RS65596B1 - Supstituisani 5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2h)-on i 2,5,6,7-tetrahidro-3h-pirolo[2,1c][1,2,4]triazol-3-on i njihova primena - Google Patents

Supstituisani 5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2h)-on i 2,5,6,7-tetrahidro-3h-pirolo[2,1c][1,2,4]triazol-3-on i njihova primena

Info

Publication number
RS65596B1
RS65596B1 RS20240564A RSP20240564A RS65596B1 RS 65596 B1 RS65596 B1 RS 65596B1 RS 20240564 A RS20240564 A RS 20240564A RS P20240564 A RSP20240564 A RS P20240564A RS 65596 B1 RS65596 B1 RS 65596B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
fluorine
hydrogen
methyl
substituted
group
Prior art date
Application number
RS20240564A
Other languages
English (en)
Inventor
Nicole Biber
Damian Brockschnieder
Kersten Matthias Gericke
Florian Kölling
Klemens Lustig
Jörg Meding
Heinrich Meier
Thomas Neubauer
Martina Schäfer
Andreas Timmermann
Dmitry Zubov
Carsten Terjung
Niels Lindner
Volker Badock
Dieter Moosmayer
Ondozabal Hideki Miyatake
Stephen Moore
Alexander Schulz
Original Assignee
Bayer Ag
Bayer Pharma AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ag, Bayer Pharma AG filed Critical Bayer Ag
Priority claimed from PCT/EP2017/060900 external-priority patent/WO2017194459A1/de
Publication of RS65596B1 publication Critical patent/RS65596B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetna prijava se odnosi na novi supstituisani 5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on i 2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on, postupak za njihovo dobijanje, postupak za upotrebu kada se primenjuju sami ili u kombinaciji za lečenje i/ili profilaksu bolesti, kao i njihovu upotrebu za proizvodnju lekova za lečenje i/ili profilaksu bolesti, posebno za lečenje i/ili profilaksu inflamatornih plućnih bolesti.
[0002] Enzim prolil endopeptidaza (PREP, prolil oligopetidaza, PE, POP) je serinska proteaza, koja cepa peptide do dužine od 30 aminokiselina iza aminokiseline prolina.
[Moriyama et al., J. Biochem. 1988, 104:112-117]. PREP se konstitutivno eksprimira i izlučuje u svim organima i tkivima, uključujući leukocite i ćelije epitela. Oslobađanje se povećava prilikom kontakta sa nadražujućim, inflamatornim supstancama. [Szul et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol.2016, 54:359-369] Dok je PREP u centralnom nervnom sistemu uključen u razgradnju peptidnih neurotransmitera, PREP na celoj periferiji, uključujući pluća, predstavlja enzim koji, između ostalog, cepa proizvode razgradnje kolagena u degenerativnim ili inflamatornim procesima. Usled velikog sadržaja prolina i glicina u sekvenci aminokiselina kolagena, putem razgradnje fragmenata kolagena ovde nastaju tripeptidi sa sekvencom prolin-glicin-prolin (PGP) [Weathington et al., Nat. Med.2006, 12:317-323]. U ispljuvku pacijenata sa hroničnim inflamatornim plućnim bolestima, kao što je hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP) ili cistična fibroza (mukoviscidoza, CF) opisana je znatno povišena koncentracija PGP [O'Reilly et al., Respir. Res.2009, 10:38 doi:10.1186/1465-9921-10-38; Gaggar et al., J. Immunol. 2008, 180:5662-5669]. PGP, koji je proizveden od strane PREP, predstavlja hemokin za neutrofilne granulocite (skraćeno: neutrofile), tj. PGP dovodi do prelaska neutrofila u tkivo sa povećanom koncentracijom PGP. Postoje dokazi da je mehanizam ovog privlačenja neutrofila zasnovan na direktnoj stimulaciji neutrofila putem receptora osetljivih na PGP na ćelijskoj membrani neutrofila (npr. CXCR1, CXCR2), ili da se na njega utiče indirektno putem oslobađanja dodatnih hemokina, na primer interleukina (npr. Interleukin-8, CXCL8) putem drugih tipova ćelija (npr. makrofagi, ćelije epitela). Dejstvo hemokina iz PGP na neutrofile više puta je pokazano in vitro i in vivo. [Weathington et al., Nat. Med.2006, 12:317-323; De Kruijf et al., Eur. J. Pharmacol.2010, 643:29-33; Overbeek et al., Eur. J. Pharmacol.2011, 668:428-434; Braber et al., Eur. J. Pharmacol.2011, 668:443-449] Kod ispitivanja na životinjama, dejstvo PGP može da se obrne dodatkom komplementarnog tripeptida (treonin-arginin-treonin, RTR) kao i primenom blokatora receptora CXCR2. Pokazalo se da ponovljena primena PGP u plućima miševa može da izazove emfizem pluća. Pored toga, duvanski dim povećava koncentraciju PGP u plućima miševa izloženih duvanskom dimu. Istovremenom primenom RTR koji neutrališe PGP, moguće je obrnuti gorenavedene efekte izazvane duvanskim dimom [Braber et al., Eur J. Pharmacol. 2011, 668:443-449; Braber et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Pysiol. 2011, 300:L255-L265].
[0003] Hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP) predstavlja bolest pluća koja je praćena hroničnim bronhitisom, plitkim disanjem, kašljem i iskašljavanjem, kao i uništavanjem plućnog tkiva (emfizem). Usled opstruktivnih promena bronhija i gubitka funkcionalnog plućnog tkiva, funkcija pluća je sa napredovanjem bolesti sve više ograničena. Usled opstruktivnog izdisanja, prekomerno naduvavanje pluća je često.
[0004] Najčešći uzrok za nastajanje HOBP je hronično udisanje duvanskog dima. Pored toga, 10 do 40% pacijenata širom sveta, uz razlike po regionima, obole od HOBP koja nije posledica duvanskog dima, nego je verovatno nastala usled izlaganja toksinima u okolini, kao što je dim nastao od vatre uglja ili drveta, ili izduvni gasovi dizel motora [Salvi, Clin. Chest Med. 2014, 35:17-27].
[0005] Sada HOBP može da se leči samo simptomatski. U prvoj liniji, pacijenti sa HOBP dobijaju lekove koji proširuju bronhije, koji olakšavaju disanje. Upotreba antiinflamatornih lekova je do sada ograničena.
[0006] Pored opisanih hroničnih simptoma, pacijenti sa HOBP često pate od akutnog, privremenog pogoršanja zdravlja koje je već narušeno, što zahteva dodatno lečenje [Ewig, Klinikarzt 2013, 42:182-187]. Lečenje ovih naglih pogoršanja, poznatih kao akutne egzacerbacije, do sada je bilo ograničeno na davanje kiseonika i sistemski primenjene kortikosteroide.
[0007] U kliničkoj studiji HOBP, pokazalo se da antiinflamatorno delujući roflumilast (inhibitor PDE4) dovodi do smanjenja koncentracije PGP u sputumu i serumu lečenih pacijenata sa HOBP [Wells et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med.2015, 192:934-942].
[0008] Pored toga, povećane, proinflamatorne koncentracije PGP opisane su, između ostalog, kod akutnog respiratornog sindroma (ARDS) i povrede rožnjače oka. [Hahn et al., Sei. Adv.
2015, 1: e1500175; Pfister et al., Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.1998, 39:1744-1750] Ovde je takođe formulisan proinflamatorni uticaj PGP, koji sa jedne strane dovodi do povećane permeabilnosti krvnih sudova, a sa druge strane, kako je iznad već opisano, do povećanog regrutovanja neutrofila (neutrofilija) i tako do povećane inflamacije. Pošto je nastajanje PGP kod upalnih procesa neizbežno povezano sa uništavanjem tkiva, a PGP zauzvrat podstiče inflamaciju, verovatno je da je PGP uključen u samoodržive, hronične inflamatorne procese. Konkretno, ovde treba pomenuti HOBP, odnosno akutno egzacerbirajuću HOBP (AE-HOBP), koji u osnovi imaju hroničnu inflamaciju [Russell et al., Curr Opin Pilm Med.2016, 22:91-99; Anzueto, Eur. Respir. Rev.2010, 19:113-118]. Ali i druge hronične upalne bolesti i poremećaji zarastanja rana u plućima i drugim tkivima i organima, kao što su, npr. koža, oči, u krvni sudovi, skelet ili muskulatura, mogu imati koristi od sniženja koncentracije PGP putem inhibicije PREP.
[0009] Potencijalne oblasti primene inhibitora PREP su akutni i hronični, patološki procesi u koje su uključeni PREP, odnosno supstrati i produkti PREP. Pošto ovo antiinflamatorno dejstvo inhibicije PREP verovatno ne utiče direktno na funkciju imunskog sistema, pa se zato ne može očekivati imunosupresivno dejstvo, prednost inhibitora PREP je da kod lečenih pacijenata može nastati manje neželjenih dejstava nego sa klasičnim imunomodulatornim delotvornim principima. Pošto PGP nastaje iz fragmenata kolagena pomoću konstitutivno eksprimiranog, tj. stalno postojećeg enzima PREP, pa zato imunski sistem ne upravlja proizvodnjom PGP, tj. ne reguliše je, očekivano je da antiinflamatorno dejstvo postoji i kod pacijenata kod kojih je delotvornost na kortikosteroide smanjena usled rezistencije.
Rezistencija na kortikosteroide posebno je opisana kod pacijenata sa HOBP u stabilnoj fazi van akutnih egzacerbacija. Nadalje, očekivana je aditivna, odnosno sinergijska delotvornost kombinacije sa kortikosteroidima čak i kada je dejstvo kortikosteroida potpuno prisutno ili ograničeno ili u velikoj meri smanjeno. Takođe, moguća je kombinacija sa svim drugim inflamatornim mehanizmima dejstva.
[0010] Pošto PGP, čije formiranje je sprečeno putem inhibicije PREP, verovatno ima ulogu pokretača u inflamatornom procesu kod svih bolesti sa inflamatornom komponentom gde je obuhvaćen kolagen ili njegovi fragmenti, inhibicija PREP može imati pozitivan uticaj na mnoge bolesti kao što su autoimune bolesti, hronične inflamatorne bolesti kao što su reumatoidne bolesti, infekcije, degenerativni procesi (koža, organi, kosti, muskulatura).
[0011] Zadatak predmetnog pronalaska je bio da se identifikuju i obezbede nova, niskomolekulska jedinjenja koja deluju kao potentni inhibitori enzima prolilendopeptidaze (PREP, proliloligopeptidaza, PE, POP), i koja kod akutnih ili hroničnih, patoloških, odnosno upalno-degenerativnih procesa preko smanjenja proizvodnje PGP koja zavisi od PREP, prvenstveno smanjuju regrutovanje neutrofilnih granulocita u organima, a posebno plućima.
[0012] U prijavi WO2006052962A2 opisani su biciklični triazoli za borbu protiv bolesti izazvanih inhibicijom integrina.1,2-dihidro-3H-indazol-3-on kao inhibitori NOX za borbu protiv bolesti kao što su HOBP, Alchajmer, inflamatorne ili fibrotične bolesti, poznati su iz WO2011062864A2. WO97007116A1 opisuje upotrebu inhibitora prolil endopeptidaze za borbu protiv neutrofilnih upala, WO2008144748A1 derivate prolina kao inhibitore prolil endopeptidaze za lečenje bolesti CNS.
[0013] Pronalazak je definisan kroz zahteve. Svaki predmet opisa koji izlazi iz opsega zahteva objavljen je kao osnovno znanje, i ne predstavlja deo pronalaska.
[0014] Predmet predmetnog pronalaska su jedinjenja opšte formule (I)
u kojoj
A
označava (C1-C4)-alkilen ili CD2,
pri čemu, (C1-C4)-alkilen može biti supstituisan hidroksi, (C1-C4)-alkoksi grupom, kao i do pet puta fluorom, ili je grupa formule
pri čemu
n je 0 ili 1,
p je 0 ili 1,
q je 1 ili 2,
pri čemu
#<1>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
* označava vezu sa R<1>,
X
predstavlja -CR<6>R<7>-, #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**, #<2>-CR<6>=CR<8>-** ili #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-CR<10>R<11>-
**
,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>predstavlja vodonik, fluor, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, trifluormetoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom,
R<7>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten,
ili
R<6>i R<4>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten,
R<8>predstavlja vodonik, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, fluor, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom,
R<9>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<8>i R<9>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten,
ili
R<7>i R<9>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten,
R<10>predstavlja vodonik, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, fluor, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom,
R<11>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<10>i R<11>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten,
R<1>predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril,
pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, (C5-C6)-heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
ili
pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, tercbutilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
R<2>
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
r je 0 ili 1,
Z je O, NR<18>, S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>,
pri čemu
R<14A>je vodonik, halogen, cijano, (C1-C4)-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, (C1-C4)-alkoksi, (C3-
C5)-cikloalkoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi ili 2,2,2-trifluoretoksi,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa hidroksi, amino, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
R<14B>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
R<18>je vodonik ili metil,
R<12>predstavlja vodonik, cijano, (C1-C4)-alkil, acetil ili formil,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan hidroksi grupom ili do pet puta fluorom,
pri čemu, acetil može biti supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom,
R<13>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil,
ili
R<12>i R<13>ciklopropil, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade jedan ili više ciklobutil prstenova,
pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<13>i R<14A>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik,
pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik,
ili
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<4>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
Y je NR<15>, CR<16A>R<16B>, kiseonik ili sumpor,
pri čemu
R<15>je vodonik ili metil,
R<16A>je vodonik ili metil,
R<16B>je vodonik ili metil,
R<3>
predstavlja vodonik ili (C1-C4)-alkil,
R<4>
predstavlja vodonik, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, fluor, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom,
R<5>
predstavlja vodonik ili (C1-C4)-alkil,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<4>i R<5>
zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
ili
R<4>i R<5>
zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten,
kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
[0015] Jedinjenja prema pronalasku su jedinjenja formule (I) i njihove soli, solvati i solvati soli, jedinjenja dolenavedenih formula obuhvaćena formulom (I) i njihove soli, solvati i solvati soli, kao i jedinjenja obuhvaćena formulom (I), u nastavku navedena kao primeri i njihove soli, solvati i solvati soli, ukoliko dolenavedena jedinjenja obuhvaćena formulom (I) već nisu soli, solvati i solvati soli.
[0016] U predmetnom pronalasku, poželjne su fiziološki prihvatljive soli jedinjenja prema pronalasku. Takođe su obuhvaćene soli koje same po sebi nisu pogodne za farmaceutsku primenu, ali, na primer, mogu da se koriste za izolovanje ili prečišćavanje jedinjenja prema pronalasku.
[0017] Fiziološki prihvatljive soli jedinjenja prema pronalasku obuhvataju kisele adicione soli mineralnih kiselina, karboksilnih kiselina i sulfonskih kiselina, npr. soli hlorovodonične kiseline, bromovodonične kiseline, sumporne kiseline, fosforne kiseline, metansulfonske kiseline, etansulfonske kiseline, toluolsulfonske kiseline, benzolsulfonske kiseline, naftalindisulfonske kiseline, mravlje kiseline, sirćetne kiseline, trifluorsirćetne kiseline, propionske kiseline, mlečne kiseline, vinske kiseline, jabučne kiseline, limunske kiseline, fumarne kiseline, maleinske kiseline i benzojeve kiseline.
[0018] Fiziološki prihvatljive soli jedinjenja prema pronalasku takođe obuhvataju soli uobičajenih baza, kao što su, na primer i poželjno, soli alkalnih metala (npr. soli natrijuma i kalijuma), soli zemnoalkalnih metala (npr. soli kalcijuma i magnezijuma) i amonijumove soli, izvedene iz amonijaka ili organskih amina sa 1 do 16 C atoma, kao što su, na primer i poželjno, etilamin, dietilamin, trietilamin, etil diizopropilamin, monoetanolamin, dietanolamin, trietanolamin, dicikloheksilamin, dimetilaminoetanol, prokain, dibenzilamin, N-metilmorfolin, arginin, lizin, etilendiamin i N-metilpiperidin.
[0019] Pod solvatima se u okviru pronalaska podrazumevaju takvi oblici jedinjenja prema pronalasku koji u čvrstom ili tečnom stanju putem koordinacije sa molekulima rastvarača grade kompleks. Hidrati su poseban oblik solvata, kod kojih se odigrava koordinacija sa vodom. U predmetnom pronalasku, od solvata su poželjni hidrati.
[0020] Jedinjenja prema pronalasku, u zavisnosti od svoje strukture, mogu postojati u različitim stereoizomernim oblicima, tj. u obliku konfiguracionih izomera ili po potrebi i kao konformacioni izomeri (enantiomeri i/ili dijastereomeri, uključujući i one kod atropizomera). Predmetni pronalazak zato obuhvata enantiomere i dijastereomere i njihove odgovarajuće smeše. Iz takve smeše enantiomera i/ili dijastereomera na poznati način mogu da se izoluju stereoizomeri ujednačenog sastava; poželjno se za to koriste hromatografski postupci, posebno HPLC hromatografija na ahiralnoj, odnosno hiralnoj fazi. U slučaju karboksilnih kiselina kao međuproizvoda ili krajnjih proizvoda, alternativno može da se vrši razdvajanje preko dijastereomernih soli pomoću hiralnih aminskih baza.
[0021] Ako jedinjenja prema pronalasku mogu biti u tautomernom obliku, predmetni pronalazak obuhvata sve tautomere.
[0022] Jedinjenja opšte formule (I) mogu da postoje kao izotopske varijante. Pronalazak zato obuhvata jednu ili više izotopskih varijanti jedinjenja opšte formule (I), posebno jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže deuterijum.
[0023] Izraz „izotopske varijante“ jedinjenja ili reagensa definisan je kao jedinjenje sa neprirodnim udelom jednog ili više izotopa od kojih je takvo jedinjenje sačinjeno.
[0024] Izraz „izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I)“ definisan je kao jedinjenje opšte formule (I) sa neprirodnim udelom jednog ili više izotopa od kojih je takvo jedinjenje sačinjeno.
[0025] Pod izrazom „neprirodni udeo“ podrazumeva se udeo takvog izotopa koji je veći od njegove učestalosti u prirodi. Učestalost izotopa u prirodi za primenu u tom kontekstu nalazi se u „Isotopic Compositions of the Elements 1997“, Pure Appl. Chem., 70(1), 217-235, 1998.
[0026] Primere za takve izotope predstavljaju stabilni i radioaktivni izotopi vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora, broma i joda, kao<2>H (deuterijum),<3>H (tricijum),<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<17>O,<18>O,<32>P,<33>P,<33>S,<34>S,<35>S,<36>S,<18>F,<36>Cl,<82>Br,<123>I,<124>I,<125>I,<129>I, odnosno<131>I.
[0027] U pogledu lečenja i/ili profilakse ovde datih poremećaja, izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) poželjno sadrže deuterijum („jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže deuterijum“). Izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) u koje su ugrađeni jedan ili više radioaktivnih izotopa, kao<3>H ili<14>C, korisne su, na primer, u studijama raspodele lekova i/ili supstrata u tkivu. Ti izotopi su posebno poželjni jer se lako ugrađuju i detektuju. U jedinjenje opšte formule (I) mogu da se ugrade izotopi koji emituju pozitrone, kao<18>F ili<11>C. Te izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) pogodne su za primenu kod aplikacija za in vivo snimanja. Jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže deuterijum i<13>C mogu da se koriste u pretkliničkim ili kliničkim studijama u analizama masene spektrometrije (H. J. Leis et al., Curr. Org. Chem., 1998, 2, 131).
[0028] Izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) mogu da se dobiju prema postupcima poznatim stručnjaku, kao u ovde opisanim šemama i/ili primerima, zamenom reagensa izotopskom varijantom reagensa, poželjno reagensom koji sadrži deuterijum. U zavisnosti od željenih mesta deuteracije, u nekim slučajevima deuterijum iz D2O može da se inkorporira bilo direktno u jedinjenja, ili u reagense koji se koriste za sintezu takvih jedinjenja (Esaki et al., Tetrahedron, 2006, 62, 10954; Esaki et al., Chem. Eur. J., 2007, 13, 4052). Koristan reagens za ugradnju deuterijuma u molekul je i gasoviti deuterijum. Brz način za ugradnju deuterijuma je katalitička deuteracija olefinskih veza (H. J. Leis et al., Curr. Org. Chem., 1998, 2, 131; J. R. Morandi et al., J. Org. Chem., 1969, 34 (6), 1889) i acetilenskih veza (N. H. Khan, J. Am. Chem. Soc., 1952, 74 (12), 3018; S. Chandrasekhar et al., Tetrahedron Letters, 2011, 52, 3865). Za direktnu zamenu vodonika deuterijumom u ugljovodinicima sa funkcionalnim grupama, mogu da se koriste i metalni katalizatori (tj. Pd, Pt i Rh) u prisustvu deuterijuma (J. G. Atkinson et al., US Patent 3966781). Različiti deuterisani reagensi i gradivni blokovi za sintezu mogu da se nabave na tržištu od kompanija kao npr. C/D/N Isotopes, Kvebec, Kanada; Cambridge Isotope Laboratories Inc., Andover, MA, SAD; i CombiPhos Catalysts, Inc., Princeton, NJ, SAD. Dodatne informacije vezane za stanje tehnike u pogledu zamene vodonika deuterijumom nalaze se, npr., u Hanzlik et al., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990; R. P. Hanzlik et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 160, 844, 1989; P. J. Reider et al., J. Org. Chem.52, 3326-3334, 1987; M. Jarman et al., Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1995; J. Atzrodt et al., Angew. Chem., Int. Ed.2007, 46, 7744; K. Matoishi et al., Chem. Commun. 2000, 1519-1520; K. Kassahun et al., WO2012/112363.
[0029] Termin „jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže deuterijum“ definisan je kao jedinjenje opšte formule (I), u kome je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa jednim ili više atoma deuterijuma, i kod koga je učestalost deuterijuma u svakoj deuterisanoj poziciji jedinjenja opšte formule (I) veća od učestalosti deuterijuma u prirodi, koja iznosi oko 0,015%. Posebno, u jedinjenju opšte formule (I) koje sadrži deuterijum, učestalost deuterijuma u svakoj deuterisanoj poziciji jedinjenja opšte formule (I) je veća od 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70% ili 80%, poželjno veća od 90%, 95%, 96% ili 97%, još poželjnije veća od 98% ili 99% u toj poziciji, odnosno tim pozicijama. Podrazumeva se da je učestalost deuterijuma u svakoj deuterisanoj poziciji nezavisna od učestalosti deuterijuma u drugim deuterisanim pozicijama.
[0030] Selektivnom ugradnjom jednog ili više atoma deuterijuma u jedinjenje opšte formule (I) mogu da se promene fizičko-hemijske osobine (kao npr. kiselost [C. L. Perrin, et al., J. Am. Chem. Soc., 2007, 129, 4490; A. Streitwieser et al., J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2759;], baznost [C. L. Perrin et al., J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 9641; C. L. Perrin, et al., J. Am. Chem. Soc., 2003, 125, 15008; C. L. Perrin u Advances in Physical Organic Chemistry, 44, 144], lipofilnost [B. Testa et al., Int. J. Pharm., 1984, 19(3), 271]) i/ili metabolički profil molekula, i mogu da se izazovu promene odnosa matičnog jedinjenja i metabolita, ili nastale količine metabolita. Takve promene mogu dovesti do određenih terapeutskih prednosti, i zato u određenim okolnostima mogu biti poželjne. Prijavljena je smanjena brzina metabolizma i promena metabolizma, u kojoj je izmenjen odnos metabolita (A. E. Mutlib et al., Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102; D. J. Kushner et al., Can. J. Physiol. Pharmacol., 1999, 77, 79). Ove promene izloženosti matičnom jedinjenju i metabolitu mogu imati značajne posledice u pogledu farmakodinamike, podnošljivosti i delotvornosti jedinjenja opšte formule (I) koje sadrži deuterijum. U nekim slučajevima, dodatkom deuterijuma se smanjuje ili eliminiše nastajanje neželjenog ili toksičnog metabolita, i povećava se nastajanje željenog metabolita (npr. nevirapin: A. M. Sharma et al., Chem. Res. Toxicol., 2013, 26, 410;
Efavirenz: A. E. Mutlib et al., Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102). U drugim slučajevima, efekat deuterijuma se sastoji u smanjenju brzine sistemskog klirensa. Time se produžava biološko vreme poluživota jedinjenja. U potencijalne kliničke prednosti spada sposobnost održavanja slične sistemske izloženosti sa smanjenim nivoom pika i povećanim najnižim nivoom. U zavisnosti od odnosa farmakokinetike i farmakodinamike dotičnog jedinjenja, to može dovesti do slabijih neželjenih dejstava i povećane delotvornosti. Primeri za ovaj efekat deuterijuma su ML-337 (C. J. Wenthur et al., J. Med. Chem., 2013, 56, 5208) i odanakatib (K. Kassahun et al., WO2012/112363). Takođe, objavljeni su i drugi slučajevi kod kojih je smanjena brzina metabolizma dovela do povećanja izloženosti leku bez promene brzine sistemskog klirensa (npr. rofekoksib: F. Schneider et al., Arzneim. Forsch. / Drug. Res., 2006, 56, 295; telaprevir: F. Maltais et al., J. Med. Chem., 2009, 52, 7993). Deuterisani lekovi koji pokazuju ovaj efekat mogu da imaju smanjene potrebe za doziranjem (npr. manji broj doza ili manje doziranje za postizanje željenog dejstva) i/ili da dovedu do manjeg opterećenja metabolitima.
[0031] Jedinjenje opšte formule (I) može da ima više potencijalnih mesta napada za metabolizam. Radi optimizacije gore opisanih efekata na fizičko-hemijske osobine i metabolički profil, mogu da se odaberu jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže deuterijum sa određenim obrascem jedne ili više zamena vodonika deuterijumom. Naročito, atom(i) deuterijuma jedinjenja opšte formule (I) koje sadrži deuterijum vezani su za atom ugljenika i/ili se nalaze u pozicijama jedinjenja opšte formule (I) koje predstavljaju mesta napada metaboličkih enzima, kao što je npr. citohrom P450.
[0032] Izraz „prolekovi“ označava jedinjenja koja sama po sebi mogu biti biološki aktivna ili neaktivna, ali se tokom vremena boravka u organizmu prevode u jedinjenja prema pronalasku (na primer, metabolički ili hidrolitički).
[0033] U predmetnom pronalasku, supstituenti, ako nisu drugačije naznačeni, imaju sledeće značenje:
Alkil u pronalasku predstavlja linearni ili razgranati alkil ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izo-butil, 1-metilpropil, terc.-butil, n-pentil, izopentil, 1-etilpropil, 1-metilbutil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, n-heksil, 1-metilpentil, 2-metilpentil, 3-metilpentil, 4-metilpentil, 3,3-dimetilbutil, 1-etilbutil, 2-etilbutil, 1,4-dimetilpentil, 4,4-dimetilpentil i 1,4,4-trimetilpentil.
Alkilkarbonil u pronalasku predstavlja linearni ili razgranati alkil ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika i karbonilnom grupom vezanom za atom ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metilkarbonil, etilkarbonil, npropilkarbonil, izopropilkarbonil i terc.-butilkarbonil.
Alkoksi u pronalasku predstavlja linearni ili razgranati alkoksi ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metoksi, etoksi, npropoksi, izopropoksi, n-butoksi i terc-butoksi.
Cikloalkoksi u pronalasku predstavlja monociklični, zasićeni alkil ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika u prstenu, koji je vezan preko atoma kiseonika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi i cikloheksiloksi.
Cikloalkil odnosno karbocikl u pronalasku predstavlja monociklični, zasićeni alkil ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika u prstenu. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil.
Cikloalkilkarbonil u pronalasku predstavlja monociklični, zasićeni alkil ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika u prstenu i karbonilnom grupom vezanom za atom ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: ciklopropilkarbonil, ciklobutilkarbonil, ciklopentilkarbonil, cikloheksilkarbonil i cikloheptilkarbonil.
Alkoksikarbonil u pronalasku predstavlja linearni ili razgranati alkoksi ostatak sa navedenim brojem atoma ugljenika i karbonilnom grupom vezanom za atom kiseonika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metoksikarbonil, etoksikarbonil, n-propoksikarbonil, izopropoksikarbonil i terc-butoksikarbonil.
Heterocikl odnosno heterociklil u pronalasku predstavlja monociklični ili biciklični, zasićeni heterocikl sa navedenim brojem atoma u prstenu, koji sadrži jedan ili dva heteroatoma u prstenu iz niza N, O, S, SO i/ili SO2i vezan je preko atoma ugljenika u prstenu ili eventualno atoma azota u prstenu. Na primer, mogu se pomenuti: azetidinil, oksetanil, pirolidinil, pirazolidinil, tetrahidrofuranil, tiolanil, piperidinil, piperazinil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, morfolinil, tiomorfolinil, heksahidroazepinil i heksahidro-1,4-diazepinil. Poželjni su azetidinil, oksetanil, pirolidinil, tetrahidrofuranil, piperidinil, piperazinil, tetrahidropiranil i morfolinil.
Aza-heterociklil u pronalasku predstavlja monociklični ili biciklični, zasićeni ili delimično nezasićeni heterocikl sa navedenim brojem atoma u prstenu, koji sadrži jedan atom azota u prstenu i pored toga može da sadrži jedan ili dva dodatna heteroatoma u prstenu iz niza N, O, S, SO i/ili SO2i vezan je preko atoma azota u prstenu. Na primer, mogu se pomenuti: pirolidinil, pirazolidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, tiomorfolinil, 1,1-dioksotiomorfolinil, heksahidroazepinil, heksahidro-1,4-diazepinil, 1,2,3,4-tetrahidroizohinolinil, 1,2,3,4-tetrahidrohinolinil, indolinil, 8-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 9-azabiciklo[3.3.1]nonanil, 3-azabiciklo[4.1.0]heptanil i hinuklidinil.
Heteroaril u pronalasku predstavlja monociklični ili biciklični, aromatični heterocikl (heteroaromat) sa navedenim brojem atoma u prstenu, koji sadrži do četiri ista ili različita heteroatoma u prstenu iz niza N, O i/ili S, i vezan je preko atoma ugljenika u prstenu ili preko atoma azota u prstenu. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: furil, pirolil, tienil, pirazolil, imidazolil, hinolinil, tiazolil, oksazolil, izoksazolil, izotiazolil, triazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, tetrazolil, piridil, pirimidinil, piridazinil, pirazinil i triazinil.
Mono-alkilaminokarbonil u pronalasku predstavlja amino grupu koja je vezana preko karbonilne grupe i ima linearni ili razgranati alkil supstituent sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metilaminokarbonil, etilaminokarbonil, n-propilaminokarbonil, izopropilaminokarbonil, nbutilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil, n-pentilaminokarbonil i nheksilaminokarbonil.
Di-alkilaminokarbonil u pronalasku predstavlja amino grupu koja je vezana preko karbonilne grupe i ima dva ista linearna ili razgranata
alkil supstituenta sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: N,N-dimetilaminokarbonil, N,N-dietilaminokarbonil, N-etil-N-metilaminokarbonil, N-metil-N-n-propilaminokarbonil, N-n-butil-N-metilaminokarbonil, N-terc-butil-N-metilaminokarbonil, N-n-pentil-N-metilaminokarbonil i N-n-heksil-N-metilaminokarbonil.
Mono-alkilaminosulfonil u pronalasku predstavlja amino grupu koja je vezana preko sulfonilne grupe i ima linearni ili razgranati alkil supstituent sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metilaminosulfonil, etilaminosulfonil, n-propilaminosulfonil, izopropilaminosulfonil, nbutilaminosulfonil, terc-butilaminosulfonil, n-pentilaminosulfonil i nheksilaminosulfonil.
Di-alkilaminosulfonil u pronalasku predstavlja amino grupu koja je vezana preko sulfonilne grupe i ima dva ista ili različita linearna ili razgranata alkil supstituenta sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: N,N-dimetilaminosulfonil, N,N-dietilamino-sulfonil, N-etil-N-metilaminosulfonil, N-metil-N-n-propilaminosulfonil, N-n-butil-N-metilaminosulfonil, N-terc-butil-N-metilaminosulfonil, N-n-pentil-N-metilaminosulfonil i N-n-heksil-N-metilaminosulfonil.
Mono-alkilamino u pronalasku predstavlja amino grupu koja ima linearni ili razgranati alkil supstituent sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: metilamino, etilamino, n-propilamino, izopropilamino, n-butilamino, terc-butilamino, n-pentilamino i n-heksilamino.
Di-alkilamino u pronalasku predstavlja amino grupu koja ima dva ista ili različita linearna ili razgranata alkil supstituenta sa navedenim brojem atoma ugljenika. Na primer i poželjno, mogu se pomenuti: N,N-dimetilamino, N,N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil-N-n-propilamino, N-n-butil-N-metilamino, N-terc-butil-N-metilamino, N-n-pentil-N-metilaminol i N-n-heksil-N-metilamino.
Halogen u pronalasku obuhvata fluor, hlor, brom i jod. Poželjni su hlor ili fluor.
Okso grupa u pronalasku predstavlja atom kiseonika koji je preko dvostruke veze vezan za atom ugljenika.
[0034] U grupnoj formuli, u kojoj mogu da budu A, X i R<2>, krajnja tačka linije na kojoj se nalazi znak #<1>odnosno #<2>odnosno #<3>odnosno #<4>odnosno #<5>odnosno * odnosno ** odnosno ***, ne predstavlja atom ugljenika odnosno CH2grupu, nego je deo veze do naznačenog atoma za koji su vezani A odnosno X odnosno R<2>.
[0035] Kada su ostaci u jedinjenjima prema pronalasku supstituisani, ako nije drugačije napomenuto, ostaci mogu biti supstituisani jednom ili više puta. U predmetnom pronalasku, za sve ostatke koji se javljaju više od jedanput, važi da je njihovo značenje međusobno nezavisno. Poželjna je supstitucija sa jednim ili dva ista ili različita supstituenta. Sasvim posebno poželjna je supstitucija jednim supstituentom.
[0036] U smislu predmetnog pronalaska, termin „lečenje“ ili „lečiti“ obuhvata sprečavanje, usporavanje, zaustavljanje, ublažavanje, slabljenje, ograničavanje, smanjivanje, potiskivanje, suzbijanje ili lečenje bolesti, tegobe, oboljenja, povrede ili zdravstvenog poremećaja, razvoja, toka ili napredovanja takvog stanja i/ili simptoma takvog stanja. Termin „terapija“ ovde se smatra sinonimom termina „lečenje“.
[0037] Termini „prevencija“, „profilaksa“ ili „sprečavanje“, u smislu predmetnog pronalaska, koriste se kao sinonimi, i označavaju izbegavanje ili smanjenje rizika da se dobije, iskusi ili ima bolest, tegoba, oboljenje, povreda ili zdravstveni poremećaj, rizika od razvoja, toka ili napredovanja takvog stanja i/ili simptoma takvog stanja.
[0038] Lečenje ili prevencija bolesti, tegobe, oboljenja, povrede ili zdravstvenog poremećaja može biti delimično ili potpuno.
[0039] Objavljena su, ali ne predstavljaju deo predmetnog pronalaska, jedinjenja opšte formule (I) u kojima
A
predstavlja (C1-C4)-alkilen, pri čemu, (C1-C4)-alkilen može biti supstituisan hidroksi, metoksi grupom, kao i do tri puta fluorom,
ili
predstavlja grupu formule
pri čemu
n je 1,
p je 0,
q je 1,
pri čemu
#<1>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, * označava vezu sa R<1>,
X
predstavlja -CR<6>R<7>- ili #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>predstavlja vodonik, fluor, metil, etil, metoksi, etoksi, trifluormetoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
pri čemu, metil i etil mogu biti supstituisani do tri puta fluorom,
R<7>je vodonik, fluor ili metil,
pri čemu, metil može biti supstituisan do tri puta fluorom,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
ili
R<6>i R<4>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
R<8>predstavlja vodonik, fluor, metil, etil, metoksi, etoksi, trifluormetoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
pri čemu, metil i etil mogu biti supstituisani do tri puta fluorom,
R<9>je vodonik, fluor ili metil,
pri čemu, metil može biti supstituisan do tri puta fluorom,
ili
R<8>i R<9>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
R<1>
predstavlja (C5-C6)-cikloalkil, fenil ili 5- do 10-člani heteroaril,
pri čemu, (C5-C6)-cikloalkil može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, cijano, trifluormetil, metil, etil, metoksi i etoksi,
pri čemu, metil i etil mogu biti supstituisani do tri puta fluorom,
pri čemu, fenil može biti supstituisan sa 1 do 4 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine halogen, cijano, (C1-C4)-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, trifluormetil, (C1-C4)-alkoksi, (C3-C5)-cikloalkoksi, monofluormetoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, (C1-C4)-alkoksikarbonil, aminokarbonil, mono-(C1-C4)-alkilaminokarbonil, di-(C1-C4)-alkilaminokarbonil, (C1-C4)-alkilsulfanil, (C1-C4)-alkilsulfonil, (C1-C4)-alkilsulfonimidoil, aminosulfonil, mono-(C1-C4)-alkilaminosulfonil, di-(C1C4)-alkilaminosulfonil, (C1-C4)-alkilsulfinil, amino, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, fenil može biti supstituisan metil ili etil grupom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom, pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
pri čemu, metil i etil mogu biti supstituisani metoksi, hidroksi, monometilamino ili di-etilamino grupom, kao i do tri puta fluorom,
ili
pri čemu, 5- do10-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 4 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine halogen, cijano, (C1-C4)-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, trifluormetil, (C1-C4)-alkoksi, (C3-C5)-cikloalkoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, hidroksikarbonil, (C1-C4)-alkoksikarbonil, aminokarbonil, mono-(C1-C4)-alkilaminokarbonil, di-(C1-C4)-alkilaminokarbonil, (C1-C4)-alkilsulfanil, (C1-C4)-alkilsulfonil, (C1-C4)-alkilsulfonimidoil, aminosulfonil, mono-(C1-C4)-alkilaminosulfonil, di-(C1-C4)-alkilaminosulfonil, (C1-C4)-alkilsulfinil, amino, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
ili
pri čemu, 5-do 10-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom ili 5- do 6-članim heterociklilom,
pri čemu, 5-do 10-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil i 5- do 6-člani heterociklil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom,
R<2>
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<3>
označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
r je 0 ili 1,
Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>,
pri čemu
R<14A>predstavlja vodonik, halogen, cijano, (C1-C4)-alkil, ciklopropil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, etoksi, ciklopropoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, hidroksikarbonil, aminokarbonil ili amino, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa hidroksi, amino, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino,
R<14B>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil, ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, etil, acetil ili formil,
pri čemu, metil može biti supstituisan hidroksi grupom ili do pet puta fluorom,
pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom,
R<13>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<13>i R<14A>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten,
pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik, ili
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<4>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
Y je NR<15>, CR<16A>R<16B>, kiseonik ili sumpor,
pri čemu
R<15>je vodonik ili metil,
R<16A>je vodonik ili metil,
R<16B>je vodonik ili metil,
R<3>
predstavlja vodonik ili metil,
R<4>
predstavlja vodonik, fluor, metil, etil, metoksi, etoksi, trifluormetoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, pri čemu, metil i etil mogu biti supstituisani do tri puta fluorom,
R<5>
predstavlja vodonik, fluor ili metil, pri čemu, metil može biti supstituisan do tri puta fluorom,
ili
R<4>i R<5>
zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
U predmetnom pronalasku, posebno su poželjna jedinjenja opšte formule (I), u kojima
A
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***,
pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom,
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi,
R<7>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil,
R<9>je vodonik, fluor ili metil,
R<1>
predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril, pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta kao što je definisano u zahtevu 2,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, (C5-C6)-heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
ili
pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, tercbutilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
R<2>
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
r je 0 ili 1,
Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0,
Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1,
pri čemu
R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi,
R<14B>je vodonik ili fluor,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil,
pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom,
R<13>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten,
ili
R<13>i R<14A>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom,
pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik,
pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik,
R<3>
je vodonik,
R<4>
je vodonik, fluor ili metil,
R<5>
je vodonik,
kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
[0040] U predmetnom pronalasku, posebno su poželjna jedinjenja opšte formule (I), u kojima
A
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***,
pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom,
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi,
R<7>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil,
R<9>je vodonik, fluor ili metil,
R<1>
predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril,
pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
ili
pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, tercbutilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
R<2>
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
r je 0 ili 1,
Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0,
Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1,
pri čemu
R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi,
R<14B>je vodonik ili fluor,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil, pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom,
R<13>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten,
ili
R<13>i R<14A>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik,
R<3>
je vodonik,
R<4>
je vodonik, fluor ili metil,
R<5>
je vodonik,
kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
[0041] U predmetnom pronalasku, posebno su poželjna jedinjenja opšte formule (I), u kojima
A
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***,
pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom,
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi,
R<7>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil,
R<9>je vodonik, fluor ili metil,
R<1>
predstavlja fenil, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil,
pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil, ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil grupom, pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
ili
pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti kondenzovani sa ciklopentil, cikloheksil, fenil ili piridil grupom,
pri čemu, piridil može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, fenil i piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
R<2>
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
r je 0 ili 1,
Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0,
Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1,
pri čemu
R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi,
R<14B>je vodonik ili fluor,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil,
pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom,
R<13>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten,
ili
R<13>i R<14A>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik,
R<3>
je vodonik,
R<4>
je vodonik, fluor ili metil,
R<5>
je vodonik,
kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
[0042] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
A
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***,
pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0043] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
A
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)- ili -CH2CH2-,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0044] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
A
predstavlja -CH2-,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0045] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X predstavlja -
#<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi,
R<7>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0046] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi,
R<7>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil,
R<9>je vodonik, fluor ili metil,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0047] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil,
R<7>je vodonik,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0048] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>predstavlja trifluormetil,
R<7>je vodonik,
R<8>je vodonik,
R<9>je vodonik,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0049] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik,
R<7>je vodonik,
R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil,
R<9>je vodonik, fluor ili metil,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0050] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik,
R<7>je vodonik,
R<8>predstavlja fluor,
R<9>predstavlja fluor,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0051] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
X
predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**,
pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe,
pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila,
pri čemu
R<6>je vodonik,
R<7>je vodonik,
R<8>je vodonik,
R<9>je vodonik,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0052] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I), u kojima
R<1>
predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril,
pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, (C5-C6)-heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
ili
pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, tercbutilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0053] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<1>
predstavlja 5- do 6-člani heteroaril,
pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, tercbutilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom,
pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0054] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<1>
predstavlja fenil, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil,
pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil grupom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
ili
pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti kondenzovani sa ciklopentil, cikloheksil, fenil ili piridil grupom,
pri čemu, piridil može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, fenil i piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0055] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<1>
predstavlja fenil,
pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil,
ili
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil grupom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0056] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<1>
predstavlja pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil ili oksadiazolil,
pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil grupom,
pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta,
pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili mogu biti supstituisani sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil,
pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti kondenzovani sa ciklopentil, cikloheksil, fenil ili piridil grupom,
pri čemu, piridil može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom,
pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, fenil i piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0057] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su posebno poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<1>
predstavlja piridil,
pri čemu, piridil može biti supstituisan sa 1 do 2 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, trifluormetil i metoksi,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0058] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<2>
predstavlja grupu formule
, pri čemu
#<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika,
r je 0 ili 1,
Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0,
Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1,
pri čemu
R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi,
R<14B>je vodonik ili fluor,
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu,
R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil,
pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom,
R<13>je vodonik, fluor ili metil,
ili
R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten,
ili
R<13>i R<14A>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, grupom R<12>i R<13>
ili
R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten,
pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0059] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<3>
je vodonik,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0060] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<4>
je vodonik, fluor ili metil,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0061] U okviru predmetnog pronalaska, takođe su poželjna jedinjenja formule (I), u kojima
R<5>
je vodonik,
kao i njihovi solvati, soli, i solvati soli.
[0062] Dalji predmet pronalaska je postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) prema pronalasku, naznačen time, što se
[A] jedinjenje formule (II)
u kome R3, R4, R5 i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
i
T<1>
predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze, sa jedinjenjem formule (III)
u kojoj
A'
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***,
pri čemu, #<5>označava vezu sa X<1>,
pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom,
R<1>
ima značenje navedeno u zahtevu 1,
i
X<1>
predstavlja pogodnu odlazeću grupu, posebno hlor, brom, jod, mezilat {(metilsulfonil)oksi}, triflat {[(trifluormetil)sulfonil]oksi}, nonaflat {[(nonafluorbutil)sulfonil]oksi}, nozilat {[(4-nitro-fenil)sulfonil]oksi} ili tozilat {[(4-metilfenil)sulfonil]oksi},
prevodi u jedinjenje formule (IV)
u kome A<1>, R<1>, R<3>, R<4>, R<5>, X imaju gorenavedeno značenje, i
T<1>
predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
,
koje se zatim uklanjanjem grupe „T<1>“ u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze ili kiseline prevodi u jedinjenje formule (V)
u kome A<1>, R<1>, R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
koje zatim u inertnom rastvaraču u uslovima kuplovanja amida reaguje sa aminom formule (VI-A) odnosno (VI-B),
u kome r, Y, Z, R<12>i R<13>imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
i zatim se po potrebi postojeće zaštitne grupe uklanjaju po metodama poznatim stručnjaku, i dobijena jedinjenja formule (I) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate. soli, i/ili solvate soli,
ili
[B] jedinjenje formule (II)
u kome R3, R4, R5 i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
i
T<1>
predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze sa aminom formule (VI-A) odnosno (VI-B),
u kojoj r, Y, Z, R<12>i R<13>imaju gorenavedeno značenje, prevodi se u jedinjenje formule (XXIII-A) odnosno (XXIII-B),
u kome r, R<3>, R<4>, R<5>, R<12>, R<13>, X, Y i Z imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
,
koje u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze reaguje sa jedinjenjem formule (III)
u kojoj
A'
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa X<1>, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>-grupom,
R<1>
ima gorenavedeno značenje,
i
X<1>
predstavlja pogodnu odlazeću grupu, posebno hlor, brom, jod, mezilat {(metilsulfonil)oksi}, triflat {[(trifluormetil)sulfonil]oksi}, nonaflat {[(nonafluorbutil)sulfonil]oksi}, nozilat {[(4-nitro-fenil)sulfonil]oksi} ili tozilat {[(4-metilfenil)sulfonil]oksi},
i zatim se po potrebi postojeće zaštitne grupe uklanjaju po metodama poznatim stručnjaku, i dobijena jedinjenja formule (I) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate. soli, i/ili solvate soli,
ili
[C] jedinjenje formule (VII)
u kome R3, R4, R5 i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1, i
T<1>
predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
T<2>
predstavlja 4-metoksi-benzil, benzil, alil, β-(trimetilsilil)etoksimetil (SEM), metoksimetil (MOM) ili benziloksimetil,
putem hidrolize estarske grupe u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze ili kiseline prevodi se u jedinjenje formule (VIII)
,
u kome R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1 kao i iznad,
i
T<2>
predstavlja 4-metoksi-benzil, benzil, alil, β-(trimetilsilil)etoksimetil (SEM), metoksimetil (MOM) ili benziloksimetil,
koje zatim u inertnom rastvaraču u uslovima kuplovanja amida reaguje sa aminom formule (VI-A)
u kome r, Y, Z, R<12>i R<13>imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
prevodi se u jedinjenje formule (IX-A) odnosno (IX-B),
u kome r, R<3>, R<4>, R<5>, R<12>, R<13>, T<2>, X, Y i Z imaju gorenavedeno značenje,
,
zaštitna grupa „T<2>“ se uklanja u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze ili kiseline ili po potrebi u prisustvu pogodnog paladijumovog katalizatora, i dobijeno jedinjenje formule (X-A) odnosno (X-B),
u kome r, R<3>, R<4>, R<5>, R<12>, R<13>, X, Y i Z imaju značenje navedeno u zahtevu 1,
u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze, sa jedinjenjem formule (III)
u kojoj
A'
predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa X<1>, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>-grupom,
R<1>
ima gorenavedeno značenje,
i
X<1>
predstavlja pogodnu odlazeću grupu, posebno hlor, brom, jod, mezilat {(metilsulfonil)oksi}, triflat {[(trifluormetil)sulfonil]oksi}, nonaflat {[(nonafluorbutil)sulfonil]oksi}, nozilat {[(4-nitro-fenil)sulfonil]oksi} ili tozilat {[(4-metilfenil)sulfonil]oksi},
i zatim se po potrebi postojeće zaštitne grupe uklanjaju po metodama poznatim stručnjaku, i dobijena jedinjenja formule (I) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate. soli, i/ili solvate soli.
[0063] Jedinjenja formule (III), (VI-A) i (VI-B) su komercijalno dostupna, poznata iz literature ili mogu da se dobiju postupcima analognim literaturnim.
[0064] Inertni rastvarači za korake postupka (II) (III) -> (IV) odnosno (X) (III) → (I) su, na primer, halogeni ugljovodonici kao što je dihlormetan, tetrahlormetan, trihloretilen ili hlorbenzol, etri kao što je dietiletar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, alkoholi kao što je metanol, etanol, n-propanol, izopropanol, n-butanol, 2,2,2-trifluoretanol ili drugi rastvarači kao što je aceton, metiletilketon, etilestar sirćetne kiseline, acetonitril, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, dimetil sulfoksid, N,N'-dimetilpropilen urea(DMPU), N-metilpirolidon (NMP) ili piridin. Takođe, moguće je koristiti smešu navedenih rastvarača. Poželjno se koriste dimetilformamid ili acetonitril.
[0065] Kao baze za korak postupka (II) (III) -> (IV) odnosno (X) (III) → (I) pogodne su uobičajene neorganske ili organske baze. Ovde poželjno spadaju litijum, natrijum, kalijum, alkalni hidroksidi kao što je, na primer, litijum, natrijum ili kalijum hidroksid, alkoholati kao što je kalijum-terc-butilat, metanolat, etanolat, alkalni karbonati ili karbonati kao što je litijum, natrijum, kalijum, kalcijum ili cezijum karbonat, po potrebi uz dodatak
alkalnog jodida kao što je, na primer, natrijum jodid ili kalijum jodid ili organski amini kao što je trietilamin, N-metilmorfolin, N-metilpiperidin, N,N-diizopropiletilamin, 1,5-diazabiciklo[4.3.0]non-5-en (DBN), 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (DBU) ili 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (DABCO<®>). Poželjno se koristi cezijum karbonat.
[0066] Reakcija se generalno izvodi u temperaturnom opsegu od 0 °C do 120 °C, poželjno na 20 °C do 80 °C, sasvim posebno poželjno na sobnoj temperaturi, po potrebi u mikrotalasnoj pećnici. Reakcija može da se izvede na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar).
[0067] Hidroliza estra jedinjenja (IV) u jedinjenja formule (V) odnosno jedinjenja (VII) u jedinjenja formule (VIII) izvodi se prema uobičajenim metodama, tretiranjem estara kiselinama ili bazama u inertnim rastvaračima, pri čemu se u drugom slučaju prvobitno nastale soli tretiranjem sa kiselinama prevode u slobodne karboksilne kiseline. U slučaju tercbutilestra, cepanje estra se poželjno vrši kiselinama.
[0068] Kao inertni rastvarači za ove reakcije su pogodni voda ili organski rastvarači uobičajeni za cepanje estara. Ovde pogodno spadaju alkoholi kao što je metanol, etanol, npropanol, izopropanol, n-butanol ili terc-butanol, ili etri kao dietiletar, tetrahidrofuran, dioksan ili glikol dimetiletar, ili drugi rastvarači, kao što je aceton, dihlormetan, dimetilformamid ili dimetil sulfoksid. Takođe, moguće je koristiti smešu navedenih rastvarača. U slučaju bazne hidrolize estra, poželjno se koriste smeše vode sa dioksanom, tetrahidrofuranom, metanolom i/ili etanolom i/ili n-propanolom. U slučaju reakcije sa trifluorosirćetnom kiselinom, poželjno se koristi dihlormetan a u slučaju reakcije sa hlorovodonikom poželjno tetrahidrofuran, dietiletar, dioksan ili voda.
[0069] Kao baze se koriste uobičajene neorganske baze. Ovde poželjno spadaju alkalni i zemnoalkalni hidroksidi, kao što je, na primer, natrijum, litijum, kalijum ili barijum hidroksid, ili alkalni i zemnoalkalni karbonati, kao što je natrijum, litijum, kalijum ili kalcijum karbonat. Posebno su poželjni natrijum ili litijum hidroksid.
[0070] Kao kiseline za cepanje estara generalno su pogodne sumporna kiselina, hlorovodonik/hlorovodonična kiselina, bromovodonik/bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sirćetna kiselina, trifluorsirćetna kiselina, toluolsulfonska kiselina, metansulfonska kiselina ili trifluormetansulfonska kiselina ili njihove smeše, po potrebi uz dodatak vode. Poželjni su hlorovodonik ili trifluorsirćetna kiselina u slučaju terc-butilestra, i hlorovodonična kiselina u slučaju metilestra.
[0071] Cepanje estara se generalno izvodi u temperaturnom opsegu od 0 °C do 100 °C, poželjno na 0 °C do 50 °C, posebno poželjno na sobnoj temperaturi.
[0072] Navedene reakcije mogu da se izvode na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku.
[0073] Inertni rastvarači za kuplovanje amida (V) (VI-A) → (I) odnosno (V) (VI-B) → (I) odnosno (VIII) (VI-A) → (IX-A) odnosno (VIII) (VI-B) → (IX-B) su, na primer, etri kao dietiletar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, halogeni ugljovodonici kao što je dihlormetan, trihlormetan, tetrahlormetan, 1,2-dihloretan, trihloretilen ili hlorbenzol, ili drugi rastvarači kao što je aceton, etilestar sirćetne kiseline, acetonitril, piridin, dimetilsulfoksid, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N,N'-dimetilpropilen urea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe se mogu koristiti smeše navedenih rastvarača. Poželjni su dihlormetan, tetrahidrofuran, dimetilformamid ili smeše ovih rastvarača.
[0074] Kao sredstva za kondenzaciju za formiranje amida odnosno (VIII) (VI-A) -> (IX-A) odnosno (VIII) (VI-B) -> (IX-B) pogodni su, na primer, karbodiimidi kao N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diizopropil-, N,N'-dicikloheksilkarbodiimid (DCC) ili N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid-hidrohlorid (EDC), derivati fosgena kao što je N,N'-karbonil diimidazol (CDI), jedinjenja 1,2-oksazolijuma kao što je 2-etil-5-fenil-1,2-oksazolijum-3-sulfat ili 2-terc-butil-5-metil-izoksazolijum-perhlorat, acilamino jedinjenja kao što je 2-etoksi-1-etoksikarbonil-1,2-di-hidrohinolin, ili izobutil hlorformijat, anhidrid propanfosfonske kiseline (T3P), 1-hlor-N,N,2-trimetilprop1-en-1-amin, dietilestar cijanofosfonske kiseline, bis-(2-okso-3-oksazolidinil)-fosforil hlorid, benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)fosfonijum-heksafluorfosfat, benzotriazol-1-iloksitris(pirolidino)fosfonijum-heksafluorfosfat (PyBOP), O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-tetrafluorborat (TBTU), O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (HBTU), 2-(2-okso-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronijum-tetrafluorborat (TPTU), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (HATU) ili O-(1H-6-hlorbenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum-tetrafluorborat (TCTU), po potrebi u kombinaciji sa dodatnim pomoćnim supstancama kao što je 1-hidroksibenzotriazol (HOBt) ili N-hidroksisukcinimid (HOSu), ili kao baze alkalni karbonati, npr. natrijum- ili kalijum karbonat ili hidrogenkarbonat, ili organske baze kao što je trialkilamin, npr. trietilamin, N-metilmorfolin, N-metilpiperidin ili N,N-diizopropiletilamin. Poželjno se koristi HATU.
[0075] Kondenzacije (V) (VI-A) -> (I) odnosno (V) (VI-B) -> (I) odnosno (VIII) (VI-A) -> (IX-A) odnosno (VIII) (VI-B) -> (IX-B) generalno se izvode u temperaturnom opsegu od -20 °C do 100 °C, poželjno na 0 °C do 60 °C. Reakcija može da se odigra na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku.
[0076] Alternativno, karboksilna kiselina formule (V) odnosno (VIII) takođe može prvo da se prevede u odgovarajući hlorid karboksilne kiseline, koji se zatim direktno ili u posebnoj reakciji sa aminom formule (VI) prevodi u jedinjenja prema pronalasku. Formiranje hlorida karboksilne kiseline iz karboksilnih kiselina vrši se prema metodama koje su poznate stručnjaku, na primer tretiranjem tionil hloridom ili oksalil hloridom u prisustvu pogodne baze, na primer u prisustvu piridina, kao i opciono uz dodatak dimetilformamida, opciono u pogodnom inertnom rastvaraču.
[0077] Cepanje zaštitne grupe u koraku reakcije (IX) -> (X) pri tome se vrši prema uobičajenim metodama poznatim iz hemije zaštitne grupe, poželjno reakcijom sa kiselinom kao što je, na primer, trifluorsirćetna kiselina u dihlormetanu, pomoću baze kao što je, na primer, amonijak u metanolu, hidrogenolizom u prisustvu paladijumskog katalizatora, kao što je, na primer, paladijum na aktivnom uglju, u inertnom rastvaraču, kao što je, na primer, etanol ili etilestar sirćetne kiseline, 2,3-dihlor-5,6-dicijano-1,4-benzohinon (DDQ) ili amonijum cerijum (IV) nitrat (CAN) [vidite i npr. T.W. Greene i P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999].
[0078] Inertni rastvarači za reakciju (II) (VI-A) -> (XXIII-A) odnosno (II) (VI-B) -> (XXIII-B) su, na primer, pirolidin, toluol, acetonitril, tetrahidrofuran ili dihlormetan. Poželjno se koristi pirolidin.
[0079] Reakcije (II) (VI-A) -> (XXIII-A) odnosno (II) (VI-B) -> (XXIII-B) generalno se izvode u temperaturnom opsegu od 20 °C do 200 °C, poželjno na 80 °C do 200 °C.
Reakcija može da se odigra na normalnom ili povišenom pritisku (npr. od 1 do 5 bar).
Generalno se radi na normalnom pritisku
[0080] Jedinjenja formule (II) u kojima X predstavlja #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-** i R<3>, R<7>i R<9>predstavljaju vodonik mogu da se dobiju kada jedinjenje formule (XI)
u kojoj
T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
X<2>predstavlja fluor, hlor, brom ili jod,
i R<4>, R<6>i R<8>imaju gorenavedeno značenje,
[0081] u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze i po potrebi paladijumskog katalizatora sa jedinjenjem formule XII,
u kojoj
T<3>predstavlja benzil ili terc-butil,
prelazi u jedinjenje formule (XIII),
u kojoj
R<4>, R<6>, R<8>, T<1>i T<3>imaju gorenavedeno značenje,
zaštitna grupa T<3>se uklanja u pogodnom inertnom rastvaraču putem hidrogenolize u prisustvu paladijumovog katalizatora i tako dobijeno jedinjenje formule (XIV)
u kojoj
R<4>, R<6>, R<8>i T<1>imaju gorenavedeno značenje,
u pogodnom rastvaraču sa derivatom fosgena ciklizuje se u jedinjenje formule (XV),
u kojoj R<4>, R<6>, R<8>i T<1>imaju gorenavedeno značenje,
i zatim se u pogodnom rastvaraču u prisustvu paladijumovog katalizatora hidrogenuje u atmosferi vodonika,
i dobijena jedinjenja formule (II) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate, soli, i/ili solvate soli.
[0082] Jedinjenja formule (II) odnosno (IV) u kojima X predstavlja #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-** mogu da se dobiju kada jedinjenje formule (XVI),
u kojoj T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
i R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>i R<9>imaju gorenavedeno značenje,
u pogodnom rastvaraču u prisustvu trimetiloksonijum-tetrafluorborata sa jedinjenjem formule (XVII-A) odnosno (XVII-B),
u kojoj
T<2>
predstavlja 4-metoksi-benzil,
predstavlja metil ili etil,
i A<1>i R<1>imaju gorenavedeno značenje,
prevodi se u jedinjenje formule (XVIII-A) odnosno (XVIII-B)
u kojoj
A<1>, R<1>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>, R<9>T<1>, T<2>i T<4>imaju gorenavedeno značenje,
koje se zatim u pogodnom rastvaraču ciklizuje u jedinjenje formule (XIX-A) odnosno (XIX-B),
u kojoj A<1>, R<1>,R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>, R<9>T<1>i T<2>imaju gorenavedeno značenje,
i kod jedinjenja formule (XIX-A) zatim se zaštitna grupa T<2>uklanja u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne kiseline,
i dobijena jedinjenja formule (II) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate, soli, i/ili solvate soli.
[0083] Jedinjenja formule (XIX-B) odgovaraju jedinjenjima formule (IV), kada u formuli (IV) X predstavlja #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**.
[0084] Jedinjenja formule (VII) odgovaraju jedinjenjima formule (XIX), kada u formuli (VII) X predstavlja #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**.
[0085] Jedinjenja formule (II), u kojima X predstavlja -CR<6>R<7>-,. mogu da se dobiju kada jedinjenje formule (XX),
u kojoj T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil,
i R<3>, R<4>, R<5>, R<6>i R<7>imaju gorenavedeno značenje,
prvo reaguje u pogodnom rastvaraču u prisustvu trimetiloksonijum-tetrafluorborata i zatim se sa jedinjenjem formule (XXI),
u kojoj
T<4>
predstavlja metil, etil, terc-butil ili benzil,
prevodi u jedinjenje formule (XXII)
u kojoj R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>i T<1>imaju gorenavedeno značenje,
.
[0086] Jedinjenja formule (XI), (XII), (XVII-A), (XVII-B), (XX) i (XXI) su komercijalno dostupna, poznata iz literature ili mogu da se dobiju postupcima analognim literaturnim.
[0087] Opisani postupak objašnjen je preko sledećih šema (Šema 1-3):
a) terc-butanol, piridin, p-toluolsulfonilhlorid, RT; b) benzil karbazat, cezijum karbonat, 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen, bis(dibenzilidenaceton)paladijum(0) u toluolu 80 °C; c) 5% Pd/C, 1 bar H2u toluolu / metanolu, RT; d) karbonil diimidazol, THF, RT; e) 5% Pd/C, 34,5 bar H2u toluolu / metanolu, RT; f) cezijum karbonat, 1-(brommetil)-3,5-dihlorbenzol u acetonitrilu, RT; g) HCl u 1,4-dioksanu, RT; h) HATU, trietilamin, pirolidin u THF-u, RT.
a) 1. metil-(5RS)-6-oksopiperidin-2-karboksilat, trimetiloksonijum tetrafluorborat, dihlormetan, RT; 2. Metil-1-(4-metoksibenzil)hidrazin karboksilat, dihlormetan, RT; b) DMF, 150 °C; c) ) litijum hidroksid, THF / voda, RT; d) HATU, trietilamin, pirolidin u DMF-u, RT; e) trifluorsirćetna kiselina, 150 °C.
a) 1. trimetiloksonijum tetrafluorborat i metil-5-okso-L-prolinat u dihlormetanu, RT; 2. metil estar hidrazinomravlje kiseline, RT 3. DMF, 170 °C; b) cezijum karbonat, 1-(brommetil)-4-metilbenzol u acetonitrilu, RT; c) litijum hidroksid u vodi / THF-u, RT; d) HATU, diizopropiletilamin, pirolidin u DMF-u / dihlormetanu, RT.
[0088] Korak postupka (XI) (XII) → (XIII) izvodi se u rastvaraču koji je inertan pod reakcionim uslovima. Pogodni rastvarači su, na primer, etri kao što je 1,4-dioksan, tetrahidrofuran, 2-metiltetrahidrofuran, dietiletar, di-n-butiletar, glikol dimetiletar ili dietilen glikol dimetiletar, alkoholi kao što je terc-butanol ili amil alkoholi ili drugi rastvarači kao što je dimetilformamid (DMF), dimetilsulfoksid (DMSO), dimetilacetamid (DMA), toluol ili acetonitril. Takođe, moguće je koristiti smešu navedenih rastvarača. Poželjni su terc-butanol, 1,4-dioksan i toluol.
[0089] Korak postupka (XI) (XII) → (XIII) izvodi se u prisustvu pogodnog paladijumovog katalizatora. Kao paladijumov katalizator pogodan je, na primer, paladijum na aktivnom uglju, paladijum(II)-acetat, bis(dibenzilidenaceton)paladijum(0), tetrakis-(trifenilfosfin)-paladijum(0), bis-(trifenilfosfin)-paladijum(II)-hlorid, bis-(acetonitril)-paladijum(II)-hlorid, [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihlorpaladijum(II) i odgovarajući kompleks sa dihlormetanom, po potrebi u vezi sa dodatnim fosfan ligandima kao što je, na primer, 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil (BINAP), (2-bifenil)di-terc-butilfosfin, dicikloheksil[2',4',6'-tris(1-metiletil)bifenil-2-il]fosfan (XPhos), bis(2-fenilfosfinofenil)etar (DPEphos) ili 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (Xantphos) [upor. npr. Hassan J. et al., Chem. Rev. 2002, 102, 1359-1469], 2-(dicikloheksilfosfin)-3,6-dimetoksi-2',4',6'-triizopropil-1,1 '-bifenil (BrettPhos), 2-dicikloheksilfosfino-2',6'-dimetoksibifenil (SPhos), 2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksibifenil (RuPhos), 2-(di-t-butilfosfino)-3-metoksi-6-metil-2',4',6'-tri-ipropil-1,1'-bifenil (RockPhos) i 2-di-terc-butilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (tercbutilXPhos). Nadalje je moguće primeniti odgovarajući pretkatalizator kao što je hlor-[2-(dicikloheksilfosfin)-3,6-dimetoksi-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil][2-(2-aminoetil)-fenil]paladijum(II) (pretkatalizator BrettPhos) [upor. npr. S. L. Buchwald et al., Chem. Sci.
2013, 4, 916] po potrebi u vezi sa dodatnim fosfan ligandima kao što je 2-(dicikloheksilfosfin)-3,6-dimetoksi-2',4',6'-triizopropil-1,1 '-bifenil (BrettPhos). Poželjni su bis(dibenzilidenaceton)paladijum(0) u kombinaciji sa 4,5-bis-(difenilfosfino)-9,9-dimetil ksantenom (Xantphos) kao i hlor-[2-(dicikloheksilfosfin)-3,6-dimetoksi-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil][2-(2-aminoetil)-fenil]paladijum(II) (pretkatalizator BrettPhos).
[0090] Reakcija (XI) (XII) → (XIII) izvodi se u prisustvu pogodne baze. Pogodne baze za ovu reakciju su uobičajene neorganske ili organske baze. Ovde poželjno spadaju alkalni ili zemnoalkalni karbonati, kao što je litijum, natrijum, kalijum, kalcijum ili cezijum karbonat, alkalni ili zemnoalkalni hidroksidi, kao što je natrijum, kalijum ili barijum hidroksid, alkalni ili zemnoalkalni fosfati, kao što je kalijum fosfat, alkalni alkoholati kao što je natrijum ili kalijum terc-butilat i natrijum metanolat, alkalni fenolati kao što je natrijum fenolat, amidi kao što je natrijum amid, litijum-, natrijum- ili kalijum-bis(trimetilsilil)-amid ili litijum diizopropil amid ili organski amini kao što je 1,5-diazabiciklo[4.3.0]non-5-en (DBN), 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (DBU). Poželjno se koriste cezijum karbonat, kalijum karbonat, natrijum ili kalijum terc-butilat ili litijum bis(trimetilsilil)amid.
[0091] Korak postupka (XI) (XII) → (XIII) generalno se izvodi u temperaturnom opsegu od 0 °C do 200 °C, poželjno na 10 °C do 150 °C. Reakcije takođe mogu da se izvode u zatvorenim sudovima (cevčice za mikrotalasni reaktor) u mikrotalasnom reaktoru. Reakcija može da se odigra na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku ili u zatvorenim sudovima (cevčice za mikrotalasni reaktor) ispod ili iznad tačke ključanja korišćenog rastvarača. Poželjne su reakcije u zatvorenim sudovima (cevčice za mikrotalasni reaktor) na temperaturi iznad tačke ključanja rastvarača i pod povišenim pritiskom uz upotrebu mikrotalasnog reaktora ili bez njega.
[0092] Cepanje zaštitne grupe u koraku reakcije (XIII) → (XIV) pri tome se vrši prema uobičajenim metodama poznatim iz hemije zaštitne grupe, poželjno reakcijom sa kiselinom kao što je, na primer, trifluorsirćetna kiselina, hidrogenolizom u prisustvu paladijumovog katalizatora, kao što je, na primer, paladijum na aktivnom uglju, u inertnom rastvaraču, kao što je, na primer, etanol ili etilestar sirćetne kiseline [vidite i npr. T.W. Greene i P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999].
[0093] Inertni rastvarači za korak reakcije (XIV) → (XV) su, na primer, etar kao što je dietiletar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, halogeni ugljovodonici kao što je dihlormetan, trihlormetan, tetrahlormetan, 1,2-dihloretan, trihloretilen ili hlorbenzol, ili drugi rastvarači kao što je aceton, etilestar sirćetne kiseline, acetonitril, piridin, dimetilsulfoksid, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N,N'-dimetilpropilen urea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe se mogu koristiti smeše navedenih rastvarača. Poželjni su dihlormetan, tetrahidrofuran, dimetilformamid ili smeše ovih rastvarača.
[0094] Kao derivati fosgena u koraku postupka (XIV) → (XV) pogodni su, na primer, N,N'-karbonildiimidazol (CDI), trihlormetil hloroformat (difosgen), bis(trihlormetil)karbonat (trifosgen) ili aril hloroformat. Poželjno se koristi N,N'-karbonildiimidazol (CDI).
[0095] Korak postupka (XIV) → (XV) generalno se izvodi u temperaturnom opsegu od -20 °C do 100 °C, poželjno na 0 °C do 60 °C. Reakcija može da se odigra na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku.
[0096] Inertni rastvarači za korak reakcije (XV) → (II) su, na primer, etar kao što je dietiletar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, ili drugi rastvarači kao što je aceton, etilestar sirćetne kiseline, acetonitril, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N,N'-dimetilpropilen urea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe se mogu koristiti smeše navedenih rastvarača. Poželjni su dihlormetan, tetrahidrofuran, dimetilformamid ili smeše ovih rastvarača.
[0097] Korak postupka (XV) → (II) generalno se izvodi u temperaturnom opsegu od -20 °C do 100 °C, poželjno na 0 °C do 60 °C. Reakcija može da se odigra na normalnom ili povišenom pritisku vodonika (npr. od 1,0 do 100 bar). Generalno se radi na povišenom pritisku vodonika.
[0098] Inertni rastvarači za korak postupka (XVI) (XVII-A) → (XVIII-A) odnosno (XVI) (XVII-B) → (XVIII-B) odnosno (XXI (XXI) → (XXII) su, na primer, etri kao što je dietiletar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, halogeni ugljovodonici kao što je dihlormetan, trihlormetan, tetrahlormetan, 1,2-dihloretan, trihloretilen ili hlorbenzol, ili drugi rastvarači kao što je N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N,N'-dimetilpropilen urea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe se mogu koristiti smeše navedenih rastvarača. Poželjan je dihlormetan.
[0099] Korak postupka (XVI) (XVII-A) → (XVIII-A) odnosno (XVI) (XVII-B) → (XVIII-B) odnosno (XXI (XXI) -> (XXII) generalno se izvodi u temperaturnom opsegu od -20 °C do 100 °C, poželjno na 0 °C do 60 °C. Reakcija može da se odigra na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku.
[0100] Inertni rastvarači za korak postupka (XVI) (XVII-A) → (XVIII-A) odnosno (XVI) (XVII-B) → (XVIII-B) odnosno (XXI (XXI) → (XXII) su, na primer, etri kao što je dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, halogeni ugljovodonici kao što je trihlormetan, tetrahlormetan, 1,2-dihloretan, trihloretilen ili hlorbenzol, ili drugi rastvarači kao što je aceton, etilestar sirćetne kiseline, acetonitril, piridin, dimetilsulfoksid, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N,N'-dimetilpropilen urea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe se mogu koristiti smeše navedenih rastvarača. Poželjan je N,N-dimetilformamid.
[0101] Korak postupka (XVI) (XVII-A) → (XVIII-A) odnosno (XVI) (XVII-B) → (XVIII-B) generalno se izvodi u temperaturnom opsegu od 20 °C do 100 °C, poželjno na 0 °C do 60 °C 20 °C do 250 °C, poželjno na 100 °C do 200 °C. Reakcija može da se odigra na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku.
[0102] Inertni rastvarači za korak postupka (XVIII-A) → (XIX-A) odnosno (XVIII-B) → (XIX-B) su, na primer, etri kao što je dietiletar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetiletar ili dietilenglikol dimetiletar, ugljovodonici kao što je benzol, toluol, ksilol, heksan, cikloheksan ili frakcije nafte, halogeni ugljovodonici kao što je dihlormetan, trihlormetan, tetrahlormetan, 1,2-dihloretan, trihloretilen ili hlorbenzol, ili drugi rastvarači kao što je aceton, etilestar sirćetne kiseline, acetonitril, piridin, dimetilsulfoksid, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N,N'-dimetilpropilen urea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe se mogu koristiti smeše navedenih rastvarača. Poželjni su dihlormetan i acetonitril.
[0103] Korak postupka (XVIII-A) → (XIX-A) odnosno (XVIII-B) → (XIX-B) generalno se izvode u temperaturnom opsegu od 20 °C do 250 °C, poželjno na 100 °C do 200 °C.
Reakcija može da se odigra na normalnom, povišenom ili sniženom pritisku (npr. od 0,5 do 5 bar). Generalno se radi na normalnom pritisku.
[0104] Svaka hidroksi, amino i/ili amido grupa prisutna u polaznim jedinjenjima prema formuli (II) i (VII) takođe može, ako je svrsishodno ili potrebno, da se koristi u privremeno zaštićenom obliku i da se zatim ponovo oslobodi na kraju odgovarajuće reakcione sekvence [prikladnost, uvođenje i uklanjanje takvih zaštitnih grupa vidite npr. u T.W.Greene i P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999).
[0105] Dalja jedinjenja prema pronalasku mogu po potrebi takođe da se dobiju konverzijom funkcionalnih grupa pojedinačnih supstituenata, konkretno onih navedenih pod R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>, R<9>, polazeći od jedinjenja formule (I) dobijenih u gornjim postupcima. Ove konverzije se izvode prema uobičajenim metodama poznatim stručnjaku, i obuhvataju, na primer, reakcije kao što je nukleofilna i elektrofilna supstitucija, oksidacija, redukcija, hidrogenovanje, reakcije kuplovanja katalizovane prelaznim metalima, eliminacija, alkilovanje, aminacija, esterifikacija, cepanje estara, eterifikacija, cepanje etara, nastajanje karbonamida, dehidratacija kao i uvođenje i uklanjanje privremenih zaštitnih grupa.
[0106] Detaljni postupci se takođe nalaze u eksperimentalnom delu u odeljku za dobijanje polaznih jedinjenja i intermedijera.
Objašnjenja uz slike:
Slika 1: Primer 237 u kompleksu sa svinjskim PREP.
Slika 2: Primer 358 u kompleksu sa svinjskim PREP.
Slika 3: Primer 454 u kompleksu sa svinjskim PREP.
Slika 4: Primer 108 u kompleksu sa svinjskim PREP.
Slika 5: Primer 113 u kompleksu sa svinjskim PREP.
Slika 6: Primer 157 u kompleksu sa svinjskim PREP.
Slika 7: Primer 026 u kompleksu sa svinjskim PREP.
[0108] Jedinjenja prema pronalasku imaju vredne farmakološke osobine i mogu da se koriste za sprečavanje i lečenje bolesti kod ljudi i životinja.
[0109] Jedinjenja prema pronalasku predstavljaju potentne, hemijski stabilne inhibitore humane prolil-endopeptidaze (PREP, PE, prolil-oligopeptidaza, POP) i zato su pogodna za lečenje i/ili prevenciju bolesti i patoloških procesa, posebno takvih kod kojih je tokom infektivnog ili neinfektivnog inflamatornog procesa i/ili remodelovanja tkiva ili krvnih sudova uključen PREP ili proizvod PREP, PGP (prolin-glicin-prolin).
[0110] Tu se u smislu predmetnog pronalaska posebno ubrajaju bolesti disajnih puteva i pluća, kao i hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP) ili cistična fibroza (mukoviscidoza, CF), astma i grupa intersticijalnih bolesti pluća (ILD), kao i bolesti kardiovaskularnog sistema, kao što je arterioskleroza i miokarditis.
[0111] Manifestacije HOBP uključuju, između ostalog, posebno npr. emfizem pluća izazvan duvanskim dimom, hronični bronhitis (HB), plućnu hipertoniju kod HOBP (PH-HOBP), bronhiektaziju (BE) i njihove kombinacije, posebno u stadijumima akutne egzacerbacije bolesti (AE-HOBP).
[0112] U manifestacije astme spadaju astmatične bolesti različitog stepena težine sa intermitentnim ili perzistentnim tokom, kao što su refraktorna astma, bronhijalna astma, alergijska astma, intrinzična astma, ekstrinzična astma i astma izazvana lekovima ili prašinom.
[0113] U grupu intersticijalnih bolesti pluća (ILD) spadaju idiopatska pulmonalna fibroza (IPF), plućna sarkoidoza i akutna intersticijalna pneumonija, nespecifične intersticijalne pneumonije, limfoidne intersticijalne pneumonije, respiratorni bronhiolitis sa grupu intersticijalnom bolešću pluća, kriptogene organizujuće pneumonije, deskvamativne intersticijalne pneumonije i idiopatske intersticijalne pneumonije koje ne mogu da se klasifikuju, nadalje granulomatozne intersticijalne bolesti pluća, intersticijalne bolesti pluća poznatog uzroka i druge intersticijalne bolesti pluća nepoznatog uzroka.
[0114] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju dodatnih bolesti disajnih puteva i pluća, kao što je npr. pulmonalna arterijska hipertonija (PAH) i drugi oblici pulmonalne hipertonije (PH), Bronchiolitis obliterans sindroma (BOS), akutnog respiratornog distres sindroma (ARDS), akutnog oštećenja pluća (ALI), deficijencije alfa-1 antitripsina (AATD) i cistične fibroze (CF), različitih oblika bronhitisa (hronični bronhitis, infektivni bronhitis, eozinofilni bronhitis), bronhiektazije, pneumonije, farmerskih pluća i srodnih bolesti, infektivnog i neinfektivnog kašlja i prehlade (hronični inflamatorni kašalj, jatrogeni kašalj), inflamacije sluznice nosa (uključujući medikamentozni rinitis, vazomotorni rinitis i sezonski alergijski rinitis, npr. polenska groznica) i polipa.
[0115] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju kardiovaskularnih bolesti, kao što je, na primer, visok krvni pritisak (hipertenzija), srčana insuficijencija, koronarna bolest srca, stabilna i nestabilna angina pektoris, renalna hipertenzija, periferne vaskularne bolesti i kardiovaskularne bolesti, aritmije, poremećaji srčanog ritma pretkomora i komora kao i poremećaji provodljivosti kao što su atrioventrikularni blokovi stepena I-III, supraventrikularna tahikardija, atrijalna fibrilacija, lepršanje pretkomora, ventrikularna fibrilacija, ventrikularni flater, ventrikularna tahikardija, torsades de pointes tahikardija, ekstrasistole pretkomore i komore, ekstrasistole atrioventrikularnog spoja, bolest sinusnog čvora, sinkopa, AV nodalna reentrant tahikardija, Volf-Parkinson-Vajtov sindrom, akutni koronarni sindrom (AKS), autoimune bolesti srca (perikarditis, endokarditis, upala srčanih zalistaka, aortitis, kardiomiopatije), kardiomiopatija boksera, aneurizme, šok kao što je kardiogeni šok, septički šok i anafilaktički šok, takođe za lečenje i/ili prevenciju tromboembolijskih bolesti i ishemije, kao što je ishemija miokarda, infarkt miokarda, moždani udar, hipertrofija srca, tranzitorni i ishemijski ataci, preeklampsija, inflamatorne kardiovaskularne bolesti, spazam koronarnih i perifernih arterija, nastanak edema kao što je, na primer, edem pluća, edem mozga, edem bubrega ili edem povezan sa srčanom insuficijencijom, bolesti perifernog krvotoka, reperfuziona povreda, arterijska i venska tromboza, mikroalbuminurija, srčana slabost, endotelna disfunkcija, mikro- i makrovaskularno oštećenje (vaskulitis), kao i za prevenciju restenoze, na primer nakon trombolitičke terapije, perkutane transluminalne angioplastike (PTA), perkutane transluminalne koronarne angioplastike (PTCA), transplantacije srca i operacija bajpasa.
[0116] U svrhe predmetnog pronalaska, termin srčana insuficijencija uključuje akutne kao i hronične manifestacije srčane insuficijencije kao i specifične ili srodne oblike bolesti, kao što je akutna kongestivna srčana insuficijencija, desnostrana srčana insuficijencija, levostrana srčana insuficijencija, globalna srčana insuficijencija, ishemijska kardiomiopatija, dilatirana kardiomiopatija, hipertrofična kardiomiopatija, idiopatska kardiomiopatija, kongenitalni defekti srca, defekt srčanog zaliska, srčana insuficijencija usled defekta srčanog zaliska, stenoza mitralnog zaliska, regurgitacija mitralnog zaliska, stenoza aortnog zaliska, insuficijencija aortnog zaliska, trikuspidalna stenoza, trikuspidalna regurgitacija, stenoza plućne valvule, insuficijencija zaliska plućne arterije, kombinovani defekti srčanih zalistaka, zapaljenje miokarda (miokarditis), hronični miokarditis, akutni miokarditis, virusni miokarditis, dijabetesna srčana insuficijencija, alkoholna kardiomiopatija, srčane bolesti skladištenja i dijastolna i sistolna srčana insuficijencija.
[0117] Jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za lečenje i/ili prevenciju bolesti bubrega, naročito bubrežne insuficijencije i zatajenja bubrega. U svrhe predmetnog pronalaska, termini bubrežna insuficijencija i zatajenje bubrega uključuju njihove akutne i hronične manifestacije kao i osnovne ili povezane bolesti bubrega, kao što je renalna hipoperfuzija, intradijalizna hipotenzija, opstruktivna uropatija, glomerulopatije, glomerulonefritis, akutni glomerulonefritis, glomeruloskleroza, tubulointersticijalne bolesti, nefropatijske bolesti kao što je primarna i urođena bolest bubrega, upala bubrega, imunološke bolesti bubrega kao što je odbacivanje transplantiranog bubrega i bolesti bubrega indukovane imunskim kompleksom, nefropatija indukovana toksičnim supstancama, nefropatija indukovana kontrastnim sredstvom, dijabetesna i nedijabetesna nefropatija, pijelonefritis, ciste na bubrezima, nefroskleroza, hipertenzivna nefroskleroza i nefrotski sindrom, koje mogu dijagnostički da se okarakterišu, na primer, na osnovu abnormalno niskog kreatinina i/ili izlučivanja vode, abnormalno povećane koncentracije uree, azota, kalijuma i/ili kreatinina u krvi, izmenjene aktivnosti enzima bubrega kao što je glutamil sintetaza, izmenjene osmolarnosti urina ili količine urina, povećane mikroalbuminurije, makroalbuminurije, lezija na glomerulima i arteriolama, tubularne dilatacije, hiperfosfatemije i/ili potrebe za dijalizom. Predmetni pronalazak takođe obuhvata korišćenje jedinjenja iz pronalaska za lečenje i/ili prevenciju posledica bubrežne insuficijencije, kao što je, na primer, hipertenzija, edem pluća, srčana insuficijencija, uremija, anemija, disbalans elektrolita (npr. hiperkalemija, hiponatremija) i poremećaji metabolizma kostiju i ugljenih hidrata.
[0118] Pored toga, jedinjenja prema pronalasku su pogodna za lečenje i/ili prevenciju bolesti urogenitalnog sistema, kao što je, na primer, benigni sindrom prostate (BSP), benigna hiperplazija prostate (BHP), benigno uvećanje prostate (BPE), poremećaji pražnjenja bešike (BOO), sindromi donjeg urinarnog trakta (LUTS), neurogena hiperaktivna bešika (OAB), inkontinencija kao što je, na primer, mešovita, urgentna, stresna inkontinencija ili inkontinencija zbog prelivanja (MUI, UUI, SUI, OUI), bol u karlici kao i erektilna disfunkcija i seksualna disfunkcija kod žena.
[0119] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje bolesti reproduktivnog sistema žena, kao što su miomi uterusa, endometrioza, dismenoreja i bolovi kod prevremenog porođaja. Takođe su pogodna za profilaksu ili lečenje hirutizma i hipertrihoze.
[0120] Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju antiinflamatorno dejstvo te stoga mogu da se koriste kao antiinflamatorni agensi za lečenje i/ili prevenciju sepse (SIRS), multiorganskog zatajenja (MODS, MOF), inflamatornih bolesti bubrega, hronične inflamacije creva (inflamatorna bolest creva, Kronova bolest, ulcerozni kolitis), pankreatitisa, peritonitisa, cistitisa, uretritisa, prostatitisa, epidimititisa, ooforitisa, salpingitisa, vulvovaginitisa, reumatskih bolesti, artroze, inflamatornih bolesti centralnog nervnog sistema, multiple skleroze, inflamatornih bolesti kože i inflamatornih bolesti oka.
[0121] Jedinjenja prema pronalasku su takođe predviđena za lečenje i/ili prevenciju fibrotičnih bolesti unutrašnjih organa, kao što su, na primer, pluća, srce, bubrezi, koštana srž i naročito jetra, kao i dermatološke fibroze i fibrotičnih bolesti oka. U svrhe predmetnog pronalaska, termin fibrotične bolesti obuhvata naročito bolesti kao što je fibroza jetre, ciroza jetre, fibroza pluća, endomiokardijalna fibroza, nefropatija, glomerulonefritis, intersticijalna fibroza bubrega, fibrotično oštećenje usled dijabetesa, fibroza koštane srži, peritonealna fibroza i slične fibrotične bolesti, skleroderma, morfea, keloidi, hipertrofični ožiljci, nevusi, dijabetička retinopatija, proliferativna vitreoretinopatija i bolesti vezivnih tkiva (npr. sarkoidoza). Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu da se koriste za pospešivanje zarastanja rana, za suzbijanje postoperativnih ožiljaka, na primer nakon operacije glaukoma, i u kozmetičke svrhe kod kože koja stari ili je keratinizovana.
[0122] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju anemije, kao što su hemolitičke anemije, naročito hemoglobinopatije kao što je anemija srpastih ćelija i talasemija, megaloblastna anemija, anemije usled nedostatka gvožđa, anemije usled akutnog gubitka krvi, displastične anemije i aplastične anemije.
[0123] Jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za lečenje kancera, kao što su, na primer, kancer kože, tumori mozga, kancer dojke, tumori koštane srži, leukemije, liposarkomi, karcinomi gastrointestinalnog trakta, jetre, pankreasa, pluća, bubrega, mokraćovoda, prostate i genitalnog trakta, kao i malignih tumora limfoproliferativnog sistema, kao što je Hodžkinov i non-Hodžkinov limfom.
[0124] Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju arterioskleroze, poremećaja metabolizma lipida i dislipidemija (hipolipoproteinemija, hipertrigliceridemija, hiperlipidemija, kombinovane hiperlipidemije, hiperholesterolemija, abetalipoproteinemija, sitosterolemija), ksantomatoze, tangerske bolesti, debljine (adipoza), gojaznosti, metaboličkih bolesti (metabolički sindrom, hiperglikemija, insulin zavisni dijabetes, insulin nezavisni dijabetes, gestacioni dijabetes, hiperinsulinemija, insulinska rezistencija, intolerancija na glukozu i kasnije posledice dijabetesa kao što je retinopatija, nefropatija i neuropatija), bolesti gastrointestinalnog trakta i abdomena (glositis, gingivitis, paradentoza, ezofagitis, eozinofilni gastroenteritis, mastocitoza, Kronova bolest, kolitis, proktitis, svrab anusa, dijareja, celijačna bolest, hepatitis, fibroza jetre, ciroza jetre, pankreatitis i holecistitis), bolesti centralnog nervnog sistema i neurodegenerativnih poremećaja (moždani udar, Alchajmerova bolest, Parkinsonova bolest, demencija, epilepsija, depresija, multipla skleroza), autoimunih bolesti, tiroidnih bolesti (hipertireoza), bolesti kože (psorijaza, akne, ekcem, neurodermatitis, različiti oblici dermatitisa kao što je, npr. dermatitis abacribus, dermatitis actinica, dermatitis allergica, dermatitis ammoniacalis, dermatitis artefacta, dermatitis autogenica, dermatitis atrophicans, dermatitis calorica, dermatitis combustionis, dermatitis congelationis, dermatitis cosmetica, dermatitis escharotica, dermatitis exfoliativa, dermatitis gangraenose, dermatitis haemostatica, dermatitis herpetiformis, dermatitis lichenoides, dermatitis linearis, dermatitis maligna, dermatitis medimencatosa, dermatitis palmaris et plantaris, dermatitis parasitaria, dermatitis photoallergica, dermatitis phototoxica, dermatitis pustularis, dermatitis seborrhoica, dermatitis solaris, dermatitis toxica, dermatitis ulcerosa, dermatitis veneata, infektivni dermatitis, piogeni dermatitis i dermatitis nalik rozocei, kao i keratitis, buloza, vaskulitis, celulitis, panikulitis, eritemski lupus, eritem, limfom, kancer kože, Svitov sindrom, Veber-Kristijanov sindrom, ožiljačno tkivo, nastanak bradavica, promrzline), inflamatornih bolesti oka (sarkoidoza, blefaritis, konjunktivitis, iritis, uveitis, horoiditis, oftalmitis), virusnih bolesti (koje uzrokuju influenca, adenovirusi i koronavirusi, kao što su, npr. HPV, HCMV, HIV, SARS), bolesti kostiju i zglobova kao i skeletnih mišića (različiti oblici artritisa, npr. arthritis alcaptonurica, arthritis ankylosans, arthritis dysenterica, arthritis exsudativa, arthritis fungosa, arthritis gonorrhoica, arthritis mutilans, arthritis psoriatica, arthritis purulenta, arthritis rheumatica, arthritis serosa, arthritis syphilitica, arthritis tuberculosa, arthritis urica, arthritis villonodularis pigmentosa, atipični artritis, hemofilni artritis, juvenilni hronični artritis, reumatoidni artritis i metastatski artritis, kao i Stilov sindrom, Feltijev sindrom, Sjogrenov sindrom, Klutonov sindrom, Ponseov sindrom, Potov sindrom i Rajterov sindrom, različite oblike artropatija, npr. arthropathie deformans, arthropathie neuropathica, arthropathie ovaripriva, arthropathie psoriatica i arthropathie tabica, sistemsku sklerozu, različiti oblici inflamatornih miopatija, npr. myopathie epidemica, myopathie fibrosa, myopathie myoglobinurica, myopathie ossificans, myopathie ossificans neurotica, myopathie ossificans progressiva multiplex, myopathie purulenta, myopathie rheumatica, myopathie trichinosa, myopathie tropica i myopathie typhosa, kao i Gunterov sindrom i Minhmajerov sindrom), inflamatornih arterijskih promena (različiti oblici arteritisa, npr. endarteritis, mezarteritis, periarteritis, panarteritis, arteritis rheumatica, arteritis deformans, arteritis temporalis, arteritis cranialis, arteritis gigantocellularis i arteritis granulomatosa, kao i Hortonov sindrom, Čarg-Štrausov sindrom i Takajašu arteritis), Makl-Velovog sindroma, Kikučijeve bolesti, polihondritisa, skleroderme i drugih bolesti sa inflamatornom ili imunskom komponentom, kao što su katarakta, kaheksija, osteoporoza, giht, inkontinencija, lepra, Sezarijev sindrom i paraneoplastični sindrom, kod reakcija odbacivanja nakon transplantacije organa i za lečenje rana i angiogenezu, naročito kod hroničnih rana.
[0125] Na osnovu profila biohemijskih i farmakoloških osobina, jedinjenja prema pronalasku posebno mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju inflamatornih plućnih bolesti, pre svega hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), emfizema pluća, hroničnog bronhitisa, bronhiektazije, plućne hipertenzije kod HOBP (PH-HOBP), akutne egzacerbacije kod HOBP, cistične fibroze (mukoviscidoza, CF) astme, kao i idiopatske pulmonalne fibroze (IPF), Bronchiolitis obliterans sindroma (BOS), arteroskleroze, miokarditisa, kao i inflamatornih bolesti kože i očiju, odnosno inflamatornih bolesti unutrašnjih organa.
[0126] Na osnovu profila biohemijskih i farmakoloških osobina, jedinjenja prema pronalasku sasvim posebno mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju inflamatornih plućnih bolesti, pre svega hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), emfizema pluća, hroničnog bronhitisa, bronhiektazije, plućne hipertenzije kod HOBP (PH-HOBP), akutne egzacerbacije kod HOBP, cistične fibroze (mukoviscidoza, CF) astme, kao i idiopatske pulmonalne fibroze (IPF) i Bronchiolitis obliterans sindroma (BOS).
[0127] Prethodno navedene, dobro okarakterisane bolesti kod ljudi slične etiologije mogu se javiti i kod drugih sisara, i takođe mogu da se leče jedinjenjima iz predmetnog pronalaska.
[0128] U smislu predmetnog pronalaska, termin „lečenje“ ili „lečiti“ obuhvata sprečavanje, usporavanje, zaustavljanje, ublažavanje, slabljenje, ograničavanje, smanjivanje, potiskivanje, suzbijanje ili lečenje bolesti, tegobe, oboljenja, povrede ili zdravstvenog poremećaja, razvoja, toka ili napredovanja takvog stanja i/ili simptoma takvog stanja. Termin „terapija“ ovde se smatra sinonimom termina „lečenje“.
[0129] Termini „prevencija“, „profilaksa“ ili „sprečavanje“, u smislu predmetnog pronalaska, koriste se kao sinonimi, i označavaju izbegavanje ili smanjenje rizika da se dobije, iskusi ili ima bolest, tegoba, oboljenje, povreda ili zdravstveni poremećaj, rizika od razvoja, toka ili napredovanja takvog stanja i/ili simptoma takvog stanja.
[0130] Lečenje ili prevencija bolesti, tegobe, oboljenja, povrede ili zdravstvenog poremećaja može biti delimično ili potpuno.
[0131] Dalji predmet predmetnog pronalaska je upotreba jedinjenja prema pronalasku za dobijanje leka za lečenje i/ili prevenciju oboljenja, posebno prethodno navedenih oboljenja.
[0132] Dalji predmet predmetnog pronalaska je lek, koji sadrži barem jedno od jedinjenja prema pronalasku, za lečenje i/ili prevenciju oboljenja, posebno prethodno navedenih oboljenja.
[0133] Jedinjenja prema pronalasku mogu da se koriste samostalno ili po potrebi u kombinaciji sa jednim ili više drugih farmakološki delotvornih supstanci, sve dok te kombinacije ne dovode do neželjenih i neprihvatljivih neželjenih dejstava. Dalji predmet predmetnog pronalaska su dakle lekovi, koji sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku, i jednu ili više aktivnih supstanci, posebno za lečenje i/ili prevenciju bolesti gorenavedenih bolesti. Kao kombinovane aktivne supstance kao primer i poželjno navodimo sledeće:
● organski nitrati i donatori NO, kao što je, na primer, natrijum nitroprusid, nitroglicerin, izosorbid mononitrat, izosorbid dinitrat, molsidomin ili SIN-1, kao i inhalativni NO;
●
● jedinjenja koja inhibiraju razgradnju cikličnog guanozin monofosfata (cGMP) i/ili cikličnog adenozin monofosfata (cAMP), kao što su, na primer, inhibitori fosfodiesteraze (PDE) 1, 2, 3, 4 i/ili 5, posebno PDE 5-inhibitori kao što je sildenafil, vardenafil, tadalafil, udenafil, dasantafil, avanafil, mirodenafil ili lodenafil;
●
● aktivatori rastvorljive guanilat ciklaze (sGC) nezavisni od NO i hema, kao što su posebno jedinjenja opisana u WO 01/19355, WO 01/19776, WO 01/19778, WO 01/19780, WO 02/070462 i WO 02/070510;
●
● stimulatori rastvorljive guanilat ciklaze (sGC) nezavisni od NO ali zavisni od hema, kao što su posebno Riociguat kao i jedinjenja opisana u WO 00/06568, WO 00/06569, WO 02/42301, WO 03/095451, WO 2011/147809, WO 2012/004258, WO 2012/028647 i WO 2012/059549;
analozi prostaciklina i agonisti IP receptora, kao što je, na primer i poželjno, iloprost, beraprost, treprostinil, epoprostenol ili seleksipag;
agonisti receptora endotelina, kao što je, na primer i poželjno, bosentan, darusentan, ambrisentan ili sitaksentan;
jedinjenja koja inhibiraju humanu neutrofilnu elastazu (HNE), kao što je, na primer i poželjno, Sivelestat ili DX-890 (Reltran);
jedinjenja koja inhibiraju kaskadu transdukcije signala, na primer i poželjno, iz grupe inhibitora kinaze, posebno iz grupe inhibitora tirozin kinaze i/ili serin/treonin kinaze, kao što je, na primer i poželjno, nintedanib, dasatinib, nilotinib, bosutinib, regorafenib, sorafenib, sunitinib, cediranib, aksitinib, telatinib, imatinib, brivanib, pazopanib, vatalanib, gefitinib, erlotinib, lapatinib, canertinib, lestaurtinib, pelitinib, semaksanib ili tandutinib;
jedinjenja koja inhibiraju razgradnju i modifikaciju ekstracelularne matrice, na primer i poželjno, inhibitori matričnih metaloproteaza (MMP), posebno inhibitori stromelizina, kolagenaza, želatinaza i agrekanaza (ovde su to, pre svega, inhibitori MMP-1, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-11 i MMP-13) kao i metaloelastaza (MMP-12);
jedinjenja koja blokiraju vezivanje serotonina za njegov receptor, na primer i poželjno, antagonisti receptora 5-HT2Bkao što je PRX-08066;
antagonisti faktora rasta, citokini i hemokini, na primer i poželjno, antagonisti TGF-β, CTGF, IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-13 i integrini;
jedinjenja koja inhibiraju Rho-kinaze, kao što je, na primer i poželjno, fasudil, Y-27632, SLx-2119, BF-66851, BF-66852, BF-66853, KI-23095 ili BA-1049; jedinjenja koja inhibiraju rastvorljivu epoksid hidrolazu (sEH), kao što je, na primer, N,N'-dicikloheksil urea, 12-(3-adamantan-1-il-ureido)-dodekanska kiselina ili 1-adamantan-1-il-3-{5-[2-(2-etoksietoksi)etoksi]pentil}-urea;
Jedinjenja koja utiču na energetski metabolizam srca, kao što je, na primer i poželjno, etomoksir, dihloracetat, ranolazin ili trimetazidin;
antiopstruktivna sredstva, kao što su, na primer, ona koja se koriste za terapiju kod hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP) ili bronhijalne astme, na primer i poželjno, iz grupe inhalativno ili sistemski primenjenih agonista b-adrenergijskih receptora (β-mimetici) i inhalativno primenjenih antimuskarinskih supstanci;
antiinflamatorna, imunomodulišuća, imunosupresivna i/ili citotoksična sredstva, na primer i poželjno, iz grupe kortikosteroida koji se primenjuju sistemski ili inhalativno, kao što su acetilcistein, montelukast, azatioprin, ciklofosfamid, hidroksikarbamid, azitromicin, pirfenidon ili etanercept;
antifibrotična sredstva, kao što su, na primer i poželjno, antagonisti receptora adenozina-A2b, antagonisti receptora 3 sfingozin-1-fosfata (S1P3); inhibitori autotaksina, antagonisti receptora lizofosfatidne kiseline 1 (LPA-1) i receptora lizofosfatidne kiseline 2 (LPA-2),inhibitori lizil oksidaze (LOX), inhibitori nalik na lizil oksidazu 2; inhibitori CTGF, antagonisti IL-13, antagonisti αvβ6-integrina, antagonisti TGF-β, inhibitori signalnog puta Wnt ili antagonisti CCR2;
antitrombotička sredstva, na primer i poželjno, iz grupe antiagregacionih agensa, antikoagulanasa i profibrinolitičkih supstanci;
aktivne supstance koje snižavaju krvni pritisak, na primer i poželjno, iz grupe kalcijumovih antagonista, All-antagonista angiotenzina, ACE inhibitora, inhibitora vazopeptidaze, antagonista endotelina, inhibitora renina, blokatora α-receptora, blokatora β-receptora, antagonista mineralokortikoidnih receptora, kao i diuretici;
aktivne supstance koji menjaju metabolizam masti, na primer i poželjno, iz grupe agonista tiroidnih receptora, inhibitora sinteze holesterina, kao što su, na primer i poželjno, inhibitori HMG-CoA-reduktaze ili sinteze skvalena, inhibitori ACAT, inhibitori CETP, inhibitori MTP, agonisti PPAR-α-, PPAR-γ- i/ili PPAR-δ, blokatori apsorpcije holesterina, inhibitori lipaze, adsorberi polimerne galenske kiseline, blokatori reapsorpcije galenske kiseline i antagonisti lipoproteina(a) i/ili
●
● hemoterapeutici, kao što su, npr. oni koji se koriste za terapiju neoplazme (neoplazija) pluća ili drugih organa.
●
[0134] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom β-adrenergijskog receptora, kao što su, na primer i poželjno, albuterol, izoproterenol, metaproterenol, terbutalin, fenoterol, formoterol, reproterol, salbutamol ili salmeterol.
[0135] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antimuskarinskom supstancom, kao što su, na primer i poželjno, ipratropijum bromid, tiotropijum bromid ili oksitropijum bromid.
[0136] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa kortikosteroidom, kao što su, na primer i poželjno, prednizon, prednizolon, metilprednizolon, triamcinolon, deksametazon, beklometazon, betametazon, flunizolid, budesonid ili flutikazon.
[0137] Pod antitrombotičkim sredstvima poželjno se podrazumevaju sredstva iz grupe antiagregacionih agensa, antikoagulanasa i profibrinolitičkih supstanci.
[0138] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antiagregacionim agensom, kao što su, na primer i poželjno, aspirin, klopidogrel, tiklopidin ili dipiridamol.
[0139] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa trombinskim inhibitorom, kao što su, na primer i poželjno, ksimelagatran, melagatran, dabigatran, bivalirudin ili kleksan.
[0140] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom GPIIb/IIIa, kao što su, na primer i poželjno, tirofiban ili abciksimab.
[0141] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom faktora Xa, kao što su, na primer i poželjno, rivaroksaban, apiksaban, fideksaban, razaksaban, fondaparinuks, idraparinuks, DU-176b, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR-126512 ili SSR-128428.
[0142] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa heparinom ili derivatom heparina male molekulske mase (low molecular weight, LMW).
[0143] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom vitamina K, kao što je, na primer i poželjno, kumarin.
[0144] Pod aktivnim supstancama koje snižavaju krvni pritisak poželjno se podrazumevaju jedinjenja iz grupe kalcijumovih antagonista, All-antagonista angiotenzina, ACE inhibitora, antagonista endotelina, inhibitora renina, blokatora α-receptora, blokatora β-receptora, antagonista mineralokortikoidnih receptora, kao i diuretici.
[0145] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom kalcijuma, kao što je, na primer i poželjno, nifedipin, amlodipin, verapamil ili diltiazem.
[0146] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom α1-receptora, kao što je, na primer i poželjno, prazosin.
[0147] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom β-receptora, kao što je, na primer i poželjno, propranolol, atenolol, timolol, pindolol, alprenolol, oksprenolol, penbutolol, bupranolol, metipranolol, nadolol, mepindolol, karazalol, sotalol, metoprolol, betaksolol, celiprolol, bisoprolol, karteolol, esmolol, labetalol, karvedilol, adaprolol, landiolol, nebivolol, epanolol ili bucindolol.
[0148] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa All-antagonistom angiotenzina, kao što je, na primer i poželjno, losartan, kandesartan, valsartan, telmisartan, embursartan, irbesartan, olmesartan, eprosartan ili azilsartan ili dvojnim All-antagonistom angiotenzina/NEP-inhibitorom, kao što je, na primer i poželjno, LCZ696 (valsartan/sakubitril).
[0149] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa ACE inhibitorom, kao što je, na primer i poželjno, enalapril, kaptopril, lizinopril, ramipril, delapril, fosinopril, hinopril, perindopril ili trandopril.
[0150] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom endotelina, kao što je, na primer i poželjno, bosentan, darusentan, ambrisentan ili sitaksentan.
[0151] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom renina, kao što je, na primer i poželjno, aliskiren, SPP-600 ili SPP-800.
[0152] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom mineralokortikoidnih receptora, kao što je, na primer i poželjno, spironolakton, eplerenon ili finerenon.
[0153] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa diuretikom, kao što jew, na primer i poželjno, furosemid, bumetanid, torsemid, bendroflumetiazid, hlortiazid, hidrohlortiazid, hidroflumetiazid, metiklotiazid, politiazid, trihlormetiazid, hlortalidon, indapamid, metolazon, hinetazon, acetazolamid, dihlorfenamid, metazolamid, glicerin, izosorbid, manitol, amilorid ili triamteren.
[0154] Pod sredstvima koja menjaju metabolizam masti, na primer i poželjno, podrazumevaju se jedinjenja iz grupe CETP-inhibitora, agonista tiroidnih receptora, inhibitora sinteze holesterina, kao što su, inhibitori HMG-CoA-reduktaze ili sinteze skvalena, inhibitori ACAT, inhibitori MTP, agonisti PPAR-α-, PPAR-γ- i/ili PPAR-δ, blokatori apsorpcije holesterina, adsorbenti polimerne galenske kiseline, blokatori reapsorpcije galenske kiseline, inhibitori lipaze kao i antagonisti lipoproteina(a).
[0155] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa CETP-inhibitorom, kao što je, na primer i poželjno, torcetrapib (CP-529414), JJT-705 ili CETP-vakcina (Avant).
[0156] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom tiroidnih receptora, kao što je, na primer i poželjno, D-tiroksin, 3,5,3'-trijodtironin (T3), CGS 23425 ili aksitirom (CGS 26214).
[0157] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom HMG-CoA-reduktaze iz klase statina, kao što je, na primer i poželjno, lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin, atorvastatin, rosuvastatin ili pitavastatin.
[0158] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom sinteze skvalena, kao što je, na primer i poželjno, BMS-188494 ili TAK-475.
[0159] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa ACAT inhibitorom, kao što je, na primer i poželjno, avasimib, melinamid, paktimib, eflucimib ili SMP-797.
[0160] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa MTP inhibitorom, kao što je, na primer i poželjno, implitapid, BMS-201038, R-103757 ili JTT-130.
[0161] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistima PPAR-γ, kao što je, na primer i poželjno, pioglitazon ili rosigitazon.
[0162] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistima PPAR-δ, kao što je, na primer i poželjno, GW 501516 ili BAY 68-5042.
[0163] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom apsorpcije holesterina, kao što je, na primer i poželjno, ezetimib, tikvezid ili pamakvezid.
[0164] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom lipaze, kao što je, na primer i poželjno, orlistat.
[0165] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa polimernim adsorbentom galenske kiseline, kao što je, na primer i poželjno, holestiramin, kolestipol, kolesolvam, holestaGel ili kolestimid.
[0166] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom reapsorpcije galenske kiseline, kao što su, na primer i poželjno, inhibitori ASBT (= IBAT), kao, na primer, AZD-7806, S-8921, AK-105, BARI-1741, SC-435 ili SC-635.
[0167] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom lipoproteina(a), kao što je, na primer i poželjno, gemkaben kalcijum (CI-1027) ili nikotinska kiselina.
[0168] Posebno su poželjne kombinacije jedinjenja prema pronalasku sa jednim ili više dodatnih aktivnih supstanci odabranih iz grupe koju čine inhibitori PDE 5, aktivatori sGC, stimulatori sGC, analozi prostaciklina, agonisti IP receptora, antagonisti endotelina, jedinjenja koja inhibiraju kaskadu transdukcije signala i pirfenidon.
[0169] Dalji predmet predmetnog pronalaska su lekovi koji sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku, uobičajeno zajedno sa jednim ili više inertnih, netoksičnih, farmaceutski pogodnih pomoćnih supstanci, kao i njihova upotreba u prethodno navedene svrhe.
[0170] Jedinjenja prema pronalasku mogu da deluju sistemski i/ili lokalno. U tu svrhu mogu da se primene na odgovarajući način, npr. oralno, parenteralno, pulmonalno, nazalno, sublingvalno, lingvalno, bukalno, rektalno, dermalno, transdermalno, konjunktivno, oftalmološki, ili kao implantat ili stent.
[0171] Za ove načine primene, jedinjenja prema pronalasku mogu da se primene u odgovarajućim oblicima primene.
[0172] Prema prethodnom stanju tehnike, oblici primene koji funkcionišu i koji oslobađaju jedinjenja prema pronalasku brzo i/ili na modifikujući način i koji sadrže jedinjenja prema pronalasku u kristalnom i/ili amorfnom i/ili rastvorenom obliku pogodni su za oralnu primenu, kao što su, npr. tablete (neobložene ili obložene tablete, na primer sa oblogom otpornom na želudačni sok ili sa odloženim rastvaranjem ili nerastvornom oblogom, koja reguliše oslobađanje jedinjenja prema pronalasku) koje se u usnoj duplji brzo raspadaju ili filmovi/oblande, filmovi/liofilizati, kapsule (na primer, tvrde ili meke želatinske kapsule), dražeje, granulati, peleti, praškovi, emulzije, suspenzije, aerosoli ili rastvarači.
[0173] Parenteralna primena može da se vrši izostavljanjem koraka resorpcije (npr. intravenski, intraarterijski, intrakardijalno, intraspinalno ili intralumbalno) ili može da uključuje resorpciju (npr. inhalacijom, intramuskularno, supkutano, intrakutano, perkutano ili intraperitonealno). Za parenteralnu primenu, pogodni oblici za aplikaciju su, između ostalog, injekcioni i infuzioni preparati u obliku rastvora, suspenzija, emulzija, liofilizata ili sterilnih praškova.
[0174] Za druge načine primene pogodni su, npr. inhalacioni oblici leka (uključujući inhalatore praha, nebulizatore, inhalatore sa merenjem doze), kapi, rastvori ili sprejevi za nos, tablete, filmovi/oblande ili kapsule koje se primenjuju lingvalno, sublingvalno ili bukalno, supozitorije, preparati za uši ili oči, vaginalne kapsule, vodene suspenzije (losioni, smeše za mućkanje), lipofilne suspenzije, masti, kreme, transdermalni terapeutski sistemi (npr. flasteri), mleka, paste, pene, puderi za posipanje, implantati ili stentovi.
[0175] Poželjna je oralna ili parenteralna primena, posebno oralna, intravenska i intrapulmonalna (inhalativna) primena.
[0176] Jedinjenja prema pronalasku mogu da se konvertuju u navedene oblike za primenu. To može da se uradi na poznat način, mešanjem sa inertnim, netoksičnim ili farmaceutski pogodnim pomoćnim supstancama. U te pomoćne supstance spadaju, između ostalog, nosači (na primer, mikrokristalna celuloza, laktoza, manitol), rastvarači (npr. tečni polietilen glikol), emulgatori i dispergensi ili umreživači (na primer, natrijum dodecilsulfat, polioksi sorbitan oleat), vezivači (na primer, polivinil pirolidon), sintetički i prirodni polimeri (na primer, albumin), stabilizatori (npr. antioksidansi, kao, na primer, askorbinska kiselina), boje (npr. neorganski pigmenti, kao, na primer, gvožđe oksidi) i sredstva za korekciju ukusa i/ili mirisa.
[0177] Generalno se pokazalo da je pogodno da se kod parenteralne primene daju količine od oko 0,001 do 1 mg/kg, poželjno oko 0,01 do 0,5 mg/kg telesne mase da bi se postigli delotvorni rezultati. Kod oralne primene, doza iznosi oko 0,01 do 100 mg/kg, poželjno oko 0,01 do 20 mg/kg, i sasvim posebno poželjno 0,1 do 10 mg/kg telesne težine. Kod intrapulmonalne primene, količina generalno iznosi oko 0,1 do 50 mg po inhalaciji.
[0178] Uprkos tome, može biti potrebno da se odstupi od pomenutih količina, u zavisnosti od telesne mase, načina primene, individualnog ponašanja prema aktivnom sastojku, vrste preparata i vremena ili intervala u kome se vrši primena. Tako u nekim slučajevima može biti dovoljna manja količina od gornjih najmanjih količina, dok se u drugim slučajevima mora preći navedena gornja granica. Ako se primenjuju veće količine, može biti dobro da se one podele u više pojedinačnih doza tokom dana.
[0179] sledeći primeri otelotvorenja objašnjavaju pronalazak. Pronalazak nije ograničen na primere.
[0180] Dalji predmet predmetnog pronalaska su farmaceutske kompozicije lekova koje0 sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku, uobičajeno zajedno sa jednim ili više inertnih, netoksičnih, farmaceutski pogodnih pomoćnih supstanci, kao i njihova upotreba u prethodno navedene svrhe.
[0181] Jedinjenja prema pronalasku mogu da deluju sistemski i/ili lokalno. U tu svrhu, ona se mogu primeniti na pogodan način, kao npr. oralno, parenteralno, pulmonalno, nazalno, sublingvalno, lingvalno, bukalno, rektalno, vaginalno, dermalno, transdermalno, konjunktivalno, očno ili kao implantat tj. stent.
[0182] Za ove načine primene, jedinjenja prema pronalasku mogu da se primene u odgovarajućim oblicima primene.
[0183] Prema prethodnom stanju tehnike, oblici primene koji brzo funkcionišu i/ili modifikuju jedinjenja prema pronalasku i koji oslobađaju jedinjenja prema pronalasku, koji sadrže jedinjenja prema pronalasku u kristalnom i/ili amorfnom i/ili rastvorenom obliku pogodni su za oralnu primenu, kao što su, npr. tablete (neobložene ili obložene tablete, na primer sa oblogom otpornom na želudačni sok ili sa odloženim rastvaranjem ili nerastvornom oblogom, koja reguliše oslobađanje jedinjenja prema pronalasku) koje se u usnoj duplji brzo raspadaju ili filmovi/oblande, filmovi/liofilizati, kapsule (na primer, tvrde ili meke želatinske kapsule), dražeje, granulati, peleti, praškovi, emulzije, suspenzije, aerosoli ili rastvarači.
[0184] Parenteralna primena može da se vrši izostavljanjem koraka resorpcije (npr. intravenski, intraarterijski, intrakardijalno, intraspinalno ili intralumbalno) ili može da uključuje resorpciju (npr. intramuskularno, supkutano, intrakutano, perkutano, intravitrealno ili intraperitonealno). Za parenteralnu primenu, pogodni oblici za aplikaciju su, između ostalog, injekcioni i infuzioni preparati u obliku rastvora, suspenzija, emulzija, liofilizata ili sterilnih praškova.
[0185] Za druge načine primene pogodni su, npr. inhalacioni oblici leka (uključujući inhalatore praha, nebulizatore), kapi, rastvori, sprejevi za nos; tablete, filmovi/oblande ili kapsule koje se primenjuju lingvalno, sublingvalno ili bukalno, supozitorije, kapi za oči, masti za oči, kupke za oči, očni inserti, kapi, sprejevi, praškovi, sredstva za ispiranje, tamponi za uši, vaginalne kapsule, vodene suspenzije (losioni, smeše za mućkanje), lipofilne suspenzije, emulzije, mikroemulzije, masti, kreme, transdermalni terapeutski sistemi (kao što su, na primer, flasteri), mleka, paste, pene, puderi za posipanje, implantati ili stentovi.
[0186] Jedinjenja prema pronalasku mogu da se konvertuju u navedene oblike za primenu. To može da se postigne na poznat način mešanjem sa farmaceutski pogodnim pomoćnim supstancama. U te pomoćne supstance ubrajaju se, između ostalog
● punioci i nosači (na primer, celuloza, mikrokristalna celuloza kao npr. Avicel<®>, laktoza, manitol, skrobovi, kalcijum fosfat, kao npr. Di-Cafos<®>),
osnove za masti (na primer, vazelin, parafini, trigliceridi, voskovi, lanolin, lanolinski alkoholi, lanolin, hidrofilne masti, polietilen glikoli),
osnove za supozitorije (na primer, polietilen glikoli, kakao puter, čvrsta mast),
rastvarači (npr. voda, etanol, izopropanol, glicerol, propilen glikol, trigliceridi srednjeg niza masna ulja, tečni polietilen glikoli, parafini),
tenzidi, emulgatori, sredstva za dispergovanje ili umrežavanje (na primer, natrijum dodecil sulfat, lecitin, fosfolipidi, masni alkoholi kao npr. Lanette<®>, sorbitanski estri masnih kiselina kao npr. Span<®>, polioksietilen-sorbitanski estri masnih kiselina kao npr. Tween<®>, polioksietilen-gliceridi masnih kiselina kao npr. Cremophor<®>, polioksietilen-estri masnih kiselina, polioksietilen-etri masnih alkohola, glicerolski estri masne kiseline, poloksameri kao npr. Pluronic<®>),
puferske supstance kao što su kiseline i baze (na primer, fosfati, karbonati, limunska kiselina, sirćetna kiselina, hlorovodonična kiselina, natrijum hidroksid, amonijum karbonat, tris(hidroksimetil)aminometan, trietanolamin),
izotonična sredstva (na primer, glukoza, natrijum hlorid),
adsorpciona sredstva (na primer, visoko dispergovani silicijum dioksidi),
sredstva za povećanje viskoziteta, sredstva za želiranje, sredstva za zgušnjavanje odnosno vezivanje (na primer, polivinilpirolidon, metilceluloza, hidroksipropilmetil celuloza, hidroksipropil celuloza, natrijum karboksimetil celuloza, skrobovi, karbomeri, poliakrilne kiseline kao npr. Carbopol<®>, alginati, želatini),
dezintegransi (na primer, modifikovani skrobovi, natrijum karboksimetil celuloza, natrijum skrob glikolat, kao npr. Explotab<®>, umreženi polivinilpirolidon, kroskarmeloza natrijum kao npr. AcDiSol<®>),
● sredstva za regulisanje protočnosti, podmazivanje, klizanje i oslobađanje iz kalupa (na primer, magnezijum stearat, stearinska kiselina, talk, visoko dispergovani silicijum dioksidi kao npr. Aerosil<®>),
●
● sredstva za oblaganje (na primer, šećer, šelak) kao i sredstva za formiranje filma za brzo ili modifikovano rastvorne filmove ili difuzione membrane (na primer, polivinilpirolidoni kao npr. Kollidon<®>, polivinil alkohol, hidroksipropil metil celuloza, hidroksipropil celuloza, etil celuloza, hidroksipropil metil celuloza ftalat, celuloza acetat, celuloza acetat ftalat, poliakrilati, polimetakrilati kao npr. Eudragit<®>),
●
● materijali za kapsuliranje (npr. želatini, hidroksipropilmetilceluloza),
●
● sintetički polimeri (na primer, polilaktidi, poliglikolidi, poliakrilati, polimetakrilati kao npr. Eudragit<®>, polivinilpirolidoni kao npr. Kollidon<®>, polivinil alkoholi, polivinil acetati, polietilen oksidi, polietilen glikoli i njihovi kopolimeri i blok kopolimeri), ●
● plastifikatori (na primer, polietilen glikoli, propilen glikol, glicerol, triacetin, triacetil citrat, dibutil ftalat),
●
● sredstvo za pojačavanje penetracije,
●
● stabilizatori (npr. antioksidansi, kao na primer askorbinska kiselina, askorbil palmitat, natrijum askorbat, butil hidroksianizol, butil hidroksitoluol, propil galat),
●
● konzervansi (na primer, parabeni, sorbinska kiselina, tiomersal, benzalkonijum hlorid, hlorheksidin acetat, natrijum benzoat),
●
● boje (npr. neorganski pigmenti, kao na primer oksidi gvožđa, titanijum dioksid), ●
● arome, zaslađivači, korigensi ukusa i/ili mirisa.
●
[0187] Poželjna je oralna ili parenteralna primena, posebno oralna primena.
[0188] Jedinjenja prema pronalasku mogu da se konvertuju u navedene oblike za primenu. To može da se uradi na poznat način, mešanjem sa inertnim, netoksičnim ili farmaceutski pogodnim pomoćnim supstancama. U te pomoćne supstance spadaju, između ostalog, nosači (na primer, mikrokristalna celuloza, laktoza, manitol), rastvarači (npr. tečni polietilen glikol), emulgatori i dispergensi ili umreživači (na primer, natrijum dodecilsulfat, polioksi sorbitan oleat), vezivači (na primer, polivinil pirolidon), sintetički i prirodni polimeri (na primer, albumin), stabilizatori (npr. antioksidansi, kao, na primer, askorbinska kiselina), boje (npr. neorganski pigmenti, kao, na primer, gvožđe oksidi) i sredstva za korekciju ukusa i/ili mirisa.
[0189] Generalno se pokazalo da je pogodno da se kod parenteralne primene daju količine od oko 0,1 do 6 mg/kg telesne mase da bi se postigli delotvorni rezultati. Kod oralne primene doza iznosi oko 0,1 do 10 mg/kg telesne mase.
[0190] Uprkos tome, može biti potrebno da se odstupi od pomenutih količina, u zavisnosti od telesne mase, načina primene, individualnog ponašanja prema aktivnom sastojku, vrste preparata i vremena ili intervala u kome se vrši primena. Tako u nekim slučajevima može biti dovoljna manja količina od gornjih najmanjih količina, dok se u drugim slučajevima mora preći navedena gornja granica. Ako se primenjuju veće količine, može biti dobro da se one podele u više pojedinačnih doza tokom dana.
[0191] sledeći primeri otelotvorenja objašnjavaju pronalazak. Pronalazak nije ograničen na primere.
[0192] Procenti u sledećim testovima i primerima su maseni procenti, ako nije drugačije navedeno; udeli su maseni udeli. Odnos rastvarača, odnos razblaživača i koncentracija rastvora tečnost-tečnost odnose se na zapreminu.
A. Primeri
[0193] Samo primeri koji potpadaju pod patentne zahteve su deo pronalaska. Primeri koji ne potpadaju pod patentne zahteve, kao što su, na primer, Primeri 40 i 41, objavljeni su samo kao referenca i nisu deo pronalaska.
Skraćenice i akronimi:
[0194]
HPLC-, GC-MS i LC-MS- metode
Metoda 1:
[0195] Instrument: Agilent MS Quad 6150; HPLC: Agilent 1290; kolona: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 µ 50 x 2,1 mm; eluent A: 1 l vode 0,25 ml 99% mravlje kiseline, eluent B: 1 l acetonitrila 0,25 ml 99% mravlje kiseline; gradijent: 0,0 min 90% A ----> 0,3 min 90% A ----> 1,7 min 5% A → 3,0 min 5% A Pećnica: 50°C; protok: 1,20 ml/min; UV detekcija: 205 - 305 nm.
Metoda 2:
[0196] Instrument: Thermo DFS, Trace GC Ultra; kolona: Restek RTX-35, 15 m x 200 µm x 0,33 µm; konstantni protok sa helijumom: 1,20 ml/min; UV pećnica: 60°C; ulaz: 220°C; gradijent: 60°C, 30°C/min ----> 300°C (držati 3,33 min).
Metoda 3:
[0197] Tip uređaja MS: Thermo Scientific FT-MS; Tip UHPLC+ uređaja: Thermo Scientific UltiMate 3000; kolona: Waters, HSST3, 2,1 x 75 mm, C181,8 µm; eluent A: 1 l vode 0,01% mravlja kiselina, eluent B: 1 l acetonitrila 0,01% mravlja kiselina; gradijent: 0,0 min 10% B - 2,5 min 95% B → 3,5 min 95% B; pećnica: 50°C; protok: 0,90 ml/min; UV detekcija: 210 nm/ Optimum Integration Path 210-300 nm
Metoda 4:
[0198] Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC sistem; kolona: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 µ 50 x 1 mm; eluent A: 1 l vode 0,25 ml 99% mravlje kiseline, eluent B: 1 l acetonitrila 0,25 ml 99% mravlje kiseline; gradijent: 0,0 min 90% A ----> 1,2 min 5% A ----> → 2,0 min 5% A Pećnica: 50°C; protok: 0,40 ml/min; UV detekcija: 208 - 400 nm.
Metoda 5:
[0199] Instrument: HP 1100 Series sa LC/MSD SL; kolona: CS MultoKrom 100-3 C18 60x4,6 mm; eluent A: 1 l vode 10 ml 99% mravlje kiseline, eluent B: 1 l 10 ml 99% mravlje kiseline; gradijent: 0,0 min 80% A -> 8,0 min 10% A -> 10,0 min 10% A; protok: 1,00 ml/min; DAD-detekcija: 120 - 800 nm.
Metoda 6:
[0200] MS instrument: Waters (Micromass) Quattro Micro; instrument Waters UPLC Acquity; kolona: Waters BEH C181,7 µ 50 x 2,1 mm; eluent A: 1 l vode 0,01 mol amonijum formijata, eluent B: 1 l acetonitrila; gradijent: 0,0 min 95% A → 0,1 min 95% A → 2,0 min 15% A → 2,5 min 15% A→ 2,51 min 10% A ----> 3,0 min 10% A; pećnica: 40°C; protok: 0,5 ml/min; UV detekcija: 210 nm
Metoda 7:
[0201] Instrument: Waters Acquity, Waters Acquity Autosampler; kolona XBridge BEH C18 2,5 µm 2,1 x 50 mm (UPLC LG 500 nm); eluent A: 10 mM amonijum hidrogenkarbonat pH 10, eluent B: acetonitril; gradijent: 2-98% B za 0,80 min, držati na 98% B tokom 1,30 min.
Metoda 8:
[0202] Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC sistem; kolona: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 µ 50 x 1 mm; eluent A: 1 l vode 0,25 ml 99% mravlje kiseline, eluent B: 1 l acetonitrila 0,25 ml 99% mravlje kiseline; gradijent: 0,0 min 95% A ----> 6,0 min 5% A ----> → 7,5 min 5% A Pećnica: 50°C; protok: 0,35 ml/min; UV detekcija: 210 - 400 nm.
Metoda 9:
[0203] Tip uređaja MS: ThermoFisherScientific LTQ-Orbitrap-XL; tip uređaja HPLC:
Agilent 1200SL; kolona: Agilent, POROSHELL 120, 3 x 150 mm, SB - C182,7 µm; eluent A: 1 l vode 0,1% trifluorsirćetna kiselina, eluent B: 1 l acetonitrila 0,1% trifluorsirćetna kiselina; gradijent: 0,0 min 2% B → 0,3 min 2% B → 5,0 min 95% B → 10,0 min 95% B; pećnica: 40°C; protok: 0,75 ml/min; UV detekcija: 210 nm.
Metoda 10:
[0204] Instrument: Waters Prep LC/MS System, kolona: XBridge C185µm 100x30 mm; eluent A : voda, eluent B : acetonitril, protok: 65 ml/min plus 5ml 2% mravlje kiseline u vodi, sobna temperatura, talasna dužina 200-400 nm, injektovanje na kolonu (kompletno injektovanje); gradijentni profil: 0 do 2 min 10% eluent B, 2 do 2,2 min na 20% eluenta B, 2,2 do 7 min na 60% eluenta B, 7 do 7,5 min na 92% eluenta B, 7,5 do 9 min na 92% B.
Metoda 11:
[0205] Instrument: Waters Prep LC/MS System, kolona: XBridge C185µm 100x30 mm; eluent A : voda, eluent B : acetonitril, protok: 65 ml/min plus 5ml 2% mravlje kiseline u vodi, sobna temperatura, talasna dužina 200-400 nm, injektovanje na kolonu (kompletno injektovanje); gradijentni profil: 0 do 2 min 7,5% eluent B, 2 do 7 min na 35% eluenta B, 7 do 7,5 min na 92% eluenta B, 7,5 do 9 min na 92% B.
Metoda 12:
[0206] Instrument: Waters Prep LC/MS System, kolona: XBridge C185µm 100x30 mm; eluent A : voda, eluent B : acetonitril, protok: 65 ml/min plus 5ml 2% amonijaka u vodi, sobna temperatura, talasna dužina 200-400 nm, injektovanje na kolonu (kompletno injektovanje); gradijentni profil: 0 do 2 min 7,5% eluent B, 2 do 7 min na 35% eluenta B, 7 do 7,5 min na 92% eluenta B, 7,5 do 9 min na 92% B.
Metoda 13:
[0207] MS instrument: Waters SQD2; instrument HPLC: Waters UPLC; kolona: Zorbax SB-Aq (Agilent), 50 mm x 2,1 mm, 1,8 µm; eluent A: voda 0,025% mravlja kiselina, eluent B: Acetonitril (ULC) 0,025% mravlja kiselina; gradijent: 0,0 min 98% A - 0,9 min 25% A - 1,0 min 5% A - 1,4 min 5% A - 1,41 min 98% A - 1,5 min 98% A; pećnica: 40°C; protok: 0,600 ml/min; UV detekcija: DAD; 210 nm.
Metoda 14:
[0208] Instrument: Waters Prep LC/MS System, kolona: Phenomenex Kinetex C185µm 100x30 mm eluent A: voda, eluent B : acetonitril, protok: 65 ml/min plus 5ml 2% mravlje kiseline u vodi, sobna temperatura, talasna dužina 200-400 nm, injektovanje na kolonu (kompletno injektovanje); gradijentni profil: 0 do 2 min 10% eluent B, 2 do 2,2 min na 20% eluenta B, 2,2 do 7 min na 60% eluenta B, 7 do 7,5 min na 92% eluenta B, 7,5 do 9 min na 92% B.
Metoda 15:
[0209] Instrument: Waters Single Quad MS System; instrument Waters UPLC Acquity; kolona: Waters BEH C181,7 µm 50 x 2,1 mm; eluent A: 1 l vode 1,0 ml (25% amonijaka)/l, eluent B: 1 l acetonitrila; gradijent: 0,0 min 92% A ----> 0,1 min 92% A ----> 1,8 min 5% A ----> 3,5 min 5% A; pećnica: 50°C; protok: 0,45 ml/min; UV-detekcija: 210 nm (208-400 nm).
Dodatni podaci:
[0210] Pri prečišćavanju jedinjenja prema pronalasku putem hromatografije, pre svega hromatografije na koloni, koriste se prethodno spakovane patrone sa silika gelom, kao npr. patrone Biotage SNAP, KP-Sil<®>ili KP-NH<®>u kombinaciji sa sistemom Biotage (SP4<®>ili Isolera Four<®>). Kao mobilna faza se koristi gradijent heksan/etil acetat ili dihlormetan/metanol.
[0211] Pri prečišćavanju jedinjenja prema pronalasku putem preparativne HPLC hromatografije prema gore opisanim metodama, u kojima eluent sadrži dodatne supstance, kao što je, na primer, trifluorsirćetna kiselina, mravlja kiselina ili amonijak, jedinjenja prema pronalasku se mogu dobiti u obliku soli, na primer kao trifluoracetat, format ili amonijumova so, pod uslovom da jedinjenja prema pronalasku sadrže dovoljno baznih ili kiselih funkcionalnih grupa. Takva so pomoću različitih postupaka poznatih stručnjaku može biti prevedena u odgovarajuću slobodnu bazu, odnosno kiselinu.
[0212] Nadalje, amidini mogu biti prisutni kao slobodna jedinjenja ili (u zavisnosti od pripreme kada je uključena sirćetna kiselina) delimično u obliku soli acetata ili solvata acetata.
[0213] Ako je u sledećim intermedijerima sinteze i primerima otelotvorenja iz pronalaska koja su opisana iznad jedinjenje navedeno u obliku soli odgovarajuće baze ili kiseline, onda stehiometrijski sastav takve soli, kao što je dobijena putem odgovarajućeg postupka za proizvodnju i/ili prečišćavanje obično nije poznat. Ako nije tačno specificirano, zato dodatke imenu i strukturnoj formuli, kao što je, na primer, „hidrohlorid“, „trifluoracetat“, „natrijumova so“ odnosno „x hlorovodonična kiselina“, „x CF3COOH“, „x Na<+>“ kod takvih soli ne treba shvatiti stehiometrijski, nego svi imaju opisni karakter u odnosu na sadržane komponente koje grade so.
[0214] Analogno tome, isto važi kada se intermedijeri sinteze ili primeri otelotvorenja ili soli dobijaju putem opisanog postupka za proizvodnju i/ili prečišćavanje u obliku solvata, kao što su, na primer, hidrati, čiji stehiometrijski sastav (ako je definisanog tipa) nije poznat.
[0215] Nadalje, the sekundarni amidi prema pronalasku mogu biti prisutni kao rotacioni izomeri/smeše izomera, posebno u NMR studijama. Podaci o čistoći se obično odnose na odgovarajuću integraciju pikova na LC/MS hromatogramu, ali takođe mogu da se odrede pomoću<1>H NMR spektra. Kada nije data čistoća, obično se radi o 100% čistoći prema automatskoj integraciji pika na LC/MS-hromatogramu, ili čistoća nije izričito navedena.
[0216] Podaci o prinosu u% od teor. su obično korigovani prema čistoći, kada je data čistoća <100%. Kod šarži koje sadrže rastvarač ili nečistoće, prinos formalno može biti „>100%“; u tim slučajevima prinos nije korigovan u pogledu rastvarača, odnosno čistoće.
[0217] Svi podaci u<1>H-NMR spektrima daju hemijska pomeranja δ[ppm] = u ppm.
[0218] Multiplikovani protonski signali u<1>H-NMR spektrima dati u narednim odeljcima odražavaju oblik signala primećen u svakom slučaju i ne uzimaju u obzir fenomen signala višeg reda. Obično se podaci o hemijskom pomeranju odnose na centar dotičnog signala. Za široke multiplete dat je interval. Signali koje pokriva rastvarač ili voda dodeljeni su uslovno ili nisu navedeni. Jako prošireni signali, npr. izazvani brzom rotacijom delova molekula ili na osnovu razmene protona, dodeljeni su uslovno (često su označeni kao široki multiplet ili široki singlet) ili nisu navedeni.
[0219] Tačka topljenja i opseg topljenja, ako su dati, nisu korigovani.
[0220] Podaci<1>H-NMR spektra odabranih intermedijera sinteze i primeri otelotvorenja navedeni su u obliku liste<1>H-NMR pikova. Uz svaki pik signala prvo je navedena vrednost δ[ppm] = u ppm a zatim intenzitet signala u okruglim zagradama. δ[ppm] = parovi brojeva vrednosti intenziteta signala različitih pikova signala navedeni su razdvojeni zarezom. Lista pikova u jednom primeru tako ima oblik: δ[ppm] =1(intenzitet1), δ[ppm] =2(intenzitet2), ... , δ[ppm] = i (intenziteti), ... , δ[ppm] =n(intenzitetn).
[0221] Intenzitet oštrih signala je u korelaciji sa visinom signala u štampanom primeru NMR spektra u cm i pokazuje stvarne odnose intenziteta signala u poređenju sa drugim signalima. Kod širokih signala može biti prikazano više pikova ili centar signala i njegov relativni intenzitet u odnosu na najintenzivniji signal u spektru. Liste pikova<1>H-NMR liče na klasične štampane<1>H-NMR spektre i tako obično sadrže sve pikove koji su navedeni kod klasične interpretacije NMR spektra. Pored toga, kao klasični<1>H-NMR spektri, one mogu da prikazuju signale rastvarača, signale stereoizomera ciljnih jedinjenja, koji su takođe predmet pronalaska, i/ili pikove nečistoća. Pikovi stereoizomera ciljnih jedinjenja i/ili pikovi nečistoća obično u proseku imaju slabiji intenzitet od pikova ciljnih jedinjenja (na primer, sa čistoćom >90%). Takvi stereoizomeri i/ili nečistoće mogu biti tipični za odgovarajući proizvodni postupak. Njihovi pikovi tako mogu pomoći da se prikaže reprodukcija našeg proizvodnog postupka na osnovu „otiska prsta sporednih proizvoda“. Stručnjak koji izračunava pikove ciljnog jedinjenja poznatim postupkom (MestreC, ACD simulacija, ili uz primenu empirijski određenih očekivanih vrednosti), po potrebi može da izoluje pikove ciljnog jedinjenja, pri čemu se po potrebi koristi dodatni filter za intenzitet. To izolovanje je slično odabiru odgovarajućeg pika kod klasične<1>H-NMR interpretacije. Detaljni opis prikaza NMR podataka u obliku liste pikova može se preuzeti iz publikacije „Citation of NMR Peaklist Data within Patent Applications“ (upor. Research Disclosure Database Number 605005, 2014, 1. avgust 2014. ili http://www.researchdisclosure.com/searching-disclosures). U rutinskom odabiru pika, koji je opisan u Research Disclosure Database Number 605005, parametar „MinimumHeight“ može biti podešen od 1% do 4%. U zavisnosti od vrste hemijske strukture i/ili u zavisnosti od koncentracije jedinjenja koje se meri, može biti korisno da se parametar „MinimumHeight“ podesi na vrednost <1%.
[0222] Za sve reaktante ili reagense čija proizvodnja u nastavku nije izričito opisana važi da su komercijalno dostupni iz uobičajenih dostupnih izvora. Za sve ostale reaktante ili reagense, čija proizvodnja u nastavku nije opisana a nisu mogli komercijalno da se nabave, ili da se nabave iz generalno dostupnih izvora, data je referenca na objavljenu literaturu koja opisuje njihovu proizvodnju.
[0223] U slučaju intermedijera i primera otelotvorenja opisanih u nastavku, oznaka „5RS“ navedena u IUPAC nazivu relevantnog primera povezana sa naznakom
„racemat“ znači da je to racemska smeša 5R enantiomera (→1. slovo nakon broja pozicije u „5RS“) sa odgovarajućim 5S enantiomerima (→2. slovo nakon broja pozicije). Oznaka „5RS“ u vezi sa podatkom „enantiomer 1“ i „enantiomer 2“ znači da su to dva enantiomera u odvojenom, izolovanom obliku, pri čemu nije moguće dodeliti apsolutnu konfiguraciju (5R ili 5S) ovim enantiomerima. Slične oznake, kao „5SR“, koje su posledica promenjenog prioriteta i/ili redosleda delova imena jedinjenja usled pravila IUPAC nomenklature, treba tumačiti na analogan način prema ovom uputstvu
[0224] U slučaju intermedijera i primera otelotvorenja opisanih u nastavku, oznaka „5RS,7RS“ navedena u IUPAC nazivu relevantnog primera povezana sa naznakom „racemat“ znači da je to racemska smeša 5R,7R enantiomera (→1. slova nakon broja pozicije u „slova nakon broja pozicije u „5RS,7RS“) sa odgovarajućim 5S,7S enantiomerima (→2. slova nakon broja pozicije). Oznaka „5RS,7RS“ u vezi sa podatkom „enantiomer 1“ i „enantiomer 2“ znači da su to dva enantiomera u odvojenom, izolovanom obliku, pri čemu nije moguće dodeliti apsolutnu konfiguraciju (5R,7R ili 5R,7R) ovim enantiomerima. Slične oznake, kao „5SR,7SR“, koje su posledica promenjenog prioriteta i/ili redosleda delova imena jedinjenja usled pravila IUPAC nomenklature, treba tumačiti na analogan način prema ovom uputstvu.
[0225] (5S)-konfiguracije je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture. Analogno tome, primerima 183-188, 190-219, 275-279, 342-402, 404-415, 418-563 dodeljena je (5S)-konfiguracija.
Polazna jedinjenja i intermedijeri:
Intermedijer 1
Metil-3-fluor-2-(trifluormetil)izonikotinat
[0226]
[0227] 3-fluor-2-(trifluormetil)izonikotinska kiselina (1,00 g, 4,78 mmol) rastvorena je u metanolu (10 ml) i dodata je sumporna kiselina (310 µl, 5,7 mmol). Reakciona smeša je zagrevana 30 minuta na 60 °C i zatim je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je uparen. Dobijeno je 890 mg (čistoća 70%, 58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 224 [M+H]<+>
Intermedijer 2
[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metanol
[0228]
[0229] Metil-3-fluor-2-(trifluormetil)izonikotinat (890 mg, čistoća 70%, 3,99 mmol) rastvoren je u metanolu (5,0 ml) i na 0°C je u porcijama dodat natrijum borhidrid (166 mg, 4,39 mmol). Nakon mešanja preko noći, u reakcionu smešu je dodat zasićen vodeni rastvor amonijum hlorida, i metanol je uklonjen pod vakuumom. U ostatak su dodati etil acetat i voda. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 420 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja. Jedinjenje je odmah dalje korišćeno.
Intermedijer 3
4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin hidrohlorid
[0230]
[0231] [3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metanol (420 mg, 2,15 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat tionil dihlorid (310 µl, 4,3 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodat tionil dihlorid (310 µl, 4,3 mmol) i kap dimetil formamida. Reakciona smeša je jedan sat mešana na sobnoj temperaturi i ponovo je dodat tionil dihlorid (620 µl, 8,6 mmol) i kap dimetil formamida. Nakon ponovljenog mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 379 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
GC-MS (metoda 2): Rt= 2,74 min; MS (ESIpos): m/z = 213 [M+H]<+>
Intermedijer 4
5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metanol
[0232]
[0233] Metil-5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (412 mg, 1,72 mmol) rastvoren je u metanolu (20 ml) i na 0 °C je u porcijama dodat natrijum borhidrid (78,1 mg, 2,06 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodat natrijum borhidrid (35 mg, 0,9 mmol). Nakon 2 dana mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, i metanol je uklonjen pod vakuumom. U ostatak su dodati etil acetat i voda. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 295 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 212 [M+H]<+>
Intermedijer 5
5-hlor-2-(hlormetil)-4-(trifluormetil)piridin hidrohlorid
[0234]
[0235] [5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metanol (295 mg, 1,39 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (20 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat tionil dihlorid (200 µl, 2,8 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 72 sata na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 274 mg (čistoća 85%, 63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.42), 3.937 (2.06), 4.644 (1.11), 4.903 (16.00), 7.839 (0.47), 8.078 (5.73), 8.296 (0.43), 8.857 (0.51), 8.957 (5.04), 9.102 (0.45).
Intermedijer 6
4-(hlormetil)-2-(trifluormetil)hinolin hidrohlorid
[0236]
[0237] [2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metanol (350 mg, 1,54 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na 0 °C je dodat tionil dihlorid (220 µl, 3,1 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 336 mg (čistoća 74%, 57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 246 [M+H]<+>
Intermedijer 7
4-(hlormetil)-2-(trifluormetil)pirimidin hidrohlorid
[0238]
[0239] [2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metanol (313 mg, 1,76 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat tionil dihlorid (260 µl, 3,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 4 sata na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 134 mg (čistoća 61%, 20% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0240]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 3.678 (0.60), 4.946 (16.00), 5.366 (0.57), 7.993 (2.80), 8.006 (2.88), 9.129 (3.11), 9.142 (3.06).
Intermedijer 8
Metil-6-[1-(terc-butoksikarbonil)hidrazino]piridin-2-karboksilat
[0242] Metil-6-hlorpiridin-2-karboksilat (32,5 g, 189 mmol), terc-butil-hidrazin karboksilat (25,0 g, 189 mmol) i cezijum karbonat (61,6 g, 189 mmol) u toluolu (325 ml) degasirani su argonom, pa je dodat [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihlorpaladijum(II) (6,9 g, 10 mmol). Reakciona smeša je preko noći mešana na 100 °C. Reakciona smeša je razblažena dihlormetanom i filtrirana preko diatomejske zemlje. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: metanol/dihlormetan 4/96). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod vakuumom i mešane sa metil-terc-butiletrom. Dobijeno je 28,8 g (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 5): Rt= 3,45 min; MS (ESIpos): m/z = 268 [M+H]<+>
Intermedijer 9
2-(diazan-2-ijum-1-il)-6-(metoksikarbonil)piridinijum dihlorid
[0243]
[0244] Metil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}piridin-2-karboksilat (29,8 g, 112 mmol) rastvoren je u dioksanu (150 ml) i dodata je hlorovodonična kiselina (112 ml, 446 mmol, 4 M u dioksanu). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na sobnoj temperaturi i razblažena metilterc-butiletrom (500 ml). Nakon 1 h mešanja, čvrsta supstanca je odvojena filtracijom, isprana metil-terc-butiletrom i osušena. Dobijeno je 28,8 g (>100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 5): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 168 [M+H]<+>
Intermedijer 10
Metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0245]
[0246] 2-(diazan-2-ijum-1-il)-6-(metoksikarbonil)piridinijum dihlorid (28,8 g, 112 mmol) rastvoren je u THF-u (500 ml) i dodat je trietilamin (46 ml, 335 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 15 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1,1-karbonil diimidazol (19,9 g, 123 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 h na 70°C. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prenet u razblaženi vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i ekstrahovan smešom dihlormetan/metanol 9/1. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je suspendovan u etil acetatu i mešan preko noći. Nakon filtracije i sušenja, dobijeno je 11,4 g (53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 5): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 194 [M+H]<+>
Intermedijer 11
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0247]
[0248] Metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (17,6 g, 91,1 mmol) i paladijum na aktivnom uglju (1,0 g, 10%) suspendovani su u metanolu (500 ml) i preko noći mešani na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (10 bar). Reakciona smeša je filtrirana preko diatomejske zemlje. Filtrat je koncentrovan i dobijeno je 17,8 g (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 5): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 198 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, MeOD) δ [ppm]= 1.64 - 1.74 (br, 1H), 1.89 - 1.97 (br, 1H), 2.15 - 2.29 (br, 2H), 2.60 - 2.69 (m, 1H), 2.77 (dt, 1H), 3.79 (s, 3H), 4.63 (dd, 1H).
Intermedijer 12
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0249]
[0250] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 33,20 g rastvoreno u 200 ml metanola; injekciona zapremina: 4,0 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 20 µm, 360 x 50 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol 80/20; protok: 400 g/min; temperatura 35 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,7 g enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,8 g enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1
[0251] Analitička hiralna SFC: Rt= 2,76 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 50 x 4,6 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol 80:20; protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 198 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]= 1.45 - 1.60 (m, 1H), 1.75 - 1.84 (m, 1H), 1.98 - 2.17 (m, 2H), 2.48 - 2.58 (m, 1H), 2.59 - 2.68 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 4.51 (dd, 1H), 11.42 (s, 1H).
Intermedijer 13
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 2)
[0252]
[0253] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 33,20 g rastvoreno u 200 ml metanola; injekciona zapremina: 4,0 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 20 µm, 360 x 50 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol 80/20; protok: 400 g/min; temperatura 35 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,7 g enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,8 g enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2
[0254] Analitička hiralna SFC: Rt= 3,90 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 50 x 4,6 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol 80:20; protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 198 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]= 1.42 - 1.59 (m, 1H), 1.72 - 1.86 (m, 1H), 1.96 - 2.17 (m, 2H), 2.44 - 2.59 (m, 1H), 2.59 - 2.69 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 4.51 (dd, 1H), 11.42 (s, 1H).
[0255] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 14
Metil-1-(4-metoksibenzil)hidrazin karboksilat
[0256]
[0257] (4-metoksibenzil)hidrazin dihidrohlorid (1,50 g, čistoća 80%, 5,33 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (50 ml), dodat je trietilamin (2,6 ml, 19 mmol) i smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je ohlađena na 0 °C i dodat je metil karbonohloridat (450 µl, 5,9 mmol), rastvoren u dihlormetanu (10 ml). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda. Organska faza je razdvojena, isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,04 g (čistoća 92%, 85% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 211 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.988 (0.46), 3.314 (7.32), 3.541 (0.79),
3.622 (16.00), 4.397 (7.56), 4.553 (4.94), 6.861 (0.47), 6.868 (3.43), 6.873 (1.30),
6.885 (1.38), 6.890 (3.96), 6.897 (0.47), 7.161 (3.22), 7.182 (2.79).
Intermedijer 15
Metil-(2S)-6-oksopiperidin-2-karboksilat (enantiomer)
[0258]
[0259] Uveden je metanol (15 ml) i na 0°C u porcijama su dodati tionil dihlorid (560 µl, 7,7 mmol) pa zatim (2S)-6-oksopiperidin-2-karboksilna kiselina (1,00 g, 6,99 mmol). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i u ostatak su dodati toluol i trietilamin (1,9 ml, 14 mmol). Smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi, zatim je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 805 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,26 min; MS (ESIpos): m/z = 158 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.70), 0.008 (1.69), 1.541 (0.78),
1.550 (1.05), 1.560 (1.24), 1.566 (1.90), 1.575 (2.78), 1.584 (3.48), 1.591 (3.19),
1.594 (3.57), 1.600 (4.36), 1.610 (3.31), 1.619 (4.16), 1.628 (3.71), 1.636 (3.43),
1.644 (5.02), 1.652 (4.23), 1.660 (4.33), 1.668 (4.60), 1.676 (2.96), 1.684 (2.78),
1.693 (1.99), 1.702 (1.75), 1.708 (1.01), 1.717 (0.85), 1.745 (1.91), 1.754 (2.09),
1.759 (2.49), 1.768 (2.39), 1.778 (3.46), 1.787 (3.35), 1.793 (3.60), 1.802 (3.22),
1.810 (2.52), 1.819 (1.83), 1.901 (2.92), 1.910 (3.42), 1.916 (3.20), 1.925 (4.72),
1.935 (4.50), 1.941 (3.46), 1.949 (4.49), 1.959 (3.35), 1.968 (1.78), 1.974 (1.91),
1.983 (1.62), 2.097 (0.90), 2.113 (0.85), 2.128 (11.31), 2.141 (16.00), 2.148 (10.19),
2.156 (7.22), 2.164 (7.72), 2.188 (0.61), 2.192 (0.69), 2.208 (0.70), 2.289 (0.72),
2.306 (1.34), 2.324 (0.85), 2.523 (0.72), 3.168 (4.31), 3.311 (4.19), 3.409 (0.45),
3.480 (0.73), 3.581 (8.47), 3.635 (7.91), 3.849 (0.72), 4.049 (4.37), 4.055 (4.73),
4.063 (8.78), 4.069 (8.78), 4.077 (4.66), 4.083 (4.33), 7.542 (6.15).
Intermedijer 16
Metil-(5S)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer)
[0260]
[0261] Metil-(2S)-6-oksopiperidin-2-karboksilat (300 mg, 1,91 mmol) dodat je u dihlormetan (6,0 ml, 93 mmol) (enantiomer) na sobnoj temperaturi i pod argonom. Zatim je dodat trimetil oksonijum tetrafluorborat (311 mg, 2,10 mmol) i reakciona smeša je mešana 2 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i u ostatak je dodat DMF (5 ml). Zatim je dodat metil-1-(4-metoksibenzil)-hidrazin karboksilat (401 mg, 1,91 mmol) i reakciona smeša je mešana 4 sata na 170 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 156 mg (26% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 318 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.02), 1.784 (0.43), 1.795 (0.46),
2.045 (0.41), 2.055 (0.68), 2.068 (0.64), 2.076 (0.62), 2.084 (0.47), 2.092 (0.40),
2.100 (0.48), 2.112 (0.44), 2.120 (0.47), 2.128 (0.45), 2.564 (0.76), 2.578 (0.61),
2.603 (0.56), 2.615 (1.06), 2.627 (0.59), 2.657 (0.47), 2.669 (0.42), 2.829 (0.43),
3.700 (14.01), 3.730 (16.00), 3.743 (0.70), 4.581 (0.93), 4.591 (1.04), 4.597 (1.20),
4.607 (0.91), 4.749 (6.71), 6.882 (3.25), 6.903 (3.86), 7.161 (3.37), 7.183 (2.94).
Intermedijer 17
Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer)
[0262]
[0263] Metil-(5S)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (155 mg, 488 µmol) (enantiomer) rastvoren je u trifluorsirćetnoj kiselini (4,5 ml) i mešan je jedan sat na 150 °C u mikrotalasnoj aparaturi. U reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida i rastvor je pomoću zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata podešen na pH 7. Dodat je dihlormetan i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent dihlormetan/metanol). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod vakuumom, dodat je etil acetat i filtrirane su. Filtrat je koncentrovan do jednog mililitra, i proizvod je kristalisao iz 10 ml petrol etra. Čvrsta supstanca je odvojena filtracijom i osušena pod vakuumom. Dobijeno je 53,1 mg (53% od teor.) naslovnog jedinjenja sa ee od 88%.
Određivanje enantiomernog viška izvršeno je putem analitičke hiralne HPLC: Uporedne vrednosti racemata:
[0264] Analitička hiralna HPLC: enantiomer 1 Rt= 3,40, enantiomer 2 Rt= 4,09 min, odnos 1:1 [kolona: Daicel Chiraltek<®>AY-33µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 1:1, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm]
Enantiomer:
[0265] Analitička hiralna HPLC: enantiomer 1 Rt= 3,35, enantiomer 2 Rt= 4,01 min, odnos 6:94 [kolona: Daicel Chiraltek<®>AY-33µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 1:1, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm]
[0266]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.506 (0.41), 1.540 (0.44), 1.774 (0.50), 1.787 (0.56), 1.800 (0.48), 1.808 (0.40), 2.026 (0.49), 2.037 (0.75), 2.050 (0.70), 2.061 (0.71), 2.069 (0.52), 2.077 (0.48), 2.085 (0.55), 2.096 (0.54), 2.105 (0.55), 2.113 (0.53), 2.560 (0.95), 2.574 (0.73), 2.601 (0.65), 2.613 (1.22), 2.626 (0.67), 2.655 (0.55), 2.669 (0.46), 3.586 (0.54), 3.687 (16.00), 4.496 (1.07), 4.506 (1.20), 4.511 (1.37), 4.521 (1.06), 11.424 (1.40).
[0267] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Intermedijer 18
Metil-(5RS)-2-(4-metoksibenzil)-5-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0268]
[0269] Metil-(5RS)-2-metil-6-oksopiperidin-2-karboksilat (racemat) (500 mg, čistoća 93%, 2,72 mmol, CAS 89115-90-2) unet je u dihlormetan (10 ml) na sobnoj temperaturi i pod argonom. Zatim je dodat trimetil oksonijum tetrafluorborat (442 mg, 2,99 mmol) i reakciona smeša je mešana 2 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i u ostatak je dodat DMF (5 ml). Zatim je dodat metil-1-(4-metoksibenzil)hidrazin karboksilat (571 mg, 2,72 mmol, čistoća 92%) i reakciona smeša je mešana 8 sati na 170 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 186 mg (čistoća 91%, 19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 332 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.589 (0.43), 1.597 (0.42), 1.606 (0.51),
1.623 (0.42), 1.697 (11.51), 1.769 (0.47), 1.782 (0.56), 1.802 (0.43), 1.907 (0.40),
1.935 (0.74), 1.942 (0.63), 1.960 (0.63), 2.023 (0.59), 2.030 (0.65), 2.042 (0.59),
2.050 (0.53), 2.058 (0.40), 2.570 (2.79), 2.586 (1.50), 2.829 (3.14), 3.531 (0.70),
3.645 (0.69), 3.665 (13.44), 3.730 (16.00), 3.742 (4.13), 4.677 (0.71), 4.716 (2.98),
4.736 (2.97), 4.774 (0.71), 5.753 (5.67), 6.885 (3.42), 6.906 (4.16), 6.922 (0.90),
7.148 (3.49), 7.169 (3.14), 7.232 (0.92), 7.253 (0.84), 7.632 (0.93).
Intermedijer 19
Metil-(5RS)-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0270]
[0271] Metil-2-(4-metoksibenzil)-5-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (186 mg, 560 µmol) rastvoren je u trifluorsirćetnoj kiselini (5,0 ml) i mešan je jedan sat na 150 °C (mikrotalasna aparatura). U reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida i rastvor je pomoću zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata podešen na pH 7. Dodat je dihlormetan i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent dihlormetan/metanol). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,5 mg (34% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 212 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.64), 0.008 (0.61), 1.622 (0.54),
1.631 (0.51), 1.640 (0.78), 1.654 (15.63), 1.757 (0.51), 1.771 (0.63), 1.777 (0.57),
1.785 (0.46), 1.792 (0.52), 1.880 (0.46), 1.887 (0.52), 1.903 (0.40), 1.915 (0.92),
1.922 (0.83), 1.938 (0.81), 1.946 (0.65), 1.990 (0.78), 1.998 (0.84), 2.010 (0.73),
2.018 (0.68), 2.025 (0.49), 2.033 (0.43), 2.045 (0.43), 2.568 (3.91), 2.584 (1.91),
3.309 (16.00), 11.369 (1.45).
Intermedijer 20
Terc-butil-6-hlorpiridin-2-karboksilat
[0272]
[0273] 6-hlorpikolinska kiselina (80,0 g, 0,51 mol) rastvorena je u piridinu (300 ml) i tercbutanolu (1,60 I), zatim je u porcijama dodat hlorid p-toluolsulfonske kiseline (194 g, 1,02 mol). Reakciona smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Nakon dodatka zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata, reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do zapremine od 1,50 l i razblažena dodatkom heptana (500 ml), etil acetata (500 ml) i vode (500 ml). Organska faza je razdvojena, isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 104 g (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0274]<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ [ppm]= 1.61 (s, 9H), 7.45 - 7.48 (dd, 1H), 7.74 - 7.77 (t, 1H), 7.93 - 7.95 (dd, 1H).
Intermedijer 21
Terc-butil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}piridin-2-karboksilat
[0275]
[0276] Terc-butil-6-hlorpiridin-2-karboksilat (91,1 g, 0,43 mol), benzil-hidrazin karboksilat (70,9 g, 0,43 mol), cezijum karbonat (174 g, 0,53 mol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (17,1 g, 32,0 mmol) pod argonom su suspendovani u toluolu (1,00 l). Dodat je bis(dibenzilidenaceton)paladijum(0) (9,76 g, 10,7 mmol) i reakciona smeša je mešana 3 h na 80 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, filtrirana je preko diatomejske zemlje i isprana etil acetatom. Organska faza je razdvojena, isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad magnezijum sulfata i filtrirana. U filtrat je dodata diatomejska zemlja, mešan je 10 min, zatim je filtriran i ispran etil acetatom. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: heptan/etil acetat 4/1, 2/1, 1/1). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 112 g (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 7): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ [ppm]= 1.59 (s, 9H), 5.30 (s, 2H), 7.31 - 7.39 (m, 3H), 7.42 - 7.45 (m, 2H), 7.76 - 7.78 (m, 2H), 7.98 - 8.12 (dd, 1H).
Intermedijer 22
Terc-butil-6-hidrazinopiridin-2-karboksilat
[0277]
[0278] Terc-butil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}piridin-2-karboksilat (112 g, 0,33 mol) i paladijum na aktivnom uglju (11,2 g, 5%) suspendovani su u toluolu (100 ml) i metanolu (1,12 l) i preko noći mešani na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Reakciona smeša je filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 79,9 g (>100%) naslovnog jedinjenja.
[0279]<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ [ppm]= 1.61 (s, 9H), 6.92 - 6.95 (d, 1H), 7.38 - 7.41 (d, 1H), 7.53 - 7.58 (dd, 1H).
Intermedijer 23
Terc-butil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0280]
[0281] Terc-butil-6-hidrazinopiridin-2-karboksilat (79,9 g, 0,33 mol) rastvoren je u THF-u (1,40 l) i uz mešanje je na sobnoj temperaturi dodat 1,1-karbonil diimidazol (74,3 g, 0,46 mol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon dodatka vode (1,0 l) mešano je 15 min, i isparljivi rastvarači su uklonjeni pod vakuumom. Vodeni ostatak je zasićen natrijum hloridom i ekstrahovan etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Organska faza je razdvojena, osušena iznad magnezijum sulfata i silika gela i filtrirana. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (SiO2; mobilna faza: heptan/etil acetat 4/1, 2/1, 1/1, 1/2). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,4 g (80% od teor. u dva koraka) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 7): Rt= 0,50 min; MS (ESIpos): m/z = 180 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ [ppm]= 1.62 (s, 9H), 6.62 - 6.64 (dd, 1H), 7.00 - 7.06 (dd, 1H), 7.15 - 7.19 (dd, 1H), 10.86 (br s, 1H).
Intermedijer 24
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0282]
[0283] Terc-butil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (34,5 g, 0,15 mol) i paladijum na aktivnom uglju (6,90 g, 5%) suspendovani su u toluolu (60 ml) i metanolu (500 ml) i 24 h mešani na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (34,5 bar). Reakciona smeša je filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana dihlormetanom/metanolom 9/1. Filtrat je koncentrovan i ostatak je mešan 30 min sa etil acetatom, zatim filtriran i osušen. Dobijeno je 36,8 g (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 7): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 240 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ [ppm]= 0.53 (s, 9H), 0.74 - 0.91 (m, 1H), 1.01 - 1.13 (m, 1H), 1.21 - 1.32 (m, 1H), 1.47 - 1.56 (m, 1H), 1.88 - 2.00 (m, 1H), 2.17 - 2.26 (dt, 1H), 4.29 - 4.34 (dd, 1H), 11.9 (br s, 1H).
Intermedijer 25
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 2)
[0284]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0285] (racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 6,00 g rastvoreno u 88 ml metanola; injekciona zapremina: 4,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 20 µm, 370 x 50 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol: 0,0 min 35% i-propanol, protok: 200 g/min; 14,0 min 35% izopropanol, protok: 200 g/min;15,0 min 60% i-propanol, protok: 115 g/min; 37,0 min 60% i-propanol, protok: 115 g/min; 38,0 min, 35% i-propanol, protok: 200 g/min; 42,0 min, 35% i-propanol, protok: 200 g/min; temperatura 38°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 2,78 g enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 2,79 g enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2
[0286] Analitička hiralna SFC: Rt= 4,20 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 50 x 4,6 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol 70:30; protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 239 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]= 1.41 (s, 9H), 1.49 (dq, 1H), 1.72 - 1.84 (m, 1H), 1.95 - 2.10 (m, 2H), 2.46 - 2.56 (m, 1H), 2.59 - 2.68 (m, 1H), 4.35 (t, 1H), 11.36 (s, 1H).
[0287] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 26
Terc-butil-(5RS)3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0288]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0289] (racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 6,00 g rastvoreno u 88 ml metanola; injekciona zapremina: 4,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 20 µm, 370 x 50 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol: 0,0 min 35% i-propanol, protok: 200 g/min; 14,0 min 35% izopropanol, protok: 200 g/min;15,0 min 60% i-propanol, protok: 115 g/min; 37,0 min 60% i-propanol, protok: 115 g/min; 38,0 min, 35% i-propanol, protok: 200 g/min; 42,0 min, 35% i-propanol, protok: 200 g/min; temperatura 38°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 2,78 g enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 2,79 g enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1
[0290] Analitička hiralna SFC: Rt= 1,67 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 50 x 4,6 mm; mobilna faza: CO2/i-propanol 70:30; protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 239 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]= 1.41 (s, 9H), 1.49 (dq, 1H), 1.81 (dt, 1H), 2.00 - 2.10 (m, 2H), 2.45 - 2.56 (m, 1H), 2.58 - 2.67 (m, 1H), 4.35 (t, 1H), 11.36 (s, 1H).
Intermedijer 27
Terc-butil-6-hlor-4-metilpiridin-2-karboksilat
[0291]
[0292] 6-hlor-4-metilpiridin-2-karboksilna kiselina (2,50 g, 14,6 mmol) rastvorena je u piridinu (10 ml) i terc-butanolu (50 ml, 520 mmol) i dodat je 4-metil benzolsulfonil hlorid (5,56 g, 29,1 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i razblažena pomoću zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata i smeše cikloheksan/etil acetat 90/10. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstrahovana smešom cikloheksan/etil acetat 90/10. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 2,89 g (čistoća 87%, 75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0293]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.325 (0.86), 1.340 (0.86), 1.553 (16.00), 7.614 (0.68), 7.830 (0.80).
Intermedijer 28
Terc-butil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-4-metilpiridin-2-karboksilat
[0294]
[0295] Terc-butil-6-hlor-4-metilpiridin-2-karboksilat (2,89 g, 12,7 mmol) i benzil-hidrazin karboksilat (2,32 g, 14,0 mmol) rastvoreni su u toluolu (32) ml i dodati su kompleks 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (657 mg, 635 µmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijumhloroform (704 mg, 1,27 mmol) i cezijum karbonat (4,96 g, 15,2 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na 80 °C pa su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: izokratska, metanol/dihlormetan 4/96). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 4,25 g (čistoća 86%, 81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,96 min; MS (ESlpos): m/z = 358 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.317 (0.87), 1.329 (0.87), 1.549 (16.00),
2.387 (5.39), 5.192 (4.02), 5.277 (3.65), 7.314 (0.79), 7.331 (1.05), 7.344 (1.30),
7.360 (1.75), 7.380 (0.82), 7.421 (2.12), 7.440 (1.40), 7.618 (1.55), 7.649 (1.81).
Intermedijer 29
Terc-butil-7-metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0296]
[0297] Pod argonom je ubačen paladijum na aktivnom uglju (299 mg, 10%) i dodat je tercbutil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-4-metilpiridin-2-karboksilat (1,80 g, 5,04 mmol) u metanolu (20 ml). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom, filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Reakciona smeša je koncentrovana i direktno je dalje korišćena u reakciji.
[0298] Ostatak je rastvoren u THF-u (40 ml) i dodat je di-1H-imidazol-1-ilmetanon (980 mg, 6,04 mmol) . Reakciona smeša je mešana tokom 30 min na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,05 g (čistoća 90%, 75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,98 min; MS (ESlneg): m/z = 248 [M-H]-
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.536 (16.00), 1.553 (0.97), 2.218 (3.39), 3.318 (0.65), 6.597 (1.20), 7.051 (0.96), 12.345 (0.65).
Intermedijer 30
Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0299]
[0300] Pod argonom je ubačen paladijum na aktivnom uglju (740 mg, 10%) i dodat je tercbutil-7-metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (3,1 g, 12,44 mmol) u metanolu (124 ml). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prenet u metanol (124 ml) i dodat je paladijum na aktivnom uglju (740 mg, 10%). Reakciona smeša je mešana tokom 48 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (2 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom.
Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 2,71 g (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [2M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.015 (2.13), 1.032 (2.20), 1.400 (0.73),
1.405 (1.16), 1.416 (16.00), 1.432 (0.48), 2.181 (0.46), 2.209 (0.56), 4.184 (0.45),
4.195 (0.43), 11.342 (0.73).
Intermedijer 31
Etil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-3-metilpiridin-2-karboksilat
[0301]
[0302] Pod argonom, etil-6-hlor-3-metilpiridin-2-karboksilat (970 mg, 4,86 mmol) i benzilhidrazin karboksilat (969 mg, 5,83 mmol) rastvoreni su u toluolu (9,7 ml) i dodati su kompleks tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum-hloroform (251 mg, 243 µmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (269 mg, 486 µmol) i cezijum karbonat (1,90 g, 5,83 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na 80 °C pa su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (SiO2; mobilna faza: izokratska, metanol/dihlormetan 8/92). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,89 g (čistoća 47%, 55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt = 0,89 min; MS (ESlpos): m/z = 330 [M+H]<+>
Intermedijer 32
Etil-6-hidrazino-3-metilpiridin-2-karboksilat dihidrohlorid
[0303]
[0304] Pod argonom je ubačen paladijum na aktivnom uglju (232 mg, 10%) i dodat je etil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-3-metilpiridin-2-karboksilat (1,89 g, 5,74 mmol) u metanolu (60 ml). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prebačen u dioksan i dodat je dioksan/hlorovodonična kiselina (4 M). Istaložena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana metil-terc-butil etrom i direktno je dalje korišćena u reakciji.
Intermedijer 33
Etil-6-metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0305]
[0306] Etil-6-hidrazino-3-metilpiridin-2-karboksilat dihidrohlorid (419 mg, 1,56 mmol) rastvoren je u THF-u (12 ml) i dodat je di-1H-imidazol-1-ilmetanon (261 mg, 1,61 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i dihlormetan, i podešena je na baznu pH vrednost pomoću zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 347 mg (čistoća 89%, 104% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,77 min; MS (ESlneg): m/z = 220 [M-H]-
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.282 (5.00), 1.299 (10.60), 1.317 (5.79),
1.335 (0.84), 1.356 (2.69), 2.078 (16.00), 2.118 (0.45), 2.280 (0.45), 2.395 (0.71),
2.428 (0.75), 4.331 (1.67), 4.349 (4.92), 4.367 (4.80), 4.385 (1.58), 7.060 (2.57),
7.084 (3.35), 7.239 (3.24), 7.263 (2.51), 7.632 (0.45), 12.533 (1.43).
Intermedijer 34
Etil-(5RS,6RS)-6-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0307]
[0308] Pod argonom je ubačen paladijum na aktivnom uglju (63 mg, 10%) i dodat je etil-6-metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (297 mg, 1,34 mmol) u metanolu (10 ml), reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu.
[0309] Ostatak je rastvoren u metanolu (5,0 ml) i nakon dodatka paladijuma na aktivnom uglju (25 mg, 10%), reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 117 mg (39% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 226 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.015 (11.82), 1.033 (12.24), 1.175 (7.82),
1.193 (16.00), 1.211 (8.16), 1.236 (0.40), 1.428 (0.40), 1.441 (0.50), 1.459 (1.16),
1.473 (1.29), 1.492 (1.47), 1.505 (1.43), 1.522 (0.71), 1.536 (0.62), 1.691 (1.35),
1.698 (1.45), 1.706 (1.50), 1.717 (0.89), 1.724 (1.18), 1.732 (1.11), 1.739 (1.07),
2.246 (0.67), 2.252 (0.78), 2.263 (1.08), 2.269 (1.18), 2.278 (1.20), 2.284 (1.18),
2.292 (1.12), 2.299 (1.03), 2.309 (0.72), 2.316 (0.63), 2.557 (1.30), 2.569 (1.98),
2.584 (1.68), 2.600 (1.66), 2.615 (1.39), 2.656 (1.71), 2.661 (2.10), 2.669 (2.15),
2.675 (1.92), 2.698 (0.96), 2.703 (1.08), 2.711 (1.03), 2.717 (0.80), 4.098 (0.91),
4.107 (1.22), 4.116 (1.20), 4.125 (4.30), 4.134 (1.05), 4.142 (6.35), 4.151 (1.07),
4.160 (4.32), 4.169 (1.26), 4.178 (1.27), 4.187 (0.95), 4.419 (4.25), 4.435 (4.22),
11.412 (1.99).
Intermedijer 35
Etil-6-hidrazino-4-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat
[0310]
[0311] Pod argonom, etil-6-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (1000 mg, 3,94 mmol) i benzil-hidrazin karboksilat (721 mg, 4,34 mmol) rastvoreni su u toluolu (10 ml) i dodati su kompleks tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum-hloroform (204 mg, 197 µmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (219 mg, 394 µmol) i cezijum karbonat (1,54 g, 4,73 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na 80 °C i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (SiO2; mobilna faza: izokratska, metanol/dihlormetan 8/92). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je direktno dalje korišćen. Ostatak je pod argonom prenet u metanol (50 ml) i dodat je paladijum na aktivnom uglju (223 mg, 10%). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Dodata je još jedna količina paladijuma na aktivnom uglju (223 mg, 10%) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom, filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 385 mg (čistoća 93%, 38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 250 [M+H]<+>
Intermedijer 36
Etil-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0312]
[0313] Etil-6-hidrazino-4-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (384 mg, 1,54 mmol) ubačen je u THF (19 ml), dodat je di-1H-imidazol-1-ilmetanon (300 mg, 1,85 mmol) mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i dihlormetan. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane vodom, zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 391 mg (čistoća 94%, 87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 276 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.299 (7.46), 1.316 (16.00), 1.334 (7.58),
1.345 (0.42), 1.357 (1.20), 1.363 (0.66), 2.525 (0.47), 4.336 (2.37), 4.354 (7.32),
4.371 (7.27), 4.389 (2.27), 7.044 (4.79), 7.048 (4.79), 7.954 (2.71), 7.957 (3.98),
7.960 (2.90).
Intermedijer 37
Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0314]
[0315] Pod argonom je ubačen paladijum na aktivnom uglju (30 mg, 10%) i dodat je etil-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (100 mg, 363 µmol) u metanolu (5,0 ml). Reakciona smeša je mešana 40 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 97,8 mg (čistoća 87%, 84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 280 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.042 (1.06), 1.056 (2.04), 1.070 (1.10),
1.199 (8.42), 1.214 (16.00), 1.228 (8.00), 1.305 (0.45), 1.356 (1.36), 1.738 (1.02),
1.763 (2.47), 1.787 (2.58), 1.812 (1.20), 2.696 (1.56), 2.721 (2.08), 2.728 (2.47),
2.752 (2.57), 2.869 (2.23), 2.896 (1.50), 2.901 (1.51), 3.057 (1.19), 3.064 (1.13),
3.072 (1.13), 3.165 (1.54), 3.174 (1.56), 3.429 (0.48), 3.439 (0.55), 3.452 (0.48),
4.141 (0.78), 4.149 (1.47), 4.156 (2.22), 4.163 (4.00), 4.170 (4.33), 4.177 (4.39),
4.184 (3.95), 4.191 (2.27), 4.198 (1.47), 4.205 (0.83), 4.319 (0.42), 4.331 (0.60),
4.432 (2.24), 4.444 (2.52), 4.455 (2.47), 4.466 (2.20), 7.628 (0.41), 11.601 (3.48).
Intermedijer 38
Metil-(2RS)-6-[(4-metoksibenzil)(metoksikarbonil)hidrazono]piperidin-2-karboksilat (racemat)
[0316]
[0317] U metil-(2RS)-6-oksopiperidin-2-karboksilat (racemat) (685 mg, 4,36 mmol) u dihlormetanu (15 ml) pod argonom dodat je trimetiloksonijum tetrafluorborat (678 mg, čistoće 95%, 4,36 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat metil-1-(4-metoksibenzil)hidrazin karboksilat (1,29 g, čistoća 71%, 4,36 mmol) i smeša je mešana nekoliko dana na sobnoj temperaturi uz povremeno praćenje konverzije. Radi obrade, isparljive komponente su uklonjene pod vakuumom. Preostali sirovi proizvod (1,52 g, 100% od teor.) dodatno je korišćen u reakciji bez dodatnog prečišćavanja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,51 min; MS (ESIpos): m/z = 350 [M+H]<+>
Intermedijer 39
Metil-(5RS)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0318]
Metil-(2RS)-6-[(4-metoksibenzil)(metoksikarbonil)hidrazono]piperidin-2-karboksilat
[0319] (racemat) (1,52 g, 4,35 mmol) u DMF-u (5 ml) mešan je preko noći na 150 °C. Radi obrade, ohlađena smeša je dodata u oko 50 ml vode, smeša je pomoću vodenog rastvora natrijum hidroksida zaalkalisana na pH oko 9 i tri puta je ekstrahovana sa 50 ml dihlormetana. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i koncentrovane pod vakuumom. Tako dobijeni sirovi proizvod je prečišćen putem hromatografije na silika gelu (patrona sa silika gelom PuriFlash 50 g , dihlormetan 100% => dihlormetan: MeOH 80:1). Tako su dobijene dve frakcije naslovnog jedinjenja: 327 mg čistoće 60% (14% od teor.) i 858 mg čistoće 72% (45% od teor.).
Analitički rezultati druge frakcije:
[0320]
LC-MS (metoda 6): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 318 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.615 (0.90), 2.731 (9.35), 2.890 (12.58),
3.700 (13.65), 3.730 (16.00), 3.736 (6.83), 3.742 (2.33), 4.492 (1.54), 4.582 (0.85),
4.591 (0.94), 4.597 (1.08), 4.607 (0.82), 4.750 (5.88), 6.882 (3.29), 6.887 (2.11),
6.899 (1.66), 6.904 (4.11), 6.908 (1.73), 7.162 (3.09), 7.167 (1.04), 7.178 (1.35),
7.183 (3.40), 7.203 (1.01), 7.923 (0.79), 7.952 (1.25).
Intermedijer 40
(5RS)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0321]
[0322] Metil-(5RS)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (320 mg, čistoća 60%, 605 µmol) rastvoren je u smeši voda/THF (5 ml/5 ml), dodat je litijum hidroksid (72,4 mg, 3,03 mmol) i reakciona smeša je preko vikenda mešana na sobnoj temperaturi . Radi obrade, dodata je voda, pH je podešen na 3 pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, rastvor je zasićen natrijum hloridom i tri puta ekstrahovan sa po 30 ml etil acetata. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 250 mg (čistoća 71%, 97% od teor.) naslovnog jedinjenja. Tako dobijeni proizvod je dalje korišćen bez dodatnog prečišćavanja.
[0323] U drugom, analognom pristupu, iz 850 mg metil-(5RS)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (čistoća 72%, 1,93 mmol) dobijeno je 625 mg naslovnog jedinjenja (čistoća 89%, 95% od teor.).
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 304 [M+H]<+>
Intermedijer 41
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[0324]
Varijanta a)
[0325] (5RS)-2-(4-metoksibenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) (670 mg, 1,88 mmol) rastvoren je u trifluorsirćetnoj kiselini (15 ml) i mešan je jedan sat u mikrotalasnoj aparaturi na 150 °C. Radi obrade, ohlađena smeša je koncentrovana i ostatak je u 2 injektovanja prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Chromatorex C18 , 250x40 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent ( A= voda 0,1% mravlja kiselina, B=acetonitril): 0 min 10% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B , 40 min 10% B. Vreme trajanja po razdvajanju 40 min. Detekcija: 210 nm). Frakcije proizvoda su koncentrovane i liofilizovane. Tako je dobijeno 0,36 g (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
Varijanta b)
[0326] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (500 mg, 2,54 mmol) mešan je u smeši sa pirolidinom (5,0 ml, 60 mmol) prvo 2 h, a zatim dodatnih 18 h na 50 °C, zatim dodatnih oko 24 h na 60°C (provera konverzije pomoću HPLC / LC/MS). Radi obrade, u smešu je dodata voda, razblažena je etil acetatom i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su odbačene nakon provere putem LC/MS. Vodena faza sa proizvodom je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Trituracijom ostatka smešom etilacetat/metanol, koncentrovanjem matičnog luga i ponovnom trituracijom smešom rastvarača dobijene su dve frakcije naslovnog jedinjenja: 45,7 mg (8%) i 112 mg (19%).
Analitički podaci druge frakcije:
[0327]
LC-MS (metoda 6): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 237 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.147 (0.62), 1.662 (1.69), 1.673 (2.39),
1.682 (4.36), 1.690 (6.79), 1.700 (8.57), 1.710 (6.71), 1.720 (3.20), 1.757 (2.60),
1.771 (9.56), 1.784 (16.00), 1.798 (11.83), 1.812 (3.41), 1.894 (3.39), 1.907 (11.19),
1.921 (15.40), 1.935 (10.59), 1.948 (4.95), 1.956 (5.06), 1.965 (4.50), 1.972 (2.37),
1.978 (2.52), 1.990 (3.30), 1.999 (3.57), 2.007 (3.10), 2.019 (2.87), 2.036 (1.28),
2.049 (0.83), 2.472 (2.42), 2.518 (5.78), 2.524 (4.83), 2.571 (3.49), 2.580 (6.69),
2.590 (3.51), 2.604 (1.94), 2.613 (3.22), 2.623 (1.57), 2.636 (0.62), 3.013 (0.68),
3.027 (1.51), 3.041 (0.64), 3.225 (2.19), 3.238 (4.42), 3.248 (4.27), 3.262 (7.12),
3.276 (3.96), 3.288 (5.24), 3.324 (12.41), 3.333 (4.62), 3.338 (5.10), 3.347 (4.83),
3.362 (2.48), 3.375 (0.68), 3.437 (2.33), 3.451 (4.93), 3.457 (3.84), 3.465 (3.28),
3.471 (6.13), 3.485 (2.81), 3.579 (2.85), 3.593 (5.88), 3.599 (3.34), 3.606 (3.61),
3.612 (4.77), 3.626 (2.17), 4.637 (5.45), 4.644 (6.46), 4.650 (7.06), 4.657 (5.49),
11.270 (6.83).
Intermedijer 42
Etil-2-izopropiliden-1-(4-metilbenzil)hidrazin karboksilat
[0328]
[0329] U etil-2-izopropiliden hidrazin karboksilat (CAS 6637-60-1; 3,23 g, 22,4 mmol) u 55 ml toluola pod argonom dodati su sprašeni kalijum hidroksid (4,11 g, 29,7 mmol) i tetra-nbutilamonijum hidrogensulfat (734 mg, 2,16 mmol). Radi lakšeg mešanja dodato je 10 ml toluola. Nakon zagrevanja na 50 °C polako je ukapan rastvor 1-(brommetil)-4-metilbenzola (5,00 g, 27,0 mmol) u 15 ml toluola, smeša je zagrejana na 80 °C i zatim mešana 2,5 h. Radi obrade, u smešu je dodata voda i organska faza je razdvojena nakon ekstrakcije. Organska faza je još dva puta ekstrahovana vodom, spojene vodene faze su zatim reekstrahovane toluolom. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, koncentrovana i osušena pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je hromatografski razdvojen na silika gelu (instrument: Isolera Kolona: 340g SNAP Mobilna faza: cikloheksan i EtOAc Gradijent: 0 min cikloheksan, 10 min cikloheksan, 35min 30% EtOAc, 40 min 30% EtOAc). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 3,76 g (56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 249 [M+H]<+>
Intermedijer 43
Etil-1-(4-metilbenzil)hidrazin karboksilat
[0330]
[0331] Etil-2-izopropiliden-1-(4-metilbenzil)hidrazin karboksilat (3,77 g, 15,2 mmol, prema LC/MS već delimično hidrolizovan u naslovno jedinjenje), rastvoren je u smeši etanol/voda (100 ml/66 ml), zagrevan uz refluks i mešan 3 h. Radi obrade je zatim maksimalno koncentrovan, ostatak je prenet u smešu dihlormetan/voda i ekstrahovan. Nakon razdvajanja faza, vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Tako je dobijeno 3,25 g (čistoća 87%, 89% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je bez dodatnog prečišćavanja dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 6): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 209 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.159 (0.80), 1.168 (1.91), 1.185 (3.86),
1.203 (1.95), 1.667 (1.33), 1.927 (1.25), 2.267 (1.24), 2.275 (9.41), 4.035 (1.18),
4.053 (3.64), 4.071 (3.59), 4.088 (1.13), 4.425 (5.48), 4.548 (3.26), 7.126 (16.00).
Intermedijer 44
Metil-(2RS)-6-[(etoksikarbonil)(4-metilbenzil)hidrazono]piperidin-2-karboksilat (racemat)
[0332]
[0333] U metil-(2RS)-6-oksopiperidin-2-karboksilat (racemat) (1,58 g, 10,1 mmol) u 20 ml dihlormetana pod argonom dodat je trimetiloksonijum tetrafluorborat (1,57 g, čistoća 95%, 10,1 mmol) i reakciona smeša je mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Zatim je ukapan etil-1-(4-metilbenzil)hidrazin karboksilat (2,41 g, čistoća 87%, 10,1 mmol), rastvoren u 10 ml dihlormetana, i smeša je mešana 26 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, isparljive komponente su uklonjene pod vakuumom i ostatak je razdvojen na silika gelu. (Instrument: Isolera; kolona: 100 g patrona SNAP Mobilna faza: cikloheksan i EtOAc // EtOAc i MeOH Gradijent: 0 min 30% EtOAc, 3 min 30% EtOAc, 13 min 100% EtOAc, 18 min 100% EtOAc, 18,01 min 10% MeOH, 33 min 10% MeOH). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 1,46 g (čistoća 88%, 37% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.055 (0.58), 1.149 (1.00), 1.157 (1.01),
1.167 (1.78), 1.175 (1.73), 1.184 (0.92), 1.192 (0.87), 1.644 (0.91), 1.908 (0.76),
1.988 (2.45), 2.128 (2.05), 2.141 (2.19), 2.144 (2.23), 2.148 (1.42), 2.156 (0.95),
2.164 (0.99), 2.274 (3.39), 2.279 (4.35), 3.162 (0.90), 3.175 (0.90), 3.538 (3.77),
3.578 (0.99), 3.585 (1.56), 3.638 (3.98), 3.667 (16.00), 3.675 (1.67), 3.684 (2.39),
3.701 (3.26), 4.021 (0.67), 4.038 (0.81), 4.049 (1.01), 4.056 (1.07), 4.063 (1.50),
4.069 (1.44), 4.775 (1.21), 7.127 (1.68), 7.134 (2.17), 7.174 (1.17).
Intermedijer 45
Metil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0334]
[0335] Metil-(2RS)-6-[(etoksikarbonil)(4-metilbenzil)hidrazono]piperidin-2-karboksilat (racemat) (730 mg, čistoća 88%, 1,85 mmol) u 15 ml DMF mešan je na 150 °C preko noći. Radi obrade, reakciona smeša je dodata u vodu, smeša je pomoću 3 N rastvora natrijum hidroksida zaalkalisana i ekstrahovana dihlormetanom. Vodena faza je zasićena natrijum hloridom i još dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Tako je dobijeno 288 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.274 (12.04), 2.580 (0.80), 2.616 (1.19),
2.731 (10.86), 2.890 (12.92), 3.285 (1.12), 3.700 (16.00), 4.588 (1.05), 4.598 (1.19),
4.604 (1.34), 4.614 (1.04), 4.775 (6.63), 7.105 (0.94), 7.119 (1.09), 7.127 (7.35),
7.134 (6.83), 7.155 (1.02), 7.952 (1.56).
Alternativna sinteza:
[0336] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (500 mg, 2,54 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (909 mg, 2,79 mmol) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (493 mg, 2,66 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 560 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.61), 0.008 (0.56), 1.787 (0.45),
1.798 (0.49), 1.812 (0.42), 2.050 (0.42), 2.060 (0.71), 2.072 (0.83), 2.080 (0.64),
2.088 (0.52), 2.096 (0.44), 2.104 (0.52), 2.108 (0.45), 2.116 (0.53), 2.124 (0.51),
2.132 (0.48), 2.274 (11.08), 2.523 (0.63), 2.566 (0.81), 2.580 (0.64), 2.605 (0.58),
2.616 (1.09), 2.629 (0.60), 2.659 (0.49), 3.701 (16.00), 4.588 (0.99), 4.598 (1.12),
4.604 (1.28), 4.614 (0.97), 4.775 (6.33), 7.106 (0.87), 7.127 (6.84), 7.134 (6.17),
7.154 (0.82).
Intermedijer 46
Metil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0337]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0338] (enantiomer 2) (700 mg, 3,55 mmol) ubačen je u acetonitril (31 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,27 g, 3,90 mmol) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (690 mg, 3,73 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 1,05 g (čistoća 91%, 89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.497 (0.40), 1.519 (0.42), 1.524 (0.43),
1.532 (0.43), 1.788 (0.50), 1.797 (0.54), 1.811 (0.47), 1.821 (0.43), 1.988 (0.48),
2.049 (0.50), 2.060 (0.81), 2.073 (0.80), 2.080 (0.72), 2.087 (0.59), 2.095 (0.51),
2.104 (0.58), 2.115 (0.59), 2.124 (0.56), 2.131 (0.52), 2.273 (12.47), 2.292 (0.91),
2.523 (0.62), 2.566 (0.84), 2.580 (0.68), 2.604 (0.64), 2.616 (1.20), 2.628 (0.66),
2.658 (0.55), 3.310 (16.00), 3.683 (0.71), 4.588 (1.13), 4.598 (1.28), 4.604 (1.44),
4.614 (1.10), 4.674 (0.43), 4.775 (6.90), 7.106 (1.01), 7.127 (8.08), 7.133 (7.29),
7.154 (1.06).
[0339] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 47
Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0340]
[0341] Metil-5-okso-L-prolinat (24,0 g, 168 mmol, CAS 4931-66-2) ubačen je u dihlormetan (210 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat trimetiloksonijum tetrafluorborat (24,8 g, 168 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i u ostatak je dodat DMF (240 ml). Zatim je dodat metil-hidrazin karboksilat (15,1 g, 168 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 170 °C. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel, mobilna faza: gradijent dihlormetan/metanol). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,57 g (25% od teor.) naslovnog jedinjenja. Ono je direktno dalje korišćeno u reakciji.
GC-MS (WUP-GC/MS): Rt= 6,48 min; MS (ESIpos): m/z = 183 [M+H]<+>
Intermedijer 48
Metil-(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0342]
[0343] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (250 mg, 1,36 mmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (489 mg, 1,50 mmol) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (265 mg, 1,43 mmol, CAS 104-81-4). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 412 mg (čistoća 91%, 96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.072 (1.11), 2.275 (9.70), 2.303 (0.99),
2.458 (0.51), 2.465 (0.54), 2.720 (1.21), 2.743 (1.93), 2.758 (1.66), 2.837 (0.42),
2.857 (0.41), 2.869 (0.51), 2.892 (0.49), 3.708 (1.25), 3.722 (12.20), 4.758 (2.95),
4.763 (3.01), 4.776 (1.05), 4.791 (1.07), 4.799 (0.95), 4.937 (0.40), 5.753 (0.46),
7.141 (16.00).
Intermedijer 49
Metil-(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0344]
[0345] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (300 mg, 1,64 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Nakon 5 min mešanja dodati su cezijum karbonat (587 mg, 1,80 mmol) i 5-(brommetil)-2-hlorpiridin (355 mg, 1,72 mmol, CAS 182924-36-3). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 430 mg (85% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 50
Metil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0346]
[0347] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (300 mg, 1,64 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (587 mg, 1,80 mmol) i 5-(brommetil)-2-(trifluormetil)piridin (413 mg, 1,72 mmol, CAS 108274-33-5). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 441 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 51
Metil-(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0348]
[0349] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (300 mg, 1,64 mmol) ubačen je u acetonitril (530 µl). Nakon 5 min mešanja dodati su cezijum karbonat (587 mg, 1,80 mmol) i 4-(brommetil)-2-hlor-1-fluorbenzol (384 mg, 1,72 mmol, CAS 192702-01-5). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 460 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 326 [M+H]<+>
Intermedijer 52
Metil-(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0350]
[0351] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (150 mg, 819 µmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Nakon 5 min mešanja dodati su cezijum karbonat (294 mg, 901 µmol) i 1-(brommetil)-3-(trifluormetil)benzol (206 mg, 860 µmol, CAS 402-23-3). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 150 mg (53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
Intermedijer 53
Metil-(5S)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer)
[0352]
[0353] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (150 mg, 819 µmol) ubačen je u acetonitril (7,0 ml). Nakon 5 min mešanja dodati su cezijum karbonat (294 mg, 901 µmol) i 4-(brommetil)-2-hlorpiridin (178 mg, 860 µmol, CAS 83004-15-3). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 250 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 54
Metil-(5RS)-2-(4-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0354]
[0355] Metil-(2RS)-6-[(terc-butoksikarbonil)hidrazono]piperidin-2-karboksilat (racemat) (2,20 g, 7,21 mmol) u 15 ml DMF mešan je na 150 °C preko noći. Reakciona smeša (teoretski prinos: 1,42 g) podeljena je na alikvote i direktno je dalje korišćena. U rastvor jednog alikvota sirovog proizvoda metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (izračunato 473 mg, 2,40 mmol) u 5 ml DMF dodati su cezijum karbonat (1,17 g, 3,60 mmol) i 1-(brommetil)-4-hlorbenzol (518 mg, 2,52 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Onda je dodat 1-(brommetil)-4-hlorbenzol (493 mg, 2,40 mmol) i mešano je preko noći na 50 °C. Radi obrade, dodata je voda, rastvor je ekstrahovan dva puta sa po 15 ml etil acetata, spojene organske faze su jednom isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom.
Ostatak je razdvojen u 2 porcije putem preparativne HPLC hromatografije (kolona:
Chromatorex, 125x40 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent ( A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 10% B, 5 min 10% B, 27 min 98% B, 35 min 98% B, 35,01 min 10% B, 38 min 10%B. Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. Detekcija: 210 nm).
Koncentrovanjem frakcija proizvoda dobijeno je 80 mg (čistoća 96%, 9,6% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,78 min; MS (ESIpos): m/z = 388 [M+H]<+>
Intermedijer 55
Terc-butil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0356]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0357] (enantiomer 2) (1,77 g, 7,38 mmol) ubačen je u acetonitril (71 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (2,40 g, 7,38 mmol) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (1,37 g, 7,38 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 2,65 g (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 56
Terc-butil-(5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0358]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0359] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i 2-(brommetil)-5-hlorpiridin (272 mg, 1,32 mmol, CAS 605681-01-4). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 306 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,61 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.410 (16.00), 2.078 (0.62), 2.085 (0.56),
2.637 (0.42), 4.453 (0.46), 4.459 (0.48), 4.463 (0.58), 4.469 (0.43), 4.932 (1.44),
4.947 (1.43), 7.232 (0.89), 7.246 (0.91), 7.928 (0.56), 7.932 (0.56), 7.942 (0.53),
7.946 (0.52), 8.578 (0.90), 8.582 (0.88).
Intermedijer 57
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0360]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0361] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i 5-(brommetil)-2-(trifluormetil)piridin (316 mg, 1,32 mmol, CAS 108274-33-5). Nakon 48 h mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je suspendovan u dietil etru i čvrsta supstanca je odvojena filtriranjem i osušena pod vakuumom. Dobijeno je 345 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.383 (16.00), 1.404 (0.51), 2.069 (0.60),
2.081 (0.48), 4.457 (0.62), 5.036 (2.03), 7.923 (1.20), 7.933 (0.73), 7.937 (0.70),
8.665 (0.72).
Intermedijer 58
Terc-butil-(5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0362]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0363] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i 1-(brommetil)-3,5-dihlorbenzol (316 mg, 1,32 mmol, CAS 7778-01-0). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 445 mg (čistoća 82%, 89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,12 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
Intermedijer 59
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(piridin-3-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0364]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0365] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) i 3-(brommetil)piridinhidrobromid (333 mg, 1,32 mmol, CAS 4916-55-6). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 366 mg (88% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 331 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.390 (16.00), 1.405 (12.47), 2.037 (0.58),
2.050 (0.73), 2.060 (0.77), 2.070 (0.65), 2.523 (0.58), 2.617 (0.41), 2.627 (0.42),
4.348 (0.50), 4.444 (0.59), 4.526 (0.81), 4.896 (1.69), 7.359 (0.43), 7.371 (0.43),
7.378 (0.45), 7.391 (0.45), 7.642 (0.49), 7.661 (0.42), 8.483 (0.82), 8.500 (0.55),
8.504 (0.55), 8.513 (0.52).
Intermedijer 60
Metil-(5RS)-2-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0367] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (50,0 mg, 254 µmol) ubačen je u acetonitril (3,6 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (124 mg, 380 µmol) i 3-(brommetil)-5-metil-1,2-oksazol (46,9 mg, 266 µmol, CAS 130628-75-0). Nakon 24 h mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 58,0 mg (čistoća 93%, 73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 293 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.58), 0.008 (0.51), 1.527 (0.40),
1.532 (0.40), 1.540 (0.42), 1.798 (0.45), 1.806 (0.50), 1.820 (0.43), 2.055 (0.46),
2.072 (3.66), 2.084 (0.69), 2.092 (0.58), 2.100 (0.46), 2.108 (0.53), 2.113 (0.51),
2.120 (0.49), 2.129 (0.51), 2.136 (0.47), 2.206 (1.02), 2.376 (10.50), 2.518 (0.88),
2.560 (0.90), 2.575 (0.76), 2.587 (0.75), 2.601 (0.66), 2.624 (0.60), 2.636 (1.04),
2.648 (0.59), 2.678 (0.48), 3.687 (1.59), 3.703 (16.00), 4.591 (0.92), 4.600 (1.03),
4.607 (1.24), 4.616 (0.92), 4.854 (7.94), 4.981 (0.43), 6.065 (2.10).
Intermedijer 61
Terc-butil-(5RS)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0368]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0369] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (429 mg, 1,32 mmol) i 4-(brommetil)-1,2-difluorbenzol (273 mg, 1,32 mmol, CAS 85118-01-0). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i 1 sat na 90 °C. Zatim su u reakcionu smešu dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 455 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0370]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.57), 0.008 (0.51), 1.393 (16.00), 1.404 (3.82), 1.908 (1.06), 1.988 (0.61), 2.064 (0.60), 2.074 (0.56), 2.523 (0.73), 4.433 (0.44), 4.443 (0.41), 4.448 (0.56), 4.699 (0.90), 4.847 (1.99), 7.400 (0.49), 7.428 (0.45).
Intermedijer 62
Terc-butil-(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0371]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0372] (racemat) (311 mg, 1,30 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (445 mg, 1,36 mmol) i 4-(brommetil)-2-hlor-1-fluorbenzol (305 mg, 1,36 mmol, CAS 192702-01-5). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i 1 sat na 90 °C. Zatim su u reakcionu smešu dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 491 mg (čistoća 90%, 89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 326 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 63
Metil-(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0373]
[0374] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (50,0 mg, 254 µmol) ubačen je u acetonitril (3,6 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (124 mg, 380 µmol) i 1-(brommetil)-3-hlorbenzol (54,7 mg, 266 µmol, CAS 766-80-3). Nakon 24 h mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu su dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 66,0 mg (81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 322 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.42), 0.008 (1.25), 1.526 (0.41),
1.532 (0.41), 1.802 (0.49), 1.811 (0.51), 1.825 (0.45), 1.836 (0.42), 2.065 (0.46),
2.075 (0.77), 2.088 (0.74), 2.095 (0.70), 2.102 (0.56), 2.110 (0.46), 2.118 (0.54),
2.130 (0.51), 2.139 (0.53), 2.146 (0.50), 2.523 (1.49), 2.564 (1.03), 2.579 (0.83),
2.591 (0.83), 2.605 (0.68), 2.631 (0.63), 2.642 (1.16), 2.654 (0.67), 2.673 (0.53),
2.684 (0.51), 3.708 (16.00), 4.615 (1.04), 4.625 (1.16), 4.631 (1.33), 4.640 (1.01),
4.863 (5.05), 7.190 (1.12), 7.208 (1.43), 7.282 (1.86), 7.343 (0.46), 7.359 (1.33),
7.364 (2.10), 7.369 (2.85), 7.387 (1.85), 7.407 (0.62).
Intermedijer 64
Terc-butil-(5RS)-2-[(2-metoksipiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0375]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0376] (racemat) (357 mg, 1,49 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (510 mg, 1,57 mmol) i 4-(brommetil)-2-metoksipiridin (381 mg, čistoća 83%, 1,57 mmol, CAS 120277-15-8). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 144 mg (27% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
Intermedijer 65
Terc-butil-(5RS)-2-(3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0377]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0378] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (429 mg, 1,32 mmol) i 1-(brommetil)-3-fluorbenzol (249 mg, 1,32 mmol, CAS 456-41-7). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 297 mg (68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 291 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.11), 0.008 (0.97), 1.397 (16.00),
2.067 (0.49), 2.077 (0.52), 2.518 (1.08), 2.523 (0.83), 4.451 (0.57), 4.865 (1.75),
4.872 (1.37), 7.078 (0.48), 7.097 (0.65), 7.380 (0.40), 7.396 (0.42).
Intermedijer 66
Terc-butil-(5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0379]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0380] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i 4-(brommetil)-2-hlor-1-metoksibenzol (314 mg, čistoća 99%, 1,32 mmol, CAS 320407-92-9). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 365 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M]<+>
Intermedijer 67
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0381]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0382] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i 1-(brommetil)-3-(trifluormetil)benzol (315 mg, 1,32 mmol, CAS 402-23-3). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je suspendovan u dietil etru i čvrsta supstanca je odvojena filtriranjem i osušena pod vakuumom. Dobijeno je 388 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
Intermedijer 68
Terc-butil-(5RS)-2-(3-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0383]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0384] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i 1-(brommetil)-3-metoksibenzol (265 mg, 1,32 mmol, CAS 874-98-6). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 340 mg (čistoća 94%, 71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 69
Terc-butil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0385]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0386] (racemat) (145 mg, 606 µmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (207 mg, 636 µmol) i 3-(brommetil)-1-metil-1,2-pirazol (106 mg, 606 µmol, CAS 102846-13-9). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim 3 h na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 150 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 278 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 70
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0387]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0388] (racemat) (400 mg, 1,67 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (572 mg, 1,76 mmol) i 6-(hlormetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalin (317 mg, 1,76 mmol, CAS 17450-63-4). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 280 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 71
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0389]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0390] (racemat) (400 mg, 1,67 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (572 mg, 1,76 mmol) i 1-(hlormetil)-2,4,5-trifluorbenzol (317 mg, 1,76 mmol, CAS 243139-71-1). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 390 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 72
Terc-butil-(5RS)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0391]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0392] (racemat) (370 mg, 1,54 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (528 mg, 1,62 mmol) i 4-(brommetil)-2-hlorpiridin (360 mg, čistoća 93%, 1,62 mmol, CAS 83004-15-3). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 490 mg (83% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,54 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.57), 0.008 (1.54), 1.405 (16.00),
2.084 (0.54), 2.094 (0.44), 2.523 (0.99), 2.568 (0.41), 2.669 (0.51), 4.476 (0.54),
4.944 (1.40), 4.949 (1.35), 7.240 (0.51), 7.250 (0.53), 7.328 (0.82), 8.377 (0.75),
8.389 (0.75).
Intermedijer 73
Terc-butil-(5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0393]
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0394] (racemat) (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (429 mg, 1,32 mmol) i 2-hlor-5-(hlormetil)tiofen (220 mg, 1,32 mmol, CAS 23784-96-5). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 414 mg (čistoća 83%, 74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,88 min; MS (ESIpos): m/z = 313 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.175 (0.45), 1.335 (0.71), 1.384 (16.00),
1.397 (0.99), 1.988 (0.79), 2.045 (0.50), 2.057 (0.51), 4.420 (0.56), 4.950 (2.59),
4.986 (2.46), 6.922 (0.61), 6.931 (0.84), 6.976 (1.11), 6.986 (0.79), 7.011 (0.48),
7.020 (0.65), 7.079 (0.51).
Intermedijer 74
Metil-(5RS)-2-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0395]
[0396] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (545 mg, 1,67 mmol) i 3-(brommetil)-4-metil-1,2,5-oksadiazol (283 mg, 1,60 mmol, CAS 90507-32-7). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 281 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 294 [M+H]<+>
Intermedijer 75
Metil-(5RS)-2-[(6-metilpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0397]
[0398] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,24 g, 3,80 mmol) i 5-(hlormetil)-2-metilpiridin hidrohlorid (298 mg, 1,67 mmol, CAS 106651-81-4). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 236 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,26 min; MS (ESIpos): m/z = 303 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.57), 0.008 (0.57), 1.511 (0.41),
1.517 (0.41), 1.525 (0.42), 1.787 (0.49), 1.798 (0.53), 1.812 (0.45), 1.822 (0.42),
2.051 (0.47), 2.061 (0.80), 2.073 (3.59), 2.086 (0.68), 2.095 (0.50), 2.103 (0.56),
2.107 (0.49), 2.115 (0.52), 2.123 (0.54), 2.131 (0.51), 2.439 (12.07), 2.523 (0.56),
2.557 (0.88), 2.569 (0.86), 2.583 (0.68), 2.609 (0.63), 2.621 (1.16), 2.633 (0.65),
2.663 (0.57), 3.700 (16.00), 4.594 (1.02), 4.603 (1.12), 4.610 (1.31), 4.619 (1.00),
4.835 (5.24), 7.216 (1.67), 7.236 (1.95), 7.506 (1.19), 7.512 (1.20), 7.526 (1.07),
7.532 (1.07), 8.337 (1.47), 8.342 (1.45).
Intermedijer 76
Metil-(5RS)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0399]
[0400] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,24 g, 3,80 mmol) i 5-(hlormetil)-2-metoksipiridin hidrohlorid (325 mg, 1,67 mmol, CAS 120276-36-0). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 206 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 319 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.39), 0.008 (1.28), 1.795 (0.43),
2.073 (5.67), 2.091 (0.40), 2.099 (0.45), 2.111 (0.42), 2.120 (0.44), 2.127 (0.41),
2.523 (0.87), 2.568 (0.68), 2.582 (0.55), 2.608 (0.50), 2.620 (0.92), 2.631 (0.52),
2.662 (0.50), 3.698 (13.67), 3.828 (16.00), 3.851 (0.46), 4.585 (0.90), 4.594 (0.95),
4.600 (1.13), 4.610 (0.82), 4.794 (5.64), 6.793 (1.69), 6.815 (1.80), 7.560 (1.13),
7.566 (1.15), 7.582 (1.09), 7.588 (1.11), 8.066 (1.53), 8.071 (1.49).
Intermedijer 77
Metil-(5RS)-2-[2,5-bis(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0401]
[0402] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,24 g, 3,80 mmol) i 2-(brommetil)-1,4-bis(trifluormetil)benzol (514 mg, 1,67 mmol, CAS 302911-98-4). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 649 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.90), 0.008 (0.79), 1.157 (0.56),
1.175 (1.14), 1.193 (0.59), 1.539 (0.40), 1.815 (0.51), 1.825 (0.49), 1.839 (0.42),
1.850 (0.43), 1.988 (2.13), 2.073 (0.47), 2.091 (0.47), 2.103 (0.89), 2.111 (1.07),
2.134 (0.56), 2.147 (0.48), 2.155 (0.51), 2.163 (0.47), 2.576 (0.89), 2.591 (0.71),
2.603 (0.74), 2.617 (0.61), 2.649 (0.57), 2.660 (1.10), 2.671 (0.76), 2.702 (0.47),
3.702 (16.00), 4.021 (0.51), 4.038 (0.50), 4.660 (1.05), 4.669 (1.11), 4.675 (1.37),
4.684 (1.00), 5.056 (0.60), 5.097 (1.96), 5.130 (2.04), 5.171 (0.61), 7.632 (2.12),
7.934 (0.89), 7.953 (1.38), 8.025 (1.90), 8.045 (1.28).
Intermedijer 78
Metil-(5RS)-3-okso-2-({5-[3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oksadiazol-3-il}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0403]
[0404] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,24 g, 3,80 mmol) i 3-(hlormetil)-5-[3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oksadiazol (439 mg, 1,67 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 642 mg (čistoća 90%, 90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.48), 0.008 (0.43), 1.158 (0.79),
1.175 (1.64), 1.193 (0.83), 1.530 (0.40), 1.563 (0.43), 1.802 (0.50), 1.814 (0.55),
1.828 (0.47), 1.989 (3.08), 2.067 (0.47), 2.077 (0.73), 2.090 (0.67), 2.105 (0.47),
2.113 (0.50), 2.121 (0.46), 2.129 (0.54), 2.141 (0.53), 2.149 (0.56), 2.157 (0.53),
2.577 (0.87), 2.592 (0.78), 2.603 (0.82), 2.617 (0.63), 2.640 (0.62), 2.652 (1.20),
2.665 (0.72), 2.695 (0.51), 3.311 (16.00), 3.701 (0.48), 4.021 (0.74), 4.039 (0.71),
4.632 (1.16), 4.641 (1.31), 4.647 (1.53), 4.657 (1.11), 5.001 (2.12), 5.074 (0.77),
5.115 (4.74), 5.128 (4.74), 5.168 (0.79), 7.878 (0.89), 7.897 (2.02), 7.917 (1.26),
8.101 (1.45), 8.120 (1.38), 8.334 (2.40), 8.391 (1.51), 8.410 (1.42).
Intermedijer 79
Metil-(5RS)-2-(2-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0405]
[0406] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 1-(brommetil)-2-metilbenzol (197 mg, 1,06 mmol, CAS 89-92-9). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 196 mg (čistoća 93%, 60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
Intermedijer 80
Metil-(5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0407]
[0408] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,24 g, 3,80 mmol) i 4-(brommetil)-1-fluor-2-(trifluormetil)benzol (430 mg, 1,67 mmol, CAS 184970-26-1). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 569 mg (čistoća 90%, 90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
Intermedijer 81
Metil-(5RS)-2-[4-metoksi-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0409]
[0410] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (347 mg, 1,06 mmol) i 4-(brommetil)-1-metoksi-2-(trifluormetil)benzol (300 mg, 1,11 mmol, CAS 261951-89-7). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 316 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,60 min; MS (ESIpos): m/z = 386 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.97), 0.008 (0.99), 1.492 (0.42),
1.513 (0.43), 1.519 (0.45), 1.526 (0.45), 1.789 (0.53), 1.798 (0.55), 1.813 (0.47),
1.823 (0.45), 2.052 (0.49), 2.062 (0.82), 2.073 (0.90), 2.096 (0.50), 2.104 (0.57),
2.116 (0.52), 2.125 (0.55), 2.132 (0.51), 2.560 (0.84), 2.572 (0.84), 2.587 (0.67),
2.613 (0.64), 2.625 (1.19), 2.637 (0.68), 2.668 (0.66), 3.696 (15.68), 3.873 (16.00),
4.600 (1.06), 4.609 (1.20), 4.615 (1.38), 4.625 (1.04), 4.844 (4.92), 7.239 (1.72),
7.260 (2.01), 7.489 (1.35), 7.510 (1.41), 7.520 (2.68).
Intermedijer 82
Metil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-indazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0411]
[0412] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (347 mg, 1,06 mmol) i 5-(brommetil)-1-metil-1H-indazol (251 mg, 1,11 mmol, CAS 1092961-01-7). Nakon 72 h mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 87,0 mg (25% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.77), 0.008 (1.59), 1.447 (0.66),
1.456 (0.44), 1.783 (0.44), 1.794 (0.48), 1.808 (0.41), 2.049 (0.42), 2.060 (0.69),
2.073 (0.71), 2.080 (0.63), 2.087 (0.51), 2.095 (0.41), 2.103 (0.49), 2.115 (0.45),
2.123 (0.48), 2.131 (0.44), 2.563 (0.85), 2.578 (0.63), 2.602 (0.59), 2.613 (1.08),
2.626 (0.61), 2.656 (0.49), 2.669 (0.50), 3.706 (14.99), 4.024 (16.00), 4.597 (0.97),
4.607 (1.09), 4.613 (1.27), 4.623 (0.94), 4.922 (6.84), 7.285 (1.33), 7.307 (1.37),
7.310 (1.55), 7.593 (1.89), 7.614 (3.97), 8.019 (3.08).
Intermedijer 83
Metil-(5RS)-2-[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0413]
[0414] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 2-(hlormetil)-1-etil-1H-imidazol (154 mg, 1,06 mmol, CAS 780722-30-7). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 54,0 mg (17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,29 min; MS (ESIpos): m/z = 306 [M+H]<+>
Intermedijer 84
Metil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-benzimidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0415]
[0416] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 2-(brommetil)-1-metil-1H-benzimidazol (240 mg, 1,06 mmol, CAS 136099-52-0). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 137 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
Intermedijer 85
Metil-(5RS)-2-[3-hlor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0417]
[0418] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (347 mg, 1,06 mmol) i 4-(brommetil)-2-hlorfenil-trifluormetiletar (323 mg, 1,11 mmol, CAS 261763-18-2). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 302 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,81 min; MS (ESIpos): m/z = 406 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.94), 0.008 (0.87), 1.805 (0.43),
1.815 (0.45), 2.070 (0.41), 2.079 (0.69), 2.094 (0.77), 2.104 (0.63), 2.112 (0.43),
2.120 (0.49), 2.124 (0.42), 2.132 (0.44), 2.140 (0.47), 2.148 (0.44), 2.524 (0.61),
2.569 (0.83), 2.583 (0.70), 2.595 (0.73), 2.609 (0.58), 2.636 (0.54), 2.647 (1.01),
2.660 (0.61), 2.690 (0.45), 3.708 (16.00), 4.619 (0.97), 4.629 (1.06), 4.635 (1.29),
4.644 (0.95), 4.911 (5.85), 7.317 (1.07), 7.322 (1.12), 7.338 (1.27), 7.344 (1.31),
7.533 (2.04), 7.539 (1.93), 7.564 (1.23), 7.567 (1.21), 7.585 (1.04), 7.588 (1.02).
Intermedijer 86
Metil-(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0419]
[0420] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-5-(trifluormetil)piridin (245 mg, 1,06 mmol, CAS 175277-52-8). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 293 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
Intermedijer 87
Metil-(5RS)-2-[3-fluor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0421]
[0422] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 4-(brommetil)-2-fluorfenil-trifluormetiletar (291 mg, 1,06 mmol, CAS 886499-04-3). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 263 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,22 min; MS (ESIpos): m/z = 390 [M+H]<+>
Intermedijer 88
Metil-(5RS)-2-{[2-metil-4-(trifluormetil)-1,3-tiazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0423]
[0424] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (347 mg, 1,06 mmol) i 5-(brommetil)-2-metil-4-(trifluormetil)-1,3-tiazol (290 mg, 1,11 mmol, CAS 1000339-73-0). Nakon 72 h mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 384 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.01), 0.008 (1.10), 1.157 (1.51),
1.175 (3.06), 1.193 (1.55), 1.793 (0.43), 1.804 (0.48), 1.818 (0.41), 1.988 (5.82),
2.051 (0.42), 2.062 (0.77), 2.073 (0.86), 2.086 (0.67), 2.094 (0.45), 2.102 (0.51),
2.114 (0.46), 2.122 (0.50), 2.130 (0.46), 2.524 (0.72), 2.568 (0.84), 2.583 (0.72),
2.594 (0.74), 2.608 (0.61), 2.639 (1.12), 2.651 (15.16), 2.668 (1.55), 2.679 (0.51),
2.687 (0.68), 3.697 (16.00), 4.003 (0.46), 4.021 (1.39), 4.038 (1.38), 4.056 (0.46),
4.594 (1.02), 4.603 (1.12), 4.609 (1.32), 4.619 (0.98), 5.171 (4.60).
Intermedijer 89
Metil-(5RS)-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0425]
[0426] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (347 mg, 1,06 mmol) i 5-(brommetil)-3-metil-1,2-oksazol (196 mg, 1,11 mmol, CAS 36958-61-9). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 259 mg (čistoća 86%, 75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,94 min; MS (ESIpos): m/z = 293 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.44), 1.174 (0.64), 1.510 (0.40),
1.531 (0.43), 1.536 (0.43), 1.544 (0.42), 1.798 (0.49), 1.809 (0.54), 1.824 (0.47),
1.988 (1.18), 2.042 (0.41), 2.055 (0.52), 2.065 (0.75), 2.071 (0.80), 2.078 (0.73),
2.087 (0.86), 2.096 (0.58), 2.104 (0.53), 2.112 (0.61), 2.117 (0.52), 2.124 (0.64),
2.133 (0.58), 2.141 (0.55), 2.205 (15.12), 2.218 (2.90), 2.518 (0.41), 2.524 (0.52),
2.567 (0.86), 2.581 (0.78), 2.593 (0.80), 2.607 (0.67), 2.629 (0.63), 2.641 (1.15),
2.653 (0.66), 2.683 (0.47), 3.687 (1.47), 3.691 (0.75), 3.703 (16.00), 4.596 (1.03),
4.606 (1.14), 4.612 (1.28), 4.622 (0.98), 4.773 (1.74), 4.981 (6.40), 6.237 (3.04),
6.458 (0.50).
Intermedijer 90
Metil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-1,2,4-triazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0427]
[0428] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (11 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (793 mg, 2,43 mmol) i 3-(hlormetil)-1-metil-1H-1,2,4-triazol hidrohlorid (187 mg, 1,11 mmol, CAS 135206-76-7). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 178 mg (čistoća 74%, 44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 293 [M+H]<+>
Intermedijer 91
Metil-(5RS)-2-[2-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0429]
[0430] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 1-(brommetil)-2-fluor-3-(trifluormetil)benzol (274 mg, 1,06 mmol, CAS 184970-25-0) nakon 5 min mešanja. U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 184 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
Intermedijer 92
Metil-(5RS)-2-[3-fluor-5-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0431]
[0432] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 1-(brommetil)-3-fluor-5-(trifluormetil)benzol (274 mg, 1,06 mmol, CAS 239087-09-3) nakon 5 min mešanja. U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 154 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
Intermedijer 93
Metil-(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0433]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0434] (enantiomer 2) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su nakon 5 min mešanja dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 4-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (247 mg, 1,06 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 279 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 94
Metil-(5RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0435]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0436] (enantiomer 2) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (266 mg, 1,06 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodat cezijum karbonat (199 mg, 0,61 mmol) i mešano je 2 sata na 60 °C. Zatim je reakciona smeša ohlađena na sobnu temperaturu i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 181 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 95
Metil-(5RS)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0437]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0438] (enantiomer 2) (164 mg, 829 µmol) ubačen je u acetonitril (4,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (594 mg, 1,82 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)-4-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (274 mg, čistoća 85%, 871 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, 5 h na 85 °C a zatim ponovo preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 269 mg (čistoća 93%, 77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.42), 0.008 (0.46), 1.157 (1.75),
1.175 (3.60), 1.193 (1.82), 1.352 (0.61), 1.534 (0.40), 1.540 (0.41), 1.807 (0.47),
1.816 (0.49), 1.830 (0.41), 1.989 (6.73), 2.074 (0.58), 2.086 (0.74), 2.098 (0.77),
2.119 (0.46), 2.126 (0.53), 2.131 (0.46), 2.139 (0.47), 2.148 (0.52), 2.155 (0.46),
2.520 (0.80), 2.563 (0.87), 2.578 (0.72), 2.590 (0.72), 2.604 (0.62), 2.630 (0.57),
2.642 (1.01), 2.654 (0.60), 2.671 (0.40), 2.684 (0.45), 3.688 (1.91), 3.704 (16.00),
3.936 (0.71), 4.003 (0.54), 4.021 (1.59), 4.039 (1.58), 4.057 (0.52), 4.628 (1.01),
4.637 (1.55), 4.643 (1.37), 4.652 (1.42), 5.074 (7.18), 7.727 (3.53), 7.832 (0.45),
8.858 (0.45), 8.910 (3.33).
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 96
Metil-(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0439]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0440] (enantiomer 2) (166 mg, 839 µmol) ubačen je u acetonitril (4,1 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (301 mg, 923 µmol) i 4-(hlormetil)-2-(trifluormetil)hinolin hidrohlorid (336 mg, čistoća 74%, 881 µmol) nakon 5 min mešanja. U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 111 mg (33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]<+>
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 97
Metil-(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0441]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0442] (enantiomer 2) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su nakon 5 min mešanja dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-5-(trifluormetil)piridin (245 mg, 1,06 mmol, CAS 175277-52-8). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 216 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 98
Metil-(5RS)-3-okso-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-yl)metil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0443]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0444] (enantiomer 2) (250 mg, 1,27 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (454 mg, 1,39 mmol) i 2-(brommetil)-3,5,6-trimetilpirazin (286 mg, 1,33 mmol, CAS 79074-45-6) nakon 5 min mešanja. U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 261 mg (62% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 332 [M+H]<+>
Intermedijer 99
Metil-(5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0445]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0446] (enantiomer 2) (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (744 mg, 2,28 mmol) i 2-(hlormetil)-4-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (371 mg, 1,60 mmol, CAS 215867-87-1). U reakcionu smešu su nakon 4 sata mešanja na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 282 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.50), 1.811 (0.48), 1.821 (0.49),
1.835 (0.42), 2.073 (0.44), 2.079 (0.46), 2.090 (0.74), 2.103 (0.69), 2.110 (0.66),
2.118 (0.53), 2.126 (0.46), 2.133 (0.53), 2.138 (0.46), 2.146 (0.48), 2.154 (0.50),
2.162 (0.46), 2.519 (0.45), 2.570 (0.85), 2.585 (0.73), 2.597 (0.75), 2.611 (0.61),
2.636 (0.59), 2.647 (1.03), 2.660 (0.59), 2.690 (0.44), 3.706 (16.00), 4.636 (1.03),
4.646 (1.11), 4.652 (1.26), 4.661 (0.93), 5.075 (7.03), 7.551 (2.03), 7.713 (1.09),
7.724 (1.09), 8.822 (1.50), 8.834 (1.43).
[0447] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 100
Metil-(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0448]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0449] (enantiomer 2) (108 mg, 548 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (268 mg, 822 µmol) i 4-(hlormetil)-2-(trifluormetil)pirimidin hidrohlorid (134 mg, 575 µmol). U reakcionu smešu su, nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi i dodatnih 2 sata pod refluksom, dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,3 mg (25% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 358 [M+H]<+>
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 101
Metil-(5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0450]
Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0451] (enantiomer 2) (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 1-(brommetil)-2,4,5-trimetilbenzol (227 mg, 1,06 mmol, CAS 35509-98-9). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 198 mg (59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 330 [M+H]<+>
(5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Metil-(5S)-3-okso-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
Intermedijer 102
Metil-(5RS)-2-[4-(terc-butoksikarbonil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0452]
[0453] U metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (300 mg, 1,52 mmol) i cezijum karbonat (744 mg, 2,28 mmol) u 15 ml acetonitrila dodat je terc-butil-4-(brommetil)benzoat (433 mg, 1,60 mmol), zatim je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je filtriran, u filtrat su dodati etil acetat/voda, i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 676 mg (čistoća 88%, 101% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,78 min; MS (ESIpos): m/z = 388 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.08), 0.008 (1.04), 1.175 (0.71),
1.537 (16.00), 1.988 (1.29), 3.286 (1.03), 3.709 (5.39), 4.915 (1.64), 7.323 (0.99),
7.344 (1.09), 7.857 (1.29), 7.878 (1.18).
Intermedijer 103
Terc-butil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0454]
[0455] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (5,00 g, 20,9 mmol) i cezijum karbonat (10,2 g, 31,3 mmol) u 180 ml acetonitrila dodat je 1-(brommetil)-4-metilbenzol (4,06 g, 21,9 mmol), zatim je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je filtriran, filtrat je u velikoj meri uparen na rotacionom uparivaču, ostatak je prenet u smešu etil acetat/voda i ekstrahovan je. Pri tome su radi boljeg razdvajanja faza dodati zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida i malo metanola. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 7,14 g (čistoća 94%, 94% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 6): Rt= 1,80 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.396 (16.00), 1.402 (2.28), 2.270 (4.79), 4.771 (2.95), 7.129 (7.75).
Intermedijer 104
Terc-butil-(5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0456]
[0457] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (500 mg, 2,09 mmol) i cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) u 30 ml acetonitrila dodat je 1-[(1RS)-1-brometil]-4-hlorbenzol (racemat) (550 mg, 2,51 mmol), zatim je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je filtriran, filtrat je u velikoj meri uparen na rotacionom uparivaču, ostatak je prenet u smešu etil acetat/voda i ekstrahovan je. Pri tome su radi boljeg razdvajanja faza dodati zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida i malo metanola. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 755 mg (čistoća 87%, 83% od teor.) naslovnog jedinjenja kao dijastereomerna smeša, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 8): Rt= 3,28 min; MS (ESIpos): m/z = 378 [M+H]<+>; Rt= 3.33 min; MS (ESIpos): m/z = 378 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.98), 0.008 (1.51), 1.157 (0.78),
1.175 (1.54), 1.192 (0.85), 1.329 (15.89), 1.342 (1.34), 1.405 (16.00), 1.416 (1.42),
1.438 (1.47), 1.597 (2.79), 1.603 (2.55), 1.614 (2.71), 1.620 (2.46), 1.988 (2.92),
2.063 (1.04), 2.661 (0.78), 3.287 (1.01), 4.020 (0.72), 4.038 (0.70), 4.403 (0.81),
4.418 (0.94), 7.323 (1.58), 7.344 (3.21), 7.378 (2.24), 7.385 (2.41), 7.399 (1.19),
7.406 (1.69).
Intermedijer 105
Terc-butil-(5R,S)-3-okso-2-(4-sulfamoilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0458]
[0459] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (500 mg, 2,09 mmol) u 10 ml acetonitrila dodati su cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) i 4-(brommetil)benzolsulfonamid (627 mg, 2,51 mmol), zatim je reakciona smeša dva puta mešana preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, u smešu je dodata voda i smeša je dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Preostali ostatak je razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: RP, Chromatorex C18, 250x40 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 10% B, 5 min 10% B, 27 min 98% B, 35 min 98% B, 35,01 min 10% B, 38 min 10%B. Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. Detekcija: 210 nm) dobijeno je 755 mg (čistoća 87%, 83% od teor.). Pomoću filtracije frakcija proizvoda, dobijeno je 37 mg (4,3% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 6): Rt= 1,35 min; MS (ESlneg): m/z = 407 [M-H]-
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.404 (16.00), 2.072 (1.17), 4.451 (0.63),
4.920 (2.40), 7.331 (2.07), 7.401 (1.29), 7.422 (1.42), 7.772 (1.69), 7.793 (1.46).
Intermedijer 106
Terc-butil-(5RS)-2-[4-(metilsulfanil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0460]
[0461] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (500 mg, 2,09 mmol) i cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) u 18 ml acetonitrila dodat je 1-(brommetil)-4-(metilsulfanil)benzol (476 mg, 2,19 mmol), zatim je reakciona smeša mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je filtriran, u filtrat su dodati etil acetat/voda, i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 776 mg (čistoća 92%, 91% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,88 min; MS (ESIpos): m/z = 376 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.395 (16.00), 1.403 (1.34), 1.988 (0.68),
2.452 (7.33), 4.783 (2.62), 7.181 (0.76), 7.198 (1.88), 7.221 (2.16), 7.238 (0.85).
Intermedijer 107
Terc-butil-(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0462]
[0463] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (1,00 g, 4,18 mmol) i cezijum karbonat (2,04 g, 6,27 mmol) u 25 ml acetonitrila dodat je 2-hlor-5-(hlormetil)piridin (711 mg, 4,39 mmol), zatim je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je prebačena u vodu, i smeša je dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 1,48 g (čistoća 89%, 87% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.369 (0.99), 1.387 (16.00), 1.405 (3.22),
1.988 (0.89), 2.060 (0.76), 2.496 (4.74), 2.501 (6.51), 2.505 (5.26), 4.443 (0.68),
4.910 (2.74), 7.510 (0.80), 7.530 (0.98), 8.313 (0.82), 8.319 (0.82).
Intermedijer 108
Terc-butil-(5RS)-2-[(6-cijanpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0464]
[0465] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 836 µmοl) i cezijum karbonat (409 mg, 1,25 mmol) u 8,0 ml acetonitrila dodat je 5-(brommetil)piridin-2-karbonitril (173 mg, 878 µmοl), zatim je reakciona smeša mešana prvo 2 h, pa preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim je još jednom dodat 5-(brommetil)piridin-2-karbonitril (32,9 mg, 167 µmοl) (kontrola konverzije putem HPLC). Radi obrade, nakon dodatnih 2 h mešanja na sobnoj temperaturi, postojeći talog je filtriran, u filtrat su dodati etil acetat/voda, i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 303 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 356 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.79), 0.008 (1.80), 1.175 (0.81),
1.394 (16.00), 1.406 (1.87), 1.988 (1.44), 3.287 (1.33), 4.459 (0.60), 5.033 (2.16),
8.034 (0.73), 8.037 (0.79).
Intermedijer 109
Terc-butil-(5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0466]
[0467] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 836 µmοl) i cezijum karbonat (409 mg, 1,25 mmol) u 8,0 ml acetonitrila dodat je 4-(brommetil)-1-hlor-2-(trifluormetil)benzol (274 mg, 1,00 mmol), zatim je reakciona smeša mešana prvo 4 h, pa preko noći na sobnoj temperaturi (kontrola konverzije putem HPLC). Radi obrade, postojeći talog je filtriran, u filtrat su dodati etil acetat/voda, i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 323 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,12 min; MS (ESIpos): m/z = 376 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.377 (16.00), 4.946 (1.13), 4.962 (1.09).
Intermedijer 110
Terc-butil-(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0468]
[0469] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 836 µmοl) i cezijum karbonat (409 mg, 1,25 mmol) u 8,0 ml acetonitrila dodat je 1-(brommetil)-3-hlorbenzol (130 µl, 1,0 mmol), zatim je reakciona smeša mešana prvo 4 h, pa preko noći na sobnoj temperaturi (kontrola konverzije putem HPLC). Radi obrade, postojeći talog je filtriran, u filtrat su dodati etil acetat/voda, i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 284 mg (čistoća 84%, 78% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,91 min; MS (ESIpos): m/z = 308 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.395 (16.00), 1.406 (0.97), 1.988 (0.71), 4.856 (1.40), 4.862 (1.37), 7.360 (1.24), 7.379 (0.68).
Intermedijer 111
Terc-butil-(5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0470]
[0471] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (200 mg, 836 µmοl) i cezijum karbonat (409 mg, 1,25 mmol) u 8,0 ml acetonitrila dodat je 4-(brommetil)-1,2-dihlorbenzol (241 mg, 1,00 mmol), zatim je reakciona smeša mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je filtriran, u filtrat su dodati etil acetat/voda, i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 330 mg (čistoća 78%, 77% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.392 (16.00), 4.867 (1.86), 7.503 (0.82), 7.508 (0.81), 7.610 (1.04), 7.631 (0.95).
Intermedijer 112
Metil-(5RS)-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0472]
Metil-(5RS)-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0473] (racemat) (40,0 mg, 189 µmοl) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (67,9 mg, 208 µmοl) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (36,8 mg, 199 µmοl). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,0 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,59 min; MS (ESIpos): m/z = 316 [M+H]<+>
Intermedijer 113
Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0474]
[0475] Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (238 mg, 940 µmοl) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (612 mg, 1,88 mmol) i 5-(brommetil)-2-(trifluormetil)piridin (237 mg, 987 µmοl). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 383 mg (čistoća 92%, 91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M-tBu+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.52), 0.008 (1.72), 1.012 (2.06),
1.028 (2.14), 1.371 (0.43), 1.406 (16.00), 2.217 (0.48), 2.230 (0.62), 2.258 (0.49),
4.295 (0.45), 4.305 (0.44), 4.835 (0.45), 5.019 (2.25), 7.922 (1.31), 7.936 (0.83),
8.668 (0.83).
Intermedijer 114
Etil-(5RS,6RS)-6-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0476]
[0477] Etil-(5RS,6RS)-6-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 355 µmοl) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (174 mg, 533 µmοl) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (69,0 mg, 373 µmοl). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan.
Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 108 mg (čistoća 71%, 65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,94 min; MS (ESIpos): m/z = 330 [M+H]<+>
Intermedijer 115
Etil-(5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0478]
[0479] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 287 µmοl) ubačen je u acetonitril (3,5 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (140 mg, 430 µmοl) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (55,7 mg, 301 µmοl). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan.
Dobijeno je 102 mg (čistoća 81%, 75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
Intermedijer 116
Metil-(5RS)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0480]
[0481] Metil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (180 mg, 913 µmοl) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (312 mg, 959 µmοl) i 1-(2-brometil)-4-metilbenzol (200 mg, 1,00 mmol, CAS 6529-51-7). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 88,0 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 316 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.356 (0.66), 2.257 (8.94), 2.567 (0.54),
2.579 (0.46), 2.588 (0.48), 2.649 (0.66), 2.870 (0.95), 2.885 (1.81), 2.900 (1.02),
3.680 (12.74), 3.783 (0.71), 3.788 (0.75), 3.798 (1.46), 3.804 (1.47), 3.813 (0.68),
3.819 (0.66), 4.525 (0.70), 4.533 (0.78), 4.538 (0.88), 4.546 (0.69), 7.085 (16.00).
Intermedijer 117
Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0482]
[0483] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (250 mg, 1,04 mmol) i cezijum karbonat (511 mg, 1,57 mmol) u 15 ml acetonitrila dodat je 1-(brommetil)-4-(trifluormetil)cikloheksan (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (307 mg, 1,25 mmol), zatim je reakciona smeša mešana preko noći, pa dodatnih 24 h na sobnoj temperaturi. Radi dalje konverzije još dva puta su dodati 1-(brommetil)-4-(trifluormetil)cikloheksan (po 128 mg, 522 µmοl) i cezijum karbonat (po 272 mg, 836 µmοl), i mešano je dodatno po 24 h (kontrola konverzije putem HPLC). Radi obrade, smeša je koncentrovana, ostatak je prenet u smešu etil acetat/voda i ekstrahovan. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Dobijeno je 466 mg (čistoća 81%, 90% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 404 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.25), 1.395 (16.00), 1.406 (2.62),
1.420 (1.08), 1.499 (1.33), 1.508 (0.84), 1.522 (0.93), 1.546 (0.75), 1.595 (0.83),
1.606 (1.20), 1.625 (1.14), 1.643 (1.63), 3.287 (0.76), 3.563 (2.36), 3.581 (2.34).
Intermedijer 118
Terc-butil-(5RS)-2-[(4,4-difluorcikloheksil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat)
[0484]
[0485] U terc-butil-(5RS)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (67,4 mg, 282 µmοl) i cezijum karbonat (138 mg, 422 µmοl) u 4,0 ml acetonitrila dodat je 4-(brommetil)-1,1-difluorcikloheksan (72,0 mg, 338 µmοl), zatim je reakciona smeša mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je filtriran, filtrat je uparen, ostatak je prenet u smešu etil acetat/voda i ekstrahovan je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i osušene. Ostatak je razdvojen pomoću preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Prečišćavanjem frakcija koje sadrže proizvod, nakon uklanjanja rastvarača pod vakuumom dobijen je 41,0 mg (39% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 6): Rt= 1,76 min; MS (ESIpos): m/z = 372 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.396 (16.00), 2.072 (2.01), 3.528 (1.35), 3.545 (1.33), 4.399 (0.62).
Intermedijer 119
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer)
[0486]
[0487] Metil-(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (430 mg, 1,39 mmol) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je litijum hidroksid (167 mg, 6,96 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 185 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 295 [M+H]<+>
Intermedijer 120
(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer)
[0488]
[0489] Metil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (441 mg, 1,29 mmol) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je litijum hidroksid (154 mg, 6,44 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 376 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 329 [M+H]<+>
Intermedijer 121
(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer)
[0490]
[0491] Metil-(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (280 mg, 975 µmοl) ubačen je u THF (4,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (117 mg, 4,87 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 251 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 274 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.73), 1.157 (0.99), 1.174 (2.01),
1.192 (1.01), 1.988 (3.62), 2.274 (10.45), 2.423 (0.43), 2.430 (0.52), 2.439 (0.46),
2.446 (0.46), 2.455 (0.52), 2.463 (0.55), 2.708 (1.26), 2.720 (0.84), 2.730 (2.22),
2.745 (1.81), 2.822 (0.50), 2.841 (0.44), 2.853 (0.62), 2.876 (0.50), 4.020 (0.87),
4.038 (0.87), 4.603 (1.09), 4.610 (1.19), 4.625 (1.25), 4.633 (1.04), 4.708 (0.51),
4.747 (2.97), 4.761 (2.99), 4.800 (0.51), 7.140 (16.00), 13.346 (0.50).
Intermedijer 122
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer)
[0492]
[0493] Metil-(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (460 mg, 1,41 mmol) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je litijum hidroksid (169 mg, 7,06 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 281 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 312 [M+H]<+>
Intermedijer 123
(5S)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer)
[0494]
[0495] Metil-(5S)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (250 mg, 810 µmοl) ubačen je u THF (7,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (97,0 mg, 4,05 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 230 mg (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,43 min; MS (ESIpos): m/z = 295 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), 0.145 (0.82), 2.371 (1.71),
2.715 (1.98), 2.758 (4.35), 2.781 (8.27), 2.795 (7.03), 2.838 (1.67), 2.861 (2.25),
2.891 (2.91), 2.915 (1.98), 4.532 (0.78), 4.662 (3.88), 4.670 (4.35), 4.685 (4.43),
4.692 (3.88), 4.887 (0.78), 4.931 (16.00), 7.253 (5.63), 7.266 (5.79), 7.340 (10.10),
8.377 (7.65), 8.389 (7.61), 11.255 (1.01).
Intermedijer 124
(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer)
[0496]
[0497] Metil-(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (150 mg, 440 µmοl) ubačen je u THF (4,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (52,6 mg, 2,20 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 129 mg (90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
Intermedijer 125
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0498]
Varijanta a)
[0499] Metil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (854 mg, čistoća 95%, 2,69 mmol) dodat je u 20 ml smeše THF/voda (3:1), dodat je litijum hidroksid (322 mg, 13,5 mmol) i reakciona smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je razblažena vodom, zakiseljena pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, dodat je dihlormetan i mala količina zasićenog rastvora natrijum hlorida, i smeša je ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Tako je dobijeno 436 mg (56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.075 (0.98), 2.084 (0.97), 2.092 (0.92), 2.272 (9.23), 4.458 (1.29), 4.770 (4.43), 7.128 (16.00).
Varijanta b)
[0500] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (7,14 g, 20,8 mmol) u 100 ml dihlormetana dodato je 10 ml (130 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Nakon dodatka još 5 ml (65 mmol) trifluorsirćetne kiseline i dodatnog dana mešanja na sobnoj temperaturi, u smešu je uz snažno mešanje i hlađenje u ledenom kupatilu dodato 14 ml 3 N NaOH, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Tako dobijeni proizvod (6,63 g, >100% od teor.) korišćen je bez daljeg prečišćavanja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.24), 0.008 (1.06), 1.397 (0.62), 1.534 (0.77), 2.272 (8.87), 4.459 (1.36), 4.770 (4.02), 7.128 (16.00).
Intermedijer 126
(5RS)-2-[4-(terc-butoksikarbonil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0501]
[0502] Metil-(5RS)-2-[4-(terc-butoksikarbonil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (676 mg, čistoća 87%, 1,52 mmol) dodat je u 15 ml smeše THF/voda, dodat je litijum hidroksid (182 mg, 7,59 mmol) i reakciona smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je pomoću 1 N hlorovodonične kiseline podešena na pH 6, dodat je dihlormetan i ekstrahovana je. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Tako je dobijena frakcija proizvoda od 99 mg (čistoća 71%, 12% od teor.).
[0503] Vodena faza koja sadrži proizvod pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline podešena je na pH 3, dodat je etil acetat i ukupno je tri puta ekstrahovana. Spojene faze etil acetata su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Tako je dobijeno 147 mg (26% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESlneg): m/z = 372 [M-H]-
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.536 (16.00), 4.911 (2.17), 7.328 (1.14), 7.349 (1.23), 7.846 (1.40), 7.867 (1.28).
Intermedijer 127
(5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0504]
[0505] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (755 mg, 2,00 mmol) u 10 ml dihlormetana dodato je 1,2 ml (16 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Nakon dodatka još 600 µl (7,8 mmol) trifluorsirćetne kiseline i dodatnih 5 h mešanja na sobnoj temperaturi, pH smeše je uz snažno mešanje i hlađenje u ledenom kupatilu podešen na 3 pomoću 3 N NaOH, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 392 mg (čistoća 79%, 48% od teor.) naslovnog jedinjenja kao smeša dijastereomera.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 322 [M+H]<+>; Rt= 1.36 min; MS (ESIpos): m/z = 322 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.83), -0.008 (16.00), 0.008
(13.62), 0.146 (1.78), 1.110 (3.38), 1.288 (4.30), 1.304 (4.30), 1.329 (5.07), 1.406
(11.38), 1.595 (12.57), 1.607 (12.53), 1.613 (13.39), 1.625 (11.70), 2.076 (5.07),
2.580 (3.20), 2.664 (3.47), 2.710 (2.42), 3.286 (7.04), 4.426 (3.15), 4.450 (3.43),
5.326 (3.06), 5.344 (3.29), 7.309 (5.62), 7.319 (4.94), 7.325 (4.75), 7.331 (10.88),
7.340 (10.10), 7.346 (4.25), 7.353 (4.30), 7.355 (14.45), 7.375 (11.93), 7.379 (15.41), 7.385 (4.75), 7.396 (6.86), 7.401 (7.54), 7.484 (4.66).
Intermedijer 128
(5RS)-3-okso-2-(4-sulfamoilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0506]
[0507] U rastvor terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(4-sulfamoilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (35,0 mg, 85,7 µmοl) u 5,0 ml dihlormetana dodato je 500 µl (6,5 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko vikenda mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana pod vakuumom i osušena. Tako je dobijeno 30 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je bez dodatnog prečišćavanja dalje korišćeno.
LC-MS (metoda 6): Rt= 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
Intermedijer 129
(5RS)-2-[4-(metilsulfanil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0508]
[0509] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-[4-(metilsulfanil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (160 mg, čistoća 89%, 379 µmοl) u 5,0 ml dihlormetana dodato je 500 µl (6,5 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko vikenda mešana na sobnoj temperaturi. Radi dalje reakcije, dodato je 100 µl (1,3 mmol) trifluorsirćetne kiseline i mešano je otprilike još jedan dan na sobnoj temperaturi (kontrola konverzije putem HPLC). Radi obrade, pH smeše je uz snažno mešanje i hlađenje u ledenom kupatilu podešen na 3 pomoću 3 N NaOH, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 137 mg (109% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 320 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.62), 0.008 (2.24), 1.396 (0.96),
2.452 (16.00), 4.461 (1.33), 4.782 (4.61), 5.754 (0.68), 7.174 (1.26), 7.196 (3.98),
7.215 (4.58), 7.221 (1.06), 7.237 (1.41).
Intermedijer 130
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0510]
[0511] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (1,84 g, 5,04 mmol) u 25 ml dihlormetana dodato je 5,0 ml (65 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, pH smeše je uz snažno mešanje i hlađenje u ledenom kupatilu podešen na 3 pomoću 3 N NaOH, smeša je razblažena vodom i dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 1,59 g (čistoća 92%, 94% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.94), 0.008 (1.83), 1.157 (3.09),
1.175 (6.27), 1.193 (3.15), 1.387 (3.56), 1.406 (0.95), 1.506 (0.97), 1.519 (1.00),
1.534 (0.85), 1.795 (0.84), 1.809 (1.23), 1.820 (1.25), 1.830 (1.04), 1.841 (1.01),
1.909 (1.25), 1.988 (11.31), 2.069 (1.57), 2.078 (2.11), 2.084 (2.94), 2.090 (3.28),
2.101 (3.07), 2.113 (1.63), 2.568 (1.70), 2.582 (1.28), 2.614 (1.39), 2.627 (2.10),
2.636 (1.49), 2.656 (0.78), 2.666 (1.09), 4.003 (1.24), 4.021 (3.03), 4.038 (3.02),
4.056 (1.29), 4.218 (0.77), 4.462 (2.60), 4.474 (4.68), 4.487 (2.49), 4.828 (1.17),
4.910 (16.00), 5.093 (0.74), 7.500 (4.57), 7.521 (5.54), 7.703 (3.17), 7.709 (3.32),
7.724 (2.78), 7.730 (2.79), 8.310 (4.06), 8.316 (3.98).
Intermedijer 131
(5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0512]
[0513] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (268 mg, čistoća 82%, 602 µmοl) u 3,0 ml dihlormetana dodato je 600 µl (7,8 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana pod vakuumom i osušena. Tako je dobijeno 220 mg (čistoća 80%, 95% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je bez dodatnog prečišćavanja dalje korišćeno.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 132
(5RS)-2-[(6-cijanpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0514]
[0515] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-[(6-cijanpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (303 mg, 853 µmol) u 8,0 ml dihlormetana dodato je 1,0 ml (13 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi dalje reakcije, dodato je 200 µl (2,6 mmol) i 100 µl (1,3 mmol) trifluorsirćetne kiseline i mešano još 3,5 h odnosno 2,5 h. (provera konverzije pomoću HPLC i LC/MS). Radi obrade, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 191 mg (čistoća 67%, 50% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 300 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.84), -0.008 (6.61), 0.008 (6.11),
0.146 (0.76), 1.394 (4.32), 1.400 (16.00), 2.094 (1.18), 2.366 (0.89), 2.665 (0.82),
2.710 (0.84), 4.489 (1.34), 4.985 (1.87), 5.034 (4.55), 5.754 (1.79), 7.851 (0.71),
7.857 (0.76), 7.871 (1.00), 7.876 (0.95), 7.978 (0.74), 8.000 (1.24), 8.023 (1.58),
8.043 (1.26), 8.633 (1.26), 8.638 (1.26).
Intermedijer 133
(5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0516]
[0517] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (332 mg, čistoća 97%, 746 µmοl) u 7,0 ml dihlormetana dodato je 700 µl (9,1 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je 4 h mešana na sobnoj temperaturi. Radi dalje reakcije, još jednom je dodato 200 µl (2,6 mmol) trifluorsirćetne kiseline i dalje mešano preko noći. Radi obrade, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 273 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 376 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.97), -0.008 (8.63), 0.008 (7.66),
0.146 (0.97), 1.034 (1.14), 1.050 (1.12), 1.377 (3.67), 1.506 (1.07), 1.519 (1.07),
1.534 (0.97), 1.800 (0.90), 1.814 (1.34), 1.824 (1.34), 1.835 (1.09), 1.846 (1.14),
2.076 (1.56), 2.084 (2.31), 2.098 (3.87), 2.108 (3.57), 2.120 (1.92), 2.366 (0.73),
2.519 (2.21), 2.561 (2.04), 2.574 (2.04), 2.588 (1.53), 2.620 (1.53), 2.633 (2.36),
2.643 (1.68), 2.662 (0.97), 2.675 (1.34), 2.685 (0.71), 2.710 (0.75), 3.168 (1.00),
3.508 (2.38), 4.477 (2.63), 4.488 (4.98), 4.501 (2.58), 4.956 (16.00), 7.523 (2.31),
7.529 (2.38), 7.544 (2.99), 7.549 (3.06), 7.706 (5.16), 7.727 (4.21), 7.748 (5.47),
7.754 (5.23), 13.264 (0.73).
Intermedijer 134
(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0518]
[0519] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (284 mg, čistoća 84%, 656 µmοl) u 6,0 ml dihlormetana dodato je 600 µl (7,8 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Radi dalje reakcije, još jednom je dodato 200 µl (2,6 mmol) trifluorsirćetne kiseline i dalje mešano preko noći. Radi obrade, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 224 mg (čistoća 83%, 92% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 308 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.79), -0.008 (16.00), 0.008
(14.92), 0.146 (1.88), 1.147 (1.13), 1.396 (0.56), 2.091 (0.71), 2.323 (0.56), 2.327
(0.89), 2.332 (0.66), 2.366 (1.46), 2.665 (0.80), 2.669 (1.04), 2.674 (0.94), 2.709
(1.55), 3.168 (1.55), 4.486 (0.89), 4.859 (3.48), 7.197 (0.56), 7.214 (0.71), 7.288
(0.99), 7.351 (0.85), 7.356 (2.02), 7.374 (0.89).
Alternativna sinteza:
[0520] Metil-(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (63,0 mg, 196 µmοl) ubačen je u THF (2,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (23,4 mg, 979 µmοl) rastvoren u vodi (2,5 ml). Reakciona smeša je mešana 65 h na sobnoj temperaturi pa su dodati voda i 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Organska faza je razdvojena i vodena faza je više puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 55,0 mg (91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 308 [M+H]<+>
Intermedijer 135
(5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0521]
[0522] U rastvor terc-butil-(5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (330 mg, čistoća 78%, 646 µmοl) u 8,0 ml dihlormetana dodato je 900 µl (12 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi dalje reakcije, još jednom je dodato 100 µl (1,3 mmol) trifluorsirćetne kiseline i dalje mešano 5 h. Radi obrade, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 282 mg (čistoća 80%, >100%) naslovnog jedinjenja, koje je tako dalje korišćeno.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.99), 0.008 (0.93), 1.365 (0.65),
1.392 (6.32), 1.510 (0.93), 1.523 (0.96), 1.535 (1.07), 1.538 (0.85), 1.801 (0.81),
1.811 (1.13), 1.815 (1.18), 1.825 (1.21), 1.836 (1.01), 1.847 (1.01), 2.077 (1.57),
2.086 (2.08), 2.092 (2.91), 2.099 (3.24), 2.108 (3.04), 2.121 (1.63), 2.521 (1.06),
2.563 (1.64), 2.576 (1.70), 2.591 (1.29), 2.621 (1.34), 2.631 (1.97), 2.635 (2.09),
2.644 (1.52), 2.664 (0.79), 2.674 (1.03), 4.475 (2.28), 4.487 (4.46), 4.499 (2.26),
4.706 (0.69), 4.868 (16.00), 5.423 (1.28), 7.221 (2.81), 7.226 (2.94), 7.242 (3.18),
7.247 (3.31), 7.486 (4.76), 7.491 (4.55), 7.603 (7.05), 7.623 (6.45), 7.631 (0.66).
Intermedijer 136
(5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat)
[0523]
[0524] Terc-butil-(5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (445 mg, 1,12 mmol) rastvoren je u 1,4-dioksanu (2,0 ml) i dodata je hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (2,8 ml, 4,0 M, 11 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi, a zatim je ponovo dodata hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (2,8 ml, 4,0 M, 11 mmol). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 493 mg (čistoća 79%, 92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.80), 0.008 (0.72), 1.175 (0.65),
1.192 (0.78), 1.235 (2.38), 1.395 (4.05), 1.406 (0.88), 1.477 (0.72), 1.496 (1.12),
1.512 (1.51), 1.525 (1.58), 1.540 (1.34), 1.553 (0.93), 1.572 (0.46), 1.808 (1.37),
1.820 (1.91), 1.831 (1.83), 1.842 (1.54), 1.853 (1.50), 1.909 (0.89), 1.988 (0.76),
2.086 (2.68), 2.100 (4.49), 2.107 (4.86), 2.116 (4.43), 2.128 (2.41), 2.560 (3.08),
2.574 (2.23), 2.587 (2.34), 2.602 (1.96), 2.635 (1.94), 2.646 (3.14), 2.656 (2.27),
2.676 (1.29), 2.686 (1.41), 2.698 (0.88), 3.365 (2.96), 3.451 (0.75), 3.463 (0.96),
3.475 (1.00), 3.492 (0.94), 3.504 (0.77), 3.515 (0.42), 3.656 (0.43), 3.667 (0.74),
3.679 (0.85), 3.690 (0.41), 3.699 (0.83), 3.713 (0.61), 4.377 (0.62), 4.490 (3.41),
4.503 (9.30), 4.514 (3.22), 4.768 (0.61), 4.845 (0.78), 4.886 (13.41), 4.931 (0.74),
7.279 (15.72), 7.284 (16.00), 7.299 (0.60), 7.303 (0.53), 7.347 (2.08), 7.352 (2.18),
7.414 (0.50), 7.419 (0.52), 7.451 (1.08), 7.533 (3.64), 7.538 (6.48), 7.543 (3.88),
11.356 (0.56), 13.281 (0.55).
Intermedijer 137
(5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0525]
[0526] Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (364 mg, 913 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,1 ml, 14 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 465 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 138
(5RS)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat)
[0527]
[0528] Terc-butil-(5S,R)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (451 mg, 1,23 mmol) rastvoren je u 1,4-dioksanu (10 ml, 120 mmol) i dodata je hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (3,1 ml, 4,0 M, 12 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 65 h na sobnoj temperaturi i preko noći na 50 °C. Ponovo je dodata hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (3,1 ml, 4,0 M, 12 mmol) i mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 420 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0529]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.02), 0.008 (2.73), 1.393 (1.69), 1.810 (0.44), 2.098 (1.23), 2.107 (1.13), 2.327 (0.53), 2.562 (0.67), 2.575 (0.60), 2.589 (0.48), 2.621 (0.48), 2.631 (0.77), 2.642 (0.55), 2.670 (0.77), 3.568 (16.00), 4.472 (0.85), 4.484 (1.55), 4.496 (0.75), 4.849 (4.79), 7.101 (0.55), 7.236 (0.48), 7.265 (0.57), 7.285 (0.50), 7.370 (0.55), 7.392 (1.04), 7.398 (0.62), 7.413 (0.59), 7.419 (1.09), 7.440 (0.52).
Intermedijer 139
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat)
[0530]
[0531] Terc-butil-(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (391 mg, 1,02 mmol) rastvoren je u 1,4-dioksanu (10 ml, 120 mmol) i dodata je hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (2,6 ml, 4,0 M, 10 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 65 h na sobnoj temperaturi i 3 h na 50 °C. Ponovo je dodata hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (1,3 ml, 4,0 M, 5 mmol) i mešana preko noći na 50 °C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 350 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0532]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.11), 0.008 (1.07), 1.391 (4.37), 1.476 (0.51), 1.492 (0.77), 1.510 (1.08), 1.523 (1.11), 1.538 (0.96), 1.551 (0.66), 1.799 (0.95), 1.812 (1.39), 1.822 (1.40), 1.833 (1.20), 1.844 (1.17), 1.909 (1.18), 2.090 (3.55), 2.097 (3.78), 2.106 (3.58), 2.118 (1.94), 2.519 (1.90), 2.561 (1.92), 2.574 (1.91), 2.589 (1.51), 2.620 (1.53), 2.633 (2.43), 2.643 (1.77), 2.662 (0.94), 2.672 (1.24), 2.685 (0.72), 3.390 (0.80), 3.484 (0.41), 3.492 (0.65), 3.502 (0.60), 3.593 (0.97), 3.671 (0.58), 3.681 (0.64), 3.700 (0.63), 3.709 (0.46), 3.733 (0.41), 3.831 (0.41), 3.840 (0.70), 3.860 (0.72), 4.020 (0.56), 4.189 (0.69), 4.210 (0.69), 4.323 (0.51), 4.329 (0.91), 4.472 (2.61), 4.484 (4.91), 4.496 (2.54), 4.767 (0.52), 4.852 (16.00), 6.348 (0.77), 7.239 (1.31), 7.245 (1.45), 7.251 (1.51), 7.256 (1.74), 7.260 (2.09), 7.266 (2.12), 7.272 (1.95), 7.278 (1.93), 7.368 (3.87), 7.377 (0.46), 7.391 (4.96), 7.413 (2.96), 7.431 (2.61), 7.436 (2.49), 7.448 (2.69), 7.454 (2.57), 8.133 (0.53).
Intermedijer 140
(5RS)-2-[(2-metoksipiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat)
[0533]
[0534] Terc-butil-(5RS)-2-[(2-metoksipiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (144 mg, 400 µmοl) rastvoren je u 1,4-dioksanu (4,0 ml, 47 mmol) i dodata je hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4dioksanu (1000 µl, 4,0 M, 4,0 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 65 h na sobnoj temperaturi i preko noći na 50 °C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 165 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
[0535] 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): d [ppm] = 1.46 - 1.60 (m, 2H), 1.79 - 1.89 (m, 2H), 2.05 - 2.15 (m, 2H), 3.83 (s, 3H) 4.49 (d, 1H), 4.85 (d, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.82 (d, 1H), 8.10 (d, 1H).
[0536] 1,53 (s, 2H), 1,83 (s, 2H), 2,11 (br s, 5H), 2,63-2,71 (m, 5H), 3,83 (s, 3H), 4,49 (d, 2H), 4,68 (s, 1H), 4,66 - 4,70 (m, 1H), 4,85 (d, 2H), 6,04 (s, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,82 (d, 1H), 7,32 (s, 1H), 8,10 (d, 1H).
Intermedijer 141
(5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0537]
[0538] Terc-butil-(5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (365 mg, 925 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (20 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (710 µl, 9,3 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 48 h na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 454 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 338 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.90), 0.008 (0.79), 1.111 (1.03),
1.157 (0.90), 1.175 (1.82), 1.193 (0.92), 1.228 (0.41), 1.391 (1.94), 1.474 (0.43),
1.488 (0.67), 1.508 (0.88), 1.522 (0.94), 1.535 (2.44), 1.550 (0.56), 1.790 (0.81),
1.802 (1.21), 1.813 (1.21), 1.824 (1.06), 1.835 (1.01), 1.848 (0.68), 1.988 (3.28),
2.067 (1.72), 2.080 (3.10), 2.087 (3.19), 2.096 (2.97), 2.108 (1.57), 2.520 (1.36),
2.563 (1.66), 2.577 (1.26), 2.609 (1.33), 2.620 (2.11), 2.631 (1.48), 2.650 (0.75),
2.661 (1.03), 2.673 (0.66), 2.690 (0.53), 2.731 (2.17), 2.890 (2.79), 4.021 (0.77),
4.039 (0.76), 4.458 (2.30), 4.470 (4.46), 4.482 (2.24), 4.771 (16.00), 5.753 (1.45),
7.094 (4.56), 7.115 (6.97), 7.185 (3.46), 7.190 (3.61), 7.206 (2.20), 7.211 (2.39),
7.298 (5.41), 7.303 (4.82).
Intermedijer 142
(5RS)-2-(3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat)
[0539]
[0540] Terc-butil-(5RS)-2-(3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (150 mg, 432 µmοl) rastvoren je u 1,4-dioksanu (4,3 ml, 51 mmol) i dodata je hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (1,1 ml, 4,0 M, 4,3 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 65 h na sobnoj temperaturi. Ponovo je dodata hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (1,1 ml, 4,0 M, 4,3 mmol) i mešana preko noći na 50 °C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 165 mg (čistoća 89%, >100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 292 [M+H]<+>
Intermedijer 143
(5RS)-2-(3-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0541]
[0542] Terc-butil-(5RS)-2-(3-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (340 mg, 947 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (20 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (730 µl, 9,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 435 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 304 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.85), 0.008 (1.73), 1.111 (1.34),
1.399 (3.15), 1.482 (0.86), 1.515 (1.77), 1.534 (5.41), 1.544 (1.65), 1.557 (1.10),
1.576 (0.53), 1.797 (1.69), 1.810 (2.41), 1.820 (2.43), 1.831 (2.06), 1.843 (1.97),
1.855 (1.32), 1.988 (0.50), 2.047 (0.43), 2.075 (3.45), 2.088 (6.07), 2.095 (6.31),
2.105 (5.87), 2.117 (3.12), 2.328 (0.42), 2.524 (1.98), 2.569 (3.23), 2.583 (2.50),
2.613 (2.67), 2.626 (4.07), 2.636 (2.95), 2.655 (1.45), 2.666 (2.17), 2.678 (1.24),
3.696 (0.64), 3.705 (0.58), 3.750 (0.42), 3.765 (1.85), 4.466 (4.47), 4.477 (8.57),
4.490 (4.32), 4.759 (1.51), 4.799 (16.00), 4.805 (15.56), 4.845 (1.43), 5.398 (0.68),
5.753 (4.67), 6.789 (14.05), 6.809 (6.64), 6.824 (4.19), 6.830 (3.47), 6.845 (4.90),
6.851 (4.14), 7.220 (6.34), 7.240 (8.92), 7.259 (4.69).
Intermedijer 144
(5RS)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0543]
[0544] Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (388 mg, 975 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (20 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (750 µl, 9,8 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (750 µl, 9,8 mmol). Nakon 2 h mešanja na 40 °C, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 534 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.110 (0.81), 1.385 (1.82), 1.535 (3.66),
1.815 (1.57), 2.100 (4.20), 2.328 (0.90), 2.562 (2.17), 2.575 (2.21), 2.590 (1.50),
2.634 (2.53), 2.674 (1.98), 4.482 (2.72), 4.493 (5.55), 4.506 (2.60), 4.958 (16.00),
7.525 (2.56), 7.544 (4.75), 7.569 (2.81), 7.588 (5.17), 7.615 (6.53), 7.649 (4.29),
7.668 (2.58).
Intermedijer 145
(5RS)-2-[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0545]
[0546] Terc-butil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (150 mg, 450 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (3,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (350 µl, 4,5 mmol). Reakciona smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi, i zatim je ponovo dodata trifluorsirćetna kiselina (350 µl, 4,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 170 mg (97% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,36 min; MS (ESIpos): m/z = 278 [M+H]<+>
Intermedijer 146
(5RS)-3-okso-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0547]
[0548] Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (280 mg, 730 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,0 ml, 26 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 320 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
Intermedijer 147
(5RS)-2-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0549]
[0550] Metil-(5RS)-2-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (412 mg, 1,41 mmol) ubačen je u THF (14 ml) i dodat je litijum hidroksid (169 mg, 7,05 mmol) rastvoren u vodi (4,0 ml). Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 136 mg (čistoća 83%, 29% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 279 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.157 (1.10), 1.174 (2.26), 1.181 (0.48),
1.192 (1.13), 1.356 (2.56), 1.405 (0.76), 1.499 (0.43), 1.513 (0.60), 1.526 (0.61),
1.541 (0.53), 1.797 (0.52), 1.809 (0.79), 1.820 (0.78), 1.831 (0.66), 1.842 (0.64),
1.908 (2.86), 1.988 (4.00), 2.083 (1.98), 2.089 (2.11), 2.099 (2.04), 2.111 (1.09),
2.201 (1.26), 2.369 (16.00), 2.561 (1.03), 2.573 (1.03), 2.587 (0.81), 2.617 (0.84),
2.629 (1.39), 2.639 (0.93), 2.659 (0.50), 2.670 (0.78), 4.020 (0.97), 4.038 (0.95),
4.426 (0.98), 4.441 (1.01), 4.450 (1.39), 4.462 (2.65), 4.474 (1.38), 4.807 (0.40),
4.847 (6.28), 4.852 (6.39), 4.892 (0.41), 6.069 (3.43), 6.180 (0.58).
Intermedijer 148
(5RS)-3-okso-2-(piridin-3-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0551]
[0552] Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(piridin-3-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (366 mg, 1,11 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,7 ml, 22 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 442 mg (čistoća 83%, 29% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 9): Rt= 3,31 min; MS (ESIpos): m/z = 275 [M+H]<+>
Intermedijer 149
(5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0553]
[0554] Terc-butil-(5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (390 mg, 1,02 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (8 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (3,3 ml, 43 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 445 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
Intermedijer 150
(5RS)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0555]
[0556] Terc-butil-(5RS)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (490 mg, 1,34 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (12 ml, 190 mmol) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 581 mg (čistoća 94%, 96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,50 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 151
(5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat)
[0557]
[0558] Terc-butil-(5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (414 mg, 1,12 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml, 160 mmol) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,7 ml, 22 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 5 sata na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 516 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 314 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.110 (1.14), 1.384 (7.34), 1.535 (2.17),
1.568 (1.23), 1.802 (2.23), 1.814 (2.29), 1.824 (1.91), 2.058 (3.54), 2.071 (5.97),
2.081 (5.66), 2.328 (1.63), 2.366 (0.97), 2.565 (2.91), 2.578 (2.97), 2.592 (2.34),
2.623 (2.46), 2.635 (3.91), 2.646 (2.66), 2.675 (2.77), 2.710 (1.09), 4.438 (5.80),
4.451 (9.29), 4.463 (5.60), 4.555 (2.31), 4.906 (1.54), 4.945 (15.09), 4.951 (16.00),
4.986 (2.40), 5.560 (1.09), 6.916 (7.37), 6.926 (10.03), 6.973 (13.74), 6.983 (9.74),
7.020 (0.63), 7.079 (0.63).
Intermedijer 152
(5RS)-2-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0559]
[0560] Metil-(5RS)-2-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (281 mg, 958 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (115 mg, 4,79 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 91,0 mg (čistoća 88%, 30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 280 [M+H]<+>
Intermedijer 153
(5RS)-2-(2-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0561]
[0562] Metil-(5RS)-2-(2-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (196 mg, 650 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (77,9 mg, 3,25 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 150 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M+H]<+>
Intermedijer 154
(5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0563]
[0564] Metil-(5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (569 mg, 1,52 mmol) ubačen je u THF (8,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (183 mg, 7,62 mmol) rastvoren u vodi.
Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 251 mg (čistoća 94%, 43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.89), 0.008 (2.76), 1.157 (2.61),
1.170 (1.52), 1.175 (5.50), 1.193 (2.73), 1.559 (1.10), 1.748 (1.40), 1.905 (1.45),
1.948 (1.17), 1.988 (10.96), 2.129 (1.67), 2.159 (1.21), 2.328 (0.45), 2.458 (0.96),
2.473 (1.31), 2.595 (2.13), 2.634 (1.08), 2.670 (0.46), 3.314 (0.58), 4.003 (0.74),
4.021 (2.44), 4.039 (2.45), 4.056 (0.80), 4.319 (2.46), 4.328 (2.44), 4.549 (0.88),
4.918 (16.00), 7.458 (2.32), 7.480 (3.39), 7.506 (3.05), 7.587 (1.95), 7.600 (2.29),
7.678 (3.14), 7.696 (3.13).
Intermedijer 155
(5RS)-2-[2,5-bis(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0565]
[0566] Metil-(5RS)-2-[2,5-bis(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (634 mg, 1,50 mmol) ubačen je u THF (8,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (179 mg, 7,48 mmol) rastvoren u vodi.
Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 242 mg (čistoća 91%, 36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 410 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.54), -0.008 (4.55), 0.008 (3.70),
0.146 (0.50), 1.170 (2.38), 1.234 (0.54), 1.573 (1.56), 1.755 (1.93), 1.949 (1.55),
1.988 (2.59), 2.153 (2.28), 2.188 (1.65), 2.328 (1.13), 2.367 (0.71), 2.611 (2.68),
2.666 (1.51), 2.710 (0.66), 3.313 (2.26), 3.405 (1.49), 4.038 (0.40), 4.324 (2.78),
4.746 (1.49), 4.911 (2.40), 5.082 (16.00), 7.649 (8.11), 7.912 (3.70), 7.932 (6.12),
8.013 (7.38), 8.033 (4.99), 8.065 (1.22), 8.098 (0.71).
Intermedijer 156
(5RS)-2-[(6-metilpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0567]
[0568] Metil-(5RS)-2-[(6-metilpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (231 mg, 764 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (91,5 mg, 3,82 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Vodena faza je koncentrovana i suspendovana u smeši tetrahidrofuran/etanol (1/1). Čvrsta supstanca je odvojena i filtrat je uparen do proizvoda. Dobijeno je 262 mg (> 100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,19 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.62), -0.008 (5.32), 0.008 (4.64),
0.146 (0.68), 1.038 (7.69), 1.055 (16.00), 1.072 (8.00), 1.356 (2.60), 1.743 (0.97),
1.760 (2.83), 1.776 (0.99), 2.090 (0.88), 2.328 (0.88), 2.366 (0.48), 2.561 (2.65),
2.620 (0.56), 2.670 (0.90), 2.710 (0.48), 3.413 (3.17), 3.431 (8.60), 3.448 (8.67),
3.466 (3.40), 3.585 (1.73), 3.601 (3.05), 3.618 (1.62), 4.465 (0.59), 4.475 (1.11),
4.936 (1.69), 8.492 (0.70).
Intermedijer 157
(5RS)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0569]
[0570] Metil-(5RS)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (202 mg, 636 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (76,1 mg, 3,18 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 45 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 305 [M]<+>
Intermedijer 158
(5RS)-2-[4-metoksi-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0571]
[0572] Metil-(5RS)-2-[4-metoksi-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (305 mg, 791 µmοl) ubačen je u THF (8,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (94,8 mg, 3,96 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 151 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 372 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.34), 0.008 (1.63), 1.157 (2.20),
1.175 (4.44), 1.192 (2.26), 1.529 (0.44), 1.785 (0.53), 1.797 (0.50), 1.807 (0.43),
1.819 (0.43), 1.988 (8.02), 2.045 (0.43), 2.079 (1.23), 2.088 (1.19), 2.562 (0.66),
2.598 (0.58), 2.610 (0.95), 2.620 (0.64), 2.650 (0.43), 3.869 (16.00), 4.002 (0.65),
4.020 (1.93), 4.038 (1.92), 4.056 (0.63), 4.419 (0.71), 4.429 (0.98), 4.835 (7.06),
7.223 (1.56), 7.244 (1.81), 7.498 (1.32), 7.520 (4.16).
Intermedijer 159
(5RS)-2-[(1-metil-1H-benzimidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0573]
[0574] Metil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-benzimidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (137 mg, 401 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (48,1 mg, 2,01 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 120 mg (91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
Intermedijer 160
(5RS)-2-[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0575]
[0576] Metil-(5RS)-2-[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (54,0 mg, 177 µmοl) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (21,2 mg, 884 µmοl) rastvoren u vodi.
Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 80,0 mg (čistoća 60%, 93% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 9): Rt= 3,44 min; MS (ESIpos): m/z = 292 [M+H]<+>
Intermedijer 161
(5RS)-2-[(1-metil-1H-indazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0577]
[0578] Metil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-indazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (87,0 mg, čistoća 98%, 250 µmοl) ubačen je u THF (2,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (29,9 mg, 1,25 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 67,0 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.92), 0.008 (0.91), 1.157 (1.12),
1.175 (2.28), 1.192 (1.13), 1.796 (0.45), 1.807 (0.50), 1.908 (0.74), 1.988 (4.27),
2.082 (1.22), 2.327 (0.41), 2.523 (2.15), 2.565 (0.61), 2.596 (0.54), 2.608 (0.89),
2.619 (0.60), 2.648 (0.42), 2.669 (0.50), 4.002 (0.41), 4.021 (16.00), 4.038 (1.11),
4.457 (0.87), 4.468 (1.72), 4.481 (0.89), 4.916 (3.28), 4.921 (3.27), 7.294 (1.26),
7.298 (1.26), 7.316 (1.45), 7.320 (1.49), 7.580 (1.84), 7.608 (2.57), 8.004 (3.39),
13.222 (0.63).
Intermedijer 162
(5RS)-3-okso-2-({5-[3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oksadiazol-3-il}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0579]
[0580] Metil-(5RS)-3-okso-2-({5-[3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oksadiazol-3-il}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (640 mg, 1,51 mmol) ubačen je u THF (15 ml) i dodat je litijum hidroksid (181 mg, 7,56 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 588 mg (čistoća 88%, 84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 410 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.41), 0.008 (1.36), 1.094 (1.28),
1.157 (4.33), 1.175 (8.82), 1.193 (4.46), 1.519 (0.93), 1.533 (1.05), 1.546 (1.17),
1.556 (1.03), 1.570 (0.87), 1.582 (0.66), 1.803 (0.93), 1.814 (1.46), 1.825 (1.48),
1.836 (1.29), 1.847 (1.23), 1.861 (0.85), 1.909 (2.18), 1.989 (16.00), 2.084 (2.29),
2.096 (4.23), 2.107 (4.15), 2.120 (2.23), 2.520 (2.12), 2.562 (2.37), 2.577 (1.87),
2.589 (1.95), 2.604 (1.50), 2.631 (1.58), 2.642 (2.66), 2.654 (1.73), 2.673 (1.07),
2.684 (1.24), 2.697 (0.66), 3.396 (0.92), 4.003 (1.25), 4.021 (3.77), 4.039 (3.73),
4.056 (1.23), 4.485 (2.76), 4.498 (5.49), 4.509 (2.71), 4.654 (0.81), 4.936 (1.26),
5.001 (1.44), 5.059 (3.19), 5.099 (10.70), 5.126 (10.72), 5.166 (3.27), 7.875 (2.15),
7.894 (4.91), 7.914 (3.01), 8.100 (3.54), 8.120 (3.11), 8.327 (5.27), 8.391 (3.58),
8.411 (3.46), 13.270 (1.29).
Intermedijer 163
(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0581]
[0582] Metil-(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (293 mg, 750 µmοl) ubačen je u THF (6,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (89,8 mg, 3,75 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 243 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.175 (0.73), 1.988 (1.31), 2.079 (0.50),
2.091 (0.90), 2.101 (0.88), 2.107 (0.79), 2.558 (0.47), 2.610 (0.60), 2.621 (0.40),
4.466 (0.65), 4.479 (1.30), 4.491 (0.64), 5.151 (2.36), 5.155 (2.31), 5.753 (16.00),
8.487 (1.31), 8.491 (1.32), 8.903 (1.28), 8.905 (1.29).
Intermedijer 164
(5RS)-2-[3-fluor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0584] Metil-(5RS)-2-[3-fluor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (263 mg, 676 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (80,9 mg, 3,38 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 180 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 376 [M+H]<+>
Intermedijer 165
(5RS)-2-[3-hlor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0585]
[0586] Metil-(5RS)-2-[3-hlor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (293 mg, čistoća 99%, 715 µmοl) ubačen je u THF (7,2 ml) i dodat je litijum hidroksid (85,6 mg, 3,57 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 85,0 mg (29% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.78), -0.008 (7.90), 0.008 (6.70),
0.146 (0.88), 1.038 (0.50), 1.055 (1.00), 1.073 (0.50), 1.157 (1.52), 1.164 (0.90),
1.175 (3.06), 1.182 (1.88), 1.193 (1.64), 1.200 (0.90), 1.235 (0.48), 1.513 (0.96),
1.526 (0.98), 1.819 (1.28), 1.829 (1.24), 1.839 (1.04), 1.851 (1.04), 1.908 (12.72),
1.988 (5.68), 2.102 (3.40), 2.112 (3.14), 2.124 (1.72), 2.328 (0.90), 2.366 (0.68),
2.518 (3.92), 2.523 (3.12), 2.569 (1.76), 2.582 (1.78), 2.596 (1.36), 2.628 (1.36),
2.639 (2.16), 2.650 (1.68), 2.670 (1.68), 2.679 (1.30), 2.692 (0.64), 2.710 (0.66),
3.431 (3.30), 3.449 (3.50), 4.003 (0.46), 4.021 (1.34), 4.038 (1.36), 4.056 (0.50),
4.157 (0.42), 4.164 (0.42), 4.481 (2.44), 4.493 (4.72), 4.505 (2.42), 4.908 (16.00),
7.326 (3.02), 7.332 (2.84), 7.348 (3.62), 7.353 (3.38), 7.531 (5.82), 7.536 (5.94),
7.545 (3.42), 7.549 (3.28), 7.566 (2.76), 7.570 (2.58).
Intermedijer 166
(5RS)-2-{[2-metil-4-(trifluormetil)-1,3-tiazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0587]
[0588] Metil-(5RS)-2-{[2-metil-4-(trifluormetil)-1,3-tiazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (380 mg, 1,01 mmol) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je litijum hidroksid (121 mg, 5,05 mmol) rastvoren u vodi.
Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 3 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 156 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 363 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.08), 0.008 (0.89), 1.157 (2.79),
1.175 (5.61), 1.193 (2.81), 1.356 (0.90), 1.797 (0.50), 1.810 (0.50), 1.820 (0.40),
1.832 (0.41), 1.908 (0.41), 1.988 (10.16), 2.050 (0.44), 2.064 (0.79), 2.075 (1.54),
2.086 (1.45), 2.097 (0.74), 2.343 (0.59), 2.519 (1.18), 2.563 (0.72), 2.576 (0.73),
2.590 (0.59), 2.627 (0.71), 2.643 (16.00), 2.670 (0.82), 2.679 (0.57), 4.003 (0.80),
4.021 (2.41), 4.038 (2.39), 4.056 (0.77), 4.431 (0.85), 4.441 (1.46), 4.455 (0.85),
5.162 (3.10).
Intermedijer 167
(5RS)-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0589]
[0590] Metil-(5RS)-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (259 mg, čistoća 86%, 762 µmοl) ubačen je u THF (7,7 ml) i dodat je litijum hidroksid (91,2 mg, 3,81 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 101 mg (čistoća 90%, 43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 279 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.37), 0.008 (1.35), 1.157 (0.64),
1.175 (1.32), 1.192 (0.66), 1.812 (0.53), 1.823 (0.54), 1.834 (0.46), 1.845 (0.44),
1.908 (0.48), 1.988 (2.37), 2.071 (0.84), 2.084 (1.48), 2.093 (1.42), 2.100 (1.31),
2.113 (0.67), 2.201 (16.00), 2.226 (0.83), 2.524 (0.85), 2.567 (0.76), 2.580 (0.76),
2.594 (0.61), 2.621 (0.61), 2.633 (0.96), 2.644 (0.67), 2.664 (0.43), 2.674 (0.56),
4.020 (0.57), 4.038 (0.55), 4.455 (1.00), 4.467 (1.96), 4.479 (1.00), 4.495 (0.61),
4.509 (0.60), 4.636 (0.43), 4.973 (4.04), 4.978 (4.07), 6.210 (0.49), 6.234 (3.48).
Intermedijer 168
(5RS)-2-[2-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0591]
[0592] Metil-(5RS)-2-[2-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (184 mg, 493 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (59,0 mg, 2,46 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 166 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 169
(5RS)-2-[3-fluor-5-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0593]
[0594] Metil-(5RS)-2-[3-fluor-5-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (154 mg, 413 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (49,4 mg, 2,06 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 124 mg (84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 170
(5RS)-3-okso-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0595]
[0596] Metil-(5RS)-3-okso-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (179 mg, 540 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (64,7 mg, 2,70 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 80,0 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 318 [M+H]<+>
Intermedijer 171
(5RS)-2-[(1-metil-1H-1,2,4-triazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0598] Metil-(5RS)-2-[(1-metil-1H-1,2,4-triazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (176 mg, čistoća 74%, 446 µmοl) ubačen je u THF (4,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (53,4 mg, 2,23 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Vodena faza je koncentrovana u vakuumu i dobijeno je 268 mg (čistoća 76%, >100%) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 9): Rt= 3,37 min; MS (ESIpos): m/z = 279 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.54), -0.008 (3.90), 0.146 (0.46),
1.592 (0.57), 1.705 (0.76), 1.857 (0.54), 2.119 (0.81), 2.166 (3.04), 2.329 (0.89),
2.368 (0.50), 2.452 (1.14), 2.670 (0.80), 2.712 (0.42), 3.041 (1.56), 3.407 (1.18),
3.815 (16.00), 3.839 (0.43), 3.851 (0.70), 3.924 (2.27), 4.152 (0.95), 4.672 (1.53),
4.688 (0.46), 4.710 (2.53), 4.758 (1.03), 4.815 (2.91), 4.854 (1.76), 8.345 (0.57),
8.360 (3.83), 8.675 (0.64), 11.177 (0.50).
Intermedijer 172
(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0599]
[0600] Metil-(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (279 mg, 783 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (93,8 mg, 3,92 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 180 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
[0601] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 173
(5RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0602]
[0603] Metil-(5RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (181 mg, 484 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (57,9 mg, 2,42 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 150 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
[0604] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 174
(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0605]
[0606] Metil-(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (111 mg, 273 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (32,7 mg, 1,37 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 94,0 mg (88% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]<+>
[0607] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 175
(5RS)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0608]
[0609] Metil-(5RS)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (269 mg, 688 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (82,4 mg, 3,44 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 100 mg (39% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
[0610] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 176
(5RS)-3-okso-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0611]
[0612] Metil-(5RS)-3-okso-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (261 mg, 788 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (94,3 mg, 3,94 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 124 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 318 [M+H]<+>
Intermedijer 177
(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0613]
[0614] Metil-(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (216 mg, 553 µmοl) ubačen je u THF (4,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (66,2 mg, 2,76 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 181 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
Intermedijer 178
(5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0615]
[0616] Metil-(5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (275 mg, 770 µmοl) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je litijum hidroksid (92,2 mg, 3,85 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 5 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 247 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
[0617] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 179
(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0618]
[0619] Metil-(5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (49,5 mg, 139 µmοl) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (16,6 mg, 693 µmοl) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 5 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 45,0 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
[0620] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 180
(5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0621]
[0622] Metil-(5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (198 mg, 601 µmοl) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (72,0 mg, 3,01 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 189 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 316 [M+H]<+>
[0623] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-3-okso-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 181
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1)
[0624]
[0625] Metil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (1,05 g, 3,48 mmol) ubačen je u THF (29 ml) i dodat je litijum hidroksid (417 mg, 17,4 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 733 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
Alternativna sinteza:
[0626] Terc-butil-(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (2,65 g, 7,72 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (45 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (45 ml, 580 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prenet u dihlormetan i dodata je voda. Organska faza je razdvojena i vodena faza je dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 2,16 g (97% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 288 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.356 (0.56), 2.065 (0.43), 2.072 (0.54),
2.076 (0.79), 2.082 (0.79), 2.089 (0.76), 2.100 (0.41), 2.271 (8.20), 2.526 (0.56),
2.612 (0.50), 3.321 (0.68), 4.449 (0.65), 4.458 (1.21), 4.468 (0.62), 4.770 (2.95),
7.128 (16.00).
[0627] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
Intermedijer 182
(5RS)-5-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0628]
[0629] Metil-(5RS)-5-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (32,0 mg, 101 µmοl) ubačen je u THF (1,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (12,1 mg, 507 µmοl) rastvoren u vodi.
Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 30,0 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
Intermedijer 183
(5RS,7RS)-7-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0630]
[0631] Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (150 mg, 592 µmοl) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (289 mg, 888 µmοl) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (115 mg, 622 µmοl). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan.
Ostatak je rastvoren u dihlormetanu (5 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,5 ml). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 120 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.53), 0.008 (0.47), 1.004 (3.87),
1.021 (4.00), 1.438 (0.57), 1.471 (0.61), 1.785 (0.92), 1.861 (0.40), 2.133 (0.60),
2.162 (0.50), 2.174 (0.69), 2.202 (0.57), 2.244 (0.44), 2.270 (10.91), 2.602 (0.51),
2.609 (0.51), 2.642 (0.45), 2.649 (0.43), 4.233 (0.46), 4.249 (0.53), 4.258 (0.53),
4.275 (0.45), 4.746 (5.02), 4.780 (0.47), 4.795 (0.45), 7.132 (16.00).
Intermedijer 184
(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0632]
[0633] Terc-butil-(5S,7S)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (383 mg, 929 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (5,0 ml, 65 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 2,5 h na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u dihlormetanu i ispran vodom. Vodena faza je ekstrahovana dihlormetanom, zasićena natrijum hloridom i još jednom ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 325 mg (92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (4.92), 0.008 (2.52), 1.015 (15.45),
1.032 (15.37), 1.237 (0.63), 1.324 (0.45), 1.407 (3.53), 1.444 (1.27), 1.471 (2.46),
1.499 (1.90), 1.504 (2.44), 1.532 (1.40), 1.920 (1.12), 1.927 (1.22), 1.936 (1.30),
1.946 (1.16), 1.954 (1.10), 2.181 (2.72), 2.209 (2.30), 2.221 (3.18), 2.250 (3.93),
2.265 (1.63), 2.282 (1.40), 2.298 (1.26), 2.328 (0.46), 2.519 (2.23), 2.524 (2.06),
2.637 (2.03), 2.643 (2.06), 2.673 (1.93), 2.683 (1.64), 3.566 (1.59), 3.686 (0.42),
4.306 (2.98), 4.322 (3.48), 4.332 (3.20), 4.348 (2.66), 4.835 (1.62), 5.016 (16.00),
5.040 (0.46), 5.754 (1.60), 7.899 (2.66), 7.918 (9.08), 7.919 (8.98), 7.931 (5.18),
7.936 (4.87), 7.952 (1.45), 7.956 (1.45), 8.670 (5.04).
Intermedijer 185
(5RS,6RS)-6-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0634]
[0635] Etil-(5RS,6RS)-6-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (108 mg, 328 µmol) ubačen je u THF (1,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (19,6 mg, 820 µmol) rastvoren u vodi (750 µl). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 95,3 mg (čistoća 67%, 65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 8): Rt= 1,88 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
Intermedijer 186
(5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0636]
[0637] Etil-(5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (102 mg, 265 µmol) ubačen je u THF (1,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (15,9 mg, 663 µmol) rastvoren u vodi (500 µl). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i dihlormetan/i-propanol 1/5. Organska faza je razdvojena i vodena faza je dva puta ekstrahovana smešom dihlormetan/i-propanol 1/5. U vodenu fazu je dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i tri puta je ekstrahovana smešom dihlormetan/i-propanol 1/5. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 98 mg (čistoća 82%, 83% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 356 [M+H]<+>
Intermedijer 187
(5RS)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0639] Metil-(5RS)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (90,0 mg, 285 µmol) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (34,2 mg, 1,43 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 82,0 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.41), -0.008 (3.22), 0.008 (2.98),
0.146 (0.44), 1.908 (1.11), 1.988 (0.63), 2.071 (0.92), 2.256 (9.10), 2.327 (0.53),
2.523 (1.85), 2.580 (0.53), 2.643 (0.69), 2.674 (0.63), 2.862 (1.04), 2.881 (2.28),
2.900 (1.16), 3.765 (0.63), 3.783 (1.52), 3.803 (1.33), 3.823 (0.53), 4.389 (0.63),
4.400 (1.22), 4.413 (0.61), 7.084 (16.00), 13.178 (0.58).
Intermedijer 188
(5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0640]
[0641] U rastvor terc-butil-(5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (465 mg, 1,15 mmol) u 20 ml dihlormetana dodato je 2,0 ml (26 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, pH je uz snažno mešanje i hlađenje u ledenom kupatilu podešen na 3 pomoću 3 N natrijum hidroksida, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 327 mg (82% od teor.) naslovnog jedinjenja (kao racemska smeša cis/trans), koje je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.44), -0.008 (12.24), 0.008
(10.19), 0.146 (1.37), 1.007 (1.88), 1.038 (2.38), 1.061 (1.44), 1.149 (2.53), 1.189
(2.71), 1.220 (2.78), 1.253 (1.77), 1.284 (0.94), 1.395 (6.68), 1.405 (3.32), 1.412
(2.20), 1.479 (7.12), 1.498 (9.86), 1.508 (5.85), 1.521 (7.22), 1.531 (5.74), 1.546
(5.89), 1.561 (4.66), 1.571 (3.61), 1.586 (4.88), 1.595 (5.96), 1.605 (8.52), 1.617
(7.01), 1.624 (7.77), 1.643 (10.76), 1.676 (4.01), 1.804 (3.29), 1.816 (3.72), 1.828
(4.80), 1.859 (3.65), 1.900 (1.95), 2.079 (7.58), 2.088 (6.79), 2.100 (3.68), 2.332
(2.09), 2.366 (1.91), 2.569 (2.93), 2.583 (2.20), 2.619 (2.31), 2.630 (4.01), 2.642
(2.53), 2.670 (2.74), 2.710 (1.48), 3.289 (7.19), 3.427 (2.74), 3.443 (2.85), 3.457
(3.97), 3.462 (4.19), 3.474 (4.19), 3.501 (1.12), 3.519 (0.98), 3.563 (16.00), 3.581
(15.67), 3.609 (3.14), 3.622 (3.61), 3.628 (3.40), 3.642 (3.11), 3.678 (0.61), 4.412
(2.13), 4.424 (5.53), 4.435 (5.16), 4.447 (1.95), 13.170 (3.58).
Intermedijer 189
(5RS)-2-[(4,4-difluorcikloheksil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[0642]
[0643] U rastvor terc-butil-(5S)-2-[(4,4-difluorcikloheksil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilata (racemat) (41,2 mg, 111 µmοl) u 2,0 ml dihlormetana dodato je 90 µl (1,2 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je mešana 5 h na sobnoj temperaturi. Zatim je još jednom dodato 120 µl (1,6 mmol) trifluorsirćetne kiseline i smeša je dalje mešana preko noći (kontrola konverzije putem HPLC). Radi obrade, pH je uz snažno mešanje i hlađenje u ledenom kupatilu podešen na 3 pomoću 3 N natrijum hidroksida, smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda i ekstrahovana. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 30,5 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 316 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.97), -0.008 (16.00), 0.008
(14.35), 0.146 (1.78), 1.227 (3.20), 1.396 (2.42), 1.515 (1.65), 1.694 (4.48), 1.806
(4.07), 1.975 (2.74), 2.085 (5.12), 2.327 (1.51), 2.366 (1.46), 2.558 (3.84), 2.571
(3.06), 2.634 (3.25), 2.675 (2.51), 2.709 (1.46), 3.286 (9.65), 3.523 (12.53), 3.541
(12.48), 4.417 (3.20), 4.428 (6.13), 4.441 (3.25), 5.754 (1.60), 13.179 (2.88).
Intermedijer 190
[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metanol
[0644]
[0645] Etil-2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-karboksilat (1,00 g, 3,70 mmol) rastvoren je u THF-u (25 ml) i na -20°C je dodat litijum aluminijum hidrid (1,9 ml, 2,4 M, 4,4 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na -20°C, u reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, i THF je uklonjen pod vakuumom. U ostatak su dodati etil acetat i voda. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 230 mg (26% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 229 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.86), -0.008 (7.77), 0.008 (6.74),
0.146 (0.86), 2.328 (1.09), 2.367 (0.80), 2.524 (3.56), 2.671 (1.18), 2.711 (0.95),
4.852 (0.43), 4.876 (15.05), 4.890 (15.34), 4.923 (0.52), 5.824 (7.51), 5.838 (15.34),
5.852 (7.14), 7.791 (8.06), 7.801 (8.32), 7.811 (8.49), 7.822 (8.66), 8.679 (8.49),
8.684 (8.66), 8.700 (8.63), 8.704 (8.17), 8.868 (16.00), 9.204 (7.51), 9.209 (7.68),
9.214 (7.80), 9.219 (7.23).
Intermedijer 191
3-(hlormetil)-2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin
[0646]
[0647] [2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metanol (46,0 mg, 202 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (910 µl) i na 0 °C je dodat tionil dihlorid (29 µl, 400 µmol). Reakciona smeša je mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, pa je rastvarač uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 46,0 mg (93% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0648]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.81), 0.008 (1.26), 2.330 (0.40), 2.521 (1.58), 2.526 (1.33), 2.672 (0.57), 2.712 (0.43), 5.126 (16.00), 5.177 (0.78), 5.756 (1.49), 7.026 (0.49), 7.041 (0.66), 7.059 (0.57), 7.853 (3.44), 7.863 (3.55), 7.873 (3.64), 7.883 (3.67), 8.038 (0.42), 8.676 (3.22), 8.681 (3.30), 8.697 (3.06), 8.701 (3.04), 8.995 (9.01), 9.278 (3.59), 9.283 (3.64), 9.288 (3.68), 9.293 (3.40).
Intermedijer 192
1-[1-(brommetil)ciklopropil]-4-(trifluormetil)benzol
[0649]
[0650] {1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metanol (350 mg, 1,62 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i dodati su N,N-diizopropiletilamin (560 µl, 3,2 mmol) i dibrom(trifenil)fosforan (854 mg, čistoća 96%, 1,94 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i ponovo je dodat dibrom(trifenil)fosforan (854 mg, čistoća 96%, 1,94 mmol). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, dihlormetan/etil acetat). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 110 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[0651]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.129 (1.56), 1.136 (1.65), 1.144 (4.59), 1.148 (5.92), 1.157 (3.27), 1.169 (1.19), 1.191 (1.17), 1.202 (3.09), 1.212 (5.74), 1.223 (1.45), 1.231 (1.56), 1.360 (1.16), 1.397 (5.40), 3.915 (16.00), 4.783 (0.41), 7.540 (4.22), 7.561 (5.81), 7.664 (5.75), 7.685 (4.22).
Intermedijer 193
Metil-1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropankarboksilat
[0652]
[0653] 1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropankarboksilna kiselina (1,00 g, 5,06 mmol) rastvorena je u metanolu (10 ml) i dodata je sumporna kiselina (54 µl, 1,0 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 60 °C. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je uparen. Dobijeno je 947 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 212 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.394 (4.13), 1.405 (10.89), 1.414 (14.44),
1.422 (6.17), 1.461 (0.81), 1.484 (0.89), 1.521 (6.34), 1.530 (14.64), 1.539 (10.67),
1.550 (4.00), 2.732 (1.03), 2.892 (1.17), 3.314 (16.00), 3.798 (0.65), 7.384 (6.75),
7.404 (7.47), 7.558 (7.35), 7.577 (8.61), 7.803 (5.32), 7.823 (9.19), 7.842 (4.27).
Intermedijer 194
[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metanol
[0654]
[0655] Metil-1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropankarboksilat (947 mg, 4,47 mmol) rastvoren je u THF-u (15 ml) i na -78 °C je dodat litijum aluminijum hidrid (2,2 ml, 2,4 M, 5,4 mmol). Reakciona smeša je tokom 2 sata mešana i zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i u ostatak je dodat etil acetat i voda. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 603 mg (čistoća 92%, 68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 184 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.918 (3.81), 0.928 (11.67), 0.933 (14.82),
0.980 (0.54), 1.021 (0.57), 1.058 (5.57), 1.066 (13.62), 1.072 (13.58), 1.082 (4.20),
1.358 (0.67), 1.663 (3.18), 3.718 (15.53), 3.732 (16.00), 4.787 (4.36), 4.800 (8.73),
4.814 (4.16), 7.229 (5.90), 7.248 (6.45), 7.495 (6.83), 7.515 (8.03), 7.695 (0.49),
7.725 (3.88), 7.744 (6.81), 7.764 (3.12), 7.853 (0.40), 9.297 (0.99).
Intermedijer 195
2-[1-(brommetil)ciklopropil]-6-hlorpiridin
[0656]
[0657] [1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metanol (300 mg, 1,63 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i dodati su N,N-diizopropiletilamin (570 µl, 3,3 mmol) i dibrom(trifenil)fosforan (862 mg, čistoća 96%, 1,96 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi i zatim je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel, dihlormetan/etil acetat). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 141 mg (34% od teor.) naslovnog jedinjenja.
GC-MS (metoda 2): Rt= 5,32 min; MS (ESIpos): m/z = 213 [M+H]<+>
Intermedijer 196
Etil-6-hlor-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat
[0658]
[0659] 6-hlor-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilna kiselina (2,50 g, 11,1 mmol) rastvorena je u etanolu (29 ml), dodata je sumporna kiselina (710 µl, 13 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći uz refluks. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je uparen. Dobijeno je 2,24 g (čistoća 88%, 70% od teor.) naslovnog jedinjenja, koje je direktno dalje korišćeno u reakciji.
Intermedijer 197
3-Azabiciklo[2.1.1]heksan-trifluorsirćetna kiselina
[0661] Terc-butil-2-azabiciklo[2.1.1]heksan-2-karboksilat (70,0 mg, 382 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (590 µl, 7,6 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je naslovno jedinjenje. Jedinjenje je direktno dalje korišćeno.
Intermedijer 198
Etil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat
[0662]
[0663] Pod argonom, etil-6-hlor-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (2,24 g, čistoća 88%, 7,77 mmol) i benzil-hidrazin karboksilat (1,42 g, 8,55 mmol) rastvoreni su u toluolu (20 ml) i dodati su kompleks tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum-hloroform (402 mg, 389 µmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (441 mg, 777 µmol) i cezijum karbonat (3,04 g, 9,33 mmol).
Reakciona smeša je mešana 3 h na 80 °C pa su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: izokratska, etil acetat/dihlormetan). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,80 g (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
Intermedijer 199
Etil-6-hidrazino-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat
[0664]
[0665] Etil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (1,80 g, 4,69 mmol) rastvoren je u etanolu (10 ml) i tretiran korišćenjem aparature za hidrogenovanje (H-Cube<®>, Pd/C 10% paladijum, 1 bar, 50 °C, protok: 1 ml/min). Dobijeno je 1,03 g (88% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,94 min; MS (ESIpos): m/z = 250 [M+H]<+>
Intermedijer 200
Etil-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0666]
[0667] Etil-6-hidrazino-3-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (1,11 g, 4,45 mmol) prenet je u THF (15 ml) i dodat je di-1H-imidazol-1-ilmetanon (866 mg, 5,34 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i dihlormetan, i dodat je zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida. Vodena faza je ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 1,22 g (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 276 [M+H]<+>
Intermedijer 201
Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0668]
[0669] Etil-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (1,22 g, 4,45 mmol) rastvoren je u etanolu (10 ml) i tretiran korišćenjem aparature za hidrogenovanje (H-Cube<®>, Pd/C 10% paladijum, 1 bar, 80°C, protok: 1 ml/min). Dobijeno je 1,24 g (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 280 [M+H]<+>
Intermedijer 202
Metil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-5-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat
[0670]
[0671] Metil-6-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (3,00 g, 12,5 mmol), benzilhidrazin karboksilat (2,29 g, 13,8 mmol), i tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (573 mg, 626 µmol) pod argonom su suspendovani u toluolu (60 ml). Dodati su 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (694 mg, 1,25 mmol) i cezijum karbonat (4,90 g, 15,0 mmol) i reakciona smeša je mešana 3 h na 80 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. i organska faza je razdvojena, isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: cikloheksan/etil acetat, 9/1, 0/1). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,87 g (čistoća 86%, 35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,23 min; MS (ESIneg): m/z = 368 [M-H]-
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (1.19), 0.006 (0.87), 1.160 (2.79),
1.174 (5.66), 1.189 (2.80), 1.398 (1.98), 1.988 (10.25), 2.518 (0.42), 3.038 (0.55),
3.051 (0.56), 3.852 (16.00), 4.008 (0.77), 4.022 (2.29), 4.037 (2.24), 4.051 (0.73),
4.484 (1.47), 4.496 (1.51), 4.998 (0.87), 5.036 (1.06), 5.085 (0.93), 5.125 (7.85),
5.134 (1.18), 5.146 (1.34), 5.157 (0.63), 7.107 (0.52), 7.195 (0.84), 7.221 (0.64),
7.232 (0.48), 7.238 (0.48), 7.271 (0.56), 7.287 (0.79), 7.309 (5.08), 7.316 (2.18),
7.319 (2.37), 7.326 (1.95), 7.340 (1.80), 7.364 (2.08), 7.380 (3.95), 7.394 (6.93),
7.409 (1.97), 7.416 (1.42), 7.422 (1.02), 7.482 (1.90), 7.498 (2.13), 7.532 (0.42),
8.085 (2.06), 8.101 (1.89), 8.765 (2.66), 8.849 (0.45), 9.009 (0.47), 9.367 (2.77).
Intermedijer 203
Metil-6-hidrazino-5-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat
[0672]
[0673] Metil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-5-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (1,87 g, čistoća 86%, 4,35 mmol) i paladijum na aktivnom uglju (100 mg, 10% paladijum) suspendovani su pod argonom u metanolu (100 ml) i preko noći mešani na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Reakciona smeša je filtrirana preko celita i zatim isprana metanolom. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i dobijeno je 1,09 g (čistoća 75%, 80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 236 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 3.849 (0.45), 3.875 (16.00), 4.491 (0.97),
4.590 (0.43), 7.244 (0.61), 7.260 (0.47), 7.277 (0.47), 7.291 (1.32), 7.308 (3.01),
7.326 (2.14), 7.956 (2.10), 7.975 (2.01), 8.058 (1.29).
Intermedijer 204
Metil-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0674]
[0675] Metil-6-hidrazino-5-(trifluormetil)piridin-2-karboksilat (1,09 g, čistoća 75%, 3,48 mmol) rastvoren je u THF-u (30 ml) i uz mešanje je na sobnoj temperaturi dodat 1,1-karbonildiimidazol (1,01 g, 6,26 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. i organska faza je razdvojena, isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Dobijeno je 1,38 g (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,07 min; MS (ESIpos): m/z = 262 [M+H]<+>
Intermedijer 205
Terc-butil-6-hlor-5-metilpiridin-2-karboksilat
[0676]
[0677] 6-hlor-5-metilpiridin-2-karboksilna kiselina (2,10 g, 12,2 mmol) rastvorena je u piridinu (8,4 ml) i terc-butanolu (42 ml, 440 mmol) i dodat je 4-metil benzolsulfonil hlorid (4,67 g, 24,5 mmol). Reakciona smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi i razblažena pomoću zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata i dihlormetana. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 2,50 g (>100%) naslovnog jedinjenja.
[0678]<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.552 (16.00), 7.901 (0.52), 7.920 (1.04), 7.959 (0.77), 7.978 (0.43).
Intermedijer 206
Terc-butil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-5-metilpiridin-2-karboksilat
[0679]
[0680] Pod argonom, terc-butil-6-hlor-5-metilpiridin-2-karboksilat (2,50 g, 11,0 mmol) i benzil-hidrazin karboksilat (3,28 g, 19,8 mmol) rastvoreni su u toluolu (50 ml) i dodati su kompleks tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum-hloroform (568 mg, 549 µmol), cezijum karbonat (4,29 g, 13,2 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (609 mg, 1,10 mmol).
Reakciona smeša je mešana 4 h na 80 °C i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (SiO2; mobilna faza: izokratska, etil acetat/cikloheksan 30/70). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,81 g (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,91 min; MS (ESIpos): m/z = 358 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.514 (16.00), 2.157 (1.85), 5.112 (1.13),
7.292 (0.85), 7.310 (1.16), 7.377 (0.57), 7.396 (0.48), 7.408 (0.70), 7.446 (0.50),
8.196 (0.45), 9.097 (0.44).
Intermedijer 207
Terc-butil-6-hidrazino-5-metilpiridin-2-karboksilat
[0681]
[0682] Pod argonom je ubačen paladijum na aktivnom uglju (195 mg, 10% paladijum) i dodat je terc-butil-6-{1-[(benziloksi)karbonil]hidrazino}-5-metilpiridin-2-karboksilat (1,30 g, 3,64 mmol) u metanolu (60 ml). Reakciona smeša je mešana tokom 5 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 bar). Suspenzija je razblažena metanolom i filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeno je 837 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,50 min; MS (ESIpos): m/z = 224 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.527 (16.00), 1.548 (1.20), 2.080 (4.20),
4.258 (1.00), 7.174 (0.76), 7.193 (0.93), 7.343 (0.70), 7.361 (0.59), 7.420 (0.64).
Intermedijer 208
Terc-butil-8-metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0683]
[0684] Terc-butil-6-hidrazino-5-metilpiridin-2-karboksilat (1,18 g, 5,27 mmol) rastvoren je u THF-u (100 ml) i uz mešanje je na sobnoj temperaturi dodat 1,1-karbonildiimidazol (1,03 g, 6,32 mmol). Reakciona smeša je tokom 1,5 h zagrevana uz refluks. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i podešena je na baznu pH vrednost pomoću zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata i filtrirane. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (SiO2; mobilna faza: cikloheksan/etil acetat 70/30 do 50/50). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 800 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIneg): m/z = 248 [M-H]-
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.529 (16.00), 2.245 (3.28), 6.683 (0.78),
6.700 (0.88), 6.940 (0.50), 6.943 (0.51), 6.957 (0.46), 6.960 (0.46), 12.505 (0.46).
Intermedijer 209
Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0685]
[0686] Terc-butil-8-metil-3-okso-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, 802 µmol) i paladijum na aktivnom uglju (40 mg, 10% paladijum) suspendovani su u metanolu (12 ml) i mešani 24 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (3 bar).
Reakciona smeša je filtrirana preko diatomejske zemlje i isprana dihlormetanom/metanolom 9/1. Filtrat je koncentrovan i ostatak je mešan 30 min sa etil acetatom, zatim filtriran i osušen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 150 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja kao smeša dijastereomera.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 254 [M]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.184 (2.53), 1.201 (2.50), 1.396 (16.00),
1.409 (0.40), 2.096 (0.48), 2.103 (0.44), 2.108 (0.52), 4.363 (0.46), 11.396 (0.58).
Intermedijer 210
Metil-(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat
[0687]
[0688] Metil-(5S)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (150 mg, 819 µmol) ubačen je u acetonitril (8,2 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (400 mg, 1,23 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (231 mg, 860 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena, isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 318 mg (čistoća 75%, 81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
Intermedijer 211
Terc-butil-(5S)-2-(ciklopropilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0690] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 627 µmol) ubačen je u acetonitril (9,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (633 mg, 1,94 mmol) i (brommetil)ciklopropan (130 µl, 1,4 mmol). Reakciona smeša je nakon mešanja preko vikenda na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom. U ostatak su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 175 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 294 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.261 (0.23), 0.273 (0.89), 0.286 (0.95),
0.298 (0.30), 0.323 (0.07), 0.427 (0.26), 0.437 (0.75), 0.441 (0.75), 0.457 (0.80),
0.461 (0.73), 0.472 (0.20), 0.527 (0.08), 0.545 (0.08), 1.055 (0.19), 1.072 (0.29),
1.091 (0.18), 1.241 (0.08), 1.402 (16.00), 1.416 (1.49), 1.491 (0.17), 1.526 (0.18),
1.558 (0.11), 1.807 (0.21), 1.830 (0.18), 1.841 (0.19), 1.988 (0.08), 2.048 (0.56),
2.060 (0.53), 2.070 (0.37), 2.082 (0.20), 2.089 (0.20), 2.097 (0.19), 2.500 (5.48),
2.565 (0.30), 2.578 (0.30), 2.592 (0.24), 2.628 (0.24), 2.639 (0.41), 2.651 (0.25),
2.670 (0.16), 2.681 (0.19), 3.485 (1.60), 3.502 (1.57), 4.379 (0.39), 4.389 (0.43),
4.394 (0.55), 4.404 (0.39).
Intermedijer 212
Etil-(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0692] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (1,07 g, 3,83 mmol) ubačen je u acetonitril (40 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,87 g, 5,75 mmol) i 2-hlor-5-(hlormetil)piridin (652 mg, 4,02 mmol). Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi filtrirana i dodat je etil acetat. Filtrat je ispran vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 7/1, 0/1). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 604 mg (čistoća 89%, 34% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,67 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.54), 0.008 (1.04), 1.164 (7.65),
1.182 (16.00), 1.194 (4.45), 1.199 (8.79), 1.212 (7.15), 1.229 (3.56), 1.305 (0.41),
1.398 (0.87), 1.797 (0.72), 1.828 (0.72), 1.988 (0.50), 2.256 (0.50), 2.275 (1.17),
2.291 (1.41), 2.304 (1.85), 2.318 (3.16), 2.346 (0.60), 2.523 (2.04), 2.678 (1.08),
2.708 (2.69), 2.743 (2.49), 2.760 (1.08), 2.768 (1.27), 2.778 (1.30), 2.808 (1.12),
2.881 (0.66), 2.887 (0.74), 2.921 (0.45), 2.927 (0.46), 2.952 (0.42), 2.978 (1.67),
3.008 (1.40), 3.059 (0.41), 4.114 (0.58), 4.132 (1.58), 4.141 (1.19), 4.150 (1.82),
4.159 (3.29), 4.168 (1.29), 4.177 (3.81), 4.191 (2.65), 4.196 (2.34), 4.208 (3.20),
4.215 (0.99), 4.226 (2.75), 4.235 (1.45), 4.243 (0.95), 4.252 (1.31), 4.270 (0.44),
4.509 (0.78), 4.524 (0.89), 4.537 (0.85), 4.551 (0.71), 4.816 (1.74), 4.822 (2.13),
4.829 (1.91), 4.836 (1.64), 4.910 (1.22), 4.922 (5.15), 4.950 (6.09), 4.959 (5.78),
4.999 (0.74), 5.754 (2.32), 7.521 (4.68), 7.541 (5.67), 7.713 (2.49), 7.719 (2.49),
7.734 (2.52), 7.740 (2.40), 7.751 (0.94), 7.758 (0.91), 8.315 (2.85), 8.321 (2.72),
8.333 (1.28), 8.339 (1.26).
Intermedijer 213
Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0693]
[0694] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (570 mg, 2,04 mmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (998 mg, 3,06 mmol) i 5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin (419 mg, 2,14 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 4/5, 1/16). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 809 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.17), 0.008 (1.20), 1.159 (7.54),
1.177 (16.00), 1.192 (8.78), 1.194 (10.17), 1.210 (11.69), 1.228 (5.67), 1.398 (1.08),
1.776 (0.63), 1.806 (1.30), 1.838 (1.33), 1.867 (0.70), 1.908 (3.87), 1.988 (2.50),
2.282 (0.98), 2.298 (1.11), 2.311 (1.39), 2.325 (3.55), 2.366 (0.86), 2.670 (0.70),
2.687 (0.82), 2.717 (2.44), 2.746 (2.57), 2.777 (1.52), 2.787 (1.81), 2.817 (1.77),
2.890 (1.01), 2.896 (1.24), 2.930 (0.63), 2.936 (0.70), 2.986 (1.71), 3.017 (1.46),
4.021 (0.60), 4.038 (0.60), 4.117 (0.41), 4.135 (1.36), 4.144 (0.92), 4.152 (1.52),
4.161 (3.26), 4.176 (3.33), 4.181 (4.21), 4.194 (3.83), 4.199 (3.26), 4.211 (3.58),
4.217 (1.14), 4.229 (2.63), 4.238 (1.36), 4.247 (0.82), 4.256 (1.27), 4.274 (0.41),
4.521 (1.33), 4.536 (1.55), 4.549 (1.52), 4.563 (1.33), 4.831 (1.68), 4.838 (2.12),
4.853 (1.68), 4.931 (2.38), 5.036 (1.05), 5.048 (8.17), 5.077 (5.51), 5.087 (5.39),
5.127 (0.67), 7.913 (1.93), 7.933 (12.67), 7.950 (2.57), 7.954 (2.63), 7.974 (0.82),
8.661 (3.58), 8.679 (2.53).
Intermedijer 214
Etil-(5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0695]
[0696] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (500 mg, čistoća 83%, 1,49 mmol) ubačen je u acetonitril (15 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,21 g, 3,72 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (420 mg, 1,56 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 7/1, 1/16).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 440 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,92 min; MS (ESIpos): m/z = 457 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.05), 1.157 (4.28), 1.170 (8.73),
1.175 (8.65), 1.187 (16.00), 1.192 (6.64), 1.205 (7.99), 1.210 (4.00), 1.228 (1.75),
1.398 (2.75), 1.819 (0.47), 1.850 (0.50), 1.988 (13.53), 2.253 (0.43), 2.269 (0.50),
2.288 (1.23), 2.303 (1.42), 2.317 (1.87), 2.332 (3.90), 2.365 (0.95), 2.523 (2.37),
2.670 (0.46), 2.696 (0.97), 2.709 (0.48), 2.726 (2.59), 2.762 (2.99), 2.798 (1.01),
2.828 (0.73), 2.908 (0.46), 2.999 (2.03), 3.028 (1.70), 4.003 (1.18), 4.021 (3.36),
4.038 (3.28), 4.056 (1.09), 4.123 (0.48), 4.140 (1.43), 4.149 (1.10), 4.158 (1.74),
4.167 (2.84), 4.175 (1.44), 4.185 (2.86), 4.192 (1.17), 4.199 (1.96), 4.216 (2.83),
4.226 (0.79), 4.234 (2.59), 4.243 (1.39), 4.252 (0.88), 4.261 (1.25), 4.532 (0.48),
4.547 (0.51), 4.560 (0.50), 4.574 (0.43), 4.848 (2.48), 4.857 (2.20), 5.098 (2.28),
5.134 (12.28), 7.594 (1.95), 7.607 (3.49), 7.620 (1.88), 7.638 (0.47), 7.650 (0.81),
7.663 (0.44), 8.581 (4.60), 8.593 (4.39).
Intermedijer 215
Terc-butil-(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0697]
[0698] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (239 mg, 999 µmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (488 mg, 1,50 mmol) i 5-(hlormetil)-2-(difluormetil)piridin (186 mg, 1,05 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo je dodat cezijum karbonat (326 mg, 999 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 395 mg (čistoća 83%, 86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,58 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
Intermedijer 216
Etil-(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0699]
[0700] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 358 µmol) ubačen je u acetonitril (4,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (175 mg, 537 µmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)-3-fluorpiridin (67,7 mg, 376 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 135 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
Intermedijer 217
Etil-(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0701]
[0702] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 358 µmol) ubačen je u acetonitril (4,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (175 mg, 537 µmol) i 3-hlor-5-(hlormetil)piridin (60,9 mg, 376 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 128 mg (čistoća 72%, 64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
Intermedijer 218
Terc-butil-(5S)-2-(4-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0703]
[0704] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 627 µmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (306 mg, 940 µmol) i 1-brom-4-(hlormetil)benzol (135 mg, 658 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 201 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,94 min; MS (ESIpos): m/z = 408 [M+H]<+>
Intermedijer 219
Terc-butil-(5S)-2-(3-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0705]
[0706] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 627 µmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (306 mg, 940 µmol) i 1-brom-3-(hlormetil)benzol (84 µl, 660 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 256 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,94 min; MS (ESIpos): m/z = 408 [M+H]<+>
Intermedijer 220
Terc-butil-(5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0707]
[0708] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 627 µmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (306 mg, 940 µmol) i 4-brom-1-(hlormetil)-2-fluorbenzol (147 mg, 658 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 4-brom-1-(hlormetil)-2-fluorbenzol (30 mg, 132 µmol) i cezijum karbonat (41 mg, 125 µmol) i mešanje je nastavljeno još 6 sati. U reakcionu smešu je dodat etil acetat, i organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 19/1, 0/1). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 135 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,01 min; MS (ESIpos): m/z = 426 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.174 (0.09), -0.033 (0.69), -0.017 (0.63),
0.121 (0.08), 1.132 (0.07), 1.150 (0.14), 1.167 (0.07), 1.208 (0.08), 1.368 (16.00),
1.445 (0.17), 1.480 (0.18), 1.773 (0.20), 1.795 (0.17), 1.807 (0.17), 1.963 (0.26),
2.029 (0.55), 2.037 (0.48), 2.063 (0.18), 2.071 (0.16), 2.303 (0.07), 2.578 (0.22),
2.589 (0.38), 2.601 (0.24), 2.620 (0.13), 2.631 (0.19), 2.644 (0.16), 3.995 (0.06),
4.013 (0.06), 4.391 (0.38), 4.406 (0.58), 4.416 (0.37), 4.785 (0.08), 4.826 (1.67),
4.867 (0.08), 7.187 (0.37), 7.208 (0.80), 7.228 (0.46), 7.380 (0.50), 7.384 (0.51),
7.401 (0.41), 7.405 (0.42), 7.522 (0.46), 7.527 (0.43), 7.546 (0.47), 7.550 (0.44).
Intermedijer 221
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (izomer 1)
[0709]
[0710] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (201 mg, 840 µmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (410 mg, 1,26 mmol) i 5-[(1RS)-1-brometil]-2-(trifluormetil)piridin (320 mg, čistoća 70%, 882 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 9/1, 0/1). Nakon razdvajanja, izolovano je 86,9 mg (24% od teor.) izomera 1, koji je eluiran prvi, i 97,7 mg (26% od teor.) izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[0711]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,84 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.21), -0.024 (0.08), -0.008 (1.59),
0.008 (1.85), 0.146 (0.21), 1.301 (16.00), 1.382 (0.59), 1.398 (0.12), 1.405 (0.14),
1.457 (0.14), 1.467 (0.17), 1.479 (0.16), 1.489 (0.16), 1.501 (0.17), 1.514 (0.13),
1.527 (0.10), 1.686 (2.25), 1.703 (2.28), 1.820 (0.20), 1.831 (0.19), 1.842 (0.18),
1.852 (0.17), 1.864 (0.15), 1.988 (0.09), 2.057 (0.33), 2.067 (0.63), 2.080 (0.53),
2.099 (0.21), 2.107 (0.17), 2.322 (0.23), 2.327 (0.35), 2.332 (0.25), 2.366 (0.30),
2.522 (0.88), 2.557 (0.36), 2.562 (0.22), 2.572 (0.19), 2.587 (0.39), 2.602 (0.29),
2.614 (0.29), 2.627 (0.22), 2.665 (0.48), 2.669 (0.52), 2.674 (0.60), 2.687 (0.25),
2.710 (0.40), 2.718 (0.20), 2.731 (0.10), 4.432 (0.37), 4.446 (0.62), 4.456 (0.38),
5.520 (0.13), 5.536 (0.46), 5.554 (0.46), 5.572 (0.14), 7.906 (0.63), 7.927 (0.90),
8.015 (0.45), 8.019 (0.46), 8.040 (0.33), 8.699 (0.63), 8.703 (0.63).
Intermedijer 222
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (izomer 2)
[0712]
[0713] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (201 mg, 840 µmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (410 mg, 1,26 mmol) i 5-[(1RS)-1-brometil]-2-(trifluormetil)piridin (320 mg, čistoća 70%, 882 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 9/1, 0/1). Nakon razdvajanja, izolovano je 86,9 mg (24% od teor.) izomera 1, koji je eluiran prvi, i 97,7 mg (26% od teor.) izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[0714]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,86 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.014 (0.28), 1.152 (0.06), 1.169 (0.13),
1.187 (0.06), 1.240 (0.07), 1.372 (0.22), 1.401 (16.00), 1.480 (0.16), 1.503 (0.17),
1.515 (0.18), 1.529 (0.13), 1.557 (0.09), 1.680 (2.33), 1.698 (2.34), 1.809 (0.19),
1.820 (0.18), 1.831 (0.17), 1.842 (0.17), 1.983 (0.16), 2.049 (0.56), 2.061 (0.46),
2.089 (0.16), 2.322 (0.06), 2.518 (0.24), 2.560 (0.34), 2.575 (0.24), 2.587 (0.25),
2.602 (0.20), 2.659 (0.23), 2.670 (0.39), 2.682 (0.22), 2.712 (0.19), 2.724 (0.10),
3.093 (0.08), 4.399 (0.37), 4.414 (0.62), 4.424 (0.36), 4.635 (0.06), 4.650 (0.07),
5.511 (0.14), 5.529 (0.53), 5.547 (0.48), 5.564 (0.14), 7.881 (0.67), 7.901 (0.90),
8.011 (0.48), 8.016 (0.48), 8.037 (0.36), 8.723 (0.69).
Intermedijer 223
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[cisitrans-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[0715]
Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (450 mg, 1,88 mmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,90 g, 5,83 mmol) i cis/trans-1-(brommetil)-4-(trifluormetil)cikloheksan (660 µl, 4,1 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati cis/trans-1-(brommetil)-4-(trifluormetil)cikloheksan (660 µl, 4,1 mmol) i cezijum karbonat (613 mg, 1,88 mmol) i mešano je preko vikenda. Reakciona smeša je filtrirana i dodat je etil acetat. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: dihlormetan/metanol 99/1, 9/1). Još jednom je izvedeno prečišćavanje putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: cikloheksan/etil acetat, 11/1, 1/2). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 112 mg (14% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,08 min; MS (ESIpos): m/z = 404 [M+H]<+>
Intermedijer 224
(5S)-5-{[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[0716]
[0717] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 348 µmol) ubačena je u dihlormetan (2,0 ml) i DMF (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (2S)-pirolidin-2-ilmetanol (41 µl, 420 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 1,5 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 83,1 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 371 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.74), -0.008 (16.00), 0.008
(12.83), 0.146 (1.58), 2.271 (2.57), 2.327 (2.72), 2.366 (2.42), 2.523 (7.55), 2.669
(2.57), 2.709 (2.42), 4.741 (1.13), 5.753 (3.40), 7.122 (1.66).
Intermedijer 225
2-[(2S)-1-{[(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-il]-2-oksoetil-acetat
[0718]
[0719] Terc-butil-(2S)-2-(acetoksiacetil)pirolidin-1-karboksilat (189 mg, 696 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (1 ml) i dodata je trifluorsirćetna kiselina (1 ml) i mešano je 1 h na sobnoj temperaturi, zatim su isparljiva organska jedinjenja uklonjena pod vakuumom. Sirovi proizvod (2S)-2-(acetoksiacetil)pirolidin je direktno korišćen u sledećem koraku.
[0720] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 348 µmol) rastvorena je u dihlormetanu (2 ml) i ohlađena na 0 °C. Dodat je 1-hlor-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amin (64 µl, 490 µmol) i mešano je 20 min na 0 °C. (2S)-2-(acetoksiacetil)pirolidin (sirovi proizvod) rastvoren je u dihlormetanu (1 ml) i na 0 °C je polako ukapan u reakcionu smešu, a nakon toga N,N-diizopropiletilamin (180 µl, 1,0 mmol). Nakon 5 min, rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 112 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 441 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.75), 0.008 (1.89), 1.580 (0.46),
1.594 (0.46), 1.726 (0.58), 1.759 (0.48), 1.799 (0.53), 1.814 (0.75), 1.832 (0.76),
1.847 (0.76), 1.862 (0.49), 1.912 (0.68), 1.928 (1.30), 1.947 (1.68), 1.960 (1.27),
2.040 (1.43), 2.080 (16.00), 2.096 (4.78), 2.100 (1.50), 2.162 (0.56), 2.183 (0.63),
2.193 (0.66), 2.214 (0.65), 2.269 (11.51), 2.323 (0.52), 2.327 (0.68), 2.366 (0.59),
2.518 (2.35), 2.523 (2.26), 2.567 (1.05), 2.580 (0.71), 2.669 (0.65), 2.710 (0.55),
3.575 (0.79), 3.582 (0.56), 3.599 (0.99), 3.617 (0.43), 3.690 (0.46), 3.750 (0.45),
3.766 (0.94), 3.783 (0.53), 3.791 (0.71), 4.545 (1.05), 4.559 (1.17), 4.566 (1.15),
4.581 (1.01), 4.733 (4.26), 4.766 (0.86), 4.774 (0.45), 4.809 (4.21), 4.822 (5.23),
4.830 (1.60), 4.840 (0.86), 4.865 (1.73), 4.951 (1.12), 4.995 (0.62), 7.093 (0.92),
7.114 (7.45), 7.120 (6.87), 7.141 (0.89).
Intermedijer 226
Metil-3-okso-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0721]
[0722] Metil-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (50,0 mg, 191 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (93,6 mg, 287 µmol) i 5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin (39,3 mg, 201 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 86,9 mg (čistoća 77%, 83% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,80 min; MS (ESIpos): m/z = 421 [M+H]<+>
Intermedijer 227
Metil-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0723]
[0724] Metil-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 574 µmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (281 mg, 862 µmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)-3-fluorpiridin (109 mg, 603 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati etil acetat i voda. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 7/1, 0/1). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 87,5 mg (38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,77 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.63), -0.008 (5.70), 0.008 (5.37),
0.146 (0.68), 1.157 (0.41), 1.175 (0.84), 1.398 (1.64), 1.988 (1.53), 2.327 (0.95),
2.670 (1.01), 3.847 (0.65), 3.901 (16.00), 5.334 (4.58), 5.338 (4.66), 6.984 (1.72),
7.001 (1.74), 7.780 (1.39), 7.798 (1.39), 8.146 (1.28), 8.151 (1.34), 8.170 (1.25),
8.175 (1.34), 8.481 (1.50), 8.484 (1.50).
Intermedijer 228
Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[0725]
[0726] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (33,4 mg, 132 µmοl) ubačen je u acetonitril (5 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (51,6 mg, 158 µmol) i 1-(brommetil)-4-metilbenzol (25,6 mg, 138 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim je dodat 1-(brommetil)-4-metilbenzol (5 mg, 2,6 µmol) i mešana je još 2 h. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 39,5 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja kao smeša dijastereomera.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,02 min; MS (ESIpos): m/z = 358 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.06), 0.008 (0.92), 1.153 (0.40),
1.164 (2.69), 1.181 (2.84), 1.194 (0.43), 1.201 (0.63), 1.236 (0.88), 1.259 (0.60),
1.298 (0.42), 1.344 (0.64), 1.350 (0.72), 1.355 (1.41), 1.386 (16.00), 1.396 (3.32),
1.417 (0.68), 1.424 (0.49), 1.428 (0.55), 1.510 (0.69), 1.548 (0.87), 1.562 (0.66),
2.120 (0.63), 2.130 (0.54), 2.272 (5.05), 2.294 (0.49), 2.523 (0.91), 4.447 (0.54),
4.790 (1.10), 4.820 (1.08), 7.129 (6.94).
Intermedijer 229
Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0727]
[0728] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (503 mg, 1,98 mmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (970 mg, 2,98 mmol) i 5-(brommetil)-2-(trifluormetil)piridin (500 mg, 2,08 mmol). Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi mešana 1 h uz refluks. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 854 mg (čistoća 90%, 94% od teor.) naslovnog jedinjenja kao smeša dijastereomera.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.157 (0.41), 1.177 (3.04), 1.194 (3.00),
1.367 (16.00), 1.548 (0.40), 1.988 (0.72), 2.135 (0.73), 2.145 (0.70), 2.154 (0.41),
4.466 (0.44), 4.475 (0.69), 4.487 (0.44), 5.067 (1.61), 5.074 (1.56), 7.926 (1.76),
8.659 (0.86).
Intermedijer 230
Terc-butil-(5S)-2-[(E)-2-(4-fluorfenil)vinil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1)
[0729]
[0730] Molekulska sita (4A°, 20,0 mg) i [(E)-2-(4-fluorfenil)vinil]borna kiselina (139 mg, 836 µmol) dodati su u dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati trietilamin (120 µl, 840 µmol), bakar(II)acetat (85,4 mg, 460 µmol), terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (100 mg, 418 µmol) i 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-iloksil (71,8 mg, 460 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodat 2 N amonijak u metanolu (50 µl) i zatim je koncentrovana. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat 7/1, 0/1). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,1 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,10 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.24), 0.008 (1.17), 1.014 (0.21),
1.098 (0.22), 1.423 (16.00), 1.864 (0.17), 1.872 (0.18), 2.086 (0.17), 2.097 (0.45),
2.107 (0.44), 2.120 (0.25), 2.134 (0.16), 2.141 (0.17), 2.323 (0.20), 2.327 (0.28),
2.332 (0.21), 2.366 (0.25), 2.523 (1.07), 2.636 (0.18), 2.665 (0.54), 2.669 (0.42),
2.674 (0.32), 2.679 (0.38), 2.691 (0.28), 2.710 (0.37), 2.738 (0.21), 2.750 (0.37),
2.762 (0.24), 2.792 (0.17), 4.502 (0.37), 4.511 (0.40), 4.517 (0.53), 4.526 (0.35),
6.753 (0.74), 6.789 (0.85), 7.121 (0.68), 7.143 (1.38), 7.165 (0.75), 7.393 (0.98),
7.429 (0.90), 7.543 (0.70), 7.557 (0.77), 7.565 (0.75), 7.574 (0.30), 7.579 (0.67).
Intermedijer 231
Etil-(5RS,6RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0731]
[0732] Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (400 mg, čistoća 62%, 888 µmol) ubačen je u acetonitril (6,2 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (579 mg, 1,78 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin (199 mg, 933 µmol). U reakcionu smešu su nakon 48 sata mešanja na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 231 mg (čistoća 73%, 42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,82 min; MS (ESIpos): m/z = 457 [M+H]<+>i Rt= 1.85 min; MS (ESIpos): m/z = 457 [M+H]<+>
Intermedijer 232
Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0733]
[0734] Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (250 mg, čistoća 62%, 555 µmol) ubačen je u acetonitril (3,9 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (362 mg, 1,11 mmol) i 5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin (114 mg, 583 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 131 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>i Rt= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.37), -0.008 (13.25), 0.008
(11.69), 0.146 (1.37), 1.148 (3.00), 1.166 (6.37), 1.185 (9.50), 1.203 (16.00), 1.221
(7.63), 1.833 (0.50), 2.018 (2.69), 2.036 (2.06), 2.052 (0.94), 2.327 (2.19), 2.366
(2.31), 2.523 (6.81), 2.669 (2.50), 2.710 (3.06), 2.764 (1.19), 2.781 (1.88), 2.825
(0.94), 2.869 (0.63), 3.425 (1.00), 4.147 (1.44), 4.154 (1.56), 4.165 (1.62), 4.172
(1.62), 4.179 (2.50), 4.196 (7.44), 4.214 (7.37), 4.232 (2.31), 4.648 (4.00), 4.662
(3.87), 4.815 (1.50), 4.829 (1.62), 5.010 (0.63), 5.058 (9.50), 5.099 (0.69), 7.927
(14.25), 7.930 (11.12), 8.642 (1.69), 8.655 (3.81).
Intermedijer 233
Etil-(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0735]
[0736] Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (566 mg, 2,03 mmol) ubačen je u acetonitril (15 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,32 g, 4,05 mmol) i 3,5-dihlor-2-(hlormetil)piridin (418 mg, 2,13 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 235 mg (čistoća 86%, 23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 8): Rt= 2,82 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>i Rt= 2.87 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.83), -0.008 (16.00), 0.008
(12.50), 0.146 (1.68), 1.168 (2.67), 1.185 (5.56), 1.201 (8.91), 1.219 (15.85), 1.237
(7.62), 1.831 (0.46), 1.850 (0.46), 2.013 (2.74), 2.028 (2.51), 2.045 (1.22), 2.073
(1.22), 2.327 (1.98), 2.366 (2.44), 2.523 (5.94), 2.621 (0.84), 2.648 (1.07), 2.669
(3.28), 2.710 (2.44), 2.754 (1.98), 2.771 (1.07), 2.797 (0.99), 3.416 (1.07), 4.144
(1.30), 4.155 (1.30), 4.161 (1.37), 4.178 (2.74), 4.195 (7.62), 4.213 (7.47), 4.231
(2.36), 4.616 (4.11), 4.629 (4.04), 4.805 (1.52), 4.819 (1.45), 5.007 (1.22), 5.047
(7.70), 5.055 (6.78), 5.060 (8.15), 5.100 (1.22), 8.259 (3.28), 8.264 (4.11), 8.557
(4.27), 8.562 (4.11).
Intermedijer 234
Etil-(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0737]
[0738] Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (432 mg, 1,55 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,01 g, 3,09 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)-3-fluorpiridin (292 mg, 1,62 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 235 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.95), -0.008 (16.00), 0.008
(15.09), 0.146 (1.90), 1.164 (2.12), 1.182 (4.63), 1.198 (4.02), 1.216 (5.88), 1.234
(2.85), 2.005 (0.91), 2.020 (0.82), 2.037 (0.48), 2.073 (1.08), 2.327 (0.95), 2.366
(1.08), 2.523 (3.11), 2.617 (0.43), 2.665 (1.08), 2.669 (1.17), 2.674 (1.08), 2.710
(1.21), 2.733 (0.56), 2.747 (0.82), 2.763 (0.61), 2.822 (0.43), 4.133 (0.48), 4.143
(1.08), 4.150 (1.17), 4.161 (1.17), 4.168 (1.08), 4.175 (1.04), 4.192 (2.81), 4.210
(2.72), 4.228 (0.86), 4.607 (1.43), 4.620 (1.43), 4.793 (1.08), 4.807 (1.08), 5.008
(2.68), 5.017 (2.64), 8.104 (1.30), 8.129 (1.38), 8.476 (1.86).
Intermedijer 235
Etil-(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0739]
[0740] Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (400 mg, 1,43 mmol) ubačen je u acetonitril (7,1 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (934 mg, 2,87 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)piridin (244 mg, 1,50 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 135 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt = 1,65 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>i Rt= 1.68 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
Intermedijer 236
Terc-butil-(5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0741]
[0742] Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (300 mg, 1,18 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (965 mg, 2,96 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin (266 mg, 1,24 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na 60 °C dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 374 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.018 (2.06), 1.035 (2.12), 1.354 (5.48),
1.393 (0.48), 1.410 (16.00), 1.911 (0.98), 2.228 (0.46), 2.241 (0.62), 2.269 (0.49),
2.650 (0.42), 4.303 (0.47), 4.313 (0.45), 5.067 (1.13), 5.079 (1.12), 5.133 (0.72),
7.619 (0.77), 7.632 (0.57), 8.569 (0.89), 8.581 (0.89).
Intermedijer 237
Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0743]
[0744] Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (247 mg, 975 µmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (794 mg, 2,44 mmol) i 5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin (200 mg, 1,02 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na 60 °C dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 274 mg (68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.011 (2.18), 1.028 (2.23), 1.337 (5.62),
1.385 (0.63), 1.406 (16.00), 1.905 (1.13), 2.217 (0.52), 2.230 (0.66), 2.258 (0.53),
2.641 (0.48), 4.279 (0.40), 4.295 (0.47), 4.305 (0.45), 5.019 (2.49), 5.077 (0.86),
7.921 (1.40), 7.931 (0.85), 7.936 (0.83), 8.667 (0.73).
Intermedijer 238
Terc-butil-(5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0745]
[0746] Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (300 mg, 1,18 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (965 mg, 2,96 mmol) i 4-(brommetil)-2-chlor-1-fluorbenzol (278 mg, 1,24 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 327 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,09 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.46), 1.011 (2.15), 1.027 (2.14),
1.348 (0.46), 1.381 (0.71), 1.411 (16.00), 2.186 (0.41), 2.214 (0.51), 2.227 (0.60),
2.255 (0.51), 4.275 (0.41), 4.291 (0.48), 4.302 (0.45), 4.834 (1.64), 7.376 (0.59),
7.399 (0.79), 7.421 (0.44), 7.448 (0.45), 7.453 (0.42), 7.466 (0.45).
Intermedijer 239
Etil-(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0747]
[0748] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (500 mg, 1,70 mmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,39 g, 4,25 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)piridin hidrohlorid (355 mg, 1,79 mmol). Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći koncentrovana na polovinu i na sobnoj temperaturi su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 248 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.41), 0.146 (0.41), 1.183 (4.99),
1.201 (15.06), 1.217 (16.00), 1.234 (6.56), 1.780 (0.75), 1.810 (1.63), 1.841 (1.78),
1.871 (0.84), 2.296 (0.77), 2.324 (2.75), 2.336 (2.13), 2.366 (0.42), 2.670 (0.49),
2.686 (0.67), 2.716 (1.72), 2.740 (1.79), 2.753 (1.97), 2.770 (1.78), 2.780 (2.11),
2.810 (2.19), 2.888 (1.32), 2.895 (1.52), 2.929 (0.83), 2.935 (0.84), 2.986 (1.41),
3.015 (1.12), 3.082 (0.72), 4.148 (0.92), 4.162 (2.00), 4.179 (5.57), 4.197 (5.43),
4.217 (2.69), 4.235 (1.82), 4.245 (0.93), 4.253 (0.62), 4.262 (0.85), 4.531 (1.67),
4.546 (1.90), 4.559 (1.81), 4.573 (1.61), 4.824 (1.22), 4.831 (1.64), 4.844 (1.28),
4.948 (11.83), 4.977 (9.93), 7.234 (2.72), 7.256 (2.91), 7.271 (3.45), 7.292 (3.70),
7.929 (3.74), 7.935 (3.92), 7.949 (3.59), 7.956 (3.73), 8.579 (4.25), 8.584 (4.25).
Intermedijer 240
Terc-butil-(5RS,8RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0749]
[0750] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (300 mg, 1,18 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (424 mg, 1,30 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin (266 mg, 1,24 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 456 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 2,09 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M-H]<+>
Intermedijer 241
Terc-butil-(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0751]
[0752] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (300 mg, 1,18 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (772 mg, 2,37 mmol) i 2-hlor-4-(hlormetil)-1-fluorbenzol (223 mg, 1,24 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 450 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,08 min; MS (ESIpos): m/z = 340 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 242
Terc-butil-(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0754] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (300 mg, 1,18 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (772 mg, 2,37 mmol) i 1-(hlormetil)-2,4-difluorbenzol (202 mg, 1,24 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 400 mg (čistoća 84%, 75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
Intermedijer 243
Metil-(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0755]
[0756] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (110 mg, 559 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml, 38 mmol). Zatim su dodati cezijum karbonat (273 mg, 838 µmol) i 2-hlor-4-(hlormetil)-1-fluorbenzol (105 mg, 587 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći uz refluks dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 58,5 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 340 [M+H]<+>
Intermedijer 244
Metil-(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0757]
[0758] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,52 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (744 mg, 2,28 mmol) i 1-(brommetil)-3-(trifluormetil)benzol (382 mg, 1,60 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći uz refluks dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 345 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 356 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.196 (2.01), 1.212 (3.72), 1.226 (2.33),
1.502 (0.44), 1.530 (0.49), 1.802 (0.57), 1.826 (0.49), 1.835 (0.51), 2.078 (0.89),
2.093 (0.89), 2.120 (0.57), 2.131 (0.51), 2.139 (0.55), 2.147 (0.53), 2.328 (0.59),
2.562 (1.35), 2.577 (0.99), 2.589 (0.99), 2.603 (0.80), 2.629 (0.74), 2.641 (1.31),
2.653 (0.76), 2.671 (1.02), 2.711 (0.51), 2.891 (0.42), 3.702 (16.00), 4.622 (1.08),
4.631 (1.23), 4.637 (1.44), 4.647 (1.10), 4.960 (4.25), 4.965 (4.25), 7.101 (5.21),
7.519 (1.04), 7.538 (1.71), 7.584 (0.95), 7.603 (2.01), 7.615 (2.41), 7.658 (1.63),
7.676 (0.87).
Intermedijer 245
Metil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0759]
[0760] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (187 mg, 947 µmol) ubačen je u acetonitril (4,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (463 mg, 1,42 mmol) i 2-(brommetil)-5-(trifluormetil)piridin (250 mg, 1,04 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 185 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.560 (0.40), 1.827 (0.50), 1.841 (0.44),
1.851 (0.42), 2.083 (0.45), 2.092 (0.76), 2.106 (0.76), 2.126 (0.45), 2.135 (0.53),
2.147 (0.47), 2.155 (0.52), 2.163 (0.48), 2.559 (0.44), 2.575 (0.90), 2.589 (0.77),
2.601 (0.78), 2.615 (0.64), 2.637 (0.60), 2.649 (1.13), 2.661 (0.72), 2.691 (0.47),
3.715 (16.00), 4.631 (1.05), 4.641 (1.16), 4.647 (1.36), 4.657 (1.01), 5.063 (5.88),
7.396 (1.64), 7.416 (1.71), 8.223 (1.06), 8.228 (1.09), 8.243 (1.02), 8.249 (1.04),
8.935 (1.74).
Intermedijer 246
Metil-(5S)-2-[(5-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0761]
[0762] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (364 mg, 1,12 mmol) i 3-(hlormetil)-5-metil-1H-pirazol hidrohlorid (178 mg, 1,06 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 60,7 mg (21% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 292 [M+H]<+>
Intermedijer 247
Metil-(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0763]
[0764] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 761 µmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (273 mg, 837 µmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-4-(trifluormetil)piridin hidrohlorid (532 mg, čistoća 40%, 799 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 137 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
Intermedijer 248
Metil-(5S)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0765]
[0766] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (826 mg, 2,54 mmol) i 4-(brommetil)-1-fluor-2-(trifluormetil)benzol (287 mg, 1,12 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 370 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
Intermedijer 249
Metil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0767]
[0768] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (400 mg, 2,03 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (991 mg, 3,04 mmol) i 5-(brommetil)-2-(trifluormetil)piridin (511 mg, 2,13 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 622 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
Intermedijer 250
Metil-(5S)-2-{[6-fluor-2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0769]
[0770] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, 1,01 mmol) ubačen je u acetonitril. Zatim su dodati cezijum karbonat (826 mg, 2,54 mmol) i 4-(hlormetil)-6-fluor-2-(trifluormetil)hinolin (453 mg, čistoća 62%, 1,06 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 59,0 mg (14% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 425 [M+H]<+>
Intermedijer 251
Metil-(5S)-2-(6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-ilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0771]
[0772] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (85,5 mg, 433 µmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (353 mg, 1,08 mmol) i 3-(hlormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin hidrohlorid (115 mg, 563 µmol). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi i zatim 3 sata pod refluksom, reakciona smeša je ohlađena, i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 106 mg (čistoća 90%, 67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 329 [M+H]<+>
Intermedijer 252
Metil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0773]
[0774] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (90,0 mg, 456 µmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (372 mg, 1,14 mmol) i 3-(hlormetil)-5-(trifluormetil)piridin (116 mg, 593 µmol). Reakciona smeša je mešana 3 sata pod refluksom, preko noći na sobnoj temperaturi, i zatim ponovo 4 sata pod refluksom. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,9 mg (25% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
Intermedijer 253
Metil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0775]
[0776] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (28,3 mg, 143 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (187 mg, 574 µmol) i 3-(hlormetil)-2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin (46,0 mg, 187 µmol). Nakon 3 sata mešanja pod refluksom, reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodati su voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 9,70 mg (17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 408 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.26), 0.008 (1.74), 1.572 (0.46),
1.832 (0.55), 1.843 (0.53), 1.857 (0.48), 1.867 (0.48), 2.111 (0.58), 2.135 (1.21),
2.144 (0.85), 2.152 (0.66), 2.164 (0.53), 2.172 (0.55), 2.179 (0.48), 2.327 (0.61),
2.366 (0.52), 2.523 (2.03), 2.561 (0.52), 2.589 (0.90), 2.604 (0.78), 2.616 (0.79),
2.630 (0.66), 2.656 (0.65), 2.667 (1.51), 2.679 (0.84), 2.709 (0.92), 3.732 (16.00),
4.672 (1.05), 4.682 (1.15), 4.688 (1.44), 4.697 (1.01), 5.239 (5.10), 7.818 (1.42),
7.828 (1.44), 7.838 (1.45), 7.849 (1.49), 8.434 (3.29), 8.583 (1.49), 8.588 (1.59),
8.604 (1.46), 8.609 (1.43), 9.248 (1.43), 9.253 (1.53), 9.258 (1.53), 9.263 (1.42).
Intermedijer 254
Terc-butil-(5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0777]
[0778] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (1,33 g, 5,55 mmol) ubačen je u acetonitril (30 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (4,52 g, 13,9 mmol), 5-(hlormetil)-2-metoksipiridin (963 mg, 6,11 mmol) i natrijum jodid (5,00 mg, 0,03 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 4 dana na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent cikloheksan/etil acetat). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 751 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.385 (16.00), 2.048 (0.54), 2.058 (0.48),
2.525 (0.41), 3.825 (6.81), 4.424 (0.60), 4.791 (2.68), 6.785 (0.78), 6.807 (0.84),
7.574 (0.51), 7.580 (0.52), 7.595 (0.49), 7.602 (0.50), 8.074 (0.67), 8.080 (0.65).
Intermedijer 255
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)pirazin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0779]
[0780] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (4,1 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) i 2-(hlormetil)-5-(trifluormetil)pirazin (259 mg, 1,32 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 111 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,83 min; MS (ESlneg): m/z = 457 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 256
Terc-butil-(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0781]
[0782] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (970 mg, 4,05 mmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (3,30 g, 10,1 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin (978 mg, čistoća 93%, 4,26 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 2 sata pod refluksom i mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 1,37 g (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,92 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
Intermedijer 257
Terc-butil-(5S)-2-[(1RS)-1-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 2 izomera)
[0784] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, 836 µmol) ubačen je u acetonitril (5,5 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (681 mg, 2,09 mmol) i 1-[(1RS)-1-hloretil]-4-metilbenzol (142 mg, 919 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 69,8 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.322 (0.75), 1.341 (16.00), 1.587 (2.31),
1.605 (2.28), 2.048 (0.49), 2.059 (0.49), 2.266 (4.00), 2.518 (0.52), 4.407 (0.57),
5.271 (0.49), 5.288 (0.48), 7.111 (0.75), 7.131 (1.46), 7.173 (1.69), 7.193 (0.87).
Intermedijer 258
Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0785]
[0786] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (250 mg, 1,04 mmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (851 mg, 2,61 mmol) i 1-(2-brometil)-4-metilbenzol (180 µl, 1,1 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 238 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.394 (16.00), 2.041 (0.53), 2.051 (0.48),
2.255 (4.71), 2.864 (0.59), 2.883 (1.12), 2.902 (0.64), 3.778 (0.43), 3.783 (0.44),
3.796 (0.81), 3.803 (0.81), 4.373 (0.59), 7.089 (6.23).
Intermedijer 259
Terc-butil-(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0787]
[0788] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (991 mg, 4,14 mmol) ubačen je u acetonitril (19 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,48 g, 4,55 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-4-(trifluormetil)piridin (1,00 g, 4,35 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći pod refluksom dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 794 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 260
Terc-butil-(5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0789]
[0790] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (120 mg, 500 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (408 mg, 1,25 mmol) i 1-[1-(brommetil)ciklopropil]-4-metilbenzol (124 mg, 550 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 167 mg (čistoća 90%, 78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,13 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.752 (0.63), 0.772 (0.71), 0.977 (1.55),
1.157 (0.59), 1.175 (1.19), 1.192 (0.62), 1.344 (1.25), 1.378 (16.00), 1.405 (1.99),
1.417 (0.84), 1.988 (2.18), 2.016 (0.51), 2.027 (0.54), 2.037 (0.43), 2.232 (4.19),
2.249 (0.42), 2.519 (0.47), 3.755 (0.54), 3.792 (0.96), 3.866 (1.00), 3.902 (0.51),
4.020 (0.51), 4.038 (0.51), 4.322 (0.42), 4.333 (0.42), 4.337 (0.59), 4.347 (0.44),
7.025 (0.89), 7.045 (1.39), 7.119 (1.76), 7.139 (1.14).
Intermedijer 261
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0791]
[0792] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (208 mg, 868 µmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,13 g, 3,47 mmol) i 3-(hlormetil)-2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin (278 mg, 1,13 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 48 sati na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 146 mg (38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,65 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.421 (16.00), 2.113 (0.64), 2.125 (0.64),
2.665 (0.41), 4.520 (0.73), 5.235 (1.07), 7.820 (0.54), 7.830 (0.56), 7.840 (0.56),
7.851 (0.57), 8.449 (1.25), 8.564 (0.56), 8.569 (0.57), 8.585 (0.55), 8.589 (0.52),
9.245 (0.61), 9.250 (0.64), 9.256 (0.63), 9.261 (0.57).
Intermedijer 262
Terc-butil-(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0793]
[0794] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (552 mg, 2,31 mmol) ubačen je u acetonitril (11 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,13 g, 3,46 mmol) i 5-(brommetil)-2-hlorpiridin (500 mg, 2,42 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 509 mg (čistoća 93%, 56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
Intermedijer 263
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0795]
[0796] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (1,00 g, 4,18 mmol) ubačen je u acetonitril (21 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (2,04 g, 6,27 mmol) i 5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin (858 mg, 4,39 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 1,71 g (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,73 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
Intermedijer 264
Terc-butil-(5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0797]
[0798] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (163 mg, 682 µmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (555 mg, 1,70 mmol) i 3-hlor-5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)piridin (549 mg, čistoća 30%, 716 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 156 mg (čistoća 72%, 38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 265
Terc-butil-(5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0799]
[0800] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (95,0 mg, 397 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (323 mg, 992 µmol) i 3-hlor-2-(2-hloretil)-5-(trifluormetil)piridin (113 mg, čistoća 94%, 437 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 74,5 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.40), 0.008 (1.82), 1.389 (16.00),
2.034 (0.55), 2.619 (0.43), 2.669 (0.51), 4.058 (0.75), 4.077 (1.16), 4.094 (0.66),
4.361 (0.59), 8.407 (0.85), 8.871 (0.84).
Intermedijer 266
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0801]
[0802] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (400 mg, 1,67 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (817 mg, 2,51 mmol) i 1-(brommetil)-3-(trifluormetil)benzol (420 mg, 1,76 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 581 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,98 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.69), 0.008 (0.57), 1.384 (16.00),
1.400 (0.78), 2.068 (0.55), 2.077 (0.49), 2.523 (0.41), 4.460 (0.57), 4.949 (1.19),
4.965 (1.15), 7.558 (0.62), 7.575 (0.40), 7.594 (0.64), 7.629 (0.79), 7.652 (0.50).
Intermedijer 267
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0803]
[0804] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (400 mg, 1,67 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (572 mg, 1,76 mmol) i 1-(hlormetil)-2,4,5-trifluorbenzol (317 mg, 1,76 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 523 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,87 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.175 (0.64), 1.394 (16.00), 1.988 (1.17),
2.060 (0.65), 2.069 (0.65), 2.072 (0.65), 2.627 (0.44), 4.428 (0.44), 4.442 (0.62),
4.864 (2.33).
Intermedijer 268
Terc-butil-(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0805]
[0806] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (500 mg, 2,09 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,70 g, 5,22 mmol) i 4-(brommetil)-1,2-difluorbenzol (454 mg, 2,19 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 900 mg (čistoća 78%, 92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 310 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 269
Terc-butil-(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0807]
[0808] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (400 mg, 1,67 mmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,36 g, 4,18 mmol) i 2-hlor-4-(hlormetil)-1-(trifluormetil)benzol (402 mg, 1,76 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 190 mg (26% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,12 min; MS (ESIpos): m/z = 454 [M+Na]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.90), 0.008 (0.82), 1.390 (16.00),
2.075 (0.55), 4.466 (0.60), 4.970 (1.54), 7.404 (0.46), 7.425 (0.49), 7.584 (0.94),
7.844 (0.81), 7.865 (0.75).
Intermedijer 270
Terc-butil-(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0809]
[0810] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (500 mg, 2,09 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,70 g, 5,22 mmol) i 4-(brommetil)-2-hlor-1-fluorbenzol (490 mg, 2,19 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 600 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
Intermedijer 271
Terc-butil-(5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0811]
[0812] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (500 mg, 2,09 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,70 g, 5,22 mmol) i 4-(hlormetil)-2-fluor-1-(trifluormetil)benzol (466 mg, 2,19 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 72 sati na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 707 mg (čistoća 91%, 74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 272
Terc-butil-(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0813]
[0814] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (371 mg, 1,55 mmol) ubačen je u acetonitril (7,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,11 g, 3,41 mmol) i 4-(hlormetil)-3-fluor-2-(trifluormetil)piridin (348 mg, 1,63 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 420 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,83 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.228 (0.06), 1.359 (0.10), 1.388 (16.00),
1.471 (0.11), 1.484 (0.16), 1.497 (0.15), 1.506 (0.16), 1.518 (0.17), 1.531 (0.12),
1.545 (0.15), 1.815 (0.19), 1.825 (0.18), 1.837 (0.16), 1.849 (0.16), 2.068 (0.55),
2.081 (0.45), 2.106 (0.17), 2.114 (0.16), 2.322 (0.04), 2.361 (0.04), 2.568 (0.26),
2.581 (0.27), 2.595 (0.21), 2.630 (0.21), 2.641 (0.36), 2.653 (0.23), 2.672 (0.13),
2.683 (0.17), 2.695 (0.09), 4.447 (0.39), 4.461 (0.60), 4.471 (0.37), 4.942 (0.11),
5.083 (2.35), 7.596 (0.35), 7.609 (0.64), 7.622 (0.35), 8.566 (0.73), 8.578 (0.71).
Intermedijer 273
Terc-butil-(5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0815]
[0816] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (129 mg, 541 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (441 mg, 1,35 mmol) i 2-[1-(brommetil)ciklopropil]-6-hlorpiridin (140 mg, 568 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 224 mg (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,94 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.157 (2.03), 1.161 (1.97), 1.175 (3.58),
1.192 (1.29), 1.253 (0.99), 1.331 (0.71), 1.376 (16.00), 1.406 (3.62), 1.988 (4.27),
2.023 (0.56), 2.036 (0.59), 2.046 (0.41), 2.520 (0.43), 4.020 (0.99), 4.038 (1.01),
4.056 (0.41), 4.096 (2.12), 4.388 (0.40), 4.393 (0.56), 7.245 (0.76), 7.265 (0.83),
7.606 (0.68), 7.625 (0.99), 7.696 (0.72), 7.715 (1.13), 7.735 (0.49).
Intermedijer 274
Terc-butil-(5S)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0817]
[0818] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (344 mg, 1,44 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,17 g, 3,59 mmol) i 1-[1-(brommetil)ciklopropil]-4-fluorbenzol (346 mg, 1,51 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 557 mg (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,04 min; MS (ESIpos): m/z = 388 [M+H]<+>
Intermedijer 275
Terc-butil-(5S)-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0819]
[0820] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (172 mg, 717 µmol) ubačen je u acetonitril (4,8 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (584 mg, 1,79 mmol) i 1-[1-(brommetil)ciklopropil]-4-metoksibenzol (190 mg, 789 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 222 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,95 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.699 (0.14), 0.724 (0.72), 0.743 (0.79),
0.766 (0.18), 0.839 (0.08), 0.931 (0.17), 0.949 (1.72), 0.971 (0.15), 1.219 (0.07),
1.354 (1.10), 1.380 (16.00), 1.512 (0.20), 1.537 (0.16), 1.780 (0.22), 1.802 (0.20),
1.814 (0.20), 2.019 (0.54), 2.030 (0.56), 2.040 (0.39), 2.327 (0.07), 2.469 (0.14),
2.525 (0.43), 2.595 (0.25), 2.606 (0.42), 2.618 (0.25), 2.637 (0.15), 2.648 (0.21),
2.660 (0.13), 2.709 (0.06), 3.698 (6.61), 3.711 (0.51), 3.726 (0.56), 3.762 (1.00),
3.831 (1.00), 3.867 (0.53), 4.286 (0.06), 4.319 (0.40), 4.334 (0.59), 4.344 (0.39),
6.776 (1.42), 6.798 (1.61), 6.818 (0.10), 6.840 (0.10), 7.142 (1.66), 7.163 (1.47),
7.227 (0.10), 7.248 (0.09).
Intermedijer 276
Terc-butil-(5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0821]
[0822] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (313 mg, 1,31 mmol) ubačen je u acetonitril (8,7 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,06 g, 3,27 mmol) i 1-[1-(brommetil)ciklopropil]-2,4-difluorbenzol (355 mg, 1,44 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 72 sati na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 256 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,38 min; MS (ESIpos): m/z = 350 [M-tBu]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.007 (0.24), 0.747 (0.38), 0.759 (1.23),
0.774 (0.45), 0.996 (0.45), 1.007 (1.20), 1.023 (0.37), 1.375 (16.00), 1.466 (0.16),
1.501 (0.17), 1.527 (0.11), 1.764 (0.19), 1.786 (0.17), 1.798 (0.16), 2.005 (0.56),
2.016 (0.45), 2.433 (0.12), 2.448 (0.15), 2.460 (0.14), 2.475 (0.36), 2.563 (0.22),
2.575 (0.38), 2.586 (0.22), 2.605 (0.13), 2.616 (0.19), 3.707 (0.32), 3.743 (1.13),
3.765 (1.16), 3.801 (0.32), 4.278 (0.39), 4.293 (0.62), 4.303 (0.37), 6.882 (0.18),
6.898 (0.37), 6.903 (0.38), 6.918 (0.20), 6.924 (0.21), 7.082 (0.23), 7.089 (0.24),
7.111 (0.34), 7.133 (0.26), 7.138 (0.45), 7.160 (0.46), 7.177 (0.46), 7.198 (0.21).
Intermedijer 277
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0823]
[0824] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (80,4 mg, 336 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (274 mg, 840 µmol) i 1-[1-(brommetil)ciklopropil]-4-(trifluormetil)benzol (110 mg, čistoća 94%, 370 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 113 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M-tBu]<+>
Intermedijer 278
Terc-butil-(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0825]
[0826] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) i 1-(hlormetil)-2,4-difluorbenzol (214 mg, 1,32 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 423 mg (92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,81 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
Intermedijer 279
Terc-butil-(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0827]
[0828] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (250 mg, 1,04 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (851 mg, 2,61 mmol) i 1-(brommetil)-2-hlor-4-fluorbenzol (245 mg, 1,10 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 370 mg (88% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 326 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 280
Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0829]
[0830] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (664 mg, 2,78 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,36 g, 4,17 mmol) i 3-hlor-5-(hlormetil)-2-metoksipiridin (560 mg, 2,92 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 718 mg (čistoća 90%, 59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
Intermedijer 281
Terc-butil-(5S)-2-(4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0831]
[0832] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (250 mg, 1,04 mmol) ubačen je u acetonitril (6,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (851 mg, 2,61 mmol) i 1-(brommetil)-4-fluorbenzol (207 mg, 1,10 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 299 mg (82% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,75 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.334 (0.45), 1.392 (16.00), 2.057 (0.50),
2.067 (0.46), 2.073 (0.41), 4.435 (0.57), 4.823 (2.34), 7.143 (0.57), 7.165 (1.32),
7.188 (0.83), 7.276 (0.70), 7.290 (0.77), 7.298 (0.62), 7.312 (0.51).
Intermedijer 282
Terc-butil-(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0833]
[0834] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (266 mg, 1,11 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (904 mg, 2,77 mmol) i 2-hlor-6-(hlormetil)piridin (189 mg, 1,17 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 372 mg (92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,65 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.009 (0.09), 0.007 (0.09), 0.786 (0.01),
0.805 (0.03), 0.828 (0.02), 0.846 (0.04), 0.865 (0.02), 1.139 (0.04), 1.156 (0.65),
1.174 (1.28), 1.191 (0.66), 1.248 (0.07), 1.372 (0.24), 1.409 (16.00), 1.456 (0.05),
1.469 (0.08), 1.482 (0.12), 1.495 (0.17), 1.507 (0.16), 1.517 (0.17), 1.529 (0.18),
1.542 (0.13), 1.556 (0.10), 1.566 (0.12), 1.823 (0.21), 1.832 (0.19), 1.844 (0.18),
1.856 (0.17), 1.867 (0.13), 1.987 (2.34), 2.044 (0.07), 2.055 (0.08), 2.072 (0.92),
2.081 (0.55), 2.090 (0.52), 2.098 (0.37), 2.109 (0.21), 2.116 (0.19), 2.124 (0.17),
2.136 (0.06), 2.145 (0.05), 2.152 (0.05), 2.160 (0.04), 2.327 (0.02), 2.365 (0.02),
2.573 (0.27), 2.585 (0.28), 2.599 (0.22), 2.630 (0.22), 2.641 (0.38), 2.653 (0.24),
2.672 (0.13), 2.683 (0.18), 2.695 (0.10), 2.808 (0.01), 4.002 (0.19), 4.020 (0.56),
4.037 (0.55), 4.055 (0.18), 4.451 (0.39), 4.461 (0.41), 4.465 (0.58), 4.475 (0.38),
4.737 (0.02), 4.771 (0.08), 4.872 (0.06), 4.915 (2.29), 4.957 (0.06), 5.154 (0.03),
5.169 (0.03), 5.392 (0.02), 5.405 (0.02), 7.163 (0.72), 7.182 (0.77), 7.332 (0.02),
7.350 (0.02), 7.437 (0.62), 7.456 (0.69), 7.482 (0.03), 7.502 (0.03), 7.515 (0.01),
7.558 (0.01), 7.577 (0.01), 7.842 (0.58), 7.861 (1.02), 7.881 (0.51), 7.904 (0.03),
7.918 (0.02).
Intermedijer 283
Metil-(5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0835]
[0836] Metil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (224 mg, 1,13 mmol) ubačen je u acetonitril (8,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (923 mg, 2,83 mmol) i 1-(2-hloretil)-4-fluorbenzol (189 mg, 1,19 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 221 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 320 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.81), -0.008 (16.00), 0.008
(13.92), 0.146 (1.74), 1.157 (0.60), 1.175 (1.34), 1.193 (0.74), 1.988 (2.48), 2.073
(0.80), 2.328 (1.81), 2.366 (1.21), 2.523 (5.29), 2.602 (0.54), 2.670 (1.94), 2.710
(1.27), 2.910 (0.54), 2.929 (0.87), 2.947 (0.54), 3.677 (5.42), 3.687 (1.41), 3.808
(0.67), 3.826 (1.00), 3.844 (0.60), 4.021 (0.60), 4.038 (0.60), 4.533 (0.47), 7.067
(0.47), 7.090 (1.14), 7.112 (0.74), 7.208 (0.67), 7.222 (0.74), 7.243 (0.54).
Intermedijer 284
Terc-butil-(5S)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0837]
[0838] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (100 mg, 418 µmol) ubačen je u acetonitril (4,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (272 mg, 836 µmol) i 1-(brommetil)-4-metoksibenzol (88,2 mg, 439 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 129 mg (čistoća 90%, 77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 304 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 285
Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0839]
[0840] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (12 ml, 230 mmol). Zatim su dodati cezijum karbonat (817 mg, 2,51 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)-3-fluorpiridin (237 mg, 1,32 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 465 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
Intermedijer 286
Terc-butil-(5S)-2-[(5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0842] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (275 mg, 1,15 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (936 mg, 2,87 mmol) i 2-(hlormetil)-5-fluorpiridin hidrohlorid (220 mg, 1,21 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 72 sati na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 345 mg (83% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 349 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.156 (0.20), 1.174 (0.36), 1.191 (0.20),
1.353 (0.26), 1.408 (16.00), 1.487 (0.22), 1.499 (0.22), 1.510 (0.24), 1.521 (0.25),
1.534 (0.19), 1.814 (0.28), 1.824 (0.28), 1.836 (0.24), 1.847 (0.24), 1.858 (0.18),
1.987 (0.66), 2.049 (0.18), 2.072 (0.93), 2.083 (0.69), 2.107 (0.24), 2.115 (0.20),
2.557 (0.30), 2.570 (0.30), 2.584 (0.24), 2.617 (0.29), 2.628 (0.49), 2.639 (0.29),
2.670 (0.26), 4.440 (0.45), 4.453 (0.67), 4.465 (0.42), 4.928 (1.68), 4.934 (1.63),
7.255 (0.43), 7.266 (0.44), 7.277 (0.49), 7.288 (0.46), 7.701 (0.26), 7.708 (0.25),
7.723 (0.49), 7.730 (0.47), 7.745 (0.24), 7.752 (0.24), 8.513 (0.78), 8.519 (0.73).
Intermedijer 287
Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0844] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (250 mg, 1,04 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (851 mg, 2,61 mmol) i 1-(2-brometil)-4-fluorbenzol (223 mg, 1,10 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 340 mg (83% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.364 (0.43), 1.391 (16.00), 1.406 (2.02),
1.414 (0.60), 2.039 (0.72), 2.049 (0.64), 2.638 (0.44), 2.909 (0.64), 2.927 (1.21),
2.946 (0.68), 3.807 (0.87), 3.825 (1.29), 3.843 (0.76), 4.352 (0.47), 4.366 (0.64),
4.376 (0.41), 7.062 (0.61), 7.084 (1.28), 7.106 (0.77), 7.219 (0.78), 7.233 (0.93),
7.240 (0.73), 7.254 (0.57).
Intermedijer 288
Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0845]
[0846] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol) i 3-hlor-5-(hlormetil)piridin (213 mg, 1,32 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodat 3-hlor-5-(hlormetil)piridin (213 mg, 1,32 mmol) i mešano je 4 sata na 60 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 450 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
Intermedijer 289
Terc-butil-(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0847]
[0848] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (449 mg, 1,38 mmol) i 4-(brommetil)-1-hlor-2-fluorbenzol (294 mg, 1,32 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 363 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 8): Rt= 3,17 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
Intermedijer 290
Terc-butil-(5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0849]
[0850] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, 836 µmol) ubačen je u acetonitril (1,3 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (545 mg, 1,67 mmol) i 2-(hlormetil)-5-metoksipiridin (138 mg, 878 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 196 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
Intermedijer 291
Terc-butil-(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0851]
[0852] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (449 mg, 1,38 mmol) i 3,5-dihlor-2-(hlormetil)piridin (271 mg, 1,38 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 260 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
Intermedijer 292
Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0854] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (250 mg, 1,04 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (851 mg, 2,61 mmol) i 1-(2-brometil)-4-metoksibenzol (170 µl, 1,1 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 4 sati na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 369 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,86 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.395 (16.00), 1.405 (1.18), 1.417 (0.64),
2.043 (0.56), 2.052 (0.51), 2.844 (0.59), 2.863 (1.09), 2.882 (0.63), 3.713 (6.85),
3.727 (0.83), 3.764 (0.44), 3.768 (0.48), 3.781 (0.80), 3.788 (0.83), 3.801 (0.41),
4.359 (0.41), 4.373 (0.62), 6.827 (1.37), 6.848 (1.63), 7.113 (1.43), 7.135 (1.23).
Intermedijer 293
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0855]
[0856] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) rastvoren je u acetonitrilu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat cezijum karbonat (1,02 g, 3,13 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i 1 sat na 50 °C. Ponovo je dodat 5-(hlormetil)-3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol (258 mg, čistoća 95%, 1,32 mmol) i smeša je mešana 5 sati na 50 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo je dodat 5-(hlormetil)-3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol (94 mg, čistoća 95%, 0,48 mmol) i smeša je mešana preko noći na 50 °C. Ponovo je dodat 5-(hlormetil)-3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol (94 mg, čistoća 95%, 0,48 mmol) i smeša je mešana 5 sati na 50 °C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 322 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,82 min; MS (ESIpos): m/z = 334 [M-tBu]<+>
Intermedijer 294
Terc-butil-(5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0857]
[0858] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (199 mg, 833 µmol) ubačen je u acetonitril (7,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (815 mg, 2,50 mmol) i 3-(hlormetil)-1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin (167 mg, 917 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 203 mg (čistoća 88%, 56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 385 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.19), 1.175 (0.42), 1.372 (16.00),
1.406 (0.56), 1.988 (0.75), 2.033 (0.53), 2.041 (0.56), 2.524 (0.57), 2.579 (0.42),
4.007 (0.86), 4.028 (5.82), 4.433 (0.40), 4.443 (0.43), 4.448 (0.59), 5.124 (1.50),
5.142 (1.48), 7.178 (0.58), 7.189 (0.61), 7.198 (0.64), 7.209 (0.62), 8.193 (0.63),
8.197 (0.64), 8.213 (0.61), 8.217 (0.60), 8.546 (0.68), 8.550 (0.68), 8.557 (0.64),
8.561 (0.60).
Intermedijer 295
Terc-butil-(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0859]
[0860] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (258 mg, 1,08 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (879 mg, 2,70 mmol) i 2-(hlormetil)-3,5-difluorpiridin (218 mg, čistoća 89%, 1,19 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 sata na sobnoj temperaturi, 8 sati na 50 °C i preko noći na sobnoj temperaturi, i zatim su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 90,1 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 312 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.404 (16.00), 2.048 (0.56), 2.059 (0.56),
2.517 (0.51), 2.588 (0.42), 4.411 (0.42), 4.421 (0.44), 4.426 (0.58), 4.974 (0.83),
4.977 (0.82), 4.989 (0.82), 8.461 (0.78), 8.467 (0.74).
Intermedijer 296
Terc-butil-(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0861]
[0862] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (352 mg, 1,47 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,20 g, 3,68 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)piridin (262 mg, 1,62 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 sata na sobnoj temperaturi, 4 sata na 50 °C i preko noći na sobnoj temperaturi, i zatim su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 269 mg (čistoća 88%, 44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 311 [M+H]<+>
Intermedijer 297
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0863]
[0864] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (176 mg, 737 µmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml, 95 mmol). Zatim su dodati cezijum karbonat (601 mg, 1,84 mmol) i 2-(hlormetil)-6-(trifluormetil)piridin (159 mg, 811 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 256 mg (čistoća 88%, 76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,94 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
Intermedijer 298
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0865]
[0866] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (817 mg, 2,51 mmol) i 2-(hlormetil)-5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol (257 mg, 1,38 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 735 mg (čistoća 66%, 99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 334 [M-tBu+H]<+>
Intermedijer 299
Terc-butil-(5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0868] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (174 mg, 725 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (473 mg, 1,45 mmol) i 5-(hlormetil)-1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol (170 mg, 798 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 283 mg (čistoća 89%, 84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 300
Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0869]
[0870] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (817 mg, 2,51 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)piridin (223 mg, 1,38 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 450 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,61 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
Intermedijer 301
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0871]
[0872] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (300 mg, 1,25 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (817 mg, 2,51 mmol) i 4-(hlormetil)-2-(trifluormetil)-1,3-tiazol (276 mg, čistoća 96%, 1,32 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 500 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
Intermedijer 302
Terc-butil-(5S)-2-{[1-metil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0874] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (234 mg, 978 µmol) ubačen je u acetonitril (5,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (638 mg, 1,96 mmol) i 3-(hlormetil)-1-metil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol (204 mg, 1,03 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 91,0 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,75 min; MS (ESIpos): m/z = 402 [M+H]<+>
Intermedijer 303
Terc-butil-(5S)-2-{[1-benzil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0875]
[0876] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (548 mg, 2,29 mmol) ubačen je u acetonitril (20 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,49 g, 4,58 mmol) i 1-benzil-3-(hlormetil)-5-(trifluormetil)-1H-pirazol (728 mg, čistoća 95%, 2,52 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 781 mg (čistoća 76%, 54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 2,12 min; MS (ESIpos): m/z = 478 [M+H]<+>
Intermedijer 304
Terc-butil-(5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0877]
[0878] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (396 mg, 1,66 mmol) ubačen je u acetonitril (6,6 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,08 g, 3,31 mmol) i 3-brom-5-(hlormetil)piridin (376 mg, 1,82 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 146 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,64 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.390 (16.00), 2.066 (0.53), 2.075 (0.53),
2.640 (0.40), 4.458 (0.61), 4.926 (1.27), 4.939 (1.25), 7.915 (0.87), 8.468 (0.83),
8.472 (0.90), 8.643 (0.71), 8.649 (0.75).
Intermedijer 305
Terc-butil-(5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0879]
[0880] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (309 mg, 1,29 mmol) ubačen je u dihlormetan (7,3 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,05 g, 3,23 mmol) i 5-brom-2-(hlormetil)piridin (347 mg, 1,68 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 5 sati na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 580 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
Intermedijer 306
Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[0881]
[0882] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (645 mg, 2,70 mmol) ubačen je u acetonitril (17 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (2,20 g, 6,74 mmol) i 2-hlor-1-(4-metilfenil)etanon (500 mg, 2,97 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 605 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 316 [M+H]<+>
Intermedijer 307
(5RS,6RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0883]
[0884] Etil-(5RS,6RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (231 mg, 506 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (48,5 mg, 2,02 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 193 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,38 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
Intermedijer 308
(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0885]
[0886] Etil-(5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (131 mg, 299 µmοl) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (28,6 mg, 1,20 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 109 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.95), -0.008 (7.81), 0.008 (7.27),
0.146 (0.98), 1.157 (1.55), 1.169 (1.23), 1.175 (3.42), 1.181 (1.45), 1.192 (1.68),
1.236 (0.82), 1.356 (3.51), 1.908 (0.79), 1.946 (1.11), 1.959 (1.33), 1.973 (1.23),
1.988 (6.67), 2.061 (2.06), 2.075 (2.18), 2.097 (1.36), 2.112 (1.26), 2.183 (0.51),
2.328 (1.08), 2.366 (1.33), 2.523 (3.35), 2.600 (0.82), 2.615 (0.82), 2.642 (1.55),
2.669 (2.28), 2.710 (1.36), 2.747 (1.20), 2.761 (2.34), 2.775 (1.30), 2.791 (0.82),
2.804 (1.26), 2.820 (0.66), 3.428 (1.08), 3.439 (1.33), 3.452 (1.58), 3.463 (1.55),
4.002 (0.47), 4.020 (1.39), 4.038 (1.39), 4.564 (5.69), 4.573 (5.50), 5.015 (1.30),
5.056 (8.73), 5.069 (7.91), 5.109 (1.30), 7.900 (0.66), 7.920 (16.00), 8.646 (5.88).
Intermedijer 309
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0887]
[0888] Etil-(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (235 mg, 535 µmοl) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (51,3 mg, 2,14 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 218 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.94), -0.008 (13.63), 0.008 (8.92),
0.146 (0.97), 1.157 (0.78), 1.169 (0.80), 1.175 (1.72), 1.181 (1.17), 1.192 (0.80),
1.356 (2.55), 1.908 (0.92), 1.950 (0.97), 1.965 (1.08), 1.974 (1.06), 1.988 (3.47),
2.031 (0.62), 2.044 (1.61), 2.058 (1.72), 2.080 (0.97), 2.094 (0.83), 2.327 (0.80),
2.366 (0.85), 2.523 (5.82), 2.574 (0.99), 2.603 (1.33), 2.619 (1.17), 2.643 (0.83),
2.670 (0.94), 2.710 (1.54), 2.728 (1.79), 2.742 (1.06), 2.758 (0.69), 2.773 (1.01),
3.434 (1.08), 3.445 (1.22), 3.456 (1.20), 4.020 (0.64), 4.038 (0.62), 4.529 (4.25),
4.538 (4.11), 5.056 (16.00), 8.253 (3.70), 8.258 (3.91), 8.553 (4.30), 8.558 (4.14),
13.919 (0.46).
Intermedijer 310
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0889]
[0890] Etil-(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (235 mg, 556 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (53,2 mg, 2,22 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 202 mg (92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
Intermedijer 311
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0891]
[0892] Etil-(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (150 mg, 371 µmοl) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (35,5 mg, 1,48 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 139 mg (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
Intermedijer 312
(5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0893]
[0894] Terc-butil-(5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (375 mg, 870 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,3 ml, 17 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 422 mg (čistoća 90%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.49), -0.008 (6.45), 0.008 (2.97),
0.146 (0.43), 1.022 (14.53), 1.039 (14.32), 1.111 (1.07), 1.354 (5.64), 1.385 (0.49),
1.410 (10.08), 1.456 (1.36), 1.484 (2.44), 1.511 (1.83), 1.517 (2.24), 1.535 (0.60),
1.544 (1.24), 1.912 (7.07), 1.932 (1.18), 1.939 (1.27), 1.949 (1.28), 1.966 (1.07),
2.195 (2.45), 2.223 (2.20), 2.235 (3.03), 2.263 (3.53), 2.276 (1.56), 2.294 (1.26),
2.309 (1.13), 2.329 (0.54), 2.367 (0.46), 2.524 (3.54), 2.606 (0.40), 2.650 (3.07),
2.671 (1.00), 2.690 (3.64), 2.696 (2.78), 2.711 (0.81), 2.966 (0.44), 2.987 (0.46),
4.316 (2.81), 4.332 (3.28), 4.342 (3.04), 4.358 (2.54), 4.782 (1.33), 4.801 (1.31),
5.070 (16.00), 5.092 (1.30), 5.134 (3.28), 5.153 (2.60), 5.195 (0.93), 5.535 (0.63),
5.754 (1.36), 6.149 (1.64), 7.567 (0.74), 7.580 (1.34), 7.599 (2.58), 7.612 (4.55),
7.625 (2.75), 8.548 (1.57), 8.564 (5.45), 8.576 (5.15).
Intermedijer 313
(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0895]
[0896] Terc-butil-(5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (274 mg, 664 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (8,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,0 ml, 13 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 438 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.46), 0.008 (3.92), 0.146 (0.46),
1.016 (14.93), 1.032 (15.11), 1.111 (1.31), 1.337 (0.57), 1.407 (2.26), 1.444 (1.19),
1.471 (2.41), 1.504 (2.44), 1.532 (1.43), 1.833 (0.54), 1.904 (7.33), 1.927 (1.28),
1.937 (1.34), 1.988 (0.61), 2.073 (0.93), 2.181 (2.59), 2.209 (2.18), 2.222 (3.05),
2.250 (3.80), 2.266 (1.58), 2.283 (1.37), 2.298 (1.24), 2.329 (0.52), 2.367 (0.47),
2.524 (3.38), 2.638 (2.93), 2.642 (2.91), 2.677 (2.32), 2.684 (2.91), 2.711 (0.61),
2.953 (0.46), 2.974 (0.47), 4.306 (2.84), 4.322 (3.29), 4.333 (3.06), 4.348 (2.60),
4.764 (1.36), 4.783 (1.34), 5.016 (16.00), 5.083 (5.43), 5.754 (1.00), 6.132 (2.18),
7.889 (1.01), 7.899 (2.82), 7.909 (3.67), 7.919 (10.17), 7.932 (5.19), 7.936 (5.01),
7.952 (1.48), 8.670 (4.96).
Intermedijer 314
(5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0897]
[0898] Terc-butil-(5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (327 mg, 827 µmοl) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,3 ml, 17 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 465 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 340 [M+H]<+>
Intermedijer 315
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0899]
Etil-(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0900] (248 mg, 612 µmol) rastvoren je u THF-u (8,0 ml) i na 0 °C je dodat natrijum etanolat (367 mg, 21% mas., 1,13 mmol). Nakon mešanja tokom 20 minuta na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu su dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 206 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.11), 0.146 (1.07), 1.157 (1.49),
1.169 (3.71), 1.174 (3.55), 1.192 (1.45), 1.235 (0.59), 1.270 (0.59), 1.356 (1.21),
1.371 (0.50), 1.413 (0.52), 1.801 (0.42), 1.908 (2.00), 1.988 (5.04), 2.244 (0.83),
2.279 (2.20), 2.295 (2.52), 2.308 (3.01), 2.327 (7.89), 2.366 (2.38), 2.675 (2.62),
2.705 (6.74), 2.730 (6.62), 2.879 (0.40), 2.954 (0.93), 2.984 (4.62), 3.012 (3.79),
3.039 (0.65), 4.002 (0.44), 4.020 (1.25), 4.038 (1.19), 4.441 (0.42), 4.701 (5.49),
4.711 (4.94), 4.924 (2.18), 4.946 (2.82), 4.965 (16.00), 4.976 (15.98), 5.016 (2.18),
6.578 (0.50), 7.240 (9.06), 7.261 (9.87), 7.277 (0.95), 7.298 (0.83), 7.911 (5.79),
7.917 (6.17), 7.932 (5.93), 7.938 (6.01), 8.579 (7.32), 8.585 (7.57), 13.685 (0.99).
Intermedijer 316
(5RS,8RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0901]
[0902] Terc-butil-(5RS,8RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (546 mg, 1,27 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,0 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 474 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
Intermedijer 317
(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0903]
[0904] Terc-butil-(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (450 mg, 1,14 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,8 ml, 23 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 470 mg (čistoća 79%, 96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 340 [M+H]<+>
Intermedijer 318
(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0905]
[0906] Terc-butil-(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (400 mg, 1,05 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,6 ml, 21 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 578 mg (čistoća 87%, 148% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,26 min; MS (ESIpos): m/z = 324 [M+H]<+>
Intermedijer 319
(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[0907]
[0908] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (854 mg, 2,07 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (10 ml, 130 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. U ostatak su dodati voda i dihlormetan. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 727 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.12), 0.008 (1.76), 1.142 (0.42),
1.175 (15.73), 1.192 (16.00), 1.206 (1.64), 1.228 (2.06), 1.239 (1.49), 1.259 (0.64),
1.270 (0.63), 1.320 (0.68), 1.886 (1.20), 1.898 (1.32), 1.908 (1.05), 1.920 (1.15),
2.106 (0.43), 2.119 (1.06), 2.126 (1.10), 2.135 (1.16), 2.142 (1.21), 2.151 (2.06),
2.162 (3.13), 2.168 (3.21), 2.197 (0.61), 2.328 (0.44), 2.524 (1.33), 2.670 (0.41),
2.717 (1.01), 2.731 (1.49), 2.747 (1.88), 2.763 (1.41), 2.778 (0.89), 3.568 (3.56),
4.501 (2.48), 4.507 (3.45), 4.517 (2.38), 4.522 (2.56), 5.023 (1.32), 5.064 (6.79),
5.081 (6.73), 5.122 (1.30), 7.892 (0.60), 7.910 (13.13), 7.912 (13.01), 7.936 (0.51),
8.645 (4.58).
Intermedijer 320
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0910] Metil-(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (58,5 mg, 172 µmol) ubačen je u THF (570 µl) i dodat je litijum hidroksid (20,6 mg, 861 µmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 55,0 mg (98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 326 [M+H]<+>
Intermedijer 321
(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0911]
[0912] Metil-(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (336 mg, 947 µmol) rastvoren je u THF-u (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (113 ml, 4,73 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 5 sati na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 218 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
Intermedijer 322
(5S)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0913]
[0914] Metil-(5S)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (275 mg, 770 µmol) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je litijum hidroksid (92,2 mg, 3,85 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 5 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 247 mg (94% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 323
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0915]
[0916] Metil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (49,5 mg, 139 µmοl) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (16,6 mg, 693 µmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 5 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 45,0 mg (95% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
Intermedijer 324
(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0917]
[0918] Metil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (175 mg, 491 µmol) ubačen je u THF (7,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (58,8 mg, 2,46 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 5 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 156 mg (93% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 325
(5S)-2-[(5-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0919]
[0920] Metil-(5RS)-2-[(5-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (60,0 mg, 206 µmol) ubačen je u THF (3,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (24,7 mg, 1,03 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 38,0 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,57 min; MS (ESIpos): m/z = 278 [M+H]<+>
Intermedijer 326
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0922] Metil-(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (137 mg, 351 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (42,0 mg, 1,75 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 107 mg (81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
Intermedijer 327
(5S)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0923]
[0924] Metil-(5S)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (370 mg, 991 µmol) ubačen je u THF (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (119 mg, 4,96 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 133 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,03 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 328
(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0925]
[0926] Metil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (442 mg, čistoća 75%, 930 µmol) ubačen je u THF (2,7 ml) i dodat je litijum hidroksid (111 mg, 4,65 mmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 316 mg (90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Alternativna sinteza:
[0927] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (411 mg, 1,03 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,6 ml, 21 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 798 mg (čistoća 90%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 329
(5S)-2-{[6-fluor-2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0928]
[0929] Metil-(5S)-2-{[6-fluor-2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (59,0 mg, 139 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (16,6 mg, 695 µmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja tokom 72 sata na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 44,0 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
Intermedijer 330
(5S)-2-(6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-ilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0930]
[0931] Metil-(5S)-2-(6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-ilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (109 mg, čistoća 90%, 299 µmol) ubačen je u THF (4,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (35,8 mg, 1,50 mmol) rastvoren u vodi. Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 72,0 mg (čistoća 43%, 33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,48 min; MS (ESIpos): m/z = 315 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.645 (7.08), 2.036 (7.44), 2.158 (4.32), 2.859 (16.00), 3.974 (4.21), 4.762 (9.00), 7.462 (5.14), 8.192 (4.78).
Intermedijer 331
(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0932]
[0933] Metil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (40,9 mg, 115 µmol) ubačen je u THF (3,0 ml, 37 mmol) i dodat je litijum hidroksid (13,7 mg, 574 µmol) rastvoren u vodi.
Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi koncentrovana pod vakuumom, a zatim je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 35,4 mg (90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 332
(5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0934]
[0935] Terc-butil-(5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (761 mg, 2,11 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (30 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (3,3 ml, 42 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 1,97 g (97% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 305 [M+H]<+>
Intermedijer 333
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0936]
[0937] Terc-butil-(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (1,37 g, 3,29 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (25 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (5,1 ml, 66 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 2,07 g (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
Intermedijer 334
(5S)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0938]
[0939] Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (238 mg, 665 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (6,7 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (800 µl, 10 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 325 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.06), 1.111 (0.44), 1.228 (0.60),
1.534 (1.02), 1.805 (0.42), 1.816 (0.43), 2.066 (1.03), 2.072 (1.19), 2.082 (1.11),
2.094 (0.64), 2.257 (9.22), 2.524 (0.71), 2.568 (0.54), 2.580 (0.54), 2.594 (0.41),
2.633 (0.41), 2.645 (0.71), 2.656 (0.54), 2.863 (1.16), 2.882 (2.43), 2.900 (1.28),
3.766 (0.67), 3.784 (1.69), 3.804 (1.53), 3.824 (0.62), 4.390 (0.71), 4.402 (1.44),
4.415 (0.79), 7.084 (16.00), 7.093 (1.84).
Intermedijer 335
(5S)-2-[(1R)-1-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 2 izomera)
[0940]
[0941] Terc-butil-(5S)-2-[(1RS)-1-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (69,8 mg, 195 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,5 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (300 µl, 3,9 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 73,1 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,98 min; MS (ESlneg): m/z = 300 [M-H]-
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.62), -0.008 (6.44), 0.008 (6.37),
0.146 (0.65), 1.055 (0.44), 1.291 (0.56), 1.309 (1.08), 1.326 (0.54), 1.532 (0.71),
1.584 (8.87), 1.602 (8.75), 1.799 (0.87), 1.810 (0.79), 1.822 (0.73), 1.832 (0.73),
2.058 (1.44), 2.070 (2.60), 2.081 (2.58), 2.267 (16.00), 2.280 (1.58), 2.327 (1.15),
2.366 (0.85), 2.561 (1.98), 2.576 (1.25), 2.589 (1.21), 2.603 (0.87), 2.632 (0.94),
2.643 (1.50), 2.654 (1.08), 2.669 (1.40), 2.674 (1.37), 2.709 (0.87), 4.414 (0.56),
4.426 (1.52), 4.439 (2.79), 4.450 (1.65), 5.251 (0.56), 5.268 (1.98), 5.286 (1.92),
5.303 (0.54), 7.109 (2.96), 7.129 (5.87), 7.171 (6.58), 7.191 (3.38).
Intermedijer 336
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0942]
[0943] Terc-butil-(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (794 mg, čistoća 94%, 1,72 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (28 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,7 ml, 34 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 72 sati na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 800 mg (čistoća 78%, 96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
Intermedijer 337
(5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0944]
[0945] Terc-butil-(5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (167 mg, 436 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (670 µl, 8,7 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 228 mg (čistoća 83%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.90), 0.008 (2.46), 0.708 (0.68),
0.729 (1.89), 0.756 (0.50), 0.783 (2.19), 0.806 (0.89), 0.978 (5.27), 1.110 (1.47),
1.175 (0.42), 1.378 (1.96), 1.406 (0.45), 1.535 (3.25), 1.782 (0.88), 1.988 (0.80),
2.051 (2.35), 2.063 (2.37), 2.074 (1.57), 2.206 (0.47), 2.235 (16.00), 2.328 (0.54),
2.524 (2.40), 2.606 (1.64), 2.615 (0.98), 2.646 (0.76), 2.671 (0.54), 3.729 (2.03),
3.765 (3.10), 3.877 (3.00), 3.913 (1.98), 4.363 (1.59), 4.374 (3.00), 4.387 (1.53),
5.754 (0.48), 7.024 (3.37), 7.044 (5.39), 7.106 (6.44), 7.126 (3.93), 11.356 (0.45).
Intermedijer 338
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0946]
[0947] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (146 mg, 326 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (7,0 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (500 µl, 6,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (500 µl, 6,5 mmol) i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je zatim uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 252 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 394 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.50), -0.008 (3.97), 0.008 (3.74),
0.146 (0.43), 1.111 (2.70), 1.228 (1.92), 1.421 (1.89), 1.535 (16.00), 1.738 (0.70),
1.856 (1.29), 1.890 (1.12), 2.073 (0.69), 2.147 (3.40), 2.160 (3.42), 2.329 (0.91),
2.367 (0.76), 2.585 (2.04), 2.599 (1.53), 2.612 (1.60), 2.627 (1.27), 2.671 (3.07),
2.711 (1.61), 4.550 (2.27), 4.560 (3.95), 4.573 (2.30), 5.243 (10.56), 7.075 (0.58),
7.815 (3.47), 7.825 (3.54), 7.835 (3.67), 7.846 (3.64), 8.380 (7.71), 8.549 (3.54),
8.554 (3.61), 8.570 (3.57), 8.575 (3.38), 9.247 (3.83), 9.252 (4.07), 9.257 (3.95),
9.262 (3.69).
Intermedijer 339
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0948]
[0949] Terc-butil-(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (509 mg, čistoća 93%, 1,30 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (20 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,0 ml, 26 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 850 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (4.68), 0.008 (2.69), 1.030 (0.43),
1.045 (0.45), 1.110 (0.93), 1.387 (0.65), 1.505 (1.01), 1.519 (1.03), 1.534 (2.22),
1.809 (1.24), 1.819 (1.24), 1.830 (1.04), 1.841 (0.96), 2.090 (3.32), 2.100 (3.06),
2.112 (1.60), 2.328 (0.73), 2.367 (0.65), 2.519 (3.99), 2.524 (3.96), 2.568 (1.63),
2.582 (1.27), 2.614 (1.34), 2.626 (2.05), 2.636 (1.46), 2.656 (0.81), 2.666 (1.46),
2.669 (1.44), 2.710 (0.57), 4.461 (2.42), 4.473 (4.35), 4.486 (2.19), 4.827 (0.51),
4.909 (16.00), 5.067 (0.79), 5.075 (0.79), 5.088 (0.82), 5.097 (0.79), 5.445 (0.78),
7.500 (4.15), 7.510 (0.76), 7.520 (5.05), 7.703 (3.14), 7.709 (3.08), 7.723 (2.67),
7.730 (2.53), 8.309 (3.43), 8.314 (3.14).
Intermedijer 340
(5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0950]
[0951] Terc-butil-(5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (156 mg, 360 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,0 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (560 µl, 7,2 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 156 mg (čistoća 66%, 76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
Intermedijer 341
(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0952]
[0953] Terc-butil-(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (900 mg, čistoća 78%, 1,92 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (3,0 ml, 38 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom.
Dobijeno je 590 mg (92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 310 [M+H]<+>
Intermedijer 342
(5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0954]
[0955] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (523 mg, 1,36 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,1 ml, 27 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 774 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.82), 0.008 (0.68), 1.118 (6.81),
1.129 (0.42), 1.161 (2.13), 1.170 (0.42), 1.179 (4.32), 1.186 (0.44), 1.197 (2.17),
1.236 (1.91), 1.399 (0.56), 1.469 (0.47), 1.484 (1.04), 1.497 (1.48), 1.511 (1.77),
1.521 (2.46), 1.537 (2.89), 1.548 (2.11), 1.561 (1.23), 1.568 (1.17), 1.582 (0.67),
1.756 (0.53), 1.807 (2.09), 1.820 (2.94), 1.830 (2.93), 1.841 (2.39), 1.852 (2.37),
1.914 (1.15), 1.990 (7.81), 2.055 (0.59), 2.060 (0.54), 2.073 (1.51), 2.082 (3.23),
2.090 (5.04), 2.104 (8.58), 2.115 (7.88), 2.126 (4.11), 2.563 (3.78), 2.576 (3.69),
2.591 (2.87), 2.626 (3.11), 2.638 (4.92), 2.648 (3.42), 2.668 (1.70), 2.679 (2.33),
2.690 (1.39), 4.008 (0.60), 4.025 (1.83), 4.043 (1.80), 4.061 (0.58), 4.477 (5.29),
4.488 (10.00), 4.501 (5.14), 4.757 (1.78), 4.831 (1.52), 4.872 (16.00), 4.878 (15.58),
4.918 (1.43), 7.264 (6.52), 7.282 (7.05), 7.287 (7.36), 7.291 (7.18), 7.304 (7.27),
7.308 (7.32), 7.313 (6.92), 7.331 (6.44), 7.523 (4.17), 7.540 (4.34), 7.548 (5.42),
7.565 (5.28), 7.574 (4.10), 7.591 (3.71), 7.621 (1.61), 7.648 (1.44), 7.673 (1.15),
7.694 (1.09), 7.711 (1.06), 7.733 (1.00), 7.761 (0.87), 7.832 (0.71), 8.138 (0.92).
Intermedijer 343
(5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0956]
[0957] Terc-butil-(5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (120 mg, 269 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (4,0 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (410 µl, 5,4 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (300 µl, 3,9 mmol) i smeša je mešana preko noći. Rastvarač je zatim uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 153 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.75), 0.146 (0.75), 0.833 (0.43),
1.038 (0.57), 1.056 (1.21), 1.073 (0.60), 1.110 (2.01), 1.157 (0.57), 1.176 (0.83),
1.236 (1.38), 1.291 (3.19), 1.309 (6.41), 1.327 (3.25), 1.390 (1.90), 1.538 (2.30),
1.566 (1.41), 1.783 (2.07), 1.793 (3.13), 1.805 (3.02), 1.815 (2.61), 1.827 (2.53),
2.047 (4.51), 2.060 (8.10), 2.076 (7.58), 2.089 (3.88), 2.328 (1.64), 2.366 (1.32),
2.522 (9.65), 2.563 (3.56), 2.606 (3.36), 2.618 (5.69), 2.629 (3.53), 2.648 (1.92),
2.660 (3.30), 2.671 (3.02), 2.710 (1.35), 3.291 (7.47), 3.309 (16.00), 3.328 (8.53),
3.432 (0.63), 3.449 (0.69), 4.004 (1.58), 4.022 (2.90), 4.039 (5.49), 4.057 (9.91),
4.081 (9.13), 4.099 (5.34), 4.116 (2.82), 4.135 (1.58), 4.384 (6.49), 4.396 (12.67),
4.408 (6.69), 4.415 (4.71), 4.433 (4.22), 4.450 (2.56), 4.729 (2.82), 8.414 (9.91),
8.881 (10.08).
Intermedijer 344
(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0958]
[0959] Terc-butil-(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (523 mg, 1,21 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 24 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 175 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 376 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.69), 0.008 (2.18), 0.018 (0.56),
0.837 (0.57), 1.227 (0.51), 1.235 (0.42), 1.460 (0.42), 1.515 (1.26), 1.527 (1.23),
1.543 (1.10), 1.822 (1.58), 1.834 (1.53), 1.844 (1.29), 1.855 (1.31), 2.108 (4.38),
2.118 (4.15), 2.130 (2.21), 2.328 (0.63), 2.366 (0.62), 2.524 (2.14), 2.558 (2.84),
2.573 (1.97), 2.586 (2.06), 2.600 (1.62), 2.631 (1.67), 2.643 (2.69), 2.653 (1.89),
2.674 (1.29), 2.683 (1.20), 2.695 (0.72), 2.710 (0.63), 4.107 (0.72), 4.322 (1.38),
4.490 (3.29), 4.501 (5.97), 4.514 (3.19), 4.588 (0.53), 4.973 (16.00), 7.391 (3.50),
7.412 (3.86), 7.561 (7.11), 7.835 (6.26), 7.855 (5.71).
Intermedijer 345
(5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0961] Terc-butil-(5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (707 mg, 1,70 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,6 ml, 34 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 611 mg (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 346
(5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0962]
[0963] Terc-butil-(5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (224 mg, 554 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,0 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (850 µl, 11 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 330 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 349 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.48), 1.113 (1.42), 1.143 (0.85),
1.164 (10.97), 1.176 (15.26), 1.194 (2.29), 1.231 (0.88), 1.278 (0.44), 1.299 (0.48),
1.379 (0.87), 1.450 (0.49), 1.468 (0.79), 1.485 (1.13), 1.499 (1.16), 1.513 (1.06),
1.536 (4.67), 1.545 (0.54), 1.600 (0.68), 1.762 (0.79), 1.770 (1.14), 1.779 (1.55),
1.793 (1.54), 1.803 (1.35), 1.815 (1.28), 1.825 (1.00), 1.989 (5.49), 2.063 (4.19),
2.073 (4.25), 2.470 (0.72), 2.484 (1.00), 2.590 (1.40), 2.600 (2.51), 2.612 (1.97),
2.622 (0.54), 2.631 (0.82), 2.642 (1.22), 2.654 (0.82), 3.784 (0.51), 4.005 (0.47),
4.023 (1.38), 4.040 (1.38), 4.058 (0.74), 4.091 (16.00), 4.369 (0.48), 4.381 (0.93),
4.394 (0.53), 4.419 (2.40), 4.431 (4.64), 4.444 (2.31), 7.239 (4.53), 7.259 (4.97),
7.312 (0.46), 7.582 (4.49), 7.601 (6.06), 7.696 (3.81), 7.716 (6.11), 7.735 (2.62),
11.361 (0.58), 12.173 (0.58).
Intermedijer 347
(5S)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0964]
[0965] Terc-butil-(5S)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (557 mg, 1,44 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,2 ml, 29 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 743 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 332 [M+H]<+>
Intermedijer 348
(5S)-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0966]
[0967] Terc-butil-(5S)-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (222 mg, 555 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,0 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (850 µl, 11 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 373 mg (čistoća 70%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.45), -0.008 (3.69), 0.008 (3.61),
0.146 (0.45), 0.678 (1.71), 0.689 (1.42), 0.704 (5.29), 0.726 (1.23), 0.752 (5.96),
0.776 (2.07), 0.916 (1.06), 0.926 (0.88), 0.940 (3.89), 0.950 (14.15), 0.962 (3.42),
0.985 (0.74), 1.045 (0.41), 1.056 (0.73), 1.111 (5.66), 1.116 (0.71), 1.149 (0.79),
1.166 (1.71), 1.184 (0.73), 1.228 (1.91), 1.278 (1.68), 1.291 (4.42), 1.309 (8.19),
1.327 (4.14), 1.381 (0.70), 1.507 (1.73), 1.520 (1.61), 1.535 (1.64), 1.568 (0.69),
1.737 (0.63), 1.775 (1.48), 1.788 (2.14), 1.798 (2.10), 1.809 (1.73), 1.820 (1.70),
2.005 (0.41), 2.032 (2.15), 2.040 (3.48), 2.054 (5.96), 2.065 (5.63), 2.076 (3.11),
2.328 (0.71), 2.367 (0.51), 2.474 (1.41), 2.524 (2.92), 2.558 (2.48), 2.599 (2.19),
2.611 (3.64), 2.622 (2.47), 2.641 (1.28), 2.652 (1.75), 2.665 (1.41), 2.711 (0.54),
3.432 (0.50), 3.653 (0.98), 3.737 (8.71), 3.754 (1.02), 3.764 (0.54), 3.771 (0.63),
3.814 (0.58), 3.836 (8.44), 3.872 (5.20), 4.119 (0.45), 4.132 (0.45), 4.137 (0.42),
4.357 (3.69), 4.369 (6.99), 4.381 (3.73), 4.397 (1.29), 4.415 (3.38), 4.433 (3.32),
4.451 (1.21), 4.463 (0.41), 4.472 (0.41), 5.344 (2.22), 6.767 (1.50), 6.774 (13.78),
6.779 (5.45), 6.791 (5.03), 6.796 (16.00), 7.120 (1.81), 7.127 (15.91), 7.132 (5.25),
7.144 (4.97), 7.149 (14.17), 7.156 (2.15), 11.357 (0.40).
Intermedijer 349
(5S)-3-okso-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0968]
[0969] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (113 mg, 258 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (1,5 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (400 µl, 5,2 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 115 mg (čistoća 88%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.78), 0.008 (6.17), 0.146 (0.86),
0.866 (2.35), 0.893 (4.18), 0.926 (4.29), 0.951 (2.69), 1.038 (1.78), 1.055 (3.61),
1.073 (1.88), 1.110 (8.13), 1.127 (14.72), 1.227 (4.55), 1.291 (7.84), 1.309 (16.00),
1.327 (8.00), 1.358 (1.25), 1.492 (1.75), 1.736 (1.44), 1.785 (2.20), 1.795 (2.14),
1.817 (1.83), 2.052 (6.41), 2.064 (5.80), 2.327 (1.59), 2.366 (0.94), 2.465 (1.52),
2.601 (3.82), 2.612 (2.54), 2.643 (1.86), 2.670 (1.75), 2.710 (0.97), 3.414 (0.65),
3.431 (1.86), 3.449 (1.83), 3.467 (0.71), 3.859 (1.78), 3.895 (13.78), 3.903 (13.73),
3.940 (1.96), 4.371 (7.48), 4.382 (11.03), 4.396 (8.89), 4.415 (10.17), 4.433 (9.93),
4.451 (5.59), 7.438 (9.57), 7.459 (12.99), 7.569 (13.54), 7.589 (10.01).
Intermedijer 350
(5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0970]
[0971] Terc-butil-(5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (256 mg, 630 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,7 ml) i na 0 °C je dodata trifluorsirćetna kiselina (970 µl, 13 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 391 mg (čistoća 81%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 350 [M+H]<+>
Intermedijer 351
(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0972]
[0973] Terc-butil-(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (443 mg, 1,21 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 24 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom.
Dobijeno je 530 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 310 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.62), -0.008 (6.71), 0.008 (4.59),
0.146 (0.59), 1.038 (0.42), 1.056 (0.82), 1.110 (1.70), 1.122 (0.42), 1.175 (0.48),
1.181 (0.40), 1.227 (0.42), 1.291 (6.89), 1.309 (13.99), 1.327 (6.97), 1.392 (1.44),
1.475 (1.13), 1.488 (1.88), 1.522 (2.43), 1.534 (3.07), 1.550 (1.54), 1.569 (0.80),
1.787 (2.21), 1.799 (3.27), 1.810 (3.22), 1.821 (2.85), 1.832 (2.72), 1.988 (0.80),
2.063 (4.96), 2.075 (8.83), 2.084 (8.61), 2.092 (8.01), 2.104 (4.30), 2.328 (0.73),
2.367 (0.62), 2.570 (3.82), 2.603 (3.86), 2.614 (5.91), 2.625 (4.13), 2.645 (2.19),
2.656 (2.80), 2.668 (2.25), 2.710 (0.82), 3.432 (0.44), 3.449 (0.44), 4.397 (1.83),
4.415 (5.54), 4.433 (5.58), 4.448 (6.82), 4.460 (11.96), 4.473 (6.07), 4.517 (0.42),
4.783 (0.99), 4.805 (3.20), 4.844 (15.73), 4.860 (16.00), 4.899 (3.40), 5.097 (1.19),
5.127 (1.32), 5.475 (1.65), 5.753 (0.97), 7.047 (2.49), 7.052 (2.65), 7.069 (5.60),
7.074 (5.92), 7.090 (3.24), 7.095 (3.35), 7.221 (3.60), 7.227 (3.42), 7.246 (5.56),
7.251 (5.25), 7.271 (3.80), 7.277 (3.66), 7.290 (3.64), 7.307 (4.64), 7.311 (7.06),
7.328 (6.95), 7.349 (3.11).
Intermedijer 352
(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0974]
[0975] Terc-butil-(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (371 mg, 970 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,5 ml, 19 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 580 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 326 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.110 (1.55), 1.157 (0.51), 1.175 (1.15),
1.192 (0.58), 1.227 (0.70), 1.404 (1.18), 1.520 (1.43), 1.534 (1.96), 1.548 (1.29),
1.561 (0.93), 1.580 (0.48), 1.802 (1.27), 1.813 (1.85), 1.824 (1.81), 1.836 (1.52),
1.847 (1.48), 1.988 (1.90), 2.073 (4.52), 2.092 (4.73), 2.099 (5.07), 2.108 (4.79),
2.119 (2.69), 2.328 (0.57), 2.366 (0.50), 2.585 (1.84), 2.617 (2.00), 2.628 (3.21),
2.639 (2.14), 2.659 (1.19), 2.670 (2.01), 2.681 (0.96), 2.710 (0.53), 4.021 (0.47),
4.038 (0.48), 4.470 (3.11), 4.482 (5.98), 4.495 (3.09), 4.857 (0.87), 4.898 (16.00),
4.940 (0.98), 5.144 (1.15), 5.158 (1.19), 5.398 (0.94), 5.504 (1.36), 5.753 (0.75),
7.190 (1.16), 7.196 (1.23), 7.211 (3.51), 7.217 (3.73), 7.232 (2.72), 7.238 (2.93),
7.250 (4.64), 7.266 (4.90), 7.287 (2.11), 7.459 (2.87), 7.465 (2.85), 7.481 (2.93),
7.487 (2.91).
Intermedijer 353
(5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0976]
[0977] Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (718 mg, 1,82 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,8 ml, 36 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 781 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 339 [M+H]<+>
Intermedijer 354
(5S)-2-(4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0978]
[0979] Terc-butil-(5S)-2-(4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (299 mg, 862 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,3 ml, 17 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 4 sati na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 397 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 292 [M+H]<+>
Intermedijer 355
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0981] Terc-butil-(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (372 mg, 1,02 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,6 ml, 20 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 554 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 356
(5S)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0982]
[0983] Terc-butil-(5S)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (129 mg, 359 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (550 µl, 7,2 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom.
Dobijeno je 258 mg (čistoća 50%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 304 [M+H]<+>
Intermedijer 357
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0984]
[0985] Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (465 mg, 1,21 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 24 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (0,19 ml, 2,4 mmol) i smeša je 3 h mešana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je zatim uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 813 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 327 [M+H]<+>
Intermedijer 358
(5S)-2-[(5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0986]
[0987] Terc-butil-(5S)-2-[(5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (345 mg, 989 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,5 ml, 20 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 549 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,42 min; MS (ESIpos): m/z = 293 [M+H]<+>
Intermedijer 359
(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0988]
[0989] Terc-butil-(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (363 mg, 951 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (8,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,5 ml, 19 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 454 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 326 [M+H]<+>
Intermedijer 360
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0990]
[0991] Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (450 mg, 1,23 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (12 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 380 mg (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,5 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 361
(5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0992]
[0993] Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (340 mg, 941 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,4 ml, 19 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 484 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 306 [M+H]<+>
Intermedijer 362
(5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0994]
[0995] Terc-butil-(5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (196 mg, 544 µmol) rastvoren je u dihlormetanu i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (420 µl, 5,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (840 µl, 11 mmol) i smeša je mešana 6 sati. Rastvarač je zatim uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 302 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,53 min; MS (ESIpos): m/z = 305 [M+H]<+>
Intermedijer 363
(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0996]
[0997] Terc-butil-(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (563 mg, 1,41 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (29 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,2 ml, 28 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 823 mg (čistoća 72%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.94), 0.008 (2.31), 1.110 (0.45),
1.228 (0.43), 1.341 (0.41), 1.412 (16.00), 1.522 (0.93), 1.535 (1.80), 1.796 (1.19),
1.807 (1.15), 1.818 (1.05), 1.829 (1.01), 1.988 (0.57), 2.071 (2.07), 2.082 (3.10),
2.092 (2.96), 2.561 (1.34), 2.588 (1.36), 2.599 (2.22), 2.611 (1.52), 2.630 (0.75),
2.641 (1.00), 2.653 (0.60), 2.671 (0.48), 3.914 (1.27), 4.438 (0.62), 4.453 (1.95),
4.466 (3.78), 4.478 (1.88), 4.618 (0.42), 4.855 (1.24), 4.991 (1.12), 5.030 (8.30),
5.041 (9.08), 5.081 (1.19), 6.473 (0.41), 8.250 (4.12), 8.256 (5.12), 8.560 (1.18),
8.567 (5.22), 8.572 (4.55).
Intermedijer 364
(5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[0999] Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (369 mg, 987 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,5 ml, 20 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 489 mg (čistoća 85%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 318 [M+H]<+>
Intermedijer 365
(5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1000]
[1001] Terc-butil-(5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (203 mg, čistoća 88%, 465 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (720 µl, 9,3 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 284 mg (čistoća 89%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 329 [M+H]<+>
Intermedijer 366
(5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1002]
[1003] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (322 mg, 826 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (7,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,3 ml, 17 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 344 mg (čistoća 82%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 334 [M+H]<+>
Intermedijer 367
(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1005] Terc-butil-(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (268 mg, 735 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (6,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,1 ml, 15 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 409 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.47), 0.008 (2.02), 1.111 (1.99),
1.228 (0.41), 1.415 (2.49), 1.513 (1.50), 1.535 (7.93), 1.551 (1.72), 1.564 (1.47),
1.577 (1.09), 1.592 (0.52), 1.787 (1.50), 1.798 (2.36), 1.809 (2.25), 1.820 (2.06),
1.831 (1.96), 1.844 (1.39), 2.074 (3.75), 2.086 (6.76), 2.097 (6.56), 2.110 (3.53),
2.368 (0.55), 2.482 (1.65), 2.524 (4.66), 2.565 (2.75), 2.588 (2.68), 2.600 (4.31),
2.612 (2.90), 2.631 (1.42), 2.641 (1.91), 2.654 (1.08), 2.672 (0.46), 2.712 (0.64),
4.458 (4.22), 4.470 (8.12), 4.482 (4.10), 4.993 (3.18), 5.033 (15.85), 5.050 (16.00),
5.090 (3.22), 5.642 (0.42), 6.764 (0.71), 7.378 (5.76), 7.389 (5.97), 7.398 (6.17),
7.410 (6.32), 7.926 (6.28), 7.929 (6.34), 7.946 (6.01), 7.949 (5.82), 8.468 (6.23),
8.472 (6.05), 8.480 (6.31), 8.483 (5.78).
Intermedijer 368
(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1006]
[1007] Terc-butil-(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (90,1 mg, 246 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (380 µl, 4,9 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 103 mg (čistoća 90%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 311 [M+H]<+>
Intermedijer 369
(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1008]
[1009] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (256 mg, čistoća 89%, 571 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (880 µl, 11 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 256 mg (čistoća 85%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 370
(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1010]
[1011] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (735 mg, čistoća 66%, 1,25 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 4 dana na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 415 mg (čistoća 80%, 80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 334 [M+H]<+>
Intermedijer 371
(5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1012]
[1013] Terc-butil-(5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (283 mg, čistoća 89%, 606 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (930 µl, 12 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 400 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 360 [M+H]<+>
Intermedijer 372
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1014]
[1015] Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (450 mg, 1,23 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 380 mg (čistoća 66%, 66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,51 min; MS (ESIpos): m/z = 309 [M+H]<+>
Intermedijer 373
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1016]
[1017] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (500 mg, 1,24 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (8,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 430 mg (čistoća 73%, 73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,62 min; MS (ESIpos): m/z = 349 [M+H]<+>
Intermedijer 374
(5S)-2-{[1-metil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1018]
[1019] Terc-butil-(5S)-2-{[1-metil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (92,0 mg, 229 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (350 µl, 4,6 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 72 sati na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 79,0 mg (čistoća 70%, 100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,07 min; MS (ESIpos): m/z = 346 [M+H]<+>
Intermedijer 375
(5S)-2-{[1-benzil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1020]
[1021] Terc-butil-(5S)-2-{[1-benzil-5-(trifluormetil)-1H-pirazol-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (781 mg, čistoća 75%, 1,23 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,9 ml, 25 mmol). Nakon što je reakciona smeša tokom 72 sata mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (1,0 ml, 12,4 mmol) i smeša je mešana 2 h na 40 °C. Rastvarač je zatim uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 976 mg (čistoća 70%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 422 [M+H]<+>
Intermedijer 376
(5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1022]
[1023] Terc-butil-(5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (580 mg, 1,42 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (91 µl) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,2 ml, 28 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 1,01 g (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.03), 0.146 (1.10), 1.110 (0.61),
1.176 (0.61), 1.192 (0.61), 1.227 (0.49), 1.409 (2.10), 1.535 (2.52), 1.819 (2.50),
1.830 (2.38), 1.841 (2.08), 1.852 (2.01), 1.988 (0.79), 2.098 (6.34), 2.107 (6.48),
2.328 (1.12), 2.367 (0.79), 2.564 (3.17), 2.577 (3.13), 2.591 (2.47), 2.619 (2.64),
2.630 (4.34), 2.641 (2.94), 2.661 (1.68), 2.671 (2.99), 2.711 (0.82), 4.473 (4.15),
4.485 (8.00), 4.498 (4.10), 4.528 (0.72), 4.769 (4.73), 4.867 (2.29), 4.908 (15.70),
4.919 (16.00), 4.960 (2.43), 5.224 (0.98), 5.831 (1.91), 7.162 (8.61), 7.183 (9.17),
7.532 (0.89), 7.552 (0.98), 8.024 (5.67), 8.030 (5.78), 8.045 (5.62), 8.051 (5.67),
8.102 (0.70), 8.117 (0.65), 8.654 (7.14), 8.659 (7.02), 8.697 (0.63).
Intermedijer 377
(5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1025] Terc-butil-(5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (146 mg, 357 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,9 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (550 µl, 7,1 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 199 mg (čistoća 89%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,52 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.87), 0.008 (2.73), 1.111 (0.85),
1.226 (0.54), 1.244 (2.70), 1.260 (2.67), 1.274 (1.67), 1.391 (9.28), 1.509 (1.14),
1.522 (1.13), 1.535 (3.08), 1.815 (1.43), 1.825 (1.40), 1.836 (1.22), 1.847 (1.20),
2.093 (3.51), 2.100 (3.75), 2.109 (3.48), 2.121 (1.86), 2.328 (0.61), 2.524 (2.13),
2.568 (1.92), 2.581 (1.92), 2.595 (1.53), 2.627 (1.61), 2.639 (2.57), 2.650 (1.73),
2.670 (1.47), 2.679 (1.38), 2.692 (0.70), 4.479 (2.53), 4.491 (4.87), 4.503 (2.51),
4.893 (0.40), 4.934 (16.00), 4.974 (0.48), 5.839 (1.06), 7.703 (0.95), 7.893 (3.04),
7.897 (5.36), 7.903 (3.24), 7.919 (0.56), 8.465 (5.32), 8.469 (5.56), 8.643 (4.66),
8.649 (4.90), 9.090 (0.42).
Intermedijer 378
(5S)-2-[2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1026]
[1027] Terc-butil-(5S)-2-[2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (226 mg, čistoća 99%, 603 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (9,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (930 µl, 12 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 190 mg (100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 316 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.13), 1.110 (1.66), 1.419 (0.45),
1.535 (2.08), 1.566 (0.73), 1.577 (0.67), 1.828 (0.81), 1.861 (0.67), 1.988 (0.60),
2.098 (1.30), 2.109 (2.54), 2.121 (2.51), 2.328 (0.50), 2.366 (0.49), 2.398 (16.00),
2.580 (1.52), 2.594 (1.27), 2.607 (1.36), 2.621 (1.07), 2.635 (1.10), 2.647 (1.65),
2.658 (1.19), 2.687 (0.71), 2.710 (0.63), 4.466 (1.43), 4.480 (2.76), 4.491 (1.53),
5.221 (11.53), 7.359 (4.46), 7.380 (5.04), 7.912 (5.54), 7.933 (5.39).
Intermedijer 379
(5RS,8RS)-8-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1028]
[1029] Terc-butil-(5RS,8RS)-8-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (39,5 mg, 111 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,0 ml, 26 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. U ostatak su dodati voda i dihlormetan. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 27,2 mg (82% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 302 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (4.03), 0.008 (2.37), 0.854 (0.43),
1.162 (6.13), 1.179 (6.09), 1.194 (1.00), 1.200 (0.78), 1.210 (0.80), 1.235 (3.03),
1.259 (1.66), 1.298 (1.05), 1.878 (0.53), 1.888 (0.41), 1.900 (0.43), 2.074 (0.43),
2.110 (0.53), 2.141 (1.26), 2.148 (1.20), 2.245 (0.73), 2.271 (11.10), 2.327 (0.46),
2.518 (2.94), 2.523 (2.66), 2.669 (0.61), 2.674 (0.46), 2.685 (0.45), 2.700 (0.64),
2.709 (0.70), 2.716 (0.77), 2.731 (0.58), 4.471 (0.92), 4.478 (1.27), 4.487 (0.82),
4.492 (0.88), 4.739 (0.98), 4.778 (2.39), 4.825 (2.35), 4.864 (1.01), 5.754 (2.62),
7.105 (0.61), 7.127 (16.00), 7.145 (0.72).
Intermedijer 380
(5S)-2-(ciklopropilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1030]
[1031] Terc-butil-(5S)-2-(ciklopropilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (174 mg, 593 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (6,0 ml) i uz hlađenje ledom je dodata trifluorsirćetna kiselina (3,0 ml, 39 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 231 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 238 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.18), 0.262 (1.91), 0.274 (8.08),
0.285 (8.53), 0.297 (2.52), 0.313 (0.57), 0.427 (1.63), 0.438 (8.30), 0.442 (7.40),
0.458 (8.82), 0.475 (1.47), 0.488 (0.45), 1.034 (0.65), 1.039 (0.94), 1.051 (1.82),
1.059 (1.78), 1.071 (2.90), 1.083 (1.70), 1.088 (1.77), 1.101 (0.92), 1.111 (3.14),
1.403 (1.07), 1.493 (0.71), 1.513 (1.50), 1.527 (1.76), 1.540 (1.95), 1.550 (1.73),
1.564 (1.44), 1.578 (1.34), 1.590 (0.60), 1.806 (2.26), 1.817 (2.13), 1.828 (2.01),
1.839 (1.90), 1.852 (1.35), 2.060 (3.96), 2.072 (7.12), 2.083 (6.87), 2.097 (3.54),
2.105 (1.98), 2.558 (4.03), 2.572 (2.98), 2.585 (3.06), 2.599 (2.54), 2.628 (2.55),
2.639 (4.08), 2.651 (2.76), 2.670 (1.62), 2.681 (1.95), 2.693 (1.10), 3.482 (16.00),
3.499 (15.83), 4.377 (0.51), 4.409 (3.82), 4.422 (7.29), 4.434 (3.82), 11.357 (0.41).
Intermedijer 381
(5S)-2-[(E)-2-(4-fluorfenil)vinil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1032]
[1033] Terc-butil-(5S)-2-[(E)-2-(4-fluorfenil)vinil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (150 mg, 417 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (500 µl, 6,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 198 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 304 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.58), -0.008 (5.47), 0.008 (4.55),
0.146 (0.64), 1.030 (0.46), 1.045 (0.49), 1.106 (2.56), 1.110 (3.05), 1.176 (0.43),
1.235 (0.52), 1.311 (2.50), 1.326 (2.02), 1.338 (2.38), 1.423 (1.31), 1.505 (0.82),
1.535 (12.52), 1.554 (1.92), 1.566 (1.80), 1.744 (0.46), 1.865 (2.23), 1.875 (2.20),
1.887 (1.98), 1.897 (1.86), 1.909 (1.40), 2.111 (3.66), 2.123 (6.38), 2.133 (6.11),
2.328 (1.16), 2.367 (1.25), 2.524 (3.18), 2.625 (1.16), 2.640 (1.50), 2.652 (1.25),
2.668 (4.21), 2.683 (2.81), 2.695 (2.90), 2.710 (3.30), 2.739 (2.38), 2.751 (3.97),
2.762 (2.63), 2.782 (1.28), 2.793 (1.83), 2.806 (0.95), 4.114 (3.30), 4.525 (5.50),
4.538 (9.65), 4.550 (5.16), 5.754 (1.40), 6.751 (8.85), 6.788 (9.83), 7.121 (7.97),
7.143 (16.00), 7.166 (8.61), 7.384 (11.48), 7.420 (10.23), 7.542 (8.09), 7.556 (9.16),
7.564 (8.52), 7.578 (7.27).
Intermedijer 382
(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1034]
[1035] Terc-butil-(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (200 mg, čistoća 86%, 452 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (4,5 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (2,0 ml, 26 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana tokom 3,5 sati na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 615 mg (čistoća 25%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 325 [M+H]<+>
Intermedijer 383
(5S)-2-(4-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1036]
[1037] Terc-butil-(5S)-2-(4-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (201 mg, čistoća 74%, 365 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,7 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (500 µl, 6,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 268 mg (čistoća 47%, 98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 352 [M+H]<+>
Intermedijer 384
(5S)-2-(3-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1038]
[1039] Terc-butil-(5S)-2-(3-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (256 mg, 590 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (4,5 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (500 µl, 6,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom.
Dobijeno je 346 mg (čistoća 59%, 98% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 352 [M+H]<+>
Intermedijer 385
(5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1040]
[1041] Terc-butil-(5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (135 mg, 317 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (3,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (300 µl, 3,9 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 174 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 370 [M+H]<+>
Intermedijer 386
(5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 1)
[1042]
[1043] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (izomer 1) (97,0 mg, 235 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (200 µl, 2,6 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 154 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
Intermedijer 387
(5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 2)
[1044]
[1045] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (izomer 2) (86,0 mg, 209 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (200 µl, 2,6 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 133 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
Intermedijer 388
(5S)-3-okso-2-{[cis/trans-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1046]
[1047] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[cis/trans-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 2 izomera) (112 mg, 264 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (5,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (500 µl, 6,5 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 153 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.53), -0.008 (16.00), 0.008
(13.04), 0.147 (1.83), 1.030 (2.72), 1.110 (9.48), 1.191 (2.96), 1.249 (3.95), 1.395
(3.01), 1.491 (10.32), 1.535 (8.54), 1.685 (3.56), 1.828 (5.53), 2.079 (9.98), 2.328
(2.17), 2.366 (1.78), 2.524 (6.22), 2.569 (4.20), 2.583 (3.11), 2.631 (5.33), 2.670
(3.90), 3.457 (4.64), 3.474 (4.79), 3.609 (5.04), 3.622 (5.68), 3.642 (4.54), 4.424
(8.54), 4.436 (8.69), 4.448 (4.00), 4.970 (3.75).
Intermedijer 389
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina
[1048]
[1049] Metil-(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (243 mg, čistoća 75%, 506 µmol) ubačen je u THF (2,5 ml) i vodu (2,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (60,6 mg, 2,53 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja tokom 90 minuta na sobnoj temperaturi dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Rastvarač je koncentrovan i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 264 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 347 [M+H]<+>
Intermedijer 390
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1050]
[1051] Etil-(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (500 mg, 1,24 mmol) ubačen je u THF (10 ml) i na 0 °C je dodat natrijum etanolat (850 µl, 21% u etanolu, 2,3 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 15 min na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i smeša je zakiseljena dodatkom 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 479 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.094 (0.28), 1.157 (2.06), 1.170 (1.54),
1.175 (4.26), 1.193 (2.09), 1.240 (0.19), 1.271 (0.24), 1.786 (0.19), 1.817 (0.21),
1.908 (2.01), 1.988 (7.50), 2.224 (0.42), 2.240 (0.55), 2.259 (1.12), 2.275 (1.16),
2.288 (1.30), 2.304 (1.30), 2.319 (2.92), 2.352 (1.02), 2.667 (0.88), 2.696 (3.39),
2.720 (3.41), 2.749 (0.95), 2.874 (0.20), 2.951 (0.48), 2.977 (2.16), 3.005 (1.87),
3.034 (0.37), 4.002 (0.61), 4.021 (1.81), 4.038 (1.78), 4.056 (0.60), 4.394 (0.20),
4.409 (0.23), 4.421 (0.22), 4.437 (0.19), 4.689 (2.91), 4.700 (2.65), 4.921 (1.26),
4.948 (16.00), 7.507 (4.76), 7.515 (0.69), 7.527 (5.86), 7.715 (3.26), 7.721 (3.37),
7.735 (3.05), 7.742 (3.13), 7.756 (0.28), 8.317 (4.42), 8.322 (4.42), 8.336 (0.48),
13.683 (0.28).
Intermedijer 391
(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1053] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (480 mg, 1,10 mmol) ubačen je u THF (20 ml) i na 0 °C je dodat natrijum etanolat (760 µl, 21% u etanolu, 2,0 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 min na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je ledena voda i smeša je zakiseljena dodatkom 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 577 mg (čistoća 88%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.57), 0.008 (0.56), 1.157 (4.39),
1.169 (1.76), 1.175 (9.00), 1.192 (4.46), 1.908 (1.38), 1.988 (16.00), 2.266 (0.42),
2.283 (0.44), 2.296 (0.49), 2.311 (0.46), 2.328 (1.28), 2.366 (0.50), 2.524 (0.59),
2.675 (0.40), 2.706 (1.29), 2.729 (1.28), 2.986 (0.84), 3.014 (0.71), 4.003 (1.29),
4.021 (3.80), 4.038 (3.75), 4.056 (1.23), 4.701 (0.89), 4.706 (1.09), 4.717 (0.99),
5.047 (0.49), 5.076 (5.23), 7.900 (0.82), 7.920 (2.75), 7.933 (1.79), 7.937 (1.59),
7.954 (0.60), 7.958 (0.60), 8.659 (1.66).
Intermedijer 392
(5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1055] Etil-(5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (440 mg, 964 µmοl) ubačen je u THF (5,0 ml) i vodu (5,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (69,3 mg, 2,89 mmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 372 mg (90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.91), -0.008 (8.08), 0.008 (7.23),
0.146 (0.98), 1.106 (2.33), 1.110 (1.68), 1.157 (4.28), 1.175 (8.94), 1.193 (4.49),
1.236 (0.42), 1.839 (0.46), 1.908 (14.96), 1.988 (16.00), 2.239 (0.66), 2.254 (0.89),
2.273 (1.85), 2.289 (1.87), 2.303 (2.06), 2.319 (2.18), 2.337 (4.86), 2.367 (1.97),
2.523 (2.97), 2.670 (1.10), 2.689 (1.29), 2.718 (5.76), 2.742 (5.61), 2.770 (1.75),
2.800 (0.73), 2.896 (0.48), 2.974 (0.81), 2.999 (3.66), 3.027 (3.18), 3.055 (0.71),
3.077 (0.89), 4.003 (1.29), 4.021 (3.82), 4.038 (3.78), 4.056 (1.25), 4.417 (0.48),
4.432 (0.54), 4.444 (0.52), 4.459 (0.44), 4.717 (4.76), 4.728 (4.45), 5.085 (1.45),
5.098 (2.93), 5.126 (12.20), 5.136 (12.34), 5.177 (1.39), 5.754 (0.75), 7.583 (3.57),
7.595 (6.94), 7.608 (3.91), 7.631 (0.54), 7.644 (0.87), 7.658 (0.46), 8.562 (7.88),
8.574 (8.27), 8.589 (1.12), 13.733 (0.56).
Intermedijer 393
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1056]
[1057] Etil-(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (133 mg, 315 µmοl) ubačen je u THF (1,5 ml) i vodu (1,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (22,6 mg, 944 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 113 mg (91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,26 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
Intermedijer 394
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1058]
[1059] Etil-(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (55,0 mg, 136 µmοl) ubačen je u THF (1,0 ml) i vodu (1,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (9,76 mg, 408 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 71,7 mg (čistoća 75%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
Intermedijer 395
3-okso-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1060]
[1061] Metil-3-okso-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (85,0 mg, čistoća 77%, 156 µmol) ubačen je u THF (1,0 ml, 37 mmol) i vodu (1,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (7,46 mg, 311 µmol) rastvoren u vodi. U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 113 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]<+>
Intermedijer 396
2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1062]
[1063] Metil-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (86,0 mg, 212 µmοl) ubačen je u THF (1,0 ml) i vodu (1,0 ml) i dodat je litijum hidroksid (10,2 mg, 425 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodat 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 85,4 mg (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
Intermedijer 397
5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1065] 3-okso-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (110 mg, 249 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (123 mg, 324 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (220 µl, 1,2 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (42,9 mg, 299 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (silika gel; mobilna faza: gradijent dihlormetan/metanol 1/0, 98/2). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,0 mg (čistoća 87%, 16% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,71 min; MS (ESIpos): m/z = 496 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.99), -0.009 (8.81), 0.007 (7.55),
0.146 (0.99), 1.237 (0.90), 1.949 (0.36), 2.322 (1.80), 2.327 (2.52), 2.331 (1.80),
2.366 (0.63), 2.522 (5.30), 2.623 (0.36), 2.664 (2.16), 2.669 (2.88), 2.674 (2.25),
2.689 (16.00), 2.709 (0.90), 2.741 (0.27), 3.356 (1.08), 3.390 (0.63), 3.408 (0.54),
3.428 (0.45), 3.473 (0.45), 3.496 (0.45), 3.614 (0.45), 3.636 (0.45), 3.648 (0.45),
3.676 (0.54), 3.723 (0.45), 3.768 (0.27), 3.867 (0.36), 3.906 (0.63), 3.920 (0.54),
3.938 (0.36), 3.953 (0.36), 4.482 (0.27), 4.497 (0.27), 5.320 (1.62), 5.369 (0.27),
5.449 (0.27), 5.472 (0.27), 5.803 (0.27), 6.694 (0.27), 6.723 (0.36), 6.791 (0.36),
6.807 (0.36), 7.268 (0.45), 7.307 (0.81), 7.320 (0.36), 7.777 (0.63), 7.910 (1.08),
7.929 (1.53), 8.026 (0.81), 8.046 (0.63), 8.772 (0.99), 14.278 (0.27).
Intermedijer 398
5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1066]
[1067] 3-okso-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (127 mg, 300 µmol) dodata je u THF (5,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (148 mg, 390 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (260 µl, 1,5 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (45,2 mg, 360 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 167 mg (čistoća 60%, 70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,64 min; MS (ESIpos): m/z = 478 [M+H]<+>
Intermedijer 399
2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1068]
[1069] 2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (42,0 mg, 100 µmοl) ubačena je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (49,3 mg, 130 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (15,1 mg, 120 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 51,2 mg (čistoća 62%, 69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,65 min; MS (ESIpos): m/z = 462 [M+H]<+>
Intermedijer 400
2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1070]
[1071] 2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-8-(trifluormetil)-2,3-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (42,0 mg, 100 µmοl) ubačena je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (49,3 mg, 130 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (17,2 mg, 120 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 95,2 mg (čistoća 47%, 92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,70 min; MS (ESIpos): m/z = 480 [M+H]<+>
Intermedijer 401
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1072]
[1073] (5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (39,0 mg, 92,6 µmol) dodat je u dihlormetan (940 µl) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Zatim je dodat Des-Martinov perjodinan (98,2 mg, 232 µmol) i reakciona smeša je mešana 15 min na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati dietil etar i rastvor natrijum tiosulfata (350 mg) u zasićenom vodenom rastvoru natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstrahovana dietil etrom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 12,7 mg (čistoća 90%, 31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 394 [M+H]<+>
Intermedijer 402
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1074]
[1075] (5S,8RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (51,7 mg, čistoća 86%, 107 µmol) dodat je u dihlormetan (1,1 ml) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Zatim je dodat Des-Martinov perjodinan (114 mg, 269 µmol) i reakciona smeša je mešana 15 min na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati dietil etar i rastvor natrijum tiosulfata (350 mg) u zasićenom vodenom rastvoru natrijum hidrogenkarbonata. Organska faza je razdvojena, i vodena faza je ekstrahovana dietil etrom i tri puta etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 25,8 mg (čistoća 75%, 46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
Intermedijer 403
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1076]
[1077] (5S,8RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (66,9 mg, čistoća 90%, 146 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (6,0 ml, 94 mmol) i na sobnoj temperaturi je dodat mangan(IV)-oksid (254 mg, 2,92 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 47,3 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
Intermedijer 404
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[1079] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (16,2 mg, 67,8 µmol) ubačen je u acetonitril (1,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (33,2 mg, 102 µmol) i 5-(hlormetil)-2-(trifluormetil)pirimidin (14,0 mg, 71,2 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodat etil acetat. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 22 mg (čistoća 11%, 8% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,88 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
Intermedijer 405
(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1080]
[1081] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (22,0 mg, čistoća 11%, 6 µmοl) rastvoren je u 1,4-dioksanu (200 µl) i dodata je hlorovodonična kiselina rastvorena u 1,4-dioksanu (140 µl, 4,0 M, 550 µmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 22 mg (čistoća 11%, >100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 344 [M+H]<+>
Intermedijer 406
Etil-(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1082]
[1083] Etil-(5S,7R)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (500 mg, 1,79 mmol) ubačen je u acetonitril (16 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,46 g, 4,48 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-5-(trifluormetil)piridin (432 mg, 1,88 mmol). Reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi pa su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 859 mg (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 473 [M+H]<+>
Intermedijer 407
Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[1084]
[1085] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (500 mg, 2,09 mmol) ubačen je u acetonitril (15 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,36 g, 4,18 mmol) i 5-hlor-2-(hlormetil)-3-fluorpiridin (395 mg, 2,19 mmol). Reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi i zatim su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 793 mg (99% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
Intermedijer 408
Terc-butil-(5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[1086]
[1087] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (452 mg, 1,89 mmol) ubačen je u acetonitril (41 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,54 g, 4,72 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-5-fluorpiridin (476 mg, 2,65 mmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 842 mg (čistoća 78%, 91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,66 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
Intermedijer 409
(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1088]
[1089] Etil-(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (859 mg, 1,82 mmol) ubačen je u THF (21 ml) i dodat je rastvor natrijum etanolata (1,09 g, 3,36 mmol, 21% mas.). Reakciona smeša je mešana tokom 20 min na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 846 mg (>100% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 445 [M+H]<+>
Intermedijer 410
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1090]
[1091] Terc-butil-(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (793 mg, 2,07 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (15 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (3,2 ml, 41 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodata trifluorsirćetna kiselina (0,64 ml, 8,2 mmol) i reakciona smeša je još 1,5 sati mešana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 676 mg (čistoća 89%, 89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 327 [M+H]<+>
Intermedijer 411
(5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1092]
[1093] Terc-butil-(5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (842 mg, 2,20 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (14,1 ml) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (3,4 ml, 44 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 1,45 g (čistoća 58%, 117% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,53 min; MS (ESIpos): m/z = 327 [M+H]<+>
Intermedijer 412
Etil-(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1094]
[1095] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (300 mg, 1,07 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (700 mg, 2,15 mmol) i 3-hlor-2-(hlormetil)-5-fluorpiridin hidrohlorid (254 mg, čistoća 96%, 1,13 mmol). Nakon što je reakciona smeša preko noći mešana na sobnoj temperaturi, ponovo je dodat 3-hlor-2-(hlormetil)-5-fluorpiridin hidrohlorid (254 mg, čistoća 96%, 1,13 mmol) i mešano je preko noći na 60 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 348 mg (>75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,67 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.187 (1.01), 1.199 (7.45), 1.204 (2.57),
1.216 (16.00), 1.234 (7.55), 1.769 (0.74), 1.799 (1.54), 1.830 (1.61), 1.860 (0.83),
2.073 (0.42), 2.482 (0.94), 2.521 (0.84), 2.716 (1.04), 2.746 (1.26), 2.756 (1.70),
2.786 (1.98), 2.867 (1.23), 2.873 (1.39), 2.877 (1.27), 2.902 (0.68), 2.907 (0.77),
2.913 (0.75), 3.056 (0.40), 3.069 (0.55), 3.077 (0.63), 3.087 (0.58), 3.098 (0.57),
4.145 (0.51), 4.154 (1.19), 4.159 (1.36), 4.171 (3.77), 4.177 (3.81), 4.189 (3.90),
4.195 (3.66), 4.207 (1.35), 4.213 (1.28), 4.222 (0.43), 4.525 (1.71), 4.539 (1.98),
4.553 (1.89), 4.567 (1.64), 4.982 (1.78), 5.021 (4.32), 5.069 (5.20), 5.109 (1.75),
8.118 (2.64), 8.124 (2.83), 8.139 (2.69), 8.145 (2.80), 8.543 (0.91), 8.548 (5.70),
8.555 (5.07).
Intermedijer 413
Etil-(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1096]
[1097] Etil-(5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (600 mg, 2,15 mmol) ubačen je u acetonitril (10 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (1,75 g, 5,37 mmol) i 2-(hlormetil)-3,5-difluorpiridin (387 mg, 2,36 mmol). Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi mešana preko noći na 60 °C. Ponovo je dodat 2-(hlormetil)-3,5-difluorpiridin (100 mg, 0,61 mmol) i reakciona smeša je mešana 1 sat na 60 °C i 48 sati na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 734 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]<+>
Intermedijer 414
Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat
[1098]
[1099] Terc-butil-(5S)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (154 mg, 645 µmol) ubačen je u acetonitril (14 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (525 mg, 1,61 mmol) i 3-(hlormetil)-5-(trifluormetil)piridin (164 mg, 838 µmol). Reakciona smeša je mešana tokom 5 sati na 50 °C i preko noći na sobnoj temperaturi.
Najveći deo acetonitrila je uklonjen pod vakuumom i u ostatak su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 26,4 mg (čistoća 83%, 9% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,72 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
Intermedijer 415
(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1100]
[1101] Etil-(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (348 mg, 824 µmοl) ubačen je u THF (10 ml) i dodat je natrijum etanolat (494 mg, 21% mas., 1,52 mmol, u etanolu). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 289 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
Intermedijer 416
(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1102]
[1103] Etil-(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (734 mg, čistoća 93%, 1,69 mmol) ubačen je u THF (20 ml) i dodat je rastvor natrijum etanolata (1,01 g, čistoća 21%, 3,12 mmol rastvoren u etanolu). Reakciona smeša je mešana tokom 20 min na 0 °C i preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 213 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 379 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.309 (1.32), 1.324 (2.78), 1.341 (1.44),
1.774 (0.56), 1.804 (0.56), 2.064 (0.56), 2.072 (0.41), 2.096 (0.40), 2.169 (0.58),
2.224 (1.06), 2.240 (1.22), 2.259 (2.88), 2.275 (3.39), 2.301 (9.72), 2.332 (2.28),
2.455 (0.76), 2.636 (2.41), 2.666 (8.01), 2.701 (8.02), 2.743 (1.91), 2.785 (0.63),
2.849 (0.55), 2.949 (5.55), 2.979 (4.61), 3.848 (0.90), 4.073 (0.62), 4.090 (1.31),
4.108 (1.11), 4.113 (1.20), 4.391 (0.55), 4.405 (0.62), 4.418 (0.62), 4.433 (0.53),
4.665 (5.53), 4.671 (7.00), 4.680 (5.72), 4.685 (5.62), 4.836 (0.65), 4.857 (0.88),
4.874 (0.78), 4.898 (1.52), 4.964 (3.41), 4.998 (11.30), 5.030 (10.17), 5.066 (2.90),
7.468 (0.68), 7.495 (0.65), 7.937 (3.94), 7.943 (4.33), 7.962 (6.26), 7.966 (6.71),
7.984 (4.12), 7.990 (4.32), 8.051 (1.42), 8.420 (0.48), 8.468 (14.61), 8.473 (16.00),
13.619 (0.72).
Intermedijer 417
(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1104]
[1105] Terc-butil-(5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (1,13 g, 2,83 mmol) rastvoren je u dihlormetanu (180 µl) i na sobnoj temperaturi je dodata trifluorsirćetna kiselina (4,4 ml, 57 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je 980 mg (101% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
Intermedijer 418
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1106]
[1107] (5S,8RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (58,0 mg, 120 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat mangan(IV)-oksid (209 mg, 2,41 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 49,4 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 480 [M+H]<+>
Intermedijer 419
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1108]
[1109] (5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (103 mg, čistoća 85%, 211 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (8,7 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat mangan(IV)-oksid (366 mg, 4,21 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 79,4 mg (čistoća 88%, 81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
Intermedijer 420
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1110]
[1111] (5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (48,1 mg, čistoća 86%, 108 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (800 µl) i na sobnoj temperaturi je dodat mangan(IV)-oksid (188 mg, 2,17 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 37,1 mg (čistoća 63%, 57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
Intermedijer 421
(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1112]
[1113] (5S,8RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (112 mg, 270 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (10 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat mangan(IV)-oksid (469 mg, 5,39 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 61,3 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
Intermedijer 422
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (izomer 1)
[1114]
[1115] (5S,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (30,0 mg, 69,9 µmol) dodata je u dihlormetan (180 µl) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Zatim je dodat Des-Martinov perjodinan (35,6 mg, 83,8 µmol) i reakciona smeša je mešana 15 min na 0 °C i 2 sata na sobnoj temperaturi. Ponovo je dodat Des-Martinov perjodinan (35,6 mg, 83,8 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći. U reakcionu smešu su dodati dietil etar i rastvor natrijum tiosulfata u zasićenom vodenom rastvoru natrijum hidrogenkarbonata, i mešana je dok dve faze nisu postale homogene. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,60 mg (5% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.86), -0.044 (0.28), -0.035 (0.39), -0.033 (0.39), -0.029 (0.51), -0.027 (0.51), -0.024 (0.56), -0.022 (0.85), -0.020 (1.01),
-0.016 (1.69), - 0.009 (16.00), 0.007 (14.08), 0.013 (2.08), 0.015 (1.18), 0.018 (0.85),
0.020 (0.56), 0.023 (0.56), 0.025 (0.45), 0.029 (0.34), 0.146 (1.75), 2.113 (0.34),
2.135 (0.34), 2.151 (0.39), 2.193 (0.28), 2.238 (0.45), 2.266 (0.56), 2.292 (0.39),
2.323 (1.35), 2.327 (1.86), 2.331 (1.46), 2.366 (2.37), 2.396 (0.45), 2.424 (0.23),
2.431 (0.28), 2.453 (0.34), 2.523 (4.73), 2.525 (3.66), 2.558 (1.58), 2.612 (0.68),
2.622 (0.62), 2.646 (0.28), 2.664 (1.46), 2.669 (1.80), 2.674 (1.35), 2.709 (2.08),
3.364 (0.56), 3.391 (0.34), 3.400 (0.34), 3.418 (0.28), 3.435 (0.34), 3.507 (0.28),
3.534 (0.34), 3.544 (0.34), 3.651 (0.62), 3.673 (0.56), 3.681 (0.68), 3.702 (0.51),
3.711 (0.56), 3.749 (0.34), 3.792 (0.23), 3.815 (0.34), 3.841 (0.68), 3.889 (0.39),
3.919 (0.39), 3.948 (0.34), 5.029 (0.68), 5.068 (0.45), 5.081 (0.85), 5.185 (0.51),
5.224 (2.14), 5.239 (1.52), 5.245 (1.86), 5.285 (0.73), 5.417 (0.51), 5.541 (0.28),
7.928 (0.96), 7.948 (2.93), 7.965 (1.52), 7.987 (0.51), 8.535 (0.45), 8.699 (1.75).
Intermedijer 423
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion
[1116]
[1117] (5S,8SR)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (93,0 mg, 201 µmol) rastvoren je u dihlormetanu (2,0 ml) i na sobnoj temperaturi je dodat mangan(IV)-oksid (349 mg, 4,01 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 75,5 mg (82% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 462 [M+H]<+>
Primeri otelotvorenja:
Primer 1
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-[4-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1118]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1119] (racemat) (70,0 mg, 296 µmol) rastvoren je u 5,0 ml acetonitrila, zatim su dodati cezijum karbonat (145 mg, 444 µmol) i 1-(brommetil)-4-(trifluormetil)benzol (85,0 mg, 356 µmol) i mešano je preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je mešana sa 1 ml vode i razdvojena pomoću preparativne HPLC hromatografije (GromSil 120 ODS-4HE, 250x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B , 40 min 0%B. Vreme trajanja po razdvajanju 40min. Detekcija: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i liofilizovane. Dobijeno je 92 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.86 - 2.11 (m, 4H), 2.45- 2.68 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3,21 - 3,41 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.92 (s, 2H), 7.41 - 7.47 (m, 2H), 7.68 - 7.74 (m, 2H).
Primer 2
(5RS)-2-(4-terc-butilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1121] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) rastvoren je u 3,0 ml acetonitrila, zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 pmol) i 1-(brommetil)-4-terc-butilbenzol (47 µl, 250 µmol) i mešano je preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je mešana sa 1 ml vode i razdvojena pomoću preparativne HPLC hromatografije (GromSil 120 ODS-4HE, 250x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B , 40 min 0%B. Vreme trajanja po razdvajanju 40min. Detekcija: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i liofilizovane. Dobijeno je 63 mg (81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,75 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.26 (s, 9H), 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.87 -2.10 (m, 4H), 2.46 - 2.65 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3,21 - 3,41 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.70 - 4.73 (m, 3H), 7.13 - 7.18 (m, 2H), 7.31 - 7.37 (m, 2H).
Primer 3
(5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1122]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1123] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) rastvoren je u 3,0 ml acetonitrila, zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 1-[(1RS)-1-brometil]-4-hlorbenzol (racemat) (55,7 mg, 254 µmol) i mešano je preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je mešana sa 1 ml vode i razdvojena pomoću preparativne HPLC hromatografije (GromSil 120 ODS-4HE, 250x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B , 40 min 0%B. Vreme trajanja po razdvajanju 40min. Detekcija: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i liofilizovane. Dobijeno je 56 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja kao dijastereomerne smeše.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.57 - 1.64 (m, 3H), 1.64 -1.82 (m, 4H), 1.86 - 2.10 (m, 4H), 2.50 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.18 -3.39 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.41 - 3.50 (m, 1H), 3.56 - 3.65 (m, 1H), 4.67 - 4.75 (td, 1H), 5.25 - 5.33 (m, 1H), 7.28 - 7.41 (m, 4H).
[1124] U daljoj smeši za isto naslovno jedinjenje, (5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (392 mg, čistoća 90%, 1,10 mmol) rastvorena je u 12 ml THF-a. Dodati su trietilamin (310 µl, 2,2 mmol), HATU (542 mg, 1,43 mmol) i pirolidin (110 µl, 1,3 mmol) i smeša je mešana 2 h pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je razblažena vodom i zatim je maksimalno koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prenet u smešu etil acetat/voda. Nakon ekstrakcije i razdvajanja organske faze, vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida i osušene iznad natrijum sulfata. Ostatak preostao nakon koncentrovanja i sušenja u vakuumu rastvoren je u smeši acetonitril/voda i 2 šarže su razdvojene putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Objedinjene frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i osušene. Dobijeno je 293 mg 56 mg (čistoća 98%, 70% od teor.) naslovnog jedinjenja kao racemska smeša dijastereomera.
Primer 4
(5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 3)
[1125]
[1126] (5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem dve preparativne tečne hromatografije na hiralnoj fazi. Zatim je stereoizomer 4 razdvojen putem preparativne tečne hromatografije na hiralnoj fazi [priprema uzorka: 392 mg rastvoreno u 10 ml etanola; injekciona zapremina: 2,0 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5µm, 250 x 50 mm; mobilna faza: etanol, protok: 15,0 ml/min; temperatura 50 °C; UV detekcija: 220 nm]. Dobijen je 61 mg stereoizomera 4 koji se poslednji eluira
[1127] U drugom koraku, spojene frakcije preostala tri stereoizomera su ponovo rastvorene i razdvojene [uzorak u 10 ml etanola; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5µm, 250 x 50 mm; mobilna faza: voda/etanol: izokratski 50% etanol; protok: 15,0 ml/min; temperatura 50 °C; UV detekcija: 220 nm]. Prema redosledu elucije, dobijen je 51 mg izomera 1, 62 mg izomera 2 i 53 mg izomera 3.
Izomer 3:
spec. optička rotacija: -145,16 (589 nm, 0,2450 g / 100 cm<3>MeOH)
Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,74 min, d.e./e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 250 x 4,6 mm; mobilna faza: etanol; protok: 1 ml/min; 50 °C; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 (d, 3H), 1.68 - 1.74 (m, 2H); 1.74 -1.83 (m, 2H), 1.87 - 1.98 (m, 3H), 1.98 - 2.07 (m, 1H), 2.50 - 2.59 (m, 1H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 2.65 (dt, 1H), 3.21 - 3.39 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.45 (dt, 1H), 3.60 (dt, 1H), 4.70 (dd, 1H), 5.28 (q, 1H), 7.30 - 7.34 (m, 2H), 7.36 - 7.40 (m, 2H).
Primer 5
(5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 4)
[1129]
[1130] (5RS)-2-[(1RS)-1-(4-hlorfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem dve preparativne tečne hromatografije na hiralnoj fazi. Zatim je stereoizomer 4 razdvojen putem preparativne tečne hromatografije na hiralnoj fazi [priprema uzorka: 392 mg rastvoreno u 10 ml etanola; injekciona zapremina: 2,0 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5µm, 250 x 50 mm; mobilna faza: etanol, protok: 15,0 ml/min; temperatura 50 °C; UV detekcija: 220 nm]. Dobijen je 61 mg stereoizomera 4 koji se poslednji eluira
[1131] U drugom koraku, spojene frakcije preostala tri stereoizomera su ponovo rastvorene i razdvojene [uzorak u 10 ml etanola; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5µm, 250 x 50 mm; mobilna faza: voda/etanol: izokratski 50% etanol; protok: 15,0 ml/min; temperatura 50 °C; UV detekcija: 220 nm]. Prema redosledu elucije, dobijen je 51 mg izomera 1, 62 mg izomera 2 i 53 mg izomera 3.
Izomer 4:
[1132] Analitička hiralna HPLC: Rt= 12,6 min, d.e./e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 250 x 4,6 mm; mobilna faza: etanol; protok: 1 ml/min; 50 °C; UV detekcija: 220 nm].
spec. optička rotacija: 134,80 (589 nm, 0,2500g / 100 cm<3>MeOH)
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
1H-NMR (500MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.60 (d, 3H), 1.63 - 1.82 (m, 4H), 1.85 -2.09 (m, 4H), 2.50 - 2.61 (m, 1H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 2.65 (dt, 1H), 3.23 (dt, 1H), 3.28 - 3.36 (m, 1H, delimično prekriven signalom vode), 3.45 (dt, 1H), 3.60 (dt, 1H), 4.72 (dd, 1H), 5.29 (q, 1H), 7.29 - 7.33 (m, 2H), 7.37 - 7.41 (m, 2H).
Primer 6
(5RS)-2-[4-(metilsulfonil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1133]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1134] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) rastvoren je u 3,0 ml acetonitrila, zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 1-(brommetil)-4-(metilsulfonil)benzol (68,5 mg, 275 pmol) i mešano je preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je mešana sa 1 ml vode i razdvojena pomoću preparativne HPLC hromatografije (GromSil 120 ODS-4HE, 250x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B , 40 min 0%B. Vreme trajanja po razdvajanju 40min. Detekcija: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i liofilizovane. Dobijeno je 71 mg (82% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.87 - 2.12 (m, 4H), 2.47 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.20 (s, 3H), 3.22 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.76 (dd, 1H), 4.94 (s, 2H), 7.45 - 7.51 (m, 2H), 7.87 - 7.92 (m, 2H).
Primer 7
(5RS)-2-[4-(difluormetoksi)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1135]
[1136] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) rastvoren je u 3,0 ml acetonitrila, zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 1-(brommetil)-4-(difluormetoksi)benzol (60,2 mg, 254 µmol) i mešano je preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je mešana sa 1 ml vode i razdvojena pomoću preparativne HPLC hromatografije (GromSil 120 ODS-4HE, 250x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B , 40 min 0%B. Vreme trajanja po razdvajanju 40min. Detekcija: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i liofilizovane. Dobijeni proizvod je po drugi put prečišćen pomoću preparativne HPLC hromatografije, kao prethodno. Nakon ponovnog koncentrovanja i liofilizacije, dobijeno je 29 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 6): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]<+>
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.87 - 2.11 (m, 4H), 2.46 - 2.66 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.73 (dd, 1H), 4.80 (s, 2H), , 7.11 - 7.17 (m, 2H), 7.20 (s, 1H) 7.25 - 7.31 (m, 2H).
Primer 8
(5RS)-2-(3-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1137]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1138] (racemat) (45,0 mg, 190 µmol) i cezijum karbonat (93,1 mg, 286 µmol) suspendovani su u 3,0 ml acetonitrila, zatim je dodat 1-(brommetil)-3-metilbenzol (31 µl, 230 µmol) i smeša je mešana prvo 2 h, a zatim dalje preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je razblažena etil acetatom i vodom, i organska faza je razdvojena. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida i zatim su osušene iznad natrijum sulfata. Ostatak preostao nakon filtracije i koncentrovanja u vakuumu rastvoren je u smeši acetonitril/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i liofilizovane, i zatim osušene u vakuumu. Dobijeno je 35,1 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.63 - 1.84 (m, 4H), 1.88 - 2.09 (m, 4H), 2.28 (s, 3H), 2.45 - 2.65 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.26 (dt, 1H) 3.36 (dt, 1H) 3.40 - 3.66 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 4.70 - 4.79 (m, 3H), 6.99 - 7.10 (m, 3H), 7.21 (t, 1H).
Primer 9
(5RS)-2-[4-(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1140] (racemat) (55,0 mg, 233 µmol) i cezijum karbonat (114 mg, 349 µmol) suspendovani su u 3,0 ml acetonitrila, zatim je dodat 5-[4-(brommetil)fenil]-3-metil-1,2,4-oksadiazol (70,7 mg, 279 µmol) i smeša je mešana prvo 2 h, a zatim dalje preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je odvojen pod vakuumom i ispran acetonitrilom. Filtrat je koncentrovan, prenet u smešu acetonitril/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije proizvoda su spojene, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 42,0 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,26 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.64 - 1.85 (m, 4H), 1.88 - 2.12 (m, 4H), 2.42 (s, 3H), 2.45 - 2.70 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.20 - 3.57 (m, 3H, delimično prekriven signalom vode), 3.63 (dt, 1H), 4.73 - 4.78 (m, 1H), 4.93 (s, 2H), 7.44 - 7.48 (m, 2H), 8.04 - 8.08 (m, 2H).
Primer 10
(5RS)-2-[4-(5-metil-1,2,4-oksadiazol-3-il)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1141]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1142] (racemat) (60,0 mg, 254 µmol) i cezijum karbonat (124 mg, 381 µmol) suspendovani su u 3,0 ml acetonitrila, zatim je dodat 5-[4-(brommetil)fenil]-3-metil-1,2,4-oksadiazol (70,7 mg, 279 µmol) i smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je odvojen pod vakuumom i filtrat je koncentrovan. Nakon sušenja u vakuumu usledilo je hromatografsko prečišćavanje (instrument: Waters Prep LC/MS System, kolona: Phenomenex Kinetex C185 µm 100x30 mm eluent A: voda, eluent B : acetonitril, protok: 65 ml/min plus 5ml 2% mravlje kiseline u vodi, sobna temperatura, talasna dužina 200-400 nm, injektovanje na kolonu (kompletno injektovanje) gradijentni profil: 0 do 2 min 10% eluent B, 2 do 2,2 min na 20% eluenta B, 2,2 do 7 min na 60% eluenta B, 7 do 7,5 min na 92% eluenta B, 7,5 do 9 min sa 92% B). Frakcije proizvoda su liofilizovane. Tako je dobijeno 57,6 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.62 - 1.85 (m, 4H), 1.88 - 2.12 (m, 4H), 2.48 - 2.72 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 2.86 (s, 3H), 3.22 - 3.41 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.63 (dt, 1H), 4.76 (dd, 1H), 4.84 - 4.95 (m, 2H), 7.38 - 7.43 (m, 2H), 7.93 - 7.98 (m, 2H).
Primer 11
(5RS)-2-(2,3-dihidro-1H-inden-5-ilmetil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1143]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1144] (racemat) (75,4 mg, 316 µmol) i cezijum karbonat (154 mg, 474 µmol) suspendovani su u 3,0 ml acetonitrila, zatim je dodat 5-(brommetil)indan (100 mg, čistoća oko 80%, oko 379 µmol), mešano 1,5 h na sobnoj temperaturi a zatim ostavljena na sobnoj temperaturi preko vikenda. Radi dalje konverzije, još jednom su dodati cezijum karbonat (206 mg, 632 µmol) i 5-(brommetil)indan (100 mg, čistoća oko 80%, oko 379 µmol), i smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, postojeći talog je odvojen pod vakuumom i odbačen. Filtrat je koncentrovan, prenet u smešu acetonitril/DMO/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 250x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 27 min 5%A, 38 min 5% A, 38 min 5% A, 39 min 90% A, protok: 50ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 77,2 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.64 - 1.74 (m, 2H), 1.79 (quint; 2H) 1.88 -2.09 (m, 6H), 2.46 - 2.64 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 2.81 (t, 4H), 3.25 (dt, 1H), 3.36 (dt, 1 H), 3.42 - 3.68 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 4.67 - 4.79 (m, 3H), 6.99 (d, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.16 (d, 1H).
Primer 12
(5RS)-2-[(5-metil-1,2,4-oksadiazol-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1145]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1146] (racemat) (30,0 mg, 127 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (62,1 mg, 190 µmol) i 3-(brommetil)-5-metil-1,2,4-oksadiazol (23,6 mg, 133 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,0 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,48 min; MS (ESIpos): m/z = 333 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.701 (0.70), 1.713 (0.92), 1.717 (0.99),
1.727 (0.86), 1.776 (1.37), 1.789 (2.33), 1.803 (1.73), 1.817 (0.51), 1.899 (0.57),
1.913 (1.61), 1.926 (2.10), 1.940 (1.46), 1.952 (0.51), 1.969 (0.52), 1.979 (0.49),
2.023 (0.40), 2.040 (0.41), 2.052 (0.41), 2.518 (0.65), 2.522 (0.41), 2.568 (3.66),
2.573 (16.00), 2.590 (1.04), 2.598 (1.52), 2.866 (2.48), 3.247 (0.78), 3.256 (0.75),
3.260 (0.64), 3.270 (1.32), 3.284 (1.11), 3.310 (3.45), 3.324 (2.02), 3.338 (1.66),
3.348 (0.84), 3.352 (0.93), 3.362 (0.92), 3.376 (0.44), 3.460 (0.74), 3.466 (0.54),
3.474 (0.47), 3.480 (0.91), 3.494 (0.41), 3.599 (0.41), 3.613 (0.84), 3.619 (0.43),
3.626 (0.48), 3.633 (0.70), 4.494 (1.93), 4.720 (0.77), 4.727 (0.88), 4.732 (0.99),
4.740 (0.78), 4.857 (1.33), 4.889 (3.17), 4.928 (3.18), 4.960 (1.36).
Primer 13
(5RS)-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1147]
[1148] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) (40,0 mg, 169 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (82,7 mg, 254 µmol) i 5-(brommetil)-3-metil-1,2-oksazol (32,8 mg, 186 µmol). U reakcionu smešu su nakon 2 dana mešanja na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 18,6 mg (33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 332 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.87), 0.008 (0.76), 1.686 (0.49),
1.709 (0.99), 1.720 (1.17), 1.732 (0.87), 1.753 (0.57), 1.772 (1.53), 1.789 (2.62),
1.806 (2.01), 1.822 (0.60), 1.892 (0.62), 1.909 (1.85), 1.925 (2.33), 1.942 (1.50),
1.959 (0.66), 1.972 (0.52), 1.983 (0.78), 1.995 (0.71), 2.004 (0.63), 2.014 (0.50),
2.019 (0.48), 2.030 (0.68), 2.039 (0.56), 2.046 (0.46), 2.055 (0.49), 2.201 (16.00),
2.215 (0.69), 2.417 (0.49), 2.523 (1.09), 2.565 (0.86), 2.580 (0.74), 2.590 (0.68),
2.602 (1.21), 2.615 (0.66), 2.643 (0.48), 3.242 (0.75), 3.254 (0.74), 3.271 (1.33),
3.288 (0.70), 3.322 (0.97), 3.339 (1.33), 3.351 (0.50), 3.357 (0.70), 3.369 (0.78),
3.454 (0.86), 3.462 (0.63), 3.471 (0.53), 3.479 (1.08), 3.496 (0.47), 3.589 (0.50),
3.606 (1.03), 3.614 (0.52), 3.623 (0.59), 3.631 (0.79), 3.703 (0.42), 4.495 (0.41),
4.510 (0.41), 4.723 (0.92), 4.732 (1.05), 4.738 (1.20), 4.747 (0.90), 4.940 (4.70),
4.982 (0.54), 6.223 (3.16).
Primer 14
(5RS)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1149]
[1150] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) (40,0 mg, 169 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (82,7 mg, 254 µmol) i 4-(brommetil)-2-fluor-1-(trifluormetil)benzol (47,9 mg, 186 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja tokom 48 h na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 48,9 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.00), 0.008 (1.79), 1.235 (0.49),
1.681 (1.63), 1.695 (1.81), 1.706 (1.87), 1.719 (2.35), 1.731 (2.76), 1.743 (2.21),
1.756 (2.58), 1.774 (5.53), 1.792 (8.57), 1.809 (6.54), 1.819 (2.30), 1.826 (3.06),
1.837 (3.80), 1.845 (1.54), 1.854 (1.49), 1.893 (2.04), 1.910 (5.29), 1.926 (6.37),
1.943 (3.93), 1.960 (1.38), 1.975 (1.13), 1.987 (1.15), 2.000 (1.81), 2.020 (3.43),
2.045 (1.84), 2.056 (1.54), 2.063 (1.50), 2.071 (1.41), 2.080 (0.76), 2.091 (0.52),
2.327 (0.60), 2.519 (4.26), 2.563 (2.70), 2.573 (2.53), 2.588 (2.17), 2.602 (2.17),
2.614 (3.60), 2.626 (2.07), 2.644 (1.03), 2.656 (1.47), 2.669 (1.30), 2.710 (0.51),
3.097 (1.58), 3.233 (1.25), 3.250 (2.51), 3.262 (2.74), 3.279 (4.78), 3.297 (3.97),
3.328 (2.43), 3.346 (4.21), 3.358 (1.68), 3.364 (2.26), 3.376 (2.38), 3.393 (1.08),
3.443 (1.37), 3.460 (2.81), 3.468 (2.17), 3.478 (1.79), 3.485 (3.40), 3.502 (1.52),
3.593 (1.77), 3.610 (3.23), 3.618 (1.80), 3.627 (1.95), 3.635 (2.43), 3.652 (1.15),
3.711 (0.75), 4.755 (3.09), 4.764 (3.43), 4.769 (4.01), 4.779 (2.85), 4.948 (16.00),
4.985 (0.48), 7.248 (3.78), 7.268 (4.07), 7.296 (3.67), 7.326 (3.62), 7.755 (2.93),
7.775 (5.28), 7.794 (2.72).
Primer 15
(5RS)-2-[(2-metilpiridin-4-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1151]
[1152] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (40,0 mg, 169 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (82,7 mg, 254 µmol) i 4-(hlormetil)-2-metilpiridin hidrohlorid (33,2 mg, 186 µmol).
Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i dodatnih 24 h na 85 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, u reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat.
Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Vodene faze su pomoću natrijum hidrogenkarbonata podešene na pH 7. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i ostatak je suspendovan u etanolu. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 51,6 mg (čistoća 94%, 84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,51 min; MS (ESIpos): m/z = 342 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.03), -0.008 (8.61), 0.008 (8.84),
0.146 (0.99), 1.038 (4.77), 1.055 (9.73), 1.072 (4.87), 1.355 (0.51), 1.679 (0.92),
1.692 (1.03), 1.704 (0.90), 1.763 (1.74), 1.780 (3.17), 1.797 (5.03), 1.814 (3.79),
1.833 (1.56), 1.912 (1.91), 1.920 (2.09), 1.927 (2.48), 1.935 (2.30), 1.945 (1.86),
1.952 (1.54), 2.055 (2.57), 2.328 (1.26), 2.366 (0.94), 2.523 (4.09), 2.568 (1.54),
2.583 (1.35), 2.594 (1.42), 2.609 (1.19), 2.618 (1.26), 2.629 (1.81), 2.642 (1.29),
2.673 (16.00), 2.698 (2.66), 2.710 (1.22), 3.087 (0.44), 3.247 (0.78), 3.264 (1.52),
3.277 (1.38), 3.293 (2.27), 3.310 (1.08), 3.335 (1.19), 3.352 (2.36), 3.370 (1.38),
3.382 (1.33), 3.399 (0.76), 3.413 (1.97), 3.431 (5.39), 3.449 (5.39), 3.459 (1.01),
3.466 (2.18), 3.476 (1.77), 3.484 (1.45), 3.501 (2.20), 3.518 (1.19), 3.593 (1.65),
3.610 (2.43), 3.626 (1.86), 3.634 (2.11), 3.652 (1.56), 3.725 (1.54), 4.020 (1.93),
4.753 (0.46), 4.791 (1.58), 4.805 (2.59), 4.815 (1.52), 4.930 (0.85), 5.057 (0.48),
5.101 (4.04), 5.112 (3.93), 5.157 (0.48), 7.543 (1.58), 7.555 (1.61), 7.575 (2.75),
7.833 (0.57), 8.664 (0.57), 8.679 (0.73), 8.703 (2.85), 8.717 (2.53).
Primer 16
(5RS)-2-(3-fluorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1153]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1154] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 1-(brommetil)-3-fluorbenzol (42,0 mg, 222 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,0 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 345 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.74), -0.008 (6.59), 0.008 (5.85),
0.146 (0.74), 1.673 (0.74), 1.685 (1.06), 1.699 (1.41), 1.709 (1.99), 1.722 (2.31),
1.733 (1.90), 1.746 (0.96), 1.755 (1.35), 1.773 (3.66), 1.791 (6.30), 1.808 (4.79),
1.824 (1.38), 1.893 (1.48), 1.910 (4.24), 1.926 (5.17), 1.943 (3.15), 1.960 (1.38),
1.983 (1.03), 1.994 (1.80), 2.005 (1.73), 2.021 (1.22), 2.036 (1.48), 2.047 (1.06),
2.053 (1.03), 2.062 (1.06), 2.072 (3.92), 2.088 (0.42), 2.322 (0.58), 2.327 (0.84),
2.332 (0.61), 2.366 (0.64), 2.518 (3.63), 2.522 (3.05), 2.564 (2.02), 2.579 (1.61),
2.593 (1.51), 2.605 (2.80), 2.617 (1.54), 2.636 (0.71), 2.647 (1.09), 2.660 (0.84),
2.665 (0.80), 2.669 (0.93), 2.674 (0.71), 2.709 (0.74), 3.230 (0.90), 3.247 (1.83),
3.259 (1.90), 3.276 (3.31), 3.294 (2.38), 3.328 (2.60), 3.346 (3.44), 3.357 (1.29),
3.364 (1.73), 3.375 (1.96), 3.393 (0.93), 3.439 (1.00), 3.457 (2.12), 3.464 (1.54),
3.474 (1.22), 3.482 (2.70), 3.499 (1.19), 3.595 (1.22), 3.611 (2.41), 3.619 (1.19),
3.628 (1.41), 3.636 (1.86), 3.653 (0.84), 4.740 (2.22), 4.750 (2.47), 4.756 (2.89),
4.765 (2.18), 4.836 (16.00), 7.005 (1.77), 7.031 (1.90), 7.036 (1.70), 7.057 (2.86),
7.076 (3.37), 7.087 (0.96), 7.103 (1.86), 7.110 (1.67), 7.124 (1.09), 7.131 (1.03),
7.356 (1.83), 7.372 (2.09), 7.376 (2.70), 7.391 (2.67), 7.396 (1.67), 7.411 (1.41).
Primer 17
(5RS)-2-(3,4-difluorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1155]
[1156] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 4-(brommetil)-1,2-difluorbenzol (46,0 mg, 222 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,4 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 363 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.10), 0.008 (0.79), 1.659 (0.87),
1.666 (0.94), 1.678 (1.26), 1.692 (1.49), 1.720 (2.53), 1.730 (1.97), 1.744 (1.22),
1.755 (1.63), 1.773 (4.14), 1.791 (6.91), 1.808 (5.24), 1.824 (1.51), 1.893 (1.74),
1.909 (4.73), 1.926 (5.77), 1.942 (3.55), 1.960 (1.63), 1.983 (1.35), 1.994 (2.27),
2.007 (2.54), 2.016 (1.71), 2.034 (1.69), 2.044 (1.27), 2.051 (1.22), 2.060 (1.18),
2.069 (0.65), 2.079 (0.40), 2.519 (2.58), 2.561 (2.09), 2.576 (1.78), 2.591 (1.72),
2.603 (3.08), 2.615 (1.71), 2.633 (0.78), 2.645 (1.17), 2.657 (0.59), 3.229 (1.01),
3.246 (2.10), 3.258 (2.34), 3.275 (4.13), 3.293 (3.31), 3.325 (2.59), 3.343 (3.64),
3.355 (1.42), 3.361 (1.92), 3.373 (2.02), 3.391 (0.93), 3.438 (1.10), 3.456 (2.33),
3.463 (1.76), 3.473 (1.45), 3.480 (2.91), 3.497 (1.27), 3.592 (1.40), 3.609 (2.74),
3.617 (1.46), 3.625 (1.61), 3.633 (2.09), 3.650 (0.96), 4.737 (2.62), 4.746 (2.87),
4.752 (3.26), 4.761 (2.48), 4.816 (16.00), 7.061 (1.51), 7.067 (1.55), 7.072 (1.61),
7.077 (1.78), 7.083 (1.77), 7.087 (1.69), 7.093 (1.61), 7.230 (1.48), 7.235 (1.43),
7.249 (1.57), 7.255 (1.72), 7.258 (1.78), 7.264 (1.49), 7.278 (1.47), 7.283 (1.38),
7.373 (1.70), 7.394 (3.23), 7.400 (1.93), 7.415 (1.77), 7.421 (3.17), 7.442 (1.48).
Primer 18
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1157]
[1158] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 4-(brommetil)-2-hlor-1-fluorbenzol (49,7 mg, 222 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 57,0 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 379 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.11), 1.666 (0.83), 1.679 (1.17),
1.692 (1.58), 1.703 (2.12), 1.717 (2.65), 1.727 (2.06), 1.755 (1.33), 1.773 (4.00),
1.790 (6.78), 1.807 (5.21), 1.824 (1.52), 1.892 (1.58), 1.909 (4.70), 1.926 (5.86),
1.942 (3.78), 1.960 (1.52), 1.978 (1.20), 1.989 (2.08), 2.001 (2.02), 2.016 (1.38),
2.031 (1.61), 2.042 (1.22), 2.049 (1.16), 2.057 (1.13), 2.067 (0.64), 2.084 (0.41),
2.328 (0.44), 2.561 (2.11), 2.576 (1.68), 2.590 (1.62), 2.602 (3.04), 2.614 (1.70),
2.632 (0.75), 2.644 (1.17), 2.656 (0.60), 2.670 (0.54), 2.710 (0.50), 3.226 (0.91),
3.243 (1.93), 3.256 (1.96), 3.273 (3.44), 3.290 (2.06), 3.326 (2.63), 3.344 (3.57),
3.356 (1.39), 3.362 (1.83), 3.374 (2.03), 3.391 (0.92), 3.436 (1.07), 3.453 (2.27),
3.461 (1.71), 3.471 (1.36), 3.478 (2.85), 3.495 (1.24), 3.591 (1.30), 3.608 (2.66),
3.616 (1.36), 3.625 (1.55), 3.633 (2.06), 3.649 (0.94), 4.737 (2.43), 4.746 (2.77),
4.752 (3.15), 4.761 (2.37), 4.818 (16.00), 7.219 (1.38), 7.225 (1.49), 7.231 (1.52),
7.241 (2.09), 7.246 (2.05), 7.252 (1.89), 7.258 (1.86), 7.371 (3.67), 7.394 (4.98),
7.415 (2.94), 7.430 (2.84), 7.435 (2.61), 7.448 (2.75), 7.453 (2.63).
Primer 19
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1159]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1160] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (3,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (103 mg, 317 µmol) i 1-(brommetil)-3-(trifluormetil)benzol (53,1 mg, 222 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 60,6 mg (72% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.664 (0.98), 1.668 (0.95), 1.678 (1.17),
1.682 (1.23), 1.691 (0.96), 1.722 (1.76), 1.728 (1.61), 1.737 (1.14), 1.744 (0.88),
1.768 (1.18), 1.779 (4.61), 1.791 (7.62), 1.802 (5.64), 1.813 (1.54), 1.903 (1.45),
1.914 (4.15), 1.925 (5.43), 1.936 (3.45), 1.947 (0.98), 1.970 (0.90), 1.987 (1.15),
1.993 (1.84), 2.002 (1.65), 2.019 (0.96), 2.024 (1.13), 2.029 (1.12), 2.035 (1.30),
2.043 (1.30), 2.048 (1.39), 2.053 (1.22), 2.058 (0.65), 2.067 (0.45), 2.071 (0.45),
2.520 (1.58), 2.566 (1.45), 2.601 (1.51), 2.608 (2.81), 2.616 (1.71), 2.629 (0.89),
2.636 (1.43), 2.645 (0.69), 3.239 (1.12), 3.251 (2.30), 3.259 (1.97), 3.270 (3.23),
3.282 (1.50), 3.346 (3.70), 3.354 (1.55), 3.358 (1.83), 3.365 (2.29), 3.377 (1.04),
3.447 (1.17), 3.459 (2.47), 3.464 (1.70), 3.471 (1.50), 3.476 (2.81), 3.487 (1.25),
3.604 (1.37), 3.615 (2.62), 3.620 (1.48), 3.626 (1.60), 3.631 (2.16), 3.642 (1.05),
4.755 (2.69), 4.761 (2.92), 4.765 (3.15), 4.771 (2.50), 4.926 (16.00), 7.508 (2.83),
7.521 (3.83), 7.579 (2.39), 7.591 (4.65), 7.604 (2.52), 7.624 (5.77), 7.653 (3.72),
7.665 (2.53).
Primer 20
(5RS)-2-(3-metoksibenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1161]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1162] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (72,4 mg, 222 µmol) i 1-(brommetil)-3-metoksibenzol (44,7 mg, 222 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 24,0 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.70), 1.685 (0.46), 1.717 (0.93),
1.754 (0.42), 1.772 (1.40), 1.789 (2.40), 1.806 (1.85), 1.823 (0.54), 1.893 (0.57),
1.909 (1.70), 1.926 (2.17), 1.942 (1.40), 1.960 (0.57), 1.975 (0.43), 1.987 (0.75),
1.998 (0.72), 2.015 (0.49), 2.030 (0.61), 2.040 (0.43), 2.055 (0.41), 2.568 (0.61),
2.583 (0.58), 2.594 (1.13), 2.606 (0.61), 2.635 (0.43), 3.243 (0.68), 3.256 (0.69),
3.273 (1.24), 3.290 (0.66), 3.339 (1.29), 3.351 (0.48), 3.356 (0.66), 3.368 (0.71),
3.455 (0.80), 3.463 (0.58), 3.473 (0.48), 3.480 (1.01), 3.497 (0.45), 3.595 (0.46),
3.611 (0.97), 3.620 (0.49), 3.628 (0.56), 3.637 (0.76), 3.730 (16.00), 4.732 (0.91),
4.742 (1.03), 4.747 (1.21), 4.757 (1.02), 4.770 (6.44), 6.774 (3.04), 6.777 (2.99),
6.793 (1.49), 6.820 (0.90), 6.824 (0.92), 6.842 (1.08), 6.847 (0.91), 7.218 (1.07),
7.238 (2.10), 7.258 (1.08).
Primer 21
(5RS)-2-[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1163]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1164] (racemat) (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (72,4 mg, 222 µmol) i 3-(brommetil)-1-metil-1H-pirazol (38,9 mg, 222 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i 1 h na 90 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, u reakcionu smešu su dodati voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ponovo razdvojene putem HPLC-a (metoda 11). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 8,00 mg (11% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,48 min; MS (ESIpos): m/z = 331 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.77), 0.008 (2.98), 1.705 (1.52),
1.717 (1.23), 1.751 (0.50), 1.770 (1.66), 1.787 (2.86), 1.804 (2.19), 1.821 (0.61),
1.891 (0.73), 1.908 (2.10), 1.924 (2.77), 1.941 (1.93), 1.965 (0.96), 2.000 (0.64),
2.011 (0.70), 2.021 (0.58), 2.036 (0.55), 2.327 (1.20), 2.366 (0.96), 2.523 (4.88),
2.574 (1.52), 2.586 (0.82), 2.616 (0.53), 2.669 (1.26), 2.709 (0.85), 3.220 (0.47),
3.236 (0.91), 3.249 (0.93), 3.266 (1.66), 3.334 (2.22), 3.351 (0.99), 3.363 (0.93),
3.380 (0.44), 3.434 (0.47), 3.451 (0.96), 3.458 (0.73), 3.476 (1.23), 3.493 (0.55),
3.590 (0.58), 3.607 (1.17), 3.624 (0.64), 3.633 (0.88), 3.649 (0.41), 3.774 (16.00),
3.796 (0.53), 4.646 (0.58), 4.685 (4.26), 4.696 (4.67), 4.706 (1.49), 4.715 (1.08),
4.735 (0.64), 6.034 (2.42), 6.039 (2.48), 7.569 (2.34), 7.574 (2.34).
Primer 22
(5RS)-2-(piridin-2-ilmetil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1165]
[1166] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (50,0 mg, 212 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (72,4 mg, 222 µmol) i 2-(brommetil)piridin (38,2 mg, 222 µmol). U reakcionu smešu su nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod su uklonjene pod vakuumom i ostatak je ponovo prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda) i dobijeno je 3,00 mg (4% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,43 min; MS (ESIpos): m/z = 328 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), -0.008 (6.95), 0.008 (6.72),
0.146 (0.82), 1.733 (2.39), 1.758 (1.81), 1.775 (4.32), 1.792 (7.12), 1.809 (5.49),
1.825 (1.64), 1.895 (1.58), 1.912 (4.55), 1.928 (5.61), 1.945 (3.45), 1.961 (1.17),
2.019 (2.22), 2.049 (1.69), 2.073 (1.23), 2.327 (2.57), 2.332 (1.87), 2.366 (1.69),
2.523 (8.76), 2.558 (3.09), 2.568 (2.28), 2.583 (1.87), 2.595 (1.69), 2.606 (3.04),
2.620 (1.75), 2.637 (0.88), 2.648 (1.17), 2.665 (2.16), 2.669 (2.80), 2.674 (2.04),
2.709 (1.75), 3.235 (1.11), 3.252 (2.10), 3.265 (2.22), 3.281 (4.09), 3.347 (3.97),
3.365 (1.87), 3.377 (1.99), 3.395 (0.93), 3.449 (1.17), 3.467 (2.28), 3.473 (1.75),
3.491 (2.92), 3.508 (1.46), 3.600 (1.34), 3.617 (2.69), 3.634 (1.64), 3.641 (2.04),
3.659 (0.99), 4.750 (2.34), 4.760 (2.69), 4.765 (3.15), 4.774 (2.63), 4.895 (16.00),
5.114 (0.53), 5.171 (0.53), 7.121 (3.74), 7.140 (4.09), 7.278 (1.81), 7.297 (2.16),
7.311 (2.34), 7.332 (0.58), 7.748 (2.16), 7.753 (2.22), 7.767 (3.85), 7.772 (3.74),
7.787 (1.99), 7.791 (1.93), 8.506 (2.51), 8.520 (2.57).
Primer 23
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1167]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1168] (racemat) (40,0 mg, 169 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (82,7 mg, 254 µmol) i 2-(brommetil)-5-(trifluormetil)piridin (44,7 mg, 186 µmol). U reakcionu smešu je nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,6 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,22 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.72), 0.147 (0.71), 1.726 (2.72),
1.738 (3.10), 1.775 (4.76), 1.792 (7.48), 1.809 (5.64), 1.826 (1.77), 1.894 (1.55),
1.911 (4.76), 1.928 (5.91), 1.945 (3.79), 1.962 (1.18), 2.025 (2.84), 2.053 (1.90),
2.328 (0.88), 2.366 (0.64), 2.564 (2.98), 2.574 (2.44), 2.589 (2.03), 2.601 (2.01),
2.613 (3.47), 2.625 (1.98), 2.655 (1.38), 2.669 (1.43), 2.710 (0.77), 3.236 (0.95),
3.253 (1.97), 3.265 (2.17), 3.282 (3.78), 3.329 (2.27), 3.347 (3.67), 3.364 (2.07),
3.377 (2.12), 3.395 (1.00), 3.450 (1.06), 3.467 (2.41), 3.492 (3.06), 3.509 (1.38),
3.599 (1.44), 3.615 (2.87), 3.632 (1.84), 3.640 (2.24), 3.657 (1.00), 4.760 (2.66),
4.775 (3.67), 4.784 (2.76), 5.026 (16.00), 7.383 (4.73), 7.403 (4.96), 8.212 (3.24),
8.233 (3.24), 8.929 (5.73).
Primer 24
(5RS)-2-[(5-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1169]
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1170] (racemat) (30,0 mg, 127 µmol) ubačen je u acetonitril (2,0 ml). Zatim su dodati cezijum karbonat (165 mg, 508 µmol) i 4-(hlormetil)-5-metil-1H-imidazol hidrohlorid (25,5 mg, 152 µmol). Reakciona smeša je nakon mešanja preko noći uz refluks koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 12). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,80 mg (4% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,46 min; MS (ESIpos): m/z = 331 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, METANOL-d4) δ [ppm]: 1.814 (0.43), 1.823 (0.63), 1.828
(0.65), 1.833 (0.66), 1.839 (0.65), 1.849 (0.45), 1.856 (0.44), 1.864 (0.53), 1.867
(0.51), 1.872 (0.54), 1.880 (0.52), 1.889 (0.64), 1.895 (0.58), 1.902 (1.23), 1.906
(1.24), 1.913 (1.77), 1.917 (1.61), 1.925 (1.40), 1.928 (1.26), 1.939 (0.67), 2.019
(0.61), 2.029 (1.55), 2.040 (2.38), 2.052 (2.28), 2.063 (1.50), 2.072 (0.63), 2.137
(0.43), 2.143 (0.44), 2.148 (0.46), 2.154 (0.67), 2.161 (0.70), 2.166 (0.75), 2.171
(0.63), 2.178 (0.46), 2.189 (0.40), 2.195 (0.45), 2.217 (0.59), 2.228 (16.00), 2.575
(0.42), 2.584 (0.47), 2.590 (0.45), 2.603 (0.80), 2.613 (0.74), 2.619 (0.77), 2.628
(0.61), 2.681 (0.63), 2.690 (1.26), 2.699 (0.63), 2.709 (0.40), 2.718 (0.74), 3.363
(0.46), 3.374 (0.82), 3.383 (0.74), 3.394 (1.07), 3.406 (0.57), 3.504 (0.62), 3.516
(1.20), 3.524 (0.65), 3.528 (0.81), 3.531 (0.72), 3.536 (1.03), 3.543 (1.03), 3.548
(1.12), 3.554 (0.65), 3.560 (1.06), 3.571 (0.53), 3.756 (0.54), 3.767 (0.99), 3.772
(0.62), 3.778 (0.65), 3.784 (0.84), 3.795 (0.44), 4.630 (0.69), 4.770 (1.70), 4.785
(1.45), 4.796 (4.48), 4.802 (1.53), 4.862 (2.68), 5.491 (5.22), 7.477 (4.91).
Primer 25
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1171]
[1172] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (436 mg, 1,52 mmol) rastvorena je u 10 ml THF-a. Dodati su trietilamin (420 µl, 3,0 mmol), HATU (865 mg, 2,28 mmol) i pirolidin (150 µl, 1,8 mmol) i smeša je mešana 2 h pod argonom na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, ostatak je rastvoren u smeši DMSO/acetonitril/voda i 2 šarže su razdvojene putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 250x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 27 min 5%A, 38 min 5% A, 38 min 5% A, 39 min 90% A, protok: 50ml/min, detektor: 210 nm). Objedinjene frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 430 mg (83% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.83 (m, 4H), 1.86 - 2.10 (m, 4H), 2.27 (s, 3H), 2.42 - 2.65 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.20 -3.30 (m, 1H), 3.30 - 3.41 (m, 1H), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.68 - 4.79 (m, 3H), 7.07 - 7.16 (m, 4H).
Primer 26
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1173]
[1174] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 1220 mg rastvoreno u 50 ml smeše metanol/acetonitril; injekciona zapremina: 2,0 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OD-H 5µm, 250 x 50 mm; eluent: CO2//etanol: izokratski 20% etanol; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 494 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 487 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1175]
spec. optička rotacija: -25,70 (589 nm, 0,4150g / 100 cm<3>MeOH)
Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,27 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>ID-3 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: izoheksan/izopropanol 1:1; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.83 (m, 4H), 1.87 - 2.10 (m, 4H), 2.27 (s, 3H), 2.47 - 2.70 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.30 (m, 1H), 3.30 - 3.67 (m, 3H, delimično prekriven signalom vode), 4.69 - 4.81 (m, 3H), 7.08 - 7.16 (m, 4H).
[1176] (5S)-konfiguracija je dodeljena primeru 26 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1177]
Primer 27
(5RS)-2-(4-hlorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1178]
[1179] Metil-(5RS)-2-(4-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (racemat) (77,0 mg, 239 µmol) ubačen je u 1 ml smeše THF/voda, dodat je litijum hidroksid (28,7 mg, 1,20 mmol) i reakciona smeša je preko vikenda mešana na sobnoj temperaturi. Radi obrade, THF je uklonjen pod vakuumom i vodeni ostatak je liofilizovan. Tako je dobijeno 74 mg litijumove soli karboksilne kiseline, koja je direktno dalje korišćena u reakciji. Pri tome, karboksilna kiselina je oslobođena pomoću vodenog rastvora hlorovodonične kiseline i rastvorena u 3 ml THF-a. Dodati su trietilamin (66 µl, 470 µmol), HATU (135 mg, 356 µmol) i pirolidin (24 µl, 280 µmol) i smeša je mešana preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, ostatak je razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Chromatorex, 125x40 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril): 0 min 10% B, 5 min 10% B, 27 min 98% B, 35 min 98% B, 35,01 min 10% B, 38 min 10%B.
Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. Detekcija: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane, liofilizovane i pod vakuumom su uklonjeni ostaci rastvarača. Dobijeno je 64,3 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.87 - 2.10 (m, 4H), 2.46 - 2.66 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.46 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.74 (dd, 1H), 4.75 -4.85 (m, 2H), 7.22 - 7.28 (m, 2H), 7.37 - 7.43 (m, 2H).
Primer 28
Terc-butil-4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzoat (racemat)
[1180]
[1181] (5RS)-2-[4-(terc-butoksikarbonil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (246 mg, čistoća 88%, 580 µmol) rastvorena je u 6,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (240 µl, 1,7 mmol), HATU (287 mg, 754 µmol) i pirolidin (58 µl, 700 µmol) i smeša je mešana preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi dalje reakcije, još jednom su dodati trietilamin (81 µl, 580 µmol), HATU (66,1 mg, 174 µmol) i pirolidin (15 µl, 170 µmol) i smeša je mešana još 2,5 h pod gornjim uslovima. Radi obrade, smeša je razblažena smešom etil acetat/voda. Nakon ekstrakcije i razdvajanja organske faze, vodena faza je još dva puta ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida i osušene iznad natrijum sulfata. Ostatak preostao nakon koncentrovanja u vakuumu rastvoren je u smeši DMSO/acetonitril/voda i 2 šarže su razdvojene putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Spojene frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i sirovi proizvod je još jednom raspodeljen između vode i etil acetata. Nakon sušenja, koncentrovanja i sušenja u vakuumu, iz organske faze je dobijeno 255 mg (103% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 427 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.54 (s, 9H), 1.62 - 1.85 (m, 4H), 1.87 -2.10 (m, 4H), 2.47 - 2.67 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.22 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.88 (s, 2H), 7.30 - 7.36 (m, 2H), 7.83 - 7.89 (m, 2H).
Primer 29
4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzolsulfonamid (racemat)
[1182]
[1183] (5RS)-3-okso-2-(4-sulfamoilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (30,0 mg, 85,1 µmol) rastvorena je u 2,0 ml DMF-a. Dodati su trietilamin (24 µl, 170 µmol), HATU (48,6 mg, 128 µmol) i pirolidin (8,5 µl, 100 µmol) i smeša je mešana preko noći pod argonom na sobnoj temperaturi. Radi obrade i prečišćavanja, smeša je direktno razdvojena putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Chromatorex, 125x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril). Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B, 40 min 0% B. Detekcija: 210 nm). Spojene frakcije koje sadrže proizvod su liofilizovane. Tako je dobijeno 7,60 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 6): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 406 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.60 - 1.85 (m, 4H), 1.85 - 2.12 (m, 4H), 2.40 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.20 - 3.31 (m, 1H), 3.31 -3.58 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.89 (s, 2H), 7.32 (s, 2H), 7.40 (d, 2H), 7.78 (d, 2H).
Primer 30
(5RS)-2-[4-(metilsulfanil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1184]
[1185] (5RS)-2-[4-(metilsulfanil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (136 mg, čistoća 95%, 405 µmol) rastvorena je u 4,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (170 µl, 1,2 mmol), HATU (200 mg, 526 µmol) i pirolidin (41 µl, 490 µmol) i smeša je mešana preko vikenda pod argonom na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene pod vakuumom. Dobijeno je 85,0 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 373 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.88 - 2.10 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.47 - 2.67 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.26 (dt, 1H), 3.36 (dt, 1H), 3.47 (dt, 1H), 3.65 (dt, 1H, delimično prekriven signalom vode), 4.70 -4.80 (m, 3H), 7.15 - 7.25 (m, 4H).
Primer 31
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1186]
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat)
[1187] (1,59 g, čistoća 92%, 4,74 mmol) rastvoren je u 25 ml THF-a. Dodati su trietilamin (2,0 ml, 14 mmol), HATU (2,34 g, 6,16 mmol) i pirolidin (470 µl, 5,7 mmol) i smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. Radi obrade, reakciona smeša je prebačena u vodu, smeša je zasićena natrijum hloridom i dva puta je ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i uparene. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na silika gelu (patrona sa silika gelom PuriFlash 100 g, dihlormetan/metanol 20:1, detektor: 214 nm). Tako je dobijeno 1,11 g (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.86 (m, 4H), 1.86 - 2.10 (m, 4H), 2.53 - 2.71 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.41 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.74 (dd, 1H), 4.88 (s, 2H), 7.51 (d, 1H), 7.70 (dd, 1H), 8.30 (d, 1H). Spektar na 1,15 ppm i na 3,05 ppm daje široke signale trietilamonijum jona
Primer 32
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1188]
[1189] (5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 400 mg rastvoreno u 15 ml etanola; injekciona zapremina: 4,0 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AD SFC 5 µm, 250 x 50 mm; mobilna faza: CO2//etanol: izokratski 35% etanol; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja i liofilizacije proizvoda, izolovano je 144 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 138 g enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
Analitička hiralna SFC: Rt= 3,41 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>AD; mobilna faza: CO2/etanol 60:40; protok: 3 ml etanola/min; UV detekcija: 210 nm]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.85 (m, 4H), 1.87 - 2.10 (m, 4H), 2.47 - 2.68 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.22 - 3.31 (m, 1H), 3.31 - 3.40 (m, 1H), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.74 (dd, 1H), 4.88 (s, 2H), 7.51 (d, 1H), 7.70 (dd, 1H), 8.30 (d, 1H).
Primer 33
(5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1191]
[1192] (5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (220 mg, čistoća 81%, 574 µmol) rastvorena je u 3,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (400 µl, 2,9 mmol), HATU (284 mg, 746 µmol) i pirolidin (57 µl, 690 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, reakciona smeša je prebačena u vodu, smeša je zasićena natrijum hloridom i dva puta je ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i uparene. Ostatak je razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Chromatorex, 125x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril). Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. Detekcija: 210 nm => 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B, 40 min 0% B). Tako je dobijeno 177 mg (85% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.64 - 1.83 (m, 4H), 1.87 - 2.11 (m, 4H), 2.46 - 2.66 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.22 - 3.43 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.48 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.76 (dd, 1H), 4.87 -4.95 (m, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.92 (dd, 1H), 8.57 (d, 1H).
Primer 34
(5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1193]
[1194] (5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne tečne hromatografije [priprema uzorka: 220 mg rastvoreno u 12 ml toplog izopropanola; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chirapak<®>AS-H 5µm, 250 x 50 mm; mobilna faza: izoheksan/izopropanol: izokratski 50% izopropanol, protok: 15,0 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 69 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 66 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1195]
Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,40 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>AS-3 3 µm, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: izoheksan/izopropanol 1:1; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.62 - 1.86 (m, 4H), 1.86 - 2.14 (m, 4H), 2.47 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.42 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.76 (dd, 1H), 4.86 -4.96 (m, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.92 (dd, 1H), 8.57 (d, 1H).
Primer 35
5-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}piridin-2-karbonitril (racemat)
[1196]
[1197] (5RS)-2-[(6-cijanpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (190 mg, čistoća 70%, 444 µmol) rastvorena je u 4,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (190 µl, 1,3 mmol), HATU (220 mg, 578 µmol) i pirolidin (45 µl, 530 µmol) i smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda (A, neutralni), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 80,0 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.84 (m, 4H), 1.86 - 2.11 (m, 4H), 2.46 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.22 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.76 (dd, 1H), 4.95 -5.05 (m, 2H), 7.84 (dd, 1H), 8.04 (d, 1H), 8.62 (d, 1H).
Primer 36
(5RS)-2-(4-metoksibenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1198]
[1199] (5RS)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (1,67 g, čistoća 80%, 4,40 mmol) rastvorena je u DMF-u (10 ml). Dodati su trietilamin (1,2 ml, 8,8 mmol), HATU (2,51 g, 6,61 mmol) i pirolidin (440 µl, 5,3 mmol) i smeša je mešana pod argonom preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, reakciona smeša je prebačena u vodu, smeša je zasićena natrijum hloridom i 3 × ekstrahovana sa po 30 ml etil acetata. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je u 3 injektovanja razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Chromatorex, 125x40 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril). Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. Detekcija: 210 nm => 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B, 40 min 0% B =>). Koncentrovanjem frakcija koje sadrže proizvod, dobijeno je 830 mg (čistoća 97%, 51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[1200] Glavna količina je bez daljeg prečišćavanja dalje korišćena kao intermedijer.
[1201] Oko.50 mg je još jednom prečišćeno pod gornjim uslovima putem preparativne HPLC hromatografije do 33 mg naslovnog jedinjenja, čistoća 100% prema LC/MS analizi.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.62 - 1.83 (m, 4H), 1.88 - 2.08 (m, 4H), 2.45 - 2.64 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode) 3.46 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 3.73 (s, 3H), 4.66 -4.77 (m, 3H), 6.85 - 6.91 (m, 2H), 7.13 - 7.20 (m, 2H).
Primer 37
(5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1202]
[1203] (5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (138 mg, 367 µmol) rastvorena je u 4,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (110 µl, 810 µmol), HATU (182 mg, 477 µmol) i pirolidin (37 µl, 440 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, reakciona smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je prenet u smešu acetonitril/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 121 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,66 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.60 - 1.85 (m, 4H), 1.87 - 2.11 (m, 4H), 2.47 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.57 (m, 3H, delimično prekriven signalom vode), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.92 (s, 2H), 7.51 (dd, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.76 (d, 1H).
Primer 38
(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1204]
[1205] (5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (110 mg, čistoća 83%, 297 µmol) rastvorena je u 3,5 ml THF-a. Dodati su trietilamin (91 µl, 650 µmol), HATU (147 mg, 386 µmol) i pirolidin (30 µl, 360 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 80,3 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 361 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.61 - 1.84 (m, 4H), 1.88 - 2.11 (m, 4H), 2.47 - 2.68 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.26 (dt, 1H), 3.36 (dt, 1H), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H, delimično prekriven signalom vode),, 4.75 (dd, 1H), 4.83 (s, 2H), 7.19 (br d, 1H), 7.29 (br s, 1H), 7.32 - 7.40 (m, 2H).
Primer 39
(5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1206]
[1207] (5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (120 mg, čistoća 80%, 281 µmol) rastvorena je u 3,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (86 µl, 620 µmol), HATU (139 mg, 365 µmol) i pirolidin (28 µl, 340 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 113 mg (97% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.60 - 1.84 (m, 4H), 1.85 - 2.10 (m, 4H), 2.45 - 2.67 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.21 - 3.51 (m, 3H, delimično prekriven signalom vode), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.83 (s, 2H), 7.22 (dd, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.62 (d, 1H).
Primer 40
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1208]
[1209] (5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (326 mg, 939 µmol) rastvorena je u 10 ml THF-a. Dodati su trietilamin (260 µl, 1,9 mmol), HATU (464 mg, 1,22 mmol) i pirolidin (94 µl, 1,1 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je razblažena vodom i zatim koncentrovana, dobijeni ostatak je prenet u smešu acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Dobijeno je 90,2 mg (24% od teor.) naslovnog jedinjenja kao racemska smeša cis/trans, koja je tako dalje korišćeno u reakciji.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0.89 - 1.08 (m, 1H), 1.10 - 1.26 (m, 1H), 1.43 - 2.10 (m, 15H), 2.11 - 2.34 (m, 1H), 2.45 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.20 - 3.29 (m, 1H), 3.29 - 3.72 (m, 5H, delimično prekriven signalom vode), 4.67 - 4.74 (m, 1H).
Primer 41
(5RS)-2-[(4,4-difluorcikloheksil)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1210]
[1211] (5RS)-2-[(4,4-difluorcikloheksil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (30,5 mg, 96,7 µmol) rastvorena je u 1,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (27 µl, 1,90 µmol), HATU (47,8 mg, 126 µmol) i pirolidin (9,7 µl, 120 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je razblažena vodom i zatim koncentrovana, dobijeni ostatak je prenet u smešu acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 17,6 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 369 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.12 - 1.27 (m, 2H), 1.61 - 2.09 (m, 15H), 2.47 - 2.68 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.25 (dt, 1H), 3.34 (dt, 1H), 3.41 - ca.3.70 (m, 4H, delimično prekriven signalom vode), 4.70 (dd, 1H).
Primer 42
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1213] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (36,0 mg, 124 µmol) rastvorena je u 1,3 ml THF-a. Dodati su trietilamin (57 µl, 410 µmol), HATU (70,7 mg, 186 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (21,4 mg, 149 µmol) i smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši DMSO/acetonitril/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 250x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 27 min 5%A, 38 min 5% A, 38 min 5% A, 39 min 90% A, protok: 50ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 26,4 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.78 (m, 2H), 1.90 - 2.12 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.35 - 2.66 (m, 4H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.32 -4.24 (m, 4H, delimično prekriven signalom vode), 4.69 - 4.85 (m, 3H), 7.09 - 715 (m, 4H). Postoji smeša rotamera.
Primer 43
(5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1214]
[1215] (5RS)-2-[4-hlor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (138 mg, 367 µmol) rastvorena je u 4,0 ml THF-a. Dodati su trietilamin (160 µl, 1,2 mmol), HATU (182 mg, 477 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (63,3 mg, 441 µmol) i smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 135 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,76 min; MS (ESIpos): m/z = 465 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.58 - 1.80 (m, 2H), 1.93 - 2.14 (m, 2H), 2.34 - 2.69 (m, 4H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.41 - 4.26 (m, 4H, delimično prekriven signalom vode), 4.78 (dd, 0.5H), 4.85 (dd, 0.5H), 4.93 (s, 2H), 7.51 (dd, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.76 (d, 1H). Postoji smeša rotamera.
Primer 44
(5RS)-2-(3-hlorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1216]
[1217] (5RS)-2-(3-hlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (110 mg, čistoća 83%, 297 µmol) rastvorena je u 3,5 ml THF-a. Dodati su trietilamin (130 µl, 950 µmol), HATU (147 mg, 386 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (51,1 mg, 356 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 89,2 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.81 (m, 2H), 1.92 - 2.14 (m, 2H), 2.35 - 2.69 (m, 4H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), ca.3.43 - 4.25 (m, 4H, delimično prekriven signalom vode), 4.77 (dd, 0.5H), 4.80 - 4.89 (m, 2.5H), 7.19 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.32 - 7.42 (m, 2H). Postoji smeša rotamera.
Primer 45
(5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1218]
[1219] (5RS)-2-(3,4-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (120 mg, čistoća 80%, 281 µmol) rastvorena je u 3,5 ml THF-a. Dodati su trietilamin (125 µl, 900 µmol), HATU (147 mg, 386 µmol) i 3,3difluorpirolidin hidrohlorid (48,3 mg, 337 µmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, smeša je koncentrovana, dobijeni ostatak je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen je putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, koncentrovane i osušene. Tako je dobijeno 112 mg (90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.80 (m, 2H), 1.92 - 2.14 (m, 2H), 2.34 - 2.69 (m, 4H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.48 - 4.25 (m, 4H), 4.77 (dd, 0.5H) 4.81 - 4.89 (m, 2.5H), 7.22 (dd, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.62 (d, 1H). Postoji smeša rotamera.
Primer 46
(5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1220]
[1221] (5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat) (70,0 mg, 155 µmol) ubačen je u THF (3,0 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (76,6 mg, 201 µmol) i trietilamin (110 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je pirolidin (16 µl, 190 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,3 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.399 (1.48), 1.709 (3.03), 1.756 (1.37),
1.773 (4.59), 1.790 (8.04), 1.807 (6.19), 1.824 (1.87), 1.892 (1.96), 1.909 (5.76),
1.925 (7.26), 1.942 (5.02), 1.960 (1.89), 1.977 (2.42), 1.996 (1.92), 2.007 (1.53),
2.022 (1.92), 2.032 (1.45), 2.073 (0.76), 2.328 (0.59), 2.523 (4.16), 2.564 (2.07),
2.577 (1.91), 2.590 (3.62), 2.602 (2.05), 2.621 (0.90), 2.631 (1.41), 2.669 (0.57),
2.865 (0.84), 3.224 (1.07), 3.241 (2.33), 3.254 (2.24), 3.270 (4.01), 3.287 (1.82),
3.326 (1.86), 3.344 (4.00), 3.361 (2.11), 3.373 (2.39), 3.391 (1.09), 3.433 (1.24),
3.451 (2.64), 3.458 (2.04), 3.476 (3.38), 3.493 (1.52), 3.592 (1.52), 3.609 (3.26),
3.625 (1.85), 3.633 (2.56), 3.649 (1.34), 3.729 (0.70), 3.966 (1.62), 4.696 (0.90),
4.724 (3.54), 4.735 (15.25), 4.739 (16.00), 4.779 (0.92), 7.095 (6.08), 7.116 (10.56),
7.167 (5.32), 7.172 (5.46), 7.188 (2.99), 7.193 (3.23), 7.293 (9.06), 7.298 (8.15).
Primer 47
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1222]
[1223] (5RS)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat) (70,0 mg, 154 µmol) ubačen je u THF (2,6 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (76,0 mg, 200 µmol) i trietilamin (110 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (26,5 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,5 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.90), -0.008 (6.54), 0.008 (6.57),
0.146 (0.79), 1.730 (1.39), 2.012 (1.46), 2.327 (2.25), 2.366 (1.69), 2.523 (8.26),
2.567 (3.00), 2.590 (2.67), 2.609 (3.00), 2.670 (2.59), 2.710 (1.50), 3.537 (1.39),
3.556 (2.07), 3.567 (1.24), 3.671 (1.16), 3.703 (1.43), 3.738 (1.13), 3.770 (1.54),
3.807 (1.80), 3.894 (0.64), 3.913 (1.35), 3.938 (0.94), 3.991 (0.94), 4.180 (0.75),
4.206 (0.75), 4.766 (1.13), 4.783 (1.46), 4.791 (1.13), 4.849 (1.39), 4.931 (16.00),
7.506 (2.37), 7.525 (3.94), 7.572 (2.37), 7.591 (4.39), 7.615 (5.78), 7.648 (3.79),
7.667 (2.22).
Primer 48
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(3-metoksibenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1224]
[1225] (5RS)-2-(3-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat) (70,0 mg, 168 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (82,9 mg, 218 µmol) i trietilamin (120 µl, 840 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (28,9 mg, 201 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 47,1 mg (72% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.176 (0.43), 1.664 (0.83), 1.676 (0.96),
1.688 (1.03), 1.702 (1.17), 1.715 (1.34), 1.724 (1.33), 1.969 (0.80), 1.978 (1.09),
1.992 (1.10), 2.002 (1.22), 2.009 (1.19), 2.026 (0.96), 2.037 (0.90), 2.045 (0.92),
2.052 (0.93), 2.062 (0.88), 2.072 (0.99), 2.080 (0.69), 2.088 (0.63), 2.365 (0.44),
2.380 (0.75), 2.392 (0.57), 2.401 (0.79), 2.409 (0.90), 2.430 (0.86), 2.451 (0.65),
2.472 (0.43), 2.517 (3.02), 2.559 (2.35), 2.569 (2.87), 2.585 (2.57), 2.601 (2.46),
2.612 (1.31), 2.631 (0.48), 2.644 (0.74), 2.669 (0.40), 3.534 (3.05), 3.548 (3.83),
3.554 (3.85), 3.566 (2.82), 3.573 (2.57), 3.635 (0.72), 3.669 (1.32), 3.702 (1.44),
3.769 (1.59), 3.783 (1.02), 3.792 (0.87), 3.802 (1.67), 3.809 (1.48), 3.828 (0.66),
3.894 (0.62), 3.913 (1.29), 3.932 (0.71), 3.939 (0.91), 3.958 (0.48), 3.993 (0.80),
4.021 (0.54), 4.035 (0.71), 4.063 (0.43), 4.147 (0.47), 4.178 (0.68), 4.205 (0.69),
4.750 (1.09), 4.776 (16.00), 4.824 (1.07), 4.834 (1.23), 4.840 (1.38), 4.849 (1.03),
6.773 (6.87), 6.777 (7.30), 6.793 (3.43), 6.823 (2.14), 6.827 (2.29), 6.832 (1.64),
6.845 (2.46), 6.851 (2.14), 7.220 (2.49), 7.241 (5.00), 7.261 (2.64).
Primer 49
(5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1226]
[1227] (5RS)-2-(3-hlor-4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina -trifluorsirćetna kiselina (racemat) (70,0 mg, 155 µmol) ubačen je u THF (3,0 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (76,6 mg, 201 µmol) i trietilamin (110 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (26,7 mg, 186 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,0 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 427 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.176 (0.66), 1.669 (0.43), 1.682 (0.48),
1.695 (0.55), 1.707 (0.61), 1.717 (0.61), 1.969 (0.48), 1.981 (0.50), 1.993 (0.57),
2.038 (0.43), 2.045 (0.41), 2.411 (0.41), 2.423 (0.41), 2.565 (1.07), 2.580 (1.02),
2.595 (1.07), 2.607 (0.68), 3.529 (0.46), 3.537 (0.50), 3.546 (0.75), 3.558 (0.84),
3.577 (0.41), 3.666 (0.48), 3.700 (0.55), 3.775 (0.68), 3.806 (1.00), 3.833 (16.00),
3.910 (0.55), 4.745 (4.55), 4.765 (0.50), 4.815 (0.46), 4.825 (0.55), 4.831 (0.59),
4.840 (0.43), 7.097 (1.68), 7.118 (2.94), 7.167 (1.52), 7.172 (1.59), 7.188 (0.84),
7.193 (0.93), 7.292 (2.30), 7.297 (2.12).
Primer 50
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer)
[1228]
[1229] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer) (100 mg, 305 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (151 mg, 396 µmol) i trietilamin (170 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (31 µl, 370 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 50,0 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.769 (0.78), 1.784 (3.02), 1.802 (5.93),
1.819 (5.24), 1.835 (1.78), 1.889 (1.56), 1.905 (4.92), 1.922 (6.24), 1.939 (3.71),
1.957 (0.94), 2.367 (1.77), 2.389 (1.77), 2.406 (1.84), 2.416 (1.09), 2.426 (0.84),
2.651 (0.49), 2.674 (1.03), 2.692 (2.10), 2.714 (4.83), 2.724 (2.25), 2.736 (4.61),
2.744 (3.26), 2.754 (1.23), 2.780 (1.92), 2.810 (2.02), 2.832 (1.50), 3.268 (0.55),
3.285 (1.24), 3.298 (2.66), 3.334 (5.63), 3.351 (2.20), 3.364 (1.29), 3.380 (1.63),
3.397 (2.45), 3.404 (1.65), 3.415 (1.42), 3.422 (2.86), 3.439 (1.27), 3.641 (1.30),
3.657 (2.74), 3.666 (1.47), 3.674 (1.51), 3.682 (2.39), 3.699 (1.08), 4.923 (3.04),
4.930 (2.28), 4.944 (3.23), 4.950 (2.23), 5.007 (16.00), 7.902 (2.10), 7.923 (8.79),
7.933 (5.24), 7.957 (1.23), 8.673 (5.78).
[1230] Sledeće analize primera 175 su pokazale da se sistemi 3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-ona prilikom korišćenja HATU delimično racemizuju i više ne postoje kao čisti enantiomeri.
Primer 51
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer)
[1231]
[1232] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer) (100 mg, 321 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (159 mg, 417 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (32 µl, 380 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 65,0 mg (56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.768 (1.33), 1.784 (5.17), 1.800 (10.32),
1.817 (9.23), 1.833 (3.24), 1.888 (2.78), 1.904 (8.68), 1.921 (10.97), 1.938 (6.38),
1.956 (1.55), 2.327 (1.35), 2.358 (2.20), 2.365 (2.34), 2.379 (3.19), 2.385 (2.61),
2.396 (3.26), 2.407 (1.96), 2.671 (2.13), 2.690 (3.70), 2.712 (7.35), 2.721 (3.63),
2.731 (8.75), 2.739 (5.90), 2.766 (2.80), 2.773 (3.72), 2.803 (3.55), 2.825 (2.63),
2.847 (0.68), 3.265 (1.09), 3.282 (2.37), 3.331 (9.81), 3.349 (3.94), 3.361 (2.22),
3.378 (2.90), 3.395 (4.21), 3.402 (2.85), 3.419 (5.00), 3.437 (2.32), 3.640 (2.37),
3.657 (4.95), 3.665 (2.54), 3.674 (2.66), 3.681 (4.23), 3.698 (1.79), 4.778 (1.21),
4.818 (16.00), 4.823 (15.78), 4.864 (1.11), 4.916 (5.34), 4.923 (3.79), 4.937 (5.68),
4.944 (3.79), 7.250 (2.44), 7.255 (2.66), 7.262 (2.71), 7.271 (4.01), 7.276 (3.79),
7.283 (3.70), 7.289 (3.48), 7.377 (7.40), 7.401 (9.52), 7.422 (5.37), 7.453 (5.78),
7.458 (5.41), 7.471 (5.78), 7.477 (5.32).
[1233] Sledeće analize primera 175 su pokazale da se sistemi 3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-ona prilikom korišćenja HATU delimično racemizuju i više ne postoje kao čisti enantiomeri.
Primer 52
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer)
[1234]
[1235] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer) (80,0 mg, 271 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H
[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (134 mg, 353 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (27 µl, 330 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,0 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 348 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.44), 1.782 (2.91), 1.798 (5.45),
1.816 (4.87), 1.832 (1.60), 1.886 (1.48), 1.902 (4.67), 1.919 (5.91), 1.936 (3.46),
1.954 (0.86), 2.328 (0.66), 2.378 (1.73), 2.396 (1.70), 2.681 (1.98), 2.703 (4.30),
2.713 (2.17), 2.724 (4.48), 2.732 (3.11), 2.769 (1.81), 2.799 (1.89), 2.821 (1.40),
3.328 (6.29), 3.346 (2.24), 3.358 (1.33), 3.375 (1.71), 3.392 (2.30), 3.416 (2.65),
3.433 (1.15), 3.636 (1.17), 3.653 (2.62), 3.678 (2.16), 3.694 (0.97), 4.879 (16.00),
4.908 (2.88), 4.929 (3.09), 7.508 (5.17), 7.529 (6.17), 7.716 (3.34), 7.722 (3.44),
7.737 (2.73), 7.743 (2.78), 8.322 (5.32), 8.328 (5.20).
[1236] Sledeće analize primera 175 su pokazale da se sistemi 3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-ona prilikom korišćenja HATU delimično racemizuju i više ne postoje kao čisti enantiomeri.
Primer 53
(5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1237]
[1238] (5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (80,0 mg, 187 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (92,4 mg, 243 µmol) i trietilamin (130 µl, 940 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (16,0 mg, 224 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,9 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.30), 1.667 (1.13), 1.679 (1.75),
1.702 (3.21), 1.711 (3.57), 1.723 (2.84), 1.753 (1.54), 1.769 (5.20), 1.787 (9.04),
1.804 (6.99), 1.821 (2.02), 1.889 (2.22), 1.906 (6.53), 1.923 (8.49), 1.939 (5.64),
1.958 (2.63), 1.970 (2.76), 1.982 (2.51), 1.991 (2.15), 2.001 (1.70), 2.017 (2.27),
2.027 (1.63), 2.033 (1.49), 2.042 (1.55), 2.052 (0.98), 2.068 (0.58), 2.078 (0.42),
2.327 (0.41), 2.564 (2.63), 2.579 (2.25), 2.592 (2.18), 2.604 (4.23), 2.617 (2.24),
2.634 (0.99), 2.646 (1.58), 2.659 (0.84), 2.669 (0.51), 2.865 (3.48), 3.219 (1.23),
3.236 (2.56), 3.248 (2.58), 3.265 (4.57), 3.282 (2.29), 3.333 (4.95), 3.345 (1.94),
3.350 (2.73), 3.362 (2.79), 3.380 (1.23), 3.428 (1.37), 3.445 (2.98), 3.453 (2.21),
3.462 (1.78), 3.470 (3.82), 3.487 (1.67), 3.586 (1.75), 3.602 (3.65), 3.611 (1.84),
3.619 (2.06), 3.627 (2.82), 3.644 (1.26), 4.707 (3.29), 4.717 (3.82), 4.722 (4.37),
4.732 (3.35), 4.872 (0.79), 4.914 (16.00), 4.957 (0.85), 6.898 (6.58), 6.908 (8.26),
6.973 (11.05), 6.982 (8.62).
Primer 54
(5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1239]
[1240] (5RS)-2-[(5-hlor-2-tienil)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (80,0 mg, 187 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (92,4 mg, 243 µmol) i trietilamin (130 µl, 940 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (32,2 mg, 224 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,9 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 403 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.94), 1.718 (1.95), 1.977 (1.59),
1.987 (1.79), 2.032 (1.31), 2.049 (1.24), 2.068 (1.06), 2.327 (0.63), 2.359 (0.64),
2.377 (1.04), 2.406 (1.36), 2.427 (1.37), 2.447 (1.16), 2.569 (3.54), 2.580 (3.06),
2.594 (3.16), 2.610 (3.13), 2.622 (1.69), 2.653 (1.01), 2.669 (0.88), 3.528 (1.74),
3.540 (2.31), 3.548 (2.49), 3.559 (1.40), 3.567 (1.29), 3.626 (0.45), 3.660 (1.48),
3.694 (1.68), 3.731 (0.97), 3.767 (1.92), 3.800 (3.09), 3.818 (0.78), 3.884 (0.83),
3.902 (1.68), 3.928 (1.18), 3.947 (0.61), 3.984 (1.06), 4.012 (0.76), 4.025 (0.96),
4.054 (0.54), 4.138 (0.59), 4.170 (0.95), 4.195 (0.98), 4.226 (0.40), 4.725 (1.42),
4.740 (1.87), 4.749 (1.31), 4.799 (1.40), 4.815 (1.84), 4.824 (1.28), 4.880 (0.62),
4.922 (16.00), 4.964 (0.58), 6.901 (6.08), 6.911 (7.61), 6.975 (10.97), 6.984 (8.41).
Primer 55
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer)
[1241]
[1242] Metil-(5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilat (enantiomer) (129 mg, 378 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (187 mg, 491 µmol) i trietilamin (160 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (38 µl, 450 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 92,4 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.766 (1.04), 1.782 (4.19), 1.799 (7.77),
1.816 (6.67), 1.832 (2.28), 1.887 (2.03), 1.903 (6.44), 1.920 (8.25), 1.937 (4.97),
1.954 (1.24), 2.349 (0.56), 2.360 (1.57), 2.365 (1.56), 2.380 (2.45), 2.387 (1.96),
2.397 (2.42), 2.408 (1.49), 2.417 (1.09), 2.650 (0.53), 2.672 (1.15), 2.691 (2.65),
2.712 (5.74), 2.722 (2.89), 2.733 (6.33), 2.740 (4.71), 2.749 (1.93), 2.767 (2.15),
2.774 (2.86), 2.781 (2.42), 2.797 (1.52), 2.804 (2.59), 2.818 (0.67), 2.826 (1.87),
2.848 (0.50), 3.265 (0.75), 3.282 (1.61), 3.295 (3.42), 3.330 (7.74), 3.348 (2.95),
3.360 (1.63), 3.377 (2.15), 3.394 (3.17), 3.401 (2.24), 3.412 (1.91), 3.419 (3.67),
3.436 (1.66), 3.642 (1.70), 3.659 (3.64), 3.667 (1.93), 3.676 (2.05), 3.684 (3.12),
3.701 (1.38), 4.883 (1.04), 4.923 (16.00), 4.929 (15.45), 4.946 (4.38), 4.953 (3.12),
4.969 (1.11), 7.540 (2.51), 7.559 (5.89), 7.578 (3.43), 7.597 (5.63), 7.616 (2.78),
7.637 (7.35), 7.650 (5.01), 7.669 (2.64).
[1243] Sledeće analize primera 175 su pokazale da se sistemi 3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-ona prilikom korišćenja HATU delimično racemizuju i više ne postoje kao čisti enantiomeri.
Primer 56
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(3-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1244]
[1245] (5RS)-2-(3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat) (140 mg, 427 µmol) dodata je u THF (4,4 m) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (211 mg, 555 µmol) i trietilamin (300 µl, 2,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (73,6 mg, 513 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 103 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.16), 0.008 (2.37), 1.676 (0.97),
1.687 (0.91), 1.725 (1.22), 1.989 (1.10), 2.000 (1.15), 2.010 (1.23), 2.044 (0.92),
2.052 (0.94), 2.059 (0.96), 2.069 (0.86), 2.079 (0.71), 2.088 (0.73), 2.095 (0.65),
2.327 (0.76), 2.366 (0.86), 2.382 (0.86), 2.392 (0.62), 2.411 (0.99), 2.430 (0.96),
2.454 (0.79), 2.522 (2.93), 2.580 (2.11), 2.594 (2.22), 2.610 (2.37), 2.624 (1.23),
2.642 (0.57), 2.653 (0.79), 2.669 (1.02), 2.709 (0.62), 3.534 (1.02), 3.541 (1.18),
3.551 (1.70), 3.561 (1.83), 3.570 (1.12), 3.580 (1.01), 3.671 (1.12), 3.705 (1.23),
3.745 (0.68), 3.778 (1.44), 3.792 (0.76), 3.811 (2.30), 3.829 (0.58), 3.893 (0.57),
3.912 (1.20), 3.931 (0.68), 3.939 (0.83), 3.957 (0.42), 3.993 (0.75), 4.022 (0.50),
4.036 (0.68), 4.149 (0.44), 4.180 (0.66), 4.205 (0.68), 4.759 (1.01), 4.769 (1.15),
4.774 (1.33), 4.783 (0.99), 4.843 (16.00), 4.857 (1.28), 7.006 (1.90), 7.030 (1.98),
7.057 (2.87), 7.076 (3.29), 7.090 (1.01), 7.106 (1.95), 7.112 (1.82), 7.128 (1.09),
7.134 (1.04), 7.358 (1.62), 7.374 (1.96), 7.378 (2.58), 7.393 (2.53), 7.413 (1.28).
Primer 57
(5RS)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1246]
[1247] (5RS)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (82,0 mg, čistoća 100%, 272 µmol) ubačena je u THF (2,8 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (135 mg, 354 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je pirolidin (27 µl, 330 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 77,0 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.41), -0.008 (3.12), 0.008 (3.21),
1.714 (0.99), 1.765 (1.02), 1.781 (1.70), 1.798 (1.31), 1.884 (0.49), 1.899 (1.27),
1.916 (1.68), 1.934 (1.12), 1.961 (0.65), 1.998 (0.53), 2.257 (9.18), 2.327 (0.70),
2.366 (0.43), 2.613 (0.80), 2.669 (0.79), 2.709 (0.41), 2.849 (0.94), 2.868 (1.96),
2.887 (1.03), 3.233 (0.51), 3.263 (0.94), 3.328 (1.09), 3.358 (0.59), 3.440 (0.56),
3.465 (0.70), 3.588 (0.61), 3.613 (0.58), 3.729 (0.63), 3.748 (0.96), 3.766 (0.58),
3.778 (0.91), 3.798 (0.57), 4.660 (0.71), 4.675 (0.82), 4.685 (0.62), 7.085 (16.00).
Primer 58
(5RS)-2-(2-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1248]
[1249] (5RS)-2-(2-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (80,0 mg, 278 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (138 mg, 362 µmol) i trietilamin (78 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (28 µl, 330 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,0 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.91), 0.008 (0.90), 1.110 (0.57),
1.680 (0.58), 1.703 (1.15), 1.712 (1.23), 1.723 (0.96), 1.756 (0.51), 1.772 (1.74),
1.790 (3.06), 1.807 (2.39), 1.823 (0.69), 1.892 (0.70), 1.909 (2.16), 1.925 (2.75),
1.942 (1.76), 1.959 (0.74), 1.973 (0.55), 1.984 (0.98), 1.996 (1.12), 2.008 (0.75),
2.023 (0.80), 2.034 (0.55), 2.040 (0.50), 2.049 (0.52), 2.293 (16.00), 2.475 (0.40),
2.574 (0.74), 2.585 (1.41), 2.598 (0.79), 2.627 (0.56), 3.226 (0.42), 3.243 (0.89),
3.255 (0.90), 3.272 (1.59), 3.290 (0.88), 3.321 (1.26), 3.340 (1.67), 3.352 (0.61),
3.357 (0.85), 3.369 (0.93), 3.387 (0.43), 3.436 (0.46), 3.454 (1.02), 3.461 (0.74),
3.471 (0.62), 3.479 (1.32), 3.496 (0.58), 3.594 (0.60), 3.610 (1.23), 3.619 (0.61),
3.627 (0.71), 3.635 (0.96), 3.652 (0.42), 4.727 (1.13), 4.736 (1.29), 4.742 (1.50),
4.751 (1.15), 4.778 (8.67), 7.070 (1.24), 7.088 (2.10), 7.117 (0.63), 7.125 (0.62),
7.131 (1.10), 7.139 (1.42), 7.157 (1.70), 7.166 (5.62), 7.180 (1.21), 7.184 (0.89).
Primer 59
(5RS)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1250]
[1251] (5RS)-2-[(2-hlorpiridin-4-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (110 mg, čistoća 94%, 245 µmol) dodata je u THF (2,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (121 mg, 318 µmol) i trietilamin (170 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (25 µl, 290 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 10,0 mg (11% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.120 (0.49), -0.007 (3.51), 0.006 (3.30),
0.117 (0.49), 1.499 (0.65), 1.693 (1.62), 1.740 (2.32), 1.748 (2.11), 1.766 (2.32),
1.778 (6.81), 1.792 (10.92), 1.806 (8.00), 1.820 (2.22), 1.901 (1.95), 1.912 (4.76),
1.925 (6.22), 1.939 (4.00), 1.952 (1.30), 1.997 (1.08), 2.015 (2.59), 2.033 (2.27),
2.040 (1.78), 2.046 (1.73), 2.053 (1.89), 2.062 (1.95), 2.068 (2.05), 2.361 (2.92),
2.365 (2.11), 2.439 (3.14), 2.518 (8.27), 2.522 (6.54), 2.559 (3.51), 2.571 (2.81),
2.580 (2.81), 2.592 (2.27), 2.617 (2.11), 2.627 (4.76), 2.635 (5.08), 2.650 (1.14),
2.660 (1.84), 2.865 (8.59), 3.242 (1.73), 3.256 (3.57), 3.266 (3.41), 3.280 (6.65),
3.338 (3.95), 3.353 (5.62), 3.367 (3.19), 3.376 (3.41), 3.390 (1.62), 3.449 (1.51),
3.463 (3.41), 3.469 (2.54), 3.483 (4.16), 3.497 (1.95), 3.598 (1.89), 3.611 (3.57),
3.625 (2.22), 3.631 (2.92), 3.645 (1.51), 3.700 (4.27), 4.766 (3.68), 4.772 (4.00),
4.778 (4.59), 4.785 (3.57), 4.833 (0.92), 4.878 (0.86), 4.912 (16.00), 4.948 (0.86),
7.209 (5.73), 7.219 (6.11), 7.319 (10.32), 8.342 (0.54), 8.368 (9.30), 8.378 (9.30).
Primer 60
(5RS)-2-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1252]
[1253] (5RS)-2-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (91,0 mg, 326 µmol) dodata je u THF (3,0 m) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (161 mg, 424 µmol) i trietilamin (91 µl, 650 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (33 µl, 390 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 14,0 mg (13% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 333 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.20), 0.008 (1.14), 1.711 (0.58),
1.721 (0.49), 1.772 (1.12), 1.790 (2.07), 1.807 (1.67), 1.823 (0.52), 1.891 (0.52),
1.908 (1.52), 1.924 (1.83), 1.941 (1.16), 1.957 (0.46), 1.998 (0.83), 2.023 (0.48),
2.289 (16.00), 2.523 (1.52), 2.565 (0.60), 2.582 (0.53), 2.593 (0.89), 2.606 (0.52),
3.238 (0.56), 3.251 (0.62), 3.268 (1.07), 3.285 (0.55), 3.328 (1.23), 3.345 (0.59),
3.357 (0.61), 3.449 (0.70), 3.456 (0.52), 3.474 (0.90), 3.490 (0.41), 3.588 (0.43),
3.604 (0.83), 3.613 (0.44), 3.621 (0.47), 3.630 (0.66), 4.739 (0.79), 4.748 (0.87),
4.754 (1.02), 4.763 (0.76), 5.087 (4.25), 5.092 (4.25).
Primer 61
(5RS)-2-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1254]
[1255] (5RS)-2-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (133 mg, čistoća 94%, 449 µmol) ubačena je u THF (4,7 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (222 mg, 584 µmol) i trietilamin (310 µl, 2,2 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je pirolidin (45 µl, 540 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 18,0 mg (12% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 332 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (0.94), 0.006 (0.97), 1.179 (0.41),
1.237 (0.58), 1.717 (1.18), 1.763 (0.56), 1.776 (2.23), 1.790 (3.84), 1.804 (2.83),
1.818 (0.75), 1.899 (0.86), 1.912 (2.55), 1.925 (3.24), 1.939 (2.02), 1.952 (0.90),
1.981 (0.90), 2.007 (0.47), 2.015 (0.60), 2.027 (0.77), 2.036 (0.64), 2.042 (0.66),
2.048 (0.64), 2.201 (1.16), 2.361 (1.31), 2.370 (15.57), 2.371 (16.00), 2.518 (3.75),
2.522 (3.17), 2.567 (0.92), 2.591 (0.79), 2.600 (1.50), 2.610 (0.86), 2.635 (1.63),
2.865 (1.80), 3.232 (0.54), 3.245 (1.12), 3.255 (1.05), 3.269 (1.84), 3.283 (1.07),
3.342 (2.62), 3.352 (1.14), 3.356 (1.29), 3.366 (1.44), 3.380 (0.69), 3.444 (0.60),
3.457 (1.24), 3.463 (0.90), 3.471 (0.75), 3.477 (1.59), 3.491 (0.71), 3.594 (0.69),
3.607 (1.46), 3.614 (0.77), 3.621 (0.86), 3.628 (1.16), 3.641 (0.51), 4.717 (1.24),
4.724 (1.48), 4.729 (1.63), 4.736 (1.35), 4.781 (0.66), 4.813 (5.96), 4.819 (6.01),
4.851 (0.64), 6.062 (4.18).
Primer 62
(5RS)-2-[(1-metil-1H-benzimidazol-2-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1256]
[1257] (5RS)-2-[(1-metil-1H-benzimidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (120 mg, 367 µmol) dodata je u DMF (2,8 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (181 mg, 477 µmol) i trietilamin (200 µl, 1,5 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (37 µl, 440 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (139 mg, 367 µmol) i pirolidin (31 µl, 367 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat.
Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,0 mg (33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.51), 0.008 (0.44), 1.653 (0.44),
1.667 (0.48), 1.677 (0.52), 1.690 (0.67), 1.702 (0.81), 1.712 (0.59), 1.725 (0.41),
1.777 (1.23), 1.795 (2.26), 1.812 (1.88), 1.829 (0.60), 1.897 (0.57), 1.914 (1.73),
1.931 (2.23), 1.947 (1.48), 1.964 (0.58), 1.977 (0.48), 1.987 (0.82), 1.997 (1.01),
2.006 (0.73), 2.022 (0.56), 2.033 (0.46), 2.040 (0.44), 2.048 (0.42), 2.518 (1.12),
2.566 (1.13), 2.578 (0.64), 2.608 (0.40), 3.245 (0.71), 3.258 (0.74), 3.275 (1.21),
3.292 (0.62), 3.324 (0.72), 3.342 (1.30), 3.354 (0.50), 3.360 (0.67), 3.372 (0.73),
3.459 (0.82), 3.466 (0.60), 3.476 (0.51), 3.483 (1.02), 3.501 (0.45), 3.604 (0.47),
3.620 (1.00), 3.628 (0.51), 3.637 (0.58), 3.645 (0.78), 3.755 (16.00), 4.749 (0.91),
4.758 (1.02), 4.764 (1.18), 4.772 (0.87), 5.072 (1.17), 5.111 (3.74), 5.139 (3.71),
5.178 (1.17), 7.172 (0.65), 7.175 (0.66), 7.192 (1.54), 7.209 (1.33), 7.212 (1.19),
7.233 (1.09), 7.236 (1.14), 7.253 (1.60), 7.271 (0.78), 7.273 (0.68), 7.524 (1.79),
7.544 (1.56), 7.582 (1.63), 7.602 (1.52).
Primer 63
(5RS)-2-[4-metoksi-3-(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1258]
[1259] (5RS)-2-[4-metoksi-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (75,0 mg, 202 µmol) dodata je u THF (2,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (99,8 mg, 263 µmol) i trietilamin (140 µl, 1,0 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (20 µl, 240 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,0 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 425 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.02), 0.008 (0.93), 1.674 (0.45),
1.697 (0.88), 1.708 (0.99), 1.719 (0.77), 1.755 (0.43), 1.773 (1.40), 1.790 (2.47),
1.807 (1.91), 1.824 (0.55), 1.892 (0.61), 1.909 (1.78), 1.925 (2.25), 1.942 (1.58),
1.960 (0.51), 1.967 (0.47), 1.978 (0.78), 1.990 (0.76), 2.005 (0.53), 2.020 (0.62),
2.030 (0.44), 2.036 (0.41), 2.046 (0.43), 2.073 (0.94), 2.519 (1.40), 2.561 (0.63),
2.576 (0.59), 2.588 (1.12), 2.600 (0.62), 2.630 (0.44), 2.865 (0.45), 3.240 (0.73),
3.253 (0.72), 3.269 (1.28), 3.287 (0.68), 3.322 (1.06), 3.341 (1.35), 3.352 (0.53),
3.358 (0.70), 3.370 (0.77), 3.449 (0.83), 3.457 (0.61), 3.467 (0.49), 3.474 (1.05),
3.491 (0.46), 3.592 (0.48), 3.608 (1.00), 3.616 (0.50), 3.625 (0.57), 3.633 (0.77),
3.871 (16.00), 4.726 (0.91), 4.735 (1.03), 4.741 (1.21), 4.750 (0.90), 4.807 (4.91),
7.227 (1.60), 7.248 (1.89), 7.477 (1.19), 7.498 (1.06), 7.519 (2.24).
Primer 64
(5RS)-2-[(1-metil-1H-indazol-5-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1260]
[1261] (5RS)-2-[(1-metil-1H-indazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (65,0 mg, 199 µmol) dodata je u THF (2,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (98,2 mg, 258 µmol) i trietilamin (140 µl, 990 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (20 µl, 240 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 26,0 mg (34% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.76), 0.008 (1.67), 1.681 (0.57),
1.691 (0.92), 1.704 (1.22), 1.717 (0.94), 1.775 (1.31), 1.792 (2.33), 1.809 (1.80),
1.826 (0.53), 1.894 (0.59), 1.911 (1.69), 1.928 (2.24), 1.945 (1.49), 1.962 (0.71),
1.972 (0.74), 1.984 (0.67), 1.993 (0.54), 2.007 (0.47), 2.018 (0.55), 2.028 (0.45),
2.043 (0.42), 2.072 (0.79), 2.523 (1.39), 2.567 (0.67), 2.579 (1.17), 2.591 (0.61),
2.621 (0.45), 2.865 (0.91), 3.244 (0.73), 3.257 (0.73), 3.273 (1.25), 3.291 (0.83),
3.331 (0.80), 3.349 (1.31), 3.361 (0.51), 3.367 (0.68), 3.379 (0.74), 3.456 (0.79),
3.463 (0.57), 3.473 (0.48), 3.480 (1.00), 3.497 (0.44), 3.597 (0.45), 3.614 (0.97),
3.622 (0.48), 3.631 (0.54), 3.639 (0.75), 4.021 (16.00), 4.723 (0.86), 4.732 (0.98),
4.739 (1.17), 4.747 (0.84), 4.841 (0.57), 4.879 (2.97), 4.894 (2.98), 4.932 (0.56),
7.280 (1.34), 7.284 (1.16), 7.302 (1.36), 7.305 (1.54), 7.581 (1.86), 7.604 (4.27),
8.009 (2.76).
Primer 65
(5RS)-2-[2,5-bis(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1262]
[1263] (5RS)-2-[2,5-bis(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (50,0 mg, 122 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (60,4 mg, 159 µmol) i trietilamin (51 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je pirolidin (10,4 mg, 147 µmol) i reakciona smeša je mešana 48 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 18,2 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,72 min; MS (ESIpos): m/z = 463 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.98), -0.008 (11.17), 0.008 (8.68),
0.146 (1.03), 1.697 (1.57), 1.707 (1.63), 1.735 (2.71), 1.756 (2.33), 1.773 (5.59),
1.790 (9.06), 1.807 (6.83), 1.824 (1.95), 1.893 (2.33), 1.909 (6.13), 1.926 (7.38),
1.943 (4.39), 1.960 (1.19), 2.025 (3.74), 2.036 (3.91), 2.078 (1.46), 2.328 (1.79),
2.366 (1.14), 2.524 (6.94), 2.566 (3.04), 2.577 (2.82), 2.592 (2.12), 2.614 (2.06),
2.625 (3.74), 2.638 (2.17), 2.670 (3.15), 2.710 (1.30), 2.865 (3.74), 3.230 (1.25),
3.247 (2.60), 3.260 (2.71), 3.276 (4.99), 3.338 (5.32), 3.356 (2.71), 3.368 (2.82),
3.385 (1.25), 3.441 (1.46), 3.458 (2.98), 3.466 (2.17), 3.483 (3.74), 3.501 (1.68),
3.594 (1.74), 3.611 (3.42), 3.627 (2.01), 3.635 (2.77), 3.652 (1.08), 3.700 (1.19),
3.730 (1.41), 4.749 (0.49), 4.785 (3.15), 4.794 (3.53), 4.800 (4.34), 4.808 (3.04),
5.077 (16.00), 7.654 (7.27), 7.917 (2.98), 7.938 (4.56), 8.013 (6.40), 8.034 (4.23).
Primer 66
(5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1264]
[1265] (5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (50,0 mg, 139 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (68,8 mg, 181 µmol) i trietilamin (58 µl, 420 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je pirolidin (11,9 mg, 167 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (68,8 mg, 181 µmol), pirolidin (11,9 mg, 167 µmol) i trietilamin (58 µl, 420 µmol) i reakciona smeša je mešana 48 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,6 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.40), -0.008 (3.74), 0.008 (3.05),
0.146 (0.40), 1.662 (0.79), 1.673 (1.11), 1.686 (1.26), 1.707 (1.77), 1.716 (2.14),
1.726 (1.68), 1.740 (1.04), 1.754 (1.26), 1.773 (3.89), 1.790 (6.75), 1.807 (5.19),
1.824 (1.46), 1.892 (1.79), 1.909 (4.77), 1.925 (5.75), 1.942 (3.51), 1.958 (1.44),
1.982 (1.14), 1.992 (2.02), 2.004 (2.51), 2.014 (1.72), 2.030 (1.46), 2.041 (1.16),
2.048 (1.16), 2.056 (1.11), 2.065 (0.58), 2.323 (0.49), 2.327 (0.67), 2.332 (0.47),
2.366 (0.58), 2.523 (2.42), 2.558 (2.05), 2.572 (1.65), 2.588 (1.58), 2.600 (2.88),
2.613 (1.65), 2.630 (0.75), 2.642 (1.14), 2.654 (0.60), 2.665 (0.58), 2.669 (0.72),
2.674 (0.53), 2.710 (0.63), 2.865 (3.96), 3.225 (0.96), 3.242 (2.02), 3.255 (1.96),
3.272 (3.58), 3.289 (2.11), 3.340 (3.82), 3.351 (1.54), 3.357 (1.98), 3.369 (2.14),
3.387 (0.93), 3.435 (1.04), 3.452 (2.28), 3.460 (1.63), 3.470 (1.35), 3.477 (2.86),
3.494 (1.25), 3.591 (1.32), 3.607 (2.65), 3.615 (1.33), 3.624 (1.53), 3.632 (2.07),
3.649 (0.95), 4.741 (2.49), 4.750 (2.68), 4.756 (3.18), 4.765 (2.39), 4.904 (16.00),
7.478 (1.72), 7.500 (3.12), 7.526 (3.04), 7.561 (1.60), 7.566 (1.77), 7.573 (1.82),
7.579 (2.07), 7.587 (1.23), 7.595 (0.98), 7.600 (1.00), 7.669 (2.53), 7.674 (2.37),
7.687 (2.60).
Primer 67
(5RS)-2-[3-fluor-4-(trifluormetoksi)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1267] (5RS)-2-[3-fluor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (80,0 mg, 213 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (105 mg, 277 µmol) i trietilamin (89 µl, 640 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (21 µl, 260 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,0 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.37), 0.008 (1.36), 1.662 (0.74),
1.669 (0.77), 1.681 (1.08), 1.695 (1.22), 1.704 (1.35), 1.717 (1.75), 1.728 (2.05),
1.737 (1.56), 1.757 (1.39), 1.774 (4.00), 1.791 (6.45), 1.809 (4.96), 1.818 (1.10),
1.826 (1.95), 1.836 (1.76), 1.844 (0.70), 1.854 (0.69), 1.893 (1.41), 1.910 (4.09),
1.926 (5.10), 1.943 (3.12), 1.960 (1.11), 1.979 (0.73), 1.993 (1.14), 2.003 (2.00),
2.015 (2.49), 2.024 (1.73), 2.040 (1.41), 2.051 (1.14), 2.059 (1.12), 2.066 (1.07),
2.074 (0.68), 2.559 (1.84), 2.570 (1.70), 2.584 (1.52), 2.599 (1.51), 2.611 (2.77),
2.623 (1.59), 2.641 (0.71), 2.653 (1.09), 2.665 (0.70), 3.095 (0.74), 3.232 (0.86),
3.248 (1.81), 3.261 (1.80), 3.278 (3.18), 3.295 (1.57), 3.329 (1.65), 3.346 (3.24),
3.358 (1.22), 3.364 (1.70), 3.376 (1.90), 3.394 (0.86), 3.441 (0.95), 3.459 (2.08),
3.466 (1.55), 3.476 (1.27), 3.484 (2.68), 3.501 (1.19), 3.593 (1.23), 3.610 (2.48),
3.618 (1.30), 3.626 (1.47), 3.634 (1.92), 3.651 (0.90), 4.747 (2.31), 4.756 (2.57),
4.761 (3.04), 4.771 (2.27), 4.879 (16.00), 7.160 (2.64), 7.182 (2.97), 7.303 (2.85),
7.308 (2.71), 7.331 (2.93), 7.336 (2.75), 7.537 (1.68), 7.557 (3.12), 7.577 (1.50).
Primer 68
(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1268]
[1269] (5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (80,0 mg, 212 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (105 mg, 276 µmol) i trietilamin (89 µl, 640 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (21 µl, 250 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,0 mg (68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.57), -0.008 (5.51), 0.008 (4.76),
0.146 (0.58), 1.530 (0.64), 1.678 (1.30), 1.691 (2.52), 1.701 (6.30), 1.714 (8.12),
1.732 (5.69), 1.745 (2.84), 1.753 (2.43), 1.771 (8.48), 1.789 (14.82), 1.806 (11.36),
1.822 (3.36), 1.891 (3.49), 1.908 (10.40), 1.924 (12.93), 1.941 (8.24), 1.959 (3.75),
1.973 (2.58), 1.984 (4.67), 1.995 (4.19), 2.006 (3.22), 2.022 (3.48), 2.036 (2.54),
2.043 (3.25), 2.058 (2.91), 2.078 (1.33), 2.094 (0.70), 2.328 (0.87), 2.366 (0.78),
2.474 (1.94), 2.523 (3.34), 2.567 (3.64), 2.579 (7.40), 2.592 (3.66), 2.609 (1.60),
2.621 (2.75), 2.634 (1.12), 2.670 (0.91), 2.690 (0.54), 2.710 (0.57), 3.229 (1.99),
3.247 (4.27), 3.259 (4.25), 3.276 (7.72), 3.293 (4.00), 3.320 (5.40), 3.338 (7.91),
3.350 (2.84), 3.355 (4.06), 3.367 (4.42), 3.385 (1.97), 3.443 (2.22), 3.460 (4.90),
3.468 (3.60), 3.477 (2.93), 3.485 (6.22), 3.502 (2.73), 3.596 (2.81), 3.612 (5.82),
3.620 (2.96), 3.629 (3.40), 3.637 (4.55), 3.654 (2.03), 4.736 (5.46), 4.745 (6.31),
4.751 (7.34), 4.761 (5.43), 5.063 (4.87), 5.104 (16.00), 5.135 (15.54), 5.175 (4.67),
8.486 (11.75), 8.490 (11.76), 8.903 (11.49), 8.906 (11.69).
Primer 69
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-({5-[3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oksadiazol-3-il}metil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1270]
[1271] (5RS)-3-okso-2-({5-[3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oksadiazol-3-il}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (70,0 mg, čistoća 88%, 151 µmol) dodata je u THF (2,0 m) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (74,7 mg, 197 µmol) i trietilamin (63 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (12,9 mg, 181 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi.
U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 27,6 mg (39% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,57 min; MS (ESIpos): m/z = 463 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.57), -0.008 (14.76), 0.008
(12.96), 0.146 (1.57), 1.726 (4.98), 1.738 (4.23), 1.760 (1.87), 1.777 (6.00), 1.795
(10.23), 1.812 (7.87), 1.829 (2.32), 1.899 (2.40), 1.915 (7.31), 1.932 (9.52), 1.949
(6.41), 1.964 (2.55), 1.976 (1.84), 1.988 (3.04), 1.999 (2.66), 2.031 (1.99), 2.043
(2.06), 2.053 (2.02), 2.068 (1.95), 2.323 (1.39), 2.327 (1.91), 2.366 (1.12), 2.523
(7.08), 2.566 (3.60), 2.588 (2.66), 2.598 (2.59), 2.610 (5.17), 2.623 (2.62), 2.640
(1.16), 2.652 (1.84), 2.665 (2.21), 2.670 (2.21), 2.674 (1.54), 2.710 (1.16), 3.235
(1.39), 3.252 (3.04), 3.264 (2.96), 3.281 (5.43), 3.329 (2.85), 3.347 (5.47), 3.365
(2.96), 3.377 (3.19), 3.394 (1.46), 3.448 (1.57), 3.466 (3.56), 3.473 (2.51), 3.483
(2.25), 3.490 (4.42), 3.508 (1.95), 3.605 (2.02), 3.622 (4.23), 3.630 (2.10), 3.638
(2.40), 3.647 (3.26), 3.663 (1.42), 4.647 (0.86), 4.662 (0.90), 4.750 (3.78), 4.759
(4.50), 4.765 (5.13), 4.774 (3.78), 5.019 (4.95), 5.060 (16.00), 5.088 (16.00), 5.128
(5.06), 7.876 (3.37), 7.896 (7.46), 7.915 (4.31), 8.100 (5.43), 8.120 (4.53), 8.333
(8.39), 8.394 (5.43), 8.413 (5.17).
Primer 70
(5RS)-2-[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1272]
[1273] (5RS)-2-[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (80,0 mg, čistoća 60%, 165 µmol) ubačena je u DMF (2,0 ml) pa su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (81,4 mg, 214 µmol) i trietilamin (92 µl, 660 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je pirolidin (17 µl, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (63,8 mg, 165 µmol) i pirolidin (14 µl, 165 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 6,00 mg (11% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 9): Rt= 3,74 min; MS (ESIpos): m/z = 345 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.41), 0.008 (2.88), 1.300 (7.13),
1.319 (16.00), 1.337 (7.18), 1.655 (0.66), 1.666 (0.90), 1.679 (0.96), 1.691 (0.97),
1.705 (1.24), 1.717 (1.47), 1.729 (1.20), 1.757 (1.00), 1.774 (2.92), 1.791 (4.94),
1.808 (3.77), 1.825 (1.17), 1.894 (1.99), 1.910 (3.30), 1.927 (3.65), 1.943 (2.23),
1.961 (1.03), 1.975 (0.56), 1.988 (1.00), 1.999 (2.36), 2.009 (2.34), 2.023 (1.62),
2.034 (0.90), 2.040 (0.83), 2.049 (0.76), 2.072 (0.41), 2.322 (0.52), 2.327 (0.66),
2.332 (0.51), 2.366 (0.54), 2.518 (3.41), 2.523 (2.61), 2.561 (1.55), 2.576 (1.19),
2.592 (1.19), 2.605 (2.17), 2.617 (1.20), 2.634 (0.58), 2.646 (0.89), 2.660 (0.62),
2.665 (0.63), 2.669 (0.75), 2.674 (0.55), 2.689 (0.58), 2.710 (0.54), 2.865 (13.73),
3.219 (0.78), 3.236 (1.55), 3.249 (1.78), 3.266 (3.05), 3.283 (1.95), 3.298 (2.44),
3.315 (4.95), 3.334 (6.17), 3.345 (6.63), 3.445 (0.99), 3.462 (1.79), 3.469 (1.41),
3.479 (1.11), 3.487 (2.22), 3.504 (1.00), 3.581 (1.00), 3.597 (1.93), 3.606 (1.03),
3.614 (1.16), 3.622 (1.45), 3.639 (0.68), 4.145 (1.55), 4.162 (4.11), 4.180 (3.94),
4.183 (3.94), 4.200 (1.38), 4.728 (1.76), 4.738 (2.03), 4.743 (2.55), 4.753 (1.68),
5.163 (1.06), 5.204 (6.89), 5.216 (6.69), 5.257 (1.06), 6.939 (0.66), 7.066 (0.68),
7.194 (0.65), 7.642 (3.94), 7.646 (3.98), 7.776 (4.66), 7.780 (4.28).
Primer 71
(5RS)-2-[2-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1274]
[1275] (5RS)-2-[2-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (80,0 mg, 223 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (110 mg, 289 µmol) i trietilamin (93 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (22 µl, 270 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 55,0 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.92), 0.008 (8.29), 0.146 (1.03),
1.693 (3.76), 1.704 (5.42), 1.717 (6.38), 1.755 (3.06), 1.773 (9.29), 1.790 (16.00),
1.807 (12.53), 1.824 (3.65), 1.892 (3.91), 1.909 (11.28), 1.926 (14.08), 1.942 (9.14),
1.960 (3.91), 1.988 (5.09), 2.030 (3.91), 2.073 (3.21), 2.328 (2.40), 2.367 (1.18),
2.559 (5.86), 2.573 (4.20), 2.588 (4.06), 2.600 (7.48), 2.613 (4.20), 2.642 (2.91),
2.669 (2.54), 2.690 (1.25), 2.710 (1.40), 3.227 (2.43), 3.243 (4.53), 3.256 (4.57),
3.273 (8.00), 3.290 (4.39), 3.325 (5.31), 3.343 (8.41), 3.361 (4.50), 3.372 (4.94),
3.391 (2.03), 3.436 (2.43), 3.454 (5.05), 3.461 (4.02), 3.479 (6.86), 3.496 (3.02),
3.590 (3.13), 3.607 (6.30), 3.623 (3.76), 3.632 (4.90), 3.649 (2.18), 4.737 (5.82),
4.747 (6.67), 4.752 (8.04), 4.761 (5.68), 4.895 (3.50), 4.935 (15.48), 4.956 (15.48),
4.995 (3.65), 6.509 (1.29), 7.386 (4.68), 7.406 (10.43), 7.425 (6.23), 7.555 (4.72),
7.573 (7.63), 7.590 (3.65), 7.720 (4.13), 7.736 (7.82), 7.756 (3.91).
Primer 72
(5RS)-2-[3-fluor-5-(trifluormetil)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1276]
[1277] (5RS)-2-[3-fluor-5-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (80,0 mg, 223 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (110 mg, 289 µmol) i trietilamin (93 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (22 µl, 270 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.15), 0.008 (2.63), 1.690 (1.16),
1.701 (1.12), 1.728 (1.86), 1.740 (1.51), 1.755 (1.38), 1.774 (4.07), 1.791 (6.54),
1.809 (5.03), 1.825 (1.42), 1.893 (1.52), 1.910 (4.33), 1.927 (5.32), 1.943 (3.23),
1.961 (1.03), 1.972 (0.74), 2.019 (2.53), 2.028 (1.84), 2.043 (1.33), 2.054 (1.16),
2.062 (1.14), 2.073 (1.44), 2.327 (0.72), 2.563 (2.11), 2.574 (1.91), 2.589 (1.64),
2.604 (1.57), 2.616 (2.72), 2.628 (1.55), 2.646 (0.75), 2.657 (1.15), 2.670 (1.25),
2.710 (0.45), 2.865 (0.60), 3.231 (0.84), 3.247 (1.83), 3.260 (1.90), 3.277 (3.31),
3.294 (1.92), 3.326 (1.93), 3.344 (3.35), 3.361 (1.78), 3.373 (1.90), 3.391 (0.87),
3.439 (0.94), 3.457 (2.17), 3.464 (1.54), 3.482 (2.73), 3.499 (1.19), 3.595 (1.24),
3.611 (2.50), 3.620 (1.31), 3.628 (1.51), 3.636 (1.92), 3.653 (0.88), 4.761 (2.42),
4.770 (2.59), 4.776 (3.10), 4.785 (2.31), 4.959 (16.00), 7.329 (2.37), 7.352 (2.34),
7.502 (5.85), 7.601 (2.38), 7.623 (2.42).
Primer 73
(5RS)-2-[3-hlor-4-(trifluormetoksi)benzil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1278]
[1279] (5RS)-2-[3-hlor-4-(trifluormetoksi)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (75,0 mg, čistoća 95%, 182 µmol) dodata je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (89,9 mg, 236 µmol) i trietilamin (130 µl, 910 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (18 µl, 220 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 41,0 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,69 min; MS (ESIpos): m/z = 445 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.80), -0.008 (6.96), 0.008 (5.94),
0.146 (0.78), 1.724 (1.73), 1.756 (1.17), 1.774 (3.10), 1.791 (5.36), 1.808 (4.08),
1.824 (1.15), 1.893 (1.26), 1.909 (3.66), 1.926 (4.36), 1.943 (2.67), 1.960 (1.19),
1.988 (1.32), 1.997 (1.60), 2.010 (1.65), 2.038 (1.17), 2.048 (0.93), 2.063 (1.06),
2.073 (16.00), 2.281 (1.30), 2.327 (1.21), 2.366 (0.71), 2.523 (3.73), 2.558 (1.89),
2.569 (1.54), 2.583 (1.30), 2.597 (1.24), 2.609 (2.28), 2.622 (1.28), 2.639 (0.58),
2.651 (0.93), 2.665 (1.28), 2.669 (1.34), 2.710 (0.59), 2.865 (0.45), 3.229 (0.69),
3.246 (1.58), 3.258 (1.52), 3.275 (2.71), 3.293 (1.56), 3.329 (1.50), 3.347 (2.73),
3.365 (1.47), 3.377 (1.61), 3.394 (0.74), 3.438 (0.78), 3.456 (1.76), 3.464 (1.28),
3.473 (1.06), 3.481 (2.25), 3.498 (0.95), 3.592 (1.02), 3.608 (2.08), 3.617 (1.06),
3.625 (1.23), 3.633 (1.58), 3.650 (0.72), 3.726 (1.63), 4.541 (0.69), 4.745 (1.93),
4.754 (2.10), 4.760 (2.52), 4.769 (1.84), 4.873 (14.14), 7.156 (0.65), 7.306 (2.49),
7.311 (2.54), 7.327 (2.99), 7.332 (3.06), 7.533 (5.10), 7.539 (4.92), 7.547 (2.99),
7.551 (2.88), 7.569 (2.47), 7.572 (2.41).
Primer 74
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1280]
[1281] (5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (70,0 mg, 205 µmol) dodata je u THF (2 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (97,1 mg, 255 µmol) i trietilamin (82 µl, 590 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (20 µl, 240 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 66,0 mg (85% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.82), 0.008 (1.91), 1.663 (0.97),
1.683 (1.29), 1.696 (1.47), 1.706 (1.28), 1.732 (1.80), 1.741 (2.17), 1.756 (2.12),
1.775 (5.55), 1.792 (8.58), 1.809 (6.36), 1.826 (1.82), 1.894 (1.68), 1.910 (4.88),
1.927 (6.01), 1.943 (3.66), 1.960 (1.07), 1.989 (0.74), 2.000 (0.78), 2.015 (1.44),
2.029 (3.22), 2.038 (3.51), 2.045 (2.41), 2.054 (1.95), 2.066 (1.46), 2.072 (1.43),
2.081 (1.30), 2.108 (0.49), 2.327 (0.55), 2.523 (1.95), 2.558 (2.98), 2.572 (2.50),
2.584 (2.37), 2.598 (1.98), 2.614 (1.90), 2.625 (3.38), 2.637 (2.01), 2.656 (0.92),
2.666 (1.65), 2.679 (0.87), 3.237 (1.07), 3.254 (2.30), 3.266 (2.34), 3.283 (4.24),
3.330 (2.25), 3.347 (4.22), 3.359 (1.53), 3.365 (2.21), 3.377 (2.39), 3.394 (1.07),
3.445 (1.23), 3.462 (2.68), 3.469 (2.01), 3.479 (1.58), 3.487 (3.47), 3.504 (1.50),
3.594 (1.62), 3.611 (3.15), 3.619 (1.64), 3.627 (1.83), 3.636 (2.39), 3.652 (1.14),
4.774 (2.95), 4.783 (3.30), 4.789 (4.07), 4.798 (2.91), 4.980 (0.51), 5.024 (16.00),
5.068 (0.51), 7.473 (4.22), 7.485 (4.38), 7.760 (8.48), 8.726 (6.15), 8.739 (6.08).
[1282] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 75
(5RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1283]
[1284] (5RS)-2-[[3-fluor-2-(trifluormetil)-4-piridil]metil]-3-okso-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (80,0 mg, 214 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (106 mg, 278 µmol) i trietilamin (89 µl, 640 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (21 µl, 260 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 67,0 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.52), 0.008 (3.36), 0.146 (0.57),
1.697 (2.60), 1.708 (2.42), 1.737 (3.98), 1.758 (3.80), 1.774 (8.57), 1.792 (13.17),
1.809 (9.76), 1.825 (2.72), 1.894 (3.04), 1.909 (7.95), 1.926 (9.58), 1.942 (5.78),
1.959 (1.76), 2.025 (5.07), 2.047 (3.06), 2.060 (2.40), 2.067 (2.35), 2.075 (2.15),
2.328 (1.01), 2.366 (0.69), 2.569 (4.00), 2.580 (3.80), 2.594 (3.25), 2.609 (3.31),
2.621 (5.56), 2.633 (3.16), 2.651 (1.53), 2.664 (2.51), 2.710 (0.69), 3.235 (1.85),
3.252 (3.80), 3.264 (4.16), 3.281 (7.27), 3.329 (3.57), 3.347 (6.42), 3.364 (3.45),
3.376 (3.57), 3.394 (1.65), 3.443 (2.03), 3.460 (4.21), 3.468 (3.22), 3.486 (5.21),
3.503 (2.33), 3.592 (2.63), 3.609 (4.96), 3.626 (3.00), 3.634 (3.73), 3.650 (1.62),
4.763 (4.87), 4.772 (5.33), 4.777 (6.22), 4.787 (4.32), 5.015 (1.69), 5.057 (16.00),
5.065 (15.41), 5.107 (1.48), 7.546 (4.85), 7.559 (8.68), 7.571 (4.71), 8.561 (10.29),
8.573 (9.81).
[1285] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 76
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1286]
[1287] (5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (94,0 mg, 240 µmol) dodata je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (118 mg, 311 µmol) i trietilamin (100 µl, 720 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (24 µl, 290 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 57,0 mg (53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.70), 0.008 (2.54), 1.147 (0.45),
1.165 (0.90), 1.183 (0.45), 1.653 (1.17), 1.666 (1.66), 1.678 (1.86), 1.691 (1.77),
1.704 (2.52), 1.717 (3.00), 1.728 (2.29), 1.740 (1.51), 1.751 (1.17), 1.763 (1.72),
1.781 (5.12), 1.799 (9.24), 1.816 (7.40), 1.832 (2.22), 1.899 (2.19), 1.915 (6.75),
1.932 (8.65), 1.949 (5.19), 1.966 (1.61), 1.983 (1.00), 1.998 (1.85), 2.010 (4.50),
2.019 (4.62), 2.034 (2.65), 2.046 (1.72), 2.052 (1.66), 2.061 (1.55), 2.071 (0.74),
2.087 (0.51), 2.096 (0.42), 2.328 (0.56), 2.333 (0.49), 2.342 (1.75), 2.519 (3.00),
2.525 (4.32), 2.567 (2.15), 2.594 (2.16), 2.605 (3.87), 2.617 (2.31), 2.636 (1.19),
2.647 (1.75), 2.660 (1.01), 2.670 (0.71), 3.238 (1.31), 3.255 (2.81), 3.268 (2.72),
3.285 (4.87), 3.340 (2.36), 3.357 (4.92), 3.369 (1.89), 3.375 (2.60), 3.387 (2.96),
3.405 (1.31), 3.440 (1.47), 3.457 (3.21), 3.464 (2.37), 3.474 (1.97), 3.482 (4.04),
3.499 (1.75), 3.606 (1.82), 3.622 (3.91), 3.630 (2.00), 3.639 (2.22), 3.647 (3.07),
3.664 (1.36), 3.803 (0.57), 3.818 (0.56), 4.792 (3.51), 4.801 (3.91), 4.806 (4.95),
4.815 (3.45), 5.408 (3.17), 5.449 (10.04), 5.480 (10.14), 5.521 (3.20), 5.558 (0.51),
6.510 (2.74), 7.293 (0.56), 7.386 (0.63), 7.406 (0.59), 7.750 (16.00), 7.823 (2.56),
7.826 (2.72), 7.844 (5.54), 7.862 (3.75), 7.864 (3.71), 7.943 (3.44), 7.946 (3.64),
7.964 (5.87), 7.967 (4.51), 7.982 (3.21), 7.985 (3.11), 8.214 (6.39), 8.234 (5.46),
8.370 (6.19), 8.390 (5.70).
[1288] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 77
(5RS)-2-{[2-metil-4-(trifluormetil)-1,3-tiazol-5-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1289]
[1290] (5RS)-2-{[2-metil-4-(trifluormetil)-1,3-tiazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (68,0 mg, 188 µmol) dodata je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (92,8 mg, 244 µmol) i trietilamin (78 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (19 µl, 230 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,0 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.56), 0.008 (2.06), 1.163 (2.87),
1.181 (6.08), 1.199 (2.98), 1.703 (0.97), 1.714 (1.06), 1.754 (0.51), 1.770 (1.54),
1.787 (2.65), 1.804 (2.06), 1.821 (0.60), 1.889 (0.63), 1.906 (1.90), 1.923 (2.45),
1.939 (1.73), 1.974 (0.84), 1.986 (0.78), 2.003 (0.52), 2.019 (0.67), 2.028 (0.50),
2.327 (0.46), 2.523 (1.51), 2.558 (0.99), 2.568 (0.83), 2.582 (0.68), 2.602 (0.66),
2.613 (1.27), 2.626 (0.75), 2.646 (16.00), 2.669 (0.74), 2.890 (0.45), 3.076 (1.10),
3.089 (1.24), 3.094 (1.13), 3.106 (1.07), 3.236 (0.78), 3.248 (0.79), 3.265 (1.40),
3.282 (0.69), 3.313 (0.78), 3.330 (1.69), 3.428 (0.64), 3.445 (0.98), 3.453 (0.73),
3.470 (1.21), 3.487 (0.56), 3.578 (0.51), 3.595 (1.09), 3.612 (0.63), 3.620 (0.80),
4.713 (0.95), 4.723 (1.09), 4.728 (1.30), 4.738 (0.95), 5.127 (2.30), 5.142 (2.33).
Primer 78
(5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1291]
[1292] (5RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (50,0 mg, 162 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (80,1 mg, 211 µmol) i trietilamin (68 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (27,9 mg, 194 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,2 mg (39% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.72), 0.008 (2.55), 1.687 (1.41),
1.699 (1.48), 1.726 (1.92), 2.023 (1.76), 2.050 (1.24), 2.064 (1.31), 2.073 (2.50),
2.085 (1.00), 2.101 (0.87), 2.328 (0.75), 2.365 (0.71), 2.381 (1.04), 2.410 (1.31),
2.431 (1.22), 2.569 (4.02), 2.578 (3.03), 2.592 (3.63), 2.607 (3.88), 2.620 (1.88),
2.650 (1.12), 2.665 (1.04), 2.709 (0.48), 3.538 (1.74), 3.557 (2.71), 3.570 (1.44),
3.577 (1.41), 3.638 (0.51), 3.672 (1.50), 3.706 (1.75), 3.740 (1.36), 3.774 (2.31),
3.790 (1.31), 3.798 (1.21), 3.808 (2.23), 3.816 (1.89), 3.835 (0.93), 3.894 (0.74),
3.912 (1.70), 3.931 (0.99), 3.938 (1.22), 3.957 (0.58), 3.972 (0.49), 4.001 (1.06),
4.014 (0.56), 4.030 (0.71), 4.043 (0.99), 4.071 (0.60), 4.147 (0.64), 4.179 (1.00),
4.203 (1.01), 4.235 (0.43), 4.761 (1.40), 4.776 (1.83), 4.785 (1.34), 4.836 (1.45),
4.846 (1.72), 4.851 (1.89), 4.861 (1.45), 4.870 (0.73), 4.914 (16.00), 4.955 (0.69),
7.199 (6.18), 7.220 (6.60), 7.913 (4.28), 7.920 (4.38), 7.934 (4.15), 7.941 (4.23),
8.571 (5.89), 8.577 (5.93).
Primer 79
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1293]
[1294] (5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (70,0 mg, 153 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (75,8 mg, 199 µmol) i trietilamin (110 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (26,4 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,7 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.24), 0.008 (3.00), 1.664 (1.10),
1.735 (1.37), 1.908 (1.15), 1.994 (1.34), 2.008 (1.72), 2.018 (1.67), 2.033 (1.58),
2.044 (1.35), 2.052 (1.21), 2.060 (1.13), 2.073 (1.48), 2.080 (0.80), 2.088 (0.84),
2.096 (0.75), 2.328 (0.80), 2.366 (0.81), 2.382 (0.98), 2.411 (1.16), 2.431 (1.11),
2.456 (0.84), 2.569 (3.33), 2.580 (2.48), 2.594 (2.56), 2.610 (2.91), 2.623 (1.48),
2.640 (0.60), 2.653 (0.91), 2.669 (1.06), 2.710 (0.48), 3.534 (1.23), 3.541 (1.45),
3.552 (2.00), 3.561 (2.15), 3.571 (1.27), 3.580 (1.08), 3.670 (1.29), 3.704 (1.47),
3.738 (0.63), 3.749 (0.72), 3.769 (0.56), 3.782 (1.84), 3.794 (0.96), 3.813 (2.64),
3.831 (0.71), 3.891 (0.68), 3.910 (1.45), 3.929 (0.81), 3.936 (1.06), 3.955 (0.49),
3.966 (0.43), 3.995 (0.88), 4.010 (0.45), 4.023 (0.60), 4.038 (0.82), 4.066 (0.49),
4.149 (0.51), 4.182 (0.79), 4.206 (0.79), 4.767 (1.21), 4.776 (1.43), 4.782 (1.63),
4.791 (1.15), 4.838 (1.28), 4.847 (1.44), 4.853 (1.63), 4.862 (1.17), 5.011 (14.35),
7.909 (15.74), 7.913 (16.00), 8.641 (5.64).
Primer 80
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1295]
[1296] (5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (350 mg, čistoća 15%, 170 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (84,1 mg, 221 µmol) i trietilamin (71 µl, 510 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (29,3 mg, 204 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,4 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.661 (1.07), 1.726 (1.27), 1.996 (1.45),
2.007 (1.54), 2.043 (1.10), 2.060 (0.88), 2.071 (0.82), 2.327 (0.70), 2.366 (0.54),
2.379 (0.89), 2.408 (1.09), 2.427 (1.04), 2.452 (0.91), 2.560 (2.42), 2.569 (2.97),
2.585 (2.82), 2.602 (2.79), 2.644 (0.79), 2.669 (0.70), 3.537 (1.17), 3.546 (1.77),
3.556 (1.91), 3.565 (1.12), 3.575 (0.94), 3.665 (1.17), 3.700 (1.30), 3.743 (0.64),
3.776 (1.61), 3.807 (2.37), 3.825 (0.62), 3.887 (0.58), 3.906 (1.29), 3.931 (0.92),
3.962 (0.43), 3.991 (0.80), 4.018 (0.57), 4.032 (0.75), 4.063 (0.47), 4.143 (0.51),
4.175 (0.74), 4.200 (0.74), 4.749 (1.05), 4.764 (1.43), 4.773 (1.05), 4.821 (1.16),
4.836 (1.48), 4.846 (1.20), 4.884 (16.00), 7.505 (4.89), 7.525 (6.06), 7.686 (3.27),
7.692 (3.34), 7.707 (2.69), 7.713 (2.73), 8.296 (5.00), 8.301 (4.81).
Primer 81
(5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1297]
[1298] (5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat) (70,0 mg, čistoća 79%, 145 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (71,7 mg, 189 µmol) i trietilamin (100 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (12,4 mg, 174 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 21,4 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,61 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.96), -0.008 (8.42), 0.008 (7.50),
0.146 (1.00), 1.406 (0.70), 1.725 (1.96), 1.756 (1.37), 1.773 (3.77), 1.791 (6.24),
1.808 (4.80), 1.824 (1.40), 1.893 (1.44), 1.909 (4.25), 1.926 (5.36), 1.943 (3.21),
1.960 (1.44), 1.997 (1.81), 2.015 (1.55), 2.040 (1.29), 2.051 (1.07), 2.058 (1.18),
2.066 (1.07), 2.327 (1.88), 2.366 (1.40), 2.518 (8.61), 2.523 (7.02), 2.565 (2.44),
2.574 (2.00), 2.590 (1.66), 2.603 (1.55), 2.615 (2.77), 2.627 (1.66), 2.644 (0.78),
2.669 (2.48), 2.709 (1.44), 3.228 (0.89), 3.245 (1.88), 3.257 (1.85), 3.274 (3.33),
3.292 (2.25), 3.330 (2.11), 3.348 (3.29), 3.365 (1.74), 3.378 (1.88), 3.395 (0.89),
3.437 (1.00), 3.454 (2.11), 3.461 (1.55), 3.479 (2.66), 3.496 (1.15), 3.593 (1.26),
3.609 (2.40), 3.626 (1.44), 3.634 (1.92), 3.651 (0.81), 4.753 (2.25), 4.762 (2.48),
4.768 (2.77), 4.777 (2.29), 4.851 (16.00), 7.273 (11.16), 7.278 (11.31), 7.533 (2.40),
7.538 (4.25), 7.543 (2.14).
Primer 82
(5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1299]
[1300] (5RS)-2-(3,5-dihlorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat) (70,0 mg, čistoća 79%, 145 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (71,7 mg, 189 µmol) i trietilamin (100 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (25,0 mg, 174 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 26,4 mg (čistoća 94%, 40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,73 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.09), 0.008 (2.90), 1.670 (0.97),
1.734 (1.17), 1.992 (1.13), 2.004 (1.20), 2.013 (1.32), 2.048 (0.92), 2.056 (1.04),
2.063 (1.01), 2.073 (6.09), 2.084 (0.76), 2.091 (0.75), 2.100 (0.66), 2.327 (0.74),
2.366 (0.72), 2.382 (0.91), 2.412 (1.03), 2.424 (0.98), 2.453 (0.85), 2.523 (3.33),
2.565 (2.41), 2.580 (2.09), 2.590 (2.49), 2.605 (2.35), 2.622 (2.34), 2.633 (1.24),
2.665 (1.27), 2.674 (0.86), 2.709 (0.46), 3.533 (1.03), 3.541 (1.15), 3.551 (1.74),
3.562 (1.93), 3.569 (1.05), 3.581 (0.92), 3.672 (1.10), 3.705 (1.28), 3.742 (0.91),
3.764 (0.52), 3.776 (1.52), 3.790 (0.80), 3.808 (2.32), 3.827 (0.59), 3.894 (0.59),
3.912 (1.26), 3.931 (0.71), 3.939 (0.91), 3.958 (0.60), 3.989 (0.78), 4.017 (0.52),
4.032 (0.71), 4.060 (0.42), 4.149 (0.46), 4.183 (0.68), 4.206 (0.70), 4.775 (1.07),
4.784 (1.23), 4.790 (1.41), 4.799 (1.05), 4.858 (16.00), 7.271 (10.23), 7.276 (10.34),
7.536 (2.16), 7.541 (3.82), 7.546 (2.01).
Primer 83
(5RS)-2-(3,4-difluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1301]
[1302] (5RS)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat) (100 mg, 289 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (143 mg, 376 µmol) i trietilamin (200 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (49,8 mg, 347 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 17,0 mg (15% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.64), -0.008 (5.78), 0.008 (4.12),
0.147 (0.54), 1.734 (1.51), 2.012 (1.51), 2.327 (1.54), 2.566 (2.86), 2.591 (2.58),
2.608 (2.98), 2.669 (1.40), 2.709 (0.76), 3.559 (2.11), 3.670 (1.33), 3.704 (1.54),
3.741 (0.97), 3.775 (1.59), 3.809 (2.49), 3.909 (1.33), 3.991 (0.97), 4.178 (0.97),
4.770 (1.68), 4.822 (16.00), 7.083 (1.87), 7.230 (1.68), 7.259 (2.04), 7.278 (1.80),
7.375 (1.75), 7.396 (3.57), 7.402 (2.25), 7.423 (3.55), 7.445 (1.68).
Primer 84
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1303]
[1304] (5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (70,0 mg, 153 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (75,8 mg, 199 µmol) i trietilamin (110 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (15 µl, 180 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,2 mg (53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.63), 0.008 (3.14), 0.146 (0.40),
1.673 (1.10), 1.686 (1.21), 1.696 (1.21), 1.710 (1.60), 1.724 (1.93), 1.736 (1.54),
1.748 (1.13), 1.758 (1.55), 1.774 (4.10), 1.791 (6.82), 1.808 (5.25), 1.825 (1.49),
1.893 (1.46), 1.909 (4.19), 1.926 (5.20), 1.942 (3.16), 1.959 (1.12), 2.013 (2.62),
2.036 (1.46), 2.048 (1.20), 2.055 (1.18), 2.063 (1.13), 2.072 (0.66), 2.327 (0.97),
2.366 (0.58), 2.523 (3.85), 2.564 (2.19), 2.579 (1.70), 2.593 (1.65), 2.605 (2.93),
2.617 (1.70), 2.635 (0.78), 2.646 (1.13), 2.660 (0.89), 2.665 (0.89), 2.669 (1.07),
2.709 (0.62), 3.231 (0.96), 3.247 (1.93), 3.260 (1.93), 3.277 (3.53), 3.295 (2.62),
3.328 (2.30), 3.346 (3.58), 3.363 (1.83), 3.375 (2.02), 3.393 (0.92), 3.440 (0.99),
3.457 (2.20), 3.464 (1.62), 3.474 (1.34), 3.482 (2.82), 3.499 (1.26), 3.592 (1.28),
3.609 (2.61), 3.617 (1.34), 3.626 (1.57), 3.633 (2.02), 3.650 (0.94), 4.747 (2.45),
4.756 (2.74), 4.762 (3.26), 4.771 (2.36), 5.005 (13.36), 7.907 (15.77), 7.910 (16.00),
8.641 (5.00).
Primer 85
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1305]
[1306] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije. [Priprema uzorka: 75 mg rastvoreno u 1 ml smeše etanol/acetonitril; injekciona zapremina: 0,2 ml; kolona: Daicel Chiralpakl<®>AD-H 5µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 40:60, protok: 20 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 27 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 27 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1307] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,61 min, e.e. = 99,9% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OJ-3 3 µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 1:1, 0,2% trifluorsirćetna kiselina, 1% voda; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,22 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.61-1.82 (m, 4H).1.87 - 1.95 (m, 2H), 1.95 - 2.10 (m, 2H), 2.56 - 2.72 (m, 2H), 3.22 - 3.28 (m, 1H), 3.33 - 3.39 (m, 1H), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.76 (dd, 1H), 5.00 (s, 2H), 7.91 (d, 2H), 8.64 (s, 1H).
Primer 86
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1308]
[1309] (5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat) (100 mg, 276 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (136 mg, 359 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (47,6 mg, 331 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 14,0 mg (12% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.46), -0.008 (3.79), 0.008 (3.46),
0.146 (0.44), 1.670 (1.08), 1.680 (1.01), 1.694 (0.93), 1.728 (1.34), 1.980 (1.24),
1.995 (1.30), 2.004 (1.45), 2.028 (1.05), 2.038 (1.04), 2.046 (1.10), 2.054 (1.05),
2.063 (0.94), 2.073 (0.88), 2.082 (0.80), 2.089 (0.70), 2.323 (0.61), 2.327 (0.83),
2.332 (0.58), 2.366 (0.83), 2.381 (0.94), 2.391 (0.67), 2.411 (1.10), 2.425 (1.04),
2.452 (0.87), 2.523 (3.60), 2.566 (2.83), 2.576 (2.48), 2.591 (2.76), 2.608 (2.96),
2.619 (1.40), 2.639 (0.57), 2.650 (0.87), 2.665 (0.91), 2.669 (0.93), 2.710 (0.53),
3.531 (1.18), 3.538 (1.34), 3.549 (1.92), 3.559 (2.12), 3.567 (1.21), 3.578 (1.04),
3.668 (1.24), 3.703 (1.42), 3.742 (0.78), 3.764 (0.56), 3.775 (1.64), 3.790 (0.88),
3.808 (2.65), 3.826 (0.68), 3.891 (0.67), 3.909 (1.41), 3.928 (0.77), 3.935 (1.02),
3.954 (0.48), 3.962 (0.46), 3.991 (0.83), 4.005 (0.44), 4.019 (0.60), 4.033 (0.77),
4.061 (0.47), 4.145 (0.53), 4.176 (0.75), 4.201 (0.77), 4.755 (1.15), 4.765 (1.38),
4.771 (1.58), 4.780 (1.20), 4.824 (16.00), 4.838 (1.79), 4.844 (1.77), 4.853 (1.32),
7.220 (1.30), 7.225 (1.47), 7.232 (1.49), 7.241 (2.05), 7.246 (2.01), 7.253 (1.84),
7.258 (1.82), 7.373 (3.89), 7.396 (5.08), 7.418 (3.09), 7.429 (2.86), 7.434 (2.69),
7.447 (2.88), 7.452 (2.65).
Primer 87
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1310]
[1311] (5RS)-3-okso-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (100 mg, 227 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (112 mg, 295 µmol) i trietilamin (160 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (39,0 mg, 272 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,0 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.52), -0.008 (13.87), 0.008
(12.34), 0.146 (1.37), 1.708 (13.94), 1.996 (2.59), 2.327 (4.65), 2.366 (3.20), 2.523
(15.54), 2.565 (4.80), 2.584 (4.19), 2.598 (3.73), 2.669 (16.00), 2.702 (5.18), 2.718
(5.79), 2.734 (3.05), 3.530 (2.29), 3.554 (3.20), 3.668 (1.75), 3.702 (2.06), 3.736
(1.75), 3.769 (2.13), 3.805 (3.20), 3.910 (1.68), 3.988 (1.37), 4.171 (1.22), 4.685
(5.26), 4.700 (5.64), 4.729 (7.54), 4.740 (8.46), 4.821 (1.83), 6.843 (2.67), 6.860
(3.43), 6.916 (8.15), 6.933 (3.58), 6.979 (4.72), 6.988 (4.88), 7.009 (4.19), 7.028
(4.11), 7.047 (1.60), 7.069 (1.07).
Primer 88
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1312]
[1313] (5RS)-3-okso-2-(5,6,7,8-tetrahidronaftalin-2-ilmetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (100 mg, 227 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (112 mg, 295 µmol) i trietilamin (160 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (19,3 mg, 272 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 39,0 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,60 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.77), -0.008 (6.64), 0.008 (5.97),
0.146 (0.77), 1.700 (12.96), 1.708 (16.00), 1.715 (12.30), 1.754 (4.68), 1.772 (7.72),
1.789 (11.63), 1.806 (8.90), 1.822 (2.52), 1.892 (2.73), 1.908 (8.28), 1.925 (10.60),
1.942 (6.89), 1.959 (3.04), 1.983 (3.04), 1.998 (3.14), 2.014 (2.52), 2.025 (2.57),
2.041 (1.90), 2.050 (1.54), 2.061 (0.93), 2.322 (1.49), 2.327 (2.01), 2.332 (1.49),
2.366 (1.23), 2.518 (10.19), 2.523 (9.67), 2.563 (3.24), 2.578 (3.81), 2.590 (4.01),
2.604 (2.11), 2.620 (1.65), 2.632 (1.75), 2.669 (14.05), 2.686 (8.90), 2.703 (6.02),
2.718 (6.07), 2.734 (3.24), 2.865 (1.49), 3.225 (1.13), 3.243 (2.32), 3.255 (2.88),
3.272 (4.12), 3.290 (3.19), 3.339 (5.20), 3.356 (2.78), 3.368 (2.83), 3.386 (1.39),
3.435 (1.65), 3.453 (3.55), 3.460 (2.62), 3.477 (4.48), 3.494 (1.95), 3.593 (1.90),
3.609 (4.12), 3.626 (2.37), 3.634 (3.14), 3.651 (1.49), 4.639 (1.29), 4.677 (6.33),
4.695 (6.28), 4.712 (2.62), 4.722 (10.08), 4.733 (11.37), 4.744 (3.60), 4.753 (2.47),
4.772 (1.18), 6.846 (2.78), 6.862 (3.40), 6.917 (7.97), 6.932 (3.91), 6.969 (2.11),
6.978 (5.09), 6.984 (5.30), 6.998 (2.73), 7.008 (4.32), 7.027 (4.78), 7.045 (1.59).
Primer 89
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1314]
[1315] (5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (100 mg, 227 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (112 mg, 295 µmol) i trietilamin (160 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (19,3 mg, 272 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,0 mg (59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.92), -0.008 (8.02), 0.008 (7.59),
1.716 (5.33), 1.754 (3.14), 1.773 (9.33), 1.790 (15.97), 1.807 (12.47), 1.824 (3.73),
1.892 (3.99), 1.909 (11.06), 1.925 (13.71), 1.942 (8.61), 2.001 (6.15), 2.028 (3.60),
2.327 (1.80), 2.365 (1.24), 2.571 (4.25), 2.588 (4.06), 2.599 (7.26), 2.611 (4.32),
2.641 (3.21), 2.669 (1.96), 3.226 (2.19), 3.243 (4.71), 3.256 (4.38), 3.272 (8.18),
3.290 (4.32), 3.341 (8.44), 3.358 (4.84), 3.370 (4.74), 3.388 (2.32), 3.435 (2.39),
3.453 (5.37), 3.478 (6.94), 3.495 (2.98), 3.589 (3.11), 3.606 (5.92), 3.631 (4.84),
3.647 (2.32), 4.732 (5.89), 4.747 (7.69), 4.756 (5.73), 4.785 (2.65), 4.825 (16.00),
4.840 (15.90), 4.880 (2.81), 7.259 (3.34), 7.282 (4.22), 7.302 (3.96), 7.325 (3.08),
7.538 (3.66), 7.555 (3.89), 7.565 (5.04), 7.580 (5.24), 7.589 (3.96), 7.606 (3.37).
Primer 90
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1316]
[1317] (5RS)-2-[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (170 mg, čistoća 96%, 417 µmol) dodata je u THF (3,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (206 mg, 542 µmol) i trietilamin (290 µl, 2,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (71,9 mg, 500 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,00 mg (4% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.35), 0.008 (1.13), 1.700 (0.76),
1.982 (0.52), 2.044 (0.44), 2.429 (0.43), 2.566 (1.33), 2.580 (1.08), 3.529 (0.54),
3.549 (0.71), 3.663 (0.43), 3.696 (0.54), 3.730 (0.41), 3.774 (16.00), 3.797 (0.64),
3.908 (0.48), 4.693 (3.32), 4.702 (3.80), 4.741 (0.50), 4.783 (0.41), 4.798 (0.51),
4.807 (0.42), 6.032 (2.54), 6.038 (2.55), 7.571 (2.52), 7.577 (2.49).
Primer 91
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1318]
[1319] (5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina - trifluorsirćetna kiselina (racemat) (100 mg, 227 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (112 mg, 295 µmol) i trietilamin (160 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (39,0 mg, 272 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,0 mg (čistoća 94%, 25% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.95), 0.008 (5.95), 1.727 (3.05),
2.007 (3.36), 2.327 (3.00), 2.366 (1.95), 2.560 (5.45), 2.570 (6.68), 2.586 (6.00),
2.604 (6.32), 2.669 (2.68), 3.536 (3.14), 3.556 (4.45), 3.669 (2.59), 3.702 (3.18),
3.738 (2.64), 3.771 (3.36), 3.805 (4.82), 3.888 (1.50), 3.907 (3.09), 3.933 (2.23),
3.989 (1.86), 4.033 (1.91), 4.175 (1.64), 4.201 (1.68), 4.765 (3.45), 4.791 (2.09),
4.831 (15.50), 4.845 (16.00), 4.885 (2.36), 7.263 (2.77), 7.286 (3.82), 7.303 (3.73),
7.330 (3.05), 7.540 (2.95), 7.557 (3.59), 7.564 (4.77), 7.582 (4.55), 7.591 (3.41),
7.608 (3.18).
Primer 92
(5RS)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1320]
[1321] (5RS)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (44,6 mg, 147 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (72,4 mg, 191 µmol) i trietilamin (61 µl, 440 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (12,5 mg, 176 µmol) i reakciona smeša je mešana 48 h na sobnoj temperaturi.
Ponovo su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (72,4 mg, 191 µmol), trietilamin (61 µl, 440 µmol) i pirolidin (12,5 mg, 176 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 12,7 mg (24% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 358 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.07), 0.008 (1.18), 1.693 (0.72),
1.705 (0.80), 1.715 (0.62), 1.771 (1.14), 1.789 (2.00), 1.806 (1.55), 1.822 (0.43),
1.891 (0.57), 1.908 (1.48), 1.924 (1.84), 1.941 (1.24), 1.960 (0.57), 1.973 (0.63),
1.985 (0.59), 2.001 (0.43), 2.016 (0.51), 2.523 (1.70), 2.571 (0.63), 2.583 (1.01),
2.595 (0.58), 2.624 (0.41), 2.669 (0.40), 2.865 (1.35), 3.239 (0.63), 3.252 (0.63),
3.269 (1.20), 3.286 (1.14), 3.340 (1.20), 3.352 (0.55), 3.357 (0.67), 3.369 (0.68),
3.449 (0.71), 3.457 (0.53), 3.466 (0.43), 3.474 (0.86), 3.589 (0.42), 3.605 (0.82),
3.614 (0.43), 3.622 (0.47), 3.630 (0.64), 3.826 (16.00), 4.712 (0.78), 4.721 (0.89),
4.727 (1.04), 4.736 (0.82), 4.760 (5.47), 6.783 (1.59), 6.804 (1.70), 7.552 (1.12),
7.558 (1.13), 7.573 (1.08), 7.580 (1.07), 8.050 (1.33), 8.055 (1.26).
Primer 93
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1322]
[1323] (5RS)-3-okso-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (55,0 mg, 161 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (79,4 mg, 209 µmol) i trietilamin (67 µl, 480 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (13,7 mg, 193 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,0 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt = 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.19), 0.008 (1.87), 1.681 (1.14),
1.693 (1.55), 1.707 (2.19), 1.718 (3.14), 1.731 (3.80), 1.741 (3.09), 1.755 (2.58),
1.773 (5.88), 1.790 (9.64), 1.807 (7.28), 1.824 (2.17), 1.894 (2.32), 1.910 (6.68),
1.927 (8.29), 1.944 (4.94), 1.962 (1.50), 1.974 (1.07), 1.986 (1.05), 2.000 (1.63),
2.010 (3.01), 2.022 (3.35), 2.034 (2.19), 2.050 (2.32), 2.060 (1.68), 2.067 (1.61),
2.075 (1.61), 2.085 (0.90), 2.096 (0.54), 2.102 (0.54), 2.111 (0.45), 2.328 (0.54),
2.366 (0.41), 2.524 (2.38), 2.559 (3.20), 2.569 (2.81), 2.583 (2.36), 2.597 (2.30),
2.609 (4.19), 2.621 (2.38), 2.639 (1.03), 2.650 (1.59), 2.664 (1.03), 2.670 (0.75),
2.710 (0.49), 2.731 (0.75), 2.865 (1.20), 2.890 (0.97), 3.232 (1.33), 3.249 (2.77),
3.261 (2.75), 3.278 (5.03), 3.296 (3.41), 3.341 (5.30), 3.353 (1.98), 3.358 (2.73),
3.370 (2.83), 3.388 (1.29), 3.445 (1.44), 3.462 (3.18), 3.470 (2.32), 3.479 (1.89),
3.487 (4.06), 3.504 (1.80), 3.597 (1.87), 3.614 (3.82), 3.622 (1.93), 3.630 (2.17),
3.638 (2.94), 3.655 (1.33), 4.764 (3.44), 4.773 (3.82), 4.779 (4.51), 4.788 (3.39),
4.992 (0.86), 5.034 (15.89), 5.037 (16.00), 5.079 (0.88), 7.555 (8.10), 7.701 (4.21),
7.713 (4.40), 8.813 (5.84), 8.826 (5.80).
[1324] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 94
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1325]
[1326] (5RS)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (45,0 mg, 131 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (64,8 mg, 170 µmol) i trietilamin (55 µl, 390 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (11,2 mg, 157 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 31,4 mg (čistoća 100%, 60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.47), 0.008 (2.16), 1.699 (1.16),
1.712 (1.27), 1.722 (1.22), 1.757 (2.55), 1.776 (4.88), 1.793 (7.57), 1.810 (5.49),
1.827 (1.56), 1.894 (1.25), 1.911 (3.41), 1.927 (4.31), 1.943 (2.78), 1.960 (0.86),
2.005 (0.61), 2.017 (0.64), 2.030 (1.24), 2.043 (2.93), 2.053 (3.15), 2.068 (1.74),
2.079 (1.22), 2.086 (1.16), 2.094 (1.11), 2.327 (0.73), 2.367 (0.49), 2.523 (2.15),
2.571 (2.36), 2.586 (2.09), 2.597 (2.01), 2.611 (1.69), 2.625 (1.66), 2.636 (2.90),
2.649 (1.72), 2.666 (1.24), 2.679 (1.36), 2.690 (0.68), 2.710 (0.54), 3.242 (1.01),
3.259 (1.98), 3.272 (2.00), 3.288 (3.53), 3.335 (1.77), 3.353 (3.53), 3.364 (1.28),
3.370 (1.84), 3.382 (1.99), 3.400 (0.93), 3.453 (1.01), 3.471 (2.24), 3.478 (1.66),
3.488 (1.33), 3.496 (2.90), 3.513 (1.27), 3.599 (1.36), 3.615 (2.51), 3.624 (1.36),
3.633 (1.62), 3.641 (1.96), 3.657 (0.95), 4.785 (2.52), 4.794 (2.77), 4.799 (3.42),
4.808 (2.43), 5.035 (0.44), 5.080 (16.00), 5.125 (0.42), 7.480 (5.36), 7.493 (5.54),
9.047 (6.50), 9.060 (6.45).
[1327] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 95
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1328]
[1329] (5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina hidrohlorid (racemat) (193 mg, 532 µmol) dodata je u THF (5,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (263 mg, 692 µmol) i trietilamin (300 µl, 2,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (70,0 mg, 639 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 63,4 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.65), 0.008 (1.43), 1.677 (2.01),
1.695 (2.51), 1.709 (2.94), 1.718 (3.05), 1.902 (1.44), 1.927 (2.11), 1.938 (3.11),
1.994 (2.08), 2.004 (2.25), 2.016 (2.08), 2.073 (3.94), 2.327 (0.59), 2.366 (0.45),
2.572 (2.33), 2.580 (3.06), 2.592 (5.37), 2.605 (2.83), 2.622 (1.29), 2.634 (1.98),
2.646 (0.91), 2.669 (0.64), 2.690 (0.67), 2.710 (0.49), 3.596 (1.70), 3.603 (1.93),
3.621 (2.05), 3.629 (2.25), 3.638 (1.86), 3.649 (1.84), 3.664 (1.78), 3.674 (1.75),
3.921 (2.08), 3.932 (2.28), 3.952 (0.58), 4.021 (3.54), 4.045 (3.84), 4.055 (2.17),
4.062 (1.96), 4.105 (1.41), 4.120 (1.77), 4.131 (1.50), 4.146 (1.38), 4.339 (1.43),
4.357 (2.42), 4.378 (1.68), 4.473 (1.22), 4.485 (2.84), 4.502 (5.81), 4.520 (8.36),
4.531 (6.20), 4.546 (2.47), 4.818 (15.96), 4.823 (16.00), 5.789 (3.64), 5.802 (7.82),
5.817 (4.83), 7.223 (2.47), 7.229 (2.57), 7.244 (3.60), 7.250 (3.33), 7.256 (3.17),
7.367 (3.18), 7.371 (3.21), 7.390 (5.20), 7.411 (2.59), 7.416 (2.59), 7.434 (4.30),
7.452 (4.27).
Primer 96
(5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1330]
[1331] (5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (60,0 mg, 175 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (86,6 mg, 228 µmol) i trietilamin (73 µl, 530 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (23,5 mg, 210 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,0 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.47), -0.008 (4.45), 0.008 (3.73),
0.146 (0.42), 1.666 (1.19), 1.675 (1.54), 1.690 (1.68), 1.700 (2.17), 1.715 (2.43),
1.968 (1.63), 2.030 (1.47), 2.073 (1.68), 2.366 (0.79), 2.518 (5.13), 2.523 (4.20),
2.560 (2.38), 2.586 (3.13), 2.599 (4.31), 2.613 (2.17), 2.628 (0.84), 2.641 (1.42),
2.655 (0.68), 2.710 (0.84), 3.901 (0.56), 3.930 (1.12), 3.963 (1.21), 3.991 (1.12),
4.026 (0.68), 4.160 (0.49), 4.175 (0.54), 4.228 (1.05), 4.244 (0.98), 4.256 (0.93),
4.277 (1.24), 4.297 (1.10), 4.327 (0.82), 4.366 (0.91), 4.399 (0.72), 4.438 (0.51),
4.460 (0.70), 4.509 (0.54), 4.524 (0.68), 4.557 (2.92), 4.568 (4.36), 4.581 (2.92),
4.638 (0.47), 4.650 (0.56), 4.687 (0.54), 4.704 (0.56), 5.011 (11.69), 5.353 (0.77),
5.408 (0.72), 5.496 (0.75), 5.551 (0.72), 7.912 (16.00), 8.649 (6.27).
Primer 97
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1332]
[1333] (5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (55,0 mg, 169 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (83,5 mg, 220 µmol) i trietilamin (71 µl, 510 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (25,0 mg, 203 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 66,0 mg (97% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.74), 0.008 (2.46), 1.668 (1.27),
1.681 (1.28), 1.731 (2.93), 1.741 (2.61), 1.754 (2.32), 1.763 (2.04), 1.827 (0.60),
1.839 (0.73), 1.849 (1.61), 1.860 (1.98), 1.872 (1.68), 1.882 (2.15), 1.892 (1.71),
1.904 (1.25), 1.972 (2.44), 1.983 (2.94), 1.994 (2.98), 2.005 (2.63), 2.015 (2.47),
2.023 (2.13), 2.029 (2.09), 2.038 (1.82), 2.050 (1.44), 2.058 (1.57), 2.066 (1.43),
2.073 (5.11), 2.086 (0.54), 2.327 (0.61), 2.366 (0.49), 2.523 (3.02), 2.571 (1.77),
2.580 (1.19), 2.593 (2.23), 2.604 (3.72), 2.616 (2.00), 2.634 (1.06), 2.646 (1.52),
2.660 (0.87), 2.669 (0.81), 2.710 (0.61), 2.731 (3.89), 2.877 (0.63), 2.890 (5.16),
3.199 (1.00), 3.231 (1.38), 3.298 (3.79), 3.339 (2.01), 3.375 (2.71), 3.397 (1.82),
3.415 (0.81), 3.432 (0.70), 3.442 (0.77), 3.454 (1.37), 3.461 (1.36), 3.470 (0.68),
3.483 (1.53), 3.520 (0.41), 3.545 (1.20), 3.562 (1.93), 3.569 (2.22), 3.585 (1.42),
3.640 (1.08), 3.651 (1.61), 3.667 (1.13), 3.678 (1.28), 3.734 (0.54), 3.754 (0.82),
3.774 (0.43), 4.268 (1.82), 4.362 (1.80), 4.687 (0.98), 4.695 (1.13), 4.702 (1.23),
4.710 (0.99), 4.738 (2.01), 4.745 (1.57), 4.794 (1.01), 4.817 (16.00), 4.955 (4.61),
4.964 (4.28), 5.073 (3.17), 5.075 (3.09), 5.082 (3.27), 7.222 (2.22), 7.227 (2.23),
7.238 (2.55), 7.243 (3.00), 7.249 (2.85), 7.255 (2.74), 7.362 (0.47), 7.371 (4.52),
7.394 (6.84), 7.406 (0.56), 7.416 (3.64), 7.430 (3.15), 7.448 (3.23), 7.953 (0.53).
[1334] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 98
(5RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1335]
[1336] (5RS)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (55,0 mg, 161 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (79,7 mg, 209 µmol) i trietilamin (67 µl, 480 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (21,2 mg, 193 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,90 mg (12% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.666 (2.27), 1.676 (2.26), 1.719 (3.03),
1.920 (1.91), 1.946 (3.45), 2.013 (2.68), 2.020 (2.73), 2.072 (11.94), 2.588 (2.90),
2.597 (5.00), 2.606 (2.91), 2.621 (1.59), 2.631 (2.38), 2.690 (0.66), 3.608 (2.01),
3.623 (2.15), 3.629 (2.19), 3.644 (1.80), 3.652 (1.89), 3.663 (1.89), 3.672 (1.75),
3.928 (2.17), 3.938 (2.46), 3.953 (0.71), 4.029 (3.39), 4.040 (3.81), 4.047 (4.10),
4.059 (2.67), 4.109 (1.41), 4.122 (1.81), 4.130 (1.69), 4.141 (1.49), 4.343 (1.52),
4.358 (2.55), 4.374 (1.66), 4.404 (0.44), 4.495 (3.28), 4.510 (4.92), 4.521 (7.10),
4.533 (5.97), 4.541 (4.89), 4.925 (15.15), 4.931 (16.00), 5.817 (8.02), 7.510 (3.60),
7.524 (5.29), 7.574 (2.93), 7.589 (5.35), 7.604 (3.34), 7.623 (9.33), 7.649 (6.87),
7.664 (4.72).
[1337] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 99
(5RS)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1338]
[1339] (5RS)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (55,0 mg, 161 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (79,7 mg, 209 µmol) i trietilamin (67 µl, 480 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (23,9 mg, 193 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 10,9 mg (16% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,26 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (2.44), 0.006 (1.71), 1.677 (1.35),
1.733 (2.92), 1.753 (2.40), 1.835 (0.67), 1.845 (0.79), 1.853 (1.67), 1.862 (2.30),
1.871 (1.79), 1.879 (2.36), 1.888 (1.98), 1.958 (1.81), 1.967 (2.10), 1.976 (2.36),
1.985 (2.86), 1.994 (2.94), 2.003 (2.57), 2.010 (2.04), 2.024 (2.04), 2.031 (2.30),
2.044 (1.74), 2.053 (1.72), 2.060 (1.78), 2.066 (1.45), 2.072 (2.04), 2.087 (0.58),
2.362 (0.62), 2.519 (2.96), 2.563 (1.74), 2.574 (0.72), 2.608 (3.40), 2.640 (1.92),
2.689 (0.42), 2.877 (0.45), 3.205 (1.08), 3.230 (1.45), 3.353 (1.74), 3.369 (2.56),
3.375 (2.51), 3.393 (2.14), 3.400 (1.78), 3.412 (0.69), 3.436 (0.87), 3.444 (0.78),
3.454 (1.01), 3.461 (1.82), 3.484 (1.52), 3.530 (0.41), 3.550 (1.21), 3.563 (2.45),
3.571 (2.19), 3.583 (1.63), 3.647 (1.29), 3.655 (1.90), 3.668 (1.25), 3.677 (1.47),
3.741 (0.57), 3.755 (0.87), 3.772 (0.49), 4.266 (2.09), 4.366 (2.09), 4.392 (0.46),
4.403 (0.66), 4.699 (1.20), 4.705 (1.32), 4.711 (1.42), 4.717 (1.14), 4.742 (1.79),
4.748 (2.20), 4.754 (1.94), 4.806 (0.98), 4.813 (1.09), 4.818 (1.14), 4.825 (0.90),
4.896 (0.42), 4.923 (16.00), 4.968 (1.22), 5.089 (1.29), 7.218 (0.52), 7.507 (2.86),
7.523 (4.44), 7.540 (0.69), 7.574 (3.29), 7.590 (6.42), 7.605 (3.61), 7.621 (6.90),
7.647 (6.52), 7.663 (4.44).
[1340] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 100
(5RS)-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1341]
[1342] (5RS)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (60,0 mg, 175 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (86,6 mg, 228 µmol) i trietilamin (73 µl, 530 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (26,4 mg, 210 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 29,0 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.59), -0.008 (5.76), 0.008 (4.91),
0.146 (0.59), 1.658 (0.69), 1.736 (1.64), 2.005 (1.91), 2.016 (1.59), 2.067 (1.00),
2.103 (1.54), 2.140 (1.08), 2.270 (0.80), 2.327 (0.74), 2.366 (0.49), 2.518 (3.66),
2.523 (2.83), 2.571 (1.61), 2.599 (1.44), 2.611 (2.42), 2.623 (1.49), 2.653 (0.91),
2.669 (1.07), 2.710 (0.54), 3.369 (0.81), 3.387 (0.58), 3.398 (0.81), 3.524 (1.13),
3.548 (0.97), 3.573 (0.86), 3.600 (1.61), 3.636 (1.07), 3.659 (1.08), 3.681 (1.00),
3.702 (0.56), 3.726 (0.56), 3.747 (1.08), 3.775 (0.80), 3.788 (0.80), 3.856 (1.07),
3.941 (0.74), 4.009 (0.41), 4.694 (0.52), 4.703 (0.64), 4.710 (0.68), 4.719 (0.54),
4.752 (0.69), 4.760 (0.78), 4.767 (0.88), 4.776 (0.66), 4.827 (0.61), 4.839 (1.02),
4.850 (0.58), 4.861 (0.59), 4.876 (0.80), 4.885 (0.61), 5.008 (10.07), 5.261 (0.76),
5.349 (0.49), 5.392 (0.78), 5.482 (0.47), 5.512 (0.41), 7.907 (9.08), 7.911 (16.00),
8.642 (5.57).
Primer 101
(5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1343]
[1344] (5RS)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (90,0 mg, 250 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (124 mg, 326 µmol) i trietilamin (100 µl, 750 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (37,1 mg, 301 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 34,0 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.32), -0.008 (12.62), 0.008
(10.09), 0.146 (1.26), 1.676 (1.38), 1.730 (2.98), 1.741 (2.71), 1.826 (0.65), 1.849
(1.75), 1.859 (2.09), 1.871 (1.82), 1.881 (2.34), 1.961 (2.00), 1.971 (2.58), 1.984
(3.11), 1.995 (3.23), 2.005 (3.02), 2.017 (2.65), 2.037 (1.94), 2.056 (1.60), 2.065
(1.42), 2.328 (1.54), 2.366 (0.98), 2.524 (6.71), 2.569 (2.18), 2.603 (3.88), 2.644
(1.60), 2.670 (1.85), 2.710 (0.98), 3.197 (1.05), 3.228 (1.51), 3.338 (2.77), 3.371
(3.54), 3.390 (2.34), 3.426 (0.80), 3.457 (1.72), 3.478 (1.45), 3.545 (1.29), 3.568
(2.28), 3.583 (1.54), 3.639 (1.14), 3.650 (1.72), 3.677 (1.32), 3.706 (1.51), 3.734
(0.62), 3.753 (0.89), 4.266 (2.03), 4.361 (1.97), 4.690 (1.05), 4.698 (1.20), 4.705
(1.29), 4.713 (1.08), 4.742 (2.06), 4.798 (0.92), 4.813 (1.29), 4.821 (0.98), 4.903
(16.00), 4.965 (1.29), 5.074 (1.72), 7.478 (2.49), 7.500 (4.77), 7.526 (4.46), 7.562
(2.74), 7.575 (3.29), 7.671 (3.72), 7.690 (3.82).
Primer 102
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1345]
[1346] (5RS)-3-okso-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (93,0 mg, 295 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (146 mg, 383 µmol) i trietilamin (120 µl, 880 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (30 µl, 350 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 h na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 55,0 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,59 min; MS (ESIpos): m/z = 369 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.95), 0.008 (0.80), 1.661 (0.42),
1.673 (0.74), 1.687 (1.21), 1.697 (1.43), 1.710 (1.15), 1.754 (0.47), 1.772 (1.91),
1.790 (3.37), 1.807 (2.63), 1.823 (0.77), 1.892 (0.79), 1.909 (2.45), 1.926 (3.23),
1.942 (2.13), 1.961 (0.95), 1.974 (1.22), 1.985 (1.53), 1.996 (1.03), 2.010 (0.92),
2.020 (0.64), 2.026 (0.58), 2.036 (0.58), 2.046 (0.40), 2.140 (15.41), 2.144 (16.00),
2.205 (14.00), 2.457 (0.40), 2.473 (0.58), 2.523 (1.61), 2.560 (0.86), 2.571 (1.56),
2.583 (0.85), 2.613 (0.63), 3.224 (0.46), 3.240 (0.99), 3.253 (0.98), 3.270 (1.74),
3.287 (0.91), 3.321 (1.38), 3.340 (1.90), 3.352 (0.69), 3.357 (0.94), 3.369 (1.05),
3.387 (0.48), 3.433 (0.53), 3.450 (1.15), 3.458 (0.84), 3.468 (0.69), 3.475 (1.45),
3.492 (0.64), 3.591 (0.67), 3.608 (1.40), 3.616 (0.70), 3.625 (0.78), 3.633 (1.09),
3.649 (0.49), 4.684 (8.43), 4.716 (1.31), 4.725 (1.52), 4.731 (1.73), 4.740 (1.26),
6.890 (4.26), 6.914 (3.98).
[1347] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-(2,4,5-trimetilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 103
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1348]
[1349] (5RS)-3-okso-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (90,0 mg, čistoća 90%, 255 µmol) dodata je u DMF (1,9 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (126 mg, 332 µmol) i trietilamin (110 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (26 µl, 310 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3oksid heksafluorfosfat (97 mg, 255 µmol) i trietilamin (36 µl, 255 µmol) i reakciona smeša je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 57,0 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 371 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.649 (0.46), 1.662 (0.81), 1.675 (1.31),
1.685 (1.56), 1.699 (1.24), 1.756 (0.44), 1.773 (1.80), 1.790 (3.21), 1.807 (2.55),
1.824 (0.78), 1.893 (0.77), 1.909 (2.39), 1.926 (3.22), 1.943 (2.22), 1.959 (1.07),
1.969 (1.22), 1.981 (1.37), 1.993 (0.94), 2.007 (0.89), 2.018 (0.64), 2.032 (0.58),
2.384 (14.92), 2.409 (15.08), 2.417 (16.00), 2.450 (0.52), 2.458 (0.45), 2.476 (1.25),
2.574 (0.48), 2.586 (0.61), 3.222 (0.45), 3.239 (0.92), 3.252 (0.96), 3.269 (1.63),
3.286 (0.80), 3.336 (1.71), 3.354 (0.89), 3.366 (0.96), 3.383 (0.44), 3.434 (0.50),
3.451 (1.10), 3.458 (0.82), 3.476 (1.38), 3.493 (0.63), 3.594 (0.64), 3.611 (1.35),
3.619 (0.70), 3.628 (0.78), 3.636 (1.06), 3.652 (0.47), 4.717 (1.21), 4.726 (1.43),
4.732 (1.62), 4.740 (1.19), 4.868 (9.21).
Primer 104
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1350]
[1351] (5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-[(3,5,6-trimetilpirazin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 46 mg rastvoreno u 4 ml etanola; injekciona zapremina: 0,35 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AD-H 5µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol: izokratski 60% etanol, protok: 25 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 19 mg enantiomera 2 (čistoća 92%), koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1352] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,11 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralcel<®>AD-3 3 µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 1:1, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 371 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.63-1.68 (m, 2H), 1.79 (quin, 2H), 1.86 -2.07 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 2.41 (d, 6H), 2.44 - 2.61 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.14 - 3.29 (m, 1H), 3.33 - 3.39 (m, 1H), 3.41 - 3.52 (m, 1H), 3.57 - 3.67 (m, 1H), 4.73 (dd, 1H), 4.87 (s, 2H).
Primer 105
5(RS)-5-metil-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1353]
[1354] (5RS)-5-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (30,0 mg, 99,6 µmol) dodata je u THF (1,0 m) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (49,2 mg, 129 µmol) i trietilamin (42 µl, 300 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (10 µl, 120 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,4 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.46), 0.008 (0.45), 1.155 (0.41),
1.173 (0.84), 1.192 (0.44), 1.202 (0.85), 1.218 (0.84), 1.563 (11.36), 1.715 (1.01),
1.754 (0.66), 1.767 (0.63), 1.781 (0.47), 1.817 (1.45), 1.845 (1.15), 1.958 (0.59),
1.986 (0.75), 2.269 (11.71), 2.599 (0.63), 2.611 (0.73), 2.624 (1.11), 2.635 (1.32),
3.237 (0.41), 4.664 (1.34), 4.702 (2.54), 4.780 (2.48), 4.818 (1.34), 7.127 (16.00).
Primer 106
(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1356] Metil-(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilat (enantiomer 1) (80,0 mg, 205 µmol) dodat je u THF (1,8 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (101 mg, 266 µmol) i trietilamin (86 µl, 610 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (21 µl, 250 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 h na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 4,20 mg (5% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.19), -0.008 (10.74), 0.008 (9.06),
0.146 (1.10), 1.480 (0.71), 1.701 (6.28), 1.714 (8.22), 1.732 (5.79), 1.744 (2.92),
1.753 (2.52), 1.771 (8.44), 1.788 (14.81), 1.805 (11.31), 1.822 (3.31), 1.891 (3.54),
1.908 (10.25), 1.924 (12.95), 1.941 (8.27), 1.958 (3.80), 1.973 (2.70), 1.984 (4.77),
1.995 (4.33), 2.006 (3.23), 2.021 (3.54), 2.042 (3.23), 2.057 (2.92), 2.078 (1.41),
2.327 (2.43), 2.366 (1.81), 2.523 (8.75), 2.566 (4.15), 2.579 (7.65), 2.591 (3.93),
2.609 (1.81), 2.620 (2.70), 2.634 (1.24), 2.670 (2.70), 2.710 (1.77), 3.229 (2.12),
3.246 (4.33), 3.259 (4.51), 3.276 (8.18), 3.337 (8.75), 3.355 (4.33), 3.367 (4.60),
3.384 (2.08), 3.442 (2.34), 3.460 (4.99), 3.467 (3.62), 3.484 (6.32), 3.501 (2.74),
3.595 (2.87), 3.612 (5.88), 3.620 (3.05), 3.629 (3.49), 3.637 (4.69), 3.654 (2.12),
4.735 (5.44), 4.745 (6.32), 4.750 (7.25), 4.760 (5.35), 5.063 (4.82), 5.104 (16.00),
5.134 (15.43), 5.175 (4.64), 8.486 (10.96), 8.489 (11.27), 8.905 (11.09).
[1357] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 107
(5RS)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1358]
[1359] (5RS)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 265 µmol) dodata je u THF (3,8 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (131 mg, 345 µmol) i trietilamin (110 µl, 800 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (27 µl, 320 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 h na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 65,0 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.42), 0.008 (2.12), 1.711 (2.02),
1.724 (2.54), 1.735 (2.04), 1.755 (1.54), 1.772 (4.25), 1.789 (6.89), 1.806 (5.25),
1.823 (1.54), 1.891 (1.57), 1.908 (4.70), 1.925 (5.85), 1.942 (3.54), 1.959 (1.16),
2.005 (2.17), 2.016 (2.70), 2.026 (1.79), 2.043 (1.62), 2.052 (1.21), 2.067 (1.15),
2.328 (0.72), 2.366 (0.47), 2.560 (2.01), 2.575 (1.77), 2.590 (1.68), 2.602 (2.96),
2.614 (1.68), 2.632 (0.81), 2.643 (1.18), 2.670 (0.81), 2.690 (1.16), 2.710 (0.47),
2.731 (0.66), 2.890 (0.73), 3.229 (0.83), 3.246 (1.96), 3.258 (1.95), 3.275 (3.58),
3.293 (1.92), 3.335 (3.62), 3.353 (1.88), 3.365 (1.97), 3.383 (0.88), 3.441 (1.04),
3.458 (2.32), 3.465 (1.61), 3.482 (2.93), 3.500 (1.30), 3.593 (1.31), 3.609 (2.74),
3.626 (1.57), 3.634 (2.05), 3.650 (0.96), 4.755 (2.49), 4.764 (2.73), 4.770 (3.18),
4.779 (2.43), 4.992 (0.41), 5.034 (16.00), 5.076 (0.45), 7.719 (10.56), 8.902 (9.80).
[1360] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 108
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1361]
[1362] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 1,3-tiazolidin hidrohlorid (39,3 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,7 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 359 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.44), 1.647 (0.49), 1.721 (0.75),
1.731 (0.71), 1.952 (0.40), 1.978 (0.57), 1.987 (0.92), 2.039 (0.54), 2.049 (0.59),
2.059 (0.57), 2.272 (16.00), 2.567 (0.97), 2.576 (0.85), 2.588 (1.42), 2.600 (0.79),
2.630 (0.50), 2.999 (0.74), 3.015 (1.56), 3.031 (0.89), 3.128 (1.06), 3.144 (2.19),
3.159 (1.12), 3.624 (0.43), 3.639 (0.56), 3.688 (0.57), 3.768 (0.50), 3.779 (0.46),
3.794 (0.63), 3.941 (0.62), 3.955 (0.43), 3.968 (0.47), 4.367 (0.97), 4.392 (1.26),
4.551 (1.28), 4.577 (1.04), 4.609 (0.73), 4.632 (0.88), 4.749 (6.74), 4.801 (0.89),
4.824 (0.72), 4.845 (0.56), 4.854 (0.68), 4.860 (0.73), 4.868 (0.55), 4.928 (0.45),
4.942 (0.57), 7.101 (0.90), 7.108 (0.56), 7.123 (12.99), 7.125 (12.62), 7.147 (0.89).
[1363] (5S)-konfiguracija je dodeljena primeru 108 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1364]
Primer 109
(2S)-1-{[(5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-karbonitril (enantiomer 1)
[1365]
[1366] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril hidrohlorid (41,5 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,4 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.03), 0.008 (0.89), 1.654 (0.52),
1.769 (0.69), 2.027 (1.21), 2.042 (1.71), 2.062 (2.62), 2.078 (2.62), 2.094 (1.23),
2.104 (1.05), 2.115 (0.95), 2.136 (0.93), 2.149 (1.11), 2.159 (0.93), 2.175 (0.45),
2.185 (0.59), 2.204 (1.26), 2.224 (1.18), 2.236 (0.75), 2.244 (0.47), 2.256 (0.74),
2.273 (16.00), 2.327 (0.30), 2.366 (0.18), 2.558 (0.99), 2.569 (0.98), 2.583 (0.79),
2.603 (0.74), 2.616 (1.37), 2.627 (0.79), 2.646 (0.35), 2.658 (0.59), 2.669 (0.49),
2.709 (0.17), 3.672 (2.09), 3.688 (4.23), 3.705 (2.02), 4.749 (8.60), 4.793 (2.28),
4.803 (3.16), 4.813 (2.75), 4.824 (1.44), 7.099 (1.37), 7.120 (9.43), 7.127 (9.47),
7.148 (1.26).
[1367] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(2S)-1-{[(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-karbonitril
Primer 110
(5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1368]
[1369] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (39,3 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 56,2 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 359 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.69), 0.008 (0.65), 1.692 (0.66),
1.706 (1.32), 1.719 (1.54), 1.737 (0.99), 1.750 (0.44), 1.993 (0.51), 2.004 (0.68),
2.017 (0.58), 2.059 (0.73), 2.073 (0.83), 2.085 (0.81), 2.108 (0.79), 2.122 (0.48),
2.133 (0.55), 2.237 (0.43), 2.272 (16.00), 2.522 (1.18), 2.562 (0.69), 2.585 (1.09),
2.590 (1.13), 2.632 (0.42), 3.287 (0.45), 3.633 (1.34), 3.652 (0.99), 3.662 (0.87),
3.679 (0.60), 3.695 (0.51), 3.720 (0.55), 3.740 (0.92), 3.768 (0.67), 3.776 (0.60),
3.784 (0.65), 3.854 (1.17), 4.665 (0.61), 4.674 (0.73), 4.681 (0.78), 4.690 (0.65),
4.698 (0.71), 4.722 (0.84), 4.737 (5.72), 4.746 (3.53), 4.788 (0.47), 5.258 (0.57),
5.381 (0.72), 5.388 (0.75), 5.510 (0.42), 7.102 (0.76), 7.119 (6.24), 7.124 (13.58),
7.146 (0.84).
[1370] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 111
(5RS)-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1371]
[1372] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (39,3 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 59,0 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 359 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.25), 1.715 (0.81), 1.979 (1.46),
2.021 (0.58), 2.103 (0.66), 2.135 (0.56), 2.272 (16.00), 2.573 (1.00), 2.585 (1.71),
2.598 (0.96), 2.627 (0.61), 3.359 (0.62), 3.378 (0.56), 3.388 (0.41), 3.503 (0.60),
3.522 (1.39), 3.548 (1.10), 3.569 (0.77), 3.593 (1.76), 3.920 (0.42), 3.942 (1.16),
3.965 (0.46), 4.004 (0.46), 4.746 (7.68), 4.787 (0.75), 4.801 (1.00), 4.811 (0.63),
4.825 (0.70), 4.841 (0.86), 4.850 (0.67), 5.270 (0.57), 5.347 (0.55), 5.398 (0.56),
5.478 (0.52), 7.103 (0.74), 7.125 (14.98), 7.145 (0.79).
[1373] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 112
(5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1374]
[1375] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (100 mg, čistoća 94%, 326 µmol) sa 3-fluorazetidin hidrohloridom (43,6 mg, 391 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijumheksafluorfosfat (161 mg, 423 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 90,8 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 345 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.706 (1.68), 1.917 (0.50), 1.930 (0.68),
1.940 (0.74), 2.004 (0.68), 2.017 (0.66), 2.039 (0.48), 2.270 (16.00), 2.522 (1.08),
2.561 (1.51), 2.575 (1.97), 2.588 (0.99), 2.616 (0.62), 3.924 (0.50), 3.953 (0.54),
3.984 (0.49), 4.220 (0.45), 4.235 (0.44), 4.251 (0.59), 4.263 (0.46), 4.277 (0.45),
4.286 (0.50), 4.319 (0.49), 4.515 (1.27), 4.528 (1.95), 4.541 (1.28), 4.745 (6.20),
5.753 (0.52), 7.104 (0.55), 7.125 (15.04), 7.145 (0.54).
Primer 113
(5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1376]
[1377] (5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 69 mg rastvoreno u 4 ml etanola i 4 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IA-H 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 30 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 32,3 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 32,7 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
[1378] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,53 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IA-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 345 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.702 (1.92), 1.940 (0.86), 2.005 (0.77),
2.017 (0.75), 2.270 (15.01), 2.561 (1.75), 2.575 (2.00), 2.588 (1.08), 2.616 (0.66),
3.921 (0.57), 3.952 (0.62), 3.985 (0.55), 4.219 (0.51), 4.233 (0.50), 4.250 (0.64),
4.286 (0.57), 4.319 (0.52), 4.516 (1.38), 4.528 (2.10), 4.541 (1.39), 4.709 (0.41),
4.745 (6.36), 7.125 (16.00).
[1379] (5S)-konfiguracija je dodeljena primeru 113 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1380]
Primer 114
(5RS)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1381]
[1382] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa 3,3-difluorazetidin hidrohloridom (71,0 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 118 mg (62% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 363 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.26), 0.008 (1.16), 1.697 (0.97),
1.712 (1.59), 1.726 (1.11), 1.959 (0.43), 1.970 (0.74), 1.983 (0.68), 2.029 (0.64),
2.045 (0.67), 2.063 (0.52), 2.271 (12.02), 2.574 (0.83), 2.583 (1.39), 2.598 (0.66),
2.625 (0.40), 4.355 (0.69), 4.384 (0.70), 4.416 (0.41), 4.568 (1.00), 4.583 (1.49),
4.595 (0.96), 4.712 (0.53), 4.752 (5.61), 4.843 (0.47), 7.105 (0.42), 7.127 (16.00),
7.149 (0.40).
Primer 115
(5RS)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1383]
[1384] (5RS)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 105 mg rastvoreno u 5 ml etanola i 5 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 53,3 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 53,2 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
[1385] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,04 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiraltek<®>IB-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 363 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.65), 0.008 (0.71), 1.697 (1.02),
1.711 (1.66), 1.725 (1.18), 1.742 (0.44), 1.958 (0.42), 1.970 (0.78), 1.982 (0.72),
2.028 (0.68), 2.045 (0.73), 2.062 (0.54), 2.271 (11.98), 2.597 (0.69), 4.355 (0.74),
4.384 (0.75), 4.414 (0.42), 4.567 (0.98), 4.582 (1.51), 4.595 (0.97), 4.712 (0.53),
4.752 (5.92), 4.841 (0.48), 4.872 (0.41), 7.127 (16.00), 7.149 (0.43).
Primer 116
(5RS)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1386]
[1387] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (38,7 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 54,0 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.41), 1.705 (1.37), 1.716 (1.38),
1.730 (1.13), 1.752 (0.63), 1.763 (0.58), 1.773 (0.48), 1.782 (0.43), 1.847 (0.72),
1.858 (0.82), 1.869 (0.69), 1.879 (0.90), 1.890 (0.66), 1.903 (0.57), 1.948 (0.77),
1.982 (0.83), 2.000 (1.05), 2.011 (0.90), 2.025 (0.93), 2.035 (0.75), 2.043 (0.63),
2.051 (0.61), 2.061 (0.41), 2.271 (16.00), 2.467 (0.41), 2.524 (1.22), 2.571 (0.77),
2.583 (1.42), 2.594 (0.75), 2.625 (0.59), 3.294 (2.42), 3.304 (3.08), 3.315 (14.88),
3.337 (1.33), 3.356 (0.54), 3.368 (0.86), 3.431 (0.43), 3.439 (0.46), 3.452 (0.54),
3.460 (0.69), 3.560 (0.52), 3.641 (0.79), 3.653 (1.21), 3.669 (0.82), 3.680 (0.94),
4.259 (0.66), 4.267 (0.63), 4.363 (0.76), 4.664 (0.74), 4.672 (0.85), 4.679 (0.94),
4.688 (0.77), 4.695 (0.44), 4.707 (0.69), 4.716 (0.77), 4.722 (0.98), 4.734 (3.46),
4.743 (4.98), 4.782 (0.43), 4.956 (1.20), 4.964 (1.17), 5.074 (1.13), 5.082 (1.11),
7.096 (0.75), 7.102 (0.81), 7.118 (7.66), 7.123 (13.54), 7.144 (0.90).
[1388] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 117
(5RS)-5-{[(cis)-6,6-difluor-3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1389]
[1390] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa (cis)-6,6-difluor-3-azabiciklo[3.1.0]heksanom (65,3 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana 5 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 86,7 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,48 min; MS (ESIpos): m/z = 389 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.15), 0.008 (2.10), 1.697 (0.91),
1.707 (0.84), 1.743 (0.61), 1.980 (0.75), 2.048 (0.40), 2.270 (16.00), 2.327 (0.68),
2.518 (3.43), 2.523 (2.64), 2.563 (1.71), 2.573 (1.66), 2.585 (1.19), 2.602 (0.89),
2.617 (0.68), 2.670 (1.12), 2.709 (0.96), 3.609 (0.51), 3.641 (0.49), 3.651 (0.61),
3.705 (1.31), 3.736 (0.63), 3.773 (0.93), 3.804 (0.68), 3.893 (0.70), 3.921 (1.33),
3.934 (0.58), 3.944 (0.65), 3.957 (0.54), 4.016 (0.82), 4.044 (0.58), 4.668 (0.70),
4.678 (0.89), 4.684 (1.14), 4.694 (0.72), 4.722 (2.45), 4.737 (4.13), 4.741 (4.41),
4.779 (0.58), 7.095 (1.24), 7.117 (10.56), 7.122 (9.65), 7.144 (1.17).
Primer 118
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-[(3-oksopirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1391]
[1392] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, čistoća 94%, 489 µmol) sa pirolidin-3-on hidrohloridom (71,3 mg, 586 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati trietilamin (200 µl, 1,5 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (242 mg, 635 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prenet u piridin (2,5 ml) i DMF (500 µl). Nakon dodavanja (242 mg, 635 µmol), dodat je pirolidin-3-on hidrohlorid (71,3 mg, 586 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i podešena je na blago kiselu pH vrednost pomoću 10% limunske kiseline. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 80,7 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.689 (0.93), 1.705 (1.02), 2.006 (1.17),
2.020 (1.11), 2.050 (0.88), 2.062 (0.79), 2.072 (0.66), 2.272 (16.00), 2.559 (1.50),
2.579 (2.25), 2.599 (1.83), 2.634 (0.49), 2.675 (0.58), 2.694 (0.65), 2.709 (0.82),
2.726 (0.46), 3.659 (0.71), 3.677 (0.70), 3.710 (1.38), 3.744 (1.37), 3.774 (0.70),
3.794 (0.74), 3.942 (0.40), 3.961 (0.45), 4.009 (0.77), 4.054 (1.67), 4.072 (0.42),
4.127 (1.60), 4.171 (0.71), 4.687 (0.61), 4.699 (1.26), 4.711 (0.76), 4.750 (5.78),
4.927 (0.75), 4.938 (0.44), 7.101 (0.97), 7.123 (13.94), 7.148 (0.87).
Primer 119
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-[(3-oksopirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1393]
[1394] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-[(3-oksopirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 71 mg rastvoreno u 6 ml etanola; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: 100% etanol; protok: 15 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 21,8 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 20,5 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
[1395] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,23 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 50 × 4,6 mm; mobilna faza: 100% etanol; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.234 (0.45), 1.652 (0.44), 1.666 (0.63),
1.690 (1.15), 1.704 (1.26), 1.719 (1.03), 1.994 (0.81), 2.007 (1.49), 2.022 (1.37),
2.038 (0.99), 2.051 (1.09), 2.063 (0.98), 2.272 (16.00), 2.579 (2.68), 2.599 (2.22),
2.634 (0.56), 2.677 (0.55), 2.696 (0.79), 2.709 (0.88), 2.726 (0.50), 3.649 (0.48),
3.660 (0.84), 3.678 (0.82), 3.699 (0.51), 3.710 (1.60), 3.744 (1.61), 3.755 (0.54),
3.775 (0.85), 3.785 (0.45), 3.794 (0.86), 3.805 (0.51), 3.942 (0.45), 3.960 (0.52),
4.010 (0.86), 4.055 (1.96), 4.072 (0.56), 4.090 (0.43), 4.127 (1.81), 4.172 (0.85),
4.687 (0.72), 4.699 (1.44), 4.711 (0.88), 4.750 (6.83), 4.914 (0.54), 4.927 (0.90),
4.938 (0.57), 7.102 (0.98), 7.109 (0.75), 7.124 (14.74), 7.147 (0.92).
Primer 120
(5RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1396]
[1397] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa azetidin-3-ol hidrohloridom (60,1 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu DMF (1,7 ml) i piridina (330 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 143 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,62 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.91), 0.008 (0.71), 1.696 (1.30),
1.706 (1.24), 1.889 (0.47), 1.902 (0.46), 1.913 (0.67), 1.925 (1.00), 1.967 (0.52),
1.980 (0.70), 1.992 (0.73), 2.001 (0.62), 2.270 (16.00), 2.522 (1.16), 2.570 (1.78),
2.582 (0.90), 2.612 (0.63), 3.598 (0.60), 3.617 (0.66), 3.624 (0.70), 3.636 (0.52),
3.648 (0.55), 3.661 (0.60), 3.673 (0.54), 3.917 (0.67), 3.928 (0.77), 4.018 (0.89),
4.032 (1.30), 4.042 (1.18), 4.056 (1.06), 4.103 (0.45), 4.118 (0.53), 4.129 (0.47),
4.144 (0.44), 4.328 (0.49), 4.348 (0.81), 4.368 (0.51), 4.481 (1.32), 4.495 (2.40),
4.504 (2.75), 4.518 (1.96), 4.740 (5.20), 4.745 (4.96), 5.800 (0.90), 7.103 (0.67),
7.123 (13.53), 7.143 (0.69).
Primer 121
(5RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1398]
[1399] (5RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne SFC hromatografije [priprema uzorka: 115 mg rastvoreno u 15 ml metanola. Injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AD 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: CO2/metanol 80:20; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 57,4 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 46,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
[1400] Analitička hiralna HPLC (SFC): Rt= 2,0 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralcel<®>AD 50 × 4,6 mm; mobilna faza: CO2/metanol 80:20; protok: 3 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 343 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.696 (1.41), 1.706 (1.35), 1.889 (0.50),
1.901 (0.50), 1.913 (0.71), 1.925 (1.07), 1.980 (0.74), 1.992 (0.78), 2.002 (0.68),
2.270 (16.00), 2.522 (1.52), 2.570 (1.94), 2.583 (1.02), 2.599 (0.46), 2.612 (0.69),
3.598 (0.65), 3.616 (0.70), 3.624 (0.74), 3.634 (0.56), 3.647 (0.59), 3.660 (0.63),
3.673 (0.57), 3.917 (0.71), 3.928 (0.83), 4.018 (0.95), 4.032 (1.37), 4.042 (1.26),
4.056 (1.11), 4.103 (0.46), 4.118 (0.56), 4.129 (0.51), 4.144 (0.49), 4.328 (0.51),
4.348 (0.85), 4.368 (0.55), 4.496 (2.50), 4.504 (3.04), 4.518 (2.20), 4.740 (5.50),
4.745 (5.33), 5.801 (3.34), 7.103 (0.68), 7.123 (13.86).
Primer 122
(5RS)-5-{[(3R)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1401]
[1402] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (91 µl, 520 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (38,7 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 58,1 mg (62% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.58), 0.008 (0.62), 1.649 (0.52),
1.662 (0.50), 1.675 (0.55), 1.689 (0.69), 1.701 (0.85), 1.714 (1.02), 1.721 (1.03),
1.730 (0.92), 1.743 (0.71), 1.754 (0.61), 1.762 (0.56), 1.848 (0.52), 1.859 (0.74),
1.870 (0.56), 1.880 (0.78), 1.891 (0.73), 1.902 (0.55), 1.940 (0.57), 1.971 (1.66),
1.977 (1.57), 1.996 (0.91), 2.003 (0.74), 2.010 (0.72), 2.017 (0.69), 2.027 (0.62),
2.037 (0.43), 2.045 (0.47), 2.052 (0.40), 2.272 (16.00), 2.478 (0.56), 2.518 (1.68),
2.557 (0.61), 2.569 (0.78), 2.582 (1.40), 2.593 (0.73), 2.624 (0.54), 3.199 (0.79),
3.230 (1.12), 3.361 (1.13), 3.372 (1.78), 3.390 (1.59), 3.413 (0.60), 3.454 (0.53),
3.481 (0.81), 3.544 (0.72), 3.560 (1.02), 3.568 (1.26), 3.584 (0.76), 3.595 (0.51),
3.735 (0.41), 3.755 (0.62), 4.264 (0.76), 4.358 (0.65), 4.699 (0.78), 4.708 (0.78),
4.714 (0.96), 4.723 (0.76), 4.741 (4.48), 4.746 (5.17), 4.770 (0.77), 4.779 (0.99),
4.786 (1.01), 4.794 (0.71), 4.956 (0.76), 5.077 (0.89), 5.085 (0.87), 7.102 (0.70),
7.124 (15.25), 7.145 (0.84).
[1403] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3R)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 123
(5RS)-5-{[3-(difluormetoksi)azetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1404]
[1405] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa 3-(difluormetoksi)azetidinom (67,5 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 27,3 mg (13% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.44), 1.701 (1.79), 1.714 (1.40),
1.941 (0.73), 2.003 (0.73), 2.017 (0.62), 2.271 (16.00), 2.327 (0.48), 2.366 (0.48),
2.518 (2.87), 2.559 (1.81), 2.573 (1.95), 2.587 (0.96), 2.602 (0.45), 2.615 (0.71),
2.670 (0.52), 2.710 (0.51), 3.701 (1.17), 3.840 (0.45), 3.858 (0.92), 3.867 (0.93),
3.885 (0.56), 3.895 (0.52), 4.175 (0.85), 4.189 (0.83), 4.201 (0.93), 4.253 (0.42),
4.271 (0.51), 4.281 (0.47), 4.300 (0.73), 4.327 (0.54), 4.336 (0.52), 4.530 (1.75),
4.553 (0.42), 4.651 (0.41), 4.669 (0.55), 4.691 (0.42), 4.746 (6.96), 4.774 (0.68),
5.004 (0.62), 5.050 (0.56), 6.587 (0.54), 6.600 (0.58), 6.773 (1.10), 6.786 (1.21),
6.960 (0.54), 6.972 (0.58), 7.105 (0.65), 7.126 (14.23).
Primer 124
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-{[3-(trifluormetil)azetidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1406]
[1407] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa 3-(trifluormetil)azetidin hidrohloridom (92,8 mg, 574 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (208 mg, 548 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 139 mg (68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.694 (1.05), 1.707 (1.44), 1.720 (1.08),
2.003 (0.41), 2.014 (0.44), 2.027 (0.47), 2.271 (12.27), 2.501 (8.74), 2.567 (0.81),
2.575 (0.93), 3.845 (0.41), 3.871 (0.47), 3.934 (0.49), 3.948 (0.43), 4.081 (0.45),
4.105 (0.66), 4.160 (0.44), 4.184 (0.67), 4.207 (0.70), 4.219 (0.41), 4.230 (0.45),
4.386 (0.53), 4.401 (0.48), 4.430 (0.50), 4.453 (0.73), 4.522 (0.44), 4.536 (0.73),
4.548 (0.83), 4.560 (0.69), 4.572 (0.48), 4.584 (0.42), 4.607 (0.74), 4.750 (5.64),
7.104 (0.48), 7.125 (16.00), 7.147 (0.48).
Primer 125
(5RS)-5-[(3-metoksiazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1408]
[1409] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa 3-metoksiazetidinom (47,8 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 123 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.40), 0.008 (1.18), 1.674 (0.74),
1.686 (1.12), 1.697 (1.34), 1.928 (0.77), 1.989 (0.59), 1.999 (0.64), 2.024 (0.45),
2.270 (14.99), 2.522 (1.34), 2.571 (1.48), 2.584 (0.75), 2.613 (0.47), 3.223 (14.06),
3.663 (0.43), 3.671 (0.43), 3.688 (0.50), 3.700 (0.80), 3.712 (0.47), 3.729 (0.51),
3.737 (0.51), 4.007 (0.82), 4.027 (0.89), 4.051 (0.44), 4.087 (0.43), 4.104 (0.57),
4.115 (0.77), 4.128 (0.73), 4.148 (0.57), 4.216 (0.43), 4.226 (0.61), 4.242 (0.49),
4.252 (0.47), 4.259 (0.44), 4.269 (0.62), 4.341 (0.53), 4.364 (0.53), 4.509 (1.78),
4.525 (0.92), 4.742 (6.60), 7.102 (0.59), 7.124 (16.00), 7.145 (0.52).
Primer 126
(5RS)-5-[(cis)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1411] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa (cis)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohloridom (65,6 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijumheksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 133 mg (72% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.049 (0.40), 0.060 (1.02), 0.071 (1.06),
0.081 (0.51), 0.096 (0.86), 0.107 (0.86), 0.689 (0.74), 0.701 (0.76), 0.707 (0.73),
0.713 (0.71), 0.725 (0.66), 1.515 (0.51), 1.524 (0.73), 1.534 (0.65), 1.543 (0.64),
1.550 (0.53), 1.559 (0.62), 1.568 (0.49), 1.612 (0.56), 1.621 (0.73), 1.630 (0.94),
1.639 (0.89), 1.649 (0.99), 1.659 (1.14), 1.674 (1.73), 1.684 (1.79), 1.695 (1.24),
1.922 (0.50), 1.935 (0.45), 1.976 (0.46), 1.994 (0.46), 2.002 (0.51), 2.019 (0.42),
2.270 (16.00), 2.518 (1.36), 2.559 (1.36), 2.571 (0.70), 2.601 (0.44), 3.203 (0.62),
3.214 (0.65), 3.232 (0.74), 3.243 (0.72), 3.335 (1.10), 3.346 (0.84), 3.497 (1.56),
3.526 (1.22), 3.533 (0.66), 3.544 (0.63), 3.560 (0.73), 3.570 (0.68), 3.659 (2.48),
3.667 (1.15), 3.692 (1.81), 3.722 (1.49), 3.840 (1.36), 3.867 (1.16), 4.618 (0.59),
4.627 (0.72), 4.633 (0.74), 4.643 (0.58), 4.679 (0.57), 4.718 (2.71), 4.729 (2.94),
4.738 (4.39), 4.778 (0.70), 7.094 (1.14), 7.116 (9.92), 7.121 (9.92), 7.142 (1.16).
Primer 127
2-(4-metilbenzil)-(5RS)-{[(2S)-2-metilpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1412]
[1413] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u dihlormetan (1,5 ml) i DMF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (64 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (2S)-2-metil pirolidin (26,7 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 56,3 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.083 (4.23), 1.098 (4.29), 1.166 (1.19),
1.182 (1.20), 1.515 (0.43), 1.522 (0.45), 1.544 (0.43), 1.676 (0.49), 1.688 (0.88),
1.702 (1.05), 1.718 (0.90), 1.730 (0.42), 1.862 (0.51), 1.870 (0.56), 1.887 (0.78),
1.905 (1.14), 1.924 (0.88), 1.939 (1.13), 1.950 (1.08), 1.969 (0.74), 1.995 (0.83),
2.015 (0.71), 2.031 (0.56), 2.270 (12.19), 2.524 (0.87), 2.569 (1.14), 2.581 (0.54),
3.432 (0.49), 3.456 (0.49), 3.669 (0.44), 3.676 (0.51), 3.992 (0.54), 4.669 (0.86),
4.679 (1.59), 4.684 (0.95), 4.694 (0.68), 4.706 (0.71), 4.717 (1.84), 4.746 (0.81),
4.777 (1.77), 4.816 (0.82), 7.122 (16.00).
[1414] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
2-(4-metilbenzil)-(5S)-{[(2S)-2-metilpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 128
(5RS)-{[(3RS)-1,1-difluor-5-azaspiro[2.4]hept-5-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1415]
[1416] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (200 mg, 696 µmol) ubačena je u dihlormetan (4,0 ml) i DMF (8,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (343 mg, 905 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (320 µl, 1,8 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3RS)-1,1-difluor-5-azaspiro[2.4]heptan hidrohlorid (142 mg, 835 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 218 mg (78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 403 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.41), 0.008 (1.27), 1.069 (0.81),
1.159 (0.77), 1.601 (0.42), 1.614 (0.52), 1.648 (1.24), 1.668 (1.35), 1.694 (1.64),
1.710 (1.47), 2.008 (1.15), 2.099 (0.56), 2.115 (0.57), 2.161 (0.53), 2.271 (15.89),
2.572 (0.75), 2.584 (1.31), 2.625 (0.49), 3.455 (1.29), 3.497 (0.60), 3.552 (0.59),
3.582 (0.47), 3.640 (0.47), 3.666 (0.52), 3.718 (0.52), 3.751 (0.73), 3.764 (0.69),
3.805 (0.46), 4.710 (0.65), 4.719 (0.61), 4.742 (3.92), 4.794 (0.69), 7.101 (0.69),
7.125 (16.00), 7.146 (0.68). (Smeša dijastereomera)
[1417] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-{[(3RS)-1,1-difluor-5-azaspiro[2.4]hept-5-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
Primer 129
(5RS)-{[(3RS)-1,1-difluor-5-azaspiro[2.4]hept-5-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1418]
[1419] (5RS)-{[(3RS)-1,1-difluor-5-azaspiro[2.4]hept-5-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 210 mg rastvoreno u 4 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,2 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>ID 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: metil terc-butiletar/acetonitril 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 99,0 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 101,0 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
[1420] Analitička hiralna HPLC: Rt= 10,49 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralcel<®>ID 250 × 4,6 mm; eluent: metil terc-butiletar/acetonitril 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 403 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.53), 0.008 (1.55), 1.604 (0.44),
1.617 (0.64), 1.637 (0.89), 1.654 (1.26), 1.669 (1.51), 1.689 (1.60), 1.702 (1.64),
1.710 (1.61), 1.721 (1.32), 2.008 (1.66), 2.025 (1.55), 2.051 (0.73), 2.070 (0.51),
2.084 (0.52), 2.102 (0.51), 2.115 (0.48), 2.165 (0.55), 2.181 (0.52), 2.272 (15.03),
2.561 (0.81), 2.572 (0.83), 2.584 (1.54), 2.596 (0.83), 2.626 (0.57), 3.455 (2.27),
3.478 (0.59), 3.486 (0.60), 3.497 (1.15), 3.515 (0.61), 3.640 (0.76), 3.647 (0.80),
3.665 (0.96), 3.804 (0.82), 3.831 (0.61), 3.881 (0.48), 3.895 (0.42), 4.710 (0.54),
4.725 (0.81), 4.743 (5.21), 4.750 (2.79), 4.783 (0.76), 4.798 (0.93), 4.808 (0.62),
7.101 (0.75), 7.123 (16.00), 7.147 (0.72).
Primer 130
(5RS)-{[(3S)-3-metoksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1421]
[1422] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (3,1 ml) i dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-metoksipirolidin hidrohlorid (43,1 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,8 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 371 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.98), 0.008 (2.66), 1.644 (0.58),
1.656 (0.64), 1.668 (0.67), 1.702 (0.97), 1.712 (0.97), 1.723 (0.75), 1.860 (0.43),
1.884 (0.68), 1.894 (0.70), 1.906 (0.55), 1.918 (0.89), 1.931 (0.91), 1.940 (0.92),
1.981 (1.60), 1.993 (1.41), 2.003 (1.20), 2.017 (0.89), 2.038 (0.66), 2.065 (0.57),
2.272 (16.00), 2.567 (0.89), 2.578 (1.51), 2.590 (0.88), 2.621 (0.54), 3.235 (12.99),
3.269 (13.24), 3.362 (1.64), 3.384 (0.55), 3.392 (0.75), 3.405 (1.07), 3.416 (1.20),
3.438 (0.53), 3.449 (0.86), 3.455 (0.70), 3.473 (0.65), 3.556 (0.51), 3.567 (0.57),
3.585 (0.78), 3.596 (0.75), 3.709 (0.94), 3.737 (0.69), 3.768 (0.42), 3.787 (0.61),
3.956 (0.89), 4.044 (0.83), 4.742 (6.80), 4.765 (0.83), 4.779 (1.64), 4.788 (1.54),
4.797 (0.73), 7.100 (0.86), 7.123 (14.91), 7.145 (0.90).
[1423] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-{[(3S)-3-metoksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 131
(5RS)-{[3-hidroksi-3-(trifluormetil)azetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1425] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa 3-(trifluormetil)azetidin-3-ol hidrohloridom (97,3 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijumheksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 147 mg (68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.49), 0.008 (0.45), 1.704 (1.35),
1.715 (1.20), 2.019 (0.55), 2.027 (0.58), 2.036 (0.57), 2.271 (16.00), 2.518 (0.75),
2.567 (1.09), 2.575 (1.21), 2.587 (1.01), 2.598 (0.45), 3.857 (0.57), 3.885 (0.67),
3.933 (0.61), 3.961 (0.86), 4.081 (1.14), 4.108 (0.81), 4.164 (0.94), 4.192 (1.19),
4.222 (0.65), 4.351 (0.56), 4.376 (0.89), 4.454 (1.17), 4.479 (0.74), 4.558 (0.60),
4.573 (0.90), 4.585 (0.67), 4.593 (0.61), 4.609 (0.77), 4.621 (1.19), 4.647 (0.77),
4.741 (2.29), 4.747 (2.82), 4.754 (4.40), 7.103 (0.62), 7.125 (13.60), 7.145 (0.56),
7.545 (1.60).
Primer 132
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-{[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1426]
[1427] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u dihlormetan (1,3 ml) i DMF (2,9 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (64 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (2R)-2-metil pirolidin (26,7 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,4 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.50), 0.008 (1.44), 1.057 (6.00),
1.073 (6.07), 1.265 (2.61), 1.281 (2.63), 1.497 (0.42), 1.508 (0.57), 1.517 (0.66),
1.526 (0.56), 1.650 (0.63), 1.659 (0.58), 1.679 (0.60), 1.694 (0.82), 1.714 (1.10),
1.724 (0.98), 1.859 (0.74), 1.870 (0.72), 1.876 (0.73), 1.886 (0.73), 1.897 (1.06),
1.915 (1.11), 1.924 (0.87), 1.933 (1.01), 1.945 (1.27), 1.963 (1.63), 1.977 (1.11),
1.997 (0.92), 2.005 (0.85), 2.015 (0.70), 2.025 (0.74), 2.033 (0.69), 2.042 (0.64),
2.062 (0.48), 2.272 (16.00), 2.583 (1.13), 2.595 (0.65), 2.625 (0.44), 3.247 (0.43),
3.379 (0.41), 3.516 (0.46), 3.523 (0.68), 3.541 (0.68), 3.552 (0.42), 3.566 (0.43),
3.584 (0.85), 3.602 (0.48), 3.609 (0.46), 4.022 (0.62), 4.030 (0.60), 4.038 (0.47),
4.107 (0.46), 4.691 (0.89), 4.700 (1.13), 4.707 (1.26), 4.715 (1.20), 4.739 (6.57),
7.099 (1.02), 7.120 (11.38), 7.124 (11.23), 7.145 (0.99).
[1428] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(4-metilbenzil)-{[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 133
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-[(3-oksoazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1429]
[1430] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (150 mg, 522 µmol) sa azetidin-3-onom (39,0 mg, 548 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (218 mg, 574 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 72,2 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.710 (0.41), 1.721 (0.65), 1.731 (0.63),
1.743 (0.59), 2.059 (0.86), 2.072 (1.04), 2.085 (0.67), 2.271 (10.99), 2.517 (0.67),
2.559 (0.57), 2.590 (0.46), 2.603 (0.95), 2.616 (0.48), 4.662 (0.54), 4.675 (1.04),
4.688 (0.55), 4.743 (0.87), 4.758 (4.04), 4.766 (1.64), 7.128 (16.00).
Primer 134
(5RS,7RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1431]
[1432] (5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 281 µmol) dodata je u dihlormetan (1,0 ml) i DMF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (138 mg, 365 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (36,9 mg, 337 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 85,4 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.42), 0.008 (2.61), 1.010 (8.92),
1.020 (11.30), 1.026 (11.21), 1.036 (9.74), 1.308 (0.59), 1.339 (1.81), 1.370 (2.83),
1.400 (2.12), 1.433 (0.76), 1.876 (1.61), 2.142 (3.55), 2.174 (4.35), 2.206 (1.62),
2.213 (1.69), 2.327 (0.64), 2.366 (0.41), 2.622 (2.64), 2.669 (2.68), 2.690 (0.68),
2.710 (0.45), 2.731 (6.01), 2.890 (7.03), 3.578 (1.58), 3.585 (1.51), 3.604 (1.66),
3.643 (1.32), 3.655 (1.35), 3.668 (1.47), 3.680 (1.39), 3.903 (1.92), 3.914 (1.76),
4.002 (1.25), 4.021 (1.65), 4.045 (2.41), 4.058 (1.45), 4.067 (1.50), 4.079 (1.42),
4.112 (1.16), 4.126 (1.43), 4.137 (1.26), 4.153 (1.15), 4.325 (1.22), 4.344 (2.16),
4.355 (1.88), 4.370 (3.12), 4.387 (2.44), 4.398 (2.75), 4.414 (1.49), 4.507 (4.97),
4.521 (3.48), 4.986 (16.00), 5.754 (1.00), 5.779 (4.75), 5.793 (4.89), 7.899 (1.61),
7.919 (11.72), 7.951 (1.52), 8.669 (7.52).
Primer 135
(5RS,7RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 1)
[1433]
[1434] (5RS,7RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 80 mg rastvoreno u 4 ml etanola; injekciona zapremina: 0,3 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 32,0 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 35,0 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1435] Analitička hiralna HPLC: Rt= 5,13 min, d.e. = 95% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IAC 250 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,63 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.005 (0.61), 1.011 (8.14), 1.022 (16.00),
1.033 (8.42), 1.320 (0.60), 1.340 (1.30), 1.354 (0.89), 1.361 (1.38), 1.374 (1.45),
1.381 (0.86), 1.394 (1.38), 1.414 (0.70), 1.872 (1.32), 1.876 (1.34), 2.136 (1.59),
2.142 (1.78), 2.148 (2.62), 2.156 (2.85), 2.168 (2.59), 2.176 (2.80), 2.183 (1.75),
2.195 (1.42), 2.203 (1.39), 2.517 (0.80), 2.521 (0.80), 2.524 (0.64), 2.615 (0.44),
2.630 (2.25), 2.633 (2.12), 2.654 (2.01), 2.657 (2.01), 2.660 (1.79), 3.584 (1.49),
3.589 (1.37), 3.601 (1.52), 3.607 (1.32), 3.649 (1.18), 3.657 (1.22), 3.666 (1.31),
3.674 (1.27), 3.907 (1.65), 3.915 (1.54), 4.011 (1.14), 4.023 (1.42), 4.027 (1.24),
4.040 (1.18), 4.051 (1.14), 4.059 (1.27), 4.066 (1.30), 4.074 (1.23), 4.119 (1.10),
4.129 (1.22), 4.135 (1.21), 4.147 (1.04), 4.335 (1.09), 4.347 (1.87), 4.363 (2.11),
4.373 (1.76), 4.381 (3.04), 4.391 (3.07), 4.399 (1.69), 4.410 (1.48), 4.496 (2.30),
4.507 (4.00), 4.518 (2.41), 4.531 (0.73), 4.986 (10.70), 4.991 (10.02), 5.802 (6.92),
5.812 (6.99), 7.905 (1.16), 7.911 (1.30), 7.919 (6.21), 7.924 (8.62), 8.671 (4.90).
Primer 136
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1436]
[1437] (5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 281 µmol) dodata je u dihlormetan (1,0 ml) i DMF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (138 mg, 365 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (42,3 mg, 337 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 93,0 mg (78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.54), -0.008 (4.36), 0.008 (4.13),
0.146 (0.54), 1.019 (5.78), 1.027 (14.45), 1.035 (7.38), 1.043 (14.30), 1.303 (0.65),
1.333 (1.76), 1.363 (2.31), 1.392 (1.65), 1.411 (0.81), 1.894 (1.42), 2.092 (1.16),
2.115 (1.14), 2.150 (3.60), 2.181 (2.75), 2.191 (3.83), 2.222 (4.36), 2.250 (2.41),
2.328 (0.92), 2.366 (0.52), 2.645 (2.55), 2.680 (2.36), 2.710 (0.54), 3.340 (0.76),
3.353 (0.71), 3.370 (0.92), 3.381 (0.80), 3.408 (0.50), 3.496 (0.64), 3.505 (0.60),
3.550 (1.42), 3.584 (1.94), 3.611 (1.31), 3.648 (1.20), 3.685 (1.45), 3.743 (0.52),
3.759 (0.86), 3.784 (1.49), 3.823 (1.07), 3.888 (1.62), 3.927 (1.07), 3.951 (1.11),
3.988 (0.54), 4.021 (0.40), 4.576 (0.71), 4.592 (0.89), 4.603 (0.84), 4.618 (0.72),
4.641 (0.87), 4.657 (1.35), 4.668 (1.09), 4.674 (0.99), 4.685 (1.27), 4.702 (0.70),
4.722 (0.84), 4.737 (1.00), 4.749 (1.01), 4.764 (0.85), 4.984 (16.00), 5.268 (0.89),
5.340 (0.62), 5.391 (1.04), 5.474 (0.61), 5.513 (0.60), 7.899 (1.19), 7.918 (15.34),
7.942 (0.74), 8.134 (0.60), 8.664 (7.69). (Smeša dijastereomera)
Primer 137
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 1)
[1438]
[1439] (5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 87 mg rastvoreno u 3 ml etanola; injekciona zapremina: 0,1 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 20 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 215 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 30,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 37,4 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1440] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,07 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.862 (0.42), 1.021 (8.42), 1.030 (11.85),
1.033 (10.67), 1.043 (9.64), 1.236 (0.53), 1.312 (0.68), 1.336 (1.44), 1.363 (2.05),
1.390 (1.65), 1.414 (0.83), 1.896 (1.37), 1.968 (0.43), 1.990 (0.47), 2.055 (0.44),
2.080 (0.57), 2.103 (1.00), 2.116 (0.94), 2.138 (1.19), 2.159 (2.57), 2.184 (2.56),
2.192 (2.90), 2.214 (3.67), 2.240 (2.57), 2.252 (2.56), 2.278 (1.16), 2.648 (2.43),
2.681 (2.11), 3.333 (1.13), 3.347 (1.49), 3.356 (2.24), 3.370 (2.60), 3.379 (2.36),
3.392 (2.36), 3.467 (0.90), 3.474 (0.87), 3.496 (1.25), 3.503 (1.23), 3.558 (2.68),
3.574 (3.46), 3.580 (3.36), 3.607 (2.29), 3.635 (0.61), 3.701 (0.58), 3.708 (0.66),
3.726 (0.80), 3.733 (0.69), 3.778 (0.56), 3.785 (0.59), 3.803 (0.74), 3.810 (0.68),
3.932 (1.39), 3.949 (2.22), 3.967 (1.42), 3.987 (0.98), 4.012 (0.73), 4.665 (1.30),
4.677 (1.47), 4.686 (1.41), 4.698 (1.25), 4.727 (1.56), 4.739 (1.77), 4.748 (1.71),
4.761 (1.51), 4.986 (16.00), 5.289 (1.44), 5.354 (1.14), 5.394 (1.40), 5.460 (1.13),
7.902 (1.50), 7.918 (12.17), 7.940 (0.91), 8.665 (6.94).
Primer 138
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1441]
[1442] (5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 87 mg rastvoreno u 3 ml etanola; injekciona zapremina: 0,1 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 20 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 215 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 30,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 37,4 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1443] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,43 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.847 (0.50), 0.861 (0.56), 1.028 (15.91),
1.041 (16.00), 1.056 (0.79), 1.088 (0.43), 1.101 (0.58), 1.235 (0.87), 1.314 (0.86),
1.336 (1.78), 1.360 (2.56), 1.384 (1.62), 1.406 (0.75), 1.896 (1.43), 1.908 (1.51),
1.963 (0.52), 1.984 (0.55), 2.048 (0.49), 2.070 (0.63), 2.109 (0.83), 2.122 (1.06),
2.158 (3.53), 2.182 (3.07), 2.190 (3.79), 2.214 (3.63), 2.233 (1.72), 2.259 (1.72),
2.273 (1.57), 2.286 (1.33), 2.300 (1.19), 2.313 (0.87), 2.645 (2.47), 2.649 (2.45),
2.677 (2.20), 2.681 (2.08), 3.273 (1.17), 3.288 (1.58), 3.296 (2.22), 3.311 (2.69),
3.319 (2.69), 3.333 (3.51), 3.347 (3.48), 3.387 (2.00), 3.394 (1.81), 3.415 (1.45),
3.423 (1.35), 3.434 (0.69), 3.448 (0.59), 3.465 (0.88), 3.472 (0.89), 3.493 (1.06),
3.501 (0.98), 3.639 (0.74), 3.653 (1.90), 3.658 (1.96), 3.673 (2.34), 3.682 (1.99),
3.694 (2.41), 3.703 (1.33), 3.714 (1.05), 3.733 (0.91), 3.765 (1.34), 3.782 (2.43),
3.801 (1.78), 3.831 (1.27), 3.855 (0.63), 3.880 (2.40), 4.581 (1.40), 4.594 (1.59),
4.603 (1.53), 4.615 (1.36), 4.646 (1.58), 4.658 (1.80), 4.668 (1.73), 4.680 (1.53),
4.982 (14.44), 5.273 (1.35), 5.379 (1.41), 5.387 (1.38), 5.394 (1.28), 5.500 (1.11),
7.901 (1.80), 7.916 (12.89), 7.940 (0.85), 8.664 (6.94).
Primer 139
(5RS,6RS)-6-metil-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1444]
[1445] (5RS,6RS)-6-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša) (95,0 mg, 315 µmol) sa pirolidinom (28 µl, 330 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (132 mg, 347 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i direktno su podvrgnute razdvajanju putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 35 mg rastvoreno u 3 ml etanola; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 40:60, protok: 15 ml/min; temperatura 50°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 10 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 11 mg izomera 2, koji je eluiran kao drugi.
Izomer 2:
[1446] Analitička hiralna HPLC: Rt= 12,49 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 250 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 40:60, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,48 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]= 0.99 (d, 3H), 1.49 - 1.62 (m, 1H), 1.70 -1.84 (m, 2H), 1.84 - 2.10 (m, 3H), 2.20 (dtd, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.55 - 2.60 (m, 1H), 2.62 - 2.71 (m, 1H), 3.21 - 3.29 (m, 1H), 3.32 - 3.39 (m, 1H), 3.41 - 3.41 (m, 1H), 3.57 (dt, 1H), 3.77 (dt, 1H), 4.62 - 4.83 (m, 3H), 7.07 - 7.19 (m, 4H).
Primer 140
(5RS)-5-{[(3S,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1447]
[1448] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (75,0 mg, 261 µmol) ubačena je u DMF (2,0 ml) i dihlormetan (1,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (129 mg, 339 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (45,0 mg, 313 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,7 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.624 (0.44), 1.629 (0.48), 1.632 (0.47),
1.637 (0.44), 1.642 (0.54), 1.646 (0.55), 1.651 (0.53), 1.722 (0.68), 1.729 (0.74),
1.738 (0.57), 1.744 (0.43), 1.952 (0.45), 1.957 (0.48), 1.962 (0.44), 1.969 (0.54),
1.976 (0.78), 1.980 (0.81), 1.985 (0.70), 2.022 (0.42), 2.027 (0.51), 2.032 (0.49),
2.037 (0.60), 2.040 (0.52), 2.045 (0.67), 2.051 (0.69), 2.056 (0.65), 2.273 (16.00),
2.518 (0.67), 2.563 (0.77), 2.584 (0.76), 2.592 (1.47), 2.600 (0.80), 2.612 (0.47),
2.620 (0.70), 3.647 (2.34), 3.697 (1.29), 3.706 (0.58), 3.711 (0.90), 3.716 (0.50),
3.830 (0.50), 3.853 (0.57), 3.899 (0.49), 3.922 (0.57), 4.152 (0.84), 4.175 (0.78),
4.195 (0.88), 4.217 (0.74), 4.749 (5.23), 4.752 (5.07), 4.873 (1.32), 4.879 (1.49),
4.883 (1.59), 4.890 (1.27), 5.336 (0.63), 5.346 (0.57), 5.429 (0.99), 5.516 (0.64),
7.109 (1.69), 7.123 (9.34), 7.129 (8.38), 7.143 (1.51).
[1449] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3S,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 141
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-{[(1RS)-1-oksido-1,3-tiazolidin-3-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1450]
[1451] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1) (80,0 mg, 223 µmol) ubačen je u dihlormetan (3,0 ml) i dodata je 3-hlorbenzol karboperokso kiselina (55,0 mg, čistoća 70%, 223 µmol). Nakon 4 h na sobnoj temperaturi dodat je zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata i izvršena je ekstrakcija dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,0 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.627 (0.41), 1.740 (0.62), 1.762 (0.45),
1.987 (0.63), 1.995 (0.76), 2.004 (0.69), 2.022 (0.56), 2.084 (0.42), 2.274 (16.00),
2.514 (0.79), 2.518 (0.79), 2.521 (0.60), 2.568 (0.47), 2.591 (0.73), 2.599 (1.07),
2.634 (0.57), 3.058 (0.50), 3.077 (0.45), 3.097 (0.45), 3.125 (0.46), 3.175 (0.50),
3.262 (0.59), 3.274 (0.75), 3.966 (0.48), 3.974 (0.70), 3.987 (0.64), 3.994 (0.60),
4.088 (0.42), 4.109 (0.64), 4.121 (0.44), 4.287 (0.64), 4.308 (0.49), 4.313 (0.64),
4.342 (0.74), 4.368 (0.88), 4.421 (0.66), 4.446 (0.72), 4.489 (0.59), 4.513 (0.64),
4.610 (0.76), 4.614 (0.82), 4.636 (0.60), 4.640 (0.66), 4.755 (5.93), 4.859 (0.41),
4.864 (0.49), 4.983 (0.64), 4.995 (0.55), 5.002 (0.52), 5.008 (0.55), 5.016 (0.87),
5.020 (0.92), 5.045 (0.78), 5.753 (0.47), 7.105 (0.99), 7.122 (5.96), 7.130 (11.47),
7.145 (0.98). (Smeša dijastereomera)
[1452] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-{[(1RS)-1-oksido-1,3-tiazolidin-3-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
Primer 142
(5RS)-5-[(1,1-dioksido-1,3-tiazolidin-3-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1453]
[1454] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1) (32,0 mg, 89,3 µmol) ubačen je u dihlormetan (2,4 ml) i dodata je 3-hlorbenzol karboperokso kiselina (77,0 mg, čistoća 70%, 312 µmol). Nakon 4 h na sobnoj temperaturi dodat je zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata i izvršena je ekstrakcija dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,5 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.583 (0.40), 1.730 (0.58), 1.741 (0.60),
1.962 (0.42), 1.990 (0.89), 1.996 (0.83), 2.015 (0.42), 2.272 (16.00), 2.514 (0.74),
2.518 (0.59), 2.521 (0.48), 2.558 (0.75), 2.569 (0.62), 2.595 (1.12), 2.628 (0.49),
3.423 (0.53), 3.439 (0.95), 3.449 (0.62), 3.455 (0.75), 3.461 (0.76), 3.476 (0.70),
3.580 (0.60), 3.593 (1.14), 3.607 (0.63), 3.850 (0.41), 3.859 (0.62), 3.874 (1.06),
3.884 (0.72), 3.889 (0.69), 3.896 (0.71), 3.901 (0.67), 3.912 (0.60), 4.158 (0.41),
4.247 (0.41), 4.470 (0.46), 4.495 (0.88), 4.544 (0.89), 4.569 (0.47), 4.755 (8.51),
4.844 (1.10), 4.868 (2.16), 4.874 (0.98), 4.880 (0.97), 4.886 (0.71), 4.982 (1.43),
5.006 (1.07), 5.020 (0.41), 5.027 (0.47), 5.032 (0.47), 5.752 (4.50), 7.105 (1.46),
7.122 (9.73), 7.127 (9.02), 7.144 (1.29).
[1455] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-[(1,1-dioksido-1,3-tiazolidin-3-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 143
(5RS)-5-{[(3S)-3-(difluormetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1456]
[1457] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-(difluormetil)pirolidin hidrohlorid (65,8 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 78,6 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.665 (0.43), 1.676 (0.55), 1.709 (1.13),
1.829 (0.41), 1.934 (0.46), 1.943 (0.53), 1.950 (0.75), 1.959 (0.76), 1.984 (0.90),
1.994 (0.95), 2.005 (0.70), 2.013 (0.90), 2.026 (0.70), 2.034 (0.69), 2.041 (0.55),
2.046 (0.49), 2.053 (0.41), 2.115 (0.44), 2.271 (16.00), 2.517 (1.18), 2.574 (0.72),
2.583 (1.40), 2.593 (0.75), 2.617 (0.64), 3.270 (0.49), 3.286 (0.47), 3.295 (0.60),
3.341 (0.43), 3.437 (0.44), 3.454 (0.41), 3.479 (0.49), 3.516 (0.79), 3.533 (0.62),
3.542 (0.59), 3.610 (0.48), 3.647 (0.44), 4.707 (0.48), 4.715 (0.44), 4.722 (0.57),
4.728 (0.96), 4.738 (3.89), 4.745 (3.45), 4.760 (0.44), 4.775 (0.87), 4.780 (0.80),
4.787 (0.40), 6.130 (0.51), 6.139 (0.54), 6.162 (0.52), 7.104 (1.25), 7.120 (10.70),
7.125 (10.23), 7.141 (1.15).
[1458] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3S)-3-(difluormetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 144
(5RS)-5-[(cis)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1459]
[1460] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je cis-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (racemat) (49,9 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 92,9 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.618 (0.56), 0.623 (0.56), 0.628 (0.79),
0.633 (0.69), 0.639 (0.64), 0.644 (0.61), 0.650 (0.49), 0.654 (0.45), 0.811 (0.53),
0.828 (0.52), 1.567 (0.43), 1.744 (0.75), 1.755 (0.95), 1.767 (1.00), 1.772 (0.92),
1.784 (0.62), 1.860 (0.57), 1.866 (0.43), 1.877 (0.51), 1.884 (0.64), 1.890 (0.41),
1.902 (0.42), 1.908 (0.42), 2.001 (0.55), 2.012 (0.48), 2.019 (0.70), 2.032 (0.79),
2.039 (0.78), 2.047 (0.76), 2.065 (0.53), 2.078 (0.41), 2.145 (0.74), 2.150 (0.68),
2.272 (15.30), 2.518 (0.58), 2.522 (0.77), 2.586 (1.07), 2.596 (0.62), 2.620 (0.47),
2.959 (0.55), 2.984 (0.56), 3.154 (0.42), 3.495 (0.42), 3.499 (0.40), 3.699 (0.42),
3.704 (0.67), 3.711 (0.88), 3.716 (0.65), 3.724 (0.71), 3.729 (0.78), 4.738 (1.92),
4.743 (2.32), 4.753 (3.33), 4.934 (0.45), 4.940 (0.46), 5.070 (0.56), 5.076 (0.65),
5.083 (0.61), 5.089 (0.52), 7.109 (0.79), 7.127 (16.00), 7.144 (0.66).
[1461] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-[(cis)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
Primer 145
(5RS)-2-(4-metilbenzil)-5-[(3,3,4,4-tetrafluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1462]
[1463] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (50,0 mg, 174 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (85,8 mg, 226 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3,4,4-tetrafluorpirolidin hidrohlorid (37,5 mg, 209 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,0 mg (15% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (0.56), 1.141 (2.17), 1.236 (0.42),
1.658 (0.47), 1.665 (0.57), 1.678 (0.56), 1.686 (0.71), 1.697 (0.83), 1.704 (0.92),
1.716 (0.72), 1.726 (0.43), 1.952 (0.43), 1.958 (0.45), 1.964 (0.44), 1.972 (0.62),
1.980 (0.69), 1.986 (0.74), 1.993 (0.62), 2.048 (0.50), 2.054 (0.48), 2.061 (0.69),
2.069 (0.65), 2.076 (0.65), 2.082 (0.64), 2.090 (0.45), 2.116 (0.98), 2.271 (16.00),
2.481 (0.93), 2.514 (0.53), 2.518 (0.54), 2.562 (1.05), 2.568 (1.04), 2.580 (1.52),
2.591 (1.69), 2.601 (0.83), 2.624 (0.53), 4.007 (0.64), 4.037 (0.76), 4.105 (0.74),
4.132 (0.59), 4.411 (0.54), 4.440 (0.52), 4.620 (0.73), 4.646 (0.65), 4.716 (0.43),
4.747 (4.79), 4.752 (4.59), 4.783 (0.41), 4.830 (1.29), 4.838 (1.55), 4.842 (1.66),
4.851 (1.23), 7.104 (1.48), 7.109 (0.84), 7.116 (1.66), 7.121 (10.49), 7.126 (9.73),
7.143 (1.20).
[1464] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-[(3,3,4,4-tetrafluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 146
(5RS)-5-{[3-(fluormetil)azetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1465]
[1466] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (50,0 mg, 174 µmol) ubačena je u DMF (2,0 ml) i dihlormetan (1,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (85,8 mg, 226 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-(fluormetil)azetidin trifluoracetat (42,4 mg, 209 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,2 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 359 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (0.41), 1.683 (0.67), 1.694 (1.11),
1.705 (1.36), 1.715 (1.05), 1.725 (0.44), 1.911 (0.49), 1.917 (0.52), 1.923 (0.43),
1.986 (0.51), 1.993 (0.63), 2.001 (0.62), 2.005 (0.47), 2.014 (0.63), 2.270 (16.00),
2.514 (0.90), 2.518 (0.75), 2.521 (0.42), 2.526 (0.57), 2.563 (0.66), 2.573 (1.35),
2.584 (0.65), 2.607 (0.56), 3.639 (0.50), 3.650 (0.50), 3.659 (0.56), 3.670 (0.52),
3.704 (0.47), 3.716 (0.48), 3.724 (0.56), 3.735 (0.52), 3.921 (0.43), 3.939 (0.70),
3.963 (0.59), 3.974 (0.57), 3.980 (0.62), 3.991 (0.87), 4.007 (0.80), 4.110 (0.43),
4.122 (0.48), 4.128 (0.56), 4.139 (0.50), 4.252 (0.44), 4.269 (0.79), 4.399 (0.45),
4.416 (0.86), 4.488 (0.61), 4.497 (1.30), 4.500 (1.08), 4.505 (1.00), 4.509 (1.33),
4.518 (1.67), 4.530 (1.10), 4.545 (1.22), 4.556 (1.11), 4.613 (1.09), 4.624 (1.10),
4.639 (1.18), 4.651 (1.12), 4.744 (6.33), 7.107 (0.78), 7.125 (13.27), 7.137 (0.43),
7.142 (0.70).
[1467] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[3-(fluormetil)azetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 147
(5RS)-5-{[(3RS)-3-fluor-3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1468]
[1469] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je [(3RS)-3-fluorpirolidin-3-il]metanol hidrohlorid (racemat) (65,0 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,8 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 389 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (0.53), 1.670 (0.41), 1.676 (0.41),
1.685 (0.45), 1.696 (0.56), 1.705 (0.77), 1.716 (1.02), 1.723 (1.05), 1.733 (0.76),
1.973 (0.72), 1.994 (0.76), 2.010 (0.86), 2.023 (0.60), 2.040 (0.73), 2.052 (0.91),
2.064 (0.73), 2.073 (0.74), 2.121 (0.50), 2.132 (0.55), 2.136 (0.56), 2.272 (16.00),
2.514 (0.86), 2.518 (0.81), 2.521 (0.89), 2.577 (0.67), 2.586 (1.31), 2.595 (0.76),
2.619 (0.58), 3.367 (0.42), 3.395 (0.47), 3.437 (0.52), 3.464 (0.64), 3.488 (0.64),
3.516 (0.43), 3.556 (0.83), 3.569 (0.40), 3.584 (0.63), 3.600 (0.63), 3.620 (1.19),
3.656 (1.64), 3.675 (0.69), 3.681 (0.94), 3.697 (0.57), 3.703 (0.49), 3.724 (0.53),
3.737 (0.53), 3.750 (0.57), 3.759 (0.61), 3.773 (0.41), 4.656 (0.40), 4.705 (0.49),
4.725 (0.57), 4.736 (3.09), 4.744 (4.56), 4.753 (1.96), 4.760 (0.52), 4.766 (0.52),
4.773 (0.46), 4.832 (0.44), 4.837 (0.47), 5.241 (0.50), 7.103 (0.89), 7.108 (1.04),
7.120 (7.69), 7.125 (11.68), 7.142 (0.91).
[1470] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3RS)-3-fluor-3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
Primer 148
(5RS)-5-{[(2S)-2-metilazetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1471]
[1472] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (2S)-2-metilazetidin hidrohlorid (44,9 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 70,3 mg (59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.314 (3.24), 1.326 (3.25), 1.349 (1.64),
1.361 (1.62), 1.450 (1.44), 1.462 (1.41), 1.520 (1.03), 1.533 (1.02), 1.706 (1.29),
1.797 (0.63), 1.803 (0.73), 1.815 (0.86), 1.819 (0.85), 1.826 (0.82), 1.838 (0.72),
1.849 (0.51), 1.917 (0.49), 1.924 (0.51), 1.933 (0.42), 1.987 (0.52), 2.001 (0.52),
2.008 (0.53), 2.017 (0.46), 2.270 (16.00), 2.395 (0.54), 2.401 (0.60), 2.413 (0.61),
2.418 (0.61), 2.434 (0.49), 2.517 (0.78), 2.522 (0.97), 2.557 (0.73), 2.567 (1.38),
2.576 (0.76), 2.601 (0.57), 4.120 (0.46), 4.132 (0.46), 4.207 (0.60), 4.220 (0.64),
4.238 (0.42), 4.329 (0.43), 4.340 (0.59), 4.357 (0.58), 4.370 (0.61), 4.423 (0.90),
4.431 (1.03), 4.435 (1.11), 4.443 (0.76), 4.681 (0.41), 4.697 (0.42), 4.712 (0.94),
4.728 (1.99), 4.743 (3.47), 4.756 (0.78), 4.776 (0.69), 7.107 (0.87), 7.126 (13.90),
7.142 (0.72).
[1473] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(2S)-2-metilazetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 149
(5RS)-5-{[3-(difluormetil)azetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1474]
[1475] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (50,0 mg, 174 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (85,8 mg, 226 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-(difluormetil)azetidin hidrohlorid (30,0 mg, 209 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,3 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.676 (0.59), 1.696 (1.28), 1.705 (1.35),
1.714 (1.08), 1.912 (0.46), 1.949 (0.44), 1.984 (0.48), 1.996 (0.65), 2.004 (0.71),
2.012 (0.62), 2.016 (0.60), 2.024 (0.53), 2.270 (16.00), 2.519 (1.23), 2.568 (0.69),
2.577 (1.28), 2.586 (0.71), 2.610 (0.51), 2.689 (1.41), 2.889 (0.42), 3.178 (0.43),
3.186 (0.44), 3.196 (0.46), 3.204 (0.40), 3.775 (0.53), 3.786 (0.55), 3.796 (0.64),
3.806 (0.59), 3.846 (0.43), 3.858 (0.47), 3.866 (0.64), 3.878 (0.59), 3.941 (0.56),
3.959 (0.84), 4.017 (0.59), 4.036 (0.95), 4.055 (0.48), 4.111 (0.55), 4.122 (0.60),
4.129 (0.64), 4.139 (0.56), 4.272 (1.16), 4.275 (1.15), 4.284 (0.93), 4.293 (0.92),
4.434 (0.55), 4.452 (1.03), 4.470 (0.47), 4.518 (1.08), 4.528 (1.66), 4.538 (1.06),
4.746 (7.75), 6.314 (0.51), 6.322 (0.52), 6.352 (0.57), 6.361 (0.56), 7.106 (1.00),
7.124 (14.14), 7.141 (0.85).
[1476] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[3-(difluormetil)azetidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 150
(5RS)-5-{[cis-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1477]
[1478] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (8,0 ml) i dihlormetan (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je cis-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (60,0 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 97,6 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,03 min; MS (ESIpos): m/z = 377 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.52), 1.636 (0.49), 1.643 (0.54),
1.668 (0.75), 1.678 (0.74), 1.695 (0.84), 1.707 (1.04), 1.717 (0.98), 1.730 (0.79),
1.949 (0.69), 1.957 (0.59), 1.974 (0.44), 1.996 (0.88), 2.005 (0.65), 2.022 (0.54),
2.031 (0.62), 2.039 (0.67), 2.047 (0.64), 2.056 (0.56), 2.066 (0.49), 2.074 (0.53),
2.082 (0.46), 2.272 (16.00), 2.522 (1.21), 2.558 (0.95), 2.571 (1.24), 2.585 (1.60),
2.597 (0.90), 2.628 (0.53), 3.485 (0.56), 3.493 (0.47), 3.506 (0.41), 3.514 (0.43),
3.523 (0.49), 3.533 (0.69), 3.541 (0.64), 3.575 (0.43), 3.612 (0.45), 3.626 (0.52),
3.668 (0.51), 3.681 (0.72), 3.688 (0.61), 3.701 (0.94), 3.714 (0.56), 3.724 (0.66),
3.733 (0.53), 3.753 (0.60), 3.766 (0.54), 3.865 (0.45), 3.924 (0.44), 3.938 (0.50),
3.973 (0.48), 3.987 (0.48), 4.172 (0.59), 4.703 (0.41), 4.743 (7.59), 4.750 (3.74),
4.768 (1.29), 4.779 (1.99), 4.789 (1.52), 5.254 (0.49), 5.265 (0.49), 5.275 (0.55),
5.284 (0.44), 5.338 (0.40), 5.349 (0.42), 5.375 (0.53), 5.387 (0.60), 5.398 (0.49),
5.407 (0.49), 5.415 (0.44), 5.457 (0.42), 5.470 (0.40), 5.479 (0.42), 7.096 (0.75),
7.102 (0.98), 7.117 (6.91), 7.123 (13.48), 7.144 (1.02).
[1479] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[cis-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
Primer 151
(5RS)-5-{[(3RS)-3-fluor-3-metilpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1480]
[1481] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (8,0 ml) i dihlormetan (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3RS)-3-fluor-3metilpirolidin hidrohlorid (racemat) (58,3 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 97,9 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 373 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.81), 0.008 (0.67), 1.487 (2.19),
1.496 (2.37), 1.505 (2.23), 1.521 (2.02), 1.539 (2.25), 1.548 (2.39), 1.557 (2.22),
1.573 (1.99), 1.717 (1.18), 1.971 (0.64), 1.983 (0.87), 1.994 (0.92), 2.041 (0.65),
2.065 (0.84), 2.102 (0.67), 2.199 (0.44), 2.222 (0.52), 2.272 (16.00), 2.558 (0.72),
2.583 (1.28), 2.625 (0.46), 3.335 (0.59), 3.354 (0.54), 3.370 (0.45), 3.525 (0.49),
3.552 (0.51), 3.572 (0.69), 3.613 (0.67), 3.631 (0.55), 3.643 (0.63), 3.660 (0.57),
3.679 (0.57), 3.729 (0.64), 3.750 (0.40), 3.951 (0.55), 3.973 (0.40), 4.718 (0.47),
4.724 (0.59), 4.745 (6.15), 4.765 (0.40), 4.824 (0.41), 4.831 (0.44), 7.101 (0.69),
7.124 (13.52), 7.145 (0.82).
[1482] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3RS)-3-fluor-3-metilpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
Primer 152
(5RS)-5-{[(3RS)-3-hidroksi-3-(trifluormetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1483]
[1484] (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (enantiomer 1) (100 mg, 348 µmol) ubačena je u DMF (8,0 ml) i dihlormetan (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (172 mg, 452 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 900 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3RS)-3-(trifluormetil)pirolidin-3-ol (racemat) (64,8 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 110 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 425 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.70), 0.008 (0.56), 1.664 (0.42),
1.674 (0.50), 1.687 (0.58), 1.719 (1.06), 1.979 (0.80), 1.997 (0.55), 2.015 (0.85),
2.031 (1.20), 2.060 (0.60), 2.077 (0.73), 2.101 (0.91), 2.111 (0.73), 2.124 (0.84),
2.243 (0.48), 2.272 (16.00), 2.299 (0.41), 2.523 (0.93), 2.577 (0.98), 2.588 (1.35),
2.600 (0.67), 2.630 (0.49), 3.444 (0.70), 3.476 (1.14), 3.492 (0.90), 3.539 (1.03),
3.572 (0.71), 3.585 (0.70), 3.617 (0.50), 3.678 (0.77), 3.707 (0.78), 3.733 (0.51),
3.753 (0.43), 3.761 (0.78), 3.778 (0.56), 3.802 (0.94), 3.840 (0.65), 3.868 (0.45),
4.743 (5.23), 4.748 (5.82), 4.769 (0.84), 4.779 (0.40), 4.836 (0.45), 4.842 (0.49),
6.549 (1.70), 6.564 (1.56), 6.615 (1.15), 6.631 (1.25), 7.099 (0.87), 7.124 (12.86),
7.146 (0.94).
[1485] (5S)-konfiguracija je dodeljena primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454 na osnovu određivanja kristalne strukture.
(5S)-5-{[(3RS)-3-hidroksi-3-(trifluormetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
Primer 153
(5RS)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[6-(2,2,2-trifluoretoksi)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1486]
[1487] Pod argonom, 2,2,2-trifluoretanol (180 µl, 2,5 mmol) rastvoren je u 3 ml DMF-a (osušen iznad molekulskih sita). Na 0 °C dodat je natrijum hidrid (101 mg, čistoća 60%, 2,52 mmol) i mešano je 30 min na 0 °C. Nakon dodavanja (5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-ona (racemat) (210 mg, čistoća 87%, 505 µmol) rastvorenog u 1 ml DMF-a, mešanje je trajalo 3 dana na 60 °C.
[1488] Radi dalje reakcije, zatim je dodatno rastvoren 2,2,2-trifluoretanol (180 µl, 2,5 mmol) u 1 ml DMF-a, zatim je na 0 °C dodat natrijum hidrid (101 mg, čistoća 60%, 2,52 mmol) i smeša je dalje mešana 30 min na 0 °C. Tako dobijen rastvor reagenasa je onda dodat glavnoj smeši i sve je mešano još 48 h na 60 °C.
[1489] Radi obrade, ohlađena smeša je prebačena u vodu, zasićena natrijum hloridom i više puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i uparene. Preostali ostatak je razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Chromatorex, 125x30 mm 10 µm. Protok: 50 ml/min. Gradijent (A= voda 0,1% mravlja kiselina, B= acetonitril). Vreme trajanja po razdvajanju 38 min. Detekcija: 210 nm => 0 min 0% B, 6 min 10% B, 27 min 95% B, 38 min 95% B, 40 min 0% B =>).
Liofilizacijom frakcija koje sadrže proizvod, dobijeno je 24,4 mg (11% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 426 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.59 - 1.84 (m, 4H), 1.86 - 2.10 (m, 4H), 2.45 - 2.65 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.20 - 3.41 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.46 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.73 (dd, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.98 (q, 2H), 6.97 (d, 1H), 7.67 (dd, 1H), 8.08 (d, 1H).
Primer 154
4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzojeva kiselina (racemat)
[1490]
[1491] Terc-butil-4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzoat (racemat) (245 mg, 574 µmol) rastvoren je u 5 ml dihlormetana. Nakon dodavanja 750 µl (9,7 mmol) trifluorsirćetne kiseline, reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Radi obrade, u smešu je uz hlađenje u ledenom kupatilu i snažno mešanje dodat 3 N vodeni rastvor natrijum hidroksida i pH je tako podešen na 3. Nakon razblaženja smešom dihlormetan/voda i ekstrakcije, organska faza je razdvojena, zatim je vodena faza još dva puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane, i pod vakuumom je uklonjen ostatak rastvarača. Tako je dobijeno 195 mg (92% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 371 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.62 - 1.84 (m, 4H), 1.89 - 2.10 (m, 4H), 2.52 - 2.67 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 3.22 - 3.41 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.84 -4.94 (m, 2H), 7.31 - 7.36 (m, 2H), 7.88 - 7.93 (m, 2H), 12.92 (br s, 1H).
Primer 155
N-metil-4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzamid (racemat)
[1492]
[1493] 4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzojeva kiselina (racemat) (78,0 mg, 211 µmol) ubačena je u 2,5 ml dihlormetana, zatim su dodati HATU (160 mg, 421 µmol), N,N-diizopropiletilamin (73 µl, 420 µmol) i 33% metilamin u etanolu (31 µl, 250 µmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodato je još 33% metilamina u etanolu (13 µl, 110 µmol) i mešano dodatnih 5 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, reakciona smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda, zakiseljena pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, ekstrahovana, i organska faza je razdvojena. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, zatim su objedinjene organske faze isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane, i ostatak rastvarača je uklonjen pod vakuumom. Sirovi proizvod je razdvojen pomoću preparativne HPLC hromatografije (instrument: Waters Prep LC/MS System, kolona: Phenomenex Kinetex C185 µm 100x30 mm eluent A: voda, eluent B : acetonitril, protok: 65 ml/min plus 5ml 2% mravlje kiseline u vodi, sobna temperatura, talasna dužina 200-400 nm, injektovanje na kolonu (kompletno injektovanje) gradijentni profil: 0 do 2 min 10% eluent B, 2 do 2,2 min na 20% eluenta B, 2,2 do 7 min na 60% eluenta B, 7 do 7,5 min na 92% eluenta B, 7,5 do 9 min sa 92% B). Objedinjavanjem liofilizovanih frakcija koje sadrže proizvod, dobijeno je 2,00 mg (2,5% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 12): Rt= 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.62 - 1.83 (m, 4H), 1.87 - 2.11 (m, 4H), 2.47 - 2.67 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 2.62 (dt, 1H), 2.77 (d, 3H), 3.23 - 3.40 (m, 2H, delimično prekriven signalom vode), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H), 4.75 (dd, 1H), 4.85 (s, 2H), 7.28 (d, 2H), 7.78 (d, 2H), 8.39 (br q, 1H).
Primer 156
N,N-dimetil-4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzamid (racemat)
[1494]
[1495] 4-{[(5RS)-3-okso-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-2(3H)-il]metil}benzojeva kiselina (racemat) (78,0 mg, 211 µmol) ubačena je u 2,5 ml dihlormetana, zatim su dodati HATU (160 mg, 421 µmol), N,N-diizopropiletilamin (73 µl, 420 µmol) i 2 M dimetilamin u THF-u (126 µl, 252 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi prvo 4 h, a zatim preko vikenda. Dodato je još 2 M dimetilamina u THF-u (105 µl, 210 µmol) i mešano dodatnih 54 h na sobnoj temperaturi. Radi obrade, reakciona smeša je razblažena smešom dihlormetan/voda, zakiseljena pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, ekstrahovana, i organska faza je razdvojena. Vodena faza je još dva puta ekstrahovana dihlormetanom, zatim su objedinjene organske faze isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, koncentrovane, i ostatak rastvarača je uklonjen pod vakuumom. Sirovi proizvod je rastvoren u smeši acetonitril/voda i razdvojen putem preparativne HPLC hromatografije (kolona: Kromasil C18, 125x30 mm, 10 µm, eluent: acetonitril (B) / voda 0,1% TFA (A), gradijent: 0 min 90% A, 6 min 90% A, 18 min 5% A, 20 min 5% A, 21 min 90% A, protok: 75 ml/min, detektor: 210 nm).
Objedinjavanjem frakcija koje sadrže proizvod i uklanjanjem rastvarača pod vakuumom dobijeno je 36,7 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.62 - 1.84 (m, 4H), 1.87 - 2.11 (m, 4H), 2.46 - 2.69 (m, 2H, delimično zaklonjen signalom rastvarač), 2.90 (br s, 3H), 2.97 (br s, 3H), 3.26 (dt, 1H), 3.36 (dt, 1H), 3.47 (dt, 1H), 3.62 (dt, 1H, adelimično prekriven signalom vode), 4.75 (dd, 1H), 4.85 (s, 2H), 7.24 - 7.29 (m, 2H), 7.34 - 7.39 (m, 2H).
Primer 157
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer)
[1496]
[1497] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (enantiomer) (50,0 mg, 183 µmol) ubačena je u DMF (2,2 ml) i dihlormetan (1,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (90,2 mg, 238 µmol) i N,Ndiizopropiletilamin (64 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (15,6 mg, 220 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu. Ostatak je dalje prečišćen hiralnom preparativnom HPLC hromatografijom [priprema uzorka: 37 mg rastvoreno u 1 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,20 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AD-H 5 µm 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol: 30:70; protok: 20 ml/min; temperatura 23°C; UV detekcija: 220 nm]. Dobijeno je 19 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[1498] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,49 min, e.e. = 99,9% [kolona: Daicel Chiralcel<®>AD-3 3 µm 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/i-propanol 1:1, 0,2% trifluorsirćetne kiseline, 1% vode; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 327 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.92), 0.008 (2.77), 1.781 (0.76),
1.798 (1.57), 1.816 (1.43), 1.832 (0.52), 1.887 (0.43), 1.903 (1.35), 1.919 (1.69),
1.936 (1.00), 2.274 (9.31), 2.327 (0.50), 2.366 (0.66), 2.377 (0.48), 2.388 (0.45),
2.524 (1.50), 2.670 (1.06), 2.685 (0.85), 2.693 (1.02), 2.706 (1.21), 2.715 (1.32),
2.748 (0.45), 2.755 (0.48), 2.786 (0.55), 2.808 (0.43), 3.291 (0.62), 3.309 (1.49),
3.328 (1.53), 3.345 (0.62), 3.396 (0.72), 3.403 (0.49), 3.414 (0.42), 3.421 (0.84),
3.438 (0.42), 3.527 (1.79), 3.646 (2.87), 3.663 (3.01), 3.688 (2.02), 3.705 (1.07),
4.698 (0.41), 4.736 (2.51), 4.748 (2.52), 4.897 (0.83), 4.905 (0.63), 4.919 (0.97),
4.925 (0.62), 7.137 (16.00).
[1499] (5S)-konfiguracija je dodeljena primeru 157 na osnovu određivanja kristalne strukture.
Primer 158
(5RS)-5-(3,6-dihidropiridin-1(2H)-ilkarbonil)-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[1500]
[1501] 1,2,3,6-tetrahidropiridin (8,3 mg, 0,10 mmol) dodat je u bunarčić Multititer ploče sa 96 bunarčića, i dodati su (5RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (28,7 mg, 0,10 mmol) i HATU (49,4 mg, 0,13 mmol), rastvoren u 0,8 ml DMF-a. U smešu je dodato 50 µl 4-metilmorfolina, Mikrotiter ploča je zatvorena i tresena je preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim je izvršena filtracija i filtrat je odvojen putem preparativne LC-MS hromatografije.
[1502] (MS instrument: Waters, HPLC instrument: Waters (kolona Waters X-Bridge C18, 19 mm × 50 mm, 5 µm, eluent A: voda, eluent B: acetonitril (ULC) sa gradijentom; protok: 38,5 ml/min; modifikator: aq.5% amonijak; protok: 1,5 ml/min; UV detekcija: DAD; 210 - 400 nm)
odnosno:
MS instrument: Waters, HPLC instrument: Waters (kolona Phenomenex Luna 5 µ C18(2) 100 A, AXIA Tech.50 × 21,2 mm, eluent A: voda, eluent B: acetonitril (ULC), sa gradijentom; protok: 38,5 ml/min; modifikator: aq.10% mravlja kiselina; protok: 1,5 ml/min; UV detekcija: DAD; 210 - 400 nm).
[1503] Frakcije koje sadrže proizvod su uparene pomoću centrifugalne sušnice. Ostatak svih frakcija proizvoda je rastvoren u ukupno 1,8 ml DMSO, objedinjen i ponovo uparen.
Dobijeno je 19,8 mg (56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[1504] LC/MS (metoda 13): Rt= 0,95 min, MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]+.
[1505] Analogno primeru 158 proizvedeni su primeri jedinjenja prikazani u Tabeli 1.
Primer IUPAC naziv / struktura (prinos) Analitički
Primer 163
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1506]
[1507] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 78%, 199 µmol) ubačena je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (29,9 mg, 238 µmol), HATU (98,1 mg, 258 µmol) i trietilamin (170 µl, 1,2 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati trietilamin (55 µl, 400 µmol), (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (12,5 mg, 99,3 µmol) i HATU (37,7 mg, 99,3 µmol) i mešanje je nastavljeno još 90 minuta. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 5,91 mg (8% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,94 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.89), 0.008 (1.61), 2.100 (1.11),
2.115 (1.07), 2.137 (1.07), 2.147 (1.03), 2.161 (0.86), 2.217 (0.84), 2.234 (0.96),
2.264 (1.15), 2.288 (0.52), 2.301 (0.58), 2.307 (0.66), 2.319 (0.78), 2.326 (0.84),
2.334 (0.82), 2.342 (0.82), 2.349 (0.56), 2.357 (0.66), 2.367 (0.62), 2.375 (0.60),
2.383 (0.74), 2.390 (1.01), 2.396 (1.11), 2.403 (0.98), 2.411 (1.03), 2.420 (1.15),
2.430 (0.78), 2.441 (0.66), 2.450 (0.48), 2.671 (1.15), 2.690 (1.41), 2.711 (3.40),
2.719 (3.04), 2.731 (4.98), 2.743 (2.57), 2.752 (4.06), 2.771 (0.86), 2.785 (0.78),
2.792 (1.25), 2.806 (0.64), 2.817 (1.35), 2.825 (1.37), 2.838 (1.27), 2.848 (1.59),
2.859 (1.03), 2.870 (1.01), 2.881 (0.68), 3.342 (1.25), 3.369 (0.74), 3.384 (0.56),
3.393 (0.78), 3.419 (0.66), 3.428 (0.70), 3.468 (0.40), 3.482 (0.72), 3.491 (0.86),
3.516 (1.11), 3.525 (0.74), 3.563 (0.56), 3.573 (0.52), 3.600 (1.29), 3.624 (2.33),
3.646 (1.45), 3.664 (1.89), 3.669 (1.89), 3.685 (2.33), 3.700 (1.55), 3.710 (1.21),
3.726 (1.75), 3.758 (0.58), 3.790 (0.72), 3.832 (0.54), 3.840 (0.62), 3.927 (0.54),
3.935 (0.56), 3.966 (0.74), 3.988 (0.68), 4.013 (0.58), 4.885 (16.00), 4.901 (1.47),
4.939 (1.43), 4.946 (1.55), 4.961 (1.61), 4.967 (1.35), 5.001 (0.46), 5.008 (0.60),
5.018 (0.88), 5.024 (1.17), 5.039 (0.76), 5.045 (0.56), 5.277 (1.37), 5.363 (0.78),
5.372 (0.92), 5.410 (1.37), 5.504 (0.90), 7.511 (6.01), 7.531 (7.46), 7.722 (3.92),
7.743 (3.34), 8.325 (4.96), 8.330 (5.23).
Primer 164
(5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1508]
[1509] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, 228 µmol) ubačena je u THF (2,4 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (34,4 mg, 274 µmol), HATU (113 mg, 297 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HATU (113 mg, 297 µmol), (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (17,2 mg, 137 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol) i mešanje je nastavljeno preko noći. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ponovo su dodati HATU (113 mg, 297 µmol), (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (17,2 mg, 137 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 39,4 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,63 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.09), 0.008 (1.78), 1.994 (0.41),
2.073 (0.50), 2.101 (1.23), 2.119 (1.08), 2.140 (1.10), 2.150 (1.06), 2.165 (0.94),
2.220 (0.88), 2.238 (1.01), 2.266 (1.21), 2.327 (0.97), 2.333 (0.76), 2.343 (0.61),
2.351 (0.76), 2.358 (0.67), 2.366 (1.12), 2.385 (0.86), 2.393 (0.90), 2.407 (1.42),
2.413 (1.23), 2.422 (0.97), 2.431 (1.21), 2.440 (0.76), 2.451 (0.58), 2.665 (0.68),
2.680 (1.14), 2.700 (1.42), 2.721 (3.08), 2.729 (3.64), 2.741 (5.50), 2.762 (3.84),
2.772 (1.50), 2.782 (1.32), 2.795 (0.92), 2.803 (1.51), 2.827 (1.32), 2.835 (1.30),
2.848 (1.23), 2.858 (1.50), 2.870 (0.94), 2.881 (0.88), 2.893 (0.59), 3.372 (1.39),
3.398 (1.01), 3.424 (0.68), 3.432 (0.72), 3.472 (0.70), 3.488 (0.86), 3.496 (1.10),
3.518 (1.44), 3.541 (0.49), 3.567 (0.92), 3.578 (0.83), 3.605 (2.02), 3.630 (2.74),
3.651 (1.28), 3.669 (1.78), 3.674 (1.66), 3.688 (2.11), 3.704 (1.37), 3.714 (1.06),
3.729 (1.77), 3.761 (0.50), 3.794 (0.61), 3.834 (0.47), 3.843 (0.50), 3.930 (0.45),
3.938 (0.49), 3.969 (0.88), 3.991 (1.12), 4.017 (0.81), 4.053 (0.47), 4.079 (0.56),
4.110 (0.45), 4.886 (0.94), 4.893 (1.03), 4.908 (1.06), 4.915 (0.92), 4.953 (1.19),
4.960 (1.32), 4.975 (1.41), 4.982 (1.23), 5.012 (16.00), 5.032 (1.64), 5.039 (2.07),
5.054 (1.35), 5.060 (0.95), 5.279 (1.44), 5.365 (0.95), 5.374 (0.94), 5.412 (1.44),
5.497 (0.92), 5.506 (0.90), 7.904 (2.50), 7.925 (10.38), 7.937 (6.31), 7.958 (1.66),
8.675 (6.00).
Primer 165
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1510]
[1511] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 87%, 209 µmol) ubačena je u THF (2,2 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (31,5 mg, 251 µmol), HATU (103 mg, 272 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim su ponovo dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (15,8 mg, 126 µmol), HATU (103 mg, 272 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol) i smeša je mešana 4 sata na 70 °C. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 16,4 mg (20% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.85), -0.008 (16.00), 0.008
(13.87), 0.146 (1.80), 2.098 (0.73), 2.266 (0.79), 2.327 (1.91), 2.366 (1.63), 2.396
(0.90), 2.421 (0.84), 2.523 (4.55), 2.670 (1.57), 2.698 (0.90), 2.711 (1.91), 2.727
(2.19), 2.738 (3.59), 2.758 (2.64), 2.799 (0.90), 2.827 (0.95), 2.851 (1.07), 2.874
(0.67), 3.372 (0.79), 3.423 (0.51), 3.495 (0.62), 3.515 (0.90), 3.602 (1.29), 3.628
(1.68), 3.666 (1.07), 3.685 (1.35), 3.727 (4.55), 3.970 (0.56), 3.991 (0.67), 4.015
(0.56), 4.826 (7.92), 4.881 (0.79), 4.903 (0.73), 4.947 (0.79), 4.954 (0.79), 4.970
(0.84), 5.029 (1.01), 5.047 (0.79), 5.277 (0.90), 5.364 (0.56), 5.411 (0.90), 5.503
(0.56), 6.922 (0.45), 7.276 (1.96), 7.288 (1.74), 7.379 (2.86), 7.402 (4.38), 7.424
(2.13), 7.458 (2.19), 7.473 (2.19).
Primer 166
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1512]
[1513] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 78%, 199 µmol) ubačena je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (34,2 mg, 238 µmol), HATU (98,1 mg, 258 µmol) i trietilamin (170 µl, 1,2 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (17,1 mg, 119 µmol), HATU (98,1 mg, 258 µmol) i trietilamin (55 µl, 400 µmol) i mešanje je nastavljeno preko noći. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 21,2 mg (28% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.41), -0.008 (11.99), 0.008
(10.88), 0.146 (1.35), 2.327 (0.96), 2.366 (0.96), 2.391 (1.02), 2.412 (2.04), 2.424
(2.13), 2.440 (2.52), 2.450 (1.77), 2.459 (1.59), 2.523 (3.45), 2.561 (1.41), 2.578
(0.78), 2.596 (0.42), 2.669 (1.20), 2.675 (1.14), 2.686 (1.05), 2.694 (1.20), 2.716
(2.52), 2.736 (2.79), 2.743 (3.48), 2.751 (1.65), 2.777 (1.92), 2.791 (1.44), 2.820
(1.29), 2.842 (0.75), 3.550 (2.13), 3.569 (3.63), 3.588 (1.86), 3.682 (0.54), 3.699
(1.80), 3.729 (2.31), 3.744 (1.20), 3.763 (0.75), 3.774 (1.65), 3.808 (1.20), 3.895
(0.48), 3.925 (0.96), 3.962 (1.08), 3.976 (1.29), 3.995 (1.08), 4.002 (1.05), 4.021
(0.51), 4.230 (0.48), 4.259 (1.05), 4.291 (1.05), 4.886 (16.00), 4.927 (1.44), 4.934
(1.17), 4.948 (1.53), 5.011 (1.47), 5.018 (1.14), 5.032 (1.59), 5.039 (1.02), 7.510
(4.82), 7.531 (5.96), 7.718 (2.61), 7.723 (2.67), 7.739 (2.25), 7.744 (2.22), 8.324
(4.01), 8.329 (3.93).
Primer 167
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1514]
[1515] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, 228 µmol) ubačena je u THF (2,4 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (39,4 mg, 274 µmol), HATU (113 mg, 297 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (19,7 mg, 137 µmol), HATU (113 mg, 297 µmol) i trietilamin (64 µl, 460 µmol) i mešanje je nastavljeno preko noći. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 15,4 mg (16% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.95), -0.034 (0.54), -0.009 (16.00),
0.007 (14.34), 0.146 (1.95), 2.327 (1.41), 2.331 (1.16), 2.365 (1.04), 2.408 (0.83),
2.421 (1.16), 2.442 (1.16), 2.460 (1.33), 2.523 (3.69), 2.581 (0.46), 2.669 (1.53),
2.710 (1.08), 2.725 (1.08), 2.747 (1.20), 2.753 (1.37), 2.762 (0.79), 2.787 (0.83),
2.801 (0.58), 2.830 (0.50), 3.556 (0.75), 3.573 (1.41), 3.592 (0.66), 3.702 (0.75),
3.732 (0.87), 3.748 (0.46), 3.770 (0.33), 3.779 (0.62), 3.812 (0.50), 3.929 (0.37),
3.964 (0.46), 3.979 (0.46), 3.998 (0.41), 4.006 (0.41), 4.263 (0.46), 4.293 (0.46),
4.948 (0.46), 4.963 (0.66), 5.012 (5.68), 5.025 (0.79), 5.046 (0.62), 5.053 (0.50),
7.904 (0.75), 7.924 (3.07), 7.935 (1.82), 7.958 (0.54), 8.673 (2.03).
Primer 168
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1516]
[1517] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 87%, 209 µmol) ubačena je u THF (2,2 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (36,1 mg, 251 µmol), HATU (103 mg, 272 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 64,0 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.35), 0.008 (10.27), 0.146 (1.18),
2.327 (2.69), 2.366 (2.86), 2.387 (1.85), 2.410 (3.37), 2.430 (3.54), 2.440 (3.87),
2.460 (2.86), 2.523 (9.60), 2.578 (1.85), 2.669 (3.03), 2.710 (3.54), 2.724 (3.87),
2.744 (5.56), 2.750 (5.73), 2.781 (3.71), 2.797 (2.53), 2.825 (2.02), 2.847 (1.35),
3.552 (3.37), 3.571 (5.73), 3.590 (3.03), 3.701 (3.20), 3.727 (7.58), 3.745 (1.85),
3.776 (2.69), 3.809 (2.02), 3.896 (0.67), 3.926 (1.52), 3.962 (2.02), 3.979 (2.02),
3.996 (1.68), 4.024 (0.84), 4.231 (0.84), 4.260 (1.68), 4.290 (1.68), 4.322 (0.51),
4.785 (1.01), 4.825 (16.00), 4.868 (0.84), 4.934 (1.85), 4.941 (1.85), 4.954 (2.36),
5.018 (2.36), 5.026 (1.68), 5.040 (2.36), 7.270 (3.20), 7.379 (5.22), 7.402 (7.24),
7.424 (3.87), 7.455 (3.87), 7.472 (3.87).
Primer 169
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1519] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 78%, 199 µmol) ubačena je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (26,6 mg, 238 µmol), HATU (98,1 mg, 258 µmol) i trietilamin (170 µl, 1,2 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim su ponovo dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (13,3 mg, 119 µmol), HATU (98,1 mg, 258 µmol) i trietilamin (55 µl, 400 µmol) i smeša je mešana još 5 sati. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 15,4 mg (21% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,52 min; MS (ESIpos): m/z = 352 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.73), -0.008 (6.62), 0.008 (5.33),
0.146 (0.69), 2.328 (0.95), 2.367 (0.90), 2.390 (0.90), 2.422 (4.13), 2.453 (1.25),
2.524 (2.58), 2.670 (1.38), 2.675 (1.55), 2.690 (1.68), 2.723 (12.26), 3.724 (0.60),
3.929 (1.25), 3.962 (1.55), 3.995 (1.25), 4.024 (1.42), 4.193 (0.69), 4.207 (0.77),
4.225 (1.20), 4.253 (1.72), 4.277 (2.02), 4.293 (1.33), 4.310 (1.46), 4.321 (1.25),
4.343 (0.86), 4.429 (0.60), 4.455 (1.12), 4.489 (1.29), 4.514 (1.55), 4.544 (1.03),
4.557 (1.12), 4.582 (0.39), 4.664 (0.65), 4.679 (0.77), 4.695 (0.77), 4.719 (3.23),
4.731 (4.39), 4.757 (0.69), 4.834 (0.65), 4.877 (16.00), 4.917 (0.77), 5.093 (0.60),
5.343 (0.82), 5.350 (0.99), 5.358 (0.77), 5.374 (0.56), 5.390 (0.77), 5.398 (0.95),
5.486 (0.82), 5.493 (0.99), 5.500 (0.82), 5.532 (0.77), 5.540 (0.90), 7.495 (1.08),
7.506 (6.37), 7.516 (1.55), 7.526 (7.87), 7.720 (4.22), 7.741 (3.61), 8.326 (6.06).
Primer 170
(5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1520]
[1521] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, 228 µmol) ubačena je u THF (2,4 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (30,6 mg, 274 µmol), HATU (113 mg, 297 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 5,30 mg (6% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 386 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.13), 0.008 (3.01), 2.328 (0.70),
2.366 (0.52), 2.405 (0.67), 2.432 (3.56), 2.464 (1.22), 2.523 (2.04), 2.670 (0.85),
2.734 (10.77), 3.729 (1.73), 3.938 (1.10), 3.966 (1.37), 3.999 (1.13), 4.028 (1.28),
4.200 (0.64), 4.215 (0.67), 4.230 (1.03), 4.257 (1.52), 4.284 (1.83), 4.296 (1.28),
4.314 (1.16), 4.326 (1.19), 4.348 (0.73), 4.434 (0.46), 4.459 (0.94), 4.494 (1.13),
4.518 (1.37), 4.547 (0.82), 4.561 (0.79), 4.669 (0.55), 4.684 (0.64), 4.746 (3.95),
4.960 (0.43), 5.003 (13.17), 5.043 (0.46), 5.352 (0.88), 5.392 (0.70), 5.400 (0.85),
5.495 (0.88), 5.503 (0.70), 5.543 (0.82), 5.754 (16.00), 7.899 (2.74), 7.919 (9.79),
7.934 (6.11), 7.955 (1.83), 8.674 (6.48).
Primer 171
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1522]
[1523] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 87%, 209 µmol) ubačena je u THF (2,2 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (28,0 mg, 251 µmol), HATU (103 mg, 272 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol). Reakciona smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. Zatim su ponovo dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (14,0 mg, 126 µmol), HATU (103 mg, 272 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol) i smeša je mešana 4 sata na 70 °C. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 31,2 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 369 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.75), -0.008 (16.00), 0.146 (1.81),
2.328 (1.81), 2.366 (1.17), 2.423 (4.50), 2.454 (1.58), 2.670 (1.99), 2.731 (14.31),
3.935 (1.46), 3.965 (1.87), 3.996 (1.46), 4.023 (1.87), 4.227 (1.46), 4.254 (2.10),
4.281 (2.57), 4.297 (1.69), 4.309 (1.75), 4.430 (0.70), 4.455 (1.34), 4.487 (1.58),
4.516 (1.81), 4.543 (1.11), 4.557 (1.05), 4.737 (4.96), 4.775 (1.40), 4.816 (12.67),
4.862 (0.93), 5.351 (1.23), 5.398 (1.11), 5.494 (1.11), 5.540 (1.05), 5.753 (1.69),
7.273 (3.62), 7.374 (5.26), 7.397 (7.82), 7.419 (3.68), 7.453 (4.67), 7.470 (4.67).
Primer 172
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1524]
[1525] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 78%, 199 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (34,2 mg, 238 µmol), HATU (98,1 mg, 258 µmol) i trietilamin (170 µl, 1,2 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HATU (98,1 mg, 258 µmol), trietilamin (55 µl, 400 µmol) i (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (17,1 mg, 119 µmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,7 mg (59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.327 (0.78), 2.350 (0.62), 2.358 (0.83),
2.366 (1.14), 2.384 (1.04), 2.401 (1.27), 2.409 (1.25), 2.418 (1.33), 2.447 (1.17),
2.633 (0.44), 2.674 (1.90), 2.694 (2.26), 2.706 (1.74), 2.722 (2.89), 2.728 (4.29),
2.748 (5.23), 2.783 (2.50), 2.806 (2.06), 2.818 (1.01), 2.828 (1.61), 2.839 (1.27),
2.852 (0.60), 2.862 (0.96), 3.478 (1.04), 3.487 (0.99), 3.512 (1.46), 3.521 (1.59),
3.532 (1.30), 3.567 (1.27), 3.652 (1.35), 3.666 (1.72), 3.687 (1.67), 3.700 (1.87),
3.722 (1.51), 3.734 (0.83), 3.752 (1.27), 3.763 (0.88), 3.784 (0.62), 3.797 (0.62),
3.849 (0.47), 3.862 (0.52), 3.877 (0.94), 3.892 (1.17), 3.926 (1.67), 3.940 (1.40),
3.966 (0.88), 4.181 (0.68), 4.196 (0.78), 4.209 (0.70), 4.223 (1.27), 4.237 (0.81),
4.249 (0.73), 4.265 (0.68), 4.885 (16.00), 4.961 (1.80), 4.968 (1.93), 4.983 (3.69),
4.990 (3.17), 5.004 (2.24), 5.094 (0.60), 5.262 (1.04), 5.274 (1.07), 5.284 (1.04),
5.322 (0.96), 5.344 (0.81), 5.356 (0.86), 5.367 (0.86), 5.383 (0.91), 5.394 (0.96),
5.407 (1.09), 5.420 (1.01), 5.430 (0.99), 5.450 (0.94), 5.458 (0.78), 5.473 (0.86),
5.486 (0.88), 7.511 (5.36), 7.531 (6.56), 7.715 (2.39), 7.720 (4.14), 7.726 (2.60),
7.741 (3.54), 7.746 (2.13), 8.324 (5.18).
Primer 173
(5RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1526]
[1527] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, 228 µmol) ubačena je u THF (2,4 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (39,4 mg, 274 µmol), HATU (113 mg, 297 µmol) i trietilamin (190 µl, 1,4 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 80,3 mg (84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.65), -0.008 (6.58), 0.008 (5.20),
0.146 (0.66), 2.327 (0.78), 2.366 (0.98), 2.428 (0.72), 2.457 (0.73), 2.670 (0.88),
2.682 (0.76), 2.703 (1.20), 2.710 (0.90), 2.715 (0.88), 2.731 (1.59), 2.738 (2.23),
2.758 (2.66), 2.794 (1.35), 2.816 (1.01), 2.838 (0.82), 2.850 (0.69), 2.872 (0.50),
3.364 (16.00), 3.482 (0.98), 3.517 (0.94), 3.525 (0.95), 3.572 (0.75), 3.656 (0.69),
3.670 (0.91), 3.692 (0.87), 3.705 (1.00), 3.726 (0.82), 3.745 (0.44), 3.756 (0.65),
3.768 (0.51), 3.882 (0.50), 3.896 (0.60), 3.930 (0.79), 3.944 (0.72), 3.971 (0.44),
4.199 (0.44), 4.227 (0.66), 4.240 (0.41), 4.975 (0.98), 4.982 (1.03), 4.997 (2.25),
5.012 (8.25), 5.264 (0.53), 5.286 (0.56), 5.324 (0.51), 5.369 (0.44), 5.387 (0.44),
5.409 (0.54), 5.489 (0.48), 7.904 (1.09), 7.924 (4.96), 7.935 (3.27), 7.956 (0.75),
8.672 (3.24).
Primer 174
(5RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1528]
[1529] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 87%, 209 µmol) ubačena je u THF (2,2 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (36,1 mg, 251 µmol), HATU (103 mg, 272 µmol) i trietilamin (180 µl, 1,3 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,9 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.49), -0.008 (4.42), 0.008 (3.97),
0.146 (0.49), 2.073 (1.28), 2.328 (0.88), 2.351 (0.74), 2.359 (1.01), 2.366 (1.55),
2.378 (1.10), 2.384 (1.24), 2.396 (1.31), 2.402 (1.46), 2.410 (1.42), 2.418 (1.49),
2.435 (0.81), 2.446 (1.28), 2.455 (0.79), 2.524 (2.73), 2.642 (0.58), 2.664 (1.38),
2.670 (1.24), 2.683 (1.76), 2.703 (2.73), 2.713 (2.19), 2.730 (3.31), 2.736 (5.21),
2.745 (3.81), 2.755 (6.60), 2.766 (1.38), 2.773 (1.40), 2.789 (3.58), 2.803 (1.13),
2.810 (2.52), 2.822 (1.20), 2.832 (1.94), 2.844 (1.62), 2.856 (0.74), 2.866 (1.24),
3.480 (1.28), 3.490 (1.29), 3.514 (1.73), 3.523 (1.89), 3.532 (1.56), 3.570 (1.60),
3.655 (1.51), 3.668 (2.03), 3.689 (2.10), 3.703 (2.28), 3.711 (1.82), 3.727 (4.12),
3.738 (1.04), 3.744 (1.01), 3.755 (1.49), 3.766 (1.10), 3.787 (0.79), 3.801 (0.76),
3.851 (0.59), 3.866 (0.68), 3.880 (1.19), 3.894 (1.42), 3.929 (2.01), 3.943 (1.51),
3.968 (1.08), 4.184 (0.83), 4.198 (1.01), 4.212 (0.84), 4.225 (1.55), 4.239 (0.95),
4.252 (0.84), 4.267 (0.77), 4.785 (0.79), 4.826 (16.00), 4.868 (0.67), 4.969 (2.05),
4.977 (2.23), 4.991 (4.24), 4.998 (3.85), 5.011 (2.70), 5.018 (1.64), 5.252 (0.76),
5.261 (1.19), 5.274 (1.24), 5.284 (1.20), 5.323 (1.24), 5.332 (0.97), 5.346 (0.99),
5.355 (1.01), 5.368 (1.06), 5.384 (1.11), 5.395 (1.13), 5.408 (1.28), 5.422 (1.17),
5.445 (0.99), 5.451 (1.11), 5.461 (0.92), 5.475 (1.06), 5.489 (0.99), 5.498 (0.68),
7.247 (1.13), 7.252 (2.10), 7.258 (2.23), 7.264 (2.55), 7.269 (2.79), 7.274 (3.33),
7.280 (3.02), 7.286 (2.98), 7.291 (1.74), 7.380 (4.01), 7.402 (6.63), 7.425 (2.97),
7.455 (3.85), 7.473 (3.87), 8.385 (0.41).
Primer 175
(5RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1531] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (66,0 mg, 183 µmol) ubačena je u THF (1,9 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (31,5 mg, 220 µmol), HATU (90,5 mg, 238 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HATU (90,5 mg, 238 µmol), trietilamin (150 µl, 1,1 mmol) i (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (52,5 mg, 366 µmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,0 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 436 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.77), -0.008 (15.84), 0.008
(16.00), 0.146 (1.77), 0.854 (1.39), 1.236 (6.21), 1.410 (2.19), 2.327 (2.41), 2.366
(2.62), 2.438 (1.87), 2.670 (2.94), 2.700 (2.09), 2.710 (2.78), 2.719 (3.10), 2.732
(2.62), 2.755 (5.83), 2.775 (6.85), 2.808 (4.76), 2.827 (2.57), 2.850 (2.03), 2.862
(1.93), 2.884 (1.50), 3.487 (1.50), 3.530 (1.98), 3.578 (2.30), 3.675 (2.35), 3.695
(2.52), 3.707 (2.68), 3.730 (2.09), 3.772 (1.55), 3.793 (0.96), 3.805 (0.96), 3.886
(1.44), 3.900 (1.61), 3.936 (2.30), 3.973 (1.34), 4.198 (1.28), 4.225 (1.93), 4.239
(1.28), 4.991 (2.41), 4.999 (2.78), 5.014 (5.24), 5.020 (5.83), 5.035 (3.05), 5.062
(11.99), 5.073 (10.70), 5.113 (1.28), 5.288 (1.50), 5.388 (1.55), 7.607 (3.80), 7.620
(7.44), 7.632 (4.12), 8.573 (8.51), 8.585 (8.56), 10.193 (1.07).
Primer 176
(5RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer 1)
[1532]
[1533] (5RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 53 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 1 ml etanola (toplog); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AS-H 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 9,2 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 12,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1534] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,22 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiraltek<®>AS, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 436 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (7.43), -0.059 (1.78), -0.045 (2.59),
-0.029 (4.69), 0.019 (5.82), 0.146 (7.43), 1.238 (2.26), 2.328 (8.08), 2.365 (8.40),
2.425 (4.04), 2.433 (4.36), 2.559 (4.53), 2.670 (7.92), 2.709 (7.11), 2.731 (2.75),
2.753 (7.11), 2.775 (8.08), 2.805 (5.01), 2.825 (2.91), 2.848 (2.26), 3.524 (2.59),
3.580 (2.75), 3.673 (3.39), 3.694 (3.07), 3.708 (3.23), 3.716 (3.07), 3.726 (2.26),
3.760 (2.10), 3.896 (1.94), 3.934 (2.75), 3.980 (1.78), 4.224 (2.10), 4.998 (3.72),
5.017 (7.11), 5.035 (3.88), 5.063 (16.00), 5.114 (2.10), 5.277 (2.26), 5.326 (1.94),
5.373 (2.10), 5.397 (2.26), 5.411 (2.26), 5.454 (1.94), 7.606 (4.69), 7.619 (9.05),
7.631 (4.85), 8.572 (9.70), 8.583 (9.05).
Primer 177
(5RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (enantiomer 2)
[1535]
[1536] (5RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 53 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 1 ml etanola (toplog); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AS-H 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 9,2 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 12,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1537] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,86 min, e.e. = 98% [kolona: Daicel Chiraltek<®>AS, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 40:60, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 436 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.89), -0.027 (0.41), -0.025 (0.54),
-0.022 (0.63), -0.019 (0.99), -0.016 (1.17), -0.015 (1.44), -0.008 (16.00), 0.008
(15.19), 0.014 (1.98), 0.016 (1.26), 0.019 (0.90), 0.021 (0.72), 0.024 (0.50), 0.030
(0.45), 0.146 (1.89), 2.327 (0.90), 2.332 (0.68), 2.366 (0.95), 2.523 (2.52), 2.560
(0.72), 2.669 (1.04), 2.710 (0.99), 2.718 (0.41), 2.755 (0.72), 2.775 (0.90), 2.808
(0.63), 5.021 (0.77), 5.036 (0.41), 5.063 (1.58), 5.072 (1.35), 7.607 (0.50), 7.620
(0.95), 7.632 (0.50), 8.572 (1.08), 8.585 (1.04).
Primer 178
(5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1538]
[1539] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (66,0 mg, 182 µmol) ubačena je u THF (1,9 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (27,5 mg, 219 µmol), HATU (90,2 mg, 237 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (13,7 mg, 109 µmol), HATU (90,2 mg, 237 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 60,9 mg (78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), 0.008 (7.50), 0.146 (0.99),
2.121 (2.67), 2.267 (2.36), 2.327 (3.16), 2.367 (3.29), 2.670 (2.60), 2.698 (2.11),
2.716 (2.91), 2.738 (6.08), 2.745 (5.95), 2.758 (9.67), 2.779 (6.82), 2.815 (2.48),
2.837 (2.36), 2.859 (2.17), 2.868 (2.85), 2.882 (2.29), 3.352 (2.29), 3.376 (1.43),
3.437 (1.18), 3.500 (1.80), 3.519 (2.17), 3.609 (3.04), 3.634 (4.16), 3.654 (2.60),
3.679 (3.47), 3.691 (3.53), 3.732 (3.04), 3.798 (1.18), 3.843 (0.99), 3.938 (1.05),
3.970 (1.49), 3.991 (1.61), 4.014 (0.93), 4.080 (0.81), 4.701 (1.12), 4.715 (0.99),
4.902 (2.05), 4.909 (2.11), 4.924 (2.29), 4.931 (1.80), 4.970 (2.42), 4.977 (2.60),
4.992 (2.79), 5.020 (2.11), 5.061 (15.01), 5.070 (16.00), 5.113 (1.55), 5.281 (2.42),
5.378 (1.74), 5.414 (2.42), 5.500 (1.55), 5.730 (0.68), 7.610 (5.40), 7.622 (9.67),
7.635 (5.21), 8.573 (11.22), 8.585 (10.60).
Primer 179
(5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (izomer 1)
[1540]
[1541] (5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 60 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 1 ml etanola; injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AS-H 5 µm, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 10,7 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,6 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1542] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,20 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiraltek<®>AS, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.73), -0.008 (15.96), 0.008
(16.00), 0.146 (1.78), 1.100 (0.61), 1.118 (0.61), 1.235 (0.65), 2.104 (0.74), 2.155
(0.56), 2.257 (0.69), 2.327 (1.26), 2.366 (1.47), 2.396 (0.91), 2.417 (1.13), 2.441
(0.65), 2.523 (3.77), 2.665 (1.04), 2.670 (1.39), 2.698 (0.65), 2.710 (1.26), 2.746
(2.12), 2.758 (3.25), 2.764 (2.25), 2.775 (2.60), 2.792 (1.30), 2.814 (0.95), 2.844
(0.78), 2.866 (0.56), 3.345 (0.65), 3.356 (0.82), 3.375 (0.78), 3.386 (0.52), 3.403
(0.43), 3.477 (0.56), 3.502 (0.78), 3.520 (1.21), 3.545 (0.43), 3.572 (0.87), 3.586
(0.74), 3.609 (1.86), 3.635 (1.73), 3.700 (0.39), 3.722 (0.48), 3.969 (0.56), 3.991
(1.04), 4.017 (0.69), 4.058 (0.48), 4.083 (0.52), 4.111 (0.43), 5.023 (0.52), 5.071
(5.46), 5.116 (0.43), 5.278 (0.74), 5.367 (0.61), 5.412 (0.74), 5.498 (0.69), 7.610
(1.21), 7.623 (2.38), 7.635 (1.30), 8.574 (2.95), 8.586 (2.99).
Primer 180
(5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (izomer 2)
[1543]
[1544] (5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 60 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 1 ml etanola; injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AS-H 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 10,7 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,6 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1545] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,51 min, d.e. = 97,4% [kolona: Daicel Chiraltek<®>AS, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.64), -0.008 (16.00), 0.008
(14.04), 0.146 (1.71), 0.858 (0.44), 1.100 (0.65), 1.118 (0.58), 1.236 (0.91), 1.984
(0.40), 2.010 (0.44), 2.118 (1.20), 2.146 (1.16), 2.215 (0.87), 2.237 (0.98), 2.266
(1.13), 2.327 (1.78), 2.337 (1.13), 2.344 (0.80), 2.354 (0.87), 2.366 (1.53), 2.410
(0.87), 2.433 (1.16), 2.441 (1.31), 2.451 (0.87), 2.463 (1.05), 2.523 (4.33), 2.670
(1.38), 2.674 (1.35), 2.697 (0.95), 2.710 (1.49), 2.716 (1.60), 2.738 (3.67), 2.748
(2.15), 2.759 (4.51), 2.771 (2.80), 2.779 (4.98), 2.818 (1.53), 2.828 (0.84), 2.838
(1.45), 2.847 (1.60), 2.859 (1.82), 2.869 (2.07), 2.882 (1.53), 2.891 (1.31), 2.904
(0.95), 3.333 (2.25), 3.352 (1.56), 3.361 (1.02), 3.379 (0.84), 3.393 (0.80), 3.401
(0.87), 3.428 (0.98), 3.436 (1.05), 3.499 (0.76), 3.525 (1.05), 3.534 (0.91), 3.630
(2.04), 3.655 (2.00), 3.679 (2.73), 3.690 (2.69), 3.706 (2.40), 3.716 (1.78), 3.732
(2.15), 3.739 (1.78), 3.769 (0.80), 3.800 (1.05), 3.844 (0.87), 3.866 (0.55), 3.875
(0.55), 3.931 (0.76), 3.939 (0.84), 3.962 (0.58), 4.902 (1.60), 4.909 (1.75), 4.924
(1.82), 4.931 (1.56), 4.970 (1.85), 4.977 (2.04), 4.992 (2.25), 4.998 (1.82), 5.018
(0.95), 5.061 (7.31), 5.071 (7.53), 5.113 (0.98), 5.282 (1.38), 5.377 (1.09), 5.415
(1.35), 5.510 (1.02), 7.609 (2.69), 7.622 (5.16), 7.635 (2.95), 8.573 (5.60), 8.585
(5.67).
Primer 181
(5RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-yl)carbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1546]
[1547] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (66,0 mg, 182 µmol) ubačena je u THF (1,9 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (31,4 mg, 219 µmol), HATU (90,2 mg, 237 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (15,7 mg, 109 µmol), HATU (90,2 mg, 237 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,9 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 436 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), -0.008 (7.61), 0.008 (6.67),
0.146 (0.86), 1.410 (1.15), 2.328 (1.87), 2.366 (2.22), 2.392 (1.51), 2.411 (2.51),
2.432 (4.52), 2.440 (3.30), 2.451 (3.66), 2.461 (3.95), 2.469 (3.09), 2.524 (5.96),
2.565 (3.01), 2.583 (1.94), 2.600 (1.08), 2.670 (2.30), 2.694 (1.00), 2.701 (1.08),
2.711 (3.52), 2.720 (2.22), 2.733 (2.44), 2.742 (4.52), 2.749 (3.01), 2.760 (4.66),
2.765 (5.24), 2.771 (5.67), 2.779 (3.52), 2.804 (3.37), 2.813 (3.23), 2.818 (2.94),
2.842 (2.51), 2.864 (1.58), 3.559 (4.09), 3.578 (6.82), 3.597 (3.66), 3.673 (0.65),
3.692 (1.08), 3.708 (3.66), 3.740 (3.73), 3.752 (1.94), 3.782 (3.16), 3.816 (2.15),
3.849 (0.50), 3.904 (0.86), 3.934 (1.72), 3.963 (2.22), 3.973 (1.87), 3.982 (2.51),
4.001 (2.08), 4.007 (2.08), 4.027 (1.00), 4.233 (0.86), 4.262 (1.87), 4.293 (1.79),
4.324 (0.65), 4.957 (2.15), 4.965 (2.22), 4.978 (2.58), 5.021 (1.65), 5.042 (2.73),
5.049 (2.37), 5.063 (16.00), 5.073 (14.28), 5.115 (1.72), 7.610 (2.58), 7.621 (5.09),
7.632 (2.80), 8.572 (8.18), 8.584 (8.18).
Primer 182
(5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on (racemat)
[1548]
[1549] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-5-karboksilna kiselina (66,0 mg, 182 µmol) ubačena je u THF (1,9 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (24,4 mg, 219 µmol), HATU (90,2 mg, 237 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 3-fluorazetidin hidrohlorid (12,2 mg, 109 µmol), HATU (90,2 mg, 237 µmol) i trietilamin (150 µl, 1,1 mmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 39,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 404 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.146 (0.43), 2.328 (1.09), 2.366 (0.75),
2.412 (1.14), 2.444 (4.98), 2.670 (1.11), 2.710 (1.84), 2.749 (16.00), 3.942 (1.73),
3.970 (2.16), 4.003 (1.75), 4.033 (2.11), 4.204 (0.91), 4.221 (1.02), 4.235 (1.70),
4.250 (1.86), 4.263 (2.36), 4.274 (2.30), 4.287 (2.57), 4.300 (2.39), 4.331 (1.86),
4.355 (1.09), 4.434 (0.70), 4.460 (1.45), 4.499 (1.61), 4.515 (2.30), 4.552 (1.16),
4.567 (1.16), 4.668 (0.77), 4.701 (1.64), 4.715 (2.16), 4.750 (4.27), 4.761 (5.57),
5.011 (1.55), 5.053 (11.95), 5.108 (1.18), 5.355 (1.34), 5.401 (1.20), 5.498 (1.27),
5.544 (1.23), 5.733 (0.75), 7.612 (4.61), 7.625 (8.73), 7.638 (4.84), 7.870 (0.66),
8.567 (9.82), 8.579 (9.68).
Primer 183
(5S)-5-{[(3R,4R)-3-fluor-4-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1550]
[1551] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 327 µmol) dodata je u THF (5,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (161 mg, 425 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (280 µl, 1,6 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R,4R)-4-fluorpirolidin-3-ol hidrohlorid (55,6 mg, 393 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 27,0 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.05), 0.008 (0.98), 1.721 (0.88),
1.913 (0.46), 1.950 (0.66), 2.040 (0.52), 2.047 (0.53), 2.056 (0.46), 2.273 (16.00),
2.518 (1.63), 2.522 (1.63), 2.562 (0.77), 2.585 (1.21), 2.628 (0.44), 3.350 (0.47),
3.381 (0.72), 3.457 (0.51), 3.474 (0.47), 3.531 (0.80), 3.557 (0.57), 3.601 (0.59),
3.651 (0.61), 3.690 (1.43), 3.757 (0.46), 4.230 (0.42), 4.338 (0.47), 4.748 (5.25),
4.794 (0.41), 4.809 (0.78), 4.818 (0.72), 4.825 (0.49), 4.903 (0.56), 5.032 (0.53),
5.571 (0.87), 5.580 (0.87), 5.595 (0.49), 5.603 (0.47), 5.662 (0.68), 5.671 (0.71),
5.703 (0.94), 5.712 (0.92), 7.101 (0.88), 7.124 (13.88), 7.147 (0.89).
Primer 184
(5S)-2-(ciklopropilmetil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1552]
[1553] Pod argonom: (5S)-2-(ciklopropilmetil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (115 mg, 460 µmol) dodata je u THF (8,5 m) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (228 mg, 599 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (240 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (79,3 mg, 553 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je rastvoren u vodi i acetonitrilu i prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,3 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 327 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.261 (12.07), 0.267 (12.21), 0.273 (12.25),
0.437 (10.80), 0.455 (10.86), 1.058 (3.69), 1.715 (5.00), 1.724 (4.78), 1.901 (1.20),
1.936 (2.51), 1.975 (2.53), 1.996 (2.05), 2.005 (1.59), 2.023 (2.13), 2.031 (2.37),
2.040 (2.55), 2.047 (2.47), 2.057 (2.29), 2.067 (1.95), 2.074 (1.97), 2.082 (1.71),
2.328 (0.60), 2.351 (0.50), 2.366 (0.78), 2.567 (3.73), 2.578 (4.58), 2.602 (5.04),
2.612 (6.20), 2.625 (3.47), 2.655 (1.93), 2.669 (1.41), 2.709 (0.42), 3.418 (0.94),
3.454 (14.61), 3.471 (16.00), 3.497 (2.67), 3.510 (2.61), 3.521 (2.53), 3.531 (2.55),
3.540 (1.59), 3.554 (1.24), 3.563 (1.65), 3.604 (1.57), 3.617 (1.89), 3.637 (1.35),
3.651 (1.65), 3.660 (2.07), 3.674 (3.47), 3.690 (3.05), 3.708 (2.67), 3.723 (2.69),
3.740 (2.27), 3.752 (2.17), 3.772 (1.39), 3.786 (1.06), 3.854 (1.63), 3.895 (1.18),
3.921 (1.51), 3.935 (1.67), 3.949 (1.12), 3.969 (1.67), 3.984 (1.63), 3.998 (1.04),
4.013 (0.94), 4.119 (1.06), 4.133 (1.22), 4.147 (1.18), 4.161 (2.13), 4.175 (1.37),
4.189 (1.16), 4.204 (1.02), 4.729 (4.68), 4.741 (6.85), 4.752 (4.56), 5.248 (1.77),
5.259 (1.83), 5.269 (2.07), 5.279 (1.73), 5.290 (1.26), 5.323 (1.55), 5.331 (1.57),
5.344 (1.71), 5.358 (1.65), 5.368 (1.99), 5.381 (2.29), 5.392 (1.87), 5.401 (1.93),
5.434 (1.30), 5.466 (1.55), 5.474 (1.55), 5.487 (1.22), 5.753 (11.24).
Primer 185
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[trans/cis-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1554]
[1555] (5S)-3-okso-2-{[cis/trans-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (445 mg, 1,26 mmol) dodata je u THF (13 ml) na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati pirolidin (120 µl, 1,5 mmol), HATU (621 mg, 1,63 mmol) i trietilamin (880 µl, 6,3 mmol) i reakciona smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 40mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 158 mg (31% od teor.) dijastereomerne smeše (2 izomera).
[1556] (5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[trans/cis-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 158 mg rastvoreno u 15 ml metanola; injekciona zapremina: 1 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm, 250 x 30 mm; eluent: ugljen dioksid/etanol 70:30; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 56 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 54 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1557] Analitička hiralna HPLC: Rt= 0,85 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IB, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30, protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.465 (2.98), 1.473 (3.40), 1.480 (3.84),
1.487 (4.67), 1.490 (4.53), 1.502 (2.02), 1.507 (1.91), 1.513 (1.33), 1.517 (1.11),
1.524 (1.67), 1.532 (1.52), 1.539 (1.17), 1.549 (1.06), 1.554 (0.73), 1.586 (1.97),
1.591 (2.58), 1.598 (2.08), 1.605 (1.53), 1.612 (1.40), 1.619 (0.96), 1.666 (0.68),
1.679 (0.82), 1.684 (0.90), 1.688 (0.91), 1.693 (0.73), 1.702 (0.78), 1.707 (1.03),
1.711 (1.20), 1.717 (1.36), 1.723 (1.20), 1.733 (0.80), 1.763 (0.70), 1.775 (3.05),
1.786 (5.27), 1.798 (4.12), 1.809 (1.20), 1.899 (1.02), 1.910 (3.13), 1.921 (4.16),
1.932 (2.69), 1.944 (0.83), 1.945 (0.83), 1.954 (0.68), 1.971 (0.80), 1.977 (1.36),
1.986 (1.26), 1.999 (0.71), 2.005 (0.80), 2.009 (0.82), 2.015 (1.00), 2.017 (0.86),
2.023 (0.93), 2.028 (1.06), 2.033 (0.95), 2.047 (0.72), 2.051 (1.08), 2.057 (1.44),
2.064 (1.42), 2.071 (1.20), 2.077 (0.81), 2.265 (0.75), 2.273 (0.73), 2.281 (0.74),
2.512 (0.95), 2.520 (0.72), 2.558 (1.03), 2.603 (1.01), 2.610 (1.93), 2.618 (1.12),
2.630 (0.67), 2.638 (1.12), 3.226 (0.77), 3.237 (1.55), 3.246 (1.41), 3.249 (1.09),
3.257 (2.33), 3.269 (1.10), 3.312 (1.21), 3.324 (2.53), 3.331 (1.48), 3.337 (16.00),
3.343 (1.86), 3.355 (0.76), 3.439 (0.82), 3.450 (1.78), 3.455 (1.23), 3.462 (1.08),
3.467 (2.08), 3.478 (0.95), 3.567 (0.52), 3.580 (0.64), 3.590 (4.31), 3.596 (3.89),
3.604 (4.32), 3.610 (3.99), 3.618 (1.89), 3.629 (0.84), 3.633 (0.57), 4.706 (1.96),
4.711 (2.09), 4.716 (2.32), 4.721 (1.86), 5.759 (13.81).
Primer 186
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[trans/cis-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1558]
[1559] (5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[trans/cis-4-(trifluormetil)cikloheksil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 158 mg rastvoreno u 15 ml metanola; injekciona zapremina: 1 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm, 250 x 30 mm; eluent: ugljen dioksid/etanol 70:30; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 56 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 54 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1560] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,84 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IB, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30, protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.957 (1.26), 0.991 (4.36), 1.023 (5.17),
1.043 (2.00), 1.053 (2.17), 1.147 (2.40), 1.155 (2.66), 1.179 (6.23), 1.186 (6.72),
1.211 (5.99), 1.218 (6.21), 1.243 (2.34), 1.621 (0.98), 1.637 (2.09), 1.647 (2.92),
1.681 (10.46), 1.693 (11.63), 1.706 (11.51), 1.747 (2.77), 1.765 (7.80), 1.782 (12.99),
1.799 (10.09), 1.817 (4.65), 1.832 (7.41), 1.863 (6.74), 1.885 (3.67), 1.902 (9.17),
1.918 (11.87), 1.935 (8.62), 1.952 (3.10), 1.960 (2.94), 1.971 (5.00), 1.983 (5.77),
1.995 (4.03), 2.010 (3.59), 2.020 (2.67), 2.035 (2.39), 2.045 (1.37), 2.057 (0.91),
2.070 (0.68), 2.152 (1.28), 2.160 (1.36), 2.182 (2.42), 2.192 (1.94), 2.204 (2.33),
2.235 (1.10), 2.568 (2.93), 2.588 (3.12), 2.600 (6.14), 2.612 (3.25), 2.629 (1.51),
2.642 (2.49), 2.653 (1.16), 3.212 (1.80), 3.229 (3.63), 3.242 (4.02), 3.258 (6.37),
3.275 (3.12), 3.325 (7.13), 3.343 (3.58), 3.355 (3.72), 3.373 (1.75), 3.390 (0.75),
3.407 (1.01), 3.427 (13.83), 3.443 (16.00), 3.468 (5.79), 3.485 (2.63), 3.578 (2.60),
3.595 (5.41), 3.603 (2.82), 3.611 (3.18), 3.619 (4.08), 3.636 (1.81), 4.682 (4.94),
4.692 (5.90), 4.697 (6.35), 4.706 (4.55), 5.754 (5.05).
Primer 187
(5S)-5-(2-azabiciklo[2.1.1]heks-2-ilkarbonil)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1561]
[1562] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (126 mg, 319 µmol) dodata je u THF (10 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (157 mg, 414 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (560 µl, 3,2 mmol). Nakon 10 min mešanja, dodata je 2-3-azabiciklo[2.1.1]heksan-trifluorsirćetna kiselina (75,4 mg, 382 µmol) i reakciona smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,6 mg (17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 426 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.09), -0.008 (10.21), 0.008 (7.21),
0.146 (0.87), 0.942 (1.20), 0.958 (1.04), 1.216 (1.37), 1.233 (1.75), 1.241 (2.51),
1.259 (2.68), 1.305 (3.39), 1.323 (2.84), 1.331 (2.57), 1.357 (5.57), 1.368 (7.10),
1.379 (5.19), 1.405 (1.15), 1.658 (1.80), 1.757 (3.66), 1.768 (3.39), 1.825 (1.91),
1.866 (1.97), 1.932 (3.39), 2.041 (6.44), 2.270 (0.82), 2.327 (2.57), 2.366 (2.35),
2.523 (8.41), 2.558 (4.15), 2.573 (3.71), 2.587 (4.15), 2.608 (4.15), 2.620 (5.84),
2.634 (3.66), 2.665 (3.55), 2.669 (3.49), 2.710 (2.35), 2.861 (2.84), 2.870 (2.78),
2.951 (1.86), 3.234 (3.06), 3.258 (5.41), 3.518 (2.29), 3.538 (3.06), 3.630 (2.84),
3.649 (2.18), 4.557 (2.62), 4.575 (2.57), 4.650 (1.69), 4.665 (2.57), 4.681 (4.04),
4.697 (3.66), 4.912 (2.62), 4.920 (3.11), 4.928 (3.22), 4.935 (2.73), 5.050 (6.23),
5.070 (16.00), 7.128 (0.82), 7.547 (2.57), 7.560 (5.95), 7.574 (5.24), 7.589 (2.02),
8.383 (0.44), 8.564 (9.67), 8.576 (9.72).
Primer 188
(5S)-5-[(1SR,5RS)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1563]
[1564] (5S)-5-[(cis)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 85 mg rastvoreno u 5 ml etanola; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AY-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 20:80, protok: 20 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 32,5 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 38,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1565] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,02 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiraltrek<®>AY-3-3 µm 50 x 6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 20:80, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.615 (0.46), 0.622 (0.54), 0.629 (0.93),
0.635 (0.92), 0.641 (0.61), 0.648 (0.51), 0.809 (0.76), 0.817 (0.50), 0.823 (0.47),
0.831 (0.78), 1.567 (0.43), 1.572 (0.41), 1.588 (0.43), 1.714 (0.42), 1.738 (0.72),
1.752 (0.82), 1.767 (0.82), 1.772 (0.81), 1.788 (0.56), 1.876 (0.40), 1.884 (0.65),
1.892 (0.58), 1.907 (0.57), 1.914 (0.54), 2.006 (0.50), 2.019 (0.71), 2.027 (0.71),
2.039 (0.88), 2.047 (0.75), 2.055 (0.78), 2.062 (0.61), 2.072 (0.55), 2.085 (0.41),
2.147 (0.65), 2.273 (12.38), 2.521 (1.08), 2.563 (0.61), 2.575 (0.60), 2.585 (0.88),
2.597 (0.58), 2.956 (0.78), 2.965 (0.46), 2.978 (0.41), 2.987 (0.84), 3.697 (0.82),
3.703 (0.88), 3.712 (0.99), 3.718 (0.98), 3.729 (1.15), 3.755 (0.41), 4.754 (5.01),
5.069 (0.77), 5.077 (0.94), 5.085 (0.87), 5.092 (0.76), 7.105 (0.41), 7.127 (16.00),
7.149 (0.41).
Primer 189
(5S)-5-[(1SR,5RS)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1567] (5S)-5-[(cis)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 85 mg rastvoreno u 5 ml etanola; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AY-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 20:80, protok: 20 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 32,5 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 38,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1568] Analitička hiralna HPLC: Rt= 5,66 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiraltrek<®>AY-3-3 µm 50 x 6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 20:80, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 353 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.614 (0.50), 0.620 (0.50), 0.626 (0.41),
0.635 (0.65), 0.641 (0.60), 0.649 (1.02), 0.655 (1.00), 0.662 (0.63), 0.668 (0.58),
0.882 (0.78), 0.890 (0.52), 0.896 (0.49), 0.904 (0.80), 1.650 (0.44), 1.663 (0.49),
1.675 (0.55), 1.686 (0.65), 1.699 (0.66), 1.711 (0.49), 1.717 (0.46), 1.738 (0.71),
1.752 (1.01), 1.766 (0.91), 1.773 (0.80), 1.787 (0.63), 1.849 (0.41), 1.859 (0.77),
1.869 (0.51), 1.881 (0.53), 1.891 (0.53), 1.931 (0.50), 1.940 (0.52), 1.957 (0.47),
1.974 (0.44), 1.984 (0.56), 1.990 (0.56), 2.008 (0.63), 2.029 (0.60), 2.043 (0.80),
2.057 (0.46), 2.070 (0.43), 2.083 (0.41), 2.117 (0.70), 2.125 (0.46), 2.133 (0.56),
2.145 (0.56), 2.153 (0.61), 2.161 (0.55), 2.272 (15.63), 2.523 (0.89), 2.569 (0.89),
2.584 (1.31), 2.596 (0.68), 2.625 (0.46), 3.130 (0.70), 3.151 (1.03), 3.161 (0.58),
3.171 (0.50), 3.181 (0.88), 3.202 (0.43), 3.480 (0.51), 3.486 (0.56), 3.495 (0.90),
3.501 (0.87), 3.510 (0.57), 3.516 (0.48), 3.578 (0.46), 3.588 (0.49), 3.603 (0.58),
3.612 (0.61), 3.619 (0.51), 3.634 (0.43), 3.677 (0.56), 3.683 (0.53), 3.944 (0.41),
4.710 (0.44), 4.719 (0.51), 4.725 (0.68), 4.742 (5.01), 4.750 (1.90), 4.925 (0.82),
4.934 (0.96), 4.941 (1.03), 4.949 (0.79), 7.104 (0.56), 7.126 (16.00), 7.147 (0.61).
Primer 190
(5S)-5-{[(2S)-2-glikoloilpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1569]
[1570] 2-[(2S)-1-{[(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-il]-2-oksoetil-acetat (124 mg, 282 µmol) ubačen je u THF (1,5 ml) i vodu (1,5 ml) i dodat je litijum hidroksid (16,9 mg, 706 µmol) rastvoren u vodi. Nakon 30 min mešanja na sobnoj temperaturi, u reakcionu smešu je dodata voda, 1 N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 11). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 21,7 mg (19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.58), 0.008 (2.09), 1.569 (0.46),
1.595 (0.59), 1.606 (0.60), 1.632 (0.43), 1.697 (0.48), 1.715 (1.13), 1.730 (1.83),
1.746 (1.66), 1.753 (1.01), 1.762 (1.38), 1.778 (0.83), 1.892 (0.57), 1.910 (1.44),
1.922 (1.77), 1.927 (1.91), 1.939 (1.34), 1.945 (1.40), 2.036 (1.22), 2.047 (2.10),
2.058 (2.01), 2.123 (0.47), 2.140 (0.76), 2.161 (0.86), 2.172 (0.80), 2.193 (0.71),
2.269 (16.00), 2.467 (0.53), 2.523 (1.88), 2.559 (1.48), 2.573 (1.07), 2.601 (0.45),
3.540 (0.50), 3.558 (1.07), 3.565 (0.78), 3.575 (0.71), 3.582 (1.28), 3.600 (0.60),
3.740 (0.62), 3.756 (1.21), 3.765 (0.70), 3.773 (0.74), 3.781 (0.96), 3.797 (0.45),
4.153 (3.51), 4.170 (3.94), 4.559 (1.33), 4.573 (1.48), 4.580 (1.52), 4.595 (1.23),
4.731 (5.31), 4.735 (5.29), 4.808 (1.25), 4.820 (2.25), 4.831 (1.09), 5.177 (1.33),
5.192 (2.83), 5.207 (1.25), 7.090 (1.34), 7.112 (9.45), 7.118 (9.08), 7.125 (4.11),
7.139 (1.22).
Primer 191
(5S)-5-[(1,1-difluor-5-azaspiro[2.3]heks-5-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1571]
[1572] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 174 µmol) ubačena je u dihlormetan (4,0 ml) i DMF (7,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (85,8 mg, 226 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (42 µl, 240 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 1,1-difluor-5-azaspiro[2.3]heksan hidrohlorid (32,5 mg, 209 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 22,0 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 389 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.702 (1.18), 1.715 (1.79), 1.728 (1.34),
1.745 (0.60), 1.766 (1.06), 1.787 (1.43), 1.812 (1.15), 1.970 (0.63), 1.982 (0.82),
1.995 (0.85), 2.012 (0.82), 2.029 (0.80), 2.045 (0.53), 2.271 (12.65), 2.567 (1.06),
2.580 (1.02), 3.983 (0.66), 4.007 (1.20), 4.056 (1.17), 4.079 (0.63), 4.363 (0.81),
4.385 (0.86), 4.481 (0.52), 4.510 (0.93), 4.531 (1.39), 4.544 (0.53), 4.574 (0.46),
4.588 (0.69), 4.600 (0.40), 4.753 (5.83), 5.753 (0.46), 7.107 (0.42), 7.128 (16.00),
7.149 (0.45).
Primer 192
(5S)-5-[(3-metilazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1573]
[1574] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 174 µmol) ubačena je u DMF (4,0 ml) i dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (85,8 mg, 226 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-metilazetidin hidrohlorid (22,5 mg, 209 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 39,3 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 341 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.45), 0.008 (0.43), 1.183 (4.30),
1.191 (4.27), 1.201 (4.62), 1.208 (4.13), 1.688 (1.31), 1.700 (1.87), 1.715 (1.47),
1.728 (0.65), 1.890 (0.48), 1.902 (0.53), 1.913 (0.79), 1.925 (0.90), 1.935 (0.57),
1.974 (0.74), 1.988 (0.69), 1.994 (0.69), 2.009 (0.68), 2.270 (14.75), 2.568 (1.78),
2.581 (0.90), 2.610 (0.61), 2.688 (0.48), 2.709 (0.62), 2.719 (0.54), 2.733 (0.45),
3.399 (0.56), 3.413 (0.56), 3.423 (0.61), 3.437 (0.57), 3.454 (0.58), 3.469 (0.59),
3.478 (0.65), 3.493 (0.60), 3.696 (0.54), 3.710 (0.60), 3.716 (0.64), 3.730 (0.55),
3.844 (0.53), 3.859 (0.61), 3.865 (0.65), 3.879 (0.56), 3.937 (0.60), 3.959 (0.95),
3.981 (0.54), 4.002 (0.61), 4.024 (0.99), 4.047 (0.54), 4.258 (0.58), 4.278 (1.15),
4.299 (0.52), 4.387 (0.55), 4.408 (1.09), 4.429 (0.52), 4.451 (0.63), 4.464 (1.38),
4.478 (1.38), 4.489 (0.61), 4.741 (6.73), 7.103 (0.54), 7.124 (16.00), 7.145 (0.55).
Primer 193
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-{[(1RS)-1-oksido-1,3-tiazolidin-3-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1575]
[1576] (5S)-2-(4-metilbenzil)-5-{[(1RS)-1-oksido-1,3-tiazolidin-3-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 24,8 mg rastvoreno u 1,5 ml etanola; injekciona zapremina: 1,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: etanol; protok: 15 ml/min; temperatura 60 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 8,0 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 10 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1577] Analitička hiralna HPLC: Rt= 9,22 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: etanol; protok: 15 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.617 (0.54), 1.629 (0.55), 1.641 (0.49),
1.703 (0.50), 1.712 (0.48), 1.727 (0.47), 1.736 (0.52), 2.022 (1.00), 2.033 (1.04),
2.044 (0.82), 2.078 (0.73), 2.088 (0.68), 2.274 (16.00), 2.557 (0.73), 2.576 (0.73),
2.589 (1.02), 2.601 (0.86), 2.617 (0.53), 2.630 (0.43), 3.037 (0.51), 3.060 (1.07),
3.082 (1.14), 3.093 (0.85), 3.100 (0.84), 3.117 (0.44), 3.125 (0.49), 3.755 (0.42),
3.770 (0.42), 3.778 (0.77), 3.785 (0.54), 3.800 (0.46), 3.807 (0.42), 4.063 (0.41),
4.082 (0.56), 4.086 (0.53), 4.093 (0.44), 4.105 (0.47), 4.112 (0.48), 4.117 (0.44),
4.162 (0.48), 4.174 (0.85), 4.191 (0.74), 4.198 (0.79), 4.284 (0.75), 4.317 (0.90),
4.418 (1.33), 4.449 (1.48), 4.608 (0.60), 4.613 (0.60), 4.641 (0.49), 4.646 (0.50),
4.753 (7.88), 4.850 (0.71), 4.864 (1.03), 4.874 (0.71), 4.898 (0.46), 4.912 (0.61),
4.921 (0.44), 5.018 (0.94), 5.046 (0.85), 7.103 (0.85), 7.128 (12.94), 7.150 (1.01).
Primer 194
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-{[(1RS)-1-oksido-1,3-tiazolidin-3-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1578]
[1579] (5S)-2-(4-metilbenzil)-5-{[(1RS)-1-oksido-1,3-tiazolidin-3-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 24,8 mg rastvoreno u 1,5 ml etanola; injekciona zapremina: 1,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: etanol; protok: 15 ml/min; temperatura 60 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 8,0 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 10 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1580] Analitička hiralna HPLC: Rt= 11,44 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: etanol; protok: 15 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.739 (0.77), 1.994 (1.34), 2.114 (0.42),
2.274 (16.00), 2.560 (1.09), 2.574 (0.86), 2.598 (1.53), 2.610 (0.98), 2.640 (0.61),
2.938 (0.54), 2.972 (0.59), 3.132 (0.43), 3.160 (0.56), 3.181 (0.77), 3.209 (0.40),
3.273 (0.59), 3.972 (1.19), 3.989 (1.18), 3.997 (1.06), 4.108 (0.72), 4.122 (0.72),
4.135 (0.43), 4.286 (0.52), 4.308 (0.71), 4.338 (1.47), 4.371 (1.58), 4.486 (1.01),
4.516 (1.12), 4.606 (1.00), 4.611 (0.98), 4.644 (0.79), 4.756 (6.31), 4.985 (1.16),
4.994 (1.28), 5.010 (0.98), 5.019 (1.39), 5.050 (0.71), 7.130 (14.05).
Primer 195
(5S)-5-[(3-fluor-3-metilazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1581]
[1582] (5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 174 µmol) ubačena je u DMF (2,0 ml) i N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (85,8 mg, 226 µmol) i dihlormetan (1,0 ml). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluor-3-metilazetidin hidrohlorid (24,0 mg, 191 µmol) i reakciona smeša je mešana 2,5 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,9 mg (38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 359 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.569 (3.12), 1.577 (3.06), 1.624 (3.10),
1.632 (3.04), 1.712 (1.77), 1.941 (0.71), 2.011 (0.74), 2.024 (0.68), 2.271 (13.50),
2.577 (1.67), 2.620 (0.50), 3.933 (0.54), 3.951 (0.47), 3.980 (1.33), 3.998 (0.90),
4.028 (0.93), 4.043 (0.99), 4.068 (0.41), 4.253 (0.47), 4.301 (0.51), 4.337 (0.49),
4.389 (0.52), 4.403 (0.55), 4.424 (0.65), 4.448 (0.83), 4.474 (0.70), 4.503 (0.81),
4.519 (1.19), 4.533 (1.19), 4.748 (7.16), 7.126 (16.00).
Primer 196
(2S)-1-{[(5S)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-karbaldehid
[1583]
[1584] Dihlorid oksalne kiseline (20 µl, 230 µmol) dodat je u dihlormetan (2 ml) i ohlađen na -78 °C. Zatim je ukapan rastvor dimetil sulfoksida (36 µl, 500 µmol) i dihlormetana (1 ml) i mešano je još 15 min na -78 °C. Ukapan je (5S)-5-{[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (77,8 mg, 210 µmol) rastvoren u dihlormetanu (2 ml) i reakciona smeša je mešana dodatnih 60 min na - 78 °C. Ukapan je trietilamin (150 µl, 1,1 mmol) i mešano je još 20 min na -78 °C.
Reakciona smeša je dovedena na sobnu temperaturu. U reakcionu smešu je dodata voda. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni (SiO2; mobilna faza: metanol/dihlormetan 10/90). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,9 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 369 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.81), 0.008 (2.35), 1.013 (0.57),
1.091 (0.63), 1.235 (0.83), 1.645 (0.74), 1.657 (0.74), 1.670 (0.86), 1.691 (0.85),
1.705 (0.93), 1.724 (0.92), 1.735 (1.12), 1.748 (1.29), 1.760 (1.25), 1.771 (1.10),
1.782 (0.89), 1.826 (0.52), 1.842 (0.89), 1.858 (1.06), 1.875 (1.07), 1.883 (1.06),
1.892 (1.32), 1.906 (1.40), 1.922 (1.29), 1.937 (1.22), 1.949 (1.42), 1.966 (1.33),
1.985 (1.17), 1.996 (1.25), 2.011 (1.16), 2.020 (1.35), 2.037 (1.48), 2.049 (1.29),
2.064 (1.15), 2.078 (1.20), 2.086 (1.68), 2.099 (1.92), 2.110 (1.86), 2.122 (0.92),
2.233 (0.40), 2.268 (16.00), 2.327 (0.42), 2.518 (2.56), 2.567 (1.27), 2.575 (1.43),
2.587 (1.83), 2.602 (1.80), 2.616 (0.59), 2.628 (0.66), 2.669 (0.42), 3.184 (1.05),
3.211 (1.19), 3.239 (0.57), 3.248 (0.79), 3.266 (1.32), 3.401 (0.42), 3.425 (0.46),
3.576 (0.44), 3.593 (0.86), 3.600 (0.69), 3.618 (1.06), 3.634 (0.49), 3.745 (0.60),
3.763 (0.86), 3.771 (0.74), 3.785 (0.64), 4.323 (0.62), 4.332 (0.73), 4.338 (1.13),
4.344 (0.76), 4.354 (0.60), 4.359 (0.59), 4.709 (0.52), 4.740 (9.55), 4.780 (0.79),
4.792 (0.69), 4.801 (0.52), 4.838 (1.16), 4.849 (1.96), 4.862 (0.99), 5.000 (0.52),
5.007 (0.50), 5.686 (0.85), 5.701 (0.80), 5.753 (1.65), 5.816 (0.77), 5.832 (0.74),
7.090 (1.40), 7.097 (1.38), 7.112 (9.05), 7.118 (13.08), 7.139 (1.38), 9.344 (3.27),
9.349 (3.19).
Primer 197
(5S)-5-[(1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1586] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (68,0 mg, 220 µmol) dodata je u THF (3,7 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (109 mg, 286 µmol), (1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (31,6 mg, 264 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 660 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 63,0 mg (77% od teor.) dijastereomerne smeše (2 izomera).
[1587] Dijastereomerna smeša (2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 63 mg rastvoreno u 2 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IF 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 20:80; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,3 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 17,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1588] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,91 min, d.e. > 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IF, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.50), -0.008 (13.97), 0.008
(12.20), 0.146 (1.59), 0.643 (2.92), 0.903 (2.39), 1.755 (2.56), 1.860 (1.94), 1.955
(2.03), 2.044 (2.30), 2.327 (3.18), 2.366 (2.65), 2.523 (9.72), 2.600 (3.54), 2.665
(2.30), 2.670 (3.09), 2.674 (2.56), 2.710 (2.39), 3.148 (2.56), 3.177 (2.56), 3.506
(2.39), 3.610 (1.59), 3.679 (1.50), 3.936 (1.33), 4.743 (1.50), 4.877 (16.00), 4.885
(8.66), 4.934 (2.39), 4.950 (2.74), 4.959 (2.21), 7.504 (6.63), 7.524 (8.49), 7.687
(3.71), 7.693 (5.04), 7.708 (2.74), 7.714 (3.89), 8.296 (5.04), 8.302 (6.72).
Primer 198
(5S)-5-[(1SR,5RS)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1589]
[1590] (5S)-5-[(1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 63 mg rastvoreno u 2 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IF 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 20:80; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,3 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 17,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1591] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,28 min, d.e. = 98% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IF, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 374 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.33), -0.008 (16.00), 0.008 (9.33),
0.146 (1.24), 0.562 (0.89), 0.619 (2.22), 0.625 (2.49), 0.632 (4.00), 0.638 (3.91),
0.645 (2.58), 0.651 (2.13), 0.728 (0.80), 0.796 (1.69), 0.811 (3.38), 0.818 (2.22),
0.834 (3.38), 0.847 (1.60), 1.578 (2.04), 1.756 (3.91), 1.791 (2.93), 1.854 (1.42),
1.862 (1.51), 1.876 (2.13), 1.885 (2.76), 1.894 (2.31), 1.908 (2.22), 1.915 (2.13),
2.028 (3.11), 2.038 (3.02), 2.048 (3.38), 2.086 (1.69), 2.163 (2.58), 2.322 (1.69),
2.327 (2.22), 2.332 (1.69), 2.366 (2.04), 2.518 (12.36), 2.523 (11.82), 2.566 (4.18),
2.580 (3.29), 2.600 (4.09), 2.612 (2.76), 2.641 (1.60), 2.665 (1.87), 2.669 (2.31),
2.674 (1.69), 2.709 (2.13), 2.934 (1.51), 2.955 (3.38), 2.964 (2.04), 2.977 (1.78),
2.986 (3.56), 3.008 (1.42), 3.541 (1.24), 3.702 (4.09), 3.711 (4.80), 3.717 (4.18),
3.726 (4.71), 3.732 (5.24), 3.757 (1.87), 3.764 (1.69), 3.802 (0.98), 4.653 (1.07),
4.850 (1.33), 4.882 (7.20), 4.890 (14.22), 4.896 (13.07), 4.936 (1.07), 5.087 (3.38),
5.094 (4.09), 5.102 (3.73), 5.110 (3.20), 7.505 (7.20), 7.525 (8.98), 7.690 (5.96),
7.697 (5.87), 7.711 (4.98), 7.717 (4.80), 8.300 (6.76), 8.306 (6.49).
Primer 199
(5S)-5-(2-azabiciklo[2.1.1]heks-2-ilkarbonil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1592]
[1593] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (112 mg, 327 µmol) dodata je u THF (5,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (161 mg, 425 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (570 µl, 3,3 mmol). Nakon 10 min mešanja, dodata je 2-3azabiciklo[2.1.1]heksan-trifluorsirćetna kiselina (77,4 mg, 393 µmol) i reakciona smeša je mešana 60 min na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 24,2 mg (18% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 408 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.67), 0.008 (3.09), 1.223 (0.73),
1.241 (0.84), 1.249 (1.36), 1.267 (1.47), 1.304 (1.61), 1.321 (1.54), 1.330 (1.47),
1.355 (3.02), 1.369 (4.75), 1.383 (2.69), 1.410 (1.26), 1.647 (0.82), 1.744 (1.96),
1.758 (1.82), 1.815 (0.96), 1.856 (1.05), 1.931 (1.87), 2.036 (3.56), 2.072 (0.98),
2.327 (0.98), 2.366 (0.98), 2.558 (3.13), 2.571 (2.48), 2.593 (2.60), 2.605 (3.58),
2.618 (2.08), 2.635 (0.84), 2.647 (1.24), 2.669 (1.26), 2.710 (1.15), 2.861 (1.59),
2.869 (1.57), 2.877 (1.64), 2.932 (1.01), 2.949 (1.05), 3.228 (1.66), 3.252 (2.90),
3.514 (1.43), 3.534 (1.87), 3.634 (1.78), 3.654 (1.26), 4.555 (1.47), 4.573 (1.50),
4.636 (1.03), 4.651 (1.47), 4.663 (1.10), 4.676 (2.08), 4.693 (2.01), 4.896 (1.50),
4.904 (1.78), 4.911 (1.80), 4.919 (1.47), 4.966 (0.73), 5.001 (7.72), 5.018 (5.08),
5.059 (0.70), 7.913 (16.00), 8.645 (5.01).
Primer 200
(5S)-5-[(1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1594]
[1595] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (251 mg, 733 µmol) dodata je u THF (12 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (362 mg, 953 µmol), (1R,5S)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (105 mg, 880 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (380 µl, 2,2 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HATU (279 mg, 733 µmol), (1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (88 mg, 733 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (127 µl, 1,7 mmol), i mešano je još 20 sati. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 54,0 mg (18% od teor.) dijastereomerne smeše (2 izomera).
[1596] Dijastereomerna smeša (2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 54 mg rastvoreno u 20 ml metanola; injekciona zapremina: 1 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: ugljen dioksid/metanol 80:20; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 20,2 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 21,3 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1597] Analitička hiralna HPLC: Rt= 5,41 min, d.e. > 99,5% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/metanol 80:20, protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 408 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.66), -0.008 (5.58), 0.008 (5.50),
0.146 (0.59), 0.630 (1.98), 0.637 (1.98), 0.644 (2.57), 0.650 (2.13), 0.657 (1.32),
0.663 (1.17), 0.691 (0.81), 0.711 (0.81), 0.870 (0.81), 0.884 (1.61), 0.906 (1.69),
0.920 (0.73), 1.567 (0.66), 1.651 (0.95), 1.773 (2.13), 1.839 (0.73), 1.862 (1.54),
1.871 (0.95), 1.885 (0.88), 1.894 (0.81), 1.958 (1.47), 1.976 (1.32), 2.029 (1.17),
2.062 (1.83), 2.154 (1.10), 2.323 (1.03), 2.327 (1.39), 2.332 (1.10), 2.366 (1.03),
2.523 (5.43), 2.567 (2.06), 2.578 (1.83), 2.593 (1.98), 2.610 (2.79), 2.651 (1.03),
2.665 (1.47), 2.670 (1.76), 2.674 (1.25), 2.710 (1.17), 3.132 (1.32), 3.152 (1.76),
3.162 (1.69), 3.172 (0.95), 3.183 (1.98), 3.203 (0.81), 3.491 (1.10), 3.497 (1.25),
3.506 (1.91), 3.521 (1.25), 3.584 (1.03), 3.593 (1.10), 3.609 (1.25), 3.619 (1.32),
3.624 (1.10), 3.641 (0.95), 3.649 (0.81), 3.677 (0.73), 3.687 (1.25), 3.693 (1.17),
3.703 (0.73), 3.920 (0.51), 3.943 (0.88), 3.970 (0.51), 4.761 (1.17), 4.769 (0.81),
4.951 (1.69), 4.959 (2.06), 4.965 (2.20), 4.974 (1.76), 5.004 (9.69), 7.908 (10.94),
7.912 (16.00), 8.642 (3.82).
Primer 201
(5S)-5-[(1SR,5RS)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1598]
[1599] (5S)-5-[(1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 54 mg rastvoreno u 20 ml metanola; injekciona zapremina: 1 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: ugljen dioksid/metanol 80:20; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 20,2 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 21,3 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1600] Analitička hiralna HPLC: Rt= 6,82 min, d.e. > 99,5% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/metanol 80:20, protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 408 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.51), -0.008 (4.45), 0.008 (4.11),
0.146 (0.51), 0.559 (0.56), 0.625 (1.18), 0.630 (1.41), 0.638 (2.42), 0.644 (2.42),
0.651 (1.63), 0.657 (1.30), 0.731 (0.45), 0.751 (0.51), 0.803 (0.96), 0.816 (2.03),
0.838 (2.03), 0.852 (0.96), 1.579 (1.18), 1.745 (1.35), 1.759 (2.37), 1.773 (2.42),
1.794 (2.03), 1.865 (0.90), 1.879 (1.01), 1.889 (1.69), 1.896 (1.35), 1.911 (1.30),
1.918 (1.18), 1.992 (0.90), 2.031 (1.80), 2.039 (1.58), 2.047 (1.58), 2.059 (1.75),
2.185 (1.52), 2.220 (0.90), 2.327 (1.13), 2.332 (0.85), 2.366 (0.79), 2.523 (4.39),
2.563 (2.37), 2.576 (2.03), 2.590 (1.80), 2.609 (2.42), 2.622 (1.63), 2.650 (0.96),
2.665 (1.35), 2.670 (1.41), 2.674 (1.01), 2.710 (0.90), 2.938 (0.90), 2.960 (2.08),
2.970 (1.24), 2.982 (1.01), 2.992 (2.14), 3.014 (0.85), 3.241 (0.51), 3.548 (0.73),
3.554 (0.73), 3.709 (2.42), 3.718 (2.93), 3.725 (2.54), 3.733 (2.76), 3.740 (3.21),
3.764 (1.13), 3.808 (0.51), 4.675 (0.68), 4.975 (0.90), 5.015 (7.21), 5.026 (6.42),
5.067 (0.90), 5.105 (2.03), 5.112 (2.48), 5.120 (2.31), 5.128 (1.97), 7.912 (15.94),
7.915 (16.00), 8.646 (5.41).
Primer 202
(5S)-5-[(1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1601]
[1602] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (533 mg, 1,64 mmol) dodata je u THF (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (809 mg, 2,13 mmol), (1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (235 mg, 1,96 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (860 µl, 4,9 mmol). Ponovo su dodati HATU (622 mg, 1,64 mmol), (1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (196 mg, 1,63 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (287 µl, 1,6 mmol), i mešano je još 20 sati. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom.
Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 112 mg (18% od teor.) dijastereomerne smeše (2 izomera).
[1603] Dijastereomerna smeša (2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 112 mg rastvoreno u 2 ml etanola; injekciona zapremina: 0,35 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AY-H 5 µm, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 40:60; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 42,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 63,6 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1604] Analitička hiralna HPLC: Rt= 7,43 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>AY-H 5 µm, 250 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.75), -0.008 (6.67), 0.008 (5.91),
0.146 (0.75), 0.626 (1.68), 0.633 (2.55), 0.639 (2.55), 0.646 (3.07), 0.652 (3.01),
0.659 (1.86), 0.665 (1.62), 0.676 (0.75), 0.693 (1.22), 0.713 (1.22), 0.727 (0.52),
0.870 (1.16), 0.885 (2.26), 0.892 (1.51), 0.906 (2.38), 0.920 (0.99), 1.548 (0.81),
1.569 (0.99), 1.583 (0.87), 1.657 (1.45), 1.692 (1.51), 1.711 (1.39), 1.756 (3.19),
1.770 (2.84), 1.791 (2.09), 1.830 (0.99), 1.840 (1.04), 1.851 (1.16), 1.861 (2.26),
1.871 (1.51), 1.882 (1.45), 1.893 (1.33), 1.946 (1.68), 1.955 (2.09), 1.988 (1.51),
2.008 (1.91), 2.025 (1.51), 2.051 (2.55), 2.059 (2.43), 2.085 (1.22), 2.131 (1.57),
2.139 (1.39), 2.148 (1.62), 2.159 (1.57), 2.168 (1.45), 2.328 (1.04), 2.366 (0.87),
2.523 (4.52), 2.564 (2.61), 2.575 (2.38), 2.591 (2.67), 2.606 (4.00), 2.619 (2.09),
2.635 (0.99), 2.648 (1.51), 2.665 (1.16), 2.670 (1.28), 2.710 (0.93), 3.106 (0.46),
3.131 (2.09), 3.151 (2.96), 3.161 (1.91), 3.172 (1.39), 3.182 (2.67), 3.202 (1.28),
3.483 (1.57), 3.489 (1.74), 3.499 (2.72), 3.504 (2.67), 3.514 (1.74), 3.519 (1.45),
3.582 (1.33), 3.591 (1.45), 3.607 (1.74), 3.616 (1.86), 3.622 (1.57), 3.638 (1.28),
3.648 (1.16), 3.664 (0.81), 3.670 (0.93), 3.680 (1.74), 3.686 (1.62), 3.696 (0.93),
3.918 (0.70), 3.944 (1.28), 3.967 (0.64), 4.736 (1.16), 4.751 (1.68), 4.760 (1.16),
4.817 (16.00), 4.825 (9.39), 4.942 (2.43), 4.950 (2.84), 4.957 (3.01), 4.966 (2.32),
7.228 (2.03), 7.234 (2.20), 7.243 (2.67), 7.248 (3.01), 7.255 (2.84), 7.260 (2.61),
7.372 (5.62), 7.395 (7.59), 7.417 (4.35), 7.435 (3.71), 7.453 (3.71).
Primer 203
(5S)-5-[(1SR,5RS)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1605]
[1606] (5S)-5-[(1SR,5RS)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 112 mg rastvoreno u 2 ml etanola; injekciona zapremina: 0,35 ml; kolona: Daiceandrel Chiralpak<®>AY-H 5 µm, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 40:60; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 42,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 63,6 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1607] Analitička hiralna HPLC: Rt= 10,06 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>AY-H 5 µm, 250 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (4.82), 0.008 (3.02), 0.564 (0.72),
0.577 (0.47), 0.619 (1.70), 0.625 (1.95), 0.632 (3.12), 0.638 (3.02), 0.645 (2.02),
0.651 (1.67), 0.729 (0.60), 0.750 (0.60), 0.798 (1.29), 0.813 (2.58), 0.820 (1.70),
0.826 (1.61), 0.834 (2.55), 0.848 (1.13), 1.554 (1.32), 1.567 (1.48), 1.575 (1.42),
1.590 (1.51), 1.726 (1.32), 1.741 (2.27), 1.755 (3.06), 1.770 (2.93), 1.776 (2.83),
1.791 (2.30), 1.806 (0.94), 1.855 (1.07), 1.862 (1.20), 1.877 (1.45), 1.886 (2.14),
1.894 (1.83), 1.909 (1.83), 1.915 (1.73), 1.973 (0.57), 1.994 (1.10), 2.007 (1.39),
2.018 (2.30), 2.026 (2.30), 2.032 (2.30), 2.041 (2.39), 2.053 (2.61), 2.061 (2.39),
2.084 (1.39), 2.099 (1.01), 2.161 (2.08), 2.195 (1.20), 2.328 (0.60), 2.366 (0.54),
2.524 (3.59), 2.559 (2.80), 2.572 (2.46), 2.586 (2.14), 2.597 (2.14), 2.606 (2.93),
2.619 (1.98), 2.638 (0.88), 2.647 (1.07), 2.661 (0.82), 2.670 (0.69), 2.710 (0.50),
2.935 (1.23), 2.957 (2.65), 2.966 (1.57), 2.979 (1.45), 2.989 (2.77), 3.010 (1.13),
3.243 (0.76), 3.528 (0.47), 3.534 (0.50), 3.544 (0.88), 3.549 (0.85), 3.559 (0.47),
3.705 (2.93), 3.714 (3.46), 3.721 (3.31), 3.733 (3.69), 3.758 (1.42), 3.765 (1.23),
3.778 (0.44), 3.805 (0.66), 4.649 (0.69), 4.658 (0.79), 4.664 (0.82), 4.674 (0.60),
4.821 (4.98), 4.833 (16.00), 5.093 (2.68), 5.100 (3.18), 5.108 (2.87), 5.115 (2.46),
7.226 (2.02), 7.232 (2.11), 7.238 (2.20), 7.244 (2.52), 7.248 (2.83), 7.253 (2.68),
7.260 (2.52), 7.265 (2.14), 7.372 (4.63), 7.396 (6.17), 7.417 (3.62), 7.437 (3.94),
7.442 (3.75), 7.455 (3.87), 7.460 (3.53).
Primer 204
(5S)-2-[(E)-2-(4-fluorfenil)vinil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1608]
[1609] (5S)-2-[(E)-2-(4-fluorfenil)vinil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (195 mg, 643 µmol) dodata je u THF (6,0 m) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (317 mg, 836 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (560 µl, 3,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (64 µl, 770 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 40mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/sa 0,1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 68,5 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,58 min; MS (ESIpos): m/z = 357 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.95), -0.008 (8.77), 0.008 (8.91),
0.146 (1.02), 1.288 (0.66), 1.732 (1.97), 1.743 (1.83), 1.768 (4.16), 1.783 (8.84),
1.800 (12.20), 1.817 (9.42), 1.832 (3.00), 1.893 (1.17), 1.905 (2.63), 1.922 (7.96),
1.938 (10.08), 1.955 (6.06), 1.973 (1.75), 1.988 (1.61), 2.014 (2.05), 2.024 (3.14),
2.047 (2.56), 2.056 (1.97), 2.062 (1.97), 2.072 (2.41), 2.085 (3.43), 2.091 (2.19),
2.099 (1.97), 2.327 (1.39), 2.366 (1.39), 2.523 (5.11), 2.613 (1.32), 2.627 (1.46),
2.638 (1.17), 2.655 (3.58), 2.670 (4.75), 2.680 (3.58), 2.695 (3.00), 2.704 (3.00),
2.716 (5.11), 2.728 (2.92), 2.746 (1.24), 2.758 (1.83), 2.771 (0.88), 3.238 (1.39),
3.256 (3.21), 3.268 (3.51), 3.285 (6.94), 3.344 (7.67), 3.356 (3.21), 3.361 (3.87),
3.374 (3.73), 3.391 (1.90), 3.457 (1.83), 3.474 (3.80), 3.482 (2.85), 3.491 (2.34),
3.499 (4.89), 3.516 (2.19), 3.611 (2.26), 3.627 (4.53), 3.635 (2.34), 3.644 (2.70),
3.652 (3.65), 3.669 (1.61), 4.791 (4.09), 4.800 (4.68), 4.806 (5.33), 4.815 (3.95),
5.754 (1.61), 6.747 (8.77), 6.783 (9.94), 7.121 (7.67), 7.144 (16.00), 7.166 (8.62),
7.330 (11.69), 7.367 (10.37), 7.519 (8.18), 7.533 (9.28), 7.541 (8.99), 7.555 (7.67).
Primer 205
(5S)-5-[(1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-ilkarbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1610]
[1611] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (52,0 mg, 144 µmol) dodata je u THF (130 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (71,3 mg, 188 µmol), N,N-diizopropiletilamin (76 µl, 430 µmol) i (1RS,5SR)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan hidrohlorid (20,7 mg, 173 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi.
Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,0 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 426 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.74), -0.008 (16.00), 0.008
(14.61), 0.146 (1.74), 0.562 (0.63), 0.640 (2.99), 0.728 (0.49), 0.805 (0.90), 0.820
(1.88), 0.842 (1.88), 0.856 (0.83), 0.907 (0.56), 1.595 (1.25), 1.773 (3.20), 1.795
(2.43), 1.861 (1.11), 1.889 (1.67), 1.912 (1.25), 1.991 (1.32), 2.071 (2.02), 2.192
(1.67), 2.327 (2.23), 2.366 (2.16), 2.523 (7.51), 2.563 (2.92), 2.578 (2.37), 2.592
(2.09), 2.625 (2.92), 2.670 (3.27), 2.710 (2.16), 2.942 (0.90), 2.965 (1.81), 2.974
(1.04), 2.996 (2.09), 3.016 (0.83), 3.151 (0.56), 3.512 (0.63), 3.556 (0.63), 3.715
(2.23), 3.740 (2.99), 3.765 (1.04), 3.814 (0.49), 4.682 (0.63), 4.777 (0.42), 4.977
(0.63), 5.076 (9.25), 5.122 (2.23), 5.129 (2.30), 5.138 (2.16), 7.549 (2.50), 7.562
(4.52), 7.575 (2.71), 8.562 (4.94), 8.574 (5.08).
Primer 206
(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1612]
[1613] (5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 25%, 77,1 µmol) dodata je u THF (800 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin (8,24 mg, 92,5 µmol), HATU (38,1 mg, 100 µmol) i trietilamin (54 µl, 390 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC
hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 15,8 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.69), 0.146 (0.74), 0.950 (0.66),
1.007 (0.42), 1.732 (3.05), 1.874 (0.54), 1.914 (0.71), 1.998 (2.72), 2.026 (1.96),
2.090 (2.37), 2.106 (2.49), 2.137 (1.90), 2.268 (1.44), 2.327 (1.00), 2.366 (0.80),
2.565 (3.31), 2.605 (4.05), 2.648 (1.58), 2.665 (1.37), 2.710 (0.88), 3.273 (1.54),
3.302 (2.23), 3.320 (2.42), 3.368 (3.38), 3.396 (3.86), 3.406 (3.83), 3.468 (4.74),
3.494 (5.02), 3.523 (5.54), 3.546 (4.81), 3.572 (4.14), 3.599 (4.61), 3.636 (4.12),
3.654 (3.67), 3.679 (3.24), 3.705 (2.27), 3.725 (2.15), 3.745 (3.12), 3.775 (2.34),
3.786 (2.18), 3.857 (2.61), 3.918 (0.97), 3.943 (1.47), 4.008 (0.83), 4.039 (0.69),
4.688 (0.97), 4.698 (1.25), 4.704 (1.28), 4.713 (1.00), 4.746 (1.23), 4.761 (1.63),
4.769 (1.26), 4.818 (0.85), 4.831 (1.23), 4.870 (1.11), 4.955 (16.00), 5.261 (1.33),
5.350 (0.68), 5.392 (1.59), 5.481 (0.69), 5.515 (0.81), 6.807 (4.02), 6.944 (7.57),
7.081 (3.72), 7.682 (5.61), 7.702 (7.55), 7.819 (4.74), 7.839 (3.67), 8.563 (6.89).
Primer 207
(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1614]
[1615] (5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 25%, 77,1 µmol) dodata je u THF (800 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin (9,91 mg, 92,5 µmol), HATU (38,1 mg, 100 µmol) i trietilamin (54 µl, 390 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 16,4 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.154 (1.88), -0.013 (16.00), 0.141 (1.83),
0.941 (0.39), 1.657 (0.55), 1.729 (0.61), 1.769 (0.33), 1.952 (0.39), 1.966 (0.55),
2.013 (0.66), 2.032 (0.50), 2.055 (0.55), 2.067 (0.50), 2.076 (0.50), 2.089 (0.44),
2.125 (0.33), 2.322 (2.33), 2.327 (1.77), 2.361 (2.05), 2.518 (5.92), 2.561 (1.38),
2.572 (0.94), 2.585 (0.89), 2.598 (1.33), 2.660 (1.83), 2.664 (2.44), 2.705 (1.94),
3.347 (0.39), 3.448 (0.33), 3.486 (0.39), 3.530 (0.50), 3.612 (0.33), 3.665 (0.39),
3.681 (0.55), 3.698 (0.66), 3.723 (0.55), 3.750 (0.44), 3.763 (0.39), 3.921 (0.39),
3.966 (0.33), 3.983 (0.39), 4.170 (0.39), 4.789 (0.89), 4.801 (1.27), 4.952 (5.04),
5.242 (0.39), 5.250 (0.39), 5.282 (0.33), 5.327 (0.44), 5.344 (0.39), 5.359 (0.33),
5.386 (0.44), 5.395 (0.50), 5.412 (0.39), 5.425 (0.33), 5.453 (0.39), 5.491 (0.39),
6.802 (0.94), 6.939 (2.05), 7.076 (1.00), 7.676 (1.38), 7.697 (1.88), 7.812 (1.27),
7.833 (1.00), 8.556 (2.10).
Primer 208
(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1616]
[1617] (5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 25%, 77,1 µmol) dodata je u THF (800 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3,3-difluorpirolidin (9,91 mg, 92,5 µmol), HATU (38,1 mg, 100 µmol) i trietilamin (54 µl, 390 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 24,3 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.38), 0.146 (1.30), 1.041 (1.65),
1.673 (1.23), 1.731 (1.69), 2.002 (1.76), 2.012 (1.88), 2.047 (1.38), 2.327 (1.50),
2.366 (1.73), 2.381 (1.04), 2.410 (1.27), 2.431 (1.11), 2.563 (3.80), 2.573 (3.95),
2.588 (3.80), 2.605 (3.84), 2.648 (1.30), 2.670 (2.00), 2.710 (1.92), 2.884 (1.00),
3.533 (1.38), 3.541 (1.61), 3.550 (2.19), 3.560 (2.42), 3.580 (1.19), 3.636 (0.50),
3.668 (1.46), 3.703 (1.69), 3.747 (0.88), 3.782 (2.30), 3.811 (2.57), 3.829 (0.81),
3.891 (0.77), 3.909 (1.61), 3.935 (1.15), 3.953 (0.50), 3.993 (0.96), 4.021 (0.77),
4.037 (0.92), 4.065 (0.61), 4.148 (0.58), 4.179 (0.92), 4.206 (0.92), 4.759 (1.27),
4.774 (1.88), 4.784 (1.38), 4.831 (1.27), 4.846 (1.76), 4.856 (1.27), 4.957 (16.00),
6.806 (3.72), 6.943 (7.10), 7.081 (3.41), 7.682 (4.87), 7.702 (6.71), 7.820 (3.84),
7.840 (2.95), 8.157 (0.81), 8.563 (5.14).
Primer 209
(5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1619] (5S)-2-{[6-(difluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 25%, 77,1 µmol) dodata je u THF (800 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 3-fluorazetidin (6,95 mg, 92,5 µmol), HATU (38,1 mg, 100 µmol) i trietilamin (54 µl, 390 µmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodata voda i koncentrovana je pod vakuumom. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,2 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.89), -0.031 (0.40), -0.026 (0.55),
-0.024 (0.65), -0.020 (0.84), -0.018 (1.09), -0.015 (1.39), -0.008 (16.00), -0.007
(12.42), 0.008 (15.60), 0.015 (1.74), 0.018 (0.94), 0.021 (0.70), 0.026 (0.45), 0.028
(0.40), 0.033 (0.35), 0.146 (1.94), 0.990 (0.55), 1.701 (1.19), 1.709 (1.24), 1.939
(0.60), 1.949 (0.75), 1.965 (0.80), 1.975 (0.80), 2.008 (0.70), 2.323 (1.64), 2.327
(2.43), 2.332 (1.84), 2.366 (1.79), 2.445 (0.45), 2.464 (0.70), 2.523 (5.42), 2.526
(4.02), 2.558 (2.09), 2.562 (1.94), 2.566 (1.44), 2.569 (1.19), 2.572 (1.19), 2.579
(1.84), 2.594 (2.34), 2.606 (1.29), 2.622 (0.75), 2.636 (0.80), 2.649 (0.45), 2.665
(1.79), 2.670 (2.34), 2.674 (1.84), 2.709 (1.74), 3.930 (0.55), 3.963 (0.60), 3.994
(0.50), 4.023 (0.40), 4.173 (0.40), 4.216 (0.35), 4.225 (0.50), 4.238 (0.50), 4.255
(0.50), 4.273 (0.65), 4.296 (0.55), 4.326 (0.45), 4.367 (0.45), 4.393 (0.35), 4.432
(0.40), 4.459 (0.45), 4.504 (0.40), 4.521 (0.35), 4.548 (1.44), 4.561 (2.14), 4.573
(1.49), 4.688 (0.35), 4.715 (0.35), 4.958 (5.47), 5.351 (0.35), 5.407 (0.40), 5.496
(0.40), 6.805 (1.64), 6.942 (3.03), 7.080 (1.59), 7.680 (1.84), 7.700 (2.48), 7.823
(1.74), 7.842 (1.34), 8.568 (2.68).
Primer 210
(5S)-2-(4-brombenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1620]
(5S)-2-(4-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1621] (134 mg, čistoća 47%, 179 µmol) ubačen je u THF (2,6 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (88,1 mg, 232 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (250 µl, 1,4 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (30,8 mg, 214 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 54,3 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 441 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.174 (0.60), 1.664 (1.05), 1.725 (1.31),
1.925 (0.44), 1.959 (1.00), 1.988 (1.71), 2.004 (1.29), 2.029 (0.82), 2.038 (0.89),
2.046 (0.97), 2.054 (0.92), 2.063 (0.77), 2.073 (0.69), 2.081 (0.76), 2.089 (0.65),
2.328 (0.44), 2.558 (2.09), 2.569 (1.44), 2.583 (1.90), 2.596 (2.49), 2.608 (1.43),
2.628 (0.55), 2.639 (0.85), 2.669 (0.53), 3.452 (0.51), 3.486 (0.85), 3.507 (0.62),
3.524 (0.76), 3.533 (1.02), 3.542 (0.96), 3.566 (0.44), 3.575 (0.63), 3.586 (0.41),
3.612 (0.67), 3.626 (0.77), 3.645 (0.46), 3.659 (0.54), 3.668 (0.75), 3.682 (1.08),
3.701 (1.39), 3.715 (0.85), 3.724 (0.88), 3.733 (0.89), 3.753 (0.84), 3.764 (0.80),
3.786 (0.45), 3.799 (0.43), 3.863 (0.66), 3.905 (0.49), 3.925 (0.65), 3.939 (0.74),
3.953 (0.43), 3.974 (0.70), 3.988 (0.71), 4.003 (0.56), 4.020 (0.50), 4.127 (0.45),
4.142 (0.52), 4.156 (0.50), 4.169 (0.84), 4.183 (0.56), 4.196 (0.49), 4.211 (0.46),
4.789 (16.00), 5.254 (0.70), 5.264 (0.73), 5.275 (0.83), 5.285 (0.70), 5.296 (0.53),
5.310 (0.50), 5.327 (0.60), 5.336 (0.57), 5.349 (0.66), 5.364 (0.57), 5.377 (0.74),
5.387 (0.87), 5.398 (0.73), 5.406 (0.76), 5.416 (0.71), 5.428 (0.49), 5.439 (0.50),
5.448 (0.55), 5.472 (0.61), 5.479 (0.63), 5.492 (0.48), 7.173 (4.16), 7.180 (4.90),
7.194 (5.08), 7.201 (5.37), 7.527 (7.08), 7.545 (5.88), 7.548 (5.94).
Primer 211
(5S)-2-(3-brombenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1622]
(5S)-2-(3-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1623] (128 mg, čistoća 59%, 215 µmol) ubačen je u THF (3,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (106 mg, 279 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (300 µl, 1,7 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (37,0 mg, 258 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,2 mg (24% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 441 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.670 (1.28), 1.695 (0.91), 1.730 (1.61),
1.928 (0.54), 1.962 (1.20), 2.011 (1.55), 2.019 (1.18), 2.036 (0.94), 2.046 (1.09),
2.054 (1.18), 2.062 (1.15), 2.073 (1.00), 2.081 (0.85), 2.089 (0.96), 2.096 (0.81),
2.327 (0.54), 2.560 (1.83), 2.571 (2.22), 2.582 (1.65), 2.596 (2.31), 2.608 (3.03),
2.620 (1.72), 2.638 (0.65), 2.650 (1.00), 2.665 (0.85), 3.455 (0.57), 3.489 (1.00),
3.510 (0.74), 3.517 (0.80), 3.526 (0.87), 3.537 (1.22), 3.545 (1.15), 3.580 (0.80),
3.616 (0.78), 3.630 (0.91), 3.649 (0.54), 3.671 (0.89), 3.685 (1.24), 3.704 (1.54),
3.718 (0.98), 3.726 (1.29), 3.740 (0.89), 3.757 (1.05), 3.769 (1.07), 3.791 (0.50),
3.803 (0.52), 3.870 (0.80), 3.925 (0.81), 3.939 (0.85), 3.954 (0.50), 3.975 (0.85),
3.989 (0.81), 4.004 (0.52), 4.017 (0.46), 4.133 (0.54), 4.148 (0.59), 4.161 (0.57),
4.175 (0.96), 4.189 (0.65), 4.201 (0.57), 4.217 (0.52), 4.795 (2.35), 4.807 (3.61),
4.823 (16.00), 4.868 (0.41), 5.255 (0.83), 5.266 (0.87), 5.276 (0.98), 5.286 (0.81),
5.299 (0.61), 5.329 (0.70), 5.339 (0.70), 5.351 (0.78), 5.366 (0.68), 5.377 (0.91),
5.389 (1.05), 5.400 (0.83), 5.408 (0.89), 5.417 (0.83), 5.429 (0.59), 5.442 (0.59),
5.459 (0.74), 5.472 (0.72), 5.481 (0.74), 5.495 (0.57), 7.221 (1.92), 7.237 (3.02),
7.288 (2.18), 7.292 (2.61), 7.308 (3.75), 7.311 (4.42), 7.327 (1.78), 7.331 (2.05),
7.435 (5.42), 7.476 (3.16), 7.495 (2.57).
Primer 212
(5S)-2-(4-brombenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1624]
(5S)-2-(4-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1625] (134 mg, čistoća 47%, 179 µmol) ubačen je u THF (2,6 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (88,1 mg, 232 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (250 µl, 1,4 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (26,9 mg, 214 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,7 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.20), -0.008 (9.55), 0.008 (10.75),
0.146 (1.20), 0.940 (0.85), 0.956 (0.80), 1.728 (4.00), 1.913 (0.90), 2.027 (1.60),
2.085 (2.35), 2.133 (1.70), 2.267 (1.45), 2.327 (1.60), 2.366 (0.85), 2.558 (3.25),
2.573 (2.10), 2.600 (3.30), 2.642 (1.30), 2.670 (1.75), 2.709 (0.90), 3.268 (0.95),
3.287 (2.35), 3.344 (1.60), 3.367 (1.10), 3.392 (1.15), 3.464 (0.90), 3.491 (1.10),
3.606 (0.70), 3.633 (3.60), 3.651 (2.55), 3.657 (2.65), 3.675 (1.95), 3.700 (1.40),
3.722 (1.45), 3.742 (2.65), 3.765 (2.00), 3.786 (1.55), 3.855 (3.20), 4.674 (1.50),
4.684 (1.85), 4.690 (1.95), 4.699 (1.55), 4.731 (1.90), 4.746 (3.25), 4.756 (1.90),
4.785 (16.00), 4.830 (0.70), 5.258 (1.70), 5.389 (2.05), 5.510 (1.10), 7.175 (6.10),
7.181 (8.15), 7.196 (8.05), 7.202 (8.55), 7.520 (1.90), 7.526 (13.45), 7.547 (12.20).
Primer 213
(5S)-2-(3-brombenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1626]
(5S)-2-(3-brombenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina
[1627] (128 mg, čistoća 59%, 215 µmol) ubačen je u THF (3,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (106 mg, 279 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (300 µl, 1,7 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (32,4 mg, 258 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 55,5 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.62), 0.146 (0.65), 1.719 (3.49),
1.732 (4.21), 1.871 (0.78), 1.881 (0.75), 1.906 (1.01), 1.995 (1.21), 2.008 (1.21),
2.021 (1.76), 2.064 (1.67), 2.089 (2.48), 2.101 (2.74), 2.126 (1.76), 2.138 (2.02),
2.220 (1.08), 2.242 (1.08), 2.269 (1.47), 2.327 (0.95), 2.366 (0.69), 2.561 (2.45),
2.570 (2.78), 2.587 (2.12), 2.613 (3.46), 2.654 (1.34), 2.669 (1.50), 2.710 (0.82),
3.273 (0.85), 3.347 (1.21), 3.369 (1.14), 3.397 (1.18), 3.405 (1.14), 3.458 (0.85),
3.466 (0.88), 3.494 (1.14), 3.503 (1.08), 3.613 (0.69), 3.638 (3.89), 3.655 (2.61),
3.663 (2.81), 3.680 (2.06), 3.704 (1.50), 3.722 (1.60), 3.742 (3.23), 3.770 (2.06),
3.785 (2.06), 3.856 (3.33), 4.691 (1.53), 4.700 (1.86), 4.706 (1.99), 4.715 (1.57),
4.747 (1.96), 4.756 (2.25), 4.762 (2.58), 4.772 (1.99), 4.819 (16.00), 4.866 (0.88),
5.260 (1.63), 5.390 (2.22), 5.512 (1.21), 7.222 (2.94), 7.241 (4.70), 7.291 (4.70),
7.311 (7.93), 7.330 (3.69), 7.436 (7.09), 7.475 (4.34), 7.495 (3.56).
Primer 214
(5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1628]
[1629] (5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (85,0 mg, 223 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (110 mg, 290 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (33,6 mg, 267 µmol) i reakciona smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,1 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 441 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.07), -0.008 (15.92), 0.008
(15.04), 0.146 (1.91), 1.722 (6.61), 1.861 (1.35), 1.895 (1.67), 2.021 (2.87), 2.087
(3.82), 2.135 (2.63), 2.265 (2.31), 2.327 (3.26), 2.366 (2.55), 2.524 (9.47), 2.569
(3.42), 2.597 (5.17), 2.639 (1.99), 2.670 (3.34), 2.710 (2.47), 3.364 (1.67), 3.391
(1.83), 3.462 (1.27), 3.488 (1.83), 3.604 (1.19), 3.630 (6.05), 3.655 (4.38), 3.673
(3.18), 3.693 (2.31), 3.718 (2.55), 3.740 (4.38), 3.764 (3.42), 3.782 (2.79), 3.851
(5.25), 4.669 (2.55), 4.678 (3.34), 4.684 (3.50), 4.693 (2.71), 4.726 (3.18), 4.735
(3.58), 4.741 (4.22), 4.750 (3.18), 4.772 (3.90), 4.811 (16.00), 4.837 (10.27), 4.877
(2.71), 5.257 (2.63), 5.388 (3.42), 5.509 (1.83), 7.188 (3.98), 7.204 (7.08), 7.208
(8.68), 7.224 (4.06), 7.229 (4.70), 7.403 (8.36), 7.408 (8.60), 7.428 (7.24), 7.543
(7.56), 7.547 (7.16), 7.567 (7.72), 7.572 (7.24), 8.559 (0.64).
Primer 215
(5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1630]
[1631] (5S)-2-(4-brom-2-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (85,0 mg, 223 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (110 mg, 290 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (38,4 mg, 267 µmol) i reakciona smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 50,6 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,54 min; MS (ESIpos): m/z = 459 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.70), -0.008 (5.71), 0.008 (5.79),
0.146 (0.63), 1.636 (2.03), 1.661 (2.64), 1.670 (2.35), 1.685 (1.84), 1.699 (2.42),
1.711 (2.93), 1.720 (3.34), 1.734 (2.81), 1.911 (1.09), 1.953 (2.49), 1.962 (2.18),
1.978 (1.62), 1.998 (3.20), 2.022 (2.03), 2.032 (2.28), 2.040 (2.49), 2.048 (2.42),
2.056 (1.91), 2.067 (1.82), 2.073 (2.20), 2.083 (1.69), 2.327 (0.99), 2.366 (0.68),
2.577 (4.65), 2.591 (6.34), 2.603 (3.56), 2.621 (1.36), 2.633 (2.18), 2.646 (1.14),
2.665 (0.92), 2.670 (1.19), 2.674 (0.94), 2.710 (0.80), 3.448 (1.23), 3.457 (0.77),
3.483 (2.13), 3.504 (1.55), 3.511 (1.57), 3.521 (1.84), 3.530 (2.59), 3.538 (2.37),
3.563 (1.09), 3.573 (1.60), 3.583 (1.02), 3.611 (1.67), 3.624 (1.96), 3.643 (1.19),
3.657 (1.33), 3.666 (1.86), 3.680 (2.74), 3.698 (3.46), 3.713 (2.13), 3.722 (2.13),
3.731 (2.32), 3.751 (2.06), 3.761 (2.03), 3.783 (1.16), 3.796 (1.14), 3.825 (0.75),
3.861 (1.65), 3.902 (1.23), 3.921 (1.62), 3.935 (1.89), 3.950 (1.14), 3.971 (1.79),
3.985 (1.84), 4.000 (1.14), 4.013 (1.04), 4.124 (1.14), 4.138 (1.31), 4.152 (1.26),
4.166 (2.15), 4.179 (1.38), 4.192 (1.26), 4.208 (1.14), 4.778 (7.46), 4.785 (7.24),
4.795 (4.72), 4.816 (16.00), 4.830 (9.08), 4.838 (9.27), 4.869 (1.48), 4.877 (2.25),
5.243 (1.14), 5.252 (1.79), 5.265 (1.79), 5.274 (2.03), 5.283 (1.69), 5.295 (1.31),
5.327 (1.48), 5.336 (1.50), 5.348 (1.60), 5.363 (1.43), 5.375 (1.89), 5.386 (2.25),
5.398 (1.86), 5.406 (1.91), 5.414 (1.69), 5.425 (1.23), 5.439 (1.23), 5.456 (1.52),
5.470 (1.57), 5.478 (1.62), 5.492 (1.21), 5.501 (0.80), 7.180 (3.00), 7.188 (3.53),
7.200 (6.70), 7.208 (7.53), 7.221 (3.87), 7.228 (4.16), 7.405 (8.08), 7.425 (6.80),
7.545 (7.07), 7.549 (4.96), 7.569 (7.21), 7.573 (4.99).
Primer 216
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 1)
[1632]
[1633] (5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 1) (75,0 mg, 210 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (104 mg, 274 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (180 µl, 1,1 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (31,7 mg, 253 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,5 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.57), -0.008 (4.90), 0.008 (5.76),
0.146 (0.57), 1.681 (15.40), 1.699 (16.00), 1.723 (3.24), 1.735 (4.02), 1.747 (3.10),
1.851 (0.68), 1.861 (0.66), 1.887 (0.87), 1.960 (0.90), 1.972 (0.80), 1.985 (1.13),
1.995 (1.46), 2.009 (1.24), 2.061 (1.64), 2.075 (1.83), 2.092 (2.11), 2.126 (1.21),
2.153 (0.79), 2.210 (0.88), 2.231 (0.83), 2.259 (1.15), 2.322 (0.79), 2.327 (1.06),
2.366 (0.60), 2.523 (3.39), 2.569 (1.87), 2.586 (1.53), 2.593 (2.30), 2.609 (1.29),
2.648 (2.28), 2.656 (2.47), 2.669 (2.14), 2.689 (1.02), 2.697 (1.10), 2.710 (1.06),
3.273 (0.63), 3.348 (0.74), 3.361 (0.69), 3.370 (0.74), 3.397 (0.79), 3.405 (0.82),
3.459 (0.61), 3.467 (0.66), 3.494 (0.93), 3.503 (0.87), 3.590 (0.57), 3.616 (1.31),
3.638 (2.46), 3.661 (1.94), 3.689 (0.83), 3.704 (2.09), 3.728 (2.05), 3.750 (1.64),
3.769 (1.31), 3.838 (2.57), 4.644 (1.23), 4.654 (1.51), 4.659 (1.64), 4.669 (1.23),
4.703 (1.53), 4.713 (1.84), 4.719 (2.05), 4.728 (1.56), 5.256 (1.31), 5.388 (1.32),
5.468 (1.95), 5.477 (2.49), 5.486 (2.09), 5.495 (2.76), 7.883 (4.74), 7.903 (6.80),
7.999 (3.75), 8.019 (2.72), 8.705 (5.28).
Primer 217
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 2)
[1634]
[1635] (5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 2) (65,0 mg, 177 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (87,2 mg, 230 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (150 µl, 880 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (26,7 mg, 212 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,2 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.56), -0.008 (4.61), 0.008 (4.37),
0.146 (0.49), 1.677 (15.68), 1.694 (16.00), 1.746 (1.65), 1.884 (0.49), 1.924 (0.75),
2.010 (0.61), 2.084 (1.67), 2.104 (1.72), 2.259 (1.02), 2.327 (1.12), 2.367 (0.53),
2.586 (1.62), 2.602 (1.34), 2.612 (1.51), 2.626 (1.26), 2.655 (1.99), 2.665 (1.94),
2.669 (1.96), 2.697 (0.78), 2.710 (0.80), 2.882 (0.51), 3.247 (0.49), 3.275 (0.90),
3.371 (0.65), 3.379 (0.68), 3.441 (0.53), 3.468 (0.77), 3.618 (1.89), 3.634 (1.74),
3.646 (1.36), 3.676 (0.97), 3.715 (1.48), 3.738 (1.51), 3.759 (1.17), 3.777 (1.00),
3.842 (2.06), 4.689 (1.02), 4.698 (1.24), 4.704 (1.33), 4.713 (0.99), 4.746 (1.26),
4.754 (1.46), 4.761 (1.69), 4.770 (1.26), 5.245 (1.06), 5.377 (1.46), 5.489 (1.69),
5.498 (2.54), 5.506 (2.30), 5.515 (2.09), 7.900 (3.88), 7.920 (6.69), 7.974 (2.72),
7.994 (1.62), 8.663 (4.90).
Primer 218
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 1)
[1636]
[1637] (5S)-3-okso-2-{(1R)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 1) (75,0 mg, 210 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (104 mg, 274 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (180 µl, 1,1 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (36,3 mg, 253 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,4 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.11), -0.008 (9.41), 0.008 (9.45),
0.146 (1.07), 1.406 (0.97), 1.679 (15.86), 1.697 (16.00), 1.719 (2.58), 1.943 (1.32),
1.968 (0.93), 1.976 (1.29), 1.990 (1.29), 2.022 (1.15), 2.041 (1.25), 2.048 (1.29),
2.058 (1.22), 2.077 (1.00), 2.322 (1.65), 2.327 (2.29), 2.332 (1.75), 2.523 (6.59),
2.569 (2.04), 2.584 (2.18), 2.595 (2.61), 2.606 (1.93), 2.619 (1.32), 2.652 (2.79),
2.665 (3.15), 2.669 (3.04), 2.674 (2.51), 2.694 (1.36), 2.709 (1.32), 3.491 (1.18),
3.511 (0.89), 3.528 (1.04), 3.537 (1.43), 3.545 (1.32), 3.579 (0.93), 3.617 (0.97),
3.630 (1.11), 3.673 (1.15), 3.687 (1.61), 3.703 (1.79), 3.722 (1.57), 3.736 (1.07),
3.753 (1.25), 3.766 (1.15), 3.801 (0.93), 3.842 (1.04), 3.882 (0.79), 3.915 (0.93),
3.928 (1.15), 3.965 (1.04), 3.978 (1.00), 4.116 (0.79), 4.131 (0.75), 4.146 (1.00),
4.158 (0.79), 4.744 (2.72), 4.758 (3.69), 4.768 (2.51), 5.251 (1.04), 5.262 (1.00),
5.272 (1.07), 5.303 (0.79), 5.312 (0.79), 5.319 (0.89), 5.329 (0.86), 5.342 (0.89),
5.365 (0.89), 5.376 (1.07), 5.385 (1.07), 5.396 (1.07), 5.404 (1.04), 5.418 (1.04),
5.427 (0.79), 5.452 (1.36), 5.470 (2.86), 5.485 (3.19), 5.500 (2.76), 5.516 (0.82),
7.884 (5.37), 7.904 (7.48), 8.002 (4.22), 8.023 (3.11), 8.705 (6.59).
Primer 219
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 2)
[1638]
[1639] (5S)-3-okso-2-{(1RS)-1-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]etil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 2) (65,0 mg, 177 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (87,2 mg, 230 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (150 µl, 880 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (30,5 mg, 212 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,6 mg (15% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.97), -0.050 (0.62), -0.008 (16.00),
0.008 (15.32), 0.018 (0.68), 0.146 (1.66), 1.616 (0.94), 1.652 (1.25), 1.677 (13.66),
1.695 (13.30), 1.741 (1.19), 1.779 (0.83), 1.976 (0.99), 2.017 (1.51), 2.027 (1.51),
2.065 (1.04), 2.093 (0.78), 2.101 (0.78), 2.322 (2.86), 2.327 (3.79), 2.332 (2.81),
2.366 (1.66), 2.392 (0.57), 2.404 (0.62), 2.523 (7.69), 2.567 (0.83), 2.583 (1.09),
2.594 (1.14), 2.609 (1.56), 2.620 (1.14), 2.633 (1.40), 2.651 (2.08), 2.661 (2.44),
2.665 (3.48), 2.669 (4.00), 2.674 (3.01), 2.692 (0.68), 2.710 (1.51), 3.462 (0.73),
3.483 (0.68), 3.501 (0.68), 3.508 (0.94), 3.517 (0.99), 3.605 (0.78), 3.645 (0.68),
3.660 (1.19), 3.673 (0.94), 3.695 (0.99), 3.720 (0.83), 3.737 (0.83), 3.758 (0.62),
3.859 (0.57), 3.897 (0.57), 3.916 (0.78), 3.929 (0.83), 3.958 (0.57), 3.966 (0.78),
3.980 (0.62), 4.145 (0.57), 4.157 (0.78), 4.186 (0.57), 4.796 (1.97), 4.810 (2.49),
4.820 (1.82), 5.247 (0.83), 5.255 (0.78), 5.264 (0.68), 5.311 (0.73), 5.342 (0.73),
5.357 (0.94), 5.368 (0.94), 5.391 (0.88), 5.441 (0.73), 5.476 (1.04), 5.493 (1.66),
5.501 (1.82), 5.511 (1.56), 5.520 (1.66), 7.897 (1.77), 7.901 (2.08), 7.916 (3.32),
7.920 (3.58), 7.966 (1.71), 7.979 (2.18), 7.993 (1.19), 8.551 (0.78), 8.660 (4.26).
Primer 220
(5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1640]
[1641] (5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}oktahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 279 µmol) dodata je u dihlormetan (2,0 ml) i DMF (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (138 mg, 363 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (38,5 mg, 307 µmol) i reakciona smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 76,0 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja kao dijastereomerna smeša.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.95), 0.008 (0.84), 1.175 (11.85),
1.181 (12.64), 1.192 (12.80), 1.198 (12.36), 1.345 (0.79), 1.375 (1.07), 1.409 (1.13),
1.442 (0.85), 1.804 (1.52), 1.814 (1.61), 1.824 (1.65), 1.833 (1.39), 1.965 (0.69),
1.999 (1.14), 2.033 (0.60), 2.040 (0.61), 2.078 (3.30), 2.088 (3.09), 2.103 (3.06),
2.111 (3.23), 2.126 (2.92), 2.135 (2.51), 2.153 (1.32), 2.172 (0.58), 2.227 (0.92),
2.237 (0.95), 2.258 (1.26), 2.524 (0.86), 2.707 (1.11), 2.722 (1.74), 2.737 (2.13),
2.752 (1.75), 2.766 (1.08), 3.276 (0.43), 3.357 (0.89), 3.367 (1.05), 3.387 (0.89),
3.397 (0.83), 3.414 (0.46), 3.463 (0.43), 3.490 (0.58), 3.498 (0.58), 3.520 (1.78),
3.543 (1.38), 3.550 (1.09), 3.569 (1.18), 3.599 (2.26), 3.625 (1.34), 3.641 (1.96),
3.648 (1.65), 3.671 (1.54), 3.700 (0.76), 3.714 (0.73), 3.736 (1.85), 3.758 (1.07),
3.766 (1.05), 3.776 (1.17), 3.844 (1.52), 3.910 (0.54), 3.932 (0.99), 3.952 (0.72),
3.980 (0.44), 4.006 (0.53), 4.038 (0.41), 4.725 (0.97), 4.738 (1.03), 4.773 (0.95),
4.782 (1.50), 4.793 (0.96), 4.854 (0.84), 4.860 (1.12), 4.872 (0.97), 4.890 (0.89),
4.902 (1.20), 4.909 (0.81), 5.002 (0.58), 5.052 (13.40), 5.092 (0.56), 5.262 (1.23),
5.269 (1.12), 5.349 (0.69), 5.395 (1.28), 5.481 (0.68), 5.511 (0.56), 7.884 (0.66),
7.908 (16.00), 7.928 (0.87), 8.633 (6.30).
Primer 221
(5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1642]
[1643] (5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 60 mg rastvoreno u 1 ml etanola i 1 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 18,4 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 18,5 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1644] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,95 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>ID-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.11), 0.008 (1.73), 1.175 (15.58),
1.191 (16.00), 1.316 (0.40), 1.345 (1.10), 1.373 (1.14), 1.401 (0.52), 1.797 (0.87),
1.821 (1.22), 1.842 (0.80), 1.856 (0.67), 2.003 (0.50), 2.076 (3.92), 2.138 (1.06),
2.153 (0.81), 2.207 (0.68), 2.229 (0.70), 2.245 (0.70), 2.257 (0.97), 2.328 (0.43),
2.670 (0.47), 2.720 (1.03), 2.735 (1.32), 2.744 (1.35), 2.774 (0.60), 3.338 (0.78),
3.356 (0.70), 3.367 (1.10), 3.385 (1.09), 3.395 (0.76), 3.413 (0.61), 3.519 (2.55),
3.542 (1.99), 3.567 (1.70), 3.598 (2.78), 3.647 (0.57), 3.671 (0.60), 3.679 (0.60),
3.745 (0.48), 3.768 (0.62), 3.776 (0.61), 3.909 (0.78), 3.931 (1.41), 3.951 (1.04),
3.978 (0.66), 4.005 (0.77), 4.036 (0.62), 4.858 (1.59), 4.872 (1.35), 4.889 (1.29),
4.901 (1.72), 4.909 (1.15), 5.051 (13.02), 5.269 (0.97), 5.348 (0.97), 5.399 (0.99),
5.480 (0.97), 7.885 (0.47), 7.908 (12.03), 7.928 (0.69), 8.632 (5.68).
Primer 222
(5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1645]
[1646] (5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 60 mg rastvoreno u 1 ml etanola i 1 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 18,4 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 18,5 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1647] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,22 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>ID-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.59), 0.008 (1.32), 1.120 (0.68),
1.181 (15.77), 1.198 (16.00), 1.377 (0.51), 1.391 (0.56), 1.408 (1.21), 1.441 (1.17),
1.464 (0.45), 1.803 (1.39), 1.813 (1.24), 1.824 (1.15), 1.837 (1.13), 1.964 (0.73),
1.999 (1.22), 2.102 (2.42), 2.115 (3.09), 2.126 (3.14), 2.135 (2.50), 2.146 (1.27),
2.170 (0.54), 2.227 (0.65), 2.236 (0.75), 2.271 (0.93), 2.282 (0.84), 2.524 (0.99),
2.707 (1.01), 2.722 (1.52), 2.737 (1.78), 2.752 (1.45), 2.767 (0.89), 3.275 (0.76),
3.294 (1.15), 3.303 (1.69), 3.391 (1.53), 3.400 (1.29), 3.453 (0.67), 3.462 (0.68),
3.489 (0.84), 3.497 (0.79), 3.599 (0.51), 3.624 (1.85), 3.641 (2.31), 3.670 (1.69),
3.698 (1.02), 3.714 (1.01), 3.735 (2.25), 3.757 (1.43), 3.774 (1.16), 3.843 (2.15),
4.724 (1.36), 4.737 (1.44), 4.772 (1.34), 4.781 (2.09), 4.792 (1.37), 5.001 (0.77),
5.042 (8.22), 5.049 (6.72), 5.091 (0.65), 5.260 (1.10), 5.391 (1.28), 5.510 (0.78),
7.883 (0.53), 7.907 (12.15), 7.927 (0.85), 8.632 (4.85).
Primer 223
(5RS,8RS)-8-metil-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1648]
[1649] (5RS,8RS)-8-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (27,3 mg, 90,6 µmol) ubačena je u DMF (1,5 ml) i dihlormetan (750 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (44,7 mg, 118 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (22 µl, 130 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (9,1 µl, 110 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 18,0 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja kao smeša dijastereomera.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.89), 0.008 (0.80), 1.166 (8.74),
1.183 (9.03), 1.380 (0.42), 1.396 (1.31), 1.411 (0.71), 1.432 (0.51), 1.442 (0.50),
1.528 (1.03), 1.755 (1.12), 1.770 (2.91), 1.787 (4.30), 1.804 (3.36), 1.821 (0.86),
1.892 (0.84), 1.908 (2.40), 1.925 (2.98), 1.942 (1.80), 1.958 (0.48), 2.040 (1.84),
2.049 (2.25), 2.058 (1.75), 2.271 (16.00), 2.523 (0.60), 2.663 (0.69), 2.677 (0.96),
2.693 (1.06), 2.708 (0.93), 2.723 (0.55), 3.220 (0.49), 3.237 (1.05), 3.250 (1.04),
3.267 (1.83), 3.284 (0.98), 3.335 (2.01), 3.347 (0.81), 3.353 (1.05), 3.364 (1.12),
3.382 (0.52), 3.428 (0.55), 3.445 (1.19), 3.453 (0.91), 3.463 (0.75), 3.470 (1.52),
3.487 (0.68), 3.578 (0.69), 3.595 (1.41), 3.603 (0.76), 3.611 (0.84), 3.619 (1.12),
3.636 (0.52), 4.707 (1.64), 4.738 (1.56), 4.746 (5.65), 4.757 (1.42), 4.799 (3.57),
4.839 (1.59), 7.097 (1.28), 7.118 (10.61), 7.124 (9.75), 7.145 (1.25).
Primer 224
(5RS,7RS)-7-metil-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1650]
[1651] (5RS,7RS)-7-metil-2-(4-metilbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 199 µmol) sa pirolidinom (25 µl, 300 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijumheksafluorfosfat (121 mg, 319 µmol) i reakciona smeša je mešana 5 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,0 mg (29% od teor.) naslovnog jedinjenja kao dijastereomerna smeša.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.013 (3.80), 1.030 (3.91), 1.106 (7.23),
1.329 (0.57), 1.359 (0.58), 1.771 (1.01), 1.788 (1.80), 1.805 (1.54), 1.814 (0.95),
1.860 (0.50), 1.882 (0.68), 1.899 (1.42), 1.916 (1.58), 1.931 (0.91), 2.111 (0.74),
2.141 (0.57), 2.151 (0.79), 2.181 (0.84), 2.270 (10.66), 2.611 (0.49), 2.616 (0.51),
2.646 (0.40), 2.651 (0.45), 2.657 (0.43), 3.076 (2.31), 3.226 (0.41), 3.243 (0.65),
3.256 (0.57), 3.273 (0.92), 3.290 (0.45), 3.339 (0.47), 3.356 (0.93), 3.374 (0.50),
3.386 (0.56), 3.468 (0.59), 3.476 (0.46), 3.493 (0.74), 3.634 (0.73), 3.651 (0.41),
3.659 (0.56), 4.601 (0.62), 4.617 (0.73), 4.628 (0.71), 4.643 (0.61), 4.718 (4.78),
7.128 (16.00).
Primer 225
(5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1652]
[1653] (5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (98,0 mg, 276 µmol) sa pirolidinom (25 µl, 300 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (115 mg, 303 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,4 mg (33% od teor.) dijastereomera 1 (racemat) i 8,7 mg (8% od teor.) dijastereomera 2 (racemat) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,69 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.44), 0.008 (0.45), 1.777 (0.99),
1.794 (1.60), 1.806 (1.64), 1.822 (1.20), 1.839 (0.52), 1.907 (0.75), 1.924 (2.35),
1.941 (3.00), 1.958 (1.73), 1.975 (0.43), 2.167 (0.74), 2.182 (0.75), 2.197 (1.28),
2.210 (2.06), 2.272 (15.46), 2.523 (0.50), 2.643 (0.56), 2.676 (1.24), 2.687 (1.24),
2.719 (0.94), 2.949 (1.79), 2.983 (1.24), 2.993 (0.80), 3.248 (0.42), 3.265 (0.82),
3.277 (0.98), 3.295 (1.74), 3.332 (1.01), 3.349 (1.49), 3.366 (0.94), 3.379 (0.80),
3.396 (0.43), 3.534 (0.43), 3.551 (0.96), 3.559 (0.83), 3.568 (0.62), 3.576 (1.44),
3.593 (0.64), 3.631 (0.66), 3.648 (1.38), 3.655 (0.63), 3.665 (0.77), 3.673 (0.92),
4.723 (0.92), 4.762 (4.01), 4.782 (3.97), 4.820 (0.94), 4.937 (1.52), 4.947 (1.32),
7.104 (0.72), 7.112 (0.47), 7.127 (16.00), 7.150 (0.70).
Primer 226
(5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1654]
[1655] (5RS,7RS)-2-(4-metilbenzil)-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (98,0 mg, 276 µmol) sa pirolidinom (25 µl, 300 µmol) ubačena je u smešu piridin/DMF (5/1) (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat (115 mg, 303 µmol) i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm), 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,4 mg (33% od teor.) dijastereomera 1 (racemat) i 8,7 mg (8% od teor.) dijastereomera 2 (racemat) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,62 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.69), 0.008 (0.74), 1.665 (0.67),
1.692 (0.67), 1.779 (0.59), 1.785 (0.66), 1.797 (0.98), 1.802 (1.02), 1.817 (0.88),
1.910 (1.28), 1.927 (1.65), 1.944 (0.95), 2.274 (9.27), 2.634 (0.46), 2.665 (0.67),
2.674 (0.77), 2.706 (0.77), 2.863 (0.57), 3.263 (0.51), 3.276 (0.51), 3.293 (0.94),
3.354 (0.43), 3.371 (0.81), 3.389 (0.49), 3.401 (0.51), 3.555 (0.51), 3.562 (0.47),
3.579 (0.82), 3.637 (0.80), 3.654 (0.44), 3.661 (0.50), 4.710 (0.65), 4.724 (0.78),
4.745 (4.83), 7.141 (16.00).
Primer 227
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1656]
[1657] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (23 µl, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 10,2 mg (10% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 43,7 mg (44% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 1, racemat:
[1658]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.19), -0.008 (9.63), 0.008 (8.89),
0.146 (1.11), 1.635 (1.26), 1.666 (2.81), 1.693 (2.74), 1.726 (1.48), 1.778 (2.37),
1.785 (2.74), 1.795 (3.93), 1.802 (4.00), 1.818 (3.19), 1.893 (1.56), 1.909 (5.48),
1.926 (6.89), 1.944 (4.00), 2.327 (2.07), 2.366 (1.85), 2.523 (8.67), 2.657 (2.15),
2.669 (2.37), 2.688 (2.52), 2.697 (3.04), 2.710 (2.30), 2.729 (3.41), 2.876 (2.44),
2.911 (1.56), 3.012 (1.19), 3.264 (2.44), 3.276 (2.59), 3.351 (2.52), 3.369 (3.70),
3.386 (2.30), 3.399 (2.37), 3.417 (1.26), 3.569 (2.15), 3.586 (3.63), 3.611 (2.00),
3.627 (3.63), 3.652 (1.93), 4.711 (2.74), 4.725 (3.04), 4.738 (2.81), 4.753 (2.44),
4.884 (16.00), 7.516 (6.22), 7.536 (7.63), 7.720 (4.52), 7.727 (4.44), 7.741 (3.85),
7.747 (3.85), 8.328 (6.00), 8.334 (5.70).
Primer 228
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1659]
[1660] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (23 µl, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 10,2 mg (10% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 43,7 mg (44% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2, racemat:
[1661]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.54), -0.008 (4.44), 0.008 (3.96),
0.146 (0.54), 1.778 (2.01), 1.795 (3.23), 1.805 (3.35), 1.822 (2.59), 1.906 (1.50),
1.923 (4.73), 1.939 (5.81), 1.957 (3.32), 2.173 (1.47), 2.189 (1.53), 2.203 (1.92),
2.218 (4.02), 2.327 (1.02), 2.366 (0.70), 2.523 (3.03), 2.667 (1.95), 2.694 (2.49),
2.705 (2.59), 2.734 (2.08), 2.962 (3.00), 3.000 (1.92), 3.010 (1.47), 3.250 (0.86),
3.268 (1.72), 3.280 (2.27), 3.297 (5.91), 3.331 (3.03), 3.349 (3.32), 3.366 (2.17),
3.377 (1.72), 3.395 (0.99), 3.532 (0.93), 3.549 (1.98), 3.557 (1.79), 3.574 (3.10),
3.591 (1.31), 3.625 (1.44), 3.641 (2.87), 3.658 (1.63), 3.666 (1.85), 3.683 (0.93),
4.914 (16.00), 4.949 (3.26), 4.964 (2.78), 7.510 (5.78), 7.530 (7.41), 7.692 (4.12),
7.699 (4.12), 7.713 (3.32), 7.719 (3.29), 8.299 (5.72), 8.305 (5.52).
Primer 229
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1662]
[1663] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 42 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 2 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,40 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 14,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 16,1 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1664] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,99 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IB, 250 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.30), -0.008 (11.16), 0.008
(10.55), 0.146 (1.30), 1.233 (0.61), 1.778 (1.99), 1.794 (3.20), 1.806 (3.29), 1.822
(2.51), 1.906 (1.47), 1.923 (4.58), 1.940 (5.62), 1.957 (3.29), 2.172 (1.47), 2.188
(1.56), 2.202 (1.73), 2.217 (4.06), 2.328 (1.82), 2.366 (1.64), 2.523 (6.49), 2.669
(2.85), 2.694 (2.42), 2.705 (2.51), 2.710 (2.25), 2.734 (2.16), 2.962 (3.11), 2.998
(1.90), 3.010 (1.47), 3.250 (1.12), 3.267 (2.34), 3.279 (2.77), 3.348 (4.67), 3.365
(2.59), 3.377 (2.08), 3.396 (1.21), 3.531 (0.95), 3.549 (2.08), 3.557 (1.73), 3.574
(3.03), 3.591 (1.30), 3.623 (1.38), 3.640 (2.77), 3.658 (1.64), 3.666 (1.99), 3.682
(0.95), 4.914 (16.00), 4.950 (3.20), 4.961 (3.03), 7.510 (4.93), 7.530 (6.23), 7.692
(3.37), 7.698 (3.63), 7.713 (2.85), 7.719 (2.94), 8.298 (4.15), 8.304 (4.24).
Primer 230
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1665]
[1666] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (40,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 10,2 mg dijastereomera 1 (racemat) (9% od teor.), koji je eluiran prvi, i 48 mg (44% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2 (racemat):
[1667]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.62), 0.008 (2.46), 2.112 (0.44),
2.129 (0.51), 2.148 (1.03), 2.164 (1.01), 2.179 (1.06), 2.189 (1.30), 2.205 (0.97),
2.220 (0.94), 2.236 (0.90), 2.259 (1.65), 2.278 (1.76), 2.311 (0.92), 2.327 (0.61),
2.366 (0.55), 2.374 (0.59), 2.394 (1.16), 2.412 (1.03), 2.424 (1.45), 2.440 (1.32),
2.461 (0.88), 2.523 (1.85), 2.563 (1.83), 2.581 (1.41), 2.601 (0.99), 2.619 (0.50),
2.678 (1.36), 2.686 (1.10), 2.707 (1.76), 2.716 (2.61), 2.725 (1.52), 2.747 (1.89),
2.755 (1.78), 2.901 (1.23), 2.970 (2.55), 3.010 (1.85), 3.534 (0.50), 3.545 (1.25),
3.565 (2.55), 3.578 (1.94), 3.596 (1.23), 3.609 (0.42), 3.710 (1.16), 3.750 (1.54),
3.779 (1.76), 3.814 (1.21), 3.889 (0.72), 3.897 (1.17), 3.914 (2.90), 3.932 (3.03),
3.951 (1.12), 4.130 (1.03), 4.157 (0.84), 4.173 (1.56), 4.200 (1.63), 4.234 (0.97),
4.878 (0.59), 4.920 (16.00), 4.951 (2.06), 4.964 (2.22), 5.029 (1.98), 5.042 (1.91),
7.512 (6.06), 7.532 (7.69), 7.695 (3.71), 7.701 (3.78), 7.715 (3.16), 7.722 (3.16),
8.299 (5.17), 8.305 (5.08).
Primer 231
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1668]
[1669] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil)]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 48 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 1,5 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 40:60; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 16,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 17,5 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1670] Analitička hiralna HPLC: Rt= 5,80 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm, 250 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 40:60, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.25), -0.008 (10.99), 0.008
(10.43), 0.146 (1.25), 1.235 (0.77), 2.113 (0.49), 2.128 (0.49), 2.147 (0.97), 2.178
(1.04), 2.190 (1.25), 2.220 (0.97), 2.236 (0.83), 2.257 (1.67), 2.281 (1.74), 2.323
(1.25), 2.328 (1.53), 2.366 (1.32), 2.395 (1.11), 2.424 (1.46), 2.441 (1.25), 2.523
(4.87), 2.563 (2.37), 2.582 (1.67), 2.600 (1.18), 2.665 (1.25), 2.670 (1.67), 2.679
(1.74), 2.687 (1.18), 2.710 (2.50), 2.716 (2.71), 2.726 (1.60), 2.747 (1.88), 2.755
(1.81), 2.911 (1.18), 2.971 (2.50), 3.010 (1.81), 3.545 (1.32), 3.565 (2.64), 3.580
(2.02), 3.596 (1.32), 3.676 (0.42), 3.709 (1.18), 3.751 (1.60), 3.780 (1.81), 3.814
(1.25), 3.896 (1.18), 3.914 (2.92), 3.932 (3.13), 3.951 (1.18), 4.130 (1.04), 4.157
(0.83), 4.173 (1.60), 4.199 (1.60), 4.233 (0.90), 4.879 (0.63), 4.921 (16.00), 4.952
(2.09), 4.964 (2.23), 5.029 (2.02), 5.042 (2.02), 7.512 (6.26), 7.533 (8.00), 7.695
(3.83), 7.701 (3.83), 7.716 (3.20), 7.722 (3.20), 8.299 (5.29), 8.305 (5.08).
Primer 232
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1671]
[1672] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil)]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 48 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 1,5 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm, 250 x 20 mm; eluent: n-heptan/etanol 40:60; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 16,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 17,5 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1673] Analitička hiralna HPLC: Rt= 6,78 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm, 250 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 40:60, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.77), -0.008 (16.00), 0.008
(12.99), 0.146 (1.77), 1.234 (0.83), 2.189 (0.94), 2.278 (1.25), 2.323 (1.56), 2.328
(1.97), 2.332 (1.35), 2.366 (2.08), 2.424 (1.14), 2.519 (7.90), 2.523 (6.75), 2.580
(1.25), 2.665 (1.66), 2.670 (2.29), 2.675 (1.87), 2.710 (2.81), 2.716 (1.87), 2.747
(1.35), 2.755 (1.25), 2.970 (1.77), 3.009 (1.25), 3.545 (0.94), 3.565 (1.77), 3.580
(1.35), 3.709 (0.83), 3.751 (0.94), 3.779 (1.35), 3.814 (0.94), 3.896 (0.94), 3.913
(1.97), 3.932 (2.18), 3.950 (0.83), 4.129 (0.73), 4.174 (1.14), 4.199 (1.14), 4.920
(10.91), 4.952 (1.35), 4.964 (1.56), 5.030 (1.25), 5.041 (1.35), 7.512 (4.47), 7.533
(5.82), 7.695 (2.70), 7.701 (2.70), 7.716 (2.29), 7.722 (2.29), 8.299 (3.95), 8.305
(3.84).
Primer 233
(5RS,7RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; 2 izomera)
[1674]
[1675] (5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (53,0 mg, 129 µmol) dodata je u dihlormetan (1,0 ml) i DMF (2,0 ml) na 0 °C. Zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (63,7 mg, 168 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (59 µl, 340 µmol). Nakon 60 min mešanja na 0 °C, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (17,0 mg, 155 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 20,5 mg (34% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.82), 0.008 (2.65), 1.236 (0.44),
2.073 (0.95), 2.126 (0.46), 2.145 (1.11), 2.163 (1.78), 2.177 (3.07), 2.190 (4.53),
2.199 (4.11), 2.231 (0.66), 2.328 (0.52), 2.523 (1.78), 2.657 (1.32), 2.666 (1.33),
2.686 (1.72), 2.695 (2.51), 2.704 (1.73), 2.726 (1.98), 2.875 (0.84), 2.905 (1.25),
2.966 (3.44), 2.975 (2.41), 3.005 (2.56), 3.017 (2.01), 3.650 (2.51), 3.659 (1.87),
3.669 (1.95), 3.677 (2.75), 4.027 (1.52), 4.040 (1.57), 4.074 (2.71), 4.089 (2.90),
4.114 (1.38), 4.129 (1.25), 4.144 (1.26), 4.153 (1.29), 4.170 (1.07), 4.461 (0.99),
4.479 (2.15), 4.498 (3.22), 4.520 (2.29), 4.542 (3.24), 4.562 (1.86), 4.579 (0.71),
4.728 (2.11), 4.741 (3.29), 4.749 (2.58), 4.760 (1.45), 5.018 (1.29), 5.043 (10.99),
5.049 (11.28), 5.787 (0.60), 5.801 (0.60), 5.830 (3.51), 5.835 (3.85), 5.844 (4.03),
5.850 (3.07), 7.917 (16.00), 7.948 (0.54), 8.645 (5.51), 8.681 (0.49).
Primer 234
(5RS,7RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 2)
[1676]
[1677] (5RS,7RS)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 20,5 mg rastvoreno u 1 ml etanola i 1 ml izopropanola; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: nheptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 6,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 7,4 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1678] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,34 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IB-3-3 µm 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/i-propanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.456 (0.65), 2.145 (1.08), 2.162 (1.77),
2.189 (4.32), 2.230 (0.66), 2.328 (0.77), 2.366 (0.54), 2.657 (1.22), 2.665 (1.38),
2.694 (2.29), 2.704 (1.66), 2.726 (1.80), 2.916 (1.19), 2.965 (3.27), 2.994 (1.08),
3.005 (2.36), 3.017 (1.85), 3.650 (2.33), 3.659 (1.80), 3.677 (2.57), 4.026 (1.47),
4.039 (1.45), 4.073 (2.54), 4.089 (2.75), 4.113 (1.31), 4.129 (1.19), 4.144 (1.21),
4.153 (1.22), 4.170 (1.01), 4.460 (0.89), 4.478 (2.03), 4.498 (3.01), 4.521 (2.19),
4.542 (3.08), 4.561 (1.75), 4.578 (0.70), 4.728 (2.01), 4.740 (3.10), 5.019 (1.22),
5.042 (10.30), 5.049 (10.63), 5.784 (0.61), 5.798 (0.56), 5.831 (4.09), 5.841 (4.20),
7.917 (16.00), 8.645 (6.64), 8.682 (0.65).
Primer 235
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 1; 2 izomera)
[1679]
[1680] (5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 244 µmol) i (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (33,7 mg, 268 µmol) dodati su u dihlormetan (2,0 ml) i DMF (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 580 µmol) i HBTU (120 mg, 317 µmol). Nakon 30 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodati su zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i dietil etar. Organska faza je razdvojena i vodena faza je dva puta ekstrahovana dietil etrom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 9,5 mg (8% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera) koja je prva eluirana i 81,0 mg (69% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera) koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 1 (2 izomera):
[1681]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.146 (0.42), 1.629 (0.89), 1.660 (1.92),
1.689 (2.14), 1.739 (1.24), 2.096 (1.31), 2.156 (1.24), 2.230 (1.52), 2.260 (1.60),
2.327 (1.24), 2.366 (0.89), 2.679 (2.18), 2.711 (3.02), 2.719 (3.47), 2.751 (3.40),
2.891 (3.33), 2.930 (2.23), 3.027 (1.55), 3.137 (0.61), 3.400 (0.80), 3.440 (0.66),
3.509 (0.80), 3.564 (0.92), 3.611 (1.71), 3.661 (1.60), 3.687 (2.09), 3.714 (1.57),
3.747 (1.20), 3.828 (0.82), 3.855 (0.84), 3.877 (1.66), 3.900 (1.67), 3.932 (1.62),
3.955 (1.78), 3.980 (0.98), 4.011 (0.71), 4.044 (0.52), 4.675 (0.85), 4.689 (0.85),
4.702 (0.96), 4.716 (0.89), 4.726 (0.92), 4.741 (2.04), 4.754 (2.02), 4.768 (1.95),
4.782 (1.10), 4.808 (0.89), 4.822 (0.98), 4.834 (1.01), 4.849 (0.80), 5.015 (16.00),
5.269 (1.05), 5.349 (0.71), 5.402 (1.38), 5.481 (0.75), 5.527 (0.75), 7.908 (3.10),
7.928 (10.34), 7.944 (6.14), 7.963 (1.78), 8.112 (0.42), 8.677 (8.03).
Primer 236
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera)
[1682]
[1683] (5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 244 µmol) i (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (33,7 mg, 268 µmol) dodati su u dihlormetan (2,0 ml) i DMF (4,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 580 µmol) i 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (120 mg, 317 µmol). Nakon 30 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodati su zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i dietil etar. Organska faza je razdvojena i vodena faza je dva puta ekstrahovana dietil etrom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 9,5 mg (8% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera) koja je prva eluirana i 81,0 mg (69% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera) koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 2 (2 izomera):
[1684]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,59 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.65), 0.008 (1.33), 2.125 (0.90),
2.141 (1.33), 2.160 (1.40), 2.171 (1.70), 2.205 (1.37), 2.215 (1.80), 2.227 (2.15),
2.236 (2.62), 2.248 (2.33), 2.277 (1.60), 2.293 (1.58), 2.328 (0.94), 2.366 (0.44),
2.518 (1.76), 2.523 (1.38), 2.670 (0.51), 2.675 (0.45), 2.686 (0.78), 2.695 (0.80),
2.710 (1.42), 2.724 (2.01), 2.734 (1.28), 2.755 (1.22), 2.763 (1.34), 2.890 (0.98),
2.925 (0.89), 2.981 (2.29), 3.019 (1.52), 3.354 (0.76), 3.380 (0.82), 3.408 (0.70),
3.434 (0.43), 3.443 (0.41), 3.519 (0.48), 3.530 (0.61), 3.541 (0.44), 3.570 (0.90),
3.592 (0.74), 3.620 (1.36), 3.643 (1.74), 3.672 (1.58), 3.689 (0.92), 3.700 (0.92),
3.738 (0.40), 3.765 (0.48), 3.796 (0.63), 3.831 (0.52), 3.852 (1.09), 3.884 (0.51),
3.892 (0.68), 3.930 (0.43), 3.964 (0.61), 3.990 (1.28), 4.017 (0.63), 4.054 (0.48),
4.922 (0.72), 4.937 (0.76), 4.971 (1.02), 4.986 (1.01), 5.017 (0.52), 5.048 (12.85),
5.073 (0.76), 5.084 (1.10), 5.269 (0.96), 5.358 (0.56), 5.403 (1.14), 5.490 (0.53),
5.524 (0.47), 7.919 (16.00), 8.644 (4.92).
Primer 237
(5S,7R)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on ( izomer 1)
[1685]
[1686] (5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on dijastereomerna smeša 2 (2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 66 mg rastvoreno u 6 ml izopropanola; injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: nheptan/izopropanol 40:60; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, dobijeno je 28,8 mg (5S,7R)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-ona ( izomer 1), koji je eluiran prvi, i 28,8 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1687]
spec. optička rotacija: 42,51 (589 nm, 0,5450 g / 100 cm<3>MeOH)
Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,38 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IB-3-3 µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/i-propanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,59 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.13), 1.261 (0.42), 2.108 (0.76),
2.120 (0.83), 2.143 (1.30), 2.172 (2.16), 2.204 (1.57), 2.215 (1.43), 2.235 (1.93),
2.250 (1.89), 2.295 (2.57), 2.328 (1.22), 2.523 (1.13), 2.682 (1.10), 2.697 (0.67),
2.710 (1.91), 2.721 (2.02), 2.735 (1.15), 2.750 (1.64), 2.764 (1.04), 2.925 (1.09),
2.934 (1.13), 2.946 (1.01), 2.954 (0.95), 2.981 (3.14), 3.018 (1.94), 3.029 (1.47),
3.346 (0.77), 3.356 (1.00), 3.375 (0.96), 3.384 (0.72), 3.402 (0.97), 3.434 (0.80),
3.443 (0.80), 3.497 (0.57), 3.505 (0.62), 3.533 (0.87), 3.541 (0.80), 3.623 (0.85),
3.646 (2.19), 3.674 (2.40), 3.691 (1.42), 3.700 (1.79), 3.716 (0.76), 3.738 (0.78),
3.766 (0.41), 3.774 (0.45), 3.799 (0.64), 3.806 (0.65), 3.831 (0.97), 3.853 (1.74),
3.877 (0.84), 3.893 (0.73), 3.901 (0.69), 3.930 (0.83), 3.960 (0.62), 3.987 (0.87),
4.019 (0.51), 4.924 (1.35), 4.937 (1.45), 4.972 (2.03), 4.986 (2.00), 5.004 (0.50),
5.016 (0.79), 5.045 (14.11), 5.269 (1.26), 5.394 (1.60), 5.401 (1.65), 5.524 (0.88),
7.919 (16.00), 7.943 (0.44), 8.644 (5.11).
Primer 238
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1688]
[1689] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (31,3 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 7,90 mg (8% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 31 mg (30% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 1, racemat:
[1690]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.51), -0.008 (16.00), 0.008
(12.99), 0.146 (1.62), 1.679 (1.16), 1.708 (1.86), 1.739 (1.28), 2.323 (1.86), 2.328
(2.20), 2.332 (1.62), 2.366 (2.43), 2.456 (1.39), 2.523 (7.77), 2.665 (1.97), 2.670
(2.55), 2.675 (2.09), 2.710 (3.94), 2.752 (2.32), 2.867 (2.32), 2.902 (1.28), 2.992
(0.93), 3.969 (0.70), 4.450 (2.67), 4.463 (2.55), 4.478 (2.90), 4.492 (2.09), 4.669
(0.70), 4.902 (6.96), 5.382 (0.70), 5.513 (0.70), 7.517 (3.13), 7.538 (4.06), 7.734
(2.32), 7.754 (1.97), 8.340 (3.36).
Primer 239
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1691]
[1692] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (31,3 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 7,90 mg (8% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 31 mg (30% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2, racemat:
[1693]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.12), -0.008 (9.92), 0.008 (7.26),
0.146 (0.94), 2.187 (2.13), 2.221 (2.54), 2.253 (3.31), 2.327 (1.83), 2.366 (1.59),
2.524 (5.08), 2.670 (2.24), 2.684 (3.19), 2.696 (3.25), 2.710 (1.83), 2.725 (2.60),
2.968 (5.90), 3.003 (3.66), 3.017 (2.36), 3.978 (1.59), 4.039 (1.83), 4.287 (1.71),
4.427 (2.13), 4.460 (1.83), 4.488 (2.07), 4.737 (5.90), 4.751 (5.49), 4.919 (16.00),
5.358 (1.30), 5.502 (1.24), 7.510 (6.85), 7.531 (8.56), 7.701 (5.73), 7.708 (3.31),
7.721 (4.84), 8.307 (9.03).
Primer 240
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1694]
[1695] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil)]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 30 mg rastvoreno u 2,5 ml etanola i 1,5 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,7 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 40:60; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 8 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 8,8 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1696] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,56 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm, 250 x 4,6 mm; eluent: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.23), 0.008 (9.60), 0.146 (0.98),
1.234 (0.80), 2.104 (0.74), 2.121 (0.98), 2.138 (1.85), 2.155 (2.34), 2.169 (2.22),
2.186 (2.15), 2.223 (2.58), 2.252 (3.32), 2.283 (1.23), 2.327 (2.28), 2.366 (2.15),
2.523 (9.23), 2.610 (0.49), 2.669 (2.71), 2.685 (3.38), 2.695 (3.38), 2.709 (2.65),
2.725 (2.58), 2.934 (1.91), 2.943 (2.09), 2.968 (5.97), 3.002 (3.57), 3.013 (2.40),
3.374 (0.68), 3.402 (0.55), 3.950 (1.29), 3.977 (1.60), 4.006 (1.48), 4.039 (1.91),
4.207 (0.92), 4.219 (0.98), 4.235 (1.60), 4.251 (1.78), 4.261 (1.54), 4.279 (1.42),
4.287 (1.72), 4.304 (1.54), 4.333 (0.68), 4.398 (1.66), 4.423 (2.15), 4.459 (1.72),
4.484 (2.03), 4.621 (0.80), 4.633 (0.98), 4.645 (0.86), 4.671 (1.42), 4.687 (1.60),
4.713 (1.60), 4.736 (6.09), 4.751 (5.29), 4.881 (0.68), 4.919 (16.00), 4.967 (0.68),
5.336 (0.49), 5.359 (1.23), 5.401 (0.92), 5.503 (1.23), 5.550 (1.11), 7.511 (6.46),
7.532 (8.25), 7.701 (5.54), 7.721 (4.49), 7.727 (2.77), 8.307 (8.31).
Primer 241
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 1; 2 izomera)
[1697]
[1698] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (35,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 11,2 mg (30% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera), koja je eluirana prva, i 54 mg (30% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera), koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 1 (2 izomera):
[1699]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.86), -0.033 (0.47), -0.025 (0.56),
-0.022 (0.65), -0.008 (16.00), 0.008 (14.19), 0.018 (0.98), 0.146 (1.86), 1.620 (0.42),
1.651 (1.07), 1.664 (0.37), 1.681 (1.07), 1.695 (0.70), 1.704 (0.74), 1.711 (0.60),
1.731 (0.65), 2.051 (0.33), 2.094 (0.65), 2.111 (0.65), 2.124 (0.65), 2.156 (0.56),
2.211 (0.60), 2.226 (0.70), 2.259 (0.79), 2.323 (1.21), 2.327 (1.58), 2.332 (1.16),
2.366 (1.35), 2.523 (5.30), 2.578 (0.60), 2.589 (0.56), 2.594 (0.56), 2.670 (2.70),
2.702 (1.49), 2.710 (3.26), 2.742 (1.86), 2.882 (1.77), 2.922 (1.21), 2.999 (0.74),
3.019 (0.93), 3.043 (0.60), 3.271 (0.51), 3.351 (0.88), 3.368 (0.74), 3.379 (0.47),
3.399 (0.51), 3.426 (0.42), 3.436 (0.37), 3.506 (0.42), 3.514 (0.42), 3.525 (0.42),
3.534 (0.37), 3.556 (0.56), 3.583 (0.47), 3.608 (0.98), 3.622 (0.74), 3.636 (0.65),
3.649 (0.74), 3.656 (0.88), 3.682 (1.07), 3.690 (0.70), 3.707 (0.70), 3.718 (0.60),
3.745 (0.60), 3.792 (0.37), 3.824 (0.60), 3.832 (0.37), 3.849 (0.47), 3.871 (0.74),
3.894 (0.84), 3.910 (0.47), 3.919 (0.70), 3.927 (0.88), 3.954 (0.88), 3.974 (0.51),
4.005 (0.37), 4.664 (0.42), 4.678 (0.51), 4.691 (0.47), 4.706 (0.51), 4.714 (0.60),
4.729 (1.07), 4.743 (1.02), 4.756 (1.07), 4.771 (0.56), 4.796 (0.51), 4.810 (0.56),
4.823 (0.56), 4.838 (0.60), 4.890 (9.02), 4.930 (0.37), 5.269 (0.51), 5.277 (0.56),
5.347 (0.42), 5.400 (0.70), 5.478 (0.37), 5.526 (0.37), 7.516 (3.53), 7.536 (4.42),
7.719 (1.49), 7.726 (2.47), 7.733 (1.81), 7.739 (1.40), 7.746 (2.09), 7.754 (1.44),
8.332 (3.49).
Primer 242
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera)
[1700]
[1701] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (35,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 11,2 mg (30% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera), koja je eluirana prva, i 54 mg (30% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera), koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 2 (2 izomera):
[1702]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (4.34), 0.008 (3.69),
0.146 (0.48), 2.132 (1.45), 2.150 (1.72), 2.161 (2.14), 2.196 (1.69), 2.205 (2.00),
2.226 (3.10), 2.239 (2.31), 2.278 (2.03), 2.322 (1.03), 2.327 (1.07), 2.332 (0.72),
2.366 (0.52), 2.523 (2.31), 2.674 (1.48), 2.685 (0.86), 2.714 (2.38), 2.724 (1.38),
2.744 (1.41), 2.753 (1.45), 2.908 (1.03), 2.973 (2.66), 3.011 (1.69), 3.356 (1.03),
3.373 (1.00), 3.402 (0.83), 3.437 (0.55), 3.512 (0.55), 3.520 (0.62), 3.564 (1.07),
3.586 (0.86), 3.613 (1.62), 3.631 (1.83), 3.667 (1.90), 3.695 (1.14), 3.728 (0.45),
3.761 (0.52), 3.793 (0.66), 3.824 (0.55), 3.847 (1.21), 3.866 (0.62), 3.889 (0.72),
3.925 (0.45), 3.958 (0.59), 3.986 (1.45), 4.012 (0.76), 4.050 (0.55), 4.875 (0.45),
4.921 (16.00), 4.957 (1.34), 4.969 (1.21), 5.013 (1.00), 5.025 (0.97), 5.067 (1.07),
5.265 (1.03), 5.355 (0.62), 5.399 (1.31), 5.487 (0.59), 5.522 (0.52), 7.511 (6.45),
7.532 (8.07), 7.691 (2.24), 7.698 (4.55), 7.705 (2.69), 7.712 (2.00), 7.719 (3.76),
7.725 (2.14), 8.304 (5.21).
Primer 243
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1703]
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1704] (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 54 mg rastvoreno u 1 ml etanola i 1 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,01 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,9 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1705] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,65 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.26), -0.008 (10.67), 0.008
(11.41), 0.147 (1.43), 0.857 (0.97), 0.877 (0.92), 2.118 (1.43), 2.135 (1.78), 2.165
(3.38), 2.196 (2.24), 2.207 (2.29), 2.225 (2.58), 2.242 (2.70), 2.263 (1.84), 2.282
(3.78), 2.322 (3.50), 2.327 (3.56), 2.332 (2.87), 2.366 (2.29), 2.523 (10.27), 2.670
(4.07), 2.688 (1.26), 2.701 (2.01), 2.710 (4.65), 2.726 (1.72), 2.740 (2.24), 2.755
(1.55), 2.877 (0.92), 2.897 (1.26), 2.940 (1.72), 2.972 (4.36), 3.008 (2.70), 3.020
(2.18), 3.368 (2.12), 3.397 (1.66), 3.427 (1.26), 3.492 (0.97), 3.526 (1.26), 3.537
(1.09), 3.615 (1.26), 3.637 (2.81), 3.667 (3.67), 3.693 (2.92), 3.713 (1.09), 3.732
(1.03), 3.802 (1.03), 3.825 (1.66), 3.845 (2.41), 3.866 (1.55), 3.889 (1.26), 3.896
(1.09), 3.921 (1.09), 3.953 (1.15), 3.979 (1.43), 4.876 (0.97), 4.915 (16.00), 4.957
(3.21), 4.970 (2.92), 5.266 (1.72), 5.391 (2.47), 5.409 (1.38), 5.524 (1.38), 7.511
(9.00), 7.532 (10.67), 7.692 (2.87), 7.698 (6.02), 7.705 (3.73), 7.712 (2.29), 7.719
(5.16), 7.725 (2.92), 8.300 (7.80).
Primer 244
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1706]
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1707] (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 54 mg rastvoreno u 1 ml etanola i 1 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,01 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,9 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1708] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,15 min, d.e. = 93% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.36), 0.008 (2.14), 2.116 (1.14),
2.132 (1.25), 2.150 (1.89), 2.166 (1.40), 2.181 (1.17), 2.196 (1.36), 2.205 (1.97),
2.226 (3.32), 2.239 (2.34), 2.274 (1.40), 2.327 (0.75), 2.366 (0.56), 2.523 (2.11),
2.670 (0.81), 2.675 (1.30), 2.684 (0.93), 2.705 (1.33), 2.715 (2.12), 2.724 (1.17),
2.745 (1.53), 2.753 (1.41), 2.895 (0.95), 2.964 (2.30), 2.975 (1.56), 3.003 (1.68),
3.014 (1.31), 3.355 (2.49), 3.373 (1.63), 3.384 (1.05), 3.401 (0.76), 3.512 (0.76),
3.521 (0.79), 3.564 (1.60), 3.587 (1.26), 3.614 (1.91), 3.630 (1.82), 3.656 (1.02),
3.666 (0.92), 3.682 (0.50), 3.761 (0.51), 3.782 (0.56), 3.791 (0.58), 3.848 (0.48),
3.880 (0.64), 3.888 (0.58), 3.965 (0.74), 3.988 (1.92), 4.012 (0.76), 4.049 (0.84),
4.078 (0.56), 4.922 (16.00), 5.014 (1.53), 5.027 (1.50), 5.067 (1.64), 5.076 (0.99),
5.274 (0.94), 5.356 (0.94), 5.406 (0.90), 5.487 (0.90), 7.512 (4.52), 7.532 (5.71),
7.691 (1.70), 7.698 (3.25), 7.705 (1.96), 7.712 (1.54), 7.719 (2.69), 7.726 (1.59),
8.304 (3.85).
Primer 245
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera)
[1709]
[1710] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (35,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 20,1 mg (10% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera), koja je eluirana prva, i 46 mg (44% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera), koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 2 (2 izomera):
[1711]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.12), -0.008 (10.52), 0.008 (7.16),
0.146 (1.12), 2.115 (1.37), 2.162 (2.24), 2.181 (1.43), 2.205 (2.05), 2.227 (3.24),
2.272 (1.99), 2.323 (1.99), 2.328 (2.18), 2.337 (0.93), 2.366 (1.06), 2.523 (4.54),
2.670 (2.30), 2.711 (2.49), 2.724 (1.43), 2.741 (1.43), 2.754 (1.49), 2.895 (1.18),
2.972 (2.61), 3.011 (1.74), 3.372 (1.31), 3.400 (0.93), 3.437 (0.62), 3.487 (0.81),
3.512 (0.75), 3.524 (0.81), 3.564 (1.18), 3.586 (1.00), 3.613 (1.74), 3.633 (1.87),
3.667 (1.99), 3.696 (1.18), 3.713 (0.68), 3.734 (0.62), 3.763 (0.56), 3.793 (0.87),
3.825 (0.56), 3.848 (1.25), 3.867 (0.75), 3.889 (0.68), 3.917 (0.56), 3.966 (0.68),
3.986 (1.56), 4.018 (0.75), 4.047 (0.81), 4.082 (0.56), 4.921 (16.00), 4.958 (1.31),
4.969 (1.25), 5.011 (1.25), 5.026 (1.25), 5.064 (1.06), 5.273 (1.06), 5.345 (0.68),
5.353 (0.75), 5.401 (1.56), 5.493 (0.68), 5.521 (0.68), 7.511 (6.91), 7.532 (8.53),
7.692 (2.24), 7.698 (4.61), 7.705 (2.86), 7.712 (2.12), 7.719 (3.98), 7.725 (2.49),
8.305 (6.16).
Primer 246
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1712]
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1713] (dijastereomerna smeša 2, 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 45,8 mg rastvoreno u 2,5 ml etanola i 2,5 ml nheptana i 1 ml dihlormetana; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19,8 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 16 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1714] Analitička hiralna HPLC: Rt= 7,02 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.66), -0.008 (6.74), 0.008 (5.83),
0.146 (0.71), 0.846 (0.63), 0.862 (0.58), 1.086 (0.66), 1.102 (0.79), 1.236 (0.76),
2.115 (1.06), 2.131 (1.22), 2.150 (1.80), 2.181 (1.09), 2.204 (1.85), 2.226 (3.25),
2.273 (1.27), 2.327 (1.01), 2.332 (0.71), 2.366 (0.91), 2.523 (3.17), 2.665 (0.89),
2.670 (1.19), 2.674 (1.47), 2.684 (1.01), 2.714 (2.21), 2.723 (1.27), 2.745 (1.62),
2.753 (1.47), 2.887 (0.96), 2.963 (2.33), 3.003 (1.70), 3.014 (1.34), 3.355 (1.09),
3.373 (1.09), 3.383 (0.74), 3.401 (0.61), 3.512 (0.76), 3.520 (0.79), 3.564 (1.62),
3.586 (1.27), 3.614 (1.90), 3.630 (1.83), 3.657 (1.01), 3.665 (0.94), 3.683 (0.51),
3.759 (0.51), 3.783 (0.66), 3.857 (0.48), 3.880 (0.63), 3.964 (0.76), 3.986 (1.93),
4.020 (0.74), 4.046 (0.86), 4.080 (0.61), 4.922 (16.00), 5.014 (1.55), 5.026 (1.52),
5.067 (1.67), 5.274 (0.94), 5.357 (0.91), 5.407 (0.89), 5.489 (0.89), 7.512 (4.74),
7.532 (6.03), 7.691 (1.85), 7.698 (3.37), 7.705 (2.03), 7.712 (1.70), 7.719 (2.87),
7.726 (1.67), 8.304 (4.13).
Primer 247
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1715]
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1716] (dijastereomerna smeša 2, 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 45,8 mg rastvoreno u 2,5 ml etanola i 2,5 ml nheptana i 1 ml dihlormetana; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19,8 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 16 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1717] Analitička hiralna HPLC: Rt= 9,14 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.57), 0.008 (11.20), 0.146 (1.25),
0.857 (0.52), 1.021 (0.73), 1.102 (0.59), 1.234 (1.22), 1.976 (0.70), 2.003 (0.70),
2.082 (0.63), 2.108 (1.22), 2.133 (1.91), 2.167 (3.17), 2.194 (2.37), 2.225 (2.23),
2.233 (2.40), 2.241 (2.71), 2.282 (3.83), 2.327 (2.57), 2.366 (1.46), 2.590 (1.08),
2.672 (3.41), 2.687 (1.22), 2.701 (2.30), 2.711 (3.83), 2.725 (1.81), 2.741 (2.26),
2.755 (1.57), 2.933 (1.67), 2.970 (4.52), 3.010 (2.92), 3.021 (2.23), 3.339 (1.53),
3.350 (1.70), 3.369 (1.53), 3.395 (1.60), 3.427 (1.46), 3.437 (1.25), 3.499 (0.97),
3.526 (1.29), 3.536 (1.32), 3.618 (1.18), 3.641 (2.89), 3.668 (3.65), 3.694 (2.78),
3.712 (1.04), 3.730 (1.43), 3.768 (0.70), 3.795 (0.94), 3.822 (1.46), 3.847 (2.54),
3.869 (1.39), 3.888 (1.01), 3.921 (1.36), 3.956 (0.80), 3.980 (1.36), 4.011 (0.97),
4.875 (1.01), 4.916 (16.00), 4.957 (3.23), 4.971 (3.06), 5.268 (1.74), 5.398 (2.64),
5.521 (1.22), 7.512 (8.10), 7.532 (10.33), 7.698 (5.46), 7.704 (3.72), 7.719 (4.49),
7.725 (2.96), 8.301 (7.48), 17.633 (0.52).
Primer 248
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1718]
[1719] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (40,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 15,5 mg (13% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 59 mg (54% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 1, racemat:
[1720]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.14), -0.008 (10.54), 0.007 (8.83),
0.145 (1.14), 1.635 (1.97), 1.663 (2.16), 1.697 (1.84), 1.728 (1.65), 2.327 (1.84),
2.366 (1.40), 2.522 (7.49), 2.559 (3.05), 2.669 (2.16), 2.679 (2.60), 2.711 (4.06),
2.719 (3.43), 2.752 (3.94), 2.884 (3.43), 2.924 (2.41), 2.992 (1.65), 3.002 (1.78),
3.011 (1.84), 3.507 (1.27), 3.517 (1.52), 3.551 (1.71), 3.559 (1.84), 3.570 (1.27),
3.605 (1.33), 3.614 (1.02), 3.638 (1.52), 3.651 (1.46), 3.671 (1.14), 3.684 (1.02),
3.696 (1.40), 3.709 (1.33), 3.729 (1.40), 3.743 (1.40), 3.766 (1.08), 3.779 (1.40),
3.792 (1.59), 3.805 (1.71), 3.818 (1.40), 3.826 (1.46), 3.839 (1.40), 3.867 (1.21),
3.906 (1.08), 4.083 (1.14), 4.097 (1.27), 4.110 (1.65), 4.125 (2.10), 4.143 (1.33),
4.153 (1.97), 4.169 (1.52), 4.709 (2.03), 4.723 (2.60), 4.735 (2.79), 4.751 (2.29),
4.760 (1.59), 4.890 (16.00), 4.920 (3.68), 5.245 (1.27), 5.273 (1.40), 5.283 (1.27),
5.306 (0.95), 5.319 (1.02), 5.325 (1.02), 5.340 (1.08), 5.368 (1.27), 5.378 (1.52),
5.391 (1.40), 5.404 (1.46), 5.413 (1.21), 5.426 (0.89), 5.435 (0.95), 5.449 (1.14),
5.458 (1.02), 5.469 (1.02), 5.483 (0.95), 7.514 (6.16), 7.535 (7.43), 7.698 (0.89),
7.716 (3.05), 7.723 (3.11), 7.727 (3.43), 7.734 (3.75), 7.743 (2.48), 7.748 (2.73),
7.754 (2.54), 8.302 (1.21), 8.325 (3.62), 8.331 (6.92), 8.338 (4.00).
Primer 249
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1721]
[1722] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (88,0 mg, 234 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (115 mg, 304 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (200 µl, 1,2 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (40,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 15,5 mg (13% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 59 mg (54% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2, racemat:
[1723]
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.00), 0.008 (2.78), 1.030 (0.77),
1.045 (0.77), 2.122 (0.58), 2.138 (0.63), 2.156 (1.24), 2.172 (1.13), 2.187 (1.27),
2.203 (2.42), 2.210 (2.40), 2.219 (2.23), 2.232 (1.38), 2.274 (1.85), 2.305 (1.07),
2.328 (0.55), 2.366 (0.44), 2.670 (0.72), 2.676 (1.60), 2.689 (1.05), 2.706 (1.90),
2.717 (2.84), 2.728 (1.35), 2.746 (2.23), 2.757 (1.62), 2.881 (1.27), 2.963 (3.19),
2.975 (2.18), 3.003 (2.37), 3.015 (1.87), 3.492 (0.83), 3.501 (0.91), 3.534 (1.38),
3.542 (1.27), 3.584 (1.35), 3.643 (0.94), 3.656 (0.85), 3.676 (0.72), 3.689 (0.74),
3.700 (1.57), 3.714 (1.43), 3.733 (1.07), 3.748 (0.99), 3.764 (0.72), 3.777 (0.74),
3.797 (0.55), 3.810 (0.55), 3.840 (0.66), 3.853 (0.94), 3.868 (1.24), 3.888 (1.18),
3.907 (0.99), 4.041 (0.72), 4.055 (0.99), 4.069 (0.63), 4.088 (0.99), 4.103 (0.96),
4.117 (0.66), 4.131 (0.69), 4.152 (0.58), 4.167 (0.63), 4.180 (0.58), 4.195 (1.16),
4.211 (0.69), 4.224 (0.58), 4.240 (0.55), 4.878 (0.61), 4.918 (16.00), 4.963 (0.66),
4.990 (3.00), 5.004 (4.43), 5.259 (0.83), 5.267 (0.94), 5.286 (0.94), 5.294 (0.94),
5.307 (0.55), 5.325 (0.74), 5.341 (0.74), 5.358 (0.74), 5.367 (0.77), 5.383 (1.18),
5.397 (1.10), 5.405 (0.94), 5.415 (1.05), 5.426 (0.96), 5.439 (0.66), 5.455 (0.74),
5.469 (0.74), 5.489 (0.80), 7.512 (5.43), 7.533 (6.88), 7.688 (1.96), 7.695 (2.45),
7.698 (2.97), 7.705 (2.86), 7.709 (2.01), 7.719 (2.51), 7.725 (2.26), 8.295 (2.73),
8.301 (5.34), 8.307 (3.33).
Primer 250
(5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1724]
[1725] (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 59 mg rastvoreno u 3 ml etanola; injekciona zapremina: 0,05 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 13,8 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,8 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1726] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,89 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,48 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), -0.008 (9.80), 0.008 (7.71),
0.146 (0.93), 0.859 (0.96), 1.135 (1.58), 1.153 (3.15), 1.171 (1.61), 2.156 (1.16),
2.171 (1.23), 2.187 (1.37), 2.203 (2.50), 2.209 (2.47), 2.218 (2.36), 2.271 (2.06),
2.307 (1.16), 2.327 (1.61), 2.366 (1.37), 2.523 (5.31), 2.669 (1.85), 2.674 (2.02),
2.688 (1.13), 2.709 (2.47), 2.716 (2.81), 2.727 (1.54), 2.746 (2.33), 2.757 (1.68),
2.891 (1.64), 2.910 (2.09), 2.928 (1.51), 2.964 (3.22), 2.976 (2.09), 3.003 (2.50),
3.014 (1.92), 3.491 (0.96), 3.499 (0.99), 3.533 (1.44), 3.582 (1.30), 3.641 (0.93),
3.656 (0.96), 3.700 (1.54), 3.712 (1.44), 3.732 (1.03), 3.745 (1.03), 3.840 (0.89),
3.868 (1.20), 3.888 (1.30), 4.056 (0.99), 4.085 (0.99), 4.102 (1.06), 4.195 (1.23),
4.918 (16.00), 4.990 (3.05), 5.003 (4.52), 5.272 (0.99), 5.283 (1.03), 5.295 (0.99),
5.340 (0.86), 5.384 (1.16), 5.404 (1.03), 5.425 (1.13), 5.504 (0.89), 7.512 (6.17),
7.532 (7.57), 7.688 (2.09), 7.698 (3.19), 7.704 (3.25), 7.719 (2.81), 7.725 (2.57),
8.301 (7.02).
Primer 251
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1727]
[1728] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (93,0 mg, 217 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (107 mg, 282 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (37,4 mg, 261 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 9,3 mg (6% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 75,8 mg (66% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,91 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.21), 0.008 (2.19), 1.030 (0.81),
1.045 (0.81), 2.073 (0.62), 2.130 (0.89), 2.146 (1.06), 2.165 (2.14), 2.171 (1.67),
2.177 (1.87), 2.182 (2.05), 2.196 (2.25), 2.206 (2.48), 2.212 (2.38), 2.222 (1.95),
2.237 (1.87), 2.252 (1.71), 2.279 (3.19), 2.300 (3.44), 2.328 (2.21), 2.332 (2.35),
2.366 (0.89), 2.377 (1.24), 2.397 (2.11), 2.427 (2.79), 2.443 (2.48), 2.462 (1.67),
2.473 (1.67), 2.523 (2.87), 2.565 (3.40), 2.583 (2.73), 2.603 (1.84), 2.622 (0.92),
2.665 (0.62), 2.670 (0.78), 2.674 (0.62), 2.702 (2.40), 2.709 (2.86), 2.731 (3.35),
2.740 (4.75), 2.749 (3.10), 2.771 (3.90), 2.778 (3.67), 2.920 (2.35), 2.993 (4.94),
3.025 (2.56), 3.033 (3.68), 3.041 (2.21), 3.520 (0.62), 3.539 (1.16), 3.550 (2.35),
3.569 (6.00), 3.589 (4.68), 3.604 (2.37), 3.618 (0.90), 3.636 (0.49), 3.685 (0.67),
3.718 (2.17), 3.755 (3.76), 3.788 (4.03), 3.817 (2.33), 3.851 (0.54), 3.876 (0.54),
3.894 (1.25), 3.902 (2.44), 3.919 (4.70), 3.934 (5.06), 3.953 (2.29), 3.960 (1.38),
3.979 (0.54), 4.105 (0.75), 4.135 (1.98), 4.147 (0.81), 4.163 (1.70), 4.178 (3.27),
4.204 (3.16), 4.236 (1.84), 4.267 (0.52), 4.984 (3.75), 4.997 (3.71), 5.048 (4.57),
5.062 (3.98), 5.074 (4.49), 5.089 (15.44), 5.117 (16.00), 5.158 (4.49), 7.561 (5.02),
7.573 (9.68), 7.586 (5.37), 8.568 (11.97), 8.580 (12.08).
Primer 252
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1729]
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1730] (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 75,8 mg rastvoreno u 3 ml izopropanola u ultrazvučnom kupatilu, pa je dodato 3 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,8 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 11,4 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 13,3 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1731] Analitička hiralna HPLC: Rt= 7,07 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm, 250 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/izopropanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,77 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.82), -0.008 (16.00), 0.008
(15.76), 0.146 (1.87), 1.260 (0.77), 2.165 (0.72), 2.180 (0.62), 2.205 (0.86), 2.252
(0.57), 2.281 (1.01), 2.296 (1.15), 2.322 (1.87), 2.327 (2.44), 2.332 (1.96), 2.366
(1.72), 2.397 (0.72), 2.409 (0.67), 2.426 (0.96), 2.444 (1.01), 2.523 (5.99), 2.665
(1.58), 2.670 (2.11), 2.674 (1.58), 2.701 (0.81), 2.710 (2.30), 2.731 (1.10), 2.739
(1.49), 2.770 (1.20), 2.778 (1.15), 2.928 (0.81), 2.993 (1.63), 3.033 (1.15), 3.550
(0.77), 3.569 (1.96), 3.588 (1.58), 3.604 (0.77), 3.717 (0.77), 3.756 (1.15), 3.787
(1.29), 3.818 (0.72), 3.903 (0.72), 3.919 (1.49), 3.935 (1.58), 3.951 (0.72), 4.135
(0.62), 4.178 (1.01), 4.204 (1.01), 4.983 (1.25), 4.996 (1.20), 5.047 (1.53), 5.061
(1.20), 5.074 (1.39), 5.089 (4.84), 5.116 (5.08), 5.158 (1.49), 7.560 (1.68), 7.573
(3.16), 7.586 (1.72), 8.568 (4.02), 8.580 (3.98).
Primer 253
(5RS,7RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1732]
[1733] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (93,0 mg, 217 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (107 mg, 282 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (29,1 mg, 261 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 6,7 mg (6% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 65,5 mg (62% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 1, racemat:
[1734]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,70 min; MS (ESIpos): m/z = 486 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.81), -0.009 (15.15), 0.007
(16.00), 0.146 (1.64), 1.667 (0.62), 1.698 (1.81), 1.728 (2.83), 1.757 (2.04), 1.790
(0.79), 2.327 (2.83), 2.365 (2.54), 2.457 (2.09), 2.522 (8.37), 2.664 (1.87), 2.669
(2.49), 2.709 (2.94), 2.737 (2.37), 2.745 (2.49), 2.776 (2.77), 2.888 (3.11), 2.917
(1.70), 2.928 (1.87), 2.968 (0.62), 3.004 (1.36), 3.017 (1.36), 3.246 (0.51), 3.905
(0.62), 3.943 (1.07), 3.971 (1.36), 4.006 (1.02), 4.041 (0.79), 4.164 (0.73), 4.178
(0.62), 4.190 (0.62), 4.211 (0.79), 4.230 (0.96), 4.255 (0.96), 4.282 (0.73), 4.307
(0.73), 4.321 (0.51), 4.338 (0.62), 4.355 (0.85), 4.384 (1.30), 4.412 (1.24), 4.443
(1.58), 4.471 (3.39), 4.485 (3.00), 4.498 (2.88), 4.512 (2.54), 4.587 (0.57), 4.602
(0.73), 4.639 (1.13), 4.658 (1.24), 4.696 (0.62), 4.727 (0.68), 4.742 (0.51), 5.070
(9.78), 5.079 (10.06), 5.380 (1.24), 5.517 (1.24), 7.635 (3.45), 7.649 (6.05), 7.661
(3.39), 8.579 (5.82), 8.590 (5.48).
Primer 254
(5RS,7RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1735]
[1736] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (93,0 mg, 217 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (107 mg, 282 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (29,1 mg, 261 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 6,7 mg (6% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 65,5 mg (62% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2, racemat:
[1737]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,75 min; MS (ESIpos): m/z = 486 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.51), -0.008 (3.67), 0.008 (3.01),
1.030 (0.61), 1.045 (0.71), 2.073 (0.61), 2.137 (1.68), 2.156 (2.90), 2.173 (3.62),
2.187 (3.57), 2.203 (3.16), 2.219 (1.73), 2.240 (3.67), 2.273 (5.10), 2.308 (1.89),
2.328 (1.43), 2.366 (1.12), 2.524 (3.72), 2.679 (2.85), 2.709 (5.76), 2.718 (4.89),
2.748 (4.38), 2.989 (8.76), 3.027 (5.04), 3.036 (3.62), 3.970 (2.55), 4.001 (2.04),
4.031 (2.24), 4.213 (1.27), 4.241 (2.04), 4.270 (2.29), 4.286 (2.70), 4.335 (1.12),
4.403 (2.34), 4.428 (2.75), 4.463 (2.50), 4.490 (3.01), 4.626 (1.17), 4.644 (1.43),
4.671 (2.24), 4.683 (2.50), 4.698 (2.34), 4.710 (2.09), 4.722 (2.19), 4.770 (8.36),
4.785 (7.85), 5.052 (3.72), 5.093 (16.00), 5.110 (9.17), 5.121 (9.27), 5.151 (1.94),
5.163 (2.45), 5.362 (1.78), 5.408 (1.73), 5.505 (1.78), 5.551 (1.68), 7.567 (5.61),
7.579 (10.90), 7.592 (5.91), 8.568 (11.87), 8.580 (11.87).
Primer 255
(5RS,7RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1738]
[1739] (5RS,7RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 65,5 mg rastvoreno u 3 ml izopropanola, pa je dodat 1 ml dihlormetana i 2 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 5,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 5,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1740] Analitička hiralna HPLC: Rt= 7,09 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm 250 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,64 min; MS (ESIpos): m/z = 486 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.04), -0.009 (16.00), 0.007 (7.79),
0.017 (0.39), 0.146 (1.01), 0.986 (0.27), 1.002 (0.30), 1.234 (0.42), 2.136 (0.27),
2.155 (0.44), 2.172 (0.54), 2.185 (0.54), 2.201 (0.52), 2.218 (0.32), 2.241 (0.62),
2.272 (0.74), 2.308 (0.30), 2.317 (0.30), 2.322 (0.49), 2.327 (0.57), 2.331 (0.44),
2.366 (0.59), 2.523 (3.72), 2.561 (0.27), 2.563 (0.27), 2.664 (0.57), 2.669 (0.76),
2.674 (0.71), 2.709 (1.26), 2.717 (0.71), 2.747 (0.64), 2.951 (0.44), 2.958 (0.47),
2.988 (1.28), 3.025 (0.74), 3.035 (0.52), 3.967 (0.37), 3.999 (0.32), 4.030 (0.32),
4.053 (0.25), 4.212 (0.25), 4.241 (0.30), 4.256 (0.37), 4.268 (0.37), 4.281 (0.42),
4.308 (0.27), 4.401 (0.35), 4.431 (0.47), 4.461 (0.42), 4.490 (0.42), 4.670 (0.37),
4.683 (0.39), 4.694 (0.42), 4.707 (0.37), 4.721 (0.35), 4.738 (0.27), 4.768 (1.21),
4.783 (1.08), 5.052 (0.54), 5.092 (2.29), 5.109 (1.38), 5.120 (1.33), 5.151 (0.32),
5.161 (0.37), 5.361 (0.27), 5.408 (0.25), 5.505 (0.30), 5.753 (1.97), 7.565 (0.89),
7.578 (1.53), 7.591 (0.84), 8.567 (1.73), 8.579 (1.65).
Primer 256
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera)
[1741]
[1742] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (93,0 mg, 217 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (107 mg, 282 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (32,7 mg, 261 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 8,8 mg (7% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera), koja je eluirana prva, i 68,3 mg (63% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera), koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 2, 2 izomera:
[1743]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,76 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.68), -0.008 (5.73), 0.008 (6.83),
0.146 (0.68), 2.000 (0.94), 2.117 (2.71), 2.149 (4.64), 2.167 (4.38), 2.183 (4.43),
2.213 (4.27), 2.224 (6.57), 2.234 (6.88), 2.245 (8.96), 2.282 (4.59), 2.323 (2.24),
2.328 (2.87), 2.333 (2.76), 2.366 (2.29), 2.523 (7.35), 2.670 (2.35), 2.675 (1.77),
2.700 (2.55), 2.710 (4.59), 2.730 (3.65), 2.738 (6.41), 2.749 (4.07), 2.768 (3.96),
2.778 (4.48), 2.927 (2.97), 2.995 (7.71), 3.033 (5.00), 3.163 (14.80), 3.173 (14.85),
3.360 (8.08), 3.378 (5.73), 3.388 (4.07), 3.406 (3.75), 3.436 (2.14), 3.446 (2.03),
3.508 (1.41), 3.527 (1.93), 3.572 (3.07), 3.596 (2.55), 3.621 (4.74), 3.643 (6.41),
3.662 (3.44), 3.671 (5.32), 3.687 (3.18), 3.696 (3.07), 3.713 (1.30), 3.736 (1.30),
3.763 (1.72), 3.794 (2.14), 3.832 (1.62), 3.853 (3.70), 3.891 (2.24), 3.928 (1.30),
3.963 (2.14), 3.990 (4.38), 4.023 (1.88), 4.087 (4.38), 4.938 (2.29), 4.950 (2.35),
4.986 (3.23), 4.999 (3.13), 5.045 (5.16), 5.087 (11.41), 5.095 (14.85), 5.117 (15.84),
5.159 (4.12), 5.269 (3.13), 5.358 (1.77), 5.402 (3.75), 5.489 (1.72), 5.524 (1.41),
7.562 (5.73), 7.574 (10.32), 7.587 (5.37), 8.136 (13.29), 8.568 (16.00), 8.580 (16.00).
Primer 257
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1744]
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1745] (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 68,3 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 2 ml etanola (toplog); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; eluent: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 30,7 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 27,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1746] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,17 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiraltek<®>IB 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.69), -0.008 (15.64), 0.008
(16.00), 0.145 (1.87), 1.235 (1.60), 2.189 (4.18), 2.207 (3.56), 2.243 (4.62), 2.302
(5.60), 2.327 (3.82), 2.332 (3.91), 2.366 (3.56), 2.523 (11.82), 2.669 (4.00), 2.696
(2.93), 2.710 (5.69), 2.724 (4.00), 2.736 (5.24), 2.749 (3.11), 2.765 (4.18), 2.779
(2.84), 2.994 (8.18), 3.032 (4.80), 3.045 (3.64), 3.330 (4.98), 3.350 (2.67), 3.359
(3.38), 3.378 (2.76), 3.406 (2.76), 3.445 (2.22), 3.507 (1.69), 3.534 (2.31), 3.543
(2.13), 3.621 (2.22), 3.640 (4.98), 3.670 (5.96), 3.686 (3.47), 3.696 (4.62), 3.735
(2.13), 3.802 (1.69), 3.832 (2.40), 3.855 (4.80), 3.929 (1.96), 3.962 (1.60), 3.988
(2.31), 4.938 (3.47), 4.950 (3.56), 4.985 (5.16), 4.999 (4.98), 5.042 (4.00), 5.086
(13.60), 5.118 (11.82), 5.159 (3.73), 5.270 (3.29), 5.400 (4.18), 5.523 (2.31), 7.561
(4.89), 7.573 (9.87), 7.587 (5.42), 8.568 (13.42), 8.580 (13.60).
Primer 258
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1747]
(5RS,7RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1748] (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 68,3 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 2 ml etanola (toplog); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; eluent: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 30,7 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 27,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1749] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,68 min, d.e. = 97,8% [kolona: Daicel Chiraltek<®>IB 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.67), -0.008 (14.33), 0.008
(12.71), 0.146 (1.67), 1.234 (1.12), 2.148 (3.10), 2.168 (3.16), 2.179 (2.17), 2.197
(2.17), 2.223 (4.71), 2.233 (5.33), 2.244 (6.88), 2.281 (2.91), 2.323 (2.23), 2.327
(2.98), 2.332 (2.29), 2.366 (2.36), 2.523 (8.06), 2.665 (2.05), 2.670 (2.91), 2.674
(2.17), 2.700 (2.11), 2.710 (4.03), 2.730 (2.73), 2.738 (4.22), 2.749 (2.42), 2.770
(3.22), 2.778 (3.10), 2.910 (1.98), 2.987 (4.65), 3.025 (3.41), 3.037 (2.85), 3.361
(2.36), 3.379 (2.29), 3.408 (1.18), 3.518 (1.67), 3.571 (3.16), 3.595 (2.79), 3.620
(3.72), 3.642 (3.72), 3.661 (2.05), 3.764 (1.12), 3.795 (1.24), 3.884 (1.43), 3.965
(1.61), 3.992 (3.60), 4.013 (1.43), 4.053 (1.80), 4.087 (1.24), 5.053 (4.40), 5.095
(16.00), 5.114 (10.67), 5.159 (1.98), 5.275 (2.05), 5.359 (1.98), 5.407 (1.86), 5.490
(1.86), 7.556 (2.67), 7.569 (5.33), 7.576 (5.52), 7.588 (2.79), 8.569 (9.92), 8.581
(9.67).
Primer 259
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1750]
[1751] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (93,0 mg, 217 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (107 mg, 282 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (37,4 mg, 261 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 8,5 mg (8% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 72 mg (64% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 1, racemat:
[1752]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,75 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (2.18), -0.009 (16.00), 0.007
(13.45), 0.145 (2.18), 1.652 (1.09), 1.682 (1.09), 1.713 (1.09), 1.747 (1.09), 2.322
(4.36), 2.327 (6.18), 2.331 (4.36), 2.365 (4.00), 2.412 (1.09), 2.444 (1.82), 2.450
(1.82), 2.523 (14.18), 2.558 (3.27), 2.560 (1.82), 2.564 (2.18), 2.566 (1.82), 2.571
(1.45), 2.576 (1.82), 2.581 (1.45), 2.585 (1.45), 2.592 (1.45), 2.596 (1.45), 2.664
(4.73), 2.669 (5.82), 2.673 (4.00), 2.689 (3.27), 2.709 (4.36), 2.737 (1.82), 2.776
(2.18), 2.906 (2.18), 2.947 (1.45), 2.989 (1.45), 3.024 (1.45), 3.180 (0.73), 3.189
(0.73), 3.201 (1.09), 3.218 (1.82), 3.223 (1.45), 3.234 (1.82), 3.246 (2.55), 3.251
(2.18), 3.358 (0.73), 3.520 (0.73), 3.565 (1.09), 3.639 (0.73), 3.699 (0.73), 3.730
(0.73), 3.788 (1.09), 3.802 (0.73), 3.823 (0.73), 4.139 (1.09), 4.744 (1.45), 4.757
(1.45), 4.764 (1.09), 4.772 (1.45), 5.070 (8.00), 5.249 (0.73), 5.256 (0.73), 5.361
(0.73), 5.394 (1.09), 5.450 (0.73), 5.470 (0.73), 5.753 (13.09), 7.623 (1.82), 7.637
(4.00), 7.650 (2.18), 8.578 (3.64), 8.589 (3.27).
Primer 260
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1753]
[1754] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (93,0 mg, 217 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (107 mg, 282 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (190 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (37,4 mg, 261 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 8,5 mg (8% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 72 mg (64% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2, racemat:
[1755]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,81 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.52), -0.008 (6.19), 0.008 (4.22),
0.146 (0.52), 2.137 (1.22), 2.154 (1.44), 2.173 (2.56), 2.189 (2.30), 2.204 (2.67),
2.220 (5.11), 2.230 (4.56), 2.238 (4.56), 2.294 (3.59), 2.328 (3.52), 2.366 (1.59),
2.519 (9.30), 2.524 (8.48), 2.665 (1.37), 2.670 (1.78), 2.675 (1.41), 2.700 (2.89),
2.711 (3.30), 2.729 (3.85), 2.740 (5.56), 2.751 (2.78), 2.769 (4.56), 2.780 (3.37),
2.898 (2.70), 2.986 (6.33), 2.997 (4.70), 3.025 (4.78), 3.036 (3.78), 3.168 (16.00),
3.493 (2.07), 3.502 (3.11), 3.526 (2.63), 3.536 (4.07), 3.545 (3.41), 3.556 (2.52),
3.566 (1.93), 3.588 (2.93), 3.599 (2.07), 3.650 (2.04), 3.665 (1.93), 3.684 (1.70),
3.697 (1.93), 3.707 (3.44), 3.720 (3.26), 3.740 (2.70), 3.754 (2.30), 3.767 (1.56),
3.780 (1.59), 3.801 (1.22), 3.814 (1.22), 3.843 (1.81), 3.871 (2.85), 3.884 (2.52),
3.891 (2.78), 4.046 (1.89), 4.060 (2.70), 4.074 (2.41), 4.091 (3.07), 4.108 (2.52),
4.122 (1.67), 4.136 (1.63), 4.150 (1.26), 4.166 (1.44), 4.180 (1.37), 4.195 (2.37),
4.210 (1.52), 4.224 (1.22), 4.238 (1.19), 5.023 (6.78), 5.034 (8.93), 5.045 (5.93),
5.087 (11.19), 5.110 (8.48), 5.120 (9.63), 5.151 (1.78), 5.161 (3.00), 5.260 (1.96),
5.270 (2.15), 5.285 (2.07), 5.296 (2.07), 5.329 (1.67), 5.337 (1.74), 5.350 (1.81),
5.384 (2.52), 5.407 (2.04), 5.417 (2.19), 5.430 (2.11), 5.440 (1.37), 5.457 (1.74),
5.471 (1.67), 5.479 (1.70), 5.491 (1.85), 7.554 (3.15), 7.566 (6.74), 7.576 (7.70),
7.588 (3.63), 8.167 (0.89), 8.569 (11.81), 8.581 (11.26).
Primer 261
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1756]
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1757] (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 72,2 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 2 ml etanola (toplog); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 31,3 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 31,2 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1758] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,08 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiraltek<®>IB, 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.73), -0.008 (16.00), 0.008
(12.80), 0.146 (1.73), 0.852 (0.61), 1.234 (1.30), 2.138 (0.78), 2.153 (0.78), 2.173
(1.56), 2.185 (1.38), 2.204 (1.47), 2.219 (3.03), 2.229 (2.94), 2.238 (2.94), 2.291
(2.42), 2.327 (3.29), 2.366 (2.68), 2.523 (6.66), 2.665 (1.73), 2.670 (2.25), 2.674
(1.64), 2.699 (1.82), 2.710 (3.89), 2.729 (2.42), 2.740 (3.63), 2.752 (1.64), 2.769
(3.03), 2.781 (2.25), 2.898 (1.64), 2.986 (3.98), 2.997 (2.85), 3.025 (3.03), 3.037
(2.51), 3.502 (1.56), 3.535 (2.25), 3.545 (1.99), 3.587 (1.73), 3.650 (1.30), 3.663
(1.12), 3.682 (0.86), 3.707 (2.08), 3.719 (1.99), 3.740 (1.64), 3.753 (1.38), 3.780
(0.86), 3.814 (0.69), 3.872 (1.73), 3.891 (1.64), 4.046 (0.95), 4.059 (1.30), 4.090
(1.30), 4.108 (1.21), 4.137 (0.86), 4.195 (1.47), 4.210 (0.86), 4.224 (0.78), 4.239
(0.69), 5.022 (4.15), 5.034 (5.62), 5.045 (3.72), 5.087 (7.18), 5.110 (5.36), 5.120
(6.49), 5.152 (1.04), 5.161 (1.99), 5.270 (1.47), 5.297 (1.30), 5.329 (0.95), 5.351
(1.04), 5.383 (1.47), 5.417 (1.30), 5.429 (1.30), 5.440 (0.78), 5.470 (1.04), 7.554
(1.73), 7.566 (4.06), 7.576 (4.93), 7.589 (2.25), 8.569 (7.26), 8.581 (7.26).
Primer 262
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1759]
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1760] (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 72,2 mg rastvoreno u 3 ml acetonitrila i 2 ml etanola (toplog); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IB 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 31,3 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 31,2 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1761] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,11 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiraltek<®>IB 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.71), 0.008 (15.86), 0.147 (1.71),
0.853 (0.96), 1.234 (2.39), 2.138 (1.78), 2.153 (1.78), 2.173 (3.49), 2.189 (3.21),
2.204 (3.42), 2.221 (6.97), 2.229 (6.63), 2.239 (6.50), 2.293 (5.40), 2.327 (5.40),
2.366 (2.80), 2.519 (10.60), 2.523 (8.27), 2.670 (2.53), 2.700 (3.56), 2.711 (4.79),
2.730 (5.06), 2.741 (7.52), 2.751 (3.76), 2.769 (6.02), 2.781 (4.51), 2.915 (3.42),
2.986 (8.62), 2.997 (6.22), 3.026 (6.56), 3.038 (5.20), 3.502 (3.28), 3.526 (2.67),
3.536 (4.85), 3.546 (4.03), 3.556 (3.01), 3.590 (3.69), 3.650 (2.53), 3.664 (2.46),
3.684 (1.98), 3.707 (4.51), 3.720 (4.44), 3.740 (3.35), 3.753 (3.01), 3.767 (1.98),
3.780 (1.85), 3.802 (1.37), 3.814 (1.44), 3.870 (3.69), 3.892 (3.56), 4.048 (1.85),
4.061 (2.67), 4.075 (1.71), 4.091 (3.01), 4.109 (2.53), 4.122 (1.71), 4.137 (1.78),
4.151 (1.50), 4.166 (1.71), 4.180 (1.64), 4.195 (3.08), 4.210 (1.98), 4.223 (1.50),
4.239 (1.57), 5.023 (9.23), 5.035 (12.51), 5.045 (8.41), 5.087 (15.52), 5.110 (11.56),
5.120 (13.81), 5.152 (2.39), 5.161 (4.31), 5.261 (2.60), 5.271 (2.94), 5.298 (2.87),
5.329 (2.12), 5.350 (2.39), 5.384 (3.35), 5.408 (2.67), 5.418 (2.94), 5.430 (2.80),
5.441 (1.71), 5.457 (2.19), 5.480 (2.26), 5.492 (2.32), 7.555 (3.83), 7.566 (9.37),
7.577 (10.87), 7.589 (5.20), 8.569 (16.00), 8.581 (15.93).
Primer 263
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1762] (dijastereomerna smeša 1; 2 izomera)
[1763] (5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (55,0 mg, 139 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (68,7 mg, 181 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (21,0 mg, 167 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 10,5 mg (16% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera), koja je eluirana prva, i 37 mg (51% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera), koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 1, 2 izomera:
[1764]
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.70), -0.033 (0.53), -0.022 (0.95),
-0.008 (14.62), 0.008 (16.00), 0.019 (0.95), 0.024 (0.53), 0.026 (0.42), 0.146 (1.70),
1.653 (0.42), 1.682 (0.53), 1.713 (0.53), 1.739 (0.53), 2.097 (0.32), 2.109 (0.32),
2.131 (0.32), 2.212 (0.32), 2.231 (0.32), 2.257 (0.32), 2.323 (1.70), 2.327 (2.33),
2.332 (1.80), 2.366 (1.91), 2.460 (0.32), 2.523 (7.31), 2.559 (2.44), 2.574 (1.27),
2.581 (0.85), 2.586 (0.74), 2.598 (0.74), 2.604 (0.53), 2.637 (0.95), 2.665 (2.44),
2.670 (3.60), 2.674 (2.75), 2.710 (3.18), 2.760 (0.21), 2.862 (1.06), 2.898 (0.74),
2.987 (0.42), 3.011 (0.42), 3.359 (1.59), 3.435 (0.74), 3.468 (0.53), 3.499 (0.64),
3.534 (0.42), 3.554 (0.53), 3.588 (0.53), 3.619 (0.64), 3.636 (0.64), 3.657 (0.64),
3.674 (0.74), 3.703 (0.53), 3.721 (0.42), 3.743 (0.32), 3.787 (0.32), 3.795 (0.32),
3.826 (0.42), 3.859 (0.53), 3.887 (0.42), 3.931 (0.64), 3.957 (0.74), 3.986 (0.42),
4.677 (0.32), 4.690 (0.42), 4.704 (0.32), 4.716 (0.42), 4.731 (0.42), 4.742 (0.42),
4.755 (0.42), 4.767 (0.42), 4.781 (0.32), 4.798 (0.42), 4.812 (0.32), 4.825 (0.32),
4.971 (4.77), 5.284 (0.32), 5.354 (0.32), 5.396 (0.53), 5.417 (0.32), 5.481 (0.32),
5.524 (0.32), 8.104 (1.17), 8.109 (1.27), 8.129 (1.17), 8.133 (1.27), 8.489 (1.70).
Primer 264
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 2; 2 izomera)
[1765]
[1766] (5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (55,0 mg, 139 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (68,7 mg, 181 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (21,0 mg, 167 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 10,5 mg (16% od teor.) dijastereomerne smeše 1 (2 izomera), koja je eluirana prva, i 37 mg (51% od teor.) dijastereomerne smeše 2 (2 izomera), koja je kasnije eluirana.
Dijastereomerna smeša 2, 2 izomera:
[1767]
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -1.950 (1.23), -1.643 (1.23), -1.565 (0.92),
-1.154 (1.23), -0.149 (5.54), -0.039 (1.85), 0.146 (5.23), 1.883 (1.23), 1.954 (1.23),
1.989 (1.54), 1.999 (1.54), 2.039 (1.23), 2.120 (4.31), 2.149 (7.38), 2.186 (6.77),
2.199 (6.46), 2.216 (6.15), 2.268 (5.54), 2.297 (3.69), 2.327 (10.46), 2.367 (6.15),
2.413 (1.54), 2.610 (2.15), 2.635 (3.38), 2.670 (15.38), 2.710 (10.15), 2.801 (1.23),
2.815 (1.23), 2.883 (1.54), 2.948 (9.85), 2.982 (7.08), 3.025 (1.23), 3.084 (1.23),
3.119 (1.23), 3.204 (1.54), 3.361 (5.85), 3.388 (3.38), 3.426 (2.46), 3.474 (1.54),
3.499 (1.85), 3.510 (2.15), 3.524 (1.85), 3.534 (2.15), 3.567 (4.00), 3.597 (4.00),
3.605 (3.08), 3.628 (4.92), 3.668 (4.62), 3.691 (4.00), 3.726 (1.85), 3.762 (1.23),
3.790 (2.46), 3.798 (1.85), 3.820 (2.46), 3.843 (3.08), 3.865 (2.15), 3.887 (2.15),
3.919 (1.85), 3.976 (2.77), 3.996 (3.08), 4.019 (2.77), 4.049 (1.85), 4.076 (1.54),
4.904 (2.46), 4.931 (5.85), 4.970 (16.00), 4.995 (3.69), 5.017 (9.54), 5.056 (6.15),
5.265 (3.08), 5.303 (1.23), 5.355 (2.15), 5.398 (3.69), 5.490 (2.46), 5.522 (1.54),
7.947 (0.92), 8.103 (10.15), 8.107 (10.77), 8.127 (9.85), 8.131 (10.77), 8.201 (1.23),
8.214 (1.54), 8.483 (15.08), 8.698 (0.92), 8.965 (1.23), 10.344 (1.23), 11.406 (0.92),
12.388 (1.23), 12.839 (0.92), 12.989 (1.23), 13.493 (1.23), 15.243 (0.92), 16.225
(0.92).
Primer 265
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1768]
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1769] (dijastereomerna smeša 2, 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 37 mg rastvoreno u 2 ml n-heptana i 2 ml etanola; injekciona zapremina: 0,9 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 50°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 14,3 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 15,1 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1770] Analitička hiralna HPLC: Rt= 6,52 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 5 µm, 250 x 4,6 mm; eluent: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.56), -0.008 (16.00), 0.008
(15.94), 0.146 (1.50), 1.235 (0.88), 1.971 (0.50), 2.115 (1.50), 2.151 (2.88), 2.185
(2.25), 2.200 (2.12), 2.216 (1.94), 2.231 (1.94), 2.267 (3.25), 2.296 (2.00), 2.327
(2.37), 2.366 (0.69), 2.669 (3.75), 2.678 (3.44), 2.692 (1.62), 2.710 (2.25), 2.948
(4.63), 2.982 (3.75), 3.362 (1.75), 3.390 (1.62), 3.426 (1.25), 3.497 (0.81), 3.523
(1.19), 3.648 (1.81), 3.667 (2.63), 3.692 (2.94), 3.721 (1.25), 3.784 (0.69), 3.818
(1.75), 3.845 (2.25), 3.868 (1.25), 3.916 (1.37), 3.952 (0.75), 3.976 (1.19), 4.009
(0.69), 4.906 (1.75), 4.922 (3.25), 4.966 (8.44), 5.021 (4.12), 5.060 (1.88), 5.266
(1.56), 5.394 (2.37), 5.525 (1.12), 8.102 (4.75), 8.107 (4.81), 8.126 (4.81), 8.131
(4.94), 8.483 (6.12).
Primer 266
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1771]
[1772] (5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (55,0 mg, 139 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (68,7 mg, 181 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (24,0 mg, 167 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 23,9 mg (35% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.73), -0.031 (0.56), -0.008 (16.00),
0.008 (13.67), 0.146 (1.63), 2.073 (0.42), 2.145 (0.47), 2.161 (0.47), 2.193 (1.17),
2.256 (0.84), 2.295 (0.56), 2.322 (1.45), 2.327 (1.96), 2.332 (1.45), 2.366 (0.56),
2.439 (0.42), 2.648 (0.42), 2.665 (1.77), 2.669 (2.33), 2.684 (1.21), 2.695 (0.65),
2.710 (0.84), 2.728 (0.56), 2.942 (1.77), 2.976 (1.17), 2.988 (0.75), 3.491 (0.37),
3.527 (0.61), 3.535 (0.56), 3.578 (0.61), 3.640 (0.37), 3.653 (0.33), 3.698 (0.56),
3.709 (0.51), 3.729 (0.42), 3.746 (0.37), 3.851 (0.42), 3.870 (0.51), 3.888 (0.51),
3.897 (0.47), 4.058 (0.37), 4.088 (0.47), 4.102 (0.33), 4.201 (0.47), 4.933 (0.89),
4.971 (2.47), 4.993 (1.77), 5.008 (1.21), 5.024 (1.40), 5.028 (1.35), 5.047 (0.47),
5.064 (0.56), 5.267 (0.42), 5.288 (0.47), 5.342 (0.37), 5.382 (0.56), 5.394 (0.47),
5.403 (0.42), 5.426 (0.37), 5.454 (0.33), 5.486 (0.37), 8.103 (1.40), 8.107 (1.49),
8.126 (1.49), 8.131 (1.45), 8.477 (2.19).
Primer 267
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1773]
(5RS,7RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1774] (dijastereomer 2, racemat) razdvojen je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 23,9 mg rastvoreno u 1,5 ml n-heptana i 2 ml etanola; injekciona zapremina: 1,2 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 8,6 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 9,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1775] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,86 min, e.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IE 3 µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.69), -0.008 (16.00), 0.008
(14.89), 0.146 (1.85), 2.128 (0.41), 2.144 (0.82), 2.162 (0.82), 2.193 (2.14), 2.259
(1.40), 2.294 (0.99), 2.323 (1.48), 2.327 (2.18), 2.332 (1.60), 2.366 (1.07), 2.651
(0.70), 2.674 (2.71), 2.683 (2.14), 2.696 (1.07), 2.711 (1.69), 2.941 (3.08), 2.976
(2.06), 2.988 (1.32), 3.488 (0.58), 3.530 (0.95), 3.577 (0.95), 3.641 (0.70), 3.653
(0.58), 3.673 (0.58), 3.697 (0.99), 3.712 (0.99), 3.732 (0.78), 3.746 (0.66), 3.759
(0.45), 3.773 (0.45), 3.837 (0.58), 3.852 (0.78), 3.867 (0.95), 3.911 (0.70), 3.916
(0.70), 4.044 (0.49), 4.056 (0.70), 4.072 (0.53), 4.087 (0.82), 4.104 (0.58), 4.117
(0.45), 4.133 (0.45), 4.170 (0.45), 4.201 (0.78), 4.216 (0.49), 4.231 (0.41), 4.933
(1.69), 4.972 (4.36), 4.977 (3.78), 4.993 (3.13), 5.008 (2.06), 5.024 (2.34), 5.028
(2.39), 5.052 (0.82), 5.064 (1.11), 5.067 (1.03), 5.263 (0.74), 5.292 (0.70), 5.384
(0.95), 5.394 (0.86), 5.414 (0.78), 5.422 (0.66), 5.454 (0.49), 5.474 (0.70), 5.484
(0.66), 8.103 (2.67), 8.108 (2.80), 8.127 (2.76), 8.132 (2.76), 8.477 (4.40), 8.481
(4.40).
Primer 268
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1776]
[1777] (5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (70,0 mg, čistoća 75%, 139 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (68,7 mg, 181 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (24,0 mg, 167 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 12,6 mg (19% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 9 mg (14% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 1, racemat:
[1778]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.45), -0.020 (0.85), -0.017 (1.09),
-0.008 (12.36), 0.008 (16.00), 0.146 (1.58), 1.642 (1.27), 1.670 (1.39), 1.703 (1.27),
1.735 (1.03), 2.323 (1.27), 2.327 (1.76), 2.332 (1.39), 2.366 (1.21), 2.523 (5.52),
2.558 (2.48), 2.564 (2.12), 2.572 (1.76), 2.665 (1.58), 2.669 (2.12), 2.674 (1.64),
2.697 (1.45), 2.710 (1.52), 2.730 (2.00), 2.737 (2.24), 2.769 (2.61), 2.901 (2.18),
2.940 (1.58), 2.996 (1.03), 3.016 (1.09), 3.509 (0.85), 3.521 (0.97), 3.555 (1.15),
3.564 (1.21), 3.572 (0.85), 3.608 (0.85), 3.642 (0.85), 3.655 (1.03), 3.700 (1.03),
3.713 (1.03), 3.735 (0.97), 3.748 (1.21), 3.783 (0.91), 3.797 (0.97), 3.809 (0.97),
3.830 (1.09), 3.844 (0.97), 3.864 (1.03), 3.895 (0.91), 3.910 (0.85), 3.951 (0.79),
4.114 (0.91), 4.130 (1.45), 4.144 (0.97), 4.160 (1.45), 4.174 (1.03), 4.723 (1.21),
4.732 (1.39), 4.737 (1.76), 4.750 (1.70), 4.765 (1.45), 4.773 (1.03), 4.923 (7.94),
4.952 (1.45), 5.248 (0.91), 5.261 (0.85), 5.276 (0.85), 5.287 (0.73), 5.322 (0.73),
5.342 (0.91), 5.354 (0.85), 5.364 (0.91), 5.371 (0.97), 5.383 (0.97), 5.392 (0.97),
5.406 (0.91), 5.415 (0.79), 5.465 (0.79), 5.472 (0.85), 7.796 (3.33), 7.801 (3.64),
8.425 (0.73), 8.446 (2.61), 8.453 (4.12), 8.458 (3.15), 8.576 (3.88), 8.581 (3.45),
9.265 (3.45).
Primer 269
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 2, racemat)
[1779]
[1780] (5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (70,0 mg, čistoća 75%, 139 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (68,7 mg, 181 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (24,0 mg, 167 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat, i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana 10% vodenim rastvorom limunske kiseline i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Nakon razdvajanja, izolovano je 12,6 mg (19% od teor.) dijastereomera 1 (racemat), koji je eluiran prvi, i 9 mg (14% od teor.) dijastereomera 2 (racemat), koji je kasnije eluiran.
Dijastereomer 2, racemat:
[1781]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.95), -0.008 (16.00), 0.008
(14.42), 0.146 (1.86), 2.166 (1.21), 2.182 (1.16), 2.197 (1.44), 2.208 (2.27), 2.218
(2.69), 2.228 (2.13), 2.241 (1.11), 2.277 (1.95), 2.312 (1.16), 2.323 (1.90), 2.327
(2.64), 2.332 (1.90), 2.366 (1.81), 2.523 (5.43), 2.665 (2.04), 2.670 (2.64), 2.674
(1.95), 2.693 (1.44), 2.703 (1.21), 2.710 (2.09), 2.723 (1.95), 2.733 (2.97), 2.743
(1.44), 2.762 (2.37), 2.772 (1.81), 2.889 (1.30), 2.904 (1.25), 2.977 (3.11), 2.988
(2.27), 3.016 (2.27), 3.027 (1.81), 3.500 (1.02), 3.533 (1.58), 3.542 (1.44), 3.552
(1.25), 3.563 (0.74), 3.578 (1.07), 3.586 (1.58), 3.596 (0.97), 3.646 (0.97), 3.660
(0.79), 3.678 (0.79), 3.695 (0.79), 3.703 (1.44), 3.718 (1.53), 3.738 (1.07), 3.752
(1.07), 3.766 (0.79), 3.780 (0.74), 3.800 (0.65), 3.847 (0.83), 3.866 (1.34), 3.895
(1.34), 3.930 (0.70), 4.043 (0.74), 4.057 (0.93), 4.071 (0.65), 4.087 (1.11), 4.104
(0.97), 4.119 (0.70), 4.134 (0.70), 4.157 (0.70), 4.173 (0.74), 4.201 (1.21), 4.230
(0.70), 4.911 (0.74), 4.952 (13.22), 5.007 (3.06), 5.020 (4.31), 5.273 (1.02), 5.296
(1.07), 5.328 (0.65), 5.351 (0.74), 5.386 (1.30), 5.397 (1.16), 5.407 (1.02), 5.418
(1.07), 5.427 (1.07), 5.439 (0.65), 5.458 (0.83), 5.480 (0.83), 5.490 (0.93), 7.750
(1.81), 7.763 (4.50), 8.425 (7.14), 8.429 (4.73), 8.570 (4.87).
Primer 270
(5RS,8RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1782]
[1783] Pod argonom: 5-{[(3RS,4RS)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (23,0 mg, 46,4
µmol) i paladijum na aktivnom uglju (50,0 mg, 10% paladijuma) suspendovani su u etanolu (5,0 ml) i mešani preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 atm). Reakciona smeša je filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem
preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 10,6 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.36), -0.008 (12.38), 0.008
(12.98), 0.146 (1.36), 1.724 (0.83), 1.755 (1.81), 1.781 (1.89), 1.807 (0.83), 2.067
(1.81), 2.084 (2.34), 2.120 (1.66), 2.167 (3.40), 2.229 (0.83), 2.323 (2.11), 2.327
(2.87), 2.332 (2.19), 2.366 (1.36), 2.665 (2.04), 2.669 (2.72), 2.674 (2.26), 2.710
(1.36), 3.477 (0.98), 3.486 (0.91), 3.498 (0.83), 3.511 (1.58), 3.520 (1.74), 3.532
(1.96), 3.541 (1.21), 3.567 (1.43), 3.574 (1.43), 3.632 (1.06), 3.645 (1.21), 3.666
(0.75), 3.690 (1.43), 3.704 (1.89), 3.726 (1.51), 3.736 (1.58), 3.757 (1.66), 3.771
(1.36), 3.794 (1.06), 3.804 (0.98), 3.840 (0.53), 3.873 (1.06), 3.892 (0.60), 3.909
(0.91), 3.935 (1.06), 3.949 (1.21), 3.964 (0.91), 3.986 (1.21), 4.000 (1.06), 4.015
(0.68), 4.028 (0.60), 4.104 (1.81), 4.136 (1.51), 4.152 (1.13), 4.166 (0.91), 4.179
(1.21), 4.191 (0.98), 4.205 (0.83), 4.220 (0.68), 4.892 (3.92), 4.901 (4.91), 5.065
(2.11), 5.106 (10.57), 5.120 (5.81), 5.126 (6.34), 5.167 (1.43), 5.257 (1.28), 5.270
(1.28), 5.280 (1.43), 5.289 (1.28), 5.300 (0.75), 5.318 (0.91), 5.335 (1.06), 5.346
(0.98), 5.357 (1.06), 5.370 (1.06), 5.381 (1.43), 5.393 (1.43), 5.402 (1.21), 5.412
(1.28), 5.421 (1.13), 5.433 (0.83), 5.447 (0.91), 5.455 (0.91), 5.464 (0.91), 5.479
(0.98), 5.486 (1.06), 5.500 (0.83), 7.922 (16.00), 7.941 (1.28), 8.634 (7.09).
Primer 271
(5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1784]
[1785] Pod argonom: 5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (165 mg, 346 µmol) i paladijum na aktivnom uglju (50,0 mg, 10% paladijuma) suspendovani su u etanolu (29 ml) i mešani preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 atm). Reakciona smeša je filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 21,3 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
Dijastereomerna smeša (4 izomera):
[1786]
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,51 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.89), -0.034 (0.38), -0.009 (16.00),
0.007 (15.87), 0.146 (2.02), 1.742 (0.63), 1.772 (0.76), 1.799 (0.63), 1.827 (0.50),
2.078 (1.51), 2.104 (1.76), 2.152 (1.39), 2.178 (1.76), 2.222 (1.26), 2.251 (0.76),
2.322 (3.15), 2.327 (4.16), 2.331 (3.02), 2.365 (2.39), 2.522 (10.20), 2.587 (0.88),
2.639 (0.50), 2.664 (3.28), 2.669 (4.54), 2.674 (3.28), 2.700 (0.38), 2.709 (2.27),
2.731 (0.50), 2.890 (0.50), 3.366 (1.51), 3.384 (1.39), 3.396 (0.88), 3.412 (1.01),
3.424 (0.50), 3.439 (0.38), 3.467 (0.50), 3.520 (0.76), 3.535 (1.26), 3.559 (1.01),
3.588 (0.88), 3.609 (1.64), 3.629 (1.13), 3.656 (1.01), 3.676 (0.76), 3.737 (0.76),
3.757 (0.76), 3.779 (0.88), 3.804 (0.50), 3.869 (0.88), 3.926 (0.50), 3.948 (0.63),
3.964 (0.63), 4.022 (0.50), 4.053 (0.63), 4.091 (1.01), 4.097 (1.01), 4.778 (0.50),
4.791 (0.63), 4.837 (0.63), 4.846 (0.63), 4.921 (0.76), 4.933 (0.76), 4.956 (0.88),
5.059 (0.63), 5.069 (0.50), 5.099 (2.52), 5.110 (3.02), 5.122 (4.28), 5.162 (0.88),
5.268 (0.88), 5.355 (0.50), 5.402 (0.88), 5.490 (0.63), 7.897 (0.50), 7.921 (9.57),
7.941 (0.63), 8.635 (3.78).
Primer 272
(5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1787]
[1788] (5RS,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 93 mg je rastvoreno u 3 ml etanola i 3 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,58 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 60:40; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 46 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 32,7 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1789] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,95 min, d.e. = 98,4% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA 3 µm 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,54 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.71), -0.008 (6.13), 0.008 (5.87),
0.146 (0.71), 1.806 (1.01), 1.827 (1.52), 1.850 (1.06), 2.078 (2.58), 2.095 (2.28),
2.105 (3.14), 2.142 (2.03), 2.152 (1.92), 2.177 (1.77), 2.192 (1.52), 2.223 (2.38),
2.248 (1.47), 2.274 (1.32), 2.327 (1.77), 2.332 (1.32), 2.367 (1.37), 2.665 (1.16),
2.670 (1.57), 2.674 (1.16), 2.710 (1.27), 3.342 (1.42), 3.360 (0.71), 3.370 (0.81),
3.379 (0.91), 3.406 (0.86), 3.415 (0.81), 3.468 (0.66), 3.475 (0.71), 3.504 (0.81),
3.514 (0.81), 3.633 (2.94), 3.651 (2.18), 3.676 (1.57), 3.699 (1.22), 3.736 (2.03),
3.761 (1.92), 3.781 (1.57), 3.806 (1.16), 3.869 (2.38), 4.089 (1.37), 4.099 (1.37),
4.780 (1.42), 4.791 (1.57), 4.838 (2.18), 4.848 (1.82), 5.059 (1.87), 5.100 (7.90),
5.123 (5.77), 5.164 (1.42), 5.268 (1.42), 5.399 (1.62), 5.520 (0.91), 7.921 (16.00),
7.941 (0.96), 8.637 (7.04).
Primer 273
(5RS,8RS)-2-[(3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1790]
[1791] Pod argonom, 2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (50,0 mg, čistoća 62%, 67,1 µmol) i paladijum na aktivnom uglju (10,0 mg, 10% paladijuma) suspendovani su u etanolu (5,0 ml) i mešani preko vikenda na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 atm). Reakciona smeša je filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 0,5 mg (1,7% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.120 (1.33), -0.009 (5.54), -0.007 (16.00),
0.007 (11.08), 0.117 (1.28), 1.330 (0.87), 1.343 (0.82), 1.768 (1.90), 1.796 (2.56),
1.815 (1.79), 1.823 (2.10), 1.856 (2.36), 1.880 (2.10), 1.901 (0.77), 2.010 (2.82),
2.019 (3.54), 2.027 (3.85), 2.037 (5.03), 2.050 (6.10), 2.072 (4.97), 2.081 (4.26),
2.101 (3.49), 2.121 (4.51), 2.152 (9.44), 2.164 (5.90), 2.182 (4.36), 2.230 (3.18),
2.258 (2.36), 2.271 (2.31), 2.354 (1.18), 2.358 (2.31), 2.361 (3.08), 2.365 (2.21),
2.369 (1.08), 2.518 (5.38), 2.522 (3.79), 2.628 (1.03), 2.631 (2.15), 2.635 (2.97),
2.639 (2.10), 2.643 (0.87), 3.348 (6.56), 3.358 (4.92), 3.371 (3.74), 3.380 (3.13),
3.390 (2.36), 3.411 (1.74), 3.418 (1.69), 3.461 (1.18), 3.468 (1.23), 3.488 (1.95),
3.495 (1.74), 3.516 (1.90), 3.522 (1.95), 3.543 (4.67), 3.563 (4.87), 3.577 (3.03),
3.585 (3.28), 3.590 (3.18), 3.598 (5.03), 3.615 (1.23), 3.633 (3.79), 3.650 (3.95),
3.656 (2.97), 3.670 (2.92), 3.686 (2.72), 3.711 (1.33), 3.738 (2.62), 3.746 (1.54),
3.756 (3.38), 3.764 (2.05), 3.772 (2.05), 3.783 (1.38), 3.789 (1.33), 3.812 (1.59),
3.837 (0.77), 3.861 (3.33), 3.936 (1.59), 3.954 (2.87), 3.972 (2.51), 3.994 (1.28),
4.015 (1.44), 4.041 (1.74), 4.079 (3.95), 4.772 (2.00), 4.776 (2.26), 4.785 (2.36),
4.825 (2.62), 4.830 (3.33), 4.838 (2.72), 4.842 (2.51), 4.896 (2.51), 4.900 (2.97),
4.908 (2.82), 4.912 (2.62), 4.936 (2.51), 4.943 (3.85), 4.953 (2.62), 4.965 (3.90),
4.970 (8.05), 4.973 (7.33), 4.997 (5.59), 5.001 (11.64), 5.005 (10.67), 5.114 (4.26),
5.118 (7.54), 5.122 (6.82), 5.127 (7.74), 5.131 (4.36), 5.146 (2.87), 5.149 (4.97),
5.154 (4.46), 5.159 (5.13), 5.163 (2.77), 5.279 (3.13), 5.285 (2.97), 5.368 (2.05),
5.385 (3.23), 5.393 (3.44), 5.474 (1.85), 5.507 (1.33), 7.422 (6.10), 7.431 (11.08),
7.439 (12.26), 7.448 (12.77), 7.457 (7.08), 7.711 (8.15), 7.713 (6.41), 7.729 (12.10),
7.733 (6.97), 7.748 (7.23), 8.360 (8.05), 8.363 (13.28), 8.369 (8.67), 8.372 (12.87),
8.524 (5.03).
Primer 274
(5RS,8RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[(3-fluorpiridin-2-il)metil]-8-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1792]
[1793] Pod argonom: 2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-(trifluormetil)[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (95,0 mg, čistoća 47%, 93,1 µmol) i paladijum na aktivnom uglju (10,0 mg, 10% paladijuma) suspendovani su u etanolu (5,0 ml) i mešani preko noći na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 atm). Reakciona smeša je filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 17 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.00), 1.747 (1.83), 1.780 (4.50),
1.808 (5.17), 1.839 (2.50), 2.024 (4.67), 2.034 (5.67), 2.049 (5.67), 2.067 (4.67),
2.094 (2.83), 2.133 (9.50), 2.141 (9.33), 2.327 (6.00), 2.366 (3.83), 2.669 (6.17),
2.710 (3.67), 3.471 (3.00), 3.480 (2.83), 3.493 (2.67), 3.504 (4.67), 3.515 (5.50),
3.525 (5.33), 3.534 (3.67), 3.559 (4.17), 3.567 (4.50), 3.626 (2.83), 3.641 (3.33),
3.660 (2.17), 3.674 (2.67), 3.686 (4.17), 3.698 (4.83), 3.720 (4.83), 3.731 (4.50),
3.751 (5.17), 3.765 (3.83), 3.785 (3.33), 3.798 (3.17), 3.855 (2.67), 3.867 (3.00),
3.904 (2.33), 3.933 (2.83), 3.947 (3.00), 3.962 (2.00), 3.983 (3.50), 3.997 (3.17),
4.011 (2.00), 4.026 (1.83), 4.087 (4.83), 4.094 (4.83), 4.102 (5.00), 4.134 (3.67),
4.148 (3.17), 4.164 (2.67), 4.176 (3.67), 4.191 (2.50), 4.204 (2.17), 4.880 (11.50),
4.890 (14.33), 4.971 (9.67), 5.010 (16.00), 5.065 (3.00), 5.114 (9.33), 5.127 (10.00),
5.154 (4.83), 5.168 (6.00), 5.247 (2.50), 5.257 (3.50), 5.268 (3.67), 5.285 (3.50),
5.324 (2.33), 5.337 (3.17), 5.345 (3.00), 5.354 (3.00), 5.366 (3.17), 5.380 (4.17),
5.392 (4.17), 5.403 (3.67), 5.415 (3.67), 5.425 (2.83), 5.443 (2.33), 5.451 (2.33),
5.463 (2.83), 5.475 (3.17), 5.486 (2.83), 5.502 (2.00), 7.419 (5.67), 7.429 (10.67),
7.440 (12.17), 7.450 (12.83), 7.461 (7.00), 7.706 (8.50), 7.731 (13.17), 7.753 (7.83),
8.360 (13.00), 8.371 (12.83).
Primer 275
(5S,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1794]
[1795] (5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (150 mg, 363 µmol) dodat je pod argonom u dihlormetan (1,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je na 0 °C ukapan hidrogen tetrafluorborat (adukt etil etra) (55 µl, 400 µmol) i reakciona smeša je mešana 30 min na 0 °C i 60 min na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i preko noći osušena pod visokim vakuumom. Ostatak je rastvoren u acetonitrilu (600 µl) i na sobnoj temperaturi je lagano ukapan rastvor gvožđe(II)-(S,S-(2-({(S)-2-[(S)-1-(piridin-2-ilmetil)pirolidin-2-il]pirolidin-1-il}metil)piridin)(bis-acetonitril) heksafluorantimonata (16,9 mg, 18,1 µmol) i sirćetne kiseline (10 µl, 180 µmol) u acetonitrilu (0,36 ml). Zatim je na sobnoj temperaturi lagano ukapan vodonik peroksid (27 µl, 50% rastvor u vodi, 440 µmol) u acetonitrilu (3,3 ml) i mešano je 10 min. Ponovo je dodat vodonik peroksid (27 µl, 50 mas.% rastvor u vodi, 440 µmol) u acetonitrilu (3,3 ml) i mešano je još 10 min. Ponovo je ukapan vodonik peroksid (27 µl, 50% rastvor u vodi, 440 µmol) u acetonitrilu (3,3 ml) i mešano je dodatnih 40 min na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodat 1 N vodeni rastvor natrijum hidroksida i snažno je mešano tokom 20 min na sobnoj temperaturi. Smeša je ponovo razblažena 1 N vodenim rastvorom natrijum hidroksida i vodena faza je ekstrahovana dihlormetanom.
Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 11). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 15,0 mg (9% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.25), -0.008 (16.00), 0.008 (8.87),
0.015 (0.77), 0.018 (0.60), 0.025 (0.32), 0.146 (1.17), 1.728 (0.85), 1.740 (1.01),
1.751 (1.41), 1.765 (1.49), 1.778 (1.61), 1.800 (0.97), 1.818 (1.17), 1.852 (0.77),
1.884 (0.36), 1.912 (0.52), 1.948 (0.60), 1.999 (0.40), 2.021 (0.36), 2.037 (0.24),
2.105 (1.49), 2.224 (0.60), 2.265 (0.85), 2.323 (1.25), 2.327 (1.53), 2.331 (1.21),
2.366 (2.10), 2.389 (0.97), 2.405 (1.01), 2.425 (0.77), 2.523 (7.70), 2.525 (6.85),
2.558 (1.21), 2.561 (0.77), 2.564 (0.69), 2.566 (0.64), 2.569 (0.56), 2.572 (0.56),
2.576 (0.52), 2.582 (0.40), 2.587 (0.28), 2.594 (0.28), 2.598 (0.28), 2.612 (0.24),
2.651 (0.28), 2.665 (1.29), 2.669 (1.69), 2.673 (1.17), 2.709 (1.69), 3.238 (0.28),
3.361 (0.69), 3.373 (0.40), 3.386 (0.64), 3.397 (0.48), 3.419 (0.32), 3.457 (0.36),
3.484 (0.48), 3.494 (0.52), 3.508 (0.28), 3.516 (0.32), 3.620 (0.85), 3.629 (1.29),
3.636 (1.37), 3.643 (1.45), 3.649 (1.37), 3.667 (1.25), 3.690 (0.85), 3.711 (0.64),
3.730 (1.33), 3.755 (1.21), 3.769 (0.97), 3.776 (1.01), 3.796 (0.60), 3.834 (0.32),
3.861 (1.21), 4.475 (0.36), 4.487 (0.69), 4.501 (0.64), 4.510 (0.77), 4.527 (2.02),
4.538 (1.93), 4.547 (0.77), 4.599 (0.36), 4.610 (0.44), 4.624 (0.24), 4.655 (0.36),
4.670 (0.64), 4.682 (0.40), 4.751 (0.77), 4.762 (0.69), 4.801 (0.89), 4.806 (0.93),
4.817 (0.93), 5.044 (3.83), 5.060 (5.96), 5.101 (0.24), 5.258 (0.93), 5.389 (1.21),
5.513 (0.64), 5.772 (2.66), 5.783 (3.51), 5.796 (1.41), 7.896 (0.60), 7.920 (7.58),
8.650 (2.66), 8.663 (1.37).
Alternativna metoda:
[1796] (5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (400 mg, 968 µmol) i cerijum(IV)sulfat (1,29 g, 3,87 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (1,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (1,3 ml, 24 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida.
Suspenzija je filtrirana i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 270 mg (59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,03 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
Primer 276
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1797]
(5S,8RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) (200 mg, čistoća 70%, 326 µmol) dodat je u THF (4,8 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 3,3,3-trietil-1-(metoksikarbonil)diazatian-3-ijum-1-id-2,2-dioksid (233 mg, 978 µmol) i mešano je 45 min na 90 °C u mikrotalasnoj pećnici. Ponovo je dodat 3,3,3-trietil-1-(metoksikarbonil)diazatian-3-ijum-1-id-2,2-dioksid (78 mg, 326 µmol) i mešano je još 2 sata na 90 °C u mikrotalasnoj pećnici. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 40 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 9,60 mg (7% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.80), -0.032 (0.48), -0.027 (0.60), -0.024 (0.72), -0.019 (0.96), -0.016 (1.20), -0.009 (16.00), 0.007 (15.52), 0.018 (0.96),
0.022 (0.60), 0.027 (0.60), 0.146 (1.80), 2.091 (0.60), 2.116 (0.72), 2.125 (0.72),
2.165 (0.48), 2.239 (0.48), 2.270 (0.60), 2.322 (2.77), 2.327 (3.85), 2.332 (2.77),
2.366 (3.85), 2.394 (0.36), 2.414 (0.36), 2.420 (0.36), 2.434 (0.48), 2.440 (0.48),
2.447 (0.60), 2.451 (0.60), 2.521 (8.66), 2.523 (8.54), 2.526 (6.50), 2.557 (3.61),
2.560 (2.65), 2.562 (2.17), 2.564 (1.80), 2.567 (1.80), 2.569 (1.56), 2.572 (1.32),
2.574 (1.32), 2.577 (1.20), 2.579 (1.20), 2.582 (0.84), 2.584 (0.84), 2.586 (1.08),
2.589 (0.84), 2.601 (0.84), 2.606 (0.96), 2.621 (0.84), 2.628 (0.60), 2.648 (0.48),
2.653 (0.48), 2.665 (3.25), 2.669 (4.33), 2.674 (3.13), 2.709 (4.33), 2.725 (0.60),
2.747 (0.48), 2.753 (0.84), 2.770 (0.60), 2.913 (0.36), 2.943 (0.36), 2.978 (0.60),
2.994 (0.60), 3.008 (0.72), 3.032 (0.48), 3.047 (0.36), 3.055 (0.48), 3.208 (0.36),
3.220 (0.36), 3.246 (0.72), 3.255 (0.72), 3.357 (0.72), 3.372 (0.60), 3.423 (0.48),
3.470 (0.72), 3.496 (0.84), 3.637 (1.08), 3.661 (0.96), 3.688 (0.60), 3.728 (0.96),
3.774 (0.96), 3.847 (0.96), 4.949 (0.60), 4.970 (0.72), 5.004 (1.20), 5.024 (0.96),
5.080 (6.02), 5.259 (0.60), 5.390 (0.84), 5.511 (0.48), 6.248 (0.84), 6.262 (0.96),
6.278 (0.60), 6.307 (1.68), 6.315 (1.80), 6.334 (0.84), 6.340 (0.84), 7.922 (7.58),
8.559 (0.36), 8.664 (2.41), 17.706 (0.36).
Primer 278
(5S)-8,8-difluor-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1798]
[1799] (5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (izomer 1) (33,5 mg, čistoća 62%, 48,6 µmol) dodat je pod argonom u dihlormetan (5,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (19 µl, 150 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je četiri puta ekstrahovana dihlormetanom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,10 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.80), -0.008 (15.78), 0.008
(16.00), 0.027 (0.58), 0.146 (1.66), 1.096 (1.30), 1.113 (3.17), 1.131 (1.51), 2.119
(0.94), 2.148 (1.37), 2.169 (1.01), 2.177 (0.94), 2.237 (1.15), 2.284 (2.02), 2.323
(3.24), 2.327 (3.68), 2.332 (3.10), 2.352 (1.73), 2.366 (3.17), 2.381 (1.37), 2.407
(0.94), 2.435 (1.30), 2.446 (1.08), 2.523 (6.92), 2.568 (0.58), 2.591 (0.58), 2.665
(1.95), 2.670 (2.67), 2.674 (1.95), 2.710 (2.31), 3.184 (0.58), 3.201 (0.65), 3.243
(0.72), 3.346 (1.51), 3.357 (1.08), 3.375 (0.65), 3.395 (0.65), 3.420 (0.58), 3.428
(0.58), 3.518 (0.58), 3.527 (0.65), 3.614 (0.58), 3.655 (1.59), 3.679 (1.66), 3.707
(1.15), 3.758 (0.94), 3.780 (1.37), 3.801 (1.15), 3.825 (0.79), 3.890 (1.51), 4.864
(0.72), 4.878 (1.15), 4.940 (1.51), 5.172 (9.87), 5.277 (1.08), 5.407 (1.15), 5.531
(0.58), 7.946 (14.49), 7.949 (9.37), 8.677 (4.25).
Primer 279
(5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1800]
[1801] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (15,2 mg, 38,8 µmol) i cerijum(IV)sulfat (51,6 mg, 155 µmol) suspendovani su u terc-butanolu (52 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (52 µl, 970 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Ponovo je dodat cerijum(IV)sulfat (25,8 mg, 77,6 µmol) i reakciona smeša je još jednom mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Čvrsta supstanca je uklonjena pomoću vakuuma i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,10 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,48 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.443 (2.53), 1.446 (2.51), 1.727 (1.43),
1.743 (2.23), 1.749 (2.12), 1.757 (2.29), 1.791 (1.45), 1.796 (1.26), 1.811 (2.25),
1.829 (1.28), 1.854 (1.39), 1.907 (2.21), 1.937 (0.93), 1.996 (0.93), 2.012 (1.02),
2.071 (0.87), 2.085 (1.04), 2.103 (2.12), 2.108 (2.12), 2.132 (1.99), 2.156 (1.21),
2.235 (1.28), 2.266 (1.28), 2.383 (2.38), 2.612 (1.34), 3.300 (15.81), 3.310 (16.00),
3.377 (2.90), 3.400 (2.40), 3.423 (1.52), 3.442 (1.30), 3.448 (1.39), 3.465 (1.54),
3.471 (1.45), 3.488 (1.04), 3.626 (1.56), 3.644 (3.44), 3.655 (2.51), 3.662 (2.68),
3.686 (1.65), 3.707 (1.97), 3.725 (1.60), 3.733 (1.52), 3.751 (1.80), 3.766 (1.08),
3.784 (1.95), 3.803 (1.19), 3.830 (1.15), 3.847 (2.25), 4.502 (1.39), 4.537 (3.66),
4.611 (1.00), 4.659 (0.82), 4.669 (1.34), 4.677 (0.89), 4.749 (1.21), 4.757 (1.19),
4.803 (1.34), 4.806 (1.39), 4.813 (1.52), 4.947 (6.52), 4.964 (10.72), 5.280 (1.80),
5.367 (1.75), 5.403 (1.19), 5.490 (1.21), 5.783 (1.47), 7.763 (3.66), 7.782 (2.77),
8.355 (1.36), 8.431 (4.78), 8.446 (3.55), 8.569 (7.77), 8.572 (7.90).
Primer 280
(5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša, 2 izomera)
[1802]
[1803] (5RS,6RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (96,0 mg, 224 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (111 mg, 291 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (33,8 mg, 269 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 72,0 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,64 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.82), -0.008 (16.00), 0.008
(13.07), 0.146 (1.70), 2.043 (1.47), 2.248 (0.64), 2.328 (2.23), 2.366 (2.34), 2.523
(6.33), 2.670 (2.81), 2.710 (2.81), 2.782 (1.17), 2.823 (0.70), 3.513 (0.70), 3.538
(1.41), 3.619 (0.70), 3.668 (0.94), 3.768 (0.76), 4.135 (0.70), 4.840 (0.82), 4.855
(0.76), 4.898 (1.11), 4.909 (1.05), 4.942 (0.88), 4.951 (0.82), 4.972 (1.00), 4.986
(0.88), 5.082 (4.10), 5.097 (3.81), 5.278 (0.76), 5.412 (0.88), 7.546 (0.88), 7.558
(1.88), 7.573 (1.70), 7.587 (1.11), 8.572 (3.52), 8.584 (3.40).
Primer 281
(5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1804]
[1805] (5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 68 mg rastvoreno u 6 ml smeše acetonitril/etanol (2:1); injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OD-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30; protok: 15 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 26,8 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 27,2 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1806] Analitička hiralna HPLC: Rt= 10,33 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OD-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 90:10, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.120 (0.91), -0.007 (10.14), 0.006 (7.74),
0.117 (0.91), 0.845 (0.57), 1.234 (1.37), 1.961 (2.73), 1.978 (2.79), 1.989 (2.33),
2.036 (3.36), 2.047 (6.89), 2.062 (6.89), 2.073 (3.93), 2.095 (2.11), 2.133 (2.96),
2.159 (2.28), 2.265 (1.82), 2.290 (1.88), 2.361 (2.39), 2.365 (1.71), 2.518 (5.98),
2.522 (4.56), 2.631 (3.87), 2.635 (3.13), 2.649 (2.16), 2.665 (3.42), 2.681 (2.51),
2.703 (1.54), 2.716 (2.22), 2.769 (1.71), 2.785 (3.30), 2.797 (4.61), 2.820 (2.22),
2.831 (2.79), 3.331 (3.70), 3.345 (2.68), 3.394 (1.77), 3.415 (1.77), 3.423 (2.05),
3.465 (1.77), 3.471 (2.16), 3.492 (3.59), 3.500 (3.76), 3.509 (2.51), 3.649 (3.07),
3.667 (4.84), 3.679 (4.38), 3.704 (2.51), 3.724 (5.24), 3.742 (3.07), 3.755 (2.05),
3.785 (1.71), 3.806 (2.73), 3.820 (2.79), 3.840 (1.31), 4.018 (1.37), 4.042 (1.31),
4.092 (1.20), 4.110 (1.14), 4.840 (6.32), 4.853 (6.32), 4.899 (9.00), 4.907 (8.71),
5.034 (1.77), 5.054 (2.28), 5.067 (8.54), 5.082 (10.65), 5.087 (13.04), 5.098 (12.19),
5.115 (1.82), 5.132 (1.94), 5.293 (2.96), 5.399 (3.02), 5.521 (1.99), 5.946 (0.51),
7.549 (3.87), 7.559 (7.12), 7.569 (4.21), 7.575 (3.25), 7.585 (5.41), 7.596 (2.73),
8.572 (16.00), 8.582 (15.43).
Primer 282
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1807]
[1808] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 122 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (60,0 mg, 158 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (64 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (18,3 mg, 146 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,4 mg (79% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.64), -0.008 (5.30), 0.008 (4.77),
0.146 (0.64), 1.038 (0.42), 1.055 (0.95), 1.073 (0.53), 1.944 (1.80), 1.964 (1.80),
1.978 (1.48), 2.003 (1.80), 2.026 (2.23), 2.041 (2.75), 2.055 (2.23), 2.073 (5.93),
2.110 (2.23), 2.144 (1.38), 2.244 (1.27), 2.286 (1.27), 2.323 (1.80), 2.327 (2.44),
2.366 (1.70), 2.523 (5.93), 2.575 (1.06), 2.620 (1.91), 2.665 (2.86), 2.670 (3.18),
2.674 (2.65), 2.690 (0.95), 2.710 (2.01), 2.736 (2.75), 2.779 (1.48), 3.347 (2.65),
3.358 (2.01), 3.376 (2.01), 3.405 (1.70), 3.467 (1.17), 3.502 (1.38), 3.530 (3.07),
3.567 (1.17), 3.607 (2.12), 3.652 (1.48), 3.669 (1.91), 3.689 (1.80), 3.714 (1.59),
3.733 (1.38), 3.775 (0.95), 3.803 (0.85), 3.819 (0.95), 3.845 (0.42), 4.004 (0.53),
4.038 (0.42), 4.089 (1.06), 4.122 (1.59), 4.146 (1.80), 4.170 (0.74), 4.816 (2.01),
4.831 (1.91), 4.862 (2.54), 4.871 (2.54), 4.882 (2.23), 4.891 (2.01), 4.930 (2.44),
4.944 (2.33), 4.981 (1.80), 4.987 (1.06), 5.021 (10.91), 5.026 (16.00), 5.045 (6.46),
5.067 (0.74), 5.085 (1.59), 5.279 (1.70), 5.409 (2.01), 5.509 (0.85), 5.945 (0.42),
8.254 (8.26), 8.259 (8.90), 8.558 (6.15), 8.560 (6.78), 8.563 (6.68).
Primer 283
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1809]
[1810] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 43 mg rastvoreno u 5 ml smeše acetonitril/izopropanol (3:2); injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OD-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19,2 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 18,3 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1811] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,97 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>ID-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,61 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.20), -0.008 (14.40), 0.008 (9.18),
0.146 (1.16), 1.234 (0.96), 1.909 (0.80), 1.922 (1.36), 1.944 (1.80), 1.957 (1.28),
2.026 (2.85), 2.041 (3.45), 2.055 (2.45), 2.078 (1.88), 2.112 (2.41), 2.147 (1.80),
2.254 (1.28), 2.288 (1.20), 2.327 (1.72), 2.366 (1.44), 2.524 (7.14), 2.576 (1.48),
2.602 (1.72), 2.620 (1.88), 2.670 (2.57), 2.674 (2.73), 2.710 (1.92), 2.745 (2.85),
2.758 (1.84), 2.788 (1.60), 3.404 (1.76), 3.473 (2.25), 3.501 (1.96), 3.509 (2.01),
3.656 (2.81), 3.668 (3.05), 3.690 (3.53), 3.714 (2.93), 3.733 (2.09), 3.749 (2.09),
3.776 (1.16), 3.802 (1.76), 3.820 (1.76), 3.844 (0.88), 4.005 (0.92), 4.036 (0.76),
4.099 (0.88), 4.122 (0.80), 4.816 (3.61), 4.831 (3.61), 4.861 (4.77), 4.871 (4.61),
4.981 (3.09), 5.020 (16.00), 5.027 (8.82), 5.046 (8.82), 5.067 (1.08), 5.085 (2.49),
5.277 (1.80), 5.408 (2.29), 5.529 (1.36), 8.254 (6.50), 8.259 (6.74), 8.557 (6.14),
8.562 (7.06), 8.566 (4.81).
Primer 284
(5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1812]
[1813] (5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (54,0 mg, 132 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (64,9 mg, 171 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (69 µl, 390 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (19,8 mg, 158 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,4 mg (81% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
Primer 285
(5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1814]
[1815] (5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 200 mg rastvoreno u 5 ml smeše acetonitril/izopropanol (1:1); injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 30 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 60 ml/min; temperatura 28°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 69,8 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 71,7 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1816] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,79 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,54 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.40), -0.008 (16.00), 0.008 (9.77),
0.146 (1.40), 2.052 (1.18), 2.327 (2.15), 2.366 (1.93), 2.669 (2.36), 2.710 (2.15),
2.781 (0.75), 3.509 (0.64), 3.666 (1.07), 4.831 (0.97), 4.847 (0.97), 4.889 (1.29),
4.899 (1.29), 5.018 (2.36), 5.035 (4.08), 5.278 (0.64), 5.405 (0.75), 7.919 (7.30),
8.643 (1.83).
Primer 286
(5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1817]
[1818] (5RS,6RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 200 mg rastvoreno u 5 ml smeše acetonitril/izopropanol (1:1); injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 30 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 60 ml/min; temperatura 28°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 69,8 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 71,7 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1819] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,10 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,54 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.85), -0.008 (16.00), 0.008
(14.32), 0.146 (1.85), 1.967 (1.18), 2.028 (2.36), 2.044 (2.02), 2.327 (3.03), 2.366
(2.36), 2.524 (6.74), 2.587 (0.84), 2.669 (3.87), 2.710 (3.03), 2.767 (1.85), 3.376
(2.19), 3.394 (2.02), 3.422 (1.35), 3.535 (3.54), 3.561 (1.68), 3.589 (1.52), 3.607
(1.68), 3.766 (0.67), 4.099 (0.84), 4.121 (1.18), 4.145 (1.68), 4.187 (0.67), 4.930
(2.36), 4.939 (2.36), 4.963 (2.86), 4.977 (2.69), 5.024 (8.76), 5.036 (4.72), 5.280
(1.01), 5.383 (1.01), 5.413 (1.01), 5.514 (1.01), 7.918 (15.16), 7.921 (16.00), 8.644
(4.04).
Primer 287
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1820]
[1821] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 122 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (60,0 mg, 158 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (64 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (20,9 mg, 146 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 41,0 mg (67% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,66 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.74), -0.008 (16.00), 0.008
(14.26), 0.146 (1.74), 1.937 (1.09), 2.021 (2.29), 2.073 (2.61), 2.328 (3.16), 2.366
(3.16), 2.603 (1.31), 2.625 (1.52), 2.669 (4.03), 2.710 (3.48), 2.740 (2.29), 2.756
(1.52), 3.503 (1.20), 3.650 (1.20), 3.699 (1.09), 3.716 (1.31), 3.818 (1.09), 3.847
(0.87), 4.057 (0.76), 4.398 (0.87), 4.918 (4.14), 4.932 (2.72), 4.989 (1.41), 5.027
(14.59), 5.047 (5.33), 5.087 (1.31), 5.255 (0.98), 5.356 (1.20), 5.462 (0.87), 8.255
(6.10), 8.260 (6.64), 8.557 (5.22).
Primer 288
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1822]
[1823] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 40 mg rastvoreno u 3,5 ml etanola (u ultrazvučnom kupatilu); injekciona zapremina: 0,80 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: etanol 0,2% dietilamina; protok: 15 ml/min; temperatura 55°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19,5 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 18,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1824] Analitička hiralna HPLC: Rt= 8,73 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H-3 250 x 4,6 mm; mobilna faza: etanol 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,70 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.79), 0.146 (0.79), 1.234 (0.93),
1.936 (1.08), 2.006 (2.14), 2.022 (2.59), 2.077 (1.22), 2.327 (1.45), 2.366 (1.24),
2.605 (1.53), 2.626 (1.90), 2.670 (2.67), 2.710 (1.61), 2.741 (2.78), 2.756 (1.72),
2.784 (1.48), 3.504 (1.59), 3.524 (1.43), 3.586 (1.24), 3.632 (1.19), 3.651 (1.45),
3.699 (1.27), 3.717 (1.48), 3.732 (1.40), 3.783 (0.90), 3.830 (1.24), 3.848 (0.95),
3.901 (0.85), 4.102 (0.85), 4.396 (1.00), 4.918 (5.32), 4.933 (3.09), 4.989 (1.22),
5.027 (16.00), 5.047 (5.71), 5.086 (1.22), 5.264 (1.19), 5.355 (1.48), 5.447 (1.06),
8.255 (6.88), 8.260 (7.17), 8.559 (6.72).
Primer 289
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1825]
[1826] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 122 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (60,0 mg, 158 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (64 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (20,9 mg, 146 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 43,0 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,75 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.23), -0.008 (10.09), 0.008 (9.95),
0.146 (1.15), 1.939 (1.51), 1.957 (2.16), 1.973 (2.52), 1.991 (2.31), 2.008 (1.59),
2.073 (4.40), 2.328 (2.16), 2.366 (2.52), 2.387 (1.51), 2.416 (1.80), 2.436 (1.73),
2.457 (1.66), 2.573 (2.81), 2.591 (2.45), 2.609 (2.38), 2.638 (2.31), 2.655 (3.10),
2.670 (3.75), 2.710 (2.16), 2.745 (2.81), 2.791 (1.51), 3.406 (2.16), 3.554 (1.66),
3.571 (3.24), 3.588 (3.82), 3.607 (1.59), 3.640 (0.86), 3.675 (3.03), 3.694 (2.16),
3.707 (2.88), 3.720 (2.23), 3.740 (1.73), 3.768 (1.01), 3.801 (2.59), 3.834 (2.31),
3.869 (1.95), 3.909 (1.37), 3.938 (0.72), 4.100 (0.94), 4.119 (2.02), 4.144 (1.87),
4.161 (0.86), 4.365 (0.79), 4.392 (1.30), 4.423 (1.15), 4.453 (0.58), 4.897 (3.82),
4.910 (3.68), 4.948 (4.25), 4.961 (4.18), 4.991 (1.95), 5.031 (16.00), 5.039 (13.91),
5.080 (1.73), 5.489 (0.50), 8.256 (7.86), 8.261 (8.65), 8.557 (9.01), 8.562 (8.86).
Primer 290
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1828] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil)]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 42 mg rastvoreno u 3,5 ml etanola (u ultrazvučnom kupatilu); injekciona zapremina: 0,80 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: etanol 0,2% dietilamina; protok: 15 ml/min; temperatura 55°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 17,9 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 17,0 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1829] Analitička hiralna HPLC: Rt= 9,89 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OZ-H-3 250 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,74 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.99), 0.008 (16.00), 0.146 (2.21),
1.235 (1.40), 1.955 (2.06), 1.974 (2.36), 1.991 (2.36), 2.007 (1.84), 2.057 (2.21),
2.327 (3.24), 2.366 (3.61), 2.573 (2.80), 2.594 (2.29), 2.610 (2.29), 2.637 (2.29),
2.669 (4.87), 2.710 (3.17), 2.742 (2.58), 3.407 (2.14), 3.571 (3.32), 3.588 (3.69),
3.606 (1.55), 3.674 (3.10), 3.707 (2.95), 3.739 (1.84), 3.767 (1.18), 3.800 (2.51),
3.835 (2.43), 3.867 (1.92), 3.909 (1.33), 4.117 (1.92), 4.143 (1.92), 4.395 (1.25),
4.897 (3.47), 4.910 (3.61), 4.947 (4.13), 4.961 (4.13), 4.991 (2.06), 5.030 (15.48),
5.039 (13.20), 5.079 (1.47), 8.256 (8.85), 8.261 (9.00), 8.557 (9.88), 8.562 (9.51).
Primer 291
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1830]
[1831] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 127 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (62,5 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (21,8 mg, 152 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,0 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.28), -0.008 (16.00), 0.008 (8.30),
0.146 (1.22), 1.903 (1.42), 1.925 (1.69), 1.938 (1.22), 1.961 (1.01), 1.996 (2.90),
2.012 (3.31), 2.038 (1.35), 2.073 (5.00), 2.327 (2.03), 2.366 (2.36), 2.524 (9.18),
2.573 (1.49), 2.597 (1.42), 2.619 (2.16), 2.635 (1.69), 2.665 (2.70), 2.669 (2.84),
2.674 (2.84), 2.710 (3.38), 2.733 (3.31), 2.748 (2.23), 2.776 (1.76), 3.398 (1.55),
3.466 (1.08), 3.501 (1.69), 3.547 (1.96), 3.599 (1.49), 3.626 (1.22), 3.648 (1.69),
3.662 (1.69), 3.696 (1.62), 3.713 (1.42), 3.736 (1.55), 3.758 (1.01), 3.771 (1.01),
3.789 (1.15), 3.802 (1.22), 3.824 (1.62), 3.839 (1.42), 3.854 (1.08), 3.865 (0.88),
3.880 (0.95), 3.893 (1.15), 3.908 (0.95), 4.054 (0.95), 4.091 (0.95), 4.356 (0.88),
4.372 (1.08), 4.384 (1.15), 4.396 (1.35), 4.410 (1.01), 4.421 (0.88), 4.437 (0.88),
4.902 (5.20), 4.909 (6.01), 4.925 (4.39), 4.940 (1.62), 4.979 (13.37), 4.998 (4.93),
5.002 (4.59), 5.037 (1.28), 5.086 (0.47), 5.260 (1.49), 5.269 (1.49), 5.362 (1.89),
5.392 (1.62), 5.401 (1.62), 5.451 (1.22), 5.480 (1.22), 8.098 (5.60), 8.103 (5.74),
8.122 (5.67), 8.127 (5.60), 8.476 (6.35).
Primer 292
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on enantiomer 1)
[1832]
[1833] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 44 mg rastvoreno u 2 ml smeše acetonitril/etanol (1:1) 0,2% dietilamina; injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 9,9 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 11,9 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1834] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,66 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.91), 0.008 (16.00), 0.146 (1.91),
1.109 (0.41), 1.236 (0.81), 1.904 (0.93), 1.926 (1.04), 1.961 (0.64), 1.997 (1.86),
2.013 (2.20), 2.057 (0.99), 2.327 (1.86), 2.366 (1.86), 2.596 (0.87), 2.620 (1.33),
2.635 (1.10), 2.670 (2.38), 2.710 (2.55), 2.734 (2.14), 2.749 (1.39), 2.777 (1.22),
3.269 (0.70), 3.399 (0.87), 3.468 (0.58), 3.501 (1.04), 3.556 (1.10), 3.600 (0.93),
3.628 (0.75), 3.650 (1.04), 3.663 (1.10), 3.698 (1.04), 3.713 (0.87), 3.736 (0.93),
3.770 (0.64), 3.790 (0.75), 3.826 (0.99), 3.840 (0.87), 3.854 (0.64), 3.881 (0.58),
3.895 (0.64), 3.908 (0.58), 4.054 (0.64), 4.100 (0.58), 4.356 (0.46), 4.372 (0.70),
4.398 (0.87), 4.410 (0.70), 4.438 (0.52), 4.903 (3.19), 4.909 (4.06), 4.925 (2.84),
4.941 (0.87), 4.979 (9.10), 5.002 (3.19), 5.037 (0.64), 5.260 (0.99), 5.362 (1.16),
5.401 (1.04), 5.481 (0.81), 8.098 (3.36), 8.103 (3.59), 8.122 (3.65), 8.127 (3.54),
8.477 (4.29).
Primer 293
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1835]
[1836] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 44 mg rastvoreno u 2 ml smeše acetonitril/etanol (1:1) 0,2% dietilamina; injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 9,9 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 11,9 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1837] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,92 min, e.e. = 97% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,55 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.80), -0.008 (16.00), 0.008
(14.88), 0.146 (1.80), 1.074 (1.91), 1.091 (3.99), 1.110 (2.08), 1.233 (0.90), 1.904
(1.12), 1.925 (1.46), 1.961 (0.90), 1.997 (2.30), 2.013 (2.75), 2.057 (1.12), 2.327
(1.91), 2.366 (2.36), 2.599 (1.35), 2.619 (1.80), 2.637 (1.40), 2.669 (2.81), 2.710
(3.31), 2.734 (3.14), 2.750 (2.41), 2.776 (2.25), 3.466 (0.95), 3.510 (1.35), 3.556
(1.52), 3.599 (1.35), 3.624 (1.12), 3.649 (1.35), 3.662 (1.40), 3.697 (1.35), 3.713
(1.18), 3.736 (1.35), 3.759 (0.90), 3.770 (0.90), 3.790 (0.90), 3.802 (0.95), 3.825
(1.40), 3.840 (1.18), 3.894 (0.95), 3.908 (0.84), 4.054 (0.79), 4.092 (0.79), 4.356
(0.84), 4.396 (1.07), 4.903 (4.15), 4.912 (5.16), 4.925 (3.59), 4.945 (1.07), 4.979
(11.51), 4.998 (4.10), 5.038 (0.95), 5.270 (1.35), 5.363 (1.52), 5.402 (1.40), 5.481
(1.07), 8.098 (4.94), 8.103 (5.16), 8.122 (5.00), 8.127 (5.33), 8.478 (7.02).
Primer 294
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1839] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 127 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (62,5 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (19,1 mg, 152 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 39,0 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.51), -0.008 (4.55), 0.008 (4.09),
0.146 (0.51), 1.250 (1.15), 1.257 (0.72), 1.266 (1.29), 1.271 (1.23), 1.288 (1.07),
1.899 (0.63), 1.913 (1.04), 1.933 (1.73), 1.954 (1.76), 1.968 (1.44), 1.994 (1.69),
2.010 (2.01), 2.018 (2.34), 2.033 (2.50), 2.047 (2.01), 2.068 (1.69), 2.082 (1.73),
2.107 (1.96), 2.148 (1.23), 2.228 (0.88), 2.242 (1.23), 2.288 (1.15), 2.327 (1.18),
2.366 (0.76), 2.524 (2.43), 2.570 (0.90), 2.592 (1.07), 2.614 (1.67), 2.670 (1.94),
2.690 (5.80), 2.710 (1.96), 2.728 (2.56), 2.741 (1.94), 2.770 (1.29), 2.783 (1.02),
3.269 (0.62), 3.298 (1.46), 3.315 (1.66), 3.333 (1.37), 3.343 (1.18), 3.362 (1.53),
3.378 (1.67), 3.391 (1.22), 3.409 (1.37), 3.471 (1.22), 3.498 (1.43), 3.528 (2.82),
3.550 (1.25), 3.565 (1.97), 3.619 (16.00), 3.663 (12.83), 3.793 (1.11), 3.802 (1.18),
3.819 (1.13), 3.845 (0.62), 4.006 (0.48), 4.038 (0.42), 4.090 (0.88), 4.123 (1.48),
4.146 (1.83), 4.170 (0.81), 4.809 (1.87), 4.825 (1.80), 4.854 (2.38), 4.864 (2.40),
4.874 (1.99), 4.884 (1.90), 4.922 (2.36), 4.937 (3.28), 4.976 (11.24), 4.997 (4.44),
5.018 (0.83), 5.034 (1.25), 5.278 (1.60), 5.379 (0.90), 5.411 (1.94), 5.511 (0.78),
5.533 (0.74), 8.097 (5.67), 8.102 (6.01), 8.121 (5.76), 8.126 (6.04), 8.478 (7.30).
Primer 295
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1840]
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1841] (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 38 mg rastvoreno u 2 ml smeše acetonitril/etanol (1:1); injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>ID 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 35:65 0,2% dietilamina; protok: 20 ml/min; temperatura 25°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 11,3 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 13,0 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1842] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,57 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>ID-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.91), -0.008 (16.00), 0.008
(14.39), 0.146 (1.76), 0.866 (0.88), 0.886 (1.17), 0.904 (0.73), 1.233 (1.61), 1.912
(1.76), 1.933 (2.20), 1.947 (1.91), 2.003 (1.76), 2.018 (4.40), 2.033 (5.14), 2.108
(3.08), 2.242 (1.91), 2.290 (1.61), 2.327 (4.11), 2.366 (3.96), 2.523 (9.39), 2.569
(3.23), 2.595 (2.94), 2.614 (3.23), 2.670 (6.75), 2.710 (5.72), 2.738 (3.96), 2.782
(2.35), 3.366 (2.50), 3.411 (2.35), 3.471 (3.08), 3.497 (2.50), 3.662 (5.87), 3.684
(3.52), 3.717 (3.96), 3.740 (4.55), 3.802 (2.50), 3.819 (2.79), 3.846 (1.32), 3.998
(1.76), 4.039 (1.32), 4.056 (0.73), 4.091 (1.47), 4.124 (1.17), 4.155 (0.88), 4.809
(5.58), 4.824 (5.58), 4.854 (7.05), 4.864 (7.05), 4.932 (2.79), 4.971 (14.39), 4.975
(14.39), 4.996 (7.49), 5.000 (7.49), 5.015 (1.32), 5.039 (2.50), 5.277 (2.79), 5.410
(3.67), 5.532 (1.91), 8.097 (7.93), 8.102 (8.37), 8.121 (8.22), 8.126 (8.51), 8.478
(8.51).
Primer 296
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1843]
[1844] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 127 µmol) ubačen je u THF (1,6 ml) i zatim su dodati HBTU (62,5 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (21,8 mg, 152 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,0 mg (78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.59), -0.008 (4.82), 0.008 (4.82),
0.146 (0.57), 1.253 (13.91), 1.269 (16.00), 1.279 (10.17), 1.294 (8.34), 1.928 (0.59),
1.947 (0.89), 1.963 (0.97), 1.981 (0.93), 1.997 (0.65), 2.049 (0.91), 2.073 (2.59),
2.328 (0.75), 2.367 (0.93), 2.389 (0.67), 2.409 (0.63), 2.419 (0.79), 2.439 (0.73),
2.460 (0.69), 2.523 (2.71), 2.576 (1.07), 2.591 (1.01), 2.608 (0.89), 2.632 (0.93),
2.649 (1.24), 2.665 (1.24), 2.670 (1.22), 2.711 (1.01), 2.736 (1.15), 2.781 (0.61),
3.114 (1.28), 3.131 (1.44), 3.143 (1.30), 3.160 (0.43), 3.539 (0.41), 3.552 (0.67),
3.570 (1.66), 3.591 (1.92), 3.603 (1.62), 3.613 (1.76), 3.630 (1.07), 3.672 (1.24),
3.688 (0.97), 3.707 (1.52), 3.733 (0.55), 3.771 (0.47), 3.805 (1.15), 3.838 (1.03),
3.863 (0.67), 3.880 (0.55), 3.904 (0.59), 4.100 (0.43), 4.118 (0.83), 4.144 (0.81),
4.390 (0.49), 4.422 (0.45), 4.888 (1.58), 4.902 (1.56), 4.940 (2.21), 4.953 (1.96),
4.984 (4.23), 4.992 (4.19), 5.031 (0.67), 7.050 (1.40), 7.177 (1.40), 7.304 (1.38),
8.099 (2.31), 8.104 (2.47), 8.123 (2.35), 8.128 (2.53), 8.477 (2.98), 8.481 (2.84).
Primer 297
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1845]
[1846] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 48 mg rastvoreno u 2 ml smeše acetonitril/metanol (1:1); injekciona zapremina: 0,20 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 13,9 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 16,2 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1847] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,67 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,64 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (3.80), 0.146 (2.40), 0.866 (1.00),
0.885 (1.40), 0.904 (0.80), 1.235 (1.00), 1.313 (0.80), 1.946 (1.80), 1.961 (1.80),
1.980 (1.80), 1.998 (1.60), 2.064 (2.20), 2.327 (12.60), 2.365 (16.00), 2.590 (3.00),
2.605 (2.80), 2.626 (2.60), 2.669 (6.80), 2.709 (7.60), 2.736 (2.00), 2.781 (1.20),
3.397 (2.60), 3.569 (2.20), 3.591 (2.00), 3.611 (1.40), 3.640 (1.00), 3.672 (2.00),
3.706 (2.60), 3.773 (1.00), 3.804 (1.80), 3.836 (1.80), 3.861 (1.40), 3.903 (1.20),
3.998 (1.20), 4.117 (1.40), 4.143 (1.40), 4.391 (1.20), 4.415 (1.00), 4.888 (2.60),
4.902 (2.60), 4.941 (3.80), 4.953 (2.60), 4.985 (6.80), 5.031 (1.00), 8.103 (3.00),
8.127 (3.20), 8.482 (3.40).
Primer 298
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1848]
[1849] (5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (47,0 mg, 125 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (61,5 mg, 162 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (65 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (18,8 mg, 150 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 31,0 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.01), -0.008 (8.66), 0.008 (8.56),
0.146 (1.01), 1.385 (1.47), 1.946 (1.67), 1.968 (2.28), 2.007 (1.67), 2.045 (3.59),
2.060 (3.29), 2.073 (3.14), 2.110 (2.53), 2.144 (1.72), 2.245 (1.52), 2.290 (1.42),
2.328 (2.58), 2.366 (1.87), 2.611 (1.06), 2.669 (3.29), 2.710 (2.73), 2.762 (2.84),
2.805 (1.42), 3.369 (2.28), 3.468 (1.16), 3.509 (1.57), 3.535 (3.34), 3.562 (1.22),
3.615 (1.82), 3.648 (1.57), 3.670 (2.58), 3.740 (1.87), 3.769 (1.42), 3.805 (0.96),
3.824 (1.06), 4.099 (0.96), 4.126 (1.52), 4.150 (1.97), 4.175 (0.86), 4.831 (2.08),
4.847 (2.13), 4.883 (2.94), 4.893 (3.85), 4.915 (6.73), 4.923 (16.00), 4.934 (14.53),
4.954 (3.80), 4.969 (3.24), 4.994 (0.61), 5.142 (0.61), 5.279 (1.82), 5.411 (2.18),
5.513 (0.96), 5.947 (0.51), 7.206 (4.66), 7.218 (3.29), 7.227 (7.80), 7.239 (3.34),
7.249 (3.09), 7.920 (5.57), 7.926 (6.38), 7.941 (5.42), 7.947 (6.08), 8.574 (9.52),
8.580 (8.46).
Primer 299
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1850]
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1851] (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 30 mg rastvoreno u 3 ml smeše metanol/terc-butil metiletar (2:1); injekciona zapremina: 1,00 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: metanol/terc-butil metiletar 10:90; protok: 20 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 270 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 11,1 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 11,3 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1852] Analitička hiralna HPLC: Rt= 6,44 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 50 x 4,6 mm; mobilna faza: metanol/terc-butil metiletar 10:90; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.82), -0.008 (16.00), 0.008
(15.36), 0.146 (1.87), 1.186 (8.95), 1.427 (2.97), 1.946 (1.36), 1.968 (1.36), 1.981
(1.15), 2.030 (1.40), 2.046 (3.27), 2.060 (3.18), 2.077 (1.91), 2.110 (1.82), 2.126
(1.53), 2.146 (1.49), 2.257 (1.10), 2.292 (1.02), 2.327 (1.49), 2.366 (1.19), 2.524
(2.97), 2.592 (0.64), 2.610 (0.98), 2.633 (1.06), 2.655 (1.87), 2.670 (1.91), 2.689
(0.89), 2.710 (1.78), 2.760 (1.82), 2.775 (2.08), 2.803 (1.02), 2.819 (1.23), 3.370
(1.02), 3.406 (0.98), 3.416 (1.02), 3.469 (1.40), 3.504 (1.70), 3.648 (1.78), 3.670
(3.44), 3.705 (1.70), 3.726 (1.53), 3.744 (2.04), 3.767 (1.32), 3.805 (1.36), 3.824
(1.36), 3.849 (0.59), 4.013 (0.72), 4.036 (0.59), 4.107 (0.68), 4.131 (0.64), 4.831
(3.10), 4.846 (3.06), 4.883 (4.20), 4.892 (4.37), 4.915 (6.49), 4.921 (6.88), 4.932
(11.50), 4.946 (2.38), 4.962 (0.51), 4.974 (0.42), 5.278 (1.53), 5.409 (1.99), 5.532
(1.06), 7.207 (4.20), 7.228 (7.60), 7.249 (3.44), 7.922 (4.12), 7.928 (4.07), 7.943
(3.95), 7.949 (3.90), 8.573 (5.26), 8.579 (5.22).
Primer 300
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[1853]
[1854] (5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (47,0 mg, 125 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (61,5 mg, 162 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (65 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (21,5 mg, 150 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 34,0 mg (59% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.67), -0.008 (6.04), 0.008 (5.59),
0.146 (0.67), 1.924 (0.61), 1.938 (1.03), 1.960 (1.34), 1.973 (0.97), 2.006 (1.18),
2.021 (2.58), 2.038 (2.61), 2.053 (1.58), 2.067 (0.94), 2.327 (1.21), 2.366 (1.34),
2.523 (3.25), 2.593 (0.61), 2.613 (0.91), 2.635 (0.91), 2.655 (1.67), 2.669 (2.16),
2.696 (0.94), 2.709 (2.58), 2.725 (0.79), 2.767 (2.37), 2.782 (1.58), 2.811 (1.28),
2.825 (0.70), 3.399 (0.97), 3.411 (1.00), 3.423 (1.00), 3.436 (0.97), 3.473 (0.88),
3.508 (1.28), 3.553 (1.43), 3.563 (1.40), 3.592 (1.15), 3.604 (1.15), 3.633 (0.88),
3.653 (1.24), 3.667 (1.18), 3.686 (0.76), 3.702 (1.21), 3.718 (1.03), 3.727 (1.03),
3.738 (1.31), 3.761 (0.85), 3.774 (0.91), 3.792 (0.85), 3.805 (0.82), 3.828 (1.06),
3.844 (0.85), 3.859 (0.76), 3.871 (0.61), 3.885 (0.64), 3.900 (0.76), 3.914 (0.76),
4.060 (0.67), 4.098 (0.67), 4.365 (0.70), 4.380 (0.76), 4.392 (0.76), 4.403 (0.85),
4.418 (0.76), 4.430 (0.70), 4.446 (0.64), 4.903 (1.03), 4.923 (11.69), 4.935 (16.00),
4.944 (4.98), 4.950 (4.43), 4.978 (0.67), 5.120 (0.49), 5.134 (0.43), 5.244 (0.97),
5.256 (1.09), 5.265 (1.28), 5.273 (1.00), 5.311 (0.76), 5.322 (0.91), 5.358 (1.34),
5.389 (1.09), 5.397 (1.09), 5.462 (0.91), 5.478 (0.91), 7.210 (3.28), 7.225 (3.89),
7.231 (3.83), 7.245 (4.01), 7.923 (3.73), 7.930 (3.58), 7.945 (3.64), 7.948 (3.46),
8.573 (4.61), 8.579 (4.37).
Primer 301
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1855]
[1856] (5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomer 1; racemat) razdvojena je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 34 mg rastvoreno u 3 ml smeše metanol/terc-butil metiletar (3:1); injekciona zapremina: 1,00 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: metanol/terc-butil metiletar 10:90; protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 270 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 15,3 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 14,3 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1857] Analitička hiralna HPLC: Rt= 5,58 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 50 x 4,6 mm; mobilna faza: metanol/terc-butil metiletar 10:90; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.57), -0.008 (13.32), 0.008
(12.83), 0.146 (1.53), 1.186 (13.39), 1.427 (0.94), 1.925 (0.52), 1.938 (0.87), 1.960
(1.15), 1.973 (0.80), 2.007 (1.08), 2.022 (2.54), 2.038 (2.57), 2.053 (1.57), 2.078
(0.97), 2.327 (1.11), 2.366 (0.90), 2.593 (0.56), 2.612 (0.90), 2.636 (0.90), 2.655
(1.60), 2.670 (2.02), 2.695 (0.90), 2.710 (2.26), 2.769 (2.19), 2.783 (1.43), 2.812
(1.18), 3.423 (0.97), 3.437 (0.90), 3.472 (0.80), 3.508 (1.18), 3.555 (1.25), 3.593
(1.04), 3.632 (0.87), 3.653 (1.18), 3.668 (1.18), 3.687 (0.70), 3.702 (1.11), 3.718
(0.94), 3.727 (0.80), 3.739 (1.22), 3.761 (0.63), 3.774 (0.70), 3.793 (0.80), 3.805
(0.80), 3.828 (1.01), 3.846 (0.80), 3.860 (0.73), 3.885 (0.63), 3.900 (0.80), 3.914
(0.63), 4.061 (0.63), 4.098 (0.66), 4.367 (0.56), 4.380 (0.70), 4.392 (0.70), 4.408
(0.87), 4.418 (0.73), 4.430 (0.70), 4.446 (0.56), 4.923 (11.65), 4.935 (16.00), 4.946
(6.99), 5.244 (0.90), 5.256 (0.97), 5.266 (1.08), 5.322 (0.77), 5.358 (1.25), 5.389
(0.97), 5.440 (0.66), 5.463 (0.87), 5.479 (0.83), 7.211 (3.41), 7.225 (3.58), 7.231
(3.90), 7.246 (3.62), 7.924 (3.44), 7.927 (3.41), 7.930 (3.34), 7.945 (3.27), 7.949
(3.23), 7.951 (3.20), 8.573 (5.39), 8.579 (5.25).
Primer 302
(5RS,6RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1858]
[1859] (5RS,6RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (96,0 mg, 224 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (111 mg, 291 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (30,0 mg, 269 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,0 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,61 min; MS (ESIpos): m/z = 486 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.95), -0.008 (16.00), 0.008
(14.87), 0.146 (2.03), 1.995 (1.95), 2.073 (2.18), 2.327 (3.15), 2.366 (3.00), 2.523
(7.21), 2.670 (3.68), 2.710 (3.31), 2.767 (2.18), 2.783 (1.20), 2.812 (1.05), 3.379
(1.13), 3.973 (1.13), 4.000 (1.20), 4.032 (1.05), 4.229 (1.13), 4.252 (1.43), 4.560
(0.90), 4.654 (2.85), 4.666 (4.36), 4.677 (2.63), 4.867 (0.68), 5.086 (6.91), 5.100
(5.93), 5.371 (0.83), 5.560 (0.90), 7.566 (2.70), 7.579 (5.18), 7.592 (2.70), 8.571
(5.18), 8.583 (5.11).
Primer 303
(5RS,6RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1860]
[1861] (5RS,6RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 23 mg rastvoreno u smeši izopropanol/dihlormetan/n-heptan (3:1:2); injekciona zapremina: 0,50 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 x 30 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 60:40; protok: 60 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 10,5 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 11,8 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1862] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,70 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 60:40; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,59 min; MS (ESIpos): m/z = 486 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.52), -0.008 (16.00), 0.146 (1.68),
1.994 (2.48), 2.047 (2.08), 2.327 (2.96), 2.366 (3.04), 2.670 (4.24), 2.710 (3.76),
2.767 (2.96), 2.811 (1.68), 3.968 (1.44), 3.999 (1.52), 4.030 (1.44), 4.229 (1.60),
4.252 (2.08), 4.567 (1.12), 4.625 (1.04), 4.654 (4.16), 4.666 (5.92), 4.679 (3.44),
4.815 (0.80), 5.087 (9.44), 5.100 (8.16), 5.369 (1.12), 5.560 (0.96), 7.566 (3.52),
7.579 (6.40), 7.592 (3.84), 8.571 (6.48), 8.583 (6.40).
Primer 304
(5RS,6RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[1863]
[1864] (5RS,6RS)-3-okso-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (54,0 mg, 132 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (64,9 mg, 171 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (69 µl, 390 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (17,6 mg, 158 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 47,9 mg (78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.77), -0.008 (16.00), 0.008
(12.72), 0.146 (1.77), 0.886 (0.42), 1.969 (1.43), 1.983 (1.77), 2.040 (1.52), 2.073
(1.43), 2.327 (2.78), 2.366 (3.54), 2.523 (7.75), 2.669 (4.04), 2.710 (3.12), 2.756
(1.85), 2.771 (1.18), 2.797 (0.93), 3.965 (0.93), 3.999 (0.93), 4.028 (0.84), 4.065
(0.67), 4.224 (1.01), 4.246 (1.09), 4.272 (1.18), 4.304 (1.09), 4.569 (0.67), 4.642
(2.53), 4.656 (3.87), 4.666 (2.61), 4.821 (0.51), 5.030 (7.33), 5.044 (7.49), 5.418
(0.67), 5.560 (0.67), 7.921 (12.46), 8.652 (4.63).
Primer 305
(5RS,6RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1865]
[1866] (5RS,6RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 46 mg rastvoreno u smeši acetonitril/etanol (3:1); injekciona zapremina: 0,30 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IE 5 µm, 250 x 30 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 16,9 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 21,7 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1867] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,09 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.84), 0.008 (5.48), 0.146 (0.75),
1.100 (0.66), 1.235 (1.33), 1.950 (1.51), 1.968 (1.99), 1.984 (2.44), 2.001 (1.63),
2.040 (1.99), 2.327 (1.45), 2.366 (1.36), 2.524 (6.48), 2.670 (3.22), 2.710 (1.51),
2.738 (1.60), 2.754 (2.71), 2.771 (1.66), 2.797 (1.33), 2.813 (0.69), 3.936 (0.75),
3.967 (1.27), 3.998 (1.36), 4.030 (1.18), 4.061 (0.84), 4.224 (1.39), 4.244 (1.54),
4.274 (1.66), 4.304 (1.51), 4.471 (0.75), 4.485 (0.78), 4.526 (0.72), 4.540 (0.69),
4.567 (0.96), 4.595 (0.72), 4.643 (3.59), 4.655 (5.06), 4.666 (3.28), 4.821 (0.72),
4.849 (0.72), 4.873 (0.66), 5.030 (9.94), 5.045 (9.76), 5.372 (0.90), 5.418 (0.87),
5.515 (0.90), 5.561 (0.87), 7.922 (16.00), 8.653 (6.24).
Primer 306
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[1868]
[1869] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 122 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (60,0 mg, 158 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (64 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (16,3 mg, 146 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,3 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H]<+>
Primer 307
(5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1870]
[1871] (5RS,6RS)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil)]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 40 mg rastvoreno u smeši acetonitril/etanol (3:1); injekciona zapremina: 0,40 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IE 5 µm, 250 x 30 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 17,6 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 18,1 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1872] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,65 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.90), -0.008 (16.00), 0.008
(14.18), 0.146 (1.90), 1.235 (0.78), 1.964 (1.56), 2.064 (1.56), 2.327 (3.46), 2.366
(3.29), 2.523 (7.87), 2.669 (3.37), 2.710 (4.06), 2.728 (2.25), 2.745 (1.21), 2.772
(1.21), 3.958 (1.12), 3.984 (1.04), 4.018 (1.04), 4.243 (1.73), 4.543 (0.86), 4.609
(3.03), 4.623 (3.55), 4.631 (2.77), 4.800 (0.69), 5.037 (9.51), 5.046 (7.26), 5.411
(0.78), 5.548 (0.69), 8.258 (5.97), 8.263 (6.31), 8.556 (4.06).
Primer 308
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[1873]
[1874] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 127 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (62,5 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (17,0 mg, 152 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,0 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 452 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.64), -0.008 (15.18), 0.008
(15.69), 0.146 (1.85), 1.921 (2.87), 1.942 (3.28), 1.956 (4.00), 2.053 (3.28), 2.327
(3.08), 2.366 (2.56), 2.589 (2.36), 2.635 (3.79), 2.650 (4.00), 2.669 (4.31), 2.710
(4.51), 2.720 (5.54), 2.735 (3.49), 2.764 (2.56), 3.925 (1.54), 3.957 (2.46), 3.987
(2.46), 4.017 (2.26), 4.048 (1.44), 4.215 (2.36), 4.240 (2.87), 4.268 (2.77), 4.297
(2.87), 4.465 (1.44), 4.555 (1.74), 4.601 (6.67), 4.610 (8.62), 4.616 (8.82), 4.766
(1.13), 4.779 (1.33), 4.804 (1.44), 4.841 (1.33), 4.856 (1.44), 4.990 (16.00), 5.000
(14.46), 5.415 (1.85), 5.549 (1.74), 8.104 (8.31), 8.129 (8.41), 8.476 (11.59).
Primer 309
(5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1875]
[1876] (5RS,6RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 36 mg rastvoreno u 3 ml etanola; injekciona zapremina: 0,80 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: etanol 0,2% dietilamin; protok: 15 ml/min; temperatura 55°C; UV detekcija: 235 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 13,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 11,7 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1877] Analitička hiralna HPLC: Rt= 7,56 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OZ-H 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 452 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.44), -0.008 (13.25), 0.146 (1.40),
1.236 (0.90), 1.922 (2.61), 1.941 (3.15), 1.956 (3.65), 1.972 (2.25), 2.052 (3.34),
2.327 (2.03), 2.366 (1.94), 2.590 (2.03), 2.634 (3.61), 2.650 (3.70), 2.669 (3.02),
2.703 (2.93), 2.710 (3.65), 2.719 (5.18), 2.735 (3.11), 2.763 (2.52), 2.778 (1.31),
3.870 (0.41), 3.927 (1.22), 3.959 (2.34), 3.986 (2.52), 4.018 (2.16), 4.055 (1.44),
4.172 (1.08), 4.184 (1.26), 4.214 (2.12), 4.238 (2.66), 4.266 (2.75), 4.295 (2.66),
4.314 (1.26), 4.343 (0.90), 4.467 (1.31), 4.481 (1.35), 4.518 (1.26), 4.533 (1.31),
4.552 (1.62), 4.583 (1.08), 4.601 (6.40), 4.610 (8.34), 4.616 (8.88), 4.622 (7.44),
4.790 (0.99), 4.805 (1.17), 4.832 (1.17), 4.856 (1.17), 4.884 (0.95), 4.990 (16.00),
5.000 (14.38), 5.371 (1.53), 5.414 (1.58), 5.513 (1.53), 5.556 (1.49), 8.104 (6.81),
8.128 (6.99), 8.476 (8.16).
Primer 310
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[1878]
[1879] (5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-6-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (47,0 mg, 125 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (61,5 mg, 162 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (65 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (16,7 mg, 150 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,0 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.09), -0.008 (15.63), 0.008
(16.00), 0.146 (2.02), 1.953 (1.79), 1.973 (2.09), 1.986 (2.54), 2.073 (3.44), 2.327
(2.32), 2.366 (2.09), 2.670 (4.34), 2.710 (2.32), 2.734 (1.87), 2.751 (3.29), 2.768
(2.17), 2.794 (1.72), 2.811 (0.97), 3.935 (0.90), 3.965 (1.57), 3.994 (1.64), 4.023
(1.50), 4.060 (0.82), 4.192 (0.97), 4.224 (1.64), 4.247 (2.09), 4.282 (1.64), 4.304
(1.57), 4.487 (0.90), 4.526 (0.90), 4.542 (0.90), 4.567 (1.20), 4.633 (4.26), 4.642
(4.93), 4.647 (5.23), 4.655 (4.56), 4.780 (1.35), 4.794 (1.72), 4.879 (1.20), 4.931
(13.23), 4.943 (13.08), 4.989 (0.97), 5.412 (1.20), 5.553 (1.12), 7.226 (9.05), 7.248
(9.87), 7.928 (4.64), 7.944 (4.26), 8.575 (7.03), 8.581 (3.96).
Primer 311
(5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1880]
[1881] (5RS,6RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 30 mg rastvoreno u 3 ml smeše etanol/acetonitril (1:2); injekciona zapremina: 0,25 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (50:50); protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 12,30 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 12,1 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1882] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,51 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 140,00 min; MS (ESIpos): m/z = 433 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.76), -0.008 (7.47), 0.008 (6.94),
0.146 (0.88), 1.234 (0.53), 1.953 (1.94), 1.971 (2.29), 1.986 (2.82), 2.073 (2.94),
2.327 (2.00), 2.366 (1.53), 2.670 (4.88), 2.710 (1.94), 2.735 (2.18), 2.751 (3.94),
2.767 (2.41), 2.794 (1.94), 3.932 (0.94), 3.964 (1.88), 3.995 (2.06), 4.023 (1.82),
4.058 (1.18), 4.192 (1.00), 4.223 (2.00), 4.247 (2.47), 4.278 (1.82), 4.303 (1.88),
4.475 (1.00), 4.489 (1.06), 4.528 (1.00), 4.563 (1.24), 4.633 (5.24), 4.647 (6.41),
4.655 (5.59), 4.880 (0.94), 4.931 (15.94), 4.943 (16.00), 5.414 (1.18), 5.555 (1.24),
7.227 (10.59), 7.248 (11.29), 7.927 (5.18), 7.947 (4.94), 8.575 (9.65).
Primer 312
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[1883]
[1884] (5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, čistoća 90%, 219 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (108 mg, 285 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 660 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (37,7 mg, 263 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije
(Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda) i izolovan je dijastereomer 1. Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 78,2 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,69 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.71), -0.008 (5.74), 0.146 (0.71),
2.138 (0.40), 2.156 (0.79), 2.173 (0.82), 2.198 (0.97), 2.229 (0.73), 2.245 (0.68),
2.270 (1.30), 2.290 (1.46), 2.327 (1.37), 2.366 (0.71), 2.376 (0.51), 2.397 (0.97),
2.427 (1.24), 2.444 (1.13), 2.462 (0.79), 2.565 (1.92), 2.583 (1.48), 2.602 (1.02),
2.670 (0.88), 2.688 (1.06), 2.696 (1.02), 2.717 (1.41), 2.726 (2.30), 2.735 (1.48),
2.757 (1.63), 2.764 (1.68), 2.895 (1.15), 2.927 (1.08), 2.979 (2.12), 3.019 (1.61),
3.541 (0.44), 3.552 (1.04), 3.571 (2.21), 3.586 (2.16), 3.603 (1.28), 3.714 (0.99),
3.756 (1.28), 3.786 (1.52), 3.821 (1.17), 3.901 (1.04), 3.919 (2.36), 3.936 (2.58),
3.955 (1.06), 4.135 (0.88), 4.163 (0.73), 4.178 (1.28), 4.205 (1.35), 4.238 (0.90),
4.968 (1.70), 4.982 (1.63), 5.019 (1.74), 5.048 (16.00), 7.920 (15.23), 7.943 (0.93),
8.642 (5.16), 8.678 (0.77).
Primer 313
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1885]
[1886] (5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 77 mg rastvoreno u 2 ml etanola; injekciona zapremina: 0,50 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (50:50); protok: 20 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 24,0 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 28,8 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1887] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,33 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,69 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.83), -0.008 (6.23), 0.008 (6.13),
0.146 (0.65), 2.156 (0.86), 2.197 (0.99), 2.228 (0.77), 2.244 (0.74), 2.268 (1.33),
2.287 (1.39), 2.327 (2.87), 2.366 (1.20), 2.396 (0.92), 2.425 (1.26), 2.444 (1.26),
2.522 (6.17), 2.565 (1.97), 2.582 (1.29), 2.669 (2.50), 2.674 (1.94), 2.687 (1.05),
2.710 (1.45), 2.716 (1.42), 2.725 (2.16), 2.734 (1.33), 2.756 (1.66), 2.764 (1.45),
2.902 (1.02), 2.979 (2.00), 3.018 (1.48), 3.551 (1.02), 3.570 (2.03), 3.584 (1.54),
3.602 (1.02), 3.714 (0.92), 3.754 (1.11), 3.785 (1.33), 3.820 (1.02), 3.901 (0.96),
3.918 (2.19), 3.936 (2.40), 3.954 (0.92), 4.135 (0.77), 4.163 (0.71), 4.179 (1.17),
4.205 (1.29), 4.237 (0.77), 4.968 (1.54), 4.982 (1.57), 5.047 (16.00), 7.917 (14.49),
7.920 (15.35), 8.642 (5.15).
Primer 314
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1888]
[1889] (5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (206 mg, 546 µmol) ubačena je u THF (8,0 ml) i zatim su dodati HBTU (269 mg, 710 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (290 µl, 1,6 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (82,3 mg, 656 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 221 mg (90% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.37), -0.009 (12.42), 0.007
(13.00), 0.146 (1.37), 1.055 (0.81), 2.072 (16.00), 2.175 (2.57), 2.240 (4.40), 2.291
(2.67), 2.327 (1.82), 2.689 (2.15), 2.709 (2.80), 2.719 (3.42), 2.730 (1.99), 2.748
(2.05), 2.976 (4.40), 3.009 (2.90), 3.353 (1.86), 3.371 (1.79), 3.400 (1.30), 3.442
(0.91), 3.512 (0.81), 3.572 (1.73), 3.618 (1.96), 3.638 (2.84), 3.673 (2.93), 3.691
(1.89), 3.802 (0.98), 3.854 (1.66), 3.897 (1.21), 3.995 (1.99), 4.021 (1.34), 4.890
(1.37), 4.932 (7.20), 4.940 (10.49), 4.947 (10.33), 4.951 (10.20), 4.974 (1.76), 4.991
(2.90), 5.025 (1.43), 5.038 (1.40), 5.081 (1.50), 5.267 (1.60), 5.358 (0.91), 5.401
(1.96), 5.488 (0.88), 7.221 (5.70), 7.242 (6.19), 7.286 (0.85), 7.919 (6.19), 7.925
(6.62), 7.940 (6.00), 7.946 (6.45), 8.574 (6.65), 8.580 (6.71).
Primer 315
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1890]
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1891] (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 218 mg rastvoreno u 5 ml smeše etanol/n-heptan (3:2); injekciona zapremina: 0,23 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (50:50); protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 100 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 90 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[1892] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,14 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.94), -0.008 (16.00), 0.008
(15.60), 0.146 (1.94), 1.234 (0.71), 2.002 (0.62), 2.140 (1.85), 2.175 (3.31), 2.211
(2.03), 2.245 (2.95), 2.295 (3.92), 2.327 (3.31), 2.366 (1.41), 2.670 (2.64), 2.709
(2.95), 2.718 (2.95), 2.732 (1.98), 2.748 (1.85), 2.764 (1.45), 2.977 (5.55), 3.011
(3.57), 3.022 (2.25), 3.343 (1.50), 3.355 (1.72), 3.372 (1.59), 3.382 (1.32), 3.399
(1.50), 3.434 (1.32), 3.442 (1.28), 3.495 (0.97), 3.532 (1.28), 3.622 (1.28), 3.647
(2.82), 3.673 (3.83), 3.699 (2.95), 3.718 (1.10), 3.732 (1.19), 3.772 (0.71), 3.812
(1.01), 3.833 (1.45), 3.854 (2.56), 3.876 (1.63), 3.899 (1.15), 3.930 (1.23), 3.964
(0.84), 3.986 (1.32), 4.020 (0.84), 4.891 (2.42), 4.932 (12.52), 4.948 (8.42), 4.952
(9.92), 4.975 (3.31), 4.988 (4.32), 5.268 (1.94), 5.399 (2.56), 5.524 (1.37), 7.222
(6.39), 7.242 (6.96), 7.919 (7.10), 7.926 (7.23), 7.940 (6.74), 7.947 (6.92), 8.574
(7.54), 8.580 (7.58).
Primer 316
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[1893]
[1894] (5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (625 mg, 1,66 mmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (818 mg, 2,16 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (870 µl, 5,0 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (250 mg, 1,99 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 296 mg (38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.08), -0.008 (8.89), 0.008 (9.13),
0.146 (1.10), 2.004 (0.47), 2.073 (1.57), 2.171 (2.52), 2.190 (1.50), 2.212 (2.41),
2.235 (3.70), 2.284 (2.39), 2.323 (1.44), 2.327 (1.52), 2.366 (0.68), 2.670 (1.15),
2.691 (1.15), 2.700 (1.08), 2.710 (0.97), 2.729 (2.70), 2.740 (1.60), 2.761 (1.73),
2.769 (1.78), 2.914 (1.23), 2.984 (2.99), 3.023 (2.02), 3.357 (1.10), 3.378 (1.15),
3.406 (0.97), 3.443 (0.63), 3.495 (0.55), 3.505 (0.55), 3.530 (0.89), 3.568 (1.31),
3.590 (1.13), 3.614 (1.78), 3.640 (2.23), 3.674 (1.99), 3.700 (1.36), 3.718 (0.63),
3.733 (0.66), 3.761 (0.58), 3.793 (0.63), 3.829 (0.73), 3.849 (1.50), 3.872 (0.89),
3.896 (0.63), 3.923 (0.58), 3.969 (0.63), 3.994 (1.47), 4.015 (0.81), 4.055 (0.63),
4.087 (0.47), 4.909 (0.68), 4.924 (1.44), 4.956 (16.00), 4.986 (1.39), 5.031 (1.15),
5.043 (1.10), 5.084 (1.18), 5.269 (1.29), 5.358 (0.81), 5.402 (1.55), 5.488 (0.71),
5.524 (0.58), 7.761 (5.30), 7.766 (3.83), 8.428 (6.82), 8.454 (0.50), 8.568 (5.72),
8.574 (5.77).
Primer 317
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[1895]
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1896] (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 296 mg rastvoreno u 9 ml smeše etanol/n-heptan (7:2); injekciona zapremina: 0,20 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IE 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (30:70); protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 110 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 101 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1897] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,16 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.59), -0.008 (12.81), 0.008
(13.77), 0.146 (1.59), 1.236 (0.64), 2.005 (0.64), 2.137 (2.17), 2.170 (4.08), 2.205
(2.49), 2.235 (3.19), 2.250 (3.19), 2.284 (4.40), 2.327 (3.44), 2.366 (2.49), 2.669
(2.68), 2.689 (1.98), 2.710 (3.12), 2.717 (2.74), 2.729 (3.57), 2.740 (2.10), 2.757
(2.87), 2.770 (1.98), 2.934 (1.85), 2.985 (5.23), 3.023 (3.12), 3.033 (2.42), 3.355
(2.04), 3.373 (1.85), 3.399 (1.85), 3.442 (1.47), 3.504 (1.15), 3.540 (1.40), 3.622
(1.40), 3.647 (2.93), 3.675 (4.21), 3.700 (3.19), 3.718 (1.27), 3.736 (1.34), 3.777
(0.83), 3.809 (1.08), 3.829 (1.66), 3.849 (2.80), 3.871 (1.85), 3.895 (1.15), 3.924
(1.34), 3.954 (0.96), 3.981 (1.59), 4.014 (0.83), 4.908 (1.34), 4.923 (2.55), 4.949
(16.00), 4.972 (3.76), 4.986 (3.44), 5.268 (2.17), 5.400 (2.87), 5.524 (1.47), 7.756
(6.25), 7.761 (7.33), 8.426 (8.67), 8.568 (6.82), 8.574 (6.95).
Primer 318
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[1898]
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1899] (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 296 mg rastvoreno u 9 ml smeše etanol/n-heptan (7:2); injekciona zapremina: 0,20 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IE 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (30:70); protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 110 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 101 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[1900] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,32 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IE 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.14), -0.008 (8.84), 0.008 (8.27),
0.146 (1.03), 2.019 (0.50), 2.159 (1.87), 2.191 (1.18), 2.211 (2.29), 2.233 (3.47),
2.274 (1.45), 2.327 (1.79), 2.366 (1.33), 2.669 (1.71), 2.692 (0.99), 2.699 (0.99),
2.710 (1.60), 2.722 (1.37), 2.731 (2.02), 2.739 (1.30), 2.761 (1.68), 2.768 (1.64),
2.891 (1.03), 2.977 (2.29), 3.016 (1.71), 3.360 (1.14), 3.378 (1.14), 3.406 (0.69),
3.490 (0.46), 3.526 (0.84), 3.567 (1.75), 3.589 (1.37), 3.614 (2.06), 3.633 (1.87),
3.658 (1.03), 3.791 (0.65), 3.858 (0.50), 3.889 (0.69), 3.968 (0.76), 3.994 (1.98),
4.017 (0.76), 4.057 (0.95), 4.087 (0.69), 4.956 (16.00), 5.029 (1.64), 5.044 (1.64),
5.084 (1.75), 5.274 (0.99), 5.358 (0.99), 5.408 (1.03), 5.488 (1.03), 7.761 (4.38),
7.766 (4.50), 8.428 (5.94), 8.568 (4.42), 8.574 (4.42).
Primer 319
(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1901]
[1902] (5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, čistoća 79%, 233 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (115 mg, 302 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (40,1 mg, 279 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,0 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.92), -0.008 (7.38), 0.008 (7.15),
0.146 (0.83), 1.173 (15.59), 1.190 (16.00), 1.310 (0.55), 1.341 (1.43), 1.370 (1.57),
1.809 (1.52), 2.014 (0.65), 2.053 (2.35), 2.077 (2.90), 2.327 (1.29), 2.366 (0.88),
2.670 (1.48), 2.710 (1.94), 2.729 (1.80), 2.742 (1.66), 3.453 (0.74), 3.487 (1.20),
3.510 (1.38), 3.534 (1.01), 3.542 (1.15), 3.554 (0.83), 3.565 (0.92), 3.611 (0.92),
3.625 (1.11), 3.644 (0.69), 3.666 (1.24), 3.681 (1.98), 3.695 (1.34), 3.713 (1.94),
3.728 (1.06), 3.745 (1.15), 3.758 (1.15), 3.778 (0.55), 3.792 (0.55), 3.862 (0.92),
3.909 (1.34), 3.922 (1.01), 3.937 (0.60), 3.958 (0.97), 3.973 (1.01), 3.988 (0.60),
4.002 (0.55), 4.125 (0.55), 4.141 (0.69), 4.153 (0.69), 4.168 (0.97), 4.179 (0.74),
4.194 (0.65), 4.208 (0.60), 4.802 (1.61), 4.826 (3.92), 4.842 (7.93), 4.865 (4.29),
4.875 (4.52), 4.906 (0.92), 4.915 (1.52), 5.265 (0.97), 5.276 (1.11), 5.288 (0.92),
5.298 (0.69), 5.314 (0.69), 5.329 (0.78), 5.352 (0.88), 5.366 (0.78), 5.389 (1.15),
5.409 (1.06), 5.429 (0.78), 5.482 (0.78), 7.228 (2.26), 7.234 (2.44), 7.242 (2.31),
7.374 (3.00), 7.395 (4.80), 7.419 (2.72), 7.429 (3.46), 7.447 (3.37).
Primer 320
(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1903]
[1904] (5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, čistoća 79%, 233 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (115 mg, 302 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (35,0 mg, 279 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 55,0 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,57 min; MS (ESIpos): m/z = 411 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.83), -0.008 (16.00), 0.008
(13.96), 0.146 (1.88), 1.175 (7.42), 1.180 (7.54), 1.192 (7.79), 1.197 (7.46), 1.380
(0.75), 1.813 (1.04), 2.105 (2.08), 2.270 (0.79), 2.327 (2.29), 2.366 (1.33), 2.670
(2.37), 2.710 (2.00), 3.516 (1.17), 3.597 (1.33), 3.643 (1.17), 3.667 (1.04), 3.731
(0.96), 3.840 (0.96), 3.930 (0.63), 4.776 (0.92), 4.799 (0.92), 4.839 (3.08), 4.848
(3.54), 4.871 (3.58), 5.266 (0.71), 5.391 (0.79), 7.245 (1.67), 7.373 (2.58), 7.395
(4.00), 7.418 (2.04), 7.431 (2.04), 7.448 (2.21).
Primer 321
(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1905]
[1906] (5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, čistoća 79%, 233 µmol) ubačen je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (115 mg, 302 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (31,1 mg, 279 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.45), -0.008 (4.06), 0.008 (3.98),
0.146 (0.44), 1.168 (15.72), 1.185 (16.00), 1.244 (0.42), 1.258 (0.43), 1.329 (0.42),
1.358 (0.84), 1.384 (1.02), 1.401 (0.96), 1.431 (0.51), 1.802 (1.14), 1.812 (1.16),
2.037 (2.52), 2.047 (2.73), 2.328 (0.47), 2.523 (1.47), 2.670 (0.54), 2.675 (0.53),
2.695 (0.80), 2.710 (1.63), 2.725 (1.48), 2.738 (1.25), 2.755 (0.72), 3.925 (0.72),
3.987 (0.81), 4.013 (0.55), 4.175 (0.44), 4.216 (0.79), 4.230 (0.84), 4.245 (0.71),
4.266 (0.96), 4.299 (0.86), 4.332 (0.49), 4.357 (0.87), 4.381 (0.59), 4.417 (0.45),
4.444 (0.60), 4.508 (0.40), 4.523 (0.46), 4.562 (0.46), 4.579 (0.51), 4.596 (2.31),
4.605 (3.55), 4.616 (2.39), 4.636 (0.47), 4.667 (0.44), 4.687 (0.44), 4.803 (1.87),
4.843 (6.36), 4.868 (2.98), 4.876 (2.92), 4.916 (0.87), 5.348 (0.55), 5.411 (0.55),
5.490 (0.54), 5.553 (0.53), 7.237 (1.82), 7.371 (2.19), 7.394 (3.62), 7.416 (1.76),
7.433 (2.20), 7.451 (2.21).
Primer 322
(5RS,8RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1907]
[1908] (5RS,8RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 214 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (105 mg, 278 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 640 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (36,8 mg, 256 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,0 mg (38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.67), -0.008 (16.00), 0.008
(12.74), 0.146 (1.71), 1.178 (7.16), 1.194 (7.28), 1.345 (0.56), 1.377 (0.60), 1.839
(0.56), 2.107 (1.07), 2.327 (1.19), 2.332 (0.84), 2.366 (1.15), 2.518 (4.34), 2.523
(3.34), 2.665 (0.92), 2.670 (1.23), 2.674 (0.84), 2.710 (1.19), 2.755 (0.68), 2.766
(0.68), 3.496 (0.44), 3.507 (0.44), 3.518 (0.56), 3.526 (0.48), 3.674 (0.48), 3.687
(0.64), 3.720 (0.72), 3.750 (0.44), 3.763 (0.44), 3.913 (0.52), 4.853 (1.43), 4.867
(1.31), 5.048 (0.80), 5.091 (2.75), 5.116 (1.75), 5.124 (1.79), 5.166 (0.56), 7.509
(1.19), 7.518 (1.31), 7.530 (0.64), 8.561 (1.83), 8.573 (1.79).
Primer 323
(5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1909]
[1910] (5RS,8RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, čistoća 79%, 233 µmol) ubačena je u THF i zatim su dodati HBTU (115 mg, 302 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (40,1 mg, 279 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 14,0 mg (14% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,72 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.90), -0.008 (16.00), 0.008
(14.19), 0.146 (1.90), 1.175 (13.05), 1.192 (13.33), 1.370 (1.14), 1.794 (1.62), 2.072
(2.38), 2.327 (2.48), 2.366 (2.29), 2.669 (2.67), 2.710 (2.29), 2.720 (1.52), 2.735
(2.00), 2.751 (1.62), 3.527 (1.52), 3.549 (2.19), 3.665 (1.14), 3.699 (1.43), 3.734
(1.24), 3.769 (2.38), 3.797 (2.00), 3.900 (1.52), 3.969 (0.86), 4.178 (0.86), 4.201
(0.95), 4.802 (3.05), 4.844 (5.71), 4.871 (7.33), 4.912 (1.62), 7.234 (2.19), 7.246
(1.90), 7.373 (3.90), 7.396 (5.33), 7.418 (3.24), 7.427 (3.24), 7.450 (2.95).
Primer 324
(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1911]
[1912] (5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 247 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (122 mg, 322 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (42,6 mg, 297 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,0 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.68), -0.008 (6.34), 0.008 (6.42),
0.146 (0.75), 1.165 (15.62), 1.182 (16.00), 1.337 (1.36), 1.370 (1.51), 1.398 (0.68),
1.810 (1.36), 2.041 (2.19), 2.072 (2.72), 2.328 (1.28), 2.366 (0.98), 2.523 (4.60),
2.670 (1.74), 2.700 (1.36), 2.710 (2.42), 2.726 (1.58), 2.742 (1.13), 3.381 (0.83),
3.398 (0.53), 3.448 (0.68), 3.482 (1.13), 3.508 (1.13), 3.519 (1.13), 3.529 (1.06),
3.538 (1.13), 3.562 (0.83), 3.607 (0.83), 3.622 (0.98), 3.640 (0.68), 3.663 (1.13),
3.677 (1.74), 3.695 (1.36), 3.710 (1.66), 3.725 (0.98), 3.742 (1.06), 3.755 (1.13),
3.775 (0.53), 3.856 (0.83), 3.905 (1.28), 3.919 (0.98), 3.934 (0.53), 3.955 (0.91),
3.970 (0.91), 3.985 (0.60), 3.998 (0.53), 4.119 (0.60), 4.135 (0.68), 4.148 (0.60),
4.162 (0.98), 4.174 (0.68), 4.188 (0.68), 4.203 (0.60), 4.788 (2.34), 4.805 (3.25),
4.827 (5.96), 4.884 (3.02), 4.894 (3.40), 4.924 (1.36), 4.934 (1.66), 5.275 (1.06),
5.349 (0.83), 5.385 (1.06), 5.407 (0.91), 5.428 (0.68), 5.440 (0.68), 5.479 (0.75),
7.059 (1.28), 7.081 (2.79), 7.102 (1.58), 7.222 (1.28), 7.251 (3.47), 7.262 (1.89),
7.272 (3.25), 7.289 (1.96), 7.310 (0.91).
Primer 325
(5RS,8RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1913]
[1914] (5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 225 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (111 mg, 292 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (38,7 mg, 269 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 70,0 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.54), -0.008 (4.71), 0.008 (5.18),
0.146 (0.58), 1.173 (15.46), 1.190 (16.00), 1.225 (1.08), 1.244 (5.33), 1.259 (6.38),
1.274 (3.52), 1.305 (0.54), 1.337 (1.35), 1.347 (1.04), 1.369 (1.47), 1.399 (0.66),
1.799 (1.00), 1.819 (1.35), 2.072 (2.36), 2.096 (2.67), 2.328 (0.77), 2.366 (0.58),
2.523 (2.67), 2.670 (0.85), 2.690 (0.77), 2.709 (1.12), 2.721 (1.20), 2.737 (1.62),
2.748 (1.55), 2.776 (0.62), 3.129 (0.46), 3.139 (0.50), 3.158 (0.46), 3.457 (0.66),
3.491 (1.04), 3.515 (1.08), 3.527 (1.00), 3.538 (0.93), 3.547 (1.08), 3.560 (0.73),
3.570 (0.77), 3.579 (0.62), 3.616 (1.28), 3.630 (1.31), 3.648 (0.77), 3.663 (0.81),
3.671 (1.16), 3.684 (1.74), 3.696 (1.12), 3.718 (1.74), 3.731 (0.97), 3.750 (1.04),
3.761 (1.04), 3.783 (0.54), 3.795 (0.50), 3.867 (0.85), 3.913 (1.24), 3.926 (0.97),
3.941 (0.50), 3.964 (0.89), 3.977 (0.89), 3.992 (0.54), 4.006 (0.46), 4.128 (0.50),
4.142 (0.58), 4.156 (0.62), 4.167 (0.85), 4.183 (0.66), 4.195 (0.62), 4.210 (0.58),
4.835 (3.32), 4.842 (2.74), 4.849 (3.09), 5.006 (0.54), 5.047 (12.83), 5.093 (0.46),
5.266 (0.93), 5.276 (0.97), 5.288 (0.93), 5.314 (0.70), 5.329 (0.73), 5.353 (0.77),
5.390 (0.97), 5.409 (0.93), 5.420 (0.93), 5.432 (0.62), 5.456 (0.73), 5.464 (0.77),
5.476 (0.73), 7.904 (9.12), 7.908 (11.32), 7.926 (1.00), 8.628 (5.80).
Primer 326
(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1915]
[1916] (5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 247 µmol) ubačena je u THF i zatim su dodati HBTU (122 mg, 322 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (37,3 mg, 297 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 50,0 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.66), -0.008 (6.12), 0.008 (5.45), 0.146 (0.66), 1.168 (15.16), 1.173 (15.96), 1.184 (16.00), 1.190 (15.82), 1.228 (0.49),
1.245 (1.99), 1.261 (2.84), 1.277 (1.42), 1.349 (1.02), 1.380 (1.46), 1.412 (1.51),
1.443 (1.02), 1.787 (1.86), 1.796 (1.95), 1.805 (1.91), 1.934 (0.58), 1.975 (1.06),
2.052 (3.28), 2.092 (3.63), 2.102 (3.59), 2.130 (1.82), 2.221 (1.11), 2.256 (1.42),
2.328 (0.84), 2.366 (0.49), 2.669 (1.24), 2.690 (1.46), 2.700 (2.04), 2.714 (2.53),
2.730 (2.53), 2.743 (1.29), 2.890 (0.80), 3.267 (0.49), 3.356 (1.73), 3.374 (1.20),
3.384 (1.33), 3.402 (0.71), 3.447 (0.58), 3.455 (0.62), 3.481 (0.71), 3.490 (0.80),
3.515 (1.99), 3.542 (1.60), 3.560 (1.37), 3.592 (2.61), 3.619 (1.73), 3.640 (2.13),
3.664 (1.95), 3.687 (0.93), 3.704 (0.93), 3.726 (1.99), 3.752 (1.29), 3.762 (1.55),
3.836 (1.82), 3.904 (0.66), 3.926 (1.24), 3.949 (0.66), 3.969 (0.62), 3.995 (0.66),
4.026 (0.53), 4.697 (1.11), 4.711 (1.20), 4.745 (1.15), 4.754 (1.86), 4.766 (1.20),
4.784 (2.17), 4.792 (2.30), 4.824 (5.67), 4.832 (6.12), 4.872 (1.51), 4.890 (5.81),
4.930 (2.66), 5.258 (1.42), 5.346 (0.84), 5.391 (1.60), 5.477 (0.80), 5.509 (0.66),
5.943 (0.44), 7.054 (1.91), 7.060 (2.04), 7.075 (4.25), 7.081 (4.61), 7.097 (2.39),
7.103 (2.48), 7.220 (2.39), 7.227 (2.39), 7.245 (5.32), 7.252 (5.27), 7.269 (5.36),
7.274 (4.70), 7.284 (2.70), 7.290 (3.50), 7.305 (1.11), 7.312 (1.20).
Primer 327
(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1917]
[1918] (5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 247 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (122 mg, 322 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (42,6 mg, 297 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,0 mg (29% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,57 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.37), -0.008 (11.75), 0.008
(10.16), 0.146 (1.30), 1.166 (15.78), 1.183 (16.00), 1.370 (1.30), 1.787 (1.73), 1.820
(1.51), 2.055 (2.67), 2.082 (2.45), 2.092 (2.31), 2.327 (1.66), 2.366 (1.59), 2.377
(1.08), 2.405 (1.37), 2.425 (1.37), 2.447 (1.23), 2.569 (1.87), 2.586 (1.23), 2.670
(1.87), 2.690 (1.44), 2.708 (2.59), 2.720 (2.38), 2.735 (1.80), 2.750 (1.15), 3.525
(1.87), 3.543 (2.59), 3.558 (1.30), 3.626 (0.43), 3.660 (1.51), 3.693 (1.66), 3.731
(1.23), 3.766 (2.67), 3.793 (2.38), 3.812 (0.86), 3.876 (0.79), 3.894 (1.51), 3.921
(1.15), 3.940 (0.94), 3.970 (1.01), 4.013 (1.01), 4.043 (0.65), 4.138 (0.58), 4.168
(0.94), 4.193 (0.94), 4.788 (4.18), 4.828 (6.13), 4.847 (2.45), 4.890 (6.05), 4.930
(2.81), 7.059 (1.59), 7.081 (3.32), 7.102 (1.87), 7.221 (2.09), 7.227 (1.87), 7.247
(4.68), 7.269 (4.97), 7.276 (2.52), 7.285 (3.39), 7.306 (1.37).
Primer 328
(5RS,8RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1919]
[1920] (5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (50,0 mg, 140 µmol) ubačena je u THF (500 µl) i zatim su dodati HBTU (69,2 mg, 182 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (73 µl, 420 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (18,8 mg, 168 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,0 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.37), 0.008 (3.14), 0.146 (0.42),
1.168 (15.69), 1.185 (16.00), 1.325 (0.46), 1.365 (0.98), 1.385 (1.02), 1.396 (1.08),
1.425 (0.50), 1.813 (1.06), 1.822 (1.08), 2.057 (2.54), 2.328 (0.66), 2.332 (0.52),
2.366 (0.56), 2.523 (2.02), 2.670 (0.75), 2.700 (0.79), 2.711 (1.35), 2.730 (1.41),
2.744 (1.21), 2.759 (0.69), 3.908 (0.44), 3.930 (0.77), 3.958 (0.75), 3.991 (0.83),
4.017 (0.52), 4.177 (0.44), 4.220 (0.71), 4.234 (0.71), 4.275 (0.79), 4.303 (0.77),
4.341 (0.48), 4.363 (0.79), 4.386 (0.56), 4.423 (0.44), 4.448 (0.58), 4.530 (0.44),
4.569 (0.44), 4.584 (0.48), 4.619 (3.03), 4.673 (0.44), 5.004 (0.56), 5.046 (7.13),
5.096 (0.39), 5.349 (0.52), 5.411 (0.52), 5.493 (0.52), 5.554 (0.52), 7.906 (11.32),
8.635 (4.70).
Primer 329
(5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1921]
[1922] (5RS,8RS)-2-(2,4-difluorbenzil)-8-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (80,0 mg, 247 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (122 mg, 322 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (33,1 mg, 297 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 55,0 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.04), -0.008 (13.04), 0.008 (7.58),
0.146 (1.08), 1.160 (16.00), 1.177 (16.00), 1.334 (0.54), 1.393 (1.18), 1.434 (0.61),
1.805 (1.28), 2.037 (2.96), 2.327 (1.01), 2.366 (0.74), 2.670 (1.55), 2.696 (1.48),
2.710 (2.36), 3.920 (0.91), 3.951 (0.84), 3.984 (0.94), 4.008 (0.61), 4.227 (0.88),
4.263 (1.01), 4.295 (0.94), 4.351 (0.94), 4.410 (0.51), 4.439 (0.64), 4.518 (0.54),
4.583 (3.60), 4.790 (2.49), 4.830 (5.36), 4.886 (2.59), 4.934 (1.21), 5.346 (0.64),
5.408 (0.57), 5.489 (0.57), 5.552 (0.57), 7.057 (1.21), 7.077 (2.39), 7.095 (1.35),
7.226 (1.25), 7.251 (3.20), 7.272 (3.40), 7.290 (2.36), 7.311 (0.94).
Primer 330
(5RS,8RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1923]
[1924] (5RS,8RS)-8-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 281 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (138 mg, 365 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 840 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (48,4 mg, 337 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 60,0 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.55), 0.008 (3.57), 0.146 (0.46),
1.175 (15.46), 1.191 (16.00), 1.317 (0.44), 1.335 (0.95), 1.349 (1.15), 1.364 (1.25),
1.379 (1.25), 1.395 (0.88), 1.407 (0.64), 1.805 (1.66), 1.817 (1.52), 1.827 (1.39),
1.839 (1.39), 2.073 (3.67), 2.105 (2.42), 2.115 (2.28), 2.328 (0.61), 2.366 (0.76),
2.381 (0.95), 2.390 (0.76), 2.408 (1.25), 2.427 (1.22), 2.451 (0.78), 2.518 (4.01),
2.572 (1.81), 2.589 (1.27), 2.607 (0.66), 2.670 (0.71), 2.696 (0.42), 2.711 (1.52),
2.728 (1.91), 2.743 (2.30), 2.758 (1.81), 2.773 (1.17), 3.533 (1.79), 3.552 (2.69),
3.566 (1.42), 3.573 (1.37), 3.633 (0.46), 3.667 (1.49), 3.701 (1.74), 3.736 (1.03),
3.742 (0.95), 3.756 (0.66), 3.775 (2.98), 3.801 (1.96), 3.807 (1.76), 3.818 (0.91),
3.841 (0.44), 3.882 (0.78), 3.901 (1.64), 3.920 (0.95), 3.927 (1.22), 3.947 (0.93),
3.977 (0.98), 3.992 (0.56), 4.005 (0.71), 4.021 (0.91), 4.048 (0.59), 4.151 (0.61),
4.183 (0.93), 4.206 (0.93), 4.238 (0.46), 4.805 (1.37), 4.812 (1.96), 4.824 (1.49),
4.868 (1.39), 4.875 (2.15), 4.887 (1.47), 5.006 (0.59), 5.050 (12.84), 5.093 (0.66),
7.881 (0.71), 7.906 (15.24), 7.927 (1.35), 8.629 (5.70).
Primer 331
(5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1925]
[1926] (5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (70,0 mg, 206 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (102 mg, 268 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (35,5 mg, 247 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 47,8 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,69 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.30), -0.008 (11.60), 0.008 (9.50),
0.146 (1.20), 1.025 (12.50), 1.041 (12.80), 1.343 (1.20), 1.371 (1.30), 1.873 (1.00),
2.073 (0.90), 2.158 (2.40), 2.188 (2.00), 2.198 (2.80), 2.228 (3.60), 2.327 (2.40),
2.366 (1.70), 2.413 (1.60), 2.651 (2.00), 2.669 (2.40), 2.710 (1.40), 3.555 (2.00),
3.570 (2.20), 3.679 (1.40), 3.712 (1.40), 3.739 (0.90), 3.771 (1.60), 3.803 (1.30),
3.836 (1.70), 3.915 (1.50), 3.941 (1.00), 4.043 (1.00), 4.081 (0.90), 4.110 (1.20),
4.141 (1.20), 4.170 (0.90), 4.591 (1.20), 4.607 (1.40), 4.619 (1.40), 4.633 (1.20),
4.705 (1.20), 4.719 (1.30), 4.730 (1.20), 4.746 (1.10), 4.802 (16.00), 7.240 (1.70),
7.256 (2.50), 7.262 (2.40), 7.268 (2.20), 7.376 (4.10), 7.399 (5.60), 7.421 (3.10),
7.443 (3.20), 7.448 (3.30), 7.461 (3.20), 7.466 (3.10).
Primer 332
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1927]
[1928] (5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 281 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (138 mg, 365 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 840 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (48,4 mg, 337 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 106 mg (85% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.75), -0.008 (7.11), 0.008 (6.34),
0.146 (0.75), 1.027 (12.01), 1.043 (12.42), 1.318 (0.55), 1.332 (0.57), 1.349 (1.14),
1.361 (1.21), 1.379 (1.21), 1.391 (1.23), 1.410 (0.93), 1.422 (0.62), 1.900 (0.89),
2.073 (0.50), 2.160 (2.26), 2.190 (1.94), 2.201 (2.60), 2.231 (2.85), 2.270 (1.30),
2.328 (1.00), 2.366 (1.09), 2.382 (0.96), 2.400 (0.98), 2.414 (1.39), 2.433 (1.09),
2.453 (0.78), 2.523 (4.67), 2.577 (1.18), 2.595 (0.61), 2.651 (1.98), 2.670 (1.32),
2.686 (1.76), 2.710 (0.93), 3.539 (1.19), 3.557 (2.05), 3.571 (2.33), 3.590 (1.05),
3.648 (0.43), 3.681 (1.25), 3.714 (1.50), 3.740 (0.84), 3.773 (1.53), 3.805 (1.34),
3.818 (1.03), 3.825 (0.96), 3.843 (1.59), 3.861 (0.71), 3.893 (0.73), 3.912 (1.50),
3.938 (1.02), 3.957 (0.43), 4.051 (1.00), 4.089 (0.98), 4.108 (0.73), 4.138 (1.10),
4.170 (0.93), 4.594 (1.10), 4.609 (1.35), 4.621 (1.25), 4.636 (1.10), 4.705 (1.14),
4.720 (1.35), 4.732 (1.23), 4.747 (1.16), 4.988 (16.00), 7.900 (1.03), 7.920 (14.02),
7.946 (0.73), 8.665 (5.02).
Primer 333
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1929]
[1930] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (81,4 mg, čistoća 90%, 196 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (96,5 mg, 254 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 590 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (33,7 mg, 235 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 41,5 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.08), -0.008 (9.90), 0.008 (8.58), 0.146 (1.08), 1.029 (12.29), 1.033 (12.77), 1.045 (13.13), 1.050 (12.49), 1.301 (0.76),
1.332 (1.72), 1.364 (2.63), 1.393 (1.84), 1.427 (0.84), 1.892 (1.76), 2.073 (2.95),
2.171 (3.51), 2.201 (2.95), 2.212 (4.07), 2.242 (4.15), 2.259 (1.96), 2.276 (1.72),
2.291 (1.76), 2.327 (1.20), 2.366 (0.88), 2.523 (3.99), 2.661 (3.15), 2.665 (3.27),
2.690 (3.87), 2.697 (2.51), 3.463 (0.84), 3.472 (0.60), 3.497 (1.32), 3.508 (1.28),
3.517 (1.16), 3.533 (0.84), 3.545 (1.48), 3.552 (1.60), 3.597 (1.08), 3.617 (0.96),
3.631 (1.24), 3.652 (0.64), 3.665 (0.88), 3.675 (0.96), 3.690 (1.36), 3.707 (1.52),
3.728 (1.28), 3.741 (1.40), 3.756 (1.52), 3.770 (1.72), 3.792 (1.28), 3.803 (1.60),
3.823 (1.08), 3.872 (0.68), 3.987 (0.84), 4.002 (0.84), 4.015 (0.88), 4.032 (1.20),
4.048 (0.84), 4.061 (0.84), 4.076 (0.60), 4.108 (0.76), 4.123 (0.84), 4.136 (0.80),
4.151 (1.56), 4.167 (0.96), 4.180 (0.84), 4.195 (0.72), 4.662 (2.11), 4.672 (2.39),
4.677 (2.47), 4.684 (2.43), 4.689 (2.31), 4.699 (2.11), 5.040 (16.00), 5.106 (0.44),
5.250 (1.16), 5.260 (1.24), 5.269 (1.20), 5.284 (1.12), 5.306 (0.84), 5.321 (1.04),
5.341 (1.08), 5.356 (0.84), 5.373 (1.20), 5.406 (1.16), 5.436 (0.88), 5.449 (1.04),
5.459 (1.04), 5.471 (0.96), 5.485 (0.76), 5.494 (0.56), 7.589 (3.31), 7.602 (6.26),
7.615 (3.55), 8.568 (5.87), 8.579 (5.67).
Primer 334
(5RS,7RS)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša, 4 izomera)
[1931]
[1932] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (81,4 mg, čistoća 90%, 196 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (96,5 mg, 254 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 590 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (33,7 mg, 235 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,3 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.84), -0.008 (7.15), 0.008 (6.47),
0.146 (0.84), 1.033 (11.98), 1.049 (12.26), 1.327 (0.53), 1.342 (0.59), 1.357 (1.11),
1.372 (1.21), 1.387 (1.21), 1.403 (1.21), 1.418 (0.65), 1.432 (0.65), 1.891 (1.21),
2.174 (2.35), 2.204 (2.01), 2.215 (2.75), 2.245 (3.03), 2.283 (1.27), 2.327 (0.99),
2.366 (0.90), 2.381 (0.99), 2.401 (0.99), 2.414 (1.36), 2.432 (1.21), 2.454 (0.87),
2.524 (3.78), 2.559 (1.70), 2.576 (1.05), 2.596 (0.59), 2.665 (2.48), 2.709 (1.83),
3.541 (1.15), 3.550 (1.33), 3.558 (1.98), 3.570 (2.10), 3.589 (1.02), 3.683 (1.21),
3.717 (1.42), 3.738 (0.77), 3.751 (0.68), 3.770 (1.58), 3.803 (1.58), 3.823 (0.93),
3.831 (0.96), 3.848 (1.55), 3.866 (0.68), 3.888 (0.74), 3.908 (1.58), 3.933 (0.96),
3.952 (0.43), 4.056 (0.99), 4.094 (1.02), 4.131 (1.21), 4.165 (0.93), 4.603 (1.15),
4.618 (1.36), 4.630 (1.27), 4.645 (1.11), 4.713 (1.21), 4.728 (1.36), 4.740 (1.30),
4.755 (1.15), 5.042 (16.00), 7.591 (2.54), 7.603 (4.80), 7.616 (2.72), 8.568 (5.29),
8.580 (5.20).
Primer 335
(5RS,7RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 1, racemat)
[1933]
[1934] (5RS,7RS)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (81,4 mg, čistoća 90%, 196 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (96,5 mg, 254 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 590 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (26,2 mg, 235 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,9 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.79), -0.008 (16.00), 0.008
(13.81), 0.146 (1.79), 1.025 (13.71), 1.041 (14.11), 1.388 (1.39), 1.417 (1.59), 1.435
(1.49), 1.467 (0.70), 1.894 (2.09), 2.170 (3.88), 2.200 (2.88), 2.210 (3.78), 2.240
(2.39), 2.327 (2.09), 2.366 (2.19), 2.523 (6.86), 2.648 (2.78), 2.670 (2.39), 2.679
(2.88), 2.710 (2.19), 2.857 (1.29), 3.103 (1.09), 3.880 (0.70), 3.966 (1.09), 4.025
(0.80), 4.153 (0.70), 4.221 (1.09), 4.248 (1.39), 4.273 (1.29), 4.305 (1.29), 4.337
(0.89), 4.396 (3.98), 4.411 (4.37), 4.424 (3.88), 4.439 (3.78), 4.465 (0.80), 4.510
(0.70), 4.561 (0.70), 4.651 (0.70), 5.042 (10.93), 5.107 (0.50), 5.380 (1.19), 5.523
(1.09), 7.603 (3.48), 7.616 (6.56), 7.628 (3.78), 8.567 (6.06), 8.579 (5.96).
Primer 336
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 1; racemat)
[1935]
[1936] (5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (78,8 mg, 221 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (109 mg, 288 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 880 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (38,1 mg, 265 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 78,9 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.58), 0.146 (0.52), 1.023 (10.88),
1.027 (11.14), 1.039 (11.23), 1.290 (0.61), 1.322 (1.50), 1.354 (2.20), 1.385 (1.56),
1.417 (0.75), 1.874 (3.65), 2.157 (2.89), 2.187 (2.52), 2.197 (3.39), 2.228 (3.41),
2.246 (1.76), 2.260 (1.56), 2.278 (1.62), 2.327 (0.78), 2.366 (0.46), 2.642 (2.43),
2.683 (2.20), 2.710 (0.61), 3.461 (0.93), 3.495 (1.24), 3.504 (1.33), 3.513 (1.33),
3.548 (1.68), 3.598 (1.04), 3.617 (0.90), 3.631 (1.13), 3.651 (0.72), 3.664 (0.90),
3.674 (0.98), 3.687 (1.13), 3.697 (1.16), 3.709 (1.42), 3.721 (1.10), 3.731 (1.24),
3.744 (1.22), 3.772 (1.71), 3.807 (1.36), 3.842 (0.81), 3.884 (0.69), 3.982 (0.75),
3.997 (0.84), 4.010 (0.72), 4.027 (1.07), 4.043 (0.72), 4.056 (0.64), 4.070 (0.55),
4.115 (0.67), 4.130 (0.81), 4.143 (0.69), 4.158 (1.36), 4.174 (0.81), 4.187 (0.78),
4.202 (0.78), 4.648 (1.68), 4.654 (1.82), 4.663 (2.05), 4.671 (2.34), 4.682 (1.91),
4.690 (1.74), 4.696 (1.56), 4.986 (16.00), 5.054 (3.27), 5.249 (1.27), 5.260 (1.27),
5.270 (1.30), 5.282 (1.13), 5.322 (1.10), 5.340 (1.04), 5.384 (1.36), 5.407 (1.30),
5.460 (1.16), 5.486 (0.81), 6.088 (0.95), 7.917 (12.88), 8.663 (6.37).
Primer 337
(5S,7S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[1937]
[1938] (5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 66,7 mg rastvoreno u 7 ml etanola; injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OD-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (60:40); protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 21,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 26,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[1939] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,78 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 15): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.09), -0.008 (10.72), 0.008 (11.52), 0.146 (1.20), 1.023 (10.64), 1.028 (11.23), 1.039 (11.52), 1.044 (11.08), 1.236
(1.17), 1.290 (0.77), 1.322 (1.49), 1.354 (2.22), 1.386 (1.57), 1.418 (0.73), 1.875
(3.75), 2.157 (2.95), 2.187 (2.51), 2.198 (3.43), 2.228 (3.43), 2.245 (1.71), 2.263
(1.57), 2.279 (1.57), 2.328 (1.35), 2.643 (2.48), 2.670 (1.86), 2.679 (2.41), 2.710
(0.62), 3.461 (0.95), 3.495 (1.28), 3.504 (1.28), 3.514 (1.31), 3.548 (1.71), 3.598
(1.17), 3.616 (0.95), 3.630 (1.13), 3.650 (0.80), 3.664 (0.95), 3.674 (0.95), 3.688
(1.13), 3.697 (1.13), 3.709 (1.38), 3.721 (1.13), 3.731 (1.24), 3.744 (1.28), 3.772
(1.64), 3.807 (1.38), 3.841 (0.77), 3.934 (0.40), 3.982 (0.80), 3.997 (0.84), 4.010
(0.73), 4.027 (1.13), 4.043 (0.77), 4.056 (0.69), 4.070 (0.51), 4.115 (0.69), 4.130
(0.80), 4.143 (0.69), 4.159 (1.35), 4.173 (0.84), 4.186 (0.80), 4.202 (0.84), 4.648
(1.64), 4.655 (1.75), 4.663 (2.00), 4.670 (2.26), 4.682 (1.97), 4.690 (1.79), 4.697
(1.57), 4.986 (16.00), 5.055 (3.46), 5.249 (1.24), 5.260 (1.28), 5.271 (1.24), 5.322
(1.02), 5.340 (0.98), 5.406 (1.28), 5.461 (1.02), 6.086 (0.98), 7.916 (12.46), 7.919
(12.28), 8.664 (5.94).
Primer 338
(5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[1940]
[1941] (5RS,7RS)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 66,7 mg rastvoreno u 7 ml etanola; injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OD-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (60:40); protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 21,7 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 26,4 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[1942] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,98 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.26), -0.008 (10.77), 0.008
(10.65), 0.146 (1.26), 1.023 (10.81), 1.028 (11.26), 1.039 (11.65), 1.044 (11.19),
1.235 (1.03), 1.290 (0.76), 1.320 (1.49), 1.355 (2.14), 1.388 (1.53), 1.418 (0.73),
1.883 (1.49), 2.157 (3.17), 2.187 (2.60), 2.198 (3.63), 2.228 (3.55), 2.246 (1.76),
2.279 (1.57), 2.327 (1.45), 2.366 (0.42), 2.648 (2.41), 2.670 (1.79), 2.679 (2.33),
2.709 (0.50), 3.460 (0.80), 3.495 (0.99), 3.505 (1.11), 3.514 (1.15), 3.548 (1.53),
3.597 (0.92), 3.617 (0.84), 3.630 (0.99), 3.652 (0.57), 3.674 (0.84), 3.687 (1.03),
3.697 (0.92), 3.709 (1.22), 3.721 (1.03), 3.732 (0.99), 3.744 (0.99), 3.772 (1.41),
3.808 (1.26), 3.983 (0.76), 3.997 (0.80), 4.010 (0.76), 4.028 (1.07), 4.043 (0.76),
4.056 (0.69), 4.072 (0.53), 4.115 (0.65), 4.130 (0.76), 4.144 (0.69), 4.158 (1.26),
4.174 (0.73), 4.187 (0.69), 4.201 (0.65), 4.648 (1.57), 4.655 (1.76), 4.663 (2.06),
4.674 (2.33), 4.681 (2.02), 4.690 (1.76), 4.697 (1.60), 4.986 (16.00), 5.249 (1.07),
5.259 (1.07), 5.270 (1.11), 5.307 (0.76), 5.322 (0.84), 5.372 (1.03), 5.384 (1.11),
5.407 (1.07), 5.459 (0.99), 7.901 (0.95), 7.919 (12.18), 8.663 (6.07).
Primer 339
(5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1943]
[1944] (5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (70,0 mg, 206 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (85,9 mg, 227 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (35,5 mg, 247 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 54,2 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,62 min; MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.33), 0.008 (11.11), 0.146 (1.21),
1.026 (10.32), 1.038 (10.57), 1.317 (1.39), 1.348 (1.69), 1.385 (1.39), 1.414 (0.78),
1.885 (1.39), 2.073 (3.68), 2.154 (2.84), 2.185 (2.23), 2.195 (3.26), 2.226 (3.62),
2.328 (2.29), 2.367 (1.39), 2.648 (2.23), 2.670 (2.66), 2.710 (1.51), 3.512 (1.21),
3.548 (1.39), 3.629 (1.03), 3.710 (1.33), 3.759 (1.57), 3.806 (1.27), 3.851 (0.91),
4.020 (1.03), 4.162 (1.33), 4.653 (1.69), 4.673 (2.17), 4.801 (16.00), 5.270 (1.03),
5.406 (1.09), 5.458 (0.97), 7.256 (2.35), 7.377 (2.96), 7.398 (4.35), 7.418 (2.11),
7.444 (3.50), 7.462 (3.50).
Primer 340
(5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-7-metil-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1945]
[1946] (5RS,7RS)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-7-metil-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (70,0 mg, 206 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (85,9 mg, 227 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (27,6 mg, 247 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 57,2 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.93), 1.017 (15.46), 1.033 (16.00),
1.340 (0.54), 1.370 (1.55), 1.400 (1.84), 1.420 (1.72), 1.451 (0.70), 1.876 (1.86),
2.072 (4.68), 2.119 (1.08), 2.152 (4.88), 2.182 (3.65), 2.192 (4.50), 2.223 (2.93),
2.327 (0.62), 2.366 (0.44), 2.630 (3.05), 2.636 (3.11), 2.670 (3.23), 2.709 (0.56),
3.878 (0.75), 3.906 (0.97), 3.936 (1.30), 3.965 (1.55), 3.997 (0.71), 4.026 (0.85),
4.136 (0.63), 4.149 (0.72), 4.165 (0.58), 4.185 (0.85), 4.201 (0.82), 4.233 (1.94),
4.251 (1.38), 4.262 (1.43), 4.291 (1.59), 4.319 (1.46), 4.385 (4.37), 4.400 (4.82),
4.413 (5.10), 4.428 (3.90), 4.448 (0.69), 4.480 (1.31), 4.496 (0.86), 4.533 (0.78),
4.549 (0.82), 4.573 (0.46), 4.644 (0.59), 4.661 (0.68), 4.686 (0.63), 4.698 (0.69),
4.713 (0.73), 4.738 (0.54), 4.806 (14.39), 5.377 (1.22), 5.519 (1.21), 7.264 (3.03),
7.375 (3.36), 7.398 (5.54), 7.420 (2.62), 7.452 (3.55), 7.470 (3.56).
Primer 341
(5RS,7RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-7-metil-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[1947]
[1948] (5RS,7RS)-7-metil-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (39,8 mg, 112 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (55,1 mg, 145 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (78 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (15,0 mg, 134 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,20 mg (16% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.80), -0.008 (6.70), 0.008 (6.25),
0.146 (0.88), 1.019 (15.47), 1.035 (16.00), 1.377 (1.52), 1.397 (1.79), 1.407 (1.83),
1.426 (1.71), 1.456 (0.72), 1.883 (1.79), 2.156 (4.65), 2.185 (3.31), 2.195 (4.50),
2.226 (2.93), 2.327 (1.30), 2.366 (0.99), 2.524 (3.89), 2.636 (3.24), 2.671 (3.92),
2.710 (1.14), 3.881 (0.80), 3.913 (0.95), 3.938 (1.26), 3.966 (1.49), 3.994 (0.72),
4.027 (0.84), 4.152 (0.80), 4.185 (0.91), 4.220 (1.22), 4.237 (1.75), 4.271 (1.60),
4.303 (1.41), 4.322 (1.22), 4.388 (4.84), 4.403 (5.60), 4.416 (5.52), 4.430 (4.27),
4.477 (0.99), 4.506 (0.88), 4.541 (0.80), 4.556 (0.80), 4.656 (0.72), 4.712 (0.76),
4.990 (13.22), 5.381 (1.26), 5.515 (1.26), 7.900 (1.98), 7.920 (11.85), 7.949 (1.49),
8.673 (7.35).
Primer 342
(5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1949]
[1950] (5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 72%, 138 µmol) ubačena je u THF (1,5 ml) i zatim su dodati HBTU (99,6 mg, 263 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (29,5 mg, 235 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 50,9 mg (>80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 462 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.83), -0.008 (7.76), 0.008 (7.06),
0.146 (0.83), 1.723 (3.81), 1.876 (0.90), 1.989 (1.39), 2.060 (2.08), 2.073 (16.00),
2.129 (1.11), 2.256 (1.04), 2.327 (2.15), 2.366 (1.59), 2.523 (7.83), 2.594 (2.35),
2.602 (2.63), 2.645 (1.25), 2.669 (2.29), 2.710 (1.59), 3.282 (5.13), 3.383 (0.97),
3.453 (0.69), 3.480 (0.90), 3.580 (0.69), 3.606 (2.98), 3.631 (2.15), 3.705 (1.87),
3.727 (1.87), 3.751 (1.59), 3.769 (1.25), 3.836 (2.56), 3.975 (0.83), 3.995 (1.45),
4.011 (2.63), 4.028 (4.29), 4.056 (3.39), 4.075 (2.08), 4.091 (1.04), 4.110 (0.62),
4.599 (1.32), 4.609 (1.66), 4.615 (1.66), 4.625 (1.32), 4.657 (1.66), 4.666 (1.87),
4.673 (2.01), 4.681 (1.45), 5.250 (1.25), 5.380 (1.52), 5.502 (0.97), 5.934 (0.48),
8.410 (5.96), 8.877 (5.96).
Primer 343
(5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1951]
[1952] (5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (65,0 mg, 166 µmol) dodata je u THF (2,5 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (82,0 mg, 216 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (28,7 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (82,0 mg, 216 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (28,7 mg, 200 µmol) i mešano je preko noći. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 33,3 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,59 min; MS (ESIpos): m/z = 480 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.01), 0.008 (7.50), 0.146 (0.97),
1.225 (1.31), 1.243 (7.46), 1.258 (8.43), 1.273 (4.85), 1.689 (5.30), 1.702 (7.20),
1.714 (6.68), 1.915 (2.16), 1.947 (3.24), 1.960 (3.10), 1.973 (4.07), 1.988 (3.13),
2.004 (2.39), 2.013 (2.65), 2.028 (2.87), 2.038 (2.91), 2.047 (2.28), 2.063 (2.20),
2.073 (16.00), 2.328 (1.75), 2.350 (1.19), 2.367 (3.32), 2.398 (2.76), 2.418 (2.65),
2.438 (1.79), 2.523 (11.00), 2.565 (5.41), 2.573 (4.03), 2.593 (6.97), 2.639 (2.39),
2.670 (1.94), 2.710 (1.57), 3.130 (0.71), 3.140 (0.75), 3.159 (0.67), 3.280 (8.47),
3.511 (5.45), 3.530 (9.44), 3.549 (5.00), 3.618 (1.42), 3.652 (3.24), 3.686 (3.54),
3.705 (2.01), 3.721 (1.79), 3.738 (3.88), 3.769 (4.92), 3.793 (3.69), 3.811 (1.83),
3.856 (1.83), 3.875 (3.58), 3.895 (2.05), 3.901 (2.46), 3.920 (1.12), 3.953 (1.04),
3.981 (3.66), 4.000 (3.28), 4.017 (6.94), 4.035 (11.93), 4.056 (11.75), 4.075 (5.93),
4.092 (2.80), 4.103 (1.75), 4.131 (2.24), 4.161 (2.09), 4.193 (0.90), 4.656 (2.87),
4.672 (4.03), 4.681 (2.87), 4.735 (3.06), 4.750 (3.99), 4.760 (2.91), 4.823 (0.71),
6.509 (1.19), 8.410 (11.82), 8.875 (12.16).
Primer 344
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1953]
[1954] (5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (73,1 mg, 240 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (118 mg, 311 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (41,3 mg, 287 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (90 mg, 240 µmol), (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (34,4 mg, 239 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (43 µl, 240 µmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,3 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.11), -0.008 (9.50), 0.008 (9.19),
0.146 (1.15), 1.664 (1.94), 1.674 (2.46), 1.687 (3.33), 1.700 (4.32), 1.712 (4.95),
1.723 (4.83), 1.737 (3.13), 1.900 (1.11), 1.940 (2.42), 1.965 (1.74), 1.983 (3.29),
2.008 (2.26), 2.016 (2.22), 2.023 (2.46), 2.031 (2.26), 2.040 (2.02), 2.050 (1.74),
2.057 (1.90), 2.073 (13.15), 2.327 (1.11), 2.366 (1.47), 2.523 (4.55), 2.526 (3.92),
2.557 (4.87), 2.571 (4.36), 2.580 (3.52), 2.605 (3.21), 2.616 (5.98), 2.627 (3.33),
2.647 (1.39), 2.659 (2.46), 2.670 (2.30), 2.710 (1.58), 2.895 (7.80), 2.913 (16.00),
2.931 (8.28), 3.367 (0.59), 3.443 (1.27), 3.453 (0.75), 3.477 (2.14), 3.487 (1.58),
3.498 (2.06), 3.506 (2.26), 3.515 (1.90), 3.524 (1.98), 3.533 (1.98), 3.549 (1.19),
3.558 (1.62), 3.568 (0.99), 3.603 (1.74), 3.617 (1.94), 3.636 (1.27), 3.650 (1.39),
3.659 (2.02), 3.671 (3.13), 3.681 (2.34), 3.691 (2.02), 3.704 (2.77), 3.715 (2.77),
3.732 (3.45), 3.749 (4.00), 3.766 (7.92), 3.784 (12.55), 3.801 (8.75), 3.807 (7.49),
3.817 (4.04), 3.826 (4.24), 3.833 (2.77), 3.841 (3.09), 3.851 (1.47), 3.859 (1.47),
3.880 (1.43), 3.913 (1.62), 3.927 (1.94), 3.942 (1.27), 3.962 (1.90), 3.976 (1.90),
3.990 (1.23), 4.005 (1.15), 4.103 (1.19), 4.118 (1.39), 4.131 (1.27), 4.145 (2.30),
4.160 (1.43), 4.173 (1.27), 4.188 (1.15), 4.706 (5.54), 4.717 (6.65), 4.721 (7.29),
4.731 (5.27), 5.254 (1.86), 5.266 (2.06), 5.276 (1.70), 5.287 (1.31), 5.300 (1.47),
5.314 (1.47), 5.323 (1.35), 5.340 (1.50), 5.358 (1.66), 5.370 (1.86), 5.388 (1.70),
5.397 (1.98), 5.407 (1.82), 5.419 (1.23), 5.429 (1.35), 5.443 (1.54), 5.451 (1.58),
5.462 (1.50), 7.060 (5.35), 7.064 (7.29), 7.082 (13.35), 7.086 (14.61), 7.104 (9.23),
7.109 (8.63), 7.198 (6.34), 7.212 (9.74), 7.221 (10.69), 7.229 (8.44), 7.243 (5.54).
Primer 345
(5S)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1955]
[1956] (5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (73,1 mg, 240 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (118 mg, 311 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (37,2 mg, 287 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 56,0 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.79), 0.146 (1.90), 1.709 (4.36),
1.721 (6.60), 1.735 (5.71), 1.950 (2.35), 1.961 (3.58), 1.974 (3.36), 1.997 (1.79),
2.012 (2.69), 2.032 (3.02), 2.046 (2.24), 2.073 (6.60), 2.327 (2.80), 2.366 (2.35),
2.523 (10.85), 2.564 (4.36), 2.584 (4.92), 2.600 (5.82), 2.613 (6.83), 2.627 (3.36),
2.642 (1.23), 2.656 (2.24), 2.670 (3.58), 2.710 (2.46), 2.900 (6.94), 2.918 (13.87),
2.937 (7.61), 3.788 (6.60), 3.803 (10.74), 3.808 (11.19), 3.822 (5.26), 4.352 (4.03),
4.499 (4.81), 4.513 (7.94), 4.526 (4.70), 4.662 (2.35), 4.694 (2.69), 4.770 (1.12),
4.799 (2.46), 4.830 (2.24), 7.062 (7.16), 7.084 (16.00), 7.106 (10.29), 7.207 (9.40),
7.221 (10.85), 7.228 (9.17), 7.242 (7.05).
Primer 346
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1957]
[1958] (5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (92,0 mg, 290 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (143 mg, 377 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 870 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (49,9 mg, 348 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,6 mg (čistoća 92%, 40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.58), 1.701 (2.94), 1.713 (4.02),
1.724 (3.77), 1.909 (0.73), 1.957 (1.87), 1.970 (1.77), 1.981 (2.06), 1.995 (2.06),
2.005 (1.63), 2.015 (1.54), 2.031 (1.60), 2.041 (1.55), 2.051 (1.14), 2.066 (1.03),
2.073 (1.41), 2.085 (0.51), 2.328 (0.87), 2.354 (0.71), 2.371 (1.17), 2.403 (1.47),
2.421 (1.42), 2.442 (1.09), 2.523 (4.27), 2.573 (3.78), 2.580 (3.40), 2.596 (2.90),
2.609 (2.10), 2.620 (3.47), 2.631 (1.84), 2.664 (1.65), 2.690 (0.57), 2.710 (0.63),
2.731 (0.98), 2.830 (5.18), 2.849 (10.41), 2.867 (5.46), 2.890 (1.30), 3.519 (15.11),
3.539 (11.03), 3.557 (6.77), 3.659 (1.93), 3.691 (2.71), 3.724 (5.71), 3.743 (6.41),
3.761 (4.83), 3.766 (6.69), 3.787 (4.86), 3.821 (1.36), 3.869 (0.93), 3.887 (1.96),
3.913 (1.36), 3.932 (0.62), 3.956 (0.62), 3.984 (1.22), 3.997 (0.65), 4.013 (0.85),
4.025 (1.11), 4.055 (0.62), 4.119 (0.74), 4.150 (1.12), 4.178 (1.12), 4.208 (0.51),
4.464 (0.46), 4.671 (1.50), 4.687 (2.17), 4.696 (1.57), 4.749 (1.55), 4.758 (1.90),
4.764 (2.10), 4.773 (1.54), 6.826 (13.56), 6.848 (16.00), 7.100 (14.23), 7.121 (12.19).
Primer 347
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1959]
[1960] (5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (92,0 mg, 290 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (143 mg, 377 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 870 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (38,8 mg, 348 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 58,3 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 375 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.49), 0.146 (0.54), 1.717 (7.02),
1.909 (1.85), 1.922 (2.69), 1.934 (2.88), 1.943 (2.71), 1.955 (2.23), 1.977 (2.25),
1.995 (3.16), 2.012 (2.77), 2.029 (1.85), 2.047 (0.94), 2.072 (7.93), 2.327 (0.82),
2.366 (0.75), 2.572 (5.35), 2.594 (3.84), 2.610 (5.84), 2.624 (3.07), 2.639 (1.24),
2.652 (2.00), 2.665 (1.61), 2.710 (0.97), 2.834 (5.71), 2.852 (11.15), 2.871 (6.06),
3.368 (1.09), 3.531 (6.66), 3.751 (6.68), 3.761 (8.12), 3.769 (6.74), 3.780 (4.30),
3.891 (1.38), 3.906 (1.68), 3.935 (1.59), 3.970 (1.85), 3.994 (1.27), 4.138 (0.90),
4.154 (1.01), 4.168 (0.80), 4.225 (2.17), 4.252 (2.10), 4.282 (1.85), 4.293 (1.55),
4.316 (1.82), 4.345 (1.31), 4.384 (0.88), 4.407 (1.31), 4.430 (1.05), 4.450 (6.06),
4.465 (8.68), 4.476 (6.14), 4.498 (1.18), 4.523 (0.71), 4.601 (0.80), 4.616 (0.94),
4.654 (0.90), 4.670 (0.94), 4.680 (0.88), 4.694 (0.69), 5.327 (1.14), 5.387 (1.14),
5.469 (1.18), 5.530 (1.16), 6.827 (13.64), 6.848 (16.00), 7.105 (10.12), 7.121 (8.80).
Primer 348
(5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1961]
[1962] (5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 172 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (84,8 mg, 224 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (90 µl, 520 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (23,0 mg, 206 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 12,1 mg (17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 406 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.72), -0.008 (6.41), 0.008 (5.61),
0.146 (0.68), 1.107 (0.87), 1.124 (1.74), 1.140 (4.78), 1.166 (16.00), 1.679 (2.92),
1.929 (1.71), 1.991 (1.40), 2.327 (1.21), 2.366 (0.99), 2.523 (5.99), 2.565 (3.94),
2.578 (2.01), 2.594 (0.83), 2.607 (1.33), 2.670 (1.36), 2.690 (0.49), 2.710 (0.99),
3.883 (0.57), 3.914 (1.06), 3.947 (1.18), 3.988 (2.24), 4.033 (3.45), 4.091 (2.73),
4.116 (2.58), 4.129 (1.52), 4.154 (1.90), 4.211 (1.06), 4.227 (1.48), 4.257 (1.21),
4.290 (0.95), 4.310 (0.91), 4.345 (0.49), 4.373 (0.68), 4.410 (0.49), 4.433 (0.68),
4.504 (3.68), 4.623 (0.57), 4.663 (0.53), 5.340 (0.68), 5.401 (0.64), 5.483 (0.61),
5.543 (0.61), 7.243 (5.95), 7.262 (6.60), 7.571 (2.43), 7.578 (2.50), 7.590 (3.30),
7.598 (3.15), 7.699 (1.63), 7.710 (1.78), 7.718 (2.84), 7.729 (2.65), 7.738 (1.33),
7.749 (1.10).
Primer 349
(5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1963]
[1964] (5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 172 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (84,8 mg, 224 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (90 µl, 520 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (29,6 mg, 206 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,6 mg (26% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.50), -0.008 (14.75), 0.008
(12.25), 0.146 (1.75), 1.110 (3.75), 1.128 (5.00), 1.148 (3.50), 1.168 (16.00), 1.699
(2.25), 1.961 (2.25), 2.327 (4.25), 2.366 (3.25), 2.407 (1.75), 2.523 (15.00), 2.563
(5.25), 2.575 (5.25), 2.617 (1.75), 2.670 (4.50), 2.710 (3.25), 3.533 (3.25), 3.544
(3.25), 3.653 (2.00), 3.687 (2.25), 3.729 (1.50), 3.760 (4.00), 3.787 (2.50), 3.899
(2.00), 3.923 (1.50), 3.941 (1.50), 3.965 (5.50), 4.002 (7.75), 4.130 (6.00), 4.163
(4.75), 4.724 (2.50), 4.796 (2.50), 7.242 (8.75), 7.262 (9.75), 7.569 (7.75), 7.589
(10.25), 7.701 (7.00), 7.721 (11.50), 7.740 (5.00).
Primer 350
(5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1965]
[1966] (5S)-2-{[1-(6-hlorpiridin-2-il)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 172 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (84,8 mg, 224 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (90 µl, 520 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (25,9 mg, 206 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 22,5 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 420 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.70), -0.008 (14.64), 0.008
(12.26), 0.146 (1.70), 1.061 (2.04), 1.094 (1.70), 1.108 (4.43), 1.128 (5.45), 1.147
(3.74), 1.167 (12.94), 1.699 (4.43), 1.869 (1.36), 1.997 (2.72), 2.102 (2.04), 2.133
(2.04), 2.261 (1.70), 2.327 (4.43), 2.366 (3.74), 2.395 (0.68), 2.523 (16.00), 2.575
(4.09), 2.620 (1.70), 2.670 (4.77), 2.710 (3.74), 3.233 (1.02), 3.260 (1.70), 3.383
(2.72), 3.453 (1.36), 3.480 (1.70), 3.617 (3.74), 3.642 (3.74), 3.669 (2.38), 3.683
(2.04), 3.703 (2.04), 3.722 (3.40), 3.736 (3.06), 3.764 (3.06), 3.840 (3.74), 3.942
(4.09), 3.958 (3.06), 3.979 (5.45), 3.996 (4.77), 4.122 (4.43), 4.144 (5.79), 4.159
(3.06), 4.182 (4.09), 4.639 (2.04), 4.655 (2.38), 4.665 (1.70), 4.697 (2.38), 4.712
(3.06), 4.722 (2.38), 5.255 (2.04), 5.384 (2.38), 5.506 (1.36), 7.242 (9.53), 7.261
(10.21), 7.344 (0.68), 7.568 (4.09), 7.587 (5.79), 7.602 (6.47), 7.699 (3.74), 7.705
(4.43), 7.719 (5.79), 7.724 (7.49), 7.738 (2.72), 7.744 (3.06).
Primer 351
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1967]
[1968] (5S)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 241 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (119 mg, 314 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (32,3 mg, 290 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,8 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 389 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.23), -0.008 (16.00), 0.008 (9.89),
0.146 (1.12), 0.767 (3.30), 0.800 (3.41), 0.825 (1.29), 0.995 (7.97), 1.692 (3.30),
1.931 (1.86), 2.327 (1.66), 2.366 (1.35), 2.524 (8.89), 2.571 (2.64), 2.615 (0.92),
2.670 (1.38), 2.710 (1.09), 3.698 (3.56), 3.735 (5.53), 3.830 (2.12), 3.850 (2.01),
3.865 (1.69), 3.886 (1.81), 3.955 (0.95), 4.182 (1.49), 4.212 (1.35), 4.441 (3.27),
4.618 (0.57), 5.310 (0.66), 5.455 (0.66), 7.015 (2.78), 7.035 (5.30), 7.057 (3.07),
7.229 (3.73), 7.243 (4.79), 7.260 (2.72).
Primer 352
(5S)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1969]
[1970] (5S)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 241 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (119 mg, 314 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (36,4 mg, 290 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,6 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 403 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.34), -0.008 (16.00), 0.008 (9.57),
0.146 (1.23), 0.723 (1.95), 0.750 (3.55), 0.778 (0.77), 0.811 (3.65), 0.835 (1.80),
0.983 (3.09), 0.998 (8.13), 1.710 (4.06), 1.838 (0.82), 1.873 (1.18), 1.997 (2.83),
2.008 (2.42), 2.019 (2.11), 2.033 (2.01), 2.048 (1.80), 2.073 (1.85), 2.125 (1.34),
2.249 (1.39), 2.327 (1.65), 2.366 (1.18), 2.519 (8.64), 2.524 (7.36), 2.586 (3.09),
2.628 (1.34), 2.669 (1.39), 2.710 (1.03), 3.379 (0.98), 3.389 (1.03), 3.450 (0.77),
3.476 (1.03), 3.486 (0.98), 3.563 (0.77), 3.598 (2.62), 3.616 (2.32), 3.633 (2.26),
3.649 (4.63), 3.659 (4.12), 3.685 (6.07), 3.695 (5.30), 3.732 (1.95), 3.753 (1.44),
3.782 (0.57), 3.818 (3.04), 3.859 (3.76), 3.880 (4.32), 3.895 (2.78), 3.916 (3.09),
4.586 (1.59), 4.595 (1.90), 4.602 (1.95), 4.610 (1.59), 4.644 (2.01), 4.654 (2.11),
4.659 (2.57), 4.668 (1.70), 5.247 (1.44), 5.368 (1.44), 5.491 (1.13), 7.015 (5.66),
7.037 (11.63), 7.058 (6.38), 7.221 (4.73), 7.228 (6.23), 7.234 (6.48), 7.242 (8.95),
7.250 (5.86), 7.257 (4.17), 7.264 (4.22).
Primer 353
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1971]
[1972] (5RS)-2-{[1-(4-fluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 241 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (119 mg, 314 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (41,6 mg, 290 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,1 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,61 min; MS (ESIpos): m/z = 421 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.60), -0.008 (5.39), 0.008 (4.70),
0.146 (0.62), 0.717 (1.43), 0.726 (2.10), 0.753 (4.13), 0.780 (1.04), 0.808 (4.45),
0.833 (2.33), 0.842 (1.75), 0.957 (1.50), 0.966 (1.34), 0.980 (3.94), 0.996 (11.00),
1.013 (3.41), 1.024 (1.20), 1.037 (1.04), 1.649 (1.59), 1.662 (2.05), 1.695 (3.09),
1.705 (3.02), 1.949 (2.90), 1.959 (2.95), 1.974 (3.18), 1.986 (3.07), 2.012 (1.64),
2.021 (1.24), 2.037 (1.08), 2.072 (3.37), 2.327 (0.65), 2.345 (0.81), 2.366 (1.89),
2.385 (1.52), 2.394 (1.68), 2.414 (1.64), 2.434 (1.20), 2.455 (0.71), 2.469 (1.57),
2.568 (3.07), 2.582 (5.12), 2.594 (2.49), 2.612 (1.11), 2.624 (1.78), 2.636 (0.88),
2.670 (0.69), 2.710 (0.71), 3.507 (3.46), 3.526 (5.76), 3.545 (2.88), 3.615 (0.55),
3.648 (2.14), 3.662 (5.37), 3.682 (2.65), 3.699 (7.52), 3.716 (1.41), 3.724 (1.11),
3.738 (3.00), 3.750 (1.54), 3.769 (4.10), 3.787 (1.13), 3.803 (0.55), 3.845 (1.13),
3.870 (8.00), 3.883 (1.54), 3.890 (1.84), 3.906 (5.42), 3.926 (0.76), 3.954 (1.52),
3.968 (0.71), 3.983 (1.06), 3.996 (1.34), 4.024 (0.83), 4.096 (0.85), 4.127 (1.38),
4.154 (1.34), 4.185 (0.55), 4.653 (1.87), 4.667 (2.67), 4.677 (1.84), 4.726 (1.91),
4.735 (2.24), 4.741 (2.58), 4.750 (1.91), 7.014 (7.26), 7.019 (2.61), 7.036 (16.00),
7.058 (9.18), 7.066 (1.08), 7.218 (1.11), 7.226 (9.22), 7.231 (4.54), 7.239 (10.44),
7.247 (8.88), 7.256 (3.53), 7.261 (7.56).
Primer 354
(5S)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1974] (5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 137 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (67,8 mg, 179 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (72 µl, 410 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (18,1 mg, 165 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,1 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.07), 0.711 (0.96), 0.777 (1.56),
0.802 (0.80), 0.930 (0.49), 0.944 (0.73), 0.969 (2.84), 0.984 (1.24), 0.994 (0.48),
1.681 (1.53), 1.691 (1.56), 1.878 (0.47), 1.903 (1.19), 1.914 (1.15), 1.944 (0.79),
1.954 (0.79), 2.236 (16.00), 2.451 (0.40), 2.565 (1.96), 2.577 (1.01), 2.594 (0.50),
2.607 (0.81), 3.572 (0.54), 3.582 (0.58), 3.606 (1.21), 3.618 (0.65), 3.631 (0.67),
3.643 (0.72), 3.654 (1.10), 3.692 (1.94), 3.730 (1.42), 3.879 (1.86), 3.900 (1.83),
3.915 (1.14), 3.936 (1.03), 3.956 (0.55), 3.968 (0.60), 3.979 (0.65), 3.992 (1.11),
4.009 (0.68), 4.036 (0.52), 4.076 (0.51), 4.092 (0.65), 4.116 (0.47), 4.242 (0.53),
4.261 (0.84), 4.281 (0.54), 4.395 (0.64), 4.410 (1.18), 4.418 (1.24), 4.430 (1.31),
4.440 (1.31), 4.456 (1.31), 4.476 (1.35), 5.779 (1.94), 5.793 (1.32), 7.026 (3.34),
7.045 (5.44), 7.103 (3.59), 7.110 (3.97), 7.123 (2.43), 7.130 (2.29).
Primer 355
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1975]
[1976] (5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 137 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (67,8 mg, 179 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (72 µl, 410 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (1:1) (18,4 mg, 165 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 17,3 mg (33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,57 min; MS (ESIpos): m/z = 385 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.15), 0.008 (1.85), 0.734 (1.36),
0.773 (1.76), 0.798 (0.79), 0.926 (0.52), 0.935 (0.45), 0.966 (3.73), 0.982 (1.21),
0.993 (0.45), 1.690 (1.97), 1.931 (1.03), 1.967 (0.82), 1.982 (0.70), 2.002 (0.48),
2.234 (16.00), 2.327 (0.70), 2.366 (0.52), 2.523 (3.12), 2.570 (1.58), 2.614 (0.58),
2.669 (0.76), 2.709 (0.55), 3.693 (1.12), 3.735 (1.61), 3.874 (2.30), 3.911 (1.61),
3.957 (0.58), 4.187 (0.67), 4.213 (0.70), 4.243 (0.52), 4.255 (0.55), 4.282 (0.67),
4.429 (1.52), 4.443 (2.30), 4.455 (1.55), 7.025 (2.88), 7.044 (4.61), 7.109 (3.64),
7.124 (2.42).
Primer 356
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1977]
[1978] (5S)-3-okso-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (57,4 mg, 151 µmol) ubačena je u THF (1,4 ml) i zatim su dodati HBTU (74,2 mg, 196 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (22,7 mg, 181 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,5 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,94 min; MS (ESIpos): m/z = 453 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.70), -0.008 (16.00), 0.146 (1.70),
0.858 (2.30), 0.939 (1.53), 1.112 (4.68), 1.709 (1.79), 1.871 (0.51), 1.999 (1.28),
2.073 (1.45), 2.251 (0.60), 2.327 (2.64), 2.366 (2.21), 2.589 (1.45), 2.669 (2.81),
2.710 (2.30), 3.491 (0.51), 3.592 (1.45), 3.615 (1.19), 3.688 (0.94), 3.707 (1.02),
3.732 (0.85), 3.763 (1.45), 3.799 (2.21), 3.807 (2.04), 3.920 (1.62), 3.935 (1.87),
3.957 (1.11), 3.971 (1.19), 4.607 (0.77), 4.665 (1.11), 5.247 (0.68), 5.380 (0.68),
5.492 (0.51), 7.430 (2.81), 7.449 (3.66), 7.571 (4.77), 7.592 (3.66).
Primer 357
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1979]
[1980] (5S)-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (93,2 mg, čistoća 50%, 136 µmol) ubačena je u THF (1,2 ml) i zatim su dodati HBTU (134 mg, 353 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 810 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (18,2 mg, 163 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,1 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.69), -0.008 (6.04), 0.008 (5.43),
0.147 (0.65), 0.705 (0.82), 0.742 (1.16), 0.938 (2.29), 1.696 (1.21), 1.934 (0.65),
2.072 (0.73), 2.328 (1.55), 2.366 (0.99), 2.523 (4.36), 2.670 (1.38), 2.710 (0.99),
3.674 (0.60), 3.700 (16.00), 3.834 (1.29), 3.869 (1.08), 4.281 (0.47), 4.426 (0.95),
4.440 (1.51), 4.451 (0.99), 6.775 (2.20), 6.796 (2.46), 7.131 (1.73), 7.146 (1.60).
Primer 358
(5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1982] (5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (78,0 mg, 223 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (110 mg, 290 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (28,0 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,3 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,52 min; MS (ESIpos): m/z = 421 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.76), -0.008 (16.00), 0.008
(12.28), 0.146 (1.76), 0.732 (2.71), 0.765 (2.65), 1.001 (5.42), 1.690 (2.08), 1.995
(1.26), 2.073 (1.39), 2.327 (2.65), 2.366 (1.45), 2.669 (2.83), 2.710 (1.76), 3.606
(2.20), 3.632 (2.65), 3.700 (1.76), 3.805 (3.15), 3.823 (1.95), 3.859 (1.45), 4.626
(1.26), 6.910 (2.08), 7.112 (1.76), 7.134 (1.83).
Primer 359
(5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1983]
[1984] (5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (78,0 mg, čistoća 100%, 223 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (110 mg, 290 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (32,1 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,2 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,66 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.72), -0.008 (16.00), 0.008
(12.30), 0.146 (1.63), 0.712 (1.03), 0.735 (3.44), 0.764 (3.78), 0.788 (1.12), 1.001
(7.83), 1.679 (1.81), 1.969 (1.63), 2.073 (8.09), 2.327 (2.41), 2.366 (2.67), 2.431
(1.20), 2.523 (9.29), 2.591 (1.20), 2.670 (2.49), 2.710 (2.24), 3.493 (1.63), 3.512
(3.10), 3.530 (1.55), 3.604 (1.89), 3.613 (1.72), 3.640 (2.92), 3.649 (2.58), 3.670
(1.20), 3.719 (1.38), 3.731 (1.03), 3.752 (1.46), 3.808 (2.41), 3.819 (2.32), 3.844
(2.15), 3.855 (2.15), 3.946 (0.77), 3.986 (0.69), 4.106 (0.69), 4.138 (0.60), 4.634
(1.29), 4.707 (1.29), 6.889 (1.03), 6.910 (2.24), 6.924 (1.12), 7.085 (1.20), 7.091
(1.20), 7.112 (1.89), 7.134 (1.81), 7.150 (2.06), 7.171 (1.98), 7.189 (0.77).
Primer 360
(5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1985]
[1986] (5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (99,9 mg, čistoća 91%, 254 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (125 mg, 330 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 760 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (38,2 mg, 304 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,2 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.11), 0.008 (1.84), 1.352 (7.67),
1.370 (16.00), 1.387 (7.75), 1.716 (2.42), 1.729 (2.81), 1.739 (2.10), 1.863 (0.55),
1.874 (0.50), 1.897 (0.67), 1.968 (0.55), 2.002 (0.92), 2.011 (1.11), 2.038 (0.79),
2.054 (1.06), 2.064 (1.33), 2.073 (5.60), 2.084 (1.60), 2.099 (1.51), 2.134 (1.15),
2.170 (0.42), 2.218 (0.70), 2.239 (0.78), 2.267 (0.94), 2.327 (0.51), 2.366 (0.50),
2.565 (1.79), 2.581 (1.33), 2.608 (2.16), 2.650 (0.82), 2.664 (0.58), 2.669 (0.55),
2.710 (0.51), 3.269 (0.51), 3.287 (0.87), 3.343 (0.65), 3.356 (0.58), 3.365 (0.60),
3.392 (0.70), 3.401 (0.73), 3.454 (0.51), 3.463 (0.55), 3.490 (0.74), 3.498 (0.72),
3.623 (1.74), 3.635 (1.32), 3.652 (1.93), 3.662 (1.55), 3.677 (1.11), 3.685 (1.06),
3.721 (1.60), 3.744 (1.68), 3.768 (1.41), 3.776 (1.09), 3.785 (1.18), 3.854 (2.16),
4.186 (2.45), 4.204 (7.35), 4.222 (7.28), 4.240 (2.37), 4.665 (1.06), 4.674 (1.28),
4.681 (1.40), 4.690 (1.09), 4.723 (1.42), 4.732 (1.58), 4.739 (1.87), 4.747 (2.37),
4.787 (10.29), 4.792 (7.03), 4.796 (7.44), 4.835 (0.85), 5.257 (1.08), 5.389 (1.47),
5.511 (0.79), 6.626 (7.19).
Primer 361
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1987]
[1988] (5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (99,9 mg, čistoća 91%, 254 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (125 mg, 330 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 760 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (43,7 mg, 304 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,8 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 449 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (3.10), 1.244 (0.66), 1.259 (0.70),
1.274 (0.45), 1.351 (7.19), 1.369 (14.93), 1.387 (7.30), 1.669 (1.28), 1.705 (1.30),
1.717 (1.51), 1.726 (1.67), 1.921 (0.54), 1.956 (1.24), 2.002 (1.57), 2.026 (0.97),
2.036 (1.10), 2.044 (1.18), 2.051 (1.10), 2.060 (0.95), 2.071 (0.85), 2.079 (0.97),
2.086 (0.81), 2.327 (0.64), 2.366 (0.85), 2.524 (2.40), 2.566 (2.56), 2.576 (1.78),
2.591 (2.40), 2.603 (3.14), 2.615 (1.76), 2.634 (0.68), 2.645 (1.07), 2.670 (0.79),
2.710 (0.91), 3.484 (2.25), 3.505 (1.69), 3.515 (1.65), 3.524 (1.36), 3.533 (1.30),
3.557 (0.83), 3.566 (1.01), 3.610 (0.97), 3.623 (1.05), 3.643 (0.70), 3.656 (0.76),
3.666 (0.99), 3.679 (1.80), 3.690 (1.16), 3.699 (1.10), 3.712 (1.51), 3.724 (1.36),
3.743 (1.07), 3.755 (1.10), 3.775 (0.89), 3.789 (0.60), 3.865 (0.79), 3.902 (0.60),
3.928 (0.79), 3.941 (0.89), 3.956 (0.58), 3.977 (0.91), 3.991 (0.91), 4.005 (0.62),
4.020 (0.52), 4.128 (0.54), 4.143 (0.62), 4.156 (0.68), 4.169 (1.07), 4.185 (2.79),
4.204 (7.26), 4.222 (7.15), 4.240 (2.40), 4.751 (1.01), 4.767 (2.34), 4.791 (16.00),
4.798 (7.81), 4.838 (0.79), 5.254 (0.87), 5.265 (0.87), 5.274 (1.01), 5.284 (0.97),
5.296 (0.64), 5.311 (0.60), 5.329 (0.74), 5.337 (0.74), 5.351 (0.77), 5.364 (0.74),
5.374 (1.01), 5.387 (1.12), 5.398 (0.87), 5.406 (0.89), 5.427 (0.60), 5.440 (0.62),
5.458 (0.74), 5.472 (0.74), 5.480 (0.77), 5.494 (0.60), 6.619 (5.44), 6.624 (6.20).
Primer 362
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1989]
[1990] (5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (99,9 mg, čistoća 91%, 254 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (125 mg, 330 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 760 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (43,7 mg, 304 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,8 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 449 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.74), 0.008 (1.80), 1.350 (7.76),
1.368 (16.00), 1.386 (7.57), 1.685 (0.98), 1.701 (1.16), 1.714 (1.30), 1.722 (1.30),
1.971 (1.06), 1.984 (1.07), 1.995 (1.23), 2.020 (0.91), 2.030 (0.86), 2.039 (0.91),
2.046 (0.91), 2.056 (0.86), 2.066 (0.68), 2.074 (0.66), 2.082 (0.58), 2.327 (0.54),
2.366 (0.66), 2.379 (0.73), 2.408 (0.88), 2.429 (0.89), 2.563 (2.10), 2.572 (2.36),
2.587 (2.57), 2.604 (2.36), 2.615 (1.11), 2.646 (0.69), 2.670 (0.52), 2.710 (0.45),
3.368 (1.56), 3.527 (1.26), 3.546 (1.89), 3.562 (0.89), 3.568 (0.88), 3.666 (0.91),
3.700 (1.05), 3.731 (0.76), 3.762 (1.37), 3.782 (0.84), 3.793 (1.22), 3.808 (1.07),
3.826 (0.73), 3.889 (0.49), 3.907 (1.08), 3.926 (0.62), 3.934 (0.74), 3.992 (0.69),
4.021 (0.49), 4.034 (0.60), 4.141 (0.43), 4.186 (2.33), 4.204 (6.79), 4.222 (6.20),
4.240 (1.95), 4.731 (0.93), 4.746 (1.32), 4.791 (6.98), 4.797 (8.50), 4.815 (1.25),
4.820 (1.29), 4.830 (0.96), 4.836 (0.88), 6.622 (6.40).
Primer 363
(5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1991]
[1992] (5S)-2-{[1-etil-3-(trifluormetil)-1H-pirazol-5-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (99,9 mg, čistoća 91%, 254 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (125 mg, 330 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 760 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (33,9 mg, 304 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 50,6 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.83), -0.008 (6.74), 0.008 (7.66),
0.146 (0.87), 1.349 (7.70), 1.366 (16.00), 1.384 (8.39), 1.708 (3.48), 1.948 (1.60),
2.022 (1.47), 2.072 (0.69), 2.327 (1.24), 2.366 (1.70), 2.522 (4.08), 2.526 (3.26),
2.580 (3.62), 2.594 (4.58), 2.607 (2.34), 2.622 (1.01), 2.637 (1.51), 2.650 (0.73),
2.665 (1.28), 2.670 (1.60), 2.710 (1.93), 3.922 (1.05), 3.951 (0.96), 3.985 (1.15),
4.008 (0.69), 4.155 (0.64), 4.185 (2.89), 4.203 (7.70), 4.220 (7.89), 4.239 (3.21),
4.257 (1.47), 4.281 (1.19), 4.311 (0.92), 4.346 (0.73), 4.391 (0.73), 4.429 (0.50),
4.455 (0.69), 4.517 (2.70), 4.529 (4.17), 4.541 (2.57), 4.568 (0.60), 4.624 (0.50),
4.636 (0.60), 4.673 (0.55), 4.691 (0.60), 4.715 (0.50), 4.795 (15.08), 5.351 (0.73),
5.403 (0.69), 5.493 (0.69), 5.546 (0.64), 6.632 (7.61).
Primer 364
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1993]
[1994] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 144 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (70,8 mg, 187 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (75 µl, 430 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (24,7 mg, 172 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj
temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 12,0 mg (19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.35), -0.008 (11.66), 0.008
(10.84), 0.146 (1.41), 1.236 (0.59), 1.684 (2.05), 1.733 (2.64), 1.986 (2.23), 2.001
(2.23), 2.012 (2.58), 2.035 (1.99), 2.045 (1.82), 2.054 (1.93), 2.061 (1.93), 2.073
(3.69), 2.081 (1.41), 2.089 (1.41), 2.097 (1.29), 2.327 (1.23), 2.366 (1.99), 2.381
(1.47), 2.410 (1.76), 2.430 (1.64), 2.451 (1.11), 2.573 (6.33), 2.583 (5.16), 2.598
(5.74), 2.612 (5.63), 2.625 (2.99), 2.642 (1.35), 2.654 (1.88), 2.669 (2.17), 2.710
(1.88), 3.538 (2.70), 3.550 (3.69), 3.558 (3.93), 3.568 (2.29), 3.577 (2.17), 3.637
(0.76), 3.670 (2.34), 3.704 (2.75), 3.741 (1.93), 3.774 (3.22), 3.789 (1.99), 3.797
(1.82), 3.807 (3.46), 3.814 (3.05), 3.833 (1.35), 3.895 (1.29), 3.914 (2.64), 3.932
(1.52), 3.940 (1.93), 3.958 (0.94), 3.971 (0.82), 4.000 (1.64), 4.013 (0.94), 4.028
(1.17), 4.042 (1.58), 4.070 (0.88), 4.151 (1.00), 4.182 (1.52), 4.208 (1.47), 4.238
(0.70), 4.758 (2.11), 4.772 (2.93), 4.782 (2.17), 4.831 (2.23), 4.846 (2.87), 4.856
(2.17), 4.957 (2.23), 4.997 (14.01), 5.011 (16.00), 5.051 (2.70), 7.889 (14.07).
Primer 365
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1995]
[1996] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 287 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (142 mg, 373 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 860 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (43,3 mg, 345 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 28,0 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 420 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.75), -0.008 (6.39), 0.008 (6.48),
0.146 (0.77), 1.717 (2.91), 1.727 (4.25), 1.740 (5.22), 1.880 (0.95), 1.890 (0.97),
1.913 (1.23), 1.968 (0.71), 1.994 (1.54), 2.003 (1.43), 2.029 (2.36), 2.086 (3.06),
2.105 (3.66), 2.122 (2.23), 2.137 (2.42), 2.172 (0.75), 2.220 (1.37), 2.240 (1.39),
2.270 (1.85), 2.327 (0.93), 2.366 (0.84), 2.525 (2.78), 2.567 (2.80), 2.577 (3.33),
2.593 (2.73), 2.616 (4.25), 2.659 (1.70), 2.669 (1.48), 2.710 (0.86), 3.274 (1.26),
3.348 (1.26), 3.362 (1.15), 3.370 (1.19), 3.397 (1.34), 3.406 (1.34), 3.459 (0.97),
3.468 (1.04), 3.495 (1.39), 3.504 (1.34), 3.614 (0.90), 3.638 (3.94), 3.657 (4.08),
3.665 (2.84), 3.683 (2.51), 3.698 (1.81), 3.729 (2.27), 3.749 (3.24), 3.774 (2.60),
3.793 (2.12), 3.825 (0.51), 3.862 (4.19), 4.691 (1.98), 4.700 (2.45), 4.707 (2.60),
4.716 (2.03), 4.748 (2.58), 4.757 (3.02), 4.763 (3.37), 4.772 (2.45), 4.953 (2.95),
4.993 (16.00), 5.011 (10.53), 5.050 (1.98), 5.258 (2.01), 5.384 (2.73), 5.390 (2.80),
5.517 (1.48), 5.944 (0.64), 7.887 (12.65).
Primer 366
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[1997]
[1998] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 287 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (142 mg, 373 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 860 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (49,5 mg, 345 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,0 mg (20% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.19), -0.008 (10.41), 0.008 (9.40),
0.146 (1.23), 1.673 (1.94), 1.739 (2.42), 1.972 (1.83), 2.017 (2.39), 2.041 (1.53),
2.051 (1.72), 2.058 (1.90), 2.066 (1.79), 2.086 (1.34), 2.094 (1.49), 2.102 (1.27),
2.327 (1.31), 2.366 (1.34), 2.523 (4.21), 2.566 (3.10), 2.577 (3.84), 2.600 (3.92),
2.612 (5.22), 2.624 (3.02), 2.642 (1.08), 2.654 (1.75), 2.669 (1.94), 2.710 (1.49),
3.457 (1.01), 3.482 (1.16), 3.490 (1.94), 3.501 (1.42), 3.512 (1.49), 3.522 (1.53),
3.535 (1.75), 3.545 (1.94), 3.554 (1.12), 3.577 (1.23), 3.616 (1.31), 3.630 (1.49),
3.650 (0.86), 3.663 (1.08), 3.672 (1.38), 3.687 (2.35), 3.702 (2.01), 3.720 (2.09),
3.735 (2.05), 3.752 (1.60), 3.765 (1.75), 3.785 (1.34), 3.799 (0.82), 3.873 (1.27),
3.909 (0.97), 3.932 (1.31), 3.946 (1.45), 3.961 (0.86), 3.981 (1.31), 3.995 (1.34),
4.010 (0.86), 4.024 (0.75), 4.135 (0.90), 4.150 (0.97), 4.164 (0.97), 4.178 (1.57),
4.191 (1.12), 4.204 (1.01), 4.220 (0.90), 4.807 (5.48), 4.957 (2.50), 4.997 (16.00),
5.008 (8.80), 5.013 (9.10), 5.054 (1.60), 5.255 (1.31), 5.266 (1.34), 5.277 (1.57),
5.286 (1.27), 5.297 (1.01), 5.331 (1.16), 5.338 (1.08), 5.352 (1.27), 5.366 (1.08),
5.377 (1.60), 5.389 (1.72), 5.408 (1.49), 5.429 (0.97), 5.474 (1.16), 5.482 (1.23),
5.496 (0.97), 7.880 (8.13), 7.889 (9.14).
Primer 367
(2S)-1-{[(5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-karbonitril
[1999]
[2000] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 144 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (70,8 mg, 187 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (75 µl, 430 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril hidrohlorid (22,8 mg, 172 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 20,0 mg (33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 427 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.78), -0.008 (6.45), 0.008 (6.32),
0.146 (0.70), 1.245 (0.52), 1.260 (0.70), 1.396 (0.83), 1.665 (1.66), 1.791 (2.18),
1.805 (1.66), 2.048 (6.84), 2.061 (8.33), 2.080 (8.28), 2.096 (4.45), 2.107 (3.27),
2.117 (3.57), 2.138 (3.05), 2.152 (4.23), 2.163 (3.40), 2.178 (1.44), 2.187 (1.92),
2.207 (4.10), 2.219 (1.40), 2.226 (3.88), 2.238 (2.44), 2.246 (1.35), 2.258 (1.96),
2.278 (0.78), 2.328 (1.57), 2.366 (1.61), 2.523 (3.97), 2.574 (3.62), 2.589 (3.10),
2.600 (3.36), 2.614 (2.57), 2.632 (2.40), 2.644 (4.40), 2.657 (2.66), 2.674 (2.27),
2.686 (1.79), 2.710 (1.79), 3.512 (0.39), 3.679 (6.67), 3.696 (13.47), 3.712 (6.63),
4.788 (4.80), 4.799 (5.06), 4.809 (5.84), 4.819 (6.37), 4.824 (5.01), 4.830 (5.32),
4.839 (3.71), 4.964 (1.40), 5.004 (16.00), 5.010 (15.83), 5.051 (1.35), 7.880 (13.34).
Primer 368
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2001]
[2002] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,9 mg, 187 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (92,0 mg, 243 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (98 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (32,2 mg, 224 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,5 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.90), -0.008 (8.08), 0.008 (7.97),
0.146 (0.87), 1.695 (1.03), 1.753 (1.26), 1.916 (0.49), 1.981 (0.72), 2.037 (1.38),
2.328 (1.10), 2.366 (1.33), 2.384 (0.82), 2.411 (1.00), 2.431 (0.97), 2.570 (2.74),
2.584 (2.10), 2.594 (2.21), 2.609 (2.18), 2.628 (2.23), 2.669 (1.92), 2.710 (1.00),
3.546 (1.15), 3.557 (1.62), 3.566 (1.72), 3.576 (1.05), 3.585 (0.95), 3.678 (1.08),
3.712 (1.28), 3.749 (0.85), 3.783 (1.44), 3.795 (0.95), 3.821 (1.56), 3.840 (0.56),
3.899 (0.54), 3.918 (1.23), 3.944 (0.87), 3.977 (0.41), 4.006 (0.79), 4.049 (0.69),
4.076 (0.41), 4.156 (0.49), 4.188 (0.74), 4.213 (0.67), 4.788 (1.00), 4.803 (1.41),
4.812 (0.97), 4.859 (0.97), 4.874 (1.41), 4.884 (0.95), 5.012 (16.00), 7.404 (3.54),
7.424 (3.67), 7.829 (4.00), 7.848 (4.72), 8.081 (2.38), 8.101 (4.18), 8.121 (2.05).
Primer 369
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2003]
[2004] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,9 mg, 187 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (92,0 mg, 243 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (98 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (25,0 mg, 224 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati N,N-diizopropiletilamin (30 µl, 171 µmol) i 3-fluorazetidin hidrohlorid (10,0 mg, 90 µmol) i mešano je 2 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,0 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: -0.149 (0.59), -0.008 (5.08), 0.146
(0.62), 1.689 (1.49), 1.699 (2.17), 1.723 (3.40), 1.733 (3.51), 1.989 (2.24), 2.001
(2.24), 2.050 (1.98), 2.073 (2.86), 2.327 (0.73), 2.366 (0.61), 2.559 (2.89), 2.577
(2.84), 2.603 (3.43), 2.617 (5.09), 2.630 (2.65), 2.647 (0.99), 2.660 (1.92), 2.670
(1.45), 2.710 (0.69), 3.910 (0.73), 3.936 (1.52), 3.965 (1.55), 3.997 (1.55), 4.026
(0.88), 4.166 (0.65), 4.180 (0.75), 4.194 (0.62), 4.231 (1.23), 4.245 (1.23), 4.281
(1.49), 4.312 (1.53), 4.344 (0.86), 4.371 (1.52), 4.396 (1.02), 4.431 (0.73), 4.460
(0.93), 4.516 (0.70), 4.530 (0.83), 4.572 (4.49), 4.586 (6.34), 4.598 (4.31), 4.637
(0.69), 4.654 (0.77), 4.688 (0.73), 4.705 (0.73), 4.730 (0.59), 5.015 (16.00), 5.354
(0.97), 5.405 (0.94), 5.497 (0.96), 5.548 (0.96), 6.957 (0.24), 7.086 (0.29), 7.213
(0.26), 7.419 (6.28), 7.439 (6.67), 7.827 (6.31), 7.847 (7.44), 8.079 (3.43), 8.099
(6.16), 8.118 (2.92), 9.029 (0.16), 9.156 (0.19).
Primer 370
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2005]
[2006] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,9 mg, 187 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (92,0 mg, 243 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (98 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (28,1 mg, 224 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati N,N-diizopropiletilamin (30 µl, 171 µmol) i 3-fluorazetidin hidrohlorid (10,0 mg, 90 µmol) i mešano je 2 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,8 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.00), -0.008 (8.75), 0.008 (7.10),
0.146 (0.96), 1.751 (2.34), 1.901 (0.50), 1.941 (0.73), 2.006 (0.58), 2.063 (1.27),
2.073 (2.26), 2.086 (1.61), 2.106 (1.76), 2.121 (1.61), 2.271 (0.96), 2.327 (1.27),
2.366 (1.50), 2.524 (2.92), 2.562 (1.84), 2.578 (1.46), 2.588 (1.61), 2.603 (1.34),
2.630 (2.30), 2.670 (1.88), 2.710 (1.42), 3.356 (0.54), 3.377 (0.58), 3.404 (0.61),
3.413 (0.65), 3.476 (0.50), 3.502 (0.73), 3.511 (0.65), 3.616 (0.50), 3.641 (2.34),
3.659 (1.76), 3.684 (1.34), 3.705 (0.88), 3.739 (1.34), 3.758 (1.53), 3.782 (1.34),
3.801 (1.04), 3.867 (2.07), 4.715 (1.04), 4.725 (1.30), 4.732 (1.34), 4.740 (1.00),
4.773 (1.34), 4.782 (1.46), 4.788 (1.73), 4.796 (1.27), 5.008 (16.00), 5.261 (1.00),
5.384 (1.34), 5.392 (1.34), 5.514 (0.77), 7.405 (3.84), 7.425 (4.14), 7.828 (4.37),
7.848 (5.06), 8.081 (2.76), 8.101 (4.95), 8.121 (2.34).
Primer 371
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2007]
[2008] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,9 mg, 187 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (92,0 mg, 243 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (98 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (32,2 mg, 224 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,4 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.151 (0.30), -0.010 (2.83), 0.006 (2.53),
0.144 (0.31), 1.680 (0.68), 1.757 (16.00), 1.994 (0.65), 2.041 (1.03), 2.072 (3.14),
2.084 (0.76), 2.327 (0.35), 2.365 (0.46), 2.560 (0.94), 2.575 (0.99), 2.586 (1.23),
2.597 (0.93), 2.612 (1.29), 2.624 (1.74), 2.637 (1.02), 2.668 (0.83), 2.709 (0.47),
3.461 (0.31), 3.496 (0.66), 3.518 (0.57), 3.527 (0.57), 3.551 (0.57), 3.581 (0.40),
3.624 (0.44), 3.638 (0.51), 3.679 (0.48), 3.694 (0.89), 3.709 (0.66), 3.727 (0.71),
3.741 (0.69), 3.760 (0.58), 3.772 (0.56), 3.876 (0.42), 3.938 (0.41), 3.952 (0.47),
3.988 (0.46), 4.002 (0.46), 4.180 (0.57), 4.207 (0.37), 4.611 (2.51), 4.833 (2.42),
5.010 (9.06), 5.276 (0.52), 5.409 (0.53), 5.457 (0.44), 7.401 (2.26), 7.421 (2.43),
7.827 (2.30), 7.846 (2.69), 8.081 (1.33), 8.100 (2.38), 8.120 (1.12).
Primer 372
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2009]
[2010] (5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 186 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,6 mg, 242 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (97 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (32,0 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,4 mg (62% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,51 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.41), -0.008 (3.04), 0.008 (3.60),
1.175 (0.45), 1.669 (1.31), 1.737 (1.59), 1.988 (1.92), 2.028 (1.81), 2.073 (10.98),
2.327 (1.40), 2.366 (0.71), 2.569 (2.50), 2.579 (1.72), 2.593 (2.39), 2.607 (3.34),
2.619 (1.90), 2.649 (1.21), 2.670 (1.51), 2.690 (1.53), 2.710 (0.73), 3.490 (1.03),
3.512 (1.31), 3.554 (0.93), 3.616 (0.86), 3.629 (0.95), 3.672 (1.55), 3.685 (1.90),
3.705 (1.36), 3.719 (1.42), 3.750 (1.21), 3.771 (0.95), 3.869 (0.88), 3.930 (0.90),
3.943 (0.99), 3.979 (0.97), 3.993 (0.84), 4.008 (0.60), 4.021 (0.67), 4.147 (0.67),
4.173 (1.01), 4.187 (0.75), 4.200 (0.62), 4.215 (0.65), 4.810 (2.63), 4.825 (3.36),
4.835 (2.28), 5.040 (16.00), 5.274 (1.01), 5.351 (0.82), 5.388 (1.03), 5.455 (0.82),
7.718 (9.09), 8.901 (8.66).
Primer 373
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2012] (5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 186 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,6 mg, 242 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (97 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (24,4 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,0 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.32), -0.008 (11.98), 0.008
(10.40), 0.146 (1.38), 1.725 (2.70), 1.919 (1.25), 1.953 (2.77), 2.005 (1.78), 2.015
(1.98), 2.327 (2.50), 2.366 (2.44), 2.523 (9.02), 2.569 (2.30), 2.581 (2.57), 2.594
(4.48), 2.606 (2.44), 2.624 (1.12), 2.636 (1.65), 2.669 (2.63), 2.710 (2.57), 3.606
(1.65), 3.627 (2.90), 3.652 (1.65), 3.663 (1.51), 3.934 (1.65), 3.947 (1.98), 4.021
(2.44), 4.042 (3.29), 4.066 (1.45), 4.091 (1.25), 4.107 (1.58), 4.131 (1.25), 4.349
(1.19), 4.366 (2.04), 4.386 (1.51), 4.495 (4.08), 4.509 (4.48), 4.531 (4.67), 4.546
(4.41), 5.037 (16.00), 5.802 (4.94), 7.731 (14.22), 8.898 (5.99).
Primer 374
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2014] (5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 186 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,6 mg, 242 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (97 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (27,6 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 47,2 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,22 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.73), -0.008 (6.82), 0.008 (5.51),
0.146 (0.70), 1.406 (0.61), 1.739 (3.21), 1.848 (1.56), 1.858 (2.05), 1.879 (2.11),
1.973 (2.36), 1.983 (2.48), 1.995 (3.00), 2.006 (3.18), 2.017 (2.69), 2.068 (1.68),
2.327 (1.38), 2.366 (1.01), 2.523 (5.84), 2.605 (4.10), 2.647 (1.71), 2.669 (1.65),
2.709 (1.13), 2.874 (0.92), 3.201 (1.01), 3.232 (1.44), 3.342 (2.63), 3.368 (3.24),
3.386 (2.36), 3.421 (0.92), 3.431 (0.89), 3.453 (1.62), 3.482 (1.53), 3.549 (1.25),
3.564 (2.17), 3.573 (2.39), 3.588 (1.71), 3.654 (1.96), 3.680 (1.47), 3.697 (0.49),
3.755 (0.92), 4.268 (1.99), 4.360 (2.02), 4.704 (1.16), 4.713 (1.25), 4.720 (1.44),
4.727 (1.10), 4.756 (2.23), 4.762 (1.87), 4.826 (1.22), 4.953 (4.10), 4.961 (3.46),
5.034 (16.00), 5.073 (5.54), 5.082 (5.38), 7.714 (6.70), 7.720 (8.08), 8.902 (11.96).
Primer 375
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2015]
[2016] (5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 186 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,6 mg, 242 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (97 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (24,9 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+ 1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.64), -0.008 (6.01), 0.008 (5.20), 0.146 (0.71),
1.691 (1.93), 1.715 (3.51), 1.970 (1.70), 2.038 (1.49), 2.327 (1.08), 2.366 (0.53),
2.560 (2.77), 2.585 (3.14), 2.598 (4.47), 2.612 (2.34), 2.628 (0.96), 2.641 (1.56),
2.669 (1.24), 2.710 (0.66), 3.908 (0.99), 3.937 (1.21), 3.999 (1.08), 4.174 (0.64),
4.211 (1.05), 4.226 (1.12), 4.259 (1.10), 4.278 (1.21), 4.305 (1.15), 4.335 (0.64),
4.365 (1.17), 4.392 (0.76), 4.431 (0.57), 4.455 (0.71), 4.522 (0.64), 4.557 (2.73),
4.569 (4.40), 4.581 (2.84), 4.639 (0.60), 4.677 (0.60), 5.044 (16.00), 5.355 (0.71),
5.402 (0.73), 5.498 (0.76), 5.546 (0.76), 7.737 (10.15), 8.891 (4.17), 8.902 (4.15).
Primer 376
(5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2017]
[2018] (5S)-2-{[5-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 186 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,6 mg, 242 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (97 µl, 560 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (28,0 mg, 223 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 50,3 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.07), -0.008 (10.68), 0.008 (7.72),
0.146 (1.11), 1.736 (2.73), 1.929 (0.59), 2.006 (2.25), 2.017 (2.00), 2.073 (4.25),
2.087 (2.03), 2.106 (2.07), 2.137 (1.59), 2.255 (1.15), 2.327 (1.59), 2.366 (1.22),
2.523 (5.73), 2.567 (2.44), 2.583 (1.81), 2.597 (2.11), 2.608 (3.55), 2.620 (2.18),
2.650 (1.33), 2.665 (1.81), 2.670 (1.92), 2.709 (1.33), 3.352 (1.37), 3.371 (1.33),
3.398 (1.00), 3.468 (0.67), 3.495 (1.18), 3.504 (1.22), 3.525 (1.52), 3.554 (1.37),
3.593 (1.92), 3.628 (1.26), 3.652 (1.63), 3.686 (1.15), 3.725 (1.22), 3.747 (1.52),
3.776 (1.29), 3.856 (1.66), 3.920 (0.55), 3.943 (1.03), 3.985 (0.52), 4.009 (0.55),
4.705 (0.85), 4.714 (0.96), 4.721 (1.03), 4.730 (0.78), 4.764 (1.07), 4.779 (1.22),
4.788 (0.92), 4.833 (0.78), 4.846 (1.26), 4.856 (0.74), 4.869 (0.85), 4.884 (1.03),
4.893 (0.81), 5.039 (16.00), 5.258 (1.07), 5.349 (0.70), 5.389 (1.18), 5.481 (0.63),
5.515 (0.63), 7.717 (8.46), 8.903 (7.94).
Primer 377
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2019]
[2020] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 324 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (160 mg, 421 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 970 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (55,8 mg, 389 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo je dodat N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 970 µmol) i mešano je 2 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 47,0 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.69), -0.008 (5.97), 0.008 (5.29),
0.146 (0.69), 1.248 (1.05), 1.265 (1.41), 1.284 (0.90), 1.411 (1.30), 1.699 (1.41),
1.714 (1.52), 1.727 (1.81), 1.917 (0.69), 1.981 (1.63), 1.992 (1.52), 2.021 (1.70),
2.049 (1.23), 2.065 (1.34), 2.074 (1.38), 2.086 (1.12), 2.093 (1.05), 2.328 (1.19),
2.366 (1.67), 2.381 (1.01), 2.411 (1.27), 2.430 (1.27), 2.452 (0.98), 2.569 (4.05),
2.578 (3.08), 2.593 (3.62), 2.608 (3.80), 2.620 (1.85), 2.651 (1.09), 2.665 (1.34),
2.670 (1.38), 2.710 (1.34), 3.538 (1.88), 3.556 (2.82), 3.570 (1.52), 3.577 (1.48),
3.640 (0.51), 3.672 (1.52), 3.705 (1.74), 3.740 (1.38), 3.774 (2.28), 3.791 (1.30),
3.808 (2.14), 3.817 (1.85), 3.835 (0.94), 3.894 (0.83), 3.912 (1.77), 3.931 (0.98),
3.938 (1.27), 3.957 (0.58), 3.973 (0.51), 4.001 (1.09), 4.030 (0.76), 4.044 (1.01),
4.072 (0.62), 4.148 (0.65), 4.180 (0.94), 4.204 (0.94), 4.234 (0.43), 4.761 (1.41),
4.776 (1.92), 4.786 (1.41), 4.836 (1.45), 4.852 (1.92), 4.861 (1.48), 4.914 (16.00),
4.947 (0.47), 4.955 (0.76), 7.199 (6.12), 7.220 (6.66), 7.914 (4.38), 7.920 (4.52),
7.935 (4.24), 7.941 (4.34), 8.572 (5.39), 8.578 (5.29).
Primer 378
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2021]
[2022] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 324 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (160 mg, 421 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 970 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (55,8 mg, 389 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 10,0 mg (8% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.28), 0.008 (1.25), 1.656 (0.94),
1.669 (1.15), 1.682 (1.23), 1.692 (1.08), 1.707 (0.89), 1.718 (1.18), 1.729 (1.39),
1.740 (1.56), 1.753 (1.30), 1.936 (0.50), 1.943 (0.52), 1.978 (1.16), 1.986 (1.06),
2.000 (0.81), 2.021 (1.50), 2.045 (0.97), 2.055 (1.06), 2.063 (1.17), 2.073 (2.34),
2.090 (0.84), 2.098 (0.92), 2.106 (0.78), 2.582 (1.56), 2.596 (2.30), 2.608 (3.05),
2.620 (1.71), 2.639 (0.60), 2.650 (0.98), 2.663 (0.53), 3.322 (2.23), 3.449 (0.59),
3.459 (0.81), 3.468 (0.57), 3.483 (0.84), 3.493 (1.38), 3.502 (1.01), 3.514 (1.18),
3.524 (1.17), 3.535 (1.04), 3.547 (1.13), 3.555 (0.73), 3.568 (0.60), 3.578 (0.81),
3.588 (0.54), 3.619 (0.83), 3.633 (0.93), 3.652 (0.59), 3.666 (0.67), 3.674 (0.91),
3.688 (1.62), 3.701 (1.11), 3.707 (1.12), 3.722 (1.44), 3.736 (1.26), 3.753 (1.04),
3.765 (1.10), 3.786 (0.86), 3.799 (0.54), 3.852 (0.50), 3.864 (0.63), 3.871 (0.79),
3.900 (0.51), 3.907 (0.56), 3.912 (0.56), 3.919 (0.49), 3.934 (0.75), 3.947 (0.88),
3.962 (0.53), 3.977 (0.62), 3.984 (0.83), 3.997 (0.85), 4.012 (0.55), 4.026 (0.49),
4.133 (0.53), 4.148 (0.61), 4.162 (0.58), 4.175 (0.98), 4.189 (0.67), 4.202 (0.59),
4.217 (0.54), 4.798 (2.25), 4.811 (3.22), 4.821 (2.12), 4.870 (0.57), 4.911 (16.00),
4.958 (0.47), 5.256 (0.79), 5.265 (0.86), 5.276 (0.95), 5.287 (0.84), 5.299 (0.55),
5.314 (0.65), 5.322 (0.61), 5.329 (0.68), 5.338 (0.66), 5.344 (0.62), 5.353 (0.76),
5.366 (0.68), 5.381 (0.83), 5.388 (1.01), 5.398 (0.80), 5.408 (0.91), 5.418 (0.84),
5.429 (0.64), 5.443 (0.61), 5.451 (0.67), 5.457 (0.67), 5.465 (0.71), 5.475 (0.66),
5.482 (0.62), 5.495 (0.55), 7.197 (3.48), 7.200 (3.78), 7.218 (3.76), 7.220 (4.05),
7.912 (2.52), 7.915 (3.07), 7.918 (2.95), 7.921 (2.92), 7.933 (2.46), 7.935 (2.96),
7.939 (2.85), 7.941 (2.78), 8.215 (0.62), 8.571 (3.84), 8.573 (3.84), 8.577 (3.84).
Primer 379
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2023]
[2024] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 324 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (160 mg, 421 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 970 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (43,4 mg, 389 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 11). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,00 mg (1% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.02), -0.008 (8.51), 0.008 (5.75),
0.146 (0.64), 1.722 (4.09), 1.969 (2.04), 2.029 (1.71), 2.040 (1.76), 2.328 (1.76),
2.366 (1.97), 2.564 (3.17), 2.584 (3.86), 2.598 (4.65), 2.611 (2.35), 2.626 (0.92),
2.640 (1.46), 2.653 (0.72), 2.670 (0.82), 2.710 (0.66), 3.904 (0.77), 3.929 (1.38),
3.957 (1.30), 3.990 (1.33), 4.017 (0.77), 4.159 (0.69), 4.173 (0.77), 4.237 (1.15),
4.287 (1.38), 4.316 (1.20), 4.343 (0.84), 4.368 (1.35), 4.397 (0.95), 4.432 (0.74),
4.459 (0.89), 4.513 (0.87), 4.559 (4.75), 4.647 (0.74), 4.683 (0.69), 4.700 (0.69),
4.724 (0.54), 4.915 (16.00), 5.356 (0.84), 5.404 (0.87), 5.499 (0.84), 5.546 (0.84),
7.212 (7.00), 7.234 (7.44), 7.912 (3.55), 7.918 (3.65), 7.933 (3.35), 7.938 (3.35),
8.571 (3.40).
Primer 380
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2026] (5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 148 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (72,9 mg, 192 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (77 µl, 440 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (25,5 mg, 177 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,0 mg (19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 394 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.72), 1.679 (0.66), 1.720 (0.83),
1.732 (0.84), 1.742 (0.80), 1.968 (0.60), 2.011 (0.73), 2.037 (0.49), 2.047 (0.54),
2.055 (0.57), 2.062 (0.53), 2.071 (0.45), 2.089 (0.43), 2.559 (1.35), 2.569 (0.98),
2.583 (1.23), 2.595 (1.50), 2.607 (0.84), 2.637 (0.50), 3.491 (0.61), 3.501 (0.46),
3.514 (0.51), 3.523 (0.51), 3.535 (0.51), 3.546 (0.56), 3.619 (0.41), 3.632 (0.45),
3.674 (0.46), 3.688 (0.77), 3.704 (0.64), 3.721 (0.66), 3.736 (0.72), 3.754 (0.65),
3.766 (0.66), 3.787 (0.68), 3.810 (16.00), 3.871 (0.41), 3.947 (0.42), 3.983 (0.41),
4.178 (0.46), 4.787 (1.48), 4.797 (1.73), 4.827 (6.88), 5.256 (0.42), 5.267 (0.43),
5.277 (0.49), 5.287 (0.41), 5.378 (0.46), 5.388 (0.53), 5.409 (0.46), 5.418 (0.41),
7.102 (1.50), 7.106 (1.54), 7.124 (1.77), 7.128 (1.82), 7.353 (1.37), 7.357 (1.33),
7.375 (1.17), 7.379 (1.11), 8.209 (1.99), 8.216 (1.83).
Primer 381
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2027]
[2028] (5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 148 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (72,9 mg, 192 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (77 µl, 440 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (25,5 mg, 177 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 14,0 mg (23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,57 min; MS (ESIpos): m/z = 394 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: -0.008 (0.99), 0.008 (0.92), 1.675
(0.28), 1.722 (0.51), 1.914 (0.21), 1.981 (0.48), 1.998 (0.36), 2.015 (0.40), 2.031
(0.33), 2.042 (0.30), 2.051 (0.30), 2.057 (0.31), 2.067 (0.31), 2.073 (0.49), 2.085
(0.24), 2.093 (0.21), 2.366 (0.24), 2.382 (0.26), 2.412 (0.29), 2.432 (0.29), 2.452
(0.21), 2.566 (0.80), 2.580 (0.84), 2.597 (0.86), 2.608 (0.55), 2.626 (0.19), 2.639
(0.26), 2.670 (0.19), 2.710 (0.18), 2.893 (0.51), 3.540 (0.40), 3.552 (0.54), 3.560
(0.59), 3.571 (0.34), 3.579 (0.31), 3.673 (0.37), 3.706 (0.40), 3.742 (0.32), 3.774
(0.51), 3.790 (0.33), 3.810 (16.00), 3.835 (0.26), 3.897 (0.20), 3.916 (0.41), 3.935
(0.23), 3.942 (0.29), 4.002 (0.25), 4.031 (0.18), 4.043 (0.23), 4.180 (0.24), 4.207
(0.23), 4.748 (0.34), 4.757 (0.39), 4.763 (0.47), 4.772 (0.33), 4.787 (0.21), 4.827
(3.23), 4.831 (3.75), 4.849 (0.40), 4.871 (0.23), 7.106 (1.41), 7.127 (1.69), 7.352
(1.06), 7.359 (1.08), 7.373 (0.91), 7.381 (0.93), 8.209 (1.75), 8.217 (1.73).
Primer 382
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2029]
[2030] (5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 148 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (72,9 mg, 192 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (77 µl, 440 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (19,8 mg, 177 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 14,0 mg (26% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,48 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: -0.149 (0.34), -0.008 (3.04), 0.008
(2.32), 0.146 (0.30), 1.720 (1.27), 1.960 (0.60), 2.021 (0.51), 2.032 (0.53), 2.327
(0.48), 2.366 (0.51), 2.523 (1.43), 2.572 (1.15), 2.585 (1.45), 2.598 (0.71), 2.614
(0.27), 2.627 (0.42), 2.641 (0.18), 2.670 (0.46), 2.710 (0.44), 3.809 (16.00), 3.901
(0.21), 3.928 (0.41), 3.956 (0.41), 3.988 (0.46), 4.017 (0.23), 4.157 (0.18), 4.172
(0.21), 4.223 (0.32), 4.239 (0.34), 4.252 (0.30), 4.274 (0.35), 4.305 (0.37), 4.340
(0.21), 4.368 (0.39), 4.395 (0.25), 4.430 (0.18), 4.457 (0.25), 4.534 (0.90), 4.545
(1.45), 4.559 (0.88), 4.577 (0.23), 4.648 (0.21), 4.676 (0.19), 4.701 (0.19), 4.831
(5.32), 5.357 (0.25), 5.405 (0.27), 5.500 (0.25), 5.547 (0.25), 7.118 (2.30), 7.140
(2.76), 7.350 (1.17), 7.358 (1.15), 7.372 (0.97), 7.379 (0.99), 8.210 (1.66).
Primer 383
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2031]
[2032] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,9 mg, 204 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (100 mg, 265 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 610 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (35,1 mg, 244 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 52,6 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.19), -0.008 (10.77), 0.008 (8.41),
0.146 (1.17), 1.483 (6.37), 1.687 (1.00), 1.746 (1.22), 1.980 (0.72), 2.028 (1.32),
2.056 (0.97), 2.072 (1.69), 2.082 (0.85), 2.327 (1.17), 2.366 (1.07), 2.382 (0.85),
2.411 (1.02), 2.430 (0.97), 2.452 (0.80), 2.523 (4.21), 2.566 (2.51), 2.580 (2.14),
2.591 (2.49), 2.605 (2.71), 2.620 (2.34), 2.632 (1.29), 2.665 (1.44), 2.670 (1.47),
2.710 (0.85), 3.541 (1.24), 3.553 (1.74), 3.562 (1.84), 3.572 (1.07), 3.581 (0.97),
3.674 (1.12), 3.707 (1.32), 3.744 (0.87), 3.778 (1.47), 3.791 (0.95), 3.799 (0.82),
3.811 (1.59), 3.836 (0.62), 3.896 (0.60), 3.915 (1.27), 3.941 (0.90), 3.960 (0.42),
4.000 (0.77), 4.030 (0.50), 4.043 (0.72), 4.072 (0.45), 4.153 (0.42), 4.182 (0.72),
4.208 (0.67), 4.776 (1.00), 4.791 (1.37), 4.801 (1.02), 4.848 (1.09), 4.864 (1.52),
4.873 (1.19), 4.892 (16.00), 7.134 (4.18), 7.153 (4.45), 7.433 (3.76), 7.453 (4.18),
7.840 (3.04), 7.860 (5.42), 7.879 (2.69).
Primer 384
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2033]
[2034] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,9 mg, 204 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (100 mg, 265 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 610 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (27,3 mg, 244 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,5 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.89), -0.008 (16.00), 0.008
(15.16), 0.146 (1.89), 1.722 (3.70), 1.980 (2.17), 2.044 (1.96), 2.327 (1.75), 2.366
(1.26), 2.574 (3.42), 2.597 (4.33), 2.611 (5.03), 2.625 (2.59), 2.653 (1.68), 2.670
(2.52), 2.710 (1.33), 3.904 (0.84), 3.932 (1.61), 3.962 (1.54), 3.993 (1.54), 4.019
(0.98), 4.175 (0.84), 4.280 (1.33), 4.308 (1.40), 4.368 (1.47), 4.427 (0.77), 4.456
(0.98), 4.559 (4.75), 4.574 (6.57), 4.585 (4.96), 4.652 (0.84), 4.686 (0.77), 4.705
(0.77), 4.893 (15.02), 4.898 (15.09), 5.355 (0.98), 5.405 (0.91), 5.497 (0.98), 5.549
(0.91), 7.150 (4.61), 7.169 (4.89), 7.433 (5.66), 7.452 (6.29), 7.839 (3.42), 7.858
(6.50), 7.877 (3.14).
Primer 385
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2035]
[2036] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,9 mg, 204 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (100 mg, 265 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 610 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (35,1 mg, 244 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 60,4 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.90), -0.008 (7.33), 0.008 (6.93),
0.146 (0.97), 1.677 (1.17), 1.747 (1.40), 1.988 (1.07), 2.029 (1.43), 2.073 (5.97),
2.105 (0.87), 2.327 (0.83), 2.366 (0.83), 2.523 (2.77), 2.558 (1.87), 2.573 (1.70),
2.584 (2.30), 2.608 (2.33), 2.619 (3.17), 2.631 (1.77), 2.665 (1.30), 2.670 (1.30),
2.710 (0.97), 3.458 (0.60), 3.493 (1.23), 3.503 (0.90), 3.516 (1.00), 3.524 (1.00),
3.538 (0.97), 3.548 (1.03), 3.579 (0.77), 3.622 (0.80), 3.635 (0.97), 3.654 (0.63),
3.676 (0.90), 3.691 (1.57), 3.707 (1.33), 3.725 (1.20), 3.738 (1.17), 3.757 (1.00),
3.770 (1.03), 3.789 (0.67), 3.804 (0.57), 3.875 (0.77), 3.915 (0.57), 3.934 (0.77),
3.946 (0.87), 3.961 (0.53), 3.983 (0.80), 3.998 (0.83), 4.011 (0.53), 4.026 (0.50),
4.136 (0.53), 4.151 (0.60), 4.165 (0.67), 4.179 (0.97), 4.193 (0.70), 4.206 (0.60),
4.220 (0.53), 4.824 (3.23), 4.891 (16.00), 5.266 (0.83), 5.276 (0.90), 5.288 (0.83),
5.299 (0.53), 5.314 (0.67), 5.353 (0.80), 5.390 (0.97), 5.409 (0.93), 5.419 (0.87),
5.430 (0.63), 5.452 (0.70), 7.134 (3.47), 7.153 (3.70), 7.433 (4.50), 7.453 (5.13),
7.838 (2.67), 7.842 (2.93), 7.858 (4.63), 7.861 (5.10), 7.878 (2.37), 7.881 (2.57).
Primer 386
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2037]
[2038] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,9 mg, 204 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (100 mg, 265 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 610 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (30,7 mg, 244 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (38 mg, 102 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (18 µl, 102 µmol) i mešano je preko noći. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,3 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (4.53), 0.008 (3.45),
0.146 (0.46), 1.747 (2.81), 1.890 (0.58), 1.932 (0.79), 1.968 (0.40), 2.005 (0.79),
2.041 (1.27), 2.073 (2.00), 2.090 (1.79), 2.108 (2.12), 2.139 (1.47), 2.222 (0.79),
2.270 (1.06), 2.327 (0.58), 2.366 (0.46), 2.560 (1.85), 2.575 (1.52), 2.584 (1.79),
2.602 (1.62), 2.622 (2.47), 2.665 (1.25), 2.710 (0.42), 3.278 (0.71), 3.333 (1.04),
3.352 (0.58), 3.365 (0.62), 3.374 (0.66), 3.401 (0.71), 3.409 (0.73), 3.462 (0.56),
3.471 (0.58), 3.498 (0.79), 3.507 (0.73), 3.613 (0.54), 3.638 (2.72), 3.656 (2.06),
3.682 (1.33), 3.701 (1.02), 3.733 (1.35), 3.753 (1.75), 3.774 (1.45), 3.795 (1.18),
3.863 (2.43), 4.706 (1.23), 4.716 (1.66), 4.722 (1.47), 4.732 (1.14), 4.763 (1.47),
4.772 (1.70), 4.778 (1.85), 4.787 (1.37), 4.888 (16.00), 5.260 (1.14), 5.383 (1.50),
5.390 (1.54), 5.514 (0.83), 6.519 (0.96), 7.135 (4.61), 7.154 (4.90), 7.433 (4.78),
7.453 (5.32), 7.841 (3.97), 7.860 (7.07), 7.879 (3.45).
Primer 387
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2039]
[2040] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (47,0 mg, 125 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (61,5 mg, 162 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (65 µl, 370 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (21,5 mg, 150 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 18,5 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.17), 0.008 (8.40), 0.146 (1.07),
1.711 (4.48), 1.978 (2.57), 2.328 (2.38), 2.366 (2.47), 2.576 (5.46), 2.589 (6.16),
2.603 (3.31), 2.631 (1.54), 2.670 (2.05), 2.710 (1.91), 3.533 (3.17), 3.552 (5.22),
3.573 (2.47), 3.671 (2.33), 3.705 (2.61), 3.736 (2.01), 3.769 (3.27), 3.802 (2.61),
3.813 (2.57), 3.832 (1.73), 3.911 (2.47), 3.939 (1.77), 3.997 (1.73), 4.039 (1.45),
4.143 (1.03), 4.176 (1.45), 4.201 (1.59), 4.769 (2.89), 4.847 (2.71), 4.858 (2.15), 5.104 (3.50), 5.144 (13.62), 5.166 (16.00), 5.207 (3.64), 7.844 (10.78), 7.856 (10.87), 8.735 (9.19), 8.748 (9.00).
Primer 388
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2041]
[2042] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 133 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati HBTU (65,4 mg, 173 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (69 µl, 400 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (22,9 mg, 159 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,0 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.23), -0.008 (15.35), 0.008 (9.72),
0.146 (1.36), 1.703 (5.38), 1.715 (5.89), 1.725 (5.77), 1.917 (1.30), 1.958 (2.85),
1.996 (2.91), 2.008 (2.91), 2.040 (2.59), 2.049 (2.79), 2.057 (2.91), 2.065 (2.85),
2.073 (3.50), 2.084 (2.07), 2.092 (2.20), 2.100 (1.94), 2.327 (2.01), 2.332 (1.49),
2.366 (2.20), 2.519 (13.80), 2.524 (12.89), 2.565 (5.51), 2.578 (6.41), 2.589 (8.16),
2.602 (4.66), 2.619 (1.88), 2.632 (2.66), 2.665 (1.94), 2.670 (2.46), 2.674 (1.81),
2.710 (2.46), 3.456 (1.49), 3.490 (2.91), 3.499 (2.07), 3.511 (2.66), 3.520 (2.79),
3.530 (2.40), 3.545 (2.33), 3.562 (1.43), 3.573 (1.88), 3.583 (1.30), 3.616 (2.01),
3.630 (2.20), 3.649 (1.49), 3.663 (1.75), 3.672 (2.40), 3.685 (3.50), 3.695 (2.91),
3.705 (2.66), 3.717 (3.50), 3.731 (2.59), 3.747 (2.59), 3.759 (2.46), 3.780 (2.07),
3.793 (1.30), 3.869 (2.01), 3.905 (1.43), 3.931 (1.88), 3.945 (2.14), 3.959 (1.43),
3.980 (2.20), 3.994 (2.14), 4.009 (1.36), 4.023 (1.23), 4.128 (1.36), 4.143 (1.62),
4.156 (1.49), 4.170 (2.53), 4.184 (1.68), 4.197 (1.49), 4.212 (1.36), 4.791 (6.87),
4.801 (8.10), 4.807 (8.74), 4.816 (6.35), 5.101 (4.28), 5.142 (15.35), 5.146 (14.77),
5.157 (12.96), 5.172 (12.50), 5.198 (2.01), 5.213 (3.95), 5.254 (2.07), 5.262 (2.14),
5.273 (2.46), 5.284 (2.01), 5.297 (1.49), 5.311 (1.68), 5.326 (1.75), 5.335 (1.75),
5.350 (2.07), 5.364 (1.94), 5.387 (2.59), 5.406 (2.33), 5.415 (2.07), 5.426 (1.62),
5.440 (1.55), 5.449 (1.75), 5.463 (1.75), 5.472 (1.68), 5.493 (1.43), 7.844 (15.74),
7.856 (16.00), 8.735 (10.62), 8.748 (10.11).
Primer 389
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2043]
[2044] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 133 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati HBTU (65,4 mg, 173 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (69 µl, 400 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (17,8 mg, 159 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.41), 0.008 (1.30), 1.721 (4.73),
1.934 (1.28), 1.946 (1.80), 1.957 (1.88), 1.967 (1.75), 1.979 (1.27), 1.991 (0.90),
2.008 (1.32), 2.026 (1.85), 2.044 (1.66), 2.063 (1.20), 2.073 (0.76), 2.080 (0.64),
2.524 (1.40), 2.572 (3.52), 2.586 (5.17), 2.599 (2.48), 2.614 (0.89), 2.628 (1.52),
2.642 (0.62), 3.895 (0.63), 3.923 (1.28), 3.953 (1.26), 3.985 (1.30), 4.012 (0.73),
4.155 (0.55), 4.169 (0.62), 4.184 (0.51), 4.234 (0.97), 4.286 (1.22), 4.314 (1.22),
4.348 (0.73), 4.368 (1.16), 4.389 (0.84), 4.426 (0.57), 4.453 (0.76), 4.509 (0.60),
4.526 (2.15), 4.537 (3.77), 4.551 (3.73), 4.561 (2.07), 4.576 (0.70), 4.604 (0.47),
4.620 (0.56), 4.635 (0.63), 4.646 (0.55), 4.662 (0.58), 4.671 (0.59), 4.686 (0.62),
4.699 (0.55), 4.713 (0.49), 5.118 (1.66), 5.159 (16.00), 5.171 (5.56), 5.213 (0.81),
5.355 (0.81), 5.370 (0.60), 5.381 (0.64), 5.389 (0.73), 5.396 (0.82), 5.497 (0.78),
5.505 (0.70), 5.512 (0.62), 5.532 (0.71), 5.539 (0.81), 7.845 (8.15), 7.857 (8.51),
8.722 (2.50), 8.734 (4.62), 8.747 (2.37).
Primer 390
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2045]
[2046] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 133 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati HBTU (65,4 mg, 173 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (69 µl, 400 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (17,4 mg, 159 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 26,0 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.15), 0.008 (8.71), 0.146 (1.10),
1.706 (7.23), 1.719 (7.18), 1.903 (2.41), 1.915 (2.47), 1.938 (4.55), 1.989 (2.30),
2.001 (3.23), 2.014 (3.01), 2.023 (3.01), 2.038 (2.30), 2.328 (2.30), 2.366 (1.81),
2.523 (9.81), 2.564 (5.48), 2.579 (7.07), 2.592 (3.45), 2.607 (1.48), 2.621 (2.25),
2.670 (2.19), 2.710 (1.75), 3.593 (2.47), 3.601 (2.79), 3.627 (3.78), 3.643 (2.58),
3.658 (2.52), 3.668 (2.47), 3.943 (2.74), 3.954 (3.18), 4.020 (4.82), 4.043 (4.93),
4.061 (2.52), 4.097 (1.97), 4.113 (2.68), 4.137 (1.86), 4.347 (1.92), 4.366 (3.23),
4.387 (2.41), 4.508 (13.21), 5.111 (1.97), 5.152 (16.00), 5.157 (13.97), 5.164 (12.00),
5.204 (1.64), 5.803 (5.42), 7.844 (13.70), 7.857 (14.19), 8.733 (11.29), 8.745 (11.01).
Primer 391
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2047]
[2048] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 133 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (65,4 mg, 173 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (69 µl, 400 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (19,7 mg, 159 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,0 mg (19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 446 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.86), -0.008 (16.00), 0.008
(12.93), 0.146 (1.86), 1.243 (2.08), 1.257 (2.30), 1.728 (6.03), 1.846 (2.63), 1.855
(2.74), 1.877 (3.07), 1.959 (2.85), 2.004 (3.07), 2.044 (3.07), 2.327 (4.60), 2.366
(3.29), 2.585 (5.92), 2.626 (2.63), 2.669 (5.04), 2.689 (1.86), 2.709 (3.51), 3.375
(3.95), 3.435 (2.08), 3.456 (2.85), 3.566 (1.75), 3.644 (3.07), 3.654 (4.49), 3.682
(3.40), 4.262 (2.63), 4.363 (2.85), 4.706 (3.62), 4.714 (2.74), 4.746 (2.52), 5.007
(1.86), 5.036 (1.75), 5.091 (3.95), 5.132 (12.05), 5.159 (10.52), 5.199 (3.07), 7.842
(10.85), 7.855 (11.18), 7.910 (2.30), 8.738 (8.44), 8.750 (8.00).
Primer 392
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2049]
[2050] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (53,0 mg, 141 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (69,4 mg, 183 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (74 µl, 420 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (15,0 mg, 169 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,0 mg (17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.89), -0.008 (16.00), 0.008
(13.03), 0.146 (1.80), 1.734 (6.56), 1.901 (1.62), 1.990 (1.98), 2.016 (2.43), 2.089
(4.22), 2.105 (4.22), 2.122 (2.79), 2.137 (2.61), 2.265 (2.07), 2.327 (3.96), 2.366
(2.61), 2.523 (13.30), 2.570 (3.87), 2.592 (4.85), 2.634 (1.80), 2.669 (4.04), 2.709
(2.52), 3.371 (1.71), 3.406 (1.44), 3.469 (1.08), 3.496 (1.71), 3.629 (4.22), 3.655
(4.31), 3.682 (2.79), 3.692 (2.07), 3.728 (3.33), 3.747 (3.60), 3.771 (2.70), 3.793
(2.25), 3.862 (4.67), 4.693 (2.16), 4.702 (2.70), 4.708 (2.79), 4.717 (2.16), 4.750
(2.70), 4.758 (3.15), 4.765 (3.51), 4.774 (2.61), 5.096 (3.87), 5.137 (12.85), 5.160
(8.54), 5.170 (9.62), 5.200 (2.07), 5.211 (3.24), 5.257 (2.25), 5.388 (2.97), 5.508
(1.62), 7.844 (11.51), 7.856 (12.04), 8.738 (9.17), 8.751 (8.90).
Primer 393
(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2051]
[2052] (5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (102 mg, 330 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (163 mg, 430 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 990 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (49,8 mg, 396 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 58,1 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.01), -0.008 (8.13), 0.008 (8.46),
0.146 (1.01), 1.722 (9.21), 1.732 (9.63), 1.861 (1.59), 1.898 (2.43), 1.907 (2.26),
1.974 (2.09), 2.009 (3.60), 2.018 (3.52), 2.045 (2.18), 2.064 (4.10), 2.082 (6.20),
2.098 (5.78), 2.135 (3.69), 2.217 (2.18), 2.237 (2.26), 2.268 (2.85), 2.327 (1.84),
2.366 (1.76), 2.561 (6.45), 2.581 (7.20), 2.624 (2.43), 2.670 (1.93), 2.690 (9.47),
2.710 (1.76), 3.274 (2.01), 3.348 (2.01), 3.363 (1.68), 3.372 (1.93), 3.398 (2.01),
3.407 (2.18), 3.460 (1.51), 3.469 (1.68), 3.496 (2.26), 3.504 (2.09), 3.633 (5.86),
3.642 (3.85), 3.658 (6.03), 3.669 (4.69), 3.685 (3.85), 3.729 (4.69), 3.751 (5.11),
3.776 (4.10), 3.797 (3.35), 3.828 (0.92), 3.865 (6.70), 4.685 (3.35), 4.695 (4.02),
4.701 (4.19), 4.710 (3.27), 4.741 (4.19), 4.750 (4.69), 4.756 (5.36), 4.765 (4.10),
4.947 (6.95), 4.987 (16.00), 4.990 (15.50), 5.034 (11.81), 5.043 (13.82), 5.073 (4.52),
5.083 (6.20), 5.258 (3.18), 5.382 (4.27), 5.389 (4.44), 5.515 (2.43), 5.944 (0.67),
7.374 (10.05), 7.386 (10.39), 7.395 (10.81), 7.406 (11.14), 7.923 (11.23), 7.926
(11.39), 7.943 (10.72), 7.946 (10.47), 8.468 (11.39), 8.479 (11.39).
Primer 394
(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2053]
[2054] (5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (102 mg, 330 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (163 mg, 430 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 990 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (51,4 mg, 396 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 75,6 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,07 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (4.34), 0.008 (4.02),
0.146 (0.48), 1.710 (3.05), 1.726 (4.50), 1.736 (4.27), 1.750 (3.05), 1.770 (1.19),
1.953 (1.29), 1.968 (1.83), 1.979 (2.44), 1.990 (2.25), 2.005 (1.09), 2.030 (1.25),
2.046 (1.83), 2.057 (1.93), 2.066 (2.25), 2.079 (1.83), 2.089 (1.25), 2.104 (0.87),
2.114 (0.58), 2.327 (0.80), 2.366 (0.71), 2.562 (4.56), 2.578 (4.02), 2.588 (6.20),
2.602 (2.96), 2.616 (1.09), 2.630 (1.67), 2.644 (0.74), 2.670 (0.93), 2.710 (0.80),
4.326 (1.73), 4.356 (2.92), 4.378 (2.92), 4.408 (1.80), 4.568 (4.21), 4.583 (6.97),
4.596 (4.18), 4.700 (0.64), 4.728 (1.83), 4.758 (2.22), 4.802 (1.12), 4.834 (2.12),
4.863 (1.80), 4.986 (2.92), 5.026 (16.00), 5.041 (16.00), 5.081 (2.92), 7.378 (5.59),
7.390 (5.78), 7.399 (6.07), 7.410 (6.23), 7.929 (6.71), 7.933 (7.07), 7.949 (6.43),
7.953 (6.43), 8.451 (6.52), 8.455 (6.81), 8.463 (6.68), 8.466 (6.52).
Primer 395
(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2055]
[2056] (5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (102 mg, 330 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (163 mg, 430 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 990 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (56,9 mg, 396 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 61,2 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.35), -0.008 (11.87), 0.008
(10.29), 0.146 (1.35), 1.710 (8.41), 1.721 (7.59), 1.733 (5.11), 1.908 (1.73), 1.952
(3.46), 1.989 (3.61), 2.002 (3.53), 2.017 (2.48), 2.032 (3.08), 2.042 (3.15), 2.049
(3.23), 2.057 (3.38), 2.067 (3.53), 2.072 (7.14), 2.084 (2.63), 2.092 (2.48), 2.102
(1.73), 2.327 (1.65), 2.366 (1.73), 2.518 (9.84), 2.567 (7.66), 2.577 (10.22), 2.589
(5.78), 2.606 (2.10), 2.620 (3.23), 2.632 (1.73), 2.670 (2.10), 2.709 (1.95), 2.890
(0.75), 3.455 (1.95), 3.479 (2.03), 3.488 (3.83), 3.498 (2.70), 3.510 (3.38), 3.520
(3.46), 3.529 (2.93), 3.542 (3.00), 3.563 (1.73), 3.572 (2.40), 3.582 (1.50), 3.616
(2.55), 3.630 (2.85), 3.649 (1.80), 3.663 (2.10), 3.671 (2.78), 3.685 (4.58), 3.696
(3.46), 3.705 (3.08), 3.718 (4.43), 3.730 (2.78), 3.748 (2.85), 3.760 (3.00), 3.781
(2.63), 3.794 (1.65), 3.835 (1.13), 3.870 (2.40), 3.911 (1.73), 3.932 (2.33), 3.946
(2.70), 3.961 (1.65), 3.981 (2.63), 3.995 (2.63), 4.010 (1.65), 4.024 (1.65), 4.131
(1.58), 4.146 (1.80), 4.160 (1.80), 4.174 (3.15), 4.188 (2.18), 4.201 (1.80), 4.216
(1.65), 4.781 (7.96), 4.791 (9.31), 4.797 (10.37), 4.806 (7.51), 4.952 (6.84), 4.959
(4.88), 4.992 (16.00), 4.998 (15.47), 5.029 (14.50), 5.044 (15.02), 5.068 (4.51), 5.083
(6.38), 5.242 (1.80), 5.253 (2.48), 5.263 (2.63), 5.274 (2.93), 5.283 (2.40), 5.296
(1.88), 5.311 (1.73), 5.327 (2.18), 5.336 (2.18), 5.350 (2.48), 5.363 (2.33), 5.375
(2.78), 5.385 (3.23), 5.397 (2.55), 5.406 (2.78), 5.415 (2.85), 5.426 (2.10), 5.440
(1.80), 5.448 (2.10), 5.464 (2.10), 5.472 (2.10), 5.480 (2.18), 5.493 (1.88), 5.502
(1.20), 7.374 (10.44), 7.385 (10.97), 7.394 (11.42), 7.406 (11.72), 7.924 (13.00),
7.944 (12.24), 8.465 (12.85), 8.476 (12.85).
Primer 396
(5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2057]
[2058] (5S)-2-[(3-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (102 mg, 330 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (163 mg, 430 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 990 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (44,2 mg, 396 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,7 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.57), 0.008 (1.11), 1.718 (5.92),
1.928 (1.66), 1.939 (2.29), 1.951 (2.40), 1.961 (2.25), 1.972 (1.69), 1.985 (1.20),
2.002 (1.67), 2.021 (2.41), 2.039 (2.28), 2.056 (1.75), 2.073 (16.00), 2.524 (3.36),
2.561 (4.73), 2.575 (6.55), 2.588 (3.16), 2.603 (1.16), 2.617 (1.86), 2.631 (0.77),
3.894 (0.84), 3.923 (1.64), 3.953 (1.64), 3.984 (1.63), 4.013 (0.91), 4.154 (0.71),
4.168 (0.80), 4.183 (0.68), 4.219 (1.26), 4.233 (1.28), 4.248 (1.10), 4.262 (1.00),
4.286 (1.40), 4.296 (1.38), 4.315 (1.43), 4.359 (1.19), 4.385 (1.41), 4.429 (0.76),
4.454 (0.96), 4.513 (2.81), 4.525 (5.12), 4.538 (4.60), 4.549 (2.31), 4.563 (0.89),
4.579 (0.85), 4.590 (0.66), 4.607 (0.64), 4.618 (0.74), 4.635 (0.82), 4.644 (0.71),
4.662 (0.76), 4.671 (0.81), 4.686 (0.85), 4.697 (0.74), 4.713 (0.61), 4.975 (3.42),
5.015 (15.16), 5.031 (6.48), 5.041 (5.56), 5.071 (1.15), 5.081 (1.50), 5.355 (1.02),
5.362 (0.91), 5.370 (0.85), 5.380 (0.89), 5.388 (0.96), 5.395 (1.04), 5.498 (1.07),
5.513 (0.91), 5.522 (0.87), 5.531 (0.96), 5.539 (1.02), 7.375 (5.78), 7.386 (5.99),
7.395 (6.11), 7.407 (6.15), 7.925 (6.95), 7.929 (6.74), 7.945 (6.47), 7.949 (6.04),
8.453 (3.20), 8.463 (5.44), 8.474 (2.85).
Primer 397
(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2059]
[2060] (5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (42,1 mg, 123 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (93,1 mg, 245 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (23,8 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 43,8 mg (85% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.71), -0.008 (16.00), 0.008
(14.02), 0.146 (1.78), 1.720 (2.63), 1.732 (2.50), 1.976 (1.45), 1.990 (1.32), 2.059
(1.25), 2.073 (0.99), 2.327 (2.17), 2.366 (1.98), 2.523 (6.85), 2.569 (2.57), 2.582
(3.42), 2.597 (1.78), 2.625 (0.99), 2.669 (2.17), 2.710 (2.04), 4.356 (1.58), 4.375
(1.65), 4.569 (2.24), 4.584 (3.56), 4.596 (2.04), 4.718 (1.05), 4.747 (1.12), 4.833
(1.19), 4.863 (0.86), 4.980 (1.25), 5.020 (8.63), 5.031 (8.76), 5.071 (1.38), 8.256
(4.81), 8.261 (4.81), 8.552 (5.33), 8.557 (5.20).
Primer 398
(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2061]
[2062] (5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (42,1 mg, 123 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (93,1 mg, 245 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (20,5 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,5 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.713 (6.00), 1.937 (2.24), 1.948 (2.38),
1.957 (2.23), 1.997 (1.64), 2.016 (2.36), 2.034 (2.18), 2.052 (1.51), 2.069 (0.81),
2.328 (0.45), 2.366 (0.45), 2.558 (4.75), 2.572 (5.93), 2.586 (2.94), 2.601 (1.13),
2.614 (1.73), 2.628 (0.76), 2.670 (0.50), 2.710 (0.47), 3.892 (0.81), 3.920 (1.61),
3.950 (1.58), 3.982 (1.66), 4.009 (0.93), 4.152 (0.66), 4.167 (0.78), 4.181 (0.66),
4.224 (1.23), 4.279 (1.56), 4.308 (1.43), 4.338 (0.95), 4.362 (1.56), 4.385 (1.03),
4.423 (0.73), 4.449 (0.98), 4.527 (4.92), 4.571 (0.86), 4.597 (0.58), 4.617 (0.68),
4.633 (0.80), 4.669 (0.76), 4.686 (0.76), 4.710 (0.60), 4.971 (2.86), 5.011 (16.00),
5.021 (6.85), 5.031 (5.96), 5.061 (0.91), 5.071 (1.28), 5.355 (0.98), 5.396 (1.03),
5.498 (0.98), 5.539 (1.00), 8.253 (7.23), 8.258 (7.31), 8.553 (3.19), 8.564 (3.14).
Primer 399
(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2063]
[2064] (5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (42,1 mg, 123 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (93,1 mg, 245 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (26,4 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 34,3 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.92), -0.008 (16.00), 0.008
(15.60), 0.146 (1.84), 1.704 (4.24), 1.982 (2.24), 2.008 (2.40), 2.046 (1.84), 2.058
(1.92), 2.327 (3.12), 2.366 (2.88), 2.427 (2.16), 2.523 (10.96), 2.562 (5.68), 2.578
(5.36), 2.605 (1.52), 2.620 (1.60), 2.669 (2.96), 2.709 (2.40), 3.530 (2.88), 3.549
(4.64), 3.568 (2.08), 3.667 (2.00), 3.700 (2.32), 3.733 (1.84), 3.764 (3.12), 3.797
(2.40), 3.809 (2.16), 3.829 (1.36), 3.890 (1.04), 3.909 (2.16), 3.934 (1.52), 3.993
(1.36), 4.035 (1.28), 4.064 (0.80), 4.140 (0.88), 4.171 (1.36), 4.196 (1.28), 4.740
(1.84), 4.755 (2.56), 4.764 (1.76), 4.818 (1.84), 4.834 (2.56), 4.844 (1.92), 4.955
(4.56), 4.995 (13.92), 5.027 (15.92), 5.067 (5.28), 8.250 (10.96), 8.255 (11.12), 8.563
(11.76), 8.568 (11.36).
Primer 400
(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2065]
[2066] (5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (42,1 mg, 123 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (93,1 mg, 245 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (26,4 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,2 mg (87% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.86), -0.008 (16.00), 0.008
(12.91), 0.146 (1.78), 1.695 (4.33), 1.706 (4.95), 1.718 (4.71), 1.950 (2.24), 1.989
(2.47), 2.000 (2.63), 2.027 (2.09), 2.045 (2.24), 2.052 (2.24), 2.062 (2.16), 2.073
(10.59), 2.328 (2.32), 2.366 (2.24), 2.523 (8.66), 2.564 (5.49), 2.576 (6.72), 2.589
(3.79), 2.607 (1.55), 2.620 (2.24), 2.670 (2.78), 2.710 (2.63), 3.452 (1.31), 3.486
(2.24), 3.507 (2.16), 3.516 (2.16), 3.526 (1.78), 3.541 (1.93), 3.560 (1.24), 3.568
(1.55), 3.613 (1.70), 3.627 (1.86), 3.645 (1.16), 3.660 (1.31), 3.668 (1.86), 3.681
(2.78), 3.691 (2.32), 3.701 (2.01), 3.714 (2.86), 3.726 (2.09), 3.744 (2.01), 3.756
(2.01), 3.776 (1.78), 3.789 (1.08), 3.865 (1.55), 3.902 (1.16), 3.927 (1.47), 3.940
(1.78), 3.956 (1.08), 3.976 (1.70), 3.990 (1.70), 4.005 (1.08), 4.019 (1.08), 4.125
(1.08), 4.139 (1.16), 4.153 (1.08), 4.168 (2.24), 4.182 (1.39), 4.195 (1.16), 4.210
(1.08), 4.778 (5.18), 4.787 (6.34), 4.793 (6.96), 4.802 (5.10), 4.952 (4.17), 4.958
(2.94), 4.992 (11.52), 4.997 (11.21), 5.018 (10.36), 5.033 (10.67), 5.058 (2.55), 5.073
(4.17), 5.152 (0.46), 5.252 (1.78), 5.273 (1.93), 5.295 (1.16), 5.326 (1.55), 5.335
(1.47), 5.349 (1.47), 5.362 (1.55), 5.372 (1.86), 5.385 (2.09), 5.405 (1.78), 5.425
(1.24), 5.479 (1.39), 5.492 (1.24), 7.368 (0.54), 8.251 (8.58), 8.255 (8.50), 8.561
(6.65), 8.564 (8.97), 8.570 (7.42).
Primer 401
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2067]
[2068] (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 119 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (59,0 mg, 155 µmol) i trietilamin (50 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R)-3-fluor pirolidin hidrohlorid (18,0 mg, 143 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 27,0 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.64), -0.008 (16.00), 0.008
(12.00), 0.146 (1.33), 1.726 (4.85), 1.990 (5.82), 2.098 (3.27), 2.256 (2.42), 2.327
(3.76), 2.366 (2.30), 2.572 (5.21), 2.585 (7.27), 2.599 (4.36), 2.627 (2.73), 2.669
(4.18), 2.709 (1.88), 3.352 (2.73), 3.370 (2.73), 3.504 (2.36), 3.529 (5.39), 3.554
(4.91), 3.596 (6.36), 3.657 (1.64), 3.682 (1.76), 3.776 (1.58), 3.947 (4.12), 4.009
(1.88), 4.040 (1.33), 4.823 (3.52), 4.861 (3.58), 5.073 (4.06), 5.113 (16.00), 5.133
(9.58), 5.143 (8.67), 5.183 (2.67), 5.268 (2.24), 5.349 (2.18), 5.401 (2.36), 5.482
(2.18), 8.487 (14.30), 8.905 (13.88).
Primer 402
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2069]
[2070] (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 119 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (59,0 mg, 155 µmol) i trietilamin (50 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (16,0 mg, 143 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 14,0 mg (27% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.02), -0.008 (10.73), 0.008 (8.00),
0.146 (1.02), 0.976 (1.48), 0.994 (2.62), 1.719 (3.94), 1.804 (1.71), 1.814 (1.93),
1.822 (4.47), 1.830 (1.90), 1.839 (1.67), 1.906 (16.00), 1.945 (1.55), 1.956 (1.67),
2.023 (1.59), 2.040 (1.40), 2.060 (0.99), 2.327 (1.63), 2.366 (1.55), 2.518 (6.60),
2.523 (6.07), 2.568 (3.72), 2.582 (5.23), 2.595 (3.00), 2.624 (1.59), 2.665 (1.29),
2.670 (1.71), 2.674 (1.21), 2.689 (0.87), 2.710 (1.36), 2.731 (1.18), 2.866 (0.87),
2.890 (1.67), 3.056 (1.78), 3.073 (3.98), 3.091 (1.59), 3.893 (0.53), 3.920 (1.06),
3.950 (1.02), 3.984 (1.06), 4.011 (0.57), 4.167 (0.49), 4.226 (0.87), 4.281 (0.99),
4.312 (0.95), 4.369 (0.99), 4.424 (0.45), 4.451 (0.61), 4.534 (3.22), 4.548 (3.03),
4.575 (0.57), 4.633 (0.53), 4.671 (0.53), 4.687 (0.53), 5.089 (1.10), 5.130 (11.11),
5.183 (0.61), 5.356 (0.68), 5.539 (0.68), 6.273 (1.25), 6.510 (1.44), 7.276 (0.53),
8.491 (5.80), 8.494 (5.76), 8.884 (2.62), 8.901 (2.46).
Primer 403
(5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[2071]
[2072] (5RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (45,0 mg, 119 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (59,0 mg, 155 µmol) i trietilamin (50 µl, 360 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (15,7 mg, 143 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 h na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HATU (59,0 mg, 155 µmol) i trietilamin (50 µl, 360 µmol) i mešano je 3 sata na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 800 µg (2% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.80), -0.009 (16.00), 0.007
(12.68), 0.146 (1.63), 1.723 (1.16), 1.937 (0.93), 2.327 (3.61), 2.365 (2.04), 2.522
(10.53), 2.669 (3.32), 2.709 (2.04), 3.597 (0.76), 3.962 (0.70), 4.022 (0.87), 4.365
(0.64), 4.505 (1.75), 5.081 (0.70), 5.121 (2.44), 5.802 (1.57), 8.487 (2.21), 8.896
(2.44).
Primer 404
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2074] (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (35,0 mg, 92,9 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (45,8 mg, 121 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (49 µl, 280 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (16,0 mg, 111 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 33,8 mg (78% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.47), -0.008 (4.42), 0.008 (2.91), 1.252 (14.54), 1.268 (16.00), 1.276 (11.71), 1.293 (10.07), 1.686 (2.47), 1.699 (3.85),
1.711 (5.07), 1.724 (4.66), 1.932 (0.91), 1.967 (1.93), 1.982 (2.71), 1.991 (2.60),
2.003 (2.78), 2.016 (2.65), 2.029 (1.98), 2.040 (1.95), 2.055 (2.11), 2.066 (2.11),
2.076 (1.61), 2.091 (1.40), 2.101 (0.83), 2.328 (1.12), 2.366 (1.53), 2.379 (1.77),
2.408 (2.13), 2.429 (2.08), 2.453 (1.85), 2.471 (1.93), 2.524 (6.48), 2.571 (6.61),
2.587 (7.49), 2.600 (3.56), 2.617 (1.20), 2.629 (1.87), 2.642 (0.83), 2.670 (1.14),
2.710 (1.14), 2.895 (9.55), 3.115 (1.48), 3.126 (1.56), 3.133 (1.61), 3.144 (1.53),
3.425 (1.72), 3.444 (1.93), 3.463 (1.20), 3.532 (4.14), 3.551 (6.56), 3.571 (3.43),
3.587 (1.17), 3.604 (1.53), 3.621 (1.82), 3.636 (1.53), 3.649 (1.51), 3.670 (2.63),
3.704 (2.86), 3.736 (2.13), 3.767 (3.30), 3.789 (2.21), 3.798 (3.59), 3.815 (2.89),
3.833 (1.90), 3.870 (0.49), 3.892 (1.33), 3.910 (2.73), 3.930 (1.51), 3.936 (1.95),
3.955 (0.86), 3.970 (0.83), 3.998 (1.74), 4.012 (0.91), 4.028 (1.20), 4.040 (1.64),
4.069 (0.96), 4.142 (1.04), 4.174 (1.61), 4.201 (1.56), 4.231 (0.65), 4.750 (2.19),
4.761 (2.71), 4.766 (3.12), 4.776 (2.26), 4.830 (2.24), 4.840 (2.71), 4.845 (3.10),
4.855 (2.21), 5.076 (3.28), 5.116 (13.61), 5.139 (14.33), 5.166 (0.68), 5.180 (3.51),
8.492 (9.52), 8.902 (9.42), 8.987 (0.62).
Primer 405
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2075]
[2076] (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (35,0 mg, 92,9 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (45,8 mg, 121 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (49 µl, 280 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (14,0 mg, 111 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,0 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.09), -0.008 (13.31), 0.008 (8.11),
0.146 (1.09), 1.725 (8.34), 1.734 (8.63), 1.868 (1.37), 1.904 (2.11), 1.913 (1.89),
1.990 (2.91), 2.016 (3.49), 2.069 (4.23), 2.084 (5.66), 2.102 (5.26), 2.120 (3.66),
2.136 (3.37), 2.217 (2.06), 2.265 (2.51), 2.327 (2.46), 2.523 (15.49), 2.566 (4.86),
2.586 (6.51), 2.632 (2.34), 2.669 (2.63), 2.710 (2.11), 3.348 (1.77), 3.371 (1.83),
3.398 (1.94), 3.406 (1.83), 3.460 (1.37), 3.468 (1.43), 3.495 (2.06), 3.504 (2.00),
3.628 (5.26), 3.653 (5.14), 3.680 (3.37), 3.689 (2.69), 3.729 (4.00), 3.749 (4.23),
3.776 (3.37), 3.795 (2.69), 3.828 (0.91), 3.861 (5.43), 4.690 (2.80), 4.699 (3.31),
4.705 (3.43), 4.715 (2.69), 4.747 (3.66), 4.755 (4.06), 4.762 (4.51), 4.771 (3.26),
5.068 (4.69), 5.109 (16.00), 5.133 (9.49), 5.143 (10.46), 5.174 (2.46), 5.184 (3.43),
5.258 (2.74), 5.388 (3.66), 5.511 (2.06), 5.944 (0.86), 8.491 (12.97), 8.904 (13.03).
Primer 406
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2077]
[2078] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (79,3 mg, 243 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (41,8 mg, 291 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol), 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (41,8 mg, 291 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 71,0 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.61), -0.008 (16.00), 0.008
(12.15), 0.146 (1.57), 1.668 (2.08), 1.693 (4.13), 1.910 (1.34), 1.958 (2.12), 1.970
(2.24), 1.980 (2.75), 1.996 (2.00), 2.012 (1.57), 2.023 (1.77), 2.038 (1.81), 2.048
(1.89), 2.073 (7.90), 2.327 (1.69), 2.366 (2.04), 2.378 (1.61), 2.407 (1.97), 2.429
(1.89), 2.449 (1.77), 2.523 (7.23), 2.568 (6.96), 2.583 (3.50), 2.610 (1.61), 2.669
(1.69), 2.709 (1.61), 3.528 (2.59), 3.548 (3.97), 3.563 (1.97), 3.630 (0.51), 3.665
(1.93), 3.698 (2.20), 3.733 (1.93), 3.765 (2.79), 3.779 (1.69), 3.788 (1.57), 3.798
(2.95), 3.805 (2.44), 3.824 (1.14), 3.888 (0.98), 3.906 (2.32), 3.931 (1.53), 3.952
(0.67), 3.962 (0.67), 3.990 (1.42), 4.020 (0.94), 4.033 (1.30), 4.061 (0.86), 4.137
(0.86), 4.168 (1.26), 4.194 (1.30), 4.227 (0.59), 4.724 (1.89), 4.740 (2.52), 4.750
(1.89), 4.804 (1.97), 4.814 (2.36), 4.820 (2.56), 4.829 (1.85), 4.901 (2.91), 4.939
(7.55), 4.984 (7.90), 4.988 (7.98), 5.023 (3.07), 5.027 (3.07), 8.089 (5.07), 8.094
(5.27), 8.113 (5.31), 8.118 (5.35), 8.476 (6.64), 8.480 (6.41).
Primer 407
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2079]
[2080] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (79,3 mg, 243 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (32,5 mg, 291 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (32,5 mg, 291 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol) i mešanje je nastavljeno preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 64,1 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.90), -0.008 (8.03), 0.008 (7.55),
0.146 (0.90), 1.406 (0.80), 1.702 (10.07), 1.911 (2.84), 1.924 (3.75), 1.935 (3.96),
1.945 (3.69), 1.968 (1.91), 1.986 (2.79), 2.005 (3.99), 2.021 (3.59), 2.040 (2.58),
2.059 (1.44), 2.073 (6.46), 2.327 (0.98), 2.366 (0.90), 2.561 (10.79), 2.575 (5.21),
2.590 (1.91), 2.603 (3.19), 2.617 (1.38), 2.670 (1.12), 2.690 (0.98), 2.710 (1.01),
3.892 (1.36), 3.919 (2.74), 3.951 (2.71), 3.982 (2.71), 4.009 (1.59), 4.150 (1.17),
4.165 (1.28), 4.180 (1.06), 4.216 (2.10), 4.229 (2.15), 4.244 (1.91), 4.265 (2.71),
4.295 (2.63), 4.311 (1.38), 4.327 (1.59), 4.355 (2.50), 4.387 (1.67), 4.421 (1.25),
4.446 (1.65), 4.517 (8.93), 4.550 (1.49), 4.566 (1.46), 4.594 (0.93), 4.617 (1.14),
4.634 (1.33), 4.670 (1.25), 4.687 (1.36), 4.697 (1.22), 4.711 (1.01), 4.915 (4.60),
4.919 (4.62), 4.954 (16.00), 4.958 (15.95), 4.981 (8.43), 4.987 (8.05), 5.026 (2.39),
5.353 (1.67), 5.398 (1.70), 5.496 (1.65), 5.541 (1.67), 8.091 (8.53), 8.095 (8.96),
8.115 (8.77), 8.119 (9.09), 8.469 (5.93), 8.478 (5.95).
Primer 408
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2081]
[2082] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (79,3 mg, 243 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (41,8 mg, 291 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol), (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (41,8 mg, 291 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 61,7 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.54), -0.008 (5.15), 0.008 (5.00),
0.146 (0.58), 1.405 (0.52), 1.650 (1.84), 1.660 (2.36), 1.675 (3.11), 1.685 (4.35),
1.697 (5.00), 1.708 (4.91), 1.911 (1.80), 1.922 (1.29), 1.939 (2.40), 1.966 (1.56),
1.979 (2.94), 1.990 (2.55), 2.003 (1.82), 2.019 (2.17), 2.028 (2.27), 2.036 (2.38),
2.044 (2.38), 2.053 (2.21), 2.063 (1.95), 2.073 (16.00), 2.088 (1.14), 2.327 (0.60),
2.366 (0.67), 2.465 (0.99), 2.567 (6.16), 2.580 (3.43), 2.598 (1.22), 2.610 (1.93),
2.623 (0.97), 2.670 (0.73), 2.690 (0.88), 2.710 (0.71), 2.885 (0.86), 3.440 (0.66),
3.450 (1.18), 3.459 (0.79), 3.475 (1.42), 3.484 (2.55), 3.494 (1.95), 3.506 (1.99),
3.516 (2.06), 3.528 (2.14), 3.538 (2.38), 3.547 (1.44), 3.560 (1.07), 3.570 (1.56),
3.580 (0.97), 3.611 (1.61), 3.625 (1.84), 3.644 (1.18), 3.658 (1.37), 3.666 (1.87),
3.681 (3.58), 3.695 (2.36), 3.714 (2.90), 3.727 (2.66), 3.744 (2.14), 3.757 (2.21),
3.778 (1.70), 3.791 (1.11), 3.827 (0.77), 3.843 (1.05), 3.862 (1.63), 3.903 (1.14),
3.925 (1.54), 3.938 (1.78), 3.953 (1.11), 3.973 (1.74), 3.987 (1.72), 4.002 (1.12),
4.016 (1.01), 4.124 (1.09), 4.139 (1.24), 4.152 (1.22), 4.166 (2.15), 4.180 (1.39),
4.194 (1.24), 4.209 (1.09), 4.764 (5.23), 4.778 (6.95), 4.788 (4.87), 4.902 (4.40),
4.941 (11.19), 4.977 (5.60), 4.981 (5.96), 4.989 (6.24), 4.993 (6.07), 5.015 (1.99),
5.020 (2.08), 5.028 (2.66), 5.032 (2.59), 5.242 (1.22), 5.251 (1.87), 5.263 (1.82),
5.273 (1.93), 5.294 (1.20), 5.308 (1.11), 5.316 (1.20), 5.328 (1.50), 5.336 (1.50),
5.348 (1.61), 5.362 (1.52), 5.374 (2.12), 5.385 (2.19), 5.396 (1.82), 5.405 (1.67),
5.410 (1.65), 5.439 (1.09), 5.446 (1.20), 5.457 (1.56), 5.470 (1.50), 5.479 (1.56),
5.492 (1.18), 5.502 (0.75), 8.090 (6.39), 8.114 (6.56), 8.478 (9.27).
Primer 409
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2083]
[2084] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (79,3 mg, 243 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (37,7 mg, 291 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (120 mg, 316 µmol), 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (37,7 mg, 291 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 730 µmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 78,3 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 402 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.72), -0.008 (16.00), 0.008
(14.28), 0.146 (1.61), 1.405 (0.77), 1.695 (5.71), 1.708 (8.45), 1.722 (7.26), 1.952
(2.97), 1.964 (4.40), 1.976 (4.04), 2.014 (1.96), 2.029 (3.27), 2.049 (4.10), 2.063
(3.03), 2.073 (6.48), 2.327 (2.14), 2.366 (1.96), 2.557 (7.26), 2.571 (9.99), 2.586
(4.88), 2.599 (1.78), 2.613 (2.68), 2.669 (2.44), 2.709 (2.02), 2.891 (0.48), 4.324
(2.97), 4.355 (4.82), 4.376 (4.76), 4.407 (2.86), 4.557 (6.72), 4.572 (10.83), 4.585
(6.42), 4.713 (3.03), 4.741 (3.45), 4.772 (1.61), 4.805 (1.61), 4.833 (3.39), 4.861
(2.91), 4.926 (3.51), 4.931 (3.39), 4.965 (14.16), 4.969 (13.86), 4.987 (14.22), 4.991
(14.28), 5.026 (3.33), 5.030 (3.39), 8.094 (9.16), 8.099 (9.52), 8.118 (9.40), 8.123
(9.64), 8.469 (12.61), 8.473 (12.97).
Primer 410
(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2085]
[2086] (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (34,2 mg, čistoća 90%, 99,2 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (48,9 mg, 129 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (52 µl, 300 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (13,3 mg, 119 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,9 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 368 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.23), 0.146 (2.23), 1.699 (11.85),
1.933 (4.77), 2.003 (4.62), 2.021 (4.46), 2.327 (4.54), 2.365 (3.85), 2.559 (12.31),
2.572 (5.54), 2.586 (2.08), 2.602 (3.00), 2.669 (4.31), 2.709 (3.31), 3.826 (1.15),
3.844 (1.69), 3.892 (1.85), 3.921 (3.15), 3.949 (3.23), 3.981 (3.15), 4.009 (2.08),
4.262 (3.46), 4.292 (2.92), 4.353 (2.69), 4.390 (2.00), 4.425 (2.08), 4.449 (2.15),
4.515 (10.92), 4.636 (1.69), 4.906 (4.54), 4.945 (16.00), 4.971 (9.31), 5.016 (2.62),
5.354 (2.08), 5.495 (2.08), 6.950 (6.23), 7.078 (6.69), 7.206 (6.31), 7.926 (4.38),
7.932 (4.69), 7.952 (8.23), 7.974 (4.69), 8.458 (9.00).
Primer 411
(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2087]
[2088] (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (34,2 mg, čistoća 90%, 99,2 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (48,9 mg, 129 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (52 µl, 300 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (17,1 mg, 119 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,7 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.87), -0.008 (16.00), 0.008
(14.04), 0.146 (1.77), 1.695 (3.14), 1.707 (2.94), 1.936 (1.37), 1.977 (1.57), 2.018
(1.37), 2.035 (1.37), 2.327 (2.85), 2.366 (2.65), 2.563 (4.91), 2.609 (1.57), 2.669
(3.24), 2.710 (2.94), 3.449 (1.18), 3.483 (1.77), 3.495 (1.37), 3.505 (1.47), 3.528
(1.57), 3.538 (1.57), 3.570 (1.08), 3.610 (1.18), 3.625 (1.28), 3.644 (0.88), 3.666
(1.18), 3.681 (2.26), 3.695 (1.77), 3.714 (1.77), 3.727 (1.67), 3.745 (1.47), 3.756
(1.37), 3.778 (1.18), 3.845 (1.87), 3.926 (0.98), 3.938 (1.08), 3.973 (1.08), 3.988
(1.08), 4.168 (1.47), 4.182 (0.88), 4.195 (0.79), 4.762 (3.04), 4.777 (3.93), 4.787
(2.75), 4.893 (2.45), 4.932 (5.99), 4.968 (3.14), 4.980 (3.34), 5.020 (1.47), 5.274
(1.18), 5.348 (0.98), 5.374 (1.37), 5.457 (0.98), 7.928 (1.67), 7.950 (3.14), 7.973
(1.57), 8.465 (5.60).
Primer 412
(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2089]
[2090] (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (34,2 mg, čistoća 90%, 99,2 µmol) ubačena je u THF (1,0 ml) i zatim su dodati HBTU (48,9 mg, 129 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (52 µl, 300 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (17,1 mg, 119 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,9 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
spec. optička rotacija: -19,10 (589 nm, 0,5200 g / 100 cm<3>hloroforma)
Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,77 min, e.e. = 98,5% [kolona: Daicel Chiralpak<®>AZ-3 3 ym 50 x 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/i-propanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.80), 0.008 (16.00), 0.146 (1.69),
1.693 (3.83), 1.957 (2.03), 2.086 (3.61), 2.328 (3.27), 2.366 (4.06), 2.566 (6.20),
2.670 (3.27), 2.710 (3.49), 3.530 (2.25), 3.550 (3.27), 3.666 (1.69), 3.700 (1.92),
3.734 (1.69), 3.765 (2.37), 3.800 (2.48), 3.845 (1.46), 3.890 (0.90), 3.907 (1.92),
3.933 (1.46), 3.991 (1.24), 4.033 (1.13), 4.168 (1.24), 4.198 (1.13), 4.739 (2.37),
4.749 (1.58), 4.819 (2.14), 4.895 (2.59), 4.933 (6.42), 4.978 (6.31), 5.015 (2.48),
7.925 (2.37), 7.930 (2.37), 7.949 (3.72), 7.972 (2.25), 7.978 (2.25), 8.463 (7.89),
8.469 (7.66).
Primer 413
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2091]
[2092] (5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (38,0 mg, 116 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (57,1 mg, 150 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (60 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (19,9 mg, 139 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (57,1 mg, 150 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (19,9 mg, 139 µmol). Nakon 6 sati mešanja, dodat je N,N-diizopropiletilamin (60 µl, 350 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,9 mg (čistoća 93%, 75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.81), -0.008 (6.99), 0.008 (5.93),
0.146 (0.77), 1.160 (3.00), 1.178 (6.33), 1.196 (3.08), 1.405 (1.06), 1.686 (0.59),
1.983 (0.62), 2.327 (1.35), 2.366 (1.50), 2.523 (4.58), 2.670 (1.32), 2.710 (1.43),
3.064 (0.51), 3.083 (1.72), 3.095 (1.76), 3.101 (1.68), 3.113 (1.65), 3.131 (0.51),
3.549 (0.84), 3.567 (0.99), 3.670 (0.48), 3.703 (0.55), 3.783 (0.81), 3.807 (0.55),
3.928 (0.51), 4.027 (16.00), 4.767 (0.66), 4.828 (0.48), 4.836 (0.55), 5.111 (7.91),
7.186 (1.61), 7.197 (1.68), 7.206 (1.79), 7.217 (1.76), 8.151 (1.50), 8.170 (1.46),
8.544 (1.72), 8.548 (1.76), 8.555 (1.83), 8.559 (1.68).
Primer 414
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2093]
[2094] (5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (38,0 mg, 116 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (57,1 mg, 150 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (60 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (19,9 mg, 139 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (57,1 mg, 150 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (19,9 mg, 139 µmol). Nakon 6 sati mešanja, dodat je N,N-diizopropiletilamin (60 µl, 350 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 33,6 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.77), -0.008 (16.00), 0.008 (9.91),
0.146 (1.20), 1.699 (0.68), 1.989 (0.80), 2.327 (3.59), 2.366 (4.10), 2.523 (14.98),
2.670 (2.39), 2.710 (1.88), 3.545 (0.74), 3.700 (0.80), 3.928 (0.74), 4.028 (13.27),
4.185 (0.57), 4.798 (1.37), 5.111 (6.78), 5.289 (0.51), 7.182 (1.02), 7.188 (1.20),
7.193 (1.08), 7.199 (1.37), 7.208 (1.37), 7.213 (1.08), 7.219 (1.14), 8.147 (1.08),
8.153 (1.20), 8.167 (1.08), 8.173 (1.14), 8.548 (1.94), 8.555 (1.99), 8.559 (1.94).
Primer 415
(5S)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2095]
[2096] (5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (38,0 mg, 116 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (57,1 mg, 150 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (60 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (18,0 mg, 139 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,8 mg (25% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 404 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.90), 0.008 (6.58), 0.146 (0.85),
1.689 (1.45), 1.968 (0.80), 2.033 (0.65), 2.366 (1.55), 2.523 (4.93), 2.559 (2.04),
2.602 (0.45), 2.710 (1.50), 4.026 (16.00), 4.368 (0.80), 4.395 (0.75), 4.595 (1.00),
4.609 (1.50), 4.621 (1.05), 4.717 (0.50), 4.744 (0.55), 4.861 (0.60), 5.122 (7.13),
7.191 (1.60), 7.202 (1.74), 7.211 (1.69), 7.222 (1.64), 8.153 (1.74), 8.157 (1.79),
8.173 (1.74), 8.177 (1.60), 8.545 (1.79), 8.549 (1.79), 8.556 (1.74), 8.560 (1.64).
Primer 416
(5RS)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[2097]
[2098] (5RS)-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (60,0 mg, 216 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (123 mg, 323 µmol) i trietilamin (90 µl, 650 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin (28,8 mg, 323 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 48 sati na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 24,3 mg (32% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 350 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.93), 0.008 (1.11), 1.721 (0.98),
1.733 (1.10), 1.988 (1.00), 2.040 (0.46), 2.073 (1.80), 2.104 (0.82), 2.136 (0.64),
2.203 (16.00), 2.238 (0.46), 2.268 (0.50), 2.300 (0.64), 2.303 (0.68), 2.327 (0.41),
2.523 (1.89), 2.571 (1.07), 2.595 (1.09), 2.608 (1.43), 2.620 (0.83), 2.650 (0.49),
2.665 (0.50), 2.669 (0.49), 3.345 (0.40), 3.357 (0.54), 3.501 (0.52), 3.508 (0.55),
3.522 (0.69), 3.550 (0.56), 3.569 (0.49), 3.595 (0.91), 3.632 (0.66), 3.653 (0.72),
3.677 (0.52), 3.743 (0.66), 3.775 (0.51), 3.783 (0.46), 3.854 (0.61), 3.940 (0.52),
4.739 (0.43), 4.745 (0.46), 4.812 (0.49), 4.845 (0.42), 4.851 (0.45), 4.946 (5.75),
5.259 (0.41), 5.389 (0.47), 6.226 (2.65).
Primer 417
(5RS)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[2099]
[2100] (5RS)-2-[(3-metil-1,2-oksazol-5-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (60,0 mg, 216 µmol) dodata je u THF (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (123 mg, 323 µmol) i trietilamin (90 µl, 650 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (36,1 mg, 323 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 48 sati na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 19,2 mg (27% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 336 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.714 (1.68), 1.949 (0.76), 2.029 (0.69),
2.072 (0.96), 2.201 (16.00), 2.293 (1.37), 2.585 (1.67), 2.598 (2.00), 2.612 (1.02),
2.639 (0.61), 2.670 (0.45), 3.928 (0.55), 3.954 (0.54), 3.988 (0.53), 4.269 (0.58),
4.300 (0.50), 4.364 (0.45), 4.528 (1.44), 4.541 (2.10), 4.554 (1.49), 4.950 (5.39),
6.234 (3.50), 6.924 (0.44).
Primer 418
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2101]
[2102] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 127 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (62,7 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (21,9 mg, 153 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 23,1 mg (38% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 483 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.63), -0.008 (16.00), 0.008
(12.96), 0.146 (1.63), 1.690 (1.01), 1.783 (1.30), 2.060 (1.95), 2.073 (2.17), 2.092
(2.06), 2.327 (1.23), 2.366 (1.27), 2.445 (1.16), 2.523 (4.45), 2.564 (2.39), 2.584
(2.79), 2.599 (2.57), 2.612 (1.92), 2.625 (1.41), 2.639 (1.48), 2.650 (2.46), 2.664
(1.88), 2.690 (1.09), 2.709 (1.23), 3.578 (1.85), 3.597 (3.00), 3.616 (1.48), 3.722
(1.16), 3.756 (1.34), 3.790 (0.76), 3.813 (2.28), 3.839 (1.52), 3.913 (0.58), 3.931
(1.30), 3.957 (0.87), 3.993 (0.43), 4.020 (0.76), 4.064 (0.69), 4.092 (0.47), 4.174
(0.47), 4.202 (0.76), 4.230 (0.80), 4.855 (1.05), 4.868 (1.70), 4.877 (1.01), 4.922
(1.12), 4.937 (1.67), 4.946 (1.01), 5.218 (10.28), 7.815 (2.68), 7.825 (2.79), 7.835
(2.75), 7.846 (2.79), 8.377 (4.16), 8.385 (4.02), 8.560 (3.40), 8.564 (3.44), 8.580
(3.29), 8.585 (3.11), 9.242 (3.73), 9.247 (3.95), 9.252 (3.87), 9.257 (3.55).
Primer 419
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2103]
[2104] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 127 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (62,7 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (19,2 mg, 153 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,2 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 465 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.73), -0.008 (16.00), 0.008
(12.57), 0.146 (1.73), 1.782 (0.41), 2.109 (0.72), 2.323 (0.90), 2.327 (1.17), 2.366
(1.13), 2.518 (4.56), 2.523 (3.76), 2.581 (0.45), 2.669 (1.51), 2.710 (1.24), 3.453
(11.33), 3.669 (0.72), 3.780 (0.53), 3.880 (0.53), 4.849 (0.49), 5.217 (2.30), 7.817
(0.90), 7.827 (0.90), 7.838 (0.87), 7.848 (0.90), 8.368 (1.69), 8.570 (0.79), 8.590
(0.72), 9.242 (0.87), 9.246 (0.90), 9.252 (0.87), 9.257 (0.79).
Primer 420
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2105]
[2106] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)-1,8-naftiridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 127 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (62,7 mg, 165 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (66 µl, 380 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (17,0 mg, 153 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 20,0 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 451 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.80), -0.008 (16.00), 0.008
(14.79), 0.146 (1.84), 1.759 (1.34), 2.045 (1.72), 2.328 (1.59), 2.366 (1.55), 2.639
(2.64), 2.651 (1.51), 2.669 (2.14), 2.710 (1.51), 3.976 (0.96), 4.280 (0.88), 4.640
(2.26), 4.654 (3.35), 4.665 (2.18), 5.217 (8.00), 5.406 (0.63), 5.549 (0.63), 7.814
(3.18), 7.824 (3.18), 7.835 (3.35), 7.845 (3.31), 8.384 (3.77), 8.558 (2.35), 8.579
(2.30), 9.241 (3.39), 9.246 (3.64), 9.252 (3.73), 9.257 (3.35).
Primer 421
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2107]
[2108] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 162 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (79,8 mg, 211 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (21,7 mg, 194 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 21,0 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.64), -0.008 (6.53), 0.008 (4.72),
0.146 (0.64), 1.648 (1.11), 1.662 (1.43), 1.672 (2.04), 1.696 (3.22), 1.707 (3.33),
1.719 (3.12), 1.956 (2.12), 1.966 (1.95), 2.002 (1.74), 2.012 (1.71), 2.023 (1.87),
2.327 (0.49), 2.523 (1.99), 2.576 (3.91), 2.590 (5.43), 2.604 (2.71), 2.619 (1.02),
2.632 (1.76), 2.646 (0.72), 2.670 (0.52), 3.897 (0.69), 3.926 (1.46), 3.957 (1.54),
3.989 (1.43), 4.020 (0.85), 4.154 (0.63), 4.169 (0.72), 4.185 (0.58), 4.208 (0.80),
4.223 (1.29), 4.238 (1.27), 4.253 (1.21), 4.270 (1.58), 4.291 (1.46), 4.322 (1.18),
4.360 (1.07), 4.394 (0.93), 4.429 (0.66), 4.456 (0.89), 4.503 (0.67), 4.518 (0.83),
4.538 (3.62), 4.551 (5.54), 4.564 (3.58), 4.598 (0.52), 4.632 (0.61), 4.646 (0.69),
4.659 (0.63), 4.684 (0.69), 4.700 (0.72), 4.724 (0.53), 4.883 (16.00), 5.351 (0.91),
5.406 (0.93), 5.494 (0.89), 5.541 (0.77), 5.548 (0.89), 6.515 (0.69), 7.503 (5.54),
7.523 (6.98), 7.694 (4.39), 7.714 (3.70), 8.305 (5.65).
Primer 422
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2109]
[2110] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 162 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (79,8 mg, 211 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (24,4 mg, 194 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,1 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.05), 1.720 (2.57), 1.727 (2.64),
1.870 (0.64), 1.894 (0.61), 1.904 (0.81), 1.968 (0.58), 1.993 (1.05), 2.020 (1.59),
2.042 (1.32), 2.058 (1.52), 2.074 (1.86), 2.085 (2.16), 2.094 (2.00), 2.101 (2.00),
2.121 (1.39), 2.135 (1.42), 2.217 (0.95), 2.237 (0.88), 2.266 (1.15), 2.519 (3.96),
2.524 (4.19), 2.563 (1.96), 2.578 (1.66), 2.602 (2.47), 2.646 (0.91), 2.670 (0.41),
3.344 (1.01), 3.357 (0.85), 3.365 (0.81), 3.393 (0.81), 3.401 (0.78), 3.454 (0.64),
3.464 (0.64), 3.490 (0.85), 3.499 (0.74), 3.606 (0.74), 3.632 (2.77), 3.649 (2.27),
3.655 (2.06), 3.675 (1.76), 3.697 (1.22), 3.721 (1.32), 3.740 (2.10), 3.764 (1.69),
3.783 (1.22), 3.850 (2.40), 4.678 (1.32), 4.687 (1.52), 4.694 (1.56), 4.703 (1.25),
4.736 (1.69), 4.745 (1.83), 4.751 (1.89), 4.760 (1.35), 4.880 (16.00), 5.257 (1.18),
5.380 (1.52), 5.388 (1.49), 5.509 (0.88), 7.504 (4.87), 7.524 (5.92), 7.683 (2.23),
7.690 (3.92), 7.696 (2.44), 7.704 (1.83), 7.710 (3.11), 7.717 (1.76), 8.296 (4.06),
8.302 (3.55).
Primer 423
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2111]
[2112] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 162 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (79,8 mg, 211 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (85 µl, 490 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (27,9 mg, 194 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,2 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.50), -0.008 (4.74), 0.008 (4.04),
0.146 (0.47), 1.660 (1.02), 1.727 (1.22), 1.996 (1.41), 2.007 (1.46), 2.043 (1.07),
2.050 (1.07), 2.059 (0.97), 2.073 (7.86), 2.328 (0.72), 2.366 (0.64), 2.380 (0.87),
2.409 (1.04), 2.424 (0.99), 2.451 (0.82), 2.560 (2.51), 2.569 (3.00), 2.585 (2.75),
2.602 (2.68), 2.645 (0.77), 2.670 (0.69), 2.710 (0.47), 3.529 (1.07), 3.535 (1.14),
3.546 (1.74), 3.556 (1.89), 3.565 (1.12), 3.575 (0.99), 3.665 (1.14), 3.699 (1.29),
3.742 (0.62), 3.776 (1.54), 3.807 (2.41), 3.825 (0.60), 3.886 (0.57), 3.906 (1.24),
3.931 (0.87), 3.951 (0.45), 3.990 (0.79), 4.018 (0.52), 4.034 (0.72), 4.061 (0.42),
4.144 (0.47), 4.175 (0.72), 4.200 (0.72), 4.749 (1.07), 4.764 (1.44), 4.773 (1.04),
4.821 (1.12), 4.836 (1.46), 4.845 (1.19), 4.884 (16.00), 7.505 (4.99), 7.525 (6.28),
7.686 (3.32), 7.692 (3.40), 7.707 (2.70), 7.713 (2.73), 8.296 (4.94), 8.302 (4.79).
Primer 424
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2113]
[2114] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 227 µmol) ubačena je u THF (4,0 ml) i zatim su dodati HBTU (112 mg, 295 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (39,1 mg, 272 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 66,6 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.29), -0.008 (12.08), 0.008
(10.65), 0.146 (1.38), 1.656 (1.21), 1.729 (1.51), 1.968 (1.25), 2.013 (1.73), 2.073
(3.54), 2.327 (1.60), 2.366 (1.12), 2.563 (2.59), 2.588 (2.33), 2.601 (2.93), 2.644
(1.08), 2.669 (1.73), 2.710 (1.25), 3.532 (1.25), 3.577 (0.82), 3.626 (0.99), 3.683
(1.51), 3.700 (1.51), 3.731 (1.29), 3.752 (1.21), 3.866 (0.78), 3.937 (0.95), 3.973
(0.86), 3.988 (0.91), 4.170 (0.91), 4.797 (3.19), 4.884 (16.00), 5.274 (0.95), 5.349
(0.91), 5.389 (1.16), 7.506 (4.27), 7.526 (5.13), 7.680 (1.94), 7.688 (3.15), 7.695
(2.42), 7.709 (2.59), 7.716 (1.90), 8.297 (5.65).
Primer 425
(5S)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2115]
[2116] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 175 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HATU (86,6 mg, 228 µmol) i trietilamin (73 µl, 530 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (26,0 mg, 210 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi.
Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,00 mg (čistoća 92%, 1% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 412 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.69), 0.008 (0.58), 1.637 (0.77),
1.644 (0.75), 1.650 (0.83), 1.663 (1.03), 1.677 (0.98), 1.689 (0.86), 1.736 (2.05),
1.751 (1.94), 1.774 (1.47), 1.783 (1.06), 1.828 (0.46), 1.840 (0.61), 1.851 (1.28),
1.862 (1.57), 1.873 (1.33), 1.883 (1.65), 1.894 (1.33), 1.905 (0.93), 1.939 (0.53),
1.973 (1.71), 1.985 (1.87), 1.997 (2.24), 2.007 (2.18), 2.019 (2.06), 2.029 (1.92),
2.036 (1.50), 2.045 (1.31), 2.057 (1.10), 2.065 (1.19), 2.073 (1.20), 2.523 (1.16),
2.561 (1.75), 2.575 (1.29), 2.597 (1.55), 2.608 (2.72), 2.619 (1.46), 2.638 (0.72),
2.650 (1.08), 2.661 (0.60), 3.204 (0.72), 3.236 (1.03), 3.343 (1.75), 3.369 (1.82),
3.379 (2.23), 3.397 (1.40), 3.419 (0.57), 3.434 (0.59), 3.443 (0.61), 3.457 (1.07),
3.464 (1.17), 3.473 (0.55), 3.485 (1.17), 3.550 (0.84), 3.567 (1.42), 3.573 (1.63),
3.589 (1.08), 3.599 (0.79), 3.640 (0.94), 3.651 (1.41), 3.667 (0.92), 3.678 (1.09),
3.756 (0.58), 4.270 (1.41), 4.363 (1.43), 4.696 (0.83), 4.705 (0.97), 4.712 (1.06),
4.720 (0.84), 4.739 (1.24), 4.752 (1.60), 4.761 (1.16), 4.806 (0.64), 4.815 (0.73),
4.821 (0.85), 4.830 (0.66), 4.964 (2.61), 5.005 (10.49), 5.078 (2.55), 5.087 (2.46),
7.909 (16.00), 8.640 (4.92).
Primer 426
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2117]
[2118] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 85%, 248 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (122 mg, 323 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 750 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (42,8 mg, 298 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (122 mg, 323 µmol) i 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (42,8 mg, 298 µmol). Nakon 48 sati mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 750 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 79,6 mg (72% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.48), -0.008 (6.41), 0.008 (3.51),
0.146 (0.45), 1.375 (0.48), 1.405 (1.49), 1.663 (1.24), 1.673 (1.15), 1.736 (1.52),
1.753 (1.60), 1.879 (0.96), 1.973 (1.38), 2.008 (1.88), 2.018 (1.83), 2.033 (1.72),
2.043 (1.49), 2.051 (1.35), 2.059 (1.24), 2.073 (1.86), 2.087 (0.90), 2.327 (0.59),
2.366 (0.93), 2.382 (1.12), 2.410 (1.77), 2.430 (2.33), 2.524 (3.77), 2.569 (3.63),
2.579 (2.76), 2.593 (2.87), 2.610 (3.09), 2.623 (1.63), 2.641 (0.70), 2.653 (1.01),
2.665 (0.96), 2.710 (0.53), 3.534 (1.38), 3.541 (1.55), 3.551 (2.11), 3.561 (2.17),
3.570 (1.29), 3.580 (1.07), 3.637 (0.45), 3.670 (1.32), 3.704 (1.52), 3.738 (0.79),
3.747 (0.93), 3.782 (1.97), 3.813 (2.59), 3.830 (0.70), 3.847 (0.42), 3.891 (0.76),
3.910 (1.49), 3.928 (0.84), 3.936 (1.04), 3.954 (0.53), 3.965 (0.51), 3.994 (0.93),
4.009 (0.51), 4.023 (0.70), 4.038 (0.84), 4.065 (0.51), 4.149 (0.59), 4.180 (0.84),
4.205 (0.87), 4.767 (1.35), 4.781 (1.69), 4.791 (1.21), 4.837 (1.32), 4.847 (1.52),
4.853 (1.63), 4.862 (1.15), 4.970 (0.56), 5.011 (14.23), 7.909 (16.00), 7.912 (15.38),
8.641 (5.34).
Primer 427
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2119]
[2120] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (1000 mg, 2,92 mmol) dodata je u THF (18 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (1,44 g, 3,80 mmol) i N,Ndiizopropil etilamin (1,5 ml, 8,8 mmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (404 mg, 3,21 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo je dodat N,N-diizopropil etilamin (1,5 ml, 8,8 mmol) i reakciona smeša je ponovo mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 797 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.38), 0.008 (1.26), 1.701 (1.17),
1.712 (1.38), 1.726 (2.00), 1.736 (2.23), 1.883 (0.48), 1.906 (0.51), 1.923 (0.69),
1.997 (0.78), 2.005 (0.71), 2.022 (0.83), 2.032 (1.29), 2.053 (1.08), 2.073 (2.09),
2.088 (1.68), 2.104 (2.05), 2.124 (1.15), 2.139 (1.40), 2.173 (0.41), 2.221 (0.76),
2.243 (0.69), 2.256 (0.74), 2.270 (1.03), 2.327 (0.53), 2.366 (0.55), 2.519 (2.48),
2.523 (2.09), 2.562 (1.54), 2.566 (1.52), 2.572 (1.59), 2.588 (1.33), 2.614 (2.30),
2.657 (0.90), 2.670 (0.87), 2.710 (0.53), 3.275 (0.69), 3.350 (0.62), 3.362 (0.60),
3.371 (0.64), 3.398 (0.74), 3.407 (0.74), 3.459 (0.55), 3.468 (0.57), 3.495 (0.78),
3.504 (0.74), 3.610 (0.51), 3.637 (2.16), 3.654 (1.86), 3.661 (1.86), 3.681 (1.54),
3.703 (0.97), 3.727 (1.06), 3.746 (1.89), 3.769 (1.36), 3.775 (1.40), 3.789 (1.15),
3.857 (2.28), 4.694 (1.10), 4.703 (1.33), 4.710 (1.38), 4.719 (1.10), 4.752 (1.43),
4.761 (1.56), 4.767 (1.82), 4.776 (1.36), 5.008 (14.51), 5.260 (1.13), 5.383 (1.33),
5.391 (1.40), 5.511 (0.78), 7.911 (16.00), 7.914 (10.30), 8.642 (4.76).
Primer 428
(5S)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2121]
[2122] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (65,0 mg, 190 µmol) dodata je u THF na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (93,9 mg, 247 µmol) i trietilamin (79 µl, 570 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (25,0 mg, 228 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,00 mg (1% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.09), -0.008 (15.61), 0.008
(16.00), 0.146 (2.16), 2.327 (4.71), 2.366 (2.16), 2.669 (4.41), 2.709 (2.40), 4.534
(2.09), 5.010 (4.48), 5.803 (1.93), 7.908 (5.87), 8.644 (3.25).
Primer 429
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2123]
[2124] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 292 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (144 mg, 380 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 880 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (39,1 mg, 351 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 74,0 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 400 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.658 (1.45), 1.670 (1.85), 1.683 (2.02),
1.694 (2.48), 1.708 (2.77), 1.961 (1.98), 1.975 (1.90), 2.004 (1.65), 2.025 (1.68),
2.359 (0.41), 2.579 (3.40), 2.593 (4.36), 2.606 (2.24), 2.622 (0.89), 2.635 (1.39),
2.648 (0.64), 2.662 (0.41), 3.898 (0.65), 3.925 (1.33), 3.956 (1.38), 3.986 (1.29),
4.017 (0.76), 4.153 (0.58), 4.168 (0.66), 4.181 (0.58), 4.206 (0.78), 4.222 (1.20),
4.236 (1.17), 4.250 (1.09), 4.269 (1.43), 4.290 (1.27), 4.321 (0.95), 4.359 (1.03),
4.393 (0.82), 4.429 (0.61), 4.455 (0.79), 4.505 (0.69), 4.518 (0.83), 4.550 (3.29),
4.562 (4.78), 4.575 (3.11), 4.597 (0.48), 4.630 (0.56), 4.646 (0.65), 4.681 (0.63),
4.699 (0.62), 4.724 (0.46), 5.004 (12.79), 5.347 (0.79), 5.401 (0.77), 5.489 (0.79),
5.543 (0.75), 7.905 (16.00), 8.642 (6.38).
Primer 430
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2125]
[2126] (5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (390 mg, 1,28 mmol) ubačena je u THF (5,0 ml) i zatim su dodati HBTU (632 mg, 1,67 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (670 µl, 3,8 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (193 mg, 1,54 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 98,9 mg (20% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,57 min; MS (ESIpos): m/z = 376 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.34), 0.008 (1.26), 1.706 (0.98),
1.718 (1.14), 2.003 (0.53), 2.048 (0.45), 2.073 (0.60), 2.083 (0.66), 2.108 (0.58),
2.134 (0.43), 2.524 (1.18), 2.565 (0.60), 2.593 (0.91), 3.632 (1.01), 3.650 (0.75),
3.677 (0.48), 3.718 (0.42), 3.736 (0.77), 3.765 (0.54), 3.781 (0.53), 3.827 (16.00),
3.851 (0.91), 4.661 (0.43), 4.671 (0.50), 4.677 (0.55), 4.686 (0.45), 4.719 (0.57),
4.727 (0.67), 4.734 (0.76), 4.743 (0.60), 4.762 (5.88), 5.258 (0.42), 5.389 (0.56),
6.784 (2.23), 6.806 (2.39), 7.551 (0.72), 7.557 (1.53), 7.563 (0.93), 7.572 (0.71),
7.578 (1.46), 7.584 (0.86), 8.054 (1.92).
Primer 431
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2127]
[2128] (5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (390 mg, 1,28 mmol) ubačena je u THF (5,0 ml) i zatim su dodati HBTU (632 mg, 1,67 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (670 µl, 3,8 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (221 mg, 1,54 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 111 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 394 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.88), 0.008 (0.85), 1.657 (0.55),
1.695 (0.52), 1.707 (0.63), 1.716 (0.71), 1.730 (0.60), 1.948 (0.53), 1.956 (0.47),
1.994 (0.68), 2.003 (0.53), 2.018 (0.42), 2.029 (0.48), 2.037 (0.53), 2.045 (0.50),
2.052 (0.41), 2.073 (0.81), 2.525 (0.94), 2.575 (0.99), 2.588 (1.28), 2.599 (0.72),
2.630 (0.43), 3.482 (0.43), 3.491 (0.41), 3.532 (0.52), 3.539 (0.47), 3.625 (0.42),
3.666 (0.41), 3.679 (0.56), 3.686 (0.47), 3.699 (0.72), 3.713 (0.46), 3.722 (0.55),
3.752 (0.47), 3.764 (0.45), 3.825 (14.71), 3.828 (16.00), 3.935 (0.40), 4.169 (0.44),
4.766 (8.26), 5.275 (0.42), 5.376 (0.42), 5.386 (0.47), 5.398 (0.40), 6.785 (1.86),
6.806 (2.01), 7.547 (0.88), 7.555 (1.43), 7.562 (1.08), 7.569 (0.92), 7.576 (1.40),
7.583 (1.01), 8.054 (2.30).
Primer 432
(2S)-1-({(5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il}karbonil)pirolidin-2-karbonitril
[2129]
[2130] (5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (390 mg, 1,28 mmol) ubačena je u THF (5,0 ml) i zatim su dodati HBTU (632 mg, 1,67 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (670 µl, 3,8 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril hidrohlorid (204 mg, 1,54 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 109 mg (18% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.93), 0.008 (0.87), 1.988 (0.50),
2.027 (0.70), 2.045 (0.98), 2.059 (1.43), 2.076 (1.42), 2.093 (0.73), 2.104 (0.58),
2.115 (0.48), 2.135 (0.50), 2.148 (0.61), 2.159 (0.53), 2.206 (0.71), 2.225 (0.67),
2.237 (0.42), 2.562 (0.56), 2.573 (0.59), 2.587 (0.46), 2.608 (0.41), 2.620 (0.75),
2.632 (0.43), 2.899 (0.83), 3.670 (1.14), 3.686 (2.31), 3.703 (1.10), 3.828 (16.00),
4.767 (3.05), 4.772 (2.80), 4.786 (0.78), 4.793 (1.36), 4.803 (1.54), 4.813 (1.53),
4.823 (0.80), 6.788 (1.71), 6.810 (1.83), 7.550 (1.02), 7.556 (1.09), 7.571 (1.03),
7.577 (1.07), 8.051 (1.46), 8.056 (1.52).
Primer 433
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2131]
[2132] (5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (390 mg, 1,28 mmol) ubačena je u THF (5,0 ml) i zatim su dodati HBTU (632 mg, 1,67 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (670 µl, 3,8 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (172 mg, 1,54 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 82,9 mg (18% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 362 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.77), 0.008 (0.79), 1.697 (1.16),
1.940 (0.55), 2.002 (0.46), 2.013 (0.50), 2.524 (1.06), 2.564 (1.20), 2.578 (1.49),
2.591 (0.77), 2.620 (0.48), 3.825 (16.00), 3.955 (0.41), 4.252 (0.44), 4.517 (0.94),
4.529 (1.44), 4.542 (0.94), 4.769 (4.35), 6.783 (1.53), 6.804 (1.66), 7.561 (1.13),
7.582 (1.11), 8.061 (1.73).
Primer 434
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2133]
[2134] (5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (390 mg, 1,28 mmol) ubačena je u THF (5,0 ml) i zatim su dodati HBTU (632 mg, 1,67 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (670 µl, 3,8 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (221 mg, 1,54 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 113 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 394 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.54), 0.008 (0.53), 1.688 (0.41),
1.711 (0.48), 1.970 (0.42), 1.978 (0.42), 1.988 (0.48), 1.996 (0.44), 2.003 (0.43),
2.571 (1.03), 2.587 (1.08), 2.602 (0.57), 3.535 (0.42), 3.544 (0.64), 3.555 (0.70),
3.663 (0.41), 3.697 (0.46), 3.776 (0.65), 3.805 (0.80), 3.826 (16.00), 3.906 (0.47),
4.728 (0.41), 4.737 (0.47), 4.743 (0.54), 4.752 (0.49), 4.766 (6.00), 4.802 (0.43),
4.812 (0.47), 4.817 (0.53), 6.784 (1.80), 6.806 (1.94), 7.553 (1.14), 7.559 (1.17),
7.574 (1.11), 7.580 (1.14), 8.052 (1.50), 8.058 (1.50).
Primer 435
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2135]
[2136] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,3 mg, 260 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (128 mg, 338 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (44,8 mg, 312 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,0 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.81), -0.008 (16.00), 0.008
(13.78), 0.146 (1.81), 1.672 (0.93), 1.733 (1.14), 1.882 (1.08), 1.975 (1.60), 2.072
(1.08), 2.327 (2.12), 2.366 (2.01), 2.572 (2.84), 2.583 (2.22), 2.598 (2.01), 2.616
(2.22), 2.669 (2.43), 2.709 (1.91), 3.550 (1.55), 3.561 (1.65), 3.670 (0.98), 3.704
(1.19), 3.744 (0.72), 3.777 (1.34), 3.809 (2.01), 3.893 (0.62), 3.911 (1.19), 3.937
(0.83), 3.990 (0.72), 4.033 (0.72), 4.182 (0.72), 4.204 (0.72), 4.765 (0.98), 4.780
(1.34), 4.852 (1.29), 4.917 (13.42), 7.757 (4.34), 8.421 (4.44), 8.562 (4.03), 8.568
(3.77).
Primer 436
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2137]
[2138] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,3 mg, 260 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (128 mg, 338 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (34,8 mg, 312 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (49 mg, 130 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (23 µl, 125 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,1 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,57 min; MS (ESIpos): m/z = 366 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.83), 0.008 (0.80), 1.651 (0.61),
1.665 (0.79), 1.675 (1.03), 1.690 (1.16), 1.700 (1.51), 1.714 (1.68), 1.723 (1.58),
1.909 (0.49), 1.953 (0.99), 1.963 (1.10), 1.972 (1.01), 1.986 (0.90), 1.995 (0.74),
2.012 (0.88), 2.022 (0.90), 2.032 (0.99), 2.057 (0.66), 2.074 (16.00), 2.520 (1.07),
2.524 (0.97), 2.566 (1.41), 2.573 (1.38), 2.591 (2.03), 2.605 (2.84), 2.618 (1.45),
2.634 (0.55), 2.646 (0.92), 2.660 (0.43), 2.690 (0.60), 3.932 (0.79), 3.962 (0.80),
3.994 (0.79), 4.023 (0.46), 4.215 (0.43), 4.228 (0.70), 4.243 (0.67), 4.257 (0.64),
4.274 (0.83), 4.297 (0.77), 4.327 (0.60), 4.366 (0.55), 4.400 (0.50), 4.461 (0.51),
4.524 (0.43), 4.556 (2.02), 4.568 (2.95), 4.581 (2.13), 4.921 (8.65), 5.192 (0.68),
5.347 (0.77), 5.354 (0.83), 5.402 (0.67), 5.410 (0.72), 5.490 (0.53), 5.497 (0.60),
5.545 (0.50), 5.552 (0.56), 7.775 (2.69), 8.432 (4.55), 8.572 (3.67), 8.577 (3.79).
Primer 437
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2139]
[2140] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,3 mg, 260 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (128 mg, 338 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (40,4 mg, 312 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (49 mg, 130 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (23 µl, 125 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,8 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.59), -0.008 (5.47), 0.008 (4.69),
0.146 (0.60), 1.695 (1.59), 1.710 (2.35), 1.720 (2.72), 1.734 (1.99), 1.958 (0.72),
1.970 (0.76), 1.981 (1.13), 1.995 (1.53), 2.027 (0.83), 2.036 (1.05), 2.051 (1.54),
2.061 (1.18), 2.073 (1.96), 2.087 (0.63), 2.327 (0.67), 2.366 (0.54), 2.523 (2.30),
2.565 (1.83), 2.580 (2.04), 2.587 (2.00), 2.600 (2.59), 2.613 (3.34), 2.626 (1.60),
2.641 (0.58), 2.654 (0.92), 2.669 (1.03), 2.710 (0.51), 4.339 (1.04), 4.367 (1.75),
4.390 (1.76), 4.421 (1.05), 4.607 (2.34), 4.622 (3.64), 4.634 (2.33), 4.728 (1.10),
4.758 (1.26), 4.790 (0.59), 4.822 (0.57), 4.851 (1.25), 4.882 (1.12), 4.924 (16.00),
7.768 (5.18), 7.773 (3.13), 8.428 (5.44), 8.432 (5.42), 8.565 (4.90), 8.571 (4.84).
Primer 438
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2141]
[2142] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,3 mg, 260 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (128 mg, 338 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (39,2 mg, 312 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (49 mg, 130 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (23 µl, 125 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,6 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.20), 0.008 (0.99), 1.177 (0.44),
1.410 (0.46), 1.700 (1.25), 1.711 (1.50), 1.725 (2.19), 1.734 (2.40), 1.877 (0.52),
1.911 (0.70), 1.997 (0.86), 2.029 (1.30), 2.051 (0.98), 2.067 (1.28), 2.078 (1.62),
2.088 (1.79), 2.103 (2.22), 2.138 (1.51), 2.221 (0.81), 2.242 (0.75), 2.270 (1.07),
2.524 (1.52), 2.566 (1.62), 2.570 (1.54), 2.576 (1.72), 2.592 (1.47), 2.619 (2.43),
2.661 (1.02), 2.670 (0.75), 2.891 (0.42), 3.274 (0.51), 3.293 (0.65), 3.303 (0.97),
3.321 (1.00), 3.331 (0.68), 3.349 (0.59), 3.362 (0.61), 3.371 (0.69), 3.398 (0.80),
3.406 (0.81), 3.460 (0.67), 3.468 (0.69), 3.495 (0.93), 3.504 (0.91), 3.613 (0.95),
3.637 (3.39), 3.655 (3.06), 3.660 (3.02), 3.681 (3.39), 3.705 (3.85), 3.723 (4.42),
3.743 (5.52), 3.770 (4.46), 3.778 (4.07), 3.816 (2.19), 3.855 (3.39), 4.695 (1.16),
4.704 (1.42), 4.710 (1.48), 4.719 (1.18), 4.752 (1.50), 4.761 (1.71), 4.768 (1.94),
4.776 (1.44), 4.915 (16.00), 5.260 (1.18), 5.384 (1.48), 5.391 (1.55), 5.512 (0.86),
7.756 (4.66), 7.761 (5.11), 8.422 (6.31), 8.564 (5.64), 8.569 (5.61).
Primer 439
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2143]
[2144] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,3 mg, 260 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (128 mg, 338 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (44,8 mg, 312 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (49 mg, 130 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (23 µl, 125 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (49 mg, 130 µmol), N,N-diizopropiletilamin (23 µl, 125 µmol) i (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (19 mg, 130 µmol) i mešano je preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 15,1 mg (15% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.42), -0.008 (4.20), 0.008 (3.95),
0.146 (0.45), 1.659 (1.27), 1.685 (0.73), 1.732 (1.72), 1.938 (0.60), 1.972 (1.30),
1.994 (1.06), 2.014 (1.71), 2.038 (1.11), 2.049 (1.17), 2.056 (1.27), 2.064 (1.29),
2.073 (3.97), 2.084 (0.91), 2.091 (0.96), 2.099 (0.83), 2.327 (0.49), 2.366 (0.60),
2.523 (2.56), 2.561 (1.97), 2.565 (1.88), 2.576 (2.48), 2.586 (1.71), 2.591 (1.64),
2.600 (2.40), 2.614 (3.24), 2.626 (1.90), 2.645 (0.71), 2.656 (1.13), 2.669 (1.04),
2.709 (0.60), 2.829 (0.45), 2.849 (0.88), 2.867 (0.47), 3.456 (0.56), 3.481 (0.65),
3.490 (1.14), 3.501 (0.87), 3.524 (1.00), 3.536 (1.37), 3.545 (1.36), 3.555 (0.84),
3.568 (0.57), 3.578 (0.75), 3.588 (0.49), 3.618 (0.81), 3.631 (0.91), 3.650 (0.57),
3.664 (0.71), 3.673 (0.92), 3.687 (1.51), 3.704 (1.64), 3.714 (6.37), 3.725 (1.80),
3.741 (1.11), 3.756 (1.34), 3.768 (1.56), 3.789 (0.84), 3.802 (0.68), 3.871 (0.84),
3.890 (0.49), 3.913 (0.73), 3.925 (0.89), 3.939 (0.91), 3.954 (0.54), 3.975 (0.88),
3.989 (0.94), 4.004 (0.58), 4.018 (0.54), 4.133 (0.54), 4.148 (0.71), 4.161 (0.62),
4.175 (1.03), 4.188 (0.69), 4.201 (0.58), 4.216 (0.57), 4.801 (2.22), 4.813 (3.34),
4.823 (2.17), 4.917 (16.00), 5.255 (0.84), 5.266 (0.88), 5.276 (1.00), 5.287 (0.83),
5.298 (0.62), 5.312 (0.61), 5.330 (0.73), 5.338 (0.71), 5.351 (0.76), 5.366 (0.69),
5.379 (0.91), 5.389 (1.06), 5.399 (0.85), 5.408 (0.95), 5.417 (0.85), 5.429 (0.65),
5.442 (0.64), 5.451 (0.68), 5.458 (0.71), 5.473 (0.76), 5.481 (0.75), 5.495 (0.62),
6.826 (1.08), 6.847 (1.30), 7.099 (1.17), 7.121 (1.00), 7.753 (3.97), 7.758 (4.19),
8.419 (5.98), 8.564 (4.00).
Primer 440
(5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2145]
[2146] (5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (35,0 mg, 92,9 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (45,8 mg, 121 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (49 µl, 280 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (16,0 mg, 111 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 25,0 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.49), -0.008 (13.42), 0.008
(10.58), 0.146 (1.49), 1.640 (1.49), 1.752 (1.90), 2.032 (2.58), 2.073 (2.31), 2.328
(4.34), 2.366 (2.98), 2.523 (12.20), 2.583 (2.85), 2.622 (3.39), 2.670 (4.88), 2.710
(3.12), 3.494 (1.63), 3.621 (1.22), 3.691 (2.17), 3.930 (1.08), 3.979 (1.08), 4.176
(1.22), 4.826 (3.80), 5.041 (16.00), 5.390 (1.36), 7.035 (9.63), 8.066 (6.10), 8.538
(8.14).
Primer 441
(5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2148] (5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (35,0 mg, 92,9 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (45,8 mg, 121 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (49 µl, 280 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (16,0 mg, 111 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 27,0 mg (62% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,60 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.15), -0.008 (10.01), 0.008 (8.29),
0.146 (1.04), 1.656 (1.27), 1.746 (1.61), 2.020 (2.07), 2.327 (2.65), 2.366 (3.57),
2.383 (1.15), 2.411 (1.50), 2.432 (1.50), 2.452 (1.38), 2.523 (11.28), 2.564 (4.14),
2.579 (3.22), 2.590 (3.68), 2.604 (2.99), 2.623 (3.34), 2.665 (3.11), 2.669 (3.34),
2.709 (2.99), 3.542 (1.84), 3.563 (2.65), 3.573 (1.50), 3.582 (1.38), 3.676 (1.61),
3.709 (1.73), 3.745 (1.38), 3.778 (1.96), 3.813 (2.99), 3.831 (0.81), 3.894 (0.92),
3.912 (1.73), 3.939 (1.15), 3.996 (1.15), 4.038 (1.04), 4.067 (0.69), 4.154 (0.58),
4.186 (0.92), 4.210 (0.92), 4.242 (0.46), 4.781 (1.38), 4.795 (1.96), 4.805 (1.38),
4.849 (1.50), 4.864 (1.96), 4.873 (1.38), 5.040 (16.00), 8.068 (5.99), 8.538 (5.87).
Primer 442
(5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2149]
[2150] (5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 236 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (116 mg, 307 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 710 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (40,7 mg, 283 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,0 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.46), 0.008 (2.19), 1.654 (0.57),
1.723 (0.70), 1.956 (0.53), 2.001 (0.70), 2.024 (0.45), 2.035 (0.49), 2.043 (0.55),
2.051 (0.51), 2.060 (0.43), 2.073 (2.65), 2.562 (1.13), 2.572 (0.79), 2.586 (1.04),
2.599 (1.36), 2.611 (0.79), 2.642 (0.49), 2.670 (0.45), 3.486 (0.49), 3.523 (0.43),
3.532 (0.57), 3.541 (0.57), 3.626 (0.43), 3.668 (0.43), 3.682 (0.62), 3.700 (0.74),
3.721 (0.62), 3.734 (0.42), 3.751 (0.49), 3.765 (0.51), 3.924 (14.47), 3.926 (16.00),
3.972 (0.42), 3.985 (0.43), 4.171 (0.45), 4.792 (1.87), 4.804 (8.38), 5.254 (0.42),
5.266 (0.43), 5.276 (0.47), 5.375 (0.45), 5.388 (0.51), 5.399 (0.42), 5.407 (0.40),
7.739 (1.63), 7.745 (2.99), 7.750 (1.89), 8.015 (1.65), 8.021 (3.08), 8.026 (1.76).
Primer 443
(5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2151]
[2152] (5S)-2-[(5-hlor-6-metoksipiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 236 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (116 mg, 307 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 710 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (40,7 mg, 283 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,0 mg (35% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.15), 0.008 (1.91), 1.722 (0.45),
1.972 (0.71), 1.996 (0.50), 2.073 (0.45), 2.328 (0.43), 2.524 (1.63), 2.569 (1.20),
2.586 (1.03), 2.601 (1.03), 2.670 (0.49), 3.528 (0.41), 3.537 (0.45), 3.546 (0.65),
3.557 (0.73), 3.667 (0.43), 3.700 (0.49), 3.775 (0.64), 3.805 (0.84), 3.909 (0.58),
3.925 (16.00), 4.759 (0.54), 4.769 (0.41), 4.805 (6.06), 4.832 (0.60), 4.842 (0.49),
7.744 (2.13), 7.749 (2.24), 8.020 (1.96), 8.025 (1.94).
Primer 444
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2153]
[2154] (5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 205 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HATU (101 mg, 267 µmol) i trietilamin (86 µl, 620 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (30,9 mg, 246 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,9 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 413 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.84), 0.008 (1.64), 1.163 (0.63),
1.633 (0.62), 1.642 (0.77), 1.655 (0.92), 1.667 (1.04), 1.681 (0.99), 1.707 (1.53),
1.719 (2.14), 1.731 (2.70), 1.741 (2.21), 1.909 (0.49), 1.968 (0.74), 1.997 (2.63),
2.027 (1.41), 2.037 (1.44), 2.049 (1.05), 2.065 (1.42), 2.072 (3.24), 2.080 (1.67),
2.089 (1.84), 2.101 (2.01), 2.137 (1.51), 2.174 (0.50), 2.220 (0.91), 2.257 (1.10),
2.269 (1.15), 2.327 (0.55), 2.366 (0.43), 2.523 (2.43), 2.567 (2.31), 2.584 (1.52),
2.597 (1.92), 2.609 (3.44), 2.621 (2.07), 2.639 (0.82), 2.650 (1.26), 2.665 (0.98),
2.710 (0.48), 3.274 (0.47), 3.352 (0.69), 3.363 (1.15), 3.381 (0.87), 3.393 (0.71),
3.407 (0.80), 3.468 (0.52), 3.494 (0.59), 3.505 (1.14), 3.524 (1.79), 3.552 (1.39),
3.570 (1.09), 3.596 (2.27), 3.613 (0.45), 3.638 (1.50), 3.655 (1.92), 3.681 (1.22),
3.696 (0.75), 3.724 (0.78), 3.744 (1.50), 3.772 (1.20), 3.784 (1.18), 3.855 (1.53),
3.922 (0.58), 3.946 (1.15), 3.969 (0.53), 3.983 (0.47), 4.011 (0.55), 4.043 (0.44),
4.698 (0.75), 4.706 (0.90), 4.713 (0.96), 4.722 (0.74), 4.754 (0.99), 4.763 (1.08),
4.770 (1.21), 4.779 (0.91), 4.824 (0.79), 4.838 (1.28), 4.848 (0.82), 4.861 (0.92),
4.869 (1.02), 4.876 (1.13), 4.885 (1.03), 4.930 (16.00), 5.261 (1.04), 5.270 (1.03),
5.348 (0.69), 5.393 (1.16), 5.481 (0.68), 5.512 (0.56), 7.508 (2.41), 7.527 (4.04),
7.572 (2.77), 7.591 (5.41), 7.620 (5.71), 7.648 (4.73), 7.667 (2.61).
Primer 445
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2155]
[2156] (5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 176 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (86,7 mg, 229 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (92 µl, 530 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (30,3 mg, 211 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 41,9 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.53), -0.008 (5.75), 0.008 (4.69),
0.146 (0.53), 1.244 (0.79), 1.259 (0.86), 1.274 (0.53), 1.667 (1.25), 1.731 (1.52),
1.937 (0.51), 1.971 (1.17), 2.012 (1.57), 2.036 (1.01), 2.054 (1.16), 2.063 (1.11),
2.073 (2.67), 2.090 (0.92), 2.327 (0.74), 2.366 (0.63), 2.523 (3.53), 2.570 (2.56),
2.580 (1.83), 2.594 (2.36), 2.608 (3.14), 2.620 (1.85), 2.651 (1.14), 2.665 (1.16),
2.669 (1.07), 2.710 (0.78), 3.033 (0.43), 3.403 (0.58), 3.455 (0.63), 3.490 (1.27),
3.499 (0.92), 3.512 (1.11), 3.521 (1.12), 3.532 (0.99), 3.544 (1.06), 3.565 (0.56),
3.574 (0.79), 3.616 (0.86), 3.630 (0.96), 3.649 (0.56), 3.671 (0.94), 3.685 (1.75),
3.699 (1.24), 3.719 (1.37), 3.732 (1.22), 3.751 (0.99), 3.762 (1.02), 3.785 (0.59),
3.797 (0.51), 3.871 (0.81), 3.926 (0.79), 3.941 (0.89), 3.955 (0.56), 3.976 (0.89),
3.990 (0.88), 4.005 (0.53), 4.018 (0.48), 4.134 (0.54), 4.149 (0.61), 4.162 (0.59),
4.176 (0.99), 4.190 (0.68), 4.202 (0.63), 4.218 (0.58), 4.803 (2.28), 4.816 (3.22),
4.825 (2.15), 4.930 (16.00), 5.266 (0.86), 5.277 (0.99), 5.298 (0.64), 5.330 (0.73),
5.339 (0.71), 5.352 (0.79), 5.366 (0.71), 5.376 (0.92), 5.390 (1.06), 5.400 (0.86),
5.409 (0.94), 5.443 (0.63), 5.473 (0.73), 5.482 (0.76), 5.495 (0.59), 7.505 (1.73),
7.524 (2.86), 7.572 (1.90), 7.591 (3.72), 7.614 (6.46), 7.648 (3.85), 7.668 (2.18).
Primer 446
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2157]
[2158] (5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 176 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (86,7 mg, 229 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (92 µl, 530 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (30,3 mg, 211 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,0 mg (50% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,62 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.35), 0.008 (3.36), 0.146 (0.40),
1.672 (1.05), 1.681 (0.96), 1.695 (0.89), 1.720 (1.32), 1.731 (1.28), 1.872 (0.59),
1.972 (1.05), 1.986 (1.17), 2.001 (1.31), 2.013 (1.47), 2.041 (1.03), 2.049 (1.03),
2.057 (1.00), 2.066 (0.92), 2.072 (0.98), 2.085 (0.76), 2.092 (0.66), 2.327 (0.56),
2.366 (0.78), 2.381 (0.85), 2.410 (1.01), 2.430 (0.96), 2.452 (0.79), 2.523 (2.83),
2.576 (2.41), 2.591 (2.53), 2.608 (2.78), 2.620 (1.36), 2.640 (0.54), 2.652 (0.84),
2.665 (0.79), 2.710 (0.57), 3.537 (1.29), 3.549 (1.82), 3.557 (1.97), 3.568 (1.11),
3.576 (1.01), 3.648 (1.56), 3.670 (1.23), 3.703 (1.36), 3.738 (1.12), 3.772 (1.54),
3.783 (1.03), 3.791 (0.84), 3.808 (1.83), 3.828 (0.65), 3.839 (0.48), 3.894 (0.62),
3.913 (1.56), 3.932 (0.75), 3.939 (0.96), 3.958 (0.61), 3.991 (0.82), 4.005 (0.42),
4.019 (0.56), 4.033 (0.75), 4.061 (0.45), 4.149 (0.46), 4.181 (0.73), 4.208 (0.71),
4.767 (1.12), 4.776 (1.31), 4.782 (1.45), 4.792 (1.06), 4.840 (1.14), 4.850 (1.29),
4.855 (1.47), 4.865 (1.09), 4.931 (16.00), 7.506 (2.20), 7.525 (3.60), 7.572 (2.11),
7.591 (4.15), 7.616 (5.26), 7.648 (3.33), 7.668 (1.87).
Primer 447
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2159]
[2160] (5S)-3-okso-2-[3-(trifluormetil)benzil]-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 176 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (86,7 mg, 229 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (92 µl, 530 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (23,5 mg, 211 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,5 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.79), -0.008 (16.00), 0.008
(13.70), 0.146 (1.87), 1.708 (2.94), 1.961 (1.58), 2.327 (2.73), 2.366 (2.51), 2.523
(9.47), 2.584 (3.52), 2.599 (4.52), 2.613 (2.44), 2.641 (1.65), 2.669 (3.16), 2.709
(2.80), 3.928 (1.15), 3.959 (1.22), 3.990 (1.22), 4.266 (1.29), 4.290 (1.22), 4.463
(0.72), 4.554 (2.87), 4.566 (4.23), 4.931 (12.77), 5.353 (0.79), 5.495 (0.79), 7.511
(2.44), 7.529 (4.23), 7.572 (2.22), 7.590 (4.30), 7.621 (5.88), 7.649 (4.66), 7.669
(2.65).
Primer 448
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2161]
[2162] (5S)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (61,0 mg, 170 µmol) dodata je u THF (2,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (83,9 mg, 221 µmol) i trietilamin (71 µl, 510 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (25,6 mg, 204 µmol) i reakciona smeša je mešana tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.93), -0.008 (16.00), 0.008
(15.16), 0.146 (2.01), 1.727 (1.51), 2.077 (1.26), 2.327 (5.70), 2.366 (3.43), 2.523
(15.58), 2.606 (1.76), 2.669 (5.78), 2.710 (2.85), 3.652 (1.09), 3.852 (0.84), 4.908
(7.71), 5.400 (0.84), 7.481 (1.26), 7.502 (2.18), 7.528 (1.93), 7.577 (1.42), 7.685
(1.68).
Primer 449
(5S)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2163]
[2164] (5S)-2-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 167 µmol) dodata je u THF na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (82,3 mg, 217 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (22,0 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,0 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.18), 0.008 (1.77), 1.662 (1.86),
1.710 (2.59), 1.719 (2.65), 1.732 (2.18), 1.906 (1.39), 1.919 (1.36), 1.931 (2.08),
1.942 (3.09), 1.954 (2.81), 1.964 (1.67), 1.993 (1.96), 2.003 (2.15), 2.012 (1.89),
2.029 (1.51), 2.328 (0.66), 2.367 (0.50), 2.519 (3.50), 2.524 (3.94), 2.566 (2.08),
2.580 (2.81), 2.592 (5.24), 2.605 (2.75), 2.621 (1.23), 2.634 (1.93), 2.646 (0.85),
2.670 (0.73), 2.675 (0.57), 2.710 (0.54), 3.596 (1.61), 3.603 (1.89), 3.621 (2.05),
3.630 (2.65), 3.646 (1.86), 3.660 (1.74), 3.671 (1.74), 3.920 (2.05), 3.932 (2.34),
3.952 (0.57), 4.021 (3.63), 4.045 (3.85), 4.054 (2.08), 4.062 (1.93), 4.101 (1.39),
4.116 (1.74), 4.127 (1.45), 4.142 (1.33), 4.339 (1.45), 4.357 (2.43), 4.378 (1.67),
4.485 (2.62), 4.502 (5.08), 4.515 (6.28), 4.526 (6.94), 4.537 (5.24), 4.551 (2.21),
4.905 (16.00), 4.910 (15.78), 5.791 (2.78), 5.803 (6.75), 5.817 (3.47), 7.476 (1.86),
7.501 (4.51), 7.525 (3.22), 7.565 (2.97), 7.570 (3.16), 7.577 (3.50), 7.598 (1.80),
7.674 (4.45), 7.691 (4.45).
Primer 450
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2165]
[2166] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 292 µmol) dodata je u DMF (3,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (144 mg, 380 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (150 µl, 880 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (44,0 mg, 351 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 65,8 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.51), -0.008 (16.00), 0.008
(10.48), 0.146 (1.36), 1.751 (1.65), 1.952 (0.65), 2.104 (1.79), 2.271 (1.00), 2.323
(3.01), 2.328 (3.80), 2.366 (3.16), 2.518 (15.50), 2.523 (12.84), 2.565 (1.79), 2.580
(1.29), 2.607 (1.15), 2.634 (2.01), 2.670 (4.16), 2.710 (2.94), 3.413 (0.72), 3.474
(0.43), 3.502 (0.65), 3.637 (1.79), 3.654 (1.72), 3.679 (1.22), 3.703 (0.79), 3.753
(1.29), 3.777 (1.22), 3.790 (0.93), 3.857 (1.87), 4.722 (0.93), 4.731 (1.22), 4.780
(1.15), 4.795 (1.51), 5.027 (12.27), 5.261 (1.00), 5.383 (1.15), 5.512 (0.72), 7.486
(2.44), 7.752 (5.31), 8.729 (3.87), 8.741 (3.95).
Primer 451
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(4-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2167]
[2168] (5S)-2-(4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,8 mg, 215 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml, 25 mmol) i zatim su dodati HBTU (106 mg, 280 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 650 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (37,1 mg, 259 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 34,6 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,38 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.79), -0.008 (16.00), 0.008
(12.60), 0.146 (1.70), 1.710 (1.61), 1.995 (1.52), 2.042 (1.07), 2.327 (1.97), 2.366
(1.70), 2.380 (0.98), 2.410 (1.16), 2.565 (3.40), 2.580 (2.86), 2.597 (2.86), 2.638
(1.07), 2.670 (2.23), 2.709 (1.61), 3.536 (1.34), 3.547 (2.06), 3.557 (2.15), 3.575
(1.07), 3.665 (1.25), 3.700 (1.43), 3.743 (0.72), 3.775 (1.70), 3.807 (2.59), 3.889
(0.72), 3.907 (1.52), 3.934 (1.07), 3.991 (0.89), 4.035 (0.80), 4.063 (0.54), 4.172
(0.80), 4.198 (0.80), 4.738 (1.16), 4.747 (1.43), 4.798 (15.28), 4.828 (1.61), 4.838
(1.43), 7.141 (4.11), 7.163 (9.56), 7.185 (6.08), 7.256 (5.27), 7.270 (5.90), 7.277
(4.38), 7.291 (3.66).
Primer 452
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2169]
[2170] (5S)-2-(4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,8 mg, 215 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (106 mg, 280 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 650 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (37,1 mg, 259 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 63,3 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: -0.149 (1.91), -0.008 (16.00), 0.008
(12.70), 0.146 (1.74), 1.722 (1.04), 2.002 (1.04), 2.072 (2.43), 2.327 (2.61), 2.366
(1.91), 2.523 (7.65), 2.582 (1.91), 2.595 (2.43), 2.638 (0.87), 2.670 (2.78), 2.710
(1.91), 3.533 (1.04), 3.576 (0.70), 3.626 (0.70), 3.669 (0.70), 3.681 (1.04), 3.701
(1.22), 3.724 (0.87), 3.865 (0.70), 3.940 (0.70), 3.973 (0.70), 3.987 (0.70), 4.171
(0.70), 4.796 (13.22), 5.273 (0.70), 5.388 (0.87), 7.142 (2.43), 7.164 (5.39), 7.183
(3.30), 7.251 (2.26), 7.258 (2.96), 7.264 (3.30), 7.272 (4.35), 7.279 (2.43), 7.287
(1.91), 7.293 (1.74).
Primer 453
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(4-metoksibenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2171]
[2172] (5S)-2-(4-metoksibenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (258 mg, čistoća 50%, 425 µmol) ubačena je u THF (5,0 ml) i zatim su dodati HBTU (210 mg, 553 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (220 µl, 1,3 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (73,3 mg, 510 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,0 mg (27% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.34), 0.008 (1.31), 1.251 (0.81),
1.261 (0.45), 1.268 (0.91), 1.274 (0.75), 1.291 (0.69), 1.642 (1.22), 1.666 (1.72),
1.676 (1.72), 1.692 (1.93), 1.704 (2.38), 1.714 (2.23), 1.728 (1.80), 1.909 (1.09),
1.927 (0.81), 1.944 (1.55), 1.970 (0.99), 1.980 (1.58), 1.993 (1.98), 2.001 (1.45),
2.018 (1.24), 2.028 (1.43), 2.036 (1.54), 2.043 (1.48), 2.052 (1.30), 2.063 (1.13),
2.071 (1.21), 2.079 (1.07), 2.088 (0.60), 2.519 (2.90), 2.570 (2.85), 2.583 (3.73),
2.595 (2.10), 2.615 (0.77), 2.626 (1.27), 2.637 (0.61), 2.689 (1.56), 3.441 (0.48),
3.450 (0.85), 3.459 (0.56), 3.483 (1.47), 3.493 (1.43), 3.505 (1.30), 3.514 (1.58),
3.567 (7.32), 3.576 (7.76), 3.586 (7.42), 3.612 (8.16), 3.625 (7.94), 3.644 (6.37),
3.666 (4.04), 3.681 (3.25), 3.688 (2.58), 3.701 (2.92), 3.714 (2.10), 3.754 (1.71),
3.766 (1.50), 3.787 (0.85), 3.800 (0.81), 3.816 (0.49), 3.829 (0.56), 3.835 (0.54),
3.845 (0.73), 3.858 (0.89), 3.864 (1.10), 3.883 (0.53), 3.893 (0.71), 3.906 (1.04),
3.925 (1.06), 3.938 (1.20), 3.953 (0.74), 3.967 (0.87), 3.974 (1.15), 3.988 (1.16),
4.002 (0.75), 4.017 (0.68), 4.130 (0.73), 4.144 (0.83), 4.158 (0.79), 4.171 (1.38),
4.186 (0.90), 4.198 (0.79), 4.214 (0.73), 4.679 (1.11), 4.719 (16.00), 4.727 (8.38),
4.766 (3.94), 4.772 (4.71), 4.777 (3.27), 5.244 (0.73), 5.254 (1.15), 5.266 (1.15),
5.276 (1.25), 5.285 (1.01), 5.296 (0.78), 5.309 (0.68), 5.318 (0.74), 5.329 (0.93),
5.338 (0.94), 5.350 (0.98), 5.365 (0.88), 5.377 (1.23), 5.387 (1.39), 5.399 (1.14),
5.408 (1.13), 5.414 (1.01), 5.427 (0.75), 5.439 (0.71), 5.448 (0.78), 5.458 (0.98),
5.467 (0.94), 5.471 (0.95), 5.480 (1.00), 5.494 (0.74), 5.503 (0.49), 6.871 (7.75),
6.875 (9.87), 6.893 (10.64), 6.896 (10.38), 7.023 (0.51), 7.150 (8.24), 7.158 (9.24),
7.172 (7.28), 7.179 (7.47), 7.278 (0.53).
Primer 454
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2173]
[2174] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 184 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (90,8 mg, 239 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (96 µl, 550 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (27,8 mg, 221 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 39,0 mg (53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.96), -0.008 (16.00), 0.008
(13.73), 0.146 (1.86), 1.728 (2.22), 1.906 (0.57), 2.088 (1.34), 2.266 (0.77), 2.327
(2.74), 2.366 (2.01), 2.523 (8.52), 2.609 (2.12), 2.669 (3.05), 2.710 (1.96), 3.395
(0.72), 3.493 (0.67), 3.635 (1.91), 3.652 (1.55), 3.719 (0.98), 3.742 (1.50), 3.768
(1.14), 3.853 (1.81), 4.702 (1.08), 4.759 (1.50), 4.820 (10.48), 5.260 (0.88), 5.390
(1.14), 5.515 (0.77), 7.245 (1.70), 7.251 (1.75), 7.373 (2.84), 7.396 (4.34), 7.417
(2.32), 7.431 (2.48), 7.449 (2.43).
Primer 455
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2175]
[2176] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 184 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (90,8 mg, 239 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (96 µl, 550 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (31,7 mg, 221 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 58,0 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,58 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.55), 0.008 (1.32), 1.670 (1.23),
1.680 (1.17), 1.692 (1.09), 1.718 (1.53), 1.728 (1.49), 1.980 (1.43), 1.995 (1.50),
2.005 (1.65), 2.011 (1.56), 2.028 (1.19), 2.039 (1.16), 2.047 (1.23), 2.054 (1.17),
2.064 (1.10), 2.073 (2.24), 2.082 (0.88), 2.090 (0.75), 2.366 (0.60), 2.381 (1.02),
2.392 (0.77), 2.410 (1.20), 2.430 (1.27), 2.453 (1.50), 2.524 (3.13), 2.576 (2.70),
2.591 (2.97), 2.607 (3.10), 2.620 (1.50), 2.637 (0.64), 2.650 (0.89), 2.664 (0.57),
3.519 (0.50), 3.531 (1.37), 3.538 (1.52), 3.549 (2.11), 3.559 (2.19), 3.567 (1.25),
3.578 (1.06), 3.669 (1.29), 3.702 (1.46), 3.742 (0.87), 3.764 (0.74), 3.775 (1.80),
3.790 (1.00), 3.808 (2.63), 3.826 (0.68), 3.891 (0.72), 3.910 (1.44), 3.928 (0.83),
3.936 (1.00), 3.954 (0.54), 3.961 (0.49), 3.990 (0.91), 4.005 (0.49), 4.019 (0.64),
4.033 (0.81), 4.061 (0.48), 4.145 (0.56), 4.177 (0.81), 4.202 (0.81), 4.756 (1.32),
4.765 (1.56), 4.771 (1.70), 4.780 (1.35), 4.824 (16.00), 4.838 (1.92), 4.844 (1.80),
4.853 (1.29), 7.220 (1.53), 7.226 (1.67), 7.232 (1.69), 7.241 (2.18), 7.247 (2.07),
7.253 (1.88), 7.258 (1.76), 7.373 (3.79), 7.396 (5.05), 7.418 (3.12), 7.429 (3.04),
7.434 (2.80), 7.447 (2.95), 7.452 (2.59).
Primer 456
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2177]
[2178] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 184 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (90,8 mg, 239 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (96 µl, 550 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (31,7 mg, 221 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,0 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,47 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.55), -0.008 (5.05), 0.008 (4.28),
0.146 (0.63), 1.665 (1.23), 1.729 (1.60), 1.971 (1.16), 2.008 (1.55), 2.051 (1.26),
2.073 (4.71), 2.327 (0.99), 2.366 (0.67), 2.569 (2.20), 2.594 (2.20), 2.607 (2.83),
2.649 (0.94), 2.669 (1.09), 2.709 (0.70), 3.489 (1.14), 3.535 (1.14), 3.545 (1.11),
3.577 (0.70), 3.614 (0.85), 3.629 (0.89), 3.684 (1.33), 3.702 (1.48), 3.723 (1.28),
3.755 (1.01), 3.868 (0.84), 3.926 (0.78), 3.939 (0.87), 3.974 (0.78), 3.989 (0.85),
4.172 (0.92), 4.198 (0.67), 4.804 (3.62), 4.823 (16.00), 5.276 (1.02), 5.388 (1.06),
7.235 (2.20), 7.241 (2.32), 7.370 (2.59), 7.374 (2.87), 7.395 (4.42), 7.419 (2.37),
7.430 (3.75), 7.448 (3.63).
Primer 457
(5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2179]
[2180] (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 184 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (90,8 mg, 239 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (96 µl, 550 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (24,7 mg, 221 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,0 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.57), 0.008 (3.84), 0.146 (0.49),
1.258 (0.93), 1.681 (2.36), 1.704 (3.76), 1.957 (2.08), 2.028 (1.83), 2.327 (0.80),
2.366 (0.82), 2.523 (4.91), 2.558 (3.01), 2.583 (3.84), 2.597 (5.04), 2.610 (2.50),
2.626 (0.97), 2.639 (1.59), 2.653 (0.69), 2.670 (0.82), 2.710 (0.77), 3.901 (0.73),
3.928 (1.44), 3.958 (1.46), 3.990 (1.41), 4.018 (0.80), 4.158 (0.62), 4.172 (0.71),
4.185 (0.60), 4.225 (1.30), 4.239 (1.30), 4.257 (1.41), 4.267 (1.53), 4.290 (1.46),
4.323 (1.22), 4.352 (0.88), 4.395 (0.88), 4.433 (0.66), 4.457 (0.86), 4.504 (0.75),
4.519 (0.91), 4.544 (3.87), 4.557 (5.50), 4.570 (3.62), 4.597 (0.49), 4.634 (0.62),
4.647 (0.75), 4.684 (0.71), 4.701 (0.64), 4.727 (0.51), 4.824 (16.00), 5.353 (0.88),
5.406 (0.88), 5.496 (0.86), 5.550 (0.82), 7.248 (2.87), 7.372 (3.29), 7.394 (5.26),
7.417 (2.67), 7.437 (3.31), 7.455 (3.12).
Primer 458
(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2181]
[2182] (5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (43,8 mg, 117 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (57,5 mg, 152 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (61 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (20,1 mg, 140 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 34,5 mg (64% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 465 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.42), -0.008 (3.58), 0.008 (3.09),
1.226 (0.51), 1.244 (2.93), 1.259 (3.14), 1.274 (1.91), 1.644 (1.11), 1.668 (1.31),
1.689 (0.71), 1.741 (1.61), 1.908 (0.42), 1.947 (0.57), 1.982 (1.26), 2.003 (0.99),
2.020 (1.73), 2.027 (1.86), 2.045 (1.14), 2.062 (1.35), 2.073 (10.23), 2.089 (0.92),
2.098 (1.01), 2.106 (0.86), 2.328 (0.72), 2.366 (0.69), 2.523 (2.61), 2.570 (1.65),
2.581 (2.21), 2.591 (1.59), 2.605 (2.33), 2.618 (3.14), 2.630 (1.74), 2.649 (0.63),
2.661 (1.28), 2.670 (1.10), 2.690 (0.47), 2.710 (0.62), 3.459 (1.13), 3.484 (1.37),
3.493 (1.94), 3.504 (1.68), 3.516 (1.88), 3.527 (2.12), 3.538 (2.52), 3.549 (2.94),
3.558 (2.70), 3.581 (3.49), 3.590 (3.41), 3.619 (4.21), 3.633 (4.46), 3.652 (4.12),
3.666 (4.31), 3.674 (4.64), 3.689 (5.20), 3.705 (4.91), 3.721 (4.10), 3.756 (3.02),
3.769 (2.58), 3.790 (1.77), 3.803 (1.52), 3.831 (1.04), 3.871 (1.29), 3.909 (0.90),
3.929 (1.08), 3.943 (1.17), 3.958 (0.75), 3.979 (1.08), 3.994 (1.05), 4.008 (0.68),
4.022 (0.63), 4.133 (0.65), 4.148 (0.69), 4.161 (0.68), 4.175 (1.07), 4.188 (0.77),
4.201 (0.69), 4.216 (0.62), 4.810 (2.43), 4.822 (3.53), 4.832 (2.28), 4.944 (16.00),
5.266 (0.95), 5.276 (1.04), 5.288 (0.89), 5.299 (0.62), 5.314 (0.71), 5.330 (0.74),
5.338 (0.74), 5.353 (0.83), 5.367 (0.75), 5.389 (1.10), 5.400 (0.87), 5.409 (0.99),
5.419 (0.92), 5.430 (0.71), 5.443 (0.68), 5.452 (0.72), 5.466 (0.74), 5.475 (0.72),
5.482 (0.69), 5.496 (0.60), 7.372 (2.48), 7.391 (2.67), 7.563 (5.75), 7.841 (4.19),
7.861 (3.82).
Primer 459
(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2183]
[2184] (5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (43,8 mg, 117 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (57,5 mg, 152 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (61 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (15,6 mg, 140 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 30,2 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 433 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.53), 0.146 (0.51), 1.708 (3.04),
1.722 (3.28), 1.971 (2.07), 2.038 (1.83), 2.073 (2.00), 2.327 (0.95), 2.366 (0.68),
2.576 (2.89), 2.594 (3.71), 2.608 (5.08), 2.621 (2.63), 2.637 (1.10), 2.650 (1.74),
2.665 (1.38), 2.710 (0.77), 3.907 (0.79), 3.933 (1.42), 3.963 (1.48), 3.995 (1.47),
4.020 (0.91), 4.175 (0.70), 4.228 (1.29), 4.275 (1.60), 4.295 (1.38), 4.324 (0.95),
4.366 (1.12), 4.400 (0.97), 4.437 (0.73), 4.462 (0.95), 4.524 (0.79), 4.563 (3.93),
4.577 (5.79), 4.589 (3.84), 4.651 (0.74), 4.704 (0.74), 4.945 (16.00), 5.354 (0.91),
5.409 (0.92), 5.497 (0.91), 5.550 (0.92), 7.376 (4.42), 7.396 (4.84), 7.569 (8.14),
7.838 (5.78), 7.859 (5.38).
Primer 460
(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2185]
[2186] (5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (43,8 mg, 117 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (57,5 mg, 152 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (61 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (20,1 mg, 140 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,4 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 465 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.40), 0.008 (2.34), 1.244 (0.81),
1.259 (0.99), 1.273 (0.51), 1.673 (1.17), 1.682 (1.09), 1.696 (0.85), 1.740 (1.46),
1.997 (1.38), 2.012 (1.69), 2.022 (1.79), 2.037 (1.61), 2.049 (1.29), 2.057 (1.23),
2.064 (1.17), 2.073 (1.49), 2.085 (0.85), 2.093 (0.87), 2.100 (0.77), 2.281 (0.61),
2.328 (0.48), 2.366 (0.80), 2.382 (0.99), 2.393 (0.73), 2.411 (1.18), 2.430 (1.12),
2.454 (0.87), 2.519 (3.66), 2.562 (2.91), 2.576 (2.85), 2.587 (3.07), 2.602 (2.51),
2.619 (2.89), 2.631 (1.54), 2.650 (0.62), 2.661 (1.10), 2.670 (0.87), 2.690 (0.52),
2.710 (0.48), 2.885 (1.28), 3.535 (1.31), 3.542 (1.47), 3.553 (2.09), 3.562 (2.29),
3.571 (1.29), 3.582 (1.16), 3.639 (0.45), 3.673 (1.35), 3.707 (1.54), 3.726 (0.90),
3.745 (0.94), 3.779 (1.78), 3.786 (1.32), 3.795 (0.96), 3.812 (2.75), 3.831 (0.74),
3.893 (0.70), 3.911 (1.53), 3.930 (0.84), 3.938 (1.09), 3.956 (0.52), 3.966 (0.48),
3.995 (0.94), 4.009 (0.48), 4.023 (0.66), 4.037 (0.85), 4.065 (0.52), 4.150 (0.56),
4.182 (0.85), 4.207 (0.83), 4.541 (0.47), 4.776 (1.25), 4.785 (1.47), 4.791 (1.72),
4.800 (1.24), 4.847 (1.27), 4.856 (1.53), 4.862 (1.75), 4.871 (1.39), 4.945 (16.00),
7.371 (3.29), 7.392 (3.62), 7.564 (5.98), 7.839 (6.03), 7.860 (5.60).
Primer 461
(5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2187]
[2188] (5S)-2-[3-hlor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (43,8 mg, 117 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (57,6 mg, 152 µmol) i trietilamin (49 µl, 350 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (17,6 mg, 140 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,7 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 447 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.72), 1.733 (2.50), 1.741 (2.71),
1.885 (0.64), 1.920 (0.84), 1.970 (0.43), 2.005 (0.84), 2.036 (1.45), 2.047 (1.38),
2.073 (5.69), 2.085 (2.04), 2.108 (2.42), 2.125 (1.59), 2.140 (1.69), 2.222 (0.93),
2.242 (0.83), 2.256 (0.88), 2.270 (1.25), 2.327 (0.64), 2.366 (0.49), 2.523 (2.19),
2.570 (1.75), 2.580 (1.91), 2.595 (1.62), 2.621 (2.69), 2.665 (1.42), 2.710 (0.48),
3.276 (0.75), 3.351 (0.78), 3.363 (0.72), 3.372 (0.77), 3.398 (0.88), 3.407 (0.88),
3.460 (0.65), 3.469 (0.68), 3.496 (0.90), 3.505 (0.85), 3.611 (0.59), 3.637 (2.74),
3.655 (2.24), 3.661 (2.19), 3.681 (1.85), 3.703 (1.17), 3.726 (1.26), 3.747 (2.22),
3.770 (1.72), 3.788 (1.39), 3.857 (2.72), 4.703 (1.29), 4.712 (1.56), 4.719 (1.59),
4.728 (1.26), 4.761 (1.69), 4.769 (1.88), 4.776 (2.09), 4.785 (1.56), 4.941 (16.00),
5.260 (1.32), 5.391 (1.77), 5.512 (0.96), 7.372 (2.79), 7.393 (3.03), 7.564 (5.99),
7.839 (5.89), 7.859 (5.50).
Primer 462
(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2189]
[2190] (5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 233 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (115 mg, 303 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (40,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 58,0 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,48 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.47), -0.008 (4.35), 0.008 (4.00),
0.146 (0.45), 1.665 (1.17), 1.699 (0.65), 1.736 (1.42), 1.940 (0.53), 1.973 (1.13),
2.020 (1.52), 2.038 (0.97), 2.048 (1.03), 2.056 (1.13), 2.063 (1.09), 2.073 (1.78),
2.083 (0.83), 2.091 (0.87), 2.099 (0.77), 2.328 (0.69), 2.366 (0.87), 2.523 (2.79),
2.558 (1.86), 2.572 (2.14), 2.582 (1.44), 2.597 (2.04), 2.610 (2.73), 2.621 (1.50),
2.640 (0.57), 2.652 (0.91), 2.665 (0.91), 2.710 (0.81), 3.490 (3.44), 3.500 (2.45),
3.512 (2.10), 3.522 (1.82), 3.533 (1.58), 3.545 (1.54), 3.567 (0.83), 3.576 (0.99),
3.586 (0.75), 3.617 (0.91), 3.630 (1.01), 3.650 (0.63), 3.664 (0.73), 3.672 (0.99),
3.686 (1.56), 3.702 (1.40), 3.719 (1.13), 3.734 (1.11), 3.755 (1.01), 3.765 (0.91),
3.788 (0.55), 3.800 (0.51), 3.868 (0.75), 3.904 (0.57), 3.927 (0.73), 3.941 (0.87),
3.955 (0.49), 3.977 (0.81), 3.991 (0.83), 4.005 (0.51), 4.019 (0.47), 4.131 (0.53),
4.146 (0.59), 4.159 (0.57), 4.172 (0.89), 4.186 (0.63), 4.199 (0.57), 4.214 (0.51),
4.806 (3.42), 4.848 (16.00), 5.265 (0.83), 5.276 (0.93), 5.287 (0.81), 5.298 (0.55),
5.312 (0.63), 5.329 (0.67), 5.337 (0.65), 5.351 (0.75), 5.365 (0.65), 5.388 (0.99),
5.407 (0.91), 5.417 (0.81), 5.428 (0.63), 5.441 (0.59), 5.464 (0.65), 5.472 (0.63),
5.482 (0.65), 5.494 (0.53), 6.947 (0.61), 7.075 (2.08), 7.081 (2.65), 7.101 (2.89),
7.202 (0.65), 7.219 (2.81), 7.244 (2.93), 7.547 (1.88), 7.551 (2.10), 7.567 (3.46),
7.571 (3.84), 7.587 (1.78), 7.591 (2.00).
Primer 463
(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2191]
[2192] (5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 233 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (115 mg, 303 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 700 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (31,2 mg, 280 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,0 mg (40% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,38 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.92), -0.008 (8.11), 0.146 (0.92),
1.680 (1.99), 1.704 (3.16), 1.715 (3.24), 1.964 (2.03), 2.029 (1.81), 2.327 (1.35),
2.366 (1.49), 2.523 (5.80), 2.560 (3.34), 2.585 (3.95), 2.599 (5.08), 2.612 (2.70),
2.627 (1.03), 2.641 (1.64), 2.669 (1.49), 2.710 (1.49), 3.899 (0.71), 3.932 (1.42),
3.961 (1.46), 3.989 (1.42), 4.019 (0.85), 4.158 (0.64), 4.172 (0.71), 4.224 (1.21),
4.241 (1.24), 4.271 (1.60), 4.292 (1.42), 4.322 (1.14), 4.360 (0.96), 4.395 (0.85),
4.433 (0.64), 4.459 (0.89), 4.548 (3.52), 4.561 (5.48), 4.573 (3.70), 4.676 (0.75),
4.701 (0.68), 4.849 (16.00), 5.352 (0.89), 5.406 (0.85), 5.495 (0.89), 5.548 (0.89),
7.069 (0.57), 7.086 (4.05), 7.106 (4.41), 7.197 (0.46), 7.226 (3.80), 7.252 (3.95),
7.548 (2.74), 7.568 (5.23), 7.588 (2.60).
Primer 464
(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2193]
[2194] (5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 246 µmol) ubačena je u THF i zatim su dodati HBTU (121 mg, 319 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (42,3 mg, 295 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,0 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.96), 0.146 (0.93), 1.736 (1.42),
2.013 (1.56), 2.366 (1.99), 2.593 (2.02), 2.609 (2.29), 2.709 (1.46), 3.557 (1.72),
3.670 (1.16), 3.703 (1.19), 3.742 (0.80), 3.774 (1.49), 3.809 (2.12), 3.909 (1.16),
3.935 (0.86), 3.992 (0.86), 4.035 (0.70), 4.178 (0.80), 4.202 (0.73), 4.768 (1.36),
4.848 (16.00), 7.081 (2.72), 7.102 (3.08), 7.217 (2.82), 7.243 (2.78), 7.549 (2.78),
7.569 (5.04), 7.589 (2.45).
Primer 465
(5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2195]
[2196] (5S)-2-(4-hlor-3-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (80,0 mg, 246 µmol) ubačena je u THF i zatim su dodati HBTU (121 mg, 319 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (38,2 mg, 295 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 69,0 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,51 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.701 (1.56), 1.711 (2.31), 1.723 (2.92),
1.736 (2.21), 1.960 (0.70), 1.971 (0.73), 1.982 (1.08), 1.995 (1.51), 2.008 (1.34),
2.019 (0.71), 2.026 (0.80), 2.037 (1.03), 2.051 (1.34), 2.061 (1.12), 2.075 (1.16),
2.096 (0.45), 2.561 (1.86), 2.577 (2.07), 2.582 (2.02), 2.596 (2.35), 2.608 (3.23),
2.621 (1.55), 2.635 (0.56), 2.650 (0.89), 2.664 (0.59), 4.336 (0.99), 4.365 (1.68),
4.388 (1.71), 4.419 (1.03), 4.601 (2.22), 4.616 (3.49), 4.628 (2.18), 4.725 (1.04),
4.755 (1.19), 4.785 (0.54), 4.817 (0.56), 4.854 (16.00), 4.875 (1.28), 7.091 (2.53),
7.112 (2.77), 7.228 (2.62), 7.233 (2.47), 7.254 (2.69), 7.258 (2.54), 7.550 (2.83),
7.570 (5.03), 7.590 (2.63).
Primer 466
(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2197]
[2198] (5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 580 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (29,2 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda).
Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,0 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.32), 0.008 (1.00), 1.705 (1.55),
1.731 (2.78), 1.874 (0.56), 1.909 (0.73), 1.969 (0.40), 1.995 (0.87), 2.023 (1.36),
2.048 (1.03), 2.064 (1.30), 2.074 (1.68), 2.090 (1.82), 2.100 (2.07), 2.126 (1.27),
2.136 (1.45), 2.220 (0.82), 2.269 (1.10), 2.328 (0.48), 2.523 (1.88), 2.560 (1.65),
2.570 (1.83), 2.585 (1.51), 2.613 (2.42), 2.654 (0.91), 2.665 (0.74), 3.273 (0.64),
3.292 (0.87), 3.302 (1.28), 3.320 (1.58), 3.330 (1.65), 3.458 (0.74), 3.466 (0.76),
3.493 (0.93), 3.502 (0.85), 3.610 (0.57), 3.634 (2.77), 3.653 (2.15), 3.678 (1.49),
3.697 (1.09), 3.724 (1.18), 3.745 (1.94), 3.768 (1.62), 3.785 (1.30), 3.855 (2.49),
4.686 (1.18), 4.695 (1.42), 4.701 (1.48), 4.710 (1.16), 4.743 (1.56), 4.752 (1.74),
4.758 (1.95), 4.767 (1.44), 4.819 (16.00), 5.259 (1.23), 5.382 (1.53), 5.390 (1.58),
5.511 (0.86), 7.075 (1.88), 7.080 (1.96), 7.091 (1.90), 7.233 (1.60), 7.257 (2.00),
7.281 (1.62), 7.375 (1.67), 7.396 (3.27), 7.402 (1.91), 7.417 (1.81), 7.423 (3.19),
7.444 (1.51).
Primer 467
(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2199]
[2200] (5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 580 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (33,4 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 65,0 mg (84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.90), -0.008 (10.40), 0.008 (5.42),
0.146 (0.81), 1.652 (1.36), 1.731 (1.54), 1.977 (1.36), 2.010 (2.08), 2.054 (1.54),
2.327 (2.62), 2.366 (3.34), 2.523 (11.66), 2.570 (2.98), 2.580 (2.17), 2.594 (2.53),
2.608 (3.16), 2.650 (1.27), 2.670 (2.44), 2.710 (1.90), 3.456 (0.90), 3.490 (1.45),
3.513 (1.18), 3.545 (1.27), 3.576 (0.90), 3.616 (0.99), 3.630 (0.99), 3.685 (1.63),
3.701 (1.63), 3.724 (1.36), 3.754 (1.18), 3.868 (0.90), 3.940 (0.99), 3.976 (0.90),
3.990 (0.99), 4.174 (0.99), 4.802 (4.07), 4.822 (16.00), 5.276 (0.99), 5.388 (1.18),
7.073 (1.90), 7.230 (1.45), 7.251 (1.81), 7.279 (1.54), 7.377 (1.18), 7.398 (2.53),
7.421 (2.35), 7.447 (0.99).
Primer 468
(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2201]
[2202] (5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 580 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (33,4 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,0 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.73), 0.146 (0.65), 1.243 (1.06),
1.258 (1.14), 1.273 (0.65), 1.670 (1.14), 1.731 (1.39), 2.012 (1.55), 2.328 (1.80),
2.366 (2.29), 2.380 (0.98), 2.408 (1.14), 2.426 (1.14), 2.523 (7.59), 2.567 (3.76),
2.591 (3.02), 2.609 (3.18), 2.669 (2.20), 2.710 (2.12), 3.538 (1.47), 3.559 (2.20),
3.578 (1.14), 3.635 (0.57), 3.670 (1.39), 3.703 (1.55), 3.743 (0.98), 3.774 (1.80),
3.809 (2.61), 3.826 (0.73), 3.889 (0.73), 3.909 (1.47), 3.935 (1.06), 3.954 (0.57),
3.992 (0.98), 4.035 (0.82), 4.061 (0.57), 4.145 (0.65), 4.177 (0.82), 4.203 (0.82),
4.700 (0.41), 4.770 (1.71), 4.779 (1.22), 4.822 (16.00), 4.852 (1.39), 7.082 (1.80),
7.230 (1.39), 7.257 (1.80), 7.283 (1.47), 7.376 (1.47), 7.396 (2.86), 7.423 (2.94),
7.445 (1.39).
Primer 469
(5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2203]
[2204] (5S)-2-(3,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 µl, 580 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (26,0 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,0 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.658 (1.01), 1.671 (1.34), 1.682 (1.98),
1.705 (3.24), 1.715 (3.29), 1.961 (1.99), 1.972 (1.82), 2.008 (1.60), 2.019 (1.65),
2.030 (1.77), 2.073 (1.65), 2.559 (2.65), 2.584 (3.64), 2.598 (4.93), 2.611 (2.51),
2.627 (0.98), 2.640 (1.60), 2.653 (0.71), 2.690 (0.79), 3.900 (0.66), 3.931 (1.37),
3.961 (1.45), 3.991 (1.40), 4.023 (0.80), 4.159 (0.60), 4.175 (0.66), 4.188 (0.54),
4.213 (0.76), 4.227 (1.24), 4.241 (1.20), 4.257 (1.32), 4.270 (1.45), 4.293 (1.44),
4.324 (1.20), 4.355 (0.84), 4.372 (0.70), 4.397 (0.86), 4.434 (0.62), 4.460 (0.86),
4.507 (0.64), 4.522 (0.75), 4.546 (3.49), 4.559 (5.42), 4.571 (3.51), 4.601 (0.49),
4.635 (0.58), 4.649 (0.71), 4.685 (0.64), 4.702 (0.66), 4.713 (0.59), 4.728 (0.52),
4.824 (16.00), 5.354 (0.85), 5.399 (0.75), 5.406 (0.83), 5.497 (0.84), 5.549 (0.83),
7.086 (2.60), 7.239 (1.90), 7.263 (2.53), 7.288 (1.94), 7.374 (1.50), 7.396 (3.14),
7.421 (3.10), 7.443 (1.35).
Primer 470
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2205]
[2206] (5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 167 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (82,3 mg, 217 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (28,8 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,0 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 449 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.99), 0.008 (7.37), 0.147 (0.91),
1.672 (1.29), 1.743 (1.60), 2.015 (2.03), 2.027 (1.90), 2.051 (1.51), 2.328 (1.55),
2.366 (2.33), 2.383 (1.12), 2.410 (1.38), 2.431 (1.29), 2.563 (3.54), 2.578 (3.11),
2.588 (3.54), 2.604 (3.02), 2.620 (3.19), 2.665 (2.11), 2.670 (2.11), 2.710 (1.90),
3.541 (1.68), 3.561 (2.46), 3.572 (1.38), 3.581 (1.29), 3.641 (0.39), 3.674 (1.42),
3.708 (1.68), 3.744 (1.12), 3.779 (1.98), 3.789 (1.29), 3.813 (2.59), 3.833 (0.82),
3.893 (0.73), 3.912 (1.64), 3.937 (1.12), 3.956 (0.52), 3.997 (0.99), 4.025 (0.73),
4.041 (0.91), 4.069 (0.56), 4.151 (0.65), 4.182 (0.91), 4.206 (0.95), 4.237 (0.43),
4.775 (1.42), 4.789 (1.81), 4.799 (1.38), 4.845 (1.34), 4.861 (1.81), 4.870 (1.29),
4.954 (16.00), 7.248 (3.62), 7.268 (4.05), 7.296 (3.62), 7.326 (3.62), 7.759 (2.72),
7.778 (5.18), 7.798 (2.63).
Primer 471
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2207]
[2208] (5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 167 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (82,3 mg, 217 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (25,2 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 44,0 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 431 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.49), -0.008 (4.64), 0.008 (3.55),
0.146 (0.49), 1.709 (1.39), 1.733 (2.38), 1.744 (2.67), 1.890 (0.58), 1.929 (0.83),
1.970 (0.41), 2.005 (0.85), 2.031 (1.00), 2.040 (1.46), 2.075 (1.75), 2.086 (2.02),
2.104 (2.33), 2.110 (2.33), 2.139 (1.65), 2.222 (0.92), 2.271 (1.22), 2.327 (0.92),
2.366 (0.80), 2.523 (2.92), 2.575 (1.68), 2.582 (1.90), 2.597 (1.63), 2.623 (2.65),
2.666 (1.60), 2.710 (0.75), 3.279 (0.83), 3.353 (0.66), 3.364 (0.68), 3.373 (0.75),
3.400 (0.85), 3.409 (0.85), 3.461 (0.63), 3.471 (0.66), 3.497 (0.88), 3.506 (0.85),
3.611 (0.56), 3.637 (2.72), 3.654 (2.26), 3.681 (1.85), 3.702 (1.12), 3.729 (1.31),
3.751 (1.92), 3.776 (1.68), 3.791 (1.31), 3.858 (2.65), 4.702 (1.24), 4.711 (1.53),
4.718 (1.58), 4.727 (1.26), 4.760 (1.63), 4.769 (1.92), 4.775 (2.14), 4.784 (1.53),
4.950 (16.00), 5.261 (1.29), 5.391 (1.70), 5.512 (0.95), 7.248 (2.87), 7.269 (3.14),
7.297 (3.45), 7.326 (3.48), 7.758 (2.72), 7.778 (5.06), 7.797 (2.55).
Primer 472
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2209]
[2210] (5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 167 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (82,3 mg, 217 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (28,8 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 43,0 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 449 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.82), -0.008 (15.01), 0.008
(13.66), 0.146 (1.71), 1.655 (1.45), 1.743 (1.71), 1.982 (1.30), 2.022 (2.03), 2.031
(2.13), 2.064 (1.35), 2.099 (1.14), 2.327 (1.92), 2.366 (2.29), 2.523 (6.13), 2.567
(2.03), 2.582 (2.44), 2.592 (1.71), 2.606 (2.55), 2.619 (3.38), 2.631 (1.92), 2.665
(2.18), 2.670 (2.34), 2.710 (2.18), 3.461 (0.62), 3.495 (1.40), 3.504 (0.94), 3.517
(1.19), 3.526 (1.30), 3.549 (1.09), 3.578 (0.83), 3.620 (0.88), 3.633 (1.04), 3.653
(0.62), 3.675 (1.04), 3.689 (1.97), 3.703 (1.45), 3.723 (1.45), 3.736 (1.40), 3.755
(1.09), 3.766 (1.09), 3.790 (0.62), 3.873 (0.94), 3.908 (0.73), 3.931 (0.88), 3.945
(1.04), 3.960 (0.57), 3.981 (0.94), 3.995 (0.94), 4.010 (0.57), 4.023 (0.57), 4.134
(0.62), 4.149 (0.73), 4.162 (0.68), 4.175 (1.14), 4.189 (0.73), 4.201 (0.68), 4.216
(0.68), 4.821 (3.84), 4.954 (16.00), 5.266 (1.04), 5.276 (1.19), 5.288 (0.99), 5.353
(0.88), 5.389 (1.14), 5.408 (1.14), 5.420 (1.04), 5.431 (0.73), 5.465 (0.83), 7.246
(2.96), 7.267 (3.27), 7.295 (3.27), 7.325 (3.27), 7.760 (2.18), 7.779 (4.05), 7.798
(1.92).
Primer 473
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2211]
[2212] (5S)-2-[3-fluor-4-(trifluormetil)benzil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 167 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (82,3 mg, 217 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (87 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (22,4 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 29,0 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.06), 0.146 (1.06), 1.674 (1.48),
1.698 (2.17), 1.708 (2.70), 1.723 (3.07), 1.977 (2.12), 2.019 (1.87), 2.041 (1.87),
2.086 (4.07), 2.327 (1.23), 2.366 (1.28), 2.570 (3.04), 2.595 (3.93), 2.609 (5.35),
2.622 (2.79), 2.637 (1.09), 2.651 (1.78), 2.665 (1.64), 2.710 (1.45), 3.908 (0.75),
3.935 (1.45), 3.964 (1.48), 3.995 (1.53), 4.023 (0.92), 4.176 (0.75), 4.230 (1.23),
4.243 (1.20), 4.258 (1.09), 4.276 (1.59), 4.306 (1.37), 4.330 (0.89), 4.367 (1.25),
4.400 (0.98), 4.434 (0.67), 4.463 (0.95), 4.515 (0.67), 4.528 (0.81), 4.565 (3.93),
4.578 (5.71), 4.590 (3.71), 4.654 (0.70), 4.689 (0.72), 4.706 (0.72), 4.732 (0.61),
4.954 (16.00), 5.354 (0.89), 5.408 (0.92), 5.498 (0.92), 5.551 (0.86), 7.252 (4.52),
7.272 (4.88), 7.303 (4.29), 7.332 (4.40), 7.757 (2.70), 7.776 (5.16), 7.796 (2.62).
Primer 474
(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2213]
[2214] (5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,2 mg, 185 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,4 mg, 241 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (31,9 mg, 222 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 70,0 mg (91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.38), -0.008 (13.47), 0.008
(11.40), 0.146 (1.38), 1.666 (2.35), 1.736 (2.79), 1.973 (2.17), 2.009 (3.15), 2.019
(3.44), 2.053 (2.14), 2.060 (2.14), 2.073 (5.00), 2.089 (1.70), 2.327 (1.67), 2.366
(1.12), 2.523 (6.84), 2.567 (4.71), 2.577 (3.40), 2.592 (3.95), 2.607 (5.43), 2.618
(3.11), 2.649 (1.88), 2.669 (2.03), 2.709 (1.34), 3.455 (1.19), 3.489 (2.24), 3.498
(1.77), 3.511 (1.88), 3.521 (1.92), 3.544 (1.99), 3.573 (1.45), 3.616 (1.48), 3.630
(1.63), 3.648 (1.05), 3.671 (1.67), 3.685 (3.19), 3.700 (2.46), 3.719 (2.46), 3.733
(2.28), 3.750 (1.95), 3.763 (1.95), 3.798 (1.01), 3.868 (1.48), 3.907 (1.09), 3.926
(1.45), 3.940 (1.63), 3.955 (1.05), 3.975 (1.52), 3.990 (1.63), 4.005 (1.09), 4.018
(0.94), 4.130 (0.98), 4.145 (1.23), 4.159 (1.12), 4.171 (1.85), 4.185 (1.23), 4.198
(0.98), 4.213 (1.05), 4.796 (4.27), 4.808 (5.97), 4.819 (4.16), 4.868 (16.00), 4.875
(9.59), 4.886 (8.65), 4.926 (1.81), 5.264 (1.63), 5.275 (1.85), 5.287 (1.59), 5.297
(1.16), 5.329 (1.41), 5.351 (1.41), 5.388 (1.99), 5.408 (1.63), 5.457 (1.34), 7.201
(1.30), 7.223 (6.33), 7.228 (6.73), 7.238 (9.38), 7.244 (8.36), 7.248 (9.81), 7.254
(6.91), 7.456 (5.36), 7.479 (5.57).
Primer 475
(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2215]
[2216] (5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,2 mg, 185 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,4 mg, 241 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (27,9 mg, 222 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 63,6 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.33), -0.008 (11.31), 0.008
(10.12), 0.146 (1.33), 1.735 (5.83), 1.878 (1.15), 1.911 (1.86), 1.994 (1.64), 2.030
(2.74), 2.064 (2.61), 2.073 (4.69), 2.090 (3.49), 2.101 (3.93), 2.137 (2.78), 2.220
(1.59), 2.268 (2.08), 2.327 (2.03), 2.366 (1.33), 2.558 (4.24), 2.568 (4.15), 2.583
(3.23), 2.612 (4.82), 2.669 (2.78), 2.710 (1.59), 3.272 (1.24), 3.359 (1.46), 3.368
(1.46), 3.395 (1.64), 3.405 (1.68), 3.466 (1.24), 3.493 (1.59), 3.502 (1.55), 3.608
(1.06), 3.633 (4.95), 3.653 (4.24), 3.678 (2.78), 3.695 (2.03), 3.726 (2.48), 3.745
(3.58), 3.768 (2.83), 3.788 (2.43), 3.821 (0.71), 3.855 (4.77), 4.691 (2.30), 4.700
(2.78), 4.706 (2.92), 4.715 (2.30), 4.748 (2.87), 4.757 (3.31), 4.763 (3.76), 4.772
(2.74), 4.823 (3.40), 4.863 (16.00), 4.878 (8.71), 4.885 (9.86), 4.925 (2.21), 5.258
(2.25), 5.390 (2.96), 5.515 (1.72), 5.944 (0.57), 7.199 (1.37), 7.220 (6.81), 7.226
(7.47), 7.241 (8.09), 7.248 (9.15), 7.274 (1.46), 7.456 (5.70), 7.462 (5.57), 7.478
(5.79), 7.483 (5.52).
Primer 476
(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2217]
[2218] (5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,2 mg, 185 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,4 mg, 241 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (24,8 mg, 222 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 57,0 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.58), 0.008 (2.92), 1.688 (2.51),
1.712 (4.48), 1.721 (4.07), 1.964 (2.44), 1.975 (2.30), 2.008 (1.96), 2.019 (2.00),
2.030 (2.15), 2.073 (5.14), 2.327 (0.53), 2.366 (0.51), 2.523 (2.70), 2.581 (3.90),
2.595 (5.88), 2.609 (3.00), 2.624 (1.16), 2.638 (1.95), 2.651 (0.89), 2.670 (0.66),
2.709 (0.55), 3.898 (0.79), 3.927 (1.67), 3.958 (1.70), 3.991 (1.66), 4.018 (0.96),
4.157 (0.70), 4.171 (0.81), 4.187 (0.66), 4.223 (1.42), 4.239 (1.38), 4.252 (1.29),
4.274 (1.71), 4.302 (1.49), 4.334 (0.93), 4.362 (1.42), 4.394 (1.05), 4.431 (0.75),
4.456 (1.03), 4.506 (0.77), 4.520 (0.88), 4.548 (4.00), 4.560 (6.36), 4.573 (4.15),
4.600 (0.64), 4.635 (0.68), 4.649 (0.81), 4.687 (0.81), 4.702 (0.82), 4.728 (0.62),
4.834 (1.19), 4.874 (16.00), 4.884 (6.86), 4.925 (0.82), 5.353 (1.00), 5.406 (1.00),
5.496 (0.99), 5.549 (1.00), 7.202 (1.12), 7.224 (4.47), 7.242 (10.36), 7.258 (7.49),
7.279 (2.00), 7.455 (3.92), 7.461 (3.86), 7.477 (4.01), 7.483 (3.93).
Primer 477
(5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2219]
[2220] (5S)-2-(2-hlor-4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (63,2 mg, 185 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (91,4 mg, 241 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 740 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (31,9 mg, 222 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 64,5 mg (84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.75), -0.008 (14.84), 0.008
(12.90), 0.146 (1.55), 1.675 (2.23), 1.723 (2.91), 1.911 (0.82), 2.004 (3.30), 2.012
(3.15), 2.039 (2.57), 2.073 (9.41), 2.327 (2.33), 2.366 (2.28), 2.381 (1.89), 2.410
(2.28), 2.430 (2.13), 2.563 (5.62), 2.572 (6.06), 2.587 (5.53), 2.607 (6.01), 2.650
(1.79), 2.670 (2.57), 2.710 (1.99), 3.536 (2.96), 3.556 (4.12), 3.567 (2.33), 3.575
(2.18), 3.636 (0.82), 3.670 (2.47), 3.703 (2.96), 3.740 (1.94), 3.773 (3.25), 3.784
(2.18), 3.809 (4.27), 3.828 (1.21), 3.890 (1.31), 3.909 (2.81), 3.936 (1.99), 3.954
(0.92), 3.993 (1.70), 4.021 (1.31), 4.035 (1.60), 4.063 (0.97), 4.145 (1.12), 4.176
(1.50), 4.201 (1.55), 4.760 (2.47), 4.775 (3.20), 4.785 (2.33), 4.830 (3.35), 4.849
(3.25), 4.868 (15.03), 4.882 (16.00), 4.922 (2.67), 7.199 (1.36), 7.205 (1.36), 7.220
(6.55), 7.226 (7.18), 7.236 (9.31), 7.247 (7.90), 7.252 (9.70), 7.274 (1.65), 7.456
(6.64), 7.462 (6.69), 7.478 (6.50), 7.484 (6.40).
Primer 478
(5S)-5-{[(3R)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2221]
[2222] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 167 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (82,3 mg, 217 µmol) i trietilamin (70 µl, 500 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3R)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (25,1 mg, 200 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 37,0 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.80), -0.008 (12.00), 0.008 (8.00),
0.146 (0.80), 1.655 (0.80), 1.760 (0.80), 2.016 (2.00), 2.027 (1.60), 2.072 (2.00),
2.101 (0.80), 2.128 (0.80), 2.263 (0.40), 2.324 (1.60), 2.329 (2.40), 2.333 (1.60),
2.367 (2.00), 2.410 (0.40), 2.520 (16.00), 2.524 (14.00), 2.558 (2.80), 2.584 (1.60),
2.595 (1.20), 2.615 (1.20), 2.626 (2.00), 2.638 (1.20), 2.666 (2.40), 2.671 (3.20),
2.711 (2.00), 3.136 (0.40), 3.176 (0.80), 3.209 (0.80), 3.383 (3.20), 3.458 (0.80),
3.528 (2.00), 3.551 (1.60), 3.578 (1.20), 3.603 (2.00), 3.659 (0.80), 3.684 (0.40),
3.748 (0.40), 3.787 (0.40), 3.919 (0.40), 3.942 (0.80), 3.983 (0.40), 4.013 (0.40),
4.043 (0.40), 4.841 (0.80), 4.855 (1.20), 4.866 (0.80), 4.890 (0.80), 5.068 (6.40),
5.272 (0.40), 5.348 (0.40), 5.400 (0.40), 5.481 (0.40), 7.561 (2.00), 8.564 (2.80),
8.575 (2.80).
Primer 479
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2223]
[2224] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (30,0 mg, 83,3 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (37,9 mg, 99,9 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (44 µl, 250 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol (9,43 mg, 108 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 17,0 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.30), -0.008 (10.80), 0.008 (9.76),
0.146 (1.30), 1.406 (2.34), 1.672 (2.21), 1.750 (4.42), 1.850 (2.47), 1.860 (2.86),
1.872 (2.60), 1.882 (3.25), 1.985 (3.51), 2.008 (3.25), 2.029 (3.90), 2.039 (4.03),
2.075 (2.47), 2.327 (3.64), 2.366 (2.34), 2.518 (16.00), 2.523 (12.88), 2.565 (4.42),
2.576 (4.16), 2.591 (3.12), 2.624 (5.59), 2.665 (5.20), 2.669 (5.20), 2.674 (3.77),
2.710 (2.47), 3.204 (0.91), 3.236 (1.30), 3.346 (4.94), 3.379 (4.42), 3.398 (2.08),
3.433 (1.56), 3.443 (1.56), 3.455 (2.21), 3.463 (2.73), 3.485 (1.95), 3.575 (2.73),
3.593 (1.95), 3.638 (2.47), 3.649 (3.64), 3.665 (2.34), 3.676 (2.86), 3.756 (0.78),
4.270 (2.60), 4.361 (2.86), 4.710 (2.08), 4.719 (2.47), 4.726 (2.60), 4.734 (2.08),
4.752 (2.21), 4.767 (3.38), 4.775 (2.34), 4.834 (0.91), 4.955 (5.07), 4.963 (6.89),
4.972 (2.08), 5.014 (1.17), 5.065 (15.87), 5.078 (7.93), 5.087 (7.02), 5.106 (1.43),
7.542 (4.03), 7.554 (7.93), 7.567 (4.42), 8.562 (9.76), 8.573 (9.76).
Primer 480
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2225]
[2226] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (1,19 g, 3,15 mmol) ubačena je u THF (25 ml) i zatim su dodati HBTU (1,55 g, 4,09 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (1,6 ml, 9,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (371 mg, 3,46 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 1,04 g (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.54), -0.008 (6.70), 0.008 (4.70),
0.146 (0.62), 1.412 (0.79), 1.655 (1.63), 1.747 (1.90), 1.987 (1.56), 2.025 (2.55),
2.034 (2.62), 2.073 (16.00), 2.095 (1.11), 2.102 (1.16), 2.328 (0.62), 2.561 (2.20),
2.576 (2.30), 2.587 (2.97), 2.597 (2.25), 2.612 (3.07), 2.625 (4.03), 2.637 (2.32),
2.669 (1.88), 2.710 (0.47), 3.461 (0.79), 3.495 (1.66), 3.505 (1.19), 3.517 (1.43),
3.527 (1.48), 3.537 (1.26), 3.551 (1.36), 3.581 (0.96), 3.622 (1.04), 3.636 (1.19),
3.655 (0.82), 3.677 (1.24), 3.691 (2.32), 3.704 (1.68), 3.724 (1.88), 3.738 (1.68),
3.755 (1.34), 3.768 (1.43), 3.802 (0.69), 3.873 (1.01), 3.909 (0.84), 3.930 (1.06),
3.944 (1.19), 3.960 (0.74), 3.980 (1.14), 3.995 (1.11), 4.009 (0.72), 4.022 (0.62),
4.131 (0.69), 4.146 (0.79), 4.160 (0.79), 4.172 (1.21), 4.186 (0.91), 4.199 (0.74),
4.214 (0.67), 4.816 (3.24), 4.830 (4.23), 4.840 (2.94), 5.021 (1.34), 5.063 (12.44),
5.074 (6.87), 5.116 (0.89), 5.266 (1.19), 5.276 (1.29), 5.288 (1.16), 5.314 (0.94),
5.329 (0.96), 5.353 (1.01), 5.389 (1.36), 5.408 (1.21), 5.420 (1.21), 5.431 (0.89),
5.444 (0.87), 5.457 (0.99), 7.549 (2.67), 7.561 (4.33), 8.564 (5.98), 8.576 (5.76).
Primer 481
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2227]
[2228] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (30,0 mg, 83,3 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (41,1 mg, 108 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (44 µl, 250 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (10,9 mg, 99,9 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 10,0 mg (29% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.83), -0.008 (16.00), 0.008
(13.26), 0.146 (1.74), 1.962 (0.46), 2.327 (2.74), 2.366 (2.56), 2.523 (9.05), 2.669
(2.65), 2.710 (2.47), 3.187 (0.55), 4.046 (0.46), 4.523 (0.55), 4.550 (0.64), 5.063
(1.74), 7.561 (0.64), 8.559 (0.64).
Primer 482
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2229]
[2230] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (180 mg, čistoća 53%, 266 µmol) ubačena je u THF (2,4 ml) i zatim su dodati HBTU (263 mg, 692 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (280 µl, 1,6 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (91,8 mg, 639 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 106 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.81), 0.145 (0.69), 1.173 (1.04),
1.191 (0.75), 1.225 (2.76), 1.243 (13.73), 1.259 (16.00), 1.273 (7.74), 1.673 (2.04),
1.748 (2.50), 1.902 (0.95), 1.978 (1.38), 2.019 (3.08), 2.327 (1.53), 2.366 (1.87),
2.382 (1.96), 2.411 (2.36), 2.432 (2.45), 2.455 (2.22), 2.583 (4.23), 2.592 (4.12),
2.608 (4.37), 2.625 (4.72), 2.669 (2.62), 2.710 (0.92), 3.145 (1.27), 3.541 (2.53),
3.560 (3.91), 3.573 (2.13), 3.581 (2.16), 3.641 (1.29), 3.674 (2.27), 3.709 (2.50),
3.744 (1.64), 3.779 (2.91), 3.814 (4.20), 3.833 (1.21), 3.891 (1.21), 3.909 (2.42),
3.936 (1.76), 3.955 (0.83), 3.967 (0.78), 3.997 (1.61), 4.025 (1.12), 4.040 (1.41),
4.067 (0.86), 4.150 (0.83), 4.179 (1.41), 4.205 (1.50), 4.238 (0.55), 4.782 (2.13),
4.797 (2.88), 4.806 (2.07), 4.853 (2.07), 4.868 (2.73), 4.877 (2.13), 5.021 (1.44),
5.063 (13.32), 5.071 (14.39), 5.113 (1.53), 6.513 (0.89), 7.547 (4.03), 7.560 (7.63),
7.573 (4.20), 8.564 (8.86), 8.575 (8.72).
Primer 483
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2231]
[2232] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (30,0 mg, 83,3 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (41,1 mg, 108 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (44 µl, 250 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (11,1 mg, 99,9 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 15,0 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.74), -0.008 (7.63), 0.008 (6.07),
0.146 (0.74), 1.673 (1.71), 1.683 (2.20), 1.698 (2.34), 1.709 (2.72), 1.730 (3.20),
1.982 (2.42), 1.995 (2.49), 2.020 (2.27), 2.327 (1.45), 2.366 (1.38), 2.523 (5.77),
2.574 (3.20), 2.600 (4.24), 2.614 (6.10), 2.627 (3.20), 2.642 (1.30), 2.656 (2.16),
2.669 (2.46), 2.710 (1.60), 3.909 (0.82), 3.935 (1.64), 3.965 (1.64), 3.997 (1.71),
4.023 (1.00), 4.166 (0.71), 4.178 (0.86), 4.194 (0.67), 4.243 (1.34), 4.278 (1.64),
4.309 (1.60), 4.343 (0.93), 4.371 (1.64), 4.398 (1.12), 4.432 (0.82), 4.460 (1.04),
4.516 (0.74), 4.530 (0.89), 4.572 (4.43), 4.585 (6.55), 4.597 (4.24), 4.634 (0.74),
4.649 (0.82), 4.685 (0.78), 4.702 (0.78), 4.726 (0.63), 5.023 (0.78), 5.065 (16.00),
5.115 (0.63), 5.355 (1.00), 5.408 (1.00), 5.497 (1.04), 5.551 (1.04), 7.556 (4.09),
7.569 (7.74), 7.581 (4.28), 8.561 (6.96), 8.573 (7.00).
Primer 484
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2233]
[2234] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (180 mg, čistoća 53%, 266 µmol) ubačena je u THF (2,4 ml) i zatim su dodati HBTU (263 mg, 692 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (280 µl, 1,6 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (80,3 mg, 639 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 98,9 mg (86% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.74), -0.008 (16.00), 0.008
(13.44), 0.146 (1.64), 1.748 (1.64), 1.934 (0.62), 2.106 (1.64), 2.267 (0.82), 2.327
(2.67), 2.366 (2.15), 2.523 (7.49), 2.587 (1.33), 2.602 (1.13), 2.629 (1.74), 2.669
(3.28), 2.709 (1.95), 3.408 (0.51), 3.462 (0.51), 3.498 (0.62), 3.634 (1.64), 3.652
(1.33), 3.679 (1.13), 3.703 (0.72), 3.751 (1.23), 3.774 (1.13), 3.792 (0.82), 3.857
(1.74), 4.717 (1.13), 4.780 (1.33), 4.790 (1.13), 5.016 (0.92), 5.057 (5.95), 5.071
(4.21), 5.112 (0.62), 5.260 (0.82), 5.393 (1.03), 5.515 (0.62), 7.548 (1.54), 7.561
(3.08), 7.573 (1.74), 8.564 (3.69), 8.575 (3.69).
Primer 485
(5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2235]
[2236] (5S)-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 278 µmol) ubačena je u THF (2,1 ml, 26 mmol) i zatim su dodati HBTU (137 mg, 361 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 830 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 1,3-tiazolidin (29,7 mg, 333 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 61,0 mg (51% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.81), -0.008 (16.00), 0.008
(14.45), 0.146 (1.94), 1.622 (0.52), 1.764 (0.65), 2.037 (0.90), 2.327 (2.84), 2.366
(2.45), 2.524 (6.32), 2.566 (2.06), 2.581 (1.42), 2.629 (1.29), 2.669 (3.48), 2.710
(2.71), 3.020 (1.42), 3.036 (0.77), 3.130 (0.90), 3.145 (1.81), 3.160 (1.03), 3.643
(0.52), 3.696 (0.52), 3.801 (0.52), 3.945 (0.52), 4.374 (0.90), 4.400 (1.16), 4.556
(1.03), 4.581 (0.90), 4.614 (0.65), 4.637 (0.77), 4.811 (0.77), 4.833 (0.65), 4.904
(0.65), 4.991 (0.52), 5.067 (3.35), 5.075 (3.61), 7.547 (0.90), 7.560 (1.81), 7.574
(0.90), 8.564 (2.06), 8.576 (2.06).
Primer 486
(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2237]
[2238] (5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (26,0 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,1 mg (75% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,22 min; MS (ESIpos): m/z = 367 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.45), 1.702 (7.00), 1.942 (3.26),
2.005 (2.78), 2.016 (2.91), 2.073 (5.89), 2.327 (0.68), 2.366 (0.55), 2.524 (5.41),
2.566 (6.11), 2.580 (8.21), 2.593 (4.09), 2.609 (1.51), 2.622 (2.63), 2.635 (1.12),
2.669 (0.79), 2.710 (0.61), 3.760 (0.96), 3.778 (0.79), 3.894 (1.12), 3.923 (2.21),
3.952 (2.34), 3.985 (2.23), 4.016 (1.34), 4.152 (0.98), 4.167 (1.09), 4.180 (0.90),
4.205 (1.25), 4.220 (2.01), 4.235 (1.97), 4.250 (2.15), 4.264 (2.34), 4.287 (2.30),
4.319 (1.99), 4.348 (1.44), 4.391 (1.40), 4.426 (1.03), 4.450 (1.36), 4.496 (1.09),
4.521 (5.41), 4.533 (8.38), 4.546 (5.32), 4.566 (1.23), 4.591 (0.79), 4.629 (0.96),
4.642 (1.12), 4.681 (1.07), 4.697 (1.07), 4.721 (0.88), 4.784 (2.28), 4.822 (16.00),
4.877 (1.42), 5.351 (1.40), 5.405 (1.38), 5.494 (1.36), 5.548 (1.38), 7.056 (2.78),
7.078 (6.02), 7.097 (3.37), 7.219 (2.93), 7.244 (5.67), 7.268 (3.02), 7.284 (2.85),
7.304 (5.87), 7.322 (5.60), 7.343 (2.34).
Primer 487
(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2239]
[2240] (5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (33,4 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 68,6 mg (89% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.009 (7.97), 1.707 (3.42), 1.991 (3.13),
2.072 (3.13), 2.327 (1.65), 2.365 (1.99), 2.408 (2.33), 2.572 (6.04), 2.590 (6.43),
2.604 (3.99), 2.633 (1.94), 2.669 (1.77), 2.710 (1.77), 3.533 (2.85), 3.544 (4.10),
3.554 (4.38), 3.664 (2.56), 3.697 (2.96), 3.739 (1.59), 3.772 (3.53), 3.804 (5.52),
3.904 (2.90), 3.930 (2.05), 3.989 (1.77), 4.031 (1.59), 4.169 (1.59), 4.196 (1.65),
4.748 (3.19), 4.779 (2.79), 4.817 (16.00), 4.836 (14.92), 4.875 (2.85), 7.059 (2.51),
7.081 (5.47), 7.102 (2.96), 7.218 (3.19), 7.225 (3.07), 7.244 (5.01), 7.268 (3.36),
7.275 (5.07), 7.298 (6.21), 7.315 (5.98), 7.336 (2.62).
Primer 488
(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2241]
[2242] (5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (29,2 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 71,0 mg (96% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,26 min; MS (ESIpos): m/z = 381 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.47), -0.008 (4.61), 0.008 (3.24),
0.146 (0.44), 1.244 (0.93), 1.259 (0.88), 1.274 (0.58), 1.710 (5.63), 1.721 (6.37),
1.858 (1.32), 1.869 (1.26), 1.882 (1.15), 1.892 (1.62), 1.970 (1.59), 1.984 (1.56),
1.996 (2.22), 2.006 (2.91), 2.019 (2.66), 2.050 (2.52), 2.060 (3.16), 2.073 (10.65),
2.086 (3.81), 2.105 (3.24), 2.123 (2.14), 2.134 (2.58), 2.170 (0.93), 2.189 (0.63),
2.217 (1.70), 2.237 (1.81), 2.266 (2.25), 2.323 (0.93), 2.328 (1.07), 2.366 (1.13),
2.519 (4.01), 2.568 (2.96), 2.591 (4.80), 2.596 (4.97), 2.638 (1.87), 2.670 (1.04),
2.690 (1.78), 2.710 (1.04), 2.731 (0.96), 2.890 (1.29), 3.267 (1.13), 3.286 (1.40),
3.296 (2.09), 3.314 (2.11), 3.324 (1.45), 3.342 (1.23), 3.357 (1.26), 3.365 (1.45),
3.369 (1.29), 3.391 (1.67), 3.400 (1.70), 3.453 (1.29), 3.462 (1.34), 3.489 (1.89),
3.498 (1.73), 3.606 (1.23), 3.631 (6.26), 3.649 (4.50), 3.654 (4.12), 3.674 (2.83),
3.693 (2.42), 3.719 (2.61), 3.740 (4.28), 3.766 (3.51), 3.773 (2.74), 3.782 (2.96),
3.814 (0.80), 3.851 (5.46), 4.491 (2.42), 4.668 (4.34), 4.677 (4.78), 4.683 (4.91),
4.693 (4.14), 4.724 (4.69), 4.734 (5.08), 4.740 (5.57), 4.749 (4.36), 4.773 (4.94),
4.812 (16.00), 4.838 (10.21), 4.877 (3.18), 5.258 (2.69), 5.382 (3.35), 5.389 (3.46),
5.510 (1.95), 5.943 (0.63), 6.954 (0.41), 7.054 (2.58), 7.060 (2.74), 7.075 (5.79),
7.081 (6.37), 7.097 (3.27), 7.102 (3.32), 7.218 (3.10), 7.225 (2.94), 7.243 (5.43),
7.249 (5.05), 7.268 (3.29), 7.274 (4.47), 7.280 (2.52), 7.297 (5.52), 7.302 (4.36),
7.314 (3.68), 7.318 (5.46), 7.335 (1.65), 7.340 (1.84).
Primer 489
(5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2243]
[2244] (5S)-2-(2,4-difluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 194 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati HBTU (95,6 mg, 252 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 780 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (33,4 mg, 233 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 70,3 mg (91% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.008 (5.38), 0.008 (5.26),
0.146 (0.55), 1.021 (0.70), 1.038 (0.74), 1.409 (0.50), 1.637 (2.21), 1.661 (2.91),
1.670 (2.58), 1.697 (2.83), 1.709 (3.33), 1.718 (3.71), 1.732 (3.08), 1.909 (1.50),
1.951 (2.82), 1.959 (2.44), 1.975 (1.85), 1.997 (3.57), 2.021 (2.24), 2.032 (2.52),
2.039 (2.71), 2.047 (2.58), 2.056 (2.19), 2.073 (9.63), 2.082 (1.94), 2.110 (0.67),
2.327 (0.77), 2.562 (4.05), 2.577 (5.02), 2.591 (6.66), 2.602 (3.78), 2.621 (1.42),
2.633 (2.28), 2.645 (1.22), 2.670 (0.89), 2.710 (0.67), 3.440 (0.78), 3.449 (1.35),
3.458 (0.84), 3.483 (2.30), 3.504 (1.67), 3.512 (1.74), 3.521 (2.00), 3.530 (2.80),
3.538 (2.63), 3.563 (1.19), 3.573 (1.72), 3.583 (1.09), 3.611 (1.83), 3.625 (2.06),
3.644 (1.28), 3.658 (1.45), 3.666 (2.06), 3.681 (2.99), 3.699 (3.74), 3.714 (2.35),
3.722 (2.38), 3.731 (2.44), 3.751 (2.28), 3.762 (2.16), 3.784 (1.24), 3.797 (1.17),
3.826 (0.81), 3.856 (1.44), 3.862 (1.78), 3.891 (1.17), 3.898 (1.31), 3.922 (1.80),
3.936 (2.03), 3.951 (1.24), 3.965 (1.42), 3.971 (1.92), 3.985 (1.92), 4.000 (1.20),
4.014 (1.11), 4.125 (1.20), 4.140 (1.39), 4.153 (1.36), 4.167 (2.31), 4.181 (1.49),
4.194 (1.33), 4.209 (1.22), 4.780 (9.35), 4.793 (4.99), 4.817 (16.00), 4.831 (9.32),
4.839 (9.45), 4.870 (1.49), 4.879 (2.33), 5.069 (0.81), 5.244 (1.25), 5.253 (1.99),
5.265 (2.00), 5.275 (2.21), 5.283 (1.78), 5.296 (1.38), 5.309 (1.24), 5.317 (1.27),
5.329 (1.60), 5.337 (1.63), 5.349 (1.70), 5.364 (1.55), 5.374 (2.16), 5.387 (2.41),
5.398 (2.00), 5.406 (1.99), 5.414 (1.78), 5.439 (1.24), 5.447 (1.36), 5.457 (1.70),
5.470 (1.64), 5.479 (1.72), 5.493 (1.25), 5.502 (0.83), 7.057 (2.83), 7.060 (2.85),
7.078 (6.16), 7.081 (6.15), 7.100 (3.50), 7.103 (3.46), 7.220 (2.96), 7.246 (5.77),
7.271 (4.75), 7.293 (4.41), 7.301 (4.41), 7.309 (3.89), 7.317 (4.60), 7.330 (1.78),
7.339 (1.81).
Primer 490
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2245]
[2246] (5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (75,3 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (26,3 mg, 183 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 34,2 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.45), -0.008 (4.97), 0.007 (3.87),
0.146 (0.52), 0.966 (0.45), 0.981 (0.45), 1.663 (2.32), 1.688 (1.81), 1.727 (2.84),
1.982 (2.65), 1.995 (3.16), 2.006 (3.42), 2.021 (2.84), 2.034 (2.32), 2.042 (2.39),
2.049 (2.26), 2.059 (2.00), 2.071 (2.00), 2.086 (1.61), 2.327 (1.48), 2.366 (1.74),
2.380 (1.87), 2.409 (2.19), 2.430 (2.19), 2.451 (1.74), 2.560 (5.94), 2.570 (6.97),
2.586 (5.87), 2.604 (6.58), 2.616 (3.16), 2.633 (1.35), 2.646 (2.06), 2.669 (1.81),
2.709 (1.48), 3.530 (2.71), 3.535 (2.90), 3.547 (4.06), 3.556 (4.39), 3.566 (2.52),
3.575 (2.26), 3.636 (0.77), 3.669 (3.29), 3.702 (3.10), 3.737 (2.52), 3.770 (3.42),
3.780 (2.39), 3.788 (1.87), 3.805 (4.65), 3.825 (1.42), 3.835 (0.77), 3.888 (1.35),
3.907 (2.90), 3.925 (1.61), 3.933 (2.06), 3.951 (0.97), 3.961 (0.97), 3.990 (1.87),
4.003 (0.90), 4.018 (1.23), 4.032 (1.68), 4.061 (1.03), 4.143 (1.10), 4.175 (1.68),
4.200 (1.68), 4.230 (0.65), 4.750 (2.39), 4.764 (3.29), 4.774 (2.45), 4.791 (2.19),
4.830 (15.23), 4.845 (16.00), 4.885 (2.52), 7.263 (2.39), 7.280 (2.77), 7.285 (3.16),
7.307 (3.16), 7.312 (2.90), 7.329 (2.45), 7.540 (2.52), 7.556 (2.77), 7.566 (3.87),
7.582 (3.87), 7.591 (2.90), 7.607 (2.65).
Primer 491
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2247]
[2248] (5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (75,3 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (20,5 mg, 183 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 27,2 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 385 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.49), -0.008 (13.66), 0.008
(11.22), 0.146 (1.44), 1.675 (2.84), 1.699 (4.55), 1.709 (4.73), 1.956 (2.93), 1.965
(2.75), 2.023 (2.61), 2.073 (1.58), 2.327 (1.49), 2.366 (1.62), 2.523 (5.72), 2.578
(5.18), 2.593 (7.66), 2.606 (3.97), 2.621 (1.58), 2.635 (2.61), 2.648 (1.22), 2.670
(1.67), 2.710 (1.80), 3.899 (0.99), 3.929 (2.03), 3.959 (2.03), 3.991 (2.07), 4.021
(1.22), 4.158 (0.90), 4.171 (1.04), 4.188 (0.86), 4.224 (1.71), 4.238 (1.71), 4.268
(2.30), 4.290 (2.12), 4.321 (1.71), 4.353 (1.35), 4.392 (1.26), 4.429 (0.95), 4.455
(1.31), 4.505 (0.95), 4.538 (4.64), 4.550 (7.62), 4.562 (4.91), 4.600 (0.77), 4.629
(0.81), 4.648 (0.99), 4.682 (0.99), 4.699 (1.04), 4.794 (1.76), 4.834 (16.00), 4.886
(1.17), 5.353 (1.26), 5.406 (1.22), 5.495 (1.22), 5.550 (1.22), 7.272 (1.89), 7.297
(3.15), 7.315 (3.20), 7.339 (1.89), 7.539 (1.89), 7.564 (3.61), 7.581 (3.65), 7.606
(1.98).
Primer 492
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2249]
[2250] (5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (75,3 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (26,3 mg, 183 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 29,0 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.81), -0.008 (16.00), 0.008
(13.82), 0.146 (1.81), 1.654 (0.75), 1.728 (0.90), 2.012 (0.94), 2.327 (2.07), 2.366
(1.62), 2.523 (6.70), 2.562 (1.69), 2.603 (1.77), 2.645 (0.68), 2.669 (2.11), 2.709
(1.62), 3.487 (1.28), 3.615 (0.60), 3.685 (1.02), 3.699 (0.83), 3.715 (0.75), 3.937
(0.60), 3.987 (0.53), 4.170 (0.56), 4.795 (2.07), 4.830 (4.10), 4.840 (2.52), 4.888
(0.53), 5.387 (0.64), 7.282 (0.98), 7.307 (1.02), 7.537 (0.56), 7.565 (1.20), 7.581
(1.17), 7.605 (0.56).
Primer 493
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2251]
[2252] (5S)-3-okso-2-(2,4,5-trifluorbenzil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (50,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (75,3 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (23,0 mg, 183 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 24,7 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.39), 0.008 (10.78), 0.146 (1.39),
0.934 (0.70), 1.728 (4.52), 1.910 (1.57), 2.073 (4.35), 2.266 (1.91), 2.327 (4.35),
2.366 (4.52), 2.524 (16.00), 2.580 (2.96), 2.609 (4.35), 2.670 (4.52), 2.710 (4.17),
3.395 (1.57), 3.465 (1.04), 3.493 (1.39), 3.631 (4.70), 3.651 (3.83), 3.697 (1.91),
3.741 (3.30), 3.767 (2.78), 3.851 (4.17), 4.695 (2.43), 4.737 (2.61), 4.752 (3.13),
4.761 (2.43), 4.786 (2.26), 4.825 (11.65), 4.846 (7.65), 4.885 (1.91), 5.259 (2.09),
5.390 (2.61), 5.510 (1.57), 7.263 (2.09), 7.284 (2.78), 7.306 (2.96), 7.329 (1.91),
7.540 (1.91), 7.565 (3.30), 7.582 (3.48), 7.607 (2.09).
Primer 494
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2253]
[2254] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (69,6 mg, 184 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3-fluorazetidin hidrohlorid (25,6 mg, 229 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 63,7 mg (93% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.76), -0.008 (16.00), 0.008
(14.24), 0.146 (1.92), 1.686 (2.08), 1.710 (2.88), 1.988 (2.72), 2.073 (2.56), 2.327
(3.68), 2.366 (3.84), 2.523 (13.60), 2.586 (3.20), 2.598 (5.60), 2.611 (3.20), 2.628
(1.44), 2.641 (2.24), 2.670 (4.16), 2.710 (4.00), 3.943 (1.28), 4.002 (1.60), 4.272
(1.92), 4.298 (1.60), 4.330 (1.44), 4.358 (0.96), 4.407 (1.12), 4.472 (0.96), 4.524
(0.80), 4.608 (3.52), 4.620 (5.12), 4.632 (3.36), 5.356 (0.96), 5.423 (3.04), 5.463
(13.44), 5.472 (6.24), 5.484 (5.44), 5.513 (1.44), 7.747 (9.12), 7.846 (3.52), 7.863
(2.40), 7.948 (3.84), 7.966 (5.92), 7.984 (3.36), 8.214 (7.04), 8.236 (6.08), 8.368
(4.32), 8.389 (4.00).
Primer 495
(5S)-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)karbonil]-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2256] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (75,4 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je azetidin-3-ol hidrohlorid (20,1 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 41,4 mg (61% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.53), -0.008 (5.42), 0.008 (4.04),
0.146 (0.53), 1.651 (3.35), 1.717 (4.41), 1.919 (2.45), 1.931 (2.34), 1.944 (3.72),
1.954 (5.95), 1.966 (5.58), 1.998 (3.61), 2.008 (3.72), 2.017 (3.46), 2.073 (1.65),
2.328 (1.17), 2.333 (0.90), 2.367 (1.22), 2.557 (4.04), 2.582 (4.52), 2.594 (8.50),
2.605 (4.62), 2.623 (2.29), 2.635 (3.56), 2.647 (1.65), 2.670 (1.33), 2.711 (1.22),
3.611 (2.82), 3.619 (3.30), 3.637 (3.67), 3.645 (4.47), 3.661 (3.30), 3.676 (3.19),
3.686 (3.14), 3.933 (3.72), 3.945 (4.15), 3.966 (1.01), 4.035 (5.05), 4.054 (6.80),
4.062 (5.48), 4.077 (3.03), 4.115 (2.45), 4.131 (3.03), 4.141 (2.60), 4.156 (2.39),
4.341 (2.50), 4.358 (4.20), 4.379 (2.98), 4.485 (3.03), 4.501 (4.36), 4.518 (7.28),
4.533 (7.44), 4.566 (3.99), 4.582 (8.40), 4.591 (7.71), 4.606 (3.35), 5.413 (2.23),
5.420 (2.18), 5.454 (12.54), 5.461 (13.50), 5.469 (14.41), 5.474 (13.61), 5.510 (2.45),
5.516 (2.34), 5.811 (11.32), 5.826 (5.58), 7.745 (15.63), 7.753 (16.00), 7.829 (3.46),
7.847 (7.97), 7.864 (5.00), 7.945 (7.23), 7.966 (10.79), 7.984 (6.49), 8.214 (13.29),
8.235 (11.48), 8.363 (6.64), 8.373 (7.02), 8.384 (6.43), 8.394 (6.27).
Primer 496
(5S)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2257]
[2258] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml, 37 mmol) i zatim su dodati HBTU (75,4 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (22,7 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,3 mg (88% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,31 min; MS (ESIpos): m/z = 462 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.53), 0.008 (2.56), 1.658 (1.13),
1.670 (1.16), 1.682 (1.13), 1.731 (2.20), 1.741 (2.13), 1.862 (1.43), 1.872 (1.73),
1.884 (1.43), 1.894 (1.83), 1.905 (1.43), 1.928 (0.50), 1.988 (2.20), 2.011 (2.23),
2.021 (2.63), 2.031 (2.56), 2.042 (2.03), 2.054 (1.36), 2.062 (1.56), 2.073 (16.00),
2.328 (0.77), 2.367 (0.57), 2.519 (4.39), 2.523 (4.56), 2.564 (1.66), 2.608 (2.89),
2.620 (1.66), 2.640 (0.96), 2.650 (1.33), 2.665 (1.03), 2.670 (0.96), 2.710 (0.63),
3.209 (0.40), 3.241 (0.60), 3.350 (2.69), 3.379 (2.23), 3.390 (1.20), 3.411 (0.93),
3.443 (0.83), 3.453 (0.86), 3.465 (1.06), 3.473 (1.50), 3.495 (0.93), 3.503 (0.90),
3.569 (1.53), 3.591 (0.93), 3.654 (1.40), 3.665 (2.06), 3.681 (1.50), 3.692 (1.60),
4.276 (1.50), 4.371 (1.60), 4.742 (1.23), 4.750 (1.43), 4.757 (1.53), 4.765 (1.23),
4.783 (1.30), 4.798 (1.70), 4.806 (1.16), 4.864 (0.47), 4.970 (2.10), 5.085 (2.03),
5.406 (1.46), 5.447 (4.79), 5.479 (6.35), 5.520 (1.80), 7.743 (10.31), 7.753 (2.59),
7.758 (1.86), 7.825 (1.53), 7.845 (3.29), 7.863 (2.16), 7.945 (2.96), 7.965 (4.46),
7.984 (2.66), 8.213 (5.52), 8.234 (4.72), 8.366 (2.93), 8.387 (2.79).
Primer 497
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2259]
[2260] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 153 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (75,4 mg, 199 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (80 µl, 460 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (26,3 mg, 184 µmol) i reakciona smeša je mešana 6 dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 62,0 mg (84% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,60 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.71), -0.008 (16.00), 0.008
(11.82), 0.147 (1.50), 1.648 (1.55), 1.733 (1.67), 2.023 (2.46), 2.328 (2.21), 2.367
(1.67), 2.572 (2.42), 2.609 (3.47), 2.670 (2.59), 2.710 (1.75), 3.501 (1.30), 3.522
(1.46), 3.641 (1.09), 3.696 (2.13), 3.729 (2.05), 3.773 (1.30), 3.930 (1.55), 3.978
(1.09), 4.189 (1.09), 4.854 (2.80), 4.867 (3.89), 4.878 (2.92), 5.265 (1.17), 5.357
(1.04), 5.415 (2.42), 5.456 (5.43), 5.464 (5.60), 5.478 (5.35), 5.492 (5.35), 5.534
(1.84), 7.548 (1.17), 7.597 (1.50), 7.627 (1.84), 7.644 (1.09), 7.735 (7.06), 7.743
(8.15), 7.849 (2.92), 7.870 (1.92), 7.946 (3.09), 7.966 (4.89), 7.983 (2.92), 8.215
(6.35), 8.236 (5.31), 8.359 (2.80), 8.367 (3.17), 8.380 (2.76), 8.388 (2.97).
Primer 498
(5S)-2-{[6-fluor-2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2261]
[2262] (5S)-2-{[6-fluor-2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (44,0 mg, 107 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HATU (53,0 mg, 139 µmol) i trietilamin (45 µl, 320 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (11 µl, 130 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 28,6 mg (58% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,65 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.01), 0.146 (1.06), 1.668 (2.28),
1.719 (3.21), 1.764 (2.32), 1.781 (6.04), 1.799 (10.55), 1.816 (8.53), 1.833 (2.66),
1.899 (2.58), 1.916 (7.89), 1.933 (10.26), 1.949 (6.25), 1.966 (1.98), 2.012 (5.91),
2.022 (5.99), 2.035 (3.80), 2.327 (2.62), 2.366 (1.94), 2.569 (3.29), 2.596 (3.08),
2.606 (4.98), 2.618 (3.17), 2.636 (1.60), 2.647 (2.32), 2.669 (2.96), 2.709 (2.07),
3.234 (1.52), 3.251 (3.29), 3.263 (3.29), 3.280 (5.91), 3.333 (3.55), 3.351 (5.78),
3.368 (3.21), 3.380 (3.42), 3.398 (1.60), 3.438 (1.77), 3.456 (3.67), 3.480 (4.64),
3.497 (2.20), 3.612 (2.07), 3.628 (4.56), 3.645 (2.70), 3.653 (3.63), 3.670 (1.65),
4.797 (4.18), 4.811 (5.87), 4.820 (3.93), 5.374 (2.74), 5.415 (12.37), 5.434 (12.50),
5.475 (2.70), 7.797 (16.00), 7.872 (2.53), 7.879 (2.79), 7.894 (4.18), 7.901 (4.69),
7.916 (3.00), 7.923 (3.04), 8.151 (4.98), 8.158 (5.15), 8.177 (5.11), 8.184 (5.02),
8.295 (4.69), 8.309 (4.90), 8.319 (4.73), 8.333 (4.43).
Primer 499
(5S)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2263]
[2264] (5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (85,0 mg, čistoća 82%, 209 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (103 mg, 272 µmol) i N,Ndiizopropiletilamin (110 µl, 630 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (32,5 mg, 251 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 46,8 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.49), 0.008 (2.81), 1.723 (2.72),
1.737 (3.89), 1.753 (2.88), 1.766 (1.17), 1.963 (1.10), 1.975 (1.10), 1.987 (1.10),
1.999 (1.76), 2.012 (1.52), 2.023 (0.68), 2.048 (0.75), 2.063 (1.38), 2.083 (1.48),
2.098 (1.38), 2.117 (0.80), 2.327 (0.63), 2.366 (0.84), 2.523 (1.99), 2.576 (0.82),
2.601 (1.90), 2.619 (3.02), 2.629 (2.08), 2.637 (2.32), 2.643 (3.77), 2.657 (1.80),
2.670 (1.12), 2.686 (0.98), 2.700 (0.45), 2.710 (0.89), 4.339 (1.24), 4.376 (2.11),
4.400 (1.27), 4.620 (2.51), 4.635 (3.98), 4.648 (2.51), 4.727 (1.12), 4.758 (1.31),
4.787 (0.68), 4.803 (0.70), 4.835 (1.41), 4.863 (1.31), 5.392 (0.40), 5.437 (16.00),
5.481 (0.45).
Primer 500
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2265]
[2266] (5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (85,0 mg, čistoća 82%, 209 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (103 mg, 272 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 630 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (36,0 mg, 251 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,1 mg (56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.99), -0.008 (9.46), 0.008 (7.63),
0.146 (0.99), 1.690 (1.73), 1.744 (2.14), 1.972 (1.73), 2.012 (1.52), 2.076 (1.78),
2.111 (1.41), 2.327 (1.83), 2.366 (1.73), 2.522 (5.39), 2.602 (2.09), 2.611 (3.03),
2.626 (3.71), 2.638 (4.65), 2.652 (2.41), 2.669 (2.67), 2.690 (1.31), 2.710 (1.93),
3.456 (0.78), 3.519 (1.52), 3.528 (1.31), 3.538 (1.41), 3.571 (1.05), 3.616 (1.10),
3.630 (1.31), 3.648 (0.73), 3.685 (1.93), 3.705 (1.52), 3.717 (1.52), 3.726 (1.57),
3.743 (1.41), 3.757 (1.41), 3.777 (1.15), 3.870 (1.10), 3.905 (0.89), 3.927 (1.20),
3.942 (1.20), 3.957 (0.84), 3.977 (1.20), 3.991 (1.20), 4.007 (0.78), 4.020 (0.84),
4.126 (0.78), 4.141 (0.84), 4.168 (1.36), 4.181 (0.94), 4.193 (0.89), 4.209 (0.73),
4.819 (3.50), 4.829 (4.34), 4.835 (4.55), 4.844 (3.61), 5.266 (1.25), 5.377 (2.14),
5.416 (16.00), 5.419 (13.91), 5.427 (10.88), 5.470 (1.78).
Primer 501
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2267]
[2268] (5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (85,0 mg, čistoća 82%, 209 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (103 mg, 272 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 630 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (36,0 mg, 251 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 69,8 mg (77% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.41), -0.008 (3.87), 0.008 (3.12),
0.146 (0.41), 1.704 (1.58), 1.719 (1.84), 1.732 (2.09), 1.741 (2.09), 1.978 (1.42),
1.991 (1.56), 2.002 (1.64), 2.013 (1.44), 2.028 (1.46), 2.052 (1.01), 2.063 (1.30),
2.072 (1.66), 2.078 (1.40), 2.088 (1.34), 2.098 (1.09), 2.107 (1.15), 2.327 (0.79),
2.366 (1.13), 2.380 (1.09), 2.408 (1.40), 2.428 (1.38), 2.450 (1.01), 2.568 (2.17),
2.593 (2.88), 2.608 (3.12), 2.617 (2.94), 2.631 (3.44), 2.640 (3.71), 2.652 (1.94),
2.669 (1.44), 2.683 (1.03), 2.710 (0.95), 3.532 (2.57), 3.551 (4.23), 3.570 (2.05),
3.637 (0.47), 3.670 (1.52), 3.704 (1.66), 3.737 (1.50), 3.768 (2.33), 3.786 (1.36),
3.802 (2.11), 3.811 (1.88), 3.830 (0.97), 3.887 (0.87), 3.906 (1.76), 3.925 (1.03),
3.931 (1.22), 3.950 (0.55), 3.965 (0.57), 3.994 (1.09), 4.007 (0.55), 4.022 (0.83),
4.037 (1.01), 4.065 (0.63), 4.146 (0.69), 4.179 (1.03), 4.202 (0.99), 4.235 (0.47),
4.783 (1.44), 4.793 (1.70), 4.798 (1.88), 4.808 (1.38), 4.858 (1.82), 4.873 (2.27),
4.883 (1.46), 5.375 (0.85), 5.419 (15.23), 5.423 (16.00), 5.467 (1.03), 5.632 (0.45).
Primer 502
(5S)-2-[(1RS)-1-(4-metilfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2269]
[2270] (5S)-2-[(1RS)-1-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (izomer 1) (58,0 mg, 192 µmol) dodata je u THF (2,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (94,9 mg, 250 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (130 µl, 770 µmol). Nakon 15 min mešanja, dodat je pirolidin (19 µl, 230 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom.
Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 49,8 mg (73% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.79), -0.008 (16.00), 0.008
(13.92), 0.146 (1.84), 1.575 (7.98), 1.593 (8.07), 1.710 (1.84), 1.755 (2.17), 1.772
(3.54), 1.789 (2.64), 1.896 (2.31), 1.912 (3.02), 1.929 (2.12), 2.267 (15.10), 2.327
(2.64), 2.366 (1.89), 2.523 (8.12), 2.615 (1.79), 2.670 (2.78), 2.709 (1.98), 3.214
(1.18), 3.226 (1.13), 3.244 (1.94), 3.261 (1.04), 3.343 (1.42), 3.442 (1.23), 3.467
(1.42), 3.592 (1.37), 4.706 (1.60), 4.716 (1.23), 5.225 (1.94), 5.243 (1.75), 7.108
(2.64), 7.128 (5.71), 7.160 (6.75), 7.180 (2.88).
Primer 503
(5S)-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2271]
[2272] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 292 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (144 mg, 380 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 880 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 1,3-tiazolidin (31,3 mg, 351 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,5 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (3.99), 0.008 (4.42),
0.146 (0.48), 1.619 (0.94), 1.743 (1.45), 1.988 (0.73), 2.020 (1.88), 2.327 (0.94),
2.366 (0.67), 2.567 (2.15), 2.579 (2.06), 2.593 (1.91), 2.613 (2.66), 2.624 (1.54),
2.669 (1.30), 2.710 (0.73), 2.914 (0.42), 3.003 (1.45), 3.019 (3.12), 3.035 (1.72),
3.130 (1.97), 3.146 (4.14), 3.161 (2.21), 3.595 (0.45), 3.611 (0.64), 3.626 (0.82),
3.640 (1.12), 3.655 (0.54), 3.677 (0.60), 3.695 (1.12), 3.712 (0.73), 3.724 (0.60),
3.758 (0.51), 3.773 (0.97), 3.785 (0.88), 3.799 (1.21), 3.814 (0.60), 3.929 (0.57),
3.943 (1.21), 3.958 (0.82), 3.970 (0.94), 3.986 (0.42), 4.371 (1.88), 4.396 (2.42),
4.557 (2.54), 4.583 (2.00), 4.611 (1.42), 4.634 (1.72), 4.809 (1.69), 4.832 (1.42),
4.893 (1.36), 4.972 (1.51), 5.015 (10.37), 5.058 (0.48), 7.910 (15.09), 7.913 (16.00),
8.642 (5.60).
Primer 504
(5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2273]
[2274] (5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 283 µmol) ubačena je u THF (23 µl) i zatim su dodati (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (48,8 mg, 340 µmol) i (200 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je HBTU (140 mg, 368 µmol) i reakciona smeša je mešana 4 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,5 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 442 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: -0.149 (1.70), -0.008 (12.77), 0.008
(16.00), 0.146 (1.62), 1.740 (1.45), 2.015 (1.45), 2.073 (2.13), 2.327 (2.89), 2.366
(3.06), 2.571 (2.55), 2.595 (2.30), 2.605 (2.98), 2.648 (1.11), 2.669 (3.06), 2.710
(2.98), 3.491 (1.11), 3.513 (0.94), 3.632 (0.85), 3.687 (1.45), 3.720 (1.19), 3.785
(0.77), 3.946 (0.77), 3.996 (0.68), 4.174 (0.68), 4.808 (2.81), 4.886 (13.53), 5.275
(0.77), 5.385 (0.85), 5.450 (0.60), 7.145 (3.23), 7.165 (3.57), 8.034 (2.64), 8.055
(2.55), 8.650 (3.15).
Primer 505
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2275]
[2276] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 324 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (160 mg, 421 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 970 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 1,3-tiazolidin (34,7 mg, 389 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 45,0 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,15 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.72), 0.008 (2.67), 1.245 (0.93),
1.261 (1.57), 1.278 (0.76), 1.661 (0.95), 1.746 (1.42), 1.796 (0.77), 1.980 (0.76),
2.016 (1.80), 2.073 (1.11), 2.327 (0.55), 2.524 (1.84), 2.578 (2.03), 2.592 (2.04),
2.610 (2.62), 2.622 (1.51), 2.640 (0.63), 2.652 (0.92), 2.665 (0.84), 2.913 (0.50),
3.002 (1.47), 3.018 (3.08), 3.034 (1.74), 3.130 (2.02), 3.146 (4.22), 3.161 (2.18),
3.596 (0.43), 3.614 (0.67), 3.629 (0.91), 3.644 (1.14), 3.659 (0.60), 3.673 (0.63),
3.690 (1.14), 3.707 (0.71), 3.720 (0.60), 3.761 (0.51), 3.777 (0.94), 3.788 (0.91),
3.803 (1.24), 3.818 (0.61), 3.932 (0.60), 3.947 (1.19), 3.961 (0.83), 3.973 (0.92),
3.989 (0.43), 4.244 (0.93), 4.373 (1.89), 4.399 (2.43), 4.486 (0.45), 4.553 (2.48),
4.578 (1.94), 4.618 (1.41), 4.640 (1.72), 4.808 (1.68), 4.831 (1.34), 4.875 (1.22),
4.891 (1.45), 4.900 (1.35), 4.916 (16.00), 4.958 (1.10), 4.974 (1.11), 7.200 (4.68),
7.221 (5.05), 7.914 (4.06), 7.920 (4.18), 7.935 (3.90), 7.941 (4.01), 8.572 (4.54),
8.578 (4.62).
Primer 506
(5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2277]
[2278] (5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 283 µmol) ubačena je u THF (1,7 ml) i zatim su dodati HBTU (140 mg, 368 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (250 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (48,8 mg, 340 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 51,1 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 442 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.64), -0.008 (5.43), 0.008 (5.61),
0.146 (0.67), 1.664 (0.94), 1.732 (1.25), 2.014 (1.37), 2.051 (1.07), 2.067 (0.90),
2.086 (0.77), 2.327 (0.97), 2.366 (0.94), 2.382 (0.97), 2.412 (1.01), 2.431 (0.99),
2.454 (0.88), 2.572 (3.14), 2.583 (2.36), 2.598 (2.26), 2.614 (2.51), 2.669 (1.31),
2.710 (0.71), 3.532 (1.05), 3.541 (1.22), 3.550 (1.83), 3.562 (2.06), 3.580 (0.92),
3.670 (1.18), 3.704 (1.31), 3.746 (0.75), 3.779 (1.91), 3.809 (2.08), 3.826 (0.69),
3.893 (0.60), 3.911 (1.31), 3.937 (0.99), 3.956 (0.54), 3.990 (0.82), 4.018 (0.56),
4.033 (0.77), 4.061 (0.47), 4.149 (0.45), 4.181 (0.75), 4.206 (0.71), 4.765 (1.03),
4.780 (1.44), 4.790 (1.12), 4.837 (1.12), 4.852 (1.50), 4.861 (1.12), 4.905 (16.00),
7.887 (3.24), 7.892 (5.73), 7.897 (3.52), 8.446 (5.61), 8.450 (5.65), 8.639 (5.35),
8.644 (5.37).
Primer 507
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2279]
[2280] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 306 µmol) ubačena je u THF (4,6 ml) i zatim su dodati HBTU (139 mg, 367 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 920 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 1,3-tiazolidin (35,5 mg, 398 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40,0 mg (33% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.06), -0.008 (9.48), 0.008 (8.72),
0.147 (1.06), 1.653 (2.73), 1.711 (4.09), 1.949 (2.12), 1.983 (4.70), 2.046 (3.03),
2.073 (3.49), 2.327 (2.88), 2.366 (0.76), 2.470 (2.35), 2.525 (8.95), 2.569 (7.73),
2.581 (4.40), 2.599 (1.97), 2.612 (2.65), 2.670 (3.11), 2.710 (1.14), 2.744 (0.76),
2.800 (0.91), 2.998 (3.79), 3.014 (8.27), 3.030 (4.63), 3.128 (5.31), 3.144 (11.37),
3.159 (5.84), 3.610 (1.44), 3.625 (2.27), 3.640 (3.03), 3.663 (1.82), 3.681 (3.11),
3.698 (1.82), 3.711 (1.44), 3.752 (1.36), 3.767 (2.58), 3.780 (2.27), 3.794 (3.18),
3.810 (1.59), 3.924 (1.59), 3.940 (3.18), 3.952 (2.20), 3.966 (2.35), 3.981 (1.14),
4.367 (5.00), 4.392 (6.82), 4.543 (6.67), 4.568 (5.23), 4.609 (3.72), 4.632 (4.40),
4.797 (4.32), 4.820 (3.64), 4.859 (3.79), 4.900 (5.61), 4.905 (5.84), 4.939 (16.00),
4.943 (15.17), 4.991 (11.98), 5.030 (4.85), 8.089 (8.42), 8.094 (8.95), 8.113 (8.87),
8.118 (8.95), 8.478 (9.33), 8.482 (9.25).
Primer 508
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2281]
[2282] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 324 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (160 mg, 421 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (280 µl, 1,6 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (48,8 mg, 389 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 67,0 mg (54% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.82), -0.008 (6.88), 0.008 (6.28),
0.146 (0.82), 1.743 (4.02), 1.883 (0.88), 1.930 (1.00), 1.997 (1.06), 2.031 (1.66),
2.109 (2.66), 2.138 (2.02), 2.269 (1.42), 2.327 (1.63), 2.366 (0.69), 2.572 (2.81),
2.588 (2.17), 2.612 (3.32), 2.654 (1.30), 2.669 (1.87), 2.709 (0.69), 2.881 (0.42),
3.276 (1.24), 3.350 (1.18), 3.372 (1.03), 3.399 (1.12), 3.407 (1.09), 3.469 (0.91),
3.496 (1.12), 3.505 (1.09), 3.612 (0.72), 3.636 (3.38), 3.655 (2.90), 3.681 (1.87),
3.697 (1.36), 3.732 (2.17), 3.752 (2.35), 3.778 (1.99), 3.794 (1.57), 3.860 (3.29),
4.695 (1.54), 4.704 (1.93), 4.710 (2.14), 4.720 (1.57), 4.752 (2.11), 4.761 (2.32),
4.767 (2.66), 4.776 (1.96), 4.865 (1.21), 4.906 (16.00), 4.913 (11.14), 4.955 (0.91),
5.259 (1.66), 5.389 (2.05), 5.516 (1.09), 5.944 (0.39), 7.200 (6.85), 7.221 (7.37),
7.913 (5.80), 7.920 (5.89), 7.934 (5.40), 7.941 (5.68), 8.572 (6.67), 8.578 (6.70).
Primer 509
(5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2283]
[2284] (5S)-2-[(5-brompiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 283 µmol) ubačena je u THF (1,7 ml) i zatim su dodati HBTU (140 mg, 368 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (250 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (42,7 mg, 340 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,7 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.52), -0.008 (13.23), 0.008
(14.75), 0.146 (1.57), 1.734 (2.39), 1.910 (0.81), 2.027 (1.25), 2.103 (2.17), 2.137
(1.57), 2.270 (1.08), 2.327 (2.22), 2.366 (1.46), 2.565 (2.12), 2.592 (1.63), 2.616
(2.44), 2.669 (2.77), 2.710 (1.46), 3.397 (0.87), 3.468 (0.71), 3.495 (0.87), 3.638
(2.66), 3.662 (2.01), 3.679 (1.63), 3.703 (1.08), 3.723 (1.14), 3.744 (2.44), 3.769
(1.63), 3.854 (2.28), 4.694 (1.14), 4.709 (1.52), 4.719 (1.19), 4.751 (1.46), 4.766
(1.90), 4.775 (1.46), 4.901 (16.00), 5.259 (1.25), 5.390 (1.63), 5.515 (0.87), 7.893
(4.99), 8.448 (5.91), 8.639 (4.72), 8.644 (4.99).
Primer 510
(5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2285]
[2286] (5S)-2-[(5-brompiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 283 µmol) ubačena je u THF (23 µl) i zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (42,7 mg, 340 µmol) i (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (200 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je HBTU (140 mg, 368 µmol) i reakciona smeša je mešana 4 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 56,0 mg (47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.76), -0.008 (6.64), 0.008 (6.30),
0.146 (0.76), 1.729 (3.63), 1.742 (4.16), 1.882 (0.86), 1.921 (1.05), 1.993 (1.10),
2.034 (1.81), 2.072 (2.05), 2.101 (2.77), 2.138 (2.15), 2.219 (1.19), 2.269 (1.48),
2.327 (1.72), 2.366 (0.91), 2.571 (3.10), 2.586 (2.39), 2.610 (3.58), 2.651 (1.29),
2.669 (2.05), 2.710 (1.10), 3.274 (1.19), 3.349 (1.53), 3.362 (1.29), 3.371 (1.29),
3.398 (1.24), 3.407 (1.29), 3.468 (0.96), 3.495 (1.19), 3.504 (1.15), 3.610 (0.81),
3.635 (3.68), 3.656 (3.06), 3.681 (2.01), 3.701 (1.58), 3.730 (2.24), 3.750 (2.58),
3.778 (2.10), 3.794 (1.67), 3.826 (0.57), 3.860 (3.49), 4.693 (1.72), 4.702 (2.05),
4.708 (2.20), 4.717 (1.72), 4.750 (2.10), 4.759 (2.48), 4.765 (2.77), 4.774 (2.01),
4.841 (1.39), 4.882 (16.00), 4.889 (11.27), 4.930 (1.05), 5.258 (1.62), 5.390 (2.24),
5.515 (1.29), 7.144 (7.02), 7.165 (7.55), 8.032 (5.68), 8.038 (5.83), 8.053 (5.59),
8.059 (5.64), 8.648 (6.83), 8.654 (6.93).
Primer 511
(2S)-1-{[(5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il]karbonil}pirolidin-2-karbonitril
[2287]
[2288] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (97,0 mg, 283 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (140 mg, 368 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 850 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril hidrohlorid (45,1 mg, 340 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 36,0 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 421 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.50), 0.146 (1.50), 1.244 (1.05),
1.260 (1.05), 1.641 (1.50), 1.780 (1.64), 2.045 (4.49), 2.061 (6.88), 2.077 (5.98),
2.094 (2.99), 2.117 (2.54), 2.136 (2.39), 2.150 (2.99), 2.161 (2.54), 2.189 (1.35),
2.209 (2.99), 2.228 (2.84), 2.240 (1.79), 2.259 (1.50), 2.327 (3.89), 2.366 (2.84),
2.570 (3.29), 2.586 (2.39), 2.597 (2.39), 2.610 (2.09), 2.646 (3.14), 2.669 (4.34),
2.710 (3.14), 3.676 (4.64), 3.692 (9.27), 3.709 (4.64), 4.798 (2.99), 4.809 (3.44),
4.818 (4.49), 4.830 (4.93), 4.847 (2.54), 4.971 (1.05), 5.011 (9.12), 5.021 (8.52),
5.061 (1.05), 7.915 (16.00), 8.642 (6.13).
Primer 512
(2S)-1-({(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il}karbonil)pirolidin-2-karbonitril
[2289]
[2290] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 324 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (160 mg, 421 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (170 µl, 970 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril (37,4 mg, 389 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 31,0 mg (25% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 387 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.008 (4.70), 0.008 (4.51),
0.146 (0.56), 1.675 (0.88), 1.791 (1.13), 2.028 (1.26), 2.047 (3.33), 2.063 (4.78),
2.079 (4.08), 2.095 (1.90), 2.106 (1.56), 2.120 (1.82), 2.130 (1.52), 2.137 (1.65),
2.151 (2.09), 2.163 (1.80), 2.177 (0.77), 2.185 (0.98), 2.205 (2.07), 2.225 (2.01),
2.237 (1.20), 2.244 (0.73), 2.256 (0.96), 2.327 (0.85), 2.569 (1.65), 2.584 (1.45),
2.595 (1.58), 2.609 (1.26), 2.628 (1.15), 2.640 (2.16), 2.653 (1.26), 2.670 (1.33),
2.682 (1.02), 3.679 (3.23), 3.695 (6.66), 3.712 (3.27), 4.791 (2.37), 4.802 (2.50),
4.811 (2.76), 4.821 (3.53), 4.828 (2.41), 4.834 (2.61), 4.843 (1.88), 4.915 (16.00),
7.195 (4.32), 7.216 (4.66), 7.921 (3.06), 7.927 (3.05), 7.942 (2.91), 7.949 (2.99),
8.573 (3.80), 8.579 (3.82).
Primer 513
(2S)-1-({(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il}karbonil)pirolidin-2-karbonitril
[2291]
[2292] (5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (70,0 mg, 204 µmol) ubačena je u THF (1,7 ml) i zatim su dodati HBTU (155 mg, 408 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 820 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril hidrohlorid (40,6 mg, 306 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 10). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,50 mg (čistoća 94%, 8% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 421 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.95), -0.008 (16.00), 0.008
(15.18), 0.146 (1.88), 1.665 (0.69), 1.759 (0.88), 2.045 (2.07), 2.060 (2.89), 2.077
(2.95), 2.093 (1.63), 2.136 (1.19), 2.149 (1.57), 2.161 (1.19), 2.181 (0.75), 2.201
(1.57), 2.221 (1.44), 2.233 (0.94), 2.252 (0.88), 2.327 (2.38), 2.366 (2.51), 2.577
(1.38), 2.606 (1.88), 2.617 (1.13), 2.669 (2.51), 2.710 (2.45), 3.672 (2.51), 3.689
(5.02), 3.706 (2.32), 4.780 (1.63), 4.791 (1.95), 4.801 (3.39), 4.811 (3.26), 4.826
(1.44), 4.964 (1.19), 5.004 (6.40), 5.018 (6.53), 5.058 (1.25), 8.251 (2.51), 8.256
(2.70), 8.566 (2.89), 8.572 (2.82).
Primer 514
(2S)-1-({(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-il}karbonil)pirolidin-2-karbonitril
[2293]
[2294] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, 306 µmol) ubačena je u THF (4,6 ml) i zatim su dodati HBTU (139 mg, 367 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 920 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (2S)-pirolidin-2-karbonitril (38,3 mg, 398 µmol) i reakciona smeša je mešana 72 sata. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 35,0 mg (28% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,19 min; MS (ESIpos): m/z = 405[M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.01), 0.008 (2.62), 1.247 (1.39),
1.264 (2.35), 1.281 (1.26), 1.655 (2.13), 1.746 (2.54), 1.757 (2.62), 1.772 (1.94),
1.982 (1.68), 2.001 (2.40), 2.017 (3.51), 2.025 (4.06), 2.046 (5.71), 2.059 (9.52),
2.078 (9.69), 2.094 (5.49), 2.104 (3.31), 2.115 (3.01), 2.129 (2.61), 2.137 (3.62),
2.149 (4.47), 2.160 (3.59), 2.176 (1.91), 2.182 (2.56), 2.202 (4.62), 2.214 (1.69),
2.221 (4.22), 2.234 (2.64), 2.241 (1.72), 2.253 (2.06), 2.274 (0.86), 2.287 (0.55),
2.328 (1.08), 2.567 (3.13), 2.584 (3.05), 2.597 (5.37), 2.610 (2.96), 2.627 (1.37),
2.639 (2.19), 2.651 (0.94), 2.665 (0.85), 2.670 (1.04), 3.502 (0.56), 3.521 (0.44),
3.670 (7.94), 3.687 (16.00), 3.703 (7.75), 4.739 (0.60), 4.783 (6.98), 4.786 (5.83),
4.793 (8.96), 4.802 (12.61), 4.812 (9.58), 4.910 (3.03), 4.915 (3.01), 4.949 (10.52),
4.953 (10.25), 4.975 (10.53), 4.979 (10.66), 5.014 (3.03), 5.019 (2.99), 5.040 (0.48),
6.973 (0.87), 7.101 (0.90), 7.229 (0.82), 8.090 (7.00), 8.095 (7.61), 8.114 (7.09),
8.118 (7.72), 8.480 (9.30), 8.483 (9.78).
Primer 515
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2295]
[2296] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (46,5 mg, 136 µmol) ubačena je u THF (11 µl) i zatim su dodati (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (20,5 mg, 163 µmol) i (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (95 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je HBTU (67,0 mg, 177 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 11). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 29,5 mg (53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.695 (1.26), 1.734 (2.23), 1.888 (0.52),
1.924 (0.76), 1.999 (0.84), 2.034 (1.38), 2.047 (1.33), 2.068 (1.37), 2.088 (1.85),
2.104 (2.27), 2.138 (1.59), 2.221 (0.85), 2.242 (0.78), 2.256 (0.80), 2.270 (1.14),
2.327 (0.56), 2.569 (1.57), 2.577 (1.70), 2.591 (1.48), 2.617 (2.57), 2.660 (1.13),
2.670 (0.97), 3.361 (1.30), 3.371 (1.17), 3.398 (1.01), 3.406 (0.99), 3.460 (0.64),
3.468 (0.71), 3.495 (0.89), 3.504 (0.86), 3.613 (0.59), 3.630 (2.11), 3.637 (2.26),
3.654 (2.41), 3.666 (1.56), 3.681 (1.50), 3.698 (1.11), 3.725 (1.28), 3.746 (1.94),
3.770 (1.64), 3.784 (1.49), 3.855 (2.48), 4.703 (1.17), 4.712 (1.42), 4.719 (1.49),
4.728 (1.18), 4.762 (1.50), 4.770 (1.68), 4.777 (1.93), 4.786 (1.45), 5.017 (16.00),
5.260 (1.25), 5.384 (1.52), 5.391 (1.57), 5.512 (0.89), 8.059 (5.28), 8.742 (5.83),
8.917 (5.45).
Primer 516
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2297]
[2298] (5S)-2-[2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (121 mg, 383 µmol) ubačena je u THF (7,0 ml) i zatim su dodati HBTU (189 mg, 498 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (200 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (57,7 mg, 459 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 77,3 mg (52% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 387 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.36), -0.008 (16.00), 0.008 (8.62),
0.146 (1.10), 1.760 (1.10), 2.110 (0.79), 2.327 (2.33), 2.366 (3.25), 2.397 (11.03),
2.523 (12.00), 2.577 (0.97), 2.597 (1.23), 2.622 (1.14), 2.669 (1.89), 2.709 (1.76),
3.658 (0.75), 3.757 (0.57), 3.870 (0.75), 4.704 (0.48), 4.758 (0.57), 5.186 (4.75),
5.254 (0.40), 5.384 (0.48), 7.358 (2.46), 7.378 (2.55), 7.908 (2.59), 7.927 (2.37).
Primer 517
(5S)-2-[2,2-difluor-2-(4-metilfenil)etil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2299]
[2300] (5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (51,5 mg, 133 µmol) rastvoren je u 1,2-dihloretanu (2,0 ml), dodat je dietilamino sumpor trifluorid (1,0 ml, čistoća 90%, 6,8 mmol) i 1 kap etanola. Reakciona smeša je mešana tokom 3 sata na 70°C. Reakciona smeša je ukapana u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Dodat je dihlormetan i organska faza je razdvojena. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 16,8 mg (31% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 409 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.007 (6.14), 1.148 (1.48), 1.729 (2.36),
2.084 (1.37), 2.347 (16.00), 2.365 (1.48), 2.568 (2.08), 2.608 (1.70), 2.669 (1.37),
2.710 (0.99), 3.615 (1.92), 3.640 (1.48), 3.726 (1.32), 3.750 (1.04), 3.839 (1.70),
4.275 (1.26), 4.315 (1.64), 4.658 (0.99), 4.716 (1.26), 5.383 (1.15), 7.288 (3.84),
7.308 (5.81), 7.393 (4.88), 7.413 (3.18).
Sledeći primeri 518- 546 prikazani su kao što je opisano u primeru 517.
Primer 518
(5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2301]
[2302] (5S)-2-{2-[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]etil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (75,0 mg, čistoća 72%, 138 µmol), N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol), HBTU (99,6 mg, 263 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (1:1) (26,2 mg, 235 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 44,1 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
[2303] LC-MS (metoda 3): Rt= 1,43 min; MS (ESIpos): m/z = 448 [M+H]<+1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (3.72), 0.146 (3.72), 1.707 (9.96), 1.931 (3.82), 1.992 (4.03), 2.072 (3.02), 2.327 (5.53), 2.366 (4.03), 2.584 (7.95), 2.625 (2.72), 2.669 (5.53), 2.709 (3.52), 3.283 (11.07), 3.910 (2.92), 4.024 (5.94), 4.041 (13.08), 4.059 (9.96), 4.235 (3.62), 4.324 (2.72), 4.441 (6.14), 4.454 (9.86), 4.468 (6.44), 4.658 (1.81), 5.385 (1.81), 5.517 (1.81), 8.413 (16.00), 8.876 (14.79).
Primer 519
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2304]
[2305] (5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (73,1 mg, 240 µmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol), HBTU (118 mg, 311 µmol), 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (41,3 mg, 287 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 53,2 mg (56% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,48 min; MS (ESIpos): m/z = 395 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.61), 1.683 (1.93), 1.709 (3.74),
1.891 (1.36), 1.971 (3.06), 2.011 (1.82), 2.026 (1.70), 2.037 (1.82), 2.328 (1.93),
2.353 (0.68), 2.367 (2.16), 2.400 (1.59), 2.523 (7.72), 2.567 (4.43), 2.576 (4.99),
2.591 (3.40), 2.604 (2.50), 2.616 (4.31), 2.660 (2.16), 2.670 (2.84), 2.710 (1.70),
2.895 (5.90), 2.914 (12.26), 2.932 (6.47), 3.518 (3.29), 3.538 (5.22), 3.557 (2.50),
3.623 (0.68), 3.658 (1.93), 3.691 (2.16), 3.721 (1.48), 3.751 (4.20), 3.767 (5.56),
3.785 (13.39), 3.803 (10.55), 3.822 (3.86), 3.838 (2.04), 3.857 (1.13), 3.882 (2.27),
3.909 (1.70), 3.928 (0.79), 3.949 (0.68), 3.979 (1.48), 4.008 (1.02), 4.020 (1.36),
4.050 (0.79), 4.115 (0.79), 4.147 (1.36), 4.174 (1.36), 4.204 (0.57), 4.668 (1.82),
4.683 (2.61), 4.693 (1.82), 4.744 (1.93), 4.759 (2.61), 4.769 (1.82), 7.062 (7.15),
7.085 (16.00), 7.107 (10.33), 7.203 (8.74), 7.217 (9.87), 7.225 (8.17), 7.239 (6.70).
Primer 520
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2306]
[2307] (5S)-2-[2-(4-fluorfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (73,1 mg, 240 µmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol), HBTU (118 mg, 311 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (1:1) (32,1 mg, 287 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 37,7 mg (43% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 363 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.06), -0.008 (15.54), 0.008
(16.00), 0.146 (2.06), 1.715 (3.20), 1.943 (1.26), 1.972 (1.14), 1.991 (1.37), 2.006
(1.26), 2.328 (2.40), 2.366 (1.94), 2.523 (7.43), 2.567 (2.74), 2.588 (1.83), 2.606
(2.97), 2.619 (1.71), 2.648 (1.03), 2.670 (2.74), 2.710 (1.94), 2.898 (2.74), 2.917
(5.60), 2.935 (3.09), 3.782 (2.17), 3.799 (4.00), 3.969 (0.80), 4.220 (1.14), 4.238
(1.14), 4.277 (0.80), 4.411 (0.57), 4.448 (2.40), 4.462 (3.43), 4.475 (2.17), 4.663
(0.46), 5.332 (0.57), 5.520 (0.57), 7.064 (2.29), 7.085 (5.03), 7.106 (3.09), 7.223
(4.00).
Primer 521
(5S)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2308]
[2309] (5S)-2-[2-(4-metilfenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (200 mg, 664 µmol), N,N-diizopropiletilamin (460 µl, 2,7 mmol), HBTU (327 mg, 863 µmol), pirolidin (66 µl, 800 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 163 mg (69% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.86), 0.008 (1.55), 1.703 (0.76),
1.714 (1.01), 1.733 (0.71), 1.746 (0.55), 1.764 (1.00), 1.781 (1.71), 1.798 (1.34),
1.815 (0.41), 1.883 (0.41), 1.900 (1.27), 1.916 (1.67), 1.933 (1.07), 1.951 (0.54),
1.962 (0.61), 1.973 (0.54), 1.982 (0.43), 1.997 (0.44), 2.018 (0.40), 2.257 (9.36),
2.560 (0.68), 2.580 (0.44), 2.602 (0.42), 2.613 (0.87), 2.626 (0.44), 2.848 (1.00),
2.868 (1.97), 2.887 (1.03), 3.233 (0.51), 3.246 (0.52), 3.263 (0.91), 3.280 (0.45),
3.328 (1.08), 3.346 (0.51), 3.357 (0.53), 3.440 (0.58), 3.447 (0.42), 3.465 (0.74),
3.589 (0.70), 3.606 (0.41), 3.613 (0.54), 3.729 (0.62), 3.748 (0.95), 3.758 (0.65),
3.766 (0.59), 3.777 (0.97), 3.797 (0.54), 4.659 (0.65), 4.669 (0.75), 4.675 (0.88),
4.684 (0.64), 7.085 (16.00).
Primer 522
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2310]
[2311] (5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (92,0 mg, 290 µmol), N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 870 µmol), HBTU (143 mg, 377 µmol), (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (49,9 mg, 348 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 71,1 mg (60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.680 (0.47), 1.704 (0.90), 1.715 (1.09),
1.727 (1.01), 1.939 (0.47), 1.976 (0.55), 1.986 (0.65), 1.998 (0.48), 2.012 (0.44),
2.021 (0.42), 2.028 (0.46), 2.036 (0.44), 2.045 (0.41), 2.073 (1.37), 2.563 (0.77),
2.575 (0.79), 2.586 (0.63), 2.620 (1.09), 2.631 (0.63), 2.663 (0.51), 2.830 (1.48),
2.848 (2.93), 2.867 (1.56), 3.477 (0.48), 3.499 (0.42), 3.509 (0.44), 3.532 (0.49),
3.673 (0.68), 3.689 (0.68), 3.715 (16.00), 3.742 (2.34), 3.750 (1.16), 3.761 (1.70),
3.769 (1.37), 3.782 (0.78), 3.804 (0.47), 4.152 (0.43), 4.710 (0.96), 4.723 (1.33),
4.734 (0.92), 6.828 (2.79), 6.846 (2.98), 6.850 (2.86), 7.095 (2.14), 7.104 (2.47),
7.116 (1.95), 7.125 (2.09).
Primer 523
(5S)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2312]
[2313] (5S)-2-[2-(4-metoksifenil)etil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (92,0 mg, 290 µmol), N,N-diizopropiletilamin (150 µl, 870 µmol), HBTU (143 mg, 377 µmol), 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (45,1 mg, 348 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 64,5 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.90), 0.008 (0.75), 1.711 (0.65),
1.726 (1.00), 1.738 (0.92), 1.749 (0.63), 1.960 (0.54), 1.971 (0.50), 2.016 (0.41),
2.028 (0.40), 2.037 (0.48), 2.569 (0.65), 2.589 (0.83), 2.605 (0.98), 2.618 (1.19),
2.632 (0.57), 2.835 (1.24), 2.854 (2.48), 2.872 (1.35), 3.713 (16.00), 3.743 (0.87),
3.750 (0.92), 3.760 (1.69), 3.770 (1.68), 3.779 (0.83), 3.789 (0.76), 4.342 (0.64),
4.357 (0.64), 4.501 (0.86), 4.515 (1.44), 4.528 (0.85), 4.700 (0.45), 4.807 (0.43),
6.825 (3.10), 6.847 (3.66), 6.854 (0.44), 7.102 (3.30), 7.123 (2.85).
Primer 524
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2314]
[2315] (5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 137 µmol), N,N-diizopropiletilamin (72 µl, 410 µmol), HBTU (67,8 mg, 179 µmol), 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (23,7 mg, 165 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 27,3 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,72 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.67), 0.008 (2.32), 0.677 (0.52),
0.687 (0.71), 0.702 (1.17), 0.713 (1.14), 0.720 (0.89), 0.786 (1.23), 0.796 (1.02),
0.811 (0.74), 0.821 (0.61), 0.921 (0.53), 0.931 (0.55), 0.945 (1.24), 0.955 (1.62),
0.966 (2.20), 0.974 (1.56), 0.988 (1.08), 0.998 (0.49), 1.662 (0.70), 1.688 (1.08),
1.958 (0.93), 1.972 (0.93), 1.985 (0.91), 2.012 (0.58), 2.022 (0.44), 2.073 (1.06),
2.235 (16.00), 2.327 (0.53), 2.366 (0.85), 2.393 (0.59), 2.416 (0.56), 2.435 (0.42),
2.467 (0.58), 2.523 (2.70), 2.566 (1.36), 2.580 (1.61), 2.622 (0.61), 2.669 (0.58),
2.710 (0.45), 3.509 (0.99), 3.528 (1.58), 3.549 (0.71), 3.644 (1.67), 3.649 (1.91),
3.680 (2.35), 3.685 (2.14), 3.712 (0.55), 3.744 (1.27), 3.772 (1.06), 3.869 (0.74),
3.895 (0.58), 3.915 (1.88), 3.922 (1.67), 3.951 (1.38), 3.958 (1.74), 4.000 (0.47),
4.133 (0.47), 4.159 (0.42), 4.657 (0.64), 4.671 (0.88), 4.681 (0.62), 4.731 (0.67),
4.747 (0.85), 4.756 (0.62), 7.025 (3.25), 7.045 (5.44), 7.105 (6.96), 7.125 (4.16).
Primer 525
(5S)-5-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]karbonil}-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2316]
[2317] (5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 137 µmol), N,N-diizopropiletilamin (72 µl, 410 µmol), HBTU (67,8 mg, 179 µmol), (3S)-pirolidin-3-ol hidrohlorid (1:1) (20,4 mg, 165 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 24,4 mg (45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 397 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.87), 0.008 (2.23), 0.683 (0.77),
0.706 (1.23), 0.786 (1.29), 0.809 (0.80), 0.820 (0.58), 0.921 (0.45), 0.933 (0.56),
0.944 (1.00), 0.956 (1.70), 0.966 (2.06), 0.992 (0.79), 1.387 (0.55), 1.692 (1.47),
1.703 (1.54), 1.752 (0.58), 1.762 (0.51), 1.831 (0.77), 1.842 (0.86), 1.853 (0.73),
1.863 (0.91), 1.874 (0.74), 1.930 (0.79), 1.964 (1.45), 1.975 (1.42), 1.987 (1.40),
1.997 (0.95), 2.013 (0.66), 2.072 (1.15), 2.236 (16.00), 2.327 (0.57), 2.366 (0.53),
2.447 (0.64), 2.464 (0.80), 2.523 (1.85), 2.565 (0.86), 2.577 (1.36), 2.619 (0.60),
2.669 (0.51), 2.709 (0.44), 3.243 (0.42), 3.276 (2.35), 3.287 (2.17), 3.297 (1.50),
3.404 (1.13), 3.413 (0.96), 3.427 (0.92), 3.434 (1.00), 3.456 (0.55), 3.464 (0.45),
3.528 (0.58), 3.549 (0.45), 3.606 (0.87), 3.617 (1.32), 3.634 (3.12), 3.644 (1.09),
3.671 (2.81), 3.918 (1.76), 3.928 (1.40), 3.954 (1.38), 3.964 (1.11), 4.251 (0.78),
4.349 (0.85), 4.591 (0.77), 4.599 (0.88), 4.606 (0.95), 4.614 (0.77), 4.633 (0.63),
4.647 (0.81), 4.656 (0.57), 7.026 (3.04), 7.046 (4.91), 7.106 (4.38), 7.112 (4.57),
7.126 (2.87), 7.132 (2.62).
Primer 526
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2319] (5S)-2-{[1-(4-metilfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 137 µmol), N,N-diizopropiletilamin (72 µl, 410 µmol), HBTU (67,8 mg, 179 µmol), (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (20,7 mg, 165 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 21,6 mg (39% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,58 min; MS (ESIpos): m/z = 399 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.60), -0.008 (5.27), 0.008 (4.23),
0.146 (0.55), 0.674 (0.50), 0.684 (0.73), 0.700 (1.15), 0.707 (1.10), 0.789 (1.04),
0.947 (0.89), 0.966 (1.93), 0.989 (0.86), 1.387 (3.45), 1.708 (1.54), 1.870 (0.42),
1.984 (0.86), 1.994 (0.94), 2.031 (0.73), 2.049 (0.65), 2.077 (0.65), 2.126 (0.50),
2.235 (16.00), 2.327 (0.97), 2.366 (1.07), 2.523 (4.28), 2.580 (1.28), 2.625 (0.65),
2.669 (1.20), 2.709 (1.10), 3.379 (0.47), 3.476 (0.44), 3.603 (0.99), 3.633 (2.01),
3.641 (1.80), 3.670 (2.17), 3.678 (1.54), 3.709 (0.99), 3.733 (0.70), 3.755 (0.57),
3.821 (1.15), 3.911 (1.33), 3.929 (1.54), 3.947 (1.04), 3.965 (1.23), 4.592 (0.57),
4.601 (0.68), 4.608 (0.65), 4.617 (0.57), 4.650 (0.76), 4.665 (0.94), 4.674 (0.70),
4.910 (0.55), 5.247 (0.57), 5.377 (0.63), 5.499 (0.44), 7.026 (2.90), 7.046 (4.72),
7.102 (3.47), 7.108 (4.33), 7.123 (2.35), 7.128 (2.45).
Primer 527
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2320]
[2321] (5S)-3-okso-2-({1-[4-(trifluormetil)fenil]ciklopropil}metil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (57,4 mg, 151 µmol), N,N-diizopropiletilamin (79 µl, 450 µmol), HBTU (74,2 mg, 196 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (20,1 mg, 181 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 37,9 mg (57% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 439 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.76), -0.008 (16.00), 0.008
(14.16), 0.146 (1.84), 0.852 (2.09), 0.877 (6.79), 0.925 (5.03), 0.949 (2.09), 1.078
(1.17), 1.111 (14.24), 1.691 (4.86), 1.932 (2.60), 1.967 (2.09), 2.072 (2.85), 2.327
(2.43), 2.366 (2.76), 2.523 (11.64), 2.569 (4.69), 2.611 (1.76), 2.669 (2.76), 2.710
(2.85), 3.799 (4.94), 3.835 (8.54), 3.877 (1.34), 3.908 (4.77), 3.923 (3.77), 3.946
(2.76), 3.961 (2.93), 4.189 (1.93), 4.219 (1.93), 4.254 (1.34), 4.274 (1.17), 4.321
(1.01), 4.357 (0.75), 4.385 (0.92), 4.449 (5.11), 4.613 (0.84), 5.316 (0.84), 5.370
(0.92), 5.462 (0.84), 5.505 (0.84), 7.434 (8.80), 7.454 (11.81), 7.572 (10.05), 7.592
(7.71).
Primer 528
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2322]
[2323] (5S)-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (93,2 mg, čistoća 50%, 136 µmol), N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 810 µmol), HBTU (134 mg, 353 µmol), (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (20,4 mg, 163 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 42,9 mg (76% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.55), 0.008 (1.21), 0.659 (0.47),
0.676 (0.69), 0.686 (0.80), 0.756 (0.77), 0.780 (0.43), 0.922 (0.63), 0.940 (1.59),
1.712 (1.04), 1.987 (0.54), 1.997 (0.67), 2.009 (0.56), 2.021 (0.47), 2.035 (0.49),
2.050 (0.46), 2.073 (7.98), 2.523 (1.28), 2.591 (0.77), 3.282 (0.42), 3.613 (1.24),
3.621 (1.22), 3.636 (0.59), 3.649 (1.32), 3.657 (1.14), 3.702 (16.00), 3.736 (0.53),
3.821 (0.80), 3.862 (0.89), 3.881 (1.07), 3.898 (0.68), 3.918 (0.80), 4.598 (0.45),
4.605 (0.46), 4.647 (0.48), 4.662 (0.62), 4.670 (0.45), 6.777 (2.71), 6.798 (2.98),
7.123 (1.91), 7.130 (2.47), 7.145 (1.88), 7.152 (2.06).
Primer 529
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2324]
[2325] (5S)-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (93,2 mg, čistoća 50%, 136 µmol), N,N-diizopropiletilamin (140 µl, 810 µmol), HBTU (134 mg, 353 µmol), 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (23,4 mg, 163 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 41,1 mg (70% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 433 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.44), -0.008 (4.06), 0.008 (3.72),
0.147 (0.48), 0.664 (0.44), 0.685 (0.72), 0.754 (0.78), 0.777 (0.48), 0.919 (0.72),
0.939 (1.64), 0.958 (0.65), 1.693 (0.68), 1.975 (0.61), 2.327 (0.78), 2.366 (1.19),
2.392 (0.41), 2.523 (3.21), 2.584 (1.13), 2.628 (0.44), 2.670 (0.92), 2.710 (0.92),
3.508 (0.65), 3.527 (1.06), 3.547 (0.58), 3.627 (0.89), 3.663 (1.16), 3.682 (0.55),
3.701 (16.00), 3.743 (0.72), 3.771 (0.78), 3.870 (1.36), 3.910 (0.96), 4.668 (0.55),
4.743 (0.55), 4.752 (0.41), 6.776 (3.14), 6.798 (3.58), 7.127 (3.79), 7.149 (3.38).
Primer 530
(5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2326]
[2327] (5S)-2-{[1-(2,4-difluorfenil)ciklopropil]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (78,0 mg, 223 µmol), N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 670 µmol), HBTU (110 mg, 290 µmol), pirolidin (22 µl, 270 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 9,80 mg (11% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 403 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.71), 0.146 (0.71), 0.705 (1.90),
0.730 (7.14), 0.761 (8.00), 0.786 (2.29), 0.968 (1.24), 1.001 (16.00), 1.036 (0.90),
1.237 (0.71), 1.676 (5.05), 1.684 (5.29), 1.695 (4.43), 1.707 (2.24), 1.732 (1.52),
1.749 (5.90), 1.766 (10.43), 1.783 (8.14), 1.800 (2.48), 1.865 (2.33), 1.881 (6.90),
1.898 (8.90), 1.915 (6.19), 1.939 (6.10), 1.953 (5.67), 1.975 (2.43), 1.990 (1.90),
2.073 (5.00), 2.327 (1.29), 2.367 (1.00), 2.418 (1.19), 2.435 (1.48), 2.459 (3.52),
2.574 (1.67), 2.586 (2.48), 2.670 (1.43), 2.710 (1.10), 3.196 (1.29), 3.213 (2.71),
3.225 (3.05), 3.242 (5.24), 3.259 (2.57), 3.281 (3.24), 3.345 (2.14), 3.388 (1.76),
3.405 (3.52), 3.412 (2.76), 3.430 (4.52), 3.447 (2.05), 3.533 (2.05), 3.550 (4.19),
3.566 (2.48), 3.574 (3.24), 3.600 (7.00), 3.636 (9.14), 3.813 (8.90), 3.849 (6.48),
4.598 (3.76), 4.612 (5.62), 4.622 (3.81), 6.883 (1.90), 6.889 (2.10), 6.904 (4.05),
6.910 (4.43), 6.925 (2.33), 6.932 (2.43), 7.087 (2.14), 7.094 (2.33), 7.116 (3.86),
7.137 (3.90), 7.144 (2.67), 7.156 (5.05), 7.173 (4.71), 7.195 (2.19).
Primer 531
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2328]
[2329] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 175 µmol), trietilamin (73 µl, 530 µmol), HATU (86,6 mg, 228 µmol), pirolidin (15,0 mg, 210 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 51,6 mg (74% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.08), 0.008 (1.90), 1.154 (3.17),
1.172 (6.53), 1.190 (3.27), 1.689 (0.90), 1.702 (1.25), 1.713 (1.69), 1.725 (2.58),
1.738 (3.07), 1.748 (2.44), 1.756 (2.05), 1.774 (4.73), 1.792 (7.66), 1.809 (5.78),
1.826 (1.71), 1.894 (1.71), 1.909 (6.12), 1.927 (5.83), 1.944 (3.53), 1.961 (1.02),
1.977 (0.83), 1.989 (0.80), 2.002 (1.29), 2.013 (2.31), 2.026 (2.61), 2.038 (1.76),
2.053 (1.85), 2.063 (1.34), 2.070 (1.25), 2.078 (1.22), 2.089 (0.73), 2.104 (0.42),
2.328 (0.69), 2.367 (0.47), 2.523 (3.17), 2.565 (2.44), 2.574 (2.24), 2.589 (1.92),
2.600 (1.83), 2.612 (3.36), 2.624 (1.90), 2.642 (0.85), 2.654 (1.29), 2.666 (1.14),
2.710 (0.56), 2.866 (1.29), 3.008 (1.19), 3.026 (3.44), 3.044 (3.36), 3.062 (1.12),
3.235 (1.08), 3.252 (2.19), 3.265 (2.12), 3.282 (3.95), 3.328 (3.27), 3.347 (4.14),
3.359 (1.61), 3.364 (2.17), 3.376 (2.29), 3.394 (1.03), 3.449 (1.15), 3.467 (2.46),
3.475 (1.83), 3.485 (1.49), 3.492 (3.15), 3.509 (1.42), 3.598 (1.47), 3.615 (2.86),
3.623 (1.51), 3.632 (1.69), 3.640 (2.25), 3.656 (1.05), 4.760 (2.66), 4.769 (2.95),
4.775 (3.56), 4.784 (2.64), 5.026 (16.00), 7.194 (0.95), 7.383 (4.80), 7.404 (5.03),
8.207 (3.02), 8.212 (3.10), 8.228 (2.95), 8.233 (2.97), 8.929 (4.64).
Primer 532
(5S)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2330]
[2331] (5S)-2-[(5-metoksipiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (45,0 mg, 148 µmol), N,N-diizopropiletilamin (77 µl, 440 µmol), HBTU (72,9 mg, 192 µmol), 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (23,0 mg, 177 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 20,0 mg (36% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.710 (1.02), 1.725 (1.59), 1.739 (1.12),
1.755 (0.41), 1.977 (0.42), 1.989 (0.76), 2.001 (0.67), 2.043 (0.64), 2.061 (0.68),
2.078 (0.51), 2.524 (0.77), 2.608 (0.64), 3.809 (16.00), 4.331 (0.41), 4.361 (0.69),
4.384 (0.69), 4.414 (0.42), 4.582 (0.92), 4.597 (1.47), 4.610 (0.91), 4.730 (0.43),
4.760 (0.50), 4.838 (6.91), 4.876 (0.46), 7.128 (1.79), 7.149 (2.18), 7.352 (1.38),
7.360 (1.40), 7.374 (1.15), 7.381 (1.19), 8.205 (1.83), 8.212 (1.80).
Primer 533
(5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2332]
[2333] (5S)-2-{[3-hlor-4-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (53,0 mg, 141 µmol), trietilamin (59 µl, 420 µmol), HATU (69,5 mg, 183 µmol), pirolidin (14 µl mg, 170 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 40,0 mg (66% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.42), -0.008 (3.83), 0.008 (3.11),
0.146 (0.41), 1.171 (0.73), 1.189 (0.45), 1.271 (0.69), 1.289 (0.69), 1.353 (3.47),
1.371 (3.53), 1.677 (1.03), 1.691 (2.06), 1.701 (5.00), 1.714 (6.44), 1.732 (4.67),
1.744 (2.31), 1.753 (1.98), 1.771 (6.88), 1.788 (11.86), 1.806 (9.09), 1.822 (2.66),
1.891 (2.78), 1.908 (8.33), 1.924 (10.44), 1.941 (6.73), 1.958 (3.14), 1.972 (2.09),
1.983 (3.64), 1.994 (3.30), 2.010 (1.77), 2.025 (2.72), 2.039 (2.05), 2.047 (2.56),
2.061 (2.41), 2.082 (1.11), 2.097 (0.59), 2.327 (0.67), 2.366 (0.64), 2.519 (5.92),
2.560 (3.36), 2.569 (3.11), 2.581 (6.08), 2.594 (3.08), 2.611 (1.28), 2.623 (2.17),
2.636 (0.92), 2.669 (0.75), 2.674 (0.58), 2.710 (0.66), 3.229 (1.62), 3.246 (3.50),
3.259 (3.55), 3.276 (6.45), 3.293 (4.66), 3.339 (6.78), 3.351 (2.56), 3.356 (3.48),
3.368 (3.94), 3.386 (1.69), 3.442 (1.84), 3.459 (3.97), 3.466 (2.95), 3.476 (2.39),
3.484 (5.08), 3.501 (2.19), 3.596 (2.28), 3.613 (5.03), 3.621 (2.52), 3.630 (2.78),
3.638 (3.70), 3.653 (2.63), 3.740 (7.44), 3.902 (4.11), 3.921 (0.52), 4.024 (0.61),
4.042 (0.59), 4.099 (0.61), 4.200 (0.53), 4.216 (0.50), 4.738 (4.37), 4.747 (5.06),
4.754 (5.78), 4.763 (4.33), 5.093 (4.67), 5.133 (16.00), 5.161 (15.97), 5.201 (4.61),
7.843 (9.97), 7.855 (10.39), 8.738 (8.03), 8.750 (7.84).
Primer 534
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2334]
[2335] (5S)-2-[(1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (38,0 mg, 116 µmol), N,N-diizopropiletilamin (60 µl, 350 µmol), HBTU (57,1 mg, 150 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (1:1) (15,5 mg, 139 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 24,7 mg (čistoća 100%, 55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 386 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (4.40), 0.008 (2.66), 1.677 (1.65),
1.935 (0.83), 2.004 (0.72), 2.327 (0.63), 2.366 (0.74), 2.523 (4.40), 2.562 (1.52),
2.578 (0.60), 2.592 (0.76), 2.665 (0.63), 2.669 (0.72), 2.709 (0.83), 3.931 (0.56),
3.963 (0.60), 4.007 (1.07), 4.025 (16.00), 4.231 (0.51), 4.260 (0.69), 4.287 (0.60),
4.316 (0.51), 4.541 (1.41), 4.553 (2.10), 4.566 (1.39), 5.116 (6.39), 7.190 (1.01),
7.196 (1.14), 7.204 (1.34), 7.216 (1.07), 8.156 (1.72), 8.177 (1.59), 8.543 (2.21),
8.547 (2.23), 8.554 (2.21), 8.558 (2.01).
Primer 535
(5S)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2336]
[2337] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (35,4 mg, 103 µmol), trietilamin (43 µl, 310 µmol), HATU (59,0 mg, 155 µmol), pirolidin (13 µl, 160 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 16,7 mg (41% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.71), -0.008 (6.63), 0.008 (5.76),
0.146 (0.68), 1.681 (1.20), 1.722 (2.27), 1.739 (2.24), 1.756 (2.05), 1.773 (3.94),
1.791 (6.63), 1.808 (5.19), 1.824 (1.51), 1.893 (1.49), 1.909 (4.48), 1.926 (5.64),
1.943 (3.35), 1.961 (1.04), 2.013 (2.69), 2.036 (1.46), 2.056 (1.20), 2.327 (1.49),
2.366 (0.85), 2.567 (2.19), 2.581 (1.86), 2.597 (1.65), 2.608 (2.93), 2.620 (1.75),
2.650 (1.23), 2.669 (1.53), 2.710 (0.80), 3.228 (1.18), 3.245 (2.27), 3.257 (2.27),
3.274 (3.54), 3.292 (1.94), 3.340 (5.12), 3.358 (2.17), 3.370 (2.17), 3.388 (1.04),
3.437 (1.01), 3.454 (2.15), 3.461 (1.65), 3.479 (2.81), 3.496 (1.16), 3.593 (1.20),
3.610 (2.57), 3.627 (1.49), 3.635 (2.01), 3.652 (1.01), 4.754 (2.38), 4.763 (2.67),
4.769 (3.12), 4.778 (2.34), 5.012 (16.00), 8.063 (5.22), 8.737 (5.29), 8.912 (4.96).
Primer 536
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-[(6-fluorpiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2338]
[2339] (5S)-2-[(6-fluorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 205 µmol), N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol), HBTU (101 mg, 267 µmol), 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (35,4 mg, 246 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 43,3 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (5.78), 0.008 (3.49),
0.146 (0.48), 1.700 (1.48), 1.713 (1.68), 1.725 (1.91), 1.915 (0.89), 1.981 (1.88),
1.992 (1.52), 2.005 (1.58), 2.021 (1.68), 2.049 (1.27), 2.058 (1.32), 2.064 (1.38),
2.073 (3.23), 2.085 (0.96), 2.093 (0.96), 2.100 (0.82), 2.327 (0.71), 2.366 (1.04),
2.381 (1.12), 2.411 (1.37), 2.433 (1.33), 2.519 (5.01), 2.524 (4.66), 2.567 (3.46),
2.576 (3.26), 2.591 (3.81), 2.607 (3.64), 2.619 (1.71), 2.635 (0.71), 2.650 (1.07),
2.665 (0.89), 2.669 (0.87), 2.690 (2.78), 2.710 (0.69), 3.539 (1.68), 3.558 (2.41),
3.571 (1.32), 3.578 (1.27), 3.639 (0.44), 3.673 (1.38), 3.706 (1.63), 3.742 (1.35),
3.774 (2.11), 3.791 (1.29), 3.799 (1.17), 3.809 (2.09), 3.817 (1.76), 3.835 (0.81),
3.844 (0.69), 3.895 (0.77), 3.914 (1.61), 3.933 (0.91), 3.940 (1.10), 3.958 (0.53),
3.973 (0.51), 4.002 (1.02), 4.014 (0.56), 4.029 (0.71), 4.043 (0.89), 4.071 (0.54),
4.149 (0.63), 4.181 (0.89), 4.205 (0.92), 4.760 (1.40), 4.775 (1.75), 4.785 (1.27),
4.835 (1.40), 4.845 (1.61), 4.850 (1.81), 4.860 (1.43), 4.908 (16.00), 4.942 (0.46),
4.949 (0.44), 6.519 (1.88), 7.226 (3.00), 7.237 (3.08), 7.248 (3.35), 7.260 (3.20),
7.698 (1.93), 7.706 (1.99), 7.720 (3.54), 7.728 (3.59), 7.742 (1.73), 7.750 (1.76),
8.512 (5.68), 8.520 (5.44).
Primer 537
(5S)-5-[(3,3-difluorazetidin-1-il)karbonil]-2-[(6-fluorpiridin-3-il)metil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2340]
[2341] (5S)-2-[(6-fluorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (60,0 mg, 205 µmol), N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 620 µmol), HBTU (101 mg, 267 µmol), 3,3-difluorazetidin hidrohlorid (31,9 mg, 246 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 41,5 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,20 min; MS (ESIpos): m/z = 368 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.07), 1.716 (2.85), 1.730 (4.22),
1.745 (2.96), 1.759 (1.15), 1.961 (0.99), 1.974 (1.04), 1.985 (1.17), 1.997 (1.96),
2.009 (1.75), 2.021 (0.75), 2.034 (0.84), 2.050 (1.58), 2.070 (1.74), 2.085 (1.40),
2.103 (0.84), 2.560 (1.95), 2.618 (1.73), 2.632 (0.58), 2.647 (0.96), 2.661 (0.43),
4.333 (1.13), 4.363 (1.88), 4.385 (1.88), 4.416 (1.14), 4.597 (2.54), 4.612 (3.97),
4.624 (2.50), 4.705 (0.40), 4.734 (1.19), 4.763 (1.35), 4.794 (0.66), 4.816 (0.68),
4.847 (1.36), 4.877 (1.28), 4.918 (16.00), 7.251 (2.70), 7.262 (2.75), 7.272 (3.02),
7.283 (2.90), 7.699 (1.82), 7.706 (1.90), 7.721 (3.45), 7.728 (3.55), 7.742 (1.69),
7.750 (1.72), 8.507 (4.62), 8.514 (4.60).
Primer 538
(5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)metil]-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2342]
[2343] (5S)-2-[(6-metoksipiridin-3-il)methyl]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (467 mg, 1,53 mmol), N,N-diizopropiletilamin (800 µl, 4,6 mmol), HBTU (757 mg, 2,00 mmol), pirolidin (150 µl, 1,8 mmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 40,0 mg (čistoća 95%, 7% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 358 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.63), -0.008 (5.45), 0.008 (4.76),
0.146 (0.63), 1.706 (0.80), 1.772 (1.20), 1.789 (2.01), 1.806 (1.61), 1.823 (0.52),
1.891 (0.69), 1.908 (1.55), 1.924 (1.89), 1.941 (1.20), 1.960 (0.57), 1.971 (0.80),
2.017 (0.52), 2.327 (1.38), 2.366 (1.20), 2.523 (5.10), 2.570 (0.92), 2.583 (1.15),
2.625 (0.46), 2.665 (1.20), 2.670 (1.55), 2.710 (1.26), 2.847 (0.46), 2.865 (0.92),
3.239 (0.69), 3.251 (0.75), 3.269 (1.38), 3.340 (2.24), 3.358 (1.09), 3.369 (0.86),
3.387 (0.52), 3.449 (0.75), 3.474 (0.97), 3.491 (0.46), 3.589 (0.40), 3.606 (0.86),
3.630 (0.69), 3.826 (16.00), 4.711 (0.75), 4.726 (1.03), 4.736 (0.75), 4.760 (5.79),
6.782 (1.72), 6.803 (1.89), 7.552 (1.15), 7.558 (1.15), 7.573 (1.09), 7.580 (1.15),
8.050 (1.43), 8.056 (1.38).
Primer 539
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2345] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)hinolin-4-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (38,5 mg, 98,1 µmol), N,N-diizopropiletilamin (51 µl, 290 µmol), HBTU (48,4 mg, 128 µmol), (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (14,8 mg, 118 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 30,9 mg (68% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,54 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.85), -0.008 (16.00), 0.008
(13.66), 0.146 (1.95), 1.732 (2.93), 2.006 (3.22), 2.327 (4.10), 2.366 (2.34), 2.609
(4.59), 2.670 (4.39), 2.709 (2.24), 3.527 (2.54), 3.554 (2.54), 3.608 (2.54), 3.651
(2.34), 3.748 (2.44), 3.777 (11.02), 3.862 (1.76), 3.960 (1.46), 4.328 (6.54), 4.759
(1.46), 4.810 (1.66), 4.890 (1.76), 5.267 (1.95), 5.408 (3.22), 5.459 (6.15), 5.481
(6.54), 5.522 (2.15), 5.800 (2.24), 6.282 (3.22), 7.741 (7.32), 7.748 (5.56), 7.756
(4.68), 7.847 (4.39), 7.865 (3.02), 7.946 (4.10), 7.966 (6.15), 7.983 (3.90), 8.214
(8.39), 8.235 (7.02), 8.371 (4.10), 8.387 (3.90).
Primer 540
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2346]
[2347] (5S)-3-okso-2-{[3-(trifluormetil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (85,0 mg, čistoća 82%, 209 µmol), N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 630 µmol), HBTU (103 mg, 272 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (28,0 mg, 251 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 53,0 mg (65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,24 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.75), -0.008 (6.77), 0.008 (6.05),
0.146 (0.77), 1.706 (3.09), 1.728 (5.31), 1.738 (4.23), 1.954 (2.13), 1.967 (2.27),
1.976 (1.96), 2.041 (1.91), 2.053 (2.07), 2.073 (4.26), 2.328 (0.77), 2.366 (0.88),
2.524 (2.07), 2.558 (1.66), 2.586 (2.85), 2.602 (3.73), 2.620 (4.67), 2.632 (6.49),
2.646 (3.21), 2.661 (1.38), 2.675 (2.40), 2.689 (0.88), 2.710 (1.02), 3.926 (1.22),
3.989 (1.44), 4.013 (1.02), 4.160 (0.72), 4.175 (0.80), 4.191 (0.69), 4.215 (1.46),
4.230 (1.52), 4.245 (1.35), 4.261 (1.55), 4.280 (1.52), 4.299 (1.46), 4.338 (0.88),
4.363 (1.60), 4.393 (1.13), 4.428 (0.83), 4.452 (1.02), 4.510 (0.69), 4.527 (0.88),
4.567 (3.76), 4.580 (6.36), 4.593 (3.65), 4.622 (0.80), 4.639 (0.83), 4.676 (0.80),
4.690 (0.80), 4.717 (0.61), 5.349 (1.05), 5.421 (16.00), 5.476 (0.88), 5.492 (1.13),
5.546 (1.05).
Primer 541
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2348]
[2349] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 80%, 240 µmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol), HBTU (118 mg, 312 µmol), 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (41,4 mg, 288 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 18,0 mg (18% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.80), -0.008 (6.76), 0.008 (5.45),
0.146 (0.80), 1.257 (1.67), 1.726 (2.55), 1.919 (3.78), 1.979 (4.73), 2.015 (2.04),
2.059 (1.75), 2.076 (1.67), 2.327 (2.47), 2.366 (3.05), 2.380 (1.45), 2.409 (1.75),
2.430 (1.82), 2.577 (4.22), 2.591 (4.15), 2.601 (3.93), 2.616 (4.29), 2.631 (4.29),
2.670 (3.56), 2.710 (2.91), 3.529 (3.35), 3.548 (5.38), 3.567 (2.55), 3.669 (1.96),
3.703 (2.11), 3.730 (1.38), 3.765 (2.76), 3.794 (2.62), 3.811 (2.33), 3.827 (2.11),
3.888 (0.95), 3.908 (2.25), 3.934 (1.60), 3.954 (0.80), 3.993 (1.38), 4.035 (1.16),
4.064 (0.73), 4.148 (0.87), 4.173 (1.16), 4.205 (1.24), 4.769 (1.82), 4.785 (2.40),
4.795 (1.82), 4.844 (1.89), 4.860 (2.18), 4.869 (1.67), 5.253 (1.82), 5.295 (15.13),
5.305 (16.00), 5.347 (3.56), 6.510 (0.65).
Primer 542
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2350]
[2351] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 80%, 240 µmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol), HBTU (118 mg, 312 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (32,1 mg, 288 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 21,0 mg (22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 391 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.62), -0.008 (4.52), 0.008 (4.71),
0.146 (0.67), 1.406 (0.72), 1.722 (5.05), 1.962 (2.21), 2.040 (2.07), 2.328 (1.83),
2.366 (1.68), 2.523 (4.85), 2.571 (2.88), 2.588 (3.70), 2.609 (4.56), 2.624 (5.67),
2.636 (3.08), 2.652 (1.25), 2.665 (3.22), 2.710 (1.73), 3.826 (0.82), 3.938 (1.35),
3.987 (1.25), 4.175 (0.77), 4.211 (1.39), 4.228 (1.44), 4.258 (1.44), 4.295 (1.44),
4.334 (0.86), 4.360 (1.35), 4.392 (1.06), 4.430 (0.91), 4.459 (1.01), 4.520 (0.82),
4.555 (3.51), 4.567 (5.67), 4.579 (3.51), 4.642 (0.82), 5.260 (1.01), 5.302 (16.00),
5.311 (7.06), 5.353 (1.44), 5.404 (0.96), 5.493 (1.01), 5.546 (0.96), 6.510 (1.20).
Primer 543
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2352]
[2353] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 80%, 240 µmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol), HBTU (118 mg, 312 µmol), (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (1:1) (41,4 mg, 288 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 30,0 mg (30% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.10), -0.008 (9.43), 0.008 (8.71),
0.146 (1.14), 1.413 (1.14), 1.684 (1.95), 1.738 (2.57), 1.750 (2.19), 1.919 (1.05),
1.979 (2.00), 2.001 (1.76), 2.045 (1.48), 2.062 (1.86), 2.071 (1.86), 2.080 (1.52),
2.097 (1.43), 2.327 (1.71), 2.366 (1.57), 2.522 (4.71), 2.571 (2.86), 2.584 (2.81),
2.595 (3.67), 2.604 (2.71), 2.618 (3.81), 2.630 (4.95), 2.643 (2.95), 2.670 (3.29),
2.710 (1.86), 3.455 (0.90), 3.489 (1.62), 3.513 (1.67), 3.535 (1.48), 3.545 (1.67),
3.557 (1.10), 3.567 (1.24), 3.614 (1.19), 3.627 (1.43), 3.647 (1.05), 3.670 (1.52),
3.684 (2.14), 3.703 (1.62), 3.717 (1.71), 3.741 (1.52), 3.752 (1.52), 3.772 (1.29),
3.826 (1.00), 3.870 (1.29), 3.927 (1.19), 3.941 (1.48), 3.957 (0.90), 3.977 (1.29),
3.991 (1.38), 4.007 (0.90), 4.021 (0.81), 4.127 (0.81), 4.142 (1.00), 4.155 (0.86),
4.169 (1.62), 4.183 (1.05), 4.196 (0.95), 4.211 (0.90), 4.806 (4.05), 4.816 (4.81),
4.821 (5.48), 4.831 (4.14), 5.253 (3.14), 5.276 (1.67), 5.294 (16.00), 5.309 (10.86),
5.340 (1.86), 5.351 (3.05), 5.365 (1.24), 5.376 (1.67), 5.388 (1.71), 5.407 (1.43),
5.473 (1.24), 5.481 (1.24).
Primer 544
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2355] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)-1,3,4-oksadiazol-2-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (100 mg, čistoća 80%, 240 µmol), N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 720 µmol), HBTU (118 mg, 312 µmol), (3S)-3-fluorpiridin hidrohlorid (36,2 mg, 288 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 18,9 mg (19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 405 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (4.07), 0.145 (4.07), 1.740 (4.95),
1.910 (1.45), 2.029 (2.04), 2.110 (3.49), 2.268 (1.75), 2.327 (8.44), 2.366 (9.89),
2.584 (4.95), 2.631 (5.53), 2.669 (10.18), 2.709 (11.35), 3.395 (2.62), 3.501 (1.75),
3.651 (3.20), 3.722 (2.91), 3.745 (3.49), 3.770 (2.91), 3.857 (4.07), 4.715 (2.33),
4.774 (3.20), 5.246 (2.91), 5.288 (16.00), 5.297 (9.02), 5.303 (10.47), 5.346 (1.75),
5.388 (2.91), 5.512 (1.75).
Primer 545
(5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2356]
[2357] (5S)-2-{[5-hlor-6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (35,0 mg, 92,9 µmol), N,N-diizopropiletilamin (49 µl, 280 µmol), HBTU (45,8 mg, 121 µmol), pirolidin (9,3 µl, 110 µmol). Mešanje tokom 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 25,0 mg (63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.06), 0.008 (2.74), 1.243 (2.70),
1.259 (3.33), 1.647 (1.15), 1.667 (1.47), 1.681 (1.59), 1.691 (1.31), 1.708 (1.15),
1.734 (2.34), 1.744 (2.18), 1.757 (2.50), 1.775 (5.76), 1.792 (9.37), 1.809 (7.07),
1.826 (1.99), 1.894 (1.91), 1.910 (5.56), 1.927 (6.87), 1.943 (4.17), 1.960 (1.23),
1.979 (0.91), 1.992 (0.87), 2.006 (1.67), 2.019 (3.69), 2.028 (4.01), 2.044 (2.18),
2.056 (1.63), 2.063 (1.67), 2.071 (1.59), 2.328 (0.91), 2.366 (0.67), 2.523 (4.09),
2.564 (3.10), 2.575 (2.78), 2.590 (2.30), 2.605 (2.26), 2.616 (3.93), 2.628 (2.34),
2.646 (1.07), 2.660 (1.67), 2.670 (1.79), 2.690 (0.71), 2.710 (0.79), 2.885 (3.65),
3.033 (1.91), 3.235 (1.23), 3.251 (2.54), 3.264 (2.66), 3.281 (4.96), 3.330 (3.73),
3.348 (4.96), 3.360 (1.99), 3.366 (2.62), 3.378 (2.90), 3.396 (1.67), 3.403 (2.02),
3.442 (1.43), 3.459 (3.06), 3.466 (2.26), 3.476 (1.87), 3.484 (3.89), 3.501 (1.75),
3.593 (1.95), 3.610 (3.77), 3.618 (2.14), 3.627 (2.38), 3.635 (3.06), 3.652 (1.43),
4.760 (3.30), 4.769 (3.73), 4.775 (4.53), 4.784 (3.18), 4.992 (0.60), 5.035 (16.00),
5.078 (0.56), 8.067 (6.83), 8.537 (6.95), 8.541 (6.83).
Primer 546
(5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-fluorbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2359] (5S)-2-(4-fluorbenzil)-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (62,8 mg, 215 µmol), N,N-diizopropiletilamin (110 µl, 650 µmol), HBTU (106 mg, 280 µmol), 3-fluorazetidin hidrohlorid (1:1) (28,8 mg, 259 µmol). Mešanje preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon prečišćavanja, dobijeno je 15,9 mg (21% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 349 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.69), -0.008 (9.17), 0.008 (5.47),
0.146 (0.72), 1.175 (0.67), 1.706 (4.47), 1.908 (2.61), 1.947 (2.08), 1.988 (2.36),
2.010 (1.81), 2.022 (1.89), 2.072 (0.81), 2.327 (0.69), 2.366 (0.61), 2.571 (4.19),
2.585 (5.22), 2.598 (2.61), 2.613 (1.08), 2.627 (1.61), 2.640 (0.72), 2.669 (0.81),
2.709 (0.67), 3.894 (0.78), 3.927 (1.42), 3.954 (1.50), 3.987 (1.39), 4.020 (1.14),
4.152 (0.64), 4.166 (0.75), 4.182 (0.61), 4.222 (1.28), 4.236 (1.28), 4.252 (1.53),
4.264 (1.33), 4.288 (1.42), 4.321 (1.28), 4.346 (0.86), 4.392 (0.89), 4.429 (0.67),
4.455 (0.89), 4.496 (0.86), 4.525 (3.69), 4.538 (5.50), 4.551 (3.61), 4.590 (0.50),
4.633 (0.61), 4.648 (0.72), 4.684 (0.64), 4.697 (0.67), 4.798 (16.00), 5.351 (0.89),
5.404 (0.89), 5.494 (0.89), 5.547 (0.86), 7.140 (4.42), 7.161 (9.78), 7.184 (5.97),
7.263 (5.64), 7.277 (6.94), 7.295 (3.83).
Primer 547
(5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2361] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (66,6 mg, 175 µmol) i cerijum(IV)sulfat (350 mg, 1,05 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (230 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (230 µl, 4,4 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Suspenzija je filtrirana i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 40,4 mg (55% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 396 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.50), 1.167 (0.78), 1.215 (0.80),
1.236 (1.14), 1.273 (0.68), 1.283 (0.48), 1.352 (0.59), 1.425 (0.57), 1.526 (0.41),
1.743 (1.70), 1.754 (2.02), 1.767 (2.20), 1.780 (2.30), 1.799 (1.41), 1.812 (1.70),
1.822 (2.02), 1.855 (1.40), 1.873 (0.98), 1.906 (1.16), 1.942 (1.08), 1.988 (0.74),
2.026 (0.56), 2.107 (1.89), 2.124 (1.73), 2.132 (1.74), 2.222 (1.05), 2.234 (1.05),
2.270 (1.43), 2.327 (0.99), 2.366 (1.04), 2.391 (1.34), 2.403 (1.29), 2.432 (0.84),
2.669 (0.72), 3.269 (0.74), 3.343 (0.69), 3.361 (0.68), 3.388 (0.77), 3.398 (0.71),
3.451 (0.53), 3.459 (0.60), 3.486 (0.83), 3.495 (0.78), 3.629 (1.85), 3.641 (2.63),
3.657 (2.17), 3.665 (2.21), 3.685 (1.68), 3.738 (1.68), 3.759 (1.83), 3.779 (1.65),
3.801 (1.05), 3.834 (0.50), 3.866 (2.24), 4.488 (0.63), 4.501 (0.59), 4.526 (3.47),
4.537 (3.85), 4.554 (0.99), 4.673 (0.62), 4.742 (1.35), 4.754 (1.28), 4.798 (1.71),
4.809 (1.65), 4.896 (0.56), 4.906 (0.72), 4.937 (2.42), 4.956 (16.00), 4.998 (0.56),
5.258 (1.44), 5.388 (2.08), 5.517 (1.20), 5.754 (6.83), 5.778 (4.87), 5.789 (5.77),
5.802 (1.23), 7.201 (3.74), 7.223 (3.98), 7.236 (1.17), 7.256 (1.19), 7.926 (4.56),
7.932 (4.63), 7.947 (4.21), 7.953 (4.26), 8.582 (4.62), 8.588 (4.12).
Primer 548
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2362]
[2363] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (162 mg, 525 µmol) dodata je u THF (11 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (259 mg, 683 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (460 µl, 2,6 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je trans-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (90,5 mg, 630 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (259 mg, 683 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (460 µl, 2,6 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu dodat je zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata i dva puta je izvršena ekstrakcija etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 12). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 2,90 mg (1,4% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.68), -0.008 (14.62), 0.008
(11.46), 0.146 (1.68), 1.146 (0.59), 1.735 (2.72), 1.936 (1.14), 2.000 (1.28), 2.073
(1.23), 2.327 (3.01), 2.366 (1.63), 2.564 (3.01), 2.579 (2.72), 2.590 (2.67), 2.604
(3.80), 2.617 (4.15), 2.629 (2.47), 2.670 (3.60), 2.710 (1.73), 3.570 (0.84), 3.637
(3.36), 3.674 (1.09), 3.712 (1.63), 3.733 (1.19), 3.757 (1.43), 3.822 (1.63), 3.860
(1.09), 3.940 (3.60), 4.014 (1.58), 4.138 (1.19), 4.171 (0.94), 4.203 (1.19), 4.236
(0.94), 4.771 (2.12), 4.780 (1.58), 4.916 (16.00), 5.309 (1.78), 5.444 (2.22), 5.537
(0.84), 7.760 (7.85), 8.425 (7.90), 8.564 (7.26), 8.570 (7.26).
Primer 549
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2364]
[2365] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (212 mg, 650 µmol) dodata je u THF (14 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (320 mg, 845 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (570 µl, 3,2 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je trans-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (112 mg, 780 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Ponovo su dodati HBTU (320 mg, 845 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (570 µl, 3,2 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu dodat je zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata i dva puta je izvršena ekstrakcija etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 12). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 26,5 mg (10% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.07), -0.008 (16.00), 0.008
(12.99), 0.146 (1.88), 1.147 (0.75), 1.719 (6.31), 1.731 (4.52), 1.879 (1.41), 1.902
(1.98), 1.914 (1.79), 1.968 (1.79), 2.035 (1.51), 2.055 (1.88), 2.074 (2.35), 2.093
(2.45), 2.110 (1.88), 2.128 (1.13), 2.327 (4.14), 2.366 (2.07), 2.558 (9.13), 2.571
(9.13), 2.584 (4.80), 2.600 (2.07), 2.613 (3.01), 2.669 (4.99), 2.709 (2.45), 3.527
(1.32), 3.563 (1.60), 3.627 (6.12), 3.665 (1.88), 3.711 (4.24), 3.745 (2.45), 3.782
(1.69), 3.813 (3.01), 3.850 (2.35), 3.936 (5.84), 4.015 (3.67), 4.127 (1.88), 4.160
(1.60), 4.190 (1.98), 4.223 (1.69), 4.726 (2.73), 4.737 (3.48), 4.742 (3.67), 4.752
(2.92), 4.855 (2.73), 4.870 (3.58), 4.880 (2.64), 4.902 (4.42), 4.941 (10.82), 4.990
(10.82), 5.029 (4.24), 5.308 (2.73), 5.427 (3.86), 5.441 (3.58), 5.533 (1.51), 5.565
(1.41), 8.089 (6.59), 8.094 (7.25), 8.114 (7.06), 8.118 (7.44), 8.478 (8.19), 8.482
(8.38).
Primer 550
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2366]
[2367] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (200 mg, 649 µmol) dodata je u THF (14 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (320 mg, 843 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (570 µl, 3,2 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je trans-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (112 mg, 779 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i u filtrat je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata i dva puta je izvršena ekstrakcija etil acetatom. Vodena faza je zakiseljena pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline i ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 40mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 71,5 mg (28% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,10 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.57), -0.008 (4.53), 0.008 (5.49),
0.146 (0.57), 1.648 (0.77), 1.672 (0.75), 1.720 (2.21), 1.730 (2.59), 1.742 (2.35),
1.887 (0.75), 1.912 (0.77), 1.928 (0.99), 1.959 (0.50), 1.995 (1.10), 2.020 (0.70),
2.030 (0.70), 2.037 (0.68), 2.045 (0.79), 2.057 (0.75), 2.065 (0.88), 2.073 (1.22),
2.082 (0.95), 2.099 (1.10), 2.108 (1.02), 2.116 (0.83), 2.124 (0.84), 2.134 (0.72),
2.327 (0.79), 2.366 (0.75), 2.524 (3.00), 2.566 (2.71), 2.576 (2.64), 2.591 (3.79),
2.604 (4.17), 2.616 (2.26), 2.633 (0.83), 2.646 (1.29), 2.660 (0.77), 2.665 (0.74),
2.669 (0.88), 2.710 (0.74), 3.528 (0.65), 3.565 (0.90), 3.633 (3.32), 3.667 (1.08),
3.709 (1.83), 3.730 (1.33), 3.753 (1.42), 3.766 (0.63), 3.789 (1.08), 3.820 (1.85),
3.845 (0.77), 3.857 (1.15), 3.914 (0.65), 3.936 (3.36), 4.013 (1.96), 4.023 (1.35),
4.132 (1.02), 4.166 (0.88), 4.196 (1.06), 4.230 (0.83), 4.739 (1.67), 4.749 (2.03),
4.755 (2.15), 4.765 (1.63), 4.883 (16.00), 4.907 (1.53), 5.257 (0.41), 5.310 (1.56),
5.399 (0.84), 5.425 (1.87), 5.442 (1.99), 5.533 (0.75), 5.567 (0.74), 7.506 (6.29),
7.527 (7.96), 7.690 (4.02), 7.696 (4.04), 7.710 (3.34), 7.716 (3.29), 8.299 (5.30),
8.304 (5.14).
Primer 551
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[2368]
[2369] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 71,5 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 2 ml dihlormetana; injekciona zapremina: 0,3 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IF 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 35:65; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19,2 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 20,3 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[2370] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,66 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IF-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.77), -0.008 (5.90), 0.008 (6.28),
0.146 (0.70), 1.237 (0.41), 1.647 (0.98), 1.732 (1.32), 1.741 (1.34), 1.755 (1.01),
1.958 (0.70), 1.995 (1.68), 2.020 (1.08), 2.029 (1.03), 2.045 (1.15), 2.057 (1.10),
2.065 (1.20), 2.073 (1.08), 2.327 (1.39), 2.366 (0.91), 2.523 (4.61), 2.565 (2.30),
2.576 (2.25), 2.591 (2.95), 2.604 (3.05), 2.616 (1.80), 2.634 (0.72), 2.646 (1.01),
2.669 (1.61), 2.710 (1.03), 3.092 (1.49), 3.633 (4.37), 3.672 (0.67), 3.708 (2.37),
3.729 (1.63), 3.765 (0.41), 3.784 (1.13), 3.811 (0.86), 3.844 (1.10), 3.914 (0.84),
3.947 (1.10), 4.132 (1.54), 4.166 (1.34), 4.196 (1.63), 4.229 (1.25), 4.888 (16.00),
4.907 (2.42), 5.310 (1.15), 5.426 (1.82), 5.532 (1.13), 7.507 (4.56), 7.527 (5.83),
7.688 (3.24), 7.695 (3.33), 7.709 (2.69), 7.715 (2.81), 8.299 (3.72), 8.304 (3.79).
Primer 552
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[2371]
[2372] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 71,5 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 2 ml dihlormetana; injekciona zapremina: 0,3 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IF 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 35:65; protok: 15 ml/min; temperatura 25 °C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 19,2 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 20,3 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[2373] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,85 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IF-3 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.56), -0.008 (4.82), 0.008 (5.43),
0.146 (0.58), 1.236 (0.48), 1.719 (2.19), 1.730 (2.33), 1.742 (1.97), 1.889 (0.92),
1.928 (1.31), 2.098 (1.19), 2.108 (1.05), 2.117 (1.01), 2.124 (1.07), 2.134 (0.86),
2.327 (1.15), 2.366 (0.42), 2.567 (2.57), 2.575 (2.43), 2.590 (3.10), 2.604 (3.42),
2.617 (1.87), 2.633 (0.88), 2.646 (1.15), 2.669 (1.57), 2.710 (0.78), 3.092 (1.25),
3.528 (0.86), 3.565 (1.21), 3.630 (0.98), 3.666 (1.19), 3.701 (0.56), 3.733 (0.54),
3.753 (1.89), 3.789 (1.49), 3.821 (1.93), 3.857 (1.29), 3.935 (4.26), 3.979 (0.44),
4.014 (2.75), 4.739 (2.19), 4.749 (2.77), 4.754 (2.93), 4.764 (2.23), 4.883 (16.00),
5.309 (1.19), 5.443 (1.95), 5.568 (1.07), 7.506 (4.64), 7.527 (5.95), 7.690 (3.22),
7.696 (3.46), 7.711 (2.75), 7.717 (2.87), 8.298 (4.10), 8.304 (4.34).
Primer 553
(5S)-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 1)
[2374]
[2375] (5S)-3-okso-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (389 mg, čistoća 88%, 1,00 mmol) dodata je u THF (21 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (493 mg, 1,30 mmol) i N,N-diizopropil etilamin (870 µl, 5,0 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je trans-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (172 mg, 1,20 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i u filtrat je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata i dva puta je izvršena ekstrakcija etil acetatom. Vodena faza je zakiseljena pomoću 1 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline i ekstrahovana etil acetatom. Spojene organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 40mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 128,5 mg (čistoća 84%, 25% od teor.) dijastereomerne smeše (2 izomera).
[2376] Dijastereomerna smeša (2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 128,5 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 2 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 43 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 45,5 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 1:
[2377] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,74 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC-3 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.66), -0.008 (13.19), 0.008
(12.41), 0.146 (1.56), 1.196 (0.61), 1.213 (1.39), 1.231 (0.78), 1.651 (1.02), 1.751
(1.36), 2.008 (1.69), 2.031 (1.39), 2.055 (1.15), 2.075 (1.15), 2.327 (1.36), 2.366
(0.68), 2.560 (2.37), 2.575 (2.10), 2.586 (1.97), 2.600 (2.88), 2.613 (2.98), 2.626
(1.73), 2.669 (1.97), 2.710 (0.68), 3.638 (4.24), 3.677 (0.75), 3.713 (2.37), 3.735
(1.56), 3.773 (0.44), 3.815 (0.92), 3.849 (1.05), 3.919 (0.81), 3.952 (1.12), 4.139
(1.59), 4.172 (1.39), 4.202 (1.76), 4.235 (1.25), 4.901 (2.14), 4.916 (2.95), 4.926
(2.10), 4.972 (0.58), 5.013 (9.08), 5.058 (0.58), 5.312 (1.15), 5.427 (1.93), 5.533
(1.19), 7.911 (14.88), 7.915 (16.00), 8.644 (5.59).
Primer 554
(5S)-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[2378]
[2379] (5S)-5-{[trans-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 128,5 mg rastvoreno u 2 ml etanola i 2 ml n-heptana; injekciona zapremina: 0,4 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>IC 5 µm 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 15 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 43 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 45,5 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[2380] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,51 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC-3 3 µm, 50 x 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 8): Rt= 1,80 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.97), -0.008 (16.00), 0.146 (1.86),
1.726 (1.43), 1.740 (1.55), 1.939 (0.89), 2.108 (0.81), 2.328 (1.66), 2.366 (1.28),
2.576 (1.70), 2.584 (1.55), 2.600 (2.09), 2.613 (2.28), 2.626 (1.20), 2.670 (2.01),
2.710 (1.28), 3.534 (0.58), 3.570 (0.85), 3.635 (0.58), 3.671 (0.81), 3.759 (1.20),
3.796 (0.89), 3.827 (1.24), 3.864 (0.85), 3.940 (2.90), 4.019 (1.97), 4.755 (1.43),
4.770 (1.97), 4.780 (1.51), 5.010 (9.89), 5.310 (0.85), 5.446 (1.35), 5.574 (0.73),
7.912 (8.81), 7.915 (10.01), 8.645 (3.29).
Primer 555
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-8,8-difluor-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2381]
[2382] Pod argonom: (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (20,7 mg, čistoća 71%, 37,2 µmol) dodat je u dihlormetan (3,8 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (15 µl, 110 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je četiri puta ekstrahovana dihlormetanom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 7,00 mg (44% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.99), -0.008 (15.19), 0.008
(16.00), 0.146 (1.74), 1.072 (1.31), 1.126 (1.25), 1.146 (1.31), 1.178 (1.56), 1.190
(1.43), 1.364 (0.93), 2.151 (1.06), 2.327 (5.23), 2.366 (3.24), 2.669 (4.86), 2.710
(2.24), 3.526 (0.75), 3.645 (1.43), 3.673 (1.31), 3.700 (1.12), 3.777 (1.18), 3.889
(1.25), 4.896 (0.81), 4.960 (1.12), 5.064 (5.60), 5.078 (3.55), 5.276 (0.75), 5.406
(1.00), 7.282 (2.93), 7.303 (3.18), 7.951 (2.18), 7.957 (2.37), 7.972 (2.24), 7.979
(2.30), 8.440 (0.68), 8.590 (2.49).
Primer 556
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-8,8-difluor-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2383]
[2384] Pod argonom: (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (25,8 mg, čistoća 79%, 49,4 µmοl) ubačena je u dihlormetan (5,1 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (20 µl, 150 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (8 µl, 59 µmol) i mešano je tokom 2 sata na 40 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata.
Vodena faza je četiri puta ekstrahovana dihlormetanom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 9,10 mg (42% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.72), -0.008 (14.25), 0.008
(16.00), 0.146 (1.68), 1.148 (0.62), 2.144 (1.21), 2.249 (1.13), 2.327 (4.24), 2.366
(2.01), 2.670 (3.11), 2.710 (1.46), 3.416 (0.95), 3.477 (0.69), 3.520 (0.77), 3.611
(0.62), 3.637 (1.86), 3.668 (1.72), 3.698 (1.28), 3.745 (0.99), 3.767 (1.53), 3.790
(1.21), 3.813 (0.88), 3.881 (1.79), 4.893 (1.13), 4.952 (1.46), 5.084 (1.02), 5.123
(4.05), 5.144 (2.63), 5.183 (0.73), 5.273 (0.99), 5.403 (1.21), 5.528 (0.66), 8.136
(2.30), 8.155 (2.23), 8.160 (2.37), 8.501 (3.14).
Primer 557
(5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8,8-difluor-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2385]
[2386] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (47,3 mg, 115 µmol) dodat je u dihlormetan (12 ml, 180 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (46 µl, 340 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je četiri puta ekstrahovana dihlormetanom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 40 mg (80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.94), -0.008 (7.23), 0.008 (7.13),
0.146 (0.88), 2.281 (2.47), 2.323 (2.09), 2.327 (2.43), 2.366 (1.18), 2.416 (1.59),
2.442 (1.91), 2.463 (1.83), 2.523 (3.29), 2.564 (1.51), 2.580 (1.04), 2.597 (0.78),
2.617 (0.48), 2.665 (1.00), 2.670 (1.26), 2.710 (0.58), 3.556 (1.97), 3.575 (3.31),
3.595 (1.83), 3.696 (1.10), 3.729 (1.30), 3.760 (0.88), 3.791 (1.35), 3.824 (1.73),
3.843 (1.32), 3.862 (0.80), 3.881 (0.72), 3.900 (1.41), 3.919 (0.78), 3.927 (0.84),
4.042 (0.78), 4.070 (0.52), 4.085 (0.72), 4.112 (0.42), 4.146 (0.50), 4.181 (0.66),
4.204 (0.70), 4.936 (1.59), 5.008 (1.59), 5.045 (16.00), 7.539 (4.94), 7.560 (6.24),
7.724 (3.37), 7.730 (3.41), 7.744 (2.75), 7.750 (2.87), 8.334 (4.38), 8.340 (4.38).
Primer 558
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2387]
[2388] (5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (176 mg, 408 µmol) i cerijum(IV)sulfat (542 mg, 1,63 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (1,7 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (1,7 ml, 32 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 72 sata na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida.
Suspenzija je filtrirana i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 40mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i ostatak je prečišćen putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 34,8 mg rastvoreno u 3 ml etanola; injekciona zapremina: 0,3 ml; kolona: Daicel Chiralcel OX-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 25:75; protok: 15 ml/min; temperatura 50°C; UV detekcija: 220 nm]. Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 11,0 mg (6% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 430 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.91), -0.008 (15.66), 0.008
(16.00), 0.146 (1.78), 0.996 (3.35), 1.006 (3.56), 1.131 (1.98), 1.150 (3.83), 1.168
(2.05), 1.223 (2.53), 1.240 (2.74), 1.347 (2.87), 1.475 (2.74), 2.287 (7.04), 2.327
(2.46), 2.366 (1.85), 2.670 (2.94), 2.709 (1.85), 2.906 (1.37), 3.777 (0.62), 3.896
(0.62), 3.950 (0.55), 5.087 (4.85), 5.108 (0.82), 6.250 (0.62), 6.316 (1.23), 7.923
(4.72), 8.661 (2.05).
Primer 559
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-5-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2389]
[2390] (5S)-3-okso-2-{[2-(trifluormetil)pirimidin-5-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (22,0 mg, čistoća 79%, 26,9 µmol) dodata je u THF (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (31,6 mg, 83,3 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (56 µl, 320 µmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (3S)-3fluorpirolidin hidrohlorid (9,66 mg, 76,9 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodat etil acetat. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata, vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 14). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 0,4 mg (3,6% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 415 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.02), -0.008 (16.00), 0.008
(15.11), 0.146 (1.96), 1.148 (0.70), 1.405 (2.85), 2.327 (4.62), 2.366 (1.96), 2.393
(5.82), 2.670 (4.17), 2.710 (1.71), 3.876 (0.57), 9.068 (1.90).
Primer 560
(5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2391]
[2392] (5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (150 mg, 459 µmol) ubačena je u THF (37 µl) i zatim su dodati HBTU (226 mg, 597 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (240 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (63,4 mg, 505 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,7 mg (>23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (3.94), 0.008 (3.64),
0.146 (0.42), 1.243 (0.46), 1.258 (0.46), 1.726 (1.88), 1.894 (0.48), 2.016 (0.71),
2.073 (16.00), 2.094 (1.03), 2.264 (0.57), 2.327 (1.25), 2.366 (0.69), 2.578 (1.45),
2.621 (0.53), 2.669 (1.25), 2.710 (0.67), 3.359 (0.42), 3.405 (0.48), 3.501 (0.46),
3.628 (1.23), 3.651 (1.19), 3.680 (0.77), 3.724 (0.91), 3.746 (1.03), 3.769 (0.83),
3.790 (0.67), 3.857 (1.37), 4.680 (0.65), 4.695 (0.79), 4.705 (0.65), 4.736 (0.79),
4.745 (0.89), 4.751 (1.01), 4.761 (0.77), 4.940 (1.21), 4.980 (3.19), 5.016 (1.88),
5.026 (2.16), 5.056 (0.63), 5.065 (0.87), 5.257 (0.65), 5.388 (0.85), 5.509 (0.51),
8.101 (1.66), 8.107 (1.82), 8.122 (1.78), 8.129 (1.84), 8.546 (3.25), 8.553 (3.19).
Primer 561
(5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (racemat)
[2393]
[2394] (5RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (racemat) (130 mg, 421 µmol) ubačena je u THF (34 µl) i zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (208 mg, 547 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (220 µl, 1,3 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (58,2 mg, 463 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm x 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 73,6 mg (46% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 380 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.02), -0.008 (13.52), 0.008 (9.53),
0.146 (1.12), 1.110 (0.63), 1.147 (0.44), 1.727 (2.58), 1.908 (0.63), 1.993 (3.02),
2.102 (2.14), 2.137 (1.70), 2.255 (1.26), 2.366 (1.70), 2.518 (12.01), 2.523 (9.78),
2.558 (3.50), 2.601 (3.84), 2.613 (2.33), 2.644 (1.41), 2.710 (1.80), 2.881 (14.25),
3.391 (1.07), 3.519 (1.70), 3.543 (1.60), 3.568 (1.46), 3.595 (2.67), 3.632 (1.95),
3.654 (1.75), 3.675 (1.51), 3.696 (0.78), 3.717 (0.92), 3.741 (1.75), 3.772 (1.26),
3.781 (1.22), 3.851 (1.60), 3.939 (1.22), 4.002 (0.63), 4.035 (0.39), 4.678 (0.83),
4.687 (0.97), 4.751 (1.26), 4.822 (1.41), 4.860 (1.80), 4.881 (16.00), 5.259 (1.12),
5.349 (0.83), 5.390 (1.22), 5.479 (0.83), 5.510 (0.63), 7.505 (6.42), 7.525 (7.88),
7.683 (3.02), 7.690 (5.45), 7.696 (3.21), 7.704 (2.48), 7.710 (4.38), 7.717 (2.33),
8.297 (5.25).
Primer 562
(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2395]
[2396] (5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (423 mg, čistoća 50%, 476 µmol) ubačena je u THF (4,5 ml) i zatim su dodati HBTU (234 mg, 618 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (250 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (71,7 mg, 571 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 54,6 mg (>22% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,70 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.14), -0.008 (16.00), 0.008 (8.79),
0.146 (1.14), 1.148 (0.44), 2.166 (1.01), 2.230 (1.31), 2.278 (1.11), 2.327 (2.72),
2.366 (1.34), 2.523 (8.12), 2.669 (3.05), 2.696 (1.07), 2.710 (1.84), 2.729 (0.64),
2.963 (1.61), 2.995 (1.27), 3.572 (0.57), 3.637 (0.84), 3.670 (0.77), 3.853 (0.50),
3.998 (0.57), 4.946 (0.44), 4.982 (0.54), 5.023 (0.50), 5.105 (0.70), 5.147 (2.62),
5.167 (1.88), 5.177 (1.88), 5.218 (0.64), 5.268 (0.54), 5.399 (0.64), 8.501 (2.48),
8.893 (2.55).
Primer 563
(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[2398] (5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 55 mg rastvoreno u 8 ml acetonitrila; injekciona zapremina: 0,9 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>AD, 250 × 20 mm; mobilna faza: CO2/izopropanol 85:15; protok: 80 ml/min; temperatura 40°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 17 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 18 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[2399] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,4 min, d.e. = 98% [kolona: Daicel Chiralpak<®>AD 50 × 4,6 mm; mobilna faza: CO2/izopropanol 85:15; protok: 3 ml/min; UV detekcija: 210 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,70 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.86), -0.008 (6.12), 0.008 (5.73),
0.068 (0.53), 0.146 (0.79), 1.029 (0.66), 1.045 (0.66), 1.146 (0.66), 1.999 (1.05),
2.104 (2.17), 2.137 (3.42), 2.164 (6.45), 2.200 (4.61), 2.215 (4.48), 2.231 (5.40),
2.245 (4.61), 2.280 (6.98), 2.322 (4.48), 2.327 (4.81), 2.366 (1.51), 2.523 (10.01),
2.652 (2.77), 2.669 (5.86), 2.685 (4.41), 2.697 (5.73), 2.710 (5.14), 2.728 (3.75),
2.743 (2.44), 2.967 (9.81), 2.999 (8.36), 3.342 (2.77), 3.353 (2.90), 3.371 (2.90),
3.380 (2.17), 3.399 (2.83), 3.433 (2.37), 3.441 (2.30), 3.503 (1.71), 3.530 (2.37),
3.539 (2.24), 3.576 (5.40), 3.631 (8.95), 3.643 (3.75), 3.670 (4.81), 3.694 (5.40),
3.724 (3.29), 3.786 (1.19), 3.831 (2.70), 3.852 (4.61), 3.874 (2.90), 3.905 (1.98),
3.927 (2.24), 3.960 (1.58), 3.985 (2.50), 4.016 (1.32), 4.933 (3.62), 4.947 (3.88),
4.983 (5.53), 4.997 (5.40), 5.101 (4.48), 5.142 (14.42), 5.167 (9.81), 5.178 (11.98),
5.208 (2.44), 5.218 (4.21), 5.267 (3.49), 5.401 (4.67), 5.525 (2.37), 7.799 (0.99),
7.821 (1.51), 7.946 (1.45), 7.967 (1.25), 8.500 (15.01), 8.504 (16.00), 8.894 (15.54).
Primer 564
(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[2400]
[2401] (5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (423 mg, 951 µmol) ubačena je u THF (9,0 ml) i zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (469 mg, 1,24 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (500 µl, 2,9 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (164 mg, 1,14 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda) i izolovan je dijastereomer 1. Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 48,0 mg (>9% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,85 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.81), -0.008 (6.61), 0.008 (7.06),
0.146 (0.71), 2.073 (16.00), 2.158 (0.58), 2.194 (0.81), 2.240 (0.58), 2.272 (1.10),
2.323 (1.45), 2.327 (1.74), 2.366 (0.84), 2.424 (0.87), 2.440 (0.87), 2.523 (4.03),
2.669 (2.06), 2.702 (1.32), 2.710 (1.58), 2.734 (0.81), 2.959 (2.10), 2.996 (1.35),
3.540 (0.68), 3.560 (1.32), 3.581 (1.16), 3.601 (0.65), 3.711 (0.61), 3.746 (0.97),
3.781 (1.03), 3.808 (0.61), 3.905 (0.68), 3.921 (1.39), 3.939 (1.48), 3.957 (0.61),
4.137 (0.55), 4.179 (0.90), 4.205 (0.87), 4.238 (0.52), 4.966 (1.06), 4.980 (1.03),
5.050 (1.06), 5.067 (1.00), 5.107 (1.16), 5.148 (4.26), 5.174 (4.48), 5.214 (1.23),
8.505 (3.45), 8.890 (3.42).
Primer 565
(5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[2402]
[2403] (5RS,7RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 48 mg rastvoreno u 2,5 ml smeše etanol/acetonitril (1:1); injekciona zapremina: 0,15 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H 5 µm, 250 x 20 mm; mobilna faza: nheptan/etanol (10/80) 0,2% dietilamina; protok: 30 ml/min; temperatura 28°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 9,9 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 9,1 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[2404] Analitička hiralna HPLC: Rt= 6,38 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>OX-H-3 250 × 4,6 mm; mobilna faza: heptan/etanol (1:1) 0,2% dietilamina; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,82 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.14), -0.008 (15.25), 0.008
(16.00), 0.146 (1.94), 0.854 (0.45), 1.075 (0.89), 1.141 (1.44), 1.235 (1.49), 2.160
(1.34), 2.194 (2.09), 2.225 (1.19), 2.240 (0.99), 2.274 (2.63), 2.323 (3.43), 2.327
(4.17), 2.366 (2.09), 2.395 (1.44), 2.425 (1.89), 2.669 (5.17), 2.692 (2.34), 2.702
(3.38), 2.710 (4.22), 2.735 (1.94), 2.961 (5.22), 2.994 (3.33), 3.509 (0.84), 3.541
(1.54), 3.561 (3.18), 3.582 (2.78), 3.602 (1.44), 3.712 (1.39), 3.746 (2.34), 3.781
(2.53), 3.808 (1.49), 3.905 (1.64), 3.922 (3.28), 3.939 (3.58), 3.957 (1.49), 4.138
(1.39), 4.180 (2.14), 4.206 (2.04), 4.236 (1.14), 4.965 (2.43), 4.979 (2.43), 5.051
(2.53), 5.065 (2.48), 5.107 (2.78), 5.148 (10.68), 5.174 (11.33), 5.214 (2.93), 8.502
(7.90), 8.890 (7.90).
Primer 566
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[2405]
[2406] (5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (393 mg, čistoća 76%, 793 µmol) ubačena je u THF (3,8 ml) i zatim su dodati HBTU (391 mg, 1,03 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (410 µl, 2,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (137 mg, 951 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 171 mg (>45% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.125 (0.60), 2.141 (0.72), 2.161 (1.46),
2.172 (1.67), 2.192 (1.64), 2.206 (2.29), 2.220 (1.51), 2.235 (1.39), 2.251 (1.32),
2.273 (2.84), 2.290 (3.01), 2.327 (2.24), 2.377 (0.97), 2.396 (1.79), 2.426 (2.36),
2.443 (2.27), 2.461 (1.61), 2.565 (2.70), 2.583 (2.16), 2.603 (1.46), 2.686 (1.65),
2.714 (2.61), 2.723 (3.94), 2.732 (2.44), 2.754 (2.45), 2.936 (2.06), 2.972 (5.32),
3.013 (2.95), 3.518 (0.44), 3.538 (0.84), 3.549 (1.85), 3.567 (4.66), 3.586 (3.76),
3.602 (1.90), 3.681 (0.54), 3.714 (1.84), 3.753 (3.10), 3.785 (3.25), 3.816 (1.94),
3.850 (0.49), 3.879 (0.44), 3.905 (1.92), 3.922 (3.99), 3.939 (4.34), 3.957 (1.84),
3.982 (0.44), 4.112 (0.52), 4.141 (1.65), 4.169 (1.47), 4.181 (2.52), 4.211 (2.65),
4.239 (1.52), 4.896 (2.75), 4.937 (14.75), 4.953 (16.00), 4.979 (3.36), 4.993 (3.14),
5.046 (3.20), 5.060 (3.14), 7.221 (8.97), 7.242 (9.62), 7.919 (6.01), 7.926 (6.46),
7.941 (5.80), 7.947 (6.12), 8.574 (8.32), 8.579 (8.50).
Primer 567
(5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[2407]
[2408] (5RS,7RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 170 mg rastvoreno u 5 ml smeše etanol/n-heptan (3:2); injekciona zapremina: 0,5 ml; kolona: Daicel Chiralpak<®>ID, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 60:40, protok: 15 ml/min; temperatura 45°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 77 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 75 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[2409] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,17 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IC-3 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,58 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.00), -0.008 (7.03), 0.008 (7.68),
0.146 (0.79), 1.149 (0.72), 1.233 (0.50), 2.161 (1.43), 2.176 (1.43), 2.205 (2.01),
2.235 (1.22), 2.250 (1.22), 2.291 (2.58), 2.327 (4.66), 2.366 (2.37), 2.395 (1.65),
2.425 (2.15), 2.441 (2.01), 2.523 (9.54), 2.564 (3.73), 2.582 (2.51), 2.669 (4.23),
2.711 (3.66), 2.723 (3.80), 2.732 (2.51), 2.753 (2.37), 2.972 (4.66), 3.013 (2.73),
3.548 (1.79), 3.567 (4.30), 3.586 (3.37), 3.601 (1.79), 3.680 (0.57), 3.714 (1.72),
3.753 (2.80), 3.784 (2.80), 3.816 (1.72), 3.848 (0.57), 3.904 (1.94), 3.922 (3.52),
3.937 (3.80), 3.956 (1.72), 4.141 (1.51), 4.179 (2.22), 4.209 (2.37), 4.236 (1.36),
4.895 (2.73), 4.936 (14.28), 4.952 (16.00), 4.978 (2.94), 4.993 (3.16), 5.045 (2.87),
5.059 (2.94), 7.220 (8.47), 7.241 (9.26), 7.920 (6.67), 7.926 (6.82), 7.941 (6.39),
7.947 (6.67), 8.574 (5.96), 8.579 (6.10).
Primer 568
(5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2410]
[2411] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (500 mg, 1,53 mmol) ubačena je u THF (10 ml) i zatim su dodati HBTU (755 mg, 1,99 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (800 µl, 4,6 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (211 mg, 1,68 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 224 mg (37% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.47), -0.008 (4.50), 0.008 (3.40),
0.146 (0.48), 1.177 (0.66), 1.707 (8.23), 1.716 (9.32), 1.848 (1.55), 1.872 (1.42),
1.884 (2.38), 1.894 (2.16), 1.962 (2.26), 1.996 (3.78), 2.033 (2.11), 2.051 (3.61),
2.069 (5.37), 2.085 (4.80), 2.104 (4.92), 2.120 (2.73), 2.133 (2.92), 2.215 (1.98),
2.236 (2.33), 2.265 (2.73), 2.327 (1.24), 2.366 (0.60), 2.465 (1.95), 2.524 (5.83),
2.567 (6.06), 2.572 (6.32), 2.614 (2.23), 2.670 (1.05), 2.710 (0.41), 2.750 (0.55),
3.268 (1.76), 3.342 (2.24), 3.357 (1.80), 3.366 (1.83), 3.393 (2.05), 3.401 (2.04),
3.455 (1.48), 3.463 (1.61), 3.490 (2.14), 3.499 (2.00), 3.609 (1.40), 3.627 (6.06),
3.652 (6.49), 3.661 (5.02), 3.678 (3.80), 3.688 (2.92), 3.720 (3.38), 3.740 (4.82),
3.768 (3.62), 3.776 (3.09), 3.786 (3.42), 3.819 (0.66), 3.855 (6.40), 4.666 (3.14),
4.675 (3.97), 4.681 (4.07), 4.691 (3.11), 4.722 (4.04), 4.732 (4.63), 4.738 (5.18),
4.747 (3.80), 4.896 (5.44), 4.934 (13.27), 4.978 (6.77), 4.983 (8.22), 4.986 (9.25),
4.991 (8.06), 5.017 (2.71), 5.025 (4.04), 5.030 (3.54), 5.256 (3.12), 5.388 (4.35),
5.510 (2.31), 5.942 (0.72), 8.088 (9.86), 8.093 (9.96), 8.112 (9.86), 8.117 (10.03),
8.135 (5.61), 8.478 (16.00), 8.483 (15.45).
Primer 569
(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 4 izomera)
[2412]
[2413] (5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša, 4 izomera) (123 mg, čistoća 96%, 312 µmol) ubačena je u THF (10 ml) i zatim su dodati HBTU (154 mg, 406 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (160 µl, 940 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (47,0 mg, 375 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 92,9 mg (>63% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.66), -0.008 (5.04), 0.008 (4.55),
0.146 (0.66), 1.312 (0.45), 2.000 (0.83), 2.073 (1.32), 2.118 (3.31), 2.149 (5.50),
2.168 (3.97), 2.185 (5.50), 2.199 (5.37), 2.216 (5.04), 2.262 (4.38), 2.294 (2.81),
2.328 (2.19), 2.366 (0.95), 2.634 (1.90), 2.643 (1.78), 2.666 (5.13), 2.677 (6.82),
2.688 (2.98), 2.709 (4.38), 2.945 (8.19), 2.977 (5.75), 3.332 (2.69), 3.344 (3.22),
3.362 (3.02), 3.373 (2.11), 3.390 (2.36), 3.426 (1.24), 3.434 (1.28), 3.475 (0.79),
3.501 (1.45), 3.511 (1.36), 3.523 (1.32), 3.568 (2.94), 3.597 (2.89), 3.616 (2.85),
3.632 (4.05), 3.641 (3.10), 3.668 (3.93), 3.693 (3.14), 3.724 (1.45), 3.766 (0.95),
3.789 (1.49), 3.820 (2.11), 3.844 (2.94), 3.864 (1.49), 3.885 (1.41), 3.917 (1.57),
3.951 (0.83), 3.976 (2.32), 3.997 (2.36), 4.020 (1.86), 4.050 (1.32), 4.080 (1.03),
4.905 (1.98), 4.919 (5.75), 4.962 (11.66), 4.994 (2.65), 5.010 (9.22), 5.052 (5.37),
5.266 (2.48), 5.274 (2.32), 5.356 (1.57), 5.400 (3.18), 5.489 (1.45), 5.526 (1.20),
7.937 (4.26), 7.943 (4.63), 7.962 (6.78), 7.966 (7.24), 7.985 (4.51), 7.990 (4.80),
8.467 (15.71), 8.472 (16.00).
Primer 570
(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[2414]
(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2415] (dijastereomerna smeša; 4 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 82,6 mg rastvoreno u 4 ml smeše etanol/acetonitril (3:1); injekciona zapremina: 0,30 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (50:50), protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 34,4 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 36,6mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[2416] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,237 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC-3 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 450 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.82), -0.008 (12.17), 0.008
(12.50), 0.146 (1.68), 2.148 (5.04), 2.186 (3.97), 2.215 (3.56), 2.262 (5.38), 2.296
(3.63), 2.327 (3.03), 2.366 (2.69), 2.665 (5.65), 2.678 (5.51), 2.692 (2.89), 2.710
(5.38), 2.946 (8.07), 2.981 (6.45), 3.390 (2.62), 3.434 (1.95), 3.523 (1.82), 3.646
(3.03), 3.668 (4.64), 3.692 (4.91), 3.722 (2.29), 3.820 (3.23), 3.845 (3.83), 3.867
(2.08), 3.919 (2.62), 3.976 (1.88), 4.917 (7.13), 4.956 (11.83), 5.012 (6.45), 5.052
(3.03), 5.265 (2.62), 5.396 (4.17), 5.530 (1.95), 7.937 (4.10), 7.943 (4.64), 7.967
(6.79), 7.985 (4.37), 7.991 (4.37), 8.467 (16.00), 8.472 (15.93).
Primer 571
(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša 1; 2 izomera)
[2417]
[2418] (5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 253 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (125 mg, 329 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 760 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (38,2 mg, 304 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 85,0 mg (>72% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,45 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.48), -0.008 (4.20), 0.146 (0.46),
1.197 (4.10), 1.213 (4.14), 1.229 (0.78), 1.245 (3.16), 1.260 (4.36), 1.277 (2.13),
1.999 (0.66), 2.073 (6.51), 2.127 (2.51), 2.158 (4.28), 2.195 (4.66), 2.210 (4.58),
2.224 (5.13), 2.270 (4.30), 2.327 (1.21), 2.366 (0.82), 2.643 (1.61), 2.676 (3.50),
2.688 (5.07), 2.699 (2.37), 2.710 (1.65), 2.720 (2.79), 2.730 (1.89), 2.951 (6.59),
2.982 (5.39), 3.345 (2.13), 3.362 (1.95), 3.393 (1.51), 3.437 (0.94), 3.474 (0.54),
3.500 (1.39), 3.527 (1.00), 3.570 (2.35), 3.596 (2.47), 3.633 (3.26), 3.669 (2.89),
3.688 (2.01), 3.723 (1.47), 3.767 (0.68), 3.790 (1.05), 3.822 (1.47), 3.848 (1.99),
3.873 (1.27), 3.887 (1.01), 3.921 (1.05), 3.955 (0.68), 3.980 (1.85), 3.999 (2.01),
4.025 (1.53), 4.053 (1.05), 4.085 (0.76), 4.922 (1.57), 4.935 (1.67), 4.970 (4.56),
4.975 (4.56), 5.015 (10.99), 5.050 (7.88), 5.060 (9.85), 5.089 (2.65), 5.100 (3.48),
5.266 (2.03), 5.356 (1.19), 5.399 (2.57), 5.489 (1.15), 5.524 (1.05), 8.112 (7.30),
8.118 (7.84), 8.133 (7.48), 8.140 (7.86), 8.543 (16.00), 8.549 (15.62).
Primer 572
(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 2)
[2419]
(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2420] (dijastereomerna smeša 1; 2 izomera) razdvojena je pomoću hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 83,0 mg rastvoreno u 5 ml smeše izopropanol/acetonitril (1:1); injekciona zapremina: 0,30 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IB 5 µm, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol (25:75); protok: 15 ml/min; temperatura 35°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 32,5 mg izomera 1, koji je eluiran prvi, i 32,6 mg izomera 2, koji je kasnije eluiran.
Izomer 2:
[2421] Analitička hiralna HPLC: Rt= 4,109 min, d.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IB-3 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/izopropanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 466 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.21), -0.008 (9.38), 0.008 (8.11),
0.146 (1.05), 0.852 (0.55), 1.173 (1.38), 1.235 (2.76), 1.973 (0.77), 1.999 (0.88),
2.122 (2.70), 2.159 (5.85), 2.195 (4.36), 2.210 (4.08), 2.225 (4.86), 2.240 (4.14),
2.273 (6.68), 2.297 (2.92), 2.322 (2.37), 2.327 (3.20), 2.366 (2.10), 2.523 (7.12),
2.643 (2.37), 2.660 (2.98), 2.665 (2.92), 2.669 (3.70), 2.675 (5.02), 2.688 (5.02),
2.702 (3.31), 2.709 (3.09), 2.720 (3.53), 2.734 (2.26), 2.943 (4.91), 2.954 (8.61),
2.987 (7.50), 3.338 (1.82), 3.348 (2.43), 3.366 (2.32), 3.376 (1.71), 3.394 (2.59),
3.429 (1.99), 3.438 (1.99), 3.491 (1.38), 3.500 (1.43), 3.527 (2.04), 3.535 (1.93),
3.630 (2.70), 3.642 (3.14), 3.671 (3.86), 3.678 (3.42), 3.695 (3.97), 3.723 (3.20),
3.786 (1.10), 3.821 (2.92), 3.848 (4.14), 3.873 (2.54), 3.907 (1.71), 3.922 (2.15),
3.956 (1.27), 3.981 (2.15), 4.013 (1.16), 4.922 (3.42), 4.934 (3.70), 4.970 (9.71),
4.983 (4.91), 5.010 (11.75), 5.015 (9.82), 5.051 (8.28), 5.060 (10.32), 5.090 (2.76),
5.100 (4.41), 5.266 (2.98), 5.394 (4.25), 5.525 (2.15), 8.113 (8.17), 8.119 (8.77),
8.134 (8.33), 8.140 (8.99), 8.543 (16.00), 8.549 (15.78).
Primer 573
(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat)
[2422]
[2423] (5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (90,0 mg, čistoća 96%, 228 µmol) ubačena je u THF (2,0 ml) i zatim su dodati HBTU (113 mg, 297 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (120 µl, 690 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (39,4 mg, 274 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 68,7 mg (>62% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.74), 1.404 (2.01), 2.098 (1.04),
2.114 (1.19), 2.133 (2.22), 2.144 (2.67), 2.163 (2.48), 2.179 (3.71), 2.194 (2.19),
2.209 (2.15), 2.225 (2.01), 2.257 (4.64), 2.283 (2.63), 2.328 (0.83), 2.375 (1.44),
2.394 (2.76), 2.412 (2.48), 2.424 (3.58), 2.441 (3.18), 2.460 (2.18), 2.469 (1.85),
2.524 (2.66), 2.562 (4.10), 2.582 (3.23), 2.602 (2.30), 2.620 (1.20), 2.639 (1.82),
2.648 (2.48), 2.673 (4.46), 2.683 (6.28), 2.692 (4.09), 2.716 (3.58), 2.724 (3.18),
2.940 (9.27), 2.981 (5.71), 3.512 (0.75), 3.531 (1.47), 3.542 (3.00), 3.560 (7.48),
3.580 (5.90), 3.596 (2.96), 3.609 (1.20), 3.626 (0.72), 3.673 (0.89), 3.707 (2.73),
3.746 (4.58), 3.776 (4.66), 3.808 (2.96), 3.844 (1.14), 3.873 (0.81), 3.892 (1.79),
3.899 (2.90), 3.917 (7.20), 3.936 (7.09), 3.956 (2.73), 3.962 (1.95), 3.982 (0.81),
4.105 (0.92), 4.134 (2.60), 4.146 (0.99), 4.163 (2.09), 4.176 (4.09), 4.204 (3.97),
4.237 (2.24), 4.266 (0.65), 4.925 (5.80), 4.936 (5.21), 4.961 (13.01), 5.015 (15.41),
5.034 (4.96), 5.050 (5.57), 7.938 (4.48), 7.943 (4.78), 7.962 (6.94), 7.966 (7.24),
7.985 (4.63), 7.991 (4.78), 8.465 (16.00), 8.471 (15.52).
Primer 574
(5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 1)
[2424]
[2425] (5RS,7RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 59,9 mg rastvoreno u 4 ml smeše etanol/acetonitril (1:1); injekciona zapremina: 0,20 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (50:50), protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 210 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 27,80 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 27,2 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 1:
[2426] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,483 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC-3 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,50 min; MS (ESIpos): m/z = 468 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (6.37), 2.179 (2.78), 2.257 (3.92),
2.327 (2.12), 2.366 (2.22), 2.673 (4.20), 2.682 (4.63), 2.710 (3.16), 2.941 (6.80),
2.978 (4.11), 3.541 (2.22), 3.560 (5.90), 3.580 (4.44), 3.707 (2.22), 3.747 (3.40),
3.776 (3.59), 3.809 (1.98), 3.899 (2.31), 3.917 (5.47), 3.936 (5.24), 3.956 (2.03),
4.133 (1.89), 4.177 (2.97), 4.204 (2.97), 4.235 (1.79), 4.924 (4.34), 4.961 (9.82),
5.014 (11.66), 5.034 (3.87), 5.052 (4.20), 7.938 (3.82), 7.944 (4.29), 7.967 (6.18),
7.985 (3.73), 7.991 (4.20), 8.465 (16.00), 8.471 (15.24).
Primer 575
(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1; racemat)
[2427]
[2428] (5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-7-(trifluormetil)-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (100 mg, 253 µmol) ubačena je u THF (3,0 ml) i zatim su dodati HBTU (125 mg, 329 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (130 µl, 760 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (43,6 mg, 304 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 98,5 mg (>80% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,60 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.073 (6.45), 2.189 (2.26), 2.257 (2.86),
2.328 (1.53), 2.425 (2.10), 2.693 (3.86), 2.736 (2.40), 2.950 (5.52), 2.983 (3.83),
3.541 (1.70), 3.560 (4.29), 3.581 (3.93), 3.598 (1.83), 3.710 (1.43), 3.745 (2.73),
3.779 (3.03), 3.807 (1.76), 3.920 (4.22), 3.939 (4.29), 3.958 (1.66), 4.134 (1.40),
4.178 (2.49), 4.206 (2.23), 4.238 (1.56), 4.953 (2.89), 4.977 (4.86), 5.017 (12.87),
5.038 (3.29), 5.056 (13.87), 5.097 (4.56), 8.113 (6.82), 8.119 (7.38), 8.134 (6.69),
8.140 (7.32), 8.540 (16.00), 8.546 (15.67).
Primer 576
(5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (enantiomer 2)
[2429]
[2430] (5RS,7RS)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomer 1, racemat) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 93,0 mg rastvoreno u 4 ml smeše etanol/acetonitril (1:1); injekciona zapremina: 0,20 ml; kolona: Daicel Chiralcel<®>IC 5 µm 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol (1:1), protok: 15 ml/min; temperatura 30°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovano je 40,9 mg enantiomera 1, koji je eluiran prvi, i 38,3 mg enantiomera 2, koji je kasnije eluiran.
Enantiomer 2:
[2431] Analitička hiralna HPLC: Rt= 1,874 min, e.e. = 100% [kolona: Daicel Chiralcel<®>IC-3 50 × 4,6 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 50:50; protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,60 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (2.11), -0.008 (16.00), 0.008
(13.37), 0.146 (1.89), 2.266 (3.05), 2.327 (7.16), 2.366 (4.95), 2.669 (6.11), 2.694
(2.63), 2.710 (3.79), 2.950 (4.84), 2.983 (3.37), 3.559 (3.58), 3.578 (3.05), 3.745
(2.42), 3.775 (2.53), 3.919 (3.47), 3.937 (3.58), 4.178 (2.42), 4.204 (2.32), 4.976
(4.32), 5.016 (10.53), 5.056 (12.21), 5.096 (3.79), 8.113 (5.89), 8.119 (6.11), 8.134
(5.47), 8.140 (5.89), 8.540 (13.47), 8.546 (12.42).
Primer 577
(5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2432]
[2433] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (46,5 mg, 136 µmol) ubačena je u THF (1,1 ml) i zatim su dodati HBTU (67,0 mg, 177 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (95 µl, 680 µmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (20,5 mg, 163 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj
temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 29,5 mg (>53% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.695 (1.26), 1.734 (2.23), 1.888 (0.52),
1.924 (0.76), 1.999 (0.84), 2.034 (1.38), 2.047 (1.33), 2.068 (1.37), 2.088 (1.85),
2.104 (2.27), 2.138 (1.59), 2.221 (0.85), 2.242 (0.78), 2.256 (0.80), 2.270 (1.14),
2.327 (0.56), 2.569 (1.57), 2.577 (1.70), 2.591 (1.48), 2.617 (2.57), 2.660 (1.13),
2.670 (0.97), 3.361 (1.30), 3.371 (1.17), 3.398 (1.01), 3.406 (0.99), 3.460 (0.64),
3.468 (0.71), 3.495 (0.89), 3.504 (0.86), 3.613 (0.59), 3.630 (2.11), 3.637 (2.26),
3.654 (2.41), 3.666 (1.56), 3.681 (1.50), 3.698 (1.11), 3.725 (1.28), 3.746 (1.94),
3.770 (1.64), 3.784 (1.49), 3.855 (2.48), 4.703 (1.17), 4.712 (1.42), 4.719 (1.49),
4.728 (1.18), 4.762 (1.50), 4.770 (1.68), 4.777 (1.93), 4.786 (1.45), 5.017 (16.00),
5.260 (1.25), 5.384 (1.52), 5.391 (1.57), 5.512 (0.89), 8.059 (5.28), 8.742 (5.83),
8.917 (5.45).
Primer 578
(5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2434]
[2435] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (130 mg, 380 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati HBTU (187 mg, 494 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (200 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3R,4S)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (60,0 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 28,1 mg (>17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.89), -0.008 (14.86), 0.008
(16.00), 0.146 (1.81), 1.739 (0.46), 2.025 (0.59), 2.073 (1.52), 2.327 (1.60), 2.332
(1.26), 2.366 (1.09), 2.523 (5.09), 2.575 (1.14), 2.614 (1.22), 2.670 (2.02), 2.674
(1.52), 2.710 (1.26), 3.684 (0.55), 3.729 (0.46), 4.825 (1.09), 5.020 (5.09), 8.061
(1.56), 8.740 (1.73), 8.915 (1.52).
Primer 579
(5S)-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2436]
[2437] (5S)-3-okso-2-{[5-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (130 mg, 380 µmol) ubačena je u THF (3,1 ml) i zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (187 mg, 494 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (200 µl, 1,1 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je 3,3-difluorpirolidin hidrohlorid (60,0 mg, 418 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 32,6 mg (>20% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 432 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.49), -0.008 (11.08), 0.008
(11.23), 0.146 (1.49), 1.656 (1.12), 1.735 (1.37), 2.009 (1.73), 2.072 (2.13), 2.088
(0.97), 2.327 (2.00), 2.366 (1.46), 2.425 (1.28), 2.571 (3.49), 2.582 (2.49), 2.596
(2.37), 2.615 (2.76), 2.670 (2.31), 2.710 (1.09), 3.534 (1.70), 3.553 (2.55), 3.568
(1.28), 3.670 (1.31), 3.703 (1.49), 3.738 (1.24), 3.769 (1.85), 3.783 (1.12), 3.801
(1.85), 3.827 (0.79), 3.895 (0.64), 3.913 (1.46), 3.939 (1.00), 3.958 (0.76), 3.990
(0.91), 4.032 (0.82), 4.058 (0.52), 4.150 (0.49), 4.184 (0.82), 4.208 (0.88), 4.776
(1.15), 4.792 (1.70), 4.801 (1.15), 4.848 (1.24), 4.863 (1.64), 4.872 (1.18), 5.019
(16.00), 8.060 (5.25), 8.741 (5.22), 8.918 (4.80).
Primer 580
(5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2438]
[2439] (5S)-2-[(3-hlor-5-fluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (150 mg, 459 µmol) ubačena je u THF (3,4 ml) i zatim su dodati 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-benzotriazol-1-ijum-3-oksid heksafluorfosfat (226 mg, 597 µmol) i N,N-diizopropiletilamin (240 µl, 1,4 mmol). Nakon 15 min mešanja na sobnoj temperaturi, dodat je (3S)-3-fluorpirolidin hidrohlorid (63,4 mg, 505 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 42,7 mg (>23% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (3.94), 0.008 (3.64),
0.146 (0.42), 1.243 (0.46), 1.258 (0.46), 1.726 (1.88), 1.894 (0.48), 2.016 (0.71),
2.073 (16.00), 2.094 (1.03), 2.264 (0.57), 2.327 (1.25), 2.366 (0.69), 2.578 (1.45),
2.621 (0.53), 2.669 (1.25), 2.710 (0.67), 3.359 (0.42), 3.405 (0.48), 3.501 (0.46),
3.628 (1.23), 3.651 (1.19), 3.680 (0.77), 3.724 (0.91), 3.746 (1.03), 3.769 (0.83),
3.790 (0.67), 3.857 (1.37), 4.680 (0.65), 4.695 (0.79), 4.705 (0.65), 4.736 (0.79),
4.745 (0.89), 4.751 (1.01), 4.761 (0.77), 4.940 (1.21), 4.980 (3.19), 5.016 (1.88),
5.026 (2.16), 5.056 (0.63), 5.065 (0.87), 5.257 (0.65), 5.388 (0.85), 5.509 (0.51),
8.101 (1.66), 8.107 (1.82), 8.122 (1.78), 8.129 (1.84), 8.546 (3.25), 8.553 (3.19).
Primer 581
(5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2440]
[2441] (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-3-okso-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (185 mg, 596 µmol) dodata je u THF (5,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (294 mg, 775 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (520 µl, 3,0 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je (S)-(+)-3-fluor pirolidin hidrohlorid (89,9 mg, 716 µmol) i reakciona smeša je mešana preko vikenda na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i organske faze su isprane zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata, vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 38,2 mg (17% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.60), 1.706 (9.68), 1.715 (10.82),
1.847 (1.79), 1.857 (1.68), 1.871 (1.71), 1.883 (2.85), 1.893 (2.55), 1.968 (2.44),
1.994 (4.47), 2.029 (2.47), 2.050 (4.18), 2.067 (6.02), 2.084 (5.61), 2.103 (5.56),
2.120 (2.96), 2.134 (3.42), 2.187 (0.87), 2.220 (2.22), 2.236 (2.79), 2.266 (3.12),
2.328 (1.19), 2.366 (1.08), 2.463 (1.87), 2.565 (7.46), 2.570 (7.65), 2.611 (2.82),
2.670 (1.19), 2.710 (0.98), 2.882 (1.11), 3.268 (1.90), 3.286 (2.96), 3.342 (2.25),
3.357 (2.12), 3.366 (2.25), 3.393 (2.47), 3.401 (2.58), 3.455 (1.84), 3.464 (1.87),
3.490 (2.55), 3.499 (2.52), 3.610 (1.68), 3.628 (7.08), 3.653 (7.89), 3.661 (6.07),
3.679 (4.53), 3.688 (3.47), 3.720 (4.04), 3.741 (5.88), 3.770 (3.93), 3.778 (3.88),
3.785 (4.18), 3.819 (0.81), 3.855 (7.62), 4.664 (3.72), 4.674 (4.66), 4.680 (4.75),
4.690 (3.69), 4.721 (4.61), 4.730 (5.37), 4.736 (6.07), 4.746 (4.61), 4.887 (6.07),
4.925 (14.56), 4.976 (9.90), 5.015 (4.15), 5.257 (3.66), 5.382 (4.91), 5.388 (5.13),
5.510 (2.74), 7.924 (4.47), 7.930 (4.66), 7.948 (7.65), 7.953 (7.86), 7.972 (4.58),
7.978 (4.69), 8.465 (16.00), 8.471 (15.38).
Primer 582
(5RS,7RS)-5-{[rel-(3R,4R)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 8 izomera)
[2442]
[2443] (5RS,7RS)-3-okso-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-2,3,5,6,7,8-heksahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-5-karboksilna kiselina (dijastereomerna smeša; 4 izomera) (259 mg, čistoća 92%, 581 µmol) dodata je u THF (5,3 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim su dodati HBTU (286 mg, 755 µmol) i N,N-diizopropil etilamin (300 µl, 1,7 mmol). Nakon 5 min mešanja, dodat je rel-(3R,4R)-3,4-difluorpirolidin hidrohlorid (100 mg, 697 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu su dodati voda i etil acetat. Organska faza je razdvojena i organske faze su tri puta isprane zasićenim vodenim rastvorom hidrogenkarbonata i 1 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 311 mg (97% od teor., dijastereomerna smeša, 8 izomera) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,56 i 1,62 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.18), 0.008 (1.10), 1.171 (2.12),
1.194 (15.97), 1.210 (16.00), 2.073 (1.12), 2.200 (0.77), 2.216 (1.54), 2.229 (1.70),
2.254 (1.42), 2.289 (0.48), 2.451 (1.81), 2.489 (6.72), 2.564 (1.85), 2.690 (0.88),
2.701 (0.92), 2.729 (1.49), 2.739 (1.37), 2.769 (1.51), 2.895 (0.95), 2.933 (0.63),
2.975 (1.58), 2.985 (2.01), 3.014 (1.57), 3.023 (1.95), 3.501 (0.87), 3.627 (0.56),
3.661 (0.78), 3.676 (1.06), 3.729 (0.55), 3.754 (2.19), 3.795 (0.53), 3.825 (0.69),
3.863 (0.48), 3.982 (0.54), 4.050 (0.44), 4.094 (1.10), 4.126 (0.41), 4.157 (0.66),
4.192 (0.96), 4.225 (0.54), 4.256 (0.68), 4.289 (0.48), 4.985 (1.04), 5.021 (0.69),
5.052 (8.26), 5.107 (1.17), 5.118 (1.11), 5.322 (0.83), 5.440 (1.32), 5.457 (1.10),
5.549 (0.50), 7.920 (10.95), 7.923 (10.77), 7.945 (0.58), 8.147 (2.92), 8.646 (4.33),
8.678 (0.41).
Primer 583
(5RS,7RS)-5-{[rel-(3R,4R)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 3)
[2444]
[2445] (5RS,7RS)-5-{[rel-(3R,4R)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 8 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 311 mg rastvoreno u 2,5 ml acetonitrila i 2,5 ml etanola; injekciona zapremina: 0,1 ml; kolona: Daicel Chiralcel OX-H 5 µm, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30; protok: 40 ml/min; temperatura 35°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovana su 4 glavna dijastereomera. (82 mg dijastereomerne smeše (izomer 1 i izomer 2), koji se prvi eluiraju, 46,7 mg izomera 3, koji se drugi eluira, i 39,4 mg izomera 4, koji se poslednji eluira)
Izomer 3:
[2446] Analitička hiralna HPLC: Rt= 2,63 min, d.e. = 99% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA-3, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,62 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.84), -0.008 (6.67), 0.008 (6.52),
0.146 (0.70), 1.100 (0.43), 1.243 (3.42), 1.258 (3.30), 1.273 (2.09), 2.163 (0.64),
2.198 (1.62), 2.214 (1.45), 2.228 (1.77), 2.256 (2.75), 2.291 (1.16), 2.327 (1.57),
2.366 (1.16), 2.669 (1.88), 2.700 (1.71), 2.709 (1.19), 2.729 (2.70), 2.739 (2.26),
2.768 (2.75), 2.911 (1.01), 2.974 (2.41), 3.012 (1.65), 3.023 (1.36), 3.675 (2.52),
3.711 (0.52), 3.752 (4.38), 3.947 (0.90), 3.980 (1.10), 4.050 (0.81), 4.083 (1.10),
4.190 (1.71), 4.223 (1.39), 4.255 (1.80), 4.288 (1.19), 5.051 (15.10), 5.105 (3.13),
5.117 (2.84), 5.323 (1.16), 5.439 (2.29), 5.549 (1.13), 7.919 (16.00), 7.923 (15.77),
8.645 (5.74).
Primer 584
(5RS,7RS)-5-{[rel-(3R,4R)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (izomer 4)
[2447]
[2448] (5RS,7RS)-5-{[rel-(3R,4R)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 8 izomera) razdvojen je putem hiralne preparativne HPLC hromatografije [priprema uzorka: 311 mg rastvoreno u 2,5 ml acetonitrila i 2,5 ml etanola; injekciona zapremina: 0,1 ml; kolona: Daicel Chiralcel OX-H 5 µm, 250 × 20 mm; mobilna faza: n-heptan/etanol 70:30; protok: 40 ml/min; temperatura 35°C; UV detekcija: 220 nm]. Nakon razdvajanja, izolovana su 4 glavna dijastereomera. (82 mg dijastereomerne smeše (izomer 1 i izomer 2), koji se prvi eluiraju, 46,7 mg izomera 3, koji se drugi eluira, i 39,4 mg izomera 4, koji se poslednji eluira)
Izomer 4:
[2449] Analitička hiralna HPLC: Rt= 3,25 min, d.e. = 96,7% [kolona: Daicel Chiralpak<®>IA-3, 50 × 4,6 mm; mobilna faza: i-heksan/etanol 50:50, protok: 1 ml/min; UV detekcija: 220 nm].
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,62 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.148 (0.80), -0.008 (5.80), 0.008 (5.01),
0.146 (0.89), 1.243 (4.40), 1.259 (4.16), 1.273 (2.95), 2.224 (3.88), 2.327 (1.96),
2.367 (1.68), 2.670 (2.85), 2.710 (1.82), 2.726 (2.15), 2.736 (2.95), 2.767 (1.73),
2.986 (2.95), 3.022 (2.11), 3.626 (1.50), 3.728 (1.22), 3.755 (1.96), 3.791 (1.08),
3.823 (1.96), 3.860 (1.08), 3.993 (1.22), 4.094 (2.71), 4.125 (1.22), 4.155 (1.92),
4.190 (1.03), 4.983 (2.99), 5.045 (7.77), 5.051 (8.05), 5.322 (1.08), 5.456 (1.73),
5.589 (1.12), 7.919 (16.00), 7.923 (15.20), 8.645 (5.80).
Primer 585
(5S,8SR)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2450]
[2451] (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (46,0 mg, 121 µmol) i cerijum(IV)sulfat (240 mg, 724 µmol) suspendovani su u terc-butanolu (160 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (160 µl, 3,0 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Ponovo su dodati cerijum(IV)sulfat (240 mg, 724 µmol) i 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (160 µl, 3,0 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 1 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Čvrsta supstanca je uklonjena pomoću vakuuma i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Phenomenex, silikagel 5 µm, 21,2 mm × 100 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 4,40 mg (>9% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 398 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.735 (4.24), 2.100 (3.29), 2.327 (11.14),
2.366 (8.63), 2.669 (9.73), 2.709 (6.27), 3.636 (5.65), 3.751 (4.08), 3.770 (4.08),
3.860 (5.33), 4.485 (7.84), 4.717 (3.29), 4.772 (3.92), 4.931 (4.08), 4.971 (10.04),
5.015 (7.53), 5.056 (3.76), 5.256 (2.82), 5.383 (4.86), 5.743 (10.82), 5.755 (11.29),
7.945 (4.55), 7.964 (7.53), 7.993 (3.92), 8.479 (16.00).
Primer 586
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8,8-difluor-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2452]
[2453] Pod argonom, u teflonskoj boci: (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (79,4 mg, čistoća 88%, 170 µmol) dodat je u dihlormetan (3,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (67 µl, 510 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata.
Vodena faza je četiri puta ekstrahovana dihlormetanom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 53,6 mg (72% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,51 min; MS (ESIpos): m/z = 434 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.120 (1.43), -0.007 (16.00), 0.006 (9.20),
0.116 (1.20), 2.292 (2.63), 2.340 (1.37), 2.358 (2.34), 2.361 (2.74), 2.365 (2.23),
2.440 (2.40), 2.518 (1.89), 2.522 (1.49), 2.566 (1.14), 2.580 (0.86), 2.593 (0.63),
2.631 (1.43), 2.635 (1.94), 2.639 (1.31), 3.563 (2.29), 3.578 (3.77), 3.593 (2.17),
3.705 (1.14), 3.732 (1.26), 3.766 (0.69), 3.792 (1.37), 3.818 (1.20), 3.825 (1.03),
3.831 (0.97), 3.846 (1.66), 3.861 (0.69), 3.893 (0.69), 3.908 (1.54), 3.923 (0.86),
3.929 (0.97), 3.944 (0.40), 4.027 (0.40), 4.050 (0.86), 4.061 (0.46), 4.072 (0.57),
4.085 (0.69), 4.107 (0.46), 4.159 (0.51), 4.183 (0.69), 4.203 (0.74), 4.961 (1.71),
5.036 (2.40), 5.047 (1.37), 5.068 (6.91), 5.078 (10.06), 5.110 (1.49), 7.284 (5.09),
7.301 (5.37), 7.953 (5.37), 7.958 (5.26), 7.970 (4.97), 7.975 (5.03), 8.590 (6.57),
8.594 (6.34).
Primer 587
(5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-8,8-difluor-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2454]
[2455] Pod argonom: (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (37,1 mg, čistoća 63%, 61,5 µmol) dodat je u dihlormetan (1,7 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (39 µl, 290 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu su dodati voda i zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je dva puta ekstrahovana dihlormetanom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 12,4 mg (48% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 402 [M+H]<+>
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.120 (1.40), -0.007 (15.46), 0.006 (8.74),
0.117 (1.13), 1.058 (0.72), 1.067 (0.90), 1.072 (1.35), 1.087 (0.77), 1.097 (0.81),
1.104 (0.77), 1.112 (1.26), 1.119 (1.35), 1.126 (1.13), 1.133 (0.95), 1.165 (0.68),
1.179 (0.86), 1.190 (0.86), 1.273 (1.62), 1.345 (0.41), 2.224 (2.07), 2.237 (2.07),
2.303 (3.38), 2.312 (3.29), 2.358 (3.06), 2.361 (3.65), 2.365 (2.66), 2.405 (1.31),
2.428 (2.57), 2.518 (1.94), 2.522 (1.22), 2.631 (1.76), 2.635 (2.52), 2.639 (1.67),
3.313 (10.05), 3.955 (1.58), 3.978 (1.80), 4.003 (1.53), 4.026 (1.58), 4.201 (0.81),
4.216 (0.86), 4.227 (0.77), 4.248 (1.53), 4.260 (1.53), 4.272 (1.40), 4.283 (1.31),
4.302 (0.90), 4.315 (0.77), 4.328 (0.68), 4.360 (0.95), 4.381 (1.76), 4.403 (1.76),
4.430 (1.85), 4.451 (1.04), 4.574 (0.77), 4.589 (0.90), 4.618 (0.81), 4.642 (1.31),
4.654 (1.26), 4.682 (0.90), 4.698 (0.86), 4.705 (0.86), 4.727 (3.43), 4.735 (6.58),
5.040 (1.31), 5.071 (16.00), 5.080 (7.53), 5.112 (0.86), 5.373 (1.13), 5.429 (1.13),
5.487 (1.13), 5.537 (0.99), 5.543 (1.08), 7.292 (7.12), 7.309 (7.44), 7.953 (4.91),
7.956 (4.96), 7.970 (4.64), 7.973 (4.60), 8.288 (15.95), 8.583 (5.09), 8.589 (7.35),
8.595 (4.60).
Primer 588
(5S)-2-[(3,5-dihlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8,8-difluor-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2456]
[2457] Pod argonom: (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (67,3 mg, 163 µmol) dodat je u dihlormetan (7,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (86 µl, 650 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. Ponovo je dodat dietilamino sumpor trifluorid (86 µl, 650 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena dihlormetanom, isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: gradijent acetonitril/voda). Objedinjene frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i rastvorene u etil acetatu. Organska faza je isprana 1 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline i vodom, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 13,6 mg (19% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 436 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (2.27), 0.008 (12.80), 1.348 (3.47),
1.504 (5.73), 1.908 (2.27), 2.271 (6.53), 2.327 (7.60), 2.366 (6.13), 2.670 (4.40),
2.710 (4.93), 3.553 (5.33), 3.573 (8.67), 3.591 (4.53), 3.694 (3.07), 3.729 (3.47),
3.783 (4.00), 3.814 (4.27), 3.900 (4.00), 4.035 (2.00), 4.197 (2.00), 4.950 (4.40),
5.028 (3.73), 5.076 (2.27), 5.117 (12.40), 5.133 (12.27), 5.169 (2.67), 7.969 (4.67),
7.975 (4.80), 7.999 (6.40), 8.015 (4.40), 8.484 (16.00), 8.490 (15.07).
Primer 589
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-8,8-difluor-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2458]
[2459] Pod argonom, u teflonskoj boci: (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (75,0 mg, 162 µmοl) ubačen je u dihlormetan (10 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (110 µl, 810 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je ekstrahovana dihlormetanom i organska faza je osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm), 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 55,5 mg (71% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 484 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.66), -0.008 (4.35), 0.008 (3.90),
0.147 (0.51), 1.168 (0.96), 1.185 (1.97), 1.203 (0.91), 1.292 (0.86), 1.310 (1.87),
1.328 (0.81), 2.012 (0.46), 2.117 (1.57), 2.150 (1.92), 2.251 (1.57), 2.282 (2.38),
2.332 (4.56), 2.346 (3.09), 2.366 (3.80), 2.407 (1.37), 2.447 (1.82), 2.524 (4.86),
2.670 (1.77), 2.710 (1.77), 3.349 (1.62), 3.394 (1.11), 3.421 (1.11), 3.483 (0.91),
3.519 (1.11), 3.614 (0.76), 3.639 (3.44), 3.667 (3.49), 3.696 (2.28), 3.732 (1.06),
3.755 (1.52), 3.777 (2.43), 3.799 (2.13), 3.823 (1.47), 3.887 (3.04), 3.900 (1.06),
3.910 (0.96), 3.918 (1.06), 4.925 (2.13), 4.984 (2.63), 5.274 (1.82), 5.299 (16.00),
5.348 (0.76), 5.406 (2.03), 5.527 (1.16), 8.531 (7.49), 8.916 (7.59).
Primer 590
(5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8,8-difluor-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2461] Pod argonom, u teflonskoj boci: (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-6,7-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3,8(2H,5H)-dion (65,0 mg, čistoća 48%, 65,0 µmοl) ubačen je u dihlormetan (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat dietilamino sumpor trifluorid (26 µl, 200 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. Ponovo je dodat dietilamino sumpor trifluorid (26 µl, 200 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. Ponovo je dodat dietilamino sumpor trifluorid (86 µl, 650 µmol) i mešano je preko noći na 40 °C. U reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je ekstrahovana dihlormetanom, i organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana, i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (metoda 14). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 4,00 mg (12% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,76 min; MS (ESIpos): m/z = 502 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (16.00), 0.146 (3.40), 2.327 (13.00),
2.366 (8.00), 2.669 (12.60), 2.710 (6.60), 3.576 (4.00), 5.305 (13.80), 8.531 (6.80),
8.915 (5.60).
Primer 591
(5S,8RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2463] (5S)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (100 mg, 244 µmol) i cerijum(IV)sulfat (486 mg, 1,46 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (330 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (330 µl, 6,1 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Suspenzija je filtrirana i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 66,9 mg (čistoća 90%, 60% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
Primer 592
(5S,8RS)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2464]
[2465] (5S)-2-[(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (95,7 mg, 229 µmol) i cerijum(IV)sulfat (456 mg, 1,37 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (310 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (310 µl, 5,7 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida.
Suspenzija je filtrirana i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Dobijeno je 51,7 mg (čistoća 86%, 47% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
Primer 593
(5S,8RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2466]
[2467] (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (685 mg, 1,53 mmol) i cerijum(IV)sulfat (3,05 g, 9,18 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (2,0 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (2,0 ml, 38 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Čvrsta supstanca je uklonjena pomoću vakuuma i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 30 mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 93,8 mg (>13% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 4): Rt= 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.95), -0.008 (11.35), 1.747 (4.47),
1.844 (3.91), 2.136 (3.53), 2.268 (3.44), 2.328 (4.00), 2.365 (5.86), 2.669 (3.26),
2.710 (3.81), 3.485 (2.05), 3.613 (4.09), 3.639 (5.30), 3.655 (5.02), 3.755 (4.00),
3.865 (4.84), 4.502 (7.53), 4.512 (7.26), 4.727 (3.35), 4.783 (4.00), 4.794 (3.72),
5.117 (3.44), 5.156 (15.35), 5.171 (8.47), 5.180 (10.33), 5.221 (3.07), 5.256 (3.35),
5.381 (4.56), 5.513 (2.51), 5.748 (10.05), 5.760 (10.05), 6.606 (1.49), 8.501 (16.00),
8.915 (14.88).
Primer 594
(5S,8RS)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2468]
[2469] (5S)-2-{[3-hlor-5-(trifluormetil)piridin-2-il]metil}-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (630 mg, čistoća 95%, 1,28 mmol) i cerijum(IV)sulfat (2,56 g, 7,71 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (1,7 ml) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (1,7 ml, 32 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 20 sata na 70 °C. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (1,7 ml, 32 mmol) i reakciona smeša je dalje mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Čvrsta supstanca je uklonjena pomoću vakuuma i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je uparen. Ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC hromatografije (Chromatorex C18, 10 µm, 125 mm × 40mm; mobilna faza: (gradijent acetonitril/voda sa 0,1% mravlje kiseline)). Frakcije koje sadrže proizvod koncentrovane su u vakuumu i dobijeno je 58,7 mg (>9% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 1,28 min; MS (ESIpos): m/z = 482 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.45), -0.008 (10.12), 0.008 (9.85),
1.424 (2.44), 1.445 (1.90), 1.742 (3.98), 1.815 (3.07), 1.898 (2.80), 2.132 (2.26),
2.327 (4.43), 2.366 (5.06), 2.405 (3.25), 2.669 (2.89), 2.709 (3.34), 3.521 (4.16),
3.540 (7.32), 3.560 (4.34), 3.658 (2.44), 3.692 (2.53), 3.725 (2.71), 3.758 (2.89),
3.791 (4.07), 3.819 (3.07), 3.916 (3.07), 3.996 (1.81), 4.188 (2.17), 4.212 (1.90),
4.501 (6.51), 4.797 (3.07), 4.807 (2.98), 4.884 (2.98), 5.123 (2.26), 5.163 (15.82),
5.176 (16.00), 5.217 (2.62), 5.763 (11.30), 5.775 (11.39), 8.505 (14.73), 8.914
(13.02).
Primer 595
(5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2470]
[2471] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (174 mg, čistoća 74%, 324 µmol) i cerijum(IV)sulfat (645 mg, 1,94 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (430 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (430 µl, 8,1 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Čvrsta supstanca je uklonjena pomoću vakuuma i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 103 mg (čistoća 85%, 65% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 1): Rt= 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 414 [M+H]<+>
Primer 596
(5S,8RS)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2472]
[2473] (5S)-2-[(5-hlorpiridin-2-il)metil]-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (166 mg, čistoća 98%, 445 µmol) i cerijum(IV)sulfat (887 mg, 2,67 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (590 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (590 µl, 11 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Čvrsta supstanca je uklonjena pomoću vakuuma i filtrat je tri puta ekstrahovan dihlormetanom. Spojene organske faze su isprane vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 48,1 mg (čistoća 84%, 24% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]<+>
Primer 597
(5S,8RS)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (dijastereomerna smeša; 2 izomera)
[2474]
[2475] (5S)-2-[(3,5-difluorpiridin-2-il)metil]-5-[(3,3-difluorpirolidin-1-il)karbonil]-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on (226 mg, 567 µmol) i cerijum(IV)sulfat (1,13 g, 3,40 mmol) suspendovani su u terc-butanolu (770 µl) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 1 N vodeni rastvor sumporne kiseline (770 µl, 770 µmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na 70 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pH je podešen na 9 pomoću 2 N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom i spojene organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane, i filtrat je koncentrovan. Dobijeno je 116 mg (49% od teor.) naslovnog jedinjenja.
LC-MS (metoda 3): Rt= 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 416 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.097 (3.87), 1.110 (1.22), 1.135 (4.05),
1.157 (1.27), 1.175 (2.34), 1.193 (1.34), 1.227 (16.00), 1.736 (6.08), 1.768 (0.64),
1.797 (0.65), 1.845 (0.62), 1.858 (0.55), 1.880 (1.03), 1.892 (0.81), 1.939 (0.47),
1.959 (0.47), 1.988 (4.06), 2.328 (0.69), 2.359 (0.53), 2.378 (0.68), 2.407 (0.68),
2.425 (0.68), 2.448 (0.57), 2.570 (0.72), 2.589 (0.50), 3.518 (0.78), 3.538 (1.26),
3.559 (0.77), 3.653 (0.55), 3.687 (0.65), 3.722 (0.49), 3.758 (0.71), 3.790 (0.95),
3.812 (0.72), 3.914 (0.65), 3.940 (0.50), 3.991 (0.42), 4.002 (0.53), 4.021 (1.25),
4.038 (1.17), 4.056 (0.42), 4.186 (0.45), 4.388 (1.59), 4.486 (1.30), 4.495 (1.21),
4.776 (0.62), 4.786 (0.63), 4.853 (0.63), 4.863 (0.64), 4.940 (0.71), 4.978 (2.02),
5.018 (2.18), 5.056 (0.84), 5.280 (0.84), 5.294 (0.72), 5.757 (2.51), 5.769 (2.47),
5.780 (0.44), 5.794 (0.41), 7.940 (0.81), 7.945 (0.83), 7.964 (1.33), 7.968 (1.37),
7.987 (0.86), 7.993 (0.84), 8.446 (0.74), 8.452 (0.75), 8.477 (3.04), 8.483 (2.64).
B. Ocenjivanje farmakološke delotvornosti
[2476] Farmakološka aktivnost jedinjenja prema pronalasku može da se odredi putem in vitro i in vivo ispitivanja, kao što je poznato stručnjaku. Sledeći primeri primene opisuju biološko dejstvo jedinjenja prema pronalasku, bez ograničenja pronalaska na ove primere.
Skraćenice i akronimi:
[2477]
ATP
adenozin trifosfat
HOBP
hronična opstruktivna bolest pluća
LPS
lipopolisaharid
PGP
prolin-glicin-prolin
Poli(I:C)
poliinozinska-policitidilna kiselina
B-1 Biohemijski test humane prolil endopeptidaze (PREP) za identifikaciju inhibitora aktivnosti PREP uz upotrebu fluorescentno označenog supstrata
Princip testa:
[2478] Enzimska konverzija fluorescentnog peptidnog supstrata praćena je na osnovu merenja intenziteta fluorescencije. Enzimska aktivnost je određena ispitivanjem početnog nagiba pri porastu fluorescencije. Jedinjenja koja inhibiraju PREP identifikovana su na osnovu smanjenja početnog nagiba u poređenju sa reakcionom smešom bez ispitivanog jedinjenja.
Određivanje aktivnosti:
[2479] Vrednosti IC50su određene putem interpolacije grafikona procenta aktivnosti PREP u odnosu na koncentraciju ispitivane supstance.
Opis testa:
[2480] U rekombinantnu humanu prolil endopeptidazu pune dužine (PREP, R&D-Systems, 4308-SE; krajnja koncentracija npr.0,4 nM, zapremina: 25 µl) u reakcionom puferu (50 mM Tris-HCl, pH 7,5; 150 mM NaCl; 0,13% BSA, 5 mM EDTA, 3 mM GSH, 0,005% Brij-35) dodato je ispitivano jedinjenje (u DMSO-u, u odgovarajućem opsegu krajnjih koncentracija od 1 nM do 30 µM, zapremina: 1 µl) u bunarčić mikrotitarske pločice sa 384 bunarčića. Reakcija je pokrenuta dodavanjem supstrata Z-Gly-Pro-AMC (krajnja koncentracija 50 µl; Z = karboksibenzil; AMC = 7-amino-4-metilkumarin, zapremina: 25 µl). Napredovanje reakcije PREP je praćeno merenjem intenziteta fluorescencije u spektrofotometru čitaču ploča u periodu od 60 min na 32 °C (talasna dužina ekscitacije: 360 nm, talasna dužina emisije: 465 nm).
[2481] U sledećoj tabeli B-1 prikazane su tako dobijene vrednosti IC50iz testa humane prolilendopeptidaze za pojedinačne primere otelotvorenja pronalaska, kao i nekoliko referentnih primera koji ne spadaju u zahteve (delimično kao srednje vrednosti od više nezavisnih pojedinačnih eksperimenata):
Tabela B-1
B-2 Biohemijski test mišje prolil endopeptidaze (PREP)
Određivanje aktivnosti:
[2482] Vrednosti IC50su određene putem interpolacije grafikona procenta aktivnosti PREP u odnosu na koncentraciju ispitivane supstance.
Priprema homogenata mišjeg mozga:
[2483] Mišji mozak BalbC miševa u 0,8 ml smeše 100 mM natrijum fosfata (pH 7,0) i 3 mM ditiotreitola homogemizovan je 4 x 25 s u uređaju OmniBead Ruptor. Dobijeni homogenat je 20 min centrifugiran na 13.000 o/min i 4 °C. Alikvotirani supernatant je zamrznut na -80 °C.
Opis testa:
[2484] Homogenat mišjeg mozga je razblažen 1:100 u reakcionom puferu (50 mM Tris-HCl, pH 7,5; 150 mM NaCl; 0,13% BSA, 5 mM EDTA, 3 mM GSH, 0,005% Brij-35) i 25 µl rastvora je preneto u bunarčić mikrotitarske pločice sa 384 bunarčića. Dodato je ispitivano jedinjenje (u DMSO-u, u odgovarajućem opsegu krajnjih koncentracija npr. od 1 nM do 30 µM, zapremina: 1 µl). Reakcija je pokrenuta dodavanjem supstrata Z-Gly-Pro-AMC (krajnja koncentracija 50 µM; Z = karboksibenzil; AMC = 7-amino-4-metilkumarin, zapremina: 25 µl). Napredovanje reakcije PREP je praćeno merenjem intenziteta fluorescencije u pogodnom spektrofotometru čitaču ploča u periodu npr. od 60 min na 32 °C (talasna dužina ekscitacije: 360 nm, talasna dužina emisije: 465 nm).
[2485] U sledećoj tabeli 1 prikazane su tako dobijene vrednosti IC50iz testa KDR- i PDGFRβ-kinaze za pojedinačne primere otelotvorenja pronalaska (delimično kao srednje vrednosti od više nezavisnih pojedinačnih eksperimenata):
B-3 Delotvornost PREP inhibitora kod miševa izloženih duvanskom dimu
[2486] Pogodnost supstanci prema pronalasku za lečenje/prevenciju pomenutih bolesti može se pokazati na sledećem životinjskom modelu.
Materijali i metode:
[2487]
Miševi: Soj: BALB/C, poreklo: Charles River Holandija, pol: muški, starost: 8 do 10 nedelja, težina: 25 g, n = 21.
Vehikulum: Solutol, EtOH, voda (S: 40%, EtOH 10%, voda 50% (v/v))
Radi primene PREP inhibitora putem gavaže, oni su rastvoreni u goreopisanom vehikulumu (c = 3750 µg/ml).
[2488] Miševi su raspoređeni u tri grupe od po sedam životinja i tretirani su na sledeći način:
Grupa 1: bez izlaganja dimu (sobni vazduh), dva puta dnevno po 200 µl vehikuluma bez aktivne supstance
Grupa 2: izlaganje dimu, dva puta dnevno po 200 µl vehikuluma bez aktivne supstance
Grupa 3: izlaganje dimu, dva puta dnevno po 200 µl vehikuluma sa aktivnom supstancom (po 30 mg/kg)
Izlaganje dimu:
[2489] Kod izlaganja dimu, životinje iz grupe 2 i 3 (životinje iz grupe 1 nisu izlagane dimu i ostajale su u svojim kavezima) dva puta dnevno su dovođene u ekspozicionu komoru ukupne zapremine 52 litra, koja je pomoću separacionih rešetki podeljena na 16 pojedinačnih kaveza. Pri tome su životinje koje su držane po grupama (7 životinja po kavezu) uvođene u pojedinačne kaveze ekspozicione komore sa dimom (7 životinja po kavezu). Između izlaganja dimu dva puta dnevno postojalo je vreme bez dima od 5 sati. Životinje su izlagane dimu ukupno pet uzastopnih dana. Cigarete su sagorevale u paru. Glavna struja duvanskog dima je uvođena u ekspozicionu komoru.
[2490] Izlaganje dimu je sprovođeno prema sledećoj šemi:
● 1. dan: 1. izlaganje dimu: 2 puta po 2 cigarete, 2. izlaganje dimu: 3 puta po 2 cigarete ●
● 2. dan: 1. izlaganje dimu: 4 puta po 2 cigarete, 2. izlaganje dimu: 5 puta po 2 cigarete ●
● 3. dan: 1. izlaganje dimu: 6 puta po 2 cigarete, 2. izlaganje dimu: 7 puta po 2 cigarete ●
● 4. i 5. dan: 1. i 2. izlaganje dimu: 7 puta po 2 cigarete
[2491] Tretiranje životinja PREP inhibitorima, odnosno vehikulumom, počelo je 15 minuta pre prvog izlaganja dimu 1. dana. U nastavku su životinje dva puta dnevno u razmaku od 8 sati dobijale PREP inhibitore, odnosno vehikulum, u goreopisanim dozama.
[2492] 6. dana, životinje su žrtvovane intraperitonealnom primenom 150 mg/kg pentobarbitala (Euthesate<®>). Traheje su oslobođene seciranjem i isečene radi uvođenja kanila. Preko ovih kanila, pluća su četiri puta isprana toplim fiziološkim rastvorom soli temperature 37 °C. Ćelije svake od četiri frakcije tečnosti od bronhoalveolarnog ispiranja (BALF) centrifugirane su na 4 °C na 400 x g tokom 5 minuta. Na kraju su ćelijski peleti objedinjeni i resuspendovani u 150 µl fiziološkog rastvora soli (4 °C). Nakon bojenja Tirkovim rastvorom, ukupan broj ćelija je prebrojan pomoću svetlosnog mikroskopa. Radi kvantifikacije neutrofilnih granulocita (skraćeno: neutrofila) ćelije su prenete na mikroskopske pločice (Cytospin) i obojene bojom DiffQuick (Dade A.G., Düdingen, Švajcarska). Na kraju su prebrojani neutrofili, makrofagi i limfociti i izračunat je relativni udeo prema prethodno određenom ukupnom broju. Radi određivanja koncentracije PGP u BALF, u 200 µl supernatanta prve frakcije BALF dodat je bestatin (krajnja koncentracija: 1 mM) i do merenja je čuvan na -20 °C.
Kvantifikacija PGP u tečnosti od bronhoalveolarnog ispiranja (BALF)
[2493] PGP je određen po metodi koju su dali Hardison et al. [Hardison et al., J. Immunol. 2009, 182:4423-4431] koristeći sledeću opremu: ESI-LC-MS/MS (Shimadzu HPLC, Columbia, MA, SAD) sa masenim spektrometrom Finnigan TSQ quantum discovery Max Quarupole povezanim sa termalnom jonizacijom elektrosprejom (Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA, SAD) i kolonom Atlantis dC18 (100 mm × 2,1 mm, dp = 3 µm, Waters Chromatography, Milford, MA, SAD) tj. pretkolonom Atlantis (10 mm × 2,1 mm, dp = 3 µm, Waters).
B-4 Prečišćavanje, kristalizacija, i određivanje kristalne strukture PREP (svinje) u kompleksu sa primerima 26, 108, 113, 157, 237, 358 i 454
[2494] Skraćenice:
GST = glutation-S-transferaze
IPTG = izopropil-β-D-tiogalaktopiranozid
OD600 = optička gustina na 600 nM
TRIS-HCl = Tris(hidroksimetil)-aminometan-hidrohlorid
EDTA = etilendiamin tetrasirćetna kiselina
DTT = ditiotreitol
PAGE = poliakrilamidna gel elektroforeza
TEV = virus graviranosti duvana
SEC = Size Exclusion Chromatography (hromatografija na molekulskim sitima) FPLC = brza proteinska tečna hromatografija
NaCl = natrijum hlorid
PEG = polietilen glikol
MES = 2-(N-morfolino)etansulfonska kiselina
DMSO = dimetil sulfoksid
CCD = Charge Coupled Device; CCD senzor
4.1 Ekspresija i čišćenje PREP
Sistem za ekspresiju:
Konstruisanje ekspresionog vektora E. coli za proizvodnju GST-PREP (svinje) - Uniprot broj P23687
[2495] Korišćeni PREP ekspresioni vektor (svinje) (na bazi pET-22b) kodira fuzioni protein koji se sastoji od GST oznake, attB1-5# (Gateway, Invitrogen), mesta cepanja TEV, regiona PREP (svinje) (1-710) i attB2-3#, (Gateway, Invitrogen).
Ekspresija E. coli u bioreaktoru:
[2496] Soj E. coli BL21 DE3 transformisan je gornjim ekspresionim vektorom i putem ampicilinske selekcije je ustanovljen stabilni soj. Ovaj transformisani soj je korišćen za ekspresiju u bioreaktoru od 10 l (Satorius). Uslovi za rad bioreaktora su bili sledeći: medijum Circle grow, inkubacija 16 h na 17 °C, indukcija sa 500 µM IPTG pri OD600, 200 µg/ml ampicilina).
Prečišćavanje PREP (svinje):
[2497] Pelet E. coli iz kulture bioreaktora od 9 l suspendovan je u 200 ml pufera za lizu (50 mM TRIS-HCl pH 7,5; 150 mM NaCl; 5 mM EDTA; 5 mM DTT), dodato je 20 µl Benzonase (Roche) i digestovan je u mikrofluidizatoru (3 × 900 bar). Tečne frakcije lizata (centrifugiranje 100.000 × g 40 min, 4 °C) korišćene su za dalje hromatografsko prečišćavanje.
[2498] U narednoj afinitetnoj hromatografiji, glutationska matrica (Protino GST/4B) inkubirana je sa tečnom frakcijom lizata, pri čemu se GST-PREP (svinje) vezao za matricu, isprana puferom za lizu (50 mM Tris HCl pH 7,5; 150 mM NaCl; 5 mM EDTA; 5 mM DTT i puferom A (50 mM TRIS-HCl pH 7,5; 150 mM NaCl; 1 mM EDTA; 1 mM DTT). Zatim je fuzioni protein GST-PREP (svinje) eluiran puferom B (50 mM Tris HCl pH 7,5; 150 mM NaCl; 1 mM EDTA; 15 mM glutation; 1 mM DTT). Elucione frakcije su analizirane pomoću Coomassie/PAGE i objedinjene su frakcije elucionog pika sa GST-PREP (svinje). (prinos 172 mg fuzionog proteina iz 9 l kulture E. coli).
[2499] Radi odvajanja GST oznake, sprovedena je inkubacija sa TEV proteazom u rastvoru tokom dijalize. Pri tome je prečišćeni GST-PREP (svinje) (172 mg) pomešan sa TEV proteazom (interna proizvodnja) u odnosu TEV:fuzioni protein 1:50 m/m i dijalizovan je i sistemu za dijalizu (SlideA-Lyzer presek 10.000 Da) u odnosu na 2 × 2 litra pufera A (17 h, 6 °C). Pomoću Coomassie/PAGE analizirano je cepanje, i određena je konverzija od 90%.
[2500] Daljom afinitetnom hromatografijom na koloni sa glutationskom matricom (Protino GST/4B) iz smese dobijene cepanjem u jednom ciklusu je izolovan protein PREP (svinje) (bez GST oznake) (110 mg), i pomoću uređaja za ultrafiltraciju (Amicon Ultra millipore presek 50 kDa) koncentrovan je radi dalje obrade.
Zatim je izvedena hromatografija na molekulskim sitima da bi se izolovala frakcija monomera PREP (svinje). Za to je korišćena kolona Superdex S20026/60 (GE) sa puferom za hromatografiju na molekulskim sitima (50 mM Tris HCl pH 7,5; 150 mM NaCl; 1 mM EDTA; 1 mM DTT). Finalni uzorci su alikvotirani (1 ml), brzo zamrznuti u tečnom azotu i čuvani na -80 °C. Pufer za čuvanje: 50 mM Tris-CI pH 7,5; 150 mM NaCl; 1 mM EDTA)
Finalna koncentracija PREP (svinje): 3,24 mg/ml, 20 ml, ukupno 64,8 mg, prinos 7,2 mg/l iz 9 l kulture E. coli
Da bi se PREP (svinje) iz pufera za čuvanje (vidi iznad) preneo u pufer za kristalizaciju (10 mM TRIS-HCl pH 7,5; 100 mM NaCl), izvršeno je ponovno puferovanje putem uređaja za FPLC sa kolonom za obesoljavanje DS26/10 (na 6 °C) i zatim koncentrovanje (uređaj za ultrafiltraciju UFC 905096, presek 50.000 Da).
4.2 Nastajanje kompleksa i kristalizacija PREP (svinje)
[2501] Svinjski protein PREP bio je prisutan u koncentraciji od ~34 mg/ml u 10 mM Tris na pH=7,5 i 100 mM NaCl. Rastvori DMSO jedinjenja iz primera dodati su u proteinske rastvore tako da je krajnja koncentracija jedinjenja iz primera iznosila 4 mM. Kompleksni rastvori proteina su inkubirani najmanje 3 sata na 4 °C na tresilici i rastvor je zatim centrifugiran 5 minuta. Merljivi pojedinačni kristali su dobijeni metodom viseće kapi na 20 °C. Pri tome, zajedno je pipetirana ista zapremina proteinskog rastvora i rastvora iz rezervoara (13-15% PEG8000, 0,2 M magnezijum acetat tetrahidrat, 0,1 M MES na pH=6,25) i pomešana sa pelc kristalima PREP svinje. Kristali PREP svinje pretežno su nastali preko noći.
4.3 Prikupljanje podataka i obrada
[2502] Pojedinačni kristal dobrog izgleda je na vrlo kratko vreme ubačen u rastvor sa 13-15% PEG8000, 0,2 M magnezijum acetatom tetrahidratom, 0,1 M MES na pH=6,25 i 20% glicerola i zatim je naglo zamrznut u tečnom azotu. Kristali iz primera [237, 108, 113] izmereni su na generatoru Rigaku 007HF kompanije Rigaku na 100 K i talasnoj dužini od 1,5418 Ä. Uređaj za detekciju je bio brojač Pilatus 2K. Podaci su obrađeni pomoću programa HKL3000. Kristali iz primera [358, 454, 157, 026] izmereni su na sistemu Bruker Proteum na 100 K i talasnoj dužini od 1,5418 Ä. Uređaj za detekciju je bio CCD brojač. Podaci su integrisani pomoću programa SAINT i skalirani pomoću programa SADABS (oba su iz paketa programa Bruker Proterum).
[2503] Kristali su kristalisali u ortorombičnoj prostornoj grupi P2(1)2(1)2(1) sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici.
4.3 Određivanje strukture i doterivanje
[2504] Struktura PREP (svinje) određena je metodom molekulske zamene (Molecular Replacement) sa dodatnom internom strukturom i programom MOLREP (paket programa CCP4). Svi primeri [xxx] stvoreni su pomoću programa Discovery Studio kao 3D model i pomoću programa PRODRG je napravljena datoteka sa parametrima. Svi primeri su ručno postavljeni u odgovarajuću elektronsku gustinu i elektronska gustina je minimizovana u programu COOT. Dodatno doterivanje je izvršeno iterativno pomoću programa REFMAC5.5 i COOT (oba iz paketa programa CCP4). Podaci statistike doterivanja za sve primere prikupljeni su u tabelama B 2-8.
Tabela B-2-8: B-4 Prikupljanje podataka i statistika doterivanja za PREP svinje u kompleksu sa primerima 237, 358, 454, 108, 113, 157 i 26.
a 71,383
.4 Određivanje apsolutne strukture iz primera 237 kod PREP (svinje)
[2505] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 237 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 237 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 237, na stereocentrima C31 i C2 jasno postoji S konfiguracija, na C6 postoji R konfiguracija (Slika 1).
Struktura iz primera 237: (5S,7R)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on sledeće formule
[2506]
4.5 Određivanje apsolutne strukture iz primera 358 kod PREP (svinje
[2507] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 358 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 358 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 358, na oba stereocentra C26 i C2 jasno postoji S konfiguracija (Slika 2).
Struktura iz primera 358: (5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-{[1-(4-metoksifenil)ciklopropil]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on sledeće formule
[2508]
4.6 Određivanje apsolutne strukture iz primera 454 kod PREP (svinje
[2509] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 454 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 454 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 454, na oba stereocentra C25 i C6 jasno postoji S konfiguracija (Slika 3).
Struktura iz primera 454: (5S)-2-(3-hlor-4-fluorbenzil)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on sledeće formule
[2510]
4.7 Određivanje apsolutne strukture iz primera 108 kod PREP (svinje
[2511] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 108 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 108 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 108, na stereocentrima C8 jasno postoji S konfiguracija (Slika 4).
Struktura iz primera 108: (2-{[(1S)-1-(3-hlorfenil)-2-fluoretil]amino}-7-metoksi-1,3-benzoksazol-5-il)[(2S,5S)-5-(2-hidroksietil)--metilmorfolin-4-il]metanon sledeće formule
(5S)-2-(4-metilbenzil)-5-(1,3-tiazolidin-3-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on
[2512]
4.8 Određivanje apsolutne strukture iz primera 113 kod PREP (svinje
[2513] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 113 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 113 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 113, na stereocentrima C3 jasno postoji S konfiguracija (Slika 5).
Struktura iz primera 113: (5S)-5-[(3-fluorazetidin-1-il)karbonil]-2-(4-metilbenzil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on sledeće formule
[2514]
4.9 Određivanje apsolutne strukture iz primera 157 kod PREP (svinje
[2515] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 157 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 157 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 157, na stereocentrima C1 jasno postoji S konfiguracija (Slika 6).
Struktura iz primera 157: (5S)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-on sledeće formule
[2516]
4.10 Određivanje apsolutne strukture iz primera 26 kod PREP (svinje
[2517] Kompleks svinjskog PREP sa primerom 26 kristalisao je sa jednim molekulom u asimetričnoj jedinici. Stereohemija primera 26 jasno je određena pomoću poznavanja stereohemije proteina svinje PREP. U primeru 26, na stereocentrima C3 jasno postoji S konfiguracija (Slika 7).
Struktura iz primera 26: (5S)-2-(4-metilbenzil)-5-(pirolidin-1-ilkarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on sledeće formule
[2518]
Literatura B-4:
[2519]
Emsley P. et al. (2010) Acta Cryst. D66:486-501
Evans P.R, (2005) Acta Cryst. D62, 72-82
Long et al. F (2008) Acta Cryst. D64, 125-132
Murshudo G.N. et al. (1997) Acta Cryst. D53, 240-255
C. Primeri otelotvorenja za farmaceutske kompozicije
[2520] Jedinjenja prema pronalasku mogu da se prevedu u farmaceutske preparate na sledeći način:
Tablete:
Kompozicija:
[2521] 100 mg jedinjenja prema pronalasku, 50 mg laktoze (monohidrat), 50 mg kukuruznog skroba (nativni), 10 mg polivinil pirolidona (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Nemačka) i 2 mg magnezijum stearata.
[2522] Masa tablete 212 mg. Prečnik 8 mm, poluprečnik zakrivljenja 12 mm.
Proizvodnja:
[2523] Smeša jedinjenja prema pronalasku, laktoze i skroba granulisana je sa 5% rastvorom (m/m) PVP u vodi. Granulat je nakon sušenja 5 minuta mešan sa magnezijum stearatom. Ova smeša je presovana pomoću uobičajene prese za tablete (format tablete vidi iznad). Kao smernica za presovanje korišćena je sila pritiska od 15 kN.
Suspenzija za oralnu primenu:
Kompozicija:
[2524] 1000 mg jedinjenja prema pronalasku, 1000 mg etanola (96%), 400 mg Rhodigel<®>(ksantan guma firme FMC, Pennsylvania, SAD) i 99 g vode.
[2525] Pojedinačnoj dozi od 100 mg jedinjenja prema pronalasku odgovara 10 ml oralne suspenzije.
Proizvodnja:
[2526] Rhodigel je suspendovan u etanolu, jedinjenje prema pronalasku je dodato u suspenziju. Voda je dodata uz mešanje. Do završetka bubrenja rodigela mešanje je trajalo oko 6 h.
Rastvor za oralnu primenu:
Kompozicija:
[2527] 500 mg jedinjenja prema pronalasku, 2,5 g polisorbata i 97 g polietilen glikola 400. Pojedinačnoj dozi od 100 mg jedinjenja prema pronalasku odgovara 20 g oralnog rastvora.
Proizvodnja:
[2528] Jedinjenje prema pronalasku uz mešanje je suspendovano u smeši polietilen glikola i polisorbata. Postupak mešanja je nastavljen do kompletnog rastvaranja jedinjenja prema pronalasku.
i.v. rastvor:
[2529] Jedinjenje prema pronalasku rastvoreno je u koncentraciji manjoj od zasićenja u fiziološki podnošljivom rastvaraču (npr., izotonični rastvor natrijum hlorida, 5% rastvor glukoze i/ili 30% rastvor PEG 400). Rastvor je sterilno filtriran i napunjen u sterilnu ambalažu za injekcije bez pirogena.

Claims (16)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I)
    u kojoj A predstavlja (C1-C4)-alkilen ili CD2, pri čemu, (C1-C4)-alkilen može biti supstituisan hidroksi, (C1-C4)-alkoksi grupom, kao i do pet puta fluorom, ili predstavlja grupu formule
    pri čemu n je 0 ili 1, p je 0 ili 1, q je 1 ili 2, pri čemu #<1>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, * označava vezu sa R<1>, X predstavlja -CR<6>R<7>-, #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**, #<2>-CR<6>=CR<8>-** ili #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-CR<10>R<11>-, pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe, pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu R<6>predstavlja vodonik, fluor, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, trifluormetoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom, R<7>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil, pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom, ili R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu, ili R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten, ili R<6>i R<4>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten, R<8>predstavlja vodonik, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, fluor, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom, R<9>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil, gde (C1-C4)-alkil do pet puta može biti supstituisan fluorom, ili R<8>i R<9>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten, ili R<7>i R<9>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten, R<10>predstavlja vodonik, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, fluor, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom, R<11>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil, pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom, ili R<10>i R<11>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten, R<1>predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril, pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil, ili pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, (C5-C6)-heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta, ili pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom, pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta, R<2>predstavlja grupu formule
    , pri čemu #<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika, r je 0 ili 1, Z je O, NR<18>, S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, pri čemu R<14A>je vodonik, halogen, cijano, (C1-C4)-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, (C1-C4)-alkoksi, (C3-C5)-cikloalkoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi ili 2,2,2-trifluoretoksi, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa hidroksi, amino, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, R<14B>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil, pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu, R<18>je vodonik ili metil, R<12>predstavlja vodonik, cijano, (C1-C4)-alkil, acetil ili formil, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan hidroksi grupom ili do pet puta fluorom, pri čemu, acetil može biti supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom, R<13>predstavlja vodonik, fluor ili (C1-C4)-alkil, ili R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten, pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili R<13>i R<14A>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten, pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil ili ciklobutil prsten, pri čemu, ciklopropil ili ciklobutil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik, ili predstavlja grupu formule
    , pri čemu #<4>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika, Y je NR<15>, CR<16A>R<16B>, kiseonik ili sumpor, pri čemu R<15>je vodonik ili metil, R<16A>je vodonik ili metil, R<16B>je vodonik ili metil, R<3>je vodonik ili (C1-C4)-alkil, R<4>predstavlja vodonik, (C1-C4)-alkil, (C1-C4)-alkoksi, fluor, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, pri čemu, (C1-C4)-alkil može biti supstituisan sa (C1-C4)-alkoksi, hidroksi, mono-(C1-C4)-alkilamino ili di-(C1-C4)-alkilamino, kao i do pet puta fluorom, R<5>je vodonik ili (C1-C4)-alkil, pri čemu, (C1-C4)-alkil može do pet puta biti supstituisan fluorom, ili R<4>i R<5>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu, ili R<4>i R<5>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil, ciklobutil prsten ili ciklopentil prsten, kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
  2. 2. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kome A predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom, X predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**, pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe, pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi, R<7>je vodonik, fluor ili metil, ili R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil, R<9>je vodonik, fluor ili metil, R<1>predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril, pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil ili metilsulfinil, ili pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, (C5-C6)-heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta, ili pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil i dimetilaminokarbonil, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom, pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta, R<2>predstavlja grupu formule
    , pri čemu #<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika, r je 0 ili 1, Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0, Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1, gde svaki R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi, R<14B>je vodonik ili fluor, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu, R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil, pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom, R<13>je vodonik, fluor ili metil, ili R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten, ili R<13>i R<14A>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik, R<3>je vodonik, R<4>je vodonik, fluor ili metil, R<5>je vodonik, kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
  3. 3. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 ili 2, u kome A predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom, X predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**, pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe, pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi, R<7>je vodonik, fluor ili metil, ili R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil, R<9>je vodonik, fluor ili metil, R<1>predstavlja fenil ili 5- do 6-člani heteroaril, pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil i metilsulfinil, ili pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta, ili pri čemu, 5- do 6-člani heteroaril može biti supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, terc-butilaminokarbonil i dimetilaminokarbonil, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti kondenzovan sa ciklopentilom, cikloheksilom, 5- do 6-članim heterociklilom, fenilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu, 5-do 6-člani heteroaril može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom, pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil i 5- do 6-člani heteroaril mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta, R<2>predstavlja grupu formule
    , pri čemu #<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika, r je 0 ili 1, Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0, Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1, gde svaki R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi, R<14B>je vodonik ili fluor, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu, R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil, pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom, R<13>je vodonik, fluor ili metil, ili R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten, ili R<13>i R<14A>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik, R<3>je vodonik, R<4>je vodonik, fluor ili metil, R<5>je vodonik, kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
  4. 4. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 ili 2, u kome A predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa atomom azota prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom, X predstavlja - #<2>-CR<6>R<7>-CR<8>R<9>-**, pri čemu, #<2>označava vezu sa atomom ugljenika CR<4>R<5>grupe, pri čemu, ** označava vezu sa atomom ugljenika prstena 5-okso-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-ila, pri čemu R<6>je vodonik, fluor, metil, trifluormetil ili hidroksi, R<7>je vodonik, fluor ili metil, ili R<6>i R<7>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, R<8>je vodonik, fluor, metil ili trifluormetil, R<9>je vodonik, fluor ili metil, R<1>predstavlja fenil, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil, pri čemu, fenil je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, hidroksikarbonil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil, metilaminokarbonil, dimetilaminokarbonil, metilsulfanil, metilsulfonil, metilsulfonimidoil, aminosulfonil i metilsulfinil, ili pri čemu, fenil može biti kondenzovan sa ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil grupom, pri čemu, (ciklopentil, cikloheksil, pirazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 metil ili etil supstituenta, ili pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti supstituisani sa 1 do 3 supstituenta koji su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koju čine fluor, hlor, cijano, metil, etil, trifluormetil, metoksi, etoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 2,2,2-trifluoretoksi, metilaminokarbonil, tercbutilaminokarbonil i dimetilaminokarbonil, pri čemu, pirazolil, imidazolil, tiazolil, tiofenil, oksazolil, oksadiazolil ili piridil mogu biti kondenzovani sa ciklopentil, cikloheksil, fenil ili piridil grupom, pri čemu, piridil može biti supstituisan metilom, etilom, hlorom, fluorom ili metoksi grupom, pri čemu, ciklopentil, cikloheksil, fenil i piridil mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 (C1-C4)-alkil supstituenta, R<2>predstavlja grupu formule
    , pri čemu #<3>označava vezu sa karbonilnim atomom ugljenika, r je 0 ili 1, Z je S ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 0, Z je S, SO, SO2ili CR<14A>R<14B>, kada r iznosi 1, pri čemu R<14A>predstavlja vodonik, fluor, metil, trifluormetil, difluormetil, fluormetil, hidroksi, metoksi, difluormetoksi ili trifluormetoksi, R<14B>je vodonik ili fluor, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade karbonilnu grupu, R<12>predstavlja vodonik, cijano, metil, acetil ili formil, pri čemu, acetil je supstituisan hidroksi grupom ili do tri puta fluorom, R<13>je vodonik, fluor ili metil, ili R<12>i R<13>, zajedno sa atomima ugljenika za koje su vezani, grade ciklopropil prsten, ili R<13>i R<14A>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, ili R<14A>i R<14B>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, grade ciklopropil prsten, pri čemu, ciklopropil prsten može do dva puta biti supstituisan fluorom, pri čemu, R<13>, R<14A>i R<14B>predstavljaju vodonik, ako R<12>nije vodonik, pri čemu, R<12>je vodonik, ako jedan od supstituenata R<13>, R<14A>ili R<14B>nije vodonik, R<3>je vodonik, R<4>je vodonik, fluor ili metil, R<5>je vodonik, kao i soli, solvati i solvati soli jedinjenja formule (I).
  5. 5. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 sa sistemskim imenom (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on i strukturnom formulom
  6. 6. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 sa sistemskim imenom (5S,7R)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on i strukturnom formulom
  7. 7. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 sa sistemskim imenom (5S)-5-{[(3R,4S)-3,4-difluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[3-fluor-2-(trifluormetil)piridin-4-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on i strukturnom formulom
  8. 8. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 sa sistemskim imenom (5S)-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-2-{[6-(trifluormetil)piridin-3-il]metil}-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on i strukturnom formulom
  9. 9. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 sa sistemskim imenom (5RS,7RS)-2-[(6-hlorpiridin-3-il)metil]-5-{[(3S)-3-fluorpirolidin-1-il]karbonil}-7-(trifluormetil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2H)-on i strukturnom formulom
  10. 10. Postupak za proizvodnju jedinjenja kao što je definisano u zahtevima 1 do 5, naznačen time što se [A] jedinjenje formule (II)
    u kome R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1, i T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil, u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze, sa jedinjenjem formule (III)
    u kojoj A<1>predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa X<1>, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom, R<1>ima značenje navedeno u zahtevu 1, i X<1>predstavlja pogodnu odlazeću grupu, posebno hlor, brom, jod, mezilat {(metilsulfonil)oksi}, triflat {[(trifluormetil)sulfonil]oksi}, nonaflat {[(nonafluorbutil)sulfonil]oksi}, nozilat {[(4-nitro-fenil)sulfonil]oksi} ili tozilat {[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}, prevodi u jedinjenje formule (IV)
    u kome A<1>, R<1>, R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1, T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil, , koje se zatim uklanjanjem grupe „T<1>“ u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze ili kiseline prevodi u jedinjenje formule (V)
    , u kome A<1>, R<1>, R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1, koje zatim u inertnom rastvaraču u uslovima kuplovanja amida reaguje sa aminom formule (VI-A) odnosno (VI-B),
    u kome r, Y, Z, R<12>i R<13>imaju značenje navedeno u zahtevu 1, i zatim se po potrebi postojeće zaštitne grupe uklanjaju po metodama poznatim stručnjaku, i dobijena jedinjenja formule (I) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate. soli, i/ili solvate soli, ili [B] jedinjenje formule (II)
    u kome R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1, T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil, u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze sa aminom formule (VI-A) odnosno (VI-B),
    u kome r, Y, Z, R<12>i R<13>imaju značenje navedeno u zahtevu 1, prevedeno je u jedinjenje formule (XXIII-A) odnosno (XXIII-B),
    u kome r, R<3>, R<4>, R<5>, R<12>, R<13>, X, Y i Z imaju značenje navedeno u zahtevu 1, , koje u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze reaguje sa jedinjenjem formule (III)
    u kojoj A<1>predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa X<1>, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom, R<1>ima značenje navedeno u zahtevu 1, i X<1>predstavlja pogodnu odlazeću grupu, posebno hlor, brom, jod, mezilat {(metilsulfonil)oksi}, triflat {[(trifluormetil)sulfonil]oksi}, nonaflat {[(nonafluorbutil)sulfonil]oksi}, nozilat {[(4-nitro-fenil)sulfonil]oksi} ili tozilat {[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}, i zatim se po potrebi postojeće zaštitne grupe uklanjaju po metodama poznatim stručnjaku, i dobijena jedinjenje formule (I) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate. soli, i/ili solvate soli, ili [C] jedinjenje formule (VII)
    u kome R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1, i T<1>predstavlja (C1-C4)-alkil ili benzil, T<2>predstavlja 4-metoksi-benzil, benzil, alil, β-(trimetilsilil)etoksimetil (SEM), metoksimetil (MOM) ili benziloksimetil, putem hidrolize estarske grupe u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze ili kiseline prevodi se u jedinjenje formule (VIII)
    , u kome R<3>, R<4>, R<5>i X imaju značenje navedeno u zahtevu 1 kao i iznad, i T<2>predstavlja 4-metoksi-benzil, benzil, alil, β-(trimetilsilil)etoksimetil (SEM), metoksimetil (MOM) ili benziloksimetil, koje zatim u inertnom rastvaraču u uslovima kuplovanja amida reaguje sa aminom formule (VI-A)
    u kome r, Y, Z, R<12>i R<13>imaju značenje navedeno u zahtevu 1, prevodi se u jedinjenje formule (IX-A) odnosno (IX-B),
    u kome r, R<3>, R<4>, R<5>, R<12>, R<13>, T<2>, X, Y i Z imaju gorenavedeno značenje, , zaštitna grupa „T<2>“ se uklanja u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze ili kiseline ili po potrebi u prisustvu pogodnog paladijumovog katalizatora, i dobijeno jedinjenje formule (X-A) odnosno (X-B),
    u kome r, R<3>, R<4>, R<5>, R<12>, R<13>, X, Y i Z imaju značenje navedeno u zahtevu 1, u inertnom rastvaraču u prisustvu pogodne baze, sa jedinjenjem formule (III)
    u kojoj A<1>predstavlja -CH2-,-CH(CH3)-, -CH2CH2-, #<5>-CH2CH(CH3)-***, #<5>-CH2C(CH3)2-***, #<5>-CH2CHF-*** ili #<5>-CH2CF2-***, pri čemu, #<5>označava vezu sa X<1>, pri čemu, *** označava vezu sa R<1>grupom, R<1>ima značenje navedeno u zahtevu 1, i X<1>predstavlja pogodnu odlazeću grupu, posebno hlor, brom, jod, mezilat {(metilsulfonil)oksi}, triflat {[(trifluormetil)sulfonil]oksi}, nonaflat {[(nonafluorbutil)sulfonil]oksi}, nozilat {[(4-nitro-fenil)sulfonil]oksi} ili tozilat {[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}, i zatim se po potrebi postojeće zaštitne grupe uklanjaju po metodama poznatim stručnjaku, i dobijena jedinjenja formule (I) se po potrebi pomoću odgovarajućih (i) rastvarača i/ili (ii) kiselina ili baza prevode u solvate. soli, i/ili solvate soli.
  11. 11. Jedinjenje kao što je definisano u jednom od zahteva 1 do 9, za lečenje i/ili prevenciju bolesti.
  12. 12. Jedinjenje kao što je definisano u jednom od zahteva 1 do 9, za primenu u postupku za lečenje i/ili prevenciju inflamatornih plućnih bolesti, pre svega hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), emfizema pluća, hroničnog bronhitisa, bronhiektazije, plućne hipertenzije kod HOBP (PH-HOBP), akutne egzacerbacije kod HOBP, cistične fibroze (mukoviscidoza, CF) astme, kao i idiopatske pulmonalne fibroze (IPF), Bronchiolitis obliterans sindroma (BOS), arteroskleroze, miokarditisa, kao i inflamatornih bolesti kože i očiju, odnosno inflamatornih bolesti unutrašnjih organa.
  13. 13. Jedinjenje formule (I) kao što je definisano u zahtevima 1 do 9, za proizvodnju leka za lečenje i/ili prevenciju inflamatornih plućnih bolesti, pre svega hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), emfizema pluća, hroničnog bronhitisa, bronhiektazije, plućne hipertenzije kod HOBP (PH-HOBP), akutne egzacerbacije kod HOBP, cistične fibroze (mukoviscidoza, CF) astme, kao i idiopatske pulmonalne fibroze (IPF), Bronchiolitis obliterans sindroma (BOS), arteroskleroze, miokarditisa, kao i inflamatornih bolesti kože i očiju, odnosno inflamatornih bolesti unutrašnjih organa.
  14. 14. Lek koji sadrži jedinjenje, kao što je definisano u jednom od zahteva 1 do 9, u kombinaciji sa jednim ili više inertnih, netoksičnih, farmaceutski prikladnih pomoćnih supstanci.
  15. 15. Lek koji sadrži jedinjenje, kao što je definisano u jednom od zahteva 1 do 9, u kombinaciji sa jednim ili više aktivnih supstanci odabranih iz grupe koju čine inhibitori PDE 5, aktivatori sGC, stimulatori sGC, analozi prostaciklina, agonisti IP receptora, antagonisti endotelina, jedinjenja koja inhibiraju kaskadu transdukcije signala i pirfenidon.
  16. 16. Jedinjenje prema zahtevu 14 ili 15, za lečenje i/ili prevenciju inflamatornih plućnih bolesti, pre svega hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), emfizema pluća, hroničnog bronhitisa, bronhiektazije, plućne hipertenzije kod HOBP (PH-HOBP), akutne egzacerbacije kod HOBP, cistične fibroze (mukoviscidoza, CF) astme, kao i idiopatske pulmonalne fibroze (IPF), Bronchiolitis obliterans sindroma (BOS), arteroskleroze, miokarditisa, kao i inflamatornih bolesti kože i očiju, odnosno inflamatornih bolesti unutrašnjih organa.
RS20240564A 2016-05-09 2017-05-08 Supstituisani 5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2h)-on i 2,5,6,7-tetrahidro-3h-pirolo[2,1c][1,2,4]triazol-3-on i njihova primena RS65596B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP2016168809 2016-05-09
PCT/EP2017/060900 WO2017194459A1 (de) 2016-05-09 2017-05-08 Substituierte 5,6,7,8-tetrahydro[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3(2h)-one und 2,5,6,7-tetrahydro-3h-pyrrolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-one und ihre verwendung
EP17723053.9A EP3455224B1 (de) 2016-05-09 2017-05-08 Substituierte 5,6,7,8-tetrahydro[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3(2h)-one und 2,5,6,7-tetrahydro-3h-pyrrolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-one und ihre verwendung

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS65596B1 true RS65596B1 (sr) 2024-06-28

Family

ID=65351627

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20240564A RS65596B1 (sr) 2016-05-09 2017-05-08 Supstituisani 5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2h)-on i 2,5,6,7-tetrahidro-3h-pirolo[2,1c][1,2,4]triazol-3-on i njihova primena

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP3455224B1 (sr)
ES (1) ES2987656T3 (sr)
HR (1) HRP20240589T1 (sr)
HU (1) HUE066246T2 (sr)
MA (1) MA44969B1 (sr)
PL (1) PL3455224T3 (sr)
RS (1) RS65596B1 (sr)

Also Published As

Publication number Publication date
EP3455224A1 (de) 2019-03-20
HRP20240589T1 (hr) 2024-07-19
EP3455224B1 (de) 2024-03-27
PL3455224T3 (pl) 2024-07-01
ES2987656T3 (es) 2024-11-15
HUE066246T2 (hu) 2024-07-28
MA44969B1 (fr) 2024-06-28
EP3455224C0 (de) 2024-03-27
MA44969A (fr) 2019-03-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102438965B1 (ko) 치환된 5,6,7,8-테트라히드로[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피리딘-3(2H)-온 및 2,5,6,7-테트라히드로-3H-피롤로[2,1-c][1,2,4]트리아졸-3-온, 및 그의 용도
CN114466850B (zh) [1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
CN102391255A (zh) 作为β3肾上腺素能受体激动剂的羟甲基吡咯烷
JP2026506002A (ja) Ｓｏｓ１阻害剤及び抗がん薬を含む、がんの処置のための医薬組成物
WO2022167627A1 (en) Map4k1 inhibitors
JP7295019B2 (ja) ７－置換１－アリール－ナフチリジン－３－カルボン酸アミドおよびその使用
CN116829545A (zh) 取代的吡唑基哌啶羧酸
CN109689654A (zh) 7-取代的1-吡啶基-萘啶-3-甲酰胺类及其用途
US20230065629A1 (en) Substituted 6-(1h-pyrazol-1-yl)pyrimidin-4-amine derivatives and uses thereof
US11337973B2 (en) Substituted [1,2,4]triazolo[4,3-A]pyrazines as prolyl endopeptidase inhibitors
RS65596B1 (sr) Supstituisani 5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2h)-on i 2,5,6,7-tetrahidro-3h-pirolo[2,1c][1,2,4]triazol-3-on i njihova primena
BR112018073061B1 (pt) 5,6,7,8- tetra-hidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3(2h)-onas e 2,5,6,7-tetrahidro-3h-pirrolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-onas, seus usos e seu processo de preparação, e medicamento
HK40000221B (zh) 取代的5,6,7,8-四氢[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3(2h)-酮和2,5,6,7-四氢-3h-吡咯并[2,1-c][1,2,4]三唑-3-酮及其用途
WO2025179161A1 (en) Protein degrading compounds
HK40000221A (en) Substituted 5,6,7,8-tetrahydro[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine-3(2h)-ones and 2,5,6,7-tetrahydro-3h-pyrrolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-ones, and use thereof
HK40007860A (en) Substituted 6-(1h-pyrazol-1-yl)pyrimidin-4-amine derivatives and uses thereof
HK40006282A (en) 7-substituted 1-aryl-naphthyridine-3-carboxylic acid amides and use thereof