SE457257B - Kristallint monolaktat-hemiacetonat av m-amsa, foerfarande foer framstaellning daerav samt foerfarande foer framstaellning av stabil, fast vattenloeslig farmaceutisk doseringsform daerav - Google Patents

Description

4.57 257 i allmänhet administreras intravenöst, medan ett vattenolös~ ligt material är begränsat till andra former av parenteral administrering, såsom intramuskulär och subkutan administre- ring. Ett terapeutiskt medel med vattenlöslighet underlättar även framställningen av orala och icke-intravenösa parenterala doseringsformer för human administrering. Det är således av- gjort fördelaktigt om ett terapeutiskt medel är vattenlösligt, speciellt om man beaktar att den mest direkta vägen för upp- nående av terapeutiska blodnivåer av ett läkemedel i människo- kroppen är genom intravenös administrering.

Den fria basformen av m-AMSA har mycket begränsad löslighet i vatten och kan således icke användas i en doseringsform för intravenös administrering. Försök har gjorts att framställa syraadditionssalter i syfte att eliminera detta löslighetspro- blem, men de i litteraturen angivna monohydroklorid- och mono- metansulfonatsalterna har även visat sig ha otillräcklig vat- tenlöslighet för kliniskt bruk. Den beredning som för närva- rande utnyttjas kliniskt består av två sterila vätskor, som kombineras före användning. En lösning av m-AMSA i vattenfri N,N-dimetylacetamid är innesluten i en ampull. En separat ampull innehåller en vattenlösning av L(+)-mjölksyra för an- vändning som utspädningsmedel. Efter blandning administreras den erhållna m-AMSA-lösningen genom intravenös infusion.

Ehuru den för närvarande kliniskt utnyttjade beredningen till- handahåller en intravenös doseringsform uppvisar den flera nackdelar. Förutom de uppenbara svårigheterna med att fram- ställa och administrera doseringsformen innehåller den dimetyl- acetamid som bärare. Dimetylacetamid har i litteraturen rappor- terats ge olika toxiska symptom hos djur och kan således visa sig vara oacceptabel eller icke önskvärd som farmaceutisk bä- Käre.

Det är således ett ändamål med föreliggande uppfinning att tillhandahålla en vattenlöslig, stabil, terapeutiskt godtagbar form av m-AMSA, som kan administreras intravenöst (liksom me- delst andra administreringssätt) och icke innehåller eller u .

L-J 457 257 kräver dimetylacetamid som farmaceutisk bärare. Detta ända- mål uppnås i enlighet med föreliggande uppfinning.

Föreliggande uppfinning tillhandahåller nya vattenlösliga syraadditionssalter av m-AMSA, som vid rekonstituering med sterilt vatten eller en steril vattenhaltig bärare kan admi- nistreras intravenöst och som icke uppvisar de nackdelar som är förknippade med de kända intravenösa formerna av detta medel.

Uppfinningen tillhandahåller närmare bestämt (1) det kristal- lina L(+)-monolaktat-hemiacetonatet av m-AMSA innehållande ca 0,5 mol aceton per mol laktatsalt, (2) det kristallina m-AMSA-DL-monolaktat-acetonsolvatet innehållande ca 0,6-0,7 mol aceton per mol laktatsalt och (3) det kristallina m-AMSA- D(-)-monolaktat-hemiacetonatet innehållande ca 0,5 mol aceton per mol laktatsalt.

Uppfinningaibeskrivs närmare med hänvisning till bifogade rit- ningar, där fig. l visar infraröd-absorptionsspektrum för m-AMSA-L(+)- monolaktat-hemiacetonat vid pelletering i kaliumbromid; fig. 2 visar NMR-spektrum för m-AMSA-L(+)-monolaktat-hemiace- tonat i dimetylsulfoxid (100 MHz); fig. 3 visar infraröd-absorptionsspektrum för DE-mono1aktat- acetonsolvatet av m-AMSA vid pelletering i kaliumbromid; fig. 4 visar NMR-spektrum för DL-monolaktat-acetonsolvatet av m-AMSA i dimetylsulfoxid (100 MHz); fig. 5 visar infraröd-absorptionsspektrum för D(-)~monolaktat- hemiacetonatet av m-AMSA vid pelletering i kaliumbromid; fig. 6 visar NMR-spektrum för D(-)-monolaktat-hemiacetonatet av m-AMSA i dimetylsulfoxid (100 MHz).

Många konventionella farmaceutiskt godtagbara syraadditionssal- ter av m-AMSA är endast ringa lösliga i vatten och är således olämpliga för framställning av vattenhaltiga intravenösa lös- ningar. Detta framgår av litteraturen över hydroklorid- och 457 257 metansulfonatsalterna liksom av löslighetsundersökningar, som har utförts av uppfinnarna med avseende på sådana salter som sulfatet, levulinatet och citratet.

Vid undersökning av löslighetsegenskaperna hos syraadditions- salter av m-AMSA har det överraskande visat sig att de kris- tallina acetonsolvaterna av m-AMSA-L(+)-monolaktat, -D(-)- monolaktat och -DL-monolaktat uppivsar tillräckligt hög vatten- löslighet vid rumstemperatur för att tillhandahålla godtag- bara, intravenösa doseringsformer för kliniskt bruk. Dessutom, dessa tre kristallina salter (1) har utmärkt stabilitet både i fast form och vid rekonstituering med vatten och (2) kan re- konstitueras med vatten för bildning av utspädda lösningar (exempelvis 3-5 mg/ml) av m-AMSA för intravenös administre- ring, vilka lösningar förblir klara (ingen utfällning av salt) under åtminstone flera timmar.

Framställningen av de kristallina laktatsalterna enligt före- liggande uppfinning åstadkommas genom att man omsätter m-AMSA- bas med L(+)-mjölksyra, D(-)-mjölksyra eller DL-mjölksyra i ett acetonlösningsmedel. Vid omröring, företrädesvis vid rums- temperatur, utkristalliserar det önskade saltet ur lösningen och kan utvinnas, exempelvis genom filtrering.

Vid utförande av ovan angivna förfarande är det föredraget att först tillhandahålla m-AMSA-basen och mjölksyrah i acetonlös- ning och därefter filtrera dem före blandning för framställ- ning av den kristallina produkten. Mjölksyran och m-AMSA-basen kan omsättas i molförhâllanden av ca 1-4 molekvivalenter mjölk- syra per mol m-AMSA. För bästa resultat används emellertid ett överskott av mjölksyra (företrädesvis minst två och i synner- het ca 2,5 molekvivalenter). Reaktionen utförs inom ett vitt temperaturintervall, exempelvis från ca OOC till 40°C, men utförsrmfi flxdelvfld rumstemperatur. Om så önskas kan groddkri- staller av det önskade kristallina laktatsaltet sättas till reaktionsblandningen för att inducera och/eller förstärka kri- stallisationen. Efter utvinning tvättas det kristallina saltet med aceton och torkas på konventionellt sätt, exempelvis genom * 457 257 vakuumtorkning vid S0°C under 16-24 timmar.

Det har visat sig att det är väsentligt vid framställning av monolaktatsalterna att undvika kontaminerande joner av klorid, sulfat, fosfat och karbonat i utgångsmaterialen och lösnings- medlet. Närvaron av dylika joner kan eventuellt resultera i (1) en med tiden erhållen nedsättning av saltets skenbara initiella löslighet, (2) en ökning av rekonstitueringstiden och (3) utfällning av saltet ur vattenlösning vid lagring.

Enligt en annan aspekt av föreliggande uppfinning tillhanda- hålls en stabil, fast, vattenlöslig farmaceutisk doserings- form för rekonstituering med vatten eller en vattenhaltig bä- rare i form av en stabil lösning av m-AMSA, varvid doserings- formen framställs genom att man (1) framställer en vattenlösning av kristallint L(+)- monolaktat-hemiacetonat av m-AMSA innehållande ca 0,5 mol aceton per mol laktatsalt, kristallint m-AMSA-DL-monolaktat-acetonsolvat innehållande ca 0,6-0,7 mol aceton per mol laktatsalt eller kris- tallint m-AMSA-D(-)-monolaktat-hemiacetonat inne- hållande ca 0,5 mol aceton per mol laktatsalt och (2) lyofiliserar_den på så sätt erhållna vattenlösning- en. “ Framställningen av de lyofiliserade laktat-acetonaterna åstad- kommes genom att man helt enkelt upplöser det kristallina L(+)- monolaktat-hemiacetonatet, D(-)-monolaktat-hemiacetonatet eller DL-monolaktat-acetonsolvatet i en lämplig vattenmängd för er- hållande av en fullständig lösning och därefter underkastar vattenlösningen (eventuellt efter filtrering) ett konventio- nellt lyofiliseringsförfarande. De lyofiliserade fasta ämnena har visat sig innehålla ca l mol mjölksyra per mol m-AMSA och är fria från aceton. De kan lätt rekonstitueras med vatten el- ler en vattenhaltig bärare för erhållande av minst 3-5 mg/ml verkliga lösningar av m-AMSA med utmärkta stabilitetsegenskaper. 31» 457 257 i ” ~ s 6 De kristallina munolaktat-acetonatsalter och lyofiliserade produkter som tillhandahålls enligt föreliggande uppfinning uppvisar väsentligen samma antitumöregenskaper som tidigare inom tekniken kända m-AMSA-former. Till följd av deras höga vattenlöslighet kan de emellertid användas för framställning av individuella torrproduktampuller och lyofiliserade klinis- ka doseringsformer för intravenös administrering, vilka icke innehåller en oönskvärd farmaceutisk bärare såsom dimetyl- acetamid. De nya doseringsformerna är samtliga lämpliga för snabb och bekväm rekonstituering med sterilt vatten eller en steril vattenhaltig bärare. Det har visat sig att en vatten- lösning av laktat-acetonatsalterna eller de lyofiliserade produkterna med en aktivitet av 3-5 mg/ml m-AMSA tillhandahål- ler en speciellt föredragen doseringsform för intravenös administrering. m-AMSA-salterna och de lyofiliserade produkterna enligt före- liggande uppfinning kan användas för framställning av orala eller icke-intravenösa parenterala doseringsformer liksom för framställning av den föredragna, intravenöst injicerbara pro- dukten. .

Vid behandling av tumörer hos däggdjur kan doseringsformerna enligt föreliggande uppfinning administreras antingen oralt eller parenteralt men-företrädesvis parenteralt, i sådana do- seringar och enligt sâdant doseringsschema som'tidigare har V angivits i litteraturen.

Uppfinningen åskådliggörs närmare medelst följande utförings- exempel, varvid temperaturerna avser Celsiusgrader.

Exempel l Framställning av L(+)-monolaktat-hemiacetonat av m-AMSA n 400 mg m-AMSA upplöstes i 35 ml aceton efter 10 minuters om- röring. Till denna lösning sattes under omröring en lösning av 450 mg (4 ekvivalenter) L(+)-mjölksyra i 10 ml aceton. En alikvot av den erhållna blandningen överfördes till ett litet 1.4.4 457 257 provrör av glas, vars väggar skrapades med en glasstav för bildning av kristaller. Kristallerna sattes till reaktions- blandningen och blandningen omrördes 2 timmar vid rumstempe- ratur. De bildade orangefärgade kristallerna avlägsnades ge- nom filtrering, tvättades med 10 ml aceton och vakuumtorkades 18 timmar vid 500. Utbytet av kristallint monolaktat var 0,53 g.

Egenskaper hos L(+)-monolaktat-hemiacetonatet av m-AMSA (a) smältpunkt; 13s-143° (sönaeraelning) (b) Spektralanalys: IR-, NMR- och UV-spektra var i över- ensstämmelse med spektra för ett solvatiserat mono- laktatsalt innehållande 0,5 mol aceton per mol m-AMSA. (c) Vattenhalt enligt Karl Fisher = 0,64% (d) Elementaranalys: C 58,44%; H 5,58%; N 7,70%; S 5,95%; (e) Löslighet i vatten: 5 mg/ml. (f) Stabilitet: 15 mg salt rekonstituerades med 10 ml sterilt vatten. Lösningen var stabil under minst 24 timmar och uppvisade mindre än 6% aktivitetsför- lust efter tvâ veckors lagring vid 450. gšempel 2 Framställning av lyofiliserat L(+)-monolaktat-hemiacetonat av m-AMSA w 10 mg av det enligt exempel l framställda m-AMSA-monolaktat- hemiacetonatet upplöstes i 0,5 ml sterilt vatten i en 8,2 ml flintampull. Ampullen lyofiliserades i en laboratorielyofili- seringsanordning under 16 timmar. 0,5 ml sterilt vatten sattes till ampullen. En lösning erhölls efter två minuters omskakning.

Detta försök upprepades under användning av 10 mg av monolak- tat-hemiacetonatsaltet upplöst i 15 ml sterilt vatten. Den mer utspädda lösningen är föredragen för framställning av den lyo- filiserade produkten. 457 257 " 8 Exemgel 3 Steril kristallisation av m-AMSA-L(+)-monolaktat-hemiacetonat l. l,0 g av fri m-AMSA-bas uppslammades i 100 ml aceton vid 22-280. Man erhöll en lösning eller näranog lösning på 10 minuter. 2. Under användning av aseptisk teknik fick acetonlösningen av m-AMSA passera ett sterilt Millipore-Fluoropore- eller Mitex-filter. Filtratet tillvaratogs i en steril glasbehâlla- re eller behållare av rostfritt stål. Filtret tvättades med 15 ml aceton och det filtrerade acetonet sattes till filtra- tet. Detta utgjorde lösning A. Lösning A användes i steg 5 nedan inom 5 timmar. 3. l g L(+)-mjölksyra upplöstes i aceton till en volym av 10 ml (100 mg/ml L(+)-mjölksyra). Lösningen omrördes under 5 minuter. 4. Under användning av asqmisk teknik fick acetonlösningen av L(+)-mjölksyra passera ett sterilt Millipore-Fluoronore- eller Mitex-filter. Filtratet tillvaratogs i en steril glas- behållare eller behållare av rostfritt stål. Detta utgjorde lösning B. Filtret tvättades icke i detta fall. 5. Under måttlig omröring sattes 5,8 ml av lösning B till hela mängden av lösning A under en tidsrymd av l-2 minuter.

Detta representerade 2,5 ekvivalenter (0,58 g) L(+)-mjölksyra.

Kristaller bildades efter l0 minuters omröring. Om kristaller icke erhålls kan groddkristaller av sterilt m-AMSA-monolaktat- hemiacetonat tillsättas eller också kan behâllarens väggar skrapas med en steril glasstav i och för inducering av kris- tallisationen. 6. Lösningen omrördes ytterligare l timma efter fullbordad kristallisation. 7. Kristallerna-avlägsnades genom luddfri, steril filtrerings- " 457 257 teknik. Kristallerna tvättades med 25 ml aceton, som 1 förväg hade filtrerats genom ett sterilt Millipore-Fluoropore- eller Mitex-filter. 8. Kristallerna vakuumtorkades vid 50° under 16-24 timmar.

Utbytet av m-AMSA~L(+)-monolaktat-hemiacetonatsalt var 1,1 g.

Exempel 4 Framställning av kristallint m-AMSA-DL-monolaktat-acetonsolvat 150 mg m-AMSA-bas uppslammades i 15 ml aceton vid 450 under 15 minuter. En liten mängd olösligt material avlägsnades ge- nom vakuumfiltrering genom ett 15 cm glasfilter. Till filtra- tet sattes 0,15 ml av en 80%-ig DL-mjölksyralösning under kraftig omröring. Kristallbildning skedde inom ca 10 minuter.

Blandningen omrördes därefter ytterligare 30 minuter. Kris- tallerna avlägsnades genom vakuumfiltrering genom ett 15 cm glasfilter. Kristallerna tvättades därefter med 2 ml aceton och vakuumtorkades 16 timmar vid 500. Man erhöll 180 mg av det i rubriken angivna saltet.

Egenskaper: Elementaranalys C 59,05%; H 5,55%; N 7,85%; S 5,88% Vatten enligt Karl Fisher = 1,03%.

Smältpunkt (kapillärsmältpunkt, okorrigerad) = 159-1es° (sönaeraeining).

NMR-spektrum för produkten var i överensstämmel- se med spektrum för ett monolaktatsalt av m-AMSA innehållande 0,6 mol aceton per mol salt. Produk- ten innehöll som förorening ca 0,1 mol% laktyl- laktatsalt, som bildades till följd av närvaron av upp till 20% laktylmjölksyra i den som utgångs- material använda DL-mjölksyræm (Denna förorening kan undvikas genom att man i stället för DL-mjölk- syran använder en ekvimolär blandning av ren L(+)-mjölksyra och ren D(-)-mjölksyra. 457 257 "_ l° Saltet kunde rekonstitueras med vatten för erhål- lande av en 5-7,5 mg/ml lösning, som förblev klar vid l7° under minst 6 timmar.

Rekonstituerade vattenlösningar av 5, 7,5 och 10 mg/ml erhölls lätt under 3 minuters omskakning vid l4°C. Saltets löslighet i vatten vid rumstempera- tur var minst 15 mg/ml.

Exempel 5 Framställning av kristallint m-AMSA-DL-monolaktat-acetonsolvat 15 g m-AMSA-bas uppslammades i 1,5 liter aceton under 10 minu- ter vid 22-240. Blandningen vakuumfiltrerades och det olösliga materialet tvättades med 50 ml aceton. Tvättvätskan sattes till filtratet och filtratet infördes därefter i en 2 liter Erlenmeyer-kolv. Under en tidsrymd av l minut tillsattes 10,7 ml av en 80%-ig DL-mjölksyralösning (2,5 ekvivalenter). Reaktions- blandningen försattes med groddkristaller av m-AMSA-DL-laktat- acetonsolvatet. Kristaller började bildas inom 5 minuter.

Blandningen omrördes l timme vid 20-230. Kristallerna avlägs- nades genom vakuumfiltrering och tvättades med 150 ml aceton.

De tvättade kristallerna vakuumtorkades vid 500 under 18 tim- mar för erhållande av 17,8 g av den i rubriken angivna produk- ten.

Egenskaper: NMR- och IR-spektra var i överensstämmelse med spektra för ett monolaktatsalt av m-AMSA med ca 0,7 mol solvatiserat aceton per mol salt. Små mängder laktyllaktat vär även närvarande som för- orening.

Elementaranalys: C 59,57%; H 5,53%; N 7,84%; S 5,81%.

Vattenhalt enligt Karl Fisher = 0,81%.

Saltet kunde lätt rekonstítueras med sterilt vat- ten under bildning av en 7,5 mg/ml lösning. Vatten- lösningar med koncentrationer av 5 och 7,5 mg/ml el 11 457 257 förblev klara under minst 16 timmar vid rumstem- peratur (l7°).

Exempel 6 Framställning av kristallint m-AMSA-DL-monolaktat-acetonsolvat 20 g m-AMSA-bas uppslammades i 2 liter aceton 10 minuter vid 250. Blandningen vakuumfiltrerades och det olösliga materialet tvättades med 100 ml aceton (tvättvätskan sattes därefter till filtratet) . Under en tidsrymd av l minut sattes till filtra- tet under kraftig omröring 11,45 ml 85%-ig DL-mjölksyra (2,5 ekvivalenter). Kristaller bildades på 5 minuter. Blandningen omrördes ytterligare l timme. Kristallerna avlägsnades genom vakuumfiltrering och tvättades med 150 ml aceton. Efter vakuum- torkning av kristallerna vid 500 under 24 timmar erhölls 25 g av den i rubriken angivna produkten.

Egenskaper: Elementaranalys: C 59,95%; H 5,35%; N 7,61%; S 5,85%.

IR- och NMR-spektra var i överensstämmelse med spektra för ett monolaktatsalt av m-AMSA med ca 0,67 mol solvatiserat aceton per mol laktatsalt.

Små mängder laktyllaktat var även närvarande som förorening.

Löslighet: rekonstituerade vattenlösningar med en halt av 7,5 och 10 mg av saltet per ml vatten förblev klara 24 timmar vid rumstemperatur. En lösning med halten 15 mg/ml förblev klar 6 tim- mar vid rumstemperatur.

Exempel 7 Lyofilisering av m~AMSA-DL-monolaktat-acetonsolvat 180 mg av det i exempel 6 framställda m-AMSA-DL-monolaktat- acetonsolvatet upplöstes i 24 ml sterilt vatten under omrö- ring. Den erhållna klara (pH 4,2) lösningen fick passera ett 2,5 mm Millipore-filter 0,45 mikron. 2 ml av filtratet inför- 457 2s7'* 12 des i en 8,2 ml flintampull och lösningen lyofiliserades under 24 timmar.

Tillsats av 2 ml sterílt vatten till den lyofiliserade ampul- len gav en klar lösning med koncentrationen 7,5 mg/ml. Lös- ningen förblev klar under minst 6 timar vid l7°. Omškakning av lösningen i en horisontell låghastighetsomskakare gav en klar lösning upp till 5 timmar.

Exemgel 8 Steril kristallisation av DL-laktat-acetonsolvatet av m-AMSA l. 1,0 g av m-AMSA-basen uppslammades i 100 ml aceton vid 22-280. Man erhöll en lösning eller näranog lösning på 10 minuter. 2. Under användning av aseptisk teknik fick acetonlösningen passera ett sterílt Millipore-Fluoropore- eller Mitex-filter.

Filtratet tillvaratogs i en steril glasbehâllare eller behål- lare av rostfritt stål. Filtret tvättades med 10 ml aceton och det filtrerade acetonet sattes till filtratet. Detta ut- gjorde lösning A, som användes i steg 5 nedan inom 5 timmar. 3. l g DL-mjölksyra (l,l8 ml av en 85%-ig DL-mjölksyralös- ning) upplöstes i aceton till en total volym av_l0 ml (100 mg/ml DL-mjölksyra). Lösningen omrördes 5 minuter. 4. Under användning av aseptisk teknik fick acetonlösningen av DL-mjölksyra passera ett sterílt Millipore-Fluoropore- eller Mitex-filter. Filtratet tillvaratogs i en steril glas- behållare eller behållare av rostfritt stål. Detta utgjorde lösning B. Filtret tvättades icke i detta fall.

S. Under måttlig omröring sattes 5,8 ml av lösning B till hela mängden av lösning A under en tidsrymd av l-2 minuter.

Detta motsvarar 2,5 ekvivalenter (0,SB g) av DL-mjölksyran.

Kristaller bildades efter 10 minuters omröríng. Om kristaller -~ 13 457 257 icke skulle bildas kan man tillsätta sterila groddkristaller av m-AMSA-DL-laktat-acetonsolvat eller skrapa behållarens väggar med en steril glasstav för att inducera kristallisa- tion. 6. Efter avslutad kristallisation omrördes blandningen ytter- ligare l timme. 7. Kristallerna avlägsnades genom luddfri, steril filtre- ringsteknik. Kristallerna tvättades med 10 ml aceton, som i förväg hade filtrerats genom ett sterilt Millipore-Fluoropore- eller Mitex-filter. 8. Kristallerna vakuumtorkades vid 500 under l6-24 timmar.

Utbytet av DL-laktat-acetonsolvat var 1,1 g.

Egenskager: IR-spektrum såsom i fig. 3.

NMR-spektrum såsom i íig. 4. Detta spektrum vi- sar ca 0,7 mol aceton solvatiserat till saltet och ca 0,1 mol% laktyllaktat som förorening. smältpunkt = 159-1s6° (sönderaelning). % m-AMSA i saltet = 72% (baserat på HPLC-analys).

Löslighet i vatten = 25 mg/ml vid rumstemperatur. gšemgel 9 Torrfylld parenteral beredning av m-AMSA-DL-laktat-acetonsolvat Beredning X Beståndsdel Per amgull sterilt m-AMsA-nL-1aktat- 0,02 g m-AMSA-aktivitet x* acetonsolvat, 0,25-0,42 mm 1. Under användning av aseptisk teknik infördes den erforder- liga mängden sterilt m-AMSA-DL-laktatsalt, 0,25-0,42 mm, i sterila ampuller. Ampullerna tillslöts med sterila gummiprop- par och förseglades med aluminiumfolie. Ampullerna förvarades i mörker till dess innehållet skulle rekonstitueras. 457 257 ' 14 2. För rekonstituering tillsattes en tillräcklig mängd ste- rilt vatten för injektionsändamâl för att ge en lösning med en aktivitet av 5 mg/ml m-AMSA. De rekonstituerade lösningarna kunde förvaras 16 timmar vid 20-250. Försiktighet bör iakttas då lösningarna av m-AMSA icke är fördragbara med klorid-, sul- fat- och fosfatjoner, eftersom olösliga salter bildas.

X En tillsats av 100 mg mannitol har visat sig minska tiden för rekonstituering med vatten. xx Den erforderliga mängden m-AMSA-DL-laktat-acetonsolvat är en funktion av saltets potens, den erforderliga överfyllnads- graden och den mängd som stannar kvar i nål-spruta-ampull.

Om man t.ex. antar att en produkt innehåller 0,7 mol aceton per mol salt är m-AMSA-halten hos en dylik produkt 74,46%.

För att således tillhandahålla en aktivitet av 0,2 g m-AMSA krävs 0,27 g 100%-igtrent m-AMSA-DL-1aktat-acetonsolvat. Denna mängd justeras därefter beroende på produktens verkliga potens, erforderlig överfyllnadsgrad, etc.

Exemgel 10 Framställning av kristallint m-AMSA-D(-l-mono1aktat-hemiaceto- nat 1. 1,0 g m-AMSA-bas uppslammades i 100 ml aceton vid 22-280.

Man erhöll en lösning eller näranog lösning på 10 minuter. 2. Under användning av aseptisk teknik fick actonlösningen av m-AMSA passera ett sterilt Mi11ipore-F1uropore- eller Mitex- filter. Filtratet tillvaratogs i en steril glasbehållare eller behållare av rostfritt stål. Filtret tvättades med 10 ml ace- ton och Millignærfiltrerat aceton sattes till filtratet. Detta utgjorde lösning A, som skulle användas i steg 5 nedan inom 5 timmar. 3. 1 g D(-)-mjölksyra upplöstes i en tillräcklig mängd aceton för att ge 10 ml acetonlösning (100 mg/ml D(-)-mjölksyra). Lös- 15 457 257 ningen omrördes 5 minuter. 4. Under användning av aseptisk teknik fick acetonlösningen av D(-)-mjölksyra passera ett Millipore-Fluoropore- eller Mitex-filter. Filtratet tillvaratogs i en steril glasbehàllare eller behållare av rostfritt stål. Detta utgjorde lösning B.

Filtret tvättades icke i detta fall. 5. Under måttlig omröring sattes 5,8 ml av lösning B till hela mängden av lösning A under en tidsrymd av l-2 minuter.

Detta motsvarade 2,5 ekvivalenter (0,58 g) D(-)-mjölksyra.

Kristaller bildades efter 10 minuters omröring. Om kristaller icke bildas kan groddkristaller av sterilt m~AMSA-D(-)-laktat- acetonsolvat tillsättas eller också kan behâllarens väggar skrapas med en steril glasstav för att inducera kristallísa- tion. 6. Blandningen omrördes ytterligare 1 timme efter avslutad kristallisation. 7. Kristallerna avlägsnades genom lämplig luddfri steril- filtreringsteknik. Kristallerna tvättades med 10 ml aceton, som i förväg hade filtrerats genom ett sterilt Millipore- Fluoropore- eller Mitex-filter. 8. Kristallerna torkades i högvakuum vid 500 under 16-24 timmar. Utbytet av m-AMSA-D(-)-monolaktat-acetonsolvat var l,l g.

Egenskager: IR~spektrum såsom visas i fig. 5.

NMR-spektrum såsom visas i fig. 6. Detta spektrum visar ca 0,4 mol aceton solvatiserat till saltet.

Smältpunkt (kapillärsmältpunkt, okorrigerad): 180-1840 (sönderdelning).

Halt m-AMSA i saltet: 78,4% (baserat på HPLC- analys).

Blementaranalys: C 59,47%; H 5,20%; N 8,41%; S 6,46%.

Vattenhalt enligt Karl Fisher = 0,39%. 16 457 257 d" Exemgel ll Lyofilisering av D(-)-monolaktat-acetonatet av m-AMSA Om förfarandet enligt exempel 7 upprepades under ersättning av m-AMSA-DL-laktat-acetonsolvatet med en ekvimolär mängd av det i exempel 10 framställda m-AMSA-D(-)-monolaktat-acetonsol- vatet erhölls ett lyofiliserat fast material, som kunde rekon- stitueras med vatten under bildning av en lösning med en akti- vitet av 3-5 mg m-AMSA per ml. Analys av det fasta materialet visade 1 mol m-AMSA per mol D(-)-mjölksyra utan närvaro av aceton.

Claims (6)

I? '_ 457 257 PATENTKRAV

1. Kristallint L(+)-monolaktat-hemiacetonat av m-AMSA (4'- -(9-akridinylamino)metansulfonsyra-m-anisidid), kristallint D(-)-monolaktat-hemiacetonat av m-AMSA och kristallint DL-mo- nolaktat-acetonsolvat av m-AMSA innehållande 0,6 - 0,7 mol aceton per mol laktatsalt.

2. Sätt att framställa kristallint L(+)-monolaktat-hemiacet- onat av m-AMSA (4'-(9-akridinylamino)metansulfonsyra-m-anis- idid), kristallint D(-)-monolaktat-hemiacetonat av m-AMSA och kristallint DL-monolaktat-acetonsolvat av m-AMSA inne- hållande 0,6~0,7 mol aceton per mol laktatsalt enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att man (1) framställer en lösning av m-AMSA och aceton~mjölk- syra, vilken lösning är i huvudsak fri från kon- taminerande joner av klorid, sulfat, fosfat och karbonat, varvid molförhållandet mjölksyra till AMSA är från 1:1 till 4:1 och (2) kristalliserar det önskade laktat~acetonatsolva- tet ur den pâ så sätt erhållna lösningen.

3. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att man använder 2-2,5 mol mjölksyra per mol m-AMSA.

4. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att man utför steg (1) vid en temperatur av OO-40oC.

5. Förfarande för framställning av en stabil, fast, vatten- löslig farmaceutisk doseringsform för rekonstituering med vatten eller en vattenhaltig bärare för bildning av en sta- bil lösning av m-AMSA, k ä n n e t e c k n a t därav, att mafl 19 457 257 (1) bildar en vattenlösning av kristallint L(+)-monø- laktat-hemiacetonat av m-AMSA, kristallint m-AMSA- -DL~monolaktat-acetonsolvat innehållande 0,6-0,7 mol aceton per mol laktatsalt eller kristallint m-AMSA-D(-)-monolaktat~hemiacetonat och (2) lyofiliserar den på så sätt framställda vattenlös- ningen.

6. Förfarande enligt krav 5, k ä n n e t e c k n a t därav, att man filtrerar vattenlösningen i steg (1) före lyofilise- ringen.