UA128757C2 - Антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, що зв'язуються з cd22 - Google Patents

Abstract

Винахід стосується антитіл до CD22, які містять тільки важкі ланцюги (UniAbsTM), а також способи отримання таких антитіл, композиції, у тому числі фармацевтичні композиції, які містять такі антитіла, та їх застосування для лікування В-клітинних розладів, які характеризуються експресією CD22. Помилка! Невідоме ім'я властивості документа.

Description

Винахід стосується антитіл до СО22, які містять тільки важкі ланцюги (підбе"М), а також способи отримання таких антитіл, композиції, у тому числі фармацевтичні композиції, які містять такі антитіла, та їх застосування для лікування В-клітинних розладів, які характеризуються експресією СО22.

Пон ВК АВК ВВ ВК пн НН

КО НЕ Я КИ ке ж в НН ек а НИ,

ПОВЕ Я КО МЕ ЯК дон А НА НЯ АВМ БР долоенн ИККУАЮ ВЕЖІ НО

ПММ ІВАН Мт ТІ УНЦА а НяК

ЗЕМННОНКОВВ КК ут ення пиву ах ши !

ОСЕНІ НН чт

Фіг.

Перехресне посилання до споріднених заявок

Ця заявка витребовує пріоритет за попередньою заявкою США Мо 62/609759, поданою 22 грудня 2017 р., опис якої включено в даний документ в повному обсязі шляхом посилання.

Перелік послідовностей

Заявка, що розглядається на даний момент, містить перелік послідовностей, поданий в електронному вигляді у форматі АБСІЇ і включений у цей документ у повному обсязі за допомогою посилання. Зазначена копія у форматі АБСІЇ, створена 7 лютого 2019 р., називається ТМО-0009-УМО 5І КІ і має розмір 80 329 байт.

Галузь техніки

Цей винахід стосується антитіл людини, які містять тільки важкі ланцюги, (наприклад,

Опідбе"М), що зв'язуються з СО22. Цей винахід також стосується способів отримання таких антитіл, композицій, у тому числі фармацевтичних композиції, які містять такі антитіла, та їх застосування для лікування В-клітинних розладів, які характеризуються експресією СО22.

Рівень техніки

Сор22 с0р22, також відомий як БІС ЕС-2 (ОпіРгої Р20273), є рецептором клітинної поверхні, який експресується на зрілих В-клітинах. СО22 містить декілька доменів Ід і є членом суперсімейства імуноглобулінів. Позаклітинний домен СО22 взаємодіє з фрагментами сіалової кислоти, включаючи присутні на білку клітинної поверхні СО45. Вважається, що СО22 функціонує як інгібіторний рецептор для сигналінгу В-клітинних рецепторів. Поряд з СО2О ії СО19, обмежена експресія В-клітин СО22 робить його привабливою мішенню для терапевтичного лікування В- клітинних злоякісних новоутворень. Моноклональні антитіла, специфічні до СО22, були описані в літературі (наприклад, дарроиг, ЕПавз, еї аЇ. "Мопосіопа! апібодіе5 іп асше ІутрПпобіавіїЇс

ІеиКетіа." Віоой 125.26 (2015): 4010-4016) і терапевтично використовувалися в якості стандартних препаратів моноклональних антитіл (наприклад, епратузумаба), а також в якості кон'югатів антитіло-лікарський засіб (інотузумаб озогаміцин). Крім того, в клінічній практиці для лікування лейкемії використовувалися Т-клітини анти-СО022 хімерного антигенного рецептора (ЕгуУ, Теїту «., еї аІ. "Со22-їагдеївй САВ Т сеї іпдисе гетіввіоп іп В-АЇ І. гпаї із паїме ог гезівіїапі 0

С019-загдеївй САВ іттипоїПегару." Маїиге теаїсіпе (2017)).

Антитіла, які містять важкі ланцюги

У звичайному антитілі дО, асоціація важкого ланцюга та легкого ланцюга частково обумовлена гідрофобною взаємодією між константною областю легкого ланцюга та константним доменом СНІ важкого ланцюга. В областях важкого ланцюга каркасу 2 (ЕК2) та каркасу 4 (ЕК4) є додаткові залишки, які також сприяють цій гідрофобній взаємодії між важким і легким ланцюгами.

Відомо, однак, що сироватка верблюжих (підряд Туіорода, який включає верблюдів, дромадерів і лам) містить основний тип антитіл, які складаються виключно з парних Н-ланцюгів (антитіла, що містять тільки важкі ланцюги або Опідбе"М). ОпіАрз"МСатеїйдає (Сатеїв дготеадагіив5, Сатеїшв Басігпапив, І ата діата, І ата одиапасо, І ата аїраса і І ата місодпа) мають унікальну структуру, яка складається з одного варіабельного домену (УНН), шарнірної області та двох константних доменів (СН2 і СНЗ), які високогомологічні доменам СНаО2 і СНЗ класичних антитіл. Ці Опідр5"М не мають першого домену константної області (СНІ), який присутній в геномі, але піддається сплайсингу під час процесингу мРНК. Відсутність домену СНІ пояснює відсутність легкого ланцюга в ОпіАбев М, оскільки цей домен є місцем закріплення константного домену легкого ланцюга. Такі Опідб5"М природним чином еволюціонували для надання антигензв'язуючої специфічності та високої афінності трьома СОК зі звичайних антитіл або їх фрагментів (МиуЇдегптапв, 2001; у) Віоїесппо!ї 74:277-302; Вемеїв еї а!., 2005; Ехреп Оріп Віо|!

ТНнег 5:111-124). Хрящові риби, як-от акули, також виробили особливий тип імуноглобуліну, позначений як ІЯМАК, позбавлений легких поліпептидних ланцюгів і повністю складається з важких ланцюгів. Молекулами ІДМАК можна маніпулювати за допомогою молекулярної інженерії для отримання варіабельного домену поліпептиду з одним важким ланцюгом (уМАК) (МмиНаї! еї аІ. Ешиг. У. Віоспет. 270, 3543-3554 (2003); Мипцаї! еї аіІ. Еипсіоп апа Віоіпіоптпаїййсв5 55, 187-197 (2004); Юооїеу єї а!., Моіесшаг Іттипоіоду 40, 25-33 (2003)).

Здатність антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, позбавлених легкого ланцюга, зв'язувати антиген була встановлена в 1960-х роках (даюп еї а. (1968) Віоспетівігу, 7, 4185-4195). Важкий ланцюг імуноглобуліну, фізично відокремлений від легкого ланцюга, зберіг 80 95 антигензв'язуючої активності відносно тетрамерного антитіла. 5йа еї аї. (1990) Сеї, 60, 781-790 продемонстрували, що видалення домену СНІ з перегрупованого гена о миші призводить до отримання антитіла, яке містить тільки важкі ланцюги, позбавленого легкого ланцюга, в клітинній культурі ссавців. Антитіла, що виробляються, зберігали специфічність зв'язування МН та ефекторні функції.

Антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, з високою специфічністю та афінністю можуть створюватися проти різних антигенів за допомогою імунізації (мап дег І іпдеп, К. Н., еї аї.

Віоспіт. Віорпуз. Асіа. 1431, 37-46 (1999)), а частина МНН може бути легко клонована та експресована в дріжджах (ЕгепКеп, Г. (С. ., еї а. У. Віоїесппої. 78, 11-21 (2000)). Їх рівні експресії, розчинності та стабільності значно вище, ніж у класичних фрагментів (аб) або Ем (Спангоцаї, М. А. еї аЇ. РЕВЗ5 І ей. 414, 521-526 (1997)).

Миші, у яких 7, (лямбода) локус легкого (І)-ланцюга та/або 7, і к (каппа) локуси І -ланцюга були функціонально пригнічені, та антитіла, які продукують такі миші, описані в патентах США Мо 7541513 та 8367888. Рекомбінантне продукування антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, у мишей та щурів було описано, наприклад, у УМО 2006008548; публікації заявки на патент США

Мо 20100122358; Моашуеп еї аї!., 2003, Іттипоіоду; 109(1), 93-101; Вгйддетапп еї аї., Стії. Вех.

Ітітипої.; 2006, 26(5):37 7-90; апа 7о0и еї аї., 2007, У Ехр Меа; 204(13): 3271-3283. Отримання нокаутних щурів за допомогою мікроіїн'єкцій ембріонам цинк-пальцевої нуклеази описано в

Сешцгіз еї а!., 2009, Зсіепсе, 325(5939):433. Розчинні антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, і трансгенні гризуни, які містять гетерологічний локус важкого ланцюга, який продукує такі антитіла, описані в патентах США Мо 8883150 та 9365655. Структури САК-Т, які містять однодоменні антитіла в якості зв'язуючого (націлюючого) домену, описані, наприклад, у Ігі-5ойПа еї а), 2011, Ехрегітепіа! СеїЇ Везеагсй 317:2630-2641 та датпапі еї а!., 2014, Віоспіт Віорпуз

Асіа, 1840:378-386.

Суть винаходу

Аспекти винаходу стосуються антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, включаючи, але не обмежуючись, ОпіАбе!"М, з афінністю зв'язування до СО22. Додаткові аспекти винаходу стосуються способів отримання таких антитіл, композицій, які містять такі антитіла, та їх застосування для лікування В-клітинних розладів, які характеризуються експресією СО22.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги та яке зв'язується з

С022, містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить: (а) СОКІ, що має дві або менше заміни в будь-якій з амінокислотних послідовностей 5ЕО ІЮО МО: 1-10, та/або (6) СОК2, що має дві або менше заміни в будь-якій з амінокислотних послідовностей 5ЕО ІЮ МО: 11-17, та/або (с) СОКЗ, що має дві або менше заміни в будь-якій з амінокислотних послідовностей

ЗЕО ІО МО: 18-23. У деяких варіантах здійснення послідовності СОКІ, СОК2 і СОКЗ присутні в каркасі людини. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, додатково містить послідовність константної області важкого ланцюга за відсутності послідовності СНІ.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить: (а) послідовність СОМКІ, вибрану з групи, яка складається з 5ЕБЕО ІЮ МО: 1-10, та/або (Б) послідовність СОМК2, вибрану з групи, яка складається з 5БО ІЮ МО: 11-17, та/або (с) послідовність СОКЗ, вибрану з групи, яка складається з 5ЕО ІЮО МО: 18-23. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить: (а) послідовність СОК1, вибрану з групи, яка складається з 5ЕО ІЮО МО: 1-10, та (Б) послідовність СОК2, вибрану з групи, яка складається з 5ЕО ІЮ МО: 11--17, та (с) послідовність СОКЗ, вибрану з групи, яка складається з

ЗЕО ІО МО: 18-23.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить: (а) послідовність СОКІТ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОМК2 5ЕО ІО МО: 11 та послідовність СОКЗ 5ЕО ІО МО: 18 або (р) послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 12 та послідовність СОКЗ ЗЕО ІО МО: 19, або (с) послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність

СОК2 5ЕО ІЮО МО: 12 та послідовність СОКЗ 5ЕО ІО МО: 20. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить варіабельну область важкого ланцюга, що має щонайменше 95 95 ідентичності послідовності з будь-якою з послідовностей 5ЕО ІЮО МО: 24- 84. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить послідовність варіабельної області важкого ланцюга, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ

МО: 24-84. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить послідовність варіабельної області важкого ланцюга 5ЕО ІЮ МО: 24.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги та яке зв'язується з

СО022, містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить: (а) послідовність. СОК1 формули:

С. Хі 5 І Х» Хз Ха Хо Хв М (5ЕО ІЮ МО: 85)

де Хі являє собою О або 0; Хо являє собою 5, Т, І або М; Хз являє собою 5 або р; Ха. являє собою С, 5 або М; Х5 являє собою 0, С або 5, а Хв являє собою У або Н; та (Б) послідовність

СОК2 формули:

Х» Хв У Хв а Хіо Хі11(5ЕО ІЮ МО: 86) де Х7 являє собою | або МУ; Хв являє собою У або Н; Хе являє собою 5 або Т; Х:іо являє собою А, М або 5, а Хі: являє собою Т або А; та (с) послідовність СОКЗ формули:

Хі2 АВ Хіз ОЮ 5 5 Хі М А 5 (5ЕО ІЮ МО: 87) де Хіг являє собою Т, А або К; Хіз являє собою 0 або Е, а Х:4 являє собою М або 5.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, що зв'язується з

С022, містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить послідовності СОК1, СОКЗ2 та

СОКЗ в каркасі МН людини, причому послідовності СОК є послідовностями, що мають дві або менше заміни в послідовності СОК, вибраної з групи, що складається з 5ЕО ІЮО МО: 1-23.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить послідовності СОКІ, СОК2 та СОКЗ в каркасі

МН людини, причому послідовності СОК вибрані з групи, що складається з 5ЕО ІО МО: 1-23.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги та яке зв'язується з

С022, містить варіабельну область важкого ланцюга, що містить: (а) послідовність СОКІ 5ЕО

ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІЮО МО: 11 та послідовність СОКЗ 5ЕО ІЮ МО: 18 або (Б) послідовність СОКІТ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 12 та послідовність СОКЗ 5ЕО ІО МО: 19, або (с) послідовність СОКІ 5ЕО ІЮО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІЮО МО: 12 та послідовність СОКЗ ЗЕО ІО МО: 20 в каркасі МН людини.

У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, є мультиспецифічним. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, є біспецифічним. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має афінність зв'язування з двома різними білками СО22. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має афінність зв'язування з двома різними епітопами на одному й тому самому білку СО22. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має афінність зв'язування з ефекторною клітиною. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має афінність зв'язування з Т-клітинним антигеном. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має афінність зв'язування з СЮОЗ. У деяких варіантах здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має формат САК-Т.

Аспекти винаходу стосуються фармацевтичних композицій, які містять антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, як описано в цьому документі.

Аспекти винаходу стосуються способів лікування В-клітинного розладу, який характеризується експресією СО22, що включає введення суб'єкту із зазначеним розладом антитіла або фармацевтичної композиції, як описано в цьому документі. У певних інших аспектах винахід стосується застосування антитіла, описаного в цьому документі, при отриманні лікарського засобу для лікування В-клітинного розладу, що характеризується експресією СО22. У ще інших аспектах винахід стосується антитіла, описаного в цьому документі, для застосування в лікуванні В-клітинного розладу, що характеризується експресією

СО22. Що стосується цих аспектів, і в деяких варіантах здійснення, розлад являє собою дифузну В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ). У деяких варіантах здійснення розлад являє собою неходжкінську лімфому (НХЛ). У деяких варіантах здійснення розлад являє собою системний червоний вовчак (СЧВ) У деяких варіантах здійснення розлад являє собою ревматоїдний артрит (РА). У деяких варіантах здійснення розлад являє собою розсіяний склероз (РОС).

Аспекти винаходу стосуються полінуклеотидів, що кодують антитіло, описане в цьому документі, векторів, що містять такі полінуклеотиди, і клітин, що містить такі вектори.

Аспекти винаходу стосуються способів отримання антитіла, описаних у цьому документі, що включають вирощування клітини, описаної в цьому документі, в умовах, сприятливих для експресії антитіла, і виділення антитіла з клітини.

Аспекти винаходу стосуються способів отримання антитіла, описаних у цьому документі, що включають імунізацію тваринного ОпіКаї за допомогою СО22 та ідентифікацію СО22-зв'язуючих послідовностей важкого ланцюга.

Ці та інші аспекти будуть додатково пояснені в іншій частині розкриття, включаючи приклади.

Короткий опис графічних матеріалів

На Фіг. 1 показані унікальні амінокислотні послідовності СОК антитіла до СО22, яке містить 60 тільки важкі ланцюги.

На Фіг. 2 показані амінокислотні послідовності варіабельного домену антитіла до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги.

На Фіг. З показані амінокислотні послідовності СОКІ, СОК2 та СОКЗ антитіла до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги.

На Фіг. 4 показана біологічна активність антитіла до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги.

На Фіг. 5А представлений графік, який зображає відсоток специфічного лізису як функцію концентрації антитіл для клітин ЮОацаі.

На Фіг. 5В представлений графік, який зображає відсоток специфічного лізису як функцію концентрації антитіл для клітин Ка)).

На Фіг. 5С представлений графік, який зображає відсоток специфічного лізису як функцію концентрації антитіл для клітин Катов.

На Фіг. 50 представлена схематична ілюстрація біспецифічного антитіла до СО22хСО03 згідно з одним варіантом здійснення винаходу.

На Фіг. 6 представлена серія графіків, які показують титр сироватки як функцію розведення.

Детальний опис переважних варіантів здійснення

При практичній реалізації цього винаходу застосовують, якщо не вказано інше, традиційні методики молекулярної біології (включаючи рекомбінантні методики), мікробіології, клітинної біології, біохімії та імунології, які відомі фахівцям у даній області техніки. Такі способи детально описані в літературі, наприклад, "МоІесшаг Сіопіпд: А Габогаїгу Мапиа!", 5есопа еайоп (Затьгоок еї а!., 1989); "ОЇїдописіеоїіде Зупіпезів" (М. 9. Сай, єа., 1984); "Апіта! Сеїї Сийите" (В.

Ї. ЕгезНпеу, єйд., 1987); "Мештоа5 іп Епгутоіоду" (Асадетіс Ргезв5, Іпс.); "Сцтепі Ргоїосої!в5 іп

Моїесшіаг Віоіоду" (ГЕ. М. А!зибеї еї аї., єдв5., 1987, апа регіодіс ирдаїез); "РСВ: Тне Роїутетгазе

Спаїп Неасійоп", (Миїїїв еї аї., єа., 1994); "А Ргасіїса! Сціде ою МоїІесшаг Сіопіпду" (Регба! Вегага

М., 1988); "Рпаде Оізріау: А І арогаїогу Маппиа!" (Ваїбаз еї аї., 2001); Напом, І апе апа Напом,

Овіпа Апііродіез: А І абогаїогу Мапиа!: Ропабріє Ргоїосо! Мо. І, Соій ріпа Нарог І абогаюгу (1998); та Напом/ апа І апе, Апііїбодіез: А І арогаїогу Мапиаї, Соїй Зргіпд Нагброг Іарогайогу; (1988).

Коли наводиться діапазон значень, слід розуміти, що цей винахід охоплює кожне проміжне значення з точністю до десятого знака нижньої межі, якщо в контексті явно не вказано інше, між верхньою та нижньою межею цього діапазону, а також будь-яке інше зазначене або проміжне значення в такому зазначеному діапазоні. Верхня і нижня межі цих менших діапазонів можуть бути незалежно включені в менші діапазони і також включені в цей винахід з урахуванням будь- якої спеціальним чином виключеної межі в зазначеному діапазоні. Якщо зазначений діапазон включає одну або обидві межі, діапазони, що виключають одну або обидві ці включені межі, також включені в цей винахід.

Якщо не вказано інше, залишки антитіл у цьому документі нумеруються відповідно до системи нумерації Кабаї (е.9., Кабаї еї аІ., ЗХедоепсез ої Іттипоїодіса! Іпіегев5і. 5 Ей. Рибіїс

Неакней Зегмісе, Маїйопаї! Іпзійшез ої Неанцй, Веїпезаа, Ма. (1991)).

Для забезпечення повного розуміння цього винаходу в нижченаведеному детальному описі викладені багаточисельні конкретні деталі. Проте для фахівця в даній області техніки буде очевидно, що цей винахід може застосовуватися на практиці та без однієї або більше зазначених конкретних деталей. В інших випадках загальновідомі відмінні ознаки та процедури, добре відомі фахівцям у цій області технікию, не були описані для уникнення труднощів розуміння винаходу.

Усі наведені в цьому документі посилання, включно з патентними заявками та публікаціями, включені в цей документ за допомогою посилання в повному обсязі.

І. Визначення

Під терміном "що містить" мається на увазі, що перераховані елементи потрібні для композиції/способу/набору, однак для формування композиції/способу/набору тощо, в рамках формули винаходу можуть бути включені й інші елементи.

Під терміном "що складається по суті з" мається на увазі обмеження рамок описаної композиції або способу зазначеними матеріалами або поетапними діями, які істотно не впливають на основну та нову характеристику(-и) об'єкту винаходу.

Під терміном "що складається з" мається на увазі виключення будь-якого елементу, поетапної дії або інгредієнту, не вказаного в формулі винаходу, з композиції, способу або набору.

Залишки антитіл у цьому документі пронумеровані відповідно до системи нумерації Кабаї і системи нумерації ЕО. Система нумерації Кабраї зазвичай використовується для позначення залишку в варіабельному домені (приблизно залишки 1-113 важкого ланцюга) (наприклад, бо Кабаї єї а!., Збедоепсез ої Іттипоіоадісаї! Іпіегевзі. Бій Еа. Рибіїс Неанй 5егмісе, Маїйопаї! Іп5ійшев ої

Неапп, ВешШезаа, Ма. (1991)). "Система нумерації ЕМО" або "індекс Би" зазвичай використовується для позначення залишку в константній області важкого ланцюга імуноглобуліну (наприклад, індекс Є), описаний в Карбаї єї аї., вище). "Індекс БО відповідно до

Кава!" стосується нумерації залишків ЄЮ антитіла ЇД1 людини. Якщо не вказано інше, в цьому документі посилання на номери залишків у варіабельному домені антитіл означають нумерацію залишків відповідно до системи нумерації Кабаї. Якщо не вказано інше, в цьому документі посилання на номери залишків у константному домені антитіл означають нумерацію залишків відповідно до системи нумерації ЕШ.

Термін "моноклональне антитіло" в цьому документі стосується антитіла, отриманого з популяції в значній мірі однорідних антитіл, тобто окремі антитіла в складі популяції є ідентичними, за винятком мутацій, що відбуваються з природних причин, які можуть бути присутніми в невеликих кількостях. Моноклональні антитіла є високоспецифічними та спрямовані проти одного антигенного сайту. Крім того, на відміну від препаратів звичайних (поліклональних) антитіл, які зазвичай включають різні антитіла, спрямовані проти різних детермінант (епітопів), кожне моноклональне антитіло направлено проти одиночної детермінанти на антигені. Моноклональні антитіла згідно з цим винаходом можуть бути отримані гібридомним способом, вперше описаним Копіег еї аІ. (1975) Маїшге 256:495, також можуть бути отримані, наприклад, способами отримання рекомбінантного білка (див., наприклад, патент США Мо 4816567).

Термін "варіабельний", в контексті цього документу, в зв'язку з антитілами стосується того факту, що послідовності деяких частин варіабельних доменів антитіла сильно розрізняються у різних антитіл та роблять внесок у зв'язування й специфічність кожного конкретного антитіла відносно його конкретного антигену. У той самий час варіабельність не є рівномірно розподіленою по варіабельних доменах антитіл. Вона зосереджена в трьох сегментах варіабельних доменів як легкого, так і важкого ланцюга, які називаються гіперваріабельними областями. Більш консервативні фрагменти варіабельних доменів називаються каркасними областями (ЕК). Варіабельні домени нативних легких та важких ланцюгів містять по чотири ЕК, що здебільшого приймають конфігурацію р-листа та з'єднаних трьома гіперваріабельними областями, що утворюють петлі, які з'єднують структури р-типу, а в деяких випадках є їх частиною. Гіперваріабельні області кожного ланцюга утримуються разом у безпосередній близькості ЕК і, разом з гіперварабельними областями іншого ланцюга, беруть участь в утворенні антиген-зв'язуючого сайту антитіл (див. Кабраї еї аЇ., Зедиепсе5 ої Ргоївіп5 ої

Іттипоіодіса! Іпієгеві, Бій Ей. Рибіїс Неацй 5егуісе, Маїйопаї! Іпзійшевз ої Неанйй, Веїйезаа, МО. (1991)). Константні домени не беруть безпосередньої участі у зв'язуванні антитіла з антигеном, однак виявляють різні ефекторні функції, наприклад, участь антитіла в антитілозалежній клітинно-опосередкованій цитотоксичності (АЗКЦ).

Термін "гіперваріабельна область" при застосуванні в цьому документі, стосується амінокислотних залишків антитіла, які відповідають за зв'язування антигену. Гіперваріабельна область зазвичай містить амінокислотні залишки з "області, яка визначає комплементарність" або "СОК" (наприклад, залишки 31-35 (НІ), 50-65 (Н2) та 95-102 (НЗ) у варіабельному домені важкого ланцюга; Кабаї еї аї., Зедиепсев5 ої Ргоївіп5 ої Іттипоіодіса! Іпіегеві, Бій Еа. Рибіїс

Неанй 5Зегуїісе, Маїопаї! Іпзійшевз ої Неайй, Веїйезаа, МО. (1991)) та/"або залишки з залишків "піперваріабельної петлі" 26-32 (НІ), 53-55 (Н2) та 96-101 (НЗ) у варіабельному домені важкого ланцюга; СпПоїніа і І е5К У). Мої. Віо!. 196:901-917 (1987)). "Каркасна область" або залишки "ЕЕ", як визначено в цьому документі, являють собою залишки гіперваріабельної області, відмінні від залишків варіабельного домену.

Приблизні позначення СОК показані в цьому документі, проте фахівця в даній області техніки буде зрозуміло, що зазвичай використовується низка визначень СОК, включно з визначенням за КаБбаї (см. "2пао еї аї. А дептіїпе Кпом/едде разедй сотршайопаї! арргоасії Тог деїептіпіпуд апібоду сотріетепіапу аесепгтіпіпд гедіоп5.» Мої! Іттипої. 2010:47:694-700), яке засноване на мінливості послідовності та є таким, найчастіше використовується. Визначення за

СпоїШіа засноване на розташуванні областей замкнутої структури (Споїпіа єї аЇ. "Сопіогтайоп5 ої іттиподіобиййп пурегуапабріє тедіоп5." Майшге. 1989; 342:877-883). Альтернативні визначення

СОК, що становлять інтерес, включають, без обмеження, розкриті Нопеддег, "Уеї апоїпег питбегіпд зспете ог іттиподіобиїп магіабіе дотаїпе: ап ашотаїйс тоаеїїпд апа апаїувів 001.7 У

Мо! Віої. 2001;309:657-670; Оїпап еї аї. "Ашотаїгїеа ідепійісайоп ої сотріетепіатіу аеїгептіпіпу гедіопе (СОК5) гемеаіє ресцшійаг сПпагасіегізїсв ої СОК5 апа В сеїЇ ерйоре5." 9 Іттипо). 2008;181:6230-6235; АІтадго "Ідепійісайоп ої айегепсез іп Ше 5ресіїісйу-деїеттіпіпу гезідцев ої апіїродіє5 їНаї гесодпіге апіїдеп5 ої айегепі в5і2е: ітріїсайоп5 Тог Ше гайопаї! аезідп ої апібоду 60 герепоіге5." 9) Мо! Кесодпії. 2004;17:132-143; та РааіІапеї аї. "Ідепійсайоп ої 5ресійсйу-

деїгептіпіпу гезідцез іп апіїбодіез." Разер 9. 1995:9:133-139., вміст кожного з яких включений в цей документ у повному обсязі шляхом посилання.

Терміни "антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги", "антитіло з важкими ланцюгами" використовуються в цьому документі як взаємозамінні та стосуються в найширшому сенсі антитіл, в яких відсутній легкий ланцюг звичайного антитіла. Терміни, зокрема, включають, без обмеження, гомодимерні антитіла, які містять антигензв'язуючий домен МН і константні домени

СНІ ї СНЗ, за відсутності домену СНІ; функціональні (антигензв'язуючі) варіанти таких антитіл, розчинні варіанти УН, ІдД-МАК, що містять гомодимер одного варіабельного домену (М-МАК) та п'яти С-подібних константних доменів (С-МАК), та їх функціональні фрагменти; і розчинні однодоменні антитіла (зОпібабе М), В одному варіанті здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, складається з антигензв'язуючого домену варіабельної області, що складається з каркаса 1, СОКІ1, каркаса 2, СОК2, каркаса 3, СОКЗ і каркаса 4. В іншому варіанті здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, складається з антигензв'язуючого домену щонайменше частини шарнірної області та доменів СН2 і СНЗ. В іншому варіанті здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, складається з антигензв'язуючого домену щонайменше частини шарнірної області та домену СН2. У додатковому варіанті здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, складається з антигензв'язуючого домену щонайменше частини шарнірної області та домену СНЗ. Антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, які мають усічений домен СН2 та/або СНЗ, також включені в цей документ. У додатковому варіанті здійснення важкий ланцюг складається з антигензв'язуючого домену та щонайменше одного домену СН (СНІ, СН2, СНЗ або СНІ), але без шарнірної області. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, може бути в формі димера, в якому два важкі ланцюги дисульфідно зв'язані один з одним, ковалентно або нековалентно зв'язані один з одним.

Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, може належати до підкласу до, але також у цьому документі включені антитіла, які належать до інших підкласів, як-от підклас І9М, ІдА, дО та ІЗЕ.

У конкретному варіанті здійснення антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, має підтип Їдс1,

Ідс2, ДОЗ або Ідс4, зокрема підтип Їд51. В одному варіанті здійснення антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, в цьому документі використовуються в якості зв'язуючого (націлюючого) домену химерного антигенного рецептора (САК). Визначення, зокрема, включає антитіла людини, які містять тільки важкі ланцюги, що називаються ОпіАбе"М, які продукуються трансгенними щурами з імуноглобуліном людини (піБаї"М). Варіабельні області (МН) Опідб5 "мМ називають Опібарз М, і вони є універсальними будівельними блоками, які можуть бути зв'язані з областями Ес або сироватковим альбуміном для розробки нових терапевтичних засобів з мультиспецифічністю, підвищеною ефективністю та збільшеним періодом напіввиведення.

Оскільки гомодимерні ОпіАб5"М позбавлені легкого ланцюга і, отже, домену Мі, антиген розпізнається одним єдиним доменом, тобто варіабельним доменом важкого ланцюга антитіла, яке містить тільки важкі ланцюги (МН).

Терміни "С022" і "кластер диференціювання-22", які використовуються в цьому документі, стосуються молекули лектинів сімейства 5ІСІ ЕС, виявленої на поверхні зрілих В-клітин і в меншій мірі в деяких незрілих В-клітинах. Термін "СО22" включає білок СО22 людини і будь- якого виду тварин, відмінних від людини, і, зокрема, включає СО22 людини, а також СО22 ссавців, відмінних від людини.

Використовуваний в цьому документі термін "СО022 людини" включає будь-які варіанти, ізоформи і видові гомологи СО22 людини (ОпіРгої Р20273) незалежно від їх джерела або способу отримання. Таким чином, "СО022 людини" включає СО22 людини, природно експресований клітинами, і СО22, експресований в клітинах, трансфікованих геном СО022 людини.

Терміни "анти-СО22 антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги", "антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги", "анти-СО22 антитіло, яке містить важкі ланцюги" і "антитіло до

СО22, яке містить тільки важкі ланцюги" використовуються в цьому документі як взаємозамінні для позначення антитіла, яке містить тільки важкі ланцюги, як визначено вище, для імуноспецифічного зв'язування з СО22, зокрема СО22 людини, як визначено вище. Визначення включає, без обмеження, антитіла людини, які містять тільки важкі ланцюги, які продукують трансгенні тварини, як-от трансгенні щури або трансгенні миші, які експресують імуноглобулін людини, зокрема ОпіКаїв5'М, які продукують антитіла Опідб'М до СО22 людини, як визначено вище. "Відсоток (95) ідентичності амінокислотної послідовності" відносно еталонної поліпептидної послідовності визначається як відсоток амінокислотних залишків у кандидатній послідовності, ідентичних амінокислотним залишкам у еталонній поліпептидній послідовності після 60 вирівнювання послідовностей та внесення гепів, за необхідності, для досягнення максимального відсотка ідентичності послідовності та без урахування будь-яких консервативних замін як частини ідентичності послідовності. Вирівнювання в цілях визначення відсотка ідентичності амінокислотної послідовності можна виконувати різними способами, відомими фахівцеві в цій галузі техніки, наприклад, за допомогою загальнодоступного програмного забезпечення, як-от ВІ А5Т, ВІ А5ЗТ-2, АПОМ або Медаїїдп (ОМА5ТАК). Фахівці в цій галузі техніки можуть визначити відповідні параметри для вирівнювання послідовностей, включно з будь-якими алгоритмами, необхідними для досягнення максимального вирівнювання по всій довжині порівнюваних послідовностей. Для цілей цього документу, проте, значення 9о ідентичності амінокислотної послідовності отримані з використанням програми для порівняння послідовностей АЇ І М-2. "Виділеним" антитілом є антитіло, яке було ідентифіковане і відокремлене та/або вилучене з компонента його природного середовища. Забруднюючий компонент природного середовища являє собою речовини, які впливають на діагностичне або терапевтичне застосування антитіла, і можуть включати ферменти, гормони та інші білкові або небілкові розчинені речовини. У переважних варіантах здійснення антитіло буде очищено (1) до більше 95 95 за масою антитіла, як визначено методом Лоурі, й найбільш переважно більше 9995 за масою, (2) до рівня, достатнього для отримання щонайменше 15 залишків М-кінцевої або внутрішньої амінокислотної послідовності, використовуючи секвенатор зі склянкою, яка обертається, або (3) до гомогенності (505-РАСЕ) у відновлювальних або невідновлювальних умовах з використанням барвника Кумассі синього або, переважніше, барвника на основі срібла.

Виділене антитіло включає антитіло іп 5їйш в рекомбінантних клітинах, оскільки щонайменше один компонент природного середовища антитіла буде відсутній. Зазвичай, проте, виділене антитіло буде отримане за допомогою щонайменше одного етапу очищення.

Антитіла за цим винаходом включають мультиспецифічні антитіла. Мультиспецифічні антитіла мають більш ніж одну специфічність зв'язування. Термін "мультиспецифічний", зокрема, включає "біспецифічний" і "триспецифічний", а також афінність незалежного специфічного зв'язування вищого порядку, як-от поліепітопна специфічність вищого порядку, а також тетравалентні антитіла та фрагменти антитіл. "Мультиспецифічні" антитіла, зокрема, включають антитіла, які містять комбінацію різних зв'язуючих об'єктів, а також антитіла, які містять більш ніж один і той самий зв'язуючий об'єкт. Терміни "мультиспецифічне антитіло", "мультиспецифічне антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги", "мультиспецифічне антитіло, яке містить важкі ланцюги" і "иультиспецифічне Опідб"М використовуються в цьому документі в найширшому сенсі та охоплюють всі антитіла з більш ніж однією специфічністю зв'язування.

Мультиспецифічні антитіла до СО22, які містять важкі ланцюги, за цим винаходом, зокрема, включають антитіла, які імуноспецифічно зв'язуються з більш ніж одним епітопом, що не перекривається, на білку СО22, як-от СО22 людини. "Епітоп" являє собою ділянку на поверхні молекули антигену, з яким зв'язується одна молекула антитіла. Зазвичай антиген має кілька або багато різних епітопів і вступає в реакцію з багатьма різними антитілами. Термін, зокрема, включає лінійні епітопи та конформаційні епітопи. "Епітопне картування" являє собою процес ідентифікації сайтів зв'язування або епітопів антитіл на їх цільових антигенах. Епітопи антитіл можуть бути лінійними або конформаційними епітопами. Лінійні епітопи утворені безперервною послідовністю амінокислот у білку.

Конформаційні епітопи утворюються з амінокислот, які є переривчастими в послідовності білка, але які об'єднуються при згортанні білка в його тривимірну структуру.

Термін "поліепітопна специфічність" стосується здатності специфічно зв'язуватися з двома або більше різними епітопами на одній або різних мішенях. Як зазначено вище, цей винахід, зокрема, включає антитіла до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, з поліепітопною специфічністю, тобто антитіла до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, які зв'язуються з двома або більше епітопами, що не перекриваються, на білку СО22, як-от СО22 людини. Термін "епітоп(и), що не перекривається" або "неконкурентний епітоп(и)» антигену визначається в цьому документі як такий епітоп(и), що розпізнається одним членом пари антигенспецифічних антитіл, але не іншим членом. Пари антитіл або антигензв'язуючі області, націлені на один і той самий антиген на мультиспецифічному антитілі, які розпізнають епітопи, що не перекриваються, не конкурують за зв'язування з цим антигеном і здатні зв'язувати цей антиген одночасно.

Антитіло зв'язує "по суті той самий епітоп", що й еталонне антитіло, коли два антитіла розпізнають епітопи, які є ідентичними або стерично перекриваються. Найбільш широко використовуваними та швидкими способами для визначення того, чи зв'язуються два епітопи з ідентичними епітопами або епітопами, які стерично перекриваються, є аналізи конкурентного 60 зв'язування, які можуть бути налаштовані в усій кількості різних форматів з використанням або міченого антигену, або міченого антитіла. Зазвичай антиген іммобілізують в 96б-лунковому планшеті, і здатність немічених антитіл блокувати зв'язування мічених антитіл вимірюють з використанням радіоактивних або ферментних міток.

Термін "валентний", в контексті цього документа, стосується вказаної кількості сайтів зв'язування в молекулі антитіла. "Полівалентне" антитіло має два або більше сайтів зв'язування. Таким чином, терміни "двовалентний", "тривалентний" і "чотиривалентний" стосуються наявності двох сайтів зв'язування, трьох сайтів зв'язування та чотирьох сайтів зв'язування, відповідно. Таким чином, біспецифічне антитіло за винаходом є щонайменше двовалентним і може бути тривалентним, чотирьохвалентним або іншим чином полівалентним.

Відома велика різноманітність способів і конфігурацій білка і використовується для отримання біспецифічних моноклональних антитіл (В5МАВ), триспецифічних антитіл, тощо.

Термін "біспецифічна триланцюгова антитілоподібна молекула" або "ТСА" використовується в цьому документі для позначення антитілоподібних молекул, що включають, складаються по суті або складаються з трьох поліпептидних субодиниць, дві з яких містять, складаються по суті з або складаються з одного важкого та одного легкого ланцюга моноклонального антитіла, або функціональних антигензв'язуючих фрагментів таких ланцюгів антитіла, що містять антигензв'язуючу область і щонайменше один СН-домен. Ця пара важкий ланцюг/легкий ланцюг має специфічність зв'язування для першого антигену. Третя поліпептидна субодиниця містить, складається по суті або складається з антитіла, яке містить тільки важкі ланцюги, яке містить ділянку Ес, що містить домени СН2 та/або СНЗ, та/або СНЯА, за відсутності домену СНІ, і антигензв'язуючий домен, який зв'язує епітоп другого антигену або інший епітоп першого антигену, причому такий зв'язуючий домен походить з або має ідентичність послідовності варіабельної області важкого або легкого ланцюга антитіла. Частини такої варіабельної області можуть кодуватися сегментами гену Мн та/або Мі, сегментами гену О та н, або сегментами гену

УЛ. Варіабельна область може кодуватися реаранжованими генними сегментами МнОУн, Мі Он,

Мнаї або М). Білок ТСА використовує антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, як визначено вище.

Термін "химерний антигенний рецептор" або "САК" використовується в цьому описі в найширшому сенсі для позначення сконструйованого рецептора, який прищеплює бажану специфічність зв'язування (наприклад, антигензв'язуючу область моноклонального антитіла або іншого ліганду) до охоплюючого мембрану та внутрішньоклітинного сигнального доменів. Як правило, рецептор використовується для прищеплення специфічності моноклонального антитіла на Т-клітину для створення химерних антигенних рецепторів (САК). (у Маї! Сапсег Іпві, з5 2015; 108(7):ам|439; апа даскзоп еї а!., Маїшге Неміємув Сіїпіса! Опсоіоду, 2016; 13:370-383.)

Термін "антитіло людини" використовується в цьому документі для включення антитіл, які мають варіабельні та константні області, отримані з послідовностей імуноглобуліну людської зародкової лінії. У цьому документі антитіла людини можуть включати амінокислотні залишки, які не кодуються послідовностями імуноглобуліну людини зародкової лінії, наприклад, мутації, введені випадковим або специфічним для сайту мутагенезом іп мйго або за допомогою соматичної мутації іп мімо. Термін "антитіло людини", зокрема, включає антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, що мають послідовності варіабельної області важкого ланцюга людини, які продукують трансгенні тварини, як-от трансгенні щури або миші, зокрема ОпіАбе "М, продуковані ОпіКаї5 М, як визначено вище.

Під "химерним антитілом" або "химерним імуноглобуліном" мається на увазі молекула імуноглобуліну, яка містить амінокислотні послідовності щонайменше з двох різних локусів Ід, наприклад, трансгенне антитіло, яке містить частину, кодовану локусом Ід людини, і частину, кодовану локусом Ід щура. Химерні антитіла включають трансгенні антитіла з нелюдськими Ес- областями або штучними Ес-областями, і людські ідіотипи. Такі імуноглобуліни можуть бути виділені з тварин за винаходом, які були сконструйовані для отримання таких химерних антитіл.

Використовуваний в цьому документі термін "ефекторна клітина" стосується імунної клітини, яка бере участь в ефекторній фазі імунної відповіді, на відміну від когнітивної та активаційної фаз імунної відповіді. Деякі ефекторні клітини експресують специфічні рецептори Ес і виконують специфічні імунні функції. У деяких варіантах здійснення ефекторна клітина, як-от природна клітина-кілер, здатна індукувати антитілозалежну клітинну цитотоксичність (АЗКЦ). Наприклад, моноцити та макрофаги, які експресують ЕсК, беруть участь у специфічному знищенні клітин- мішеней і поданні антигенів іншим компонентам імунної системи або зв'язуються з клітинами, які представляють антигени. У деяких варіантах здійснення ефекторна клітина може здійснювати фагоцитоз антигену-мішені або клітини-мішені.

"Ефекторні клітини людини" являють собою лейкоцити, які експресують рецептори, як-от рецептори Т-клітин або ЕсК, і здійснюють ефекторні функції. Переважно, такі клітини експресують щонайменше ЕсукйІ і здійснюють ефекторну функцію АЗКЦ. Приклади лейкоцитів людини, які опосередковують АЗКЦ, включають, природні клітини-кілери (МК), моноцити, цитотоксичні Т-клітини та нейтрофіли; причому МК-клітини є переважними. Ефекторні клітини можуть бути виділені з нативного джерела, наприклад, з крові або МКПК, як описано в цьому документі.

Термін "імунна клітина" використовується в цьому описі в найширшому сенсі, зокрема, без обмеження, клітини мієлоїдного або лімфоїдного походження, наприклад лімфоцити (як-от В- клітини й Т-клітини, включаючи цитолітичні Т-клітини (ЦТЛ)), клітини-кілери, природні клітини- кілери (МК), макрофаги, моноцити, еозинофіли, поліморфноядерні клітини, як-от нейтрофіли, гранулоцити, огрядні клітини та базофіли. "Ефекторні функції" антитіла стосуються тієї біологічної активності, яка належить до області

Ес (області Ес нативної послідовності або області Ес варіанту амінокислотної послідовності) антитіла. Приклади ефекторних функцій антитіла включають зв'язування С14; комплемент- залежну цитотоксичність; зв'язування з рецептором Ес; антитілозалежну клітинно- опосередковану цитотоксичність (АЗКЦ); фагоцитоз; пригнічення рецепторів поверхні клітини. (наприклад, В-клітинний рецептор, ВСЕ) тощо. "Антитілозалежна клітинно-опосередкована цитотоксичність" та "АЗКЦ" відповідають опосередкованій клітинами реакції, в якій неспецифічні цитотоксичні клітини, які експресують рецептори Ес (БСК) (наприклад, природні клітини-кілери (МК), нейтрофіли і макрофаги), розпізнають зв'язане антитіло на цільовій клітині й, таким чином, призводять до лізису клітини- мішені. Первинні клітини, що опосередковують АЗКЦ, природні клітини-кілери, експресують тільки ЕсукІ, тоді як моноцити експресують ЕсуВі, ЕсукІ і ЕсукІ. Дані з експресії ЕсКк на гемопоетичних клітинах узагальнені в таблиці З на сторінці 464 публікації Камеїсн апа Кіпеї,

Аппи. Нем. Іттипо!ї 9:457-92 (1991). Для оцінки активності АЗКЦ молекули, яка становить інтерес, може бути проведений аналіз АЗКЦ іп мйго, описаний в патенті США Мо 5500362 або 5821337. Ефекторні клітини, придатні для такого аналізу, включають мононуклеарні клітини периферійної крові (МКПК) і природні клітини-кілери (МК). В якості альтернативи або доповнення, АЗКЦ-активність молекули, яка становить інтерес, можна оцінити іп мімо, наприклад, в тваринній моделі, наприклад, згідно з описом в публікації Сіупез еї аї. РМАБ(5А) 95:652-656 (1998). "Комплементзалежна цитотоксичність" або "СОС" стосується здатності молекули лізувати мішень в присутності комплементу. Шлях активації комплементу ініціюється зв'язуванням першого компонента системи комплементу (С14) з молекулою (наприклад, антитілом), що утворює комплекс з розпізнаваним антигеном. Для оцінки активації комплементу може бути виконаний аналіз СОС, наприклад, як описано в Са7апо-бапіого 6вї аї.,). Іттипої. Меїнодз 202:163 (1996). "Афінність зв'язування" стосується сили сумарної кількості нековалентних взаємодій між одним сайтом зв'язування молекули (наприклад, антитілом) та її зв'язуючим партнером (наприклад, антигеном). Якщо не вказано інше, як використовується в цьому документі, "афінність зв'язування" стосується афінності власного зв'язування, яка відображає взаємодію 171 між членами пари зв'язування (наприклад, антитілом і антигеном). Афінність молекули Х до її партнеру М в цілому можна виразити константою дисоціації (Ка). Афінність може бути виміряна звичайними методами, відомими в даній галузі техніки. Низькоафінні антитіла зазвичай зв'язують антиген повільно і схильні легко дисоціювати, тоді як високоафінні антитіла зазвичай зв'язують антиген швидше і мають тенденцію залишатися зв'язаними.

Використовуваний в цьому документі термін "Ка" або "значення Ка" стосується константи дисоціації, визначеної методом інтерферометрії ВіоЇауег, з використанням приладу Осіеї

ОКЗ384 (Ропебіо Іпс., Мепіо РагК, СА) в режимі кінетики. Наприклад, анти-мишачі Ес-датчики завантажують зі злитим Ес-антигеном миші та потім занурюють в лунки, що містять антитіла, для вимірювання залежних від концентрації швидкостей (Коп). Швидкості дисоціації антитіл (Кот) вимірюються на останньому етапі, коли датчики занурюють в лунки, які містять тільки буфер. Ка являє собою співвідношення Кой/Ккоп. (Детальніше див. Сопсерсіоп, .), еї аїЇ.,, Сотр

СПпет Нідп Тпгопдприї Зстееп, 12(8), 791-800, 2009).

Терміни "лікування", "лікувати" тощо використовуються в цьому документі для позначення досягнення бажаного фармакологічного та/або фізіологічного ефекту. Ефект може бути профілактичним з точки зору повного або часткового запобігання захворювання або його симптомів талабо може бути терапевтичним з точки зору часткового або повного лікування 60 захворювання та/або несприятливого явища, пов'язаного з цим захворюванням. У контексті цього документу термін "лікування" охоплює будь-яке лікування захворювання у ссавця і включає: (а) запобігання появі захворювання у суб'єкта, який може бути схильний до захворювання, але у якого це захворювання ще не діагностували; (Б) інгібування захворювання, тобто припинення його розвитку; або (с) полегшення захворювання, тобто регресію захворювання. Терапевтичний засіб можна вводити до, під час або після початку захворювання або травми. Лікування поточного захворювання, при якому лікування стабілізує або зменшує небажані клінічні симптоми пацієнта, становить особливий інтерес. Таке лікування бажано проводити до повної втрати функції в уражених тканинах. Терапія суб'єкту може бути введена під час симптоматичної стадії захворювання, і, в деяких випадках, після симптоматичної стадії захворювання.

Термін "терапевтично ефективна кількість" означає кількість активного агента, необхідну для надання терапевтичного ефекту у суб'єкта. Наприклад, "тнерапевтично ефективна кількість" являє собою кількість, яка викликає, послаблює або іншим чином викликає покращання патологічних симптомів, прогресування захворювання або фізіологічних станів, пов'язаних із захворюванням, або яка підвищує стійкість до розладу.

Терміни "В-клітинні новоутворення" або "зрілі В-клітинні новоутворення" в контексті цього винаходу включають дрібноклітинну лімфоцитарну лімфому, В-клітинну пролімфоцитарну лімфому, В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз, лімфому з мантійних клітин, лімфому

Беркітта, фолікулярну лімфому, дифузну В-крупноклітинну лімфому (ДВККЛ), множинну мієлому, лімфоплазмацитарну лімфому, лімфому маргінальної зони селезінки, новоутворення плазматичних клітин, як-от мієлома клітин плазми, плазмоцитома, хвороба відкладення моноклональних імуноглобулінів, хвороба важких ланцюгів, МА Т-лімфома, вузлова В-клітинна лімфома з клітин маргінальної зони, внутрішньосудинна В-великоклітинна лімфома, первинна випітна лімфома, лімфоматоїдний гранулематоз, неходжкінська лімфома, лімфома Ходжкіна, волосатоклітинний лейкоз, первинна випітна лімфома та СНІД-асоційована неходжкінська лімфома.

Терміни "суб'єкт", "індивідуум" і "пацієнт" використовуються в цьому документі як взаємозамінні для позначення ссавця, якого оцінюють на предмет лікування та/або який піддається лікуванню. В одному варіанті здійснення ссавець є людиною. Терміни "суб'єкт", "індивідуум" і "пацієнт" охоплюють, без обмеження, індивідуумів, які мають рак, індивідуумів з автоїмунними захворюваннями, патогенними інфекціями тощо. Суб'єктами можуть бути люди, але також можуть бути й інші ссавці, зокрема ті ссавці, які можуть бути використані в якості лабораторних моделей захворювань людини, наприклад, миша, щур тощо.

Термін "фармацевтична композиція" стосується композиції, яка знаходиться в такій формі, що дозволяє біологічній активності активного інгредієнта бути ефективною, і яка не містить додаткових компонентів, які є неприйнятно токсичними для суб'єкта, якому буде вводитися композиція. Такі композиції є стерильними. "Фармацевтично прийнятні допоміжні речовини" (носії, ад'юванти) є такими, що резонно можуть вводитися суб'єкту-ссавцю і забезпечувати ефективну дозу використовуваного активного інгредієнта. "Стерильна" композиція є асептичною або вільною від, або практично не містить будь-яких живих мікроорганізмів та їх спор. "Заморожена" композиція є композицією при температурі нижче 0 26. "Стабільна композиція" є такою, в якій білок практично повністю зберігає свою фізичну стабільність та/або хімічну стабільність та/або біологічну активність під час зберігання.

Переважно, композиція практично повністю зберігає свою фізичну або хімічну стабільність, а також свою біологічну активність. Період зберігання в загалом вибраний, виходячи з терміну придатності композиції. Різноманітні техніки для вимірювання стабільності білка відомі в даній області техніки і розглянуті в Рерііде апа Ргоївіп Огша Оеєїїмегу, 247-301. Міпсепі І ее Еа., Магсеї

ОеккКег, Іпс., Мем/ ХогКк, М.У., Рирв5. (1991) та допех. А. Аду. Огид Оеєїїмегу Кеу. 10: 29-90) (1993), наприклад. Стабільність може бути виміряна за обраної температури для обраного періоду часу. Стабільність може бути оцінена якісно та/або кількісно різними способами, включно з оцінкою утворення агрегатів (наприклад, з використанням ексклюзійної хроматографії, шляхом вимірювання каламутності та/або візуальним контролем); шляхом оцінки неоднорідності заряду за допомогою катіонообмінної хроматографії, ізоелектричного фокусування зображення (ісіє:Е) або електрофорезу в капілярній зоні; аналізом амінокінцевої або карбоксикінцевої послідовності; мас-спектрометричним аналізом; 5ЗЮО5Б-РАСЕ аналізом для порівняння відновленого та інтактного антитіла; аналізом пептидної карти (наприклад, триптичний або І У5-

С); оцінку біологічної активності або антигензв'язуючих функції антитіла; тощо. Нестабільність може включати в себе одне або декілька з: агрегації, дезамідування (наприклад, Авп 60 дезамідування), окислення (наприклад, окислення Мей), ізомеризації (наприклад, ізомеризації

Авзр), відсікання / гідроліз / фрагментація (наприклад, фрагментація шарнірної області), утворення сукциніміду, неспарений цистеїн(и), подовження М-кінця, обробка С-кінця, відмінності глікозилювання, тощо.

ІЇ. Детальний опис сутності винаходу

Антитіла до СО22

Цей винахід стосується сімейства тісно пов'язаних антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, які зв'язуються з СО22 людини. Антитіла цього сімейства містять послідовності СОЖК, як визначено в цьому документі і показано на Фіг. 1, та ілюструються наведеними послідовностями варіабельної області важкого ланцюга (МН) ЗЕО ІО МО: 24--84 зазначеними на Фіг. 2. Сімейства антитіл забезпечують ряд переваг, які сприяють їх застосуванню в якості клінічного(-их) терапевтичного(-их) агентас-ів). Антитіла включають членів з діапазоном афінності зв'язування, які дозволяють вибирати конкретну послідовність з бажаною афінністю зв'язування.

Придатне антитіло може бути вибрано з представлених в цьому документі для розробки і терапевтичного або іншого застосування, включно з, без обмеження, використанням в якості біспецифічного антитіла, наприклад, наведеного на Фіг. 5В, або триспецифічного антитіла або частини структури САК-Т.

Визначення афінності до білка-кандидата може бути виконано з використанням способів, відомих в даній області, як-от вимірювання Віасоге. Члени сімейства антитіл можуть мати афінність до СО22 з Ка від близько 109 від близько 107", в тому числі без обмеження: від близько 102 від близько 1079: від близько 102 від близько 1072; від близько 102 від близько 108; від близько 10 від близько 107; від близько 10 від близько 1079: від близько 103 від близько 10: від близько 107 від близько 10-11; від близько 107 від близько 1079; або будь-яке значення в цих діапазонах. Вибір афінності може бути підтверджений біологічною оцінкою для модуляції, наприклад, блокування, біологічна активність СО22, включно з аналізами іп міо, доклінічними моделями та клінічними випробуваннями, а також оцінкою потенційної токсичності.

Члени сім'ї антитіл, описані в цьому документі, не є перехресно-реактивними з СО22 білком макака СупотоЇдиє, але можуть бути сконструйованими для отримання перехресної реактивності з білюоом СО22 макака СупотоїЇдиз або білками СО22 інших видів, за необхідності.

Сімейство специфічних для СО22 антитіл в цьому документі включає домен УН, що містить послідовності СОКІ, СОК2 ії СОМКЗ в каркасі МН людини. Послідовності СОМ можуть бути розташовані, наприклад, в області близько амінокислотних залишків 26-35; 53-59; і 98-117, для

СОКІ, СОМкК2 ї СОКЗ відповідно, наданих зразкових послідовностей варіабельної області, наведених в 5ЕО ІЮ МО: 24-84. Фахівцю в даній галузі техніки має бути зрозуміло, що послідовності СОК можуть знаходитися в інших положеннях, якщо вибрана інша каркасна послідовність, хоча, як правило, порядок послідовностей залишається незмінним.

Послідовності СОКІ, СОМК2 і СОКЗ антитіл до СО22 за цим винаходом можуть охоплюватися такими структурними формулами, де Х означає варіабельну амінокислоту, яка може являти собою специфічні амінокислоти, як зазначено нижче.

Сов

ОС ХІІ 5 І Хе Хз Ха Хв Хв М (5ЕО ІО МО: 85) де Хі являє собою О або 0;

Хг являє собою 5, Т, І або М;

Хз являє собою 5 або Ю;

Ха являє собою 0, 5, або М;

Хо являє собою ЮО, з або 5, а

Хв являє собою У або Н. соваг

Х» Хв М Хе 0 Хіо Хі(5ЕО ОО МО: 86) де Х7 являє собою І або У;

БО Хв являє собою У або Н;

Хе являє собою 5 або Т;

Хо являє собою А, М або 5, а

Хії являє собою Т або А.

СсовЗ

Хі2 АВ Хіз ОЮ 5 5 Хі М А 5 (5ЕО ІЮ МО: 87) де Хіг являє собою Т, А або К;

Хіз являє собоюЮ абоєбЄ, а

Ха являє собою М або 5.

Ілюстративні послідовності СОК1Т, СОК2 та СОКЗ показані на Фіг. 1 і Фіг. 3.

У деяких варіантах здійснення антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги, за цим винаходом містить послідовність СОКІ будь-якої з ЗЕО ІЮО МО: 1-10. У конкретному варіанті здійснення послідовність СОРБІТ являє собою 5ЕО ІЮО МО: 1.

У деяких варіантах здійснення антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги, за цим винаходом містить послідовність СОК2 будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 11-17. У конкретному варіанті здійснення послідовність СОВ2 являє собою ЗЕО ІЮО МО: 11.

У деяких варіантах здійснення антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги, за цим винаходом містить послідовність СОКЗ будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 18-23. У конкретному варіанті здійснення послідовність СОВ2 являє собою ЗЕО ІЮО МО: 18.

У додатковому варіанті здійснення антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги, за цим винаходом містить послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО:1; послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 11 та послідовність СОБЗ ЗЕО І МО: 18.

У додаткових варіантах здійснення антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги, за цим винаходом містить будь-яку з амінокислотних послідовностей варіабельної області важкого ланцюга 5ЕО ІО МО: від 24 до 84 (Фіг. 2).

В іншому додатковому варіанті здійснення антитіло до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги за цим винаходом, містить варіабельну область важкого ланцюга ЗЕО ІЮО МО: 24.

У деяких варіантах здійснення послідовність СОК в антитілі до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги, за цим винаходом, містить одну або дві амінокислотні заміни відносно послідовності СОКІ, СОК2 та/"або СОКЗ або набору послідовностей СОКІ, СОК2 і СОКЗ в будь-якій з 5ЕО ІО МО: 1-23 (Фіг. 1). У деяких варіантах здійснення вказана амінокислотна заміна(и) являє собою одне або два амінокислотні положення 4-6 СОКІ1 та/або одне або два амінокислотні положення 2, 4-7 СОК2, та/(або одне або два амінокислотні положення 5-12

СОКЗ, відносно формул, запропонованих вище. У деяких варіантах здійснення антитіла до

СО022, які містять тільки важкі ланцюги, будуть містити послідовність варіабельної області важкого ланцюга з щонайменше близько 85 95 ідентичності, щонайменше 90 95 ідентичності, щонайменше 9595 ідентичності, щонайменше 98595 ідентичності, або щонайменше 99 95 ідентичності будь-яким послідовностям варіабельної області важкого ланцюга 5ЕО ІЮО МО: 24-- 84 (показаним на Фіг. 2).

У деяких варіантах здійснення пропонуються біспецифічні або мультиспецифічні антитіла, які можуть мати будь-яку з конфігурацій, обговорюваних в цьому документі, зокрема, без обмеження, біспецифічну триланцюгову антитілоподібну молекулу. У деяких варіантах здійснення біспецифічне антитіло може містити щонайменше одну варіабельну область важкого ланцюга, яка має специфічність зв'язування для СО22, і щонайменше одну варіабельну область важкого ланцюга, яка має специфічність зв'язування для білка, відмінного від СО22. У деяких варіантах здійснення біспецифічне антитіло може містити пару важкий ланцюг / легкий ланцюг, яка має специфічність зв'язування для першого антигену, і важкий ланцюг з антитіла, яке містить тільки важкі ланцюги, що містить частину Ес, яка містить СН2 та/або СНЗ та/або домени

СНна4, за відсутності домену СНІ, і антигензв'язуючого домену, який зв'язує епітоп другого антигену або інший епітоп першого антигену. В одному конкретному варіанті здійснення біспецифічне антитіло містить пару важкий ланцюг/легкий ланцюг, яка має специфічність зв'язування для антигену на ефекторній клітині (наприклад, білок СЮОЗ на Т-клітині), а важкий ланцюг з антитіла, яке містить тільки важкі ланцюги, містить антигензв'язуючий домен, що має специфічність зв'язування для СО22.

У деяких варіантах здійснення, коли білок за винаходом являє собою біспецифічне антитіло, одне плече антитіла (один зв'язуючий фрагмент) є специфічним для СО22 людини, в той час як інший фрагмент може бути специфічним для клітин-мішеней, асоційованих з пухлиною антигенів, цільових антигенів, наприклад, інтегринів і т. ін., антигенів патогенів, білків контрольних точок тощо. Клітини-мішені конкретно включають ракові клітини, зокрема, без обмеження, клітини з гематологічної пухлини, наприклад В-клітинні пухлини, як описано вище.

Різні формати біспеціфічних антитіл знаходяться в межах обсягу винаходу, зокрема, без обмеження, одноланцюгові поліпептиди, дволанцюгові поліпептиди, триланцюгові поліпептиди, чотириланцюгові поліпептиди й кратні їм поліпептиди. В цьому документі біспеціфічні антитіла конкретно включають біспецифічні антитіла Т-клітин, які зв'язуються з СО22, який вибірково експресується на зрілих В-клітинах, та СОЗ (антитіла до СО22хСОЗ3). Такі антитіла індукують сильне опосередковане Т-клітинами знищення клітин, що експресують СО22.

Отримання антитіл до СО22, які містять тільки важкі ланцюги

Антитіла, які містять тільки важкі ланцюги за цим винаходом можуть бути отримані за допомогою методів, відомих в даній області техніки. У переважному варіанті здійснення 60 антитіла, які містять тільки важкі ланцюги в даному випадку продукуються трансгенними тваринами, включаючи трансгенних мишей і щурів, переважно щурів, у яких ендогенні гени імуноглобуліну нокаутовані або відключені. У переважному варіанті здійснення антитіла, які містять тільки важкі ланцюги за цим винаходом продукуються в ОпіКаї"м, Опіка! мМ мають мовчазні гени власного ендогенного імуноглобуліну і використовують транслокус важкого ланцюга імуноглобуліну людини для експресії різноманітного, природно оптимізованого репертуару повністю людських НСАБ. У той час як ендогенні локуси імуноглобуліну у щурів можуть бути нокаутовані або заглушені з використанням різних технологій, у ОпікКаї"м технологія цинк-пальцевої (ендо-)нуклеази (2МЕ) була використана для інактивації ендогенного

У-локусу важкого ланцюга щура, локусу Ск легкого ланцюга і локусу С). легкого ланцюга.

Конструкції 2МЕ для мікроїін'єкції в ооцити можуть продукувати нокаутні (КО) лінії ІЧН та Ід.

Детальніше див., наприклад, Сешгів еї аїЇ., 2009, Зсіепсе 325:433. СНагасієегігайоп ої Ід пеаму спаіп КпосКоші гаїв наз реєеп геропейа Бу Мепотгеї еї аї., 2010, Єик. У. Іттипої. 40:2932-2941.

Переваги технології 4АМЕ полягають в тому, що негомологічне приєднання кінця для пригнічення гену або локусу за допомогою делецій розміром до декількох т.п.н. також може забезпечити сайт-мішень для гомологічної інтеграції (Сиї еї аї., 2011, Маї Віоїеснпої 29: 64-67). Антитіла важкого ланцюга людини, що продукуються в ОпікКаї"М, називаються Опідре"М ї можуть зв'язувати епітопи, які не можна атакувати звичайними антитілами. Їх висока специфічність, афінність і невеликий розмір роблять їх ідеальними для моно- і поліспецифічних застосувань.

На додаток до ОпіАбе» М, зокрема, в цей документ включені антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, позбавлені верблюжого каркаса й мутацій УНН, та їх функціональні області УН. Такі антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, можна, наприклад, продукувати у трансгенних щурів або мишей, які містять повністю людські генні локуси, що містять тільки важкі ланцюги, як описано, наприклад, в М/О 2006/008548, але також можна використовувати інших трансгенних ссавців, як-от кролик, морська свинка, щур, переважними є щури і миші. Антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, включаючи їх функціональні фрагменти УНН або УН, також можуть бути отримані за допомогою технології рекомбінантних ДНК шляхом експресії кодуючої нуклеїнової кислоти в придатному еукаріотичному або прокаріотичному хазяїні, включаючи, наприклад, клітини ссавців (наприклад, клітини СНО), кишкову паличку або дріжджі.

Домени антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, поєднують в собі переваги антитіл і низькомолекулярних лікарських засобів: можуть бути моно- або мультивалентними; мають низьку токсичність; і економічно вигідні у виробництві. Через їх невеликий розмір ці домени легко вводити, включаючи пероральне або місцеве введення, вони характеризуються високою стабільністю, включаючи шлунково-кишкову стабільність; та їх період напіввиведення може бути адаптований до бажаного застосування або показанням. Крім того, домени УН і МНН НСАБ можуть бути отримані економічно ефективним способом.

У конкретному варіанті здійснення антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, за даним винаходом, включаючи ШпіАбе"М, мають нативний амінокислотний залишок в першому положенні області ЕК4 (амінокислотне положення 101 відповідно до системи нумерації Кабаїй), заміщений іншим амінокислотним залишком, здатним руйнувати поверхнево експонований гідрофобний петч, що містить або зв'язаний з нативним амінокислотним залишком в цьому положенні. Такі гідрофобні петчі зазвичай приховані на межі з константною областю легкого ланцюга антитіла, але стають відкритими для поверхні в НСАБ ї, щонайменше, частково, для небажаної агрегації та асоціації легсого ланцюга НСАБ. Заміщений амінокислотний залишок переважно є зарядженим і, більш переважно, є позитивно зарядженим, як-от лізин (Гув, К), аргінін (Аго, К) або гістидин (Ні, Н), переважно аргінін (К). У переважному варіанті здійснення антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, отримані від трансгенних тварин, містять мутацію Тгр-

Агд в положенні 101. Отримані НСАБ переважно мають високу антигензв'язуючу афінність і розчинність в фізіологічних умовах за відсутності агрегації.

У межах цього винаходу були ідентифіковані антитіла ЇдДс людини, які містять тільки важкі ланцюги, до СО22 з унікальними послідовностями від тварин Опіваї"М (ОпіАБ"М), які зв'язують

СО022 людини в ІФА зв'язування білка і клітин (рекомбінантний позаклітинний домен СО22).

Ідентифіковані послідовності варіабельної області важкого ланцюга (МН) (див. Фіг. 2) є позитивними відносно зв'язування білка СО22 людини та/або відносно зв'язування з клітинами

СОр22, й всі вони є негативними відносно зв'язування з клітинами, які не експресують СО22.

Антитіла, описані в цьому документі, зв'язують СО22-позитивну лімфому Беркітта в клітинній лінії ОСацаї (АТССФ ССІ -213 М), і деякі перехресно реагують з білююом СО22 яванського макака.

Крім того, вони можуть бути сконструйовані для забезпечення перехресної реактивності з білком СО22 будь-яких видів тварин, якщо це бажано.

Антитіла до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, як-от Опідб5 "М, можуть мати афінність 60 до СО22 з Ка від близько 105 від близько 10-!!, в тому числі без обмеження: від близько 10 від близько 10-19: від близько 10 від близько 10: від близько 105 від близько 108: від близько 108 від близько 10-11; від близько 103 від близько 10-79: від близько 103 від близько 10: від близько 109 від близько 1071; від близько 107 від близько 1070; або будь-яке значення в цих діапазонах.

Вибір афінності може бути підтверджений біологічною оцінкою для модуляції, наприклад, блокування, біологічна активність СО22, включно з аналізами іп міїго, доклінічними моделями та клінічними випробуваннями, а також оцінкою потенційної токсичності.

Антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, що зв'язуються з епітопами, які не перекриваються, на білюу СО22, наприклад Опідб5"М, можна ідентифікувати за допомогою аналізів конкурентного зв'язування, як-от ферментні аналізи (ІФА) або аналізи конкурентного зв'язування за допомогою проточної цитометрії наприклад, можна використовувати конкуренцію між відомими антитілами, які зв'язуються з антигеном-мішенню, і антитілом, яке становить інтерес. Використовуючи цей підхід, можна розділити набір антитіл на ті, що конкурують з еталонним оантитілом, і ті, що не конкурують. Неконкурентні антитіла ідентифікуються як такі, що зв'язуються з окремим епітопом, який не перекривається з епітопом, зв'язаним з еталонним антитілом. Часто одне антитіло іммобілізується, антиген зв'язується, а друге мічене (наприклад, біотинильоване) антитіло тестується в ІФА на здатність зв'язувати захоплений антиген. Його також можна проводити з використанням платформ поверхневого плазмонного резонансу (5РК), включаючи РгоїеОп ХРЕЗ6 (ВіоКадй, Іпс), Віасоге 2000 і Віасоге

Т200 (СЕ Неайсаге І іїе Зсіепсез), і томограф МХ9б 5РЕК (ІБі5 (есппоЇодіез ВМ), а також на біошарові інтерферометричні платформи, як-от Осівєї Кеазв84 і Осівї НТХ (РопевВіо, Раї!| Іпс). Для подальших деталей дивіться приклади в цьому документі.

Як правило, антитіло "конкурує" з еталонним антитілом, якщо воно викликає зниження зв'язування еталонного антитіла з антигеном-мішенню на близько 15-100 95, що визначено стандартними методами, як-от аналізи конкурентного зв'язування, описані вище. У різних варіантах здійснення відносне інгібування складає щонайменше близько 15 9565, щонайменше близько 20 965, щонайменше близько 25 95, щонайменше близько 30 6, щонайменше близько 3595, щонайменше близько 40 95, щонайменше близько 4595, щонайменше близько 50 95, щонайменше близько 5595, щонайменше близько 6095, щонайменше близько 65 95, щонайменше близько 7095, щонайменше близько 75595, щонайменше близько 80 95, щонайменше близько 85 95, щонайменше близько 90 95, щонайменше близько 95 95 або вище.

Фармацевтичні композиції, застосування та способи лікування.

Іншим аспектом цього винаходу є пропозиція фармацевтичних композицій, які містять одне або більше антитіл за винаходом в суміші з придатним фармацевтично прийнятним носієм.

Фармацевтично прийнятні носії, які використовуються в цьому документі, наприклад, але не обмежуються ними, ад'юванти, тверді носії, вода, буфери або інші носії, які використовуються в цій області для зберігання терапевтичних компонентів або їх комбінацій.

В одному варіанті здійснення фармацевтична композиція містить антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, (наприклад, Опідб'"М), яке зв'язується з СО22. В іншому варіанті здійснення фармацевтична композиція містить мультиспецифічне (включаючи біспецифічне) антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, (наприклад, Опідр"М) зі специфічністю зв'язування для двох або більше епітопів, що не перекриваються, на білюу СО22. У переважному варіанті здійснення фармацевтична композиція містить мультиспецифічне (включаючи біспецифічне) антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги, (наприклад, Опідр"М) зі специфічністю зв'язування з

СО22 і зі специфічністю зв'язування з мішенню зв'язування на ефекторній клітині (наприклад, мішенню зв'язування на Т-клітині, як-от, наприклад, білок СОЗ на Т-клітині).

Фармацевтичну композицію антитіл, використовуваних згідно з цим винаходом, готують для зберігання шляхом змішування білів, які мають бажану міру чистоти, з необов'язковими фармацевтично прийнятними носіями, допоміжними речовинами або стабілізаторами (див., наприклад, Кетіпдїоп'є Рпагтасеціїса! 5сіепсез 161 еайіоп, О5ої, А. Ей. (1980)) наприклад, у формі ліофілізованих композицій або водних розчинів. Прийнятні носії, допоміжні речовини або стабілізатори є нетоксичними для реципієнтів при використовуваних дозуваннях і концентраціях та включають в себе буфери, як-от фосфат, цитрат та інші органічні кислоти; антиоксиданти, зокрема, аскорбінову кислоту та метіонін; консерванти (як-от хлорид октадецилдиметилбензиламонію; хлорид гексаметонію; хлорид бензалконію, хлорид бензетонію; фенол, бутиловий або бензиловий спирт; алкіллпарабени, як-от метил або пропілпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; З-пентанол; і м-крезол); низькомолекулярні (менше ніж близько 10 залишків) поліпептиди; білки, як-от сироватковий альбумін, желатин або імуноглобуліни; гідрофільні полімери, як-от полівінілпіролідон; амінокислоти, як-от гліцин, глутамін, аспарагін, гістидин, аргінін або лізин; моносахариди, 60 дисахариди та інші вуглеводи, включаючи глюкозу, манозу або декстрини; хелатоутворюючі агенти, як-от ЕДТА; цукри, як-от сахароза, маніт, трегалоза або сорбіт; солеутворюючі протиїони, як-от натрій; комплекси металів (наприклад, комплекси 2п-білок); та/або неїіонні поверхнево-активні речовини, як-от ТМ/ЕЕМ "М, РІ ШКОМІС5 М або поліетиленгліколь (ПЕГ).

Фармацевтичні композиції для парентерального введення переважно стерильні й по суті ізотонічні та вироблені відповідно до умов правил виробництва та контролю якості лікарських засобів (ЗМР). Фармацевтичні композиції можуть бути запропоновані в одиничній дозажній формі (наприклад, дозажній формі для одиничного введення). Придатна лікарська форма залежить від обраного шляху введення. Антитіла, описані в цьому документі, можуть вводитися за допомогою внутрішньовенної ін'єкції або інфузії, або підшкірно. Для ін'єкційного введення, антитіла описані в цьому документі можуть бути складені у водних розчинах, переважно у фізіологічно-сумісних буферах для зменшення дискомфорту в місці ін'єкції. Розчин може містити носії, допоміжні речовини або стабілізатори, як описано вище. Як альтернатива, антитіла можуть бути ліофілізовані для змішування з придатним носієм, наприклад, стерильною апірогенною водою, перед застосуванням.

Композиції антитіл розкриті, наприклад, в патенті США Мо 9034324. Подібні композиції можуть бути використані для антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, включно з ОпіАбь» "М, за цим винаходом. Композиції антитіла для підшкірного введення описані, наприклад, в патентах

США 20160355591 та США 20160166689.

Способи застосування

Антитіла до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, мультиспецифічні антитіла та фармацевтичні композиції, описані в цьому документі, можна застосовувати для лікування захворювань і станів, що характеризуються експресією СО22, включаючи, без обмеження, стани і захворювання, описані далі в цьому документі. Аспекти цього винаходу також стосуються застосування антитіла, описаного в цьому документі, при отриманні лікарського засобу для лікування В-клітинного розладу, що характеризується експресією СО22. Аспекти цього винаходу також стосуються антитіла, описаного в цьому документі, для застосування в лікуванні В- клітинного розладу, що характеризується експресією СО22.

СО022 являє собою трансмембранний білок типу | з молекулярною масою 135 кДа, який експресується на низьких рівнях у пре- й незрілих В-клітинах, максимально в зрілих В-клітинах і в кінцевому підсумку пригнічується в плазматичних клітинах. (Наприклад, УМаїКег еї аї.,

Іттипоїоду, 2008 Маг; 123(3) 314-25). СО22 у великій кількості експресується в фолікулярних (первинних і вторинних зонах В-клітин), В-клітинах мантійних і маргінальних зон і, як повідомляється, присутній в 60-80 95 зразків від пацієнтів із злоякісними пухлинами В-клітин (АІдегзоп еї аї., Сіп. Сапсег Ке5 2009:15(3) Рергиагу 11, 2009). Через його спостережувану експресію в низці гематологічних злоякісних новоутворень, СЮО22 є багатообіцяючою мішенню для терапії на основі антитіл.

В одному аспекті антитіла до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, (наприклад, Опідбь "М) і фармацевтичні композиції за цим винаходом можуть бути використані для лікування гематологічних злоякісних пухлин, що характеризуються експресією СО22, включаючи, без обмеження, дифузну В-великоклітинна лімфому (ДВККЛ), неходжкінську лімфому, В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз (ХЛЛ) і В-клітинний гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ).

Дифузна В-великоклітинна лімфома (СОЇ ВСіабо 0 ВІ) є найбільш поширеною формою неходжкінської лімфоми серед дорослих (Віосо4 1997 89 (11): 3909-18), з оцінкою щорічної захворюваності від 7 до 8 випадків на 100000 осіб на рік в США і Великій Британії. Вона характеризується як агресивний рак, який може виникнути практично в будь-якій частині тіла.

Причини ДВВКЛ не зовсім зрозумілі, ії вона може бути викликана нормальними В-клітинами, а також злоякісною трансформацією інших типів клітин лімфоми або лейкозу. Підходи до лікування зазвичай включають хіміотерапію та опромінення, і в результаті загальна п'ятирічна виживаність становить в середньому близько 58 96 для дорослих. Хоча деякі моноклональні антитіла продемонстрували перспективність лікування ДВВКЛ, послідовна клінічна ефективність ще не була остаточно продемонстрована. Тому існує велика потреба в нових способах лікування, включно з імунотерапією, для лікування ДВВКЛ.

В іншому аспекті антитіла до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, (наприклад, ОпіАбв "М) і фармацевтичні композиції за цим винаходом можуть бути використані для лікування автоїмунних порушень, які характеризуються патогенними В-клітинами, які експресують СО22, включаючи, без обмеження, системний червоний вовчак (СЧВ), ревматоїдний артрит (РА) і розсіяний склероз (РОС).

Ефективні дози композицій за цим винаходом для лікування захворювання варіюються в залежності від багатьох різних факторів, включно з способами введення, місцем призначення, 60 фізіологічним станом пацієнта, чи є пацієнт людиною або твариною, чи вводяться інші лікарські препарати, і чи є лікування профілактичним або терапевтичним. Зазвичай пацієнтом є людина, але ссавці, відмінні від людини, також можуть піддаватися лікуванню, наприклад, домашні тварини, як-от собаки, кішки, коні тощо, лабораторні ссавці, як-от кролики, миші, щури тощо, та інші. Для оптимізації безпеки та ефективності можна підбирати лікарські дозування.

Рівні дозування можуть бути легко визначені звичайним кваліфікованим лікарем і можуть бути змінені за необхідності, наприклад, за необхідності зміни реакції суб'єкта на терапію.

Кількість діючої речовини, яку можна комбінувати з матеріалами носія для отримання одиничної лікарської форми, варіюється залежно від хазяїна, який піддається лікуванню, і конкретного способу введення. Стандартні лікарські форми зазвичай містять від близько 1 до близько 500 мг діючої речовини.

У деяких варіантах здійснення терапевтичне дозування агента може складати від близько 0,0001 до 100 мг/кг і більше зазвичай від 0,01 до 5 мг/кг маси тіла хазяїна. Наприклад, дозування може складати 1 мг/кг маси тіла або 10 мг/кг маси тіла, або в межах 1-10 мг/кг.

Приблизний режим лікування включає введення один раз кожні два тижні або один раз на місяць або один раз кожні від З до 6 місяців. Терапевтичні речовини за цим винаходом зазвичай вводять кілька разів. Інтервали між однократними дозами можуть бути щотижневими, щомісячними або щорічними. Інтервали також можуть бути нерегулярними, на що вказує вимірювання рівня терапевтичної речовини в крові пацієнта. Альтернативно, терапевтичні речовини за цим винаходом можна вводити у вигляді композиції з уповільненим вивільненням, і в цьому випадку потрібно менш часте введення. Дозування і частота варіюються залежно від періоду напіввиведення поліпептиду у пацієнта.

Як правило, композиції готують у вигляді ін'єкційних препаратів, або у вигляді рідких розчинів або суспензій; також можуть бути отримані тверді форми, придатні для розчинення або суспендування в рідких носіях перед ін'єкцією. Фармацевтичні композиції, описані в цьому документі, підходять для внутрішньовенного або підшкірного введення, безпосередньо або після відновлення з твердої (тобто, ліофілізованої) композиції. Препарат також може бути емульгований або інкапсульований в ліпосоми або мікрочастинки, як-от полілактид, полігліколід або сополімер, для посилення ад'ювантного ефекту, як описано вище. І апдег, Зсіеєпсе 249: 1527, 1990 та Напез, Адумапсей Огид Оеїїмегу Кеміемує 28: 97-119, 1997. Речовини за цим винаходом можна вводити в формі депо-ін'єкції або препарату імплантату, який може бути складений так, щоб забезпечити тривале або пульсуюче вивільнення діючої речовини.

Фармацевтичні композиції, як правило, сформульовані як стерильні, практично ізотонічні та повністю відповідають усім нормам Правил виробництва і контролю якості лікарських засобів (СМР) Управління з санітарного нагляду за якістю харчових продуктів і медикаментів США.

Токсичність антитіл і структур антитіл, описаних в цьому документі, може бути визначена стандартними фармацевтичними процедурами на клітинних культурах або експериментальних тваринах, наприклад, шляхом визначення І 050 (доза, летальна для 50 95 популяції) або 0100 (доза, летальна до 100 95 популяції). Співвідношення доз між токсичним і терапевтичним ефектом є терапевтичним показником. Дані, отримані з цих аналізів клітинних культур і досліджень на тваринах, можуть бути використані при складанні діапазону доз, який не є токсичним для застосування у людей. Дозування антитіл, описаних в цьому документі, переважно знаходиться в діапазоні циркулюючих концентрацій, які включають ефективну дозу з невеликою токсичністю або без неї. Дозування може варіюватися в межах даного діапазону залежно від використовуваної лікарської форми і використовуваного шляху введення. Точна композиція, спосіб введення та дозування можуть бути обрані індивідуально лікарем з урахуванням стану пацієнта.

Композиції для введення зазвичай містять антитіло або інший абляційний агент, розчинений в фармацевтично прийнятному носії, переважно у водному носії. Можуть бути використані різні водні носії, наприклад забуферений сольовий розчин тощо. Ці розчини є стерильними і, як правило, не містять небажаних речовин. Ці композиції можуть бути стерилізовані звичайними, добре відомими способами стерилізації. Композиції можуть містити фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, необхідні для наближення їх до фізіологічних умов, як-от регулюючі рн агенти і буферні агенти, регулюючі токсичність агенти тощо, наприклад ацетат натрію, хлорид натрію, хлорид калію, хлорид кальцію, лактат натрію тощо. Концентрація активного агента в цих композиціях може варіюватися в широких межах і буде вибиратися в основному на основі об'ємів рідини, в'язкості, маси тіла тощо, відповідно до конкретного обраного способу введення і потреб пацієнта (наприклад, Кетіпдіоп'є Рпагтасеціїса! Зсіепсе (15Іп ед., 1980) та Соодтап 5

СіШтап, ТНне Ріаптасоіодіса! Вазіз ої ТПнегарешісзв (Нагатанг еї аї., еавз., 1996)).

Також в обсяг винаходу входять набори, що містять активні агенти та їх композиції, 60 винаходи та інструкції із застосування. Набір може додатково містити щонайменше один додатковий компонент, наприклад, хіміотерапевтичний препарат та ін. Набори зазвичай включають етикетку, яка вказує на ймовірне застосування вмісту набору. Термін "етикетка", який використовується в цьому документі, включає будь-які письмові або записані матеріали, які поставляються в комплекті або разом з ним, або іншим чином супроводжують набір.

Тепер, коли винахід повністю описаний, для фахівця в даній області техніки буде очевидно, що різні зміни та модифікації можуть бути зроблені без відхилення від суті або обсягу винаходу.

Приклади

Матеріали та методи

Зв'язування білка СО22

Експерименти з кінетичного зв'язування для визначення афінності антиген-антитіло проводили на системі Осіеї ОК-384 (БопеВіо) з використанням двошарової інтерферометрії.

Біосенсори анти-людського (Дб Ес Саріиге (АНС) (Ропе Віо, Мо: партії 18-5064) гідратували в буфері для аналізу (їх РВ5, 0,1 95 БСА, 0,02 95 Гуееп-20, рН 72) і попередньо обробляли в 100

ММ гліцину рН 1,5. Вихідний рівень був встановлений в буфері для аналізу на рівні 120 секунд.

Біосенсори АНС потім іммобілізували з Опідрбе"М в концентрації 5 мкг/мл протягом 120 секунд.

Інший вихідний рівень (120 секунд) був встановлений в буфері для аналізу. Потім їх занурювали в 7-точкову серію розведень 1:2 білка СО22 людини в буфері для аналізу, починаючи з 250 НМ.

Остання лунка колонки аналіту містила тільки буфер для аналізу для перевірки неспецифічного зв'язування між буфером і завантаженими біосенсорами і використовувалася в якості контрольної лунки. Асоціація спостерігалася протягом 600 секунд з подальшою дисоціацією протягом 900 секунд. Аналіз даних проводили з використанням Осіеї Оаїа Апаїузів м9.0 (ЕопевВіо). Кінетики зв'язування аналізували з використанням моделі зв'язування 1:1.

Зв'язування клітин СО22

Зв'язування з СО22-позитивними клітинами оцінювали за допомогою проточної цитометрії (Сцама еазуСуїє 8НТ, ЕМО МіПйроге) з використанням клітинної лінії ЮОацаії (АТСС). Якщо коротко, 100 000 клітин-мішеней забарвлювали серією розведень очищеного Опідб»5 "М протягом хвилин при 4 "С. Після інкубації клітини двічі промивали буфером для проточної цитометрії (1Х ФСБ, 195 БСА, 0,195 Мам») і забарвлювали козячим Е (аб)»2 анти-людським Ід, кон'югованим з К-фікоеритрином (РЕ) (Зошійегтп Віоїесй, кат. Мо 2042-09) для виявлення 30 зв'язаних з клітинами антитіл. Після 20-хвилинної інкубації при 4 "С клітини двічі промивали буфером для проточної цитометрії та потім вимірювали середню інтенсивність флуоресценції (МЕЇ) за допомогою проточної цитометрії. Значення ЕС5О розраховували з використанням

СтарпРаа Ргіт 7. Зв'язування з СО22-позитивними клітинами яванського макака визначали з використанням того самого протоколу з такими модифікаціями: клітини-мішені являли собою клітини СНО, стабільно трансфіковані для експресії позаклітинного домену СО22 яванського макака, і кожне антитіло тестували в одній концентрації (- 1,7 мкг/мл) тому значення ЕС5О не були розраховані.

Приклад 1: Генетично сконструйовані щури, які експресують антитіла, які містять тільки важкі ланцюги

Локус ІЧДН людини і щура був сконструйований і зібраний з декількох частин. Це включало модифікацію та об'єднання генів С-області щура нижче .н людини, а потім додавання вище області Мнб -ЮО-сегменту людини. Два ВАС з окремими кластерами генів Мн людини ІВАСбЄ та

ВАСЗІ потім спільно вводили за допомогою ВАС, що називається Сеого, який кодує зібрану й модифіковану область, що включає Унб людини, всі 0, всі Ун і модифікований Суга/1/26 (АСні) щура.

Були отримані трансгенні щури, які несуть штучні локуси імуноглобулінів важкого ланцюга в невпорядкованій конфігурації. Ідс2а(Асні1)., ІДИ (АсСнті1)., сеБ(АснНІ) гени були відсутні в Сні сегменті. Гени константної області ІДЕ, ІдА і 3" енхансер були включені в ВАС Сеогдо. ЗТ-ПЛР і аналіз сироватки (ІФА) трансгенних щурів виявили продуктивну перебудову локусів трансгенних імуноглобулінів та експресію в сироватці тільки антитіл, що містять тільки важкі ланцюги, різних ізотипів. Трансгенні щури схрещувалися зі щурами з мутованими ендогенними локусами важкого ланцюга і легкого ланцюга, раніше описаними в публікації патенту США 2009/0098134

А1. Аналіз таких тварин продемонстрував інактивацію експресії важкого та легкого ланцюга імуноглобуліну щура і високий рівень експресії антитіл, які містять тільки важкі ланцюги, з варіабельними областями, кодованими генами УМ, О і ) людини. Імунізація трансгенних щурів призводила до отримання сироваткових відповідей з високим титром антиген-специфічних антитіл, які містять тільки важкі ланцюги. Ці трансгенні щури, які експресують антитіла, які містять тільки важкі ланцюги, з областю МО) людини, були названі ОпіКаїв "М,

Приклад 2: Імунізація 60 Імунізація рекомбінантним позаклітинним доменом СО22.

Дванадцять тварин ОпіКаї (6 НС27, 6 НС28) були імунізовані рекомбінантним білком СО22 людини. Тварин імунізували відповідно до стандартного протоколу з використанням ад'юванта

Тіегтах/АІпудгоде!. Рекомбінантний позаклітинний домен СО22 був придбаний у КУО Зузіетв, розведений стерильним фізіологічним розчином і об'єднаний з ад'ювантом. Імуноген комбінували з ад'ювантами Тйегтах і АІйуагодеІ. Перша імунізація (праймінг) імуногеном в

Тіегтах проводилася на лівій і правій ногах. Подальші бустерні імунізації були проведені в присутності АІйудгоде! і за три дні до відбору бустів були проведені імуногеном у ФСБ.

Сироватку збирали у щурів при останньому заборі крові для визначення сироваткових титрів.

Результати сироваткових титрів

Зведена інформація про сироватковий титр представлена на Фіг. 6. На графіках, зображених на Фіг. б, кожна лінія представляє окрему тварину. На умовних позначеннях графіків показаний ідентифікаційний номер кожної окремої тварини. Активність зв'язування для серії сироваток з 8-точковим розведенням тестували за допомогою ІФА проти білка пиСО22--Ес, пиСо22-НІівз-мітка, білка макака резусу СО22--Нів-мітка і білка-мішені без Ніб-мітки. Серед цієї групи тварин спостерігався діапазон рівнів реактивності сироватки як до білка СО22 людини, так і макака резусу. Також спостерігалася відповідь сироватки на Ніз-мітку білка.

Приклад 3: Зв'язування з СО22-експресуючими клітинними лініями

На Фіг. 4 наведена активність зв'язування мішені антитіл до СО22, які містять тільки важкі ланцюги, описані в цьому документі. У стовпці 1 показаний ідентифікаційний номер (І0) клону антитіла до СО22, яке містить тільки важкі ланцюги. У стовпці 2 показана афінність зв'язування з білком (КО), виміряна в молярності. У стовпці З показана константа дисоціації зв'язування з білком (швидкість К-ої), виміряна в секундах. У стовпці 4 показано зв'язування з клітинами

Оацаї, виміряне як кратність у порівнянні з фоновим сигналом МЕЇ. У стовпці 5 показано зв'язування з клітинами СНО, стабільно експресуючими СО22 яванського макака, виміряне як кратність у порівнянні з фоновим сигналом МЕРЇ. У стовпці б показано зв'язування з клітинами

СНО, які не експресують СО22, виміряне як кратність у порівнянні з фоновим сигналом МРЇ.

Приклад 4: Опосередковане біспецифічними антитілами знищення пухлинних клітин людини шляхом перенаправлення активованих Т-клітин

Три різні СО22-позитивні клітинні лінії пухлини лімфоми Беркітта (Оацаї, Каїї і Катовз) були помічені барвником і інкубували зі збільшуваними кількостями біспецифічного антитіла в присутності попередньо активованих Т-клітин людини. Біспецифічне антитіло складалося з анти-СОЗ-зв'язуючого плеча, спареного з анти-СО22 МН-зв'язуючим доменом, яке схематично зображено на Фіг. 50. Антитіло негативного контролю містило зв'язуючий домен МН, який не зв'язувався з СО22. СО22-негативні клітини КО62 не виявляли специфічного лізису (дані не представлені). Дані трьох біспецифічних антитіл, які містять три різні зв'язуючі домени до СО22 на основі тільки важкого ланцюга, спарені з одним і тим самим зв'язуючим доменом до СОЗ, представлені на Фіг. 5А, порівнювали з негативним контролем і демонстрували опосередковане антитілами знищення СО22-позитивних пухлинних клітин Юацаї за допомогою перенаправлення активованих Т-клітин. Дані за двома біспецифічними антитілами, які містять один і той самий анти-СО22-зв'язуючий домен на основі тільки важкого ланцюга, спарений з двома різними анти-

СОЗ-зв'язуючими доменами, представлені на Фіг. 5В, порівнювали з негативним контролем і демонстрували опосередковане антитілами знищення СО22-позитивних пухлинних клітин Ка) за допомогою перенаправлення активованих Т-клітин. Дані за двома біспецифічними антитілами, які містять один і той самий анти-СО22-зв'язуючий домен на основі тільки важкого ланцюга, спарений з двома різними анти-СОЗ-зв'язуючими доменами, представлені на Фіг. 5С, порівнювали з негативним контролем і демонстрували опосередковане антитілами знищення

Срг2-позитивних пухлинних клітин Катоб5 за допомогою перенаправлення активованих Т- клітин.

Незважаючи на те що в цьому документі були показані та описані переважні варіанти здійснення цього винаходу, спеціалістам в даній галузі техніки буде очевидно, що ці варіанти здійснення наведені виключно з метою ілюстрації. Безліч варіацій, змін та замін будуть очевидні спеціалістам в даній галузі техніки без відходу від об'єму та суті цього винаходу. Слід розуміти, що різні альтернативні варіанти здійснення цього винаходу, описані в цьому документі, можуть застосовуватись при практичній реалізації цього винаходу. Передбачається, що нижченаведена

Claims (1)

1. формула винаходу визначає обсяг винаходу і, що таким чином охоплюються способи та структури в межах обсягу цієї формули винаходу та їх еквівалентів.

   ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ «110» ТЕНЕОБІО, ІНК. « 120» АНТИТІЛА, ЯКІ МІСТЯТЬ ТІЛЬКИ ВАЖКІ ЛАНЦЦЮГИ, ЩО ЗВ'ЯЗУЮТЬСЯ З С022 «-1305 ТМО-0009-МО «1405» РСТ/О52018/067299 -1415 21.12.2018 -1505» 62/609 759 -1515 22.12.2017 -160» 87 «170» РаїепіІп версія 3.5 «21051 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005» 1 ау Азр 5еї Пе 5ег Зег Сіу Авр Туг Туг 1 5 10 «21052 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005» 2 Сіу Авр 5ег Пе 5ег 5ег Сіу Спу Туг Туг 1 5 10 «2105» З «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» З Сіу слу 5Зег Пе 5ег 5ег Сіу А5р Туг Туг 1 5 10 «2105» 4 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 4 Сіу слу 5ег Пе 5ег 5ег 5ег 5ег Туг Туг 1 5 10

   «210» 5 «2115» 8 «212» Білок «213» Штучна послідовність 60 «220»

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005 5 Сіу слу 5ег РНе 5ег Сіу Туг Туг 1 5 «2105 6 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 6 ау Азр бе Пе 5ег Зег Зег Зег Туг Туг 1 5 10 «2105 7 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005 7 Сіу слу Зег Пе Тит ег 5ег Зег Туг Туг 1 5 10 -2105 8 Зо «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 8 Стпу Сіу бег Пе 5ег бег 5ег бег Нів Туг 1 5 10 «2105 9 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 9 Сіу слу 5ег Пе Пе Зег 5ег Зег Туг Туг 1 5 10

   «2105» 10 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005 10 Сіу слу 5ег Пе Авп Авр Авп 5ег Ніз Туг 60 1 5 10

   «2105 11

   «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 11 Пе Туг Туг Зег Спу Ма! ТНг 1 5 «2105» 12 «-21157 «212» Білок -213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 12 Пе Туг Туг Зег Спу Аа ТНг 1 5 «210513 «-21157 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка- «Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005» 13 Пе Туг Туг Зег Спу 5ег ТНг 1 5 «210» 14 «-21157 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 14 Пе Туг Туг Тиг Спу Бег ТНг 1 5

   «2105» 15 «-21157 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 15 ма! Туг Туг Тнг Сту Аа Тиг 1 5 «210516 «-21157 «212» Білок 60 «213» Штучна послідовність

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005 16 Пе Ні Туг Зег Спу 5ег ТНг 1 5 «210517 «-21157 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 17 Пе Туг Туг Зег Спу 5ег Аа 1 5 «2105» 18 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005 18 Тиг Агу Сім Авр 5ег 5ег Азп Тр Агу 5ег 1 5 10 «2105» 19 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «4005 19 Тпиг Агу Азр Авр 5ег Зег Азп Тр Агу 5ег 1 5 10

   «210» 20 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 20 Тпиг Агу Сім Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Ага Зег 1 5 10 «2105» 21 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 21 60 Аа Ага Си Авр 5ег 5ег З5ег Тгр Ага 5ег

   1 5 10 «2105» 22 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 22 Гуз Агу Азр Азр 5ег Зег Азп Тгр Агу 5ег 1 5 10 «2105» 23 «2115 10 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «400» 23 Аа Ага Ар Азвр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег 1 5 10 «210» 24 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 24 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Су Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 30 Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! ТАиг Туг Туг Азп Рго Зег 5О0 55 бо Геи Гуз бег Аг Ма! ТНг Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Агу Азп Сіп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95

   Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тиг маї бег 5ег 115 «2105» 25 «2115 118 «212» Білок 60 «213» Штучна послідовність

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 25 іп еи Сп еи Сп Спи бБег Сіу Рго Су І еи Маї І уз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо

   Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Си Авп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Авп Сп Ріе 65 70 75 80 ЗегІеи Гуз І еи 5ег 5ег Ма! ТНг Аа Аа Ар Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 26 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 26 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАигІ еи 5ег І еи Тиг Суз ТАг Маї Зег Сіпу Авр Зег Пе бег Зег Су 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 5О 65 70 75 80 зег і еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Азр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 55 Суз Тиг Ага Сім Авр 5ег Зег 5ег Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї Зег 5ег 115 бо

   «2105 27

   «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 27 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 101 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Су Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 зо Авр Туг Туг Тр Су Ттр Пе Аго Сіп Рго Рго Спу Гуз Спу І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 28 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 28 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Су Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 60 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег

   «2105» 29 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 29 Сип Гей Сій Ї ви Сп Сі бег Спу Рго СІу І еи Маї Гуз Рго 5ег Си 1 5 10 15

   ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 20 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 25 Геи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Ма! Азр Тиг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Зо Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 30 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 30 СіпГеи Сіп Гей Сип Сіи Зег Спіу Рго Сіу Геи Маї Гуз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо

   Азр Туг Туг Ттр Сіу Ттр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз СПУ Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 60 Бегі еи Гуз Геи Зег бег Ма! ТНг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг

   85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 31 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 31 Сп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спіу Рго С1Уу І еи Маї Гуз Рго бег Сім 1 5 10 15 Тип еи 5егІ еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спу Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 зо Сіу Туг Туг Ттр Сіу Тгр Іе Ага Сіп Рго Рго Сіу Гуз СПУ Геи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 бо Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе зо 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сувз ТНг Ага Ар Азр 5ег 5ег Азп Тгр Аг 5ег Агу Сіу Сп СІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «2105 32 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 32 Сіп Гей Сп еи Сп Сіи бег Спу Рго Су І еи Маї Гуз Рго бег Сім 501 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Су Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 зо 55 Авр Туг Туг Ттр Су Ттр Пе Ага Сп Рго Рго Сіу Гуз СЧПу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег бо бо

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Ага Азп Сп Ре 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 33 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 33 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Авзп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг Зег Гуз Ап Сп Рпе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу 5ег Агу Сіу Сип СІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 34 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 34 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 60 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Гей Гуз Авп Агу Маї Тиг Іе Зег Ма! Авр Тнг 5ег Агу Азп Сп Рпе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Авп Тгр Агу Зег Ага Сіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 35 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 35 іп еи Сп Ї еиш Суп Спи бег Сіу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Сі 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо

   Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 35 50 55 60 Ї еи Си Авп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 40 Зег еи Гуз І еи 5ег 5ег Маї ТНг Аіа Аа Ар Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Си Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СПУ ТНг 100 105 110 45 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 36 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 36 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 60 ТНгГеи Зег І еи Тиг Суз ТНиг Маї Зег Спу Азр Зег Пе 5ег 5ег Спу

   20 25 зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе (655 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сім Авр 5ег Зег 5ег Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «2105» 37 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «20» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 37 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Авр Туг Туг Ттр Су Ттр Пе Агу Сп Рго Рго Спіу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 38 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» 60 «400» 38 Зо

   Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Авр 5ег Пе 5ег 5ег Су 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Ме Слу Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 39 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 39 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе бег Зег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Геи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Ма! Азр Тиг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 40 «2115118 «212» Білок 60 «213» Штучна послідовність

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучноїпослідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 40 іп еи Сп еи Сп Спи бБег Сіу Рго Су І еи Маї І уз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Спіу Азр Зег Пе 5ег 5ег Спіу 20 25 Зо

   Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Нів Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Авзп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 ЗегІеи Гуз І еи 5ег 5ег Ма! Тнг Аіа Аа Ар Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 41 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 41 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАигІ еи 5ег І єи Тиг Суз ТАг Маї Зег Сіпу Авр Зег Пе бег Зег Су 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ага ТАг Туг Туг Азп Рго Зег 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 5О 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 55 Суз Тиг Аг Сім Авр 5ег Зег Азп Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СТУ ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 бо

   «210» 42

   «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 42 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 101 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Су Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 зо Авр Туг Туг Тр Су Ттр Пе Аго Сіп Рго Рго Спу Гуз Спу І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Аа Тнг Туг Туг Авзп Рго 5ег 50 55 60

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 43 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 43 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Сіу Спіу бег Пе 5ег Зег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Сіу Ніз Пе Туг Туг 5ег Спу Аа Тиг Туг Туг Азп Рго Зег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! Тнг Аа Аа Азр Тниг Айа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 60 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег

   «210» 44 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 44 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТигГеи зег І еи Тиг Суз ТНиг Маї Бег Сіу Спу Зег Пе Зег Зег Спу Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 20 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 25 Геи Сі Авзп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи Зег Зег Ма! ТАг Аа Аа Азр Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Зо Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 45 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 45 СіпГеи Сіп Гей Сип Сіи Зег Спіу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо

   Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 60 Бегі еи Гуз Геи Зег бег Ма! ТНг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг

   85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 46 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 46 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 Тип еи 5егІ еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спу Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45

   Тер Пе Стпу Авп Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 бо Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе зо 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Ага Сім Авр 5ег Зег 5ег Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «210» 47 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 47 Сип Гей Сій Ї ви Сп Сі бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Си 501 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Су Азр 5ег Пе 5ег Зег Спу 20 25 зо 55 ау Туг Туг Тгтр Су Тр Іе Аго Сіп Рго Рго Стпу Гуз С1Іу І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег бо бо

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 48 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучноїпослідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 48 Сп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Сі 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Тгтр Су Тр Пе Аг Ні Рго Рго Сіу Гуз СІу Гей Си 35 40 45 Тер Пе Слу Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 49 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 49 Сп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег СпПу Рго Су І еи Маї Гуз Рго бег Сі 1 5 10 15

   ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 зо Азр Туг Туг Ттр Сіу Ттр Пе Агу Сп Рго Рго Стпу Гуз Су Геи Спи 60 35 40 45 Зб

   Тер Пе Стпу Авп Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Гей Гуз Авп Агу Маї Тпг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 50 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 50 іп еи Сп еиш Сійп Сі бег Сіу Рго Сіу І еи Ма! Гуз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо

   Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Ага Сп Рго Рго Спіу Гуз СпПу Гей Спи

   Тер Пе Стпу Авп Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 35 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Ап Сп Рпе 65 70 75 80 40 Зег еи Гуз І еи 5ег 5ег Маї ТНг Аіа Аа Ар Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТНг 100 105 110 45 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 51 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 51 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Си 1 5 10 15 60 ТНгГеи Зег І еи Тиг Суз Тиг Маї Зег Спіу Сіу Зег Пе 5ег Бег 5ег

   20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Сіу Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Спу Гуз СпПу І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр Тнг 5ег Гуз Ап Сп Ріе (655 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Авр Авр 5ег 5ег Азп Тр Ага 5ег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «2105 52 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «20» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005 52 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Авр Туг Туг Ттр Су Ттр Пе Агу Сп Рго Рго Спіу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60

   Ї еи Гуз 5ег Агу Маї Тит Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «2105 53 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» 60 «4005 53 Зв

   Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Су бег Пе Туг Туг ТАг Су Зег ТАг Туг Туг Авп Рго Зег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Маї Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сип Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Авп Тр Агу Зег Ага Сіу Сп СПУ ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 54 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 54 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТигГеи зег І еи Тиг Суз ТНиг Маї Бег Сіу Спу Зег Пе Зег Зег Спу 20 25 зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Геи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Ма! Азр Тиг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105 55 «2115116 «212» Білок 60 «213» Штучна послідовність

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 55 іп еи Сп еи Сп Спи бБег Сіу Рго Су І еи Маї І уз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТигГеи Зег І еи Тнг Суз Аа Маї Туг Сіу Спу Зег Ре Зег Спіу Туг 20 25 зо

   Туг Ттр Сіу Тгр Пе Аго Сп Рго Рго Су Гуз Спу І еи Сім Ттр Пе 35 40 45 Су Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіпу Аа Тиг Туг Туг Азп Рго З5ег І еи Гуз 50 55 60 Азп Агу Маї Тиг Іе 5ег Маї Азр ТАг Зег Агу Азп Сп РНе 5ег ей 65 70 75 80 Авпі еи 5ег 5ег Ма! Тнг Аа Аа Азр ТНг Аа Маї Туг Туг Суз ТНг 85 90 95 Аг Си Авр 5ег 5ег 5ег Тгтр Агу 5ег Агу Сіу Сіп Сіу ТНг Гей Маї 100 105 110

   Тиг Маї Зег Зег 115 «2105» 56 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 56 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І єи Тиг Суз ТАг Маї Зег Спу Спу Зег Пе бег Зег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 50 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Ага Туг Туг 85 90 95 55 Сувз ТНг Ага Ар Азр 5ег 5ег Азп Тгр Аг 5ег Агу Сіу Сп СІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 60

   «2105 57

   «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 57 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 101 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо Зег Туг Туг Тгтр ау Тр Іе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спіу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 58 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 58 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бег Спу Спіу бег Пе бег 5ег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Сіу бег Пе Туг Туг Зег Спу Зег Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Агу Азп Сіп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 60 100 105 110 ді

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег

   «2105 59 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 59 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТАгІ еи 5ег ГГ еи Тнг Суз Тнг Маї бег Сіу Азр 5ег Пе 5ег бег 5ег зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 20 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 25 Геи Гуз бег Аг Ма! ТНг Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Авзп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 60 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 60 СіпГеи Сіп Гей Сип Сіи Зег Спіу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тиг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе бег Зег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу Зег Тиг Туг Туг Авп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 60 Бегі еи Гуз Геи Зег бег Ма! ТНг Аа Аа Азвр Тнг Аа Маї Туг Туг

   85 90 95 Сув Аа Агд Сім Ар 5ег Зег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип Спу ТАг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 61 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучноїпослідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 61 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 Тип еи 5егІ еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Су Спіу бег Пе 5ег бег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Аа Тнг Туг Туг Авзп Рго 5ег 50 55 бо Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе зо 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Ага Сім Авр 5ег Зег 5ег Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «210» 62 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 62 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 501 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо 55 Зегї Туг Туг Ттр ау Тр Іе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спіу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Сту Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тиг Туг Туг Азп Рго Зег бо бо

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи Зег Зег Ма! Тнг Аа Аїа Ар Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 63 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 63 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Сіу бег Пе Туг Туг Зег Спу Зег Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 бо Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи Зег Зег Ма! ТАг Аа Аа Азр Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 64 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 64 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 60 35 40 45

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Гей Гуз Авп Агу Маї Тпг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 65 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 65 іп еи Сп Ї еиш Суп Спи бег Сіу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Сі 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи

   Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Аа Тиг Туг Туг Авзп Рго 5ег 35 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 40 Зег еи Авп І ви 5ег 5ег Ма! ТНиг Аа Аа Азр ТНг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 45 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 66 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 66 Сип Гей Сій Ї ви Сп Сі бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Си 1 5 10 15 60 ТНгГеи Зег І еи Тиг Суз Тиг Маї Зег Спіу Сіу Зег Пе 5ег Бег 5ег

   20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе (655 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сім Авр 5ег Зег Азп Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СТУ ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «210» 67 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «20» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 67 Сп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Сі 1 5 10 15 ТигГеи зег І еи Тиг Суз ТНиг Ма! Зег Сіу Спу Зег Пе Тиг Зег Зег 20 25 Зо Зег Туг Туг Тгтр ау Тр Іе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу І еи Си 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60

   Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 68 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» 60 «400» 68

   Сп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег СпПу Рго Су І еи Маї Гуз Рго бег Сім 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 Зо зЗег Туг Туг Ттр Су Тгр Пе Аго Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Си 35 40 45 Тер Пе Слу бЗег Пе Туг Туг Зег Спіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 69 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 69 Сп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго Су І еи Ма! Гуз Рго бег Сім 1 5 10 15

   ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр Пе Ага Сіп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Си 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60 Геи Гуз бег Аг Ма! ТНг Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сп Рпе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 70 «2115118 «212» Білок 60 «213» Штучна послідовність

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 70 Сп Ге Сіп Гей Сіп Сіи Бег Сіу Рго Су І еи Маї Агу Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз СпПу І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг 5ег Спу 5ег ТНг Туг Туг Ап Рго Бег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 ЗегІеи Гуз І еи 5ег 5ег Ма! Тнг Аіа Аа Ар Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Спу Сіп Спу ТАг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105 71 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 71 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 Тип еи 5егІ еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Су Спіу бег Пе 5ег бег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Аа Тиг Туг Туг Авзп Рго 5ег 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Рпе 5О 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 55 Суз Тиг Аг Сім Авр 5ег Зег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сип Спу ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 бо

   «2105 72

   «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 72 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 101 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо Зег Туг Туг Тгтр ау Тр Іе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спіу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Аа Тиг Туг Туг Авзп Рго 5ег 50 55 60

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тиг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи Зег Зег Ма! ТНг Аа Аа Авр Тнг Аа Меї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Авп Тр Агу Зег Ага Сіу Сип СПУ ТНг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 73 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 73 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 ЗО зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу бег Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СПУ ТНг 60 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег

   «210» 74 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 74 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу зо Азр Туг Туг Ттр Сіу Ттр Пе Агу Сп бег Рго Сім Гуз Спу Гей Си 20 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Ма! Тиг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 25 Геи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Ма! Азр Тиг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Сувз Гуз Агу Азр Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сип Спу ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 75 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «4005» 75 СіпГеи Сіп Гей Сип Сіи Зег Спіу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Си 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе 65 70 75 80 60 Бегі еи Гуз Геи Зег бег Ма! ТНг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг

   85 90 95 Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110

   Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 76 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 76 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 Тип еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег бег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Зег Маї Туг Туг ТНиг Спу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 бо Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Гуз Азп Сп Ріе Зо 65 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! ТАг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Сувз ТНг Ага Ар Азр 5ег 5ег Азп Тгр Аг 5ег Агу Сіу Сп СІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «2105 77 «2115 118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 77 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 501 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Сіу бег Пе бег Зег 5ег 20 25 зо 55 зе Туг Туг Ттр азу Тр Ре Ага Ні Рго Рго Сіпу Гуз Су Геи А5р 35 40 45 Тер Пе Стлу Зег Пе Ні Туг 5ег Спіу Зег ТНг Туг Туг Азп Рго Зег бо бо

   Ї еи Гуз 5ег Агу Ма! Тит Пе 5ег Ма! Азр ТНг 5ег Агу Азп Сіп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 78 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 78 Сіп Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Авр Рго СУ І еи Ма! Гуз Рго бег Сім 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Маї бЗег Су Сіу бег Пе бег Зег 5ег 20 25 Зо зег Ніз Туг Ттр Су Тгр Пе Ага Сп Рго Рго Спу Гуз Спу І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіу Аа ТАг Туг Туг Авп Рго Зег 50 55 бо Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи Зег Зег Ма! ТНг Аа Аа Авр Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «2105» 79 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 79 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15

   ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 60 35 40 45

   Тер Пе Стлу Зег Пе Туг Туг Зег Спіу Зег Тиг Туг Туг Авп Рго 5ег 50 55 60 Гей Гуз Авп Агу Маї Тпг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи Зег Зег Ма! ТНг Аа Аа Ар Тнг Аа Маї Туг Туг 85 90 95

   Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 80 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 80 іп еи Сп Ї еиш Суп Спи бег Сіу Рго Су І еи Маї Гуз Рго 5ег Сі 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи

   Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа ТАг Туг Туг Азп Рго Зег 35 50 55 60 Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 40 Зег еи Авп І ви 5ег 5ег Ма! ТНг Аа Аа Азр Тпг Аа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 45 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 81 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 81 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 60 ТНгГеи бег І еи Тиг Суз Тиг Ма! Зег Сіу Спу Зег Пе Пе Зег Зег

   20 25 Зо зег Туг Туг Ттр Су Тгр ІПе Аго Сп Рго Рго Сіу Гуз Су І еи Спи 35 40 45

   Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Зег Аа Туг Туг Ні Рго 5ег 50 55 60 Ї еи Гуз 5ег Агу Маї Тнг Пе Зег Пе Азр Тпг Зег Гуз Авзп СіІп Рпе (655 70 75 80 зегі еи Гуз І еи бег Зег Ма! Тиг Аа Аа Азр Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Аа Агу Азр Авр 5ег 5ег Авп Тр Ага 5ег Ага Сіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115

   «210» 82 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «20» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 82 Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТАгІ еи 5ег І еи Тнг Суз Тнг Ма! бег Спіу Спіу бег Пе 5ег Зег 5ег 20 25 Зо Зег Туг Туг Ттр ау Тр Іе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спіу Геи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Зег Пе Туг Туг Зег Спу Аа Тиг Туг Туг Авзп Рго 5ег 50 55 60

   Ї еи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар Тнг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Сув Тиг Агу Азр Авр 5ег Зег Авп Тр Агу Зег Ага Спіу Сп СПУ ТАг 100 105 110 Геи Маї Тнг Маї Зег Зег 115 «210» 83 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» 60 «400» 83

   Сип Гей Сій Ї ви Сп Спи бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Сіи 1 5 10 15 ТигГеи Зег ГГ еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Азр 5ег Пе 5ег 5ег Спу 20 25 Зо Азр Туг Туг Ттр Су Тр Пе Агу Сп Рго Рго Спу Гуз Спу Геи Спи 35 40 45 Тер Ме Слу Ніз Пе Туг Туг 5ег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 І еи Гуз Авзп Агу Маї Тнг Пе Зег Маї Азр Тнг 5ег Агу Азп Сп Бег 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95 Суз Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег Азп Тгр Агу 5ег Агу Спіу Сіп СПУ ТАг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 84 «2115118 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний поліпептид» «400» 84 Сип Гей Сій Ї ви Сп Сі бег Спу Рго СІУу І еи Маї Гуз Рго бег Си 1 5 10 15

   ТигГеи зег І еи Тиг Суз Тниг Ма! Зег Сіу Спу Зег Пе Авп Авр Авп 20 25 Зо зег Ніз Туг Ттр Су Тгр Пе Ага Сп Рго Рго Спу Гуз Спу І еи Спи 35 40 45 Тер Пе Слу Ні Пе Туг Туг Зег Сіу Аа Тниг Туг Туг Азп Рго 5ег 50 55 60 Геи Гуз Азп Агу Маї Тнг Пе Зег Ма! Азр Тиг 5ег Агу Азп Сп Ріе 65 70 75 80 зег І еи Авп ГГ еи 5ег Зег Ма! Тниг Аа Аа Ар ТНг Аїа Маї Туг Туг 85 90 95

   Сув Тиг Агу Сі Авр 5ег 5ег 5ег Тгр Агу 5ег Агу Сіу Сип СпІу ТНг 100 105 110 Ї еи Маї Тниг Маї 5ег Зег 115 «210» 85 «211510 «212» Білок 60 «213» Штучна послідовність

   «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «220» «221» ВАРІАНТ «222» (2)..(2) «223» /замінити- "Су" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (5). (5) «223» /замінити-"ТНг" або "Пе" або "Авп" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (6)..(6) «223» /замінити-:"Авр" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (7)..(7) «223» /замінити-:"бег" або "Авзп" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (8)..(8) «223» /замінити-: "Су" або "Зег" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (9)..(9) «223» /замінити:"Нів" «220» Зо «2215» 5ІТЕ «222» (1)..410) «223» /примітка- "Варіантні залишки, наведені в послідовності, не є переважними в порівнянніз наведеними у виносках для варіантних позицій" «400» 85 ау Авр бе Пе бег 5ег Сіу А5р Туг Туг 1 5 10 «210» 86 «-21157 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид»

   «220» «221» ВАРІАНТ «222» (1).41) «223» /замінити-: "Ма!" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (2)..(2) «223» /замінити:"Нів" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (4). (4) «223» /замінити-: "Ти" «220» «221» ВАРІАНТ 60 «222» (6)..(6)

   «223» /замінити- "Ма!" або "Зег" «221» ВАРІАНТ «222» (7)..(7) «223» /замінити: "Аа" «220» «2215» 5ІТЕ «222» (1)..(7) «223» /примітка- "Варіантнізалишки, наведенівпослідовності, неє переважними в порівняннізнаведенимиувиносках для варіантнихпозицій" «400» 86 Пе Туг Туг Зег Стпу Аа ТНг 1 5 «210» 87 «211510 «212» Білок «213» Штучна послідовність «220» «221» джерело «223» /примітка-«Опис штучної послідовності: Синтетичний пептид» «220» «221» ВАРІАНТ «222» (1).41) «223» /замінити- "Аа" або "Гув" «220» «221» ВАРІАНТ Зо «222» (3)..(3) «223» /замінити: "Си" «220» «221» ВАРІАНТ «222» (7)..(7) «223» /замінити-"5ег" «220» «2215» 5ІТЕ «222» (1)..(10) «223» /примітка- "Варіантнізалишки, наведенівпослідовності, неє переважними в порівняннізнаведенимиувиносках для варіантнихпозицій" «400» 87 Тпиг Ага Авр Азр 5ег Зег Азп Тгр Агу 5ег 1 5 10 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

   1. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги та яке зв'язується з СО22, що містить варіабельну область важкого ланцюга, яка містить: БО (а) послідовність СОКІ ЗЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 11 та послідовність СОМКЗ 5ЕО ІО МО: 18; або (Б) послідовність СОКІ ЗЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 ЗЕО ІО МО: 12 та послідовність СОМКЗ 5ЕО ІО МО: 19; або (с) послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 12 та послідовність СОВАЗ 5ЕО ІО МО: 20.

   2. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги за п. 1, де послідовності СОКІ, СОК2 ії СОКЗ знаходяться в каркасі МН людини.

   3. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги за п. 1, де варіабельна область важкого ланцюга містить послідовність, що має щонайменше 95 95 ідентичності 52Е0 І МО: 24.

   4. Антитіло, яке містить лише важкі ланцюги за п. 3, де варіабельна область важкого ланцюга містить послідовність 5ЕО ІЮ МО: 24.

   5. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги за п. 1, де варіабельна область важкого ланцюга містить послідовність, що має щонайменше 95 95 ідентичності 5260 І МО: 25.

   6. Антитіло, яке містить лише важкі ланцюги за п. 5, де варіабельна область важкого ланцюга містить послідовність 5ЕО ІЮ МО: 25.

   7. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги за п. 1, де варіабельна область важкого ланцюга містить послідовність, що має щонайменше 95 95 ідентичності 5260 І МО: 32.

   8. Антитіло, яке містить лише важкі ланцюги за п. 7, де варіабельна область важкого ланцюга містить послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 32.

   9. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги за п. 1, містить послідовність константної області важкого ланцюга, де в послідовності константної області важкого ланцюга відсутня послідовність СНІ.

   11. Антитіло, яке містить тільки важкі ланцюги за п. 9, де послідовність константної області важкого ланцюга містить домен СНЕІ і домен СНЗ.

   10. Антитіло, яке містить лише важкі ланцюги за п. 1, також містить область Ес людського досі.

   12. Антитіло, яке містить лише важкі ланцюги за п. 10, де область Ес людського Їдс4 є варіантом області Ес людського досі.

   13. Антитіло, що містить тільки важкі ланцюги за п. 10, де ділянка Ес людського Ідс4 є мовчазною ділянкою Ес людського Ід.

   14. Спосіб лікування В-клітинного розладу, який характеризується експресією СО22, що включає введення суб'єкту із зазначеним розладом антитіла, що містить лише важкі ланцюги, за будь-яким з пп. 1-10.

   15. Спосіб за п. 14, де В-клітинний розлад являє собою неходжкінську лімфому (НХЛ).

   16. Спосіб за п. 14, де В-клітинний розлад являє собою В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз.

   17. Спосіб за п. 14, де В-клітинний розлад являє собою фолікулярну лімфому.

   18. Спосіб за п. 14, де В-клітинний розлад вибирають із групи, що складається з дифузної В- великоклітинної лімфоми (ДВККЛ), системного червоного вовчака (СЧВ), ревматоїдного артриту (РА) і розсіяного склерозу (РО).

   19. Мультиспецифічне антитіло, яке містить перший зв'язувальний домен, що має специфічність зв'язування з СО22, і другий зв'язувальний домен, що має специфічність зв'язування з ефекторною клітиною, де перший зв'язувальний домен містить варіабельну ділянку важкого ланцюга, що містить: (а) послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 11 і послідовність СОКЗ 5ЕО ІЮО МО: 18; або (Б) послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 12 і послідовність СОКЗ 5ЕО ІЮО МО: 19; або (с) послідовність СОКІ 5ЕО ІО МО: 1, послідовність СОК2 5ЕО ІО МО: 12 та послідовність СОВАЗ 5ЕО ІО МО: 20.

   20. Мультиспецифічне антитіло за п. 19, яке є біспецифічним.

   21. Мультиспецифічне антитіло за п. 19, де другий зв'язувальний домен має афінність зв'язування з Т-клітинним антигеном.

   22. Мультиспецифічне антитіло п. 19, де другий зв'язувальний домен має афінність зв'язування з СОЗ.

   23. Полінуклеотид, який кодує антитіло, що містить лише важкі ланцюги, за будь-яким з пп. 1-10. нн ВВ КК В нн ВН а І НИ Я ТИИЗщХЦУВО НЕ : ОВО 0 НОВ КВК ВЕ ВО ЕВ КМ ХЕ нн А АКЕВК ННК МВМ О ЕК я нн

   Фіг. 1

   ; « | у КК КЕ ЕК М ЗЕ ще и и ВК ! ше ДЕ КТК у КК САТКЕКХ ши ВК ТИВИ ТУКА рати аходи орех ет ши: ен ВЕЙТИММ ГЯКи МТМ ТИ щі са АКУ КЗ Мн оо ук Ки з п а ХІМ СЬКУ ВОМ КК і : ; о Ер КЕ оку х ПКУ УМАМЕ ЖОВ ЕЕ РИ сл КК диф днийиими іуппупутеюси ин ЕМ МА КМУ З ТКА Ти у Кв тити : ВНІ ОА ЕК кру В ТЕОВ ня ОК п СК ІНК І ХАІ РЕММ КК т НАМ М ке ан и в ! пен о НЯ ТОБ ми МКК : пплчтсяий приво ЕМ УКАЗ ТЕКТИ накрив и МК нт песотчннх ОБО п еклДЛМ ВКА Бо ю кет ПТУКК КВК ОКО ке Крюк ЩЕ ЯН ІК ит фе Кук КК У їх ПАК КН ТИ В в : 8 ке Он КБ : : ! ЕТ ЕЕ МО ЮК МЕХТ КОМ ЕК У КРУК Мк МКК Ми й Он ПАЙ ОК КВК КО ШЕ тк ВМ сем Кеш ес отн Ме дення ЛЕН РЕЖ лоша им ХК ВОВК сення сен а ПЕ «жук КІ КК певен АК КИНУТО ' : вро пе Кв Кр УК Ук У КВ Я є ї песни,

   ши. С ХЕ є А і ЗВУКО г стю ут сих. сдхолет денний ТЕМІ РК М ЕВех УКВ ЯВ, Ге ВА пов ВК НИ дететук стен ЕІ ІМЯ ПЕБХВЮТМ ге АК ТАНЕ АК УВК ЕЕ ко ен ее : ї РАКІВ МКК, МК ДИН ек ПО : нини ОК ТОНИ Ге ВИРОК рек нн Мел Ки УНІ Ер КУМ З пок нкі ту Жах опт нн НЕ НН п г МУРАХ У КЕТІ ВМО ПАМ вою пррвне щи Фо Оля, І фен «Ж ТК ЖК ЛИ, пи ЕЕ КК ТОК : : УКР ТТУМАН КІ АХ ЕК Кв ОО Ви АК і НВ ПКЕЕ КК ІОАН КАК КОЛ пи ПИШЕ ту ев КВК кий екв ях ко - БЖ БКЦ КНЕХ ор щи ФЕВ пе ту нки КВ її : пе ви, ПеВОКЕБЕНМИУ КИТИ : : ке СЕК шви пе га КН се х ЧЕ ГКІ ух ЛИХ Б т дух т. лляні ПУТІ Тіра нас Ут СТИ МННИК ог вн ши г пер : їй В ЕКНеех ся Ві» х пес тут КЕ 1: ІК ТЕХ ї М нениутнирюьки пен - ТЕН ЯЗКИ КЕКВ АКТУ кеа КВК ОЧЕВЕ ЮК КвоуеК : ши ОТРИ КУН КАЖУ но і : НЕТ и ВК Свв МЕЖА УК СК ОК оучєнтнняхтний Кррусу ту вело ВКМ ЕК УНХ соми МІ ЮК кт диня ; ВАШ ХВ У КЕ пет АСУ УКВ ВОК ПВ ноут у хх БАЖОНЕ СМЕе ВЕ ЖК МЕ о оонке ов : вк Ло ІЕМ ТТ ни пе ОК ЖОВ ких ПО СУЮ Вина ри 1 су Млашудт ту ук ОА КОТЮК УМ са гі Кф КК доня ГІЕКІЩА ФММ ККННК КВК Те т ШТАМУ ВОНО У ХНН Перо ве ЕЕ Уа ХОВАТИ ОСЯХ КН уми у вик ШЕ ТА Ж ож СТУД мука ТЕ ІКІКУ КК ІКА ОКР Е : щі і ДИКУ КО Вх тн ФОТО КОРОБ ВВНК УВУ : КУБ ПАК Я УКВ ТКУ ОВх ПА и Ух ЕК хх хакі ПИ ЯК МЕНА ВК ох В. ХЕ кут КІЗАЖХКВАИЮ ОО пове ЕХ У Я ІЛ ІКТ, за КІ КА ЖЕКу Є ХДАК пе ВЕК ! яю УКУС ВЕ КТ ех о кое Ополе ов : ОК у ПОЕТ УМ У УК КИ Деениткиюнююннняї гер КМ Ічні пнях ти терте Бора Кв АКУЛ ЖЕ Ку у ве ВВ ДІ, Кв ше ТМ ДАЛИ она пошук А МИ В ОК ше З КАЖЕШ М КІ КВУ АЕС ВЕТУКЕВ ЕЕ деки Я - ето пек ткКаяВВ ККУ КИ НТ пмІвОРОо во оо я жу А КК І : З ит пе Кен еикр ин МУ ОК ККЕ СК щЕ ОК і А Тушки пк кк под кю ян ГИХфФИДІ Ту ну УКР ІС ТУ НКО ПЕКІБофир нм Кв нан ж ЗБК Еко КНЕУ УКВ) АН В оку УеюНЕреК я їли ік х коки КАЖЕ. ОДА У НН я о ех ЗІКу В : еутунр УКВ РУ КеМУ км жу ня п ПЛЕН ЖК яке са нши ню ее тА СКУ пов иа й : ТЕБУБІ ЗК ВУ ТАК МК КСТКН ех Хімчччучучучуучу ут Ки

   Фіг. 2 МНН ка Юа Ка я гук ту око ру ях ї Со ЗК ї ' зм : Коен КН и А КУ Ї в и МСЕК ОВК КК Я СИ Фнниииної гео оо ЕОМ КМ ДАЮ Кр АК Ке нн репо я ї Бладікх ТОК ЗЕ АВІА КУ ТВ Х хан пиво котка нки : / п х ; и НО АВ ПИ ДН КК ї. ТІК ОК КЗ СВАТИ х т Енея ее КК сх ж : : Ь ди р и ОЕМ У КІк КЗ ери ГУ гостеві те нт ттеттеютттт Ку; З ЛОБКУ КК МИМО й Ух ТОВКИ рон оре ему її ; пд ЛВ, поруч арк из шо АЛІ ПЕ нн ня тонке : ин Кн ДЕС КОН КЕ УМА УМ і : і ниви ка МІЖ КЕ у КУКИ совок век ко УпшНйнянндмння вт ОКА У КВК Ж ТЕХ пуУС ТВО ТКУ тво гук ех п ї рах т МАЗКА ди папЕкю тях КК АМК УЮ КЕН КО пен ее етЕФе у ; ; о са етеве Вимя тйн нЕ Н т : : ен, КЕН КУ Спи ві яких, пити нику Е КОТ Тіма Я УКВ хека хе дк ук УВХВ ПИ поету реднетретя Ж р од уж пт АЛУ СКТНХ ВК ЕК ВЖЕК У ке пев : ЕДККОЗ ОМА ПАЮ мими ТК як Ку КОКСУ МУК " Ї ї Ер тримав СК ши І. їк КА Гр пеня ово У Ка ще ху ВІК Ку Км СЕ он ше 7 де ек ик КиМУ ІК еНе ВК І кквтетнвн юю о | ПКТ я ; АН повне ІК оман КЕ пиття ! т я в І сет ЕЕ я ПО же Та З х СЯ пет ск ЕК й ММ Є етотек ето ст . я : ЕХ: МКК НЯ паю Ат да Ор Кале кукі . ї турку, КК с ее ОО У окало : о ня ДК ен ХНА ТЕХ АК НК Я, Ж ШІ ГЕДДЕ ТВО м УКеЕМК ТУ нах Ак Мине - гля Вовк СК пек діввК ХЕ КК КК еЕтон ему ше ди ПАК СЕ АХ п а МК я нн кож : г АК ие нем ЖЕО ЖК Кх : ї : пе он док ОН М ТЕТУ ІК КК ке в цими Каши де КК РОН рек рр мети МКУ Пк ненор ви ри ї по ї ши МЕ УВКНЕК У оентяя вежа ее пучки а ТРАК КМЖАТ УТ і : КЕ ТОМ чи Х ТІ ЗКУ ниви Ха си ОНА БЕХ КР В ТУ КОВО ес ТВ ОВК ВИ п ш КИ ов ОБАМА СТОК. ОЇ КУ сід оноия пк пня - . ЕЕ МИ ТОК ХТЛМ В А КВУ ї м АТХ У УК ТЕКИ ККЕ КВ пушок шк щ : плн ХОлИтх шелак и почу КІЛ ик МІ ІТИ ни Дня пер МКК : пан ЖЕ УККУВ ВЕК Е У КО : : СК овоєвевч УКР Ян РОВНО веСКевЕка виш ШІ ПІН ажажаєшюв Ук пекар А му ре тв ие КЕ Но просп еро Еш ПЛОКИУХ. доки ХЕМЕНОр Квота КН МАК ЕЕ : : ; ї кмин п УРЕ ВАК УК КК я : : пІрун водне тре ТЕХНО а м п пот лити м утння ГМО Ту ВЕ КК ек ВІЯК ню ан І РТ пОоБЮБОБ УК Се хни аУрУЄТЕ ВВ КеВКЗО ще пок ше ОВ ЗУ К У сн ЕК Кок т у ВЕ Ї УЗ Ж ПІЦИ ОТИХ ву Сун ИУ сі : : ! гу ж ін вок ІВ уМжК их КВУ пеРОКОюіУк ші ГБХМІ ізн овнн екв МТУ А в М . РАЗАОК БНО кВ Ен о я в ре т Крук кр КК ЕК а нн вин ПО ВК КК : раси а нн ОВ КВЕБЕК : ше СТЕ ТД УнЯя ЕЛЕН ЕК ЗЕКНУК КС не коня ша ЕМ ЖЕ У ІК ПЕ енлискоокя ша с рив т пер режі рок я ВШ Іс ни нон реко г КВ | : : НЯНЯ ї- МИМО хи підмет мМуни УК. Я Я її ЯК Ку с3 : / кН ЗЕ ПІ му І ІМ ТК : ; ЕД КА СЕН ШЕБСТУ І у У ОКО ШЕ я нн ев таку уєТкї а нн р кох пером уУ тьма КУЄ ДЕК КВ пр отут Е шо МЖК ЖЕК КК ЯМИ : : сшек Тувеовеєея КЕ КОМ БУКА КВК ши ве ГІКИЗ І БОКІВ вишня хікка ух рік МОВНУ й 1 ЕХО ВАХ МАМИ єди і МНМА ЕК ї Дені ту У дннчнчннн ни

   Фіг. 2 (продовження!)

   Жак ЗККК ва КК ММА р ощаане: ОЕ І КО щЕО: ІЛИК БІК МЕ К МАТАХОМН НН КК УНІ Іо і Шифи н А о ВЙ . . . дині НЕОН и в а п ев ін НН Й й ПФУ И БУ ТА ПЕА КУЄ МИ ОБУ Ту ! : ІМТ пев УБІК ТКА нО У ам Ре вані ун ЗК пиши НВК К МОМ ВЕК ВАМИ К У Є КК АНК ЖК ї ПЕЖІДХ ЖАНА МИО В МИЛЕ КЕ Ва У КИ ВН КЕ ВО ВЕК ККУ Ж ВК, і З : й ПФК ва АХ ВІКОН ТК. пе ки : ГТК МИр і кА ДТ ува УТ ! : ТЯІЕУ івана жим СКАТ тТкні як НРК ВИК У ЕВ нн ЕК ОН ВЕ ЗВОНКА ВОВК КС НКУ ЕНН ол ТІМ ОБОЄ АТАК Тему ума ке уоКо и Км дл М ВІН КЕ КЕН АК КЕКВ ект т нн ІЗ іме те мі На КІН НЕ КЕКС: до А ВМІМННК ОРВК КТ АЕН АМКУ АВК нн ІДаЖИНИ МОКОВ ДИВНУ КВК КВТ ОЕМ КУ М КК ХА ВКМ | ах Я ТМЕБИР ІММУНОВІТ Тк еУ ЯМОК МНК АТО ри З ВЕУЕКВОКОВЕ Я ЗЕ КУ ТАНЯ У КУ КЕЕТКНОК ВУВАННЯ ти БІО ПІКИ УКРЕКІО ТКТУВКНУ КУ ВІ УА КІМ ВВ ОВІНУЕИУЧА УКВ В КВ ї : ТАТИ МОЄ МКУ А А ТІДЕЖУСІНКІ КАНАВ ИМУ УТА і о : ОЕІЮТ ФФК ІНЖО КОС УКР МК ТК НІК ВОК вк КОТУ ї ТАТУ ЖК ЕК АМКУ УК ПІК КНАК У КК ; : ї ОПО МЕмЖ т МІК У ТАС і ! ТРБЕІДЕ МА НОКеКНЯК КЕКВ Тім Ук МІК им у ЕК В дюни МОТКІВ КЕ Х ТВ АН ХУ ПЕКУН У КЕ НКТ АЕН | ; шк ТУМАН НН КеЕ І УНК Ук КН КВ НМ НИ

   Фіг. 2 (продовження! і Ж ин ан я 00 тане ВО: Рома МАНО ЕН ІНАНОНИ УМО У М КЕ В УМ ОЇ І ЗУМІВ К НИ ВІЗУ КАК ТЕ КВІТКУ КВН ККУ ! і ГЛ БОМ НМ УКВ М ГУ КУТА В ООН У У ВУ ІС Птн: ІННО УВК КУН ІНАААВК МО РВОМО КВН ТКУ ВС І ек КВ УК ук КС ТВЕН ТВ ! і ОЛИЛОЖ ОКА ННЯ УВК ГУ АН КН ВОМ УМ УА В ЕЕ ЕОС дн КВК В МК ЯН А ТВО КНТУ тот віт ря ОБО ОЕКИКИ УК РХКЖК НОЖУОрИ Ме УК КІВ ЕОМ У УА 0000 БЕН в НЕ ек А ІАЕ і і ПІКУ тоновані в КУ ЕН В , ЕТНО е КЕ УТ ККУ ІКОН УТ Ух : і оо Е УК М ун р ки о В У в Ку БАКУ Я У АЯКВОчЯ ОСИЖОЕЩ БО ТГК КОМОРУ К ОХ ЗМІНУ ІК У МЕ, : а : пий КЕКВ КОП СВ КВ ММК Яни нний п ТОРА КЕКВ СУМКУ ів вн нн ХЕ НК ОК КК ВВ КО А Я КЕВВКН ОВО пики ЗИМІКе ТОБ АХ УКВ ООН МКУ УМ ВІ КУКА І УТМР кН Кі. ХВОРА Ма УНК ! і ПНІ тіфенаВ КИ Кк Кум ки и ЕН и КЕН Я ППжХуптвн м тан ау тку ак УТ : ; нен а а в а ЕК о ВН ШИ рн нен ни о кп п о пов Со КК В І РВХЕНа КЕН У В В КК К ле ув ни мн нвУ мн ККУ ! ! Гея шани на в нн и 5 НИ ЖУМНИ НІНА КК КОСУ Не УК КЕН ок КК ЕН У і МЕ З ши: ШИ Ша ГКУ БУДЕ ВВ НЕ У ТВ ОКУ КТК ВакрК ОАЕ УУМЕ КМУ Ж

   Фіг. 2 "(продовження бо жде ОТ ЕЕ ак КВ ЖВЕ РОЗМОВ: ко Ждеж їі ЯК ак БОЖА ши : Ба ! СКК кеккккуюсюєкк ке уки юює кю ки куки є юки кю нироу тете вт тр коли кп о опе етно ЕІ ЕНН КЕ БЕ ТВ ТУ ЕК У АНА УВЧ КУЛОН У ТАКІ Ії і і ШОПОТЯМ потен шо в кі у ве щи шт сних прим Кенн лио Її Н : і УМЖКІТОВ см ен ке ВЕ Ух СЕК Ем т ОШ : КІ ї ї : а не тик и пт у В КЕ КК КІ Іа ІХС иа УВО КУ МТУ НОМ ЕК КК ВАТ УКВ : хх : ВТМ о ке о и и т су нія вк ї : лиже ЕЕ ТИ а думи Ку Ву ї ПК с ЗК ї МЕ зай ! хрнатаму З ЯКО ав ЗК ї ЗЕАЮ кої ЧО : М ! : яИУИМУ Н : ! їх їх : ПО : ї ентодерми ! Кор ие пет р Ер ЕК ' ІЗЗОВХ ДОМУ ПНО ОСЯХ поп коп ВЕДЕМО КИ АК М КМ нини рт, ІтТВІКаМук І пи і ГР: ооКНВ ЕК ВЕУ У ВК 1 ут а г еСТВИЕХ МК ВЕ МО, ння перги ЕН ЕК Ки КА ! МБ тер ие ІОН: БОМ ТІ НУвак м; ТК УЮОЖ У І осі Ан ен в ж нн ие нн ЕЕ ЕК НУ ех ' ну ТТ и ВО пен КЗ ОМА ша , ке : ша ОН ОВ М Он, ОО ВКМ пиляння кн о А о нн І НО М : ОВТ ОХ НВО ПІ АОАТІННО ЯКО СІКМОХОХА ЕН ПЕМЕК пуття ЕФ КА и Сон НЕ ев Кт ' ОСМЧКТООБЕВАНХ І МА ЗО Ку ПОВ О У КО А Я до ли ДЕТІЕімт енд ТК нти вн Бура треку прю рт МВ ЛК Мини КЕ ШЕ : МО ОО А ИН про рутин ВД МАЯ Кт ин нки пев М я : си ев ПЕВНЕ В ВО В ння ХАКАХААКЕВкнм ПЕК КЕКВ КУМ о ЛУ я По ск а МК КА кн а КЕ а са і СУПОМ ТКУ ЕВ Ех ; ПЕ ТНК НУ Ав М МТУ МІВ І ІТИ ЕОБЖЯЖКВ НЕ ле ОО хх Пе и их Ки и КК Ж ! В в в; 6 Ше НЕД и ВМ ВМ нти М М А А АК МТД ння пк я Кия али ост нини Мати ЕТ ТУ Те Я Мн СОЯ М пін ЯК СХ НАВ хо ХЕ М онекиих пехееєтккі Кн У и ни; ша и ! гія ОБОВ Х ІН ОСІ У ЕМ КМВУ ВО он в у 4 ЛЮТ ІТП ТТ ТКА ПТО ми прик вк ЕЕ ср Комтнть же ТІ е РТ КИТИ іван них ' С 5 ЗАВОБЕН АЖ ДВ МО МОЖ и МАЛА ПЕК КВУ НОЖІВ охо Мн Ен шу срртнанек не Пат Ние ЕЗІУряЕ З ОІВ АЦІК Я ЖЕН КО ВКМ Х СУК ТЕ АК ння Кошти м КЕ КАТА АВ Ки АВК а і ан На о НЕ З НН МОДИ ний КТК КК оон мух ! ГЕ МАМ КЕКВ НЕК ПІКУ Ма МІК Зк ее МК ВИЙТИ НЯ. ПЕНІ Ииси ом мн ми ее : Геухкаи клав в ЖЕК Я ЗЕ вас ті ІТК КТК слині ТЕЗАХ ї ІАЕ ВХ М ЕК. ее КО Ця с Я во о о КН ВХ пере З екв Те п СЕМ Ме ПТО МІК М СІВБОЮ В нини МЕКТКр мн ни м фр ЕВ КІ : ПК ТОНН ІТЖ ВТ НАМ ЕМО КВ лення МИТИ ТМ дев тки ЕК По х і ЕвСЮКОНА ВІКУ А ' : ЗНУ ї КАЗКУ У ТУЕВЖ ТЕХ у КО... УВУ ДІ, Я Мал КЕ ЕВ ПК ори ЕНН ЗК М ПУЕ ОТВЕК ВВ сс лом ВК КНН ТКА тет А н А К КИ яниМтя І МИПлт В, пл ення о В со у пок пра й БЛОЗІ БУК К Є ік З ї ГКУ КС МИ ВК пп ння у пф КЕ шрн и в з ми ТРУ БВ ЕМ ! ІКНІ СК КМКеВІХ МК НХ МОЯ ТРУ ЖК м ЖК. ПК Ка ПЕ а і м о в оо а

   Фіг. З

   Ето у Кук Ї БЕХ наб ВВ ! СЕ аа ВВЕ : ЗЕ з СВКе і сш нн : ї Пе ж Ед ТЕКУ кі с ОМВК їх о Ко: УК і Оля Ж ІПИПИЛлИЄНИиИМоМ ин : і Я 4 КВК ТК я іа ЕХ АЖ БЕ нях тек Ех МЕЖАХ КК МЕ коди 1 й в МЕТІ Ен В ша см иУУенеВмнимІ ит и у ЕЕ ЕК Бя доки КН Я ж і лу ТАНК МеХ ЛА МЛН ню ї НО І мк я ках ПЕКУН нн т. Межа т КХХ Б 1 ТААБОБОНе и. ї . о стук ищУ СК ее ПМС ТЕ ІК, ЗХ ТІ АПТЕК Ме Ех по п М ГЕО ТАМ НеОЮ ях КЕ ее ІЕМ У в АХ їх : ня ДУ КЕК ЕН ВОНИ я З шк БОНН Х нн ІСІ ПО КЕ пер п й пущі СТЕК КВ Пяні Вт зів ТММ вити сх ! ЗАМ КМИН УЮ х ЖК ІКТ МК «ВЛЛИЙИМИ пси . но пох ЗОБІ НЯ ОН ех -к ВІДНЯ у ТЕ ЦУВИ Сен НИКИ як ЕВЕР ПЕК ння ; ГЗК ши ПК А ЗОБА ТЕ нин Грея Бех ПК вн ДУ КЕН п ЕЕ КК Е о ровів ВО СЯ ОМВК АК МЕ однин Пор воа ши ЗК ПНа НК БВ рн КЕ ТЕ Е В ОХ Її пепсин сд З ВИПАВ М ах КА ІБ Х и пола ши пе пн не ІКТ ЗЕ КО ен ІБ І НУ ї ВШ у КИМ ІК ЕК ЯК А, Кок КАК ше я пи ян а я ж няння ето не Іва й ЕМ дл ЕТИКИ ра и Ку ОККО поси ЕЕ Х "У КЕ СЕК КК ї ГЕ ЕК УХ ПЕ Ти КІВІ НІ МИК ОХ 1 я ежО я ; пот ЗІ К Я, ККЛОКОМИХ ПОЕМ ей ПН МЕ ТВ БІО ТЕ кн ПЕК ОКО ше і : БАБКИ ния то УА КАМ в ЕМКОН КК, : пон ке ета А АЕН МК КК лак Кннннлн 7 ке я яко 00 ЗВУКОМ КН ПН я кН о нннннтетннннннй Гір терка МЕМ ОКО У се Ікс г ВИ певен ся ; й я МВВ лях пн пек НЕТ ах Р ІХ на мон ут. нн в МУК ЖК Ех ШЕ паху Се ХЕ УК їх КМУ КАК пттЕКрК их ЗЕМ ПД юттттттттеннннй Мои ДЖЕ АКОІВ ТЕС нн ення ЕД ВУ КІ І ОК В оно ї РІЗКУ 1, МК ОО с ІВ тет КН ше ВЕДИ Ен КК о еВ ТК ЖЕ о СЕ ких пн Еш Я НК ОН ОН Ен емии ПОС но Мо тк МИХ ТожанМр МОР ОБОХ ше ї РІД ІА ВК ПДТУ ною ІфеІри ЕІ. он ен пе : - КТК нд ІЕЕ щО Моне ТУ БАК Ка ! п щ: ук пе ВО ше НО МОВ й рання КО ОК т ТОК вався ТУБАХ уУКк В НОМ : УЮ ші з п ан по ї КАХ поту у їх ТЕТ АК ться ЕК МВ ння Гу Кому МАК кн пек АК ВЕ МЕ ОКО : ння пс с ше СІ дою ек ще НК ЗМК хе о МО ИЮо . ке ее о ККАЛ ІВЕЕ МИТНІ Пк ве КІЖЕЖК а й пре ми ю СЕК ел А 5) ГГ ЕВАБХХК ЕХ у нн НЕК ЗЕД ОТАК ЗНО рОхка па и Се . петанк с ще ПН сок КИ хя: НУ АНА га їх пе ев ню МДУ ТК ди у ММ . пк Ку КУМ ГК КМ, МЕ ТЕ есесєсске : пам теми я КВК КУБ КК МИ 1 песня ЕК ї Маки енне Ки ОЕМ ЕК У ВИ ПОН Коен еене ване СО сш ДОК не ПІК і ЕЕ КРУ о нн нн панк ЗА ИННКо нет ниннняу ТКА МО ТК пк я Пт МЕ КК ЗКУ МО вив А дк АН Кт КН і ЗУ РМ ЕЙ Те пеки полотен Ко КЕ кВ пуМОК о ОКО МОАСНИНИ САКЕ ОКЕАН КЕ ЮК ї ; с од.

   іг. з (продовження!)

   г. ДО днини ненннннннннмя трек дк» : перу ух шик т ут» : ККУ вя КЕНЯ ! пи. про екв Уже ни ЩЕ : : шк | сстлюнудеууо вних шк а я БУ Я : Ж ІМК їх Е ЗВО ЖК С я : НК 00 РІУ УААН Се ЕР ЕН БИ Ко МНН гЕхЕую Ки нциюи ЗМІЇ Мт Пеня а 0: ЖИ ДЕРЕ ! ІТжКх ПОШІХКЕК Тими вк Кк ЕЕ ЕХ ЗЕ он ЕК о Ен Е кв ОВ ОЦ КО КБ нні ВЕУ В КОКО я ПАДАВ сен ж пок НЕ Ка КН нн НН НН В КЮ

   Фіг. 5 (продовження!)

   м НрЕЖУ 00100000 шах 00000 шашок ОЖНО я тя ЗЕК ех с : УК КК Ї МЕЧЕМ, : КОХ зму нам НЯ СНІ еу Ка І : калач ? овес Ї ши ща п : Ха х 1 хх ї : ЗИ З ПАНИ ї ШОЖЦТХ ТК ї СЖКлЕ 3 Хо ї Кднтллттл АКАД пиття АКА КА тля АЛ ДАК ДІМ плат Алл ААУ ДА сна ли ДАІ да дала фл КМ уклали : ТУВІВХ ї я ЖК : ХВ ЖТКуХ ик Х : фа тю 1 хх ї : М їх дОТМКИХ ї ЕМ, пи Н Ми 1 2. т : Пи : х Тра і ХХ 1 І : і В Н 1 Е : ІЛ : З ЯКЕ : ТАКУ ІБ : КА Н хх ї : тт З ДИКИХ : Ху Кат: : УКВ З х : : УК З ЕК ї их ї ду, : гак ї У ї : пижмо. у ТЕХН ї КОКО Бе : іжудЕ 3 БУ ї ду ААХА АХ КАКАК АХ ХХ У У МАУ КК КУ ХАКААХ МАУ ААУ У УМА УКХ ККУ УА УХА КАК УА ТАК КК УКХ АМАКАХ МАУ ХХХ АХА ААХА У : УХА 7 КТ І У ДмХ пах 7 п У ї т ї : ХЛ ї ор : БО ЖЕ : кІХ З пх ї : Я ї КА і ал КК : ША. ї А : : ха : Хв : Ка ЗУ Я ік і ж : : УЖ ї хар их : В МУ: ї КН ї .Е Її фохеежк ех І Кр кхжекккк юне ІК Снінжкскн ки кккоктн ке ІІ шкккктєк юки КІ нуккцюкнижкидкккххккуккхк ак ккюнжкжккккюни : пд ї она Ї Іа шия т о і ТЇ ї : п І КК : ЗИ ТЩЕБОКУ. : з лх 1 С ї мм АТАК кни ДУ У УК АИУ мк М м мк икум ки мкм КК мкм мм км КК мкм : ТАК ? СУ не ? Де уко т ТК ї их т : Ди 1: ДК і ХО ЖОТНУ БО : БУ З п ЕІ : ЗАТ ї ТАКА : шт ТЕЕ тал : Кт 3 хх : : пк ї ка х ин й ее ї У із имя ї : ЖК : Ух : я ВІК У : Зм 1 ЗХ : ун КИ о нн нн КЕ пеня фунт ДК дк ДТ оф хни : ха : ядра Н ЯТЬ ТЕ : ТОІХ 1 Ух : тент ІОН яю ОК тя оон нн о р : ХИТ : ЖОМЯКЕ : ВОК В ї ТтТЖл 1 хо ї : ХЕ В ОКА : МТ ТАКА Я ТУ ї ЗЕ В І хи : ІНН : УНК Ті : ТЕЛЕ І ха Е ЕТИКИ КЕ В НИ ИН КИМ ШИК ДИ ЕИМИИММММ І : пвх ї ДЕК і ТАК ТІ : ж і щі ї Партктн т НК КАНА тн тя тт тА Дн НА ОК нт ТАКТ т ит тА тА тт ТЕТ НКТ тт ТАКТ ЖДЕ НН НК і тт тт тн тт тлі т : Б ї ЗВОАЖЕАН : ОКА М: ї ДЕК 3 СЯ ї фічнннанян і нн а я ннфни Пнннния : ХЕ : «КА : КЕ ЖЖ І ТЕ 3 в : ї ЗК 2 Бр ї МІ Ь ше ДЕ ї Не 3 п : : МУ ї лк. : КлсКн. ЗУ ї РІЖОТЬ ї паї ї : ДТЗ ї БК : Тонке ХЕ : ісжелх 1 УЖ Її ин а пн п в и п 7 УДК З Код жк ї ССЖ хх І зд 1 ях р : ЗІ 5 РЕ і М й ВА ї зда си СО і ; ІДИ Кент Ек ЕК нн фен ДК нен нн о е юн нн яннннї : ЖК 3 З КЕ : ГІКея МЕ : ВТИх ї Ми ї : КУ ї КОЛО с ї По УК Ки : іща Хо ї : ЛАК : КОНЯ ї КОЖ У : БМ дя З М ї : таж Її Зак : УЖ ах : іа 1 5 х І Піклаце : кі бери Х дюни им жи хх Тоосвщо «кажи Сн 0000 ВНІМЬ 00010000 0000 ленеюжлоннени 0 ВО ННІ 0 КН. : ЗІ ! хро СКУ ї Арх ! хх Н шо : ї АР : пря і КОМУ ї пу і ХХ 1 с і фони ані тннннннннннийннннннники о тасотнннннюнююкфннккнне нн І ііннннннннен но фннннннннкюки ін монюнюнююннннкінннннкинитннн я а іднннннтннкюннни дн ксюнеткокююєентн сс женінюненетння Н КИ : ІНВ 1 ПЕ : За ї ши 1 : рід МІВ ми муфт МІМІКИ Інк хи ми мя мА ХІ дня ння кляті А: Учні : САУ, І пока. ожк ТЕМ їК Е ско І лих ту ї шо ї Н «ЛЕ : ФОН, Ї ШАХ : ЦЕ : и 3 У ! ї МАК ї КЕ и ї ПМ Х 1 хи жТуу ї КІ. ї М 1 і АНІ : ях З МАУ : ТЕЗ : клад Н їх : : пушику 1 Мо ПОШТИ Х Н п ї Ух 1 я ї і: ХАЛАК : ЖЕ ШЕУ : КК Н Б Н хі ї ! АК ! пу оо УК ! ххх : ж і жу ї 1 ЗЕ : ї ЗА Ок : я в ї КО 1 СК : 1 КИ : щи ПІЙМАТИ ї Се ї кОЯ 3 с ! фан ДК уникнення УК А Мантнфенння ВА За жжни жи ин І Ккня нини нн ІА АЖ тиждня Ану Акт кеннняяняЯ 1 КІ : ООН ОРІ ї пе : ЖК в і : ху : ПОКИ ЛЕНІ ; ші : І і КН : і ск 1 ікри гуд ї п : че В я ! : ЗИ ! Мох ВА : ІК ! жо З З : ї ХУ : Ван і ЗЕМ З КК : Шо 1 3 Н : пах Ї под ооо 1 Зак, ї я 1 Мох ї і дало : дике ЛЕНА : Зі : ЕН З ох ! ук СУД ккд АК АКАЛИХ АК М КАХААЛАМАХА АКА УА АКА ях АМАКА МА АКА, ДАЛА ААААККАХАААККАХАМАХ МАМА АХ чАА АКА ДК АКААААК ХА КА ААучАХ АХА : ПОЕТ : Зк ик ОМ т ПК : Ж ож 1 і НМ : ХОДАХ ЗХ : М : 1 і х : фен Кент ення фен тн фен нти нн е Уже н фо нут юн нюютютнний : ЗАТ Я : ТОК ЗЖОКУМІ ї ХА : шл З хх ї і уми ї Ух КЕ : Ех ? Ах і та : : ЗЕК : ЕЕ Я ХОМ : сх : Ме 3 їх З 1 Дн КОД дол па ККУ дл ф и КА ня Мала А АД ан а А А А А Ат А ДА А А А А АК М тт : ПУЕ Ї ко ПЕ ї ХМ 7 У я ї : ДМЕ. І З МІХ шЛІЯООХ : А : є З ої і: фі тінннннннніі нні нні М Інні інн інн дення нні і пкт : а ТЕМ т УХХ : ти ї ЩХ ї і Я ! ОКХ. ХОБІ АТЕ : ВА : ха ї ха : і За і ЗК хе і ЗА : І 1 55 : а ле ть кн вв п п в в п В в і ХА : ВКА шлю і ща : лю у у : Н ЕВ : МОХІВ. МАКУХУ ; ЛОВ : Ж: З М і ! УК ! аз Бек ! та : «нд : кі ! і Я : ДВ і МОЛ і БВОЯнЯ : в 1 А ! : МВ І ку, ТЕ ї АЖ І тата 1 КЕ Н : ЗУ 1 що Н КНУ ї «Ж : ж х 1 о ї ї ЗІ. : ТОМАТІ ХК УКАНИХ ї БВ : пи ії З : : зем : хи жк ї пк і : ох І СН ! 1 МДЕ ! БД МКУ ї МИ ї ЯН З хі і : НЯ ї Уа ее Її ж : Ох 3 кх 1 ї ШК ЛК ї ких ЖАХ ЖНІХ МОВ : хх в : : З : ОАЄ ШКО і ІБК і З 3 Зі : фумеєтткех и Км Стих юх хек КУ єтккєктєкі век І ект кет КК юююєк кети Кт оекєхкккєкс і Уіш ї де м ї таж ? ХА тХ : ї дже : ЗИМ УНІ Х ЯМ ї ПКТ: Н ЛУ 4 пеню но о п пи а В КК ОН и о ! ТЕ : МАВКИ і ЖАВ : Ж : вх 1 му і і ЛВ : ЯК Ї коки ї Я : Ух З З. ; і джшунх ! Ми по ик ня ї ж ї р 3 и ї : ЗХ Ех : З ма залах : ай : їх Н хх і нн он нн о вн нн М нн и и п кн кп и о ; нь : Пп Теми Ї Кит : пихи х а ї нн з У Ж 7 иа Кг ? о 7 щих ї Ж 1 : Я : ХХ Ї КУН : 33 : ї | и : и

   Фіг. 4 (продовження а я муж нен о Ї шок ї тар КК, : ше Тости соки 00 КВ пе кер ут т ї ах : ЕІ : КО кт Кок киіВ КИ ХВ: «Її СТУК : КЕ 3 ка ! ПІВ : КН : МО ук некннівя ев 0 ЕНН Десерт КАК УК ТУ М ик Теки пен о и п о і п п в В В ї ТАКТ ї ЯК ї вза І ХМ : а : ож т ї Ж: : ЯЗ Х : ках І ЖІ : КІ : Я Е Ду у мет КАК у КУ У А У УНК КА У КУУ У У У У У ефе ТУКА ААУ У УК КТ У КТ КК АКА КА куму кутю Н как : схо : ках ме фе І «а : їі: х ї Ж т ї ї Ех ї КД ї а І "ХХ : Я : Тк Е 1 ДНЯ ї с ЗЕ: о : Бал і ФУ : пою ї Й. Е вн о ко о ї шля : ОЕМ г : Ки і Ек : ее І хх ї Н ЗАЗ : В : Ди : ММ : Е х : ух Е нн В нн М я

   Фіг. 4 (продовження!) нм ЕК м: 1-х ї киосуюа шо отри й ро СВТ ї ї : І | і ї т Кк пкехкА п, сі 5 Тон сходах - І: ї ше алея ї ї АХ х х - ма. 3 щл-ї 4 сх дики З 7 Ї 8 кт ї се вкх. ОО З Є в га З ро-к : Кун : Кох : треки Ок ; Я Кт цеха дно З як Р сн ї ; З-Ж НЕЖКАТ шантІУ а ання ; ох ї ние ям ак й МО - з хж НЯ ей У ж пе КТ ї Мая где М 5 КТ дифе Дю й Ж І ЯК Я -к в ї де ЕТ й -к т : Ж Х і Я я ОО кА ОХ ОО А х : 5 Бе х соя Ж т КЖ - 5 А Я : де я Н - Є Ж лк я ов ов Ох ВОЖКЯ У ї ак к : вро Кя х де -- ніш есе че шк ту рах щу їх ефе. Ко Кт нн, ек, СЕ У свв ї ех З | м СИ а день ву. се АК Є і-ї -Х чех ие си сш ї ре М У оо З КЗ А Я м дини мо шАКх ші З - урн, ВЖК ДМЕ КК тен нннтнтнднннтннннті нти т щі до х х . ї с ти ж нуЗ ще Чо м х ї ї ї хека ї х. СКК ЧаАнтенк м кА Ех ВН ТАКТ ! ' ' ' ї ї Н їх се ср дух ючих шо ! Коти бен ОюІВ ВМ вік: і Її що У чути ЯМ гої Дехи- ї 1 о Я В ї Н г ЖЖ со жжк в ми к шха Ї І о МІК М : ї 1 ' КОРМ Біврдт хпцкя 1

   ; т. 15 ЗЕГТ. КОВО НЬ ої Н ї їх 5 і Хіт риття Же ик с КАТ х ' В ' КЕ ; - ' м ! я : й . с ! зе Х д с т Н Є ах С с Мо Ж удееенннянкй ее ване з ДНтоннкюнін ян. Коди шт ре ЖЕ. тр ех дО Ки ще чу т ' я - Ж Н дк ях - ! ке се Яке т : ря Жодлня них тих ї : Я оон кс ря ! - чо зок м ке : я я ож я се ТІ де лий ! ки вс і М ях Бо що . ; Жуех єння о джин об» - На жк 2 ' їх КЕМЕ Ж ж 1: ІК ЖУА : х з У се Ії м з ож ло і ще ща | як щЕ Хей і :

   ех. ВИДІ ли ІІТ Во ит. х Н 3 ще х з же еЕ Іти пи Ек Мк Інн тнжк ні

   Фіг. 55

   ТК і Валя пн ї " ї

   ОО. ВВЕ котик 1 Бі х | ра ж де діятжнк ЄЖінентіня - й : є: т ях Ден оснастку косавнт отв ватного домов ккд вдаккс вовк я? не ни мн етакн СЯ

   Фіг. 5 ГІ Її; ех ЖЕ З ї І о | ІА п ТЕН Му Я ; ї ЇВ КИ ОЯ І КВ ОНЕНЕННН 3 Х Же ден Ми Її й; пк те ех М А снах я у я ЗТ К з 7 Хей вант ей пече «шо ь нн і лен ох Кі м І ах ши і і Я Х КЕ КАК й "а я є о: т я в Є ї х й й х ! х і Е 1 5 Е ' і і ї Ще і у - Кок і? че; Ки

   Фіг. 50

   Техв ж орооватці; ВМО КК Канни т «2 ВЕЖМЖХЮХУ. херес косою соксккокіккокіс со осіккккококеюкококеокеснске жк МЖК ТВ пан р І нє МОЗІПеЦОЮ 13243 жо АКЛАННЯ в Ве | век Кі я устя вх щ р Же і-й ХВ 11 го ЗООпОлю ОО ох І якан МОТВОВІ, 1ЗЗБВ х до яю ко ! плн мох Є зроврдюв о З я МОНО Я 3 МК ТМ А ке ку. у и КК ке ТТ УТ УТ УМХ і нич жи сток 7 ай с- ВЕХНОО Я вв ве ІЗ ' Ві 2 і й тя: ЗМО ЗАНЕО НУМН ЗИМ ЕСЕ М дуднкикндюнихакнчкнннннидицкиААнАК КАК Титв я широт виСментвВ ВОДОЮ се Ін НОДІВК ІВ КІ кеВ и ях їжею КАК У Е Оце др тет детьд ве : Зо з Н -йй си ее МОХІ НЯ Я ї ЗІ - пек теіеттчяенян " Шк Е -К ЯКОЮ о іа ВИ ВвиВм о ре ЗЗСОЮСЮ сля М нн З - УЖ БУК ЖЕУЖ оку хх Ї ЩО рт вно су й З си -.. ВИК е ТВ Ва

   Щ. ДЕКО не ММ Вурннннененененікокікососсснечснснснснсцецететенстенетененесекекекекнкекккккесесекссстснх пе нСлТВКЕи 1ВЖО ї хх ге што, че с х гі УК. ВУ, я Ук тм ик и щ. 7 я де КК: ех К К ОО ЯВОЮОЮИЮ яння КО ря ії НОСОВОЮ З МВ з в пн Ж ї Ідуть ит т о ШИХ ї ДР ИНИ опмннмнмнмнвналіт у го МО уддртннтттттт етно ноцінчрнвветтт ж кнія З в Ваг слитею Х ї вОвОопов с ве зе ВЕУ ЯО Я хх тив ХО зо даме я се секхккй : риси УЖ вок в ї Крани порно в НОЗТВМВМ ТУ Ж ЗРК ВАН зи: ЗЕЧЕЕ мапи НИй Е НН ТИ МК ЧО ЗККЕ ОМ БЯМХ УМОВИ. У сокола

   Фіг. 6 Титрусироватці СІВа-Кі5 какака песусх Зо тн ЗЕД В : БЕ дек й й 0. як як п 00 иа ТУ і я окопи т ХК ояже ЗАОДНО ТЗ : щ ЗБОДОВОЮ Пот нд ння пиття ТО і - є й х ші Іри кт ' М МК ЖЮИК- С «дня нти тннтнннннх ТК НО РВВ УКХ. ХЕ ЗАЛЕЖНІ я о й оофрйе НЕЛІМЕМ М з х зу : ти ' їх ЗПОСЕй ша ОН М С З В о СМ Ж 1ВОСЄЛГЖЮІ Ед Тен НЕДВВВІ З ЖНС І ет сич й ва з те ї вата й а: х ' повіт ЗА о хм ї пихи жк ! ККККК пев М дв тт іа МОЗ ОХ і фронти МВВ форс ннннннннов НОТА ЖК мне КЕ ЧНО ЗЯМН МУК ВТО ЗНЕВИВ одалллодлллллллотллолтотлорлелтоттонй Натр у даровані: минвне беж Б і ВЕКЖКЕ нення етннненененетнтеннененентх Тер МЕМКИДЕЬ ТІ : ВОЮ то х І яю РИ ВМВМ ТІВ І У ВКМ нен Ус дикетткеотксеткетк екс ет сс сееектетксе текст есе тек сеткстн сія Іяжк- шани зЖа ОЇ г с Й і кю пня ї Я І М Так. ІРД ЖНРХ рХ 3 Ж зроду Ж Дня я : дал юЮ у лих ! пп Я ту ї о ре МАТОМ я ї що ЗО ЗАЯВ О сБюор; а оон нн | Ї

   Фіг. 6 (ПРроДдоОБЖЕеННЯ)