RS66543B1 - Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela - Google Patents

Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela

Info

Publication number
RS66543B1
RS66543B1 RS20250193A RSP20250193A RS66543B1 RS 66543 B1 RS66543 B1 RS 66543B1 RS 20250193 A RS20250193 A RS 20250193A RS P20250193 A RSP20250193 A RS P20250193A RS 66543 B1 RS66543 B1 RS 66543B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
ser
thr
pro
leu
ala
Prior art date
Application number
RS20250193A
Other languages
English (en)
Inventor
Carrie Brownstein
Israel Lowy
Lieve Lucille Adriaens
Original Assignee
Regeneron Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Regeneron Pharma filed Critical Regeneron Pharma
Publication of RS66543B1 publication Critical patent/RS66543B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/475—Quinolines; Isoquinolines having an indole ring, e.g. yohimbine, reserpine, strychnine, vinblastine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C07K16/248—IL-6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3069—Reproductive system, e.g. ovaria, uterus, testes, prostate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3076—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells against structure-related tumour-associated moieties
    • C07K16/3092—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells against structure-related tumour-associated moieties against tumour-associated mucins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Ovaj pronalazak pripada oblasti medicine i odnosi se na strategije doziranja i režime administracije za terapeutsko bispecifično anti-CD20 x anti-CD3 antitelo koje ublažava prevalence i težinu sindroma oslobađanja citokina ili reakcije povezane sa infuzijom kod pacijenata koji su podvrgnuti imunoterapiji. WO2017/112762 otkriva moguću upotrebu CD3 x CD20 bispecifičnog antitela REGN1979 u lečenju leukemije, ali se ne bavi pitanjem mogućeg CRS-a.
STANJE TEHNIKE
[0002] Sindrom oslobađanja citokina (CRS) je sistemski inflamatorni odgovor koji može biti izazvan raznim faktorima, uključujući određene lekove. Imunoterapije kancera koje aktiviraju T ćelije nose posebno visok rizik od CRS-a, što je obično posledica efekata na cilj indukovanih vezivanjem bispecifičnog antitela ili himernog antigenskog receptora (CAR) T ćelije za njegov antigen i naknadnom aktivacijom bystander imunskih ćelija i neimunskih ćelija, kao što su endotelne ćelije. Aktivacija bystander ćelija dovodi do masovnog oslobađanja niza citokina. IL-6, IL-10 i interferon (IFN)-γ su između jezgra citokina za koje se stalno otkriva da su povišeni u serumu pacijenata sa CRS. Sa terapijama koje aktiviraju T ćelije usmerene protiv tumorskih ćelija, CRS se pokreće masivnim oslobađanjem IFN-γ od strane aktiviranih T ćelija ili samih tumorskih ćelija. Izlučeni IFN-γ indukuje aktivaciju drugih imunih ćelija, najvažnije makrofaga, koji zauzvrat proizvode prekomerne količine dodatnih citokina kao što su IL-6, TNF-α, i IL-10. IL-6, posebno, doprinosi mnogim ključnim simptomima CRS-a, uključujući vaskularno curenje i aktivaciju komplementa i kaskade koagulacije koja izaziva diseminovanu intravaskularnu koagulaciju. Pored toga, IL-6 verovatno doprinosi kardiomiopatiji promovišući disfunkciju miokarda. Shimabukaro-Vornhagen et al., Journal for Immunotherapy of Cancer, 6:56, pp. 1‑14, 2018. U nekim slučajevima, simptomi povezani sa CRS se nazivaju reakcija vezana za infuziju (IRR) ako se jave manje od šest sati nakon početka infuzije, i CRS ako se jave nakon šest sati nakon početka infuzije.
[0003] Upravljanje toksičnostima imunoterapije kancera je izazovan klinički problem. Ublažavanje CRS-a ili IRR je obeležje primene određenih modaliteta lečenja, na primer CAR T ćelija i bispecifičnih antitela koja ciljaju T ćelije. CRS niskog stepena se uglavnom simptomatski leči antihistaminicima, antipireticima i tečnostima. Teški CRS može predstavljati neželjeni događaj opasan po život koji zahteva brz i agresivan tretman. Smanjenje tumorskog opterećenja, ograničenja doze primenjene terapije i premedikacija steroidima smanjili su incidencu teških CRS-a, kao i upotreba tretmana protiv citokina. Tocilizumab, anti-IL-6 antitelo, postalo je standardni početni tretman za teški CRS u nekim okolnostima. Međutim, upotreba ograničenja doze i tretmana za minimiziranje aktivnosti citokina može imati štetne efekte na efikasnost imunoterapije. Stoga, ostaje potreba za alternativnim strategijama za ublažavanje potencijalnih po život opasnih efekata CRS-a bez negativnog uticaja na terapeutske prednosti imunoterapije.
KRATKO IZLAGANJE SUŠTINE PRONALASKA
[0004] Ovaj pronalazak obezbeđuje terapijski protein za upotrebu u postupku lečenja CD20+ B-ćelijskog maligniteta, pri čemu postupak obuhvata davanje terapijskih proteina subjektu u režimu doziranja da se smanji incidenca ili težina sindroma oslobađanja citokina ili reakcije povezane sa infuzijom, postupak obuhvata:
davanje frakcija primarne doze (D1) terapijskog proteina u nedelji 1 režima doziranja, gde primarna doza sadrži 1 mg terapijskog proteina, frakcija prve doze (F1D1) sadrži 50% ukupne primarne doze i daje se subjektu 1. dana nedelje 1, i frakcija druge doze (F2D1) sadrži preostalih 50% ukupne primarne doze i daje se subjektu od 12 do 96 sati nakon davanja F1D1;
davanje frakcija sekundarne doze (D2) terapijskog proteina u nedelji 2 režima doziranja, gde sekundarna doza sadrži 20 mg terapijskog proteina, prva frakcija doze (F1D2) sadrži 50% ukupne sekundarne doze, druga frakcija doze (F2D2) sadrži preostalih 50% ukupne sekundarne doze, i F2D2 se daje subjektu od 12 do 96 sati nakon primene F1D2 u toku nedelje 2 režima doziranja; i davanje maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina subjektu kao pojedinačne doze u narednoj nedelji režima doziranja, pri čemu maksimalna nedeljna doza sadrži 80 mg, 160 mg ili 320 mg terapijskog proteina,
pri čemu je terapijski protein bispecifično anti-CD20 x anti-CD3 antitelo koje sadrži anti-CD20 vezujući krak koji sadrži težak lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu datu u SEQ ID NO: 10 i laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu datu u SEQ ID NO: 12, i anti-CD3 vezujući krak koji sadrži težak lanac koji se sastoji iz aminokiselinske sekvence koja je data u SEQ ID NO: 11 i laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je data u SEQ ID NO: 12.
[0005] U nekim slučajevima, F2D1 se daje subjektu od 24 do 96 sati nakon primene F1D1. U nekim slučajevima, F2D1 se daje subjektu od 18 do 72 sata nakon primene F1D1. U nekim slučajevima, F2D2 se daje subjektu od 24 do 96 sati nakon primene F1D2. U nekim slučajevima, F2D2 se daje subjektu od 18 do 72 sata nakon primene F1D2. U nekim slučajevima, sledeća nedelja je nedelja 3 režima doziranja. U nekim slučajevima, sledeća nedelja je nedelja 4 režima doziranja. U nekim slučajevima, sledeća nedelja je 14. nedelja režima doziranja. U nekim slučajevima, sledeća nedelja je bilo koja od nedelja 4 do 36 režima doziranja.
[0006] U nekim izvođenjima, postupak dalje obuhvata: (i) davanje frakcija tercijarne doze (D3) terapijskog proteina u nedelji 3 režima doziranja, pri čemu tercijarna doza nije manja od polovine maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina i ne više od maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina i ne više od maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina (frakciona prva nedeljna doza F proteina) obuhvata 40% do 60% ukupne tercijarne doze, druga frakcija doze (F2D3) obuhvata preostalih 40% do 60% ukupne tercijarne doze, a F2D3 se daje subjektu od 12 do 96 sati nakon primene F1D3 tokom 3 nedelje režima doziranja; i (ii) davanje maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina subjektu kao pojedinačna doza u narednoj nedelji režima doziranja.
[0007] U nekim slučajevima, F2D3 se daje subjektu od 24 do 96 sati nakon primene F1D3. U nekim slučajevima, F2D3 se daje subjektu od 18 do 72 sata nakon primene F1D3.
[0008] U nekim slučajevima, sledeća nedelja je nedelja 4 režima doziranja. U nekim slučajevima, sledeća nedelja je 14. nedelja režima doziranja. U nekim slučajevima, sledeća nedelja je bilo koja od nedelja 4 do 36 režima doziranja. U različitim izvođenjima, tercijarna doza se primenjuje kao pojedinačna doza u nedeljama od 4 do 12 režima doziranja.
[0009] U nekim izvođenjima, metode predmetnog pronalaska dalje obuhvataju primenu jedne ili više doza "održavanja" tokom faze održavanja režima doziranja, koja sledi nakon završetka nedeljne faze režima. U nekim slučajevima, svaka doza održavanja se primenjuje 2, 3 ili 4 nedelje nakon neposredno prethodne doze. U jednom izvođenju, doza održavanja je maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina koja se primenjuje kao pojedinačna doza.
[0010] U nekim slučajevima, maksimalna nedeljna doza (MD) terapijskog proteina se daje subjektu kao pojedinačna doza tokom od 1 do 8 nedelja, od 1 do 12 nedelja ili od 1 do 16 nedelja tokom nedeljne faze režima doziranja. U nekim slučajevima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje subjektu kao pojedinačna doza jednom u dve nedelje tokom faze održavanja režima doziranja, koja sledi nakon završetka nedeljne faze režima doziranja. U nekim slučajevima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje subjektu kao a pojedinačna doza jednom u tri nedelje tokom faze održavanja režima doziranja, koja sledi nakon završetka nedeljne faze režima doziranja. U nekim slučajevima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje subjektu kao pojedinačna doza jednom svake četiri nedelje tokom faze održavanja režima doziranja, koja sledi nakon završetka nedeljne faze režima doziranja. U nekim izvođenjima, faza održavanja je period do 86 nedelja. U nekim izvođenjima, faza održavanja je period do 87 nedelja. U nekim izvođenjima, faza održavanja je period do 88 nedelja. U nekim izvođenjima, faza održavanja je duža od 86 nedelja, duže od 100 nedelja, duže od 150 nedelja, duže od 200 nedelja ili duže od 250 nedelja. U nekim izvođenjima, faza održavanja je najmanje 24 nedelje. U nekim izvođenjima, faza održavanja je 24 nedelje.
[0011] U različitim izvođenjima, tercijarna doza je 40 mg. U različitim izvođenjima, tercijarna doza je 80 mg. U različitim izvođenjima, tercijarna doza je 160 mg. U različitim izvođenjima, tercijarna doza je 320 mg.
[0012] U različitim izvođenjima, F1D3 obuhvata 50% ukupne tercijarne doze, a F2D3 čini 50% ukupne tercijarne doze.
[0013] U nekim izvođenjima, maksimalna nedeljna doza je 80 mg. U nekim izvođenjima, maksimalna nedeljna doza je 160 mg. U nekim izvođenjima, maksimalna nedeljna doza je 320 mg.
[0014] U nekim slučajevima, doza održavanja terapijskog proteina je od 5 mg do 320 mg. U različitim izvođenjima, doza održavanja terapijskog proteina je 6-320 mg, 10-320 mg, 5-40 mg, 5-80 mg, 5-160 mg, 12-40 mg, 18-80 mg, 40-80 mg, 40-80 mg.160-320 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 12 mg, 18 mg, 27 mg, 40 mg, 80 mg, 160 mg ili 320 mg. U nekim izvođenjima, doza održavanja je 80 mg. U nekim izvođenjima, doza održavanja je 160 mg. U nekim izvođenjima, doza održavanja je 320 mg.
[0015] U nekim slučajevima, svaka doza ili frakcija doze se daje subjektu tokom perioda od 1 do 6 sati.
[0016] U nekim slučajevima, CD20+ B-ćelijski malignitet je ne-Hodčkinov limfom, Hodčkinov limfom, hronična limfocitna leukemija, akutna limfoblastna leukemija, mali limfocitni limfom, difuzni krupnoćelijski B limfom, folikularni limfom, limfom ćelija plašta (mantle cell lymphoma), limfom marginalne zone, Waldenstrom-ova makroglobulinemija, primarni mediastinalni B ćelijski limfom, limfoblastični limfom, ili Burkitov limfom. U nekim izvođenjima, subjektu je dijagnostikovan folikularni limfom (FL). U nekim slučajevima, FL je stepena 1‑3a. U nekim izvođenjima, subjektu je dijagnostikovan difuzni krupnoćelijski B limfom (DLBCL). U jednom aspektu, subjektu je dijagnostikovan relapsni/refraktorni DLBCL. U nekim slučajevima, subjekt sa dijagnozom DLBCL nije uspeo u prethodnoj terapiji CAR-T. U nekim izvođenjima, subjektu je dijagnostikovan limfom ćelija plašta (MCL). U nekim slučajevima, subjekt sa dijagnozom MCL nije uspeo pre terapije inhibitorom Bruton tirozin kinaze (BTK). U nekim izvođenjia, subjektu je dijagnostikovan limfom marginalne zone (MZL).
[0017] U nekim slučajevima, subjekt je humani, odrasla osoba ili humano dete (manje od osamnaest godina).
[0018] Anti-CD20 x anti-CD3 antitelo se može nazvati REGN1979.
[0019] U različitim izvođenjima, terapijski protein se održava na serumskoj koncentraciji na ili iznad oko 2000 mikrograma/litar (mcg/L) nakon primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja. U nekim slučajevima, terapijski protein se održava na serumskoj koncentraciji na ili iznad oko 2600 mcg/L nakon primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja. U nekim izvođenjima, terapijski protein se održava na koncentraciji u serumu na ili iznad oko 3700 mcg/L nakon primene maksimalnog nedeljna doza za vreme trajanja režima doziranja.
[0020] U nekim izvođenjima, terapijski protein se daje subjektu u kombinaciji sa drugim agensom odabranim od steroida, anti-histamina, acetaminofena, nesteroidnog antiinflamatornog leka (NSAID), antagonista IL-6 ili antagonista IL-6R. U nekim slučajevima, steroid je deksametazon. U nekim slučajevima, NSAID je indometacin. U nekim slučajevima, IL-6 antagonist je anti-IL-6 antitelo, ili IL-6R antagonist je anti-IL-6R antitelo. U nekim izvođenjima, anti-IL-6R antitelo je sarilumab. U različitim izvođenjima, primena drugog agensa se eliminiše nakon prve primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja. U drugim izvođenjima, drugi agens se primenjuje pre primene terapijskog proteina (npr., oko jedan do tri sata pre F1D1, F2D1, F1D2, F2D2, F1D3 i/ili F2D3). U još nekim izvođenjima, terapijski protein se primenjuje infuzijom tokom vremenskog perioda kao što je 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ili više sati.
[0021] U različitim izvođenjima, terapijski protein se daje subjektu u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom. U nekim izvođenjima, drugi terapijski agens sadrži najmanje jedan od rituksimaba, obinutuzumaba, ciklofofamida, doksorubicina, vinkristina, prednizona, prednizolona, bendamustina, lenalidomida, hlorambucila, ibritumomaba tiuksetana, ibritumomab tiuksetan, ipansibilisib i etopozid, metilprednizolon, citarabin, cisplatin, mesna, ifosfamid, mitoksantron i prokarbazin. U nekim slučajevima, drugi terapijski agens sadrži kombinaciju ciklofosfamida, doksorubicina, vinkristina i prednizona. U nekim slučajevima, drugi terapijski agens sadrži kombinaciju ifosfamida, cisplatina i etopozida. U nekim slučajevima, drugi terapijski agens sadrži kombinaciju gemcitabina i oksaliplatina. U nekim slučajevima, drugi terapijski agens sadrži kombinaciju lenalidomida i rituksimaba. U nekim slučajevima, drugi terapijski agens je lenalidomid.
[0022] U jednom aspektu, ovaj pronalazak uključuje antitelo kao što je gore definisano za upotrebu u postupku lečenja kancera CD20+ B ćelija kod subjekta, pri čemu postupak obuhvata: (a) odabir subjekta sa dijagnozom kancera CD20+ B ćelija; i (b) davanje antitela subjektu u skladu sa bilo kojim od metoda pronalaska o kojima se raspravljalo gore ili ovde korišćenjem režima doziranja za smanjenje incidencije ili težine sindroma oslobađanja citokina ili reakcije povezane sa infuzijom. U nekim izvođenjima, subjekt je prethodno lečen terapijom anti-CD20 antitela. U nekim izvođenjima, subjekt je prethodno lečen CAR-T terapijom. U nekim slučajevima, kancer B ćelija se bira iz grupe koju čine folikularni limfom, difuzni krupnoćelijski B limfom, limfom ćelija plašta i limfom marginalne zone.
[0023] U bilo kom drugom od izvođenja o kojima se raspravljalo gore ili ovde, incidencija CRS i IRR stepena 3 je manja od 10%. U nekim slučajevima, incidencija CRS i IRR stepena 3 je manja od 7,5% ili manja od 7%. U nekim izvođenjima, incidencija CRS i IRR je manja od 10%, manje od 9%, manje od 8%, manje od 7,5% ili manje od 7%. U bilo kom od izvođenja, bilo koja doza primenjena kao pojedinačna doza može da se primeni za najviše 1 sat.
[0024] U različitim izvođenjima, bilo koja od karakteristika ili komponenti bilo kojih izvođenja koja je diskutovana gore ili ovde može da se kombinuje, a takve kombinacije su obuhvaćene obimom ovog prikaza. Bilo koja specifična vrednost koja je diskutovana gore ili ovde može da se kombinuje sa drugom povezanom vrednosti koja je diskutovana gore ili ovde da bi se nabrojao opseg sa vrednostima koje predstavljaju gornji i donji kraj opsega, a takvi opsegi su obuhvaćeni obimom ovog otkrića.
[0025] Druga izvođenja će postati očigledna iz pregleda detaljnog opisa koji sledi.
KRATAK OPIS SLIKA NACRTA
[0026] Slika 1 ilustruje incidencu CRS/IRR tokom prvih pet nedelja terapije sa REGN1979 pri različitim nivoima doziranja.
DETALJAN OPIS
[0027] Obim ovog pronalaska je definisan priloženim patentnim zahtevima. Tehničko otkrivanje prikaza navedeno u nastavku može u nekim aspektima prevazići obim patentnih zahteva. Elementi otkrivanja koji ne spadaju u obim patentnih zahteva su dati u informativne svrhe.
[0028] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje koje obično razume stručnjak u oblasti kojoj ovaj pronalazak pripada. Termin "oko", kada se koristi u odnosu na određenu navedenu numeričku vrednost, znači da vrednost može da varira od navedene vrednosti za najviše 1%. Na primer, izraz "oko 100" uključuje 99 i 101 i sve vrednosti između njih (npr., 99.1, 99.2, 99.3, 99.4, itd.).
[0029] Iako se bilo koji metod i materijali slični ili ekvivalentni onima koji su ovde opisani mogu koristiti u praksi ili testiranju ovog pronalaska, sada se opisuju poželjni postupci i materijali.
[0030] Izraz "CD3" se odnosi na antigen koji je eksprimiran na T ćelijama kao deo multimolekulskog T ćelijskog receptora (TCR) i koji se sastoji od homodimera ili heterodimera formiranog iz asocijacije dva od četiri lanca receptora: CD3-epsilon, CD3-delta, CD3-zeta i CD3-gama. Humani CD3-epsilon sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je data u SEQ ID NO: 1; humani CD3-delta sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je data u SEQ ID NO: 2; humani CD3-zeta sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je data u SEQ ID NO: 3; i CD3-gama sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je data u SEQ ID NO: 4.
[0031] Sve reference na proteine, polipeptide i fragmente proteina ovde su namenjene da se odnose na humanu verziju odgovarajućeg proteina, polipeptida ili proteinskog fragmenta, osim ako nije eksplicitno navedeno da su iz nehumane vrste. Dakle, izraz "CD3" označava humani CD3 osim ako nije navedeno da je iz nehumane vrste, npr., "CD3 miša", "CD3 majmuna" itd.
[0032] "Domen koji se vezuje za antigen koji vezuje CD3", "antitelo koje vezuje CD3" ili "anti-CD3 antitelo" uključuje antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen koji specifično prepoznaju jednu CD3 podjedinicu (npr., epsilon, delta, gama ili zeta), kao i dva specifična antigenska kompleksa koja prepoznaju dva antigenska antitela CD3 podjedinice (npr., gama/epsilon, delta/epsilon i zeta/zeta CD3 dimeri). Antitela iz ovog pronalaska mogu da vežu rastvorljivi CD3 i/ili CD3 eksprimiran na površini ćelije. Rastvorljivi CD3 uključuje prirodne CD3 proteine kao i rekombinantne varijante CD3 proteina kao što su, na primer, monomerni i dimerni CD3 konstrukti, koji nemaju transmembranski domen ili su na drugi način nepovezani sa ćelijskom membranom.
[0033] Izraz "CD20" se odnosi na ne-glikozilovani fosfoprotein eksprimiran na ćelijskim membranama zrelih B ćelija. CD20 se smatra antigenom povezanim sa tumorom B ćelija jer je eksprimiran u više od 95% ne-Hodčkinovih limfoma (NHL) B ćelija i drugih maligniteta B-ćelija, ali je odsutan na prekursorskim B-ćelijama, dendritičnim ćelijama i plazma ćelijama. Humani CD20 protein ima sekvencu aminokiselina koja je data u SEQ ID NO: 5.
[0034] "Domen koji vezuje antigen koji vezuje CD20", "antitelo koje vezuje CD20" ili "anti-CD20 antitelo" uključuje antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen koji specifično prepoznaju CD20.
[0035] Izraz "BCMA" se odnosi na antigen sazrevanja B-ćelija. BCMA (takođe poznat kao TNFRSF17 i CD269) je protein ćelijske površine eksprimiran na malignim plazma ćelijama i igra centralnu ulogu u regulisanju sazrevanja B ćelija i diferencijacije u plazma ćelije koje proizvode imunoglobulin. Aminokiselinska sekvenca humanog BCMA je data u SEQ ID NO: 6.
[0036] "Domen koji vezuje antigen koji vezuje BCMA", "antitelo koje vezuje BCMA" ili "anti-BCMA antitelo" uključuje antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen koji specifično prepoznaju BCMA.
[0037] Izraz "PSMA" se odnosi na membranski antigen specifičan za prostatu, takođe poznat kao folatna hidrolaza 1 (FOLH1). PSMA je integralni membranski glikoprotein koji se ne izbacuje i koji je visoko eksprimiran u epitelnim ćelijama prostate i predstavlja površinski marker za kancer prostate. Aminokiselinska sekvenca humanog PSMA je data u SEQ ID NO: 7.
[0038] "Domen koji vezuje antigen koji vezuje PSMA", "antitelo koje vezuje PSMA" ili "anti-PSMA antitelo" uključuje antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen koji specifično prepoznaju PSMA.
[0039] Izraz "MUC16" se odnosi na mucin 16. MUC16 je visoko glikozilovani integralni membranski glikoprotein sa jednim transmembranskim domenom koji je visoko eksprimiran kod kancera jajnika. Aminokiselinska sekvenca humanog MUC16 je data u SEQ ID NO: 8.
[0040] "Domen koji vezuje antigen koji vezuje MUC16", "antitelo koje vezuje MUC16" ili "anti-MUC16 antitelo" uključuje antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen koji specifično prepoznaju MUC16.
[0041] Izraz "STEAP2" se odnosi na šest-transmembranski epitelni antigen prostate 2. STEAP2 je integralni protein koji premošćuje membranu šest puta i koji je visoko eksprimiran u epitelnim ćelijama prostate i predstavlja marker ćelijske površine za kancer prostate. STEAP2 je protein od 490 aminokiselina kodiran genom STEAP2 koji se nalazi u humanom hromozomskom regionu 7q21. Aminokiselinska sekvenca humanog STEAP2 je data u SEQ ID NO: 9.
[0042] "Domen koji se vezuje za antigen koji vezuje STEAP2", "antitelo koje vezuje STEAP2" ili "anti-STEAP2 antitelo" uključuje antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen koji specifično prepoznaju STEAP2.
[0043] Termin "terapijski protein" uključuje bilo koji polipeptid, uključujući antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen, i bispecifična antitela i njihove fragmente koji se vezuju za antigen, koji se koristi za prevenciju, lečenje ili poboljšanje bilo kog stanja, bolesti ili poremećaja kod subjekta.
[0044] Termin "molekul koji se vezuje za antigen" uključuje antitela i fragmente antitela koji se vezuju za antigen, uključujući, npr., bispecifična antitela.
[0045] Termin "antitelo" označava bilo koji molekul koji se vezuje za antigen ili molekularni kompleks koji sadrži najmanje jedan region koji određuje komplementarnost (CDR) koji se specifično vezuje za određeni antigen ili je u interakciji sa njim (npr., CD20, BCMA, PSMA, MUC16, STEAP2 ili CD3). Termin "antitelo" obuhvata molekule imunoglobulina koji sadrže četiri polipeptidna lanca, dva teška (H) lanca i dva laka (L) lanca međusobno povezana disulfidnim vezama, kao i njihove multimere (npr., IgM). Termin "antitelo" takođe uključuje molekule imunoglobulina koji se sastoje od četiri polipeptidna lanca, dva teška (H) lanca i dva laka (L) lanca međusobno povezana disulfidnim vezama. Svaki težak lanac sadrži varijabilni region (ovde skraćeno HCVR ili VH) i konstantni region teškog lanca. Konstantni region teškog lanca obuhvata tri domena, CH1, CH2 i CH3. Svaki laki lanac sadrži varijabilni region lakog lanca (ovde skraćeno LCVR ili VL) i konstantni region lakog lanca. Konstantni region lakog lanca obuhvata jedan domen (CL1). VHi VLregioni se mogu dalje podeliti na regione hipervarijabilnosti, nazvane regionima koji određuju komplementarnost (CDR), ispresecani regionima koji su više konzervirani, nazvani regioni okvira (FR). Svaki VHi VLse sastoji od tri CDR-a i četiri FR-a, raspoređenih od amino-kraja do karboksi-kraja u sledećem redosledu: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. FR antitela (ili njegovog dela koji se vezuje za antigen) mogu biti identične sekvencama humane germinativne linije, ili mogu biti prirodno ili veštački modifikovane. Konsenzusna sekvenca aminokiselina može biti definisana na osnovu paralelne analize dva ili više CDR-a. Izraz "antitelo" uključuje "bispecifično antitelo" osim ako nije drugačije naznačeno.
[0046] Termin "antitelo" takođe uključuje fragmente potpunih molekula antitela koji se vezuju za antigen. Termini "deo koji se vezuje za antigen", "fragment koji se vezuje za antigen" antitela, i slično, obuhvataju bilo koji prirodni, enzimski dobijen, sintetički ili genski modifikovani polipeptid ili glikoprotein koji specifično vezuje antigen da bi se formirao kompleks. Fragmenti antitela koji se vezuju za antigen mogu biti izvedeni, npr., iz potpunih molekula antitela korišćenjem bilo koje odgovarajuće standardne tehnike kao što su proteolitička digestija ili tehnike rekombinantnog genetičkog inženjeringa koje uključuju manipulaciju i ekspresiju DNK koja kodira varijabilne i opciono konstantne domene antitela. Takva DNK je poznata i/ili je lako dostupna iz, na primer, komercijalnih izvora, DNK biblioteka (uključujući, na primer, biblioteke fag-antitela), ili se može sintetizovati. DNK se može sekvencionirati i manipulisati hemijski ili korišćenjem tehnika molekularne biologije, na primer, da se uredi jedan ili više varijabilnih i/ili konstantnih domena u odgovarajuću konfiguraciju, ili da se uvedu kodoni, stvore cisteinski ostaci, modifikuju, dodaju ili izbrišu aminokiseline, itd.
[0047] Izraz "bispecifični molekul koji vezuje antigen" odnosi se na protein, polipeptid ili molekulski kompleks koji sadrži najmanje prvi domen za vezivanje antigena i drugi domen za vezivanje antigena. Svaki domen koji se vezuje za antigen unutar bispecifičnog molekula koji vezuje antigen sadrži najmanje jedan CDR koji se sam, ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih CDR-a i/ili FR-a, specifično vezuje za određeni antigen. Bispecifični molekuli koji vezuju antigen uključuju bispecifična antitela.
[0048] Neograničavajući primeri fragmenata koji se vezuju za antigen uključuju: (i) Fab fragmente; (ii) F(ab’)2fragmente; (iii) Fd fragmente; (iv) Fv fragmente; (v) jednolančane Fv (scFv) molekule; (vi) dAb fragmente; i (vii) minimalne jedinice za prepoznavanje koje se sastoje od aminokiselinskih ostataka koji oponašaju hipervarijabilni region antitela (npr., izolovani region koji određuje komplementarnost (CDR) kao što je CDR3 peptid), ili ograničeni FR3-CDR3-FR4 peptid. Drugi modifikovani molekuli, kao što su domen-specifična antitela, antitela sa jednim domenom, antitela sa izbrisanim domenom, himerna antitela, CDR-kalemljena antitela, dijatela, trijatela, tetratela, minitela, nanotela (npr. monovalentna nanotela, bivalentna nanotela, itd.), mali modularni imunofarmaceutici (SMIP-i), i varijabilni IgNAR domeni ajkula, takođe su obuhvaćeni izrazom "fragment koji se vezuje za antigen".
[0049] Fragment antitela koji se vezuje za antigen će tipično sadržati najmanje jedan varijabilni domen. Varijabilni domen može biti bilo koje veličine ili sastava aminokiselina i generalno će sadržati najmanje jedan CDR koji je susedan ili u okviru sa jednom ili više okvirnih sekvenci. U fragmentima koji se vezuju za antigen koji imaju VHdomen povezan sa VLdomenom, VHi VLdomeni mogu biti locirani jedan u odnosu na drugi u bilo kom pogodnom rasporedu. Na primer, varijabilni region može biti dimeran i sadržati VH-VH, VH-VLili VL-VLdimere. Alternativno, fragment antitela koji se vezuje za antigen može da sadrži monomerni VHili VLdomen.
[0050] U određenim izvođenjima, fragment antitela koji se vezuje za antigen može da sadrži najmanje jedan varijabilni domen kovalentno vezan za najmanje jedan konstantni domen. Neograničavajući, primeri konfiguracija varijabilnih i konstantnih domena koji se mogu naći unutar fragmenta antitela koji se vezuje za antigen uključuju: (i) VH-CH1; (ii) VH‑CH2; (iii) VH‑CH3; (iv) VH‑CH1-CH2; (v) VH‑CH1-CH2-CH3; (vi) VH‑CH2-CH3; (vii) VH‑CL; (viii) VL‑CH1; (ix) VL‑CH2; (x) VL‑CH3; (xi) VL‑CH1-CH2; (xii) VL‑CH1-CH2-CH3; (xiii) VL‑CH2-CH3; i (xiv) VL‑CL. U bilo kojoj konfiguraciji promenljivih i konstantnih domena, uključujući bilo koju od primernih konfiguracija navedenih gore, varijabilni i konstantni domeni mogu biti ili direktno povezani jedan sa drugim ili mogu biti povezani potpunim ili delimičnim zglobom ili linker regionom. Zglobni region se može sastojati od najmanje 2 (npr., 5, 10, 15, 20, 40, 60 ili više) aminokiselina koje rezultiraju fleksibilnom ili polufleksibilnom vezom između susednih varijabilnih i/ili konstantnih domena u jednom polipeptidnom molekulu. Osim toga, fragment antitela koji se vezuje za antigen može da sadrži homodimer ili hetero-dimer (ili drugi multimer) bilo koje od konfiguracija varijabilnih i konstantnih domena navedenih gore u nekovalentnoj povezanosti jedna sa drugom i/ili sa jednim ili više monomernih VHili VLdomena (npr., disulfidnom vezom(ama)).
[0051] Kao i kod potpunih molekula antitela, fragmenti koji se vezuju za antigen mogu biti monospecifični ili multispecifični (npr. bispecifični). Multispecifični fragment antitela koji se vezuje za antigen će tipično sadržati najmanje dva različita varijabilna domena, pri čemu je svaki varijabilni domen sposoban da se specifično veže za poseban antigen ili za drugi epitop na istom antigenu. Bilo koji format multispecifičnog antitela, uključujući primere formata bispecifičnih antitela koji su ovde otkriveni, može biti prilagođen za upotrebu u kontekstu fragmenta antitela koji se vezuje za antitela korišćenjem rutinskih tehnika dostupnih u oblasti tehnike.
[0052] Antitela iz ovog pronalaska mogu da funkcionišu kroz citotoksičnost zavisnu od komplementa (CDC) ili citotoksičnost posredovanu ćelijama zavisnu od antitela (ADCC). "Citotoksičnost zavisna od komplementa" (CDC) se odnosi na lizu ćelija koje eksprimiraju antigen antitelom pronalaska u prisustvu komplementa. "Citotoksičnost posredovana ćelijama zavisna od antitela" (ADCC) se odnosi na ćelijski posredovanu reakciju u kojoj nespecifične citotoksične ćelije koje eksprimiraju Fc receptore (FcRs) (npr., ćelije prirodnog ubice (NK), neutrofili i makrofagi) prepoznaju vezano antitelo na ciljnoj ćeliji i na taj način dovode do ciljane ćelije. CDC i ADCC se mogu meriti korišćenjem testova koji su dobro poznati i dostupni u oblasti tehnike. (Videti, npr., patente SAD br.5,500,362 i 5,821,337, i Clynes et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. (SAD) 95:652-656). Konstantni region antitela je važan u sposobnosti antitela da fiksira komplement i posreduje u citotoksičnosti zavisnoj od ćelije. Prema tome, izotip antitela može biti izabran na osnovu toga da li je poželjno da antitelo posreduje u citotoksičnosti. Antitela prema ovom pronalasku mogu uključivati humani IgG teški lanac. U različitim izvođenjima, teški može biti izotip IgG1, IgG2, IgG3 ili IgG4. Antitelo pronalaska je definisano u patentnim zahtevima.
[0053] Izraz "humano antitelo" treba da obuhvati antitela koja imaju varijabilne i konstantne regione izvedene iz sekvenci humanog imunoglobulina germinativne linije. Humana antitela mogu da obuhvataju aminokiselinske ostatke koji nisu kodirani sekvencama humanog imunoglobulina germinativne linije (npr. mutacije uvedene slučajnom ili specifičnom za mesto mutageneze in vitro ili somatskom mutacijom in vivo), na primer u CDR-ovima i posebno CDR3. Međutim, termin "humano antitelo" nije namenjen da uključi antitela u kojima CDR sekvence potiču iz germinativne linije druge vrste sisara, kao što je miš, koje su kalemljene na sekvence humanog regiona okvira.
[0054] Antitela iz pronalaska mogu, u nekim izvođenjima, biti rekombinantna humana antitela. Termin "rekombinantno humano antitelo" treba da obuhvati sva humana antitela koja su pripremljena, eksprimirana, stvorena ili izolovana rekombinantnim sredstvima, kao što su antitela eksprimirana korišćenjem rekombinantnog ekspresionog vektora transfektovanog u ćeliju domaćina (opisano dalje u nastavku), antitela izolovana iz rekombinantne, kombinatorne biblioteke humanih antitela (opisana dalje u nastavku), antitela koja su izolovana iz životinje (npr., miša) koja je transgena za humane imunoglobulinske gene (videti npr. Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295) ili antitela pripremljena, eksprimirana, stvorena ili izolovana na bilo koji drugi način koji uključuje spajanje sekvenci gena humanog imunoglobulina sa drugim sekvencama DNK. Takva rekombinantna humana antitela imaju varijabilne i konstantne regione izvedene iz sekvenci humanog imunoglobulina germinativne linije. Međutim, takva rekombinantna humana antitela mogu biti podvrgnuta in vitro mutagenezi (ili, kada se koristi životinja je životnja transgena za humane sekvence Ig, in vivo somatska mutageneza) i stoga su aminokiselinske sekvence regiona VHi VLregiona rekombinantnih antitela sekvence koje, iako su izvedene iz i povezane sa VHi VLsekvencama humane germinativne linije, možda ne postoje prirodno u humanog germinativnom repertoaru antitela in vivo.
[0055] Humana antitela mogu postojati u dva oblika koja su povezana sa heterogenošću zgloba. U jednom obliku, molekul imunoglobulina sadrži stabilan konstrukt četiri lanca od približno 150-160 kDa u kome se dimeri drže zajedno disulfidnom vezom između teškog lanca. U drugom obliku, dimeri nisu povezani preko međulančanih disulfidnih veza i formira se molekul od oko 75-80 kDa koji se sastoji od kovalentno spregnutog lakog i teškog lanca (poluantitelo). Ove oblike je bilo izuzetno teško razdvojiti, čak i nakon afinitetnog prečišćavanja.
[0056] Učestalost pojavljivanja drugog oblika kod različitih intaktnih IgG izotipova je posledica, ali nije ograničena na, strukturnih razlika povezanih sa zglobnim regionom izotipa antitela. Jedna supstitucija aminokiselina u zglobnom regionu humanog zgloba IgG4 može značajno smanjiti pojavu drugog oblika (Angal et al. (1993) Molecular Immunology 30:105) na nivoe koji se tipično primećuju korišćenjem šarke humanog IgG1. Generalno, antitela koja imaju jednu ili više mutacija u zglobu, CH2 ili CH3 regionu mogu biti poželjna, na primer, u proizvodnji, da bi se poboljšao prinos željenog oblika antitela.
[0057] Antitela iz pronalaska mogu biti izolovana antitela. "Izolovano antitelo" označava antitelo koje je identifikovano i izdvojeno i/ili izvučeno iz najmanje jedne komponente svog prirodnog okruženja. Na primer, antitelo koje je izdvojeno ili uklonjeno iz najmanje jedne komponente organizma, ili iz tkiva ili ćelije u kojima antitelo prirodno postoji ili se prirodno proizvodi, je "izolovano antitelo" za potrebe ovog pronalaska. Izolovano antitelo takođe uključuje antitelo in situ unutar rekombinantne ćelije. Izolovana antitela su antitela koja su bila podvrgnuta najmanje jednom koraku prečišćavanja ili izolacije. Prema određenim izvođenjima, izolovano antitelo može biti u suštini bez drugog ćelijskog materijala i/ili hemikalija.
[0058] Termin "epitop" se odnosi na antigensku determinantu koja stupa u interakciju sa specifičnim mestom vezivanja antigena u varijabilnom regionu molekula antitela poznatog kao paratop. Jedan antigen može imati više od jednog epitopa. Dakle, različita antitela se mogu vezati za različite oblasti na antigenu i mogu imati različite biološke efekte. Epitopi mogu biti ili konformacioni ili linearni. Konformacioni epitop se proizvodi od prostorno postavljenih aminokiselina iz različitih segmenata linearnog polipeptidnog lanca. Linearni epitop je onaj koji proizvode susedni aminokiselinski ostaci u polipeptidnom lancu. U određenim okolnostima, epitop može da sadrži ostake saharida, fosforil grupe ili sulfonil grupe na antigenu.
[0059] Termin "suštinski identitet" ili "suštinski identičan", kada se odnosi na nukleinsku kiselinu ili njen fragment, ukazuje na to da, kada je optimalno usklađen sa odgovarajućim nukleotidnim insercijama ili delecijama sa drugom nukleinskom kiselinom (ili njenim komplementarnim lancem), postoji identičnost nukleotidne sekvence najmanje 9%, a najmanje oko 9%, poželjno oko 9% identičnosti. 98% ili 99% nukleotidnih baza, mereno bilo kojim dobro poznatim algoritmom identičnosti sekvence, kao što je FASTA, BLAST ili Gap, kao što je objašnjeno u nastavku. Molekul nukleinske kiseline koji ima suštinski identitet sa referentnim molekulom nukleinske kiseline može, u određenim slučajevima, da kodira polipeptid koji ima istu ili suštinski sličnu aminokiselinsku sekvencu kao polipeptid koji je kodiran referentnim molekulom nukleinske kiseline.
[0060] Kako se primenjuje na polipeptide, termin "značajna sličnost" ili "suštinski sličan" znači da dve peptidne sekvence, kada su optimalno usklađene, kao što je program GAP ili BESTFIT koristeći podrazumevane težine praznina (gap weights), dele najmanje 95% identičnosti sekvence, još poželjnije najmanje 98% ili 99% identičnosti sekvence. Poželjno, pozicije ostataka koji nisu identični razlikuju se konzervativnim supstitucijama aminkiselina. "Konzervativna aminokiselinska supstitucija" je ona u kojoj je aminokiselinski ostatak supstituisan drugim aminokiselinskim ostatkom koji ima bočni lanac (R grupa) sa sličnim hemijskim svojstvima (npr. naelektrisanje ili hidrofobnost). Generalno, konzervativna supstitucija aminokiselina neće bitno promeniti funkcionalna svojstva proteina. U slučajevima kada se dve ili više aminokiselinskih sekvenci razlikuju jedna od druge konzervativnim supstitucijama, procenat identiteta sekvence ili stepen sličnosti može se podesiti naviše da bi se korigovala konzervativna priroda supstitucije. Sredstva za ovo podešavanje su dobro poznata stručnjacima u ovoj oblasti. Videti, npr., Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24: 307-331, ovde uključeno kao referenca. Primeri grupa aminokiselina koje imaju bočne lance sa sličnim hemijskim svojstvima uključuju (1) alifatične bočne lance: glicin, alanin, valin, leucin i izoleucin; (2) alifatičnohidroksil bočni lanci: serin i treonin; (3) bočni lanci koji sadrže amid: asparagin i glutamin; (4) aromatični bočni lanci: fenilalanin, tirozin i triptofan; (5) osnovni bočni lanci: lizin, arginin i histidin; (6) kiseli bočni lanci: aspartat i glutamat, i (7) bočni lanci koji sadrže sumpor su cistein i metionin. Poželjne konzervativne supstitucione grupe amino kiselina su: valin-leucin-izoleucin, fenilalanin-tirozin, lizinarginin, alanin-valin, glutamat-aspartat i asparagin-glutamin. Alternativno, konzervativna supstitucija je svaka promena koja ima pozitivnu vrednost u matrici logaritamske verovatnoće PAM250 otkrivenoj u Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443-1445, ovde uključeno kao referenca. "Umereno konzervativna" supstitucija je svaka promena koja ima nenegativnu vrednost u matrici logaritamske verovatnoće PAM250.
[0061] Sličnost sekvenci za polipeptide, koja se takođe naziva i identitet sekvence, obično se meri korišćenjem softvera za analizu sekvence. Softver za analizu proteina poklapa slične sekvence koristeći mere sličnosti dodeljene različitim supstitucijama, delecijama i drugim modifikacijama, uključujući konzervativne supstitucije aminokiselina. Na primer, GCG softver sadrži programe kao što su Gap i Bestfit koji se mogu koristiti sa podrazumevanim parametrima za određivanje homologije sekvence ili identiteta sekvence između blisko povezanih polipeptida, kao što su homologni polipeptidi iz različitih vrsta organizama ili između proteina divljeg tipa i njegovog muteina. Videti, npr., GCG verziju 6.1. Polipeptidne sekvence se takođe mogu uporediti korišćenjem FASTA koristeći podrazumevane ili preporučene parametre, program u GCG verziji 6.1. FASTA (npr., FASTA2 i FASTA3) obezbeđuje poravnanja i procentualni identitet sekvenci regiona najboljeg preklapanja između sekvenci upita i pretrage (Pearson (2000) supra). Drugi poželjni algoritam kada se poredi sekvenca pronalaska sa bazom podataka koja sadrži veliki broj sekvenci iz različitih organizama je kompjuterski program BLAST, posebno BLASTP ili TBLASTN, koji koristi podrazumevane parametre. Videti, npr., Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol.215:403‑410 and Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res.25:3389‑402.
Strategije doziranja i režimi primene
[0062] Stvorene su strategije doziranja koje obezbeđuju režime primene za ublažavanje prevalencije ili težine, ili oboje, sindroma oslobađanja citokina (CRS) ili reakcije povezane sa infuzijom (IRR) primenom terapijskog proteina pacijentu za različite terapije. Ove strategije uključuju višestruke doze terapijskog bispecifičnog antitela kao što je definisano u patentnim zahtevima koje se mogu davati subjektu tokom definisanog vremenskog toka da bi se kreirao režim. Postupci obuhvataju sekvencijalno davanje subjektu višestrukih doza antitela. "Sekvencionalno davanje" znači da se svaka doza terapijskog proteina daje subjektu u različitom trenutku, npr., u različite dane razdvojene unapred određenim intervalom (npr. satima, danima, nedeljama ili mesecima). Postupci obuhvataju sekvencijalno davanje pacijentu podeljene primarne doze antitela, nakon čega sledi podeljena sekundarna doza antitela, opciono praćena podeljenom tercijarnom dozom terapijskog proteina, nakon čega slede pojedinačne doze maksimalne nedeljne doze antitela. Trenutno zastupljeni režimi primene dozvoljavaju veće doze antitela koje su poželjne za povećanje terapeutske efikasnosti, ali bez štetnih efekata povezanih sa CRS ili IRR. Bez namere da budu vezani bilo kakvom posebnom teorijom, sadašnji režimi primene obezbeđuju pripremanje imunološkog odgovora na davanje antitela kako bi se minimizirala incidenca i ozbiljnost CRS i IRR tokom početnih faza režima lečenja, što onda dozvoljava primenu većih doza terapijskih proteina tokom narednih faza režima lečenja bez značajnih neželjenih događaja povezanih sa CRS ili IRR.
[0063] Primer režima primene uključuje: (i) davanje frakcija primarne doze terapijskog proteina u nedelji 1 (W1) režima doziranja, pri čemu primarna doza obuhvata 1 mg terapijskog proteina, frakcija prve doze (F1D1) čini 50% primarne doze i primenjuje se subjektu 1. dana u nedelji 1, a frakcija druge doze (F2D1) čini 50% ukupne primarne doze i primenjuje se subjektu od 12 do 96 sati nakon primene F1D1; (ii) davanje frakcija sekundarne doze terapijskog proteina u nedelji 2 (W2) režima doziranja, pri čemu je sekundarna doza 20 mg terapijskog proteina, frakcija prve doze (F1D2) sadrži 50% sekundarne doze, frakcija druge doze (F2D2) sadrži 50% sekundarne doze, i F1D2 i F2D2 se daju subjektu od 12 do 96 sati jedna od druge tokom 2 nedelje režima doziranja; (iii) davanje frakcija tercijarne doze terapijskog proteina u nedelji 3 (W3) režima doziranja, pri čemu tercijarna doza nije manja od jedne polovine maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina i nije više od maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina, frakcija prve doze (F1D3) obuhvata 50% tercijerne doze, frakcija druge doze (F2D3) obuhvata 50% tercijerne doze, i F1D3 i F2D3 se daju subjektu u toku 96 sati jedna od druge u toku nedelje 3 režima doziranja; i (iv) davanje maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina subjektu kao pojedinačne doze u sledećoj nedelji (Ws) režima doziranja, pri čemu maksimalna nedeljna doza obuhvata 80 mg, 160 mg ili 320 mg terapijskog proteina.
[0064] U različitim izvođenjima, tercijarna doza obuhvata 50% maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina. U nekim slučajevima, tercijarna doza se sastoji od 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 71%, 71%, 7,7%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89% ili 90% od maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina. U nekim slučajevima, tercijarna doza terapijskog proteina obuhvata procentualni opseg maksimalne nedeljne doze uključujući bilo koju od vrednosti navedenih iznad kao gornji ili donji kraj opsega (npr., 50-75%).
[0065] U različitim izvođenjima, prva frakcija doze i druga frakcija doze tercijarne doze svaka čine 50% doze. U nekim slučajevima, prva frakcija doze i druga frakcija doze tercijarne doze čine različite procente (ukupno 100%) ukupne doze. Na primer, prva frakcija doze može da čini 45% doze, a druga frakcija doze može da čini 55% doze. Alternativno, prva frakcija doze može da čini 55% doze, a druga frakcija doze može da čini 45% doze. U različitim izvođenjima, prva i druga frakcija doze mogu uključivati 10%/90%, 15%/85%, 20%/80%, 25%/75%, 30%/70%, 35%/65%, 40%/60%, 46%/54%, 47%/53%, 48%/52% ili obrnuto, od ukupne tercijarne doze, redom.
[0066] U različitim izvođenjima, tercijarna doza (D3) se može podeliti na dve ili više frakcija. Različite opcije za podelu doze na dve frakcije su razmatrane gore. U nekim slučajevima, međutim, doza se deli na 3, 4 ili 5 frakcija. Na primer, doza se može podeliti na 5 frakcija, od kojih svaka čini 20% ukupne doze, a svaka frakcija doze (F1, F2, F3, F4 i F5) se može primeniti na subjekta pet uzastopnih dana tokom režima primene. U drugim slučajevima, procenat ukupne doze može da varira između svake frakcije doze. Na primer, ako je doza podeljena na 3 frakcije, prva frakcija doze (F1) može uključivati 30% ukupne doze, druga frakcija doze (F2) može uključivati 30% ukupne doze, a treća frakcija doze (F3) može uključivati preostalih 40% ukupne primarne doze. Druge kombinacije procenata i broja frakcionih doza koje su jednake 100% ukupne doze su izričito razmatrane ovde.
[0067] U jednom primeru izvođenja režima doziranja, primarna doza se sastoji od 1 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D1) i druge frakcije doze (F2D1) sadrži 500 mcg, sekundarna doza sadrži 20 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D2) i druge frakcije doze sastoji se od frakcije doze od 10 mg (F2D2).60 mg, svaka frakcija prve doze (F1D3) i frakcija druge doze F2D3) sadrži 30 mg, a maksimalna nedeljna doza obuhvata 80 mg terapijskog proteina.
[0068] U jednom primeru izvođenja režima doziranja, primarna doza se sastoji od 1 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D1) i druge frakcije doze (F2D1) sadrži 500 mcg, sekundarna doza sadrži 20 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D2) i druge frakcije doze sastoji se od frakcije doze od 10 mg (F2D2).80 mg, svaka frakcija prve doze (F1D3) i frakcija druge doze F2D3) sadrži 40 mg, a maksimalna nedeljna doza obuhvata 160 mg terapijskog proteina.
[0069] U jednom primeru izvođenja režima doziranja, primarna doza se sastoji od 1 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D1) i druge frakcije doze (F2D1) sadrži 500 mcg, sekundarna doza sadrži 20 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D2) i druge frakcije doze sastoji se od frakcije doze od 10 mg (F2D2).
160 mg, svaka frakcija prve doze (F1D3) i frakcija druge doze F2D3) sadrži 80 mg, a maksimalna nedeljna doza obuhvata 320 mg terapijskog proteina.
[0070] U različitim izvođenjima, terapijski protein se primenjuje u dozi za održavanje koncentracije u serumu od najmanje oko 2000 mcg/L nakon primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja. U nekim slučajevima, terapijski protein se primenjuje u dozi za održavanje koncentracije u serumu od najmanje oko 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3100, 3200, 3300, 3400, ili 3500 mcg/L nakon primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja.
[0071] U različitim izvođenjima, terapijski protein se primenjuje u dozi za održavanje prosečne koncentracije u serumu od najmanje oko 2600 mcg/L nakon primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja. U nekim slučajevima, terapijski protein se primenjuje u dozi koja održava prosečnu koncentraciju u serumu od najmanje 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2700, 2800, 2900, 3000, 3200, 300, 300, 3003500, 3600, 3700, 3800, 3900 ili 4000 mcg/L nakon primene maksimalne nedeljne doze tokom trajanja režima doziranja.
[0072] U različitim izvođenjima, sledeća nedelja (nedelje - week W) režima doziranja je nedelja 3 (W3), nedelja 4 (W4), nedelja 5 (W5), nedelja 6 (W 6), nedelja 7 (W7), nedelja 8 (W8), nedelja 9 (W9), nedelja 10 (W10), nedelja 11 (W11), nedelja 12 (W 31 nedelja), nedelja 12 (W31 nedelja), nedelja 12 (W14 nedelja), nedelja (W12), nedelja 15 (W15), nedelja 16 (W16), nedelja 17 (W17), nedelja 18 (W18), nedelja 19 (W19), nedelja (W20), nedelja (W20), nedelja (W21), nedelja 22 (W22), nedelja 23 (W23), nedelja 24 (W24), nedelja 25 (W65), nedelja 25 (W65), nedelja (W65), nedelja (W27), nedelja 28 (W29), nedelja 30 (W30), nedelja 31 (31), nedelja 32 (32), nedelja 33 (33), nedelja 34 (W34), nedelja 35 (W35) ili nedelja 36 (W36).
[0073] U različitim izvođenjima, druga frakciona doza u bilo kojoj nedelji režima doziranja se primenjuje u roku od 24, 36, 48, 60, 72, 84 ili 96 sati nakon primene prve frakcione doze.
[0074] U različitim izvođenjima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje subjektu kao pojedinačna doza u periodu od 1 do 8 nedelja, ili tokom 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 16, 15, 19, 19.21, 22, 23, 24, 25, 26 ili više nedelja tokom nedeljne faze režima doziranja. U nekim slučajevima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje subjektu kao pojedinačna doza tokom niza nedelja uključujući bilo koju od vrednosti koje su gore navedene kao gornji ili donji kraj opsega (npr., 1-12 nedelja).
[0075] U raznim izvođenjima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje u subjektu kao jedinstvena doza (doza održavanja) jednom svake dve nedelje do 24 nedelje, ili do 25, 26, 43, 44, 37, 54, 51, 52, 57, 58, 59, 56, 57, 58, 59, 56, 57, 58, 59, 56, 61, 62 , 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 95, 101, 101, 01, 01, 101, 150, 160, 170, 1, 18, 18 240, 250, 260 ili više nedelja tokom dvonedeljne, tronedeljne, četvoronedeljne ili petonedeljne faze (faza održavanja) koja može da prati fazu održavanja svake nedelje. (tj., ili nedeljno doziranje maksimalne nedeljne doze ili podeljeno doziranje primarne, sekundarne i (opciono) tercijarne doze. U nekim slučajevima, maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina se daje subjektu kao pojedinačna doza (doza održavanja) jedan na svake tri nedelje, ili jednom u četiri nedelje tokom niza nedelja, uključujući bilo koju od vrednosti navedenih iznad kao gornji ili donji kraj opsega (npr., 24-86 nedelja).
[0076] U jednom primeru izvođenju režima doziranja, primarna doza se sastoji od 1 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D1) i druge frakcije doze (F2D1) sadrži 500 mcg, sekundarna doza sadrži 20 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D2) i druge frakcije doze sastoji se od frakcije doze od 10 mg (F2D2).80 mg, svaka frakcija prve doze
[0077] (F1D3) i frakcija druge doze F2D3) čine 40 mg, a maksimalna nedeljna doza obuhvata 160 mg terapijskog proteina, pri čemu se tercijarna doza primenjuje kao pojedinačna doza (tj., 80 mg) nedeljno (QW) tokom 4. do 12. nedelje maksimalnog režima doziranja, a maksimalna nedeljna doza je davana kao pojedinačna doza (tj., 160 mg) jednom u svake dve nedelje (Q2W) od 14. nedelje pa nadalje režima doziranja.
[0078] U nekim slučajevima, gore identifikovani režim doziranja je za upotrebu u metodama lečenja agresivnog limfoma (npr. limfom ćelija plašta ili limfom marginalne zone).
[0079] U jednom primeru izvođenja režima doziranja, primarna doza se sastoji od 1 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D1) i druge frakcije doze (F2D1) sadrži 500 mcg, sekundarna doza sadrži 20 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D2) i druge frakcije doze sastoji se od frakcije doze od 10 mg (F2D2).
160 mg, svaka od frakcija prve doze (F1D3) i druge frakcije doze F2D3) sadrži 80 mg, a maksimalna nedeljna doza obuhvata 320 mg terapijskog proteina, pri čemu se tercijarna doza primenjuje kao pojedinačna doza (tj., 160 mg) nedeljno, a maksimalna doza je od 4 do 1 nedelje u toku nedelje, a maksimalna doza je režim od 4 do 2 nedelje. primenjena kao pojedinačna doza (tj., 320 mg) jednom u dve nedelje (Q2W) od 14. nedelje pa nadalje režima doziranja.
[0080] U nekim slučajevima, gore identifikovani režim doziranja je za upotrebu u metodama lečenja agresivnog limfoma (npr. limfom ćelija plašta ili limfom marginalne zone). U nekim slučajevima, gore navedeni režim doziranja je za upotrebu u metodama lečenja folikularnog limfoma (npr. stepen 1-3a). U nekim slučajevima, gore identifikovani režim doziranja je za lečenje difuznog limfoma velikih B ćelija (uključujući relapsirani ili refraktorni DLBCL, npr., kod pacijenata koji nisu uspeli pre CART terapije).
[0081] U različitim izvođenjima, svaka doza ili frakciona doza terapijskog proteina se daje subjektu tokom perioda od 1-4, 1-5 ili 1-6 sati (npr., putem infuzije). U nekim slučajevima, doza ili frakciona doza se primenjuje tokom perioda od 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ili 12 ili više sati. U nekim slučajevima, svaka doza ili frakciona doza terapijskog proteina se daje subjektu u određenom vremenskom opsegu uključujući bilo koju od vrednosti navedenih iznad kao gornji ili donji kraj opsega (npr., 1-8 sati). U različitim izvođenjima, svaka maksimalna nedeljna doza se primenjuje kao pojedinačna infuzija.
[0082] U nekim izvođenjima režima davanja o kojima se ovde raspravlja, drugi agens se primenjuje kao pretretman, ili u kombinaciji sa terapijskim proteinom. U nekim slučajevima, steroid, kao što je deksametazon, se daje pacijentu kao predtretman pre primene primarnih frakcionih doza i sekundarnih frakcionih doza, i opciono pre tercijarnih frakcionih doza. U nekim izvođenjima, deksametazon se daje pacijentu oko jedan do tri sata pre prve frakcije doze (F1D1). U određenim izvođenjima, doza deksametazona se primenjuje intravenskom infuzijom. U nekim slučajevima, antagonist citokina, kao što je anti-IL-6 antitelo ili anti-IL-6R antitelo se primenjuje u kombinaciji sa terapijskim proteinom tokom primarne, sekundarne i opciono tercijarne doze. U nekim slučajevima, anti-CD20 monospecifično antitelo (npr., rituksimab) se daje pacijentu kao predtretman pre primene primarnih frakcionih doza i opciono sekundarnih frakcionih doza, i opciono pre tercijarnih frakcionih doza. Ovi predtretmani ili kombinovana davanja drugog agensa se prekidaju, u jednom izvođenju, sa primenom pojedinačne doze maksimalne nedeljne doze koja počinje, npr., od 3. nedelje, 4. nedelje, 5. ili 6. nedelje režima doziranja kako se ne bi veštački prigušila aktivnost citokina i na taj način ometali terapijski efekti terapijskog proteina.
[0083] Izrazi "primarna doza", "sekundarna doza" i "tercijarne doze" odnose se na vremensku sekvencu primene molekula koji se vezuje za antigen pronalaska. Dakle, "primarna doza" je doza koja se primenjuje na početku režima lečenja; "sekundarna doza" je doza koja se primenjuje nakon primarne doze (uključujući sve dozne frakcije primarne doze); a "tercijarne doze" su doze koje se primenjuju posle sekundarne doze (uključujući sve dozne frakcije sekundarne doze). Primarne, sekundarne i tercijarne doze (ili njihove frakcije doze) mogu sadržati količinu terapijskog proteina kako je ovde diskutovano. U nekim slučajevima, "primarna doza" i "sekundarna doza", kao i opciona "tercijarna doza" mogu se nazvati "dozama punjenja", dok se naredne maksimalne nedeljne doze mogu nazvati "dozama održavanja". U nekim slučajevima, "primarna doza" se može nazvati "početna doza". U nekim slučajevima, "sekundarna doza" se može nazvati "srednja doza". U nekim slučajevima, "tercijarna doza" se može nazvati "dozom pojačanja".
[0084] Izraz "neposredna prethodna doza" se odnosi na, u nizu višestrukih administracija, dozu molekula koji vezuje antigen koji se daje pacijentu pre primene sledeće doze u nizu bez intervencionih doza.
Antigen-vezujući molekuli
[0085] Multispecifična antitela mogu biti specifična za različite epitope jednog ciljnog polipeptida ili mogu da sadrže domene za vezivanje antigena specifične za više od jednog ciljnog polipeptida. Videti, e.g., Tutt et al., 1991, J. Immunol. 147:60‑69; Kufer etal., 2004, Trends Biotechnol. 22:238‑244. Bispecifična antitela iz ovog pronalaska mogu biti povezana ili istovremeno eksprimirana sa drugim funkcionalnim molekulom, npr., drugim peptidom ili proteinom. Na primer, antitelo ili njegov fragment mogu biti funkcionalno povezani (npr., hemijskim spajanjem, genskom fuzijom, nekovalentnom asocijacijom ili na neki drugi način) sa jednim ili više drugih molekularnih entiteta, kao što je drugo antitelo ili fragment antitela da bi se proizvelo bi-specifično antitelo sa drugom ili dodatnom specifičnošću vezivanja.
[0086] Ovaj pronalazak se odnosi na bispecifično anti-CD20 x anti-CD3 antitelo koje je prikazano u WO 2014/047231.
[0087] Upotreba izraza "anti-CD3 antitelo", "anti-CD20 antitelo", "anti-PSMA antitelo", anti-MUC16 antitelo, "anti-STEAP2 antitelo," "anti-BCMA antitelo" ili slično ovde je namenjeno da uključi i monospecifična antitela kao i bispecifična antitela koja sadrže odgovarajući antigen-vezujući krak (npr., CD3). Ovaj pronalazak se odnosi na bispecifična antitela gde jedan krak imunoglobulina vezuje humani CD3, a drugi krak imunoglobulina je specifičan za humani CD20.
[0088] U određenim izvođenjima, CD3-vezujući krak se vezuje za humani CD3 i indukuje aktivaciju humanih T ćelija. U određenim izvođenjima, krak koji se vezuje za CD3 se slabo vezuje za humani CD3 i indukuje aktivaciju humanih T ćelija. U drugim izvođenjimam, CD3-vezujući krak se slabo vezuje za humani CD3 i indukuje ubijanje ćelija koje eksprimiraju antigen u vezi sa tumorom u kontekstu bispecifičnog ili multispecifičnog antitela. U drugim izvođenjima, CD3-vezujući krak se slabo vezuje ili povezuje sa CD3 čoveka i cinomolgusa (majmuna), ali se interakcija vezivanja ne može detektovati in vitro testovima poznatim u oblasti tehnike.
[0089] Svaki domen bispecifičnog antitela koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni domen teškog lanca (HCVR) i varijabilni domen lakog lanca (LCVR). U kontekstu bispecifičnog molekula za vezivanje antigena koji sadrži prvi i drugi domen za vezivanje antigena (npr., bispecifično antitelo), CDR-ovi prvog domena za vezivanje antigena mogu biti označeni prefiksom "A1", a CDR-ovi drugog domena za vezivanje antigena mogu biti označeni prefiksom "A2". Prema tome, CDR-ovi prvog domena za vezivanje antigena mogu se ovde označiti kao A1-HCDR1, A1-HCDR2 i A1-HCDR3; i CDR-ovi drugog domena za vezivanje antigena se ovde mogu nazvati A2-HCDR1, A2-HCDR2 i A2-HCDR3.
[0090] Terapijsko bispecifično anti-CD20 x anti-CD3 antitelo je poznato kao REGN1979. REGN1979 obuhvata anti-CD20 vezujući krak koji sadrži težak lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je data u SEQ ID NO: 10, anti-CD3 vezujući krak koji sadrži težak lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je data u SEQ ID NO: 11, i zajednički laki lanac (koji odgovara i sekvenci anti-CD32 aminokiseline koja se sastoji od anti-CD32 aminokiselinske sekvence) ID NO: 12. U nekim slučajevima, zreli oblik antitela možda neće uključivati ostatke lizina na C-kraju SEQ ID NO: 10 i 11. Stoga, u nekim slučajevima anti-CD20 vezujući krak REGN1979 sadrži težak lanac koji sadrži ostatke 1‑452 SEQ ID NO: 10, i anti-CD3 vezujući krak REGN1979 sadrži težak lanac koji sadrži ostatke 1‑448 SEQ ID NO: 11. REGN1979 takođe sadrži HCVR, LCVR i CDR sekvence navedene u pratećem spisku sekvenci. Anti-CD20 HCVR odgovara SEQ ID NO: 13, anti-CD3 HCVR odgovara SEQ ID NO: 14, a zajednički LCVR odgovara SEQ ID NO: 15. Anti-CD20 HCDR1-HCDR2-HCDR3 domeni odgovaraju SEQ ID NO: 16‑1, redom. Anti-CD3 HCDR1-HCDR2-HCDR3 domeni odgovaraju SEQ ID NOs: 19-20-21, redom. Zajednički domeni LCDR1-LCDR2-LCDR3 odgovaraju SEQ ID NOs: 22-23-24, tim redom.
[0091] U nekim slučajevima, bispecifični molekuli koji vezuju antigen iz ovog pronalaska mogu sadržati bilo koji od formata koji se razmatraju u Brinkmann et al., MABS, 9(2):182‑212, 2017.
[0092] Prvi domen koji vezuje antigen i drugi domen koji vezuje antigen mogu biti direktno ili indirektno povezani jedan sa drugim da bi formirali bispecifično antitelo ovog pronalaska. Alternativno, prvi domen za vezivanje antigena i drugi domen za vezivanje antigena mogu biti povezani sa zasebnim multimerizujućim domenom. Povezivanje jednog multimerizujućeg domena sa drugim multimerizujućim domenom olakšava asocijaciju između dva domena za vezivanje antigena, čime se formira bispecifičan molekul koji vezuje antigen. "Domen za multimerizaciju" je bilo koji makromolekul, protein, polipeptid, peptid ili aminokiselina koji ima sposobnost da se poveže sa drugim multimerizujućim domenom iste ili slične strukture ili konstitucije. Na primer, multimerizirajući domen može biti polipeptid koji sadrži CH3 domen imunoglobulina. Neograničavajući primer multimerizujuće komponente je Fc deo imunoglobulina (koji sadrži CH2-CH3 domen), npr., Fc domen IgG izabranog od izotipova IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4, kao i bilo koji alotip unutar svake grupe izotipova.
[0093] Bispecifični molekuli koji se vezuju za antigen ovog pronalaska će tipično sadržati dva multimerizujuća domena, npr., dva Fc domena koji su svaki pojedinačno deo posebnog teškog lanca antitela.
[0094] U određenim izvođenjima, domen multimerizacije je Fc fragment ili aminokiselinska sekvenca dužine od 1 do oko 200 amino kiselina koja sadrži najmanje jedan cisteinski ostatak. U drugim izvođenjima, domen multimerizacije je cisteinski ostatak, ili kratak peptid koji sadrži cistein. Drugi domeni multimerizacije obuhvataju peptide ili polipeptide koji sadrže ili se sastoje od leucinskog zatvarača, motiva zavonica-petlja ili motiva namotanog kalema (coiled-coil).
[0095] Bilo koji format ili tehnologija bispecifičnog antitela može se koristiti za pravljenje bispecifičnih molekula koji vezuju antigen prema ovom pronalasku. Na primer, antitelo ili njegov fragment koji ima prvu specifičnost vezivanja antigena može biti funkcionalno povezan (npr. hemijskim spajanjem, genskom fuzijom, nekovalentnom asocijacijom ili na neki drugi način) sa jednim ili više drugih molekularnih entiteta, kao što je drugo antitelo ili fragment antitela koji ima drugu specifičnost vezivanja za antigen da bi proizveo bispecifični molekul koji se vezuje za antigen. Specifični primeri bispecifičnih formata koji se mogu koristiti u kontekstu ovog pronalaka sadrže, bez ograničenja, npr., formate zasnovane na scFv ili dijatelo bispecifične formate, IgG-scFv fuzije, dualni varijabilni domen (DVD)-lg, Quadroma, “knobs-into-holes”, zajednički laki lanac (npr. zajednički laki lanac sa “knobs-into holes” itd.), CrossMab, CrossFab, (SEED)telo, leucinski zatvarač, Duotelo, IgG1/IgG2, Fab (DAF)‑lgG dvostrukog dejstva, i Mab2 bispecifični formati (videti, npr., Klein et al. 2012, mAbs 4:6, 1‑11, i reference koje su u njima citirane, za pregled prethodno navedenih formata).
Svojstva vezivanja molekula koji vezuju antigen
[0096] Termin "vezivanje" u kontekstu vezivanja antitela, imunoglobulina, fragmenta koji se vezuje za antitelo ili proteina koji sadrži Fc za bilo koji, npr., unapred određeni antigen, kao što je protein površine ćelije ili njegov fragment, obično se odnosi na interakciju ili asocijaciju između najmanje dva entiteta ili molekularne strukture, kao što je interakcija antitela sa antigenom.
[0097] Na primer, afinitet vezivanja obično odgovara KDvrednosti od oko 10<‑7>M ili manje, kao što je oko 10<‑8>M ili manje, kao što je oko 10<‑9>M ili manje kada je određeno sa, na primer, tehnologijom površinske plazmonske rezonance (SPR) u BIAcore 3000 instrumentu korišćenjem antigena kao liganda i antitela, Ig, fragmenta vezivanja antitela, ili proteina koji sadrži Fc ako analita (ili antiliganda). Strategije vezivanja zasnovane na ćelijama, kao što su testovi sortiranja fluorescentno aktiviranih ćelija (FACS), takođe se rutinski koriste, a podaci FACS-a dobro koreliraju sa drugim metodama kao što su vezivanje radioliganda u konkurenciji i SPR (Benedict, CA, J Immunol Methods.1997, 201(2):223‑31; Geuijen, CA, et al. J Immunol Methods.2005, 302(1‑2):68‑77).
[0098] Shodno tome, antitelo pronalaska se vezuje za unapred određeni antigen ili molekul ćelijske površine (receptor) koji ima afinitet koji odgovara vrednosti KDkoja je najmanje deset puta niža od njegovog afiniteta za vezivanje za nespecifičan antigen (npr., BSA, kazein). Prema ovom pronalasku, afinitet antitela koje odgovara vrednosti KDkoja je jednaka ili manja od deset puta niža od nespecifičnog antigena može se smatrati nedetektabilnim vezivanjem, međutim takvo antitelo može biti upareno sa drugom krakom za vezivanje antigena za proizvodnju bispecifičnog antitela iz pronalaska.
[0099] Termin "KD" (M) se odnosi na konstantu ravnoteže disocijacije određene interakcije antiteloantigen, ili konstantu ravnoteže disocijacije antitela ili fragmenta koji se vezuje za antitelo koji se vezuje za antigen. Postoji inverzna veza između KDi afiniteta vezivanja, stoga što je manja vrednost KD, to je veći, tj. jači, afinitet. Prema tome, termini "veći afinitet" ili "jači afinitet" odnose se na veću sposobnost formiranja interakcije i samim tim na manju KDvrednost, i obrnuto, termini "niži afinitet" ili "slabiji afinitet" odnose se na nižu sposobnost formiranja interakcije i samim tim na veću KDvrednost. U nekim okolnostima, veći afinitet vezivanja (ili KD) određenog molekula (npr. antitela) za njegov interaktivni partnerski molekul (npr. antigen X) u poređenju sa afinitetom vezivanja molekula (npr. antitela) za drugi interaktivni partner molekul (npr. antigen Y) može se izraziti kao odnos vezivanja određen deljenjem veće vrednosti KD(niži ili slabiji afinitet) sa manjim KD(veći ili jači afinitet), na primer izražen kao 5 ili 10 puta veći afinitet vezivanja, u zavisnosti od slučaja.
[0100] Termin "kd" (sec-1 ili 1/s) se odnosi na konstantu brzine disocijacije određene interakcije antitelo-antigen, ili konstantu brzine disocijacije antitela ili fragmenta koji se vezuje za antitelo. Navedena vrednost se takođe naziva koffvrednost.
[0101] Termin "ka" (M-1 x sec-1 ili 1/M) se odnosi na konstantu brzine asocijacije određene interakcije antitelo-antigen, ili konstantu brzine asocijacije antitela ili fragmenta koji se vezuje za antitelo.
[0102] Termin "KA" (M-1 ili 1/M) se odnosi na konstantu ravnoteže asocijacije određene interakcije antitelo-antigen, ili konstantu ravnoteže asocijacije antitela ili fragmenta koji se vezuje za antitelo. Konstanta ravnoteže asocijacije se dobija deljenjem kasa kd.
[0103] Izraz "EC50" ili "EC50" se odnosi na polovinu maksimalne efektivne koncentracije, koja uključuje koncentraciju antitela koje indukuje odgovor na pola puta između osnovne linije i maksimuma nakon određenog vremena izlaganja. EC50u suštini predstavlja koncentraciju antitela gde se primećuje 50% njegovog maksimalnog efekta. U određenim izvođenjima, vrednost EC50jednaka je koncentraciji antitela prema pronalasku koje daje polumaksimalno vezivanje za ćelije koje eksprimiraju CD3 ili CD20, kao što je određeno npr. FACS test vezivanja. Tako se primećuje smanjeno ili slabije vezivanje sa povećanom EC50, ili polovinom maksimalne efektivne vrednosti koncentracije.
[0104] U jednom aspektu, smanjeno vezivanje se može definisati kao povećana koncentracija EC50antitela koja omogućava vezivanje za polovinu maksimalne količine ciljnih ćelija.
[0105] U drugom aspektu, EC50vrednost predstavlja koncentraciju antitela prema pronalasku koje izaziva polu-maksimalno iscrpljivanje ciljnih ćelija citotoksičnom aktivnošću T ćelija. Stoga, povećana citotoksična aktivnost (npr., T ćelija posredovano ubijanje tumorskih ćelija) je primećena sa smanjenom EC50, ili upola vrednosti maksimalne efektivne koncentracije.
pH-zavisno vezivanje
[0106] Ovaj pronalazak obuhvata antitela sa karakteristikama vezivanja zavisnim od pH. Na primer, antitelo ovog pronalaska može da pokaže smanjeno vezivanje za, npr., tumorski antigen kao što je CD20 pri kiselom pH u poređenju sa neutralnim pH. Alternativno, antitela pronalaska mogu da ispolje pojačano vezivanje za, npr., tumorski antigen kao što je CD20 pri kiselom pH u poređenju sa neutralnim pH. Izraz "kiseli pH" uključuje pH vrednosti manje od oko 6,2, na primer, oko 6,0, 5,95, 5,9, 5,85, 5,8, 5,75, 5,7, 5,65, 5,6, 5,55, 5,5, 5,45, 5,3, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5,5, 5, 5, 5, 5, 5, 5, 5, 5.5.2, 5.15, 5.1, 5.05, 5.0 ili manje. Izraz "neutralni pH" označava pH od oko 7,0 do oko 7,4. Izraz "neutralni pH" uključuje pH vrednosti od oko 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35 i 7,4.
[0107] U određenim slučajevima, "smanjeno vezivanje... pri kiselom pH u poređenju sa neutralnim pH" se izražava u smislu odnosa KDvrednosti antitela koje se vezuje za svoj antigen pri kiselom pH prema KDvrednosti antitela koje se vezuje za svoj antigen pri neutralnom pH (ili obrnuto). Na primer, antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen može se smatrati da pokazuje "smanjeno vezivanje za, npr., CD20 pri kiselom pH u poređenju sa neutralnim pH" za svrhe ovog pronalaska ako antitelo pokazuje kiseli/neutralni KDodnos od oko 3,0 ili veći. U određenim primerima izvođenjima, odnos kiseli/neutralni KDza antitelo iz ovog pronalaska može biti oko 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 5,5, 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0, 8,5, 9,0, 0,5.11,0, 11,5, 12,0, 12,5, 13,0, 13,5, 14,0, 14,5, 15,0, 20,0.25,0, 30,0, 40,0, 50,0, 60,0, 70,0, 100,0 ili više.
[0108] Antitela sa karakteristikama vezivanja zavisnim od pH mogu se dobiti, na primer, skriningom populacije antitela na smanjeno (ili pojačano) vezivanje za određeni antigen pri kiselom pH u poređenju sa neutralnim pH. Dodatno, modifikacije domena za vezivanje antigena na nivou aminokiselina mogu dati antitela sa pH zavisnim karakteristikama. Na primer, supstitucijom jedne ili više aminokiselina domena za vezivanje antigena (npr. unutar CDR) sa histidinskim ostatkom, može se dobiti antitelo sa smanjenim vezivanjem antigena pri kiselom pH u odnosu na neutralni pH.
Antitela koja sadrže Fc Varijante
[0109] Generalno, antitela i bispecifični molekuli koji se vezuju za antigen mogu da sadrže Fc domen koji sadrži jednu ili više mutacija koje pojačavaju ili smanjuju vezivanje antitela za FcRn receptor, npr., pri kiselom pH u poređenju sa neutralnim pH. Na primer, antitela koja sadrže mutaciju u CH2 ili CH3 regionu Fc domena, pri čemu mutacija(e) povećava afinitet Fc domena za FcRn u kiseloj sredini (npr., u endozomu gde se pH kreće od oko 5,5 do oko 6,0). Takve mutacije mogu dovesti do povećanja poluživota antitela u serumu kada se daju životinji. Neograničavajući primeri takvih Fc modifikacija uključuju, npr., modifikaciju na poziciji 250 (npr., E ili Q); 250 i 428 (npr., L ili F); 252 (npr., L/Y/F/W ili T), 254 (npr., S ili T), i 256 (npr., S/R/Q/E/D ili T); ili modifikaciju na poziciji 428 i/ili 433 (npr., H/L/R/S/P/Q ili K) i/ili 434 (npr., H/F ili Y); ili modifikaciju na poziciji 250 i/ili 428; ili modifikaciju na poziciji 307 ili 308 (npr., 308F, V308F), i 434. U jednom primeru, modifikacija sadrži 428L (npr., M428L) i 434S (npr., N434S) modifikaciju; 428L, 259I (npr., V259I), i 308F (npr., V308F) modifikaciju; 433K (npr., H433K) i 434 (npr., 434Y) modifikaciju; 252, 254, i 256 (npr., 252Y, 254T, i 256E) modifikaciju; 250Q i 428L modifikaciju (npr., T250Q i M428L); i 307 i/ili 308 modifikaciju (npr., 308F ili 308P).
[0110] Na primer, Fc domen sadrži jednu ili više parova ili grupa mutacija odabranih iz grupe koju čine: 250Q i 248L (npr., T250Q i M248L); 252Y, 254T i 256E (npr., M252Y, S254T i T256E); 428L i 434S (npr., M428L i N434S); i 433K i 434F (npr., H433K i N434F). Antitela iz predmetnog pronalaska se definišu patentnim zahtevima.
Priprema domena za vezivanje antigena i konstrukcija bispecifičnih molekula
[0111] Domeni za vezivanje antigena specifični za određene antigene mogu se pripremiti bilo kojom tehnologijom za generisanje antitela poznatom u oblasti tehnike. Kada se jednom dobiju, dva različita domena za vezivanje antigena, specifična za dva različita antigena (CD3 i CD20), mogu se na odgovarajući način rasporediti jedan u odnosu na drugi da bi se proizvelo bispecifično antitelo ovog pronalaska korišćenjem rutinskih metoda. (Diskusija o primerima formata bispecifičnih antitela koji se mogu koristiti za konstruisanje bispecifičnog antitela iz ovog pronalaska je data na drugom mestu ovde). U određenim izvođenjima, jedna ili više pojedinačnih komponenti (npr., teški i laki lanci) antitela pronalaska su izvedeni iz himernih, humanizovanih ili potpuno humanih antitela. Postupci za pravljenje takvih antitela su dobro poznati u tehnici. Na primer, jedan ili više teških i/ili lakih lanaca bispecifičnog antitela iz ovog pronalaska mogu biti pripremljeni korišćenjem VELOCIMMUNE™ tehnologije. Koristeći VELOCIMMUNE™ tehnologiju (ili bilo koju drugu tehnologiju za generisanje humanih antitela), himerna antitela visokog afiniteta na određeni antigen (npr. CD3 ili CD20) se inicijalno izoluju sa humanim varijabilnim regionom i mišjim konstantnim regionom. Antitela su okarakterisana i odabrana prema poželjnim karakteristikama, uključujući afinitet, selektivnost, epitop, itd. Konstantni regioni miša su zamenjeni poželjnim humanim konstantnim regionom da bi se generisali potpuno humani teški i/ili laki lanci koji se mogu ugraditi u bispecifično antitelo ovog pronalaska.
[0112] Genetički modifikovane životinje mogu da se koriste za pravljenje humanih bispecifičnih molekula koji vezuju antigen. Na primer, može se koristiti genetički modifikovan miš koji nije sposoban da preuredi i eksprimira varijabilnu sekvencu lakog lanca endogenog mišjeg imunoglobulina, pri čemu miš eksprimira samo jedan ili dva varijabilna domena lakog lanca humanog lanca kodirana sekvencama humanog imunoglobulina koje su operativno povezani sa mišjim kapa konstantnim genom na endogenom mišjem kapa lokusu. Takvi genetički modifikovani miševi mogu se koristiti za proizvodnju potpuno humanih bispecifičnih molekula za vezivanje antigena koji sadrže dva različita teška lanca koji se povezuju sa identičnim lakim lancem koji sadrži varijabilni domen izveden iz jednog od dva različita segmenta gena varijabilnog regiona humanog lakog lanca. (Vidi, npr., US 2011/0195454). Potpuno humani se odnosi na antitelo, ili fragment koji se vezuje za antigen ili njegov imunoglobulinski domen, koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kodiranu DNK izvedenom iz humane sekvence preko cele dužine svakog polipeptida antitela ili fragmenta koji se vezuje za antigen ili njegovog imunoglobulinskog domena. U nekim slučajevima, potpuno humana sekvenca je izvedena iz proteina endogenog za čoveka. U drugim slučajevima, potpuno humana proteinska ili proteinska sekvenca sadrži himernu sekvencu u kojoj je svaka komponentna sekvenca izvedena iz humane sekvence. Iako nisu vezani nijednom teorijom, himerni proteini ili himerne sekvence su generalno dizajnirani da minimiziraju stvaranje imunogenih epitopa u spojevima sekvenci komponenti, npr. u poređenju sa bilo kojim divljim tipom humanih imunoglobulinskih regiona ili domena.
Bioekvivalenti
[0113] Dva antigen-vezujuća proteina, ili antitela, smatraju se bioekvivalentnima ako su, na primer, farmaceutski ekvivalenti ili farmaceutske alternative čija brzina i obim apsorpcije ne pokazuju značajnu razliku kada se primenjuju u istoj molarnoj dozi pod sličnim eksperimentalnim uslovima, bilo pojedinačna ili višestruka doza. Neki proteini koji vezuju antigen će se smatrati ekvivalentima ili farmaceutskim alternativama ako su ekvivalentni po obimu svoje apsorpcije, ali ne i po stopi apsorpcije, a ipak se mogu smatrati bioekvivalentnim jer su takve razlike u brzini apsorpcije namerno i odražavaju se u obeležavanju, nisu efikasne za koncentraciju leka u telu i za postizanje hronične upotrebe leka. medicinski beznačajan za određeni lek koji se proučava.
[0114] Dva proteina koji vezuju antigen mogu biti bioekvivalentna ako ne postoje klinički značajne razlike u njihovoj bezbednosti, čistoći i snazi.
[0115] Dva proteina koji vezuju antigen mogu biti bioekvivalentna ako se pacijent može jednom ili više puta prebaciti između referentnog proizvoda i biološkog proizvoda bez očekivanog povećanja rizika od neželjenih efekata, uključujući klinički značajnu promenu imunogenosti, ili smanjenu efikasnost, u poređenju sa kontinuiranom terapijom bez takve promene.
[0116] Dva proteina koji vezuju antigen mogu biti bioekvivalentna ako oba deluju zajedničkim mehanizmom ili mehanizmima delovanja za stanje ili uslove upotrebe, u meri u kojoj su takvi mehanizmi poznati.
[0117] Bioekvivalencija se može demonstrirati in vivo i in vitro metodama. Mere bioekvivalencije obuhvataju, npr., (a) in vivo test na ljudima ili drugim sisarima, u kome se koncentracija antitela ili njegovih metabolita meri u krvi, plazmi, serumu ili drugoj biološkoj tečnosti kao funkcija vremena; (b) in vitro test koji je u korelaciji sa podacima o bioraspoloživosti in vivo kod ljudi i koji razumno predviđa; (c) in vivo test na ljudima ili drugim sisarima u kome se odgovarajući akutni farmakološki efekat antitela (ili njegovog cilja) meri kao funkcija vremena; i (d) u dobro kontrolisanom kliničkom ispitivanju koje utvrđuje bezbednost, efikasnost ili biodostupnost ili bioekvivalentnost proteina koji vezuje antigen.
[0118] Bioekvivalentne varijante primera antitela i bispecifičnih molekula za vezivanje antigena koji su ovde izloženi mogu biti konstruisani, na primer, pravljenjem različitih supstitucija ostataka ili sekvenci ili delecijom terminalnih ili unutrašnjih ostataka ili sekvenci koje nisu potrebne za biološku aktivnost. Na primer, cisteinski ostaci koji nisu neophodni za biološku aktivnost mogu biti deletirani ili supstituisani drugim aminokiselinama da bi se sprečilo stvaranje nepotrebnih ili netačnih međumolekulskih disulfidnih mostova nakon renaturacije. U drugim kontekstima, bioekvivalentni proteini za vezivanje antigena mogu uključivati varijante primera antitela i bispecifičnih molekula za vezivanje antigena koji su ovde navedeni, koji sadrže promene aminokiselina koje modifikuju karakteristike glikozilacije molekula, npr., mutacije koje eliminišu ili uklanjaju glikozilaciju.
[0119] Antitela iz predmetnog pronalaska definisana su patentnim zahtevima.
Terapeutska formulacija i isporuka
[0120] Ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže antitela iz ovog pronalaska. Farmaceutske kompozicije mogu biti formulisane sa pogodnim nosačima, ekscipijentima i drugim agensima koji obezbeđuju poboljšani transfer, isporuku, toleranciju i slično. Mnoštvo odgovarajućih formulacija može se naći u formularu poznatom svim farmaceutskim hemičarima: Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Ove formulacije uključuju, na primer, praškove, paste, masti, žele, voskove, ulja, lipide, lipide (katjonske ili anjonske) koje sadrže vezikule (kao što je LIPOFECTIN™, Life Technologies, Carlsbad, CA), DNK konjugate, anhidrovane apsorpcione paste, emulzihe ulje u vodi i voda u ulju, emulzije carbowax (polietilen glikoli različite molekulske mase), polučvrsti gelovi i polučvrste mešavine koje sadrže carbowax. Vidi takođe Powell et al. "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238‑311.
[0121] Različiti sistemi isporuke su poznati i mogu se koristiti za primenu farmaceutske kompozicije, npr., inkapsulacija u lipozome, mikročestice, mikrokapsule, rekombinantne ćelije sposobne da ekspresuju mutantne viruse, endocitozu posredovanu receptorom (videti, npr., Wu et al., 1987, J. Biol. Chem. 262:4429‑4432). Metode uvođenja uključuju, ali nisu ograničene na, intradermalni, intramuskularni, intraperitonealni, intravenski, subkutani, intranazalni, epiduralni i oralni putevi. Kompozicija se može primeniti na bilo koji pogodan način, na primer infuzijom ili bolus injekcijom, apsorpcijom kroz epitelne ili mukokutane obloge (npr. oralnu sluzokožu, rektalne i crevne sluzokože, itd.) i može se primeniti zajedno sa drugim biološki aktivnim agensima. Administracija može biti sistemska ili lokalna. U jednom aspektu, antitelo pronalaska je za primenu putem intravenske infuzije.
[0122] Farmaceutska kompozicija se može uneti subkutano ili intravenozno sa standardnom iglom i špricem. Pored toga, u pogledu subkutane isporuke, uređaj za isporuku olovke lako ima primenu u isporuci farmaceutske kompozicije. Takav uređaj za isporuku olovke može biti za višekratnu ili jednokratnu upotrebu. Uređaj za isporuku olovke za višekratnu upotrebu generalno koristi zamenljivi kertridž koji sadrži farmaceutsku kompoziciju. Kada se cela farmaceutska kompozicija unutar kertridža primeni i kertridž je prazan, prazan kertridž se može lako odbaciti i zameniti novim kertridžom koji sadrži farmaceutsku kompoziciju. Uređaj za isporuku olovke se tada može ponovo koristiti. U uređaju za isporuku olovke za jednokratnu upotrebu ne postoji zamenljivi kertridž. Umesto toga, uređaj za isporuku olovke za jednokratnu upotrebu dolazi unapred napunjen farmaceutskom kompozicijom koja se nalazi u rezervoaru unutar uređaja. Kada se rezervoar isprazni od farmaceutskog sastava, ceo uređaj se odbacuje.
[0123] Brojni uređaji za isporuku olovke i autoinjektora za višekratnu upotrebu imaju primenu u subkutanoj isporuci farmaceutske kompozicije. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK), DISETRONIC™ olovku (Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Switzerland), HUMALOG MIX 75/25™ olovku, HUMALOG ™ olovku, HUMALIN 70/30™ olovku (Eli Lilly and Co., Indianapolis, IN), NOVOPEN™ I, II i III (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), BD™ olovku (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™, i OPTICLIK™ (sanofi-aventis, Frankfurt, Germany), da navedemo samo nekoliko. Primeri uređaja za isporuku olovke za jednokratnu upotrebu koji imaju primenu u potkožnoj isporuci farmaceutske kompozicije uključuju, ali nisu ograničeni na SOLOSTAR™ olovku (sanofi-aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk), i KWIKPEN™ (Eli Lilly), the SURECLICK™ Autoinjector (Amgen, Thousand Oaks, CA), PENLET™ (Haselmeier, Stuttgart, Germany), EPIPEN (Dey, L.P.), i HUMIRA™ Olovku (Abbott Labs, Abbott Park IL), da navedemo samo nekoliko.
[0124] U određenim situacijama, farmaceutska kompozicija može biti isporučena u sistemu sa kontrolisanim oslobađanjem. U jednom aspektu, pumpa se može koristiti (videti Langer, supra; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng.14:201). U drugom izvođenju, mogu se koristiti polimerni materijali; videti Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), 1974, CRC Pres., Boca Raton, Florida. U još jednom izvođenju, sistem sa kontrolisanim oslobađanjem može biti postavljen u blizini cilja kompozicije, tako da zahteva samo deo sistemske doze (videti, npr., Goodson, 1984, in Medical Applications of Controlled Release, supra, tom 2, pp. 115‑138). Drugi sistemi kontrolisanog oslobađanja su razmatrani u pregledu Langer, 1990, Science 249:1527‑1533.
[0125] Preparati za injekcije mogu uključivati dozne oblike za intravenske, potkožne, intrakutane i intramuskularne injekcije, infuzije kap po kap, itd. Ovi preparati za injekcije mogu biti pripremljeni javno poznatim metodama. Na primer, preparati za injekcije se mogu pripremiti, npr., rastvaranjem, suspendovanjem ili emulgovanjem antitela ili njegove soli opisane gore u sterilnom vodenom medijumu ili uljnom medijumu koji se uobičajeno koristi za injekcije. Kao vodeni medijum za injekcije, postoje, na primer, fiziološki slani rastvor, izotonični rastvor koji sadrži glukozu i druge pomoćne agense, itd., koji se mogu koristiti u kombinaciji sa odgovarajućim sredstvom za rastvaranje kao što je alkohol (npr., etanol), polialkohol (npr., propilen glikol, polietilen glikol), nejonsko površinski aktivno sredstvo [npr., polisorbat 80, HCO‑50 (polioksietilenski (50 mol) adukt hidrogenizovanog ricinusovog ulja)], itd. Kao uljni medijum koriste se npr. susamovo ulje, sojino ulje, itd., koji se može koristiti u kombinaciji sa sredstvom za rastvaranje kao što je benzil benzoat, benzil alkohol, itd. Ovako pripremljena injekcija se poželjno puni u odgovarajuću ampulu.
Terapeutska upotreba antitela
[0126] Ovaj pronalazak obezbeđuje bispecifično antitelo kao što je definisano u patentnim zahtevima za upotrebu u postupcima koji se sastoje od davanja subjektu kome je to potrebno, npr. terapijski preparat koji sadrži bispecifično antitelo. Terapeutska kompozicija može da sadrži bispecifični molekul koji vezuje antigen i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač. Izraz "subjekat kome je to potrebno" označava čoveka ili nehumanu životinju koja pokazuje jedan ili više simptoma ili indicija kancera (npr., subjekt koji ima tumor ili pati od bilo kog od karcinoma navedenih ovde ispod).
[0127] Antitela pronalaska (i terapeutske kompozicije koje ih sadrže) su korisna, između ostalog, za lečenje bilo koje bolesti ili poremećaja kod kojih bi stimulacija, aktivacija i/ili ciljanje imunog odgovora bila korisna. Konkretno, antitela ili bispecifični molekuli koji se vezuju za antigen iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje, prevenciju i/ili poboljšanje bilo koje bolesti ili poremećaja koji su povezani ili posredovani ekspresijom ili aktivnošću CD20 ili proliferacijom CD20+ ćelija. Mehanizam delovanja kojim se postižu terapijske metode obuhvata ubijanje ćelija koje eksprimiraju takve antigene u prisustvu efektorskih ćelija, na primer CDC, apoptozom, ADCC, fagocitozom, ili kombinacijom dva ili više ovih mehanizama. Antitela iz pronalaska su za upotrebu u postupku lečenja maligniteta CD20+ B-ćelija.
[0128] U skladu sa određenim izvođenjima ovog pronalaska, bispecifična antitela su korisna za lečenje pacijenata obolelih od refraktornog ili kancera otpornog na lečenje.
[0129] Bispecifično anti-CD3 x anti-CD20 antitelo pronalaska je korisno za lečenje kancera koji eksprimira CD20, uključujući ne-Hodčkinov limfom, Hodčkinov limfom, hroničnu limfocitnu leukemiju, akutnu limfoblastičnu leukemiju, mali limfocitni limfom, difuzni krupnoćelijski B limfom, folikularni limfom, limfom ćelija plaša, limfom marginalne zone, Waldenstrom-ova makroglobulinemija, primarni medijastinalni B ćelijski limfom, limfoblastični limfom, ili Burkitov limfom. U nekim izvođenjima, kancer je folikularni limfom. U nekim izvođenjuma, kancer je difuzni krupnoćelijski B limfom (DLBCL). U nekim izvođenjima, kancer je limfom ćelija plašta. U nekim izvođenjima, kancer je limfom marginalne zone. U nekim izvođenjima, kancer je folikularni limfom i maksimalna nedeljna doza bispecifičnog antitela je 80 mg. U nekim izvođenjima, kancer je DLBCL i maksimalna nedeljna doza bispecifičnog antitela je 80 mg. U nekim izvođenjima, kancer je DLBCL i maksimalna nedeljna doza bispecifičnog antitela je 160 mg. U nekim izvođenjima, kancer je DLBCL i maksimalna nedeljna doza bispecifičnog antitela je 320 mg. U bilo kom od ovih izvođenja, ili drugim o kojima se ovde raspravlja, pacijent sa kancerom je možda prethodno lečen terapijom anti-CD20 monospecifičnim antitelom.
[0130] Ne-Hodčkinov limfom (NHL) je najčešći hematološki malignitet. Među heterogenom grupom NHL-a, 85-90% je B-ćelijskog porekla i uključuje folikularni limfom (FL), difuzni krupnoćelijski B-limfom (DLBCL), limfom ćelija plašta (MCL), limfom marginalne zone (MZL) i nekoliko drugih B-NHL-a. Anti-CD20 antitela u kombinaciji sa hemoterapijom su standard nege za lečenje B-NHL; međutim, uprkos početnim odgovorima, mnogi pacijenti imaju relaps, često sa progresivno kraćim trajanjem odgovora u narednim linijama terapije i lošim ishodima. Prema tome, u nekim izvođenjima, bispecifično anti-CD3 x anti-CD20 antitelo pronalaska se vezuje za CD3+ T ćelije i CD20+ B ćelije, ciljajući CD20+ tumorske ćelije preko citotoksičnosti posredovane T-ćelijama. U nekim slučajevima, anti-CD3 x CD20 bispecifično antitelo je za lečenje kancera B-ćelija (npr., NHL) kod subjekta koji nije uspeo u prethodnoj terapiji sa anti-CD20 monospecifičnim antitelom.
[0131] Za pacijente sa manje od potpunog odgovora na terapiju CAR-T, ishodi su generalno loši i ne postoje standardne terapijske opcije. Stoga, u nekim slučajevima, anti-CD3 x CD20 bispecifično antitelo ovog pronalaska je za lečenje kancera B-ćelija (npr., NHL kao što je DLBCL) kod subjekta koji nije uspeo u prethodnoj terapiji CAR-T ili ne reaguje na prethodnu terapiju CAR-T (npr., anti-CD19 CAR-T terapija).
Kombinovane terapije
[0132] Ovaj pronalazak obezbeđuje bispecifično antitelo kao što je definisano u patentnim zahtevima za upotrebu u postupcima lečenja maligniteta CD20+ B-ćelija koji obuhvataju davanje farmaceutske kompozicije koja sadrži antitelo u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa. Primeri dodatnih terapijskih agenasa koji se mogu kombinovati sa ili davati u kombinaciji sa antitelom iz ovog pronalaska uključuju, npr., antitumorsko sredstvo (npr. hemoterapeutske agense uključujući melfalan, vinkristin (Oncovin), ciklofosfamid (Cytoxan), etopozid (VP‑16), doksorubicin (Adriamycin), lipozomalni doksorubicin (Doxil), obendamustin (Treanda) ili bilo koje druge za koje se zna da su efikasani u lečenju tumora plazma ćelija kod subjekta.). U određenim izvođenjima, drugi terapijski agens je režim koji obuhvata radioterapiju ili transplantaciju hematopoetskih matičnih ćelija. U određenim izvođenjima, drugi terapijski agens može biti imunomodulatorni agens. U određenim izvođenjima, drugi terapijski agens može biti inhibitor proteazoma, uključujući bortezomib (Velcade), karfilzomib (Kyprolis), ixazomib (Ninlaro). U određenim izvođenjima, drugi terapijski agens može biti inhibitor histon deacetilaze kao što je panobinostat (Farydak). U određenim izvođenjima, drugi terapijski agens može biti monoklonsko antitelo, konjugat leka antitela, bispecifično antitelo konjugovano sa antitumorskim agensom, inhibitor imunološke kontrolne tačke ili njihove kombinacije. Farmaceutske kompozicije se takođe mogu davati kao deo terapijskog režima koji sadrži jednu ili više terapijskih kombinacija izabranih od monoklonskog antitela različitog od onih opisanih ovde, koje može da interaguje sa različitim antigenom na površini plazma ćelije, bispecifičnog antitela, koje ima jedan krak koji se vezuje za antigen na površini ćelije tumora, i drugi krak koji se vezuje za antigen na T ćeliji, konjugat leka antitela, bispecifično antitelo konjugovano sa antitumorskim agensom, inhibitor kontrolne tačke, na primer, onaj koji cilja, PD-1 ili CTLA-4, ili njihove kombinacije. U određenim izvođenjima, inhibitori kontrolne tačke mogu biti izabrani između inhibitora PD-1, kao što su pembrolizumab (Keytruda), nivolumab (Opdivo) ili cemiplimab. U određenim izvođenjima, inhibitori kontrolne tačke mogu biti izabrani između inhibitora PD-L1, kao što su atezolizumab (Tecentriq), avelumab (Bavencio) ili Durvalumab (Imfinzi)). U određenim izvođenjima, inhibitori kontrolne tačke mogu biti izabrani između inhibitora CTLA-4, kao što je ipilimumab (Yervoy). Druge kombinacije koje se mogu koristiti zajedno sa antitelom iz pronalaska su opisane gore.
[0133] Ovaj pronalazak takođe obuhvata terapeutske kombinacije koje sadrže bispecifično antitelo za upotrebu kao što je definisano u patentnim zahtevima i inhibitor jednog ili više od VEGF, Ang2, DLL4, EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4, EGFRvIII, cMet, IGF1R, B-raf, PDGFR-α, PDGFR-β, FOLH1 (PSMA), PRLR, STEAP1, STEAP2, TMPRSS2, MSLN, CA9, ili uroplakina, pri čemu je inhibitor aptamer, antisensni molekul, ribozim, mala interferirajuća RNK (siRNK), peptitelo, nanotelo ili fragment antitela (npr., Fab fragment; F(ab’)2fragment; Fd fragment; Fv fragment; scFv; dAb fragment; ili drugi modifikovani molekuli, kao što su diatela, triatela, tetratela, minitela i minimalne jedinice za prepoznavanje). Antitelo iz pronalaska se takođe može primeniti i/ili zajendnički formulisati u kombinaciji sa antivirusnim lekovima, antibioticima, analgeticima i/ili NSAIL. Antitelo iz pronalaska se takođe može primeniti kao deo režima lečenja koji takođe uključuje tretman zračenjem i/ili konvencionalnu hemoterapiju.
[0134] Dodatna terapijski aktivna komponenta(e) se može primeniti neposredno pre, istovremeno sa ili ubrzo nakon primene antitela iz ovog pronalaska; (za potrebe ovog prikaza, takvi režimi primene se smatraju primenom molekula koji vezuje antigen "u kombinaciji sa" dodatnom terapijski aktivnom komponentom).
[0135] Antitelo iz ovog pronalaska može biti zajednički formulisano sa jednom ili više dodatnih terapijski aktivnih komponen(ata) ti kao što je opisano negde drugde.
PRIMERI
[0136] Sledeći primeri su predstavljeni tako da onima koji su uobičajeno verzirane u ovoj oblasti tehnike pruže kompletno otkrivanje i opis kako da naprave i koriste kompozicije iz pronalaska, i nemaju za cilj da ograniče obim patentnih zahteva.
[0137] Uloženi su napori da se obezbedi tačnost u pogledu korišćenih brojeva (npr. količine, temperatura, itd.), ali neke eksperimentalne greške i odstupanja treba uzeti u obzir. Osim ako nije drugačije naznačeno, delovi su delovi po težini, molekulska masa je prosečna molekulska masa, temperatura je u stepenima Celzijusa, a pritisak je na ili blizu atmosferskog.
Primer 1: Klinička evaluacija i eskalacija doze bispecifičnog antitela
[0138] Dole opisana klinička studija je otvorena, multicentrična studija faze 1 za ispitivanje bezbednosti i podnošljivosti REGN1979, anti-CD20 x anti-CD3 bispecifičnog monoklonskog antitela, kod pacijenata sa malignim tumorima CD20+ B-ćelija koji su prethodno lečeni terapijom usmerenim na CD20 antitela.
[0139] Ciljevi: Primarni ciljevi studije bili su da se proceni bezbednost, podnošljivost i toksičnosti koje ograničavaju dozu (DLT) REGN1979 primenjenog intravenozno (IV), i da se prouči antitumorska aktivnost REGN1979 u ekspanzionim kohortama koje se sastoje od difuznog krupnoćelijskog B-limfoma (DLBCL) nakon otkazivanja terapije himernim antigenskim receptorom T ćelija (CAR-T), agresivnog limfoma (osim DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T), folikularni limfom (FL) stepena 1‑3a i hronična limfocitna leukemija (CLL). Sekundarni ciljevi studije su bili: (1) da se karakteriše farmakokinetički (PK) profil REGN1979; (2) da proceni imunogenost REGN1979; (3) za proučavanje preliminarne antitumorske aktivnosti REGN1979 primenjenog pacijentima sa malignitetima CD20+ B-ćelija (ne-Hodčkinov limfom [NHL] koji je prethodno lečen terapijom anti-CD20 antitela, ili hronična limfocitna leukemija [CLL]); i (4) da se prouči preliminarna antitumorska aktivnost REGN1979 u delu studije o eskalaciji doze. Urađene su procene minimalne rezidualne bolesti (MRD) kod pacijenata sa CLL. Istraživački ciljevi studije su bili da se procene biomarkeri koji mogu da koreliraju sa mehanizmom delovanja, uočenom toksičnošću i potencijalnom antitumorskom aktivnošću uključujući, ali ne ograničavajući se, na: (1) profilisanje citokina i procenu inflamatornih markera (npr., C-reaktivni protein [CRP]); (2) podgrupe B-ćelija i T-ćelija periferne krvi i imunološki fenotip; i (3) promene u ekspresiji gena u perifernoj krvi.
[0140] Dizajn studije: Pacijenti su raspoređeni u kohortu nivoa doze (DL) koja se sastoji od inicijalne početne doze, praćene višim pojačanim dozama za drugu i sledeću primenu doze. Pacijenti su upisani na osnovu indikacija (NHL ili CLL). Na svakom DL, postojale su 2 kohorte (po jedna za svaku indikaciju), sa 3 do 6 pacijenata po NHL kohorti i 1 do 6 pacijenata po CLL kohorti. Pacijenti sa malim limfocitnim limfomom (SLL) su uključeni u CLL ruku i prate NHL procene.
[0141] Pacijenti koji su inicijalno pokazali kliničku korist i koji su naknadno imali recidiv ili napredovanje ili su imali suboptimalan odgovor na lečenje možda su ponovo lečeni sa REGN1979 na najvišoj DL za koju se smatralo da je tolerantno u vreme relapsa ili progresije.
[0142] Pacijenti su podvrgnuti procedurama skrininga da bi se utvrdilo podobnost u roku od 28 dana pre inicijalne primene REGN1979. Pacijenti su upisivani uzastopno na osnovu indikacija (NHL ili CLL) u redosledu potvrde kvalifikovanosti od strane sponzora sve dok svaka kohorta nije popunjena prema kriterijumima protokola.
[0143] Postojale su zasebne nezavisne kohorte eskalacije doze za NHL i CLL na svakom DL. Svaki DL se sastojao od početne doze i druge i sledeće doze, koja je bila veća od početne doze, pod uslovom da se početna doza toleriše.
[0144] Eskalacija doze je pratila tradicionalni dizajn eskalacije doze 3+3 za pacijente sa NHL. Planirano je 3 do 6 pacijenata po kohorti na osnovu uočene toksičnosti.
[0145] Eskalacija doze je usledila nakon modifikovanog 3+3 sa komponentom ubrzane titracije za pacijente sa CLL. Na osnovu uočene toksičnosti, planirano je 1 do 6 pacijenata po kohorti.
[0146] Po završetku faze eskalacije doze, i nakon određivanja preporučene doze za dalju studiju kod pacijenata sa NHL, trebalo je otvoriti tri ekspanzione kohorte za 1) pacijente sa DLBCL nakon neuspeha CAR-T terapije (20 pacijenata), 2) agresivnim limfomom (osim DLBCL nakon neuspeha CAR-T terapije) (40 pacijenata; među kojima je po 20 pacijenata trebalo da bude upisano u kohortu 1 agresivnog limfoma [160 mg pojačana doza]), i kohortu 2 [pojačana doza od 80 mg]), i 3) pacijenti sa relapsom/refraktornim folikularnim limfomom stepena 1-3a (60 pacijenata; među kojima je po 30 pacijenata trebalo da bude upisano u kohortu 1 [80 mg pojačana doza] i kohorta 2 [pojačana doza od 160 mg]). Nedeljna pojačana doza REGN1979 za svaku od ovih ekspanzionih kohorti (osim za agresivnu kohortu limfoma 2 i kohortu folikularnog limfoma 1) postavljena je na 160 mg nedeljno, nakon čega je usledio Q2W tretman održavanja sa 320 mg REGN1979. U kohorti agresivnog limfoma 2 i kohorti folikularnog limfoma 1, nedeljna pojačana doza REGN1979 bila je 80 mg, a Q2W doza održavanja REGN1979 bila je 160 mg. eskalacija, praćena sa dodatnih 8 nedeljnih doza i tretmanom od 160 mg Q2W kroz progresiju, sa opcijom prekida terapije nakon što pacijent pokaže trajni odgovor najmanje 9 meseci nakon inicijalne demonstracije CR. Za pacijente kojima je dodeljena povećana doza od 160 mg, pacijenti su primali 160 mg nedeljno tokom perioda indukcije od 4 nedelje, nakon početne eskalacije doze, nakon čega je usledilo dodatnih 8 nedeljnih doza i tretman od 320 mg Q2W kroz progresiju, sa opcijom da prekine lečenje nakon što pacijent pokaže trajni inicijalni odgovor od najmanje 9 meseci nakon CR.
[0147] Korisnost uvodne doze rituksimaba pre prve primene REGN1979 je proučavana kod pacijenata sa NHL da bi se utvrdilo da li ova intervencija može da smanji učestalost i težinu reakcije povezane sa infuzijom (IRR) i sindroma oslobađanja citokina (CRS). U kohorti koja je uvodila rituksimab, REGN1979 je primenjen uz pomoć povećane doze od 160 mg tokom nedeljnog tretmana i 320 mg tokom Q2W tretmana održavanja. Nakon toga, dodatna 24 pacijenta je trebalo da bude lečena optimalnim režimom doze i dozom; zajedno sa 6 pacijenata u grupi koja je primala rituksimab tretiranih optimalnom dozom, ukupno 30 pacijenata je pregledano u pogledu bezbednosti i podnošljivosti.
[0148] U prvom DL za deo eskalacije doze, postojao je potreban period čekanja od 48 sati između inicijalnih davanja leka u studiji za prva 3 pacijenta u okviru iste indikacije. Naredni pacijenti u prvom DL nisu lečeni istog dana, bez obzira na indikacije. U narednim kohortama, pod uslovom da nije primećena neočekivana toksičnost u prethodnim kohortama ili unutar kohorte, početne infuzije za prva 3 pacijenta su davane u razmaku od najmanje 24 sata.
[0149] Nakon što je svaka kohorta pacijenata uključena, lečena i završena DLT perioda posmatranja, otvaranje narednih DL kohorti za upis (ili proširenje trenutne otvorene DL kohorte) je određeno nakon što su podaci o bezbednosti pregledali i sponzor i istraživač(i).
[0150] Period posmatranja DLT je definisan kao prvih 28 dana tretmana, što u ovoj studiji odgovara periodu indukcije. Tokom indukcije, pacijenti su lečeni sa 4 nedeljne primene REGN1979.
[0151] Da bi mogao da se proceni DLT, pojedinačni pacijent mora da je primio najmanje prve 2 primene REGN1979 (1. nedelja 1. ["početna ili primarna doza"] i nedelja 2. dan 1. ["sekundarna i naknadna doza"]), ili je doživeo DLT. Pacijenti koji su upisani u DL11 i iznad treba da su primili najmanje prve 3 primene REGN1979 (početna doza 1. nedelje, srednja ili sekundarna doza 2. nedelje i viša tercijarna ili pojačana doza 3. nedelje) ili su imali DLT. Pored toga, pacijent mora biti pregledan najmanje 28 dana od prve primene i najmanje 21 dan od druge primene.
[0152] Eskalacija doze i kohorte za pacijente sa NHL i CLL prikazani su u tabeli 1, ispod.
Tabela 1. Eskalacija doze i kohorte
[0153] U ovoj studiji, svaki nivo doze obuhvata početnu dozu REGN1979 nakon koje sledi povećana doza; za kohorte DL11 i više, sekundarna doza je dodata pre dostizanja povećane doze (videti tabelu 1). Inicijalna (primarna) doza, srednja (sekundarna) doza (ako je primenjivo) i prva primena intenzivne (tercijarne) doze su opciono podeljene na najmanje 2 dana. Svi pacijenti u kohorti maksimalnih doza DL7 i viših primali su podeljeno doziranje (npr. frakcionisano doziranje) za početne (primarne) i srednje (sekundarne) doze. Pacijenti u kohortama sa maksimalnim dozama DL11 i višim primali su podeljeno doziranje (npr. frakcionisano doziranje) za početnu (primarnu), srednju (sekundarnu) i prvu pojačanu (tercijarnu) dozu, nakon čega su sledile pojačane doze (maksimalna nedeljna doza).
[0154] Trajanje studije: Period lečenja je 9 meseci. Pacijenti će biti lečeni sa do 24 doze REGN1979 – 4 nedeljne doze tokom 4-nedeljnog indukcionog perioda, nakon čega sledi dodatnih 8 nedeljnih doza i 12 ili više doza koje se primenjuju dva puta mesečno (Q2W) tokom perioda održavanja kroz progresiju, sa mogućnošću prekida terapije nakon 9 meseci nakon postizanja potpunog odgovora pacijenta. Pacijenti se mogu pratiti u pogledu efikasnosti i bezbednosti do 15 meseci nakon završetka lečenja.
[0155] Populacija studije: Pod pretpostavkom upisa kroz DL17 i potpuni upis u sve proširene kohorte, planirano je do 370 pacijenata na približno 15 lokacija širom Sjedinjenih Država i Nemačke. Do 204 pacijenta biće uključena u kohorte povećanja doze kroz DL17 za obe indikacije (NHL i CLL) tokom faze eskalacije doze. Do 100 pacijenata koji obuhvataju 90 NHL pacijenata (20 pacijenata sa DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T, 40 pacijenata sa agresivnim limfomom [osim DLBCL nakon neuspeha CAR-T terapije], 30 pacijenata sa FL stepenom 1-3a) i 10 pacijenata sa CLL će biti uključeno u kospecifičnu ekspanziju bolesti. Do 42 pacijenta će biti uvrštena u početnu kohortu rituksimaba da bi se odredio optimalni režim doze. Kada se odredi optimalni režim uvodne doze rituksimaba, dodatna 24 pacijenta će biti uključena u uvodnu ekspanziju rituksimaba i biće kombinovana sa 6 pacijenata iz gornje uvodne grupe rituksimaba koji će biti lečeni optimalnim režimom doze i dozom. Dakle, ukupno 30 pacijenata će biti procenjeno na optimalnom režimu uvodne doze i dozi rituksimaba.
[0156] Pacijenti moraju imati dokumentovani malignitet CD20+ B-ćelija, sa aktivnom bolešću koja ne reaguje na prethodnu terapiju, za koje ne postoje standardne opcije nege i za koje lečenje anti-CD20 antitelom može biti prikladno. Pacijenti sa NHL moraju prethodno biti lečeni terapijom antitela usmerenim na CD20.
[0157] Kriterijumi za uključivanje: Pacijent mora ispuniti sledeće kriterijume da bi bio kvalifikovan za uključivanje u studiju:
1. Imati dokumentovan malignitet CD20+ B-ćelija, sa aktivnom bolešću koja ne reaguje na prethodnu terapiju, za koju ne postoje standardne opcije nege i za koje lečenje anti-CD20 antitelom može biti prikladno:
• B-NHL potvrđen kriterijumima radne grupe NCI, 2007 (Cheson 2007, Dodatak 2); i
• HLL potvrđen kriterijumima radne grupe Međunarodne radionice o hroničnoj limfocitnoj leukemiji (IWCLL), 2008 (Hallek 2008, Dodatak 3) - Pacijenti sa malim limfocitnim limfomom (SLL) biće upisani u CLL grupu i pratiće NHL procene.
Napomena - Pacijent sa biopsijom CD20-negativnih limfnih čvorova (NHL) koja je izvedena kao standardna nega neposredno pre upisa, ostaje podoban za studiju pod uslovom da je pacijent prethodno dokumentovao CD20+ bolest i ranije je bio lečeni rituksimabom ili drugom terapijom antitela usmerenim na CD20 u roku od približno 6 meseci. Pojedinačni slučajevi mogu razgovarati sa medicinskim praćenjem.
2. Pacijenti sa NHL moraju prethodno imati terapiju anti-CD20 antitelima. Pacijentima sa CLL nije potrebno je da prethodno budu lečeni terapijom anti-CD20 antitela, pod uslovom da pacijent nije uspeo ili sa BTK inhibitorom ili PI3K inhibitorom i lekar koji leči smatra da je prikladno da pacijent uđe u fazu 1 ispitivanja. Za uključivanje u kohortu proširenja FL stepena 1‑3a, pacijenti moraju da su primili najmanje 2 prethodne linije sistemskih terapija, uključujući anti-CD20 antitelo i sredstvo za alkilovanje. Za uključivanje u ekspanziju specifičnu za bolest kohortu pacijenata sa DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T, pacijent mora da se oporavio od toksičnosti terapija limfodeplecije i infuzija CAR-T. Ne postoji uslov da prethodna CAR-T terapija bude najveća nedavna linija terapije pre upisa u studiju.
3. Svi pacijenti (B-ćelijski NHL i CLL) moraju imati najmanje jednu dvodimenzionalno merljivu leziju ≥1,5 cm) dokumentovanu CT ili MRI skeniranjem, ako CT skeniranje nije izvodljivo.
4. Pacijenti sa CLL moraju imati bela krvna zrnca (VBC) ≤200 × 109/L
5. Starost ≥18 godina
6. Status učinka Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) ≤1
7. Očekivano trajanje života od najmanje 6 meseci
8. Adekvatna funkcija koštane srži dokumentovana od: a. Broj trombocita ≥75 × 109/L; b. nivo Hb ≥9 g/dL; c. ANC ≥1 × 109/L
Napomena - Pacijenti sa brojem ćelija ispod navedenih pragova mogu se uzeti u obzir za upis ako, po mišljenju istraživača, se smatra da je razlog infiltracija koštane srži osnovnom bolešću. U takvim slučajevima, istraživač mora razgovarati o podobnosti sa sponzorom i dobiti pismeno odobrenje za upis.
9. Adekvatna funkcija organa dokumentovana od:
• Aspartat aminotransferaza (AST) i alanin aminotransferaza (ALT) ≤2,5 X ULN
• Ukupni bilirubin ≤1,5 X ULN
Napomena – Pacijenti sa Gilbertovim sindromom ne moraju da ispune ovaj zahtev pod uslovom da im je ukupan bilirubin nepromenjen u odnosu na njihovu osnovnu liniju.
• Izračunati klirens kreatinina po Cockcroft-Gault-u ≥50 mL/min
Napomena - Pacijenti se mogu uzeti u obzir za upis ako, po mišljenju istraživača, abnormalna laboratorija rezultati su posledica osnovne bolesti. U takvim slučajevima, istraživač mora razgovarati o podobnosti sa sponzorom i pismeno dobije odobrenje za upis.
Napomena - Pacijenti sa graničnim klirensom kreatinina po Cockcroft-Gault-u mogu se uzeti u obzir za upis ako izmereni klirens kreatinina (na osnovu 24-časovnog urina ili druge pouzdane metode) je ≥50 mL/min.
10. Spremnost da se podvrgne obaveznoj biopsiji tumora pre tretmana, ako po mišljenju istraživača pacijent ima dostupnu leziju koja se može biopsirati bez značajnog rizika za pacijenta.
11. Spremni i sposobni da se pridržavaju poseta klinici i procedura vezanih za studije
12. Obezbedi potpisanu informisanu saglasnost.
[0158] Kriterijumi isključenja: Pacijent koji ispunjava bilo koji od sledećih kriterijuma biće isključen iz studije:
1. Primarni limfom centralnog nervnog sistema (CNS) ili poznatu ili sumnjivu zahvaćenost CNS-a od strane neprimarnog NHL-a CNS-a
2. Istorija ili aktuelna relevantna CNS patologija kao npr
• Epilepsija, napadi, pareza, afazija, apopleksija, teške povrede mozga, cerebelarna bolest, organski moždani sindrom, psihoza, ili
• Dokazi o prisustvu inflamatornih lezija i/ili vaskulitisa na cerebralnoj MR
3. Standardna anti-neoplastična hemoterapija (nebiološka) u roku od 5 puta dužeg od poluživota ili u roku od 28 dana, šta god je kraće, pre prve primene ispitivanog leka.
4. Standardna radioterapija u roku od 14 dana od prve primene ispitivanog leka.
Napomena – Palijativna radioterapija simptomatskog limfnog čvora/lezije je dozvoljena pod uslovom da ozračivane lezije ili čvor(i) nisu uključene kao ciljna lezija za procenu tumora
5. Alogena transplantacija matičnih ćelija
6. Tretman rituksimabom, alemtuzumabom ili drugim ispitivanim ili komercijalnim biološkim agensom u roku od 12 nedelja pre prve primene ispitivanog leka.
Napomena - za pacijente sa agresivnim limfomom za koje je potrebno hitno lečenje, period ispiranja se može smanjiti na 28 dana. Ovo će zahtevati diskusiju i pismeno odobrenje sponzora.
7. Imunosupresivna terapija (osim biološke) u roku od 28 dana od prve primene ispitivanog leka. 8. Tretman ispitivanim nebiološkim agensom u roku od 28 dana od prve primene ispitivanog leka.
9. Istorija alergijskih reakcija pripisanih jedinjenjima sličnog hemijskog ili biološkog sastava ispitivanog leka.
10. Istorija preosetljivosti na bilo koje jedinjenje iz grupe tetraciklinskih antibiotika.
11. Istovremeni aktivni malignitet od kojeg se pacijent leči.
12. Poznata aktivna bakterijska, virusna, gljivična, mikobakterijska ili druga infekcija ili bilo koja veća epizoda infekcije koja zahteva hospitalizaciju ili lečenje IV antiinfektivima u roku od 4 nedelje od prve primene.
13. Dokaz značajne istovremene bolesti ili zdravstvenog stanja koje bi moglo da ometa izvođenje studije ili dovede pacijenta u značajan rizik, uključujući, ali ne ograničavajući se na, značajnu kardiovaskularnu bolest (npr. oboljenje srca klase III ili IV New York Heart Association, infarkt miokarda u prethodnih 6 meseci, nestabilne aritmije ili nestabilna angina) i/ili značajna plućna bolest (npr. opstruktivna plućna bolest i simptomatski bronhospazam u anamnezi).
Napomena - Pacijente sa istorijom bolesti srca treba proceniti ECHO ili multigated ackuisition scan (MUGA) pre prve primene REGN1979 da bi se obezbedile adekvatne srčane rezerve i funkcija. 14. Tekući sistemski tretman kortikosteroidima, sa izuzetkom upotrebe kortikosteroida za druge (netumorske i ne-imunosupresivne) indikacije do maksimalno 10 mg/dan prednizona ili ekvivalenta.
15. Infekcija virusom humane imunodeficijencije (HIV) ili hronična infekcija virusom hepatitisa B (HBV) ili virusom hepatitisa C (HCV). Pacijentima sa hepatitisom B (HepBsAg+) koji imaju kontrolisanu infekciju (serumska DNK virusa hepatitisa B koja je ispod granice detekcije I primaju antivirusnu terapiju za hepatitis B) dozvoljeno je da se konsultuju sa lekarom koji vodi infekciju.
16. Poznata preosetljivost i na alopurinol i na rasburikazu.
17. Trudnice ili dojilje.
18. Žene u reproduktivnom periodu* koje nisu spremne da primenjuju visokoefikasnu kontracepciju pre inicijalne terapije ispitivanim lekovima, tokom studije i najmanje 6 meseci nakon poslednje doze. Visoko efikasne kontracepcijske mere obuhvataju stabilnu upotrebu kombinovane (koje sadrže estrogen i progestogen) hormonske kontracepcije (oralne, intravaginalne, transdermalne) ili hormonske kontracepcije samo progestagena (oralne, injekcione, implantabilne) povezane sa inhibicijom ovulacije započete 2 ili više menstrualnih ciklusa pre skrininga; intrauterini uređaj; intrauterini sistem za oslobađanje hormona; bilateralna ligacija jajovoda; partner sa vazektomijom; i ili seksualna apstinencija†,
.
* Žene u postmenopauzi moraju da imaju amenoreju najmanje 12 meseci kako se ne bi smatrale potencijalnim za rađanje. Test na trudnoću i kontracepcija nisu potrebni za žene sa dokumentovanom histerektomijom ili podvezivanjem jajovoda.
† Seksualna apstinencija se smatra veoma efikasnom metodom samo ako je definisana kao uzdržavanje od heteroseksualnih odnosa tokom čitavog perioda rizika koji je povezan sa tretmanima u studiji. Pouzdanost seksualne apstinencije treba proceniti u odnosu na trajanje kliničkog ispitivanja i preferirani i uobičajeni način života pacijenta.
Periodična apstinencija (kalendarska, simptotermalna, post-ovulacijska metoda), prekid (coitus interruptus), samo spermicidi i metoda laktacione amenoreje (LAM) nisu prihvatljive metode kontracepcije. Ženski i muški kondom ne treba koristiti zajedno.
19. Primena žive vakcinacije u roku od 28 dana od prve primene ispitivanog leka
20. Član tima za ispitivanje kliničkog mesta i/ili njegove/njene uže porodice, osim ako prethodno nije odobreno od Sponzora.
[0159] Tretmani: REGN1979 je isporučen kao tečnost u sterilnim bočicama za jednokratnu upotrebu. Svaka bočica je sadržala REGN1979 u koncentraciji od 2 mg/mL. Detaljna uputstva za pripremu i administraciju su data lokacijama u apotekarskom priručniku. Razblaživač je isporučen za pripremu leka za studiju REGN1979.
[0160] Pacijenti su primali REGN1979 nedeljno tokom 4-nedeljnog perioda indukcije, nakon čega je usledilo još 8 nedeljnih doza, i Q2W doze do progresije, u dozi po njihovoj dodeljenoj kohorti.
[0161] U rituksimab uvodnoj kohorti i samo proširenju, jedna doza rituksimaba (375 mg/m2) je primenjena jedan dan pre prve doze REGN1979 [tj. na dan ispitivanja (-1)]. REGN1979 je započet 1. nedelje prvog dana, a period lečenja za REGN1979 je bio 9 meseci. Pacijenti su lečeni sa do 24 doze REGN1979: 4 nedeljne doze tokom 4-nedeljnog perioda indukcije, nakon čega je usledilo dodatnih 8 nedeljnih doza i 12 ili više doza primenjenih Q2W tokom perioda održavanja, do progresije. U kohorti koja je uvodila rituksimab, REGN1979 je primenjen uz pomoć povećane doze od 160 mg tokom nedeljnog tretmana i 320 mg tokom Q2W tretmana održavanja. Grupe za doziranje sa pojačanim dozama REGN1979 ispod 160 mg nedeljnog tretmana i ispod 320 mg REGN1979 Q2W tretmana održavanja takođe se mogu proceniti. Nakon toga, dodatna 24 pacijenta su procenjena sa optimalnim režimom doze i dozom; zajedno sa 6 pacijenata u uvodnoj grupi rituksimaba lečenih optimalnim režimom doze i dozom, ukupno 30 pacijenata je bilo pregledan za bezbednost i podnošljivost.
Krajnje tačke
[0162] Primarni: Primarne krajnje tačke bile su bezbednost (konkretno, neželjeni događaji [AEs] i DLT) za određivanje maksimalne tolerantne doze (MTD) i/ili optimalne biološke doze (OBD) kao preporučene doze faze 2 (RP2D) REGN1979; i efikasnost merena stopom objektivnog odgovora (ORR) u ekspanzionoj kohorti pacijenata sa DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T, agresivnim limfomom (osim DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T), ekspanzijskim kohortama 1 i 2, FL stepenom 1-3a, ekspanzionom kohortom CLL.
[0163] Sekundarni: Sekundarne krajnje tačke su bile:
• Farmakokinetika: Koncentracija REGN1979
• Imunogenost: Anti-REGN1979 antitela
• Antitumorska aktivnost:
– Stopa objektivnog odgovora (ORR)
• Procena odgovora tumora prema revidiranim kriterijumima odgovora na maligni limfom NCII Međunarodna Radna grupa (NCI-WG)
• Procena odgovora tumora prema Međunarodnoj radionici o smernicama za hroničnu limfocitnu leukemiju za dijagnozu i lečenje CLL
• Za pacijente koji su upisani u kohorte proširenja NHL-a, procena odgovora tumora prema Lugano klasifikaciji
- Preživljavanje bez progresije (PFS) i ukupno preživljavanje (OS)
- Minimalna rezidualna bolest (MRD) za pacijente sa CLL
[0164] Istraživačke krajnje tačke uključuju:
• Farmakodinamičke (PD) mere uključujući:
- Podgrupe i fenotip B-ćelija i T-ćelija
- Nivoi cirkulišućih citokina
- CRP
- Promene u ekspresiji gena u perifernoj krvi
[0165] Procedure i procene
[0166] Osnovne procedure: testiranje MRI mozga, elektrokardiogram (EKG), virus humane imunodeficijencije (HIV), virus hepatitisa C (HCV) i virus hepatitisa B (HBV) i koagulacija.
[0167] Bezbednosne procedure: istorija bolesti, fizički pregled, procena simptoma, procena statusa performansi, klinički laboratorijski testovi, vitalni znaci, neželjeni efekti i prateći lekovi.
[0168] Procedure efikasnosti: Procene tumora, uključujući CT ili MRI skeniranje, 18F-fluorodeoksiglukoza-pozitronska emisiona tomografija (FDG-PET), skeniranje koštane srži i biopsije, biopsije limfnih čvorova i/ili tumora i uzorci samo periferne krvi pacijenata (CLL). Prikupljeni su uzorci krvi za procenu PK i antitela na lek (ADA). Uzorci biomarkera su prikupljeni da bi se pratile promene u proizvodnji citokina, nivoi proinflamatornih citokina u serumu i promene u podskupovima limfocita i statusu aktivacije. Pored toga, ovi uzorci su dozvoljavali tumorske ili somatske genetske analize za varijacije koje utiču na klinički tok osnovne bolesti ili moduliraju neželjene efekte lečenja.
[0169] Statistički plan: Dizajn studije je zasnovan na tradicionalnom dizajnu 3+3 sa 3 do 6 pacijenata po DL za pacijente sa NHL, i modifikovanom dizajnu 3+3 sa komponentom ubrzane titracije sa 1 do 6 pacijenata po DL za pacijente sa CLL. Tačan broj pacijenata koji su uključeni zavisiće od broja pacijenata (NHL i CLL) primećenih sa protokolom definisanim DLT i stepenom 2 ili višom toksičnošću u vezi sa lečenjem u kojoj se akutni efekti (sa izuzetkom povezanih laboratorijskih abnormalnosti) rešavaju na ≤ stepen 1 ili početnu liniju u roku od 72 sata (CLL, tokom ubrzane titracione komponente), i potrebe da se prošire trenutno definisani DL-i, ili otvore dodatne kohorte na nižim DL.
[0170] Upis pacijenata je u toku i planirano je do 370 pacijenata. Do 204 pacijenta biće uključena u kohorte povećanja doze kroz DL17 za obe indikacije (NHL i CLL) tokom faze eskalacije doze. Do 100 pacijenata koji čine 90 NHL pacijenata (20 DLBCL pacijenata nakon neuspeha CAR-T terapije, 40 pacijenata sa agresivnim limfomom [osim DLBCL nakon neuspeha CAR-T terapije] i 30 pacijenata sa FL stepenom 1-3a), i 10 pacijenata sa CLL će biti upisano u kohorte ekspanzije specifične za bolest. Do 42 pacijenta će biti uključena u početnu kohortu rituksimaba da bi se odredio optimalni režim doze. Dodatna 24 pacijenta će biti uključena u uvodnu ekspanziju rituksimaba i biće kombinovana sa 6 pacijenata iz gore navedene grupe za uvodjenje rituksimaba koji će biti lečeni optimalnim doznim režimom i dozom. Dakle, ukupno 30 pacijenata će biti procenjeno po optimalnom režimu uvodne doze i dozi rituksimaba.
[0171] Podaci se sumiraju koristeći samo deskriptivnu statistiku. Uopšteno govoreći, podaci se sumiraju prema DL, i prema indikacijama (NHL ili CLL). U okviru NHL indikacija, podaci će takođe biti sumirani po podgrupama i dozi DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T, agresivnog limfoma (osim DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T) kohorte 1 i 2 i FL stepena 1-3a. U okviru NHL indikacije, podaci su takođe sumirani po podgrupama indolentnih i agresivnih NHL-a. Demografske i osnovne karakteristike su sumirane opisno po grupama.
[0172] Sažeci bezbednosti i analize su izvedeni na setu za bezbednosnu analizu (SAF). Primarna analiza bezbednosti bila je zasnovana na neželjenim efektima koji se javljaju u lečenju (TEAE). Ova analiza je predstavljala osnovu na kojoj su doneti zaključci u vezi sa bezbednosnim profilom REGN1979. Svi neželjeni efekti prijavljeni u ovoj studiji su kodirani korišćenjem trenutno dostupne verzije Medicinskog rečnika za regulatorne aktivnosti (MedDRA®). Kodiranje će biti do termina najnižeg nivoa. Naveden je doslovni tekst, preferirani termin (PT) i klasa primarnih organa (SOC). Analiza za varijable efikasnosti i osnovne vrednosti se vrši na skupu za analizu efikasnosti (FAS). Analiza efikasnosti za proširene kohorte koje se sastoje od DLBCL nakon neuspeha CAR-T terapije, agresivnog limfoma (osim DLBCL nakon neuspeha CAR-T terapije) kohorte 1 i 2, FL stepen 1‑3a i CLL će biti obavljeni odvojeno nakon što svi pacijenti u odgovarajućoj kohorti završe 24-nedeljnu posetu ili su prekinuli studiju pre ovog vremena.
[0173] Rezultati: Rezultati za pacijente kojima je primenjena maksimalna nedeljna doza od 5 do 320 mg ukazuju na nisku incidencu CRS. Primećeno je da se serumske koncentracije REGN1979 kod pacijenata koji su primali maksimalnu nedeljnu dozu od samo 12 mg približavaju ili premašuju nivoe koncentracije u serumu za koje je pokazano da su efikasni na modelima miša sa ksenotransplantatom Raji tumora (podaci nisu prikazani). Pacijenti koji su primali maksimalnu nedeljnu dozu od samo 40 mg održavali su koncentraciju u serumu koja prelazi nivo minimalne koncentracije (2000 mg/L) za koji je pokazano da je efikasan u modelima miša sa ksenotransplantatom Raji tumora (podaci nisu prikazani). Pored toga, brojni delimični i potpuni odgovori su takođe primećeni kod pacijenata lečenih na ovim nivoima, kao što je prikazano u tabelama 2-9, u nastavku. Kumulativno iskustvo REGN1979 u pogledu bezbednosti i farmakokinetike kroz period procene DLT kohorte 13N (27.000 mcg REGN1979) pokazuje da je algoritam upravljanja za CRS ili IRR reakcije (tj. inkrementalna eskalacija doze, podeljeno doziranje tokom prvih nedelja teške primene REGN1979) dokazano efikasan. CRS ili IRR uprkos inkrementalnom povećanju doziranja u kohortama uzastopnih doza. Podeljeno doziranje je obezbedilo korist za bezbednost pacijenata u nedeljama od 1 do 4 (dostupni podaci), pri čemu je primećeno manje ukupnih incidenata teških CRS/IRR. Konkretno, strategija doziranja koja se ovde razmatra je obezbedila bezbedniju strategiju za eskalaciju doza na nivoe veće od 80 mg, čak i 160 mg ili više, sa manje ozbiljnim događajima koji su se dešavali u nedeljama 3 i 4 kada su veće doze dostigle i premašile željene koncentracije u serumu o kojima je gore diskutovano. Slika 1 ilustruje incidencu CRS/IRR kod pacijenata koji primaju do maksimalne doze od 320 mg. Do danas, nijedan pacijent nije udaljen zbog neželjenog događaja CRS/IRR.
Tabela 2. Uočeni odgovor Folikularnog limfoma stepen 1‑3a
nastavak
[0174] Nakon preseka podataka (Tabela 2), dva dodatna pacijenta za procenu pokazala su potpune odgovore (CR), jedan na 40 mg i drugi na 320 mg.
Tabela 3. Uočeni od ovor u Difuznom kru noćeliskom B-limfomu
[0175] Dva od tri pacijenta od 80 mg sa CR su bila neuspešna terapijom CAR T-ćelijama. Svi kompletni odgovori navedeni u Tabeli 3 su bili potpuni metabolički odgovori.
[0176] Svi CR-i u dozama od 80 mg, 160 mg i 320 mg su tekući CR na studijskom tretmanu, što ukazuje na trajnost odgovora.
Tabela 4. Uočeni odgovor u DLBCL nakon neuspeha terapijom CAR-T
Tabela 5. Uočeni odgovor u limfomu ćelija plašta
(nastavak)
Tabela 6. Uočeni odgovor u limfomu marginalne zone
Tabela 7. Odgovori kod pacijenata sa MCL prema nivou doze
Tabela 8. Odgovori kod pacijenata sa MZL prema nivou doze
Tabela 9. Odgovori kod pacijenata sa drugom-NHL prema nivou doze
[0177] Uopšteno govoreći, aktivnost primećena u velikoj meri kod pacijenata sa relapsom/refraktornom B-NHL-om koji su bili u velikoj meri prethodno lečeni, koji su lečeni REGN1979, uključujući neke sa progresijom nakon prethodne terapije CAR T-ćelijama, uključivala je:
(i) FL ocenu 1‑3a: 12/13 (92,3%) ORR; 8/13 CR (61,5%) pri dozama ≥5 mg;
(ii) DLBCL: 4/6 (66,7%) ORR (sve CR) pri dozama od 80-160 mg, sa dva pacijenta koja su postigla CR nakon neuspeha CD19 usmerene terapije CAR T-ćelijama;
(iii) MCL: 3/3 odgovora na doze ≥5mg, uključujući jedan CR;
(iv) MZL: odgovor 3/5 pri dozama ≥5 mg, uključujući dva CR;
(v) Tolerantnost kod pacijenata sa B-NHL je dokazana do doza od 320 mg nedeljno, bez uočenih DLT kod pacijenata sa B-NHL;
(vi) Većina neželjenih događaja sa blagom do umerenom težinom;
(vii) Infekcije su prijavljene kod 49,4% pacijenata (14,8% stepen 3-4, sa dva smrtna slučaja (2,5%)); (viii) Nijedan pacijent nije prekinuo lečenje zbog CRS ili neuroloških neželjenih događaja. Od 96 početnih pacijenata, samo sedam pacijenata je iskusilo CRS stepena 3; i
(ix) Deksametazon nije inhibirao citotoksičnost REGN1979, umereno je uticao na povećanje regulacije aktivacije T-ćelija i inhibirao oslobađanje citokina.
Primer 2: Klinička procena bispecifičnog antitela
[0178] Dole opisana klinička studija je otvorena multi-centrična studija faze 2 za procenu antitumorske aktivnosti i bezbednosti REGN1979, anti-CD20 × anti-CD3 bispecifičnog antitela, kod pacijenata sa relapsom ili refraktornim folikularnim limfomom.
[0179] Ciljevi: Primarni cilj ove studije je da se proceni antitumorska aktivnost pojedinačnog agensa REGN1979, merena stopom objektivnog odgovora (ORR) prema Lugano klasifikaciji odgovora kod malignog limfoma (Cheson, 2014) nezavisnim centralnim pregledom, kod pacijenata sa folikularnim limfomom koji ima najmanje refraktorni limfom (FL) koji ima najmanje reflractornu liniju do (FL) sistemsku terapiju, uključujući anti-CD20 antitelo i sredstvo za alkilovanje. Sekundarni ciljevi ove studije su: (1) da se proceni antitumorska aktivnost pojedinačnog agensa REGN1979 kod pacijenata sa relapsom ili refraktornom FL, mereno (a) ORR prema Lugano klasifikaciji (Cheson, 2014) kako je procenio lokalni evaluacija istraživača, (b) stopa potpunog odgovora (CR) prema Lugano klasifikaciji kako je procenjena nezavisnom centralnom revizijom, i procena lokalnog istraživača, (c) preživljavanje bez progresije (PFS) prema Lugano klasifikaciji procenjeno nezavisnom centralnom revizijom, i procena lokalnog istraživača, (d) ukupno preživljavanje (OS), (e) trajanje odgovora (DOR) prema Lugano klasifikaciji, kao što je procenjeno nezavisnom centralnom revizijom i procena lokalnog istraživača, (f) stopa kontrole bolesti (DCR) prema Lugano klasifikaciji kako je procenjena nezavisnim centralnim pregledom, i procena lokalnog istraživača, (g) trajanje kontrole bolesti (DDC) prema Lugano klasifikaciji prema proceni nezavisnog centralnog pregleda i procene lokalnog istraživača; (2) da proceni bezbednost i podnošljivost REGN1979; (3) da proceni farmakokinetiku (PK) REGN1979; (4) da proceni imunogenost REGN1979; i (5) za procenu uticaja REGN1979 na kvalitet života meren validiranim instrumentima Upitnik o kvalitetu života Evropske organizacije za istraživanje i lečenje kancera (EORTC QLQ-C30) i EuroQoL 5 Dimenzija 3 nivoa (EQ‐5D‐3L).
[0180] Dizajn studije: studija se sastoji od perioda skrininga do 28 dana, ukupnog perioda lečenja do 98 nedelja koji uključuje 12 nedeljnih (QW) doza praćenih doziranjem svake 2 nedelje (Q2W) do 86 nedelja, i period praćenja nakon tretmana od 96 nedelja.
[0181] REGN1979 se primenjuje kao pojedinačni agens intravenozno (IV) u početnoj (primarnoj) dozi od 1 mg, nakon čega sledi 5 srednja (sekundarna) doza od 20 mg, a zatim nominalna (tercijarna i maksimalna nedeljna) doza od 80 mg u režimu doziranja od 12 QW tretmana, nakon čega sledi doza od 80 mg REGN1979 Q2W.
[0182] Upis sledi otvoreni dizajn sa jednom rukom.
[0183] Period skrininga počinje potpisivanjem obrasca informisanog pristanka (ICF) i završava se kada se potvrdi da je pacijent kvalifikovan za studiju i započne lečenje, ili utvrđivanjem da je pacijent nepodoban i da je označen kao neuspešan pregled.
[0184] Period lečenja počinje sa inicijalnom primenom REGN1979 i sastoji se od 12 QW infuzija REGN1979 praćenih Q2W doziranjem tokom 86 nedelja za ukupan period lečenja od 98 nedelja doziranja ispitivanog leka, osim ako pacijent ne prekine studijsko lečenje zbog progresije bolesti, početka naknadne, neželjene terapije limfoma (AE).
[0185] Period praćenja nakon tretmana biće 96 nedelja nakon poslednje doze ispitivanog tretmana. Svi pacijenti će biti praćeni svakih 12 nedelja radi statusa preživljavanja do smrti, gubitka zbog praćenja, pacijentovog povlačenja pristanka za praćenje ili prekida studije od strane sponzora, šta god bude ranije. Za pacijente koji su prekinuli studijsko lečenje iz bilo kog razloga osim progresije bolesti, početka naknadne terapije limfoma ili smrti, odgovor na bolest će se procenjivati svakih 12 nedelja tokom perioda praćenja nakon tretmana do vremena progresije bolesti, smrti, početka naredne terapije limfoma ili povlačenja pristanka za praćenje, u zavisnosti od toga šta je ranije.
[0186] Trajanje studije: Trajanje studije za svakog pacijenta, isključujući period skrininga, biće približno 194 nedelje osim ako pacijent nema progresiju bolesti ili ne započne naknadnu terapiju, ili do trenutka smrti, gubitka praćenja, povlačenja pristanka pacijenta za praćenje ili prekida studije od strane sponzora. Kraj studije se definiše kao poslednja poseta poslednjeg pacijenta.
[0187] Populacija studije: Do 481 pacijent će biti upisan na do 100 lokacija. Ispitivana populacija će se sastojati od pacijenata starijih od 18 godina sa prethodno lečenim FL stepenom od 1 do 3a koji je relapsirao ili je refraktoran na najmanje 2 prethodne linije sistemske terapije, uključujući anti-CD20 antitelo i sredstvo za alkilovanje. Centralna histopatološka potvrda dijagnoze FL biće potrebna pre upisa. Pacijenti sa FL ocenom 3b nisu podobni. Refraktorna bolest se definiše kao nedostatak odgovora na standardni režim ili progresija u roku od 6 meseci od poslednjeg lečenja.
[0188] Kriterijumi za uključivanje: Svaki pacijent mora ispuniti sledeće kriterijume da bi bio kvalifikovan za uključivanje u studiju:
1. Starost od 18 godina ili više
2. Centralna histopatološka potvrda dijagnoze FL stepena 1 do 3a mora se dobiti pre upisa u studiju. Pacijenti sa FL stepenom 3b nisu podobni. Podtipovanje folikularnog limfoma je zasnovano na klasifikaciji Svetske zdravstvene organizacije (SZO) (Swerdlow, 2017).
3. Bolest mora imati relaps ili mora biti refraktorna na ≥2 prethodne linije sistemske terapije, uključujući anti-CD20 antitelo i sredstvo za alkilovanje. Po mišljenju istraživača, pacijenti bi trebalo da zahtevaju terapiju za FL u vreme upisa u studiju.
4. Merljiva bolest na poprečnom preseku (definisana kao najmanje 1 bi-dimenzionalno merljiva nodalna lezija od ≥1,5 cm u najvećem poprečnom prečniku (GTD) bez obzira na prečnik kratke ose) dokumentovana dijagnostičkim snimanjem (kompjuterska tomografija [CT] ili magnetna rezonanca [MRI]).
5. Status učinka Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 0 ili 1.
6. Adekvatna funkcija koštane srži dokumentovana: (a) Brojem trombocita ≥50 × 109/L. Pacijent možda nije primio transfuziju trombocita u roku od 7 dana pre prve doze REGN1979 da bi ispunio kriterijum podobnosti za trombocite; (b) Hemoglobin ≥9,0 g/dL; (c) Apsolutni broj neutrofila (ANC) ≥1,0 × 109/L. Pacijent možda nije primio faktor stimulacije kolonije granulocita u roku od 2 dana pre prve doze REGN1979 da bi ispunio kriterijum podobnosti za ANC.
7. Adekvatna funkcija jetre: (a) Ukupni bilirubin ≤1,5 × gornja granica normale (GGN) (≤3 × GGN ako se pripisuje limfomskom infiltracijom jetre); (b) Alanin aminotransferaza (ALT) i aspartat aminotransferaza (AST) ≤2,5 × GGN (≤5 × GGN ako se pripisuje limfomskom infiltracijom jetre); (c) Alkalna fosfataza (ALP) ≤2,5 × GGN (≤5 × GGN ako se pripisuje limfomskom infiltracijom jetre); NAPOMENE – Bez obzira na prisustvo limfomske infiltracije jetre, pacijent sa AST >2,5 × ULN i/ili ALT >2,5 × ULN istovremeno sa ukupnim bilirubinom >1,5 × ULN biće isključen, a pacijenti sa poznatim Gilbertovim sindromom nisu obavezni da ispune ovu potrebu za ukupnim bilirubinom pod uslovom da je vrednost nepromenjena u odnosu na osnovni nivo.
8. Kreatinin u serumu ≤1,5 × ULN, ili izračunati klirens kreatinina po Cockcroft-Gault formuli ≥50 mL/min; NAPOMENA – Pacijenti sa izračunatim klirensom kreatinina <50 mL/min mogu se uzeti u obzir za upis ako je izmereni klirens kreatinina (na osnovu 24-časovnog prikupljanja urina ili druge pouzdane metode) ≥50 mL/min.
9. Spremnost da se podvrgne biopsiji tumora na početku. Ako je istraživač utvrdio da se početna biopsija tumora ne može bezbedno dobiti, sponzor može odobriti izuzetak od zahteva za biopsiju samo nakon razgovora i odobrenja medicinskog praćenja.
10. Sposobnost razumevanja svrhe i rizika studije i obezbeđivanja potpisane i datirane informisane saglasnosti i ovlašćenja za korišćenje zaštićenih zdravstvenih informacija (u skladu sa nacionalnim i lokalnim propisima o privatnosti).
11. Spremni i sposobni da se pridržavaju poseta klinici i procedura vezanih za studije.
12. Dajte informisani pristanak potpisan od strane pacijenta ili zakonski prihvatljivog predstavnika.
13. Sposoban da razume i popuni upitnike koji se odnose na studije.
[0189] Kriterijumi isključenja: Pacijent koji ispunjava bilo koji od sledećih kriterijuma biće isključen iz studije:
1. Primarni limfom centralnog nervnog sistema (CNS) ili poznato zahvaćenost ne-primarnog CNS NHL (sumnja na CNS limfom treba da se proceni lumbalnom punkcijom, po potrebi, pored obaveznog CT ili MRI glave).
2. Tretman bilo kojom sistemskom terapijom protiv limfoma u roku od 5 poluživota ili u roku od 28 dana pre prve primene ispitivanog leka, šta god je kraće.
3. Istorijat alogenske transplantacije matičnih ćelija.
4. Prethodno lečenje bilo kojom terapijom T-ćelija receptora himernog antigena (CAR-T).
5. Kontinuirano sistemsko lečenje kortikosteroidima sa više od 10 mg dnevno prednizona ili antiinflamatornog ekvivalenta u roku od 72 sata od početka ispitivanja leka.
6. Istorija neurodegenerativnog stanja ili poremećaja kretanja CNS-a. Istorija nekontrolisanog poremećaja napada, definisanog kao bilo koji napad u roku od 12 meseci pre upisa u studiju.
7. Vakcinacija u roku od 28 dana pre prve primene ispitivanog leka vektorom koji ima replikativni potencijal.
8. Još jedan malignitet osim FL u poslednjih 5 godina, sa izuzetkom nemelanomskog karcinoma kože koji je bio podvrgnut potencijalno kurativnoj terapiji ili in situ karcinoma grlića materice, ili bilo kog drugog tumora za koji se smatra da je efikasno lečen uz definitivnu lokalnu kontrolu i sa kurativnom namerom.
9. Dokaz značajne istovremene bolesti ili zdravstvenog stanja koje bi moglo da ometa izvođenje studije ili da pacijenta izloži značajnom riziku, uključujući, ali ne ograničavajući se na, značajne kardiovaskularne bolesti (npr., srčana bolest klase III ili IV New York Heart Association, infarkt miokarda u prethodnih 6 meseci, nestabilne aritmije ili nestabilna angina) i/ili značajna plućna bolest (npr. opstruktivna bolest pluća i istorija simptomatskog bronhospazma).
10. Frakcija izbacivanja srca <40% pomoću ehokardiograma ili skeniranja multigated ackuisition (MUGA).
11. Svaka infekcija koja zahteva hospitalizaciju ili lečenje IV antiinfektivima u roku od 2 nedelje od prve primene ispitivanog leka.
12. Nekontrolisana infekcija virusom humane imunodeficijencije (HIV), infekcijom hepatitisom B ili hepatitisom C; ili druge nekontrolisane infekcije, osim: (a) Pacijenti sa HIV-om koji imaju kontrolisanu infekciju (nedetektovano virusno opterećenje i broj CD4 iznad 350 ćelija/mikrolitar bilo spontano ili na stabilnom antivirusnom režimu) su dozvoljeni; (b) Pacijenti sa hepatitisom B (HepBsAg+) koji imaju kontrolisanu infekciju (lančana reakcija polimeraze DNK virusa hepatitisa B u serumu [PCR] koja je ispod granice detekcije I primaju antivirusnu terapiju za hepatitis B) su dozvoljeni; (c) Dozvoljeni su pacijenti koji su pozitivni na antitela na virus hepatitisa C (HCV Ab+) koji imaju kontrolisanu infekciju (nedetektovana HCV RNK pomoću PCR-a bilo spontano ili kao odgovor na uspešan prethodni kurs anti-HCV terapije).
13. Istorija teške alergijske reakcije koja se pripisuje jedinjenjima sa sličnim hemijskim ili biološkim sastavom kao ispitivanog leka ili ekscipijensa. Teška alergijska reakcija se definiše za ovu svrhu kao ona koja zahteva hospitalizaciju i/ili lečenje epinefrinom.
14. Poznata preosetljivost i na alopurinol i na rasburikazu.
15. Član tima za ispitivanje kliničkog mesta ili njegove/njene uže porodice, osim ako prethodno nije odobreno od strane sponzora.16. Žene sa pozitivnim serumskim b-hCG testom trudnoće na skrining poseti. Ako je pozitivan, ultrazvukom se mora isključiti trudnoća da bi pacijent bio kvalifikovan. 17. Pacijenti koji su upućeni u ustanovu na osnovu naloga sudskih ili upravnih organa.
18. Trudnice ili dojilje.
19. Žene u reproduktivnom periodu* ili muškarci koji nisu voljni da primenjuju visokoefikasnu kontracepciju pre početne doze/početka prvog tretmana, tokom studije i najmanje 6 meseci nakon poslednje doze. Visoko efikasne kontracepcijske mere uključuju: (a) stabilnu upotrebu kombinovane (sadrže estrogen i progestogen) hormonske kontracepcije (oralne, intravaginalne, transdermalne) ili hormonske kontracepcije koja sadrži samo progestogen (oralna, injekciona, implantabilna) povezana sa inhibicijom ovulacije koja je započeta 2 ili više menstrualnih ciklusa; (b) intrauterini uložak (IUD); intrauterini sistem za oslobađanje hormona (IUS); (c) bilateralna ligacija jajovoda; (d) vazektomirani partner; (e) i/ili seksualna apstinencija†,
.
[0190] Žene u postmenopauzi moraju biti amenoreične najmanje 12 meseci kako se ne bi smatrale da imaju potencijal za rađanje. Testiranje trudnoće i kontracepcija nisu potrebni za žene sa dokumentovanom histerektomijom ili podvezivanjem jajovoda.
† Seksualna apstinencija se smatra veoma efikasnom metodom samo ako je definisana kao uzdržavanje od heteroseksualnih odnosa tokom čitavog perioda rizika povezanog sa ispitivanim lekovima. Pouzdanost seksualne apstinencije treba proceniti u odnosu na trajanje kliničkog ispitivanja i preferirani i uobičajeni način života ispitanika.
Periodična apstinencija (kalendarska, simptotermalna, post-ovulacijska metoda), prekid (coitus interruptus), samo spermicidi i metoda laktacione amenoreje (LAM) nisu prihvatljive metode kontracepcije. Ženski i muški kondom ne treba koristiti zajedno.
[0191] Tretman: REGN1979 će se primenjivati IV infuzijom sa početnom dozom od 1 mg tokom prve nedelje, srednjom dozom od 20 mg tokom nedelje 2, i nominalnom dozom od 80 mg ili 160 mg tokom narednih primena. Za početnu dozu, međudozu i prvu nominalnu dozu (primarna, sekundarna i tercijarna doza, respektivno), tretmani će biti podeljeni u 2 odvojene infuzije, svaka u trajanju od 4 sata u svaki od 2 dana koji su poželjno uzastopni, ali ne više od 3 dana razmaka (npr., 1. nedelja 1. dan i 1. nedelja 2. dan). Naknadni tretmani (maksimalne nedeljne doze; npr., 320 mg) mogu se davati kao jedna infuzija ili kao 2 odvojene infuzije i mogu se davati tokom 1 do 4 sata u zavisnosti od podnošljivosti. Studijski tretman se sastoji od 12 QW administracija praćenih Q2W doziranjem tokom 86 nedelja, za ukupno 98 nedelja doziranja ispitivanog leka.
[0192] Krajnje tačke: Primarna krajnja tačka studije je ORR od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze, kao što je mereno Lugano klasifikacijom odgovora na maligni limfom (Cheson, 2014) i prema nezavisnom centralnom pregledu, kod pacijenata sa FL koji je relapsirao ili je refraktoran na najmanje 2 prethodne linije sistemske terapije, uključujući anti-CD2 antitela i alkilaciono sredstvo. Sekundarne krajnje tačke su: (1) ORR prema Lugano klasifikaciji kako je ocenjeno procenom lokalnog istraživača od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze; (2) stopa CR od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze, prema Lugano klasifikaciji, prema proceni nezavisnog centralnog pregleda i procene lokalnog istraživača; (3) PFS od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze, prema Lugano klasifikaciji, prema proceni nezavisnog centralnog pregleda i procene lokalnog istraživača; (4) OS od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze; (5) DOR od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze, prema Lugano klasifikaciji, prema proceni nezavisnog centralnog pregleda i procene lokalnog istraživača; (6) DCR od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze, prema Lugano klasifikaciji, prema proceni nezavisnog centralnog pregleda i procene lokalnog istraživača; (7) DDC od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze, prema Lugano klasifikaciji, prema proceni nezavisnog centralnog pregleda i procene lokalnog istraživača; (8) Učestalost i ozbiljnost neželjenih događaja izazvanih lečenjem (TEAE) od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze; i (9) Promene u rezultatima prijavljenih pacijenata od prve doze do 194 nedelje nakon prve doze mereno validiranim instrumentima EORTC QLQ-C30 i EQ‑5D‑3L.
[0193] Procedure i procene: Za sve pacijente, bolest će biti procenjena radiološki korišćenjem kompjuterizovane tomografije (CT) ili magnetne rezonance (MRI) i 18F-fluorodeoksiglukoze-pozitron emisione tomografije (FDG-PET). Odgovor tumora prema kriterijumima Lugano klasifikacije biće ocenjen nezavisnim centralnim radiološkim pregledom. Biće urađeni aspirat koštane srži, biopsija koštane srži i biopsija limfnih čvorova i/ili tumora, a uzorci će biti procenjeni histološki i mogu se koristiti za druge studije, uključujući imunohistohemiju. Bezbednost će biti procenjena procenom vitalnih znakova, fizičkim pregledom, statusom učinka Istočne kooperativne onkološke grupe (ECOG), elektrokardiogramom (EKG), incidencom neželjenih efekata i izveštavanjem o istovremenim lekovima. Laboratorijske procene uključuju kompletnu krvnu sliku sa diferencijalom, vrednosti hemije krvi, serumske imunoglobuline G (IgG), serumsko testiranje trudnoće (ako je relevantno), feritin i C-reaktivni protein (CRP). Uzimaće se uzorci krvi za procenu PK i antitela na lek (ADA). Uzimaće se uzorci periferne krvi da bi se procenile promene u biomarkerima (npr., proizvodnja citokina, nivoi proinflamatornih citokina u serumu i promene u podskupovima limfocita i statusu aktivacije). Pored toga, ovi uzorci će omogućiti tumorske ili somatske genetske analize za varijacije koje utiču na klinički tok osnovne bolesti ili moduliraju neželjene efekte lečenja. Procene kvaliteta života će se vršiti korišćenjem upitnika EORTC QLQ-C30 i EQ‑5D‑3L koji se samostalno primenjuju.
[0194] Statistički plan: Ova studija je dizajnirana da proceni efikasnost i bezbednost REGN1979 za pacijente sa FL kod kojih je došlo do recidiva ili je otporan na najmanje 2 prethodne linije sistemskih terapija. Analiza za primarnu krajnju tačku efikasnosti biće obavljena nakon što svi pacijenti završe 28 nedelja perioda lečenja u studiji do procene i kada su imali procenu odgovora tumora ili su se povukli iz studije. Opravdanje veličine uzorka – jednostepeni egzaktni binomni dizajn je usvojen za primarnu krajnju tačku ORR. Dvostrani intervali poverenja od 95% za posmatrane ORR su izračunati na osnovu veličine uzorka 100. Sa 100 pacijenata, ako je uočeni ORR najmanje 60%, 66%, 70% i 75%, donja granica od 95% CI će isključiti ORR od 49%, 55%, odnosno 65%; tj. ORR se značajno razlikuje od 49%, 55%, 60% i 65% kao što je prikazano u tabeli 10, ispod. Sa veličinom uzorka od 100 pacijenata, ako je pravi efekat tretmana REGN197964%, 70%, 75% ili 80%, verovatnoća je 82%, 83%, 89% ili 91% za uočenu donju granicu od 95% CI da isključi 49%, 55%, 60%, odnosno 65%. Veličina uzorka će biti dodatno povećana za 10% kako bi se uzeli u obzir pacijenti koji se prerano povuku iz studije. Dakle, ukupna veličina uzorka biće 112 pacijenata.
Tabela 10. Dvostrani intervali pouzdanosti od 95% tačnih za posmatrani ORR na osnovu veličine uzorka od 100 pacijenata
[0195] Statističke metode: Demografske i osnovne karakteristike će biti sažeto opisane. Primarna krajnja tačka efikasnosti je ORR prema Lugano klasifikaciji zasnovanoj na nezavisnom centralnom pregledu. ORR zajedno sa dvostranim intervalom poverenja od 95% biće sumirani. Pacijenti koji se ne mogu proceniti za najbolji ukupni odgovor smatraće se kao oni koji nisu odgovorili. Sekundarne krajnje tačke efikasnosti ORR utvrđene pregledom istraživača prema Lugano klasifikaciji, i stopa CR i DCR procenom lokalnog istraživača i nezavisnim centralnim pregledom prema Lugano klasifikaciji biće sumirani zajedno sa dvostranim intervalom poverenja od 95%. Ostale sekundarne krajnje tačke efikasnosti, uključujući DOR, DDC, PFS i OS, biće sumirane po medijani i njegovom intervalu poverenja od 95% korišćenjem Kaplan-Meier-ove metode prema Lugano klasifikaciji. Stopa kontrole bolesti biće sumirana zajedno sa dvostranim intervalom poverenja. Kvalitet života meren validiranim instrumentima EORTC QLQ-C30 i EQ‑5D‑3L biće sumiran deskriptivnom statistikom. Bezbednosna zapažanja i merenja uključujući izloženost lekovima, neželjene efekte, laboratorijske podatke, vitalne znakove i ECOG status performansi biće sažeti i predstavljeni u tabelama i listama.
[0196] Privremena analiza: Privremena analiza će biti obavljena nakon što prvih 50 pacijenata završi procenu tumora u 28. nedelji ili su se ranije povukli iz studije. ORR i povezani interval poverenja od 95% biće sumirani. Kako je primarni cilj ove privremene analize tačana procena na ORR-u i karakterizacija preciznosti bodovne procene, ne postoji testiranje hipoteze povezano sa ovom privremenom analizom. Stoga, prilagođavanje greške tipa I nije primenljivo za ovu planiranu privremenu analizu. Za druge krajnje tačke efikasnosti, takođe će biti predstavljen dvostrani interval poverenja od 95%.
[0197] Dodatna ispitivanja efikasnosti REGN1979 mogu biti uključena u ovu studiju, ili u dodatne studije, uključujući (a) pacijente sa folikularnim limfomom (stepen 1‑3a) kao treću liniju ili veću (3L+) terapiju, (b) pacijente sa folikularnim limfomom (stepen 1‑L+ koji su pogodni za punu dozu od 2 ili 2+) terapija, (c) pacijenti sa folikularnim limfomom (stepen 1‑3a) koji nisu sposobni za hemoterapiju pune doze kao terapiju 2L+, (d) pacijenti sa folikularnim limfomom (stepen 1‑3a) koji prethodno nisu lečeni i sposobni za punu dozu hemo-imunoterapije, (e) pacijenti sa folikularnom terapijom 1‑3 prethodno nelečeni i nesposobni za hemoimunoterapiju u punoj dozi, (f) pacijenti sa folikularnim limfomom (stepen 1-3a) sposobni za punu dozu hemoimunoterapije kao prva linija (1L) terapije u odnosu na standardnu negu, (g) pacijenti sa folikularnim limfomom (stepen versus-L standardne doze od 1-1) kao nesposobna terapija pune doze od 1-L kao standardna terapija zbrinjavanje, (h) pacijenti sa folikularnim limfomom (stepen 1‑3a) sposobni za punu dozu hemo-imunoterapije kao 2L+ terapiju u odnosu na standardnu negu, (i) pacijenti sa folikularnim limfomom (stepen 1‑3a) nesposobni za punu dozu hemoimunoterapije kao 2L+ standardnu terapiju i folikularnu terapiju u odnosu na/ u kombinaciji sa standardom nege.
[0198] Dodatna ispitivanja efikasnosti REGN1979 mogu biti uključena u ovu studiju, ili u dodatne studije, uključujući (a) pacijente sa difuznim krupnoćelijskim B limfomom (DLBCL) koji je de novo ili transformisan kao 3L+ terapija, (b) pacijente sa DLBCL nakon neuspeha terapije CAR-T, (c) pacijente sa difuznim limfomom velikih ćelija B (DLBCL) transplantacija matičnih ćelija) kao 2L+ terapija, (d) pacijenti sa DLBCL koji ne ispunjavaju uslove za HSCTas 2L+ terapiju, (e) pacijenti sa DLBCL koji se prethodno ne leče, sa lošim molekularnim prognostičkim faktorima (negerminativni centar B, dvostruki pogodak ili trostruki pogodak) i koji su sposobni za punu dozu hemoimunoterapije, (f) pacijenti sa DLBCL koji prethodno nisu lečeni, loši molekularni prognostički faktori (ne-germinativni centar B, dvostruki ili trostruki pogodak) i nesposobni za punu dozu hemoimunoterapije, (g) pacijenti sa DLBCL koji su bili naivni na CAR-T, (h) pacijenti sa DLBCL pri maksimalnoj nedeljnoj dozi od 320 mg, (i) pacijenti sa DLBCL u kombinaciji sa standardnom negom, (j) pacijenti sa DLBCL za punu dozu hemoimunoterapije kao 1L terapije u odnosu na standardnu negu, (k) pacijenti sa DLBCL nesposobnim za punu dozu hemoimunoterapije kao terapiju od 1L u odnosu na standardnu negu, (I) pacijenti sa DLBCL koji ispunjavaju uslove za auto-HSCT kao terapiju od 2L+ u odnosu na standardnu negu, i/ili m) pacijenti sa DLBCL koji ne ispunjavaju uslove za auto-HSCT kao terapiju od 2L+ u odnosu na standardnu negu.
[0199] Dodatna ispitivanja efikasnosti REGN1979 mogu biti uključena u ovu studiju, ili u dodatne studije, uključujući (a) pacijente sa limfomom ćelija plašta (MCL) nakon neuspeha BTK inhibitora kao 2L+ terapije, (b) kod pacijenata sa limfomom marginalne zone (MZL) kao 2L+ terapijom i/ili kod pacijenata sa limfoblastičnim limfomom, limfoplazmacitnim limfomom, Burkit-ovim limfomom, ili drugim podtipovima B-NLH kao 2L+ terapijom.
[0200] Dodatna ispitivanja efikasnosti REGN1979 mogu biti uključena u ovu studiju, ili u dodatne studije, uključujući (a) pacijente sa malignitetom CD20+ B-ćelija koji su primili jednu dozu rituksimaba jedan dan pre prve doze REGN1979. Samo u ovoj uvodnoj kohorti rituksimaba i ekspanziji, jedna doza rituksimaba (375 mg/m<2>) biće primenjena jedan dan pre prve doze REGN1979 [tj., na dan ispitivanja (-1)]. REGN1979 će početi 1. nedelje, 1. dan, a period lečenja za REGN1979 će biti 9 meseci. Pacijenti će biti lečeni sa do 24 doze REGN1979: 4 nedeljne doze tokom 4-nedeljnog perioda indukcije, nakon čega sledi dodatnih 8 nedeljnih doza i 12 doza primenjenih Q2W tokom 6-mesečnog perioda održavanja. U prvom delu ove uvodne kohorte rituksimaba, REGN1979 će biti primenjen uz pomoć povećane doze od 80 mg. Kada se identifikuje optimalni režim doze, jedna dodatna dozna grupa od 6 pacijenata sa povećanom dozom od 320 mg REGN1979 će biti procenjena sa optimalnim režimom doze. Takođe se mogu proceniti dozne grupe sa pojačanim dozama REGN1979 između 80 mg i 320 mg. Nakon toga, dodatnih 24 pacijenata će biti procenjeno sa ovim optimalnim režimom doze i optimalnom dozom, a zajedno sa 6 pacijenata u grupi koja je primala rituksimab koji je primala optimalnu dozu biće pregledano ukupno 30 pacijenata u pogledu bezbednosti i podnošljivosti.
[0201] U bilo kojoj od studija kombinovanja sa standardnom nege, kombinacija može uključivati REGN1979 plus CHOP (ciklofosfamid, doksorubicin, vinkristin i prednizon), ICE (ifosfamid, karboplatin i etopozid), Gem-Ox (gemcitabin i oksaliplatin), lenalidomid, ili lenalidomid plus rituksimab.
<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc.
<120> Dosing Strategy that Mitigates Cytokine Release Syndrome for Therapeutic Antibodies
<130> 10496WO01
<150> 62/726,137
<151> 2018-08-31
<150> 62/774,019
<151> 2018-11-30
<150> 62/861,100
<151> 2019-06-13
<160> 24
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 207
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD3 Epsilon Protein (>NP_000724.1 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain precursor
<400> 1
Met Gln Ser Gly Thr His Trp Arg Val Leu Gly Leu Cys Leu Leu Ser 1 5 10 15
Val Gly Val Trp Gly Gln Asp Gly Asn Glu Glu Met Gly Gly Ile Thr 20 25 30
Gln Thr Pro Tyr Lys Val Ser Ile Ser Gly Thr Thr Val Ile Leu Thr 35 40 45
Cys Pro Gln Tyr Pro Gly Ser Glu Ile Leu Trp Gln His Asn Asp Lys 50 55 60
Asn Ile Gly Gly Asp Glu Asp Asp Lys Asn Ile Gly Ser Asp Glu Asp 65 70 75 80
His Leu Ser Leu Lys Glu Phe Ser Glu Leu Glu Gln Ser Gly Tyr Tyr 85 90 95
Val Cys Tyr Pro Arg Gly Ser Lys Pro Glu Asp Ala Asn Phe Tyr Leu 100 105 110
Tyr Leu Arg Ala Arg Val Cys Glu Asn Cys Met Glu Met Asp Val Met 115 120 125
Ser Val Ala Thr Ile Val Ile Val Asp Ile Cys Ile Thr Gly Gly Leu 130 135 140
Leu Leu Leu Val Tyr Tyr Trp Ser Lys Asn Arg Lys Ala Lys Ala Lys 145 150 155 160 43
Pro Val Thr Arg Gly Ala Gly Ala Gly Gly Arg Gln Arg Gly Gln Asn Lys Gly Gln Arg Asp Leu Tyr Ser Gly Leu Asn Gln Arg Arg Ile 195 200 205
<210> 2
<211> 171
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD3 Delta Protein (>NP_000723.1 T-cell surface glycoprotein CD3 delta chain isoform A
precursor
<400> 2
Met Glu His Ser Thr Phe Leu Ser Gly Leu Val Leu Ala Thr Leu Leu 1 5 10 15
Ser Gln Val Ser Pro Phe Lys Ile Pro Ile Glu Glu Leu Glu Asp Arg 20 25 30
Val Phe Val Asn Cys Asn Thr Ser Ile Thr Trp Val Glu Gly Thr Val 35 40 45
Gly Thr Leu Leu Ser Asp Ile Thr Arg Leu Asp Leu Gly Lys Arg Ile 50 55 60
Leu Asp Pro Arg Gly Ile Tyr Arg Cys Asn Gly Thr Asp Ile Tyr Lys 65 70 75 80
Asp Lys Glu Ser Thr Val Gln Val His Tyr Arg Met Cys Gln Ser Cys 85 90 95
Val Glu Leu Asp Pro Ala Thr Val Ala Gly Ile Ile Val Thr Asp Val 100 105 110
Ile Ala Thr Leu Leu Leu Ala Leu Gly Val Phe Cys Phe Ala Gly His 115 120 125
Glu Thr Gly Arg Leu Ser Gly Ala Ala Asp Thr Gln Ala Leu Leu Arg 130 135 140
Asn Asp Gln Val Tyr Gln Pro Leu Arg Asp Arg Asp Asp Ala Gln Tyr 145 150 155 160
Ser His Leu Gly Gly Asn Trp Ala Arg Asn Lys
165 170
<210> 3
<211> 164
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD3 Zeta Protein (>NP_932170.1 T-cell surface glycoprotein CD3 zeta chain isoform 1
precursor
<400> 3
Met Lys Trp Lys Ala Leu Phe Thr Ala Ala Ile Leu Gln 44 Ala Gln Leu 1 5 10 15
Leu Phe Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 50 55 60
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg 65 70 75 80
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met 85 90 95
Gly Gly Lys Pro Gln Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn 100 105 110
Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met 115 120 125
Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly 130 135 140
Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala 145 150 155 160
Leu Pro Pro Arg
<210> 4
<211> 182
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD3 Gamma Protein (>NP_000064.1 T-cell surface glycoprotein CD3 gamma chain precursor
<400> 4
Met Glu Gln Gly Lys Gly Leu Ala Val Leu Ile Leu Ala Ile Ile Leu 1 5 10 15
Leu Gln Gly Thr Leu Ala Gln Ser Ile Lys Gly Asn His Leu Val Lys 20 25 30
Val Tyr Asp Tyr Gln Glu Asp Gly Ser Val Leu Leu Thr Cys Asp Ala 35 40 45
Glu Ala Lys Asn Ile Thr Trp Phe Lys Asp Gly Lys Met Ile Gly Phe 50 55 60
Leu Thr Glu Asp Lys Lys Lys Trp Asn Leu Gly Ser Asn Ala Lys Asp 65 70 75 80
Pro Arg Gly Met Tyr Gln Cys Lys Gly Ser Gln Asn Lys Ser Lys Pro 85 90 95
Leu Gln Val Tyr Tyr Arg Met Cys Gln Asn Cys Ile Glu Leu Asn Ala 100 105 110
Ala Thr Ile Ser Gly Phe Leu Phe Ala Glu Ile Val Ser Ile Phe Val 115 120 125
Leu Ala Val Gly Val Tyr Phe Ile Ala Gly Gln Asp Gly Val Arg Gln 130 135 140
Ser Arg Ala Ser Asp Lys Gln Thr Leu Leu Pro Asn Asp Gln Leu Tyr 145 150 155 160
Gln Pro Leu Lys Asp Arg Glu Asp Asp Gln Tyr Ser His Leu Gln Gly 165 170 175
Asn Gln Leu Arg Arg Asn 45
180
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD20 Protein
<400> 5
Met Thr Thr Pro Arg Asn Ser Val Asn Gly Thr Phe Pro Ala Glu Pro 1 5 10 15
Met Lys Gly Pro Ile Ala Met Gln Ser Gly Pro Lys Pro Leu Phe Arg 20 25 30
Arg Met Ser Ser Leu Val Gly Pro Thr Gln Ser Phe Phe Met Arg Glu 35 40 45
Ser Lys Thr Leu Gly Ala Val Gln Ile Met Asn Gly Leu Phe His Ile 50 55 60
Ala Leu Gly Gly Leu Leu Met Ile Pro Ala Gly Ile Tyr Ala Pro Ile 65 70 75 80
Cys Val Thr Val Trp Tyr Pro Leu Trp Gly Gly Ile Met Tyr Ile Ile 85 90 95
Ser Gly Ser Leu Leu Ala Ala Thr Glu Lys Asn Ser Arg Lys Cys Leu 100 105 110
Val Lys Gly Lys Met Ile Met Asn Ser Leu Ser Leu Phe Ala Ala Ile 115 120 125
Ser Gly Met Ile Leu Ser Ile Met Asp Ile Leu Asn Ile Lys Ile Ser 130 135 140
His Phe Leu Lys Met Glu Ser Leu Asn Phe Ile Arg Ala His Thr Pro 145 150 155 160
Tyr Ile Asn Ile Tyr Asn Cys Glu Pro Ala Asn Pro Ser Glu Lys Asn 165 170 175
Ser Pro Ser Thr Gln Tyr Cys Tyr Ser Ile Gln Ser Leu Phe Leu Gly 180 185 190
Ile Leu Ser Val Met Leu Ile Phe Ala Phe Phe Gln Glu Leu Val Ile 195 200 205
Ala Gly Ile Val Glu Asn Glu Trp Lys Arg Thr Cys Ser Arg Pro Lys 210 215 220
Ser Asn Ile Val Leu Leu Ser Ala Glu Glu Lys Lys Glu Gln Thr Ile 225 230 235 240
Glu Ile Lys Glu Glu Val Val Gly Leu Thr Glu Thr Ser Ser Gln Pro 245 250 255
Lys Asn Glu Glu Asp Ile Glu Ile Ile Pro Ile Gln Glu Glu Glu Glu 260 265 270
Glu Glu Thr Glu Thr Asn Phe Pro Glu Pro Pro Gln Asp Gln Glu Ser 275 280 285
Ser Pro Ile Glu Asn Asp Ser Ser Pro
290 295
<210> 6
<211> 184
<212> PRT 46
<213> Artificial Sequence
Met Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser 1 5 10 15
Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr 20 25 30
Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser 35 40 45
Val Lys Gly Thr Asn Ala Ile Leu Trp Thr Cys Leu Gly Leu Ser Leu 50 55 60
Ile Ile Ser Leu Ala Val Phe Val Leu Met Phe Leu Leu Arg Lys Ile 65 70 75 80
Asn Ser Glu Pro Leu Lys Asp Glu Phe Lys Asn Thr Gly Ser Gly Leu 85 90 95
Leu Gly Met Ala Asn Ile Asp Leu Glu Lys Ser Arg Thr Gly Asp Glu 100 105 110
Ile Ile Leu Pro Arg Gly Leu Glu Tyr Thr Val Glu Glu Cys Thr Cys 115 120 125
Glu Asp Cys Ile Lys Ser Lys Pro Lys Val Asp Ser Asp His Cys Phe 130 135 140
Pro Leu Pro Ala Met Glu Glu Gly Ala Thr Ile Leu Val Thr Thr Lys 145 150 155 160
Thr Asn Asp Tyr Cys Lys Ser Leu Pro Ala Ala Leu Ser Ala Thr Glu 165 170 175
Ile Glu Lys Ser Ile Ser Ala Arg
180
<210> 7
<211> 750
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human PSMA (FOLH1) Protein
<400> 7
Met Trp Asn Leu Leu His Glu Thr Asp Ser Ala Val Ala Thr Ala Arg 1 5 10 15
Arg Pro Arg Trp Leu Cys Ala Gly Ala Leu Val Leu Ala Gly Gly Phe 20 25 30
Phe Leu Leu Gly Phe Leu Phe Gly Trp Phe Ile Lys Ser Ser Asn Glu 35 40 45
Ala Thr Asn Ile Thr Pro Lys His Asn Met Lys Ala Phe Leu Asp Glu 50 55 60
Leu Lys Ala Glu Asn Ile Lys Lys Phe Leu Tyr Asn Phe Thr Gln Ile 65 70 75 80
Pro His Leu Ala Gly Thr Glu Gln Asn Phe Gln Leu Ala Lys Gln Ile 85 90 95
Gln Ser Gln Trp Lys Glu Phe Gly Leu Asp Ser Val Glu Leu Ala His 100 105 110 47
Tyr Asp Val Leu Leu Ser Tyr Pro Asn Lys Thr His Pro Asn Tyr Ile Glu Pro Pro Pro Pro Gly Tyr Glu Asn Val Ser Asp Ile Val Pro Pro 145 150 155 160
Phe Ser Ala Phe Ser Pro Gln Gly Met Pro Glu Gly Asp Leu Val Tyr 165 170 175
Val Asn Tyr Ala Arg Thr Glu Asp Phe Phe Lys Leu Glu Arg Asp Met 180 185 190
Lys Ile Asn Cys Ser Gly Lys Ile Val Ile Ala Arg Tyr Gly Lys Val 195 200 205
Phe Arg Gly Asn Lys Val Lys Asn Ala Gln Leu Ala Gly Ala Lys Gly 210 215 220
Val Ile Leu Tyr Ser Asp Pro Ala Asp Tyr Phe Ala Pro Gly Val Lys 225 230 235 240
Ser Tyr Pro Asp Gly Trp Asn Leu Pro Gly Gly Gly Val Gln Arg Gly 245 250 255
Asn Ile Leu Asn Leu Asn Gly Ala Gly Asp Pro Leu Thr Pro Gly Tyr 260 265 270
Pro Ala Asn Glu Tyr Ala Tyr Arg Arg Gly Ile Ala Glu Ala Val Gly 275 280 285
Leu Pro Ser Ile Pro Val His Pro Ile Gly Tyr Tyr Asp Ala Gln Lys 290 295 300
Leu Leu Glu Lys Met Gly Gly Ser Ala Pro Pro Asp Ser Ser Trp Arg 305 310 315 320
Gly Ser Leu Lys Val Pro Tyr Asn Val Gly Pro Gly Phe Thr Gly Asn 325 330 335
Phe Ser Thr Gln Lys Val Lys Met His Ile His Ser Thr Asn Glu Val 340 345 350
Thr Arg Ile Tyr Asn Val Ile Gly Thr Leu Arg Gly Ala Val Glu Pro 355 360 365
Asp Arg Tyr Val Ile Leu Gly Gly His Arg Asp Ser Trp Val Phe Gly 370 375 380
Gly Ile Asp Pro Gln Ser Gly Ala Ala Val Val His Glu Ile Val Arg 385 390 395 400
Ser Phe Gly Thr Leu Lys Lys Glu Gly Trp Arg Pro Arg Arg Thr Ile 405 410 415
Leu Phe Ala Ser Trp Asp Ala Glu Glu Phe Gly Leu Leu Gly Ser Thr 420 425 430
Glu Trp Ala Glu Glu Asn Ser Arg Leu Leu Gln Glu Arg Gly Val Ala 435 440 445
Tyr Ile Asn Ala Asp Ser Ser Ile Glu Gly Asn Tyr Thr Leu Arg Val 450 455 460
Asp Cys Thr Pro Leu Met Tyr Ser Leu Val His Asn Leu Thr Lys Glu 465 470 475 480
Leu Lys Ser Pro Asp Glu Gly Phe Glu Gly Lys Ser Leu Tyr Glu Ser 485 490 495
Trp Thr Lys Lys Ser Pro Ser Pro Glu Phe Ser Gly Met Pro Arg Ile 500 505 510
Ser Lys Leu Gly Ser Gly Asn Asp Phe Glu Val Phe Phe Gln Arg Leu 515 520 525
Gly Ile Ala Ser Gly Arg Ala Arg Tyr Thr Lys Asn Trp Glu Thr Asn 530 535 540
Lys Phe Ser Gly Tyr Pro Leu Tyr His Ser Val Tyr Glu 48 Thr Tyr Glu 545 550 555 560
Leu Pro Phe Asp Cys Arg Asp Tyr Ala Val Val Leu Arg Lys Tyr Ala 595 600 605
Asp Lys Ile Tyr Ser Ile Ser Met Lys His Pro Gln Glu Met Lys Thr 610 615 620
Tyr Ser Val Ser Phe Asp Ser Leu Phe Ser Ala Val Lys Asn Phe Thr 625 630 635 640
Glu Ile Ala Ser Lys Phe Ser Glu Arg Leu Gln Asp Phe Asp Lys Ser 645 650 655
Asn Pro Ile Val Leu Arg Met Met Asn Asp Gln Leu Met Phe Leu Glu 660 665 670
Arg Ala Phe Ile Asp Pro Leu Gly Leu Pro Asp Arg Pro Phe Tyr Arg 675 680 685
His Val Ile Tyr Ala Pro Ser Ser His Asn Lys Tyr Ala Gly Glu Ser 690 695 700
Phe Pro Gly Ile Tyr Asp Ala Leu Phe Asp Ile Glu Ser Lys Val Asp 705 710 715 720
Pro Ser Lys Ala Trp Gly Glu Val Lys Arg Gln Ile Tyr Val Ala Ala 725 730 735
Phe Thr Val Gln Ala Ala Ala Glu Thr Leu Ser Glu Val Ala
740 745 750
<210> 8
<211> 14507
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human MUC16 (CA-125) Protein
<400> 8
Met Leu Lys Pro Ser Gly Leu Pro Gly Ser Ser Ser Pro Thr Arg Ser 1 5 10 15
Leu Met Thr Gly Ser Arg Ser Thr Lys Ala Thr Pro Glu Met Asp Ser 20 25 30
Gly Leu Thr Gly Ala Thr Leu Ser Pro Lys Thr Ser Thr Gly Ala Ile 35 40 45
Val Val Thr Glu His Thr Leu Pro Phe Thr Ser Pro Asp Lys Thr Leu 50 55 60
Ala Ser Pro Thr Ser Ser Val Val Gly Arg Thr Thr Gln Ser Leu Gly 65 70 75 80
Val Met Ser Ser Ala Leu Pro Glu Ser Thr Ser Arg Gly Met Thr His 85 90 95
Ser Glu Gln Arg Thr Ser Pro Ser Leu Ser Pro Gln Val Asn Gly Thr 100 105 110
Pro Ser Arg Asn Tyr Pro Ala Thr Ser Met Val Ser Gly Leu Ser Ser 115 120 125
Pro Arg Thr Arg Thr Ser Ser Thr Glu Gly Asn Phe Thr Lys Glu Ala 130 135 140 49
Ser Thr Tyr Thr Leu Thr Val Glu Thr Thr Ser Gly Pro Val Thr Glu Glu Thr Pro Trp Asp Thr Arg Tyr Ile Pro Val Lys Ile Thr Ser Pro 180 185 190
Met Lys Thr Phe Ala Asp Ser Thr Ala Ser Lys Glu Asn Ala Pro Val 195 200 205
Ser Met Thr Pro Ala Glu Thr Thr Val Thr Asp Ser His Thr Pro Gly 210 215 220
Arg Thr Asn Pro Ser Phe Gly Thr Leu Tyr Ser Ser Phe Leu Asp Leu 225 230 235 240
Ser Pro Lys Gly Thr Pro Asn Ser Arg Gly Glu Thr Ser Leu Glu Leu 245 250 255
Ile Leu Ser Thr Thr Gly Tyr Pro Phe Ser Ser Pro Glu Pro Gly Ser 260 265 270
Ala Gly His Ser Arg Ile Ser Thr Ser Ala Pro Leu Ser Ser Ser Ala 275 280 285
Ser Val Leu Asp Asn Lys Ile Ser Glu Thr Ser Ile Phe Ser Gly Gln 290 295 300
Ser Leu Thr Ser Pro Leu Ser Pro Gly Val Pro Glu Ala Arg Ala Ser 305 310 315 320
Thr Met Pro Asn Ser Ala Ile Pro Phe Ser Met Thr Leu Ser Asn Ala 325 330 335
Glu Thr Ser Ala Glu Arg Val Arg Ser Thr Ile Ser Ser Leu Gly Thr 340 345 350
Pro Ser Ile Ser Thr Lys Gln Thr Ala Glu Thr Ile Leu Thr Phe His 355 360 365
Ala Phe Ala Glu Thr Met Asp Ile Pro Ser Thr His Ile Ala Lys Thr 370 375 380
Leu Ala Ser Glu Trp Leu Gly Ser Pro Gly Thr Leu Gly Gly Thr Ser 385 390 395 400
Thr Ser Ala Leu Thr Thr Thr Ser Pro Ser Thr Thr Leu Val Ser Glu 405 410 415
Glu Thr Asn Thr His His Ser Thr Ser Gly Lys Glu Thr Glu Gly Thr 420 425 430
Leu Asn Thr Ser Met Thr Pro Leu Glu Thr Ser Ala Pro Gly Glu Glu 435 440 445
Ser Glu Met Thr Ala Thr Leu Val Pro Thr Leu Gly Phe Thr Thr Leu 450 455 460
Asp Ser Lys Ile Arg Ser Pro Ser Gln Val Ser Ser Ser His Pro Thr 465 470 475 480
Arg Glu Leu Arg Thr Thr Gly Ser Thr Ser Gly Arg Gln Ser Ser Ser 485 490 495
Thr Ala Ala His Gly Ser Ser Asp Ile Leu Arg Ala Thr Thr Ser Ser 500 505 510
Thr Ser Lys Ala Ser Ser Trp Thr Ser Glu Ser Thr Ala Gln Gln Phe 515 520 525
Ser Glu Pro Gln His Thr Gln Trp Val Glu Thr Ser Pro Ser Met Lys 530 535 540
Thr Glu Arg Pro Pro Ala Ser Thr Ser Val Ala Ala Pro Ile Thr Thr 545 550 555 560
Ser Val Pro Ser Val Val Ser Gly Phe Thr Thr Leu Lys Thr Ser Ser 565 570 575
Thr Lys Gly Ile Trp Leu Glu Glu Thr Ser Ala Asp Thr 5 L0eu Ile Gly 580 585 590
His Leu Leu Thr Arg Ala Thr Ala Ser Ser Glu Thr Ser Ala Asp Leu 625 630 635 640
Thr Leu Ala Thr Asn Gly Val Pro Val Ser Val Ser Pro Ala Val Ser 645 650 655
Lys Thr Ala Ala Gly Ser Ser Pro Pro Gly Gly Thr Lys Pro Ser Tyr 660 665 670
Thr Met Val Ser Ser Val Ile Pro Glu Thr Ser Ser Leu Gln Ser Ser 675 680 685
Ala Phe Arg Glu Gly Thr Ser Leu Gly Leu Thr Pro Leu Asn Thr Arg 690 695 700
His Pro Phe Ser Ser Pro Glu Pro Asp Ser Ala Gly His Thr Lys Ile 705 710 715 720
Ser Thr Ser Ile Pro Leu Leu Ser Ser Ala Ser Val Leu Glu Asp Lys 725 730 735
Val Ser Ala Thr Ser Thr Phe Ser His His Lys Ala Thr Ser Ser Ile 740 745 750
Thr Thr Gly Thr Pro Glu Ile Ser Thr Lys Thr Lys Pro Ser Ser Ala 755 760 765
Val Leu Ser Ser Met Thr Leu Ser Asn Ala Ala Thr Ser Pro Glu Arg 770 775 780
Val Arg Asn Ala Thr Ser Pro Leu Thr His Pro Ser Pro Ser Gly Glu 785 790 795 800
Glu Thr Ala Gly Ser Val Leu Thr Leu Ser Thr Ser Ala Glu Thr Thr 805 810 815
Asp Ser Pro Asn Ile His Pro Thr Gly Thr Leu Thr Ser Glu Ser Ser 820 825 830
Glu Ser Pro Ser Thr Leu Ser Leu Pro Ser Val Ser Gly Val Lys Thr 835 840 845
Thr Phe Ser Ser Ser Thr Pro Ser Thr His Leu Phe Thr Ser Gly Glu 850 855 860
Glu Thr Glu Glu Thr Ser Asn Pro Ser Val Ser Gln Pro Glu Thr Ser 865 870 875 880
Val Ser Arg Val Arg Thr Thr Leu Ala Ser Thr Ser Val Pro Thr Pro 885 890 895
Val Phe Pro Thr Met Asp Thr Trp Pro Thr Arg Ser Ala Gln Phe Ser 900 905 910
Ser Ser His Leu Val Ser Glu Leu Arg Ala Thr Ser Ser Thr Ser Val 915 920 925
Thr Asn Ser Thr Gly Ser Ala Leu Pro Lys Ile Ser His Leu Thr Gly 930 935 940
Thr Ala Thr Met Ser Gln Thr Asn Arg Asp Thr Phe Asn Asp Ser Ala 945 950 955 960
Ala Pro Gln Ser Thr Thr Trp Pro Glu Thr Ser Pro Arg Phe Lys Thr 965 970 975
Gly Leu Pro Ser Ala Thr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ala Thr Ser Leu 980 985 990
Ser Ala Thr Val Met Val Ser Lys Phe Thr Ser Pro Ala Thr Ser Ser 995 1000 1005
Met Glu Ala Thr Ser Ile Arg Glu Pro Ser Thr Thr Ile Leu Thr 1010 1015 1020 51
Thr Glu Thr Thr Asn Gly Pro Gly Ser Met Ala Val Ala Ser Thr Thr Ser His Leu Pro Ile Gly Thr Thr Ala Ser Ser Glu Thr Ser 1055 1060 1065
Met Asp Phe Thr Met Ala Lys Glu Ser Val Ser Met Ser Val Ser 1070 1075 1080
Pro Ser Gln Ser Met Asp Ala Ala Gly Ser Ser Thr Pro Gly Arg 1085 1090 1095
Thr Ser Gln Phe Val Asp Thr Phe Ser Asp Asp Val Tyr His Leu 1100 1105 1110
Thr Ser Arg Glu Ile Thr Ile Pro Arg Asp Gly Thr Ser Ser Ala 1115 1120 1125
Leu Thr Pro Gln Met Thr Ala Thr His Pro Pro Ser Pro Asp Pro 1130 1135 1140
Gly Ser Ala Arg Ser Thr Trp Leu Gly Ile Leu Ser Ser Ser Pro 1145 1150 1155
Ser Ser Pro Thr Pro Lys Val Thr Met Ser Ser Thr Phe Ser Thr 1160 1165 1170
Gln Arg Val Thr Thr Ser Met Ile Met Asp Thr Val Glu Thr Ser 1175 1180 1185
Arg Trp Asn Met Pro Asn Leu Pro Ser Thr Thr Ser Leu Thr Pro 1190 1195 1200
Ser Asn Ile Pro Thr Ser Gly Ala Ile Gly Lys Ser Thr Leu Val 1205 1210 1215
Pro Leu Asp Thr Pro Ser Pro Ala Thr Ser Leu Glu Ala Ser Glu 1220 1225 1230
Gly Gly Leu Pro Thr Leu Ser Thr Tyr Pro Glu Ser Thr Asn Thr 1235 1240 1245
Pro Ser Ile His Leu Gly Ala His Ala Ser Ser Glu Ser Pro Ser 1250 1255 1260
Thr Ile Lys Leu Thr Met Ala Ser Val Val Lys Pro Gly Ser Tyr 1265 1270 1275
Thr Pro Leu Thr Phe Pro Ser Ile Glu Thr His Ile His Val Ser 1280 1285 1290
Thr Ala Arg Met Ala Tyr Ser Ser Gly Ser Ser Pro Glu Met Thr 1295 1300 1305
Ala Pro Gly Glu Thr Asn Thr Gly Ser Thr Trp Asp Pro Thr Thr 1310 1315 1320
Tyr Ile Thr Thr Thr Asp Pro Lys Asp Thr Ser Ser Ala Gln Val 1325 1330 1335
Ser Thr Pro His Ser Val Arg Thr Leu Arg Thr Thr Glu Asn His 1340 1345 1350
Pro Lys Thr Glu Ser Ala Thr Pro Ala Ala Tyr Ser Gly Ser Pro 1355 1360 1365
Lys Ile Ser Ser Ser Pro Asn Leu Thr Ser Pro Ala Thr Lys Ala 1370 1375 1380
Trp Thr Ile Thr Asp Thr Thr Glu His Ser Thr Gln Leu His Tyr 1385 1390 1395
Thr Lys Leu Ala Glu Lys Ser Ser Gly Phe Glu Thr Gln Ser Ala 1400 1405 1410
Pro Gly Pro Val Ser Val Val Ile Pro Thr Ser Pro Thr Ile Gly 1415 1420 1425
Ser Ser Thr Leu Glu Leu Thr Ser Asp Val Pro Gly G 52lu Pro Leu 1430 1435 1440
Leu Asp Ile Ser Ser Pro Ser Ser Pro Met Ser Thr Phe Ala Ile 1475 1480 1485
Phe Pro Pro Met Ser Thr Pro Ser His Glu Leu Ser Lys Ser Glu 1490 1495 1500
Ala Asp Thr Ser Ala Ile Arg Asn Thr Asp Ser Thr Thr Leu Asp 1505 1510 1515
Gln His Leu Gly Ile Arg Ser Leu Gly Arg Thr Gly Asp Leu Thr 1520 1525 1530
Thr Val Pro Ile Thr Pro Leu Thr Thr Thr Trp Thr Ser Val Ile 1535 1540 1545
Glu His Ser Thr Gln Ala Gln Asp Thr Leu Ser Ala Thr Met Ser 1550 1555 1560
Pro Thr His Val Thr Gln Ser Leu Lys Asp Gln Thr Ser Ile Pro 1565 1570 1575
Ala Ser Ala Ser Pro Ser His Leu Thr Glu Val Tyr Pro Glu Leu 1580 1585 1590
Gly Thr Gln Gly Arg Ser Ser Ser Glu Ala Thr Thr Phe Trp Lys 1595 1600 1605
Pro Ser Thr Asp Thr Leu Ser Arg Glu Ile Glu Thr Gly Pro Thr 1610 1615 1620
Asn Ile Gln Ser Thr Pro Pro Met Asp Asn Thr Thr Thr Gly Ser 1625 1630 1635
Ser Ser Ser Gly Val Thr Leu Gly Ile Ala His Leu Pro Ile Gly 1640 1645 1650
Thr Ser Ser Pro Ala Glu Thr Ser Thr Asn Met Ala Leu Glu Arg 1655 1660 1665
Arg Ser Ser Thr Ala Thr Val Ser Met Ala Gly Thr Met Gly Leu 1670 1675 1680
Leu Val Thr Ser Ala Pro Gly Arg Ser Ile Ser Gln Ser Leu Gly 1685 1690 1695
Arg Val Ser Ser Val Leu Ser Glu Ser Thr Thr Glu Gly Val Thr 1700 1705 1710
Asp Ser Ser Lys Gly Ser Ser Pro Arg Leu Asn Thr Gln Gly Asn 1715 1720 1725
Thr Ala Leu Ser Ser Ser Leu Glu Pro Ser Tyr Ala Glu Gly Ser 1730 1735 1740
Gln Met Ser Thr Ser Ile Pro Leu Thr Ser Ser Pro Thr Thr Pro 1745 1750 1755
Asp Val Glu Phe Ile Gly Gly Ser Thr Phe Trp Thr Lys Glu Val 1760 1765 1770
Thr Thr Val Met Thr Ser Asp Ile Ser Lys Ser Ser Ala Arg Thr 1775 1780 1785
Glu Ser Ser Ser Ala Thr Leu Met Ser Thr Ala Leu Gly Ser Thr 1790 1795 1800
Glu Asn Thr Gly Lys Glu Lys Leu Arg Thr Ala Ser Met Asp Leu 1805 1810 1815
Pro Ser Pro Thr Pro Ser Met Glu Val Thr Pro Trp Ile Ser Leu 1820 1825 1830
Thr Leu Ser Asn Ala Pro Asn Thr Thr Asp Ser Leu Asp Leu Ser 1835 1840 1845 53
His Gly Val His Thr Ser Ser Ala Gly Thr Leu Ala Thr Asp Arg Ser Asp Thr Ser Ser Lys Ser Leu Ser Met Gly Asn Ser Thr His 1880 1885 1890
Thr Ser Met Thr Tyr Thr Glu Lys Ser Glu Val Ser Ser Ser Ile 1895 1900 1905
His Pro Arg Pro Glu Thr Ser Ala Pro Gly Ala Glu Thr Thr Leu 1910 1915 1920
Thr Ser Thr Pro Gly Asn Arg Ala Ile Ser Leu Thr Leu Pro Phe 1925 1930 1935
Ser Ser Ile Pro Val Glu Glu Val Ile Ser Thr Gly Ile Thr Ser 1940 1945 1950
Gly Pro Asp Ile Asn Ser Ala Pro Met Thr His Ser Pro Ile Thr 1955 1960 1965
Pro Pro Thr Ile Val Trp Thr Ser Thr Gly Thr Ile Glu Gln Ser 1970 1975 1980
Thr Gln Pro Leu His Ala Val Ser Ser Glu Lys Val Ser Val Gln 1985 1990 1995
Thr Gln Ser Thr Pro Tyr Val Asn Ser Val Ala Val Ser Ala Ser 2000 2005 2010
Pro Thr His Glu Asn Ser Val Ser Ser Gly Ser Ser Thr Ser Ser 2015 2020 2025
Pro Tyr Ser Ser Ala Ser Leu Glu Ser Leu Asp Ser Thr Ile Ser 2030 2035 2040
Arg Arg Asn Ala Ile Thr Ser Trp Leu Trp Asp Leu Thr Thr Ser 2045 2050 2055
Leu Pro Thr Thr Thr Trp Pro Ser Thr Ser Leu Ser Glu Ala Leu 2060 2065 2070
Ser Ser Gly His Ser Gly Val Ser Asn Pro Ser Ser Thr Thr Thr 2075 2080 2085
Glu Phe Pro Leu Phe Ser Ala Ala Ser Thr Ser Ala Ala Lys Gln 2090 2095 2100
Arg Asn Pro Glu Thr Glu Thr His Gly Pro Gln Asn Thr Ala Ala 2105 2110 2115
Ser Thr Leu Asn Thr Asp Ala Ser Ser Val Thr Gly Leu Ser Glu 2120 2125 2130
Thr Pro Val Gly Ala Ser Ile Ser Ser Glu Val Pro Leu Pro Met 2135 2140 2145
Ala Ile Thr Ser Arg Ser Asp Val Ser Gly Leu Thr Ser Glu Ser 2150 2155 2160
Thr Ala Asn Pro Ser Leu Gly Thr Ala Ser Ser Ala Gly Thr Lys 2165 2170 2175
Leu Thr Arg Thr Ile Ser Leu Pro Thr Ser Glu Ser Leu Val Ser 2180 2185 2190
Phe Arg Met Asn Lys Asp Pro Trp Thr Val Ser Ile Pro Leu Gly 2195 2200 2205
Ser His Pro Thr Thr Asn Thr Glu Thr Ser Ile Pro Val Asn Ser 2210 2215 2220
Ala Gly Pro Pro Gly Leu Ser Thr Val Ala Ser Asp Val Ile Asp 2225 2230 2235
Thr Pro Ser Asp Gly Ala Glu Ser Ile Pro Thr Val Ser Phe Ser 2240 2245 2250
Pro Ser Pro Asp Thr Glu Val Thr Thr Ile Ser His Ph 5e4 Pro Glu 2255 2260 2265
Ala Met Ser Thr Lys Pro Thr Gly Ala Ser Pro Ser Ile Thr Leu 2300 2305 2310
Gly Glu Arg Arg Thr Ile Thr Ser Ala Ala Pro Thr Thr Ser Pro 2315 2320 2325
Ile Val Leu Thr Ala Ser Phe Thr Glu Thr Ser Thr Val Ser Leu 2330 2335 2340
Asp Asn Glu Thr Thr Val Lys Thr Ser Asp Ile Leu Asp Ala Arg 2345 2350 2355
Lys Thr Asn Glu Leu Pro Ser Asp Ser Ser Ser Ser Ser Asp Leu 2360 2365 2370
Ile Asn Thr Ser Ile Ala Ser Ser Thr Met Asp Val Thr Lys Thr 2375 2380 2385
Ala Ser Ile Ser Pro Thr Ser Ile Ser Gly Met Thr Ala Ser Ser 2390 2395 2400
Ser Pro Ser Leu Phe Ser Ser Asp Arg Pro Gln Val Pro Thr Ser 2405 2410 2415
Thr Thr Glu Thr Asn Thr Ala Thr Ser Pro Ser Val Ser Ser Asn 2420 2425 2430
Thr Tyr Ser Leu Asp Gly Gly Ser Asn Val Gly Gly Thr Pro Ser 2435 2440 2445
Thr Leu Pro Pro Phe Thr Ile Thr His Pro Val Glu Thr Ser Ser 2450 2455 2460
Ala Leu Leu Ala Trp Ser Arg Pro Val Arg Thr Phe Ser Thr Met 2465 2470 2475
Val Ser Thr Asp Thr Ala Ser Gly Glu Asn Pro Thr Ser Ser Asn 2480 2485 2490
Ser Val Val Thr Ser Val Pro Ala Pro Gly Thr Trp Thr Ser Val 2495 2500 2505
Gly Ser Thr Thr Asp Leu Pro Ala Met Gly Phe Leu Lys Thr Ser 2510 2515 2520
Pro Ala Gly Glu Ala His Ser Leu Leu Ala Ser Thr Ile Glu Pro 2525 2530 2535
Ala Thr Ala Phe Thr Pro His Leu Ser Ala Ala Val Val Thr Gly 2540 2545 2550
Ser Ser Ala Thr Ser Glu Ala Ser Leu Leu Thr Thr Ser Glu Ser 2555 2560 2565
Lys Ala Ile His Ser Ser Pro Gln Thr Pro Thr Thr Pro Thr Ser 2570 2575 2580
Gly Ala Asn Trp Glu Thr Ser Ala Thr Pro Glu Ser Leu Leu Val 2585 2590 2595
Val Thr Glu Thr Ser Asp Thr Thr Leu Thr Ser Lys Ile Leu Val 2600 2605 2610
Thr Asp Thr Ile Leu Phe Ser Thr Val Ser Thr Pro Pro Ser Lys 2615 2620 2625
Phe Pro Ser Thr Gly Thr Leu Ser Gly Ala Ser Phe Pro Thr Leu 2630 2635 2640
Leu Pro Asp Thr Pro Ala Ile Pro Leu Thr Ala Thr Glu Pro Thr 2645 2650 2655
Ser Ser Leu Ala Thr Ser Phe Asp Ser Thr Pro Leu Val Thr Ile 2660 2665 2670 55
Ala Ser Asp Ser Leu Gly Thr Val Pro Glu Thr Thr Leu Thr Met Asn Pro Asp Arg Ser Ile Pro Gly Ile Thr Ile Gln Gly Val Thr 2705 2710 2715
Glu Ser Pro Leu His Pro Ser Ser Thr Ser Pro Ser Lys Ile Val 2720 2725 2730
Ala Pro Arg Asn Thr Thr Tyr Glu Gly Ser Ile Thr Val Ala Leu 2735 2740 2745
Ser Thr Leu Pro Ala Gly Thr Thr Gly Ser Leu Val Phe Ser Gln 2750 2755 2760
Ser Ser Glu Asn Ser Glu Thr Thr Ala Leu Val Asp Ser Ser Ala 2765 2770 2775
Gly Leu Glu Arg Ala Ser Val Met Pro Leu Thr Thr Gly Ser Gln 2780 2785 2790
Gly Met Ala Ser Ser Gly Gly Ile Arg Ser Gly Ser Thr His Ser 2795 2800 2805
Thr Gly Thr Lys Thr Phe Ser Ser Leu Pro Leu Thr Met Asn Pro 2810 2815 2820
Gly Glu Val Thr Ala Met Ser Glu Ile Thr Thr Asn Arg Leu Thr 2825 2830 2835
Ala Thr Gln Ser Thr Ala Pro Lys Gly Ile Pro Val Lys Pro Thr 2840 2845 2850
Ser Ala Glu Ser Gly Leu Leu Thr Pro Val Ser Ala Ser Ser Ser 2855 2860 2865
Pro Ser Lys Ala Phe Ala Ser Leu Thr Thr Ala Pro Pro Thr Trp 2870 2875 2880
Gly Ile Pro Gln Ser Thr Leu Thr Phe Glu Phe Ser Glu Val Pro 2885 2890 2895
Ser Leu Asp Thr Lys Ser Ala Ser Leu Pro Thr Pro Gly Gln Ser 2900 2905 2910
Leu Asn Thr Ile Pro Asp Ser Asp Ala Ser Thr Ala Ser Ser Ser 2915 2920 2925
Leu Ser Lys Ser Pro Glu Lys Asn Pro Arg Ala Arg Met Met Thr 2930 2935 2940
Ser Thr Lys Ala Ile Ser Ala Ser Ser Phe Gln Ser Thr Gly Phe 2945 2950 2955
Thr Glu Thr Pro Glu Gly Ser Ala Ser Pro Ser Met Ala Gly His 2960 2965 2970
Glu Pro Arg Val Pro Thr Ser Gly Thr Gly Asp Pro Arg Tyr Ala 2975 2980 2985
Ser Glu Ser Met Ser Tyr Pro Asp Pro Ser Lys Ala Ser Ser Ala 2990 2995 3000
Met Thr Ser Thr Ser Leu Ala Ser Lys Leu Thr Thr Leu Phe Ser 3005 3010 3015
Thr Gly Gln Ala Ala Arg Ser Gly Ser Ser Ser Ser Pro Ile Ser 3020 3025 3030
Leu Ser Thr Glu Lys Glu Thr Ser Phe Leu Ser Pro Thr Ala Ser 3035 3040 3045
Thr Ser Arg Lys Thr Ser Leu Phe Leu Gly Pro Ser Met Ala Arg 3050 3055 3060
Gln Pro Asn Ile Leu Val His Leu Gln Thr Ser Ala Leu Thr Leu 3065 3070 3075
Ser Pro Thr Ser Thr Leu Asn Met Ser Gln Glu Glu 5 P6ro Pro Glu 3080 3085 3090
Leu Leu Pro Val Ser Ser Pro Thr Glu Pro Thr Ala Arg Arg Lys 3125 3130 3135
Ser Ser Pro Glu Thr Trp Ala Ser Ser Ile Ser Val Pro Ala Lys 3140 3145 3150
Thr Ser Leu Val Glu Thr Thr Asp Gly Thr Leu Val Thr Thr Ile 3155 3160 3165
Lys Met Ser Ser Gln Ala Ala Gln Gly Asn Ser Thr Trp Pro Ala 3170 3175 3180
Pro Ala Glu Glu Thr Gly Ser Ser Pro Ala Gly Thr Ser Pro Gly 3185 3190 3195
Ser Pro Glu Met Ser Thr Thr Leu Lys Ile Met Ser Ser Lys Glu 3200 3205 3210
Pro Ser Ile Ser Pro Glu Ile Arg Ser Thr Val Arg Asn Ser Pro 3215 3220 3225
Trp Lys Thr Pro Glu Thr Thr Val Pro Met Glu Thr Thr Val Glu 3230 3235 3240
Pro Val Thr Leu Gln Ser Thr Ala Leu Gly Ser Gly Ser Thr Ser 3245 3250 3255
Ile Ser His Leu Pro Thr Gly Thr Thr Ser Pro Thr Lys Ser Pro 3260 3265 3270
Thr Glu Asn Met Leu Ala Thr Glu Arg Val Ser Leu Ser Pro Ser 3275 3280 3285
Pro Pro Glu Ala Trp Thr Asn Leu Tyr Ser Gly Thr Pro Gly Gly 3290 3295 3300
Thr Arg Gln Ser Leu Ala Thr Met Ser Ser Val Ser Leu Glu Ser 3305 3310 3315
Pro Thr Ala Arg Ser Ile Thr Gly Thr Gly Gln Gln Ser Ser Pro 3320 3325 3330
Glu Leu Val Ser Lys Thr Thr Gly Met Glu Phe Ser Met Trp His 3335 3340 3345
Gly Ser Thr Gly Gly Thr Thr Gly Asp Thr His Val Ser Leu Ser 3350 3355 3360
Thr Ser Ser Asn Ile Leu Glu Asp Pro Val Thr Ser Pro Asn Ser 3365 3370 3375
Val Ser Ser Leu Thr Asp Lys Ser Lys His Lys Thr Glu Thr Trp 3380 3385 3390
Val Ser Thr Thr Ala Ile Pro Ser Thr Val Leu Asn Asn Lys Ile 3395 3400 3405
Met Ala Ala Glu Gln Gln Thr Ser Arg Ser Val Asp Glu Ala Tyr 3410 3415 3420
Ser Ser Thr Ser Ser Trp Ser Asp Gln Thr Ser Gly Ser Asp Ile 3425 3430 3435
Thr Leu Gly Ala Ser Pro Asp Val Thr Asn Thr Leu Tyr Ile Thr 3440 3445 3450
Ser Thr Ala Gln Thr Thr Ser Leu Val Ser Leu Pro Ser Gly Asp 3455 3460 3465
Gln Gly Ile Thr Ser Leu Thr Asn Pro Ser Gly Gly Lys Thr Ser 3470 3475 3480
Ser Ala Ser Ser Val Thr Ser Pro Ser Ile Gly Leu Glu Thr Leu 3485 3490 3495 57
Arg Ala Asn Val Ser Ala Val Lys Ser Asp Ile Ala Pro Thr Ala Asp Val Thr Thr Ala Pro Thr Pro Gly Ile Ser Thr Thr Ile Thr 3530 3535 3540
Thr Met Gly Thr Asn Ser Ile Ser Thr Thr Thr Pro Asn Pro Glu 3545 3550 3555
Val Gly Met Ser Thr Met Asp Ser Thr Pro Ala Thr Glu Arg Arg 3560 3565 3570
Thr Thr Ser Thr Glu His Pro Ser Thr Trp Ser Ser Thr Ala Ala 3575 3580 3585
Ser Asp Ser Trp Thr Val Thr Asp Met Thr Ser Asn Leu Lys Val 3590 3595 3600
Ala Arg Ser Pro Gly Thr Ile Ser Thr Met His Thr Thr Ser Phe 3605 3610 3615
Leu Ala Ser Ser Thr Glu Leu Asp Ser Met Ser Thr Pro His Gly 3620 3625 3630
Arg Ile Thr Val Ile Gly Thr Ser Leu Val Thr Pro Ser Ser Asp 3635 3640 3645
Ala Ser Ala Val Lys Thr Glu Thr Ser Thr Ser Glu Arg Thr Leu 3650 3655 3660
Ser Pro Ser Asp Thr Thr Ala Ser Thr Pro Ile Ser Thr Phe Ser 3665 3670 3675
Arg Val Gln Arg Met Ser Ile Ser Val Pro Asp Ile Leu Ser Thr 3680 3685 3690
Ser Trp Thr Pro Ser Ser Thr Glu Ala Glu Asp Val Pro Val Ser 3695 3700 3705
Met Val Ser Thr Asp His Ala Ser Thr Lys Thr Asp Pro Asn Thr 3710 3715 3720
Pro Leu Ser Thr Phe Leu Phe Asp Ser Leu Ser Thr Leu Asp Trp 3725 3730 3735
Asp Thr Gly Arg Ser Leu Ser Ser Ala Thr Ala Thr Thr Ser Ala 3740 3745 3750
Pro Gln Gly Ala Thr Thr Pro Gln Glu Leu Thr Leu Glu Thr Met 3755 3760 3765
Ile Ser Pro Ala Thr Ser Gln Leu Pro Phe Ser Ile Gly His Ile 3770 3775 3780
Thr Ser Ala Val Thr Pro Ala Ala Met Ala Arg Ser Ser Gly Val 3785 3790 3795
Thr Phe Ser Arg Pro Asp Pro Thr Ser Lys Lys Ala Glu Gln Thr 3800 3805 3810
Ser Thr Gln Leu Pro Thr Thr Thr Ser Ala His Pro Gly Gln Val 3815 3820 3825
Pro Arg Ser Ala Ala Thr Thr Leu Asp Val Ile Pro His Thr Ala 3830 3835 3840
Lys Thr Pro Asp Ala Thr Phe Gln Arg Gln Gly Gln Thr Ala Leu 3845 3850 3855
Thr Thr Glu Ala Arg Ala Thr Ser Asp Ser Trp Asn Glu Lys Glu 3860 3865 3870
Lys Ser Thr Pro Ser Ala Pro Trp Ile Thr Glu Met Met Asn Ser 3875 3880 3885
Val Ser Glu Asp Thr Ile Lys Glu Val Thr Ser Ser Ser Ser Val 3890 3895 3900
Leu Arg Thr Leu Asn Thr Leu Asp Ile Asn Leu Glu 5 S8er Gly Thr 3905 3910 3915
Asn Thr Val Glu Thr Thr Gly Trp Val Thr Ser Ser Glu His Ala 3950 3955 3960
Ser His Ser Thr Ile Pro Ala His Ser Ala Ser Ser Lys Leu Thr 3965 3970 3975
Ser Pro Val Val Thr Thr Ser Thr Arg Glu Gln Ala Ile Val Ser 3980 3985 3990
Met Ser Thr Thr Thr Trp Pro Glu Ser Thr Arg Ala Arg Thr Glu 3995 4000 4005
Pro Asn Ser Phe Leu Thr Ile Glu Leu Arg Asp Val Ser Pro Tyr 4010 4015 4020
Met Asp Thr Ser Ser Thr Thr Gln Thr Ser Ile Ile Ser Ser Pro 4025 4030 4035
Gly Ser Thr Ala Ile Thr Lys Gly Pro Arg Thr Glu Ile Thr Ser 4040 4045 4050
Ser Lys Arg Ile Ser Ser Ser Phe Leu Ala Gln Ser Met Arg Ser 4055 4060 4065
Ser Asp Ser Pro Ser Glu Ala Ile Thr Arg Leu Ser Asn Phe Pro 4070 4075 4080
Ala Met Thr Glu Ser Gly Gly Met Ile Leu Ala Met Gln Thr Ser 4085 4090 4095
Pro Pro Gly Ala Thr Ser Leu Ser Ala Pro Thr Leu Asp Thr Ser 4100 4105 4110
Ala Thr Ala Ser Trp Thr Gly Thr Pro Leu Ala Thr Thr Gln Arg 4115 4120 4125
Phe Thr Tyr Ser Glu Lys Thr Thr Leu Phe Ser Lys Gly Pro Glu 4130 4135 4140
Asp Thr Ser Gln Pro Ser Pro Pro Ser Val Glu Glu Thr Ser Ser 4145 4150 4155
Ser Ser Ser Leu Val Pro Ile His Ala Thr Thr Ser Pro Ser Asn 4160 4165 4170
Ile Leu Leu Thr Ser Gln Gly His Ser Pro Ser Ser Thr Pro Pro 4175 4180 4185
Val Thr Ser Val Phe Leu Ser Glu Thr Ser Gly Leu Gly Lys Thr 4190 4195 4200
Thr Asp Met Ser Arg Ile Ser Leu Glu Pro Gly Thr Ser Leu Pro 4205 4210 4215
Pro Asn Leu Ser Ser Thr Ala Gly Glu Ala Leu Ser Thr Tyr Glu 4220 4225 4230
Ala Ser Arg Asp Thr Lys Ala Ile His His Ser Ala Asp Thr Ala 4235 4240 4245
Val Thr Asn Met Glu Ala Thr Ser Ser Glu Tyr Ser Pro Ile Pro 4250 4255 4260
Gly His Thr Lys Pro Ser Lys Ala Thr Ser Pro Leu Val Thr Ser 4265 4270 4275
His Ile Met Gly Asp Ile Thr Ser Ser Thr Ser Val Phe Gly Ser 4280 4285 4290
Ser Glu Thr Thr Glu Ile Glu Thr Val Ser Ser Val Asn Gln Gly 4295 4300 4305
Leu Gln Glu Arg Ser Thr Ser Gln Val Ala Ser Ser Ala Thr Glu 4310 4315 4320 59
Thr Ser Thr Val Ile Thr His Val Ser Ser Gly Asp Ala Thr Thr Ser Ser Pro His Gln Phe Ile Thr Ser Thr Asn Thr Phe Thr Asp 4355 4360 4365
Val Ser Thr Asn Pro Ser Thr Ser Leu Ile Met Thr Glu Ser Ser 4370 4375 4380
Gly Val Thr Ile Thr Thr Gln Thr Gly Pro Thr Gly Ala Ala Thr 4385 4390 4395
Gln Gly Pro Tyr Leu Leu Asp Thr Ser Thr Met Pro Tyr Leu Thr 4400 4405 4410
Glu Thr Pro Leu Ala Val Thr Pro Asp Phe Met Gln Ser Glu Lys 4415 4420 4425
Thr Thr Leu Ile Ser Lys Gly Pro Lys Asp Val Ser Trp Thr Ser 4430 4435 4440
Pro Pro Ser Val Ala Glu Thr Ser Tyr Pro Ser Ser Leu Thr Pro 4445 4450 4455
Phe Leu Val Thr Thr Ile Pro Pro Ala Thr Ser Thr Leu Gln Gly 4460 4465 4470
Gln His Thr Ser Ser Pro Val Ser Ala Thr Ser Val Leu Thr Ser 4475 4480 4485
Gly Leu Val Lys Thr Thr Asp Met Leu Asn Thr Ser Met Glu Pro 4490 4495 4500
Val Thr Asn Ser Pro Gln Asn Leu Asn Asn Pro Ser Asn Glu Ile 4505 4510 4515
Leu Ala Thr Leu Ala Ala Thr Thr Asp Ile Glu Thr Ile His Pro 4520 4525 4530
Ser Ile Asn Lys Ala Val Thr Asn Met Gly Thr Ala Ser Ser Ala 4535 4540 4545
His Val Leu His Ser Thr Leu Pro Val Ser Ser Glu Pro Ser Thr 4550 4555 4560
Ala Thr Ser Pro Met Val Pro Ala Ser Ser Met Gly Asp Ala Leu 4565 4570 4575
Ala Ser Ile Ser Ile Pro Gly Ser Glu Thr Thr Asp Ile Glu Gly 4580 4585 4590
Glu Pro Thr Ser Ser Leu Thr Ala Gly Arg Lys Glu Asn Ser Thr 4595 4600 4605
Leu Gln Glu Met Asn Ser Thr Thr Glu Ser Asn Ile Ile Leu Ser 4610 4615 4620
Asn Val Ser Val Gly Ala Ile Thr Glu Ala Thr Lys Met Glu Val 4625 4630 4635
Pro Ser Phe Asp Ala Thr Phe Ile Pro Thr Pro Ala Gln Ser Thr 4640 4645 4650
Lys Phe Pro Asp Ile Phe Ser Val Ala Ser Ser Arg Leu Ser Asn 4655 4660 4665
Ser Pro Pro Met Thr Ile Ser Thr His Met Thr Thr Thr Gln Thr 4670 4675 4680
Gly Ser Ser Gly Ala Thr Ser Lys Ile Pro Leu Ala Leu Asp Thr 4685 4690 4695
Ser Thr Leu Glu Thr Ser Ala Gly Thr Pro Ser Val Val Thr Glu 4700 4705 4710
Gly Phe Ala His Ser Lys Ile Thr Thr Ala Met Asn Asn Asp Val 4715 4720 4725
Lys Asp Val Ser Gln Thr Asn Pro Pro Phe Gln Asp 6 G0 lu Ala Ser 4730 4735 4740
Ser Met Ser Ser Val Leu Thr Ser Ser Leu Val Lys Thr Ala Gly 4775 4780 4785
Lys Val Asp Thr Ser Leu Glu Thr Val Thr Ser Ser Pro Gln Ser 4790 4795 4800
Met Ser Asn Thr Leu Asp Asp Ile Ser Val Thr Ser Ala Ala Thr 4805 4810 4815
Thr Asp Ile Glu Thr Thr His Pro Ser Ile Asn Thr Val Val Thr 4820 4825 4830
Asn Val Gly Thr Thr Gly Ser Ala Phe Glu Ser His Ser Thr Val 4835 4840 4845
Ser Ala Tyr Pro Glu Pro Ser Lys Val Thr Ser Pro Asn Val Thr 4850 4855 4860
Thr Ser Thr Met Glu Asp Thr Thr Ile Ser Arg Ser Ile Pro Lys 4865 4870 4875
Ser Ser Lys Thr Thr Arg Thr Glu Thr Glu Thr Thr Ser Ser Leu 4880 4885 4890
Thr Pro Lys Leu Arg Glu Thr Ser Ile Ser Gln Glu Ile Thr Ser 4895 4900 4905
Ser Thr Glu Thr Ser Thr Val Pro Tyr Lys Glu Leu Thr Gly Ala 4910 4915 4920
Thr Thr Glu Val Ser Arg Thr Asp Val Thr Ser Ser Ser Ser Thr 4925 4930 4935
Ser Phe Pro Gly Pro Asp Gln Ser Thr Val Ser Leu Asp Ile Ser 4940 4945 4950
Thr Glu Thr Asn Thr Arg Leu Ser Thr Ser Pro Ile Met Thr Glu 4955 4960 4965
Ser Ala Glu Ile Thr Ile Thr Thr Gln Thr Gly Pro His Gly Ala 4970 4975 4980
Thr Ser Gln Asp Thr Phe Thr Met Asp Pro Ser Asn Thr Thr Pro 4985 4990 4995
Gln Ala Gly Ile His Ser Ala Met Thr His Gly Phe Ser Gln Leu 5000 5005 5010
Asp Val Thr Thr Leu Met Ser Arg Ile Pro Gln Asp Val Ser Trp 5015 5020 5025
Thr Ser Pro Pro Ser Val Asp Lys Thr Ser Ser Pro Ser Ser Phe 5030 5035 5040
Leu Ser Ser Pro Ala Met Thr Thr Pro Ser Leu Ile Ser Ser Thr 5045 5050 5055
Leu Pro Glu Asp Lys Leu Ser Ser Pro Met Thr Ser Leu Leu Thr 5060 5065 5070
Ser Gly Leu Val Lys Ile Thr Asp Ile Leu Arg Thr Arg Leu Glu 5075 5080 5085
Pro Val Thr Ser Ser Leu Pro Asn Phe Ser Ser Thr Ser Asp Lys 5090 5095 5100
Ile Leu Ala Thr Ser Lys Asp Ser Lys Asp Thr Lys Glu Ile Phe 5105 5110 5115
Pro Ser Ile Asn Thr Glu Glu Thr Asn Val Lys Ala Asn Asn Ser 5120 5125 5130
Gly His Glu Ser His Ser Pro Ala Leu Ala Asp Ser Glu Thr Pro 5135 5140 5145 61
Lys Ala Thr Thr Gln Met Val Ile Thr Thr Thr Val Gly Asp Pro Asn Ile Lys Arg Glu Pro Thr Tyr Phe Leu Thr Pro Arg Leu Arg 5180 5185 5190
Glu Thr Ser Thr Ser Gln Glu Ser Ser Phe Pro Thr Asp Thr Ser 5195 5200 5205
Phe Leu Leu Ser Lys Val Pro Thr Gly Thr Ile Thr Glu Val Ser 5210 5215 5220
Ser Thr Gly Val Asn Ser Ser Ser Lys Ile Ser Thr Pro Asp His 5225 5230 5235
Asp Lys Ser Thr Val Pro Pro Asp Thr Phe Thr Gly Glu Ile Pro 5240 5245 5250
Arg Val Phe Thr Ser Ser Ile Lys Thr Lys Ser Ala Glu Met Thr 5255 5260 5265
Ile Thr Thr Gln Ala Ser Pro Pro Glu Ser Ala Ser His Ser Thr 5270 5275 5280
Leu Pro Leu Asp Thr Ser Thr Thr Leu Ser Gln Gly Gly Thr His 5285 5290 5295
Ser Thr Val Thr Gln Gly Phe Pro Tyr Ser Glu Val Thr Thr Leu 5300 5305 5310
Met Gly Met Gly Pro Gly Asn Val Ser Trp Met Thr Thr Pro Pro 5315 5320 5325
Val Glu Glu Thr Ser Ser Val Ser Ser Leu Met Ser Ser Pro Ala 5330 5335 5340
Met Thr Ser Pro Ser Pro Val Ser Ser Thr Ser Pro Gln Ser Ile 5345 5350 5355
Pro Ser Ser Pro Leu Pro Val Thr Ala Leu Pro Thr Ser Val Leu 5360 5365 5370
Val Thr Thr Thr Asp Val Leu Gly Thr Thr Ser Pro Glu Ser Val 5375 5380 5385
Thr Ser Ser Pro Pro Asn Leu Ser Ser Ile Thr His Glu Arg Pro 5390 5395 5400
Ala Thr Tyr Lys Asp Thr Ala His Thr Glu Ala Ala Met His His 5405 5410 5415
Ser Thr Asn Thr Ala Val Thr Asn Val Gly Thr Ser Gly Ser Gly 5420 5425 5430
His Lys Ser Gln Ser Ser Val Leu Ala Asp Ser Glu Thr Ser Lys 5435 5440 5445
Ala Thr Pro Leu Met Ser Thr Thr Ser Thr Leu Gly Asp Thr Ser 5450 5455 5460
Val Ser Thr Ser Thr Pro Asn Ile Ser Gln Thr Asn Gln Ile Gln 5465 5470 5475
Thr Glu Pro Thr Ala Ser Leu Ser Pro Arg Leu Arg Glu Ser Ser 5480 5485 5490
Thr Ser Glu Lys Thr Ser Ser Thr Thr Glu Thr Asn Thr Ala Phe 5495 5500 5505
Ser Tyr Val Pro Thr Gly Ala Ile Thr Gln Ala Ser Arg Thr Glu 5510 5515 5520
Ile Ser Ser Ser Arg Thr Ser Ile Ser Asp Leu Asp Arg Pro Thr 5525 5530 5535
Ile Ala Pro Asp Ile Ser Thr Gly Met Ile Thr Arg Leu Phe Thr 5540 5545 5550
Ser Pro Ile Met Thr Lys Ser Ala Glu Met Thr Val Th 6r2 Thr Gln 5555 5560 5565
Gln Gly Phe Pro His Ser Glu Ile Thr Thr Leu Arg Ser Arg Thr 5600 5605 5610
Pro Gly Asp Val Ser Trp Met Thr Thr Pro Pro Val Glu Glu Thr 5615 5620 5625
Ser Ser Gly Phe Ser Leu Met Ser Pro Ser Met Thr Ser Pro Ser 5630 5635 5640
Pro Val Ser Ser Thr Ser Pro Glu Ser Ile Pro Ser Ser Pro Leu 5645 5650 5655
Pro Val Thr Ala Leu Leu Thr Ser Val Leu Val Thr Thr Thr Asn 5660 5665 5670
Val Leu Gly Thr Thr Ser Pro Glu Pro Val Thr Ser Ser Pro Pro 5675 5680 5685
Asn Leu Ser Ser Pro Thr Gln Glu Arg Leu Thr Thr Tyr Lys Asp 5690 5695 5700
Thr Ala His Thr Glu Ala Met His Ala Ser Met His Thr Asn Thr 5705 5710 5715
Ala Val Ala Asn Val Gly Thr Ser Ile Ser Gly His Glu Ser Gln 5720 5725 5730
Ser Ser Val Pro Ala Asp Ser His Thr Ser Lys Ala Thr Ser Pro 5735 5740 5745
Met Gly Ile Thr Phe Ala Met Gly Asp Thr Ser Val Ser Thr Ser 5750 5755 5760
Thr Pro Ala Phe Phe Glu Thr Arg Ile Gln Thr Glu Ser Thr Ser 5765 5770 5775
Ser Leu Ile Pro Gly Leu Arg Asp Thr Arg Thr Ser Glu Glu Ile 5780 5785 5790
Asn Thr Val Thr Glu Thr Ser Thr Val Leu Ser Glu Val Pro Thr 5795 5800 5805
Thr Thr Thr Thr Glu Val Ser Arg Thr Glu Val Ile Thr Ser Ser 5810 5815 5820
Arg Thr Thr Ile Ser Gly Pro Asp His Ser Lys Met Ser Pro Tyr 5825 5830 5835
Ile Ser Thr Glu Thr Ile Thr Arg Leu Ser Thr Phe Pro Phe Val 5840 5845 5850
Thr Gly Ser Thr Glu Met Ala Ile Thr Asn Gln Thr Gly Pro Ile 5855 5860 5865
Gly Thr Ile Ser Gln Ala Thr Leu Thr Leu Asp Thr Ser Ser Thr 5870 5875 5880
Ala Ser Trp Glu Gly Thr His Ser Pro Val Thr Gln Arg Phe Pro 5885 5890 5895
His Ser Glu Glu Thr Thr Thr Met Ser Arg Ser Thr Lys Gly Val 5900 5905 5910
Ser Trp Gln Ser Pro Pro Ser Val Glu Glu Thr Ser Ser Pro Ser 5915 5920 5925
Ser Pro Val Pro Leu Pro Ala Ile Thr Ser His Ser Ser Leu Tyr 5930 5935 5940
Ser Ala Val Ser Gly Ser Ser Pro Thr Ser Ala Leu Pro Val Thr 5945 5950 5955
Ser Leu Leu Thr Ser Gly Arg Arg Lys Thr Ile Asp Met Leu Asp 5960 5965 5970 63
Thr His Ser Glu Leu Val Thr Ser Ser Leu Pro Ser Ala Ser Ser Thr Ile His Phe Ser Glu Asn Thr Ala Glu Thr Asn Met Gly Thr 6005 6010 6015
Thr Asn Ser Met His Lys Leu His Ser Ser Val Ser Ile His Ser 6020 6025 6030
Gln Pro Ser Gly His Thr Pro Pro Lys Val Thr Gly Ser Met Met 6035 6040 6045
Glu Asp Ala Ile Val Ser Thr Ser Thr Pro Gly Ser Pro Glu Thr 6050 6055 6060
Lys Asn Val Asp Arg Asp Ser Thr Ser Pro Leu Thr Pro Glu Leu 6065 6070 6075
Lys Glu Asp Ser Thr Ala Leu Val Met Asn Ser Thr Thr Glu Ser 6080 6085 6090
Asn Thr Val Phe Ser Ser Val Ser Leu Asp Ala Ala Thr Glu Val 6095 6100 6105
Ser Arg Ala Glu Val Thr Tyr Tyr Asp Pro Thr Phe Met Pro Ala 6110 6115 6120
Ser Ala Gln Ser Thr Lys Ser Pro Asp Ile Ser Pro Glu Ala Ser 6125 6130 6135
Ser Ser His Ser Asn Ser Pro Pro Leu Thr Ile Ser Thr His Lys 6140 6145 6150
Thr Ile Ala Thr Gln Thr Gly Pro Ser Gly Val Thr Ser Leu Gly 6155 6160 6165
Gln Leu Thr Leu Asp Thr Ser Thr Ile Ala Thr Ser Ala Gly Thr 6170 6175 6180
Pro Ser Ala Arg Thr Gln Asp Phe Val Asp Ser Glu Thr Thr Ser 6185 6190 6195
Val Met Asn Asn Asp Leu Asn Asp Val Leu Lys Thr Ser Pro Phe 6200 6205 6210
Ser Ala Glu Glu Ala Asn Ser Leu Ser Ser Gln Ala Pro Leu Leu 6215 6220 6225
Val Thr Thr Ser Pro Ser Pro Val Thr Ser Thr Leu Gln Glu His 6230 6235 6240
Ser Thr Ser Ser Leu Val Ser Val Thr Ser Val Pro Thr Pro Thr 6245 6250 6255
Leu Ala Lys Ile Thr Asp Met Asp Thr Asn Leu Glu Pro Val Thr 6260 6265 6270
Arg Ser Pro Gln Asn Leu Arg Asn Thr Leu Ala Thr Ser Glu Ala 6275 6280 6285
Thr Thr Asp Thr His Thr Met His Pro Ser Ile Asn Thr Ala Val 6290 6295 6300
Ala Asn Val Gly Thr Thr Ser Ser Pro Asn Glu Phe Tyr Phe Thr 6305 6310 6315
Val Ser Pro Asp Ser Asp Pro Tyr Lys Ala Thr Ser Ala Val Val 6320 6325 6330
Ile Thr Ser Thr Ser Gly Asp Ser Ile Val Ser Thr Ser Met Pro 6335 6340 6345
Arg Ser Ser Ala Met Lys Lys Ile Glu Ser Glu Thr Thr Phe Ser 6350 6355 6360
Leu Ile Phe Arg Leu Arg Glu Thr Ser Thr Ser Gln Lys Ile Gly 6365 6370 6375
Ser Ser Ser Asp Thr Ser Thr Val Phe Asp Lys Ala 6 P4he Thr Ala 6380 6385 6390
Ser Thr Arg Ser Val Thr Met Leu Ser Thr Phe Ala Gly Leu Thr 6425 6430 6435
Lys Ser Glu Glu Arg Thr Ile Ala Thr Gln Thr Gly Pro His Arg 6440 6445 6450
Ala Thr Ser Gln Gly Thr Leu Thr Trp Asp Thr Ser Ile Thr Thr 6455 6460 6465
Ser Gln Ala Gly Thr His Ser Ala Met Thr His Gly Phe Ser Gln 6470 6475 6480
Leu Asp Leu Ser Thr Leu Thr Ser Arg Val Pro Glu Tyr Ile Ser 6485 6490 6495
Gly Thr Ser Pro Pro Ser Val Glu Lys Thr Ser Ser Ser Ser Ser 6500 6505 6510
Leu Leu Ser Leu Pro Ala Ile Thr Ser Pro Ser Pro Val Pro Thr 6515 6520 6525
Thr Leu Pro Glu Ser Arg Pro Ser Ser Pro Val His Leu Thr Ser 6530 6535 6540
Leu Pro Thr Ser Gly Leu Val Lys Thr Thr Asp Met Leu Ala Ser 6545 6550 6555
Val Ala Ser Leu Pro Pro Asn Leu Gly Ser Thr Ser His Lys Ile 6560 6565 6570
Pro Thr Thr Ser Glu Asp Ile Lys Asp Thr Glu Lys Met Tyr Pro 6575 6580 6585
Ser Thr Asn Ile Ala Val Thr Asn Val Gly Thr Thr Thr Ser Glu 6590 6595 6600
Lys Glu Ser Tyr Ser Ser Val Pro Ala Tyr Ser Glu Pro Pro Lys 6605 6610 6615
Val Thr Ser Pro Met Val Thr Ser Phe Asn Ile Arg Asp Thr Ile 6620 6625 6630
Val Ser Thr Ser Met Pro Gly Ser Ser Glu Ile Thr Arg Ile Glu 6635 6640 6645
Met Glu Ser Thr Phe Ser Leu Ala His Gly Leu Lys Gly Thr Ser 6650 6655 6660
Thr Ser Gln Asp Pro Ile Val Ser Thr Glu Lys Ser Ala Val Leu 6665 6670 6675
His Lys Leu Thr Thr Gly Ala Thr Glu Thr Ser Arg Thr Glu Val 6680 6685 6690
Ala Ser Ser Arg Arg Thr Ser Ile Pro Gly Pro Asp His Ser Thr 6695 6700 6705
Glu Ser Pro Asp Ile Ser Thr Glu Val Ile Pro Ser Leu Pro Ile 6710 6715 6720
Ser Leu Gly Ile Thr Glu Ser Ser Asn Met Thr Ile Ile Thr Arg 6725 6730 6735
Thr Gly Pro Pro Leu Gly Ser Thr Ser Gln Gly Thr Phe Thr Leu 6740 6745 6750
Asp Thr Pro Thr Thr Ser Ser Arg Ala Gly Thr His Ser Met Ala 6755 6760 6765
Thr Gln Glu Phe Pro His Ser Glu Met Thr Thr Val Met Asn Lys 6770 6775 6780
Asp Pro Glu Ile Leu Ser Trp Thr Ile Pro Pro Ser Ile Glu Lys 6785 6790 6795 65
Thr Ser Phe Ser Ser Ser Leu Met Pro Ser Pro Ala Met Thr Ser Ser Pro Met Thr Ser Leu Leu Thr Pro Ser Leu Val Met Thr Thr 6830 6835 6840
Asp Thr Leu Gly Thr Ser Pro Glu Pro Thr Thr Ser Ser Pro Pro 6845 6850 6855
Asn Leu Ser Ser Thr Ser His Glu Ile Leu Thr Thr Asp Glu Asp 6860 6865 6870
Thr Thr Ala Ile Glu Ala Met His Pro Ser Thr Ser Thr Ala Ala 6875 6880 6885
Thr Asn Val Glu Thr Thr Ser Ser Gly His Gly Ser Gln Ser Ser 6890 6895 6900
Val Leu Ala Asp Ser Glu Lys Thr Lys Ala Thr Ala Pro Met Asp 6905 6910 6915
Thr Thr Ser Thr Met Gly His Thr Thr Val Ser Thr Ser Met Ser 6920 6925 6930
Val Ser Ser Glu Thr Thr Lys Ile Lys Arg Glu Ser Thr Tyr Ser 6935 6940 6945
Leu Thr Pro Gly Leu Arg Glu Thr Ser Ile Ser Gln Asn Ala Ser 6950 6955 6960
Phe Ser Thr Asp Thr Ser Ile Val Leu Ser Glu Val Pro Thr Gly 6965 6970 6975
Thr Thr Ala Glu Val Ser Arg Thr Glu Val Thr Ser Ser Gly Arg 6980 6985 6990
Thr Ser Ile Pro Gly Pro Ser Gln Ser Thr Val Leu Pro Glu Ile 6995 7000 7005
Ser Thr Arg Thr Met Thr Arg Leu Phe Ala Ser Pro Thr Met Thr 7010 7015 7020
Glu Ser Ala Glu Met Thr Ile Pro Thr Gln Thr Gly Pro Ser Gly 7025 7030 7035
Ser Thr Ser Gln Asp Thr Leu Thr Leu Asp Thr Ser Thr Thr Lys 7040 7045 7050
Ser Gln Ala Lys Thr His Ser Thr Leu Thr Gln Arg Phe Pro His 7055 7060 7065
Ser Glu Met Thr Thr Leu Met Ser Arg Gly Pro Gly Asp Met Ser 7070 7075 7080
Trp Gln Ser Ser Pro Ser Leu Glu Asn Pro Ser Ser Leu Pro Ser 7085 7090 7095
Leu Leu Ser Leu Pro Ala Thr Thr Ser Pro Pro Pro Ile Ser Ser 7100 7105 7110
Thr Leu Pro Val Thr Ile Ser Ser Ser Pro Leu Pro Val Thr Ser 7115 7120 7125
Leu Leu Thr Ser Ser Pro Val Thr Thr Thr Asp Met Leu His Thr 7130 7135 7140
Ser Pro Glu Leu Val Thr Ser Ser Pro Pro Lys Leu Ser His Thr 7145 7150 7155
Ser Asp Glu Arg Leu Thr Thr Gly Lys Asp Thr Thr Asn Thr Glu 7160 7165 7170
Ala Val His Pro Ser Thr Asn Thr Ala Ala Ser Asn Val Glu Ile 7175 7180 7185
Pro Ser Ser Gly His Glu Ser Pro Ser Ser Ala Leu Ala Asp Ser 7190 7195 7200
Glu Thr Ser Lys Ala Thr Ser Pro Met Phe Ile Thr S 6e6r Thr Gln 7205 7210 7215
Arg Glu Thr Gly Ser Ser Val Glu Thr Ser Ser Ala Ile Glu Thr 7250 7255 7260
Ser Ala Val Leu Ser Glu Val Ser Ile Gly Ala Thr Thr Glu Ile 7265 7270 7275
Ser Arg Thr Glu Val Thr Ser Ser Ser Arg Thr Ser Ile Ser Gly 7280 7285 7290
Ser Ala Glu Ser Thr Met Leu Pro Glu Ile Ser Thr Thr Arg Lys 7295 7300 7305
Ile Ile Lys Phe Pro Thr Ser Pro Ile Leu Ala Glu Ser Ser Glu 7310 7315 7320
Met Thr Ile Lys Thr Gln Thr Ser Pro Pro Gly Ser Thr Ser Glu 7325 7330 7335
Ser Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Thr Thr Pro Ser Leu Val Ile 7340 7345 7350
Thr His Ser Thr Met Thr Gln Arg Leu Pro His Ser Glu Ile Thr 7355 7360 7365
Thr Leu Val Ser Arg Gly Ala Gly Asp Val Pro Arg Pro Ser Ser 7370 7375 7380
Leu Pro Val Glu Glu Thr Ser Pro Pro Ser Ser Gln Leu Ser Leu 7385 7390 7395
Ser Ala Met Ile Ser Pro Ser Pro Val Ser Ser Thr Leu Pro Ala 7400 7405 7410
Ser Ser His Ser Ser Ser Ala Ser Val Thr Ser Leu Leu Thr Pro 7415 7420 7425
Gly Gln Val Lys Thr Thr Glu Val Leu Asp Ala Ser Ala Glu Pro 7430 7435 7440
Glu Thr Ser Ser Pro Pro Ser Leu Ser Ser Thr Ser Val Glu Ile 7445 7450 7455
Leu Ala Thr Ser Glu Val Thr Thr Asp Thr Glu Lys Ile His Pro 7460 7465 7470
Phe Ser Asn Thr Ala Val Thr Lys Val Gly Thr Ser Ser Ser Gly 7475 7480 7485
His Glu Ser Pro Ser Ser Val Leu Pro Asp Ser Glu Thr Thr Lys 7490 7495 7500
Ala Thr Ser Ala Met Gly Thr Ile Ser Ile Met Gly Asp Thr Ser 7505 7510 7515
Val Ser Thr Leu Thr Pro Ala Leu Ser Asn Thr Arg Lys Ile Gln 7520 7525 7530
Ser Glu Pro Ala Ser Ser Leu Thr Thr Arg Leu Arg Glu Thr Ser 7535 7540 7545
Thr Ser Glu Glu Thr Ser Leu Ala Thr Glu Ala Asn Thr Val Leu 7550 7555 7560
Ser Lys Val Ser Thr Gly Ala Thr Thr Glu Val Ser Arg Thr Glu 7565 7570 7575
Ala Ile Ser Phe Ser Arg Thr Ser Met Ser Gly Pro Glu Gln Ser 7580 7585 7590
Thr Met Ser Gln Asp Ile Ser Ile Gly Thr Ile Pro Arg Ile Ser 7595 7600 7605
Ala Ser Ser Val Leu Thr Glu Ser Ala Lys Met Thr Ile Thr Thr 7610 7615 7620 67
Gln Thr Gly Pro Ser Glu Ser Thr Leu Glu Ser Thr Leu Asn Leu Ile Gln Gly Phe Pro His Pro Glu Met Thr Thr Ser Met Gly Arg 7655 7660 7665
Gly Pro Gly Gly Val Ser Trp Pro Ser Pro Pro Phe Val Lys Glu 7670 7675 7680
Thr Ser Pro Pro Ser Ser Pro Leu Ser Leu Pro Ala Val Thr Ser 7685 7690 7695
Pro His Pro Val Ser Thr Thr Phe Leu Ala His Ile Pro Pro Ser 7700 7705 7710
Pro Leu Pro Val Thr Ser Leu Leu Thr Ser Gly Pro Ala Thr Thr 7715 7720 7725
Thr Asp Ile Leu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Gly Thr Ser Ser Ser 7730 7735 7740
Ser Ser Leu Ser Thr Thr Ser His Glu Arg Leu Thr Thr Tyr Lys 7745 7750 7755
Asp Thr Ala His Thr Glu Ala Val His Pro Ser Thr Asn Thr Gly 7760 7765 7770
Gly Thr Asn Val Ala Thr Thr Ser Ser Gly Tyr Lys Ser Gln Ser 7775 7780 7785
Ser Val Leu Ala Asp Ser Ser Pro Met Cys Thr Thr Ser Thr Met 7790 7795 7800
Gly Asp Thr Ser Val Leu Thr Ser Thr Pro Ala Phe Leu Glu Thr 7805 7810 7815
Arg Arg Ile Gln Thr Glu Leu Ala Ser Ser Leu Thr Pro Gly Leu 7820 7825 7830
Arg Glu Ser Ser Gly Ser Glu Gly Thr Ser Ser Gly Thr Lys Met 7835 7840 7845
Ser Thr Val Leu Ser Lys Val Pro Thr Gly Ala Thr Thr Glu Ile 7850 7855 7860
Ser Lys Glu Asp Val Thr Ser Ile Pro Gly Pro Ala Gln Ser Thr 7865 7870 7875
Ile Ser Pro Asp Ile Ser Thr Arg Thr Val Ser Trp Phe Ser Thr 7880 7885 7890
Ser Pro Val Met Thr Glu Ser Ala Glu Ile Thr Met Asn Thr His 7895 7900 7905
Thr Ser Pro Leu Gly Ala Thr Thr Gln Gly Thr Ser Thr Leu Asp 7910 7915 7920
Thr Ser Ser Thr Thr Ser Leu Thr Met Thr His Ser Thr Ile Ser 7925 7930 7935
Gln Gly Phe Ser His Ser Gln Met Ser Thr Leu Met Arg Arg Gly 7940 7945 7950
Pro Glu Asp Val Ser Trp Met Ser Pro Pro Leu Leu Glu Lys Thr 7955 7960 7965
Arg Pro Ser Phe Ser Leu Met Ser Ser Pro Ala Thr Thr Ser Pro 7970 7975 7980
Ser Pro Val Ser Ser Thr Leu Pro Glu Ser Ile Ser Ser Ser Pro 7985 7990 7995
Leu Pro Val Thr Ser Leu Leu Thr Ser Gly Leu Ala Lys Thr Thr 8000 8005 8010
Asp Met Leu His Lys Ser Ser Glu Pro Val Thr Asn Ser Pro Ala 8015 8020 8025
Asn Leu Ser Ser Thr Ser Val Glu Ile Leu Ala Thr S 6e8r Glu Val 8030 8035 8040
Val Leu Ala Asp Ser Gln Thr Ser Lys Val Thr Ser Pro Met Val 8075 8080 8085
Ile Thr Ser Thr Met Glu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ser Thr Pro 8090 8095 8100
Gly Phe Phe Glu Thr Ser Arg Ile Gln Thr Glu Pro Thr Ser Ser 8105 8110 8115
Leu Thr Leu Gly Leu Arg Lys Thr Ser Ser Ser Glu Gly Thr Ser 8120 8125 8130
Leu Ala Thr Glu Met Ser Thr Val Leu Ser Gly Val Pro Thr Gly 8135 8140 8145
Ala Thr Ala Glu Val Ser Arg Thr Glu Val Thr Ser Ser Ser Arg 8150 8155 8160
Thr Ser Ile Ser Gly Phe Ala Gln Leu Thr Val Ser Pro Glu Thr 8165 8170 8175
Ser Thr Glu Thr Ile Thr Arg Leu Pro Thr Ser Ser Ile Met Thr 8180 8185 8190
Glu Ser Ala Glu Met Met Ile Lys Thr Gln Thr Asp Pro Pro Gly 8195 8200 8205
Ser Thr Pro Glu Ser Thr His Thr Val Asp Ile Ser Thr Thr Pro 8210 8215 8220
Asn Trp Val Glu Thr His Ser Thr Val Thr Gln Arg Phe Ser His 8225 8230 8235
Ser Glu Met Thr Thr Leu Val Ser Arg Ser Pro Gly Asp Met Leu 8240 8245 8250
Trp Pro Ser Gln Ser Ser Val Glu Glu Thr Ser Ser Ala Ser Ser 8255 8260 8265
Leu Leu Ser Leu Pro Ala Thr Thr Ser Pro Ser Pro Val Ser Ser 8270 8275 8280
Thr Leu Val Glu Asp Phe Pro Ser Ala Ser Leu Pro Val Thr Ser 8285 8290 8295
Leu Leu Asn Pro Gly Leu Val Ile Thr Thr Asp Arg Met Gly Ile 8300 8305 8310
Ser Arg Glu Pro Gly Thr Ser Ser Thr Ser Asn Leu Ser Ser Thr 8315 8320 8325
Ser His Glu Arg Leu Thr Thr Leu Glu Asp Thr Val Asp Thr Glu 8330 8335 8340
Asp Met Gln Pro Ser Thr His Thr Ala Val Thr Asn Val Arg Thr 8345 8350 8355
Ser Ile Ser Gly His Glu Ser Gln Ser Ser Val Leu Ser Asp Ser 8360 8365 8370
Glu Thr Pro Lys Ala Thr Ser Pro Met Gly Thr Thr Tyr Thr Met 8375 8380 8385
Gly Glu Thr Ser Val Ser Ile Ser Thr Ser Asp Phe Phe Glu Thr 8390 8395 8400
Ser Arg Ile Gln Ile Glu Pro Thr Ser Ser Leu Thr Ser Gly Leu 8405 8410 8415
Arg Glu Thr Ser Ser Ser Glu Arg Ile Ser Ser Ala Thr Glu Gly 8420 8425 8430
Ser Thr Val Leu Ser Glu Val Pro Ser Gly Ala Thr Thr Glu Val 8435 8440 8445 69
Ser Arg Thr Glu Val Ile Ser Ser Arg Gly Thr Ser Met Ser Gly Thr Arg Leu Ser Thr Ser Pro Ile Met Thr Glu Ser Ala Glu Ser 8480 8485 8490
Ala Ile Thr Ile Glu Thr Gly Ser Pro Gly Ala Thr Ser Glu Gly 8495 8500 8505
Thr Leu Thr Leu Asp Thr Ser Thr Thr Thr Phe Trp Ser Gly Thr 8510 8515 8520
His Ser Thr Ala Ser Pro Gly Phe Ser His Ser Glu Met Thr Thr 8525 8530 8535
Leu Met Ser Arg Thr Pro Gly Asp Val Pro Trp Pro Ser Leu Pro 8540 8545 8550
Ser Val Glu Glu Ala Ser Ser Val Ser Ser Ser Leu Ser Ser Pro 8555 8560 8565
Ala Met Thr Ser Thr Ser Phe Phe Ser Thr Leu Pro Glu Ser Ile 8570 8575 8580
Ser Ser Ser Pro His Pro Val Thr Ala Leu Leu Thr Leu Gly Pro 8585 8590 8595
Val Lys Thr Thr Asp Met Leu Arg Thr Ser Ser Glu Pro Glu Thr 8600 8605 8610
Ser Ser Pro Pro Asn Leu Ser Ser Thr Ser Ala Glu Ile Leu Ala 8615 8620 8625
Thr Ser Glu Val Thr Lys Asp Arg Glu Lys Ile His Pro Ser Ser 8630 8635 8640
Asn Thr Pro Val Val Asn Val Gly Thr Val Ile Tyr Lys His Leu 8645 8650 8655
Ser Pro Ser Ser Val Leu Ala Asp Leu Val Thr Thr Lys Pro Thr 8660 8665 8670
Ser Pro Met Ala Thr Thr Ser Thr Leu Gly Asn Thr Ser Val Ser 8675 8680 8685
Thr Ser Thr Pro Ala Phe Pro Glu Thr Met Met Thr Gln Pro Thr 8690 8695 8700
Ser Ser Leu Thr Ser Gly Leu Arg Glu Ile Ser Thr Ser Gln Glu 8705 8710 8715
Thr Ser Ser Ala Thr Glu Arg Ser Ala Ser Leu Ser Gly Met Pro 8720 8725 8730
Thr Gly Ala Thr Thr Lys Val Ser Arg Thr Glu Ala Leu Ser Leu 8735 8740 8745
Gly Arg Thr Ser Thr Pro Gly Pro Ala Gln Ser Thr Ile Ser Pro 8750 8755 8760
Glu Ile Ser Thr Glu Thr Ile Thr Arg Ile Ser Thr Pro Leu Thr 8765 8770 8775
Thr Thr Gly Ser Ala Glu Met Thr Ile Thr Pro Lys Thr Gly His 8780 8785 8790
Ser Gly Ala Ser Ser Gln Gly Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Ser 8795 8800 8805
Arg Ala Ser Trp Pro Gly Thr His Ser Ala Ala Thr His Arg Ser 8810 8815 8820
Pro His Ser Gly Met Thr Thr Pro Met Ser Arg Gly Pro Glu Asp 8825 8830 8835
Val Ser Trp Pro Ser Arg Pro Ser Val Glu Lys Thr Ser Pro Pro 8840 8845 8850
Ser Ser Leu Val Ser Leu Ser Ala Val Thr Ser Pro S 7e0r Pro Leu 8855 8860 8865
Asp Thr Ser Leu Glu Pro Val Thr Thr Ser Pro Pro Ser Met Asn 8900 8905 8910
Ile Thr Ser Asp Glu Ser Leu Ala Thr Ser Lys Ala Thr Met Glu 8915 8920 8925
Thr Glu Ala Ile Gln Leu Ser Glu Asn Thr Ala Val Thr Gln Met 8930 8935 8940
Gly Thr Ile Ser Ala Arg Gln Glu Phe Tyr Ser Ser Tyr Pro Gly 8945 8950 8955
Leu Pro Glu Pro Ser Lys Val Thr Ser Pro Val Val Thr Ser Ser 8960 8965 8970
Thr Ile Lys Asp Ile Val Ser Thr Thr Ile Pro Ala Ser Ser Glu 8975 8980 8985
Ile Thr Arg Ile Glu Met Glu Ser Thr Ser Thr Leu Thr Pro Thr 8990 8995 9000
Pro Arg Glu Thr Ser Thr Ser Gln Glu Ile His Ser Ala Thr Lys 9005 9010 9015
Pro Ser Thr Val Pro Tyr Lys Ala Leu Thr Ser Ala Thr Ile Glu 9020 9025 9030
Asp Ser Met Thr Gln Val Met Ser Ser Ser Arg Gly Pro Ser Pro 9035 9040 9045
Asp Gln Ser Thr Met Ser Gln Asp Ile Ser Thr Glu Val Ile Thr 9050 9055 9060
Arg Leu Ser Thr Ser Pro Ile Lys Thr Glu Ser Thr Glu Met Thr 9065 9070 9075
Ile Thr Thr Gln Thr Gly Ser Pro Gly Ala Thr Ser Arg Gly Thr 9080 9085 9090
Leu Thr Leu Asp Thr Ser Thr Thr Phe Met Ser Gly Thr His Ser 9095 9100 9105
Thr Ala Ser Gln Gly Phe Ser His Ser Gln Met Thr Ala Leu Met 9110 9115 9120
Ser Arg Thr Pro Gly Asp Val Pro Trp Leu Ser His Pro Ser Val 9125 9130 9135
Glu Glu Ala Ser Ser Ala Ser Phe Ser Leu Ser Ser Pro Val Met 9140 9145 9150
Thr Ser Ser Ser Pro Val Ser Ser Thr Leu Pro Asp Ser Ile His 9155 9160 9165
Ser Ser Ser Leu Pro Val Thr Ser Leu Leu Thr Ser Gly Leu Val 9170 9175 9180
Lys Thr Thr Glu Leu Leu Gly Thr Ser Ser Glu Pro Glu Thr Ser 9185 9190 9195
Ser Pro Pro Asn Leu Ser Ser Thr Ser Ala Glu Ile Leu Ala Ile 9200 9205 9210
Thr Glu Val Thr Thr Asp Thr Glu Lys Leu Glu Met Thr Asn Val 9215 9220 9225
Val Thr Ser Gly Tyr Thr His Glu Ser Pro Ser Ser Val Leu Ala 9230 9235 9240
Asp Ser Val Thr Thr Lys Ala Thr Ser Ser Met Gly Ile Thr Tyr 9245 9250 9255
Pro Thr Gly Asp Thr Asn Val Leu Thr Ser Thr Pro Ala Phe Ser 9260 9265 9270 71
Asp Thr Ser Arg Ile Gln Thr Lys Ser Lys Leu Ser Leu Thr Pro Glu Lys Ser Thr Val Leu Ser Ser Val Pro Thr Gly Ala Thr Thr 9305 9310 9315
Glu Val Ser Arg Thr Glu Ala Ile Ser Ser Ser Arg Thr Ser Ile 9320 9325 9330
Pro Gly Pro Ala Gln Ser Thr Met Ser Ser Asp Thr Ser Met Glu 9335 9340 9345
Thr Ile Thr Arg Ile Ser Thr Pro Leu Thr Arg Lys Glu Ser Thr 9350 9355 9360
Asp Met Ala Ile Thr Pro Lys Thr Gly Pro Ser Gly Ala Thr Ser 9365 9370 9375
Gln Gly Thr Phe Thr Leu Asp Ser Ser Ser Thr Ala Ser Trp Pro 9380 9385 9390
Gly Thr His Ser Ala Thr Thr Gln Arg Phe Pro Gln Ser Val Val 9395 9400 9405
Thr Thr Pro Met Ser Arg Gly Pro Glu Asp Val Ser Trp Pro Ser 9410 9415 9420
Pro Leu Ser Val Glu Lys Asn Ser Pro Pro Ser Ser Leu Val Ser 9425 9430 9435
Ser Ser Ser Val Thr Ser Pro Ser Pro Leu Tyr Ser Thr Pro Ser 9440 9445 9450
Gly Ser Ser His Ser Ser Pro Val Pro Val Thr Ser Leu Phe Thr 9455 9460 9465
Ser Ile Met Met Lys Ala Thr Asp Met Leu Asp Ala Ser Leu Glu 9470 9475 9480
Pro Glu Thr Thr Ser Ala Pro Asn Met Asn Ile Thr Ser Asp Glu 9485 9490 9495
Ser Leu Ala Ala Ser Lys Ala Thr Thr Glu Thr Glu Ala Ile His 9500 9505 9510
Val Phe Glu Asn Thr Ala Ala Ser His Val Glu Thr Thr Ser Ala 9515 9520 9525
Thr Glu Glu Leu Tyr Ser Ser Ser Pro Gly Phe Ser Glu Pro Thr 9530 9535 9540
Lys Val Ile Ser Pro Val Val Thr Ser Ser Ser Ile Arg Asp Asn 9545 9550 9555
Met Val Ser Thr Thr Met Pro Gly Ser Ser Gly Ile Thr Arg Ile 9560 9565 9570
Glu Ile Glu Ser Met Ser Ser Leu Thr Pro Gly Leu Arg Glu Thr 9575 9580 9585
Arg Thr Ser Gln Asp Ile Thr Ser Ser Thr Glu Thr Ser Thr Val 9590 9595 9600
Leu Tyr Lys Met Pro Ser Gly Ala Thr Pro Glu Val Ser Arg Thr 9605 9610 9615
Glu Val Met Pro Ser Ser Arg Thr Ser Ile Pro Gly Pro Ala Gln 9620 9625 9630
Ser Thr Met Ser Leu Asp Ile Ser Asp Glu Val Val Thr Arg Leu 9635 9640 9645
Ser Thr Ser Pro Ile Met Thr Glu Ser Ala Glu Ile Thr Ile Thr 9650 9655 9660
Thr Gln Thr Gly Tyr Ser Leu Ala Thr Ser Gln Val Thr Leu Pro 9665 9670 9675
Leu Gly Thr Ser Met Thr Phe Leu Ser Gly Thr His S 72er Thr Met 9680 9685 9690
Thr Arg Ser Ser Ser Ser Leu Thr Ser Leu Pro Leu Thr Thr Ser 9725 9730 9735
Leu Ser Pro Val Ser Ser Thr Leu Leu Asp Ser Ser Pro Ser Ser 9740 9745 9750
Pro Leu Pro Val Thr Ser Leu Ile Leu Pro Gly Leu Val Lys Thr 9755 9760 9765
Thr Glu Val Leu Asp Thr Ser Ser Glu Pro Lys Thr Ser Ser Ser 9770 9775 9780
Pro Asn Leu Ser Ser Thr Ser Val Glu Ile Pro Ala Thr Ser Glu 9785 9790 9795
Ile Met Thr Asp Thr Glu Lys Ile His Pro Ser Ser Asn Thr Ala 9800 9805 9810
Val Ala Lys Val Arg Thr Ser Ser Ser Val His Glu Ser His Ser 9815 9820 9825
Ser Val Leu Ala Asp Ser Glu Thr Thr Ile Thr Ile Pro Ser Met 9830 9835 9840
Gly Ile Thr Ser Ala Val Asp Asp Thr Thr Val Phe Thr Ser Asn 9845 9850 9855
Pro Ala Phe Ser Glu Thr Arg Arg Ile Pro Thr Glu Pro Thr Phe 9860 9865 9870
Ser Leu Thr Pro Gly Phe Arg Glu Thr Ser Thr Ser Glu Glu Thr 9875 9880 9885
Thr Ser Ile Thr Glu Thr Ser Ala Val Leu Tyr Gly Val Pro Thr 9890 9895 9900
Ser Ala Thr Thr Glu Val Ser Met Thr Glu Ile Met Ser Ser Asn 9905 9910 9915
Arg Ile His Ile Pro Asp Ser Asp Gln Ser Thr Met Ser Pro Asp 9920 9925 9930
Ile Ile Thr Glu Val Ile Thr Arg Leu Ser Ser Ser Ser Met Met 9935 9940 9945
Ser Glu Ser Thr Gln Met Thr Ile Thr Thr Gln Lys Ser Ser Pro 9950 9955 9960
Gly Ala Thr Ala Gln Ser Thr Leu Thr Leu Ala Thr Thr Thr Ala 9965 9970 9975
Pro Leu Ala Arg Thr His Ser Thr Val Pro Pro Arg Phe Leu His 9980 9985 9990
Ser Glu Met Thr Thr Leu Met Ser Arg Ser Pro Glu Asn Pro Ser 9995 10000 10005
Trp Lys Ser Ser Leu Phe Val Glu Lys Thr Ser Ser Ser Ser Ser 10010 10015 10020
Leu Leu Ser Leu Pro Val Thr Thr Ser Pro Ser Val Ser Ser Thr 10025 10030 10035
Leu Pro Gln Ser Ile Pro Ser Ser Ser Phe Ser Val Thr Ser Leu 10040 10045 10050
Leu Thr Pro Gly Met Val Lys Thr Thr Asp Thr Ser Thr Glu Pro 10055 10060 10065
Gly Thr Ser Leu Ser Pro Asn Leu Ser Gly Thr Ser Val Glu Ile 10070 10075 10080
Leu Ala Ala Ser Glu Val Thr Thr Asp Thr Glu Lys Ile His Pro 10085 10090 10095 73
Ser Ser Ser Met Ala Val Thr Asn Val Gly Thr Thr Ser Ser Gly Ala Thr Tyr Pro Val Gly Thr Pro Ser Ser Met Ala Glu Thr Ser 10130 10135 10140
Ile Ser Thr Ser Met Pro Ala Asn Phe Glu Thr Thr Gly Phe Glu 10145 10150 10155
Ala Glu Pro Phe Ser His Leu Thr Ser Gly Phe Arg Lys Thr Asn 10160 10165 10170
Met Ser Leu Asp Thr Ser Ser Val Thr Pro Thr Asn Thr Pro Ser 10175 10180 10185
Ser Pro Gly Ser Thr His Leu Leu Gln Ser Ser Lys Thr Asp Phe 10190 10195 10200
Thr Ser Ser Ala Lys Thr Ser Ser Pro Asp Trp Pro Pro Ala Ser 10205 10210 10215
Gln Tyr Thr Glu Ile Pro Val Asp Ile Ile Thr Pro Phe Asn Ala 10220 10225 10230
Ser Pro Ser Ile Thr Glu Ser Thr Gly Ile Thr Ser Phe Pro Glu 10235 10240 10245
Ser Arg Phe Thr Met Ser Val Thr Glu Ser Thr His His Leu Ser 10250 10255 10260
Thr Asp Leu Leu Pro Ser Ala Glu Thr Ile Ser Thr Gly Thr Val 10265 10270 10275
Met Pro Ser Leu Ser Glu Ala Met Thr Ser Phe Ala Thr Thr Gly 10280 10285 10290
Val Pro Arg Ala Ile Ser Gly Ser Gly Ser Pro Phe Ser Arg Thr 10295 10300 10305
Glu Ser Gly Pro Gly Asp Ala Thr Leu Ser Thr Ile Ala Glu Ser 10310 10315 10320
Leu Pro Ser Ser Thr Pro Val Pro Phe Ser Ser Ser Thr Phe Thr 10325 10330 10335
Thr Thr Asp Ser Ser Thr Ile Pro Ala Leu His Glu Ile Thr Ser 10340 10345 10350
Ser Ser Ala Thr Pro Tyr Arg Val Asp Thr Ser Leu Gly Thr Glu 10355 10360 10365
Ser Ser Thr Thr Glu Gly Arg Leu Val Met Val Ser Thr Leu Asp 10370 10375 10380
Thr Ser Ser Gln Pro Gly Arg Thr Ser Ser Ser Pro Ile Leu Asp 10385 10390 10395
Thr Arg Met Thr Glu Ser Val Glu Leu Gly Thr Val Thr Ser Ala 10400 10405 10410
Tyr Gln Val Pro Ser Leu Ser Thr Arg Leu Thr Arg Thr Asp Gly 10415 10420 10425
Ile Met Glu His Ile Thr Lys Ile Pro Asn Glu Ala Ala His Arg 10430 10435 10440
Gly Thr Ile Arg Pro Val Lys Gly Pro Gln Thr Ser Thr Ser Pro 10445 10450 10455
Ala Ser Pro Lys Gly Leu His Thr Gly Gly Thr Lys Arg Met Glu 10460 10465 10470
Thr Thr Thr Thr Ala Leu Lys Thr Thr Thr Thr Ala Leu Lys Thr 10475 10480 10485
Thr Ser Arg Ala Thr Leu Thr Thr Ser Val Tyr Thr Pro Thr Leu 10490 10495 10500
Gly Thr Leu Thr Pro Leu Asn Ala Ser Met Gln Met 74 Ala Ser Thr 10505 10510 10515
10535 10540 10545
Thr Ser Thr Ala Leu Pro Arg Thr Thr Pro Ser Val Phe Asn Arg 10550 10555 10560
Glu Ser Glu Thr Thr Ala Ser Leu Val Ser Arg Ser Gly Ala Glu 10565 10570 10575
Arg Ser Pro Val Ile Gln Thr Leu Asp Val Ser Ser Ser Glu Pro 10580 10585 10590
Asp Thr Thr Ala Ser Trp Val Ile His Pro Ala Glu Thr Ile Pro 10595 10600 10605
Thr Val Ser Lys Thr Thr Pro Asn Phe Phe His Ser Glu Leu Asp 10610 10615 10620
Thr Val Ser Ser Thr Ala Thr Ser His Gly Ala Asp Val Ser Ser 10625 10630 10635
Ala Ile Pro Thr Asn Ile Ser Pro Ser Glu Leu Asp Ala Leu Thr 10640 10645 10650
Pro Leu Val Thr Ile Ser Gly Thr Asp Thr Ser Thr Thr Phe Pro 10655 10660 10665
Thr Leu Thr Lys Ser Pro His Glu Thr Glu Thr Arg Thr Thr Trp 10670 10675 10680
Leu Thr His Pro Ala Glu Thr Ser Ser Thr Ile Pro Arg Thr Ile 10685 10690 10695
Pro Asn Phe Ser His His Glu Ser Asp Ala Thr Pro Ser Ile Ala 10700 10705 10710
Thr Ser Pro Gly Ala Glu Thr Ser Ser Ala Ile Pro Ile Met Thr 10715 10720 10725
Val Ser Pro Gly Ala Glu Asp Leu Val Thr Ser Gln Val Thr Ser 10730 10735 10740
Ser Gly Thr Asp Arg Asn Met Thr Ile Pro Thr Leu Thr Leu Ser 10745 10750 10755
Pro Gly Glu Pro Lys Thr Ile Ala Ser Leu Val Thr His Pro Glu 10760 10765 10770
Ala Gln Thr Ser Ser Ala Ile Pro Thr Ser Thr Ile Ser Pro Ala 10775 10780 10785
Val Ser Arg Leu Val Thr Ser Met Val Thr Ser Leu Ala Ala Lys 10790 10795 10800
Thr Ser Thr Thr Asn Arg Ala Leu Thr Asn Ser Pro Gly Glu Pro 10805 10810 10815
Ala Thr Thr Val Ser Leu Val Thr His Pro Ala Gln Thr Ser Pro 10820 10825 10830
Thr Val Pro Trp Thr Thr Ser Ile Phe Phe His Ser Lys Ser Asp 10835 10840 10845
Thr Thr Pro Ser Met Thr Thr Ser His Gly Ala Glu Ser Ser Ser 10850 10855 10860
Ala Val Pro Thr Pro Thr Val Ser Thr Glu Val Pro Gly Val Val 10865 10870 10875
Thr Pro Leu Val Thr Ser Ser Arg Ala Val Ile Ser Thr Thr Ile 10880 10885 10890
Pro Ile Leu Thr Leu Ser Pro Gly Glu Pro Glu Thr Thr Pro Ser 10895 10900 10905
Met Ala Thr Ser His Gly Glu Glu Ala Ser Ser Ala Ile Pro Thr 10910 10915 10920 75
Pro Thr Val Ser Pro Gly Val Pro Gly Val Val Thr Ser Leu Val Phe Ser Leu Gly Glu Pro Glu Thr Thr Pro Ser Met Ala Thr Ser 10955 10960 10965
His Gly Thr Glu Ala Gly Ser Ala Val Pro Thr Val Leu Pro Glu 10970 10975 10980
Val Pro Gly Met Val Thr Ser Leu Val Ala Ser Ser Arg Ala Val 10985 10990 10995
Thr Ser Thr Thr Leu Pro Thr Leu Thr Leu Ser Pro Gly Glu Pro 11000 11005 11010
Glu Thr Thr Pro Ser Met Ala Thr Ser His Gly Ala Glu Ala Ser 11015 11020 11025
Ser Thr Val Pro Thr Val Ser Pro Glu Val Pro Gly Val Val Thr 11030 11035 11040
Ser Leu Val Thr Ser Ser Ser Gly Val Asn Ser Thr Ser Ile Pro 11045 11050 11055
Thr Leu Ile Leu Ser Pro Gly Glu Leu Glu Thr Thr Pro Ser Met 11060 11065 11070
Ala Thr Ser His Gly Ala Glu Ala Ser Ser Ala Val Pro Thr Pro 11075 11080 11085
Thr Val Ser Pro Gly Val Ser Gly Val Val Thr Pro Leu Val Thr 11090 11095 11100
Ser Ser Arg Ala Val Thr Ser Thr Thr Ile Pro Ile Leu Thr Leu 11105 11110 11115
Ser Ser Ser Glu Pro Glu Thr Thr Pro Ser Met Ala Thr Ser His 11120 11125 11130
Gly Val Glu Ala Ser Ser Ala Val Leu Thr Val Ser Pro Glu Val 11135 11140 11145
Pro Gly Met Val Thr Ser Leu Val Thr Ser Ser Arg Ala Val Thr 11150 11155 11160
Ser Thr Thr Ile Pro Thr Leu Thr Ile Ser Ser Asp Glu Pro Glu 11165 11170 11175
Thr Thr Thr Ser Leu Val Thr His Ser Glu Ala Lys Met Ile Ser 11180 11185 11190
Ala Ile Pro Thr Leu Ala Val Ser Pro Thr Val Gln Gly Leu Val 11195 11200 11205
Thr Ser Leu Val Thr Ser Ser Gly Ser Glu Thr Ser Ala Phe Ser 11210 11215 11220
Asn Leu Thr Val Ala Ser Ser Gln Pro Glu Thr Ile Asp Ser Trp 11225 11230 11235
Val Ala His Pro Gly Thr Glu Ala Ser Ser Val Val Pro Thr Leu 11240 11245 11250
Thr Val Ser Thr Gly Glu Pro Phe Thr Asn Ile Ser Leu Val Thr 11255 11260 11265
His Pro Ala Glu Ser Ser Ser Thr Leu Pro Arg Thr Thr Ser Arg 11270 11275 11280
Phe Ser His Ser Glu Leu Asp Thr Met Pro Ser Thr Val Thr Ser 11285 11290 11295
Pro Glu Ala Glu Ser Ser Ser Ala Ile Ser Thr Thr Ile Ser Pro 11300 11305 11310
Gly Ile Pro Gly Val Leu Thr Ser Leu Val Thr Ser Ser Gly Arg 11315 11320 11325
Asp Ile Ser Ala Thr Phe Pro Thr Val Pro Glu Ser 7 P6ro His Glu 11330 11335 11340
11360 11365 11370
Asp Thr Thr Pro Ser Ile Ala Thr Ser Pro Gly Ala Glu Ala Thr 11375 11380 11385
Ser Asp Phe Pro Thr Ile Thr Val Ser Pro Asp Val Pro Asp Met 11390 11395 11400
Val Thr Ser Gln Val Thr Ser Ser Gly Thr Asp Thr Ser Ile Thr 11405 11410 11415
Ile Pro Thr Leu Thr Leu Ser Ser Gly Glu Pro Glu Thr Thr Thr 11420 11425 11430
Ser Phe Ile Thr Tyr Ser Glu Thr His Thr Ser Ser Ala Ile Pro 11435 11440 11445
Thr Leu Pro Val Ser Pro Gly Ala Ser Lys Met Leu Thr Ser Leu 11450 11455 11460
Val Ile Ser Ser Gly Thr Asp Ser Thr Thr Thr Phe Pro Thr Leu 11465 11470 11475
Thr Glu Thr Pro Tyr Glu Pro Glu Thr Thr Ala Ile Gln Leu Ile 11480 11485 11490
His Pro Ala Glu Thr Asn Thr Met Val Pro Arg Thr Thr Pro Lys 11495 11500 11505
Phe Ser His Ser Lys Ser Asp Thr Thr Leu Pro Val Ala Ile Thr 11510 11515 11520
Ser Pro Gly Pro Glu Ala Ser Ser Ala Val Ser Thr Thr Thr Ile 11525 11530 11535
Ser Pro Asp Met Ser Asp Leu Val Thr Ser Leu Val Pro Ser Ser 11540 11545 11550
Gly Thr Asp Thr Ser Thr Thr Phe Pro Thr Leu Ser Glu Thr Pro 11555 11560 11565
Tyr Glu Pro Glu Thr Thr Ala Thr Trp Leu Thr His Pro Ala Glu 11570 11575 11580
Thr Ser Thr Thr Val Ser Gly Thr Ile Pro Asn Phe Ser His Arg 11585 11590 11595
Gly Ser Asp Thr Ala Pro Ser Met Val Thr Ser Pro Gly Val Asp 11600 11605 11610
Thr Arg Ser Gly Val Pro Thr Thr Thr Ile Pro Pro Ser Ile Pro 11615 11620 11625
Gly Val Val Thr Ser Gln Val Thr Ser Ser Ala Thr Asp Thr Ser 11630 11635 11640
Thr Ala Ile Pro Thr Leu Thr Pro Ser Pro Gly Glu Pro Glu Thr 11645 11650 11655
Thr Ala Ser Ser Ala Thr His Pro Gly Thr Gln Thr Gly Phe Thr 11660 11665 11670
Val Pro Ile Arg Thr Val Pro Ser Ser Glu Pro Asp Thr Met Ala 11675 11680 11685
Ser Trp Val Thr His Pro Pro Gln Thr Ser Thr Pro Val Ser Arg 11690 11695 11700
Thr Thr Ser Ser Phe Ser His Ser Ser Pro Asp Ala Thr Pro Val 11705 11710 11715
Met Ala Thr Ser Pro Arg Thr Glu Ala Ser Ser Ala Val Leu Thr 11720 11725 11730
Thr Ile Ser Pro Gly Ala Pro Glu Met Val Thr Ser Gln Ile Thr 11735 11740 11745 77
Ser Ser Gly Ala Ala Thr Ser Thr Thr Val Pro Thr Leu Thr His Arg Thr Glu Thr Ser Lys Thr Phe Pro Ala Ser Thr Val Phe Pro 11780 11785 11790
Gln Val Ser Glu Thr Thr Ala Ser Leu Thr Ile Arg Pro Gly Ala 11795 11800 11805
Glu Thr Ser Thr Ala Leu Pro Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Phe 11810 11815 11820
Thr Leu Leu Val Thr Gly Thr Ser Arg Val Asp Leu Ser Pro Thr 11825 11830 11835
Ala Ser Pro Gly Val Ser Ala Lys Thr Ala Pro Leu Ser Thr His 11840 11845 11850
Pro Gly Thr Glu Thr Ser Thr Met Ile Pro Thr Ser Thr Leu Ser 11855 11860 11865
Leu Gly Leu Leu Glu Thr Thr Gly Leu Leu Ala Thr Ser Ser Ser 11870 11875 11880
Ala Glu Thr Ser Thr Ser Thr Leu Thr Leu Thr Val Ser Pro Ala 11885 11890 11895
Val Ser Gly Leu Ser Ser Ala Ser Ile Thr Thr Asp Lys Pro Gln 11900 11905 11910
Thr Val Thr Ser Trp Asn Thr Glu Thr Ser Pro Ser Val Thr Ser 11915 11920 11925
Val Gly Pro Pro Glu Phe Ser Arg Thr Val Thr Gly Thr Thr Met 11930 11935 11940
Thr Leu Ile Pro Ser Glu Met Pro Thr Pro Pro Lys Thr Ser His 11945 11950 11955
Gly Glu Gly Val Ser Pro Thr Thr Ile Leu Arg Thr Thr Met Val 11960 11965 11970
Glu Ala Thr Asn Leu Ala Thr Thr Gly Ser Ser Pro Thr Val Ala 11975 11980 11985
Lys Thr Thr Thr Thr Phe Asn Thr Leu Ala Gly Ser Leu Phe Thr 11990 11995 12000
Pro Leu Thr Thr Pro Gly Met Ser Thr Leu Ala Ser Glu Ser Val 12005 12010 12015
Thr Ser Arg Thr Ser Tyr Asn His Arg Ser Trp Ile Ser Thr Thr 12020 12025 12030
Ser Ser Tyr Asn Arg Arg Tyr Trp Thr Pro Ala Thr Ser Thr Pro 12035 12040 12045
Val Thr Ser Thr Phe Ser Pro Gly Ile Ser Thr Ser Ser Ile Pro 12050 12055 12060
Ser Ser Thr Ala Ala Thr Val Pro Phe Met Val Pro Phe Thr Leu 12065 12070 12075
Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Gln Tyr Glu Glu Asp Met Arg His 12080 12085 12090
Pro Gly Ser Arg Lys Phe Asn Ala Thr Glu Arg Glu Leu Gln Gly 12095 12100 12105
Leu Leu Lys Pro Leu Phe Arg Asn Ser Ser Leu Glu Tyr Leu Tyr 12110 12115 12120
Ser Gly Cys Arg Leu Ala Ser Leu Arg Pro Glu Lys Asp Ser Ser 12125 12130 12135
Ala Thr Ala Val Asp Ala Ile Cys Thr His Arg Pro Asp Pro Glu 12140 12145 12150
Asp Leu Gly Leu Asp Arg Glu Arg Leu Tyr Trp Glu 78 Leu Ser Asn 12155 12160 12165
12185 12190 12195
Thr Thr Ser Thr Pro Gly Thr Ser Thr Val Asp Val Gly Thr Ser 12200 12205 12210
Gly Thr Pro Ser Ser Ser Pro Ser Pro Thr Thr Ala Gly Pro Leu 12215 12220 12225
Leu Met Pro Phe Thr Leu Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Gln Tyr 12230 12235 12240
Glu Glu Asp Met Arg Arg Thr Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr Met 12245 12250 12255
Glu Ser Val Leu Gln Gly Leu Leu Lys Pro Leu Phe Lys Asn Thr 12260 12265 12270
Ser Val Gly Pro Leu Tyr Ser Gly Cys Arg Leu Thr Leu Leu Arg 12275 12280 12285
Pro Glu Lys Asp Gly Ala Ala Thr Gly Val Asp Ala Ile Cys Thr 12290 12295 12300
His Arg Leu Asp Pro Lys Ser Pro Gly Leu Asn Arg Glu Gln Leu 12305 12310 12315
Tyr Trp Glu Leu Ser Lys Leu Thr Asn Asp Ile Glu Glu Leu Gly 12320 12325 12330
Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asn Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr 12335 12340 12345
His Gln Ser Ser Val Ser Thr Thr Ser Thr Pro Gly Thr Ser Thr 12350 12355 12360
Val Asp Leu Arg Thr Ser Gly Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ser Pro 12365 12370 12375
Thr Ile Met Ala Ala Gly Pro Leu Leu Val Pro Phe Thr Leu Asn 12380 12385 12390
Phe Thr Ile Thr Asn Leu Gln Tyr Gly Glu Asp Met Gly His Pro 12395 12400 12405
Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr Thr Glu Arg Val Leu Gln Gly Leu 12410 12415 12420
Leu Gly Pro Ile Phe Lys Asn Thr Ser Val Gly Pro Leu Tyr Ser 12425 12430 12435
Gly Cys Arg Leu Thr Ser Leu Arg Ser Glu Lys Asp Gly Ala Ala 12440 12445 12450
Thr Gly Val Asp Ala Ile Cys Ile His His Leu Asp Pro Lys Ser 12455 12460 12465
Pro Gly Leu Asn Arg Glu Arg Leu Tyr Trp Glu Leu Ser Gln Leu 12470 12475 12480
Thr Asn Gly Ile Lys Glu Leu Gly Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asn 12485 12490 12495
Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr His Arg Thr Ser Val Pro Thr 12500 12505 12510
Ser Ser Thr Pro Gly Thr Ser Thr Val Asp Leu Gly Thr Ser Gly 12515 12520 12525
Thr Pro Phe Ser Leu Pro Ser Pro Ala Thr Ala Gly Pro Leu Leu 12530 12535 12540
Val Leu Phe Thr Leu Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Lys Tyr Glu 12545 12550 12555
Glu Asp Met His Arg Pro Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr Thr Glu 12560 12565 12570 79
Arg Val Leu Gln Thr Leu Leu Gly Pro Met Phe Lys Asn Thr Ser Glu Lys Asp Gly Ala Ala Thr Gly Val Asp Ala Ile Cys Thr His 12605 12610 12615
Arg Leu Asp Pro Lys Ser Pro Gly Val Asp Arg Glu Gln Leu Tyr 12620 12625 12630
Trp Glu Leu Ser Gln Leu Thr Asn Gly Ile Lys Glu Leu Gly Pro 12635 12640 12645
Tyr Thr Leu Asp Arg Asn Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr His 12650 12655 12660
Trp Ile Pro Val Pro Thr Ser Ser Thr Pro Gly Thr Ser Thr Val 12665 12670 12675
Asp Leu Gly Ser Gly Thr Pro Ser Ser Leu Pro Ser Pro Thr Thr 12680 12685 12690
Ala Gly Pro Leu Leu Val Pro Phe Thr Leu Asn Phe Thr Ile Thr 12695 12700 12705
Asn Leu Lys Tyr Glu Glu Asp Met His Cys Pro Gly Ser Arg Lys 12710 12715 12720
Phe Asn Thr Thr Glu Arg Val Leu Gln Ser Leu Leu Gly Pro Met 12725 12730 12735
Phe Lys Asn Thr Ser Val Gly Pro Leu Tyr Ser Gly Cys Arg Leu 12740 12745 12750
Thr Leu Leu Arg Ser Glu Lys Asp Gly Ala Ala Thr Gly Val Asp 12755 12760 12765
Ala Ile Cys Thr His Arg Leu Asp Pro Lys Ser Pro Gly Val Asp 12770 12775 12780
Arg Glu Gln Leu Tyr Trp Glu Leu Ser Gln Leu Thr Asn Gly Ile 12785 12790 12795
Lys Glu Leu Gly Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asn Ser Leu Tyr Val 12800 12805 12810
Asn Gly Phe Thr His Gln Thr Ser Ala Pro Asn Thr Ser Thr Pro 12815 12820 12825
Gly Thr Ser Thr Val Asp Leu Gly Thr Ser Gly Thr Pro Ser Ser 12830 12835 12840
Leu Pro Ser Pro Thr Ser Ala Gly Pro Leu Leu Val Pro Phe Thr 12845 12850 12855
Leu Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Gln Tyr Glu Glu Asp Met His 12860 12865 12870
His Pro Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr Thr Glu Arg Val Leu Gln 12875 12880 12885
Gly Leu Leu Gly Pro Met Phe Lys Asn Thr Ser Val Gly Leu Leu 12890 12895 12900
Tyr Ser Gly Cys Arg Leu Thr Leu Leu Arg Pro Glu Lys Asn Gly 12905 12910 12915
Ala Ala Thr Gly Met Asp Ala Ile Cys Ser His Arg Leu Asp Pro 12920 12925 12930
Lys Ser Pro Gly Leu Asn Arg Glu Gln Leu Tyr Trp Glu Leu Ser 12935 12940 12945
Gln Leu Thr His Gly Ile Lys Glu Leu Gly Pro Tyr Thr Leu Asp 12950 12955 12960
Arg Asn Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr His Arg Ser Ser Val 12965 12970 12975
Ala Pro Thr Ser Thr Pro Gly Thr Ser Thr Val Asp 8 L0eu Gly Thr 12980 12985 12990
13010 13015 13020
Tyr Gly Glu Asp Met Arg His Pro Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr 13025 13030 13035
Thr Glu Arg Val Leu Gln Gly Leu Leu Gly Pro Leu Phe Lys Asn 13040 13045 13050
Ser Ser Val Gly Pro Leu Tyr Ser Gly Cys Arg Leu Ile Ser Leu 13055 13060 13065
Arg Ser Glu Lys Asp Gly Ala Ala Thr Gly Val Asp Ala Ile Cys 13070 13075 13080
Thr His His Leu Asn Pro Gln Ser Pro Gly Leu Asp Arg Glu Gln 13085 13090 13095
Leu Tyr Trp Gln Leu Ser Gln Met Thr Asn Gly Ile Lys Glu Leu 13100 13105 13110
Gly Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asn Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe 13115 13120 13125
Thr His Arg Ser Ser Gly Leu Thr Thr Ser Thr Pro Trp Thr Ser 13130 13135 13140
Thr Val Asp Leu Gly Thr Ser Gly Thr Pro Ser Pro Val Pro Ser 13145 13150 13155
Pro Thr Thr Thr Gly Pro Leu Leu Val Pro Phe Thr Leu Asn Phe 13160 13165 13170
Thr Ile Thr Asn Leu Gln Tyr Glu Glu Asn Met Gly His Pro Gly 13175 13180 13185
Ser Arg Lys Phe Asn Ile Thr Glu Ser Val Leu Gln Gly Leu Leu 13190 13195 13200
Lys Pro Leu Phe Lys Ser Thr Ser Val Gly Pro Leu Tyr Ser Gly 13205 13210 13215
Cys Arg Leu Thr Leu Leu Arg Pro Glu Lys Asp Gly Val Ala Thr 13220 13225 13230
Arg Val Asp Ala Ile Cys Thr His Arg Pro Asp Pro Lys Ile Pro 13235 13240 13245
Gly Leu Asp Arg Gln Gln Leu Tyr Trp Glu Leu Ser Gln Leu Thr 13250 13255 13260
His Ser Ile Thr Glu Leu Gly Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asp Ser 13265 13270 13275
Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr Gln Arg Ser Ser Val Pro Thr Thr 13280 13285 13290
Ser Thr Pro Gly Thr Phe Thr Val Gln Pro Glu Thr Ser Glu Thr 13295 13300 13305
Pro Ser Ser Leu Pro Gly Pro Thr Ala Thr Gly Pro Val Leu Leu 13310 13315 13320
Pro Phe Thr Leu Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Gln Tyr Glu Glu 13325 13330 13335
Asp Met Arg Arg Pro Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr Thr Glu Arg 13340 13345 13350
Val Leu Gln Gly Leu Leu Met Pro Leu Phe Lys Asn Thr Ser Val 13355 13360 13365
Ser Ser Leu Tyr Ser Gly Cys Arg Leu Thr Leu Leu Arg Pro Glu 13370 13375 13380
Lys Asp Gly Ala Ala Thr Arg Val Asp Ala Val Cys Thr His Arg 13385 13390 13395 81
Pro Asp Pro Lys Ser Pro Gly Leu Asp Arg Glu Arg Leu Tyr Trp Thr Leu Asp Arg His Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr His Gln 13430 13435 13440
Ser Ser Met Thr Thr Thr Arg Thr Pro Asp Thr Ser Thr Met His 13445 13450 13455
Leu Ala Thr Ser Arg Thr Pro Ala Ser Leu Ser Gly Pro Met Thr 13460 13465 13470
Ala Ser Pro Leu Leu Val Leu Phe Thr Ile Asn Phe Thr Ile Thr 13475 13480 13485
Asn Leu Arg Tyr Glu Glu Asn Met His His Pro Gly Ser Arg Lys 13490 13495 13500
Phe Asn Thr Thr Glu Arg Val Leu Gln Gly Leu Leu Arg Pro Val 13505 13510 13515
Phe Lys Asn Thr Ser Val Gly Pro Leu Tyr Ser Gly Cys Arg Leu 13520 13525 13530
Thr Leu Leu Arg Pro Lys Lys Asp Gly Ala Ala Thr Lys Val Asp 13535 13540 13545
Ala Ile Cys Thr Tyr Arg Pro Asp Pro Lys Ser Pro Gly Leu Asp 13550 13555 13560
Arg Glu Gln Leu Tyr Trp Glu Leu Ser Gln Leu Thr His Ser Ile 13565 13570 13575
Thr Glu Leu Gly Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asp Ser Leu Tyr Val 13580 13585 13590
Asn Gly Phe Thr Gln Arg Ser Ser Val Pro Thr Thr Ser Ile Pro 13595 13600 13605
Gly Thr Pro Thr Val Asp Leu Gly Thr Ser Gly Thr Pro Val Ser 13610 13615 13620
Lys Pro Gly Pro Ser Ala Ala Ser Pro Leu Leu Val Leu Phe Thr 13625 13630 13635
Leu Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Arg Tyr Glu Glu Asn Met Gln 13640 13645 13650
His Pro Gly Ser Arg Lys Phe Asn Thr Thr Glu Arg Val Leu Gln 13655 13660 13665
Gly Leu Leu Arg Ser Leu Phe Lys Ser Thr Ser Val Gly Pro Leu 13670 13675 13680
Tyr Ser Gly Cys Arg Leu Thr Leu Leu Arg Pro Glu Lys Asp Gly 13685 13690 13695
Thr Ala Thr Gly Val Asp Ala Ile Cys Thr His His Pro Asp Pro 13700 13705 13710
Lys Ser Pro Arg Leu Asp Arg Glu Gln Leu Tyr Trp Glu Leu Ser 13715 13720 13725
Gln Leu Thr His Asn Ile Thr Glu Leu Gly Pro Tyr Ala Leu Asp 13730 13735 13740
Asn Asp Ser Leu Phe Val Asn Gly Phe Thr His Arg Ser Ser Val 13745 13750 13755
Ser Thr Thr Ser Thr Pro Gly Thr Pro Thr Val Tyr Leu Gly Ala 13760 13765 13770
Ser Lys Thr Pro Ala Ser Ile Phe Gly Pro Ser Ala Ala Ser His 13775 13780 13785
Leu Leu Ile Leu Phe Thr Leu Asn Phe Thr Ile Thr Asn Leu Arg 13790 13795 13800
Tyr Glu Glu Asn Met Trp Pro Gly Ser Arg Lys Phe 82 Asn Thr Thr 13805 13810 13815
13835 13840 13845
Pro Glu Lys Asp Gly Glu Ala Thr Gly Val Asp Ala Ile Cys Thr 13850 13855 13860
His Arg Pro Asp Pro Thr Gly Pro Gly Leu Asp Arg Glu Gln Leu 13865 13870 13875
Tyr Leu Glu Leu Ser Gln Leu Thr His Ser Ile Thr Glu Leu Gly 13880 13885 13890
Pro Tyr Thr Leu Asp Arg Asp Ser Leu Tyr Val Asn Gly Phe Thr 13895 13900 13905
His Arg Ser Ser Val Pro Thr Thr Ser Thr Gly Val Val Ser Glu 13910 13915 13920
Glu Pro Phe Thr Leu Asn Phe Thr Ile Asn Asn Leu Arg Tyr Met 13925 13930 13935
Ala Asp Met Gly Gln Pro Gly Ser Leu Lys Phe Asn Ile Thr Asp 13940 13945 13950
Asn Val Met Gln His Leu Leu Ser Pro Leu Phe Gln Arg Ser Ser 13955 13960 13965
Leu Gly Ala Arg Tyr Thr Gly Cys Arg Val Ile Ala Leu Arg Ser 13970 13975 13980
Val Lys Asn Gly Ala Glu Thr Arg Val Asp Leu Leu Cys Thr Tyr 13985 13990 13995
Leu Gln Pro Leu Ser Gly Pro Gly Leu Pro Ile Lys Gln Val Phe 14000 14005 14010
His Glu Leu Ser Gln Gln Thr His Gly Ile Thr Arg Leu Gly Pro 14015 14020 14025
Tyr Ser Leu Asp Lys Asp Ser Leu Tyr Leu Asn Gly Tyr Asn Glu 14030 14035 14040
Pro Gly Pro Asp Glu Pro Pro Thr Thr Pro Lys Pro Ala Thr Thr 14045 14050 14055
Phe Leu Pro Pro Leu Ser Glu Ala Thr Thr Ala Met Gly Tyr His 14060 14065 14070
Leu Lys Thr Leu Thr Leu Asn Phe Thr Ile Ser Asn Leu Gln Tyr 14075 14080 14085
Ser Pro Asp Met Gly Lys Gly Ser Ala Thr Phe Asn Ser Thr Glu 14090 14095 14100
Gly Val Leu Gln His Leu Leu Arg Pro Leu Phe Gln Lys Ser Ser 14105 14110 14115
Met Gly Pro Phe Tyr Leu Gly Cys Gln Leu Ile Ser Leu Arg Pro 14120 14125 14130
Glu Lys Asp Gly Ala Ala Thr Gly Val Asp Thr Thr Cys Thr Tyr 14135 14140 14145
His Pro Asp Pro Val Gly Pro Gly Leu Asp Ile Gln Gln Leu Tyr 14150 14155 14160
Trp Glu Leu Ser Gln Leu Thr His Gly Val Thr Gln Leu Gly Phe 14165 14170 14175
Tyr Val Leu Asp Arg Asp Ser Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Ala Pro 14180 14185 14190
Gln Asn Leu Ser Ile Arg Gly Glu Tyr Gln Ile Asn Phe His Ile 14195 14200 14205
Val Asn Trp Asn Leu Ser Asn Pro Asp Pro Thr Ser Ser Glu Tyr 14210 14215 14220 83
Ile Thr Leu Leu Arg Asp Ile Gln Asp Lys Val Thr Thr Leu Tyr Asn Leu Thr Met Asp Ser Val Leu Val Thr Val Lys Ala Leu Phe 14255 14260 14265
Ser Ser Asn Leu Asp Pro Ser Leu Val Glu Gln Val Phe Leu Asp 14270 14275 14280
Lys Thr Leu Asn Ala Ser Phe His Trp Leu Gly Ser Thr Tyr Gln 14285 14290 14295
Leu Val Asp Ile His Val Thr Glu Met Glu Ser Ser Val Tyr Gln 14300 14305 14310
Pro Thr Ser Ser Ser Ser Thr Gln His Phe Tyr Leu Asn Phe Thr 14315 14320 14325
Ile Thr Asn Leu Pro Tyr Ser Gln Asp Lys Ala Gln Pro Gly Thr 14330 14335 14340
Thr Asn Tyr Gln Arg Asn Lys Arg Asn Ile Glu Asp Ala Leu Asn 14345 14350 14355
Gln Leu Phe Arg Asn Ser Ser Ile Lys Ser Tyr Phe Ser Asp Cys 14360 14365 14370
Gln Val Ser Thr Phe Arg Ser Val Pro Asn Arg His His Thr Gly 14375 14380 14385
Val Asp Ser Leu Cys Asn Phe Ser Pro Leu Ala Arg Arg Val Asp 14390 14395 14400
Arg Val Ala Ile Tyr Glu Glu Phe Leu Arg Met Thr Arg Asn Gly 14405 14410 14415
Thr Gln Leu Gln Asn Phe Thr Leu Asp Arg Ser Ser Val Leu Val 14420 14425 14430
Asp Gly Tyr Ser Pro Asn Arg Asn Glu Pro Leu Thr Gly Asn Ser 14435 14440 14445
Asp Leu Pro Phe Trp Ala Val Ile Leu Ile Gly Leu Ala Gly Leu 14450 14455 14460
Leu Gly Val Ile Thr Cys Leu Ile Cys Gly Val Leu Val Thr Thr 14465 14470 14475
Arg Arg Arg Lys Lys Glu Gly Glu Tyr Asn Val Gln Gln Gln Cys 14480 14485 14490
Pro Gly Tyr Tyr Gln Ser His Leu Asp Leu Glu Asp Leu Gln 14495 14500 14505
<210> 9
<211> 490
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> human STEAP2 (STAMP1) Protein
<400> 9
Met Glu Ser Ile Ser Met Met Gly Ser Pro Lys Ser Leu Ser Glu Thr 1 5 10 15
Phe Leu Pro Asn Gly Ile Asn Gly Ile Lys Asp Ala Arg Lys Val Thr 20 25 30
Val Gly Val Ile Gly Ser Gly Asp Phe Ala Lys Ser Leu 8 T4hr Ile Arg 35 40 45
Asp Ala Leu Thr Lys Thr Asn Ile Ile Phe Val Ala Ile His Arg Glu 85 90 95
His Tyr Thr Ser Leu Trp Asp Leu Arg His Leu Leu Val Gly Lys Ile 100 105 110
Leu Ile Asp Val Ser Asn Asn Met Arg Ile Asn Gln Tyr Pro Glu Ser 115 120 125
Asn Ala Glu Tyr Leu Ala Ser Leu Phe Pro Asp Ser Leu Ile Val Lys 130 135 140
Gly Phe Asn Val Val Ser Ala Trp Ala Leu Gln Leu Gly Pro Lys Asp 145 150 155 160
Ala Ser Arg Gln Val Tyr Ile Cys Ser Asn Asn Ile Gln Ala Arg Gln 165 170 175
Gln Val Ile Glu Leu Ala Arg Gln Leu Asn Phe Ile Pro Ile Asp Leu 180 185 190
Gly Ser Leu Ser Ser Ala Arg Glu Ile Glu Asn Leu Pro Leu Arg Leu 195 200 205
Phe Thr Leu Trp Arg Gly Pro Val Val Val Ala Ile Ser Leu Ala Thr 210 215 220
Phe Phe Phe Leu Tyr Ser Phe Val Arg Asp Val Ile His Pro Tyr Ala 225 230 235 240
Arg Asn Gln Gln Ser Asp Phe Tyr Lys Ile Pro Ile Glu Ile Val Asn 245 250 255
Lys Thr Leu Pro Ile Val Ala Ile Thr Leu Leu Ser Leu Val Tyr Leu 260 265 270
Ala Gly Leu Leu Ala Ala Ala Tyr Gln Leu Tyr Tyr Gly Thr Lys Tyr 275 280 285
Arg Arg Phe Pro Pro Trp Leu Glu Thr Trp Leu Gln Cys Arg Lys Gln 290 295 300
Leu Gly Leu Leu Ser Phe Phe Phe Ala Met Val His Val Ala Tyr Ser 305 310 315 320
Leu Cys Leu Pro Met Arg Arg Ser Glu Arg Tyr Leu Phe Leu Asn Met 325 330 335
Ala Tyr Gln Gln Val His Ala Asn Ile Glu Asn Ser Trp Asn Glu Glu 340 345 350
Glu Val Trp Arg Ile Glu Met Tyr Ile Ser Phe Gly Ile Met Ser Leu 355 360 365
Gly Leu Leu Ser Leu Leu Ala Val Thr Ser Ile Pro Ser Val Ser Asn 370 375 380
Ala Leu Asn Trp Arg Glu Phe Ser Phe Ile Gln Ser Thr Leu Gly Tyr 385 390 395 400
Val Ala Leu Leu Ile Ser Thr Phe His Val Leu Ile Tyr Gly Trp Lys 405 410 415
Arg Ala Phe Glu Glu Glu Tyr Tyr Arg Phe Tyr Thr Pro Pro Asn Phe 420 425 430
Val Leu Ala Leu Val Leu Pro Ser Ile Val Ile Leu Gly Lys Ile Ile 435 440 445
Leu Phe Leu Pro Cys Ile Ser Arg Lys Leu Lys Arg Ile Lys Lys Gly 450 455 460
Trp Glu Lys Ser Gln Phe Leu Glu Glu Gly Met Gly Gly Thr Ile Pro 465 470 475 480 85
His Val Ser Pro Glu Arg Val Thr Val Met
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD20 REGN1979 Heavy Chain
<400> 10
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Val Ile Ser Trp Asn Ser Asp Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met His Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Asp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gln Tyr 100 105 110
Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala 115 120 125
Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser 130 135 140
Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe 145 150 155 160
Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly 165 170 175
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 180 185 190
Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr 195 200 205
Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg 210 215 220
Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro 225 230 235 240
Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 260 265 270
Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser 290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gl 8y6 Leu Pro Ser 325 330 335
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu 405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 435 440 445
Leu Ser Leu Gly Lys
450
<210> 11
<211> 449
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD3 REGN1979 Heavy Chain
<400> 11
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Asp Asn Ser Gly Tyr Gly His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ala Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 87
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445
Lys
<210> 12
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Common REGN1979 Light Chain
<400> 12
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Ile Asn Trp Pro Leu 85 90 95 88
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 13
<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD20 REGN1979 HCVR
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Val Ile Ser Trp Asn Ser Asp Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met His Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Asp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gln Tyr 100 105 110
Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125
<210> 14
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD3 REGN1979 HCVR
<400> 14 89
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Asp Asn Ser Gly Tyr Gly His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ala Ser
115 120
<210> 15
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Common REGN1979 LCVR
<400> 15
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Ile Asn Trp Pro Leu 85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 16
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD20 REGN1979 HCDR1
<400> 16
90
Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr Ala
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD20 REGN1979 HCDR2
<400> 17
Ile Ser Trp Asn Ser Asp Ser Ile
1 5
<210> 18
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD20 REGN1979 HCDR3
<400> 18
Ala Lys Asp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gln Tyr 1 5 10 15
Gly Met Asp Val
20
<210> 19
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD3 REGN1979 HCDR1
<400> 19
Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Thr
1 5
<210> 20
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
91
<220>
Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 21
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Anti-CD3 REGN1979 HCDR3
<400> 21
Ala Lys Asp Asn Ser Gly Tyr Gly His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 1 5 10 15
<210> 22
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Common REGN1979 LCDR1
<400> 22
Gln Ser Val Ser Ser Asn
1 5
<210> 23
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Common REGN1979 LCDR2
<400> 23
Gly Ala Ser
1
<210> 24
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence 92
Gln His Tyr Ile Asn Trp Pro Leu Thr 1 5

Claims (14)

  1. Patentni zahtevi 1. Terapijski protein za upotrebu u postupku lečenja maligniteta CD20+ B-ćelija, pri čemu postupak obuhvata davanje terapijskog proteina subjektu u režimu doziranja da se smanji učestalost ili ozbiljnost sindroma oslobađanja citokina ili reakcije povezane sa infuzijom, a postupak obuhvata: davanje frakcija primarne doze (D11) terapijskog proteina u nedelji 1 režima doziranja, gde primarna doza sadrži 1 mg terapijskog proteina, prva frakcija doze (F1D1) čini 50% ukupne primarne doze i primenjuje se subjektu 1. dana nedelje 1, a druga frakcija doze (F2D1) obuhvata preostalih 50% ukupne primarne doze i daje se subjektu od 1 do 96 sati nakon primene F1D1; davanje frakcija sekundarne doze (D2) terapijskog proteina u nedelji 2 režima doziranja, gde sekundarna doza sadrži 20 mg terapijskog proteina, frakcija prve doze (F1D2) čini 50% ukupne sekundarne doze, frakcija sekundarne doze (F2D2) čini preostalih 50% ukupne sekundarne doze, i F2D2 se daje subjektu od 12 do 96 sati nakon primene F1D2 tokom 2 nedelje režima doziranja; i davanje maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina subjektu kao pojedinačne doze u sledećoj nedelji režima doziranja, pri čemu maksimalna nedeljna doza obuhvata 80 mg, 160 mg ili 320 mg terapijskog proteina, pri čemu je terapijski protein bispecifično anti-CD20 x anti-CD3 antitelo koje sadrži anti-CD20 vezujući krak koji sadrži težak lanac koji se sastoji iz aminokiselinske sekvence koja je data u SEQ ID NO: 10 i laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je data u SEQ ID NO: 12, i anti-CD3 vezujući krak sadrži težak lanac koji se sastoji iz aminokiselinske sekvence koja je data u SEQ ID NO: 11 i laki lanac koji se sastoji iz aminokiselinske sekvence koja je data u SEQ ID NO: 12.
  2. 2. Terapijski protein za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se frakcija druge doze primarne doze ili sekundarne doze daje subjektu od 18 do 72 sata nakon primene frakcije prve doze primarne doze ili sekundarne doze.
  3. 3. Terapijski protein za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu je sledeća nedelja 3. nedelja, 4. nedelja, 14. nedelja ili bilo koja od 4. do 36. nedelje režima doziranja.
  4. 4. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, pri čemu se maksimalna nedeljna doza terapijskog proteina daje subjektu kao pojedinačna doza tokom od 1 do 8 nedelja, 1 do 12 nedelja ili 1 do 16 nedelja tokom nedeljne faze režima doziranja.
  5. 5. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4, pri čemu postupak dalje obuhvata primenu maksimalne nedeljne doze terapijskog proteina subjektu kao pojedinačne doze jednom svake dve, tri ili četiri nedelje tokom faze održavanja režima doziranja, koji sledi nakon završetka nedeljne faze režima doziranja.
  6. 6. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, pri čemu je maksimalna nedeljna doza 160 mg ili 320 mg.
  7. 7. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentih zahteva 1-6, pri čemu je malignitet CD20+ B-ćelija ne-Hodčkin-ov limfom, Hodčkin-ov limfom, hronična limfocitna leukemija, akutna limfoblastna leukemija, mali limfocitni limfom, difuzni krupnoćelijski B-limfom, folikularni limfom, limfom ćelija plašta, limfom marginalne zone, Burkitov limfom, primarni mediastinalni limfom B-ćelija, limfoblastični limfom, ili Waldenstrom-ova makroglobulinemija.
  8. 8. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-6, pri čemu je subjektu dijagnostikovan: (i) folikularni limfom ili folikularni limfom stepena 1-3a; (ii) difuzni krupnoćelijski B-limfom (DLBCL), opciono pri čemu subjekt nije uspeo sa prethodnom terapijom CAR-T; (iii) limfom ćelija plašta (MCL), opciono pri čemu subjekt nije uspeo pre terapije inhibitorom Brutonove tirozin kinaze (BTK); ili (iv) limfom marginalne zone (MZL).
  9. 9. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, pri čemu se terapijski protein daje subjektu u kombinaciji sa drugim agensom odabranim od steroida, antihistamina, acetaminofena, nesteroidnog antiinflamatornog leka (NSAID), IL-6 antagonista ili IL-6 antagonista.
  10. 10. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-9, pri čemu se terapijski protein daje subjektu u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom.
  11. 11. Terapijski protein za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, gde drugo terapeutsko sredstvo: (a) sadrži najmanje jedan od rituksimaba, obinutuzumaba, ciklofosfamida, doksorubicina, vinkristina, prednizona, prednizolona, bendamustina, lenalidomida, hlorambucila, ibritumomaba tiuksetana, idelalisiba, copanlisiba, duvelisiba, etopozida, metilprednizolona, citarabina, cisplatina, mesna, ifosfamida, mitoksantrona, i prokarbazina; (b) sadrži kombinaciju ciklofosfamida, doksorubicina, vinkristina i prednizona; (c) sadrži kombinaciju ifosfamida, cisplatina i etopozida; (d) sadrži kombinaciju gemcitabina i oksaliplatina; (e) sadrži kombinaciju lenalidomida i rituksimaba; ili (f) je lenalidomid.
  12. 12. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-11, gde je (a) subjekt je prethodno lečen terapijom protiv kancera; (b) subjekt je refraktoran na prethodni tretman ili je relapsirao nakon prethodnog lečenja; (c) subjekt koji je prethodno bio lečen terapijom anti-CD20 antitela; ili (d) subjekt je prethodno lečen CAR-T terapijom.
  13. 13. Terapijski protein za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, gde je incidenca CRS i IRR stepena 3 manja od 10% u populaciji subjekata koji primaju maksimalnu nedeljnu dozu od najmanje 80 mg.
  14. 14. Terapijski protein za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, gde je incidenca stepena 3 CRS i IRR manja od 7,5%.
    Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 96
RS20250193A 2018-08-31 2019-08-30 Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela RS66543B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862726137P 2018-08-31 2018-08-31
US201862774019P 2018-11-30 2018-11-30
US201962861100P 2019-06-13 2019-06-13
PCT/US2019/049027 WO2020047389A1 (en) 2018-08-31 2019-08-30 Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/c20 bispecific antibodies
EP19782800.7A EP3844189B1 (en) 2018-08-31 2019-08-30 Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/cd20 bispecific antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66543B1 true RS66543B1 (sr) 2025-03-31

Family

ID=68136512

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20250193A RS66543B1 (sr) 2018-08-31 2019-08-30 Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela

Country Status (21)

Country Link
US (2) US11590223B2 (sr)
EP (2) EP4512418A3 (sr)
JP (2) JP7605734B2 (sr)
KR (2) KR20210054528A (sr)
CN (1) CN112771077B (sr)
AU (2) AU2019331024B2 (sr)
CA (1) CA3110513A1 (sr)
DK (1) DK3844189T3 (sr)
ES (1) ES3009025T3 (sr)
FI (1) FI3844189T3 (sr)
HR (1) HRP20250234T1 (sr)
HU (1) HUE070384T2 (sr)
IL (1) IL280875B2 (sr)
LT (1) LT3844189T (sr)
MA (1) MA53495A (sr)
MX (1) MX2021002190A (sr)
PL (1) PL3844189T3 (sr)
PT (1) PT3844189T (sr)
RS (1) RS66543B1 (sr)
SI (1) SI3844189T1 (sr)
WO (1) WO2020047389A1 (sr)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
TWI754319B (zh) * 2014-03-19 2022-02-01 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
CA2981312C (en) 2015-03-30 2023-09-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Heavy chain constant regions with reduced binding to fc gamma receptors
LT3353212T (lt) 2015-09-23 2021-12-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Optimizuoti anti-cd3 bispecifiniai antikūnai ir jų naudojimas
NZ754713A (en) 2016-12-21 2025-11-28 Teneobio Inc Anti-bcma heavy chain-only antibodies
RS66543B1 (sr) * 2018-08-31 2025-03-31 Regeneron Pharma Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela
TW202210104A (zh) 2020-06-04 2022-03-16 瑞典商生物創新國際有限公司 皮下抗體調配物
EP3919077A1 (en) 2020-06-04 2021-12-08 BioInvent International AB Model for prediction of tolerability issues in connection with intravenous administration of therapeutic antibodies
WO2022053990A1 (en) * 2020-09-14 2022-03-17 Pfizer Inc. Methods, therapies and uses for treating cancer
US20230374160A1 (en) 2020-10-02 2023-11-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of antibodies for treating cancer with reduced cytokine release syndrome
AU2021374594B2 (en) 2020-11-04 2026-03-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
CA3196539A1 (en) * 2020-11-04 2022-05-12 Chi-Chung Li Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
KR20230100732A (ko) 2020-11-04 2023-07-05 제넨테크, 인크. 항-cd20/항-cd3 이중특이성 항체의 피하 투여
FI4284512T3 (fi) 2021-01-28 2025-05-22 Regeneron Pharma Koostumuksia ja menetelmiä sytokiinien vapautumisoireyhtymän hoitamiseksi
CA3214628A1 (en) * 2021-04-06 2022-10-13 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Combination therapy with dexamethasone and tumor-specific t cell engaging multi-specific antibodies for treating cancer
US12291575B2 (en) 2021-05-14 2025-05-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of CD20-positive proliferative disorder with mosunetuzumab and polatuzumab vedotin
AU2023212415A1 (en) * 2022-01-31 2024-08-15 Cytoagents, Inc. Bispecific antibody therapies
TW202400228A (zh) * 2022-02-25 2024-01-01 美商再生元醫藥公司 減輕細胞激素釋放症候群的給藥方案
CN119546329A (zh) 2022-04-11 2025-02-28 瑞泽恩制药公司 用于通用肿瘤细胞杀伤的组合物和方法
KR20250151441A (ko) 2023-02-17 2025-10-21 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Cd3/taa 이중특이적 항체에 대해 반응성인 유도된 nk 세포

Family Cites Families (146)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6893625B1 (en) 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
JP3095168B2 (ja) 1988-02-05 2000-10-03 エル． モリソン，シェリー ドメイン‐変性不変部を有する抗体
EP1400536A1 (en) 1991-06-14 2004-03-24 Genentech Inc. Method for making humanized antibodies
IE922437A1 (en) 1991-07-25 1993-01-27 Idec Pharma Corp Recombinant antibodies for human therapy
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
MD1367C2 (ro) 1992-11-13 2000-11-30 Idec Pharmaceuticals Corporation Metode de tratament al limfomului celulelor B, anticorpi anti-CD20, hibridom.
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
US6750334B1 (en) 1996-02-02 2004-06-15 Repligen Corporation CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor
ATE218143T1 (de) 1996-09-03 2002-06-15 Gsf Forschungszentrum Umwelt Verwendung bi-und trispezifischer antikörper zur induktion einer tumorimmunität
CZ20003099A3 (cs) 1998-02-25 2002-04-17 Lexigen Pharmaceuticals Corporation Zvýąení doby poloviční ľivotnosti cirkulujících fúzních proteinů odvozených od protilátek
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
CZ302070B6 (cs) 1998-04-21 2010-09-29 Micromet Ag Jednoretezcový multifunkcní polypeptid, polynukleotid, vektor obsahující tento polynukleotid, bunka transfekovaná tímto polynukleotidem, prostredek obsahující tento polypeptid, polynukleotid nebo vektor a jejich použití a zpusob identifikace aktiváto
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
CA2340091C (en) 1998-08-11 2013-02-05 Idec Pharmaceuticals Corporation Combination therapies for b-cell lymphomas comprising administration of anti-cd20 antibody
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
HU230769B1 (hu) 1999-01-15 2018-03-28 Genentech Inc. Módosított effektor-funkciójú polipeptid-változatok
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
EP1176195B1 (en) 1999-04-09 2013-05-22 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
MXPA01011279A (es) 1999-05-07 2002-07-02 Genentech Inc Tratamiento de enfermedades autoinmunes con antagonistas que se unene a los marcadores de superficie, de celulas b.
ITMI991299A1 (it) 1999-06-11 2000-12-11 Consiglio Nazionale Ricerche Uso di anticorpi contro antigeni di superficie per il trattamento della malattia trapianto contro ospite
EP2206720A1 (en) 2000-04-12 2010-07-14 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US7396917B2 (en) 2000-12-05 2008-07-08 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Rationally designed antibodies
US7511121B2 (en) 2001-03-09 2009-03-31 Arnason Barry G W Polymeric immunoglobulin fusion proteins that target low-affinity Fcγreceptors
EP1487487A2 (en) 2001-09-28 2004-12-22 Elusys Therapeutics, Inc. Methods and compositions for prevention, diagnosis, and treatment of cancer using bispecific molecules
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
KR101033196B1 (ko) 2002-02-14 2011-05-09 이뮤노메딕스, 인코오포레이티드 항-ｃｄ20 항체 및 그 융합 단백질 및 이들의 이용방법
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US8673589B2 (en) 2002-05-29 2014-03-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Inducible eukaryotic expression system
EP1400534B1 (en) 2002-09-10 2015-10-28 Affimed GmbH Human CD3-specific antibody with immunosuppressive properties
US7820166B2 (en) 2002-10-11 2010-10-26 Micromet Ag Potent T cell modulating molecules
CN101928344B (zh) 2002-10-17 2014-08-13 根马布股份公司 抗cd20的人单克隆抗体
US7608260B2 (en) 2003-01-06 2009-10-27 Medimmune, Llc Stabilized immunoglobulins
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
JP2006524039A (ja) 2003-01-09 2006-10-26 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 変異型Ｆｃ領域を含む抗体の同定および作製ならびにその利用法
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
CA2525251C (en) 2003-05-09 2015-10-27 Duke University Cd20-specific antibodies and methods employing same
AR044388A1 (es) 2003-05-20 2005-09-07 Applied Molecular Evolution Moleculas de union a cd20
JP2007501021A (ja) 2003-05-30 2007-01-25 アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 遺伝子操作された定常領域を含む、抗体および融合タンパク質
KR20060015602A (ko) 2003-05-31 2006-02-17 마이크로메트 에이지 ＥｐＣＡＭ 에 대한 이중 특이성 항체를 포함하는약학조성물
SI1629011T1 (sl) 2003-05-31 2010-05-31 Micromet Ag Humane molekule za vezavo anti hu cd
CA2529945A1 (en) 2003-06-27 2005-01-06 Biogen Idec Ma Inc. Use of hydrophobic-interaction-chromatography or hinge-region modifications for the production of homogeneous antibody-solutions
KR20060132554A (ko) 2003-08-29 2006-12-21 제넨테크, 인크. 안과 질병의 항-ｃｄ２０ 치료
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
DE602004030811D1 (de) 2003-10-16 2011-02-10 Micromet Ag Multispezifische deimmunisierte cd3-bindende moleküle
MXPA06006865A (es) 2003-12-19 2006-08-23 Genentech Inc Deteccion de cd20 en rechazo de transplante.
EP1737890A2 (en) 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
KR100891620B1 (ko) 2004-04-13 2009-04-02 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-ｐ-셀렉틴 항체
JP2007536246A (ja) 2004-05-05 2007-12-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド 自己免疫疾患の予防法
JP5139800B2 (ja) 2004-06-03 2013-02-06 ノビミューン エスアー 抗ｃｄ３抗体およびその使用方法
EP1765400A2 (en) 2004-06-04 2007-03-28 Genentech, Inc. Method for treating lupus
CA2580271A1 (en) 2004-10-05 2006-04-20 Genentech, Inc. Method for treating vasculitis
EP1810035A4 (en) 2004-11-10 2010-03-17 Macrogenics Inc GENERATION OF FC ANTIBODY REGIONS FOR EFFECTOR FUNCTION
AR051836A1 (es) 2004-11-30 2007-02-14 Centocor Inc Antagonistas de receptor 3 simil toll metodos y usos
US20120189643A1 (en) 2004-11-30 2012-07-26 Carton Jill M Toll Like Receptor 3 Antagonists, Methods and Uses
WO2006074399A2 (en) 2005-01-05 2006-07-13 Biogen Idec Ma Inc. Multispecific binding molecules comprising connecting peptides
US7700099B2 (en) 2005-02-14 2010-04-20 Merck & Co., Inc. Non-immunostimulatory antibody and compositions containing the same
TW200714289A (en) 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
AR053579A1 (es) 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
JP2008538767A (ja) 2005-04-22 2008-11-06 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｃｄ２０抗体による認知症又はアルツハイマー病の治療方法
KR20080031001A (ko) 2005-06-02 2008-04-07 아스트라제네카 아베 Ｃｄ20에 대한 항체 및 그의 용도
CN102875681A (zh) 2005-07-08 2013-01-16 拜奥根Idec马萨诸塞公司 抗-αvβ6抗体及其用途
KR20130108481A (ko) 2005-08-19 2013-10-02 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
EP2500356A3 (en) 2005-08-19 2012-10-24 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
AU2006301492B2 (en) 2005-10-11 2011-06-09 Amgen Research (Munich) Gmbh Compositions comprising cross-species-specific antibodies and uses thereof
KR20080073293A (ko) 2005-10-14 2008-08-08 메디뮨 엘엘씨 항체 라이브러리의 세포 디스플레이
HUE028179T2 (en) 2006-01-12 2016-12-28 Alexion Pharma Inc Antibodies to OX-2 / CD200 and their use
EP1820513A1 (en) 2006-02-15 2007-08-22 Trion Pharma Gmbh Destruction of tumor cells expressing low to medium levels of tumor associated target antigens by trifunctional bispecific antibodies
PL3167888T3 (pl) 2006-03-15 2024-08-26 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Leczenie pacjentów z napadową nocną hemoglobinurią za pomocą inhibitora dopełniacza
CA2644663A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Kirin Pharma Kabushiki Kaisha Agonist antibody to human thrombopoietin receptor
NO347649B1 (no) 2006-12-14 2024-02-12 Regeneron Pharma Humant antistoff eller antistoff fragment som spesifikt binder human deltaliknende ligand 4 (hDII4), nukleinsyremolekyl som koder for slike og vektor og vert-vektorsystemer, samt fremgangsmåte for fremstilling, sammensetning og anvendelse.
WO2008119353A1 (en) 2007-03-29 2008-10-09 Genmab A/S Bispecific antibodies and methods for production thereof
RS53008B2 (sr) 2007-04-03 2022-12-30 Amgen Res Munich Gmbh Interspecijski specifičan cd3-epsilon vezujući domen
WO2008119566A2 (en) 2007-04-03 2008-10-09 Micromet Ag Cross-species-specific bispecific binders
MX2009012343A (es) 2007-05-14 2010-02-10 Biogen Idec Inc Regiones fc (sc fc) de cadena sencilla, polipeptidos de enlace que comprenden las mismas, y metodos relacionados con ello.
CN105131127B (zh) 2007-05-30 2018-09-07 浦项工科大学校产学协力团 免疫球蛋白融合蛋白
AU2008255352B2 (en) 2007-05-31 2014-05-22 Genmab A/S Stable IgG4 antibodies
CA2689895A1 (en) 2007-05-31 2008-12-04 Genmab A/S Non-glycosylated recombinant monovalent antibodies
WO2009006520A1 (en) 2007-07-03 2009-01-08 Medimmune, Llc Hinge domain engineering
NZ583019A (en) 2007-07-31 2011-05-27 Regeneron Pharma Human antibodies to human cd20 and method of using thereof
BRPI0815370B8 (pt) 2007-08-10 2021-05-25 Regeneron Pharma anticorpos humanos de alta afinidade contra o fator de crescimento neural humano e seu uso, molécula de ácido nucleico, vetor de expressão, método para produção de um anticorpo anti-ngf humano e composiçao farmacêutica
CN101821292B (zh) 2007-09-05 2014-03-26 霍夫曼-拉罗奇有限公司 Ⅰ型和ⅱ型抗-cd20抗体的组合疗法
AU2008304748C1 (en) 2007-09-26 2014-06-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Modified antibody constant region
EP2206775B1 (en) 2007-09-26 2016-06-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-il-6 receptor antibody
EP2254911B1 (en) 2008-02-20 2015-11-25 Novo Nordisk A/S Humanized anti-c5ar antibodies
WO2009106096A1 (en) 2008-02-27 2009-09-03 Fresenius Biotech Gmbh Treatment of resistant tumors with trifunctional antibodies
US20110313134A1 (en) 2008-11-06 2011-12-22 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Engineered antibodies with reduced immunogenicity and methods of making
PT3330293T (pt) 2008-11-07 2019-10-18 Amgen Res Munich Gmbh Tratamento da leucemia linfoblástica aguda pediátrica com anticorpos biespecíficos contra cd3xcd19
AR074438A1 (es) 2008-12-02 2011-01-19 Pf Medicament Proceso para la modulacion de la actividad antagonista de un anticuerpo monoclonal
JP5746040B2 (ja) 2008-12-03 2015-07-08 ゲンマブ エー／エス 定常領域の中に改変を有する抗体変種
EP2389192A4 (en) 2009-01-23 2013-01-16 Biogen Idec Inc STABILIZED FC POLYPEPTIDES WITH REDUCED EFFECTOR FUNCTION AND METHOD OF USE
TWI682995B (zh) 2009-03-19 2020-01-21 日商中外製藥股份有限公司 抗體恆定區域改變體
WO2010107110A1 (ja) 2009-03-19 2010-09-23 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
JP5816170B2 (ja) 2009-06-26 2015-11-18 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． 天然の免疫グロブリン形式を有する容易に単離される二重特異性抗体
US10150808B2 (en) 2009-09-24 2018-12-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Modified antibody constant regions
ES2751549T3 (es) 2009-11-30 2020-04-01 Janssen Biotech Inc Mutantes de anticuerpos Fc con funciones efectoras ablacionadas
CN102958942A (zh) 2009-12-29 2013-03-06 新兴产品开发西雅图有限公司 异二聚体结合蛋白及其应用
US20130129723A1 (en) 2009-12-29 2013-05-23 Emergent Product Development Seattle, Llc Heterodimer Binding Proteins and Uses Thereof
SI2501817T2 (sl) 2010-02-08 2021-09-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Miš z navadno lahko verigo
JP5889181B2 (ja) 2010-03-04 2016-03-22 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
BR112012024489A2 (pt) 2010-03-29 2016-05-31 Zymeworks Inc anticorpos com função efetora suprimida ou aumentada
SG185107A1 (en) 2010-04-30 2012-12-28 Alexion Pharma Inc Antibodies having reduced immunogenicity in a human
WO2011163566A2 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Tolerx, Inc. Methods of treating patients with immune-related diseases
GB201014033D0 (en) 2010-08-20 2010-10-06 Ucb Pharma Sa Biological products
CN103249742B (zh) 2010-09-16 2017-04-12 巴利奥医药股份公司 抗人肿瘤坏死因子1型受体抗体
RS67768B1 (sr) 2010-11-30 2026-03-31 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Terapijski agens koji indukuje citotoksičnost
CA2822366A1 (en) 2010-12-23 2012-06-28 Janssen Biotech, Inc. Active protease-resistant antibody fc mutants
EP3470526A3 (en) 2011-02-08 2019-07-17 Medimmune, LLC Antibodies that specifically bind staphylococcus aureus alpha toxin and methods of use
SG10201602394QA (en) 2011-03-29 2016-05-30 Roche Glycart Ag Antibody FC Variants
DK2714733T3 (da) 2011-05-21 2019-05-06 Macrogenics Inc Cd3-bindende molekyler, der er i stand til at binde til human og ikke-human cd3
US9738707B2 (en) 2011-07-15 2017-08-22 Biogen Ma Inc. Heterodimeric Fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto
BR112014004168A2 (pt) 2011-08-23 2017-12-12 Roche Glycart Ag anticorpo biespecífico, composição farmacêutica, uso do anticorpo biespecífico, célula hospedeira procariótica ou eucariótica, método de produção de anticorpo e invenção
TWI679212B (zh) 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
US20140370012A1 (en) 2012-01-27 2014-12-18 Gliknik Inc. Fusion proteins comprising igg2 hinge domains
WO2013157105A1 (ja) 2012-04-18 2013-10-24 公立大学法人大阪市立大学 ムチンサブタイプ５ａｃ特異的ヒト化抗体およびその利用
RU2014153674A (ru) 2012-06-05 2016-07-27 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи
WO2014012085A2 (en) 2012-07-13 2014-01-16 Zymeworks Inc. Bispecific asymmetric heterodimers comprising anti-cd3 constructs
US20150203591A1 (en) 2012-08-02 2015-07-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mutivalent antigen-binding proteins
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
EP3470431A1 (en) 2012-09-27 2019-04-17 Merus N.V. Bispecific igg antibodies as t cell engagers
US9714291B2 (en) 2012-10-05 2017-07-25 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Heterodimer protein composition
EP2904016B1 (en) 2012-10-08 2018-11-14 Roche Glycart AG Fc-free antibodies comprising two fab-fragments and methods of use
TWI682941B (zh) 2013-02-01 2020-01-21 美商再生元醫藥公司 含嵌合恆定區之抗體
MX373245B (es) 2013-07-05 2020-05-11 Genmab As Anticuerpos cd3 humanizados o quiméricos.
JP2016531100A (ja) 2013-07-12 2016-10-06 ザイムワークス，インコーポレイテッド 二重特異的なｃｄ３及びｃｄ１９抗原結合構築物
UA129760C2 (uk) 2013-12-17 2025-07-30 Дженентек, Інк. Анти-cd3 антитіло та спосіб його застосування
EP3327038B1 (en) 2013-12-20 2020-09-23 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific her2 antibodies and methods of use
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
TWI754319B (zh) 2014-03-19 2022-02-01 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
RS60739B1 (sr) 2014-11-17 2020-09-30 Regeneron Pharma Postupci za lečenje tumora upotrebom cd3xcd20 bispecifičnog antitela
CA2981312C (en) 2015-03-30 2023-09-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Heavy chain constant regions with reduced binding to fc gamma receptors
GB201506407D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
JOP20160154B1 (ar) 2015-07-31 2021-08-17 Regeneron Pharma أجسام ضادة مضاد لل psma، وجزيئات رابطة لمستضد ثنائي النوعية الذي يربط psma و cd3، واستخداماتها
LT3353212T (lt) 2015-09-23 2021-12-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Optimizuoti anti-cd3 bispecifiniai antikūnai ir jų naudojimas
JP7126941B2 (ja) 2015-12-22 2022-08-29 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド がんを治療するための抗ｐｄ－１抗体と二重特異性抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３抗体の組合せ
AU2016378573A1 (en) * 2015-12-22 2018-07-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-CD20/anti-CD3 antibodies to treat acute lymphoblastic leukemia
EP3252078A1 (en) * 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
TW201815821A (zh) 2016-07-18 2018-05-01 美商再生元醫藥公司 抗茲卡病毒抗體及使用方法
MY194596A (en) 2016-09-23 2022-12-06 Regeneron Pharma Bi Specific Anti-Muc16-CD3 Antibodies And Anti-Muc16 Drug Conjugates
MX2019003325A (es) 2016-09-23 2019-08-05 Regeneron Pharma Anticuerpos anti-steap2, conjugados anticuerpo-farmaco, y moleculas de fijacion al antigeno biespecificas que se fijan a steap2 y cd3, y usos de estos.
WO2018093821A1 (en) * 2016-11-15 2018-05-24 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
AU2017384126B2 (en) * 2016-12-20 2025-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of anti-CD20/anti-CD3 bispecific antibodies and 4-1BB (CD137) agonists
TW202504917A (zh) 2018-06-21 2025-02-01 美商再生元醫藥公司 用雙特異性抗CD3xMUC16抗體及抗PD-1抗體治療癌症之方法
RS66543B1 (sr) * 2018-08-31 2025-03-31 Regeneron Pharma Strategija doziranja koja ublažava sindrom oslobađanja citokina za cd3/cd20 bispecifična antitela
CA3148849A1 (en) 2019-07-26 2021-02-04 Velo3D, Inc. Quality assurance in formation of three-dimensional objects

Also Published As

Publication number Publication date
PL3844189T3 (pl) 2025-03-31
JP2021535142A (ja) 2021-12-16
JP7605734B2 (ja) 2024-12-24
ES3009025T3 (en) 2025-03-25
EP4512418A3 (en) 2025-10-01
DK3844189T3 (da) 2025-02-24
CA3110513A1 (en) 2020-03-05
MX2021002190A (es) 2021-05-14
CN112771077A (zh) 2021-05-07
US11590223B2 (en) 2023-02-28
EP3844189A1 (en) 2021-07-07
PT3844189T (pt) 2025-01-29
WO2020047389A1 (en) 2020-03-05
KR20210054528A (ko) 2021-05-13
AU2019331024B2 (en) 2026-01-15
KR20260043133A (ko) 2026-03-31
EP3844189B1 (en) 2025-01-22
IL280875B1 (en) 2024-08-01
IL280875B2 (en) 2024-12-01
CN112771077B (zh) 2025-05-02
HUE070384T2 (hu) 2025-06-28
AU2019331024A1 (en) 2021-03-18
HRP20250234T1 (hr) 2025-04-11
FI3844189T3 (fi) 2025-03-05
US20230165959A1 (en) 2023-06-01
LT3844189T (lt) 2025-02-25
AU2026202496A1 (en) 2026-04-23
MA53495A (fr) 2021-12-08
US20200129617A1 (en) 2020-04-30
EP4512418A2 (en) 2025-02-26
IL280875A (en) 2021-04-29
SI3844189T1 (sl) 2025-03-31
JP2025038043A (ja) 2025-03-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3844189B1 (en) Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/cd20 bispecific antibodies
CN105636986B (zh) 包含vegf拮抗剂和抗-ctla-4抗体的组合的方法和组合物
CN114269782A (zh) 抗tigit抗体及其应用
US20240270849A1 (en) Methods of treating cancer with bispecific egfr xcd28 antibodies alone or in combination with anti-pd-1 antibodies
RU2799529C2 (ru) Стратегия дозирования, уменьшающая синдром высвобождения цитокинов для биспецифичных антител к cd3/c20
HK40121299A (en) Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/cd20 bispecific antibodies
HK40056070A (en) Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/c20 bispecific antibodies
HK40056070B (en) Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/c20 bispecific antibodies
US20230272118A1 (en) Dosing Regimens for Mitigation of Cytokine Release Syndrome
JP2026508624A (ja) 二重特異性抗ｃｄ２２×抗ｃｄ２８分子でがんを治療する方法