RS66518B1 - Pth jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem - Google Patents

Pth jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem

Info

Publication number
RS66518B1
RS66518B1 RS20250170A RSP20250170A RS66518B1 RS 66518 B1 RS66518 B1 RS 66518B1 RS 20250170 A RS20250170 A RS 20250170A RS P20250170 A RSP20250170 A RS P20250170A RS 66518 B1 RS66518 B1 RS 66518B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
pth
pharmaceutical composition
amidated
seq
use according
Prior art date
Application number
RS20250170A
Other languages
English (en)
Inventor
David Brian Karpf
Kennett Sprogøe
Lars Holten-Andersen
Original Assignee
Ascendis Pharma Bone Diseases As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ascendis Pharma Bone Diseases As filed Critical Ascendis Pharma Bone Diseases As
Publication of RS66518B1 publication Critical patent/RS66518B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/593—Polyesters, e.g. PLGA or polylactide-co-glycolide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/29—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Opis
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat, za upotrebu u postupku lečenja hipoparatiroidizma, pri čemu se farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem primenjuje u skladu sa režimom doziranja u kojem prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemija se izvodi u koracima od ne više od 25%.
[0002] Hipoparatiroidizam je redak endokrini poremećaj metabolizma kalcijuma i fosfata koji najčešće nastaje kao posledica oštećenja ili uklanjanja paratireoidne žlezde tokom operacije na štitnoj žlezdi. Hipoparatiroidizam je neobičan među endokrinim poremećajima po tome što se do nedavno nije lečio zamenom hormona koji nedostaje, paratiroidnog hormona ili PTH. Konvencionalna terapija hipoparatiroidizma uključuje velike doze vitamina D i oralne suplementacije kalcijuma, što je, iako često efikasno, povezano sa izrazitim promenama Ca<2+>u krvi, što dovodi do hiperkalcemije i hipokalcemije, izlučivanja viška kalcijuma u urinu, nefrokalcinoze i ektopičnih kalcifikacija, uključujući vaskularne, bazalne ganglije i očno sočivo.
[0003] Kalcijum je najzastupljeniji mineral u ljudskom telu i njegova striktna regulacija je neophodna za mnoge kritične biološke funkcije, kao što su mineralizacija kostiju, kontrakcija mišića, nervna provodljivost, oslobađanje hormona i koagulacija krvi. Posebno je važno održavati koncentraciju kalcijuma što je moguće stabilnijom, zbog visoke osetljivosti različitih ćelijskih sistema ili organa, uključujući centralni nervni sistem, mišiće i egzo/endokrine žlezde, na male varijacije Ca<2+>. PTH je glavni regulator homeostaze kalcijuma.
[0004] Neodgovarajuće nizak ili zaista nizak nivo PTH u odnosu na koncentraciju Ca<2+>u serumu, karakterističan za hipoparatiroidizam, dovodi do smanjene renalne tubularne reapsorpcije Ca<2+>i istovremeno do povećane renalne tubularne reapsorpcije fosfata. Dakle, glavne biohemijske abnormalnosti hipoparatiroidizma su hipokalcemija i hiperfosfatemija. Kliničke karakteristike bolesti uključuju simptome hipokalcemije, kao što su perioralna utrnulost, parestezije i grčevi mišića karpalnog/pedalnog mišića. Spazam larinksa, tetanija i napadi su ozbiljne i potencijalno opasne komplikacije po život. Hiperfosfatemija i povišeni kalcijum x fosfat proizvod doprinose ektopičnom taloženju nerastvorljivih kompleksa kalcijum fosfata u mekim tkivima, uključujući vaskulaturu, mozak, bubrege i druge organe.
[0005] Standardna terapija hipoparatiroidizma je oralna suplementacija kalcijuma i vitamina D. Ciljevi terapije su a) ublažavanje simptoma hipokalcemije; b) održavanje kalcijuma u serumu pri gladovanju unutar ili malo ispod niskog normalnog opsega; c) održavanje serumskog fosfora pri gladovanju u granicama visokog normalnog ili samo blago povišenog; d) izbegavanje ili minimiziranje hiperkalciurije; e) održavanje kalcijum-fosfatnog produkta na nivoima znatno ispod gornje granice normale i f) izbegavanje ektopične kalcifikacija bubrega (kamenje i nefrokalcinoza) i drugih mekih tkiva.
[0006] Nekoliko problema se javlja kod produžene upotrebe kalcijuma i aktivnog vitamina D u velikim dozama, posebno u pogledu hiperkalciurije, kamena u bubregu, nefrokalcinoze i ektopične kalcifikacije mekog tkiva. Pored toga, konvencionalna terapija kalcijumom i aktivnim vitaminom D ne ublažava tegobe na u odnosu na kvalitet života niti poništava abnormalnosti u remodeliranju kosti karakteristične za bolest. Ukratko, postoji velika potreba za poboljšanim terapijama za hipoparatiroidizam.
[0007] Godine 2015, Natpara, PTH(1-84), odobren je za subkutanu injekciju jednom dnevno kao dodatak vitaminu D i kalcijumu kod pacijenata sa hipoparatiroidizmom. Natpara, PTH(1-84), odobren je za kontrolisanje hipokalcemije na osnovu ključnog ispitivanja koje je pokazalo da je 42 procenta učesnika lečenih PTH(1-84) postiglo normalne nivoe kalcijuma u krvi uz smanjene doze suplemenata kalcijuma i aktivnih oblika vitamina D, u poređenju sa 3 procenta učesnika koji su primali placebo. Nakon vremenskog toka u kome je serumski kalcijum praćen nakon injekcije, 71 procenat pacijenata lečenih PTH(1-84) razvilo je hiperkalcemiju na jednom ili više merenja tokom perioda od 24 sata. PTH(1-84) je smanjio izlučivanje kalcijuma u urinu 2-8 sati nakon injekcije, ali tokom perioda od 24 sata, izlučivanje kalcijuma u urinu se nije promenilo. Slično, izlučivanje fosfata u urinu se povećalo samo tokom prvih 8 sati nakon injekcije PTH(1-84).
[0008] Iako ovo predstavlja važan napredak u lečenju bolesti, Natpara nije pokazao sposobnost da smanji incidence hiperkalcemije (povišeni nivoi kalcijuma u serumu), hipokalcemije (nizak serum kalcijuma) ili hiperkalciurije (povećan kalcijum u urinu) u odnosu na konvencionalnu terapiju lečenih pacijenata.
[0009] Stoga postoji velika potreba za poboljšanim terapijama zasnovanim na PTH za hipoparatiroidizam.
[0010] PTH(1-34), ili teriparatid, odobrila je FDA 2002. za lečenje osteoporoze. Uprkos tome što nije odobren za ovu indikaciju, PTH(1-34) se u prošlosti koristio za lečenje hipoparatiroidizma kod pacijenata koji primaju injekcije dva ili tri puta dnevno. Da bi se olakšali fiziološki nivoi PTH, sprovedene su kliničke studije sa PTH(1-34) primenjenim pumpom u poređenju sa injekcijama dva puta dnevno. Tokom 6 meseci, isporuka pumpom je proizvela normalne, stabilne nivoe kalcijuma sa minimalnom fluktuacijom i izbegla je porast nivoa kalcijuma u serumu i urinu koji je očigledan ubrzo nakon injekcije PTH. Izraženo smanjenje izlučivanja kalcijuma u mokraći kada se PTH(1-34) primenjuje pomoću pumpe može ukazivati na to da PTH mora biti kontinuirano izložen renalnim tubulima da bi se ostvarili efekti očuvanja kalcijuma u bubregu. Isporuka PTH(1-34) pumpom postigla je istovremenu normalizaciju markera koštanog obrta, serumskog kalcijuma i izlučivanja kalcijuma u urinu. Ovi rezultati su postignuti sa 65 procenata nižom dnevnom dozom PTH(1-34) i smanjenom potrebom za suplementacijom magnezijuma u poređenju sa režimom injekcije PTH(1-34) dva puta dnevno.
[0011] Međutim, kontinuirana terapija pumpom je nezgodna i izazovna za pacijente, a cilj sadašnjeg pronalaska je da obezbedi pogodniju terapijsku opciju obezbeđivanja kontinuiranog izlaganja PTH.
[0012] Dugotrajna dnevna primena PTH je povezana sa progresivnim gubitkom kortikalne kosti usled povećanog metabolizma kostiju. U 6-godišnjem praćenju pacijenata lečenih PTH(1-84) (Rubin, JCEM 2016) markeri koštanog obrta ostali su veći od vrednosti pre tretmana, dostižući vrhunac u ranim godinama nakon početka PTH(1-84) i opadaju nakon toga, ali ostaju značajno veće od početnih vrednosti do 6. godine. BMD na osnovu DXA je bio u skladu sa poznatim efektima PTH specifičnim za lokaciju, odnosno povećanjem u lumbalnoj kičmi i opada u distalnoj 1/3 radijusa. Smanjenje primećeno na distalnom radijusu od jedne trećine je u skladu sa poznatim efektima intermitentnog PTH na povećanje kortikalne poroznosti i endostealne resorpcije.
[0013] Predmet ovog pronalaska je da obezbedi postupak povremenog davanja PTH, sa poboljšanom kontrolom kalcijuma u serumu i urinu, fosfora u serumu, i nižim porastom markera koštanog obrta od trenutno primenjenih PTH terapija. Poželjno povremeno znači sa dnevnim intervalima, ili poželjnije sa nedeljnim intervalima.
[0014] U pretkliničkom programu razvoja i Forteo, PTH(1-34) i Natpara, PTH(1-84), primećeno je povećanje stope osteosarkoma zavisno od doze kod pacova tretiranih svakodnevnim injekcijama PTH jedinjenja. U Natpara studiji, doziranje pacova sa visokim dozama je prekinuto zbog prekomerne smrti u ovoj grupi, prvenstveno od metastatskog osteosarkoma. Smatra se da je ovo posledica osetljivosti pacova na anaboličke efekte intermitentnog PTH. Nasuprot tome, poznato je da kontinuirano izlaganje PTH nema značajnu anaboličku aktivnost kostiju. Stoga je cilj ovog pronalaska da obezbedi intermitentnu terapiju zamene PTH koja obezbeđuje profil PTH sličan infuziji, što rezultuje poboljšanom kontrolom simptoma sa nižom primenjenom dozom. Poželjno povremeno znači sa dnevnim intervalima, ili poželjnije sa nedeljnim intervalima.
[0015] WO 2004/024758 otkriva jedinjenja koja sadrže PTH za upotrebu u lečenju hipoparatiroidizma, koja se mogu formulisati za produženo oslobađanje.
[0016] Ukratko, postoji potreba za pogodnijim i sigurnijim tretmanom hipoparatiroidizma sa smanjenim nuspojavama.
[0017] Stoga je cilj ovog pronalaska da se bar delimično prevaziđu prethodno opisani nedostaci.
[0018] Ovaj cilj je postignut sa farmaceutskom kompozicijom koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat, za upotrebu u postupku lečenja hipoparatiroidizma kao što je opisano u zahtevima.
[0019] Iznenađujuće je otkriveno da takvo jedinjenje PTH sa kontrolisanim oslobađanjem ima veću potentnost od PTH 1-84, tako da se prilagođavanje doze za farmaceutsku kompoziciju koja sadrži takva PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem može izvesti u manjim koracima nego za farmaceutske kompozicije koje sadrže PTH 1-84, u kojima se doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju udvostručuju ili prepolove, odnosno kako bi se postigla prava doza. Tipična početna doza je 50 µg/dan, koja se titrira do 25 µg/dan (50%) u slučaju hiperkalcemije, ili titrira do 75 µg/dan u početku (50%), a zatim 100 µg/dan ( 33.3%) u slučaju hipokalcemije, pri čemu je većini ispitanika potrebno 75 ili 100 µg/dan.
[0020] U okviru ovog pronalaska se koriste termini koji imaju sledeće značenje.
[0021] Kako se ovde koristi, izraz "povećanje" se odnosi na povećanje ili smanjenje količine PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem na osnovu prethodno primenjene doze istog PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem čije povećanje ili smanjenje se daje kao određeni procenat na osnovu težinske količine PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem.
[0022] Kako se ovde koristi, termin "PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem" odnosi se na bilo koje jedinjenje, konjugat, kristal ili smešu koja sadrži najmanje jedan PTH molekul ili deo i iz kojih se najmanje jedan PTH molekul ili deo oslobađa sa poluživotom oslobađanja. od najmanje 12 sati.
[0023] Kako se ovde koristi, termini "polu-život oslobađanja" i "polu-život" odnose se na vreme potrebno pod fiziološkim uslovima (tj. vodeni pufer, pH 7.4, 37°C) dok se polovina svih PTH ili PTH ostataka, respektivno, ne uključi u PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem se oslobađaju iz pomenutog PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem.
[0024] Kako se ovde koristi, termin "PTH" se odnosi na sve polipeptide PTH, poželjno od vrsta sisara, poželjnije od ljudi i vrsta sisara, poželjnije od ljudi i mišjih vrsta, kao i njihove varijante, analoge, ortologe, homologe i derivate i njihove fragmente, za koje je karakteristično povećanje izlučivanja kalcijuma i fosfora u serumu, i smanjenje serumskog fosfora i izlučivanja kalcijuma putem bubrega. Termin "PTH" se takođe odnosi na sve PTHrP polipeptide, kao što je polipeptid SEQ ID NO: 121, koji se vezuju za zajednički PTH/PTHrP1 receptor i aktiviraju. Poželjno, termin "PTH" se odnosi na PTH polipeptid SEQ ID NO: 51 kao i na njegove varijante, homologe i derivate koji pokazuju suštinski istu biološku aktivnost, tj. povećanje serumskog kalcijuma i renalno izlučivanje fosfora, i smanjenje izlučivanja fosfora i renalnog izlučivanja kalcijuma.
[0025] Poželjno, termin "PTH" se odnosi na sledeće polipeptidne sekvence:
SEQ ID NO:10 (PTH 1-75)
SEQ ID NO:22 (PTH 1-63)
SEQ ID NO:29 (PTH 1-56) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED SEQ ID NO:30 (PTH 1-55) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKE SEQ ID NO:31 (PTH 1-54) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKK SEQ ID NO:32 (PTH 1-53) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRK SEQ ID NO:33 (PTH 1-52) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPR SEQ ID NO:34 (PTH 1-51) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRP SEQ ID NO:35 (PTH 1-50) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQR SEQ ID NO:36 (PTH 1-49)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQ SEQ ID NO:37 (PTH 1-48) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGS SEQ ID NO:38 (PTH 1-47) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAG SEQ ID NO:39 (PTH 1-46) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDA SEQ ID NO:40 (PTH 1-45) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRD SEQ ID NO:41 (PTH 1-44) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPR SEQ ID NO:42 (PTH 1-43) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAP SEQ ID NO:43 (PTH 1-42) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLA SEQ ID NO:44 (PTH 1-41) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPL SEQ ID NO:45 (PTH 1-40) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAP SEQ ID NO:46 (PTH 1-39) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGA SEQ ID NO:47 (PTH 1-38) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALG SEQ ID NO:48 (PTH 1-37) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVAL SEQ ID NO:49 (PTH 1-36) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVA SEQ ID NO:50 (PTH 1-35) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFV SEQ ID NO:51 (PTH 1-34) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNF SEQ ID NO:52 (PTH 1-33) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHN SEQ ID NO:53 (PTH 1-32)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVH
SEQ ID NO:54 (PTH 1-31)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDV SEQ ID NO:55 (PTH 1-30)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQD SEQ ID NO:56 (PTH 1-29)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQ SEQ ID NO:57 (PTH 1-28)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKL SEQ ID NO:58 (PTH 1-27)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKK SEQ ID NO:59 (PTH 1-26)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRK SEQ ID NO:60 (PTH 1-25)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLR SEQ ID NO:61 (amidovan PTH 1-84)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVLTKAKSQ; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:62 (amidovan PTH 1-83)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVLTKAKS; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:63 (amidovan PTH 1-82)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVLTKAK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:64 (amidovan PTH 1-81)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVLTKA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:65 (amidovan PTH 1-80)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVLTK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:66 (amidovan PTH 1-79)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVLT; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:67 (amidovan PTH 1-78)
1
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNVL; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:68 (amidovan PTH 1-77)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVNV; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:69 (amidovan PTH 1-76)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADVN; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:70 (amidovan PTH 1-75)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKADV; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:71 (amidovan PTH 1-74)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKAD; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:72 (amidovan PTH 1-73)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADKA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:73 (amidovan PTH 1-72)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEADK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:74 (amidovan PTH 1-71)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEAD; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:75 (amidovan PTH 1-70)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGEA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:76 (amidovan PTH 1-69)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLGE; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:77 (amidovan PTH 1-68)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSLG; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:78 (amidovan PTH 1-67)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKSL; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:79 (amidovan PTH 1-66)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEKS; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:80 (amidovan PTH 1-65)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHEK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:81 (amidovan PTH 1-64)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESHE; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:82 (amidovan PTH 1-63)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVESH; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:83 (amidovan PTH 1-62)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVES; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:84 (amidovan PTH 1-61)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLVE; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:85 (amidovan PTH 1-60)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVLV; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:86 (amidovan PTH 1-59)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NVL; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:87 (amidovan PTH 1-58)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED NV; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:88 (amidovan PTH 1-57)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED
N; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:89 (amidovan PTH 1-56)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKED ; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:90 (amidovan PTH 1-55) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKE; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:91 (amidovan PTH 1-54) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:92 (amidovan PTH 1-53) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:93 amidovan PTH 1-52) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPR; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:94 (amidovan PTH 1-51) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRP; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:95 (amidovan PTH 1-50) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQR; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:96 (amidovan PTH 1-49) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQ; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:97 (amidovan PTH 1-48) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGS; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:98 (amidovan PTH 1-47) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAG; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:99 (amidovan PTH 1-46) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:100 (amidovan PTH 1-45)
1
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRD; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:101 (amidovan PTH 1-44) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPR; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:102 (amidovan PTH 1-43) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAP; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:103 (amidovan PTH 1-42) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:104 (amidovan PTH 1-41) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPL; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:105 (amidovan PTH 1-40) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAP; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:106 (amidovan PTH 1-39) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:107 (amidovan PTH 1-38) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALG; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:108 (amidovan PTH 1-37) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVAL; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:109 (amidovan PTH 1-36) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVA; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:110 (amidovan PTH 1-35) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFV; pri čemu je C-terminus amidovan SEQ ID NO:111 (amidovan PTH 1-34) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNF; pri čemu je C-terminus amidovan SEQ ID NO:112 (amidovan PTH 1-33)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHN; pri čemu je C-terminus amidovan SEQ ID NO:113 (amidovan PTH 1-32) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVH; pri čemu je C-terminus amidovan SEQ ID NO:114 (amidovan PTH 1-31) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDV; pri čemu je C-terminus amidovan SEQ ID NO:115 (amidovan PTH 1-30) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQD; pri čemu je C-terminus amidovan SEQ ID NO:116 (amidovan PTH 1-29) SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQ; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:117 (amidovan PTH 1-28)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKL; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:118 (amidovan PTH 1-27)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:119 (amidovan PTH 1-26)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRK; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO:120 (amidovan PTH 1-25)
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLR; pri čemu je C-terminus amidovan
SEQ ID NO: 121 (PTHrP)
[0026] Poželjnije, termin "PTH" se odnosi na sekvencu SEQ ID NO: 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114 i 115. Još poželjnije, termin "PTH" se odnosi na sekvence SEQ ID NO: 50, 51, 52, 110, 111 i 112. U posebno poželjnom primeru izvođenja, termin "PTH" se odnosi na sekvencu SEQ ID NO: 51.
[0027] Kako se ovde koristi, termin "varijanta polipeptida PTH" se odnosi na polipeptid iste vrste koji se razlikuje od referentnog PTH ili PTHrP polipeptida. Poželjno, takva referenca je PTH polipeptidna sekvenca i ima sekvencu SEQ ID NO:51. Generalno, razlike su ograničene tako da su aminokiselinska sekvenca reference i varijante u celini blisko slične i, u mnogim regionima, identične. Poželjno, varijante PTH polipeptida su najmanje 70%, 80%, 90% ili 95% identične referentnom PTH ili PTHrP polipeptidu, poželjno PTH polipeptidu SEQ ID NO:51. Pod polipeptidom koji ima sekvencu aminokiselina najmanje, na primer, 95% "identičnu" sekvenci aminokiselina za koju se postavlja upit, podrazumeva se da je sekvenca aminokiselina
1
predmetnog polipeptida identična sekvenci za koju se traži, osim što predmetna polipeptidna sekvenca može uključiti do pet aminokiselinskih alteracija na svakih 100 aminokiselina tražene aminokiselinske sekvence. Ove promene referentne sekvence mogu se desiti na amino (N-terminalnoj) ili karboksi terminalnoj (C-terminalnoj) poziciji referentne aminokiselinske sekvence ili bilo gde između tih terminalnih pozicija, izmešanih ili pojedinačno između ostataka u referentnoj sekvenci ili u jednoj ili više susednih grupa unutar referentne sekvence. Sekvenca upita može biti cela aminokiselinska sekvenca referentne sekvence ili bilo koji fragment naveden kao što je ovde opisano. Poželjno, sekvenca upita je sekvenca SEQ ID NO:51.
[0028] Takve varijante PTH polipeptida mogu biti varijante koje se javljaju u prirodi, kao što su prirodne alelne varijante kodirane jednim od nekoliko alternativnih oblika PTH ili PTHrP koji zauzimaju dati lokus na hromozomu ili organizmu, ili izoforme kodirane prirodnim splajs varijantama koje potiču iz pojedinačnog primarnog transkripta. Alternativno, varijanta PTH polipeptida može biti varijanta za koju nije poznato da se javlja u prirodni i koja se može napraviti tehnikama mutageneze poznatim u tehnici.
[0029] U tehnici je poznato da jedna ili više aminokiselina mogu biti deletirane sa N-terminusa ili C-terminusa bioaktivnog polipeptida bez značajnog gubitka biološke funkcije. Takve N- i/ili C-terminalne delecije su takođe obuhvaćene terminom PTH polipeptidna varijanta.
[0030] Stručnjak u ovoj oblasti takođe prepoznaje da se neke aminokiselinske sekvence PTH ili PTHrP polipeptida mogu menjati bez značajnog uticaja na strukturu ili funkciju polipeptida. Takvi mutanti uključuju delecije, insercije, inverzije, ponavljanja i supstitucije odabrane prema opštim pravilima poznatim u tehnici tako da imaju mali uticaj na aktivnost. Na primer, uputstva o tome kako napraviti fenotipski tihe supstitucije aminokiselina su date u Bowie et al. (1990), Science 247:1306-1310, pri čemu autori ukazuju da postoje dva glavna pristupa za proučavanje tolerancije aminokiselinske sekvence na promenu.
[0031] Termin "PTH polipeptid" takođe obuhvata sve PTH i PTHrP polipeptide kodirane PTH i PTHrP analozima, ortolozima i/ili homolozima vrste. Stručnjak u ovoj oblasti takođe prepoznaje da se analozi PTHrP i PTHrP vezuju za i aktiviraju zajednički PTH/PTHrP1 receptor, tako da termin PTH polipeptid takođe obuhvata sve analoge PTHrP. Kako se ovde koristi, termin "PTH analog" se odnosi na PTH i PTHrP različitih i nesrodnih organizama koji obavljaju iste funkcije u svakom organizmu, ali koji nisu potekli iz zajedničke predačke strukture. Umesto toga, analogni PTH i PTHrP su nastali odvojeno, a zatim su se kasnije razvili da obavljaju iste ili slične funkcije. Drugim rečima, analogni polipeptidi PTH i PTHrP su polipeptidi sa prilično različitim sekvencama aminokiselina, ali koji vrše istu biološku
1
aktivnost, odnosno podižu serumsko izlučivanje kalcijuma i renalnog fosfora i snižavaju serumski fosfor i renalno izlučivanje kalcijuma.
[0032] Kako se ovde koristi, termin "PTH ortolog" se odnosi na PTH i PTHrP unutar dve različite vrste čije su sekvence povezane jedna sa drugom preko zajedničkog homolognog PTH ili PTHrP u predačkoj vrsti, ali koje su evoluirale da bi postale različite jedna od druge.
[0033] Kako se ovde koristi, termin "PTH homolog" se odnosi na PTH i PTHrP različitih organizama koji obavljaju iste funkcije u svakom organizmu i koji potiču iz zajedničke predačke strukture. Drugim rečima, homologni polipeptidi PTH su polipeptidi sa prilično sličnim sekvencama aminokiselina koji vrše istu biološku aktivnost, odnosno povećavaju serumsko izlučivanje kalcijuma i renalnog fosfora i snižavaju serumski fosfor i izlučivanje kalcijuma putem bubrega. Poželjno, homolozi PTH polipeptida mogu biti definisani kao polipeptidi koji pokazuju najmanje 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% ili 95% identičnosti sa referentnim PTH ili PTHrP polipeptidom, poželjno PTH polipeptidom SEQ ID NO :51.
[0034] Prema tome, polipeptid PTH prema pronalasku može biti, na primer: (i) onaj u kome je najmanje jedan od aminokiselinskih ostataka supstituisan sa konzervisanim ili nekonzervisanim aminokiselinskim ostatkom, poželjno konzervisanim aminokiselinskim ostatkom, i takav supstituisani aminokiselinski ostatak može ili ne mora biti onaj koji je kodiran genetskim kodom; i/ili (ii) onaj u kome najmanje jedan od aminokiselinskih ostataka uključuje supstituentsku grupu; i/ili (iii) onaj u kome je PTH polipeptid fuzionisan sa drugim jedinjenjem, kao što je jedinjenje za povećanje poluživota polipeptida (na primer, polietilen glikol); i/ili (iv) onu u kojoj su dodatne aminokiseline spojene sa PTH polipeptidom, kao što je polipeptid IgG Fc fuzionog regiona ili vodeća ili sekretorna sekvenca ili sekvenca koja se koristi za prečišćavanje gornjeg oblika polipeptida ili pre-proteinska sekvenca.
[0035] Kako se ovde koristi, izraz "fragment PTH polipeptida" se odnosi na bilo koji polipeptid koji sadrži neprekidni raspon dela aminokiselinske sekvence PTH ili PTHrP polipeptida, poželjno polipeptid SEQ ID NO:51.
[0036] Tačnije, fragment PTH polipeptida sadrži najmanje 6, kao što je najmanje 8, najmanje 10 ili najmanje 17 uzastopnih aminokiselina PTH ili PTHrP polipeptida, poželjnije od polipeptida SEQ ID NO:51. Fragment PTH polipeptida može se dodatno opisati kao pod-rodovi PTH ili PTHrP polipeptida koji sadrže najmanje 6 aminokiselina, pri čemu je "najmanje 6" definisan kao bilo koji ceo broj između 6 i celog broja koji predstavlja C-terminalnu aminokiselinu PTH ili PTHrP polipeptid, poželjno od polipeptida SEQ ID NO:51. Dalje su uključene vrste PTH ili PTHrP polipeptidnih fragmenata dužine najmanje 6 aminokiselina, kao što je prethodno opisano, koje su dalje specificirane u smislu njihovih N-terminalnih i C-
1
terminalnih pozicija. Takođe obuhvaćeni terminom "PTH polipeptidni fragment" kao pojedinačne vrste su svi PTH ili PTHrP polipeptidni fragmenti, dužine od najmanje 6 aminokiselina, kao što je prethodno opisano, koji mogu biti posebno specificirani N-terminalnim i C-terminalnim položajem. Odnosno, svaka kombinacija N-terminalne i C-terminalne pozicije koju bi fragment dužine od najmanje 6 susednih aminokiselinskih ostataka mogao da zauzme, na bilo kojoj datoj aminokiselinskoj sekvenci PTH ili PTHrP polipeptida, poželjno PTH polipeptida SEK ID :NO51, uključen je u ovaj pronalazak.
[0037] Termin "PTH" takođe uključuje konjugate poli(aminokiselina) koji imaju sekvencu kao što je prethodno opisano, ali imaju kičmu koja sadrži i amidne i neamidne veze, kao što su estarske veze, kao na primer depsipeptidi. Depsipeptidi su lanci aminokiselinskih ostataka u kojima kičma sadrži i amidne (peptidne) i estarske veze. Shodno tome, termin "bočni lanac" kako se ovde koristi odnosi se ili na deo vezan za alfa-ugljenik aminokiselinskog dela, ako je aminokiselinski deo povezan preko aminskih veza kao što su polipeptidi, ili na bilo koji atom ugljenika koji sadrži deo vezan za kičmu konjugata poli(aminokiselina), kao što je na primer u slučaju depsipeptida. Poželjno, termin "PTH" se odnosi na polipeptide koji imaju kičmu formiranu preko amidnih (peptidnih) veza.
[0038] Kako termin "PTH" uključuje prethodno opisane varijante, analoge, ortologe, homologe, derivate i fragmente PTH i PTHrP, sve reference na specifične pozicije unutar referentne sekvence takođe uključuju ekvivalentne pozicije u varijantama, analozima, ortolozima, homolozima, derivatima i fragmentima PTH ili PTHrP dela, čak i ako nisu posebno pomenuti.
[0039] Kako se ovde koristi izraz "micela" označava agregat amfifilnih molekula dispergovanih u tečnom koloidu. U vodenom rastvoru tipična micela formira agregat sa hidrofilnim delom molekula surfaktanta koji je okrenut ka okolnom rastvaraču i hidrofobnim delom molekula surfaktanta okrenutim ka unutra, koji se takođe naziva "micela normalne faze". "Inverzne micele" imaju hidrofilni deo okrenut ka unutra i hidrofobni deo okrenut ka okolnom rastvaraču.
[0040] Kako se ovde koristi, termin "lipozom" se odnosi na vezikulu, poželjno sferičnu vezikulu, koja ima najmanje jedan lipidni dvosloj. Poželjno, lipozomi sadrže fosfolipide, još poželjnije fosfatidilholin. Termin "lipozom" se odnosi na različite strukture i veličine, kao što su, na primer, multilamelarne vezikule lipozoma (MLV) koje imaju više od jednog koncentričnog lipidnog dvosloja sa prosečnim prečnikom od 100 do 1000 nm, male unilamelarne vezikule lipozoma (SUV) koje imaju jedan lipidni dvosloj i prosečnog prečnika od 25 do 100 nm, velike unilamelarne lipozomske vezikule (LUV) koje imaju jedan lipidni dvosloj i prosečni prečnik od oko 1000 µm i džinovske unilamelarne vezikule (GUV) koje
1
imaju jedan lipidni dvosloj i prosečni prečnik od 1 do 100 µm. Termin "lipozom" takođe uključuje elastične vezikule kao što su, na primer, transferozomi i etozomi.
[0041] Kako se ovde koristi, termin "akvazom" se odnosi na sferične nanočestice prečnika od 60 do 300 nm koje se sastoje od najmanje tri sloja samo-sastavljajuće strukture, odnosno čvrste faze nanokristalnog jezgra obloženog oligomernim filmom na koji su molekuli leka adsorbovani sa ili bez modifikacije leka.
[0042] Kako se ovde koristi, termin "etozom" se odnosi na lipidne vezikule koje sadrže fosfolipide i etanol i/ili izopropanol u relativno visokoj koncentraciji i vodu, veličine u rasponu od desetina nanometara do mikrometara.
[0043] Kako se ovde koristi, termin "LeciPlex" se odnosi na pozitivno naelektrisani vezikularni sistem na bazi fosfolipida koji sadrži sojini PC, katjonska sredstvo i biokompatibilni rastvarač kao što je PEG 300, PEG 400, dietilen glikol monoetil etar, tetrahidrofurfuril alkohol polietilen glikol etar ili 2-pirolidon ili N-metil-2-pirolidon.
[0044] Kako se ovde koristi, izraz "niozom" se odnosi na unilamelarne ili multilamelarne vezikule koje sadrže nejonske surfaktante.
[0045] Kako se ovde koristi, termin "farmakozom" se odnosi na ultrafine vezikularne, micelarne ili heksagonalne agregate od lipida kovalentno vezanih za biološki aktivne delove.
[0046] Kako se ovde koristi, termin "proniozom" se odnosi na suve formulacije nosača obloženog surfaktantom koji pri rehidrataciji i blagom mešanju daje niozome.
[0047] Kako se ovde koristi, termin "polimerzom" se odnosi na veštačku sferičnu vezikulu koja sadrži membranu formiranu od amfifilnih sintetičkih blok kopolimera i može opciono da sadrži vodeni rastvor u svom jezgru. Polimerzom ima prečnik u rasponu od 50 nm do 5 µm i veći. Termin takođe uključuje sintozome, koji su polimerzomi konstruisani da sadrže kanale koji omogućavaju određenim hemikalijama da prođu kroz membranu u ili iz vezikule.
[0048] Kako se ovde koristi, termin "sfingozom" se odnosi na koncentrične, dvoslojne vezikule u kojima je vodena zapremina u potpunosti zatvorena membranskim lipidnim dvoslojem koji se uglavnom sastoji od prirodnog ili sintetičkog sfingolipida.
[0049] Kako se ovde koristi, termin "transferozom" se odnosi na ultrafleksibilne lipidne vezikule koje sadrže vodeno jezgro koje se formira od mešavine uobičajenih polarnih i pogodnih ivično aktiviranih lipida koji olakšavaju formiranje visoko zakrivljenih dvoslojeva koji transferozom čine visoko deformabilnim.
[0050] Kako se ovde koristi, termin "ufazom" se odnosi na vezikulu koja sadrži nezasićene masne kiseline.
1
[0051] Kako se ovde koristi, termin "polipeptid" se odnosi na peptid koji sadrži do i uključujući 50 monomera aminokiselina.
[0052] Kako se ovde koristi, termin "protein" se odnosi na peptid sa više od 50 aminokiselinskih ostataka. Poželjno, protein sadrži najviše 20000 aminokiselinskih ostataka, kao što je najviše 15000 aminokiselinskih ostataka, kao što je najviše 10000 aminokiselinskih ostataka, kao što je najviše 5000 aminokiselinskih ostataka, kao što je najviše 4000 aminokiselinskih ostataka, kao npr. najviše 3000 aminokiselinskih ostataka, kao što je najviše 2000 aminokiselinskih ostataka, kao što je najviše 1000 aminokiselinskih ostataka.
[0053] Kako se ovde koristi, izraz "fiziološka stanja" odnosi se na vodeni pufer na pH 7.4, 37°C.
[0054] Kako se ovde koristi, termin "farmaceutska kompozicija" odnosi se na kompoziciju koja sadrži jedan ili više aktivnih sastojaka, kao što je na primer najmanje jedno jedinjenje PTH sa kontrolisanim oslobađanjem i jedan ili više ekscipijenasa, kao i bilo koji proizvod koji rezultuje, direktno ili indirektno od kombinacije, kompleksiranja ili agregacije bilo koja dva ili više sastojaka kompozicije, ili od disocijacije jednog ili više sastojaka, ili od drugih vrsta reakcija ili interakcija jednog ili više sastojaka. Shodno tome, farmaceutske kompozicije ovog pronalaska obuhvataju bilo koju kompoziciju napravljenu mešanjem jednog ili više PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem i farmaceutski prihvatljivog ekscipijensa.
[0055] Kako se ovde koristi, termin "tečna kompozicija" odnosi se na smešu koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim otpuštanjem rastvorljivo u vodi i jedan ili više rastvarača, kao što je voda.
[0056] Termin "sastav suspenzije" se odnosi na smešu koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim otpuštanjem nerastvorljivo u vodi i jedan ili više rastvarača, kao što je voda.
[0057] Kako se ovde koristi, izraz "suva kompozicija" znači da je farmaceutska kompozicija obezbeđena u suvom obliku. Pogodni postupci za sušenje su sušenje raspršivanjem i liofilizacija, tj. sušenje zamrzavanjem. Ovakva suva kompozicija proleka ima rezidualni sadržaj vode od maksimalno 10%, poželjno manji od 5%, a poželjnije manji od 2%, određen prema Karl Fišeru. Poželjno, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska se suši liofilizacijom.
[0058] Termin "lek" kako se ovde koristi odnosi se na supstancu koja se koristi u tretmanu, lečenju, prevenciji ili dijagnostici bolesti ili se koristi za poboljšanje fizičkog ili mentalnog blagostanja. Ako je lek konjugovan sa drugim ostatkom, deo rezultujućeg proizvoda koji potiče iz leka naziva se "biološki aktivan deo".
[0059] Kako se ovde koristi, termin "prolek" se odnosi na konjugat u kome je biološki aktivni deo reverzibilno i kovalentno povezan sa specijalizovanom zaštitnom grupom preko
2
reverzibilnog linker dela, koji se takođe naziva "reverzibilni linker deo proleka", koji sadrži reverzibilnu vezu sa biološki aktivnim delom i pri čemu specijalizovana zaštitna grupa menja ili eliminiše nepoželjna svojstva u matičnom molekulu. Ovo takođe uključuje poboljšanje poželjnih svojstava leka i suzbijanje neželjenih svojstava. Specijalizovana netoksična zaštitna grupa se naziva "nosač". Prolek oslobađa reverzibilno i kovalentno vezan biološki aktivni deo u obliku odgovarajućeg leka. Drugim rečima, prolek je konjugat koji sadrži biološki aktivni deo koji je kovalentno i reverzibilno konjugovan sa ostatkom nosača preko reverzibilnog vezujućeg dela proleka, pri čemu je kovalentna i reverzibilna konjugacija nosača sa reverzibilnim linker delom proleka ili direktna ili preko spejsera. Takav konjugat oslobađa ranije konjugovani biološki aktivni deo u obliku slobodnog nemodifikovanog leka.
[0060] "Biološki razgradiva veza" ili "reverzibilna veza" je veza koja je hidrolitički razgradiva, tj. odcepljiva, u odsustvu enzima u fiziološkim uslovima (vodeni pufer na pH 7.4, 37°C) sa poluživotom u rasponu od jednog sata do tri meseca, poželjno od jednog sata do dva meseca, još poželjnije od jednog sata do jednog meseca, još poželjnije od jednog sata do tri nedelje, najpoželjnije od jednog sata do dve nedelje. Shodno tome, stabilna veza je veza koja ima vreme poluraspada u fiziološkim uslovima (vodeni pufer na pH 7.4, 37°C) duže od tri meseca.
[0061] Kako se ovde koristi, izraz "linker proleka bez tragova" označava reverzibilni linker proleka, tj. vezujući deo koji reverzibilno i kovalentno povezuje biološki aktivni deo sa nosačem, koji nakon cepanja oslobađa lek u njegovom slobodnom obliku. Kako se ovde koristi, izraz "slobodni oblik" leka označava lek u njegovom nemodifikovanom, farmakološki aktivnom obliku.
[0062] Kako se ovde koristi, termin "ekscipijens" se odnosi na razblaživač, pomoćno sredstvo ili vehikulum sa kojim se primenjuje terapeutik, kao što je lek ili prolek. Takav farmaceutski ekscipijens mogu biti sterilne tečnosti, kao što su voda i ulja, uključujući one naftnog, životinjskog, biljnog ili sintetičkog porekla, uključujući ulje kikirikija, sojino ulje, mineralno ulje i susamovo ulje. Voda je poželjni ekscipijens kada se farmaceutska kompozicija daje oralno. Slani rastvor i vodeni rastvor dekstroze su poželjni ekscipijensi kada se farmaceutska kompozicija primenjuje intravenski. Slani rastvori i vodeni rastvori dekstroze i glicerola se poželjno koriste kao tečni ekscipijensi za rastvore za injekcije. Pogodni farmaceutski ekscipijensi uključuju skrob, glukozu, laktozu, saharozu, manitol, trehalozu, želatin, slad, pirinač, brašno, kredu, silika gel, natrijum stearat, glicerol monostearat, talk, natrijum hlorid, sušeno obrano mleko, glicerol propil, vodu i etanol. Farmaceutska kompozicija, po želji, takođe može da sadrži manje količine sredstava za vlaženje ili emulgovanje, pH pufer, kao što su, na primer, acetat, sukcinat, tris, karbonat, fosfat, HEPES (4-(2-hidroksietil)-1piperazinetansulfonska kiselina), MES (2-(A-morfolino)etansulfonska kiselina), ili može da sadrži deterdžente, kao što su Tween, poloksameri, poloksamini, CHAPS, Igepal ili aminokiseline kao što su, na primer, glicin, lizin ili histidin. Ove farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku rastvora, suspenzija, emulzija, tableta, pilula, kapsula, praškova i formulacija sa produženim oslobađanjem. Farmaceutska kompozicija se može formulisati kao supozitorija, sa tradicionalnim vezivnim sredstvima i ekscipijensima kao što su trigliceridi. Oralna formulacija može uključivati standardne ekscipijense kao što su manitol, laktoza, skrob, magnezijum stearat, natrijum saharin, celuloza, magnezijum karbonat, itd. Takve kompozicije će sadržati terapeutski efikasnu količinu leka ili biološki aktivnog dela, zajedno sa odgovarajućim količinu ekscipijensa kako bi se obezbedio oblik za pravilno davanje pacijentu. Formulacija treba da odgovara načinu primene.
[0063] Kako se ovde koristi, izraz "reagens" označava hemijsko jedinjenje koje sadrži najmanje jednu funkcionalnu grupu za reakciju sa funkcionalnom grupom drugog hemijskog jedinjenja ili leka. Podrazumeva se da je lek koji sadrži funkcionalnu grupu (kao što je primarna ili sekundarna amin ili hidroksilna funkcionalna grupa) takođe reagens.
[0064] Kako se ovde koristi, izraz "deo" označava deo molekula kome nedostaje jedan ili više atoma u poređenju sa odgovarajućim reagensom. Ako, na primer, reagens formule "H-X-H" reaguje sa drugim reagensom i postane deo reakcionog proizvoda, odgovarajući deo reakcionog proizvoda ima strukturu "H-X-" ili "-X-", dok svaki "- " ukazuje na vezanost za drugu grupu. Shodno tome, biološki aktivni deo se oslobađa iz proleka kao lek.
[0065] Podrazumeva se da ako je data sekvenca ili hemijska struktura grupe atoma pri čemu je grupa atoma vezana za dva dela ili je deo koji prekida, pomenuta sekvenca ili hemijska struktura mogu biti vezani za dva dela u bilo kojoj orijentaciji, osim ako nije eksplicitno navedeno drugačije. Na primer, deo "-C(O)N(R<1>)-" može biti vezan za dva dela ili prekidajući deo ili kao "-C(O)N(R<1>)-" ili kao "-N(R<1>)C(O)-". Slično, deo
može biti vezan za dva dela ili može prekinuti deo ili kao
ili kao
[0066] Kako se ovde koristi, izraz "funkcionalna grupa" označava grupu atoma koja može da reaguje sa drugim grupama atoma. Funkcionalne grupe uključuju, ali nisu ograničene na sledeće grupe: karboksilnu kiselinu (-(C=O)OH), primarni ili sekundarni amin (-NH2, -NH-), maleimid, tiol (-SH), sulfonsku kiselinu (-(O=S=O)OH), karbonat, karbamat (-O(C=O)N<), hidroksil (-OH), aldehid (-(C=O)H), keton (-(C=O)-), hidrazin (>N-N<), izocijanat, izotiocijanat, fosfornu kiselinu (-O(P=O)OHOH), fosfonsku kiselinu (-O(P=O)OHH), haloacetil, alkil halid, akriloil, aril fluorid, hidroksilamin, disulfid, sulfonamide, sumpornu kiselinu, vinil sulfon, vinil keton, diazoalkan, oksiran i aziridin.
[0067] U slučaju da PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem predmetnog pronalaska sadrži jednu ili više kiselih ili baznih grupa, pronalazak takođe obuhvata njihove odgovarajuće farmaceutski ili toksikološki prihvatljive soli, posebno njihove farmaceutski upotrebljive soli. Prema tome, PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem predmetnog pronalaska koje sadrži kisele grupe može se koristiti prema pronalasku, na primer, kao soli alkalnih metala, soli zemnoalkalnih metala ili kao soli amonijuma. Precizniji primeri takvih soli obuhvataju natrijumove soli, kalijumove soli, soli kalcijuma, soli magnezijuma ili soli sa amonijakom ili organskim aminima kao što su, na primer, etilamin, etanolamin, trietanolamin ili aminokiseline. PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem predmetnog pronalaska koje sadrži jednu ili više baznih grupa, tj. grupa koje se mogu protonovati, mogu biti prisutne i mogu se koristiti prema pronalasku u obliku njihovih adicionih soli sa neorganskim ili organskim kiselinama. Primeri pogodnih kiselina su hlorovodonik, bromovodonik, fosforna kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, metansulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina, naftalendisulfonske kiseline, oksalna kiselina, sirćetna kiselina, vinska kiselina, mlečna kiselina, salicilna kiselina, benzojeva kiselina, mravlja kiselina, propionska kiselina, pivalinska kiselina, dietilasirćetna kiselina, malonska kiselina, jantarna kiselina, pimelna kiselina, fumarna kiselina, maleinska kiselina, jabučna kiselina, sulfaminska kiselina, fenilpropionska kiselina, glukonska kiselina, askorbinska kiselina, izonikotinska kiselina, limunska kiselina, adipinska kiselina i druge kiseline poznate stručnjaku. Za stručnjake iz ove oblasti su poznati dalji postupci za pretvaranje osnovne grupe u katjon, kao što je alkilacija aminske grupe koja rezultuje pozitivno naelektrisanom amonijum grupom i odgovarajućim protivjonom soli. Ako PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem predmetnog pronalaska istovremeno sadrži kisele i bazne grupe, pronalazak takođe uključuje, pored pomenutih oblika soli, unutrašnje soli ili betaine
2
(cviterjone). Odgovarajuće soli se mogu dobiti uobičajenim postupcima koji su poznati stručnjaku kao što su, na primer, dovođenjem ovih jedinjenja u kontakt sa organskom ili neorganskom kiselinom ili bazom u rastvaraču ili disperzantu, ili izmenom anjona ili izmenom katjona sa drugim solima. Predmetni pronalazak takođe uključuje sve soli jedinjenja predmetnog pronalaska koje, zbog niske fiziološke kompatibilnosti, nisu direktno pogodne za upotrebu u farmaceutskim proizvodima, ali koje se mogu koristiti, na primer, kao intermedijeri za hemijske reakcije ili za pripremu farmaceutski prihvatljivih soli.
[0068] Termin „farmaceutski prihvatljiva“ označava supstancu koja ne uzrokuje štetu kada se daje pacijentu i poželjno znači da je odobrena od strane regulatorne agencije, kao što je EMA (Evropa) i/ili FDA (SAD) i/ili bilo koja druga nacionalna regulatorna agencija za upotrebu kod životinja, poželjno za upotrebu kod ljudi.
[0069] Kako se ovde koristi, termin "oko" u kombinaciji sa numeričkom vrednošću se koristi da označi opseg u rasponu od i uključujući numeričku vrednost plus i minus ne više od 10% navedene numeričke vrednosti, poželjnije ne više od 8% navedene numeričke vrednosti vrednost, još poželjnije ne više od 5% navedene numeričke vrednosti i najpoželjnije ne više od 2% navedene numeričke vrednosti. Na primer, fraza "oko 200" se koristi da označava opseg u rasponu od i uključujući 200 /- 10%, tj. u rasponu od i uključujući 180 do 220; poželjno 200 /-8%, tj. u rasponu od i uključujući 184 do 216; još poželjnije u rasponu od i uključujući 200 /-5%, tj. u rasponu od i uključujući 190 do 210; a najpoželjnije 200 /-2%, tj. u rasponu od i uključujući 196 do 204. Podrazumeva se da procenat dat kao "oko 20%" ne znači "20% /-10%", tj. u rasponu od i uključujući 10 do 30%, ali "oko 20%" znači u rasponu od i uključujući 18 do 22%, tj. plus i minus 10% numeričke vrednosti koja je 20.
[0070] Kako se ovde koristi, termin "polimer" označava molekul koji se sastoji od ponavljajućih strukturnih jedinica, tj. monomera, povezanih hemijskim vezama na linearan, kružni, razgranat, umrežen ili dendrimerni način ili njihovu kombinaciju, koja može biti sintetičkog ili biološkog porekla. ili kombinacija oba. Podrazumeva se da polimer može takođe da sadrži jednu ili više drugih hemijskih grupa i/ili grupa, kao što je, na primer, jedna ili više funkcionalnih grupa. Poželjno, rastvorljivi polimer ima molekulsku težinu od najmanje 0.5 kDa, npr. molekulsku težinu od najmanje 1 kDa, molekulsku težinu od najmanje 2 kDa, molekulsku težinu od najmanje 3 kDa ili molekulsku težinu od najmanje 5 kDa. Ako je polimer rastvorljiv, poželjno je da ima molekulsku težinu od najviše 1000 kDa, kao što je najviše 750 kDa, kao što je najviše 500 kDa, kao što je najviše 300 kDa, kao što je najviše 200 kDa, kao što je najviše 100 kDa. Podrazumeva se da se za nerastvorljive polimere, kao što su hidrogelovi, ne mogu obezbediti značajni rasponi molekulske težine. Podrazumeva se da je i protein polimer u kome su aminokiseline ponavljajuće strukturne jedinice, iako bočni lanci svake aminokiseline mogu biti različiti.
[0071] Kako se ovde koristi, izraz "polimer" označava reagens ili deo koji sadrži jedan ili više polimera ili polimernih delova. Polimerni reagens ili deo može opciono da sadrži jedan ili više drugih ostataka/komponenti, koji su poželjno izabrani iz grupe koju čine:
● C1-50alkil, C2-50alkenil, C2-50alkinil, C3-10cikloalkil, 3- do 10-člani heterociklil, 8- do 11-člani heterobiciklil, fenil, naftil, indenil, indanil i tetralinil; i
● veze izabrane iz grupe koja sadrži
pri čemu
isprekidane linije označavaju vezivanje za ostatak grupe ili reagensa, i
-R i -R<a>su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koju čine -H, metil, etil, propil, butil, pentil i heksil.
[0072] Stručnjak u ovoj oblasti razume da svi proizvodi polimerizacije dobijeni reakcijom polimerizacije nemaju istu molekulsku težinu, već pokazuju distribuciju molekulske mase. Shodno tome, rasponi molekulske težine, molekulske težine, rasponi broja monomera u polimeru i broja monomera u polimeru kako se ovde koristi, odnose se na prosečnu molekulsku težinu i prosek broja monomera, tj. na aritmetičku sredinu molekulskih težina polimera ili polimernog dela i aritmetičku sredinu broja monomera u polimeru ili polimernom delu.
[0073] Shodno tome, u polimernoj grupi koja sadrži "x" monomernih jedinica bilo koji ceo broj dat za "x" stoga odgovara aritmetičkom srednjem broju monomera. Bilo koji opseg celih brojeva dat za "x" obezbeđuje opseg celih brojeva u kojima se nalazi aritmetička sredina broja monomera. Ceo broj za "x" dat kao "oko x" znači da srednji aritmetički broj monomera leži u
2
opsegu celih brojeva od x /- 10%, poželjno x /- 8%, poželjnije x /- 5% a najpoželjnije x /-2%.
[0074] Kako se ovde koristi, termin "prosečna molekulska težina" označava uobičajenu aritmetičku sredinu molekulskih težina pojedinačnih polimera.
[0075] Kako se ovde koristi, termin "rastvorljiv u vodi" u odnosu na nosač znači da kada je takav nosač deo PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem ovog pronalaska, najmanje 1 g PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem koje sadrži takav nosač rastvorljiv u vodi može se rastvoriti u jednom litru vode na 20°C da bi se dobio homogeni rastvor. Shodno tome, termin "nerastvorljiv u vodi" u odnosu na nosač znači da kada je takav nosač deo PTH jedinjenja sa kontrolisanim otpuštanjem ovog pronalaska, manje od 1 g PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem koje sadrži takav nosač nerastvorljiv u vodi može rastvoriti u jednom litru vode na 20°C da bi se dobio homogeni rastvor.
[0076] Kako se ovde koristi, termin "hidrogel" označava hidrofilnu ili amfifilnu polimernu mrežu sastavljenu od homopolimera ili kopolimera, koja je nerastvorljiva zbog prisustva kovalentnih hemijskih umrežavanja. Unakrsne veze obezbeđuju strukturu mreže i fizički integritet.
[0077] Kako se ovde koristi, termin "termogeliranje" označava jedinjenje koje je tečnost ili rastvor niskog viskoziteta koji ima viskozitet manji od 500 cps na 25°C pri brzini smicanja od oko 0.1/sekundi na niskoj temperaturi, čiji se raspon temperatura kreće između oko 0°C do oko 10°C, ali koje je jedinjenje veće viskoznosti manje od 10000 cps na 25°C na brzini smicanja od oko 0.1/sekundi na višoj temperaturi, čija viša temperatura se kreće između oko 30°C do oko 40°C, kao što je na oko 37°C.
[0078] Kako se ovde koristi, izraz "na bazi PEG" u odnosu na deo ili reagens znači da pomenuti deo ili reagens sadrži PEG. Poželjno, deo ili reagens zasnovan na PEG sadrži najmanje 10% (tež.) PEG, kao što je najmanje 20% (tež./tež.) PEG, kao što je najmanje 30% (tež./tež.) PEG, kao npr. najmanje 40% (zapr/zapr) PEG, kao što je najmanje 50% (zapr/zapr), kao što je najmanje 60 (zapr/zapr) PEG, kao što je najmanje 70% (zapr/zapr) PEG, kao što je najmanje 80% (zapr/zapr) PEG, kao što je najmanje 90% (zapr/zapr) PEG, kao što je najmanje 95%. Preostali težinski procenat dela ili reagensa zasnovanog na PEG-u su drugi delovi poželjno odabrani od sledećih grupa i veza:
● C1-50alkil, C2-50alkenil, C2-50alkinil, C3-10cikloalkil, 3- do 10-člani heterociklil, 8- do 11-člani heterobiciklil, fenil, naftil, indenil, indanil i tetralinil; i
● veze izabrane iz grupe koja sadrži
2
pri čemu
isprekidane linije označavaju vezivanje za ostatak grupe ili reagensa, i
-R i -R<a>su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koju čine -H, metil, etil, propil, butil, pentil i heksil.
[0079] Kako se ovde koristi, termin "na bazi PEG koji sadrži najmanje X% PEG" u odnosu na deo ili reagens znači da navedeni deo ili reagens sadrži najmanje X% (zapr/zapr) jedinica etilen glikola (-CH2CH2O-), pri čemu jedinice etilen glikola mogu biti raspoređene blokovno, naizmenično ili mogu biti nasumično raspoređene unutar ostatka ili reagensa i poželjno su sve jedinice etilen glikola pomenutog dela ili reagensa prisutne u jednom bloku; preostali težinski procenat ostatka ili reagensa zasnovanog na PEG su drugi ostaci poželjno odabrani od sledećih ostataka i veza:
● C1-50alkil, C2-50alkenil, C2-50alkinil, C3-10cikloalkil, 3- do 10-člani heterociklil, 8- do 11-člani heterobiciklil, fenil, naftil, indenil, indanil i tetralinil; i
● veze izabrane iz grupe koja sadrži
2
pri čemu
isprekidane linije označavaju vezivanje za ostatak grupe ili reagensa, i
-R i -R<a>su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koju čine -H, metil, etil, propil, butil, pentil i heksil.
[0080] Termin "na bazi hijaluronske kiseline koji sadrži najmanje X% hijaluronske kiseline" se koristi u skladu sa tim.
[0081] Termin "supstituisan" kako se ovde koristi znači da su jedan ili više -H atoma molekula ili grupe zamenjeni drugim atomom ili grupom atoma, koji se nazivaju "supstituentima".
[0082] Poželjno, jedan ili više dodatnih opcionih supstituenata su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koja se sastoji od sleećih: halogen, -CN, -COOR<x1>, -OR<x1>, -C(O)R<x1>, -C(O)N(R<x1>R<x1a>), -S(O)2N(R<x1>R<x1a>), -S(O)N(R<x1>R<x1a>), -S(O)2R<x1>, -S(O)R<x1>, -N(R<x1>)S(O)2N(R<x1a>R<x1b>), -SR<x1>, -N(R<x1>R<x1a>), -NO2, -OC(O)R<x1>, -N(R<x1>)C(O)R<x1a>, -N(R<x1>)S(O)2R<x1a>, -N(R<x1>)S(O)R<x1a>, -N(R<x1>)C(O)OR<x1a>, -N(R<x1>)C(O)N(R<x1a>R<x1b>), -OC(O)N(R<x1>R<x1a>), -T<0>, C1-50alkil, C2-50alkenil i C2-50alkinil; pri čemu -T<0>, C1-50alkil, C2-50alkenil i C2-50alkinil su opciono supstituisani sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti i pri čemu su C1-50alkil, C2-50alkenil i C2-50alkinil opciono prekinuti sa jednom ili više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od -T<0>-, -C(O)O-, -O-, -C(O)-, -C(O)N(R<x3>)-, -S(O)2N(R<x3>)-, -S(O)N(R<x3>)-, -S(O)2-, -S(O)-, -N(R<x3>)S(O)2N(R<x3a>)-, -S-, -N(R<x3>)-, -OC(OR<x3>)(R<x3a>)-, -N(R<x3>)C(O)N(R<x3a>)-, i -OC(O)N(R<x3>)-;
-R<x1>, -R<x1a>, -R<x1b>su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koja se sastoji od -H, -T<0>, C1-50alkil, C2-50alkenil i C2-50alkinil; pri čemu -T<0>, C1-50alkil, C2-50alkenil i C2-50alkinil su opciono supstituisani sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti i gde je C1-
50alkil, C2-50alkenil i C2-50alkinil su opciono prekinuti sa jednom ili više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od -T<0>-, -C(O)O-, -O-, -C(O)-, -C(O)N(R<x3>)-, -S(O)2N(R<x3>)-, -S(O)N(R<x3>)-; -S(O)2-, -S(O)-, -N(R<x3>)S(O)2N(R<x3a>)-, -S-, -N(R<x3>)-, -OC(OR<x3>)(R<x3a>)-, -N(R<x3>)C(O)N(R<x3a>)-, i -OC(O)N(R<x3>)-;
svaki T<0>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: fenil, naftil, indenil, indanil, tetralinil, C3-10cikloalkil, 3- do 10-člani heterociklil i 8- do 11-člani heterobiciklil; pri čemu svaki T<0>je nezavisno opciono supstituisan sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti;
2
svaki -R<x2>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, okso (=O), -COOR<x4>, -OR<x4>, -C(O)R<x4>, -C(O)N(R<x4>R<x4a>), -S(O)2N(R<x4>R<x4a>), -S(O)N(R<x4>R<x4a>), -S(O)2R<x4>, -S(O)R<x4>, -N(R<x4>)S(O)2N(R<x4a>R<x4b>), -SR<x4>, -N(R<x4>R<x4a>), -NO2, -OC(O)R<x4>, -N(R<x4>)C(O)R<x4a>, -N(R<x4>)S(O)2R<x4a>, -N(R<x4>)S(O)R<x4a>, -N(R<x4>)C(O)OR<x4a>, -N(R<x4>)C(O)N(R<x4a>R<x4b>), -OC(O)N(R<x4>R<x4a>), i C1-6alkil; pri čemu C1-6alkil je opciono supstituisan sa jednim ili više halogena, koji su isti ili različiti; svaki -R<x3>, -R<x3a>, -R<x4>, -R<x4a>, -R<x4b>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od -H i C1-6alkil; pri čemu C1-6alkil je opciono supstituisan sa jednim ili više halogena, koji su isti ili različiti.
[0083] Još poželjnije, jedan ili više dodatnih opcionih supstituenata su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, -COOR<x1>, -OR<x1>, -C(O)R<x1>, -C(O)N(R<x1>R<x1a>), -S(O)2N(R<x1>R<x1a>), -S(O)N(R<x1>R<x1a>), -S(O)2R<x1>, -S(O)R<x1>, -N(R<x1>)S(O)2N(R<x1a>R<x1b>), -SR<x1>, -N(R<x1>R<x1a>), -NO2, -OC(O)R<x1>, -N(R<x1>)C(O)R<x1a>, -N(R<x1>)S(O)2R<x1a>, -N(R<x1>)S(O)R<x1a>, -N(R<x1>)C(O)OR<x1a>, -N(R<x1>)C(O)N(R<x1>aR<x1b>), -OC(O)N(R<x1>R<x1a>), -T<0>, C1-10alkil, C2-10alkenil i C2-10alkinil; pri čemu -T<0>, C1-10alkil, C2-10alkenil i C2-10alkinil su opciono supstituisani sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti i pri čemu su C1-10alkil, C2-10alkenil i C2-10alkinil opciono prekinuti sa jednom ili više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od -T<0>-, -C(O)O-, -O-, -C(O)-, -C(O)N(R<x3>)-, -S(O)2N(R<x3>)-, -S(O)N(R<x3>)-, -S(O)2-, -S(O)-, -N(R<x3>)S(O)2N(R<x3a>)-, -S-, -N(R<x3>)-, -OC(OR<x3>)(R<x3a>)-, -N(R<x3>)C(O)N(R<x3a>)-, i -OC(O)N(R<x3>)-;
svaki -R<x1>, -R<x1a>, -R<x1b>, -R<x3>, -R<x3a>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: -H, halogen, C1-6alkil, C2-6alkenil i C2-6alkinil;
svaki T<0>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od fenil, naftil, indenil, indanil, tetralinil, C3-10cikloalkil, 3- do 10-člani heterociklil i 8- do 11-člani heterobiciklil; pri čemu svaki T<0>je nezavisno opciono supstituisan sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti;
svaki -R<x2>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, okso (=O), -COOR<x4>, -OR<x4>, -C(O)R<x4>, -C(O)N(R<x4>R<x4a>), -S(O)2N(R<x4>R<x4a>), -S(O)N(R<x4>R<x4a>), -S(O)2R<x4>, -S(O)R<x4>, -N(R<x4>)S(O)2N(R<x4a>R<x4b>), -SR<x4>, -N(R<x4>R<x4a>), -NO2, -OC(O)R<x4>, -N(R<x4>)C(O)R<x4a>, -N(R<x4>)S(O)2R<x4a>, -N(R<x4>)S(O)R<x4a>, -
2
N(R<x4>)C(O)OR<x4a>, -N(R<x4>)C(O)N(R<x4a>R<x4b>), -OC(O)N(R<x4>R<x4a>), i C1-6alkil; pri čemu C1-6alkil je opciono supstituisan sa jednim ili više halogena, koji su isti ili različiti;
svaki -R<x4>, -R<x4a>, -R<x4b>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: -H, halogen, C1-6alkil, C2-6alkenil i C2-6alkinil;
Još poželjnije, jedan ili više dodatnih opcionih supstituenata su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, -COOR<x1>, -OR<x1>, -C(O)R<x1>, -C(O)N(R<x1>R<x1a>), -S(O)2N(R<x1>R<x1a>), -S(O)N(R<x1>R<x1a>), -S(O)2R<x1>, -S(O)R<x1>, -N(R<x1>)S(O)2N(R<x1a>R<x1b>), -SR<x1>, -N(R<x1>R<x1a>), -NO2, -OC(O)R<x1>, -N(R<x1>)C(O)R<x1a>, -N(R<x1>)S(O)2R<x1a>, -N(R<x1>)S(O)R<x1a>, -N(R<x1>)C(O)OR<x1a>, -N(R<x1>)C(O)N(R<x1a>R<x1b>), -OC(O)N(R<x1>R<x1a>), -T<0>, C1-6alkil, C2-6alkenil i C2-6alkinil; pri čemu -T<0>, C1-6alkil, C2-6alkenil i C2-6alkinil su opciono supstituisani sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti i pri čemu su C1-6alkil, C2-6alkenil i C2-6alkinil su opciono prekinuti sa jednom ili više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od sledećih: -T<0>-, -C(O)O-, -O-, -C(O)-, -C(O)N(R<x3>)-, -S(O)2N(R<x3>)-, -S(O)N(R<x3>)-, -S(O)2-, -S(O)-, -N(R<x3>)S(O)2N(R<x3a>)-, -S-, -N(R<x3>)-, -OC(OR<x3>)(R<x3a>)-, -N(R<x3>)C(O)N(R<x3a>)-, i -OC(O)N(R<x3>)-;
svaki -R<x1>, -R<x1a>, -R<x1b>, -R<x2>, -R<x3>, -R<x3a>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: -H, halogen, C1-6alkil, C2-6alkenil i C2-6alkinil;
svaki T<0>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: fenil, naftil, indenil, indanil, tetralinil, C3-10cikloalkil, 3- do 10-člani heterociklil i 8- do 11-člani heterobiciklil; pri čemu svaki T<0>je nezavisno opciono supstituisan sa jednim ili više -R<x2>, koji su isti ili različiti.
[0084] Poželjno, najviše 6 -H atoma opciono supstituisanog molekula je nezavisno zamenjeno supstituentom, npr. 5 -H atoma je nezavisno zamenjeno supstituentom, 4 -H atoma je nezavisno zamenjeno supstituentom, 3 -H atoma je nezavisno zamenjeno supstituentom, 2 -H atoma su nezavisno zamenjeni supstituentom, ili je 1 -H atom zamenjen supstituentom.
[0085] Termin "prekinut" znači da je deo umetnut između dva atoma ugljenika ili - ako je umetanje na jednom od krajeva ostatka - između ugljenika ili heteroatoma i atoma vodonika, poželjno između atoma ugljenika i atoma vodonika.
[0086] Kako se ovde koristi, termin "C1-4alkil" sam ili u kombinaciji označava ravnolančani ili razgranati alkil deo koji ima 1 do 4 atoma ugljenika. Ako je prisutan na kraju molekula, primeri pravog ili razgranatog C1-4alkil su metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil i terc-butil. Kada su dva dela molekula povezana pomoću C1-4alkil, onda su primeri za takve C1-
4alkil grupe -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(C2H5)-, -C(CH3)2-. Svaki vodonik C1-4alkil ugljenika može opciono biti zamenjen supstituentom kao što je gore definisan. Opciono, C1-4alkil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0087] Kako se ovde koristi, termin "C1-6alkil" sam ili u kombinaciji označava ravnolančani ili razgranati alkil deo koji ima 1 do 6 atoma ugljenika. Ako je prisutan na kraju molekula, primeri prave i razgranate C1-6alkil grupe su metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil, terc-butil, n-pentil, 2-metilbutil, 2,2-dimetilpropil, n-heksil, 2-metilpentil, 3 -metilpentil, 2,2-dimetilbutil, 2,3-dimetilbutil i 3,3-dimetilpropil. Kada su dva dela molekula povezana pomoću C1-6alkil grupa, onda su primeri za takve C1-6alkil grupe -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(C2H5)- i -C(CH3)2-. Svaki atom vodonika C1-6ugljenika može opciono biti zamenjen supstituentom kao što je gore definisan. Opciono, C1-6alkil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0088] Shodno tome, „C1-10alkil", "C1-20alkil" ili "C1-50alkil" označava alkil lanac koji ima 1 do 10, 1 do 20 ili 1 do 50 atoma ugljenika, respektivno, pri čemu je svaki atom vodonika C1-10, C1-20ili C1-50ugljenik može opciono biti zamenjen supstituentom kao što je gore definisan. Opciono, C1-10ili C1-50alkil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0089] Kako se ovde koristi, termin "C2-6alkenil" sam ili u kombinaciji označava ravnolančani ili razgranati ugljovodonični deo koji sadrži najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik sa 2 do 6 atoma ugljenika. Ako je prisutan na kraju molekula, primeri su -CH=CH2, -CH=CH-CH3, -CH2-CH=CH2, -CH=CHCH2-CH3i -CH=CH-CH=CH2. Kada su dva dela molekula povezana pomoću C2-6alkenil grupa, onda je primer za takvu C2-6alkenil -CH=CH-. Svaki atom vodonika C2-6alkenil dela može opciono biti zamenjen supstituentom kao što je prethodno definisan. Opciono, C2-6alkenil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0090] Shodno tome, termin alkenil", "C2-20alkenil" ili "C2-50alkenil" sam ili u kombinaciji označava ravnolančani ili razgranati ugljovodonični deo koji sadrži najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik koja ima 2 do 10, 2 do 20 ili 2 do 50 atoma ugljenika. Svaki atom vodonika C2-10alkenil, C2-20alkenil ili C2-50alkenil grupa može opciono biti zamenjena
1
supstituentom kao što je gore definisan. Opciono, C2-10alkenil, C2-20alkenil ili C2-50alkenil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0091] Kako se ovde koristi, termin "C2-6alkinil" sam ili u kombinaciji označava ravnolančani ili razgranati ugljovodonični deo koji sadrži najmanje jednu trostruku vezu ugljenik-ugljenik sa 2 do 6 atoma ugljenika. Ako je prisutan na kraju molekula, primeri su -C=CH, -CH2-C≡CH, CH2-CH2-C=CH i CH2-C≡C-CH3. Kada su dva dela molekula povezana alkinil grupom, onda je primer -C=C-. Svaki atom vodonika C2-6alkinil grupe može opciono biti zamenjen supstituentom kao što je prethodno definisan. Opciono, može se pojaviti jedna ili više dvostrukih veza. Opciono, C2-6alkinil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0092] Shodno tome, kako se ovde koristi, termin "C2-10alkinil", "C2-20alkinil" i "C2-50alkinil" sam ili u kombinaciji označava ravnolančani ili razgranati ugljovodonični deo koji sadrži najmanje jednu trostruku vezu ugljenik-ugljenik koja ima 2 do 10, 2 do 20 ili 2 do 50 atoma ugljenika, respektivno. Svaki atom vodonika u C2-10alkinil, C2-20alkinil ili C2-50alkinil grupi može opciono biti zamenjen supstituentom kao što je prethodno definisan. Opciono, može se pojaviti jedna ili više dvostrukih veza.
[0093] Opciono, C2-10alkinil, C2-20alkinil ili C2-50alkinil može biti prekinut sa jednom ili više grupa kao što su definisane u nastavku.
[0094] Kao što je gore pomenuto, C1-4alkil, C1-6alkil, C1-10alkil, C1-20alkil, C1-50alkil, C2-6alkenil, C2-10alkenil, C2-20alkenil, C2-50alkenil, C2-6alkinil, C2-10alkinil, C2-20alkenil ili C2-50alkinil može opciono biti prekinut sa jednim ili više ostataka koji su poželjno izabrani iz grupe koja se sastoji od
pri čemu isprekidane linije označavaju vezivanje za ostatak grupe ili reagensa; i -R i -R<a>su nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: -H, metil, etil, propil, butil, pentil i heksil.
[0095] Kako se ovde koristi, termin "C3-10cikloalkil" označava ciklični alkil lanac koji ima 3 do 10 atoma ugljenika, koji može biti zasićen ili nezasićen, npr. ciklopropil, ciklobutil,
2
ciklopentil, cikloheksil, cikloheksenil, cikloheptil, ciklooktil, ciklooktil, ciklononil ili ciklodecil. Svaki vodonikov atom C3-10cikloalkil ugljenika može biti zamenjen supstituentom kao što je prethodno definisan. Termin takođe uključuje premoštene biciklike kao što su norbornan ili norbornen.
[0096] Termin "8- do 30-člani karbopoliciklil" ili "8- do 30-člani karbopolicikl" označava ciklični deo od dva ili više prstena sa 8 do 30 atoma u prstenu, gde dva susedna prstena dele najmanje jedan atom u prstenu i koji mogu sadržati do maksimalnog broja dvostrukih veza (aromatični ili nearomatični prsten koji je u potpunosti, delimično ili nezasićeni). Poželjno, 8-do 30-člani karbopoliciklil označava ciklični deo od dva, tri, četiri ili pet prstenova, poželjnije od dva, tri ili četiri prstena.
[0097] Kako se ovde koristi, termin "3- do 10-člani heterociklil" ili "3- do 10-člani heterocikl" označava prsten sa 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 atoma u prstenu koji može sadržati do maksimalnog broja dvostrukih veza (aromatičnog ili ne-aromatičnog prstena koji je potpuno, delimično ili nezasićen) pri čemu najmanje jedan atom u prstenu do 4 atoma u prstenu su zamenjeni heteroatomom izabranim iz grupe koju čine sumpor (uključujući -S(O)-, -S(O)2-), kiseonik i azot (uključujući =N(O)-) i pri čemu je prsten vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika ili azota. Primeri za 3- do 10-člane heterocikle uključuju, ali nisu ograničeni na aziridin, oksiran, tiiran, azirin, oksiren, tiren, azetidin, oksetan, tietan, furan, tiofen, pirol, pirolin, imidazol, imidazolin, pirazol, pirazolin, oksazol, oksazolin, izoksazol, izoksazolin, tiazol, tiazolin, izotiazol, izotiazolin, tiadiazol, tiadiazolin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, pirolidin, imidazolidin, pirazolidin, oksazolidin, izoksazolidin, tiazolidin, izotiazolidin, tiadiazolidin, sulfolan, piran, dihidropiran, tetrahidropiran, imidazolidin, piridin, piridazin, pirazin, pirimidin, piperazin, piperidin, morfolin, tetrazol, triazol, triazolidin, tetrazolidin, diazepan, azepin i homopiperazin. Svaki atom vodonika 3- do 10-člane heterociklil ili 3- do 10-člane heterociklične grupe može biti zamenjen supstituentom kao što je definisan u nastavku.
[0098] Kako se ovde koristi, termin "8- do 11-člani heterobiciklil" ili "8- do 11-člani heterobicikl" označava heterociklični deo od dva prstena sa 8 do 11 atoma u prstenu, gde najmanje jedan atom u prstenu dele oba prstena i koji može da sadrži do maksimalnog broja dvostrukih veza (aromatični ili nearomatični prsten koji je u potpunosti, delimično ili nezasićeni) pri čemu je najmanje jedan atom u prstenu do 6 atoma u prstenu zamenjen heteroatomom izabranim iz grupe koju čine sumpor (uključujući -S(O)-, -S(O)2-), kiseonik i azot (uključujući =N(O)-) i pri čemu je prsten vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika ili azota. Primeri za 8- do 11-člani heterobicikl su indol, indolin, benzofuran, benzotiofen, benzoksazol, benzizoksazol, benzotiazol, benzizotiazol, benzimidazol, benzimidazolin, hinolin, hinazolin, dihidrohinazolin, hinolin, dihidrohinolin, tetrahidrohinolin, dekahidrohinolin, izohinolin, dekahidroizohinolin, tetrahidroizohinoline, dihidroizohinolin, benzazepin, purin i pteridin Termin 8- do 11-člani heterobicikl takođe uključuje spiro strukture od dva prstena kao što je 1,4-dioksa-8-azaspiro[4.5]dekan ili premošćene heterocikle kao što je 8-aza-biciklo[3.2.1]oktan. Svaki atom vodonika 8- do 11-članog heterobiciklil ili 8- do 11-članog heterobiciklilnog ugljenika može biti zamenjen supstituentom kao što je definisan u nastavku.
[0099] Slično, termin "8- do 30-člani heteropoliciklil" ili "8- do 30-člani heteropolicikl" označava heterociklični deo od više od dva prstena sa 8 do 30 atoma u prstenu, poželjno od tri, četiri ili pet prstena, gde dva susedna prstena dele najmanje jedan atom u prstenu i koji može sadržati do maksimalnog broja dvostrukih veza (aromatični ili nearomatični prsten koji je potpuno, delimično ili nezasićen), gde je najmanje jedan atom u prstenu do 10 atoma u prstenu zamenjen heteroatomom izabranim iz grupe od sumpora (uključujući -S(O)-, -S(O)2-), kiseonika i azota (uključujući =N(O)-) i pri čemu je prsten vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika ili azota.
[0100] Podrazumeva se da je fraza „par R<x>/Ry su spojeni zajedno sa atomom za koji su vezani da formiraju C3-10cikloalkil ili 3- do 10-člani heterociklil" u odnosu na deo strukture
znači da R<x>i R<y>formiraju sledeću strukturu:
pri čemu R je C3-10cikloalkil ili 3- do 10-člani heterociklil.
[0101] Takođe se podrazumeva da fraza „par R<x>/R<y>je spojen zajedno sa atomima za koje su vezani da formiraju prsten A" u odnosu na deo strukture
znači da R<x>i R<y>formiraju sledeću strukturu:
4
[0102] Kako se ovde koristi, "halogen" označava fluoro, hloro, bromo ili jodo. Generalno je poželjno da halogen bude fluoro ili hloro.
[0103] Uopšteno govoreći, termin "sastoji se" ili "sastoji" takođe obuhvata "sastoji se od" ili "koji se sastoji od".
[0104] Poželjno, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje u skladu sa režimom doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od najviše 20%, poželjnije u koracima od ne više od 15 % i najpoželjnije u koracima ne većim od 10%.
[0105] U jednom izvođenju, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje u skladu sa režimom doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od 25%.
[0106] Još poželjnije, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje u skladu sa režimom doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od 20%.
[0107] Još poželjnije, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje u skladu sa režimom doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od 15%.
[0108] Najpoželjnije je da se farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem primenjuje u skladu sa režimom doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od 10%.
[0109] Poželjno je da se lek koji sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem daje pacijentu ne češće od jednom u 24 sata, na primer svaka 24 sata, svakih 36 sati, svakih 48 sati, svakih 60 sati, svaka 72 sata, svaka 84 sata , svakih 96 sati, svakih 108 sati, svakih 120 sati, svakih 132 sata, svakih 144 sata, svakih 156 sati, jednom nedeljno, jednom u dve nedelje.
[0110] U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje svaka 24 sata.
[0111] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje svakih 48 sati.
[0112] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje svaka 72 sata.
[0113] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje svakih 96 sati.
[0114] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje svakih 120 sati.
[0115] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje svakih 144 sata.
[0116] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem se primenjuje jednom nedeljno.
[0117] Poželjno, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje se daje pacijentu subkutanom primenom, poželjno subkutanom injekcijom.
[0118] U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija za upotrebu ovog pronalaska se izvodi pomoću šprica. U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija za upotrebu ovog pronalaska se primenjuje pomoću pen injektora. U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija za upotrebu predmetnog pronalaska se primenjuje pomoću auto injektora.
[0119] PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem je rastvorljivo u vodi.
[0120] Takvo PTH jedinjenje rastvorljivo u vodi sa kontrolisanim otpuštanjem je jedinjenje formule (Ia)
pri čemu
-D ima sekvencu SEQ ID NO:51;
-L<1>-L<2>- ima formulu:
pri čemu neoznačena isprekidana linija označava vezivanje amidnom vezom za azot od -D, a isprekidana linija označena zvezdicom označava vezu sa -Z; -Z sadrži deo formule (b)
pri čemu
isprekidana linija označava vezu sa -L<2>- ili do ostatka -Z; i
m i p su nezavisno jedan od drugog celi broj u rasponu od i uključujući 400 do 500; i h je 1.
[0121] Podrazumeva se da su jedinjenja formule (la) PTH prolekovi, tačnije PTH prolekovi rastvorljivi u vodi.
[0122] -D ima sekvencu SEQ ID NO:51.
[0123] Deo -L<1>- je ili konjugovan sa funkcionalnom grupom bočnog lanca aminokiselinskog ostatka -D ili sa N-terminalnom amin funkcionalnom grupom -D.
[0124] Poželjno, aminokiselinski ostatak -D za koji je konjugovan -L<1>- sadrži primarnu ili sekundarnu amin funkcionalnu grupu. Najpoželjnije aminokiselinski ostatak -D za koji je konjugovan -L<1>- sadrži primarnu amin funkcionalnu grupu.
[0125] U određenim primerima izvođenja -L<1>- je konjugovan sa funkcionalnom grupom bočnog lanca aminokiselinskog ostatka -D. Poželjno je da se navedena aminokiselina bira iz grupe koju čine histidin, lizin, triptofan i arginin. Još poželjnije je da se navedena aminokiselina bira iz grupe koju čine lizin i arginin.
[0126] U jednom primeru izvođenja -L<1>- je konjugovan sa funkcionalnom grupom bočnog lanca histidina -D.
[0127] U sledećem primeru izvođenja -L<1>- je konjugovan sa funkcionalnom grupom bočnog lanca lizina -D.
[0128] U sledećem primeru izvođenja -L<1>- je konjugovan sa funkcionalnom grupom bočnog lanca triptofana -D.
[0129] U sledećem primeru izvođenja -L<1>- je konjugovan sa funkcionalnom grupom bočnog lanca arginina -D.
[0130] U poželjnom primeru izvođenja -L<1>- je konjugovan sa N-terminalnom amin funkcionalnom grupom -D. Deo -L<1>-L<2>- je
pri čemu
neoznačena isprekidana linija ukazuje na vezu sa azotom od -D formiranjem amidne veze; i isprekidana linija označena zvezdicom označava vezu sa -Z.
[0131] PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem ovog pronalaska je formule (Ia) sa x = 1.
[0132] -Z sadrži deo formule (b)
pri čemu
isprekidana linija označava vezu sa -L<2>- ili za ostatak -Z; i
m i p su nezavisno jedan od drugog celi broj u rasponu od i uključujući 400 do 500.
[0133] Poželjno, m i p formule (b) su isti ceo broj.
[0134] Najpoželjnije su m i p formule (b) oko 450.
[0135] Poželjno, -Z je deo formule (b).
[0136] U poželjnom primeru izvođenja PTH jedinjenje u farmaceutskoj kompoziciji ovog pronalaska je formule (IIf-i):
pri čemu
neoznačena isprekidana linija ukazuje na vezu sa azotom -D koji je deo PTH preko formiranja amidne veze; i
isprekidana linija označena zvezdicom označava vezivanje za grupu
pri čemu
m i p su nezavisno ceo broj u rasponu od i uključujući 400 do 500.
[0137] Poželjno, -D je vezan za deo formule (IIf-i) preko N-terminalne amin funkcionalne grupe PTH dela.
[0138] U poželjnom primeru izvođenja, rezidualna aktivnost PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem u obliku PTH proleka je manja od 10%, poželjnije manja od 1%, još poželjnije manja od 0.1%, još poželjnije manje od 0.01%, još poželjnije manje od 0.001% i najpoželjnije manje od 0.0001%.
[0139] Kako se ovde koristi, izraz "rezidualna aktivnost" se odnosi na aktivnost koju pokazuje PTH prolek sa PTH ostatkom vezanim za nosač u odnosu na aktivnost koju pokazuje odgovarajući slobodni PTH. U ovom kontekstu, termin "aktivnost" se odnosi na vezivanje za aktivaciju PTH/PTHrP 1 receptora što rezultuje aktivacijom adenilat ciklaze za stvaranje cAMP, fosfolipaze C za stvaranje intracelularnog kalcijuma ili osteoblastične ekspresije RANKL (koja se vezuje za RANK (receptor aktivator nuklearnog faktora kB) na osteoklaste. Podrazumeva se da merenje preostale aktivnosti PTH proleka iz ovog pronalaska zahteva vreme tokom kojeg će se određena količina PTH osloboditi iz PTH proleka iz ovog pronalaska i da će tako oslobođeni PTH iskriviti rezultate merene za PTH prolek. Stoga je prihvaćena praksa da se testira rezidualna aktivnost proleka sa konjugatom u kome je deo leka, u ovom slučaju PTH, nepovratno, tj. stabilno, vezan za nosač, koji što je više moguće podseća na strukturu PTH proleka za koji se meri rezidualna aktivnost.
[0140] Poželjno, farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem predmetnog pronalaska ima pH u rasponu od i uključujući pH 3 do pH 8. Poželjnije, farmaceutska kompozicija ima pH u rasponu od i uključujući pH 4 do pH 6. Najpoželjnije, farmaceutska kompozicija ima pH u rasponu od i uključujući pH 4 do pH 5.
[0141] U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem iz ovog pronalaska je tečna ili formulacija suspenzije. Podrazumeva se da farmaceutska kompozicija je formulacija suspenzije ako je jedinjenje PTH sa kontrolisanim oslobađanjem iz ovog pronalaska nerastvorljivo u vodi.
[0142] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem iz ovog pronalaska je suva formulacija koja se rekonstituiše pre primene na pacijenta.
[0143] Takva tečna, suspenzija, suva ili rekonstituisana farmaceutska kompozicija sadrži najmanje jedan ekscipijens. Ekscipijensi koji se koriste u parenteralnim formulacijama mogu se kategorisati kao, na primer, sredstva za puferovanje, modifikatori izotoničnosti, konzervansi, stabilizatori, sredstva protiv adsorpcije, sredstva za zaštitu od oksidacije, viskozifikatori/sredstva za povećanje viskoznosti ili druga pomoćna sredstva. Međutim, u nekim slučajevima, jedan ekscipijens može imati dvostruku ili trostruku funkciju. Poželjno, najmanje jedan ekscipijens koji se nalazi u farmaceutskoj kompoziciji ovog pronalaska je izabran iz grupe koja se sastoji od
(i) Puferska sredstva: fiziološki tolerisani puferi za održavanje pH u željenom opsegu, kao što su natrijum fosfat, bikarbonat, sukcinat, histidin, citrat i acetat, sulfat, nitrat, hlorid, piruvat; antacidi kao što je Mg(OH)2ili ZnCO3mogu se takođe koristiti; (ii) Modifikatori izotoničnosti: da se minimizira bol koji može nastati usled oštećenja ćelija usled razlika u osmotskom pritisku u depou za injekcije; glicerin i natrijum hlorid su primeri; efektivne koncentracije se mogu odrediti osmometrijom koristeći pretpostavljenu osmolalnost od 285-315 mOsmol/kg za serum;
(iii) Konzervansi i/ili antimikrobni lekovi: višedozne parenteralne formulacije zahtevaju dodavanje konzervansa u dovoljnoj koncentraciji da se minimizira rizik od inficiranja pacijenata nakon injekcije i uspostavljeni su odgovarajući regulatorni zahtevi; tipični konzervansi uključuju m-krezol, fenol, metilparaben, etilparaben, propilparaben, butilparaben, hlorobutanol, benzil alkohol, fenilmerkurnitrat, timerosol, sorbinsku kiselinu, kalijum sorbat, benzojevu kiselinu, hlorokrezol i benzalkonijum hlorid;
(iv) Stabilizatori: Stabilizacija se postiže jačanjem sila stabilizacije proteina, destabilizacijom denaturisanog stanja, ili direktnim vezivanjem ekscipijenasa za protein; stabilizatori mogu biti aminokiseline kao što su alanin, arginin, asparaginska kiselina, glicin, histidin, lizin, prolin, šećeri kao što su glukoza, saharoza, trehaloza, polioli kao što su glicerol, manitol, sorbitol, soli kao što su kalijum fosfat, natrijumsulfat sredstva kao što je EDTA, heksafosfat, ligandi kao što su joni dvovalentnih metala (cink, kalcijum, itd.), druge soli ili organski molekuli kao što su fenolni derivati; pored toga, mogu se koristiti oligomeri ili polimeri kao što su ciklodekstrini, dekstran, dendrimeri, PEG ili PVP ili protamin ili HSA;
(v) Sredstva protiv adsorpcije: Uglavnom jonski ili nejonski surfaktanti ili drugi proteini ili rastvorljivi polimeri se koriste za oblaganje ili adsorpciju konkurentno na unutrašnjoj površini kontejnera formulacije; npr. poloksamer (Pluronic F-68), PEG dodecil etar (Brij 35), polisorbat 20 i 80, dekstran, polietilen glikol, PEG-polihistidin, BSA i HSA i želatini; odabrana koncentracija i tip ekscipijensa zavise od efekta koji treba izbegavati, ali se tipično formira monosloj surfaktanta na interfejsu neposredno iznad CMC vrednosti;
(vi) Sredstva za zaštitu od oksidacije: antioksidansi kao što su askorbinska kiselina, ektoin, metionin, glutation, monotioglicerol, morin, polietilenimin (PEI), propil galat i vitamin E; mogu se takođe koristiti helatna sredstva kao što su limunska kiselina, EDTA, heksafosfat i tioglikolna kiselina;
(vii) Viskozifikatori ili pojačivači viskoziteta: u slučaju suspenzije usporavaju taloženje čestica u bočici i špricu i koriste se da bi se olakšalo mešanje i resuspenzija čestica i olakšalo ubrizgavanje suspenzije (tj. mala sila na klip šprica); pogodni viskozifikatori ili pojačivači viskoziteta su, na primer, viskozifikatori karbomera kao što su Carbopol
4
940, Carbopol Ultrez 10, derivati celuloze kao što su hidroksipropilmetilceluloza (hipromeloza, HPMC) ili dietilaminoetil celuloza (DEAE ili DEAE-C), koloidni magnezijum silikat (Veegum) ili natrijum silikat, hidroksiapatit gel, trikalcijum fosfat gel, ksantani, karagenani kao što je Satia guma UTC 30, alifatične poli(hidroksi kiseline), kao što su poli(D,L- ili L-mlečna kiselina) (PLA) i poli(glikolna kiselina) (PGA) i njihove kopolimeri (PLGA), terpolimeri D,L-laktida, glikolida i kaprolaktona, poloksameri, hidrofilni poli(oksietilenski) blokovi i hidrofobni poli(oksipropilen) blokovi koji čine triblok poli(oksietilen)-poli(oksipropilen)-poli(oksietilena) (npr. Pluronic<®>), kopolimer polietera, kao što je polietilen glikol tereftalat/polibutilen tereftalat kopolimer, saharoza acetat izobutirat (SAIB), dekstran ili njegovi derivati, kombinacije dekstrana i PEG, polidimetilsiloksan, kolagen, hitozan, polivinil alkohol (PVA) i derivati, polialkilimidi, poli (akrilamid-ko-dialildimetil amonijum (DADMA)), polivinilpirolidon (PVP), glikozaminoglikani (GAG) kao što su dermatan sulfat, hondroitin sulfat, keratan sulfat, heparin, heparan sulfat, hijaluronan, ABA triblok ili AB blok kopolimeri sastavljeni od hidrofobnih A-blokova, kao što je polilaktid (PLA) ili poli(laktid-ko-glikolid) (PLGA), i hidrofilnih B-blokova, kao što je polietilen glikol (PEG) ili polivinil pirolidon; takvi blok kopolimeri kao i gorepomenuti poloksameri mogu da ispolje obrnuto ponašanje termičkog geliranja (tečno stanje na sobnoj temperaturi da bi se olakšala primena i stanje gela iznad prelazne temperature sol-gel na telesnoj temperaturi posle injekcije);
(viii) Sredstvo za širenje ili difuziju: modifikuje permeabilnost vezivnog tkiva kroz hidrolizu komponenti ekstracelularnog matriksa u intrasticijalnom prostoru kao što je hijaluronska kiselina, polisaharid koji se nalazi u međućelijskom prostoru vezivnog tkiva; sredstvo za širenje kao što je hijaluronidaza privremeno smanjuje viskozitet ekstracelularnog matriksa i promoviše difuziju ubrizganih lekova; i
(ix) Druga pomoćna sredstva: kao što su sredstva za vlaženje, modifikatori viskoziteta, antibiotici, hijaluronidaza; kiseline i baze kao što su hlorovodonična kiselina i natrijum hidroksid su pomoćna sredstva neophodna za podešavanje pH tokom proizvodnje.
[0144] Poželjno, farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje se primenjuje na pacijenta subkutanom primenom, poželjno subkutanom injekcijom.
[0145] Poželjno, pacijent koji se leči od hipoparatiroidizma prema ovom pronalasku je pacijent sisar, poželjno čovek.
Primeri
Materijali i metode
[0146] PTH(1-34) zaštićen bočnim lancem (SEQ ID NO:51) na TCP smoli koji ima Boc zaštićen N-terminus i ivDde zaštićen bočni lanac Lys26 (sintetisan Fmoc-strategijom) dobijen je od dobavljača za prilagođenu sintezu peptida.
[0147] PTH(1-34) zaštićen bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom (sintetisan Fmoc-strategijom) dobijen je od dobavljača za prilagođenu sintezu peptida.
[0148] PEG 2x20 kDa maleimid, Sunbright GL2-400MA je kupljen od NOF Europe N.V., Grobbendonk, Belgija. S-tritil-6-merkaptoheksanska kiselina je kupljena od Polipeptide, Strazbur, Francuska. HATU je dobijen od Merck Biosciences GmbH, Schvalbach/Ts, Nemačka. Fmoc-N-Me-Asp(OBn)-OH je dobijen od Peptide International Inc., Louisville, KY, SAD. Fmoc-Aib-OH je kupljen od Iris Biotech GmbH, Marktredvitz, Nemačka. Sve ostale hemikalije i reagensi su kupljeni od Sigma Aldrich GmbH, Taufkirchen, Nemačka, osim ako nije pomenut drugi dobavljač.
[0149] Jedinjenje 11a (primeri 11-15) je sintetizovano po postupku opisanom u patentu WO29095479A2, primer 1.
[0150] Špricevi opremljeni polietilenskim fritom (MultySinTech GmbH, Witten, Nemačka) korišćeni su kao reakcioni sudovi ili za korake ispiranja peptidnih smola.
[0151] Opšti postupak za uklanjanje ivDde zaštitne grupe sa PTH zaštićenog bočnim lancem na smoli: Smola je prethodno nabubrena u DMF tokom 30 minuta i rastvarač je odbačen. ivDde grupa je uklonjena inkubacijom smole sa DMF/hidrazin hidratom 4/1 (zapr/zapr, 2.5 mL/g smole) tokom 8 x 15 min. Za svaki korak je korišćen svež rastvor DMF/hidrazin hidrata. Na kraju, smola je isprana sa DMF (10 x), DCM (10 x) i osušena in vacuo.
[0152] Opšti postupak za uklanjanje Fmoc zaštitne grupe iz zaštićenog PTH na smoli: Smola je prethodno nabubrena u DMF tokom 30 minuta i rastvarač je odbačen. Fmoc grupa je uklonjena inkubacijom smole sa DMF/piperidin/DBU 96/2/2 (zapr/zapr/zapr, 2.5 mL/g smole) tokom 3 x 10 min. Za svaki korak korišćen je svež rastvor DMF/piperidin/DBU. Na kraju, smola je isprana sa DMF (10 x), DCM (10 x) i osušena in vacuo.
RP-HPLC prečišćavanje:
[0153] Za preparativnu RP-HPLC korišćen je Waters 600 kontroler i 2487 Dual Absorbance Detector, opremljen sledećim kolonama: Waters XBridge<™>BEH300 Prep C185 µm, 150 x 10 mm, brzina protoka 6 mL/min, ili Waters XBridge<™>BEH300 Prep C1810 µm, 150 x 30 mm, brzina protoka 40 mL/min. Korišćeni su linearni gradijenti sistema rastvarača A (voda koja sadrži 0.1 % TFA zapr/zapr) i sistema rastvarača B (acetonitril koji sadrži 0.1 % TFA zapr/zapr). HPLC frakcije koje sadrže proizvod su sakupljene i liofilizovane ako nije drugačije navedeno.
Flash hromatografija:
[0154] Prečišćavanja fleš hromatografijom izvedena su na sistemu Isolera One kompanije Biotage AB, Švedska, korišćenjem Biotage KP-Sil kertridža od silicijum dioksida i n-heptana i etil acetata kao eluenta. Proizvodi su detektovani na 254 nm.
[0155] Jonoizmenjivačka hromatografija:
[0156] Jonoizmenjivačka hromatografija (IEX) je izvedena korišćenjem Amersham Bioscience AEKTAbasic sistema opremljenog MacroCap SP kolonom katjona (Amersham Bioscience/GE Healthcare). Kao mobilne faze korišćeni su 17 mM sirćetne kiseline pH 4.5 (rastvarač A) i 17 mM sirćetne kiseline, 1 M NaCl, pH 4.5 (rastvarač B).
Ekskluziona hromatografija:
[0157] Ekskluziona hromatografija (SEC) je izvedena korišćenjem Amersham Bioscience AEKTAbasic sistema opremljenog HiPrep 26/10 kolonama za odsoljavanje (Amersham Bioscience/GE Healthcare). Kao mobilna faza korišćena je 0.1 % (zapr/zapr) sirćetna kiselina.
Analitičke metode
[0158] Analitički ultra-performansni LC (UPLC)-MS je izveden na Waters Aquity sistemu opremljenom Waters BEH300 C18 kolonom (2.1 × 50 mm, veličina čestica 1.7 µm, protok: 0.25 mL/min; rastvarač A: voda koja sadrži 0.04% TFA (zapr/zapr), rastvarač B: acetonitril koji sadrži 0.05% TFA (zapr/zapr)) spojen sa LTK Orbitrap Discovery masenim spektrometrom kompanije Thermo Scientific ili povezan sa Waters Micromass ZQ.
Primer 1 - nije prema pronalasku
4
Sinteza linker reagensa 1f
[0159] Linker reagens 1f je sintetisan prema sledećoj šemi:
[0160] U rastvor N-metil-N-Boc-etilendiamina (2 g, 11.48 mmol) i NaCNBH3(819 mg, 12.63 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je 2,4,6-trimetoksibenzaldehid (2.08 g, 10.61 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 min, zakiseljena sa 3 M HCl (4 mL) i mešana još 15 min. Reakciona smeša je dodata u zasićeni NaHCO3rastvor (200 mL) i ekstrahovana 5 x sa DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4a rastvarači su upareni in vacuo. Dobijeni N-metil-N-Boc-N'-Tmob-etilendiamin 1a je osušen u visokom vakuumu i upotrebljen u sledećem koraku reakcije bez daljeg prečišćavanja.
Prinos: 3.76 g (11.48 mmol, 89 % čistoće, 1a: dvostruki Tmob zaštićeni proizvod = 8:1) MS: m/z 355.22 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 354.21).
[0161] U rastvor 1a (2 g, 5.65 mmol) u DCM (24 mL), dodati su COMU (4.84 g, 11.3 mmol), N-Fmoc-N-Me-Asp(OBn)-OH (2.08 g, 4.52 mmol) i 2,4,6-kolidin (2.65 mL, 20.34 mmol). Reakciona smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi, razblažena sa DCM (250 mL) i isprana 3 x sa 0.1 M H2SO4(100 mL) i 3 x sa fiziološkim rastvorom (100 mL). Vodene faze su ponovo ekstrahovane sa DCM (100 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i ostatak je koncentrovan do zapremine od 24 mL. 1b je prečišćen korišćenjem fleš hromatografije.
Prinos: 5.31 g (148 %, 6.66 mmol)
MS: m/z 796.38 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 795.37).
[0162] Rastvoru 1b (5.31 g, max 4.52 mmol ref. u N-Fmoc-N-Me-Asp(OBn)-OH) u THF (60 mL), dodat je DBU (1.8 mL, 3 % zapr/zapr). Rastvor je mešan 12 minuta na sobnoj temperaturi, razblažen sa DCM (400 mL) i ispran 3 x sa 0.1 M H2SO4(150 mL) i 3 x sa slanim rastvorom (150 mL). Vodene faze su ponovo ekstrahovane sa DCM (100 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4i filtrirane.1c je izolovan nakon isparavanja rastvarača i korišćen u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.
MS: m/z 574.31 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 573.30).
[0163] 1c (5.31 g, 4.52 mmol, sirov) rastvoren je u acetonitrilu (26 mL) i dodati su COMU (3.87 g, 9.04 mmol), 6-tritilmerkaptoheksanska kiselina (2.12 g, 5.42 mmol) i 2,4,6-kolidin (2.35 ML, 18.08 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi, razblažena sa DCM (400 mL) i isprana 3 x sa 0.1 M H2SO4(100 mL) i 3 x sa fiziološkim rastvorom (100 mL). Vodene faze su ponovo ekstrahovane sa DCM (100 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtrirane i 1d je izolovan nakon isparavanja rastvarača. Proizvod 1d je prečišćen korišćenjem fleš hromatografije.
Prinos: 2.63 g (62 %, 94 % čistoće)
MS: m/z 856.41 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 855.41).
4
[0164] Rastvoru 1d (2.63 g, 2.78 mmol) u i-PrOH (33 mL) i H2O (11 mL) je dodat LiOH (267 mg, 11.12 mmol) i reakciona smeša je mešana 70 min na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa DCM (200 mL) i isprana 3 x sa 0.1 M H2SO4(50 mL) i 3 x sa slanim rastvorom (50 mL). Vodene faze su ponovo ekstrahovane sa DCM (100 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, filtriran i 1e je izolovan nakon isparavanja rastvarača.1e je prečišćen korišćenjem fleš hromatografije.
Prinos: 2.1 g (88%)
MS: m/z 878.4 = [M+Na]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 837.40).
[0165] Rastvoru 1e (170 mg, 0.198 mmol) u anhidrovanom DCM (4 mL) je dodat DCC (123 mg, 0.59 mmol) i katalitička količina DMAP. Posle 5 min, dodat je N-hidroksi-sukcinimid (114 mg, 0.99 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je filtrirana, rastvarač je uklonjen in vacuo a ostatak je stavljen u 90% acetonitril plus 0.1% TFA (3.4 mL). Sirova smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su neutralizovane sa 0.5 M pH 7.4 fosfatnog pufera i koncentrovane. Preostala vodena faza je ekstrahovana sa DCM i 1f je izolovan nakon isparavanja rastvarača.
Prinos: 154 mg (81%)
MS: m/z 953.4 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 952.43)
Primer 2
Sinteza linker reagensa 2g
[0166]
4
[0167] 4-metoksitrifenilmetil hlorid (3.00 g, 9.71 mmol) je rastvoren u DCM (20 mL) i dodat je u kapima uz mešanje u rastvor etilendiamina 2a (6.5 mL, 97.3 mmol) u DCM (20 mL). Reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi, nakon čega je razblažena dietil etrom (300 mL), isprana 3 x fiziološkim rastvorom/0.1 M NaOH 30/1 (zapr/zapr) i jednom fiziološkim rastvorom. Organska faza je osušena preko Na2SO4i 2b je izolovan nakon isparavanja rastvarača.
4
Prinos: 3.18 g (98%)
[0168] Mmt zaštićeni intermedijer 2b (3.18 g, 9.56 mmol) je rastvoren u DCM (30 mL). Dodati su 6-(tritiltio)-heksanska kiselina (4.48 g, 11.5 mmol), PyBOP (5.67 g, 10.9 mmol) i DIPEA (5.0 mL, 28.6 mmol) i smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Rastvor je razblažen dietil etrom (250 mL), ispran 3 x rastvorom soli/0.1 M NaOH 30/1 (zapr/zapr) i jednom fiziološkim rastvorom. Organska faza je osušena preko Na2SO4i rastvarač je uklonjen in vacuo.
2c je prečišćen korišćenjem fleš hromatografije.
Prinos: 5.69 g (85 %)
MS: m/z 705.4 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 704.34).
[0169] Jedinjenje 2c (3.19 g, 4.53 mmol) rastvoreno je u bezvodnom THF (50 mL), dodat je 1 M BH3·THF rastvor u THF (8.5 mL, 8.5 mmol) i smeša je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Dodato je još 1 M BH3·THF rastvora u THF (14 mL, 14.0 mmol) i smeša je mešana još 16 h na sobnoj temperaturi. Dodati su metanol (8.5 mL) i N,N'-dimetil-etilendiamin (3.00 mL, 27.9 mmol) i smeša je zagrevana pod refluksom 3 h. Smeša je ostavljena da se ohladi i dodat je etil acetat (300 mL). Rastvor je ispran 2 x sa vodenim rastvorom Na2CO3i 2 x sa vodenim rastvorom NaHCO3. Organska faza je osušena preko Na2SO4i rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobio 2d.
Prinos: 3.22 g (103 %)
MS: m/z 691.4 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 690.36).
[0170] Di-terc-butil dikarbonat (2.32 g, 10.6 mmol) i DIPEA (3.09 mL, 17.7 mmol) rastvoreni su u DCM (5 mL) i dodati u rastvor 2d (2.45 g, 3.55 mmol) u DCM (5 mL). Smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Rastvor je koncentrovan in vacuo i prečišćen fleš hromatografijom da bi se dobio proizvod 2e.
Prinos: 2.09 g (74 %)
MS: m/z 791.4 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 790.42).
4
[0171] Jedinjenje 2e (5.01 g, 6.34 mmol) je rastvoreno u acetonitrilu (80 mL). Dodat je 0.4 M vodeni rastvor HCl (80 mL), a zatim acetonitril (20 mL) i smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. pH je podešen na pH 5.5 dodavanjem 5 M vodenog rastvora NaOH. Organski rastvarač je uklonjen in vacuo i preostali vodeni rastvor je ekstrahovan 4 x sa DCM. Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4i rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobio proizvod 2f.
Prinos: 4.77 g (95 %)
MS: m/z 519.3 = [M+H]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 518.30).
[0172] Jedinjenje 2f (5.27 g, 6.65 mmol) je rastvoreno u DCM (30 mL) i dodat u rastvor pnitrofenil hloroformijata (2.01 g, 9.98 mmol) u DCM (25 mL). Dodat je 2,4,6-trimetilpiridin (4.38 mL, 33.3 mmol) i rastvor je mešan 45 min na sobnoj temperaturi. Rastvor je koncentrovan in vacuo i prečišćen fleš hromatografijom da bi se dobio proizvod 2g.
Prinos: 4.04 g (89 %)
MS: m/z 706.32 = [M+Na]<+>, (izračunata monoizotopska masa = 683.30).
Primer 3 - nije prema pronalasku
Sinteza trajnog S1 PTH(1-34) konjugata 3
[0173]
[0174] PTH(1-34) zaštićen sa bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom je deprotektovan sa Fmoc prema proceduri datoj u Materijalima i metodama. Rastvor 6-tritilmerkaptoheksanske kiseline (62.5 mg, 160 µmol), PyBOP (80.1 mg, 154 µmol) i DIPEA (53 µL, 306 µmol) u DMF (2 mL) dodat je u 0.21g (51 µl) smole. Suspenzija je mešana 80 min na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena in vacuo. Cepanje
4
peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 10 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi 3 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 36 mg (14 %), 3*8 TFA
MS: m/z 1062.31 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>= 1062.30).
Primer 4
Sinteza trajnog K26 PTH(1-34) konjugata 4 - nije prema pronalasku
[0175]
[0176] Zaštićen bočni lanac PTH(1-34) na TCP smoli koja ima Boc zaštićen N-terminus i ivDde zaštićen bočni lanac Lys26 je ivDde deprotektovan u skladu sa procedurom datom u Materijalima i metodama. Rastvor 6-tritilmerkaptoheksanske kiseline (107 mg, 273 µmol), PyBOP (141 mg, 273 µmol) i DIPEA (95 µL, 545 µmol) u DMF (3 mL) je dodat u 0.80 µl (90.9 µmol) smole. Suspenzija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena in vacuo. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 6 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 4 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 40 mg (8 %), 4*8 TFA
MS: m/z 1062.30 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>=
1062.30).
Primer 5
Sinteza prolaznog S1 PTH(1-34) konjugata
[0177]
[0178] PTH(1-34) zaštićen sa bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom je deprotektovan sa Fmoc prema proceduri datoj u Materijalima i metodama. Rastvor Fmoc-Aib-OH (79 mg, 244 µmol), PyBOP (127 mg, 244 µmol) i DIPEA (64 µL, 365 µmol) u DMF (1.5 mL) je dodat u 0.60 g (61 µmol) smole. Suspenzija je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF i deprotektovana sa Fmoc kao što je prethodno opisano. Smoli je dodat rastvor 2g (167 mg, 244 µmol) i DIPEA (64 µL, 365 µmol) u DMF (1.5 mL). Suspenzija je mešana 24 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena in vacuo. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 7 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 5 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 78 mg (24 %), 5*9 TFA
MS: m/z 1101.59 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>= 1101.57).
Primer 6
Sinteza prolaznog S1 PTH(1-34) konjugata 6 - nije prema pronalasku
[0179]
1
[0180] PTH(1-34) zaštićen sa bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom je deprotektovan sa Fmoc prema proceduri datoj u Materijalima i metodama. Rastvor Fmoc-Ala-OH (32 mg, 102 µmol), PyBOP (53 mg, 102 µmol) i DIPEA (27 µL, 152 µmol) u DMF (3 mL) je dodat u 0.25 g (25 µmol) smole. Suspenzija je mućkana 1 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena pod vakuumom. Fmoc-deprotekcija je izvedena kao što je prethodno opisano. Rastvor 2g (69 mg, 102 µmol) i DIPEA (27 µL, 152 µmol) u DMF (3 mL) su dodati smoli. Suspenzija je mešana 1.5 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena in vacuo. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 3 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 6 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 25 mg (18 %), 6*9 TFA
MS: m/z 1098.75 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>= 1098.07).
Primer 7
Sinteza prolaznog S1 PTH(1-34) konjugata 7 - nije prema pronalasku
[0181]
[0182] PTH(1-34) zaštićen sa bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom je deprotektovan sa Fmoc prema proceduri datoj u Materijalima i metodama. Rastvor Fmoc-Ser(Trt)-OH (117 mg, 205 µmol), PyBOP (108 mg, 207 µmol) i DIPEA (53 µL, 305 µmol) u
2
DMF (2 mL) je dodat u 0.50 g (51 µmol) smole. Suspenzija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena pod vakuumom. Fmoc-deprotekcija je izvedena kao što je prethodno opisano. Rastvor 2g (144 mg, 211 µmol) i DIPEA (53 µL, 305 µmol) u DMF (1.8 mL) je dodat smoli. Suspenzija je mućkana 7 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena in vacuo. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 6 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 7 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/voda i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 54 mg (20 %), 7*9 TFA
MS: m/z 1102.08 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>= 1102.07).
Primer 8
Sinteza prolaznog S1 PTH(1-34) konjugata 8 - nije prema pronalasku
[0183]
[0184] PTH(1-34) zaštićen sa bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom je deprotektovan sa Fmoc prema proceduri datoj u Materijalima i metodama. Rastvor Fmoc-Leu-OH (36 mg, 102 µmol), PyBOP (53 mg, 102 µmol) i DIPEA (27 µL, 152 µmol) u DMF (3 mL) je dodat u 0.25 g (25 µmol) smole. Suspenzija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena pod vakuumom. Fmoc-deprotekcija je izvedena kao što je prethodno opisano. Rastvor 2g (69 mg, 102 µmol) i DIPEA (27 µL, 152 µmol) u DMF (3 mL) su dodati smoli. Suspenzija je mešana 1.5 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena in vacuo. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 3 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 8 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 31 mg (22 %), 8*9 TFA
MS: m/z 1109.32 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>= 1108.58).
Primer 9
Sinteza prolaznog S1 PTH(1-34) konjugata 9 - nije prema pronalasku
[0185]
[0186] PTH(1-34) zaštićen sa bočnim lancem na TCP smoli sa Fmoc zaštićenim N-terminusom je deprotektovan sa Fmoc prema proceduri datoj u Materijalima i metodama. Rastvor 1e (182 mg, 213 µmol), PyBOP (111 mg, 213 µmol) i DIPEA (93 µL, 532 µmol) u DMF (5 mL) su dodati u 2.00 g (107 µmol) smole. Suspenzija je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena pod vakuumom. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 20 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mešanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 9 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 47 mg (8 %), 9*9 TFA
4
MS: m/z 1108.58 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>=
1108.57).
Primer 10
Sinteza prolaznog K26 PTH(1-34) konjugata 10 - nije prema pronalasku
[0187]
[0188] Zaštićen bočni lanac PTH(1-34) na TCP smoli koja ima Boc zaštićen N-terminus i ivDde zaštićen bočni lanac Lys26 je ivDde deprotektovan u skladu sa procedurom datom u Materijalima i metodama. Rastvor 1f (867 mg, 910 µmol) i DIPEA (0.24 mL, 1.36 mmol) u DMF (5 mL) su dodati u 1.91 g (227 µmol) smole. Suspenzija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Smola je isprana 10 x sa DMF, 10 x sa DCM i osušena pod vakuumom. Cepanje peptida od smole i uklanjanje zaštitnih grupa postignuto je dodavanjem 20 mL koktela za cepanje 100/3/3/2/1 (zapr/zapr/zapr/zapr/zapr) TFA/DTT/TES/voda/tioanizol i mućkanjem suspenzije 1 h na sobnoj temperaturi. Sirov 10 je istaložen u prethodno ohlađenom dietil etru (-18 °C). Precipitat je rastvoren u ACN/vodi i prečišćen pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem.
Prinos: 92 mg (7 %), 10*9 TFA
MS: m/z 1108.58 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>=
1108.57).
Primer 11
Sinteza prolaznog S1 PEG konjugata 11b niske molekulske težine - nije prema pronalasku
[0190] 0.15 mL 0.5 M NaH2PO4pufera (pH 7.4) je dodato u 0.5 mL 20 mg/mL rastvora tiola 5 (10 mg, 1.84 µmol) u 1/1 (zapr/zapr) acetonitril/voda koja sadrži 0.1 % TFA (zapr/zapr). Rastvor je inkubiran na sobnoj temperaturi 10 minuta nakon čega je dodato 238 µL 10 mg/mL rastvora maleimida 11a (2.4 mg, 2.21 µmol) u 1/1 (zapr/zapr) acetonitril/voda koja sadrži 0.1 % TFA (zapr/zapr). Rastvor je inkubiran 20 min na sobnoj temperaturi. Dodato je 10 µL TFA i smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC. Frakcije proizvoda su osušene zamrzavanjem da bi se dobilo 11b.
Prinos: 3.1 mg (26 %), 11b*9 TFA
MS: m/z 1097.00 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+5H]<5+>= 1096.99).
Primer 12
Sinteza prolaznog S1 PEG konjugata 12 niske molekulske težine - nije prema pronalasku
[0191]
[0192] Konjugat 12 je sintetisan kako je opisano za 11b korišćenjem tiola 6 (10 mg, 1.85 µmol) i maleimida 11a (2.4 mg, 2.21 µmol).
Prinos: 10 mg (83 %), 12*9 TFA
MS: m/z 1094.20 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>=
1094.19).
Primer 13
Sinteza prolaznog S1 PEG konjugata 13 niske molekulske težine - nije prema pronalasku
[0193]
[0194] Konjugat 13 je sintetisan kako je opisano za 11b korišćenjem tiola 7 (10 mg, 1.84 µmol) i maleimida 11a (2.4 mg, 2.21 µmol).
Prinos: 8 mg (67 %), 13*9 TFA
MS: m/z 1097.40 = [M+5H]<5+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+5H]<5+>=
1097.39).
Primer 14
Sinteza prolaznog S1 PEG konjugata 14 niske molekulske težine - nije prema pronalasku
[0195]
[0196] Konjugat 14 je sintetisan kako je opisano za 11b korišćenjem tiola 8 (10 mg, 1.83 µmol) i maleimida 11a (2.4 mg, 2.21 µmol).
Prinos: 4 mg (33 %), 14*9 TFA
MS: m/z 1378.01 = [M+4H]<4+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+4H]<4+>=
1378.00).
Primer 15
Sinteza prolaznog K26 PEG konjugata 15 niske molekulske težine - nije prema pronalasku
[0197]
[0198] Konjugat 15 je sintetisan kako je opisano za 11b korišćenjem tiola 10 (5.2 mg, 0.95 µmol) i maleimid 11a (1.23 mg, 1.14 µmol).
Prinos: 2.1 mg (33 %), 15*9 TFA
MS: m/z 1102.60 = [M+5H]<5+>, (izračunata monoizotopska masa za [M+5H]<5+>= 1102.59).
Primer 16
Sinteza trajnog 2x20 kDa S1 PEG konjugata 16 - nije prema pronalasku
[0199]
[0200] 772 µL rastvora koji sadrži tiol 3 (19.4 mg/mL, 15 mg, 3.54 µmol) i 2.5 mg/mL Boc-L-Met u 1/1 (zapr/zapr) acetonitril/voda koja sadrži 0.1 % TFA (zapr/zapr) dodato je u 1.87 mL rastvora koji sadrži PEG 2x20 kDa maleimida (Sunbright GL2-400MA, 187 mg, 4.32 µmol) i 2.5 mg/mL Boc-L-Met u vodi koja sadrži 0.1 % TFA (zapr/zapr).0.5 M NaH2PO4dodat je pufer (0.66 mL, pH 7.0) i smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Dodato je 10 µL 270 mg/mL rastvora 2-merkaptoetanola u vodi. Smeša je mešana 5 min na sobnoj temperaturi i dodato je 0.33 mL 1 M HCl. Konjugat 16 je prečišćen pomoću IEX praćenog RP-HPLC koristeći linearni gradijent sistema rastvarača A (voda koja sadrži 0.1 % AcOH zapr/zapr) i sistema rastvarača B (acetonitril koji sadrži 0.1 % AcOH zapr/zapr). Proizvod koji sadrži frakcije je osušen zamrzavanjem.
Prinos: 97 mg (2.01 µmol, 57 %) konjugata 16*8 AcOH
Primer 17
Sinteza trajnog 2x20 kDa K26 PEG konjugata 17 - nije prema pronalasku
[0201]
[0202] Konjugat 17 je pripremljen kako je opisano za 16 reakcijom tiola 4 (15 mg, 3.53 µmol) i PEG 2x20 kDa maleimida (Sunbright GL2-400MA, 187 mg, 4.32 µmol).
Prinos: 80 mg (1.79 µmol, 51 %) konjugata 17*8 AcOH
Primer 18
Sinteza prolaznog 2x20 kDa S1 PEG konjugata 18
[0203]
[0204] Konjugat 18 je pripremljen kako je opisano za 16 reakcijom tiola 5 (37 mg, 8.40 µmol) i PEG 2x20 kDa maleimida (Sunbright GL2-400MA, 445 mg, 9.24 µmol). Reakcija je ugašena dodavanjem 50 µL TFA bez prethodnog dodavanja 2-merkaptoetanola. Konjugat 18 je prečišćen sa IEX, a zatim SEC za odsoljavanje. Proizvod koji sadrži frakcije je osušen zamrzavanjem.
Prinos: 161 mg (3.33 µmol, 40 %) konjugata 18*9 AcOH
Primer 19
Sinteza prolaznog 2x20 kDa S1 PEG konjugata 19 - nije prema pronalasku
[0205]
[0206] Konjugat 19 je pripremljen kako je opisano za 16 reakcijom tiola 7 (27 mg, 6.14 µmol) i PEG 2x20 kDa maleimida (Sunbright GL2-400MA, 325 mg, 7.50 µmol).
Prinos: 249 mg (5.16 µmol, 84 %) konjugata 19*9 AcOH
Primer 20
Sinteza prolaznog 2x20 kDa S1 PEG konjugata 20 - nije prema pronalasku
[0207]
[0208] Konjugat 20 je pripremljen kako je opisano za 16 reakcijom tiola 9 (38 mg, 8.59 µmol) i PEG 2x20 kDa maleimida (Sunbright GL2-400MA, 455 mg, 9.45 µmol). Reakcija je ugašena dodavanjem 50 µL TFA bez prethodnog dodavanja 2-merkaptoetanola. Konjugat 20 je prečišćen sa IEX, a zatim SEC za odsoljavanje. Proizvod koji sadrži frakcije je osušen zamrzavanjem.
1
Prinos: 194 mg (4.01 µmol, 47 %) konjugata 20*9 AcOH
Primer 21
Sinteza prolaznog 2x20 kDa K26 PEG konjugata 21 - nije prema pronalasku
[0209]
[0210] Konjugat 21 je pripremljen kako je opisano za 16 reakcijom tiola 10 (34 mg, 7.58 µmol) i PEG 2x20 kDa maleimida (Sunbright GL2-400MA, 401 mg, 9.26 µmol).
Prinos: 256 mg (5.30 µmol, 70 %) konjugata 21*9 AcOH
Primer 22
Studija nalaženja opsega doze - Studija prilagođavanja doze kod makaki majmuna sa dnevnim subkutanim injekcijama sa TransCon PTH
[0211] Postupak: Ova studija je sprovedena da bi se testirala hipoteza o prilagođavanju doze sa TransCon PTH u koracima od 25% kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju. Studija je sprovedena na mužjacima i ženkama makaki majmuna. Četiri grupe sa jednim mužjakom i jednom ženkom u svakoj dozirane su četiri nedelje počevši od doza od 0.2, 0.5, 1.0 i 2.0 µg/kg/dan, respektivno. Nivoi kalcijuma u serumu (sCa) kod životinja su mereni pre doze i posle doze 6, 1, 3, 7, 8, 12, 14, 16, 19, 23, 26, 28 i 29 dana.
[0212] Rezultati: Dnevna subkutana primena TransCon PTH u dozama od 0.2, 0.5 i 1.0 µg/kg/dan tokom 28 dana se dobro podnosila i bila je povezana sa očekivanim sporadičnim
2
blagim povećanjem nivoa sCa (od 1.05x do 1.12x u poređenju sa nivoima pre studije ). Trećeg dana za mužjaka i ženku dozirane sa 2.0 µg/kg/dan sCa je porastao na nivoe teške hiperkalcemije (do 1.42x i 1.34x, respektivno, u poređenju sa nivoima pre studije). Doziranje je prekinuto kod ove dve životinje nakon čega je usledio odmor od doziranja. Dana 23. doziranje je nastavljeno na 1.5 µg/kg/dan (25% smanjenje doze) tokom jedne nedelje. Dana 23 (prvi dan doziranja nakon odmora za doziranje), zabeleženo je povećanje kalcijuma u svim vremenskim tačkama za mužjake (od 1.05 x do 1.12 x od nivoa pre studije) sa vršnom koncentracijom postignutom 4 sata posle doze. Dana 26. zabeležena su povećanja kod mužjaka i ženki (do 1.17 x od nivoa pre studije). Dana 29, povećanje kalcijuma je i dalje bilo prisutno kod oba pola.
[0213] Zaključak: Doza PTH jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem koja se daje subkutano mužjacima i ženkama makaki majmuna uspešno je prilagođena (smanjena) u porastu od 25% kao odgovor na hiperkalcemiju. Nivo sCa je bio niži kod životinja nakon doziranja sa 25% smanjenom dozom u poređenju sa doziranjem sa originalnom višom dozom.
Skraćenice:
[0214]
ACN acetonitril
AcOH sirćetna kiselina
Aib 2-aminoizobuterna kiselina
BMD mineralna gustina kostiju
Bn benzil
Boc terc-butiloksikarbonil
COMU (1-cijano-2-etoksi-2-oksoetilidenaminooksi)dimetilamino-morfolinokarbenijum heksafluorofosfat
cAMP ciklični adenozin monofosfat
d dan
DBU 1,3-diazabiciklo[5.4.0]undecen
DCC N,N'-dicikloheksilkarbodiimid
DCM dihlorometan
DIPEA N,N-diizopropiletilamin
DMAP dimetilamino-piridin
DMF N,N-dimetilformamid
DMSO dimetilsulfoksid
DTT ditiotreitol
EDTA etilendiamintetrasirćetna kiselina
eq stehiometrijski ekvivalent
ESI-MS elektrosprej jonizaciona masena spektrometrija
Et etil
Fmoc 9-fluorenilmetiloksikarbonil
Glu-C endoproteinaza Glu-C
h sat
HATU O-(7-azabenzotri azol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat HP hipoparatiroidizam
HPLC tečna hromatografija visokih performansi
ivDde 4,4-dimetil-2,6-dioksocikloheks-1-iliden)-3-metilbutil
LC tečna hromatografija
LTQ linearni trap kvadrupol
Lis-C endoproteinaza Lys-C
LLOQ donja granica kvantifikacije
Mal 3-maleimido propil
Me metil
MeOH metanol
min minut
Mmt monometoksitritil
MS maseni spektar / masena spektrometrija
m/z odnos mase i punjenja
OtBu terc-butiloksi
PEG poli(etilen glikol)
pH potentia Hydrogenii
PK farmakokinetika
Pr propil
PTH paratiroidni hormon
PyBOP benzotriazol-1-il-oksitripirolidinofosfonijum heksafluorofosfat
Q-TOF kvadrupol vreme leta
RP-HPLC tečna hromatografija visokih performansi reverzne faze
rt sobna temperatura
4
sCa kalcijum u serumu
SIM praćenje pojedinačnih jona
SEC ekskluziona hromatografija
sc potkožni
sP serum fosfat
t1/2poluživot
TCP tritilhlorid polistirol
TES trietilsilan
TFA trifluorosirćetna kiselina
THF tetrahidrofuran
Tmob 2,4,6-trimetoksibenzil
TPTx tiroparatiroidektomija
Trt trifenilmetil, tritil
ULOQ gornja granica kvantifikacije
UPLC tečna hromatografija ultra performanse UV ultraljubičasto
ZQ jednostruki kvadrupol

Claims (12)

  1. Patentni zahtevi 1. Farmaceutska kompozicija koja sadrži PTH jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat, za upotrebu u postupku lečenja hipoparatiroidizma, naznačena time da postupak prati režim doziranja u kojem se vrši prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju u koracima od ne više od 25%, i pri čemu jedinjenje PTH sa kontrolisanim oslobađanjem oslobađa najmanje jedan PTH molekul sa poluživotom oslobađanja od najmanje 12 sati u vodenom puferu, pH 7.4 i 37°C, pri čemu, jedinjenje PTH sa kontrolisanim oslobađanjem je jedinjenje formule (Ia)
    gde -Z sadrži deo formule (b)
    pri čemu isprekidana linija označava vezu sa -L<2>- ili sa ostatkom -Z; i m i p su nezavisno jedan od drugog celi broj u rasponu od i uključujući 400 do 500, i -L<1>-L<2>- ima formulu:
    pri čemu neobeležena isprekidana linija označava vezivanje amidnom vezom za azot od -D, a isprekidana linija označena zvezdicom označava vezu sa -Z, pri čemu -D ima sekvencu SEQ ID NO:51 i x je 1.
  2. 2. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačena time da postupak prati režim doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od ne više od 20%.
  3. 3. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačena time da postupak prati režim doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od ne više od 15%.
  4. 4. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, naznačena time da postupak prati režim doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od ne više od 10%.
  5. 5. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, naznačena time da postupak prati režim doziranja u kome se prilagođavanje doze kao odgovor na hipokalcemiju ili hiperkalcemiju vrši u koracima od 10%.
  6. 6. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, naznačena time da se farmaceutska kompozicija primenjuje na pacijenta ne češće od jednom u 24 sata.
  7. 7. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, naznačena time da se farmaceutska kompozicija primenjuje na pacijenta jednom na svaka 24 sata.
  8. 8. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, naznačena time da se farmaceutska kompozicija primenjuje na pacijenta jednom svakih 48 sati.
  9. 9. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, naznačena time da se farmaceutska kompozicija primenjuje na pacijenta jednom nedeljno.
  10. 10. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, naznačena time da se farmaceutska kompozicija primenjuje na pacijenta subkutano.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10, naznačena time da -Z je deo formule (b).
  12. 12. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 11, naznačena time da -L<1>-L<2>- je vezan amidnom vezom za N-terminalnu amin funkcionalnu grupu od -D. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20250170A 2016-09-29 2017-09-28 Pth jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem RS66518B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP16191453 2016-09-29
EP17781426.6A EP3518982B1 (en) 2016-09-29 2017-09-28 Controlled-release pth compounds
PCT/EP2017/074593 WO2018060311A1 (en) 2016-09-29 2017-09-28 Incremental dose finding in controlled-release pth compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66518B1 true RS66518B1 (sr) 2025-03-31

Family

ID=57042754

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20250170A RS66518B1 (sr) 2016-09-29 2017-09-28 Pth jedinjenja sa kontrolisanim oslobađanjem

Country Status (19)

Country Link
US (1) US12453778B2 (sr)
EP (2) EP3518982B1 (sr)
JP (3) JP7039574B2 (sr)
CN (2) CN109789221B (sr)
AU (3) AU2017336250C1 (sr)
CA (1) CA3037444A1 (sr)
DK (1) DK3518982T3 (sr)
ES (1) ES3012647T3 (sr)
FI (1) FI3518982T3 (sr)
HR (1) HRP20250102T1 (sr)
HU (1) HUE070273T2 (sr)
LT (1) LT3518982T (sr)
MA (1) MA46428B1 (sr)
PL (1) PL3518982T3 (sr)
PT (1) PT3518982T (sr)
RS (1) RS66518B1 (sr)
SI (1) SI3518982T1 (sr)
SM (1) SMT202500059T1 (sr)
WO (1) WO2018060311A1 (sr)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL317744A (en) * 2016-03-01 2025-02-01 Ascendis Pharma Bone Diseases As PTH drug agonists
PL3518961T3 (pl) 2016-09-29 2023-08-14 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Związki pth o niskim stosunku wartości maksymalnej do minimalnej
FI3518982T3 (fi) * 2016-09-29 2025-02-11 Ascendis Pharma Bone Diseases As Säädellysti vapautuvia PTH-yhdisteitä
RS64440B1 (sr) 2016-09-29 2023-09-29 Ascendis Pharma Bone Diseases As Režim doziranja za pth jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem
CN119504973A (zh) * 2018-03-28 2025-02-25 阿森迪斯药物肿瘤股份有限公司 Il-2缀合物
CA3099620A1 (en) * 2018-05-18 2019-11-21 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Starting dose of pth conjugates
US12403182B2 (en) 2019-02-11 2025-09-02 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Liquid pharmaceutical formulations of PTH conjugates
CN115003320A (zh) * 2020-01-13 2022-09-02 阿森迪斯药物骨疾病股份有限公司 甲状旁腺功能减退的治疗
IL298642A (en) 2020-06-03 2023-01-01 Ascendis Pharma Oncology Div A/S il-2 sequences and uses thereof
EP4217004A1 (en) * 2020-09-28 2023-08-02 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Improvement of physical and mental well-being of patients with hypoparathyroidism
CA3251827A1 (en) * 2022-05-11 2023-11-16 Alexion Pharmaceuticals, Inc. ELISA ASSAY FOR BINDING TO A HIGH-SENSITIVITY BIOTINYLED PEPTIDE
EP4593867A2 (en) 2022-09-30 2025-08-06 Extend Biosciences, Inc. Long-acting parathyroid hormone

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5744444A (en) 1989-10-27 1998-04-28 Haemopep Pharma Gmbh HPTH-fragment-(1-37), the preparation thereof, medicaments containing same and the use thereof
US5567439A (en) 1994-06-14 1996-10-22 Fuisz Technologies Ltd. Delivery of controlled-release systems(s)
ZA9811127B (en) 1997-12-09 2000-07-11 Lilly Co Eli Stabilized teriparatide solutions.
US6624142B2 (en) 1997-12-30 2003-09-23 Enzon, Inc. Trimethyl lock based tetrapartate prodrugs
US20050124537A1 (en) 2000-04-27 2005-06-09 Amgen Inc. Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein
EP1477496A4 (en) * 2002-02-01 2006-08-02 Chugai Pharmaceutical Co Ltd PEG-CONJUGATED PTH BZW. PEG-CONJUGATED PTH DERIVATIVE
US6559293B1 (en) 2002-02-15 2003-05-06 Transform Pharmaceuticals, Inc. Topiramate sodium trihydrate
US7122189B2 (en) 2002-08-13 2006-10-17 Enzon, Inc. Releasable polymeric conjugates based on aliphatic biodegradable linkers
AU2002951372A0 (en) * 2002-09-13 2002-09-26 St Vincent's Institute Of Medical Research Parathyroid hormone-like polypeptides
US7332164B2 (en) 2003-03-21 2008-02-19 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Heterobifunctional polymeric bioconjugates
CA2521784C (en) 2003-04-08 2012-03-27 Yeda Research And Development Co. Ltd. Reversible pegylated drugs
US7690003B2 (en) 2003-08-29 2010-03-30 Fuller Jeffrey C System and method for increasing data throughput using thread scheduling
KR101241862B1 (ko) 2003-09-19 2013-03-13 노보 노르디스크 에이/에스 신규 ｇｌｐ-1 유도체
WO2005099768A2 (en) 2004-03-23 2005-10-27 Complex Biosystems Gmbh Polymeric prodrug with a self-immolative linker
CN101151048A (zh) 2004-05-10 2008-03-26 纳斯泰克制药公司 增强甲状旁腺激素粘膜递送的组合物和方法
US7968085B2 (en) 2004-07-05 2011-06-28 Ascendis Pharma A/S Hydrogel formulations
CN1597697A (zh) 2004-07-19 2005-03-23 中国药科大学 一种人的甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg11]]hPTH(1－34)－Pro－Pro
US20060069021A1 (en) 2004-08-13 2006-03-30 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for intranasal administration of inactive analogs of PTH or inactivated preparations of PTH or PTH analogs
WO2006059237A1 (en) 2004-08-30 2006-06-08 Lunamed, Inc. 4-phenylbutyric acid controlled-release formulations for therapeutic use
GB2427360A (en) 2005-06-22 2006-12-27 Complex Biosystems Gmbh Aliphatic prodrug linker
CN1298386C (zh) * 2005-08-31 2007-02-07 上海交通大学 甲状旁腺激素缓释微球的制备方法
US20080176787A1 (en) 2005-09-06 2008-07-24 Paul Morley Parathyroid hormone analogues and methods of use
JP2009508820A (ja) * 2005-09-06 2009-03-05 ゼロス セラピューティクス， インコーポレイテッド 副甲状腺ホルモンアナログおよび使用法
US8450269B2 (en) 2006-02-03 2013-05-28 Prolor Biotech Ltd. Long-acting growth hormone and methods of producing same
CN101466393A (zh) * 2006-03-15 2009-06-24 阿尔扎公司 用于经皮递送甲状旁腺激素药剂以治疗骨质减少的方法
MX2009002859A (es) 2006-09-15 2009-03-30 Enzon Pharmaceuticals Inc Enlazadores biodegradables a base de ester impedido para suministro de oligonucleotidos.
BRPI0719885B8 (pt) 2006-10-13 2021-05-25 Lilly Co Eli peptídeos peguilados como moduladores de receptores de pth, seus usos, e composição.
US8101729B2 (en) 2007-03-19 2012-01-24 Henry Joseph Niemczyk Pegylated amino acid derivatives and the process to synthesize the same
ES2675174T3 (es) 2007-04-09 2018-07-09 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Proteínas de fusión de un dominio de enlazamiento a colágeno y hormona paratiroidea
JP5351889B2 (ja) 2007-06-21 2013-11-27 テクニシェ ユニバーシタット ミュンヘン インビボおよび／またはインビトロ安定性が増大した生物学的に活性なタンパク質
EP2175878A4 (en) 2007-07-11 2014-12-03 Belrose Pharma Inc POLYMER DRUG DISPENSING SYSTEM WITH A MULTIPLE SUBSTITUTED AROMATIC PART
EP2052736A1 (en) 2007-10-26 2009-04-29 Nycomed Danmark ApS Parathyroid hormone formulations und uses thereof
CA2712224C (en) * 2008-02-01 2016-03-08 Ascendis Pharma As Prodrug comprising a drug linker conjugate
HUE054585T2 (hu) * 2008-04-29 2021-09-28 Ascendis Pharma Endocrinology Div A/S Pegilezett rekombináns humán növekedési hormon vegyületek
US20110105413A1 (en) 2008-05-23 2011-05-05 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Polymeric systems containing intracellular releasable disulfide linker for the delivery of oligonucleotides
JP5560266B2 (ja) 2008-06-06 2014-07-23 ダニスコ・ユーエス・インク バシルススブチリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来アルファ‐アミラーゼを用いるデンプンからのグルコースの生産
WO2009156481A1 (en) 2008-06-25 2009-12-30 Ascendis Pharma As Pegylated bnp
WO2010022171A1 (en) * 2008-08-19 2010-02-25 Ferring International Center S.A. Peptidic pth receptor agonists
CN108530543B (zh) 2009-02-03 2023-06-23 阿穆尼克斯制药公司 延伸重组多肽和包含该延伸重组多肽的组合物
EP2411038B1 (en) * 2009-03-27 2016-12-28 Van Andel Research Institute Parathyroid hormone peptides and parathyroid hormone-related protein peptides and methods of use
US20120191039A1 (en) 2009-07-31 2012-07-26 Ascendis Pharma A/S Carrier linked pramipexole prodrugs
RU2554854C9 (ru) 2009-07-31 2017-02-03 Асцендис Фарма Ас Биоразлагаемые нерастворимые в воде гидрогели на основе полиэтиленгликоля
SG178195A1 (en) 2009-07-31 2012-03-29 Sanofi Aventis Deutschland Long acting insulin composition
US9173953B2 (en) 2009-07-31 2015-11-03 Ascendis Pharma As Prodrugs containing an aromatic amine connected by an amido bond to a linker
WO2011012723A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Ascendis Pharma As Injectable sustained release compositions comprising a pramipexole prodrug
SG178193A1 (en) 2009-07-31 2012-03-29 Sanofi Aventis Deutschland Prodrugs comprising an insulin linker conjugate
US20130053405A1 (en) 2009-10-06 2013-02-28 Ulrich Hersel Carrier linked paliperidone prodrugs
CA2783296C (en) 2009-12-15 2019-01-15 Ascendis Pharma As Growth hormone composition
US20120289571A1 (en) 2009-12-31 2012-11-15 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Polymeric conjugates of aromatic amine containing compounds including releasable urea linker
WO2011089216A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Ascendis Pharma As Dipeptide-based prodrug linkers for aliphatic amine-containing drugs
WO2011089215A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Ascendis Pharma As Dipeptide-based prodrug linkers for aromatic amine-containing drugs
WO2011089214A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Ascendis Pharma As Carrier-linked carbamate prodrug linkers
US20110229580A1 (en) 2010-03-22 2011-09-22 Indian Institute of Technology Bombay, School of Biosciences and Bioengineering Compositions and methods for nano-in-micro particles
CN103037902A (zh) * 2010-03-29 2013-04-10 赛特克罗公司 用于降低甲状旁腺水平的方法和组合物
EP4450523A3 (en) 2010-04-02 2025-03-12 Amunix Pharmaceuticals, Inc. Binding fusion proteins, binding fusion protein-drug conjugates, xten-drug conjugates and methods of making and using same
WO2011140392A1 (en) 2010-05-05 2011-11-10 Prolynx Llc Controlled drug release from solid supports
ES2584381T3 (es) 2010-05-05 2016-09-27 Prolynx Llc Liberación controlada de compuestos activos desde conjugados macromoleculares
US9492508B2 (en) 2010-05-13 2016-11-15 The General Hospital Corporation Parathyroid hormone analogs and uses thereof
MX338914B (es) 2010-05-21 2016-05-06 Xl Protein Gmbh Polipeptidos biosinteticos de espira aleatoria de prolina/alanina y sus usos.
US8865220B2 (en) 2010-06-14 2014-10-21 Kaohsiung Medical University Method for controlled release of parathyroid hormone from encapsulated poly(lactic-glycolic)acid microspheres
CN102959585B (zh) 2010-06-30 2016-03-30 日本电气方案创新株式会社 属性确定方法、属性确定装置及属性确定系统
US20120040320A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Nadeau Daniel A Injection Simulation Device and Methods Thereof
EP2438930A1 (en) 2010-09-17 2012-04-11 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Prodrugs comprising an exendin linker conjugate
WO2013024049A1 (en) 2011-08-12 2013-02-21 Ascendis Pharma A/S Protein carrier-linked prodrugs
EP2741778A1 (en) 2011-08-12 2014-06-18 Ascendis Pharma A/S Polymeric hyperbranched carrier-linked prodrugs
CA2843506C (en) 2011-08-12 2020-05-12 Ascendis Pharma A/S Carrier-linked prodrugs having reversible carboxylic ester linkages
US9872864B2 (en) 2011-08-12 2018-01-23 Ascendis Pharma A/S Sustained release composition of prostacyclin
EP2741781A1 (en) 2011-08-12 2014-06-18 Ascendis Pharma A/S Carrier-linked treprostinil prodrugs
WO2013036857A1 (en) 2011-09-07 2013-03-14 Prolynx Llc Sulfone linkers
RU2014118642A (ru) 2011-10-12 2015-11-20 Асцендис Фарма Офтальмолоджи Дивижн А/С Предотвращение и лечение глазных нарушений
US8883862B2 (en) 2012-01-12 2014-11-11 Kaohsiung Medical University Method for controlled release of parathyroid hormone from cross-linked hyaluronic acid hydrogel
WO2013108235A1 (en) 2012-01-20 2013-07-25 Lupin Limited Stabilized pth formulation
AU2013254756B2 (en) 2012-04-25 2017-03-30 Ascendis Pharma A/S Prodrugs of hydroxyl-comprising drugs
US9457096B2 (en) 2012-07-06 2016-10-04 Consejo Nacional De Investigaciones Cientificas Y Tecnicas (Concet) Protozoan variant-specific surface proteins (VSP) as carriers for oral drug delivery
CA2883707A1 (en) 2012-08-28 2014-03-06 The Governors Of The University Of Alberta Parathyroid hormone, insulin, and related peptides conjugated to bone targeting moieties and methods of making and using thereof
BR112015007814B1 (pt) 2012-10-11 2022-04-19 Ascendis Pharma A/S Uso de profármaco polimérico no diagnóstico, prevenção e tratamento de doenças da articulação
AU2013328785B2 (en) 2012-10-11 2016-07-21 Ascendis Pharma A/S Hydrogel prodrugs
US10519226B2 (en) 2012-10-11 2019-12-31 Ascendis Pharma Opthalmology Division A/S VEGF neutralizing prodrugs for the treatment of ocular conditions
EP2908845A1 (en) 2012-10-17 2015-08-26 Novo Nordisk Health Care AG Fatty acid acylated amino acids for growth hormone delivery
WO2014086961A1 (en) 2012-12-07 2014-06-12 Ascendis Pharma A/S Carrier-linked prostanoid prodrugs
GB201303771D0 (en) 2013-03-04 2013-04-17 Midatech Ltd Nanoparticles peptide compositions
US11116849B2 (en) 2013-04-22 2021-09-14 Ascendis Pharma A/S Hydrogel-linked prodrugs releasing tagged drugs
US20150065423A1 (en) 2013-08-30 2015-03-05 Perosphere, Inc. Rapid acting injectable formulations
US10040850B2 (en) 2013-10-08 2018-08-07 Ascendis Pharma A/S Protecting group comprising a purification tag
EP2868326A1 (en) 2013-11-04 2015-05-06 Université Pierre et Marie Curie (Paris 6) Peptide inhibitors of TEAD/YAP-TAZ interaction
EP3193941B1 (en) * 2014-08-06 2024-05-22 Ascendis Pharma A/S Prodrugs comprising an aminoalkyl glycine linker
US9585934B2 (en) 2014-10-22 2017-03-07 Extend Biosciences, Inc. Therapeutic vitamin D conjugates
CA2972318A1 (en) 2015-01-09 2016-07-14 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Prodrugs of c-type natriuretic peptide(cnp)
AR105319A1 (es) 2015-06-05 2017-09-27 Sanofi Sa Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico
IL317744A (en) 2016-03-01 2025-02-01 Ascendis Pharma Bone Diseases As PTH drug agonists
HRP20230385T1 (hr) 2016-09-29 2023-06-23 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Kombinirana terapija sa cnp agonistima s kontroliranim oslobađanjem
FI3518982T3 (fi) 2016-09-29 2025-02-11 Ascendis Pharma Bone Diseases As Säädellysti vapautuvia PTH-yhdisteitä
PL3518961T3 (pl) * 2016-09-29 2023-08-14 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Związki pth o niskim stosunku wartości maksymalnej do minimalnej
RS64440B1 (sr) 2016-09-29 2023-09-29 Ascendis Pharma Bone Diseases As Režim doziranja za pth jedinjenje sa kontrolisanim oslobađanjem
TW201832783A (zh) 2016-12-02 2018-09-16 法商賽諾菲公司 包含ｇｌｐ－１／胰高血糖素雙重激動劑、連接子和透明質酸的接合物
CA3099620A1 (en) 2018-05-18 2019-11-21 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Starting dose of pth conjugates
US12403182B2 (en) 2019-02-11 2025-09-02 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Liquid pharmaceutical formulations of PTH conjugates
CN115003320A (zh) 2020-01-13 2022-09-02 阿森迪斯药物骨疾病股份有限公司 甲状旁腺功能减退的治疗

Also Published As

Publication number Publication date
EP4491239A2 (en) 2025-01-15
WO2018060311A1 (en) 2018-04-05
AU2017336250C1 (en) 2023-08-03
PL3518982T3 (pl) 2025-03-24
HRP20250102T1 (hr) 2025-03-28
AU2017336250A1 (en) 2019-03-21
AU2017336250B2 (en) 2023-04-20
SMT202500059T1 (it) 2025-03-12
SI3518982T1 (sl) 2025-03-31
US12453778B2 (en) 2025-10-28
AU2023202402B2 (en) 2024-09-12
ES3012647T3 (en) 2025-04-09
LT3518982T (lt) 2025-02-25
AU2024270632A1 (en) 2025-01-02
CN109789221A (zh) 2019-05-21
AU2023202402A1 (en) 2023-07-20
MA46428B1 (fr) 2025-02-28
MA46428A (fr) 2019-08-07
EP3518982A1 (en) 2019-08-07
JP2024037994A (ja) 2024-03-19
FI3518982T3 (fi) 2025-02-11
CN109789221B (zh) 2022-11-01
CN116059321A (zh) 2023-05-05
US20190224329A1 (en) 2019-07-25
JP2022081604A (ja) 2022-05-31
HUE070273T2 (hu) 2025-05-28
EP3518982B1 (en) 2024-11-27
PT3518982T (pt) 2025-01-29
DK3518982T3 (da) 2025-02-03
JP7483776B2 (ja) 2024-05-15
CA3037444A1 (en) 2018-04-05
JP7039574B2 (ja) 2022-03-22
JP2019533649A (ja) 2019-11-21
EP4491239A3 (en) 2025-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7646888B2 (ja) 制御放出ｐｔｈ化合物の投薬レジメン
JP7483776B2 (ja) 放出制御ｐｔｈ化合物の漸増用量設定
JP7434419B2 (ja) ピーク対トラフ比が小さいｐｔｈ化合物
CA3037442C (en) Dosage regimen for a controlled-release pth compound
HK40116755A (en) Incremental dose finding in controlled-release pth compounds
RU2777357C2 (ru) Режим дозирования соединения pth контролируемого высвобождения
HK40099006A (en) Dosage regimen for a controlled-release pth compound
HK40011847B (en) Controlled-release pth compounds
HK40011847A (en) Controlled-release pth compounds
HK40108784A (zh) 控释pth化合物的剂量方案
HK40091935A (zh) 控释pth的药物组合物
HK40011848A (en) Dosage regimen for a controlled-release pth compound
HK40011848B (en) Dosage regimen for a controlled-release pth compound
HK40007777A (en) Pharmaceutical composition for controlling the pth release