RU2012105647A - Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из реакций обратной транскрипции и амплификации - Google Patents
Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из реакций обратной транскрипции и амплификации Download PDFInfo
- Publication number
- RU2012105647A RU2012105647A RU2012105647/10A RU2012105647A RU2012105647A RU 2012105647 A RU2012105647 A RU 2012105647A RU 2012105647/10 A RU2012105647/10 A RU 2012105647/10A RU 2012105647 A RU2012105647 A RU 2012105647A RU 2012105647 A RU2012105647 A RU 2012105647A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dnase
- reverse transcription
- nucleic acid
- reaction
- seq
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/22—Ribonucleases [RNase]; Deoxyribonucleases [DNase]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/6848—Nucleic acid amplification reactions characterised by the means for preventing contamination or increasing the specificity or sensitivity of an amplification reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2549/00—Reactions characterised by the features used to influence the efficiency or specificity
- C12Q2549/10—Reactions characterised by the features used to influence the efficiency or specificity the purpose being that of reducing false positive or false negative signals
- C12Q2549/101—Hot start
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
1. Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из реакции обратной транскрипции, при котором используют ДНКазу, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин, и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК.2. Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из полимеразной цепной реакции (ПЦР) с горячим стартом, где указанная реакция представляет собой барьерную комбинацию ПЦР с горячим стартом и/или включает ДНК-полимеразу с горячим стартом, при котором используют ДНКазу, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин, и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК.3. Способ по любому из пп.1 и 2, где реакционную смесь для обратной транскрипции, комбинацию для ПЦР с горячим стартом, смесь для ПЦР с горячим стартом или любой из их индивидуальных компонентов приводят в контакт с ДНКазой в условиях, которые дают возможность для расщепления любой загрязняющей двухцепочечной ДНК, и затем реакционную смесь нагревают для инактивации ДНКазы.4. Способ обратной транскрипции in vitro нуклеиновой кислоты-мишени, при котором осуществляют стадию обработки реакционной смеси для обратной транскрипции ДНКазой, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК, перед началом реакции обратной транскрипции.5. Способ по п.3, где реакционная смесь для обратной транскрипции представляет собой полную смесь, и ее нагревают при рабочей температур�
Claims (27)
1. Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из реакции обратной транскрипции, при котором используют ДНКазу, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин, и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК.
2. Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из полимеразной цепной реакции (ПЦР) с горячим стартом, где указанная реакция представляет собой барьерную комбинацию ПЦР с горячим стартом и/или включает ДНК-полимеразу с горячим стартом, при котором используют ДНКазу, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин, и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК.
3. Способ по любому из пп.1 и 2, где реакционную смесь для обратной транскрипции, комбинацию для ПЦР с горячим стартом, смесь для ПЦР с горячим стартом или любой из их индивидуальных компонентов приводят в контакт с ДНКазой в условиях, которые дают возможность для расщепления любой загрязняющей двухцепочечной ДНК, и затем реакционную смесь нагревают для инактивации ДНКазы.
4. Способ обратной транскрипции in vitro нуклеиновой кислоты-мишени, при котором осуществляют стадию обработки реакционной смеси для обратной транскрипции ДНКазой, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК, перед началом реакции обратной транскрипции.
5. Способ по п.3, где реакционная смесь для обратной транскрипции представляет собой полную смесь, и ее нагревают при рабочей температуре фермента для обратной транскрипции для инактивации ДНКазы.
6. Способ по п.4, где реакционная смесь для обратной транскрипции представляет собой полную смесь, и ее нагревают при рабочей температуре фермента для обратной транскрипции для инактивации ДНКазы.
7. Способ по любому из пп.4-6, при котором осуществляют один или более чем один цикл, включающий одну или более чем одну из следующих стадий:
(1) отжиг праймера,
(2) удлинение цепи относительно полинуклеотида с праймером,
(3) плавление полинуклеотидного дуплекса.
8. Способ по любому из пп.1 и 4-6, где за указанной реакцией обратной транскрипции следует реакция амплификации нуклеиновой кислоты.
9. Способ по п.8, где указанная реакция амплификации нуклеиновой кислоты представляет собой ПЦР, лигазную цепную реакцию (ЛЦР), амплификацию с вытеснением цепи (SDA), самоподдерживающуюся репликацию последовательности (3SR) или изотермальную петлевую амплификацию (ИПА), предпочтительно ПЦР.
10. Способ по п.8, где реакцию обратной транскрипции и реакцию амплификации осуществляют в одном реакционном сосуде.
11. Способ ПЦР с горячим стартом, где указанная реакция представляет собой барьерную комбинацию для ПЦР с горячим стартом и/или включает ДНК-полимеразу с горячим стартом, включающий стадию обработки комбинации/смеси для ПЦР с горячим стартом или ДНК-полимеразы с горячим стартом ДНКазой, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК, перед началом ПЦР с горячим стартом.
12. Способ по любому из пп.9-11, при котором дополнительно осуществляют множество циклов, включающих одну или более чем одну из следующих стадий:
(1) плавление полинуклеотидного дуплекса,
(2) отжиг праймера,
(3) удлинение цепи относительно полинуклеотида с праймером.
13. ДНКаза, которая, по существу, необратимо инактивируется путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин и которая, по существу, специфична в отношении двухцепочечной ДНК.
14. ДНКаза или ее ферментативно активный фрагмент, имеющие последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 1 или последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична ей, но где пролиновый остаток в положении 237 в SEQ ID NO: 1 или эквивалентный пролин в других последовательностях модифицирован, удален или замещен, где указанная ДНКаза или ее ферментативно активный фрагмент, по существу, необратимо инактивируются путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин, и которые, по существу, специфичны в отношении двухцепочечной ДНК.
15. ДНКаза или ее ферментативно активный фрагмент по п.14, имеющие последовательность SEQ ID NO: 5 или последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична ей, но где пролиновый остаток в положении 214 в SEQ ID NO: 5 или эквивалентный пролин в других последовательностях модифицирован, удален или замещен, где указанная ДНКаза или ее ферментативно активный фрагмент, по существу, необратимо инактивируются путем нагревания при температуре примерно 50°С в течение 5 мин и которые, по существу, специфичны в отношении двухцепочечной ДНК.
16. ДНКаза или ее фрагмент по п.14 или 15, имеющие последовательность ДНКазы, полученной из видов типа Arthropodoa, но где эквивалент пролинового остатка в положении 237 в SEQ ID NO: 1 модифицирован, удален или замещен.
17. ДНКаза или ее фрагмент по п.16, имеющие последовательность ДНКазы, полученной из видов подтипа, выбранного из Crustacea, Hexpoda, Chelicerata или Myriapoda, но где эквивалент пролинового остатка в положении 237 в SEQ ID NO: 1 модифицирован, удален или замещен.
18. ДНКаза или ее фрагмент по п.16, имеющие последовательность ДНКазы, полученной из видов, выбранных из Pandalus borealis, Paralithodes camtschaticus (королевский краб), Marspenus japonicus (креветка kuruma) или Penaeus japonicus, но где эквивалент пролинового остатка в положении 237 в SEQ ID NO: 1 модифицирован, удален или замещен.
19. ДНКаза или ее фрагмент по п.18, имеющие последовательность ДНКазы, полученной из Pandalus borealis, но где эквивалент пролинового остатка в положении 237 в SEQ ID NO: 1 модифицирован, удален или замещен.
20. ДНКаза по любому из пп.13-15, имеющая последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 7.
21. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая ДНКазу по любому из пп.13-20.
22. Молекула нуклеиновой кислоты по п.21, содержащая нуклеотидную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 8.
23. Применение ДНКазы по любому из пп.13-20 в качестве агента для удаления загрязнения в способе амплификации нуклеиновой кислоты.
24. Применение ДНКазы по любому из пп.13-20 в способе по любому из пп.1-12.
25. Способ выделения и очистки ДНКазы или ее фрагмента по любому из пп.13-20, включающий экспрессию указанной ДНКазы или ее фрагмента в подходящей клетке-хозяине и затем выделение ДНКазы из указанных клеток-хозяев и/или сред, в которых выращивали указанные клетки.
26. Набор для осуществления способа по любому из пп.1-12, содержащий ДНКазу по любому из пп.13-20 и/или нуклеиновую кислоту по п.21 или 22; и возможно один или более чем один из следующих:
(1) нуклеотидтрифосфат;
(2) олигонуклеотидный праймер;
(3) фермент обратной транскрипции;
(4) ДНК-полимераза;
(5) ДНК-лигаза; и
(6) рестрикционный фермент.
27. Композиция для осуществления способа по любому из пп.1-12, содержащая ДНКазу по любому из пп.13-20 и/или нуклеиновую кислоту по п.21 или 22; и возможно один или более чем один из следующих:
(1) нуклеотидтрифосфат;
(2) олигонуклеотидный праймер;
(3) фермент обратной транскрипции;
(4) ДНК-полимераза;
(5) ДНК-лигаза и
(6) рестрикционный фермент.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB0912637.6 | 2009-07-21 | ||
| GB0912637A GB2474225A (en) | 2009-07-21 | 2009-07-21 | DNase for decontamination of reverse transcription and amplification reactions |
| US23517709P | 2009-08-19 | 2009-08-19 | |
| US61/235,177 | 2009-08-19 | ||
| PCT/GB2010/001384 WO2011010094A1 (en) | 2009-07-21 | 2010-07-21 | A method of removing nucleic acid contamination in reverse transcription and amplification reactions |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012105647A true RU2012105647A (ru) | 2013-08-27 |
| RU2550277C2 RU2550277C2 (ru) | 2015-05-10 |
Family
ID=41058269
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012105647/10A RU2550277C2 (ru) | 2009-07-21 | 2010-07-21 | Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из реакций обратной транскрипции и амплификации |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8551753B2 (ru) |
| EP (1) | EP2456886B1 (ru) |
| JP (1) | JP5813637B2 (ru) |
| KR (1) | KR101536039B1 (ru) |
| CN (1) | CN102510904B (ru) |
| AU (1) | AU2010274809B2 (ru) |
| BR (1) | BR112012001515A2 (ru) |
| CA (1) | CA2768593C (ru) |
| DK (1) | DK2456886T3 (ru) |
| ES (1) | ES2562155T3 (ru) |
| GB (1) | GB2474225A (ru) |
| RU (1) | RU2550277C2 (ru) |
| SG (1) | SG178040A1 (ru) |
| WO (1) | WO2011010094A1 (ru) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011142310A1 (ja) * | 2010-05-14 | 2011-11-17 | タカラバイオ株式会社 | ｃＤＮＡの合成方法 |
| US20140242587A1 (en) * | 2011-10-03 | 2014-08-28 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Rapid and Reliable Detection of Infectious Agents |
| EP2602331A1 (en) * | 2011-12-09 | 2013-06-12 | Qiagen GmbH | Diagnostic reagent embedded in wax as an internal standard for nucleic acid preparation or nucleic acid detection |
| ES2622906T3 (es) | 2012-02-17 | 2017-07-07 | Biotec Pharmacon Asa | Endonucleasas |
| CN103382502B (zh) * | 2013-05-28 | 2015-08-19 | 浙江今复康生物科技有限公司 | 一种整合限制性内切去除dna污染的rt-pcr方法 |
| GB201414745D0 (en) | 2014-08-19 | 2014-10-01 | Articzymes As | Exonucleases |
| WO2016040446A1 (en) * | 2014-09-10 | 2016-03-17 | Good Start Genetics, Inc. | Methods for selectively suppressing non-target sequences |
| WO2016052619A1 (ja) * | 2014-09-30 | 2016-04-07 | 国立研究開発法人理化学研究所 | 核酸の増幅方法 |
| CN106337045A (zh) * | 2016-05-24 | 2017-01-18 | 微基生物科技（上海）有限公司 | 一种防止pcr污染的方法及其应用 |
| BR112019002679A2 (pt) * | 2016-08-08 | 2019-05-14 | Karius, Inc. | redução de sinal de ácidos nucleicos contaminantes |
| WO2019014359A2 (en) * | 2017-07-12 | 2019-01-17 | The Scripps Research Institute | POLYMERASE CHAIN TRANSCRIPTION (PCT): EXPONENTIAL SYNTHESIS OF RNA AND MODIFIED RNA |
| CN108280326B (zh) * | 2018-01-22 | 2021-06-11 | 哈尔滨工程大学 | 一种基于深度递归神经网络的DNase高通量测序数据中DNA碱基倾向性偏差消除方法 |
| CN110592194A (zh) * | 2019-10-17 | 2019-12-20 | 北京新羿生物科技有限公司 | 一种巢式pcr试剂盒 |
| GB2600103B (en) * | 2020-10-19 | 2024-01-10 | Quantumdx Group Ltd | Integrated thermal conditioning and PCR in a molecular POC diagnostic system |
| US11993792B2 (en) | 2021-05-27 | 2024-05-28 | New England Biolabs, Inc. | DNase I variants, compositions, methods, and kits |
| CN113604455B (zh) * | 2021-08-11 | 2022-04-01 | 北京擎科生物科技有限公司 | 双链特异性核酸酶变体及其应用 |
| WO2023023644A1 (en) | 2021-08-20 | 2023-02-23 | Danisco Us Inc. | Polynucleotides encoding novel nucleases, compositions thereof and methods thereof for eliminating dna from protein preparations |
| GB202410171D0 (en) * | 2024-07-12 | 2024-08-28 | Nucleome Therapeutics Ltd | Methods of producing nucleic acid fragments |
| CN119193581A (zh) * | 2024-09-06 | 2024-12-27 | 广东国盛医学科技有限公司 | 一种用于检测dna酶单链水解活性的荧光探针及其应用 |
| CN119438150B (zh) * | 2024-09-27 | 2025-10-28 | 广东国盛医学科技有限公司 | 一种检测单链dna结合蛋白相对活性的方法 |
| CN120442597B (zh) * | 2025-07-11 | 2025-09-02 | 江苏愚公生物科技有限公司 | 一种热敏感双链特异性核酸酶突变体及其应用 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5418149A (en) | 1990-07-24 | 1995-05-23 | Hoffmann-La Roche Inc. | Reduction of non-specific amplification glycosylase using DUTP and DNA uracil |
| US5683896A (en) * | 1989-06-01 | 1997-11-04 | Life Technologies, Inc. | Process for controlling contamination of nucleic acid amplification reactions |
| US5700672A (en) * | 1992-07-23 | 1997-12-23 | Stratagene | Purified thermostable pyrococcus furiousus DNA ligase |
| GB9716664D0 (en) * | 1997-08-06 | 1997-10-15 | Norwegian Inst Of Fisheries & | A method of removing nucleic acid contamination reactions |
| AU7364700A (en) * | 1999-09-08 | 2001-04-10 | University Of Victoria Innovation And Development Corporation | Use of psychrotrophic bacterium in biotechnology applications |
| EP1431387B1 (en) * | 2002-12-20 | 2008-02-27 | Roche Diagnostics GmbH | Heat-labile desoxyribonculease I variants |
| US8034597B2 (en) | 2005-03-08 | 2011-10-11 | Takara Bio Inc. | Microorganism-derived psychrophilic endonuclease |
| CA2623405C (en) * | 2005-09-20 | 2014-11-25 | Immunivest Corporation | Methods and composition to generate unique sequence dna probes labeling of dna probes and the use of these probes |
| JP5517284B2 (ja) * | 2008-09-03 | 2014-06-11 | 西川ゴム工業株式会社 | 耐熱性２本鎖特異的核酸分解酵素 |
-
2009
- 2009-07-21 GB GB0912637A patent/GB2474225A/en not_active Withdrawn
-
2010
- 2010-07-21 BR BR112012001515A patent/BR112012001515A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2010-07-21 AU AU2010274809A patent/AU2010274809B2/en active Active
- 2010-07-21 US US12/840,552 patent/US8551753B2/en active Active
- 2010-07-21 EP EP10735050.6A patent/EP2456886B1/en active Active
- 2010-07-21 SG SG2012003281A patent/SG178040A1/en unknown
- 2010-07-21 KR KR1020127004419A patent/KR101536039B1/ko active Active
- 2010-07-21 JP JP2012521095A patent/JP5813637B2/ja active Active
- 2010-07-21 CA CA2768593A patent/CA2768593C/en active Active
- 2010-07-21 CN CN201080033460.4A patent/CN102510904B/zh active Active
- 2010-07-21 RU RU2012105647/10A patent/RU2550277C2/ru active
- 2010-07-21 WO PCT/GB2010/001384 patent/WO2011010094A1/en not_active Ceased
- 2010-07-21 DK DK10735050.6T patent/DK2456886T3/en active
- 2010-07-21 ES ES10735050.6T patent/ES2562155T3/es active Active
-
2013
- 2013-09-25 US US14/036,459 patent/US9133447B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2010274809B2 (en) | 2015-05-14 |
| US9133447B2 (en) | 2015-09-15 |
| AU2010274809A1 (en) | 2012-02-02 |
| CN102510904A (zh) | 2012-06-20 |
| ES2562155T3 (es) | 2016-03-02 |
| DK2456886T3 (en) | 2016-02-15 |
| JP2012533316A (ja) | 2012-12-27 |
| KR101536039B1 (ko) | 2015-07-10 |
| SG178040A1 (en) | 2012-03-29 |
| CA2768593A1 (en) | 2011-01-27 |
| US20140093938A1 (en) | 2014-04-03 |
| WO2011010094A1 (en) | 2011-01-27 |
| US8551753B2 (en) | 2013-10-08 |
| CA2768593C (en) | 2016-09-06 |
| GB2474225A (en) | 2011-04-13 |
| KR20120058520A (ko) | 2012-06-07 |
| RU2550277C2 (ru) | 2015-05-10 |
| US20110020878A1 (en) | 2011-01-27 |
| JP5813637B2 (ja) | 2015-11-17 |
| EP2456886A1 (en) | 2012-05-30 |
| GB0912637D0 (en) | 2009-08-26 |
| EP2456886B1 (en) | 2015-12-23 |
| BR112012001515A2 (pt) | 2016-11-08 |
| CN102510904B (zh) | 2015-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2012105647A (ru) | Способ удаления загрязняющей нуклеиновой кислоты из реакций обратной транскрипции и амплификации | |
| AU2011253427B2 (en) | Isothermal amplification of nucleic acid using a mixture of randomized primers and specific primers | |
| EP2699698B9 (en) | Oscillating amplification reaction for nucleic acids | |
| US9255291B2 (en) | Oligonucleotide ligation methods for improving data quality and throughput using massively parallel sequencing | |
| AU2013203624B2 (en) | Isothermal amplification of nucleic acid using a mixture of randomized primers and specific primers | |
| MX2011007693A (es) | Metodos para amplificar acidos nucleicos del virus de hepatitis c. | |
| US20080268508A1 (en) | Methods and kits for negative selection of desired nucleic acid sequences | |
| HK1203218A1 (en) | Use of template switching for dna synthesis | |
| CA2709632A1 (en) | Elimination of contaminants associated with nucleic acid amplification | |
| CN105960467A (zh) | 利用核酸和信号探针的非对称等温扩增的核酸检测方法 | |
| JP5150829B2 (ja) | 核酸検出及び増幅方法 | |
| CN102757960B (zh) | 一种扩增未知序列的半随机pcr技术及其引物和试剂盒 | |
| WO2016052619A1 (ja) | 核酸の増幅方法 | |
| CN101522908A (zh) | 用于微生物检测和分析的微生物修饰核酸 | |
| CN1333827A (zh) | 合成cDNA的方法 | |
| US9695417B2 (en) | Method for large-scale synthesis of long-chain nucleic acid molecule | |
| CN1276089C (zh) | 体外扩增环形或串联核酸的方法 | |
| EP3277833A1 (en) | Methods to amplify highly uniform and less error prone nucleic acid libraries | |
| JP7333171B2 (ja) | Ｒｎａ検出方法、ｒｎａ検出用核酸及びｒｎａ検出用キット | |
| JPWO2011007889A1 (ja) | 核酸の増幅方法 | |
| JP7127023B2 (ja) | 核酸検出方法、核酸検出用プライマー及び核酸検出用キット | |
| Gilbert et al. | Multiple displacement amplification | |
| Keeler et al. | Investigating the Putative RecA-Like Recombinase Gene | |
| JP2008178338A (ja) | 断片化核酸が混入する核酸試料中の標的核酸を増幅する核酸増幅方法、及びそのキット | |
| ZHANG et al. | Modified Touchdown PCR as a high efficient approach to improve the specificity of PCR |