RS65943B1 - Režim doziranja anti-bcma agenasa - Google Patents

Režim doziranja anti-bcma agenasa

Info

Publication number
RS65943B1
RS65943B1 RS20241032A RSP20241032A RS65943B1 RS 65943 B1 RS65943 B1 RS 65943B1 RS 20241032 A RS20241032 A RS 20241032A RS P20241032 A RSP20241032 A RS P20241032A RS 65943 B1 RS65943 B1 RS 65943B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
seq
cdr
region
antibody construct
use according
Prior art date
Application number
RS20241032A
Other languages
English (en)
Inventor
Julia Stieglmaier
Birgit Huber
Alexander Minella
Vijay Upreti
Original Assignee
Amgen Res Munich Gmbh
Amgen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=68581157&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS65943(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Amgen Res Munich Gmbh, Amgen Inc filed Critical Amgen Res Munich Gmbh
Publication of RS65943B1 publication Critical patent/RS65943B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na doziranje i primenu anti-BCMA agenasa za lečenje BCMA pozitivnih neoplazmi. Konkretnije, ovaj pronalazak se odnosi na konstrukt antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena na bazi Fc koji produžava ili poboljšava poluživot konstrukta antitela, za upotrebu u lečenju ili ublažavanju BCMA pozitivne neoplazme kod humanog ispitanika, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u određenoj dozi u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje tokom prvog ciklusa 1. dana i u jednom ili dva koraka doziranja. Aspekt koji se odnosi na metodu za lečenje BCMA pozitivne neoplazme, koja se sastoji od primene određene doze takvog konstrukta antitela i upotrebe takvog konstrukta antitela za proizvodnju leka za lečenje BCMA pozitivne neoplazme ne odnosi se na pronalazak i prezentovan je samo u ilustrativne svrhe.
Stanje tehnike
[0002] Multipli mijelom (MM) je maligni tumor plazma ćelija koje se razmnožavaju u koštanoj srži i oslobađaju para protein. Rezultirajuće kliničke laboratorijske slike uključuju infekciju, razaranje kostiju, otkazivanje koštane srži, otkazivanje bubrega i hiperkalcemiju. Godišnja incidencija prilagođena uzrastu se povećava sa približno 6 novih slučajeva na 100.000. Incidencija je 2 puta veća kod crne američke populacije nego kod belaca. Petogodišnja stopa preživljavanja za MM je povećana sa ~ 25% za novodijagnostikovane pacijente 1975. godine na ~ 45% 2006. godine. Ovo poboljšanje je uglavnom posledica novih lekova kao što su inhibitori proteazoma i imunomodulatori. Međutim, MM se ne smatra izlečivim sa trenutnim pristupima. Pacijenti refraktorni na inhibitore proteazoma i imunomodulatore pokazuju nepovoljan ishod sa medijanom ukupnog preživljavanja od 9 meseci.
[0003] Ishod je posebno loš kod populacija sa visokim rizikom kao što je podgrupa sa del17p13 pozitivnim MM. Iako su mnogi lekovi u kliničkom razvoju za MM, i dalje su potrebne nove opcije lečenja. Pacijenti koji pokazuju simptomatsku bolest se inicijalno leče primarnom indukcionom terapijom, nakon čega sledi visoka doza hemoterapije sa podrškom autolognih matičnih ćelija kod podobnih pacijenata. Pacijenti podobni za intenzivno lečenje određuju se prema starosti (65 do 75 godina kao gornja granica), bez komorbiditeta i intaktne bubrežne funkcije. Iako je ovaj režim poboljšao preživljavanje mlađih i sposobnih pacijenata, medijana trajanja odgovora ne prelazi 3 godine, a mali broj pacijenata ostaje bez bolesti duže od 10 godina.
[0004] Testirani su pristupi konsolidaciji i održavanju kako bi se povećala dubina i trajanje remisije. Pošto je terapija održavanja izazovna zbog nedostatka efikasnosti ili podnošljivosti, još uvek postoji mogućnost poboljšanja ishoda preživljavanja u okruženju transplantacije dodavanjem novih terapija režimima indukcije, konsolidacije ili održavanja. Pacijenti nepodobni za terapiju visokim dozama obično primaju indukcione režime slične onima za kandidate za transplantaciju. Ovi režimi uključuju inhibitor proteazoma bortezomib ili kombinaciju na bazi melfalana sa talidomidom. Medijana ukupnog preživljavanja (OS) melfalan-talidomid-prednizon (MPT) kod starijih pacijenata je 40 meseci. Lenalidomid u kombinaciji sa deksametazonom je standardni režim za relapsni/refraktorni MM, ali može preći na prvu liniju kod pacijenata nepodobnih za transplantaciju.
[0005] Drugi utvrđeni režimi u relapsirajućem okruženju su ponovljeni indukcioni režimi ili kombinacije spasavanja zasnovane na bortezomibu ili imunomodulatoru sa alkilirajućim agensima. Potrebno je poboljšanje ishoda (preživljavanje bez progresije bolesti (PFS) i OS) kod pacijenata sa recidivirajućom bolešću. Pacijenti koji su refraktorni na utvrđene terapije i napreduju na terapiji imaju sumoran ishod od 9 meseci OS na terapiji i 3 meseca bez terapije. Neispunjena potreba je najveća kod ovih pacijenata.
[0006] Bispecifični molekuli kao što su konstrukti antitela BiTE<®>(bispecifični aktivator T ćelija) su konstrukti rekombinantnog proteina koji imaju (najmanje) jedan domen vezivanja koji je specifičan za izabrani površinski antigen povezan sa tumorom na ciljnim ćelijama i drugi domen vezivanja koji je specifičan za CD3, podjedinicu kompleksa receptora T ćelija na T ćelijama. Po svom posebnom dizajnu, BiTE<®>konstrukti antitela su jedinstveno pogodni za prolazno povezivanje T ćelija sa ciljnim ćelijama i, istovremeno, potencijalno aktiviraju inherentni citolitički potencijal T ćelija protiv ciljnih ćelija. Prva generacija takozvanih "kanonskih" (bez produženog poluživota) BiTE<®>konstrukata antitela (vidi WO 99/54440 i WO 2005/040220) doneta je u kliniku kao AMG 103 (blinatumomab, anti-CD19 x anti-CD3) i AMG 110 (solitomab, anti-EpCAM x anti-CD3). Dalji razvoj prve generacije kanonskih BiTE<®>konstrukata antitela bilo je obezbeđivanje bispecifičnih konstrukata antitela koji se vezuju za kontekst nezavisnog epitopa na N-terminusu CD3-epsilonskog lanca čoveka i Callithrix jacchus, Saguinus oedipus ili Saimiri sciureus (WO 2008/119567). Prvi BiTE<®>molekul koji se sastojao od ovog novog domena vezivanja CD3-epsilon koji je testiran u klinici bio je AMG 330.
[0007] Konstrukti antitela kako su opisani u WO 2008/119567 verovatno će patiti od brzog klirensa iz tela; stoga, iako su u stanju da brzo dođu do većine delova tela i brzo se proizvode i lako se njima rukuje, njihove primene in vivo mogu biti ograničene njihovom kratkom postojanošću in vivo. Produžena primena kontinuiranom intravenskom infuzijom korišćena je za postizanje terapijskih efekata zbog kratkog poluživota in vivo ovog relativno malog molekula. Međutim, takve kontinuirane intravenske infuzije su klasifikovane kao nezgodne za pacijente i stoga, u slučaju pogodnijih alternativnih pristupa lečenju, mogu ometati izbor jedinjenja za koje se pokazalo da je efikasnije u lečenju odgovarajuće bolesti. To je dovelo do razvoja bispecifičnih terapeutika koji zadržavaju sličnu terapijsku efikasnost i istovremeno imaju povoljna farmakokinetička svojstva, uključujući duži poluživot. Stoga je važan dalji razvoj takozvanih kanonskih BiTE<®>molekula bio dodavanje dodatnog domena koji produžava ili poboljšava poluživot konstrukta antitela. Dobijeni molekuli se takođe nazivaju "HLE" (produženi poluživot) BiTE<®>molekuli, vidi npr. WO 2017/134140.
[0008] Antigen sazrevanja B ćelija (BCMA, TNFRSF17, CD269) je transmembranski protein koji pripada super porodici TNF receptora. BCMA ekspresija se selektivno indukuje tokom kasne faze diferencijacije plazma ćelija i odsutna je na naivnim i memorijskim B ćelijama. Nakon vezivanja BCMA za njegove ligande, faktor aktivacije B ćelija (BAFF) i ligand koji indukuje proliferaciju (APRIL), promoviše se preživljavanje plazma ćelija koštane srži i plazmablasta. BCMA ne održava normalnu homeostazu B ćelija, ali je neophodan za preživljavanje dugovečnih plazma ćelija. Studije na BCMA -/- miševima pokazale su da je preživljavanje dugovečnih plazma ćelija koštane srži bilo narušeno, ali razvoj B ćelija i rani humoralni imunološki odgovori nisu se razlikovali od miševa divljeg tipa. MRNK ekspresija BCMA je visoko povišena kod malignih poremećaja plazma ćelija. Nasuprot tome, ekspresija mRNK u normalnim tkivima je veoma niska i ograničena na limfoidna tkiva gde se nalaze normalne dugovečne plazma ćelije. Prijavljeno je da je ekspresija proteina BCMA ograničena samo na plazma ćelije. Ekspresija BCMA je ograničena na plazmablaste i dugovečne plazma ćelije i ne može se detektovati na drugim normalnim ljudskim tkivima. BCMA se univerzalno eksprimira na ćelijskoj površini MM ćelija i na relativno višim nivoima na malignim plazma ćelijama od nivoa uočenog na normalnim plazma ćelijama. Ne postoji korelacija između ekspresije BCMA i stadijuma MM bolesti, odgovora na poslednje lečenje i vremena od dijagnoze. Ni T ćelije ni mijeloidne ćelije ili CD34+ hematopoetske matične ćelije ne eksprimiraju BCMA. Selektivna ekspresija BCMA čini je veoma atraktivnom metom za terapije zasnovane na antitelima i himernim antigenskim receptorima (CAR).
[0009] AMG 420 (ranije BI 836909) je kanonski bispecifični aktivator T ćelija koji se vezuje za BCMA na ciljnim ćelijama, kao i za CD3-epsilon na T ćelijama. Funkcioniše kao most između BCMA pozitivnih ciljnih ćelija kao što su MM ćelije i citotoksični T limfociti (CTL) usmeravanjem citolitičke aktivnosti CTL na ciljne ćelije. AMG 420 se sastoji od dva jednolančana varijabilna fragmenta (scFv), od kojih je jedan usmeren na BCMA, a drugi na CD3. Svaki od scFv fragmenata se sastoji od VH i VL domena povezanog sa glicin/serinskim linkerom. Dva scFv fragmenta su takođe povezana sa glicin/serinskim linkerom. Konstrukti anti-BCMA x anti-CD3 antitela sa produženim poluživotom kao što je AMG 701 detaljno su opisani u WO 2017/134134. Cho et al. (Clinical Lymphoma, Myeloma and Leukemia - 17th International Myeloma Workshop 2019, vol.19, no. 10, Supplement) navode da je u modelu ksenografta NCI-H929, AMG 701 blokirao rast tumora 5 dana nakon prve injekcije i potpuno iskorenio rast tumora nakon 3 injekcije na svim nivoima doze (0,02; 0,2; 2 mg/kg). Postoji stalna nezadovoljena medicinska potreba za razvojem terapija za lečenje BCMA pozitivnih neoplazmi, posebno sa takvim produženim poluživotom anti-BCMA x anti-CD3 molekula.
Sažetak pronalaska
[0010] Ovaj pronalazak je naveden u priloženim patentnim zahtevima.
Kratak opis slika
[0011]
Na slici 1 prikazan je primer istraživanja doze AMG 701.
Na slici 2 prikazan je protokol optimizacije doziranja u koraku od 1 nedelje.
Detaljan opis pronalaska
[0012] Stoga je cilj ovog pronalaska da obezbedi šemu primene anti-BCMA x anti-CD3 konstrukta antitela produženog poluživota, koja obezbeđuje povoljan profil bezbednosti i podnošljivosti, dok rezultira pozitivnim signalom efikasnosti kod BCMA pozitivnih neoplazmi.
[0013] Konkretnije, ovaj pronalazak se odnosi na konstrukt antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena na bazi Fc koji produžava poluživot konstrukta antitela, za upotrebu u lečenju ili ublažavanju BCMA pozitivne neoplazme kod humanog ispitanika, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u minimalnoj dozi od 800 µg/dan u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje tokom prvog ciklusa 1. dana i u jednom ili dva koraka doziranja.
[0014] Štaviše, aspekt koji se odnosi na metodu za lečenje ili ublažavanje BCMA pozitivne neoplazme, koja se sastoji od primene konstrukta antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena koji produžava poluživot konstrukta antitela ispitaniku kome je to potrebno, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u minimalnoj dozi od 800 µg/dan u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela i ne odnosi se na pronalazak i prisutan je samo u svrhu ilustracije.
[0015] Aspekt koji se odnosi na upotrebu konstrukta antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena koji produžava poluživot konstrukta antitela, za proizvodnju leka za lečenje BCMA pozitivne neoplazme, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u minimalnoj dozi od 800 µg/dan u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela i ne odnosi se na pronalazak i prisutan je samo u svrhu ilustracije.
[0016] Aspekt koji se odnosi na upotrebu konstrukta antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena koji produžava poluživot konstrukta antitela, za lečenje ili ublažavanje BCMA pozitivne neoplazme, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u minimalnoj dozi od 800 µg/dan u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela i ne odnosi se na pronalazak i prisutan je samo u svrhu ilustracije.
[0017] „Neoplazma“ je nenormalni rast tkiva, koji obično, ali ne uvek, formira masu. Kada se takođe formira masa, obično se naziva "tumor". Kod tumora mozga, nekontrolisana deoba ćelija znači da se masa neoplazme povećava u veličini, a u zatvorenom prostoru kao što je intrakranijalna šupljina, to brzo postaje problematično jer masa napada prostor mozga gurajući ga u stranu, što dovodi do kompresije moždanog tkiva i povećanog intrakranijalnog pritiska i destrukcije parenhima. Prema pronalasku, termin „neoplazma“ ili „tumor“ se takođe odnosi na stanje koje bi imalo koristi od lečenja konstruktom antitela kako je ovde opisano. Ovo uključuje hronične i akutne poremećaje ili bolesti, uključujući i ona patološka stanja koja predisponiraju sisara na dotično stanje (neoplazmu ili tumor).
[0018] Neoplazme ili tumori mogu biti benigni, potencijalno maligni (prekancerozni) ili maligni (kancerozni). Maligne neoplazme / tumori se obično nazivaju kancer. Obično napadaju i uništavaju okolno tkivo i mogu da formiraju metastaze, tj. šire se na druge delove, tkiva ili organe tela. "Primarni tumor" je tumor koji raste na anatomskom mestu gde je počela progresija tumora i nastavio da daje kancerogenu masu. Na primer, tumor mozga nastaje kada se unutar mozga formiraju abnormalne ćelije. Većina karcinoma se razvija na svom primarnom mestu, ali zatim formira metastaze ili se širi na druge delove tela (npr. tkiva i organe). Ovi dalji tumori su sekundarni tumori. Većina karcinoma se i dalje naziva po svom primarnom mestu, čak i nakon što se prošire na druge delove tela.
[0019] Limfomi i leukemije su hematopoetske ili limfoidne neoplazme. Za potrebe ovog pronalaska, limfomi i leukemije su takođe obuhvaćeni terminima „tumor“, „kancer“ ili „neoplazma“. Limfom je grupa karcinoma krvi koji se razvijaju iz limfocita (vrsta belih krvnih zrnaca). Leukemija je grupa karcinoma koji obično počinju u koštanoj srži i rezultiraju velikim brojem abnormalnih belih krvnih zrnaca. Ova bela krvna zrnca nisu u potpunosti razvijena i nazivaju se blastima ili ćelijama leukemije. Limfomi i leukemije su deo šire grupe tumora hematopoetskog i limfoidnog tkiva.
[0020] Za potrebe ovog pronalaska, termini „neoplazma“, „tumor“ i „rak“ mogu se koristiti naizmenično, a obuhvataju i primarne tumore / karcinome i sekundarne tumore / karcinome (ili „metastaze“), kao i neoplazme koje formiraju masu (tumore) i limfoidne neoplazme (kao što su limfomi i leukemije), kao i MRD.
[0021] Termin „minimalna rezidualna bolest“ (MRD) odnosi se na dokaze o prisustvu malog broja rezidualnih ćelija karcinoma koje ostaju u pacijentu nakon lečenja karcinoma, npr. kada je pacijent u remisiji (pacijent nema simptome ili znakove bolesti). Veoma mali broj preostalih ćelija raka obično se ne može otkriti rutinskim putem jer standardni testovi koji se koriste za procenu ili otkrivanje raka nisu dovoljno osetljivi za detekciju MRD. Danas su dostupni veoma osetljivi molekularno biološki testovi za MRD, kao što su protočna citometrija, PCR i sekvenciranje sledeće generacije. Ovi testovi mogu da mere minimalne nivoe ćelija raka u uzorcima tkiva, ponekad i do jedne ćelije raka u milion normalnih ćelija. U kontekstu ovog pronalaska, pojmovi „prevencija“, „lečenje“ ili „melioracija“ neoplazme predviđeni su i da obuhvataju „prevenciju, lečenje ili melioraciju MRD“, bez obzira da li je MRD detektovan ili ne.
[0022] Da li je predviđeno da BCMA pozitivna neoplazma je neoplazma B ćelija ili neoplazma plazma ćelija. B ćelije, poznate i kao B limfociti, su vrsta belih krvnih zrnaca podtipa limfocita. Funkcionišu u humoralnoj komponenti imuniteta adaptivnog imunog sistema lučenjem antitela. Pored toga, B ćelije predstavljaju antigen (takođe se klasifikuju kao profesionalne ćelije koje predstavljaju antigen) i luče citokine. Kod sisara B ćelije sazrevaju u koštanoj srži, koja je u srži većine kostiju. B ćelije, za razliku od druge dve klase limfocita - T ćelija i prirodnoubilačkih ćelija (NK) - eksprimiraju receptore B ćelija (BCR) na svojoj ćelijskoj membrani. BCR omogućavaju B ćeliji da se veže za određeni antigen, protiv koga će pokrenuti odgovor antitela. Plazma ćelije, takođe nazvane plazma B ćelije, plazmociti ili efektorske B ćelije, su bela krvna zrnca koja luče velike količine antitela. Obično se transportuju krvnom plazmom i limfnim sistemom. Plazma ćelije potiču iz koštane srži. B ćelije se diferenciraju u plazma ćelije koje proizvode molekule antitela blisko modelirane po receptorima prekursorske B ćelije. Kada se oslobode u krv i limfu, ovi molekuli antitela se vezuju za ciljni antigen i iniciraju njegovu neutralizaciju ili uništavanje.
[0023] Nivo ekspresije BCMA na površini ćelije može se odrediti npr. putem analize protočnom citometrijom. Subpopulacija ćelija (npr. B ćelije, plazma ćelije, MM ćelije, CD138+ ćelije) koja je izabrana za analizu ekspresije BCMA može se npr. obojiti anti-BCMA antitelima, nakon čega sledi sekundarno antitelo, a zatim analizirati u FACS testu. Kao kontrola se može koristiti BCMA negativna ćelijska linija (kao što su K562, A549, TC71, CCRF-CEM). Pomeraj u FACS testu (sa negativnom ćelijskom linijom BCMA koja definiše ekspresiju BCMA od 0%) ukazuje na to da su ćelije koje treba analizirati pozitivne na BCMA. Na površinskim ćelijama mogu postojati različiti nivoi ekspresije BCMA, kao što su niska, srednja ili visoka ekspresija. Vidi takođe Quinn et al., Blood (2011) 117:890-901 i Sanchez et al, Br J Heamatol 2012 Jul 18.
[0024] „BCMA pozitivna neoplazma“ ili „(BCMA pozitivna) B ćelijska neoplazma ili neoplazma plazma ćelija“ može se izabrati iz grupe koja uključuje, ali nije ograničena na, multipli mijelom, relapsni i/ili refraktorni multipli mijelom, multipli mijelom teškog lanca, multipli mijelom lakog lanca, ekstramedularni mijelom (ekstramedularni plazmacitom, ekstramedularni multipli mijelom), plazmacitom, leukemiju plazma ćelija, Waldenströmovu makroglobulinemiju (limfoplazmacitni limfom) i tinjajući mijelom (tinjajući multipli mijelom). Ovaj pronalazak se stoga odnosi i na konstrukt antitela za upotrebu u lečenju ili ublažavanju multiplog mijeloma (MM), plazmacitoma, leukemije plazma ćelija i Waldenströmove makroglobulinemije, kao što je ovde opisano. MM se može izabrati iz grupe koju čine ili se sastoji od relapsirajućeg i/ili refraktornog multiplog mijeloma, multiplog mijeloma teškog lanca, multiplog mijeloma lakog lanca, ekstramedularnog multiplog mijeloma i tinjajućeg multiplog mijeloma.
[0025] Konstrukt antitela pronalaska (i farmaceutski sastav koji se sastoji od takvog konstrukta antitela) je/su korisni u lečenju i/ili ublažavanju BCMA pozitivne neoplazme kako je ovde opisano kod humanog ispitanika kome je to potrebno. Termin „lečenje“ se odnosi i na terapijsko lečenje i na profilaktičke ili preventivne mere. Lečenje uključuje primenu konstrukta antitela (ili farmaceutskog sastava koji se sastoji od takvog konstrukta antitela) na telo pacijenta, izolovano tkivo ili ćeliju pacijenta ili ispitanika kome je potrebno i koji ima BCMA pozitivnu neoplazmu kao što je ovde opisano, simptom takve neoplazme ili predispoziciju prema takvoj neoplazmi, sa svrhom izlečenja, zarastanja, ublažavanja, izmene, otklanjanja, ublažavanja, poboljšanja ili uticaja na BCMA pozitivnu neoplazmu, jedan ili više simptoma BCMA pozitivne neoplazme ili predispoziciju prema bolesti.
[0026] Termini „ispitanik u potrebi“, „pacijent“ ili oni „kojima je potrebno lečenje“ uključuju one koji već imaju BCMA pozitivnu neoplazmu, kao i one u MRD okruženju i one u kojima se neoplazma sprečava. Termini takođe uključuju humane ispitanike koji primaju ili profilaktičko ili terapijsko lečenje.
[0027] Termin „melioracija“ koji se ovde koristi odnosi se na svako poboljšanje stanja bolesti (bolest je BCMA pozitivna neoplazma) pacijenta, primenom konstrukta antitela prema pronalasku na takvog pacijenta ili ispitanika kome je to potrebno. Takvo poboljšanje se može posmatrati kao usporavanje progresije ili zaustavljanje progresije bolesti pacijenta, i/ili kao smanjenje težine simptoma bolesti, povećanje učestalosti ili trajanja perioda bez simptoma bolesti ili sprečavanje oštećenja ili invaliditeta usled bolesti.
[0028] Termin „prevencija“ kako se ovde koristi znači izbegavanje pojave ili relapsa bolesti kako je ovde navedeno, primenom konstrukta antitela prema pronalasku na ispitaniku kome je to potrebno.
[0029] U slučaju multiplog mijeloma, simptomi i znaci se veoma razlikuju jer bolest može uticati na mnoge organe. Uobičajeni simptomi multiplog mijeloma uključuju povišene nivoe kalcijuma, bubrežnu insuficijenciju, anemiju i koštane lezije (zajedno, karakteristike "CRAB"). Kod uznapredovalog MM može doći do bola u kostima, krvarenja i čestih infekcija. Komplikacije mogu uključivati i amiloidozu. Međunarodna radna grupa za mijelom (IMWG) uspostavila je kriterijume za dijagnozu MM koji, pored klasičnih karakteristika CRAB, podučavaju o tri „događaja koji definišu mijelom“ (MDE):
- 60% ili više klonskih plazma ćelija na pregledu koštane srži
- Odnos uključenog / neuključenog slobodnog lakog lanca u serumu od 100 ili više, pod uslovom da je apsolutni nivo uključenog lakog lanca najmanje 100 mg/l ("uključeni" slobodni laki lanac pacijenta - bilo kapa ili lambda - je onaj koji je iznad normalnog referentnog opsega; "neuključeni" slobodni laki lanac je onaj koji je obično u normalnom opsegu ili ispod njega)
- Više od jedne fokalne lezije na MR koja je veličine najmanje 5 mm ili veća. Prisustvo najmanje jednog od ovih markera smatra se dovoljnim za dijagnozu multiplog mijeloma, bez obzira na prisustvo ili odsustvo simptoma ili karakteristika CRAB. Pogledajte i Palumbo A. J Clin Oncol.2014 Feb 20; 32(6): 587-600.
[0030] Bol u kostima pogađa skoro 70% pacijenata i najčešći je simptom. Obično zahvata kičmu i rebra. Uključivanje pršljenova može dovesti do kompresije kičmene moždine ili kifoze.
1
Bolest kostiju mijeloma je posledica prekomerne ekspresije aktivatora receptora za nuklearni faktor κB ligand (RANKL) od strane strome koštane srži. RANKL aktivira osteoklaste, koji resorbuju kost. Rezultirajuće lezije kostiju su litičke (tj. izazivaju raspad) prirode i najbolje se vide na običnim rendgenskim snimcima. Razgradnja kosti takođe dovodi do oslobađanja kalcijuma u krv, što dovodi do hiperkalcemije i njenih povezanih simptoma.
[0031] Anemija koja se nalazi u mijelomu je obično normocitna i normohromna. Nastaje zamenom normalne koštane srži infiltracijom tumorskih ćelija i inhibicijom normalne proizvodnje crvenih krvnih zrnaca (hematopoeza) citokinima.
[0032] Biopsija koštane srži se može izvršiti kako bi se procenio procenat koštane srži koju zauzimaju plazma ćelije. Ovaj procenat se koristi u dijagnostičkim kriterijumima za MM. Obično, MM pacijenti imaju ≥ 10% klonskih plazma ćelija koštane srži. Imunohistohemija (bojenje određenih tipova ćelija korišćenjem antitela protiv površinskih proteina) može detektovati plazma ćelije koje eksprimiraju imunoglobulin u citoplazmi i povremeno na površini ćelije; na primer, ćelije mijeloma su obično pozitivne na markere CD56, CD38, CD138, CD319, ali mogu biti uključeni i drugi markeri za definisanje ili identifikaciju MM.
[0033] Takozvani „paraprotein“ (takođe nazvan protein mijeloma, monoklonski protein ili M protein) je abnormalni fragment imunoglobulina koji se proizvodi u višku abnormalnom monoklonskom proliferacijom plazma ćelija, obično u MM. U teoriji, MM pacijenti mogu proizvesti sve klase imunoglobulina, ali IgG paraproteini su najčešći, zatim IgA i IgM, dok su IgD i IgE mijelom veoma retki. Pored toga, laki lanci antitela i/ili teški lanci mogu se izlučivati u izolaciji: kapa ili lambda laki lanci ili bilo koja od pet vrsta teških lanaca (alfa, gama, delta, epsilon ili mi (µ)-teški lanci). Ova proliferacija paraproteina ima nekoliko štetnih efekata na telo, uključujući oštećenu imunološku funkciju, abnormalno visoku viskoznost krvi i oštećenje bubrega. Pacijenti bez dokaza o paraproteinu mogu imati "nesekretorni" mijelom (ne proizvode imunoglobuline); oni predstavljaju približno 3% svih MM pacijenata. Prisustvo serumskog i/ili urinarnog paraproteina je pokazatelj MM, osim kod pacijenata sa pravim nesekretornim MM. Kvantitativna merenja paraproteina u urinu i/ili serumu pacijenta mogu se koristiti za uspostavljanje dijagnoze i/ili za praćenje bolesti.
[0034] Otkazivanje bubrega može se razviti i akutno i hronično. Najčešći uzrok otkazivanja bubrega kod MM je zbog proteina koje luče maligne ćelije. Ćelije mijeloma proizvode monoklonske proteine različitih tipova, najčešće imunoglobuline (antitela) i slobodne lake lance, što rezultira abnormalno visokim nivoima ovih proteina (paraproteina) u krvi. U zavisnosti od veličine ovih proteina, oni se mogu izlučiti kroz bubrege, ali bubrezi takođe mogu biti oštećeni njihovim delovanjem. Dalje, povećana resorpcija kosti dovodi do hiperkalcemije i izaziva nefrokalcinozu, čime doprinosi otkazivanju bubrega.
[0035] Najčešće infekcije koje se javljaju kod MM su pneumonija i pijelonefritis. Povećan rizik od infekcije je posledica imunodeficijencije. Iako je nivo ukupnog imunoglobulina obično povišen u MM, većina antitela su neefikasna monoklonska antitela iz klonske plazma ćelije.
[0036] Predviđeno je da primena konstrukta antitela u lečenju ili melioraciji BCMA pozitivne neoplazme kod humanog ispitanika prema pronalasku
- smanjuje nivo paraproteina ili slobodnog lakog lanca u urinu i/ili serumu za najmanje oko 20%, najmanje oko 30%, najmanje oko 40%, najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, ili najmanje oko 90% u odnosu na nivo paraproteina ili slobodnog lakog lanca u urinu i/ili serumu, respektivno, pre početka lečenja, odnosno pre prve primene konstrukta antitela („pre“, u ovom specifičnom kontekstu, znači u roku od 1, 2, 4, 6, 8 ili 12 sati pre, u roku od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 dana pre, u roku od 1, 2, 3 ili 4 nedelje pre, ili u roku od 1, 2, 3 ili 4 meseca pre);
- smanjuje procenat plazma ćelija u koštanoj srži za najmanje oko 20%, najmanje oko 30%, najmanje oko 40%, najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, ili najmanje oko 90% u odnosu na procenat plazma ćelija u koštanoj srži pre početka lečenja, tj. pre prve primene konstrukta antitela („pre“, u ovom specifičnom kontekstu, znači u roku od 1, 2, 4, 6, 8 ili 12 sati pre, u roku od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 dana pre, u roku od 1, 2, 3 ili 4 nedelje pre, ili u roku od 1, 2, 3 ili 4 meseca pre); - indukuje smanjenje bilo kog od gore opisanih simptoma za najmanje oko 20%, najmanje oko 30%, najmanje oko 40%, najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, ili najmanje oko 90% u odnosu na simptome pre početka lečenja, tj. na prvu primenu konstrukta antitela („pre“, u ovom specifičnom kontekstu, znači u roku od 1, 2, 4, 6, 8 ili 12 sati pre, u roku od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 dana pre, u roku od 1, 2, 3 ili 4 nedelje pre, ili u roku od 1, 2, 3 ili 4 meseca pre, u zavisnosti od simptoma);
- inhibira rast tumora ili proliferaciju tumorskih ćelija za najmanje oko 20%, najmanje oko 30%, najmanje oko 40%, najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, ili najmanje oko 90% u odnosu na nelečene pacijente ili u odnosu na nelečene ćelije; i/ili
- indukuje lizu ćelija BCMA pozitivne neoplazme od najmanje oko 20%, najmanje oko 30%, najmanje oko 40%, najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, ili najmanje oko 90% u odnosu na nelečene pacijente ili u odnosu na nelečene ćelije.
[0037] Sposobnost konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku da inhibira rast tumora/proliferaciju tumorskih ćelija ili da izazove lizu ćelija može se proceniti na životinjskom modelu koji predviđa efikasnost kod humanih tumora, ili u in vitro ili ex vivo studiji (kao što je osiromašenje BCMA pozitivnih ćelija autolognim T ćelijama iz BM aspirata pacijenta sa multiplim mijelomom indukovanog konstruktom antitela). Procene efikasnosti konstrukta antitela mogu se dalje vršiti na sledeći način: Procena tumora može se vršiti analizom procenta uključenosti mijeloma, od strane FISH (fluorescentna in situ hibridizacija), kao i kariotipizacijom u koštanoj srži (BM). Podaci za kariotipizaciju BM i FISH mogu se dobiti iz uzorka BM. Elektroforeza proteina u serumu (SPEP) i elektroforeza proteina u urinu (UPEP) omogućavaju merenje M proteina u serumu / urinu. Imunofiksacija je još jedno sredstvo za detekciju M proteina u serumu i/ili urinu. Takođe je predviđeno da se može izvršiti test slobodnog lakog lanca u serumu i analiza odnosa. U slučaju multiplog mijeloma slobodnog lakog lanca (FLC), FLC se može analizirati u serumu i urinu (sFLC i uFLC). Mogu se odrediti nivoi uključene/neuključene FLC, odnos monoklonske lambda-FLC/kapa-FLC i odnos monoklonske kapa-FLC/lambda-FLC. Dalje, može se analizirati i kvantitativni i kvalitativni imunoglobulin (Ig), a može se proceniti i beta-2 mikroglobulin u serumu. Takođe je predviđeno da se može izvršiti ispitivanje skeleta i procena plazmacitoma. Može se izvršiti skrining radi procene ekstramedularnog relapsa pomoću MRI celog tela ili PET/CT. Snimanje prikladno za procenu koštanih lezija uključuje, ali nije ograničeno na, CT skeniranje, MR, PET, PET-CT ili druge metode standardne nege. Takođe je predviđeno da se minimalna rezidualna bolest meri sekvenciranjem sledeće generacije (NGS). U tu svrhu, aspirati koštane srži mogu se prikupiti od ispitanika za koje se sumnja da su osobe sa potpunim odgovorom. Uzorci plazme se mogu dodatno prikupiti od ispitanika u istim vremenskim tačkama kada se prikupljaju uzorci BM MRD, kako bi se procenila izvodljivost detekcije MRD na ctDNK (DNK cirkulišućeg tumora). MRD odgovor se može definisati kao <1 tumorska ćelija /10<4>normalne ćelije u koštanoj srži po FACS koje koriste antitela na citIgλ, citIgκ, CD19, CD56 ili CD138, CD38 i CD45, po
1
potrebi. U jednom otelotvorenju pronalaska, ovi markeri su dovoljan uslov za definisanje tumorske ćelije u kontekstu ovog pronalaska.
[0038] Predviđeno je da se odgovor pacijenta ili ispitanika na primenu konstrukta antitela prema pronalasku meri na jedan od sledećih načina:
- kvantitativno merenje paraproteina (M proteina) ili slobodnog lakog lanca u urinu i/ili serumu;
- određivanje procenta plazma ćelija u koštanoj srži; i/ili
- snimanje (CT, MR) ekstramedularnih manifestacija.
[0039] Pronalazak se odnosi na konstrukt antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena na bazi Fc koji produžava poluživot konstrukta antitela, za upotrebu u lečenju ili ublažavanju BCMA pozitivne neoplazme kod humanog ispitanika, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u minimalnoj dozi od 800 µg/dan u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje tokom prvog ciklusa 1. dana i u jednom ili dva koraka doziranja.
[0040] Konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku se primenjuje u najmanje jednom ciklusu, ali je takođe predviđeno više ciklusa primene kao što su 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 ili više. Termin „najmanje jedan ciklus“ znači „jedan ili više ciklusa“. Prema pronalasku, „jedan ciklus“ odgovara periodu od oko 25 do oko 30 dana, od oko 26 ili 27 do oko 29 dana, poželjno oko 28 dana ili četiri nedelje. Nakon jednog ciklusa može odmah uslediti sledeći ciklus, ali je takođe predviđen interval bez primene između dva ciklusa. Različiti ciklusi primene ne moraju biti potpuno identični. Konkretno, predviđeno je da se prvi ciklus može razlikovati od sledećih ciklusa, posebno u pogledu doze konstrukta antitela.
[0041] Termin „minimalna doza od…“ znači „doza od najmanje … ". Doza konstrukta antitela je između 800 µg dnevno i 12 mg dnevno. Može biti 1000 µg, 1200 µg, 1500 µg, 1600 µg, 2000 µg, 2500 µg, 3000 µg, 3500 µg, 4000 µg, 4500 µg, 5000 µg, 5500 µg, 6000 µg, 6500 µg, 7000 µg, 7500 µg, 8000 µg, 8500 µg, 9000 µg, 9500 µg, 10 mg, 11 mg ili 12 mg dnevno.
[0042] Doza konstrukta antitela koja se primenjuje u prvom ciklusu može biti stabilna tokom celog ciklusa, ili se može povećati u jednom ili dva koraka. U slučaju da postoje jedan ili dva koraka, (najmanje) poslednja doza koja se primenjuje u prvom ciklusu je takozvana "ciljna doza". Predviđeno je da ciljna doza bude između 6500 µg i 12 mg. Ciljna doza može biti npr.
6500 µg, 7000 µg, 7500 µg, 8000 µg, 8500 µg, 9000 µg, 9500 µg, 10 mg, 11 mg ili 12 mg. Predviđeno je da se ciljna doza dostigne 3. dana, 4. dana, 5. dana, 6. dana, 7. dana, 8. dana, 9. dana ili 10. dana prvog ciklusa. U slučaju da postoje jedan ili dva koraka u prvom ciklusu, predviđeno je da prva doza koja se daje 1. dana bude između 800 µg i 1200 µg. U slučaju da postoje dva koraka u prvom ciklusu, predviđeno je da druga doza koju treba primeniti bude između 2500 µg i 5000 µg, poželjno oko 3000 µg ili oko 4500 µg. U slučaju da postoje dva koraka u prvom ciklusu, druga doza se daje 3., 4. ili 5. dana.
[0043] Jedan ciklus se sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela, poželjno četiri pojedinačne primene. Takođe je predviđeno da se prvi ciklus sastoji od tri do šest pojedinačnih primena, poželjno četiri ili pet pojedinačnih primena konstrukta antitela. Predviđeno je da poslednje dve ili tri primene u okviru prvog ciklusa budu u ciljnoj dozi.
[0044] Prema pronalasku, konstrukt antitela kako je ovde definisan primenjuje se tokom prvog ciklusa 1. dana (d1). Predviđeno je da dalji dani primene u prvom ciklusu budu d3 ili d4 ili d5. Predviđeno je da dalji dani primene budu d7 ili d8 ili d9. Predviđeno je da dalji dani primene budu d11 ili d12 ili d13. Predviđeno je da dalji dani primene budu d14 ili d15 ili d16. Predviđeno je da dalji dani primene budu d18 ili d19 ili d20. Predviđeno je da dalji dani primene budu d21 ili d22 ili d23.
[0045] Počevši od drugog ciklusa, predviđeno je da se konstrukt antitela primenjuje u ciljnoj dozi. Predviđeno je da ciljna doza bude između 6500 µg i 12 mg. Ciljna doza može biti npr.
6500 µg, 7000 µg, 7500 µg, 8000 µg, 8500 µg, 9000 µg, 9500 µg, 10 mg, 11 mg ili 12 mg. Predviđeno je da se počev od drugog ciklusa, konstrukt antitela primenjuje u nedeljnim intervalima. Na primer, primena u drugom i svakom narednom ciklusu je na d1, d8 (+/- jedan ili dva dana), d15 (+/- jedan ili dva dana) i d22 (+/- jedan ili dva dana).
[0046] Poželjne šeme primene prikazane su na slikama 1 i 2.
1
[0047] Predviđeno je da konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku ima molekulsku težinu od oko 75 do oko 200 kDa, oko 80 do oko 175 kDa, oko 85 do oko 150 kDa, oko 90 do oko 130 kDa, oko 95 do oko 120 kDa, a poželjno oko 100 do oko 115 kDa ili oko 105 do oko 110 kDa.
[0048] Konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku obuhvata domen koji produžava ili poboljšava poluživot konstrukta. Termin „produžava“ ili „povećava“ može se definisati u odnosu na ili u poređenju sa konstruktom antitela koji ne obuhvata takav domen („HLE domen“). Predviđeno je da je vreme poluživota konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku najmanje dva puta duže od vremena poluživota konstrukta antitela koje ne sadrži treći domen na bazi Fc, ili najmanje pet puta duže, ili najmanje deset puta duže, ili najmanje 20 puta duže.
[0049] Treći domen na bazi Fc može se alternativno definisati kao domen koji obezbeđuje konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku sa „poluživotom“ ili „terminalnim poluživootom“ (T1/2) od oko 3 do oko 14 dana, oko 4 do oko 12 dana, oko 3 ili 4 do oko 10 dana, oko 3 ili 4 do oko 8 dana, ili oko 5 do oko 7 dana. "Poluživot" je vreme potrebno da se količina smanji na polovinu svoje početne vrednosti. Medicinske nauke se odnose na poluživot supstanci ili lekova (ovde: konstrukt antitela) u ljudskom telu, npr. u serumu. Stoga se „poluživot“ ponekad naziva i „poluživot u serumu“. Može se odrediti merenjem koncentracije primenjenog konstrukta antitela u serumu ispitanika. Tipično, eliminacija ili uklanjanje primenjene supstance / leka odnosi se na čišćenje tela biološkim procesima kao što su metabolizam, izlučivanje, uključujući i funkciju bubrega i jetre.
[0050] Konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku će generalno biti dizajniran za specifične puteve i metode primene. Put primene u farmakologiji je put kojim se supstanca unosi u organizam. Putevi primene se generalno klasifikuju prema lokaciji na kojoj se supstanca primenjuje, oni mogu biti topikalni (lokalni), enteralni (efekat supstance na ceo sistem, ali se isporučuju kroz gastrointestinalni trakt) ili parenteralni (sistemsko delovanje supstance, ali se isporučuju putem koji nije gastrointestinalni trakt). U kontekstu ovog pronalaska, putevi primene uključuju topikalne, enteralne i parenteralne puteve. Razlozi za izbor puteva primene leka su regulisani različitim faktorima kao što su:
- Fizičko-hemijska svojstva leka. Fizička svojstva su čvrsto, tečnost i gas. Hemijska svojstva su rastvorljivost, stabilnost, pH, iritacija itd.
1
- Mesto željene radnje: Radnja može biti lokalizovana i pristupačna ili generalizovana i nepristupačna.
- Brzina obima apsorpcije leka iz različitih puteva.
- Stanje pacijenta.
[0051] Konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku (i farmaceutski sastav koji sadrži ovaj konstrukt antitela) je posebno koristan za parenteralnu primenu. Parenteralna primena generalno deluje brže od topikalne ili enteralne primene i često dolazi sa veoma visokom bioraspoloživošću do 100% (posebno u slučaju intravenske primene). Generalno, parenteralna primena uključuje, ali nije ograničena na, intravensku, intracerebralnu, intraarterijsku, intraperitonealnu, intraosealnu i intravezikalnu isporuku.
[0052] Primena prema ovom pronalasku je poželjno intravenska. Parenteralna ili intravenska primena može se izvršiti injekcijom (npr. pomoću igle i šprica) ili infuzijom (npr. preko katetera i sistema pumpe). Stoga je predviđeno da se primena prema ovom pronalasku vrši intravenskom injekcijom ili intravenskom infuzijom. Obično se intravenska infuzija primenjuje putem linije, porta ili katetera (mali, fleksibilni tubus), kao što je centralni venski pristup ili centralni venski kateter (CVC) koji je kateter postavljen u veliku venu, ili periferni venski kateter (PVC), koji je kateter postavljen u perifernu venu. Generalno, kateteri ili linije se mogu postaviti u vene u vratu (unutrašnja jugularna vena), grudima (potključna vena ili aksilarna vena), preponama (femoralna vena) ili kroz vene u rukama (poznate i kao PICC linija ili periferno plasirani centralni kateteri). Centralne IV linije imaju svoje katetere koji se napreduju kroz venu i prazne u veliku centralnu venu, obično gornju šuplju venu, donju šuplju venu ili čak desnu pretkomoru srca. Periferna intravenska (PIV) linija se koristi na perifernim venama (vene u rukama, šakama, nogama i stopalima). Port je centralna venska linija koja nema spoljni konektor; umesto toga, ima mali rezervoar koji je prekriven silikonskom gumom i ugrađuje se ispod kože. Lekovi se primenjuju intermitentno postavljanjem male igle kroz kožu, probijanjem silikona u rezervoar. Kada se igla izvuče, poklopac rezervoara se ponovo zatvara. Poklopac može da primi stotine uboda iglom tokom svog životnog veka.
[0053] Ovaj pronalazak predviđa bolusnu primenu konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku. Bolus je primena diskretne količine medikamenta, leka ili drugog jedinjenja u određenom zanemarljivom vremenu, obično u roku od 1-30 minuta. U većini slučajeva, bolus se daje intravenski. Bolus se obično primenjuje putem injekcije (npr. intravenska bolusna
1
injekcija), ali je moguća i bolusna infuzija (npr. intravenska bolusna infuzija). Kratkotrajna infuzija je infuzija (obično intravenska infuzija), relativno male zapremine (kao što je 50 ml do 500 ml, ili 100 ml do 250 ml), koja se primenjuje u periodu od najviše tri sata, obično od 30 do 60 minuta ili oko 60 minuta. Kratkotrajna (ili kratkotrajna IV) infuzija konstrukta antitela predviđena je ovim pronalaskom.
[0054] Intravenska „intermitentna infuzija“ je infuzija zapremine leka u određenom vremenskom periodu, kao što je 20-120 minuta ili 30-60 minuta, u propisanim intervalima, kao što su svakih 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22 ili 24 sata. Svrha je da se primenjuju male količine lekova u redovnim intervalima. Intermitentni medikament - kao i svaki drugi oblik infuzije - može se primeniti gravitacijom ili putem elektronskog uređaja za infuziju (EID), poznatog i kao infuziona pumpa.
[0055] U slučaju infuzije, infuziona pumpa se može koristiti za infuziju medikamenta (konstrukt antitela) u cirkulacioni sistem pacijenta. Pumpa se obično koristi intravenski, iako su moguće i arterijske i epiduralne infuzije pumpama. Rastvor za infuziju se može pripremiti u kesama za intravensku infuziju i isporučiti putem infuzionih linija. Infuzione pumpe mogu davati tečnosti na načine koji bi bili nepouzdani ako bi se izvodili ručno. Na primer, oni mogu davati injekcije od samo 0,1 ml na sat, injekcije svakog minuta, injekcije sa ponovljenim bolusima, do maksimalnog broja na sat, ili tečnosti čije zapremine variraju u zavisnosti od doba dana. Takođe je moguće da se infuzije primenjuju samo pomoću pritiska koji obezbeđuje gravitacija. Različite vrste infuzija prema ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničene na, bolusnu infuziju, kratkotrajnu infuziju i intermitentnu infuziju. Konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku može se stoga primeniti npr. kao bolusna primena (bolusna injekcija ili bolusna infuzija), kao injekcija ili kao kratkotrajna infuzija, na primer u periodu od oko 30 do oko 90 minuta ili oko 60 minuta.
[0056] Farmaceutski sastavi mogu se primenjivati pomoću medicinskog uređaja. Primeri medicinskih uređaja za primenu farmaceutskih sastava opisani su u američkim patentima br.
4.475.196; 4.439.196; 4.447.224; 4.447, 233; 4.486.194; 4.487.603; 4.596.556; 4.790.824; 4.941.880; 5.064.413; 5.312.335; 5.312.335; 5.383.851; i 5.399.163.
[0057] U kontekstu ovog pronalaska, predviđeno je da se primeni premedikacija pre svake primene konstrukta antitela, posebno tokom prvog ciklusa. Predviđeno je da „pre“, u ovom
1
specifičnom kontekstu, znači u roku od 24 sata, 18 sati, dvanaest sati, šest sati, pet sati, četiri sata ili tri sata, a poželjno u roku od 120, 90, 60 ili 30 minuta pre primene konstrukta antitela. Premedikacija se može npr. primeniti 30-120 ili 30-60 minuta pre primene konstrukta antitela. Takođe je predviđeno da se komedikacija primenjuje istovremeno sa ili nakon početka primene konstrukta antitela u prvom ciklusu, a opciono i istovremeno sa ili nakon početka primene konstrukta antitela u jednom ili više sledećih ciklusa, po potrebi pacijenta. Predviđeno je da „posle“, u ovom specifičnom kontekstu, znači u roku od 24 sata, 18 sati, dvanaest sati, šest sati, pet sati, četiri sata ili tri sata, a poželjno u roku od 120, 90, 60, 30, 20, 15 ili 10 minuta posle početka primene konstrukta antitela. Komedikacija se može npr. primeniti 10-120, 10-60, 10-30 ili 15-20 minuta nakon početka primene konstrukta antitela. Svrha premedikacije ili komedikacije može biti npr. sprečavanje ili smanjenje težine reakcija povezanih sa infuzijom. Premedikacija se preferira u odnosu na komedikaciju.
[0058] Premedikacija ili komedikacija može uključivati bilo koje ili kombinaciju sledećeg:
- Paracetamol (acetaminofen, APAP) ili ekvivalent; poželjno ga je primenjivati oralno (p.o.) ili intravenski; i poželjno ga je primenjivati u dozi od 100-4000 mg, poželjno 200-3000 mg ili 300-2500 mg ili 400-2000 mg ili 500-1500 mg, poželjno 600-1400 mg, 700-1300 mg, 800-1200 mg, 900-1100 mg ili oko 1000 mg p.o. paracetamola (ili ekvivalentna doza za ekvivalentni lek i/ili drugi put primene). Kvalifikovana osoba zna kako da identifikuje ekvivalente paracetamola. Oni uključuju, ali nisu ograničeni na, ibuprofen (primenjuje se npr. u dozi od 100-3200 mg, poželjno 200-3000 mg ili 300-2500 mg ili 400-2000 mg, poželjno 500-1500 mg, 600-1200 mg, 700-1000 mg, 750-900 mg ili oko 800 mg) i metamizol (primenjuje se npr. u dozi od 100-4000 mg, poželjno 200-3000 mg ili 300-2500 mg ili 400-2000 mg, ili oko 500-1000 mg) - Jedan ili više analgetika izabranih između meperidina, dipirona, hidromorfona, fentanila i tramadola
- Antihistaminik, koji se poželjno primenjuje oralno ili intravenski, i koji se poželjno primenjuje u dozi ekvivalentnoj difenhidraminu 50 mg i.v. Kvalifikovana osoba zna kako da identifikuje antihistaminike. Oni uključuju, ali nisu ograničeni na, antihistaminike oralnog, parenteralnog ili rektalnog puta kao što su: azatadin (maksimalna doza npr.4 mg/dan), bromfeniramin (maksimalna doza npr.30 mg/dan), cetirizin (maksimalna doza npr.15 mg/dan), hlorfeniramin (maksimalna doza npr.30 mg/dan), klemastin (maksimalna doza npr. 10 mg/dan), ciproheptadin (maksimalna doza npr. 15 mg/dan), desloratadin (maksimalna doza npr. 7 mg/dan),
1
dekshlorfeniramin (maksimalna doza npr. 15 mg/dan), difenhidramin (maksimalna doza npr. 350/dan), doksilamin (maksimalna doza npr. 180 mg/dan), feksofenadin (maksimalna doza npr. 200 mg/dan), loratadin (maksimalna doza npr. 15 mg/dan), fenindamin (maksimalna doza npr.180 mg/dan)
- Glukokortikoid, koji se poželjno primenjuje oralno ili intravenski, i koji se poželjno primenjuje u dozi ekvivalentnoj 2-20 mg ili 4-16 mg ili 6-12 mg ili 8 mg deksametazona i.v. (ekvivalent koji se odnosi na potentnost glukokortikoida)
[0059] Sve četiri gore navedene supstance ili grupe supstanci mogu se primenjivati kao premedikacija ili komedikacija, ili kombinacija samo dve ili tri supstance, ili samo jedne od četiri supstance. Predviđeno je da doza glukokortikoida (GC) primenjena pre početka drugog ciklusa može biti identična dozi GC primenjenoj pre početka prvog ciklusa, ili može biti smanjena na oko 50% doze primenjene pre početka prvog ciklusa, ili može biti izostavljena za drugi (i potencijalno bilo koji naredni) ciklus. Može se primeniti smanjenje doze GC, npr. ako se konstrukt antitela prema pronalasku dobro podnosi bez značajnih znakova reakcija povezanih sa infuzijom tokom prvog ciklusa. Dalje je predviđeno da se doza može dodatno smanjiti pre početka trećeg i bilo kog narednog ciklusa. Alternativno, dok se GC primenjuje kao premedikacija (i potencijalno komedikacija) pre početka prvog ciklusa, ne primenjuje se premedikacija ili komedikacija GC u drugom, trećem, četvrtom i/ili petom ciklusu. Generalno, doza premedikacije ili komedikacije koja će se koristiti u skladu sa otelotvorenjima ovog pronalaska zavisiće od okolnosti pojedinačnog pacijenta.
[0060] Glukokortokoidi su klasa kortikosteroida, koji su klasa steroidnih hormona. Glukokortikoidi su kortikosteroidi koji se vezuju za glukokortikoidni receptor. Ređi sinonim je glukokortikosteroid. Kortizol (poznat kao hidrokortizon kada se koristi kao lek) je najvažniji ljudski glukokortikoid. Različiti sintetički glukokortikoidi, neki daleko potentniji od kortizola, stvoreni su za terapijsku upotrebu. Oni se razlikuju i po farmakokinetici (npr. faktor apsorpcije, poluživot, volumen distribucije, klirens) i po farmakodinamici (npr. potentnost glukokortikoida ili potentnost mineralokortikoida). Kortizol je standard poređenja za potentnost glukokortikoida. Jedan primer često propisanih zamenskih steroidnih ekvivalenata može biti prednizon (5 mg) = kortizon (25 mg) = deksametazon (0,75 mg) = hidrokortizon (20 mg) = metilprednizolon (4 mg). Ove doze ukazuju na ekvivalentnu farmakološku dozu sistemskih glukokortikoida. Još jedan grafikon za poređenje kortikosteroida koji pokazuje poluživote različitih supstanci može se naći npr. na www.nadf.us/downloads/adrenalhormone.pdf.
2
[0061] Primeri GC koji se koriste kao premedikacija ili komedikacija u ovom otelotvorenju uključuju, ali nisu ograničeni na, kortizon, hidrokortizon, prednizon, prednizolon, metilprednizolon, deksametazon, betametazon, beklometazon, budezonid, triamcinolon, kloprednol, deflazakort, fluokortolon, kortivazol, parametazon, flutikazon, flutikazon propionat, triamcinolon acetonid, kao i njihove kombinacije i/ili farmaceutski prihvatljive derivate. U kontekstu ovog pronalaska, različiti GC se mogu koristiti samostalno ili u kombinaciji. Deksametazon, prednizon i prednizolon su poželjna otelotvorenja GC.
[0062] Predviđeno je da se sve supstance koje već jesu ili će biti klasifikovane kao „glukokortikoid“ mogu koristiti i u kontekstu ovog pronalaska. Takvi budući glukokortikoidi uključuju jedinjenja koja se specifično vezuju za glukokortikoidni receptor i aktiviraju ga. Termin „specifično se vezuje za GC receptor“ znači prema ovom pronalasku da se GC (ili jedinjenje za koje se pretpostavlja da deluje kao GC) povezuje sa (npr. interaguje sa) GC receptorom (takođe poznatim kao NR3C1) u statistički značajnom stepenu u poređenju sa asocijacijom sa proteinima/receptorima generalno (tj. nespecifično vezivanje). Kada se GC receptor veže za glukokortikoide, njegov primarni mehanizam delovanja je regulacija transkripcije gena. U odsustvu GC, glukokortikoidni receptor (GR) se nalazi u citosolu kompleksiranom sa različitim proteinima, uključujući protein toplotnog šoka 90 (hsp90), protein toplotnog šoka 70 (hsp70) i protein FKBP52 (FK506-vezujući protein 52). Vezivanje GC za glukokortikoidni receptor dovodi do oslobađanja proteina toplotnog šoka. Stoga je predviđeno da se budući GC, ili farmaceutski prihvatljiv derivat ili so GC, može vezati za GC receptor i osloboditi gore pomenute proteine toplotnog šoka. Aktivirani GR kompleks zatim pozitivno reguliše ekspresiju antiinflamatornih proteina u nukleusu ili potiskuje ekspresiju proinflamatornih proteina u citosolu sprečavanjem translokacije drugih transkripcionih faktora iz citosola u nukleus.
[0063] Konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku sastoji se od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena zasnovanog na Fc koji produžava (ili poboljšava) poluživot konstrukta antitela.
[0064] Termin „konstrukt antitela“ se odnosi na molekul u kojem se struktura i/ili funkcija zasnivaju/zasnivaju na strukturi i/ili funkciji antitela, npr. molekula imunoglobulina pune dužine. Konstrukt antitela se stoga imunospecifično vezuje za svoju metu ili antigen, i/ili obuhvata domene koji su izvedeni iz ili koji su varijabilni region teškog lanca (VH) i/ili varijabilni region lakog lanca (VL) antitela. Štaviše, konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku obuhvata minimalne strukturne zahteve antitela koji omogućavaju imunospecifično vezivanje za metu. Ovaj minimalni zahtev može se npr. definisati prisustvom najmanje tri CDR lakog lanca (tj. CDR1, CDR2 i CDR3 regiona VL) i/ili tri CDR teškog lanca (tj. CDR1, CDR2 i CDR3 regiona VH), poželjno svih šest CDR.
[0065] U okviru definicije „antitela“ prema pronalasku nalaze se antitela pune dužine, uključujući i kamelidna antitela i druge imunoglobuline generisane biotehnološkim ili proteinskim inženjerskim metodama ili procesima. Ova antitela pune dužine mogu biti na primer monoklonska, rekombinantna, himerna, deimunizovana, humanizovana i humana antitela, kao i antitela drugih vrsta kao što su miš, hrčak, zec, pacov, koza ili ne-humani primati.
[0066] "Konstrukti antitela" za upotrebu prema ovom pronalasku mogu imati opštu strukturu imunoglobulina pune dužine kako se prirodno javlja. Na primer, mogu se sastojati od (najmanje) dva teška lanca antitela pune dužine i dva laka lanca antitela pune dužine. Međutim, s obzirom na to da se konstrukti antitela prema pronalasku sastoje od jednog domena koji se vezuje za BCMA i drugog domena koji se vezuje za CD3, oni se ne javljaju prirodno i značajno se razlikuju po svojoj funkciji od prirodnih proizvoda. Konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku je stoga veštački "hibridni" molekul koji se sastoji od najmanje dva različita domena vezivanja sa različitim specifičnostima.
[0067] „Konstrukti antitela“ za upotrebu prema ovom pronalasku takođe mogu da sadrže fragmente antitela pune dužine, kao što su VH, VHH, VL, (s)dAb, Fv, laki lanac (VL-CL), Fd (VH-CH1), teški lanac, Fab, Fab', F(ab')2ili „r IgG“ („poluantitelo“ koje se sastoji od teškog lanca i lakog lanca). Konstrukti antitela za upotrebu prema pronalasku takođe mogu da sadrže modifikovane fragmente antitela, koji se takođe nazivaju varijantama antitela ili derivatima antitela. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, scFv, di-scFv ili bi(s)-scFv, scFv-Fc, scFvzatvarač, scFab, Fab2, Fab3, dijatela, jednolančana dijatela, tandemska dijatela (Tandab), tandem di-scFv, tandem tri-scFv, "minitela" predstavljena strukturom koja je sledeća: (VH-VL-CH3)2, (scFv-CH3)2, ((scFv) 2-CH3 CH3), ((scFv)2-CH3) ili (scFv-CH3-scFv)2, multitela kao što su triatela ili tetratela i antitela sa jednim domenom kao što su nanotela ili antitela sa jednim varijabilnim domenom koja se sastoje samo od jednog varijabilnog regiona, koji mogu biti VHH, VH ili VL, koja se specifično vezuju za antigen ili metu nezavisno od drugih varijabilnih regiona ili domena. Dalji mogući formati konstrukata antitela za upotrebu prema pronalasku su unakrsna tela, maksi tela, hetero Fc konstrukti, mono Fc konstrukti i scFc konstrukti.
[0068] Štaviše, definicija termina „konstrukt antitela“ uključuje bivalentne i polivalentne / multivalentne konstrukte, koji se specifično vezuju za dve, tri ili više antigenskih struktura, kroz različite domene vezivanja. Konstrukt antitela stoga može imati više valentnosti vezivanja nego specifičnosti, npr. u slučaju kada ima dva domena vezivanja za prvu metu (BCMA) i jedan domen vezivanja za drugu metu (CD3) - ili obrnuto - u kom slučaju je konstrukt trovalentan i bispecifičan. Štaviše, definicija termina „konstrukt antitela“ uključuje molekule koji se sastoje od samo jednog polipeptidnog lanca, kao i molekule koji se sastoje od dva, tri, četiri ili više polipeptidnih lanaca, koji lanci mogu biti ili identični (homodimeri, homotrimeri ili homo oligomeri) ili različiti (heterodimer, heterotrimer ili heterooligomer). Primeri za gore identifikovana antitela i njihove fragmente, varijante, derivate i konstrukte antitela izvedene iz njih opisani su, između ostalog, u Harlow and Lane, Antibodies: A laboratory manual, CSHL Press (1988); Kontermann and Dübel, Antibody Engineering, Springer, 2nd ed.2010; i Little, Recombinant Antibodies for Immunotherapy, Cambridge University Press 2009. Predviđeno je da je konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku jednolančani konstrukt antitela / jednolančani polipeptid.
[0069] Termin „domen vezivanja“ ili „domen koji se vezuje za…“ karakteriše u vezi sa ovim pronalaskom domen konstrukta antitela koji se imunospecifično vezuje za/stupa u interakciju sa / prepoznaje dati epitop na meti ili antigenu (ovde: BCMA u slučaju prvog domena, i CD3 u slučaju drugog domena). Struktura i funkcija prvog domena (vezivanje za BCMA), a poželjno i struktura i/ili funkcija drugog domena (vezivanje za CD3), zasnivaju se/zasnovani su na strukturi i/ili funkciji antitela, npr. molekula imunoglobulina pune dužine. "Domen vezivanja" ili "domen koji se vezuje za..." može stoga obuhvatiti minimalne strukturne zahteve antitela koji omogućavaju imunospecifično vezivanje za metu. Ovaj minimalni strukturni zahtev može se npr. definisati prisustvom najmanje tri CDR lakog lanca (tj. CDR1, CDR2 i CDR3 regiona VL) i/ili tri CDR teškog lanca (tj. CDR1, CDR2 i CDR3 regiona VH), poželjno svih šest CDR. Predviđeno je da drugi domen takođe obuhvata ovaj minimalni strukturni zahtev antitela koji omogućava imunospecifično vezivanje za metu. Poželjnije, drugi domen takođe sadrži najmanje tri CDR lakog lanca (tj. CDR1, CDR2 i CDR3 regiona VL) i/ili tri CDR teškog lanca (tj. CDR1, CDR2 i CDR3 regiona VH), poželjno svih šest CDR. "Domen koji se vezuje za" (ili
2
"domen vezivanja") obično može da sadrži varijabilni region lakog lanca antitela (VL) i varijabilni region teškog lanca antitela (VH); međutim, ne mora da sadrži oba, ali može da sadrži samo jedan od VH ili VL. Fd fragmenti, na primer, često zadržavaju neku funkciju vezivanja antigena u intaktnom domenu vezivanja antigena.
[0070] Primeri za format „domena koji se vezuje za“ (ili „domena vezivanja“) uključuju, ali nisu ograničeni na, antitela pune dužine, fragmente antitela pune dužine (kao što su VH, VHH, VL), (s)dAb, Fv, laki lanac (VL-CL), Fd (VH-CH1), teški lanac, Fab, Fab', F(ab')2ili „r IgG“ („pola antitela“)), varijante antitela ili derivate kao što su scFv, di-scFv ili bi(s)-scFv, scFv-Fc, scFv-zatvarač, scFab, Fab2, Fab3, dijatela, jednolančana dijatela, tandemska dijatela (Tandab), tandem di-scFv, tandem tri-scFv, „mini tela“ (izabrana iz formata kao što su (VH-VL-CH3)2, (scFv-CH3)2, ((scFv)2-CH3 CH3)), ((scFv)2-CH3) ili (scFv-CH3-scFv)2, multitela kao što su triatela ili tetratela i jednodomenska antitela kao što su nanotela ili antitela sa jednim varijabilnim domenom koja sadrže samo jedan varijabilni region koji može biti VHH, VH ili VL. Dalji primeri za format „domena koji se vezuje za“ (ili „domena vezivanja“) uključuju (1) fragment ili varijantu antitela koja se sastoji od VL, VH, CL i CH1 (kao što je Fab); (2) fragment ili varijantu antitela koja se sastoji od dva povezana Fab fragmenta (kao što je F(ab')2); (3) fragment ili varijantu antitela koja se sastoji od VH i CH1(kao što je Fd); (4) fragment ili varijantu antitela koja se sastoji od VL i CL (kao što je laki lanac); (5) fragment ili varijantu antitela koja se sastoji od VL i VH (kao što je Fv); (5) dAb fragment (Ward et al., (1989) Nature 341 : 544-546), koji ima VH domen; (6) varijantu antitela koja se sastoji od najmanje tri izolovana CDR teškog i/ili lakog lanca; i (7) jednolančani Fv (scFv). Primeri za otelotvorenja konstrukata antitela ili domena vezivanja prema pronalasku su npr. opisani u WO 00/006605, WO 2005/040220, WO 2008/119567, WO 2010/037838, WO 2013/026837, WO 2013/026833, US 2014/0308285, US 2014/0302037, WO2014/144722, WO 2014/151910 i WO 2015/048272.
[0071] Termini "(specifično ili imunospecifično) se vezuje za", "(specifično ili imunospecifično) prepoznaje", ili "(specifično ili imunospecifično) reaguje sa" znače prema ovom pronalasku da konstrukt antitela ili domen vezivanja interaguje ili (imuno-)specifično interaguje sa datim epitopom na ciljnom molekulu (antigen), ovde: BCMA, odnosno CD3. Ova interakcija ili asocijacija se javlja češće, brže, sa dužim trajanjem, sa većim afinitetom, ili sa nekom kombinacijom gore navedenog, za epitop na određenoj meti nego za alternativne supstance (neciljne molekule). Zbog sličnosti sekvenci između homolognih proteina kod različitih vrsta, konstrukt antitela ili domen vezivanja koji se imuno specifično vezuje za svoju metu (kao što je humana meta) može, međutim, unakrsno reagovati sa homolognim ciljnim molekulima iz različitih vrsta (kao što su ne-humani primati, npr. makaki). Termin „specifično / imunospecifično vezivanje“ stoga može uključivati vezivanje konstrukta antitela ili domena vezivanja za epitope ili strukturno srodne epitope kod više od jedne vrste.
[0072] U kontekstu ovog pronalaska, termin „epitop“ se odnosi na deo ili region antigena koji je prepoznat / imunospecifično prepoznat od strane domena vezivanja. "Epitop" je antigenski, pa se stoga termin epitop ponekad naziva i "antigena struktura" ili "antigena determinanta". Deo domena vezivanja koji se vezuje za epitop naziva se paratop. Veruje se da na specifično vezivanje utiču specifični motivi u aminokiselinskoj sekvenci vezujućeg domena i antigena. Dakle, vezivanje se postiže kao rezultat njihove primarne, sekundarne i/ili tercijarne strukture, kao i rezultat potencijalnih sekundarnih modifikacija navedenih struktura. Specifična interakcija paratopa sa njegovom antigenom odrednicom može rezultirati jednim vezivanjem navedenog mesta za antigen. U nekim slučajevima, specifična interakcija može alternativno ili dodatno dovesti do inicijacije signala, npr. zbog indukcije promene konformacije antigena, oligomerizacije antigena itd.
[0073] Epitopi proteinskih antigena su podeljeni u dve kategorije, konformacione epitope i linearne epitope, na osnovu njihove strukture i interakcije sa paratopom. Konformacioni epitop se sastoji od diskontinuiranih delova aminokiselinske sekvence antigena. Ovi epitopi stupaju u interakciju sa paratopom na osnovu trodimenzionalnih površinskih karakteristika i oblika ili tercijarne strukture (savijanja) antigena. Metode određivanja konformacije epitopa uključuju, ali nisu ograničene na, rendgensku kristalografiju, dvodimenzionalnu nuklearnu magnetnu rezonancu (2D-NMR) spektroskopiju i označavanje spina usmereno na lokaciju i elektronsku paramagnetnu rezonancu (EPR) spektroskopiju. Nasuprot tome, linearni epitopi stupaju u interakciju sa paratopom na osnovu njihove primarne strukture. Linearni epitop se formira kontinuiranom sekvencom aminokiselina iz antigena i obično uključuje najmanje 3 ili najmanje 4, a češće, najmanje 5 ili najmanje 6 ili najmanje 7, na primer, oko 8 do oko 10 aminokiselina u jedinstvenoj sekvenci.
[0074] Interakcija između domena vezivanja i epitopa ciljnog antigena podrazumeva da domen vezivanja pokazuje primetan ili značajan afinitet za epitop /ciljni antigen (ovde: BCMA, odnosno CD3). Generalno, on dalje ne pokazuje značajan afinitet za proteine ili antigene osim
2
za ciljni antigen (ovde: BCMA / CD3) - bez obzira na gore pomenutu unakrsnu reaktivnost sa homolognim metaama, npr. iz drugih vrsta. "Značajan afinitet" uključuje vezivanje sa afinitetom (konstanta disocijacije, KD) ≤10<-6>M. Poželjno je da se vezivanje smatra specifičnim kada je afinitet vezivanja ≤ 10<-7>M, ≤ 10<-8>M, ≤ 10<-9>M, ≤10<-10>M, ili čak ≤10<-11>M, ili ≤10<-12>M. Da li domen vezivanja (imuno)specifično reaguje ili se vezuje za metu može se lako testirati, npr. upoređivanjem afiniteta navedenog domena vezivanja za njegov željeni ciljni protein ili antigen sa afinitetom navedenog domena vezivanja za ne-ciljane proteine ili antigene (ovde: proteini različiti od BCMA, odnosno CD3). Poželjno, konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku se ne vezuje značajno za proteine ili antigene različite od BCMA, odnosno CD3 (tj. prvi domen se ne vezuje za proteine različite od BCMA i drugi domen se ne vezuje za proteine različite od CD3). Na primer, predviđeno je da se konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku (a preciznije njegov prvi domen) ne vezuje značajno za, ne stupa u interakciju sa, ne prepoznaje niti unakrsno reaguje sa humanim BAFF-R i/ili humanim TACI.
[0075] Ravnotežna konstanta disocijacije (KD) konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku za BCMA može se odrediti pomoću Scatchard ili biakor analize, kao što je opisano npr. u WO 2013/072406. Vrednosti KD za CD3 mogu se npr. odrediti analizom površinske plazmonske rezonance, kao što je opisano npr. u WO 2013/072406. Predviđeno je da konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku ima KD vrednost za BCMA i/ili za CD3 u dvocifrenom ili jednocifrenom nanomolarnom opsegu ili u trocifrenom ili čak dvocifrenom pikomolarnom opsegu.
[0076] Termin „ne vezuje se značajno“ znači da konstrukt antitela ili domen vezivanja ovog pronalaska ne vezuje protein ili antigen osim BCMA ili CD3, tj. pokazuje reaktivnost od ≤30%, poželjno ≤ 20%, poželjnije ≤ 10%, posebno poželjno ≤9%, 8%, 7%, 6% ili 5% sa proteinima ili antigenima osim BCMA ili CD3, pri čemu je vezivanje za BCMA, odnosno CD3, postavljeno kao 100%.
[0077] Prema jednom otelotvorenju konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku, prvi i/ili drugi domen su u formatu scFv. U scFv, VH region i VL region su raspoređeni u redosledu VH-VL ili VL-VH (od N- do C-terminusa). Predviđeno je da su VH i VL regioni prvog i/ili drugog vezivnog domena povezani preko linkera, poželjno peptidnog linkera. Prema jednom otelotvorenju prvog i/ili drugog domena, VH-region je pozicioniran N-terminalno od linkera, a VL-region je pozicioniran C-terminalno od linkera. Dalje je predviđeno da su prvi domen i drugi domen konstrukta antitela povezani preko linkera, poželjno peptidnog linkera.
2
Linkeri su poželjno peptidni linkeri, poželjnije kratki peptidni linkeri. Primeri su prikazani u SEQ ID NO: 686-699. U sadašnjem kontekstu, "kratki" linker ima između 2 i 50 aminokiselina, poželjno između 3 i 35, između 4 i 30, između 5 i 25, između 6 i 20 ili između 6 i 17 aminokiselina. Linker između dva varijabilna regiona jednog domena vezivanja može imati različitu dužinu (npr. može biti duži) od linkera između dva domena vezivanja. Na primer, linker između dva varijabilna regiona jednog domena vezivanja može imati dužinu između 7 i 15 aminokiselina, poželjno između 9 i 13, a linker između dva domena vezivanja može imati dužinu između 3 i 10 aminokiselina, poželjno između 4 i 8. Dalje je predviđeno da su peptidni linkeri glicinski/serinski linkeri, kao što su oni prikazani u SEQ ID NO: 687, 689-699.
[0078] Predviđeno je za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da
a) konstrukt antitela je jednolančani polipeptid,
b) prvi domen je u formatu scFv,
c) drugi domen je u formatu scFv, i/ili
d) prvi i drugi domen su povezani preko linkera, poželjno peptidnog linkera, poželjno glicin/serin linkera.
[0079] Prvi domen konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku vezuje se za BCMA (antigen sazrevanja B ćelija, TNFRSF17, CD269). Još poželjnije, vezuje se za BCMA na površini ciljne ćelije. "Ciljna ćelija" može biti bilo koja prokariotska ili eukariotska ćelija koja eksprimira BCMA na svojoj površini; poželjno je da ciljna ćelija je ćelija koja je deo ljudskog ili životinjskog tela, kao što je specifična BCMA ćelija koja eksprimira kanceroznu ili tumorsku ćeliju ili ćeliju BCMA pozitivne neoplazme. Dalje se predviđa da se prvi domen vezuje za humani BCMA, poželjno za ljudski BCMA na površini ciljne ćelije. Takođe je predviđeno da se prvi domen vezuje za makaki BCMA, poželjno za makaki BCMA na površini ciljne ćelije. Poželjna aminokiselinska sekvenca za humani BCMA je prikazana u SEQ ID NO: 647, za makaki BCMA u SEQ ID NO: 648, za ekstracelularni domen humanog BCMA u SEQ ID NO: 649, za ekstracelularni domen makaki BCMA u SEQ ID NO: 650.
[0080] U jednom otelotvorenju ovog pronalaska, prvi domen konstrukta antitela se vezuje za epitopski klaster 3 BCMA. Još poželjnije, vezuje se za epitopski klaster 3 humanog BCMA. Poželjna aminokiselinska sekvenca za epitopski klaster 3 humanog BCMA prikazana je u SEQ ID NO: 651. Konstrukti antitela koji imaju domene koji se vezuju za navedeni epitopski klaster
2
3 BCMA detaljno su opisani u WO 2013/072406. Ovi konstrukti antitela su prikazani u WO 2013/072406 da imaju veoma koristan odnos epitopa i aktivnosti.
[0081] Metoda za mapiranje epitopa BCMA se koristi u WO 2013/072406 i opisana je u sledećem: Jedan ili više unapred definisanih regiona (svaki u obliku kontinuirane aminokiselinske deonice) unutar ekstracelularnog domena humanog BCMA je izmenjen / zamenjen odgovarajućim regionom molekula BCMA glodara (kao što je mišji BCMA, ali su i druge vrste glodara takođe zamislive, sve dok domen vezivanja nije unakrsno reaktivan sa vrstama glodara koje se koriste). Ove humane BCMA/ glodarske (mišje) BCMA himere eksprimirane su na površini ćelija domaćina (kao što su CHO ćelije). Vezivanje antitela ili konstrukta antitela može se testirati FACS analizom. Kada se vezivanje antitela ili konstrukta antitela za himerni molekul potpuno ukine, ili kada se primeti značajno smanjenje vezivanja, može se zaključiti da je region humanog BCMA koji je uklonjen iz ovog himernog molekula relevantan za prepoznavanje imunospecifičnih epitop-paratopa. Navedeno smanjenje vezivanja je poželjno najmanje 10%, 20%, 30%, 40% ili 50%; poželjnije najmanje 60%, 70% ili 80%, a najpoželjnije 90%, 95% ili čak 100% u poređenju sa vezivanjem za humani (divlji tip) BCMA, pri čemu je vezivanje za humani BCMA postavljeno na 100%. Alternativno ili dodatno, gore opisana analiza mapiranja epitopa može se modifikovati uvođenjem jedne ili više tačkastih mutacija u sekvencu ekstracelularnog domena BCMA.
[0082] Dalje je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 i region VL koji se sastoji od CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 izabranih između:
(1) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 1, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 2, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 3, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 4, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 5 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 6;
(2) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 11, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 12, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 13, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 14, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 15 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 16;
(3) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 21, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 22, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 23, CDR-L1 kao što je
2
prikazano u SEQ ID NO: 24, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 25 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 26;
(4) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 31, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 32, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 33, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 34, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 35 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 36;
(5) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 41, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 42, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 43, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 44, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 45 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 46;
(6) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 51, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 52, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 53, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 54, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 55 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 56;
(7) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 61, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 62, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 63, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 64, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 65 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 66;
(8) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 71, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 72, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 73, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 74, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 75 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 76;
(9) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 81, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 82, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 83, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 84, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 85 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 86;
(10) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 91, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 92, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 93, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 94, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 95 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 96;
(11) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 101, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 102, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 103, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 104, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 105 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 106;
2
(12) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 111, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 112, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 113, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 114, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 115 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 116;
(13) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 121, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 122, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 123, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 124, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 125 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 126;
(14) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 131, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 132, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 133, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 134, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 135 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 136;
(15) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 141, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 142, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 143, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 144, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 145 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 146;
(16) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 151, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 152, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 153, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 154, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 155 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 156;
(17) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 161, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 162, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 163, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 164, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 165 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 166;
(18) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 171, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 172, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 173, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 174, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 175 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 176;
(19) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 181, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 182, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 183, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 184, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 185 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 186;
(20) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 191, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 192, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 193, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 194, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 195 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 196;
(21) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 201, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 202, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 203, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 204, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 205 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 206;
(22) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 211, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 212, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 213, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 214, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 215 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 216;
(23) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 221, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 222, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 223, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 224, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 225 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 226;
(24) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 231, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 232, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 233, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 234, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 235 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 236;
(25) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 241, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 242, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 243, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 244, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 245 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 246;
(26) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 251, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 252, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 253, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 254, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 255 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 256;
(27) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 261, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 262, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 263, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 264, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 265 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 266;
(28) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 271, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 272, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 273, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 274, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 275 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 276;
1
(29) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 281, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 282, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 283, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 284, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 285 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 286;
(30) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 291, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 292, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 293, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 294, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 295 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 296;
(31) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 301, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 302, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 303, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 304, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 305 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 306;
(32) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 311, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 312, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 313, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 314, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 315 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 316;
(33) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 321, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 322, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 323, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 324, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 325 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 326;
(34) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 331, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 332, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 333, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 334, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 335 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 336;
(35) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 341, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 342, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 343, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 344, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 345 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 346;
(36) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 351, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 352, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 353, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 354, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 355 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 356;
(37) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 361, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 362, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 363, CDR-L1 kao što
2
je prikazano u SEQ ID NO: 364, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 365 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 366;
(38) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 371, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 372, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 373, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 374, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 375 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 376;
(39) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 381, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 382, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 383, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 384, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 385 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 386;
(40) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 391, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 392, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 393, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 394, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 395 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 396;
(41) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 401, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 402, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 403, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 404, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 405 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 406;
(42) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 411, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 412, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 413, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 414, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 415 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 416;
(43) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 421, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 422, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 423, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 424, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 425 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 426;
(44) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 431, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 432, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 433, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 434, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 435 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 436;
(45) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 441, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 442, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 443, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 444, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 445 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 446;
(46) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 451, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 452, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 453, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 454, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 455 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 456;
(47) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 461, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 462, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 463, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 464, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 465 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 466;
(48) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 471, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 472, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 473, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 474, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 475 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 476;
(49) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 481, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 482, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 483, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 484, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 485 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 486;
(50) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 491, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 492, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 493, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 494, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 495 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 496;
(51) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 501, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 502, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 503, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 504, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 505 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 506;
(52) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 511, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 512, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 513, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 514, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 515 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 516; i
(53) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 521, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 522, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 523, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 524, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 525 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 526.
4
[0083] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata region VL koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 8, 18, 28, 38, 48, 58, 68, 78, 88, 98, 108, 118, 128, 138, 148, 158, 168, 178, 188, 198, 208, 218, 228, 238, 248, 258, 268, 278, 288, 298, 308, 318, 328, 338, 348, 358, 368, 378, 388, 398, 408, 418, 428, 438, 448, 458, 468, 478, 488, 498, 508, 518, i 528. Predviđeno je da prvi domen obuhvata region VL koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 178.
[0084] Dalje je predviđeno da prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata region VH koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207, 217, 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 307, 317, 327, 337, 347, 357, 367, 377, 387, 397, 407, 417, 427, 437, 447, 457, 467, 477, 487, 497, 507, 517, i 527. Predviđeno je da prvi domen obuhvata region VL koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 177.
[0085] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata region VH i region VL izabran iz grupe koja se sastoji od
(1) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 7 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 8;
(2) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 17 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 18;
(3) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 27 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 28;
(4) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 37 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 38;
(5) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 47 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 48;
(6) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 57 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 58;
(7) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 67 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 68;
(8) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 77 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 78;
(9) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 87 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 88;
(10) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 97 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 98;
(11) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 107 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 108;
(12) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 117 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 118;
(13) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 127 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 128;
(14) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 137 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 138;
(15) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 147 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 148;
(16) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 157 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 158;
(17) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 167 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 168;
(18) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 177 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 178;
(19) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 187 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 188;
(20) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 197 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 198;
(21) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 207 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 208;
(22) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 217 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 218;
(23) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 227 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 228;
(24) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 237 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 238;
(25) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 247 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 248;
(26) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 257 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 258;
(27) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 267 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 268;
(28) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 277 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 278;
(29) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 287 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 288;
(30) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 297 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 298;
(31) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 307 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 308;
(32) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 317 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 318;
(33) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 327 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 328;
(34) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 337 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 338;
(35) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 347 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 348;
(36) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 357 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 358;
(37) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 367 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 368;
(38) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 377 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 378;
(39) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 387 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 388;
(40) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 397 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 398;
(41) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 407 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 408;
(42) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 417 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 418;
(43) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 427 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 428;
(44) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 437 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 438;
(45) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 447 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 448;
(46) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 457 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 458;
(47) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 467 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 468;
(48) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 477 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 478;
(49) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 487 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 488;
(50) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 497 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 498;
(51) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 507 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 508;
(52) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 517 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 518; i
(53) VH regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 527 i VL regiona kako je prikazan u SEQ ID NO: 528.
[0086] Predviđeno je da prvi domen obuhvata region VH koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 177 i region VL koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 178.
[0087] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 9, 19, 29, 39, 49, 59, 69, 79, 89, 109, 129, 139, 149, 159, 169, 179, 189, 199, 209, 219, 229, 239, 249, 259, 269, 279, 289, 299, 309, 319, 329, 339, 349, 359, 369, 379, 389, 399, 409, 419, 429, 439, 449, 459, 469, 479, 489, 499, 519 i 529. Predviđeno je da prvi domen obuhvata polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 179.
[0088] "T ćelije" ili T limfociti su vrsta limfocita (samo po sebi vrsta belih krvnih zrnaca) koji imaju centralnu ulogu u ćelijski posredovanom imunitetu. Postoji nekoliko podskupova T ćelija, od kojih svaka ima posebnu funkciju. T ćelije se mogu razlikovati od drugih limfocita, kao što su B ćelije i NK ćelije, prisustvom receptora T ćelija (TCR) na površini ćelije. TCR je odgovoran za prepoznavanje antigena vezanih za glavne molekule kompleksa histokompatibilnosti (MHC) i sastoji se od dva različita proteinska lanca. U 95% T ćelija, TCR se sastoji od alfa (α) i beta (β) lanca. Kada se TCR angažuje sa antigenim peptidom i MHC (peptid / MHC kompleks), T limfocit se aktivira nizom biohemijskih događaja posredovanih povezanim enzimima, koreceptorima, specijalizovanim molekulima adaptera i aktiviranim ili oslobođenim transkripcionim faktorima.
[0089] „CD3“ (klaster diferencijacije 3) je koreceptor T ćelija sastavljen od četiri lanca. Kod sisara, CD3 proteinski kompleks sadrži CD3γ (gama) lanac, CD3δ (delta) lanac i dva CD3ε (epsilon) lanca. Ova četiri lanca se asociraju sa T ćelijskim receptorom (TCR) i takozvanim ζ (zeta) lancem za „kompleks T ćelijskih receptora“ i za generisanje aktivacionog signala u T limfocitima. CD3γ (gama), CD3δ (delta) i CD3ε (epsilon) lanci su visoko srodni ćelijski površinski proteini imunoglobulinske superfamilije i svaki od njih sadrži jedan ekstracelularni imunoglobulinski domen. Unutarćelijski repovi molekula CD3 sadrže jedan konzervirani motiv poznat kao aktivacioni motiv na bazi imunoreceptora tirozina (ITAM), koji je od suštinskog značaja za signalni kapacitet TCR. CD3 epsilon molekul je polipeptid koji kod ljudi kodira CD3E gen koji se nalazi na hromozomu 11.
[0090] Preusmerena liza ciljnih ćelija putem regrutovanja T ćelija konstruktom antitela koji se vezuje za CD3 na T ćeliji i za ciljni protein na ciljnoj ćeliji generalno uključuje formiranje citolitičke sinapse i isporuku perforina i granzima. Angažovane T ćelije su sposobne za serijsku lizu ciljnih ćelija i na njih ne utiču imunološki mehanizmi bekstva koji ometaju obradu i prezentaciju peptidnih antigena ili klonsku diferencijaciju T ćelija; vidi, na primer, WO 2007/042261.
[0091] Citotoksičnost posredovana konstruktima antitela BCMA x CD3 može se meriti na različite načine. "Pola maksimalne efikasne koncentracije" (EC50) se obično koristi kao mera potencije biološki aktivnog molekula kao što je konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku. Izražava se u molarnim jedinicama. U ovom slučaju merenja citotoksičnosti, EC50vrednost se odnosi na koncentraciju konstrukta antitela koji indukuje citotoksični odgovor (lizu ciljnih ćelija) na pola puta između početne i maksimalne vrednosti. Efektorske ćelije u testu citotoksičnosti mogu npr. biti stimulisane obogaćene (humane) CD8 pozitivne T ćelije ili nestimulisane (humane) mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC). Ciljne ćelije treba da eksprimiraju BCMA na površini ćelije. Poželjno je da ciljne ćelije eksprimiraju (barem) ekstracelularni domen BCMA na površini ćelije. Ciljne ćelije mogu biti ćelijska linija (kao što je CHO) koja je stabilno ili tranzijentno transficirana sa BCMA, npr. humanim BCMA. Alternativno, ciljne ćelije mogu biti BCMA pozitivna prirodna ekspresiona ćelijska linija, kao što je humana ćelijska linija L363 ili NCI-H929 multiplog mijeloma.
[0092] Odnos efektorske i ciljne ćelije (E:T) u testu citotoksičnosti je obično oko 10:1, ali takođe može varirati. Citotoksična aktivnost BCMA x CD3 konstrukata antitela može se izmeriti u testu oslobađanja 51- hroma (npr. sa vremenom inkubacije od oko 18 sati) ili u testu citotoksičnosti na bazi FACS (npr. sa vremenom inkubacije od oko 48 sati). Predviđene su i izmene vremena inkubacije (citotoksična reakcija). Ostale metode merenja citotoksičnosti su dobro poznate i obuhvataju MTT ili MTS testove, testove na bazi ATP, uključujući bioluminiscentne testove, sulforodamin B (SRB) test, WST test, klonogeni test i ECIS tehnologiju.
[0093] Prema jednom otelotvorenju, citotoksična aktivnost posredovana konstruktima antitela BCMAxCD3 ovog pronalaska meri se u testu citotoksičnosti na bazi FACS. Predviđeno je da EC50vrednost BCMAxCD3 konstrukta antitela je ≤5000 pM ili ≤4000 pM, poželjnije ≤3000 pM ili ≤2000 pM, još poželjnije ≤1000 pM ili ≤500 pM, još poželjnije ≤400 pM ili ≤300 pM, još poželjnije ≤200 pM, još poželjnije ≤100 pM, još poželjnije ≤50 pM, još poželjnije ≤20 pM ili ≤10 pM, i najpoželjnije ≤5 pM. Takođe je predviđeno da konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku ima EC50vrednost u 3-cifrenom, 2-cifrenom ili 1-cifrenom opsegu pg/ml, kako je utvrđeno u testu citotoksičnosti na bazi FACS. Test se može sprovesti sa ćelijskom linijom L363 ili NCI-H929 ili sa BCMA transficiranim CHO ćelijama kao ciljnim ćelijama i stimulisanim obogaćenim (humanim) CD8 pozitivnim T ćelijama ili nestimulisanim (humanim) PBMC kao efektorskim ćelijama. Vidi takođe WO 2013/072406.
4
[0094] Drugi domen konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku vezuje se za CD3. Poželjno, vezuje se za CD3 na površini T ćelije. Dalje se predviđa da se drugi domen vezuje za humani CD3, poželjno za humani CD3 na površini T ćelije. Predviđeno je i da se drugi domen veže za CD3 epsilon. Poželjnije, vezuje se za humani CD3 epsilon, npr. za humani CD3 epsilon na površini T ćelije. Poželjna aminokiselinska sekvenca za ekstracelularni domen humanog CD3 epsilona prikazana je u SEQ ID NO: 653.
[0095] U jednom otelotvorenju ovog pronalaska, drugi domen konstrukta antitela vezuje se za humani CD3 epsilon (ili humani CD3 epsilon na površini T ćelije) i za Callithrix jacchus ili Saimiri sciureus CD3 epsilon. Takođe je predviđeno da se drugi domen veže za ekstracelularni epitop CD3 epsilona, poželjno za ekstracelularni epitop humanog CD3 epsilona. Takođe je predviđeno da se drugi domen vezuje za ekstracelularni epitop humanog i Macaca CD3 epsilon lanca. Jedan poželjni epitop CD3 epsilona se sastoji od aminokiselinskih ostataka 1-27 humanog CD3 epsilon ekstracelularnog domena (vidi SEQ ID NO: 654). Još preciznije, epitop obuhvata najmanje aminokiselinsku sekvencu Gln-Asp-Gly-Asn-Glu. Callithrix jacchus je novi svetski primat koji pripada porodici Callitrichidae, dok je Saimiri sciureus novi svetski primat koji pripada porodici Cebidae. Veziva koja imaju takve karakteristike detaljno su opisana u WO 2008/119567.
[0096] Antitela ili bispecifični konstrukti antitela usmereni protiv (humanog) CD3 ili posebno protiv CD3 epsilona su poznati u struci, a njihove CDR, VH i VL sekvence mogu poslužiti kao osnova za drugi domen vezivanja konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku. Na primer, Kung et al. su 1979. godine prijavili razvoj OKT3 (Ortho Kung T3), prvog mAb koji prepoznaje CD3 (konkretno, epsilonski lanac CD3) na humanim T ćelijama. OKT3 (muromonab) je bilo prvo monoklonsko antitelo mišjeg porekla koje je postalo dostupno za terapiju kod ljudi. Novija anti-CD3 monoklonska antitela uključuju oteliksizumab (TRX4), teplizumab (MGA031), foralumab i visilizumab, a sva su usmerena na epsilonski lanac CD3. Bispecifični konstrukti antitela usmereni protiv (kancerogene) mete i CD3 su takođe razvijeni i (pre)klinički testirani, a njihov domen vezivanja za CD3 (CDR, VH, VL) može poslužiti kao osnova za drugi domen vezivanja konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, Blinatumomab, Solitomab (MT110, AMG 110), Catumaxomab, Duvortuxizumab, Ertumaxomab, Mosunetuzumab, FBTA05 (Bi20, TPBs05), CEA-TCB (RG7802, RO6958688), AFM11 i MGD006 (S80880). Drugi primeri domena vezivanja CD3 su obelodanjeni npr. u patentima US 7.994.289 B2, US 7.728.114 B2, US 7.381.803 B1, US 6.706.265 B1.
[0097] Za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku predviđeno je da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata VL region koji se sastoji od CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 izabranih između:
(a) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 542, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 543 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 544;
(b) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 599, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 600 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 601; i
(c) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 621, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 622 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 623.
[0098] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 izabranih između:
(a) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 534, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 535 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 536;
(b) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 545, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 546 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 547;
(c) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 557, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 558 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 559;
(d) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 568, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 569 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 570;
(e) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 579, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 580 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 581;
(f) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 591, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 592 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 593;
(g) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 602, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 603 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 604;
(h) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 613, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 614 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 615;
(i) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 624, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 625 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 626; i
(j) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638.
[0099] Dalje je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata VL region koji se sastoji od CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 i VH region koji se sastoji od CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 izabranih između:
(a) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 531, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 532, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 533, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 534, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 535 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 536;
(b) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 542, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 543, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 544, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 545, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 546 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 547;
(c) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 554, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 555, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 556, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 557, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 558 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 559;
(d) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 565, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 566, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 567, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 568, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 569 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 570;
(e) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 576, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 577, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 578, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 579, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 580 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 581;
(f) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 588, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 589, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 590, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 591, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 592 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 593;
(g) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 599, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 600, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 601, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 602, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 603 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 604;
4
(h) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 610, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 611, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 612, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 613, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 614 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 615;
(i) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 621, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 622, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 623, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 624, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 625 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 626; i
(j) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 633, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 634, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 635, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638.
[0100] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata region VL koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 550, SEQ ID NO: 551, SEQ ID NO: 584, SEQ ID NO: 585, SEQ ID NO: 629 i SEQ ID NO: 630.
[0101] Dalje je predviđeno da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata region VH koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 537, SEQ ID NO: 538, SEQ ID NO: 548, SEQ ID NO: 549, SEQ ID NO: 560, SEQ ID NO: 561, SEQ ID NO: 571, SEQ ID NO: 572, SEQ ID NO: 582, SEQ ID NO: 583, SEQ ID NO: 594, SEQ ID NO: 595, SEQ ID NO: 605, SEQ ID NO: 606, SEQ ID NO: 616, SEQ ID NO: 617, SEQ ID NO: 627, SEQ ID NO: 628, SEQ ID NO: 639, SEQ ID NO: 640 i SEQ ID NO: 644.
[0102] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata VL region i VH region izabran iz grupe koja se sastoji od
(a) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 539 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 537 ili 538;
(b) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 550 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 548 ili 549;
(c) VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 562 ili 521 i VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 560 ili 561;
(d) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 573 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 571 ili 572;
(e) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 584 ili 585 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 582 ili 583;
(f) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 596 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 594 ili 595;
(g) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 607 ili 585 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 605 ili 606;
(h) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 618 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 616 ili 617;
(i) VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 629 ili 630 i VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 627 ili 628;
(j) VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 641 ili 630 i VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 639 ili 640; i
(k) VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 645 i VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 644.
[0103] Takođe je predviđeno za konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku da drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata ili se sastoji od polipeptida koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 540, 541, 552, 553, 563, 564, 574, 575, 586, 587, 597, 598, 608, 609, 619, 620, 631, 632, 642, 643 i 646.
[0104] Takođe je predviđeno da se konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku konkuriše za vezivanje za CD3 sa:
a) antitelom ili konstruktom antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637, i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638, i region VL koji se sastoji od CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 633, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 634, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 635;
4
b) antitelom ili konstruktom antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 639, i VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 641;
c) konstruktom antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 642; ili
d) konstruktom antitela koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
[0105] Takođe je predviđeno da se konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku vezuje za isti epitop CD3 kao:
a) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637, i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638, i region VL koji se sastoji od CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 633, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 634, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 635;
b) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 639, i VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 641;
c) konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 642; ili
d) konstrukt antitela koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
[0106] Dalje je predviđeno da konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku obuhvata polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, i 530. Predviđeno je da konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku sadrži polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 180.
4
[0107] Takođe je predviđeno da konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku sadrži ili se sastoji od polipeptida koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, i 530, i koji je povezan na svom N-terminusu ili na svom C-terminusu sa oznakom prečišćavanja proteina, poželjno preko peptidne veze (amidna veza). Poželjno je povezivanje oznake prečišćavanja proteina na C-terminusu polipeptida. Predviđeno je da oznaka prečišćavanja proteina bude kratak peptid. Na primer, dužina kratkog peptida može biti 2-30 aminokiselina, 4-25 aminokiselina, 5-20 aminokiselina ili 6-19 aminokiselina. Primeri oznaka prečišćavanja proteina uključuju, ali nisu ograničeni na, epitop AU1 (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 666), epitop AU5 (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 667), oznaku T7 (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 668), oznaku V5 (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 669), oznaku B (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 670), E2 epitop (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 671), FLAG epitop / FLAG oznaku (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 672), oznaku Glu-Glu (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 673 ili 674), oznaku HA, oznaku afiniteta prema histidinu (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 675), HSV epitop (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 676), KT3 epitop (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 677), Myc epitop (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 678), oznaku poliarginina (5-6 Arg ostataka), oznaku poliaspartata (5-16 Asp ostataka), oznaku polihistidina (2-10 His ostataka, obično 6 His ostataka, vidi npr. SEQ ID NO: 662-665), oznaku polifenilalanina (obično 11 Phe ostataka), oznaku S1 (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 679), S-oznaku (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 680), Strep-oznaku (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 681 ili 682), univerzalnu oznaku (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 683), VSV-G (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 684), protein C (npr. kao što je prikazano u SEQ ID NO: 685) i protein A. Poželjna je histidinska oznaka, posebno 6x His oznaka (SEQ ID NO: 663).
[0108] Takođe je predviđeno da se konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku vezuje za isti epitop BCMA kao:
a) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 171, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 172, i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 173, i region VL koji se
4
sastoji od CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 174, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 175, i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 176;
b) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 177, i VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 178;
c) konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 179; ili
d) konstrukt antitela koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
[0109] Bez obzira na to da li se antitelo, konstrukt antitela ili domen vezivanja vezuje za isti epitop BCMA / BCMA na površini ciljne ćelije kao drugo dato antitelo, konstrukt antitela ili domen vezivanja može se meriti različitim analizama, npr. mapiranjem epitopa himernim ili mutiranim BCMA molekulima, kao što je opisano u WO 2013/072406. Druga mogućnost za identifikaciju epitopa unutar mete je test skeniranja alaninima (vidi npr. Morrison KL & Weiss GA. Curr Opin Chem Biol. 2001 Jun;5(3):302-7), gde je svaki ostatak unutar mete (ovde: BCMA) koji treba analizirati zamenjen alaninom, npr. putem mutageneze usmerene na lokaciju. Alanin se koristi zbog svoje neglomazne, hemijski inertne, metil funkcionalne grupe koja ipak oponaša reference sekundarne strukture koje poseduju mnoge druge aminokiseline. Ponekad se glomazne aminokiseline kao što su valin ili leucin mogu koristiti u slučajevima kada se želi očuvanje veličine mutiranih ostataka. Skeniranje alanina se obično postiže mutagenezom usmerenom na lokaciju ili nasumično kreiranjem PCR biblioteke. Pored toga, razvijene su računske metode za procenu termodinamičkih parametara na osnovu teorijskih supstitucija alanina. Podaci se mogu testirati pomoću IR, NMR spektroskopijom, matematičkim metodama, biološkim testovima itd. Ista analiza se, naravno, može primeniti i za druge mete kao što je CD3.
[0110] Takođe je predviđeno da se konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku takmiči za vezivanje za BCMA sa:
a) antitelom ili konstruktom antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 171, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 172, i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 173, i region VL koji se
4
sastoji od CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 174, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 175, i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 176;
b) antitelom ili konstruktom antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 177, i VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 178;
c) konstruktom antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 179; ili
d) konstruktom antitela koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
[0111] Da li ima kompeticije antitela ili konstrukta antitela za vezivanje za BCMA / BCMA na površini ciljne ćelije sa drugim datim antitelima ili konstruktom antitela može se izmeriti u testu kompeticije kao što je kompetitivni ELISA ili kompetitivni test na bazi ćelija (koristeći ćelije koje prirodno eksprimiraju BCMA ili ćelije koje su stabilno ili prolazno transformisane sa BCMA). Takođe se mogu koristiti avidin spregnute mikročestice (perlice). Slično ELISA ploči obloženoj avidinom, kada reaguje sa biotinilisanim proteinom, svaka od ovih perlica može se koristiti kao supstrat na kome se može izvršiti test. Perlica se oblaže antigenom, a zatim se prethodno oblaže prvim antitelom. Dodaje se drugo antitelo i određuje se svako dodatno vezivanje. Očitavanje se odvija putem protočne citometrije. Termin "kompetira za vezivanje", u ovom kontekstu, znači da se javlja kompeticija između dva testirana antitela od najmanje 20%, najmanje 30%, najmanje 40%, najmanje 50%, najmanje 60%, najmanje 70%, najmanje 80% ili najmanje 90%, kako je utvrđeno bilo kojim od gore navedenih testova. Ista analiza se, naravno, može primeniti i za druge mete kao što je CD3.
[0112] Ovde opisani konstrukt antitela sastoji se od trećeg domena na bazi Fc koji produžava ili poboljšava poluživot (ili „poluživot seruma“) konstrukta antitela. Primeri sredstava ili domena za produženje poluživota konstrukata antitela u serumu iz pronalaska uključuju peptide, proteine ili domene proteina, koji su fuzionisani ili na drugi način vezani za konstrukte antitela. Grupa peptida, proteina ili proteinskih domena uključuje peptide koji se vezuju za druge proteine sa poželjnim farmakokinetičkim profilom u ljudskom telu, kao što je serumski albumin (vidi WO 2009/127691). Alternativni koncept takvih peptida koji produžavaju poluživot uključuje peptide koji se vezuju za neonatalni Fc receptor (FcRn, vidi WO 2007/098420), koji se takođe mogu koristiti za konstrukte antitela ovog pronalaska. Koncept
4
vezivanja većih domena proteina ili kompletnih proteina uključuje npr. fuziju humanog serumskog albumina, varijanti ili mutanata humanog serumskog albumina (vidi WO 2011/051489, WO 2012/059486, WO 2012/150319, WO 2013/135896, WO 2014/072481, WO 2013/075066) ili njihovih domena, kao i fuziju konstantnog regiona imunoglobulina (Fc domen) i njihovih varijanti. Takve varijante Fc domena nazivaju se domeni na bazi Fc i mogu se dalje optimizovati/modifikovati kako bi se omogućilo željeno uparivanje dimera ili multimera, radi ukidanja vezivanja Fc receptora (npr., radi izbegavanja ADCC ili CDC) ili iz drugih razloga. Dalji koncept poznat u struci za produženje poluživota supstanci ili molekula u ljudskom telu je pegilacija tih molekula (kao što su konstrukti antitela ovog pronalaska).
[0113] U jednom otelotvorenju, konstrukti antitela prema pronalasku povezani su (npr. putem peptidne veze) sa fuzionim partnerom (kao što je protein, polipeptid ili peptid) u svrhu produženja poluživota konstrukta u serumu. Ovi fuzioni partneri se mogu izabrati između humanog serumskog albumina ("HSA" ili "HALB") kao i njihovih varijanti sekvenci, peptida koji se vezuju za HSA, peptida koji se vezuju za FcRn ("FcRn BP") ili konstrukata koji se sastoje od Fc regiona (izvedenog iz antitela). Generalno, fuzioni partneri mogu biti povezani sa N-terminusom ili C-terminusom konstrukata antitela prema pronalasku, bilo direktno (npr. putem peptidne veze) ili putem peptidnog linkera kao što je (GGGS)n (pri čemu je "n" ceo broj 2 ili veći, npr.2 ili 3 ili 4). Odgovarajući peptidni linkeri prikazani su u SEQ ID NO: 686-694.
[0114] Prema daljem otelotvorenju, treći domen konstrukta antitela na bazi Fc za upotrebu prema pronalasku sastoji se od dva polipeptidna monomera, od kojih se svaki sastoji od šarke, CH2 i CH3 domena, pri čemu su navedena dva polipeptidna monomera međusobno fuzionisana putem peptidnog linkera. Predviđeno je da se navedeni treći domen na bazi Fc sadrži poredak od N-terminala do C-terminala: šarka-CH2-CH3-linker-šarka-CH2-CH3. Aminokiselinske sekvence koje se mogu koristiti za navedeni treći domen na bazi Fc prikazane su u SEQ ID NO: 700-707. Svaki od navedenih polipeptidnih monomera može imati aminokiselinsku sekvencu koja se bira iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 708-715, ili koja je najmanje 90% identična tim sekvencama. U drugom otelotvorenju, prvi i drugi domen konstrukta antitela za upotrebu prema pronalasku fuzionisani su sa trećim domenom na bazi Fc preko peptidnog linkera koji je, na primer, izabran iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693 ili 694.
[0115] U skladu sa ovim pronalaskom, "šarka" je IgG zglobni region. Ovaj region se može identifikovati analogno korišćenjem Kabat numeracije, vidi npr. Kabat pozicije 223-243. U skladu sa prethodnim, minimalni zahtev za "šarku" su aminokiselinski ostaci koji odgovaraju deonici IgG1sekvence od D231 do P243 prema Kabat numeraciji. Termini "CH2" i "CH3" se odnose na konstantne regione teškog lanca imunoglobulina 2 i 3. Ovi regioni se takođe mogu identifikovati analogijom koristeći Kabat numeraciju, vidi npr. Kabat pozicije 244-360 za CH2 i Kabat pozicije 361-478 za CH3. Podrazumeva se da postoje neke varijacije između imunoglobulina u smislu njihovog IgG1 Fc regiona, IgG2 Fc regiona, IgG3 Fc regiona, IgG4 Fc regiona, IgM Fc regiona, IgA Fc regiona, IgD Fc regiona i IgE Fc regiona (vidi, npr., Padlan, Molecular Immunology, 31(3), 169-217 (1993)). Termin Fc region se odnosi na poslednja dva konstantna regiona teškog lanca IgA, IgD i IgG, i poslednja tri konstantna regiona teškog lanca IgE i IgM. Fc region takođe može uključiti N-terminal fleksibilne šarke za ove domene. Za IgA i IgM, Fc region može uključivati lanac J. Za IgG, Fc region obuhvata imunoglobulinske domene CH2 i CH3 i šarku između prva dva domena i CH2. Iako granice Fc regiona imunoglobulina mogu varirati, primer za Fc deo teškog lanca humanog IgG koji sadrži funkcionalnu šarku, CH2 i CH3 domen se može definisati npr. da sadrži ostatke D231 (domena šarke) do P476 (od C-terminusa CH3 domena), ili D231 do L476, respektivno, za IgG4, pri čemu je numerisanje prema Kabatu.
[0116] Konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku stoga može sadržati u poretku N- do C-terminusa:
(a) prvi domen;
(b) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO 687, 693 i 694;
(c) drugi domen;
(d) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693 ili 694;
(e) prvi polipeptidni monomer trećeg domena (koji se sastoji od šarke, CH2 i CH3 domena); (f) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 695, 696, 697, 698 ili 699; i
(g) drugi polipeptidni monomer trećeg domena (koji se sastoji od šarke, CH2 i CH3 domena).
1
[0117] Takođe je predviđeno da konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku sadrži redosled od N- do C-terminusa:
(a) prvi domen koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 9, 19, 29, 39, 49, 59, 69, 79, 89, 109, 129, 139, 149, 159, 169, 179, 189, 199, 209, 219, 229, 239, 249, 259, 269, 279, 289, 299, 309, 319, 329, 339, 349, 359, 369, 379, 389, 399, 409, 419, 429, 439, 449, 459, 469, 479, 489, 499, 519, i 529; pri čemu se peptidni linker sadržan u tim sekvencama i koji ima SEQ ID NO: 694 može zameniti bilo kojim od SEQ ID NO: 686-693 i 695-699;
(b) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 687, 693 i 694;
(c) drugi domen koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 540, 541, 552, 553, 563, 564, 574, 575, 586, 587, 597, 598, 608, 609, 619, 620, 631, 632, 642, 643 i 646; pri čemu se peptidni linker koji je sadržan u okviru tih sekvenci i koji ima SEQ ID NO: 694 može zameniti bilo kojim od SEQ ID NO: 686-693 i 695-699;
(d) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693 i 694; i
(e) treći domen koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koju čine SEQ ID NO: 700-707.
[0118] Stoga, u jednom otelotvorenju, konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku obuhvata redosledom od N- do C-terminusa:
(a) polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, i 530;
(b) linker koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 686; i
(c) treći domen koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO:
700.
[0119] Poželjni konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku sadrži ili se sastoji od polipeptida koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
2
[0120] Konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku, ili jedan ili oba njegova domena vezivanja, može biti „humanizovan“ ili „human“. "Humanizovana" antitela, varijante ili njihovi fragmenti, konstrukti antitela i domeni vezivanja su bazirani na imunoglobulinima uglavnom humanih sekvenci, koji sadrže (a) minimalne sekvence izvedene iz ne-humanog imunoglobulina. U većini slučajeva, humanizovana antitela, varijante ili njihovi fragmenti, konstrukti antitela i domeni vezivanja su na bazi ljudskih imunoglobulina (antitela primaoca) u kojima su ostaci iz hipervarijabilnog regiona ili CDR zamenjeni ostacima iz hipervarijabilnog regiona ili CDR ne-humane vrste (antitelo donora) kao što je glodar (npr. miš, hrčak, pacov ili zec) koji ima željenu specifičnost, afinitet, kapacitet i/ili biološku aktivnost. U nekim slučajevima, ostaci Fv regiona okvira (FR) humanog imunoglobulina se zamenjuju odgovarajućim ne-humanim ostacima. Pored toga, „humanizovana“ antitela, njihove varijante ili fragmenti, konstrukti antitela i domeni vezivanja koji se ovde koriste takođe mogu da sadrže rezidue koji se ne nalaze ni u antitelima primaoca ni u antitelima donora. Ove modifikacije se vrše kako bi se dodatno poboljšao i optimizovao učinak antitela. Humanizovana antitela, varijante ili njihovi fragmenti, konstrukti antitela i domeni vezivanja takođe mogu da obuhvataju najmanje deo konstantnog regiona imunoglobulina (kao što je Fc), obično deo humanog imunoglobulina. Za detalje, vidi Jones et al., Nature, 321: 522-525 (1986); Reichmann et al., Nature, 332: 323-329 (1988); i Presta, Curr. Op. Struct. Biol., 2: 593-596 (1992).
[0121] Odgovori humanih anti-mišjih antitela (HAMA) doveli su do toga da industrija pripremi himerna ili na drugi način humanizovana antitela /konstrukte antitela. Međutim, očekuje se da će biti primećeni određeni odgovori humanog antihimernog antitela (HACA), posebno kod hronične ili višedozne upotrebe antitela ili konstrukta antitela. Stoga bi bilo poželjno obezbediti konstrukte antitela koji se sastoje od humanog domena vezivanja za BCMA i/ili humanog domena vezivanja za CD3, kako bi se poništila zabrinutost i/ili efekti HAMA ili HACA odgovora.
[0122] Stoga, prema jednom otelotvorenju, konstrukt antitela, prvi vezujući domen i/ili drugi vezujući domen su „humani“. Termin „humano antitelo“, „konstrukt humanog antitela“ i „humani domen vezivanja“ uključuje antitela, konstrukte antitela i domene vezivanja, respektivno, koji imaju regione izvedene iz antitela kao što su varijabilni i konstantni regioni ili domeni koji u suštini odgovaraju sekvencama imunoglobulina humane nasledne linije poznatim u struci, uključujući, na primer, one opisane u Kabat et al. (1991) (loc. cit.). Humani konstrukti antitela ili domeni vezivanja pronalaska mogu uključivati aminokiselinske ostatke koji nisu kodirani sekvencama imunoglobulina humane nasledne linije (npr. mutacije uvedene slučajnom ili mesto-specifičnom mutagenezom in vitro ili somatskom mutacijom in vivo), na primer u CDR, a posebno u CDR3. Humani konstrukti antitela ili domeni vezivanja mogu imati najmanje jednu, dve, tri, četiri, pet ili više pozicija zamenjenih aminokiselinskim ostatkom koji nije kodiran sekvencom imunoglobulina humane nasledne linije. Definicija humanih antitela, konstrukta antitela i domena vezivanja kako se ovde koristi takođe razmatra potpuno humana antitela, konstrukte antitela i domene vezivanja koji uključuju samo ne-veštački i/ili genetski izmenjene humane sekvence antitela, jer se one mogu izvesti korišćenjem tehnologija ili sistema kao što je Xenomouse.
[0123] Konstrukti antitela koji se sastoje od najmanje jednog humanog domena vezivanja izbegavaju neke od problema povezanih sa antitelima ili konstruktima antitela koji poseduju ne-humane kao što su glodarske (npr. miš, pacov, hrčak ili zec) varijabilne i/ili konstantne regione. Prisustvo takvih proteina dobijenih od glodara može dovesti do brzog klirensa antitela ili konstrukata antitela ili može dovesti do stvaranja imunog odgovora na antitelo ili konstrukt antitela od strane pacijenta. Da bi se izbegla upotreba konstrukata antitela dobijenih od glodara, humanizovani ili potpuno humani konstrukti antitela mogu se generisati uvođenjem funkcije humanog antitela u glodara tako da glodar proizvodi potpuno humana antitela.
[0124] U nekim otelotvorenjima, konstrukt antitela za upotrebu prema pronalasku je „izolovani“ ili „suštinski čisti“ konstrukt antitela. „Izolovano“ ili „suštinski čisto“, kada se koristi za opisivanje konstrukata antitela koji su ovde obelodanjeni, označava konstrukt antitela koji je identifikovan, izdvojen i/ili rekuperiran iz komponente njegovog proizvodnog okruženja. Poželjno, konstrukt antitela je slobodan ili u suštini slobodan od asocijacije sa svim drugim komponentama iz svog proizvodnog okruženja. Kontaminantne komponente njegovog proizvodnog okruženja, kao što su one koje su rezultat rekombinantnih transficiranih ćelija, su materijali koji obično ometaju dijagnostičku ili terapijsku upotrebu za konstrukt antitela, i mogu uključivati enzime, hormone i druga proteinska ili neproteinska jedinjenja. Podrazumeva se da izolovani ili suštinski čisti konstrukt antitela može predstavljati od 5% do 99,9% težine ukupnog sadržaja proteina / polipeptida u datom uzorku, u zavisnosti od okolnosti. Željeni konstrukt antitela može se proizvesti u značajno većoj koncentraciji upotrebom inducibilnog promotora ili promotora visoke ekspresije. Definicija uključuje proizvodnju konstrukta antitela u širokom spektru organizama i/ili ćelija domaćina koji su poznati u struci. U određenim otelotvorenjima, konstrukt antitela će biti prečišćen (1) do stepena dovoljnog da se dobije
4
najmanje 15 ostataka N-terminalne ili unutrašnje aminokiselinske sekvence korišćenjem Edmanovog sekvenatora, ili (2) do homogenosti pomoću SDS-PAGE pod ne-redukujućim ili redukujućim uslovima upotrebom Coomassie plavog ili, poželjno, srebrnog bojenja. Međutim, obično će izolovani konstrukt antitela biti pripremljeni pomoću najmanje jednog koraka prečišćavanja.
[0125] Prema jednom otelotvorenju, celokupni konstrukt antitela i/ili domeni vezivanja su u obliku jednog ili više polipeptida ili u obliku proteina. Pored proteinskih delova, takvi polipeptidi ili proteini mogu uključivati neproteinske delove (npr. hemijske linkere ili hemijske agense za umrežavanje kao što je glutaraldehid).
[0126] Peptidi su kratki lanci aminokiselinskih monomera povezanih kovalentnim peptidnim (amidnim) vezama. Dakle, peptidi spadaju u široke hemijske klase bioloških oligomera i polimera. Aminokiseline koje su deo peptidnog ili polipeptidnog lanca nazivaju se „ostaci“ i mogu se uzastopno numerisati. Svi peptidi osim cikličkih peptida imaju N-terminalni ostatak na jednom kraju i C-terminalni ostatak na drugom kraju peptida. Oligopeptid se sastoji od samo nekoliko aminokiselina (obično između dve i dvadeset). Polipeptid je duži, kontinuirani i nerazgranati peptidni lanac. Peptidi se razlikuju od proteina na osnovu veličine, a kao proizvoljna referentna vrednost može se shvatiti da sadrže približno 50 ili manje aminokiselina. Proteini se sastoje od jednog ili više polipeptida, obično raspoređenih na biološki funkcionalan način. Dok se aspekti laboratorijskih tehnika koje se primenjuju na peptide u odnosu na polipeptide i proteine razlikuju (npr. specifičnosti elektroforeze, hromatografije, itd.), granice veličine koje razlikuju peptide od polipeptida i proteina nisu apsolutne. Stoga, u kontekstu ovog pronalaska, termini „peptid“, „polipeptid“ i „protein“ mogu se koristiti naizmenično, a često se preferira termin „polipeptid“.
[0127] Polipeptidi mogu dalje formirati multimere kao što su dimeri, trimeri i viši oligomeri, koji se sastoje od više od jednog polipeptidnog molekula. Polipeptidni molekuli koji formiraju takve dimere, trimere itd. mogu biti identični ili neidentični. Odgovarajuće strukture višeg reda takvih multimera se, shodno tome, nazivaju homo- ili heterodimeri, homo- ili heterotrimeri itd. Primer za hereteromultimer je antitelo ili molekul imunoglobulina, koji se, u svom prirodnom obliku, sastoji od dva identična laka polipeptidna lanca i dva identična teška polipeptidna lanca. Termini "peptid", "polipeptid" i "protein" se takođe odnose na prirodno modifikovane peptide / polipeptide / proteine pri čemu se modifikacija postiže npr. post-translacionim modifikacijama kao što su glikozilacija, acetilacija, fosforilacija i slično. "Peptid", "polipeptid" ili "protein" kada se ovde pominju takođe mogu biti hemijski modifikovani kao što je pegilisani. Takve metode su dobro poznate u struci.
[0128] Konstrukt antitela za upotrebu prema ovom pronalasku je obično formulisan u farmaceutskom sastavu ili formulaciji. Materijali farmaceutskog sastava se obično formulišu u koncentracijama koje su prihvatljive za mesto primene. Formulacije i sastavi stoga mogu biti dizajnirani prema pronalasku za isporuku bilo kojim odgovarajućim putem primene.
[0129] Kao što se ovde koristi, termin "farmaceutski sastav" odnosi se na sastav koji je pogodan za primenu pacijentu, poželjno humanom pacijentu. Posebno poželjan farmaceutski sastav se sastoji od jednog ili više konstrukata antitela za upotrebu prema pronalasku, obično u terapijski efikasnoj količini. Farmaceutski sastav može dalje da sadrži odgovarajuće formulacije jednog ili više (farmaceutski efikasnih) nosača, stabilizatora, ekscipijenata, razblaživača, solubilizatora, površinski aktivnih supstanci, emulgatora, konzervansa i/ili adjuvanasa. Prihvatljivi sastojci sastava su obično netoksični za primaoce u primenjenim dozama i koncentracijama. Farmaceutski sastavi uključuju, ali nisu ograničeni na, tečne, smrznute i liofilizovane sastave. Ako je farmaceutski sastav liofilizovan, liofilizovani materijal se prvo rekonstituiše u odgovarajućoj tečnosti pre primene. Liofilizovani materijal se npr. može rekonstituisati u bakteriostatskoj vodi za injekcije (BWFI), fiziološkom rastvoru, fiziološkom rastvoru sa fosfatnim puferom (PBS) ili istoj formulaciji u kojoj je protein bio pre liofilizacije.
[0130] Sastavi mogu sadržati farmaceutski prihvatljiv nosač. Generalno, kako se ovde koristi, „farmaceutski prihvatljiv nosač“ označava sve vodene i nevodene rastvore, sterilne rastvore, rastvarače, pufere, npr. fosfatno puferisani fiziološki rastvor (PBS), vodu, suspenzije, emulzije, kao što su emulzije ulja/vode, različite vrste sredstava za vlaženje, lipozome, disperzione medije i premaze, koji su kompatibilni sa farmaceutskom primenom, posebno sa parenteralnom primenom. Upotreba takvih medija i agenasa u farmaceutskim sastavima dobro je poznata u struci, a sastavi koji se sastoje od takvih nosača mogu se formulisati poznatim konvencionalnim metodama.
[0131] Određeni aspekti ovog obelodanjivanja koji nisu deo pronalaska i samo su prisutni u svrhu ilustracije pružaju samo farmaceutske sastave koji se sastoje od konstrukta antitela pronalaska i dalje jedne ili više pomoćnih supstanci. Pomoćne supstance se mogu koristiti u različite svrhe, kao što je podešavanje fizičkih, hemijskih ili bioloških svojstava formulacija, kao što je podešavanje viskoznosti, i/ili procesa pronalaska radi poboljšanja efikasnosti i/ili stabilizacije takvih formulacija i procesa protiv degradacije i kvarenja, npr. zbog stresova koja se javljaju tokom proizvodnje, transporta, skladištenja, pripreme pre upotrebe, primene i nakon toga. Pomoćne supstance generalno treba koristiti u njihovim najnižim efikasnim koncentracijama.
[0132] U određenim aspektima ovog obelodanjivanja, farmaceutski sastav takođe može da sadrži formulacione materijale / supstance u svrhu modifikacije, održavanja ili očuvanja određenih karakteristika sastava kao što su pH, osmolarnost, viskozitet, bistrina, boja, izotoničnost, miris, sterilnost, stabilnost, brzina rastvaranja ili oslobađanja, adsorpcija ili penetracija (videti, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18" Edition, 1990, Mack Publishing Company).
[0133] Kao što se ovde koristi, oblici jednine "a", "an", i "the" uključuju referente množine, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije. Tako, na primer, pozivanje na "reagens" uključuje jedan ili više takvih različitih reagensa, a pozivanje na "metodu" uključuje pozivanje na ekvivalentne korake i metode poznate običnim stručnjacima, koje bi mogle biti modifikovane ili zamenjene ovde opisanim metodama.
[0134] Osim ako nije drugačije naznačeno, termin „najmanje“ koji prethodi nizu elemenata treba shvatiti tako da se odnosi na svaki element u nizu. Stručnjaci će prepoznati, ili moći da utvrde koristeći samo rutinsko eksperimentisanje, mnoge ekvivalente specifičnim otelotvorenjima pronalaska opisanim ovde.
[0135] Termin "i/ili" gde god se ovde koristi uključuje značenje "i", "ili" i "sve ili bilo koju drugu kombinaciju elemenata povezanih navedenim terminom".
[0136] Termin "oko" ili "približno" kako se ovde koristi znači unutar ±20%, poželjno unutar ±15%, poželjnije unutar ±10%, a najpoželjnije unutar ±5% date vrednosti ili opsega. Uključuje i konkretnu vrednost, npr. „oko 50“ uključuje vrednost „50“.
[0137] U celoj ovoj specifikaciji i patentnim zahtevima, osim ako kontekst ne zahteva drugačije, reč "obuhvatati" i varijacije kao što su "obuhvata" i "koji obuhvata" podrazumevaće uključivanje navedenog celog broja ili koraka ili grupe celih brojeva ili koraka, ali ne i isključivanje bilo kog drugog celog broja ili koraka ili grupe celih brojeva ili koraka. Kada se ovde koristi termin "koji se sastoji" može se zameniti terminom "koji sadrži" ili "uključujući" ili ponekad kada se ovde koristi sa terminom "koji ima".
[0138] Kada se koristi ovde "koji se sastoji od" isključuje bilo koji element, korak ili sastojak koji nije naveden u elementu zahteva. Kada se koristi ovde, "koji se u suštini sastoji od" ne isključuje materijale ili korake koji ne utiču materijalno na osnovne i nove karakteristike patentnog zahteva.
[0139] U svakom slučaju ovde, bilo koji od termina "koji se sastoje", "koji se u suštini sastoje od" i "koji se sastoje od" mogu se zameniti sa bilo kojim od druga dva termina.
[0140] Treba razumeti da gornji opis i dolenavedeni primeri pružaju primere aranžmana, ali ovaj pronalazak nije ograničen na određene metodologije, tehnike, protokole, materijal, reagense, supstance itd., opisane u ovom dokumentu i kao takvi mogu varirati. Terminologija koja se ovde koristi je samo u svrhu opisivanja određenih otelotvorenja i nije namenjena ograničavanju obima ovog pronalaska, koji je definisan isključivo patentnim zahtevima. Aspekti pronalaska dati su u nezavisnim patentnim zahtevima. Neke opcione karakteristike pronalaska date su u zavisnim zahtevima.
[0141] Bolje razumevanje ovog pronalaska i njegovih prednosti dobiće se iz sledećih primera, koji se nude samo u ilustrativne svrhe. Primeri nisu namenjeni i ne treba ih tumačiti tako da ograničavaju obim ovog pronalaska na bilo koji način.
PRIMERI
[0142] Pozadina: AMG 701, molekul HLE BiTE<®>koji se vezuje za BCMA na ćelijama multiplog mijeloma (MM) i CD3 na T ćelijama, ima aktivnost u MM pretkliničkim modelima. Ciljevi ove prve studije uključuju procenu bezbednosti i procenu maksimalne tolerisane doze (MTD) AMG 701 kod pacijenata sa relapsnim/refraktornim (R/R) multiplim mijelomom (NCT03287908).
[0143] Metode: Nedeljne kratkotrajne intravenske infuzije AMG 701 primenjene su u 4-nedeljnim ciklusima sve dok su pacijenti imali koristi, prvo u kohortama sa jednim pacijentom (5, 15, 45 µg), zatim u kohortama ≥3 pacijenta (140, 400, 800, 1200 µg), a moguće i do 10 pacijenata u kohortama sa višim dozama (1600, 3000, 4500, 6500, 9000, 12000 µg). Podobni pacijenti imali su relapsni MM nakon ili netoleranciju na ≥2 linije sa inhibitorom proteazoma, IMiD i anti-CD38 MAb (gde je odobreno i dostupno). Isključeni su bili pacijenti sa isključivo ekstramedularnom bolešću (dozvoljeni u naknadnom povećanju doze), zahvaćenošću CNS, prethodnom terapijom usmerenom na BCMA i imunosupresivnom terapijom. Nakon stadijuma 3 toksičnosti koja ograničava dozu (DLT) sindroma oslobađanja citokina (CRS) pri 1600 µg, za sve ciljne doze ≥1200 µg, dodata je početna uvodna doza od 800 µg, nakon čega je usledio korak do ciljne doze. MRD je definisan kao <1/105 ćelija, mereno prema testu sekvenciranja sledeće generacije koji je odobrila FDA
[0144] Rezultati: 47 pacijenata je primilo AMG 701 u dozama u rasponu od 5 do 6500 µg, sa uvodnom dozom od 800 µg koja se koristi za povećanje do ciljnih doza od ≥1200 µg; pacijenti tek treba da budu uključeni u dodatne planirane doze od 9000 i 12000 µg, vidi takođe Sliku 1. Medijana starosti je bila 62 godine, 21 pacijent (78%) je imao ≥5 prethodnih linija terapije.12 pacijenata je u toku, MTD kako je definisano prema protokolu još uvek nije postignut. Nisu detektovana anti-AMG 701 antitela. Odgovori su uključivali 1 oskudan potpuni odgovor (sCR) na 800 µg i 4 delimična odgovora (PR), 2 PR na 3000 µg, 1 PR na 4500 µg i 1 PR i minimalni odgovor na 6500 µg. Pacijent sa sCR je imao početni PR u 1 mesecu, produbljujući se na sCR u 4,3 meseca; ovaj tekući odgovor je trajao 13,2 meseca, od kojih je 9,8 bilo MRD-negativno.
4 PR su počela sa 1-3,7 meseca (odgovori su prvi put procenjeni sa 1. mesecom), a odgovori su trajali do 4 meseca (tri su u toku).
[0145] Zaključci: U ovoj FIH studiji sa tekućom eskalacijom doze i MTD koji još nije identifikovan, AMG 701, HLE konstrukt antitela koji cilja na CD3 i BCMA, pokazao je ohrabrujuću aktivnost kod pacijenata sa teško prethodno lečenim R/R MM.
[0146] Tabela 1: Rezultati AMG 701 FIH studije. Tabela ne uključuje kohorte sa jednim pacijentom 1-3 od 5, 15 i 45 µg. ukazuje da su odgovori u toku. * Osim za 1 pacijenta sa 1600 µg, tj. pacijenta sa DLT CRS, svi pacijenti koji su primali doze od ≥1200 µg primili su stepenastu dozu od 800 µg pre primanja ciljne doze 5. ili 8. dana. Broj pacijenata koji primaju ciljnu dozu 5. dana je sledeći: 1600 µg (n=3), 3000 µg (n=2) i 4500 µg (n=2); svi ostali pacijenti su primili ciljnu dozu 8. dana.
[0147] Kriterijumi odgovora IMWG za potpuni odgovor (vidi takođe http://imwg.myeloma.org/international-myeloma-working-group-imwg-uniform-responsecriteria-for-multiple-myeloma/) su:
- Negativna imunofiksacija M proteina na serumu i urinu,
- Nestanak bilo kakvih plazmacitoma mekih tkiva, i
- < 5% plazma ćelija u koštanoj srži
[0148] Kriterijumi odgovora IMWG za delimičan odgovor su:
- Elektroforeza M proteina: ≥ 50% smanjenje M-proteina u serumu i smanjenje M-proteina u urinu za ≥90% za 24 sata ili na <200 mg/24 h
- Slobodni laki lanci (FLC): Ako su M protein u serumu i urinu nemerljivi, potrebno je smanjenje od ≥ 50% razlike između nivoa uključenih i neuključenih FLC umesto kriterijuma M-proteina
- Ako su M protein u serumu i urinu nemerljivi, a test sloobodnih lakih lanaca u serumu je takođe nemerljiv, zahteva se smanjenje plazma ćelija od ≥50% umesto M-proteina, pod uslovom da je osnovni procenat plazma ćelija koštane srži ≥30%
- Pored navedenih kriterijuma, ako je prisutno na početku, takođe je potrebno smanjenje veličine plazmacitoma mekog tkiva za ≥50%.
[0149] Kriterijumi odgovora IMWG za veoma dobar delimičan odgovor su:
- M protein u serumu i urinu koji se može detektovati imunofiksacijom, ali ne na elektroforezi ili ≥90% smanjenje nivoa M-proteina u serumu i M-proteina u urinu <100 mg na 24 sata
1
2
4
1
2
4
1
2
4
1
2
4
1
11
12
1
14
1
1
1
1
1
11
11
11
11
11
11
11
12

Claims (30)

Patentni zahtevi
1. Konstrukt antitela koji se sastoji od prvog domena koji se vezuje za BCMA, drugog domena koji se vezuje za CD3 i trećeg domena na bazi Fc koji produžava poluživot konstrukta antitela, za upotrebu u lečenju ili ublažavanju BCMA pozitivne neoplazme kod humanog ispitanika, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u minimalnoj dozi od 800 µg/dan u najmanje jednom ciklusu, pri čemu se jedan ciklus sastoji od najmanje tri pojedinačne primene konstrukta antitela, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje tokom prvog ciklusa 1. dana i u jednom ili dva koraka doziranja.
2. Konstrukt antitela za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 koji se primenjuje tokom 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 ili više ciklusa.
3. Konstrukt antitela za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu jedan ciklus ima 25 do 30 dana, poželjno 26 ili 27 do 29 dana, a poželjnije 28 dana.
4. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje u dozi od 800 µg/dan do 12 mg dnevno, kao što su 1000 µg, 1200 µg, 1500 µg, 1600 µg, 2000 µg, 2500 µg, 3000 µg, 3500 µg, 4000 µg, 4500 µg, 5000 µg, 5500 µg, 6000 µg, 6500 µg, 7000 µg, 7500 µg, 8000 µg, 8500 µg, 9000 µg, 9500 µg, 10 mg, 11 mg ili 12 mg dnevno.
5. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu je prva doza između 800 µg i 1200 µg, opciona druga doza je između 2500 µg i 5000 µg, poželjno 3000 µg ili 4500 µg, a poslednja doza (ciljna doza) je između 6500 µg i 12 mg, kao što je 6500 µg, 7000 µg, 7500 µg, 8000 µg, 8500 µg, 9000 µg, 9500 µg, 10 mg, 11 mg ili 12 mg.
6. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu se prvi ciklus sastoji od tri do šest pojedinačnih primena, poželjno četiri ili pet pojedinačnih primena konstrukta antitela.
7. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od zahteva 2 do 6, pri čemu se konstrukt antitela primenjuje tokom drugog ciklusa i opciono tokom bilo kog narednog ciklusa u konstantnim dozama.
8. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji se primenjuje parenteralno, poželjno intravenski, a poželjnije putem intravenske bolusne injekcije, bolusne infuzije ili kratkotrajne intravenske infuzije.
9. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu je BCMA pozitivna neoplazma izabrana iz grupe koja se sastoji od multiplog mijeloma, relapsirajućeg i/ili refraktornog multiplog mijeloma, multiplog mijeloma teškog lanca, multiplog mijeloma lakog lanca, ekstramedularnog mijeloma, plazmacitoma, leukemije plazma ćelija, Waldenströmove makroglobulinemije i tinjajućeg mijeloma.
10. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu a) konstrukt antitela je jednolančani polipeptid,
b) prvi domen je u formatu scFv,
c) drugi domen je u formatu scFv, i/ili
d) prvi domen i drugi domen su povezani preko linkera, poželjno peptidnog linkera, poželjnije glicinskog/serinskog linkera.
11. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji kompetira za vezivanje za BCMA sa ili koji se vezuje za isti epitop BCMA kao:
a) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 171, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 172, i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 173, i region VL koji se sastoji od CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 174, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 175, i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 176;
b) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 177, i VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 178;
c) konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za BCMA na površini ciljne ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 179; ili
d) konstrukt antitela koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
12. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji kompetira za vezivanje za CD3 sa ili koji se vezuje za isti epitop CD3 kao:
a) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen obuhvata region VH koji se sastoji od CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637, i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638, i region VL koji se sastoji od CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 633, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 634, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 635;
b) antitelo ili konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži VH region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 639, i VL region kao što je prikazano u SEQ ID NO: 641;
c) konstrukt antitela koji se sastoji od domena koji se vezuje za CD3 na površini T ćelije, pri čemu navedeni domen sadrži aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 642; ili
d) konstrukt antitela koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 661.
13. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu prvi domen koji se vezuje za BCMA sadrži VH region koji se sastoji od CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 i VL region koji se sastoji od CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 izabranih iz grupe koju čine:
(1) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 1, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 2, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 3, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 4, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 5 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 6;
12
(2) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 11, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 12, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 13, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 14, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 15 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 16;
(3) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 21, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 22, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 23, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 24, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 25 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 26;
(4) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 31, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 32, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 33, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 34, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 35 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 36;
(5) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 41, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 42, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 43, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 44, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 45 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 46;
(6) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 51, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 52, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 53, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 54, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 55 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 56;
(7) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 61, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 62, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 63, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 64, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 65 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 66;
(8) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 71, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 72, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 73, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 74, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 75 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 76;
(9) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 81, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 82, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 83, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 84, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 85 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 86;
(10) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 91, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 92, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 93, CDR-L1 kao što je
12
prikazano u SEQ ID NO: 94, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 95 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 96;
(11) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 101, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 102, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 103, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 104, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 105 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 106;
(12) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 111, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 112, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 113, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 114, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 115 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 116;
(13) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 121, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 122, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 123, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 124, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 125 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 126;
(14) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 131, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 132, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 133, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 134, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 135 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 136;
(15) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 141, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 142, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 143, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 144, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 145 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 146;
(16) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 151, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 152, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO:153, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 154, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 155 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 156;
(17) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 161, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 162, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 163, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 164, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 165 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 166;
(18) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 171, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 172, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 173, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 174, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 175 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 176;
12
(19) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 181, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 182, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 183, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 184, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 185 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 186;
(20) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 191, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 192, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 193, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 194, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 195 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 196;
(21) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 201, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 202, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 203, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 204, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 205 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 206;
(22) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 211, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 212, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 213, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 214, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 215 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 216;
(23) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 221, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 222, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 223, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 224, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 225 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 226;
(24) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 231, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 232, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 233, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 234, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 235 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 236;
(25) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 241, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 242, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 243, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 244, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 245 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 246;
(26) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 251, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 252, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 253, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 254, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 255 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 256;
(27) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 261, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 262, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 263, CDR-L1 kao što
12
je prikazano u SEQ ID NO: 264, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 265 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 266;
(28) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 271, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 272, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 273, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 274, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 275 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 276;
(29) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 281, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 282, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 283, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 284, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 285 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 286;
(30) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 291, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 292, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 293, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 294, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 295 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 296;
(31) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 301, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 302, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 303, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 304, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 305 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 306;
(32) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 311, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 312, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 313, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 314, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 315 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 316;
(33) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 321, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 322, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 323, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 324, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 325 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 326;
(34) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 331, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 332, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 333, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 334, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 335 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 336;
(35) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 341, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 342, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 343, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 344, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 345 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 346;
12
(36) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 351, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 352, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 353, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 354, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 355 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 356;
(37) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 361, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 362, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 363, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 364, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 365 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 366;
(38) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 371, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 372, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 373, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 374, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 375 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 376;
(39) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 381, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 382, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 383, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 384, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 385 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 386;
(40) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 391, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 392, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 393, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 394, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 395 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 396;
(41) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 401, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 402, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 403, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 404, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 405 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 406;
(42) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 411, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 412, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 413, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 414, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 415 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 416;
(43) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 421, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 422, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 423, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 424, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 425 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 426;
(44) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 431, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 432, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 433, CDR-L1 kao što
1
je prikazano u SEQ ID NO: 434, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO:435 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 436;
(45) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 441, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 442, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 443, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 444, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 445 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 446;
(46) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 451, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 452, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 453, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 454, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 455 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 456;
(47) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 461, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 462, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 463, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 464, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 465 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 466;
(48) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 471, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 472, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 473, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 474, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 475 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 476;
(49) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 481, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 482, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 483, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 484, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 485 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 486;
(50) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 491, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 492, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 493, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 494, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 495 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 496;
(51) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 501, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 502, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 503, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 504, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 505 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 506;
(52) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 511, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 512, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 513, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 514, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 515 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 516;
1 1
(53) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 521, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 522, CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 523, CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 524, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 525 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 526;
14. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata VH region koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207, 217, 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 307, 317, 327, 337, 347, 357, 367, 377, 387, 397, 407, 417, 427, 437, 447, 457, 467, 477, 487, 497, 507, 517 i 527.
15. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata VL region koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 8, 18, 28, 38, 48, 58, 68, 78, 88, 98, 108, 118, 128, 138, 148, 158, 168, 178, 188, 198, 208, 218, 228, 238, 248, 258, 268, 278, 288, 298, 308, 318, 328, 338, 348, 358, 368, 378, 388, 398, 408, 418, 428, 438, 448, 458, 468, 478, 488, 498, 508, 518 i 528.
16. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu prvi domen koji se vezuje za BCMA sastoji se od VH regiona i VL regiona izabranog iz grupe koju čine:
(1) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 7 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 8;
(2) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 17 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 18;
(3) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 27 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 28;
(4) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 37 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 38;
(5) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 47 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 48;
(6) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 57 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 58;
1 2
(7) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 67 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 68;
(8) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 77 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 78;
(9) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 87 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 8www8;
(10) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 97 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 98;
(11) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 107 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 108;
(12) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 117 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO:118;
(13) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 127 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 128;
(14) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 137 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 138;
(15) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 147 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 148;
(16) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 157 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 158;
(17) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 167 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 168;
(18) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 177 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 178;
(19) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 187 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 188;
(20) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 197 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 198;
(21) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 207 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 208;
(22) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 217 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 218;
(23) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 227 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 228;
1
(24) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 237 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 238;
(25) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 247 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 248;
(26) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 257 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 258;
(27) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 267 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 268;
(28) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 277 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 278;
(29) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 287 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 288;
(30) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 297 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 298;
(31) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 307 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 308;
(32) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 317 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 318;
(33) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 327 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 328;
(34) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 337 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 338;
(35) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 347 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 348;
(36) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 357 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 358;
(37) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 367 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 368;
(38) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 377 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 378;
(39) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 387 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 388;
(40) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 397 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 398;
1 4
(41) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 407 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 408;
(42) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 417 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 418;
(43) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 427 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 428;
(44) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 437 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 438;
(45) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 447 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 448;
(46) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 457 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 458;
(47) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 467 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 468;
(48) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 477 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 478;
(49) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 487 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 488;
(50) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 497 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 498;
(51) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 507 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 508;
(52) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 517 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 518; i
(53) VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 527 i VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 528.
17. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu prvi domen koji se vezuje za BCMA obuhvata ili se sastoji od polipeptida koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 9, 19, 29, 39, 49, 59, 69, 79, 89, 109, 129, 139, 149, 159, 169, 179, 189, 199, 209, 219, 229, 239, 249, 259, 269, 279, 289, 299, 309, 319, 329, 339, 349, 359, 369, 379, 389, 399, 409, 419, 429, 439, 449, 459, 469, 479, 489, 499, 519 i 529.
1
18. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu se drugi domen koji se vezuje za CD3 sastoji od VL regiona koji se sastoji od CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 izabranih iz grupe koja se sastoji od:
(a) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 542, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 543 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 544;
(b) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 599, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 600 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 601; i
(c) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 621, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 622 i CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 623.
19. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu se drugi domen koji se vezuje za CD3 sastoji od VH regiona koji se sastoji od CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 izabranih iz grupe koja se sastoji od:
(a) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 534, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 535 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 536;
(b) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 545, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 546 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 547;
(c) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 557, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 558 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 559;
(d) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 568, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 569 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 570;
(e) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 579, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 580 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 581;
(f) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 591, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 592 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 593;
(g) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 602, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 603 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 604;
(h) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 613, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 614 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 615;
(i) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 624, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 625 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 626; i
(j) CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638.
1
20. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu se drugi domen koji se vezuje za CD3 sastoji od VL regiona koji se sastoji od CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 i VH regiona koji se sastoji od CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 izabranih iz grupe koja se sastoji od:
(a) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 531, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 532, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 533, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 534, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 535 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 536;
(b) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 542, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 543, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 544, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 545, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 546 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 547;
(c) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 554, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 555, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 556, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 557, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 558 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 559;
(d) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 565, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 566, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 567, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 568, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 569 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 570;
(e) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 576, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 577, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 578, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 579, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 580 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 581;
(f) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 588, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 589, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 590, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 591, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 592 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 593;
(g) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 599, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 600, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 601, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 602, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 603 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 604;
(h) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 610, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 611, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 612, CDR-H1 kao što
1
je prikazano u SEQ ID NO: 613, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 614 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 615;
(i) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 621, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 622, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 623, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 624, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 625 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 626; i
(j) CDR-L1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 633, CDR-L2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 634, CDR-L3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 635, CDR-H1 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 636, CDR-H2 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 637 i CDR-H3 kao što je prikazano u SEQ ID NO: 638.
21. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata region VL koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 550, SEQ ID NO: 551, SEQ ID NO: 584, SEQ ID NO: 585, SEQ ID NO: 629 i SEQ ID NO: 630.
22. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata region VH koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 537, SEQ ID NO: 538, SEQ ID NO: 548, SEQ ID NO: 549, SEQ ID NO: 560, SEQ ID NO: 561, SEQ ID NO: 571, SEQ ID NO: 572, SEQ ID NO: 582, SEQ ID NO: 583, SEQ ID NO: 594, SEQ ID NO: 595, SEQ ID NO: 605, SEQ ID NO: 606, SEQ ID NO: 616, SEQ ID NO: 617, SEQ ID NO: 627, SEQ ID NO: 628, SEQ ID NO: 639, SEQ ID NO: 640 i SEQ ID NO: 644.
23. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu se drugi domen koji se vezuje za CD3 sastoji od VL regiona i VH regiona izabranog iz grupe koju čine:
(a) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 539 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 537 ili 538;
(b) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 550 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 548 ili 549;
(c) VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 562 ili 521 i VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 560 ili 561;
1
(d) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 573 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 571 ili 572;
(e) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 584 ili 585 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 582 ili 583;
(f) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 596 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 594 ili 595;
(g) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 607 ili 585 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 605 ili 606;
(h) region VL kako je prikazan u SEQ ID NO: 618 ili 521 i region VH kako je prikazan u SEQ ID NO: 616 ili 617;
(i) VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 629 ili 630 i VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 627 ili 628;
(j) VL region kako je prikazan u SEQ ID NO: 641 ili 630 i VH region kako je prikazan u SEQ ID NO: 639 ili 640; i
(k) region VL kao što je prikazano u SEQ ID NO: 645 i region VH kao što je prikazano u SEQ ID NO: 644.
24. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu drugi domen koji se vezuje za CD3 obuhvata ili se sastoji od polipeptida koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 540, 541, 552, 553, 563, 564, 574, 575, 586, 587, 597, 598, 608, 609, 619, 620, 631, 632, 642, 643 i 646.
25. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji se sastoji od polipeptida koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, i 530.
26. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji sadrži redosled od N- do C-terminusa:
(a) prvi domen;
1
(b) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 687, 693 i 694;
(c) drugi domen;
(d) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693 ili 694;
(e) prvi polipeptidni monomer trećeg domena (koji se sastoji od šarke, CH2 i CH3 domena);
(f) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 695, 696, 697, 698 ili 699; i
(g) drugi polipeptidni monomer trećeg domena (koji se sastoji od šarke, CH2 i CH3 domena).
27. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji sadrži redosled od N- do C-terminusa:
(a) prvi domen koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 9, 19, 29, 39, 49, 59, 69, 79, 89, 109, 129, 139, 149, 159, 169, 179, 189, 199, 209, 219, 229, 239, 249, 259, 269, 279, 289, 299, 309, 319, 329, 339, 349, 359, 369, 379, 389, 399, 409, 419, 429, 439, 449, 459, 469, 479, 489, 499, 519, i 529; pri čemu se peptidni linker sadržan u tim sekvencama i koji ima SEQ ID NO: 694 može zameniti bilo kojim od SEQ ID NO: 686-693 i 695-699;
(b) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 687, 693 i 694;
(c) drugi domen koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 540, 541, 552, 553, 563, 564, 574, 575, 586, 587, 597, 598, 608, 609, 619, 620, 631, 632, 642, 643 i 646; pri čemu se peptidni linker sadržan u tim sekvencama i koji ima SEQ ID NO: 694 može zameniti bilo kojim od SEQ ID NO: 686-693 i 695-699;
(d) peptidni linker koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693 i 694; i
(e) treći domen koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koju čine SEQ ID NO: 700-707.
28. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji sadrži redosled od N- do C-terminusa:
14
a) polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od onih prikazanih u SEQ ID NO: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, i 530;
(b) linker koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 686; i
(c) polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazano u SEQ ID NO: 700.
29. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji ima molekulsku težinu od 75 do 200 kDa, 80 do 175 kDa, 85 do 150 kDa, 90 do 130 kDa, 95 do 120 kDa, a poželjno 100 do 115 kDa ili 105 do 110 kDa.
30. Konstrukt antitela za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji ima poluživot eliminacije (T1/2) od 3 do 14 dana, 4 do 12 dana, 3 ili 4 do 10 dana, 3 ili 4 do 8 dana ili 5 do 7 dana.
RS20241032A 2019-11-11 2019-11-11 Režim doziranja anti-bcma agenasa RS65943B1 (sr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP19208417.6A EP3819007B1 (en) 2019-11-11 2019-11-11 Dosing regimen for anti-bcma agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS65943B1 true RS65943B1 (sr) 2024-10-31

Family

ID=68581157

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20241032A RS65943B1 (sr) 2019-11-11 2019-11-11 Režim doziranja anti-bcma agenasa
RS20240493A RS65581B1 (sr) 2019-11-11 2020-05-08 Režim doziranja za anti-bcma agense

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20240493A RS65581B1 (sr) 2019-11-11 2020-05-08 Režim doziranja za anti-bcma agense

Country Status (20)

Country Link
US (1) US20210139584A1 (sr)
EP (3) EP3819007B1 (sr)
JP (2) JP2022554362A (sr)
AU (1) AU2020381671A1 (sr)
CA (1) CA3155069A1 (sr)
DK (2) DK3819007T3 (sr)
ES (2) ES2987783T3 (sr)
FI (2) FI3819007T3 (sr)
HR (2) HRP20241281T1 (sr)
HU (2) HUE068401T2 (sr)
LT (2) LT3819007T (sr)
MA (1) MA47888B1 (sr)
MX (1) MX2022005628A (sr)
PL (2) PL3819007T3 (sr)
PT (2) PT3819007T (sr)
RS (2) RS65943B1 (sr)
SI (2) SI3819007T1 (sr)
SM (2) SMT202400373T1 (sr)
TW (1) TW202118784A (sr)
WO (1) WO2021094000A1 (sr)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL317134A (en) 2016-12-21 2025-01-01 Teneobio Inc An antibody containing only heavy chains that binds a human B-cell maturation antigen, a pharmaceutical composition containing the same, its use in the treatment of B-cell disorders and a method for its preparation
EP4243936A1 (en) * 2020-11-10 2023-09-20 Amgen Inc. Methods for administering a bcma x cd3 binding molecule
WO2023098846A1 (zh) * 2021-12-03 2023-06-08 江苏先声药业有限公司 抗bcma纳米抗体及其应用

Family Cites Families (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US233A (en) 1837-06-14 Improvement in plows
US4447A (en) 1846-04-04 Car- wheel
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
GB9206422D0 (en) 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
US7381803B1 (en) 1992-03-27 2008-06-03 Pdl Biopharma, Inc. Humanized antibodies against CD3
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US7112324B1 (en) 1998-04-21 2006-09-26 Micromet Ag CD 19×CD3 specific polypeptides and uses thereof
GB9815909D0 (en) 1998-07-21 1998-09-16 Btg Int Ltd Antibody preparation
AU5728999A (en) 1998-07-28 2000-02-21 Micromet Ag Heterominibodies
MXPA06004035A (es) 2003-10-16 2006-08-31 Micromet Ag Aglutinantes cd3 de-inmunizados multi-especificos.
CA2569509C (en) 2004-06-03 2014-08-12 Novimmune S.A. Anti-cd3 antibodies and methods of use thereof
EP1940881B1 (en) 2005-10-11 2016-11-30 Amgen Research (Munich) GmbH Compositions comprising cross-species-specific antibodies and uses thereof
TW200745163A (en) 2006-02-17 2007-12-16 Syntonix Pharmaceuticals Inc Peptides that block the binding of IgG to FcRn
RS53008B2 (sr) 2007-04-03 2022-12-30 Amgen Res Munich Gmbh Interspecijski specifičan cd3-epsilon vezujući domen
WO2009127691A1 (en) 2008-04-17 2009-10-22 Ablynx N.V. Peptides capable of binding to serum proteins and compounds, constructs and polypeptides comprising the same
EP2352765B1 (en) 2008-10-01 2018-01-03 Amgen Research (Munich) GmbH Cross-species-specific single domain bispecific single chain antibody
EP2493921B1 (en) 2009-10-30 2018-09-26 Albumedix Ltd Albumin variants
US20130225496A1 (en) 2010-11-01 2013-08-29 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin Variants
EP3974453A3 (en) 2010-11-16 2022-08-03 Amgen Inc. Agents and methods for treating diseases that correlate with bcma expression
CA2830660A1 (en) 2011-05-05 2012-11-08 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
NO2748201T3 (sr) 2011-08-23 2018-05-12
WO2013026837A1 (en) 2011-08-23 2013-02-28 Roche Glycart Ag Bispecific t cell activating antigen binding molecules
TWI679212B (zh) 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
EP2780364A2 (en) 2011-11-18 2014-09-24 Eleven Biotherapeutics, Inc. Proteins with improved half-life and other properties
DK2825556T3 (en) 2012-03-16 2018-04-16 Albumedix As albumin Variants
MX2015005363A (es) 2012-11-08 2015-11-06 Novozymes Biopharma Dk As Variantes de albumina.
US20140302037A1 (en) 2013-03-15 2014-10-09 Amgen Inc. BISPECIFIC-Fc MOLECULES
US11634502B2 (en) 2013-03-15 2023-04-25 Amgen Inc. Heterodimeric bispecific antibodies
US20140308285A1 (en) 2013-03-15 2014-10-16 Amgen Inc. Heterodimeric bispecific antibodies
US20160257748A1 (en) 2013-09-25 2016-09-08 Amgen Inc. V-c-fc-v-c antibody
EP2982692A1 (en) 2014-08-04 2016-02-10 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
TWI703159B (zh) 2015-04-13 2020-09-01 美商輝瑞股份有限公司 Bcma特異性治療性抗體及其用途
EA039859B1 (ru) 2015-07-31 2022-03-21 Эмджен Рисерч (Мюник) Гмбх Биспецифические конструкты антител, связывающие egfrviii и cd3
SI3331910T1 (sl) 2015-08-03 2020-07-31 Engmab Sarl Monoklonska protitelesa proti humani antigen dozorevanja limfocitov B (BCMA)
MX2018002043A (es) 2015-08-17 2018-07-06 Janssen Pharmaceutica Nv ANTICUERPOS ANTI-BCMA, MOLí‰CULAS DE UNIí“N A ANTíGENOS BIESPECíFICAS QUE SE UNEN A BCMA Y CD3, Y USOS DE ESTOS.
IL313507A (en) * 2016-02-03 2024-08-01 Amgen Res Munich Gmbh Constructs of bispecific antibodies to BCMA and CD3 that bind to T cells, preparations containing the same and uses thereof
JP7267914B2 (ja) 2016-11-02 2023-05-02 エンクマフ エスアーエールエル Ｂｃｍａ及びｃｄ３に対する二重特異性抗体、及び多発性骨髄腫を治療するために併用して使用される免疫療法薬
MX2020003915A (es) 2017-10-13 2020-10-08 Harpoon Therapeutics Inc Proteinas trispecificas y metodos de uso.
PL3796912T3 (pl) 2018-05-23 2023-09-11 Celgene Corporation Związki przeciwproliferacyjne i przeciwciało bispecyficzne przeciwko bcma i cd3 do zastosowania kombinowanego
TWI838389B (zh) 2018-07-19 2024-04-11 美商再生元醫藥公司 雙特異性抗-BCMAｘ抗-CD3抗體及其用途
MA53732A (fr) * 2018-09-28 2022-01-05 Amgen Inc Anticorps dirigés contre bcma soluble
EP3911371A4 (en) * 2019-01-18 2023-04-26 University of Southern California METHODS AND COMPOSITIONS FOR IMPROVING THE SAFETY AND EFFICACY OF CELL THERAPY
CN119679936A (zh) 2019-06-24 2025-03-25 诺华股份有限公司 针对靶向b细胞成熟抗原的多特异性抗体的给药方案和组合疗法
PT3766701T (pt) 2019-07-18 2023-06-26 Barberan Latorre Jesus Francisco Cabeça, máquina e método de impressão digital em substratos
CN115279459A (zh) 2019-11-05 2022-11-01 百时美施贵宝公司 使用针对bcma和cd3的抗体的治疗方法
MX2023003041A (es) * 2020-09-16 2023-05-09 Amgen Inc Métodos para administrar dosis terapéuticas de moléculas de acoplamiento a células t biespecíficas para el tratamiento de cáncer.
EP4243936A1 (en) * 2020-11-10 2023-09-20 Amgen Inc. Methods for administering a bcma x cd3 binding molecule

Also Published As

Publication number Publication date
WO2021094000A1 (en) 2021-05-20
HUE066166T2 (hu) 2024-07-28
FI3819007T3 (fi) 2024-09-25
SI3819007T1 (sl) 2024-10-30
LT3819007T (lt) 2024-10-10
JP2022554362A (ja) 2022-12-28
SMT202400373T1 (it) 2024-11-15
HUE068401T2 (hu) 2024-12-28
EP3819007B1 (en) 2024-07-10
CA3155069A1 (en) 2021-05-20
EP4058148B1 (en) 2024-03-13
PT3819007T (pt) 2024-09-20
ES2987783T3 (es) 2024-11-18
DK3819007T3 (da) 2024-09-30
LT4058148T (lt) 2024-05-27
MA47888B1 (fr) 2024-10-31
DK4058148T3 (da) 2024-05-06
PT4058148T (pt) 2024-05-03
SMT202400165T1 (it) 2024-05-14
EP4058148A1 (en) 2022-09-21
HRP20240553T1 (hr) 2024-07-05
EP4424709A2 (en) 2024-09-04
DK4058148T5 (da) 2024-07-22
US20210139584A1 (en) 2021-05-13
PL3819007T3 (pl) 2024-11-18
ES2987070T3 (es) 2024-11-13
JP2025170264A (ja) 2025-11-18
MX2022005628A (es) 2022-06-14
HRP20241281T1 (hr) 2024-12-06
PL4058148T3 (pl) 2024-09-16
TW202118784A (zh) 2021-05-16
AU2020381671A1 (en) 2022-03-31
RS65581B1 (sr) 2024-06-28
EP3819007A1 (en) 2021-05-12
FI4058148T3 (fi) 2024-05-06
SI4058148T1 (sl) 2024-06-28
EP4424709A3 (en) 2024-12-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20250154255A1 (en) DOSING REGIMEN FOR BCMAx-CD3 ANTIBODIES CONSTRUCTS
JP7000660B2 (ja) Ｒｏｒ１抗体組成物及び関連の方法
TWI701259B (zh) ４﹘１ｂｂ抗體及其製備方法和應用
JP7829773B2 (ja) Ｉｌ２７受容体結合に関連する組成物および方法
RS66543B1 (sr) Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela
JP2019510498A (ja) 癌を標的とするキメラ抗原受容体
CN108463245A (zh) 具有修饰的j链的结合分子
JP2025170264A (ja) 抗ｂｃｍａ剤のための投与レジメン
US20250136704A1 (en) Methods for administering a bcmaxcd3 binding molecule
US20230374147A1 (en) Bcma/taci antigen-binding molecules
US20250313631A1 (en) Treatment and prevention of cancer using vista antigen-binding molecules
WO2023143547A1 (zh) 抗cd28抗体及其应用
HK40052227B (en) Dosing regimen for anti-bcma agents
HK40052227A (en) Dosing regimen for anti-bcma agents
CN121108346B (zh) 抗ly6g6d单域抗体及其制备方法和用途
EP4417623A1 (en) Ccr9 targeting moiety for the treatment of ccr9-positive cancer
JP2026502831A (ja) Ｐｄ－ｌ１を標的としｇａｓ６を中和する融合タンパク質及びその使用
BR112023001737B1 (pt) Proteínas de ligação ao receptor de il27
HK40121932A (zh) 结合剂及其使用方法
BR122024014186A2 (pt) Proteínas de ligação ao receptor de il27 e seu uso, ácido nucleico isolado, vetor de expressão, célula hospedeira, composição farmacêutica e seu uso
CN113307871A (zh) 新型抗cd19抗体和cd19-car-t细胞的制备及其应用