TW201920149A - 二環酮化合物及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本發明提供具有通式I之新穎化合物：
Figure TW201920149A_A0001
其中R1、A環及B環係如本文所述；包括該等化合物之醫藥組合物；及使用該等化合物之方法。

Description

二環酮化合物及其使用方法
本發明係關於可用於哺乳動物之治療及/或預防之有機化合物，且具體而言係關於RIP1激酶抑制劑，其可用於治療與發炎、細胞死亡及其他者相關之疾病及病症。
受體相互作用蛋白-1 (「RIP1」)激酶係絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶。RIP1係細胞信號傳導調節劑，其尤其涉及程式化細胞死亡路徑(例如，壞死性凋亡(necroptosis))之調介。研究最佳之壞死性細胞死亡形式係由TNFα (腫瘤壞死因子)起始，但壞死性凋亡亦可藉由以下誘發：TNFα死亡配體家族之其他成員(Fas及TRAIL/Apo2L)、干擾素、類鐸受體(TLR)信號傳導及經由DNA感測劑DAI (干擾素調節因子之DNA依賴性活化劑)之病毒性感染[1-3]。TNFα與TNFR1 (TNF受體1)之結合促進TNFR1三聚化及細胞內複合物(亦即複合物-I)之形成。TRADD (TNF受體相關之死亡結構域蛋白)結合至TNFR1之細胞內死亡結構域，且經由兩種蛋白質中所存在之死亡結構域募集蛋白激酶RIP1 (受體相互作用蛋白1) [4]。在初始募集至TNFR1相關之信號傳導複合物中後，RIP1易位至次級細胞質複合物(亦即複合物-II)中[5-7]。複合物-II由含死亡結構域之蛋白質FADD (Fas相關蛋白)、RIP1、半胱天冬酶-8及cFLIP形成。若半胱天冬酶-8未完全活化或其活性阻斷，則蛋白激酶RIP3募集至複合物，從而形成壞死小體(necrosome)，其將導致壞死性細胞死亡起始[8-10]。一旦形成壞死小體，則RIP1及RIP3參與一系列自體及交叉磷酸化事件，該等事件對於壞死性細胞死亡至關重要。壞死性凋亡可藉由兩種激酶中任一者之激酶失活性突變或藉由RIP1激酶抑制劑(奈克他汀(necrostatin))或RIP3激酶抑制劑以化學方式完全阻斷[11-13]。RIP3之磷酸化容許壞死性細胞死亡之關鍵組分假激酶MLKL (混合譜系激酶結構域樣)之結合及磷酸化[14, 15]。
壞死性凋亡在心肌梗塞、中風、動脈粥樣硬化、缺血再灌注損傷、發炎性腸病、視網膜變性及多種其他常見臨床病症中具有關鍵之病理生理學相關性[16]。因此，由此期望RIP1激酶活性之選擇性抑制劑作為由此路徑介導且與發炎及/或壞死性細胞死亡相關之疾病的潛在治療。
先前已闡述RIP1激酶之抑制劑。首先公開之RIP1激酶活性抑制劑係奈克他汀1 (Nec-1) [17]。在此初始發現之後為具有各種阻斷RIP1激酶活性能力之Nec-1之經修飾形式[11, 18]。最近，已闡述其他RIP1激酶抑制劑，其在結構上不同於奈克他汀類之化合物[19, 20, 21]。
上文所提及之參考文獻，其各自係以全文引用的方式併入本文中： 1) Vanden Berghe, T., Linkermann, A., Jouan-Lanhouet, S., Walczak, H.及Vandenabeele, P. (2014) Regulated necrosis: the expanding network of non-apoptotic cell death pathways. Nature reviews. Molecular cell biology.15 , 135-147。 2) Newton, K. (2015) RIPK1 and RIPK3: critical regulators of inflammation and cell death. Trends in cell biology.25 , 347-353。 3) de Almagro, M. C.及Vucic, D. (2015) Necroptosis: Pathway diversity and characteristics. Semin Cell Dev Biol.39 , 56-62。 4) Chen, Z. J. (2012) Ubiquitination in signaling to and activation of IKK. Immunological reviews.246 , 95-106。 5) O'Donnell, M. A., Legarda-Addison, D., Skountzos, P., Yeh, W. C.及Ting, A. T. (2007) Ubiquitination of RIP1 regulates an NF-kappaB-independent cell-death switch in TNF signaling. Curr Biol.17 , 418-424。 6) Feoktistova, M., Geserick, P., Kellert, B., Dimitrova, D. P., Langlais, C., Hupe, M., Cain, K., MacFarlane, M., Hacker, G.及Leverkus, M. (2011) cIAPs block Ripoptosome formation, a RIP1/caspase-8 containing intracellular cell death complex differentially regulated by cFLIP isoforms. Molecular cell.43 , 449-463。 7) Bertrand, M. J., Milutinovic, S., Dickson, K. M., Ho, W. C., Boudreault, A., Durkin, J., Gillard, J. W., Jaquith, J. B., Morris, S. J.及Barker, P. A. (2008) cIAP1 and cIAP2 facilitate cancer cell survival by functioning as E3 ligases that promote RIP1 ubiquitination. Mol Cell.30 , 689-700。 8) Wang, L., Du, F.及Wang, X. (2008) TNF-alpha induces two distinct caspase-8 activation pathways. Cell.133 , 693-703。 9) He, S., Wang, L., Miao, L., Wang, T., Du, F., Zhao, L.及Wang, X. (2009) Receptor interacting protein kinase-3 determines cellular necrotic response to TNF-alpha. Cell.137 , 1100-1111。 10) Cho, Y. S., Challa, S., Moquin, D., Genga, R., Ray, T. D., Guildford, M.及Chan, F. K. (2009) Phosphorylation-driven assembly of the RIP1-RIP3 complex regulates programmed necrosis and virus-induced inflammation. Cell.137 , 1112-1123。 11) Degterev, A., Hitomi, J., Germscheid, M., Ch'en, I. L., Korkina, O., Teng, X., Abbott, D., Cuny, G. D., Yuan, C., Wagner, G., Hedrick, S. M., Gerber, S. A., Lugovskoy, A.及Yuan, J. (2008) Identification of RIP1 kinase as a specific cellular target of necrostatins. Nat Chem Biol.4 , 313-321。 12) Newton, K., Dugger, D. L., Wickliffe, K. E., Kapoor, N., de Almagro, M. C., Vucic, D., Komuves, L., Ferrando, R. E., French, D. M., Webster, J., Roose-Girma, M., Warming, S.及Dixit, V. M. (2014) Activity of protein kinase RIPK3 determines whether cells die by necroptosis or apoptosis. Science.343 , 1357-1360。 13) Kaiser, W. J., Sridharan, H., Huang, C., Mandal, P., Upton, J. W., Gough, P. J., Sehon, C. A., Marquis, R. W., Bertin, J.及Mocarski, E. S. (2013) Toll-like receptor 3-mediated necrosis via TRIF, RIP3, and MLKL. The Journal of biological chemistry.288 , 31268-31279。 14) Zhao, J., Jitkaew, S., Cai, Z., Choksi, S., Li, Q., Luo, J.及Liu, Z. G. (2012) Mixed lineage kinase domain-like is a key receptor interacting protein 3 downstream component of TNF-induced necrosis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.109 , 5322-5327。 15) Sun, L., Wang, H., Wang, Z., He, S., Chen, S., Liao, D., Wang, L., Yan, J., Liu, W., Lei, X.及Wang, X. (2012) Mixed Lineage Kinase Domain-like Protein Mediates Necrosis Signaling Downstream of RIP3 Kinase. Cell.148 , 213-227。 16) Linkermann, A.及Green, D. R. (2014) Necroptosis. The New England journal of medicine.370 , 455-465。 17) Degterev, A., Huang, Z., Boyce, M., Li, Y., Jagtap, P., Mizushima, N., Cuny, G. D., Mitchison, T. J., Moskowitz, M. A.及Yuan, J. (2005) Chemical inhibitor of nonapoptotic cell death with therapeutic potential for ischemic brain injury. Nat Chem Biol.1 , 112-119。 18) Takahashi, N., Duprez, L., Grootjans, S., Cauwels, A., Nerinckx, W., DuHadaway, J. B., Goossens, V., Roelandt, R., Van Hauwermeiren, F., Libert, C., Declercq, W., Callewaert, N., Prendergast, G. C., Degterev, A., Yuan, J.及Vandenabeele, P. (2012) Necrostatin-1 analogues: critical issues on the specificity, activity and in vivo use in experimental disease models. Cell Death Dis.3 , e437。 19) Harris, P. A., Bandyopadhyay, D., Berger, S. B., Campobasso, N., Capriotti, C. A., Cox, J. A., Dare, L., Finger, J. N., Hoffman, S. J., Kahler, K. M., Lehr, R., Lich, J. D., Nagilla, R., Nolte, R. T., Ouellette, M. T., Pao, C. S., Schaeffer, M. C., Smallwood, A., Sun, H. H., Swift, B. A., Totoritis, R. D., Ward, P., Marquis, R. W., Bertin, J.及Gough, P. J. (2013) Discovery of Small Molecule RIP1 Kinase Inhibitors for the Treatment of Pathologies Associated with Necroptosis. ACS medicinal chemistry letters.4 , 1238-1243。 20) Najjar, M., Suebsuwong, C., Ray, S. S., Thapa, R. J., Maki, J. L., Nogusa, S., Shah, S., Saleh, D., Gough, P. J., Bertin, J., Yuan, J., Balachandran, S., Cuny, G. D.及Degterev, A. (2015) Structure Guided Design of Potent and Selective Ponatinib-Based Hybrid Inhibitors for RIPK1. Cell Rep。 21) 國際專利公開案第WO 2014/125444號。 22) 國際專利公開案第WO 2017/004500號。
本文提供式I化合物：(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R1 係選自由以下組成之群：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、4員至8員雜環基及5員至6員雜芳基；其中R1 藉由碳原子結合至毗鄰羰基，且其中R1 視情況由一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代：F、Cl、Br、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、羥基、羥基甲基、氰基、氰基甲基、氰基乙基、C(O)C1 -C6 烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)； 每一RN 獨立地選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷基；或兩個RN 可與毗鄰N一起形成4員至6員環； A環係具有以下作為僅有雜原子之5員雜芳基：(i) 兩個或三個氮原子，(ii) 一個氮原子及一個氧原子，或(iii) 一個氮原子及一個硫原子；其中該A環藉由碳原子結合至毗鄰羰基；且 B環係4員至8員環烷基，或具有1至3個選自由氮、氧及硫組成之群之雜原子之4員至8員雜環基；其中該B環根據(a)、(b)或(a)及(b)兩者經取代： (a) 1至2個選自由以下組成之群之取代基：鹵素、氘、羥基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 及氰基；其中兩個C1 -C6 烷基取代基可一起形成橋接環或螺環；且其中若該B環中之氮原子經取代，則取代基不係鹵素、氰基或氧或硫原子直接鍵結至該氮原子之C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基或C1 -C6 硫烷基； (b) 1個選自由以下組成之群之取代基：C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環或5員至6員雜芳基環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基、氰基及環丙基。
本文亦提供醫藥組合物，其包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。特定實施例包括適於經口遞送之醫藥組合物。
本文亦提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種適於經口遞送之醫藥學上可接受之載劑或賦形劑之經口調配物。
本文亦提供治療與RIP1激酶有關之發炎、細胞死亡及其他者相關之疾病及病症之方法，如下文所進一步闡述。
本文亦提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用作治療活性物質。
本文亦提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症：帕金森氏病(Parkinson's Disease)、路易氏體失智症(Lewy body dementia)、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群、tau蛋白病變(taupathy)、阿茲海默氏病(Alzheimer's Disease)、額顳失智症、肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病(Huntington's disease)、局部缺血、中風、顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
本文亦提供根據本文所提供實施例中任一實施例之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其組合物，其用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症：帕金森氏病、路易氏體失智症、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群、tau蛋白病變、阿茲海默氏病、額顳失智症、肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病、局部缺血、中風、顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
本文亦提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於製備用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症之藥劑：帕金森氏病、路易氏體失智症、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群、tau蛋白病變、阿茲海默氏病、額顳失智症、肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病、局部缺血、中風、顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
本文亦提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症：發炎性腸病、克隆氏病(Crohn's disease)、潰瘍性結腸炎、青光眼、牛皮癬、牛皮癬性關節炎、類風濕性關節炎、脊椎關節炎、幼年特發性關節炎及骨關節炎。
定義
如本文所提供，所有化學式及通用化學結構應理解為提供適當化合價及原子間之化學穩定鍵，如熟習此項技術者所理解。若適當，取代基可鍵結至一個以上之毗鄰原子(例如，烷基包括其中存在兩個鍵之亞甲基)。
在本文所提供之化學式中，「鹵素」或「鹵基」係指氟、氯及溴(亦即，F、Cl、Br)。
除非另有明確定義，否則烷基係指視情況經取代之直鏈或具支鏈C1 -C12 烷基。在一些實施例中，烷基係指C1 -C6 烷基。例示性烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、正己基、正庚基及正辛基。本文所提供之經取代烷基由一或多個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、氰基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C3 -C6 環烷基、苯基、OH、CO2 H、CO2 (C1 -C4 烷基)、NH2 、NH(C1 -C4 烷基)、N(C1 -C4 烷基)2 、NH(C=O)C1 -C4 烷基、(C=O)NH(C1 -C4 烷基)、(C=O)N(C1 -C4 烷基)2 、S(C1 -C4 烷基)、SO(C1 -C4 烷基)、SO2 (C1 -C4 烷基)、SO2 NH(C1 -C4 烷基)、SO2 N(C1 -C4 烷基)2 及NHSO2 (C1 -C4 烷基)。在一些實施例中，經取代烷基具有1或2個取代基。在一些實施例中，烷基未經取代。
除非另有明確定義，否則環烷基係指視情況經取代之C3 -C12 環烷基且包括稠合、螺環及橋接二環基團，其中取代基係選自由以下組成之群：鹵素、氰基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C3 -C6 環烷基、苯基、OH、CO2 H、CO2 (C1 -C4 烷基)、NH2 、NH(C1 -C4 烷基)、N(C1 -C4 烷基)2 、NH(C=O)C1 -C4 烷基、(C=O)NH(C1 -C4 烷基)、(C=O)N(C1 -C4 烷基)2 、S(C1 -C4 烷基)、SO(C1 -C4 烷基)、SO2 (C1 -C4 烷基)、SO2 NH(C1 -C4 烷基)、SO2 N(C1 -C4 烷基)2 及NHSO2 (C1 -C4 烷基)。在一些實施例中，環烷基係指C3 -C6 環烷基。在一些實施例中，C3 -C6 環烷基視情況經1至3個鹵素原子取代。在一些實施例中，C3 -C6 環烷基視情況經1至3個氟原子取代。例示性C3 -C6 環烷基包括環丙基、環丁基、環戊基及環己基。例示性C3 -C12 環烷基進一步包括二環[3.1.0]己基、二環[2.1.1]己基、環庚基、二環[4.1.0]庚基、螺[4.2]庚基、環辛基、螺[4.3]辛基、螺[5.2]辛基、二環[2.2.1]庚基、二環[2.2.2]辛基、金剛烷基、十氫萘基(decalinyl)及螺[5.4]癸基。若適當，環烷基可稠合至其他基團，使得在環烷基與另一環系統(例如，式I之C環)之間存在一個以上之化學鍵。在一些實施例中，環烷基未經取代。
除非另有明確定義，否則鹵烷基係指直鏈或具支鏈C1 -C12 烷基，其中一或多個氫原子由鹵素置換。在一些實施例中，鹵烷基係指C1 -C6 鹵烷基。在一些實施例中，鹵烷基之1至3個氫原子由鹵素置換。在一些實施例中，鹵烷基之每個氫原子由鹵素置換(例如，三氟甲基)。在一些實施例中，鹵烷基係如本文所定義，其中鹵素在每一情況中係氟。例示性鹵烷基包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基及五氟乙基。
除非另有明確定義，否則烷氧基係指直鏈或具支鏈C1 -C12 烷基，其中在每一情況中於兩個碳原子之間存在一或多個氧原子。在一些實施例中，烷氧基係指C1 -C6 烷氧基。在一些實施例中，本文所提供之C1 -C6 烷氧基具有一個氧原子。例示性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、CH2 OCH3 、CH2 CH2 OCH3 、CH2 OCH2 CH3 、CH2 CH2 OCH2 CH3 、CH2 OCH2 CH2 CH3 、CH2 CH2 CH2 OCH3 、CH2 OCH(CH3 )2 、CH2 OC(CH3 )3 、CH(CH3 )OCH3 、CH2 CH(CH3 )OCH3 、CH(CH3 )OCH2 CH3 、CH2 OCH2 OCH3 、CH2 CH2 OCH2 CH2 OCH3 及CH2 OCH2 OCH2 OCH3 。
除非另有明確定義，否則環烷氧基係指如上文所定義之C4 -C10 或C4 -C6 烷氧基，其中該基團係環狀的且含有一個氧原子。例示性環烷氧基包括氧雜環丁基、四氫呋喃基及四氫哌喃基。
除非另有明確定義，否則鹵烷氧基係指如上文所定義之C1 -C6 鹵烷基，其中在每一情況中於兩個碳原子之間存在一或兩個氧原子。在一些實施例中，本文所提供之C1 -C6 鹵烷氧基具有一個氧原子。例示性鹵烷氧基包括OCF3 、OCHF2 及CH2 OCF3 。
除非另有明確定義，否則硫烷基係指如上文所定義之C1 -C12 或C1 -C6 烷氧基，其中氧原子由硫原子置換。在一些實施例中，硫烷基可包括由一或兩個氧原子取代之硫原子(亦即，烷基碸及烷基亞碸)。例示性硫烷基係在上文烷氧基定義中所例示之彼等基團，其中在每一情況中每一氧原子由硫原子置換。
除非另有明確定義，否則硫環烷基係指如上文所定義之C4 -C10 或C4 -C6 硫烷基，其中該基團係環狀的且含有一個硫原子。在一些實施例中，硫環烷基之硫原子由一或兩個氧原子取代(亦即，環狀碸或亞碸)。例示性硫環烷基包括硫雜環丁基(thietanyl)、硫雜環戊基(thiolanyl)、硫雜環己基(thianyl)、1,1-二側氧基硫雜環戊基及1,1-二側氧基硫雜環己基。
除非另有明確定義，否則雜環基係指在環中具有至少一個除碳以外之原子的單一飽和或部分不飽和4員至8員環，其中該原子係選自由氧、氮及硫組成之群；該術語亦包括具有至少一個此飽和或部分不飽和環之多重縮合環系統，該等多重縮合環系統具有7至12個原子且進一步闡述於下文中。因此，該術語包括環中約1至7個碳原子及約1至4個選自由氧、氮及硫組成之群之雜原子的單一飽和或部分不飽和環(例如，3員、4員、5員、6員、7員或8員環)。該環可係C分支的(亦即，由C1 -C4 烷基取代)。該環可經一或多個(例如，1個、2個或3個)側氧基取代且硫及氮原子亦可以其氧化形式存在。例示性雜環包括(但不限於)氮雜環丁基、四氫呋喃基及六氫吡啶基。當化合價要求容許時，多重縮合環系統之環可經由稠合、螺合及橋接鍵彼此連結。應理解，多重縮合環系統之個別環可相對於彼此以任何順序連結。亦應理解，多重縮合環系統之連接點(如上文針對雜環所定義)可在多重縮合環系統之任一位置處。亦應理解，雜環或雜環多重縮合環系統之連接點可在雜環基之任一適宜原子處(包括碳原子及氮原子)。例示性雜環包括(但不限於)吖丙啶基、氮雜環丁基、吡咯啶基、六氫吡啶基、高六氫吡啶基、嗎啉基、硫嗎啉基、六氫吡嗪基、四氫呋喃基、二氫噁唑基、四氫哌喃基、四氫硫哌喃基、1,2,3,4-四氫喹啉基、苯并噁嗪基、二氫噁唑基、苯并二氫哌喃基(chromanyl)、1,2-二氫吡啶基、2,3-二氫苯并呋喃基、1,3-苯并二氧雜環戊烯基、1,4-苯并二氧雜環己基、螺[環丙烷-1,1'-異吲哚啉基]-3'-酮、異吲哚啉基-1-酮、2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚基、咪唑啶-2-酮N-甲基六氫吡啶、咪唑啶、吡唑啶、丁內醯胺、戊內醯胺、咪唑啶酮、乙內醯脲、二氧雜環戊烷、酞醯亞胺、1,4-二噁烷、硫嗎啉、硫嗎啉-S-氧化物、硫嗎啉-S,S-氧化物、哌喃、3-吡咯啉、噻喃、哌喃酮、四氫噻吩、奎寧環(quinuclidine)、托品烷(tropane)、2-氮雜螺[3.3]庚烷、(1R,5S)-3-氮雜二環[3.2.1]辛烷、(1s,4s)-2-氮雜二環[2.2.2]辛烷、(1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜二環[2.2.2]辛烷及吡咯啶-2-酮。
在一些實施例中，雜環基係具有1至3個選自由氮、氧及硫組成之群之雜原子之C4 -C10 雜環基。在一些實施例中，雜環基不係二環抑或螺環。在一些實施例中，雜環基係具有1至3個雜原子之C5 -C6 雜環基，其中若存在3個雜原子，則至少2個為氮。
除非另有明確定義，否則芳基係指單一全碳芳香族環或多重縮合全碳環系統，其中環中之至少一者為芳香族且其中芳基具有6至20個碳原子、6至14個碳原子、6至12個碳原子或6至10個碳原子。芳基包括苯基。芳基亦包括具有約9至20個碳原子之多重縮合環系統(例如，包含2個、3個或4個環之環系統)，其中至少一個環為芳香族且其中其他環可為芳香族或不為芳香族(亦即，碳環)。此等多重縮合環系統視情況在多重縮合環系統之任一碳環部分上經一或多個(例如，1個、2個或3個)側氧基取代。當化合價要求容許時，多重縮合環系統之環可經由稠合、螺合及橋接鍵彼此連結。應理解，如上文所定義之多重縮合環系統之連接點可在環系統之任一位置處(包括環之芳香族或碳環部分)。例示性芳基包括苯基、茚基、萘基、1, 2, 3, 4-四氫萘基、蒽基及諸如此類。
除非另有明確定義，否則雜芳基係指在環中具有至少一個除碳以外之原子的5員至6員芳香族環，其中該原子係選自由氧、氮及硫組成之群；「雜芳基」亦包括具有至少一個此芳香族環之具有8至16個原子之多重縮合環系統，該等多重縮合環系統進一步闡述於下文中。因此，「雜芳基」包括約1至6個碳原子及約1至4個選自由氧、氮及硫組成之群之雜原子的單一芳香族環。倘若環為芳香族環，則硫及氮原子亦可以氧化形式存在。例示性雜芳基環系統包括(但不限於)吡啶基、嘧啶基、噁唑基或呋喃基。「雜芳基」亦包括多重縮合環系統(例如，包含2個或3個環之環系統)，其中如上文所定義之雜芳基與一或多個選自以下各項之環縮合以形成多重縮合環系統：雜芳基(以形成(例如)萘啶基，諸如1,8-萘啶基)、雜環(以形成(例如) 1, 2, 3, 4-四氫萘啶基(諸如1,2,3,4-四氫-1,8-萘啶基))、碳環(以形成(例如) 5,6,7,8-四氫喹啉基)及芳基(以形成(例如)吲唑基)。因此，雜芳基(單一芳香族環或多重縮合環系統)在雜芳基環內具有1至15個碳原子及約1至6個雜原子。此等多重縮合環系統可視情況在縮合環之碳環或雜環部分上經一或多個(例如，1個、2個、3個或4個)側氧基取代。當化合價要求容許時，多重縮合環系統之環可經由稠合、螺合及橋接鍵彼此連結。應理解，多重縮合環系統之個別環可相對於彼此以任何順序連結。亦應理解，多重縮合環系統之連接點(如上文針對雜芳基所定義)可在多重縮合環系統之任一位置處，包括多重縮合環系統之雜芳基、雜環、芳基或碳環部分。亦應理解，雜芳基或雜芳基多重縮合環系統之連接點可在該雜芳基或雜芳基多重縮合環系統之任一適宜原子處(包括碳原子及雜原子(例如，氮))。例示性雜芳基包括(但不限於)吡啶基、吡咯基、吡嗪基、嘧啶基、嗒嗪基、吡唑基、噻吩基、吲哚基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、呋喃基、噁二唑基、噻二唑基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、吲唑基、喹喔啉基、喹唑啉基、5,6,7,8-四氫異喹啉基苯并呋喃基、苯并咪唑基、硫雜茚基(thianaphthenyl)、吡咯并[2,3-b]吡啶基、喹唑啉基-4(3H)-酮、三唑基、4,5,6,7-四氫-1H-吲唑及3b,4,4a,5-四氫-1H-環丙[3,4]環-戊[1,2-c]吡唑。
如本文所用，術語「對掌性」係指具有與其鏡像夥伴不可疊合之性質之分子，而術語「非對掌性」係指與其鏡像夥伴可疊合之分子。
如本文所用，術語「立體異構物」係具有相同化學組成，但在原子或基團在空間中之佈置方面不同之化合物。
如本文所用，與化學結構中之鍵相交的波形線「」指示波形鍵在化學結構中與分子之其餘部分相交之鍵的連接點。
如本文所用，術語「C-連接」意指該術語所描述之基團經由環碳原子連接分子之其餘部分。
如本文所用，術語「N-連接」意指該術語所描述之基團經由環氮原子連接至分子之其餘部分。
「非鏡像異構物」係指具有兩個或更多個對掌性中心且其分子彼此不為鏡像之立體異構物。非鏡像異構物具有不同物理性質，例如熔點、沸點、光譜性質及反應性。非鏡像異構物之混合物可在諸如電泳及層析等高解析度分析程序下分離。
「鏡像異構物」係指化合物之鏡像彼此不可疊合之兩種立體異構物。
本文所用之立體化學定義及慣例通常遵循S. P. Parker編輯，McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York；及Eliel, E.及Wilen, S.，「Stereochemistry of Organic Compounds」, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994。本發明之化合物可含有不對稱或對掌性中心，且因此以不同立體異構形式存在。本發明化合物之所有立體異構形式、包括(但不限於)非鏡像異構物、鏡像異構物及阻轉異構物以及其混合物(諸如外消旋混合物)意欲形成本發明之一部分。許多有機化合物係以光學活性形式存在，亦即其具有旋轉平面偏振光之平面的能力。在闡述光學活性化合物時，使用前綴D及L或R及S表示分子關於其對掌性中心之絕對構形。採用前綴d及l或(+)及(-)來指定化合物之平面偏振光之旋轉符號，其中(-)或l意指該化合物係左旋的。具(+)或d前綴之化合物係右旋的。對於給定化學結構而言，該等立體異構物係相同的，唯其彼此為鏡像。特定立體異構物亦可稱為鏡像異構物，且此等異構物之混合物通常稱為鏡像異構混合物。鏡像異構物之50:50混合物稱為外消旋混合物或外消旋物，其可發生於在化學反應或製程中無立體選擇性或立體特異性時。術語「外消旋混合物」及「外消旋物」係指兩種無光學活性之鏡像異構物質之等莫耳混合物。
當本文化合物式中之鍵係以非立體化學方式(例如扁平)繪製時，該鍵所連接之原子包括所有立體化學可能性。當本文化合物式中之鍵係以確定之立體化學方式(例如粗體、粗體-楔形、虛線或虛線-楔形)繪製時，應理解，除非另有註明，否則所繪示之絕對立體異構物中富含立體化學鍵所連接之原子。在一個實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少51%。在另一實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少80%。在另一實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少90%。在另一實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少95%。在另一實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少97%。在另一實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少98%。在另一實施例中，該化合物可為所繪示絕對立體異構物之至少99%。
如本文所用，術語「互變異構物」或「互變異構形式」係指經由低能量障壁可相互轉化之具有不同能量之結構異構物。舉例而言，質子互變異構物(亦稱為質子移變互變異構物)包括經由質子遷移之互變，諸如酮-烯醇及亞胺-烯胺異構化。化合價互變異構物包括藉由一些鍵結電子重組之互變。
如本文所用，術語「溶劑合物」係指一或多種溶劑分子與本發明化合物之締合物或複合物。形成溶劑合物之溶劑之實例包括(但不限於)水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸及乙醇胺。術語「水合物」係指其中溶劑分子係水之複合物。在一些實施例中，本文所提供之化合物之水合物係酮水合物。
如本文所用，術語「保護基團」係指化合物上通常用於阻斷或保護特定官能基之取代基。舉例而言，「胺基保護基團」係連接至胺基之阻斷或保護化合物中之胺基官能基之取代基。適宜胺基保護基團包括乙醯基、三氟乙醯基、第三丁氧基羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBZ)及9-茀基甲基氧基羰基(Fmoc)。類似地，「羥基保護基團」係指阻斷或保護羥基官能基之羥基取代基。適宜保護基團包括乙醯基及矽基。「羧基保護基團」係指阻斷或保護羧基官能基之羧基取代基。常見羧基保護基團包括苯基磺醯基乙基、氰基乙基、2-(三甲基矽基)乙基、2-(三甲基矽基)乙氧基甲基、2-(對甲苯磺醯基)乙基、2-(對硝基苯基亞氧硫基)乙基、2-(二苯基膦基)-乙基、硝基乙基及諸如此類。關於保護基團及其用途之一般說明，參見P.G.M. Wuts及T.W. Greene，Greene's Protective Groups in Organic Synthesis第4版, Wiley-Interscience, New York, 2006。
如本文所用，術語「哺乳動物」包括(但不限於)人類、小鼠、大鼠、天竺鼠、猴、狗、貓、馬、牛、豬及綿羊。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」意欲包括用相對無毒酸或鹼製備之活性化合物之鹽，此取決於在本文所述化合物上所發現之具體取代基。當本發明之化合物含有相對酸性官能基時，可藉由使此等化合物之中性形式與足夠量之純淨或於適宜惰性溶劑中之期望鹼接觸來獲得鹼加成鹽。衍生自醫藥學上可接受之無機鹼之鹽之實例包括鋁鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、二價錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽及諸如此類。衍生自醫藥學上可接受之有機鹼之鹽包括以下之鹽：一級、二級及三級胺(包括經取代之胺、環狀胺、天然胺及諸如此類)，諸如精胺酸、甜菜鹼、咖啡因、膽鹼、N,N'-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲基胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基六氫吡啶、還原葡糖胺、葡萄糖胺、組胺酸、哈胺(hydrabamine)、異丙胺、離胺酸、甲基還原葡糖胺、嗎啉、六氫吡嗪、六氫吡啶、聚胺樹脂、普魯卡因(procaine)、嘌呤、可可鹼(theobromine)、三乙胺、三甲胺、三丙胺、胺丁三醇及諸如此類。當本發明之化合物含有相對鹼性官能基時，可藉由使此等化合物之中性形式與足夠量之純淨或於適宜惰性溶劑中之期望酸接觸來獲得酸加成鹽。醫藥學上可接受之酸加成鹽之實例包括衍生自諸如以下等無機酸之彼等鹽：鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸、一氫碳酸、磷酸、一氫磷酸、二氫磷酸、硫酸、一氫硫酸、氫碘酸或亞磷酸及諸如此類；以及衍生自諸如以下等相對無毒有機酸之鹽：乙酸、丙酸、異丁酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富馬酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸、甲烷磺酸及諸如此類。亦包括胺基酸之鹽，諸如精胺酸鹽及諸如此類，以及諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸及諸如此類等有機酸之鹽(例如，參見Berge, S. M., 等人，「Pharmaceutical Salts」, Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19)。本發明之某些特定化合物含有容許將化合物轉化成鹼加成鹽或酸加成鹽之鹼性及酸性官能基。
該等化合物之中性形式可藉由使鹽與鹼或酸接觸且以習用方式分離母體化合物來重新產生。化合物之母體形式在某些物理性質(諸如於極性溶劑中之溶解性)方面不同於各種鹽形式，但在其他方面，出於本發明之目的，該等鹽等效於化合物之母體形式。
除鹽形式以外，本發明亦提供呈前藥形式之化合物。如本文所用，術語「前藥」係指在生理條件下易於經歷化學變化以提供本發明化合物之彼等化合物。另外，前藥可藉由化學或生物化學方法在離體環境中轉化成本發明之化合物。舉例而言，當與適宜酶或化學試劑一起置於經皮貼劑貯器中時，前藥可緩慢轉化成本發明之化合物。
本發明之前藥包括其中胺基酸殘基或兩個或更多個(例如，兩個、三個或四個)胺基酸殘基之多肽鏈經由醯胺或酯鍵共價連接至本發明化合物之游離胺基、羥基或羧酸基團之化合物。胺基酸殘基包括(但不限於)一般由三字母符號指定之20種天然胺基酸且亦包括磷酸絲胺酸、磷酸蘇胺酸、磷酸酪胺酸、4-羥基脯胺酸、羥基離胺酸、鎖鏈素(demosine)、異鎖鏈素、γ-羧基麩胺酸鹽、馬尿酸、八氫吲哚-2-甲酸、抑胃酶胺酸(statine)、1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸、青黴胺、鳥胺酸、3-甲基組胺酸、正纈胺酸、β-丙胺酸、γ-胺基丁酸、瓜胺酸、高半胱胺酸、高絲胺酸、甲基-丙胺酸、對苯甲醯基苯基丙胺酸、苯基甘胺酸、炔丙基甘胺酸、肌胺酸、甲硫胺酸碸及第三丁基甘胺酸。
亦涵蓋其他類型之前藥。舉例而言，本發明化合物之游離羧基可衍生化為醯胺或烷基酯。作為另一實例，包含游離羥基之本發明化合物可藉由將羥基轉化成諸如(但不限於)磷酸酯基、半琥珀酸酯基、二甲基胺基乙酸酯基或磷醯基氧基甲基氧基羰基之基團而衍生化為前藥：，如Fleisher, D.等人，(1996) Improved oral drug delivery: solubility limitations overcome by the use of prodrugs Advanced Drug Delivery Reviews, 19:115中所概述。亦包括羥基及胺基之胺基甲酸酯前藥，以及碳酸酯前藥、羥基之磺酸酯及硫酸酯。亦涵蓋將羥基衍生化為(醯氧基)甲基及(醯氧基)乙基醚，其中該醯基可係視情況經包括(但不限於)醚、胺及羧酸官能基之基團取代之烷基酯，或其中該醯基係如上文所述之胺基酸酯。此類型之前藥闡述於J. Med. Chem., (1996), 39:10中。更具體實例包括以(諸如)以下之基團置換醇基之氫原子：(C1-6 )烷醯基氧基甲基、1-((C1-6 )烷醯基氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-6 )烷醯基氧基)乙基、(C1-6 )烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-6 )烷氧基羰基胺基甲基、琥珀醯基、(C1-6 )烷醯基、α-胺基(C1-4 )烷醯基、芳基醯基及α-胺基醯基或α-胺基醯基-α-胺基醯基，其中每一α-胺基醯基獨立地選自天然L-胺基酸、P(O)(OH)2 、-P(O)(O(C1-6 )烷基)2 或醣基(自去除碳水化合物之半縮醛形式之羥基而產生之基團)。
關於前藥衍生物之其他實例，參見(例如) a) Design of Prodrugs, H. Bundgaard編輯, (Elsevier, 1985)及Methods in Enzymology, 第42卷, 第309-396頁, K. Widder等人編輯(Academic Press, 1985)；b) A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen及H. Bundgaard編輯, 第5章「Design and Application of Prodrugs」, H. Bundgaard, 第113-191頁(1991)；c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8:1-38 (1992)；d) H. Bundgaard等人，Journal of Pharmaceutical Sciences, 77:285 (1988)；及e) N. Kakeya等人，Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984)，其各自以引用的方式明確併入本文中。
另外，本發明提供本發明化合物之代謝物。如本文所用，「代謝物」係指經由指定化合物或其鹽在機體中之代謝產生之產物。此等產物可源自(例如)所投與化合物之氧化、還原、水解、胺化、去醯胺、酯化、去酯化、酶促裂解及諸如此類。
代謝物產物通常藉由以下來鑑別：製備本發明化合物之放射性標記(例如，14 C或3 H)同位素，以可檢測劑量(例如，大於約0.5 mg/kg)將其非經腸投與至動物(諸如大鼠、小鼠、天竺鼠、猴)或人類，容許足夠時間進行代謝(通常約30秒至30小時)且自尿液、血液或其他生物樣品分離其轉化產物。該等產物由於其經標記而易於分離(其他產物藉由使用能夠結合代謝物中尚存表位之抗體來分離)。代謝物結構係以習用方式來確定，例如藉由MS、LC/MS或NMR分析。一般而言，代謝物之分析係以與熟習此項技術者所熟知之習用藥物代謝研究相同之方式來進行。只要代謝物產物在活體內未發現，則其可用於治療性投用本發明化合物之診斷分析中。
本發明之某些化合物可以非溶劑化形式以及溶劑化形式(包括水合形式)存在。一般而言，溶劑化形式等效於非溶劑化形式，且意欲涵蓋於本發明之範圍內。本發明之某些化合物可以多種結晶或非晶形形式存在。一般而言，所有物理形式對於本發明所涵蓋之用途而言均係等效的且意欲在本發明之範圍內。
本發明之某些化合物具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵；外消旋物、非鏡像異構物、幾何異構物、區域異構物及個別異構物(例如，單獨之鏡像異構物)均意欲涵蓋於本發明之範圍內。
如本文所用，術語「組合物」意欲涵蓋包含指定量之指定成分的產品以及任何直接或間接地自指定量之指定成分組合而成的產品。「醫藥學上可接受之」意指載劑、稀釋劑或賦形劑必須與調配物之其他成分相容且對其接受者無害。
術語「治療(treat及treatment)」係指治療性治療及/或預防性治療或防止性措施二者，其中目標係防止或減慢(減輕)不期望之生理變化或病症，舉例而言，諸如癌症之發生或擴散。出於本發明之目的，有益或期望臨床結果包括(但不限於)減輕症狀、降低疾病或病症之程度、穩定疾病或病症之狀態(亦即不惡化)、延遲或減緩疾病進展、改善或緩和疾病狀態或病症及可檢測或不可檢測地緩解病情(部分或全部)。「治療」亦可意指與不接受治療之預期存活相比延長存活。需要治療者包括已患有疾病或病症者以及易於患有該疾病或病症者或其中欲預防該疾病或病症者。
片語「治療有效量」或「有效量」意指本發明之化合物(i) 治療或預防具體疾病、病狀或病症，(ii) 減弱、改善或消除具體疾病、病狀或病症之一或多種症狀，或(iii) 預防或延遲本文所述之具體疾病、病狀或病症之一或多種症狀發作之量。對於癌症療法而言，可(例如)藉由評價疾病進展時間(TTP)及/或測定反應率(RR)來量測功效。
術語「生物利用度」係指投與患者之給定量藥物之全身可用性(亦即，血液/血漿含量)。生物利用度係絕對術語，其指示對藥物自所投與劑型達到一般循環之時間(速率)及總量(程度)二者之量度。 RIP1激酶抑制劑 本發明提供具有通式I之新穎化合物：(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R1 係選自由以下組成之群：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、4員至8員雜環基及5員至6員雜芳基；其中R1 藉由碳原子結合至毗鄰羰基，且其中R1 視情況由一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代：F、Cl、Br、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、羥基、羥基甲基、氰基、氰基甲基、氰基乙基、C(O)C1 -C6 烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)； 每一RN 獨立地選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷基；或兩個RN 可與毗鄰N一起形成4員至6員環； A環係具有以下作為僅有雜原子之5員雜芳基：(i) 兩個或三個氮原子，(ii) 一個氮原子及一個氧原子，或(iii) 一個氮原子及一個硫原子；其中該A環藉由碳原子結合至毗鄰羰基；且 B環係4員至8員環烷基，或具有1至3個選自由氮、氧及硫組成之群之雜原子之4員至8員雜環基；其中該B環根據(a)、(b)或(a)及(b)兩者經取代： (a) 1至2個選自由以下組成之群之取代基：鹵素、氘、羥基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 及氰基；其中兩個C1 -C6 烷基取代基可一起形成橋接環或螺環；且其中若該B環中之氮原子經取代，則取代基不係鹵素、氰基或氧或硫原子直接鍵結至該氮原子之C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基或C1 -C6 硫烷基； (b) 1個選自由以下組成之群之取代基：C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環或5員至6員雜芳基環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基及氰基。
在另一實施例中，本文提供式I化合物：(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R1 係選自由以下組成之群：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、4員至6員雜環基及5員至6員雜芳基；其中R1 藉由碳原子結合至毗鄰羰基，且其中R1 視情況由一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代：F、Cl、甲基、乙基、羥基、羥基甲基、甲氧基甲基、氰基、三氟甲基、二氟甲氧基及三氟甲氧基。
每一RN 獨立地選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷基；或兩個RN 可與毗鄰N一起形成4員至6員環； A環係具有以下作為僅有雜原子之5員雜芳基：(i) 兩個或三個氮原子，(ii) 一個氮原子及一個氧原子，或(iii) 一個氮原子及一個硫原子；其中該A環藉由碳原子結合至毗鄰羰基；且 B環係4員至8員環烷基，或具有1至3個選自由氮、氧及硫組成之群之雜原子之4員至8員雜環基；其中該B環根據(a)、(b)或(a)及(b)兩者經取代： (a) 1至2個選自由以下組成之群之取代基：鹵素、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 及氰基；其中兩個C1 -C6 烷基取代基可一起形成橋接環或螺環；且其中若該B環中之氮原子經取代，則取代基不係鹵素、氰基或氧或硫原子直接鍵結至該氮原子之C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基或C1 -C6 硫烷基； (b) 1個選自由以下組成之群之取代基：C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基、氰基及環丙基。
在一些實施例中，R1 係選自由以下組成之群：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 鹵烷基、苯基、苄基、氧雜環丁基、氧雜二環[3.1.0]己-6-基、噻吩基及吡唑基；其中R1 視情況由以下取代：(i) 一個選自由F、Cl、甲基、羥基、羥基甲基、氰基及三氟甲基組成之群之取代基，或(ii) 兩個F取代基。在上文實施例中之一些實施例中，R1 係C1 -C6 烷基。在一些實施例中，R1 係C1 -C4 烷基。在一些實施例中，R1 係C3 -C5 環烷基。在一些實施例中，R1 係C3 -C4 環烷基。在一些實施例中，R1 係甲基。在一些實施例中，R1 係乙基。在一些實施例中，R1 係CF3 CH2 。在一些實施例中，R1 係2-丙基。在一些實施例中，R1 係第三丁基。在一些實施例中，R1 係(2-羥基)-2-丙基。在一些實施例中，R1 係(2-氰基)-2-丙基。在一些實施例中，R1 係C1 -C6 鹵烷基。在一些實施例中，R1 係C1 -C4 鹵烷基。在一些實施例中，R1 係環丙基。在一些實施例中，R1 係單氟環丙基或二氟環丙基。在一些實施例中，R1 係1-氟環丙基。在一些實施例中，R1 係2-氟環丙基。在一些實施例中，R1 係2,2-二氟環丙基。在一些實施例中，R1 係1-(三氟甲基)環丙基。在一些實施例中，R1 係1-甲基環丙基。在一些實施例中，R1 係1-(羥基甲基)環丙基。在一些實施例中，R1 係環丁基。在一些實施例中，R1 係環戊基。在一些實施例中，R1 係苯基。在一些實施例中，R1 係苄基。在一些實施例中，R1 係氧雜環丁-3-基。在一些實施例中，R1 係3-甲基氧雜環丁-3-基。在一些實施例中，R1 係氧雜二環[3.1.0]己-6-基。在一些實施例中，R1 係2-吡啶基。在一些實施例中，R1 係1-甲基吡唑-4-基。在一些實施例中，R1 係2-噻吩基。
在一些實施例中，每一RN 獨立地選自由H及C1 -C6 烷基組成之群。在一些實施例中，每一RN 係C1 -C4 烷基。在一些實施例中，每一RN 係甲基。
在式(I)之一些實施例中，R1 係如上文所定義，且A環及B環一起係選自由以下組成之群：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、及； 其中 R2 係選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基及氰基；且 R3a 及R3b 係如下選擇： (i) R3a 及R3b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基； (ii) R3a 及R3b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN及甲基，條件係R3a 及R3b 不能同時係OH或CN；或 (iii) R3a 及R3b 一起形成環丙基。
在式(I)之一些實施例中，R1 係如上文所定義，且A環及B環一起係選自由以下組成之群：、、、、、、、及； 其中 R3a 及R3b 係如下選擇： (i) R3a 及R3b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基； (ii) R3a 及R3b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN及甲基，條件係R3a 及R3b 不能同時係OH或CN；或 (iii) R3a 及R3b 一起形成環丙基； 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷氧基；且 m係1、2或3。
在式(I)之一些實施例中，R1 係如上文所定義，且A環及B環一起為：； 其中 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷氧基；且 m係1、2或3。
在式(I)之一些實施例中，R1 係如上文所定義，且A環及B環一起係選自由以下組成之群：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、； 其中 R2 係選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基及氰基； R4a 及R4b 係如下選擇： (i) R4a 及R4b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基；或 (ii) R4a 及R4b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl及甲基；且 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷氧基。
在式(I)之一些實施例中，R1 係如上文所定義，且A環及B環一起係選自由以下組成之群：、及； 其中 R4a 及R4b 係如下選擇： (i) R4a 及R4b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基；或 (ii) R4a 及R4b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl及甲基； 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基；且 m係1、2或3。
在上文實施例中之一些實施例中，R2 係苯基。在一些實施例中，R2 係單氟苯基或二氟苯基。在一些實施例中，R2 係單氯苯基或二氯苯基。在上文實施例中之一些實施例中，R2 係吡啶基。在上文實施例中之一些實施例中，R2 係經氯取代之吡啶基。在上文實施例中之一些實施例中，R2 係經氟取代之吡啶基。在上文實施例中之一些實施例中，R2 係吡唑基。在上文實施例中之一些實施例中，R2 係1-甲基-1H-吡唑-4-基。在上文實施例中之一些實施例中，R2 係4-氯-1-甲基-1H-吡唑-3-基。
在上文實施例中之一些實施例中，R3a 及R3b 各自係H。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係H且R3b 係F。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係H且R3b 係Cl。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 及R3b 各自係F。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 及R3b 各自係Cl。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 及R3b 各自係甲基。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係甲基且R3b 係F。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係甲基且R3b 係Cl。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係甲基且R3b 係OH。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係甲基且R3b 係CN。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 及R3b 各自係D。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係H且R3b 係D。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係D且R3b 係F。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係D且R3b 係Cl。在上文實施例中之一些實施例中，R3a 係D且R3b 係甲基。
在上文實施例中之一些實施例中，R4a 及R4b 各自係H。在上文實施例中之一些實施例中，一個R4a 係H且R4b 係F。在上文實施例中之一些實施例中，一個R4a 係H且R4b 係甲基。在上文實施例中之一些實施例中，一個R4a 係H且R4b 係Cl。在上文實施例中之一些實施例中，R4a 及R4b 各自係F。在上文實施例中之一些實施例中，R4a 及R4b 各自係D。在上文實施例中之一些實施例中，R4a 係H且R4b 係D。在上文實施例中之一些實施例中，R4a 係D且R4b 係F。在上文實施例中之一些實施例中，R4a 係D且R4b 係Cl。
在上文實施例中之一些實施例中，R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、CH3 、CH2 CH3 、OCH3 、CF3 、OCF3 、CF2 H及OCF2 H。
在上文實施例中之一些實施例中，m係0。在一些實施例中，m係1。在一些實施例中，m係2。
在另一實施例中，本文提供選自下表1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之化合物。在另一實施例中，本文提供在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中Ki 小於100 nM之表1化合物，包括如本文所闡述者。在另一實施例中，表1化合物在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中具有小於50 nM之Ki ，包括如本文所闡述者。在另一實施例中，表1化合物在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中具有小於25 nM之Ki ，包括如本文所闡述者。在另一實施例中，表1化合物在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中具有小於10 nM之Ki ，包括如本文所闡述者。
在另一實施例中，本文提供選自下表2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之化合物。在另一實施例中，本文提供在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中Ki 小於100 nM之表2化合物，包括如本文所闡述者。在另一實施例中，表2化合物在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中具有小於50 nM之Ki ，包括如本文所闡述者。在另一實施例中，表2化合物在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中具有小於25 nM之Ki ，包括如本文所闡述者。在另一實施例中，表2化合物在RIP1K生物化學或基於細胞之分析中具有小於10 nM之Ki ，包括如本文所闡述者。
在一些實施例中，本文提供表1或表2化合物之單一立體異構物，如藉由參考其對掌性分離及離析(例如，如藉由對掌性SFC之實例中所闡述)所表徵。
在一些實施例中，本文提供醫藥組合物，其包含如上文實施例中之任一實施例中所述之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。特定實施例包括適於經口遞送之醫藥組合物。
本文亦提供如上文實施例中之任一實施例中所述之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種適於經口遞送之醫藥學上可接受之載劑或賦形劑之經口調配物。
在一些實施例中，本文提供如上文實施例中之任一實施例中所述之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於治療神經變性疾病及病症。在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係新紐蛋白病變(synucleopathy)，諸如帕金森氏病、路易氏體失智症、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群。在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係tau蛋白病變，諸如阿茲海默氏病及額顳失智症。在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係脫髓鞘疾病，諸如多發性硬化症。
在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係其他神經變性疾病，諸如肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病、局部缺血及中風。如本文所提供之欲治療之其他例示性神經變性疾病包括(但不限於)顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係阿茲海默氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係帕金森氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係亨庭頓氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係多發性硬化症。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係肌萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係脊髓性肌肉萎縮症(SMA)。
在一些實施例中，本文提供如上文實施例中之任一實施例中所述之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於治療發炎性疾病及病症。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係選自由以下組成之群：發炎性腸病(包括克隆氏病及潰瘍性結腸炎)、牛皮癬、視網膜剝離、色素性視網膜炎、黃斑變性、胰臟炎、特應性皮炎、關節炎(包括類風濕性關節炎、骨關節炎、椎關節炎、痛風、全身型幼年特發性關節炎(SoJIA)、牛皮癬性關節炎)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、薛格連氏症候群(Sjogren's syndrome)、全身性硬皮症、抗磷脂症候群(APS)、血管炎、肝損害/疾病(非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自體免疫肝炎、自體免疫肝膽疾病、原發性硬化性膽管炎(PSC)、乙醯胺酚毒性、肝毒性)、腎損害/損傷(腎炎、腎移植、手術、腎毒性藥物(例如順鉑)之投與、急性腎損傷(AKI)、乳糜瀉病(Celiac disease)、自體免疫特發性血小板減少紫斑症、移植排斥、實體器官之局部缺血再灌注損傷、敗血症、全身性發炎性反應症候群(SIRS)、腦血管意外(CVA、中風)、心肌梗塞(MI)、動脈粥樣硬化、亨庭頓氏病、阿茲海默氏病、帕金森氏病、肌萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)、脊髓性肌肉萎縮症(SMA)、過敏性疾病(包括氣喘及特應性皮炎)、多發性硬化症、I型糖尿病、韋格納氏肉芽腫(Wegener's granulomatosis)、肺結節病、貝賽特氏病(Behcet's disease)、介白素-1轉化酶(ICE，亦稱為半胱天冬酶-1)相關之發燒症候群、慢性阻塞性肺病(COPD)、腫瘤壞死因子受體相關之週期性症候群(TRAPS)、牙周炎、NEMO缺乏症候群(F-κ-B基本調節基因(亦稱為IKKγ或IKKG)缺乏症候群)、HOIL-1缺乏((亦稱為RBCKl)原血紅素氧化之IRP2泛素連接酶-1缺乏)、線性泛素鏈總成複合物(LUBAC)缺乏症候群、血液及實體器官惡性病、細菌性感染及病毒性感染(諸如結核病及流行性感冒)及溶酶體儲積病(具體而言，高雪氏病(Gaucher Disease)，且包括GM2神經節苷脂儲積病、α-甘露醣儲積症、天冬胺醯葡萄糖胺尿症、膽固醇酯儲積病、慢性己醣胺酶A缺乏、胱胺酸病、唐尼病(Danon disease)、法布里病(Fabry disease)、法伯病(Farber disease)、岩藻糖苷儲積病、半乳糖唾液酸儲積病、GM1神經節苷脂儲積病、黏脂儲積病、嬰兒期游離唾液酸儲積病、幼年己醣胺酶A缺乏、克拉伯病(Krabbe disease)、溶酶體酸性脂肪酶缺乏、異染性腦白質營養不良、黏多醣累積症、多硫酸酯酶缺乏、尼曼-匹克氏病(Niemann-Pick Disease)、神經元蠟樣脂褐質儲積症、龐貝病(Pompe disease)、緻密成骨不全症、山德霍夫氏病(Sandhoff disease)、辛德勒氏病(Schindler disease)、唾液酸儲積病、泰-薩克斯病(Tay-Sachs)及沃爾曼病(Wolman disease))。
在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係發炎性腸病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係克隆氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係潰瘍性結腸炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係青光眼。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係牛皮癬。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係類風濕性關節炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係脊椎關節炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係幼年特發性關節炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係骨關節炎。
在一些實施例中，本文提供利用治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療或預防疾病或病症之方法，其中該疾病或病症與發炎及/或壞死性凋亡相關。在一些實施例中，該疾病或病症係選自本文所列舉之特定疾病及病症。
在一些實施例中，本文提供抑制RIP1激酶活性之方法，其係藉由使細胞與式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸來實施。 醫藥組合物及投與
本文提供含有本發明之化合物(或其立體異構物、幾何異構物、互變異構物、溶劑合物、代謝物、同位素、醫藥學上可接受之鹽或前藥)及治療惰性載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物或藥劑，以及使用本發明之化合物製備此類組合物及藥劑之方法。在一個實例中，可藉由在環境溫度下在適當pH下且以期望純度將式I化合物與生理學上可接受之載劑(亦即，在所採用之劑量及濃度下對接受者無毒之載劑)混合來調配成蓋倫製劑(galenical)投與形式。調配物之pH主要取決於化合物之具體用途及濃度，但較佳地在約3至約8之任一處範圍內。在一個實例中，將式I化合物調配於pH 5之乙酸鹽緩衝液中。在另一實施例中，式I化合物係無菌的。化合物可(例如)作為固體或非晶形組合物、作為凍乾調配物或作為水溶液儲存。
組合物係以與良好醫學實踐一致之方式調配、投用及投與。在此背景下需考慮之因素包括所治療之具體病症、所治療之具體哺乳動物、個別患者之臨床病狀、病因、藥劑之遞送部位、投與方法、投與時間安排及開業醫師所知之其他因素。在一些實施例中，欲投與化合物之「有效量」將受此類考慮因素支配，且係抑制RIP1激酶活性以在所治療之哺乳動物中提供治療效應所需之最小量。另外，此一有效量可低於對正常細胞或作為整體之哺乳動物有毒之量。
在一個實例中，以靜脈內或非經腸方式投與之本發明化合物之醫藥學上之有效量將為每劑量以下範圍：約0.1至100 mg/kg、替代地約0.1至20 mg/kg患者體重/天或替代地約0.3至15 mg/kg/天。
在另一實施例中，經口單位劑型(諸如錠劑及膠囊)較佳含有約1 mg至約1000 mg (例如，1 mg、5 mg、10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、30 mg、40 mg、50 mg、100 mg、200 mg、250 mg、400 mg、500 mg、600 mg、700 mg、800 mg、900 mg或1000 mg)之本發明化合物。在某些實施例中，日劑量係作為單一日劑量或以一天2次至6次之分開劑量或以持續釋放形式給予。在70 kg成人之情形下，總日劑量通常將為約7 mg至約1,400 mg。此劑量方案可經調整以提供最佳治療反應。化合物可以每天1次至4次、較佳每天一次或兩次之方案來投與。
在一些實施例中，投與低劑量之本發明化合物以在使不良效應最小化或防止不良效應的同時提供治療益處。
本發明之化合物可藉由任何適宜方式來投與，包括經口、局部(包括經頰及舌下)、經直腸、經陰道、經皮、非經腸、皮下、腹膜內、肺內、真皮內、鞘內及硬膜外及鼻內以及(若期望用於局部治療)病灶內投與。非經腸輸注包括肌內、靜脈內、動脈內、腹膜內或皮下投與。在特定實施例中，式I化合物係以經口方式投與。在其他特定實施例中，式I化合物係以靜脈內方式投與。
本發明之化合物可以任何便捷投與形式投與，例如錠劑、粉劑、膠囊、溶液、分散液、懸浮液、糖漿、噴霧劑、栓劑、凝膠、乳液、貼劑等。此類組合物可含有醫藥製劑中之習用組分，例如稀釋劑、載劑、pH調節劑、甜味劑、增積劑及其他活性劑。
典型調配物係藉由混合本發明之化合物及載劑或賦形劑來製備。適宜載劑及賦形劑為熟習此項技術者所熟知且詳細闡述於(例如) Ansel, Howard C.等人，Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004；Gennaro, Alfonso R.等人，Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000；及Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005中。調配物亦可包括一或多種緩衝劑、穩定劑、表面活性劑、潤濕劑、潤滑劑、乳化劑、助懸劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、處理助劑、著色劑、甜味劑、芳香劑、矯味劑、稀釋劑及其他已知的賦予藥物(亦即，本發明之化合物或其醫藥組合物)之優美外觀或幫助製造醫藥產品(亦即藥劑)之添加劑。
適宜載劑、稀釋劑及賦形劑為熟習此項技術者所熟知且包括諸如碳水化合物、蠟、水溶性及/或水可溶脹性聚合物、親水性或疏水性物質、明膠、油、溶劑、水及諸如此類等材料。所用具體載劑、稀釋劑或賦形劑將取決於施加本發明化合物之方式及目的。通常基於熟習此項技術者公認為安全(GRAS)投與哺乳動物之溶劑來選擇溶劑。一般而言，安全溶劑係無毒水性溶劑(諸如水)及可溶於或可混溶於水中之其他無毒溶劑。適宜水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG 400、PEG 300)等及其混合物。調配物亦可包括一或多種緩衝劑、穩定劑、表面活性劑、潤濕劑、潤滑劑、乳化劑、助懸劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、處理助劑、著色劑、甜味劑、芳香劑、矯味劑及其他已知的賦予藥物(亦即，本發明之化合物或其醫藥組合物)之優美外觀或幫助製造醫藥產品(亦即藥劑)之添加劑。
可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑及穩定劑在所採用之劑量及濃度下對接受者無毒，且包括緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如十八烷基二甲基苄基氯化銨；六甲氯銨；苯紮氯銨(benzalkonium chloride)、苄索氯銨(benzethonium chloride)；苯酚、丁醇或苄醇；對羥基苯甲酸烷基酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯基吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、二醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖，諸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；鹽形成抗衡離子，諸如鈉離子；金屬複合物(例如Zn-蛋白質複合物)；及/或非離子型表面活性劑，諸如TWEEN™、PLURONICS™或聚乙二醇(PEG)。本發明之活性醫藥成分(例如，式I化合物或其實施例)亦可分別裝入藉由(例如)凝聚技術或界面聚合製備之微膠囊(例如，羥甲基纖維素微膠囊或明膠微膠囊以及聚-(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊)中、膠質藥物遞送系統(例如，脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米粒子及奈米膠囊)中或粗滴乳液中。此類技術揭示於Remington: The Science and Practice of Pharmacy: Remington the Science and Practice of Pharmacy (2005)第21版, Lippincott Williams & Wilkins, Philidelphia, PA中。
可製備本發明化合物(例如，式I化合物或其實施例)之持續釋放製劑。持續釋放製劑之適宜實例包括含有式I化合物或其實施例之固體疏水性聚合物之半透性基質，該等基質呈成形物件之形式，例如膜或微膠囊。持續釋放基質之實例包括聚酯、水凝膠(例如，聚(甲基丙烯酸-2-羥基乙基酯)或聚(乙烯醇))、聚乳酸(美國專利第3,773,919號)、L-麩胺酸與L-麩胺酸γ-乙基酯之共聚物(Sidman等人，Biopolymers 22:547, 1983)、不可降解之乙烯-乙酸乙烯酯(Langer 等人，J. Biomed. Mater. Res. 15:167, 1981)、可降解之乳酸-乙醇酸共聚物(諸如LUPRON DEPOT™ (由乳酸-乙醇酸共聚物及乙酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)構成之可注射微球體))及聚-D-(-)-3-羥基丁酸(EP 133,988A)。持續釋放組合物亦包括脂質體包埋化合物，其可藉由本身已知之方法來製備(Epstein 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82:3688, 1985；Hwang 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 77:4030, 1980；美國專利第4,485,045號及第4,544,545號；及EP 102,324A)。通常，脂質體係小的(約200-800埃)之單層類型，其中脂質含量為大於約30 mol%膽固醇，調整所選擇之比例以達成最佳治療。
在一個實例中，可藉由在環境溫度下在適當pH下且以期望純度將式I化合物或其實施例與生理學上可接受之載劑(亦即，在所採用之劑量及濃度下對接受者無毒之載劑)混合來調配成蓋倫製劑投與形式。調配物之pH主要取決於化合物之具體用途及濃度，但較佳地在約3至約8之任一處範圍內。在一個實例中，將式I化合物(或其實施例)調配於pH 5之乙酸鹽緩衝液中。在另一實施例中，式I化合物或其實施例係無菌的。化合物可(例如)作為固體或非晶形組合物、作為凍乾調配物或作為水溶液儲存。
本文所提供之適宜經口劑型之實例係含有約1 mg至約500 mg (例如，約1 mg、5 mg、10 mg、25 mg、30 mg、50 mg、80 mg、100 mg、150 mg、250 mg、300 mg及500 mg)之本發明化合物與適宜量之無水乳糖、交聯羧甲纖維素鈉、聚乙烯基吡咯啶酮(PVP) K30及硬脂酸鎂之複合物之錠劑。首先將粉末狀成分混合在一起，且接著與PVP溶液混合。可將所得組合物乾燥，製粒，與硬脂酸鎂混合且使用習用設備壓製成錠劑形式。
本發明化合物(例如，式I化合物或其實施例)之調配物可呈無菌可注射製劑形式，諸如無菌可注射水性或油性懸浮液。此懸浮液可根據已知技術使用已於上文提及之彼等適宜分散劑或潤濕劑及助懸劑來調配。無菌可注射製劑亦可係於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液(諸如於1,3-丁二醇中之溶液)或製備為凍乾粉劑。可採用之可接受之媒劑及溶劑係水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等滲氯化鈉溶液。另外，可習用地採用無菌不揮發性油作為溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任一溫和不揮發性油，包括合成甘油單酯或甘油二酯。另外，諸如油酸等脂肪酸可同樣用於製備可注射劑。
可與載劑物質組合以產生單一劑型之活性成分之量將端視所治療主體及具體投與模式而有所變化。舉例而言，意欲用於經口投與人類之延時釋放調配物可含有大約1 mg至1000 mg活性物質，該活性物質與適當及便捷量之載劑物質複合，該載劑物質之量可自總組成之約5%至約95% (重量:重量)變化。可製備醫藥組合物以提供用於投與之易量測量。舉例而言，意欲用於靜脈內輸注之水溶液可含有約3 μg至500 μg活性成分/毫升溶液，以使得可以約30 mL/小時之速率進行適宜體積之輸注。
適於非經腸投與之調配物包括水性及非水性無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及可使調配物與預期接受者之血液等滲之溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，其可包括助懸劑及增稠劑。
調配物可包裝於單位劑量或多劑量容器(例如密封安瓿及小瓶)中，且可儲存於冷凍亁燥(凍亁)條件下，從而僅需在即將使用前添加無菌液體載劑(例如，注射用水)。臨時注射溶液及懸浮液係自先前所述種類之無菌粉劑、顆粒及錠劑來製備。
因此，一實施例包括包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之醫藥組合物。另一實施例中包括包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑之醫藥組合物。
當結合靶標位於腦中時，本發明之某些實施例提供穿過血腦障壁之式I化合物(或其實施例)。在該等實施例中，本文所提供之化合物展現作為神經性疾病之潛在治療劑之足夠的腦滲透。在一些實施例中，腦滲透係藉由評估游離腦/血漿比(Bu /Pu )(如在囓齒類動物中之活體內藥代動力學研究所量測)或藉由熟習此項技術者已知之其他方法(例如，參見 Liu, X. 等人，J. Pharmacol. Exp. Therap., 325:349-56, 2008)來評價。
某些神經性疾病與血腦障壁之滲透性增加相關，使得式I化合物(或其實施例)可容易地引入腦。當血腦障壁保持完整時，存在若干種業內已知之跨越該障壁運輸分子之方法，包括(但不限於)物理方法、基於脂質之方法及基於受體及通道之方法。跨越血腦障壁運輸式I化合物(或其實施例)之物理方法包括(但不限於)完全規避血腦障壁或藉由在血腦障壁中產生開口。
規避方法包括(但不限於)直接注射至腦中(例如，參見Papanastassiou等人，Gene Therapy 9:398-406, 2002)、間質輸注/對流增強遞送(例如，參見Bobo等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 91 :2076-2080, 1994)及在腦中植入遞送裝置(例如，參見Gill等人，Nature Med. 9:589-595, 2003；及Gliadel Wafers™, Guildford)。
在障壁中產生開口之方法包括(但不限於)超音波(例如，參見美國專利公開案第2002/0038086號)、滲透壓(例如，藉由投與高滲甘露醇(Neuwelt, E. A.，Implication of the Blood-Brain Barrier and its Manipulation, 第1卷及第2卷, Plenum Press, N.Y., 1989))及藉由(例如)舒緩肽(bradykinin)或透化劑A-7 (permeabilizer A-7)之透化(例如，參見美國專利第5,112,596號、第5,268,164號、第5,506,206號及第5,686,416號)。
跨越血腦障壁運輸式I化合物(或其實施例)之基於脂質之方法包括(但不限於)將式I或I-I之化合物(或其實施例)包封於脂質體中，該等脂質體與結合至血腦障壁之血管內皮上之受體的抗體結合片段偶合(例如，參見美國專利公開案第2002/0025313號)，及將式I化合物(或其實施例)包覆於低密度脂蛋白粒子(例如，參見美國專利公開案第2004/0204354號)或載脂蛋白E (例如，參見美國專利公開案第2004/0131692號)中。
跨越血腦障壁運輸式I化合物(或其實施例)之基於受體及通道之方法包括(但不限於)使用醣皮質激素阻斷劑以增加血腦障壁之滲透性(例如，參見美國專利公開案第2002/0065259號、第2003/0162695號及第2005/0124533號)；使鉀通道活化(例如，參見美國專利公開案第2005/0089473號)；抑制ABC藥物運輸蛋白(例如，參見美國專利公開案第2003/0073713號)；用運鐵蛋白包覆式I或I-I之化合物(或其實施例)且調節一或多種運鐵蛋白受體之活性(例如，參見美國專利公開案第2003/0129186號)，及使抗體陽離子化(例如，參見美國專利第5,004,697號)。
對於大腦內使用，在某些實施例中，化合物可藉由輸注至CNS之儲液室中來連續投與，但濃注注射亦可接受。抑制劑可投與至腦室中或以其他方式引入至CNS或脊髓液中。投與可藉由使用留置導管及連續投與器件(例如幫浦)來實施，或其可藉由植入(例如，大腦內植入持續釋放媒介)來投與。更特定而言，抑制劑可經由長期植入之套管注射或借助於微滲幫浦(osmotic minipump)長期輸注。經由小管將蛋白質遞送至腦室之皮下幫浦可獲得。高度精細之幫浦可經由皮膚再填充，且可在不進行外科手術之情形下設定其遞送速率。涉及皮下幫浦裝置或經由完全植入之藥物遞送系統連續腦室內輸注之適宜投與方案及遞送系統之實例係用於向阿茲海默氏病患者及帕金森氏病動物模型投與多巴胺、多巴胺激動劑及膽鹼能激動劑之彼等，如Harbaugh, J. Neural Transm.增刊24:271, 1987；及DeYebenes等人，Mov. Disord. 2: 143, 1987所闡述。 適應症及治療方法
本發明之化合物抑制RIP1激酶活性。因此，本發明之化合物可用於治療由此路徑介導且與發炎及/或壞死性細胞死亡相關之疾病及病症。
在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係神經變性疾病或病症。在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係新紐蛋白病變，諸如帕金森氏病、路易氏體失智症、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群。在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係tau蛋白病變，諸如阿茲海默氏病及額顳失智症。在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係脫髓鞘疾病，諸如多發性硬化症。
在一些實施例中，欲治療之疾病及病症係其他神經變性疾病，諸如肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病、局部缺血及中風。如本文所提供之欲治療之其他例示性神經變性疾病包括(但不限於)顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係阿茲海默氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係帕金森氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係亨庭頓氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係多發性硬化症。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係肌萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係脊髓性肌肉萎縮症(SMA)。
在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係發炎性疾病或病症。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係選自由以下組成之群：發炎性腸病(包括克隆氏病及潰瘍性結腸炎)、牛皮癬、視網膜剝離、色素性視網膜炎、黃斑變性、胰臟炎、特應性皮炎、關節炎(包括類風濕性關節炎、骨關節炎、椎關節炎、痛風、全身型幼年特發性關節炎(SoJIA)、牛皮癬性關節炎)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、薛格連氏症候群、全身性硬皮症、抗磷脂症候群(APS)、血管炎、肝損害/疾病(非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自體免疫肝炎、自體免疫肝膽疾病、原發性硬化性膽管炎(PSC)、乙醯胺酚毒性、肝毒性)、腎損害/損傷(腎炎、腎移植、手術、腎毒性藥物(例如順鉑)之投與、急性腎損傷(AKI)、乳糜瀉病、自體免疫特發性血小板減少紫斑症、移植排斥、實體器官之局部缺血再灌注損傷、敗血症、全身性發炎性反應症候群(SIRS)、腦血管意外(CVA、中風)、心肌梗塞(MI)、動脈粥樣硬化、亨庭頓氏病、阿茲海默氏病、帕金森氏病、肌萎縮性脊髓側索硬化症(ALS)、脊髓性肌肉萎縮症(SMA)、過敏性疾病(包括氣喘及特應性皮炎)、多發性硬化症、I型糖尿病、韋格納氏肉芽腫、肺結節病、貝賽特氏病、介白素-1轉化酶(ICE，亦稱為半胱天冬酶-1)相關之發燒症候群、慢性阻塞性肺病(COPD)、腫瘤壞死因子受體相關之週期性症候群(TRAPS)、牙周炎、NEMO缺乏症候群(F-κ-B基本調節基因(亦稱為IKKγ或IKKG)缺乏症候群)、HOIL-1缺乏((亦稱為RBCKl)原血紅素氧化之IRP2泛素連接酶-1缺乏)、線性泛素鏈總成複合物(LUBAC)缺乏症候群、血液及實體器官惡性病、細菌性感染及病毒性感染(諸如結核病及流行性感冒)及溶酶體儲積病(具體而言，高雪氏病，且包括GM2神經節苷脂儲積病、α-甘露醣儲積症、天冬胺醯葡萄糖胺尿症、膽固醇酯儲積病、慢性己醣胺酶A缺乏、胱胺酸病、唐尼病、法布里病、法伯病、岩藻糖苷儲積病、半乳糖唾液酸儲積病、GM1神經節苷脂儲積病、黏脂儲積病、嬰兒期游離唾液酸儲積病、幼年己醣胺酶A缺乏、克拉伯病、溶酶體酸性脂肪酶缺乏、異染性腦白質營養不良、黏多醣累積症、多硫酸酯酶缺乏、尼曼-匹克氏病、神經元蠟樣脂褐質儲積症、龐貝病、緻密成骨不全症、山德霍夫氏病、辛德勒氏病、唾液酸儲積病、泰-薩克斯病及沃爾曼病)。
在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係發炎性腸病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係克隆氏病。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係潰瘍性結腸炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係青光眼。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係牛皮癬。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係類風濕性關節炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係脊椎關節炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係幼年特發性關節炎。在一些實施例中，欲治療之疾病或病症係骨關節炎。
在一些實施例中，本文所提供之治療方法係治療上文所列示疾病或病症之一或多種症狀。
本文亦提供本發明之化合物在治療中之用途。在一些實施例中，本文提供本發明之化合物用於治療或預防上述疾病及病症之用途。本文亦提供本發明之化合物用於製造用於治療或預防上述疾病及病症之藥劑之用途。
本文亦提供治療需要此治療之哺乳動物之如上文所提供疾病或病症之方法，其中該方法包括向該哺乳動物投與治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，該哺乳動物係人類。
本文亦提供治療需要此治療之哺乳動物之疾病或病症之症狀的方法，該疾病或病症係選自由以下組成之群：腸易激病症(IBD)、腸易激症候群(IBS)、克隆氏病、潰瘍性結腸炎、心肌梗塞、中風、創傷性腦損傷、動脈粥樣硬化、腎、肝及肺之缺血再灌注損傷、順鉑誘發之腎損傷、敗血症、全身性發炎性反應症候群(SIRS)、胰臟炎、牛皮癬、色素性視網膜炎、視網膜變性、慢性腎病、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)及慢性阻塞性肺病(COPD)，其中該方法包括向該哺乳動物投與治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本文亦提供治療需要此治療之人類患者之疾病或病症之方法，該疾病或病症係選自上文所提供之彼等疾病或病症，其中該方法包括以經口可接受之醫藥組合物形式經口投與治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 組合療法
在本文所提供疾病及病症之治療中，本發明之化合物可與一或多種本發明之其他化合物或一或多種其他治療劑以其任何組合形式組合。舉例而言，本發明之化合物可與已知可用於治療選自上文所列舉彼等之疾病或病症之其他治療劑組合來同時、依序或分開投與。
如本文所用，「組合」係指一或多種本發明之化合物與一或多種本發明之其他化合物或一或多種其他治療劑之任何混合物或排列。除非上下文另外明確說明，否則「組合」可包括同時或依序遞送本發明之化合物與一或多種治療劑。除非上下文另外明確說明，否則「組合」可包括本發明之化合物與另一治療劑之劑型。除非上下文另外明確說明，否則「組合」可包括本發明之化合物與另一治療劑之投與途徑。除非上下文另外明確說明，否則「組合」可包括本發明之化合物與另一治療劑之調配物。劑型、投與途徑及醫藥組合物包括(但不限於)本文所闡述之彼等劑型、投與途徑及醫藥組合物。
在一些實施例中，本文所提供之化合物可與如WO 2016/027253中所列舉之另一治療活性劑組合，該案之內容係以全文引用的方式併入本文中。在此等實施例中，WO 2016/027253中所列舉組合中之抑制RIP1激酶之化合物由本揭示案之式I化合物替代。
在一些實施例中，本文所提供之化合物可與DLK抑制劑組合以用於治療神經變性疾病及病症，該等疾病及病症係諸如本文中別處所列示之彼等疾病及病症，且包括(但不限於)以下：帕金森氏病、路易氏體失智症、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群、阿茲海默氏病、額顳失智症、脫髓鞘疾病(諸如多發性硬化症)、肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病、局部缺血、中風、顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺及皮質基底節變性。DLK抑制劑闡述於(例如) WO 2013/174780、WO 2014/177524、WO 2014/177060、WO 2014/111496、WO 2015/091889及WO 2016/142310中。 實例
藉由參考以下實例可更全面地理解本發明。然而，該等實例不應解釋為限制本發明之範圍。
該等實例用以為熟習此項技術者提供製備及使用本發明之化合物、組合物及方法之指導。儘管闡述本發明之具體實施例，但熟習此項技術者應瞭解，可在不背離本發明之精神及範圍之情形下作出各種變化及修改。
所述實例中之化學反應可容易地適用於製備多種本發明之其他化合物，且製備本發明化合物之替代方法視為在本發明之範圍內。舉例而言，本發明之非例示性化合物之合成可藉由熟習此項技術者所明瞭之修改成功地實施，例如藉由利用業內已知之其他適宜試劑適當地保護干擾基團(例如藉由利用除所描述之彼等試劑以外之業內已知之其他適宜試劑適當地保護干擾基團)，及/或藉由對反應條件進行常規修改來實施。
在下文實例中，除非另有指示，否則所有溫度均係以攝氏度來闡述。市售試劑係購自諸如Aldrich Chemical Company、Lancaster、TCI或Maybridge等供應商，且除非另有指示，否則不經進一步純化即使用。下文所闡述之反應通常係在氮氣或氬氣正壓下或用乾燥管(除非另有說明)於無水溶劑中進行，且反應燒瓶通常裝有橡膠隔板以用於經由注射器引入受質及試劑。玻璃器皿經烘箱乾燥及/或熱乾燥。使用三甲基矽烷(TMS)或殘餘非氘化溶劑峰作為參考標準，於氘化CDCl3 、d6 -DMSO、CH3 OD或d6 -丙酮溶劑溶液(以ppm報告)中獲得1 H NMR光譜。在報告峰多重性時，使用以下縮寫：s (單峰)、d (雙重峰)、t (三重峰)、q (四重峰)、m (多重峰)、br (寬峰)、dd (雙重峰之雙重峰)、dt (三重峰之雙重峰)。偶合常數在給出時係以Hz (赫茲)報告。
用於描述試劑、反應條件或設備之所有縮寫均意欲與以下縮寫列表中所述之定義一致。本發明之離散化合物之化學名稱通常係使用ChemDraw命名程式之結構命名特徵來獲得。縮寫 ACN 乙腈 Boc第三丁氧基羰基 DAST 二乙胺基三氟化硫 DCE 1,2-二氯乙烷 DCM 二氯甲烷 DMF N,N-二甲基甲醯胺 DMSO 二甲基亞碸 DPPH 2,2-二苯基-1-苦味基苯肼基 HPLC 高壓液相層析 LCMS 液相層析質譜法 PCC 氯鉻酸吡啶鎓 RP 反相 RT或RT 滯留時間 SEM 2-(三甲基矽基)乙氧基甲基 SFC 超臨界流體層析 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃合成方案
除下文實例之具體合成方法以外，本發明之其他化合物可(例如)根據以下合成方案來製備。
在遵循下文方法9之步驟1-5之後，遵循方案1以製備偕-二氟代部分：方案 1
使用多種親核劑遵循方案2以製備式I化合物之額外B環多樣性，該等親核劑包括(但不限於)鹵化物及氰化物源：方案 2
遵循方案3以製備式I之偕-二甲基B環取代之化合物：方案 3
下文實例中所用之以下中間體係根據WO 2017/004500 (其全文係以引用的方式併入本文中)中所闡述之程序來製備：
若在具體方法中未說明，則任何所利用之N-甲氧基-N-甲基-烷基、芳基、雜芳基或雜環羧醯胺係以與下文方法5中順式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺相同之方式來製備。方法 1 ：化合物實例 1 及 2 實例 1 實例 2 [(1S,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及 [(1R,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.53 mmol)及順式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(157 mg, 1.06 mmol)於四氫呋喃(12 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.64 mL, 1.60 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/0.225% HCl)純化殘餘物。藉由對掌性SFC進一步分離外消旋物質，得到任意分配之以下：
[(1S,2S)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.635 min) (4.0 mg, 2.5%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.39 (m, 3H), 7.30 - 7.28 (m, 2H), 6.20 - 6.18 (m, 0.5H), 6.06 - 6.04 (m, 0.5H), 5.65 - 5.64 (m, 1H), 5.04 - 5.02 (m, 0.5H), 4.90 - 4.87 (m, 0.5H), 3.80 - 3.74 (m, 1H), 3.25 - 3.21 (m, 1H), 2.88 - 2.81 (m, 1H), 2.03 - 1.96 (m, 1H), 1.34 - 1.28 (m, 1H)。LCMS RT = 1.662 min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.662 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。
[(1R,2R)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.995 min) (15.9 mg, 10%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.30 - 7.28 (m, 2H), 6.21 - 6.18 (m, 0.5H), 6.06 - 6.05 (m, 0.5H), 5.66 - 5.65 (m, 1H), 5.05 - 5.04 (m, 0.5H), 4.90 - 4.87 (m, 0.5H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 3.23 - 3.20 (m, 1H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.02 - 1.96 (m, 1H), 1.34 - 1.30 (m, 1H)。LCMS RT = 1.654 min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.654 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。
SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 ，B：異丙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5mL/min，管柱溫度35℃。方法 2 ：化合物實例 3 及 4 實例 3 實例 4 [(1S,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及 [(1R,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向(5R,7R)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.53 mmol)及順式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(156.5 mg, 1.06 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.64 mL, 1.60 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(30 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈粉色固體之[順式-2-氟環丙基]-[(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(35 mg, 22.5%)。藉由對掌性SFC分離外消旋物質，得到任意分配之以下：
[(1S,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 (峰1，滯留時間= 4.787 min) (5.9 mg, 17%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.39 (m, 3H), 7.28 - 7.27 (m, 2H), 6.13 - 6.11 (m, 1H), 5.99 - 5.97 (m, 1H), 5.53 - 5.49 (m, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.27 - 3.24 (m, 1H), 3.03 - 2.96 (m, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 1H), 1.29 - 1.24 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.846 min,m/z = 289.9 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.846 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.9。
[( 1R,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 (峰2，滯留時間= 5.711 min) (11.7 mg, 33%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.37 (m, 3H), 7.28 - 7.27 (m, 2H), 6.13 - 6.11 (m, 1H), 5.99 - 5.97 (m, 1H), 5.53 - 5.50 (m, 1H), 3.69 - 3.63 (m, 1H), 3.27 - 3.23 (m, 1H), 3.03 - 2.96 (m, 1H), 2.23 - 2.16 (m, 1H), 1.29 - 1.24 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.849 min,m/z = 289.9 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.849 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.9。
SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：異丙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5mL/min，管柱溫度：35℃。對掌性 SFC 純化及分析條件：
在下表中所提供之方法中，溶劑A係二氧化碳且溶劑B係於CH3 OH中之0.1% NH4 (aq)。 方法 SP 5 實例52- 羥基 -2- 甲基 -1-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
任意分配之2-羥基-2-甲基-1-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(10.94 mg，43%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.50 - 7.33 (m, 2H), 7.29 - 7.14 (m, 2H), 6.40 - 6.05 (m, 1H), 5.81 - 5.63 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 2.98 - 2.56 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.48 (s, 3H)。LC-MS RT = 4.029 min,m/z = 290.1 (M+H)+ 。方法 SP 6 實例62- 羥基 -2- 甲基 -1-[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
任意分配之2-羥基-2-甲基-1-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(11.1 mg，43%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.47 - 7.31 (m, 3H), 7.30 - 7.12 (m, 2H), 6.37 - 6.01 (m, 1H), 5.82 - 5.53 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 2.85 - 2.59 (m, 1H), 1.52 - 1.47 (m, 6H)。LC-MS RT = 4.029 min,m/z = 290.1 (M+H)+ 。方法 SP 37 實例372,2- 二甲基 -1-[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
任意分配之2,2-二甲基-1-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(2.84 mg，48%產率)。LC-MS RT = 5.26 min,m/z = 288.1 (M+H)+ 。方法 SP 38 實例382,2- 二甲基 -1-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
任意分配之2,2-二甲基-1-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(4.2 mg，77%產率)。LC-MS RT = 5.26 min,m/z = 288.1 (M+H)+ 。方法 SP 39 實例39(1- 甲基吡唑 -4- 基 )-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
任意分配之(1-甲基吡唑-4-基)-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(19.23 mg，77%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.69 (s, 1H), 8.18 (d,J = 0.7 Hz, 1H), 7.48 - 7.34 (m, 3H), 7.30 - 7.22 (m, 2H), 6.43 - 6.09 (m, 1H), 5.88 - 5.62 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.87 - 3.58 (m, 1H)。LC-MS RT = 3.99 min,m/z = 312.1 (M+H)+ 。方法 SP 40 實例40(1- 甲基吡唑 -4- 基 )-[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
任意分配之(1-甲基吡唑-4-基)-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(20.4 mg，82%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.68 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.48 - 7.33 (m, 3H), 7.32 - 7.06 (m, 2H), 6.43 - 6.08 (m, 1H), 5.92 - 5.62 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.96 - 2.57 (m, 1H)。LC-MS RT = 3.99 min,m/z = 312.1 (M+H)+ 。方法 3 實例72- 苯基 -1-[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 乙酮
在氮氣下在-78℃下向[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(100 mg, 0.363 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液添加苄基氯化鎂(於四氫呋喃中2 M，0.20 mL, 0.400 mmol)。添加後，將反應混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(1 mL)來淬滅。用乙酸異丙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮至乾燥。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於庚烷中之0%至100%乙酸異丙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之2-苯基-1-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]乙酮(80 mg，69%產率)。LCMS RT = 5.24 min,m/z = 322.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.1%甲酸經10 min)，滯留時間5.24 min，ESI+實驗值[M+H] = 322.1。方法 4 實例8 實例9[(1S,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及 [(1R,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向(5R,7R)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.53 mmol)及反式-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(156 mg, 1.06 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.64 mL, 1.60 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(30 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈粉色固體之[反式-2-氟環丙基]-[(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(35 mg, 23%)。藉由對掌性SFC進一步分離此外消旋物質，得到任意分配之以下：
[(1S,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 (峰1，滯留時間= 2.836 min) (14.3 mg, 40%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.39 (m, 3H), 7.28 - 7.27 (m, 2H), 6.13 - 5.97 (m, 1H), 5.54 - 5.51 (m, 1H), 5.02 - 4.84 (m, 1H), 3.69 - 3.53 (m, 2H), 3.03 - 2.97 (m, 1H), 1.70 - 1.63 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.866 min,m/z = 289.9 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.866 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.9。
[(1R,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 (峰2，滯留時間= 3.725 min) (11.3 mg, 32%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.39 (m, 3H), 7.28 - 7.27 (m, 2H), 6.12 - 5.97 (m, 1H), 5.54 - 5.50 (m, 1H), 5.03 - 4.87 (m, 1H), 3.69 - 3.51 (m, 2H), 3.04 - 2.97 (m, 1H), 1.70 - 1.62 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.865 min,m/z = 289.9 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.865 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.9。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：甲醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min。方法 5 實例10( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-[ 外消旋 -(1S,2S)-2- 氟環丙基 ] 甲酮 步驟 1 ：順式 -2- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基環丙烷甲醯胺
將順式-2-氟環丙烷甲酸(500 mg, 4.80 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(610 mg, 6.25 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(2375 mg, 6.25 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1552 mg, 12.0 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。將該混合物傾倒至水(10 mL)中，且用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(420 mg, 59%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.87 - 4.67 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.35 - 2.33 (m, 1H), 1.94 - 1.86 (m, 1H), 1.11 - 1.05 (m, 1H)。 步驟 2 ： ( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-[ 外消旋 -(1S,2S)-2- 氟環丙基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)及順式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(52 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.21 mL, 0.53 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-[外消旋-(1S,2S)-2-氟環丙基]甲酮(2.0 mg, 4%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.37 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 6.19 - 6.18 (m, 0.5H), 6.04 - 6.03 (m, 0.5H), 5.67 - 5.61 (m, 1H), 5.08 - 4.89 (m, 1H), 3.81 - 3.70 (m, 1H), 3.26 - 3.16 (m, 1H), 2.91 - 2.75 (m, 1H), 2.07 - 1.90 (m, 1H), 1.36 - 1.29 (m, 1H)。LCMS RT = 1.038 min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.038 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。方法 6 實例11(2,2- 二氟環丙基 )-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 2,2- 二氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 - 環丙烷甲醯胺
將2,2-二氟環丙烷甲酸(300 mg, 2.46 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(312 mg, 3.19 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(1214 mg, 3.19 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(794 mg, 6.14 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。將該混合物傾倒至水(10 mL)中，且用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2,2-二氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(200 mg, 49%)。LCMS RT = 0.427 min,m/z = 166.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.427 min，ESI+實驗值[M+H] = 166.1。 步驟 2 ： (2,2- 二氟環丙基 )-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)及2,2-二氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(59 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.25 mL, 0.62 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(2,2-二氟環丙基)-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(10.6 mg, 19%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.39 (m, 3H), 7.30 - 7.29 (m, 2H), 6.21 - 6.05 (m, 1H), 5.69 - 5.64 (m, 1H), 3.84 - 3.74 (m, 2H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.32 - 2.27 (m, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H)。LCMS RT = 0.875 min,m/z = 307.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.875 min，ESI+實驗值[M+H] = 307.9。方法 7 實例12苯基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
根據方法3，自[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯及苯基鎂製備苯基-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，0%至100%乙酸異丙酯於庚烷)純化粗製殘餘物，得到呈白色固體之最終產物(17 mg, 30%)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.20 - 8.12 (m, 2H), 7.74 - 7.65 (m, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 2H), 7.48 - 7.33 (m, 3H), 7.32 - 7.24 (m, 2H), 6.28 (ddd, J = 56.4, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.78 (ddd, J = 8.5, 6.5, 3.1 Hz, 1H), 3.78 (dddd, J = 25.8, 15.4, 8.5, 7.1 Hz, 1H), 2.74 (dddd, J = 26.7, 15.2, 3.2, 2.0 Hz, 1H)。LC-MS RT = 5.04 min, m/z = 308.1 (M+H)+ 。 LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.1%甲酸經10 min)，滯留時間5.04 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1.1方法 8 實例13 步驟 1 ： (E )- 苯甲醛肟
向苯甲醛(45.0 g, 424.1 mmol)於乙醇(100 mL)中之溶液添加碳酸鈉(112.3 g, 1060.1 mmol)及羥胺鹽酸鹽(35.3 g, 508.9 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌3 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮且用水(50 mL)稀釋殘餘物。用乙酸乙酯(3 × 150 mL)萃取所得混合物。用鹽水(60 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製(E )-苯甲醛肟(51.0 g, 99%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。 步驟 2 ： 3- 苯基 -4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
向(E )-苯甲醛肟(20.0 g, 165.1 mmol)於1,4-二噁烷(500 mL)中之溶液添加丙烯酸甲酯(14.2 g, 165.1 mmol)、碘化鈉(24.7 g, 165.1 mmol)、2,6-二甲基吡啶(17.6 g, 165.1 mmol)及次氯酸第三丁基酯(17.9 g, 165.1 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌24 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之3-苯基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(25.0 g, 74%)。LCMS RT = 0.871 min,m/z = 206.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.871 min，ESI+實驗值[M+H] =206.2。 步驟 3 ： 3- 羥基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮
使3-苯基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(25.0 g, 121.8 mmol)及鈀(於碳上10%，2.5 g)於乙醇(800 mL)中之混合物在25℃下氫化(50 psi) 2 h且接著過濾，且將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之粗製3-羥基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(18.0 g, 83%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 0.270 min,m/z = 177.8 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.270 min，ESI+實驗值[M+H] =177.8。 步驟 4 ：順式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮及反式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮 向3-羥基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(15.0 g, 84.6 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(19.1 g, 126.9 mmol)及咪唑(11.5 g, 169.3 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到 順式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮 (12.4 g, 51%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.37 - 7.25 (m, 5H), 4.88 - 4.53 (m, 1H), 4.54 - 4.46 (m, 1H), 2.89 - 2.79 (m, 1H), 1.80 - 1.71 (m, 1H), 0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.19 - 0.12 (m, 6H)及 反式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮 (9.3 g, 38%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.34 (m, 2H), 7.29 - 7.24 (m, 3H), 4.87 - 4.80 (m, 1H), 4.44 - 4.41 (m, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.27 - 2.22 (m, 1H), 0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.16 - 0.13 (m, 6H)。 步驟 5 ：順式 - 1- 胺基 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮
在0℃下向順式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(12.4 g, 42.8 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(400 mL)中之溶液緩慢添加氫化鈉(60%, 2.6 g, 64.1 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌20 min，且隨後添加O-(二苯基磷醯基)羥胺(14.9 g, 64.1mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製順式 - 1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(9.5 g, 73%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 0.877 min,m/z = 307.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.877 min，ESI+實驗值[M+H] =307.0。 步驟 6 ： 2-[[ 順式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -2- 側氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -1- 基 ] 胺基 ]-2- 亞胺基 - 乙酸乙基酯
向順式 - 1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(9.5 g, 31.0 mmol)於乙醇(250 mL)中之溶液添加2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(6.7 g, 46.5 mmol)。將反應混合物在60℃下攪拌6 h，且隨後在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製2-[[順式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-2-側氧基-5-苯基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(10.6 g, 84%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 2.106 min,m/z =406.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間2.106 min，ESI+實驗值[M+H] =406.2。 步驟 7 ：順式 - 7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向2-[[順式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-2-側氧基-5-苯基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(10.6 g, 26.1 mmol)於甲苯(200 mL)中之溶液添加對甲苯磺酸(4.5 g, 26.1 mmol)。將反應混合物在120℃下加熱24 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至80%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式 - 7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(6.5 g, 64%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 8 ：順式 - 7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將2-[[順式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-2-側氧基-5-苯基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(3.1 g, 7.6 mmol)及第三丁基氟化銨(於THF中1.0 M，7.6 mL, 7.6 mmol)於四氫呋喃(60 mL)中之混合物在60℃下加熱18 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至100%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式 - 7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.4 g, 69%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ7.39 - 7.32 (m, 5H), 5.73 (d,J = 3.5 Hz, 1H), 5.50 (m, 1H), 4.41 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 3.73 - 3.65 (m, 1H), 2.76 (td,J = 4.5 Hz, 13.9 Hz, 1H), 1.35 (t,J = 7.1 Hz, 3H)。 步驟 1 ：反式 - 7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在0℃下向順式 -7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(100 mg, 0.37 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液添加二乙胺基三氟化硫(176.9 mg, 1.10 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2 h，且接著藉由添加水(20 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取該混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.5)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之反式 - 7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(30 mg, 30%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.40 - 7.37 (m, 3H), 7.14 - 7.12 (m, 2H), 6.14 (d,J = 5.2 Hz, 0.5H), 6.00 (d,J = 5.2 Hz, 0.5H), 5.74 - 5.71 (m, 1H), 4.51 - 4.45 (m, 2H), 3.42 - 3.35 (m, 1H), 3.07 - 2.96 (m, 1H), 1.42 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。 步驟 2 ：反式 - 7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
向反式 - 7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(30 mg, 0.11 mol)於四氫呋喃(4 mL)及水(1 mL)中之溶液添加氫氧化鋰一水合物(14 mg, 0.33 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌2 h，且接著在減壓下濃縮。藉由添加鹽酸(2 N)將殘餘物調整至pH = 5。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製反式 - 7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(13 mg, 48%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1-[ 外消旋 -(5R,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向反式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(15 mg, 0.05 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加乙基溴化鎂(於THF中3 M，0.03 mL, 0.10 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之34-64%乙腈/ 0.05%鹽酸鹽)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-[外消旋-(5R,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(7.4 mg, 50%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.30 - 7.26 (m, 2H), 6.27 - 6.26 (m, 0.5H), 6.14 - 6.12 (m, 0.5H), 5.87 - 5.84 (m, 1H), 3.44 - 3.41 (m, 1H), 3.12 - 3.02 (m, 3H), 1.16 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.840 min,m/z = 260.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.840 min，ESI+實驗值[M+H] = 260.1。方法 9 實例14( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-[1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ] 甲酮 步驟 1 ： 3,5- 二溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑
在0℃下向3,5-二溴-1h-1,2,4-三唑(150.0 g, 661.2 mmol)於四氫呋喃(1500 mL)中之溶液緩慢添加對甲苯磺酸(17.1 g, 99.2 mmol)，之後添加3,4-二氫-2h-哌喃(166.9 g, 1983.6 mmol)。添加後，將反應混合物在70℃下加熱3 h且在減壓下濃縮。將殘餘物傾倒至水(500 mL)中，且藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液調整至pH = 9。用乙酸乙酯(3 × 400 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。用甲醇(2 × 50 mL)洗滌所得粗產物，在減壓下乾燥，得到呈白色固體之粗製3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(155 g, 75%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 5.49 - 5.46 (m, 1H), 4.12 - 3.99 (m, 1H), 3.72 - 3.61 (m, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.18 - 2.07 (m, 1H), 1.98 - 1.90 (m, 1H), 1.78 - 1.60 (m, 3H)。 步驟 2 ： 1- 苯基丁 -3- 烯 -1- 醇
向苯甲醛(130 g, 1.23 mol)於四氫呋喃(1000 mL)中之經冷卻(0℃)溶液經30 min添加烯丙基氯化鎂(於THF中2 M，858 mL, 1.72 mol)。添加後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌2 h。接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(1000 mL)使該混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 500 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之1-苯基丁-3-烯-1-醇(140 g, 77%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 7.37 - 7.34 (m, 4H), 7.29 - 7.26 (m, 1H), 5.83 - 5.75 (m, 1H), 5.21 - 5.08 (m, 2H), 4.76 - 4.69 (m, 1H), 2.55 - 2.45 (m, 2H), 2.12 (d,J = 2.8 Hz, 1H)。 步驟 3 ：第三丁基二甲基 ((1- 苯基丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 矽烷
向1-苯基-3-丁烯-1-醇(29.0 g, 195.7 mmol)於二氯甲烷(400 mL)中之經攪拌溶液添加咪唑(27.0 g, 391.6 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(39.0 g, 254.4 mmol)。添加後，將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且接著藉由添加水(200 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，100%石油醚)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之第三丁基-二甲基-(1-苯基丁-3-烯氧基)矽烷(43.0 g, 84%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 4 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3- 苯基丙醛
向第三丁基-二甲基-(1-苯基丁-3-烯氧基)矽烷(50.0 g, 190.5 mmol)於四氫呋喃/水(600 mL, 1:1)中之溶液添加四氧化鋨(968 mg, 3.8 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(163 g, 762.0 mmol)。將所得混合物在30℃下再攪拌2 h，且接著藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(500 mL)來淬滅。將混合物攪拌30 min，且接著用乙酸乙酯(3 × 400 mL)萃取。用水(200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-苯基-丙醛(33.0 g, 65%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 9.94 (t,J = 2.4 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 4.2 Hz, 4H), 7.44 - 7.39 (m, 1H), 5.37 - 5.34 (m, 1H), 2.99 - 2.97 (m, 1H), 2.80 - 2.75 (m, 1H), 1.01 (s, 9H), 0.19 (s, 3H), 0.00 (s, 3H)。 步驟 5 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3- 苯基丙 -1- 醇
在N2 氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(39.0 g, 125.4 mmol)於四氫呋喃(400 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，55.0 mL, 137.5 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-苯基-丙醛(33.0 g, 124.2 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(500 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之1-(3-溴-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-3-苯基丙-1-醇(50.0 g, 80%)。 步驟 6 ：反式 -2- 溴 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
向1-(3-溴-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-3-苯基丙-1-醇(50.0 g, 100.7 mmol)於二氯甲烷(150 mL)中之經攪拌溶液緩慢添加三氟乙酸(150 mL)。將所得混合物在50℃下加熱2 h，且接著在減壓下濃縮。用飽和碳酸氫鈉水溶液將殘餘物調整至pH = 9，且用二氯甲烷(3 × 200 mL)萃取。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至32%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之反式-2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(5.5 g, 20%) (亦獲得呈反式/順式產物之4:3混合物之第二級分(8.5 g, 30%))。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 7.46 - 7.32 (m, 3H), 7.15 (d,J = 7.6 Hz, 2H), 5.65 (t,J = 6.6 Hz, 1H), 5.50 (br s, 1H), 5.45 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 3.19 - 3.11 (m, 1H), 3.01 - 2.92 (m, 1H)。LCMS RT = 0.682 min, m/z = 279.8 [M +H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.682 min，ESI+實驗值[M +H] = 279.8。 步驟 7 ： (5S,7S)-2- 溴 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑及 (5R,7R)-2- 溴 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向反式-2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(3.0 g, 10.71 mmol)於二氯甲烷(60 mL)中之經攪拌溶液緩慢添加二乙胺基三氟化硫(7.8 g, 48.19 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2.5 h，且接著在0℃下緩慢添加至經攪拌之飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)中。用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取該混合物。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之外消旋順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(1.5 g, 49%)及呈白色固體之外消旋反式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(650 mg, 21%)。
順式 -2- 溴 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 ：1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 7.31 - 7.24 (m, 3H), 7.17 - 7.07 (m, 2H), 5.97 - 5.77 (m, 1H), 5.37 - 5.27 (m, 1H), 3.52 - 3.37 (m, 1H), 2.84 - 2.70 (m, 1H)。LCMS RT = 0.632 min, m/z = 281.9 [M +H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.632 min，ESI+實驗值[M +H] = 281.9。
反式 -2- 溴 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 ：1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 7.58 - 7.29 (m, 3H), 7.24 - 7.05 (m, 2H), 6.14 - 5.93 (m, 1H), 5.70 - 5.65 (m, 1H), 3.41 - 3.25 (m, 1H), 3.04 - 2.87 (m, 1H)。
藉由對掌性SFC進一步分離外消旋順式物質，得到任意分配之以下：
(5R,7R)-2- 溴 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 (峰1，滯留時間= 2.963 min) (350 mg, 44%)，呈白色固體。
(5S,7S)-2- 溴 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 (峰2，滯留時間= 3.174 min) (350 mg, 44%)，呈白色固體。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min。 步驟 8 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -1-( 三氟甲基 ) 環丙烷甲醯胺
將1-(三氟甲基)環丙烷甲酸(400 mg, 2.60 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(329 mg, 3.37 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(1283 mg, 3.37mmol)及N,N-二異丙基乙胺(838 mg, 6.49 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用水(20 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至25%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈輕質油狀物之N-甲氧基-N-甲基-1-(三氟甲基)環丙烷甲醯胺(330 mg, 64%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 3.74 (s, 3H), 3.29 (s, 3H), 1.37 - 1.17 (m, 4H)。 步驟 9 ： ( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-[1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-1-(三氟甲基)環丙烷甲醯胺(70 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(4 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.1 mL, 0.25 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(5 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC ((於水中之45-75%乙腈/0.05%氫氧化氨))純化殘餘物，得到呈紅色固體之任意分配之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-[1-(三氟甲基)環丙基]甲酮(14.1 mg, 23%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.35 (m, 3H), 7.24 - 7.22 (m, 2H), 6.15 - 5.99 (m, 1H), 5.61 - 5.60 (m, 1H), 3.77 - 3.68 (m, 1H), 2.84 - 2.77 (m, 1H), 2.27 - 2.17 (m, 2H), 1.60 - 1.55 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.933 min, m/z = 339.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間0.933 min，ESI+實驗值[M+H] = 339.9。方法 10 實例15( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-(3- 甲基氧雜環丁 -3- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N,3- 二甲基 - 氧雜環丁烷 -3- 甲醯胺
將3-甲基氧雜環丁烷-3-甲酸(300 mg, 2.58 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(328 mg, 3.36 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(1277 mg, 3.36 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(835 mg, 6.46 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。將該混合物傾倒至水(10 mL)中，且用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N,3-二甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(120 mg, 29.2%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.97 (d,J = 6.4 Hz, 2H), 4.30 (d,J = 6.4 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 1.67 (s, 3H)。 步驟 2 ： ( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-(3- 甲基氧雜環丁 -3- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(40 mg, 0.14 mmol)及N-甲氧基-N,3-二甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(45 mg, 0.28 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.17 mL, 0.43 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，且藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-(3-甲基氧雜環丁-3-基)甲酮(11.5 mg, 27%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.37 (m, 3H), 7.26 - 7.23 (m, 2H), 6.17 - 6.01 (m, 1H), 5.65 - 5.63 (m, 1H), 5.08 - 5.03 (m, 2H), 4.52 - 4.48 (m, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 1H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 1.75 (s, 3H)。LCMS RT = 0.816 min,m/z = 302.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.816 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.0。方法 11 實例16( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-[ 外消旋 -(1S,2R)-2- 氟環丙基 ] 甲酮 步驟 1 ：反式 -2- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 - 環丙烷甲醯胺
將反式-2-氟環丙烷-1-甲酸(100 mg, 0.96 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(122 mg, 1.25 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(475 mg, 1.25 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(310 mg, 2.40 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。將該混合物傾倒至水(10 mL)中，且用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之反式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(70 mg, 50%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.89 - 4.71 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.62 - 2.60 (m, 1H), 1.48 - 1.35 (m, 2H)。LCMS RT = 0.292 min,m/z = 148.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.292 min，ESI+實驗值[M+H] = 148.1。 步驟 2 ： ( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-[ 外消旋 -(1S,2R)-2- 氟環丙基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(40 mg, 0.14 mmol)及反式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(42 mg, 0.28 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.07 mL, 0.18 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-[外消旋-(1S,2R)-2-氟環丙基]甲酮(3.3 mg, 7.6%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.42 - 7.37 (m, 3H), 7.28 - 7.27 (m, 2H), 6.13 - 5.97 (m, 1H), 5.54 - 5.52 (m, 1H), 5.03 - 4.85 (m, 1H), 3.71 - 3.51 (m, 2H), 3.04 - 2.94 (m, 1H), 1.70 - 1.62 (m, 2H)。LCMS RT = 0.862 min,m/z = 289.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.862 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.9。方法 12 實例171-(7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -2- 基 ) 丙 -1- 酮 步驟 1 ： 6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 醇
向咪唑(40.0 g, 587.5 mmol)、乙酸(1.8 mL)及1,4-二噁烷之溶液(600 mL)添加丙烯醛(58.8 mL, 881.3 mmol)。將所得混合物在110℃下攪拌24 h且冷卻至0℃。藉由過濾收集所得固體，用石油醚(200 mL)洗滌，得到呈白色固體之粗製6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-醇(50.0 g, 69%)。其原樣用於下一步驟中。 步驟 2 ： 3- 氯 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 醇
向6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-醇(10.0 g, 80.6 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液添加N-氯琥珀醯亞胺(10.8 g, 80.6 mmol)。將混合物在50℃下攪拌2 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於二氯甲烷中之0%至10%甲醇)純化殘餘物，得到呈白色固體之3-氯-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-醇(8.0 g, 63%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 3 ： 3- 氯 -2- 碘 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 醇
向3-氯-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-醇(5.6 g, 35.3 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之溶液添加N-碘琥珀醯亞胺(8.3 g, 37.1 mmol)。將混合物在60℃下加熱3 h且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於二氯甲烷中之0%至10%甲醇)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之3-氯-2-碘-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-醇(5.3 g, 53%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 4 ： 3- 氯 -2- 碘 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7(6H)- 酮
向3-氯-2-碘-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-醇(5.3 g, 18.6 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液添加二氧化錳(8.1 g, 93.2 mmol)。將混合物在40℃下加熱5 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮至乾燥，得到呈棕色固體之粗製3-氯-2-碘-5,6-二氫吡咯并[1,2-a]咪唑-7-酮(3.2 g, 61%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 5 ： N-[(Z)-(3- 氯 -2- 碘 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 亞基 ) 胺基 ]-4- 甲基 - 苯磺醯胺
將4-甲基苯磺醯肼(2.1 g, 11.3 mmol)及3-氯-2-碘-5,6-二氫吡咯并[1,2-a]咪唑-7-酮(3.2 g, 11.3 mmol)於乙醇(70 mL)中之混合物在90℃下加熱7 h且冷卻至15℃。藉由過濾收集所得固體且在減壓下乾燥，得到呈淡綠色固體之粗製N-[(Z)-(3-氯-2-碘-5,6-二氫吡咯并[1,2-a]咪唑-7-亞基)胺基]-4-甲基-苯磺醯胺(2.8 g, 54%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 6 ： 3- 氯 -2- 碘 -7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑
在N2 氣氛下將N-[(Z)-(3-氯-2-碘-5,6-二氫吡咯并[1,2-a]咪唑-7-亞基)胺基]-4-甲基-苯磺醯胺(1.8 g, 3.88 mmol)、苯基有機硼酸(710 mg, 5.82 mmol)、碳酸鉀(1.6 g, 11.65 mmol)於1,4-二噁烷(40 mL)中之混合物在110℃下加熱18 h。將混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺棕色固體之3-氯-2-碘-7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑(200 mg, 15%)。LCMS RT = 0.879 min,m/z = 334.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.879 min，ESI+實驗值[M+H] = 334.9。 步驟 7 ： 3- 氯 -7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -2- 甲酸甲基酯
將3-氯-2-碘-7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑(200 mg, 0.58 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(24 mg, 0.03 mmol)及三乙胺(0.4 mL, 2.9 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(24 mL) /甲醇(8 mL)中之混合物在CO (50 Psi)下在90℃下加熱18 h。經由短矽藻土墊過濾混合物且將濾液在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈淺棕色固體之3-氯-7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲酸甲基酯(140 mg, 87%)。LCMS RT = 0.676 min,m/z = 277.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.676 min，ESI+實驗值[M+H] = 277.0 步驟 8 ： 7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -2- 甲酸甲基酯
使3-氯-7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲酸甲基酯(120 mg, 0.43 mmol)及鈀(於碳上10%，103 mg，0.10 mmol，50%濕)於甲醇(50 mL)中之混合物在50℃下氫化(40 psi) 24 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲酸甲基酯(100 mg, 95%)，其原樣用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.85 - 7.60 (m, 1H), 7.40 - 7.25 (m, 4H), 4.70 - 4.55 (m, 1H), 4.40 - 4.15 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.30 - 3.20 (m, 1H), 2.75 - 2.70 (m, 1H), 1.70 - 1.60 (m, 1H)。LCMS RT = 0.513 min,m/z = 243.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.513 min，ESI+實驗值[M+H] = 243.1。 步驟 9 ： 7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -2- 甲酸
將7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲酸甲基酯(100 mg, 0.41 mmol)及氫氧化鋰一水合物(118 mg, 2.89 mmol)於四氫呋喃(2 mL)、水(1 mL)及甲醇(2 mL)中之混合物在25℃下加熱18 h。添加氫氧化鈉(100 mg)，且將混合物在40℃下再加熱2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於水(5 mL)中，且藉由添加2 M HCl調整至pH = 3。將所得混合物凍乾至乾燥，得到呈白色固體之粗製7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲酸(94 mg, 99%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 10 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -2- 甲醯胺
將7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲酸(60 mg, 0.26 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(77 mg, 0.79 mmol)、三乙胺(0.11 mL, 0.79 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(105 mg, 0.28 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之混合物在15℃下攪拌2 h。在減壓下濃縮該混合物。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.5)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-甲氧基-N-甲基-7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲醯胺(70 mg, 98%)。LCMS RT = 0.506 min,m/z = 272.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.506 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.1。 步驟 11 ： 1-(7- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -2- 基 ) 丙 -1- 酮
在N2 氣氛下向N-甲氧基-N-甲基-7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-甲醯胺(50 mg, 0.18 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液添加乙基溴化鎂(於THF中3.0 M，0.61 mL, 1.83 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(3 mL)來淬滅。將混合物在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈淺棕色固體之1-(7-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-2-基)丙-1-酮(4.6 mg, 9%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.86 (s, 1H), 7.35 - 7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.21 (m, 3H), 4.42 - 4.38 (m, 1H), 4.25 - 4.23 (m, 1H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 3.12 - 3.10 (m, 1H), 2.89 - 2.83 (m, 2H), 2.58 - 2.50 (m, 1H), 1.14 - 1.10 (m, 3H)。LCMS RT = 0.634 min,m/z = 241.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.634 min，ESI+實驗值[M+H] = 241.1。方法 13 實例18環丙基 -[ 外消旋 -(5R,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：反式 -7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將反式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(50 mg, 0.20 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(46 mg, 0.24 mmol)、1-羥基苯并三唑(5 mg, 0.04 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(12 mg, 0.20 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之混合物在20℃下攪拌18 h。在減壓下濃縮該混合物且藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.7)純化殘餘物，得到呈白色固體之反式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(30 mg, 51%)。 步驟 2 ：環丙基 -[ 外消旋 -(5R,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向反式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(15 mg, 0.05 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加環丙基溴化鎂(於THF中0.5 M，0.2 mL, 0.10 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/ 0.05%鹽酸鹽)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[外消旋-(5R,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(7.6 mg, 50%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.40 (m, 3H), 7.30 - 7.26 (m, 2H), 6.29 - 6.26 (m, 0.5H), 6.14 - 6.12 (m, 0.5H), 5.92 - 5.87 (m, 1H), 3.44 - 3.41 (m, 1H), 3.01 - 3.02 (m, 2H), 1.19 - 1.16 (m, 2H), 1.12 - 1.09 (m, 2H)。LCMS RT = 0.849 min,m/z = 272.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.849 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.0。方法 14 實例191-(6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ) 丙 -1- 酮 步驟 1 ： 3-( 羥基甲基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯及 4-( 羥基甲基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯
向丙-2-炔-1-醇(30.0 g, 535.14 mmol)於甲苯(300 mL)中之溶液添加2-重氮乙酸乙基酯(67.2 g, 588.66 mmol)。將反應混合物在110℃下攪拌5 h且冷卻至室溫。藉由過濾收集粗產物且用於石油醚中之10%乙酸乙酯(50 mL)洗滌，得到呈淺黃色固體之4-(羥基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(15.8 g, 17%)及3-(羥基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯之混合物(不可分離，1:3, 63.1 g, 69%)，其作為混合物用於下一步驟中。
3-(羥基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(主要異構物)：1 H NMR (DMSO-d6) 12.60 (1H, s, 寬峰)；6.70 (1H, s)；4.70 (1H, s)；4.35 (2H, q,J = 7.0 Hz)；4.45 (1H, s, 寬峰)；1.25 (3H, t,J = 7.0 Hz)。
4-(羥基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(次要異構物)：1 H NMR (DMSO-d6) 12.60 (1H, s, 寬峰)；7.65 (1H, s)；4.75 (1H, s)；4.35 (2H, q,J = 7.0 Hz)；4.13 (1H, s, 寬峰)；1.25 (3H, t,J = 7.0 Hz)。 步驟 2 ： 3-( 羥基甲基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯及 4-( 羥基甲基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯
將3-(羥基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯及4-(羥基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(3:1, 4.0 g, 23.5 mmol)、(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(11.2 mL, 70.5 mmol)及碳酸銫(45.9 g, 141.0 mmol)於丙酮(100 mL)中之混合物在25℃下攪拌3 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到3-(羥基甲基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯及4-(羥基甲基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(不可分離，3.7g, 52%)，其作為混合物用於下一步驟中。LC-MS RT = 0.855 min,m/z = 322.9 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.855 min，ESI+實驗值[M+Na] = 322.9。 步驟 3 ： 3- 甲醯基 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯
向3-(羥基甲基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯及4-(羥基甲基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(2.0 g, 6.66 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之溶液添加二氧化錳(7.0 g, 80.52 mmol)。將混合物在25℃下攪拌15 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之5-甲醯基-2-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)吡唑-3-甲酸乙基酯(700 mg, 35%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 10.02 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 4.40 (q,J = 8.0 Hz, 2H), 3.69 - 3.60 (m, 2H), 1.40 (t,J = 8.0 Hz, 3H), 0.98 - 0.89 (m, 2H), 0.02 - 0.07 (m, 9H)。 步驟 4 ： (E)-3-(3- 側氧基 -3- 苯基丙 -1- 烯 -1- 基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯
向5-甲醯基-2-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)吡唑-3-甲酸乙基酯(700 mg, 2.35 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之溶液添加三甲基((1-苯基乙烯基)氧基)矽烷(499 mg, 2.59 mmol)及四氯化鈦(875 mg, 4.61 mmol)。將混合物在40℃下攪拌48 h，且接著藉由添加水(50 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之(E)-3-(3-側氧基-3-苯基丙-1-烯-1-基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(310 mg, 49%)。LC-MS RT = 0.853 min,m/z = 270.9 (M+H)+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.853min，ESI+實驗值[M+H] = 270.9。 步驟 5 ： 3-(3- 羥基 -3- 苯基丙基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯
使(E)-3-(3-側氧基-3-苯基丙-1-烯-1-基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(310 mg, 1.15 mmol)及鈀(於碳上10%，122 mg)於甲醇(20 mL)中之混合物在25℃下氫化(15 psi) 15 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製3-(3-羥基-3-苯基丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(314 mg, 99%)。此粗製品不經進一步純化即直接用於下一步驟中。 步驟 6 ： 3-(3- 氯 -3- 苯基丙基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸乙基酯
向3-(3-羥基-3-苯基丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(314 mg, 1.14 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液添加二氯亞碸(681 mg, 5.72 mmol)。將混合物在65℃下加熱15 h，且接著在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製3-(3-氯-3-苯基-丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(335 mg, 100%)。此粗製品不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LC-MS RT = 0.861 min,m/z = 314.9 (M+H)+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.861min，ESI+實驗值[M+H] = 314.9。 步驟 7 ： 6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 甲酸乙基酯
將3-(3-氯-3-苯基-丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙基酯(335 mg, 1.14 mmol)及碳酸銫(3.0 g, 9.21 mmol)於乙腈(20 mL)中之混合物在15℃下攪拌15 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至25%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸乙基酯(120 mg, 41%)。LC-MS RT = 0.824 min,m/z = 279.0 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.824 min，ESI+實驗值[M+H] = 279.0。 步驟 8 ： 6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 甲酸
將6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸乙基酯(60 mg, 0.23 mmol)及氫氧化鋰一水合物(50 mg, 1.2 mmol)於四氫呋喃(5 mL)、甲醇(5 mL)及水(2 mL)中之混合物在25℃下攪拌3 h，且接著在減壓下濃縮。藉由添加鹽酸(2 N)將殘餘物調整至pH = 5。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之粗製6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸(30 mg, 56%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 9 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 甲醯胺
將6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸(30 mg, 0.13 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(17 mg, 0.17 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(65 mg, 0.17 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(42 mg, 0.33 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌2 h。用水(20 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-甲氧基-N-甲基-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲醯胺(25 mg, 70%)。LC-MS RT = 0.952 min,m/z = 272.1 (M+H)+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.952 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.1。 步驟 10 ： 1-(6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ) 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向N-甲氧基-N-甲基-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲醯胺(24 mg, 0.09 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中3.0 M，0.07 mL, 0.21 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-(6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基)丙-1-酮(13.0 mg, 61%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.39 - 7.30 (m, 3H), 7.11 - 7.09 (m, 2H), 6.60 (s, 1H), 5.54 - 5.50 (m, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 3H), 2.95 - 2.89 (m, 2H), 2.52 - 2.48 (m, 1H), 1.11 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LC-MS RT = 1.858 min,m/z = 241.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間1.858 min，ESI+實驗值[M+H] = 214.2。方法 15 實例 20 實例 21 1-[(4S)-4-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(4R)-4-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向4-(2-氟苯基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸酯(200 mg, 0.63 mmol)於四氫呋喃(13 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中2 M，0.63 mL, 1.26 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-[4-(2-氟苯基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-基]丙-1-酮(120 mg, 70%)。藉由對掌性SFC進一步分離此外消旋物質，得到任意分配之以下：
1-[(4S)-4-(2-氟苯基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-基]丙-1-酮(峰1，滯留時間= 2.979 min) (45.0 mg, 37%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.16 - 7.14 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.42 - 4.18 (m, 4H), 2.96 - 2.92 (m, 2H), 1.10 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LC-MS RT = 1.761 min,m/z = 275.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間1.761 min，ESI+實驗值[M+H] = 275.2。
1-[(4R)-4-(2-氟苯基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-基]丙-1-酮(峰2，滯留時間= 3.234 min) (52 mg, 43%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.16 - 7.14 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.41 - 4.15 (m, 4H), 3.00 - 2.92 (m, 2H), 1.10 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LC-MSRT = 1.755 min,m/z = 275.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間1.752 min，ESI+實驗值[M+H] = 275.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 ，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 16 實例223-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2,2- 二甲基 -3- 側氧基 - 丙腈 步驟 1 ：順式 -3-(7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-3- 側氧基丙腈
向乙腈(298 mg, 7.27 mmol)於四氫呋喃(15 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加第三丁醇鉀(611.4 mg, 5.45 mmol)。攪拌30 min後，逐滴添加於四氫呋喃(5 mL)中之順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(500 mg, 1.82 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由緩慢添加冷的飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製順式-3-(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-3-側氧基-丙腈(150 mg, 31%)，其原樣用於下一步驟中。 步驟 2 ： 3-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2,2- 二甲基 -3- 側氧基 - 丙腈
向順式-3-(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-3-側氧基-丙腈(140 mg, 0.52 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加碳酸銫(422 mg, 1.30 mmol)。攪拌30 min後，添加碘甲烷(2800 mg, 19.7 mmol)，且將反應混合物在0℃下攪拌4 h。接著藉由添加冷的飽和氯化銨水溶液(10 mL)使該混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之3-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-2,2-二甲基-3-側氧基-丙腈(28.0 mg, 17%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.27 - 7.25 (m, 2H), 6.15 - 6.13 (m, 0.5H), 6.01 - 5.99 (m, 0.5H), 5.57 - 5.56 (m, 1H), 3.74 - 3.63 (m, 1H), 3.06 - 2.95 (m, 1H), 1.81 (s, 3H), 1.78 (s, 3H)。LC-MS RT = 1.734 min,m/z = 299.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間1.734 min，ESI+實驗值[M+H] = 299.2。方法 17 實例23 實例241-[(4S)-4- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(4R)-4- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -4- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 甲醯胺
將4-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸(93 mg, 0.41 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(80 mg, 0.81 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(163 mg, 0.43 mmol)及三乙胺(124 mg, 1.22 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之混合物在25℃下攪拌2 h。將混合物在減壓下濃縮且藉由製備型TLC (於二氯甲烷中之10%甲醇，Rf = 0.7)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-4-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲醯胺(100 mg, 91%)。LCMS RT = 0.593 min,m/z = 272.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.593 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.1。 步驟 2 ： 1-[(4S)-4- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(4R)-4- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向N-甲氧基-N-甲基-4-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲醯胺(100 mg, 0.37 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中2.7 M，0.54 mL, 1.47 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈淺棕色固體之粗製1-(4-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基)丙-1-酮(80 mg, 90%)，其藉由對掌性SFC進一步分離，得到任意分配之以下：
(R)-1-(4-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基)丙-1-酮(峰1，滯留時間= 2.581 min) (25.4 mg, 32%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.32 - 7.21 (m, 5H), 6.43 (s, 1H), 4.50 - 4.37 (m, 1H), 4.36 - 4.33 (m, 1H), 4.24 - 4.22 (m, 1H), 3.13 - 3.10 (m, 1H), 2.99 - 2.95 (m, 2H), 2.57 - 2.53 (m, 1H), 1.15 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.843 min,m/z = 240.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.843 min，ESI+實驗值[M+H] = 240.9。
(S)-1-(4-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基)丙-1-酮(峰2，滯留時間= 2.968 min) (22.7 mg, 28%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.35 - 7.22 (m, 5H), 6.43 (s, 1H), 4.51 - 4.38 (m, 1H), 4.37 - 4.33 (m, 1H), 4.25 - 4.22 (m, 1H), 3.14 - 3.12 (m, 1H), 3.02 - 2.96 (m, 2H), 2.58 - 2.54 (m, 1H), 1.16 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.838min,m/z = 241.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.838 min，ESI+實驗值[M+H] = 241.0。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD (250 mm*30 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O iPrOH；開始B 15%結束B 15%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 18 實例251-( 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2- 羥基 -2- 甲基 - 丙 -1- 酮
向1-[順式-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-2-甲基-丙-1-酮(50 mg, 0.18 mmol)於二甲基亞碸(4 mL)中之溶液添加1-溴-2,5-吡咯啶二酮(33 mg, 0.18 mmol)。將混合物在空氣下在100℃下加熱15 h。將溶劑在減壓下蒸發且藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)且進一步藉由製備型TLC (乙酸乙酯，Rf = 0.6)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-(外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-2-羥基-2-甲基-丙-1-酮(48.6 mg, 91%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.37 (m, 3H), 7.27 - 7.25 (m, 2H), 6.20 - 6.03 (m, 1H), 5.66 - 5.57 (m, 1H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.56 (s, 3H)。LC-MS RT = 0.771 min,m/z = 290.1 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.771 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。方法 19 實例26( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-(1- 甲基環丙基 ) 甲酮 步驟 1 ：順式 -1-(7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2- 甲基丙 -2- 烯 -1- 酮
將順式-1-(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)丙-1-酮(120 mg, 0.46 mmol)、二溴甲烷(1931 mg, 11.11 mmol)及二乙胺(1625 mg, 22.22 mmol)於乙腈(10 mL)中之混合物在微波條件下在100℃下加熱30 min。將溶劑在減壓下蒸發且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-1-(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-2-甲基-丙-2-烯-1-酮(52 mg, 41%)。LC-MS RT = 1.020 min,m/z = 272.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之0%至60%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.020 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.1。 步驟 2 ： ( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-(1- 甲基環丙基 ) 甲酮
在0℃下向二乙基鋅(123 mg, 1.00 mmol)及氯化鎳(8 mg, 0.07 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之混合物添加二碘甲烷(355 mg, 1.33 mmol)。攪拌30 min後，添加1-(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-2-甲基-丙-2-烯-1-酮(90 mg, 0.33 mmol)，且將反應混合物在0℃下攪拌2 h。藉由添加冷的飽和氯化銨水溶液(10 mL)使該混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (25-55%乙腈/於乙腈中之0.05% HCl)純化殘餘物，得到呈白色固體之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-(1-甲基環丙基)甲酮(3.0 mg, 3%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.41 - 7.37 (m, 3H), 7.24 - 7.23 (m, 2H), 6.15 - 6.13 (m, 0.5H), 6.01 - 5.99 (m, 0.5H), 5.60 - 5.59 (m, 1H), 3.76 - 3.68 (m, 1H), 2.84 - 2.74 (m, 1H), 1.82 - 1.76 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 0.97 - 0.92 (m, 2H)。LC-MS RT = 1.068 min,m/z = 286.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.068 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.1。方法 20 實例27 實例281-[(4S)-4- 苯基 -6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(4R)-4- 苯基 -6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 基 ] 丙 -1- 酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -4- 苯基 -6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 甲醯胺
將4-苯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸(156 mg, 0.64 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(125 mg, 1.28 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(291.42 mg, 0.77 mmol)及三乙胺(258 mg, 2.55 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之混合物在15℃下攪拌2 h，且接著在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於二氯甲烷中之10%甲醇，Rf = 0.7)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-4-苯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲醯胺(80 mg, 43.6%)。 步驟 2 ： 1-[(4S)-4- 苯基 -6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(4R)-4- 苯基 -6,7- 二氫 -4H- 吡唑并 [5,1-c][1,4] 噁嗪 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向N-甲氧基-N-甲基-4-苯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲醯胺(60 mg, 0.21 mmol)於四氫呋喃(6 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中2.7 M，0.39 mL, 1.04 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮以得到粗製外消旋產物，其藉由對掌性SFC進一步分離，得到任意分配之以下：
1-[(4S)-4-苯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-基]丙-1-酮(峰1，滯留時間= 3.254 min) (11.5 mg, 21%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.39 - 7.37 (m, 5H), 6.21 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.42 - 4.36 (m, 2H), 4.30 - 4.28 (m, 1H), 4.21 - 4.18 (m, 1H), 3.00 - 2.95 (m, 2H), 1.13 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 1.026 min,m/z = 257.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.026 min，ESI+實驗值[M+H] = 257.1。
1-[(4R)-4-苯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-基]丙-1-酮(峰2，滯留時間= 4.381 min) (13.6 mg, 25%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.39 - 7.37 (m, 5H), 6.21 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.42 - 4.36 (m, 2H), 4.31 - 4.25 (m, 1H), 4.21 - 4.19 (m, 1H), 3.00 - 2.92 (m, 2H), 1.13 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 1.023 min,m/z = 257.1 [M + H]+ LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.023 min，ESI+實驗值[M+H] = 257.1。
SFC條件：管柱：OD (250 mm*30 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B：30% ；結束B：30%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 21 實例293,3,3- 三氟 -1-( 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 丙 -1- 酮 步驟 1 ： 1- 順式 -7- 氟 -5- 苯基 -2-(1-(( 三甲基矽基 ) 氧基 ) 乙烯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向1-(順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)乙酮(200 mg, 0.82 mmol)於1,4-二噁烷(6 mL)中之溶液添加三乙胺(165 mg, 1.63 mmol)及三氟甲烷磺酸三甲基矽基酯(254 mg, 1.14 mmol)。將混合物在0℃下攪拌2 h，且藉由添加冷的飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製1-(順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)乙烯基氧基-三甲基-矽烷(245 mg, 95%)。1 H NMR (400 MHz,CDCl3 ) δ 7.17 - 7.10 (m, 3 H), 6.98 - 6.96 (m, 2 H), 5.79 - 5.78 (m, 0.5 H), 5.65 - 5.64 (m, 0.5 H), 5.21 - 5.17 (m, 2 H), 4.40 (s, 1 H), 4.49 (s, 1 H), 3.37 - 3.27 (m, 1 H), 2.66 - 2.56 (m, 1 H), 0.03 (s, 9 H)。 步驟 2 ： 3,3,3- 三氟 -1-( 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 丙 -1- 酮
將1-三氟甲基-1,2-苯碘醯-3(1H)-酮(418 mg, 1.32 mmol)、1-(順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)乙烯基氧基-三甲基-矽烷(210 mg, 0.66 mmol)及硫氰酸亞銅(16 mg, 0.13 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之混合物在15℃下攪拌15 h，且接著在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (25-55%乙腈/於乙腈中之0.05% HCl)純化殘餘物，得到呈白色固體之3,3,3-三氟-1-(外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)丙-1-酮(31mg, 15%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.40 - 7.37 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.19 - 6.17 (m, 0.5H), 6.05 - 6.03 (m, 0.5H), 5.65 - 5.63 (m, 1H), 4.09 - 4.01 (m, 2H), 3.78 - 3.29 (m, 1H), 2.89 - 2.77 (m, 1H)。LC-MS RT = 1.072 min,m/z = 314.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經2.0 min)，滯留時間1.072 min，ESI+實驗值[M+H] = 314.1。方法 22 實例301-[(5S)-5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向(S)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(200 mg, 0.78 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中3.0 M，0.58 mL, 1.74 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-[(5S)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(60 mg, 32%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.42 - 7.32 (m, 3H), 7.12 - 7.10 (m, 2H), 5.49 (dd,J = 5.6, 8.4 Hz, 1H), 3.31 - 3.21 (m, 1H), 3.17 - 3.01 (m, 4H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 1.21 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 1.523 min,m/z = 242.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.523 min，ESI+實驗值[M+H] = 242.2。方法 23 實例311-[(5S)-5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(496 mg, 1.8 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中2.7 M，1.33 mL, 3.6 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮以得到粗製外消旋產物，其藉由對掌性SFC及RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)進一步純化，得到任意分配之以下：
1-[(5S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(峰2，滯留時間= 3.038 min) (17 mg, 8%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.20 - 7.12 (m, 3H), 5.80 - 5.75 (m, 1H), 3.30 - 3.28 (m, 1H), 3.15 - 3.05 (m, 2H), 3.01 - 2.97 (m, 2H), 2.72 - 2.66 (m, 1H), 1.12 (t,J =7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.977 min,m/z = 260.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.977 min，ESI+實驗值[M+H] = 260.1。
SFC條件：管柱：OJ (250 mm*30 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B：20%；結束B：20%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 24 實例321-[ 外消旋 -(5R,6S)-6- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮 步驟 1 ： (E)-4- 苯基丁 -3- 烯酸甲基酯
向(E)-4-苯基丁-3-烯酸(15.0 g, 92.48 mmol)於甲醇(60 mL)中之溶液添加硫酸(2.3 g, 23.12 mmol)。將混合物在90℃下加熱18 h且冷卻。用水(20 mL)稀釋該混合物且用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取。用水(30 mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(30 mL)、鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層，乾燥且在減壓下濃縮，得到呈輕質油狀物之粗製(E)-4-苯基丁-3-烯酸甲基酯(14.8 g, 91%)，其原樣用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.39 - 7.21 (m, 5H), 6.54 - 6.45 (m, 1H), 6.35 - 6.25 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.30 - 3.25 (m, 2H)。 步驟 2 ： 2-(3- 苯基環氧乙烷 -2- 基 ) 乙酸甲基酯
在0℃下向(E)-4-苯基丁-3-烯酸甲基酯(14.8 g, 84.0 mmol)及碳酸氫鈉(34.4 g, 409.0 mmol)於丙酮(300 mL)中之混合物逐滴添加單過硫酸氫鉀三合鹽(67.1 g, 109.2 mmol)於水(80 mL)中之溶液。添加後，使所得混合物升溫至25℃且攪拌4 h並過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2-(3-苯基環氧乙烷-2-基)乙酸甲基酯(15.0 g, 93%)。LC-MS RT = 0.799 min,m/z = 233.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.799 min，ESI+實驗值[M+H] = 233.9。 步驟 3 ： ( 外消旋 -3R,4S)-4- 溴 -3- 羥基 -4- 苯基丁酸甲基酯
在0℃下向2-(3-苯基環氧乙烷-2-基)乙酸甲基酯(15.0 g, 78.0 mmol)於乙腈(400 mL)中之溶液添加溴化鋰(6.8 g, 78.0 mmol)及過氯酸鎂(1.7 g, 78.0 mmol)。將混合物在20℃下攪拌12 h且用二氯甲烷(100 mL)稀釋。用鹽酸(1 N, 100 mL)洗滌所得混合物。用二氯甲烷(3 × 100 mL)洗滌經分離之水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製(外消旋-3R,4S)-4-溴-3-羥基-4-苯基丁酸甲基酯(20.0 g, 94%)。粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS RT = 0.610 min,m/z = 256.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.610 min，ESI+實驗值[M+H] = 256.9。 步驟 4 ： ( 外消旋 -3R,4R)-4- 疊氮基 -3- 羥基 -4- 苯基丁酸甲基酯
將(外消旋-3R,4S)-4-溴-3-羥基-4-苯基丁酸甲基酯(20.0 g, 73.2 mmol)及疊氮化鈉(14.3 g, 219.7 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(500 mL)中之混合物在20℃下攪拌16 h。用水(500 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。用鹽水(150 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製(外消旋-3R,4R)-4-疊氮基-3-羥基-4-苯基丁酸甲基酯(17.0 g, 99%)。LC-MS RT = 0.978 min,m/z = 208.3 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.978min，ESI+實驗值[M+H] = 208.3。 步驟 5 ： ( 外消旋 -3R,4R)-4- 胺基 -3- 羥基 -4- 苯基丁酸甲基酯
使(外消旋-3R,4R)-4-疊氮基-3-羥基-4-苯基丁酸甲基酯(17.0 g, 72.3 mmol)及鈀(於碳上10%，7.7 g)於乙酸乙酯(800 mL)中之混合物在25℃下氫化(15 psi) 24 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製(外消旋-3R,4R)-4-胺基-3-羥基-4-苯基丁酸甲基酯(15.0 g, 99%)。粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS RT = 0.315 min,m/z = 210.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.315 min，ESI+實驗值[M+H] = 210.2。 步驟 6 ：順式 -4- 羥基 -5- 苯基吡咯啶 -2- 酮
將(外消旋-3R,4R)-4-胺基-3-羥基-4-苯基丁酸甲基酯(15.0 g, 71.7 mmol)於甲醇(200 mL)中之溶液在50℃下加熱16 h，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於二氯甲烷中之0%至5%甲醇)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-4-羥基-5-苯基吡咯啶-2-酮(9.6 g, 76%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.45 - 7.26 (m, 5H), 6.39 (br s, 1H), 4.89 - 4.87 (m, 1H), 4.66 - 4.48 (m, 1H), 2.80 - 2.62 (m, 1H), 2.53 - 2.30 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.678 min,m/z = 178.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之0%至60%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.678 min，ESI+實驗值[M+H] = 178.2。 步驟 7 ：順式 -4-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基吡咯啶 -2- 酮
向順式-4-羥基-5-苯基吡咯啶-2-酮(9.6 g, 54.2 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液添加咪唑(11.1 g, 162.5 mmol)及第三丁基二甲基矽基氯(16.3 g, 108.4 mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌16 h，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-4-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基吡咯啶-2-酮(10.0 g, 63%)。LC-MS RT = 1.257 min,m/z = 292.3 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.257 min，ESI+實驗值[M+H] = 292.3。 步驟 8 ：順式 -1- 胺基 -4-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基吡咯啶 -2- 酮
在0℃下向順式-4-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基吡咯啶-2-酮(10.0 g, 34.3 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)中之溶液添加氫化鈉(60%, 2.1 g, 51.5 mmol)。在0℃下攪拌30 min後，逐份添加(胺基氧基)二苯基氧化膦(12.0 g, 51.47 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌12 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈棕色固體之粗製順式-1-胺基-4-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基吡咯啶-2-酮(9.0 g, 86%)。此粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS RT = 1.225 min,m/z = 307.4 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.225 min，ESI+實驗值[M+H] = 307.4。 步驟 9 ：順式 -2-((3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 側氧基 -2- 苯基吡咯啶 -1- 基 ) 胺基 )-2- 亞胺基乙酸乙基酯
將順式-1-胺基-4-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基吡咯啶-2-酮(9.0 g, 29.4 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(21.3 g, 146.8 mmol)於甲苯(500 mL)中之混合物在90℃下加熱18 h，且在減壓下濃縮。用水(200 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 150 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製順式-2-((3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-側氧基-2-苯基吡咯啶-1-基)胺基)-2-亞胺基乙酸乙基酯(10.0 g, 84%)。LC-MS RT = 1.128 min,m/z = 406.4 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.128 min，ESI+實驗值[M+H] = 406.4。 步驟 10 ：順式 -6-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將順式-2-((3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-側氧基-2-苯基吡咯啶-1-基)胺基)-2-亞胺基乙酸乙基酯(10.0 g, 24.7 mmol)及4-甲基苯磺酸水合物(4.7 g, 24.7 mmol)於甲苯(300 mL)中之混合物在120℃下加熱16 h，且接著在減壓下濃縮。用水(200 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 150 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之順式-6-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(5.5 g, 58%)。LC-MS RT = 1.345 min,m/z = 388.4 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.345 min，ESI+實驗值[M+H] = 388.4。 步驟 11 ： 順式 -6- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向四丁基氟化銨(18.5 g, 70.9 mmol)於四氫呋喃(200 mL)中之溶液添加順式-6-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(5.5 g, 14.2 mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌16 h，且用乙酸乙酯(300 mL)稀釋。用水(50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌該混合物，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之順式-6-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.8 g, 46%)。LC-MS RT = 1.036 min,m/z = 274.3 [M + H]+ 。LCMS (於水中之0%至60%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.036 min，ESI+實驗值[M+H] = 274.3。 步驟 12 ：反式 -6- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在25℃下向順式-6-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.0 g, 3.66 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液逐滴添加二乙胺基三氟化硫(10.0 g, 62.0 mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌1 h，且接著藉由緩慢添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取該混合物。用鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之反式-6-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(400 mg, 40%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 )δ 7.41 - 7.24 (m, 3H), 6.92 - 6.89 (m, 2H), 5.70 - 5.55 (m, 1H), 5.62 - 5.48 (m, 1H), 4.49 - 4.34 (m, 2H), 3.52 - 3.35 (m, 1H), 3.35 - 3.15 (m, 1H), 1.40 - 1.36 (m, 3H)。LC-MS RT = 0.958 min,m/z = 276.2 [M + H]+
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.958 min，ESI+實驗值[M+H] = 276.2。 步驟 13 ： 1-[ 外消旋 -(5R,6S)-6- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向反式-6-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(30 mg, 0.11 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加乙基氯化鎂(於THF中3.0 M，0.25 mL, 0.75 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之任意分配之1-[外消旋-(5R,6S)-6-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(13.6 mg, 45%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.34 - 7.31 (m, 3H), 6.90 - 6.87 (m, 2H), 5.63 - 5.61 (m, 0.5H), 5.59 - 5.57 (m, 1H), 5.46 - 5.44 (m, 0.5H), 3.42 - 3.28 (m, 1H), 3.26 - 3.21 (m, 1H), 3.03 - 3.01 (m, 2H), 1.16 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.977 min,m/z = 260.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.977 min，ESI+實驗值[M+H] = 260.1。方法 25 實例33( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-(2- 吡啶基 ) 甲酮
在-78℃下向2-溴吡啶(435 mg, 2.76 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，1.10 mL, 2.76 mmol)。添加後，使混合物升溫至30℃且攪拌2 h。將混合物冷卻至-78℃且添加於四氫呋喃(5 mL)中之順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(200 mg, 0.69 mmol)。將反應混合物在-78℃下攪拌6 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-(2-吡啶基)甲酮(32.0 mg, 15%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.69 - 8.65 (m, 1H), 8.00 - 7.90 (m, 2H), 7.62 - 7.59 (m, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 3H), 7.25 - 7.20 (m, 2H), 6.30 - 6.22 (m, 0.5H), 6.18 - 6.14 (m, 0.5H), 5.75 - 5.55 (m, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 1H), 2.74 - 2.45 (m, 1H)。LCMS：RT = 1.510 min,m/z = 309.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.510 min，ESI+實驗值[M+H] = 309.1。方法 26 實例34 實例35環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 實例42步驟 1 ：環丙基 -( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(100 mg, 0.36 mmol)於四氫呋喃(4 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加環丙基溴化鎂(於THF中0.5 M，1.45 mL, 0.73 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式外消旋環丙基-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(15 mg, 10%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.35 (m, 3H), 7.27 - 7.25 (m, 2H), 6.18 - 6.15 (m, 0.5H), 6.05 - 6.00 (m, 0.5H), 5.65 - 5.60 (m, 1H), 3.77 - 3.65 (m, 1H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.90 - 2.70 (m, 1H), 1.17 - 1.13 (m, 2H), 1.10 - 1.05 (m, 2H)。LCMS RT = 1.031 min,m/z = 272.3 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.031 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.3。 步驟 2 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
藉由對掌性SFC來分離外消旋環丙基-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(100 mg, 0.37 mmol)，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.575 min) (25.5 mg, 24%)，呈白色固體。
1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 6.19 (d,J = 5.6 Hz, 0.5H), 6.05 (d,J = 5.2 Hz, 0.5H), 5.66 - 5.62 (m, 1H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.05 - 3.02 (m, 1H), 3.01 - 2.81 (m, 1H), 1.29 - 1.09 (m, 4H)。LCMS RT = 0.816 min,m/z = 271.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.816 min，ESI+實驗值[M+H] = 271.9。
環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.849 min) (18.5 mg, 17%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.27 (m, 5H), 6.20 - 6.17 (m, 0.5H), 6.06 - 6.03 (m, 0.5H), 5.66 - 5.64 (m, 1H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.05 - 3.02 (m, 1H), 3.01 - 2.81 (m, 1H), 1.19 - 1.09 (m, 4H)。LCMS RT = 0.817 min,m/z = 271.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.817 min，ESI+實驗值[M+H] = 271.9。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD (250 mm*30 mm, 10 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O iPrOH；開始B 25%結束B 25%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 27 實例36環戊基 -( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ：環戊基 -( 順式 -7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲醇
在氮氣氛下將環戊基溴化鎂(於THF中1 M，0.73 mL, 0.73 mmol)逐滴添加至順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸酯(100 mg, 0.36 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經攪拌且冷卻(-78℃)之溶液。添加後，將混合物在25℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製順式-環戊基(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲醇(100 mg, 91%)。LCMS RT = 0.611 min,m/z = 302.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.611 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.1。 步驟 2 ：環戊基 -( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
向順式-環戊基(7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲醇(100 mg, 0.33 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液添加二氧化錳(288 mg, 3.32 mmol)。將反應混合物在35℃下攪拌2 h，且接著經由短矽藻土墊過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由製備型TLC (於石油醚中之40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之環戊基-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(18.2 mg, 18%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.40 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.19 - 6.17 (m, 0.5H), 6.05 - 6.03 (m, 0.5H), 5.64 - 5.63 (m, 1H), 3.89 - 3.68 (m, 2H), 2.88 - 2.75 (m, 1H), 2.02 - 1.60 (m, 8H)。LCMS RT = 2.070 min,m/z = 300.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之0%至60%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經3.0 min)，滯留時間2.070 min，ESI+實驗值[M+H] = 300.2。方法 28 實例41( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-(2- 噻吩基 ) 甲酮
在N2 氣氛下向2-碘噻吩(289 mg, 1.38 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.55 mL, 1.38 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌1 h，接著添加於四氫呋喃(2 mL)中之順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(100 mg, 0.34 mmol)。將混合物在-78℃下再攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40-70%乙腈/ 0.05%鹽酸鹽)純化殘餘物，得到呈白色固體之(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-(2-噻吩基)甲酮(15.6 mg, 14%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.50 - 8.49 (m, 1H), 7.96 - 7.94 (m, 1H), 7.49 - 7.35 (m, 3H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 6.24 - 6.22 (m, 0.5H), 6.10 - 6.08 (m, 0.5H), 5.74 - 5.68 (m, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 1H), 2.91 - 2.79 (m, 1H)。LCMS RT = 0.891 min,m/z = 314.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.891 min，ESI+實驗值[M+H] = 314.1。方法 29 實例42環丁基 -[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在N2 氣氛下向鎂(234 mg, 9.65 mmol)、碘(12 mg, 0.05 mmol)、1,2-二溴乙烷(0.1 mL, 0.10 mmol)於四氫呋喃(15 mL)中之經冷卻(0℃)混合物逐滴添加溴環丁烷(0.5 mL, 5.85 mmol)。將混合物在35℃下攪拌約1 h。將以上新製備之環丁基溴化鎂溶液(1.0 mL, 0.39 mmol)逐滴添加至順式 - 7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(28 mg, 0.10 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經攪拌且冷卻(-78℃)之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 5 mL)萃取該混合物。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之42-62%乙腈/ 0.05%鹽酸鹽)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丁基-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(2 mg, 7%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.40 - 7.30 (m, 3H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 6.15 - 6.10 (m, 0.5H), 6.01 - 5.95 (m, 0.5H), 5.60 - 5.55 (m, 1H), 4.15 - 4.07 (m, 1H), 3.74 - 3.65 (m, 1H), 2.80 - 2.70 (m, 1H), 2.35 - 2.20 (m, 3H), 2.20 - 2.15 (m, 1H), 2.12 - 2.00 (m, 1H), 1.90 - 1.85 (m, 1H)。LCMS RT = 0.883 min,m/z = 286.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.883 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.0。方法 30 實例441-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2,2- 二甲基 - 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(30 mg, 0.11 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加第三丁基鋰(於戊烷中1.3 M，0.17 mL, 0.22 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之45-75%乙腈/ 0.05%鹽酸鹽)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-2,2-二甲基-丙-1-酮(12.7 mg, 40%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.42 - 7.36 (m, 3H), 7.36 - 7.23 (m, 2H), 6.16 - 6.13 (m, 0.5H), 6.02 - 5.99 (m, 0.5H), 5.65 - 5.61 (m, 1H), 3.77 - 3.68 (m, 1H), 2.85 - 2.73 (m, 1H), 1.35 (s, 9H)。LCMS RT = 0.907 min,m/z = 288.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.907 min，ESI+實驗值[M+H] = 288.0。方法 31 實例451-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2- 甲基 - 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(200 mg, 0.73 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於THF中2.0 mL，1.1 mL, 2.20 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之外消旋1-(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)-2-甲基-丙-1-酮(6.9 mg, 3.4%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.46 - 7.36 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.18 - 6.16 (m, 0.5H), 6.05 - 6.02 (m, 0.5H), 5.65 - 5.61 (m, 1H), 3.78 - 3.72 (m, 1H), 3.64 - 3.61 (m, 1H), 2.87 - 2.76 (m, 1H), 1.19 (d,J = 7.2 Hz, 3H), 1.17 (d,J = 6.8 Hz, 3H)。LCMS RT = 1.971 min,m/z = 274.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之0%至60%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經3.0 min)，滯留時間1.971 min，ESI+實驗值[M+H] = 274.2。方法 32 實例46 實例47實例491-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮 步驟 1 ： 1-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(30 mg, 0.10 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加乙基溴化鎂(於THF中3.0 M，0.1 mL, 0.30 mmol)。添加後，將混合物在30℃下攪拌約3 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(6.3 mg, 23%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.38 - 7.35 (m, 3H), 7.25 - 7.23 (m, 2H), 6.15 - 6.13 (m, 0.5H), 6.01 - 5.99 (m, 0.5H), 5.59 - 5.53 (m, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 1H), 3.05 - 2.99 (m, 2H), 2.84 - 2.73 (m, 1H), 1.13 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 1.038 min,m/z = 260.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.038 min，ESI+實驗值[M+H] = 260.2。 步驟 2 ： 1-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮及 1-[(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
藉由對掌性SFC來分離外消旋1-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(220 mg)，得到任意分配之以下：
1-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(峰1，滯留時間= 2.265 min) (78 mg, 35%, 88%ee)，呈淺黃色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.32 (m, 3H), 7.27 - 7.23 (m, 2H), 6.17 - 6.14 (m, 0.5H), 6.02 - 6.00 (m, 0.5H), 5.65 - 5.58 (m, 1H), 3.84 - 3.64 (m, 1H), 3.06 - 3.00 (m, 2H), 2.88 - 2.69 (m, 1H), 1.13 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.822 min,m/z = 260.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.822 min，ESI+實驗值[M+H] = 260.0。
1-[(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(峰2，滯留時間= 2.382 min) (80 mg, 35%, 91%ee)，呈淺黃色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.32 (m, 3H), 7.27 - 7.23 (m, 2H), 6.17 - 6.14 (m, 0.5H), 6.02 - 6.00 (m, 0.5H), 5.65 - 5.58 (m, 1H), 3.84 - 3.64 (m, 1H), 3.06 - 3.00 (m, 2H), 2.88 - 2.69 (m, 1H), 1.13 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.817 min,m/z = 260.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.817 min，ESI+實驗值[M+H] = 260.0。
SFC條件：管柱：AS (250 mm*30 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B 20%結束B 20%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 33 實例48(1- 甲基吡唑 -4- 基 )-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(137 mg, 0.47 mmol)及1-甲基-4-碘-1h-吡唑(393 mg, 1.89 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加第三丁基鋰(於己烷中1.3 M，1.45 mL, 1.89 mmol)。將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之27-57%乙腈/0.05%鹽酸鹽)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式外消旋(1-甲基吡唑-4-基)-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(53.4 mg, 36%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.61 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.46 - 7.34 (m, 3H), 7.32 - 7.25 (m, 2H), 6.22 - 6.19 (m, 0.5H), 6.08 - 6.05 (m, 0.5H), 5.72 - 5.65 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.85 - 3.70 (m, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 1H)。LCMS RT = 0.791 min,m/z = 311.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.791 min，ESI+實驗值[M+H] = 311.9。方法 34 實例501-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 乙酮 步驟 1 ： (E )- 苯甲醛肟
向苯甲醛(45.0 g, 424.1 mmol)於乙醇(100 mL)中之溶液添加碳酸鈉(112.3 g, 1060.1 mmol)及羥胺鹽酸鹽(35.3 g, 508.9 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌3 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮且用水(50 mL)稀釋殘餘物。用乙酸乙酯(3 × 150 mL)萃取所得混合物。用鹽水(60 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製(E )-苯甲醛肟(51.0 g, 99%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。 步驟 2 ： 3- 苯基 -4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
向(E )-苯甲醛肟(20.0 g, 165.1 mmol)於1,4-二噁烷(500 mL)中之溶液添加丙烯酸甲酯(14.2 g, 165.1 mmol)、碘化鈉(24.7 g, 165.1 mmol)、2,6-二甲基吡啶(17.6 g, 165.1 mmol)及次氯酸第三丁基酯(17.9 g, 165.1 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌24 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之3-苯基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(25.0 g, 74%)。LCMS RT = 0.871 min,m/z = 206.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.871 min，ESI+實驗值[M+H] =206.2。 步驟 3 ： 3- 羥基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮
使3-苯基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(25.0 g, 121.8 mmol)及鈀(於碳上10%，2.5 g)於乙醇(800 mL)中之混合物在25℃下氫化(50 psi) 2 h且接著過濾，且將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之粗製3-羥基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(18.0 g, 83%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 0.270 min,m/z = 177.8 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.270 min，ESI+實驗值[M+H] =177.8。 步驟 4 ：順式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮及反式 - 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-羥基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(15.0 g, 84.6 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(19.1 g, 126.9 mmol)及咪唑(11.5 g, 169.3 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到任意分配之以下：
順式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(12.4 g, 51%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.37 - 7.25 (m, 5H), 4.88 - 4.53 (m, 1H), 4.54 - 4.46 (m, 1H), 2.89 - 2.79 (m, 1H), 1.80 - 1.71 (m, 1H), 0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.19 - 0.12 (m, 6H)及
反式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(9.3 g, 38%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.34 (m, 2H), 7.29 - 7.24 (m, 3H), 4.87 - 4.80 (m, 1H), 4.44-4.41 (m, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 1H), 2.27 - 2.22 (m, 1H), 0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.16 - 0.13 (m, 6H)。 步驟 5 ：反式 - 1- 胺基 -3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基吡咯啶 -2- 酮
在0℃下向反式 -3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(7.0 g, 24.0 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中之溶液添加氫化鈉(1.44 g, 36.0 mmol)，且將混合物在0℃下攪拌20 min。接著添加o -(二苯基磷醯基)羥胺(8.40 g, 36.03 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16小時。將混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之反式 - 1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(7.0 g, 95.1%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 0.775 min,m/z = 307.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.775 min，ESI+實驗值[M+H] = 307.0。 步驟 6 ：反式 - 2-(3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-2- 側氧基 -5- 苯基吡咯啶 -1- 基 ) 胺基 )-2- 亞胺基乙酸乙基酯
向反式 - 1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-吡咯啶-2-酮(7.0 g, 22.8 mmol)於乙醇(150 mL)中之溶液添加2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(6.63 g, 45.7 mmol)。將反應混合物在60℃下攪拌16 h，且隨後在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製反式-2-(3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-2-側氧基-5-苯基吡咯啶-1-基)胺基)-2-亞胺基乙酸乙基酯(8.50 g, 92%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 2.154 min,m/z = 406.3 [M + H]+ 。LCMS (於水中之0%至60%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經3.0 min)，滯留時間2.143 min，ESI+實驗值[M+H] = 406.3。 步驟 7 ：反式 - 7-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向2-[[反式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-2-側氧基-5-苯基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(8.5 g, 21.0 mmol)於甲苯(100 mL)中之溶液添加對甲苯磺酸(4.4 g, 25.2 mmol)。將反應混合物在120℃下攪拌16 h，且隨後在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製反式 - 7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(7.5 g, 92.3%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 1.022 min,m/z = 374.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.022 min，ESI+實驗值[M+H] = 374.2。 步驟 8 ：反式 - 7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向反式 - 7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(7.0 g, 18.06 mmol)於四氫呋喃(120 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於THF中1 N，18.06 mL, 18.06 mmol)。將反應混合物在40℃下攪拌3 h，且隨後在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製反式 - 7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(3.5 g, 57%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ 7.39 - 7.35 (m, 3H), 7.14 - 7.12 (m, 2H), 5.73 - 5.70 (m, 1H), 5.54 - 5.51 (m, 1H), 4.47 - 4.40 (m, 2H), 3.24 - 3.21 (m, 1H), 3.05 - 3.00 (m, 1H), 1.41 - 1.36 (m, 3H)。 步驟 9 ：順式 - 7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在0℃下向反式-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(100 mg, 0.37 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液添加二乙胺基三氟化硫(176.9 mg, 1.10 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2 h，且隨後藉由添加水(20 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取所得混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.5)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之順式 -7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(54 mg, 54%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.31 (m, 3H), 7.25 - 7.17 (m, 2H), 6.09 (dd,J = 1.4 Hz, 7.2 Hz, 1H), 5.95 (dd,J = 1.4 Hz, 7.2 Hz, 1H), 5.52 - 5.47(m, 1H), 4.53 - 4.37 (m, 2H), 3.74 - 3.54 (m, 1H), 3.05 - 2.82 (m, 1H), 1.48 - 1.33 (m, 3H)。 步驟 10 ：順式 - 7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
向順式 - 7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(54 mg, 0.20mol)於四氫呋喃(4 mL)及水(1 mL)中之溶液添加氫氧化鋰一水合物(25 mg, 0.59 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌2 h，且隨後在減壓下濃縮。藉由添加鹽酸(2 N)將殘餘物調整至pH = 5。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。用水(10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製順式 - 7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(45 mg, 93%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。 1-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 乙酮 步驟 11 ：順式 -7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將順式-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(350 mg, 1.42 mmol)、1-羥基苯并三唑(201 mg, 1.49 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(407 mg, 2.12 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(180 mg, 1.84 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之混合物在20℃下攪拌18 h。將混合物在減壓下濃縮且藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.7)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(225 mg, 54.7%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.35 (m, 3H), 7.26 - 7.22 (m, 2H), 6.09 - 6.07 (m, 0.5H), 5.96 - 5.93 (m, 0.5H), 5.49 - 5.46 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.66 - 3.59 (m, 1H), 3.55 - 3.35 (brs, 3H), 2.99 - 2.88 (m, 1H)。LCMS RT = 0.564 min,m/z = 291.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.564 min，ESI+實驗值[M+H] = 291.1。 步驟 12 ： 1-[ 外消旋 -(5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 乙酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(30 mg, 0.10 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加甲基溴化鎂(於THF中3.0 M，0.1 mL, 0.30 mmol)。添加後，將混合物在30℃下攪拌約3 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-[外消旋-(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]乙酮(4 mg, 15%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.41 - 7.35 (m, 3H), 7.26 - 7.24 (m, 2H), 6.16 - 6.14 (m, 0.5H), 6.01 - 6.00 (m, 0.5H), 5.62 - 5.58 (m, 1H), 3.77 - 3.68 (m, 1H), 2.85 - 2.74 (m, 1H), 2.55 (s, 3H)。LCMS RT = 0.954 min,m/z = 246.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.954 min，ESI+實驗值[M+H] = 246.2。方法 35 實例51 實例52[(1S,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及 [(1R,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.53 mmol)及反式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(157 mg, 1.06 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.64 mL, 1.60 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(30 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之37-67%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈深紅色固體之[反式-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(25 mg, 16%)。藉由對掌性SFC進一步分離此物質，得到任意分配之以下：
[(1S,2R)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.130 min) (11.2 mg, 44%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.51 - 7.33 (m, 3H), 7.30 - 7.28 (m, 2H), 6.21 - 6.03 (m, 1H), 5.68 - 5.64 (m, 1H), 5.02 - 4.94 (m, 1H), 4.84 - 4.80 (m, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 1H), 3.47 - 3.44 (m, 1H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H)。LCMS RT = 1.765 min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經2.0 min)，滯留時間1.765 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。
[(1R,2S)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.464 min) (10.2 mg, 40%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.51 - 7.33 (m, 3H), 7.32 - 7.20 (m, 2H), 6.21 - 6.04 (m, 1H), 5.70 - 5.62 (m, 1H), 5.00 - 4.82 (m, 1H), 3.83 - 3.70 (m, 1H), 3.47 - 3.42 (m, 1H), 2.90 - 2.77 (m, 1H), 1.74 - 1.63 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H)。LCMS RT = 1.756 min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經2.0 min)，滯留時間1.756 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。
SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 150 × 4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min。方法 36 實例53(1- 氟環丙基 )(7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 1- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基環丙烷甲醯胺
將1-氟環丙烷甲酸(150 mg, 1.44 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(465 mg, 3.60 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(712 mg, 1.87 mmol)及N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(183 mg, 1.87 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用飽和氯化銨水溶液(15 mL)稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。用水(2 × 20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之1-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(140 mg, 66%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 3.75 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 1.31 - 1.21 (m, 4H)。 步驟 2 ： (1- 氟環丙基 )( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)及1-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(52 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.21 mL, 0.53 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/ 0.05% HCl)純化殘餘物，得到粗產物(20 mg)。藉由製備型TLC (於石油醚中之30%乙酸乙酯，Rf = 0.3)進一步純化此粗製品，得到呈淺黃色油狀物之(1-氟環丙基)(外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(10.2 mg, 19%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.37 (m, 3H), 7.23 - 7.21 (m, 2H), 6.09 - 6.07 (m, 0.5H), 5.96 - 5.93 (m, 0.5H), 5.51 - 5.50 (m, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 1H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 1.92 - 1.88 (m, 2H), 1.62 - 1.58 (m, 2H)。LCMS RT = 1.726 min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間：1.726 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。方法 37 實例54((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(3- 甲基氧雜環丁 -3- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(80 mg, 0.28 mmol)及N-甲氧基-N,3-二甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(90 mg, 0.57 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.34 mL, 0.85 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈粉色固體之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-(3-甲基氧雜環丁-3-基)甲酮(16.3 mg, 19%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.37 (m, 3H), 7.25 - 7.23 (m, 2H), 6.17 - 6.15 (m, 0.5H), 6.03 - 6.01 (m, 0.5H), 5.65 - 5.62 (m, 1H), 5.09 - 5.02 (m, 2H), 4.52 - 4.26 (m, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 1H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 1.74 (s, 3H)。LCMS RT = 0.675 min,m/z = 302.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.675 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.1。方法 38 實例55((5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(3- 甲基氧雜環丁 -3- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N,3- 二甲基氧雜環丁烷 -3- 甲醯胺
將N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(252 mg, 2.58 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(396 mg, 2.07 mmol)、3-甲基氧雜環丁烷-3-甲酸(200 mg, 1.72 mmol)、1-羥基苯并三唑(140 mg, 1.03 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(556 mg, 4.31 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用水(30 mL)稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製N-甲氧基-N,3-二甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(270 mg, 98%)。此粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.96 - 4.93 (m, 2H), 4.29 - 4.27 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 1.66 (s, 3H)。 步驟 2 ： ((5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(3- 甲基氧雜環丁 -3- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向(5R,7R)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.35 mmol)及N-甲氧基-N,3-二甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(113 mg, 0.71 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.43 mL, 1.06 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈粉色固體之[(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-(3-甲基氧雜環丁-3-基)甲酮(13.6 mg, 13%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.37 (m, 3H), 7.25 - 7.23 (m, 2H), 6.17 - 6.15 (m, 0.5H), 6.03 - 6.01 (m, 0.5H), 5.65 - 5.62 (m, 1H), 5.09 - 5.02 (m, 2H), 4.52 - 4.26 (m, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 1H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 1.74 (s, 3H)。LCMS RT = 0.678 min,m/z = 302.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.678 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.1。方法 39 實例563- 氧雜二環 [3.1.0] 己 -6- 基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -3- 氧雜二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲醯胺
將3-氧雜二環[3.1.0]己烷-6-甲酸(反式，300 mg, 2.34 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(297 mg, 3.04 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(1157 mg, 3.04 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(756 mg, 5.85 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用水(30 mL)稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-3-氧雜二環[3.1.0]己烷-6-甲醯胺(180 mg, 45%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 3.95 - 3.93 (m, 2H), 3.80 - 3.78 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.17 - 2.09 (m, 3H)。 步驟 2 ： 3- 氧雜二環 [3.1.0] 己 -6- 基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-3-氧雜二環[3.1.0]己烷-6-甲醯胺(61 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.21 mL, 0.53 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(2.2 mg, 3.9%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.39 (m, 3H), 7.27 - 7.26 (m, 2H), 6.12 - 5.96 (m, 1H), 5.53 - 5.49 (m, 1H), 4.02 - 3.99 (m, 2H), 3.82 - 3.80 (m, 2H), 3.70 - 3.61 (m, 1H), 3.07 - 3.05 (m, 1H), 3.02 - 2.95 (m, 1H), 2.45 - 2.43 (m, 2H)。LCMS RT = 0.821 min,m/z = 313.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.821 min，ESI+實驗值[M+H] = 313.9。方法 40 實例57氧雜環丁 -3- 基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 - 氧雜環丁烷 -3- 甲醯胺
將氧雜環丁烷-3-甲酸(300 mg, 2.94 mmol)、1,1'-羰基二咪唑(524 mg, 3.23 mmol)及N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(286 mg, 2.94 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用水(20 mL)稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之60%乙酸乙酯，Rf = 0.3)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(60 mg, 14%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.92 - 4.89 (m, 2H), 4.80 - 4.76 (m, 2H), 4.19 - 4.13 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.21 (s, 3H)。 步驟 2 ：氧雜環丁 -3- 基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(38 mg, 0.13 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-氧雜環丁烷-3-甲醯胺(39 mg, 0.27 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(-70℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.16 mL, 0.40 mmol)。添加後，將混合物在-70℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之氧雜環丁-3-基-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(6.3 mg, 15.5%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.40 (m, 3H), 7.27 - 7.23 (m, 2H), 6.11 - 5.95 (m, 1H), 5.50 - 5.49 (m, 1H), 4.97 - 4.90 (m, 4H), 4.72 - 4.68 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H)。LCMS RT = 0.782 min,m/z = 287.9 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.782 min，ESI+實驗值[M+H] = 287.9。方法 41 實例58[1-( 羥基甲基 ) 環丙基 ]-[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-((( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙烷甲酸
向1-(羥基甲基)環丙烷甲酸(200 mg, 1.72 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(532 mg, 3.53 mmol)及咪唑(240 mg, 3.53 mmol)。將混合物在25℃下攪拌5 h，且接著藉由添加水(10 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於乙腈(6 mL)/水(6 mL)中且添加氫氧化鈉(138 mg, 3.44 mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌10 h，且接著藉由添加檸檬酸調整至pH = 4。用乙酸乙酯萃取(2 × 20 mL)溶液。使合併之有機層乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製1-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丙烷甲酸(400 mg, 100%)。 步驟 2 ： 1-((( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 甲基 )-N- 甲氧基 -N- 甲基環丙烷甲醯胺
將1-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丙烷甲酸(400 mg, 1.74 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(423 mg, 4.34 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(499 mg, 2.6 mmol)、1-羥基苯并三唑(235 mg, 1.74 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1.23 mL, 6.95 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌18 h。使所得混合物在水(30 mL)與二氯甲烷(30 mL)之間分配。使經分離之有機層乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之1-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(200 mg, 42%)。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.848 min，ESI+實驗值[M+H] = 274.1。 步驟 3 ： (1-((( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙基 )[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H - 吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(60 mg, 0.21 mmol)及1-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(116 mg, 0.43 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.26 mL, 0.64 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之[1-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丙基]-[順式 - 7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(34 mg, 38%)。 步驟 4 ： [1-( 羥基甲基 ) 環丙基 ]-[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
將[1-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丙基]-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(34 mg, 0.08 mmol)及2,2,2-三氟乙酸(0.50 mL)於二氯甲烷(3 mL)中之混合物在20℃下攪拌2 h，且接著在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之30-60%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之[1-(羥基甲基)環丙基]-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(4.1 mg, 16%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.37 (m, 3H), 7.27 - 7.25 (m, 2H), 6.17 - 6.15 (m, 0.5H), 6.03 - 6.01 (m, 0.5H), 5.63 - 5.61 (m, 1H), 3.96 - 3.85 (m, 2H), 3.77 - 3.71 (m, 1H), 2.86 - 2.75 (m, 1H), 1.71 - 1.67 (m, 2H), 1.10 - 1.07 (m, 2H)。LCMS RT = 0.648min,m/z = 302.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.648 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.1。方法 42 實例59 實例60((1S)-2,2- 二氟環丙基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及 ((1R)-2,2- 二氟環丙基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 2,2- 二氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基環丙烷甲醯胺
將2,2-二氟環丙烷甲酸(1.00 g, 8.19 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(2646 mg, 20.5 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(4.05 g, 10.6 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.04 g, 10.7 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用飽和氯化銨水溶液(20 mL)稀釋反應混合物，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。用水(2 × 20 mL)、鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2,2-二氟-N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(700 mg, 52%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 3.77 (s, 3 H), 3.26 (s, 3 H), 2.96 - 2.91 (m, 1 H), 2.16-2.12 (m, 1 H), 1.69-1.65 (m, 1 H)。 步驟 2 ： ((1S)-2,2- 二氟環丙基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及 ((1R)-2,2- 二氟環丙基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(300 mg, 1.06 mmol)及2,2-二氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(351 mg, 2.13 mmol)於四氫呋喃(15 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，1.28 mL, 3.19 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/ 0.225% HCl)純化殘餘物，得到呈白色固體之(2,2-二氟環丙基)-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(120 mg, 37%)。藉由對掌性SFC進一步分離此物質，得到任意分配之以下：
((1S)-2,2-二氟環丙基)((5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(峰1，滯留時間= 2.069 min) (35.0 mg, 29%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.42 - 7.38 (m, 3H), 7.31 - 7.29 (m, 2H), 6.21 - 6.19 (m, 0.5H), 6.07 - 6.05 (m, 0.5H), 5.68 - 5.66 (m, 1H), 3.85 - 3.76 (m, 2H), 2.86 - 2.83 (m, 1H), 2.32 - 2.28 (m, 1H), 1.96 - 1.93 (m, 1H)。LCMS RT = 1.834min, m/z = 308.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間：1.834 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。
((1R)-2,2-二氟環丙基)((5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(峰2，滯留時間= 3.055 min) (35.0 mg, 29%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.41 (m, 3H), 7.30 - 7.28 (m, 2H), 6.21 - 6.19 (m, 0.5H), 6.07 - 6.05 (m, 0.5H), 5.66 - 5.65 (m, 1H), 3.87 - 3.74 (m, 2H), 2.89 - 2.79 (m, 1H), 2.33 - 2.28 (m, 1H), 1.98 - 1.97 (m, 1H)。LCMS RT =1.822 min, m/z = 308.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間：1.822 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。
SFC條件：管柱Chiralcel OD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 ，B：異丙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃。方法 43 實例61(1- 氟環丙基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在氮氣氛下向1-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(313 mg, 2.13 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(300 mg, 1.06 mmol)於四氫呋喃(30 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，1.28 mL, 3.19 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮且藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/0.05% HCl)且接著藉由製備型TLC (於石油醚中之30%乙酸乙酯，Rf = 0.3)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之(1-氟環丙基)((5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(80 mg, 25%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.40 - 7.37 (m, 3H), 7.23 - 7.21 (m, 2H), 6.09 - 6.07 (m, 0.5H), 5.96 - 5.94 (m, 0.5H), 5.51 - 5.49 (m, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 1H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 1.92 - 1.88 (m, 2H), 1.62 - 1.60 (m, 2H)。LCMS RT = 1.736min,m/z = 290.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間：1.736 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。方法 44 實例62環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在氮氣氛下在0℃下向2-氟苯甲醛(15.0 g, 120.86 mmol)於四氫呋喃(250 mL)中之溶液添加烯丙基溴化鎂(於四氫呋喃中1.0 M，150.0 mL, 150.0 mmol)。添加後，使混合物升溫至25℃且攪拌2 h，之後藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(2-氟苯基)丁-3-烯-1-醇(6.0 g, 24%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.49 - 7.27 (m, 1H), 7.29 - 7.12 (m, 2H), 7.05 - 7.00 (m, 1H), 5.89 - 5.80 (m, 1H), 5.20 - 5.13 (m, 2H), 5.15 - 5.07 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 1H), 2.57 - 5.48 (m, 1H)。 步驟 2 ：第三丁基 ((1-(2- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 二甲基矽烷
向1-(2-氟苯基)丁-3-烯-1-醇(6.0 g, 36.1 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液添加咪唑(4.9 g, 72.2 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(7.1 g, 146.9 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，100%石油醚)純化殘餘物，得到呈輕質油狀物之第三丁基-[1-(2-氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(8.5 g, 84%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.60 - 7.36 (m, 1H), 7.34 - 7.18 (m, 2H), 7.13 - 7.02 (m, 1H), 5.97 - 5.85 (m, 1H), 5.21 - 5.07 (m, 3H), 2.60 - 2.48 (m, 2H), 0.99 (s, 9H), 0.15 (s, 3H), 0.00 (s, 3H)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2- 氟苯基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(2-氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(8.50 g, 30.3 mmol)於水(100 mL)及四氫呋喃(100 mL)中之溶液添加四氧化鋨(0.15 g, 0.6 mmol)。在25℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(25.90 g, 121.2 mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌2 h，且藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(100 mL)來淬滅。將混合物攪拌30 min，且接著用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取。用水(50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黑色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氟苯基)丙醛(5.5 g, 64%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 9.84 - 9.77 (m, 1H), 7.53 - 7.51 (m, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 1H), 7.09 - 6.98 (m, 1H), 5.58 - 5.55 (m, 1H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.74 - 2.64 (m, 1H), 0.92 - 0.85 (m, 9H), 0.09 (s, 3H), - 0.09 (s, 3H)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2- 氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(6.3 g, 20.1 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，8.6 mL, 21.4 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氟苯基)丙醛(5.5 g, 19.5 mmol)於四氫呋喃(25 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氟苯基)丙-1-醇(8.0 g, 80%)。其原樣用於下一步驟中。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氟苯基)丙-1-醇(8.0 g, 15.55 mmol)及三氟乙酸(30.0 mL)於二氯甲烷(3.0 mL)中之混合物在50℃下攪拌5 h且在減壓下濃縮。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液將殘餘物調整至pH = 9且用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取。用水(50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之2-溴-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(2.0 g, 43%)。LCMS RT = 0.505 min, m/z = 298.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.505 min，ESI+實驗值[M+H] =298.1。 步驟 6 ： (5S,7S)-2- 溴 -7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向2-溴-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(750 mg, 2.52 mmol)於甲苯(20 mL)中之溶液添加二乙胺基三氟化硫(1.62 g, 10.0 6 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1 h，且接著在0℃下緩慢添加至冰水(20 mL)中。用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取該混合物。用水(50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至15%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之外消旋-(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(250 mg, 33%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.40 - 7.27 (q,J = 6.6 Hz, 1H), 7.20 - 7.10 (m, 2H), 7.01 - 6.97 (m, 1H), 6.10 - 5.89 (m, 1H), 5.84 - 5.75 (m, 1H), 3.70 - 3.53 (m, 1H), 2.96 - 2.75 (m, 1H)。LCMS RT = 1.112 min, m/z = 300.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.112 min，ESI+實驗值[M+H] =300.0。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰2，滯留時間= 3.408 min) (100 mg, 40%)，呈白色固體。(亦收集5R,7R-異構物(峰1，滯留時間= 3.139 min) (100 mg, 40%))。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在-78℃下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.33 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(86 mg, 0.67 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.27 mL, 0.67 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/0.05%氫氧化銨)純化殘餘物，得到呈黃色固體之任意分配之環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(7.2 mg, 7%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.47 - 7.41 (m, 1H), 7.25 - 7.18 (m, 2H), 7.16 - 7.13 (m, 1H), 6.22 - 6.06 (m, 1H), 5.92 - 5.88 (m, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 3.08 - 3.02 (m, 1H), 2.93 - 2.78 (m, 1H), 1.22 - 1.17 (m, 2H), 1.15 - 1.09 (m, 2H)。LCMS RT = 1.043 min, m/z = 290.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間1.043 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.2。方法 45 實例63(S)- 環丙基 (5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在-78℃下在氮氣氛下向(5S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(100 mg, 0.36 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液逐滴添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，0.72 mL, 0.36 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40-50%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[(5S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(50 mg, 51%) (80% ee)。藉由對掌性SFC進一步純化產物，得到呈棕色油狀物之任意分配之(S)-環丙基(5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(17.5 mg, 34%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.35 (m, 1H), 7.23 - 7.16 (m, 3H), 5.81 - 5.77 (m, 1H), 3.37 - 3.29 (m, 1H), 3.21 - 3.03 (m, 2H), 2.99 - 2.93 (m, 1H), 2.77 - 2.65 (m, 1H), 1.16 - 1.09 (m, 2H), 1.09 - 1.00 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.699 min,m/z = 272.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.699 min，ESI+實驗值[M+H] = 272.1。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 46 實例64(3,3- 二氟環丁基 )((5R,7R)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在-78℃下向3,3-二氟-N-甲氧基-N-甲基-環丁烷甲醯胺(76 mg, 0.43 mmol)及(5R,7R)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(60 mg, 0.21 mmol)於四氫呋喃(13 mL)中之溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.26 mL, 0.64 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(25 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/0.225%鹽酸)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之(3,3-二氟環丁基)-[(5R,7R)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(11.0 mg, 16%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.38 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 6.19 - 6.17 (m, 0.5H), 6.05 - 6.03 (m, 0.5H), 5.64 - 5.63 (m, 1H), 3.94 - 3.93 (m, 1H), 3.79 - 3.75 (m, 1H), 2.90 - 2.82 (m, 5H)。LCMS RT = 1.904 min,m/z = 322.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.904 min，ESI+實驗值[M+H] =322.1。方法 47 實例66及67[(5S)-7,7- 二氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1S,2R)-2- 氟環丙基 ] 甲酮及 [(5S)-7,7- 二氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1R,2S)-2- 氟環丙基 ] 甲酮 步驟 1 ： 2- 溴 -5- 苯基 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7(6H)- 酮
向2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(2.0 g, 7.14 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之溶液添加氯鉻酸吡啶鎓(1.7 g, 7.85 mmol)。將混合物在20℃下攪拌18 h，且接著過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之2-溴-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-酮(1.8 g, 88%)。其原樣用於下一步驟中。 步驟 2 ： (S)-2- 溴 -7,7- 二氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向2-溴-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-酮(1.7 g, 6.11 mmol)於二氯甲烷(80 mL)中之經冷卻溶液添加二乙胺基三氟化硫(7.88 mL, 61.13 mmol)。在25℃下攪拌2 h後，將混合物傾倒至冰水(10 mL)中且用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈粉色固體之外消旋2-溴-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(1.5 g, 82%)。LC-MS RT = 0.774 min,m/z = 303.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.774 min，ESI+實驗值[M+H] = 303.1。
藉由對掌性SFC進一步分離外消旋物質(950 mg, 3.17 mmol)，得到任意分配之以下：
(5R)-2-溴-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰1，滯留時間= 2.308 min) (410 mg, 43%)，呈淺棕色固體。
(5S)-2-溴-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰2，滯留時間= 2.614 min) (440 mg, 46%)，呈淺棕色固體。
SFC條件：管柱：OJ (250 mm*50 mm, 10 um)；移動相：A：CO2 B：0.1% NH3 H2 O EtOH，梯度：20%至20%之B；流速：180 mL/min，管柱溫度：40℃。 步驟 3 ： [(5S)-7,7- 二氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1S,2R)-2- 氟環丙基 ] 甲酮及 [(5S)-7,7- 二氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1R,2S)-2- 氟環丙基 ] 甲酮
在-78℃下在氮氣氛下向(5S)-2-溴-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(200 mg, 0.67 mmol)及反式 - 2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(196 mg, 1.33 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之混合物逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.8 mL, 2.0 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮至乾燥以得到粗產物，其藉由RP-HPLC (於水中之45-75%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)進行純化，得到呈棕色油狀物之[(5S)-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[反式-2-氟環丙基]甲酮(50 mg, 24%)。藉由對掌性SFC來分離此外消旋物質，得到任意分配之以下：
[(5S)-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[(1S,2R)-2-氟環丙基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.365 min) (15.1 mg, 30%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.49 - 7.44 (m, 3H), 7.33 - 7.30 (m, 2H), 5.99 - 5.92 (m, 1H), 5.02 - 5.00 (m, 0.5H), 4.86 - 4.82 (m, 0.5H), 3.89 - 3.86 (m, 1H), 3.51 - 3.47 (m, 1H), 3.34 - 3.33 (m, 0.5H), 3.32 - 3.22 (m, 0.5H), 1.78 - 1.70 (m, 1H), 1.63 - 1.57 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.822 min,m/z = 308.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.822 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.0。
[(5S)-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[(1R,2S)-2-氟環丙基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.163 min) (13.6 mg, 27%)，呈白色固體。
1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.47 - 7.43 (m, 3H), 7.31 - 7.29 (m, 2H), 5.98 - 5.94 (m, 1H), 5.05 - 4.99 (m, 0.5H), 4.86 - 4.83 (m, 0.5H), 3.91 - 3.86 (m, 1H), 3.47 - 3.45 (m, 1H), 3.34 - 3.26 (m, 1H), 1.74 - 1.68 (m, 1H), 1.62 - 1.56 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.818 min,m/z = 308.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.818 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。
SFC條件：管柱：管柱：AD (250 mm*30 mm, 5 μm)；移動相：A：CO2 B：0.1% NH3 H2 O EtOH；梯度：20%至20%之B；流速：50 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 48 實例68環丙基 -[(5S)-7,7- 二氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R)-7,7- 二氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在-78℃下向7,7-二氟-N-甲氧基-N-甲基-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(100 mg, 0.32 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，2.6 mL, 1.3 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-(7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(60 mg, 64%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.38 - 7.31 (m, 3H), 7.16 - 7.11 (m, 2H), 5.66 - 5.60 (m, 1H), 3.73 - 3.61 (m, 1H), 3.23 - 3.11 (m, 1H), 3.00 - 2.96 (m, 1H), 1.31 - 1.19 (m, 2H), 1.11 - 0.96 (m, 2H)。
藉由對掌性SFC進一步分離此外消旋物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S)-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 2.971 min) (22.4 mg, 37%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.45 - 7.41 (m, 3H), 7.23 - 7.21 (m, 2H), 5.73 - 5.68 (m, 1H), 3.75 - 3.70 (m, 1H), 3.31 - 3.19 (m, 1H), 3.09 - 3.04 (m, 1H), 1.37 - 1.32 (m, 2H), 1.14 - 1.09 (m, 2H)。LCMS RT = 1.238 min,m/z =290.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.238 min，ESI+實驗值[M+H] =290.2。
環丙基-[(5R)-7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.677 min) (24.7 mg, 41%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.45 - 7.41 (m, 3H), 7.23 - 7.20 (m, 2H), 5.72 - 5.68 (m, 1H), 3.81 - 3.66 (m, 1H), 3.28 - 3.21 (m, 1H), 3.09 - 3.05 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 2H), 1.17 - 1.05 (m, 2H)。LCMS RT = 1.239 min,m/z =290.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.239 min，ESI+實驗值[M+H] =290.2。
SFC條件：管柱：Chiralcel OJ (250 mm*30 mm, 5 μm)，移動相：A：CO2 ，B：乙醇(0.1% NH3 H2 O)，梯度：5 min內25%至25%之B ：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃方法 49 實例70(2,2- 二氟螺 [2.3] 己 -5- 基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1,1- 二氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基螺 [2.3] 己烷 -5- 甲醯胺
將1-羥基苯并三唑(83 mg, 0.62 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(180 mg, 1.85 mmol)、2,2-二氟螺[2.3]己烷-5-甲酸(200 mg, 1.23 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(284 mg, 1.48 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(478 mg, 3.70 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h，且用水(30 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2,2-二氟-N-甲氧基-N-甲基-螺[2.3]己烷-5-甲醯胺(130 mg, 51%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 3.67 (s, 3H), 3.65 - 3.51 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.78 - 2.68 (m, 1H), 2.57 - 2.47 (m, 1H), 2.48 - 2.37 (m, 1H), 2.28 - 2.17 (m, 1H), 1.32 - 1.13 (m, 2H)。 步驟 2 ： (2,2- 二氟螺 [2.3] 己 -5- 基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)及2,2-二氟-N-甲氧基-N-甲基-螺[2.3]己烷-5-甲醯胺(73 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻 (-78℃)溶液添加正丁基鋰(於正己烷中2.5 M，0.28 mL, 0.71 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之47-77%乙腈/ 0.2%甲酸)純化殘餘物，得到呈白色固體之(2,2-二氟螺[2.3]己-5-基)-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(10.8 mg, 17%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.38 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.18 - 6.02 (m, 1H), 5.64 - 5.62 (m, 1H), 4.24 - 4.08 (m, 1H), 3.87 - 3.64 (m, 1H), 2.91 - 2.74 (m, 1H), 2.68 - 2.28 (m, 4H), 1.32 - 1.23 (m, 2H)。LCMS RT = 1.281 min及1.298 min，m/z = 348.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.281 min及1.298 min，ESI+實驗值[M+H] = 348.1方法 50 實例711-[(5S)-5-(2- 氯苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮 步驟 1 ： 4-(2- 氯苯基 )-4- 側氧基丁酸 乙基酯
在-60℃下向2-氯苯乙酮(100.0 g, 646.87 mmol)、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氫-2(1h)-嘧啶酮(156.4 mL, 1293.70 mmol)於四氫呋喃(500 mL)中之溶液添加[雙(三甲基矽基)胺基]鋰(於四氫呋喃中1.0 M，711.6 mL, 711.56 mmol)。將混合物在-60℃下攪拌100 min且快速添加溴乙酸乙酯(143.5 mL, 1293.7 mmol)。使所得混合物升溫至25℃且攪拌15 h。藉由添加水(400 mL)使反應物淬滅且用乙酸乙酯(3 × 1000 mL)萃取。用水(2 × 500 mL)、鹽水(1500 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之4-(2-氯苯基)-4-側氧基-丁酸乙基酯(50.0 g, 32%)。其原樣用於下一步驟中。 步驟 2 ： (2-(2- 氯苯基 )-5- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 胺基甲酸第三丁基酯
向4-(2-氯苯基)-4-側氧基-丁酸乙基酯(10.0 g, 41.55 mmol)於乙酸(33 mL)及四氫呋喃(100 mL)中之溶液添加肼甲酸第三丁基酯(11.0 g, 83.10 mmol)。將混合物在85℃下攪拌12 h且添加氰基硼氫化鈉(7.8 g, 124.65 mmol)。將所得混合物在85℃下再攪拌12 h且在減壓下濃縮。用水(100 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 80 mL)萃取。用飽和碳酸鈉(80 mL)、鹽酸(2 M, 80 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之20%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之N-[2-(2-氯苯基)-5-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基甲酸第三丁基酯(5.0 g, 39%)。LCMS RT = 0.840 min,m/z = 255.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.840 min，ESI+實驗值[M-55] = 255.0。 步驟 3 ： 1- 胺基 -5-(2- 氯苯基 ) 吡咯啶 -2- 酮
將N-[2-(2-氯苯基)-5-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基甲酸第三丁基酯(5.0 g, 16.09 mmol)於鹽酸(於1,4-二噁烷中4.0 M，40.2 mL, 160.89 mmol)中之溶液在25℃下攪拌12 h且過濾。用乙酸乙酯(20 mL)洗滌濾餅且溶解於水(20 mL)中。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液將溶液調整至pH = 9，且用二氯甲烷(4 × 50 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製1-胺基-5-(2-氯苯基)吡咯啶-2-酮(3.3 g, 97%)。LCMS RT = 0.615 min,m/z = 211.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.615 min，ESI+實驗值[M+H] = 211.0。 步驟 4 ： 1- 胺基 -5-(2- 氯苯基 ) 吡咯啶 -2- 酮
將1-胺基-5-(2-氯苯基)吡咯啶-2-酮(3.3 g, 15.67 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(4.6 g, 31.33 mmol)於乙醇(50 mL)中之混合物在70℃下攪拌18 h且在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製2-[[2-(2-氯苯基)-5-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(4.8 g, 99%)。LCMS RT = 0.675 min,m/z = 310.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.675 min，ESI+實驗值[M+H] = 310.0。 步驟 5 ： (S)-5-(2- 氯苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將2-[[2-(2-氯苯基)-5-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(4.8 g, 15.5 mmol)及磷醯氯(21.4 g, 139.5 mmol)之混合物在100℃下攪拌3 h且冷卻至25℃。將混合物小心地傾倒至水(100 mL)中，且用乙酸乙酯(3 × 50 ml)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(3.0 g, 66%)。LCMS RT = 0.741 min,m/z = 292.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.741 min，ESI+實驗值[M+H] = 292.1。
藉由SFC進一步分離以上外消旋物質(1.0 g, 3.43 mmol)，得到任意分配之以下：
(S)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(峰2，滯留時間= 4.111 min) (400 mg, 40%)及(R)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(峰1，滯留時間= 3.762 min) (400 mg, 40%)，二者均為黃色固體。
SFC條件：管柱：AD-3 (250 mm*30 mm , 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B 30%結束B 30%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。 步驟 6 ： (S)-5-(2- 氯苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
將(S)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(400 mg, 1.37 mmol)及氫氧化鋰一水合物(287 mg, 6.86 mmol)於乙醇(2 mL)、水(2mL)及四氫呋喃(2 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h且在減壓下濃縮。用冰水(2 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加鹽酸(2 M)調整至pH = 3。藉由過濾收集固體產物且用乙腈洗滌，得到呈白色固體之粗製(S)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(350 mg, 97%)。LCMS RT = 0.642 min,m/z = 264.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.642 min，ESI+實驗值[M+H] = 264.0。 步驟 7 ： (S)-5-(2- 氯苯基 )-N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將1-羥基苯并三唑(215 mg, 1.59 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(194 mg, 1.99 mmol)、(S)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(350 mg, 1.33 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(305 mg, 1.59 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(515 mg, 3.98 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h。用水(15 mL)稀釋反應物，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。用鹽水(2 × 25 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之10%至35%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(S)-5-(2-氯苯基)-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(300 mg, 74%)。LCMS RT = 0.700 min,m/z = 307.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.700 min，ESI+實驗值[M+H] = 307.0。 步驟 8 ： 1-[(5S)-5-(2- 氯苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 丙 -1- 酮
向(S)-5-(2-氯苯基)-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(20 mg, 0.07 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加乙基溴化鎂(於己烷中1.0 M，0.42 mL, 0.42 mmol)。將混合物在0-5℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(5 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取該混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之32-62%乙腈/ 0.2%甲酸)純化殘餘物，得到呈白色固體之1-[(5S)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]丙-1-酮(5.7 mg, 31%)。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.52 - 7.50 (m, 1H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 6.96 - 6.94 (m, 1H), 5.99 - 5.96 (m, 1H), 3.40 - 3.33 (m, 1H), 3.14 - 3.11 (m, 2H), 3.07 - 3.03 (m, 2H), 2.68 - 2.65 (m, 1H), 1.18 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 1.185 min,m/z = 276.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.185 min，ESI+實驗值[M+H] = 276.1方法 51 實例72[1-( 羥基甲基 ) 環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-( 乙氧基羰基 ) 環丙烷甲酸
向1,1-環丙烷二甲酸二乙基酯(10.0 g, 53.7 mmol)於乙醇(70 mL)及水(35 mL)中之混合物添加氫氧化鈉(2.1 g, 53.7 mmol)。將反應物在25℃下攪拌16 h且用乙酸乙酯(60 mL)稀釋。棄掉有機層。藉由添加鹽酸水溶液(4 M)將水相調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 80 mL)萃取該混合物。用鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製1-乙氧基羰基環丙烷甲酸(6.6 g, 78%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 12.86 (br s, 1H), 4.31 - 4.17 (m, 2H), 1.87 - 1.81 (m, 2H), 1.77 - 1.69 (m, 2H), 1.32 - 1.24 (m, 3H)。 步驟 2 ： 1-( 羥基甲基 ) 環丙烷甲酸乙基酯
在0℃下向1-乙氧基羰基環丙烷甲酸(6.6 g, 41.7 mmol)及三乙胺(6.98 mL, 50.1 mmol)於四氫呋喃(60 mL)中之混合物逐滴添加氯甲酸異丁酯(8.12 ml, 62.6 mmol)。添加後，將反應物在0℃下攪拌1 h且過濾。接著將濾液添加至硼氫化鈉(1.6 g, 41.7 mmol)於四氫呋喃(40 mL)及水(10 mL)中之混合物。將所得混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加10%乙酸(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取該混合物。用鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之1-(羥基甲基)環丙烷甲酸乙基酯(3.8 g, 63%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.17 - 4.08 (m, 2H), 3.62 (s, 2H), 1.29 - 1.21 (m, 5H), 0.87 - 0.84 (m, 2H)。 步驟 3 ： 1-((( 第三丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙烷甲酸乙基酯
在0℃下向1-(羥基甲基)環丙烷-1-甲酸乙基酯(1.0 g, 6.94 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之經攪拌溶液添加咪唑(1.4 g, 20.81 mmol)及第三丁基二苯基氯矽烷(3.8 g, 13.87 mmol)。將混合物在25℃下攪拌18 h且傾倒至水(30 mL)中。用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]環丙烷甲酸乙基酯(2.3 g, 87%)。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.70 - 7.61 (m, 4H), 7.46 - 7.35 (m, 6H), 4.15 - 4.06 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 1.23 (t,J = 7.0 Hz, 3H), 1.17 - 1.11 (m, 2H), 1.04 (s, 9H), 0.93 - 0.87 (m, 2H)。 步驟 4 ： 1-((( 第三丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙烷甲酸
將1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]環丙烷甲酸乙基酯(1.0 g, 2.61 mmol)及氫氧化鋰一水合物(438 mg, 10.46 mmol)於四氫呋喃(16 mL)、甲醇(16 mL)及水(8 mL)中之混合物在25℃下攪拌18 h。將有機溶劑在減壓下去除。用乙酸乙酯(15 mL)洗滌水性殘餘物，且藉由在0℃下添加鹽酸水溶液(4 M)調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈螢光棒白色固體之粗製1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]環丙烷甲酸(950 mg, 100%)。此粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。 步驟 5 ： 1-((( 第三丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 )-N- 甲氧基 -N- 甲基環丙烷甲醯胺
將1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]環丙烷甲酸(950 mg, 2.68 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(523 mg, 5.36 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(1.43 mL, 8.04 mmol)、1-羥基苯并三唑(217 mg, 1.61 mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(771 mg, 4.02 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之混合物在25℃下攪拌18 h。將所得混合物傾倒至水(20 mL)中且用二氯甲烷(3 × 10 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之15%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(700 mg, 66%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.68 - 7.63(m, 4H), 7.42 - 7.25 (m, 6H), 3.79 (s, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 1.04 - 0.99 (m, 9H), 0.75 - 0.71 (m, 2H)。 步驟 6 ： (1-((( 第三丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 ) 環丙基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在-78℃下在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.35 mmol)及1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(282 mg, 0.71 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之混合物逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.43 mL, 1.06 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之[1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(60 mg, 31%)。 步驟 7 ： [1-( 羥基甲基 ) 環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向[1-[[第三丁基(二苯基)矽基]氧基甲基]環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(60 mg, 0.11 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，0.17 mL, 0.17 mmol)。將混合物在25℃下攪拌3 h且傾倒至水(10 mL)中。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。用鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之25-55%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之任意分配之[1-(羥基甲基)環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(7.8 mg, 18%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.30 - 7.26 (m, 2H), 6.19 - 6.16 (m, 0.5H), 6.05 - 6.02 (m, 0.5H), 5.65 - 5.61 (m, 1H), 3.97 - 3.85 (m, 2H), 3.84 - 3.68 (m, 1H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 1.72 - 1.67 (m, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.695 min,m/z = 302.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.695 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.1。方法 52 實例73(3,3- 二氟環丁基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 3,3- 二氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基環丁烷甲醯胺
將1-羥基苯并三唑(297 mg, 2.20 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(845 mg, 4.41 mmol)、3,3-二氟環丁烷羧酸(500 mg, 3.67 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(537 mg, 5.51 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1187 mg, 9.18 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之混合物在25℃下攪拌5 h，且用水(20 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。用水(2 × 20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3,3-二氟-N-甲氧基-N-甲基-環丁烷甲醯胺(430 mg, 65%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 3.67 (s, 3H), 3.33 - 3.22 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.93 - 2.78 (m, 2H), 2.76 - 2.64 (m, 2H)。 步驟 2 ： (3,3- 二氟環丁基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在-78℃下向3,3-二氟-N-甲氧基-N-甲基-環丁烷甲醯胺(76 mg, 0.43 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(60 mg, 0.21 mmol)於四氫呋喃(13 mL)中之溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.26 mL, 0.64 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(25 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/0.225%鹽酸)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之(3,3-二氟環丁基)-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(12.4 mg, 18%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.39 (m, 3H), 7.30 - 7.28 (m, 2H), 6.20 - 6.17 (m, 0.5H), 6.06 - 6.03 (m, 0.5H), 5.66 - 5.64 (m, 1H), 3.97 - 3.80 (m, 1H), 3.78 - 3.74 (m, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 5H)。LCMS RT = 1.241 min,m/z = 322.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.241 min，ESI+實驗值[M+H] = 322.2。方法 53 實例74((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(2-( 吡啶 -2- 基 ) 環丙基 ) 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 ) 環丙烷甲醯胺
將1-羥基苯并三唑(149 mg, 1.10 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(423 mg, 2.21 mmol)、2-(吡啶-2-基)環丙烷甲酸(300 mg, 1.84 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(269 mg, 2.76 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(594 mg, 4.60 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且用水(20 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-2-(吡啶-2-基)環丙烷甲醯胺(300 mg, 79%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.47 - 8.43 (m, 1H), 7.57 - 7.51 (m, 1H), 7.27 - 7.22 (m, 1H), 7.10 - 7.02 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.76 (s, 1H), 2.61 - 2.52 (m, 1H), 1.63 - 1.55 (m, 2H)。 步驟 2 ： ((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(2-( 吡啶 -2- 基 ) 環丙基 ) 甲酮
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.53 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-2-(2-吡啶基)環丙烷甲醯胺(219 mg, 1.06 mmol)於2-甲基四氫呋喃(3 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加正丁基鋰(於正己烷中2.5 M，0.64 mL, 1.6 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌約30 min且藉由添加飽和氯化銨溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之32-62%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈微粉色固體之任意分配之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[2-(2-吡啶基)環丙基]甲酮(11.0 mg, 6%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.39 - 8.37 (m, 1H), 7.69 - 7.65 (m, 1H), 7.42 - 7.31 (m, 4H), 7.27 - 7.17 (m, 3H), 6.18 - 6.02 (m, 1H), 5.65 - 5.61 (m, 1H), 3.83 - 3.67 (m, 1H), 3.56 - 3.51 (m, 1H), 2.88 - 2.73 (m, 2H), 1.86 - 1.79 (m, 2H)。LCMS RT = 0.745 min,m/z = 348.9 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間0.745 min，ESI+實驗值[M+H] =348.9。方法 54 實例75[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[ 外消旋 -(1S,2S)-2- 甲基環丙基 ] 甲酮
在0℃下在氮氣氛下向反式-N-甲氧基-N,2-二甲基-環丙烷甲醯胺(137 mg, 0.96 mmol)、(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(180 mg, 0.64 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之溶液逐滴添加異丙基溴化鎂(於四氫呋喃中3.0 M，0.85 mL, 2.55 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取所得溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之30%乙酸乙酯，Rf = 0.2)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(1S,2S)-2-甲基環丙基]甲酮(反式混合物甲基環丙基混合物) (80 mg, 44%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.42 - 7.37 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.20 - 6.16 (m, 0.5H), 6.05 - 6.02 (m, 0.5H), 5.65 - 5.63 (m, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 1H), 1.45 - 1.37 (m, 1H), 1.19 - 1.14 (m, 3H), 1.01 - 0.91 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.793 min,m/z = 286.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.793 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.1。方法 55 實例76[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 螺 [2.3] 己 -5- 基 - 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 - 螺 [2.3] 己烷 -5- 甲醯胺
將螺[2.3]己烷-5-甲酸(150 mg, 1.19 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(0.5 mL, 2.97 mmol)、1-羥基苯并三唑(96.4 mg, 0.71 mmol)及N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(174 mg, 1.78 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且用水(30 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-螺[2.3]己烷-5-甲醯胺(170 mg, 84%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 3.66 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.60 - 2.54 (m, 2H), 2.17 - 2.12 (m, 2H), 0.50 - 0.40 (m, 4H)。 步驟 2 ： [(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 螺 [2.3] 己 -5- 基 - 甲酮
在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-螺[2.3]己烷-5-甲醯胺(43 mg, 0.25 mmol)、(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.21 mL, 0.42 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(5 mL)來淬滅。接著用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (水(0.05%氫氧化氨v/v)- 45-70%乙腈)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-螺[2.3]己-5-基-甲酮(42 mg, 75%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.42 - 7.37 (m, 3H), 7.27 - 7.23 (m, 2H), 6.10 - 5.94 (m, 1H), 5.50 - 5.47 (m, 1H), 4.32 - 4.26 (m, 1H), 3.67 - 3.60 (m,1H), 3.01 - 2.70 (m, 1H), 2.65 - 2.57 (m, 2H), 2.31 - 2.26 (m, 2H), 0.51 - 0.47 (m, 2H), 0.43 - 0.40 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.904 min,m/z = 312.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.904 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 312.0。方法 56 實例77環丙基 -[(5S)-5-(2- 氯苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向(5S)-5-(2-氯苯基)-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(100 mg, 0.33 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，4.24 mL, 2.12 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之38-68%乙腈/ 0.2%甲酸)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之任意分配之環丙基-[(5S)-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(23.5 mg, 25%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.51 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.49 - 7.33 (m, 2H), 6.96 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 6.00 - 5.96 (m, 1H), 3.45 - 3.36 (m, 1H), 3.15 - 3.10 (m, 2H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.70 - 2.60 (m, 1H), 1.20 - 1.15 (m, 2H), 1.11 - 1.07 (m, 2H)。LCMS RT = 1.187 min, m/z = 288.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.187 min，ESI+實驗值[M+H] = 288.1方法 57 實例78環丙基 -[ 外消旋 -(4S,6S)-4- 氟 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(4S,6S)-4- 氟 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：外消旋 -(4S,6S)-4- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 甲醯胺
將外消旋-(4S,6S)-4-氟-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸(800 mg, 3.25 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(412 mg, 4.22 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(1.34 mL, 8.12 mmol)及2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V) (1.6 g, 4.22 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之混合物在25℃下攪拌3 h。用水(30 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之外消旋-(4S,6S)-4-氟-N-甲氧基-N-甲基-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲醯胺(800 mg, 85%)。LCMS RT = 0.707 min, m/z = 290.1 [M + H]+。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.707 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。 步驟 2 ：環丙基 -[ 外消旋 -(4S,6S)-4- 氟 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向外消旋-(4S,6S)-4-氟-N-甲氧基-N-甲基-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲醯胺之經冷卻(0℃)溶液(40 mg, 2.77 mmol)添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，1.5 mL, 0.75 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(5 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 15 mL)萃取該混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之環丙基-[外消旋-(4S,6S)-4-氟-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基]甲酮(28.6 mg, 75%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.36 (m, 3H), 7.27 - 6.90 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.09 - 5.92 (m, 1H), 5.53 - 5.49 (m, 1H), 3.58 - 3.47 (m, 1H), 2.97 - 2.79 (m, 2H), 1.22 - 1.19 (m, 2H), 0.99 - 0.96 (m, 2H)。LCMS RT = 0.870 min,m/z = 270.9 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.870 min，ESI+實驗值[M +H] = 270.9。 步驟 3 ：環丙基 -[(4S,6S)-4- 氟 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ] 甲酮 (G03280299)
藉由對掌性SFC進一步分離環丙基-[外消旋-(4S,6S)-4-氟-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基]甲酮(600 mg, 2.22 mmol，來自另一擴大規模批次)，得到任意分配之以下：
環丙基-[(4S,6S)-4-氟-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.306 min) (250 mg, 41.7%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.39 - 7.37 (m, 3H), 7.23 - 7.21 (m, 2H), 6.93 (d,J = 2.8Hz, 1H), 6.09 - 6.07(m, 0.5H), 5.95 - 5.93 (m, 0.5H), 5.51 - 5.49(m, 1H), 3.54 - 3.45 (m, 1H), 2.96 - 2.92 (m, 1H), 2.85 - 2.82 (m, 1H), 1.23 - 1.20 (m, 2H), 0.99 - 0.96 (m, 2H)。LCMS RT = 0.883 min,m/z = 271.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.883 min，ESI+實驗值[M+H] = 271.0。
SFC條件：管柱：OD-H (250 mm*30 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B 30%結束B 30%；流速(60 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 58 實例79[1-( 氟甲基 ) 環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-( 氟甲基 )-N- 甲氧基 -N- 甲基 - 環丙烷甲醯胺
將1-(氟甲基)環丙烷甲酸(543 mg, 4.60 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(1057 mg, 5.52 mmol)、1-羥基苯并三唑(372 mg, 2.76 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(897 mg, 9.19 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(594 mg, 4.60 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之混合物在30℃下攪拌18 h，且藉由添加水(10 mL)來淬滅。用鹽水(30 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之1-(氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(135 mg, 18%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.63 - 4.47 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 1.30 - 1.23 (m, 2H), 0.95 - 0.85 (m, 2H)。 步驟 2 ： [1-( 氟甲基 ) 環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在-78℃下向1-(氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(80 mg, 0.50 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(70 mg, 0.25 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，0.3 mL, 0.75 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之任意分配之[1-(氟甲基)環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(15.6 mg, 20%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.43 - 7.33 (m, 3H), 7.26 - 7.23 (m, 2H), 6.17 - 6.12 (m, 0.5H), 6.01 - 5.98 (m, 0.5H), 5.62 - 5.60 (m, 1H), 4.83 - 4.76 (m, 1H), 4.73 - 4.63 (m, 1H), 3.76 - 3.65 (m, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 1.86 - 1.79 (m, 2H), 1.23 - 1.16 (m, 2H)。LC-MS RT = 1.188 min, m/z = 304.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.188 min，ESI+實驗值[M+H] = 304.2。方法 59 實例80(3,3- 二氟二環 [3.1.0] 己 -6- 基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ：第三丁基 ( 環戊 -3- 烯 -1- 基氧基 ) 二甲基矽烷
向3-環戊烯-1-醇(10.0 g, 118.88 mmol)於四氫呋喃(130 mL)中之溶液添加咪唑(16.0 g, 237.76 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(23.0 g, 154.54 mmol)。添加後，將反應混合物在30℃下攪拌16 h，且藉由添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至3%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之第三丁基-環戊-3-烯-1-基氧基-二甲基-矽烷(22.0 g, 93%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.61 (s, 2H), 4.49 - 4.44 (m, 1H), 2.54 - 2.48 (m, 2H), 2.24 - 2.19 (m, 2H), 0.82 (s, 9H), 0.02 (s, 6H)。 步驟 2 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸乙基酯
向第三丁基-環戊-3-烯-1-基氧基-二甲基-矽烷(20.0 g, 100.82 mmol)於二氯甲烷(160 mL)中之溶液添加重氮乙酸乙酯(13.8 g, 120.98 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌12 h且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(15.0 g , 52%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.49 - 4.44 (m, 2H), 2.53 - 2.48 (m, 2H), 2.24 - 2.19 (m, 2H), 1.65 - 1.24 (m, 2H), 1.25 - 1.22 (m, 2H), 0.83 (s, 9H), 0.00 (s, 6H)。 步驟 3 ： 3- 羥基二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸乙基酯
向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(15.0 g, 52.73 mmol)於四氫呋喃(200 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(20.7 g, 79.09 mmol)。將反應混合物在50℃下攪拌12 h且用水(200 mL)稀釋。用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製3-羥基二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(8.8 g, 98%)。 步驟 4 ： 3- 側氧基二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸乙基酯
向戴斯-馬丁(Dess-Martin)過碘烷(32.9 g, 77.55 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液添加3-羥基二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(8.8 g, 51.70 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌12 h且用水(200 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 80 mL)萃取所得混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3-側氧基二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(8.0 g, 92%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.15 - 4.12 (m, 2H), 2.68 - 2.62 (m, 2H), 2.30 - 2.25 (m, 2H), 2.17 - 2.15 (m, 2H), 1.27 - 1.24 (m, 4H)。 步驟 5 ： 3,3- 二氟二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸乙基酯
向3-側氧基二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(2.0 g, 11.89 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液添加二乙胺基三氟化硫(19.2 g, 118.91 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌12 h，且藉由在0℃下添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 40 mL)萃取該混合物。用水(40 mL)、鹽水(40 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3,3-二氟二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(1.7 g, 75%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 4.12 - 4.07 (m, 2H), 2.48 - 2.38 (m, 2H), 2.29 - 2.20 (m, 2H), 1.93 - 1.92 (m, 2H), 1.63 - 1.62 (m, 1H), 1.25 - 1.22 (m, 3H)。 步驟 6 ： 3,3- 二氟二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸
向3,3-二氟二環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(500 mg, 2.63 mmol)於四氫呋喃(24 mL)中之溶液添加氫氧化鋰一水合物(330 mg, 7.89 mmol)於水(7 mL)中之溶液。將混合物在25℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。藉由在0℃下添加鹽酸水溶液(4 M)將水性殘餘物調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製3,3-二氟二環[3.1.0]己烷-6-甲酸(250 mg, 59%)。 步驟 7 ： 3,3- 二氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基二環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲醯胺
將1-羥基苯并三唑(250 mg, 1.85 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(426 mg, 2.22 mmol)、3,3-二氟二環[3.1.0]己烷-6-甲酸(300 mg, 1.85 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(271 mg, 2.78 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(598 mg, 4.63 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且用水(20 mL)稀釋。用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取該混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3,3-二氟-N-甲氧基-N-甲基-二環[3.1.0]己烷-6-甲醯胺(102 mg, 27%)。LCMS RT =0.522 min,m/z = 206.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.522 min，ESI+實驗值[M+H] = 206.1。 步驟 8 ： (3,3- 二氟 -6- 二環 [3.1.0] 己基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在-78℃下向3,3-二氟-N-甲氧基-N-甲基-二環[3.1.0]己烷-6-甲醯胺(102 mg, 0.50 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(70 mg, 0.25 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.37 mL, 0.74 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(25 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之20-45%乙腈/0.225%鹽酸)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之(3,3-二氟-6-二環[3.1.0]己基)-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(11 mg, 13%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.40 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 6.19 - 6.16 (m, 0.5H), 6.05 - 6.02 (m, 0.5H), 5.65 - 5.64 (m, 1H), 3.79 - 3.73 (m, 1H), 3.03 - 3.02 (m, 1H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.54 - 2.30 (m, 2H), 2.30 - 2.25 (m, 2H), 2.20 - 2.18 (m, 2H)。LCMS RT = 1.255 min,m/z = 348.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.255 min，ESI+實驗值[M+H] = 348.2。方法 60 實例81[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[2-( 三氟甲基 ) 環丙基 ] 甲酮 步驟 1 ： (E)-4,4,4- 三氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基丁 -2- 烯醯胺
將N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(4.42 g, 45.30 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(10.2 mL, 56.94 mmol)、4,4,4-三氟丁-2-烯酸(5.00 g, 35.70 mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(8.21 g, 42.84 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之混合物在0℃下攪拌5 h。用鹽水(2 × 50 mL)洗滌該混合物，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之(E)-4,4,4-三氟-N-甲氧基-N-甲基-丁-2-烯醯胺(2.50 g, 38%)。LC-MS RT = 0.522 min,m/z = 184.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.522 min，ESI+實驗值[M+H] = 184.1。 步驟 2 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -2-( 三氟甲基 ) 環丙烷甲醯胺
向三甲基碘化亞碸鎓(6.01 g, 27.30 mmol))於二甲基亞碸(50 mL)中之溶液添加氫化鈉(60%, 1.09 g, 27.30 mmol)。將混合物攪拌1 h且添加 (E)-4,4,4-三氟-N-甲氧基-N-甲基-丁-2-烯醯胺(2.50 g, 13.65 mmol)於二甲基亞碸(20 mL)中之溶液。將所得混合物在25℃下攪拌16 h，且用飽和氯化銨水溶液(100 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取溶液。用鹽水(150 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之35%-65%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之N-甲氧基-N-甲基-2-(三氟甲基)環丙烷甲醯胺(700 mg, 26%)。LC-MS RT = 0.722 min, m/z = 197.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.722 min，ESI+實驗值[M+H] = 197.9。 步驟 3 ： [(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[2-( 三氟甲基 ) 環丙基 ] 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-2-(三氟甲基)環丙烷甲醯胺(98 mg, 0.50 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.35 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，1.06 mL, 2.13 mmol)。添加後，將混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。用鹽水(3 × 10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0-40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[2-(三氟甲基)環丙基]甲酮(30 mg , 24%)。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.39 (m, 3H), 7.32 - 7.29 (m, 2H), 6.22 - 6.05 (m, 1H), 5.70 - 5.65 (m, 1H), 3.84 - 3.71 (m, 1H), 3.41 - 3.37 (m, 1H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 2.45 - 2.40 (m, 1H), 1.53 - 1.46 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.904 min, m/z = 339.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.904 min，ESI+實驗值[M+H] = 339.9。方法 61 實例82(6,6- 二氟 -3- 二環 [3.1.0] 己基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 6,6- 二氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基二環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲醯胺
將6,6-二氟二環[3.1.0]己烷-3-甲酸(150 mg, 0.93 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(355 mg, 1.85 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(359 mg, 2.78 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(180 mg, 1.85 mmol)及1-羥基苯并三唑(125 mg, 0.93 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌18 h。用水(15 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%-30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之6,6-二氟-N-甲氧基-N-甲基-二環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(100 mg, 53%)。LCMS RT = 0.540 min及0.572 min，m/z = 206.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.540 min及0.572 min，ESI+實驗值[M+H] = 206.0。 步驟 2 ： (6,6- 二氟 -3- 二環 [3.1.0] 己基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在-78℃下在氮氣下向6,6-二氟-N-甲氧基-N-甲基-二環[3.1.0]己烷-3-甲醯胺(33 mg, 0.16 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(30 mg, 0.11 mmol)於四氫呋喃(6 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.16 mL, 0.32 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(15 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。用水(30 mL)、鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40%-70%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之(6,6-二氟-3-二環[3.1.0]己基)-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(3.9 mg, 11%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.42 - 7.39 (m, 3H), 7.26 - 7.23 (m, 2H), 6.12 - 5.94 (m, 1H), 5.52 - 5.48 (m, 1H), 4.19 - 4.15 (m, 0.5H), 3.88 - 3.85 (m, 0.5H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.02 - 2.91 (m, 1H), 2.39 - 2.30 (m, 4H), 2.08 - 2.04 (m, 2H)。LCMS RT = 0.896 min, m/z = 347.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.896 min，ESI+實驗值[M+H] = 347.9。方法 63 實例84環丙基 -[(5S,7S)-7- 甲氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：順式 -2- 溴 -7- 甲氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.20 g, 4.28 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液添加氫化鈉(60%, 342 mg, 8.57 mmol)。將混合物攪拌20 min且逐滴添加碘甲烷(3.00 g, 21.14 mmol)。添加後，將混合物攪拌2 h且傾倒至冰水(70 ml)中。用乙酸乙酯(3 × 80 mL)萃取所得混合物。用鹽水(2 × 70 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之8%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-2-溴-7-甲氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(330 mg, 26%)。LCMS RT = 0.748 min, m/z = 294.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.748 min，ESI+實驗值[M+H] = 294.0。 步驟 2 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 甲氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下在氮氣下向順式-2-溴-7-甲氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(220 mg, 0.75 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(193 mg, 1.50 mmol)於四氫呋喃(6 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，2.24 mL, 4.49 mmol)。將混合物在25℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(25 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之環丙基(順式-7-甲氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(180 mg, 85%)。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-甲氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 4.247 min) (29.8 mg, 16%)，呈黃色固體。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.56 - 5.52 (m, 1H), 4.94 - 4.92 (m, 1H), 3.67 - 3.59 (m, 4H), 3.02 - 3.01 (m, 1H), 2.62 - 2.57 (m, 1H), 1.17 - 1.15 (m, 2H), 1.10 - 1.07 (m, 2H)。LCMS RT = 0.709 min, m/z = 284.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.709 min，ESI+實驗值[M+H] = 284.1。
SFC條件：管柱：Lux Cellulose-2 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：於CO2 中之40%乙醇(0.05% DEA)。流速：2.5 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 64 實例85環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(4- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(4- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在氮氣下在0℃下向4-氟苯甲醛(50.0 g, 402.87 mmol)於四氫呋喃(500 mL)中之溶液添加烯丙基氯化鎂(於四氫呋喃中1.82 M，288.0 mL, 523.73 mmol)。使反應混合物升溫至25℃且攪拌2 h，之後藉由添加飽和氯化銨水溶液(200 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製1-(4-氟苯基)丁-3-烯-1-醇(66.8 g, 99%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.32 - 7.28 (m, 2H), 7.04 - 7.00 (m, 2H), 5.80 - 5.73 (m, 1H), 5.17 - 5.12 (m, 2H), 4.70 - 4.67 (m, 1H), 2.48 - 2.46 (m, 2H), 2.44 - 2.31 (m, 1H)。 步驟 2 ：第三丁基 ((1-(4- 氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 二甲基矽烷
向1-(4-氟苯基)丁-3-烯-1-醇(66.8 g, 401.95 mmol)於二氯甲烷(500 mL)中之溶液添加咪唑(54.7 g, 803.9 mmol)及第三丁基氯二甲基矽烷(72.7 g, 482.34 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且用水(500 mL)稀釋。用二氯甲烷(2 × 300 mL)萃取所得混合物。用鹽水(500 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈輕質油狀物之粗製第三丁基-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(111.0 g, 98%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.37 (m, 2H), 7.14 - 7.10 (m, 2H), 5.92 - 5.85 (m, 1H), 5.15 - 5.11 (m, 2H), 4.81 - 4.79 (m, 1H), 2.58 - 2.45 (m, 2H), 1.01 (s, 9H), 0.15 (s, 3H), 0.00 (s, 3H)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(4- 氟苯基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(4-氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(110.0 g, 392.23 mmol)於水(500 mL)及四氫呋喃(500 mL)中之溶液添加四氧化鋨(0.5 g, 1.97 mmol)。在25℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(335.6 g, 1568.90 mmol)，且將所得混合物在25℃下再攪拌2 h。藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(500 mL)使該混合物淬滅。將混合物攪拌30 min，且接著用乙酸乙酯(3 × 500 mL)萃取。用水(500 mL)、鹽水(500 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至2%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(4-氟苯基)丙醛(70.0 g, 63%)。1 HNMR (400Hz, CDCl3 ) δ 9.95 - 9.90 (m, 1H), 7.48 - 7.44 (m, 2H), 7.19 - 7.15 (m, 2H), 5.37 - 5.34 (m, 1H), 3.02 - 2.95 (m, 1H), 2.79 - 2.77 (m, 1H), 1.01 (s, 9H), 0.19 (s, 3 H), 0.00 (s, 3 H)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(4- 氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(70.1 g, 225.32 mmol)於四氫呋喃(500 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，98.2 mL, 245.37 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，且逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(4-氟苯基)丙醛(63.0 g, 223.06 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(500 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 500 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(4-氟苯基)丙-1-醇(95.0 g, 83%)。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(4- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(4-氟苯基)丙-1-醇(40.0 g, 77.75 mmol)及2,2,2-三氟乙酸(150 mL, 1554.9 mmol)之混合物在55℃下攪拌8 h，且在減壓下濃縮。用乙酸乙酯(300 mL)稀釋殘餘物且藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液調整至pH = 9。用乙酸乙酯(2 × 300 mL)萃取所得混合物。用水(150 mL)、鹽水(150 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之20%至33%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之2-溴-5-(4-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(23.5 g, 100%)。LCMS RT = 0.679 min, m/z = 300.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.679 min，ESI+實驗值[M+H] = 300.0。 步驟 6 ：順式 -2- 溴 -7- 氟 -5-(4- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向2-溴-5-(4-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(6.0 g, 20.13 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加於二氯甲烷(8 mL)中之二乙胺基三氟化硫(10.7 mL, 80.51 mmol)。攪拌30 min後，將混合物傾倒至冰水(100 mL)中。用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之順式-2-溴-7-氟-5-(4-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(2.1 g, 35%)。1 HNMR (CDCl3 , 400 MHz) δ 7.26 - 7.23 (m, 2H), 7.12 - 7.08 (m, 2H), 6.07 - 5.91 (m, 1 H), 5.45 - 5.42 (m, 1H), 3.64 - 3.52 (m, 1H), 2.92 - 2.85 (m, 1H)。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(4- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(378 mg, 2.94 mmol)及順式-2-溴-7-氟-5-(4-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(400 mg, 1.34 mmol)於四氫呋喃(15 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，2.66 mL, 5.34 mmol)。將混合物在0℃下攪拌8 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之30%乙酸乙酯，Rf = 0.25)純化殘餘物，得到呈黃白色固體之環丙基-[順式-7-氟-5-(4-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(180 mg, 47%)。LCMS RT = 0.733 min, m/z = 290.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.733 min，ESI+實驗值[M+H] = 290.1。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-(4-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.981 min) (71 mg, 39%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.36 - 7.32 (m, 2H), 7.19 - 7.14 (m, 2H), 6.20 - 6.04 (m, 1H), 5.65 - 5.65 (m, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.10 - 2.97 (m, 1H), 2.89 - 2.77 (m, 1H), 1.20 - 1.09 (m, 4H)。LCMS RT = 0.833 min,m/z = 289.9 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.833 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.9。
亦收集呈白色固體之5R,7R-異構物(峰1，滯留時間= 3.439 min) (65 mg, 36%)。
SFC條件：管柱：ChiralPak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 65 實例862-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ) 環丙烷甲腈 步驟 1 ： 2- 溴 -1-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 乙酮
向1-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]乙酮(250 mg, 1.02 mmol)於乙酸(3 mL)中之混合物添加過溴化氫溴酸吡啶(370 mg, 1.16 mmol)。將混合物在25℃下攪拌3 h，且用乙酸乙酯(40 mL)稀釋。用水(2 × 20 mL)洗滌溶液，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之2-溴-1-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]乙酮(185 mg, 56%)。LCMS RT = 0.771 min,m/z = 326.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.771 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 326.0。 步驟 2 ： 2-( 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ) 環丙烷甲腈
向2-溴-1-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]乙酮(120 mg, 0.37 mmol)於四氫呋喃(2 mL)及二甲基亞碸(0.5 mL)中之混合物添加1,4-二氮雜二環[2.2.2.]辛烷(53 mg, 0.48 mmol)。在20℃下攪拌30 min後，向混合物添加碳酸鈉(76 mg, 0.72 mmol)及丙烯腈(6.2 mL, 94.23 mmol)。將所得混合物在90℃下攪拌20 h，且用乙酸乙酯(40 mL)稀釋。用水(2 × 20 mL)洗滌溶液，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (水(0.05%氫氧化氨v/v)- 30-60%乙腈)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之2-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲腈(3 mg, 3%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.46 - 7.42 (m, 3H), 7.31 - 7.27 (m, 2H), 6.15 - 5.99 (m, 1H), 5.56 - 5.53 (m, 1H), 3.72 - 3.67 (m, 2H), 3.07 - 3.03 (m, 1H), 2.21 - 2.08 (m, 1H), 1.75 - 1.70 (m, 1H), 1.68 - 1.57 (m, 1H)。LCMS RT = 0.818 min,m/z = 296.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.771 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 296.9。方法 66 實例87環丙基 -[(5S,7S)-7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： ( 順式 )-2- 溴 -7-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑及 ( 反式 )-2- 溴 -7-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1000 mg, 3.57 mmol)及三乙胺(1083 mg, 10.71 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之混合物添加三氟甲烷磺酸第三丁基二甲基矽基酯(1415 mg, 5.35 mmol)。將混合物在25℃下攪拌14 h，且用水(50 mL)稀釋。用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取所得溶液。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到：
(反式)-2-溴-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(870 mg, 62%)，呈黃色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ7.41 - 7.36 (m, 5H), 5.31 - 5.28 (m, 1H), 5.26 - 5.23 (m, 1H), 3.47 - 3.40 (m, 1H), 2.58 - 2.52 (m,1H), 0.99 (s, 9H), 0.23 (s, 3H), 0.20 (s, 3H)。
(順式)-2-溴-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(430 mg, 31%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.49 - 7.35 (m, 3H), 7.11 - 7.10 (m, 2H), 5.61 - 5.58 (m, 1H), 5.33 - 5.30 (m, 1H), 3.00 - 2.96 (m, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 0.93 (s, 9H), 0.23 (s, 3H), 0.19 (s, 3H)。 步驟 2 ： [ 順式 -7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 環丙基 - 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向N-甲氧基-n-甲基-環丙烷甲醯胺(242 mg, 1.88 mmol)及(順式)-2-溴-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(370 mg, 0.94 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，1.41 mL, 2.81 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之[順式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(220 mg, 61%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.36 - 7.34 (m, 5H), 5.39 - 5.36 (m, 1H), 5.29 - 5.28 (m, 1H), 3.54 - 3.48(m, 1H), 3.08 - 3.05 (m, 1H)。2.65 - 2.61 (m, 1H), 1.30 - 1.28 (m, 2H), 1.07 - 1.02 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.24 (s, 3H), 0.22 (s, 3H)。 步驟 3 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在25℃下向[順式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(200 mg, 0.52 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，2.09 mL, 2.09 mmol)。將混合物在25℃下攪拌14 h，且用二氯甲烷(30 mL)稀釋。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌所得混合物，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至90%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[順式-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(95 mg, 67%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.42 - 7.36 (m, 5H), 5.46 - 5.40 (m, 2H), 4.79 - 4.78(d, 1H), 3.64 - 3.58 (m, 1H)。3.00 - 2.98 (m, 1H), 2.81 - 2.76 (m, 1H), 1.31 - 1.27 (m, 2H), 1.07-1.03 (m, 2H)。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.345 min) (22.2 mg, 24%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.36 (m, 5H), 5.44 - 5.41 (m, 2H), 4.81 (s, 1H), 3.65 - 3.60 (m, 1H), 2.99 - 2.96 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 1.30 - 1.29 (m, 2H), 1.06 - 1.03 (m, 2H)。LCMS RT = 2.061 min,m/z = 270.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經7.0 min)，滯留時間2.061 min，ESI+實驗值[M+H] = 270.2。
環丙基-[(5R,7R)-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.975 min) (32.2 mg, 35%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.34 (m, 5H), 5.44 - 5.39 (m, 2H), 3.65 - 3.57 (m, 1H), 3.07 - 3.00 (m, 1H), 2.79 - 2.74 (m, 1H), 1.31 - 1.28 (m, 2H), 1.07 - 1.04 (m, 2H)。LCMS RT = 0.896 min,m/z = 270.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.896 min，ESI+實驗值[M+H] = 270.2。
SFC條件：管柱：OD (250 mm*30 mm, 5 μm)，移動相：A：CO2 B：0.1% NH3 H2 O EtOH，梯度：40%之B。流速：60 mL/min；管柱溫度：40℃。方法 67 實例88環丙基 -[(5S,7R)-7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： [ 反式 -7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 環丙基 - 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(47 mg, 0.36 mmol)及[反式-2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(100 mg, 0.25 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.3 mL, 0.60 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之30%乙酸乙酯，Rf = 0.5)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之[反式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(50 mg, 51%)。LCMS RT = 1.008 min,m/z = 384.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.008 min，ESI+實驗值[M+H] = 384.2。 步驟 2 ：環丙基 -[(5S,7R)-7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7S)-7- 羥基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向[反式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(50 mg, 0.13 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，0.52 mL, 0.52 mmol)。將混合物在25℃下攪拌14 h，且用二氯甲烷(20 mL)稀釋。用水(10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌溶液，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於二氯甲烷中之2.5%甲醇，Rf = 0.5)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之環丙基-[(反式)-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(20 mg, 57%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.38 (m, 3H), 7.19 - 7.17 (m, 2H), 5.76 - 5.73 (m, 1H), 5.54 - 5.52 (m, 1H), 3.29 - 3.25 (m, 1H), 3.03 - 3.00 (m, 2H), 1.31 - 1.28 (m, 2H), 1.06 - 1.03(m, 2H)。
藉由對掌性SFC進一步分離此反式混合物(70 mg，來自另一批)，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7R)-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.515 min) (10.5 mg, 15%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.20 - 7.18 (m, 2H), 5.76 - 5.73 (m, 1H), 5.70 - 5.62 (m, 1H), 5.52 - 5.49 (m, 1H), 3.29 - 3.25 (m, 1H), 3.01 - 2.96 (m, 2H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.06 - 1.04 (m, 2H)。LCMS RT = 0.906 min,m/z = 270.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.906 min，ESI+實驗值[M+H] = 270.2。
環丙基-[(5R,7S)-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.729 min) (17.0 mg, 24%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.44 - 7.38 (m, 3H), 7.20 - 7.18 (m, 2H), 5.76 - 5.73 (m, 1H), 5.65 (brs, 1H), 5.51 - 5.50 (m, 1H), 3.28 - 3.25 (m, 1H), 3.01 - 2.96 (m, 2H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.06 - 1.04 (m, 2H)。LCMS RT = 0.905 min,m/z = 270.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.905 min，ESI+實驗值[M+H] = 270.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 B：IPA (0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：25 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 68 實例89[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1S,2S)-2- 甲基環丙基 ] 甲酮及 [(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1R,2R)-2- 甲基環丙基 ] 甲酮
藉由對掌性SFC進一步分離外消旋[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(1S,2S)-2-甲基環丙基]甲酮(反式混合物LHS) (80 mg)，得到任意分配之以下：
[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[(1S,2S)-2-甲基環丙基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.714 min) (28 mg, 35%, ee: 96.1%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.38 (m, 3H), 7.29 - 7.26 (m, 2H), 6.19 - 6.17 (m, 0.5H), 6.05 - 6.03 (m, 0.5H), 5.67 - 5.62 (m, 1H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 2.89 - 2.75 (m, 2H), 1.62 - 1.54 (m, 1H), 1.45 - 1.39 (m, 1H), 1.18 (d,J = 6.4 Hz, 3H), 0.99 - 0.96 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.756 min,m/z = 286.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.756 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.1。
[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[(1R,2R)-2-甲基環丙基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.901 min) (48 mg, 60%, ee: 86%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.40 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 6.20 - 6.16 (m, 0.5H), 6.06 - 6.02 (m, 0.5H), 5.67 - 5.61 (m, 1H), 3.79 - 3.73 (m, 1H), 2.89 - 2.74 (m, 2H), 1.64 - 1.60 (m, 1H), 1.44 - 1.39 (m, 1H), 1.17 (d,J = 6.0 Hz, 3H), 1.00 - 0.95 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.757 min,m/z = 286.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.757 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.1
SFC條件：管柱：AD (250 mm*30 mm, 5 μm)；移動相：A：CO2 B：0.1% NH3 H2 O EtOH；梯度：25%至25%之B；流速：50 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 69 實例90[(1R,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及 [(1S,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向反式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(反式混合物) (245 mg, 1.65 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(250 mg, 0.85 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(2.1 mL, 4.15 mmol，於四氫呋喃中2 M)。將混合物在0℃下攪拌1小時。藉由添加水(10 mL)使反應混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。使有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之33%乙酸乙酯，Rf = 0.6)純化殘餘物，得到呈白色固體之[(1S,2R)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(反式混合物) (105 mg, 41%)。LCMS RT = 0.739 min, m/z = 308.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.739 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。
藉由對掌性SFC進一步分離以上反式混合物，得到任意分配之以下：
[(1R,2S)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.773 min) (48.1 mg, 45%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.25 - 7.13 (m, 3H), 6.22 - 6.06 (m, 1H), 5.93 - 5.89 (m, 1H), 5.01 - 4.87 (m, 0.5H), 4.85 - 4.82 (m, 0.5H), 3.88 - 3.75 (m, 1H), 3.51 - 3.42 (m, 1H), 2.93 - 2.81 (m, 1H), 1.75 - 1.64 (m, 1H), 1.62 - 1.54 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.852 min,m/z = 308.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.852 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 308.0。
SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5mL/min，管柱溫度：35℃
藉由對掌性SFC來分離更大批之反式混合物(215 mg, 0.70 mmol)，得到：
[(1S,2R)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.445 min) (19.5 mg, 9%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.40 - 7.38 (m, 1H), 7.18 - 7.15 (m, 2H), 6.98 - 6.97 (m, 1H), 6.13 - 6.11 (m, 0.5H), 5.99 - 5.98 (m, 0.5H), 5.87 - 5.85 (m, 1H), 5.05 - 5.04 (m, 0.5H), 4.89 - 4.88 (m, 0.5H), 3.73 - 3.67 (m, 1H), 3.58 - 3.54 (m, 1H), 3.01 - 2.95 (m, 1H), 1.72 - 1.65 (m, 2H)。LC-MS RT = 1.763 min,m/z = 308.1 (M+H)+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.763 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 308.1。注意：在AD SFC條件下，1R,2S-異構物為峰2 (滯留時間= 2.728 min)。
SFC條件：管柱：Daicel Chiralpak AD-H (250 mm*30 mm, 5 μm)，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.1% NH3 H2 O甲醇)，梯度：5 min內15%至15%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃。方法 70 實例91[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1S,2S)-2- 甲基環丙基 ] 甲酮及 [(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[(1R,2R)-2- 甲基環丙基 ] 甲酮
藉由對掌性SFC進一步分離外消旋[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(1S,2S)-2-甲基環丙基]甲酮(反式混合物LHS) (80 mg)，得到任意分配之以下：
[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[(1S,2S)-2-甲基環丙基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.714 min) (28 mg, 35%, ee: 96.1%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.38 (m, 3H), 7.29 - 7.26 (m, 2H), 6.19 - 6.17 (m, 0.5H), 6.05 - 6.03 (m, 0.5H), 5.67 - 5.62 (m, 1H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 2.89 - 2.75 (m, 2H), 1.62 - 1.54 (m, 1H), 1.45 - 1.39 (m, 1H), 1.18 (d,J = 6.4 Hz, 3H), 0.99 - 0.96 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.756 min,m/z = 286.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.756 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.1。
[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[(1R,2R)-2-甲基環丙基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.901 min) (48 mg, 60%, ee: 86%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.44 - 7.40 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 6.20 - 6.16 (m, 0.5H), 6.06 - 6.02 (m, 0.5H), 5.67 - 5.61 (m, 1H), 3.79 - 3.73 (m, 1H), 2.89 - 2.74 (m, 2H), 1.64 - 1.60 (m, 1H), 1.44 - 1.39 (m, 1H), 1.17 (d,J = 6.0 Hz, 3H), 1.00 - 0.95 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.757 min,m/z = 286.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.757 min，ESI+實驗值[M+H] = 286.1
SFC條件：管柱：AD (250 mm*30 mm, 5 μm)；移動相：A：CO2 B：0.1% NH3 H2 O EtOH；梯度：25%至25%之B；流速：50 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 71 實例92環丙基 -[(5R,7S)-5- 乙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 3- 乙基 -4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸乙基酯
在25℃下向丙烯酸乙酯(89.6 mL, 841.85 mmol)、二碳酸二-第三丁基酯(58.0 mL, 252.55 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(2.1 g, 16.84 mmol)於乙腈(50 mL)中之溶液添加1-硝基丙烷溶液(15.1 mL, 168.37 mmol)。將混合物在25℃下攪拌5 h，且藉由添加飽和氯化銨溶液(80 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由急速層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-乙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(25.5 g, 88%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.94 - 4.86 (m, 1H), 4.24 - 4.13 (m, 2H), 3.21 - 3.14 (m, 2H), 2.40 - 2.29 (m, 2H), 1.30 - 1.24 (m, 3H), 1.16 - 1.11(m, 3H) 步驟 2 ： 5- 乙基 -3- 羥基 - 吡咯啶 -2- 酮
將3-乙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(15.0 g, 87.62 mmol)及鈀(於碳上10%，6.7 g)於乙醇(300 mL)中之混合物在40℃下在氫氣氛(50 psi)下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製5-乙基-3-羥基-吡咯啶-2-酮(11.0 g, 97%)。 步驟 3 ： 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 乙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向5-乙基-3-羥基-吡咯啶-2-酮(11.0 g, 85.17 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液添加咪唑(11.6 g, 170.33 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(19.2 g, 127.75 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-吡咯啶-2-酮(10.0 g, 48%)。 步驟 4 ： 1- 胺基 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 乙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-吡咯啶-2-酮(10.0 g, 41.08 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中之溶液添加氫化鈉(60%, 2.5 g, 61.62 mmol)。在0℃下攪拌20 min後，向混合物添加O-(二苯基磷醯基)羥胺(14.4 g, 61.62 mmol)，且在25℃下攪拌16 h。將反應混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製(1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-吡咯啶-2-酮(10.0 g, 94%)。LCMS RT = 1.130 min, m/z = 259.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.130 min，ESI+實驗值[M+H] = 259.2。 步驟 5 ： 2-[[3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 乙基 -2- 側氧基 - 吡咯啶 -1- 基 ] 胺基 ]-2- 亞胺基 - 乙酸乙基酯
將1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-吡咯啶-2-酮(10.0 g, 38.7 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(14.0 g, 96.74 mmol)於乙醇(250 mL)中之混合物在90℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(13.0 g, 94%)。LCMS RT = 1.148 min, m/z = 358.3 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.148 min，ESI+實驗值[M+H] = 358.3。 步驟 6 ： 7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 乙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(13.0 g, 36.36 mmol)及對甲苯磺酸(7.5 g, 43.63 mmol)於甲苯(250 mL)中之混合物在120℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(12.0 g, 97%)。LCMS RT = 0.823 min, m/z = 340.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.823 min，ESI+實驗值[M+H] = 340.2。 步驟 7 ：反式 -5- 乙基 -7- 羥基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-乙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(12.0 g, 35.35 mmol)於四氫呋喃(200 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，35.35 mL, 35.35 mmol)。將反應混合物在40℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。用水(70 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 70 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至100%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淡紅色油狀物之反式-5-乙基-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.3 g, 29%) (以及順式異構物(2.8 g, 35%))。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.32 - 5.27 (m, 1H), 4.49 - 4.43 (m, 3H), 3.24 - 3.17 (m, 1H), 2.41 - 2.36 (m, 1H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 1H), 1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.03 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 步驟 8 ： 順式 -5- 乙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在0℃下向反式-5-乙基-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.3 g, 10.21 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液逐滴添加二乙胺基三氟化硫(6.6 g, 40.85 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取該混合物。用鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之順式-5-乙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(800 mg, 34%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 6.00 - 5.78 (m, 1H), 4.53 - 4.37 (m, 3H), 3.35 - 3.16 (m, 1H), 2.69 - 2.54 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 1H), 1.98 - 1.91 (m, 1H), 1.43 (t,J = 7.2 Hz, 3H), 1.02 (t,J = 7.6 Hz, 3H)。 步驟 9 ：順式 -5- 乙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
向順式-5-乙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(200 mg, 0.88 mmol)於四氫呋喃(3 mL)、水(2 mL)及甲醇(1 mL)中之混合物添加氫氧化鋰一水合物(148 mg, 3.52 mmol)。將混合物在25℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。用冰水(20 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加鹽酸水溶液(4 M)調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製順式-5-乙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(150 mg, 86%)。 步驟 10 ：順式 -5- 乙基 -7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺，順式混合物
將順式-5-乙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(100 mg, 0.50 mmol)、1-羥基苯并三唑(34 mg, 0.25 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(0.21 mL, 1.26 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(74 mg, 0.75 mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(116 mg, 0.60 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h。用水(20 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-5-乙基-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(120 mg, 99%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.99 - 5.79 (m, 1H), 4.40 - 4.39 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.43 ( s, 3H), 3.36 - 3.16 (m, 1H), 2.67 - 2.54 (m, 1H), 2.14 - 2.03 (m, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.07 - 1.03 (m, 3H) LCMS RT = 0.481 min, m/z = 243.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.481 min，ESI+實驗值[M+H] = 243.1。 步驟 11 ：環丙基 -[(5R,7S)-5- 乙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下在氮氣下向順式-5-乙基-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺之溶液(100 mg, 0.41 mmol)添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，2.0 mL, 1.0 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之環丙基-[順式-5-乙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(80 mg, 87%)。藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5R,7S)-5-乙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.928 min) (22.5 mg, 28%)，呈橙色固體((5S,7R)-異構物亦收集為峰2 (滯留時間= 4.391 min，18.8 mg, 22%))。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 6.09 - 5.89 (m, 1H), 4.55 - 4.45 (m, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 1H), 3.15 - 3.06 (m, 1H), 2.67 - 2.53 (m, 1H), 2.09 - 1.93 (m, 2H), 1.23 - 1.18 (m, 2H), 1.17 - 1.11 (m, 2H), 1.05 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.770 min, m/z = 224.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.770 min，ESI+實驗值[M+H] = 224.0。
SFC條件：管柱：Chiralcel IC 100×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：甲醇(0.05% DEA)，梯度：3.5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：3 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 72 實例93環丙基 -[(5R,7S)-7- 氟 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 3- 丙基 -4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸乙基酯
在25℃下向丙烯酸乙酯(10.32 mL, 96.97 mmol)、二碳酸二-第三丁基酯(6.68 mL, 29.09 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(0.24 g, 1.94 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液添加1-硝基丁烷溶液(2.01 mL, 19.39 mmol)。添加後，將混合物在25℃下攪拌5 h，且藉由添加飽和氯化銨溶液(80 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由急速層析在矽膠上進行溶析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)來純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-丙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(3.2 g, 89%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.98 - 4.93 (m, 1H), 4.27 - 4.20 (m, 2H), 3.21 - 3.18 (m, 2H), 2.37 - 2.33 (m, 2H), 1.64 - 1.58 (m, 2H), 1.33 - 1.28 (m, 3H), 0.98 - 0.94 (m, 3H)。 步驟 2 ：羥基 -5- 丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
將3-丙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(8.0 g, 43.19 mmol)及鈀(於碳上10%，3.3 g)於乙醇(200 mL)中之混合物在40℃下在氫氣氛(50 psi)下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製3-羥基-5-丙基-吡咯啶-2-酮(6.1 g, 99%)。LCMS RT = 0.263 min,m/z = 144.3[M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.263 min，ESI+實驗值[M+H] = 144.3。 步驟 3 ： 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-羥基-5-丙基-吡咯啶-2-酮(6.1 g, 42.60 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液添加咪唑(5.8 g, 85.21 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(9.6 g, 63.91 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-丙基-吡咯啶-2-酮(7.5 g, 68%)。LCMS RT = 1.474 min,m/z = 258.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.474 min，ESI+實驗值[M+H] = 258.2。 步驟 4 ： 1- 胺基 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-丙基-吡咯啶-2-酮(7.0 g, 27.19 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中之溶液添加氫化鈉(60%, 1.6 g, 40.79 mmol, 60%)。在0℃下攪拌20 min後，向混合物添加O-(二苯基磷醯基)羥胺(9.5 g, 40.79 mmol)，且在25℃下攪拌16 h。將反應混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製(1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-丙基-吡咯啶-2-酮(6.8 g, 92%)。此粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS RT = 0.766 min,m/z = 273.3 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.766 min，ESI+實驗值[M+H] =273.3。 步驟 5 ： 2-[[3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -2- 側氧基 -5- 丙基 - 吡咯啶 -1- 基 ] 胺基 ]-2- 亞胺基 - 乙酸乙基酯
將1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-丙基-吡咯啶-2-酮(6.6 g, 24.22 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(8.8 g, 60.56 mmol)於乙醇(100 mL)中之混合物在90℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-2-側氧基-5-丙基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(9.0 g, 100%)。LCMS RT = 1.192 min,m/z = 372.3[M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.192 min，ESI+實驗值[M+H] = 372.3。 步驟 6 ： 7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-2-側氧基-5-丙基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(9.0 g, 24.22 mmol)及對甲苯磺酸(6.3 g, 36.33 mmol)於甲苯(150 mL)中之混合物在120℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(8.3 g, 97%)。LCMS RT = 0.803 min,m/z = 240.2 [M - TBS]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.803 min，ESI+實驗值[M-TBS] = 240.2。 步驟 7 ：反式 -7- 羥基 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(8.30 g, 23.48 mmol)於四氫呋喃(150 mL)中之溶液添加於四氫呋喃中之四丁基氟化銨(11.74 mL, 11.74 mmol)。將反應混合物在40℃下攪拌15 h且在減壓下濃縮。用水(70 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 70 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由急速層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之反式-7-羥基-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.0 g, 18%) (以及相同量之順式產物)：1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.33 - 5.31 (m, 1H), 4.64 - 4.63 (m, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 2H), 2.87 - 2.85 (m, 1H), 2.70 - 2.66 (m, 1H), 2.66 - 2.06 (m, 1H), 1.63 - 1.33 (m, 6H), 0.96 - 0.92 (m, 3H)。 步驟 8 ：順式 -7- 氟 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在0℃下向反式-7-羥基-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(800 mg, 3.34 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液添加二乙胺基三氟化硫(2.2 g, 13.37 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取該混合物。用鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之順式-7-氟-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(270 mg, 34%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.99 - 5.78 (m, 1H), 4.53 - 4.40 (m, 3H), 3.34 - 3.15 (m, 1H), 2.70 - 2.54 (m, 1H), 2.14 - 2.02 (m, 1H), 1.91 - 1.78 (m, 1H), 1.63 - 1.50 (m, 1H), 1.46 - 1.41 (m, 4H), 0.98 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 步驟 9 ：順式 -7- 氟 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
將順式-7-氟-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(260 mg, 1.08 mmol)及氫氧化鋰一水合物(135 mg, 3.23 mmol)於四氫呋喃(2 mL)、水(1 mL)及甲醇(0.5 mL)中之混合物在25℃下攪拌4 h，且接著在減壓下濃縮。用冰水(20 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加鹽酸水溶液(4 M)調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之粗製順式-7-氟-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(225 mg, 98%)。 步驟 10 ：環丙基 -[ 順式 -7- 氟 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
將順式-7-氟-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(200 mg, 0.94 mmol)、1-羥基苯并三唑(63 mg, 0.47 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(137 mg, 1.41 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(0.39 mL, 2.35 mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(215 mg, 1.13 mmol)之混合物在25℃下攪拌3 h。用水(20 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(180 mg, 75%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 6.00 - 5.76 (m, 1H), 4.51 - 4.37 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.43 (s, 2H), 3.33 - 3.17 (m, 1H), 2.70 - 2.53 (m, 1H), 2.11 - 1.97 (m, 1H), 1.89 - 1.77 (m, 1H), 1.66 - 1.53 (m, 1H), 1.51 - 1.38 (m, 1H), 0.98 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 步驟 11 ：環丙基 -[(5R,7S)-7- 氟 -5- 丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下在氮氣下向順式-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺之溶液(170 mg, 0.66 mmol)添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，3.21 mL, 1.61 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之環丙基-[順式-7-氟-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(100 mg, 64%)。藉由對掌性SFC進一步分離順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5R,7S)-7-氟-5-丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.997 min) (40.0 mg, 40%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 6.07 - 5.91 (m, 1H), 4.59 - 4.53 (m, 1H), 3.42 - 3.33 (m, 1H), 3.11 - 3.07 (m, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 1H), 2.02 - 1.98 (m, 1H), 1.91 - 1.80 (m, 1H), 1.69 - 1.57 (m, 1H), 1.52 - 1.38 (m, 1H), 1.23 - 1.11 (m, 4H), 1.01 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.972 min, m/z = 238.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.972 min，ESI+實驗值[M+H] = 238.2。
SFC條件：管柱：Chiralcel IC 100×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：甲醇(0.05% DEA)，梯度：3.5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：3mL/min，管柱溫度：40℃。
注意： 亦收集呈無色油狀物之5S,7R-異構物。(峰2，滯留時間= 4.420 min) (42.0 mg, 42%)方法 73 實例94環丙基 -[(5S,7S)-5-(2,6- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2,6- 二氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在氮氣氛下在0℃下向2,6-二氟苯甲醛(90.0 g, 633.36 mmol)於四氫呋喃(2000 mL)中之溶液逐滴添加烯丙基溴化鎂(於四氫呋喃中1.0 M，760.0 mL, 760.0 mmol)。使混合物升溫至25℃且攪拌2 h，之後藉由添加飽和氯化銨水溶液(2000 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 2000 mL)萃取所得混合物。用鹽水(1000 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製1-(2,6-二氟苯基)丁-3-烯-1-醇(116 g, 99%)。 步驟 2 ：第三丁基 ((1-(2,6- 二氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 二甲基矽烷
向1-(2,6-二氟苯基)丁-3-烯-1-醇(116.0 g, 629.82 mmol)於二氯甲烷(2000 mL)中之溶液添加咪唑(85.8 g, 1259.60 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(113.9 g, 755.78 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌4 h且過濾。將濾液用水(2 × 2000 mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2 × 2000 mL)、鹽水(500 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製第三丁基-[1-(2,6-二氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(180.0 g, 96%)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,6- 二氟苯基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(2,6-二氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(180.0 g, 603.14 mmol)於水(1000 mL)及四氫呋喃(1000 mL)中之溶液添加四氧化鋨(0.88 g, 3.45 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(516.0 g, 2412.6 mmol)。將所得混合物在25℃下再攪拌2 h，且藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(300 mL)來淬滅。將混合物攪拌30 min，且用乙酸乙酯(3 × 2000 mL)萃取。用水(2000 mL)、鹽水(2000 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗產物3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,6-二氟苯基)丙醛(180.0 g, 99%)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,6- 二氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(190.0 g, 610.99 mmol)於四氫呋喃(2000 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液緩慢添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，268.8 mL, 672.09 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,6-二氟苯基)丙醛(177.0 g, 589.17 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(500 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 2000 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,6-二氟苯基)丙-1-醇(160 g, 49%)。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2,6- 二氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,6-二氟苯基)丙-1-醇(80.0 g, 150.24 mmol)、三氟乙酸(400 mL, 6009.5 mmol)及三氟甲烷磺酸(40 mL, 600.95 mmol)之混合物在50℃下攪拌12 h，且在減壓下濃縮。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液將殘餘物調整至pH = 9，且用二氯甲烷(2 × 700 mL)萃取。用水(2 × 300 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。用甲基第三丁基醚(80 mL)洗滌殘餘物，得到呈白色固體之粗製2-溴-5-(2,6-二氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(40 g, 84%)。LCMS RT = 0.694 min及0.711 min，m/z = 317.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.694 min及0.711 min，ESI+實驗值[M+H] = 317.9。 步驟 6 ： (5S,7S)-2- 溴 -5-(2,6- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向2-溴-5-(2,6-二氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.5 g, 4.75 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加二乙胺基三氟化硫(2.5 mL, 18.98 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由在0℃下添加飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取該混合物。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之順式-2-溴-5-(2,6-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.25 g, 16%)。LCMS RT = 0.808 min, m/z = 319.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.808 min，ESI+實驗值[M+H] = 319.9。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
(5S,7S)-2-溴-5-(2,6-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰2，滯留時間= 3.293 min) (115 mg, 46%)，呈淺黃色固體。
SFC條件：ChiralPak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：40℃。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-5-(2,6- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向(5S,7S)-2-溴-5-(2,6-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(115 mg, 0.36 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(93 mg, 0.72 mmol)於四氫呋喃(6 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.36 mL, 0.72 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之37-67%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[(5S,7S)-5-(2,6-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(32.6 mg, 29%)。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.54 - 7.48 (m, 1H), 7.10 - 7.06 (m, 2H), 6.24 - 6.21 (m, 0.5H), 6.10 - 6.07 (m, 0.5H), 5.98 - 5.94 (m, 1H), 3.89 - 3.81 (m, 1H), 3.03 - 2.91 (m, 2H), 1.18 - 1.16 (m, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 2H)。LCMS RT = 0.740 min, m/z = 308.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.740 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。方法 74 實例951-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ] 環丙烷甲腈 步驟 1 ： 1- 氰基 -N- 甲氧基 -N- 甲基 - 環丙烷甲醯胺
將1-氰基環丙烷甲酸(500 mg, 4.5 mmol)、1-羥基苯并三唑(365 mg, 2.7 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(1.0 g, 5.4 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(878 mg, 9.0 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.8 mL, 4.5 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取所得混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之50%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-氰基-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(410 mg, 59%)。 步驟 2 ： 1-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ] 環丙烷甲腈
在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(200 mg, 0.71 mmol)及1-氰基-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(164 mg, 1.06 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之經冷卻(0℃)混合物逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，1.06 mL, 2.13 mmol)。添加後，將混合物在25℃下攪拌3 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之35-65%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之1-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲腈(20 mg, 9.2%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.40 (m, 3H), 7.78 - 7.27 (m, 2H), 6.15 - 5.99 (m, 1H), 5.57 - 5.55 (m, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.06 - 2.96 (m, 1H), 2.10 - 2.03 (m, 2H), 1.84 - 1.81 (m, 2H)。LCMS RT = 0.813 min,m/z = 296.9 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.813 min，ESI+實驗值[M +H] = 296.9。方法 75 實例96[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 螺 [2.2] 戊 -2- 基 - 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基螺 [2.2] 戊烷 -1- 甲醯胺
將螺[2.2]戊烷-2-甲酸(0.5 g, 4.46 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(0.65 g, 6.69 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(1.70 g, 4.46 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1.44 g, 11.15 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌5 h。將反應物傾倒至水(30 mL)中且用二氯甲烷(2 × 20 mL)萃取。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製N-甲氧基-N-甲基-螺[2.2]戊烷-2-甲醯胺(690 mg, 100%)。粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。
LC-MS RT = 0.638 min,m/z = 156.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.638 min，ESI+實驗值[M+H] = 156.1 步驟 2 ： [(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 螺 [2.2] 戊 -2- 基 - 甲酮
在0℃下在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.35 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-螺[2.2]戊烷-2-甲醯胺(110 mg, 0.71 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之混合物添加異丙基溴化鎂(於2-甲基四氫呋喃中3.0 M，0.71 mL, 2.13 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 30 mL)萃取所得混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40-70%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-螺[2.2]戊-2-基-甲酮(18.6 mg, 18%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.33 (m, 3H), 7.29 - 7.23 (m, 2H), 6.09 - 5.93 (m, 1H), 5.52 - 5.44 (m, 1H), 3.68 - 3.60 (m, 1H), 3.40 - 3.36 (m, 1H), 3.01 - 2.89 (m, 1H), 1.88 - 1.82 (m, 1H), 1.63 - 1.61 (m, 1H), 1.05 - 0.97 (m, 2H), 0.95 - 0.89 (m, 1H), 0.88 - 0.83 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.786 min,m/z = 298.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.786 min，ESI+實驗值[M+H] = 298.1方法 76 實例97[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 螺 [2.3] 己 -2- 基 - 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基螺 [2.3] 己烷 -1- 甲醯胺
將螺[2.3]己烷-2-甲酸(300 mg, 2.38 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(464 mg, 4.76 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(922 mg, 7.13 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(949 mg, 2.5 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之混合物在20℃下攪拌2 h。將該混合物傾倒至水(60 mL)中且用二氯甲烷(2 × 30 mL)萃取。用水(2 × 20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製N-甲氧基-N-甲基-螺[2.3]己烷-2-甲醯胺(400 mg, 99%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS RT = 0.725 min,m/z = 170.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.725 min，ESI+實驗值[M+H] = 170.2。 步驟 2 ： [(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 螺 [2.3] 己 -2- 基 - 甲酮
在0℃下在氮氣氛下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.35 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-螺[2.3]己烷-2-甲醯胺(120 mg, 0.71 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液逐滴添加異丙基溴化鎂(於2-甲基四氫呋喃中3.0 M，0.71 mL, 2.13 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 5 mL)萃取該混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之45-75%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-螺[2.3]己-2-基-甲酮(21.6 mg, 19%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.42 - 7.38 (m, 3H), 7.29 - 7.26 (m, 2H), 6.11 - 5.95 (m, 1H), 5.51 - 5.48 (m, 1H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 3.10 - 3.03 (m, 1H), 3.02 - 2.90 (m, 1H), 2.38 - 2.13 (m, 4H), 2.08 - 1.99 (m, 1H), 1.98 - 1.89 (m, 1H), 1.56 - 1.52 (m, 1H), 1.29 - 1.24 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.821 min,m/z = 312.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.821 min，ESI+實驗值[M+H] = 312.1方法 77 實例98[1-(2- 吡啶基 ) 環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -1-(2- 吡啶基 ) 環丙烷甲醯胺
將1-(2-吡啶基)環丙烷甲酸(200 mg, 1.23 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(475 mg, 3.68 mmol)、1-羥基苯并三唑(198 mg, 1.47 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(282 mg, 1.47 mmol)及N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(179 mg, 1.84 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在30℃下攪拌18 h，且用水(30 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取所得混合物。用水(2 × 10 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之N-甲氧基-N-甲基-1-(2-吡啶基)環丙烷甲醯胺(200 mg, 79%)。LC-MS RT = 0.733 min,m/z = 207 (M+H)+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.733 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 207。 步驟 2 ： [1-(2- 吡啶基 ) 環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-1-(2-吡啶基)環丙烷甲醯胺(55 mg, 0.27 mmol)、(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.18 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.4 mL, 0.80 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(5 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (水(0.05%氫氧化氨v/v)- 35-65%乙腈)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之[1-(2-吡啶基)環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(15.4 mg, 24%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.42 - 8.40 (m, 1H), 7.50 - 7.47 (m, 1H), 7.34 - 7.32 (m, 3H), 7.26 - 7.10 (m, 1H), 7.06 - 7.02 (m, 3H), 6.00 - 5.83 (m, 1H), 5.40 - 5.35 (m, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 1H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.02 - 1.90 (m, 1H), 1.83 - 1.78 (m, 2H), 1.60 - 1.50 (m, 1H)。LCMS RT = 1.678 min,m/z =349.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.678 min，ESI+ 實驗值[M+H] =349.2。方法 78 實例99( 1- 環丙基環丙基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1- 環丙基 -N- 甲氧基 -N- 甲基 - 環丙烷甲醯胺
將1-環丙基環丙烷甲酸(500 mg, 3.96 mmol)、1-羥基苯并三唑(321 mg, 2.38 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(773 mg, 7.93 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(912 mg, 4.76 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(512 mg, 3.96 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌18 h，且藉由添加水(10 mL)來淬滅。用鹽水(10 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之50%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-環丙基-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(370 mg, 55%)。 步驟 2 ： (1- 環丙基環丙基 )-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向1-環丙基-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(340 mg, 2.01 mmol)、(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(288 mg, 1.02 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，3.57 mL, 7.15 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之20%乙酸乙酯，Rf = 0.6)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之任意分配之(1-環丙基環丙基)-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(100 mg, 31%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.40 - 7.36 (m, 3H), 7.24 - 7.22 (m, 2H), 6.09 - 5.91 (m, 1H), 5.52 - 5.45 (m, 1H), 3.69 - 3.54 (m, 1H), 2.99 - 2.86 (m, 1H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.54 - 1.50 (m, 2H), 0.78 - 0.76 (m, 2H), 0.43 - 0.39 (m, 2H), 0.07 - 0.03 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.816 min, m/z = 312.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間1.935 min，ESI+實驗值[M+H] = 312.2。方法 79 實例100環丙基 -[(5S,7S)-5-(2- 氯苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2- 氯苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在氮氣氛下在-78℃下向2-氯苯甲醛(90.0 g, 640.25 mmol)於四氫呋喃(1000 mL)中之溶液添加烯丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，448.1 mL, 896.35 mmol)。使所得混合物升溫至25℃且攪拌1 h，之後藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 500 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製1-(2-氯苯基)丁-3-烯-1-醇(116.0 g, 99%)。 步驟 2 ：第三丁基 -[1-(2- 氯苯基 ) 丁 -3- 烯氧基 ]- 二甲基 - 矽烷
向1-(2-氯苯基)丁-3-烯-1-醇(116.0 g, 634.55 mmol)於二氯甲烷(1.5 L)中之溶液添加咪唑(86.4 g, 1269.1 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(124.3 g, 824.9 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(1 L)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 1 L)萃取該混合物。用鹽水(1 L)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製第三丁基-[1-(2-氯苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(188.0 g, 99%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) 7.59 - 7.54 (m, 1H), 7.31 - 7.23 (m, 2H), 7.20 - 7.14 (m, 1H), 5.92 - 5.79 (m, 1H), 5.17 - 5.12 (m, 1H), 5.07 - 5.00 (m, 2H), 2.49 - 2.42 (m, 1H), 2.40 - 2.32 (m, 1H), 0.89 (s, 9H), 0.05 (s, 3H), -0.10 - -0.13 (m, 3H)。 步驟 3 ： 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -3-(2- 氯苯基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(2-氯苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(188.0 g, 633.19 mmol)於水(1.0 L)及四氫呋喃(1.0 L)中之溶液添加四氧化鋨(於水中0.04%，41.55 mL, 6.65 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(541.7 g, 2532.8 mmol)。將所得混合物在30℃下再攪拌2 h，且藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(500 mL)來淬滅。將混合物攪拌30 min，且用乙酸乙酯(3 × 500 mL)萃取。用水(500 mL)、鹽水(500 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈有色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氯苯基)丙醛(189.0 g, 99%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) 9.84 - 9.81 (m, 1H), 7.63 - 7.59 (m, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.25 - 7.19 (m, 1H), 5.66 - 5.62 (m, 1H), 2.76 - 2.69 (m, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.09 (s, 3H), -0.10 (s, 3H)。 步驟 4 ： 1-(5- 溴 -2- 四氫哌喃 -2- 基 -1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -3-(2- 氯苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(194.6 g, 626.04 mmol)於四氫呋喃(1100 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液緩慢添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，278.2 mL, 695.6 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氯苯基)丙醛(189.0 g, 632.4 mmol)於四氫呋喃(400 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(200 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 800 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2-氯苯基)丙-1-醇(202.0 g, 60%)。LC-MS RT = 2.657 min, m/z = 446.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間2.657 min，ESI+實驗值[M+H] = 446.1。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2- 氯苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,6-三氟苯基)丙-1-醇(50.0 g, 94.17 mmol)及三氟乙酸(280.7 mL, 3766.8 mmol)之混合物在55℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液將殘餘物調整至pH = 9，且用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之2-溴-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(9.2 g, 31%)。1 H NMR (400MHz, CD3 Cl) δ 7.48 - 7.41 (m, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 2H), 7.10 - 6.79 (m, 1H), 6.08 - 5.83 (m, 1H), 5.70 - 5.53 (m, 1H), 5.41 (br s, 1H), 3.74 - 3.57 (m, 0.5H), 3.35 - 3.21 (m, 0.5H), 2.99 - 2.84 (m, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 0.5H)。LC-MS RT = 0.614 min, m/z = 314.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.614 min，ESI+實驗值[M +H] = 314.0。 步驟 6 ： 2- 溴 -5-(2- 氯苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向2-溴-5-(2-氯苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(5.2 g, 16.53 mmol)於二氯甲烷(80 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加於二氯甲烷(20 mL)中之二乙胺基三氟化硫(8.8 mL, 66.12 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由在0℃下添加飽和碳酸氫鈉水溶液(300 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取該混合物。用水(200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈深黃色油狀物之2-溴-5-(2-氯苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(3.9 g, 75%)。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-5-(2- 氯苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(402 mg, 3.11 mmol)、2-溴-5-(2-氯苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(500 mg, 1.58 mmol)於四氫呋喃(30 mL)中之混合物逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，5.5 mL, 11.06 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加水(30 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之20%乙酸乙酯，Rf = 0.5)純化殘餘物，得到呈白色固體之[5-(2-氯苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(250 mg, 52%)。LC-MS RT = 0.685 min, m/z = 306.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.685 min，ESI+實驗值[M +H] = 306.1。
藉由對掌性SFC進一步分離以上順式/反式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-5-(2-氯苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 2.509 min) (50.6 mg, 12%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.45 - 7.43 (m, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 1H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 6.76 - 6.72 (m, 1H), 6.10 - 6.06 (m, 0.5H), 6.01 - 5.95 (m, 1H), 5.95 - 5.93 (m, 0.5H), 3.78 - 3.62 (m, 1H), 3.12 - 3.04 (m, 1H), 2.93 - 2.80 (m, 1H), 1.37 - 1.32 (m, 2H), 1.14 - 1.09 (m, 2H)。LC-MS RT = 1.049 min, m/z = 306.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.049 min，ESI+實驗值[M+H] = 306.1。
環丙基-[(5R,7R)-5-(2-氯苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰4，滯留時間= 3.571 min) (65.6 mg, 15%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.47 - 7.43 (m, 1H), 7.34 - 7.26 (m, 1.5H), 7.25 - 7.22 (m, 0.5H), 6.76 - 6.72 (m, 1H), 6.10 - 6.06 (m, 0.5H), 6.01 - 5.96 (m, 1H), 5.95 - 5.93 (m, 0.5H), 3.78 - 3.62 (m, 1H), 3.12 - 3.04 (m, 1H), 2.93 - 2.80 (m, 1H), 1.37 - 1.32 (m, 2H), 1.14 - 1.08 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.776 min, m/z = 306.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.776 min，ESI+實驗值[M+H] = 306.1。注意：峰 1 及峰 3 係反式異構物。
SFC方法：管柱：Chiralcel OJ-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 ，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃。方法 80 實例101環丙基 -[(5S,7S)-5-(2,5- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2,5- 二氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在氮氣氛下在0℃下向2,5-二氟苯甲醛(10.0 g, 70.4 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液添加烯丙基溴化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，49.3 mL, 98.5 mmol)。添加後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌2 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使該混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製1-(2,5-二氟苯基)丁-3-烯-1-醇(11.0 g, 85%)。 步驟 2 ： 第三丁基 ((1-(2,5- 二氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 二甲基矽烷
向1-(2,5-二氟苯基)丁-3-烯-1-醇(11.0 g, 59.7 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液添加咪唑(8.1 g, 119.5 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(11.7 g, 77.6 mmol)。添加後，將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈輕質油狀物之粗製第三丁基-[1-(2,5-二氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(17.0 g, 95%)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,5- 二氟苯基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(2,5-二氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(17.0 g, 57.0 mmol)於四氫呋喃/水(100 mL, 1:1)中之溶液添加四氧化鋨(80.0 mg, 0.33 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(48.7 g, 227.9 mmol)，且將所得混合物在30℃下再攪拌2 h。藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(100 mL)使該混合物淬滅。將混合物攪拌30 min，且接著用乙酸乙酯(3 × 150 mL)萃取。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,5-二氟苯基)丙醛(10.8 g, 63%)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,5- 二氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(11.4 g, 36.6 mmol)於四氫呋喃(80 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液緩慢添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，16.1 mL, 40.3 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3-二氟苯基)丙醛(10.8 g, 36.0 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,5-二氟苯基)丙-1-醇(10.0 g, 52%)。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2,3,6- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
向1-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,5-二氟苯基)丙-1-醇(3.96 g, 8.83 mmol)於三氟乙酸(25 mL, 88.3 mmol)中之溶液添加三氟甲烷磺酸(2.5 mL, 8.83 mmol)。將所得混合物在60℃下加熱2 h且在減壓下濃縮。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液將殘餘物調整至pH = 9，且用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之50%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物以得到粗產物，用甲基第三丁基醚(20 mL)洗滌該粗產物，得到呈棕色固體之2-溴-5-(2,5-二氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.1 g, 39%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.11 - 7.03 (m, 1H), 6.98 - 6.75 (m, 1H), 5.84 - 5.68 (m, 1H), 5.47 - 5.30 (m, 2H), 3.64 - 3.18 (m, 1H), 3.02 - 2.63 (m, 1H)。LCMS RT = 0.727 min, m/z = 318.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.727 min，ESI+實驗值[M+H] = 318.0。 步驟 6 ： (5S,7S)-2- 溴 -5-(2,5- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向2-溴-5-(2,5-二氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(5.0 g, 15.8 mmol)於甲苯(50 mL)中之溶液逐滴添加二乙胺基三氟化硫(10.2 g, 63.3 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌16 h，且接著在0℃下緩慢添加至飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)中。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取該混合物。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至15%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色固體之外消旋-(5S,7S)-2-溴-5-(2,5-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(1.3 g, 26%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.15 - 7.05 (m, 2H), 6.72 - 6.68 (m, 1H), 6.07 - 5.91 (m, 1H), 5.78 - 5.74 (m, 1H), 3.68 - 3.55 (m, 1H), 2.90 - 2.79 (m, 1H)。LCMS RT = 0.821 min, m/z = 317.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.821 min，ESI+實驗值[M+H] = 317.9。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物(500 mg, 1.7 mmol)，得到任意分配之以下：
(5S,7S)-2-溴-5-(2,5-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰2，滯留時間= 2.600 min) (220 mg, 44%)，呈棕色固體。(以及5R,7R-異構物 (峰1，滯留時間= 2.295 min) (220 mg, 44%))。
SFC條件：管柱：ChiralPak IC-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm。移動相：A：CO2 ，B：乙醇(0.05% DEA)。梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min。流速：2.5 mL/min。管柱溫度：40℃。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2,3,6- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向(5S,7S)-2-溴-5-(2,5-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(100 mg, 0.31 mmol)、N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(81 mg, 0.63 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之混合物逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.31 mL, 0.63 mmol)。將混合物在0℃下攪拌0.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[(5S,7S)-5-(2,5-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(22.1 mg, 23%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.28 - 7.17 (m, 2H), 6.93 - 6.88 (m, 1H), 6.22 - 6.06 (m, 1H), 5.90 - 5.86 (m, 1H), 3.88 - 3.74 (m, 1H), 3.09 - 3.02 (m, 1H), 2.93 - 2.82 (m, 1H), 1.21 - 1.18 (m, 2H), 1.15 - 1.11 (m, 2H)。LCMS RT = 1.007 min, m/z = 308.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.007 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。方法 81 實例102環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2,3,6- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2,3,6- 三氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在氮氣氛下在0℃下向2,3,6-三氟苯甲醛(25.0 g, 156.2 mmol)於四氫呋喃(350 mL)中之溶液添加烯丙基溴化鎂(於己烷中2.5 M，93.7 mL, 187.4 mmol)。使所得混合物升溫至25℃且攪拌1 h，之後藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製1-(2,3,6-三氟苯基)丁-3-烯-1-醇(30 g, 95%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.01 - 7.17 (m, 1H), 6.79 - 6.92 (m, 1H), 5.72 - 5.91 (m, 1H), 5.07 - 5.26 (m, 3H), 2.74 - 2.88 (m, 1H), 2.65 - 2.69 (m, 1H), 2.44 (s, 1H)。 步驟 2 ： 第三丁基二甲基 ((1-(2,3,6- 三氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 矽烷
向1-(2,3,6-三氟苯基)丁-3-烯-1-醇(30.0 g, 148.4 mmol)於二氯甲烷(250 mL)中之溶液添加咪唑(20.2 g, 296.8 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(29.1 g, 192.9 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且接著藉由添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製第三丁基-二甲基-[1-(2,3,6-三氟苯基)丁-3-烯氧基]矽烷(46.0 g, 98%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.26 (s, 1H), 7.07 - 6.95 (m, 1H), 6.97 - 6.77 (m, 1H), 5.58 - 5.82 (m, 1H), 4.97 - 5.11 (m, 3H), 2.84 - 2.64 (m, 1H), 2.62 - 2.44 (m, 1H), 0.83 - 0.86 (m, 9H), 0.03 - 0.07 (m, 3H), -0.17 - -0.13 (m, 3H)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,3,6- 三氟苯基 ) 丙醛
向第三丁基-二甲基-[1-(2,3,6-三氟苯基)丁-3-烯氧基]矽烷(5.0 g, 15.8 mmol)於水(30 mL)及四氫呋喃(30 mL)中之溶液添加四氧化鋨(0.5 g, 1.97 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經2 h添加過碘酸鈉(13.5 g, 63.2 mmol)。將所得混合物在30℃下再攪拌2 h，且接著藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(300 mL)來淬滅。將混合物攪拌30 min，且接著用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取。用水(200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗產物3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,6-三氟苯基)丙醛(5 g, 99%)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,3,6- 三氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(26.9 g, 86.4 mmol)於四氫呋喃(300 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，38.0 mL, 95.0 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,6-三氟苯基)丙醛(27.0 g, 84.8 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(3-溴-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-3-(2,3,6-三氟苯基)丙-1-醇(23 g, 49%)。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2,3,6- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,6-三氟苯基)丙-1-醇(22.9 g, 41.6 mmol)及三氟甲烷磺酸(12.2 mL, 138.4 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之混合物在55℃下加熱4 d且在減壓下濃縮。用水(100 mL)稀釋殘餘物，且利用飽和碳酸氫鈉水溶液調整至pH = 9。用二氯甲烷(3 × 200 mL)萃取混合物。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之2-溴-5-(2,3,6-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(9.2 g, 66%)。LCMS RT = 0.873 min及0.897 min，m/z = 334.0/336.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間0.873 min及0.897 min，ESI+實驗值[M+H] = 334.0/336.0 步驟 6 ：外消旋 -(5S,7S)-2- 溴 -7- 氟 -5-(2,3,6- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向2-溴-5-(2,3,6-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(9.2 g, 27.5 mmol)於甲苯(100 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加於甲苯(4 mL)中之二乙胺基三氟化硫(14.6 mL, 110.2 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1 h，且接著在0℃下緩慢添加至飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)中。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取該混合物。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之外消旋-(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2,3,6-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(1.8 g, 19%)。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2,3,6- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(188 mg, 1.47 mmol)及外消旋-(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2,3,6-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.72 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.73 ml, 1.46 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加水(30 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之環丙基-[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-(2,3,6-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(95 mg, 40%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.25 - 7.16 (m, 1H), 6.92 - 6.89 (m, 1H), 6.23 - 5.96 (m, 1H), 5.91 - 5.77 (m, 1H), 3.87 - 3.72 (m, 1H), 3.14 - 2.97 (m, 2H), 1.37 - 1.27 (m, 2H), 1.14 - 1.03 (m, 2H)。LCMS RT = 0.655 min, m/z = 326.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.655 min，ESI+實驗值[M+H] = 326.1。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-(2,3,6-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.856 min) (40 mg, 42%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.24 - 7.20 (m, 1H), 6.93 - 6.90 (m, 1H), 6.19 - 6.03 (m, 1H), 5.86 - 5.83 (m, 1H), 3.84 - 3.74 (m, 1H), 3.10 - 3.04 (m, 2H), 1.34 - 1.31 (m, 2H), 1.13 - 1.08 (m, 2H)。LCMS RT = 0.864 min, m/z = 325.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.864 min，ESI+實驗值[M+H] = 325.9。
SFC條件：管柱：Chiralcel OJ-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm。移動相：A：CO2 B：乙醇(0.05% DEA)。梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min。流速：2.5mL/min，管柱溫度：35℃。方法 82 實例103環丙基 -[(5S,7S)-7- 氘 -7- 氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：順式 -2- 溴 -7- 氘 -7- 氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
向反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(400 mg, 1.42 mmol)於甲苯(10 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加二乙胺基三氟化硫(917 mg, 5.69 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由在0℃下添加飽和碳酸氫鈉(30 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取該混合物。用水(50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-2-溴-7-氘-7-氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.22 g, 55%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.38 (m, 3H), 7.27 - 7.24 (m, 2H), 5.47 - 5.42 (m, 1H), 3.63 - 3.51 (m, 1H), 2.94 - 2.84 (m, 1H)。 步驟 2 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氘 -7- 氟 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣下在0℃下向順式-2-溴-7-氘-7-氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(210 mg, 0.74 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(192 mg, 1.48 mmol)於四氫呋喃(6 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.74 mL, 1.48 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取該混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之44-74%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[順式-7-氘-7-氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(55 mg, 27%)。LCMS RT = 0.646 min, m/z = 273.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.646 min，ESI+實驗值[M+H] = 273.2。
藉由對掌性SFC進一步分離以上順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-氘-7-氟-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 4.354 min) (16.6 mg, 29%)，呈白色固體。1 HNMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.38 (m, 3H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 5.67 - 5.63 (m, 1H), 3.80 - 3.70 (m, 1H), 3.05 - 3.02 (m, 1H), 2.88 - 2.80 (m, 1H), 1.19 - 1.16 (m, 2H), 1.12 - 1.09 (m, 2H)。LCMS RT = 0.738 min, m/z = 273.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間：0.738 min，ESI+實驗值[M+H] = 273.1。
SFC條件：管柱：Daicel Chiralpak AD-H (250 mm*30 mm, 5 μm) I.D., 5 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.1% NH3 H2 O IPA)，梯度：5 min內30%至30%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃。方法 83 實例104[(1R,2S)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及 [(1S,2R)-2- 氟環丙基 ]-[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2- 氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向反式-2-氟-N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(反式混合物) (245 mg, 1.65 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(250 mg, 0.85 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(2.1 mL, 4.15 mmol，於四氫呋喃中2 M)。將混合物在0℃下攪拌1小時。藉由添加水(10 mL)使反應混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。使有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之33%乙酸乙酯，Rf = 0.6)純化殘餘物，得到呈白色固體之[(1S,2R)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(反式混合物) (105 mg, 41%)。LCMS RT = 0.739 min, m/z = 308.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.739 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。
藉由對掌性SFC進一步分離以上反式混合物，得到任意分配之以下：
[(1R,2S)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.773 min) (48.1 mg, 45%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.25 - 7.13 (m, 3H), 6.22 - 6.06 (m, 1H), 5.93 - 5.89 (m, 1H), 5.01 - 4.87 (m, 0.5H), 4.85 - 4.82 (m, 0.5H), 3.88 - 3.75 (m, 1H), 3.51 - 3.42 (m, 1H), 2.93 - 2.81 (m, 1H), 1.75 - 1.64 (m, 1H), 1.62 - 1.54 (m, 1H)。LC-MS RT = 0.852 min,m/z = 308.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.852 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 308.0。
未分離出1S,2R-異構物。
SFC條件：管柱：Chiralcel OD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃
藉由對掌性SFC來分離更大批之反式混合物(215 mg, 0.70 mmol)，得到任意分配之以下：
[(1S,2R)-2-氟環丙基]-[(5S,7S)-7-氟-5-(2-氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.445 min) (19.5 mg, 9%)，呈白色固體。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.40 - 7.38 (m, 1H), 7.18 - 7.15 (m, 2H), 6.98 - 6.97 (m, 1H), 6.13 - 6.11 (m, 0.5H), 5.99 - 5.98 (m, 0.5H), 5.87 - 5.85 (m, 1H), 5.05 - 5.04 (m, 0.5H), 4.89 - 4.88 (m, 0.5H), 3.73 - 3.67 (m, 1H), 3.58 - 3.54 (m, 1H), 3.01 - 2.95 (m, 1H), 1.72 - 1.65 (m, 2H)。LC-MS RT = 1.763 min,m/z = 308.1 (M+H)+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.763 min，ESI+ 實驗值[M+H] = 308.1。注意：在AD SFC條件下，1R,2S-異構物為峰2 (滯留時間= 2.728 min)。
SFC條件：管柱：Daicel Chiralpak AD-H (250 mm*30 mm, 5 μm)，移動相：A：CO2，B：乙醇(0.1% NH3 H2 O甲醇)，梯度：5 min內15%至15%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃。方法 84 實例105外消旋 -(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ] 環丙烷甲腈 步驟 1 ：反式 -2-( 乙氧基羰基 ) 環丙烷甲酸
向反式-環丙烷-1,2-二甲酸二乙基酯(2000 mg, 10.74 mmol)於乙醇(26 mL)中之溶液添加氫氧化鈉(429 mg, 10.74 mmol)於水(3 mL)中之溶液。將混合物在25℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。藉由在0℃下添加鹽酸水溶液(4 M)將水性殘餘物調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之反式-2-乙氧基羰基環丙烷甲酸(820 mg, 48%)。LCMS RT = 0.430 min,m/z = 159.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.430 min，ESI+實驗值[M+H] = 159.1。 步驟 2 ：反式 -2-( 甲氧基 ( 甲基 ) 胺甲醯基 ) 環丙烷甲酸乙基酯
將1-羥基苯并三唑(684 mg, 5.06mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(1164 mg, 6.07 mmol)、反式-2-乙氧基羰基環丙烷甲酸(800 mg, 5.06 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(740 mg, 7.59 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1634 mg, 12.65 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且用水(20 mL)稀釋。用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取反應混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之反式-2-[甲氧基(甲基)胺甲醯基]環丙烷甲酸乙基酯(600 mg, 59%)。LCMS RT = 0.525 min,m/z = 202.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.525 min，ESI+實驗值[M+H] = 202.2。 步驟 3 ：反式 -2-((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ) 環丙烷甲酸乙基酯
在氮氣氛下在0℃下向反式-2-[甲氧基(甲基)胺甲醯基]環丙烷甲酸乙基酯(571 mg, 2.84 mmol)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(400 mg, 1.42 mmol)於四氫呋喃(13 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，2.84 mL, 5.67 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 25 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之反式-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲酸乙基酯(350 mg, 72%)。LCMS RT = 0.693 min,m/z = 344.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.693 min，ESI+實驗值[M+H] = 344.1。 步驟 4 ：反式 -2-((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ) 環丙烷甲酸
向反式-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲酸乙基酯(100 mg, 0.29 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加氫氧化鋰(42 mg, 1.75 mmol)於水(2 mL)中之溶液。將混合物在25℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。藉由在0℃下添加鹽酸水溶液(4 M)將水性殘餘物調整至pH = 3。接著用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製反式-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲酸(90 mg, 98%)。LCMS RT = 0.590 min,m/z = 316.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.590 min，ESI+實驗值[M+H] = 316.2。 步驟 5 ：反式 -2-((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ) 環丙烷甲醯胺
將1-羥基苯并三唑(34 mg, 0.25 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(49 mg, 0.25 mmol)、氯化銨(27 mg, 0.51 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(98 mg, 0.76 mmol)及反式-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲酸(80 mg, 0.25 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之混合物在25℃下攪拌18 h，且用水(10 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於甲醇中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之反式-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲醯胺(75 mg, 94%)。LCMS RT = 0.555 min,m/z = 315.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.555 min，ESI+實驗值[M+H] = 315.1。 步驟 6 ：外消旋 -(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ] 環丙烷甲腈
向反式-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲醯胺(65 mg, 0.21 mmol)於1,4-二噁烷(3 mL)中之溶液添加三乙胺(62 mg, 0.62 mmol)及三氟乙酸酐(87 mg, 0.41 mmol)。將反應物在25℃下攪拌2 h，且用水(15 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取混合物。用飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之15-45%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之外消旋-(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-羰基]環丙烷甲腈(24.0 mg, 38%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.39 (m, 3H), 7.32 - 7.30 (m, 2H), 6.22 - 6.20 (m, 0.5H), 6.08 - 6.06 (m, 0.5H), 5.70 - 5.67 (m, 1H), 3.81 - 3.75 (m, 1H), 3.62 - 3.31(m, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 1H), 2.28 - 2.24 (m, 1H), 1.68 - 1.63 (m, 2H)。LCMS RT = 0.957 min,m/z = 297.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經2.0 min)，滯留時間0.957 min，ESI+實驗值[M+H] = 297.2。方法 85 實例106環丙基 -[(5S,7S)-5-(2,3- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2,3- 二氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
向2,3-二氟苯甲醛(10.0 g, 70.4 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之經冷卻(0℃)溶液經30 min添加烯丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，46.0 mL, 92.0 mmol)。添加後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌2 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺黃色油狀物之粗製1-(2,3-二氟苯基)丁-3-烯-1-醇(12.9 g, 99%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.27 - 7.24 (m, 1H), 7.11 - 7.06 (m, 2H), 5.87 - 5.77 (m, 1H), 5.20 - 5.08 (m, 3H), 2.62 - 2.47 (m, 2H)。 步驟 2 ：第三丁基 ((1-(3,4- 二氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 二甲基矽烷
向1-(2,3-二氟苯基)丁-3-烯-1-醇(12.9 g, 70.6 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之經攪拌溶液添加咪唑(9.6 g, 141.2 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(12.8 g, 84.7 mmol)。添加後，將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(100 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取該混合物。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製第三丁基-[1-(2,3-二氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(21.0 g, 99%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.25 - 7.22 (m, 1H), 7.08 - 7.03 (m, 2H), 5.82 - 5.75 (m, 1H), 5.10 - 4.99 (m, 3H), 2.49 - 2.42 (m, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.67 (s, 3H), -0.08 (s, 3H)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(3,4- 二氟苯基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(2,3-二氟苯基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(21.0 g, 70.4 mmol)於四氫呋喃/水(200 mL, 1:1)中之溶液添加四氧化鋨(0.1 g, 0.39 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經2 h向混合物添加過碘酸鈉(60.2 g, 281.5 mmol)。將所得混合物在30℃下再攪拌2 h，且接著藉由添加冷的飽和硫代硫酸鈉水溶液(300 mL)來淬滅。將混合物攪拌30 min，且接著用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取。用水(200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至3%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3-二氟苯基)丙醛(15.0 g, 71%)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(3,4- 二氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(15.7 g, 50.4 mmol)於四氫呋喃(150 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，22.0 mL, 54.9 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，接著逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3-二氟苯基)丙醛(15.0 g, 49.9 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液。添加後，將混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至12%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3-二氟苯基)丙-1-醇(12.0 g, 45%)。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2,3- 二氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3,4-二氟苯基)丙-1-醇(56.0 g, 105.2 mmol)於三氟乙酸(150 mL)中之溶液在55℃下加熱16 h，且在減壓下濃縮。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液將殘餘物調整至pH = 9，且用二氯甲烷(3 × 200 mL)萃取。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製2-溴-5-(2,3-二氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(22.0 g, 66%)。 步驟 6 ： (5S,7S)-2- 溴 -5-(2,3- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑及 (5R,7R)-2- 溴 -5-(2,3- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向2-溴-5-(2,3-二氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(30.0 g, 94.9 mmol)於甲苯(200 mL)中之經攪拌溶液緩慢添加二乙胺基三氟化硫(45.9 g, 284.7 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌16 h，且接著在0℃下緩慢添加至經攪拌之飽和碳酸氫鈉水溶液(200 mL)中。用二氯甲烷(3 × 150 mL)萃取該混合物。用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至15%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到順式-2-溴-5-(2,3-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑。藉由對掌性SFC進一步分離此順式物質，得到任意分配之以下：
呈白色固體之(5S,7S)-2-溴-5-(2,3-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰1，滯留時間= 2.828 min) (1.1 g, 3.7%)及呈白色固體之(5R,7R)-2-溴-5-(2,3-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰2，滯留時間= 2.935 min) (1.1 g, 3.7%)。
SFC條件：管柱：Chiral Cel OJ-H 150×4.6 mm I.D., 5 μm，移動相：A：CO2 ，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：2.5 mL/min。管柱溫度：40℃。 步驟 7 ：環丙基 -[(5S,7S)-5-(2,3- 二氟苯基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向(5S,7S)-2-溴-5-(2,3-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(150 mg, 0.47 mmol)、N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(122 mg, 0.94 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.47 mL, 0.94mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌0.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取該混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40-70%乙腈/ 0.225%甲酸)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之環丙基-[(5S,7S)-5-(2,3-二氟苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(49.1 mg, 34%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.22 - 7.16 (m, 1H), 7.14 - 7.08 (m, 1H), 6.75 - 6.72 (m, 1H), 6.13 - 6.10 (m, 0.5H), 5.99 - 5.96 (m, 0.5H), 5.88 - 5.84 (m, 1H), 3.74 - 3.67 (m, 1H), 3.09 - 3.04 (m, 1H), 2.99 - 2.92 (m, 1H), 1.36 - 1.31 (m, 2H), 1.14 - 1.09 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.666 min, m/z = 308.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.666 min，ESI+實驗值[M+H] = 308.1。方法 86 實例107環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5-(2,3,5- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(2,3,5- 三氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在25℃下向2,3,5-三氟苯甲醛(20.0 g, 124.93 mmol)於二氯甲烷(120 mL)及水(120 mL)中之溶液添加四丁基碘化銨(4.6 g, 12.49 mmol)及烯丙基三氟硼酸鉀(40.7 g, 137.42 mmol)。將混合物在25℃下攪拌2 h，且用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取。用鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製1-(2,3,5-三氟苯基)丁-3-烯-1-醇(29.0 g, 100%)。 步驟 2 ：第三丁基二甲基 ((1-(2,3,5- 三氟苯基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 ) 氧基 ) 矽烷
向1-(2,3,5-三氟苯基)丁-3-烯-1-醇(20.5 g, 101.4 mmol)及咪唑(13.8 g, 202.7 mmol)於二氯甲烷(120 mL)中之混合物添加第三丁基二甲基氯矽烷(19.9 g, 131.9 mmol)。將混合物在35℃下攪拌16 h且用二氯甲烷(50 mL)稀釋。用水(2 × 50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌該混合物，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之第三丁基二甲基((1-(2,3,5-三氟苯基)丁-3-烯-1-基)氧基)矽烷(28.0 g, 87%)。 步驟 3 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,3,5- 三氟苯基 ) 丙醛
將第三丁基-二甲基-[1-(2,3,5-三氟苯基)丁-3-烯氧基]矽烷(5.0 g, 15.8 mmol)及四氧化鋨(5.0 g, 19.7 mmol)於四氫呋喃(20 mL)及水(20 mL)中之混合物在20℃下攪拌0.5 h，且接著分3份經0.5 h添加過碘酸鈉(13.5 g, 63.2 mmol)。添加後，將反應混合物在20℃下攪拌3 h，且藉由添加飽和硫代硫酸鈉水溶液(30 mL)來淬滅。藉由過濾去除固體。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取濾液。用鹽水洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至5%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,5-三氟苯基)丙醛(1.6 g, 32%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 9.78 (t,J = 2.2 Hz, 1H), 7.04 - 7.01 (m, 1H), 6.87 - 6.83 (m, 1H), 5.56 - 5.53 (m, 1H), 2.85 - 2.79 (m, 1H), 2.71 - 2.66 (m, 1H), 0.89 (s, 1H), 0.11 (s, 1H), -0.05 (s, 1H)。 步驟 4 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(2,3,5- 三氟苯基 ) 丙 -1- 醇
在-78℃下在氮氣下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(1.6 g, 5.2 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之混合物逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M，2.1 mL, 5.2 mmol)。添加後，將混合物在-78℃下攪拌0.5 h且逐滴添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,5-三氟苯基)丙醛(1.5 g, 4.71 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液。將所得混合物在-78℃下攪拌4 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取該混合物。用鹽水洗滌合併之有機層且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至15%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色膠狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,5-三氟苯基)丙-1-醇(1.78 g, 69%)。LCMS RT = 1.056 min, m/z = 466.0 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.056 min，ESI+實驗值[M+H] = 466.0。 步驟 5 ： 2- 溴 -5-(2,3,5- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(2,3,5-三氟苯基)丙-1-醇(1.8 g, 3.2 mmol)於三氟乙酸(250 mL, 32.3 mmol)中之溶液在50℃下攪拌1 h，且接著添加三氟甲烷磺酸(1 mL, 3.2 mmol)。將所得混合物在50℃下攪拌3 h，且接著在減壓下濃縮。用乙酸乙酯(50 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加氫氧化鈉水溶液(20%)調整至pH = 8。用水(2 × 50 mL)、鹽水洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之40%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物以得到粗產物。用甲基第三丁基醚(20 mL)洗滌此粗製品，得到呈棕色固體之2-溴-5-(2,3,5-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(0.55 g, 51%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.01 - 6.94 (m, 1H), 6.980 - 6.56 (m, 1H), 5.88 - 5.60 (m, 2H), 5.47 - 5.40 (m, 1H), 3.66 - 3.22 (m, 1H), 3.01 - 3.64 (m, 1H)。 步驟 6 ： (5S,7S)-2- 溴 -7- 氟 -5-(2,3,5- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向2-溴-5-(2,3,5-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(550 mg, 1.65 mmol)於甲苯(10 mL)中之混合物逐滴添加二乙胺基三氟化硫(1.06 g, 6.6 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌16 h，且接著藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液(50 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 30 mL)萃取所得混合物。用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之15%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色固體之外消旋-(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2,3,5-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(197 mg, 36%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.00 - 6.95 (m, 1H), 6.52 - 6.48 (m, 1H), 6.08 - 5.92 (m, 1H), 5.81 - 5.77 (m, 1H), 3.71 - 3.57 (m, 1H), 2.90 - 2.80 (m, 1H)。
藉由對掌性SFC進一步分離此外消旋物，得到任意分配之以下：
呈棕色固體之(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2,3,5-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(峰2，滯留時間= 2.866 min) (80 mg, 41%) (以及5R,7R-異構物(峰1，滯留時間= 2.345 min) (80 mg, 41%))。
SFC條件：管柱：Chiralpak IC-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm。移動相：A：CO2 ，B：異丙醇(0.05% DEA)。梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min。流速：2.5 mL/min。管柱溫度：35℃。 步驟 7 ：環丙基 -((5S,7S)-7- 氟 -5-(2,3,5- 三氟苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下向(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(2,3,5-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(80 mg, 0.24 mmol)、N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(62 mg, 0.48 mmol)於四氫呋喃(3 mL)中之混合物逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，0.24 mL, 0.48 mmol)。將該混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取該混合物。用鹽水(15 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40-70乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-(2,3,5-三氟苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(11 mg, 14%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.29 - 7.26 (m, 1H), 6.78 - 6.75 (m, 1H), 6.23 - 6.06 (m, 1H), 5.96 - 5.93 (m, 1H), 3.88 - 3.80 (m, 1H), 3.07 - 3.04 (m, 1H), 2.96 - 2.89 (m, 1H), 1.22 - 1.11 (m, 4H)。LCMS RT = 1.029 min, m/z = 326.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.029 min，ESI+實驗值[M+H] = 326.2。方法 87 實例109環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： (1E )-2- 甲基丙醛肟
向異丁醛(200.0 g, 2773.5 mmol)於水(2.0 L)中之溶液添加羥胺鹽酸鹽(231.3 g, 3328.3 mmol)及碳酸鈉(587.9 g, 5547.1 mmol)。添加後，將反應混合物在20℃下攪拌4 h且過濾。用乙酸乙酯(3 × 1 L)萃取濾液。用鹽水(2 × 1 L)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製(1E)-2-甲基丙醛肟(220 g, 91%)。 步驟 2 ： 3- 異丙基 -4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
在25℃下向n -氯琥珀醯亞胺(268.2 g, 2008.7 mmol)於氯仿(1500 mL)中之溶液添加吡啶(9.73 mL, 120.5 mmol)及(1E)-2-甲基丙醛肟(175.0 g, 2008.7 mmol)。在25℃下攪拌0.5 h後，在25℃下經30 min逐滴添加丙烯酸甲酯(227.2 mL, 2506.9 mmol)及三乙胺(292.4 mL, 2109.2 mmol)於氯仿(100 mL)中之溶液。將反應混合物在25℃下攪拌16 h，且用二氯甲烷(1000 mL)稀釋。用水(3 × 500 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-異丙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(240 g, 70%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.98 - 4.93 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.21 - 3.19 (m, 2H), 2.75 - 2.66 (m, 1H), 1.16 (d, J = 6.8 Hz, 6H)。 步驟 3 ： 3- 羥基 -5- 異丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
使3-異丙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(240.0 g, 1402 mmol)及鈀(於碳上10%，14.9 g)於乙醇(2 L)中之混合物在45℃下氫化(50 psi) 16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製3-羥基-5-異丙基-吡咯啶-2-酮(70 g, 35%)。 步驟 4 ： 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 異丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-羥基-5-異丙基-吡咯啶-2-酮(49.0 g, 342.2 mmol)及咪唑(69.9 g, 1026.7 mmol)於二氯甲烷(1120 mL)中之經冷卻(0℃)混合物添加第三丁基二甲基氯矽烷(77.4 g, 513.3 mmol)。添加後，將混合物在25℃下攪拌16 h且傾倒至水(1000 mL)中。用鹽水(500 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-吡咯啶-2-酮(35.0 g, 40%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 6.63 (s, 1H), 4.32 - 4.28 (m, 1H), 3.17 - 3.11 (m, 1H), 2.46 - 2.40 (m, 1H), 1.66 - 1.60 (m, 2H), 0.92 - 0.89 (m, 14H), 0.15 (d,J = 10.4 Hz, 6H)。 步驟 5 ： 1- 胺基 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 異丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-吡咯啶-2-酮(5.0 g, 19.42 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加氫化鈉(60%, 1.2 g, 29.13 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌30 min，接著添加o-(二苯基磷醯基)羥胺(6.8 g, 29.13 mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製(1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-吡咯啶-2-酮(5.3 g, 100%)。LCMS RT = 1.178 min,m/z = 273.3 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2 min)，滯留時間1.178 min，ESI+實驗值[M +H] = 273.3。 步驟 6 ： 2-[[3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 異丙基 -2- 側氧基 - 吡咯啶 -1- 基 ] 胺基 ]-2- 亞胺基 - 乙酸乙基酯
向1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-吡咯啶-2-酮(5.28 g, 19.38 mmol)於乙醇(250 mL)中之溶液添加2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(8.44 g, 58.14 mmol)。將反應混合物在90℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(7.10 g, 98%)。LCMS RT = 0.948 min,m/z = 372.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.948 min，ESI+實驗值[M +H] = 372.2。 步驟 7 ： 7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(7.1 g, 19.11 mmol)於甲苯(140 mL)中之溶液添加對甲苯磺酸一水合物(4.4 g, 22.93 mmol)。將反應混合物在120℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(6.6 g, 98%)。LCMS RT = 0.952 min,m/z = 354.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.952 min，ESI+實驗值[M +H] = 354.2。 步驟 7 ：順式 -7- 羥基 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在25℃下向7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(6.6 g, 18.67 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，18.67 mL, 18.67 mmol)。將反應混合物在40℃下攪拌16 h且濃縮。用水(100 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 50 ml)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至70%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之順式-7-羥基-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.8 g, 62.7%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.34 - 5.31 (m, 1H), 4.47 - 4.43 (m, 2H), 4.26 - 4.24 (m, 1H), 3.14 - 3.09 (m, 1H), 2.48 - 2.42 (m, 2H), 1.43 - 1.39 (m, 3H), 1.07 (d,J = 7.2 Hz, 3H), 0.92 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。 步驟 8 ：反式 -5- 異丙基 -7-(4- 硝基苯甲醯基 ) 氧基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在氮氣氛下在0℃下向順式-7-羥基-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.0 g, 8.36 mmol)、4-硝基苯甲酸(2.1 g, 12.54 mmol)及三苯基膦(6.6 g, 25.08 mmol)於四氫呋喃(40 mL)中之混合物添加偶氮二甲酸二異丙基酯(5.0 mL, 25.08 mmol)。將混合物在25℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至17%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之反式-5-異丙基-7-(4-硝基苯甲醯基)氧基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.5 g, 77%)。 步驟 9 ：反式 -7- 羥基 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將碳酸鉀(1.23 g, 8.88 mmol)及反式-5-異丙基-7-(4-硝基苯甲醯基)氧基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.3 g, 5.92 mmol)於乙醇(10 mL) /四氫呋喃(5 mL) /水(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌1 h且在減壓下濃縮。用水(50 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(2 × 30 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製反式-7-羥基-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.10 g, 78%)。 步驟 10 ：順式 -7- 氟 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在氮氣氛下在0℃下向反式-7-羥基-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.0 g, 4.18 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之混合物添加二乙胺基三氟化硫(2.23 mL, 16.72 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液(200 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取溶液。用鹽水(2 × 100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至7%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-7-氟-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(550 mg, 55%)。 步驟 11 ：順式 -7- 氟 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
將順式-7-氟-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(550 mg, 2.28 mmol)及氫氧化鋰水合物(191 mg, 4.56 mmol)於甲醇(10 mL) /四氫呋喃(5 mL) /水(5 mL)中之混合物在20℃下攪拌1 h且在減壓下濃縮。用水(20 mL)稀釋殘餘物且用乙酸乙酯(20 mL)洗滌。藉由添加鹽酸(1 M)將水相調整至pH = 6，且接著用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製順式-7-氟-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(420 mg, 86%)。 步驟 12 ：順式 -7- 氟 -5- 異丙基 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將順式-7-氟-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(420 mg, 1.97 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(1.05 mL, 5.91 mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(453 mg, 2.36 mmol)、1-羥基苯并三唑(160 mg, 1.18 mmol)及N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(384 mg, 3.94 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(20 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取該混合物。用鹽水(2 × 50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，50%至60%)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之順式-7-氟-5-異丙基-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(200 mg, 40%)。LCMS RT = 0.692 min,m/z = 257.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.692 min，ESI+實驗值[M +H] = 257.1。 步驟 13 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氟 -5- 異丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-7-氟-5-異丙基-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(200 mg, 0.78 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，1.0 mL, 0.50 mmol)。將混合物在25℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取所得混合物。用鹽水(2 × 10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至40%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[順式-7-氟-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(100 mg, 52%)。藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-異丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 5.136 min) (24 mg, 23%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.99 - 5.83 (m, 1H), 4.39 - 4.34 (m, 1H), 3.22 - 3.18 (m, 1H), 3.12 - 3.08 (m, 1H), 2.72 - 2.62 (m, 1H), 2.42 - 2.38 (m, 1H), 1.34 - 1.33 (m, 2H), 1.13 - 1.10 (m, 2H), 1.08 (d,J = 6.8 Hz, 3H), 0.94 (d,J = 6.8 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.822 min,m/z = 238.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.822 min，ESI+實驗值[M +H] = 238.0。
SFC條件：管柱：Lux 3u Cellulose-2 150 × 4.6 mm，移動相：A：CO2 ，B：甲醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度35℃。方法 88 實例110環丙基 -[(5S,7S)-5- 環丙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： (E)- 環丙烷甲醛肟
向環丙烷甲醛(50.0 g, 713.37 mmol)於乙醇(500 mL)中之溶液添加碳酸鈉(166.3 g, 1569.4 mmol)及羥胺鹽酸鹽(59.5 g, 856.04 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌3 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。用水(1000 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 600 mL)萃取。用鹽水(1000 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物之粗製(E)-環丙烷甲醛肟(40 g, 66%)。 步驟 2 ： 3- 環丙基 -4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
將吡啶(2.85 mL, 35.25 mmol)、N-氯琥珀醯亞胺(78.5 g, 587.54 mmol)及(E)-環丙烷甲醛肟(50 g, 587.54 mmol)於氯仿(500 mL)中之混合物在25℃下攪拌2 h，接著添加丙烯酸甲酯(66.45 mL, 733.25 mmol)及三乙胺(85.35 mL, 615.75 mmol)於氯仿(100 mL)中之溶液。將反應混合物在25℃下攪拌12 h，且藉由添加水(200 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 200 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-環丙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(75.0 g, 76%)。 步驟 3 ： 5- 環丙基 -3- 羥基 - 吡咯啶 -2- 酮
將3-環丙基-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(35.0 g, 206.88 mmol)及氧化鉑(6.1 g, 26.89 mmol)於乙二醇(300 mL)中之混合物在氫氣氛(30 psi)下在25℃下攪拌48 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至100%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之5-環丙基-3-羥基-吡咯啶-2-酮(15.5 g, 53%)。LCMS RT = 0.297 min,m/z =142.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間0.297 min，ESI+實驗值[M+H] =142.1。 步驟 4 ： 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 環丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向5-環丙基-3-羥基-吡咯啶-2-酮(13.0 g, 92.09 mmol)及咪唑(18.8 g, 276.26 mmol)於二氯甲烷(150 mL)中之經冷卻(0℃)混合物添加第三丁基二甲基氯矽烷(20.8 g, 138.13 mmol)。將混合物在25℃下攪拌16 h，且接著用水(2 × 50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-吡咯啶-2-酮(10.2 g, 43%)。 步驟 5 ： 1- 胺基 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 環丙基 - 吡咯啶 -2- 酮
向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-吡咯啶-2-酮(10.2 g, 39.93 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(150 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加氫化鈉(於礦物油中60%，2.4 g, 59.9 mmol)。將混合物在0℃下攪拌30 min，且接著添加O-(二苯基磷醯基)羥胺(14.0 g, 59.9 mmol)。將所得混合物在10℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製(1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-吡咯啶-2-酮(10.5 g, 97%)。LCMS RT = 0.810 min,m/z =271.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.810 min，ESI+實驗值[M+H] =271.2。 步驟 6 ： 2-[[3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 環丙基 -2- 側氧基 - 吡咯啶 -1- 基 ] 胺基 ]-2- 亞胺基 - 乙酸乙基酯
將1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-吡咯啶-2-酮(10.5 g, 38.83 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(14.1 g, 97.06 mmol)於乙醇(150 mL)中之混合物在90℃下攪拌12 h且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製2-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(10.0 g, 70%)。LCMS RT = 0.804 min,m/z =370.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.804 min，ESI+實驗值[M+H] =370.2。 步驟 7 ： 7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 環丙基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向(2Z)-2-胺基-2-[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-2-側氧基-吡咯啶-1-基]亞胺基-乙酸乙基酯(10.0 g, 27.06 mmol)於甲苯(120 mL)中之溶液添加對甲苯磺酸(5.6 g, 32.47 mmol)。將反應混合物在120℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。用水(200 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈紅色油狀物之粗製7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(9.5 g, 99%)。LCMS RT = 0.928 min,m/z = 352.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.928 min，ESI+實驗值[M+H] =352.2。 步驟 8 ： 5- 環丙基 -7- 羥基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-環丙基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(9.5 g, 27.03 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，27.0 mL, 27.0 mmol)。將反應混合物在40℃下攪拌12 h且在減壓下濃縮。用水(200 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取。將合併之有機層在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至100%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之5-環丙基-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.2 g, 34%)。LCMS RT = 0.521 min,m/z = 238.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.521 min，ESI+實驗值[M+H] =238.1。 步驟 9 ：順式 -5- 環丙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向5-環丙基-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(2.0 g, 8.43 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加二乙胺基三氟化硫(3.26 mL, 25.29 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌12 h，且藉由添加水(5.0 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 50 mL)萃取所得混合物。用鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化所得殘餘物，得到呈黃色油狀物之順式-5-環丙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(220 mg, 11%)。LCMS RT = 0.701 min,m/z = 240.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.701 min，ESI+實驗值[M+H] =240.1。 步驟 10 ：順式 -5- 環丙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
將氫氧化鋰一水合物(105 mg, 2.51 mmol)及順式-5-環丙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(200 mg, 0.84 mmol)於乙醇(0.50 mL) /水(0.50 mL) /四氫呋喃(0.50 mL)中之混合物在25℃下攪拌2 h且在減壓下濃縮。藉由添加鹽酸水溶液(1 M)將水性殘餘物調整至pH = 7且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製順式-5-環丙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(175 mg, 99%)。LCMS RT = 0.452 min,m/z = 212.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.452 min，ESI+實驗值[M+H] =212.1。 步驟 11 ：順式 -5- 環丙基 -7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將順式-5-環丙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(175 mg, 0.83 mmol)、1-羥基苯并三唑(56 mg, 0.41 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(121 mg, 1.24 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(0.34 mL, 2.07 mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(190.6 mg, 0.99 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且藉由添加水(10 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取該混合物。用鹽水(10 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至60%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-5-環丙基-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(75 mg, 36%)。LCMS RT = 0.604 min,m/z = 255.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.604 min，ESI+實驗值[M+H] =255.1。 步驟 12 ：環丙基 -[(5S,7S)-5- 環丙基 -7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-5-環丙基-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(65 mg, 0.26 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，1.24 mL, 0.62 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(3 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 5 mL)萃取所得混合物。用鹽水(5 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之環丙基-[順式-5-環丙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(50 mg, 83%)。LCMS RT = 0.676 min,m/z = 236.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.676 min，ESI+實驗值[M+H] =236.1。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-5-環丙基-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 2.841 min) (3.1 mg, 6%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 6.05 - 5.89 (m, 1H), 4.02 - 3.95 (m, 1H), 3.51 - 3.35 (m, 1H), 3.14 - 3.10 (m, 1H), 2.78 - 2.70 (m, 1H), 1.26 - 1.12 (m, 5H), 0.79 - 0.67 (m, 3H), 0.58 - 0.52 (m, 1H)。LCMS RT = 0.677 min,m/z = 236.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.677 min，ESI+實驗值[M+H] = 236.1。
SFC條件：管柱：DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm*30 mm, 5 μm) ，移動相：A：CO2，B：0.1% NH3H2O IPA 開始B 40%結束B 40%，梯度時間：梯度：5 min內40%至40%之B且保持40%持續2.5 min，流速：60 mL/min，管柱溫度：35℃。方法 89 實例111環丙基 -[(5S,7S)-7- 氘 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向環丙基-[(5S,7S)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(50 mg, 0.17 mmol)於甲醇(2.0 mL)中之溶液添加鎳(10 mg, 0.17 mmol)。將混合物在氫氣氛(15 psi)下在20℃下攪拌2 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (水(0.05%氫氧化氨v/v)- 33-63%乙腈)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之環丙基-[(5S,7S)-7-氘-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(14.8 mg, 33%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.36 (m, 3H), 7.14 - 7.11 (m, 2H), 5.52 - 5.48 (m, 1H), 3.28 - 3.21 (m, 1H), 3.06 - 3.00 (m, 2H), 2.70 - 2.65 (m, 1H), 1.30 - 1.27 (m, 2H), 1.06 - 1.03 (m, 2H)。LCMS RT = 1.551 min,m/z =255.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.551 min，ESI+ 實驗值[M+H] =255.1。方法 90 實例112環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮、環丙基 -[(5S,7S)-5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1- 硝基丁 -2- 醇
在25℃下向硝基甲烷(52.6 g, 860.9 mmol)、十六烷基三甲基氯化銨(27.6 g, 86.1 mmol)、氫氧化鈉(34.4 g, 860.9 mmol)於水(2.5 L)中之混合物添加丙醛(50.0 g, 860.9 mmol)。將混合物在25℃下攪拌4 h，接著添加氯化鈉(700 g)，且用乙酸乙酯(2 × 300 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺棕色油狀物之粗製1-硝基丁-2-醇(80.0 g, 78%)。粗製品不經進一步純化即直接用於下一步驟中。 步驟 2 ：第三丁基二甲基 ((1- 硝基丁 -2- 基 ) 氧基 ) 矽烷
在25℃下在氮氣下向1-硝基丁-2-醇(40.0 g, 335.8 mmol)及咪唑(48.0 g, 705.2 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(300 mL)中之經攪拌溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(53.2 g, 352.6 mmol)。添加後，將反應混合物在25℃下攪拌15 h。接著用水(400 mL)稀釋該混合物，且用乙酸乙酯(2 × 200 mL)萃取。用水(200 mL)、鹽水(200 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之第三丁基-二甲基-[1-(硝基甲基)丙氧基]矽烷(28.0 g, 36%)。 步驟 3 ： 3-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丙基 )-4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
向丙烯酸甲酯(54.4 mL, 599.9 mmol)、二碳酸二-第三丁基酯(39.3 g, 179.9 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(1.5 g, 12.0 mmol)於乙腈(500 mL)中之混合物添加第三丁基-二甲基-[1-(硝基甲基)丙氧基]矽烷(28.0 g, 119.9 mmol)於乙腈(10 mL)中之溶液。將混合物在25℃下攪拌5 h，且接著在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(17.0 g, 47%)。 步驟 4 ： 5-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丙基 )-3- 羥基吡咯啶 -2- 酮
將3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(17.0 g, 53.89 mmol)及鈀(於碳上10%，3.0 g)於乙醇(500 mL)中之混合物在氫氣氛(50 psi)下在40℃下攪拌48 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-3-羥基-吡咯啶-2-酮(12.0 g, 82%)。 步驟 5 ： 3-( 苄氧基 )-5-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丙基 ) 吡咯啶 -2- 酮
向5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-3-羥基-吡咯啶-2-酮(8.8 g, 32.2 mmol)於二氯甲烷(440 mL)中之溶液添加四丁基溴化銨(519 mg, 1.6 mmol)、氫氧化鈉水溶液(30%, 60 mL)及苄基溴(8.3 g, 48.3 mmol)。添加後，將混合物在40℃下攪拌18 h。接著將混合物傾倒至水(200 mL)中且用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至80%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]吡咯啶-2-酮(6.8 g, 58%)。 步驟 6 ： 1- 胺基 -3-( 苄氧基 )-5-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丙基 ) 吡咯啶 -2- 酮
在0℃下向3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]吡咯啶-2-酮(6.80 g, 18.7 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(150 mL)中之溶液添加氫化鈉(於礦物油中60%，1.12 g, 28.1 mmol)。在25℃下攪拌20 min後，向混合物添加o-(二苯基磷醯基)羥胺(6.50 g, 28.1 mmol)且在25℃下再攪拌18 h。將混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮，得到呈淺黃色固體之粗製1-胺基-3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]吡咯啶-2-酮(7.10 g, 100%)。LC-MS RT = 0.876 min,m/z = 379.3 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.876 min，ESI+實驗值[M+H] = 379.3。 步驟 7 ： 2-((3-( 苄氧基 )-5-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丙基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 胺基 )-2- 亞胺基乙酸乙基酯
將1-胺基-3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]吡咯啶-2-酮(1.87 g, 4.94 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(1.79 g, 12.35 mmol)於乙醇(25 mL)中之混合物在90℃下攪拌33 h且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製2-((3-(苄氧基)-5-(1-((第三丁基二甲基矽基)氧基)丙基)-2-側氧基吡咯啶-1-基)胺基)-2-亞胺基乙酸乙基酯(2.36 g, 99%)。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS RT = 1.037 min及1.061 min，m/z = 478.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.037 min及1.061 min，ESI+實驗值[M+H] = 478.2。 步驟 8 ： 7-( 苄氧基 )-5-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丙基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向2-[[3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(2.2 g, 4.61 mmol)於甲苯(50 mL)中之溶液添加對甲苯磺酸一水合物(1.1 g, 5.53 mmol)。將反應混合物在120℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之7-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(0.9 g, 43%)。LC-MS RT = 0.935 min,m/z = 460.3 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.935 min，ESI+實驗值[M+H] = 460.3。 步驟 9 ： 7-( 苄氧基 )-5-(1- 羥基丙基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向7-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基丙基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(800 mg, 1.74 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，5.22 mL, 5.22 mmol)。將混合物在25℃下攪拌18 h且用水(20 mL)稀釋。用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取所得混合物。用鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製7-苄氧基-5-(1-羥基丙基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(70 mg, 93%)。此粗製品不經進一步純化即用於下一步驟中。 步驟 10 ： 7-( 苄氧基 )-5- 丙醯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在0℃下向7-苄氧基-5-(1-羥基丙基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(600 mg, 1.74 mmol)及碳酸氫鈉(584 mg, 6.95 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之混合物添加戴斯-馬丁過碘烷(1473 mg, 3.47 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌40 min，且接著藉由添加飽和亞硫酸鈉水溶液(20 mL)來淬滅。用鹽水(10 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.3)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之7-苄氧基-5-丙醯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(590 mg, 99%)。LC-MS RT = 0.834 min,m/z = 344.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.834 min，ESI+實驗值[M+H] = 344.1 步驟 11 ： 7- 羥基 -5- 丙醯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將7-苄氧基-5-丙醯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(450 mg, 1.31 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(20 mL)中之混合物在120℃下加熱3 h，且在減壓下濃縮。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷(30 mL)中，用飽和碳酸氫鈉水溶液(15 mL)洗滌且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之60%乙酸乙酯，Rf = 0.3)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之7-羥基-5-丙醯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(220 mg, 66%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 5.43 - 5.39 (m, 1H), 5.25 - 5.21 (m, 1H), 4.50 - 4.43 (m, 2H), 3.05 - 3.01 (m, 2H), 2.75 - 2.55 (m, 2H), 1.44 - 1.40 (m, 3H), 1.13 - 1.08 (m, 3H)。LC-MS RT = 0.530 min及0.564 min,m/z = 254.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.530 min及0.564 min，ESI+實驗值[M+H] = 254.1。 步驟 12 ：順式 -5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將7-羥基-5-丙醯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(220 mg, 0.87 mmol)及二乙胺基三氟化硫(140 mg, 0.87 mmol)之混合物在10℃下攪拌2 h，且接著藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液(15 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 10 mL)萃取所得混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，順式 異構物Rf = 0.4且反式 異構物Rf = 0.6)純化殘餘物，得到反式 - 5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(60 mg, 25%)及順式 - 5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(60 mg, 25%)，兩者均呈棕色油狀物。 步驟 13 ：順式 -5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
向順式-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(55 mg, 0.20 mmol)於四氫呋喃(2 mL)、乙醇(2 mL)及水(0.5 mL)中之溶液添加氫氧化鋰一水合物(83 mg, 1.98 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌2 h，且接著在減壓下濃縮。用冰水(20 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加鹽酸水溶液(4 M)調整至pH = 3。用乙酸乙酯(2 × 5 mL)萃取混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺粉色固體之粗製順式-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(40 mg, 81%)。 步驟 14 ：順式 -5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將順式-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(40 mg, 0.16 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(31 mg, 0.32 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(64 mg, 0.17 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.08 mL, 0.48 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之混合物在20℃下攪拌2 h且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.3)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(27 mg, 58%)。LC-MS RT = 0.7.14 min,m/z = 293.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.714 min，ESI+實驗值[M+H] = 293.1 步驟 15 ：環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(27 mg, 0.09 mmol)於四氫呋喃(0.5 mL)中之溶液添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，0.92 mL, 0.46 mmol)。添加後，將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加甲醇(10 mL)來淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮且藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.6)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[外消旋-(5S,7S)-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(順式混合物) (9.9 mg, 35%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 5.97 - 5.80 (m, 1H), 4.90 - 4.78 (m, 1H), 3.45 - 3.25 (m, 1H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.95 - 2.75 (m, 1H), 2.28 - 2.00 (m, 2H), 1.20 - 1.11 (m, 2H), 1.07 - 0.98 (m, 5H)。LC-MS RT = 0.766 min,m/z = 274.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.766 min，ESI+實驗值[M+H] = 274.1。 步驟 16 ：環丙基 -[(5S,7S)-5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-5-(1,1- 二氟丙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
藉由對掌性SFC來分離環丙基-[外消旋-(5S,7S)-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(58 mg)，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 5.085 min) (8.2 mg, 14%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 6.02 - 5.84 (m, 1H), 4.71 - 4.66 (m, 1H), 3.33 - 3.23 (m, 1H), 3.19 - 3.07 (m, 2H), 2.34 - 2.26 (m, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 1H), 1.35-1.25 (m, 2H), 1.18 (s, 1H), 1.17 - 1.15 (m, 2H), 1.14 - 1.11 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.818 min,m/z = 273.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.818 min，ESI+實驗值[M +H] = 273.9。
環丙基-[(5R,7R)-5-(1,1-二氟丙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.815 min) (13.9 mg, 23%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.04 - 5.81 (m, 1H), 4.69 - 4.61 (m, 1H), 3.43 - 3.23 (m, 1H), 3.20 - 3.00 (m, 2H), 2.43 - 2.22 (m, 1H), 2.20 - 2.00 (m, 1H), 1.35 - 1.25 (m, 2H), 1.18 (s, 1H), 1.16 - 1.15 (m, 2H), 1.15 - 1.12 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.815 min,m/z = 273.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.815 min，ESI+實驗值[M +H] = 273.9。方法 91 實例113環丙基 -[(5R,7S)-5-( 環丙基甲基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 2- 環丙基環氧乙烷 -2- 甲酸甲基酯
在-10℃下向甲醇鈉(40.5 g, 749.04 mmol)於甲醇(250 mL)中之混合物添加環丙烷甲醛(35.0 g, 499.36 mmol)，接著經2 h逐滴添加氯乙酸甲酯(81.3 g, 749.04 mmol)。添加後，將混合物在25℃下攪拌16 h且藉由添加乙酸來淬滅。用水(300 mL)稀釋所得混合物，且用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。用鹽水(500 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製2-環丙基環氧乙烷-2-甲酸甲基酯。將該油狀物在減壓下蒸餾，得到呈無色油狀物之2-環丙基環氧乙烷-2-甲酸甲基酯(38 g, 53%)。 步驟 2 ： (Z)-2- 環丙基乙醛肟
在25℃下經2 h向氫氧化鈉(19.9 g, 498.07 mmol)於水(70 mL)中之溶液添加2-環丙基環氧乙烷-2-甲酸甲基酯(59.0 g, 415.05 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌1 h，且在25℃下經30 min添加硫酸羥胺(37.5 g, 228.28 mmol)。將混合物在25℃下攪拌2 h且用水(300 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取溶液。用鹽水(300 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之(Z)-2-環丙基乙醛肟(23.5 g, 57%)。LC-MS RT = 0.265 min, m/z = 100.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.265 min，ESI+實驗值[M+H] = 100.1。 步驟 3 ： 3-( 環丙基甲基 )-4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
將吡啶(0.85 mL, 10.59 mmol)、N-氯琥珀醯亞胺(28.3 g, 211.84 mmol)及(Z)-2-環丙基乙醛肟(21.0 g, 211.84 mmol)於氯仿(200 mL)中之溶液在25℃下攪拌2 h，且接著添加丙烯酸甲酯(23.96 mL, 264.38 mmol)及三乙胺(30.77 mL, 222.01 mmol)於氯仿(30 mL)中之溶液。將混合物在25℃下攪拌16 h且用水(300 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0-50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-(環丙基甲基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(21.0 g, 54%)。LC-MS RT = 0.565 min, m/z = 184.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.565 min，ESI+實驗值[M+H] = 184.1。 步驟 4 ： 5-( 環丙基甲基 )-3- 羥基吡咯啶 -2- 酮
將於甲醇中之3-(環丙基甲基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(18.0 g, 98.25 mmol)及鈀(於碳上10%，10.5 g)之混合物在氫氣(15 psi)下在25℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮且藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0-100%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之5-(環丙基甲基)-3-羥基-吡咯啶-2-酮(6.2 g, 41%)。LC-MS RT = 0.272 min, m/z = 165.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.272 min，ESI+實驗值[M+H] = 165.2。 步驟 5 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5-( 環丙基甲基 ) 吡咯啶 -2- 酮
向5-(環丙基甲基)-3-羥基-吡咯啶-2-酮(5.7 g, 36.73 mmol)及咪唑(5.5 g, 80.80 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(11.1 g, 73.46 mmol)。將混合物在20℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0-50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(環丙基甲基)吡咯啶-2-酮(7.7 g, 78%)。LC-MS RT = 0.872 min, m/z = 270.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.872 min，ESI+實驗值[M+H] = 270.2。 步驟 6 ： 1- 胺基 -3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5-( 環丙基甲基 ) 吡咯啶 -2- 酮
在0℃下向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(環丙基甲基)吡咯啶-2-酮(7.2 g, 26.72 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液添加氫化鈉(60%, 1.6 g, 40.08 mmol)。在0℃下攪拌30 min後，添加O-(二苯基磷醯基)羥胺(9.3 g, 40.08 mmol)，且將混合物在10℃下攪拌16 h。將反應混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(環丙基甲基)吡咯啶-2-酮(7.5 g, 99%)。LC-MS RT = 0.772 min, m/z = 285.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.772 min，ESI+實驗值[M+H] = 285.2。 步驟 7 ： (Z)-2- 胺基 -2-((3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5-( 環丙基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 亞胺基 ) 乙酸乙基酯
將1-胺基-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(環丙基甲基)吡咯啶-2-酮(7.1 g, 24.96 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(9.1 g, 62.4 mmol)於乙醇(150 mL)中之混合物在90℃下攪拌12 h且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製(Z)-2-胺基-2-((3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-(環丙基甲基)-2-側氧基吡咯啶-1-基)亞胺基)乙酸乙基酯(9.2 g, 96%)。LC-MS RT = 0.783 min, m/z = 384.3 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.783 min，ESI+實驗值[M+H] = 384.3。 步驟 8 ： 5-( 環丙基甲基 )-7- 羥基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將(Z)-2-胺基-2-[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(環丙基甲基)-2-側氧基-吡咯啶-1-基]亞胺基-乙酸乙基酯(9.2 g, 23.99 mmol)及對甲苯磺酸(5.0 g, 28.78 mmol)於甲苯(100 mL)中之混合物在120℃下攪拌16 h，且用水(200 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈紅色油狀物之粗製5-(環丙基甲基)-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(4.9 g, 82%)。LC-MS RT = 0.540 min, m/z = 252.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.540 min，ESI+實驗值[M+H] = 252.2。 步驟 9 ： 順式 -5-( 環丙基甲基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向5-(環丙基甲基)-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(3.0 g, 11.98 mmol)於二氯甲烷(150 mL)中之溶液添加二乙胺基三氟化硫(5.8 g, 35.94 mmol)。將混合物在0℃下攪拌16 h，且藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液(200 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0-30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到反式-5-(環丙基甲基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(650 mg, 21%)及順式-5-(環丙基甲基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(850 mg, 28%)，兩者均呈黃色油狀物。(TLC：於石油醚中之33%乙酸乙酯，順式異構物Rf = 0.35且反式異構物Rf = 0.85)。 步驟 10 ：順式 -5-( 環丙基甲基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
將順式-5-(環丙基甲基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(750 mg, 2.96 mmol)及氫氧化鋰一水合物(1.2 g, 29.61 mmol)於乙醇(3 mL)及水(1 mL)中之混合物在20℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。用冰水(2 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加鹽酸(2 M)調整至pH = 3。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈澄清油狀物之粗製順式-5-(環丙基甲基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(660 mg, 99%)。LC-MS RT = 0.491 min, m/z = 226.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.491 min，ESI+實驗值[M+H] = 226.2。 步驟 11 ：順式 -5-( 環丙基甲基 )-7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將順式-5-(環丙基甲基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(660 mg, 3.11 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(3.32 mL, 18.65 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(606 mg, 6.22 mmol)及1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(1536 mg, 4.04 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌3 h，且用水(50 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取所得混合物。用鹽水(2 × 50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈棕色固體之粗製順式-5-(環丙基甲基)-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(670 mg, 80%)。LC-MS RT = 0.706 min, m/z = 269.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.706 min，ESI+實驗值[M+H] = 269.2。 步驟 12 ：環丙基 -[(5R,7S)-5-( 環丙基甲基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向順式-5-(環丙基甲基)-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(150 mg, 0.56 mmol)於四氫呋喃(1 mL)中之溶液添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，3.35 mL, 1.68 mmol)。將混合物在0℃下攪拌5 h，且藉由添加水(5 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 5 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC(於水中之30-60%乙腈/ 0.225%甲酸)純化殘餘物且藉由對掌性SFC進一步純化，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5R,7S)-5-(環丙基甲基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.498 min) (13.6 mg, 9.5%)，呈無色油狀物。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 6.02 - 6.00 (m, 0.5H), 5.88 - 5.86 (m, 0.5H), 4.60 - 4.55 (m, 1H), 3.37 - 3.23 (m, 1H), 3.05 - 3.01 (m, 1H), 2.75 - 2.60 (m, 1H), 2.00 - 1.95 (m, 1H), 1.68 - 1.65 (m, 1H), 1.16 - 1.06 (m, 4H), 0.90 - 0.77 (m, 1H), 0.49 - 0.47 (m, 2H), 0.10 - 0.02 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.635 min, m/z = 250.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.635 min，ESI+實驗值[M+H] = 250.2。
亦獲得呈無色油狀物之5S,7R-異構物 (峰1，滯留時間= 3.041 min) (13.5 mg, 9%)。
SFC條件：管柱：Chiralpak AD-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：25 mL/min，管柱溫度：40℃。
SFC條件：管柱：Lux Cellulose-2 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5.5 min內5%至40%之B且保持40%持續3 min，接著5%之B持續1.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：40℃。方法 92 實例114環丙基 -[(5S)-7,7- 二氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：環丙基 -[(5S,7S)-7- 氯 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-7- 氯 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
藉由對掌性SFC來分離環丙基-[外消旋-(5S,7S)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(350 mg，來自另一擴大規模批次)，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5R,7R)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1：滯留時間= 3.132 min, 100 mg, 10%)及環丙基-[(5S,7S)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2：滯留時間= 4.124 min, 100 mg, 10%)，兩者均呈白色固體。
SFC條件：管柱：OJ-H (250 mm*30 mm, 10 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B 30%結束B 30%；流速(80 mL/min)，管柱溫度40℃。 步驟 2 ：環丙基 -[(5S)-7,7- 二氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
將環丙基-[(5S,7S)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(40 mg, 0.14 mmol)及鋅(40 mg, 0.61 mmol)於甲酸-D2 (2.0 mL, 0.14 mmol)中之溶液在20℃下攪拌48 h。用乙酸乙酯(20 mL)稀釋混合物，用水(2 × 10 mL)洗滌且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (0.05%氫氧化氨v/v- 36-66%乙腈)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之環丙基-[(5S)-7,7-二氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(13.2 mg, 36%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.41 - 7.36 (m, 3H), 7.14 - 7.11 (m, 2H), 5.52 - 5.48 (m, 1H), 3.28 - 3.21 (m, 1H), 3.04 - 3.00 (m, 1H), 2.70 - 2.65 (m, 1H), 1.30 - 1.27 (m, 2H), 1.06 - 1.03 (m, 2H)。LCMS RT = 1.549 min,m/z =256.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.1%氨水經3.0 min)，滯留時間1.549 min，ESI+ 實驗值[M+H] =256.2。方法 93 實例115環丙基 -[(5S,7S)-7- 氯 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5R,7R)-7- 氯 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
將亞硫醯氯(441 mg, 3.71 mmol)及環丙基-[反式-7-羥基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(400 mg, 1.49 mmol)之混合物在0℃下攪拌0.5 h，且藉由添加水(100 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 200 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之環丙基-[順式-7-氯-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(220 mg, 52%)。LC-MS RT = 0.692 min, m/z = 288.1 [M+H] +。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.692 min，[M +H] = 288.1。
藉由對掌性SFC進一步分離此順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-7-氯-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰1，滯留時間= 3.711 min) (72.9 mg, 33%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.39 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 3H), 5.56 - 5.51 (m, 1H), 5.40 - 5.35 (m, 1H), 3.95 - 3.88 (m, 1H), 3.07 - 2.99 (m, 2H), 1.34 - 1.31 (m, 2H), 1.11 - 1.07 (m, 2H)。LCMS RT = 1.034 min, m/z = 288.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.034 min，ESI+實驗值[M+H] = 288.2。
環丙基-[(5R,7R)-7-氯-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 3.949 min) (84.6 mg, 38%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.43 - 7.39 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 3H), 5.56 - 5.51 (m, 1H), 5.40 - 5.35 (m, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 1H), 3.10 - 2.99 (m, 2H), 1.35 - 1.28 (m, 2H), 1.10 - 1.06 (m, 2H)。LCMS RT = 1.033 min, m/z = 288.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.033 min，ESI+實驗值[M+H] = 288.2。
SFC方法：管柱：Chiralcel OJ-3 150×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2 ，B：乙醇(0.05% DEA)，梯度：5 min內5%至40%之B且保持40%持續2.5 min，接著5%之B持續2.5 min，流速：2.5 mL/min，管柱溫度：35℃方法 94 實例117環丙基 -[(5S,7R)-7- 氯 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： [ 外消旋 -(5S,7S)-2- 溴 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 基 ] 氧基 - 第三丁基 - 二甲基 - 矽烷
將外消旋-(5S,7S)-2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(800 mg, 2.86 mmol)、咪唑(389 mg, 5.71 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(646 mg, 4.28 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之混合物在15℃下攪拌1.5 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之[外消旋-(5S,7S)-2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(900 mg, 80%)。 步驟 2 ：環丙基 -[( 外消旋 -5S,7S)-7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(589 mg, 4.56 mmol)及[外消旋-(5S,7S)-2-溴-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(900 mg, 2.28 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，3.42 mL, 6.85 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且用乙酸乙酯(100 mL)稀釋。用飽和氯化銨水溶液(50 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之環丙基-[(外消旋-5S,7S)-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(450 mg, 51%)。LCMS RT = 1.016 min, m/z = 384.3 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.016min，ESI+實驗值[M+H] = 384.3。 步驟 3 ：環丙基 -[(5S,7R)-7- 氯 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向環丙基-[(外消旋-5S,7S)-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(450 mg, 1.17 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液添加亞硫醯氯(0.43 mL, 5.87 mmol)。將混合物在25℃下攪拌40 h且在減壓下濃縮。用水(20 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之環丙基-[外消旋-(5S,7R)-7-氯-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(200 mg, 59%)。LCMS RT = 0.803 min, m/z = 288.2 [M + H]+
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.803 min，ESI+實驗值[M+H] = 288.2。
藉由對掌性SFC進一步分離此外消旋物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7R)-7-氯-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(峰2，滯留時間= 4.690 min) (60 mg, 40%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.45 - 7.38 (m, 3H), 7.34 - 7.32 (m, 2H), 5.85 (t,J = 7.2 Hz, 1H), 5.69 - 5.67 (m, 1H), 3.40 - 3.31 (m, 2H), 3.03 - 3.00 (m, 1H), 1.19 - 1.16 (m, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 2H)。LCMS RT = 1.028 min, m/z = 288.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.028 min，ESI+實驗值[M+H] = 288.2。
SFC條件：管柱：Chiralcel OJ-H 100×4.6 mm I.D., 3 μm，移動相：A：CO2，B：甲醇(0.05% DEA)，梯度：30%至30%之B，溫度：40℃。方法 95 實例118環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-5-(3- 氯 -2- 吡啶基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5S,7S)-5-(3- 氯 -2- 吡啶基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：乙基 3- 氯 -2- 乙烯基吡啶
將2-溴-3-氯吡啶(62.5 g, 324.78 mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(47.9 g, 357.25 mmol)、[1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (13.2 g, 16.24 mmol)及碳酸氫鈉(68.2 g, 811.94 mmol)於1,4-二噁烷(600 mL)及水(150 mL)中之混合物在100℃下攪拌24 h，且在減壓下濃縮。用石油醚(500 mL)稀釋殘餘物且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈綠色油狀物之3-氯-2-乙烯基-吡啶(40.0 g, 88%)。LCMS RT = 0.554 min,m/z = 140.1/142.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.554 min，ESI+實驗值[M+H] = 140.1及142.1。 步驟 2 ： 3- 氯吡啶甲醛
向3-氯-2-乙烯基-吡啶(35.0 g, 250.75 mmol)於水(200 mL)及四氫呋喃(200 mL)中之溶液添加四氧化鋨(0.89 g, 3.51 mmol)。將黑色溶液在25℃下攪拌30 min，且添加過碘酸鈉(214.5 g, 1003 mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌2 h，且藉由添加飽和亞硫酸鈉水溶液(200 mL)來淬滅。用乙酸乙酯萃取(2 × 100 mL)溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色固體之3-氯吡啶-2-甲醛(18.5 g, 52%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 10.45 - 10.18 (m, 1H), 8.73 - 8.70 (m, 1H), 7.86 - 7.84 (m, 1H), 7.48 - 7.44 (m, 1H)。 步驟 3 ： 1-(3- 氯吡啶 -2- 基 ) 丁 -3- 烯 -1- 醇
在0℃下經30 min向3-氯吡啶-2-甲醛(18.5 g, 130.7 mmol)於四氫呋喃(200 mL)中之溶液逐滴添加烯丙基溴化鎂(於正己烷中1.0 M，162.2 mL, 162.2 mmol)。添加後，使反應物升溫至20℃且攪拌2 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)使混合物淬滅，且用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取。用鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之1-(3-氯-2-吡啶基)丁-3-烯-1-醇(10.0 g, 42%) 。LCMS RT = 0.524 min,m/z = 184.1/186.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.524 min，ESI+實驗值[M+H] = 184.1及186.1。 步驟 4 ： 2-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 丁 -3- 烯 -1- 基 )-3- 氯吡啶
向1-(3-氯-2-吡啶基)丁-3-烯-1-醇(10.0 g, 54.46 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之溶液添加咪唑(7.4 g, 108.91 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(12.3 g, 81.69 mmol)。將反應混合物在10℃下攪拌16 h且用水(50 mL)稀釋。用鹽水(50 mL)洗滌經分離之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈輕質油狀物之第三丁基-[1-(3-氯-2-吡啶基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(10 g, 62%)。 步驟 5 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(3- 氯吡啶 -2- 基 ) 丙醛
向第三丁基-[1-(3-氯-2-吡啶基)丁-3-烯氧基]-二甲基-矽烷(10.0 g, 33.57mmol)於水(100 mL)及四氫呋喃(100 mL)中之溶液添加四氧化鋨(0.11 g, 0.44 mmol)。在15℃下攪拌30 min後，以小份經30 min向混合物添加過碘酸鈉(28.7 g, 134.27 mmol)且在25℃下再攪拌2 h。藉由添加飽和亞硫酸鈉水溶液(1.50 L)使混合物淬滅，且用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。用鹽水(300 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3-氯-2-吡啶基)丙醛(6.5 g, 65%)。LCMS RT = 0.719 min,m/z = 300.1/302.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.719 min，ESI+實驗值[M+H] = 300.1及302.1。 步驟 6 ： 1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(3- 氯吡啶 -2- 基 ) 丙 -1- 醇
在氮氣氛下向3,5-二溴-1-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑(8.1 g, 26.01 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之經冷卻(-78℃)溶液逐滴添加正丁基鋰(於正己烯中2.5 M，9.97 mL, 24.93 mmol)。將混合物在-78℃下攪拌30 min，且接著添加3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3-氯-2-吡啶基)丙醛(6.5 g, 21.68 mmol)於四氫呋喃(15 mL)中之溶液。將所得混合物在-78℃下攪拌1.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3-氯-2-吡啶基)丙-1-醇(10.0 g, 87%)。LCMS RT = 0.941 min,m/z = 533.2 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.941 min，ESI+實驗值[M+H] = 533.2。 步驟 7 ： 2,2- 二甲基丙酸 [1-(3- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-3-(3- 氯吡啶 -2- 基 ) 丙基 ] 酯
向4-二甲基胺基吡啶(321 mg, 2.63 mmol)、1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3-氯-2-吡啶基)丙-1-醇(14.0 g, 26.32 mmol)及三乙胺(7.01 mL, 52.64 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之混合物添加新戊醯氯(4.8 g, 39.48 mmol)。將混合物在20℃下攪拌2 h，且藉由添加水(50 mL)來淬滅。用二氯甲烷(2 × 100 mL)萃取溶液。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之2,2-二甲基丙酸[1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3-氯-2-吡啶基)丙基]酯(12.5 g, 77%)。 步驟 8 ： 2,2- 二甲基丙酸 1-(3- 溴 -1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-3- 羥基丙基酯
將2,2-二甲基丙酸[1-(5-溴-2-四氫哌喃-2-基-1,2,4-三唑-3-基)-3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-(3-氯-2-吡啶基)丙基]酯(12.0 g, 19.48 mmol)及對甲苯磺酸(4.0 g, 23.37 mmol)於甲醇(100 mL)中之混合物在50℃下攪拌2 h，且接著在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之17-47%乙腈/ 0.05%氫氧化銨)純化殘餘物，得到呈白色固體之2,2-二甲基丙酸[1-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-(3-氯-2-吡啶基)-3-羥基-丙基]酯(6.8 g, 83%)。LCMS RT = 0.760 min及0.768 min，m/z = 417.1/419.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.760 min及0.768 min，ESI+實驗值[M+H] = 417.1及419.0。 步驟 9 ：外消旋 -2,2- 二甲基丙酸 [(5S,7S)-2- 溴 -5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 基 ] 酯
向2,2-二甲基丙酸[1-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-(3-氯-2-吡啶基)-3-羥基-丙基]酯(6.2 g, 14.84 mmol)、三苯基膦(4.7 g, 17.81 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之混合物添加偶氮二甲酸二異丙基酯(3.6 g, 17.81 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液。將混合物在25℃下攪拌12 h，且接著在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之外消旋-2,2-二甲基丙酸[(5S,7S)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]酯(2.3 g, 39%)。LCMS RT = 0.753 min及0.781 min，m/z = 399.0/401.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.753 min及0.781 min，ESI+實驗值[M+H] = 399.0及401.0。 步驟 10 ：外消旋 -(5S,7S)-2- 溴 -5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將外消旋-2,2-二甲基丙酸[(5S,7S)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]酯(2.3 g, 5.75 mmol)、氫氧化鋰一水合物(2.4 g, 57.55 mmol)於四氫呋喃(10 mL)及水(10 mL)中之混合物在25℃下攪拌12 h，且接著用乙酸乙酯(2 × 10 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈白色固體之外消旋-(5S,7S)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.7 g, 94%)。LCMS RT = 0.639 min,m/z = 315.0/317.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.639 min，ESI+實驗值[M+H] = 315.0及317.0。 步驟 11 ：外消旋 -4- 硝基苯甲酸 (5S,7R)-2- 溴 -5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 基酯
在氮氣氛下在0℃下向三苯基膦(1.25 g, 4.75 mmol)、外消旋-(5S,7S)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.2 g, 3.80 mmol)及4-硝基苯甲酸(790 mg, 4.75 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之混合物逐滴添加偶氮二甲酸二異丙基酯(0.77 mL, 4.75 mmol)。將溶液在0℃下攪拌12 h且過濾，得到呈白色固體之粗製外消旋-4-硝基苯甲酸[(5S,7R)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]酯(1.6 g, 91%)。 步驟 12 ：外消旋 -(5S,7R)-2- 溴 -5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將碳酸鉀(713 mg, 5.16 mmol)及外消旋-4-硝基苯甲酸[(5S,7R)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]酯(1.6 g, 3.44 mmol)於甲醇(5 mL)及水(5 mL)中之混合物在70℃下攪拌1 h，且在減壓下濃縮。用水(10 mL)稀釋殘餘物且過濾。用乙腈(5 mL)洗滌固體產物，得到呈白色固體之粗製外消旋-(5S,7R)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(800 mg, 74%)。LCMS RT = 0.649 min,m/z = 315.0/317.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.649 min，ESI+實驗值[M+H] = 315.0及317.0。 步驟 13 ：外消旋 -(5S,7R)-2- 溴 -7-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在0℃下向外消旋-(5S,7R)-2-溴-5-(3-氯-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(350 mg, 1.11 mmol)、咪唑(151 mg, 2.22 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之混合物添加第三丁基二甲基氯矽烷(251 mg, 1.66 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈白色固體之外消旋-(5S,7R)-2-溴-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-(3-氯吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(450 mg, 94%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.43 - 8.41(m, 1H), 7.73 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 1H), 6.22 - 6.19 (m, 1H), 5.49 - 5.46(m, 1H), 3.12 - 3.08 (m, 1H), 2.97 - 2.93 (m, 1H), 0.95 (s, 9H), 0.24 - 0.19 (m, 6H)。 步驟 14 ：外消旋 -((5S,7R)-7-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 環丙基 ) 甲酮
在0℃下向外消旋-(5S,7R)-2-溴-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-(3-氯吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(450 mg, 1.05 mmol)及N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(270 mg, 2.09 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，2.62 mL, 5.23 mmol)。添加後，將反應混合物在0℃下攪拌1 h且藉由添加水(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取所得混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之外消旋-((5S,7R)-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-(3-氯吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮(125 mg, 28%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 - 8.40 (m, 1H), 7.75 - 7.73 (m, 1H), 7.24 - 7.22 (m, 1H), 6.28 - 6.25 (m, 1H), 5.53 - 5.50 (m, 1H), 3.15 - 3.12 (m, 1H), 3.10 - 3.06 (m, 1H), 3.04 - 3.02 (m, 1H), 1.06 - 1.04 (m, 2H), 0.96 (s, 9H), 0.91 - 0.86 (m, 2H), 0.25 (d,J = 6.8 Hz, 6H)。LCMS RT = 0.857 min,m/z = 419.1 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.857 min，ESI+實驗值[M+H] = 419.1。 步驟 15 ：外消旋 -((5S,7R)-5-(3- 氯吡啶 -2- 基 )-7- 羥基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 環丙基 ) 甲酮
將外消旋-((5S,7R)-7-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-5-(3-氯吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮(120 mg, 0.29 mmol)及鹽酸(於甲醇中4.0 M，3.60 mL, 14.40 mmol)於甲醇(10 mL)中之混合物在20℃下攪拌1 h，且接著在減壓下濃縮。用水(10 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液調整至pH = 7。用二氯甲烷(2 × 20 mL)萃取該混合物。將合併之有機層在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之粗製外消旋-((5S,7R)-5-(3-氯吡啶-2-基)-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮(52 mg, 60%)。LCMS RT = 0.567 min,m/z = 305.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.567 min，ESI+實驗值[M+H] = 305.0。 步驟 16 ：環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-5-(3- 氯 -2- 吡啶基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[(5S,7S)-5-(3- 氯 -2- 吡啶基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 在0℃下向外消旋-((5S,7R)-5-(3-氯吡啶-2-基)-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮(90 mg, 0.28 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之混合物添加二乙胺基三氟化硫(40 mg, 0.25 mmol)。將混合物攪拌1 h，且接著藉由添加水(5 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 5 mL)萃取所得混合物。用鹽水(5 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之32-62%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[外消旋-(5S,7S)-5-(3-氯-2-吡啶基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(G03345456) (15.0 mg, 28.7%)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.45 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.97 - 7.95 (m, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 1H), 6.24 - 6.03 (m, 2H), 3.83 - 3.72 (m, 1H), 3.04 - 2.89 (m, 2H), 1.18 - 1.15 (m, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 2H)。LCMS RT = 0.780 min,m/z = 306.9 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.780 min，ESI+實驗值[M+H] = 306.9。
藉由SFC進一步分離順式混合物，得到任意分配之以下：
環丙基-[(5S,7S)-5-(3-氯-2-吡啶基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(G03348054) (峰1，滯留時間= 3.920 min) (5.2 mg, 34%)，呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.47 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.79 - 7.76 (m, 1H), 7.29 - 7.27 (m, 1H), 6.14 - 6.12 (m, 1H), 6.11 - 6.10 (m, 0.5H), 5.99 - 5.98 (m, 0.5H), 3.71 - 3.64 (m, 1H), 3.13 - 3.02 (m, 2H), 1.34 - 1.32 (m, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 2H)。LCMS RT = 0.617 min,m/z = 307.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.617 min，ESI+實驗值[M+H] = 307.0。
SFC條件：管柱：OJ-H (250 mm*30 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH3 H2 O EtOH；開始B 35%結束B 35%；流速(50 mL/min)，管柱溫度40℃。方法 96 實例119環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氯 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ：順式 -2- 溴 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
向2-溴-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-酮(3.0 g, 10.79 mmol)於甲醇(100 mL)中之溶液添加硼氘化鈉(1.4 g, 32.36 mmol)。將混合物在20℃下攪拌1 h且在減壓下濃縮。用水(50 mL)、鹽酸水溶液(1.0 M, 2 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取。用鹽水(40 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈黃色固體之粗製順式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(3.0 g, 99%)。LCMS RT = 0.681 min, m/z = 283.0 [M + H]+ 。
LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.681 min，ESI+實驗值[M+H] = 283.0。 步驟 2 ： 4- 硝基苯甲酸 [ 反式 -2- 溴 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 基 ] 酯
在0℃下在氮氣下向4-硝基苯甲酸(1.0 g, 6.24 mmol)、三苯基膦(1.9 g, 7.21 mmol)及順式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.4 g, 4.8 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之混合物逐滴添加偶氮二甲酸二異丙基酯(1.5 g, 7.21 mmol)。將此混合物攪拌1.5 h且過濾。用四氫呋喃(10 mL)及甲基第三丁基醚(10 mL)洗滌固體，得到呈白色固體之4-硝基苯甲酸[反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]酯(800 mg, 39%)。LCMS RT = 0.904 min, m/z = 432.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.904 min，ESI+實驗值[M+H] = 432.0。 步驟 3 ：反式 -2- 溴 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將碳酸鉀(514 mg, 3.72 mmol)及4-硝基苯甲酸[反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]酯(800 mg, 1.86 mmol)於甲醇(10 mL)/水(5 mL)中之混合物在25℃下攪拌16 h，且用水(20 mL)稀釋。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取該混合物。用鹽水(2 × 20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至35%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淡黃色固體之反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(300 mg, 57%)。LCMS RT = 0.689 min, m/z = 281.0 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.689 min，ESI+實驗值[M+H] = 281.0。 步驟 4 ： [ 反式 -2- 溴 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 基 ] 氧基 - 第三丁基 - 二甲基 - 矽烷
向反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(300 mg, 1.07 mmol)及咪唑(145 mg, 2.13 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(241 mg, 1.6 mmol)。將混合物在25℃下攪拌18 h且用水(30 mL)稀釋。用二氯甲烷(2 × 30 mL)萃取溶液。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之[反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷350 mg, 83%)。LCMS RT = 0.931 min, m/z = 397.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.931 min，ESI+實驗值[M+H] = 397.1。 步驟 5 ： [ 反式 -7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 環丙基 - 甲酮
在氮氣氛下在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(457 mg, 3.54 mmol)及[反式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(350 mg, 0.89 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，1.33 mL, 2.66 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取所得混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之[反式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(200 mg, 59%)。LCMS RT = 0.935 min, m/z = 385.3 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.935 min，ESI+實驗值[M+H] = 385.3。 步驟 6 ：環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氯 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向[反式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(200 mg, 0.52 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之混合物添加亞硫醯氯(0.19 mL, 2.6 mmol)及2滴二甲基甲醯胺。將混合物在25℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。用水(30 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取。用鹽水(30 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。首先藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至30%乙酸乙酯)、接著藉由RP-HPLC (於水中之54-84%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈黃色固體之環丙基-[外消旋-(5S,7S)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(35.0 mg, 23%)。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 7.46 - 7.38 (m, 3H), 7.33 - 7.31 (m, 2H), 5.69 - 5.65 (m, 1H), 4.02 - 3.96 (m, 1H), 3.07 - 2.99 (m, 1H), 2.91 - 2.86 (m, 1H), 1.21 - 1.16 (m, 2H), 1.13 - 1.09 (m, 2H)。LCMS RT = 1.033 min, m/z = 289.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.033 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.1。方法 97 實例120環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7R)-7- 氯 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： [ 順式 -2- 溴 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 基 ] 氧基 - 第三丁基 - 二甲基 - 矽烷
向順式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(1.5 g, 5.34 mmol)及咪唑(726 mg, 10.67 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液添加第三丁基二甲基氯矽烷(1.2 g, 8.00 mmol)。將混合物在15℃下攪拌16 h，且用水(20 mL)稀釋。用二氯甲烷(2 × 30 mL)萃取所得混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之[順式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(1.8 g, 85%)。LCMS RT = 1.029 min, m/z = 395.1 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.029 min，ESI+實驗值[M+H] = 395.1。 步驟 2 ： [ 順式 -7-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]- 環丙基 - 甲酮
在0℃下向N-甲氧基-N-甲基-環丙烷甲醯胺(1.2 g, 9.10 mmol)及[順式-2-溴-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-基]氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(1.8 g, 4.55 mmol)於四氫呋喃(40 mL)中之溶液逐滴添加異丙基氯化鎂(於四氫呋喃中2.0 M，6.83 mL, 13.66 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1.5 h，且藉由添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)來淬滅。用乙酸乙酯(3 × 50 mL)萃取該混合物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至20%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之[順式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(450 mg, 26%)。LCMS RT = 1.030 min, m/z = 384.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.030 min，ESI+實驗值[M+H] = 384.2。 步驟 3 ：環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7R)-7- 氯 -7- 氘 -5- 苯基 -5,6- 二氫吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
向[順式-7-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(450 mg, 1.17 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之混合物添加亞硫醯氯(1.47 mL, 20.23 mmol)。將混合物在25℃下攪拌25 h且在減壓下濃縮。用水(50 mL)稀釋殘餘物，且用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取。用鹽水(40 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。首先藉由管柱層析於二氧化矽上(溶劑梯度：於石油醚中之0-30%乙酸乙酯)、接著藉由RP-HPLC (於水中之40-70%乙腈/0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之任意分配之環丙基-[外消旋-(5S,7R)-7-氯-7-氘-5-苯基-5,6-二氫吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(110 mg，32.2%產率)。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 7.74 - 7.69 (m, 3H), 7.63 - 7.61 (m, 2H), 6.14 (t,J = 6.8 Hz, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 2H), 3.61 - 3.59 (m, 1H), 1.48 - 1.45 (m, 2H), 1.40 - 1.37 (m, 2H)。LCMS RT = 1.033 min, m/z = 289.2 [M + H]+ 。LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經2.0 min)，滯留時間1.033 min，ESI+實驗值[M+H] = 289.2。方法 98 實例122環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-5-(1,1- 二氟乙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1- 硝基丙 -2- 醇
向乙醛(45.9 mL, 819.13 mmol)及硝基甲烷(44.4 mL, 819.13 mmol)於水(1000 mL)中之氫氧化鈉(32.8 g, 819.13 mmol)中之經冷卻(0℃)溶液添加十六烷基三甲基氯化銨(26.2 g, 81.91 mmol)。將反應混合物在15℃下攪拌16 h，且藉由添加乙酸調整至pH = 7。用乙酸乙酯(2 × 500 mL)萃取該混合物。用鹽水洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈淺棕色油狀物之粗製1-硝基丙-2-醇(61.0 g, 71%)。 步驟 2 ：第三丁基 - 二甲基 -(1- 甲基 -2- 硝基 - 乙氧基 ) 矽烷
在0℃下向咪唑(83.0 g, 1219 mmol)及1-硝基丙-2-醇(61.0 g, 580.45 mmol)於二氯甲烷(1.00 L)中之混合物添加第三丁基二甲基氯矽烷(104.9 g, 696.55 mmol)。將混合物在20℃下攪拌16 h且用水(200 mL)稀釋。用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取溶液。用鹽水(200 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物之第三丁基-二甲基-(1-甲基-2-硝基-乙氧基)矽烷(115.0 g, 90%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.53 - 4.68 (m, 1H), 4.24 - 4.53 (m, 2H), 1.25 - 1.32 (m, 3H), 0.87 - 0.90 (m, 9H), 0.07 - 0.12 (m, 6H)。 步驟 3 ： 3-[1-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基乙基 ]-4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸乙基酯
在20℃下向丙烯酸乙酯(242.6 mL, 2279.5 mmol)、二碳酸二-第三丁基酯(157.1 mL, 683.84 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(5.6 g, 45.59 mmol)於乙腈(1 L)中之混合物添加第三丁基-二甲基-(1-甲基-2-硝基-乙氧基)矽烷(100.0 g, 455.89 mmol)。將混合物在20℃下攪拌16 h且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至10%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(40.0 g, 29%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 4.89 - 5.07 (m, 1H), 4.66 - 4.84 (m, 1H), 4.16 - 4.33 (m, 2H), 3.21 - 3.41 (m, 2H), 1.32 - 1.37 (m, 3H), 1.26 - 1.30 (m, 3H), 0.86 - 0.87 (m, 9H), 0.03 - 0.10 (m, 6H)。 步驟 4 ： 5-[1-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基乙基 ]-3- 羥基 - 吡咯啶 -2- 酮
使3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸乙基酯(40.0 g, 132.69 mmoL)及鈀(於碳上10%，7.06 g)於乙醇(1.0 L)中之混合物在40℃下氫化(50 psi) 48 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈白色固體之粗製5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-3-羥基-吡咯啶-2-酮(37.0 g, 92%)。 步驟 5 ： 3- 苄氧基 -5-[1-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基乙基 ] 吡咯啶 -2- 酮
向5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-3-羥基-吡咯啶-2-酮(31.2 g, 120.27 mmol)於二氯甲烷(500 mL)中之溶液添加四丁基溴化銨(1.94 g, 6.01 mmol)、氫氧化鈉(於水中30%，80.2 g, 601.34 mmol)及苄基溴(30.9 g, 180.4 mmol)。將混合物在40℃下攪拌18 h且冷卻至25℃。使經分離之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至80%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]吡咯啶-2-酮(22.0 g, 52%)。LC-MS RT = 0.957 min, m/z = 350.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.957 min，ESI+實驗值[M+H] = 350.2。 步驟 6 ： 1- 胺基 -3- 苄氧基 -5-[1-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基乙基 ] 吡咯啶 -2- 酮
在0℃下向3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]吡咯啶-2-酮(22.0 g, 62.94 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(400 mL)中之溶液添加氫化鈉(於礦物油中60%，3.78 g, 94.41 mmol)。在20℃下攪拌30 min後，添加o-(二苯基磷醯基)羥胺(19.1 g, 81.82 mmol)。將混合物在20℃下攪拌18 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製1-胺基-3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]吡咯啶-2-酮(22.9 g, 99%)。 步驟 7 ： 2-((3-( 苄氧基 )-5-(1-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 ) 乙基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 胺基 )-2- 亞胺基乙酸乙基酯
將1-胺基-3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]吡咯啶-2-酮(22.0 g, 60.4 mmol)及2-乙氧基-2-亞胺基-乙酸乙基酯(20.3 mL, 150.9 mmol)於乙醇(220 mL)中之混合物在90℃下攪拌33 h且在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀物之粗製2-((3-(苄氧基)-5-(1-((第三丁基二甲基矽基)氧基)乙基)-2-側氧基吡咯啶-1-基)胺基)-2-亞胺基乙酸乙基酯(27.9 g, 99%)。LC-MS RT = 0.840 min,m/z = 365.3 [M+15]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.840 min，ESI+實驗值[M+15] = 365.3。 步驟 8 ： 7- 苄氧基 -5-[1-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽基 ] 氧基乙基 ]-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向2-[[3-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-2-側氧基-吡咯啶-1-基]胺基]-2-亞胺基-乙酸乙基酯(27.0 g, 58.2 mmol)於甲苯(500 mL)中之溶液添加對甲苯磺酸一水合物(13.3 g, 69.9 mmol)。將反應混合物在130℃下攪拌16 h且過濾。將濾液在減壓下濃縮。藉由管柱層析(矽膠，100-200目，於石油醚中之0%至50%乙酸乙酯)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之7-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(11.2 g, 43%)。LC-MS RT = 1.029 min,m/z = 446.3 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間1.029 min，ESI+實驗值[M+H] = 446.3。 步驟 9 ： 7- 苄氧基 -5-(1- 羥基乙基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向7-苄氧基-5-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(5.1 g, 11.44 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之溶液添加四丁基氟化銨(於四氫呋喃中1.0 M，34.33 mL, 34.33 mmol)。將混合物在25℃下攪拌18 h且用水(50 mL)稀釋。用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取所得混合物。用鹽酸水溶液(1 N, 15 mL)及鹽水(50 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，得到呈棕色油狀物之粗製7-苄氧基-5-(1-羥基乙基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(3.8 g, 100%)。 步驟 10 ： 5- 乙醯基 -7- 苄氧基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
向7-苄氧基-5-(1-羥基乙基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(3.8 g, 11.44 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之經冷卻(0℃)溶液添加碳酸氫鈉(3.8 g, 45.75 mmol)及戴斯-馬丁過碘烷(9.7 g, 22.87 mmol)。將混合物在0℃下攪拌2 h且過濾。將濾液用水(20 mL)稀釋且用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，R f = 0.5)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之5-乙醯基-7-苄氧基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.5 g, 40%)。LC-MS RT = 0.655 min,m/z = 330.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.655 min，ESI+實驗值[M+H] = 330.2。 步驟 11 ： 5- 乙醯基 -7- 羥基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將5-乙醯基-7-苄氧基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(1.5 g, 4.6 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(3 mL)中之混合物在120℃下加熱3 h且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之5%甲醇及45%乙酸乙酯，R f = 0.2)純化殘餘物，得到呈淺棕色油狀物之5-乙醯基-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(350 mg, 32%)。LC-MS RT = 0.278min,m/z = 240.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.278 min，ESI+實驗值[M+H] = 240.2。 步驟 12 ：順式 -5-(1,1- 二氟乙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
將5-乙醯基-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(350 mg, 1.46 mmol)及二乙胺基三氟化硫(5.0 mL, 1.46 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物在10℃下攪拌2 h，且藉由添加冰冷卻之飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)來淬滅。用二氯甲烷(3 × 10 mL)萃取混合物。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層，經硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之50%乙酸乙酯，Rf = 0.4)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之順式-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(37 mg, 10%)。LC-MS RT = 0.694 min,m/z = 264.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.694 min，ESI+實驗值[M+H] = 264.1。 步驟 13 ：順式 -5-(1,1- 二氟乙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸
將順式-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(27 mg, 0.10 mmol)、氫氧化鋰一水合物(22 mg, 0.51 mmol)於甲醇(0.7 mL) /水(0.7 mL) /四氫呋喃(0.7 mL)中之混合物在10℃下攪拌2 h且在減壓下濃縮。用冰水(2 mL)稀釋殘餘物，且藉由添加鹽酸水溶液(1 M)調整至pH = 4。將混合物在減壓下濃縮至乾燥，得到含氯化鋰鹽之粗製順式-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(28 mg, 98%)。 步驟 14 ：順式 -5-(1,1- 二氟乙基 )-7- 氟 -N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
將順式-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(28 mg, 0.12 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(23 mg, 0.24 mmol)、1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(48 mg, 0.13 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(62 mg, 0.48 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之混合物在20℃下攪拌3 h且在減壓下濃縮。藉由製備型TLC (於石油醚中之70%乙酸乙酯，Rf = 0.3)純化殘餘物，得到呈白色固體之順式-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(15 mg, 45%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 6.05 - 5.73 (m, 1H), 4.62 (br s, 1H), 3.86 - 3.82 (m, 3H), 3.54 - 3.21 (m, 5H), 3.14 - 2.99 (m, 1H), 1.96 - 1.75 (m, 3H)。 步驟 15 ：環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-5-(1,1- 二氟乙基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮
在氮氣氛下向順式-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(10 mg, 0.04 mmol)於四氫呋喃(1 mL)中之經冷卻(0℃)溶液逐滴添加環丙基溴化鎂(於四氫呋喃中0.5 M，0.5 mL, 0.25 mmol)。在0℃下攪拌1 h後，藉由添加飽和氯化銨水溶液(0.5 mL)使混合物淬滅且在減壓下濃縮。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷(50 mL)中，過濾以去除固體，將濾液在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之36-66%乙腈/ 0.05%氫氧化氨)純化殘餘物，得到呈白色固體之環丙基-[外消旋-(5S,7S)-5-(1,1-二氟乙基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(2.2 mg, 23%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 6.00 - 5.84 (m, 1H), 4.75 - 4.55 (m, 1H), 3.38 - 3.29 (m, 1H), 3.18 - 2.99 (m, 2H), 1.86 (t,J = 19.2 Hz, 3H), 1.36 - 1.33 (m, 2H), 1.16 - 1.12 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.828 min,m/z = 259.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.03%三氟乙酸經1.5 min)，滯留時間0.828 min，ESI+實驗值[M+H] = 259.9。方法 99 實例1242-[(5S,7S)-2-( 環丙烷羰基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -5- 基 ] 苯甲腈
將[(5S,7S)-5-(2-氯苯基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-環丙基-甲酮(40 mg, 0.13 mmol)、六氰基鐵(II)酸鉀三水合物(28 mg, 0.07 mmol)、乙酸鉀(2 mg, 0.02 mmol)、聯苯-2-胺甲磺酸t-BuXPhos Phos鈀(II) (10 mg, 0.01 mmol)及2-二-第三丁基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯(6 mg, 0.01 mmol)於水(5 mL)及1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物在氮氣氛下在100℃下攪拌6 h。將反應混合物過濾且將濾液在減壓下濃縮。藉由RP-HPLC (於水中之40-70/0.04% NH3 H2 O+10 mM NH4 HCO3 )純化殘餘物，得到呈白色固體之2-[(5S,7S)-2-(環丙烷羰基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-5-基]苯甲腈(6.1 mg, 16%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.79 - 7.76 (m, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.53 - 7.50 (m, 1H), 7.01 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.15 - 6.12 (m, 0.5H), 6.00 - 5.98 (m, 1.5H), 3.90 - 3.74 (m, 1H), 3.10 - 3.06 (m, 1H), 2.99 - 2.85 (m, 1H), 1.39 - 1.33 (m, 2H), 1.17 - 1.09 (m, 2H)。LC-MS RT = 0.915 min, m/z = 397.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之10%至80%乙腈+ 0.03%碳酸氫銨經3.0 min)，滯留時間0.915 min，ESI+實驗值[M+H] = 397.2。方法 100 實例125(1- 乙基環丙基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 1- 乙基 -N - 甲氧基 -N - 甲基環丙烷 -1- 甲醯胺
使用方法5自1-乙基環丙烷甲酸來製備。藉由急速管柱層析(矽膠，0-100%乙酸異丙酯/庚烷)純化粗製反應混合物，得到1-乙基-N -甲氧基-N -甲基環丙烷-1-甲醯胺(435 mg，63%產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d) δ 3.71 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 1.60 (q, J = 7.4 Hz, 2H), 0.97 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.59 - 0.52 (m, 2H)。LCMS RT = 0.92 min,m/z = 157.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.92 min，ESI+實驗值[M+H] = 157.9。 步驟 2 ： (1- 乙基環丙基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
使用方法2自1-乙基-N -甲氧基-N -甲基環丙烷-1-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之30-70%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到(1-乙基環丙基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(134 mg，72%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.46 - 7.34 (m, 3H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 6.20 (ddd,J = 56.5, 7.1, 1.9 Hz, 1H), 5.69 (ddd,J = 8.5, 6.6, 3.0 Hz, 1H), 3.72 (dddd,J = 26.1, 15.4, 8.5, 7.1 Hz, 1H), 2.68 (dddd,J = 26.6, 15.3, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 1.73 (qd,J = 7.2, 1.7 Hz, 2H), 1.58 (dq,J = 4.4, 1.7, 1.2 Hz, 2H), 0.93 (q,J = 3.2, 2.6 Hz, 2H), 0.86 (t,J = 7.3 Hz, 3H)。LCMS RT = 5.29 min,m/z = 300.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間5.29 min，ESI+實驗值[M+H] = 300.1。方法 101 實例126((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基四氫 -2H - 哌喃 -4- 甲醯胺
使用方法5自四氫哌喃-4-甲酸來製備。藉由急速管柱層析(矽膠，0-100%乙酸異丙酯/庚烷)純化粗製反應混合物，得到N -甲氧基-N -甲基四氫-2H -哌喃-4-甲醯胺(721 mg，定量產率)。 1 H NMR (400 MHz，氯仿-d) δ 4.08 - 3.95 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.46 (td, J = 11.8, 2.3 Hz, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.91 (tt, J = 11.4, 3.8 Hz, 1H), 1.94 - 1.78 (m, 2H), 1.73 - 1.59 (m, 2H)。LCMS RT = 0.70 min,m/z = 173.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.70 min，ESI+實驗值[M+H] = 173.9。 步驟 2 ： ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 ) 甲酮
使用方法2自N -甲氧基-N -甲基四氫-2H -哌喃-4-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1% NH4 OH，10 min)純化粗製反應混合物，得到((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(四氫-2H -哌喃-4-基)甲酮(167 mg，85%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.47 - 7.35 (m, 3H), 7.28 - 7.21 (m, 2H), 6.23 (ddd,J = 56.4, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.73 (ddd,J = 8.9, 6.5, 3.0 Hz, 1H), 3.88 (ddt,J = 11.0, 4.6, 2.4 Hz, 2H), 3.74 (dddd,J = 26.1, 15.5, 8.6, 7.2 Hz, 1H), 3.60 (tt,J = 11.5, 3.8 Hz, 1H), 3.42 (tdd,J = 11.4, 3.6, 2.2 Hz, 2H), 2.70 (dddd,J = 26.7, 15.2, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 1.76 (tdt,J = 10.8, 4.5, 2.2 Hz, 2H), 1.58 (dtdd,J = 13.3, 11.7, 8.8, 4.5 Hz, 2H)。LCMS RT = 4.22 min,m/z = 316.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.22 min，ESI+實驗值[M+H] = 316.1。方法 102 實例127((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 四氫 -2H - 哌喃 -3- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基四氫 -2H - 哌喃 -3- 甲醯胺
使用方法5自四氫哌喃-3-甲酸來製備。藉由急速管柱層析(矽膠，0-100%乙酸異丙酯/庚烷)純化粗製反應混合物，得到N -甲氧基-N -甲基四氫-2H -哌喃-3-甲醯胺(697 mg，定量產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d) δ 4.03 - 3.96 (m, 1H), 3.96 - 3.89 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.49 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 3.45 - 3.37 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 3.07 - 2.94 (m, 1H), 1.94 (dtd, J = 11.1, 3.7, 1.9 Hz, 1H), 1.86 - 1.61 (m, 3H)。LCMS RT = 0.73 min,m/z = 173.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.73 min，ESI+實驗值[M+H] = 173.9。 步驟 2 ： ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 四氫 -2H - 哌喃 -3- 基 ) 甲酮
使用方法2自N -甲氧基-N -甲基四氫-2H -哌喃-3-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1% NH4 OH，10 min)純化粗製反應混合物，得到((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(四氫-2H -哌喃-3-基)甲酮(169 mg，86%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.49 - 7.34 (m, 3H), 7.25 (dt,J = 7.8, 1.4 Hz, 2H), 6.23 (dddd,J = 56.4, 7.2, 2.0, 0.9 Hz, 1H), 5.73 (ddd,J = 8.8, 6.4, 3.0 Hz, 1H), 4.01 (tdd,J = 10.5, 3.9, 1.8 Hz, 1H), 3.84 - 3.65 (m, 2H), 3.57 (tdd,J = 9.8, 3.8, 1.9 Hz, 1H), 3.45 (ddd,J = 10.9, 9.5, 2.6 Hz, 1H), 3.41 - 3.33 (m, 1H), 2.79 - 2.62 (m, 1H), 2.05 - 1.89 (m, 1H), 1.78 - 1.47 (m, 3H)。LCMS RT = 4.42 min,m/z = 316.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.42 min，ESI+實驗值[M+H] = 316.1。方法 103 實例128(5S ,7S )-2-(D - 脯胺醯基 )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 步驟 1 ： (R )-2-( 甲氧基 ( 甲基 ) 胺甲醯基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸第三丁基酯
使用方法1自N -Boc-D-脯胺酸來製備(1.23 g，定量產率)。產物不經純化即使用。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d) δ 4.65 (ddd, J = 42.4, 8.5, 3.5 Hz, 1H), 3.74 (d, J = 25.4 Hz, 3H), 3.57 (dddd, J = 15.0, 10.5, 7.8, 5.0 Hz, 1H), 3.44 (ddt, J = 28.9, 10.3, 6.9 Hz, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.27 - 2.08 (m, 1H), 2.08 - 1.74 (m, 3H), 1.43 (d, J = 17.9 Hz, 9H)。LCMS RT = 1.03 min,m/z = 158.9 [(M−Boc)+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間1.03 min，ESI+實驗值[(M-Boc)+H] = 158.9。 步驟 2 ： (R )-2-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 羰基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸第三丁基酯
使用方法3自(R )-2-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)吡咯啶-1-甲酸第三丁基酯來製備。產物不經純化即使用。LCMS RT = 1.30 min,m/z = 300.9 [(M-Boc)+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間1.30 min，ESI+實驗值[(M−Boc)+H] = 300.9。 步驟 3 ： (5S ,7S )-2-(D - 脯胺醯基 )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑
將(R )-2-((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-羰基)吡咯啶-1-甲酸第三丁基酯溶解於二氯甲烷(2 mL)中且冷卻至0℃。添加三氟乙酸(2 mL)，且將反應混合物在0℃下攪拌。將反應混合物濃縮且藉由SFC (5-60%甲醇/二氧化碳，吡啶基醯胺管柱，12 min)進行純化，得到(5S ,7S )-2-(D -脯胺醯基)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑(3.7 mg，3%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.48 - 7.29 (m, 3H), 7.23 (ddt,J = 11.8, 6.1, 1.6 Hz, 2H), 6.35 - 5.99 (m, 1H), 5.82 - 5.52 (m, 1H), 4.37 - 3.89 (m, 1H), 3.88 - 3.45 (m, 1H), 3.12 - 2.51 (m, 3H), 2.40 - 0.29 (m, 4H)。LCMS RT = 0.88 min,m/z = 300.9 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.88 min，ESI+實驗值[M+H] = 300.9。方法 104 實例129((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(2- 甲基四氫呋喃 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N ,2- 二甲基四氫呋喃 -2- 甲醯胺
使用方法2自2-甲基四氫呋喃-2-甲酸來製備(76 mg，38%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.82 min,m/z = 174.0 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.82 min，ESI+實驗值[M+H] = 174.0。 步驟 2 ： ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )(2- 甲基四氫呋喃 -2- 基 ) 甲酮
使用方法3自N -甲氧基-N ,2-二甲基四氫呋喃-2-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(2-甲基四氫呋喃-2-基)甲酮(24 mg，17%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.48 - 7.35 (m, 3H), 7.28 - 7.19 (m, 2H), 6.23 (ddt,J = 56.5, 7.2, 2.0 Hz, 1H), 5.72 (ddt,J = 8.9, 6.3, 2.8 Hz, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 1H), 3.82 - 3.65 (m, 2H), 2.71 (dddd,J = 26.6, 15.2, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 2.52 (m, 1H), 1.99 - 1.85 (m, 2H), 1.85 - 1.72 (m, 1H), 1.53 (d,J = 3.6 Hz, 3H)。LCMS RT = 4.66 min,m/z = 316.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.66 min，ESI+實驗值[M+H] = 316.1。方法 105 實例130((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基四氫呋喃 -3- 甲醯胺
使用方法3自四氫呋喃-3-甲酸來製備(97 mg，47%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.80 min,m/z = 160.0 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.80 min，ESI+實驗值[M+H] = 160.0。 步驟 2 ： ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮
使用方法3自N -甲氧基-N -甲基四氫呋喃-3-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(四氫呋喃-3-基)甲酮之非鏡像異構混合物(49 mg，37%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.49 - 7.35 (m, 3H), 7.30 - 7.21 (m, 2H), 6.24 (ddd,J = 56.2, 7.1, 1.9 Hz, 1H), 5.74 (ddd,J = 9.2, 6.6, 3.1 Hz, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 1H), 3.93 (dt,J = 11.3, 8.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.65 (m, 4H), 2.72 (dddd,J = 26.7, 15.3, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 2.19 - 2.00 (m, 2H)。LCMS RT = 4.33 min,m/z = 302.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.33 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.2。方法 106 實例131及132及 ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )((S )- 四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮
藉由對掌性SFC純化((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(四氫呋喃-3-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 1.241 min)，得到任意分配之((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)((S )-四氫呋喃-3-基)甲酮(15 mg，11%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.49 - 7.35 (m, 3H), 7.30 - 7.21 (m, 2H), 6.24 (ddd,J = 56.2, 7.1, 1.9 Hz, 1H), 5.74 (ddd,J = 9.2, 6.6, 3.1 Hz, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 1H), 3.93 (dt,J = 11.3, 8.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.65 (m, 4H), 2.72 (dddd,J = 26.7, 15.3, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 2.19 - 2.00 (m, 2H)。LCMS RT = 4.33 min,m/z = 302.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.33 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.2。 ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )((R )- 四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮
藉由對掌性SFC純化((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(四氫呋喃-3-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 1.627 min)，得到任意分配之((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)((R )-四氫呋喃-3-基)甲酮(23 mg，17%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.49 - 7.35 (m, 3H), 7.30 - 7.21 (m, 2H), 6.24 (ddd,J = 56.2, 7.1, 1.9 Hz, 1H), 5.74 (ddd,J = 9.2, 6.6, 3.1 Hz, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 1H), 3.93 (dt,J = 11.3, 8.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.65 (m, 4H), 2.72 (dddd,J = 26.7, 15.3, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 2.19 - 2.00 (m, 2H)。LCMS RT = 4.33 min,m/z = 302.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.33 min，ESI+實驗值[M+H] = 302.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak IA (150 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 10%結束B 10%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。
SFC條件：管柱：Chiralpak IA (150 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 10%結束B 10%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。方法 107 實例1331-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-3- 甲氧基 -2,2- 二甲基丙 -1- 酮 步驟 1 ： N ,3- 二甲氧基 -N ,2,2- 三甲基丙醯胺
使用方法2自3-甲氧基-2,2-二甲基丙酸來製備(184 mg，46%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.93 min,m/z = 176.0 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.93 min，ESI+實驗值[M+H] = 176.0。 步驟 2 ： 1-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-3- 甲氧基 -2,2- 二甲基丙 -1- 酮
使用方法3自N ,3-二甲氧基-N ,2,2-三甲基丙醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到1-((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)-3-甲氧基-2,2-二甲基丙-1-酮(16 mg，18%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.48 - 7.34 (m, 3H), 7.25 - 7.18 (m, 2H), 6.23 (ddd,J = 56.5, 7.1, 1.9 Hz, 1H), 5.74 (ddd,J = 8.9, 6.5, 2.9 Hz, 1H), 3.84 - 3.71 (m, 2H), 3.79 - 3.66 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 2.71 (dddd,J = 26.6, 15.2, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 1.25 (d,J = 6.0 Hz, 6H)。LCMS RT = 5.44 min,m/z = 318.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間5.44 min，ESI+實驗值[M+H] = 318.2。方法 108 實例134(S )-3,3,3- 三氟 -1-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2- 羥基丙 -1- 酮 步驟 1 ： (S )-3,3,3- 三氟 -2- 羥基 -N - 甲氧基 -N - 甲基丙醯胺
使用方法2自(S )-3,3,3-三氟-2-羥基丙酸來製備(52 mg，13%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.72 min,m/z = 187.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.72 min，ESI+實驗值[M+H] = 187.9。 步驟 2 ： (S )-3,3,3- 三氟 -1-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2- 羥基丙 -1- 酮
使用方法3自(S )-3,3,3-三氟-2-羥基-N -甲氧基-N -甲基丙醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到任意分配之(S )-3,3,3-三氟-1-((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)-2-羥基丙-1-酮(7.5 mg，9%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.42 (dddd,J = 9.2, 7.4, 6.3, 3.3 Hz, 3H), 7.26 (td,J = 8.3, 7.8, 1.6 Hz, 2H), 6.27 (dddd,J = 56.3, 7.3, 3.5, 2.0 Hz, 1H), 5.77 (ddd,J = 9.0, 6.3, 3.1 Hz, 1H), 5.62 (dd,J = 10.2, 4.0 Hz, 1H), 3.77 (dddd,J = 25.7, 15.5, 8.5, 7.2 Hz, 1H), 2.80 - 2.65 (m, 1H)。LCMS RT = 4.82 min,m/z = 330.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.82 min，ESI+實驗值[M+H] = 330.1。方法 109 實例1351-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2-( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 乙 -1- 酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基 -2-( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 乙醯胺
使用方法2自2-四氫哌喃-2-基乙酸來製備(200 mg，77%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.84 min,m/z = 188.0 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.84 min，ESI+實驗值[M+H] = 188.0。 步驟 2 ： 1-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2-( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 乙 -1- 酮
使用方法3自N -甲氧基-N -甲基-2-(四氫-2H -哌喃-2-基)乙醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之5-85%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到1-((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)-2-(四氫-2H -哌喃-2-基)乙-1-酮(2.5 mg，3%產率)。LCMS RT = 4.94 min,m/z = 330.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.94 min，ESI+實驗值[M+H] = 330.2。方法 110 實例1361-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 ) 乙 -1- 酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基 -2-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 ) 乙醯胺
使用方法2自2-四氫哌喃-4-基乙酸來製備(154 mg，59%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.78 min,m/z = 188.0 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.78 min，ESI+實驗值[M+H] = 188.0。 步驟 2 ： 1-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 ) 乙 -1- 酮
使用方法3自N -甲氧基-N -甲基-2-(四氫-2H -哌喃-4-基)乙醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到1-((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)-2-(四氫-2H -哌喃-4-基)乙-1-酮(46 mg，52%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.46 - 7.34 (m, 3H), 7.28 - 7.22 (m, 2H), 6.22 (ddd,J = 56.4, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.71 (ddd,J = 8.5, 6.5, 3.1 Hz, 1H), 3.84 - 3.63 (m, 3H), 3.28 - 3.21 (m, 1H), 2.94 (dd,J = 6.8, 2.1 Hz, 2H), 2.71 (dddd,J = 26.7, 15.2, 3.2, 2.0 Hz, 1H), 2.10 (ttt,J = 11.0, 7.1, 3.9 Hz, 1H), 1.55 (ddd,J = 12.9, 4.2, 2.0 Hz, 2H), 1.23 (qd,J = 12.4, 4.4 Hz, 2H), 0.87 - 0.65 (m, 1H)。LCMS RT = 2.51 min,m/z = 330.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間2.51 min，ESI+實驗值[M+H] = 330.2。方法 111 實例137及138及 ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )((R )-3- 甲基四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮及 ((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )((S)-3- 甲基四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N ,3- 二甲基四氫呋喃 -3- 甲醯胺
使用方法2自3-甲基四氫呋喃-3-甲酸來製備(386 mg，58%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.89 min,m/z = 173.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.89 min，ESI+實驗值[M+H] = 173.9。 ((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )((R )-3- 甲基四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮
使用方法3自N -甲氧基-N ,3-二甲基四氫呋喃-3-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(3-甲基四氫呋喃-3-基)甲酮之非鏡像異構混合物(31 mg，28%產率)。藉由對掌性SFC純化((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(3-甲基四氫呋喃-3-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 0.785 min)，得到任意分配之((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)((R )-3-甲基四氫呋喃-3-基)甲酮(11 mg, 10%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.46 - 7.35 (m, 3H), 7.28 - 7.21 (m, 2H), 6.24 (ddd,J = 56.4, 7.1, 2.0 Hz, 1H), 5.73 (ddd,J = 8.9, 6.4, 3.1 Hz, 1H), 4.18 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 3.84 - 3.66 (m, 3H), 3.64 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 2.71 (dddd,J = 26.6, 15.2, 3.1, 2.0 Hz, 1H), 2.56 (ddd,J = 12.6, 8.2, 6.8 Hz, 1H), 1.85 (ddd,J = 13.0, 7.6, 5.6 Hz, 1H), 1.48 (s, 3H)。LCMS RT = 4.68 min,m/z = 316.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.68 min，ESI+實驗值[M+H] = 316.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak IG (150 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 20%結束B 20%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )((S )-3- 甲基四氫呋喃 -3- 基 ) 甲酮
藉由對掌性SFC純化((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)(3-甲基四氫呋喃-3-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 0.966 min)，得到任意分配之((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)((S )-3-甲基四氫呋喃-3-基)甲酮(12 mg，11%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.47 - 7.34 (m, 3H), 7.28 - 7.21 (m, 2H), 6.24 (ddd,J = 56.3, 7.1, 1.9 Hz, 1H), 5.73 (ddd,J = 8.9, 6.5, 3.1 Hz, 1H), 4.21 (d,J = 89. Hz, 1H), 3.83 - 3.64 (m, 3H), 3.67 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 2.71 (dddd,J = 26.6, 15.2, 3.1, 2.0 Hz, 1H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 1.82 (ddd,J = 12.6, 7.6, 5.7 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H)。LCMS RT = 4.68 min,m/z = 316.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.68 min，ESI+實驗值[M+H] = 316.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak IG (150 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 25%結束B 25%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。方法 112 實例139、140及141及及 ((1R ,2R ,4S )-7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚 -2- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及 ((1S,2R,4R)-7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚 -2- 基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及 ((1R,2S,4S)-7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚 -2- 基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基 -7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲醯胺
使用方法2自7-氧雜二環[2.2.1]庚烷-2-甲酸來製備(184 mg，70%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.76 min,m/z = 185.8 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.76 min，ESI+實驗值[M+H] = 185.8。 步驟 2 ： ((1R ,2R ,4S )-7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚 -2- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
使用方法3自N -甲氧基-N -甲基-7-氧雜二環[2.2.1]庚烷-2-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到(7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(41 mg，31%產率)。藉由對掌性SFC純化(7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 0.442min)，得到任意分配之((1R ,2R ,4S )-7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(3 mg，2%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.47 - 7.35 (m, 3H), 7.29 - 7.22 (m, 2H), 6.25 (ddd,J = 56.4, 7.2, 2.0 Hz, 1H), 5.74 (ddd,J = 9.1, 6.4, 3.1 Hz, 1H), 4.91 (t,J = 4.9 Hz, 1H), 4.59 (t,J = 5.2 Hz, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 1H), 3.75 (dddd,J = 25.8, 15.5, 8.5, 7.2 Hz, 1H), 2.72 (dddd,J = 26.7, 15.1, 3.1, 2.0 Hz, 1H), 2.00 (dd,J = 11.9, 4.6 Hz, 1H), 1.75 (dddd,J = 12.0, 10.9, 5.3, 2.8 Hz, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 1H), 1.50 - 1.36 (m, 2H), 1.29 - 1.17 (m, 1H)。LCMS RT = 4.61 min,m/z = 328.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.61 min，ESI+實驗值[M+H] = 328.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak ID (250 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4OH MeOH；開始B 25%結束B 25%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。 ((1S ,2R ,4R )-7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚 -2- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
藉由對掌性SFC純化(7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 0.523 min)，得到任意分配之((1S ,2R ,4R )-7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(3 mg，2%產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d) δ 7.43 - 7.34 (m, 3H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 6.03 (ddd, J = 55.8, 7.1, 1.7 Hz, 1H), 5.50 (ddd, J = 8.8, 6.2, 2.8 Hz, 1H), 4.83 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 4.70 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 3.77 - 3.51 (m, 2H), 2.95 (dddd, J = 25.0, 15.4, 2.8, 1.7 Hz, 1H), 2.32 (dtd, J = 12.2, 5.0, 2.1 Hz, 1H), 1.90 - 1.63 (m, 5H)。LCMS RT = 4.54 min,m/z = 328.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.54 min，ESI+實驗值[M+H] = 328.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak ID (250 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 25%結束B 25%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。 ((1R ,2S ,4S )-7- 氧雜二環 [2.2.1] 庚 -2- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
藉由對掌性SFC純化(7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 1.220 min)，得到任意分配之((1R ,2S ,4S )-7-氧雜二環[2.2.1]庚-2-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(21 mg，16%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.47 - 7.35 (m, 3H), 7.31 - 7.24 (m, 2H), 6.23 (ddd,J = 56.3, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.74 (ddd,J = 8.9, 6.5, 3.1 Hz, 1H), 4.94 (t,J = 4.9 Hz, 1H), 4.59 (t,J = 5.2 Hz, 1H), 3.93 - 3.83 (m, 1H), 3.75 (dddd,J = 26.1, 15.5, 8.5, 7.2 Hz, 1H), 2.72 (dddd,J = 26.6, 15.2, 3.1, 1.9 Hz, 1H), 1.99 (dd,J = 12.0, 4.6 Hz, 1H), 1.73 (dddd,J = 11.9, 10.8, 5.3, 2.8 Hz, 1H), 1.59 (ddt,J = 12.8, 8.5, 4.8 Hz, 1H), 1.51 - 1.37 (m, 2H), 1.28 - 1.17 (m, 1H)。LCMS RT = 4.61 min,m/z = 328.2 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.61 min，ESI+實驗值[M+H] = 328.2。
SFC條件：管柱：Chiralpak ID (250 mm*21.2 mm, 5 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 25%結束B 25%；流速(70 mL/min)；管柱溫度40℃。方法 113 實例1421-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2-( 三氟甲氧基 ) 乙 -1- 酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基 -2-( 三氟甲氧基 ) 乙醯胺
使用方法2自2-(三氟甲氧基)乙酸來製備(129 mg，20%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.88 min,m/z = 187.8 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.88 min，ESI+實驗值[M+H] = 187.8。 步驟 2 ： 1-((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 )-2-( 三氟甲氧基 ) 乙 -1- 酮
使用方法3自N -甲氧基-N -甲基-2-(三氟甲氧基)乙醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到1-((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)-2-(三氟甲氧基)乙-1-酮(2 mg，2%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.47 - 7.36 (m, 3H), 7.30 - 7.24 (m, 2H), 6.26 (ddd,J = 56.2, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.75 (ddd,J = 8.8, 6.5, 3.1 Hz, 1H), 5.50 (d,J = 1.2 Hz, 2H), 3.84 - 3.63 (m, 1H), 2.74 (dddd,J = 26.8, 15.3, 3.2, 1.9 Hz, 1H)。LCMS RT = 5.39 min,m/z = 330.1 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間5.39 min，ESI+實驗值[M+H] = 330.1。方法 114 及實例143及144((1R ,5R )-3- 氧雜二環 [3.1.0] 己 -1- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及 ((1S,5S)-3- 氧雜二環 [3.1.0] 己 -1- 基 )((5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： N - 甲氧基 -N - 甲基 -3- 氧雜二環 [3.1.0] 己烷 -1- 甲醯胺
使用方法3自3-氧雜二環[3.1.0]己烷-1-甲酸來製備(150 mg, 56%產率)。產物不經純化即使用。LCMS RT = 0.72 min,m/z = 171.9 [M+H]+ 。LCMS (於水中之5%至100%乙腈+ 0.1%甲酸經1.6 min)，滯留時間0.72 min，ESI+實驗值[M+H] = 171.9。 步驟 2 ： ((1R ,5R )-3- 氧雜二環 [3.1.0] 己 -1- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
使用方法3自N -甲氧基-N -甲基-3-氧雜二環[3.1.0]己烷-1-甲醯胺來製備。藉由RP-HPLC (於水中之20-60%乙腈/0.1%甲酸，10 min)純化粗製反應混合物，得到(3-氧雜二環[3.1.0]己-1-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(30 mg，27%產率)。藉由對掌性SFC純化(3-氧雜二環[3.1.0]己-1-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 0.736 min)，得到任意分配之((1R ,5R )-3-氧雜二環[3.1.0]己-1-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(28 mg，25%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.48 - 7.33 (m, 3H), 7.24 (dt,J = 7.8, 1.5 Hz, 2H), 6.22 (dddd,J = 56.4, 7.2, 3.5, 1.9 Hz, 1H), 5.76 - 5.65 (m, 1H), 4.11 - 4.04 (m, 1H), 4.00 (dd,J = 8.7, 1.7 Hz, 1H), 3.81 - 3.64 (m, 3H), 2.83 - 2.61 (m, 2H), 1.84 (td,J = 8.3, 3.9 Hz, 1H), 1.13 (dd,J = 5.7, 4.0 Hz, 1H)。LCMS RT = 4.58 min,m/z = 314.1 [M+H]+ 。
LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.58 min，ESI+實驗值[M+H] = 314.1。
SFC條件：管柱：Chiralcel OX (50 mm*4.6 mm, 3 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 25%結束B 25%；流速(4 mL/min)；管柱溫度40℃。((1S ,5S )-3- 氧雜二環 [3.1.0] 己 -1- 基 )((5S ,7S )-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H - 吡咯并 [1,2-b ][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
藉由對掌性SFC純化(3-氧雜二環[3.1.0]己-1-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(滯留時間= 0.914 min)，得到任意分配之((1S ,5S )-3-氧雜二環[3.1.0]己-1-基)((5S ,7S )-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(0.5 mg，0.05%產率)。LCMS RT = 4.58 min,m/z = 314.2 [M+H]+ 。LCMS (於水中之2%至98%乙腈+ 0.1%甲酸經7 min)，滯留時間4.58 min，ESI+實驗值[M+H] = 314.2。
SFC條件：管柱：Chiralcel OX (50 mm*4.6 mm, 3 μm)；條件：0.1% NH4 OH MeOH；開始B 25%結束B 25%；流速(4 mL/min)；管柱溫度40℃。方法 115 及實例145及146環丙基 -(5- 苯基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲酮及 (S)- 環丙基 (5- 苯基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 2- 溴 -5- 苯基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-a] 吡啶
使氫氣鼓泡通過5-苯基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(0.90 g, 4.28 mmol)及氧化鉑(IV)(97.2 mg, 0.428 mmol)於乙酸(43 mL)中之溶液。5 min後，將針自溶液移除且使反應物在氫氣氛下攪拌48 h (約50%轉化率)。使用甲醇經由矽藻土塞過濾反應物。將濾液在減壓下濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。
在60℃下向溴化銅(II)(1.72 g, 7.61 mmol)及亞硝酸第三丁基酯(0.750 mL, 5.71 mmol)於乙腈(7.6 mL)中之溶液添加粗製5-苯基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(0.80 g, 3.81 mmol)。接著將反應物在75℃下加熱1 h。冷卻至室溫後，添加1 M HCl。用乙酸異丙酯萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮，且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至50%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到2-溴-5-苯基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(0.354 g，1.27 mmol，33%產率)。LCMS RT = 1.15 min,m/z = 277.8 [M = H]+ 。步驟 2 ：環丙基 -(5- 苯基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲酮 (S)- 環丙基 (5- 苯基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下經15 min將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，0.27 mL, 0.540 mmol)逐滴添加至2-溴-5-苯基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(50 mg, 0.180 mmol)及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(71 mg, 0.54 mmol)於THF (1.8 mL)中之溶液。1 h後，添加飽和氯化銨水溶液。用乙酸異丙酯(2 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型TLC (100%乙酸異丙酯)純化粗製殘餘物，得到環丙基-(5-苯基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)甲酮(20.9 mg，0.078 mmol，44%產率)。藉由製備型SFC進一步純化粗製物質，提供任意分配之(S)-環丙基(5-苯基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)甲酮。環丙基 -(5- 苯基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲酮：
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.41 - 7.27 (m, 3H), 7.12 - 7.04 (m, 2H), 5.62 (t,J = 5.9 Hz, 1H), 3.12 - 2.83 (m, 3H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 2.13 - 2.01 (m, 1H), 1.93 - 1.81 (m, 2H), 1.04 - 0.92 (m, 4H)。LCMS RT = 4.37 min,m/z = 268.1 [M + H]+ 。
(S)-環丙基(5-苯基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)甲酮：
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.42 - 7.23 (m, 3H), 7.12 - 7.04 (m, 2H), 5.62 (t,J = 6.0 Hz, 1H), 3.12 - 2.85 (m, 3H), 2.45 - 2.35 (m, 1H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.96 - 1.82 (m, 2H), 1.05 - 0.93 (m, 4H)。LCMS RT = 4.39 min,m/z = 268.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Chiralcel OJ 5 μm, (250 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /於甲醇中之0.1%氫氧化銨(B)，等度溶析程式：15% B
流速：70 mL/min，管柱溫度：30℃，波長：220 nm方法 116 實例147、148及149 環丙基 ((5S,7R)-7- 羥基 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7R)-7- 氟 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮及環丙基 -[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ] 甲酮 步驟 1 ： 1-(3- 溴 -1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3-( 鄰甲苯基 ) 丙烷 -1,3- 二酮
在-78℃下將雙(三甲基矽基)胺基鋰(於THF中1.0 M，26 mL, 26 mmol)添加至1-(鄰甲苯基)乙酮(1.9 mL, 15 mmol)及3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲基酯(2.0 g, 9.7 mmol)於THF (32 mL)中之溶液。之後，使反應物升溫至室溫且攪拌1 h。用水及乙酸異丙酯稀釋該反應物。添加5%檸檬酸溶液(100 mL)，且用乙酸異丙酯(3 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至80%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到1-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-(鄰甲苯基)丙烷-1,3-二酮(2.03 g，6.59 mmol，68%產率)。LCMS RT = 1.28 min,m/z = 307.8 [M + H]+ 。 步驟 2 ： (5S,7R)-2- 溴 -7- 氟 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑及 (5S,7R)-2- 溴 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇及 (5S,7S)-2- 溴 -7- 氟 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在室溫下將硼氫化鈉(3.84 g, 97.4 mmol)添加至1-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-(鄰甲苯基)丙烷-1,3-二酮(2.00 g, 6.49 mmol)於乙醇(130 mL)中之溶液。1 h後，添加氯化銨飽和水溶液且將反應物在減壓下濃縮。將粗製殘餘物溶解於乙酸異丙酯及水中。用乙酸異丙酯(6 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 0.96 min,m/z = 311.8 [M + H]+ 。在室溫下將三氟乙酸(65 mL)添加至粗製殘餘物於二氯甲烷(65 mL)中之溶液。30 min後，將反應物在減壓下濃縮。將粗製殘餘物溶解於二氯甲烷中。添加水及飽和碳酸氫鈉水溶液。用二氯甲烷(4 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 1.08 min,m/z = 293.8 [M + H]+ 及LCMS RT = 0.98 min,m/z = 293.8 [M + H]+ 。在室溫下將二乙胺基三氟化硫(3.60 mL, 26.0 mmol)添加至粗製殘餘物於二氯甲烷(65 mL)中之溶液。30 min後，小心地添加飽和碳酸氫鈉水溶液。用二氯甲烷(4 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，10%至100%乙酸異丙酯-庚烷、接著10%甲醇-二氯甲烷)純化粗製殘餘物，得到(5S,7R)-2-溴-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇及(5S,7R)-2-溴-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑之2:1混合物(0.470 g)及(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.350 g，1.18 mmol，18%產率)。
(5S,7R)-2-溴-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑：
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.30 - 7.18 (m, 3H), 6.88 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 6.30 (ddd,J = 56.2, 6.8, 1.6 Hz, 1H), 6.11 (td,J = 6.8, 3.8 Hz, 1H), 3.44 - 3.27 (m, 1H), 2.92 (ddt,J = 27.9, 15.2, 6.5 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H)。LCMS RT = 1.26 min,m/z = 295.8 [M + H]+ 。
(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.38 - 7.09 (m, 3H), 6.78 - 6.69 (m, 1H), 6.20 (ddd,J = 56.4, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.95 - 5.80 (m, 1H), 3.69 (dddd,J = 25.4, 15.4, 8.5, 7.2 Hz, 1H), 2.66 - 2.51 (m, 1H), 2.39 (s, 3H)。LCMS RT = 1.25 min,m/z = 295.7 [M + H]+ 。 步驟 3 ：環丙基 ((5S,7R)-7- 氟 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及環丙基 ((5S,7R)-7- 羥基 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下經15 min將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，2.4 mL, 4.76 mmol)逐滴添加至(5S,7R)-2-溴-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇及(5S,7R)-2-溴-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑之2:1混合物(0.470 g)及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(0.634 g, 4.76 mmol)於THF (15.9 mL)中之溶液。1 h後，添加飽和氯化銨水溶液。用乙酸異丙酯(2 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型HPLC/SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之環丙基((5S,7R)-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(137 mg, 0.480 mmol)及環丙基((5S,7R)-7-羥基-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(33.8 mg, 0.119 mmol)。
環丙基((5S,7R)-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.33 - 7.14 (m, 3H), 6.89 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 6.35 (ddd,J = 56.2, 6.8, 1.6 Hz, 1H), 6.19 (td,J = 6.9, 3.2 Hz, 1H), 3.59 - 3.27 (m, 1H), 3.11 - 2.91 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.14 - 1.01 (m, 4H)。LCMS RT = 4.81 min,m/z = 286.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Torus Diol 5 µm, (150 × 30 mm)，移動相：二氧化碳(A) /於甲醇中之0.1%氫氧化銨(B)，等度溶析程式：5% B
流速：150 mL/min，管柱溫度：25℃，波長：220 nm
環丙基((5S,7R)-7-羥基-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.30 - 7.13 (m, 3H), 7.01 - 6.94 (m, 1H), 6.25 (bs, 1H), 5.75 (dd,J = 8.1, 5.8 Hz, 1H), 5.23 (dd,J = 7.9, 4.6 Hz, 1H), 3.63 - 3.52 (m, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.31 - 2.14 (m, 1H), 1.09 - 0.96 (m, 4H)。LCMS RT = 4.08 min,m/z = 284.1 [M + H]+ 。
製備型HPLC資訊：管柱：Gemini-NX C18, 5 µm (50 × 30 mm)，移動相：於水中之0.1%氫氧化銨(A) /乙腈(B)，溶析程式梯度：10%至60% B，流速：60 mL/min，管柱溫度：25℃，波長：254 nm 步驟 4 ：環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-( 鄰甲苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下經15 min將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，1.80 mL, 3.55 mmol)逐滴添加至(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.350 g, 1.18 mmol)及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(0.472 g, 3.55 mmol)於THF (11.8 mL)中之溶液。1 h後，添加飽和氯化銨水溶液。用乙酸異丙酯(2 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之環丙基((5S,7S)-7-氟-5-(鄰甲苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(0.179 g，0.627 mmol，53%產率)。
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.35 - 7.14 (m, 3H), 6.76 - 6.66 (m, 1H), 6.26 (ddd,J = 56.3, 7.2, 1.9 Hz, 1H), 5.94 (ddd,J = 8.5, 6.6, 3.2 Hz, 1H), 3.94 - 3.48 (m, 1H), 3.01 (ddt,J = 7.6, 6.1, 5.2 Hz, 1H), 2.66 (dddd,J = 26.8, 15.1, 3.2, 2.0 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.18 - 0.99 (m, 4H)。LCMS RT = 4.80 min,m/z = 286.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Torus Diol 5 µm, (150 × 30 mm)，移動相：二氧化碳(A) /於甲醇中之0.1%氫氧化銨(B)，等度溶析程式：5% B
流速：150 mL/min，管柱溫度：25℃，波長：220 nm。方法 117 實例150及151 環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及環丙基 ((5S,7R)-7- 氟 -5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 3-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-4,5- 二氫異噁唑 -5- 甲酸甲基酯
在0℃下將三乙胺(9.8 mL, 70 mmol)添加至(2Z)-3-氟-N-羥基-吡啶-2-甲亞胺醯基氯(12.0 g, 68.7 mmol)及丙烯酸甲酯(6.3 mL, 70 mmol)於二氯甲烷(460 mL)中之溶液。使反應物升溫至室溫且再攪拌4 h。添加水且用二氯甲烷(3 × 200 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到3-(3-氟-2-吡啶基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(10.6 g，47.3 mmol，68%產率)。
關於(2Z)-3-氟-N-羥基-吡啶-2-甲亞胺醯基氯之製備，參見：WO2006/114706, 2006, A1。LCMS RT = 0.89 min,m/z = 224.8 [M + H]+ 。 步驟 2 ： 3-(( 第三丁基二甲基矽基 ) 氧基 )-5-(3- 氟吡啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -2- 酮
將氯化鎳(II)六水合物(21.6 g, 89.2 mmol)及3-(3-氟-2-吡啶基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸甲基酯(10.0 g, 44.6 mmol)溶解於甲醇(372 mL)中且在氮氣下冷卻至-30℃。經10 min逐份添加硼氫化鈉(8.79 g, 223 mmol)。之後，使反應物升溫至室溫且再攪拌1 h。添加氫氧化氨(100 ml)且使反應物在室溫下攪拌過夜。將沈澱物過濾出。將濾液濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 0.75 min,m/z = 196.8 [M = H]+ 。在40℃下將4-二甲基胺基吡啶(0.545 g, 4.46 mmol)添加至粗製受質及咪唑(9.11 g, 134 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(13.9 g, 89.2 mmol)於二甲基亞碸(89 mL)中之溶液。24 h後，用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。用乙酸異丙酯(4 × 200 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(3-氟-2-吡啶基)吡咯啶-2-酮(9.6 g，31 mmol，69%產率)。
1 H NMR (400 MHz，氯仿-d )非鏡像異構物之1:1混合物 δ 8.41 - 8.36 (m, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.31 - 7.22 (m, 1H), 6.21 (s, 0.5H), 5.87 (s, 0.5H), 5.18 - 5.10 (m, 0.5H), 4.90 (ddd,J = 9.5, 6.3, 1.3 Hz, 0.5H), 4.59 - 4.47 (m, 1H), 3.01 - 2.90 (m, 0.5H), 2.61 (ddd,J = 13.0, 7.5, 3.7 Hz, 0.5H), 2.48 (ddd,J = 13.2, 8.1, 6.5 Hz, 0.5H), 2.21 (dt,J = 12.3, 9.5 Hz, 0.5H), 0.93 (s, 4.5H), 0.91 (s, 4.5H), 0.22 - 0.13 (m, 6H)。LCMS RT = 1.38 min,m/z = 311.0 [M + H]+ 。 步驟 3 ： 5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-7- 羥基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在0℃下將氫化鈉(於油中60%，0.390 g, 9.7 mmol)添加至3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-(3-氟-2-吡啶基)吡咯啶-2-酮(2.0 g, 6.4 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(64 mL)中之溶液。30 min後，添加O-二苯基磷醯基羥胺(2.3 g, 9.7 mmol)。使反應物升溫至室溫且攪拌16 h。將反應物過濾且將濾液在減壓下蒸發。粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一反應。LCMS RT = 1.34 min,m/z = 326.0 [M + H]+ 及LCMS RT = 1.30 min,m/z = 326.0 [M + H]+ 。將2-乙氧基-2-亞胺基乙酸乙基酯(2.50 g, 16 mmol)及粗製殘餘物溶解於乙醇(23 mL)中，且將反應物在90℃下加熱16 h。冷卻至室溫後，將反應物過濾且將濾液在減壓下濃縮。粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一反應。LCMS RT = 1.38 min,m/z = 425.0 [M + H]+ 及LCMS RT = 1.34 min,m/z = 425.0 [M + H]+ 。將對甲苯磺酸一水合物(1.5 g, 7.7 mmol)添加至粗製殘餘物於甲苯(25 mL)中之溶液。將反應物在120℃下加熱16 h。冷卻至室溫後，將反應物過濾且將濾液在減壓下濃縮。粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一反應。LCMS RT = 1.55 min,m/z = 407.0 [M + H]+ 及LCMS RT = 1.50 min,m/z = 407.1 [M + H]+ 。將四丁基氟化銨(於THF中1.0 M，6.4 mL, 6.4 mmol)添加至粗製殘餘物於THF (21 mL)中之溶液，且將反應物在40℃下加熱1 h。冷卻至室溫後，添加飽和氯化銨水溶液。用乙酸異丙酯(4 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽0%至10%甲醇/二氯甲烷)純化粗製殘餘物，得到5-(3-氟-2-吡啶基)-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(0.800 g，2.74 mmol，42%產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d )非鏡像異構物之1:1混合物 δ 8.41 - 8.29 (m, 1H), 7.63 - 7.26 (m, 2H), 6.12 (dd,J = 8.1, 4.4 Hz, 0.5H), 6.07 (d,J = 8.2 Hz, 0.5H), 5.64 (dd,J = 7.6, 4.0 Hz, 0.5H), 5.21 (d,J = 6.5 Hz, 0.5H), 4.51 - 4.38 (m, 2H), 3.45 (ddd,J = 14.7, 8.3, 6.6 Hz, 0.5H), 3.29 (ddd,J = 13.8, 7.5, 4.3 Hz, 0.5H), 3.10 (ddd,J = 13.8, 8.1, 4.0 Hz, 0.5H), 2.74 (d,J = 14.4 Hz, 0.5H), 1.40 (t,J = 7.1 Hz, 3H)。LCMS RT = 0.89 min,m/z = 292.9 [M + H]+ 。 步驟 4 ： 7- 氟 -5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲酸乙基酯
在室溫下將二乙胺基三氟化硫(1.53 mL, 10.9 mmol)添加至5-(3-氟-2-吡啶基)-7-羥基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(0.800 g, 2.74 mmol)於二氯甲烷(27.4 mL)中之溶液。20 min後，添加飽和碳酸氫鈉水溶液。用二氯甲烷(4 × 30 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至10% DCM - 甲醇)純化粗製殘餘物，得到7-氟-5-(3-氟-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(0.800 g，2.72 mmol，99%產率)。LCMS RT = 1.01 min,m/z = 294.8 [M + H]+ 。 步驟 5 ： 7- 氟 -5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-N- 甲氧基 -N- 甲基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 甲醯胺
在室溫下將氫氧化鋰一水合物(1.20 g, 27 mmol)添加至7-氟-5-(3-氟-2-吡啶基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙基酯(0.80 g, 2.7 mmol)於THF (9.1 mL)、水(4.5 mL)及甲醇(9.1 mL)中之溶液。1 h後，用1 M HCl (27 mL)使反應物中和。用乙酸異丙酯(10 × 20 mL)萃取該反應物。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一反應。LCMS RT = 0.83 min,m/z = 266.8 [M + H]+ 。在室溫下將三乙胺(1.5 mL, 11 mmol)添加至1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.790 g, 4.1 mmol)、1-羥基苯并三唑(0.370 g, 2.7 mmol)、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(0.540 g, 5.4 mmol)及粗製殘餘物於N,N-二甲基甲醯胺(9.1 mL)中之溶液。2 h後，將反應物過濾且將濾液在減壓下濃縮。藉由急速管柱層析(0%至10%甲醇-二氯甲烷)純化粗製殘餘物，得到7-氟-5-(3-氟-2-吡啶基)-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(0.224 g，0.724 mmol，27%產率)。LCMS RT = 0.85 min,m/z = 309.9 [M + H]+ 。 步驟 6 ：環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮及環丙基 ((5S,7R)-7- 氟 -5-(3- 氟吡啶 -2- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在-50℃下將環丙基溴化鎂(於THF中0.5 M，5.7 mL, 2.85 mmol)添加至7-氟-5-(3-氟-2-吡啶基)-N-甲氧基-N-甲基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲醯胺(0.220 g, 0.711 mmol)於THF (2.4 mL)中之溶液。20 min後，將反應物置於室溫浴中且攪拌3 min。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。用乙酸異丙酯(4 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之環丙基((5S,7S)-7-氟-5-(3-氟吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(16.59 mg, 0.057 mmol, 8%產率)及環丙基((5S,7R)-7-氟-5-(3-氟吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(23.7 mg，0.082 mmol，12%產率)。
環丙基((5S,7S)-7-氟-5-(3-氟吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.45 (dt,J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.89 (ddd,J = 10.0, 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.57 (dt,J = 8.6, 4.4 Hz, 1H), 6.26 (ddd,J = 56.6, 7.7, 2.7 Hz, 1H), 6.10 - 5.99 (m, 1H), 3.74 (dddd,J = 19.7, 14.7, 8.5, 7.7 Hz, 1H), 3.16 - 2.84 (m, 2H), 1.18 - 0.93 (m, 4H)。LCMS RT = 3.64 min,m/z = 291.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Chiralcel OJ 5 µm, (250 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /甲醇(B)，等度溶析程式：15% B，流速：70 mL/min，管柱溫度：35℃，波長：261 nm
環丙基((5S,7R)-7-氟-5-(3-氟吡啶-2-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.42 (dt,J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.89 (ddd,J = 10.0, 8.5, 1.3 Hz, 1H), 7.56 (dt,J = 8.6, 4.4 Hz, 1H), 6.58 - 6.32 (m, 2H), 3.55 - 3.19 (m, 2H), 2.95 (tt,J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 1.13 - 0.98 (m, 4H)。LCMS RT = 3.82 min,m/z = 291.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Chiralcel OJ 5 µm, (250 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /甲醇(B)，等度溶析程式：15% B，流速：70 mL/min，管柱溫度：35℃，波長：261 nm。方法 118 實例152環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 1-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H-1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 丙烷 -1,3- 二酮
在0℃下將雙(三甲基矽基)胺基鋰(於THF中1.0 M，9.5 mL, 9.5 mmol)添加至5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-甲酸甲基酯(2.0 g, 5.9 mmol)及1-(1-甲基吡唑-4-基)乙酮(1.20 g, 9.5 mmol)於THF (40 mL)中之溶液。之後，使反應物升溫至室溫且攪拌1 h。用水及乙酸異丙酯稀釋該反應物。添加5%檸檬酸溶液，且用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烷-1,3-二酮(2.40 g，5.60 mmol，94%產率)。LCMS RT = 1.57 min,m/z = 427.9 [M + H]+ 。 步驟 2 ： 2- 溴 -7- 氟 -5-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在室溫下將硼氫化鈉(3.30 g, 84 mmol)添加至1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烷-1,3-二酮(2.4 g, 5.6 mmol)於乙醇(110 mL)中之溶液。30 min後，用飽和氯化銨水溶液使反應物淬滅且在減壓下去除揮發物。將粗製殘餘物溶解於乙酸異丙酯中且用水稀釋。用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮，且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 1.17 min,m/z = 431.9 [M + H]+ 。將三氟乙酸(56 mL)及二氯甲烷(56 mL)添加至粗製殘餘物且將反應物在50℃下加熱16 h。冷卻至室溫後，將反應物在減壓下濃縮。將粗製殘餘物溶解於二氯甲烷中且添加飽和碳酸氫鈉水溶液。用二氯甲烷(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 0.82 min,m/z = 283.8 [M + H]+ 。在室溫下將二乙胺基三氟化硫(3.1 mL, 22 mmol)添加至粗製殘餘物於二氯甲烷(56 mL)中之溶液。20 min後，向反應物添加碳酸氫鈉(5.0 g)。用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。添加鹽水，且用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(50%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到2-溴-7-氟-5-(1-甲基吡唑-4-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.379 g，1.32 mmol，24%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )非鏡像異構物之1:1混合物 δ 7.84 (s, 0.5H), 7.78 (s, 0.5H), 7.52 (d,J = 0.8 Hz, 0.5H), 7.45 (d,J = 0.8 Hz, 0.5H), 6.33 - 6.03 (m, 1H), 5.88 - 5.74 (m, 0.5H), 5.63 - 5.51 (m, 0.5H), 3.83 (s, 1.5H), 3.82 (s, 1.5H), 3.65 - 3.47 (m, 0.5H), 3.25 - 3.00 (m, 1H), 2.81 - 2.64 (m, 0.5H)。LCMS RT = 0.92 min,m/z = 285.8 [M + H]+ 。 步驟 3 ：環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M， 2.0 mL, 3.97 mmol)添加至2-溴-7-氟-5-(1-甲基吡唑-4-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.379 g, 1.32 mmol)及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(0.529 g, 3.97 mmol)於THF (13.2 mL)中之溶液。5 min後，使反應物升溫至室溫且再攪拌1 h。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。添加鹽水，且用乙酸異丙酯(4 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之環丙基((5S,7S)-7-氟-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮(44.23 mg，0.161 mmol，12%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.80 (d,J = 0.8 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 0.8 Hz, 1H), 6.21 (ddd,J = 56.4, 7.0, 2.4 Hz, 1H), 5.66 (ddd,J = 8.2, 6.0, 3.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.73 - 3.55 (m, 1H), 2.99 (tt,J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 2.80 (dddd,J = 26.4, 14.9, 3.7, 2.4 Hz, 1H), 1.14 - 0.95 (m, 4H)。LCMS RT = 3.10 min,m/z = 276.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Whelko-01 5 µm, (150 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /於甲醇中之0.1%氫氧化銨(B)，等度溶析程式：35% B
流速：70 mL/min，管柱溫度：40℃，波長：220 nm。方法 119 實例153環丙基 (7- 氟 -5-(5- 甲基異噁唑 -4- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 1-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H-1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3-(5- 甲基異噁唑 -4- 基 ) 丙烷 -1,3- 二酮
在0℃下將雙(三甲基矽基)胺基鋰(於THF中1.0 M，7.1 mL, 7.1 mmol)添加至5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-甲酸甲基酯(1.5 g, 4.5 mmol)及1-(5-甲基異噁唑-4-基)乙酮(0.890 g, 7.1 mmol)於THF (30 mL)中之溶液。5 min後，使反應物升溫至室溫且再攪拌30 min。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。添加10%檸檬酸水溶液以將pH調整至2。用乙酸異丙酯(2 × 200 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(5-甲基異噁唑-4-基)丙烷-1,3-二酮(1.6 g，3.7 mmol，84%產率)。LCMS RT = 1.35 min,m/z = 428.9 [M + H]+ 。 步驟 2 ：環丙基 (7- 氟 -5-(5- 甲基異噁唑 -4- 基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在室溫下將硼氫化鈉(3.30 g, 84 mmol)添加至1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(5-甲基異噁唑-4-基)丙烷-1,3-二酮(2.4 g, 5.6 mmol)於乙醇(110 mL)中之溶液。30 min後，用飽和氯化銨水溶液使反應物淬滅。在減壓下去除揮發物。將粗製殘餘物溶解於乙酸異丙酯中且用水稀釋。用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 1.27 min,m/z = 432.9 [M + H]+ 。將硫酸(10 mL)添加至粗製殘餘物，且將反應物在100℃下加熱2 h。冷卻至室溫後，用水稀釋反應物。添加氫氧化鈉(於水中3 M)，直至水層變為鹼性為止。用乙酸異丙酯(3 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。在室溫下將二乙胺基三氟化硫(0.470 mL, 3.37 mmol)添加至粗製殘餘物於二氯甲烷(8.4 mL)中之溶液。20 min後，添加碳酸氫鈉(2.0 g)。用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。添加鹽水，且用乙酸異丙酯(4 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物(0.110 g, 0.383 mmol)不經進一步純化即呈遞至下一反應。LCMS RT = 1.02 min,m/z = 286.8 [M + H]+ 。在0℃下將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，0.38 mL, 0.766 mmol)添加至粗製殘餘物及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(0.153 g, 1.15 mmol)於THF (3.8 mL)中之溶液。5 min後，使反應物升溫至室溫且再攪拌20 min。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。用乙酸異丙酯(4 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到環丙基(7-氟-5-(5-甲基異噁唑-4-基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮之非鏡像異構混合物(1.26 mg, 0.0046 mmol)。LCMS RT = 3.63 min,m/z = 277.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Chiracel OX 5 µm, (150 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /甲醇(B)，等度溶析程式：20% B，流速：70 mL/min，管柱溫度：40℃，波長：220 nm方法 120 實例154及155 及 ((5S,7S)-5-(4- 氯 -1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 環丙基 ) 甲酮及 ((5S,7R)-5-(4- 氯 -1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 環丙基 ) 甲酮 步驟 1 ： 1-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H-1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3-(4- 氯 -1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 丙烷 -1,3- 二酮
在0℃下將雙(三甲基矽基)胺基鋰(於THF中1.0 M，5.9 mL, 5.9 mmol)添加至5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-甲酸甲基酯(2.0 g, 5.9 mmol)及1-(4-氯-1-甲基-吡唑-3-基)乙酮(0.940 g, 5.9 mmol)於THF (40 mL)中之溶液。5 min後，使反應物升溫至室溫且再攪拌30 min。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。添加10%檸檬酸水溶液以將pH調整至2。用乙酸異丙酯(2 × 200 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(4-氯-1-甲基-吡唑-3-基)丙烷-1,3-二酮(2.40 g，5.19 mmol，87%產率)。LCMS RT = 1.68 min,m/z = 461.9 [M + H]+ 。 步驟 2 ： ((5S,7S)-5-(4- 氯 -1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 環丙基 ) 甲酮及 ((5S,7R)-5-(4- 氯 -1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-7- 氟 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 )( 環丙基 ) 甲酮
在室溫下將硼氫化鈉(3.10 g, 78 mmol)添加至1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(4-氯-1-甲基-吡唑-3-基)丙烷-1,3-二酮(2.4 g, 5.2 mmol)於乙醇(100 mL)中之溶液。30 min後，用飽和氯化銨水溶液使反應物淬滅。在減壓下去除揮發物。將溶液溶解於乙酸異丙酯中且用水稀釋。用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。將硫酸(10 mL)添加至粗製殘餘物，且將反應物在100℃下加熱2 h。冷卻至室溫後，用水稀釋該反應物。添加氫氧化鈉(於水中3 M)，直至水層變為鹼性為止。用乙酸異丙酯(3 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。
在室溫下將二乙胺基三氟化硫(1.5 mL, 10 mmol)添加至粗製殘餘物於二氯甲烷(26 mL)中之溶液。20 min後，添加碳酸氫鈉(2.0 g)。用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。添加鹽水，且用乙酸異丙酯(4 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物(0.40 g, 1.25 mmol)不經進一步純化即呈遞至下一反應。在0℃下將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，1.2 mL, 2.50 mmol)添加至粗製殘餘物及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(0.498 g, 3.74 mmol)於THF (12.5 mL)中之溶液。5 min後，使反應物升溫至室溫且再攪拌20 min。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。用乙酸異丙酯(4 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之((5S,7S)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮(8.4 mg, 0.027 mmol)及((5S,7R)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮(38.8 mg, 0.125 mmol)。
((5S,7S)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.03 (s, 1H), 6.23 (ddd,J = 56.8, 7.8, 3.3 Hz, 1H), 5.70 (ddd,J = 8.4, 6.5, 5.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.72 (ddt,J = 16.3, 14.6, 8.1 Hz, 1H), 3.02 - 2.82 (m, 2H), 1.14 - 0.99 (m, 4H)。LCMS RT = 3.86 min,m/z = 310.0 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Chiralpak IB-N 5 µm, (150 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /於甲醇中之0.1%氫氧化銨(B)，等度溶析程式：20% B
流速：70 mL/min，管柱溫度：40℃，波長：225 nm
((5S,7R)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-7-氟-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)(環丙基)甲酮。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.03 (s, 1H), 6.58 - 6.22 (m, 1H), 6.04 (ddd,J = 7.4, 6.1, 3.1 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.46 - 3.21 (m, 2H), 2.97 (tt,J = 7.6, 4.8 Hz, 1H), 1.14 - 1.00 (m, 4H)。LCMS RT = 4.01 min,m/z = 310.0 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Chiralpak IB-N 5 µm, (150 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /於甲醇中之0.1%氫氧化銨(B)，等度溶析程式：20% B
流速：70 mL/min，管柱溫度：40℃，波長：225 nm。方法 121 實例156環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(3- 甲氧基苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 1-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H-1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3-(3- 甲氧基苯基 ) 丙烷 -1,3- 二酮
在0℃下將雙(三甲基矽基)胺基鋰(於THF中1.0 M，14 mL, 14 mmol)添加至5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-甲酸甲基酯(3.00 g, 8.9 mmol)及1-(3-甲氧基苯基)乙酮(2.0 mL, 14 mmol)於THF (59 mL)中之溶液。5 min後，使反應物升溫至室溫且再攪拌30 min。添加水且用乙酸異丙酯稀釋反應物。添加10%檸檬酸水溶液以將pH調整至2。用乙酸異丙酯(2 × 200 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(3-甲氧基苯基)丙烷-1,3-二酮(4.10 g，9.02 mmol，100%產率，產物受1-(3-甲氧基苯基)乙烯酮污染)。LCMS RT = 1.80 min,m/z = 453.9 [M + H]+ 。 步驟 2 ： 2- 溴 -7- 氟 -5-(3- 甲氧基苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在室溫下將硼氫化鈉(5.30 g, 140 mmol)添加至1-[5-溴-1-(2-三甲基矽基乙氧基甲基)-1,2,4-三唑-3-基]-3-(3-甲氧基苯基)丙烷-1,3-二酮(4.1 g, 9.0 mmol)於乙醇(180 mL)中之溶液。30 min後，添加飽和氯化銨水溶液。在減壓下去除揮發物。將粗製殘餘物溶解於乙酸異丙酯中且用水稀釋。用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 1.40 min,m/z = 357.9 [M + H]+ 。將硫酸(10 mL)添加至粗製殘餘物之溶液，且將反應物在100℃下加熱2 h。冷卻至室溫後，用水稀釋反應物。添加氫氧化鈉(於水中3 M)，直至水層變為鹼性為止。用乙酸異丙酯(3 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且粗製殘餘物不經進一步純化即呈遞至下一步驟。LCMS RT = 1.02 min,m/z = 309.8 [M + H]+ 。在室溫下將二乙胺基三氟化硫(2.50 mL, 17.9 mmol)添加至粗製殘餘物於二氯甲烷(89 mL)中之溶液。20 min後，添加碳酸氫鈉(5.0 g)。用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。添加鹽水，且用乙酸異丙酯(4 × 100 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到2-溴-7-氟-5-(3-甲氧基苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg，0.160 mmol，1.79%產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d ) δ 7.35 - 7.26 (m, 1H), 6.90 (ddd,J = 8.3, 2.5, 0.9 Hz, 1H), 6.83 (dd,J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 6.76 (t,J = 2.1 Hz, 1H), 5.97 (ddd,J = 56.0, 7.1, 1.8 Hz, 1H), 5.39 (t,J = 9.1 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.64 - 3.46 (m, 1H), 2.96 - 2.80 (m, 1H)。LCMS RT = 1.16 min,m/z = 311.8 [M + H]+ 。 步驟 3 ：環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(3- 甲氧基苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下經15 min將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，0.24 mL, 0.481 mmol)逐滴添加至(5S,7S)-2-溴-7-氟-5-(3-甲氧基苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(50 mg, 0.160 mmol)及N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(64 mg, 0.481 mmol)於THF (1.6 mL)中之溶液。之後，使反應物在此溫度下攪拌1 h。添加飽和氯化銨水溶液。用乙酸異丙酯(2 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之環丙基-[(5S,7S)-7-氟-5-(3-甲氧基苯基)-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(2.35 mg，0.0078 mmol，5%產率)。LCMS RT = 4.92 min,m/z = 302.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Cellulose-1 5 µm, (150 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /甲醇(B)，等度溶析程式：15% B，流速：70 mL/min，管柱溫度：40℃，波長：220 nm方法 122 實例157環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(3- 氟 -5-( 三氟甲基 ) 苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮 步驟 1 ： 3-(3- 溴 -1H-1,2,4- 三唑 -5- 基 )-3- 側氧基 - 丙酸甲基酯
在-20℃下將雙(三甲基矽基)胺基鋰(於THF中1.0 M，194 mL, 194 mmol)添加至3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲基酯(20.0 g, 97.1 mmol)及乙酸甲酯(15.5 mL, 194 mmol)於THF (324 mL)中之溶液。添加後，使反應物升溫至室溫且攪拌過夜。藉由添加10%檸檬酸水溶液將反應物之反應pH調整至pH 1。用乙酸異丙酯(3 × 200 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到3-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-側氧基-丙酸甲基酯(15.4 g，62.1 mmol，64.0%產率)。LCMS RT = 0.91 min,m/z = 247.7 [M + H]+ 。 步驟 2 ： 2- 溴 -5-(3- 氟 -5-( 三氟甲基 ) 苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -7- 醇
將乙酸六氫吡啶鎓(0.250 g, 1.6 mmol)添加至3-(3-溴-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3-側氧基-丙酸甲基酯(2.00 g, 8.1 mmol)及3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醛(1.2 mL 8.1 mmol)於苯(8.1 mL)中之溶液。反應裝配有迪安-斯塔克(Dean-Stark)分水器及回流冷凝器，且在回流下加熱3 h。冷卻至室溫後，用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。用乙酸異丙酯(3 × 50 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到2-溴-5-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]-7-羥基-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-6-甲酸甲基酯(0.60 g，1.4 mmol，18%產率)，其立即用於下一反應中。LCMS RT = 1.28 min,m/z = 421.8 [M + H]+ 。
將氯化鈉(0.830 g, 14 mmol)添加至粗製殘餘物於二甲基亞碸(4.7 mL)及水(0.47 mL)中之溶液。接著將反應物在120℃下加熱15 min，此時將反應物置於室溫水浴中且添加硼氫化鈉(0.270 g, 7.1 mmol)。10 min後，添加飽和氯化銨水溶液且用水及乙酸異丙酯稀釋反應物。用乙酸異丙酯(3 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到2-溴-5-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(0.320 g，0.874 mmol，61%產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d )非鏡像異構物之3:1混合物 δ 7.45 (s, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 2H), 5.46 - 5.35 (m, 2H), 3.63 - 3.49 (m, 0.75H), 3.18 (ddd,J = 14.3, 7.5, 2.5 Hz, 0.25 H), 2.90 (ddd,J = 14.2, 7.1, 6.1 Hz, 0.25H), 2.66 (ddd,J = 14.5, 3.9, 3.0 Hz, 0.75H)。LCMS RT = 1.19 min,m/z = 365.8 [M + H]+ 。 步驟 3 ： 2- 溴 -7- 氟 -5-(3- 氟 -5-( 三氟甲基 ) 苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑
在40℃下將二乙胺基三氟化硫(0.230 mL, 1.75 mmol)添加至2-溴-5-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-7-醇(0.320 g, 0.874 mmol)於二氯甲烷(17.5 mL)中之溶液。10 min後，添加飽和碳酸氫鈉水溶液。用水及二氯甲烷稀釋反應物。用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由急速管柱層析(二氧化矽，0%至100%乙酸異丙酯-庚烷)純化粗製殘餘物，得到2-溴-7-氟-5-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.250 g，0.679 mmol，78%產率)。1 H NMR (400 MHz，氯仿-d )非鏡像異構物之3:1混合物 δ 7.42 - 7.33 (m, 1H), 7.27 (d,J = 12.2 Hz, 1H), 7.15 - 7.04 (m, 1H), 6.14 - 5.88 (m, 1H), 5.72 (td,J = 6.8, 3.6 Hz, 0.75H), 5.60 - 5.44 (m, 0.25H), 3.70 - 3.52 (m, 0.25H), 3.41 (dddd,J = 22.4, 15.3, 7.0, 1.3 Hz, 0.75H), 3.01 - 2.80 (m, 1H)。LCMS RT = 1.35 min,m/z = 367.7 [M + H]+ 。 步驟 4 ：環丙基 ((5S,7S)-7- 氟 -5-(3- 氟 -5-( 三氟甲基 ) 苯基 )-6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
在0℃下經15 min將異丙基氯化鎂(於THF中2.0 M，1.0 mL, 2.04 mmol)逐滴添加至N-甲氧基-N-甲基環丙烷甲醯胺(0.271 g, 2.04 mmol)及2-溴-7-氟-5-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑(0.250 g, 0.679 mmol)於THF (6.8 mL)中之溶液。1 h後，添加飽和氯化銨水溶液。用乙酸異丙酯(2 × 20 mL)萃取水層。使合併之有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮且藉由製備型SFC純化粗製殘餘物，得到任意分配之環丙基-[7-氟-5-[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]甲酮(3.47 mg，0.0097 mmol，1.4%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.76 (dt,J = 8.8, 2.1 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.47 (dt,J = 9.4, 1.9 Hz, 1H), 6.26 (ddd,J = 56.2, 7.0, 2.1 Hz, 1H), 5.89 (ddd,J = 8.9, 6.2, 3.4 Hz, 1H), 3.86 - 3.66 (dddd,J = 25.2, 15.4, 8.5, 7.1 Hz, 1H), 3.09 - 2.93 (m, 1H), 2.83 (dddd,J = 26.1, 15.2, 3.4, 2.2 Hz, 1H), 1.16 - 0.99 (m, 4H)。LCMS RT = 5.51 min,m/z = 358.1 [M + H]+ 。
製備型SFC資訊：管柱：Whelko-01 5 µm, (150 × 21.2 mm)，移動相：二氧化碳(A) /甲醇(B)，等度溶析程式：20% B，流速：70 mL/min，管柱溫度：40℃，波長：220 nm。方法 123 實例158(1-((1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丙基 )(5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ) 甲酮
(1-((1H-吡唑-1-基)甲基)環丙基)(5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基)甲酮係根據方法2及3自(1R,2R)-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷甲酸製備。藉由製備型HPLC (Gemini-NX C18 50×30 mm, 5 μm, 20-60%之於水中之0.1%甲酸/乙腈)進一步純化粗製殘餘物，得到呈白色固體之最終產物(20.2 mg, 32%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.57 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.44 - 7.30 (m, 4H), 7.26 - 7.18 (m, 2H), 6.16 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 5.60 (dd,J = 8.3, 5.8 Hz, 1H), 4.63 (q,J = 14.4 Hz, 2H), 3.22 - 2.81 (m, 2H), 2.61 - 2.28 (m, 1H), 1.70 - 1.53 (m, 2H), 1.35 - 1.13 (m, 3H)。LCMS RT = 4.31 min, m/z = 334.2 (M+H)+ 。LCMS (於水中之5%至95%乙腈+ 0.1%甲酸經10 min)，滯留時間4.31 min，ESI+實驗值[M+H] = 334.2
額外 SFC 純化及分析條件： SFC 1實例159環丙基 ((4S,6S)-4- 氟 -6- 苯基 -5,6- 二氫 -4H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -2- 基 ) 甲酮
任意分配之環丙基((4S,6S)-4-氟-6-苯基-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-基)甲酮(7.9 mg，55%產率)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.46 - 7.28 (m, 3H), 7.28 - 7.07 (m, 2H), 6.94 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.34 - 5.96 (m, 1H), 5.88 - 5.51 (m, 1H), 2.94 - 2.75 (m, 1H), 2.76 - 2.55 (m, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.04 - 0.74 (m, 4H)。LC-MS RT = 5.11 min,m/z = 271.1 (M+H)+ 。 SFC 2實例160[ 外消旋 -(5S,7S)-7- 氟 -5- 苯基 -6,7- 二氫 -5H- 吡咯并 [1,2-b][1,2,4] 三唑 -2- 基 ]-[ 外消旋 -(1S,2S)-2-( 三氟甲基 ) 環丙基 ] 甲酮
任意分配之[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(1S,2S)-2-(三氟甲基)環丙基]甲酮(4.2 mg，31%產率)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 - 7.08 (m, 5H), 6.50 - 6.06 (m, 1H), 5.93 - 5.55 (m, 1H), 3.76 - 3.25 (m, 1H), 2.58 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 1.88 - 1.15 (m, 2H)。LC-MS RT = 5.36 min,m/z = 340.1 (M+H)+ 。SFC 3 實例161
[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(1R,2R)-2-(三氟甲基)環丙基]甲酮
任意分配之[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(1R,2R)-2-(三氟甲基)環丙基]甲酮(12.2 mg，89%產率)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.50 - 7.13 (m, 5H), 6.51 - 6.05 (m, 1H), 5.93 - 5.49 (m, 1H), 3.90 - 3.54 (m, 1H), 2.84 - 2.59 (m, 1H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.64 - 1.26 (m, 2H)。LC-MS RT = 5.40 min,m/z = 340.1 (M+H)+ 。SFC 4 實例162
[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(2S)-螺[2.2]戊-2-基]甲酮。
任意分配之[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(2S)-螺[2.2]戊-2-基]甲酮(3.2 mg，39%產率)。LC-MS RT = 4.95 min,m/z = 298.1 (M+H)+ 。SFC 5 實例163
[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(2R)-螺[2.2]戊-2-基]甲酮
任意分配之[外消旋-(5S,7S)-7-氟-5-苯基-6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-基]-[外消旋-(2R)-螺[2.2]戊-2-基]甲酮(x mg，x%產率)。LC-MS RT = 4.94min,m/z = 298.1 (M+H)。
*所有管柱溫度均為40℃，唯SFC 1製備型為30℃。RIP1 激酶抑制分析 ( 生物化學分析 )
如下文所述測試本發明之化合物抑制RIP1K活性之能力。酶分析： 使用Transcreener ADP (5'-二磷酸腺苷)分析(BellBrook Labs)監測受體相互作用蛋白激酶(RIPK1)催化5'-三磷酸腺苷(ATP)水解之能力。將源自受桿狀病毒感染之昆蟲細胞表現系統之經純化人類RIP1激酶結構域(2-375) (50 nM)與測試化合物於含有30 mM MgCl2 、1 mM二硫蘇糖醇、50 μM ATP、0.002% Brij-35及0.5%二甲基亞碸(DMSO)之50 mM Hepes緩衝液(pH 7.5)中一起培育2小時。藉由添加含有額外12 mM EDTA及55 ug/mL ADP2抗體及4 nM ADP-AlexaFluorâ 633示蹤劑之1X Bell Brooks終止緩衝液B (20 mM Hepes (ph7.5)、40 mM乙二胺四乙酸及0.02% Brij-35)使反應物淬滅。結合至抗體之示蹤劑由在RIP1K反應期間所產生之ADP置換，此引起螢光偏振降低，其藉由利用FP微量板讀數儀M1000在633 nm處之雷射激發量測。將分率活性對檢品濃度作圖。使用Genedata Screener軟體(Genedata；Basel, Switzerland)，將數據擬合至緊密結合表觀抑制常數(K i app )莫里森等式(Morrison equation) [Williams, J.W.及Morrison, J. F. (1979) The kinetics of reversible tight-binding inhibition.Methods Enzymol 63 : 437-67]。使用以下等式來計算分率活性及K i app ：其中[E]T 及[I]T 分別係活性酶及檢品之總濃度。
本發明之例示性化合物以及其生理化學表徵及活體外RIP1激酶抑制活性數據提供於表1及表2中。每一表格之第一行中之「方法」係指一或多種用於製備如上文實例中所示之每一化合物之合成方法。在某些實例中，對於某些立體異構物提供對掌性管柱滯留時間(min)。除非另有指定，否則每一結構中所示之立體化學表示單一立體異構物之相對構形，且任意分配絕對構形(亦即，「R」及/或「S」)。在其中方法描述為包括立體異構物之分離之一些實施例中，提供表1或表2之化合物之單一立體異構物。表 1 表 2
本說明書中所提及之所有美國專利、美國專利申請公開案、美國專利申請案、外國專利、外國專利申請案及非專利出版物均係以全文引用的方式併入本文中。
儘管已相當詳細地對上述發明進行闡述以促進理解，但應明瞭，可在隨附申請專利範圍之範圍內實踐某些改變及修改。因此，所闡述之實施例應視為說明性而非限制性的，且不應將本發明限於本文中所給出之細節，而是可在隨附申請專利範圍之範圍及等效內容內進行修改。

Claims (30)

  1. 一種式(I)化合物，(I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R1 係選自由以下組成之群：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、4員至8員雜環基及5員至6員雜芳基；其中R1 藉由碳原子結合至毗鄰羰基，且其中R1 視情況由一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代：F、Cl、Br、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、羥基、羥基甲基、氰基、氰基甲基、氰基乙基、C(O)C1 -C6 烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)； 每一RN 獨立地選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷基；或兩個RN 可與毗鄰N一起形成4員至6員環； A環係具有以下作為僅有雜原子之5員雜芳基：(i) 兩個或三個氮原子，(ii) 一個氮原子及一個氧原子，或(iii) 一個氮原子及一個硫原子；其中該A環藉由碳原子結合至毗鄰羰基；且 B環係4員至8員環烷基，或具有1至3個選自由氮、氧及硫組成之群之雜原子之4員至8員雜環基；其中該B環根據(a)、(b)或(a)及(b)兩者經取代： (a) 1至2個選自由以下組成之群之取代基：鹵素、氘、羥基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 及氰基；其中兩個C1 -C6 烷基取代基可一起形成橋接環或螺環；且其中若該B環中之氮原子經取代，則取代基不係鹵素、氰基或氧或硫原子直接鍵結至該氮原子之C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基或C1 -C6 硫烷基； (b) 1個選自由以下組成之群之取代基：C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環或5員至6員雜芳基環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基、氰基及環丙基。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R1 係選自由以下組成之群：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、4員至6員雜環基及5員至6員雜芳基；其中R1 藉由碳原子結合至毗鄰羰基，且其中R1 視情況由一或兩個選自由以下組成之群之取代基取代：F、Cl、甲基、乙基、羥基、羥基甲基、甲氧基甲基、氰基、三氟甲基、二氟甲氧基及三氟甲氧基； 每一RN 獨立地選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷基；或兩個RN 可與毗鄰N一起形成4員至6員環； A環係具有以下作為僅有雜原子之5員雜芳基：(i) 兩個或三個氮原子，(ii) 一個氮原子及一個氧原子，或(iii) 一個氮原子及一個硫原子；其中該A環藉由碳原子結合至毗鄰羰基；且 B環係4員至8員環烷基，或具有1至3個選自由氮、氧及硫組成之群之雜原子之4員至8員雜環基；其中該B環根據(a)、(b)或(a)及(b)兩者經取代： (a) 1至2個選自由以下組成之群之取代基：鹵素、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 及氰基；其中兩個C1 -C6 烷基取代基可一起形成橋接環或螺環；且其中若該B環中之氮原子經取代，則取代基不係鹵素、氰基或氧或硫原子直接鍵結至該氮原子之C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基或C1 -C6 硫烷基； (b) 1個選自由以下組成之群之取代基：C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、C1 -C6 烷基-N(RN )2 、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基及氰基。
  3. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該A環及該B環一起係選自由以下組成之群：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、及；其中 R2 係選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基及氰基；且 R3a 及R3b 係如下選擇： (i) R3a 及R3b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基； (ii) R3a 及R3b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN及甲基，條件係R3a 及R3b 不能同時係OH或CN；或 (iii) R3a 及R3b 一起形成環丙基。
  4. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該A環及該B環一起係選自由以下組成之群：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、； 其中 R2 係選自由以下組成之群：H、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷氧基、C1 -C6 硫烷基、苯基、苄基、CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 CH2 -(C3 -C6 環烷基)、CH2 -(4員至6員雜環基)、CH2 CH2 -(4員至6員雜環基)、5員至6員雜芳基及CH2 -(5員至6員雜芳基)；其中當存在苯環時，其可由1至3個選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基、C1 -C4 鹵烷氧基及氰基；且 R4a 及R4b 係如下選擇： (i) R4a 及R4b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基；或 (ii) R4a 及R4b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl及甲基。
  5. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R2 係選自由以下組成之群：苯基、單氟苯基、二氟苯基、單氯苯基及二氯苯基。
  6. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該A環及該B環一起係選自由以下組成之群：、、、、、、、及； 其中 R3a 及R3b 係如下選擇： (i) R3a 及R3b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基； (ii) R3a 及R3b 各自選自由以下組成之群：D、F、Cl、OH、CN及甲基，條件係R3a 及R3b 不能同時係OH或CN；或 (iii) R3a 及R3b 一起形成環丙基； 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷氧基；且 m係1、2或3。
  7. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該A環及該B環一起係：； 其中 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C6 鹵烷基、C1 -C6 烷氧基及C1 -C6 鹵烷氧基；且 m係1、2或3。
  8. 如請求項4之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R2 係選自由以下組成之群：苯基、單氟苯基、二氟苯基、單氯苯基及二氯苯基。
  9. 如請求項4之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該A環及該B環一起係選自由以下組成之群：、及； 其中 R4a 及R4b 係如下選擇： (i) R4a 及R4b 中之一者係H，且另一者係選自由以下組成之群：F、Cl、OH、CN、C1 -C4 烷基、C1 -C4 鹵烷基、環丙基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基；或 (ii) R4a 及R4b 各自選自由以下組成之群：F、Cl及甲基； 每一R5 係選自由以下組成之群：H、F、Cl、C1 -C6 烷基、C1 -C4 鹵烷基、C1 -C4 烷氧基及C1 -C4 鹵烷氧基；且 m係1、2或3。
  10. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自表1或表2。
  11. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中所選擇之該化合物係RIP1激酶抑制活性Ki 小於100 nM之化合物。
  12. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及治療惰性載劑。
  13. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用作治療活性物質。
  14. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症：帕金森氏病(Parkinson's Disease)、路易氏體失智症(Lewy body dementia)、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群、tau蛋白病變(taupathy)、阿茲海默氏病(Alzheimer's Disease)、額顳失智症、肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病(Huntington's disease)、局部缺血、中風、顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
  15. 一種如請求項1至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項12之醫藥組合物之用途，其用於製備用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症之藥劑：帕金森氏病、路易氏體失智症、多系統萎縮症、帕金森疊加症候群、tau蛋白病變、阿茲海默氏病、額顳失智症、肌萎縮性脊髓側索硬化症、脊髓性肌肉萎縮症、原發性脊髓側索硬化症、亨庭頓氏病、局部缺血、中風、顱內出血、大腦出血、肌肉營養不良症、漸進性肌萎縮、假性延髓麻痹、漸進性延髓麻痹、脊髓性肌肉萎縮症、遺傳性肌肉萎縮症、周邊神經病變、漸進性核上性麻痺、皮質基底節變性及脫髓鞘疾病。
  16. 一種如請求項1至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項12之醫藥組合物之用途，其用於製備用於治療選自由以下組成之群之疾病或病症之藥劑：發炎性腸病、克隆氏病(Crohn’s disease)、潰瘍性結腸炎、青光眼、牛皮癬、牛皮癬性關節炎、類風濕性關節炎、脊椎關節炎、幼年特發性關節炎及骨關節炎。
  17. 如請求項15之用途，其中該疾病或病症係阿茲海默氏病。
  18. 如請求項15之用途，其中該疾病或病症係多發性硬化症。
  19. 如請求項15之用途，其中該疾病或病症係帕金森氏病。
  20. 如請求項15之用途，其中該疾病或病症係肌萎縮性脊髓側索硬化症。
  21. 如請求項15之用途，其中該疾病或病症係亨庭頓氏病。
  22. 如請求項15之用途，其中該疾病或病症係脊髓性肌肉萎縮症。
  23. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係發炎性腸病。
  24. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係克隆氏病。
  25. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係潰瘍性結腸炎。
  26. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係牛皮癬。
  27. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係牛皮癬性關節炎。
  28. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係類風濕性關節炎。
  29. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係脊椎關節炎。
  30. 如請求項16之用途，其中該疾病或病症係幼年特發性關節炎。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI878888B (zh) * 2022-05-19 2025-04-01 美商默沙東有限責任公司 Ripk1抑制劑及使用方法

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11071721B2 (en) 2016-12-02 2021-07-27 Genentech, Inc. Bicyclic amide compounds and methods of use thereof
US11098058B2 (en) 2017-07-14 2021-08-24 Genentech, Inc. Bicyclic ketone compounds and methods of use thereof
SG11202002877RA (en) 2017-10-31 2020-04-29 Hoffmann La Roche Bicyclic sulfones and sulfoxides and methods of use thereof
CN113302193A (zh) 2019-01-11 2021-08-24 豪夫迈·罗氏有限公司 双环吡咯并三唑酮化合物及其使用方法
WO2021198981A1 (en) 2020-04-01 2021-10-07 Janssen Biopharma, Inc. Antiviral compounds and uses thereof
WO2021221444A1 (ko) 2020-04-27 2021-11-04 주식회사 오토텍바이오 Ubr 박스 도메인 리간드로의 화합물
EP4313986A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 Genentech, Inc. Processes for making bicyclic ketone compounds
WO2023039795A1 (zh) * 2021-09-16 2023-03-23 维泰瑞隆（北京）生物科技有限公司 Rip1激酶抑制剂及其用途
KR20260027251A (ko) * 2023-06-19 2026-02-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 카이랄 피롤로 트리아졸 알코올의 제조 공정

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1620508A1 (de) 1965-07-23 1969-09-18 Thomae Gmbh Dr K Verfahren zur Herstellung neuer 4,5,6,7-Tetrahydrothiazolo-[5,4-c]-pyridine
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US3948903A (en) 1972-12-15 1976-04-06 Parke, Davis & Company Substituted N-(1,2-dihydro-2-oxonicotinyl)-cephalexins and -cephaloglycins
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
EP0102324A3 (de) 1982-07-29 1984-11-07 Ciba-Geigy Ag Lipide und Tenside in wässriger Phase
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
GB8610530D0 (en) 1986-04-30 1986-06-04 Fbc Ltd Herbicides
US5004697A (en) 1987-08-17 1991-04-02 Univ. Of Ca Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier
US5112596A (en) 1990-04-23 1992-05-12 Alkermes, Inc. Method for increasing blood-brain barrier permeability by administering a bradykinin agonist of blood-brain barrier permeability
US5268164A (en) 1990-04-23 1993-12-07 Alkermes, Inc. Increasing blood-brain barrier permeability with permeabilizer peptides
ATE191853T1 (de) 1992-07-27 2000-05-15 Us Health Zielgerichte liposome zur blut-hirne schranke
US6080772A (en) 1995-06-07 2000-06-27 Sugen, Inc. Thiazole compounds and methods of modulating signal transduction
EP1007042A4 (en) 1997-06-13 2001-07-04 Sugen Inc NEW HETEROCYCLIC COMPOUNDS FOR MODULATING THE PROTEIN-TYROSIN-ENZYME-RELATED CELLULAR SIGNAL TRANSDUCTION
WO2001058869A2 (en) * 2000-02-11 2001-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Cannabinoid receptor modulators, their processes of preparation, and use of cannabinoid receptor modulators in treating respiratory and non-respiratory diseases
US6514221B2 (en) 2000-07-27 2003-02-04 Brigham And Women's Hospital, Inc. Blood-brain barrier opening
US20020065259A1 (en) 2000-08-30 2002-05-30 Schatzberg Alan F. Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
US7034036B2 (en) 2000-10-30 2006-04-25 Pain Therapeutics, Inc. Inhibitors of ABC drug transporters at the blood-brain barrier
DE10121982B4 (de) 2001-05-05 2008-01-24 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Nanopartikel aus Protein mit gekoppeltem Apolipoprotein E zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke und Verfahren zu ihrer Herstellung
JP4202250B2 (ja) 2001-07-25 2008-12-24 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド 血液脳関門輸送を調節するための組成物および方法
US20030162695A1 (en) 2002-02-27 2003-08-28 Schatzberg Alan F. Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
KR101050700B1 (ko) 2002-08-26 2011-07-20 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 칼슘 수용체 조절 화합물 및 이의 용도
CN101284136A (zh) 2002-12-03 2008-10-15 布朗歇特洛克菲勒神经科学研究所 传输物质穿过血脑屏障的人工低密度脂蛋白载体
ATE410161T1 (de) 2003-05-02 2008-10-15 Elan Pharm Inc 4-bromo-5-(2-chloro-benzoylamino)-1h-pyrazol-3- carbonsäureamid-derivate und verwandte verbindungen als bradykinin b1 rezeptor antagonisten zur behandlung von entzündlichen erkrankungen
US20050089473A1 (en) 2003-09-10 2005-04-28 Cedars-Sinai Medical Center Potassium channel mediated delivery of agents through the blood-brain barrier
EP1877399A1 (en) 2005-04-26 2008-01-16 Pfizer Limited Triazole derivatives as vasopressin antagonists
EP2083009A1 (de) 2008-01-22 2009-07-29 Grünenthal GmbH Substituierte Tethrahydroimidazopyridin-Verbindungen und deren Verwendung in Arzneimitteln
US8299077B2 (en) 2009-03-02 2012-10-30 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
CN101824036A (zh) 2009-03-05 2010-09-08 上海恒瑞医药有限公司 四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪衍生物的盐,其制备方法及其在医药上的应用
TWI421252B (zh) 2009-07-09 2014-01-01 Irm Llc 用於治療寄生蟲疾病之化合物及組合物
RU2628616C2 (ru) 2011-11-03 2017-08-21 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Бициклические соединения пиперазина
EP2852584B1 (en) 2012-05-22 2018-02-28 F. Hoffmann-La Roche AG Substituted dipyridylamines and uses thereof
CA2896187A1 (en) 2013-01-18 2014-07-24 F. Hoffmann-La Roche Ag 3-substituted pyrazoles and use as dlk inhibitors
TWI648274B (zh) 2013-02-15 2019-01-21 英商葛蘭素史克智慧財產發展有限公司 作為激酶抑制劑之雜環醯胺類 （二）
PH12019502378A1 (en) 2013-05-01 2022-05-11 Hoffmann La Roche Biheteroaryl compounds and uses thereof
CA2907912A1 (en) 2013-05-01 2014-11-06 F. Hoffmann-La Roche Ag C-linked heterocycloalkyl substituted pyrimidines and their uses
WO2015006280A1 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Fused piperidine amides as modulators of ion channels
MX2016008110A (es) 2013-12-20 2016-08-19 Hoffmann La Roche Derivados de pirazol como inhibidores de la cinasa de cremallera de leucina dual (dlk) y usos de los mismos.
WO2015144609A1 (en) 2014-03-26 2015-10-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Condensed [1,4]diazepine compounds as autotaxin (atx) and lysophosphatidic acid (lpa) production inhibitors
RU2017109122A (ru) 2014-08-21 2018-09-21 Глэксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед Способы лечения с использованием гетероциклических амидов в качестве ингибиторов киназы
WO2016128908A1 (en) * 2015-02-12 2016-08-18 Advinus Therapeutics Limited Bicyclic compounds, compositions and medicinal applications thereof
WO2016142310A1 (en) 2015-03-09 2016-09-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Tricyclic dlk inhibitors and uses thereof
TWI763630B (zh) 2015-07-02 2022-05-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 雙環內醯胺及其使用方法
CN108602809B (zh) 2015-12-04 2022-09-30 戴纳立制药公司 异噁唑烷衍生的受体相互作用蛋白激酶1(ripk 1)的抑制剂
WO2017109724A1 (en) 2015-12-21 2017-06-29 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as kinase inhibitors
MA44007A (fr) 2016-02-05 2018-12-19 Denali Therapeutics Inc Inhibiteurs du récepteur interagissant avec protéine kinase 1
US11071721B2 (en) 2016-12-02 2021-07-27 Genentech, Inc. Bicyclic amide compounds and methods of use thereof
US11072607B2 (en) 2016-12-16 2021-07-27 Genentech, Inc. Inhibitors of RIP1 kinase and methods of use thereof
CN110169087B (zh) 2017-01-05 2021-04-20 微软技术许可有限责任公司 重定向音频输出
US11098058B2 (en) 2017-07-14 2021-08-24 Genentech, Inc. Bicyclic ketone compounds and methods of use thereof
PE20211246A1 (es) * 2017-10-11 2021-07-13 Hoffmann La Roche Compuestos biciclicos para su uso como inhibidores de rip1 quinasa
SG11202002877RA (en) 2017-10-31 2020-04-29 Hoffmann La Roche Bicyclic sulfones and sulfoxides and methods of use thereof

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI878888B (zh) * 2022-05-19 2025-04-01 美商默沙東有限責任公司 Ripk1抑制劑及使用方法

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