RU2012149102A - Физиологические способы выделения клеточных популяций высокой чистоты - Google Patents

Физиологические способы выделения клеточных популяций высокой чистоты Download PDF

Info

Publication number
RU2012149102A
RU2012149102A RU2012149102/10A RU2012149102A RU2012149102A RU 2012149102 A RU2012149102 A RU 2012149102A RU 2012149102/10 A RU2012149102/10 A RU 2012149102/10A RU 2012149102 A RU2012149102 A RU 2012149102A RU 2012149102 A RU2012149102 A RU 2012149102A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cells
differentiation
stem cells
dimensional
cell
Prior art date
Application number
RU2012149102/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Николай ТУРОВЕЦ
Андрей СЕМЕЧКИН
Лариса АГАПОВА
Джеффри ЯНУС
Original Assignee
Интернэшнл Стем Селл Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Интернэшнл Стем Селл Корпорейшн filed Critical Интернэшнл Стем Селл Корпорейшн
Publication of RU2012149102A publication Critical patent/RU2012149102A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0603—Embryonic cells ; Embryoid bodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/115—Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/119—Other fibroblast growth factors, e.g. FGF-4, FGF-8, FGF-10
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/12—Hepatocyte growth factor [HGF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/155—Bone morphogenic proteins [BMP]; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone inducing factor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/16—Activin; Inhibin; Mullerian inhibiting substance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/30—Hormones
    • C12N2501/38—Hormones with nuclear receptors
    • C12N2501/39—Steroid hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/40—Regulators of development
    • C12N2501/415—Wnt; Frizzeled
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
    • C12N2502/13—Coculture with; Conditioned medium produced by connective tissue cells; generic mesenchyme cells, e.g. so-called "embryonic fibroblasts"
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
    • C12N2506/02—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from embryonic cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2513/00—3D culture

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

1. Способ выделения чистой или обогащенной популяции дифференцированных клеток, полученных из стволовых клеток, включающий дифференцировку популяции стволовых клеток и миграцию дифференцированных клеток через пористую мембрану в устройстве для дифференцировки для выделения чистой или обогащенной популяции дифференцированных клеток.2. Способ по п. 1, где дифференцировка клеток приводит к эпителиально-мезенхимальному переходу (EMT) или мезенхимально-эпителиальному переходу (MTE).3. Способ по п. 1, где миграция клеток включает хемотаксическую миграцию или миграцию индукцией посредством структурных свойств или расположения компонентов в устройстве для дифференцировки.4. Способ по п. 1, где дифференцированные клетки используются для терапевтических или исследовательских целей.5. Способ по п. 4, где терапевтическое применение включает лечение диабета, заболеваний почек, сердца или печени.6. Способ по п. 1, где стволовые клетки выбраны из группы, состоящей из эмбриональных стволовых клеток, партеногенетических стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, зародышевых стволовых клеток, полученных из бластомера стволовых клеток, взрослых стволовых клеток, выделенных из органов и тканей, стволовых клеток, выделенных из пуповинной крови, стволовых клеток, выделенных из тканей плодов, стволовых клеток, выделенных из волосяных фолликулов, мезенхимальных стволовых клеток, нейрональных стволовых клеток и раковых стволовых клеток.7. Способ по п. 1, где стволовые клетки являются стволовыми клетками млекопитающих.8. Способ по п. 1, где дифференцированные клетки являются первичными клетками, включающими кл

Claims (76)

1. Способ выделения чистой или обогащенной популяции дифференцированных клеток, полученных из стволовых клеток, включающий дифференцировку популяции стволовых клеток и миграцию дифференцированных клеток через пористую мембрану в устройстве для дифференцировки для выделения чистой или обогащенной популяции дифференцированных клеток.
2. Способ по п. 1, где дифференцировка клеток приводит к эпителиально-мезенхимальному переходу (EMT) или мезенхимально-эпителиальному переходу (MTE).
3. Способ по п. 1, где миграция клеток включает хемотаксическую миграцию или миграцию индукцией посредством структурных свойств или расположения компонентов в устройстве для дифференцировки.
4. Способ по п. 1, где дифференцированные клетки используются для терапевтических или исследовательских целей.
5. Способ по п. 4, где терапевтическое применение включает лечение диабета, заболеваний почек, сердца или печени.
6. Способ по п. 1, где стволовые клетки выбраны из группы, состоящей из эмбриональных стволовых клеток, партеногенетических стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, зародышевых стволовых клеток, полученных из бластомера стволовых клеток, взрослых стволовых клеток, выделенных из органов и тканей, стволовых клеток, выделенных из пуповинной крови, стволовых клеток, выделенных из тканей плодов, стволовых клеток, выделенных из волосяных фолликулов, мезенхимальных стволовых клеток, нейрональных стволовых клеток и раковых стволовых клеток.
7. Способ по п. 1, где стволовые клетки являются стволовыми клетками млекопитающих.
8. Способ по п. 1, где дифференцированные клетки являются первичными клетками, включающими клетки, полученные из эндодермы; клетки, полученные из эктодермы, или клетки, полученные из мезодермы.
9. Способ по п. 8, где клетки, полученные из эндодермы, включают железистые клетки, включающие секреторные эпителиальные клетки экзокринных желез, клетки, секретирующие гормоны, и/или реснитчатые клетки с движущей функцией; клетки, полученные из эктодермы, включают клетки из покровной системы, включающие кератинизированные эпителиальные клетки или эпителиальные клетки, выстилающие влажные слоистые барьерные поверхности, клетки, полученные из нервной системы, включающие сенсорные клетки-трансдукторы, клетки вегетативной нервной системы, клетки органов чувств и периферические нейрональные поддерживающие клетки, нейроны центральной нервной системы и глиальные клетки или клетки хрусталика и клетки, полученные из мезодермы, включают клетки обмена веществ и накопления, клетки с барьерной функцией, включающие клетки легких, пищеварительного тракта, экзокринных желез и мочеполового тракта, включая клетки почек, секреторные клетки внеклеточного матрикса, сокращающиеся клетки, клетки крови и иммунной системы, пигментные клетки, зародышевые клетки, питающие клетки или интерстициальные клетки.
10. Способ по п. 1, где пористая мембрана необязательно содержит любое из скэффолда с большой площадью поверхности, включающего одну или более пористых двумерных или трехмерных мембран или губки, состоящие из поликарбоната, полиэтилена, тефлона или карбоната кальция; внеклеточный матрикс, содержащий коллагены человека или животного, отличного от человека, ламинины, фибронектины, эластины, протеогликаны, включающие гепарина сульфат, хондроитина сульфат, кератина сульфат, полисахариды, не относящиеся к протеогликанам, включающие гиалуроновую кислоту, вещества, полученные рекомбинантными технологиями или синтетическими технологиями, или полученные из встречающихся в природе веществ от людей, животных, растений или прокариотов; волокнистые структуры и волокна; губки; клеточный матрикс, выделенный из клеток человека, включающий матрикс, выделенный из культивированных фибробластов человека; сетки, включающие двух- или трехмерные сетки; сито; молекулы ростовых факторов или их фрагменты, включающие белки семейства TGF, активин А, различные FGF, различные BMP, HGF, KGF, OSM или различные типы прикрепившихся живых клеток, расположенных на устройстве для дифференцировки в двумерном или трехмерном паттернах, или их комбинаций.
11. Способ по п. 10, где пористый двух- или трехмерный скэффолд, или губка, или внеклеточный матрикс, или любой другой компонент устройства для дифференцировки покрыт на любой стороне молекулами, которые обладают биологической активностью, включающими молекулы, которые стимулируют/способствуют дифференцировке клеток; стимулируют/способствуют созреванию клеток; стимулируют/способствуют миграции клеток; поддерживают миграцию клеток; стимулируют/способствуют EMT или MTE; активные молекулы, которые стимулируют пролиферацию, или активные молекулы, которые поддерживают дифференцированную стадию/статус клеток или любую их комбинацию.
12. Способ по п. 1, где пористая мембрана, или другие компоненты устройства для дифференцировки обладают ингибирующими свойствами в отношении клеточной адгезии.
13. Способ по п. 1, где пористая мембрана, или губка, или сетка, или сито, или волокнистые структуры, или любые другие компоненты устройства для дифференцировки имеют поры с размером от 0,1 мкм до 1000 мкм.
14. Способ по п. 1, где пористая мембрана имеет поры с любым размером от 5 мкм до 12 мкм.
15. Способ по п. 1, где пористая мембрана имеет форму пор, включающую круг, овал, прямоугольник, треугольник, квадрат, щель/трещину/бороздку или любую их комбинацию.
16. Способ по п. 1, где любой или все компоненты устройства для дифференцировки являются биодеградируемыми.
17. Способ по п. 1, где внеклеточный матрикс или любой другой компонент устройства, включая пористые мембраны, губки, сетки, сита, волокна и волокнистые структуры, имеют гомогенную структуру, или гетерогенную структуру, или градиентную структуру, или слоистую структуру.
18. Способ по п. 1, где устройство для дифференцировки погружено в клеточную культуральную среду или буфер.
19. Способ по п. 18, где культуральная среда является стационарной или нагнетается насосом через устройство для дифференцировки.
20. Способ по п. 1, где стволовые клетки высеваются в верхней части, и/или в нижней части, и/или в середине, или в различных других ориентациях в устройстве для дифференцировки.
21. Способ по п. 1, где стволовые клетки предварительно смешивают с клеточным матриксом и затем высевают на или в устройство для дифференцировки.
22. Способ по п. 1, где выделение чистой или обогащенной популяции дифференцированных клеток включает обработку химическими реагентами и/или ферментными реагентами, которые разрушают и/или переваривают внеклеточный матрикс и/или любой другой компонент устройства для дифференцировки.
23. Способ по п. 1, где условия для дифференцировки применяют до, и/или во время, и/или после посева клеток в и/или на устройство для дифференцировки.
24. Способ по п. 1, где миграция клеток происходит непосредственно через пористые структуры, включающие пористые мембраны, губки, волокнистые структуры, сетки, сита или непосредственно во внеклеточный матрикс.
25. Способ по п. 1, где миграция клеток происходит на поверхности двумерной или трехмерной системы.
26. Способ по п. 1, где миграция клеток происходит внутри капилляров, каналов или трубок.
27. По существу очищенные или обогащенные дифференцированные клетки, полученные из стволовых клеток, приготовленные способом по п. 1.
28. Способ по п. 1, где способ является способом выделения чистой или обогащенной популяции дефинитивной эндодермы высокой чистоты (DE) из популяции плюрипотентных стволовых клеток в условиях in vitro, включающий контактирование популяции плюрипотентных стволовых клеток с одним или более сигналами к дифференцировке; дифференцировку контактировавших клеток обеспечением возможности подвергаться эпителиально-мезенхимальному переходу (ЕМТ) с получением клеток, имеющих мезенхимальный фенотип; обеспечение миграции дифференцированных клеток с мезенхимальным фенотипом через пористую мембрану в трехмерный внеклеточный матрикс (ЕСМ) и обеспечение дифференцировки мигрировавших клеток в трехмерном ЕСМ для дифференцировки в DE высокой чистоты.
29. Способ по п. 28, где DE высокой чистоты выделяют с чистотой выше, чем 90%.
30. Способ по п. 28, где DE высокой чистоты оценивают по экспрессии OCT4 или SOX2 с использованием иммуноцитохимического анализа и проточной цитометрии.
31. Способ по п. 28, где DE высокой чистоты выделяют без загрязнения ОСТ4-позитивными клетками.
32. Способ по п. 28, где DE высокой чистоты содержит до 80% CXCR4- или SOX17-позитивных клеток.
33. Способ по п. 28, где плюрипотентные стволовые клетки являются плюрипотентными стволовыми клетками человека.
34. Способ по п. 33, где плюрипотентные стволовые клетки человека являются эмбриональными стволовыми клетками человека (hESC), партеногенетическими стволовыми клетками человека (hpSC) или индуцированными плюрипотентными стволовыми клетками человека (hiPSC).
35. Способ по п. 34, где hESC представляет клеточную линию WA09 и hpSC представляет клеточную линию phESC-1, phESC-3, phESC-5 или hpSC-Hhom-1.
36. Способ по п. 28, где сигнал дифференцировки представляет растворимый фактор роста.
37. Способ по п. 36, где сигнал к дифференцировке представляет сигнальный путь активина А или сигнальный путь Wnt3a на высоком уровне, который напоминает сигнальный путь TGF-β и Wnt, получаемый клетками во время ингрессии в первичной полоске.
38. Способ по п. 28, где пористая мембрана имеет поры с диаметром от примерно 6 мкм до примерно 10 мкм.
39. Способ по п. 38, где пористая мембрана имеет поры с диаметром от примерно 7 мкм до примерно 9 мкм.
40. Способ по п. 39, где пористая мембрана имеет поры с диаметром примерно 8 мкм.
41. Способ по п. 28, где трехмерный ЕСМ содержит коллаген I и/или фибронектин.
42. Способ по п. 28, дополнительно включающий стадию дифференцировки высокоочищенной DE в гепатоциты или эндокринные клетки поджелудочной железы.
43. Способ по п. 42, где стадия дифференцировки высокоочищенной DE в гепатоциты включает обработку DE FGF4, BMP2, фактором роста гепатоцитов (HGF), онкостатином М и дексаметазоном.
44. Способ по п. 28, где немигрирующие недифференцированные плюрипотентные стволовые клетки выделяют из DE высокой чистоты.
45. Способ по п. 7 или 32, где клетки являются человеческими клетками.
46. Устройство для дифференцировки для выделения чистой или обогащенной популяции дифференцированных клеток, полученных из стволовых клеток, где устройство содержит пористую мембрану и внеклеточный матрикс.
47. Устройство для дифференцировки по п. 46, где миграция клеток происходит через пористую мембрану.
48. Устройство для дифференцировки по п. 46, где миграция клеток включает хемотаксическую миграцию или миграцию индукцией посредством структурных свойств или расположения компонентов в устройстве для дифференцировки.
49. Устройство для дифференцировки по п. 46, где стволовые клетки выбраны из группы, состоящей из эмбриональных стволовых клеток, партеногенетических стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, зародышевых стволовых клеток, полученных из бластомера стволовых клеток; взрослых стволовых клеток, выделенных из органов и тканей, стволовых клеток, выделенных из пуповинной крови, стволовых клеток, выделенных из тканей плодов, стволовых клеток, выделенных из волосяных фолликулов, мезенхимальных стволовых клеток или нейрональных стволовых клеток и раковых стволовых клеток.
50. Устройство для дифференцировки по п. 46, где стволовые клетки являются стволовыми клетками млекопитающих.
51. Устройство для дифференцировки по п. 46, где дифференцированные клетки являются первичными клетками, включающими клетки, полученные из эндодермы; клетки, полученные из эктодермы, или клетки, полученные из мезодермы.
52. Устройство для дифференцировки по п. 46, где пористая мембрана необязательно содержит любое из скэффолда с большой площадью поверхности, включающего одну или более пористых двумерных, или трехмерных мембран, или губки, состоящие из поликарбоната, полиэтилена, тефлона или карбоната кальция; внеклеточный матрикс, содержащий коллагены человека или животного, отличного от человека, ламинины, фибронектины, эластины, протеогликаны, включающие гепарина сульфат, хондроитина сульфат, кератина сульфат, полисахариды, не относящиеся к протеогликанам, включающие гиалуроновую кислоту, вещества, полученные рекомбинантными технологиями или синтетическими технологиями, или полученные из встречающихся в природе веществ от людей, животных, растений или прокариотов; волокнистые структуры и волокна; губки; клеточный матрикс, выделенный из клеток человека, включающий матрикс, выделенный из культивированных фибробластов человека; сетки, включающие двух- или трехмерные сетки; сито; молекулы ростовых факторов или их фрагменты, включающие белки семейства TGF, активин А, различные FGF, различные BMP, HGF, KGF, OSM или различные типы прикрепившихся живых клеток, расположенных на устройстве для дифференцировки в двумерном или трехмерном паттернах, или их комбинаций.
53. Устройство для дифференцировки по п. 46, где пористый двух- или трехмерный скэффолд, или губка, или внеклеточный матрикс, или любой другой компонент устройства для дифференцировки покрыт на любой стороне молекулами, которые обладают биологической активностью, включающими молекулы, которые стимулируют/способствуют дифференцировке клеток; стимулируют/способствуют созреванию клеток; стимулируют/способствуют миграции клеток; поддерживают миграцию клеток; стимулируют/способствуют EMT или MTE; активные молекулы, которые стимулируют пролиферацию, или активные молекулы, которые поддерживают дифференцированную стадию/статус клеток.
54. Устройство для дифференцировки по п. 46, где пористая мембрана или другие компоненты устройства для дифференцировки обладают ингибирующими свойствами в отношении клеточной адгезии.
55. Устройство для дифференцировки по п. 46, где пористая мембрана, или губка, или сетка, или сито, или волокнистые структуры, или любые другие компоненты устройства для дифференцировки имеют поры с любым размером от 0,1 мкм до 1000 мкм.
56. Устройство для дифференцировки по п. 46, где пористая мембрана имеет поры с любым размером от 5 мкм до 12 мкм.
57. Устройство для дифференцировки по п. 46, где пористая мембрана имеет форму пор, включающую круг, овал, прямоугольник, треугольник, квадрат, щель/трещину/бороздку или любую их комбинацию.
58. Устройство для дифференцировки по п. 46, где любой или все компоненты устройства для дифференцировки являются биодеградируемыми.
59. Устройство для дифференцировки по п. 46, где внеклеточный матрикс или любой другой компонент устройства, включая пористые мембраны, губки, сетки, сита, волокна или волокнистые структуры, имеют гомогенную структуру, или гетерогенную структуру, или градиентную структуру, или слоистую структуру.
60. Устройство для дифференцировки по п. 46, где миграция клеток происходит непосредственно через пористые структуры, включающие пористые мембраны, губки, волокнистые структуры, сетки, сита, или непосредственно во внеклеточный матрикс.
61. Устройство для дифференцировки по п. 46, где миграция клеток происходит на поверхности двумерной или трехмерной системы.
62. Устройство для дифференцировки по п. 46, где миграция клеток происходит внутри капилляров, каналов или трубок.
63. Очищенная или обогащенная популяция дифференцированных клеток, полученных из стволовых клеток, приготовленных устройством для дифференцировки по п. 46.
64. Устройство по п. 46, где с помощью устройства выделяют DE высокой чистоты из популяции плюрипотентных стволовых клеток, где устройство содержит пористую мембрану и трехмерный ЕСМ.
65. Устройство по п. 64, где DE высокой чистоты выделяют с чистотой выше, чем 90%.
66. Устройство по п. 65, где DE высокой чистоты оценивают по экспрессии OCT4 или SOX2 с использованием иммуноцитохимического анализа и проточной цитометрии.
67. Устройство по п. 64, где DE высокой чистоты выделяют без загрязнения ОСТ4-позитивными клетками.
68. Устройство по п. 64, где DE высокой чистоты содержит до 80% CXCR4- или SOX17-позитивных клеток.
69. Устройство по п. 64, где плюрипотентные стволовые клетки являются плюрипотентными стволовыми клетками человека.
70. Устройство по п. 69, где плюрипотентные стволовые клетки человека являются эмбриональными стволовыми клетками человека (hESC), партеногенетическими стволовыми клетками человека (hpSC) или индуцированными плюрипотентными стволовыми клетками человека (hiPSC).
71. Устройство по п. 70, где hESC представляет клеточную линию WA09 и hpSC представляет клеточную линию phESC-1, phESC-3, phESC-5 или hpSC-Hhom-1.
72. Устройство по п. 64, где пористая мембрана имеет поры с диаметром от примерно 6 мкм до примерно 10 мкм.
73. Устройство по п. 72, где пористая мембрана имеет поры с диаметром от примерно 7 мкм до примерно 9 мкм.
74. Устройство по п. 73, где пористая мембрана имеет поры с диаметром примерно 8 мкм.
75. Устройство по п. 64, где трехмерный ЕСМ содержит коллаген I и/или фибронектин.
76. Устройство по п. 64, где высокоочищенная DE далее дифференцируется в гепатоциты или эндокринные клетки поджелудочной железы.
RU2012149102/10A 2010-04-20 2011-04-19 Физиологические способы выделения клеточных популяций высокой чистоты RU2012149102A (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US32608410P 2010-04-20 2010-04-20
US61/326,084 2010-04-20
US34594910P 2010-05-18 2010-05-18
US61/345,949 2010-05-18
PCT/US2011/033122 WO2011133599A2 (en) 2010-04-20 2011-04-19 Physiological methods for isolation of high purity cell populations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2012149102A true RU2012149102A (ru) 2014-05-27

Family

ID=44834772

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012149102/10A RU2012149102A (ru) 2010-04-20 2011-04-19 Физиологические способы выделения клеточных популяций высокой чистоты

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20120100110A1 (ru)
EP (1) EP2561087A4 (ru)
CN (1) CN102985556B (ru)
CA (1) CA2796888A1 (ru)
RU (1) RU2012149102A (ru)
WO (1) WO2011133599A2 (ru)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9018010B2 (en) 2009-11-12 2015-04-28 Technion Research & Development Foundation Limited Culture media, cell cultures and methods of culturing pluripotent stem cells in an undifferentiated state
US9157908B2 (en) 2011-04-22 2015-10-13 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Chitosan-alginate scaffold cell culture system and related methods
WO2013155114A1 (en) * 2012-04-09 2013-10-17 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Scaffold and method for proliferation and enrichment of cancer stem cells
JP6057418B2 (ja) * 2012-12-28 2017-01-11 国立大学法人 千葉大学 人工多能性幹細胞から分化した肝細胞を含む細胞群から、肝細胞からなる細胞培養物を得る方法
CN103589637A (zh) * 2013-11-08 2014-02-19 王海涛 细胞体外立体培养系统
CN103611193B (zh) * 2013-11-26 2015-05-27 中山大学 一种碳酸钙微球-细胞外基质复合材料及其制备方法和应用
EP3395939B1 (en) * 2015-12-26 2022-02-09 Nepa Gene Co., Ltd. Cell sorting, culture, and growth vessel; and cell sorting, culture, and growth method
GB201710615D0 (en) * 2017-07-03 2017-08-16 Wutz Anton Method for haploid cell separation
CA3082896A1 (en) 2017-11-16 2019-05-23 Aivita Biomedical, Inc. Use of cell membrane-bound signaling factors
US12553034B2 (en) 2019-11-05 2026-02-17 Eyestem Research Private Limited Unified in-vitro process for obtaining lung cells from pluripotent stem cells
CN116162595A (zh) 2021-11-25 2023-05-26 北京迈格松生物科技有限公司 工程化迁移体及其制备方法和用途

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2295540A1 (en) * 1998-11-19 2011-03-16 Organogenesis, Inc. Bioengineered tissue constructs and methods for producing and using them
US7316822B2 (en) * 2003-11-26 2008-01-08 Ethicon, Inc. Conformable tissue repair implant capable of injection delivery
CN103898047B (zh) * 2003-12-23 2020-03-03 维亚希特公司 定形内胚层
EP1576957A1 (en) * 2004-03-18 2005-09-21 Universiteit Twente Tissue repair using pluripotent cells
CN101048495A (zh) * 2004-04-27 2007-10-03 赛瑟拉公司 表达pdx1的内胚层
US8741643B2 (en) * 2006-04-28 2014-06-03 Lifescan, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells to definitive endoderm lineage
DE102006031871B4 (de) * 2006-07-10 2008-10-23 Gerlach, Jörg, Dr.med. 3-D Petri-Schale zur Züchtung und Untersuchung von Zellen
US20080206204A1 (en) * 2007-02-27 2008-08-28 Tiziana Brevini Human parthenogenetic stem cells
US9421304B2 (en) * 2007-07-03 2016-08-23 Histogenics Corporation Method for improvement of differentiation of mesenchymal stem cells using a double-structured tissue implant
US9381273B2 (en) * 2008-01-31 2016-07-05 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Scaffolds with oxygen carriers, and their use in tissue regeneration

Also Published As

Publication number Publication date
CN102985556A (zh) 2013-03-20
US20120100110A1 (en) 2012-04-26
CA2796888A1 (en) 2011-10-27
WO2011133599A3 (en) 2012-02-23
EP2561087A4 (en) 2013-10-16
WO2011133599A2 (en) 2011-10-27
EP2561087A2 (en) 2013-02-27
CN102985556B (zh) 2017-09-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2012149102A (ru) Физиологические способы выделения клеточных популяций высокой чистоты
Hong et al. Bioengineered skin organoids: from development to applications
Zhang et al. Vascularized organoids on a chip: strategies for engineering organoids with functional vasculature
US20250109385A1 (en) Compositions and methods for using small mobile stem cells
US20240336898A1 (en) Formation of three-dimensional organ from pluripotent stem cells, method for generating cell condensate for self-organization
Saei Arezoumand et al. An overview on different strategies for the stemness maintenance of MSCs
EP3124600B1 (en) Method for generating a cell condensate for self-organisation
WO2019189324A1 (ja) 細胞塊融合法
US9650611B2 (en) Mammary artery derived cells and methods of use in tissue repair and regeneration
WO2009080794A1 (en) Method for preparing cell-specific extracellular matrices
KR20230026952A (ko) 전분화능 줄기세포 유래 상피 오가노이드의 제조방법
US20250236839A1 (en) Method for Inducing Differentiation from Pluripotent Stem Cell to Epidermal Keratinocyte
CN114381419B (zh) 仿生人工肝组织及其制备方法与应用
JP2005341967A (ja) 細胞及び組織工学におけるｌｉｆの使用
Wood Advances in isolation and expansion of human cells for clinical applications
WO2025164731A1 (ja) 大型融合細胞塊、その作製方法、培養器及び支持構造体
Muzzi Development of engineered human-derived brain-on-a-chip models for electrophysiological recording
US20200095557A1 (en) Cell spheroids containing capillary structures and methods of using same
Alt Prevascular Cell Condensations for Modular Tissue Engineering
US8889413B2 (en) Mammary artery derived cells and methods of use in tissue repair and regeneration
Morrissette-McAlmon A MULTI-CELLULAR APPROACH TO ENGINEER VASCULARIZED CARDIAC GRAFTS FOR MYOCARDIAL REGENERATION
Luginbühl The bioengineering of human blood and lymphatic capillaries in dermo-epidermal skin substitutes
JP2005287478A (ja) ヒト脂肪前駆細胞株及びその利用方法
OMAY DIFFERENTIATION OF VESSEL WALL CELLS FROM UMBILICAL CORD BLOOD MESENCHYMAL CELLS FOR VASCULAR TISSUE ENGINEERING
Haraguchi et al. Cell sheet engineering for cardiac repair and regeneration

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20170328