RU2019190C1 - Способ получения моноспецифической антисыворотки - Google Patents
Способ получения моноспецифической антисыворотки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2019190C1 RU2019190C1 SU5040865A RU2019190C1 RU 2019190 C1 RU2019190 C1 RU 2019190C1 SU 5040865 A SU5040865 A SU 5040865A RU 2019190 C1 RU2019190 C1 RU 2019190C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- serum
- blood
- antigenic material
- centrifuged
- filtered
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 44
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 22
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 9
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 4
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 claims 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 abstract description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 4
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 abstract 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 7
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 7
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 description 4
- 108010087504 Beta-Globulins Proteins 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 description 2
- 102000006734 Beta-Globulins Human genes 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004404 adrenal cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000003372 endocrine gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологии и может быть использовано для стимуляции жизнедеятельности клеток органов и тканей человека и животных. Сущность изобретения состоит в выполнении содержащихся в противотканевой сыворотке иммунных α, β и γ - глобулинов в виде антител моноспецифической направленности действия на надпочечники человека. При этом в способе получения противотканевой сыворотки, включающем получение антигенного материала из органа-мишени, иммунизацию животного-донора этим антигенным материалом с последующей эксфузией крови иммунизированного животного и отделение сыворотки, после эксфузии производят отделение жидкой фракции крови, а затем проводят абсорбцию этой отделенной фракции крови белками плазмы крови и форменными элементами крови видовой принадлежности источника антигенного материала, после отделения сыворотки проводят очищение ее от абсорбента, а затем определяют активность очищенной сыворотки. 1 табл.
Description
Изобретение относится к биологии и может быть использовано для стимуляции жизнедеятельности клеток органов и тканей человека и животных.
Известна сыворотка серотрансфузин, содержащая водно-солевой раствор, включающий, г: NaCl 7,5; KCl 0,4; MCl 0,4; NaH2PO4 0,0518; Na2HPO4 0,467 и глюкозу 10,0 на 1000 мл воды, причем к солевому раствору добавлена сыворотка крови человека в 20%-ной концентрации.
Недостатком этой сыворотки является вызываемая ею опасность развития аллергических осложнений.
Известен способ получения сыворотки, включающий приготовление водно-солевого раствора заданной концентрации и добавление к нему сыворотки человеческой крови.
Недостатком данного способа является невозможность обеспечения с его помощью сложных технологий, требуемых для изготовления сывороток с заданной видовой специфичностью.
Прототипом изобретения является способ получения сыворотки, включающий изготовление однородного в смысле последующего применения антигенного материала, иммунизацию животного-донора этим однородным антигенным материалом с последующей эксфузией крови у этого донора, отделение полученной иммунной сыворотки и последующую ее сублимацию.
Недостатком прототипа является невозможность получения с его помощью моноспецифической антисыворотки с антисупраренальной направленностью.
Сущность изобретения состоит в том, что в противотканевой сыворотке, включающей иммунные α, β и γ глобулины, альбумины и прочие белки, α,β и γ глобулины выполнены в виде антител моноспецифической направленности действия на надпочечники человека и животных при следующем соотношении компонентов, мас.%: α глобулин 6,0-10,0; β глобулин 20,0-25,0; γ глобулин 60,0-70,0; альбумин и прочие белки - 0,0-3,5.
Сущность изобретения состоит также в том, что в способе получения противотканевой сыворотки, включающем получение однородного антигенного материала из органа-мишени, иммунизацию животного-донора этим антигенным материалом с последующей эксфузией крови иммунизи- рованного животного и отделение сыворотки, после эксфузии крови иммунизированного животного производства отделение жидкой фракции крови, а затем проводят абсорбцию этой отделенной фракции крови белками плазмы крови и форменными элементами крови видовой принадлежности источника антигенного материала.
Далее в способе получения противотканевой сыворотки после отделения сыворотки проводят очищение ее от абсорбента, а затем определяют активность очищенной сыворотки.
При этом абсорбцию проводят 3-5 раз, а антигенный материал изготавливают в виде водно-солевого экстракта из разрушенных до уровней органелл клеток тканей надпочечников организма видовой принадлежности соответственно последующему применению и 0,9-0,95%-ного раствора NaCl, причем экстракт выполняют с содержанием белка 1,5-2,5 г/л, а конечное содержание белка в сыворотке получают в концентрации 6,0-10,0 г/л, причем иммунизацию животного-донора принимают завершенно после 5-7 введений ему антигенного материала, второе введение антигенного материала осуществляют через 10-15 дней после первого введения, а третье и каждое следующее введение антигенного материала проводят через 3-5 дней предыдущего.
Далее в способе получения противотканевой сыворотки перед разрушением клеток тканей донорского органа (надпочечника) проводят его механическую очистку от жировых тканей, соединительных тяжей и кровеносных сосудов и последующую их фильтрацию, в качестве форменных элементов при абсорбции используют лейкоциты крови, а активность очищенной сыворотки определяют в реакции пассивной гемаглютинации.
При этом разрушение клеток тканей надпочечников производят путем трех- и более кратной процедуры в виде механической гомогенизации, последующего замораживания, выдерживания в замороженном состоянии и оттаивания, причем после выполнения последней процедуры гомогенизацию повторяют еще раз, а полученный материал центрифугируют. Кроме того, замораживание разрушаемых клеток тканей осуществляют в интервале температур (-15) - (-20)оС, выдерживание в замороженном состоянии проводят в течении 10-24 ч, оттаивание производят при температуре 25-35оС, а центрифугирование проводят в течение 40-60 мин.
Предложенный состав противотканевой сыворотки обеспечивает локализацию действия препарата на взаимодействии с надпочечниками организма человека и животных и регуляцию функций надпочечниковых клеток.
Предлагаемый способ получения противотканевой сыворотки обеспечивает возможность создания моноспецифической антисыворотки с антисупраренальной направленностью и приводит к требуемой очистке антисупраренальной антисыворотки от остальных противоорганных антител, кроме моноспецифических антител к тканям надпочечников.
П р и м е р. Антигенный материал приготовляют из ткани надпочечника трупа человека, погибшего от механической травмы без повреждения внутренних органов тела. Надпочечники очищают от жировой ткани, соединительных тканных тяжей и крупных сосудов. Очищенные таким образом ткани надпочечников промывают 0,9-0,95%-ным раствором хлорида натрия, измельчают ножницами, заливают равным объемом того же раствора хлорида натрия и гомогенизирут в ротационном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком при 1500 об/мин в течение 5-10 мин поpциями объемом 5 мл. После этого гомогенат сливают в общую емкость, фильтруют через марлевый (8-10 слоев марли) фильтр и замораживают при температуре (-15)-(-20)оС. После замерзания гомогената его выдерживают при той же температуре в течение 10-24 ч, а затем размораживают, помещая под струю теплой воды (температура 25-35оС). Оттаявший гомогенат снова гомогенизируют в том же режиме и снова замораживают. Процедуру повторяют от трех до семи раз, после чего снова гомогенизируют гомогенат, а затем материал центрифугируют при 6000 об/мин в течение 40-60 мин. После этого осадок отбрасывают, а надосадочную жидкость используют в качестве антигенного материала, предварительно доведя содержание в ней белка до 1,5-2,5 г/л.
Иммунизируют здоровых беспородных кроликов массой тела не менее 2,5 кг. Цикл иммунизации состоит из 5-47 инъекций, причем первая состоит из введения животным части антигенного материала вместе с полным адъювантом Фрейнда в подушечки всех четырех лап, а остальную часть антигена при первой инъекции проводят внутривенно, в краевую вену уха. Инъекцию в лапы готовят из расчета 0,4 мл/кг антигена, 0,2 г/кг ланолина, 0,4 г/кг вазелина, 0,02 г/кг туберкулина, а в краевую вену уха вводят 0,6 мл/кг антигена.
Спустя 14 дней после первой иммунизации животных реиммунизируют внутривенным введением антигенного материала из расчета 1 мл/кг массы тела. Последующие инъекции осуществляют с интервалом 3-5 дней внутривенно. Через 14 дней после заключительного введения антигенного материала проводят тотальную эксфузию крови.
Кровь собирают в стеклянные емкости, оставляют на сутки при 12-15оС, а затем сыворотку крови переносят в центрифужные стаканы и центрифугируют при 2500 об/мин в течение 20 мин. Сгустки, оставшиеся после снятия сыворотки, разрезают стеклянными палочками и центрифугируют в том же режиме. Осадок отбрасывают, отснятую сыворотку хранят в замороженном виде при (-20оС) до абсорбции не более 3 месяцев. Абсорбцию иммунной сыворотки форменными элементами и белками плазмы крови человека производят в стеклянных емкоcтях достаточного объема. Размороженную при 18оС сыворотку смешивают с плазмой крови доноров всех групп крови в соотношении: 50 мл смешанной плазмы на 1000 мл иммунной сыворотки. После пятнадцати минутной экспозиции при комнатной температуре смесь разливают в центрифужные стаканы и центрифугируют при 2500 об/мин в течение 15-25 мин. Надосадочную часть переносят в чистую емкость, куда добавляют отмытые от консерванта форменные элементы крови человека каждой из четырех групп крови поровну, таким образом, чтобы суммарный объем форменных элементов крови равнялся объему абсорбируемой сыворотки. Сразу после перемешивания смесь разливают в центрифужные стаканы и центрифугируют на рефрижераторной центрифуге типа К-70 при 10-15оС в течение 15-25 мин при 2500 об/мин.
Описанную процедуру абсорбции форменными элементами крови человека повторяют еще 3-4 раза. После последнего центрифугирования сыворотку подвергают абсорбции заранее приготовленными лейкоцитами из плазмы крови доноров всех четырех групп крови.
После проведения реакции пассивной гемаглютинации сыворотку подвергают риванольному фракционированию. В стерильную емкость достаточного объема помещают все количество абсорбированной сыворотки и по каплям добавляют 3,4% -ный риванол в объеме, составляющим половину объема сыворотки. Фракционирование происходит при рН=8,3-8,5, что обеспечивается добавлением 10% -ного гидрокарбоната натрия. Ингредиенты тщательно перемешивают. Процесс фракционирования происходит при комнатной температуре. После добавления последней порции риванола смесь продолжают перемешивать еще 25-30 мин, после чего дают отстояться в течение 30-40 мин до образования плотного слоя альбуминов над раствором глобулинов. Раствор глобулинов переносят в отдельную емкость и, с целью удаления излишков риванола, смешивают с активированным углем ОУ марки А, добавляя последний из расчета 160 г/л раствора глобулинов при тщательном перемешивании. Затем смеси дают отстояться при комнатной температуре в течение часа, жидкую часть переносят в центрифужные стаканы и центрифугируют при 2500 об/мин в течение 25-30 мин. Осветленный раствор полученной противотканевой сыворотки проверяют на отсутствие риванола, а после отрицательной пробы подвергают стерилизационной фильтрации через миллипоровские фильтры с диаметром пор 0,25 мкм на установке "Millipor" (США).
Для определения концентрации белка применяли биуретовый метод. Результаты исследований свидетельствовали о том, что концентрация белка в растворах после фракционирования составляла от 6,9 до 8,5 г/л. Для более удобного использования препарата концентрацию белка повышали до 10-30 г/л. Для этого после выделения глобулиновых фракций из противо-надпочечниковых сывороток препарат лиофилизировали и растворяли в дистил- лированной воде в меньшем объеме, чем тот, из которого они были лиофилизированы. Препараты для контрольного исследования, полученные из неиммунных кроличьих сывороток, концентрировали до соответствующей величины глобулинов противонадпочечниковой специфичности.
Анализ глобулинов производили методом электрофореза в полиакридном геле (ПАГ-200) по показателю рН. Объемы препаратов для разгонки составляли (0,01-0,02) ˙ 10-3 л. Образцы окрашивали амидочерным -В (5 г/л в спиртовом растворе ледяной уксусной кислоты) и после остывания - денситометрировали.
Результаты денситометрии показали, что в исследуемом составе альбумины либо полностью отсутствовали, либо сохранялись лишь в количествах, обозначаемых как "следы".
При этом в противонадпочечниковых сыворотках в результате риванольного фракционирования указанным способом относительное содержание α-глобулинов составляло 6-10%, β - глобулинов для 20-25%, γ-глобулинов - 40-70%.
Таким образом, полученные противонадпочечниковые сыворотки представляют собой смесь глобулиновых фракций с преобладающим содержанием β и γ фракций, имеют рН в пределах 7,8-8,2 при конечной концентрации белка в разных сериях от 7,5 до 30,0 г/л.
В таблице приведены данные, показывающие влияние абсорбции иммунных сывороток белками плазмы и форменными элементами крови на титры специфических и неспецифических тел в них, характеризующие активность и избирательность действия полученной противотканевой сыворотки. Токсичность полученной противотканевой сыворотки определяли в соответствии с утвержденным МЗ СССР приказом N 31 от 13.01.83 г. "Об унификации методов контроля медицинских иммуно-биологических препаратов" методичес- кими рекомендациями "Требования к доклиническому применению общетоксического действия новых фармокологических средств" М.: 1985.
Испытания проводили на двух видах животных.
Белые мыши. Выбирали 5 здоровых животных массой 17-22 г при регламентированном рационе, ранее не использованных ни в каких исследованиях. Противотканевую сыворотку вводили внутривенно в объеме не более 0,5 мл со скоростью не более 0,1 мл/с.
Морские свинки. Выбирали 3 здоровых животных массой 250-350 г, находящихся на регламентированном рационе и не использованных ранее ни в одном эксперименте. Противотканевую сыворотку вводили внутрибрюшинно в объеме не превышающем 5 мл.
Наблюдения проводили в течение семи дней после инъекции.
Поскольку все животные остались живы, ни у одного из них не наблюдалось появления признаков какого-либо заболевания, масса тела ни у одного животного за период наблюдения не снизилась, и отсутствовали воспалительные изменения в месте инъекции, было сделано заключение о нетоксичности полученной противотканевой сыворотки.
Приведенные данные свидетельствуют о том, что противотканевая сыворотка и способ ее получения дают возможность выделения лекарственного препарата, обеспечивающего моноспецифическое воздействие на надпочечники человека и животных и позволяющего менять функционирование этой железы внутренней секреции в требуемом направлении, а, поскольку участие иммунной системы в защитно-приспособительных реакциях организма путем перераспределения иммунокомпетентных клеток зависит от деятельности коры надпочечников, предполагаемое изобретение предоставляет возможность оказывать в терапевтических целях регуляторное воздействие на иммунную реактивность организма.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОСПЕЦИФИЧЕСКОЙ АНТИСЫВОРОТКИ направленного действия, включающий многократную иммунизацию животных антигенным материалом с последующим забором крови и отделения антисыворотки, отличающийся тем, что антигенный материал готовят из ткани надпочечников, которые промывают, измельчают, гомогенизируют в физиологическом растворе, фильтруют, фильтрат замораживают, выдерживают при температуре (-15) - (-20)oС в течение 10 - 24 ч, размораживают, процедуру замораживания с последующим размораживанием повторяют от 3 до 7 раз, после чего фильтрат снова гомогенизируют и центрифугируют, а затем антигенный материал собирают и иммунизацию проводят с адъювантом Фрейнда с интервалом между инъекциями 3 - 5 дней, а антисыворотку замораживают, смешивают с плазмой крови доноров всех групп, выдерживают при комнатной температуре, центрифугируют, к надосадной жидкости добавляют форменные элементы крови в соотношении 1 : 1, перемешивают, вновь центрифугируют, надосадочную жидкость собирают, причем процедуру абсорбции повторяют 3 - 4 раза, поэтапно добавляют раствор 3,4%-ного риванола до половины объема сыворотки, перемешивают, инкубируют при рН 8,3 - 8,5 30 - 40 мин, раствор собирают, смешивают с активированным углем при перемешивании, смесь выдерживают при комнатной температуре, центрифугируют, а надосадочную жидкость, содержащую целевой продукт, подвергают стерилизующей фильтрации.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5040865 RU2019190C1 (ru) | 1992-04-22 | 1992-04-22 | Способ получения моноспецифической антисыворотки |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5040865 RU2019190C1 (ru) | 1992-04-22 | 1992-04-22 | Способ получения моноспецифической антисыворотки |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019190C1 true RU2019190C1 (ru) | 1994-09-15 |
Family
ID=21603582
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5040865 RU2019190C1 (ru) | 1992-04-22 | 1992-04-22 | Способ получения моноспецифической антисыворотки |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2019190C1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2123862C1 (ru) * | 1996-03-28 | 1998-12-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Способ получения эталонных положительных сывороток для контроля качества тест-систем, предназначенных для определения антител |
| RU2145503C1 (ru) * | 1997-12-24 | 2000-02-20 | Кубанский государственный аграрный университет | Способ получения преципитирующих сывороток для определения видовой принадлежности мяса домашних и диких животных |
| RU2215294C2 (ru) * | 2001-10-23 | 2003-10-27 | Государственное учреждение Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского | Способ получения моноспецифических поликлональных антисывороток к антигенно родственным белкам |
| RU2410395C2 (ru) * | 2008-05-04 | 2011-01-27 | Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской Академии наук | Способ получения моноспецифических антител к белкам растительных клеток |
-
1992
- 1992-04-22 RU SU5040865 patent/RU2019190C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1079246, кл. A 61K 39/50, 1977. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2123862C1 (ru) * | 1996-03-28 | 1998-12-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Способ получения эталонных положительных сывороток для контроля качества тест-систем, предназначенных для определения антител |
| RU2145503C1 (ru) * | 1997-12-24 | 2000-02-20 | Кубанский государственный аграрный университет | Способ получения преципитирующих сывороток для определения видовой принадлежности мяса домашних и диких животных |
| RU2215294C2 (ru) * | 2001-10-23 | 2003-10-27 | Государственное учреждение Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского | Способ получения моноспецифических поликлональных антисывороток к антигенно родственным белкам |
| RU2410395C2 (ru) * | 2008-05-04 | 2011-01-27 | Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской Академии наук | Способ получения моноспецифических антител к белкам растительных клеток |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hill et al. | Studies of bactericidal activity to Escherichia coli of porcine serum and colostral immunoglobulins and the role of lysozyme with secretory IgA | |
| BG64350B1 (bg) | Универсално приложима кръвна плазма | |
| Laing et al. | Experimental assessment of a new, low-cost antivenom for treatment of carpet viper (Echis ocellatus) envenoming | |
| Ramalho‐Pinto et al. | Murine Schistosomiasis mansoni: anti‐schistosomula antibodies and the IgG subclasses involved in the complement‐and eosinophilmediated killing of schistosomula in vitro | |
| Dwyer | Thirty years of supplying the missing link: History of gamma globulin therapy for immunodeficient states | |
| DE59008883D1 (de) | Verfahren zur Herstellung nicht modifizierter intravenös verabreichbarer IgM- und/oder IgA-haltige Immunglobulinpräparate. | |
| Sutherland | Antivenom to the Venom of the Male Sydney Funnel‐Web Spider Atrax Robustus: Preliminary Report | |
| Essex | Certain animal venoms and their physiologic action | |
| RU2114636C1 (ru) | Противоядие, способ его получения, фармацевтическая композиция, способ противодействия яду и комплект | |
| Harkins | Recent advances in the study of burns | |
| US20090181043A1 (en) | Method for Producing Human Anti-Thymocyte Immunoglobulins | |
| AT410636B (de) | Verfahren zur herstellung eines impfstoffes | |
| RU2178309C2 (ru) | Антитимоцитарный глобулин для внутривенного введения и способ его получения | |
| US4676982A (en) | Treatment of chronic inflammatory disease with polyvalent immunoglobulins | |
| US3591677A (en) | Allergenic extract and process for preparing same | |
| Mun | Toxic effects of normal sera and homologous antisera on the chick embryo | |
| Light | The antigenicity of bovine thrombin: clinical evaluation | |
| Bosanquet et al. | Serums, vaccines and toxins in treatment and diagnosis | |
| Janeway | Blood and blood derivatives—a new public health field | |
| US20220079999A1 (en) | Antivenom compositions and uses thereof | |
| RU2264826C1 (ru) | Способ получения антитимоцитарного глобулина для внутривенного введения | |
| RU2287345C2 (ru) | Средство для стимуляции выработки фактора viii свертывания крови | |
| RU2283666C2 (ru) | Средство для активации восстановления структуры и функции поврежденных тканей и органов | |
| DE4244894C2 (de) | Vakzine für eine Immuntherapie sowie Verfahren zu deren Herstellung | |
| WO1994028932A1 (en) | Immunoglobulin infusion in xenotransplantation |