WO2001088527A2 - Procede et dispositif pour l'injection d'un echantillon dans un capillaire d'electrophorese - Google Patents

Procede et dispositif pour l'injection d'un echantillon dans un capillaire d'electrophorese Download PDF

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Gilbert Gauguet
Rainer Siebert
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Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
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    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416Systems
    • G01N27/447Systems using electrophoresis
    • G01N27/44704Details; Accessories
    • G01N27/44743Introducing samples

Definitions

  • the present invention relates to the injection of a sample into an electrophoresis capillary.
  • the electrophoresis by capillary (s) has the advantage of allowing a higher flow rate and a higher automation than the previous electrophoresis techniques.
  • the injection techniques mainly used to date indeed require preparations of large quantities of sample volume (10 to 20 ⁇ l of DNA sample for example), of which they use only a small part.
  • An object of the invention is to overcome this drawback.
  • Another object of the invention is to propose a technique which makes it possible to carry out, in a capillary or a set of capillaries, a reproducible and effective electrokinetic injection.
  • Hydrodynamic injection consists in using a pressure difference to bring a certain quantity of sample into a capillary. This technique is often unsatisfactory, insofar as it requires large areas for introducing samples and therefore does not allow good resolution, where it can only be used for low viscosity separation matrices and where it is difficult to implement in parallel on a plurality of capillaries.
  • electrokinetic injection which consists in applying, for a short time, a potential difference between the ends of the capillaries to cause the molecules to migrate inside them.
  • the quantity of sample introduced by this method can be increased, either by accentuating the difference in potential, either by extending the loading time, without completely controlling the quantity injected.
  • the resolution is better than for hydrodynamic injection.
  • the invention proposes a method for injecting a sample into an electrophoresis capillary, according to which the capillary is immersed in the sample and an electric field is applied between the ends of the capillary to cause the sample to migrate.
  • the capillary characterized in that the sample is introduced beforehand into a part having a channel whose dimensions, perpendicular to the direction in which said channel extends, are less than about four times the outside diameter of the capillary, and in that to immerse the capillary in the sample, said capillary is introduced into said channel.
  • It also provides a device for injecting a sample into an electrophoresis capillary comprising a hollow part in which the sample is received and in which the capillary is intended to be immersed, as well as means for applying between the ends.
  • an electric field from the capillary for migrating the sample into the capillary characterized in that said hollow part is a part having a channel whose dimensions, perpendicular to the direction in which said channel extends, are less than about four times the outside diameter of the capillary and which is capable of receiving a capillary and in that it further comprises means for introducing the sample into said channel.
  • the volume of sample which it is necessary to prepare is considerably restricted: in fact a volume of sample is sufficient to fill the channel over a few millimeters; the entire prepared sample is then used.
  • such a channel makes it possible to perfectly control the position of the capillary and in particular to position it with great precision relative to the electrode and thus to create in an reproducible manner an electric field intended to migrate the sample.
  • it allows great homogeneity on the field at the inlet of the capillary, and therefore the same migration speed on all of the molecules in the channel.
  • the injection device proposed by the invention is advantageously supplemented by the following different characteristics taken alone or in all their possible combinations, which also contribute to achieving the aims of the invention:
  • the well-forming element and the part which presents the channel are able to fit into each other, the sample rising by capillarity or pressure difference in the channel when the part which presents the channel is introduced into the part forming a well;
  • the well element has a flared shape facilitating the guiding of the part which has a channel; - the channel is extended by a flared opening which facilitates the introduction of the capillary;
  • This opening is substantially conical in shape
  • the device comprises a plate which has a plurality of elements forming wells intended to cooperate with a plurality of complementary parts each having a channel;
  • the device comprises at least one receptacle capable of receiving such a plate and means capable of automatically transporting said receptacle from one work station to another;
  • the device further comprises a cover capable of closing the receptacle when such a plate is in place therein;
  • the device comprises means forming a seal ensuring the seal between the receptacle and the cover;
  • the complementary parts, each having a channel, are carried by a plate and the device comprises means for automatically positioning said plate and the plate which has a plurality of well-forming elements relative to each other.
  • the invention also relates to an electrophoresis device comprising such an injection device.
  • FIG. 1 is a schematic sectional representation of a device according to a possible embodiment of the invention.
  • FIG. 2 is a schematic exploded perspective representation of a handling palette of a device according to an embodiment of the invention
  • FIG. 3 is a schematic perspective representation of a storage enclosure of a device according to a possible embodiment of the invention and automatic handling means.
  • FIG. 1 shows a system allowing the injection of samples into a capillary 1.
  • This system comprises a well 2, the bottom of which is of substantially conical shape and receives a droplet of a sample to be injected into the capillary. It further comprises a part 3 intended to be introduced into this well 2 and which is of a shape allowing it to fit into it.
  • This part 3 has a channel 4, in this case tubular, which extends axially over its entire length and in which the capillary 1 is received.
  • this channel 4 is defined by a tube 5 made of glass or of a similar material which is of very small internal diameter and in which the capillary 1 is received.
  • the part 3 carries, at its end by which the sample is intended to be introduced into the tube 5, then into the capillary 1, an electrode
  • the supply of this electrode 6 is carried out by means of a metal wire 7 which extends in the height of the part 3 between said electrode
  • the part 3 is fixed in an orifice 9 which passes through the plate 8, for example by screwing.
  • This part 3 ends at said orifice 9 by a metal portion 3a (electrical conductor), which is crossed by an axial opening 3b of conical shape which makes it possible to guide the capillary to place it in the tube 5 (the walls of this opening are for example in Teflon).
  • a metal portion 3a electrical conductor
  • an axial opening 3b of conical shape which makes it possible to guide the capillary to place it in the tube 5 (the walls of this opening are for example in Teflon).
  • the capillary 1 is in turn carried by a plate 10 forming a support.
  • a drop G of sample is placed at the bottom of the well 2 (that is to say a few ⁇ l, for example from 1 to 5), then the part 3 is introduced into the well 2.
  • the drop G then rises by capillary action or pressure in the tube 5.
  • a drop of a few micro-liters of sample is enough to thus create in the tube 5 a column of several mm of sample.
  • the capillary 1 is then introduced into the part 3 by bringing the plate 10 forming a support onto the plate 8.
  • the capillary 1 then bathes in the sample, being located at a well-determined and reproducible distance from the electrode 6.
  • the capillary 1 is for example 35 cm long, with an internal diameter of 75 ⁇ m and an external diameter of 200 ⁇ m.
  • the part 3 and the plate 10 are for example made of Plexiglas.
  • the well 2, the part 3 and the tube 5 are for example of a height of 20 to 25 mm.
  • Plate 8 is for example made of stainless steel.
  • the tube 5 has for example an internal diameter of 650 ⁇ m and an external diameter of 1600 ⁇ .
  • the internal diameter of the conical hole presented by the Teflon portion 3 varies from 1000 ⁇ m to 400 ⁇ m.
  • the electrode 6 is for example made of Platinum and is in the form of a disc with an internal diameter of 400 ⁇ m and an external diameter of 700 ⁇ m, attached to the end edge of the part 3.
  • the electrode 6 could be carried by the bottom of the well 2. It could consist of a wire, for example made of Platinum, which descends from the plate 8 to the bottom of the well.
  • the tube 5 can be made of Platinum and play the role of electrode.
  • the part 2 could be a metal part constituting the electrode 6.
  • the electrode In all cases, it is advantageous to give the electrode a geometry allowing an electric field as homogeneous as possible in the channel 4.
  • the well 2 is advantageously carried by a plate 11, with a plurality of other injection wells.
  • the plate 11 can carry 96 wells distributed in an 8 * 12 matrix.
  • this plate 11 and the wells 2 which it carries are advantageously received in a receptacle 12.
  • This receptacle 12 makes it possible to handle said plates 11 and in particular to transport them from one work station to another. It includes keying means (pins 17) imposing a single possible position for a plate 11 in said receptacle 12.
  • a cover 13 is attached to said receptacle 12 to prevent evaporation and exposure to light of the samples.
  • the pallets 14 thus formed by a receptacle 12 closed by a cover 13 and containing a plate 11 allow an automaton to handle the plates 11 in the following manner.
  • the wells 2 of the plate 11 having been initially filled, the automaton or an operator positions a cover 13 on the receptacle 12 in which said plate 11 is arranged so as to close the receptacle 12.
  • the pallet 14 thus formed is transported to an enclosure 15 (FIG. 3), in which it is possible to store a large number of these pallets 14.
  • the cabinet 15 comprises for example a refrigerated compartment permanently maintained at 4 ° C or below, which makes it possible to minimize the degradation of the stored samples.
  • the device may also also include a heating compartment making it possible to denature the samples, for example by heating them to 95 ° C., before rapidly cooling them to 4 ° C. or below, the automaton moving the pallets 14 by one compartment to another.
  • a heating compartment making it possible to denature the samples, for example by heating them to 95 ° C., before rapidly cooling them to 4 ° C. or below, the automaton moving the pallets 14 by one compartment to another.
  • the heating compartment can be integrated into the cabinet 15, or be constituted by an independent work station.
  • the automaton will seek in the refrigerated compartment of the cabinet 15 the pallet which corresponds to this plate 11, by means of a handling arm 16.
  • the new pallet - constituted by a receptacle 12, a plate 11 and a cover 8 carrying a plurality of parts 3 electrode holders - is transported by the automaton in the sequencer. It is inserted therein in a movement parallel to the axis of the capillaries, which are introduced into the tubes 5 of the parts 3 while being guided by the conical openings of the portions 3a.

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Abstract

Procédé pour l'injection d'un échantillon dans un capillaire d'électrophorèse selon lequel on plonge le capillaire (1) dans l'échantillon et on applique entre les extrémités du capillaire (1) un champ électrique pour faire migrer l'échantillon dans le capillaire (1), caractérisé en ce qu'on introduit préalablement l'échantillon dans une pièce (3) présentant un canal (4) dont les dimensions, perpendiculairement à la direction selon laquelle ledit canal (4) s'étend, sont inférieures à environ quatre fois le diamètre extérieur du capillaire (1), et en ce que pour plonger le capillaire (1) dans l'échantillon, on introduit ledit capillaire (1) dans ledit canal (4).

Description

PROCEDE ET DISPOSITIF POUR L'INJECTION D'UN ECHANTILLON DANS UN CAPILLAIRE D'ELECTROPHORESE
La présente invention est relative à l'injection d'un échantillon dans un capillaire d'électrophorèse.
L'électrophorèse par capillaire(s) a l'avantage de permettre un plus grand débit et une automatisation plus élevée que les techniques d'électrophorèse antérieures.
Toutefois, cette technique s'avère très coûteuse en particulier quant à la préparation des échantillons.
Les techniques d'injection principalement utilisées à ce jour nécessitent en effet des préparations de grandes quantités de volume d'échantillons (10 à 20 μl d'échantillon d'ADN par exemple), dont elles n'utilisent qu'une faible partie. Un but de l'invention est de pallier cet inconvénient.
Un autre but de l'invention est de proposer une technique qui permette de réaliser, dans un capillaire ou un ensemble de capillaires, une injection électrocinétique reproductible et efficace.
On connaît principalement deux méthodes différentes pour injecter un échantillon, tel que par exemple un échantillon d'ADN, dans un capillaire : l'injection hydrodynamique, et l'injection électrocinétique.
L'injection hydrodynamique consiste à utiliser une différence de pression pour faire entrer une certaine quantité d'échantillon dans un capillaire. Cette technique est souvent peu satisfaisante, dans la mesure où elle nécessite des zones d'introduction d'échantillons larges et ne permet par conséquent pas une bonne résolution, où elle ne peut être utilisée que pour des matrices de séparation peu visqueuses et où elle est difficile à mettre en œuvre en parallèle sur une pluralité de capillaires.
C'est pourquoi on privilégie le plus souvent l'injection électrocinétique, qui consiste à appliquer, pendant une courte durée, une différence de potentiel entre les extrémités des capillaires pour faire migrer les molécules à l'intérieur de ceux-ci. La quantité d'échantillon introduite par cette méthode peut être augmentée, soit en accentuant la différence de potentiel, soit en allongeant le temps de chargement, sans pour autant maîtriser totalement la quantité injectée. En général, la résolution est meilleure que pour l'injection hydrodynamique.
L'invention propose quant à elle un procédé pour l'injection d'un échantillon dans un capillaire d'électrophorèse selon lequel on plonge le capillaire dans l'échantillon et on applique entre les extrémités du capillaire un champ électrique pour faire migrer l'échantillon dans le capillaire, caractérisé en ce qu'on introduit préalablement l'échantillon dans une pièce présentant un canal dont les dimensions, perpendiculairement à la direction selon laquelle ledit canal s'étend, sont inférieures à environ quatre fois le diamètre extérieur du capillaire, et en ce que pour plonger le capillaire dans l'échantillon, on introduit ledit capillaire dans ledit canal.
Elle propose également un dispositif pour l'injection d'un échantillon dans un capillaire d'électrophorèse comportant une pièce creuse dans laquelle l'échantillon est reçu et dans laquelle le capillaire est destiné à être plongé, ainsi que des moyens pour appliquer entre les extrémités du capillaire un champ électrique destiné à faire migrer l'échantillon dans le capillaire, caractérisé en ce que ladite pièce creuse est une pièce présentant un canal dont les dimensions, perpendiculairement à la direction selon laquelle ledit canal s'étend, sont inférieures à environ quatre fois le diamètre extérieur du capillaire et qui est apte à recevoir un capillaire et en ce qu'il comporte en outre des moyens pour introduire l'échantillon dans ledit canal.
Avec un tel procédé ou un tel dispositif, on restreint considérablement le volume d'échantillon qu'il est nécessaire de préparer : il suffit en effet d'un volume d'échantillon permettant de remplir le canal sur quelques millimètres ; l'ensemble de l'échantillon préparé est alors utilisé.
Par ailleurs, un tel canal permet de parfaitement contrôler la position du capillaire et en particulier de le positionner avec une grande précision par rapport à l'électrode et créer ainsi d'une manière reproductible un champ électrique destiné à faire migrer l'échantillon. En outre, il permet une grande homogénéité sur le champ en entrée du capillaire, et donc une même vitesse de migration sur l'ensemble des molécules dans le canal.
On améliore ainsi la reproductibilité et l'efficacité de l'injection. Le dispositif d'injection proposé par l'invention est avantageusement complété par les différentes caractéristiques suivantes prises seules ou selon toutes leurs combinaisons possibles, qui contribuent également à atteindre les buts de l'invention :
- l'élément formant puits et la pièce qui présente le canal sont aptes à s'emboîter l'un dans l'autre, l'échantillon montant par capillarité ou différence de pression dans le canal lorsque la pièce qui présente le canal est introduite dans la pièce formant puits ;
- l'élément formant puits présente une forme évasée facilitant le guidage de la pièce qui présente un canal ; - le canal se prolonge par une ouverture évasée qui facilite l'introduction du capillaire ;
- cette ouverture est sensiblement de forme conique;
- le dispositif comporte une plaque qui présente une pluralité d'éléments formant puits destinés à coopérer avec une pluralité de pièces complémentaires présentant chacune un canal ;
- le dispositif comporte au moins un réceptacle apte à recevoir une telle plaque et des moyens aptes à transporter automatiquement ledit réceptacle d'une station de travail à une autre ;
- le dispositif comporte en outre un couvercle apte à fermer le réceptacle lorsqu'une telle plaque est en place dans celui-ci ;
- le dispositif comporte des moyens formant joint assurant l'étanchéité entre le réceptacle et le couvercle ;
- les pièces complémentaires présentant chacune un canal sont portées par une plaque et le dispositif comporte des moyens pour positionner automatiquement l'une par rapport à l'autre ladite plaque et la plaque qui présente une pluralité d'éléments formant puits.
L'invention porte également sur un dispositif d'électrophorèse comportant un tel dispositif d'injection. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront encore de la description qui suit qui est purement illustrative et non limitative et qui doit être lue en regard des dessins annexés sur lesquels :
- la figure 1 est une représentation schématique en coupe d'un dispositif conforme à un mode de réalisation possible de l'invention ;
- la figure 2 est une représentation schématique en perspective éclatée d'une palette de manipulation d'un dispositif conforme à un mode de réalisation de l'invention ;
- la figure 3 est une représentation schématique en perspective d'une enceinte de stockage d'un dispositif conforme à un mode de réalisation possible de l'invention et de moyens de manipulation automatiques.
On a représenté sur la figure 1 un système permettant l'injection d'échantillons dans un capillaire 1. Ce système comporte un puits 2 dont le fond est de forme sensiblement conique et reçoit une gouttelette d'un échantillon à injecter dans le capillaire. Il comporte en outre une pièce 3 destinée à être introduite dans ce puits 2 et qui est d'une forme lui permettant de s'emboîter dans celui-ci. Cette pièce 3 présente un canal 4, en l'occurrence tubulaire, qui s'étend axialement sur toute sa longueur et dans lequel le capillaire 1 est reçu.
Plus exactement, ce canal 4 est défini par un tube 5 en verre ou en un matériau analogue qui est de très faible diamètre intérieur et dans lequel le capillaire 1 est reçu.
La pièce 3 porte, à son extrémité par laquelle l'échantillon est destiné à s'introduire dans le tube 5, puis dans le capillaire 1 , une électrode
6.
L'alimentation de cette électrode 6 est réalisée au moyen d'un fil métallique 7 qui s'étend dans la hauteur de la pièce 3 entre ladite électrode
6 et une plaque métallique 8 qui est elle-même reliée à un générateur Haute
Tension. La pièce 3 est fixée dans un orifice 9 qui traverse la plaque 8, par exemple par vissage.
Cette pièce 3 se termine au niveau dudit orifice 9 par une portion 3a métallique (conducteur électrique), qui est traversée par une ouverture axiale 3b de forme conique qui permet de guider le capillaire pour le placer dans le tube 5 (les parois de cette ouverture sont par exemple en Téflon).
Le capillaire 1 est quant à lui porté par une plaque 10 formant support.
Une injection au moyen du dispositif qui vient d'être décrit s'effectue de la façon suivante.
On dispose au fond du puits 2 une goutte G d'échantillon (c'est à dire quelques μl, par exemple de 1 à 5), puis on introduit la pièce 3 dans le puits 2.
La goutte G monte alors par capillarité ou pression dans le tube 5. Une goutte de quelques micro- litres d'échantillon suffit pour créer ainsi dans le tube 5 une colonne de plusieurs mm d'échantillon.
On introduit alors le capillaire 1 dans la pièce 3 en rapportant la plaque 10 formant support sur la plaque 8.
Le capillaire 1 baigne alors dans l'échantillon, en étant situé à une distance bien déterminée et reproductible de l'électrode 6.
L'application d'un champ électrique entre l'électrode 6 et une autre électrode - non représentée - à l'extrémité du capillaire 1 la plus éloignée de l'électrode 6 permet de faire migrer les molécules dans le capillaire 1.
Le capillaire 1 est par exemple d'une longueur de 35 cm, d'un diamètre interne de 75 μm et d'un diamètre externe de 200 μm.
La pièce 3 et la plaque 10 sont par exemple en Plexiglas.
Le puits 2, la pièce 3 et le tube 5 sont par exemple d'une hauteur de 20 à 25 mm.
La plaque 8 est par exemple en Inox. Le tube 5 présente par exemple un diamètre interne de 650 μm et un diamètre externe de 1600 μ . Le diamètre interne du trou conique que présente la portion 3 en Téflon varie de 1000 μm à 400 μm.
L'électrode 6 est par exemple en Platine et se présente sous la forme d'un disque d'un diamètre interne de 400 μm et d'un diamètre externe de 700 μm, rapporté sur la tranche d'extrémité de la pièce 3.
Bien entendu, d'autres dispositions d'électrodes pourraient être envisagées.
Notamment, l'électrode 6 pourrait être portée par le fond du puits 2. Elle pourrait être constituée par un fil par exemple en Platine qui descend de la plaque 8 jusqu'au fond du puits. Le tube 5 peut être en Platine et jouer le rôle d'électrode.
En variante encore, la pièce 2 pourrait être une pièce métallique constituant l'électrode 6.
Dans tous les cas, il est avantageux de donner à l'électrode une géométrie permettant un champ électrique aussi homogène que possible dans le canal 4.
Le puits 2 est avantageusement porté par une plaque 11 , avec une pluralité d'autres puits d'injection.
A titre d'exemple, la plaque 11 peut porter 96 puits répartis selon une matrice 8 * 12.
Ainsi que l'illustre la figure 2, cette plaque 11 et les puits 2 qu'elle porte sont avantageusement reçus dans un réceptacle 12.
Ce réceptacle 12 permet de manipuler lesdites plaques 11 et en particulier de les transporter d'une station de travail à une autre. II comporte des moyens de détrompage (picots 17) imposant une seule position possible pour une plaque 11 dans ledit réceptacle 12.
Un couvercle 13 est rapporté sur ledit réceptacle 12 pour éviter l'évaporation et l'exposition à la lumière des échantillons.
Des moyens formant joint sont prévus entre ledit couvercle 13 et ledit réceptacle 12 pour réduire au minimum l'évaporation. Les palettes 14 ainsi constituées par un réceptacle 12 fermé par un couvercle 13 et renfermant une plaque 11 permettent à un automate de manipuler les plaques 11 de la façon suivante.
Les puits 2 de la plaque 11 ayant été initialement remplis, l'automate ou un opérateur positionne un couvercle 13 sur le réceptacle 12 dans lequel ladite plaque 11 est disposée de façon à fermer le réceptacle 12.
Puis, la palette 14 ainsi constituée est transportée jusqu'à une enceinte 15 (figure 3), dans laquelle il est possible de stocker un grand nombre de ces palettes 14.
L'armoire 15 comporte par exemple un compartiment réfrigéré maintenu en permanence à 4°C ou en dessous, ce qui permet de minimiser la dégradation des échantillons stockés.
Le dispositif peut par ailleurs également comporter un compartiment de chauffage permettant de dénaturer les échantillons, par exemple en les chauffant à 95°C, avant de les refroidir rapidement à 4°C ou en dessous, l'automate déplaçant les palettes 14 d'un compartiment à un autre.
Le compartiment de chauffage peut être intégré à l'armoire 15, ou être constitué par une station de travail indépendante. Lorsqu'une électrophorèse doit être mise en œuvre sur une plaque11 , l'automate va chercher dans le compartiment réfrigéré de l'armoire 15 la palette qui correspond à cette plaque 11 , au moyen d'un bras de manipulation 16.
Il lui retire son couvercle 13 et le remplace par un couvercle constitué par une plaque du type de la plaque 8, porteuse d'une pluralité de pièces 3 supports d'électrodes, ces pièces 3 étant réparties sur ladite pièce 8 de façon à correspondre aux différents puits 2 de la plaque 11.
Les échantillons montent alors par capillarité dans les tubes 5 des pièces 3. Lorsque les échantillons sont ainsi en place dans les tubes 5, la nouvelle palette - constituée par un réceptacle 12, une plaque 11 et un couvercle 8 porteur d'une pluralité de pièces 3 supports d'électrodes - est transportée par l'automate dans le séquenceur. Elle y est insérée selon un mouvement parallèle à l'axe des capillaires, lesquels s'introduisent dans les tubes 5 des pièces 3 en étant guidés par les ouvertures coniques des portions 3a.
Tous les capillaires se trouvent alors positionnés de la même façon par rapport aux électrodes 6 et ce positionnement est reproductible d'une plaque 11 à une autre.

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé pour l'injection d'un échantillon dans un capillaire d'électrophorèse selon lequel on plonge le capillaire (1) dans l'échantillon et on applique entre les extrémités du capillaire (1) un champ électrique pour faire migrer l'échantillon dans le capillaire (1), caractérisé en ce qu'on introduit préalablement l'échantillon dans une pièce (3) présentant un canal (4) dont les dimensions, perpendiculairement à la direction selon laquelle ledit canal (4) s'étend, sont inférieures à environ quatre fois le diamètre extérieur du capillaire (1), et en ce que pour plonger le capillaire (1) dans l'échantillon, on introduit ledit capillaire (1) dans ledit canal (4).
2. Dispositif pour l'injection d'un échantillon dans un capillaire (1) d'électrophorèse comportant une pièce (3) creuse dans laquelle l'échantillon est reçu et dans laquelle le capillaire (1) est destiné à être plongé, ainsi que des moyens pour appliquer entre les extrémités du capillaire (1) un champ électrique destiné à faire migrer l'échantillon dans le capillaire (1), caractérisé en ce que ladite pièce (3) creuse est une pièce présentant un canal (4) dont les dimensions, perpendiculairement à la direction selon laquelle ledit canal (4) s'étend, sont inférieures à environ quatre fois le diamètre extrerieur du capillaire (1) et qui est apte à recevoir un capillaire (1) et en ce qu'il comporte en outre des moyens pour introduire l'échantillon dans ledit canal (4).
3. Dispositif selon la revendication 2, caractérisé en ce que les moyens pour introduire un échantillon dans le canal (4) comportent un élément formant puits qui est apte à recevoir la pièce(3) qui présente le canal (4) et dont le fond est destiné à recevoir une goutte d'échantillon.
4. Dispositif selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'élément formant puits et la pièce (3) qui présente le canal sont aptes à s'emboîter l'un dans l'autre, l'échantillon montant par capillarité ou différence de pression dans le canal (4) lorsque la pièce (3) qui présente le canal (4) est introduite dans la pièce formant puits.
5. Dispositif selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'élément formant puits présente une forme évasée facilitant le guidage de la pièce (3) qui présente un canal (4).
6. Dispositif selon l'une des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que le canal se prolonge par une ouverture évasée qui facilite l'introduction du capillaire.
7. Dispositif selon la revendication 6, caractérisé en ce que cette ouverture est sensiblement de forme conique.
8. Dispositif selon la revendication 3, prise seule ou en combinaison avec l'une des revendications 4 à 7, caractérisé en ce qu'il comporte une plaque qui présente une pluralité d'éléments formant puits destinés à coopérer avec une pluralité de pièces complémentaires présentant chacune un canal.
9. Dispositif selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il comporte au moins un réceptacle apte à recevoir une telle plaque et des moyens aptes à transporter automatiquement ledit réceptacle d'une station de travail à une autre.
10. Dispositif selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'il comporte en outre un couvercle apte à fermer le réceptacle lorsqu'une telle plaque est en place dans celui-ci.
11. Dispositif selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'il comporte des moyens formant joint assurant l'étanchéité entre le réceptacle et le couvercle.
12. Dispositif selon l'une des revendications 8 à 10, caractérisé en ce que les pièces complémentaires présentant chacune un canal sont portées par une plaque et en ce qu'il comporte des moyens pour positionner automatiquement l'une par rapport à l'autre ladite plaque et la plaque qui présente une pluralité d'éléments formant puits.
13. Dispositif d'électrophorèse caractérisé en ce qu'il comporte un dispositif d'injection selon l'une des revendications 2 à 12.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0581983B1 (fr) * 1992-08-04 1996-10-23 Hewlett-Packard GmbH Appareil pour l'exécution d'électrophorèse capillaire
US6132582A (en) * 1998-09-14 2000-10-17 The Perkin-Elmer Corporation Sample handling system for a multi-channel capillary electrophoresis device

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2301284A1 (es) * 2005-07-15 2008-06-16 Consejo Superior Inveti. Cientificas Dispositivo y procedimiento de mejorado para el analisis cuantitativo en electroforesis capilar.
ES2301284B1 (es) * 2005-07-15 2009-05-20 Consejo Superior Inveti. Cientificas Dispositivo y procedimiento de mejora para el analisis cuantitativo en electroforesis capilar.

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