TH9844A - เพพไทด์ที่สัมพันธุ์ hiv - Google Patents

Abstract

ใช้ชิ้นส่วน HIV p17 โปรตีนที่มีความยาวในช่วงประมาณ 12ถึงประมาณ 40 กรดอะมิโน สำหรับพัฒนาการวินิจฉัยและวัคซีน เพื่อใช้ตรวจหาและรักษาโรคเอดส์ ชิ้นส่วนเพพไทด์จำเพาะนี้ มีความยาวจากปลายด้าน N ไปสู่ปลายด้าน C เพพไทด์นี้มีลำดับ กรดอะมิโนตามสูตร (I) , (II), (III) , (IV) , และ (V) Tyr-Ser-Val-His-Gln-Arg-Ile-Asp-Val-Lys- Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu-Gly-Lys-Ile-Glu- Glu-Glu-Gln-Asn-Lys-Ser-Lys-Lys-Lys-Ala (I) Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly- Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu- Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu- Lys-His (II) Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg- Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu (III) Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu- Gly-Gln-Leu-Cln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly- Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr- Val-Ala-Thr-Leu (IV) Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His- Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr (V) จะมีความสามารถทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีในซีรัม ผู้ป่วยที่ให้ผลบวกต่อการตรวจสอบทางซีรั่ม สำหรับ p17 ของ HIV-1

Claims (7)

1. วิธีสำหรับตรวจหาไวรัสเอดส์ในของเหลวของตัวผู้ป่วยซึ่งประกอบด้วยการให้ตัวอย่างของของเหลวในร่างกายอย่างน้อย หนึ่งตัวอย่างสัมผัสกับแอนติบอดีหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งที่ จำเพาะต่อเพพไทด์หนึ่งสายหรือมากกว่าหนึ่งสายที่มี่ลักษณะ เป็นเพพไทด์ที่มีความจำเพาะในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับ เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 12 ถึงประมาณ 25 ตัว ที่มีลำดับสมนัยเป็นบางส่วนหรือทั้งหมดกับลำดับดังนี้ : Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His- Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr อะนาลอค (analogues) ต่าง ๆ ของมันที่กรดอะมิโนในลำดับได้ รับการแทนที่ตัดออกหรือเติมตราบใดที่ความสามารถในการทำ ปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่อนุพัทธ์จาก โครงร่างสามมิติของลำดับยังได้รับการอนุรักษ์ไว้รวมทั้งคู่ ของเพพไทด์ หรือคู่ของอะนาลอคต่าง ๆ ของสิ่งเหล่านี้หรือ เพพไทด์ที่มีความจำเพาะในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับ แอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยเพพ ไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโน 34 ตัว โดยที่มีลำดับสมนัยเป็น บางส่วนหรือทั้งหมดกับลำดับดังนี้ Glu-Thr-Ser- Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu- Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly- Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr- Val-Ala-Thr-Leu อะนาลอคต่าง ๆ ของมันที่กรดอะมิโนในลำดับได้รับการแทนที่ ตัดออกหรือเติม ตราบใดที่ความสามารถในการทำปฏิกิริยาทางอิม มูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่อนุพัทธ์จากโครงร่างสามมิติ ของลำดับยังได้รับการอนุรักษ์ไว้รวมทั้งคู่ของเพพไทด์ หรือ คู่ของอะนาลอคต่าง ๆ ของสิ่งเหล่านี้ หรือเพพไทด์ที่มีความ จำเพาะในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยเพพไทด์ที่ประกอบด้วย กรดอะมิโน 18 ตัว โดยที่มีลำดับที่สมนัยเป็นบางส่วนหรือทั้งหมดกับลำดับ ต่อไปนี้ Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg- Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu อะนาลอคต่าง ๆ ของมันที่กรดอะมิโนในลำดับอาจได้รับการแทน ที่ตัดออกหรือเติม ตราบใดที่ความสามารถในการทำปฏิกิริยา ทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่อนุพัทธ์จากโครงร่าง สามมิติของลำดับยังได้รับการอนุรักษ์ไว้รวมทั้งคู่ของเพพ ไทด์ หรือคู่ของอะนาลอคต่าง ๆ ของสิ่งเหล่านี้ หรือเพพไทด์ ที่มีความจำเพาะในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยเพพไทด์ที่มี กรดอะมิโน 32 ตัว โดยที่มีลำดับที่สมนัยเป็นบางส่วนหรือทั้งหมดกับลำดับดัง ต่อไปนี้ Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly- Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu- Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu- Lys-His หรือเพพไทด์ผสมที่เป็นของผสมของเพพไทด์สองหรือมากกว่าสอง สายที่แสดงลักษณะจำเพาะในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับ แอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่คัดจากกลุ่มที่ประกอบด้วย (1) เพพไทด์ที่มีส่วนประกอบกรดอะมิโนประมาณจาก 10 ถึง ประมาณ 36 ตัวที่มีลำดัลสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำ ดับในสูตร (I) : Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu- X3-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Glu Aan โดยที่ X1 คือ Asp หรือ Glu , X2 คือ Val หรือ Ile และ X3 คือ Glu หรือ Asp ; (2) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 26 ถึงประมาณ 40 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (II) ; Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly- Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu- Arq-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu- Lys-His Ile (3) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 14 ถึงประมาณ 27 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (III) ; Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe- Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu-Glu-Thr (4) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 28 ถึงประมาณ 42 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (IV) ; Leu-Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile- Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr- Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn- Thr-Val-Ala-Thr-Leu (5) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 12 ถึงประมาณ 25 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (V) ; Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser- Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr อะนาลอคต่าง ๆ ของเพพไทด์เหล่านี้โดยที่กรดอะมิโนในลำดับ เหล่านี้อาจได้รับการแทนที่ตัดออกหรือเติม ตราบใดที่ความ สามารถในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่อนุพัทธ์จากโครงร่างสามมิติของลำดับยังได้รับการ อนุรักษ์ไว้รวมทั้งคู่ของเพพไทด์ และอะนาลอคเหล่านี้และวัด การเกิดสารประกอบแอนติเจน-แอนติบอดี โดยเรดิโออิมมูโนแอส เสย์ เอนไซม์ลิงค์อิมมูโนซอร์เบนท์หรือการวิเคราะห์อิมมุ ในฟลูโอเลสเซนท์ชนิดอ้อม

2. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ประกอบด้วยการให้ตัวอย่าง ของของเหลวในร่างกายสัมผัสกับเพพไทด์ผสมที่เป็นของผสมของ เพพไทด์สองหรือมากกว่าสองสายที่แสดงลักษณะจำเพาะในการทำ ปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่คัดจากกลุ่ม ที่ประกอบด้วย (1) เพพไทด์ที่มีส่วนประกอบกรดอะมิโนประมาณจาก 10 ถึง ประมาณ 36 ตัวที่มีลำดัลสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำ ดับในสูตร (I) : Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu- X3-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Glu Aan โดยที่ X1 คือ Asp หรือ Glu , X2 คือ Val หรือ Ile (2) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 26 ถึงประมาณ 40 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (II) ; Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly- Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu- Arq-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu- Lys-His Ile (3) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 14 ถึงประมาณ 27 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (III) ; Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe- Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu-Glu-Thr (4) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 28 ถึงประมาณ 42 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (IV) ; Leu-Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile- Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr- Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn- Thr-Val-Ala-Thr-Leu (5) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 12 ถึงประมาณ 25 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (V) ; Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser- Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr อะนาลอคต่าง ๆ ของเพพไทด์เหล่านี้โดยที่กรดอะมิโนในลำดับ เหล่านี้อาจได้รับการแทนที่ตัดออกหรือเติม ตราบใดที่ความ สามารถในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่อนุพัทธ์จากโครงร่างสามมิติของลำดับยังได้รับการ อนุรักษ์ไว้รวมทั้งคู่ของเพพไทด์ และอะนาลอคเหล่านี้และวัด การเกิดสารประกอบแอนติเจน-แอนติบอดีของแต่ละเพพไทด์ในของ ผสมนั้น

3. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งประกอบด้วยการให้ตัวอย่าง ของเหลวในร่างกายจำนวนมากจากผู้ป่วยสัมผัสกับแอนติเจนิคเพพ ไทด์ที่ต่างกันในแต่ละตัวอย่าง หลังจากนั้นวัดการเกิดสาร ประกอบแอนติเจน-แอนติบอดีในแต่ละตัวอย่าง

4. ชุดวินิจฉัยสำเร็จรูปสำหรับตรวจหาแอนติบอดีที่จะอีพิโทป ของโปรตีน p17 ของ HIV ในของเหลวในร่างกายคนที่ประกอบด้วย ช่องที่มีเพลทชนิดหลายหลุมที่ฉาบด้วยเพพไทด์หนึ่งหรือมาก กว่าหนึ่งตัวตามข้อถือสิทธิ 1 หรือของผสมของเพพไทด์ตามข้อ ถือสิทธิ 2 และวัสดุ ELISA สำหรับการตรวจหาทางเอนไซม์อัน ประกอบด้วย แอนติซีรัมของสัตว์ปกติและเอนไซม์ แอน ติ-แอนติบอดี แอนติซีรัมที่ติดฉลากและอินติเคเตอร์ที่ เปลี่ยนสีได้

5. ชุดวินิจฉัยสำเร็จรูปตามข้อถือสิทธิ 4 ซึ่งประกอบด้วย เพลทหลายหลุมจำนวนมากโดยหลุมแต่ละหลุมของ เพลทจะฉายด้วยเพพ ไทด์ชนิดต่าง ๆ กัน

6. ชุดวินิจฉัยสำเร็จรูปตามข้อถือสิทธิ 4 ที่หลุมของเพลทจะ ฉายด้วยส่วนผสมของเพพไทด์ดังกล่าว 2 ตัวหรือมากกว่า

7. วิธีการผลิตซีรั่มที่มีแอนติบอดีสูงสำหรับใช้รักษาเอดส์ ซึ่งประกอบด้วยการเอาตัวอย่างของเหลวจากร่างกายคนที่ให้ผล บวกสำหรับแอนติ -p17 แอนติบอดีต่อ HIV แต่ไม่แสดงอาการใด ๆ ของเอดส์หรือ ARC ตรวจหาแอนติบอดีต่ออิมมูโนโดมิแนนท์ (immundoninent) อีพิโทปของเพพไทด์หนึ่งหรือมากกว่าหนึ่ง ที่เลือกจากกลุ่มที่มี (1) เพพไทด์ที่มีส่วนประกอบกรดอะมิโนประมาณจาก 10 ถึง ประมาณ 36 ตัวซึ่งมีลำดัลสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของ ลำดับในสูตร (I') : Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu- X3-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Glu Aan โดยที่ X1 คือ Asp หรือ Glu , X2 คือ Val หรือ Ile และ X3 คือ Glu หรือ Asp ; (2) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 26 ถึงประมาณ 40 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (II) Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly- Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu- Arq-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu- Lys-His Ile (3) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 14 ถึงประมาณ 27 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (III) Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg- Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu (4) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 28 ถึงประมาณ 42 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (IV) ; Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu- Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly- Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr- Val-Ala-Thr-Leu (5) เพพไทด์ที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนประมาณ 12 ถึงประมาณ 25 ตัวที่มีลำดับสมนัยกับส่วนหนึ่งหรือทั้งหมดของลำดับในสูตร (V) ; Ala-Gln-GLn-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser- Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr อะนาลอคต่าง ๆ ของเพพไทด์เหล่านี้โดยที่กรดอะมิโนในลำดับ เหล่านี้อาจได้รับการแทนที่ตัดออกหรือเติม ตราบใดที่ความ สามารถในการทำปฏิกิริยาทางอิมมูนกับแอนติบอดีต่อ HIV p17 ที่อนุพัทธ์จากโครงร่างสามมิติของลำดับได้รับการอนุรักษ์ ไว้ และคอนจูเกตของเพพไทด์นั้นตลอดจนอะนาลอคของมัน และนำ ตัวอย่างของเหลวในร่างกายของบุคคลผู้นั้นอย่างน้อยหนึ่งตัว อย่างได้ผ่านแอฟินิตีโครมาดตกราฟี เพื่อเอาแอนติบอดีที่ไม่ เกี่ยวข้องกับการป้องกันการเกิดเอดส์ออกและหรือเพื่อทำให้ ซีรัมมีแอนติบอดีที่ป้องกันการเกิดเอดส์มากขึ้น (ข้อถือสิทธิ 7 ข้อ, 6 หน้า, 5 รูป)