RS67876B1 - Derivat 3‑hidroksi‑5‑pregnan‑20‑ona i njegova upotreba - Google Patents

Description

[0001] Opis

[0003] Oblast pronalaska

[0005] Prikazani pronalazak se odnosi na oblast farmaceutske hemije, posebno, prikazani pronalazak se odnosi na derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona formule (I) i njegovu upotrebu u proizvodnji leka za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema.

[0007] Stanje tehnike

[0009] Neuroaktivni steroidi su steroidi aktivni u nervnom tkivu, a neuroaktivni steroidi igraju ključnu ulogu u regulaciji ljudskog tela. Neuroaktivni steroidi uglavnom obuhvataju progesteron, pregnenolon, alopregnanolon itd. Progesteron, pregnenolon i alopregnanolon nastaju iz holesterola kroz različite metaboličke puteve. Holesterol se prenosi, uz posredovanje translina od 18 kDa, sa spoljašnje membrane mitohondrija na unutrašnju membranu, proizvodeći pregnenolon metabolizmom enzima za razlaganje bočnih lanaca holesterola citohroma P450, zatim proizvodi progesteron metabolizmom 3 β-hidroksisteroid dehidrogenaze, i nastavlja da proizvodi alopregnanolon metabolizmom niza enzimskih reakcija posredovanih 5α -reduktazom i 3α -hidroksisteroidnom dehidrogenazom. Neuroaktivni steroidi se mogu koristiti kao anestetici, sredstva za smirenje, hipnotici, antianksiolitici, antidepresivi i antikonvulzivi.

[0011] Alopregnanolon je poslednjih godina bio centar ispitivanja, a još 1986. godine je istaknuto da je alopregnanolon pozitivni modulator GABA<A>receptora. Međutim, tek 2006. godine ljudi su konačno otkrili da se alopregnanolon može u suštini vezati za α i β podjedinice GABA<A>receptora, povećati frekvenciju otvaranja hloridnih jonskih kanala u receptoru i smanjiti nervnu ekscitabilnost kako bi proizveo stabilizujuće i anksiolitičke efekte.

[0013] [0004] U literaturi je objavljeno da se tokom različitih perioda menstrualnog ciklusa nivoi progesterona i njegovih metabolita in vivo razlikuju. Pre početka menstrualnog ciklusa, nivoi progesterona i njegovog metabolita se smanjuju, što može izazvati predmenstrualni sindrom (PMS), odnosno pre početka menstrualnog ciklusa, neki simptomi bi se više puta pojavljivali, ali bi nestajali nakon menstrualnog ciklusa, kao što su stres, anksioznost i migrena. Postporođajna depresija bi takođe bila povezana sa abnormalnim nivoima progesterona i njegovog metabolita, a sa razvojem trudnoće, koncentracija alopregnanolona u plazmi zdrave trudnice se povećava, a nakon porođaja, koncentracija alopregnanolona bi drastično opala.

[0015] Istraživanja sugerišu da se smanjenje sadržaja alopregnanolona smatra usko povezanim sa pojavom i razvojem mnogih mentalnih poremećaja kao što su anksioznost, depresija i tremor, a egzogena primena alopregnanolona može značajno poboljšati gore pomenute psihijatrijske simptome.

[0017] Međutim, alopregnanolon ima nisku rastvorljivost u vodi i lošu oralnu dostupnost, sa periodom poluraspada u ljudskoj plazmi od oko 45 minuta, i može se brzo metabolisati. Zulresso, koji se prodaje na tržištu, je preparat alopregnanolona rastvorljiv u vodi na bazi sulfobutil β- ciklodekstrina koji se ubrizgava intravenski da bi se dobila stabilna fiziološka koncentracija alopregnenolona. Međutim, breksanolon zahteva intravensku infuziju do 60 sati, a prihvatanje pacijenta je loše.

[0019] CN-A‑108517 001 opisuje estre alopregnanolona sa aminokiselinama kao njihove prolekove.

[0021] Prema tome, postoji klinička potreba za rastvorom sa poboljšanom rastvorljivošću, sa smanjenim trajanjem primene i održavanjem stabilne fiziološke koncentracije alopregnalona in vivo u toku dužeg vremena.

[0023] Suština pronalaska

[0025] Cilj prikazanog pronalaska je da se obezbedi derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona, koji može biti korišćen u proizvodnji leka za prevenciju ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema. Derivat ima poboljšanu rastvorljivost, stabilnost pri skladištenju, pogodnu primenu, i visoko prihvatalje pacijenta tokom primene.

[0027] U prvom pogledu, ovaj pronalazak daje jedinjenje formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so:

[0030]

[0033] gde,

[0035] svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, supstituisani ili nesupstituisani C<1>‑C<10>alkil, ili supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil; R<3>je H, halogen, hidroksil, amino, nitril, ili sulfidril; ili R<2>i R<3>su povezani da obrazuju 5‑ do 6-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten; i

[0037] svaki a i b je nezavisno ceo broj 0 do 3.

[0039] U posebnom izvođenju, R<3>je amino ili H.

[0041] U posebnom izvođenju, jedinjenje formule I je jedinjenje formule I‑1, I‑2, I‑3 ili 1‑4:

[0044]

[0047] gde R<1>, R<2>, R<3>, a, i b su kako je gore opisano.

[0049] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, ili supstituisani ili nesupstituisani C<1>‑C<8>alkil; gde supstituent alkila je izabran između C<1>‑C<6>alkila, arila, hidroksil-supstituisanog arila, amino-supstituisanog arila, halogen-supstituisanog arila, karboksil-supstituisanog arila, heteroarila, hidroksil-supstituisanog heteroarila, aminosupstituisanog heteroarila, halogen-supstituisanog heteroarila, karboksil-supstituisanog heteroarila, amino, metilamino, dimetilamino, hidroksil, sulfidrila, metiltio, acilamino, gvanidila ili karboksila.

[0051] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, supstituisani ili nesupstituisani C<1>alkil, supstituisani ili nesupstituisani C<2>alkil, supstituisani ili nesupstituisani C<3>alkil, supstituisani ili nesupstituisani C<4>alkil, supstituisani ili nesupstituisani C<5>alkil, supstituisani ili nesupstituisani C<6>alkil, supstituisani ili nesupstituisani C<7>alkil, ili supstituisani ili nesupstituisani C<8>alkil; gde je supstituent alkila izabran između metila, etila, propila, izobutila, butila, izopropil terc-butila, fenila, hidroksil-supstituisanog fenila, indolila, imidazolila, amino, hidroksila, sulfidrila, metiltio, acilamino, gvanidila, metilamino, dimetilamino ili karboksila.

[0053] [0015] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, supstituisani ili nesupstituisani metil, supstituisani ili nesupstituisani etil, supstituisani ili nesupstituisani propil, supstituisani ili nesupstituisani izopropil supstituisani ili nesupstituisani n-butil, supstituisani ili nesupstituisani terc-butil, supstituisani ili nesupstituisani 2-izobutil, ili supstituisani ili nesupstituisani 1-izobutil; gde je supstituent izabran između metila, etila, propial, butila, izopropila, izobutila, terc-butila, fenila, 2-hidroksifenila, 3-hidroksifenila, 4-hidroksifenila, indolila, imidazolila, amino, hidroksil, sulfidril, metiltio, acilamino, metilamino, dimetilamino, gvanidila ili karboksila.

[0055] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, supstituisani ili nesupstituisani metil, supstituisani ili nesupstituisani etil, supstituisani ili nesupstituisani propil, supstituisani ili nesupstituisani izopropil supstituisani ili nesupstituisani n-butil, supstituisani ili nesupstituisani terc-butil, supstituisani ili nesupstituisani 2-izobutil, ili supstituisani ili nesupstituisani 1-izobutil; gde je supstituent izabran između metila, etila, propila, butila, izopropila, izobutila, terc-butila, amino, hidroksila, sulfidrila, metiltio, acilamino, metilamino, dimetilamino, gvanidila ili karboksila.

[0057] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, metil, etil, propil, izopropil butil, terc-butil, izobutil, amid-supstituisani metil, fenil-supstituisani metil, hidroksilsupstituisani metil, karboksil-supstituisani metil, sulfidril-supstituisani metil, imidazolsupstituisani metil, indol-supstituisani metil, p-hidroksifenil-supstituisani metil, metiltiosupstituisani metil, gvanidil-supstituisani metil, amino-supstituisani metil, amidsupstituisani etil, hidroksil-supstituisani etil, karboksil-supstituisani etil, sulfidrilsupstituisani etil, imidazol-supstituisani etil, indol- supstituisani etil, p-hidroksifenilsupstituisani etil, metiltio-supstituisani etil, gvanidil-supstituisani etil, aminosupstituisani etil, amid-supstituisani propil, hidroksil-supstituisani propil, karboksilsupstituisani propil, sulfidril-supstituisani propil, imidazol-supstituisani propil, indolsupstituisani propil, p-hidroksifenil-supstituisani propil, metiltio-supstituisani propil, gvanidil-supstituisani propil, amino-supstituisani propil, dimetilamino-supstituisani propil, metil-supstituisani propil, amid-supstituisani butil, hidroksil-supstituisani butil, karboksil-supstituisani butil, sulfidril-supstituisani butil, imidazol-supstituisani butil, indol-supstituisani butil, p-hidroksifenil-supstituisani butil, metiltio-supstituisani butil, gvanidil- supstituisani butil, ili amino-supstituisani butil.

[0059] [0018] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, metil, etil, propil, izopropil butil, terc-butil, izobutil, amid-supstituisani metil, hidroksil-supstituisani metil, karboksil-supstituisani metil, sulfidril-supstituisani metil, metiltio-supstituisani metil, gvanidil-supstituisani metil, amino-supstituisani metil, amid-supstituisani etil, hidroksilsupstituisani etil, karboksil-supstituisani etil, sulfidril-supstituisani etil, metiltiosupstituisani etil, gvanidil- supstituisani etil, amino-supstituisani etil, amid-supstituisani propil, hidroksil-supstituisani propil, karboksil-supstituisani propil, sulfidril-supstituisani propil, metilthio-supstituisani propil, gvanidil-supstituisani propil, amino-supstituisani propil, dimetilamino-supstituisani propil, metil-supstituisani propil, amid-supstituisani butil, hidroksil-supstituisani butil, karboksil-supstituisani butil, sulfidril-supstituisani butil, metiltio-supstituisani butil, gvanidil-supstituisani butil, ili amino-supstituisani butil.

[0061] U posebnom izvođenju, bar jedan od R<1>i R<2>je izopropil.

[0063] U poželjnom izvođenju, svaki R<1>i R<2>je nezavisno H, metil, etil, propil, izopropil butil, terc-butil, izobutil, amid-supstituisani metil, fenil-supstituisani metil, hidroksilsupstituisani metil, karboksil-supstituisani metil, sulfidril-supstituisani metil, imidazolsupstituisani metil, indol-supstituisani metil, p-hidroksifenil-supstituisani metil, metiltiosupstituisani metil, gvanidil-supstituisani metil, amino-supstituisani metil, amidsupstituisani etil, hidroksil-supstituisani etil, karboksil-supstituisani etil, sulfidrilsupstituisani etil, imidazol-supstituisani etil, indol-supstituisani etil, p-hidroksifenilsupstituisani etil, metiltio-supstituisani etil, gvanidil-supstituisani etil, aminosupstituisani etil, amid-supstituisani propil, hidroksil-supstituisani propil, karboksilsupstituisani propil, sulfidril-supstituisani propil, imidazol-supstituisani propil, indolsupstituisani propil, p-hidroksifenil-supstituisani propil, metiltio-supstituisani propil, gvanidil-supstituisani propil, amino-supstituisani propil, dimetilamino-supstituisani propil, metil-supstituisani propil, amid-supstituisani butil, hidroksil-supstituisani butil, karboksil-supstituisani butil, sulfidril-supstituisani butil, imidazol-supstituisani butil, indol-supstituisani butil, p-hidroksifenil-supstituisani butil, metiltio-supstituisani butil, gvanidil- supstituisani butil, ili amino-supstituisani butil; i bar jedan od R<1>i R<2>je izopropil; R<3>je H, halogen, hidroksil, amino, nitril, ili sulfidril; i svaki a i b je nezavisno izabran između 0, 1, 2, ili 3.

[0065] U posebnom izvođenju, R<1>je izopropil.

[0067] U poželjnom izvođenju, R<2>je izabran između H, metila, etila, propila, izopropila butila, terc-butila, izobutila, amid-supstituisanog metila, fenil-supstituisanog metila, hidroksil-supstituisanog metila, karboksil-supstituisanog metila, sulfidril- supstituisanog metila, imidazol-supstituisanog metila, indol-supstituisanog metila, p-hidroksifenilsupstituisanog metila, metiltio-supstituisanog metila, 2-amidoetila, 1-hidroksietila, 2-hidroksietila, 2-karboksietila, sulfidril-supstituisani etila, imidazol-supstituisanog etila, indol-supstituisanog etila, p-hidroksifenil-supstituisanog etila, 2-metiltioetila, gvanidilsupstituisanog etila, 2-aminoetila, amid-supstituisanog propila, hidroksil-supstituisanog propila, karboksil-supstituisanog propila, sulfidril-supstituisanog propila, imidazolsupstituisanog propila, indol-supstituisanog propila, p-hidroksifenil-supstituisanog propila, metiltio-supstituisanog propila, 1-guanidinopropila, 2-guanidinopropila, 3-guanidinopropila, 1-aminopropila, 2-aminopropila, 3-aminopropila, 1-dimetilaminopropila, 2-dimetilaminopropila, 3-dimetilaminopropila, 1-metilpropila, 2-metilpropila, amid-supstituisanog butila, hidroksil-supstituisanog butila, karboksilsupstituisanog butila, sulfidril-supstituisanog butila, imidazol- supstituisanog butila, indol-supstituisanog butila, p-hidroksifenil-supstituisanog butila, metiltiosupstituisanog butila, gvanidil-supstituisanog butila, 1-aminobutila, 2-aminobutila, 3-aminobutila ili 4-aminobutila.

[0069] U poželjnom izvođenju, R<2>je izabran između H, metila, etila, propila, izopropil butila, terc-butila, izobutila, amid-supstituisanog metila, fenil-supstituisanog metila, hidroksil-supstituisanog metila, karboksil-supstituisanog metila, sulfidril- supstituisanog metila, imidazol-supstituisanog metila, indol-supstituisanog metila, p-hidroksifenilsupstituisanog metila, metiltio-supstituisanog metila, 2-amidoetila, 1-hidroksietila, 2-karboksietila, 2-metiltioetila, 3-guanidinopropila, 3- dimetilaminopropila, 1-metilpropila, 2-metilpropila ili 4-aminobutila.

[0071] U poželjnom izvođenju, R<3>je izabran između H ili amino.

[0073] U poželjnom izvođenju, R<2>i R<3>su povezani da obrazuju 5‑ do 6-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten; poželjno 5-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten sadrži jedan heteroatom; poželjnije 5-člani zasićeni heterociklični prsten sadrži jedan heteroatom; i najpoželjnije pirolidinil.

[0075] U poželjnom izvođenju, svaki a i b je nezavisno izabran između 0, 1, 2, ili 3.

[0077] U poželjnom izvođenju, a je izabran između 0, b je izabran između 0 ili 1.

[0079] U poželjnom izvođenju, R<1>je izopropil; R<2>je izabran između H, metila, etila, propila, izopropil butila, terc- butila, izobutila, amid-supstituisanog metila, fenil-supstituisanog metila, hidroksil-supstituisanog metila, karboksil-supstituisanog metila, sulfidrilsupstituisanog metila, imidazol-supstituisanog metila, indol-supstituisanog metila, phidroksifenil-supstituisanog metila, metiltio-supstituisanog metila, 2-amidoetila, 1-hidroksietila, 2-hidroksietila, 2-karboksietila, sulfidril-supstituisanog etila, imidazolsupstituisanog etila, indol-supstituisanog etila, p-hidroksifenil-supstituisanog etila, 2-metiltioetila, gvanidil-supstituisanog etila, 2-aminoetila, amid-supstituisanog propila, hidroksil-supstituisani propila, karboksil-supstituisanog propila, sulfidril-supstituisanog propila, imidazol-supstituisanog propila, indol-supstituisanog propila, p-hidroksifrnilsupstituisanog propila, metiltio-supstituisanog propila, 1-guanidinopropila, 2-guanidinopropila, 3-guanidinopropila, 1-aminopropila, 2-aminopropila, 3-aminopropila, 1-dimetilaminopropila, 2-dimetilaminopropila, 3-dimetilaminopropila, 1- metilpropila, 2-metilpropila, amid-supstituisanog butila, hidroksil-supstituisanog butila, karboksilsupstituisanog butila, sulfidril- supstituisanog butila, imidazol-supstituisanog butila, indol-supstituisanog butila, p-hidroksifenil-supstituisanog butila, metiltiosupstituisanog butila, gvanidil-supstituisanog butila, 1-aminobutila, 2-aminobutila, 3-aminobutila, ili 4-aminobutila; R<3>je izabran između H, ili amino; i svaki a i b je nezavisno izabran između 0, 1, 2 ili 3.

[0081] U poželjnom izvođenju, R<1>je izopropil; R<2>je izabran između H, metila, etila, propila, izopropil butila, terc- butila, izobutila, amid-supstituisanog metila, fenil-supstituisanog metila, hidroksil-supstituisanog metila, karboksil-supstituisanog metila, sulfidrilsupstituisanog metila, imidazol-supstituisanog metila, indol-supstituisanog metila, phidroksifenil-supstituisanog metila, metiltio-supstituisanog metila, 2-amidoetila, 1-hidroksietila, 2-karboksietila, 2-metiltioetila, 3-guanidinopropila, 3-dimetilaminopropila, 1-metilpropila, 2-metilpropila ili 4-aminobutila; R<3>je izabran između H ili amino; a je izabran između 0; i b je izabran između 0 ili 1.

[0083] U poželjnom izvođenju, R<1>je izopropil; R<2>i R<3>su povezani da obrazuju 5‑ do 6-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten; i svaki a i b je nezavisno izabran između 0, 1, 2 ili 3.

[0085] U poželjnom izvođenju, R<2>i R<3>su povezani da obrazuju 5-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten sadrži jedan heteroatom; poželjno 5-člani zasićeni heterociklični prsten sadrži jedan heteroatom; poželjnije pirolidinil; a je izabran između 0; i b je izabran između 0 ili 1.

[0087] U drugom aspektu, prikazani pronalazak obezbeđuje jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so izabrano iz grupe koju čine:

[0090]

[0091]

[0092]

[0095] 

[0096]

[0097]

[0098]

[0101] 

[0102]

[0103]

[0105] U trećem aspektu, prikazani pronalazak obezbeđuje jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, izabrano iz grupe koju čine:

[0107]

[0110] 1

[0111] U četvrtom aspektu, prikazani pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapeutski efikasnu dozu jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli prema prvom i drugom aspektu, i farmaceutski prihvatljiv nosač i/ili ekscipijent.

[0113] U poželjnom izvođenju, farmaceutska kompozicija je farmaceutska kompozicija za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema.

[0115] U poželjnom izvođenju, poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen na, tremor, poremećaj sna, depresiju, depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj, anksiozni poremećaj, reakciju na stres, poremećaj post-traumatskog stresa, opsesivno-kompulsivni poremećaj, šizofreniju, šizoafektivni poremećaj, epilepsiju, epileptični napad, oštećenje pamćenja i/ili kognitivno oštećenje, demenciju, diskineziju, poremećaj ličnosti, autizam, autizam sa jednim uzrokom, bol, traumatsku povredu mozga, vaskularnu bolest, poremećaj zloupotrebe supstanci i/ili apstinencijski sindrom ili tinitus; ili

[0117] poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen na, esencijalni tremor, epilepsiju, kliničku depresiju, postporođajnu ili postpartalnu depresiju, tipičnu depresiju, psihotičnu veliku depresiju, katatoničnu depresiju, sezonski afektivni poremećaj, distimiju, duplu depresiju, depresivni poremećaj ličnosti, rekurentnu kratku depresiju, blagi depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj ili manično-depresivni poremećaj, posttraumatski stresni poremećaj, depresiju usled hroničnih medicinskih stanja, depresiju otpornu na lečenje, refraktornu depresiju, suicidne namere, suicidne ideje, suicidno ponašanje, traumatsku povredu mozga, generalizovani anksiozni poremećaj, poremećaj socijalne anksioznosti, poremećaj hiperaktivnosti sa nedostatkom pažnje, demenciju, Hantingtonovu bolest, Parkinsonovu bolest, neuropatski bol, sindrom bola povezan sa povredom, akutni bol, dugotrajni bol, moždani udar, ishemiju, vaskularnu malformaciju, zavisnost od opioida, kokaina i/ili alkohola, ili nesanicu.

[0119] U posebnom izvođenju, poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen na, tremor, poremećaj sna, depresiju, depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj, anksiozni poremećaj, reakciju na stres, posttraumatski stresni poremećaj, opsesivno kompulsivni poremećaj, šizofreniju, šizoafektivni poremećaj, epilepsiju, epileptični napad, oštećenje pamćena i/ili kognitivno oštećenje, demenciju, diskineziju, poremećaj ličnosti, autizam, autizam sa jednim uzrokom, bol, traumatsku povredu mozga, vaskularnu bolest, poremećaj zloupotrebe supstanci i/ili apstinencijski sindrom ili tinitus; ili

[0121] poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen na, esencijalni tremor, epilepsiju, kliničku depresiju, postporođajnu ili postpartalnu depresiju, atipičnu depresiju, psihotičnu veliku depresiju, katatoničnu depresiju, sezonski afektivni poremećaj, distimiju, duplu depresiju, depresivni poremećaj ličnosti, rekurentnu kratku depresiju, blagi depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj ili manično-depresivni

[0124] 1

[0125] poremećaj, posttraumatski stresni poremećaj, depresiju usled hroničnih medicinskih stanja, depresiju otpornu na lečenje, refraktornu depresiju, suicidne namere, suicidne ideje, suicidno ponašanje, traumatsku povredu mozga, generalizovani anksiozni poremećaj, poremećaj socijalne anksioznosti, poremećaj hiperaktivnosti sa nedostatkom pažnje, demenciju, Hantingtonovu bolest, Parkinsonovu bolest, neuropatski bol, sindrom bola povezan sa povredom, akutni bol, dugotrajni bol, moždani udar, ishemiju, vaskularnu malformaciju, zavisnost od opioida, kokaina i/ili alkohola, ili nesanicu.

[0127] U šestom aspektu, prikazani pronalazak obezbeđuje jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so od prvog do trećeg aspekta, ili farmaceutsku kompoziciju prema drugom aspektu, koje su korišćene kao lekovi za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema.

[0129] U sedmom aspektu, prikazani pronalazak obezbeđuje postupak za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema, koji obuhvata primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli od prvog do trećeg aspekta, ili farmaceutske kompozicije na subjekta kome je to potrebno.

[0131] U poželjnom izvođenju, subjekat je sisar, poželjno čovek.

[0133] Treba razumeti da se, u okviru ovog pronalaska, svaka od gore pomenutih tehničkih karakteristika ovog pronalaska i svaka od tehničkih karakteristika koje su posebno opisane u daljem tekstu (npr. izvođenja) mogu kombinovati jedna sa drugom da bi se stvorilo novo ili poželjno tehničko rešenje. Zbog ograničenja prostora, ovde se to neće ponavljati.

[0135] Kratak opis slika nacrta

[0137] Slika 1 prikazuje farmakokinetičku krivu muških pacova posle oralnog davanja jedinjenja prema prikazanom pronalasku.

[0139] Detaljan opis pronalaska

[0141] Kroz ispitivanje, pronalazači ovog pronalaska su otkrili da alopregnanolon ima lošu rastvorljivost u vodi, da ga je potrebno klinički pripremiti u vodenu formulaciju ciklodekstrina i da zahteva dugotrajnu injekciju da bi bio efikasan. Nakon opsežnog i intenzivnog istraživanja, pronalazači ovog pronalaska su neočekivano otkrili da pretvaranje alopregnanolona u specifičan derivat može značajno poboljšati rastvorljivost alopregnanolona u vodi, da ima određenu stabilnost pri skladištenju u vodenom rastvoru i da se može formulisati u preparat dugog dejstva i produženog oslobađanja sa malom individualnom razlikom nakon primene. Preparat formulisan pomoću derivata prema

[0144] 1

[0145] ovom pronalasku može održati efikasnu fiziološku koncentraciju alopregnanolona in vivo relativno dugo i pogodan je za primenu, što ima prednosti poboljšanja prihvatanja pacijenta . Ovaj pronalazak je završen na osnovu toga.

[0147] Definicije

[0149] Osim ako nije navedeno suprotno, izrazi korišćeni u opisu i patentnim zahtevima imaju sledeće značenje.

[0151] Ugljenik, vodonik, kiseonik, sumpor, azot ili halogen uključeni u grupe i jedinjenja prema prikazanom pronalasku svi sadrže svoje izotope, a ugljenik, vodonik, kiseonik, sumpor, azot ili halogen uključeni u grupe i jedinjenje prema prikazanom pronalasku su opciono dalje supstituisani sa jednim ili više njihovih odgovarajućih izotopa, gde izotopi ugljenika obuhvataju<12>C,<13>C i<14>C, izotopi vodonika obuhvataju protijum (H), deuterijum (D, takođe poznat kao teški vodonik), tricijum (T, takođe pozanat kao superteški vodonik), izotopi kiseonika obuhvataju<16>O,<17>O i<18>O, izotopi sumpora obuhvataju<32>S,<33>S,<34>S i<36>S, izotopi azota obuhvataju<14>N i<15>N, izotopi fluora obuhvataju<19>F, izotopi hlora obuhvataju<35>Cl i<37>Cl, i izotopi broma obuhvataju<79>Br i<81>Br.

[0153] Izraz „alkil“, kako se ovde koristi, ima značenje koje je uobičajeno za stručnjake u ovoj oblasti, a posebno se odnosi na pravu ili razgranatu zasićenu grupu sastavljenu od ugljenika i vodonika sa određenim brojem atoma ugljenika. Na primer, C<1>‑C<10>alkil, kako se ovde koristi, odnosi se na pravu ili razgranatu zasićenu grupu sastavljenu od ugljenika i vodonika sa određenim brojem atoma ugljenika; uključujući, ali ne ograničavajući se na: n-metil, n-etil, n-propil, izopropil, n-butil, terc-butil, izobutil, sek-butil, n-pentil, n-heksil i n-heptil, itd.

[0155] Izraz „cikloalkil“, kako se ovde koristi, odnosi se na monociklični, kondenzovani, spiro ili premošćeni prsten koji je sav od ugljenika, uključujući, ali ne ograničavajući se na ciklopropan, ciklobutan, ciklopentan, spiro[3.4]oktan i biciklo[3.1.1]heksan, itd.

[0157] Izraz "5‑ do 6-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten" kako je ovde korišćeno odnosi se na supstituisani ili nesupstituisani zasićeni ili nezasićeni nearomatični sistem prstenova koji sadrži bar 1 ili 2 atoma ili grupe izabrane između N, O, S, S(=O) ili S(=O)<2>, i nearomatični sistem prstenova koji sadrži 5 ili 6 atoma prstenova; i neograničavajuća izvođenja koja sadrže azaciklopentil, azacikloheksil, 1,3-dioksociklopentil, 1,4-dioksociklopentil, 1,3-dioksociklopentil, 1,3-diokso- cikloheksil, 1,3-ditiocikloheksil, morfolinil, piperazinil, piridil, furil, tienil, pirolil, piranil, N-alkilpirolil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, imidazolil, piperidil, tiomorfolinil, dihidropiran, tiadiazolil, oksazolil, oksadiazolil, pirazolil, 1,4-dioksocikloheksadienil, 2H‑1,2-oksazinil ili 2,5-dihidrotienil, itd.

[0159] Izraz "halogen" kako je ovde korišćeno odnosi se na F, Cl, Br, ili I.

[0162] 1

[0163] Termin „farmaceutski prihvatljiva so“ kako je ovde korišćeno odnosi se na na one soli koje su pogodne za kontakt sa tkivima ljudi i nižih životinja, ali ne pokazuju prekomernu toksičnost, iritaciju i alergijske reakcije itd. u okviru pouzdanog medicinskog opsega procene, i proporcionalne su razumnoj koristi/opasnosti. Farmaceutski prihvatljive soli su dobro poznate u struci, na primer, farmaceutski prihvatljiva so je detaljno opisana od strane Berge i dr., J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66: 1‑19. Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja ovog pronalaska obuhvata so dobijenu od odgovarajućih neorganskih i organskih kiselina i baza. Izvođenja farmaceutski prihvatljivih netoksičnih soli dobijenih adicijom kiselina su so obrazovana amino grupom i neorganskom kiselinom, kao što je hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina i perhlorna kiselina, ili so obrazovana amino grupom i organskom kiselinom, kao što je sirćetna kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, ćilibarna kiselina ili malonska kiselina, ili so obrazovana korišćenjem postupka koji se koristi u struci, kao što je postupak jonske izmene. Druge farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju: adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzen sulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, kamforsulfonatnu so, citrat, cipionat, diglukonat, lauril sulfat, etil sulfonat, formijat, fumarat, glukonat, glicerofosfat, glukonat, hemisulfat, enantat, kaproat, hidrojodat, 2-hidroksi-etil sulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, mezilat, 2-naftalen sulfonat, nikotinat, nitrat, oleat, oksalat, palmitat, pamoat, pektat, persulfat, 3-fenpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinat, sulfat, tartrat, tiocijanat, tozilat, undekanoat i valerat, itd. Farmaceutski prihvatljive soli izvedene iz odgovarajućih baza obuhvataju so alkalnog metala, so zemnoalkalnog metala, amonijumovu so i N+(C1‑4alkil)4 so. Reprezentativna so alkalnog metala ili so zemnoalkalnog metala obuhvata natrijumovu so, litijumovu so, kalijumovu so, kalcijumovu so i magnezijumovu so, itd. Ako je prikladno, dalje farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju netoksične amonijumove soli, kvaternarnu amonijumovu so i aminske katjone obrazovane korišćenjem suprotnih jona, pri čemu su suprotni joni kao što su halidni anjon, hidroksi radikal, karboksilatni radikal, sulfatni radikal, fosfatni radikal, nitratni radikal, niži alkil sulfonat i aril sulfonat.

[0165] Derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona prema prikazanom pronalasku i postupak njegovog dobijanja

[0167] Da bi se ostvario cilj ovog pronalaska, pronalazači ovog pronalaska su derivatizovali alopregnanolonsko jedinjenje i 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-on, kako bi dobili derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona formule I:

[0170] 1

[0171]

[0174] Kada je svaki R<1>i R<2>nezavisno H, supstituisani ili nesupstituisani C<1>‑C<10>alkil, ili supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil; R<3>je H, halogen, hidroksil, amino, nitril, ili sulfidril; ili R<2>i R<3>su povezani da obrazuju 5‑ do 6-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten; i svaki a i b je nezavisno ceo broj 0 do 3.

[0176] Na osnovu učenja ovog pronalaska i konvencionalnih tehničkih sredstava u ovoj oblasti, stručnjaci u ovoj oblasti će znati da se gornja formula I može dalje razložiti na formulu I-1 ili I-2 ili I-3 ili I-4:

[0179]

[0182] Jedinjenje opisano u ovom pronalasku može da sadrži jedan ili više asimetričnih centara i stoga može imati više izomernih oblika, kao što su oblici enantiomera i/ili diastereoizomera. Na primer, jedinjenje opisano ovde može biti u obliku enantiomera, diastereomera ili geometrijskog izomera samostalno, ili može biti u obliku stereoizomerne smeše, uključujući racemsku smešu i smešu obogaćenu jednim ili više stereoizomera. Izomeri se mogu izdvojiti iz smeša postupcima poznatim stručnjacima u ovoj oblasti, uključujući: hiralnu tečnu hromatografiju visokih performansi (HPLC) i obrazovanje i kristalizaciju hiralne soli; ili se poželjni izomeri mogu pripremiti asimetričnom sintezom. Ovaj pronalazak dalje uključuje jedinjenje opisano ovde kao sam izomer koji je u suštini slobodan od drugih izomera, ili kao smešu više izomera.

[0184] Sadašnji pronalazači su neočekivano otkrili da derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska ima poboljšanu rastvorljivost u vodi i može održati određenu stabilnost kada se čuva u vodenom rastvoru glukoze; posebno kada je R<1>ili R<2>u derivatu 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona formule I ovog pronalaska izopropil, rastvorljivost u vodi je

[0187] 2

[0188] značajno poboljšana. Nakon daljeg proučavanja, sadašnji pronalazači su otkrili da derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska ima odlična farmakokinetička svojstva; posebno kada je R<1>u derivatu 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona formule I ovog pronalaska izopropil, farmakokinetička svojstva derivata su superiornija od svojstava prototipa leka i drugih derivata sa sličnom strukturom.

[0190] Stručnjacima u ovoj oblasti je poznato da, iako je obrazovanje estara jedna od uobičajeno korišćenih postupaka modifikacije u dizajniranju prolekova, glavni problem sa kojim se suočavaju estarski prolekovi jeste to što je teško predvideti farmakokinetsku distribuciju estarskih prolekova, a pošto je biotransformacija supstituisanog ili nesupstituisanog alkil estra u ljudskoj krvi relativno spora i nepotpuna, biodostupnost ovih estarskih prolekova je često niža od očekivane; drugim rečima, kako se estar obrazuje i da li će dobijeni prolekovi nakon toga imati željena svojstva su nepredvidivi. Stoga je veoma neočekivano da derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska ima odlična farmakokinetička svojstva.

[0192] Na osnovu učenja ovog pronalaska i opšteg znanja u oblasti hemijske sinteze, stručnjaci u ovoj oblasti znaju kako da dobiju derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska. Za primer, derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona se priprema reakcijom alopregnanolonskog jedinjenja sledeće formule sa odgovarajućom organskom kiselinom.

[0195]

[0198] Alopregnanolon korišćen za dobijanje jedinjenja prema prikazanom pronalasku mogu biti komercijalno dostupna ili mogu biti dobijeni prema poznatom postupku.

[0200] Farmaceutska kompozicija prema prikazanom pronalaku

[0202] [0059] Pronalazači ovog pronalaska su otkrili da se derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska, nakon primene na subjekta, može hidrolizovati pod odgovarajućim uslovima, npr. hidrolizom esterazom in vivo, čime se oslobađa aktivni alopregnanolon. Stoga se derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska ili kompozicija koja ga sadrži može koristiti za pripremu leka za bolest uzrokovanu abnormalnošću centralnog nervnog sistema. Bolest izazvana abnormalnostima centralnog nervnog sistema uključuje, ali nije ograničena samo na njih, tremor, epilepsiju, depresiju ili anksiozni poremećaj. Detaljnije, poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen samo na njih, esencijalni tremor, epilepsiju, kliničku depresiju, postporođajnu ili postpartalnu depresiju, atipičnu depresiju, psihotičnu veliku depresiju, katatoničnu depresiju, sezonski afektivni poremećaj, distimiju, duplu depresiju, depresivni poremećaj ličnosti, rekurentnu kratku depresiju, blagi depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj ili manično-depresivni poremećaj, posttraumatski stresni poremećaj, depresiju usled hroničnih medicinskih stanja, lečenje rezistentne depresije, refraktornu depresiju, suicidne namere, suicidne ideje ili suicidno ponašanje.

[0204] U smislu ovoga, ovaj pronalazak dalje pruža farmaceutsku kompoziciju koja sadrži gore pomenuti derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20 ketona prema ovom pronalasku i opcioni farmaceutski prihvatljiv nosač. Kako se ovde koristi, izraz „kompozicija“ treba da obuhvati proizvod koji sadrži određenu količinu određenog sastojka, kao i bilo koji proizvod, direktno ili indirektno, koji je rezultat kombinacije određene količine određenog sastojka; dok se farmaceutski prihvatljiv nosač odnosi na nosač, razblaživač ili ekscipijent koji ne izaziva značajnu iritaciju organizma i ne ometa biološku aktivnost i svojstva primenjenog jedinjenja; to jest, nosač, razblaživač ili ekscipijent moraju biti kompatibilni sa drugim sastojcima preparata i ne smeju biti štetni za subjekta primene.

[0206] Farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može se pripremiti postupkom dobro poznatim stručnjacima u ovoj oblasti. Za izvođenje, jedinjenje ovog pronalaska može se pomešati sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, razblaživačem ili ekscipijentom da bi se pripremila odgovarajuća farmaceutska kompozicija. Dalje, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija ovog pronalaska mogu se formulisati u različite pogodne dozne oblike od strane stručnjaka u ovoj oblasti, uključujući, ali ne ograničavajući se na oblik pogodan za rektalnu primenu, transdermalnu primenu, intradermalnu primenu, intratekalnu primenu, potkožnu primenu, intravenoznu primenu, intramuskularnu primenu, primenu u zglobnu šupljinu, primenu u usnoj sluzokoži, vaginalnu primenu i intranazalnu primenu itd. U zavisnosti od potrebnog doznog oblika, stručnjaci u ovoj oblasti mogu takođe odabrati odgovarajući farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač ili ekscipijent.

[0208] Jedinjenja za upotrebu u Postupku sprećavanja i lečenja bolesti

[0210] Kao što je gore opisano, dok derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska može da oslobodi aktivni alopregnanolon pod odgovarajućim uslovima nakon što se primeni na subjekta, stručnjacima u ovoj oblasti je jasno da je derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona ovog pronalaska obezbeđen za upotrebu u postupku za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema, uključujući, ali ne ograničavajući se na gore pomenute poremećaje centralnog nervnog sistema.

[0212] Postupak za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema ovog pronalaska obuhvata davanje terapeutski efikasne količine gore pomenutog jedinjenja i farmaceutske kompozicije subjektu kome je to potrebno. Predmet obuhvata, ali nije ograničen na čoveka.

[0213] Prednosti prikazanog pronalaska:

[0215]

[0217] 1. Derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona prema prikazanom pronalasku ima poboljšanu rastvorljivost;

[0219] 2. Derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona prema prikazanom pronalasku ima određenju stablinost pri skladištenju u rastvoru glukoze;

[0221] 3. Derivat 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-on prema prikazanom pronalasku može biti formulisan u dugo delujući preparat sa odloženim dejstvom sa malim individualnim razlikama posle primene;

[0223] 4. Preparat prema prikazanom pronalasku je pogodan za primenu; i

[0225] 5. Preparat prema prikazanom pronalasku ima visoko prihvatanje od strane pacijenta tokom primene.

[0227] Predmetni pronalazak je dalje opisan u nastavku u vezi sa specifičnim izvođenjima. Treba razumeti da ova izvođenja služe samo da ilustruju predmetni pronalazak i ne ograničavaju njegov obim, pri čemu je pronalazak u svom najširem obimu definisan u zahtevima. U sledećim izvođenjima, eksperimentalni postupci bez navođenja specifičnih uslova se generalno izvode pod konvencionalnim uslovima ili prema preporučenim uslovima proizvođača. Procenti i delovi su maseni, osim ako nije drugačije naznačeno.

[0229] Reagensi i sirovi materijali korišćni u prikazanom pronalasku su svi komercijalno dostupni.

[0231] Primer 1. Sinteza hidrohlorida jedinjenja 1

[0233]

[0236]

[0238] Hidrohlorid jedinjenja 1

[0241] 2

[0242] Dobijanje intermedijera 1.2:

[0244] Jedinjenje 1.1 (50.0 g, 157.0 mmol, 1.0 ekv), Boc-L-Val-OH (40.9 g, 188.2 mmol), DMAP (1.9 g, 15.5 mmol) i 500 mL dihlormetana su dodati u trogrli reakcioni balon od 1,000 ml i magnetno mešani i reakcioni sistem je ohlađen na ‑5 do 10°C pod zaštitom azota. Rastvor DCC (38.9 g, 188.5 mmol) u dihlorometanu (80 mL) je dodat u kapima, zatim je reagovao na ovoj temperaturi u toku 3 sata. TLC-om je detektovano da je reakcija završena i zatim je zaustavljena. Reakcioni rastvor je proceđen, i kolač je ispran pomoću dihlorometana (100 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i pomešan sa silikagelom od 100‑ do 200-meša, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90) petroleum etar (60‑90)/etil acetat 20 : 1‑10 : 1) da bi se dobila beličasta voštana čvrsta supstanca (78.2 g, prinos 96.2%).

[0246] Dobijanje intermedijera 1.3:

[0248] Jedinjenje 1.2 (78 g, 150.6 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (320 mL) su dodati u trogrli reakcioni balon sa okruglim dnom od 1,000 mL. Sistem je ohlađen na 0 do 10°C pod zaštitom azota i mešan je magnetno. Dodata je brzo trifluorosirćetna kiselina (171.8 g, 1,510 mmol) u kapima, zatim je reagovala na 15 do 25°C u toku 3 sata, zatim je reakcija zaustavljena. Reakcioni rastvor je sipan u rastvor (sa 780 mL vode) natrijm bikarbonata (164.5 g, 1,958 mmol) i ugašen da se održi pH na oko 8. Dihlorometan (700 mL) je dodat i mešan, i razdvajanje tečnosti je izvedeno da bi se dobila organska faza. Organska faza je zatim isprana sa 500 mL čiste vode i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, koja je proceđena i koncentrovana da bi se dobilo beličasta čvrsta supstanca (59.5 g, prinos 94.6%).

[0250] Dobijanje intermedijera 1.4:

[0252] Jedinjenje Boc-L-Val-OH (3.4 g, 15.8 mmol) i dihlorometan (60 mL) su dodati u rekacioni balon od 250 mL sa jednim grlom, i magnetno mešani. Zatim, N,N-diizopropiletilamin (2.0 g, 15.8 mmol), TBTU (5.1 g, 15.8 mmol), i jedinjenje 1.3 (6.0 g, 14.4 mmol, 1.0 ekv) su dodati, zatim su reagovali na sobnoj temperaturi u toku oko 1 sata, zatim je reakcija zaustavljena. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90) petroleum etar (60‑90)/etil acetat 50:1‑10 : 1) da bi se dobila bečasta čvrsta supstanca (7.9 g, prinos 96.2%).

[0253] Dobijanje intermedijera 1.5:

[0255] Jedinjenje 1.4 (7.9 g, 12.8 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (32 mL) su dodati u trogrli reakcioni balon od 250mL. Pod zaštitom azota i magnetim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (14.6 g, 128.0 mmol) je dodata na 0 do 10°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata, a zatim je reakcija zaustavljena. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, dihlorometan (70 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana sa dihlorometanom (30 mL). Organska faza je spojena, zatim isprana sa 100 mL čiste vode i organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđena je i koncentrovana da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (6.5 g, prinos 98.2%).

[0257] Dobijanje Hidrohlorida Jedinjenja 1:

[0259] Jedinjenje 1.5 (6.5 g, 12.6 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (32 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 5.0 mL, 15.0 mmol) na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku još 1 sat. Bela koloidna supstanca je istaložena, i reakcioni rastvor je uparen da se ukloni rastvarač. Izopropanol (60 mL) je dodat da se rastvori dobijeni ostatak uz zagrevanje, zatim je mešan na sobnoj temperaturi u toku 50 minuta, proceđen, i ispran izopropanolom (7 mL) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (3.2 g, prinos 46.0%).

[0261] <1>H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.34 (bs, 3H), 7.80 - 7.59 (m, 1H), 5.21 - 5.01 (m, 1H), 4.54 - 4.41 (m, 1H), 4.36 - 4.20 (m, 1H), 2.53 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.45 - 2.10 (m, 3H), 2.12 (s, 3H),2.05 - 1.97 (m, 1H), 1.78 - 0.90 (m, 19H),1.16 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.11 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 3.3 Hz, 3H), 1.03 (d, J = 3.2 Hz, 3H),0.86 - 0.73 (m, 1H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0263] MS: m/z [M H]+ 517.6

[0265] Primer 2. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 2

[0267]

[0270] 2

[0271]

[0273] ro or e nena

[0275] Dobijanje intermedijera 2.2:

[0277] Jedinjenje 1.4 (5.5 g, 9.63 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (22 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (10.9 g, 95.7 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (50 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (30 mL). Organska faza je spojena, zatim isprana sa 50 mL čiste vode i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđena je i koncentrovana pod sniženim pritiskom, i osušena pod vakuumom pomoću uljane pumpe da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (4.5 g, prinos 99.0%).

[0279] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 2:

[0281] Jedinjenje 1.5 (4.5 g, 9.5 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (27 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 3.8 mL, 11.4 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i mešan u toku još 1 sat. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Acetonitril (70 mL) je dodat i mešan na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. Posle ceđenja, čvrsta supstanca je isprana acetonitrilom (15 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 2 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (3.5 g, prinos 72.2%).

[0283] <1>H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.28 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.16 (bs, 3H), 5.14 - 5.03 (m, 1H), 4.55 (d, J = 4.1 Hz, 1H),4.27 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 4.09 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.52 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 2.40 - 2.07 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.05 - 1.96 (m,1H), 1.82 - 1.08 (m, 18H), 1.08 ‑0.89 (m, 7H), 0.85 - 0.71 (m, 1H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0285] MS: m/z [M H]+ 475.3.

[0288] 2

[0289] Primer 3. Sinteza hidrohlorida jedinjenja 3

[0291]

[0294]

[0297] Dobijanje intermedijera 3.1:

[0299] Jedinjenje Boc-L-Phe-OH (0.96 g, 3.6 mmol), dihlorometan (12 mL), N,N-diizopropiletilamin (0.44 g, 3.6 mmol), TBTU (1.16 g, 3.6 mmol), i 1.3 (1.25 g, 3.0 mmol, 1.0 ekv) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL, i magnetno mešani, zatim je reakcija nastavljena u toku 40 minuta. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑4 : 1) da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca (1.5 g, prinos 75.3%).

[0301] Dobijanje intermedijera 3.2:

[0303] Jedinjenje 3.1 (1.5 g, 2.3 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (7.5 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (2.63 g, 23 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (50 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (20 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 50 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (1.1 g, prinos 86.3%).

[0306] 2

[0307] Dobijanje hidrohlorida jedinjenja 3:

[0309] Jedinjenje 3.2 (1.1 g, 1.95 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (11 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 0.8 mL, 2.4 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i mešan u toku još 1 sat. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, i kristalizovana pomoću etanol/voda (2:1, 15 mL). Posle ceđenja, uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 50°C u toku 4 sata da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca (620 mg, prinos 52.9%).

[0311] <1>H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 7.88 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.38 - 7.17 (m, 5H), 5.15 - 5.05 (m, 1H), 4.57 (dd, J = 9.2, 4.6 Hz, 1H), 3.67 (dd, J = 9.5, 3.8 Hz, 1H), 3.30 (dd, J = 13.7, 3.8 Hz, 1H), 2.72 (dd, J = 13.7, 9.5 Hz, 1h), 2.53 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.28 - 2.07 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 2.05 - 1.97 (m, 1H), 1.78 - 1.10 (m, 18h), 1.00 - 0.85 (m, 1H), 0.95 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.83 - 0.72 (m, 1H), 0.80 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0313] MS: [M H]+ 565.40.

[0315] Primer 4. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 4

[0317]

[0320]

[0322] ro or e nena

[0324] Dobijanje intermedijera 4.1:

[0326] Jedinjenje Boc-L-Pro-OH (0.77 g, 3.6 mmol), dihlorometan (12 mL), N,N-diisopropiletilamin (0.44 g, 3.6 mmol), TBTU (1.16 g, 3.6 mmol), i jedinjenje 1.3 (1.25 g, 3.0 mmol, 1.0 ekv) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL, i magnetno mešani, zatim je reakcija nastavljena na sobnoj temperaturi u toku 40 minuta. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (1.6 g, prinos 86.9%).

[0329] 2

[0330] Dobijanje intermedijera 4.2:

[0332] Jedinjenje 4.1 (1.41 g, 2.3 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (7 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (2.63 g, 23 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (50 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (20 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 50 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (1.0 g, prinos 84.7%).

[0334] Dobijanje hidrohlorida jedinjenja 4:

[0336] Jedinjenje 3.2 (1.0 g, 1.94 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (11 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 0.8 mL, 2.4 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i posle pošto je završeno dodavanje, mešanje je nastavljeno u toku 17 sati. Bela čvrsta supstanca je iztaložena, proceđena, i isprana sa etil acetatom (3 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila čvrsta supstanca (560 mg, prinos 52.0%).

[0338] <1>H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 11.34 (bs, 1H), 8.01 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.34 (m, 1H), 5.16 - 5.03 (m, 1H), 5.01 - 4.89 (m, 1H), 4.43 (dd, J = 7.7, 4.6 Hz, 1H), 3.62 - 3.49 (m, 1H), 3.48 - 3.37 (m, 1H), 2.72 - 2.58 (m, 1H), 2.53 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.25 - 2.09 (m, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.07 - 1.96 (m, 2H), 1.88 - 1.10 (m, 18H),1.05 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 1.09 - 0.88 (m, 1H), 1.03 (d, J = 2.2 Hz, 3H), 0.85 - 0.72 (m, 1H), 0.80 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0340] MS: [M H]+ 515.4.

[0342] Primer 5. Sinteza hidrohlorida jedinjenja 5

[0344]

[0347] 2

[0348]

[0351] Dobijanje intermedijera 5.1:

[0353] Jedinjenje Boc-L-Trp-OH (1.10 g, 3.6 mmol), dihlorometan (12 mL), N,N-diisopropiletilamin (0.44 g, 3.6 mmol), i TBTU (1.16 g, 3.6 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL, i mešani na sobnoj temperaturi u toku 6 minuta. Posle toga, jedinjenje 1.3 (1.25 g, 3.0 mmol, 1.0 ekv) je dodato, i magnetno mešano, zatim reakcija je nastavljena na sobnoj temperaturi u toku 40 minuta. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (1.7 g, prinos 80.7%).

[0355] Dobijanje intermedijera 5.2:

[0357] Jedinjenje 5.1 (1.58 g, 2.3 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (8 mL) su dodati u reakcioni trogrli balon sa 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (2.63 g, 23 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (50 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (20 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 50 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene i koncentrovane da se dobije beličasta čvrsta supstanca (1.20 g, prinos 88.5%).

[0359] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 5:

[0361] [0096] Jedinjenje 3.2 (1.15 g, 1.95 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (11 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 0.8 mL, 2.4 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, i mešana i pulpificirana sa petroleum etar/etil acetatom (5 : 1, 30 mL). Posle ceđenja, uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (690 mg, prinos 56.7%).

[0363] <1>H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 9.35 (s, 1H), 7.96 (bs, 3H), 7.74 - 7.41 (m, 2H),7.38 -7.16 (m, 2H), 7.13 - 6.74 (m, 2H), 5.13 - 4.96 (m, 1H), 4.60 - 4.20 (m, 2H), 3.54 - 3.20 (m, 2H), 2.35 - 2.22 (m, 1H), 2.17 - 1.96 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.92 - 1.80 (m, 1H), 1.79 - 0.99 (m, 18H), 1.00 - 0.63 (m, 8H), 0.75 (s, 3H), 0.53 (s, 3H).

[0365] MS:[M+H]+ 604.4.

[0367] Primer 6. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 6

[0369]

[0372]

[0375] Dobijanje intermedijera 6.1:

[0377] Jedinjenje 1.3 (6.26 g, 15.0 mmol), Boc-L-Ala-OH (3.41 g, 18 mmol), dihlorometan (60 mL), trietilamin (3.04 g, 30 mmol), HOBT (0.41 g, 3 mmol), i EDCI (3.45 g, 18 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL, i magnetno mešani. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i reakcioni rastvor je ispran pomoću H<2>O (50 mL), 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (8.20 g, prinos 92.9%).

[0379] Dobijanje intermedijera 6.2:

[0381] Jedinjenje 6.1 (7.9 g, 13 mmol, 1.0 ekv.), i dihlorometan (40 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (14.8 g, 130 mmol) je dodata na 0°C, zatim reagovala na sobnoj

[0384] 1

[0385] temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (100 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene i koncentrovane pod sniženim pritiskom, i osušene pod vakuumom pomoću uljane pumpe da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (6.25 g, prinos 95.3%).

[0387] Dobijanje hidrohlorida jedinjenja 6 H:

[0389] Jedinjenje 6.2 (6.0 g, 12.3 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (60 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 5 mL, 15 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 6 sati. Bela čvrsta supstanca je staložena, proceđena, i isprana etil acetatom (15 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (4.7 g, prinos 72.9%).

[0391] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.33 (bs, 3H), 7.96 - 7.67 (m, 1H), 5.20 - 5.00 (m, 1H), 4.76 - 4.36 (m, 2H), 2.53 (t, J =8.6 Hz, 1H), 2.39 - 2.07 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.05 - 1.96 (m, 1H), 1.80 - 0.89 (m, 28H), 0.88 - 0.71 (m, 1H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3h).

[0393] MS: [M+H]+ 489.4.

[0395] Primer 7. Sinteza hidrohlorida jedinjenje 7

[0397]

[0400]

[0403] Dobijanje intermedijera 7.1:

[0406] 2

[0407] Jedinjenje 1.3 (2.09 g, 5.0 mmol), Boc-L-Leu-OH (1.50 g, 6.0 mmol), dihlorometan (20 mL), trietilamin (0.76 g, 7.5 mmol), HOBT (0.14 g, 1 mmol), i EDCI (1.15 g, 6 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL, i magnetno mešani. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i reakcioni rastvor je ispran sa H<2>O (50 mL), 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (3.0 g, prinos 95.0%).

[0409] Dobijanje intermedijera 7.2:

[0411] Jedinjenje 7.1 (3.0 g, 4.7 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (12 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (5.42 g, 47 mmol) je dodata na 0°C, mešana u toku 20 minuta, zatim reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (30 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (10 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 30 mL čiste vode i osušene anhidrovanim natrijum sulfatom. Proceđene i koncentrovane pod sniženim pritiskom, i osušene pod vakuumom pomoću uljane pumpe da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (1.30 g, prinos 51.5%).

[0413] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 7:

[0415] Jedinjenje 7.2 (1.30 g, 2.5 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (13 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 50 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 5 mL, 15 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 6 sati. Bela čvrsta susptanca je staložena, proceđena i isprana etil acetatom (15 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sati da bi se dobila bela čvsta supstanca (0.9 g, prinos 64.8%).

[0417] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.40 (s, 3H), 7.55 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.17 - 5.05 (m, 1H), 4.57 - 4.44 (m, 1H), 4.36 -4.21 (m, 1H), 2.52 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.35 - 1.97 (m, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.96 - 0.73 (m, 35H), 0.80 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0419] MS: m/z [M+H]+ 531.4.

[0420] Primer 8. Kombinovanje hidrohlorida Jedinjenja 8

[0422]

[0425]

[0428] Dobijanje intermedijera 8.1:

[0430] Jedinjenje 1.3 (5.00 g, 11.98 mmol, 1.0 ekv), Boc-L-Gln-OH (3.54 g, 14.38 mmol), DMAP (0.15 g, 1.20 mmol), i dihlorometan (40 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, smeša je ohlađena u kupatilu ledvoda. Rastvor DCC (2.97 g, 14.38 mmol) je dodat u dihlorometan (50 mL), i pošto dodadavanje je završeno, reagovao je na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Reakcioni rastvor je ispran 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je osušen preko anhidrovanog Na<2>SO<4>, i proceđen. Koncentrovan je pod sniženim pritiskom, i osušen pod vakuumom pomoću uljane pumpe da se dobije bela čvrsta supstanca (4.42 g, prinos 57.2%).

[0432] Dobijanje intermedijera 8.2:

[0434] Jedinjenje 8.1 (4.42 g, 6.84 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (22 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (7.80 g, 68.43 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dihlorometan (100 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (3.0 g, prinos 80.3%).

[0437] 4

[0438] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 8:

[0440] Jedinjenje 8.2 (1.10 g, 2.02 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (12 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 50 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 0.8 mL, 2.4 mmol) na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Smeša je koncentrovana da se ukloni dihlorometan pod sniženim pritiskom, i mešana je i pulpificirana uz dodatak metil terc-butil etar/izopropanola (4 : 1, 20 mL) u toku 2 sata. Posle ceđenja, metil terc-butil etar/izopropanol (4 : 1, 5 mL) je prethodno ohlađen radi ispiranja. Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (0.85 g, prinos 72.4%).

[0442] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.67 - 8.59 (m, 1H), 8.36 (bs, 3H), 7.63 (bs, 1H), 6.92 (bs, 1H), 5.30 - 4.96 (m, 1H), 4.80 - 4.31 (m, 2H), 2.80 - 1.94 (m, 6H), 2.52 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.89 - 0.70 (m, 27H), 0.79 (s, 3H), 0.60 (s, 3H).

[0444] MS: m/z [M+H]+ 546.4

[0446] Primer 9. Sinteza hidrohlorid Jedinjenja 9

[0448]

[0451]

[0454] Dobijanje intermedijera 9.1:

[0456] Jedinjenje 1.3 (9.60 g, 23.1 mmol, 1.0 ekv), Boc-Lys(Boc)‑OH (8.00 g, 23.1 mmol), DMAP (0.28 g, 2.3 mmol), i dihlorometan (100 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, smeša je ohlađena u kupatilu ledvoda. Rastvor DCC (5.20 g, 25.4 mmol) u dihlorometanu (20 mL) je dodat u kapima dok je unutrašnja temperatura kontrolisana na 3 do 5°C, i pošto je dodavanje završeno, reagovao je na sobnoj temepraturi u toku 17 sati. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila bela pena kao čvrsta supstanca (10.0 g, prinos 61.0%).

[0457] Dobijanje intermedijera 9.2:

[0459] Jedinjenje 9.1 (10.5 g, 14.1 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (50 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (16.0 g, 141.0 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Reakcioni rastvor je dodat u kapima u rastvor NaHCO<3>(28 g) u H<2>O (100 mL) uz mešanje, i dodat je dihlorometan (150 mL). Izvedeno je razdvajanje tečnosti, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (100 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene i koncentrovane da bi se dobila svetlo žuta penasta čvrsta supstanca (7.1 g, prinos 92%).

[0461] Dobijanje hidrohlorida jedinjenja 9:

[0463] Jedinjenje 9.2 (7.0 g, 12.8 mmol, 1.0 ekv.), i etil acetat (20 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 50 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 5.1 mL, 15.3 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Smeša je koncentrovana da se ukloni etil acetat pod sniženim pritiskom, i mešana je i pulpificirana dodavanjem metil terc-butil etra (100 mL) u toku 2 sata. Posle ceđenja, metil terc-butil etar (20 mL) je korišćen za ispiranje. Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 45°C u toku 3 sata da bi se dobla bela čvrsta supstanca (7.2 g, prinos 90.7%).

[0465] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.30 (bs, 3H), 8.13 - 7.98 (m, 1H), 7.89 (bs, 3H), 5.20 - 4.96 (m, 1H), 4.60 - 4.19 (m, 2H), 3.17 - 2.85 (m, 2H), 2.51 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 2.46 - 0.70 (m, 35H), 2.11 (s, 3H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0467] MS: m/z [M+H]+ 546.8.

[0468] Primer 10. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 10

[0470]

[0473]

[0476] Dobijanje intermedijera 10.1:

[0478] Jedinjenje 1.1 (20.0 g, 62.8 mmol, 1.0 ekv), Boc-L-Ala-OH (14.3 g, 75.4 mmol), DMAP (0.8 g, 6.3 mmol), i dihlorometan (150 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 1,000 mL. Pod zaštitom azota i magentno mešani, rastvor DCC (15.5 g, 75.4 mmol) u dihlorometanu (50 mL) je dodat na 0°C, zatim je reagovao na sobnoj temperaturi u toku 6 sati. Reakcioni rastvor je proceđen, kolač je ispran pomoću dihlorometana (100 mL). Filtrat je koncentrovan, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑4 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (27.3 g, prinos 88.7%).

[0480] Dobijanje intermedijera 10.2:

[0482] Jedinjenje 10.1 (27.0 g, 55.1 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (135 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 500 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (62.8 g, 551 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (300 mL) je dodat, i zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje. Dihlorometan (150 mL) je korišćen za ekstrahovanje vodene faze. Organske faze su spojene, zatim isprane sa 300 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (20.9 g, prinos 97.3%).

[0483] Dobijanje intermedijera 10.3:

[0485] Jedinjenje 10.2 (5.0 g, 12.8 mmol), Boc-L-Val-OH (3.3 g, 15.4 mmol), dihlorometan (50 mL), trietilamin (1.6 g, 15.4 mmol), HOBT (0.7 g, 5.1 mmol), i EDCI (3.0 g, 15.4 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 100 mL, i magnetno mešani. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i reakcioni rastvor je ispran pomoću H<2>O (50 mL), 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑5 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (7.2 g, prinos 95.6%).

[0487] Dobijanje intermedijera 10.4:

[0489] Jedinjenje 10.3 (6.0 g, 10.2 mmol, 1.0 ekv.), i dihlorometan (30 mL) su dodati u reakcini balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (11.6 g, 102 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dihlorometan (100 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa100 mL čiste vode i osušene anhidrovanim natrijum sulfatom. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (4.6 g, prinos 92.3%).

[0491] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 10:

[0493] Jedinjenje 10.3 (4.6 g, 9.4 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (50 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 3.8 mL, 11.4 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Bela čvrsta supstanca je staložena, proceđena i isprana etil acetatom (20 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca(4.5 g, prinos 86.4%).

[0495] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.28 (bs, 3H), 8.11 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.51 (p, J = 7.0 Hz, 1H),4.23 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.53 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.40 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.25‑2.09 (m,2H), 2.08‑1.06 (m, 18H),1.54‑1.50 (m, 3H), 1.22‑1.12 (m, 6H)1.05‑0.73 (m, 2H) , 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0497] MS: m/z [M+H]+ 489.4.

[0498] Primer 11. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 11

[0500]

[0503]

[0506] Dobijanje intermedijera 11.1:

[0508] Jedinjenje 10.1 (5.0 g, 12.8 mmol), Boc-L-Ala-OH (2.9 g, 15.4 mmol), dihlorometan (50 mL), trietilamin (1.6 g, 15.4 mmol), HOBT (0.7 g, 5.1 mmol), i EDCI (3.0 g, 15.4 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL, i magnetno mešani. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i reakcioni rastvor je ispran pomoću H<2>O (50 mL), 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (6.7 g, prinos 93.5%).

[0510] Dobijanje intermedijera 11.2:

[0512] Jedinjenje 11.1 (5.8 g, 10.3 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (30 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (11.8 g, 103 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dodat je dihlorometan (100 mL), a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (4.5 g, prinos 94.4%).

[0513] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 11:

[0515] Jedinjenje 11.2 (4.5 g, 9.8 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (50 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 3.9 mL, 11.7 mmol) na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Bela čvrsta supstanca je staložena, proceđena, i isprana etil acetatom (20 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca(4.2 g, prinos 86.5%).

[0517] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.14 (m, 4H), 5.05 (m, 1H), 4.47 (dt, J= 21.0, 6.9 Hz, 1H), 2.53 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.24‑1.97 (m, 2H), 1.94 - 1.07 (m, 19H), 1.69‑1.65 (m, 3H), 1.52‑1.47 (m, 3H), 0.79 (s,3H), 1.05‑0.73 (m, 2H), 0.61(s, 3H).

[0519] MS: m/z [M+H]+ 461.3.

[0521] Primer 12. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 12

[0523]

[0526]

[0529] Dobijanje intermedijera 12.1:

[0531] Jedinjenje 10.1 (5.0 g, 12.8 mmol), Boc-Gly-OH (2.7 g, 15.4 mmol), dihlorometan (50 mL), trietilamin (1.6 g, 15.4 mmol), HOBT (0.7 g, 5.1 mmol), i EDCI (3.0 g, 15.4 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i reakcioni rastvor je ispran pomoću H<2>O (50 mL), 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑3 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca(6.5 g, prinos 93.1%).

[0534] 4

[0535] Dobijanje intermedijera 12.2:

[0537] Jedinjenje 11.1 (5.8 g, 10.6 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (30 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 100 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodata je trifluorosirćetna kiselina (12.1 g, 106 mmol) na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dodat je dihlorometan (100 mL), a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila bela čvrsta supstanca (4.5 g, prinos 95.0%).

[0539] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 12:

[0541] Jedinjenje 11.2 (4.5 g, 10.1 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (50 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 4.0 mL, 12.0 mmol) na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Bela čvrsta supstanca je staložena, proceđena i isprana pomoću etil acetata (20 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca(4.6 g, prinos 94.5%).

[0543] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.49 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.08 (bs, 3H), 5.06 (m, 1H), 4.55 (p, J = 7.1 Hz, 1H), 4.35‑3.94 (m, 2H), 2.51 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.17‑1.95 (m, 2H) 1.94 - 0.88 (m, 19H), 1.51‑1.45(m,3H),0.87‑0.72 (m, 1H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0545] MS: m/z [M+H]+ 447.3.

[0546] Primer 13. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 13

[0548]

[0551]

[0553] Hidrohlorid jedinjenja 13

[0555] Dobijanje intermedijera 13.2:

[0557] Jedinjenje 13.1 (10.0 g, 55.5 mmol, 1.0 ekv), Boc-L-Val-OH (12.0 g, 55.5 mmol), DMAP (1.4 g, 11.5 mmol), i dihlorometan (100 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 500 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je rastvor DCC (13.7 g, 66.6 mmol) u dihlorometanu (50 mL) na 0°C, i zatim reagovao na sobnoj temperaturi u toku 6 sati. Reakcioni rastvor je proceđen, i kolač je ispran pomoću dihlorometana (100 mL). Filtrat je koncentrovan, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 20 : 1‑6:1) da bi se dobilo bezbojno ulje (20.5 g, prinos 97.3%).

[0559] Dobijanje intermedijera 13.3:

[0561] Jedinjenje 13.2 (20.0 g, 52.7 mmol), i THF (300 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 1,000 mL.10% Pd/C (2 g) je dodato posle zamene azotom. Posle zamene azotom, hidrogenizovano je na sobnoj temperaturi u toku 6 sati pod normalnim pritiskom. Posle zamene azotom, proceđeno je i isprano pomoću THF (50 mL). Filtrat je koncentrovan, uparen da se ukloni rastvarač, i osušen pod vakuumom pomoću uljane pumpe na sobnoj temperaturi da bi se dobila bela čvrsta supstanca(14.9 g, prinos 97.7%).

[0562] Dobijanje intermedijera 13.4:

[0564] Jedinjenje 1.1 (5.0 g, 15.7 mmol, 1.0 ekv), Jedinjenje 13.3 (5.4 g, 18.7 mmol), DMAP (0.2 g, 1.6 mmol), i dihlorometan (50 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor DCC (3.9 g, 18.9 mmol) u dihlorometanu (15 mL) je dodat na 0°C, zatim je reagovao na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. Reakcioni rastvor je proceđen, i kolač je ispran pomoću dihlorometana (20 mL). Filtrat je koncentrovan, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 20 : 1‑3 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (8.7 g, prinos 93.9%).

[0566] Dobijanje intermedijera 13.5:

[0568] Jedinjenje 13.4 (8.0 g, 13.6 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (40 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota, dodata je trifluorosirćetna kiselina (15.5 g, 136 mmol) na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dodat je dihlorometan (150 mL), a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušne pomoću anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđena je i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca (6.5 g, prinos 97.8%).

[0570] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenje 13:

[0572] Jedinjenje 13.4 (6.0 g, 12.3 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (60 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 4.9 mL, 14.7 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Bela čvrsta supstanca je staložena, proceđena i isprana etil acetatom (20 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (5.2 g, prinos 80.6%).

[0574] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.76 (s, 3H), 5.25 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.08 (q, J = 2.8 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 2.62 - 2.45 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 2.01 (dt, J = 11.9, 3.3 Hz, 1H), 1.78 - 1.63 (m, 5H), 1.63 - 1.58 (m, 1H), 1.56 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 1.50 (t, J = 5.1 Hz, 3H), 1.45 ‑1.32 (m, 3H), 1.28 (dd, J = 13.2, 3.9 Hz, 2H), 1.22 (dd, J = 7.0, 2.7 Hz, 7H), 1.20 - 1.09 (m, 4H), 0.96 (dd, J = 12.3, 4.6 Hz, 1H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0576] MS: m/z [M+H]+490.3.

[0579] 4

[0580] Primer 14. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 14

[0582]

[0585]

[0587] Hidrohlorid jedinjenja 14

[0589] Dobijanje intermedijera 14.1:

[0591] Jedinjenje 1.1 (50.0 g, 157.0 mmol, 1.0 ekv), Boc-Gly-OH (33.0 g, 188.2 mmol), DMAP (1.9 g, 15.5 mmol), i dihlorometan (500 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 1,000 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je rastvor DCC (38.9 g, 188.5 mmol) u dihlorometanu (80 mL) na 0°C, zatim je reagovao na sobnoj temperaturi u toku 2 sata, zatim je reakcija zaustavljena. Reakcioni rastvor je proceđen, i kolač je ispran pomoću dihlorometana (100 mL). Filtrat je koncentrovan, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 20 : 1‑4 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (71.8 g, prinos 95.8%).

[0593] Dobijanje intermedijera 14.2:

[0595] Jedinjenje 1.2 (30 g, 63.1 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (1200 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 1,000 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (71.9 g, 631 mmol) je dodata na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (500 mL) i izopropanol (50 mL) su dodati, i zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje. Organska faza je zatim isprana sa 500 mL čiste vode i osušena anhidrovanim natrijum sulfatom. Proceđena je i koncentrovana da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (21.7 g, prinos 91.6%).

[0596] Dobijanje intermedijera 14.3:

[0598] Jedinjenje Boc-L-Val-OH (3.4 g, 15.8 mmol), dihlorometan (60 mL), N,N-diizopropiletilamin (2.0 g, 15.8 mmol), TBTU (5.1 g, 15.8 mmol), i jedinjenje 14.2 (5.4 g, 14.4 mmol, 1.0 ekv) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL, zatim su reagovali na sobnoj temperaturi u toku 40 minuta. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 20 : 1‑5 :1) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (7.8 g, prinos 92.6%).

[0600] Dobijanje intermedijera 14.4:

[0602] Jedinjenje 1.4 (7.8 g, 13.6 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (32 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodata je trifluorosirćetna kiselina (15.5 g, 135.9 mmol) na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i uparena da se ukloni rastvarač. Dihlorometan (100 mL) je dodat, a zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (6.2 g, prinos 96.2%).

[0604] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenje 14:

[0606] Jedinjenje 1.5 (6.0 g, 12.6 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (42 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 5.0 mL, 15.0 mmol) i metil terc-butil etru (42 mL) su dodati na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u toku 50 minuta, i mešana je na 0°C u toku 1 sata. Posle ceđenja, etil acetat (10 mL) je prethodno ohlađen radi ispiranja da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca (5.3 g, prinos 82.0%).

[0608] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.54 (s, 1H), 8.38 - 8.02 (s, 3H), 5.18 - 4.96 (m, 1H), 4.33 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H), 2.52 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 2.43 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.02 (dd, J = 12.3, 3.4 Hz, 1H), 1.82 - 1.56 (m, 6H), 1.56 -1.32 (m, 6H), 1.32 - 1.20 (m, 4h), 1.16 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.12 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.03 - 0.81 (m, 2H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0610] MS: m/z [M+H]+ 475.3.

[0613] 4

[0614] Primer 15. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 15

[0616]

[0619]

[0621] ro or e nena

[0623] Dobijanje intermedijera 15.1:

[0625] Jedinjenje 14.2 (5.0 g, 13.3 mmol), Boc-Gly-OH (2.8 g, 16.0 mmol), dihlorometan (50 mL), trietilamin (1.6 g, 16.0 mmol), HOBt (0.7 g, 5.1 mmol), i EDCI (3.1 g, 16.2 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i reakcioni rastvor je ispran pomoću H<2>O (50 mL), 1N HCl (50 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑2:1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (6.2 g, prinos 87.4%).

[0627] Dobijanje intermedijera 15.2:

[0629] Jedinjenje 15.1 (3.0 g, 5.6 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (15 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodata je trifluorosirćetna kiselina (6.4 g, 56 mmol) na 0°C, zatim je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dodat je dihlorometan (100 mL), 100 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata je korišćeno za ispiranje, i vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (50 mL). Organske faze su spojene, zatim isprane sa 100 mL čiste vode i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila bela čvrsta supstanca (2.0 g, prinos 82.1%).

[0631] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 15:

[0633] Jedinjenje 15.2 (2.0 g, 4.6 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (20 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, dodat je

[0636] 4

[0637] rastvor hlorovodonika u etil acetatu (3 M, 1.9 mL, 5.7 mmol) na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 1 sata. Bela čvrsta supstanca je staložena i proceđena. Čvrsta supstanca je rastvorena pomoću refluksa zagrevanjem sa MeCN/H<2>O (23 mL), mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 sat, i mešana na 0°C u toku 1 sat. Posle ceđenja, MeCN (5 mL) je korišćen za ispiranje. Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (1.2 g, prinos 55.3%).

[0639] 1H NMR (400 MHz, CD<3>OD) δ 5.10 - 5.02 (m, 1H), 4.03 (s, 2H), 3.74 (s, 2H), 2.63 (t, J =9.0 Hz, 1H), 2.17 - 2.00 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.85 - 1.10 (m, 18H), 1.07 - 0.90 (m, 1H), 0.88 - 0.77 (m, 1H), 0.85 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0641] MS: m/z [M+H]+ 433.5.

[0643] Primer 16. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 16

[0645]

[0648]

[0650] ro or e nena

[0652] Dobijanje intermedijera 16.1:

[0654] L-OH-IIe-Boc (2.00 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), EDCI (1.65 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), HOBt (0.2 g, 1.40 mmol, 1.2 ekv) i N,N-diizopropiletilamin (1.86 g, 14.38 mmol, 2.0 ekv) su dodati u balon u obliku patlidžana od 100 mL. Dodat je dihloro-metan (25 mL), i mešan u ledenom upatilu do homogene faze. Zatim, 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv) je polako dodat u reakcioni rastvor, mešan u ledenom kupatilu u toku 1 sat, i mešan na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Određeno je da je reakcija završena pomoće TLC detekcije. Reakcioni rastvor je podešen na neutralno pomoću 1.0 M hlorovodonične kiseline, izvedeno je razdvajanje tečnosti, i organska faze isprane pomoću zasićenog NaHCO<3>su spojene, i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata u toku 2.0 sata; i rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobio bezbojni koloid (4.12 g, prinos 90.95%).

[0657] 4

[0658] Dobijanje intermedijera 16.2:

[0660] 16.1 (4.12 g, 6.53 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (40 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani do homogene faze. Dodata je trifluorosirćetna kiselina (12 mL), i reakcioni rastvor je polako postao svetlo žut, i mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Detektovano je da je reakcija završtena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno sa dihlorometanom. pH rastvora je podešen na oko 8 sa zasićenim NaHCO<3>, i razdvajanje tečnosti je izvedeno da se dobije organaska faza, koja je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje (3.15 g, prinos 90.78%).

[0662] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 16:

[0664] 16.2 (3.15 g, 5.94 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (50 mL) su dodati u reakcioni balon od 50 mL, i mešani do homogene faze. pH reakcionog rastvora je podešen na oko 3 do 4 dodavanjem rastvora hlorovodonika u etil acetatu. Uz dododavanje HCl/etil acetata, bela čvrsta supstanca je staložena iz reakcionog rastvora; i mešana i kristalizovana na sobnoj temperaturi u toku 1.0 sata. Proceđena je da bi se dobila bela čvrsta supstanca(1.82 g, prinos 54.17%).

[0666] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.39 (s, 3H), 7.40 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.48 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 2.53 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.27 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.01 (d, J = 118 Hz, 1H), 1.81 (s, 5H), 1.69 (d, J = 11.6 Hz, 6H), 1.49 (s, 2H), 1.41 (d, J = 10.3 Hz, 3H), 1.31 - 1.24 (m, 1H), 1.24 - 1.20 (m, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.07 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.06 -1.00 (m, 6H), 0.98 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.80 (s, 4H), 0.61 (s, 3H).

[0668] MS: m/z [M+H]+ 531.39.

[0670] Primer 17. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 17

[0672]

[0675]

[0679] 4

[0680] Dobijanje intermedijera 17.1:

[0682] 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv), L-HO-Met-Boc (2.15 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), DMAP (0.10 g, 0.72 mmol, 0.1 ekv), i dihlorometan (20 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešanani na ledenom kupatilu do homogene faze. DCC (1.78 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv) je rastvoren u 10 mL dihlormetana, dodat u reakcioni rastvor, zatim mešan na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Bela čvrsta supstanca DCU je uklonjena ceđenjem, i organska faze su isprane pomoću zasićenog NaHCO<3>, spojene, i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata; rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobila bela čvrsta masa, i prečišćena je pomoću kolone na silikagelu (petroleum etar (60‑90)/etil acetat = 10 : 1) da se na kraju dobije bela čvrsta supstanca (3.4 g, prinos 72.96%).

[0684] Dobijanje intermedijera 17.2:

[0686] 17.1 (3.4 g, 4.32 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (30 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani do homogene faze. Dodata je trifluorosirćetna kiselina (9 mL), i reakcioni rastvor je polako postao svetlo žut, i mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sata. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno u 10 mL dihlormetana. pH rastvora je podešen na oko 8 zasićenim NaHCO<3>, tečnost je razdvojena, i organske faze su spojene, i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje (1.82 g, prinos 63.41%).

[0688] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 17:

[0690] 17.2 (1.82 g, 3.33 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (5 mL) su dodati u reakcioni balon od 25 mL, i mešani do homogene faze. pH reakcionog rastvora je podešen na oko 3 do 4 dodavanjem rastvora hlorovodonika u etil acetatu. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobila uljasta tečnost. Etil acetat (10 mL) je dodat radi mešanja i pulpifikacije. Reakcioni rastvor je polako postao bela suspenzija. Posle pulpifikacije u toku 3 sata, proceđen je da bi se dobila bela čvrsta supstanca (1.2 g, prinos 61.86%).

[0692] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.56 (s, 3H), 7.62 (s, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.53 (s, 2H), 2.77 (s, 2H), 2.53 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.42 (s, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.01 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 1.79 (s, 1H), 1.69 (d, J = 11.9 Hz, 4H), 1.66 - 1.58 (m, 2H), 1.54 (d, J= 13.3 Hz, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.41 (t, J= 13.0 Hz, 2H), 1.28 (d, J= 12.9 Hz, 4H), 1.19 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 1.05 (d,J = 6.8 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.80 (s, 4H), 0.61 (s, 3H).

[0694] MS: m/z [M+H]+ 549.4.

[0697] 4

[0698] Primer 18. Sinteza hidrohlorida Jedinjenje 18

[0700]

[0703]

[0706] Hidrohlorid jedinjenja 18

[0708] Dobijanje intermedijera 18.1:

[0710] 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv), L-HO-Glu-Boc‑5-OBn (2.91 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), DMAP (0.10 g, 0.72 mmol, 0.1 ekv), i dihlorometan (20 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani u ledenom kupatilu da se dobije homogena faza. DCC (1.78 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv) je rastvoren u 10 mL dihlormetana, dodat u reakcioni rastvor, zatim je mešan na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Bela čvrsta supstanca DCU je uklonjena ceđenjem, i filtrat je ispran pomoću zasićenog NaHCO<3>. Organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat = 10 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (4.7 g, prinos 88.85%).

[0712] Dobijanje intermedijera 18.2:

[0714] Kotao za hidrogenizaciju je pripremljen i konfigurisan sa uređajem za magnetno mešanje. 18.1 (4.7 g, 6.38 mmol, 1.0 ekv), i izopropanol (40 mL) su dodati u reakcioni balon, dodat je Pd/C (10%), zamena vodonika je izvedena 3 puta, reakcija je izvedena pod sniženim pritiskom od oko 1 MPa, i mešana na sobnoj temperaturi u toku 8 sati. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno pomoću dihlorometana i isprano vodom. Organske faze su spojene, i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobila bela čvrsta supstanca (3.12 g, prinos 75.54%).

[0715] Dobijanje intermedijera 18.3:

[0717] 18.2 (3.0 g, 4.64 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (30 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani do homogene faze. Trifluorosirćetna kiselina (9 mL) je dodata, i reakcioni rastvor je polako postao beldo žut, i mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno dihlorometanom. pH rastvora je podešen na oko 8 sa zasićenim NaHCO<3>, i tečnost je razdvojena da bi se dobila organska faza, koja je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje (1.82 g, prinos 71.65%).

[0719] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 18:

[0721] Intermedijer 3 (1.82 g, 3.33 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (5 mL) su dodati u reakcioni balon od 25 mL, i mešani do homogene faze. HCl/etil acetat je dodat da se podesi pH reakcionog rastvora na oko 3 do 4, i mešan je u toku 10 minuta. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobila bezbojna uljana tečnost. Etil acetat (20 mL) je dodat i mešan bez potpunog bistrenja. Metil terc-butil etar (20 mL) je dodat, i reakcioni rastvor je polako postao bela suspenzija. Posle pulpifikacije u toku 3 sata, proceđen je da bi se dobila bela čvrsta supstanca(1.33 g, prinos 68.56%).

[0723] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.39 - 8.23 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.21 - 8.08 (s, 3H), 5.14 - 5.04 (s, 1H), 4.77 - 4.60 (s, 1H), 4.52 - 4.39 (dd, J= 8.0, 4.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.64 (s, 2H), 2.58 ‑2.47 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 2.44 - 2.33 (s, 1H), 2.33 - 2.21 (dd, J= 11.9, 6.0 Hz, 2H), 2.12 -2.07 (s, 3H), 2.04 - 1.96 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 1.81 - 1.56 (t, J = 15.4 Hz, 7H), 1.56 - 1.32 (m, 7H), 1.31 - 1.07 (m, 6H), 1.05 - 1.00 (d, J = 3.0 Hz, 3H), 1.00 - 0.93 (d, J = 4.7 Hz, 4H), 0.82 ‑0.75 (s, 4H), 0.65 - 0.55 (s, 3H).

[0725] MS: m/z[M+H]+ 546.4.

[0727] Primer 19. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 19

[0729]

[0732]

[0736] 1

[0737] Dobijanje intermedijera 19.1:

[0739] L-HO-His-Boc (2.20 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), EDCI (1.65 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), HOBt (0.2 g, 1.40 mmol, 1.2 ekv), N,N-diizopropiletilamin (1.86 g, 14.38 mmol, 2.0 ekv), i dihlorometan (3 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani u ledenom kupailu do homogene faze. Zatim, 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv) je polako dodat u reakcioni rastvor, mešan u ledenom kupatilu u toku 1 sat, i mešan na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Određeno je da je reakcija završena pomoću TLC detekcije. Reakcioni rastvor je podešen do neutralnog sa 1.0 M hlorovodoničnom kiselinom, tečnost je razdvojena, i organska faza je isprana pomoću zasićenog NaHCO<3>, i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo svetlo žuto ulje (3.81 g, prinos 96.38%).

[0741] Dobijanje intermedijera 19.2:

[0743] 19.1 (3.81 g, 6.92 mmol, 1.0 ekv), dihlorometan (60 mL), i trifluorosirćetna kiselina (20 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL. Reakcioni rastvor je polako poastao tamno žut, i mešan je na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno sa dihlorometan. pH rastvora je podešen na oko 8 sa zasićenim NaHCO<3>, izvedeno je razdvajanje tečnosti, i dobijena je organaska faza, i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje (3.09 g, prinos 95.96%).

[0745] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 19 :

[0747] 19.2 (3.09 g, 5.57 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (20 mL) su dodati u reakcioni balon od 50 mL, i mešani radi rastvaranja. pH reakcionog rastvora je podešen na oko 3 do 4 dodavanjem rastvora hlorovodonika u etil acetatu. Bela čvrsta supstanca je polako staložena iz reakcionog rastvora. Posle mešanja i kristalizacije u toku 4 sata, proceđena je da bi se dobila bela čvrsta supstanca (2.11 g, prinos 64.33%).

[0749] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 13.88 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.58 (s, 3H), 7.56 (d, J = 24.9 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.98 (s,1H), 4.50 (s, 1H), 3.57 (s, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.00 (s, 1H), 1.66 (s, 6H), 1.50 (s, 4H), 1.39 (s, 2H), 1.32 - 1.11 (m,7H), 1.04 (s, 7H), 0.79 (s, 4H), 0.60 (s, 3H).

[0751] MS: m/z [M H]+ 555.4.

[0754] 2

[0755] Primer 20. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 20

[0757]

[0760]

[0763] Dobijanje intermedijera 20.1:

[0765] 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv), L-HO-Tyr-Boc-O-Boc (2.74 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), DMAP (0.10 g, 0.72 mmol, 0.1ekv), i dihlorometan (20 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani u ledenom kupatilu do homogene smeše. DCC (1.78 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv) je rastvoren u 10 mL dihlormetana, zatim je dodat u reakcioni rastvor, zatim je mešan na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Bela čvrsta supstanca je uklonjena ceđenjem, i organske faze su isprane zasićenim NaHCO<3>, spojene, i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata; rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobila bela čvrsta masa, i prečišćena je pomoću kolone na silikagelu (petroleum etar (60‑90)/etil acetat = 10 : 1 do 5 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca (0.6 g, prinos 10.69%).

[0767] Dobijanje intermedijera 20.2:

[0769] 20.1 (0.60 g, 0.77 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (6.0 mL) su dodati u reakcioni balon od 25 mL, i mešani do homogene faze. Trifluorosirćetna kiselina (2.0 mL) je dodata, i mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 sat. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno sa dihlorometanom. Zasićeni vodeni rastvor NaHCO<3>je korišćen za ispiranje, i pH vodene faze je bio 7 do 8. Izvedeno je razdvajanje tečnosti, i organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje (0.43 g, prinos 95.56%).

[0770] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 20:

[0772] 20.2 (0.4 g, 0.68 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (6.0 mL) su dodati u reakcioni balon od 25 mL, i mešani radi rastvaranja. HCl/etil acetat je dodat da se podesi pH reakcionog rastvora do oko 3 do 4. Pošto je dodat metil terc-butil etar (1.5 mL), mešanje i kristalizacija su izvedeni u toku 1 sata. Posle ceđenja i sušenja dobijena je bela čvrsta supstanca (0.41 g, prinos 97.62%).

[0774] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.11 (s, 5H), 7.19 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.43 (s, 1H), 3.30 (s, 1H), 3.06 (s, 1H), 2.43 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 2.24 (s, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.90 (s, 1H), 1.82 - 1.56 (m, 5H), 1.49 (s, 5H), 1.38 - 1.20 (m, 4H), 1.22 - 1.07 (m, 4H), 1.07 - 0.86 (m, 8H), 0.77 (s, 3H), 0.70 (s, 1H), 0.56 (s, 3H).

[0776] MS: m/z[M+H]+ 581.4.

[0778] Primer 21. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 21

[0780]

[0783]

[0786] Dobijanje intermedijera 21.1:

[0788] L-HO-Asn-Boc (2.00 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), EDCI (1.65 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), HOBt (0.2 g, 1.40 mmol, 1.2 ekv), N,N-diizopropiletilamin (1.86 g, 14.38 mmol, 2.0 ekv), i dihlorometan (30 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani u ledenom kupatilu do homogene faze. Zatim, 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv) je dodat u reakcioni rastvor, zatim je mešan na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Određeno je da je reakcija završena pomoću TLC detekcije. Reakcioni rastvor je podešen na neutralni pomoću 1.0 M hlorovodonične kiseline, i izvedeno je razdvajanje tečnosti, isprana je zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>, i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđena je i koncentrovana pod sniženim pritiskom, rastvarač je uparen da bi se dobila bela masa čvrsta supstance d (4.17 g, prinos 91.85%).

[0791] 4

[0792] Dobijanje intermedijera 21.2:

[0794] 21.1 (4.17 g, 6.60 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (40 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani do homogene faze. Trifluorosirćetna kiselina (12 mL) je dodata, i mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 sata. Ustanovljeno je da reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno sa dihlorometanom. pH rastvora je podešen na oko 8 zasićenim NaHCO<3>, izvedeno je razdvajanje tečnosti, i dobijena je organska faza, i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje (3.01 g, prinos 86.00%).

[0796] Dobijanje hidrohlorida jedinjenja 21:

[0798] 21.2 (3.00 g, 6.57 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (30 mL) su dodati u reakcioni balon od 50 mL, i mešani radi rastvaranja. pH reakcionog rastvora je podešen na oko 3 do 4 dodavanjem rastvora hlorovodonika u etil acetatu. Reakcioni rastvor je izbistren, metil terc-butil etar je dodat, i smeša je mešana i kristalizovana. Proceđena je da bi se dobila bela čvrsta supstanca(1.8 g, prinos 56.25%).

[0800] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.63 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.23 (brs, 3H), 7.81 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.80 (s,1H), 4.46 (dd, J = 8.3, 4.2 Hz, 1H), 3.11 (s, 2H), 2.52 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.28 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.01 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.81 - 1.56 (m, 6H), 1.56 - 1.44 (m, 4H), 1.37 (d, J = 21.9 Hz, 1H), 1.26 (qd, J = 6.3, 5.9, 3.3 Hz, 2H), 1.19 (s, 6h), 0.99 (t, J = 7.3 Hz, 7H), 0.79 (s, 4H), 0.61 (s, 3H).

[0802] MS: m/z [M+H]+ 532.4.

[0804] Primer 22. Sinteza hidrohlorida Jedinjenja 22

[0806]

[0809]

[0810] Dobijanje intermedijera 22.1:

[0812] L-HO-Ar g-Boc (3.23 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), EDCI (1.65 g, 8.63 mmol, 1.2 ekv), HOBt (0.2 g, 1.40 mmol, 1.2 ekv), N,N-diizopropiletilamin (1.86 g, 14.38 mmol, 2.0 ekv), i dihlorometan (3 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani do homogene faze u ledenom kupatilu. Zatim, 1.3 (3.00 g, 7.19 mmol, 1.0 ekv) je dodat u reakcioni rastvor, i mešani na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Određeno je da je reakcija završena pomoću TLC detekcije. pH reakcionog rastvora je podešen na neutralni pomoću 1.0 M hlorovodonične kiseline, izvedeno je razdvajanje tečnosti. Organska faza je isprana zasićenim NaHCO<3>, i osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Organska faza je koncentrovana da bi se dobilo svetlo žuto ulje (4.21 g, prinos 86.98%).

[0814] Dobijanje intermedijera 22.2:

[0816] 22.1 (4.21 g, 6.25 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (40 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani do homogene faze. Trifluorosirćetna kiselina (12 mL) je dodata, i mešana na sobnoj temperaturi u toku 1 sata. Detektovano je da je reakcija završena pomoću TLC. Rastvarač je uklonjen uparavanjem da bi se dobilo bezbojno ulje, koje je rastvoreno sa dihlorometanom. a zasićeni vodeni rastvor NaHCO<3>je korišćen za ispiranje, i pH vodene faze je bio 7 do 8. Izvedeno je razdvajanje tečnosti, i organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđena je i koncentrovana da bi se dobilo bezbojno ulje (3.23 g, prinos 90.23%).

[0818] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 22:

[0820] 22.2 (3.23 g, 5.63 mmol, 1.0 ekv), i izopropanol (20 mL) su dodati u reakcioni balon od 100 mL, i mešani radi rastvaranja. pH reakcionog rastvora je podešen na oko 3 do 4 dodavanjem rastvora hlorovodonika u etil acetatu, i mešanje i kristalizacija su nastavljeni u toku 1 sata. Posle ceđenja, uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 4 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (0.84 g, prinos 22.46%).

[0822] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.53 (s, 1H), 8.28 (s, 3H), 7.54 (s, 1H), 6.96 (s, 4H), 5.07 (s, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.45 (s, 1H), 3.35 (d, J = 28.0 Hz, 2H), 2.51 (s, 1H), 2.29 (s, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.02 (s, 1H), 1.87 (s, 2H), 1.67 (s, 6H), 1.48 (s, 5H), 1.41 (s, 2H), 1.33 - 1.23 (m, 2H), 1.23 - 1.08 (m, 5H), 1.00 (d, J = 6.1 Hz, 7H), 0.91 (s, 1H), 0.79 (s, 4H), 0.61 (s, 3H).

[0824] MS: m/z [M H]+ 574.4.

[0825] Primer 23. Sinteza hidrohlorida Jedinjenje 23

[0827]

[0830]

[0833] Dobijanje intermedijera 23.1:

[0835] Jedinjenje 14.2 (5.0 g, 13.3 mmol), Boc-L-Ala-OH (3.0 g, 15.9 mmol), dihlorometan (50 mL), trietilamin (1.6 g, 16.0 mmol), HOBT (0.7 g, 5.1 mmol), i EDCI (3.1 g, 16.2 mmol) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Smeša je reagovala na sobnoj temperaturi u toku 4 sata, i isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO<3>. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na koloni (petroleum etar (60‑90)/etil acetat 10 : 1‑2 : 1) da bi se dobila bela čvrsta supstanca(6.5 g, prinos 89.3%).

[0837] Dobijanje intermedijera 23.2:

[0839] Jedinjenje 23.1 (3.5 g, 6.4 mmol, 1.0 ekv), i dihlorometan (18 mL) su dodati u reakcioni balon sa tri grla od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, trifluorosirćetna kiselina (7.3 g, 64 mmol) je dodata na 0°C, zatim reagovala na sobnoj temperaturi u toku 3 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dihlorometan (100 mL) je dodat, i zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata je korišćen za ispiranje. Organske faze su spojene, i osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata. Proceđene su i koncentrovane da bi se dobila bela čvrsta supstanca(2.6 g, prinos 90.9%).

[0841] Dobijanje hidrohlorida Jedinjenja 23:

[0843] [0211] Jedinjenje 23.2 (2.6 g, 5.85 mmol, 1.0 ekv), i etil acetat (20 mL) su dodati u reakcioni balon sa jednim grlom od 250 mL. Pod zaštitom azota i magnetnim mešanjem, HCl/etil acetat (3 M, 2.4 mL, 7.2 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi, i pošto je dodavanje završeno, mešanje je nastavljeno u toku 3 sata. Bela čvrsta supstanca je iztaložena, proceđena i isprana pomoću etil acetata (5 mL). Uljana pumpa je korišćena za sušenje u vakuumu na 40°C u toku 3 sata da bi se dobila bela čvrsta supstanca (2.1 g, prinos 74.6%).

[0845] 1H NMR (400 MHz, CDCl<3>) δ 8.66 - 8.46 (m, 1H), 8.16 (brs, 3H), 5.18 - 5.02 (m, 1H), 4.70 - 4.52 (m, 1H), 4.44 - 3.78 (m, 2H), 2.53 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 2.28 - 1.96 (m, 2H),2.11 (s, 3H), 1.93 - 0.70 (m, 23H), 0.79 (s, 3H), 0.61 (s, 3H).

[0847] MS: m/z [M+H]+ 447.6.

[0849] Primer 24. Test rastvorivosti

[0851] Postupak testiranja

[0853] Odgovarajuća količina jedinjenja prema prikazanom pronalasku je izmerena, pripremljeni su rastvori u različitim medijumima, tim redom, mešani na konstantnoj temperaturi manometra vodenog kupatila na 25°C u toku oko 24 sati, i proceđeni kroz filter membranu za vodu od 0.22 µm. Odgovarajuća količina filtrata je razblažena do izvesne koncentracije sa metanolom, i korišćena je kao rastvor za testiranje. Koncentracija rastvora za testiranje je određena pomoću HPLC sa UV detektorom pomoću metanola kao slepog kontrolnog rastvora.

[0855] (1) Rastvor slepe probe: Metanol

[0857] (2) Referentni rastvor: 5 mg referentne supstance je izmereno precizno, smešteno u normalni sud od 10 mL, rastvoreno metanolom i razblaženo do razmere i dobro promešano.

[0859] (3) Rastvor uzorka: Odgovarajuća količina rastvora uzorka je pipetirana, razblažena metanolom do oko 0,5 mg/mL (određeno koncentracijom svakog uzorka), i dobro promešana.

[0861]

[0862] Rezultati testiranja

[0864]

[0867]

[0870] "j" znači da nije testirano; kada je količina rastvorivosti specifična vrednost, izražava se kao "rastvorljivost do zasićenja"; kada je "> 10", to znači da je rastvorljivost veća od 10 mg/mL.

[0872] Primer 25. Stabilnost Jedinjenja prema prikazanom rastvoru u glukoznom sirupu

[0874] Postupak testiranja

[0876] Odgovarajuća količina derivata prema prikazanom pronalasku je izmerena, tim redom, rastvorena u 5% rastvora glukoze i pripremljena u rastvor koncentracije od oko 1 mg/g. Posle mešanja na konstantnoj temepraturi magnetometra vodenog kupatila na 25°C u toku oko 24 sati, smeša je proceđena kroz filter membranu za vodu od 0.22 µm. Bistar rastvor je razblažen do izvesne koncentracije metanolom i korišćen kao rastvor za testiranje. Omogućeno je da uzorak stoji na sobnoj temperaturi u toku 0 sati, 1 sat, 3 sata, 5 sati, i 8 sati, i stabilnost rastvora uzorka za testiranje je određena pomoću HPLC pomoću UV detektora pomoću metanola kao slepog rastvarača.

[0878] (1) Slepi rastvor: Metanol.

[0880] (2) Rastvor uzorka: Pogodan rastvor je sakupljen i proceđen kroz filter membranu od 0.22 µm.

[0881]

[0883] (nastavak)

[0886]

[0888] Rezultat testiranja

[0889]

[0892]

[0894] [0219] Zaključak: Gornji rezultati ukazuju da derivat prema prikazanom pronalasku ima izvesnu stabilnost pošto je bio smešten u vodeni rastvor glukoze u toku izvesnog vremenskog perioda; naročito kada je R<1>u derivatu 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-ona formule I prema prikazanom pronalasku izopropil, čistoća derivata u glukoznom rastvoru ostaje suštinski neporomenjena.

[0896] Primer 26. Farmakokinetično testiranje jedinjenja prema prikazanom pronalasku

[0897] Cilj ovog eksperimenta je da se ispita pojedinačno oralno davanje svakog rastvora jedinjenja prema ovom pronalassku, i rastvora alopregnanolona, da se detektuje alopregnanolon, aktivan sastojak u plazmi, i da se procene njegove farmakokinetičke (PK) osobine kod SD pacova. Rešenje je bilo da se rastvori svako jedinjenje u vodenom rastvoru koji sadrži 5% Tween 20.

[0899] Muški SD pacovi su korišćeni u ovom izođenju, koji su težili 180‑220 g, nabavljeni su kod Shanghai SLAC Laboratory Animal Co., Ltd. Sve životinje su bile gladne u toku noći, do 4 sata posle davanja.

[0901] Eksperimentalni SD pacovi su grupisani nasumično na osnovu blok dizajna, u po 5 pacova u svakoj grupi, naime grupa alopregnanolona, grupa hidrohlorida jedinjenja 1, grupa hidrohlorida jedinjenja 2, grupa hidrohlorida jedinjenja 14, i grupa hidrohlorida jedinjenja 15. Primena u svakoj grupi je irigacija (i.g.) u dozi od 20 mg/kg (mereno alopregnanolonom).

[0903] 0.0833h, 0.25h, 0.5h, 1h, 2h, 3h, 4h, 6h, 9h, 12h, 24 h posle davanja, oko 0.6 mL uzorala krvi je sakupljeno iz perifernih vena i premešteno u komercijalne kivete za centrifugiranje koje sadrže 0.85 do 1.15 mg antikoagulanta K2 EDTA (Jiangsu Kangjian Medical Products Co., Ltd.). U toku 30 minuta posle sakupljanja krvi, plazma je centrifugirana (centrifugirana na 3,000 g u toku 10 minuta na približno 4°C). Plazma je smeštena u obeleženu polipropilensku kivetu, zamrznuta u suvom ledu, zatim čuvana u zamrzivaču sa ultra-niskom temperaturom na ‑60°C ili nižom radi testiranja. LC-MS/MS biotest je korišćen da se detekctuje koncentracija leka u plazmi SD pacova. Podaci koncentracija u krvi-vreme su analizirani pomoću modela bez odeljaka i WinNonlin-ovog softverskog paketa (verzija 6.3 ili kasnija), kako je prikazano u Tabeli‑3.

[0906]

[0910] 1

[0911] Zaključak: Gornji rezultati ukazuju da derivat prema prikazanom pronalasku ima značajno poboljšane farmakokinetične osobe u poređenju sa osnovnim lekom. Posle davanja derivata prema prikazanom pronalasku, oba AUC i Cmax su značano poboljšani, i imaju osobine drugog delovanja i produženog oslobađanja. Naročito kada je R<1>u 3-hidroksil‑5-pregnan‑20-on derivatu formule I prema prikazanom izvođenju izopropil efikasna fiziološka koncentracija alopregnanolona može biti održavana in vivo duže vremena bez iznenadnog oslobađanja i kriva koncentracije u krvi ima blago kolebanje.

[0914] 2

Claims (10)

1. Patentni zahtevi

1. Jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so:

gde,

je svaki R<1>i R<2>nezavisno H, supstituisani ili nesupstituisani C<1>‑C<10>alkil, ili supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil;

R<3>je H, halogen, hidroksil, amino, nitril, ili sulfidril; ili R<2>i R<3>su povezani da obrazuju 5‑ do 6-člani zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten; i

svaki a i b je nezavisno ceo broj 0 do 3.

2. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 1, gde je R<3>amino ili H.

3. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 1 ili 2, gde je jedinjenje formule I jedinjenje formule I‑1, I‑2, I‑3 ili I‑4:

gde R<1>, R<2>, R<3>, a, i b su kao što je opisano u zahtevu 1 ili 2.

4. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 1 ili 2, gde je bar jedan od R<1>i R<2>izopropil.

5. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 4, gde je R<1>izopropil.

6. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 1, gde je jedinjenje izabrano iz grupe koju čine:

4

7. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema zahtevu 6, gde je jedinjenje izabrano iz grupe koju čine:

1

8. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapeutski efikasnu dozu jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli prema bilo kom od zahteva 1‑7, i farmaceutski prihvatljiv nosač i/ili ekscipijens.

9. Jedinjenje ili njegova farmaceustki prihvatljiva so prema bilo kom od zahteva 1‑7, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 8 za upotrebu kao lek za sprečavanje ili lečenje poremećaja centralnog nervnog sistema.

10. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili farmaceutska kompozicija za upotrebu prema zahtevu 9, gde poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen na, tremor, poremećaj sna, depresiju, depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj, anksiozni poremećaj, reakciju na stres, posttraumatski stresni poremećaj, opsesivno-kompulsivni poremećaj, šizofreniju, šizoafektivni poremećaj, epilepsiju, epileptični napad, oštećenje pamćenja i/ili kognitivno oštećenje, demenciju, diskineziju, poremećaj ličnosti, autizam, autizam sa jednim uzorkom, bol, traumatsku povredu mozga, vaskularnu bolest, poremećaj zloupotrebe supstanci i/ili sindrom odvikavanja ili tinitus;

ili

poremećaj centralnog nervnog sistema obuhvata, ali nije ograničen na, esencijalni tremor, epilepsiju, kliničku depresiju, postporođajnu ili postpartalnu depresiju, atipičnu depresiju, psihotičnu veliku depresiju, katatoničnu depresiju, sezonski afektivni poremećaj, distimiju, duplu depresiju, depresivni poremećaj ličnosti, rekurentnu kratku depresiju, blagi depresivni poremećaj, bipolarni poremećaj ili manično-depresivni poremećaj, posttraumatski stresni poremećaj, depresiju usled hroničnih medicinskih stanja, depresiju otpornu na lečenje, refraktornu depresiju, suicidne namere, suicidne ideje, suicidno ponašanje, traumatsku povredu mozga, generalizovani anksiozni poremećaj, poremećaj socijalne anksioznosti, poremećaj hiperaktivnosti sa nedostatkom pažnje, demenciju, Hantingtonovu bolest, Parkinsonovu bolest, neuropatski bol, sindrom bola povezan sa povredom, akutni bol, dugotrajni bol, moždani udar, ishemiju, vaskularnu malformaciju, zavisnost od opioida, kokaina i/ili alkohola, ili nesanicu.

2