1
Изобретение относитс к способу полу- чени новых производных цефалоспорановой кислоты, обладающих фармакологической ак , тивностью, превосход щей актнЬность известных аналогичных соединений.
Известен способ получени производных
7-аминоцефалоспорановой кислоты общей формулы
Ег° СНг С где й - имрщазопий- или имидааолил группа, котора может быть гидрирована и котора присоединена к ацетильной лфуппе атомом азота и может быть замещена одним или несколькими атомами галогена ,, низшими алкилами, низшими коксилами, низшими алкилмеркаптогруппа- ми; JR - оксигруппа, свободна или этери фицированна карбоновой кислотой в слож ный эфир, в которой атомы кислорода мо- гут быть заменены на атомы серы, креме ацетоксигруппы, N -замещенна карбамо- илоксигруппа формулы -O CO-NHR , где - низший алкил, незамещенный или замещенный одной или несколькими ашсоксигруппами или атомами галогака, в которой атомы кислорода могут быть заменены на атом серы, четвертична аминогруппа, преимущественно пиридиногруппа ,. Способ заключаетс в том, что цёфалоспорин общей формулы, г-БН где f имеет вышеуказанные значени или ацетоксигруппа; 7, -галогенацетил или свободна или эте рифидированна карбоновой кислотой оксигруппа , в которой атомы кислорода сложн го эфира могут быть заменены на атомы серы, подвергают взаимодействию с гидрированным имидазолом или имидазолом. Процесс предпочтительно провод т в инертном растворителе, таком, как метиле хлорид, хлороформ, четырехбромистый угл род, тетрагидрофуран, диоксан, диметил- формамид, ацетонитрил, в присутствии аге та, св зывающего кислоту, например слаб го неорганического основани , такого, как карбонат, бикарбонат или ацетат щелочного металла, или третичного амина, преимуществ венно - этилдиизопропиламина. Св зьгоающим кислоту агентом может служить и избыток используемого имидазола или гидрированного имидазола. Рекаци протекает при комнатной температуре в течение нескольких часов. Однако, если желательнОг ее можно проводить при более низкой или при i слегка повышенной температуре. Продукты вьщел ют известным способом в сЕГободном виде или в виде соли. Полученные производные 7-аминоцефалоспорановой кислоть, в которых Rp- ацетоксигруппа , перевод т в- соединени , в которых R - свободна или друга сложноэфирна группа така , как ацетоксигруппа, в которой атомы кислорода могут быть за- менены на атомы серы, или четвертична аминогруппа, или соединени , в которых оксигруппа перевод т в соединени . где Щ„ -Ц -замещенна карбамоилоксигрупП р Р5 м е р 1. Раствор 5,92 г (15 ммоль) бромааетип-7-аминоцефалоспо- раноБОй кислоты в 45 мл диметилформами- да прибавл ют к. раствору 2,58 г (31,5 NjMoab) 1-мвтилимидазола в 27 мл метиленхлорида . Через 7 час приливают 1 мл ледЕной уксусной кислоты к затем 12,5 мл смеси метиленхлорид-тетрагидрофуран (4tl)c Далее отдел ют смолистый осадок и к декантату прибавл ют 75 мл той же смеси растворителей. Полученный смолистый ос.адС1К отдел ют и растирают с 75 мл той же смеси растворителей, пока не получает сернистый продукт который отсасывают, промьгеают тетрагидрофураном и сушат в глубоком вакууме. Получают 4,92 г сырой .метилимидазолш1-(3)-ацетиламино -цефалоспорановой кислоты; прибавлением тетрагидрофурана к фильтрату можно получить еще 1.,6 г этой кислоты. Дл перевода кислоты в соль натри 2,5 г сырого продукта раствор ют в 9,25мл метанола, после чего прибавл ют 3,25 мл ЗМ метанрпьного раствора натрий-of-этилгексаната и затем 12,5 мл тетрагидрофурана . При сто нии на xqnoay выкристаллизовьшаетс соль натри , котора легко расттвор етс в воде. Соль содержит ион , наход щийс , веро тно, у четвертичного аэота имидазольного кольца. После перекристал изации продукт разлагаетс (без плав- лени ) в запа нном капилл ре при 178°С. o( с 1, в воле). Rf.,0,0i, R)oiAOi35УФ-сп ёктр в воде: Я26О мм ( 85ОО) и Р 34О ммк (с 35О). Пример 2, К Р4СТВФУ 5,92 г ( 15 ммоль) бромацетип-7-аминоцефалоспорансеой кислоты в 45 мл диметилформамида прибавл ют раствор 3,37 г (49,5ммоль имидазола в 22,5 мл метиленхлсфида, после чего промьгеают 7,5 мл метиленхлорада, Дл охлаждени реакционной смесв колбу на короткое врем помещают в лед ную воду . Через 6 час приливают 1,17 мл лед ной уксусной кислоты. 7- Имидазолил-(1)-ацетиламино -цефалоспорановую кислоту вы дел ют фракционным осаждением, дл чего к реакционной смеси прибавл ют 37,5 мл . 1 смеси из 4 об. ч. метиленхлорида и 1 об. ч. тетрагидрофурана . Образуетс осадок, кото-г рый удал ют фильтрованием на нутче. К фильтрату прибавл ют при перемешивании 30 мл метиленхлорида и 16О мл тетрагид .. рофурана. Образовавшийс при этом бесдвет ный осадок отфильтровывают на нутче и про мьгоают тетрагидрофураном. Поскольку веще ство содержит еще незначительное количертво диметилформамида, его растирают с 75 мл смеси метиленхлорид-тетрагидрофуран (4 :1), отфильтровьгоают на нутче и промывают еще раз тетрагидрофурансм. После сушки в п гбсжом вакууме получают 7- имидазолил-( 1 )-ацетиламино -цефалоспорановую кислоту в виде почти бесцвет;ного порошка. Цвет продукта при 131 °С и;змен етс на желтоватый; плавитс кисло|та при 141-15О°С с разложением в за- па нном капилл ре, pi -127± 1 ( с ;1,вводе). Rf 0,03 ;%,. 0,50. Пример 3. К раствору 393 мг (1,О ммоль) бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты в 2,5 мл диметклформам да прибавл ют раствор 254 мг (3,2 ммоль) 2-метилимидазола в смеси из 1,5 мл ме- тиленхлррида и 0,5 мл диметилформамида, I после чего промьшают 6,5 мл метиленхлорида . Через 2ОО мин приливают О,О66 мл лед ной уксусной кислоты. 2-Метилимвдазолилацетил-7-аминоцефалосйорановую кислоту выдел ют фракционным осаждением, дл чегр к реакционной смеси рибавл ют 4,5 мп смеси из 4 об. ч. метипенхло|рида и 1 об. ч. тетрагидрофурана и образо;вавшийс хлопьевидный осадок отдел ют фильтрованием. К фильтрату прибавл ют при перемешивании 2О мл тетрагидрофурана и образовавшийс осадок отсасьшают на нуть. че. Поскольку последний содержит еще диметилформамид, то его тщательно растирают с 5 мл смеси метилен ( 4:1 ), затем хлорид-тетрагидрофуран отфнр.тровывают на нутче и промьтают тетраридр1(эф;згр|ано1у1. После сушки в глубоком вакууме пб зрчвйкзт 7-|2-метилимидазолил- ( 1)-ацетилам н -дефалоспорансеую кислоту в виде бесц1вет иого порошка При 145°С цвет вешества измей етс на коричневый; плавитс вещество при 160170 0 с разложением в запа нных капилл рах , Ид 136±1° Сс 1, в вОА). Rts. Пример 4. К раствору 11,75 г 3-(дезацетоксиметил)-3-бензоилметил-7 ,-бромацетиламиноц ефалоспорановой кислоты . ь 45 мл диметилформамнда прибавл ют соеi о раствор 5,25 г имидазола в 12 мл диметилформамида , после чего приливают 1,45 мл лед ной уксусной кислоты и оставл ют сто ть в темноте при комнатной ипо температуре. Через 23 час медленно приt- Jt-г-tбавл ют при перемешивании и охлаждении В) лед ной воде 56 мл 1/12 н. сол ной кислоты . Коричневый мазеобразный осадок отфильтровывают черюз тонкий слой . К фильтрату прибавл ют еще 570 мл 1/12н. сол ной кислоты при интенсивном перемешивании и охлаждении льдом, после чего продолжают перемешивать еще 1 час и охлаждают . Образовавшийс хлопьевидный осадок 3-(де здетоксиметил) -3-бензоилтиометил-7 -имидазолил-;( 1) -ацетиламиноТ -дефалоспорановой кислоты отделшот фильтрованием на нутче и промьгеают 10 мл воды. 52 . УФ-спектр в О,1 М растворе бикарбоната натри : Д 243 нм ( 14 200) И 273 им (е 15600). Исходный продукт можно получить следующим образом. Раствор 17,5 г З-(дезацетоксиметил)- -3-Jбeнзoилтиoмeтил-7-aминoцeфaлocпopaнoвой кислоты и 12,5 мл триэтиламина в 1л диметилформамида в течение 1 час прикапы вают к перемешиваемому, вьщержанному при (-13) - ( раствору 9,2 мл бромацетилбромида в 10О мл метиленхлорида (атмосфера азота). Затем в течение 1,5 час раствор медленно нагревают до 10°С, поддержива эту температуру в течение 30 мин. Далее ёоошшую часть раст ворител отгон ют в вакууме при 0,5-1 м рт. ст. через охладитель из смеси сухой лед - ацетон. Масл нистый продукт вылива ют на фосфатный буфер (рН б) и встр хива ют с 1 л этилового эфира уксусной кислоты . На границе обеих фаз образуетс осадо который отдел ют фильтрованием или центр фугирсеанием. Затем водную фазу довод т до рН 2, насыщают ее поваренной солью и отдел ют органическую фазу. Водную фазу дополнительно экстрагируют 6ОО и 4ОО мл этиловогоэфира; уксусной кислоты После высушивани насыщенным раствором поваренной соли органические фазы сушат над сульфатом натри и фильтруют друг за другом через колонку со 100 мг силикаге л . Фильтраты концентрируют в вакууме до суха. К остатку прибавл ют 30 мл этанола и перекристаллизовывают при -2О°С. Полу чают 7,8 г 3-(дезацетоксиметцл)-3-бен- зоилтиометил-7-бромацетиламиноцефалоспорановой кислоты, т. пл,-137-138 С. ,55. В УФ-спектре в воде соль натри пока- зывает: Л243 нм ( 16800) и 275 нм (620600). И 47 :. 10(с 1, в О,1 моль смеси бикарбонат натри -ацетон, 1:1). Пример 5. К раствору 5,13 г 3-{дезацетоксиметил) -3-бензоилтиометил-7 - имидазолил-( 1) -адетиламинЬ -цефалоспорановой кислоты в 45 мл пиридина прибавл ют 45 мл диоксана, а затем приливают 26 мл 40%-ного раствора перхлората ртути и дают прореагировать при 45°С и сильном перемешивании в течение 45 мин (атмосфера азота). Далее смесь охлаждают , прибавл ют 13,8 мл тиобензойной кислоты и встр хивают в течение 5 мин. Растворители отгон ют в вакууме и оставший с раствор в 200 мл воды фильтруют чере Cetite . Фильтрат по очереди промываю НО мл толуола, 2 раза по 68 мл AmberliteifrXB 140 мл толуола и 2 раза по НО мл толуола. Затем водную фазу фильтруют через колонку, содержащую снизу вверх 1О мл Sephadex СМ С-25 ( Н -форма), 42 мл Alox , 1О,5 мл Zeo-Karb 226 (Н -форма), 42 мл АЮх , 10,5 мл Dowex -1 (ацетат-ч} )орма) и 10 мл Sephadex СМ С-25 (Н -форма). Celite , opганические формы и колонку дополнительно экстрагируют 2 раза по ЗО мл воды. 8 Кроме того, колонку элюируют еще 300мл. воды. Соединеннее элюаты концентрируют : Б вакууме, удал ют небольшое количество рсадка и выпаривают досуха. Остаток ди- герируют 10 мл спирта. Получают чистую 3-( дезацетоксиметил) -3-пиридинометил- j -7-Гимидазолил-(1)-ацетиламино1 -цефалоспоран№ую кипло;ту , aj +76±l Чс 1, в воде).Й D. УФ-спектр в воде: Д257 нм ( 11650). Пример 6. Раствор 1,97 г 7- { имидазолил-(1)-ацетиламиьо|-цефалоспр рановой кислоты в 100 мл воды нагревают до 37ОС и прибавлением 57,5 мл 0,1н, едкого натра дснвод т рН раствора до 3,5. Затем прибавл ют суспензию 50 мг ацетилэстеоазы (Ba tllus subtUis АТСС 6633 в 2 мл воды и посто нно нейтрализуют ооразующуюс уксусную кислоту до нейтральной реакции при помощи автоматического титратора с 0,1 н. едким натром (довод т до рН 7,3). Через 4 час реакци прекращаетс . Далее довод т рН , среды до 6,5, фильтруют раствор через спекшиес частицы стекла О 4 и подвергают лиофильной сушке. Получакуг 2,62 г желтоватойсмолил соли натри 7- имида- золил-( 1) -ацетиламино -О-дезацетилцефалоспорановой кислоты. Полученный сырой продукт раствор ют .в смеби из 22 мл абсолютного диметилформамида и 6,15 мл триэтиламина, прибавл ю к нему 3,7 мл 3 -хлорэтилизоцианата и перемешивают 30 мин при комнатной температуре . Затем удал ют в глубоком вакууме растворитель и растирают смолообраз- ный коричневатый остаток несколько раз со 100 мл абсолютного эфира. Нераствори-мый в эфире остаток растворжоот в 60 мл воды и экстрагируют сначала два раза по ЗОО мл, а затем два раза по 150 мл этилового эфира уксусной кислоты. Органические фазы дополнительно промьшают два раза по 15 мд. воды. Водную фазу фильтруют через колонку диаметром 2,1 см и длиной 9 см из SepHadex СМ С-25 (Н -форма) и допол1штельно промывают водой . Первые 80 мл элюата содержат побочный продукт, а следующие 150 мл состо т из желтоватого раствора исходного продукта . Раствор фильтруют через тонкий слой Celtte и подвергают лиофильной сушке. Получают хорошо очищенную О-де- : задетил -O4JS - хлорэтилкарбамоил)-: -7 -имидазолил - (1 )-ацетш1аминоЗ