WO2006133472A1 - Probiotischer, gesundheits- bzw. lei stungs fördernder nahrungs-, futtermittel und/oder trinkwasserzusatz sowie seine verwendung - Google Patents

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Michaela Mohnl
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Viviana Klose
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Definitions

  • PROBIOTIC HEALTH OR BZW.
  • the present invention relates to a probiotic, health-promoting food, feed and / or drinking water additive which contains a mixture of microorganisms, and to the use of such a, probiotic, health-promoting or Feed and / or drinking water additive.
  • Food, feed and / or drinking water additives containing a mixture of microorganisms are increasingly used in both the human and animal field of application, as far as possible to prevent infections by pathogenic bacteria such as Salmonella or E. coli, Campylobacter, clostridia, etc.
  • pathogenic bacteria such as Salmonella or E. coli, Campylobacter, clostridia, etc.
  • CE competitive exclusion
  • a special mixture of bacteria which can also be isolated from the digestive tract, is used, whereby an attempt is made to administer the broadest possible spectrum of intestinal bacteria in order to achieve a broad field of application.
  • the broadest possible range of intestinal bacteria which are unspecified.
  • problems of undefined mixtures such as the transmission of antimicrobial resistance or disease, can hardly be avoided, and on the other hand, the administration of undefined mixtures is restricted by regional or international regulations and legislation in order to avoid unexpected or to achieve undesirable results by the administration of such mixtures. It will therefore be necessary to resort to the use of defined mixtures, in particular to defined probiotic cultures consisting of one or more strains, in order to avoid unexpected effects and to comply with legislation.
  • US Publication 2004-0115308 describes consumable products containing fresh probiotic ingredients, the probiotics consisting of the groups of yeasts, Aspergillus, Lactobacilli, Bifidobacteria, Streptococci, Enterococci and mixtures thereof.
  • the bacteria used here are not dried or concentrated in any way, but are used as if they were recovered. by problems in durability, applicability and the like. arise.
  • EP 1 037 964 discloses a defined probiotic or formulation of anaerobic bacteria for controlling or inhibiting salmonella in pigs, the bacteria being Enterococcus faecalis, Streptococcus bovis, Clostridium clostridiforme, Clostridium symbiosum, Clostridium ramosum, Bacteroides fragilis, Bactereroides distasonis, Bacteroides vulgatus, Bacteroides the taiotamicron and Bacteroides caccae and at least seven different groups of germs must be included in the product.
  • WO 03/054168 describes a process for the preparation of a formulation of intestinal germs which have the ability to exclude pathogenic microorganisms.
  • a microbe sample is recovered from the gut of a particular animal species and exposed to aerobic conditions, subsequently frozen and thawed.
  • the individual microbial groups are selectively cultured and tested for their action against pathogenic microbes in an inhibition test and finally fermented and used.
  • the present invention now aims to provide a probiotic, health-promoting food, feed and / or drinking water additive containing a mixture of microorganisms, which has an effect essentially in the entire digestive system of mammals and / or avian and thereby in particular prevents or at least reduces the harmful effect of a large number of unwanted germs, such as salmonella, E. coli, clostridia, etc.
  • a probiotic, health-promoting or performance-enhancing food, feed and / or drinking water additive which contains a mixture of microorganisms is used in which at least two microorganisms selected from the group Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, and Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, and Bifidobacterium animalis, DSM 16284.
  • microorganisms from the group consisting of Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, and Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, and Bifidobacterium animalis, DSM 16284, are successful because of the origin of these microorganisms Cover the most diverse areas of the digestive tract, such as the cecum, jejunum, ileutn or goiter, substantially the entire digestive tract, especially the gastrointestinal tract, so that pathogenic germs can be successfully prevented from affecting their activity throughout the digestive tract.
  • the deposited microorganisms with the exception of DSM 16284 Bifidobacterium animalis, which is likely to be a new species, are new strains of already known species, as they generally show greater than 99% agreement with known strains.
  • Sequencing primer 341 forward, 530 reverse
  • Sequencing primer 341 forward, 530 reverse contig of 2 partial sequences: 341f530r
  • Sequencing primer 341 forward, 530 reverse
  • Sequencing primer 341 forward, 1492 reverse contig of 2 partial sequences: 341fl492r sequence length: 1139 bases in total
  • At least three microorganisms are contained in the food, feed and / or drinking water additive, whereby a more complete
  • a food, feed and / or drinking water supplement in which Enterococcus faecium, DSM 16211, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, and Bifidobacterium animalis, DSM 16284, are contained.
  • Such a food, feed and / or drinking water additive shows in particular a uniformly improved inhibition of almost all, usually present, pathogenic germs, in particular E. coli, Salmonella choleraesuis, Campylobacter jejuni, Clostridium perfrinens, which compared to the individual effect of in the Mixture contained microorganisms is so greatly increased that a synergistic effect of the three microorganisms against a variety of pathogenic germs can be achieved.
  • this mixture also shows a strong pH lowering potential, in particular due to the relatively high amounts of lactic acid and acetic acid which are formed, which in turn greatly adversely affects the living conditions of pathogenic bacteria.
  • nutrient substances and / or prebiotic substances which can additionally be used as carrier in the food, feed and / or drinking water additive, selected from fructo-oligosaccharides, inulins, isomalto-oligosaccharides, lactitol, Lactosucrose, lactulose, pyrodextrins, soybean oligosaccharides, transgalacto-oligosaccharides, xylo-oligosaccharides, vitamins, especially vitamin E, the living conditions of the microorganisms used in the digestive tract are significantly improved and particular care is taken to that the microorganisms used can multiply rapidly and reliably in the digestive tract and at the same time, however, prevent or prevent the multiplication of pathogenic germs by "comple- titive exclusion". Due to the nutrients and / or prebiotic acids used, a growth advantage for the microorganisms used against pathogenic germs is created.
  • another carrier selected from zeolites, calcium carbonate, magnesium carbonate, trehalose, chitosan, shellac, albumin, starch, skimmed milk powder, sweet whey powder, maltodextrins, lactose, inulin, dextrose, vegetable oils, or a solvent selected from water or physiological saline solution is included, on the one hand, a uniform distribution of the microorganisms in the digestive tract can be achieved and on the other hand further support the "competitive exclusion" can be achieved.
  • a coating material selected from maltodextrins, guar gum, gum arabic, alginates, modified starch and starch derivatives, dextrins, cellulose derivatives, such as cellulose esters and ethers, proteins, such as gelatin, albumin, casein Gluten, acacia, ginger, gums, lipids, such as waxes, paraffin, stearic acid, mono- and diglycerides, it is possible to coat the microorganisms together with carrier materials, if any, thereby ensuring that the microorganisms only on Place of their intended use, ie in the digestive tract, can take effect.
  • a coating material selected from maltodextrins, guar gum, gum arabic, alginates, modified starch and starch derivatives, dextrins, cellulose derivatives, such as cellulose esters and ethers, proteins, such as gelatin, albumin, casein Gluten, acacia, ginger, gums, lipids, such as waxes,
  • the additive is preferably further developed such that additionally at least one microorganism selected from the group Bifidobacterium sp., Lactobacillus salivarius, Lactobacillus sp. , Lactobacillus dienum and Enterococcus faecalis.
  • the effect against one or more to be expected in the respective animals, pathogenic germs (s) can be specifically enhanced, thereby further reducing the risk of infection can be achieved.
  • the food, feed and / or drinking water additive in suspended, powdered or encapsulated form with a maximum diameter of 2000 microns used, thereby depending on the desired location, such as crop , Stomach, small intestine and like. , an accurate, targeted release of the action of microorganisms can be achieved.
  • mixed forms of suspended and encapsulated food, feed and / or drinking water additive can be used in order to ensure the effect on the entire digestive system can.
  • a feed additive in particular for useful birds and / or pigs, provided for improving the performance of the livestock, which from 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , CFU / kg feed additive Enterococcus faecium, DSM 16211, and 1 x 10 s to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , cfu / kg feed additive Lactobacillus reuteri, DSM 16350.
  • a feed additive in particular for use birds and / or pigs, is made available for increasing the performance of the livestock, which comprises from 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 12 , CFU / kg feed additive En- terococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , CFU / kg Feed additive Pedicoccus acidilactici, DSM 16210, and 1 x 10 7 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 12 , CFU / kg feed additive Bifidobacterium animalis, DSM 16284.
  • a feed additive it is possible, in particular, to detect the effect of Salmonella choleraesuis or Clostridium perfringens as well as the effect of E. coli bacteria.
  • the feed additive it is preferably further developed such that it from 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , CFU / kg feed additive Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10 G. to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 12 , CFU / kg feed additive Lactobacillus reuteri, DSM 16350, and 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 12 , CFU / kg Feed additive Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351.
  • Such a selection of the amounts of the microorganisms used makes it possible, in particular, to produce a feed additive which exhibits an excellent action against E. coli germs and moreover makes possible a strong inhibition of the growth of almost all other pathogenic germs due to the high pH reduction potential.
  • the feed additive in particular for useful birds and / or pigs to increase the performance of the livestock, according to a preferred embodiment of the present invention from 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , CFU / kg feed additive Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10 s to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , cfu / kg feed additive Lactobacillus reuteri, DSM 16350, 1 x 10 e to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , CFU / kg Feed additive Lactobacillus salivarius ssp.
  • salivarius DSM 16351, 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 12 , CFU / kg feed additive Pediococcus acidilactici, DSM 16210, 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 ⁇ D to 1 x 10 12 , CFU / kg feed additive Bi- fidobacterium animalis, DSM 16284, and 1 ⁇ 10 5 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 12 CFU / kg Feed additive Bifidobacterium sp. 2.
  • Such a mixture of the feed additive shows in particular a significantly increased activity against the pathogenic bacteria Campylobacter jejuni as well as Salmonella choleraesuis. Furthermore, the effects on common E. coli bacteria are greatly improved and go far beyond the effect of the individual strains. Furthermore, the metabolic reaction of such a feed additive shows that a synergistic effect of the bacteria must be present.
  • the present mixture of five microorganisms can inter alia utilize XyIitoi, which no microorganism of the mixture alone can.
  • the feed additive additionally contains 1% -95%, in particular 20% -98%, of a carrier or natural substance.
  • the aqueous bacterial suspension in an amount of 0.01 g / kg - 10 g / kg of feed, in particular 0.025 g / kg to 2.5 g / kg of feed, to the feed or its pellets is applied, on the one hand ensures that the feed additive is easily absorbed by the animals and on the other hand, already before receiving the feed on the surface of the feed existing, pathogenic germs can be combated or displaced by the feed additive or degraded.
  • the feed additive is preferably mixed in an amount of 20g / t to 20 kg / t, in particular 100 g / t to 2.5 kg / t in the feed, whereby on the one hand a sufficient amount of Microorganisms is provided and on the other hand, a safe degradation or safe displacement of pathogenic microorganisms from the gastrointestinal environment can be ensured.
  • the microorganisms or the mixture of microorganisms are used as drinking water additive used, wherein according to a preferred embodiment of the drinking water additive 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , CFU / kg drinking water additive Enterococcus faecium, DSM 16211, and 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 13 , CFU / kg drinking water additive Lactobacillus reuteri, DSM 16350.
  • Such a drinking-water additive is particularly advantageous in particular for the inhibition of pathogenic germs and, in particular, for the inhibition of E. coli.
  • a drinking water additive which consists of 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 13 , CFU / kg of drinking water additive terococcus faecium, DSM 16211, 1 ⁇ 10 e to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , cfu / kg drinking water additive Lac tobacillus reuteri, DSM 16350, and 1 x 10 s to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , cfu / kg drinking water additive Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351.
  • Such a drinking water additive has proven to be favorable, in particular, in the inhibition of E. coli and Salmonella cholerae, and moreover has a synergistic effect on the metabolic profile.
  • this mixture can degrade D-tagatose, which none of the individual strains it contains can be taken for granted.
  • a synergistic effect of these three strains on metabolism1 is detectable.
  • the invention is further developed such that the drinking water additive from 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , cfu / kg drinking water additive Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10 7 bis 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 13 , CFU / kg of drinking water additive Pediococcus acidilactici, DSM 16210, and 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 13 , CFU / kg of drinking water additive Bifidobacterium animalis, DSM 16284.
  • Such a mixture of microorganisms has been shown to be particularly beneficial in the inhibition of pathogenic microorganisms from the group Salmonella choleraesuis, Campylobacter jejuni and Clostridium perfringens, and is also able to treat the various origins of microorganisms from the gastrointestinal tract Effect throughout the gastrointestinal tract, which can almost complete displacement of harmful, pathogenic germs throughout the digestive system can be achieved.
  • a drinking water additive consisting of 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 14 , in particular 1 ⁇ 10 10 to 1 ⁇ 10 13 , CFU / kg of drinking water additive Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 ⁇ 10 s to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , cfu / kg drinking water additive Lactobacillus reuteri, DSM 16350, 1 x 10 6 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , cfu / kg of drinking water additive Lactobacillus salivarius ssp.
  • salivarius DSM 16351, 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , especially 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , CFU / kg of drinking water additive Pediococcus acidilactici, DSM 16210, 1 x 10 7 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 , CFU / kg drinking water additive Bifidobacterium animalis, DSM 16284, and 1 x 10 6 to 1 x 10 14 , in particular 1 x 10 10 to 1 x 10 13 CFU / kg drinking water additive Bifidobacterium sp.
  • a drinking water additive it is possible to inhibit almost all common pathogens, in particular E.
  • the drinking water additive in order to promote in particular the growth of the desired microorganisms in the gastrointestinal tract and to enhance the displacement effect, additionally contains 1% -95%, in particular 20% -92%, of a carrier or nutrient ,
  • the present invention aims at selectively strengthening the immune system of mammals and / or aves by a targeted use of microorganisms or a mixture of microorganisms and thereby displacing pathogenic germs from the digestive tract as completely as possible.
  • a mixture of at least two microorganisms selected from the group Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, and Lactobacillus salivary ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, and Bifidobacterium animalis, DSM 16284, as a probiotic, health or performance enhancing food, feed and / or drinking water additive.
  • Such a use makes it possible, in particular, to inhibit the action of pathogenic germs, namely E. coli, and to worsen the living conditions for pathogenic microorganisms per se to such an extent due to the extremely rapid lowering of the pH in the digestive tract that the Growth of all other harmful germs is strongly inhibited or inhibited, which significantly reduces the susceptibility to disease of the mammals and / or useful birds so supplied.
  • a mixture consisting of Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, together with other strains of these groups Lactobacilli, Streptococci and / or Bifidobacteria used, wherein the additional use of strains from these groups Lactobacilli, Streptococci and / or Bifidobacteria targeted use or targeted inhibition of specific microorganisms at specific areas of the gastrointestinal tract
  • the occurrence of a specific disease caused by pathogenic bacteria can be inhibited.
  • the mixture of microorganisms is used to increase the immune defense.
  • Such an application is particularly possible that can be ensured by targeted selection of the microorganisms used and their origin from various areas of the digestive tract that the microorganisms used over the entire length of the digestive system to exert their effect and thus in fact the immune defense of the thus treated mammal or useful bird can be significantly increased compared to specific, pathogenic germs in the entire digestive tract.
  • the mixture of microorganisms is used together with at least one gel or granule former or coating material selected from maltodextrins, guar gum, gum arabic, alginates, modified starch and starch derivatives, dextrins, cellulose derivatives, proteins, acacia gum, tragacanth gum , Lipids, used.
  • a gel or granulant By using the mixture of microorganisms with a gel or granulant, it is possible to use them as so-called granulate or gel application, whereby in particular extremely young animals which are no longer supplied by the mother with the corresponding immune-enhancing subcutaneous can be supplied safely and reliably with the necessary, necessary for the increase of the immune defense microorganisms can be supplied.
  • the mixture of microorganisms is coated with gel formers or encapsulated and sprayed this mixture directly on the young animals to be supplied or applied or introduced, for example, in chicks in the transport box, thereby providing a supply of juveniles with the for They can be ensured of essential microorganisms.
  • a similar preferred use succeeds in that the mixture of microorganisms is applied together with a liquid carrier as a spray suspension directly on the young to be treated with it. By spraying the young with the mixture of microorganisms, a part of this spray mixture is taken into the digestive tract by self-grooming or contact with other juveniles, which in turn ensures a supply of the microorganisms essential for the enhancement of the immune system.
  • Example 1 shows the inhibition of pathogens by the isolated test microbes in the agar plate test model
  • Example 2 a feeding trial in which day chicks with a feed and a drinking water additive containing five, three or no microorganisms were supplied
  • Example 3 a Field trial in which day chicks were supplied with a drinking water additive containing five microorganisms
  • Example 4 a feeding experiment in which day chicks at defined times a drinking water supplement containing five microorganisms received, example - -
  • Example 6 a feeding trial in settling piglets.
  • the experiment was performed on MRS agar plates.
  • the strains were applied to the agar plates by inoculation, with the strains removed directly from the cooling vials. The incubation of the plates took place for 48 h under anaerobic conditions. After cultivation of the pathogenic strains in the appropriate media, the plates were carefully poured over with about 9 ml of the semi-solid medium containing the pathogenic strain.
  • Semi-solid VL medium was used for E. coli and Salmonella chloeraesuis, for Campylobacter jejuni semi-solid "Brain Heart Infusion Medium” and for Clostridium perfringens semisolid "Reinforced CI Stridial Medium”.
  • the plates were then incubated under the respective incubation conditions of the pathogenic strains.
  • the evaluation of the plates was carried out by measuring the diameter of the test germs and the Hemmhöfe and from there the calculation of the ratio Hemmhof to test germ. From the conditions Hemmhof / test germ an evaluation of the inhibiting effect of the test germs can be carried out.
  • Table 1 shows the results for the strains used alone and in a mixture.
  • Feeding test on day chicks which was administered either a mixture of all five deposited microorganisms or a mixture of three deposited microorganisms, wherein in the starter period, the mixtures were administered via the drinking water and additionally through the feed during the entire experimental period
  • Group 2 five microorganisms; Day 1 - 21 in drinking water; Day 1 - 42 on feed Group 3: DSM 16210, DSM 16211, DSM 16284; Day 1 - 21 in the
  • the live weight of the animals in the experimental groups could be significantly improved.
  • the feed intake was slightly increased in the product group, which received all five microorganisms, with respect to the feed conversion, however, no difference was found.
  • the mortality was generally high because the experiment was carried out in midsummer and the animals were exposed to a very high ambient temperature. Despite this additional stress factor, however, a significant increase in performance could be observed in the product groups.
  • chicks were given a mixture of all five microorganisms via drinking water at defined times.
  • a product of all five microorganisms and a product consisting of three microorganisms were administered in the diet throughout the experimental period and via drinking water in the starter period.
  • Group 3 with Salmonella Challenge + product of five microorganisms Day 1 - 21 in drinking water; Day 1 - 42 over the food
  • Salmonella challenge group 4 + product of three microorganisms (DSM 16211, DSM 16210, DSM 16284):
  • Salmonella enteritidis infection resulted in significant reductions in performance compared to the control group, which could be improved by the addition of the products according to the invention. It was found here that a significant improvement could be achieved both in the addition of the product of three microorganisms and that of five microorganisms.
  • the feed intake was also adversely affected by the infection, but the feed utilization could be significantly improved by the addition of the products of the invention.
  • Morbidity measured by the number of diarrhea observed, was also significantly reduced by the addition of the products compared to the untreated group. - -
  • the daytime chicks were kept in cages.
  • the probiotic products were administered via the drinking water available to the chick ad libitum on days 1, 2 and 3.
  • all chicks were orally administered with 1.0 ml of a suspension of Salmonella enteriditis.
  • the concentration of salmonella solution was 1.0 x 10 6 CFU / ml.
  • All chicks received additional food and water ad libitum.
  • the concentration of Salmonella in the feces of the animals was measured.
  • Salmonella growth was significantly reduced, to the extent that the number of Salmonella bacteria was below the detection limit.
  • microorganisms according to the present invention were tested for their performance on weaned piglets.
  • the products were administered via the diet throughout the 47-day experimental period.
  • Feed group 3 three microorganisms (C3), consisting of DSM
  • the live weight of the animals in the experimental groups could be significantly improved, ie by 3% or 1.7% after the first 13 days and by 4% or 2.6% until the end of the experiment. Even with the daily increases, a significant increase could be achieved by adding the products.
  • the group of the negative control is shown as a black bar
  • the group of the positive control is shown as a hatched bar
  • the group administered the five microorganisms via the feed as a dotted bar
  • the group containing the mixture of five microorganisms administered via the drinking water shown as a gray monochrome bar.
  • microorganisms mentioned in claim 1 in the present PCT application have been deposited with the DSMZ - German Collection of Microorganisms and Cell Cultures GmbH, Mascheroder Weg Ib, 38124 Braunschweig, Germany (DE).

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Abstract

Bei einem probiotischen, gesundheits- bzw. leistungsfördernden Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz, welcher eine Mischung von Mikroorganismen enthält, ist vorgesehen, daß wenigstens zwei Mikroorganismen, gewählt aus der Gruppe Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bif idobacterium animalis, DSM 16284, enthalten sind. Weiters wird eine Verwendung des Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatzes insbesondere zur Verhinderung der schädlichen Wirkung einer Vielzahl von unerwünschten Keimen im Verdauungssystem von Säugern und/oder Nutzvögeln zur Verfügung gestellt.

Description

PROBIOTISCHER, GESUNDHEITS- BZW. LEISTUNGSFÖRDERNDER NAHRUNGS-, FUTTERMITTEL UND/ODER TRINKWASSERZUSATZ SOWIE
SEINE VERWENDUNG
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf einen probiσti- schen, gesundheits- bzw. leistungsfördernden Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz, welcher eine Mischung von Mikroorganismen enthält, sowie auf die Verwendung eines derartigen, probiotischen, gesundheits- bzw. leistungsfordernden Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatzes .
Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusätze, welche eine Mischung von Mikroorganismen enthalten, werden verstärkt sowohl im humanen als auch tierischen Anwendungsbereich eingesetzt, um Infektionen durch pathogene Keime, wie beispielsweise Salmonellen oder E. coli, Campylobacter, Clostridien etc., möglichst hintanzuhalten. Der Einsatz von derartigen Mischungen von Mikroorganismen beruht auf der sogenannten "competitive exclusion" (CE) , bei welcher versucht wird, mit sogenannten "guten" Bakterien die "schlechten oder,bösen" Bakterien, d.h. gesundheitsschädigende bzw. -beeinträchtigende Bakterien, zu verdrängen bzw. auszuschließen. Hiebei hemmt das Wachstum der guten Bakterien jenes der bösen Bakterien, beispielsweise indem sie im Milieu des Verdauungstrakts einen Wachstumsvorteil haben und dadurch schneller proliferieren. Konkret wird dabei eine spezielle Mischung von Bakterien, welche auch aus dem Verdauungstrakt isoliert werden kann, eingesetzt, wobei ver- sucht wird, möglichst breite Spektren an Darmbakterien zu verabreichen, um ein breites Anwendungsgebiet zu erzielen. Es hat sich jedoch der Einsatz von einem möglichst breiten Spektrum von Darmbakterien, welche nicht spezifiziert sind, als problematisch erwiesen, da einerseits etwaige Probleme Undefinierter Mischungen, wie beispielsweise die Übertragung von Antibiotikaresistenzen oder Krankheiten, kaum vermieden werden können, und andererseits auch die Verabrei- chung von Undefinierten Mischungen durch regionale oder internationale Regulierungen und Gesetzgebungen eingeschränkt ist, um nicht unerwartete bzw. unerwünschte Ergebnisse durch die Verabreichung derartiger Mischungen zu erzielen. Es wird daher auf den Einsatz definierter Mi- schungen, insbesondere auf definierte Probiotikakulturen, die aus einem oder mehreren Stämmen bestehen, zurückgegriffen werden müssen, um unerwartete Wirkungen zu vermeiden und der Gesetzgebung Genüge zu tun.
Unter Berücksichtigung von gesetzlichen Bestimmungen und in dem Wunsch, möglichst konkrete Ergebnisse zu erzielen, ist in letzter Zeit eine Vielzahl von Literaturstellen bekannt geworden, von welchen beispielsweise die US-A 5 372 810 eine Formulierung und ein Verfahren zur Prävention und Be- handlung von Durchfall bei Nutztieren beschreibt, wobei sterilisierte Bakterienzellen, ihre Homogenate oder Zellwandbestandteile, die aerob gezüchtet wurden, eingesetzt werden. Die eingesetzten Bakterien gehören hiebei zum Genus Brevibacterium und/oder Corynebacterium.
Die US-Publikation 2004-0115308 beschreibt konsumierbare Produkte, die frische, probiotische Zutaten enthalten, wobei die Probiotika aus den Gruppen der Hefen, Aspergillen, Lactobacillen, Bifidobakterien, Streptococcen, Enterococcen und Mischungen davon bestehen. Die hier eingesetzten Bakterien sind nicht getrocknet oder in irgendeiner Weise auf- konzentriert, sondern werden wie gewonnen eingesetzt, wo- durch Probleme in bezug auf die Haltbarkeit, Anwendbarkeit und dgl . entstehen.
Aus der EP 1 037 964 ist ein definiertes Probiotikum oder eine Formulierung von anaeroben Bakterien zur Kontrolle oder Inhibierung von Salmonellen bei Schweinen bekannt geworden, wobei die Bakterien Enterococcus faecalis, Streptococcus bovis, Clostridium clostridiforme, Clostridium sym- biosum, Clostridium ramosum, Bacteroides fragilis, Bacte- roides distasonis, Bacteroides vulgatus, Bacteroides the- taiotamicron und Bacteroides caccae umfassen und mindestens sieben verschiedene Gruppen von Keimen in dem Produkt enthalten sein müssen.
Schließlich beschreibt die WO 03/054168 ein Verfahren zur Herstellung einer Formulierung aus Darmkeimen, die die Fähigkeit besitzen, pathogene Keime auszuschließen. Bei diesem Verfahren wird eine Mikrobenprobe aus dem Darm einer bestimmten Tierspezies gewonnen und aeroben Bedingungen ausgesetzt, in der Folge eingefroren und wieder aufgetaut.
Die einzelnen Mikrobengruppen werden selektiv kultiviert und in einem Inhibierungstest auf ihre Wirkung gegenüber pathogenen Mikroben getestet und schließlich fermentiert und eingesetzt.
Bei den in den Literaturstellen beschriebenen Verfahren bestehen jedoch einerseits Probleme dahingehend, daß nur eine Wirkung gegen einen speziellen pathogenen Keim erzielt werden kann, indem entweder einzelne spezifische Bakterien oder Kombinationen davon eingesetzt werden. Eine Wirkung gegenüber verschiedensten im Verdauungstrakt enthaltenen, pathogenen Keimen ist nicht erzielbar. Schließlich leiden die in der Literatur beschriebenen Verfahren meist auch _
daran, daß das verabreichte Spektrum an Bakterien nicht breit genug ist, um eine möglichst vollständige Inhibierung von pathogenen Keimen zu erzielen. Andere bekannte Produkte setzen nicht aus dem Darm gewonnene Bakterien ein, wodurch eine nicht vollständig spezifische Wirkung erzielt werden kann.
Die vorliegende Erfindung zielt nun darauf ab, einen probiotischen, gesundheits- bzw. leistungsfördernden Nah- rungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz, welcher eine Mischung von Mikroorganismen enthält, zur Verfügung zu stellen, welcher seine Wirkung im wesentlichen im gesamten VerdauungsSystem von Säugern und/oder Nutzvögeln zeigt und dadurch insbesondere die schädliche Wirkung von einer Viel- zahl von unerwünschten Keimen, wie beispielsweise Salmonellen, E. coli, Clostridien usw., verhindert oder zumindest reduziert.
Zur Lösung dieser Aufgaben wird gemäß der vorliegenden Er- findung ein probiotischer, gesundheits- bzw. leistungsför- dernder Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz, welcher eine Mischung von Mikroorganismen enthält, eingesetzt, in welchem wenigstens zwei Mikroorganismen, gewählt aus der Gruppe Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus saliva- rius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, enthalten sind. Dadurch, daß Mikroorganismen aus der Gruppe, bestehend aus Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, eingesetzt werden, gelingt es, aufgrund der Herkunft dieser Mikroorganismen aus den verschiedensten Bereichen des Verdauungstrakts, wie beispielsweise dem Blinddarm, Leerdarm, Ileutn oder Kropf, im wesentlichen den gesamten Verdauungstrakt, insbesondere den Magen-Darm-Bereich, abzudecken, so daß pathogene Keime erfolgreich an ihrer Wirkung im gesamten Verdauungstrakt gehindert werden können.
Bei den hinterlegten Mikroorganismen handelt es sich mit der Ausnahme von DSM 16284 Bifidobacterium animalis, wel- eher eine neue Spezies darstellen dürfte, um neue Stämme bereits bekannter Spezies, da sie allgemein eine Übereinstimmung von über 99 % mit bekannten Stämmen zeigen.
Die einzelnen Sequenzen der hinterlegten Stämme lauten wie folgt:
Pediococcus acidilactici, DSM 16210
CCTGGCTCAGGATGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTTCCGT TAATTGATTATGACGTGCTTGCACTGAATGAGATTTTAACACGAAGTGAGTGGCGGACGG GTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCAGAAGCAGGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTA ATACCGTATAACAGAGAAAΛCCGCCTGGTTTTCTTTTAAAΆGATGGCTCTGCTATCACTT CTGGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGATGAT GCGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCT ACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGTGCACGCCGCG TGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAGCTCTGTTGTTAAAGAAGAACGTGGGTGAGAG
TAACTGTTCACCCAGTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAG CCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAG GCGGTCTTTTAAGTCTAATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATTGGAAACT GGGAGACTTGAGTGCAGAΆGAGGATAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAΆATGCGTAGA TATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTC
GAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGATT ACTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGTAATCCGCC TGGGGAGTACGACCGCAΆGGTTGAAΆCTCAAAAGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGT GGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAΆCCTTACCAGGTCTTGACATCTTCTG CCAACCTAAGAGATTAGGCGTTCCCTTCGGGGACAGAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTC
GTCAGCTCGTGTCG
Sequenzierungsprimer: 341 forward, 530 reverse
Contig aus 2 Partialsequenzen: 341f530r Sequenzlänge: 1094 Basen insgesamt
Übereinstimmung mit einem bekannten Stamm 99,6 % — o —
Lactobacillus reuteri, DSM 16350
GGATGAACGCCGGCGGTGTGCCTAATACATGCAAGTCGTACGCACTGGCCCAACTGATTG ATGGTGCTTGCACCTGATTGACGATGGATCACCAGTGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACAC GTAGGTAACCTGCCCCGGAGCGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAA CAACAAAAGCCACATGGCTTTTGTTTGAAAGATGGCTTTGGCTATCACTCTGGGATGGAC CTGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTAAGGTAACGGCTTACCAAGGCGATGATGCATAGCCGA GTTGAGAGACTGATCGGCCACAATGGAACTGAGACACGGTCCATACTCCTACGGGAGGCA GCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGGCGCAAGCCTGATGGAGCACACCGCGTGAGTGAAGA AGGGTTTCGGCTCGTAAAGCTCTGTTGTTGGAGAAGAACGTGCGTGAGAGTAACTGTTCA YGCAGTGACGGTATCCAACCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAAT ACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAΆAGCGAGCGCAGGCGGTTGCTT AGGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTTAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACCGGGCGACTTG AGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGGAATGCGTAGATATATGGAAG AACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGCAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGG GTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAGTGCTAGGGTGT TGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGGAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTA CGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAAGCATG TGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTGCGCTAACCTT
AGÄGATAΆGGCGTTCCCTTCGGGGACGCAATGACAGGTGGTGCATG GTCGTCGTCAGCTCGTG
Sequenzierungsprimer : 341 forward, 530 reverse Contig aus 2 Partialsequenzen: 341f530r
Sequenzlänge: 1083 Basen insgesamt
Übereinstimmung mit einem bekannten Stamm 99,7 %
Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351
ACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAAACTTTCTTACACCGAATGCTTG CATTCACTCGTAAGAAGTTGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTAA AΆGAAGGGGATAΆCACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGTATATCTNTAAGGATCGCATGA TCCTNAGATGAΆAGATGGTTCTGCTATCGCTTNTAGATGGACCCGCGGCGTATTANCTAG TTGGTGGGGTAACGGCNTACCAAGGNGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGNTGATCGGC
CACATTGGGACTGAGACACGGCCCAΆACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAΆTCTTCCA CAATGGACGCAAGTCTGATGGTGCCCGCCGCGAGAGTGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAA ACTCTGTTGTTAGAGAAGAΆCACGAGTGAGAGTAΆCTGTTCATTCGATGACGGTATCTAA CCAGCAAGTCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTT GTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGAACGCAGGCGGTCTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCC
TTCGGCTTAACCGGAGTAGTGCATTGGAAACTGGAAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGT GGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAΆCACCAGTGGCGAAAGC GGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGTTCGAAAGCGTGGGTAGCAAACAGGATTAGA TACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAΆTGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTC AGTGCCGCAGCTAACGCAATAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACT CAAΆGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAΆTTCGAAGCAACG CGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTTTGACCACCTAAAAAATTAGGTTTCCCTTCG _
GGGACAAAGTGACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGT
Sequenzierungsprimer: 341 forward, 530 reverse
Contig aus 2 Partialsequenzen: 341f530r Sequenzlänge: 1066 Basen insgesamt
Übereinstimmung mit einem bekannten Stamm 99,5 %
Enterococcus faecium, DSM 16211
CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGCTTCTTTT TCCACCGGAGCTTGCTCCACCGGAAAAAGAGGAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGG GTAACCTGCCCATCAGAAGGGGATAACACTTG
GAAACAGGTGCTAATACCGTATAACAATCAAAACCGCATGGTTTTGATTTGAAAGGCGC TTTCGGGTGTCGCTGATGGATGGACCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGC TCACCAAGGCCACGATGCATAGCCGACCTGAG
AGGGTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGT AGGGAATCTTCGGCAATGGACGAAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGG TTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTTAGAGAA GAACAAGGATGAGAGTAACTGTTCATCCCTTGACGGTATCTAACCAGAAAGCCACGGCT AACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGG GCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGG GGAGGGTCATTGGAAACTGGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCATGTG TAGCGGTGAAΆTGCGTAGATATATGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCTCTGGTC TGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAG TCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAG
CTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAAT TGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAΆGAAC CTTACCAGGTCTTGACATCCTTTGACCACTCTAGAGATAGAGCTTCCCCTTC Sequenzierungsprimer: 341 forward, 530 reverse
Contig aus 2 Partialsequenzen: 341f530r Sequenzlänge: 1033 Basen insgesamt
Übereinstimmung mit einem bekannten Stamm 99,9 %
Bifidobacterium animalis, DSM 16284
TTGCCATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTG TAAΆCCGCTTTTGTTCAAGGGCAΆGGCACGGTTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGA ATAAGCACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTATC CGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTATJGCGGTTCGTCGICGTCCGGTGTGAAT-GTUCAT— CGCCTAACGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGNTAAGGGAGACTGGA ATTCCCGGTGTAACGNTGGAATGTGTANATATCGGGAAGAACACCAATGGNNAANGNAGG TCTCTGGGCCGTTACTGACGCTGACGATNNAAAGACGTGAACCAGCGANCNCNATAANAT ACCCTGACTACGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGATGCTGGATGT _
— o —
GGGGCCCTTTCCACGGGTCCTGTGTCGGAGCCAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGGAGT ACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATG CGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTGCCGGATCGCCG TGGAAACACGGTTTCCCTTCGGGGCCGGTTCACAGGTGGTGCATGGTCGTCGTCAGCTCG TGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCGCATGTTGCCAGC GGGTGATGCCGGGAACTCATGTGGGACCGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGA CGTCAGATCATCATGCCCCTTACGTCCAGGGCTTCACGCATGCTACAATGGCCGGTACAA CGCGATGCGACACGGTGACGTGGGGCGGATCGCTGAAAACCGGTCTCAGTTCGGATCGCA GTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGGCGGAGTCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAACGCCGCG GTGAATGCGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGTCATGAAAGTGGGTAGCACC GGAAGCCGGTGGCCCGACCCTCGTGGGGCGGACCGTCTAATGGTGAGACTCGTGATTGG
Sequenzierungsprimer : 341 forward, 1492 reverse Contig aus 2 Partialsequenzen: 341fl492r Sequenzlänge: 1139 Basen insgesamt
Übereinstimmung mit einem bekannten Stamm 98,9 % - neue Spezies
Gemäß einer Weiterbildung der Erfindung sind in dem Nah- rungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz wenigstens drei Mikroorganismen enthalten, wodurch eine vollständigere
Abdeckung des gesamten Verdauungstrakts erzielt werden kann und darüber hinaus auch eine synergistische Wirkung der drei eingesetzten Mikroorganismen gegenüber pathogenen Kei- men nachgewiesen werden kann.
Als besonders bevorzugte Mischung für Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusätze hat sich hiebei eine Mischung erwiesen, in welcher Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, enthalten ist. Eine derartige Mischung hat sich nicht nur bei der Inhibierung von pathogenen Keimen, insbesondere E. coli Bakterien als günstig erwiesen, sondern es wird auch aufgrund ihres star- ken pH-Absenkungspotentials und der hohen Produktionsraten von Säure, beispielsweise Milchsäure, das Lebensumfeld für pathogene Keime stark eingeschränkt, wodurch auch die An- - -
Siedlung von weiteren, anderen Pathogenen zusätzlich stark inhibiert werden kann.
Weiters besonders bevorzugt ist ein Nahrungs-, Futtermit- tel- und/oder Trinkwasserzusatz, in welchem Enterococcus faecium, DSM 16211, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, enthalten sind. Ein derartiger Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz zeigt insbesondere eine gleichmäßig verbesserte Inhibierung von nahezu sämtlichen, üblicherweise vorhandenen, pathogenen Keimen, insbesondere E. coli, Salmonella choleraesuis, Campylobacter jejuni, Clostridium perfrin- gens , welche gegenüber der Einzelwirkung der in der Mischung enthaltenen Mikroorganismen derartig stark erhöht ist, daß eine synergistische Wirkung der drei Mikroorganismen gegenüber einer Vielzahl von pathogenen Keimen erzielbar ist. Darüber hinaus zeigt auch diese Mischung ein starkes pH-Absenkungspotential, insbesondere aufgrund der relativ hohen Mengen an Milchsäure und Essigsäure, welche ge- bildet werden, wodurch wiederum die Lebensbedingungen für pathogene Keime stark nachteilig beeinflußt werden.
Indem, wie dies einer bevorzugten Weiterbildung der vorliegenden Erfindung entspricht, in dem Nahrungs-, Futtermit- tel- und/oder Trinkwasserzusatz zusätzlich als Träger einsetzbare Nährsubstanzen und/oder prebiotische Substanzen, gewählt aus Fructo-Oligosacchariden, Inulinen, Isomalto- Oligosacchariden, Lactitol, Lactosucrose, Lactulose, Pyro- dextrinen, Soja-Oligosacchariden, Transgalacto-Oligosaccha- riden, Xylo-Oligosaccardien, Vitaminen, insbesondere Vitamin E, enthalten sind, werden die Lebensbedingungen der eingesetzten Mikroorganismen im Verdauungstrakt deutlich verbessert und es wird insbesondere dafür Sorge getragen, daß sich die eingesetzten Mikroorganismen im Verdauungs- trakt rasch und zuverlässig vermehren können und gleichzeitig jedoch die Vermehrung von pathogenen Keimen durch "com- petitive exclusion" hintangehalten bzw. verhindert wird. Aufgrund der eingesetzten Nährsubstanzen und/oder prebio- tischen Säuren wird ein Wachstumsvorteil für die eingesetzten Mikroorganismen gegenüber pathogenen Keimen geschaffen.
Indem, wie dies einer bevorzugten Weiterbildung der vorlie- genden Erfindung entspricht, ein weiterer Träger, gewählt aus Zeolithen, Calciumkarbonat, Magnesiumkarbonat, Treha- lose, Chitosan, Schellack, Albumin, Stärke, Magermilchpulver, Süßmolkenpulver, Maltodextrine, Lactose, Inulin, Dextrosen, pflanzlichen Ölen, oder ein Lösungsmittel, gewählt aus Wasser oder physiologischer Kochsalzlösung, enthalten ist, kann einerseits eine gleichmäßige Verteilung der Mikroorganismen im Verdauungstrakt erzielt werden und andererseits eine weitere Unterstützung der "competitive exclusion" erzielt werden.
Indem, wie dies einer Weiterbildung der Erfindung entspricht, zusätzlich ein Beschichtungsmaterial, gewählt aus Maltodextrinen, Guarkernmehl , Gummi arabicum, Alginaten, modifizierter Stärke und Stärkederivaten, Dextrinen, Cellu- losederivaten, wie Celluloseester und -ether, Proteinen, wie Gelatine, Albumin, Casein, Gluten, Akaziengummi, Tra- ganthgummi, Lipiden, wie Wachsen, Paraffin, Stearinsäure, Mono- und Diglyceriden, enthalten ist, gelingt es, die Mikroorganismen gemeinsam mit gegebenenfalls enthaltenen Trä- germaterialien zu beschichten, wodurch sichergestellt wird, daß die Mikroorganismen erst am Ort ihres Einsatzzwecks, d.h. im Verdauungstrakt, ihre Wirkung entfalten können. Durch Einsatz derartiger Beschichtungsmaterialien ist es darüber hinaus beispielsweise möglich, den Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz direkt auf damit zu behandelnde Tiere, wie einen Tag alte Küken, in ihrer Transportbox durch sogenannte Gel- oder Granulatapplika- tionen aufzubringen, wodurch eine Prophylaxe und eine therapeutische Behandlung von Jungtieren gegenüber Infektionen durch pathogene Mikroben zur Verfügung gestellt wird. Derartige Anwendungen sind in der modernen Tierzucht insbesondere von Bedeutung, da aufgrund des fehlenden, direkten Kontakts von Jungtieren mit den Muttertieren eine entsprechende Weitergabe einer Grundlage für eine intakte Darmflora nicht mehr gegeben ist.
Um eine noch vollständigere Wirkung des Nahrungs-, Futter- mittel- und/oder Trinkwasserzusatzes gegenüber pathogenen Keimen zu erzielen, ist der Zusatz bevorzugt dahingehend weitergebildet, daß zusätzlich wenigstens ein Mikroorganismus, gewählt aus der Gruppe Bifidobacterium sp., Lactoba- cillus salivarius, Lactobacillus sp . , Lactobacillus fermen- tum und Enterococcus faecalis enthalten ist. Indem ein weiterer, an sich bekannter Mikroorganismus dem Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz beigemischt ist, kann gezielt die Wirkung gegenüber einem oder mehreren bei den jeweiligen Tieren zu erwartenden, pathogenen Keim(en) verstärkt werden, wodurch eine weitere Absenkung der Infektionsgefahr erzielt werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung hat es sich insbesondere als günstig erwiesen, den Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz in suspendierter, pulverförmiger oder verkapselter Form mit einem maximalen Durchmesser von 2000 μm zum Einsatz zu bringen, wodurch je nach gewünschtem Einsatzort, wie beispielsweise Kropf, Magen, Dünndarm und dgl . , eine exakte, gezielte Freisetzung der Wirkung der Mikroorganismen erzielbar ist. Darüber hinaus können selbstverständlich auch Mischformen aus suspendiertem und verkapseltem Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasser- Zusatz zum Einsatz gebracht werden, um die Wirkung über das gesamte Verdauungssystem sicherstellen zu können.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der Erfindung wird ein Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine, zur Leistungssteigerung der Nutztiere zur Verfügung gestellt, welcher aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Ente- rococcus faecium, DSM 16211, und 1 x 10s bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, besteht. Durch eine derartige Auswahl der Mengen an eingesetzten Mikroorganismen gelingt es insbesondere, einen Futtermittelzusatz herzustellen, welcher eine exzellente Wirkung gegenüber den meisten E. coli Keimen zeigt.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der Erfindung wird ein Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine, zur Leistungssteigerung der Nutztiere zur Verfügung gestellt, welcher aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbeson- dere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Ente- rococcus faecium, DSM 16211, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Pedio- coccus acidilactici, DSM 16210, und 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzu- satz Bifidobacterium animalis, DSM 16284, besteht. Mit einem derartigen Futtermittelzusatz gelingt es insbesondere, die Wirkung von Salmonella choleraesuis bzw. Clostridium perfringens ebenso wie die Wirkung von E. coli Bakte- — —
rien stark bzw. gleichmäßig stark zu inhibieren und darüber hinaus aufgrund der hohen Produktion von Säuren, nämlich Essigsäure und Milchsäure, der eingesetzten Mikroorganismen den pH-Wert im Verdauungstrakt der damit gefütterten Tiere derart stark abzusenken, daß weitere pathogene Keime an ihrem Wachstum stark behindert sind.
Zur Verstärkung der Wirkung des Futtermittelzusatzes ist er bevorzugt dahingehend weitergebildet, daß er aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10G bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus salivarius ssp. saliva- rius, DSM 16351, besteht. Durch eine derartige Auswahl der Mengen der eingesetzten Mikroorganismen gelingt es insbesondere, einen Futtermittelzusatz herzustellen, welcher eine exzellente Wirkung gegenüber E. coli Keimen zeigt und darüber hinaus aufgrund des hohen pH-Absenkungspotentials eine starke Inhibierung des Wachstums von nahezu sämtlichen weiteren pathogenen Keimen ermöglicht.
Der Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, besteht gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der vorliegenden Erfindung aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10s bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, 1 x 10e bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbeson- dere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Pedio- coccus acidilactici, DSM 16210, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 10αD bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Bi- fidobacterium animalis, DSM 16284, und 1 x 105 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012 KBE/kg Futtermittelzusatz Bifidobacterium sp. 2. Eine derartige Mischung des Futtermittelzusatzes zeigt insbesondere eine deutlich erhöhte Wirkung gegenüber den pathogenen Keimen Campylobacter je- juni ebenso wie Salmonella choleraesuis . Des weiteren sind auch die Wirkungen gegenüber gängigen E. coli Bakterien stark verbessert und gehen insgesamt weit über die Wirkung der Einzelstämme hinaus. Des weiteren zeigt die Stoffwech- selreaktion eines derartigen Futtermittelzusatzes, daß eine synergistische Wirkung der Bakterien vorhanden sein muß. So kann die vorliegende Mischung aus fünf Mikroorganismen unter anderem XyIitoi verwerten, was kein Mikroorganismus der Mischung alleine kann. Dies läßt sich damit begründen, daß für den Abbau von Xylitol beispielsweise mehrere Enzyme notwendig sind, und lediglich durch die erfindungsgemäße Kombination von fünf Mikroorganismen die nötigen Enzyme gemeinsam zur Verfügung gestellt werden können, wodurch ein derartig kompliziert abzubauendes Kohlehydrat verwertet werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung enthält der Futtermittelzusatz zusätzlich 1 % - 95 %, insbesondere 20 % - 98 %, eines Trägers bzw. Naturstoffes. Dadurch, daß zusätzlich ein Träger bzw. ein Naturstoff enthalten ist, gelingt eine weitere Verdrängung von pathogenen Keimen aus dem Magen- Darm-Milieu, indem das gezielte Wachstum der eingesetzten
Mikroorganismen unterstützt bzw. gefordert wird. Indem, wie dies einer bevorzugten Weiterbildung der Erfindung entspricht, die wäßrige Bakteriensuspension in einer Menge von 0,01 g/kg - 10 g/kg Futtermittel, insbesondere 0,025 g/kg bis 2,5 g/kg Futtermittel, auf das Futtermittel bzw. dessen Pellets aufgebracht ist, wird einerseits sichergestellt, daß der Futtermittelzusatz problemlos von den Tieren aufgenommen wird und andererseits bereits vor Aufnahme des Futtermittels auf der Oberfläche des Futtermittels vorhandene, pathogene Keime durch den Futtermittel- zusatz bekämpft bzw. verdrängt oder abgebaut werden können. Um eine besonders gute Wirkung des Futtermittelzusatzes zu erzielen, wird der Futtermittelzusatz bevorzugt in einer Menge von 20g/t bis 20 kg/t, insbesondere 100 g/t bis 2,5 kg/t in das Futtermittel eingemischt, wodurch einerseits eine ausreichende Menge an Mikroorganismen bereitgestellt ist und andererseits ein sicherer Abbau bzw. eine sichere Verdrängung von pathogenen Keimen aus dem Magen-Darm-Milieu sichergestellt werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der Erfindung werden die Mikroorganismen bzw. die Mischung aus Mikroorganismen als Trinkwasserzusatz zum Einsatz gebracht, wobei gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der Trinkwasserzusatz 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, enthält. Ein derartiger Trinkwasserzusatz ist insbesondere bei der Inhibierung von pathogenen Keimen und hiebei insbeson- dere bei der Inhibierung von E. coli besonders günstig.
Darüber hinaus kann eine derartige Mischung aufgrund der Bildung von Milchsäure, Essigsäure und Proprionsäure den pH-Wert im Magen-Darm-Trakt stark absenken, wodurch ungün- stige Lebensbedingungen für pathogene Keime geschaffen werden und andererseits die gebildeten Säuren, wie dies allgemein bekannt ist, in ihrer nicht dissoziierten Form auch bakterizid wirken, so daß eine insgesamt gute Wirkung gegen eine Vielzahl von pathogenen Keimen erzielt werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung wird ein Trinkwasserzusatz eingesetzt, welcher aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz En- terococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10e bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lac- tobacillus reuteri, DSM 16350, und 1 x 10s bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, be- steht. Ein derartiger Trinkwasserzusatz hat sich insbesondere bei der Inhibierung von E. coli sowie Salmonella cho- leraesuis als günstig erwiesen und zeigt darüber hinaus auch eine synergistische Wirkung in bezug auf das Stoff- wechselprofil . So kann diese Mischung beispielsweise D- Tagatose abbauen, was keiner der enthaltenen Einzelstämme für sich gesehen kann. Es ist damit eine synergistische Wirkung dieser drei Stämme in bezug auf das StoffWechsel- profi1 nachweisbar .
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung ist die Erfindung dahingehend weitergebildet, daß der Trinkwasserzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Bifidobacterium animalis, DSM 16284, besteht. Eine derartige Mischung von Mikroorganismen hat sich insbesondere bei der Inhibierung von pathogenen Keimen aus der Gruppe Salmonella choleraesuis, Campylobac- ter jejuni und Clostridium perfringens als günstig erwiesen und ist darüber hinaus aufgrund der unterschiedlichen Her- kunft der Mikroorganismen aus dem Magen-Darm-Trakt in der Lage, auch die Wirkung über den gesamten Magen-Darm-Trakt zu entfalten, wodurch eine nahezu vollständige Verdrängung von schädlichen, pathogenen Keimen im gesamten Verdauungssystem erzielt werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung wird ein Trinkwasserzusatz zum Einsatz gebracht, bestehend aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10s bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Pediococcus acidilactici, DSM 16210, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Bifidobacterium animalis, DSM 16284, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013 KBE/kg Trinkwasserzusatz Bifidobacterium sp. Mit einem derartigen Trinkwasserzusatz gelingt es, nahezu sämtliche, häufig vorkommende, pathogene Keime, insbesondere E. coli, Salmonellen, Clostridien und Campylobacter, in einem Ausmaß zu inhibieren, welches weit über Summenwirkung der einzelnen Mikroorganismen hinausgeht, so daß eine massive Synergistische Wirkung gegenüber pathogenen Keimen erzielt werden kann. Darüber hinaus gelingt es mit einem derartigen Mikroorganismus, den pH-Wert im Verdauungstrakt von Tieren stark und überaus rasch abzusenken, wodurch die Wirkung und insbesondere die Inhibierung des Wachstums von weiteren pathogenen Keimen weiter verstärkt wird.
Um insbesondere das Wachstum der erwünschten Mikroorganis- men im Magen-Darm-Trakt zu fördern und die Verdrängungswirkung noch zu verstärken, enthält der Trinkwasserzusatz gemäß einer bevorzugten Weiterbildung zusätzlich 1 % - 95 %, insbesondere 20 % - 92 %, eines Trägers bzw. Nährstoffes.
Gemäß einer weiteren Aufgabe zielt die vorliegende Erfindung darauf ab, durch eine gezielte Verwendung von Mikroorganismen bzw. einer Mischung von Mikroorganismen das Immunsystem von Säugern und/oder Nutzvögeln gezielt zu stärken und dadurch pathogene Keime aus dem Verdauungstrakt so vollständig wie möglich zu verdrängen.
Zur Lösung dieser Aufgaben wird gemäß der vorliegenden Erfindung eine Mischung von wenigstens zwei Mikroorganismen, gewählt aus der Gruppe Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri , DSM 16350, und Lactobacillus saliva- rius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, als probiotischer, gesundheits- bzw. leistungsfordernder Nah- rungs-, Futtermittel- und/ oder Trinkwasserzusatz verwen- det. Durch eine derartige Verwendung gelingt es, pathogene Keime durch die sogenannte "competitive exclusion" nahezu vollständig aus dem Verdauungstrakt von Säugern bzw. Nutz- vögeln zu verdrängen, da insbesondere durch eine gezielte Mischung dieser Mikroorganismen eine extrem rasche und starke Absenkung des pH-Werts im Verdauungstrakt gelingt, wobei durch die erfindungsgemäße Verwendung pathogene Keime an ihrer Entwicklung gezielt gehindert werden können. Darüber hinaus zeigte bei einer derartigen Verwendung keiner der Mikroorganismen auch bei länger dauernder gleichzeitiger Verwendung von wenigstens einem Antibiotikum keinerlei Resistenz diesen gegenüber.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung wird gemäß der vorliegenden Erfindung eine Mischung von Enterococcus fae- cium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lac- tobacil-lus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, verwendet . Durch eine derartige Verwendung gelingt es insbeson- dere, die Wirkung von pathogenen Keimen, nämlich E. coli, zu inhibieren und aufgrund der überaus raschen Absenkung des pH-Werts im Verdauungstrakt die Lebensbedingungen für pathogene Keime per se so weit zu verschlechtern, daß auch das Wachstum sämtlicher anderen schädlichen Keime stark be- hindert bzw. inhibiert ist, wodurch die Krankheitsanfälligkeit der damit versorgten Säuger und/oder Nutzvögel deutlich absinkt.
Gemäß einer Weiterbildung der Erfindung wird bevorzugt eine Mischung aus Enterococcus faecium, DSM 16211, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, verwendet, mit welcher insbesondere die Inhibierung von Salmonella choleraesuis, Campylobacter jejuni bzw. Clostridium perfringens gelingt und überdies auch die Lebens- bedingungen für weitere pathogene Keime stark verschlechtert werden, wodurch insgesamt eine probiotische Wirkung der verwendeten Mischung nachgewiesen werden kann, welche weit über die Summenwirkung der Verwendung der einzelnen Mikroorganismen hinausgeht .
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der Erfindung wird eine Mischung, bestehend aus Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, gemeinsam mit wei- teren Stämmen aus diesen Gruppen Lactobacilli, Streptococci und/oder Bifidobacteria verwendet, wobei durch den zusätzlichen Einsatz von Stämmen aus diesen Gruppen Lactobacilli, Streptococci und/oder Bifidobacteria ein gezielter Einsatz bzw. eine gezielte Inhibierung von speziellen Mikroorganismen an gezielten Bereichen des Magen-Darm-Trakts möglich wird, wodurch insbesondere das Auftreten von einer speziellen Krankheit, welche durch pathogene Keime verursacht wird, inhibiert werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung der Erfindung wird die Mischung aus Mikroorganismen zur Steigerung der Immunabwehr eingesetzt. Ein derartiger Einsatz wird insbesondere dadurch möglich, daß durch gezielte Auswahl der verwendeten Mikroorganismen und deren Herkunft aus den verschiedensten Bereichen des Verdauungstrakts sichergestellt werden kann, daß die verwendeten Mikroorganismen über die gesamte Länge des VerdauungsSystems ihre Wirkung entfalten und somit tatsächlich die Immunabwehr des damit behandelten Säugers bzw. Nutzvogels gegenüber speziellen, pathogenen Keimen im gesamten Verdauungstrakt deutlich gesteigert werden kann.
Gemäß einer bevorzugten Weiterbildung wird die Mischung aus Mikroorganismen gemeinsam mit wenigstens einem Gel- bzw. Granulatbildner oder Coatingmaterial, gewählt aus Malto- dextrinen, Guarkernmehl , Gummi arabicum, Alginaten, modifizierter Stärke und Stärkederivaten, Dextrinen, Cellulose- derivaten, Proteinen, Akaziengummi, Traganthgummi , Lipiden, verwendet. Durch eine Verwendung der Mischung aus Mikroor- ganismen mit einem Gel- bzw. Granulatbildner gelingt eine Verwendung als sogenannte Granulat- bzw. Gelapplikation, wodurch insbesondere extrem junge Tiere, welche nicht mehr von der Mutter mit den entsprechenden immunsteigernden Sub- stanzen versorgt werden können, sicher und zuverlässig mit den nötigen, für die Steigerung der Immunabwehr erforderlichen Mikroorganismen versorgt werden können. Bei einer derartigen Gel- bzw. Granulatapplikation wird die Mischung aus Mikroorganismen mit Gelbildnern überzogen bzw. verkapselt und diese Mischung direkt auf die damit zu versorgenden Jungtiere aufgesprüht bzw. aufgebracht oder beispielsweise bei Küken in die Transportbox eingebracht, wodurch eine Versorgung der Jungtiere mit den für sie essentiell wichtigen Mikroorganismen sichergestellt werden kann. Eine ähnliche bevorzugte Verwendung gelingt damit, daß die Mischung aus Mikroorganismen gemeinsam mit einem flüssigen Träger als Sprühsuspension direkt auf die damit zu behandelnden Jungtiere aufgebracht wird. Indem die Jungtiere mit der Mischung aus Mikroorganismen besprüht werden, wird ein Teil dieser Sprühmischung durch selbst vorgenommene Fellpflege bzw. Kontakt mit anderen Jungtieren in den Verdauungstrakt aufgenommen, wodurch wiederum eine Versorgung mit den essentiell für die Steigerung der Immunabwehr not- wendigen Mikroorganismen sichergestellt ist.
Die Erfindung wird nachfolgend anhand von Ausführungsbeispielen weiter erläutert. In diesen zeigt Beispiel 1 die Inhibierung von pathogenen Keimen durch die isolierten Testkeime im Agarplatten-Testmodell, Beispiel 2 einen Fütterungsversuch, bei welchem Tagesküken mit einem Futtermittel- und einem Trinkwasserzusatz, enthaltend fünf, drei bzw. keine Mikroorganismen, versorgt wurden, Beispiel 3 einen Feldversuch, bei welchem Tagesküken mit einem Trink- wasserzusatz, enthaltend fünf Mikroorganismen, versorgt wurden, Beispiel 4 einen Fütterungsversuch, bei welchem Tagesküken zu definierten Zeitpunkten einen Trinkwasserzusatz, enthaltend fünf Mikroorganismen, erhielten, Beispiel - -
5 Salmonella-Challenge bei Tagesküken, welche Mikroorganismen entweder über das Trinkwasser oder über das Futter zu definierten Zeitpunkten verabreicht wurden, wobei eine Mischung aus drei bzw. fünf Mikroorganismen zum Einsatz ge- langte, und Beispiel 6 einen Fütterungsversuch bei Absetz- ferkeln.
Beispiel 1
Inhibierung von pathogenen Keimen durch die erfindungsge- mäßen, isolierten "CE-Testkeime" ( "competitive exclusion"- Testkeime) im Agarplatten-Testmodell
Der Versuch wurde auf MRS-Agarplatten durchgeführt. Die Stämme wurden mittels Impfen auf die Agarplatten aufge- bracht, wobei die Stämme direkt aus den Kühlphiolen entnommen wurden. Die Inkubation der Platten erfolgte für 48 h unter anaeroben Bedingungen. Nach Anzucht der pathogenen Stämme in den entsprechenden Medien wurden die Platten mit etwa 9 ml des halbfesten Mediums, welches den pathogenen Stamm enthält, vorsichtig Übergossen. Für E. coli und Salmonella chloeraesuis wurde halbfestes VL-Medium, für Campy- lobacter jejuni halbfestes "Brain Heart Infusion Medium" und für Clostridium perfringens halbfestes "Reinforced CIo- stridial Medium" verwendet.
Die Platten wurden anschließend unter den jeweiligen Inkubationsbedingungen der pathogenen Stämme inkubiert . Die Auswertung der Platten erfolgte durch Ausmessen des Durchmessers der Testkeime und der Hemmhöfe und daraus die Be- rechnung des Verhältnisses Hemmhof zu Testkeim. Aus den Verhältnissen Hemmhof/Testkeim kann eine Bewertung der inhibierenden Wirkung der Testkeime durchgeführt werden. In der nachfolgenden Tabelle 1 sind die Ergebnisse für die verwendeten Stämme allein und in Mischung angeführt.
Tabelle 1
Figure imgf000025_0001
Aus dem Vergleich der hinterlegten Mikroorganismen (fett geschrieben) mit verwandten Stämmen (kursiv geschrieben) ergibt sich eindeutig, daß die hinterlegten Mikroorganismen (fett geschrieben) pathogene Keime in einem bedeutend höheren Ausmaß als bereits bekannte Stämme (kursiv) hemmen können. Beispiel 2
Fütterungsversuch an Tagesküken, welchen entweder eine Mischung aus allen fünf hinterlegten Mikroorganismen oder eine Mischung aus drei hinterlegten Mikroorganismen verab- reicht wurde, wobei in der Starterperiode die Mischungen über das Trinkwasser verabreicht wurden und zusätzlich während der gesamten Versuchsperiode über das Futter
Versuchsparameter : 600 Tagesküken (Rasse: Ross 308) wurden in 3 Gruppen aufgeteilt:
Gruppe 1 : Kontrolle ohne Zusätze
Gruppe 2: fünf Mikroorganismen; Tag 1 - 21 im Trinkwasser; Tag 1 - 42 über das Futter Gruppe 3: DSM 16210, DSM 16211, DSM 16284; Tag 1 - 21 im
Trinkwasser; Tag 1 - 42 über das Futter
Wasser und Futter standen den Tieren zur Aufnahme ad libitum zur Verfügung.
Erfaßte Leistungsparameter:
Lebendgewicht, tägl . Zunahmen, Futteraufnahme, Futterverwertung (= FCR) , Mortalität, EPEF (European Pro- duction Efficiency Factor)
- -
Tabelle 2: Zusammenfassung Leistungsdaten des Fütterungsversuches
Figure imgf000027_0001
a, b sign. Unterschied (P < 0,05) * EPEF (European Production Efficiency Factor)
Durch den Einsatz der Produkte konnte das Lebendgewicht der Tiere in den Versuchsgruppen signifikant verbessert werden. Die Futteraufnahme konnte in der Produktgruppe, welche alle fünf Mikroorganismen erhielt, leicht gesteigert werden, hinsichtlich der Futterverwertung konnte allerdings kein Unterschied festgestellt werden. Die Mortalität war allgemein hoch, da der Versuch im Hochsommer durchgeführt wurde und die Tiere mit einer sehr hohen Umgebungstemperatur kon- frontiert waren. Trotz dieses zusätzlichen Streßfaktors konnte jedoch ein deutlicher Leistungsanstieg in den Produktgruppen beobachtet werden.
Beispiel 3
In einem Feldversuch wurde eine Mischung aus allen fünf Mikroorganismen an Tagesküken unter Praxisbedingungen getestet und im Trinkwasser über die gesamte Periode verabreicht . Versuchsparameter :
Ca. 53.000 Tagesküken wurden gleichmäßig auf 2 Etagen aufgeteilt .
Erdgeschoß Kontrolle ohne Zusätze
1. Stock alle fünf Mikroorganismen im Trinkwasser
Wasser und Futter standen den Tieren ad libitum zur Verfügung.
Erfaßte Leistungsparameter: Lebendgewicht, Mortalität
Die Leistungen der Tiere konnten, wie dies der nachfolgenden Tabelle 3 entnommen werden kann, deutlich gesteigert werden, vor allem auch im Vergleich zu vorangegangenen Pro- duktionszyklen, die in Tabelle 4 aufgelistet sind, und die zuvor aufgetretenen E. coli Probleme konnten in den Griff bekommen werden.
Tabelle 3 : Zusammenfassung Leistungsdaten
Tabelle 4 : Leistung der letzten 6 Produktionszyklen der Farm
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mit allen fünf Mikroorganismen Beispiel 4
In einem Fütterungsversuch wurde Tagesküken eine Mischung aus allen fünf Mikroorganismen über das Trinkwasser zu de- finierten Zeitpunkten verabreicht.
Versuchsparameter :
400 Tagesküken der Rasse Ross 308 wurden nach dem Zufalls- prinzip in 2 Gruppen aufgeteilt: Gruppe 1 Kontrolle; ohne Zusätze
Gruppe 2 fünf Mikroorganismen im Trinkwasser am Tag 1, 2, 3, 7, 8, 9 und 14, 15, 16
Wasser und Futter standen den Tieren zur Aufnahme ad libitum zur Verfügung .
Erfaßte Leistungsparameter
Lebendgewichtszunähme, Futteraufnahme, Futterverwertung (=
FCR) , Mortalität, EPEF (European Production Efficiency Fac- tor) Die Ergebnisse sind in Tabelle 5 zusammengefaßt.
Tabelle 5 : Zusammenfassung Leistungsdaten
Figure imgf000029_0001
a, b sign. Unterschiede (P < 0,05)
* EPEF (European Production Efficiency Factor)
Durch den Zusatz der Mikroorganismen konnte das Lebendgewicht der Tiere signifikant gesteigert werden. Bei der Fut- teraufnähme bzw. Futterverwertung waren beide Gruppen miteinander vergleichbar. Die Produktivitätsmassezahl (= EPEF) lag in der Produktgruppe deutlich höher als in der Kontrolle.
Beispiel 5
Salmonella-Challenge bei Tagesküken
Ein Produkt aus allen fünf Mikroorganismen und ein Produkt, bestehend aus drei Mikroorganismen, wurde im Futter über die gesamte Versuchsperiode und über das Trinkwasser in der Starterperiode verabreicht.
Versuchsparameter : 304 Tagesküken der Rasse Cobb wurden in 4 Gruppen aufgeteilt: Gruppe 1 negative Kontrolle; ohne Zusätze und ohne Salmo- ne11en-Chal1enge
Gruppe 2 positive Kontrolle; ohne Zusätze; mit Salmonel- len-Challenge
Gruppe 3 mit Salmonellen-Challenge + Produkt aus fünf Mikroorganismen: Tag 1 - 21 im Trinkwasser; Tag 1 - 42 über das Futter
Gruppe 4 mit Salmonellen-Challenge + Produkt aus drei Mik- roorganismen (DSM 16211, DSM 16210, DSM 16284) :
Tag 1 - 21 im Trinkwasser; Tag 1 - 42 über das Futter
Wasser und Futter standen den Tieren zur Aufnahme ad libitum zur Verfügung .
Alle Tiere der Gruppe 2, 3 und 4 wurden am fünften Tag oral mit einer Dosis von 6 x 105 cfu Salmonella enteritidis ino- kuliert. Die negative Kontrolle wurde zur Kontrolle der normalen Leistungsdaten mitgeführt.
Erfaßte Leistungsparameter: Lebendgewichtszunähme, Futteraufnähme, Futterverwertung (= FCR) , Morbidität (gemessen als Anzahl der Durchfälle) , Mortalität, EPEF (European Production Efficiency Factor) Die Ergebnisse sind in Tabelle 6 zusammengestellt.
Tabelle 6: Zusammenfassung Leistungsdaten
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a, b sign. Unterschiede (P < 0,05)
* EPEF (European Production Efficiency Factor)
Hinsichtlich der Gesamtzunahme kam es durch die Infektion mit Salmonella enteritidis zu deutlichen Leistungseinbüßen im Vergleich zu der Kontrollgruppe, die durch den Zusatz der Produkte gemäß der Erfindung verbessert werden konnten. Es zeigte sich hiebei, daß sowohl bei der Zugabe des Produkts aus drei Mikroorganismen als auch jenem aus fünf Mik- roorganismen eine deutliche Verbesserung erzielt werden konnte. Die Futteraufnahme wurde durch die Infektion ebenfalls negativ beeinflußt, allerdings konnte die Futterverwertung durch den Zusatz der erfindungsgemäßen Produkte deutlich verbessert werden. Auch die Morbidität, gemessen an der Anzahl der beobachteten Durchfälle, konnte durch den Zusatz der Produkte im Vergleich zu der nicht behandelten Gruppe deutlich reduziert werden. - -
Beispiel 6
Fütterungsversuch bei Tagesküken - Salmonella-Challenge
Je drei Gruppen bestehend aus 36 Tagesküken wurden einem Fütterungsversuch Salmonella-Challenge unterzogen. Einer ersten Gruppe wurde keinerlei Produkt verabreicht, einer zweiten Gruppe wurde eine Mischung aus allen fünf hinterlegten Stämmen verabreicht und eine dritte Gruppe erhielt ein kommerziell erhältliches probiotisches Produkt bestehend aus folgenden Mikroorganismen-. Lactobacillus sp., Lac- tobacillus sp., Bifidobacterium sp und Enterococcus fae- cium.
Versuchsansatz :
In einem isolierten Raum wurden die Tagesküken in Käfigen gehalten. Die probiotischen Produkte wurden über das Trinkwasser, das den Küken ad libitum zur Verfügung stand, verabreicht, und zwar am Lebenstag 1, 2 und 3. Am dritten Lebenstag wurde allen Küken oral 1,0 ml einer Suspension von Salmonella enteriditis verabreicht. Die Konzentration der Salmonellenlösung betrug l,0 x 106 CFU/ml . Alle Küken erhielten zusätzlich Futter und Wasser ad libitum. Gemessen wurde die Konzentration der Salmonellen im Kot der Tiere.
Auswertung :
Figure imgf000032_0001
Die Ergebnisse zeigen, daß einzig die Kombination aus den fünf hinterlegten Mikroorganismen in der Lage war, das - -
Wachstum von Salmonellen signifikant zu reduzieren, und zwar so weit, daß die Anzahl der Salmonellenkeime unter den Detektionslimit lag.
Beispiel 7
Fütterungsversuch bei Absetzferkeln unter Einsatz einer Mischung, bestehend aus fünf Mikroorganismen, und einer Mischung, bestehend aus drei Mikroorganismen
In einem Fütterungsversuch wurde die Mikroorganismen gemäß der vorliegenden Erfindung auf ihrer Auswirkungen auf die Leistung bei Absetzferkeln getestet. Die Produkte wurde über die gesamte Versuchsperiode von 47 Tagen über das Futter verabreicht .
Versuchsparameter :
101 Absetzferkel der Rasse OHYB wurden in 3 Gruppen aufgeteilt: Gruppe 1 Kontrolle ohne Zusätze Gruppe 2 fünf Mikroorganismen (C5) ; Tag 1 - 47 über das
Futter Gruppe 3 drei Mikroorganismen (C3) , bestehend aus DSM
16211, DSM 16350, DSM 16351; Tag 1 - 47 über das Futter Wasser und Futter standen den Tieren zur Aufnahme ad libitum zur Verfügung.
Erfaßte Leistungsparameter:
Lebendgewicht, tägliche Zunahmen, Futteraufnahme, Futterverwertung (= FCR) , Mortalität
Die Ergebnisse sind in Tabelle 7 zusammengefaßt. Tabelle 7: Zusammenfassung Leistungsdaten
Figure imgf000034_0001
Durch den Einsatz der Produkte konnte das Lebendgewicht der Tiere in den Versuchsgruppen deutlich, nämlich um 3 % bzw. 1,7 % nach den ersten 13 Tagen und um 4 % bzw. 2,6 % bis zum Versuchsende, verbessert werden. Auch bei den täglichen Zunahmen konnte eine deutliche Steigerung durch den Zusatz der Produkte erreicht werden.
In der nachfolgenden Tabelle 8 sind die Futterdaten zusammengefaßt.
Tabelle 8 : Zusammenfassung Futterdaten
Figure imgf000035_0001
Die Futteraufnahme konnte in den Produktgruppen leicht gesteigert werden, hinsichtlich Futterverwertung ergab sich vor allem in der ersten Versuchsperiode eine Verbesserung. Im weiteren Verlauf konnte allerdings kein Unterschied in der Futterverwertung festgestellt werden.
Liste gemäß Regel 13bis, Absatz 4 der AusführungsOrdnung zum Vertrag über die internationale Zusammenarbeit auf dem Gebiet des Patentwesens
Sämtliche der in der vorliegenden Anmeldung genannten Mikroorganismen wurden bei der DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg Ib, 38124 Braunschweig, Deutschland (DE), hinterlegt. -
Figure imgf000036_0001
Beispiel 8
Positive Verschiebung der Darmflora bei Masthühnern
Vier Gruppen von Masthühnern wurden einem Fütterungsversuch unterzogen, wobei 2 Gruppen eine Produktmischung, bestehend aus fünf hinterlegten Mikroorganismen, verabreicht wurde, eine Gruppe ist eine Negativkontrolle ohne jede Zusätze, eine Gruppe eine Positivkontrolle unter Zusatz eines antibiotischen Leistungsförderes, nämlich Avialmycin, eine Gruppe, die Mischung aus fünf Mikroorganismen über das Trinkwasser verabreicht bekam und eine Gruppe, die Mischung von Mikroorganismen über das Futter verabreicht bekam.
Im Zuge der Überprüfung stellte sich heraus, daß es zwischen den einzelnen Gruppen keine statistisch signifikanten Unterschiede in bezug auf aerobe Gesamtkeimzahl, Coliforme, anaerobe Gesamtkeimzahl und Bacteroide gab. Jene Gruppen, die die Mischung aus fünf Mikroorganismen verabreicht bekamen, hatten im Vergleich zur Positivkontrolle und Negativkontrolle (NK, PK) signifikant höhere Keimzahlen in bezug auf auf Bifidobacterium sp, Lactobacillus spp und Gram+Kokken (z.B. Enterococcus, Pediococcdus) .
In der Figur ist ein Flußdiagramm dieses Vergleichs dargestellt.
In dem Flußdiagramm der Figur kann in dem schwarz umrahmten Teil gezeigt werden, daß jene Gruppen, die die Mischung aus fünf Mikroorganismen über das Trinkwasser bzw. das Futter verabreicht beka- men, eine bedeutend höhere Anzahl von "guten" Keimen aufwiesen. In dem Diagramm der Figur ist die Gruppe der Negativkontrolle als schwarzer Balken dargestellt, die Gruppe der Positivkontrolle als schraffierter Balken, die Gruppe, die die fünf Mikroorganismen über das Futtermittel verabreicht bekamen, als gepunkteter Balken, und jene Gruppe, die die Mischung aus fünf Mikroorganismen über das Trinkwasser verabreicht bekamen, als grauer einfarbiger Balken dargestellt.
Beispiel 9
Fütterungsversuch bei Masthühnern
4500 gemischtgeschlechtliche Masthühner (Ross 308) wurden in zwei Gruppen aufgeteilt, wobei jede der beiden Gruppen in weitere drei Untergruppen zur Vereinfachung der Beobachtung unterteilt wurde. Beide Gruppen erhielten ein Standardfuttermittel und die Testgruppe erhielt eine Mischung aus den fünf hinterlegten Mikroorganismen in einer Dosierung von l*109 CFU/kg Futter. Die Kontrollgruppe erhielt ein kommerziell erhältliches probiotisches Produkt in der gleichen Dosierung. Die Verabreichung der Substanzen erfolgte über das Futtermittel .
Nach 38 Tagen konnte festgestellt werden, daß die Leistungsparameter der Testgruppe deutlich besser waren und zwar sowohl in bezug auf das Lebendgewicht, die täglichen Zunahmen und die Futterverwertung. Darüber hinaus ist die Mortalität gegenüber der Vergleichsgruppe deutlich abgesunken. Die Ergebnisse sind in der nachfolgenden Tabelle 9 gezeigt . Tabelle 9
Ergebnisse nach 38 Tagen
Figure imgf000038_0001
Beispiel 10
In einem Laborversuch wurden Antibiotikaresistenzen der fünf hinterlegten Mikroorganismen untersucht und soferne verfügbar, mit den Antibiogrammen von verwandten, Difidobakterien, verglichen. Lediglich beim Stamm Bifidobakterium animalis konnte kein Vergleichsstamm in der Literatur gefunden werden bzw. aufgrund von schwierigen Anzuchtbedingungen gesicherte Daten für Vergleichs- stamme erhalten werden. Die Ergebnisse der Resistenzversuche gegenüber gängigen Antibiotika zusammen mit soweit vorhandenen Vergleichsstämmen sind in den nachfolgenden Tabellen gezeigt.
Figure imgf000038_0002
- -
Figure imgf000039_0001
Figure imgf000039_0002
Figure imgf000039_0003
- -
Figure imgf000040_0001
sensitive, R resistent
Aus diesen Vergleichsversuchen ergibt, daß keiner der hinterlegten Mikroorganismen gegen eines der bekannten getesteten Antibiotika resistent wurde, sie blieben alle sensitiv bzw. aufnahmefähig.
Anlage zu PCT-Anmeldung
Anmelder: Erber Aktiengesellschaft et al .
Liste gemäß Regel 13bis, Absatz 4 der Ausführungsordnung zum Vertrag über die internationale Zusammenarbeit auf dem Gebiet des Patentwesens
Die in Anspruch 1 in der vorliegenden PCT-Anmeldung genannten Mikroorganismen wurden bei der DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg Ib, 38124 Braunschweig, Deutschland (DE) , hinterlegt.
Figure imgf000041_0001

Claims

P a t e n t a n s p r ü c h e :
1. Probiotischer, gesundheits- bzw. leistungsfördernder Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz, welcher eine Mischung von Mikroorganismen enthält, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens zwei Mikroorganismen, gewählt aus der Gruppe Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lacto- bacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus aci- dilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, enthalten sind.
2. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens drei Mikroorganismen enthalten sind.
3. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, enthalten sind.
4. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß Enterococcus faecium, DSM 16211, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, enthalten sind.
5. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich als Träger einsetzbare NährSubstanzen und/oder prebiotische Substanzen, gewählt aus Fructo-Oligosacchariden, Inulinen, Isomalto-Oli- gosacchariden, Lactitol, Lactosucrose, Lactulose, Pyrodextrinen, Soja-Oligosacchariden, Transgalacto-Oligosacchariden, Xylo-Oligo- saccardien, Vitaminen, insbesondere Vitamin E, enthalten sind. -
6. Nahrungs- , Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach, einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß ein weiterer Träger, gewählt aus Zeolithen, Calciumkarbonat, Magnesiumkarbonat, Trehalose, Chitosan, Schellack, Albumin, Stärke, Magermilchpulver, Süßmolkenpulver, Maltodextrine, Lactose, Inulin, Dextrosen, pflanzlichen Ölen, oder ein Lösungsmittel, gewählt aus Wasser oder physiologischer Kochsalzlösung, enthalten ist.
7. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich ein Beschichtungsmaterial, gewählt aus Maltodextrinen, Guarkernmehl , Gummi arabicum, Alginaten, modifizierter Stärke und Stärkederivaten, Dextrinen, Cellulosederivaten, wie Celluloseester und -ether, Proteinen, wie Gelatine, Albumin, Casein, Gluten, Akaziengummi, Traganthgummi , Lipiden, wie Wachsen, Paraffin, Stearinsäure, Mono- und Diglyceriden, enthalten ist.
8. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich wenigstens ein Mikroorganismus, gewählt aus der Gruppe Bifidobacte- rium sp., Lactobacillus salivarius, Lactobacillus sp., Lactobacil- lus fermentum und Enterococcus faecalis enthalten ist.
9. Nahrungs-, Futtermittel- und/oder Trinkwasserzusatz nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Mikroorganismen in suspendierter, pulverförmiger oder verkapselter Form mit einem maximalen Durchmesser von 2000 μm enthalten sind.
10. Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Futtermittelzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, besteht.
11. Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Ente- rococcus faecium, DSM 16211, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Pediococcus acidilac- tici, DSM 16210, und 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Bifidobacterium animalis, DSM 16284, enthalten sind.
12. Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvδgel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Futtermittelzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 10s bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, besteht.
13. Futtermittelzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Futtermittelzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, 1 x 10e bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Pediococcus acidilactici, DSM 16210, 1 x 107 bis 1 x 1014, - -
insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012, KBE/kg Futtermittelzusatz Bifi- dobacterium animalis, DSM 16284, und 1 x 10δ bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1012 KBE/kg Futtermittelzusatz Bifidobac- terium sp. 2 besteht.
14. Futtermittelzusatz nach Anspruch 11, 12 oder 13, dadurch gekennzeichnet, daß der Futtermittelzusatz zusätzlich 1 % - 95 %, insbesondere 20 % - 98 %, eines Trägers bzw. Naturstoffes enthält.
15. Futtermittelzusatz nach Anspruch 11, 12 oder 13, dadurch gekennzeichnet, daß der Futtermittelzusatz als wäßrige Suspension in einer Menge von 0,01 g/kg - 10 g/kg, insbesondere 0,025 g/kg bis 2,5 g/kg, Futtermittel auf das Futtermittel aufgebracht ist.
16. Futtermittelzusatz nach einem der Ansprüche 10 bis 15, dadurch gekennzeichnet, daß der Futtermittelzusatz in einer Menge von 20 g/t bis 20 kg /t, insbesondere 100 g/t bis 2,5 kg/t, in das Futtermittel eingemischt ist.
17. Trinkwasserzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Trinkwasserzusatz 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, enthält.
18. Trinkwasserzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Trinkwasserzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und 1 x 10s bis 1 x 1014, insbe- - -
sondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacil- lus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, besteht.
19. Trinkwasserzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Trinkwasserzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Bifido- bacterium animalis, DSM 16284, besteht.
20. Trinkwasserzusatz, insbesondere für Nutzvögel und/oder Schweine zur Leistungssteigerung der Nutztiere, nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Trinkwasserzusatz aus 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/ Trinkwasser Enterococcus faecium, DSM 16211, 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lacto- bacillus reuteri, DSM 16350, 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Pediococcus acidilactici, DSM 16210, 1 x 107 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013, KBE/kg Trinkwasserzusatz Bifidobacterium animalis, DSM 16284, und 1 x 106 bis 1 x 1014, insbesondere 1 x 1010 bis 1 x 1013 KBE/kg Trinkwasserzusatz Bifidobacterium sp. 2 besteht.
21. Trinkwasserzusatz nach einem der Ansprüche 17 bis 20, dadurch gekennzeichnet, daß der Trinkwasserzusatz zusätzlich 1 % - 95 %, insbesondere 20 % - 92 %, eines Trägers bzw. Nährstoffes enthält.
22. Verwendung einer Mischung von wenigstens zwei Mikroorganismen, gewählt aus der Gruppe Enterococcus faecium, DSM 16211, Lactoba- - -
cillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifi- dobacterium animalis, DSM 16284, als probiotischer, gesundheits- bzw. leistungsfordernder Nahrungs-, Futtermittel- und/ oder Trinkwasserzusatz .
23. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, daß Ente- rococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, und Lactobacillus salivarius ssp. salivarius, DSM 16351, eingesetzt werden.
24. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, daß Ente- rococcus faecium, DSM 16211, Pediococcus acidilactici, DSM 16210, und Bifidobacterium animalis, DSM 16284, eingesetzt werden.
25. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, daß Ente- rococcus faecium, DSM 16211, Lactobacillus reuteri, DSM 16350, gemeinsam mit weiteren Stämmen aus diesen Gruppen Lactobacilli, Streptococci und/oder Bifidobacteria eingesetzt werden.
26. Verwendung nach einem der Ansprüche 22 bis 25, dadurch gekennzeichnet, daß die Mischung aus Mikroorganismen zur Steigerung der Immunabwehr eingesetzt wird.
27. Verwendung nach einem der Ansprüche 22 bis 26, dadurch gekennzeichnet, daß die Mischung aus Mikroorganismen gemeinsam mit wenigstens einem Gelbildner, gewählt aus Maltodextrinen, Guarkern- mehl, Gummi arabicum, Alginaten, modifizierter Stärke und Stärkederivaten, Dextrinen, Cellulosederivaten, Proteinen, Akaziengummi, Traganthgummi , Lipiden, eingesetzt wird.
28. Verwendung nach einem der Ansprüche 22 bis 27, dadurch gekennzeichnet, daß die Mischung aus Mikroorganismen gemeinsam mit einem flüssigen Träger als Sprühsuspension eingesetzt wird.
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