WO2004024686A1 - 生体低分子誘導体 - Google Patents

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Tetsushi Taguchi
Naotoshi Kobayashi
Junzo Tanaka
Hiroshi Saito
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
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    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom

Definitions

  • the present invention relates to a low-molecular-weight lipoxyl group having two or more carboxyl groups.
  • the present invention relates to a low-molecular-weight biomolecule derivative modified with these derivatives and a polymer cross-linked product synthesized with the derivative.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Application Laid-Open No. 7-163650 Patent Document 2 Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-249751 Patent Document 3 Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-71199 Patent Document 4 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-502380 Patent Document 5 Japanese Patent Application Laid-Open No. 8-53548 Publication No.Patent Document 6
  • Non-Patent Document 1 Biomaterials, Vol. 17, pp. 765, (1996) Disclosure of the Invention
  • Cross-linking agents and condensing agents that have been used in the treatment of medical devices, etc. are mainly non-naturally synthesized artificially and are toxic to living organisms without being metabolized in vivo. Has been pointed out. For this reason, their use and usage are limited when used in medical settings. To solve these problems, the development of biologically-derived cross-linking agents is required.
  • the present invention relates to a small biomolecule obtained by modifying a carboxyl group of a small biomolecule having two or more carboxyl groups with N-hydroxysuccinimide, N-hydroxysulfosuccinimid, or a derivative thereof.
  • a derivative and a crosslinked polymer obtained by using the derivative are provided.
  • a carboxyl group of a biomolecule having two or more carboxyl groups is converted into at least one group by N-hydroxysuccinimide, N-hydroxysulfosuccinimide, or a derivative thereof. It is a biological low-molecular-weight derivative modified by one or more. Such a low-molecular biological derivative is harmless to the human body, and can have a rapid reaction because it has two or more reactive groups (one COOH group).
  • the present invention relates to a method for converting a low-molecular-weight lipoxyl group having two or more lipoxyl groups into N-hydroxysuccinimide, N-hydroxysulfosuccinimide, or a derivative thereof.
  • a crosslinked polymer obtained by crosslinking a polymer using a low-molecular-weight biomolecule derivative modified by at least one of the above.
  • Such a crosslinked polymer is metabolized in vivo after being applied in vivo, and a certain period of time elapses Absorbs and disappears, and does not remain as a foreign substance in the body.
  • FIG. 1 is a chart of a nuclear magnetic resonance spectrum of a citrate derivative, the best mode for carrying out the invention.
  • Small biomolecules having two or more hepoxyl groups used in the present invention may be tri- or dicarboxylic acid small molecules present in a citric acid circuit, such as malic acid, oxalic acetic acid, cunic acid, cis-aconitic acid, —Ketoglutaric acid or derivatives thereof.
  • the low biomolecule derivative according to the present invention comprises N-hydroxysuccinimide and N-hydroxysulfosuccinimide having low cytotoxicity in combination with a carboximide at the carboxyl group of a low biomolecule having two or more carboxyl groups. , Or their derivatives are reacted to introduce an active ester.
  • Such reactants are bio low molecular 0.0 0 1 to 1 0% by weight relative to, N- human Dorokishi succinimide, N- hydroxycarboxylic sulfosuccinimide, or derivatives thereof 0.0 0 1 to 1 0 weight 0 / 0, 0 Karupojiimi de (EDC). 0 0 1 to 2 0 weight 0/0 used in a proportion of, reaction temperature 0 to 1 0 0 ° C, select the appropriate conditions for the reaction time to 4 8 hours Is obtained. .
  • carpoimide examples include 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carpoimide 'hydrochloride (EDC), 1-cyclohexyl 3- (2-morpholinoethyl) carpoimid'meth-p-toluenesulfone Acid salt, dicyclohexyl Silkal posiimide can be used.
  • EDC 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carpoimide 'hydrochloride
  • 1-cyclohexyl 3- (2-morpholinoethyl) carpoimid'meth-p-toluenesulfone Acid salt dicyclohexyl Silkal posiimide
  • reaction solvent N, N-dimethylformamide (DMF) or dimethylsulfoxide (DMSO) can be used.
  • FIG. 1 is a chart of a nuclear magnetic resonance spectrum of a citrate derivative obtained by reacting citrate with N-hydroxysuccinimide in the presence of EDC.
  • the peak in a indicates the methylene proton of cunic acid, and the peak in b is derived from the methylene proton of the succinimidyl group.
  • the other two peaks are the solvent (DMSO).
  • the proteins used in preparing the cross-linked product are collagen (not dependent on the number 10 types), atelocollagen (not dependent on the type 10), alkali-solubilized collagen (type 10 Not included), gelatin, keratin, serum albumin, egg white anolevumin, hemoglobin, casein and glopurine, fibrinogen and other polymers having an amino group. These proteins do not depend on the organism from which they are derived.
  • Glycosaminoglycans used in preparing the crosslinked product include chondroitin sulfate, dermatan sulfate, hyaluronic acid, heparan sulfate, heparin, keratan sulfate, and derivatives thereof. These glycosaminodalicans do not depend on the molecular weight or the organism from which they are derived.
  • polymers include chitosan (deacetylation degree, regardless of molecular weight), polyamino acid (irrespective of amino acid type and molecular weight), and polyalcohol (irrespective of type and molecular weight).
  • the cross-linking reaction between the low-molecular-weight derivative and the polymer is 0.1 to 50% by weight of polymer Biological low molecular derivatives 0.0 1-5 0 weight 0/0, preferably, Ru reacted at 3 0 ⁇ 5 0 ° C.
  • Solvents for preparing such solutions include distilled water, physiological saline solution, buffers such as sodium bicarbonate, boric acid and phosphoric acid, and organic solvents (DMF, DMSO, ethanol). Those that do not can be used.
  • the synthesized Kuen acid derivative 24 mu L was dissolve in dimethyl sulfoxide solution 9 76 mu L, the solution 1 00 L measured out than in, 1.2 5 wt 0/0 ⁇ collagen phosphate buffer solution 400 mu L And stirred. The mixture was allowed to stand at room temperature for 24 hours to synthesize a collagen gel having a crosslinking agent concentration of 0.4 to 4 OmM. After the weight of each gel was measured, the gel was dried with a freeze dryer and the weight of the gel was measured again to check the water content of the gel. Table 1 shows the water content of each gel.
  • cis-Aconitic acid derivative Synthesized cis-aconitic acid derivative 46 ⁇ L Dissolve with 954 L, weigh 100 / L from the solution, and add 25% by weight collagen type 11 phosphate buffer solution 4 It was added to 00 L and stirred. After standing at room temperature for 24 hours, a collagen gel having a crosslinking agent concentration of 1-3 OmM was synthesized. After measuring the weight of each gel, after drying with a freeze dryer, the weight of the gel is measured again to determine the water content of the gel. Examined. Table 3 shows the water content of each gel.
  • Malic acid derivatives synthesized malic acid derivative 3 2 mu L was dissolve in dimethyl sulfoxide solution 9 6 8 / L, 1 0 0 ⁇ L measured out from the solution, 1.2 5 wt 0/0 ⁇ collagen It was added to a phosphate buffer solution of 400 / ml and stirred. After standing at room temperature for 24 hours, a collagen gel with cross-linking and agent concentration of 3-5 O mM was synthesized. After the weight of each gel was measured, the gel was dried with a freeze dryer and the weight of the gel was measured again to check the water content of the gel. Table 4 shows the water content of each gel.
  • Example 5-2 Hereinafter, the synthesis of a collagen gel obtained by the following reaction using the oxalacetic acid derivative synthesized in Example 5-1 will be described.
  • the biopolymer that gels is subjected to a cross-linking reaction directly at the affected area and applied to any of a bioadhesive, a hemostatic agent, a vascular embolus material, and a sealant for aneurysms Let it.
  • a bioadhesive e.g., a hemostatic agent
  • a vascular embolus material e.g., a vascular embolus material
  • a sealant for aneurysms e.g., a sealant for aneurysms Let it.
  • it when used after the cross-linking reaction, it can be suitably used as an adhesion inhibitor, a scaffold for tissue regeneration, and a drug carrier.

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Abstract

これまで生体用接着剤や心臓弁などの医療用デバイス処理に用いられている架橋剤や縮合剤は、人工的に合成された非天然のものであり、生体内で代謝されず生体に対して毒性を示すことが指摘されている。そのため、医療現場で用いる際には用途や使用量が制限されている。本発明は、生体低分子のカルボキシル基をＮ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミド、又はこれらの誘導体によって修飾した生体低分子誘導体とこの誘導体で種々の高分子を架橋することにより得られる高分子架橋体を提供する。

Description

生体低分子誘導体
技術分野 本発明は、 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低分子の力ルポキシル基を N 明
ーヒ ドロキシスクシンィミ ド、 N—ヒ ドロキシスノレホスクシンイミ ド、 又はこれ 田
らの誘導体によつて修飾した生体低分子誘導体と該誘導体により合成された高分 子架橋体に関する。
背景技術 これまで、 生体接着剤や生体由来の医療用デバイスの処理 （例えば、 ブタ由来 心臓弁） には、 人工的に化学合成されたダルタルアルデヒドなどのアルデヒドを 有する架橋剤や 1—ェチル一 3— ( 3—ジメチルァミノプロピル） カルポジィミ ドなどの縮合剤等が用いられていた (例えば、 特許文献 1〜6、 非特許文献 1) 。
特許文献 1 特開平 7— 163650号公報 特許文献 2 特開平 9— 249751号公報 特許文献 3 特開平 10— 71 1 99号公報 特許文献 4 特表 2000— 502380号公報 特許文献 5 特開平 8— 53548号公報 特許文献 6 特表平 8— 502082号公報 非特許文献 1 Biomaterials, 1 7卷， 7 6 5頁， （1 9 9 6 ) 発明の開示
これまで医療用デバイスの処理等に用いられている架橋剤や縮合剤は、 主に人 ェ的に合成された非天然のものであり、 生体内で代謝されず生体に対して毒性を 示すことが指摘されている。 そのため、 医療現場で用いる際には用途や使用量が 制限されている。 このような問題点を解決するため、 生体由来の架橋剤の開発が 求められている。
本発明は、 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低分子のカルボキシル基を N —ヒ ドロキシスクシンイミ ド、 N—ヒ ドロキシスルホスクシンイミ ド、 又はこれ らの誘導体によって修飾した生体低分子誘導体とこの誘導体を用いることにより 得られた高分子架橋体を提供する。
すなわち、 本発明は、 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低分子のカルボキ シル基を N—ヒ ドロキシスクシンイミ ド、 N—ヒ ドロキシスルホスクシンィミ ド、 又はこれらの誘導体によって少なくとも 1つ以上修飾した生体低分子誘導体であ る。 かかる生体低分子誘導体は、 人体に対し無害であり、 反応基 （一 C O O H 基） を 2個以上有するために迅速な反応が可能である。
また、 本発明は、 2個以上の力ルポキシル基を持つ生体低分子の力ルポキシル 基を N—ヒ ドロキシスクシンィミ ド、 N—ヒ ドロキシスルホスクシンィミ ド、 又 はこれらの誘導体によって少なくとも 1つ以上修飾した生体低分子誘導体を用い て高分子を架橋することにより得られた高分子架橋体である。
かかる高分子架橋体は生体内に適用後は生体内で代謝され、 一定期間経過する と吸収、 消失する特性があり、 体内に異物として残存することがない。 図面の簡単な説明
第 1図は、 クェン酸誘導体の核磁気共鳴スぺク トルのチャートである, 発明を実施するための最良の形態
本発明で使用する 2個以上の力ルポキシル基を持つ生体低分子は、 クェン酸回 路に存在するトリ又はジカルボン酸低分子、 例えば、 リンゴ酸、 ォキサル酢酸、 クェン酸、 cis—アコニット酸、 2—ケトグルタル酸、 又はこれらの誘導体であ る。
本発明における生体低分子誘導体は、 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低 分子のカルボキシル基にカルポジイミ ドの併用下に細胞毒性の低い N—ヒドロキ シスクシンィミ ド、 N—ヒ ドロキシスルホスクシンイミ ド、 又はこれらの誘導体 を反応させ、 活性エステルを導入したものである。
かかる反応物は、 生体低分子 0 . 0 0 1〜1 0重量％に対し、 N—ヒ ドロキシ スクシンイミド、 N—ヒ ドロキシスルホスクシンイミド、 又はこれらの誘導体を 0 . 0 0 1〜1 0重量0 /0、 カルポジイミ ド （E D C ) を 0 . 0 0 1〜2 0重量0/0 の割合で用い、 反応温度 0〜1 0 0 °C、 反応時間 1〜4 8時間の適宜の条件を選 択して得られる。 .
なお、 カルポジイミ ドとしては、 1ーェチルー 3—（3—ジメチルァミノプロピ ル）カルポジイミド '塩酸塩 ( E D C ) 、 1ーシクロへキシルー 3—（2—モルホ リノエチル）カルポジイミ ド 'メ ト一 p—トルエンスルホン酸塩、 ジシクロへキ シルカルポジイミ ドを用いることができる。 なお、 反応溶媒には、 N、 N—ジメ チルホルムアミ ド （D M F ) 、 ジメチルスルホキシド （DM S O) を用いること ができる。
第 1図は、 クェン酸と N—ヒ ドロキシスクシンイミ ドを E D C存在下の反応に より得られたクェン酸誘導体の核磁気共鳴スペク トルのチャートである。 aのピ ークは、 クェン酸のメチレンプロ トンを示し、 bのピークはスクシンィミジル基 のメチレンプロトンに由来するものである。 残りの 2つのピークは、 溶媒 （DM S O) である。
架橋体を調製する際に用いるタンパク質は、 コラーゲン （数 1 0種類のタイプ によらない） 、 ァテロコラーゲン （数 1 0種類のタイプによらない） 、 アルカリ 可溶化コラーゲン （数 1 0種類のタイプによらない） 、 ゼラチン、 ケラチン、 血 清アルブミン、 卵白ァノレブミン、 ヘモグロビン、 カゼィンぉよびグロプリン、 フ イブリノ一ゲン等アミノ基を有する高分子が含まれる。 これらのタンパク質は、 由来する生物によらない。
架橋体を調製する際に用いるグリコサミノグリカンには、 コンドロイチン硫酸、 デルマタン硫酸、 ヒアルロン酸、 へパラン硫酸、 へパリン、 ケラタン硫酸、 又は これらの誘導体が含まれる。 これらのグリコサミノダリカンは、 分子量、 由来す る生物によらない。
また、 その他の高分子としてキトサン （脱ァセチル化度、 分子量によらない） 、 ポリアミノ酸 （アミノ酸の種類、 分子量によらない） 、 ポリアルコール (種類、 分子量によらない） が含まれる。
生体低分子誘導体と高分子との架橋反応は、 高分子 0 . 1〜5 0重量％に対し、 生体低分子誘導体 0 . 0 1 ~ 5 0重量0 /0、 好ましくは、 3 0 ~ 5 0 °Cで反応させ る。 なお、 両者の配合に際しては、 均一な架橋体を得やすいことから双方を適耷 の濃度の溶液として混合するのが好ましい。 なお、 かかる溶液を作成するための 溶媒としては、 蒸留水のほか、 生理責塩水、 炭酸水素ナトリウム、 ホウ酸、 リン 酸等の緩衝液、 有機溶媒 （DMF、 DM S O, エタノール） 等、 毒性のないもの を用いることができる。
(実施例）
実施例 1一 1
クェン酸の DMF溶液（5重量0 /0)中に室温にて、 N—ヒドロキシスクシンイミ ドを 3 . 2当量分と E D Cを 3 . 1当量分加え、 2 4時間撹拌した。 続いて、 反 応溶液中の有機溶媒である DMFのみを減圧留去した。 得られた残渣をアセトン 一 n ^キサンの展開溶媒を用いて、 シリカゲル力ラムクロマトグラフィ一にて 精製し、 クェン酸の 3つのカルボキシル基が、 N—ヒ ドロキシスクシンイミ ドに 修飾された誘導体を合成した。
実施例 1一 2
以下、 実施例 1— 1で合成したクェン酸誘導体を用いて下記の反応により得ら れるコラーゲンゲルの合成について説明する。
(化 1 )
コラ
Figure imgf000006_0001
クェン酸誘導体 合成したクェン酸誘導体 24 μ Lをジメチルスルホキシド溶液 9 76 μ Lで溶 解させ、 その溶液中より 1 00 L計り取り、 1. 2 5重量0 /0の Π型コラーゲン りん酸緩衝溶液 400 μ L中に加え、 撹拌した。 室温にて 24時間静置し、 架橋 剤濃度 0. 4~4 OmMのコラーゲンゲルを合成した。 それぞれのゲルの重量を 測定した後、 凍結乾燥機にて乾燥後、 再度ゲルの重量を測定し、 ゲルの含水率を 調べた。 それぞれのゲルの含水率は、 表 1に示す。
(表 1) クェン酸誘導体濃度 （ID ) 含水率 (%)
0.4 98
98
2 96
4 97
8 97
10 97
20 98
30 98
40 98
実施例 2— 1
2—ケトグルタル酸の DMF溶液（5重量0 /0)中に室温にて、 N—ヒドロキシス クシンイミドを 2. 2当量分と EDCを 2. 1当量分加え、 24時間撹拌した。 続いて、 反応溶液中の有機溶媒である DMFのみを減圧留去した。 得られた残渣 をァセトン一 n—へキサンの展開溶媒を用いて、 シリカゲルカラムクロマトグラ フィ一にて精製し、 2—ケトグルタル酸の 2つのカルボキシル基が、 N—ヒドロ キシスクシンイミドに修飾された誘導体を合成した c 実施例 2— 2 以下、 実施例 2—1で合成した2—ケトダルタル酸誘導体を用いて下記の反応 により得られるコラーゲンゲルの合成について説明する。 (化 2 )
コラ
Figure imgf000008_0001
2—ケトグルタル酸誘導体
O 合成した 2—ケトグルタル酸誘導体 1 4 ド溶液 9 8
6 Lで溶解させ、 その溶液中より 1 0 0 μ L計り取り、 1 . 2 5重量0 /0の Π型 コラーゲンりん酸緩衝溶液 4 0 0 L中に加え、 撹拌した。 室温にて 2 4時間静; 置し、 架橋剤濃度 0 . 6〜1 O mMのコラーゲンゲルを合成した。 それぞれのゲ 5 ルの重量を測定した後、 凍結乾燥機にて乾燥後、 再度ゲルの重量を測定し、 ゲル の含水率を調べた。 それぞれのゲルの含水率は、 表 2に示す。
(表 2 )
2 酸誘導体濃度 （mM) 含水率
0.6 98
0.8 98
0 98
4 97
8 98 実施例 3— 1
cis -アコ ット酸の DMF溶液（5重量0 /0)中に室温にて、 N—ヒドロキシスク シンイミドを 3 . 2当量分と E D Cを 3 . 1当量分加え、 2 4時間撹拌した。 続 いて、 反応溶液中の有機溶媒である DMFのみを減圧留去した。 得られた残渣を アセトン一 n—へキサンの展開溶媒を用いて、 シリカゲルカラムクロマトグラフ ィ一にて精製し、 cis-アコニット酸の 3つのカルボキシル基が、 N—ヒドロキシ スクシンィミドに修飾された誘導体を合成した。
実施例 3— 2
以下、 実施例 3— 1で合成した cis-アコニット酸誘導体を用いて下記の反応に より得られるコラーゲンゲルの合成について説明する。
(化 3 )
コ
Figure imgf000009_0001
cis—アコニット酸誘導体 合成した cis-アコニット酸誘導体 4 6 μ 溶液 9 5 4 Lで溶解させ、 その溶液中より 1 0 0 / L計り取り、 2 5重量％の11型コ ラーゲンりん酸緩衝溶液 4 0 0 L中に加え、 撹拌した。 室温で 2 4時間静置し、 架橋剤濃度 1〜 3 O mMのコラーゲンゲルを合成した。 それぞれのゲルの重量を 測定した後、 凍結乾逢機にて乾燥後、 再度ゲルの重量を測定し、 ゲルの含水率を 調べた。 それぞれのゲルの含水率は、 表 3に示す。
(表 3)
cis—アコュット'酸誘導体濃度（ ） 含水率 （%)
1 97
2 97
4 97
8 97
10 97
30 97
実施例 4一 1
リンゴ酸の DMF溶液（5重量0 /0)中に室温にて、 N—ヒドロキシスクシンイミ, ドを 2. 2当量分と EDCを 2. 1当量分加え、 24時間撹拌した。 続いて、 反 応溶液中の有機溶媒である DMFのみを減圧留去した。 得られた残渣をアセトン' 一 n—へキサンの展開溶媒を用いて、 シリカゲルカラムクロマトグラフィ一にて 精製し、 リンゴ酸の 2つのカルボキシル基が、 N—ヒ ドロキシスクシンイミ ドに 修飾された誘導体を合成した。
以下、 実施例 4一.1で合成したリンゴ酸誘導体を用いて下記の反応により得ら れるコラーゲンゲルの合成について説明する。 (化 4 )
コ
Figure imgf000011_0001
リンゴ酸誘導体 合成したリンゴ酸誘導体 3 2 μ Lをジメチルスルホキシド溶液 9 6 8 / Lで溶 解させ、 その溶液中より 1 0 0 μ L計り取り、 1 . 2 5重量0 /0の Π型コラーゲン りん酸緩衝溶液 4 0 0 /Ζ L中に加え、 撹抨した。 室温で 2 4時間静置すると架橋, 剤濃度 3〜5 O mMのコラーゲンゲルを合成した。 それぞれのゲルの重量を測定 した後、 凍結乾燥機にて乾燥後、 再度ゲルの重量を測定し、 ゲルの含水率を調べ た。 それぞれのゲルの含水率は、 表 4に示す。
(表 4 ) リンゴ酸誘導体濃度 (mM) 含水率（％
3 97
4 98
5 97
6 97
8 97
10 97
20 97
40 97
50 97 実施例 5—
ォキサル酢酸の DMF溶液（5重量0 /0)中に室温にて、 N—ヒドロキシスクシン イミドを 2 . 2当量分と E D Cを 2 , 1当量分加え、 2 4時間撹拌した。 続い , 反応溶液中の有機溶媒である DMFのみを減圧留去した。 得られた残渣をァセト' ンー n—へキサンの展開溶媒を用いて、 シリカゲル力ラムクロマトグラフィー て精製し、 ォキサル酢酸の 2つのカルボキシル基が、 N—ヒドロ
ドに修飾された誘導体を合成した
実施例 5— 2 以下、 実施例 5— 1で合成したォキサル酢酸誘導体を用いて下記の反応により; 得られるコラーゲンゲルの合成について説明する。
(化 5 )
コ
Figure imgf000012_0001
ォキサル酢酸誘導体
合成したォキサル酢酸誘導体 1 6 Lをジメチルスルホキシド溶液 9 8 4 μ L で溶解させ、 その溶液中より 1 0 0 μ L計り取り、 1 . 2 5重量％の Π型コラー ゲンりん酸緩衝溶液 4 0 0 L中に加え、 撹拌した。 室温で 2 4時間静置し、 架 橋剤濃度 2〜 4 0 mMのコラ一ゲンゲルを合成した。 それぞれ ゲルの重量を測 定した後、 凍結乾燥機にて乾燥後、 再度ゲルの重量を測定し、 ゲルの含水率を調 ベた。 それぞれのゲノレの含水率は、 表 5に示す。 (表 5 ) ォキサル酢酸誘導体 (mM) 含水率 （%)
2 98
4 97
6 98
8 97
10 98
20 96
40 98
産業上の利用可能性 以上のようにゲル化する生体高分子は、 架橋反応を直接患部で行い、 生体用瑋 着剤、 止血剤、 血管塞栓材、 動脈瘤の封止剤のいずれかに適用させる。 また、 一 且架橋反応させた後に用いることにより、 癒着防止剤、 組織再生用足場材料、 薬； 物担体として好適に用いられる。

Claims

請 求 の 範 囲
1 . 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低分子のカルボキシル基を N—ヒドロ キシスクシンイミ ド、 N—ヒ ドロキシスルホスクシンィミ ド、 又はこれらの誘導 体によって少なくとも 1つ以上修飾したことを特徴とする生体低分子誘導体。
2 . 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低分子がクェン酸回路に存在する低分 子およびその誘導体であることを特徴とする請求の範囲第 1項記載の生体低分子 誘導体。
3 . 2個以上のカルボキシル基を持つ生体低分子が、 リンゴ酸、 ォキサル酢酸、 クェン酸、 cis-アコニット酸、 2—ケトグルタル酸、 又はこれらの誘導体である ことを特徴とする請求の範囲第 1項記載の生体低分子誘導体。
4 . 請求の範囲第 1項記載の生体低分子誘導体を用いて高分子を架橋することに より得られたことを特徴とする高分子架橋体。
5 . 高分子がタンパク質、 グリコサミノダリカン、 キトサン、 ポリアミノ酸、 ポ リアルコール、 又はこれらの 2つ又はそれ以上の組み合わせであることを特徴と する請求の範囲第 4項記載の高分子架橋体。
6 . 高分子がコンドロイチン硫酸、 デルマタン硫酸、 ヒアルロン酸、 へパラン硫 酸、 へパリン、 ケラタン硫酸、 又はこれらの誘導体からなるグリコサミノグリカ ンであることを特徴とする請求の範囲第 4項記載の高分子架橋体。
7 . 高分子がコラーゲン、 ァテロコラーゲン、 アルカリ可溶化コラーゲン、 ゼラ チン、 ケラチン、 血清アルブミン、 卵白アルブミン、 ヘモグロビン、 カゼインお よびグロブリン、 フィプリノーゲン、 又はこれらの誘導体からなるタンパク質で あることを特徴とする請求の範囲第 4項記載の高分子架橋体。
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4585743B2 (ja) * 2003-02-13 2010-11-24 独立行政法人物質・材料研究機構 生体内分解吸収性粘着性医用材料
WO2006016600A1 (ja) * 2004-08-10 2006-02-16 National Institute For Materials Science 酒石酸誘導体及び該誘導体により合成された高分子架橋体
JP2006051121A (ja) * 2004-08-10 2006-02-23 National Institute For Materials Science アルブミンと生体低分子誘導体から構成される生体内分解吸収性粘着性医用材料
JP2006052158A (ja) * 2004-08-10 2006-02-23 National Institute For Materials Science 生体低分子誘導体、架橋体及び生体内分解吸収性粘着性医用材料
CA2706491A1 (en) * 2007-12-12 2009-06-18 Osteotech, Inc. Bone/collagen composites and uses thereof
KR100971271B1 (ko) 2008-04-28 2010-07-20 한양대학교 산학협력단 헤파린이 결합된 피브린젤, 그 제조방법 및 키트
US20110251281A1 (en) * 2008-09-08 2011-10-13 National Institute For Materials Science Composite Material Comprising High-Molecular-Weight Matrix and Low-Molecular-Weight Organic Compound and Process For Producing Same
WO2012046759A1 (ja) * 2010-10-05 2012-04-12 独立行政法人物質・材料研究機構 組織接着膜及びその製造方法
CN102120753B (zh) * 2010-12-23 2013-09-04 暨南大学 一种改性角蛋白材料及其制备方法和应用
CA2963057C (en) 2014-10-06 2023-08-01 Gatt Technologies B.V. Tissue-adhesive porous haemostatic product
AR111190A1 (es) 2017-03-22 2019-06-12 Genentech Inc Composiciones en hidrogel de prodrogas entrecruzadas de ácido hialurónico y métodos relacionados
CN107653244B (zh) * 2017-11-30 2020-06-02 海默斯（重庆）医学生物技术有限公司 一种止血蛋白及其制备方法和应用
CN112851796B (zh) * 2019-11-12 2023-07-25 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 胶原共轭烯酮化衍生物及其制备方法和应用
CN115531597A (zh) * 2022-08-26 2022-12-30 海南医学院第一附属医院 一种可注射型改性海藻酸钠水凝胶及其制备方法和应用
CN116355205B (zh) * 2023-03-29 2024-03-26 四川轻化工大学 生物基聚酰胺及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6169759A (ja) * 1984-09-14 1986-04-10 Agency Of Ind Science & Technol タンパク質の架橋反応用修飾剤及びそれを用いる方法
WO2001091814A2 (en) * 2000-05-30 2001-12-06 Viridis Biotech Inc. Polyubiquitin based hydrogel and uses thereof

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL47468A (en) * 1975-06-12 1979-05-31 Rehovot Res Prod Process for the cross-linking of proteins using water soluble cross-linking agents
US4757140A (en) * 1986-06-02 1988-07-12 Wisconsin Alumni Research Foundation Coenzyme a derivatives of all-trans- and 13-cis retionic acid
US5162430A (en) 1988-11-21 1992-11-10 Collagen Corporation Collagen-polymer conjugates
US5475052A (en) 1988-11-21 1995-12-12 Collagen Corporation Collagen-synthetic polymer matrices prepared using a multiple step reaction
IT1262906B (it) * 1992-07-17 1996-07-22 Sclavo Spa Proteine funzionalizzate e loro uso per la preparazione di traccianti coniugati
FR2707878A1 (fr) 1993-07-21 1995-01-27 Imedex Nouvelles compositions adhésives à usage chirurgical.
US6962979B1 (en) * 1995-03-14 2005-11-08 Cohesion Technologies, Inc. Crosslinkable biomaterial compositions containing hydrophobic and hydrophilic crosslinking agents
US5752974A (en) * 1995-12-18 1998-05-19 Collagen Corporation Injectable or implantable biomaterials for filling or blocking lumens and voids of the body
WO1997022371A1 (en) 1995-12-18 1997-06-26 Collagen Corporation Crosslinked polymer compositions and methods for their use
JPH09249751A (ja) 1996-03-14 1997-09-22 Collagn Corp 架橋生体物質組成物を調製するための疎水性架橋剤の使用
JPH1071199A (ja) 1996-08-30 1998-03-17 Gunze Ltd 抗菌剤含有人工皮膚
US6303759B1 (en) * 1996-11-08 2001-10-16 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. Dye-labeled and polymerized antibody and method for preparing the same
JP2000212286A (ja) * 1999-01-25 2000-08-02 Terumo Corp 耐温水性ゼラチンゲル
EP1111069A1 (en) * 1999-12-22 2001-06-27 BioChip Technologies GmbH Modified nucleic acids and their use

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6169759A (ja) * 1984-09-14 1986-04-10 Agency Of Ind Science & Technol タンパク質の架橋反応用修飾剤及びそれを用いる方法
WO2001091814A2 (en) * 2000-05-30 2001-12-06 Viridis Biotech Inc. Polyubiquitin based hydrogel and uses thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SAKAMOTO TAKESHI; LI HAO; KIKUGAWA YASUO: "A total synthesis of nannochelin A. A short route to optically active N. omega.-hydroxy-.alpha.-amino acid derivatives", CHEMISTRY, vol. 61, no. 24, 1996, pages 8496 - 8499, XP002973803 *

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