SU960190A1 - Способ получени поливалентного панкреатического ингибитора,обладающего антикининогеназным действием - Google Patents
Способ получени поливалентного панкреатического ингибитора,обладающего антикининогеназным действием Download PDFInfo
- Publication number
- SU960190A1 SU960190A1 SU813264578A SU3264578A SU960190A1 SU 960190 A1 SU960190 A1 SU 960190A1 SU 813264578 A SU813264578 A SU 813264578A SU 3264578 A SU3264578 A SU 3264578A SU 960190 A1 SU960190 A1 SU 960190A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- activity
- polyvalent
- pancreatic
- inhibitor
- actikininogenase
- Prior art date
Links
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 title 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 4
- 229940039088 kininogenase Drugs 0.000 claims description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- BCESCHGDVIYYPC-UHFFFAOYSA-N 2-(ethylamino)phenol Chemical compound CCNC1=CC=CC=C1O BCESCHGDVIYYPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 10
- 108010072210 Cyclophilin C Proteins 0.000 description 9
- 102100024968 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase C Human genes 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 6
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 4
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 4
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 4
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 108010079099 gordox Proteins 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 2
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- -1 3-diethylaminopropyl Chemical group 0.000 description 1
- 102000002397 Kinins Human genes 0.000 description 1
- 108010093008 Kinins Proteins 0.000 description 1
- 102000052651 Pancreatic hormone Human genes 0.000 description 1
- 101800001268 Pancreatic hormone Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- UATJOMSPNYCXIX-UHFFFAOYSA-N Trinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC([N+]([O-])=O)=C1 UATJOMSPNYCXIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- KUHRIIPUCPOQMQ-UHFFFAOYSA-N n,n-diethyl-3-(ethyliminomethylideneamino)propan-1-amine Chemical compound CCN=C=NCCCN(CC)CC KUHRIIPUCPOQMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000004025 pancreas hormone Substances 0.000 description 1
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 1
- 229940032957 pancreatic hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИВАЛЕНТНОГО ПАНКРЕАТИЧЕСКОГО ИНГИБИТОРА. ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИКИНИНОГЕНАЗНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
1
Изобретение относитс к фармацевтичеокой промышленности, в частности к спо- собу попучени вещества,, обладающего антикининогеназным действием, и может найти применение в медицине.
Молекула поливалентного панкреатичеокогр ингибитора кининогеназ (ППИК), выделенна из-поджелудочной и рколоуиьной желез и легких крупного рогатого скота, состоит из 58 аминокислотных ю остатков. ППИК широко примен етс в медицине в качестве лекарственного средства (гордокс) при лечении р да забол&ваний , сопровождаюишхс избыточным образованием биологически активных поли- ts пептидов - кининов
Недостатком известного средства вл етс К1ютковременное действие, св занное с быстрым выведением его вз организма. Врем полувыведени гордокса зависит 20 от дозы и составл ет ЗО-7О мин.
Целью изобретени вл етс получение целевого продукта, обладающего длител ной антикининогеназной активностью.
Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу получени поливалентного панкреатического ингибитора, обладающего антикининогеназным дейсгвкем , включающему выделение ингибитора из организма крупного рогатого скота , 1-8 вес.ч. поливалентного панкреатического ингибитора дополнительно обрабатывают раствором смеси карбоксц метилдекстрана и 1А-9тил-3-(з-диэтиламинопропил )карбодиимида при их соотношении 2,5-10:5-10 при рН 4,7-7,6 и 20-25°С.;
Следует отметить, что только использование карбоксимётилдекстрана приводит к пролонгированию действи ППИК, другие же полисахарвды, такие как декстран и ДЭАЗ-декстран, привод т к получению продуктов, содержащих 0,2-1% белка в препарате с сохранением менее 1О% и гибирующей активности, тогда как карбо ксиметилдекстран приводит к продукту, содерисащему 2О-50% белка от веса пре , парата с полным сохранением кин латических и равновесных ковстант в модельной реакции ассоциации с трипсином.
Структура нового произвол нотч) ПГШК индивидуального -полимерного продукта, полученного химическим путем аци лированием карбоксиметилдёкстраном. в присутст ВИИ карбодиимида, подтверждена химическими и физико-химическими методами. Образование св зи с носителем доказано измерением количества модифицированных аминогрупп ППИК. ,
Реакци с тринитробензолсуль юкислотой показывает, что при ашшировании КМ-дейстраном вступают в реакцию две аминогруппы белка. Выделение препарата ППЙК, св занного с карбоксИметилдёкстраном , проводилось Методом, гель-хроматографии , в основе которого лежит разделение веществ с различньпуги величинами Молекул рных весов. Хроматографически выделенный пик высокомолекул рного веще тва содержит белок, определенный известны методом Лоури, и. полисахарид, определенный по цветной реакции Дюбуа.
Новое производное ППИК сохран ет : биологическую активность - вл етс ингибитором кининогеназ, но в отличие от исходного продукта - ППИК обладает пролонгированным действием, что подтверждено на модели острого панкреат та у собак данными lio выживаемости и средней продолжительности жизни.
Пример 1. 200 мг КМ-декстрана (ст.з. 0,6; средний Mv- б-Ю) раствор ют в 1О мл ОД М раствора
хлористого натри и добавл ют 200 мг 1-©ти/1 (3 -диэтиламинопрошш) карбодиимида , рН реакционной смеси поддерживают 4,7 в течение 30 мин. Затем к реакционной смеси добавл ют 1ОО мг ППИК, смесь инкубтфуют при рН 5,7 в течение 16-24 ч при , ППИК, св занный с КМ-декстраном, отдел ют от нативного белка гель хроматографией реакционной смеси на колонке с сефарозо 6В-С1 (25 V400 мм), уравновешенной 0,1 М раствором хлористого натри при рН 5,7. За хроматографическим разделением след т по изменению оптической плотности при 23О и 2О6 нм. Первый пик, соответствующий высокомолекул рному производному ППИК, обессоливают ; на колонке с сефадексом G-25 (25 6ОО мм), уравновешенном 5%-ным раотвором уксусной кислоты. Обессоленный препарат лиофильно высушивают и определ ют в нем содеркание белка по- мето ду Лоури и ингибирующую активность по отношению к трипсину. Полученное водорастворимое соединение ППИК с КМ-дек . страном содержит ЗО% белка от сухого веса препарата и сохран ет 75% инга
бирующей активности по отношению к
трипсину.
Пример 2. 52 мг КМ-декстрана {ст.з. 0,6; средний Mr 6 10) рас. твор ют в 10 мл 0,1 М раствора хлорида натри и добавл ют 200 мг 1-етил-3 (3-диэ тилами нопропил) карбодиимида, рН реакционной смеси поддерживают 5,7 в течение 30 мин. Затем к реакционной смеси добавл ют 160 мг ППИК, смесь инкубируют при рН 5,7 в течение 1624 ч при 25РС.
Выделение ППИК, св занного с КМдекстраном , аналогично примеру 1. Полученное водорастворимое соединение ППИК с КМ-декстраном содержит 5О% белка от сухого вёса препарата и сохран ет 60% ингибирующей активности по отношению к трипсину..
Пример 3. 2ОО мг КМ-декстрана (ст.з. 0,6; средний М, 6 1О) )раотвор ют в 1О мл раствора 0,1 М NaC8 и добавл ют 100 мг 1-втил-3(3 -диэтиламинопропил )карбодиимида, рН реакцио ной смеси поддержттают 7,6 в течение ЗО мин. Затем к реакционной смеси добавл ют 20 мг ППИК, смесь инкубируют рН 5,7 в течение 16-24 ч Выделение ППИК, св занного с Р М-декстраном , аналогично примеру 1. Получеии ное водорастворимое соединение ППИК с КМ-декстраном содержит 20% белка от сухого веса препарата и сохран ет 10О% ингибируюшей активности по отношению к трипсину.
Пример 4. Испытание антикининогеназной активности полученного соединени . Высока биологическа активность и пролонгированность действи ППИК, св занного с КМ-декстраном, подтверждена данными о выживаемости и средней продолжительности жизни собак при экспериментальной форме острого панкреатита.
Острый панкреатит воспроизводилс введением в главный панкреатический проток инкубационной смеси желчи с трипсином . Через 3 ч: в вену задней конечности ввод т предлагаемое вещество. В эксперименте выделенй две контрольные группы животных: первую составили 11 собак, у которых лечение не проводилось; вторую 11 собак, у которых острый панкреатит Протекал на фоне применени поливалентно5 го т1гибитора китгаогеназ в виде (ственного препарата - гордокса. oeoiso лекар-Результаты эксперимента лредставпены ь таблице.
Таким образом, предлагаемый способ позвол ет получить препарат поливале.нт кого панкреатическогх) ингибитора кинвногеназ , обладающий пролонгированным действием по сравнению с известным.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени поливалентного панкреатического ингибитора, обладающего антикининогеназным действием, включаю-. щий выделение ингибитора из органиа «а крупного рогатого скота, отличаю1-2О11щий с тем, что, с целью получени целевого продукта, обладающего длитепь ной антикининогеназной активностью, 1 « 8 вес.ч. поливалентного панкреатического 11нгибитора дополнительно обрабатывают : раствором смеси карбоксиметшэдекстрана и 1-9Тил-3-{з-«иэтиламинопрошш)карбодиимида при ИХсоотнощении 2,5-10-:-510 при рН 4,7 - 7,6 и 20-25С.25Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе{. R.,We)e Е- KaE i1crein in itibors . Handbook of txpeHfuevitae Pjia r acoEog v . Ber-ewJQTO (прототип).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU813264578A SU960190A1 (ru) | 1981-03-17 | 1981-03-17 | Способ получени поливалентного панкреатического ингибитора,обладающего антикининогеназным действием |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU813264578A SU960190A1 (ru) | 1981-03-17 | 1981-03-17 | Способ получени поливалентного панкреатического ингибитора,обладающего антикининогеназным действием |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU960190A1 true SU960190A1 (ru) | 1982-09-23 |
Family
ID=20949248
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU813264578A SU960190A1 (ru) | 1981-03-17 | 1981-03-17 | Способ получени поливалентного панкреатического ингибитора,обладающего антикининогеназным действием |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU960190A1 (ru) |
-
1981
- 1981-03-17 SU SU813264578A patent/SU960190A1/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sakurai et al. | Tumor-inhibitory effect of a streptococcal preparation (NSC-B116209) | |
| Berry et al. | Bacterial toxins | |
| Spivak et al. | Reverse-phase hplc separation, quantification and preparation of bilirubin and its conjugates from native bile. Quantitative analysis of the intact tetrapyrroles based on hplc of their ethyl anthranilate azo derivatives | |
| Pick et al. | Interaction between “sensitized lymphocytes” and antigen in vitro: II. Mitogen-induced release of skin reactive and macrophage migration inhibitory factors | |
| EP0063988B1 (fr) | Médicaments anticancéreux contenant la chaîne A de la ricine associée à un anticorps antimélanome et procédé pour leur préparation | |
| Shier | Handbook of toxinology | |
| Rietschel et al. | Biological activities of chemically modified endotoxins | |
| FR2475900A1 (fr) | Complexe vaccinal contenant un antigene specifique et vaccin le contenant | |
| JPS58500482A (ja) | 治療上活性な化合物およびそれを含有する薬学的組成物 | |
| Suzuki et al. | Biological activities of non-protein chromophores of antitumor protein antibiotics: Auromomycin and neocarzinostatin | |
| Siegel | Non-enzymic macromolecules as matrices in biological synthesis: The role of polysaccharides in peroxidase-catalyzed lignin polymer formation from eugenol | |
| EP0037522B1 (fr) | Dérivés de l'entérotoxine thermostable de Escherichia Coli et leur préparation | |
| US4234570A (en) | Proteinic active substances | |
| FREUDENBERG et al. | Alterations in rats in vivo of the chemical structure of lipopolysaccharide from Salmonella abortus equi | |
| Funatsu et al. | Studies on Tyrosinase in Housefly Part I. Protyrosinase in the Pupae of Housefly and Its Activation | |
| Purcell et al. | Comparison of histamine and 5-hydroxytryptamine content and secretion in rat mast cells isolated from different anatomical locations | |
| IE42760B1 (en) | Derivatives of the tetanus toxin, process for their preparation and agents containing them | |
| Nisselbaum et al. | Immunochemical studies of functionally similar enzymes | |
| US4446314A (en) | Fractionation of heparin | |
| Deibel et al. | Biochemical and immunological properties of human terminal deoxynucleotidyl transferase purified from blasts of acute lymphoblastic and chronic myelogenous leukemia | |
| Bowen | A comparison of the lethal and hemolytic toxins of Clostridium histolyticum | |
| Born et al. | Biological activity of the vegetalizing factor: Decrease after coupling to polysaccharide matrix and enzymatic recovery of active factor | |
| Fiszer-Szafarz et al. | Hyaluronic acid content of the interstitial fluid of Walker carcinoma 256 | |
| Watt et al. | Effects on lethality of toxins in venom from the scorpion Centruroides sculpturatus by group specific reagents | |
| WO1994008595A1 (en) | Use of non-anticoagulant heparin for treating ischemia/reperfusion injury |