TW583190B

TW583190B - Purified chitins and production process thereof

Info

Publication number: TW583190B
Application number: TW091105522A
Authority: TW
Inventors: Takanori Sannan; Shinya Tsuchida; Satoru Yoshinaga; Kazushige Ieda; Mitsutaka Seki
Original assignee: Dainichiseika Color Chem
Priority date: 2001-04-04
Filing date: 2002-03-22
Publication date: 2004-04-11
Also published as: CN1304429C; AU783299B2; KR20020079448A; IS6327A; CN1379046A; US6989440B2; CA2378910A1; NO20021569L; NO20021569D0; US20030045692A1; EP1247819A1; AU2925302A

Description

583190 五、發明說明（1) 透成形蜀混生發不較士%Γ 日水於解溶 J 種域一户7 IV 術有技係屬明所發明本發之地此二 J有液，溶中水書性明酸說卩本括於包， J者液再溶；水法 Γ 方該造 C製液其溶及水類之殼古冋甲度製明精成此生因解’ 分酸及或 3水體於導溶誘不 (並物殼修於學由化但其’ 、 J 奢員聚殼殼甲、厂殼為甲稱等包方物液溶1 水術類技殼知曱習括包不並司士-口 J 液溶水殼甲外今類現殼 ’ 甲物於子在分存高指然係天殼之曱中等霉曱及產菇生香業、工甲於由η 用的活賊仍烏雖金殼利曾係不份即部料一原有性也業，工殼的的謂蝦所或此蟹因螃，自甲由冃〇分的料部賊原大烏之料或外原殼以其的述但蛄上，蝦用上用使殼曱之到得所料原些這由殼到得化醯乙脫行進質物發出為作者兩再單蝦 , 其或糖、蟹聚糖螃體導讀一ell 種各其造製寡其

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第6頁 583190 五、發明說明（2) f 加熱後，分散之蛋白質以水洗去除，將含有甲殼之不溶物浸潰在稀釋鹽酸水溶液中，將不溶物中之碳酸鉀轉變為水溶性之氣化鉀以水洗去除，得到不溶物之甲殼；此時，以稀釋鹼溶液進行之處理與以稀釋鹽酸進行之處理，亦有順序相反之情況。將如上述所得之甲殼乾燥後，或者不經乾燥，浸潰於反應後濃度為4 0重量％左右之漠氫氧化鈉水溶液中，藉由加熱進行脫乙醯化即可得到殼聚糖；將以此得到之殼聚糖溶解於稀釋醋酸水溶液，調查該溶液之混濁度，依原料種類或產地等不同，混濁度亦會有極大的差異，亦即工業性 ® 殼聚糖在品質上欠缺均一性，是為工業製品之一大問題；依原料不同，所得殼聚糖水溶液若過於混濁，該種殼聚糖則無法做為製品使用，而予以廢棄。再將得到之甲殼或殼聚糖作為出發物質，以習知方法在水中進行加酸水解或氧化分解等化學分解，藉由利用曱殼質酶或殼聚糖酶等進行酵素分解，得到低分子量甲殼、低分子量殼聚糖、葡糖胺鹽酸鹽、葡糖胺硫酸鹽、乙醯葡糖胺等。又，甲殼或殼聚糖與環氧氣丙烷、環氧乙烷、環氧丁 ¥ 烷、縮水甘油等之反應中，所得到之羥烷基誘導體；與氣乙酸反應所得到之羧曱基誘導體；與琥珀酸酐反應所得到之羧醯基誘導體；與縮水甘油三甲基銨氣離子 (glycidyltrimethylammonium chi 〇 ride)反應所 4 寻至1J 之 4 級銨誘導體；與二硫化碳素反應所得到之黃原酸鹽

第7頁 583190 五、發明說明（3) (X a n t h a t e )誘導體等，皆是由習知方法所得到；再者，殼聚糖與醋酸 '乳酸、吡咯烷酮羧酸等有機酸反應，得到殼聚糖之有機酸鹽；又，利用甲殼或殼聚糖之黃原酸鹽誘導體的加水分解，可使曱殼或殼聚糖再生，又，若將殼聚糖之有機酸鹽中和亦可再生殼聚糖。此時，當形成前述之水溶液時，由易生混濁之殼聚糖或其原料之甲殼，製造之水溶性誘導體或分解物水溶液，較容易出現混濁，這些混濁之曱殼類水溶液或其商品價值則顯著低下，而失去了其商品價值。有關上述問題之本質上的原因及其解決方法，至今尚未有報告指出，因此現狀仍是由甲殼類製造業者，將其所認為不易發生混濁之甲殼類原料，以其經驗經嚴選後來對應混濁的問題；最近，甲殼類之利用漸趨蓬勃，特別是在精細化學藥品中之利用增加，因此對於上述甲殼類水溶液混濁問題的解決更是迫切需要。【發明欲解決之問題】因此，本發明之目的即在提供一種闡明上述甲殼類水溶液之混濁原因，當溶解於水或酸性水時，可形成混濁少透明度高之甲殼類水溶液之精製甲殼類及其製造方法。本案發明者為解決上述問題，試著將由習知方法所製造之殼聚糖以異丙醇洗淨，接著把洗淨前之殼聚糖與洗淨後之殼聚糖，各別溶解於稀釋醋酸溶液中，比較兩液之混濁程度，發現洗淨後殼聚糖水溶液之混濁明顯改善，再將殼聚糖中以異丙醇進行索克斯累特回流提取，將於異丙醇

第8頁 583190 五、發明說明（4) 中抽出之雜質，以紅外線分光法及氣相色譜法、其他方法進行分析後，得知抽出之雜質係以棕櫚酸及油酸為主成分，另外尚含有包含少量硬脂酸及肉豆蔻酸之脂肪酸及/ 或其鹽。甲殼工業性原料之曱殼類外殼，如前所述在其本質中含有定量以上之脂肪或脂肪酸，若利用這些原料以習知方法來製造甲殼類，則成品之曱殼類中會殘留一定量以上之脂肪酸及/或其鹽，而該殘留之脂肪酸及/或其鹽，即是殼聚糖在溶解為水溶液時’造成水溶液混濁之主要原因。亦即，從原料之甲殼類外殼，一直到得到殼聚糖為止之現行工業生產過程，皆僅以氫氧化鈉水溶液、鹽酸及水來處理，認為利用該方法可分解存在於原料中之脂肪部分，並除去水溶性物質，且不需要另外之特別操作步驟。但，經本案發明者詳細檢討後之結果，存在於甲殼原料中或曱殼製造過程之脂肪分解物中，尚存在有不溶水性物質之脂肪酸及/或其鹽，這些之肪酸及/或其鹽即使在曱殼原料除去碳酸鈣或蛋白質後，在同為不溶水物質之甲殼或殼聚糖中，仍有少量殘留。又，即使在甲殼類之製造過程中，不去除存在於甲殼原料、甲殼及殼聚糖中之脂肪酸及/或其鹽，仍會殘留於最終製品中；由該脂肪酸及/或其鹽之分析來看，可得知其主體乃脂肪酸之鈣鹽或脂肪酸之鎂鹽等不溶水性鹽者，進而發現藉由將曱殼類以有機溶媒或含水有機溶媒洗淨，將造成混濁原因之脂肪酸及/或其鹽從甲殼類中除去之方

第9頁 583190 五、發明說明（5) 法。另外，也有由於曱殼類之製造設備或製品用途等理由，而無法使用上述有機溶劑的情況，因此，於以下檢討出不依靠有機溶劑之方法，結果可知，該脂肪酸及/或其鹽若在甲殼類之複數個製造過程之至少一過程中，使其在含有錄或驗金屬（例如鈉或钟）之驗狀態中，使用脫妈水及/或鈣感壓水洗淨甲殼類，即可達到目的；亦即發現，包含於甲殼類中之脂肪酸及/或其鹽，在變換為親水性之敍或驗金屬鹽，並以脫妈水及/或妈感壓水加以洗淨後，即可輕易地去除。【解決問題之方法】上述目的可利用以下之本發明達成，亦即，本發明係在提供一種脂肪酸及其鹽之總含量，若以脂肪酸換算為0. 2重量％以下之精製甲殼類；該精製甲殼類係在溶解於水時，不會產生混濁，且品質極高者。甲殼類之原料以由蝦、蟹、蝦蛄、磷蝦及烏賊中選出之至少一種為理想，前述之脂肪酸，係從例如棕櫚酸、油酸、硬脂酸、肉豆蔻酸及其鹽中選出至少一種；前述脂肪酸之鹽，係從例如脂肪酸之鈣鹽及脂肪酸之鎂鹽中選出至少一種者；前述曱殼類，係從例如甲殼、殼聚糖、其化學修飾物、甲殼之分解物及殼聚糖之分解物中選出至少一種者。前述化學修飾物，係從例如醯基化合物、甲笨磺醯基化合物、烷基化合物、羧基化合物、硫酸化合物、磷酸化

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第10頁 583190 五、發明說明（6) ' 合物、硝基化合物、氨基甲醯化合物、硫代氨基甲醯化合物、金屬離子配位化合物、席夫驗（S c h i f f b a s e )化合物、4級銨化合物、交聯化合物、黃原酸鹽化合物、鹽形成化合物及之黃原酸鹽再生化合物中，選出至少一種。前述由甲殼之分解物及殼聚糖之分解物中選出至少一種者，係指由例如葡糖胺、葡糖胺鹽酸鹽、葡糖胺硫酸鹽、乙醯葡糖胺及其低聚糖中選出之一種。前述精製甲殼類，以分子内含有羥烷基、羧烷基、羧酸基、經基、硫酸基、鱗酸基及4級敍基中選出之一種 k 者為宜。又，前述甲殼類為殼聚糖’將該殼聚糖於0. 5重ϊ % 之醋酸水溶液中以0. 5重量％之濃度，溶解成殼聚糖水溶液，其在J I S K 0 1 0 2 ( 1 9 9 8)工廠排水試驗方法之「9 .透視度」標準中，以透視度在2 0以上為理想。又，本發明係提供一種特徵在於，將曱殼類以由有機溶媒及含水有機溶媒中選出至少一種加以洗淨，而脂肪酸及其鹽之總含量若換算為脂肪酸，係在0. 2重量％以下之精製甲殼類之製造方法；上述有機溶媒以從乙醇及異丙醇中選出至少一種為宜；該方法操作簡單，適用範圍廣，且曱殼類中之脂肪酸及/或其鹽除去能力亦高之優良方法。在分析以本發明方法所製得知甲殼類時，甲殼類中的脂肪酸及其鹽之總含量，若以脂肪酸換算下係在0. 2重量％以下，該曱殼類之水溶液若做為工業製品，可成為透明度高且商品價值極高之製品，又，發現造成甲殼類水溶液混濁

第11頁 583190 五、發明說明（7) 之主要原因為脂肪酸及/或其鹽，特別是脂肪酸之鈣鹽或脂肪酸之鎂鹽等不溶水性鹽；相對於此，由習知技術所得，未經嚴選之原料所得到的曱殼類，大約含有0. 5重量 %以上之脂肪酸及其鹽，然而即使是由經過嚴選之原料所得到之甲殼類，以脂肪酸換算大約仍含有超過0. 2重量％之脂肪酸及/或其鹽，因此尚不論原料，先行技術在形成甲殼類水溶液時仍無法避免混濁的問題。又，本發明係在提供一種精製曱殼類製造方法，其於甲殼類製造過程之至少一個過程中，將脫鈣水及水中之鈣以鈣感壓劑加以感壓（以下單稱「鈣感壓水」），選出至少一種來使用，將包含於甲殼類之脂肪酸及其鹽的總含量，以脂肪酸換算係在0. 2重量％ ;前述鈣感壓劑以乙撐二胺四醋酸為理想。又，本發明係在提供一種精製甲殼類之製造方法，特徵在於係由將曱殼類浸潰於含氨或鹼金屬之鹼性水之過程、及將曱殼類分離（例如過濾或傾濾等）洗淨之工程所構成；其在洗淨過程中至少有一次，需在含有氨或鹼金屬之鹼性狀態下，以由脫妈水及妈感壓水中選出至少一種進行洗淨，將脂肪酸及其鹽之總含量以脂肪酸換算，為〇 · 2 重量％以下；前述脫妈水以由蒸德水、去鹽水及離子交換水中選出至少一種為宜。又，本發明係在提供一種精製甲殼類之製造方法，特徵為係由將曱殼浸潰於超濃鹼性水溶液中之去乙醯工程、及將生成之殼聚糖分離洗淨之工程所構成；其在洗淨過程

第12頁 583190 五、發明說明（8) 中至少有一次，需在含有氨或驗金屬之驗性狀態下，以由脫鈣水及鈣感壓水中選出至少一種進行洗淨，將脂肪酸及其鹽之總含量以脂肪酸換算，為0. 2重量％以下。使用脫妈水之方法，若與使用有機溶劑或妈感壓水之方法相比較，使用有機溶劑或鈣感壓水者所得到之甲殼類中，完全不必擔心有殘留的問題，可說是最有力的，又，使用鈣感壓水者若與使用脫鈣水者相比較，則不需要設置製造脫鈣水用之去鹽裝置或離子交換水製造裝置等特別設備，具有可利用習知甲殼類製造設備之優點。【發明之實施型態】以下舉出理想之實施形態對本發明作一詳細說明。首先說明有關使用有機溶媒（該有機溶媒若含水亦可），將脂肪酸及/或其鹽自曱殼類中抽出去除之方法，只要利用有機溶媒將甲殼類洗淨即可輕易完成本發明之目的。以有機溶媒洗淨之步驟，可適用於習知任一種曱殼之製造工程中，而洗淨方法等並無特別限制，例如，可利用索克斯累特提取裝置於有機溶劑中將脂肪酸及/或其鹽自甲殼類去，再者更簡單的方法係將甲殼類浸潰於有機溶媒中，待脂肪酸及/或其鹽溶出於有機溶劑後，僅將曱殼類過濾亦可充分去除脂肪酸及/或其鹽，以該有機溶劑洗淨，不管是脂肪酸及/或其鹽皆可溶解於有機溶劑中，進而簡單地從甲殼類抽出去除。上述方法中所使用之有機溶劑，例如：甲醇、乙醇、丙醇等醇類；丙酮、甲基乙基酮等酮類；乙酸乙酯、醋酸

第13頁 583190 五、發明說明（9) 甲基等酯類；己烷、庚二氣f烷、三氣乙烯等四氫呋喃等酯類；乙二酯等乙二醇二鍵類；二類；二甲基醯胺、二甲 (aproton 1c polar s〇選擇有機溶劑，只溶劑即可，從處理性或宜，特別是含有30重量在安全性及經濟性皆較水、工業用水或地下水在不使用有機溶劑造過程之至少一次的工之鹼狀態下，使用脫鈣淨一次；其中之脫妈水水，就成本來看以離子將甲殼類在氨或藉由含曱殼類中所含之脂肪酸驗金屬鹽，以脫妈水及中輕易去除。曱殼類製造過程中在習知方法中由曱殼原到的濕潤曱殼類，在氨再以脫妈水來洗淨即可烷、笨、甲笨等羥類；二氣乙烷、鹵化羥類；二乙烯乙酯、二噁烷、醇一曱基醚、乙二醇一曱基醚醋酸甘醇一曱基醚等雙乙二醇二醚類替乙醯胺等質子惰性極性溶劑 1 v e n t s )等。要是不會溶解洗淨對象之甲殼類的經濟性來考量的話，以醇類較適 %以上之乙醇或2 -丙醇之水溶液，理想，此時之水可使用一般自來〇之本發明方法中，於上述甲殼類製程中，將曱殼類在含有氨或鹼金屬水及/或鈣感壓水將曱殼類至少洗例如有蒸餾水、離子交換水及脫鹽交換水及脫鹽水較適宜；像這樣地鹼金屬鹼物質生成之鹼性狀態下，及/或其鹽則形成親水性高之銨或 /或妈感壓水洗淨後即可由甲殼類之水，雖亦可全部使用脫鈣水，但料去除蛋白質及碳酸鈣後，將所得或含驗金屬驗物質之驗性狀態下，，此時，視必要性在脫鈣水中並用

第14頁 583190 五、發明說明鈣感壓劑水中，使甲殼類完在洗淨鹼述濕潤甲特別規定如上其鹽之曱殼聚糖後水、工業需再次以處理工作理，惟以只要能將制，例如下，例如本發水時帶處之驗性水用於該鈣基乙二胺 (10) 亦可，甲殼類全浸於性狀態殼類重〇所述，殼浸潰，殼聚用水及稀釋鹽，此時實施者甲殼脫 45重量以 6 0°C 明中，理之曱中形成感壓水四乙酸又，將甲殼類浸潰在含氨或鹼金屬之鹼性保持鹼性狀態之鹼性水的使用量，以可將水中之程度，又以可攪拌之量為宜，又，之甲殼類時，以所需最少量之脫妈水將上複清洗2次以上較有效果，洗淨溫度則無在甲殼之製於超濃驗性糖之洗淨不地下水即可酸將甲殼作，並非較有效乙醯化 %氫氧中進行亦可以殼類雖鹼性狀之妈感、二羥一定果；後成化納為宜的感並非態，壓劑乙基造工程中將去除脂肪酸及/或水溶液中，進行脫乙醯化形成需使用脫妈水，用一般自來 :至於由外部購入之曱殼，則脫鈣處理，再進行上述相同之要以稀釋鹽酸來進行脫鈣之處又，前述之超濃驗性水溶液，為殼聚糖者皆可，並無特別限水溶液，脫乙醯化則是在加熱〇壓水取代脫鈣水，使用鈣感壓一定得在氨或含鹼金屬鹼物質但以上述鹼性狀態為理想，使，例如有乙二胺四乙酸、羥乙乙二胺二乙酸、1，3-丙胺四

第15頁 583190 五、發明說明（11) 1 螯合劑；甲基甘氨二乙酸、L-谷氨酸二乙酸、L-天冬氨酸二乙酸及其鹽等胺酸系螯合劑；焦磷酸、偏磷酸、多磷 _ 酸、三聚磷酸及其鹽等縮合磷酸系螯合劑；檸檬酸、酒石酸、葡糖酸及其鹽等羥（基羧螯合劑；乙醯丙酮、酸型及鈉型沸石等。只要是能防止脂肪酸形成鈣鹽或鎂鹽等水不溶性鹽者，並不限定於以上之鈣感壓劑；其中就鈣感壓能力一點來看，以乙二胺四乙酸二鈉為理想。此時，上述曱殼製造過程中雖可以鈣感壓水作為使用水，但僅在曱殼原料除去蛋白質及碳酸鈣兩者後，將所得到之濕潤甲殼以鈣感壓水洗淨，即可充分達到本發明之目 ® 的，此時，視必要性合用脫妈水亦可。使用之鈣感壓劑的量，視殘留於甲殼類中脂肪酸鈣鹽之量而定，通常為鈣感壓劑溶解於水中所含之鈣離子的約 1 . 2倍以上，理想為2. 0倍左右。將曱殼類以鈣感壓水洗淨時，可事先調製好已溶解鈣感壓劑之水，或者，加入使曱殼類不含鈣感壓劑所需的水量後，再加入所需量之辦感壓劑亦可，又，順序相反亦可；又，鈣感壓水或不含鈣感壓劑之水的使用量，以將曱殼類全部浸入水中，且可攪拌為宜，以所需最少量之鈣感 ¥ 壓水重複洗淨兩次以上更見成效，洗淨溫度並無特別規定。在甲殼類係由外部購入之情況等時，將該曱殼類以再稀釋鹽酸進行脫鈣處理，其後續與上述濕潤甲殼相同，亦可以鈣感壓水處理；此時，並非一定要實施稀釋鹽酸之脫

第16頁 583190 五、發明說明（12) 鈣處理，惟以實施者較具效果；再者當曱殼由外部購入而殼聚糖化等時，將曱殼作脫乙醯化後，得到的殼聚糖在洗淨時以鈣感壓水來洗淨亦有效，此時之脫乙醯化可按照前述來實施。將該殼聚糖以鈣感壓水洗淨時，可事先調製好已溶解鈣感壓劑之水，或者，加入使殼聚糖不含鈣感壓劑所需的水量後，再加入所需量之妈感壓劑亦可，又，順序相反亦可；又，鈣感壓水或不含鈣感壓劑之水的使用量，以將殼聚糖全部浸入水中，且可攪拌為宜，以所需最少量之鈣感壓水重複洗淨兩次以上更見成效，洗淨溫度並無特別規定。以本發明上述之任一種方法，皆可得到脂肪酸及其鹽之總含量在脂肪酸換算下為0. 2重量％以下之甲殼類，且該脂肪酸及其鹽之總含量以脂肪酸換算為0. 2重量％以下之曱殼類中，水溶性者在作為任一種工業製品之使用或供給上，皆可得到標準以上透明度高之水溶液，使該水溶液之商品價值更為提高；曱殼類之應用不僅在水溶液，亦有其他許多用途；在此，脂肪酸及其鹽之總含量，以脂肪酸換算在0. 2重量％以下之甲殼類的商品價值，想當然爾也是極高的。以下舉出參考例及實施例對本發明作更具體之說明。參考例1 東南亞產渡蟹蟹殼曬乾後，將1 0 0重量分於4重量％鹽酸水溶液8 0 0重量分中以3 0°C攪拌兩小時，蟹殼中之碳酸

隱圓__ m 第17頁 583190 五、發明說明（13) 鈣即化成氯化鉀溶解後，將固形物經過濾集中，以地下水洗淨，進行脫碳酸鈣處理，接著將含有甲殼之過濾殘渣於 2重量％之氫氧化鈉水溶液8 0 0重量分中，以7 5T：加熱攪拌 2小時，進行去蛋白處理後，將殘渣經過濾集中以地下水洗淨，得到過濾殘渣之曱殼，以6 0°C加熱攪拌1 6小時進行脫乙醯化處理，將固形物以過濾集中利用地下水洗淨，乾燥後得到殼聚糖25重量分。實施例1 在上述參考例1中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之曱殼，在脫乙醯化後之地下水洗淨步驟，以0. 1重量％之EDTA水溶液取代，將殼聚糖洗淨3次外，其餘同參考例 1，得到精製曱殼。實施例2 在上述參考例1中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之蟹殼，在去蛋白處理後之地下水洗淨步驟，以0 · 1重量 %之EDTA水溶液取代，將曱殼洗淨3次外，其餘同參考例 1，得到精製甲殼。實施例3 在上述參考例丨中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之蟹殼，在去蛋白處理後之地下水洗淨步驟，以〇. 1重量 %之EDTA水溶液取代，將曱殼洗淨1次外，其餘同參考例 1，得到精製曱殼。實施例4 在上述參考例1中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態

第18頁 583190 五之子殼水實甲交實 % 甲厂之製脂、發明說明（14) 甲殼，在去蛋白處理後之地下水洗淨步驟，將甲殼以離交換水洗淨3次，再將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之甲，在脫乙醯化後之地下水洗淨步驟，將甲殼以離子交換洗淨4次外，其餘同參考例1，得到精製甲殼。施例5 上述參考例丨中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之殼，在去蛋白處理後之地下水洗淨步驟，將甲殼以離子換水洗淨3次外，其餘同參考例1，得到精製甲殼。施例6 除了將上述參考例1中得到之乾燥殼聚糖，於3 0重量異丙醇水溶液中洗淨1次外，其餘同參考例1，得到精製殼。殼聚糖試料水溶液之透視度及殼聚糖試料中脂肪酸含量測定」將上述參考例1之殼聚糖試料、及實施例1〜6之6種精殼聚糖試料的透視度及各個殼聚糖及精製殼聚糖試料中肪酸含量，以下述方法測定，結果如表1所示。透視度測定法〉 1) 試料溶液之調製及溶時於0. 5重量％醋酸水溶液中，將參考例1之殼聚糖試料實施例1〜6中6種精製殼聚糖試料，以0. 5重量％之濃度解，得到7種殼聚糖水溶液，這7種殼聚糖水溶液在2 4小靜置後，各別可進行透視度測定。 2) 測定方法

第19頁 583190 五、發明說明（15) 以JISK 0 1 0 2 ( 1 9 9 8)工廠排水試驗方法之「9·透視度」中記載方法為準則，測定上述7種殼聚糖水溶液之透視度。〈脂肪酸含量之測定方法〉 (1) 分析試料的調製 _ 將參考例1之殼聚糖試料及實施例1〜6中6種精製殼聚糖試料作為試料，將這7種試料各別以5. 0 g (考慮到水分後之純量5. Og)於7個圓筒遽紙中评重，將這7個圓筒渡紙各別以脫脂棉塞住。 (2) 測定方法將參考例2之殼聚糖試料秤重5. 0 g，以加拴之圓筒濾紙固定於索克斯累特回流提取器之抽取部，於該抽取部注入5 0 m 1蒸餾水，靜置3 0分鐘後將試料浸於水中使其膨潤，於索克斯累特回流提取器下部之平底燒瓶中，加入6 5 m 1異丙醇及1 5 m 1蒸餾水及5個沸石，3 0分鐘後，將索克斯累回流提取器抽取部之水，移至下面之平底燒瓶内，進行2小時之索克斯累回流提取，在抽出後，將殘留於索克斯累回流抽取部之溶液移至下面之平底燒瓶中，於平底燒瓶内集中所有的抽出液；再將集中之抽出液移至圓底燒瓶，為抑制該液之發泡，可視必要性於該燒瓶中加入3〜4滴醋酸，將燒瓶繫於蒸發器，使抽出液濃縮為1〜2 m 1左右，於該濃縮液中加入5%醋酸水溶液5 0 m 1，在,超音波槽中振落燒瓶内壁之附著物，將附著物於醋酸水溶液中分散解膠；於該燒瓶内加入5 0 πι 1己烷，利用振動機均勻混合將抽出液中之

第20頁 583190 五、發明說明（16) 脂肪酸抽出至己烷層，並分離己烷層；將分離之己烷層作為氣相色譜分析試料溶液，利用下述（3)之脂肪酸標準溶液、下述（4)之裝置及條件，測定殼聚糖中脂肪酸的量；而實施例1〜6之精製殼聚糖試料中的脂肪酸含量，亦以相同方法進行測定。 (3) 脂肪酸標準溶液的調製將肉豆兹酸、掠櫊酸、油酸及硬脂酸各別作為試藥 (純度：9 8%以上）使用，各別溶解於己烷中調製成4種之0. 1 W / V%溶液；將這些溶液做為原液依序以己烷稀釋調製成濃度5〜2 0 0 ppm之標準溶液，再將這些標準溶液各別以2// 1注入氣相色譜分析裝置中，做成檢量線，接著將前述（1)中測定透視度用之分析試料溶液分別注入氣相色譜分析裝置中進行分析，以上述檢量線為基礎各別算出試料中脂肪酸濃度。

(4) 氣相色譜分析裝置及操作條件本體··島津製作所製GC-14A ;商品名柱：G - 1 0 0 財團法人化學品檢查協會檢測器：F I D 載氣：氦，30ml/min 柱溫度：1 2 0°C - 2 8 0°C，6°C / m i η

檢測氣溫度：2 8 (TC 樣本尺寸：2· 0// 1 表1

583190 五、發明說明（17) 參考例實施例 1 1 2 J 4 5 6 透視度 5 23 >50 33 22 21 21 脂肪 MA 0.03 <0.01 <0.01 <0.01 <0.0 <0.01 <0.01 酸含 PA 0.20 0.08 0.01 0.02 0.09 0.08 0.07 量 OA 0.26 0.08 0.01 0.05 0.05 0.08 0.07 (%) SA 0.04 0.02 0.01 0.03 0.03 0.02 0.02 合計 0.53 0.18 0.03 0.10 0.17 0.18 0.17 Μ A :肉豆蔻酸、P A :棕櫚酸、0 A :油酸、S A :硬脂酸如上表所示，參考例1中殼聚糖水溶液之透視度為5，而以脂肪酸換算之脂肪酸總量為0. 5 3重量％，相對於此，實施例1〜6中殼聚糖試料水溶液之透視度皆在2 0以上，而所含脂肪酸總量皆在0. 2 0重量％以下；再者，在後記表2 及表3中之透視度及脂肪酸含量皆以前述相同方法測定。參考例2 進行參考例1中之脫碳酸鈣及去蛋白處理，將得到之

第22頁 583190 五、發明說明（18) 甲殼以地下水洗淨後使其乾燥，得到乾燥曱殼1 0 0重量分，接著將上述甲殼放入4 5重量％之氫氧化鈉水溶液3 0 0 重量分中，以6 0°C加熱攪拌1 6小時後進行脫乙Μ化處理，將固形物利用過濾集中，再以地下水洗淨及乾燥，得到乾燥殼聚糖90重量分。實施例7 在上述參考例2中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之乾燥曱殼，在脫乙醯化後之地下水洗淨步驟，以0. 1重量％之E D Τ Α水溶液取代，將殼聚糖洗淨3次外，其餘同參考例2，得到精製殼聚糖。實施例8 在上述參考例2中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之乾燥曱殼，在脫乙醯化後之地下水洗淨步驟，以離子交換水取代，將殼聚糖洗淨3次外，其餘同參考例2，得到精製殼聚糖。實施例9 在上述參考例2中，除了在乾燥曱殼進行脫乙醯化前，以0. 1重量％之EDTA水溶液清洗3次外，其餘同參考例 2，得到精製殼聚糖。實施例1 0 在上述參考例2中，除了將利用氫氧化鈉形成鹼狀態之乾燥甲殼，在脫乙醯化前以3 0重量％之異丙醇水溶液洗淨1次外，其餘同參考例2，得到精製殼聚糖。實施例1 1

第23頁 583190 五、發明說明（19) 除了將參考例2中所得，利用氫氧化鈉形成鹼狀態之乾燥殼聚糖，以0. 1重量％之EDTA水溶液洗淨3次外，其餘同參考例2，得到精製殼聚糖。貧施例1 2 除了將參考例2中所得之乾燥殼聚糖，以3 0重量％之異丙醇水溶液洗淨1次外，其餘同參考例2，得到精製殼聚糖。表2

參考例實施例 2 7 8 9 10 11 12 透視度 5 22 20 22 21 20 21 脂肪 MA 0.03 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 酸含 PA 0.20 0.09 0.09 0.08 0.09 0.09 0.09 量 OA 0.26 0.05 0.06 0.08 0.06 0.06 0.06 (%) SA 0.04 0.03 0.03 0.02 0.03 0.03 0.03 合計 0.53 0.17 0.18 0.18 0.18 0.19 0.18 如上表2所示，參考例2中殼聚糖水溶液之透視度為 5，而以脂肪酸換算之脂肪酸總量為0. 5 3重量％，相對於此，實施例7〜1 2中殼聚糖試料水溶液之透視度皆在2 0以

苐24頁 583190 五、發明說明（20) 上，而所含脂肪酸總量皆在0. 2 0重量％以下。實施例1 3 將參考例1之1 0 0重量分殼聚糖及9 0 0重量分自來水，餽入高壓鍋中，再加入環氧丙烷2 0 0重量分，接著加入4 8 重量％氫氧化鈉水溶液0. 5重量分，以70°C於3Kg/crii中攪拌2小時後，再加入環氧丙烧2 0 0重量分，接著加入48重量 %氫氧化鈉水溶液0. 5重量分，以70°C於3Kg/cnf中攪拌2 小時。將得到之水溶液滴入沸水中，析出經丙烧殼聚糖，反覆進行熱時濾過及熱水洗淨，將最終得到之羥丙烷殼聚糖凍結乾燥，將凍結乾燥物於純水中溶解得到0. 7重量％之水溶液（A);相同之操作亦進行於實施例1之精製殼聚糖，將凍結乾燥物溶於純水中調整為0. 7重量％之水溶液 (B);又，將由參考例1中殼聚糖所得之羥丙烷殼聚糖凍結乾燥物以乙醯洗淨後再乾燥，利用其得到0. 7重量％之水溶液（C)。測定各水溶液2 4小時後之透視度、及羥丙烷殼聚糖凍結乾燥物之脂肪酸含量，結果如表3所示。表

第25頁 583190 五、發明說明（21) 溶液 A B C 透視度 10 40 >50 脂肪 MA 0.02 <0.01 <0.01 酸含 PA 0.20 0.05 <0.01 量 OA 0.20 0.03 <0.01 (%) SA 0.03 <0.01 <0.01 合計 0.45 0.08 0.01 如表3所示，由參考例1之殼聚糖調：聚糖，其脂肪酸換算後之脂肪酸總量有因此，水溶液（A)之透視度有丨0之低，施例1之精製殼聚糖調整而成之羥丙烷殼換算後之脂肪酸總量有〇. 〇 8重量％之低之透視唐亦有4 0之高，商品價值亦堅而成之羥丙烷^ 0. 45重量％之多相對於此，由實聚糖，其脂肪酸此液溶水例精烷丙羥之成而整 HI? -6 糖聚殼之高提考參由之後洗酮丙以糖聚 & 糖聚殼烷丙羥製其最為亦旦里總分义 S 月匕曰月之後算換 S 月過超為亦度視透之 \)/ C /X 液溶水亥兮〇此因 % 量〇重液 ·**· ο溶 ο水之之 ο 小 5

583190

第27頁

Claims

583190 六、申請專利範圍 ---—. / · 7 ；如申请專利範圍第1項所述之精製曱殼類，，其中甲殼_ 為双5^糖，而泫设聚糖係在〇 · 5重量％之醋酸水溶液中，以0.5重量％之濃度所溶解形成之殼聚糖水溶液，以， JISK0 1 02 ( 1 998 )工廠排水試驗方法之「9•透視度」中言載方法為準則進行測定，則具有透視度在20〜60之間的= 疮。 J純 8· —種精製曱殼類之製造方法，係將曱殼類以由有機溶媒及含水有機溶媒組成群中由乙醇及異丙醇等中選出之至 ^ 種’谷媒洗淨’將脂肪酸及其鹽之總含量以脂肪酸捡算，係在0· 2重量％以下者。、 9 · ★ 一種精製甲殼類之製造方法，透過複數個工程在精製曱殼之製造方法中，於該工程之至少一過程中，將脫鈣水及水，的舞以鈣感壓劑感壓後的水中，至少以一種處理，將甲设類所含脂肪酸及其鹽之總含量，以脂肪酸換算後為 0.2重量％以下。 ’ 10·如申請專利範圍第9項所述之精製甲殼類製造方法，其中鈣感壓劑為乙撐二胺四乙酸二鈉。 11 ·〃一種精製曱殼類之製造方法，係由將曱殼類浸潰於含有，或鹼金屬之鹼性水中的過程、及將甲殼類分離洗淨之，私所構成，在洗淨過程中需至少一次，使曱殼類在含有虱或f金屬之鹼性狀態下，以脫鈣水及水中的鈣經鈣感壓劑感壓後之水的至少一者洗淨，纟脂肪酸及鹽之總含量以脂肪酸換算在〇· 2重量％以下。 12·如申請專利範圍第9項至第丨丨項任一項所述之精製甲

583190 六、申請專利範圍殼類製造方法換水等中選出 13· —種精製驗性水溶液中分離洗淨之過聚糖在含有氨妈經#5感壓劑之總含量以脂 14.如申請專其中脫鈣水係少一種。，其中至少一殼聚糖 ’脫乙程所構或驗金感壓後肪酸換利範圍由蒸鶴

脫鈣水係由蒸餾水、脫鹽水及離子交種。之製造方法，係由將甲殼浸潰於超濃醯化成殼聚糖的過程、及將該殼聚糖成；在洗淨過程中需至少一次，使殼屬之鹼性狀態下，以脫妈水及水中的之水的至少一者洗淨，其脂肪酸及鹽算在0.2重量％以下。第1 3項所述之精製殼聚糖製造方法，水、脫鹽水及離子交換水等中選出至第30頁

六、申ϋίίϊ /f 1 · 一種精製甲殼類，其中甲殼類之原料係從，蝦、蟹、蝦姑、磷蝦及烏賊等中選出直少一種，且其中脂肪酸含量在 υ· 2重量％以下，而該脂肪酸係由棕櫚酸、油酸、硬脂，、肉豆謹酸及其鹽中選出至少一種之脂肪酸或其鹽9所形成0 2.如申請專利範圍第1項所述之精製甲殼類，其中脂肪酸之鹽係由脂肪酸之鈣鹽及脂肪酸之鎂鹽等中選出至少一鹽所形成。、 3;如申請專利範圍第1項所述之精製甲殼類，其中甲殼類係由甲殼及殼聚糖、其化學修飾物、以及由這些分解物之組成群中選出至少一種之甲殼類。 4·如申請專利範圍第3項所述之精製甲殼類，其中化學修飾物為醯基化合物 '甲苯磺醯基化合物、烷基化合物、缓基化合物、硫酸化合物、磷酸化合物、硝基化合物、氨基甲醯化合物、硫代氨基甲醯化合物、金屬離子配位化合物、席夫鹼化合物、4級銨化合物、交聯化合物、黃原酸鹽（xanthate)化合物、鹽形成化合物及之黃原酸鹽再生化合物。 •如申凊專利範圍第3項所述之精製甲殼類，其中甲殼類係從葡糖胺、葡糖胺鹽酸鹽、葡糖胺硫酸鹽、乙醯葡糖胺及其低聚糖中，選出至少一種之化合物。 6 ·如申請專利範圍第1項所述之精製甲殼類，其中甲殼類於分子内具有由羥烷基、羧烷基、羧醯基、羥醯基、硫酸基、磷酸基及4級銨基中選出之至少、一種的基。