TR201808280T4 - Pirazolo[1,5-a]pirimidin-bazlı bileşikler, bunları içeren bileşimler, ve bunların kullanım usulleri. - Google Patents

Pirazolo[1,5-a]pirimidin-bazlı bileşikler, bunları içeren bileşimler, ve bunların kullanım usulleri. Download PDF

Info

Publication number
TR201808280T4
TR201808280T4 TR2018/08280T TR201808280T TR201808280T4 TR 201808280 T4 TR201808280 T4 TR 201808280T4 TR 2018/08280 T TR2018/08280 T TR 2018/08280T TR 201808280 T TR201808280 T TR 201808280T TR 201808280 T4 TR201808280 T4 TR 201808280T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
pyrazolo
carboxylate
piperazine
pyrimidine
pyrimidin
Prior art date
Application number
TR2018/08280T
Other languages
English (en)
Inventor
Bi Yingzhi
Gordon Carson Kenneth
Cianchetta Giovanni
Alan Green Michael
Kumi Godwin
Main Alan
Zhang Yulian
Gregory Zipp Glenn
Original Assignee
Lexicon Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lexicon Pharmaceuticals Inc filed Critical Lexicon Pharmaceuticals Inc
Publication of TR201808280T4 publication Critical patent/TR201808280T4/tr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/002—Heterocyclic compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Pirazolo[1,5-a]pirimidin-bazlı bileşikler, bunları içeren bileşimler, ve bunların kullanım usulleri.

Description

TARIFNAME PIRAZOLO[1,5-a1PIRIMIDIN-BAZLI BILESIKLER, BUNLARI IÇEREN BILESIMLER, VE BUNLARIN KULLANIM USULLERI rüçhan hakkini talep eder. 1. BULU UN ALANI Bu bulus, adaptörle iliskili kinaz 1 (AAKI) inhibitörleri olarak yararli pirazolo[l,5- a]pirimidin-bazli bilesiklere yöneliktir. 2. BULUSLA ILGILI BILINEN HUSUSLAR Adaptörle iliskili kinaz l (AAKl), serin/treonin kinazlarin Arkl/Prkl ailesinin bir üyesidir. AAKl mRNA, kisa ve uzun olarak adlandirilan iki ekleme formda mevcuttur. Uzun form baskindir ve beyin ve kalpte oldukça eksprese edilir (Henderson ve Conner, Mol. Biol. Cell. hücrelerde endositik yapilarla birlikte lokalize olur. AAKl, sinaptik kesecik geri dönüsümü ve reseptör-aracili endositozda önemli olan bir islein olan klaterin kaplamali endositozu modüle eder. AAKl, reseptör kargoyu klaterin kaplamaya baglanan bir hetero-tetramerle, AP2 kompleksiyle iliskilidir. Klaterinin AAK1,e baglanmasi, AAKl kinaz aktivitesini (Conner ve stimüle eder. AAKl, mu-2'nin, kargo reseptörleri üzerinde siralama motifleri içeren tirozine baglanmasini tesvik eden AP-2'nin mu-2 alt-birimini fosforlar (Ricotta ve digerleri, J. Cell fosforilasyonu, reseptör alimi için gerekli degildir, fakat fosforilasyon, internalizasyon etkisini AAKl, PC12 hücrelerinde Neuregulin-l/ErbB4 sinyalinin bir inhibitörü olarak tanimlanmistir. RNA etkilesimi aracili gen susturma veya kinaz inhibitör K252a (AAKl kinaz aktivitesini inhibe eder) ile tedaviyle AAKl ekspresyonu kaybi, Neuregulin-l kaynakli nörit asiri büyümesinin potansiyalizasyonuyla sonuçlanir. Bu tedaviler, ErbB4"ün artmis ekspresyonuyla ve plazma membraninda veya yakininda ErbB4,ün birikimiyle (Kuai ve SNP"ler, çoklu sizofreni endofenotipleriyle iliskilidir (Greenwood ve digerleri, Am. J. morfolojik degisiklikler ve davranissal fenotipler göstermistir (Jaaro-Peled ve digerleri, polimorfizm, Parkinson hastaliginin baslangiç yasiyla iliskilidir (Latourelle ve digerleri, BMC Med. Genet. 2009, 10, 98). Bu sonuçla, AAKl aktivitesinin inhibisyonunun sizofreni, sizofrenide bilissel eksiklikler, Parkinson hastaligi, bipolar rahatsizlik, ve Alzheimer hastaliginin tedavisinde yarara sahip olabilecegi ileri sürülmektedir. 3. BULUSUN ÖZETI Bu bulus, kismen, asagidaki formüle sahip AAKl inhibitörlerine, veya bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzuna yönelik olup, burada, X CH veya N7dir; her bir RIA bagimsiz olarak -ORIC, -N(R1c)2, -C(O)R1c, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, - N(R1c)C(O)ORic, siyano, halo, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis Ci-iz hidrokarbil veya 2-12-üye1i heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla Rig her 1311' Rlß bagimsiz olarak -ORic, -N(Ric)2, -C(O)R1c, -C(O)OR1c, -C(O)N(Rlc)2, - N(Ric)C(O)ORic, siyano veya halodur; her bir Ric bagimsiz olarak hidrojen veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis C1-12 hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon bir veya daha fazla siyano, halo veya hidroksilledir; her bir Rgc bagimsiz olarak -ORZD, -N(RZD)2, -C(O)R2D, -C(O)ORZD, -C(O)N(RZD)2, - N(R2D)C(O)OR29, siyano, halo, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis C1-[2 hidrokarbil veya 2-12-üye1i heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon bir veya daha fazla amino, siyano, halo, hidroksil, veya R2D iledir; her bir R2D bagimsiz olarak hidrojen veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis CH; hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon bir veya daha fazla amino, siyano, halo, hidroksilledir; ve Bulusun yönleri, Sekil llde açiklanmaktadir, burada AAKl homozigot (-/-) nakavt fareler ve bunlarin vahsi-tip (+/+) yavrulari kullanilarak bir formalin agri modelinden elde edilen sonuçlari gösterilir. AAKl homozigot (-/-) nakavt fareler, bunlarin vahsi-tip (+/+) yavrulariyla kiyaslandiginda hem akut hem tonik agri yanitinda belirgin bir azalma gösterir. . BULUSUN DETAYLI AÇIKLAMASI Bu bulus, kismen, AAKl nakavt farelerin, agriya yüksek bir direnç göstermesi kesfini baz almaktadir. Bu kesif, en sonunda AAKl inhibitörlerinin, bunlari içeren bilesimlerin, ve bunlarin kullanim usullerinin kesfine yol açan arastirmayi tesvik etti. .1. TANIMLAR Baska türlüsü belirtilmedikçe, "bulusun bilesikleri," "bu tarifnamenin bilesikleri," ve benzerleri ifadeleriyle burada açiklanan bilesiklere atifta bulunulur. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "hidrokarbil" terimi, bir tüm-karbon omurgaya sahip ve karbon ve hidrojen atomlardan olusan bir alifatik veya alisiklik parça anlamindadir. Hidrokarbil hidrokarbil, Ci_12 hidrokarbil, CH,- hidrokarbil, ve 0.4 hidrokarbil olarak atifta bulunulur) yer alir. Özel örnekler arasinda alkil, alkenil, alkinil, aril, benzil, sikloalkil, sikloalkenil, sikloalkil alkil, sikloalkenilalkil, naftil, fenil, ve feniletil yer alir. ve dallanmis parçalar (sirasiyla Cmo alkil, C1.12 alkil, CH, alkil, C1-4 alkil ve C1-3 alkil olarak atifta bulunulur) yer alir. Özel örnekler arasinda metil, etil, propil, izopropil, n-butil, t-butil, izobutil, pentil, heksil, izoheksil, heptil, 4,4-dimetilpentil, oktil, 2,2,4-trimetilpentil, nonil, desil, undesil ve dodesil yer alir. Alkenil parçalarin örnekleri arasinda düz Zincirli ve dallanmis C240, C2" ve CM alkenil yer alir. Özel örnekler arasinda vinil, allil, 1-butenil, 2-butenil, izobutilenil, l-pentenil, 2-pentenil, nonenil, l-desenil, 2-desenil ve 3-desenil yer alir. Alkinil parçalarin örnekleri arasinda düz Zincirli ve dallanmis C220, C2," ve Cu, alkinil yer alir. Özel örnekler arasinda etinil ve 2-propinil (propargil) yer alir. Aril parçalarin örnekleri arasinda antrasenil, azulenil, fluorenil, indan, indenil, naftil, fenil ve fenantrenil yer alir. Sikloalkil parçalarin Örnekleri arasinda C342, C3-7, C4_(, ve C6 Sikloalkil yer alir. Özel örnekler arasinda siklopropil, siklobutil, siklopentil, sikloheksil ve adamantil yer alir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "halo" terimi floro, kloro, bromo, ve iyodoyu kapsar. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "heterokarbil" terimi ile bir veya daha fazla karbon atom ve bir veya daha fazla heteroatomdan yapilan bir omurgaya sahip bir parçaya atifta bulunulur. Özel heteroatomlar azot, oksijen ve sülfürdür. Bir heterokarbil parça, en az bir karbon atom, CH, CH2, veya CH3 grubun, degerleri karsilamak için bir veya daha fazla heteroatomla ve gerekli sayida hidrojen atomla ikame ettigi bir hidrokarbil parça olarak düsünülebilir. Heterokarbil araligi ile parçada karbon, azot, oksijen, ve/Veya sülfür atomlarin genel toplamina atifta bulunulur. Böylelikle "2-12 üyeli heterokarbil" terimi ile bir toplamda 2-12 karbon, azot, oksijen, ve/veya sülfür atomlara sahip bir heterokarbil parçaya atifta bulunulur. Özel heterokarbil parçalar arasinda düz zincirli ve dallanmis heteroalkil, heteroalkenil, ve heteroalkinil, ayni zamanda heterosikl ve heteroaril yer alir. Heteroalkil parçalarin örnekleri arasinda 2-8-üyeli, 2-6-üyeli ve 2-4-üyeli heteroalkil parçalar yer alir. Özel örnekler arasinda alkoksil, asil (örnegin, formil, asetil, benzoil), alkil amino (örnegin, di-(Ci-3-alkil )amin0), arilamino, ariloksim, karbamatlar, karbamidler, alkil karbonil, arilkarbonil, aminokarbonil, alkil aminokarbonil, alkil sülfanil, arilsülfanil, alkil sülfinil, arilsülfmil, alkil sülfonil, arilsülfonil, alkil sülfonilamino, ve arilsülfonilamino yer alir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "heterosikl" terimi ile aromatik olabilen, kismen aromatik olabilen veya aromatik olmayabilen bir siklik (monosiklik veya polisiklik) heterokarbil parçaya atifta bulunulur. Heterosikller arasinda heteroariller yer alir. Örnekler arasinda 4-10- üyeli, 4-7-üyeli, 6-üyeli, ve 5-üyeli heterosikller yer alir. Özel örnekler arasinda benzo[l,3]dioksolil, 2,3-dihidro-benzo[1,4]dioksinil, sinnolinil, furanil, hidantoinil, morfolinil, oksetanil, oksiranil, piperazinil, piperidinil, pirrolidinonil, pirrolidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, tetrahidropyridinil, tetrahidropyrimidinil, tetrahidrotiyofenil, tetrahidrotiyopiranil ve valerolaktamil yer alir. "Heterosikl" terimi ile bir halkaya atifta bulunuldugundan, tek basina oksazolidinon ve imidazolidinon gibi parçalari kaplamaz: bu tür parçalar sübstitüe edilmis heterosikller, viz. oksoyla sübstitüe edilmis heterosikl olarak kabul edilir. Heteroaril parçalarin örnekleri arasinda akridinil, benzimidazolil, benzofuranil, benzoizotiazolil, benzoisoksazolil, benzokuinazolinil, benzotiazolil, benzoksazolil, furil, imidazolil, indolil, izotiazolil, izoksazolil, oksadiazolil, oksazolil, ftalazinil, pirazinil, pirazolil, piridazinil, piridil, pirimidinil, pirimidil, pirrolil, kuinazolinil, kuinolinil, tetrazolil, tiazolil, ve triazinil yer alir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "içermekte" terimi, "sinirlayici olmadan içermektedir" olarak ayni anlama sahiptir ve terimi "içerir", "sinirlayici olmadan içerir" olarak ayni anlama sahiptir. Benzer sekilde, "örnegin" terimi, "örnegin, sinirlayici olmadan" terimi olarak ayni anlama sahiptir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "idare eder, idare etmekte" ve "idare etme" terimleri, hastalik veya rahatsizliktan önceden muzdarip olan bir hastada belirtilen hastalik veya rahatsizligin önlenmesini, ve/veya hastalik veya rahatsizliktan muzdarip bir hastanin nekahet döneminde kaldigi sürenin uzamasini kapsar. Terimler, esigin modüle edilmesi, hastalik veya rahatsizligin gelisimi ve/veya süresi, veya bir hastanin hastalik veya rahatsizliga verdigi yanit seklini degistirmeyi kapsar. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "terapötik olarak etkili bir miktarda" bir bilesik, bir hastalik veya durumun tedavisi veya idaresinde terapötik bir yarar sunmak için, veya hastalik veya durumla iliskili bir veya daha fazla semptomu geciktirmek veya minimize etmek için yeterli bir miktardadir. "Terapötik olarak etkili bir miktarda" bir bilesik, tek basina veya baska terapilerle kombinasyon halinde, hastalik veya durumun tedavisinde veya idare edilmesinde bir terapötik yarar sunan terapötik maddenin bir miktari anlamindadir. "Terapötik olarak etkili bir miktarda" terimi genel terapiyi gelistiren, bir hastalik veya durumun semptomlari veya nedenlerini azaltan veya bunlardan kaçinan, veya baska bir terapötik maddenin terapötik etkisini arttiran bir miktari kapsayabilir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, "tedavi etme," "tedavi etmek" ve "tedavi" terimleri bir hasta, belirtilen hastalik veya hastaliktan muzdarip olurken meydana gelen, hastalik veya rahatsizligin ciddiyetini azaltan, veya hastalik veya rahatsizligin ilerlemesini geciktiren veya yavaslatan bir etki üzerinde durmaktadir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, bir dizi isimden hemen önce gelen bir veya daha fazla sifat, isimlerin her birine uygulanacak sekilde yorumlanmalidir. Örnegin, "istege bagli olarak sübstitüe edilmis alkil, aril, veya heteroaril" ifadesi, "istege bagli olarak sübstitüe edilmis alki, istege bagli olarak sübstitüe edilmis aril, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis heteroaril" olarak ayni anlama sahiptir. .2. BILESIKLER Bu bulus asagidaki formüle sahip bilesikleri, veya bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzunu kapsamaktadir, burada: X CH veya Nidir; her bir RIA bagimsiz olarak -ORic, -N(Ric)2, -C(O)Ric, -C(O)ORic, -C(O)N(Ric)2, - N(RiC)C(O)ORiC, siyano, halo, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis CH; hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla RiB her bir R1 B bagimsiz olarak -ORic, -N(R1c)2, -C(O)R1c, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, - N(R1C)C(O)OR1C, siyano veya halodur; her bir RK` bagimsiz olarak hidrojen veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis Ci_12 hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla siyano, halo veya hidroksilledir; her bir Rzc bagimsiz olarak -ORZD, -N(R2D)2, -C(O)R2D, -C(O)ORZD, -C(O)N(R2D)2, - N(R2D)C(O)OR20, siyano, halo, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis CHZ hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla amino, siyano, halo, hidroksil, veya R2D iledir; her bir RgD bagimsiz olarak hidrojen veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis Ci-i2 hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla amino, siyano, halo, hidroksil iledir; ve Özellikle bilesikler, RiA, -OR1(~,dir. Özellikle bilesikler, RiB, -N(R1c)2, halodur. Özellikle bilesikler, Ric, hidrojendir. Bazilarinda, Ric, CHz hidrokarbildir (örnegin, CH, hidrokarbil, C1.4 hidrokarbil, örnegin metil, etil, propil). Bazilarinda, Rzc, -C(O)OR2D, - C(O)N(R2D)2, veya -N(R2D)C(O)OR2D,dir. Özellikle bilesikler, R2D, hidrojendir. Özellikle bilesikler, Rzo, Ci-i2 hidrokarbildir (örnegin, CH, hidrokarbil, Ci_4 hidrokarbil, örnegin metil, etil, propil). Özel bilesikler asagidaki formüle aittir: Digerleri asagidaki formüle aittir: Özellikle bilesikler RiA halodur. Bazilarinda, RiA, -OR1c7dir. Özellikle bilesikler Ric istege bagli olarak sübstitüe edilmis CH; hidrokarbildir (örnegin, CH, hidrokarbil, Ci.4 hidrokarbil). Özellikle bilesikler Rzc, -C(O)OR20, -C(O)N(R2D)2, veya -N(R2D)C(O)OR29"dir. Bazilarinda Rzc, -C(O)R21)sdlr. Özellikle bilesikler R2D bagimsiz olarak hidrojen veya CHZ hidrokarbildir (örnegin, CH, hidrokarbil, C1_4 hidrokarbil). Bazilarinda, R2D istege bagli olarak sübstitüe edilmis Ci-iz hidrokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla amino, siyano, halo, hidroksilledir. Bulusun bilesikleri bir veya daha fazla asimetrik merkeze sahip olabilir. Baska türlüsü belirtilmedikçe, bu bulus bilesiklerin tüm stereoizomerlerini, ayni zamanda bunlarin karisimlarini kapsamaktadir. Bilesiklerin tek tek stereoizomerleri, kiral merkezler içeren piyasada satilan baslangiç malzemelerinden sentetik olarak veya enantiomerik ürünlerin karisimlarinin preparasyonu, ardindan bir diastereomerler karisimina dönüsüm gibi ayirma, ardindan ayirma veya yeniden kristallesme, kromatografik teknikler, veya kiral kromatografik kolonlar üzerinde enantiomerlerin dogrudan ayrilmasiyla hazirlanabilir. Özel stereokimyanin baslangiç bilesikleri ya piyasada satilinaktadir ya da bu sahada bilinen tekniklerle hazirlanabilir ve ayristirilabilir. Bu tarifnamenin birtakim bilesikleri ayrica ayrilabilen farkli stabil konformasyonel formlarda mevcut olabilir. Bir asimetrik tekli bag ile ilgili kisitli rotasyondan ötürü, örnegin sterik engel veya halk gerginligi nedeniyle torsiyon asimetrisi, farkli konformerlerin ayrilmasina izin verebilir. Mevcut tarifname, bu bilesiklerin her bir konformasyonel izomeri ve bunlarin karisimlarini içerir. Mevcut tarifnamenin, mevcut bilesiklerde ortaya çikan atomlarin tüm izotoplarini içermesi amaçlanmaktadir. Izot0plar, ayni atomik sayiya sahip, fakat farkli kütle sayilari olan söz konusu atomlari içerir. Genel örnek yoluyla ve sinirlama olmadan, hidrojen izotoplari, döteryum ve tritiuin içerir. Karbon izotoplari, 13C ve 14C içerir. Bulusun izotopik olarak etiketli bilesikleri genellikle bu sahada söz konusu uzman kisilerce bilinen geleneksel tekniklerle veya baska türlü kullanilan etiketli olmayan reaktif madde yerine uygun bir izotopik olarak etiketli reaktif madde kullanilarak burada açiklananlara benzer islemlerle hazirlanabilir. Bu tür bilesikler, örnegin biyolojik aktivitenin belirlenmesinde standartlar ve reaktif maddeler olarak çesitli potansiyel kullanimlara sahip olabilir. Stabil izotoplar durumunda, bu tür bilesikler biyolojik, farmakolojik, veya farmakokinetik özellikleri uygun olarak modifiye etmek için potansiyele sahip olabilir. Bu tarifnamenin bilesikleri, farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlar olarak mevcut olabilir. Burada kullanildigi haliyle "farmasötik olarak kabul edilebilen tuz" terimi, bu tarifnamenin bilesiklerinin, saglam tibbi degerlendirme kapsaminda olan, asiri toksisite, irritasyon, alerjik yanit veya baska sorun veya komplikasyon olmadan makul bir yarar/risk oraniyla orantili olan, ve bunlarin amaçlanan kullanimi için etkili olan, hastalarin dokulariyla temas halinde kullanim için uygun olan, suda ya da yagda-çözünen veya dagilan tuzlarini veya zvitterionik formlarini temsil eder. Tuzlar, bilesiklerin nihai izolasyonu ve saflastirilmasi sirasinda veya ayri sekilde uygun bir azot atomun, uygun bir asitle reaksiyona sokulmasiyla hazirlanabilir. Temsil edici asit ilaveli tuzlar arasinda asetat, adipat, alginat, sitrat, aspartat, benzoat, benzensülfonat, bisülfat, butirat, kamforat, kamforsülfonat; diglukonat, dihidrobromür, didroklorür, dihidroiyodür, gliserofosfat, hemisülfat, heptanoat, heksanoat, format, ûimarat, hidroklorür, hidrobromür, hidroiyodür, 2-hidr0ksietansülf0nat, laktat, maleat, mesitilensülfonat, metansülfonat, naftilensülfonat, nikotinat, 2-naftalensülf0nat, oksalat, palmoat, pektinat, persülfat, 3-fenilproprionat, pikrat, pivalat, propionat, süksinat, tartrat, trikloroasetat, trifloroasetat, fosfat, glutamat, bikarbonat, para-toluensülfonat, ve undekanoat yer alir. Farmasötik olarak kabul edilebilen ilave tuzlar olusturmak için kullanilabilen asitlerin örnekleri arasinda inorganik asitler, örnegin hidroklorik, hidrobromik, sülfürik, ve fosforik, ve organik asitler, örnegin oksalik, maleik, süksinik, ve sitrik yer alir. Bazik ilave tuzlar, bilesiklerin nihai izolasyonu ve saflastirilmasi sirasinda bir karboksi grubun bir metal katyonun hidroksit, karbonat, veya bikarbonati gibi uygun bir bazla veya amonyakla veya bir organik primer, sekonder, veya tersiyer aminle reaksiyonuyla hazirlanabilir. Farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlarin katyonlari arasinda lityum, sodyum, potasyum, kalsiyum, magnezyum, ve alüminyum, ayni zamanda toksik olmayan kuaterner amin katyonlar, örnegin amonyum, tetrametilamonyum, tetraetilamonyum, metilamin, dimetilamin, trimetilamin, trietilamin, dietilamin, etilamin, tributilamin, piridin, N,N- dimetilanilin, N-metilpiperidin, N-metilmorfolin, disikloheksilamin, prokain, dibenzilamin, N,N-dibenzilfenetilamin, ve N,N'-dibenziletilendiamin yer alir. Baz ilaveli tuzlarin olusumu için yararli baska temsil edici organik aminler arasinda etilendiamin, etanolamin, dietanolamin, piperidin, ve piperazin yer alir. Bulusun Özel bilesikleri, asagida Örneklerde açiklanan P81 filtre plaka analizinde ölçüldügü asagida Örneklerde açiklanan HEK281 hücre bazli analizde ölçüldügü gibi 0.1, 0.01 veya 0.001 uM,den az bir IC50 ile AAKl ,i inhibe eder. .3. SENTEZ USULLERI Bu bulusun bilesikleri (yani, burada açiklanan bilesikler), asagida açiklanan usuller kullanilarak ve bu sahada söz konusu uzman kisilerce bilinen organik kimyanin usulleri kullanilarak hazirlanabilir. Bulusun bilesikleri asagidaki genel formülle kapsanmaktadir: R2 \N \ R1, R1 A veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis Ci-12 hidrokarbil veya 2-12-üye1i heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla R1 A iledir; her bir RiA bagimsiz olarak -ORic, -N(R1c)2, -C(O)R1c, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, - N(Ric)C(O)ORic, siyano, halo, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis C1-" hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla RiB her bir RlB bagimsiz olarak -ORic, -N(Ric)2, -C(O)Ric, -C(O)OR1C, -C(O)N(Ric)2, - N(Ric)C(O)OR1c, siyano veya halodur; her bir Ric bagimsiz olarak hidrojen veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis CHz hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla siyano, halo veya hidroksil iledir; R2 -NRZARZB"dir, burada RgA hidrojendir ve RZR istege bagli olarak sübstitüe edilmis CHZ hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla Rzc iledir; veya RZA ve RZB bir veya daha fazla R2C ile istege bagli olarak sübstitüe edilmis bir 4-7-üyeli heterosikl olusturmak için birlikte alinir; her bir Rgc bagimsiz olarak -ORgD, -N(R23)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, - N(R2D)C(O)OR2D, siyano, halo, veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis Ci-iz hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla amino, siyano, halo, hidroksil, veya R2D iledir; her bir RZD bagimsiz olarak hidrojen veya istege bagli olarak sübstitüe edilmis CHz hidrokarbil veya 2-12-üyeli heterokarbildir, burada istege bagli sübstitüsyon, bir veya daha fazla amino, siyano, halo, veya hidroksil iledir; ve R3 hidrojen veya bir veya daha fazla siyanoa halo veya hidroksille istege bagli olarak sübstitüe edilmis CH, alkildir; ve bunlarin tuzlarini içerir. Bu bilesikler, asagida belirtilen usullerle hazirlanabilir. Yukarida gösterilen formüle sahip bilesikler asagida belirtilen usullerle hazirlanabilir. Sema 1°de, formül 1,e sahip bir bilesigin kloru, 2"yi üretmek için bir aminle ikame edilir. Zsnin brominasyonu 3°ü sunar. Alternatif olarak 1, ilk olarak 4,ü sunmak için, ardindan 3?ü sunmak için amin ikamesiyle brom edilebilir. 3°ün uygun bir boronik asit [R1B(OH)2] ile Suzuki kenetlenmesi, formül 5"e sahip bilesikleri sunar. Sema 2"de, sübstitüe edilmis asetonitril 6, 7'yi sunmak için etil formatla reaksiyona sokulur. dionla reaksiyonu 9"u sunar. Ayrica 9'un aminle reaksiyonu, formül 5"e sahip bilesikleri N\\\ HÄOA N\\ | NH2NH2 Äs? 2Ahil N 0 u lO"un, metil 2,2-ditl0r0-2-(fl0r0sülf0nil)asetatla reaksiyonu, formül ll°e sahip bilesikler R2.` ~ k) ' ' RmN `N Rum `fî .4. KULLANIM USULLERI Bu tarifnamenin talep edilen bulusla ilgili bir yönü, AAK1"in bulusun bir bilesigiyle, hem in vitro hem in vivo temas ettirilmesini içeren adaptörle iliskili kinaz 1'i (AAKl) inhibe etme usullerini kapsamaktadir. Baska bir yön, AAKl aktivitesi aracili hastaliklar ve rahatsizliklari tedavi etme ve idare etme usullerini kapsamaktadir. AAKl aktivitesi aracili hastaliklar ve rahatsizliklar, en az bir semptoma sahip, AAKl aktivitesinden etkilenen, ciddiyeti veya belirtisi olan hastaliklar ve rahatsizliklardir. Bu tür hastaliklarin ve rahatsizliklarin örneklerinin Alzheimer hastaligi, bipolar rahatsizlik, agri, Parkinson hastaligi, ve sizofreniyi (sizofrenide bilissel eksiklikler dahil olmak üzere) içerdigi düsünülmektedir. Özel usuller buna ihtiyaç duyan bir hastaya (bir insan veya baska inemeli) terapötik olarak veya profilaktik olarak etkili bir miktarda bir AAKl inhibitörünün (örnegin, burada açiklanan bir bilesik) uygulanmasini içerir. Bu bulusla ilgili açiklamanin baska bir yönü, buna ihtiyaç duyan bir hastaya terapötik olarak veya profîlaktik olarak etkili bir miktarda bir AAKl inhibitörünün uygulanmasini içeren bir hastalik veya rahatsizligi tedavi etme veya idare etmeye yönelik bir usulü kapsamaktadir, burada hastalik veya rahatsizlik Alzheimer hastaligi, bipolar rahatsizlik, agri, Parkinson hastaligi, veya sizofrenidir (sizofrenide bilissel eksiklikler dahil olmak üzere). Agrinin özel tipleri kronik agri, akut agri, ve nöropatik agri içerir. Nöropatik agrinin özel tipleri arasinda fibromiyalji ve periferal nöropati (örnegin, diyabetik nöropati) yer alir. Bir hastalik veya rahatsizligi tedavi etmek veya idare etmek için kullanildiginda, bulusun bilesikleri tercihen bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilen tasiyici, seyreltici veya eksipiyan içeren farmasötik bir bilesimin bir kismi olarak uygulanir. Farmasötik bilesimler, veya formülasyonlar, beher birim doz için önceden belirlenen bir miktarda aktif bilesen içeren birim doz formlarda sunulabilir. Bu tarifnamenin bilesiklerinin beher gün için vücut agirligi yaklasik 0.01 ve yaklasik 250 miligram/kilogram ("mg/kg") arasinda, tercihen beher gün için vücut agirligi yaklasik 0.05 ve yaklasik 100 mg/kg arasinda dozaj seviyeleri, hastaligin önlenmesi ve tedavisi için bir monoterapide tipiktir. Tipik olarak, bu tarifnamenin farmasötik bilesimleri günde yaklasik 1 ila yaklasik 5 kez veya alternatif olarak, bir sürekli infüzyon olarak uygulanacaktir. Bu tür uygulama bir kronik veya akut terapi olarak kullanilabilir. Bir tekli dozaj formunu üretmek için tasiyici malzemelerle birlestirilebilen aktif bilesen miktari, tedavi edilecek durum, durumun ciddiyeti, uygulama süresi, uygulama yolu kullanilan bilesigin ekspresyon hizi, tedavinin süresi, ve hastanin yasi, cinsiyeti ve durumuna bagli olarak degisecektir. Tercih edilen birim dozaj formülasyonlari, bir aktif bilesenin veya bunun uygun bir fraksiyonunun burada yukarida belirtildigi gibi bir günlük doz veya alt-dozunu içerenlerdir. Tedavi, bilesigin en uygun dozundan esas itibariyle daha az dozajlarla baslatilabilir. Bundan sonra dozaj, bu kosullar altinda ideal etkiye ulasilana kadar küçük artislarla arttirilir. Genelde bilesik, genellikle zararli veya toksik yan etkilerin herhangi birine neden olmadan etkili sonuçlar sunan en arzu edilen haliyle bir konsantrasyon seviyesinde uygulanacaktir. Bulusun bilesikleri bir veya daha fazla ilave terapötik veya profilaktik maddeyle kombinasyon halinde uygulanabilir. Örnegin, agri tedavisi için kullanildiginda, muhtemel ilave maddeler arasinda immünosüpresif ve anti-enflamatuar maddeler yer alir. Bu bulusla ilgili usuller ve bilesimlerde kullanim için uygun immünosüpresanlar, bu sahada bilinenleri içerir. Örnekler arasinda aminopterin, azatiyoprin, siklosporin A, D-penisillamin, altin tuzlar, hidroksiklorokuin, leflunomid, metotreksat, minosiklin, rapamisin, sülfasalazin, takrolimus (FK506), ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari yer alir. Özel bir immünosuppresan, metotreksattir. Ilave örnekler arasinda anti-TNF antikorlar, örnegin adalimumab, sertolizumab pegol, etanersept, ve infliksimab yer alir. Digerleri arasinda interlökin-l blokerler, örnegin anakinra yer alir. Digerleri arasinda anti-B hücre (CD20) antikorlar, örnegin rituksimab yer alir. Digerleri arasinda T hücre aktivasyon blokerleri, örnegin abatasept yer alir. Ilave örnekler arasinda inosin monofosfat dehidrojenaz inhibitörleri, örnegin mikofenolat mofetil (CellCept®) ve mikofenolik asit (Myfortic®) yer alir. Bu bulusla ilgili usuller ve bilesimlerde kullanim için uygun anti-enflamatuar ilaçlar arasinda bu sahada bilinenler yer alir. Örnekler arasinda glukokortikoidler ve NSAIDler yer alir. Glukokoitikoidlerin örnekleri arasinda aldosteron, beklometason, betametason, kortison, deoksikortikosteron, deksametason, fludrokortisonlar, hidrokortison, metilprednisolon, prednisolon, prednison, triamsinolon, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari yer alir. NSAID örnekleri arasinda salisilatlar (örnegin, aspirin, amoksiprin, benorilat, kolin magnezyum salisilat, diflunisal, faislamin, metil salisilat, magnezyum salisilat, salisil salisilat, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), arilalkanoik asitler (örnegin, diklofenak, aseklofenak, asemetakin, bromfenak, etodolak, indometasin, nabumeton, sulindak, tolmetin, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), arilpropiyonik asitler (örnegin, ibuprofen, karprofen, fenbufen, fenoprofen, flurbiprofen, ketoprofen, ketorolak, loksoprofen, naproksen, oksaprozin, tiaprofenik asit, suprofen, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), arilantranilik asitler (örnegin, meklofenamik asit, mefenamik asit, ve bunlarin farrnasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), pirazolidin türevleri (örnegin, azapropazon, metamizol, oksifenbutazon, fenilbutazon, sülfinprazon, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), oksikamlar (örnegin, lornoksikam, meloksikam, piroksikam, tenoksikam, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), COX-2 inhibitörleri (örnegin, selekoksib, etorikoksib, lumirakoksib, parekoksib, rofekoksib, valdekoksib, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari), ve sülfonanilidler (örnegin, nimesulid ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari) yer alir. Agri tedavisinde kullanilan baska maddeler (sinirlayici olmadan nöropatik ve enflamatuar agri dahil olmak üzere) arasinda pregabalin, lidokain, duloksetin, gabapentin, karbamazepin, kapsaikin, ve baska serotonin/norepinefrin/dopamin yeniden alim inhibitörleri, ve opiatlar (örnegin oksikontin, morfin, ve kodein) gibi maddeler yer alir. Diyabet, enfeksiyon (örnegin, herpes zoster veya HIV enfeksiyon), veya kanser gibi bilinen bir hastalik veya durumun neden oldugu agri tedavisinde, bulusun bilesikleri, altta yatan hastalik veya duruma yönelik bir veya daha fazla ilave terapötik veya profilaktik maddeyle kombinasyon halinde uygulanabilir. Örnegin, diyabetik nöropatiyi tedavi etmek için kullanildiginda, bulusun bilesikleri bir veya daha fazla anti-diyabetik maddeyle, antihiperglisemik maddeler, hipolipidemik/lipid düsürücü maddeler, anti-obezite maddeler, anti-hipertansif maddeler ve istah bastiricilarla kombinasyon halinde uygulanabilir. Anti- diyabetik maddelerin örnekleri arasinda biguanidler (örnegin, metformin, fenformin), glukosidaz inhibitörler (örnegin, akarboz, miglitol), insülinler (insülin sekretagoglar ve insülin duyarlastirieilar dahil olmak üzere), meglitinidler (örnegin, repaglinid), sülfonilüreler (örnegin, glimepirid, gliburid, gliklazid, klorpropamid, ve glipizid), biguanid/gliburid kombinasyonlar (örnegin, Glukovanlar), tiazolidindionlar (örnegin, troglitazon, rosiglitazon, ve pioglitazon), PPAR-alfa agonistler, PPAR-gamma agonistler, PPAR alfa/gamma dual agonistler, glikogen fosforilaz inhibitörler, yag asidi baglayici protein (aP2) inhibitörleri, glukagon-benzeri peptid-l (GLP-l) veya GLP-l reseptörünün baska agonistleri, dipeptidil peptidaz IV (DPP4) inhibitörleri, ve sodyum-glukoz yardimci-transportörü 2 (SGLT2) inhibitörleri (örnegin, dapaglitlozin, kanaglitlozin, ve LX-4211) yer alir. .5. FARMASÖTIK BILESIMLER Farmasötik formülasyonlar herhangi bir uyun yolla, örnegin oral (yanaktan veya dil alti dahil olmak üzere), rektal, nazal, topikal (yanaktan, dil alti, veya transdermal dahil olmak üzere), vajinal, veya parenteral (subkütanöz, intrakütanöz, kas içi, intra-artiküler, intrasinovial, intrasternal, intratekal, intralezyonel, intravenöz, veya intraderrnal enjeksiyonlar veya infüzyonlar dahil olinak üzere) yolla uygulama için adapte edilir. Bu tür formülasyonlar, örnegin, aktif bilesenin, tasiyici(lar) veya eksipiyan(lar) ile iliskilendirilmesi saglanarak eczacilik alaninda herhangi bir bilinen usulle hazirlanabilir. Agizdan uygulama veya enj eksiyonla uygulama tercih edilir. Agizdan uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar kapsüller veya tabletler; tozlar veya granüller; sulu veya sulu olmayan sivilarda çözeltiler veya süspansiyonlar; yenilebilir köpükler veya kizartmalar; veya su içinde yag sivi emülsiyonlari veya yag içinde su emülsiyonlari gibi ayrik birimler olarak sunulabilir. Örnegin, bir tablet veya kapsül formunda agizdan uygulama için, aktif` ilaç bileseni bir oral, toksik olmayan farrnasötik olarak kabul edilebilen inert tasiyici, örnegin etanol, gliserol, su, ve benzerleriyle birlestirilebilir. Tozlar, bilesigin, uygun ince bir boyuta ufalanmasiyla ve örnegin, nisasta veya mannitol gibi yenilebilir bir karbonhidrat gibi benzer bir sekilde ufalanmis farmasötik tasiyiciyla karistirilmasiyla hazirlanir. Aroma verici, koruyucu, dagitici, ve renklendirici madde ayrica mevcut olabilir. Kapsüller yukarida açiklandigi gibi bir toz karisimin hazirlanmasiyla, ve olusturulan jelatin kiliflarin doldurulinasiyla yapilir. Glidanlar ve kayganlastiricilar, örnegin kolloidal silika, talk, magnezyum stearat, kalsiyum stearat, veya kati polietilen glikol, doldurma Operasyonundan önce toz karisima ilave edilebilir. Bir parçalayici veya çözündürücü madde, örnegin agar-agar, kalsiyum karbonat, veya sodyum karbonat ayrica kapsül alindiginda ilacin uygunlugunu gelistirmek için ilave edilebilir. Bundan baska, arzu edildiginde veya gerekli oldugunda, uygun baglayicilar, kayganlastiricilar, parçalayici maddeler, ve renklendirici maddeler ayrica karisima katilabilir. Uygun baglayicilar arasinda nisasta, jelatin, dogal sekerler, örnegin glukoz veya beta-laktoz, misir tatlandiricilari, dogal ve sentetik sakizlar, örnegin akasya, kitre veya sodyum alginat, karboksimetilselüloz, polietilen glikol, ve benzerleri yer alir. Bu dozaj formlarda kullanilan kayganlastiricilar arasinda sodyum oleat, sodyum klorür, ve benzerleri yer alir. Parçalayicilar arasinda, sinirlama olmadan, nisasta, metil selüloz, agar, betonit, ksantan sakizi ve benzerleri yer alir. Tabletler, örnegin, bir toz karisimin hazirlanmasiyla, granüle edilmesiyle veya sertçe vurulmasiyla, bir kayganlastirici ve parçalayicinin ilave edilmesiyle, ve tabletlere sikistirilmasiyla formüle edilir. Bir toz karisim, uygun sekilde ufalanmis bilesigin, yukarida açiklandigi gibi bir seyreltici veya bazla, ve istege bagli olarak, bir baglayici, örnegin karboksimetilselüloz, bir aliginat, jelat, veya polivinil pirrolidon, bir çözelti geciktirici, örnegin parafin, bir resorpsiyon hizlandiricilar, örnegin bir kuatemer tuzu ve/Veya ve absorpsiyon madde, örnegin betonit, kaolin, veya dikalsiyum fosfatla karistirilmasiyla hazirlanir. Toz karisim, bir baglayici, örnegin surup, nisasta macunu, akadia musilaj, veya selülozik veya polimerik malzemelerin çözeltileriyle islatilarak ve bir elekten ittirilerek granüle edilebilir. Granüle etmeye bir alternatif olarak, toz karisim, tablet makinesinden geçirilebilir ve sonuç, granüllere bölünen mükemmel olinayan sekilde olusturulmus islenmemis parçalardir. Granüller, ilave stearik asit, bir stearat tuzu, talk, veya mineral yag araciligiyla tablet Olusturucu kaliplara yapismasini önlemek için kayganlastirilabilir. Kayganlastirilmis karisim daha sonra tabletlere sikistirilir. Bu tarifnamenin bilesikleri ayrica bir serbest akan inert tasiyiciyla birlestirilebilir ve granüle etme veya parçalama asamalarindan dogrudan geçmeden tabletlere sikistirilabilir. Bir selak sizdirmaz kaplama, bir seker veya polimerik malzeme kaplamasi, ve bir mum cila kaplainasindan olusan bir berrak veya mat koruyucu kaplama sunulabilir. Boyar maddeler, farkli birim dozajlari ayristirmak için bu kaplamalara ilave edilebilir. Oral akiskanlar, örnegin çözelti, suruplar, ve iksirler dozaj birim formunda hazirlanabilir, böylelikle belirtilen bir miktar, önceden belirlenen bir miktarda bilesik içerir. Suruplar, bilesigin, uygun olarak aromalandirilmis bir sulu çözeltide çözündürülmesiyle hazirlanabilir, diger yandan iksirler, toksik olmayan bir vehikülün kullanimiyla hazirlanir. Çözündürücüler ve emülsiyonlastiricilar, örnegin etoksillenmis izostearil alkoller ve polioksietilen sorbitol eterler, koruyucular, aroma katki maddesi, örnegin nane yagi veya dogal tatlandiricilar, veya sakarin veya baska yapay tatlandiricilar, ve benzerleri ayrica ilave edilebilir. Uygun oldugunda, agizdan uygulama için dozaj birim formülasyonlar mikrokapsüllenebilir. Formülasyon ayrica, örnegin parçacik malzemenin polimerlere, muma, veya benzerlerine kaplanmasiyla veya yerlestirilmesiyle, salimi uzatmak veya sürdürmek için hazirlanabilir, Formül (I)°e sahip bilesikler, ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari, ayrica lipozom iletim sistemleri, ömegin küçük ünilamel kesecikler, büyük ünilamel kesecikler, ve çoklu-lamel kesecikler formunda uygulanabilir. Lipozomlar çesitli fosfolipidlerden, örnegin kolesterol, stearilamin, veya fosfatidilkolinlerden olusturulabilir. Formül (I)°e sahip bilesikler ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen tuzlari ayrica bilesik moleküllerinin kenetlendigi tek tek tasiyicilar olarak monoklonal antikorlarin kullanimiyla iletilebilir. Bilesikler, hedeflenebilir ilaç tasiyicilar olarak çözünür polimerlerle ayrica kenetlenebilir. Bu tür polimerler arasinda palitoil kalintilarla sübstitüe edilmis polivinilpirrolidon, piran kopolimer, polihidroksipropilmetakrilamidfenol, polihidroksietilaspartamidfenol, veya polietilenoksitpolilizin yer alabilir. Bundan baska, bilesikler, bir ilacin kontrollü salimini elde etmede yararli bir biyolojik olarak çözünür polimerler sinifina, örnegin, polilaktik asit, polepsilon kaprolakton, polihidroksi butirik asit, poliortoesterler, poliasetaller, polidihidropiranlar, polisiyanoakrilatlar, ve hidrojellerin çapraz bagli veya amfipatik blok kopolimerlerine kenetlenebilir. Transdermal uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar, bir uzatilmis zaman zarfi için alicinin epidermisiyle yakin temas halinde kalmasi amaçlanan ayrik Ilasterler olarak açiklandigi gibi iyontoforezle flasterden iletilebilir. Topikal uygulama için adapte edilebilen famiasötik formülasyonlar merhemler, kremler, süspansiyonlar, losyonlar, tozlar, çözeltiler, macunlar, jeller, Spreyler, aerosoller, veya yaglar olarak formüle edilebilir. Rektal uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar, süppozituarlar olarak veya lavmanlar olarak sunulabilir. Nazal uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar, burada tasiyici, bir katidir, buruna çekmenin gerçeklesecegi sekilde, yani', buruna yakin tutulan bir toz kabindan nazal geçisle hizli inhalasyonla uygulandigi örnegin 20 ila 500 mikron araliginda bir parçacik boyutuna sahip bir iri taneli toz içerir. Bir nazal sprey veya nazal damlalar olarak uygulama için uygun formülasyonlar, burada tasiyici, bir sividir, aktif bilesenin sulu veya yag çözeltilerini içerir. Inhalasyonla uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar, çesitli tipte ölçülü, dozla basinçlandirilmis aerosoller, nebülizörler, veya insuflatörler araciligiyla olusturulabilen ince parçacikli tozlar veya buharlar içerir. Vajinal uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar, pesariler, tamponlar, kremler, jeller, macunlar, köpükler, veya sprey formülasyonlar olarak sunulabilir. Parenteral uygulama için adapte edilen farmasötik formülasyonlar, anti-oksidanlar, tamponlar, bakteriostatlar, ve amaçlanan alicinin kaniyla formülasyonu izotonik kilan sutlar içerebilen sulu ve sulu olmayan steril enjeksiyon çözeltiler; ve süspansiyon halinde tutucu maddeler ve kivamlastirici maddeler içerebilen sulu ve sulu olmayan steril süspansiyonlar içerir. Forrnülasyonlar, birim-dozda veya çoklu-doz kaplarinda, örnegin sizdirmaz sekilde kapatilmis ampullerde ve flakonlarda sunulabilir, ve sadece steril sivi tasiyici, örnegin, kullanimdan hemen önce enjeksiyonlar için su ilavesi gerektiren, dondurularak kurutulmus (liyofilize edilmis) bir durumda muhafaza edilebilir. Eksteinporane enjeksiyon çözeltileri ve süspansiyonlari steril tozlar, granüller, ve tabletlerden hazirlanabilir. Özellikle yukarida belirtilen bilesenlere ilaveten, formülasyonlarin, söz konusu formülasyon tipiyle ilgili olan bu sahada geleneksel baska maddeler, örnegin agizdan uygulama için uygun olanlarin, aroma verici maddeler içerebilecegi anlasilmalidir. .6. ÖRNEKLER Bulusun bazi yönleri asagidaki örneklerden anlasilabilir. .6.1. AAKl Nakavt Fareler AAK] geninin parçalanmasi için homozigot (-/-)fareler, iki usulle; gen yakalama ve homolog rekombinasyonla hazirlandi. Gen yakalama, bir mutagen olarak bir raportör veya seçici markör gen için bir DNA kodlama fragmani kullanan bir rastgele yerlestirilebilir mutagenez usulüdür. Gen yakalama vektörleri, hücresel birlestirme makinesinin, vektör kodlu eksonlarin, hücresel mRNAlara birlestirilmesine izin verecek bir sekilde intronlara veya genlere katmak için dizayn edilmistir. Yaygin olarak, gen yakalama vektörleri, kuvvetli birlestirici akseptör dizilerini takip eden ve bir promotörü takip etmeyen seçici markör dizileri içerir. Dolayisiyla, bu tür vektörler, bir gene katildiginda, hücresel birlestirme makinesi, yakalanan geriden eksonlari, seçici markör dizisinin 5' ucuna birlestirir. Tipik olarak, bu tür seçici markör genleri sadece geni kodlayan vektör, bir introna katilmissa eksprese edilebilir. Elde edilen gen yakalama olaylari, seçici kültüre dayanabilen hücreler için seçilerek müteakip olarak tanimlanir. Embriyonik kök hücreler (murin sus A129'dan türetilen Lex-l hücreleri), en az bir porsiyon genetik olarak degistirilmis bir vektör dizisinin, ilgili gene yerlestirilmesini içeren bir islemle mutasyona ugramistir, mutasyona ugramis embriyonik kök hücreler, müteakip olarak psödopregnan disi konakçilara katilmis olan blastosistlere mikroenjekte edildi ve olusturulan usulleri adlandirmak için gerçeklestirildi. Bakiniz, örnegin, "Mouse Mutagenesis", 1998, Zambrowicz ve digerleri, ed., Lexicon Press, The Woodlands, TX. Elde edilen kimerik hayvanlar, ilgili geride genetigi degistirilmis mutasyonu içeren bir allelinin germ hatti transmisyonunu yapabilen yavrulari elde etmek için müteakip olarak beslenir. AAKl-geniyle bozulmus fareler ayrica homolog rekombinasyonla hazirlandi. Bu durumda, murin AAKl geninin ikinci kodlayici eksonu (bakiniz GenBank Erisim Sayisi NM_l77762) ve 5,789,215. AAKl geninin parçalanmasi için homozigot (-/-) fareler, AAKl geninin parçalanmasi için heterozigot (+/-) farelerle, ve vahsi-tip (+/+) bir batinda dogan yavrularla baglanti halinde çalisildi. Bu analiz sirasinda, fareler, bir memeli sujede ana organ sistemlerin fonksiyonunu degerlendirmek için dizayn edilen tibbi tani prosedürlerin bir entegre suiti kullanilarak bir tibbi tetkige tabi tutuldu. Homozigot (-/-) "nakavt" fareler, bunlarin heterozigot (+/-) ve vahsi- tip (+/+) bir batinda dogan yavrularla baglantili olarak çalisildi. AAK] geninin parçalanmasi Southern analiziyle dogrulandi. AAK1"in murin homologunun ekspresyonu murin beyni; omurilik; göz; timus; dalak; akciger; böbrek; karaciger; iskelet kasi; kemik; mide, ince bagirsak ve kolon; kalp; adipoz; astmatik akciger; LPS karacigeri; kan; çizgili kalp; aortic agaç; prostat; ve meme bezinde (5 haftalik Virjin, matür Virjin, 12 DPC, 3 günlük post-partum (emzirme), 3 günlük post-ayrilma (erken involüsyon), ve 7 günlük post- ayrilma (geç involüsyon)) RT-PCR ile saptandi. AAKl homozigot (-/-) ve bunlarin vahsi-tip (+/+) yavrulari, bunlarin akut ve tonik nosiseptif yanitlarini degerlendirmek amaciyla, formalin ayak testi kullanilarak test edildi. Bu testler için, Otomatik Nosisepsiyon Analiz ediciler (University California, San Diego"da Ozaki laboratuarindan satin alindi) kullanildi. Bir metal serit testten 30 dakika önce her bir farenin sol arka ayaginin etrafina yerlestirildi. 30-dakikalik alistirma periyodunun ardindan, 20 pl %5 formalin, sol arka ayagin dorsal yüzeyine subkütanöz olarak enjekte edilir. Fareler silindir seklindeki bölinelere 45 dakika bireysel olarak yerlestirilir. Bir bilgisayar, bir elektromanyetik alandan beher dakika için geri çekineleri, faz l (akut faz = ilk 8 dakika) için toplam geri çekmeleri, ve faz 11 için toplam geri çekmeleri (tonik faz = dakika 20 - 40 arasinda zaman) kaydetti. Bakiniz Yaksh TL, Ozaki G, McCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive Sekil 19de gösterildigi gibi, faz 1 ve faz 2 verileri, homozigot (-/-) disi fareler (n = 16), vahsi- tip disiler (n = 15), erkek homozigot (-/-) fareler (n = 9), ve vahsi-tip erkekler (n = 18) kullanilarak elde edildi. Tüm gruplarda ve hem fazlarda, AAKl homozigot (-/-) fareleri, bunlarin vahsi-tip (+/+) yavrularindan anlamli sekilde daha az kaydedilmis ayak geri çekmesi sergiledi. .6.2. [3-(4-Amin0metil-fenil)-pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-il]-butil-amin sentezi Bölüm A. Butil- irazolo 1 S-a irimidin-S-îl-amin karistirildi, ardindan tuzlu su (pH doymus sulu sodyum bikarbonatla 10"a ayarlandi) ve etil asetat olarak ayrildi. Fazla ayrilmis ekstrakt kurutuldu (MgSO4) ve butil-pirazolo[l,5- a]pirimidin-5-i1-amini, 1.2 g sari toz olarak çökeltmek için heptanla seyreltildi, e.n. 75-76°C. Bölüm B. (3-Br0m0-pirazol0I1,S-a]pirimidin-S-il)-butil-amin pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il-amin (1.1 g, 5.9 mmol) çözeltisine Ilave edildi ve ortam sicakliginda katinin hepsi çözündürülene kadar karismaya birakildi. Brom [7726-95-6] ( ortam sicakliginda damla damla ilave edildi, asetik asit reaksiyon çözeltisi 5 dakika tamponlandi. Brom ilavesinin tamamlanmasindan sonra, süspansiyon bir ilave 15 dakika karismaya birakildi, ardindan 500 mL karistirilmis suya yavas yavas akitildi. Doymus sulu sodyum bikarbonat, karistirilmis süspansiyona ilave edildi, üst fazin pH"1, pH kagidiyla yaklasik 8 olacak sekilde belirlendi, ardindan süspansiyon, etil asetatla ekstrakte edildi. Ekstrakt (MgSO4) kurutuldu ve 1.2 g grimsi beyaz kati sunmak için flas kromatogafisi alindi için hesaplandi. Bölüm C. [3-(4-Amin0metil-fenil)-pirazoloI1.S-alpirimidin-S-ilI-butil-amin 0.1 mmol) ile kompleks halinde, bir (3-brom0-pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-i1)-buti1-amin bis(difenilfosfino) ferrosen] dikloropalladyum(II) karisimina 1,2-dimetoksietan (25 mL) içinde bir %30 (h/h) su çözeltisi ve bir manyetik karistirici çubuk ilave edildi. Reaksiyon kabi bir geri akis kondansörüne uyduruldu, bir ortam sicakligi yag banyosuna düsürüldü, ve sistem, hizli sekilde karistirilirken 10 bosaltma / N; örtü döngüleriyle alindi. Hizli sekilde karistirilmis, N2 ile Örtülmüs reaksiyon 85°C"lik bir yag banyosu sicakligina 17 saat isitildi, daha sonra sogutuldu ve tuzlu su ve etil asetat olarak ayrildi. 71.9 mg [3-(4-Aminometil- feni1)-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1]-buti1-amin monoasetat tuzunu beyaz bir kati olarak sunmak için preparatif RP-HPLC ile saflastirilan bir kahverengi yag elde etmek için faz ile sentezi Bölüm A. N-(Z-metoksietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-amin ( bir karistirilmis karisimi 65°C9ye 17 saat isitildi, sogutuldu ve tuzlu su (pH, doymus sulu sodyum bikarbonat ile 8,e ayarlandi) ve etil asetat olarak ayrildi. 706.4 mg açik sari kati sunmak için ekstrakt kurutuldu (MgSO4) ve buharlastirildi. LRMS (ESI) m/z Bölüm B. (3-Br0m0-pirazoloI1,S-alpirimidin-5-il)-(2-met0ksi-etil)-amin metoksietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin (706.4 mg, 3.7 mmol) çözeltisine ilave edildi ve katinin hepsi çözündürülene kadar ortam sicakliginda karismaya birakildi. Brom [7726-95-6] ( ortam sicakliginda ilave edildi, asetik asit reaksiyon çözeltisi 2 dakika tamponlandi, ardindan reaksiyon çözeltisi, karistirilan suya (IL) yavas yavas akitildi. pH, üst faz pH"i pH kagidiyla yaklasik olarak 8 olacak sekilde belirlenene kadar kati sodyum bikarbonat ilavesiyle arttirildi. 819.6 mg beyaz toz sunmak için çökeltilen ürün süzülerek izole edildi, filtre topak suyla yikandi, ve kurumaya birakildi. LRMS (ESI) m/z 271.0/273.0 Bölüm C. (2-Met0ksi-etil)-{3-[4-(1H-tetrazol-S-il-fenil]-pirazolo[1,5-alpirimidin-5-il}- 0.1 mmol) ile kompleks halinde olan bir (3-bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-(2-metoksi- mL) içinde bir %30 (h/h) su çözeltisi ve bir manyetik karistirici çubuk ilave edildi. Reaksiyon kabi bir geri akis kondansörüne uyduruldu, bir ortam sicakliginda yag banyosuna düsürüldü, ve sistem hizli sekilde karistirilirken 10 bosaltma / Nz örtü döngülerinden geçirildi. Hizli sekilde karistirilmis, N; ile örtülmüs reaksiyon, 85°C"1ik bir yag banyosu sicakligina 4 saat isitildi, daha sonra sogutuldu, metanolle seyreltildi, ve gravite-f'iltrelendi. Süzüntü, silika jel üzerinde önceden absorbe edildi ve flas kromatogafisi alindi (silika jel, %10 (h/h) metanol / etil asetat içinde %1 NH4OH ile elute edildi). Arzu edilen kromatografi fraksiyonlari birlestirildi, buharlastirildi, 2-propanol içinde yeniden çözündürüldü ve saflastirilmis ürünü çökeltmek için karistirilan heptana gravite-filtrelendi. (2-Met0ksi-etil)-{3-[4-(1H-tetrazol-5- il)-feni1]-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1}-amin, 96.3 mg kati malzeme olarak süzülerek izole tert-butil ester sentezi Bölüm A. 3-Oks0-2-tiv0fen-2-il-pr0pionitril Tiyofen-Z-il-asetonitril [20893-30-5] (, bir Nz ile örtülmüs, 0°C, etanol ( karistirilmis çözeltisine ilave edildi. 5 dakika sonra, etil format [109-94-4] ( ilave edildi ve elde edilen çözelti 20 dakika karistirildi. Buz banyosu daha sonra çikarildi ve bir isitma inantosuyla ikame edildi. Bir sari kati sunmak için reaksiyon 2 saat geri akisa isitildi, sogutuldu, ve buharlastirildi. Ham ürün, su içinde çözündürüldü, çözelti 0°C,ye sogutuldu ve bir grimsi beyaz tozu çökeltmek için sulu hidroklorik asitle asitlestirildi. 7.4 g suninak için ürün süzülerek izole edildi, suyla yikandi, ve kurutuldu. LRMS (ESI) m/z 152.0 [(M+H)]+, C7H5NOS: 151.19 için hesaplandi. Bölüm B. 4-Tiv0fen-2-il-2H-pirazol-3-ilamin 97.8 mmol), etanol içinde ( çözeltisine ilave edildi. Çözelti daha sonra 2 saat geri akisa isitildi. Sogutulan reaksiyon, kuruyana kadar buharlastirildi ve elde edilen kati, su içinde toz halinde getirildi. 4-tiyofen-2- il-2H-pirazol-3-ilamini 7.1 g ince grimsi beyaz toz olarak sunmak için ürün süzülerek izole edildi, suyla yikandi, ve kurutuldu, e.n. ö ppm DMSO-dÖ) ö ppm ]+, C7H7N3$2 165.22 için hesaplandi. Bölüm C. 3-Tivofen-Z-il-4H-pirazolo[1.S-alpirimidin-S-on Etanol içinde ( agirlikça % 21 ,lik bir sodyum etoksit çözeltisi, bir ortam sicakligina yavas yavas ilave edildi, etanol içinde ( 4-tiyofen-2-il-2H-pirazol-3- mmol) süspansiyonu karistirildi. Ilave etme devam ettikçe, kati, bir berrak kahverengi çözelti sunmak için çözündürüldü. Çözelti, 2 gün geri akisa isitildi, sogutuldu, ardindan %5 (a/h) sulu amonyum klorüre akitildi. 3-tiyofen-2-il-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-0nu, 3.2 g kirmizi- kahverengi ince kristalize toz olarak çökeltmek için etanol buharlastirildi ve indirgenmis hacimli ürün çözeltisi bir buz banyosu içinde karistirilarak sogutuldu, e.n. 231-232°C. lH DMSO-dö) ö ppm ]+, C10H7N3OS: 217.25 için hesaplandi. Bölüm D. Metil-I2-(3-tiv0fen-2-il-pirazolol1,5-alpirimidin-S-ilamin0)-etill-karbamik asit tert-butil ester bir ortam sicakliginda, asetonitril (16 mL) içinde karistirilmis, 3-tiyofen-Z-i1-4H-pirazolo[l,5-a]pirimidin-5-0n (852.2 mg, 4.9 mmol), ve (benzotriazol-1-iloksi)tris(dimetilamino)fosf0nyum DBU ilavesinin ardindan, turbidite berraklasti ve çözelti 2 gün karismaya birakildi, daha sonra tuzlu su ve etil asetat olarak ayrildi. Ekstrakt kurutuldu (MgSO4) ve flas kromatogafîsi alindi (silika jel, %10 (h/h) metanol / etil asetat ile elute edildi). Ürün fraksiyonlarinin buharlastirilmasi, metiI-[2-(3-tiyofen-2-il-pirazolo[l,5-a]pirimidin-5-ilamin0)-etil]-karbamik asit tert-butil esteri, 333.6 mg sari, ince kristalize toz olarak sunmak için, heptandan kristalize edilen bir yag sundu, e.n. ö ppm (rotomerler il)amin0)etil)(metil)-karbamat sentezi YoirNwu `N ` 0~ katinin hepsi çözündürülene kadar ortam sicakliginda karismaya birakildi. Bir buz banyosu mmol), tedrici olarak kivamli karistirilmis bir süspansiyon halini alan 0°C tamponlu asetik asit reaksiyon çözeltisine 35 dakika damla damla ilave edildi. Brom ilavesinin tamamlanmasindan sonra, süspansiyon bir ilave 15 dakika karismaya birakildi, daha sonra bir buz banyosu içinde karistirilmis sodyum metabisülfidin [7681-57-4] bir sulu (%5 a/h) çözeltisine (1 L) yavas yavas akitildi. Kati sodyum hidroksit [1310-73-2] peletler, üst faz pH"1 pH kagidiyla yaklasik olarak 8 olarak belirlenene kadar 40°C°den az bir iç sicakligi koruyacak bir hizda karistirilmis süspansiyona ilave edildi. 39.8 g açik sari tozu sunmak için çökeltilen ürün süzülerek izole edildi, filtre topak suyla yikandi, ve kurumaya birakildi, en. için hesaplandi. Bölüm B. tert-butil (2-((3-br0m0pirazolo[1,S-alpirimidin-S- il)amin0)etil)(metil)karbamat 4.00 mmol) ilave edildi. Elde edilen karisim, 140°C,ye 0.5 saat mikrodalgada isitildi. EtOAc ile seyreltildi, ve su ve tuzlu suyla yikandi. 607 mg (%82) arzu edilen ürünü sunmak için organik tabaka, MgSO4 üzerinde kurutuldu ve %20 - %100 EtOAc/Heks ile elute edilerek silika jel kolon üzerinde saflastirildi. Bölüm C. N1-(3-br0m0pirazolo[LS-a]pirimidin-S-il)-N2-metiletan-1,2-diamin Arzu edilen ürünün TFA-tuzunu %100 verimde (622 mg) sunmak için tert-butoksikarbonil, i1)amin0)etil)(metil)karbamat 4 mL DCM içinde çözündürülerek, ve ardindan 4 mL TFA ilave edilerek, 0.5 saat oda sicakliginda karistirilarak, ve karisim konsantre edilerek giderildi. Bölüm D. Izopropil (2-((3-br0m0pirazolo[LS-alpirimidin-S- il)amin0)etil)(metil)karbamat 4.000 mmol) ilave edildi. Elde edilen karisim oda sicakliginda 0.5 saat karistirildi, ve ardindan DCM (30 mL) ile seyreltildi, su ve tuzlu suyla yikandi, MgSO4 üzerinde kurutuldu, ve konsantre edildi. Arzu edilen ürünü (%87 verim) elde etmek için ham kalinti, %1-%10 MeOH/DCM ile elute edilerek silikajel (ISCO) içinde saflastirildi. karisim, 140°C"de 0.5 saat mikrodalgaya tabi tutuldu. Sogutulduktan sonra, EtOAc ile seyreltildi, ve su ve tuzlu suyla yikandi. Arzu edilen ürünü %77 verimde (66.4 mg) sunmak için organik tabaka MgSO4 üzerinde kurutuldu, ve PREP HPLC üzerinde saflastirildi. 1H .6.6. (S)-tert-butil 2-(((3-(4-(aminometil)fenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat sentezi Bölüm A. (S)-tert-butil g-"B-bromopirazolol1.5-alpirimidin-5- mamin0)metil)pirrolidin-l-karboksilat Örnek 5.6.5°te açiklanan amin ikamesi kosullari altinda 3-bromo-5-k10ropirazolo[1,5- a]pirimidin ve (S)-tert-buti1 2-(amin0metil)pirrol-idin-1-karboksi1at reaksiyonu %74 ürünü Bölüm B. (S)-tert-butil2-(((3-(4-(amin0metil)fenil)pirazoloI1,5-alpirimidin-5- ihamino)metil)-pîrrolidin-1-karboksilat (S)-tert-butil 2-(((3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)amino)metil)pirrolidin-1- karboksilatin, örnek 5.6.5,te açiklandigi gibi ayni kosullar altinda (4- (aminometil)fenil)b0r0nik asitle Suzuki kenetlenmesi, %73 oraninda basliktaki bilesigi sundu. .6.7. (S)-tert-butil 2-(((3-(2-metoksifenil)pirazolo[1,S-a]pirimidin-S- il)amin0)metil)pirrolidin-l-karboksilat sentezi (S)-tert-butil 2-(((3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin-1- karboksilatin, örnek 5.6.5,te açiklandigi gibi ayni kosullar altinda (2-met0ksifenil)b0r0nik asitle Suzuki kenetlenmesi %68 oraninda basliktaki bilesigi sundu. lH NMR (400 MHZ, il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat sentezi 13).". g& Bölüm A. (S)-tert-butil 2-((pirazolo[LS-a]pirimidin-S-ilamin0)metil)pirrolidin-1- karboksilat Piyasada satilan 5-k10r0pirazolo[1,5-a]pirimidin, %96 oraninda ürünü sunmak için örnek .6.5"te açiklanan amin ikamesi kosullari altinda (S)-tert-buti1 2-(aminometi1)pirrolidin-1- karboksilatla reaksiyona sokulur. l-karboksilat ilave edildi. Bu karisim 4 saat oda sicakliginda karistirildi, ve ardindan 10 mL su ile sönümlendi. Bu daha sonra 50 mL EtOAe ile seyreltildi ve organik tabaka ayrildi, tuzlu suyla iki kez yikandi, ve MgSO4 üzerinde kurutuldu. 1.03 g (%93) grimsi beyaz bir kati elde etmek için, bu konsantre edildi ve %20-%100 EtOAc/heks ile elute edilerek silika jel üzerinde saflastirildi. Bölüm C. (S)-izopr0pil 2-(((3-(triIl0r0metil)pirazolo[LS-alpirimidin-S- il)amin0)metil)pirrolidin-l-karboksilat mmol) ilave edildi. Bu karisim, 90°Csye önceden isitilmis bir yag banyosu üzerinde 0.75 saat karistirildi. Reaksiyon oda sicakligina sogutuldu, ve NH4C1 doymus sulu çözeltiyle sönümlendi. 30 mL EtOAc ile ekstrakte edildi, tuzlu suyla yikandi ve MgSO4 üzerinde kurutuldu. 81 mg (%42) arzu edilen ürünü elde etmek için bu konsantre edildi ve PREP HPLC üzerinde satlastirildi. lH NMR ( 1.86 - (br. s., 1 H) +, C17H22F3N502 385.0] için hesaplandi. .6.9. 4-[3-(3-Metoksi-piridin-4-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-il]-piperazin-l-karboksilik asit izopropil ester sentezi g, 659.5 mmol) bir havanda bir derinlemesine karisima birlikte yerlestirildi ve bir manyetik karistirici çubuk içeren bir 250 mL yuvarlak tabanli deney sisesine aktarildi. Deney sisesi bir geri akis kondansörüne uyduruldu, N2 ile örtüldü, ve reaksiyon kabi bir ortam sicakliginda yag banyosuna batirildi. Katkisiz kati karisim karistirilirken, banyo 120°C°ye 0.5 saat isitildi ve nominal sicaklikta bir toplamda 2 saat tutuldu. Banyo çikarildi ve erimis reaksiyon yaklasik olarak 75°C3ye sogumaya birakildi. Etil asetat, bunun ayarlanmasinin bir kati kütleye engellenmesi için reaksiyon ürününü çözündürmek için kondansöre dikkatli sekilde ilave edildi. Reaksiyon çözeltisi bir ayirma hunisine aktarildi, ayrica etil asetatla seyreltildi, ve suyla yikandi. 16.] g berrak sari yag elde etmek için etil asetat ekstrakti (MgSO4) kurutuldu ve buharlastirildi. Yag, iki mahsulde 15.8 g açik sari kristalize toz sunmak için metanolden kristallestirildi, e.n. 3.16 - Bölüm B. 4-(3-Br0m0-pirazoloI1,S-a1pirimidin-5-il)-piperazin-1-karboksilik asit izopropil ester Hizli sekilde karistirilmis, 0°C7de, Nz ile örtülmüs bir 3-br0m0-5-piperazin-1-il-pirazolo[1,5- çözeltisi 10 dakikalik süre boyunca sabit sekilde ilave edildi. Reaksiyon karismaya birakildi ve ortam sicakligina gece boyunca isitildi, bu sirada tuzlu suyla yikandi, kurutuldu (MgSO4), silika jel üzerine önceden yüklendi, kromatografisi alindi (Silika jel, %100 etil asetat ile elute edildi) ve 13.2 g beyaz toz elde etmek için etil asetat / heptandan kristalize edildi, e.n. 78- 79°C. lH NMR ( Bölüm C. 4-13-(3-Metol_(si-piridin-4-il)-pirazoloI1.S-a1pirimidin-S-ilI-piperazin-l-10 karboksilik asit izopropil ester 0.1 mmol) ile kompleks halinde, bir 4-(3-bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-piperazin-1- karboksilik asit izopropil ester (385.0 mg, 1.1 mmol), 3-metoksipiridin-4-boronik asit hidrat (516.3 mg, 2.2 mmol), ve [l,1'-bis(difenilfosfino)ferrosen]dikloropalladyum(ll) karisimina, bir 1,2-dimetoksietan (25 mL) içinde %30 (h/h) su çözeltisi ve bir manyetik karistirici çubuk ilave edildi. Reaksiyon kabi bir geri akis kondansörüne uyduruldu, bir ortam sicakliginda yag banyosuna düsürüldü, ve sistem hizli sekilde karistirilirken 10 bosaltma/ N2 örtü döngülerine alindi. Hizli sekilde karistirilmis, N2 ile örtülmüs, reaksiyon 85°C°lik bir yag banyosu sicakligina 17 saat isitildi, daha sonra sogutuldu ve tuzlu su (pH, 3N sulu sodyum hidroksitle 'a ayarlandi) ve etil asetat olarak ayrildi. Preparatif RP-HPLC ile saIlastirilan bir turuncu yag sunmak için faz ile ayrilmis ekstrakt (MgSO4) kurutuldu ve buharlastirildi. Izole edilen ürün, metanol içinde çözündürüldü, konsantre hidroklorik asit ile seyreltildi, kuruyana kadar buharlastirildi, metanol içinde yeniden çözündürüldü ve dietil ctcr ilavesiyle çökeltildi. Çökeltinin süzülmesi, 100.5 mg ürün monohidroklorür tuzunu bir sari toz olarak sundu. e.n. 2.51 (5, 2 .6.10. 4-[3-(2-Met0ksi-fenil)-pirazolo[1,S-a]pirimidin-S-il]-piperazin-l-karboksilik asit izopropil ester sentezi 76.4 mg sari tozu serbest bir baz olarak sunmak için 4-(3-bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- hazirlandi, e.n. 3.48 .6.11. (S)-tert-butil 2-(((3-(2-etilfenil)pirazolo[l ,S-alpirimidin-S- il)amin0)metil)pirrolidin-l-karboksilat sentezi Örnek 5.6.5`te açiklandigi gibi ayni kosullar altinda (S)-tert-butil 2-(((3-br0m0pirazolo[l,5- a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilatin (2-etilfenil)b0r0nik asitle Suzuki kenetlenmesi %77 oraninda basliktaki bilesigi sundu. iH NMR ( hesaplandi. il)amin0)metil)pirrolidin-l-karboksilat sentezi mg, 0.909 mmol) ilave edildi. Elde edilen karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. mL EtOAc ile seyreltildi, ve su ve tuzlu su ile yikandi. 108 mg (%100) eter ürünü sunmak için MgSO4 üzerinde kurutuldu ve konsantre edildi. Bölüm B. (S)-tert-butil 2-( ((3-(2-[D31met0ksi fenil)pirazolo[1,5-alpirimidin-5- il)amin0)metil)-pirrolidin-1-karboksilat Suzuki kosullari altinda (S)-tert-butil 2-(((3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amin0)metil)pirrolidin-l-karboksilatla reaksiyonu, basliktaki bilesigi %70 verimde sundu. lH NMR ( 3.40 (dd, karboksilik asit izopropil ester sentezi 76.0 mg sari tozu serbest bir baz olarak sunmak için 4-(3-brom0-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)-piperazin-l-karboksilik asit izopropil ester (338.7 mg, 0.9 mmol) ve 2-metoksi-3- benzer sekilde hazirlandi, e.n. ö ppm 1.22 (d,10 piperazin-l-karboksilik asit izopropil ester sentezi Bir sari tozu serbest bir baz olarak sunmak için 4-(3-br0mo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)- piperazin-l-karboksilik asit izopropil ester ve (1-metil-2-0kso-1,2-dihidropiridin-3-il)b0r0nik asitten örnek 5.6.9,un preparasyonuna benzer sekilde hazirlandi, e.n. 206-207°C. lH NMR ( 4.83 karboksilik asit izopropil ester sentezi preparasyonuna benzer sekilde hazirlandi, e.n. ö karboksilat sentezi içine alindi ve 800 C°de 2 saat karistirildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, etil asetatla celite tipadan süzüldü. In vacuo indirgendi ve heksanzetil asetatla %75-%100 bir isko silika kolonundan geçirildi. Ürün ve desbromo birlikte elute edildi, i'n vacuo giderildi. 889mg ürünü elde etmek için, ürün, IPAC°den 3 kez yeniden kristallestirildi, heptanlarla yikandi, kurutuldu. lH NMR (, 8.78 ((1, J = için hesaplaridi. il)piperazin-1-karboksilat sentezi Bir izopropil 4-(3- mmol) trietilamin ilavesi eklendi. Reaksiyon sisesi, 90°C,ye önceden isitilmis bir yag banyosuna daldirildi, ve kuvvetli sekilde karistirildi. Bu, tamamen çözündürmek için süspansiyon halinde tutulan katilarin hepsi için yaklasik 0.25 saatlik karistirmayi buldu. Çesitli renk degisiklikleri gözlemlendi, reaksiyonun gerisi için kalan son renk, çok koyu kahverengi bir renkti. 1.5 saat sonra, LCMS, reaksiyonun tamamlandigini gösterdi. Oda sicakligina sogumaya birakildi, ve 100 mL EtOAc ile seyreltildi. Organik tabaka ayrildi, ve sulu tabaka 40 mL EtOAc porsiyonlarla iki kez ekstrakte edildi. Birlesik organik tabakalar tuzlu suyla yikandi, MgSO4 üzerinde kurutuldu, ve konsantre edildi. Ham karisimi çözündürmek için az bir hacimde DCM kullanildi, ve ardindan ISCO üzerinde ayirma için bir 120 g silika jel kolonu üzerine dogrudan dolduruldu. %40 EtOAc/heks ila %100 EtOAdlik bir gradyan, ilk 25 dakika ilerletildi. Arzu edilen ürün elute etmedi, sadece bazi katiskilar elute edildi. Ancak, birlikte elute etmeye basladi. Desbromo bilesigi arzu edilen ürünü içeren fraksiyonlarin hepsinden yayilsa dahi, desbromo bilesiginin yüzdesinin zamanla siddetli biçimde azalmaktadir. Dolayisiyla, desbromomm en yüksek yüzdelerini içeren baslangiç fraksiyonlari bosaltildi, ve 254 nm°de 3.4 g yaklasik %87 satligi (yaklasik %13 desbromo bilesigiyle) elde etmek için geri kalan fraksiyonlar konsantre edildi. [IH NMR baz alinarak, desbromo, UV üzerinde 254 nm°de asiri büyütüldü, ve 220 nmide UV üzerinde eksik degerlendirildi]. saflikla elde etmek için, IPAC ve heptanlar kullanilarak iki kez yeniden kristallestirildi. lH karboksilat sentezi ve bir karistirma çubugu ilave edildi. Tüm katilar ilave edildikten sonra, 200 mL- MeCN ilave edildi, bunu 100 mL su ilavesi takip etti. Reaksiyon sisesi, 85°C,ye önceden isitilmis bir yag banyosuna daldirildi, ve kuvvetli sekilde karistirildi. Bu reaksiyon geri akisa ayarlandi. 85°C"de yaklasik 16 saat karistirildiktan sonra, oda sicakligina sogumaya birakildi ve 200 mL EtOAc ile seyreltildi. Organik tabaka ayrildi, ve sulu tabaka, EtOAc°nin 80 mL°lik porsiyonlariyla iki kez ekstrakte edildi. Birlesik organik tabakalar tuzlu suyla yikandi, MgSO4 üzerinde kurutuldu, ve konsantre edildi. Ham karisimi çözündürmek için az bir hacimde DCM kullanildi, ve ardindan ISCO-XL üzerinde ayirma için bir 750 g silika jel kolonuna dogrudan yüklendi. Bir %50 EtOAc/heks ila %100 EtOAc gradyani ilk 35 dakika ilerletildi. Arzu edilen ürün elute etmedi, sadece bazi katiskilar elute edildi. Ancak, %100 EtOAc ile yaklasik 10 dakika ilerletildikten sonra, desbromo yan ürünü, arzu edilen ürünle birlikte elute edilir. Desbromo bilesigi, arzu edilen ürünü içeren fraksiyonlarin hepsinden yayilsa dahi, desbroino bilesiginin yüzdesi zamanla azalir gibi görünüyor. Dolayisiyla, desbromonun en yüksek yüzdelerini içeren baslangiç fraksiyonlari bosaltildi, ve geri kalan fraksiyonlar 13.46 g 254 nm,de yaklasik %86 saflik elde etmek için (yaklasik %14 desbroino bilesigiyle) konsantre edildi. Bu malzeme, 11.4 g (%68) arzu edilen ürünü elde etmek için IPAC ve heptanlar kullanilarak iki kez yeniden kristallestirildi. 1H NMR ( ö ppm hesaplandi]. l-karboksilat sentezi 3-brom0-5-(piperazin-l- ardindan TEA ilave edildi. 5 dakika sonra, buz banyosu çikartildi, ve reaksiyon karisimi oda sicakliginda karistirildi. 5 saat sonra, LCMS, reaksiyonun tamamlandigini gösterdi. EtOAc ile seyreltildi, tuzlu su ile sönümlendi, ve organik tabaka, MgSO4 üzerinde kurutuldu. Arzu edilen ürünü elde etmek için bu, konsantre edildi ve %0-%9 MeOH/DCM ile elute edilerek bir . Bölüm B. 2-met0ksietil 4-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-alpirimidin-5- il)pinerazin-1-karboksilat Bir 2-metoksietil 4-(3- 85°C3ye önceden isitilmis bir yag banyosuna daldirildi, ve karistirildi. 1 saat sonra, reaksiyon tamamlandi, ve oda sicakligina sogumaya birakildi, ve ardindan 200 mL EtOAc ile seyreltildi. Organik tabaka ayrildi, ve sulu tabaka 150 mL porsiyonlarda EtOAc ile iki kez ekstrakte edildi. Birlesik organik tabakalar tuzlu suyla yikandi, MgSO4 üzerinde kurutuldu, ve bir ince ped silika jelden süzüldü, ve 14 g kati ürün, [254 nm'de uV absopsiyon baz alinarak %90 arzu edilen ürün ve %10 desbromo yan ürün] elde etmek için süzüntü konsantre edildi. Elde edilen kati, tüm 14 g, 100 mL DCE içinde çözündürülerek ve 500 mg Darco ilave edilerek kömür muainelesine tabi tutuldu. Bu isitildi ve yaklasik 1.5 saat karistirildi, sogutuldu ve ardindan celite ile süzüldü, ve konsantre edildi. Elde edilen ürün, silika jel kromatografisine tabi tutulmadan önce yeniden kristallestirilmek için yeterince temiz göründü. Yeniden kristallesme, bunun az bir hacimde IPAC içinde yaklasik 75°C"de (birkaç mililitre MeOH, katilarin çözündürülmesine yardim etmek için kullanildi) çözündürülmesiyle gerçeklestirildi. Tam çözünmeden sonra, heptan ilave edildi ve çökeltiler olusmaya basladi, ve 0°C°de 1 saat sogumaya birakildi. Bu daha sonra süzüldü ve yaklasik %97°lik saflikla 13.1 g ürün kurutuldu. Soluk sari bir kati 12.45 g arzu edilen ürünü elde etmek için bu malzeme tekrar yeniden kristallestirildi (%77 verim, %99 üzerinde saflik). iH NMR (400 MHz, karboksilat sentezi Bölüm A. tert-butil 4-(3-br0m0pirazololl,S-alpirimidin-S-il)piperazin-1-karboksilat +OYNJ Br edildi ve 65° C"de gece boyunca karistirildi. Reaksiyon oda sicakligina sogutuldu, su ile seyreltildi ve kati ürün süzüldü. Kati suyla yikandi, daha fazla reaksiyon için 15.84g ham ürünü oldugu gibi elde etmek için kurutuldu. LRMS (ESl) m/z 382/384 [(M+H)]+, Bölüm B. tert-butil 4-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat dioksan ve 30mL su içine alindi ve 75° C,de 2 saat karistirildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, toluenle seyreltildi, tuzlu suyla yikandi. Organik tabaka, magnezyum sülfatla ve celite tipayla süzüldü. In vacuo indirgendi ve heksanzetil asetat %0-%100 ile bir konsantre edildi. Ürün, IPAC:Heptan 30:707ten 2 kez yeniden kristalize edildi, heptanlar ile yikandi, 12;; ürün elde etmek için kurutuldu. lH NMR ( 5 8.78 - 8.85 karboksilat sentezi Toluen (13.3mL, I3.3mmol) içinde izopropilkloroformat IM, ve trietilamin (2.47mL, 17.7mmol) ilave edildi ve oda sicakliginda 30 dakika karistirildi. Reaksiyon suyla yikandi, DCM tabaka, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü, in vacuo indirgendi. DCMzMeOH %0-%5 ile bir 1500 silika kolonu üzerinde ilerletildi. Ürün fraksiyonlar birlestirildi ve daha fazla reaksiyon için 2.86g ham ürün oldugu gibi elde etmek için i'ri vacuo l-karboksilat dioksan ve 7mL su içine alindi ve 800 C7de 2 saat karistirildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, etil asetatla celite tipa ile süzüldü. In vacuo indirgendi ve heksanzetil asetatla %75-%100 bir ISCO silika kolonundan geçirildi. Ürün ve desbromo birlikte elute edildi, i'n vacuo indirgendi. 12g ürünü elde etmek için, ürün etil asetatzHeksandan 2 kez yeniden kristallestirildi, heptanlarla yikandi, kurutuldu. lH NMR ( 5 il)piperazin-l -karboksilat sentezi Bir izopropil 4-(3- Tüm katilar ilave edildikten sonra, 30 mL %2 TPGS-750-M çözelti ilave edildi, bunu 3.80 mL (27.15 mmol) trietilamin ilavesi takip etti. Reaksiyon sisesi, 85°C,ye önceden isitilmis bir yag banyosuna daldirildi, ve kuvvetli sekilde karistirildi. Süspansiyon halinde tutulan katilarin10 tamamen çözündürülmesi yaklasik 025 saat karistirma gerekti. 85°C,de yaklasik 2 saat karistirmadan sonra, LCMS, reaksiyonun tamamlandigini gösterdi. Oda sicakligina sogumaya birakildi, 40 mL EtOAc ile seyreltildi. Organik tabaka ayrildi, ve sulu tabaka, 30 mL porsiyonlarda EtOAc ile iki kez ekstrakte edildi. Birlesik organik tabakalar tuzlu suyla yikandi, MgSO4 üzerinde kurutuldu, ve konsantre edildi. Ham karisimi çözündürmek için az bir hacimde DCM kullanildi, ve ardindan ISCO üzerinde ayirma için bir 80 g silika jel kolonu üzerine dogrudan yüklendi. Bir %50 EtOAc/heks ila %100 EtOAc gradyani ilk 15 dakika ilerletildi, ve ardindan kolon sadece EtOAc ile ilerletildi. Arzu edilen ürün, sadece EtOAc ile ilerlemeye yaklasik 8 dakika elute etmeye basladi. Desbromo yan ürün, arzu edilen ürünle birlikte elute edildi. Desbromo bilesigi, arzu edilen ürünü içeren fraksiyonlarin hepsiyle yayilsa dahi, desbromo bilesiginin yüzdesi zamanla azalir gibi görünüyor. Dolayisiyla, desbromonun en yüksek yüzdelerini içeren ilk birkaç tüp bosaltildi, ve 254 nm"de 1.73 g yaklasik %84 sat1ik elde etmek için geri kalan fraksiyonlar konsantre edildi (yaklasik %16 desbromo bilesigi ile). [IH nmr baz alinarak, desbromo, 254 nmade UV üzerinde asiri büyütüldü, ve UV üzerinde 220 nmide eksik degerlendirildi]. 1.45 g (%65 verim) arzu edilen ürünü sunmak için malzeme, IPAC ve heptanlar kullanilarak iki kez yeniden kristallestirildi. [H NMR ( ö ppm 1.30 ((1, J=6.32 hesaplandi]. karboksilat sentezi alpirimidin-5-il)piperazin-1-karboksilat DMSO, ardindan 41 mg (0.05 mmol) PdC12(dppI)2.DCM ilave edildi. Hava, N2 ile ikame edildi, ve karisim 80°C"ye karistirilarak isitildi. Ertesi sabah LCMS, reaksiyonun tamamlanmaya basladigini gösterdi. Oda sicakligina sogutuldu, EtOAc ile seyreltildi, tuzlu suyla yikandi, ve organik tabaka MgSO4 üzerinde kurutuldu. 107 mg arzu edilen ürünü elde etmek için konsantre edildi ve bir 12 g kolonu kullanilarak ISCO içinde saflastirildi, ve %25 - boronik aside hidrolize edildi]. Bölüm B. izopropil 4-(3-(6-metoksipiridin-2-il)pirazolo[1.5-alpirimidin-5-i1)piperazin-1- saat mikrodalgaya tabi tutuldu. EtOAc ile seyreltildi, tuzlu suyla yikandi, ve organik tabaka MgSO4 üzerinde kurutuldu. 42 mg arzu edilen ürünü elde etmek için konsantre edildi ve nötr PREP HPLC üzerinde saflastirildi. lH NMR ( ö ppm 1.30 (d, Bölüm A. 4-(3-br0m0piraz010[1,S-alpirimidin-S-il)piperazin-l-karbonitril alindi ve 0°C3de bir buz banyosu içinde karistirildi. 6mL su içinde sodyum bikarbonat edildi ve 00 C,de 30 dakika karistirildi, ardindan bir Oda sicakligina ulasmasina izin verildi ve gece boyunca karistirildi. Reaksiyon DCM ile seyreltildi, suyla yikandi, DCM tabakasi magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, daha fazla reaksiyon için 500 mg ham ürün oldugu hesaplandi. oksadiazol 9mL DMF içinde 4-(3-bromopirazolo[l,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-l-karbonitril (450mg, Daha sonra 12mL toluen ilave edildi ve piridin (474uL, 5.86mmol) ve izobutirikanhidrür sicakligina in vacuo sogutuldu, indirgendi, ardindan etil asetat içine alindi ve su, tuzlu su, suyla yikandi. Organik tabaka magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu ve in vacuo indirgendi. Oldugu gibi kullanmak üzere m/z Bölüm C. 5-izopropil-3-(4-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[l,5-a]pirimidin-S-illpiperazin-l- isitildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, asetonitril ve DCM ile bir celite tipayla süzüldü, in vacuo indirgendi. 12mg ürünü elde etmek için Shimadzu nötr faz prep üzerinde saflastirildi, liyofilize edildi. IH NMR ( 5 8.83 (dd, J : 1.77, il)piperazin-l-il)-4-metilpentan-1-0n sentezi metilpentan-l-on DMF içine alindi ve oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Reaksiyon, DCM ile seyreltildi ve suyla yikandi. Organik tabaka magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü ve in vacuo indirgendi. Kalinti, DCM çözeltisi içinde 20mL bir %40TFA içine alindi ve 35(J C,de gece boyunca karistirildi. Karisim in vacuo konsantre edildi ve DCM içinde %IOMeOH ile bir silika tipadan geçirildi. 600mg ham ürünü daha fazla reaksiyon için TFA tuzu olarak sunmak 395.31 için hesaplandi. Bölüm B. ( S)-2-amino- l -(4-( 3 -(2-met0ksipiridin-3 -il)pirazolo[l ,5-alpirimidin-5-il)piperazin- (1 lmg, 0.022mmol) bir sizdirmaz tüp içinde 2mL dioksan ve lmL su içine alindi ve 85° C,de 2 saat isitildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, asetonitril ve DCM ile bir celite tipadan süzüldü, in vacuo indirgendi. 28.1mg formik asit tuz ürünü elde etmek için shimadzu nötr faz prep üzerinde saflastirildi, liyofilize edildi. lH NMR (400 MHZ, DMSO- il)pirr0|idiii-3-il)-N,4-dimetilpentanamid sentezi Bölüm A. (S)-tert-butil (1-(3-br0m0pirazolo[1,5-alpirimidin-S-il)pirr01idin-3- il !karbamat izopropanol içine alindi ve l40° C,de 30 dakika mikrodalgaya tabi tutuldu. Reaksiyon in vacuo siyrildi, etil asetat içine alindi, suyla yikandi, daha sonra etil asetatla bir silika tipadan geçirildi. Çözücü, Bölüm B,ye oldugu gibi tasinan 3.6g ham ürünü sunmak için in vacuo Bölüm B. (S)-1-(3-br0mopirazololl,5-a]pirimidin-S-il)-N-metilpirrolidin-3-amin 9.4mm01) 15mL DMF içine alindi ve 00 Üye bir buz banyosu içinde sogutuldu. Iyodometan 18.8mmol) içinde sodyum hidrür %60 yavas yavas ilave edildi. Reaksiyon, 5 dakika 0° C,de karistirildi, daha sonra buz banyosundan çikarildi ve 30 dakika oda sicakliginda karistirildi. Reaksiyon buz ile sönümlendi, daha sonra etil asetatla 2x ekstrakte edildi. Etil asetat fraksiyonlar birlestirildi, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü, in vacuo giderildi. Bu, daha sonra 26mL DCM içine alindi ve 4mL TFA ilave edildi. LC/MS ile tamamlanana kadar 1 saat karistirildi. Bölüm C°ye oldugu gibi tasinan 2.72g ham ürünü elde etmek için reaksiyon lN NaOH ile yikandi, DCM tabakasi giderildi, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü, in vacuo indirgendi. LRMS (ESI) m/z 296/298 [(M+H)]+, Cl lHl4BrN5: 296.17 için hesaplandi. Bölüm C. (S)-2-amin0-N-((S)-l-(3-br0mopirazoloI1,5-alpirimidin-S-il)pirrolidin-S-il)- N4-dimetil entanamid H2N ,WC/`i N Boc-L-Leu ( DMF içine alindi ve oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Reaksiyon DCM ile seyreltildi, suyla yikandi, ardindan DCM tabakasi magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü ve in vaciio indirgendi. Bu daha sonra 26mL DCM içine alindi ve 4mL TFA ilave edildi. LC/MS ile tamamlanana kadar 1 saat karistirildi. Bölüm Dide oldugu gibi kullanilan 226mg ham ürün için reaksiyon lN NaOH ile yikandi, DCM tabakasi giderildi, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü, in vacuo indirgendi. LRMS (ESI) m/z 409/411 [(M+H)]+, Ci7H24BrNÖO: 409 için hesaplandi. Bölüm D. ( S)-2-amino-N-( ( S)-1 -( 3-( 2-met0ksipiridin-3-il)pirazolof1 ,5-alpirimidin-5 - illpirrolidin-3 -il)-N,4-dimetilpentanamid. (S)-2-amino-N-((S)-1-(3 -bromopirazolo[1,5- alindi ve sizdirmaz sekilde kapatilmis bir tüp içinde 85° Cide 2 saat isitildi. Reaksiyon daha sonra asetonitrille celite ile süzüldü ve DCM in vacuo indirgendi, ardindan Shimadzu nötr faz prep üzerinde saflastirildi ve ürün fraksiyonlari, 41.3mg 0.5 esdegerde formik tuz olarak (S)- 2-amino-N-((S)-l -(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)-N,4- dimetilpentanamidi elde etmek için liyofilize edildi. lH NMR ( 5 8.87 - il)piperazin-1-il)-3-metilbutan-1-0n sentezi Bölüm A. (S)-2-amin0-1-(4-(3-br0m0pirazolo[LS-a]pirimidin-S-il)piperazin-1-il)-3- metilbutan-l-on ( DMF içine alindi ve oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. reaksiyon DCM ile seyreltildi, suyla yikandi, DCM tabakasi, ardindan magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü ve in vacuo indirgendi. Bu, daha sonra 26mL DCM içine alindi ve 4mL TFA ilave edildi. LC/MS ile tamamlanana kadar 1 saat karistirildi. Daha fazla reaksiyon için 349mg ham ürünü oldugu gibi elde etmek için reaksiyon, 1N NaOH ile yikandi, DCM tabakasi giderildi, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü, in vacuo indirgendi. LRMS (ESI) m/z 381/3 83 [(M+H)]+, C15H21BrNÖO: 381.28 için hesaplandi. (5mg, 0.012mmol) azot altinda 3mL dioksan ve lmL su içine alindi ve 85° C,de 2 saat karistirildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, asetonitril ve DCM ile celite tipa ile süzüldü. l8mg 1.5esdegerde formik tuz ürününü elde etmek için in vacuo indirgendi ve shimadzu nötr faz prep üzerinde saflastirildi, liyofilize edildi. lH NMR ( 5 il)piperazin-1-il)pr0pan-l-0ii sentezi Bölüm A. (S)-2-amin0-1-(4-(3-br0m0pirazolo[LS-a]pirimidin-S-il)piperazin-1-il)-3- metoksi ro an-l-on alindi. Boc-Ser(Me)-OH (, ve trietilamin (590uL, 4.25niniol) ilave edildi ve oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Reaksiyon DCM ile seyreltildi ve suyla yikandi. DCM tabakasi magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, in vacuo indirgendi. Bu, daha sonra DCM çözeltisi içinde %30 TFA içine alindi ve oda sicakliginda 2 saat karistirildi. Bu daha sonra 00 Üye sogutuldu ve sulu tabaka bazik kalana kadar kons sulu NaOH yavas yavas ilave edildi. DCM tabakasi ekstrakte edildi, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, 405mg ham ürün daha fazla reaksiyon için oldugu gibi in vacuo ve x-Phos (l4mg, 0.042 mmol) bir sizdirmaz tüp içinde 2mL dioksan ve lmL su içine alindi ve 85°C9de 2 saat isitildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, asetonitril ve DCM ile bir celite tipadan süzüldü, in vacuo indirgendi. 39mg°i formik asit tuz ürünü olarak elde etmek için shimadzu nötr faz prep üzerinde saflastirildi, liyofilize edildi. lH NMR (, il)piperazin-1-il)-3,3-dimetilbutan-1-0n sentezi 3-bromo-5-(piperazin-l-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin (300mg, 1.1 mmol) N-Boc-L-tert-Lösin içine alindi ve oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Reaksiyon DCM ile seyreltildi, suyla yikandi, DCM tabakasi daha sonra magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü ve in vacuo indirgendi. Bu daha sonra 26mL DCM içine alindi ve 4mL TFA ilave edildi. LC/MS ile tamamlanana kadar 1 saat karistirildi. Daha fazla reaksiyon için 420mg ham ürünü oldugu gibi elde etmek için reaksiyon IN NaOH ile yikandi, DCM tabakasi giderildi, magnezyum sülfat üzerinde kurutuldu, süzüldü, in vacuo indirgendi. LRMS (ESI) m/z 395/397 [(M+H)]+, C16H23BrNGO: 395.31 için hesaplandi. Bölüm B. (S)-2-amino-1-(4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1.5-alpirimidin-S-il)piperazin- 0.02lmmol), ve x-Phos (l4mg, 0.043mmol) azot altinda 4mL dioksan ve lmL su içine alindi ve 85° C°de 2 saat karistirildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, asetonitril ve DCM ile celite tipa ile süzüldü. 18mg lesdegerde formik tuz ürünü elde etmek için in vacuo indirgendi ve shimadzu nötr faz prep üzerinde satlastirildi, liyofilize edildi. lH NMR (, il)piperazin-1-karboksilat sentezi Bölüm A. 4-(3-Br0m0-pirazolol1,S-alpirimidin-S-il)-piperazin-l-karboksilik asit 4-nitr0- fenil ester (14.18 mmol) TEA ilave edildi. O°C°de 5 dakika karistirildiktan sonra, buz banyosu çikarildi, ve karistirmaya oda sicakliginda yaklasik 2 saat devam edildi. Bu, 50 mL %50 EtOAc/heks ile seyreltildi. 3.17 g (%100 verim) grimsi beyaz bir kati elde etmek için arzu edilen ürün süzüldü, ve kurutuldu. (tetrahidrofuran-3-il) ester a]pirimidin-5-il)piperazin-1-karboksilata, (R)-tetrahidrofuran-3-ol (44 mg, 0.5 mmol), ardindan %60 NaH (40 mg, 1.0 mmol) ilave edildi ve oda sicakliginda 2 saat karistirildi. 2 saat sonra 20 mL EtOAc ile seyreltildi ve tuzlu suyla yavas yavas sönümlendi. 71 mg (%72 verim) arzu edilen ürünü elde etmek için organik tabaka MgSO4 üzerinde kurutuldu ve konsantre edildi, %O-%10 MeOH/DCM ile elute edilerek 12 gram silika jel kolonu üzerinde saflastirildi. il)piperazin-l-karboksilat. Suzuki kenetlenmesi reaksiyonu, %72 oraninda arzu edilen ürün il)piperazin-1-karboksilat sentezi Bölüm A. l-metoksipropan-Z-il 4-(3-br0mopirazolol1,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat Bu, 1 -metoksipropan-Z-olün kullanilmasiyla ve (R)-tetrahidrofuran-3-il 4-(3- bromopirazolo[l,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1-karboksilati hazirlamak için yukarida açiklanan prosedürde Bölüm B takip edilerek hazirlandi. Bölüm B. l-Metoksipropan-Z-il 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazololl.5-alpirimidin-5- il)piperazin-l-karboksilat. Suzuki kenetlenmesi reaksiyonu, baska örnekler için kullanilan prosedür takip edilerek gerçeklestirildi. lH NMR ( ö ppm 1.29 J=7.45, 1.89 Hz, 1 H). il)piperazin-1-karboksilat sentezi Bölüm A. Tetrahidro-ZH-piran-4-i1 4-(3-br0m0pirazolo[1.S-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat Bu, tetrahidro-ZH-piran-4-ol kullanilarak ve (R)-tetrahidr0furan-3-i1 4-(3-br0mopirazolo[1,5- a]pirimidin-S-il)piperazin-1-karboksilati hazirlamak için yukarida açiklanan prosedürde Bölüm B takip edilerek hazirlandi. Bölüm B. Tetrahidro-ZH-piran-4-il 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1.5-alpirimidin-5- il)piperazin-l-karboksilat. Bu, Suzuki, (R)-tetrahidr0furan-3-il 4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-l -karboksilati hazirlamak için yukarida açiklanan prosedür takip edilerek sentezlendi. lH NMR ( ö ppm 1.66 - 1.80 a]pirimidin-S-il)piperazin-l-karboksilat sentezi (R)-tetrahidr0furan-3 -il 4-(3 -bromopirazolo[1,5-a]pirimidin-5 -il)piperazin-1-karboksilat karistirildi. Reaksiyon daha sonra oda sicakligina sogutuldu, asetonitril ve DCM ile celite tipa ile süzüldü. 30mg ürünü elde etmek için in vacuo indirgendi ve shimadzu nötr faz prep üzerinde saflastirildi, liyofilize edildi. 1H NMR ( (1 8.80 ((1, J = 7.83 HZ, (5, IH), ]+, il)piperazin-l-karboksilat sentezi Bölüm A. (S)-tetrahidr0furan-3-il 4-(3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat ajpirimidin-S-il)piperazin-1-karboksilata, (S)-tetrahidrofuran-3-01 (88 mg, 1.0 mmol), ardindan %60 NaH (80 mg, 2.0 mmol) ilave edildi ve oda sicakliginda 2 saat karistirildi. 2 saat sonra, 30 mL EtOAc ile seyreltildi ve tuzlu suyla yavas yavas sönümlendi. 301 mg (%76 verim) arzu edilen ürünü elde etmek için organik tabaka MgSO4 üzerinde kurutuldu ve10 konsantre edildi, %0-%10 MeOH/DCM ile elute edilerek bir 40 g silika jel kolonu kullanilarak saflastirildi. lH NMR ( Bölüm B. (S)-tetrahvdrofuran-3-il 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1.5-alpirimidin-5- il)piperazin-l-karboksilat. Suzuki kenetlenmesi reaksiyonu, %61 arzu edilen ürün elde edilerek LP-943795 sentezi için açiklandigi gibi ayni kosullar altinda gerçeklestirildi. iH 1 H) m/e il)piperazin -l-karboksilat sentezi Bölüm A. (S)-1-met0ksigropan-2-il 4-(3-br0mopirazolo[LS-a]pirimidin-S-il)piperazîn-1- karboksilat Bu, ayni kosullar altinda gerçeklestirildi ve %71 oraninda arzu edilen ürünü [(8)- tetrahidrofuran-3-il 4-(3-br0mopirazolo[l,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-l-karboksilat] elde etmek için yukarida kullanildigi gibi derecelendirildi. lH NMR ( il)piperazin -l-karboksilat. Suzuki kenetlenmesi reaksiyonu, baska örneklerin sentezi için kullanilan tipik kosullar altinda gerçeklestirildi, %64 arzu edilen ürün elde edildi. iH NMR ( 3.42 - 3.54 (m, 2 il)piperazin(dg)-l-karboksilat sentezi piperazin-d8 HCI (1 g, 6 ininol) ve TEA ( karisimi, 140°C°de 30 dakika bir mikrodalga firinda isitildi. Bir sonraki asama için kullanilan basliktaki bilesigi sunmak için daha fazla saflastirma olmadan karisim konsantre edildi. Bölüm B. 2-Met0ksietil 4-(3-br0m0pirazolol1,S-alpirimidin-S-il)niperazin(d8)-1- karboksilat ve DIEA ( ilave edildi. Elde edilen karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Basliktaki bilesigi (382 mg) sunmak için karisim konsantre edildi ve kalinti ISCOiya, ardindan prep HPLClye tabi tutuldu. IH NMR ( 4.24 Bölüm C. 2-Met0ksietil 4-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-alpirimidin-5- i1)piperazin(d8)-l -karboksilat. 2-metoksietil 4-(3-br0mopirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)piperazin(dg)-1-karboksilat ve uygun boronik asitle tipik Suzuki kenetlenmesi kosullari altinda basliktaki bilesigi sunmak için. 1H NMR ( ö ppm 3.41 (5, karboksilat sentezi THF içinde (20 mL) bir 3-brom0-5-(piperazin-l -il)pirazolo [1,5-a]pirimidin-dg (~ 2 ininol) ve damla damla ilave edildi. Elde edilen karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirildi. Basliktaki bilesigi (449 mg) sunmak için karisim konsantre edildi ve kalinti ISCO,ya tabi tutuldu. lH NMR ( 4.90 - 5.00 Bölüm B. Izopropil 4-(3-(2-met0ksi-6-metilpiridin-3-il)pirazolo[1,5-alpirimidin-5- i1)piperazin(d8)-1-karboksilat. Basliktaki bilesigi sunmak için 2-izopr0pil 4-(3- bromopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin(d8)-1-karboksilat ve uygun boronik asitle tipik Suzuki kenetleninesi kosullari altinda. lH NMR ( ö ppm 1.29 ((1, .6.38. P81 Filtre plaka analizi Bilesikler, bir Mutiprobe (PerkinElmer) ve Biomek FX (Beckman Coulter) kullanilarak bir Labcyte LDV plakaya (Labcyte, kat# LP-0200) seri sekilde seyreltildi, böylelikle en yüksek bilesik konsantrasyonu 96 uM"ydi. Bilesikler daha sonra bir ECHO 550 Sivi Isleyici (beher kuyucuk için 75 nL) koyuldu. bir toplamda 12u1 reaksiyon tamponu (Molecular Devices'tan Tween ve DTT içeren IMAP tamponu) daha sonra negatif kontroller için kolonlar 1 ve l3,ün her bir kuyucuguna ilave edildi ve lZul 2X AAKl (0.2 nM tm boy insan proteini, NCBI erisim no. NP_055726.2) geri kalan kuyucuklara ilave edildi. Enzim daha sonra bilesikle 10 dakika oda sicakliginda önceden inkübe edildi. Reaksiyonlar, 2X Mu2 (0.2 uM, tam boy insan proteini), 2x soguk ATP (2 uM), ve 1.3 uCi sicak 33P-ATP içeren 12ul substrat karisiminin Minitrak (PerkinElmer) ilavesi üzerine baslatildi. Reaksiyonlar bir saat oda sicakliginda devam etti. Bu sirada, Millipore 384-kuyucuklu P81 filtre plakalari (Millipore, katalog # MZPHNOWIO) bir plaka yikayici (Zoom ZW, Titertekîen) üzerine yerlestirildi ve 50ul %1 fosforik asitle önceden islatildi. Kinaz reaksiyonlari daha sonra her bir kuyucuga 24p1 %2 fosforik asit ilavesi üzerine durduruldu ve Minitrak daha sonra her bir kuyucuktan 40ul,yi, önceden islatilmis Millipore 384-kuy'ucuklu P81 filtre plakalarina aktarmak için kullanildi. Reaksiyon karisimlari 10 dakika oda sicakliginda P8l plakalarinda inkübe edildi, bunu Zoom filtre yikayici kullanilarak 100 pl/kuyucuk %1 fosforik asitle bes kez yikama takip etti. Her bir filtre plakasinin alti sizdirmaz sekilde kapatildi, bunu 20u1 Microscint 40iin her bir kuyucuga ilavesi takip etti, Flashplate kapagiyla plakalarin üzeri sizdirmaz sekilde kapatildi, ve ardindan TopCount (PerkinElmer) üzeri okunana kadar bir saat bekletildi. .6.39. HEK281 Hücre bazli Analiz HEK, %10 PES (SAFC Biosciences, kat. günde, hücreler bir IOCm tabak üzerinde plakalandi, böylelikle bunlar transfeksiyon zamaninda ~%80 birlesti. Kabaca 12 milyon hücreler transfeksiyon zamaninda bir 100m tabaktaydi. Ikinci gününde, her bir tabak, 48 ug DNA ve 144 ul Lipofectamin ile transfekte edildi. DNA, 3 ug AAKl/HA/leES (tam boy insan, NCBI erisim no. NP_, ve 1.5 ml OPTI-MEM içeren bir karisimdan (beher lOcm tabak için) olustu. Lipofectamin 2000, 144 ul Lipofectamin olustu. Her bir karisim, tek tek 15ml tüpe aktarildi ve oda sicakliginda 5 dakika inkübe edildi, ve ardindan iki karisim birlestirildi ve oda sicakliginda 20 dakika inkübe edildi. Büyüme ortami daha sonra her bir lûcm plakadan aspire edildi ve 10mL DMEM+%10 FBS (no GPS) ile ikame edildi. En sonunda, 3 m1 DNA/Lipofektamin karisimi, her bir 100m,lik tabaga ilave edildi ve yavas yavas karistirildi bunu gece boyunca 37°C,de ve %5 C021de plakanin inkübasyonu takip etti.10 Üçüncü günde, bilesikler lOOOX nihai konsantrasyonda %100 DMSO içinde seyreltildi, bunu test edilen bir toplamda 5 konsantrasyon için 3-kat seri seyreltme takip etti. Dört bilesik beher lOcm tabak için test edildi. Daha sonra her bir bilesik seyreltmesinin bir uPsi bir derin- kuyucuklu, 96-kuyucuk1u plakaya pipetlendi, bunu her bir bilesigin bir 2)( nihai konsantrasyonu için her bir kuyucuga 500 u] DMEM + %05 F BS ilavesi takip etti. Hücreler bir lOcm tabakta basit pipetlemeyle (HEK293 hücreleri bu noktada kolaylikla plakadan kolaylikla çikarildi) yeniden süspansiyon halinde tutuldu ve ardindan bir 50 ml konik tüpe aktarildi ve 1000rpm7de 5 dakika santrifügasyonla peletlendi. hücre peletleri daha sonra beher 100 al hücre sü3pansiyonu, 96-kuyucuklu TC plakasinin her bir kuyucuguna aktarildi. En sonunda, DMEM + %05 PES içinde seyreltilen 100 pl 2X bilesik daha sonra bir IX nihai konsantrasyon için hücre süspansiyonu içeren kuyucuklara ilave edildi. Plakalar daha sonra 37 °C1de ve %5 COfde 3 saat inkübe edildi, bunu hücre süspansiyonlarin her bir kuyucuktan 12-tüp PCR seritlere aktarilmasi takip etti. PCR seritler, hücreleri peletlemek için 1000rpm3de dakika bir tip rafa inceltildi ve ortam daha sonra hücre peletleri bozulmadan pipetlenerek çikarildi. Western Blot analizi hazirlamak için, hücre peletleri, 40ul lX LDS-PAGE numune tamponu (Invitrogen, kat# NP0008) + 2X Halt fofataz ve proteaz inhibitör kokteyli (Therrno saniye Sae ayarlanan mikrotip sonikatörle sonikasyona tabi tutulmasi takip etti. Bes ul 10X NuPage Numune Indirgeme maddesi (50 mM DTT ile) her bir numune içindi, bunu PCR makinesi üzerinde 70C3de 10 dakika isiyla denatüre etme takip eder. fosfo-muZ blot için beher numune için bir %4-%20 Tris-Glisin Criterion 26-kuyucuk1u jelin (Biorad, kat# 345- tamponu) NuPAGE 26-kuyucuk1u jelde (Invitrogen, kat# WGl403BX10) beher serit için lOiil yüklendi. Kontroller için, 2ng fosfo-mu2 veya 20ng mu2/Flag proteinler, her bir jelin son kuyucuguna yüklendi. SDS-PAGE°dan sonra, her bir jel üzerinde numuneler, bir iBlot kullanilarak PVDF inembranina aktarildi ve membranlar, TBST + %5 süt içinde bir saat bloke edildi, bunu TBST ile 5-10 dakika 3X yikama takip etti. Kriter jeller, TBST + %5 BSA içinde tavsan anti-fosfo-muZ (l :5000; New England Peptide tarafindan üretilen bir tavsan poliklonal antikor ve Lexicon"da satlastirilan aftînite) ile problandi, diger yandan, NuPAGE jeller, antikorlar gece boyunca 4°C"de bir külbütör üzerinde inkübe edildi. Dördüncü günde, Western blotilar 3)( 5-10 dakika TBST ile yikandi. TBST + %5 süt içinde reaktif maddesiyle (GE Healthcare, kat# RPN2132) bir Versadoc üzerinde yakalandi. En sonunda, kamera 10 dakika her 30 saniyede bir, bir resim çekmesi için ayarlandi ve her bir blot için en iyi görüntü hiç doymus sinyal olmadan (sinyal doydugunda, bantlar kinniziyla vurgulanacaktir) kaydedildi. Her bir serit üzerinde bir hacim analizi yogunluk degerleri elde etmek için degerlendirildi. Yüzde inhibisyonu, toplam Mu2 ekspresyon seviyelerine ilk normallestirilmesiyle her bir numune için ve ardindan %0 ve %100 kontrollerine kiyaslanarak hesaplandi. IC50 degerleri daha sonra Excel uydunna yazilimi kullanilarak hesaplandi. .6.40. In Vitro Veriler Bulusun çesitli bilesikleri için in vitro veriler burada Tablo l,de sunulmaktadir, burada "MW'I moleküler agirlik anlamindadir, "P81 Analizi" ile yukarida açiklanan P81 filtre plaka analizine atifta bulunulur, "CBA" ile yukarida açiklanan HEK281 hücre bazli analize atifta bulunulur, "--" belirtilen analiz için sonuçlarin elde edilmedigi anlamindadir, "*" 1.0 uMiden az veya buna esit anlamindadir, "**" 0.1 uM'den az veya buna esit bir deger anlamindadir, ve Bilesik MW CBAICsouM P81 IC50 uM (4-(3-(2-met0ksipiridin-3-i1)pirazolo[1,5-a]pirimidin- . 407.5 ** *** -il)piperazin-1-i1)(pirr01idin- l-il)metan0n -il)amin0)metil)pirr01idin- l -il)butan- 1 -on ' -il)amino)metil)pirrolidin-1-il)-3,3 -dimetilbutan- 1 -on etoksifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 435.6 ** *** metoksifeni1)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5- 421.5 *** * * * Bilesik MW CBAICSOiiM P811C50uM (S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 422. 5 ** * * * (S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(3-metoksipiridin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 422. 5 ** * * * (S)-1-(3,3-dimetilbuti1)-5-(((3-fenilpirazolo[1,5- a]pirimidin-S-il)amin0)metil)pirrolidin-2-0n il)amin0)metil)-N-(tert-butil)pirrolidin- l -karboksamid ' (S)-2-sik]0pr0pi1-N-meti1-N-(1-(3-(piridin-2- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3- 376. 5 -- * * il)asetamid metoksifenil)pirazolo[ l ,5-a]pirimidIn-5- 433.4 ** * * * il)amin0)metil)pirr0lidin-1-il)pr0pan-1-0n a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin-1-il)pr0pan-1- 404.4 ** * * * metoksifenil)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)pirr01idin- 433.4 -- ** 3-i1)-N-metilpr0panamid (8)-3 ,3,3-triflor0-N-( l -(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)pirrolidin-3-il)-N- 434.4 *** * * * metilpropanamid il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3- 404.4 *** * * * il)pr0panamid (S)-5-(((3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)am1n0)metil)-1-(3,3-dimetilbutil)pirrolidin-2-on (S)-eti12-(((3-(2-metoksifeniDpirazolo[1,5- a]pirimidin-S-il)amin0)metil)pirrolidin- 1 -karboksilat Bilesik (S)-izopr0pi1 (1 -(3-(2-metoksifenil)pirazolo[ l `,5- a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)(metil)karbamat (S)-izopr0pi1 (1-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3- il)(metil)karbamat (S)-iz0pr0pil 2-(((3-(2-met0ksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin-1-karb0ksilat (S)-izopr0pi1 metil(l-(3-(piridin-2-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)pirrolidin-3-il)karbamat (S)-izopr0pil metil(l-(3-(piridin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)pirrolidin-3-il)karbamat (S)-metil 2-(((3-(2-metoksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-S-il)amin0)metil)pirr01idin- l-karboksilat (S)-N-(1-(3-(2-metoksifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin- -il)pirr01idin-3-il)-N-metilbutiramid (S)-N-(1-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[ 1 ,5- a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)-N-metilbutiramid (S)-N-(1-(3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)pirrolidin-3-i1)-3 ,3,3-trifloro-N-metilpropanamid (S)-N-(1-(3-brom0pirazolo[l,5-a]pirimidin-5- il)pirr0|idin-3-i1)-N-meti1pirrolidin-1-karboksamid (S)-N-(tert-butil)-2-(((3-(2-rnet0ksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin- l-karboksamid (S)-N-metil-N-(1-(3-(piridin-2-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)butiramid a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)(metil)karbamat (S)-tert-buti1 2-(((3-(2- (metoksimetil)fenil)pira2010[l ,5-a]pirimidin-5- il)amin0)metil)pirrolidin- 1 -karboksilat 409.5 410.5 409.5 380.4 380.4 381.4 393.5 394.5 406.2 393.3 422.5 364.4 423.5 437.5 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik MW a]pirimidin-S-il)amin0)metil)pirrolidin- 1 -karboksilat ' a]pirimidin-S-i1)amin0)metil)pirrolidin- 1 -karboksilat ' (S)-tert-butil 2-(((3-(2-isopropoksifenil)pirazolo[1,5- 45 l 6 a]pirimidin-5-i1)amin0)meti1)pirr01idin-l-karboksilat ` a]pirimidin-S-il)amin0)metil)pirrolidin- l-karboksilat . a]pirimidin-S-i1)amin0)metil)pirrolidin- l-karboksilat ' a]pirimidin-S-il)amino)metil)pirrolidin-l-karboksilat ' a]pirimidin-5-il)amin0)meti1)pirrolidin- 1 -karboksilat ' (S)-tert-butil 2-(((3-(4-metoksifenil)pirazolo[1,5- 423 5 a]pirimidin-5-i1)amin0)metil)pirr01idin- l-karboksilat (S)-tert-butil 2-(((3 -(4-metoksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 424. 5 il)amin0)metil)pirr01idin- l -karboksilat (S)-tert-butil 2-(((3-(piridin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin- l-karboksilat ' (S)-tert-butil 2-(((3-(triflor0metil)pirazolo[1,5- 385 4 a]pirimidin-5-il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat ' il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat ' (S)-tert-butil 2-(((3-fenilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 393 5 il)amin0)metil)pirrolidin- l -karboksilat ' (S)-tert-buti1 metil(1-(3-(2-metilpiridin-4- 408.5 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)pirrolidin-3- il)karbamat (S)-tert-butil metil(1-(3-(piridin-2-il)pirazolo[1,5- a]pirirnidin-5-il)pirrolidin-3-il)karbamat a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -i1)-3-meti1butan- 1 -on il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat 2-met0ksietil 4-(3-(2-metoksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- l-karboksilat 2-met0ksietil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin- l-karboksilat 3-(2-met0ksipiridin-3-i1)-N-(4,4,4- triflorobutil)pirazolo[1 ,5 -a]pirimidin- 5-amin 3-(3-metoksipiridin-4-i1)-N-(2- (triflorometoksi)feneti1)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 3-(4-(aminometi1)fenil)-N-(2- (siklopentiloksi)eti1)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin 3-(4-(amin0metil)feni1)-N-(2- 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(tei"t- butoksi)etil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin 3-(4-(amin0metil)feni1)-N-(2- (tritlorometoksi)feneti1)pira2010[ l,5-a]pirimidin-5- 3-(4-(aminometil)feni1)-N-(2-met0ksietil)pirazolo[1 ,5- a]pirimidin-5-amin 394.5 394.5 436.4 400.4 411.5 412.4 351.3 429.4 351.4 353.5 339.4 427.4 297.4 CBA IC50 iiM P81 IC50 iiM Bilesik 3-(4-(amin0meti1)feni1)-N-(3- (siklopentiloksi)propil)pirazolo[1 ,5 -a]pirimidin-5- 3-(4-(amin0metil)feni1)-N-buti1pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-amin 3-(4-met0ksipiridin-3-i1)-N-(2- (triflorometoksi)fenetil)pirazolo[ l,5-a]pirimidin-5- 3-br0m0-N-((1-(2,2,2-trifloroetil)pirrolidin-2- il)metil)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin-5-amin 3-bromo-N-(3-(siklopenti10ksi)pr0pi1)pirazol0[1,5- a]pirimidin-5-amin 4-(5-(butilamin0)pirazolo[1,5-a]pirimidin-3 -il)-N-(2- (metilamin0)etil)benzamid -(4-(izobutilsülfonil)piperazin- l-il)-3-(2- metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin siklopentil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat etil 4-(3-(2-et0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin- etil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat etil 5-(4-(isopropoksikarbonil)piperazin-1- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-3-karboksilat etil metil(2-((3-(4-(metilkarbamoil)fenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)amin0)eti1)karbamat izobutil (2-((3-(4-karbam0ilfenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-S-il)amin0)eti1)(metil)karbamat izobutil meti1(2-((3-(4- (metilkarbamoil)fenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amin0)etil)karbamat 365.5 295.4 429.4 378.2 339.2 366.5 430.5 422.5 396.4 382.4 361.4 396.4 410.5 424. 5 CBA IC50 iiM P81 IC50 iiM Bilesik izopropil (1-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)azetidin-3-i1)(meti1)karbamat izopropil (2-((3-(3-metoksipiridin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirirnidin-S-il)amin0)etil)(meti1)karbamat izopropil (2-((3-(4-(amin0metil)fenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)amin0)eti1)(meti1)karbamat izopropil (2-((3-(4-karbam0ilfeni1)pirazolo[1,5- a]pirimidin-S-il)amin0)etil)(metil)karbamat a]pirimidin-S-i1)amin0)etil)(metil)karbamat izopropil 4-(3-(1,3,5-trimetil-lH-pirazol-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat izopropil 4-(3-(1-izobutil-1H-pirazol-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat i1)pira2010[1,5-a]pirimidin-5-il)pi`perazin-1- karboksilat izopropil 4-(3-(2-(met0ksimeti1)feni1)pirazolo[1,5- a]pirimidin-S-i1)piperazin-1-karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-karb0ksilat izopropil 4-(3-(2,6-dimet0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin-`1-karboksi1at a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat a]pirimidin-5-il)piperazin-1-karb0ksilat 396.4 384.4 382.5 396.4 384.4 397.5 411.5 396.4 409.5 412.5 426.5 381.4 400.9 410.5 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik a]pirimidin-5-i1)piperazin- l-karboksilat izopropil 4-(3-(2-hidroksipiridin-3-i1)pirazolo[1,5- a]pirirnidin-5-il)piperazin-1-karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksi-5-meti1 piridin-3- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksi-6-metil piridin-3- il)pira2010[1 ,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)pipera2in- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[ 1 ,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-i1)pirazolo[1 ,5- a]pirimidin-5-i1)-3-0ksopiperazin- l -karboksilat izopropi] 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-i1)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)-2,2-dimetilpipera2in- 1 -karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat izopropil4-(3-(3,6-dimet0ksipiridazin-4- il)pirazolo[l ,S-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat izopropi] 4-(3-(3-et0ksifeni1)pirazolo[1,5-a]pirimid in- -i l)piperazin- 1 -karboksi [at izopropil 4-(3-(3-Hor0-2-metoksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat a] pirimidin-S-il)piperazin- 1-karb0ksilat 384.4 382.4 424. 5 410.5 410.5 395.5 396.4 410.4 424.5 380.4 427.5 409.5 413.4 396.4 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik MW CBA IC50 iiM P81 IC50 llM a]pirimidin-5-il)piperazin- l-karboksilat ` ' izopropil 4-(3-(4-f10r0piridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pir1rn1din-5-1l)piperazin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(4-met0ksipiridin-2-il)pirazolo[1 ,5- a]pirim1din-5-11)piperazm- 1 -karboksilat a]pirimidin-S-il)piperazin- l-karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin- l-karboksilat ' izopropi] 4-(3-(5-f10r0-2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- 414.4 ** * * * karboksilat a]pirim1din-5-11)piperazin- l-karboksilat izopropil 4-(3-(5-metoksipiridin-Z-il)pirazolo[1,5- 396 4 ak** W* a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat ' a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat ' a]pirimidin-S-i1)piperazin-1-karboksilat ' a]pirimidin-5-il)piperazin- l-karboksilat -il)piperazin- 1 -karboksilat ' a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat ' a]pirimidin-5-il)piperazin-l-karboksilat ' izopropil 4-(3-(pirazin-Z-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 367.4 -- ** Bilesik i1)piperazin-1-karboksilat izopropil 4-(3-(piridin-2-i1)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-5- il)piperazin- l -karboksilat izopropil 4-(3-(piridin-3-i1)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)piperazin- 1 -karboksilat il)piperazin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(pirimidin-5-i1)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-izopr0pilpirazolo[ l ,5-a]pirimidin-5- i1)piperazin- l -karboksilat izopropil 4-(pirazolo [1 ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 - karboksilat izopropil meti1(2-((3-(4-((2- (metilamin0)eti1)karbamoil)fenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amin0)etil)karbamat izopropil metil(2-((3-(4- (metilkarbam0i1)feni1)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amin0)eti1)karbamat izopropil meti1(2-((3-(4-(pirr01idin-2- il)feni1)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amin0)eti1)karbamat inetil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat N-(2-(sik10pentiloksi)etil)-3-(3-metoksipiridin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin N-(2-(tert-butoksi)etil)-3-(3-metoksipiridin-4- N-(Z-a minoetil)-4-(5-((2- metoksieti1)amin0)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin-3- il)benzamid 366.4 366.4 366.4 367.4 331.4 289.3 453.5 410.5 422.5 368.4 353.4 341.4 354.4 CBA IC50 iiM P81 IC50 iiM Bilesik N-(2-aminoeti1)-4-(5-((3,3- dimetilbutil)amin0)pirazolo [l,5-a]pirimidin-3- il)benzamid N-(2-arninoetil)-4-(5-(butilamino)pirazolo[1,5- a]pirimidin-3-il)benzamid N-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin- -i1)-N-(4,4,4-triflor0butil)asetamid N-(3-(siklopentiloksi)pr0pi1)-3-(3-metoksipiridin-4- N-(tert-butil)-4-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- l-karboksamid N-(tert-buti1)-4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)-N-metilpiperazin- l -karboksamid N-izopropi1-4-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksamid N-izopropil-4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)-N-metilpiperazin- 1 -karboksamid tert-butil (1 -(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1 ,5- a]pirimidin-5-il)azetidin-3-i1)(meti1)karbamat tert-butil (2-((3-(3-metoksipiridin-4-il)pirazo10[1,5- a]pirimidin-5-il)amin0)etil)(meti1)karbamat tert-butil (2-((3-(4-karbam0ilfenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amin0)etil)(metil)karbamat tert-buti] (2-(4-(5-((2-met0ksieti1)amin0)pirazolo[1,5- a]pirimidin-3-il)benzamido)etil)karbamat tert-butil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-i1)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat tert-butil metil(2-((3-(4- 380.5 352.4 268.3 393.4 367.4 409.5 423.5 395.5 409. 5 410.5 398.5 410.5 454.5 410.5 424.5 CBA IC50 iiM P81 IC50 iiM Bilesik (meti1karbam0i1)feni1)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amin0)etil)karbamat -il)piperazin-l-i1)(piperidin-1-i1)metan0n izopropil 4-(3-(6-met0ksipiridin-2-il)pirazolo[1 ,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(5-Iloro-2-met0ksi-4- metilfenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-l- karboksilat izopropil 4-(3-(2,4-dimet0ksipirimidin-5- i1)pira2010[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat izopropil 4-(3-(3-f10r0-4-metilfenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)pipera2in- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-iy0dopirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)piperazin-1-karb0ksilat (S)-izopr0pi12-((meti1(pirazolo[1,5 -a]pirimidin-5- i1)amin0)meti1)pirr01idin-1-karb0ksi1at (S)-izopr0pil 2-(((3-(2-met0ksipiridin-3- i1)(metil)amin0)meti1)pirrolidin-1 -karboksilat izoprOpil 4-(3-(2-metoksipiridin-4-i1)pirazolo[1 ,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-karb0ksilat (E)-izopr0pi1 4-(3-(3-met0ksipr0p- 1 -en- 1 - il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat (E)-izopr0pil 4-(3-(2-etoksivini1)pirazolo[1,5- a]pirimidin-S-i1)piperazin-1-karb0ksi1at il)piperazin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(2-d3-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- 421.5 396.4 427.5 427.5 397.4 415.2 317.4 424.5 396.4 359.4 359.4 323.8 399.4 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat (S)-izopr0pil 2-(((3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin-5- il)amin0)metil)pirr01idin- 1 -karboksilat ten-butil 4-(3-br0mopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-d8- pi perazin- 1 -karboksilat izopropi14-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo [1 ,5- a]pirimidin-5-i1)-dg-piperazin-l-karboksilat izopropil 4-(3-(1,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin- 3-il)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- l- karboksilat izopropil 3-(3-(2-metoksipiridin-3-il)pirazolo[1 ,5- a] pirimidin-S-il)-2-0ksoimidazolidin- 1 -karboksilat izopropil 4-(3-(1H-benzo[d]imidazol-4- il)piraz010[ l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- l - karboksilat 2-izobuti1-7-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)heksahidr0imidazo[1,5-a]pirazin- 3(2H)-0n (1 R,SS)-tert-butil 3-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)-3,6- diazabisik10[3.1.1]heptan-6-karboksi1at izopropil 4-(3-(2-met0ksi-4-metilfenil)pirazolo[1,5- a]pirirnidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat (1 R,SS)-izopr0pil 3-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)-3,6- diazabisiklo[3.1.1]heptan-6-karb0ksilat izopropil (2-((3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)(meti1)amin0)eti1)(metil)karbamat izopropil 4-(3-(2-(2-metoksietoksûfenil)pirazo10[ l ,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- l-karboksilat 410.5 390.2 404.4 410.5 396.4 405.5 421.5 422.5 409.5 408.5 398.5 439.5 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik MW CBA IC50 iiM P81 IC50 llM il)pirazolo[1,5-a]pirin1idin-5-i1)piperazin-1- karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat a]pirimidin-5-i1)amin0)eti1)karbamat izopropil (2-((3-(2-met0ksi-6-metil piridin-B- 412.5 -- * * il)(metil)amino)etil)(metil)karbamat il)pirazolo[1,5-a]pirimidi n-5- i1)(metil)amin0)eti1)(metil)karbamat il)pirazolo[1,5-a]pirimidi n-5- 11)(meti1)amin0)eti1)(metil)karbamat a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat a]pirirnidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat a]pirirnidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat a]pirimidin-5-i1)(meti1)amin0)pr0pi1)(metil)karbamat il)pirazolo[ 1 ,5-a]pirimidi n-5- i1)(meti1)amin0)pr0pi1)(meti1)karbamat a] pirimidin-S-i1)piperazin- 1-karb0ksilat Bilesik izopropil 4-(3-(2-(2-(dimetilamin0)et0ksi)piridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirin1idin-5-il)piperazin-1- karboksilat izopropil (3-((3-(5-f10r0-2-metoksipiridin-3- iI)(metil)amin0)pr0pi1)(meti])karbamat N-(2-(tert-but0ksi)etil)-3-(2-met0ksipiridin-3- N-(2-(tert-but0ksi)etil)-3-(2-met0ksi-6-metilpiridin-3- tert-butil (2-((3-(2-met0ksipiridin-3-i1)pirazolo[ l ,5- a]pirimidin-5-il)0ksi)etil)(metil)karbamat izopropil (2-((3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)0ksi)eti1)(meti1)karbamat (S)-izopr0pil (l-(3-(2,6-dimet0ksipiridin-3- il)(metil)karbamat (S)-izopr0pil (1-(3-(5-flor0-2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-i1)pirrolidin-3- il)(metil)karbamat (S)-izopr0pi1 (1-(3-(2-met0ksi-5-metilpiridin-3- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3- il)(metil)karbamat dihidropiridin-3-il)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-5- il)pirrolidim-3-il)(meti1)karbamat (S)-izopr0pil (1-(3-(2-d3-met0ksi-6-metilpiridin-3- il)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin-S-il)pirrolidin-3- i1)(metil)karbamat (S)-izopr0pil (1-(3 -(2-met0ksipiridin-3- il)(metil)karbamat 453.5 430.5 341.4 355.4 399.4 385.4 440. 5 428.5 424. 5 424.5 424.5 413.4 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik izopropil 4-(3-(imidazo[1,2-a]piridin-5- il)pirazolo[1,5-a]pirin1idin-5-i1)piperazin-1- karboksilat metoksifenil)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-5-il)pirr01idin- 3-i1)(meti1)karbamat izopropil 4-(3-(imidazo[ l ,2-a]piridin-8- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat propil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat propil 4-(3-(2-met0ksi-6-metilpiridin-3- i1)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-S-il)piperazin-1- karboksilat il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat trifloropropil)piperazin-1-i1)pirazolo[1,5-a]pirimidin 3-(5-floro-Z-metoksipiridin-3-il)-5-(4-(3,3,3- trif10r0pr0pi1)piperazin-1-i1)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin 3-brorno-S-(4-(2,2,2-triflor0etil)piperazin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin trifloroetil)piperazin-1-il)pirazolo[1,S-a]pirimidin trifloroetil)piperazin-l-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin 3-(5-Horo-Z-metoksipiridin-B-il)-5-(4-(2,2,2- trifloroetil)pipera2in- 1 -il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin tert-butil 4-(3-(2-d3-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a] pirimidin-S-il)piperazin- l-karboksilat 405.5 427.5 405.5 396.4 410.5 414.4 406.4 424.4 364.2 392.4 406.4 410.4 413.4 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik tert-butil 4-(3-(2-met0ksi-6-meti1 piridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirin1idin-5-il)piperazin-1- karboksilat tert-butil 4-(3-(2-et0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat tert-butil 4-(3-(5-f10r0-2-met0ksipirid i n-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat tert-butil 4-(3-(5-flor0-2-met0ksifenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin- l-karboksilat N-(3-(tert-but0ksi)pr0pi1)-3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin N-(3-(tert-but0ksi)pr0pil)-3-(2-metoksi-6-meti1piridin- 3-il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-amin 3-bromo-N-(3-(tert-butoksi)pr0pil)pira2010[1,5- a]pirimidin-5-amin izopropil 4-(3-(trif10r0metil)pirazolo[1,5-a]pirimidin- izopropil 4-(3-(piridazin-4-il)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin- N-(3-(tert-but0ksi)pr0pi1)-3-(2-metoksi-6-meti1piridin- 3-il)-N-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin N-(3-(tert-but0ksi)pr0pil)-3-(2-met0ksipiridin-3-il)-N- metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5-amin -izopr0pil-3-(4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-i1)-1,2,4- oksadiazol (S)-2-amin0- l -(4-(3-(2-met0ksipiridin-3- metilpentan- l -0n izopropil 4-(3-(4-(2-aminoetoksi)fenil)pirazolo[1,5- 424. 5 424.5 428.5 427.5 355.4 369.5 327.2 357.3 367.4 383.5 369.5 420.5 423.5 424. 5 CBA IC50 HM P81 IC50 "M Bilesik a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat (S)-2-amin0-N-((S)-1-(3-(2-metoksipiridin-3- il)pirazolo[ l ,5-a]pirimidin-5-il)pirr01idin-3-il)-N,4- dimetilpentanamid (S)-2-amin0-N-(2-((3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)(meti1)amin0)eti1)-N,4- dimetilpentanamid (S)-2-amin0- l -(4-(3-br0m0pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5- i1)piperazin- 1 -i1)-4-metilpentan- 1 -on izopropil 4-(3-(4-(met0ksikarb0nil)fenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat metoksifenil)pira2010[l,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- 1-il)-4-metilpentan-1 -on (S)-2-amin0-4-metil-1-(4-(3-fenilpirazolo[ l ,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1-il)pentan- 1 -on izopropil 4-(3-(4-(amin0metil)fenil)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat (S)-2-amin0-1-(4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]piriniidin-5-il)piperazin-l-il)-3- metilbutan- l -on (R)-2-amin0-1-(4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-l-il)-4- metilpentan- 1 -on izopropil 4-(3-(2-Hor0-6-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat (S)-2-amin0- l -(4-(3-(2-I10r0fenil)pirazolo[ l ,5- a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -i1)-3-metilbutan- 1 -on (S)-2-amin0-l-(4-(3-kloropirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)piperazin- l -il)-4-metilpentan- l-on 437.5 425.5 395.3 423.5 440. 5 392.5 394.5 409.5 423.5 414.4 396.5 350.8 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik MW CBAICSOiiM P811C50uM il)piperazin- l -il)-4-metilpentan- 1 -on metoksifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -karboksilat il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat il)piraz010[ l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- l - karboksilat a]pirimidin-5-il)piperazin- 1-i1)-4-metil-2- (metilamin0)pentan- 1 -on il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-Il)piperazin-1-il)pr0pan- il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-i1)metanon il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-i1)-3,3- dimetilbutan-l-on a]pirirnidin-5-il)piperazin- 1 -il)-2-metilpropan- 1 -on a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-i1)(pirr01idin-2-i1)metan0n a]pirimidin-S-il)piperazin- l-karboksilat a]pirimidin-S-il)piperazin- 1-i1)-3-metilbutan- l-on a]pirimidin-5-il)piperazin- 1 -il)butan- 1 -on Bilesik MW CBAICSOiiM P811C50uM a]pirimidin-S-il)piperazin- 1 -il)-3-metilbutan- l -on a]pirimidin-S-il)piperazin- 1 -il)-3-metilbutan- 1 -on metilfeni1)pirazolo[ 1 ,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 - il)-3-metilbutan-1-on a]pirimidin-S-i1)piperazin- 1 -i1)-3-metilbutan- 1 -on il)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-S-i1)piperazin-1- karboksilat a]pirimidin-5-il)pipera2in- 1 -karboksilat il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin-1-karboksi1at a]pirimidin-S-il)piperazin- 1 -il)butan- 1 -on a]pirimidin-5-il)piperazin-1-il)-3,3-dimetilbutan-l-0n metoksifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- 1-i1)-3,3-dimeti1butan- l -on a]pirimidin-S-il)piperazin-1-i1)-3,3-dimetil-2- (metilamin0)butan- 1 -on a] pirimidin-S-il)piperazin- 1-il)-4-metilpentan-2-amin Bilesik metoksifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- 1-i1)-3-metilbutan- 1 -OH (1-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin- -i1)- 1 H-imidazol-4-il) metanol (R)-tetra hyd rofu ra n-3-i1 4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat 1-metoksipropan-Z-il4-(3-(2-metoksipiridin-3- il)piraz010[ l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin- l - karboksilat tetrahidro-ZH-piran-4-il 4-(3-(2-metoksipiridin-3- il)pira2010[ l ,5-a]pirimidin-S-il)piperazin- 1- karboksilat l-metoksi-2-metil propa n-2-il 4-(3-(2-met0ksipiridin- 3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat -(4-(met0ksimetil)- 1 H-imidazol- 1 -i1)-3-(2- metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin metoksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)piperazin-1-i1)butan-1-0n (8)-(4-(3-(2-metoksipiridin-3 -il)pirazolo[ l ,5- a]pirirnidin-5-il)piperazin- 1-i1)(morfolin-3 -i1)metan0n (3-aminotetrahidrofuran-3-il)(4-(3-(2-met0ksipiridin- il)metan0n 2-(dimetilamin0)etil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pira2010[l,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat 2-(tert-but0ksi)eti1 4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- 426.5 322.3 424. 5 426.5 438.5 440. 5 336.3 425.5 423.5 423.5 425.5 454.5 CBA IC50 HM P81 IC50 !IM Bilesik karboksilat il)pira2010[l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat metoksipiridin-3-i1)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-5- il)piperazin- 1 -karboksilat (R)-tetrahidr0furan-3-il 4-(3-(5-I10r0-2- metoksifeni1)pira2010[1 ,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin- 1 -karboksilat (R)-tetrahidr0furan-3-i1 4-(3-(2-metoksi-6- meti1piridin-3-il)pirazolo[1 ,5-a]pirimidin-5- il)piperazin- l -karboksilat a]pirimidin-5-i1)piperazin-'l-karboksilat (S)-tetrahidrofuran-3-il 4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat (S)-1-met0ksipr0pan-2-i1 4-(3-(2-metoksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]piriniidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat (R)-1-met0ksipropan-2-i1 4-(3-(2-metoksipiridin-3- il)pira2010[l ,5-a]pirimidin-5-il)piperazin-1- karboksilat 2-met0ksi-2-0ksoetil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3- il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- karboksilat izopropil 4-(3-br0m0pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-dg- piperazin- 1 -karboksilat 2-metoksietil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-i1)-dg-piperazin- l-karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksi-6-meti1piridin-3- 456.5 442.4 441.5 438.5 410.4 424. 5 426.5 426.5 426.4 376.2 420.4 418.4 CBA IC50 HM P81 IC50 "M Bilesik MW CBA IC50 iiM P81 IC50 ilM il)pirazolo[l ,5-a]pirimidin-5-i1)-dg-piperazin-1 - karboksilat N-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[l,5-a]pirimidin- 311.3 -- ** -i1)butiramid .6.41. Farmakolojik Etkiler AAKl nakavt farelerin çalismalari, AAKl geninin parçalanmasinin, formalin ayak testi kullanilarak ölçüldügü gibi agri yanitini etkiledigi gösterdi. Bakiniz yukaridaki Örnek 5.6.1. Bu test, bir AAKl inhibitörü uygulamasinin ayrica agri yanitini etkiledigini dogrulamak için kullanildi. Fareler Otomatik Nosisepsiyon Analiz ediciler (University California, San Diego'da Ozaki laboratuarindan satin alindi) ile nosisepsiyon için test edildi. Bir metal serit, testten 30 dakika önce süper yapiskanla her bir farenin sol arka ayaginin etrafina yerrlestirildi. 30-dakikalik alistirma periyodunun ardindan, 20 pl %5 formalin, sol arka ayagin dorsal yüzeyine subkütanöz olarak enjekte edildi. Fareler silindir seklindeki bölmelere 45 dakika bireysel olarak yerlestirilir. Taze %5 formalin çözeltisi, fonnaldehidin (Formalde-fresh %20, Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) damitilmis suyla seyreltilmesiyle hazirlandi. Arastirilan bilesikler, formalin enj eksiyonundan 30 dakika önce uygulandi Bir bilgisayar yaziliini, bir elektromanyetik alandan beher dakika için geri çekmeleri, Faz I (akut faz = ilk 8 dakika) için toplam geri çekmeleri, ve Faz H (20 - 40 dakika arasinda tonik faz) için toplain geri çekmeleri kaydetti. Bakiniz Yaksh TL, Ozaki G, MCCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. An automatedflinch detecting system for use in the Bulusun çesitli bilesikleri farkli dozlarda test edildi. Gabapentin ve pregabalin pozitif kontroller olarak kullanildi. Sonuçlar asagida Tablo 27de gösterilmektedir, burada "*" 200 mpklde gabapentininkine esit veya bundan yüzde 50 daha büyük bir etki anlamindadir, "**" 200 mpklde gabapentininkine esit veya bundan yüzde 100 daha büyük bir etki anlamindadir, Bilesik Doz (mpk) Etki Gabapentin 50 sc * Gabapentin 200 SC ** Pregabalin 50 sc * il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat (S)-tert-butil 2-(((3-(2-met0ksifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- 60 sc * il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat il)amin0)metil)pirrolidin-1-karboksilat izopropil 4-(3 -(2-metoksifenil)pirazolo[1,5 -a]pirimidin-5-i1)piperazin-1- . 30 sc ** karboksilat izopropil 4-(3-(2-met0ksipiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- . il)piperazin-l -karboksilat il)piperazin-1 -karboksilat Bu sonuçlar, AAKI inhibitörlerinin, agriyi tedavi etmek için kullanilabilecegini göstermektedir. TR TR TR TR TR TR TR TR

Claims (1)

1.
TR2018/08280T 2012-03-09 2013-03-05 Pirazolo[1,5-a]pirimidin-bazlı bileşikler, bunları içeren bileşimler, ve bunların kullanım usulleri. TR201808280T4 (tr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261608765P 2012-03-09 2012-03-09

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201808280T4 true TR201808280T4 (tr) 2018-07-23

Family

ID=47892052

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/08280T TR201808280T4 (tr) 2012-03-09 2013-03-05 Pirazolo[1,5-a]pirimidin-bazlı bileşikler, bunları içeren bileşimler, ve bunların kullanım usulleri.

Country Status (25)

Country Link
US (3) US8946415B2 (tr)
EP (1) EP2834243B1 (tr)
JP (1) JP6418950B2 (tr)
KR (1) KR101965025B1 (tr)
CN (1) CN104302649B (tr)
AR (1) AR090292A1 (tr)
AU (1) AU2013230128B2 (tr)
BR (1) BR112014022000A8 (tr)
CA (1) CA2866143C (tr)
DK (1) DK2834243T3 (tr)
ES (1) ES2676224T3 (tr)
HU (1) HUE038786T2 (tr)
IL (1) IL234486A (tr)
IN (1) IN2014DN07384A (tr)
MX (2) MX381849B (tr)
NZ (1) NZ630721A (tr)
PL (1) PL2834243T3 (tr)
PT (1) PT2834243T (tr)
RU (1) RU2014140735A (tr)
SG (1) SG11201405561RA (tr)
TR (1) TR201808280T4 (tr)
TW (1) TW201341386A (tr)
UY (1) UY34668A (tr)
WO (1) WO2013134228A1 (tr)
ZA (1) ZA201406149B (tr)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2014140739A (ru) 2012-03-09 2016-04-27 Лексикон Фармасьютикалз, Инк. Соединения на основе имидазо[1, 2-b]пиридазина, композиции таких соединений и способы их применения
EP2834243B1 (en) 2012-03-09 2018-04-25 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. PYRAZOLO[1,5-a]PYRIMIDINE-BASED COMPOUNDS, COMPOSITIONS COMPRISING THEM, AND METHODS OF THEIR USE
US8901305B2 (en) 2012-07-31 2014-12-02 Bristol-Myers Squibb Company Aryl lactam kinase inhibitors
US9708337B2 (en) 2013-02-22 2017-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Aryl amide-based kinase inhibitors
TW201542550A (zh) 2013-09-06 2015-11-16 Lexicon Pharmaceuticals Inc 吡唑并［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含彼之組合物以及使用彼之方法
WO2015054358A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine kinase inhibitors
PL3636649T3 (pl) 2014-01-24 2024-05-06 Turning Point Therapeutics, Inc. Diaryle makrocykliczne jako modulatory kinaz białkowych
ES2701903T3 (es) * 2014-01-31 2019-02-26 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores de cinasa a base de quinolina
TW201620911A (zh) * 2014-03-17 2016-06-16 雷西肯製藥股份有限公司 銜接子關聯激酶１之抑制劑、包含其之組成物、及其使用方法
WO2016053794A1 (en) * 2014-09-30 2016-04-07 Bristol-Myers Squibb Company Quinazoline-based kinase inhibitors
CA2971024C (en) * 2014-12-15 2023-09-26 Handok Inc. Fused ring heteroaryl compounds and their use as trk inhibitors
ES2740224T3 (es) 2015-04-10 2020-02-05 Bristol Myers Squibb Co 6H-isocromeno[3,4-c]piridinas y benzo[c][1,7]naftiridin-6-(5H)-onas como inhibidores de la cinasa asociada a adaptador 1 (AAK1)
ES2864839T3 (es) 2015-07-02 2021-10-14 Turning Point Therapeutics Inc Macrociclos de diarilo quirales como moduladores de proteína quinasas
JP6917974B2 (ja) 2015-07-06 2021-08-11 ターニング・ポイント・セラピューティクス・インコーポレイテッドＴｕｒｎｉｎｇ Ｐｏｉｎｔ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． ジアリール大環状多形
FI3733187T3 (fi) 2015-07-21 2024-12-18 Turning Point Therapeutics Inc Kiraalinen diaryylimakrosykli ja sen käyttö syövän hoidossa
CN108349979B (zh) 2015-11-02 2021-04-09 詹森药业有限公司 [1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-基化合物
BR112019001607A2 (pt) 2016-07-28 2019-04-30 Tp Therapeutics, Inc. inibidores macrocíclicos de quinases
EA039102B1 (ru) 2016-11-02 2021-12-03 Янссен Фармацевтика Нв Соединения [1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидина в качестве ингибиторов pde2
CN109890824B (zh) 2016-11-02 2022-05-24 詹森药业有限公司 作为pde2抑制剂的[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶化合物
MY193511A (en) 2016-11-02 2022-10-17 Janssen Pharmaceutica Nv [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidine derivatives as pde2 inhibitors
TWI808958B (zh) 2017-01-25 2023-07-21 美商特普醫葯公司 涉及二芳基巨環化合物之組合療法
US11286264B2 (en) 2017-07-28 2022-03-29 Turning Point Therapeutics, Inc. Macrocyclic compounds and uses thereof
KR102717819B1 (ko) 2017-07-28 2024-10-14 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 Tyk2 억제제 및 이의 용도
EA202091475A1 (ru) * 2017-12-15 2020-09-09 Пирамид Байосайенсиз, Инк. ПРОИЗВОДНЫЕ 5-(2-(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)ПИРРОЛИДИН-1-ИЛ)-3-(1H-ПИРАЗОЛ-1-ИЛ)ПИРАЗОЛО[1,5-а]ПИРИМИДИНА И РОДСТВЕННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Trk КИНАЗЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА
LT3728271T (lt) 2017-12-19 2022-12-12 Turning Point Therapeutics, Inc. Makrocikliniai junginiai, skirti ligų gydymui
US11453672B2 (en) 2017-12-22 2022-09-27 Shenzhen Targetrx, Inc. Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidines as tropomyosin receptor kinase inhibitors
WO2019144885A1 (zh) 2018-01-23 2019-08-01 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶类的大环化合物
TW202028209A (zh) * 2018-09-27 2020-08-01 大陸商重慶複創醫藥研究有限公司 作為RET激酶抑制劑的取代的咪唑[1,2-a]吡啶和[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶化合物
JP7619951B2 (ja) * 2018-10-15 2025-01-22 武田薬品工業株式会社 Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
US11666575B2 (en) 2020-04-21 2023-06-06 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Pyrazolo[1,5]pyrimidine-based compounds and methods of their use to treat viral infections
AU2021259419A1 (en) 2020-04-21 2022-11-10 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. AAK1 inhibitors for use in treating viral infections
US11478733B2 (en) 2020-11-24 2022-10-25 Caterpillar Inc. Filter interlock with tabs mating with a pedestal or a housing
AU2024338138A1 (en) * 2023-09-08 2026-03-19 Satellos Bioscience Inc. Ap2 associated kinase 1 inhibitors and uses thereof
WO2025230262A1 (ko) * 2024-04-29 2025-11-06 심플렉스 주식회사 신규한 헤테로아릴 유도체 및 이의 aak1 억제 용도

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5464764A (en) 1989-08-22 1995-11-07 University Of Utah Research Foundation Positive-negative selection methods and vectors
WO1993004169A1 (en) 1991-08-20 1993-03-04 Genpharm International, Inc. Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs
US6194410B1 (en) * 1998-03-11 2001-02-27 Hoffman-La Roche Inc. Pyrazolopyrimidine and pyrazolines and process for preparation thereof
JP4847275B2 (ja) * 2005-10-21 2011-12-28 田辺三菱製薬株式会社 ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン化合物
WO2008037477A1 (en) 2006-09-29 2008-04-03 Novartis Ag Pyrazolopyrimidines as p13k lipid kinase inhibitors
US20120058997A1 (en) * 2006-11-06 2012-03-08 Supergen, Inc. Imidazo[1,2-b]pyridazine and pyrazolo[1,5-a]pyrimidine derivatives and their use as protein kinase inhibitors
WO2009140128A2 (en) * 2008-05-13 2009-11-19 Irm Llc Compounds and compositions as kinase inhibitors
AR074052A1 (es) * 2008-10-22 2010-12-22 Array Biopharma Inc Compuestos pirazolo{1,5-a}pirimidina sustituida como inhibidores de trk cinasa
AR077468A1 (es) * 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
WO2011029027A1 (en) 2009-09-03 2011-03-10 Array Biopharma Inc. SUBSTITUTED PYRAZOLO[1,5-a]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS mTOR INHIBITORS
US8946237B2 (en) * 2010-01-14 2015-02-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrazolo[1,5-A]pyrimidines as mark inhibitors
EP2734205B1 (en) * 2011-07-21 2018-03-21 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic protein kinase inhibitors
DK2822555T3 (en) 2012-03-09 2018-02-05 Lexicon Pharmaceuticals Inc Inhibition of adapter-associated kinase 1 for the treatment of pain
EP2834243B1 (en) 2012-03-09 2018-04-25 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. PYRAZOLO[1,5-a]PYRIMIDINE-BASED COMPOUNDS, COMPOSITIONS COMPRISING THEM, AND METHODS OF THEIR USE
RU2014140739A (ru) 2012-03-09 2016-04-27 Лексикон Фармасьютикалз, Инк. Соединения на основе имидазо[1, 2-b]пиридазина, композиции таких соединений и способы их применения
TW201620911A (zh) * 2014-03-17 2016-06-16 雷西肯製藥股份有限公司 銜接子關聯激酶１之抑制劑、包含其之組成物、及其使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
AR090292A1 (es) 2014-11-05
ES2676224T3 (es) 2018-07-17
DK2834243T3 (en) 2018-07-23
AU2013230128B2 (en) 2017-08-17
EP2834243B1 (en) 2018-04-25
MX2014010589A (es) 2014-09-18
KR20140138864A (ko) 2014-12-04
CA2866143A1 (en) 2013-09-12
BR112014022000A8 (pt) 2021-06-15
PL2834243T3 (pl) 2018-09-28
CN104302649A (zh) 2015-01-21
MX345830B (es) 2017-02-17
ZA201406149B (en) 2016-06-29
US9403832B2 (en) 2016-08-02
PT2834243T (pt) 2018-08-01
WO2013134228A1 (en) 2013-09-12
CA2866143C (en) 2020-08-04
MX381849B (es) 2025-03-13
IL234486A (en) 2016-10-31
HK1201257A1 (en) 2015-08-28
TW201341386A (zh) 2013-10-16
IN2014DN07384A (tr) 2015-04-24
UY34668A (es) 2013-10-31
CN104302649B (zh) 2017-06-23
NZ630721A (en) 2016-12-23
BR112014022000A2 (pt) 2017-06-20
US20170129896A1 (en) 2017-05-11
EP2834243A1 (en) 2015-02-11
SG11201405561RA (en) 2014-10-30
HUE038786T2 (hu) 2018-11-28
US8946415B2 (en) 2015-02-03
JP2015509535A (ja) 2015-03-30
RU2014140735A (ru) 2016-04-27
US20130253194A1 (en) 2013-09-26
AU2013230128A1 (en) 2014-09-25
JP6418950B2 (ja) 2018-11-07
US20150183792A1 (en) 2015-07-02
KR101965025B1 (ko) 2019-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TR201808280T4 (tr) Pirazolo[1,5-a]pirimidin-bazlı bileşikler, bunları içeren bileşimler, ve bunların kullanım usulleri.
US9862724B2 (en) Pyrazolo[1,5-a]pyrimidine-based compounds, compositions comprising them, and methods of their use
CN105517552A (zh) 基于咪唑并[1,2-b]哒嗪的化合物、包含它们的组合物及其使用方法
JP6553081B2 (ja) アダプター関連キナーゼ１の阻害剤、それを含む組成物、及びその使用方法
HK1217658B (zh) 基於吡唑并[1，5-a]嘧啶的化合物、包含其的组合物和其使用方法
HK1226065B (zh) 连接物关联激酶1的抑制剂、包含其的组合物、及其使用方法
HK1201257B (en) Pyrazolo[1,5-a]pyrimidine-based compounds, compositions comprising them, and methods of their use