SU943280A1 - Способ консервации иммобилизованных ферментов - Google Patents
Способ консервации иммобилизованных ферментов Download PDFInfo
- Publication number
- SU943280A1 SU943280A1 SU782620877A SU2620877A SU943280A1 SU 943280 A1 SU943280 A1 SU 943280A1 SU 782620877 A SU782620877 A SU 782620877A SU 2620877 A SU2620877 A SU 2620877A SU 943280 A1 SU943280 A1 SU 943280A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- filler
- inert
- drying
- water
- fact
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 title claims description 14
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims abstract description 24
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 claims 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 claims 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 abstract description 8
- 230000007774 longterm Effects 0.000 abstract description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 108010058683 Immobilized Proteins Proteins 0.000 abstract 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 abstract 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 abstract 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 5
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 5
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- 108010027350 protosubtilin Proteins 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- -1 for example Polymers 0.000 description 1
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229920003170 water-soluble synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Crystals, And After-Treatments Of Crystals (AREA)
Description
Изобретение относитс к способшл ксжсервации иммобилизованных ферментов , позвол ющим избежать существенной потери активности при длительном хранении и транспортировке промьшшенно изготовленных препара-. тов иммобилизованных ферментов. Способ консервации может найти широкое применение при изготовлении препаратов иммобилизованных ферментов дл использовани их в пищевой , химической и микробиологической промышленности.
Известно, что дл длительного хранени белков и ферментов используют лиофильное высушивание, которое в большинстве случаев обеспечивает стопроцентное сохранение активности и нативности препаратов. В случае потерь активности при лиофилизации в раствор фермента перед высушиванием добавл ют различные инертные наполнители, растворимые в воде 1.
Лиофильное высушивание иммобилизованных ферментов также широко примен етс дл получени форм препаратов , выдерживающих длительное хранение , однако часто сопровождаетс частичной потерей активности.
Наиболее близким к предлагаемому вл етс способ консервации иммобилизованных ферментов путем лиофильного высушивани суспензии иммобилизованного фермента, в частности пепсина, в воде или буфере, который имеет тот недостаток, что в зависимости от использованного дл иммобилизации носител , при высу10 шивании тер етс от 10 до 90% активности 2 .
Цель изобретени - уменьшение потерь активности фермента при высуши15 вании.
Цель достигаетс тем, что согласно способу консервации иммобилизированных ферментов путем лиофольного вы20 сушивани их суспензии в воде или буфере, у суспензии добавл ют инертный растворимЛ) наполнитель при соотношении фермент;наполнитель 1:(1-20).
75
В качестве инертного наполнител используют неорганические соли, например поваренную соль.
В качестве инертного наполнител используют аминокислоты, например
JO глицин.
В качестве инертного наполнител используют углеводы, например глюкозу , сахарозу.
В качестве инертного наполнител используют водораствори у1ые полисахариды , например декстран.
В качестве инертного наполнител используют полиспирты, например полиэтиленгликоль .
В качестве инертного наполнител используют водорастворимые синтетические полимеры, например поливинилпирролидон .
Перед высушиванием к суспензии иммобилизованного фермента в воде или буфере добавл ют инертный растворимый в воде наполнитель , который предохран ет препарат иммобилизованного фермента от потери активности при лиофильном высушивании и легко может быть удален перед использованием препарата иммобилизованного фермента путем отмывани водой.
Препараты иммобилизованных ферментов сохран ют активность, превышающую в несколько раз (в р де случаев в 8 раз) активность препаратой подвергнутых лиофильному высушиванию без наполнител .
Перед последующим использованием фермента наполнитель может быть легко удален отмыва 1ием буфером или центрифугированием.
Пример. 20 мг пепсина свиньи , иммобилизованного на аэросиле, суспендируют в 1 мл воды, содержаще инертный растворимый наполнитель в весовом соотношении к препарату иммобилизованного фермента от 1:1 до 20:1. Смесь -лиофильно высушивают Перед использованием препарат суспендируют в 0,01 М ацетатном буфере , рН 4,5 и удал ют наполнитель путем отмывани буфером на колонке или с помощью центрифугировани . Активность препаратов, определенна по гемоглобину в качестве субстрата , приведена ниже в виде процентного отношени активности лиофильно высушенных препаратов к активности исходного препарата до лиофилизации Без наполнител 9
С глицином в соотношении 10:116 20:125 С глюкозой в соотношении 1:150 10:153 С сахарозой в соотношении 1:144 20:1 .63 .С поливинилпирролидоном (MB 25000) 1:167 10:175 С декстраном . (MB 500000)
. 1:125
С полиэтиленгликолем (МБ 3000) 1:178
С NaCE в соотношении 1:1 21
10:1 31 20:1 35
Пример 2. 20 мг куриного пепсина, иммобилизованного на диатомите , консервируют аналогично иммобилизованному пепсину свиньи.
Активность по гемоглобину лио0 фильно высушенных препаратов, %: Без наполнител 50
С глицином в соотнс иении 1:160
10:167
5 Пример 3. 20 мгпротосубтилина , иммобилизованного на сфероне АгА 1000, .суспендируют в 1 мл 0,01 М фосфатного буфера, рН 8,0 и консервируют аналогично консервации и;«пиобилизованного пепсина. Активность лиофильно высушенных препаратов по гемоглобину, %:
Без наполнител 80
С глюкозой в соотношении 1:193 С полиэтиленгликолем (MB 3000) 1:1 86 Пример 4. 20 мг протосубтилина , иммобилизованного на энзакриле АА, консервируют аналогично консервации
протосубтилина, иммобилизованного на сфероне. Активность лиофильно высушенных препаратов по гемоглобину , %:
Без наполнител 74
5 с глюкозой в соотношении 1:1100 С полиэтиленгликолем (MB 3000) 1:193
Claims (6)
1.Способ консервации иммобилизованных ферментов путем лиофильного
высушивани их суспензии в воде или буфере, отличающийс тем, что, с целью уменьшени потери активности фермента при высушивании, к суспензии добавл ют инертный растворимый наполнитель при соотношении фермент:наполнитель 1:(1-20).
2.Способ по П.1, отличающий с тем, что в качестве инертного наполнител используют неорганические соли, например поваренную
соль.
3.Способ по П.1, отличающийс тем, что в качестве инертного наполнител используют аминокислоты , например глицин.
4. Способ по П.1, отличающийс тем, что в качестве инертного наполнител используют углеводы , например глюкозу, сахарозу.
5. Способ по П.1, отличающ и и с тем, что в качестве инер59432806
тного наполнител используют водораст- Источники информации,
воринфле полисахариды, например дек-прин тые во внимание при экспертизе стран.
6.Способ по п. 1, отличаю- 1. Патент США 3133001,
щ и и с тем, что в качестве инер-кл. 195-68, опублик. 12.05.64.
THot-o напсшнител используют поли- 5
спирты, например полиэтиленгликоль. 2, Крылова ГО.И., Козлов Л.В., Ан7 .Способ ПОП.1, отличаю-тонов В.К. Гаина Б.С., Датунашвили щ и и с тем, что в качестве инерт-Е.Н., Павленко Н.М. Иммобилизаци ного наполнител используют водораст-кислых протеиназ. - Виоорганичесворимые синтетические полимеры, ю хими , 1976, вып.2, с.273 например псливинилпирролидон,(прототип).
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU782620877A SU943280A1 (ru) | 1978-05-29 | 1978-05-29 | Способ консервации иммобилизованных ферментов |
| CH80480A CH633560A5 (de) | 1978-05-29 | 1979-04-13 | Verfahren zur konservierung von immobilisierten eiweissstoffen. |
| DE19792952815 DE2952815C1 (de) | 1978-05-29 | 1979-04-13 | Verfahren zur Konservierung von immobilisierten Eiweissstoffen |
| GB8002346A GB2049700B (en) | 1978-05-29 | 1979-04-13 | Process of conservation of immobilized proteins |
| PCT/SU1979/000017 WO1979001137A1 (fr) | 1978-05-29 | 1979-04-13 | Procede de conservation de proteines immobilisees |
| CS371079A CS222968B1 (en) | 1978-05-29 | 1979-05-29 | Method of preserving ommobilized enzymes |
| SE8000648A SE8000648L (sv) | 1978-05-29 | 1980-01-28 | Forfarande for konservering av immobiliserande eggvitor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU782620877A SU943280A1 (ru) | 1978-05-29 | 1978-05-29 | Способ консервации иммобилизованных ферментов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU943280A1 true SU943280A1 (ru) | 1982-07-15 |
Family
ID=20766846
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU782620877A SU943280A1 (ru) | 1978-05-29 | 1978-05-29 | Способ консервации иммобилизованных ферментов |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| CH (1) | CH633560A5 (ru) |
| CS (1) | CS222968B1 (ru) |
| DE (1) | DE2952815C1 (ru) |
| GB (1) | GB2049700B (ru) |
| SE (1) | SE8000648L (ru) |
| SU (1) | SU943280A1 (ru) |
| WO (1) | WO1979001137A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2172170C2 (ru) * | 1999-10-07 | 2001-08-20 | Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова | Лекарственное средство для улучшения пищеварения |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60258125A (ja) * | 1984-06-06 | 1985-12-20 | Hayashibara Biochem Lab Inc | 蛋白性生理活性物質を含有する水溶性乾燥物 |
| GB8500698D0 (en) * | 1985-01-11 | 1985-02-13 | Unilever Plc | Preparation of reagents |
| US4931385A (en) * | 1985-06-24 | 1990-06-05 | Hygeia Sciences, Incorporated | Enzyme immunoassays and immunologic reagents |
| US5102788A (en) * | 1988-11-21 | 1992-04-07 | Hygeia Sciences, Inc. | Immunoassay including lyophilized reactant mixture |
| JP4336198B2 (ja) | 2001-09-06 | 2009-09-30 | アトナーゲン アクチエンゲゼルシャフト | 細胞の選択、および／または定性および／または定量検出のための方法および診断キット |
| DE10323901A1 (de) * | 2003-05-26 | 2005-01-05 | Institut Virion/Serion Gmbh | Verfahren und Testmittel zur Untersuchung und/oder zum Nachweis von Biomolekülen und/oder Wirkstoffen in Flüssigkeitsproben |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3133001A (en) * | 1959-11-26 | 1964-05-12 | Muset Pedro Puig | Stabilization of enzymes |
-
1978
- 1978-05-29 SU SU782620877A patent/SU943280A1/ru active
-
1979
- 1979-04-13 GB GB8002346A patent/GB2049700B/en not_active Expired
- 1979-04-13 CH CH80480A patent/CH633560A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-04-13 WO PCT/SU1979/000017 patent/WO1979001137A1/ru not_active Ceased
- 1979-04-13 DE DE19792952815 patent/DE2952815C1/de not_active Expired
- 1979-05-29 CS CS371079A patent/CS222968B1/cs unknown
-
1980
- 1980-01-28 SE SE8000648A patent/SE8000648L/xx unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2172170C2 (ru) * | 1999-10-07 | 2001-08-20 | Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова | Лекарственное средство для улучшения пищеварения |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CH633560A5 (de) | 1982-12-15 |
| WO1979001137A1 (fr) | 1979-12-27 |
| GB2049700B (en) | 1982-08-25 |
| DE2952815C1 (de) | 1985-05-30 |
| SE8000648L (sv) | 1980-01-28 |
| CS222968B1 (en) | 1983-08-26 |
| GB2049700A (en) | 1980-12-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lu et al. | Comparison of gel properties and biochemical characteristics of myofibrillar protein from bighead carp (Aristichthys nobilis) affected by frozen storage and a hydroxyl radical-generation oxidizing system | |
| Weston et al. | Proteins coupled to polyacrylamide beads using glutaraldehyde | |
| US4094743A (en) | Enzymes immobilized on chitosan | |
| CN112485451B (zh) | 一种白介素6冻干校准品及其制备方法与冻干保护液 | |
| Van Hofsten et al. | Protease-catalyzed formation of plastein products and some of their properties | |
| HU189251B (en) | Process for stabilizing tumor necrosis factor | |
| IE37582L (en) | Preserved meat. | |
| Buamard et al. | Stability of tuna trypsin‐loaded alginate‐chitosan beads in acidic stomach fluid and the release of active enzyme in a simulated intestinal tract environment | |
| JPH07506001A (ja) | 活性化因子ｘｉｉｉ | |
| Itoyama et al. | Spacer effects on enzymatic activity of papain immobilized onto porous chitosan beads | |
| YASUI et al. | Effect of Freeze‐Drying on Denaturation of Myosin horn Rabbit Skeletal Muscle | |
| FR2217347A1 (en) | Animal fodder concentrate contg. essential biofactors - esp. lysine and vitamins, prepd. by thermolysis and evaporation of water from aq. substrate esp. non-filtered nutrient medium | |
| Yang et al. | Separation of egg white lysozyme by anionic polysaccharides | |
| JPS62169732A (ja) | 血圧降下剤 | |
| SE8000648L (sv) | Forfarande for konservering av immobiliserande eggvitor | |
| Mitchell et al. | Purification and characterization of citrate synthase isoenzymes from Pseudomonas aeruginosa | |
| Torchilin et al. | Enzyme immobilization on heparin | |
| Ryle | An insolubilised pepsin | |
| Baranowski et al. | Effects of drying on selected qualities of Spirulina platensis protein | |
| Wriston Jr | Modification of chymotrypsinogen with 1-aminoglucose | |
| Taylor | The specificity of the Vi-phage II bacteriolytic enzyme | |
| JPH02117367A (ja) | 魚肉又は畜肉タンパク質の高圧変性の抑制法 | |
| Harte | On the in vitro proteolysis of egg white | |
| Ford et al. | The Adverse Effect of Glycation of Human Serum Albumin on its Preservative Activity in the Freeze‐Drying and Accelerated Degradation of Alkaline Phosphatase | |
| Kaloyereas et al. | Heat sterilization of liquid eggs after stabilization treatment with various proteinases |