RU2112503C1 - Композиция для ухода за кожей - Google Patents
Композиция для ухода за кожей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2112503C1 RU2112503C1 RU94023244A RU94023244A RU2112503C1 RU 2112503 C1 RU2112503 C1 RU 2112503C1 RU 94023244 A RU94023244 A RU 94023244A RU 94023244 A RU94023244 A RU 94023244A RU 2112503 C1 RU2112503 C1 RU 2112503C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fer
- skin
- composition
- analysis
- concentration
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 15
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 abstract 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 abstract 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 abstract 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 21
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 206010040799 Skin atrophy Diseases 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 2
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 2
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 2
- ZCTXEAQXZGPWFG-UHFFFAOYSA-N imidurea Chemical compound O=C1NC(=O)N(CO)C1NC(=O)NCNC(=O)NC1C(=O)NC(=O)N1CO ZCTXEAQXZGPWFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 2
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 101150093530 Fer gene Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 101500025419 Homo sapiens Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- -1 Ketostearyl alcohol Chemical compound 0.000 description 1
- 238000013494 PH determination Methods 0.000 description 1
- 244000264897 Persea americana var. americana Species 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- VUBTYKDZOQNADH-UHFFFAOYSA-N acetyl hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(C)=O VUBTYKDZOQNADH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N d-alpha-Tocopheryl acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035618 desquamation Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 229940106582 estrogenic substances Drugs 0.000 description 1
- JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N estrone 3-sulfate Chemical compound OS(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 210000001061 forehead Anatomy 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940116978 human epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- ZEDUIPIAGLVVIG-UHFFFAOYSA-N icosan-9-ol octanoic acid Chemical compound C(CCCCCCC)C(CCCCCCCCCCC)O.C(CCCCCCC)(=O)O ZEDUIPIAGLVVIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N nepidermin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- 238000007665 sagging Methods 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000004215 skin function Effects 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 229940071127 thioglycolate Drugs 0.000 description 1
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-M thioglycolate(1-) Chemical compound [O-]C(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Cosmetics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение касается косметической композиции, содержащей рекомбинантный человеческий полипептид, которая способствует улучшению состояния кожи и замедляет процесс ее старения, вызванный естественными причинами или воздействием вредных агентов. Изобретение основано на применении малых концентраций фактора эпидермального роста, который надлежащим образом стабилизируется в высокомолекулярном декстране. Композиция содержит γ-урогастрон 1 - 10 нг/мл композиции, а также декстран 1-10 мг на 1 мг активного начала. 1 з. п.ф-лы, 2 табл., 13 ил.
Description
Изобретение касается косметической композиции, включающей в очень небольшом количестве рекомбинатный человеческий полипептид, которая способствует улучшению состояния кожи и замедляет процесс ее старения, связанный как с естественными причинами, так и с вредным для нее внешним воздействием, а также метода применения этой композиции.
В последнее время значительно усилился интерес к вопросам старения кожи. Найдены новые вещества, позволяющие предупредить или даже обратить вспять процесс старения кожи как на косметическом, так и на фармацевтическом уровне.
В производстве косметических средств используются свыше 16 тысяч химических соединений, многие из которых сопряжены с потенциальным или реальным риском появления нежелательных реакций или даже серьезных расстройств, как, например, в случае применения эстрогенных веществ, которые стимулируют рост рака кожи, или при переральном введении ретиноидов при лечении акне, которые, как известно, могут серьезно воздействовать на зрение или на функции печени (Jonathan A. Gold etal.-International Journal of Dermatology, 1989, vol, 28 No 4, p. 218).
Большинство этих веществ, применяемых в методах омоложения кожи, обладают известным эффектом, стимулирующим рост кожного покрова, но неподдающемуся механизмам контроля, в связи с чем самый безобидный из них чреват потенциальным риском вызвать дегенеративные нарушения в результате чрезмерного размножения.
Фактор эпидермального роста (ФЭР) - полипептид мол.м. 6000 дальтон, состоящий из цепи 53 аминокислот, обладает мощной митогенной активностью в отношении клеток, имеющих специальные рецепторы, и может быть обнаружен в различных органах и биологических жидкостях организма. Разновидностью ФЭР является гамма-урогастрон из 52 аминокислот.
Это полипептид участвует в регулировании нормальным процессом миграции и размножения эпителиальных клеток, в связи с чем является, по-видимому, основополагающим звеном во многих функциях кожи волос. В действительности ФЭР способствует осуществлению большого числа функций кожи. При снижении способности кожи к регенерации, когда вследствие хронологического природного или актиничного старения (вызванного воздействием внешних агентов) кожа становится более тонкой, применение ФЭР восстанавливает ее жизнеспособность, увеличивает толщину, возвращает эластичность, улучшает проходимость сосудов и секреторные функции, делает кожу более упругой и гладкой (Jean-Luc Nothia-Biofutur, Septembre, 1988, Van Brunt Jennifer and Klausner Arthur.-Biotechnology, Vol. 6, Number 1, Jomnary 1988. pp 25-30; Scheidegger A. - Trendisin Biotechology, 1989, Vol. 7, pp. 138-143). Однако утолщение кожи не способно превысить пределы для молодой нормальной кожи, что выявляет тем самым его регулирующий характер, отмечены прежде при анализе механизма действия этого белка на молекулярном уровне (Daniele S. et al. - Graetes Arch. Clin. Exp. Ophtalmol. vol. 210: 159, 1979, Carpenter, G. and Cohen S., - Anmu. Rev. Biochem. Vol. 48, (1979) 193-216). Это со всей очевидностью отличает его от веществ, чуждых коже.
Вот почему это вещество полезно не только для поврежденной кожи, его потенциальные возможности в качестве защитного средства от естественного воздействия старения кожи позволили включить его в косметические формулы (Японские патенты N JP 2-49734, JP 62-19511, JP 61-15810, JP 61-5006, JP 60-258105, N Wo 86/02264).
Его использование в формулах, принятых в фармацевтике, в виде кремов и гелей предложено в европейских патентах N EP-BI 200757 и 267015. Предложенные пределы этого активного начала колеблется 0,01 - 1000 мкг/мл раствора, предпочтительно 1 - 100 мкг/мл раствора, который стабилизируется при помощи производной целлюлозы.
Цель изобретения - получение в высшей степени стабильных и эффективных форм с очень малой концентрацией препарата, содержащего два вида биологически активных молекул ФЭР (Araki, F. et al.-Chemical Phermacentical Bulletin 1989, Vol 37, P.p. 404-406) с 51 и 52 аминокислотами, последняя из которых аналогична естественному - урогастрону, полученному однако путем рекомбинации из дрожжей и с большим выходом. Эти формулы дали положительные результату по улучшению состояния кожи при их использовании в качестве косметических средств различного назначения, как, например, для лиц, страдающих преждевременной атрофией кожи, акне, при солнечных ожогах и т.д.
В частности, формулы согласно изобретению содержат 1 - 10 нг активного начала, определяемого высокочувствительным иммуноферментным анализом с использованием двух моноклональных антител, разработанных специально для этой цели. Активное начало стабилизируется высокомолекулярным декстраном, что обеспечивает его эффективность и сохранность в неконтролируемых условиях окружающей среды, как это обычно происходит с косметическими препаратами.
Пример 1. Контроль качества продукта.
После процесса ферментации и очистки активного начала, полученного путем рекомбинации, необходимо, чтобы этот продукт удовлетворял следующим требованиям:
концентрация ФЭР по методу ELISA не менее 0,25 мг/мл;
определение активности связывания со специфическими мембранными рецепторами по методу RRA (Radio Receptor Analysis) - не менее 0,25 мг/мл. Это значение должно соответствовать величине, полученной по методу ELISA, что доказывает биологическую активность ФЭР, входящего в состав крема;
определение pH (7±0,2) при 25oC;
электрофорез в полиакриламидном геле - 1 полоса на уровне 6000 дальтон без присутствия продуктов распада или олигомеров;
анализ методом жидкостной хроматографии высокого разрешения с обратной фазой (RP-HPLC). Чистота, установленная этим методом должна составлять более 95% и должны присутствовать два преобладающих вида ФЭР, соответствующие ФЭР 1-52 и ФЭР 1-51;
определение уровня рекомбинантных белков в штамме-хозяине по методу got-blot. Не должен содержать свыше 50 нг контаминирующих белков на каждый микрограмм ФЭР;
определение стерильности: раствор ФЭР должен соответствовать требованиям анализа на стерильность (USP XXII).
концентрация ФЭР по методу ELISA не менее 0,25 мг/мл;
определение активности связывания со специфическими мембранными рецепторами по методу RRA (Radio Receptor Analysis) - не менее 0,25 мг/мл. Это значение должно соответствовать величине, полученной по методу ELISA, что доказывает биологическую активность ФЭР, входящего в состав крема;
определение pH (7±0,2) при 25oC;
электрофорез в полиакриламидном геле - 1 полоса на уровне 6000 дальтон без присутствия продуктов распада или олигомеров;
анализ методом жидкостной хроматографии высокого разрешения с обратной фазой (RP-HPLC). Чистота, установленная этим методом должна составлять более 95% и должны присутствовать два преобладающих вида ФЭР, соответствующие ФЭР 1-52 и ФЭР 1-51;
определение уровня рекомбинантных белков в штамме-хозяине по методу got-blot. Не должен содержать свыше 50 нг контаминирующих белков на каждый микрограмм ФЭР;
определение стерильности: раствор ФЭР должен соответствовать требованиям анализа на стерильность (USP XXII).
а) Идентификация и количественное определение ФЭР с помощью иммуноферментного анализа (ELISA).
Метод идентификации и количественного определения ФЭР - это система ELISA типа "сэндвич" с двумя моноклональными антителами (CB-EGF I и CB-EGF 2), сконструированными специально с этой целью.
Метод ELISA основан на опознании ФЭР моноклональным антителом (CB-EGF1), адсорбированным на твердой фазе (иммунопластинки ПХВ) с последующим проявлением реакции другим антителом (CB-EGF 2) в сочетании с ферментом (пероксилазой).
б) Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PACE). Используется модификация системы Леммли (Laemmli, Nature, 1979, Vol 277, p. 680, предложенная Шаггером /Schagger, A. Analytical Biochemistry, 1979, Vol. 166, p. 368-379), в которой применяется гель, разделяющий 16,5% концентрации в проценте мономеров и 3% перекрещивания от полной концентрации мономеров.
Подготовка проб отличается от предложенной Леммли и Шаггером, при этом в качестве окислителя используется дитиотрейтол.
Полученные результаты показаны на графике, приведенном на чертеже.
в) RP-HPLC. Анализ ФЭР осуществляет в колонке C4 размерами 4,6 • 250 мм. Применялся 5-минутный линейный градиент при начальных условиях 10% буфера В. Позже концентрация буфера B увеличена с 10 до 60% в течение 45 мин.
Растворитель A: 0,1% трихлоруксусная кислота.
Буфер B: 0,5% трихлоруксусная кислота в Ацетонитриле.
Преобладающие виды соответствуют молекулярным видам с 51 и 52 аминокислотами. (Подтверждены масс-спектральным анализом).
г) Дот-блоттинг контаминирующих антибелков штамма-хозяина. Приготовляется эталонная кривая белков штамма-хозяина, трансформированного плазмидой экстрессии без включения гена ФЭР и приготовляются различные растворы анализируемых образцов, при этом осуществляется визуальное сравнение сигналов каждого из них с соответствующими точками эталонной кривой.
д) Контроль стерильности раствора ФЭР.
Контроль стерильности раствора ФЭР осуществляется высевом образца в культуральную среду тиогликолята и триптона сои с инкубацией соответственно при 37 и 28oC в течение 14 дней и ежедневным наблюдением согласно требованиям USP XXII.
e) Определение концентрации ФЭР методом связывания с рецепторами. Использовались клеточные культуры клеток A431.
Проводится анализ компетентности по рецептору между ФЭР образца и радиоактивности меченным ФЭР.
Результаты этого анализа должны совпадать с полученными методами ELISA для активного начала.
Пример 2. Анализ по определению минимально активной дозы в культуре человеческих кератоцитов.
Использовалась культура человеческих кератоцитов для анализа минимальной активной дозы, т.е. минимальной концентрации рекомбинантного человеческого фактора роста эпидермиса, способного удвоить скорость размножения этих клеток in vitro.
Культура человеческих кератофитов предварительно делится на аликвоты по 2 мл на используемых для анализа чашках Петри. Концентрация клеток измеряется методом микроскопического подсчета: мера - 5 пятен на чашку.
В каждом эксперименте брались 3 реплики на пробную группу и следующие 7 групп:
1. Контрольная. Эта группа показывает базальный рост.
1. Контрольная. Эта группа показывает базальный рост.
2. Доза 1. Базальная культура с добавлением 0,1 нг/мл ФЭР.
3. Доза 2. Базальная культура с добавлением 0,5 нг/мл ФЭР.
4. Доза 3. Базальная культура с добавлением 1 нг/мл ФЭР.
5. Доза 4. Базальная культура с добавлением 5 нг/мл ФЭР.
6. Доза 5. Базальная культура с добавлением 10 нг/мл ФЭР.
7. Доза 6. Базальная культура с добавлением 50 нг/мл ФЭР.
Культура инкубировалась в течение 48 ч, после чего был добавлен витальный краситель и произведен подсчет.
Минимальная доза, позволяющая удвоить скорость размножения кератоцитов, оказалась концентрацией выше 1 нг/мл и ниже 5. Напрашивается вывод, что эта концентрация находится между 1 и 2 нг/мл, хотя график - подсказка в этом направлении.
Пример 3. Примеры форм.
Формы типа кремов или гелей, содержащие в своем составе перечисленные компоненты, приготовлены условно.
Форма N 1 - гель.
Компоненты - мас.ч.
Carbopol 940 - 0,5 - 0,7
Триэтаноламин 10% - 5 - 7
Полипропиленгликоль - 5
Glucam E20
Germall 115% - 0,2
Phenonip - 0,4
Фактор роста эпидермиса - 0,0001 - 0,005
Деионизированная вода - 100 C.S.P. (достаточное кол-во)
Форма N 2: крем - эмульсия.
Триэтаноламин 10% - 5 - 7
Полипропиленгликоль - 5
Glucam E20
Germall 115% - 0,2
Phenonip - 0,4
Фактор роста эпидермиса - 0,0001 - 0,005
Деионизированная вода - 100 C.S.P. (достаточное кол-во)
Форма N 2: крем - эмульсия.
Фаза A
Компоненты, % - мас.ч.
Компоненты, % - мас.ч.
Tego-caze 150 - 8
Изопропилмиристат - 8
Ацетулан - 5
Жидкий PCL - 2
Вазелиновое масло - 5
Фаза C
Полипропиленгликоль - 3
Glucam E 20 - 2
Germall 115% - 0,2
Phenonip - 0,5
Фактор роста эпидермиса - 0,001 - 0,005
Фаза B
Деионизированная вода - 100
Форма N 3
Триглицерин C8C10
Глицеринмоностеарат
Кетостеариловый спирт
Кетеарилоктаноат
Октилдодеканол
Коллаген оливкового масла
Ацетилпальмитат
Масло авакадо
Эластин
Триэтаноламин
Карбомер
Стабилизатор
Витамин E ацетат
Аромат BHA
Фактор роста эпидермиса (ФЭР)
Пример 4. Методы анализа форм.
Изопропилмиристат - 8
Ацетулан - 5
Жидкий PCL - 2
Вазелиновое масло - 5
Фаза C
Полипропиленгликоль - 3
Glucam E 20 - 2
Germall 115% - 0,2
Phenonip - 0,5
Фактор роста эпидермиса - 0,001 - 0,005
Фаза B
Деионизированная вода - 100
Форма N 3
Триглицерин C8C10
Глицеринмоностеарат
Кетостеариловый спирт
Кетеарилоктаноат
Октилдодеканол
Коллаген оливкового масла
Ацетилпальмитат
Масло авакадо
Эластин
Триэтаноламин
Карбомер
Стабилизатор
Витамин E ацетат
Аромат BHA
Фактор роста эпидермиса (ФЭР)
Пример 4. Методы анализа форм.
Для проверки соответствия активных начал необходимым требованиям после приготовления форм разработан следующий метод анализа:
Завесить 2 г крема, соответствующих 2 мл последнего,
Взвесить в равных количествах этанола и дистиллированной воды,
Гомогенизировать эту взвесь примерно в течение 10 мин,
Центрофугировать при 18000 об/мин в течение 5 мин,
Взять образцы всех образовавшихся фаз,
Подвергнуть образцы анализу ELISA в соответствии с методом, изложенным в примере 1 в отношении контроля качества активного начала.
Завесить 2 г крема, соответствующих 2 мл последнего,
Взвесить в равных количествах этанола и дистиллированной воды,
Гомогенизировать эту взвесь примерно в течение 10 мин,
Центрофугировать при 18000 об/мин в течение 5 мин,
Взять образцы всех образовавшихся фаз,
Подвергнуть образцы анализу ELISA в соответствии с методом, изложенным в примере 1 в отношении контроля качества активного начала.
Результаты показали утилизацию 96% активного начала, присутствующего в первоначальном образце.
Пример 5. Стабилизация ФЭР в декстране.
Был проведен анализ ускорений стабильности ФЭР, стабилизированного декстраном, концентрация которого составила 10 мг на мг ФЭР. Для этого из партии ФЭР, стабилизированного декстраном, взяли три образца, которые выдерживали при 45, 63 и 80oC, используя для анализа образцов иммуноферментный метод с моноклональными антителами, изложенный в примере 1. Полученные результаты исследования показаны в табл.2.
Исходя из этих результатов, с помощью уравнения Аррениуса была предсказана потеря 10% общего количества белка в год при хранении ФЭР при 4oC.
Log K = Log K0 - Ea/2,303 R (1/TO)
Первый порядок
t/T/Кельвин/Log скоростей деградации (распада)
0,00288 - - 1,982
0,00297 - - 2,261
0,00314 - - 2,739
Осталось: 2454,97.
t/T/Кельвин/Log скоростей деградации (распада)
0,00288 - - 1,982
0,00297 - - 2,261
0,00314 - - 2,739
Осталось: 2454,97.
Захвачено: 4,988501.
Пример 6. Результаты протоколов испытания косметических форм с ФЭР.
Для ведения протокола испытания косметических форм, содержащих ФЭР, учитывались следующие требования.
Обследуемый контингент. Было отобрано 30 пациенток, страдающих преждевременной атрофией кожи, причем в группу включались на добровольной основе женщины в возрасте 25 - 40 лет с явными признаками кожной инволюции и получали отказ:
женщины старше 40 лет,
больные, страдающие нарушением эндокринной системы, сосудов и обмена,
женщины с другими заболеваниями кожи,
женщины, состояние кожи которых соответствует их календарному возрасту.
женщины старше 40 лет,
больные, страдающие нарушением эндокринной системы, сосудов и обмена,
женщины с другими заболеваниями кожи,
женщины, состояние кожи которых соответствует их календарному возрасту.
Чтобы следить за изменениями в обследуемых женщинах, были проведены следующие исследования.
Фотография головы и шеи с увеличением специфических зон до и после применения крема.
Гистологическое исследование и электронная микроскопия биопсий, взятых вблизи обрабатываемых зон до и после применения крема, обращая в первую очередь внимание на изменения в коллагеновых волокнах и фибробластах.
Биохимические исследования включают определение гормонального уровня эндрогенов и эстрогенов в крови, а также анализ на толерантность к глюкозе.
Детальное клиническое обследование, при котором учитывается тип кожи и признаки инволюции по таблице Себастияни, с классификацией по следующим категориям:
I-ая категория: кожа пациентки соответствует ее календарному возрасту,
2-я категория: состояние кожи опережают на одну ступень ее календарный возраст,
3-я категория: кожа опережает хронологический возраст на несколько ступеней,
Определение степени удовлетворенности пациенток увеличением гидратации кожи, тургора, трофики и др.
I-ая категория: кожа пациентки соответствует ее календарному возрасту,
2-я категория: состояние кожи опережают на одну ступень ее календарный возраст,
3-я категория: кожа опережает хронологический возраст на несколько ступеней,
Определение степени удовлетворенности пациенток увеличением гидратации кожи, тургора, трофики и др.
Определение негативных реакций: зуд, десквамация, эритема, отечность.
Методика лечения.
Косметические средства были предоставлены женщинам, добровольно согласившимся участвовать в проведении эксперимента, которые были предварительно проинструктированы в отношении правильного применения крема, таким образом чтобы он воздействовал в частности на наиболее уязвимые зоны, в том числе вокруг глаза, у углов рта и на лбу.
Формы применились ежедневно в течение 6 мес. в амбулаторном порядке, т. е. каждая пациентка применяла их самостоятельно без наблюдения специалиста в продолжении всего курса лечения, чтобы таким образом имитировать применение потребителем косметического продукта в нормальных условиях, как всякого другого средства аналогичного назначения, имеющегося на рынке.
В период лечения строго следили за тем, чтобы пациентки не принимали другие лекарства, способные нарушить его правильное течение, а также за тем, чтобы не было значительных изменений в весе обследуемых.
В конце лечения были получены следующие результаты.
Клинические: большая эластичность и бархатистость кожи, улучшение гидратации,
большая упругость (тургор), замедление процесса атрофии кожи в связи с исчезновением наиболее поверхностных морщин, особенно в области губных складок.
большая упругость (тургор), замедление процесса атрофии кожи в связи с исчезновением наиболее поверхностных морщин, особенно в области губных складок.
Гистологические: увеличенная плотность фибробластов, исчезновение фрагментации и дряблости коллагеновых волокон, проявлявшиеся у большинства обследуемых пациенток. Не наблюдался рост пре-злокачественных образований.
Claims (2)
1. Композиция для ухода за кожей, включающая γ-урогастрон, натуральный, синтетический или рекомбинантный, а также стабилизатор - полисахарид, отличающаяся тем, что она содержит γ-урогастрон от 1 до 10 нг/мл композиции.
2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве стабилизатора она содержит декстран от 1 до 10 мг на 1 мг активного начала.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CU64/93 | 1993-07-05 | ||
| CU1993064A CU22405A1 (es) | 1993-07-05 | 1993-07-05 | Composicion cosmetica para el cuidado de la piel |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94023244A RU94023244A (ru) | 1996-11-10 |
| RU2112503C1 true RU2112503C1 (ru) | 1998-06-10 |
Family
ID=5459284
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94023244A RU2112503C1 (ru) | 1993-07-05 | 1994-07-05 | Композиция для ухода за кожей |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| BR (1) | BR9402638A (ru) |
| CO (1) | CO4230067A1 (ru) |
| CU (1) | CU22405A1 (ru) |
| ES (1) | ES2070791B1 (ru) |
| RU (1) | RU2112503C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2161974C1 (ru) * | 2000-01-20 | 2001-01-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Клиника Института биорегуляции и геронтологии" | Лечебно-профилактическое средство для ухода за кожей (варианты) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4717717A (en) * | 1986-11-05 | 1988-01-05 | Ethicon, Inc. | Stabilized compositions containing epidermal growth factor |
| NZ222413A (en) * | 1986-11-05 | 1991-06-25 | Ethicon Inc | Compositions containing a polypeptide growth factor and a water-soluble cellulose polymer stabiliser |
| NZ226171A (en) * | 1987-09-18 | 1990-06-26 | Ethicon Inc | Gel formulation containing polypeptide growth factor |
-
1993
- 1993-07-05 CU CU1993064A patent/CU22405A1/es not_active IP Right Cessation
- 1993-12-31 ES ES9302740A patent/ES2070791B1/es not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-07-05 RU RU94023244A patent/RU2112503C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1994-07-05 BR BR9402638A patent/BR9402638A/pt not_active IP Right Cessation
- 1994-07-05 CO CO94029150A patent/CO4230067A1/es unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2161974C1 (ru) * | 2000-01-20 | 2001-01-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Клиника Института биорегуляции и геронтологии" | Лечебно-профилактическое средство для ухода за кожей (варианты) |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR9402638A (pt) | 1995-04-04 |
| RU94023244A (ru) | 1996-11-10 |
| CU22405A1 (es) | 1996-01-31 |
| ES2070791A1 (es) | 1995-06-01 |
| ES2070791B1 (es) | 1996-01-01 |
| CO4230067A1 (es) | 1995-10-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Saurat et al. | Topical retinaldehyde on human skin: biologic effects and tolerance | |
| US6521669B1 (en) | Hydroxystilbene compounds for reducing/inhibiting protein glycation | |
| TW480178B (en) | Cosmetic compositions containing resveratrol | |
| Tsai et al. | Permeability barrier disruption alters the localization and expression of TNFα/protein in the epidermis | |
| US6414038B2 (en) | Hydroxystilbenes for reducing/inhibiting protein glycation and combating skin aging | |
| EP0899330B1 (fr) | Polypeptide isolé de l'épiderme et son utilisation | |
| US20070134183A1 (en) | Aminosulfonic acid compounds for promoting desquamation of the skin | |
| US8216618B2 (en) | Cosmetic use of an Ophiopogon japonicus active principle | |
| US20250345265A1 (en) | Active principle comprising a particular extract of punica granatum and uses for preventing and/or treating acne | |
| US5356874A (en) | Angiogenic factor isolated from live yeast cell derivatives and its use in treating wounds or burns in mammals | |
| JP2011520768A (ja) | 皮膚のバリア機能を改善するための、ｆｎ３ｋおよび／またはｆｎ３ｋｒｐの発現を刺激するための有効薬剤の化粧上の使用 | |
| Solomon et al. | Hereditary trichodysplasia: Marie Unna's hypotrichosis | |
| Squier et al. | The ultrastructure of the melanocyte in human gingival epithelium | |
| RU2112503C1 (ru) | Композиция для ухода за кожей | |
| CA2299171A1 (fr) | Utilisation d'un 2-amino-alcane polyol pour le traitement de vieillissement cutane | |
| KR101766393B1 (ko) | 블레오마이신 하이드로라제를 이용한 건조 피부 개선물질 스크리닝 방법 | |
| US5719126A (en) | Melanogenic inhibitor, and methods of producing and using the same | |
| Aleporou-Marinou et al. | Purification of apolipoprotein H (beta2-glycoprotein I)-like protein from human follicular fluid | |
| JP3611675B2 (ja) | 皮膚外用剤 | |
| Van den Hove‐Vandenbroucke et al. | Defective Thyroglobulin Endocytosis and Hydrolysis in Thyroid Cold Nodules 1 | |
| Fisch et al. | Studies of phenylketonurics with dermatitis | |
| KR102866929B1 (ko) | 루콜라 유래 폴리데옥시리보뉴클레오티드를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 약학 조성물 | |
| EP0967968A1 (en) | Pharmaceutical or cosmetic composition containing at least one retinoid | |
| US20090042958A1 (en) | Composition and method for treating immune-mediated skin disorders | |
| CA2258796A1 (fr) | Heteromere isole liant l'acide arachidonique et son utilisation en cosmetique ou pharmacie |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20040706 |