RS65481B1 - Litijum askorbat koji ispoljava antistres, anksiolitik i antidepresivnu aktivnost - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Ovaj pronalazak odnosi se na oblast farmaceutskih proizvoda, konkretno, na hemijska jedinjenja zasnovana na litijumskim solima, tačnije na supstance sa antistresom, anksiolitikom i antidepresivnom aktivnošću, a može se koristiti i u medicini, veterinarskoj nauci ili farmaceutskoj industriji.

[0002] Predloženo je da se agens koristi za proizvodnju složenih preparata po svojoj osnovi, a takođe i kao konstitutivni element u različitim medicinskim i farmaceutskim oblicima: balzamima, rešenjima i tabletama.

STANJE TEHNIKE

[0003] Poznato je da se litijum askorbat koristi kao konstitutivni element u sastavu koji ispoljava antioksidativnu i nemuštu aktivnost (RU 2444358 C1, 10.03.2012), kao agent za povećanje neutrofilne efikasnosti (RU 15 2226391 C2, 10.01.2004), kao hematoprotektivni agens (RU 235132610.04.2009).

[0004] Sve pomenute reference o litijum ascorbate ne otkrivaju niti sugerišu njegova potencijalna antidepresivna, anksiolitička i antistres svojstva. Analiza raspoložive prethodne umetnosti pokazala je da drugi nisu ranije objavljivali podatke o antidepresivnim, anksiolitičkim ili antistres aktivnostima litijum-askorbata.

[0005] Trenutno postoje kompozicije na bazi litijuma na bazi soli sa nootropskom aktivnošću. Trenutno postoji u upotrebi litijumska so n-(4-acetoksibenzoil) glicin (RU 2505294, 27.01.2014), koja se odnosi na nove vodeno rastvorljive litijumske soli glice derivata (aminoacetična kiselina) sa 4-hidroksibenzoičnu kiselinu.

[0006] Navedeni agens omogućava dobijanje visokoefikasnog derivata glicina rastvorljivog u vodi i 4-hidroksibenzojeve kiseline kombinujući glavne efekte svojstvene sredstvima za smirenje i nootropima.

[0007] Iz izvora podataka (RU 2322240 C1, 20.04.2008), postoji farmaceutski sastav koji poseduje nootropsku aktivnost i sastoji se od dimefosfona aktivne supstance. Farmaceutski u obliku aqueous rastvora sadrži dodatnu citričnu kiselinu i litijum karbonat sa sledećim odnosom komponenti, masa%: dimefosphon 15.0-30.0; litijum karbonat 0,5-5,0; citrična kiselina 3,0-4,0; deionizovana voda - do 100.

[0008] Nedostatak navedenog sastava je njegova znatna toksičnost zbog upotrebe litijumske soli (litijum karbonat) koja poseduje visoku toksičnost.

[0009] Postoji i preparat (poznat iz patenta RU 2428992 C1, 20.09.2011) za ispravljanje stresnih stanja u stoci koju čine litijum oksibat, natrijum selenit, askorbna kiselina i voda za injekcije u odnosu komponenti (u masi%): litijum oksibat - 4,0-7,0; natrijum selenit - 0,2-0,5; askorbna kiselina - 3,0 - 12,0; voda za injekcije - ostatak. Preparat poseduje obeleženu nootropsku aktivnost i nemuštu akciju, a pogodan je i za administraciju.

[0010] Nedostatak rečenog sastava je upotreba litijum oksibata koji ima mnoštvo neželjenih efekata kao što su opšta malaksalost, vrtoglavica, pospanost, slabost mišića, drhtavica gornjih ekstremiteta, sinusna tahikardia, dispeptični događaji, dijareja, drhtavica, tik, razvoj difuznog netoksičnog goitera, alergijske reakcije.

[0011] Iz patenta (RU 2477722 C1, 20.03.2013.) poznata je so litijum komenske kiseline i njegova upotreba kao antioksidansa i sredstva za zaštitu od stresa i neuroze.

[0012] Sledi iz navedenog patenta da (RU 2477722 C1, 20.03.2013) da se litijumska so od komenske kiseline dobija mešanjem rastvora komenske kiseline, zagrejanom na temperaturu od 80 ±2°C, sa stoičiometrijskom količinom rastvora karbonata ili litijum hidroksida i bojenjem rastvora u žutoj boji i pH vrednosti rastvora od 4,6 ili 10 odnosno izolovati litijumsku so od komenske kiseline iz rastvora destilišući vodu pod vakuumom. Litijumska so komenske kiseline pripada agensima za prevenciju i lečenje neurodegenerativnih bolesti izazvanih oksidativnim oštećenjem mozga. U tu svrhu je predloženo da se litijumska so litijumske komenske kiseline uzima u količini od 2 mg na 1 kg telesne težine jednom dnevno u periodu od 3 dana.

[0013] Nedostatak ovog pronalaska je u tome što je usmeren samo na prevenciju i lečenje neurodegenerativnih bolesti izazvanih oksidativnim oštećenjem mozga.

[0014] Postoji agens koji sadrži litijum za prevenciju i lečenje cerebrovaskularnih bolesti (RU 2367427 C1, 20.09.2009).

[0015] Pomenuti agens za lečenje i prevenciju cerebrovaskularnih bolesti sadrži litijumsku so gde je litijumska cation vezana za anion organske kiseline iz grupe sledećih: adipate, aspartat, benzoat, gama linolenoat, glicinat, glukotina, nikotina, orotat, Agens koji sadrži litijum za prevenciju i lečenje cerebrovaskularnih bolesti osigurava efikasnost lečenja u malim dozama naznačenog agensa.

[0016] Međutim, ovaj agent je usmeren samo na prevenciju i lečenje moždanog udara.

[0017] Najbliži prisvojenom sastavu je agens koji sadrži litijum karbonat koji pacijenti koriste kao lek u maničnoj fazi i za sprečavanje pogoršanja bipolarnih afektivnih poremećaja, šizoafektivni poremećaji, manična stanja različitih geneza, afektivni poremećaji u hroničnom alkoholizmu, zavisnost od droga, seksualne abnormalnosti, Menierin sindrom, migrena [M.D. Mashkovsky, Lekarstvenniye Sredstva: Posobiye dlya vrachei. - T.1. - Moskva: Novaja Volna. - 2002. - str.109-110]. Glavni nedostatak ovog agensa je niska bioavailnost koja rezultira potrebom za visokim dozama, kao i visokom toksičnošću (LD50 = 531 mg/kg), što dovodi do brojnih neželjenih efekata: drhtavice, pospanosti, adynamia, srčanog ritma poremećaja, miasthenia gravis, povećane žeđi, poliurije i renalne disfunkcije. Ovo znatno sužava terapeutski opseg, sa visokim rizikom od predoziranja.

[0018] Askorbinska kiselina je poznata po tome što leči depresiju. Videti: BINFARE R V ET AL: „Unošenje askorbinske kiseline proizvodi efekat sličan antidepresivu: dokazi za učešće monoaminergičke neurotransmisije", PROGRESS U NEURO-PSIHOFARMAKOLOGIJI I BIOLOŠKOJ PSIHIJATRIJI, ELSEVIER, GB.

[0019] Litijum hlorid je takođe poznat po svom anksiolitičkom dejstvu. Videti: SMAGIN D A ET AL: „Anksiogenija i anksiolitik Efekti litijum hlorida u preventivnim i terapijskim tretmanima mužjaka miševa sa ponovljenim iskustvom Agresija“, ŽURNAL VISSHEI NERVNOI DEJATEL’NOSTI IMENI I. P. PAVLOVA

REZIME PRONALAKSA

[0020] Zahtevana grupa pronalazaka ima za cilj da proširi arsenal kandidata za drogu anti-stresom, anksiolitičkim i antidepresivnim akcijama.

[0021] Tehnički rezultat postignut u ovom pronalasku izumu je činjenica da su tvrdi agenti i kompozicije poseduju antistres, anksiolitička i antidepresivna svojstva.

[0022] Dalje, tvrdi agent i odgovarajuće kompozicije zasnovane na agentu imaju povećanu efikasnost u malim dozama i nisku toksičnost u poređenju sa poznatim lekom.

[0023] Litijum askorbat kao agens sa antistresom, anksiolitičkim i antidepresivnim dejstvom je predložen za rešavanje ovog problema.

[0024] Uostalom, cilj se postiže korišćenjem litijumskog askorbata kao litijumske soli u naznačenom sastavu sa litijumskom solju, sastav takođe sadrži, preferencijalno, piridoksin hidrohlorid i tiamin mononit.

[0025] Sledeći odnos mase (%) litijumskog askorbata, piridoksina hidrohlorida, tiaminskog mononitata poželjno je koristiti u sastavu.

Litijumski askorbat: 10-90 %;

Piridoksinski hidrohlorid: 6-50 %;

Thiamine mononitrate: 4-40 %;

[0026] Zahtevani agent i kompozicije na osnovu toga mogu proširiti opseg kandidata za lekove koji se mogu koristiti za povećanje otpornosti na stres, smanjenje anksioznosti, emocionalne smetnje, a takođe deluju i kao antidepresivi. Osim toga, litijum askorbat ima anti-stres, anksiolitičko i antidepresivno dejstvo, a tiamin mononitrat i piridoksin hidrohlorid takođe blagotvorno utiču na centralni i periferni nervni sistem. Thiamin optimizuje kognitivnu aktivnost i funkciju mozga.

[0027] Piridoksin hidrohlorid igra važnu ulogu u metabolizmu i uključen je u sintezu neurotransmitera. Uzete zajedno, rezultira sinergičnim dejstvom tako što pospešuje anti-stres, anksiolitičko i antidepresivno dejstvo sastava, i dovodi do visoke efikasnosti prisvojenog sastava zasnovanog na litijumskom askorbatu koji se daje u malim dozama.

[0028] Kao što je prikazano u nastavku, tvrdi se da supstanca opsega kompozicija u jednoj od poželjnih varijanti implementacije sastava zasnovanog na litijumu askorbate pruža anti-stres, anksiolitičku i antidepresivnu aktivnost u različitim odnosima komponenti u prisvojenim opsegima. Međutim, ovi asortimani komponenti u tvrdim kompozicijama nisu striktno bitni, s obzirom da će sa farmaceutski prihvatljivim komponentama sastava litijum askorbata, piridoksina hidrohlorida i tiaminskog mononita, tvrdi agens i sastav biti dovoljno efikasni za antistres, anksiolitičku i antidepresivnu aktivnost.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0029] Anti-stres, anksiolitičko i antidepresivno dejstvo tvrdih agensa i kompozicija na njegovoj osnovi utvrđeno je na sledeći način.

[0030] Da bi se potvrdila potencijalna primena litijumskog askorbata kao agensa sa anti-stresom, anksiolitičkim i antidepresivnim dejstvom, izvršeni su standardni stres testovi na bele Wistar pacove, uobičajenu rasu koja se uobičajeno koristi za prekliničke studije novih kandidata za lekove:

1. Test suspenzije. Korišćeno je po pet životinja iz svake grupe. Svaka životinja je suspendovana na 24 sata. Posle toga uzorak cele krvi je uzet iz podzemnih posuda te životinje. Onda je životinja smeštena u etar sa dietil etarom.60 minuta kasnije izvršena je odsecanje glave životinji. Izvršen je otvor za trbuh i broj čireva na unutrašnjoj površini stomaka je izbrojan. Dobijena cela krv je stavljena u dve epruvete. Cela krv je korišćena za utvrđivanje broja eozinofila metodom Danker. Serum je korišćen za utvrđivanje biohemijske sastava krvi. Adrenalin i norepinefrin su utvrđeni kao biohemijski indeksi. Ove karakteristike su specifični markeri koji identifikuju uticaj faktora stresa različitih etiologija.

2. Test simulacije transportnog stresa. Korišćeno je po pet životinja iz svake grupe. Životinje su stavljene u kaveze fiksirane na laboratorijsku roletnu. Trajanje testa je bilo 240 minuta. Na kraju testa životinje su pregledane tehnikama opisanim u stavu 1. Uzorak cele krvi je uzet da bi se utvrdio broj eozinofila metodom Danker. Krvni serum je proučavan kako bi se izmerila količina enzima: alanine aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST), kreatinin.

[0031] Testovi su izvršeni na 2-mesečnim pacovima linije Vistar. Grupe su izabrane po principu uparenih kolega. U tu svrhu formirano je šest grupa životinja od po 30 životinja:

grupa #1- kontrola (pacovi dobijaju vodu);

grupa #2- eksperimentalna, litijumska askorbat doza od 120 mg/kg životinjske telesne težine;

grupa #3- eksperimentalna, litijumska askorbat doza od 60 mg/kg težine tela životinja;

grupa #4 - eksperimentalna, litijumska askorbat doza od 30 mg/kg životinjske telesne težine; grupa #5 - netaknuti pacovi (nisu zanemareni u testovima, prirodno se razvijaju pod istim uslovima držanja u vivarium);

grupa #6 - eksperimentalna, litijumska askorbat doza od 60 mg/kg težine tela životinja, datih u tabletama (pilule su imale ukupnu masu od 0,2-0,25 g, a kakao puter je korišćen kao uzbudljiv).

[0032] Tokom studije životinje su izabrane iz formiranih grupa od po 10 životinja da bi učestvuju u testovima stresa, 5 životinja po testu. Selekcija je izvršena 7, 14., 21. dan uprave za lekove (eksperimenti su vršeni istih dana odmah po selekciji). Životinje su se merile nedeljno neposredno pre testiranja. Dobijeni podaci obrađeni su statističkim metodama matematičke statistike.

[0033] Lek je dat životinjama 2, 3. i 4. grupe u rastvoru kroz gastričnu cev. Voda za injekciju koju proizvodi "Bufus Novosibkhimpharm" korišćena je kao rastvarač. Uvedena zapremina bila je 1,5 mlrd. Rešenje je uvedeno u istom tme 2 sata nakon jutarnjeg hranjenja. Prvoj grupi je na isti način data voda za injekciju. Obim administracije bio je 1,5 mlrd.

[0034] Efikasnost i bezbednost litijumskog askorbata kao anti-stres, anksiolitički i antidepresivni agens podržani su sledećim primerima.

Primer 1. Metod proučavanja antistresa i anksiolitičke aktivnosti - test suspenzije.

[0035] Tokom testa primećena je promena reakcije životinja tokom produžene administracije preparata. Tri sekvence eksperimenta izvedene su sa periodičnošću od 7 dana. Lek je dat od prvog dana studije svakodnevno bez pauze. Tako je došlo do nagomilavanja leka u telu životinje. U svakom nizu eksperimenta korišćeno je po pet životinja iz svake grupe (životinje su suspendovane na 24 sata). Posle ovoga, uzeti su uzorci krvi iz sublingualnih sudova. Dalje, životinja je eutanazirana sa dietil etarom. Odsecanje glave i seciranje trbušne šupljine izvršeni su kako bi se izračunao broj čireva na unutrašnjoj površini stomaka. Pacovi kao predmeti za proučavanje psihotropnih lekova su uspešan model. Brzo reaguju na razne faktore stresa. Zgodno je proceniti efikasnost lekova zbog različitih faktora koji počinju fiziološkim, ponašanjem, biohemijskim i drugim parametrima. U testu suspenzije moguće je utvrditi celokupno psiho-emocionalno stanje životinje pored fizičke izdržljivosti.

[0036] Test suspenzije omogućava da se utvrdi sposobnost tela da se brzo prilagodi dugoročnom nepovoljnom uticaju, proceni fizičku izdržljivost, prouči stanje ponašanja i proceni sposobnost adaptacije (pokazivanjem psihostimulantne aktivnosti). Tokom studije utvrđeno je da litijum askorbat povećava fizičku izdržljivost.

Eksperimentalne životinje, u poređenju sa kontrolnim, pod jednako nepovoljnim uslovima, pokušale su da im se prilagode brže i efikasnije. Životinje na litijum askorbatu pokušale su da dođu do tačke priloga (u predelu udova) sa prednjim udovima i poprave svoj položaj tela svojim forelegima. Neke životinje su pokušale da se oslobode praveći prevodilačke pokrete. Tako su životinje pokazale anti-stres i anksiolitičko dejstvo litijum-askorbata, što je smanjilo uticaj faktora stresa. Kontrolne životinje su, naprotiv, u prvoj fazi migoljile po celom telu, nasumično mahale udovima i kada dođu do tačke iscrpljenosti, vise bez ikakvih pokreta. Broj defekatnih akata kontrolnih životinja bio je 3-4 puta veći nego od životinja tretiranih litijumskim askorbatskim kompozicijama.

[0037] Fiziološke, morfološke i biohemijske karakteristike, kao što su određivanje čira u želucu, eozinofili u celoj krvi, epinefrin i norepinefrin u krvnom serumu procenjeni su kao glavni i najinterativniji pokazatelji nastanak stresnog stanja u živom organizmu i sveukupnog uticaja na organizam. Deo celog uzorka krvi je korišćen za prebrojavanje eozinofila Danker testom. Drugi deo uzorka krvi korišćen je za proizvodnju seruma za utvrđivanje adrenalina i norepinefrina. Podaci su prikazani u tabelama 1, 2, 3. Na osnovu zbirnih podataka dobijenih testiranjem anti-stres efikasnosti litijumskog askorbata, može se zaključiti da oralna administracija aqueous rešenja litijum-ascorbate vodi veridično do brze adaptacije organizma na stres. Prvi test obavljen 7 dana kasnije dao je nešto veće rezultate od onih u netaknutoj grupi (grupa #5), ali drugi test (14 dana od početka eksperimenta) podaci su bili blizu netaknute grupe, rezultati su dobijeni u gotovo svim dozama. Treba napomenuti i da su sve izmerene karakteristike na svim testovima bile 2,5-3,5 puta i u slučaju broja čira bile su više od 10 puta veće od onih u kontrolnoj grupi (grupa #1). Smanjenje nivoa hormona straha - adrenalina i norepinephrina - 3,5-4 puta ukazuje na izraženu anksiolitičku akciju litijumskog askorbata. Dobijeni podaci omogućavaju da se donese nedvosmislen zaključak o visokoj antistres i anksiolitičkoj aktivnosti litijumskog askorbata.

Primer 2. Transportni test simulacije stresa za proučavanje anti-stresa, anksiolitičke i antidepresivne aktivnosti.

[0038] Rotirajući univerzalni Shaker Unimax 10 korišćen je kao model za simulaciju transportnog stresa. Brzina rotacije je izabrana u 120 časova za 240 min. Kavez sa pet životinja je fiksiran na tom mestu. Pacovi su ostali u kavezu u slobodnom stanju. Primećena je promena reakcije životinja sa produženom administracijom leka. Proces uzorkovanja i odsecanja glave opisan je u primeru 1. Fiziološki, morfološki i biohemijski parametri krvi utvrđeni su kao markeri uticaja stresa na životinje, kao što su: individualno i grupno ponašanje životinja, broj enurzijskih akata, broj defekatnih akata i broj bolusa izmeta; Eozinofili u celoj krvi prema Dankeru i nivoi ALT- a, AST enzima i kreatinina u krvnom serumu su izmereni. Transportni stres je upečatljiv primer tehnološkog uticaja na životinjsko i ljudsko telo. Tokom kratkog perioda izlaganja, životinje nisu imale vremena da razviju adaptivna svojstva kako bi nadoknadile taj efekat. Tako najbolje pristaje kao pokazatelj za posmatranje klasičnog primera razvoja adaptivnog sindroma od strane Seli. U eksperimentu je izvršena simulacija uticaja transporta na pacove uz pomoć laboratorijske roletne. Progresivne 4-časovne kružne vibracije nepovoljno su uticale na životinje. Pacovi u kontrolnoj grupi su se stalno kretali, sudarajući se jedni sa drugima pokušavajući da se koncentrišu u krivinama, gde je pojačanje oscilacija bilo najveće. Istovremeno, broj defekata je bio veći. Ћivotinje su se ponaљale agresivno. Jači su pokušali da izguraju slabiju životinju iz ugla. Podaci su dati u tabeli 4. Ponašanje životinja u eksperimentalne grupe su se razlikovale. Postojala je izražena društvena interakcija i sposobnost životinja da brže reaguju na promenu izloženosti. Životinje su pokušale da nađu mesto sa najmanjom vibracijom. U isto vreme su se okupljali u grupama, ustao na zadnje udove i pokušao da se kreće zajedno sa platformom. Ovakvo ponašanje ukazuje na to da životinjama nije nedostajao strah i anksioznost. Pokušavajući da se prilagode ovim uslovima, životinje su se manje kretale na sajtu, i grupisale se da smanje negativan uticaj. Broj akata za osiguravanje i defekaciju bio je znatno manji. Takvo ponašanje životinja, kao i morfološki parametri cele krvi, kao što su eozinofili, ukazuje na izraženo anksiolitičko dejstvo litijumskog askorbata. Eosinopenia je odlika stresora različite etiologije, o što dokazuju informacije iz "Poremećaji izazvani stresom u krvnom sistemu i njihova korekcija od strane posrednika i metabolita sistema za stresiranje", dr. Makarova's topic of the dissertation and abstract for the VAC 14.00.16, 2003. Hematoloske studije sprovedene nakon izlaganja stresu pokazale su da se u kontrolnoj grupi broj eozinofila smanjio više od 2 puta u poređenju sa netaknutim životinjama. U eksperimentalnim grupama smanjenje je bilo manje obeleženo i zavisilo je od litijum ascorbate doza. Rezultati studije daju se u tabelama 4; 5; 6.

[0039] Antidepresivno dejstvo litijumskog askorbata je jasno primećeno na osnovu stanja i ponašanja eksperimentalnih i kontrolnih životinja. Nakon dužeg izlaganja transportnog stresa pacovi kontrolne grupe pokazali su potpunu ravnodušnost i apatiju prema onome što se dešavalo u okolini. Nakon što je eksperiment zaustavljen, životinje su se ravnodušno odmarale i nisu demonstrirale nikakve akcije usmerene na njegovu odbranu. Dela defekata su postala neuredna, a fekali nisu bili izraženi. Životinje su prebegle i urinirala na istom mestu gde su ležale i nisu pokušale da nađu zgodnije mesto. Pacovi tretirani litijum askorbatom prikazali su motornu aktivnost nakon eksperimenta, uprkos nestabilnom položaju njihovog tela. Pokušali su da čuče u kavezu do izliva pića, ne pokazujući agresiju, već održavajući dominaciju. Tokom pokušaja da se životinji oduzme kavez, opirala se i pokušala da se sakrije. Tako instinkti gladi i samoodržanja nisu potisnuti u eksperimentalnim grupama.

[0040] Na osnovu sprovedenih studija, može se potvrditi da je litijum-askorbat lek protiv stresa. Rezultati dobijeni na ovom testu potvrđuju zaključke doneti ranije u Primeri 1 o visokom antistresu i anksiolitičkoj aktivnosti litijumskog askorbata, a dopunjeni su podacima koji omogućavaju uspostavljanje antidepresivnog dejstva litijumaskorbata.

Primer 3. Efikasnost askorbata u malim dozama

[0041] Tokom nagomilavanja litijum-askorbata u organizmu eksperimentalnih životinja, odgovor tela na stres nije mnogo zavisio od doze administracije, barem u opsegu testiranih doza. Doza od 30 mg/kg telesne težine blago je premašila efikasnost doze od 60 mg/kg. Doza od 120 mg/kg je bila manje efikasna. Štaviše, drugi i treći test (na danima 14. i 21. od početka studije) pokazali su značajnu razliku između rezultata dobijenih na 30 mg/kg i 120 mg/kg doza, od 3 do 10% u proseku (Tabele 1, 2, 3). Tako se može zaključiti da je litijum-askorbat efikasniji kod malih doza.

Primer 4. Efikasnost produženih oblika litijumskog askorbata

[0042] Jednoj od studijskih grupa dat je preparat u obliku tableta (sa kakao puterom kao ekscipient) na dozi od 60 mg/kg. Ova varijanta je sugerisala manje stresan oblik administracije i produženu, proširenu vrstu litijumskih efekata. Dobijeni rezultati (Tabela 1-5) sugerišu da je stopa akumulacije litijuma bila sporija u poređenju sa akustim rešenjem iste doze koja se daje oralno. Aktivnost ovog oblika administracije 7. Ali na dan administracije 14. i 21. dan, uslovi životinja koje primaju litijum-askorbat u obliku bolusa (pilula) sa kakao puterom su se uporedili sa onim netaknutim životinjama i u nekim slučajevima premašili su rezultate dobijene u oralnoj administraciji litijum ascorbate rešenja. Tako se smatra da je efekat produženih oblika efikasan sa produženom izloženošću i odlikuje ga akumulacija litijum-askorbata i dugotrajno blagotvorno dejstvo na metabolizam.

Povećanje težine životinja u Grupi 6 i povećanje kreatinina krvi ukazuju na povećanje mišićne mase. Nije bilo emacipacije tela, što može dovesti do distrofije. Adekvatna reakcija organizma na stresove različitih etiologija, nagomilavanje energetskih rezervi organizma dovelo je do povećanja mišićnog tkiva, bez naglog povećanja potkožne masti (masno tkivo). Tako je životinja rasla i razvijala se

utisnuti od stresa.

[0043] Produženi, prošireni obrasci doza omogućavaju značajno smanjenje frekvencije doza, čime se povećava usklađenost pacijenata. Glatko i sporo oslobađanje litijumskog askorbata iz produženih oblika doza omogućava izbegavanje naglog povećanja koncentracije litijumske krvi i umesto toga obezbeđuje ujednačenu koncentraciju litijumske krvi na duži vremenski period, što rezultira formiranjem efikasne koncentracije litijuma u ciljnim organima.

Primer 5. Utvrđivanje akutne toksičnosti litijumskog askorbata

[0044] Proučavani su parametri akutne toksičnosti preparata litijumskog askorbata u vidu rešenja. Eksperimenti su izvedeni na 4 meseca starim muškim Wistar pacovima teškim 180,0-200,0 g. Životinje su odabrane i distribuirane grupama po principu uparenih analoga, i ostale su pod identičnim uslovima ishrane i održavanja kuće.

[0045] Pre početka studije, životinje su držane u karantinu 12 dana, a pre administracije kompozicija bile su izložene lišavanju 24 h. U svakoj seriji eksperimenata formirano je 8 grupa životinja sa po 6 životinja u svakoj grupi.

[0046] U prvoj seriji eksperimenata akutna toksičnost litijumskog askorbata bila je određena za oralnu administraciju. LD50 (prosečna smrtonosna doza, već doza na kojoj je umrlo 50% pacova) izračunata je Kerber metodom. Supstanca je dat jednom interna u dozama 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000 mg/kg telesne težine. Zapremina uvedene supstance bila je 2,0 mlrd po pacovu (maksimalna dozvoljena zapremina za oralnu administraciju) intragastrično specijalnom metalnom sondom. Zapremina litijumskog askorbata koji se daje životinjama bila je prilagođena vodi za ubrizgavanje. Kriterijumi za procenu toksičnosti bili su smrtonosan ishod i priroda kliničke slike. Podaci dobijeni tokom eksperimenta na laboratorijskim životinjama predstavljeni su u tabelama 7, 8.

[0047] Rezultati dva metoda utvrđivanja LD50 potvrđuju izvodljivost bilo koje od njih, s obzirom da razlike ne prelaze 0,1 odsto, u zavisnosti od metoda preduzetog za standard.

[0048] Dobijeni podaci su omogućili određivanje parametara akutne toksičnosti litijum askorbata. Tako, za bele pacove linije Vistar su bili: LD50 - 6334 mg/kg, LD100 - 8000 mg/kg. Dakle, litijum askorbat pripada klasa 5 "praktično netoksičnih" LD50 ≥ 5000 mg/kg lekova prema tabeli distribucije lekova. Upoređujući doze od 30 mg/kg do 120 mg/kg, u kojima je litijum askorbat pokazao antistresno i anksiolitičko dejstvo, a uzimanje Imajući u vidu visok nivo LD50 za litijum askorbat (6334 mg/kg), zaključujemo da litijum askorbat ima široku terapeutski prozor i niska toksičnost. Za poređenje, LD50 litijum karbonata je 531 mg/kg (Badman A.L., et al, Vredniie himičeskie veshčestva: Neorganičeskie soedinenia elementov I-IV grupe, priručnik, priredio V. A. Filov et al: Himija, 1988. str.25-26).

[0049] Tabele 1-8 ispod sadrže podatke dobijene u gore pomenutim Primerima.

Tabela 1. Broj identifikovanih čireva na želucu u testu fizičke izdržljivosti (test suspenzije)

Tabela 2. Određivanje broja eozinofila u punoj krvi po Dunckeru (test suspenzije)

Tabela 3. Određivanje nivoa adrenalina i noradrenalina u krvnom serumu (test suspenzije)

Tabela 4. Uticaj različitih doza litijum askorbata na broj bolusa u defekaciji

Tabela 5. Određivanje broja eozinofila u punoj krvi po Dunckeru (test na simulaciji nosača).

Tabela 6. Efekat litijum-askorbata na aktivnost aminotransferaze i kreatinina u krvi (test na simulaciji vozila)

Tabela 7. Određivanje srednje smrtonosne doze litijum askorbata kod pacova (Kerber)

Tabela 8. Određivanje srednje smrtonosne doze litijum askorbata kod pacova Vistar (od Peršina)

[0050] Primeri kompozicija na bazi litijumskog askorbata su obelodanjeni u nastavku.

[0051] Sledeći primeri ilustruju opcije implementacije pronalaksa.

Primer 6.

[0052] Koristili smo kompoziciju koja sadrži litijum askorbat i vitamine: piridoksin hidrohlorid - B6, i tiamin mononitrat - B1 u aqueous rastvoru u različitim procentima.

[0053] Utvrđene su antistres, anksiolitičke i antidepresivne efifikasnosti kompozicija sa različitim odnosom litijumaskorbata i vitamina B1 i B6.

[0054 ] Formirane su četiri grupe životinja. Kompozicije su oralno administrirane u aqueous rešenju.

Koncentracije odnosa su bile sledeće:

Grupa (1) je dobila 10% ascorbate litijuma, 55% vitamina B6 i 35% vitamina B1.

Grupa (2) - 50% ascorbate litijuma, 30% vitamina B620% vitamina B1.

Grupa (3) - 65% litijum-askorbata, 20% vitamina B6 i 15% vitamina B1.

Grupa (4) - 90% litijumskog askorbata, 6% vitamina B6 i 4% vitamina B1.

Grupa (5) - kontrolna grupa je primala samo vodu za injekcije.

[0055] Neuropsihijatrijska agitacija podrazumeva karakter i intenzitet kretanja životinje u areni. To zavisi od različitih faktora stresa (npr. neobično okruženje za životinju) u kombinaciji sa prirodnom istraživačkom aktivnošću i koristi se za dijagnostiku funkcionalnog stanja nervnog sistema kada je izložen prirodnim i eksperimentalnim faktorima životne sredine. Pokazatelji povećane anksioznosti i stresa su broj bolusa i činova mladoženje, nivo istraživačke aktivnosti, pokretljivosti i nivoi radoznalosti ili opšte apatije, koji su u korelaciji sa nivoom depresije. Izvršeni testovi pokazali su da su proučavani parametri dobro povezani sa rezultatima drugih testova ponašanja.

[0056] Muški beli Wistar pacovi teški 130-170 g korišćeni su kao modeli predmeta. Životinje su držane u identičnim prostorijama u kavezima po 10 pacova na temperaturi od 19-21°C. Životinje su se svakodnevno hranile mešovitim mesom, po 30-40 g po svakom. Voda je bila dostupna bez restrikcije. Četrdeset životinja je bilo uključeno u studiju. Životinje su podeljene u četiri grupe od po 10 životinja u svakoj. Kompozicija je bila administrirana 5 dana. Ponašanje životinja istraženo je na testu "Otvoreno polje". Životinje su smeštene na otvorenom polju (pilot lokacija) posle petodnevne administracije. Životinje su postavljene na istom trgu, koji se nalazi u blizini zida. Vreme izlaganja svakog životinjskog modela bilo je 5 minuta.

Tabela 9. Uticaj kompozicije na ponašanje pacova u testu "Otvoreno polje" nakon 5 dana primene

[0057] Dobijeni rezultati pokazuju da:

sastav izlaže pomenutu aktivnost u poređenju rezultata dobijenih u eksperimentalnoj i kontrolnoj grupi; efikasan opseg odnosa aktivnih agenata u sastavu je prilično širok, ali maksimalna efikasnost

sastav se postiže u odnosu 65% litijumskog askorbata, 20% vitamina B6 i 15% vitamina B1; efikasnost sastava se smanjila sa povećanjem litijumske askorbate proporcije i smanjenjem

proporcija vitamina, kao i sa povećanjem proporcije vitamina i smanjenjem proporcije litijumskog askorbata, tako sugerišu sinergični efekat supstanci koje se koriste u sastavu.

[0058] Dakle, upotreba kao supstance koja sadrži litijum u obliku litijumskog asortimana kao agensa sa antistresom, anksiolitičkim i antidepresivnim dejstvom i sastavom zasnovanim na njemu omogućava da se proširi asortiman agenasa za naznačenu administraciju. Istovremeno, tvrdi se da agenti imaju nisku toksičnost i visoku efikasnost.

Claims (5)

Patentni zahtevi

1. Kompozicija koja sadrži litijum askorbat za upotrebu u ublažavanju i lečenju stresa, anksioznosti ili depresije kod subjekta.

2. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 1, naznačena time što kompozicija dalje sadrži piridoksin hidrohlorid i tiamin mononitrat.

3. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 2, naznačena time što su komponente kompozicije prisutne unutar sastav u sledećim masenim procentima:

10-90% litijum askorbat;

6-50% piridoksin hidrohlorid;

4-40% tiamin mononitrat.

4. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 3, naznačena time što kompozicija dalje sadrži sorbitol ili maltodekstrin ili talk kao ekspicijente.

5. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 3, naznačena time što kompozicija dalje sadrži kakao puter.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd

13