RU2425383C1 - METHOD AND KIT FOR IMMUNE-ENZYME FUNCTIONAL ACTIVITY ASSAY ON C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT - Google Patents
METHOD AND KIT FOR IMMUNE-ENZYME FUNCTIONAL ACTIVITY ASSAY ON C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT Download PDFInfo
- Publication number
- RU2425383C1 RU2425383C1 RU2010115978/15A RU2010115978A RU2425383C1 RU 2425383 C1 RU2425383 C1 RU 2425383C1 RU 2010115978/15 A RU2010115978/15 A RU 2010115978/15A RU 2010115978 A RU2010115978 A RU 2010115978A RU 2425383 C1 RU2425383 C1 RU 2425383C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- component
- human
- subcomponents
- functional activity
- complement
- Prior art date
Links
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000003556 assay Methods 0.000 title abstract 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract 2
- 101000901154 Homo sapiens Complement C3 Proteins 0.000 claims abstract 2
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims abstract 2
- 102000057770 human C3 Human genes 0.000 claims abstract 2
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 3
- -1 (R1) Substances 0.000 claims 1
- 102000005686 Serum Globulins Human genes 0.000 abstract description 7
- 108010045362 Serum Globulins Proteins 0.000 abstract description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 abstract description 4
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010078044 Complement C1r Proteins 0.000 description 2
- 102100030149 Complement C1r subcomponent Human genes 0.000 description 2
- 108010078015 Complement C3b Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940098197 human immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицинской иммунологии, а именно к способам определения функциональной активности компонентов комплемента в сыворотке крови человека при диагностике ряда заболеваний и в биологических препаратах. Субкомпоненты C1r и C1s, синтезируемые в организме в равных количествах и представляющие собой зимогены протеиназ, образуют прочный Ca-зависимый тетрамерный комплекс C1r2s2, связанный с субкомпонентом C1q также Ca-зависимым образом и формирующий с ним компонент C1. При связывании C1 с иммунным комплексом происходит активация протеиназ C1r и C1s. Активация этих ферментов - существенный этап инициации каскада активации комплемента по классическому пути, поэтому их функциональный дефицит может быть причиной различного рода патологических состояний организма.The invention relates to medical immunology, and in particular to methods for determining the functional activity of complement components in human serum in the diagnosis of a number of diseases and in biological preparations. Subcomponents C1r and C1s, synthesized in the body in equal amounts and representing zymogenes of proteinases, form a strong Ca-dependent tetrameric complex C1r 2 s 2 , connected with the C1q subcomponent also in a Ca-dependent manner and forming component C1 with it. When C1 binds to the immune complex, C1r and C1s proteinases are activated. The activation of these enzymes is an essential stage in the initiation of the complement activation cascade along the classical pathway; therefore, their functional deficiency can be the cause of various pathological conditions of the body.
Наиболее перспективным из современных методов определения белков сыворотки крови является метод иммуноферментного анализа благодаря своей чувствительности, избирательности и возможности автоматизации аналитического процесса. Однако имеющиеся на сегодня методы иммуноферментного анализа белков комплемента позволяют определять лишь их содержание как антигена. Тем не менее наиболее информативным является оценка функциональной активности этих белков, которая и характеризует развитие патологического процесса. Известен способ определения функциональной активности компонентов C1r2s2 [1], который предусматривает сорбцию в лунках микропланшета иммуноглобулина G, затем внесение в лунки микропланшета сыворотки морской свинки в присутствии этилендиаминтетраацетата натрия для сорбции на иммуноглобулине только субкомпонента C1q. После освобождения лунок микропланшета от жидкости и их промывки в лунки вносят буферный раствор с ионами кальция, анализируемые пробы, содержащие комплекс C1r2s2 с неизвестной активностью, и псевдоглобулиновую фракцию сыворотки человека (супернатант после осаждения эуглобулинов сыворотки диализом против дистиллированной воды при pH 5,5) в качестве источника компонентов С4, С2 и С3. При проведении инкубации для активации комплемента происходит ковалентное связывание C3b на сорбированном иммуноглобулине в количествах, зависящих от концентрации функционально активного определяемого комплекса C1r2s2. Количество ковалентно связавшегося в результате активации компонента С3 определяют по продукту ферментативной реакции с помощью антител к С3-фракции иммуноглобулинов G, конъюгированных с ферментом.The most promising of modern methods for determining serum proteins is enzyme immunoassay due to its sensitivity, selectivity and the ability to automate the analytical process. However, currently available methods of enzyme immunoassay of complement proteins allow only their content to be determined as antigen. Nevertheless, the most informative is the assessment of the functional activity of these proteins, which characterizes the development of the pathological process. A known method for determining the functional activity of the components of C1r 2 s 2 [1], which provides for the sorption of immunoglobulin G microplate in the wells, then introducing guinea pig serum into the microplate wells in the presence of sodium ethylene diamine tetraacetate for sorption on the immunoglobulin only C1q subcomponent. After releasing the microplate wells from the liquid and washing them into the wells, a buffer solution with calcium ions, analyzed samples containing a complex of C1r 2 s 2 with unknown activity, and a pseudoglobulin fraction of human serum (supernatant after precipitation of serum euglobulins by dialysis against distilled water at pH 5, 5) as a source of components C4, C2 and C3. During incubation, to activate complement, C3b covalently binds to sorbed immunoglobulin in amounts that depend on the concentration of the functionally active detectable complex C1r 2 s 2 . The amount of component C3 covalently bound as a result of activation is determined by the product of the enzymatic reaction using antibodies to the C3 fraction of immunoglobulins G conjugated to the enzyme.
Недостатком этого способа является трудность получения иммунохимически чистых препаратов иммуноглобулина G человека и плохое сохранение активирующей способности при хранении.The disadvantage of this method is the difficulty of obtaining immunochemically pure preparations of human immunoglobulin G and poor preservation of activating ability during storage.
Задачей заявленного изобретения является разработка способа и набора на основе иммуноферментного метода, позволяющего определять функциональную активность комплекса C1r2s2 комплемента человека с использованием доступного и хорошо сохраняемого в обычных условиях коммерческого препарата для использования в качестве активатора классического пути комплемента.The objective of the claimed invention is to develop a method and kit based on an enzyme-linked immunosorbent assay that allows you to determine the functional activity of the complex of human complement C1r 2 s 2 using an available and well-preserved under normal conditions commercial preparation for use as an activator of the classical complement pathway.
Поставленная задача достигается путем разработки способа определения и набора. Способ определения предусматривает сорбцию в лунках микропанели аптечного препарата дерината, представляющего собой дезоксирибонуклеат натрия, хорошо сохраняемый в обычных условиях, затем внесение в лунки микропланшета сыворотки морской свинки в присутствии этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) для сорбции на деринате только субкомпонента C1q. После освобождения лунок микропланшета от жидкости и их промывки в лунки вносят буферный раствор с ионами кальция, анализируемые пробы, содержащие комплекс C1r2s2 с неизвестной активностью, и псевдоглобулиновую фракцию сыворотки человека (супернатант после осаждения эуглобулинов сыворотки диализом против дистиллированной воды при pH 5,5) в качестве источника компонентов С4, С2 и С3. При проведении инкубации для активации комплемента происходит ковалентное связывание C3b в лунках микропанели в количествах, зависящих от концентрации функционально активного определяемого комплекса C1r2s2. Количество связавшегося в результате активации компонента С3 определяют по продукту ферментативной реакции с помощью антител к С3-фракции иммуноглобулинов G, конъюгированных с ферментом. Тем самым достигается определение функциональной активности C1r2s2 иммуноферментным методом, пригодным для стандартизации.The task is achieved by developing a method for determining and recruiting. The determination method involves sorption in the micropanel wells of a pharmacy preparation of derinate, which is sodium deoxyribonucleate, well preserved under ordinary conditions, then introducing guinea pig serum into the microtiter wells in the presence of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) for sorption on the derinate only of the C1q subcomponent. After releasing the microplate wells from the liquid and washing them into the wells, a buffer solution with calcium ions, analyzed samples containing a complex of C1r 2 s 2 with unknown activity, and a pseudoglobulin fraction of human serum (supernatant after precipitation of serum euglobulins by dialysis against distilled water at pH 5, 5) as a source of components C4, C2 and C3. During incubation, to activate complement, C3b covalently binds in the wells of the micropanel in amounts depending on the concentration of the functionally active detectable complex C1r 2 s 2 . The amount of component C3 bound as a result of activation is determined by the product of the enzymatic reaction using antibodies to the C3 fraction of immunoglobulins G conjugated to the enzyme. Thus, the determination of the functional activity of C1r 2 s 2 is achieved by an enzyme immunoassay suitable for standardization.
Техническим результатом заявленного изобретения является разработка способа определения функциональной активности комплекса C1r2s2 комплемента человека, обладающего хорошей воспроизводимостью результатов.The technical result of the claimed invention is the development of a method for determining the functional activity of the complex of human complement C1r 2 s 2 with good reproducibility of the results.
Пример 1. Определение функциональной активности субкомпонентов C1r2s2 первого компонента комплемента человека. Аптечный препарат дерината в 0,15 М NaCl в концентрациях 10-100 мкг/мл и вносят по 100 мкл раствора в каждую лунку плоскодонной полистироловой 96-луночной микропанели. Закрывают крышкой и оставляют на ночь при 4°C. Два раза отмывают планшет вероналовым буферным раствором, pH 7,4 (VBSE), содержащим 0,15 М NaCl, 50 мМ динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), заливая по 150 мкл в каждую лунку, затем планшет осушают путем вытряхивания остатка жидкости. В лунки планшета вносят по 100 мкл раствора VBSE и 1,25 мкл сыворотки морской свинки. После инкубации в термостате в течение 1 ч при 37°C и отмывки вероналовым буферным раствором, pH 7,4, содержащим 0,15 М NaCl, 0,15 мМ Ca2+ и 0,5 мМ Mg2+ (VBS2*), в лунки микропанели вносят по 100 мкл раствора VBS2+, содержащего 15 мкл псевдоглобулиновой фракции сыворотки человека (супернатант после осаждения эуглобулинов сыворотки диализом против дистиллированной воды при pH 5,5 - реагент R1) и анализируемую пробу, содержащую комплекс C1r2s2 с неизвестной активностью. После инкубации в термостате в течение 1 ч при 37°C, двукратной отмывки фосфатным буфером, pH 7,4, содержащим 0,15 М NaCl и 0,05% Твин-20, (ЗФР-Т) и осушения микропанели в каждую лунку вносят по 100 мкл конъюгата пероксидазы с антителами против компонента С3 человека в том же буфере в подобранном разведении. После инкубации в термостате в течение 1 ч при 37°C, отмывки ЗФР-Т и осушения планшета в каждую лунку вносят по 100 мкл субстратного буфера с ТМБ (3,3',5,5'-тетраметилбензидин в 15 мл цитратно-фосфатного буфера, pH 5,0, и 50 мкл 3% перекиси водорода). После 5-10 мин инкубации в темноте реакцию останавливают внесением в каждую лунку 50 мкл 14% серной кислоты. Результаты реакции учитывают с помощью спектрофотометра с вертикальным лучом измерением светопоглощения при 450 нм. Функциональную активность C1r2s2 рассчитывают по стандартной кривой (см. чертеж).Example 1. Determination of the functional activity of subcomponents C1r 2 s 2 of the first component of human complement. A pharmacy preparation of derinate in 0.15 M NaCl at concentrations of 10-100 μg / ml and 100 μl of solution are added to each well of a flat-bottomed polystyrene 96-well micro-panel. Cover and leave overnight at 4 ° C. The tablet is washed twice with veronal buffer solution, pH 7.4 (VBSE) containing 0.15 M NaCl, 50 mM disodium salt of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), pouring 150 μl into each well, then the tablet is dried by shaking the remaining liquid. 100 μl of VBSE solution and 1.25 μl of guinea pig serum are added to the wells of the plate. After incubation in a thermostat for 1 h at 37 ° C and washing with Veronal buffer solution, pH 7.4, containing 0.15 M NaCl, 0.15 mm Ca 2+ and 0.5 mm Mg 2+ (VBS 2 *) , 100 μl of VBS 2+ solution containing 15 μl of human serum pseudoglobulin fraction (supernatant after precipitation of serum euglobulins by dialysis against distilled water at pH 5.5 - reagent R1) and an analyzed sample containing the C1r 2 s 2 s complex are added to the micropanel wells unknown activity. After incubating in an incubator for 1 h at 37 ° C, washing twice with phosphate buffer, pH 7.4, containing 0.15 M NaCl and 0.05% Tween-20, (PBS-T) and drying the micropanel, add to each well 100 μl of peroxidase conjugate with antibodies against human component C3 in the same buffer in a selected dilution. After incubation in a thermostat for 1 h at 37 ° C, washing with PBS-T and drying the plate, 100 μl of TMB substrate buffer (3.3 ', 5.5'-tetramethylbenzidine in 15 ml of citrate-phosphate buffer are added to each well) , pH 5.0, and 50 μl of 3% hydrogen peroxide). After 5-10 min incubation in the dark, the reaction is stopped by adding 50 μl of 14% sulfuric acid to each well. The results of the reaction are taken into account using a spectrophotometer with a vertical beam by measuring light absorption at 450 nm. The functional activity of C1r 2 s 2 is calculated according to a standard curve (see drawing).
Пример 2. Набор для определения функциональной активности субкомпонентов C1r2s2 первого компонента комплемента человека содержит плоскодонную микропанель с сорбированным деринатом и C1q морской свинки, конъюгат пероксидазы с антителами к компоненту С3 комплемента человека, реагент R1, субстратный буфер и стандарт с известной активностью C1r2s2.Example 2. A kit for determining the functional activity of subcomponents C1r 2 s 2 of the first component of a human complement contains a flat-bottomed micropanel with sorbed derinate and C1q guinea pig, a peroxidase conjugate with antibodies to component C3 of the human complement, reagent R1, substrate buffer, and a standard with known C1r 2 activity s 2 .
Из приведенных на чертеже результатов следует, что измеряемая оптическая плотность линейно зависит от активности C1r2s2 с коэффициентом корреляции R2=0,995, что позволяет достоверно определять функциональную активность C1r2s2 описанным способом с использованием описанного набора.From the results shown in the drawing, it follows that the measured optical density linearly depends on the activity of C1r 2 s 2 with a correlation coefficient of R 2 = 0.995, which allows you to reliably determine the functional activity of C1r 2 s 2 in the described manner using the described set.
ЛИТЕРАТУРАLITERATURE
Козлов Л.В., Колесникова Е.А., Дьяков В.Л. Способ определения функциональной активности субкомпонентов C1r2s2 первого компонента комплемента человека. Патент РФ 2251698. Бюл. № 13. 10.05.2005.Kozlov L.V., Kolesnikova E.A., Dyakov V.L. A method for determining the functional activity of subcomponents C1r 2 s 2 of the first component of human complement. RF patent 2251698. Bull. No. 13. 05/10/2005.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010115978/15A RU2425383C1 (en) | 2010-04-22 | 2010-04-22 | METHOD AND KIT FOR IMMUNE-ENZYME FUNCTIONAL ACTIVITY ASSAY ON C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010115978/15A RU2425383C1 (en) | 2010-04-22 | 2010-04-22 | METHOD AND KIT FOR IMMUNE-ENZYME FUNCTIONAL ACTIVITY ASSAY ON C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2425383C1 true RU2425383C1 (en) | 2011-07-27 |
Family
ID=44753679
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010115978/15A RU2425383C1 (en) | 2010-04-22 | 2010-04-22 | METHOD AND KIT FOR IMMUNE-ENZYME FUNCTIONAL ACTIVITY ASSAY ON C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2425383C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2542399C1 (en) * | 2013-11-06 | 2015-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for determining integral functional activity of human complement component c1 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2251698C1 (en) * | 2003-12-09 | 2005-05-10 | Государственное учреждение "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Министерства здравоохранения Российской Федерации" | METHOD FOR DETECTING FUNCTIONAL ACTIVITY OF SUBCOMPONENTS C1r2s2 OF THE FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT |
-
2010
- 2010-04-22 RU RU2010115978/15A patent/RU2425383C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2251698C1 (en) * | 2003-12-09 | 2005-05-10 | Государственное учреждение "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Министерства здравоохранения Российской Федерации" | METHOD FOR DETECTING FUNCTIONAL ACTIVITY OF SUBCOMPONENTS C1r2s2 OF THE FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КОЗЛОВ Л.В., КРЫЛОВА Ю.И., ЧИХ В.П., МОЛЧАНОВА Н.Н. Модифицированные методы определения функциональной активности факторов комплемента С2, С3, С4 и С5, Биоорганическая химия. 1982. т.8. № 5. С.652-659. Arlaud G.J. et. al., Structural biology of C1: dissection of a complex molecular machinery, Immunol Rev., 2001 Apr., 180, pp 136-45. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2542399C1 (en) * | 2013-11-06 | 2015-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for determining integral functional activity of human complement component c1 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108445230B (en) | Procalcitonin chemiluminescence detection reagent based on nano antibody and detection method | |
| RU2417375C2 (en) | Method and set for immune-enzyme assay of functional activity of human complement component c3 | |
| CN101718779A (en) | Kit for detecting immuno-nanogold synchronous scattering spectrum of human serum ceruloplosmin and use method thereof | |
| RU2232991C1 (en) | Method for assay of functional activity of human complement factor d | |
| US9146233B2 (en) | Detecting molecular interactions by fluorescence resonance energy transfer on a solid-phase support | |
| RU2380707C1 (en) | Method and set for immunoenzyme assay of functional activity of component c3 of human complement by alternative pathway of activation | |
| RU2425383C1 (en) | METHOD AND KIT FOR IMMUNE-ENZYME FUNCTIONAL ACTIVITY ASSAY ON C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT | |
| RU2232992C1 (en) | Method for assay of functional activity of human complement component c3 by alternative pathway of activation | |
| WO2011149272A9 (en) | Qualitative and quantitative analytical method for analyzing the activity type of an enzyme that is activated by proteolysis | |
| RU2195662C1 (en) | Method of determining functional activity of human complement c1 inhibitor | |
| RU2405042C1 (en) | Method and kit for immune-enzyme assay of functional activity of human complement component c2 | |
| RU2376606C1 (en) | Method and set for immune-enzyme detection of functional activity of component c4 of human complement | |
| RU2232993C1 (en) | Method for assay of functional activity of human complement factor b | |
| RU2506594C1 (en) | Method and kit for immune-enzyme assay of functional activity of human complement component c3 | |
| RU2376605C1 (en) | Method and set for immune-enzyme detection of functuinal activity of factor d of human complement | |
| RU2413224C1 (en) | METHOD AND SET FOR ELISA DETERMINATION OF FUNCTIONAL ACTIVITY OF HUMAN COMPLEMENT COMPONENT C1q | |
| RU2253118C1 (en) | Determination of functional activity of human complement c4 component | |
| RU2374650C1 (en) | Method and kit for immune-enzyme assay of functional activity of human complement factor b | |
| RU2450275C1 (en) | Method and set for immune-enzyme assessment of functional bypass activity of human complement component c9 | |
| RU2195670C1 (en) | Method of assay of functional activity of component c2 in human complement | |
| RU2235329C1 (en) | METHOD FOR DETERMINATION OF FUNCTIONAL ACTIVITY OF C1r2s2 SUBCOMPONENTS OF THE FIRST HUMAN COMPLEMENT COMPONENT | |
| RU2251698C1 (en) | METHOD FOR DETECTING FUNCTIONAL ACTIVITY OF SUBCOMPONENTS C1r2s2 OF THE FIRST COMPONENT OF HUMAN COMPLEMENT | |
| RU2251697C1 (en) | Method for detecting functional activity of human complement c3 component according to classical way of activation | |
| RU2495432C1 (en) | Method and kit for immune-enzyme assay of functional activity of human complement component c4 | |
| RU2457491C1 (en) | Method and kit for immune-enzyme assessment of functional classical activity of human complement component c9 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170423 |