RU2476440C2

RU2476440C2 - Кристаллические формы мононатриевой соли d-изоглутамил-d-триптофана

Info

Publication number: RU2476440C2
Application number: RU2009134531/04A
Authority: RU
Inventors: Тим Фэт Тэм; Блэйз Н'Земба; Реджис Леунг-Тоунг; Иншэн Ван; Яньцин Чжао; Лили ЮЙ
Original assignee: Апотекс Текнолоджиз Инк.
Priority date: 2007-02-16
Filing date: 2008-02-11
Publication date: 2013-02-27
Also published as: CA2579119A1; CN101663314B; CN103319393B; US8592607B2; CA2579119C; EP2121727A1; EP2121727A4; US8481588B2; US20100029742A1; US20130045930A1; US8207217B2; CN103319394A; US8664262B2; WO2008098355A1; CN101663314A; US20130045929A1; CN103319393A; US20130005987A1; RU2009134531A

Abstract

Настоящее изобретение относится к кристаллическим модификациям: 1 (полиморфная форма F), 2 (полиморфная форма I) и 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), характеризующиеся пиками на порошковой рентгенограмме, представленными в материалах заявки, а также к содержащим их фармацевтическим композициям. Изобретение описывает их применение для лечения различных болезней и состояний организма, по меньшей мере, одного аутоиммунного заболевания, которое выбирают из группы, состоящей из псориаза, атопического дерматита и ревматоидного артрита. Также настоящее изобретение раскрывает способы получения завленных кристаллических модификаций мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), 16 н. и 26 з.п. ф-лы, 4 пр., 9 ил.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к кристаллическим формам мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, способам их получения, фармацевтическим препаратам, содержащим их, а также их применение для лечения различных состояний и заболеваний. Более конкретно, настоящее изобретение относится к кристаллической модификации 1 (полиморфная форма F), кристаллической модификации 2 (полиморфная форма I) и кристаллической модификации 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Соединение D-изоглутамил-D-триптофан (известное также, как H-D-γ-Glu-D-Trp-OH или H-D-iGlu-D-Trp-OH, или iDD, или D-(iEW), или тимодепрессин) представляет собой синтетический геморегулирующий дипептид, имеющий следующую химическую структуру:

.

Тимодепрессин относится к свободным дикислотам. Химической реферативной службой (ХРС) ему присвоен регистрационный номер ® 186087-26-3. Он является иммуносупрессантом и селективно ингибирует пролиферацию клеток костного мозга. Его действие эффективно для подавления иммунной системы во время пересадки костного мозга, органов и тканей (Семина О.В. и др. (2001) Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 131(5), 493-495); для защиты клеток костного мозга и иммунной системы от разрушающего действия химиотерапии и облучения (патенты США №№ 5736519, 6103699 и 6410515); а также для лечения аутоиммунных заболеваний, таких как псориаз и атопический дерматит (Сапунцова С.Г. и др. (май 2002), Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 133(5), 488-490).

Способ получения тимодепрессина описан в примере 1 патентов США №№ 5736519, 6103699 и 6410515. Однако производство тимодепрессина в крупных промышленных масштабах на основе экспериментальных деталей этого способа не представляется возможным, поскольку результатом этого способа является смесь D-глутамил-D-триптофана и D-изоглутамил-D-триптофана, которую затем необходимо разделить и очистить посредством ионообменной хроматографии, что дает в итоге очень низкий (12,25%) выход готового тимодепрессина.

Патенты США №№ 5736519, 6103699 и 6410515 показывают, что описанные в них пептиды могут быть преобразованы в кислотно-аддитивные соли путем реакции с неорганическими кислотами, включая хлористоводородную кислоту, серную кислоту, бромистоводородную кислоту, фосфорную кислоту и т.п., или с органическими кислотами, включая муравьиную кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, пировиноградную кислоту, молочную кислоту, щавелевую кислоту, янтарную кислоту, яблочную кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, салициловую кислоту, бензолсульфоновую кислоту и толуолосульфоновые кислоты. Однако в этих патентах не описаны ни основно-аддитивные соли тимодепрессина, ни способы получения таких солей.

Тимодепрессин не является биодоступным как лекарственное средство для перорального применения в традиционной форме - в виде таблеток или капсул. В настоящее время, являясь твердым, он продается в России в виде динатриевой соли в форме жидкого препарата для инъекций и интраназального введения при лечении псориаза, атопического дерматита и ревматоидного артрита. Твердая форма динатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представляет собой аморфный порошок, обладающий высокой гигроскопичностью, и обращение с ним весьма затруднено. Динатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана имеет молекулярную формулу C₁₆H₁₇N₃Na₂O₅ и следующую химическую структуру:

Динатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана не была идентифицирована регистрационной системой ХРС, не внесена в регистрационный файл XPC^SM и не имеет присвоенного ей регистрационного номера ХРС®. Идентификация и определение структуры динатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана были выполнены посредством инфракрасной (ИК) спектроскопии (Каширин Д.М. и др. (2000), Химико-фармацевтический журнал, 34(11), 619-622). Однако несмотря на то, что динатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана известна, ее получение, выделение и дальнейшая характеристика свойств не описаны.

Путем проведения исследований в своей лаборатории авторы изобретения определили, что лиофилизированная динатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана обладает крайне высокой гигроскопичностью, превращаясь на открытом воздухе в гель за считанные минуты, поэтому обращение с ней весьма затруднено. Использование для фармацевтических потребностей порошковой или аморфной формы соединения может привести к увеличению проблем производства, связанных с вопросами объемной плотности выхода, гигроскопичности и варьирующимся содержанием воды, что не может быть исправлено путем вакуумной сушки. D-изоглутамил-D-триптофан является дипептидом, и высушивание его аморфной формы при повышенной температуре, например, 80-100°C, в вакууме не рекомендуется. Таким образом, способы очистки динатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана и получения чистой динатриевой соли в промышленном масштабе связаны с серьезными трудностями. Кроме того, как уже упоминалось выше, способ ее получения не опубликован.

Мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана идентифицирована регистрационной системой ХРС, занесена в регистрационный файл XPC^SM под регистрационным номером ® 863988-88-9, она имеет следующую химическую структуру:

Однако не существует источников, описывающих мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана, а следовательно, нет публикаций о ней, о ее физических и/или химических свойствах, ее характеристике в твердом состоянии или о способе ее получения и выделения. Таким образом, не существует свидетельств, подтверждающих существование мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Объемная плотность выхода лиофилизированных порошков мононатриевых и динатриевых солей пептидных лекарственных средств может не поддаваться контролю в диапазонах значений, требуемых для формулирования лекарственных средств, что может потребовать значительных вложений в технологию дисперсии на основе сублимационной сушки.

Поэтому существует потребность в разработке фармацевтически приемлемых солей D-изоглутамил-D-триптофана в кристаллической форме. Такие кристаллические соли в общем случае могут быть очищены значительно легче, чем аморфная форма, и могут обладать другими полезными свойствами, например, связанными с их конкретной кристаллической формой, и/или характеристиками растворимости, и/или отсутствием гигроскопичности у них, и/или их характеристиками стабильности, включая свойства термической стабильности и/или их способность противостоять окислительной деструкции.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ранее авторами данной заявки были изобретены способ получения D-изоглутамил-D-триптофана и кристаллического полиморфа, новая стабильная моноаммониевая соль и способ получения этой моноаммониевой соли. Эти вопросы были предметом заявки на патент Канады № 2569204, поданной 28 ноября 2006 года и включенной в настоящую заявку путем ссылки. Авторами также ранее были изобретены кальциевая, магниевая, калиевая и литиевая соли D-изоглутамил-D-триптофана и способы получения этих солей. Эти вопросы были предметом заявки на патент Канады № 2571645, поданной 19 декабря 2006 года и включенной в настоящую заявку путем ссылки.

Для способов производства дипептидных фармацевтических препаратов часто бывает полезно задействовать карбоксильную группу в виде конкретной натриевой соли, обладающей, например, более предпочтительным значением растворимости, более предпочтительными характеристиками абсорбции, лучшей стабильностью, более предпочтительным значением pH, или, в целом, более предпочтительным набором характеристик.

Авторы изобретения установили, что D-изоглутамил-D-триптофан, взаимодействуя с гидроокисью натрия, может образовывать соли, например, мононатриевую соль, в которой атом водорода в карбоновой кислоте замещается ионом натрия, и которая может быть формально представлена формулой III, или динатриевую соль, в которой два атома водорода замещаются двумя атомами натрия, и которая может быть формально представлена формулой II.

Авторами изобретения было проведено исследование видообразования, итоги которого представлены диаграммой на фиг.1. Авторы определили, что для применения в фармацевтических препаратах определенное преимущество имеет мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана, которая может быть формально представлена формулой III, и которая представляет собой главным образом фармацевтическую соль с нейтральным pH. Это преимущество определяется тем, что аминокислота является цвиттер-ионом. Авторы установили, что мононатриевая соль, представленная формулой III, является наиболее предпочтительной солью для получения фармацевтических препаратов. Динатриевая соль, представленная формулой II, является предпочтительней при pH около 12 или выше. Раствор динатриевой соли в воде будет иметь значение pH приблизительно равное 12, и поэтому эта соль не пригодна для применения в жидких препаратах. Доведение pH раствора динатриевой соли до значений в диапазоне приблизительно от 7 до 7,4 фактически дает мононатриевую соль в качестве предпочтительной соли в растворе.

Поэтому целью настоящего изобретения является получение мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в форме, удобной для фармацевтического применения, и полученной при помощи способа, пригодного для осуществления в большом промышленном масштабе.

Стабильную кристаллическую мононатриевую соль можно использовать в фармацевтических препаратах соответствующего состава, и способ введения которых обеспечивает лечебное воздействие, требуемое в данном конкретном случае.

Сейчас авторами изобретения было установлено, что мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана может быть получена в твердой кристаллической форме, пригодной для фармацевтического применения, путем реакции D-изоглутамил-D-триптофана с основными соединениями натрия, например, с гидроокисью натрия. В качестве явных химических эквивалентов гидроокиси натрия могут рассматриваться гидрид натрия, карбонат натрия, бикарбонат натрия, алкоголяты натрия C₁-C₄. Неожиданностью оказалось то, что твердая кристаллическая мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана может быть получена в виде нескольких различных кристаллических модификаций, т.е. в полиморфных формах, которые имеют отличающиеся физико-химические свойства и которые могут быть получены путем регулирования условий реакции и/или кристаллизации. В целом, эти кристаллические модификации могут отличаться друг от друга такими характеристиками, как, например, растворимость, скорость растворения или поведение в способе получения фармацевтического препарата, что позволяет осуществлять производство фармацевтических препаратов с разными наборами свойств из одного исходного соединения.

В соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения представлена мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана в кристаллической форме.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая форма мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана при анализе способом рентгеновской дифракции дает отчетливые пики, имеющие ширину на половине высоты, менее 2º, при измерениях с углом отражения 2θ с использованием CuK_α излучения.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая форма мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представляет собой кристаллическую модификацию 1 (полиморфную форму F).

В другом воплощении настоящего изобретения картина порошковой рентгеновской дифракции (порошковая рентгенограмма) кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана имеет вид, показанный на фиг.2.

Еще в одном воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме при следующих значениях 2θ: 9,23±0,20; 9,91±0,20; 12,41±0,20; 13,76±0,20; 14,87±0,20; 15,75±0,20; 17,88±0,20; 18,78±0,20; 19,57±0,20; 19,84±0,20; 20,31±0,20; 21,32±0,20; 21,55±0,20; 22,95±0,20; 23,45±0,20; 24,34±0,20; 24,96±0,20; 27,49±0,20; 27,94±0,20; 29,27±0,20; 30,07±0,20; 30,43±0,20; 31,29±0,20; 32,25±0,20; 34,07±0,20; 34,94±0,20; 35,53±0,20; 36,08±0,20; 37,21±0,20; 38,17±0,20; 39,19±0,20; и 9,23±0,20.

Еще в одном воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме при следующих значениях 2θ: 9,23±0,10; 9,91±0,10; 12,41±0,10; 13,76±0,10; 14,87±0,10; 15,75±0,10; 17,88±0,10; 18,78±0,10; 19,57±0,10; 19,84±0,10; 20,31±0,10; 21,32±0,10; 21,55±0,10; 22,95±0,10; 23,45±0,10; 24,34±0,10; 24,96±0,10; 27,49±0,10; 27,94±0,10; 29,27±0,10; 30,07±0,10; 30,43±0,10; 31,29±0,10; 32,25±0,10; 34,07±0,10; 34,94±0,10; 35,53±0,10; 36,08±0,10; 37,21±0,10; 38,17±0,10; 39,19±0,10; и 9,23±0,10.

Еще в одном воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется следующей порошковой рентгенограммой, выраженной в терминах межплоскостных расстояний d, углов Брэгга 2θ, и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу наибольшей интенсивности):

2θ (°)	D-расстояние (ангстрем)	Относительная интенсивность (%)
9,23	9,573	2
9,91	8,917	41,3
12,41	7,126	37,6
13,76	6,43	0,8
14,87	5,954	35,8
15,75	5,622	7,6
17,88	4,957	5,5
18,78	4,721	58,9
19,57	4,532	30,9
19,84	4,471	28,1
20,31	4,368	2,9
21,32	4,165	53,5
21,55	4,12	30,3
22,95	3,873	67,4
23,45	3,79	24,5
24,34	3,654	19,4
24,96	3,565	85,2
27,49	3,242	100
27,94	3,19	23,3
29,27	3,049	19,1
30,07	2,97	27,2
30,43	2,935	15,2
31,29	2,856	39,9
32,25	2,774	13
34,07	2,629	19,3
34,94	2,566	7,8
35,53	2,525	5
36,08	2,487	8,4
37,21	2,414	15,5
38,17	2,356	9,1
39,19	2,297	3,1

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая форма мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представляет собой кристаллическую модификацию 2 (полиморфную форму I).

В другом воплощении настоящего изобретения порошковая рентгенограмма кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана имеет вид, показанный на фиг.3.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме при следующих значениях 2θ: 9,65±0,20; 10,41±0,20; 11,2±0,20; 11,71±0,20; 13,45±0,20; 13,93±0,20; 14,44±0,20; 15,61±0,20; 17,01±0,20; 18,18±0,20; 18,65±0,20; 20,02±0,20; 20,85±0,20; 21,39±0,20; 21,73±0,20; 22,52±0,20; 23,27±0,20; 24,3±0,20; 25,84±0,20; 26,82±0,20; 28,49±0,20; 30,18±0,20; 30,76±0,20; 31,49±0,20; 33,03±0,20; 34,55±0,20; 34,97±0,20; 35,74±0,20; 37,25±0,20; 37,71±0,20; и 38,79±0,20.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме при следующих значениях 2θ: 9,65±0,10; 10,41±0,10; 11,2±0,10; 11,71±0,10; 13,45±0,10; 13,93±0,10; 14,44±0,10; 15,61±0,10; 17,01±0,10; 18,18±0,10; 18,65±0,10; 20,02±0,10; 20,85±0,10; 21,39±0,10; 21,73±0,10; 22,52±0,10; 23,27±0,10; 24,3±0,10; 25,84±0,10; 26,82±0,10; 28,49±0,10; 30,18±0,10; 30,76±0,10; 31,49±0,10; 33,03±0,10; 34,55±0,10; 34,97±0,10; 35,74±0,10; 37,25±0,10; 37,71±0,10; и 38,79±0,10.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется следующей порошковой рентгенограммой, выраженной в терминах межплоскостных расстояний d, углов Брэгга 2θ, и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу наибольшей интенсивности):

2θ (°)	D-расстояние (ангстрем)	Относительная интенсивность (%)
9,65	9,161	5,3
10,41	8,492	23,7
11,2	7,897	40,4
11,71	7,549	4,5
13,45	6,58	90,2
13,93	6,351	15,9
14,44	6,128	3,7
15,61	5,672	32,4
17,01	5,207	9,9
18,18	4,876	11,7
18,65	4,755	47,8
20,02	4,432	59,2
20,85	4,257	35,9
21,39	4,15	24,1
21,73	4,086	27,3
22,52	3,945	100
23,27	3,819	13,7
24,3	3,66	32,4
25,84	3,445	69,5
26,82	3,322	82,5
28,49	3,13	30,1
30,18	2,959	58,8
30,76	2,904	86,9
31,49	2,839	35,3
33,03	2,71	8,7
34,55	2,594	17,8
34,97	2,564	43,4
35,74	2,51	8,5
37,25	2,412	28,1
37,71	2,383	28,5
38,79	2,319	16,9

Еще в одном воплощении настоящего изобретения кристаллическая форма мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представляет собой кристаллическую модификацию 3 (полиморфную форму X).

В другом воплощении настоящего изобретения порошковая рентгенограмма кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана имеет вид, показанный на фиг.4.

Еще в одном воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме при следующих значениях 2θ: 9,187±0,200; 11,058±0,200; 11,713±0,200; 12,239±0,200; 13,785±0,200; 14,806±0,200; 15,763±0,200; 17,126±0,200; 17,693±0,200; 18,268±0,200; 18,562±0,200; 19,261±0,200; 20,033±0,200; 20,63±0,200; 21,006±0,200; 21,778±0,200; 22,268±0,200; 23,054±0,200; 23,361±0,200; 23,851±0,200; 24,626±0,200; 24,981±0,200; 25,507±0,200; 26,257±0,200; 26,963±0,200; 27,329±0,200; 27,807±0,200; 28,243±0,200; 28,975±0,200; 29,264±0,200; 29,687±0,200; 30,409±0,200; 30,798±0,200; 31,193±0,200; 31,724±0,200; 32,505±0,200; 32,985±0,200; 33,645±0,200; 34,249±0,200; 34,587±0,200; 35,048±0,200; 35,41±0,200; 35,933±0,200; 36,833±0,200; 37,276±0,200; 37,937±0,200; 38,467±0,200; и 39±0,200.

Еще в одном воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме при следующих значениях 2θ: 9,187±0,100; 11,058±0,100; 11,713±0,100; 12,239±0,100; 13,785±0,100; 14,806±0,100; 15,763±0,100; 17,126±0,100; 17,693±0,100; 18,268±0,100; 18,562±0,100; 19,261±0,100; 20,033±0,100; 20,63±0,100; 21,006±0,100; 21,778±0,100; 22,268±0,100; 23,054±0,100; 23,361±0,100; 23,851±0,100; 24,626±0,100; 24,981±0,100; 25,507±0,100; 26,257±0,100; 26,963±0,100; 27,329±0,100; 27,807±0,100; 28,243±0,100; 28,975±0,100; 29,264±0,100; 29,687±0,100; 30,409±0,100; 30,798±0,100; 31,193±0,100; 31,724±0,100; 32,505±0,100; 32,985±0,100; 33,645±0,100; 34,249±0,100; 34,587±0,100; 35,048±0,100; 35,41±0,100; 35,933±0,100; 36,833±0,100; 37,276±0,100; 37,937±0,100; 38,467±0,100; и 39±0,100.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана характеризуется следующей порошковой рентгенограммой, выраженной в терминах межплоскостных расстояний d, углов Брэгга 2θ, и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу наибольшей интенсивности):

2Θ (°)	D-расстояние (Ангстрем)	Относительная интенсивность (%)
9,187	9,618	25,4
11,058	7,995	2,3
11,713	7,549	18,7
12,239	7,226	34,2
13,785	6,419	23,5
14,806	5,978	13
15,763	5,618	5
17,126	5,173	29,3
17,693	5,009	8,4
18,268	4,852	48,2
18,562	4,776	28,2
19,261	4,604	14,3
20,033	4,429	14,5
20,63	4,302	17,2
21,006	4,226	12
21,778	4,078	2,4
22,268	3,989	100
23,054	3,855	6,4
23,361	3,805	7,4
23,851	3,728	1,8
24,626	3,612	14,9
24,981	3,562	14,7
25,507	3,489	11,1
26,257	3,391	34,3
26,963	3,304	11,1
27,329	3,261	20,6
27,807	3,206	35
28,243	3,157	25,6
28,975	3,079	1,1
29,264	3,049	2,3
29,687	3,007	9,5
30,409	2,937	20,9
30,798	2,901	6,1
31,193	2,865	6,9
31,724	2,818	24,7
32,505	2,752	8
32,985	2,713	12,1
33,645	2,662	26,5
34,249	2,616	15,2
34,587	2,591	8,6
35,048	2,558	4,6
35,41	2,533	3,3
35,933	2,497	15,3
36,833	2,438	8
37,276	2,41	10,8
37,937	2,37	12,7
38,467	2,338	14,7
39	2,308	2,6

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая форма мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представляет собой смесь кристаллической модификации 1 (полиморфная форма F) и кристаллической модификации 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

В другом воплощении настоящего изобретения кристаллическая форма мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представляет собой смесь кристаллической модификации 1 (полиморфная форма F) и кристаллической модификации 3 (полиморфная форма Х) мононатриевой соли Д-изоглутамил-Д-триптофана.

В другом воплощении настоящего изобретения порошковая рентгенограмма смеси кристаллических модификаций 1 (полиморфная форма F) и 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана имеет вид, показанный на фиг.9.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения представлена фармацевтическая композиция, содержащая любую из описанных выше кристаллических форм мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, а также, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения представлен способ получения фармацевтической композиции, содержащей любую из описанных кристаллических форм мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, включающий комбинирование любой из описанных выше кристаллических форм мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана с, по меньшей мере, одним фармацевтически приемлемым носителем.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предлагается применение любой из описанных кристаллических форм мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана без хроматографической очистки при получении фармацевтической композиции.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предлагается применение любой из описанных кристаллических форм мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в качестве средства против псориаза.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предлагается способ получения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в кристаллической форме, включающий стадии:

(a) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде при pH приблизительно от 6,5 до 7,2;

(б) фильтрование раствора с целью удаления твердых частиц;

(в) упаривание воды с целью концентрирования фильтрата; и

(г) добавление изопропанола с целью осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана,

или

(д) перемешивание твердого вещества, полученного на стадиях (a), (б), (в) и (г) способа с этилацетатом; и

(е) фильтрование твердого вещества,

или

после описанных выше стадий (a) и (б) выполняются следующие стадии:

(ж) упаривание фильтрата, полученного на стадии (б), с целью получения твердого вещества;

(з) добавление воды с целью получения раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана; и

(и) упаривание воды в течение периода времени, превышающего 5 часов для получения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в кристаллической форме,

или

(к) получение раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в метаноле;

(л) фильтрование раствора с целью удаления твердых частиц; и

(м) добавление изопропанола с целью осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана,

или

(н) получение раствора моноаммониевой соли D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде,

после чего выполняются описанные выше стадии (б), (в) и (г).

В одном из воплощений настоящего изобретения, когда способ включает стадии (a), (б), (в) и (г), продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно от 1,5 до 16 часов.

В другом воплощении настоящего изобретения, когда способ включает стадии (a), (б), (в) и (г), продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно 1 час.

В другом воплощении настоящего изобретения, когда способ включает стадии (a), (б), (в), (г), (д) и (е), продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно 1 час, а продолжительность перемешивания в этилацетате на стадии (е) составляет приблизительно 2,5 часа.

В другом воплощении настоящего изобретения, когда способ включает стадии (a), (б), (ж), (з) и (и), на стадии (з) добавляют воду из расчета приблизительно от 18 до 22 мл воды на каждый грамм мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, а продолжительность упаривания на стадии (и) составляет приблизительно от 5 до 6 часов при температуре упаривания в диапазоне приблизительно от 30 до 35°C.

В другом воплощении настоящего изобретения, когда способ включает стадии (к), (л) и (м), на стадии (к) берется приблизительно от 11 до 13 мл метанола на каждый 1 г мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, а отношение изопропанола к метанолу на стадии (м) составляет приблизительно 0,4-0,6 мл к 1 мл.

В другом воплощении настоящего изобретения, когда способ включает стадии (н), (б), (в) и (г), продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно от 12 до 16 часов.

Другие и дальнейшие преимущества и особенности настоящего изобретения станут понятными для специалистов в данной отрасли из последующего подробного описания изобретения, поданного совместно с сопутствующими чертежами.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Сопутствующие фигуры представляют собой:

Фиг.1 - диаграмма видообразования дипептида H-D-iGlu-D-Trp-OH и его соли, вычисленная на основе экспериментально определенных значений pKa кислотных и аминных групп.

Фиг.2 - характеристическая порошковая рентгенограмма кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.3 - характеристическая порошковая рентгенограмма кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.4 - характеристическая порошковая рентгенограмма кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.5 - характеристический спектр инфракрасного (ИК) поглощения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.6 - характеристический спектр инфракрасного (ИК) поглощения кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.7 - характеристический спектр инфракрасного (ИК) поглощения кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.8 представляет собой сравнение порошковой рентгенограммы кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F), кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Фиг.9 - характеристическая порошковая рентгенограмма смеси кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем описании D-изоглутамил-D-триптофан представлен в виде дипептида

Химия аминокислот или простых дипептидов усложняется тем фактом, что группа -NH₂ представляет собой основание, а группа -CO₂H представляет собой кислоту. Поэтому в водном растворе ион H⁺ переходит от одного конца молекулы на другой, образуя цвиттер-ионы.

Цвиттер-ионы являются одновременно и электрически заряженными, и электрически нейтральными. Они содержат положительные и отрицательные заряды, однако, общий заряд молекулы равен нулю. Хотя и не в полном соответствии с теоретическим обоснованием, аминокислотная группа iGlu молекулы H-D-iGlu-D-Trp-OH существует в виде цвиттер-иона, и, следовательно, для образования соли остается только одна группа -CO₂H, когда только один эквивалент одновалентной гидроокиси натрия используется для доведения pH к нейтральным значениям. Если мононатриевую соль H-D-iGlu-D-Trp-OH согласно формуле III представить в показанном выше формате, то только одна группа CO₂H способна принять один атом металла натрия, что дает в результате соль согласно формуле III. В соединении формулы (III) катион натрия замещает один атом водорода в той части соединения формулы (I), которая представляет собой карбоновую кислоту.

Фиг.1 представляет собой диаграмму видообразования дипептида H-D-iGlu-D-Trp-OH и его соли, вычисленную при помощи программы Hyperquad Simulation & Speciation с использованием полученных на основе эксперимента значений pKa кислотных и аминных групп. LH₂=H-D-iGlu-D-Trp-OH в дикислотной форме, представленной соединением формулы I, LH=соль монокарбоновой кислоты, такая, как мононатриевая соль, представленная соединением формулы III, L=соль дикарбоновой кислоты, такая, как динатриевая соль, представленная соединением формулы II, LH₃=кислотно-аддитивная соль соединения H-D-iGlu-D-Trp-OH, например, такая, как моногидрохлоридная соль соединения формулы I, где к группе NH₂ добавляется протон. На оси Х представлены значения pH раствора. По оси Y определяются молярные доли видов соединений, присутствующих при конкретных значениях pH. Следует отметить: доля вида соединения в % по отношению к L представляет собой терминологию программы, принятую по умолчанию. Концентрация 0,5 M используется для того, чтобы отразить эквивалентность 1 г тимодепрессина в 6 мл воды во время способа выделения. Эта фиг.1 показывает, что практически 100% тимодепрессина находится в форме мононатриевой соли в воде при pH в диапазоне приблизительно от 7,0 до 7,4.

Настоящее изобретение направлено на новую мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана согласно формуле (III), новые кристаллические формы мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, включая новую кристаллическую модификацию 1 (полиморфную форму F), новую кристаллическую модификацию 2 (полиморфную форму I) и новую кристаллическую модификацию 3 (полиморфную форму Х).

Настоящее изобретение также направлено на способ получения новой кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F), новой кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I), новой кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X), а также смеси новых кристаллических модификаций 1 и 3 мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, причем этот способ включает следующие стадии:

(a) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде при pH приблизительно от 6,5 до 7,0;

(в) упаривание воды с целью концентрирования фильтрата;

или

описанные выше стадии (a), (б), (в) и (г), после которых следуют стадии:

(д) перемешивание твердого вещества, полученного на стадиях (a), (б), (в) и (г) способа, с этилацетатом; и

(е) фильтрование твердого вещества,

или

описанные выше стадии (a) и (б), после которых выполняются стадии:

(ж) упаривание воды из фильтрата, полученного на стадии (б) с целью получения твердого вещества;

(и) упаривание воды в течение периода времени, превышающего 5 часов, для получения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в кристаллической форме,

или

(л) фильтрование раствора с целью удаления твердых частиц;

или

В предпочтительном варианте способ, включающий описанные выше стадии (а), (б), (в) и (г), применяется для получения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана. Этот способ включает следующие стадии:

(а) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде;

(г) добавление изопропанола с целью осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

В зависимости от отношения объема изопропанола к объему раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, а также от концентрации раствора и времени перемешивания, в результате этого способа могут быть получены чистая кристаллическая модификация 1 или чистая кристаллическая модификация 2. На основании вычисленных данных для диаграммы видообразования, показанной на фиг.1, видно, что значение pH раствора на стадии (a) до перехода к этапу (б) должно находиться в диапазоне приблизительно от 6,5 до 7,2, оптимальным было бы значение 7,0.

Раствор D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде получают путем добавления твердого D-изоглутамил-D-триптофана в раствор гидроокиси натрия. D-изоглутамил-D-триптофан обладает ограниченной растворимостью в воде (<20 мг на 1 мл воды), однако, натриевая соль прекрасно растворяется в воде. Гидроокись натрия выбрана, исходя из удобства получения раствора гидроокиси натрия, однако, можно применять и другие натриевые основания, такие как гидрид натрия, карбонат натрия, бикарбонат натрия. Эти химические вещества являются очевидными химическими эквивалентами гидроокиси натрия для выполнения стадии (а) способа. На стадии (б) раствор фильтруют для удаления каких-либо твердых частиц до перехода к стадии (в).

В способе получения кристаллической модификации 1 концентрацию фильтрата, полученного на стадии (б), увеличивают на стадии (в) для удаления воды и достижения значения концентрации приблизительно от 1,3 до 3 ммоль/мл растворенного вещества в растворе. Растворенное вещество представляет собой мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана. Для осаждения этой мононатриевой соли применяется антирастворитель. В нашем случае антирастворитель представляет собой такой растворитель, который приводит к выпадению в осадок растворенного вещества. Примерами антирастворителей, пригодных для применения в настоящем изобретении, являются изопропанол и алканол C₁-C₄. В предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения в качестве антирастворителя для осаждения мононатриевой соли используется изопропанол. На стадии (г) на каждый 1 мл натриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в воде добавляют приблизительно от 30 до 40 мл изопропанола для того, чтобы инициировать осаждение кристаллической модификации 1 мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана. Длительность перемешивания составляет приблизительно от 1,5 до 16 часов, более предпочтительный диапазон значений - приблизительно от 12 до 16 часов. Твердое вещество отделяют путем фильтрования и высушивают в вакуумной печи в условиях высокого вакуума. Предпочтительная температура сушки составляет приблизительно от 40 до 45°C, а предпочтительное значение вакуума - ниже 8 мм рт.ст. Еще более предпочтительно, чтобы значение применяемого вакуума было ниже 5 мм рт.ст.

В способе получения кристаллической модификации 2 фильтрат, полученный на стадии (б), затем подвергается повышению его концентрирования на стадии (в) для удаления воды и достижения значения концентрации растворенного вещества в растворе приблизительно от 3 до 18 ммоль/мл. Растворенное вещество представляет собой мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана. Для осаждения мононатриевой соли применяется изопропанол в качестве антирастворителя. Для осаждения кристаллической модификации 2 мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана добавляют приблизительно 40 мл изопропанола на 1 мл мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в воде. Длительность перемешивания составляет приблизительно 1 час. Твердое вещество отделяют путем фильтрования и высушивают в вакуумной печи в условиях высокого вакуума. Предпочтительная температура сушки составляет приблизительно от 40 до 45°C, а предпочтительное значение вакуума - ниже 8 мм рт.ст. Еще более предпочтительно, чтобы значение вакуума было ниже 5 мм рт.ст.

Не ограничиваясь теоретическими сведениями, авторы изобретения тем не менее определили, что в способе осаждения при помощи изопропанола на стадии (г) важную роль в вопросе определения того, какая из кристаллических модификаций - 1 или 2 - будет составлять продукт реакции, играет длительность перемешивания. Результатом непродолжительного перемешивания (в течение одного часа или менее одного часа) является кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I), а результатом длительного перемешивания продолжительностью около 16 часов является кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F). Выход кристаллической модификации также зависит от концентрации мононатриевой соли в растворе и от количества изопропанола, добавленного в качестве антирастворителя. Подробные данные об условиях эксперимента можно найти в примерах 1 и 2, описанных ниже.

Авторами изобретения было также установлено, что если осаждение мононатриевой соли формулы III при концентрации приблизительно 3 ммоль/мл из раствора в воде осуществляется при помощи изопропанола, в результате может быть получена смесь кристаллической модификации 1 (полиморфная форма F) и кристаллической модификации 3 (полиморфная форма X). Если эту смесь перемешать с этилацетатом и затем профильтровать, то конечная кристаллическая форма будет представлена главным образом кристаллической модификацией 1, а более подробная информация по эксперименту представлена в описанном ниже примере 4В.

Таким образом, в предпочтительном варианте способ получения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана включает следующие стадии:

(б) фильтрование раствора с целью удаления твердых включений;

(г) добавление изопропанола с целью осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана;

(д) перемешивание твердого вещества, полученного на стадии (г), с этилацетатом; и

(е) фильтрование твердого вещества.

Наличие кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) в смеси с кристаллической модификацией 1 (полиморфной формой F) потребовало проведения дальнейших исследований, которые привели к изобретению двух способов для получения кристаллической модификации 3.

В предпочтительном варианте способ получения кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана включает описанные выше стадии (a), (б), (ж), (з) и (и). Более конкретно, этот способ включает следующие стадии:

(ж) упаривание фильтрата, полученного на стадии (b) с целью получения твердого вещества;

(з) добавление воды с целью получения раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана;

(и) упаривание воды в течение периода времени, превышающего 5 часов, для получения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в кристаллической форме.

Процедура выполнения стадий (a) и (б) такая же, как описанная выше. На стадии (ж) на каждый 1 г мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана добавляют приблизительно от 18 до 22 мл воды для получения раствора. Медленное упаривание растворителя в условиях пониженного давления дает возможность образования кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана. На стадии (з) выполняется упаривание растворителя в круглодонной колбе при помощи роторного испарителя в условиях вакуума. Предпочтительная температура наружной водяной бани для упаривания растворителя составляет приблизительно от 30 до 35°C, предпочтительное значение вакуума приблизительно от 14 до 20 мм рт. ст., а предпочтительная продолжительность упаривания составляет приблизительно от 5 до 7 часов.

В альтернативном, но также предпочтительном, способе для получения кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана применяется способ, включающий стадии (к), (л) и (м). Более конкретно, этот способ включает следующие стадии:

(м) добавление изопропанола с целью осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

Стадия (к) представляет собой получение раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в метаноле путем растворения твердой мононатриевой соли (в любой полиморфной форме) в метаноле. Для осуществления растворения применяется нагревание полученной суспензии в метаноле. Предпочтительное значение концентрации растворяемого вещества (мононатриевой соли) составляет 1 г растворяемого вещества примерно на 11-13 мл метанола. Затем на стадии (л) нерастворившиеся частицы отфильтровывают. На стадии (м) добавляют изопропанол из расчета приблизительно от 0,4 до 0,6 мл изопропанола на каждый 1 мл раствора в метаноле. Нерастворенный материал выделяется путем фильтрации всасыванием и представляет собой кристаллическую модификацию 3 (полиморфную форму Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

В другом варианте воплощения настоящего изобретения мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана может быть получена путем обменной реакции моноаммониевой соли D-изоглутамил-D-триптофана с гидроокисью натрия. Этот способ включает описанные выше стадии (н), (б), (в) и (г) и выполняется следующим образом:

(н) получение раствора моноаммониевой соли D-изоглутамил-D-триптофана с гидроокисью натрия в воде;

На стадии (н) моноаммониевая соль D-изоглутамил-D-триптофана смешивается с гидроокисью натрия в соотношении приблизительно 1:1 в воде. На стадии (б) полученный раствор фильтруется. Следует отметить, что на стадии (н) происходит выделение гидроокиси аммония. Поэтому уровень рН превышает значение 7,5. Нет необходимости в корректировке уровня pH. Далее концентрация фильтрата повышается до достижения значений в диапазоне приблизительно от 0,25 до 0,5 г растворенного вещества (мононатриевой соли) на 1 мл воды. На стадии (г) для осаждения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в раствор, полученный на стадии (в), добавляют изопропанол из расчета приблизительно 15-30 мл изопропанола на 1 мл раствора.

Как описано в примере 4 настоящего изобретения, путем варьирования условий реакции D-изоглутамил-D-триптофана с гидроокисью натрия можно получить смешанный полиморф мононатриевой соли, содержащий кристаллические модификации 1 и 3. В качестве составной части настоящего изобретения авторы изобретения проиллюстрировали в примере 4 преобразование смеси кристаллических модификаций 1 и 3 в основном в кристаллическую модификацию 1 путем перемешивания твердого вещества в этилацетате.

Как в целом описывалось выше для способа получения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, при выполнении данного способа, а также других описанных здесь способов, преимущества дает дополнительное добавление изопропанола к водному раствору натриевой соли с целью выделения натриевой соли в виде твердого кристаллического вещества.

Установлено, хотя и без теоретического обоснования, что перемешивание с изопропанолом в течение непродолжительного периода времени (обычно не более часа) дает в результате кристаллическую модификацию 2 (полиморфную форму I) мононатриевой соли формулы III. Перемешивание в течение продолжительного времени (до 16 часов) дает в результате кристаллическую модификацию 1 (полиморфную форму F). В тех случаях, когда в результате способа получают смесь кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X), чистую кристаллическую модификацию 1 можно получить путем перемешивания смеси в этилацетате.

Если раствор мононатриевой соли получают в метаноле, то применение изопропанола в качестве антирастворителя дает возможность получить кристаллическую модификацию 3 по настоящему изобретению.

Фармакологические свойства мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана и кристаллических модификаций 1, 2 и 3, а также возможности их применения для лечения и профилактики нарушений в организме, соответствуют, при условии, что эти вещества присутствуют в целевом органе или в целевой клетке в растворенной форме, независимо от их изначальной формы твердого вещества, свойствам, описанным для тимодепрессина и его динатриевой соли, описанным во многих источниках, в частности, в патентах США №№ 5736519, 6103699 и 6410515l, в работах Семиной О.В. и др. (2001), Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 131(5), 493-495); а также Сапунцовой С.Г. и др. (май 2002), Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 133(5), 488-490).

Действие кристаллических модификаций 1, 2 и 3 может быть исследовано, например, при помощи фармакологических моделей, описанных, в частности, в патентах США №№ 5736519, 6103699 и 6410515, в работах Семиной О.В. и др. (2001), Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 131(5), 493-495); а также Сапунцовой С.Г. и др. (май 2002), Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 133(5), 488-490), которые включены сюда путем ссылки, и соответствующие разделы которых представляют собой часть настоящего описания.

Кристаллические модификации мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по настоящему изобретению могут использоваться в качестве фармацевтических средств для животных, предпочтительно для млекопитающих и, в частности, для людей, как в чистом виде, так и в виде смесей этих модификаций друг с другом или в виде фармацевтических препаратов (или фармацевтических композиций). Поэтому настоящее изобретение относится также к кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана и кристаллическим модификациям мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана для применения в качестве фармацевтических средств, к их применению в качестве средств против псориаза и, в особенности, к их применению в качестве иммуносупрессантов, а также к их применению для производства лекарственных средств на их основе. Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим препаратам, содержащим в качестве активных составляющих эффективную дозу кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, в частности, мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в форме одной или нескольких кристаллических модификаций 1, 2 и 3 и, по меньшей мере, один приемлемый фармацевтический носитель, то есть одно или несколько веществ, способствующих доставке в нужную точку организма, и/или эксципиентов. Эти фармацевтические препараты содержат, например, мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана в форме кристаллической модификации 1, а также, по меньшей мере, один приемлемый фармацевтический носитель, или мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана в форме кристаллической модификации 2, а также, по меньшей мере, один приемлемый фармацевтический носитель, или же мононатриевую соль D-изоглутамил-D-триптофана в форме кристаллической модификации 3, а также, по меньшей мере, один приемлемый фармацевтический носитель, или, например, комбинацию из двух кристаллических модификаций по настоящему изобретению, таких, как кристаллические модификации 1 и 2 или кристаллические модификации 1 и 3 или кристаллические модификации 2 и 3, в каждом случае вместе с, по меньшей мере, одним фармацевтически приемлемым носителем.

ПРИМЕНЕНИЕ И ВВЕДЕНИЕ

Динатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана нашла применение в лечении псориаза, атопического дерматита и ревматоидного артрита. Поэтому мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана по настоящему изобретению может применяться в фармацевтических композициях для введения пациентам в количествах, эффективных с терапевтической точки зрения и в биологически приемлемой форме для введения in vivo, т.е. в форме пептидов, терапевтическое воздействие от применения которых значительно превосходит вызванную ими токсичность.

В соответствии с диаграммой видообразования, показанной на фиг.1, доминирующим видом при нейтральном pH является монокарбоновая форма тимодепрессина, то есть мононатриевая соль дипептида D-изоглутамил-D-триптофана в том случае, если противоионом является натрий. Динатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана имеет крайне высокую гигроскопичность, и ее очень трудно дозировать. В зависимости от концентрации динатриевой соли в растворе pH раствора превышает значение 8,2. Значение pH раствора, содержащего 100% динатриевой соли, превышает 11,5 как показано на диаграмме видообразования (фиг.1). Раствор с высоким pH не подходит для введения в человеческий организм. Регулировка pH от значения приблизительно 7,2 до 7,4 при помощи неорганической кислоты означает введение в препарат дополнительной соли, например хлорида натрия.

Кристаллические формы мононатриевой соли являются идеальными кандидатами для замены динатриевой соли при получении различных лекарственных препаратов. Введение этих описанных здесь новых кристаллических солей по настоящему изобретению может осуществляться любым из приемлемых способов введения лекарственных средств системного действия. К этим способам относятся пероральное, парентеральное или другое системное введение в организм в целом, введение в аэрозольной или в местной форме.

В зависимости от назначенного способа введения эти композиции могут применяться в виде твердых, полутвердых или жидких дозированных форм, например, в виде таблеток, подъязычных таблеток, суппозиториев, пилюль, капсул, порошков, жидкостей, аэрозолей, суспензий и т.п., предпочтительно в единичных дозированных формах, удобных для одного введения точно назначенных доз. В состав этих композиций будет входить, по меньшей мере, один приемлемый фармацевтический носитель или экципиент, а также кристаллический D-изоглутамил-D-триптофан мононатрия, кроме того, они также могут включать другие лекарственные средства, фармацевтические средства, носители, адъюванты и т.п.

К традиционным нетоксичным твердым носителям, которые могут применяться в составе твердых композиций, относятся, например, соответствующие фармацевтическим стандартам маннит, лактоза, крахмал, стеарат магния, сахарин натрия, тальк, целлюлоза, глюкоза, сахароза, карбонат магния и другие. Как отмечалось выше, активное вещество может находиться в дозированной форме, представляющей собой суппозитории, включающие в качестве носителя, например, полиалкиленгликоли или пропиленгликоль. Жидкие фармацевтические композиции, предназначенные для введения в организм, можно получить, например, путем растворения, диспергирования и т.п. описанного выше активного вещества и необязательно фармацевтических адъювантов в носителе, например, в воде, солевом растворе, в водном растворе декстрозы, в глицерине, в этиловом спирте и т.п., в результате чего образуется раствор или суспензия. При необходимости фармацевтические композиции, предназначенные для введения, могут также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, буферные агенты для контроля уровня pH и т.п., к которым относятся, например, ацетат натрия, сорбитанмонолаурат, триэтаноламин ацетата натрия, триэтаноламин олеата и др. Практические способы получения таких дозированных форм известны специалистам в данной области, они также описаны, например, в работе Ремингтона: The Science and Practice of Pharmacy, 21^st Edition, 2006, Part 5, Pharmaceutical Manufacturing, Chapters 37, 39, 41-47 and 50, pp. 702-719, 745-775, 802-938, and 1000-1017 (прежнее название Remington's Pharmaceutical Sciences), David B. Troy (Ed.), Lipincott Williams & Wilkins, Baltimore, Maryland. В любом случае, в состав такой композиции или препарата, предназначенных для введения в организм, будет входить активное вещество (вещества) в количестве, достаточном для эффективного воздействия на симптомы у субъекта лечения.

Парентеральное введение в общем случае представляет собой инъекцию, которая может быть подкожной, внутримышечной или внутривенной. Препараты для инъекции могут быть получены в удобной форме - это могут быть жидкие растворы или суспензии, твердые формы, пригодные для приготовления раствора или суспензии в жидкости перед инъекцией, а также эмульсии. К приемлемым эксципиентам относятся, например, вода, солевой раствор, декстроза, глицерин, этиловый спирт и другие. Кроме того, при необходимости, фармацевтические композиции, предназначенные для введения, могут также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, буферные агенты для контроля уровня pH и т.п., к которым относятся, например, ацетат натрия, сорбитан монолаурат, триэтаноламин олеата и другие.

Предпочтительными путями введения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана являются либо оральный, либо назальный (бронхиальный), в зависимости от природы нарушения, которое подлежит лечению.

Для орального введения изготовляется нетоксичная фармацевтически приемлемая композиция, включающая любой из традиционно применяемых эксципиентов, таких как соответствующие фармацевтическим стандартам маннит, лактоза, крахмал, стеарат магния, сахарин натрия, тальк, целлюлоза, глюкоза, сахароза, карбонат магния и т.п. Такие композиции могут быть получены в форме растворов, суспензий, таблеток, пилюль, капсул, порошков, препаратов с замедленным высвобождением и т.п. Активный ингредиент в таких композициях может составлять приблизительно от 1 до 95%, в предпочтительном варианте этот диапазон составляет приблизительно от 25 до 70%.

Для введения в легкие путем орального или назального применения могут использоваться также аэрозольные формы доставки. Для введения аэрозольным способом желательно, чтобы активный ингредиент находился в мелкодисперсной форме вместе с поверхностно-активным веществом и пропеллентом. Типичные значения содержания активных ингредиентов находятся в диапазоне приблизительно от 0,01 до 20 мас.%, предпочтительно 0,04 до 1,0 мас.%.

Естественно, поверхностно-активные вещества должны быть нетоксичными и, желательно, растворимыми в аэрозольном носителе. Представителями таких агентов являются эфиры и частичные эфиры жирных кислот, содержащих от 6 до 22 атомов углерода, таких как капроновая, октановая, лауриновая, пальмитиновая, стеариновая, линолевая, линоленовая, олестеариновая и олеиновая кислоты, с алифатическим многоатомным спиртом или его циклическим ангидридом, таким как этиленгликоль, глицерин, эритрит, арабитол, маннит, сорбит, ангидриды гексита, полученные из сорбита (сложные эфиры сорбитана, имеющиеся в продаже под торговой маркой SPANS®), а также полиоксиэтиленовые и полиоксипропиленовые производные этих сложных эфиров. Могут также использоваться смешанные эфиры, например, смешанные или природные глицериды. Из поверхностно-активных агентов наиболее предпочтительными являются олеаты или сорбитан, например, имеющиеся в продаже под торговыми марками ARLACEL® C (сорбитана полутороолеат), SPAN® 80 (сорбитана моноолеат) и SPAN® 85 (сорбитана триолеат). Массовая доля поверхностно-активного вещества в композиции может составлять приблизительно от 0,1 до 20 мас.%, предпочтительным является диапазон значений приблизительно от 0,25 до 5 мас.%.

Остальную часть композиции обычно составляет аэрозольный носитель. Сжиженные аэрозольные носители в условиях окружающей среды обычно являются газами и конденсируются под давлением. К примерам приемлемых сжиженных аэрозольных носителей относятся низшие алканы, содержащие до пяти атомов углерода, такие как бутан и пропан, и, предпочтительно, фторированные или фторхлорированные алканы, например, имеющиеся в продаже под торговой маркой FREON®. Могут также применяться смеси вышеупомянутых веществ.

При производстве аэрозоля баллончик с подходящим клапаном заполняется соответствующим аэрозольным носителем, содержащим мелкодисперсный активный ингредиент и поверхностно-активное вещество. Таким образом, ингредиенты композиции будут находиться под высоким давлением до нажатия клапана.

Для местного введения эти композиции включают эффективное количество активного вещества этого класса в смеси с приемлемым нетоксичным фармацевтическим носителем. Приемлемый диапазон значений доли активного ингредиента в композиции составляет приблизительно от 0,1 до 10%, а остальную часть составляет носитель, более предпочтительное значение доли активного ингредиента приблизительно от 1 до 2%. Концентрация активного ингредиента в фармацевтических композициях, пригодных для местного применения, будет варьировать в зависимости от конкретной активности используемого активного вещества в сочетании с состоянием пациента, которому вводится композиция. Приемлемыми носителями или средствами медикаментозной доставки для местного введения этих веществ являются кремы, мази, лосьоны, эмульсии, растворы и т.п.

Например, приемлемая мазь для местного нанесения соединений по настоящему изобретению содержит приблизительно от 15 до 45 процентов насыщенного жирного спирта, содержащего от 16 до 24 атомов углерода в молекуле, например, цетилового спирта, стеарилового спирта или бегенилового спирта, а также от 45 до 85 мас.% гликолевого растворителя, такого как пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, дипропиленгликоль, а также их смеси. Мазь может также содержать от 0 до 15 мас. процентов пластификатора, например, такого, как полиэтиленгликоль, 1,2,6-гексантриол, сорбит, глицерин и т.п.; приблизительно от 0 до 15 мас. процентов связующего вещества, например, насыщенной жирной кислоты, содержащей от 16 до 24 атомов углерода, такой как стеариновая кислота, пальмитиновая кислота, бегеновая кислота, амид жирной кислоты, такого как олеамид, пальмитамид, стеарамид, бегенамид, а также сложного эфира жирной кислоты, содержащей от 16 до 24 углеродных атомов, такого как моностеарат сорбита, моностеарат полиэтиленгликоля, полипропиленгликоль или соответствующего моноэфира других жирных кислот, таких как олеиновая кислота и пальмитиновая кислота; а также приблизительно от 0 до 20 мас.% вещества, способствующего проникновению, например, диметилсульфоксида или диметилацетамида.

Терапевтически активное количество кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана может варьироваться в зависимости от таких факторов, как стадия болезни, возраст, пол и вес пациента. Режим дозирования также можно изменять для получения оптимального терапевтического эффекта. В общем случае доза ежедневного приема должна составлять приблизительно от 1 до 200 мг пептида.

Ниже приведены иллюстративные примеры композиций, которые ни в коей мере не ограничивают объем изобретения при получении различных фармацевтических композиций.

Ингредиенты	Количество в одной таблетке, мг
Активный ингредиент	25
Лактоза, высушенная распылением	20
Кукурузный крахмал	153
Стеарат магния	2

Представленные выше ингредиенты тщательно перемешиваются и прессуются в таблетку с одной насечкой.

Ингредиенты	Количество в одной таблетке, мг
Активный ингредиент	100
Лактоза, высушенная распылением	148
Стеарат магния	2

Представленные выше ингредиенты смешиваются и заключаются в капсулу с оболочкой из твердого желатина

Ингредиенты	Количество в одной таблетке, мг
Активный ингредиент	200
Лактоза	145
Кукурузный крахмал	50
Стеарат магния	5

Представленные выше ингредиенты тщательно перемешиваются и прессуются в таблетку с одной насечкой

Ингредиенты	Количество в одной таблетке, мг
Активный ингредиент	108
Лактоза	15
Кукурузный крахмал	25
Стеарат магния	2

Ингредиенты	Количество в одной таблетке, мг
Активный ингредиент	150
Лактоза	92

Представленные выше ингредиенты смешиваются и заключаются в капсулу с оболочкой из твердого желатина.

Препарат для инъекций с уровнем pH, отрегулированным с помощью буфера до значения 7, получен в следующем составе:

Ингредиенты
Активный ингредиент	0,2 г
KH₂PO₄	2 мл
KOH (1 н.)	количество до получения pH 7
Вода (дистиллированная, стерильная)	количество до получения 20 мл

Ингредиенты
Активный ингредиент	0,01 г
Вода (дистиллированная, стерильная)	количество до получения 1 мл
NaOH (0,2 н.)	количество до получения pH 7

Суспензия для орального введения приготовлена в следующем составе:

Ингредиенты
Активный ингредиент	0,1 г
Фумарова кислота	0,5 г
Метил парабен	2,0 г
Гранулированный сахар	0,1 г
сорбит (70% раствор)	25,5 г
Veegum K (Vanderbilt Co.)	12,85 г
Ароматизирующее вещество	1,0 г
Красители	0,035 мл
Дистиллированная вода	количество до получения 100 мл

Форма для местного применения

Ингредиенты	Граммы
Активное вещество	0,2-2
Span 60	2
Tween 60	2
Минеральное масло	5
Петролатум	10
Метил парабен	0,15
Пропил парабен	0,05
БГА (бутилированный гидроксианизол)	0,01
Дистиллированная вода	количество до получения 100 мл

Все представленные выше ингредиенты, кроме воды, смешиваются и нагреваются до 45 градусов по Цельсию при перемешивании. Затем добавляется необходимое количество нагретой до 45 градусов по Цельсию воды при сильном перемешивании с целью получения эмульсии из ингредиентов, затем вода добавляется до получения 100 г эмульсии.

Более подробно предпочтительные варианты выполнения изобретения проиллюстрированы на следующих примерах, которые не следует воспринимать в качестве ограничения по отношению к ниже прилагаемой формуле изобретения.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

Получение кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1)

Способ A: Из моноаммониевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) и гидроокиси натрия

Раствор H-D-iGlu-D-Trp-OH, моноаммониевой соли (1:1), (496 мг, 1,34 ммоль) и 1N гидроокиси натрия (1,4 мл, 1,40 ммоль) в воде (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Прореагировавшую смесь подвергли упариванию при пониженном давлении до остаточного количества растворителя 1-2 мл. После охлаждения до комнатной температуры добавляли изопропанол (30 мл) до выпадения твердого осадка. Полученную суспензию перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего твердое вещество отделили посредством фильтрации всасыванием. Это твердое вещество промывали изопропиловым спиртом (2×40 мл), а затем высушивали в течение ночи в печи при температуре 44°C. Был получен грязно-белый порошок (462 мг, выход 97%). Этот материал получил название кристаллической модификации 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1).

Содержание воды в этом материале, определенное с помощью теста Карла-Фишера, составляло 3,4%.

МС (м/з): 356,0 [M]⁺, 334,1 [C₁₆H₂₀N₃O₅]⁺, 187,9 (100%).

Порошковая рентгенограмма для этого материала показана на фиг.2. Эту порошковую рентгенограмму также можно выразить в параметрах межплоскостных расстояний d, Брэгговского угла 2θ, и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу максимальной интенсивности) следующим образом:

2Θ (°)	D-расстояние (ангстрем)	Относительная интенсивность (%)
9,23	9,573	2
9,91	8,917	41,3
12,41	7,126	37,6
13,76	6,43	0,8
14,87	5,954	35,8
15,75	5,622	7,6
17,88	4,957	5,5
18,78	4,721	58,9
19,57	4,532	30,9
19,84	4,471	28,1
20,31	4,368	2,9
21,32	4,165	53,5
21,55	4,12	30,3
22,95	3,873	67,4
23,45	3,79	24,5
24,34	3,654	19,4
24,96	3,565	85,2
27,49	3,242	100
27,94	3,19	23,3
29,27	3,049	19,1
30,07	2,97	27,2
30,43	2,935	15,2
31,29	2,856	39,9
32,25	2,774	13
34,07	2,629	19,3
34,94	2,566	7,8
35,53	2,525	5
36,08	2,487	8,4
37,21	2,414	15,5
38,17	2,356	9,1

Образцы в виде порошка были приготовлены при помощи обычной технологии фронтальной упаковки и исследованы на системе дифрактометрии D8 Discovery с источником Cu-kα, работающим в режиме 45 kV/45 mA. Система оснащена пропорциональным 2D - детектором (GADDS). Данные исследования были собраны на двух кадрах с выдержкой 600 сек для каждого, результат охватывает диапазон 3-35° (2-θ). Затем полученные 2D-изображения дифракции были объединены и обработаны для получения стандартных картин дифракции, показывающих зависимость между I и 2θ. Эти данные были затем обработаны с помощью различных программ обработки данных Bruker AXS, включая: EVA™ 8.0 and TOPAS™ v. 2.1 (для выполнения анализа совпадений с приложениями, в случае необходимости). Все порошковые рентгенограммы, представленные в настоящем описании, были получены с помощью описанных выше технологии, оборудования и режимов.

Спектр этого материала, полученный по способу спектроскопии ПФ-ИК (KBr)-, показан на фиг.5.

Способ B: Из D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия.

В круглодонную колбу объемом 100 мл с магнитным стержнем-мешалкой поместили 2,91 мл гидроокиси натрия (1,000 Н, 2,91 ммоль) и 2,91 мл деионизованной воды. Раствор охладили до 0°C на ледяной бане, затем одной порцией добавили H-D-iGlu-D-Trp-OH (1,00 г, 3,00 ммоль) в твердом виде. Добавили еще 3 мл деионизованной воды, и полученный раствор перемешивали еще 15 минут. Значение pH этого раствора составляло приблизительно от 5,5 до 6,0. Уровень pH доводили до значения 6,5 путем добавления 40 мкМ раствора 0,500 н. NaOH. Смесь профильтровали для удаления каких-либо твердых частиц, затем фильтрат концентрировали в вакууме до получения значения объема раствора 0,5 мл при температуре бани 30°C. Полученный остаток разбавили деионизованной водой объемом 0,6 мл и изопропанолом (10 мл) при энергичном перемешивании, в результате чего был получен твердый осадок. В течение нескольких минут на смесь воздействовали ультразвуком. Затем добавили еще 30 мл изопропанола. После перемешивания в течение 90 минут, смесь разделили на две части (А и В).

A. Часть А смеси профильтровали, и твердое вещество промыли изопропанолом (2×10 мл). Твердое вещество сушили воздухом в течение 1 часа, а затем сушили в течение ночи в условиях вакуума в печи при температуре 40°C. Порошковая рентгенограмма и ИК-спектр (KBr) этой части A материала оказались такими же, как и представленные на фиг.2 и фиг.5 для полиморфной формы F, полученные согласно способу А, описанному выше.

B. Часть B перемешивали в течение ночи. Затем смесь профильтровали, и твердое вещество промыли изопропанолом (2×10 мл), сушили воздухом в течение 15 минут, а затем в течение ночи сушили в вакууме при температуре 40°C. Порошковая рентгенограмма и ИК-спектр (KBr) этой части В материала оказались такими же, как и представленные на фиг.2 и фиг.5 для полиморфной формы F, полученные согласно способу А, описанному выше.

Пример 2

Получение кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1)

В круглодонную колбу объемом 100 мл с магнитным стержнем-мешалкой поместили 2,97 мл гидроокиси натрия (1,000 Н, 2,97 ммоль) и 3,0 мл деионизованной воды. Раствор охладили до 0°C на ледяной бане, затем одной порцией добавили H-D-iGlu-D-Trp-OH (1,00 г, 3,00 ммоль) в твердом виде, в результате чего получили прозрачный слегка розоватый раствор. Значение pH этого раствора составляло приблизительно 7,0. Смесь профильтровали для удаления оставшихся твердых частиц, затем фильтрат концентрировали в вакууме до получения масла. Остаток разбавили деионизованной водой объемом 0,6 мл и при сильном перемешивании добавили изопропанол (40 мл) до выпадения твердого осадка. После перемешивания в течение 1 часа смесь профильтровали, и твердое вещество промыли изопропанолом (2×15 мл), сушили воздухом около 15 минут, затем сушили в течение ночи в условиях вакуума при 36°C. Было получено белое кристаллическое твердое вещество (1,00 г, выход 94%). Этот материал получил название кристаллической модификации 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1).

Чистота этого материала, определенная по способу ВЭЖХ (доля пиковой области в процентах), составила 98,5%. способ ВЭЖХ; Колонка: XTerra MS C18; 5 мкм, 4,6×250 мм; подвижная фаза: A=водная фаза: 4 мМ гидроксиметиламинометан, 2 мМ ЭДТК, pH 7,4; B=органическая фаза: CH₃CN; градиент: B%: 0 минут 5%, 15 минут 55%, 30 минут 55%, 32 минуты 5%, 35 минут 5%; Скорость потока: 1 мл/мин; объем инъекции: 5 мкл; λ: 222, 254, 280, 450 нм; время удержания продукта: 6,39 мин.

Содержание воды в этом материале, определенное по тесту Карла-Фишера, составило 6,0%.

УФ (вода, c=22,4 мкМ, λ_макс нм): 221 (ε 30528), 280 (ε 4958).

МС (м/з): 356,0 [M]⁺, 334,2 [C₁₆H₂₀N₃O₅]⁺, 187,9 (100%).

Порошковая рентгенограмма для этого материала показана на фиг.3. Эту порошковую рентгенограмму также можно выразить в параметрах межплоскостных расстояний d, угла Брэгга 2θ, и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу максимальной интенсивности) следующим образом:

Спектр ПФ-ИК (KBr) для этого материала показан на фиг.6.

Этот материал был приготовлен по способу, описанному ниже.

Деионизованную воду (18 мл) и раствор 1 н. NaOH (18,0 мл 18 ммоль) смешали в колбе объемом 250 мл с круглым дном и охладили до 0°C. Затем добавили H-D-iGlu-D-Trp-OH (6,0 г 18 ммоль) в твердом виде и медленно растворили. Спустя 1 час раствор окрасился бледно-персиковым цветом. Часть этого раствора (6 мл) отобрали и подвергли упариванию в вакууме до масла. Затем это масло разбавили деионизованной водой объемом 0,6 мл и по каплям добавили 40 мл изопропилового спирта (ИПС). Смесь энергично перемешивали в течение 1 часа, а затем профильтровали. Твердое вещество сушили воздухом, а затем сушили в течение ночи в вакуумной печи, в результате чего получили 450 мг твердого белого вещества, т.пл: 186,9-189,2°C. Порошковая рентгенограмма и ИК-спектр этого материала оказались подобными представленным соответственно на фиг.3 и фиг.6, как описано выше.

Пример 3

Получение кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1)

Способ A: мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана (800 мг) в твердом виде, полученная согласно описанному выше в примере 1 способу В, была суспендирована в метаноле (10 мл). Смесь слегка нагрели, чтобы растворилось твердое вещество. Раствор дважды профильтровали, пропустив через воронку с фильтром из пористого стекла, и поместили в круглодонную колбу объемом 100 мл. Колба была оснащена мешалкой, и 4 мл ИПС медленно добавляли до образования твердого вещества. В течение 4 часов суспензию перемешивали, а затем профильтровали. Затем твердое вещество промыли изопропиловым спиртом (3×10 мл). Твердое вещество сушили воздухом (твердое вещество окрасилось в бледно-персиковый цвет), а затем сушили в течение ночи в вакуумной печи. Было получено белое твердое кристаллическое вещество (480 мг, выход 60%), т.пл.: 182,3-186,1°C. Этот материал получил название кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1).

Порошковая рентгенограмма этого материала показана на фиг.4. Эту порошковую рентгенограмму также можно выразить в терминах межплоскостных расстояний d, угла Брэгга 2θ, и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу максимальной интенсивности) следующим образом:

Содержание воды в этом материале, определенное с помощью теста Карла-Фишера, составило 9,3%.

МС (м/з): 356,0 [M]⁺, 334,2 [C₁₆H₂₀N₃O₅]⁺, 187,9 (100%).

Спектр ПФ-ИК (KBr) представлен на фиг.7.

Способ B: Деионизованную воду (6 мл) и раствор 1 н. NaOH (6,0 мл, 6 ммоль) смешали в круглодонной колбе объемом 100 мл и охладили до 0°C, затем добавили H-D-iGlu-D-Trp-OH (2,0 г, 6 ммоль), и на смесь воздействовали ультразвуком в течение 2 минут, чтобы растворить все твердые частицы. Значение pH составляло приблизительно 6,0. Часть этого раствора (6 мл) отобрали и профильтровали для удаления оставшихся твердых частиц. Затем фильтрат выпаривали в вакууме для получения твердого вещества (1,02 г). Часть этого твердого вещества (0,5 г) растворили в деионизованной воде (10 мл), в результате чего получили прозрачный бесцветный раствор. Удаление летучих веществ производилось в вакууме при помощи роторного испарителя с охлаждением конденсатора ледяной водой и при температуре бани 30°C в течение 6 часов, в результате чего было получено твердое вещество. Порошковая рентгенограмма и ИК-спектр этого материала оказались подобными представленным соответственно на фиг.4 и фиг.7, как описано выше в способе А.

Пример 4

Получение смеси кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы Х) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1)

В круглодонную колбу объемом 50 мл, оснащенную магнитным стержнем-мешалкой, поместили 3,0 мл NaOH (1,0 M, 3 ммоль) и 3 мл дистиллированной воды. Затем раствор охладили до 0°C при помощи бани с ледяной водой, и добавили H-D-iGlu-D-Trp-OH (1,00 г, 3,00 ммоль), что дало в результате прозрачный раствор розового цвета. Раствору дали перемешаться в течение 1 часа при температуре ледяной воды, а затем нагрели до комнатной температуры. Раствор профильтровали, а затем концентрировали, пока объем растворителя не достигал 1 мл. ИПС в количестве 38 мл добавляли до образования твердого осадка. Раствор сильно перемешивали в течение 1 часа. Половину этого раствора профильтровали и промыли ИПС (2×15 мл). Твердое вещество сушили воздухом, а затем сушили в течение ночи в вакуумной печи при 35°C, в результате чего получили 379 мг белого кристаллического твердого вещества. Этот материал представляет собой смесь кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) натриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1). Порошковая рентгенограмма этого материала представлена на фиг.9.

Часть твердого вещества (50 мг), полученного как описано выше, суспендировали в 3 мл этилацетата при комнатной температуре и перемешивали. Спустя 2,5 часа раствор профильтровали, твердое вещество сушили воздухом, а затем сушили в течение ночи в вакуумной печи, в результате чего получили 38 мг (выход 78%) белого кристаллического твердого вещества. Анализ порошковой рентгенограммы показал, что этот материал главным образом представляет собой кристаллическую модификацию 1 (полиморфную форму F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), описанную выше в примере 1, порошковая рентгенограмма которой представлена на фиг.2.

Порошковые рентгенограммы для описанных выше кристаллических модификаций 1, 2 и 3 мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана представлены соответственно на фиг.2, 3 и 4. Специалисты в данной области поймут, что значения угла 2θ на порошковых рентгенограммах для кристаллических модификаций 1, 2 и 3 мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана могут слегка варьировать при использовании разных аппаратов и/или от образца к образцу, поэтому приведенные здесь значения не следует считать абсолютными. В типичном случае значения углов 2θ должны соответствовать указанным с допуском приблизительно ±0,2 градуса, предпочтительно, около ±0,1 градуса. Специалисты в данной области также поймут, что значения относительной интенсивности пиков на порошковых рентгенограммах для кристаллических модификаций 1, 2 и 3 мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана могут значительно варьировать при использовании разных аппаратов и/или от образца к образцу, поэтому приведенные здесь значения не следует считать абсолютными.

Хотя в данном описании представлены предпочтительные варианты выполнения настоящего изобретения, специалисты в данной области поймут, что в эти варианты могут быть внесены изменения, не нарушающие сущность изобретения и не выходящие за объем формулы изобретения.

Claims

1. Кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 18,78±0,20, 21,32±0,20, 22,95±0,20, 24,96±0,20 и 27,49±0,20.

2. Кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.1, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 18,78±0,10, 21,32±0,10, 22,95±0,10, 24,96±0,10 и 27,49±0,10.

3. Кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.1, имеющая порошковую рентгенограмму, как представлено на фиг.2.

4. Кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.1, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 9,23±0,20; 9,91±0,20; 12,41±0,20; 13,76±0,20; 14,87±0,20; 15,75±0,20; 17,88±0,20; 18,78±0,20; 19,57±0,20; 19,84±0,20; 20,31±0,20; 21,32±0,20; 21,55±0,20; 22,95±0,20; 23,45±0,20; 24,34±0,20; 24,96±0,20; 27,49±0,20; 27,94±0,20; 29,27±0,20; 30,07±0,20; 30,43±0,20; 31,29±0,20; 32,25±0,20; 34,07±0,20; 34,94±0,20; 35,53±0,20; 36,08±0,20; 37,21±0,20; 38,17±0,20; и 39,19±0,20.

5. Кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.2, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 9,23±0,10; 9,91±0,10; 12,41±0,10; 13,76±0,10; 14,87±0,10; 15,75±0,10; 17,88±0,10; 18,78±0,10; 19,57±0,10; 19,84±0,10; 20,31±0,10; 21,32±0,10; 21,55±0,10; 22,95±0,10; 23,45±0,10; 24,34±0,10; 24,96±0,10; 27,49±0,10; 27,94±0,10; 29,27±0,10; 30,07±0,10; 30,43±0,10; 31,29±0,10; 32,25±0,10; 34,07±0,10; 34,94±0,10; 35,53±0,10; 36,08±0,10; 37,21±0,10; 38,17±0,10; и 39,19±0,10.

6. Кристаллическая модификация 1 (полиморфная форма F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.4 или 5, характеризующаяся следующей порошковой рентгенограммой, полученной при помощи дифрактометра (медный антикатод) и выраженной в параметрах межплоскостных расстояний d, угла Брэгга 2θ и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу с наибольшей интенсивностью):
2θ (°) D-расстояние (Ангстрем) Относительная интенсивность (%) 9,23 9,573 2 9,91 8,917 41,3 12,41 7,126 37,6 13,76 6,43 0,8 14,87 5,954 35,8 15,75 5,622 7,6 17,88 4,957 5,5 18,78 4,721 58,9 19,57 4,532 30,9 19,84 4,471 28,1 20,31 4,368 2,9 21,32 4,165 53,5 21,55 4,12 30,3 22,95 3,873 67,4 23,45 3,79 24,5 24,34 3,654 19,4 24,96 3,565 85,2 27,49 3,242 100 27,94 3,19 23,3 29,27 3,049 19,1 30,07 2,97 27,2 30,43 2,935 15,2 31,29 2,856 39,9 32,25 2,774 13 34,07 2,629 19,3 34,94 2,566 7,8 35,53 2,525 5 36,08 2,487 8,4 37,21 2,414 15,5 38,17 2,356 9,1 39,19 2,297 3,1

7. Кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 3,45±0,20, 20,02±0,20, 22,52±0,20, 25,84±0,20, 26,82±0,20, 30,18±0,20 и 30,76±0,20.

8. Кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.7, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 3,45±0,10, 20,02±0,10, 22,52±0,10, 25,84±0,10, 26,82±0,10, 30,18±0,10 и 30,76±0,10.

9. Кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.7, имеющая порошковую рентгенограмму, как представлено на фиг.3.

10. Кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.7, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 9,65±0,20; 10,41±0,20; 11,2±0,20; 11,71±0,20; 13,45±0,20; 13,93±0,20; 14,44±0,20; 15,61±0,20; 17,01±0,20; 18,18±0,20; 18,65±0,20; 20,02±0,20; 20,85±0,20; 21,39±0,20; 21,73±0,20; 22,52±0,20; 23,27±0,20; 24,3±0,20; 25,84±0,20; 26,82±0,20; 28,49±0,20; 30,18±0,20; 30,76±0,20; 31,49±0,20; 33,03±0,20; 34,55±0,20; 34,97±0,20; 35,74±0,20; 37,25±0,20; 37,71±0,20; и 38,79±0,20.

11. Кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.8, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 9,65±0,10; 10,41±0,10; 11,2±0,10; 11,71±0,10; 13,45±0,10; 13,93±0,10; 14,44±0,10; 15,61±0,10; 17,01±0,10; 18,18±0,10; 18,65±0,10; 20,02±0,10; 20,85±0,10; 21,39±0,10; 21,73±0,10; 22,52±0,10; 23,27±0,10; 24,3±0,10; 25,84±0,10; 26,82±0,10; 28,49±0,10; 30,18±0,10; 30,76±0,10; 31,49±0,10; 33,03±0,10; 34,55±0,10; 34,97±0,10; 35,74±0,10; 37,25±0,10; 37,71±0,10; и 38,79±0,10.

12. Кристаллическая модификация 2 (полиморфная форма I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.10 или 11, характеризующаяся порошковой рентгенограммой, полученной при помощи дифрактометра (медный антикатод) и выраженной в параметрах межплоскостных расстояний d, угла Брэгга 2θ и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу с наибольшей интенсивностью):
2θ (°) D-расстояние (Ангстрем) Относительная интенсивность (%) 9,65 9,161 5,3 10,41 8,492 23,7 11,20 7,897 40,4 11,71 7,549 4,5 13,45 6,58 90,2 13,93 6,351 15,9 14,44 6,128 3,7 15,61 5,672 32,4 17,01 5,207 9,9 18,18 4,876 11,7 18,65 4,755 47,8 20,02 4,432 59,2 20,85 4,257 35,9 21,39 4,15 24,1 21,73 4,086 27,3 22,52 3,945 100 23,27 3,819 13,7 24,30 3,66 32,4 25,84 3,445 69,5 26,82 3,322 82,5 28,49 3,13 30,1 30,18 2,959 58,8 30,76 2,904 86,9 31,49 2,839 35,3 33,03 2,71 8,7 34,55 2,594 17,8 34,97 2,564 43,4 35,74 2,51 8,5 37,25 2,412 28,1 37,71 2,383 28,5 38,79 2,319 16,9

13. Кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 12,239±0,200, 18,268±0,200, 22,268±0,200, 26,257±0,200 и 27,807±0,200.

14. Кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.13, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 12,239±0,100, 18,268±0,100, 22,268±0,100, 26,257±0,100 и 27,807±0,100.

15. Кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.13, имеющая порошковую рентгенограмму, как представлено на фиг.4.

16. Кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.13, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 9,187±0,200; 11,058±0,200; 11,713±0,200; 12,239±0,200; 13,785±0,200; 14,806±0,200; 15,763±0,200; 17,126±0,200; 17,693±0,200; 18,268±0,200; 18,562±0,200; 19,261±0,200; 20,033±0,200; 20,63±0,200; 21,006±0,200; 21,778±0,200; 22,268±0,200; 23,054±0,200; 23,361±0,200; 23,851±0,200; 24,626±0,200; 24,981±0,200; 25,507±0,200; 26,257±0,200; 26,963±0,200; 27,329±0,200; 27,807±0,200; 28,243±0,200; 28,975±0,200; 29,264±0,200; 29,687±0,200; 30,409±0,200; 30,798±0,200; 31,193±0,200; 31,724±0,200; 32,505±0,200; 32,985±0,200; 33,645±0,200; 34,249±0,200; 34,587±0,200; 35,048±0,200; 35,41±0,200; 35,933±0,200; 36,833±0,200; 37,276±0,200; 37,937±0,200; 38,467±0,200; и 39±0,200.

17. Кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.14, характеризующаяся пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 9,187±0,100; 11,058±0,100; 11,713±0,100; 12,239±0,100; 13,785±0,100; 14,806±0,100; 15,763±0,100; 17,126±0,100, 17,693±0,100; 18,268±0,100; 18,562±0,100; 19,261±0,100; 20,033±0,100; 20,63±0,100; 21,006±0,100; 21,778±0,100; 22,268±0,100; 23,054±0,100; 23,361±0,100; 23,851±0,100; 24,626±0,100; 24,981±0,100; 25,507±0,100; 26,257±0,100; 26,963±0,100; 27,329±0,100; 27,807±0,100; 28,243±0,100; 28,975±0,100; 29,264±0,100; 29,687±0,100; 30,409±0,100; 30,798±0,100; 31,193±0,100; 31,724±0,100; 32,505±0,100; 32,985±0,100; 33,645±0,100; 34,249±0,100; 34,587±0,100; 35,048±0,100; 35,41±0,100; 35,933±0,100; 36,833±0,100; 37,276±0,100; 37,937±0,100; 38,467±0,100; и 39±0,100.

18. Кристаллическая модификация 3 (полиморфная форма X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по п.16 или 17, характеризующаяся порошковой рентгенограммой, полученной при помощи дифрактометра (медный антикатод) и выраженной в параметрах межплоскостных расстояний d, угла Брэгга 2θ и относительной интенсивности (выраженной в процентах по отношению к лучу с наибольшей интенсивностью):
2θ (°) D-расстояние (Ангстрем) Относительная интенсивность (%) 9,187 9,618 25,4 11,058 7,995 2,3 11,713 7,549 18,7 12,239 7,226 34,2 13,785 6,419 23,5 14,806 5,978 13 15,763 5,618 5 17,126 5,173 29,3 17,693 5,009 8,4 18,268 4,852 48,2 18,562 4,776 28,2 19,261 4,604 14,3 20,033 4,429 14,5 20,630 4,302 17,2 21,006 4,226 12 21,778 4,078 2,4 22,268 3,989 100 23,054 3,855 6,4 23,361 3,805 7,4 23,851 3,728 1,8 24,626 3,612 14,9 24,981 3,562 14,7 25,507 3,489 11,1 26,257 3,391 34,3 26,963 3,304 11,1 27,329 3,261 20,6 27,807 3,206 35 28,243 3,157 25,6 28,975 3,079 1,1 29,264 3,049 2,3 29,687 3,007 9,5 30,409 2,937 20,9 30,798 2,901 6,1 31,193 2,865 6,9 31,724 2,818 24,7 32,505 2,752 8 32,985 2,713 12,1 33,645 2,662 26,5 34,249 2,616 15,2 34,587 2,591 8,6 35,048 2,558 4,6 35,410 2,533 3,3 35,933 2,497 15,3 36,833 2,438 8 37,276 2,41 10,8 37,937 2,37 12,7 38,467 2,338 14,7 39,000 2,308 2,6

19. Смесь кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), где смесь характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 18,79±0,20, 21,30±0,20, 22,33±0,20, 22,90±0,20, 24,96±0,20 и 27,48±0,20.

20. Смесь кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.19, где смесь характеризуется пиками на порошковой рентгенограмме, имеющими следующие значения 2θ: 18,79±0,10, 21,30±0,10, 22,33±0,10, 22,90±0,10, 24,96±0,10 и 27,48±0,10.

21. Смесь кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) и кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1) по п.19, имеющая порошковую рентгенограмму, как представлено на фиг.9.

22. Кристаллическая мононатриевая соль D-изоглутамил-D-триптофана по п.1-21, в которой кристаллы при измерении методом рентгеновской дифракции дают отчетливые пики, ширина которых на половине высоты, измеренная при угле отражения 2θ и с использованием излучения CuK_α, меньше 2°.

23. Способ получения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), включающий следующие стадии:
(а) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде с рН приблизительно от 6,5 до 7,2;
(б) фильтрование раствора для удаления твердых частиц;
(в) упаривание воды для концентрирования фильтрата и
(г) добавление антирастворителя для осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, и
(д) твердое вещество, полученное после стадии (г), перемешивают с этилацетатом с получением кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

24. Способ получения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), включающий следующие стадии:
(а) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде с рН приблизительно от 6,5 до 7,2;
(б) фильтрование раствора для удаления твердых частиц;
(в) упаривание воды для концентрирования фильтрата и
(г) добавление приблизительно 30 мл антирастворителя на 1 мл натриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в воде для осаждения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

25. Способ получения кристаллической модификации 2 (полиморфной формы I) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), включающий следующие стадии:
(а) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде с рН приблизительно от 6,5 до 7,2;
(б) фильтрование раствора для удаления твердых частиц;
(в) упаривание воды для концентрирования фильтрата и
(г) добавление приблизительно 40 мл антирастворителя на 1 мл натриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана в воде для осаждения кристаллической модификации 2 (полиморфной формы III) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

26. Способ получения кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), включающий следующие стадии:
(а) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде с рН приблизительно от 6,5 до 7,2;
(б) фильтрование раствора для удаления твердых частиц;
(в) упаривание фильтрата со стадии (б) с получением твердого вещества;
(г) добавление воды для получения раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана и
(д) упаривание воды в течение более чем 5 ч с получением кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

27. Способ получения кристаллической модификации 3 (полиморфной формы X) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), включающий следующие стадии:
(а) получение раствора D-изоглутамил-D-триптофана в метаноле;
(б) фильтрование раствора для удаления твердых частиц и
(в) добавление антирастворителя для осаждения мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

28. Способ получения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана (1:1), включающий следующие стадии:
(а) получение раствора мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана и гидроокиси натрия в воде;
(б) фильтрование раствора для удаления твердых частиц;
(в) упаривание воды для концентрирования фильтрата и
(г) добавление антирастворителя для осаждения кристаллической модификации 1 (полиморфной формы F) мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана.

29. Способ по п.24, где продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно от 1,5 до 16 ч.

30. Способ по п.25, где продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно 1 ч.

31. Способ по п.23, где продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно 1 ч, а продолжительность перемешивания в этилацетате на стадии (д) составляет приблизительно 2,5 ч.

32. Способ по п.26, где на стадии (г) добавляют приблизительно от 18 до 22 мл воды на 1 г мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана, а продолжительность упаривания на стадии (д) составляет приблизительно от 5 до 6 ч при температуре упаривания приблизительно от 30 до 35°С.

33. Способ по п.27, где отношение мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана к метанолу на стадии (а) составляет 1 г соли на 11-13 мл метанола, а отношение антирастворителя к метанолу на стадии (в) составляет приблизительно 0,4-0,6 мл на 1 мл.

34. Способ по п.28, где продолжительность перемешивания на стадии (г) составляет приблизительно от 12 до 16 ч.

35. Способ по любому из пп.23-34, где антирастворитель представляет собой С₁-С₄алканол.

36. Способ по п.35, где С₁-С₄алканол представляет собой изопропанол.

37. Фармацевтическая композиция, применяемая в качестве иммуносупрессанта, содержащая эффективное количество кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по любому из пп.1-22 и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель.

38. Способ получения фармацевтической композиции, применяемой в качестве иммуносупрессанта, включающий объединение эффективного количества кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по любому из пп.1-22 с, по меньшей мере, одним фармацевтически приемлемым носителем.

39. Применение кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по любому из пп.1-22 без хроматографической очистки в фармацевтической композиции.

40. Применение кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по любому из пп.1-22 в качестве средства против псориаза.

41. Применение кристаллической мононатриевой соли D-изоглутамил-D-триптофана по любому из пп.1-22 для производства лекарственного средства для лечения, по меньшей мере, одного из аутоиммунных заболеваний.

42. Применение по п.41, где, по меньшей мере, одно аутоиммунное заболевание выбирают из группы, состоящей из псориаза, атопического дерматита и ревматоидного артрита.