SU641884A3 - Реактив дл определени тригицеридов - Google Patents
Реактив дл определени тригицеридовInfo
- Publication number
- SU641884A3 SU641884A3 SU762386217A SU2386217A SU641884A3 SU 641884 A3 SU641884 A3 SU 641884A3 SU 762386217 A SU762386217 A SU 762386217A SU 2386217 A SU2386217 A SU 2386217A SU 641884 A3 SU641884 A3 SU 641884A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- reagent
- serum
- solution
- mixture
- mmol
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title description 21
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 title description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-N phosphoenolpyruvic acid Chemical compound OC(=O)C(=C)OP(O)(O)=O DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 5
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 5
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 5
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 5
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 5
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 5
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N Adenosine triphosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 4
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 description 4
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 229960001456 adenosine triphosphate Drugs 0.000 description 4
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 229930029653 phosphoenolpyruvate Natural products 0.000 description 3
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 3
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 3
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 2
- 102000057621 Glycerol kinases Human genes 0.000 description 2
- 108700016170 Glycerol kinases Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- -1 glitserinkinazu Proteins 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N tetratriacontan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001000 lipidemic effect Effects 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002966 varnish Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/61—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving triglycerides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/939—Rhizopus
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
I
Изобретение относитс к аналитической химии, а именно к определению триглиперидов , в продуктах питани , крови и сыворотке .
Известен реактив дл определени триглииеридов , содержащий липазу из KhilOPUS arPtl-ixu , буфер, ot -химотрипсин, глицеринкиназу, лактатдегидрогеназу, сывороточный альбумин аденозин-5-трифосфата , фосфоенолпировиноградную кислоту, восстановленный никотинамид - адениндинуклеотид , пируваткиназу ij.
Недостатками реактива вл ютс большой расход фермента и длительность проведени анализа дл определени триглииеридов .
По технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому реактиву наиболее близок реактив дл определени триглнцеридов, содержащий липазу из Rtiizopus arriiizus , карбоксилостеразу из микроорганизмов, додецилсульфат натри , иикотинамид - аденин - динуклеотид в восстановленной форме.
аденозинтрифосфат, фосфоенолпируват, лак татдегидрогеназу, фосфоенолкпназу, глицеринкиназу , aльбy шн сыворотки, сульфа магни , буфер и воду 2,
Недостатком этого реактива вл етс невысока точность определени , так как в сильно липемических сыворотках по вл етс муть в результате осаждени выдел ющихс в свободном виде жирных кислот, что сильно преп тствует оптическому определению.
Целью изобретени вл етс повышение точности определени .
Цель достигаетс описываемым реактивом дл определени триглицеридов, который содерхшт липазу из RIllZOpus orrfilZUS , карбоксилэстеразу из микроорганизмов , додещиюульфат натри , ник;от11намид - аденил-динуклеотид в восстановленной форме, аденозинтрифосфат, фосфоенолпирзват, лактатдегидрогеназу, фосфоенолкиназу, глицеринкиназу, альбумин сыворотки, сульфат магни , буфер и воду, а также дополнительно - сое нение обшей формухш (СН2 2°)« ; где R - алкильна или алкенильна г па - 20 П- 7-20, при следующем соотношении комп тов, вес%: Липаза из Rtl-jzopus arrilUus 0,01-1,0 Карбоксилэстераза 0,001-2 из микроорганизмов Додецилсульфат 0,001 -0,0 натри Никотинамид-аденин-динуклеотид-в в ее стан овленн ой 0,07-1,40 Аденовинтрифосфат 0,6-6,0 Фосфоенолпируват 0,1-0,9 Лактатдегидро- 0,05-0,5 геназа Фос;фоенолкиназа О,02-О5 Глицеринкиназа О,005-О,5 Альбумин сыворотки 0,О1-0,2 Сульфат магни с содержанием ионов магни 0,03-0,3 0,1-3,0 Соединение общей формулы RO(CH,gCH2O)H где алкильна или алкенильна группа ; 0,0015-0 11-7-20 Остальное Отличительный признак предлагае реактива состоит в том, что он допо тельно содержит соединение обшей ф лы ROCCHg CHjjO) И где К - алкильна или алкенильиа па С - С2о; П - 7-20. Применение предлагаемого реакти повышаетТОЧНОСТЬ определени . Кр того, он позвол ет сократить продол тельность определени до 1О мин и этом работать при комнатной темпер ре. Пример 1. Реактив согласн изобретению приготавливают из след смесей: 1) раствор буфера: 0,05 М натр фосфатный буфер, рН 7,0, содерлшши 4 ммолъ сульфата магни О,О1% доде сульфата натри , 0,015% полигликол 44 эфира цетилстеарилового спирта (с 12 моль окиси этилена); 2)коферментна смесь 10 ммоль нкот намид-аденил-динуклеотид в восстаовленной форме (НАДН), 22 ммоль ТФ - СНА-СОЛИ, 18 ммоль ФЭП-СНА3 )ферментна смесь 40О ед.акт/мл ипазы (Ktiizopus otr-i -hizus) 50 ед. акт/мл карбоксилзстеразы {из микроорганизмов) 50 ед, акт/мл фосеенолкиназы (ФК) (из мускулов кролика ), ЗОО ед. акт/мл лактатдегидрогеназы (ЛДГ) ( из серыа свиньи) в Виде суспензии в растворе сульфата аммони ; 4)150 ед. акт/мл глицеринкиназы (ГК), суспендированной в растворе сульфата аммони . Смеси 1-4 могут хранитьс при 4 С минимально в течение одного года. Смесь 2после растворени при этой температуре может хранитьс около двух недель. Из реактивов 1-3 приготавливают смесь, котора в охлажденном виде может хранитьс около двух дней. Смесь 2 к тому же раствор ют предварительно в дистиллированной воде. Дл приготовлени реакционной смеси смешивают растворы реактивов 1; 2 и суспензию реактива 3в объемном соотношении 5О:1,0;1,О. Определение с контрольной пробой. 5,0 мл смеси .1-3 смешивают с 0,1 мл сыворотки. Затем отбирают 2,0 - 2,5мл и смешившот их с 0,01 мл суспензии реактива 4 (проба); остальное служит контрольной пробой,Растворы пробы и контрольной пробы выдерживают около 10 мин при 20-25 С и измер ют экстинкцию пробы по отношению к величине контрольной пробы. Найденную величину примен ют ДЛЯ расчета. Определение без контрольной пробы, 2,5 мл смеси 1-3 смешивают с О,О5мл сыворотки, выдерживают 10 мин при 20-25 С и измер ют экстинкцию этого раствора. Затем прибавл ют О,О1 мл суспензии 4 и через 10 мин снова изме-. р ют экстиикцию. Разницу между обоими показани ми примен ют дл расчета. Измерени провод т на фотометре при 365, 340 или 334 нм. Расчет провод т в зависимости от длины воли измерени умно жением рааницьх экстинк.ций на 15,5 (365 нм) или 8,23 (340 нм),-или 8,53 (334 нм), При этом результат получают в ммол х. триглийхзрида i на 1 л пробы. 5 Повтор определени с разл1гчными количествами триглииерида в сыворотке, получают пр мую. Пропорциональрость (коэффициент коррел ции ) 0,997. П р и м е р 2. Дл сравнени реакти ва согласно изобретению с известным провод т следующие опыты. Опыты 1 и 2, Смешивают 4,9 мл раствора 1, который состоит из 0,1 М натрийфосфатного буфера, рН 7,6, содержащего 4 ммоль сульфата магни , 1,5мг альбумина , сыворотки и 0,01% додецилсульфата натри ; 0,2 мл раствора 2, состо щего из кс4)ерментной смеси 6 ммол НАНД, 33 ммоль аденозинтрифосфата (АТФ) и 11 моль фосфоенолпирувата (ФЕП 0,1 мл раствора 3, который включает 2 2 мг/мл ЛДГ и 1.МГ/МЛ ФК, в форме суспензии в растворе сульфата аммони ;, раствор 4, состо щий из коферментной смеси 0,2 мг липазы из Rfi-izopUS Ql rllizus и 4,0 мг карбоксилэстеразы; 0,1 мл сыворотки (примерно 5О мг три глицерида). От полученного раствора от бирают 1,5 мл в кювету 1, остальное в кювету 2, Опыты 3 и 4. Смешивают 5 мл реактива 1 по примеру 1; 0,1 мл реактива 2 по примеру 1; О,1 мл реактива 3 по приме ру 1 и 0,1 мл сыворотки {как в опытах 1 и 2). От приготовленного раствора отбирают в кювету 3 2,5 мл, остальное в кювету 4. Через примерно 20 мин отбирают пипеткой в каждую из кювет 1 и 3 по 0,01 мл суспензии ГК, Кюветы 2 и 4 остаютс дл контрольной пробы. Ниже приведены полученные результаты . Найдено после оценки с контрольной пробой 517 мг триглицерида /100 мл, сыворотки. Через 1О мин после оценки контрольной пробой найдено 508 мг триглицерида/ 1ОО мл сыворотки. Найдено после оценки без контрольной пробы 477 мг триглицерида/100 мл сыворотки. Через 10 мин после оценки без контрольной пробы найдено 513 мг триглицерида /1ОО мл сыворотки, С реактивом согласно изобретению получают практически идентичные величины при измерени х с учетом и без учета контрольной пробы, С известным реактивом получают различ1гые величины (за счет по влени мути), разница определений в данном примере около 8%. 4 Непосредственно после прибавлени пробы загрузки во всех опытах почти прозрачны. В кюветах 1 и 2 через 5мии образуетс заметна муть, В кюветах 3 и 4 через 0,5 мин раствор становитс прозрачным. Через 55 ин раствор в кювете 4 все еше прозрачен, а в кювете 3 очень мутен. П р и м 8 р 3. Дл приготовлени согласно изобретению используют: 1) раствор буфера; 0,02 М фосфат натри в качестве буфера, рН 7,0, содержащего 3 ммоль сульфата магни , 0,01 мг/мл додецилсульфата натри , 0,015 мг/мл цетилстеарилалкоголь- полигликольэфира с 12 ммоль этиленоксида и 0,1 мг/мл альбумина плазмы; 2)смесь коэнзимов, как в примере 1; 3)смесь ферментов; 0.2 Л1тааы из RtlizopUS ahrtlizus 0,2 мг/мл ФК (из мускулов кролика), 0,2 мг/мл карбоксилэстеразы (из микроорганизмов), 0,5 мг/гл ЛДГ (из сердцу свиньи или мускулов свиньи или кролика) в виде кристалл1П1еской суспензии; 4) 0,05 мг/мл ГК в виде кристаллической суспензии. Смесь реактивов приготавливают по примеру 1, исследование провод т так же, как в примере 1. При исследовании 1О сывороток человека и 3 контрольных сьшороток получено хорошее совпадение результатов с результатами, пол 1енными в примере 1. Коэффициент коррел ции 0,991, П р и м е р 4, Дл притотовлени реактива согласно изобретению примен ют: 1)буферный раствор --0,1 М фосфат натри в качестве буфера, рН 7,0, содержащего 8 ммоль суль4)ата магни , 0,2 мг/мл додешшсульфата натри , 0,3 мг/мл цетилстеарилалкогольполигликольэфира с 12 моль этиленокснда, 2,0 мг/мл альбумина сыворотки; 2)смесь коферментов; 20 ммачь НАДИ, 100 ммачь АТФ, 20 ммоль ФЕП в Д15стиллированной воде; 3)смеси ферментов: 1О мг/мл липазы из RtlizopUS arrliizuu , 20 мг/мл карбоксилэстеразы ( з мпкрооргаиизмов), 5 мг/мл ФК (из мускулов кролийа), 5 мг/мл ЛДГ (из сердца CBHtibH или мускулов свиньи или кролика), как раствор в буфере; 4) 5 мг/мл ГК.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19752535953 DE2535953C2 (de) | 1975-08-12 | Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Triglyceriden |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU641884A3 true SU641884A3 (ru) | 1979-01-05 |
Family
ID=5953826
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU762386217A SU641884A3 (ru) | 1975-08-12 | 1976-07-30 | Реактив дл определени тригицеридов |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4066508A (ru) |
| JP (1) | JPS5223110A (ru) |
| AT (1) | AT354406B (ru) |
| BE (1) | BE845042R (ru) |
| CA (1) | CA1057179A (ru) |
| CH (1) | CH607028A5 (ru) |
| CS (2) | CS219875B2 (ru) |
| DD (1) | DD126398A6 (ru) |
| DK (1) | DK144856C (ru) |
| FR (1) | FR2321126A2 (ru) |
| GB (1) | GB1502204A (ru) |
| HU (1) | HU175208B (ru) |
| IT (1) | IT1065064B (ru) |
| NL (1) | NL7608735A (ru) |
| SE (1) | SE420216B (ru) |
| SU (1) | SU641884A3 (ru) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4195126A (en) * | 1977-10-04 | 1980-03-25 | The Board Of Trustees Of The University Of Alabama | Albumin-dye complex for fatty acid determination |
| US4223090A (en) * | 1978-07-13 | 1980-09-16 | American Hospital Supply Corporation | Reagents for the enzymatic determination of triglycerides |
| US4254222A (en) * | 1978-07-19 | 1981-03-03 | Owen Oliver E | Semi-quantitative assay of lactic acid and β-hydroxy butyrate |
| DE2839433A1 (de) * | 1978-09-11 | 1980-03-20 | Merck Patent Gmbh | Waessrige lipid-standardloesung und verfahren zu ihrer herstellung |
| US4394445A (en) * | 1979-02-22 | 1983-07-19 | Nix Paul T | Enzymatic glyceride hydrolysis |
| US4259440A (en) * | 1979-05-21 | 1981-03-31 | Miles Laboratories, Inc. | Hydrolysis and assay of triglycerides |
| DE3007764A1 (de) * | 1980-02-29 | 1981-10-15 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagens zur bestimmung der beta -lipoproteine |
| US4309502A (en) * | 1980-06-30 | 1982-01-05 | Beckman Instruments, Inc. | Enzymatic assay for glycerol and triglycerides and a reagent for use therein |
| US4338395A (en) * | 1980-07-21 | 1982-07-06 | Technicon Instruments Corporation | Method for the analysis of triglycerides |
| EP0045031A1 (en) * | 1980-07-22 | 1982-02-03 | Baker Instruments Corporation | Glycerol detection reagent and its use |
| US4503146A (en) * | 1980-10-01 | 1985-03-05 | Technicon Instruments Corporation | Method for eliminating turbidity in a biological fluid and reagent therefor |
| JPS59173080A (ja) * | 1983-03-19 | 1984-09-29 | Nippon Oil & Fats Co Ltd | リパ−ゼの安定化方法 |
| US5310679A (en) * | 1985-05-13 | 1994-05-10 | Artiss Joseph D | Composition for reducing turbidity in samples of biological fluids |
| US4626511A (en) * | 1985-05-13 | 1986-12-02 | Wayne State University | Composition for reducing turbidity in samples of biological fluids |
| GB8514708D0 (en) * | 1985-06-11 | 1985-07-10 | Unilever Plc | Enzymatic detergent composition |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3853465A (en) * | 1972-06-09 | 1974-12-10 | Technicon Instr | Turbidity reduction in serum and plasma samples using polyoxyethylated lauric acid compounds |
| AT324282B (de) * | 1972-06-19 | 1975-08-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagens zur bestimmung von triglyceriden |
| US4011045A (en) * | 1975-02-14 | 1977-03-08 | Bonderman Dean P | Turbidity reduction in triglyceride standards |
| US4012287A (en) * | 1975-11-18 | 1977-03-15 | Dr. Bruno Lange Gmbh | Method and reagent for the quantitative analysis of triglycerides |
-
1976
- 1976-06-08 AT AT416376A patent/AT354406B/de not_active IP Right Cessation
- 1976-06-10 GB GB24061/76A patent/GB1502204A/en not_active Expired
- 1976-07-06 CS CS766611A patent/CS219875B2/cs unknown
- 1976-07-06 CS CS764473A patent/CS219874B2/cs unknown
- 1976-07-07 CA CA256,485A patent/CA1057179A/en not_active Expired
- 1976-07-21 US US05/707,455 patent/US4066508A/en not_active Expired - Lifetime
- 1976-07-22 DK DK331776A patent/DK144856C/da not_active IP Right Cessation
- 1976-07-26 IT IT25712/76A patent/IT1065064B/it active
- 1976-07-30 SU SU762386217A patent/SU641884A3/ru active
- 1976-08-06 FR FR7624214A patent/FR2321126A2/fr active Granted
- 1976-08-06 NL NL7608735A patent/NL7608735A/xx not_active Application Discontinuation
- 1976-08-09 CH CH1014376A patent/CH607028A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-08-10 BE BE169690A patent/BE845042R/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-08-10 DD DD194266A patent/DD126398A6/xx unknown
- 1976-08-10 SE SE7608919A patent/SE420216B/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-08-11 HU HU76BO1627A patent/HU175208B/hu unknown
- 1976-08-12 JP JP51096608A patent/JPS5223110A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BE845042R (fr) | 1977-02-10 |
| FR2321126A2 (fr) | 1977-03-11 |
| CS219875B2 (en) | 1983-03-25 |
| SE420216B (sv) | 1981-09-21 |
| IT1065064B (it) | 1985-02-25 |
| DD126398A6 (ru) | 1977-07-13 |
| FR2321126B2 (ru) | 1980-10-10 |
| ATA416376A (de) | 1979-06-15 |
| CA1057179A (en) | 1979-06-26 |
| DK144856C (da) | 1982-11-08 |
| JPS5223110A (en) | 1977-02-21 |
| GB1502204A (en) | 1978-02-22 |
| CS219874B2 (en) | 1983-03-25 |
| DK331776A (da) | 1977-02-13 |
| AT354406B (de) | 1979-01-10 |
| US4066508A (en) | 1978-01-03 |
| DK144856B (da) | 1982-06-21 |
| CH607028A5 (ru) | 1978-11-30 |
| NL7608735A (nl) | 1977-02-15 |
| SE7608919L (sv) | 1977-02-13 |
| HU175208B (hu) | 1980-06-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1125151A (en) | Triglycerides assay and reagents therefor | |
| SU641884A3 (ru) | Реактив дл определени тригицеридов | |
| Jaworek et al. | Adenosine-5′-diphosphate and adenosine-5′-monophosphate | |
| US4543326A (en) | Stabilization of oxidase | |
| Lowry | [17] Micromethods for the assay of enzymes | |
| Giusti | Adenosine deaminase | |
| Bergmeyer | Methods of enzymatic analysis | |
| Masaru et al. | A direct method for the estimation of ornithine carbamoyltransferase activity in serum | |
| Wieland | Glycerol | |
| GB2115926A (en) | Method for the quantitative determination of physiological components in biological fluids | |
| US4097338A (en) | Fluorimetric demonstration and determination of a reduced coenzyme or derivative in an aqueous system | |
| US4271265A (en) | Method and reagent for the determination of glutamate-oxalacetate transaminase and glutamate-pyruvate transaminase | |
| US4394445A (en) | Enzymatic glyceride hydrolysis | |
| US4001089A (en) | Method for determination of triglycerides and glycerol | |
| Cunningham et al. | A two-stage enzymatic method for determination of uric acid and hypoxanthine/xanthine | |
| Dieplinger et al. | The determination of lecithin: cholesterol acyl transferase in the clinical laboratory: a modified enzymatic procedure | |
| US4080265A (en) | Method for the determination of creative phosphokinase enzyme | |
| Blecher et al. | Determination of glucose in the presence of sucrose using glucose oxidase; effect of pH on absorption spectrum of oxidized o-dianisidine | |
| Jabs et al. | Microdetermination of plasma ATP and creatine phosphate concentrations with a luminescence biometer. | |
| Nazar et al. | An improved microfluorometric enzymatic assay for the determination of ammonia | |
| JPS6357040B2 (ru) | ||
| US4237044A (en) | Antibodies against creatinekinase-M8 and process for the production thereof | |
| US4888289A (en) | Reagent for determining creatine kinase | |
| US4035239A (en) | Enzymic assay for acetate ion | |
| US4142938A (en) | Determination of triglycerides and glycerol |