SU1291602A1 - Способ отбраковки легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочнокислых стрептококков - Google Patents
Способ отбраковки легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочнокислых стрептококков Download PDFInfo
- Publication number
- SU1291602A1 SU1291602A1 SU853899330A SU3899330A SU1291602A1 SU 1291602 A1 SU1291602 A1 SU 1291602A1 SU 853899330 A SU853899330 A SU 853899330A SU 3899330 A SU3899330 A SU 3899330A SU 1291602 A1 SU1291602 A1 SU 1291602A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- strains
- streptococci
- rejecting
- mesophilic
- dose
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 16
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 title claims description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 230000001320 lysogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims abstract description 7
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims abstract description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims abstract 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 4
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 claims description 3
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 claims 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 1
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 claims 1
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 claims 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims 1
- 235000011835 quiches Nutrition 0.000 abstract 1
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 description 18
- 241000194034 Lactococcus lactis subsp. cremoris Species 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000006424 hmd medium Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000000424 optical density measurement Methods 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к сыроде- ланию, может быть использовано в селекции МОЛОЧНО-КИСЛЫХ бактерий, включаемых в состав заквайок дл сыров, и позвол ет упростить оценку легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезо- фильных МОЛОЧНО-КИСЛЫХ стрептококков. Исследуемые штаммы культивируют до логарифмической фазы роста, ресуспен- дируют в солевом раствореj облучают . УФ-излучением дозой 25 Дж-м и куль- тивируют в питательном бульоне при оптимальной температуре. О фаголизисе культур суд т по их ростовой реакции в течение 2-3 ч после облучени , оцениваемой по временному иймененик (снижению) оптической плотности. 1 з.п.ф-лы, 2 ил. с (О (Л
Description
Изобретение относитс к сыроделию и может быть использовано в селекции мезофильных молочно-кислых стрептококков , включаемых в состав заквасок дл сыров.
Целью изобретени вл етс создание более простого способа легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочно-кислых стрептококков.
Предлагаемый способ заключаетс в следующем.
Клетки исследуемой культуры мезофильных молочно-кислых стрептококков наход щиес в начале логарифмической фазы роста (3-4-часова бульонна культура), отдел ют от питательной среды, суспендируют в стерильном солевом растворе с рН 6,8-7,2, облучают УФ-излучением дозой 25 Дж-м , помещают в питательный бульон и инкубируют при температуре, оптимальной дл роста культуры (25°С дл штаммов вида С. creraoris и 30°С дл штаммов вида S. lactis и S. lactis subsp. di acetylactis). В процессе инкубации регистрируют рост культуры по изменению величины оптической плотности контролируемой смеси (или интенсив- ности светорассе ни ) во времени.
В период от 1,0 до 2,5 ч от начала инкубации облученных клеток (в зависимости от штаммовой специфичности ) у легкоиндуцируемых лизогенных культур при указанной дозе УФ-облу- чени наблюдаетс временное уменьшение или торможение оптической плотности (или светорассе ни ), св занное с лизисом определенной части клеточной попул ции под действием индуцированного умеренного фага, ta- кие культуры не следует включать в состав заквасок дл сыродели как потенциально опасные с точки зрени продукции бактериофагов.
Пример. Вы вление легкоиндуцируемых лизогенных культур тур- бидиметрическим методом с помощью фотоэлектрокалориметра. Пробирку со стерильным бульоном, приготовлен- ным из обезжиренного молока, гидро- лизованного панкреатином (среда БГМ) инокулируют 1 мл 18-часовой культуры производственного штамма S.lactis 94 и инкубируют 3 ч при . Клетки собирают центрифугированием (10 мин при 5000 об/мин ) и ресуспендируют в стерильном физиологическом растворе до плотности попул ции около 5
0
15
0
5
5
п
, г
30
35
.мл . 9 мл полученной суспензии в стерильной чашке Петри (диаметр 93 мм) подвергают УФ-облучению дозой 25 посто нном перемешивании с помощью магнитной мешалки. Источником УФ-излучени служит бактерицидна лампа БУВ-15.
Аналогичным образом готов т и облучают клеточные суспензии производственных штаммов S.lactis 350, S.cre- moris 49 и S.lactis subsp. diacety- lactis 625 . Сразу после облучени 2 мл клеточной суспензии смешивают с 2 мл среды БГМ двойной концентрации в- стерильной оптической кювете (длина оптического пути 10 мм) с крьш1кой, инкубируют 3 ч при 25 С (S. crenoris) или при 30°С (остальные штаммы стрептококков). Через каждые 15 мин инкубации измер ют оптическую плотность полученной смеси с помощью электрофотоколори-- метра КФК КЛ 4,2 (перед каждым измерением смесь в кюветах перемешивают с помощью магнитной мешалки).
На фиг. 1- представлены полученные графики изменени оптической плотности облученных культур в зависимости от времени инкубации. Из представленных графиков видно, что штаммы S. lactis 94 и S.cremoris 49 легко индуцируютс , а штаммы S.lactis 350 иS.lactis subsp. diacetylactis 625 не индуцируютс при данной дозе УФ-излу- ченй . Таким образом, штаммы S.lactis 94 и S.cremoris 49 не рекомендуетс включать в состав заквасок дл сыродели .
П р и м е р 2. Вы вление легкоин-т дуцируемых лизогенных культур с помощью автоматизированной оптической установки, разработанной в Алтайском филиале ВНИИМС. Суспензию клеток исследуемых молочно-кислых стрептококков S.lactis (индивидуальные штаммы 94 и 350), приготовленную и облученную УФ-излучением, как указано в примере 1, смешивают с равным объемом среды БГМ двойной концентрации,- помещают в стерильную оптическую кювету , расположенную в термостатиро-- ванном блоке и оснащенную устройством , обеспечивающим непрерывное перемешивание культуральной среды, и инкубируют 3 ч при . В процессе инкубации через каждые 3 мин провод т автоматическое измерение оптической плотности смеси с помощью
управл ющей программы компьютера с одновременной выдачей данных на циф- ропечать. Полученные таким образом результаты измерений оптической плот- ности культур S.lactis 94 и 350 пред- 5 ставлены в виде графиков на фиг.2. Они не отличаютс от результатов, полученных ручным способом дл соответствующих штаммов мезофильных мо- лочно-кислых стрептококков (пример 1)ЛО
П р и м е р 3. Приготовление за- квасочной комбинации и сухого бактериального препарата. Производственные штаммы мезофильных молочнокислых стрептококков S.lactis 94, S.lactis 5 198, S.lactis 203, , S.cremoris 49 S.lactis subsp. diacetylactis 407, S.lactis subsp. diacetylactis 625, вход щие в состав заквасочной комбинации , провер ют предлагаемым спосо бом на наличие легкоиндуцируемого лизогенного состо ни . Штаммы S.lactis 94 и S.cremoris 49, оказавшиес легкоиндуцируемыми лизогенными стрептококками (примеры 1 и 2), исключают из состава закваски дл сыров как потенциально опасные в отношении продукции бактериофага на производстве. Взамен их в состав заквасочной комбинации ввод т биологически совмес- тимые штаммы S.lactis 350 и S.cremoris ЗМ-5, аналогичные по производственно ценным свойствам исключенным штаммам, но не дающие реакции фаголицируемых лизогенных штаммов мезофи ных молочно-кислых стрептококков, представл ющих потенциальную опасность дл сыродели , не требуетс личи дорогосто щего электронного микроскопа и проведени сложных и трудоемких операций, св занных с злектронно-микроскопическим исслед ванием бактериальных клеток. Приме нение простого, широко используемо в микробиологической практике опти ческого метода контрол роста куль тур и проста дешева аппаратура (ф тоэлектрокалориметр любой марки) по вол ют упростить процесс отбраковки При этом по вл етс возможность ав матизации способа, что облегчает эк плуатацию соответствующей аппаратур
Claims (2)
1. Способ отбраковки легкоиндуци руемых лизо.генных штаммов мезофильн молочно-кислых стрептококков, заклю чающийс в культивировании бактерий до достижени ими логарифмической ф зы роста, отборе проб после культив ровани и последующей оценке культу дл вы влени пригодных дл дальней шего использовани , отличающийс тем, что, с целью упроще ни оценки, культуру стрептококков после отбора помещают в солевой рас вор с рН 6,8-7,2 и облучают УФ-излу
зиса при УФ-облучении дозой 25 Дж-м 35 чением дозой 25 Дж-.м , после чего В производственной лаборатории -биопрепаратов Алтайского филиала ВНЙИМСа на основе указанной заквасочной комбинации выработали партию
помещают в питательный бульон и инк бируют при оптимальной температуре роста, оценива ее развитие по изме нению оптической плотности полученн
сухого бактериального препарата № 3М.40 го раствора, а отбраковку осуществПрепарат разослан на сыродельные заводы Западной Сибири и Казахстана дл использовани при производстве твердых сычужных сыров с низкой температурой второго нагревани .
Преимущество способа заключаетс в том, что дл вы влени легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочно-кислых стрептококков, представл ющих потенциальную опасность дл сыродели , не требуетс наличи дорогосто щего электронного микроскопа и проведени сложных и трудоемких операций, св занных с злектронно-микроскопическим исследованием бактериальных клеток. Применение простого, широко используемого в микробиологической практике оптического метода контрол роста культур и проста дешева аппаратура (фо- тоэлектрокалориметр любой марки) позвол ют упростить процесс отбраковки. При этом по вл етс возможность автоматизации способа, что облегчает эксплуатацию соответствующей аппаратуры.
5 20 Формула изобретени
1. Способ отбраковки легкоиндуцируемых лизо.генных штаммов мезофильных молочно-кислых стрептококков, заключающийс в культивировании бактерий до достижени ими логарифмической фазы роста, отборе проб после культивировани и последующей оценке культур дл вы влени пригодных дл дальнейшего использовани , отличающийс тем, что, с целью упрощени оценки, культуру стрептококков после отбора помещают в солевой раствор с рН 6,8-7,2 и облучают УФ-излучением дозой 25 Дж-.м , после чего
помещают в питательный бульон и инкубируют при оптимальной температуре роста, оценива ее развитие по изменению оптической плотности полученно
л ют по результату сравнени измеренного значени по отношению к заданному значению.
2. Способ по п. 1, отличающийс тем, что в качестве параметра оценки используетс светорассе ние полученного раствора.
hi ) )J id is ko i5 4t j Врем , V Фие.)
fo Ж jfWWsrmr,. врем , мин Фив. 2
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU853899330A SU1291602A1 (ru) | 1985-05-17 | 1985-05-17 | Способ отбраковки легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочнокислых стрептококков |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU853899330A SU1291602A1 (ru) | 1985-05-17 | 1985-05-17 | Способ отбраковки легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочнокислых стрептококков |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1291602A1 true SU1291602A1 (ru) | 1987-02-23 |
Family
ID=21178635
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU853899330A SU1291602A1 (ru) | 1985-05-17 | 1985-05-17 | Способ отбраковки легкоиндуцируемых лизогенных штаммов мезофильных молочнокислых стрептококков |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1291602A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2346034C1 (ru) * | 2007-06-08 | 2009-02-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт маслоделия и сыроделия Россельхозакадемии | ШТАММ БАКТЕРИЙ Lactococcus lactis subsp. cremoris ТК-ОБЛ-К1-1Ф, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ ЛАКТОКОККОВ |
-
1985
- 1985-05-17 SU SU853899330A patent/SU1291602A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР 761557, кл, С 12 N 1/00, 1978. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2346034C1 (ru) * | 2007-06-08 | 2009-02-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт маслоделия и сыроделия Россельхозакадемии | ШТАММ БАКТЕРИЙ Lactococcus lactis subsp. cremoris ТК-ОБЛ-К1-1Ф, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ ЛАКТОКОККОВ |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Roy et al. | Production of antifungal substance by Lactococcus lactis subsp. lactis CHD-28.3 | |
| Proper et al. | Mass culture of the protozoa Colpoda steinii | |
| Phalip et al. | A method for screening diacetyl and acetoin‐producing bacteria on agar plates | |
| Cooper et al. | Studies in the differentiation between human and animal pollution by means of faecal streptococci | |
| JPH072119B2 (ja) | 牛乳中の抗生物質の測定用試験セット及び牛乳中の抗生物質の測定方法 | |
| US4421849A (en) | Method for biological screening | |
| CN212925040U (zh) | 一种生物制品用微生物培养装置 | |
| Fildes | Tetanus: I. Isolation, Morphology and Cultural Reactions of B. tetani | |
| Baribo et al. | The production of a growth inhibitor by lactic streptococci | |
| Williams et al. | Genetic transformation in Methylococcus capsulatus | |
| JPH06500004A (ja) | 蛋白質組成物の製造 | |
| Flournoy | Facilitating identification of lactose-fermenting enterobacteriaceae on macconkey agar | |
| US4753876A (en) | Marker genes in pseudomonad bacteria | |
| CN113462627B (zh) | 构建乳链菌肽细胞分子传感器筛选乳链菌肽高产菌的方法 | |
| JP2024522837A (ja) | 酸化滅菌プロセスの有効性を決定するための生物学的指標および使用方法 | |
| US3853711A (en) | Installation for automation of microbiological work techniques | |
| RU2081917C1 (ru) | Способ идентификации бруцелл | |
| EP1222469A2 (en) | One step test to detect antimicrobial residues in eggs | |
| RU2159808C2 (ru) | Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме | |
| IRIÉ et al. | Preparation of a clean sample of bacterial spores | |
| RU2108384C1 (ru) | Штамм bacillus thuringiensis - продуцент эндотоксина против жесткокрылых насекомых и способ его культивирования | |
| Shahani et al. | A Resazurin disk assay method for detecting antibiotics and natural starter inhibitory activity in milk | |
| CN112365920A (zh) | 一种鉴定蜜蜂分化关键基因的方法及鉴定得到的基因和应用 | |
| SU600179A1 (ru) | Штамм 220-тесткультура дл вы влени вирулентных и умеренных бактериофагов мезофильных молочнокислых стрептококков | |
| RU2086984C1 (ru) | Способ получения диагностикума для выявления термостабильных антигенов кампилобактеров |