RS89504A - 5-(2-hidroksi-3-/1-(3-trifluormetilfenil)-ciklopropil/- propionilamino)-ftalid i srodna jedinjenja koja imaju modulirajuću aktivnost na progesteron receptor za upotrebu kod kontrole plodnosti i terapije izmene hormona - Google Patents

Abstract

Sadašnji pronalazak se odnosi na ne-steroidne progestine opšte formule (I) pri čemu su R1 i R2 nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3 je -CH3 ili -CF3, i Ar je (a) ili (b), ili njihov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. Ovi progestini su pogodni za selektivno moduliranje sa progesteron receptorom posredovanih dejstva u različitim ciljanim tkivima, posebno u materičnom tkivu spram tikiva dojke. Prema tome, progestini sadašnjeg pronalaska, opciono u kombinaciji sa estrogenima, mogu biti upotrebljeni za kontracepciju (posebno u od estrogena oslobođenim kontraceptivnim sredstvima), terapiji zamene hormona i lečenju ginekoloških poremećaja. Sadašnji pronalazak se dalje odnosi na postupke za selektivno moduliranje sa progesteron receptorom posredovanih dejstava u različitim ciljanim tkivima ili organima.

Description

5-{2-HIDROKSI-3-[1-(3-TRIFLUOROMETILFENIL)-CIKLOPROPIL]-PROPIONILAMINO}-FTALID I SRODNA JEDINJENJA KOJA IMAJU MODULIRAJUĆI! AKTIVNOST NA PROGESTERON RECEPTOR ZA UPOTREBU KOD KONTROLE PLODNOSTI I TERAPIJE IZMENE

HORMONA

Oblast pronalaska

Sadašnji pronalazak se odnosi na ne-steroidne progestine opšte formule (I) kao na upotrebe navedenih jedinjenja za selektivno moduliranje dejstava posredovanih progesteron receptorom u različitim ciljanim tkivima, odnosno, na progestine koji imaju razdvojen profil aktivnosti u pogledu različitih ciljanih tkiva, pretpostavljeno materica/grudi razdvojen profil. Sadašnji pronalazak se dalje odnosi na upotrebe navedenih jedinjenja kao i postupaka za selektivno pojačavanje dejstava posredovanih progesteron receptorom u materičnom tkivu spram dejstava posredovanih progesteron receptorom u tkivu grudi. Zbog, prema ovom pronalasku, jedinstvene razdvojene aktivnosti i selektivnosti profila progestina, pronalazak se posebno odnosi na upotrebu navedenih jedinjenja za kontrolu plodnosti, posebno kod oralne kontracepcije, terapiju izmene hormona i lečenje

t

ginekoloških poremećaja. Progestini prema sadašnjem pronalasku su posebno podesni za upotrebu u od estrogena oslobođenim oralnim kontraceptivnim sredstvima.

Stanje tehnike

Progesteron je jedinstver reproduktivni hormon, i igra odlučujuću ulogu za tkiva reprodukcije kod žena. Njegovi glavni ciljani organi su materica, jajnik, dojka i hipotalamusna-hipofizna osa. Dodatno primarnoj upotrebi kao kontrola trudnoće kod žena (n.pr., oralna kontracepcija (OC)), progestini, opciono kombinovani sa estrogenima, se široko koriste u terapiji izmene hormona (HRT). Progestini se takođe upotrebljavaju za lečenje nekoliko ginekoloških poremećaja, n.pr., dismenoreja, endometrioza, i disfunkcionalno krvarenje materice izazvano nedostatkom ili debalansom hormona. Usled određenih dejstava progestina, koja mogu biti nepoželjna u nekim primenama, ili unakrsnih reakcija sa drugim receptorima osim progesteron receptora, razvoj novih generacija progestina da se poboljša njihov profil aktivnosti je veliki izazov. Dodatno, istraživanje terapeutskih primena kao što je onkologija zahteva progestine sa novim profilima aktivnosti.

U skorije vreme, ne-steroidni progestini sa vrlo jakim afinitetom na progesteron receptor, ali sa dodatnom androgen aktivnošću su otkriveni u WO 98/54159. Ovi progestini nisu samo pogodni za kontrolu plodnosti kod žena (FC) i HRT (opciono u kombinaciji sa estrogenima), već se mogu koristiti i za mušku FC, mušku HRT i za lečenje androloških sindroma.

W0 00/32584 otkriva specifične ne-steroidne glukokortikoide koji prikazuju jasno razdvajanje između anti-inflamatorne aktivnosti i metaboličkih dejstava, dok je njihov progestagenični potencijal manje izražen iako njihov afinitet prema progesteron receptom visok.

Konačno, DE 100 38 639.3 otkriva glukokortikoide koji prikazuju visok afinitet prema glukokortikoidnom receptom i koji tako ima anti-inflamatornu kao i dodatnu anti-alergijsku, imunosupresivnu i anti-proliferativnu aktivnost za lečenje bolesti uključujući artritis, alergije itd.

Pa ipak, posebno u oblasti ženske FC i HRT postoji velika potreba za progestinima koji imaju nizak afinitet za druge hormonske receptore, ali umesto toga prikazuju snažno razdvajanje između PR ciljanih tkiva ili organa, kao što je to kod grudi i u reproduktivnom traktu.

Posebno, uslov razdbojenog progestina sa antiproliferativnim potencijalnom u tkivu grudi i, u isto vreme, korisnim dejstvima u endometrijumu izgleda poželjnim, pošto postoje brojne epidemiološke studije o odnosu između incidence kancera dojke i upotrebe oralnih kontraceptivnih sredstava (COC-ovi) ili HRT, posebno u pogledu produženih perioda upotrebe (videti, n.pr., . K.E. Malone et aL Epidemiological Revievvs 1993, 15, 80-97 i Standford et al., Epidemiologis Reviews 1993, 15, 98-107). lako su rizici kontradiktorni i kontraverzni, postoje dokazi da dugo godišnje uzimanje pod određenim okolnostima može da pojača mitotičku aktivnost normalnih epitelijalnih ćelija dojke. Prema tome, razdvojeni profil aktivnosti progestina u pogledu gslova korisnih, n.pr., antiproliferativnih, dejstava u dojci, ali sa klasičnim progestageničkim dejstvima u jajniku i/ili materici je poželjan. U skorije vreme, obezbeđeni su ogledi pretraživanja progesteron receptor liganda koji prikazuju tkivo-specifičnost, uporedi, WO 02/054064. Jedan pristup pretraživanju progesteron receptor (PR) liganda sa razdovjenim profilom aktivnosti se zasniva na činjenici da se PR ekspresuje u dve različite izoforme (PR-A i PR-B) koji izgleda da su sposobne da budu aktivirane nezavisno jedna od druge sa drugim jedinjenjima koja imaju selektivnost prema bilo PR-A ili PR-B.

Do sada testirane obe PR-izoforme su ekspresovane u svim ciljanim organima progesteronom (n.pr., dojka, materica). Pa ipak, postoje jaki dokazi da PR-A i PR-B funkcionišu na tkivo-specifični način da se posreduju odgovori na progesteron. Izoforma-specifični onesvešćeni miševi pokazuju različite funkcije PR-A i PR-B u istom ciljanom organu. Na osnovu ovih studija, PR-B izgleda da je najodgovorniji receptor za proliferaciju i diferencijaciju mlečne žlezde, dok je antiproliferativno dejstvo progestina na materični epitel i ovulaciju najverovatnije posredovano sa PR-A (B. Mulac-Jericevic, Science 2000, 289, 1751-1754; Orla Conneelv, Endocrine Societv Meeting, Toronto, June 2000).

Tako je pronalazak otkriven u WO 02/054064 zasnovan na novoj teoriji da izoforma-specifični ligandi PR aktivnosti .mogu dopustiti tkivo-selektivnu modulaciju aktivnosti progestina u hormonskoj terapiji i kontracepciji. Pa ipak, kod WO 02/054064 obezbeđuje oruđe za identifikovanje potencijalne PR-izoforme i/ili tkivo-specifičnih PR liganda, sadašnji pronalazak obezbeđuje specifične ne-steroidne progestine koji prikazuju izraženu selektivnost PR izoforme kao i iznenađujuće razdvojeno dejstvo na različite PR-om ciljane organe, posebno materica/dojka razdovojeni profil aktivnosti.

Predmeti pronalaska

Kako je to već gore podvučeno, jedan predmet sadašnjeg pronalaska je da se obezbede novi progestini za upotrebu u FC, HRT, i tečenju ginekoloških poremećaja. Sledeći predmet je da se obezbede novi progestini koji su pogodni za upotrebu u od estrogena oslobođenim oralnim kontraceptivnim sredstvima. Posebno, poželjno je obezbediti nove progestine koji vrše korisna dejstva na određene PR ciljane organe, kao što je materica, i ne pojačavanje neželjenih dejstava na druge PR ciljane organe, kao što je proliferacija/diferencijacija epitela dojke. Tako, poželjno je obezbediti nove progestine koji prikazuju razdvojeni profil aktivnosti u pogledu različitih ciljanih tkiva ili organa, pretpostavljeno materica/dojka specifične progestine.

Dalji predmet sadašnjeg pronalaska je da se obezbedi postupak za selektivno moduliranje progesteronom posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu, pretpostavljeno materičnom tkivu, spram drugog odabranog tkiva, pretpostavljeno tkiva dojke. Posebno je poželjno obezbediti postupak za selektivno pojačavanje antiproliferativnih dejstava u materici dok se istovremeno sprečavaju neželjena dejstva, kao što je proliferacija ili diferencijacija, u tkivu dojke.

Sledeći predmet sadašnjeg pronalaska je da se obezbedi PR izoforma selektivnih (pretpostavljeno PR-A spram PR-B selektivna) progestina. Takođe je poželjno da se obezbede postupci za selektivno moduliranje posredovanih dejstava PR izoforme, pretpostavljeno PR-A, kao i selektivno aktiviranje transkripcije PR izoforme, pretpostavljeno PR-A. Svi ovi predmeti su iznenađujuće postignuti obezbeđivanjem progestina sa opštom formulom (I), upotreba navedenih progestina kao i postupaka za moduliranje progesteronom posredovanih dejstava prama sadašnjem pronalasku kao što je to dole detaljnije opisano.

Suština pronalaska

U prvom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje jedinjenje opšte formule (I) kao što je dole identifikovana. Pretpostavljeno jedinjenje sadašnjeg pronalaska je (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid.

U drugom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje farmaceutski sastav koji se sastoji od jedinjenja opšte formule (I), bilo samog (na primer u od estrogena oslobođenom oralnom kontraceptivnom sredstvu) ili opciono kombinovano sa 17a-etinil estradiolom ili drugim estrogenom kao daljom komponentom.

U trećem aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje jedinjenja opšte formule (I) za upotrebu u terapiji.

U četvrtom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje opšte formule (I) za upotrebu u terapiji.

U petom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja opšte formule (I) ili farmaceutskog sastava koji sadrži navedeno jedinjenje'za proizvodnju medikamenta za selektivno moduliranje progesteron receptorom posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu, pretpostavljeno materičnom tkivu, spram drugog odabranog tkiva, pretpostavljeno tkiva dojke, posebno za upotrebu kod kontrole plodnosti, terapije izmene hormona ili lečenja ginekoloških poremećaja.

U šestom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja opšte formule (I) kao kontraceptivnog sredstva, pretpostavljeno od estrogena oslobođenog oralnog kontraceptivnog sredstva, kao što je, na primer, "pilula samo sa progesteronom" (POP).

U sedmom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje postupak za selektivno moduliranje progesteron receptorom posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu, pretpostavljeno materičnom tkivu, spram drugog odabranog tkiva, pretpostavljeno tkiva dojke, posebno za upotrebu kod kontrole plodnosti, terapije izmene hormona ili lečenja ginekoloških poremećaja, postupak koji sadrži korak davanja individui jedinjenja opšte formule (I).

Dalje, u osmom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja opšte formule (I) za proizvodnju medikamenta za selektivno aktiviranje posredovanih dejstava transkripcijom progesteron receptor izoforme A spram transkripcije progesteron receptor izoforme B.

U devetom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje postupak za selektivno aktiviranje posredovanih dejstava transkripcijom progesteron receptor izoforme A spram transkripcije progesteron receptor izoforme B kao i za selektivno pojačavanje posredovanih dejstava transkripcijom progesterpn receptor izoforme A spram transkripcije progesteron receptor izoforme B.

Kratak opis slika

Slika 1 demonstrira razlike u sitmulaciji krajnje i alveolarne formacije završnog pupoljka na koju dejstvuje jedinjenje ((+)-1) upoređeno sa standardnim progestin promegestonom (R5020) posle potkožnog davanja nezrelim ovariektomizovanim ženskim pacovima (ekvi-efikasna doza ((+)-1) prema 0,3 mg/kg R5020).

Slika 2 prikazuje stimulaciju proliferacije epitela dojke nezrelih ovariektomizovanih ženskih pacova na koje se dejstvuje sa jedinjenjem ((+)-1) u poređenju sa standardnim progestinom R5020 putem sredstava MIB-5 mrljanja.

Slika 3 se odnosi na stimulaciju kranje i alveolarne formacije završnog pupoljka sa R5020 (standardni progestin) i jedinjenjem ((t)-1) posel potkožnog davanja nezrelim ovariektomizovanim ženskim pacovima (granična vrednost).

Slika 4 demonstrira antiestogenu aktivnost jedinjenja ((+)-1) na materični rast kod pacova (materična vlažna težina i materična suva težina; epitelijalna visina) upoređeno sa referentnom grupom tretiranom sa estradiolom.

t

Detaljan opis pronalaska

U prvom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje ne-steroidna progestagena jedinjenja opšte formule (I)

pri čemu su Rii R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3 je -CH3 ili -CF3. i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pod uslovom da jedinjenje . nije 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorgmetilpropionilaminoj-ftalid.

U svrhe sadašnjeg pronalaska, "farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog" jedinjenja opšte formule (I) kao što je gore opisano je jedinjenje čija je struktura izvedena i/ili u osnovi slična sa strukturom opšte formule (I) kao što je gore pokazano i čija je biološka aktivnost( in vitroi/iliin vivo)takođe u osnovi slična sa onom postignutom sa jedinjenjm opšte formule (I) u kvalitativnim i kvantitativnim pogledima.

Kako jedinjenja opšte formule (I) prikazuju stereogenski centar, ona postoje u dva različita stereoizomerna (enantiomerna) oblika. Tako, jedinjenja prema sadašnjem pronalasku mogu biti obezbeđena kao racemati, odnosno, smeše enantiomera (identifikovanih na primer sa (±). Pa ipak, n.pr., putem sredstava enantioselektivne sinteze ili putem primene standardnih postupaka separacije kao što su opisani n.pr. u donjem Primeru 1a), jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu takođe biti obezbeđena kao odvojeni (+) ili (-), odnosno dekstrotacioni levorotacioni, enantiomeri. Takođe treba da se razume da je otkrivanjem (+) i (-) enantiomera, istovremeno su otkrivene inherentne apsolutne konfiguracije ovih enantiomera.

Standardni postupci separacije su u okviru delokruga stručnjaka. Na primer, racemati mogu biti odvojeni putem hromatografije ili optički aktivnog nosača (n.pr., CHIRALPAK AD™) u čiste izomere. Dalje, takođe je moguće reagovati slobodnu hidroksi grupu (racemskih) jedinjenja formule (I) sa optički aktivnom kiselinom (n.pr.,a-hidroksifenilsirćetna kiselina, kamposulfokiselina ili vinska kiselina), rezultirajući u diasteromernim estrima, koji mogu biti odvojeni putem frakcione'kristalizacije ili putem hromatografije i potom saponifikovani da formiraju optički čiste enantiomere.

Pretpostavljena jedinjenja sadašnjeg pronalaska opšte formule (I) kao što su gore opisana u obliku (+)-enantiomera.

Primerna jedinjenja opšte formule (I) su sledeća:

Racemski, (+) i (-)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid (((±)-1), ((+)-1) i ((-)-1)),

racemski, (+) i (-)-6-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on (((±)-2), ((+)-2) i ((-)-2)),

racemski, (+) i (-)-6-{2-hidroksi-3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-metil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on (((±)-3), ((+)-3) i ((-)-3)),

racemski, (+) i (-)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid (((±)-4), ((+)-4) i ((-)-4)),

racemski, (+) i (-)-6-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on (((±)-5), ((+)-5) i ((-)-5)),

racemski, .(+) i (-)-6-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropiJ]-2-metil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on (((+)-6), ((+)-6) i ((-)-6)).

Posebno pretpostavljena jedinjenja prema sadašnjem pronalasku su sledeća: ((±)-1), ((+)-1), ((-)-1),

((±)-2), ((+)-2), ((-)-2),

((±)-3), ((+)-3), ((-)-3),

((±)-4), ((+)-4) i ((-)-4)).

Najpoželjnije jedinjenja sadašnjeg pronalaska je 5-{2-hidroksi-3-[1 -(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid, ovde i nadalje označeno kao jedinjenja (1):

Kao što je gore pomenuto, (+)-enantomer 5-{2-hidroksi-3-[1 -(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropi!]-2-trif!uorometil-propionilarnino}-ftaiida je posebno pretpostavljeno i označeno kao ((+)-1), Sintetički put prema (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalidu ((+)-1) kao i fizički podaci ovog jedinjenja su posebno poduvučeni u Primeru 1. Dobijeni eksperimentalni rezultati za ovo. jedinjenje uin vivokao iin vitrotestiranjima su opisani u Primerima 2, 3, 4 i 5.

Iz ovih primera evidentno je da pretpostavljeni progestin ((+)-1) prema sadašnjem pronalasku prikazuje idealnein vitroiin vivoprofile. U pogleduin vitroprofila jedinjenja ((+)-1), demonstrirano je u donjem Primeru 5 da je jedinjenje ((r)-1) selektivni PR-A agonist i prikazuje visoku PR-A spram PR-B specifičnost (detalji u vezi specifičnosti PR izoforme jedinjenja prema sadašnjem pronalasku su dati u pogledu osmog i devetog aspekta pronalaska koji su dole opisani). Kako je demonstrirano, jedinjenje ((+)-1) selektivno aktivira PR-A transkripciju i tako selektivno pojačava sa PR-A posredovana dejstva.

U pogleduin vivoprofila aktivnosti jedinjenja ((+)-1), treba da se opiše da je visoko razdvojen. Specifično, ((+)-1) prikazuje vrlo visoku aktivnost u materici pri održavanju trudnoće, i značajno nižu aktivnost u mlečnoj žlezdi, odnosno, ((+)-1) ne aktivira proliferaciju i diferencijaciju mlečne žlezde (uporedi, Primer 3 za pacova), posebno ne u rasponu doze gde se postiže održavanje trudnoće.

Jedinjenje((+)-1) je jedno od najmoćnijih progestina koji su do sada identifikovaniin vivo.U testu inhibicije ovulacije (uporedi, Primer 2), jedinjenje ((+)-1) je bar moćno kao standardni progestin koji se upotrebljava u ovom testu, $5020 (promegeston). U testu održavanja trudnoće kod pacova (uporedi, Primer 3), jedinjenje ((+)-1) je oko 10 puta moćnije od levonorgestrela (LNG). Dalje u Clauberg-ovom testu (endometrijumska transformacija kod zeca; uporedi, Primer 4), zabeležena je identična progestagena aktivnost za ((+)-1) posle potkožnog i oralnog davanja. Ovo demonstrira da je ((+)-"!) krajnje aktivan kada se daje oralno.

Dalje, jedinjenje ((+)-1) ne pokazuje androgenu kao ni anti-androgenu aktivnostin vivoiako pokazuje blagi afinitet ka vezivanju za androgen receptor (AR). Odsustvo androgene kao i anti-androgene aktivnostiin vivose potvrđuje putem testova obavljenih sa orhidektomizovanim pacovima (pramena u težini prostate i u seminalnoj vezikuli). U obavljenom testu održavanja trudnoće sa pacovima, čak i u dozi koja je 100 puta viša nego doza koja se zahteva za održavanje trudnoće, ne nailazi na androgenu aktivnost jedinjenja ((+)-"!). Dodatno, iako je pronađeno za jedinjenje ((+)-1) da ima vrlo visok afinitet ka glukokortikoidnom receptom (GR), ne izgleda da pokazuje bilo kakvu glukokortikoidnu ili bilo kakvu anti-glukokortikoidnu aktivnostin vivo,što se zaključuje iz eksperimenata usmerenih na promene u težini grudne žlezde. Konačno, pošto se jedinjenje ((+)-1) vezuje za mineralokortikoidni receptor (MR) i estrogen receptor-a (ERa) sa zanemarljivim afinitetomin vitro,iz interakcije sa ovim receptorima ne mogu se očekivati MR ili ERa hormonska dejstva.

U pogledu gore opisanih dejstava i aktivnosti, jedinjenje ((+)-1) se može smatrati kao primerno za sva druga jedinjenja opšte formule (I) prema sadašnjem pronalasku.

Zbog gore opisanih dejstava novih progestina prema sadašnjem pronalasku sa prednostima, posebno (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fiuoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalida, odnosno, jedinjenja ((+)-1), ovi progestini su posebno pogodni za upotrebu u kontraceptivnim sredstvima, posebno u kontraceptivnim sredstvima oslobođenimod estrogena, kao što je, na primer, pilula sastavljena samo od progestina (POP).

U drugom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje farmaceutski sastav koji sadrži progestin opšte formule (I) kao što je gore opisan, pod uslovom da to jedinjenje nije 5-[3-{1-(3-trifiuorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid. Pretpostavljeni farmaceutski sastavi su oni koji sadrže pretpostavljena jedinjenja kao što su gore pomenuta. Poželjniji farmaceutski sastav prema sadašnjem pronalasku sadrži 5-{2-hidroksi-3-[1 -(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid (1), a najpoželjniji sadrži (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ((+)-1).

U zavisnosti od željene primene u vezi n.pr. stanja koje se ima tretirati/na koje se ima uticati ili načina davanja, farmaceutski sastav prema ovom pronalasku može - kada se ne upotrebljava kao oralno kontraceptivno sredstvo bez estrogena (koja je jedna od pretpostavljenih upotreba progestina prema sadašnjem pronalasku) - dodatno jedinjenju opšte formule (I), pretpostavljeno jedinjenju ((+)-1), sadrži estrogen komponentu. Na primer, u slučaju da se ima namera da farmaceutski sastav upotrebi za (oralnu) kontracepciju (čija upotreba će biti detaljnije objašnjena u daljem opisu), odgovarajući estrogeni su oni koji se uobičajeno upotrebljavaju u kombinovanim (oralnim) kontraceptivnim sredstvima, lako bilo koji prirodni estrogen (posebno estriol ili estradiol) ili sintetički estrogen, steroidni ili ne-steroidni, mogu biti upotrebljeni, pretpostavljeni estrogen u ovom pogledu, posebno za oralno davanje, je 17a-etinil estradiol kao i estri, etri i drugi derivati 17a-etinil estradiola.

Dalje, estratrien-3-amidosulfonat (W0 96/05216 i WO 96/05217), izvedeni iz estradiola ili etinil estradiola, mogu se upolrebiti u kombinaciji sa jedinjenjima opšte formule (I), pretpostavljeno jedinjenjem ((+)-1). Takođe 14a,15a-metilen-17a-estradiol kao i odgovarajući 3-amidosulfonat derivati su pogodni u ovom pogledu.

Za upotrebu u terapiji izmene hormona (koja će biti objašnjena detaljnije u daljem opisu), estrogen koji se ima opciono kombinovati sa progestinom opšte formule (I) prema sadašnjem pronalasku, pretpostavljeno jedinjenjem ((+)-1), je pretpostavljeno estradiol, estradiol valerat ili drugi estri estradiola kao i konjugovani (prirodni, n.pr. konjski) estrogeni.

U farmaceutskom sastavu prema sadašnjem pronalasku, jedinjenje kao što je definisano gornjom opštom formulom (I), pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), i opciono dodatna estrogen komponenta, pretpostavljeno 17a-etinil estradiol, ima/imaju da budu prisutni u (farmaceutskoj) efektivnoj količini!. Količina koja se ima dati (odnosno, "(farmaceutski) efektivna količina") varira u okviru širokog raspona i zavisi od stanja koje se ima lečiti ili bilo koje druge željene upotrebe i načina davanja. Može da pokrije bilo koju količinu koja je efikasna za nameravani tretman ili upotrebu. Utvrđivanje "farmaceutski efektivne količine" je u okviru delokruga stručnjaka iz ove oblasti nauke.

Preciznije, u farmaceutskom sastavu prema sadašnjem pronalasku za bilo koje predviđene upotrebe (odnosno, za oralnu kontracepciju (kombinovana oralna kontraceptivna sredstva kao i oralna kontraceptivna sredstva bez estrogena, kao što je, na primer, "pilula samo sa progestinom"), HRT i lečenje ginekoloških poremećaja kao i drugih stanja) dnevna doza jedinjenja opšte formule (I), pretpostavljeno jedinjenja ((+)-1), koja se daje individualno u rasponu od 0,01 do 2 mg se smatra generalno odgovarajućom. Pa ipak, doze koje su posebno odgovarajuće za specifične primene su kao što se dalje navodi: U slučaju da se progestin prema sadašnjem pronalasku, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), upotrebljava u farmaceutskom sastavu kao kombinovano oralno kontraceptivno sredstvo, u kombinaciji sa estrogen komponentom kao što je gore defmisano, odgovarajuća dnevna doza koja se daje individui je 10 ug do 100 mg. Pretpostavljena dnevna doza koja se daje individui u ovom pogledu je 10 ug do 1 mg.

U slučaju da se progestin prema sadašnjem pronalasku, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), upotrebljava u farmaceutskom sastavu kao oralno kontraceptivno sredstvo bez estrogena, kao što je "pilula samo sa progesteronom" (POP) bez bilo koje dodatne estrogen komponente, može se primeniti odgovarajuća dnevna doza koja se daje individui od 10 ug do 1 mg, pretpostavljeno 30 ug do 300 ug ili 10 ug do 100 ug, dok takođe može biti tako nisko u rasponu od 1 ug do 10 ug.

U slučaju da se progestin prema sadašnjem pronalasku, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), upotrebljava u farmaceutskom sastavu za HRT, odgovarajuća dnevna doza koja se daje individui je 10 ug do 10 mg, pretpostavljeno 10 ug do 1 mg (odgovarajuće do 1/100 ekvi-efikasne doze medroksiprogesteronacetata (MPA)), najpoželjnije 10 ug do 100 ug.

U slučaju da se progestin prema sadašnjem pronalasku, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), upotrebljava u farmaceutskom sastavu za neku drugu primenu osim za kontracepciju ili HRT, odnosno, u lečenju ginekoloških poremećaja, kao što je predmenstrualni sindrom (koji se sam manifestuje kroz glavobolju, znake depresije, zadržavanje vode itd.), dismenoreja, endometrioza, mijom ili disfunkcionalno materično krvarenje, količina koja se ima dati je generalno u istom rasponu kao kod primene kod COC-ova, POP-ova i HRt kako je to gore opisano, ali može se takođe razlikovati od ovih vrednosti, u zavisnosti od dejstva koje se namerava da se postigne.

U slučaju daje progestin prema sadašnjem pronalasku, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), kombinovan u farmaceutskom sastavu kao što je gore definisano sa estrogen komponentom, pretpostavljeno sa 17a-etinil estradiolom, dnevna doza estrogen komponente koja se daje individui je takva da je (ili je ekvi-efikasna sa) 0,01 do 0,05 mg, pretpostavljeno 0,015 do 0,03 mg 17a-etinil estradiola.

U slučaju da se progestini prema sadašnjem pronalasku, posebno jedinjenje ((+)-1), daju u kombinaciji sa estrogen komponentom, pretpostavljeno 17a-etinil estradiolom, za upotrebu kao kontraceptivno sredstvo, pretpostavljeno u kombinovanom oralnom kontraceptivnom sredstvu (COC), ili u HRT, progestin i estrogen mogu bilo bidi davani simultano, n.pr. u jednoj tableti, ali takođe mogu bidi davane odvojeno pram određenom režimu i čak različitim putevima, n.pr., oralno i parenteralno: Za upotrebu u kontracepciji (kao što je u oralnim kontraceptivnim sredstvima bez estrogena) kao i u HRT, dnevne doze progestina prema sadašnjem pronalasku kao što gore definisano, pretpostavljeno ((+)-"!), i opciono (u slučaju kombinovanih oralnih kontraceptivnih sredstava) estrogen komponenta kao što je gore definisana mogu ostati iste tokom celog ženskog menstrualnog ciklusa, kao što je to u poznatim dvo- ili višestrukim faznim preparatima, gde su koncentracije oba progestina kao i estrogena povećane u dve ili više faza tokom menstrualnog ciklusa. Dalje, u sekvencijalnoj primeni predviđeno je da se u prvom preiodu ciklusa estrogen komponenta daje sama a u drugom periodu ciklusa dodaje se progestin. Dalje, kao što je to slučaj kod konvencionalnih oralnih kontraceptivnih sredstava, davanje progestina sadašnjeg pronalaska, posebno jedinjenja ((+)-1), i opciono dodatne estrogen komponente kako je gore definisana, može biti prekinuta x dana posele perioda unošenja y=28-x dana u 28-dnevnom ciklusu, pri čemu x može biti, na primer, 7, 6, 5, 4 ili manje i tako y može biti, na primer, 21, 22, 23, 24 ili više. U slučaju oralnih kontraceptivnih sredstava bez estrogena, kao što su, na primer, POP-ovi, može se predvideti da nema prekida dnevnog davanja progestina prema sadašnjem pronalasku, posebno jedinjenja ((+)-1).

Proizvodnja famraceutskih sastava prema pronalasku može biti obavljeno prema postupcima koji su poznati u nauci i koji će biti u daljem opisu detaljnije opisani. Mogu se upotrebiti uobičajeno poznati i u upotrebi adjuvanti kao i dalje odgovarajući nosači, razređivači, sredstva za davanje ukusa itd., u zavisnosti od nameravanog načina davanja kao i određenih karakteristika aktivnog jedinjenja koje se upotrebljava, kao što je rastvorljivost, biokorisnost itd. Odgovarajući nosači i adjuvanit mogu biti oni koji su preporučeni na u farmaciji, kozmetici, i poljima koja su povezana sa njima u: Ullmann's Encvclopedia of Technical Chemistrv, Vol. 4, (1953), pp. 1-39; Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 52 (1963), p.918ff; H.v.Czetsch-Lindenvvald, "Hilfsstoffe fuer Pharmazie und angrenzende Gebiete"; Pharm. Ind. 2, 1961, p.72ff; Dr. H.P. Fiedler, Lexikon der Hilfsstoffe fuer Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete, Cantor KG, Aulendorf in VVuerttemberg, 1971.

Kao što je gore naznačeno, pretpostavljeni način primene progestina opšte formule (I), pretpostavljeno jedinjenja ((+)-1), ili farmaceutskih sastava koji sadrže navedeno jedinjenje, bilo bez (kao što su oralna kontraceptivna sredstva bez estrogena) ili zajedno sa dodatnom estrogen komponentom, kao što je 17a-etinil estradiol, je oralna primena, n.pr., putem tableta, pilula, dražeja, gel kapsula, granula, rastvora, emulzija ili suspenzija. Za pripremanje farmaceutskih sastava za oralno davanje, jedinjenja pogodna za ove svrhe sadašnjeg pronalaska kao što je gore opisano mogu biti smešana sa uobičajeno poznatim adjuvantima i nosačima kao što su na primer, guma arabika, talk, škrob, šećeri (kao što su, n.pr., manitoza, metil celuloza, laktoza), želatin, površinski aktivna sredstva, magnezijum stearat, vodeni i ne-vodeni inertni punioci, derivati parafina, agensi za unakrsno povezivanje, disperzanti, emulgatori, maziva, agensi za konzervisanje, agensi za davanje ukusa (n.pr, eterična ulja) ili pojačivači rastvorljivosti (n.pr., benzil benzoat ili benzil alkohol). U farmaceutskom sastavu, aktivni sastojci mogu takođe biti dispergovani u sastav od mikročestica, n.pr., nanočestica.

Pa ipak, takođe su predviđeni drugi načini primene, kao što je parenteralno davanje, n.pr., intraperitonelna, intramuskularna (kao što je ubrizgavanjem vodenih, uljanih ili drugih rastvora, n.pr., putem depoa injekcije gde se hormoni oslobađaju sporo u krv iz depoa i prenose odatle do ciljanih organa, n.pr. hipotalamus, hipofiza i materica), potkožna ili transdermalna primena. Za parenteralno davanje, aktivna sredstva se mogu rastvoriti ili suspendovati u fiziološki prihvatljivom rastvaraču, kao što su, n.pr., ulja sa ili bez sredstava za rastvaranje, površinski aktivni sredstva, sredstva za dispergovanje ili emulgatori. Kao ulja na primer i bez limitiranja, mogu se upotrebiti maslinovo ulje, arahisovo ulje, ulje od pamučnog semena, soja-ulje, ricinusovo ulje i sezamovo ulje. Transdermalna primena može se postići odgovarajućim flasterima, opšte poznatim u nauci, specifično dizajniranim za transdermalnu isporuku aktivnih sredstava, opciono u prisustvu specifičnih propustljivih pojačivača. Dalje, takođe se mogu upotrebiti za transdermalnu isporuku emulzije, masti, kreme ili gelovi.

Sledeći način primene je putem implantacije depo implanta koji sadrži inertni materijal nosača, kao što su biološki degradirajući polimeri ili sintetički silikoni kao n.pr. silikon guma. Takvi implanti su dizajnirani da oslobode aktivno sredstvo na kontrolisani način tokom produženog perioda vremena (n.pr., 3 do 5 godina). Sledeći odgovarajući način davanje je putem intravaginalnih uređaja (n.pr., vaginalni prsteni) ili intramateričnih sistema (IUS) koji sadrže rezervoare za kontrolisano oslobađanje aktivnih sredstava, kao što su progestini sadašnjeg pronalaska i/ili estrogeni tokom produženih perioda vremena. Takvi IUS (kao, n.pr., MIRENA™) se uvode u meteričnu šupljinu gde se kontinuirano oslobađaju definisane količine hormona tokom do 5 godina ( ili dok se sistem ne ukloni). Količina progestina i/ili estrogena koja se dnevno oslobađa odgovara dnevnim dozama kako su gore definisane.

U trećem aspektu sadašnji pronalazak obezbeđuje jedinjenje opšte formule (I) pri čemu su R, i R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3je -CH3ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pod uslovom da jedinjenje nije 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid, za upotrebu u lečenju.

Sadašnji pronalazak u četvrtom aspektu dalje obezbeđuje farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje opšte formule (I) kao što je gore definisano pod uslovom da to jedinjenje nije 5-[3-{ 1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid, za upotrebu u lečenju..

Pretpostavljena jedinjenja i sastavi za upotrebu u lečenju prema trećem i četvrtom aspektu sadašnjeg pronalaska su identični sa pretpostavljenim jedinjenjima i sastavima već opisanim gore u pogledu prvog i drugog aspekta pronalaska. Poželjno, jedinjenja i sastavi prema sadašnjem pronalasku, posebno jedinjenje ((+)-"!) ili farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje ((+)-1), su za upotrebu u kontroli plodnosti, n.pr. kao (kombinovana) oralna kontraceptivna sredstva (COC), oralna kontraceptivna sredstva bez estrogena, kao što su, na primer, "minipilule" koje se sastoje samo od progestina (POP-ovi), kontraceptivni flasteri, injekcije, implanti ili intramaterični sistemi (IUS), ili za upotrebu u terapiji izmene hormona ili lečenju ginekoloških poremećaja, kao što su dismenoreja, endometrioza, mijom, predmenstrualni sindrom, disfunkcionalno materično krvarenje itd., opciono u kombinaciji sa estrogenima, posebno 17u-etinil estradiolom. Dalje objašnjenja u pogledu stanja koja se leče ili drugih primena, n.pr. u oblasti kontracepcije, će biti dole razmatrana u pogledu petog i šestog aspekta sadašnjeg pronalaska.

U petom aspektu, sadašnji pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja opšte formule (I)

pri čemu su R, i R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F,

R3 je -CH3 ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pa ipak uključujući 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid koje je isklučeno u prvom, drugom, trećem i četvrtom aspektu pronalaska od sredstava opšte formule (I), za proizvodnju medikamenta za selektivno moduliranje progesteron receptorom posredovanih dejstava u prvom odabranom ciljanom tkivu spram drugog odabranog ciljanog tkiva.

Takođe su pretpostavljena za peti aspekt sadašnjeg pronalaska, ista jedinjenja opšte formule (I) kao što su gore opisana su pretpostavljena u svrhe sadašnjeg pronalaska kao što je to već otkriveno za ranije aspekte, posebno za prvi aspekt, sadašnjeg pronalaska. Tako, jedinjenje (1), posebno jedinjenje ((+)-1), odnosno, (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalid, ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog, je najpoželjnije jedinjenje takođe u svrhe petog aspekta sadašnjeg pronalaska.

"Selektivno moduliranje" sa PR posredovanih dejstava u svrhe ovog aspekta sadašnjeg pronalaska znači da je jedinjenje opštre formule (I) kao što je gore definisano postiže jedno ili više dejstava u prvom odabranom ciljanom tkivu koje(a) je/su različite vrste (n.pr., inhibiranje, stimulisanje ili neuticanje) i/ili različitog intenziteta (n.pr., slabije ili snažnije i/ili održava se duže ili kraće) upoređeno sa dejstvom(ima) izazvanim putem navedenog liganda u drugom selektivnom ciljanom tkivu.

Treba da se razume da koristi sadašnjeg pronalaska naravno nisu limitirane na prvo i drugo selektivno tkivoper se,ali su na isti način usmereni na prvi i drugi odabrani organ tako da peti aspekt ovog pronalaska takođe spada u upotrebu jedinjenja kao što je gore definisano formulom (I) (i uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid isključeno iz prvog, drugog, trećeg i četvrtog aspekta ovog pronalaska iz značenja opšte formule (I) za proizvodnju medikamenta za selektivno moduliranje sa PR posredovanih dejstava u prvom odabranom ciljanom organu spram drugog odabranog ciljanog organa.

U svrhe sadašnjeg pronalaska, prvi odabrani ciljani organ je pretpostavljeno reproduktivni trakt, odnosno, uglavnom materica, a drugi odabrani ciljani organ je dojka, posebno mlečna žlezda. U skladu sa tim, prvo odabrano ciljano tkivo je pretpostavljeno materično tkivo a drugo odabrano ciljano tkivo je pretpostavljeno tkivo dojke.

Tako, jedinjenja prema petom aspektu sadašnjeg pronalaska pokazuju razdvojeni profil aktivnosti u pogledu prvog odabranog ciljanog tkiva, pretpostavljeno materičnog tkiva, i drugom (odnosno, različitom) odabranom ciljanom tkivu, pretpostavljeno tkivu dojke.

Pretpostavljeno, "selektivno moduliranje sa PR posredovanih dejstava u prvom odabranom ciljanom tkivu spram drugog odabranog ciljanog tkiva" u specifičnom kontekstu sadašnjeg pronalaska znači selektivno pojačavanje sa PR posredovanih dejstava u navedenom prvom odabranom tkivu, pretpostavljeno materičnom tkivu, spram sa PR posredovanih dejstava u drugom odabranom tkivu, pretpostavljeno tkivu dojke. Drugim rečima, upotrebama i postupcima sadašnjeg pronalaska, sa PR posredovana dejstva u prvom odabranom tkivu (pretpostavljeno materičnom tkivu) su selektivno pojačana u odnosu (odnosno, upoređeno) sa sa PR posredovanim dejstvima u drugom odabranom tkivu (pretpostavljeno tkivu dojke), odnosno, primećeno je razdvajanje u vezi sa PR posredovanim dejstvima u navedenom prvom i drugom odabranom ciljanom tkivu.

Pojam "selektivno pojačavanje sa PR posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu spram sa PR posredovanih dejstava u drugom odabranom tkivu" tako nema nameru da bude limitiran na bilo koje apsolutne vrednosti sa PR posredovanih dejstava u prvom i drugom odabranom tkivu, već pokriva scenarije gde je, na primer, sa PR posredovano dejstvo u drugom odabranom tkivu (pretpostavljeno tkivu dojke) slabo ili se ne može uopšte detektovati, a sa PR posredovano dejstvo izazvano u prvom odabranom tkivu (pretpostavljeno materičnom tkivu) je vrlo izraženo ili samo blago, ali je u svakom slučaju pojačano spram sa PR podredovanog dejstva izazvanog u drugom odabranom tkivu.

Najpoželjnije, jedinjenja prema sadašnjem pronalasku kao što su gore definisana za peti aspekt ovog pronalaska vrše korisna i/ili zaštitna sa PR posredovana dejstva u reproduktivnom traktu, kao što je održavanje trudnoće, i takođe održavanju klasična progestativna dejstva, kao što je inhibicija ovulacije itd. spram neželjenih sa PR posredovanih dejstava u dojci, kao što je proliferacija/diferencijacija epitela dojke. Tako, jedinjenja prema sadašnjem pronalasku pokazuju vrlo visoku aktivnost u materici i relativno slabiju aktivnost u mlečnoj žlezdi.

Tako, sadašnji pronalazak obezbeđuje progestagena jedinjenja koja imaju jasno razdvojen profil aktivnost progestina i koja su sposobna da izazovu željena, korisna dejstva u jednom ciljanom organu progesterona, kao što je materica, dok ne izazivaju neželjena dejstva u drugom ciljanom organu progesterona, n.pr., dojci, kao što su proliferacija/diferencijacija tkiva dojke (koje je evidentno povećanjem formiranja krajnjih završnih pupoljaka u mlečnim žlezadama). Pa ipak, korist sadašnjeg pronalaska nije limitirana na razdvojeni profil tkiva materice/dojke, već je jednako korisan za durge kombinacije ciljanog tkiva koje uključuje progesteron receptor posredovanje.

Da jedinjenja opšte formule (!) kao što su gore definisana za ovaj aspekt sadašnjeg pronalaska, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), stvarno pokazuju razdvojenu aktivnost (materica spram mlečne žlezde) demonstrirano je n.pr. u donjem Primeru 3, pri čemu je potvrđeno da jedinjenja sadašnjeg pronalaska, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), prikazuju snažnu progestativnu aktivnostin vivona matericu u vezi održavanja trudnoće i značajno nižu progestativnu aktivnost u tkivu dojke u vezi proliferacije krajnjih završnih pupoljaka u mlečnoj žlezdi. Detaljan opis bioogleda upotrebljenih da se utvrdi dali određeno jedinjenje stvarno selektivno modulira sa PR posredovana dejstva u prvom odabranom tkivu, pretpostavljeno materičnom tkivu, spram drugog odabranog tkiva, pretpostavljeno tkiva dojke, može takođe biti pronađen u primerima.

Pa ipak, u opštim pojmovima može se reći da za utvrđivanje da li određeno jedinjenje stvarno selektivno modulira definisana sa PR posredovana dejstva u definisanom ciljanom tkivu spram drugog ciljanog tkiva, tipo dejstva izazvanog sa navedenim jedinjenjem (odnosno, da li jedinjenje inhibira, ne utiče, pojačava ili održava sa PR posredovano dejstvo u navedenom ciljanom tkivu) kao i intenzitet izazvanog dejstva oni se mere, pretpostavljeno u odnosu na dejstvo izazvano sa poznatim "standardnim" PR ligandom, kao što je standardni progestin R5020 (promegeston). Tada se dejstva postignuta u prvom i drugom ciljanom tkivu sa testiranim jedinjenjem upoređuju i procenjuju, pretpostavljeno prema razmatranoj željenoj medicinskoj indikaciji ili nameravanoj primeni (n.pr., kontrola plodnosti ili HRT itd.). Detaljan opis ogleda za pretraživanje tkivo-specifičnih progesteron receptor liganda, zasnovano u jednu ruku nain vivotestiranja a u drugu ruku nain vitrotestiranja kao i na kombinovanain vitro/ in vivotestiranja, je dat u WO 02/054064 čije je otkriće u ovom- pogledu inkorporisano ovde putem reference. Na primer, odgovarajućain vivotestiranja za utvrđivanje da li određeni progestin selektivno izaziva sa PR posredovana dejstva u materici ili jajniku spram dojke su bioogled proliferacije/diferencijacije epitela dojke glodara, test održavanja trudnoće ili test proliferacije/diferencijacije endometrijuma kod glodara. Pa ipak/kao što je ranije pomenuto, sadašnji pronalazak nije limitiran na selektivne progestine materice/dojke, već je jednako koristan za druga tkiva ili organe gde postoje sa PR posredovana dejstva. Naravno da je u okviru znanja stručnjaka da odabere i obavi odgovarajućain vivotestiranja kao što su gore definisana u određenim ciljanim tkivima sem pretpostavljenih tkiva kao što je gore definisano i da utvrdi dejstvo izazvano sa određenim probnim progestinom u odnosu na odgovarajući standardni progestin.

Zbog izraženog razdvojenog profila aktivnosti progestina opšte formule (I) kao što je gore definisano, posebno jedinjenja ((+)-1), u vezi moduliranja sa PR posredovanih dejstava u različitim ciljanim organima progesterona, posebno dojci i reproduktivnom traktu (materica), medikamenti pripremljeni iz jedinjenja sadašnjeg pronalaska ( i opciono dodatna estrogen komponenta) su pogodni za lečenje određenih ginekoloških poremećaja kao za primenu u HRT. Upotreba jedinjenja prema sadašnjem pronalasku kao kontraceptivnih sredstava nije uvek čisto medicinska indikacija i tako pripada šestom aspektu ovog pronalaska pa će prema tome biti u daljem tekstu razmatrana. Za ginekološke poremećaje se podrazumeva da obuhvataju na primer endometrioza, mijom, dismenoreja, predmenstrualni sindrom (PMS, koji je zajednički pojam za brojne simptome, kao što je niži abdominalni bol, glavobolje, edem, depresija, iritiranost itd. koje doživljavaju mnoge žene šest do osam dana pre menstruacije) i dis.funkcionalno krvarenje materice (izazvano nedostatcima ili neravnotežama hormona), ali nisu limitirani samo na njih. Takođe neregularni menstrualni ciklusi mogu biti kontrolisani sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska. HRT se predominantno upotrebljava da se ublaže klimakterični simptomi, kao što su menopauzni simptomi (n.pr., vruće faze, noćna znojenja), osteoporoza, suve mukozne membrane kao i psihološki simptomi (n.pr. depresija). Postoje jaki dokazi da HRT sprečava razvoj kardiovaskularnih bolesti, Alchajmerove bolesti, kancera debelog creva i drugih bolesti.

Što se tiče predviđenih kao i pretpostavljenih načina primene, predviđenih kao i pretpostavljenih doza, predviđenih kao i pretpostavljenih dodatnih sastojaka medikamenata i opcionog prisustva dodatne estrogen komponente, referenca je učinjena prema drugom aspektu sadašnjeg pronalaska. Svi iskazi učinjeni u pogledu odgovarajućih, pretpostavljenih, poželjnijih i najpoželjnijih realizacija jednako se odnose na peti aspekt pronalaska, odnosno upotreba jedinjenja opšte formule (I), pa ipak uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid isključenog u prvom, drugom, trećem i četvrtom aspektu ovog pronalaska iz raspona opšte formule (I), za proizvodnju medikamenta za moduliranje sa PR posredovanih dejstava u provom odabranom tkivu spram drugog odapranog tkiva. Pretpostavljene realizacije ovog aspekta pronalaska (kao i drugi aspekti sadašnjeg pronalaska) se takođe sadrže u odgovarajućim zavisnim zahtevima svakog aspekta pronalaska.

Dok se peti aspekt sadašnjeg pronalaska odnosi na upotrebe jedinjenja opšte formule (I) u čisto medicinske svrhe, šesti aspekt sadašnjeg pronalaska odnosi se na upotrebu jedinjenja opšte formule (!) pri čemu su R, i R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3 je -CH3 ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pod uslovom da jedinjenje nije 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropii}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilaminoj-ftalid, kao kontraceptivnog sredstva.

lako generalno kontrola plodnosti i posebno kontracepcija mogu pod određenim okolnostima takođe da budu primenjeni iz čisto medicinskog razloga (i tako se dovodi u vezu u ovom pogledu sa petim aspektom sadašnjeg pronalaska koji je gore razmatran), za kontracepciju (odnosno, sprečavanje trudnoće) se generalno smatra da nema nameru da sprečava ili leči određenu bolest. Pa ipak, kontracepcija upotrebom progestina bilo samih (kao kontraceptivna sredstva bez estrogena, na primer POP-ovi) ili u kombinaciji sa estrogenima (kao kod COC-ova) može imati korisna (medicinska) dejstva osim inhibicije trudnoće. Poznato je da su kontraceptivna sredstva sposobna da leče određene poremećaje, kao što je nenormalan obrazac krvarenja tokom menstrualnog ciklusa ili predmenstrualni sindrom sa simptomima koji su gore navedeni u pogledu petog aspekta sadašnjeg pronalaska.

Kontraceptivna sredstva generalno takođe imaju pozitivan uticaj na izgled kože. Dalje, žene koje upotrebljavaju kontraceptivna sredstva rede pate od karlične inflamatorne bolesti (PID), i rizik jajničkog, endometrijalnog i kolorektalnog kancera je smanjen.

Kao što je gore pomenuto, novi progestini prema sadašnjem pronalasku i pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1) se sa prednostima koriste u oralnim kontraceptivnim sredstvima bez estrogena, kao što je, na primer, "minipilula" koja se sastoji samo od progestina (POP). Ova oralna kontraceptivna sredstva bez estrogena su pogodna alternativa za žene koje ne mogu da tolerišu estrogen-progestin kombinaciju zbog određenih dejstava estrogena, ali ipak žele da uživaju prednosti hormonske kontracepcije u obliku tablete. Dalje, oralna kontraceptivna sredstva bez estrogena su takođe opcija za žene koje doje, pošto estrogeni smanjuju proizvodnju mleka i prema tome upotreba kombinovanih estrogen-progestin kontraceptivnih sredstava se ne preporučuje u to vreme.

Novi progestini prema sadašnjem pronalasku i pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1) ne moraju se upotrebiti u oralnim kontraceptivnim sredstvima koja su u potpunosti oslobođena. od bilo koje estrogen komponente, već takođe i kod oralnih kontraceptivnih sredstava koja su suštinski oslobođena od estrogena. "Suštinski oslobođena od estrogena" treba da se razume kao pozivanje na količine estrogena koje su manje nego one koje se sadrže u estrogen-progestin kombinovanim oralnim kontraceptivnim sredstvima.

Pa ipak, dodatno gornjim koristima kod kontraceptivnih sredstava koja sadrže samo progestine (odnosno, kao oralna kontraceptivna sredstva bez estrogena) ili su u kombinaciji sa estrogenima, kontraceptivna sredstva koja sadrže progestine prema sadašnjem pronalasku kao što je gore definisano, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1), u stvari takođe izbegavaju moguće nedostatke poznatih kontraceptivnih sredstava tako što progestini prema sadašnjem pronalasku samo aktiviraju progesteron receptor na specifičnom ciljanom tkivu ili organu (posebno materici), ali samo u manjem stepenu (ili ne uopšte) na bilo kom drugom, neželjenom tkivu ili organu (posebno mlečnoj žlezdi), tako prevodeći ove tretmane u lakše podnošljive i manje okrenute ka ozbiljnim sporednim dejstvima ili čak rizik od izazivanja potencijalnih daljih zdravstvenih problema. Dalje, zbog njihove moćnog i skrojenog moduliranja sa PR posredovanih stanja i dejstava, progestini sadašnjeg pronalaska, posebno jedinjenje ((+)-1), mogu se dati u mnogo manjoj dozi kao posledica specifičnosti njihovog ciljanog tkiva nego poznati progestini koji se upotrebljavaju kao kontraceptivna sredstva (i takođe za druge indikacije koje su razmatrane u pogledu petog aspekta sadašnjeg pronalaska). Drugi aspekti upotrebe progestina kao kontraceptivnih sredstava mogu se uzeti iz knjige "Kontrazeption mit Hormonen" ("Kontracepcija sa hormonima") od H.-D. Taubert and H. Kuhl, Georg Thieme Verlag Stuttgart - New York, 1995.

U vezi pretpostavljenih realiacija šestog aspekta sadašnjeg pronalaska, referenca je učinjena u jednu ruku prema zahtevima a u drugu ruku prema objašnjenjima i opisima datim u pogledu drugog aspekta sadašnjeg pronalaska, naime farmaceutskih sastava koji sadrže progestine opšte formule (I), pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1). Sve što je tamo rečeno u pogledu načina davanja, doza, kombinacija sastojaka (posebno u pogledu opcione dodatne estrogen komponente) i bilo koja druga pretpostavljena realizacija odgovaraju šestom aspektu pronalaska, odnosno upotrebi jedinjenja opšte formule (I) za kontracepciju.

Sedmi aspekt sadašnjeg pronalaska je u vezi sa postupkom za selektivno moduliranje sa progesteron receptorom posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu ili organu spram drugog odabranog tkiva ili organa. Postupak sadrži korak davanje efektivne količine jedinjenja opšte formule (I)

pri čemu su Rti R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3 je -CH3 ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pa ipak uključujući 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-

trifluorometilpropionilamino]-ftalid koje je isklučeno u prvom, drugom, trećem, četvrtom i šestom aspektu pronalaska od sredstava opšte formule (I), ili farmaceutski sastav koji sadrži takvo jedinjenje opšte formule (I) individui kojoj je neophodna takvo selektivno moduliranje sa progesteron receptorom posredovanih dejstava.

U pogledu sedmog aspekta sadašnjeg pronalaska, selektivno moduliranje sa progesteronom posredovanih dejstava u prvom odabrano tkivu spram drugog odabranog tkiva na primer sadrži - kao i u drugim aspektima pronalaska koji su gore razmatrani - selektivno pojačavanje željenih i/ili zaštitnih dejstava u prvom ciljanom tkivu, pretpostavljeno tkivu materice, ili ciljanom organu, pretpostavljeno materici, sparam neželjenih sa PR posredovanih dejstava (kao što je proliferacija/diferencijacija) u drugom ciljanom tkivu, pretpostavljeno tkivu dojke, ili ciljanom organu, pretpostavljeno mlečnoj žlezdi. Pa ipak, treba da se razume da sadašnji pronalazak nije limitiran na materica/dojka razdvojenu aktivnost progestina prema pronalasku, već sadašnji pronalazak takođe pokriva razdvojene aktivnosti u vezi drugih odabranih prvih i drugih ciljanog tkiva na koje se utiče putem PR posredovanja. U vezi pretpostavljenih realizacija kao i detaljnog opisa indikacije "moduliranje sa PR posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu spram drugog odabranog tkiva", referenca je sačinjena na gore data iskaze u pogledu drugih aspekata sadašnjeg pronalaska, posebno prema petom aspektu.

Kao što je već objašnjeno u pogledu petog aspekta sadašnjeg pronalaska kao i u pogledu šestog aspekta sadašnjeg pronalaska, individua, pretpostavljeno sisar, najpoželjnije čovek, kome je takvo selektivno moduliranje sa progesteronom posredovanih dejstava potrebno mogu biti, na primer, ženska individua koja ima potrebu (usled medicinskih razloga) ili koja želi da spreči trudnoću. Tako, kao što je već ranije podvučeno, postupak prema sedmom aspektu sadašnjeg pronalaska može se upotrebiti za kontracepciju. U ovom pogledu, sve što je rečeno ranije u pogledu upotrebe progestina prama sadašnjem pronalasku kao kontraceptivnih sredstava, jednako se primenjuje na postupak prema sedmom aspektu pronalaska, uključujući pretpostavljene realizacije u vezi doza, doznih režima, načina davanja, opcione kombinacije progestina prema sadašnjem pronalasku sa estrogenima itd.

Odvojeno od kontracepcije, medicinske indikacije gde moduliranje sa PR posredovanih dejstava u prvom tkivu spram drugog tkiva ima prednosti ili je neophodno, su na primer terapija izmene hormona ili lečenje ginekoloških poremećaja. Sve ove indikacije su već opisane detaljno u pogledu n.pr. petog aspekta pronalaska i jednako su primenjlive za sadašnji sedmi aspekt pronalaska.

Osmi i deveti aspekti sadašnjeg pronalaska se odnose na upotrebe jedinjenja opšte formule (I)

pri čemu suR:i R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F,

R3 ]e -CH3 ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pa ipak uključujući 5-[3-{ 1 -(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilaminoj-ftalid koje je isklučeno u prvom, drugom, trećem, četvrtom i šestom aspektu pronalaska od sredstava opšte formule (I), za proizvodnju medikamenta za selektivno aktiviranje PR-A transkripcije spram PR-B transkripcije i za selektivno pojačavanje sa PR-A posredovanih dejstava spram sa PR-B posredovanih dejstava.

Osmi i deveti aspekt sadašnjeg pronalaska se odnose na postupke selektivnog aktiviranja PR-A transkripcije spram PR-B transkripcije i na nn^tunkeRRlpktovnnn nniar.avanie sa PR-A . nn^rprtrn/anih dei^tava spram sa PR-B posredovanih dejstava, postupke koji se sastoje od koraka davanja jedinjenje opšte formule (I) pri čemu su R, i Fi2 nezavisno jedan od drugog -H ili -F, F!3 je -CH3 ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pa ipak uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid koje je isključeno u prvom, drugom, trećem, četvrtom i šestom aspektu pronalaska od sredstava opšte formule (I), individui kojoj je potrebna takvo selektivno moduliranje PR-A transkripcije i sa PR-A posredovana dejstva, svako posebno.

Kao što je demonstrirano u donjem Primeru 5, za progestine sadašnjeg pronalaska, posebno jedinjenje (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifiuorometiifenil)-cik[opropii]-2-trifiuorornetii-propioriiiarriiriO [-ftaiiu, ((+)-1), je pronađeno da selektivno aktiviraju PR-A transkripciju i tkao selekivno izazivaju sa PR-A posredovana dejstva dok pretpostavljeno ne utiču na PR-B transkripciju i tkao sa PR-B posredovana dejstva.

Kao što je pomenuto u gornjem delu "Stanje tehnike", zasnovano na sudijama od strane B. Mulac-Jericevic kao i O. Conneelv, PR izoforma B izgleda da ej najodgovornija za proliferaciju i diferencijaciju mlečne žlezde, dok je antiproliferativno dejstvo progestina na materični epitel i ovulaciju najverovatnije posredovano sa PR izoformom (B. Bulac-Jericevic, Science 2000, 289, 1751-1754; Orla Conneelv, Endocrine Societv Meeting, Toronto, June 2000). Tako, kao što je podvučeno gore, progestini pokazuju selektivnost za progesteron izoformu A, odnosno progestine koji aktiviraju PR-A transkripciju i pretpostavljeno u isto vreme ne utiču na PR-B transkripciju, takođe verovatno selektivno pojačavaju sa PR posredovana dejstva u materici dok u isto vreme pretpostavljeno ne utiču na sa PR posredovana dejstva u mlečnoj žlezdi. Potvrda veze između specifičnosti PR izoforme i selektivnost tkiva PR liganada je već bila predmet ranije prijave WO 02/054064. Sadašnji pronalazak ponovo potvrđuje ovaj princim sredstvima Primera 3 i 5, prei čemu n.pr. pretpostavljeno jedinjenje prema sadašnjem pronalasku, jedinjenje ((+)-1) demonstrira da je selektivni i krajnje moćan PR-A agonist i tkao pokazuje snažno razdvojeni profil aktivnostiin vitrou pogledu PR izoforme A spram B kao iin vivou pogledu različitih ciljanih tkiva, izazivajući željena i korisna dejstva u materičnom tkivu do ne izaziva neželjena dejstva u tkivu dojke, kao što je proliferacije/diferencijacija mlečne žlezde.

Pa i<p>ak, primeniljivost sadašnjeg pronalaska niio oaraničena na materica spram dojke sistem, već se može proširiti na druge sisteme progesteron ciljanog organa. U osnovi bilo koje stanje koje su umešana sa PR izoformom posredovana dejstva mogu se tretirati putem upotreba progestina sadašnjeg pronalaska, bilo putem proizvodnje medikamenta prema osmom aspektu ovog pronalaska ili putem postupaka koji se sastoje od davanja navedenih progestina prema devetom aspektu sadašnjeg pronalaska. Treba da se razume da svi iskazi koji su gore učinjeni u pogledu drugih aspekata sadašnjeg pronalaska u vezi sa pretpostavljenim progestinima prema pronalasku, načinom davanja, doze i doznih režima, kombinacije sa drugim komponentama, kao što su estrogeni, itd. se jednako mogu primeniti na osmi i deveti aspekt koji je ovde opisan.

Zabeleženo je da je u svrhu sadašnjeg pronalaska, selektivnost (ili takođe specifičnost, termin koji se ovde takođe upotrebljava kao sinonim za selektivnost) progestina prema pronalasku za PR izoformu A spram PR izoforme B definisana kao razlika u efikasnosti transkripcije izazvane ovom progestinu sa PR-A spram sa PR-B ćelijama izmenjenih infekcijom. Pretpostavljeno, ova razlika je iznad ili jednaka sa 10%, poželjnije iznad ili jednaka sa 15% i najpoželjnije iznad ili jednaka sa 20%. "Efikasnost transkripcije" je definisana kao odgovor postignut sa definisanom koncentracijom probnog progestina u odnosu na standardni progestin (n.pr., R5020) u bolo sa PR-A ili sa PR-B ćelijama izmenjenih infekcijom.

Osim "efikasnosti transkripcije", sledeći potencijalni parametar za ocenjivanje selektivnost probnog progestina u poglesu bilo PR-A ili PR-B "moćnosti", odnosno, EC50vrednost (ili njegov tehnički ekvivalent ED50), se utvrđujein vitrou bilo sa PR-A ili sa PR-B ćelijama izmenjenih infekcijom. Pretpostavljeno, razlika u moćnosti postignutoj sa određenim probnim progestinom u sa PR-A spram sa PR-B ćelijama izmenjenim infekcijom treba da bude u rasponu od ili iznad faktora 10. Dalji detalji u vezi određivanja efikasnosti transkripcije mogu biti pronađeni u donjem Primeru 5 kao i ranijoj prijavi WO 02/054064 koja je u ovu sVrhu ovde inkorporisana putem reference. Kao što je demonstrirano u donjem Primeru 5, jedinjenja sadašnjeg pronalaska, posebno jedinjenje ((+)-1), su jaki agonisti sa selektivnošću za PR-A. Odvojeno odin vivoprimena koje su gore opisane za progestine prema sadašnjem pronalasku usled njihove specifičnosti za PR izoformu A, ova izražena sposobnost za selektivno aktiviranje PR-A transkripcije može biti eksploatisana n.pr. zain vitrooglede u koje su umešane dve PR izoforme, bilo u dijagnostičke ili naučne svrhe. Tako, ovi osmi i deveti aspekti sadašnjeg pronalaska takođe obezbeđujuin vitroupotrebe i postupke, koji su u vezi čisto na nivou receptora. Na primer, jedinjenje sadašnjeg pronalaska, pretpostavljeno jedinjenje ((+)-1) može se upotrebiti kao standard za ocenjivanje potencijala specifičnosti PR izoforme daljih PR liganada. U skladu sa tim, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti inkorporisana u dijagnostičke ili naučne pribore za utvrđivanje sposobnosti drugih jedinjenja za selektivno aktiviranje transkripcije PR izoforme. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu takođe biti upotrebljena za identifikovanje specifičnih ćelija PR izoforme koje mogu biti potrebne za određene dijagnostičke ili naučne primene.

U vezi detaljain vitrotesta za progestin koji ima specifičnost PR izoforme kao što se koristi u donjem Primeru 5, poziva se na WO 02/054064 koji je ovde inkorporisan putem reference. VVO 02/054064 posebno otkriva kako su dobijeni ćelijski stabilno izmenjeni infekcijom sa PR-A ili PR-B ekspresujući plazmidi, kako je otkrivena PR-A i PR-B transkripcija i kako oni mogu biti identifikovani oni PR ligandi koji pokazuju specifičnost PR izoforme. Dalje, kao što je gore pomenuto, VVO 02/054064 takođe otkriva ogled pretraživanja za tkivo selektivne PR ligande.

U vezi postupka pripremanja jedinjenja opšte formule (I)

pri čemu su R? i R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3 je -CH3 ili -CF3, i

Ar je

ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, sa ili bez uslova da jedinjenje nije 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil} -2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid, takav postupak je analogan sa postupkom otkrivenim n.pr. u VVO 98/54159 za dobijanje veće klase jedinjenja koja su tamo opisana. Pa ipak, pošto su jedinjenja sadašnjeg pronalaska nova u odnosu na jedinjenja otkrivena u VVO 98/54159, podvučeno je nekoliko sledećih različitih sintetičkih puteva za dobijanje progestina sadašnjeg pronalaska. Detaljan opis pripremanja jedinjenja (1), (2), (3) i (4) je dat u Primerima 1a), 1b), 1c) i 1d), svakom posebno.

Prvi postupak za dobijanje jedinjenja opšte formule (I) kao što je gore definisano'počinje sa jedinjenjm opšte formule (II)

pri čemu su supstituenti R,, R2i Ar definisani kao što je objašnjeno za opštu formulu (I). Jedinjenje opšte formule (II) reaguje sa jedinjenjem opšte formule CF3-SiMe3ili CF3-Si(R<x>)3, pri čemu je R<x>d do C4alkil, u prisustvu katalizatora, ili sa metil metalnim jedinjenjem, n.pr. Grignard-tip reagens ii litijum alkil, da se formira jedinjenje opšte formule (I). Kao katalizatori, fluorid soli ili bazne soli kao što su alkalni karbonati se mogu upotrebiti (uporedi, J. Am. Chem. Soc. 111, 1989, 393). Dalje, jedinjenja opšte formule (I) prema sadašnjem pronalasku mogu takođe biti formirana iz jedinjenja opšte formule (III)

pri čemu su R1i R2definisani kao što je gore objašnjeno za opštu formulu (I) a LG je odlazeća grupa, kao što je -Cl ili -Br ili tozilat supstituent. Jedinjenje opšte formule (III) reaguje sa jedinjenjem Ar-NH-R', pri čemu je Ar kao što je gore definisano za opštu formulu (I) a R1 je bilo atom vodonika ili Cido C5acil grupa. Pod određenim

okolnostima, supstituent R' može biti kasnije uklonjen. Jedinjenje opšte formule (III) može takođe biti formirano kao intermedijarni proizvod, na primer, može biti hloranhidrid intermedijarno formiran iz odgovarajuće ugljene kiseline.

Mustra supstitucije na fenil prstenu u opštoj formuli (I) prema sadašnjem pronalasku i nošenje supstituenata R,, R2i -CF3se dobija putem postupaka poznatih u nauci za selektivnu supstituciju na aromatičnom prstenu.

Sadašnji pronalazak je dalje ilustrovan sredstvima sledećih primera koji, naravno, nemaju nameru da budu limitirajući na obim sadašnjeg pronalaska.

Primeri

Primer1:Pripremanje progestina opšte formule ( I)

a)Pripremanje ( ±K(+)- i (-)- 5-{ 2- hidroksi- 3- n-( 2- fluoro- 5-trifluorometilfenil)- ciklopropil1- 2- trifluorometil- propionilamino}-

ftalida (( ±K (+)- i(- H) :

1 - ( 2- Fluoro- 5- trifluorometilfenil)- ciklopropil- karbonitril:

8,15 ml_ N,N'-dimetilimidazolidinona se dodaje na temperaturi od -70°C pod atmosferom inertnog gasa tokom 10 minuta rastvoru od 78 mL 2 Ivi litijum diizopropilamida (tetrahidrofuran/hepatn/etil benzen). Posle 15 minuta dodaje se, 10,6 g (2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-acetonitrila. Posle 10 minuta na -20°C, dodaje se 20,3 mL 1,2-dihloroetana (beleška: takođe je moguće reagovati (2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-acetonitril sa 1,2-dibromoetanom i Cs2C03) i smeša se meša na -20°C tokom 2 sata i 16 sati na ambijentalnoj temperaturi. Onda se smeša ohladi sredstvima leda i dodaju se zasićeni rastvor amonijumhlorida kao i etilacetat. Faza etilacetata se onda opere dva puta sa zasićenim rastvorom amonijumhlorida i dva puta sa vodom, osuši preko natrijumsulfata, koncentriše i destilira putem Kugelrohr-ove aparature.

Prinos: 8,7 g 1-(2-fluoro-5-triflurometilfenil)-ciklopropil-karbonitrila, t.k. 140°C/0,04 hPa.

1-( 2- Fluro- 5- trifluorometilfenil)- ciklopropil- karbaldehid:

8,5 g 1-(2-fluoro-5-triflurometilfenil)-ciklopropil-karbonitrila se rastvori u 60 mL tčluena. Na -70°C, 56 mL 1 M diizobutilaluminijum hidrida rastvorenog u toluenu se dodaje tokom 45 minuta. Posle 4 sata dodaje se, na -78 °C, 120 mL etilacetata kapanjem. Smeša se ostavi da se zagreje do ambijentalne temperature i opere se tri puta sa 2 N sumporne kiseline i jednom sa vodom. Etilacetat faza se onda osuši preko natrijumsulfata i hromatografiše na silika gelu (heksan/etilacetat: 5+1).

Prinos: 4,5 g 1 -(2-fluro—trifluorometilfenilj-ciklopropil-karbaldehid.

3-/7 - ( 2- Fluoro- 5- trifluorometilfenil)- ciklopropil} 2- okso- propionska

kiselina:

Rastvoru 5,0 g 2-dietilfosfono-2-etoksisirćetna kiselina etil estra u 40 mL tetrahidrofurana, dodaje se u okviru 20 minuta pod hlađenjem ledom 10 mL 2 M rastvora litijumdiizopropilamida u tetrahidrofuran/heptan/toluen. Smeša se meša 30 minuta na 0°C. Tokom 30 minuta, dodaje se rastvor 4 g 1-(2-fluro—trifluorometilfenil)-ciklopropil-karbaldehida u 30 mL tetrahidrofurana kapanjem na 0°C. Posle 20 sati na ambijentalnoj temperaturi, dodaje se smeše 2 N sumporne kiseline, onda se ekstrakuje sa etilacetatom, osuši preko natrijumsulfata i koncentriše. Sirovi proizvod se rastvori u 50 mL etanola i saponifikuje sa 33 mL 2 M rastvora natrijumhidroksida.

Prinos: 5,2 g kiseline, koja se zagreje pod refluksom zajedno sa 180 mL 2 N sumporne kiseline nekoliko sati pod energičnim mešanjem. Posle ekstrakcije sa etilacetatom i pranja sa vodom, dobija se 4,6 g 3-[1-(2-Fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline kao žuto ulje.

5- / 3-[ 1-( 2- fluoro- 5- trifluorometilfenil)- ciklopropil/- 2- okso-

propionilamino /- ftalid:

Na -10°C, dodaje se 0,84 mL tionilhlorida u 2,9 g 3-[1-(2-Fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline u 15 mL dimetilacetamidu. Smeša se meša 30 minuta na -10°C i 1 sat na 0°C i potom dodaje 1,95 g 5-aminoftalidu (ili, obrnouto, 5-aminoftalid može biti dodat smeši). Posle 16 sati na ambijentalnoj temperaturi, 2 M hlorovodonične kiseline i etilacetat se dodaju, organska faza se opere do neutralnog sa vodom, osuši preko natrijumsulfata i koncentriše. Posle hromatografije na silika gelu (heksan/etilacetat: 1+1) i rekristalizacije iz diizopropil etra, dobija se 2,4 g 5-{3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-ftalida (t.t. 168°C). ( ±)- 5- / 2- Hidroksi- 3- f1-( 2- fluoro- 5- trifluorometilfenil)- ciklopropilj- 2-trifluorometil- propionilamino/- ftalid ((+)- 1) :2,7 g 5-{3-[1 -(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilaminoj-ftalida se rastvori u 15 mL diemtilformamidu; dodaju se pod ledenim hlađenjem 4,25 mL triflurometil-trimetilsilana i 972 g cezijumkarbonata. Posle 18 sati mešanja na ambijentalnoj temperaturi, dodaje se 6,5 mL 1 M rastvora tetrabutilamonijufluorida u tetrahidrofuranu i rezultirajuća smeša se meša jedan sat. Posle potpunog dodavanja vode ekstrakuje se sa etilacetatom, organska faza se osuši preko natrijumsulfata i koncentriše. Posle hromatografije na silika gelu (heksan/etilacetat: 3+2), dobija se 760 mg početnog materijala kao frakcija 1 i kao frakcija 2 se dobija 880 mg (±)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalida ((+)-1) (t.t. 158°C).

Odvajanje enantiomera jedinjenja (( ±)- 1) :

Smeša enantiomera jedinjenja ((±)-1) se odvaja hromatografijom preko hiralnog nosača (CHIRALPAK AD<®>, dobijen od DAiCEL-a) i heksan/etanola: 97+3 kao tečne faze; prinos je 2,4 g racemata: (+)-5-{2-Hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ((+)-1) kao prva frakcija: 867 mg; t.t. 162- 163°C, aD= +114,5° (c = 0,5 u hloroformu) i (-)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ((-)-1) kao druga frakcija: 860 mg; t.t. 163- 164°C, aD = +113,7° (c = 0,5 u hloroformu).

b ) Pripremanje ( £ •, (-)- i (+)- 6 - / 2 - hidroksi - 3 -/ 1 '( 2 - fluoro - 3 -

trifluorometilfenil )- ciklopropilJ - 2 - trifluorometil - propioniiaminof - 4 -

metil - 2 , 3 - benzoksazin - 1 - ona ((( £ - 2 ), ((+)- 2 ) i ((-)- 2 )) :

1 - ( 2- Fluoro- 3- triflurometilfenil)- ciklopropil- karbonitrila

Pripremanje iz (2-fluro-3-trifluorometilfenil)-acetonitrila analogno pripremanju 1-(2-fluoro-5-triflurometilfenil)-ciklopropil-karbonitrila (uporedi, Primer 1a)). T.k. 120°C/o,o4 hPa.

1-( 2- Fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropil- karbaldehid:

Pripremanje od 1 -(2-fluoro-3-triflurometilfenil)-ciklopropil-karbonitrila analogno pripremanju 1 -(2-fluro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil-karbaldehidu (uporedi, Primer 1a)):3-[ 1-( 2- Fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropilJ- 2- okso- propionska

kiselina:

Pripremanje iz 1 -(2-fluro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil-karbaidehida analogno pripremanju 3-[1 -(2-Fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline (uporedi, Primer 1a)). T.t. 177°C (degradacija).

6- / 3-[ 1 -( 2- fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropil J- 2- okso-

propionilamino J- 4- metil- 2, 3- benzoksazin- 1 - on:

Pripremanje od 3-[1 -(2-fluro-3-trifluorometilfenii)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline analogno pripremanju 6-{3-[1 -(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-ona (uporedi, Primer 1c)). T.t. 117-118°C. ( ±)- 6- / 2- Hidroksi- 3-[ 1-( 2- fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropil j- 2-trifluorometil- propionilamino J- 4- metil- 2, 3- benzoksazin- 1 - on (( ±)- 2) :Analogno jedinjenj((+)-1) u Primeru 1a), jedinjenje (±)-6-{2-Hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on ((±)-2) se dobija od 6-{3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-ona. T.t. 200-201 °C.

Odvajanje enantiomera jedinjenja (( ±)- 2) :

(+) i (-) Enantiomeri se odvajaju kao što je opisano u Primeru 1a). Odvajanje donosi prinos: (-)-6-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorom'etil-pro<p>ionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1 -ona ((-)-2) kao prve frakcije; t.t. 171-173°C, aD = +115,2° (c = 0,5 u hloroformu), i

(+)-6-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1 -ona ((+)-2) kao druge frakcije; t.t. 168-173°C.

c) Pripremanje ( ±),(+) i (-)- 6-{ 2- hidroksi- 3- ri-( 3- trifluorometilfenin-

ciklopropill^- metil- propionilaminol- A- metil^^- benzoksazin- l- on

(( ±)- 3), ((+)- 3) i ((-)- 3) :6- / 3-[ 1-( 3- trifluorometilfenil)- ciklopropilJ- 2- okso- propionilamino /- 4- metil-2, 3- benzoksazin- 1 - on:1,8 mL Tionilhlorida se dodaje na -10°C u 6,0 g 3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline (pripremljena kao što je opisano u WO 98/54159) u 60 mL dimetil acetamida. Smeša se meša 30 minuta na -10°C i 1 sat na 0°C i potom smeša u 5 g 6-amino-4-metil-2,3-benzoksazin-1-ona. Posle 16 sati na ambijentalnoj temperaturi, faze se odvajaju između vode i etilacetata. Organska faza se opere sa slanim rastvorom, osuše preko natrijumsulfata i koncentriše. Posle hromatografije na silika gelu upotrebom heksana i etilacetata (10-20%) kao tečne faze, dobija se 6,78 g 6-{3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-4-metil-2!3-benzoksazin-1-ona (t.t. 136-139°C).

( ±)- 6- { 2- hidroksi- 3-[ 1-( 3- trifluorometilfeni!)- ciklopropilJ- 2- metil-

propionilamino}- 4- metil- 2, 3- benzoksazin- 1- on (( ±)- 3) :

215 mg 6-{3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-ona se rastvori u 7,5 suvom tetrahidrofuranu. Hlađenjem pod ledom, dodaje se 0,32 mL 3 M rastvora metil magnezijum bromida u etru. Posle 30 minuta na 0°C, reakciona smeša se sipa na zasićeni rastvor amonijumhlorida i ekstrakuje sa etilacetatom. Organska faza se opere sa slanim rastvorom, osuši preko natrijumsulfata i isparava. Posle hromatografije na silika gelu upotrebom heksana i etilacetata (0,20%) kao tečne faze, dobija se kao frakcija 1 80 mg početnog materijala i kao frakcija 2 dobija se 6-{2-hidroksi-3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-metil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on ((±)-(3), t.t. 75-76°C).

Odvajanje enantiomera jedinjenja (( ±)- 3) :

(+) i (-) Enantiomeri se odvajaju kao što je opisano u primeru 1a) za jedinjenje ((+)-1). Odvajanje donosi prinos: (-)-6-{2-hidroksi-3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-metil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on ((-)-3) kao prva frakcija; t.t. 129-130°C, aD- -54,8 (c - 0,5 u hloroformu) i

(+)-6-{2-hidroksi-3-[1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-metil-propionilamino}-4-metil-2,3-benzoksazin-1-on ((+)-3) kao drugu frakciju; t.t. 132-135°C; cxD= +55,2 (c = 0,5 u hloroformu).

d) Pripremanje (+), (+) i (-)- 5-{ 2- hidroksi- 3- n-( 2- fluoro- 3-trifluorometilfenil)- ciklopropil1- 2- trifluorometil- propionilamino}-

ftalid ( d± )-. ((+)- i M- 4) :

1-( 2- Fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropil- karbonitril:

Pripremanje iz (2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-acetonitrila analogno pripremanju . 1 -(2-fluoro-5-triflurometilfenil)-ciklopropil-karbonitrila (uporedi, Primer 1a)). T.k. 120°C/0,04 hPa.

1 -( 2- Fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropil- karbaldehid:

Pripremanje iz 1 -(2-Fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil-karbonitrila analogno sa pripremanjem 1 -(2Tluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil-karbaldehida (uporedi, Primer 1a)).

3-[ 1-( 2- Fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropilJ- 2- okso- propionska

kiselina:

Pripremanje iz 1 -(2-Fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil-karbaldehida analogno pripremanju 3-[1 -(2-Fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline (uporedi, Primer 1a). T.t. 177°C (degradacija).

5- { 3-[ 1-( 2- Fluoro- 3- trifluorometilfenil)- ciklopropil' j- 2- okso-

propionilamino /- ftalid:

Pripremanje iz 3-[1 -(2-Fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionske kiseline i 5-aminoftalida analogno pripremanju 5-{3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-ftalida (uporedi, Primer 1a)). T.t. 157-158°C.

( ±)- 5-{ 2- Hidroksi- 3-[ 1-( 2- fluoro- 3- trifluorometilfen^

trifluorometil- propionilaminoj- ftalid (( ±)- 4) :

Anaiogno pripremanju jedinjenja ((±)-1) u Primeru 1a), (±)-5-{2-Hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ((±)-4) se dobija iz 5-{3-[1-(2-Fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-okso-propionilamino}-ftalida. T.t. 212-214°C.

Odvajanje enantiomera jedinjenja (( ±)- 4) :

(+) i (-) Enantiomeri se odvajaju kao što je opisano u Primeru 1a) za jedinjenje ((±)-1). Odvajanje daje prinos: (-)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ((-)-4) kao prvu frakciju; t.t. 165-166°C, aD = -115,5°(c = 0,5 u hloroformu), i

(+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalid ((+)-4) kao drugu frakciju; t.t. 164-166°C.

Primer 2 ( In vivo testiranje progestogene aktivnosti - inhibicija

ovulacije) :

Pre nego što tretman započne, prate se dva menstrualna ciklusa ženskih pacova (težina: 190 do 210 g). Samo životinje koje imaju regularni 4 dnevni-ciklus se koriste za potonje testiranje. Počevši u metoestrusu, probno jedinjenje se daje 4 dana (dan 1 do 4) i ciklus se potom kontroliše.

Za potkožnu primenu, probna jedinjenja se rastvore u beznil benzoat/ricinusovo uije (1+9 v/v) i dnevna doza se daje u zapremini od 1 mL/kg telesne težine.

Za peroralnu primenu, probna jedinjenja se suspenduju u tečnom nosaču (85 mg Myrj<R>u 100 mL 0,9 % masa/v NaCI rastvor) i dnevna doza se daje u zapremini od 2 mL/kg telesne težine.

P roče na:

Na dan 4 posle primene probnog jedinjenja, one životinje koje imaju estrus ili metoestrus se avariectomized pod anestezijom etrom na jednoj strani. Preparati od cevčica se pripremaju i istražuju se za ova mikroskopom. Na dan 5 sve životinje (netaknute i delimično ovariektomizovani) se ubijaju sa ugljen dioksidom, cevčice se zaštite i analiziraju na isti način. Onda se utvrđuje, kao procenat, kod koliko životinja je ovulacija inhibirana.

Donje tabele 1-a i 1-b jasno pokazuju da kod odraslih ženki pacova, jedinjenje ((±)-1) efikasno inhibira ovulaciju potiskivanjem LH sekrecije. Tabela 1-a demonstrira da je EC50vrednost za ((±)-1) 45 ug7kg. U skladu sa tim, za jedinjenje se ima smatrati da poseduje snažnu progestationu aktivnost. Upoređenje sa standardnim progestinom R5020 (promegeston) otkriva da jein vivojedinjenje ((±)-1) jedno od najmoćnijih progestina koji su do sada identifikovani, pošto je sa faktorom 1 do 2 (više) efiksano kao/od R5020 (uporedi, Tabela 1-b).

Primer3 ( In vivo testiranje na selektivnost dojka/ materica) :

a) Bioogled o dejstvima proliferacije/ diferencijacije u epitelu

dojke pacova

Predmet ovog testiranja je da oceni dejstvo progestina na razvoj mlečne žlezde, posebno na formiranje krajnjih završnih pupoljaka u mlečnoj žlezdi kod sa estrogenom prvo premazanim pacovima. Progestini zajedno sa hormonima (prolaktin, estrogeni, glukokoritikoidi, hormoni rasta itd.) izazivaju proliferaciju i diferencijaciju mlečnog žlezdastog epitela dojke. Posebno, igraju ulogu u morfogenezi alveolarnih i krajnjih završnih pupoljaka, položajima proteina za proizvodnju mleka i sekreciji u duktalni lumen.

Da bi se utvrdila dejstva probnih progestina prema sadašnjem pronalasku, posebno jedinjenja ((±)-1), kod diferencijacije i proliferacije mlečne žlezde, prerane ženke pacova (VVistar Han, SPF) se ovariektomiziraju pri starosti od 21 dana, 4 do 6 dana pre nego što tretman započne. Životinje se tretiraju 6 dana sa standardnim estrogenom (estron (E1), 70[ug/kg) i probnim progestinom ((±)-1)

(zapremina aplikacije, 0,1 mL/50 g telesne težine; tečni nosač: benzilbenzoat/ricinusovo ulje (1+4 v/v); potkožno). Kontrolne grupe su n.pr.: tečni nosač, estron bez progestina, estradiol zajedno sa poznatim progestinom, n.pr. R5020 (promegeston). Posle 6-dnevnog tretmana životinje se ubiju ugljen dioksidom.

Za sva bojenja pločice za mikroskop, životinje se obriju u levom abdominalnom preponskom dojčanom regionu, koji se iseca od tela zajedno sa kožom. Za histološke/imunohistološke analize desna abdominalna inguinal mlečna žlezda se odseca od tela zajedno sa vezivnim tkivom koje je tamo spojeno i fiksira u 3,7 % formalinu u PBS

(fosfat pufer solana; bez Ca<2+>/Mg<2+>)

Potpuno bojenje mikroskopske pločice:

Preparati se fiksiraju preko noći u alkohol-formalinu prema postupku Tellyesniczky-ja (videti dole). Onda se tkivo mlečne žlezde i potkožni deo prilepljen na njega skinu sa kože i preparati se ponovo fiksiraju preko noći. Zatim dolaze sledeći koraci: etanol 70%: 1,5 sati; aceton: 3 x 1,5 sati; aceton: preko noći; izopropanol: 1,5 sati; etanol 96%; 2 sata; hetoksilin-gvožđe; 3 sata; VE voda; prvo se ispiraju preparati i potom 2 x 0,5 sati; etanol 70% preko noći; etanol 80%: 1,5 sati; etanol 96%: 1,5 sati; izopropanol: 1,5 sati. Preparati se onda pomere na pteri sudove i ostave u toluenu otprilike 1 sat, odnosno sve dok ne prestanu da plivaju. Onda se preparati tretiraju sa kedrovim uljem (Merck, br. 1.06965). Gornja vremena inkubacije su minimalna vremena i mogu se produžiti. Posebno, inkubacija u 70% etanolu posle fiksacije se može produžiti do bar 2,5 nedelje.

Pripremanje rastvora koji su neophodni za potpuno bojenje pločice mikroskopa: a) Alkohol-formalin prema Tellyesniczky-om; formaldehid 37%: 81,8 mL, etanol 70%: 1636 mL, glacijalna sirćetna kiselina (da

se doda kratko pre upotrebe): 81,8 mL (ukupno: 1800 mL).

b) Hematoksilin matični rastvor: Hematoksilin (Merck, br. 1.15938): 10 g, etanol 96%: 100 mL. Rastvor mora stajati 48

sati na 37°C pre upotrebe. Može se čuvati na mračnom mestu gotovo neograničeno vreme.

c) Hematoksilin-gvožđe rastvor za upotrebu: hamatoksilin matični rastvor (filtriran): 15,2 mL, etanol 96%: 1374 mL, FeCI3x 6

H20 (s. 4): 91,1 mL, 1 mol/1 HCI: 220 mL (ukupno: 1700 mL);

podešavanje do pH od 1,25 sa 2 mol/1 NaOH.

d) FeCI3x 6 H20 rastvor: FeCI3x 6 H20 (Merck, br. 1.03943): 1,07 g, VE voda: 90,2 mL, HCI: 0,92 mL (ukupno: 81,1 mL).

Putem sredstava od uvećanja 40 puta, krajnji- završni pupoljci blizu bradavice u pravu repa se računaju. Oblast koja se istražuje treba da bude oko 1,8 mm<2>. Za dobro-diferencirane preparate ova oblast može da bude smanjena, sa bar 250 pupoljaka koji se imaju računati. Posle brojanja, izračunava se broj završnih pupoljaka po 1 mm<2>.

Procena: •

Broj krajnih i alveolarnih završnih pupoljaka se izračunava po mm<2>+/standardno odstupanje (SD). Progestageno dejstvo probnog progestina je bilo utvrđeno kao granična vrednost za formiranje krajnjih i alveolarnih završnih pupoljaka (uporedi, SI. 3) (odnosno, koncentracija na kojoj je značajno progestageno dejstvo prepoznato po prvi put), ili kao ekvi-efikasna doza koja je potrebna da se postigne diferencijacija jednaka sa 0,3 mg/kg referentnog jedinjenja promegestona (R5020)

(uporedi, SI. 1). U vezi sa podacima predstavljenim na SI. 1, razlike među različitim testiranim grupama su testirane sa ANOVA (Dunn-ov postupak). Na SI. 3, razlike među grupama se testiraju sa t-testom spramm estron kontrolne grupe. Na obe SI. 1 i SI. 3, zvezdice označavaju značajnu razliku.

MIB- 5 imunohistohemija ( prema C. gerlach et al., Lab. Invest. 1997,

77( 6), 697- 698, sa modifikacijama) :

Za detaljniju procenu proliferacije kod epitela dojke, ćelije se boje sa proliferacionim markerom MIB-5 kako sledi (uporedi, SI. 2): Mlečne žlezde se fiksiraju u 4% formaldehid/PBS 24 sata i uglave u parafin. 4 um sekcije se rašire po slajdovima, deparafiniziraju, tretiraju sa mikrotalasima 10 minuta u citrat puferu pH 6,0 i ispiraju sa PBS. Slajdovi se onda blokiraju sa 3% H202/metanol 15 minuta, Blockingkit-om (Vektor, br. SP-2001) 10 minuta i serumom pacova (Sigma, br. S-7648) razblaženim 1:2 u PBS 30 minuta da se smanji nespecifično bojenje i ispere u PBS. Slajdovi se inkubiraju 1 sat sa monoklonalnim antitelom MIB-5 (Dianova, br. Dia-5055), koji je specifičan za antigen pacova Ki-67 (1:200 razblažen u PBS/0,2% BSA). Onda se slajdovi operu dva puta u PBS/o,2% TVVEEN 20, inkubiraju sa biotinilovanim pacov anti-rhiš sekundarnim antitelima (Dianova, br. 425-066-100), razblaže 1:200 u PBS/0,2% TVVEEN 20 1 sat i operu ponovo dva puta u PBS/0,2% TVVEEN 20, praćeno inkubacijom sa avidin-biotin-proksidaza kompleksima (Vecstein Elite ABC Kit br. PK-6100) 1 sat. Bojenje se obavlja sredstvima diaminobenzidina (Zymed Substrate Kit). Svi koraci se obavljaju na sobnoj temperaturi.

Procena:

Da bi se karakterisalo probno jedinjenje, utvrđuje se procenat MIB-5 obojenih ćelija epitela dojke. Slika 2 pokazuje procenta MIB-5 pozitivnih epitelijalnih ćelija +/- standardno odstupanje (SD). Razlike među grupama se testiraju putem ANOVA (Bonferroni t-test). Zvezdice na SI. 2 označavaju značajne razlike (p<0,05). Rezultati testiranja se dole dalje razmatraju pod c).

b)Test održavanja trudnoće kodpacova

Kod pacova, kastracija izaziva kraj trudnoće. Progestini (kombinovani

sa estrogenima) su sposobni da održe trudnoću kod kastriranih životinja. Pa ipak, stepen održavanja trudnoće kod kastriranih pacova je optimalan samo u definisanom rasponu doze. Pre tome, više kao i niže doze generalno izazivaju slabije dejstvo. Zajednički tretman sa definisanim dozama estrona (E-,) povećavaju dejstvo progesina na održavanje trudnoće-

Trudni pacovi (VVistar Han, SPF) od 190 do 220 g (5 do 8 životinja po dozi) se ovariektomiziraju na dan 8 od trudnoće, 2 sata pošto je prva supstanca data. Od dana 8 do dana 14, pacovi se dnevno tretiraju sa probnim progestinom u kombinaciji sa standardnom dozom E^ Dan kasnije, životinje se ubiju sa ugljen dioksidom. Za svaku životinju , broj živih i mrtvih fetusa se utvrđuje putem srčanih otkucaja embriona. U slučaju prazne materice, broj položaja implantacije se utvrđuje sredstvima bojenja sa 10% rastvorom amonijum sulfida.

Formulacija i primena probnih progestina i estrona:

S.c. (potkožna) primena: Probni progestin se rastvori u benzil benzoat/ricinusovo ulje (1+4 v/v), i dnevna doza se daje u zapremini od 1 mL/kg telesne težine.

P.o. (peroralna) primena: Probni progestin se suspenduje u tečnom nosaču (85 mg Myrj<R>u 100 mL 0,9 % w/w NaCI rastvor), i dnevna doza se daje u zapremini od 2 mL/kg telesne težine. I.p. (intraperitonelna) primena: Probni progestin se rastvori u propilen glikolu i napunu u minijaturne osmotske pumpe (tip 2001, 1,0 [ul_/h, 7 dana), koje se postave u abdominalnu šupljinu pacova.

Standardna doza estrona je 0,005 mg/kg telesne težine s.c. i rastvara se u benzil benzoat/ricinusovom ulju (1,4 v/v).

Procena:

Utvrđeno je održavanje trudnoće po životinji [%], održavanje trudnoće po dozi (srednje i pojedinačne vrednosti) i EC50 (doza, pri kojoj se trudnoć održava kod 50% životinja; 100 % odgovara kontrolnim životinjama koje nisu ovariektomizirane). Rezultati testiranja se dalje razmatraju u donjem c).

c)Rezultati dobijeni sa (+)- 5-{ 2- hidroksi- 3- ri-( 2- fluoro- 5-trifluorometilfenil)- ciklopropill- 2- trifluorometil-

propionilaminol- ftalidom (( ±H) i razmatranje rezultata

Sledeći rezultati (Tabela 2) su dobijeni u bioogledu dejstava proliferacije/diferencijacije u epitelu dojke pacova (potpuno bojenje pločice mikroskopa) opisanom gore pod a) i u testu održavanja trudnoće opisanom gore pod b) za najpoželjnije jedinjenje prema sadašnjem pronalasku, odnosno (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ((±)-1) u poređenju sa standardnim progestinom R5020 (promegeston).

Tabela 2 pokazuje dozu probnog progestina (bilo R5020 ili ((±)-1)) potrebnu po kg telesne težine (pacova) za postizanje EC50vrednosti u testu održavanja trudnoće i dozu potrebnu u bioogledu proliferacije/diferencijacije epitela dojke (pacov; potpuno bojenje pločice mikroskopa). "Ekvi-efikasna doza" znači da srednja kolona pokazuje dozu ((±)-1) potrebnu da postigne isto dejstvo kao što se postiže n.pr. sa 0,3 mg/kg R5020. Krajnje desna kolona pokazuje faktor probnog progestina((±)-i) koji se razlikuje od standardnog progestina R5020 u vezi njihove aktivnost u oba testa. Različiti parovi vrednosti unešeni u test diferencijacije/proliferacije stabla epitela dojke iz tri različita testiranja koja su urađena nezavisno. Srednji vrednost pojedinačnih vrednosti rezultira u faktoru (uporedi, krajnja leva kolona) od ca. 1. Pretpostavljeni progestin prema sadašnjem pronalasku, jedinjenje ((±)-1), izaziva od doze zavisno povećanje krajnjih i alveolarnih završnih pupoljaka, sa ekvi-efikasnom dozom prema 0,3 mg/kg/d promegestona od 0,6 mg/kg/d (SI. 1).

Dalje, granična vrednost za ((±)-1) za indukciju krajnih i alveolarnih završnih pupoljaka je 100 ug/kg/d (videti SI.3). Interesantno je, da postoji u zavisnosti od doze opadanje MIB-5 pozitivnih ćelija sa povećanim koncentracijama ((±)-1) (SI. 2). SI. 2 dalje demonstrira da 0,3 mg/kg/d promegestona pokazuje~42% MIB-5 pozitivnih ćelija, dok 1 mg/kg/d ((±)-1) pokazuje - 12% MIB-5 pozitivnih ćelija.

Uzeto zajedno, ovi rezultati ukazuju da ((±)-1) pokazuje otprilike istu aktivnost u mlečnoj žlezdi kao i referentno jedinjenje promegeston. Najviše vredno beleženja je da pri dozama gde se trudnoća u potpunosti održava (uporedi, Tabela 2), nema mogu se primetiti dejstva na formaciji krajnjeg i alveolarnog završnog pupoljka (SI. 3, Tabela 2). Tako, ((±)-1) pokazuje tkivo-selektivnu aktivnost na materici spram mlečne žlezde. Ovo razdvajanje u korist uterotropične aktivnosti je bar šest puta. Dalje, postoji inverzna korelacija doze ((±)-1) i izazivanja proliferacije mlečne žlezde

Gornji rezultati jasno ukazuju da je pretpostavljeno jedinjenje prema sadašnjem pronalasku, (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino} -ftalid ((±)-1), veoma moćno u održavanju trudnoće, dok su njegova proliferativna/diferencirajuća dejstva na epitel dojke ekstremno slaba kada se uporede sa standardnim progestinom R5020: Upoređeno sa R5020, jedinjenje ((±)-1) je osam puta moćnije u pogledu održavanja trudnoće, ali oko jednako moćno kao R5020 na mlečnu žlezdu. Ovi rezultati impresivno demonstriraju da je jedinjenje ((±)-1) selektivni modulator sa PR posredovanih dejstava prema sadašnjem pronalasku na taj način da povećava sa PR posredovana dejstva (održavanje trudnoće) na matericu, odnosno, prvo odabrano ciljano tkivo prema sadašnjem pronalasku, u odnosu na sa PR posredovana dejstva (proliferacija/diferencijacija mlečne žlezde) u dojci, odnosno, drugom odabranom ciljanom tkivu prema sadašnjem pronalasku. Posebno, kao što je gore naznačeno, kada se jedinjenje ((±)-1) daje u količini koja je dovoljna za održavanje trudnoće, nisu primećena dajstva na mlečnu žlezdu (videti Tabelu 2 i SI. 3). Tako je ovo jedinjenje posebno pogodno za upotrebu u kontracepciji, HRT i u lečenju ginekoloških poremećaja kao što je gore podvučeno u delu "Detaljan opis pronalaska". Pretpostavljeni progestin prema sadašnjem pronalasku, jedinjenje ((+)-1), je posebno pogodno za upotrebu u od estrogena oslobođenim oralnim kontraceptivnim sredstvima.

Gornji rezultati dobijeni za jedinjenje ((±)-1) u vezi njegovog materica/dojka razdvojenog profila aktivnosti ne samo da demonstrira da je ovo jedinjenje krajnje pogodno kao tkivo-specifični progestin prema sadašnjem pronalasku za indikacije i primene pomenute u delu "Detaljan opis pronalaska", već ona takođe demonstriraju prohodnost koncepta da je specifičnost PR izoforme PR liganada povezana za tkivo-specifičnost PR liganada, uporedi, VVO 02/054064. Dalje, rezultati pokazuju da tkivo-specifični progestini, posebno materica/dojka selektivni progestini prema sadašnjem pronalasku mogu biti identifikovani identifikovanjem progestina koji su selektivni po PR izofomi, 'odnosno, PR-A spram PR-B. Gornji rezultati specifično demonstriraju da progestini sa selektivnošću za PR izoformu A upoređeno sa PR izoformom B kao što je demonstrirano u donjem Primeru 5 selektivno pojačavaju sa PR posredovana dejstva u materici spram sa PR posredovanim dejstvima u dojci pri dozi koja je pogodna za održavanje trudnoće (uporedi, Tabela 2). Pa ipak, treba razumeti da PR-A spram PR-B selektivnosti (koja je utvrđena za progestine prema sadašnjem pronalasku kao što je demonstrirano u donjem Primeru 5) ne rezultiraju ekskluzivno u selektivnosti materica/dojka (kao što je potvrđeno gore za progestine sadašnjeg pronalaska), već da bilo koje drugo ciljano tkivo sa progesteron selektivnošću i bolo koje drugo selektivno moduliranje sa PR posredovanih dejstava zasnovano na progesteron izoformom posredovana dejstva mogu biti uključeni.

Primer 4( In vivotestiranje na oralnu progestationu aktivnost -

Endometrijumska transformacija kod zeca) :

Testiranje se obavlja na mladim ženkama zeca (Novo Zelandski beli, 30 do 35 dana starosti; dobijeni od Schriever-a, Nemačka). Od dana 1 do 4, svi zečevi se prvo premazuju sa 5,0 g/kg/dan 17a-estradiolom (potkožno, 0,5 mL/kg/dan) da bi se izazvala proliferacija endometrijuma. Od dana 7 do 10, testirano jedinjenje se primenjuje oralno (p.o., 0,5 m^kg/dan) pri dozama od 0,001, 0,01 i 0,1 mg/kg/dan. Grupa koja prima samo tečni nosač posle prvog premazivanja estradiolom služi kao negativna kontrola. Druga grupa koja prima samo progesteron da bi se izazvala endometrijumska diferencijacija posle prvog premazivanja estradiola se upotrebljava kao pozitivna kontrola. Da bi se proučila progestagena aktivnost ((±)-1), koji je najpoželjnije jedinjenje prema sadašnjem pronalasku, jedna grupa koja se tretira prima samo jedinjenje ((±)-1) posle prvog premazivanja.

Procena:

Autopsija se obavlja na dan 11. Kao parametar za progestagenu aktivnost, utvrđuje se McPhail-ov indeks (odnosno, stepen diferencijacije) sredstvima svetlosne mikroskopije (rezultati: 1 do 4; 1=nema žlezdane diferencijacije, 4=maksimalna diferencijacija).

Kao što je demonstrirano u donjoj Tabeli 3, pretpostavljeno jedinjenje sadašnjeg pronalaska, jedinjenje ((±)-1), je krajnje moćno na testu endometrijumske transformacije kod zeca (Clauberg-ov test). Identična moćnost je utvrđena za ((±)-1) posle potkožne kao i oralne primene. Tako, jedinjenje ((±)-1) mora da se smatra da je krajnje aktivno kada se daje oralno.

Primer5( In vitrotestiranje na specifičnost PR- A/ PR- B izoforme) : Prema osmom i devetom aspektu sadašnjeg pronalaska, progestini opšte formule (I), uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid koje je isključeno iz prvog, drugog, trećeg, četvrtog i šestog aspekta pronalaska, su korisni za selektivno aktiviranje PR-A transkripcije spram PR-B transkripcije, odnosno progestini sadašnjeg pronalaska pretpostavljeno ne aktiviraju PR-B transkripciju, bar ne do istog stepena kao PR-A transkripciju. U skladu sa tim, progestini su korisni za selektivno aktiviranje sa PR-A posredovanih dejstava spram sa PR-B posredovanih dejstava; odnosno, ova jedinjenja pretpostavljeno ne utiču na sa PR-B posredovana dejstva. U sledećem je opisano,in vitrotestiranje za utvrđivanje da li je određeni progestin selektivan za PR-A ili PR-B. Takođe je dole demonstrirano da su prema ovom in vitro testiranju, progestini opšte formule (I) prema sadašnjem pronalasku selektivni PR-A agonisti. Dalji detalji u vezi sa predstavljanjem ovog ogleda, posebno u vezi pripremanja PR-A i PR-B ćelija izmenjenih infekcijom, mogu biti pronađeni u WO 02/054064, koja je ovde inkorporisana putem reference.

Postupci za pretraživanje PR izoforma-specifičnih progestina prema sadašnjem pronalasku se obavlja sa prvim i drugim SK-N-MC ćelijama stabilno izmenjeni infekcijom sa plazmidom koji ekspresuje hPR-A (prve ćelije) ili hPR-B (druge ćelije) i LUC reporter gen povezan za hormonski odgovorni MTV promoter.

Ćelije se kultivišu u Minimalnom esencijalnom medijumu sa Earl-ovim solima (S-MEM, bez L-glutamina; Gibco BRL, br. 21090-022), sa dodatkom 10% fetalnog seruma teleta (FCS), penicilin 100U7streptomicinom 100ug/mL (Biochrom, br. A2213), L-glutaminom 4 mmol/L (Gibco BRL, br. 25030-024), natrijum piruvatom 1 mmol/L (Biochrom, br. L0473) i 1x ne-esencijalnim amino kiselinama (Biochrom, br. K0293) pri temperaturi od 37 °C i pri atmosferi od 5% ugljen dioksida.

Za ogled transkripcije, ćelije se zaseju na sudove sa 96 bazenčića (2x10<4>ćelija/sud) i kultivišu u medijumu kako je gore opisan, sa izuzetkom da se FCS zamenjuje sa 3% ugljem desorbiranim FCS-om. 48 Sati kasnije, ćelije se kontaktiraju sa prethodno razblaženim probnim jedinjenjima. Za utvrđivanje agonističke aktivnosti, ćelije se kultivišu u prisustvu povećanih koncentracija (10~<6>do 10~<11>mol/L) probnih progestina. Kao pozitivna kontrola za reporter genske indukcije ćelije se tretiraju sa 10<6>do 10<11>mol/L R5020 (promegeston). Kao negativna kontrola za reporter genske indukcije, ćeiije se kultivišu u 1 % etanolu.

Posle inkubacije sa probnim progestinima od. 24 sata, medijum se uklanja i ćelije se lizuju sa 20 uL puferom lize (Sistem ogleda luciferaze E 153A; Promega) i pod mešanjem ploče u trajanju od 10 minuta. Posle dodavanja 30uL reagensa luciferaze (Sistem ogleda luciferaze E 151A + 152A; Promega) u okviru 30 sekundi po ploči, aktivnost luciferaza reporter gena se utvrđuje u lizatima ćelije sredstvima Microlite ML 3000<luminometra mikrotitar ploče (Dvnatech) na cikličan način. Procena odgovora daje efikasnost [%], i procena EC50vrednosti daje moćnost [nM]. Izračunavanje agonistične aktivnosti se obavlja kako dalje sledi: LUC aktivnost [%] za merene tačke podataka su izračunate kako dalje sledi: Relativ. LUC aktiv. [%] = 100 x odgovor 10' 6 do 1011 mol/ probno jedinjenje - CO

CI-CO

Pri čemu Cl = 100% stimulacije (R5020, 10"<7>mol/L)

i CO = 0% stimulacije (etanol, 1%)

Tako se efikasnost [%] izračunava prema:

Efikasnost [%] - 100 x odgovor 10<7>mol/ probno jedinjenje - CO

CI-CO

Moćnost [nM], odnosno EC50, se utvrđuje grafički.

Neki rezultati efikasnosti postignuti za različite progestine prema sadašnjem pronalasku su prikazani u donjoj Tabeli 2. Ovi rezultati jasno demonstriraju selektivnost progestina sadašnjeg pronalaska, posebno jedinjenja ((±)-1)) za PR izoformu A. Tako su ovi progestini sposobni da selektivno pojačavaju sa PR-A posredovana dejstva spram sa PR-B posredovanih dejstava. Tako, dok je ranije nauka stalno stremila kao još moćnijim progestinima, sadašnji pronalazak obezbeđuje krajnju progesteron receptor izoformu, posebno selektivne progestine sa progesteron receptor A izoformom za selektivno ciljanje određenih željenih tkiva i organa, pretpostavljeno za selektivno aktiviranje sa PR posredovanih dejstava u materičnom tkivu spram sa PR posredovanih dejstava u tkivu dojke.

Primer 6 ( Antiuterotropična aktivnost kodpacova) :

Jedinjenja sa estrogenom aktivnošću izazivaju rast materice, rezultirajući u povećanju težine materice. Ona takođe izazivaju karakterističnu promenu izgleda endometrijumskog epitela što je naznačeno povećanjem visine epitela. PR modulatori kontra reaguju na estrogenu aktivnost inhibiranjem dobijanja na težini materice i proliferacije epitelne ćelije. Na ovo dejstvo se ponekad primenjuje termin dejstvo "funkcionalne antiestrogeničnosti".

Testiranom antiuterotropičnom aktivnošću najpoželjnijeg progestina prema sadašnjem pronalasku, odnosno, jedinjenja ((±)-1)), ovariektomizovani pacovi se tretiraju 3 dana sa 0,3ug/kg/d estradiolom (E2) i dodatno sa povećanim dozama ((±)-1)) (uporedi, SI. 4). Svaka probna grupa pokazana na SI. 4 se sastoji od 10 pacova, sa izuzetkom jedne grupe (uporedi, SI. 4, donji dijagram, 150 ug/kg ((±)-1)), naznačena kao "#"), koja se sastoji od devet pacova.

Procena:

Promene u težini materice, visini luminalnog epitela i statusu ćelijske proliferacije i keratonizacije vaginalne masti služe kao parametri za estrogenu aktivnost. U kombinaciji sa ((±)-1)), smanjuje se estrogenom stimulisano dobijanje na težini materice i visini luminalnog epitela što su parametri za antiestrogenu aktivnost (uporedi, SI. 4).

Za referentnu grupu (sa estradiolom (E2) tretiranu), stimulacija težine materice' i visine luminalnog epitela u poređenju sa tečnim nosačem kontrole se izračunava kako dalje sledi: srednja vrednost težine ( referentno jedinjenje) x 100 % = % stimulacije srednja vrednost težine (tečni nosač kontrola)

U antiestrogen ogledu, inhibicija težine materice ili visine luminalnog epitela u poređenju sa dejstvom viđenim sa referentnim jedinjenjem (estradiol) se izračunava kako dalje sledi: sred. vr. tež.( probno jedinjenje) - sred. vr. tež.( nosać kontr.) x 100% = % stimulacije sred.vr.tež.(ref. Jedinjenje) - sred.vr.tež. (nosač kontrola)

Za statističku analizu, interval sigurnosti od 95% se izračunava upotrebom softvera koji je razvijen od strane Biostatičkog odeljenja Schering AG-a. Zvezdica označava značajnu razliku (p<0,05).

Razmatranje:

((±)-1)) kada se daje u kombinaciji sa estradiolom, ima snažno funkcionalno antiestrogenično dejstvo u pogledima od doze zaivnosti inhibicije dobijanja na težini materice i visine epitela ćelije kao što je prikazano na Slici 4. Doza od 5 ug/kg/d ((±)-1)) pokazuje submaksimalno dejstvo. Maksimalno dejstvo se primećuje sa dozom od 15 ug/kg/d.

Kao zaključak, ((±)-1)) je PR modulator sa moćnom funkcionalnom antiestrogeničnom aktivnošću. Antiuterotropična aktivnost ((±)-1)) se pojavljuje u istom rasponu doze kao i kod njegove aktivnosti na održavanje trudnoće (EC50vrednost 12 ug/kg/d). Ovi rezultati demonstriraju krajnju progestageničnu aktivnost koja je prikazaa od strane ((±)-1)) u materici.

Granična vrednost progestina ((±)-1)) za formiranje krajnih i alveolarnih završnih pupoljaka u mlečnoj žlezdi je veoma visoka (uporedi, Slika 3 i Tabela 2), dok se dejstva na matericu mogu već primetiti pri vrlo niskoj koncentraciji ((±)-1)) (uporedi, n.pr. Primer 6 i Slika 4), demonstrirajući razdvojeno dejstvo ovog jedinjenja pronalaska u dojci spram materice.

Claims (36)

1. Jedinjenje opšte formule naznačeno time, što suRti R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3 je -CH3 ili -CF3, i Ar je ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pod uslovom da jedinjenje nije 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid.

2. (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog.

3. Farmaceutski sastav,naznačen time,što sadrži jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1.

4. Farmaceutski sastav prema zahtevu 3,naznačen time,što je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog.

5. Farmaceutski sastav prema zahtevima 3 ili 4,naznačen time,što je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 prisutno u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 2 mg.

6. Farmaceutski sastav prema bilo kom od zahteva 3 do 5, naznačen time, što dalje sadrži 17a-etinil estradiol ili drugu estradiol komponentu.

7. Farmaceutski sastav prema zahtevu 6, naznačen time, što je 17oc-etinil estradiol ili druga estradiol komponenta prisutna u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 0,05 mg.

8. Jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1,naznačeno time,što se upotrebljava u lečenju.

9. (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog,naznačen time,što se upotrebljava u lečenju.

10. Jedinjenje prema zahtevima 8 ili 9, naznačeno time, što se upotrebljava u kontroli plodnosti, terapiji izmene hormona ili lečenju ginekoloških poremećaja.

11. Farmaceutski sastav kao što je definisan u zahtevu 3,naznačen time,što se upotebljava u lečenju.

12. Farmaceutski sastav koji sadrži (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog,naznačen time,što se upotrebljava u lečenju.

13. Farmaceutski sastav prema zahtevima 11 ili 12,naznačen time,što se upotrebljava u kontroli plodnosti, terapiji izmene hormona ili lečenju ginekoloških poremećaja.

14. Upotreba jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1, uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilaminoj-ftalid koje je isključeno iz zahteva 1, za proizvodnju medikamenta za selektivno moduliranje sa progesteron receptorom posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu spram drugog odabranog tkiva.

15. Upotreba prema zahtevu 14, pri čemu je prvo odabrano tkivo materično tkivo a drugo odabrano tkivo je tkivo dojke.

16. Upotreba prema zahtevima 14 ili 15 za selektivno pojačavanje sa progesteronom posredovanih dejstava u materičnom tkivu spram sa progesteronom posredovanih dejstava u tkivu dojke.

17. Upotreba prema bolo kom od zahteva 14 do 16, pri čemu je medikament za upotrebu kod kontrole plodnosti, terapije izmene hormona ili lečenja ginekoloških poremećaja.

18. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 17 za selektivno pojačavanje antiproliferativnih dejstava u materici spram proliferacije i diferencijacije tkiva dojke.

19. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 18, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog.

20. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 19, pri čemu se medikament daje oralno.

21. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 20, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 prisutno u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 2 mg.

22. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 21, pri čemu medikament dalje sadrži 17a-etinil estradiol ili drugu estrogen komponentu.

23. Upotreba prema zahtevu 22, pri čemu je 17a-etinil estradiol ili druga estrogen komponenta prisutna u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 0,05 mg.

24. Upotreba prema zahtevima 22 ili 23, pri čemu dnevne doze jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1 i 17a-etinil estradiol ili druga estrogen komponenta koji se imaju dati variraju nezavno jedna od druge tokom ženskog menstrualnog ciklusa.

25. Upotreba jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1 ili kao farmaceutskog sastava kao što je definisan u zahtevu 3 kao kontraceptivnog sredstva.

26. Upotreba prema zahtevu 25, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1 -(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog.

27. Upotreba prema zahtevima 25 ili 26, pri čemu se kontraceptivno sredstvo daje oralno.

28. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 27, pri čemu je kontraceptivno sredstvo od estrogena oslobođeno kontraceptivno sredstvo.

29. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 28, pri čemu se jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 daje u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 2 mg.

30. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 27 i 29, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 zajedno sa 17a-etinil estradiolom ili drugom estrogen komponentom.

31. Upotreba prema zahtevu 30, pri čemu se 17a-etinil estradiol ili druga estrogen komponenta daju u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 0,05 mg.

32. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 27 i 29 do 31, pri čemu dnevne doze jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 i 17a-etinil estradiola ili druge estrogen komponente koje se imaju dati variraju nezavisno jedna od druge tokom ženskog menstrualnog ciklusa.

33. Upotreba jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1, uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilaminoj-ftalid koje je isključeno iz zahteva 1, za proizvodnju medikamenta za selektivno aktiviranje transkripcije progesteron receptor izoforme A spram transkripcije progesteron receptor izoforme B.

34. Upotreba prema zahtevu 33, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-24rifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog.

35. Upotreba jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1, uključujući jedinjenje 5-[3-{ 1 -(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilarninoj-ftalid koje je isključeno iz zahteva 1, za proizvodnju medikamenta za selektivno pojačavanje sa progesteron receptor izoformom A posredovanih dejstava spram sa progesteron receptor izoformom B posredovanih dejstava.

36. Upotreba prema zahtevu 35, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil'propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. 1. Jedinjenje opšte formule naznačeno time,što su R, i R2nezavisno jedan od drugog -H ili -F, R3je -CH3 ili -CF3l i Ar je ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat ili analog, pod uslovom da jedinjenje nije 5-[3-{ 1 -(3-trifluorometiifeni01cik!opropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid. 2. (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. 0 3. Farmaceutski sastav,naznačen time,što sadrži jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1. 4. Farmaceutski sastav prema zahtevu 3,naznačen time,što je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[l-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. 5. Farmaceutski sastav prema zahtevima 3 ili 4,naznačen time,što je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 prisutno u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 2 mg. 6. Farmaceutski sastav prema bilo kom od zahteva 3 do 5, naznačen time, što dalje sadrži 17a-etinil estradiol ili drugu estradiol komponentu. 7. Farmaceutski sastav prema zahtevu 6, naznačen time, što je 17a-etinil estradiol ili druga estradiol komponenta prisutna u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 0,05 mg. 8. Jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1,naznačeno time,što se upotrebljava u lečenju. 9. (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilaminoj-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog,naznačen time,što se upotrebljava u lečenju. 10. Jedinjenje prema zahtevima 8 ili 9, naznačeno time, što se upotrebljava u kontroli plodnosti, terapiji izmene hormona ili lečenju ginekoloških poremećaja, na primer endometrioze. 11. Farmaceutski sastav kao što je definisan u zahtevu 3,naznačen time,što se upotebljava u lečenju. 12. Farmaceutski sastav koji sadrži (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog,naznačen time,što se upotrebljava u lečenju. 13. Farmaceutski sastav prema zahtevima 11 ili 12,naznačen time,što se upotrebljava u kontroli plodnosti, terapiji izmene hormona ili lečenju ginekoloških poremećaja, na primer endometrioze. 14. Upotreba jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1, uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid koje je isključeno iz zahteva 1, za proizvodnju medikamenta za selektivno moduliranje sa progesteron receptorom posredovanih dejstava u prvom odabranom tkivu spram drugog odabranog tkiva. 15. Upotreba prema zahtevu 14, pri čemu je prvo odabrano tkivo materično tkivo a drugo odabrano tkivo je tkivo dojke. 16. Upotreba prema zahtevima 14 ili 15 za selektivno pojačavanje sa progesteronom posredovanih dejstava u materičnom tkivu spram sa progesteronom posredovanih dejstava u tkivu dojke. 17. Upotreba prema bolo kom od zahteva 14 do 16, pri čemu je medikament za upotrebu kod kontrole plodnosti, terapije izmene hormona ili lečenja ginekoloških poremećaja, na primer endometrioze. 18. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 17 za selektivno pojačavanje antiproliferativnih dejstava u materici spram proliferacije i diferencijacije tkiva dojke. 19. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 18, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. 20. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 19, pri čemu se medikament daje oralno. 21. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 20, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 prisutno u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 2 mg. IZMENJENA STRANA 22. Upotreba prema bilo kom od zahteva 14 do 21, pri čemu medikament dalje sadrži 17a-etinil estradiol ili drugu estrogen komponentu. 23. Upotreba prema zahtevu 22, pri čemu je 17cx-etinil estradiol ili druga estrogen komponenta prisutna u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 0,05 mg. 24. Upotreba prema zahtevima 22 ili 23, pri čemu dnevne doze jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1 i 17a-etinil estradiol ili druga estrogen komponenta koji se imaju dati variraju nezavno jedna od druge tokom ženskog menstrualnog ciklusa. 25. Upotreba jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1 ili kao farmaceutskog sastava kao što je definisan u zahtevu 3 kao kontraceptivnog sredstva. 26. Upotreba prema zahtevu 25, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-p-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. 27. Upotreba prema zahtevima 25 ili 26, pri čemu se kontraceptivno sredstvo daje oralno. 28. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 27, pri čemu je kontraceptivno sredstvo od estrogena oslobođeno kontraceptivno sredstvo. 29. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 28, pri čemu se jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 daje u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 2 mg. 30. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 27 i 29, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 zajedno sa 17a-etinil estradiolom ili drugom estrogen komponentom. 31. Upotreba prema zahtevu 30, pri čemu se 17u-etinil estradiol ili druga estrogen komponenta daju u količini kao što je ona gde je dnevna doza 0,01 do 0,05 mg. 32. Upotreba prema bilo kom od zahteva 25 do 27 i 29 do 31, pri čemu dnevne doze jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 i I7a-etinil estradiola ili druge estrogen komponente koje se imaju dati variraju nezavisno jedna od druge tokom ženskog menstrualnog ciklusa. 33. Upotreba jedinjenja kao što je definisano u zahtevu 1, uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilamino]-ftalid koje je isključeno iz zahteva 1, za proizvodnju medikamenta za selektivno aktiviranje transkripcije progesteron receptor izoforme A spram transkripcije progesteron receptor izoforme B. 34. Upotreba prema zahtevu 33, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino)-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog. 35. Upotreba jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1, uključujući jedinjenje 5-[3-{1-(3-trifluorometilfenil)-ciklopropil}-2-hidroksi-2-trifluorometilpropionilaminoj-ftalid koje je isključeno iz zahteva 1, za proizvodnju medikamenta za selektivno pojačavanje sa progesteron receptor izoformom A posredovanih dejstava spram sa progesteron receptor izoformom B posredovanih dejstava. 36. Upotreba prema zahtevu 35, pri čemu je jedinjenje kao što je definisano u zahtevu 1 (+)-5-{2-hidroksi-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-ciklopropil]-2-trifluorometil-propionilamino}-ftalid ili njegov farmaceutski prihvatljiv derivat ili analog.