WO2010128807A2 - 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물 - Google Patents

신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물 Download PDF

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Definitions

  • the present invention relates to a pharmaceutical composition that can effectively treat nerve diseases such as peripheral nerve injury or neurological damage, neuropathy, neuropathic pain or brain disease by rapidly repairing damaged nerve tissue.
  • nerve diseases such as peripheral nerve injury or neurological damage, neuropathy, neuropathic pain or brain disease by rapidly repairing damaged nerve tissue.
  • Many neurological disorders such as Parkinson's disease, Alzheimer's disease, Huntington's disease, spinal cord cerebellar degeneration, amyotrophic lateral sclerosis, multiple neuropathy, spinal cord injury, cerebrovascular disorder, etc. Or is caused by reduction, cell death, or injury or exclusion. Therefore, in the treatment of such neurological diseases, it is important to replenish neurotransmitters lost by injury of nerve cells or to regenerate nerve cells.
  • As a method of regenerating nerve cells there are embryonic stem cells that can differentiate into undifferentiated neural stem cells or various cells.
  • DRG dorsal root ganglion
  • neuropathic pains include shingles or post shingles neuralgia, and in many cases, these neuropathic pains are comparable to those at childbirth, in which the degree of pain is the greatest pain that can be felt throughout life. There is a greater severity in that persistent pain, rather than periodicity, is caused, unlike in other diseases that cause severe pain, such as terminal cancer pain, gout attacks, and trigeminal neuralgia.
  • Some of the antiviral agents currently in use for shingles may be applied only within 72 hours after the initial rash of shingles, as indicated in the prescription guidelines. A therapeutic effect can be expected, but the usefulness is halved for many patients by visiting the hospital after 72 hours.
  • symptomatic agents for reducing neuralgia in shingles and shingles neuralgia for example, nonsteroidal anti-inflammatory drugs, such as acetaminophen, pyricampam, narcotic analgesics such as morphine, oxycodone, fentanyl, codeine, gabapentin , Anti-interstitial agents such as pregabalin, valproate, nortriptyline, decipramine, antidepressants such as amitriptyline, corticosteroids such as prednisolone, or local anesthetics such as lidocaine are used but are often ineffective. In the case of severe pain or prolonged duration, neuroblocking is a trend.
  • nonsteroidal anti-inflammatory drugs such as acetaminophen, pyricampam, narcotic analgesics such as morphine, oxycodone, fentanyl, codeine, gabapentin .
  • Anti-interstitial agents such as pregab
  • antiviral and anti-inflammatory drugs used for the treatment of shingles do not actually play a role in the repair function of nerve tissue damage, which is a pathogen of shingles and post-herpetic neuralgia, thus preventing effective pain control.
  • acute inflammatory demyelinating polyneuropathy chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy, diabetic peripheral neuropathy, vasculitis neuropathy, hereditary, which is a disease accompanied by damage to nerve tissue, as in the case of shingles and herpes zoster neuralgia
  • Peripheral neuropathy, stroke, brain tumor, degenerative neuropathy, painful diabetic peripheral neuropathy, trigeminal neuralgia, cancerous lesions that occur along the cerebral cortex or spinal cord thalamus, post-traumatic neuropathy, ring pain, central pain or thalamus after stroke Development of a therapeutic agent that can directly prevent or treat neuropathy or neuropathic pain such as pain, or brain diseases such as stroke, brain tumor, dementia, Parkinson's disease, Alzheimer's disease, Huntinton's disease, epilepsy, stroke or ischemic brain disease It is a desperate situation.
  • the present invention can effectively prevent or treat neurological diseases such as neurological damage, neuropathy, neuropathic pain or brain diseases such as peripheral nerve damage or central nerve damage by repairing the damaged nerve of the compound of formula (1) or formula (2)
  • neurological diseases such as neurological damage, neuropathy, neuropathic pain or brain diseases such as peripheral nerve damage or central nerve damage
  • its purpose is to develop a pharmaceutical composition for preventing or treating neurological damage and neurological diseases.
  • the present invention is to prevent the nerve damage and neurological diseases containing any one compound or two or more compounds selected from the group consisting of a compound of Formula 1, a compound of Formula 2 and possible salts thereof as an active ingredient or Provide therapeutic pharmaceutical compositions:
  • X is OH, SH or O -
  • the nerve injury and nerve disease may be any disease selected from peripheral nerve damage, central nerve damage, neuropathy, neuropathic pain or brain disease.
  • composition of the present invention may further include any one or a mixture of two or more selected from vegetable gels, vegetable resins, or synthetic resins.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is any one compound selected from the group consisting of the compound of formula (1), the compound of formula (2) and their possible salts or 0.1 to 99.9% by weight of at least two compounds and selected from vegetable gels, vegetable resins or synthetic resins 0.1 to 99.9% by weight of any one or two or more mixtures.
  • Any one or two or more compounds selected from the group consisting of a compound of Formula 1, a compound of Formula 2, and possible salts thereof, which is an active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention, can be repaired quickly by repairing damaged nerve tissue Neurological damage such as damage, neuropathy, neuropathic pain or neurological diseases such as brain diseases can be effectively prevented or treated.
  • 1 is a schematic diagram showing the repair of damaged nerve areas by filling the phospholipids or sphingosine derivatives contained in the composition of the present invention to nerves damaged by budding of the shingles virus,
  • Figure 2 shows the median (median) of the time it takes to produce a scab throughout the skin lesion
  • Figure 3 shows the median (median) of the time taken to relieve pain according to shingles
  • Figure 4 shows the median (median) of the time to relieve pain following shingles neuralgia
  • 5 and 6 show optical and electron micrographs of neural tissue following treatment with phospholipids or sphingosine derivatives contained in the composition of the present invention in a sciatic nerve crush injury model, respectively (a: normal control group, b: 1 week) Control group, c: 1 week treatment group, d: 2 weeks control group, e: 2 weeks treatment group, f: 3 weeks control group, g: 3 weeks treatment group),
  • FIG. 7 and 8 show optical micrographs and electron micrographs of neural tissue following treatment with phospholipids or sphingosine derivatives contained in the composition of the present invention in diabetic neuropathy models (a: normal control group, b: diabetes induced) 4 weeks post-treatment group, c: 4 weeks HZ cream treatment group after diabetes induction, d: 5 weeks treatment group without diabetes induction group, e: 1 week HZ cream treatment group after 4 weeks treatment without diabetes group, f: diabetes 6 weeks untreated group, g: 4 weeks untreated diabetic 2 weeks HZ cream treated group),
  • diabetic neuropathy models (a: normal control group, b: diabetes induced) 4 weeks post-treatment group, c: 4 weeks HZ cream treatment group after diabetes induction, d: 5 weeks treatment group without diabetes induction group, e: 1 week HZ cream treatment group after 4 weeks treatment without diabetes group, f: diabetes 6 weeks untreated group, g: 4 weeks untreated diabetic 2 weeks HZ cream treated group),
  • Figure 9 shows the weight change according to the treatment of phospholipids or sphingosine derivatives contained in the composition of the present invention in a stroke model
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating neuronal damage and neurological diseases, which comprises any one compound selected from the group consisting of the compound of Formula 1, the compound of Formula 2, and possible salts thereof, or two or more compounds as an active ingredient. :
  • X is OH, SH or O -
  • the compounds include phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylserine, phosphatidyl inositol, phosphatidic acid, sphingophospholipid, sphingomyelin, plasmalogen, sphingoplastalogen, phosphatidylglycerol, cardiolipin, cerevoloside , Ceramides, lyso-like materials thereof and possible salts thereof are preferred.
  • the nerve injury and nerve disease may be any disease selected from peripheral nerve damage, central nerve damage, neuropathy, neuropathic pain or brain disease.
  • the neuropathy or neuropathic pain may include acute inflammatory demyelinating polyneuropathy, chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy, diabetic peripheral neuropathy, shingles, vasculitis neuropathy, hereditary peripheral neuropathy, spinal cord cerebellar degeneration, myopathy Atrophic lateral sclerosis, painful diabetic peripheral neuropathy, trigeminal neuralgia, cancerous lesions that occur along the cerebral cortex or spinal cord thalamus, post-traumatic neuropathy, shingles neuralgia, ring pain, central pain after stroke, and thalamus Can be selected from.
  • the neuropathy or neuropathic pain is preferably diabetic peripheral neuropathy, shingles, vasculitis neuropathy, painful diabetic peripheral neuropathy, trigeminal neuralgia, post-traumatic neuropathy, shingles neuralgia and ring pain It may be selected from the group consisting of, more preferably diabetic peripheral neuropathy, shingles, painful diabetic peripheral neuropathy, trigeminal neuralgia, post-traumatic neuropathy and shingles neuralgia, Most preferably may be selected from shingles or post shingles neuralgia.
  • the brain disease may be selected from stroke, brain tumor, dementia, Parkinson's disease, Alzheimer's disease, Huntinton's disease, epilepsy or ischemic brain disease.
  • peripheral nerve injury or central nerve injury may be selected from the group consisting of neuronal insufficiency and traumatic nerve injury.
  • composition of the present invention may further include any one or a mixture of two or more selected from vegetable gels, vegetable resins, or synthetic resins.
  • the vegetable gel, vegetable resin or synthetic resin may be aloe gel; Seaweed extracts selected from the group consisting of kelp extract, wormwood extract and fucoidan; Vegetable or synthetic resins having functions similar to these; And it can be selected from the group consisting of a mixture thereof.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is any one selected from the group consisting of a compound of Formula 1, a compound of Formula 2 and possible salts thereof, or 0.1 to 99.9% by weight of two or more compounds and any one selected from vegetable gels, vegetable resins or synthetic resins. Or from 0.1 to 99.9 weight percent of two or more mixtures.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a suitable carrier, adjuvant or vehicle which can be used conventionally in the preparation of the pharmaceutical composition.
  • Carriers, adjuvants or vehicles usable in the present invention include ion exchangers, alumina, aluminum stearate, serum proteins such as human serum albumin, buffer substances such as phosphates, glycine, sorbic acid, potassium sorbate, saturated vegetable fatty acids, and the like.
  • Partial glyceride mixtures water, protamine sulfate, disodium hydrogen phosphate, potassium hydrogen phosphate, sodium chloride, salts or electrolytes such as zinc salts, colloidal silica, magnesium trisilicate, polyvinyl pyrrolidone, cellulosic materials, Polyethylene glycol, sodium carboxymethylcellulose, polyacrylates, waxes, polyethylene-polyoxypropylene-block polymers, polyethylene glycols, wool fats, and the like.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be administered to mammals such as mice, mice, livestock, humans, and the like by various routes. All modes of administration can be expected, for example orally, parenterally, by injection, by needle-free device, by inhalation spray, topically, rectally, by nose It can be administered via buccally, vaginally or implanted reservoir. Administration by oral or injection or administration by needleless device or transdermal administration is preferred.
  • parenteral refers to transdermal administration and subcutaneous, intracutaneous, intravenous, intramuscular, intra-articular, synovial membranes. Intrasynovial, intrasternal, intrathecal, intralesional and intracranial injection or infusion techniques.
  • the pharmaceutical composition When the pharmaceutical composition is administered by injection or by a needleless device, it may be in the form of a sterile injectable formulation or in a form suitable for delivery by a needleless device, which may be an aqueous or oily suspension. Such suspensions may be formulated according to techniques known in the art using suitable dispersing or wetting agents and suspending agents. Suitable forms for delivery by sterile injectable preparations or needleless devices can also be solutions or suspensions in nontoxic parenterally acceptable diluents or solvents, for example solutions in 1,3-butanediol.
  • Vehicles and solvents that can be used include mannitol, water, Ringer's solution, and isotonic sodium chloride solution.
  • sterile, fixed oils can conventionally be employed as a solvent or suspending medium.
  • any bland fixed oil can be employed including synthetic mono- or diglycerides.
  • Fatty acids such as oleic acid and its glyceride derivatives are useful in the preparation of injectables which are natural pharmaceutically acceptable oils such as olive or castor oil, especially their polyoxyethylated versions.
  • compositions of the present invention may be administered orally in any orally acceptable formulation including, but not limited to, capsules, tablets, and aqueous suspensions and solutions.
  • carriers that are commonly used include lactose and corn starch.
  • Lubricants such as magnesium stearate may also typically be added.
  • useful diluents include lactose and dry corn starch.
  • compositions of the present invention may be administered topically, which is particularly useful when the desired treatment relates to sites and organs for which the desired treatment is easily accessible by topical application.
  • the pharmaceutical composition For topical application to the skin, the pharmaceutical composition must be formulated in a suitable ointment containing the active ingredient suspended or dissolved in the carrier.
  • Carriers for topical administration of the compounds of the present invention include, but are not limited to, mineral oil, liquid petroleum, white petroleum, propylene glycol, polyoxyethylene-polyoxypropylene compounds, emulsifying waxes and water.
  • compositions of the present invention may be prepared in a suitable lotion or cream containing the active compound suspended or dissolved in a carrier, and suitable carriers include, for example, mineral oil, sorbitan monostearate, polysorbate 60, Cetyl ester wax, cetearyl alcohol, 2-octyldodecanol, benzyl alcohol and water.
  • suitable carriers include, for example, mineral oil, sorbitan monostearate, polysorbate 60, Cetyl ester wax, cetearyl alcohol, 2-octyldodecanol, benzyl alcohol and water.
  • suitable carriers include, for example, mineral oil, sorbitan monostearate, polysorbate 60, Cetyl ester wax, cetearyl alcohol, 2-octyldodecanol, benzyl alcohol and water.
  • the pharmaceutical compositions of the invention can also be applied topically to the lower intestinal tract by rectal suppository formulation or in an enema formulation. Topical-transdermal patches are
  • compositions of the present invention may be administered by nasal aerosol or inhalation.
  • Such compositions are prepared according to techniques well known in the art of pharmaceutical formulations, and include benzyl alcohol or other suitable preservatives, absorption promoters for enhancing bioavailability, fluorocarbons, and / or other solubilizing agents known in the art or By employing a dispersant, it can be prepared as a solution in saline.
  • the levels or ranges selected for the essential or optional ingredients described in the present invention may be determined by formulating a composition for direct use or a concentrate for dilution prior to use, as well as the particular component selected, the ultimate end use of the composition, And those of ordinary skill in the art will recognize that they will rely on other factors known to those of ordinary skill in the art.
  • the dosage of any one compound or two or more compounds selected from the group consisting of the compound of Formula 1, the compound of Formula 2, and possible salts thereof is typically 100 to 10,000 mg / 60 kg (once). Body weight), 2-3 times a day, and the dose may be increased or decreased depending on the age, sex, weight, severity of the disease, health condition, etc. of the patient.
  • the dosage and frequency are many factors including age, sex, weight, severity of disease, area of disease, health condition, concentration of active ingredient, etc. of the patient to be treated.
  • the pharmaceutical composition is, for most applications, at least 10 milligrams (mg / cm 2) per square centimeter of tissue, preferably at least 50 mg / cm 2, more preferably at least 100 mg / cm 2, and most preferably It may be delivered at a dose of 200 mg / cm 2 or more.
  • Such application may be made once or several times daily (eg, 2-6 times) for one or more days, and typically, the composition is applied 1-2 times / day for 1-14 days.
  • Soak 15 g of stearic acid in a 250 mL beaker add 75 mL of purified water to a 200 mL beaker in a solution completely dissolved in a water bath at 80-85 ° C, and dissolve 0.7 g of potassium hydroxide and 10 mL of glycerin, and then at 80-85 ° C. After the heated solution was added and stirred, it was cooled to room temperature to prepare a varnish cream.
  • aloe vera gel 200.0 g was added 4.00 g of Tween # 80 and thoroughly stirred, followed by a small amount of 20.00 g of Oronia soy lecithin (vendor: Deraco Natural Source Company LTI), 2.00 g of alpha-tocopherol and 0.30 g of propyl benzoate. Stirring gently to give a pale yellow cream. At this time, the prepared composition contained 3.24% by weight as a phospholipid or sphingosine derivative.
  • the prepared composition contained 29.1% by weight as a phospholipid or sphingosine derivative.
  • composition prepared according to Examples 1 to 3 (collectively referred to as H-Z cream) was subjected to clinical trials of shingles and shingles neuralgia in the following manner.
  • H-Z cream Apply on the thickness of 3.0mm on the skin lesion and seal it with polyethylene wrap.
  • Step 2 Creating Small Bumps Following Oscillation
  • Stage 3 The minority guns are merged and converted into blisters
  • stage 4 blister filling and bursting with lymph
  • Stage 5 A scab is created and no stage
  • Pain Score The pain is recorded between 0 and 10 so that the patient can indicate their pain level.
  • Table 4 Treatment method Median (median) of time it takes for scab to form throughout skin lesion (days) Famicyclovir 500mg, three times a day, 7 days + HZ cream 2 Famicyclovir 500mg, three times a day, 7 days 5 Placebo 7
  • H-Z cream Apply it to the painful area with a thickness of about 3.0mm and seal it with polyethylene wrap.
  • Pain Score The pain is recorded between 0 and 10 so that the patient can indicate their pain level.
  • the median (median) of the time for pain relief is shown in FIG. 4.
  • HZ cream 1 HZ cream was used alone in only two clinical trials among 33 patients. In the remaining clinical trials, famciclovir (1 tablet 500 mg, 3 times a day) and HZ cream (one application at the time of admission) were used. It is applied at the same time (31 people). This clinical trial indirectly compared the effects of H-Z cream with meta-analysis on famciclovir-treated patients.
  • HZ cream significantly reduced the degree of pain relief and the duration of pain relief.
  • HZ cream when applying HZ cream, the above-mentioned subjects (over 50 years of age, initiation of antiviral treatment within 72 hours) There was no difference in the degree of alleviation and the duration of remission of the acute pain ( Figure 3 and Table 3), regardless of the age of the patient and the start of treatment (72 hours after the onset of skin lesions). It can be used to alleviate and reduce pain period.
  • antiviral agents do not provide any benefit in the treatment of shingles with regard to skin lesion improvement, pain relief, shortening of healing period and the rate of transition to shingles.
  • the key to the actual healing in shingles patients is to reduce the acute pain and shorten the healing period, to block the transition to post shingles neuralgia and to reduce the pain and the healing period of shingles rather than antiviral action.
  • the HZ cream which plays a key role in relieving pain and shingling of the shingles and shingles neuralgia and blocking the transition to shingles neuralgia, is useful through the repair of damaged nerve tissue.
  • H-Z cream was used alone.
  • Other diseases with nerve damage for example, acute inflammatory demyelinating polyneuropathy, chronic inflammatory demyelinating multiple peripheral Neuropathy, diabetic peripheral neuropathy, shingles, vasculitis neuropathy, hereditary peripheral neuropathy, stroke, brain tumor, degenerative neuropathy, painful diabetic peripheral neuropathy, trigeminal neuralgia, cerebral cortex or spinal cord
  • the pharmaceutical composition can be effectively applied to cancerous lesions, post-traumatic neuropathy, shingles neuralgia, ring pain, central pain after stroke, and neuropathy or neuropathic pain of thalamic pain.
  • the HZ cream exhibits the pain-reducing effect shown in shingles and post shingles neuralgia and the blocking effect from shingles to post shingles neuralgia due to the effective recovery of the damaged nerves in the shingles stage. It was judged that the HZ cream or the main component of the HZ cream had the effect of repairing the damaged nerve as follows.
  • mice 35 Sprague-Dawley male rats, 7 weeks old, were pre-cultured for 1 week for laboratory adaptation, and experiments were started at 8 weeks of age. They were kept indoors with a humidity of 60 ⁇ 10% and a 12-hour light-dark cycle, and were freely fed with feed for experimental animals and drinking water. Experimental animals were divided into 3 groups and 10 animals were placed in each group. The animals were divided into negative control group that caused crush injury in both sciatic nerves and no treatment, and experimental group which received H-Z cream treatment.
  • ketamine hydrochloride 15 mg / 100 g, Ketara ® , Yuhan Corp.
  • ketamine hydrochloride 15 mg / 100 g, Ketara ® , Yuhan Corp.
  • ketamine hydrochloride 15 mg / 100 g, Ketara ® , Yuhan Corp.
  • Surgery was performed as usual. After exposing the sciatic nerve and inducing crush injury for 30 seconds using forceps with a tip diameter of 1 mm at a point of 1 cm above the tibial and total tibial nerves, the muscle and skin were sutured.
  • the experimental group was treated with H-Z cream once a day for 1, 2 and 3 weeks on the skin where the crush injury occurred.
  • Injured sciatic nerve was excised before and after inducing crush injury and after 1, 2 and 3 weeks of HZ ointment treatment, and normal control did not induce crush injury. After cutting through a general tissue treatment process and observed with an optical microscope to select the site where the nerve fibers were cut perpendicular to the running direction.
  • FIG. 5 an optical micrograph of the neural tissue is shown in FIG. 5, and an electron micrograph of the neural tissue is shown in FIG. 6.
  • Nerve conduction tests were performed before, after induction of crush injury and at 1, 2 and 3 weeks after treatment with H-Z ointment using an electromyograph (Multiliner, Tonnies, Germany). Set the EMG as the stimulus frequency once per second, stimulus time 0.1 ms, frequency width 10 Hz-10 KHz, recording speed 5 ms / div, recording sensitivity 10 mV / div. The stimulus was increased several times until the amplitude of the action potential peaked.
  • the rats were fixed in the abdomen and stomach.
  • the surface active electrode was attached to the central epidermis of the gastrocnemius muscle and placed in the muscle.
  • As the stimulation electrode two subcutaneous coaxial needle electrodes were directly fixed to directly stimulate the exposed sciatic nerve.
  • the nerve conduction test was performed in both sciatic nerves and the nerve conduction velocity (m / s) was measured. The results are shown in Table 9 below.
  • a digital camera mounted on an optical microscope was used to select a representative lateral cut and to capture an image 400 times.
  • the total number of degenerated and degenerated denervable fibers was analyzed using an image analysis system. .
  • the cross section of the nerve was accurately cross-sectioned to make an Epon block for optical microscopy, which was semi-sectioned (1 ⁇ m thick). These sections were stained with toluidine blue to count the total number of myelinated nerve fibers and the number of damaged nerves observed by taking a 400-fold micrograph using Olympus BX 51. Based on this, the ratio of impaired flowing nerves per unit area was calculated and their averages were compared and evaluated, and the results are shown in Table 10 below.
  • the experimental group applied H-Z cream once a day to the skin area where the sciatic nerves of both left and right legs were distributed.
  • the injured sciatic nerve was cut after inducing general anesthesia at an appropriate time point, and the normal control group cut the sciatic nerve in the same manner without causing diabetic neuropathy and treated with general tissue.
  • the optical fiber microscope was used to select a site where nerve fibers were cut at right angles to the running direction.
  • FIG. 7 an optical micrograph of the neural tissue is shown in FIG. 7, and an electron micrograph of the neural tissue is shown in FIG. 8.
  • Neuroconduction tests were performed before and after the induction of diabetic neuropathy and after the treatment of H-Z ointment using an electromyograph (Multiliner, Tonnies, Germany) at 23-27 ° C.
  • Set the EMG as the stimulus frequency once per second, stimulus time 0.1 ms, frequency width 10 Hz-10 KHz, recording speed 5 ms / div, recording sensitivity 10 mV / div.
  • the stimulus was increased several times until the amplitude of the action potential peaked.
  • sciatic nerve examination the rats were fixed in the abdomen and stomach.
  • the surface active electrode was attached to the central epidermis of the gastrocnemius muscle and placed in the muscle.
  • As the stimulation electrode two subcutaneous coaxial needle electrodes were directly fixed to directly stimulate the exposed sciatic nerve. Nerve conduction test was performed in both sciatic nerves and the nerve conduction velocity was measured.
  • Experiment 1 HZ cream treatment for 4 weeks after diabetic induction; Diabetes peripheral neuropathy prevention effect
  • Experiment 2 no treatment for 4 weeks after induction, only 1 week after treatment with HZ cream; for treatment of diabetic peripheral neuropathy
  • Experiment 3 no treatment for 4 weeks after diabetes induction, 2 weeks thereafter
  • a digital camera mounted on an optical microscope was used to select a representative lateral cut and to capture an image 400 times.
  • the total number of degenerated and degenerated denervable fibers was analyzed using an image analysis system. .
  • the cross section of the nerve was accurately cross-sectioned to make an Epon block for optical microscopy, which was semi-sectioned (1 ⁇ m thick). These sections were stained with toluidine blue to count the total number of myelinated nerve fibers and the number of damaged nerves observed by taking a 400-fold micrograph using Olympus BX 51. Based on this, the ratio of impaired flowing nerves per unit area was calculated and their averages were compared and evaluated, and the results are shown in Table 13 below.
  • Preventive group H-Z cream group for 4 weeks after diabetes
  • MCA-O model rats were injected intravenously with Lipobin ® and the degree of cerebral infarction was observed to verify the effect of central nerve repair.
  • Lipoic starting blank ® into the tail vein of the rats before the MCAO procedure for one hour to repeated administration once a day to 14 days.
  • the experimental group was sham operation (3 primary experiments, 2 secondary experiments: 3), the negative control group (3 primary experiments, 2 secondary experiments: 2), lipobin ® 0.6 ml (3 primary experiments, 3 secondary experiments) and the Lipovin ® 1.2ml administration group (1 primary experiment: 3 animals, 2 secondary experiments: 3) and the like.
  • Weight change was measured once daily, at 4 pm, and as shown in FIG. 9, the negative control group showed statistically significant difference with the control group at 5 days and 11 days, and the low dose drug group (0.6ml). Significant differences were found at 8, 9, 10, and 11 days of the control group. In the high dose group (1.2ml), significant weight loss was observed in all doses except 1 and 2 days (One-Way ANOVA, Tukey's Multiple Comparison Test).
  • brains were extracted and stained with TTC (2,3,5-Triphenylterazolium chloride), and the cerebral infarct area of each experimental group was compared.
  • TTC 2,3,5-Triphenylterazolium chloride
  • the brains extracted with 2% TTC solution maintained at 37 ° C. in the state of blocking light were cut out vertically at intervals of 2 mm from the frontal pole using the Brain Matrix and the sections were immersed. After about 1 to 2 minutes, only the injured part of the tissue (the cerebral infarction area) remained white and the normal breakfast was dyed red. It was transferred to 4% paraformaldehyde solution and fixed, and the tissues were taken the next day using a digital camera. Cerebral infarct area was measured using the image-pro plus program and statistically analyzed using Graph-pad Prism 4.0 program.
  • Cerebral infarction area is expressed in% of the area of cerebral infarction relative to the total area of each brain tissue. As shown in Fig. 10 and 11, the therapeutic effect showed a significant tendency in the low dose (0.6ml) and high dose (1.2ml) administration group. (One-Way ANOVA, Tukey's Multiple Comparison Test.).

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Abstract

본 발명은 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물을 유효성분으로 함유하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물에 관한 것이다. 이러한 약학조성물은 대상포진에 의해 손상된 신경조직을 수복하여 대상포진에 의한 급성통증을 감소시키고 대상포진후신경통으로의 이행을 차단할 수 있고, 대상포진후신경통에서도 신경조직의 수복을 통한 근본적인 치료를 가능하게 하며, 더나아가 좌골신경 압궤 손상 등을 포함하는 신경손상, 당뇨병성 신경병증 등을 포함하는 신경병증 및 신경병증성 통증, 뇌졸중 등을 포함하는 뇌질환을 비롯한 신경조직의 손상에 의해 초래되는 다양한 질환들에서도 매우 유용하게 사용될 수 있다.

Description

신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물
본 발명은 손상된 신경조직을 빠르게 수복시킴으로써 말초신경손상 또는 중추신경손상과 같은 신경손상, 신경병증, 신경병증성 통증 또는 뇌질환과 같은 신경질환을 효과적으로 치료할 수 있는 약학조성물에 관한 것이다.
파킨슨병, 알츠하이머병, 헌팅톤병, 척수 소뇌 변성증, 근위축성 측색 경화증, 다발성 신경병증, 척수 손상, 뇌혈관 장해 등 수많은 신경질환은 가령, 환경, 유전 등의 요인에 의하여 뇌나 말초의 신경세포가 퇴화, 감소, 세포사하거나, 또는 상해를 입거나 제외됨으로써 발병한다. 따라서, 이러한 신경질환의 치료에는 신경세포의 상해에 의하여 소실된 신경 전달 물질을 보충하거나, 신경세포를 재생하는 것이 중요하다. 신경세포를 재생하는 방법으로는 미분화된 신경줄기세포나 여러 가지 세포로 분화할 수 있는 배아줄기세포 등이 있다.
손상된 신경의 신경재생에 대한 수많은 연구가 수행되어 왔다. 일반적으로, 말초신경의 외상성 손상에 대한 임상의 외과치료는 먼저 손상 국소 부위 근처의 손상된 조직을 제거하고, 말초신경의 재생을 가능하게 하는 환경을 제공하는 복잡한 연속적인 단계로 이루어진다(Kline, J Neurosurg, 1989, 70: 166-174). 외과적 과정의 역할은 일반적으로 손상된 영역의 근위부와 원위부를 직접 연결하거나, 융합하는 것을 포함한다(Kline and Judice, J Neurosurg, 1983, 58: 631-649). 신경의 자발적인 재생을 기다리는 동안 근육-신경 연합의 퇴화를 억제하는 것을 돕는 근육의 수축을 생성하기 위해 전기적 흥분을 유지하는 것과 같은 보다 신중한 외래 환자 치료뿐만 아니라(Kim et al., Korean Academy of Rehabilitation Medicine (Korean), 1999, 23: 893-8983; al-Amood et al., J Physiol (Lond), 1991, 441: 243-256), 말초신경 이식 같은 추가의 외과적 방법(Millesi, Clin Orthop, 1988, 237: 36-42)이 사용된다. 그리고, 이러한 과정의 대부분은 여전히 근육 약화와 수축을 막고, 신경의 발아를 촉진하기 위해, 장기적이고 제어된 운동 요법을 포함하는 광범위한 물리 치료법을 포함한다(Pyun et al., Korean Academy of Rehabilitation Medicine (Korean), 1999, 23: 1063-1075).
최근 성체의 뇌 해마 등에 있어서 새로운 신경세포가 생산되는 신경신생이 보고되었으며, 이를 계기로 환자의 뇌 내에 내재하는 신경줄기세포를 약제 등으로 자극하여 재생을 유도하면서 신경질환을 치료하는 방법이 검토되고 있다. 그러나, 모두 단백질 또는 단백성 인자를 뇌 내에 주입할 필요가 있고, 일반적인 의료에 응용하는 것이 곤란하기 때문에, 단백질을 대신하는 저분자 화합물로서 살비아놀산 B나 리튬 또는 그 약리학적으로 허용되는 염 등이 제안되어 있다.
한편, 말초신경의 손상은 생존 및 축색돌기 재생을 증진하는 배근 신경절(dorsal root ganglion, DRG)에 위치한 감각 뉴런의 세포체 내의 변화를 유발한다. 예를 들면 압좌손상 이후, 호전된 병태 하에서 대부분의 신경 섬유가 성공적으로 재생된다. 그러나, 많은 임상적 관련 상황에 있어서, 외상성 또는 질병-유발 신경 손상은 기능의 단지 제한된 회복 및 종종 상당한 지연과 같은 불량한 결과를 가져온다. 그러한 경우에, 신경병증성 또는 만성 통증 상태가 진행될 수 있다.
대표적인 신경병증성 통증으로는 대상포진 또는 대상포진후신경통을 들 수 있고, 이러한 신경병증성 통증은 많은 경우에 있어 통증의 정도가 일생동안 느낄 수 있는 가장 큰 통증이라는 분만 시의 통증과 비견되고 있으며, 심각한 통증을 유발하는 타 질환, 예를들면 말기 암성 통증, 통풍성 발작, 삼차신경통 등에서와는 달리 주기성이 아닌 지속적인 통증이 유발된다는 점에서 더 큰 심각성이 있다.
대상포진에 있어 현재 사용 중인 항바이러스제 예를들어, 아시클로비르, 발라시클로비르, 팜시클로비르, 펜시클로비르의 경우 처방가이드라인에 나와 있듯이 대상포진의 최초발진 후 72시간내 적용시에만 어느 정도 치료효과를 기대할 수 있으나, 많은 환자의 경우 72시간이 경과한 후 병원에 방문함으로써 그 유용성이 반감된다.
더욱이 대상포진 및 대상포진후신경통에 있어 신경통을 줄여주기 위한 대증요법제 예를들어, 아세트아미노펜, 피록시캄과 같은 비스테로이드성 소염진통제, 모르핀, 옥시코돈, 펜타닐, 코데인과 같은 마약성진통제, 가바펜틴, 프레가발린, 발프로에이트와 같은 항전간제, 노르트립틸린, 데시프라민, 아미트립틸린과 같은 항우울제, 프레드니솔론과 같은 부신피질호르몬제 또는 리도카인과 같은 국소마취제가 사용되고 있으나 효과적이지 못한 경우가 많으며, 통증이 심하거나 지속기간이 길어지는 경우에 있어 신경차단술을 적극적으로 시행하는 추세이다.
현재 대상포진 치료에 사용되는 항바이러스제와 소염진통제 위주의 처방은 대상포진 및 대상포진후신경통의 병인적 요인인 신경조직 손상의 수복 기능에 실제로 역할을 하지 못함으로써 효과적인 통증 조절이 불가능하다.
또한, 대상포진과 대상포진후신경통의 경우에서처럼 신경조직의 손상이 동반되는 질환인 급성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 만성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 당뇨병성 말초신경병증, 혈관염신경병증, 유전성 말초신경병증, 뇌졸중, 뇌종양, 퇴행성 신경질환, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차 신경통, 대뇌 피질이나 척수시상로를 따라 발생하는 암성 병변, 외상 후 신경병증, 환지통, 뇌졸중 후의 중추성 통증 또는 시상통 등과 같은 신경병증 또는 신경병증성 통증이나, 뇌졸중, 뇌종양, 치매, 파킨슨병, 알츠하이머병, 헌틴톤병, 간질, 중풍 또는 허혈성 뇌질환 등과 같은 뇌질환을 직접적으로 예방 또는 치료할 수 있는 치료제의 개발도 절실한 실정이다.
따라서, 신경조직손상을 신속히 수복하여 신경손상 또는 신경질환을 효과적으로 치료할 수 있는 약물의 개발이 절실하다.
본 발명은 화학식 1 또는 화학식 2의 화합물이 손상된 신경을 수복하여 말초신경손상 또는 중추신경손상과 같은 신경손상, 신경병증, 신경병증성 통증 또는 뇌질환과 같은 신경질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다는 점에 착안하여, 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물을 개발하고자 하는 데에 그 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물을 유효성분으로 함유하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2010002879-appb-I000001
상기 화학식 1에서, X는 OH, SH 또는 O-이고, R1, R2, R3는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, -C(=O)R4, -(CH2)nOH, -(CH2)nNR5R6, -(CH2)nN+R7R8R9, -CH2CH(COOH)NH2, -CH2CH(COO-)NH2, -CH2CH(COOH)NH3 +, 이노시톨, 오탄당, 육탄당, 글리세롤, 포스파티딜글리세롤 또는 H이며, n은 1 내지 10의 정수이고, R4, R5, R6, R7, R8, R9는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, 또는 H이며,
[화학식 2]
Figure PCTKR2010002879-appb-I000002
상기 화학식 2에서, R1, R2, R3, R4, R5는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, -C(=O)R6, 포스포콜린, 인산, 오탄당, 육탄당 또는 그들 당의 유도체, 아미노당류, 알콕시 인산 또는 H이며 R6은 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐이다.
상기 신경손상 및 신경질환은 말초신경손상, 중추신경손상, 신경병증, 신경병증성 통증 또는 뇌질환 중에서 선택된 어느 질환일 수 있다.
또한, 본 발명의 약학조성물은 추가로 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지 중에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학조성물은 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물 0.1 내지 99.9 중량% 및 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지 중에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물 0.1 내지 99.9 중량%를 포함할 수 있다.
본 발명의 약학조성물의 유효성분인 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물은 손상된 신경조직을 빠르게 수복시킴으로써 말초신경손상 또는 중추신경손상과 같은 신경손상, 신경병증, 신경병증성 통증 또는 뇌질환과 같은 신경질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
도 1은 대상포진 바이러스의 버딩(budding)에 의해 손상된 신경부위에 본 발명의 조성물에 함유된 인지질 또는 스핑고신 유도체가 충진됨으로써 손상 신경 부위가 수복되는 모식도를 나타낸 것이고,
도 2는 피부병변 전체에 걸쳐 딱지가 생성되는데 걸리는 시간의 메디안(중위수)을 나타낸 것이고,
도 3은 대상포진에 따른 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수)을 나타낸 것이고,
도 4는 대상포진후신경통에 따른 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수)을 나타낸 것이고,
도 5 및 도 6은 각각 좌골신경 압궤 손상 모델에서 본 발명의 조성물에 함유된 인지질 또는 스핑고신 유도체 처치에 따른 신경조직의 광학현미경 및 전자현미경 사진을 나타낸 것이고(a: 정상대조군, b: 1주 대조군, c: 1주 처치군, d: 2주 대조군, e: 2주 처치군, f: 3주 대조군, g: 3주 처치군),
도 7 및 도 8은 각각 당뇨병성 신경병증 모델에서 본 발명의 조성물에 함유된 인지질 또는 스핑고신 유도체 처치에 따른 신경조직의 광학현미경 및 전자현미경 사진을 나타낸 것이고(a: 정상대조군, b: 당뇨유발 후 4주 무처치군, c: 당뇨유발 후 4주 H-Z 크림 처치군, d: 당뇨유발 후 5주 무처치군, e: 당뇨유발 후 4주 무처치 후 1주 H-Z 크림 처치군, f: 당뇨유발 후 6주 무처치군, g: 당뇨유발 후 4주 무처치 후 2주 H-Z 크림 처치군),
도 9는 뇌졸중 모델에서 본 발명의 조성물에 함유된 인지질 또는 스핑고신 유도체 처치에 따른 체중변화를 나타낸 것이고,
도 10 및 도 11은 각각 뇌졸중 모델에서 본 발명의 조성물에 함유된 인지질 또는 스핑고신 유도체 처치에 따른 뇌조직에 대한 TTC 염색 사진 및 뇌경색 면적을 나타낸 것이다.
본 발명은 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물을 유효성분으로 함유하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2010002879-appb-I000003
상기 화학식 1에서, X는 OH, SH 또는 O-이고, R1, R2, R3는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, -C(=O)R4, -(CH2)nOH, -(CH2)nNR5R6, -(CH2)nN+R7R8R9, -CH2CH(COOH)NH2, -CH2CH(COO-)NH2, -CH2CH(COOH)NH3 +, 이노시톨, 오탄당, 육탄당, 글리세롤, 포스파티딜글리세롤 또는 H이며, n은 1 내지 10의 정수이고, R4, R5, R6, R7, R8, R9는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, 또는 H이며,
[화학식 2]
Figure PCTKR2010002879-appb-I000004
상기 화학식 2에서, R1, R2, R3, R4, R5는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, -C(=O)R6, 포스포콜린, 인산, 오탄당, 육탄당 또는 그들 당의 유도체, 아미노당류, 알콕시 인산 또는 H이며 R6은 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐이다.
상기 화합물은 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜세린, 포스파티딜이노시톨, 포스파티드산, 스핑고포스포리피드, 스핑고마이엘린, 플라스말로겐, 스핑고플라스말로겐, 포스파티딜글리세롤, 카르디오리핀, 세레브로사이드, 세라마이드, 이들의 리소(lyso-)형 물질 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 것이 바람직하다.
상기 신경손상 및 신경질환은 말초신경손상, 중추신경손상, 신경병증, 신경병증성 통증 또는 뇌질환 중에서 선택된 어느 질환일 수 있다.
상기 신경병증 또는 신경병증성 통증은 급성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 만성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 당뇨병성 말초신경병증, 대상포진, 혈관염신경병증, 유전성 말초신경병증, 척수 소뇌 변성증, 근위축성 측색경화증, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차 신경통, 대뇌 피질이나 척수시상로를 따라 발생하는 암성 병변, 외상 후 신경병증, 대상포진후신경통, 환지통, 뇌졸중 후의 중추성 통증 및 시상통으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
또한, 상기 신경병증 또는 신경병증성 통증은 바람직하게는 당뇨병성 말초신경병증, 대상포진, 혈관염신경병증, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차신경통, 외상 후 신경병증, 대상포진후신경통 및 환지통으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 보다 바람직하게는 당뇨병성 말초신경병증, 대상포진, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차신경통, 외상 후 신경병증 및 대상포진후신경통으로 이루어진 군에서 선택될 수 있고, 가장 바람직하게는 대상포진 또는 대상포진후신경통에서 선택될 수 있다.
또한, 상기 뇌질환은 뇌졸중, 뇌종양, 치매, 파킨슨병, 알츠하이머병, 헌틴톤병, 간질 또는 허혈성 뇌질환에서 선택될 수 있다.
또한, 상기 말초신경손상 또는 중추신경손상은 신경단열증 및 외상성 신경손상으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학조성물은 추가로 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지 중에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지로는 알로에 겔; 다시마 추출물, 우뭇가사리 추출물 및 후코이단으로 이루어진 군에서 선택된 해조류 추출물; 이들과 유사한 기능을 하는 식물성 또는 합성 수지; 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
본 발명의 약학조성물은 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물 0.1 내지 99.9 중량% 및 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지 중에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물 0.1 내지 99.9 중량%를 포함할 수 있다.
본 발명의 약학조성물은 약학조성물의 제조에 통상적으로 사용할 수 있는 적절한 담체, 보조제 또는 비히클을 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용가능한 담체, 보조제 또는 비히클로는, 이온교환체, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 인간 혈청 알부민과 같은 혈청 단백질, 포스페이트와 같은 완충 물질, 글리신, 소르브산, 포타슘 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분적 글리세라이드 혼합물, 물, 프로타민 설페이트, 디소듐 하이드로겐 포스페이트, 포타슘 하이드로겐 포스페이트, 소듐 클로라이드, 아연 염과 같은 염 또는 전해질, 콜로이달 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로오스계 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체(polyethylene-polyoxypropylene-block polymers), 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지(wool fat) 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를들어 경구적으로, 비경구적으로, 주사에 의해, 바늘없는 장치(needle-free device)에 의해, 흡입 스프레이에 의해, 국소적으로, 직장으로, 코로, 볼로(buccally), 질로(vaginally) 또는 이식된 저장소(implanted reservoir)를 통해 투여될 수 있다. 경구 투여 또는 주사에 의한 투여 또는 바늘없는 장치에 의한 투여 또는 경피 투여가 바람직하다. 본 명세서에 사용된 "비경구"라는 용어는 경피(transdermal) 투여 및 피하(subcutaneous), 피부내(intracutaneous), 정맥내(intravenous), 근육내(intramuscular), 관절내(intra-articular), 활액막내(intrasynovial), 흉골내(intrasternal), 척수강내(intrathecal), 병변내(intralesional) 및 두개강내(intracranial) 주사 또는 주입 기술(infusion techniques)을 포함한다.
약학조성물이 주사에 의해 또는 바늘없는 장치에 의해 투여되는 경우, 무균 주사할 수 있는 제제의 형태 또는 바늘없는 장치에 의한 전달에 적절한 형태일 수 있으며, 이는 수용성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이와 같은 현탁액은 적절한 분산제 또는 습윤제와 현탁제를 이용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제제화될 수 있다. 무균 주사할 수 있는 제제 또는 바늘없는 장치에 의한 전달에 적절한 형태는 또한 무독성인 비경구적으로 허용가능한 희석액 또는 용매에서의 용액 또는 현탁액, 예를 들면, 1,3-부탄디올에서의 용액일 수 있다.
사용가능한 비히클 및 용매로는 만니톨, 물, 링거 용액 및 등장성 소듐 클로라이드 용액이 있다. 게다가, 무균의 고정유가 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로 채용될 수 있다. 이와 같은 목적을 위하여, 합성 모노- 또는 디글리세라이드를 포함하는 임의의 자극성이 적은 고정유가 채용될 수 있다. 올레인산 및 이의 글리세라이드 유도체와 같은 지방산은 올리브유 또는 피마자유, 특히 이들의 폴리옥시에틸레이트화 형태(their polyoxyethylated versions)와 같은 천연 약학적으로 허용가능한 오일인 주사제 제조에 있어서 유용하다.
본 발명의 약학조성물은 이에 제한되지 않으나, 캡슐(capsules), 정제(tablets), 및 수용성 현탁액 및 용액을 포함하는 임의의 경구적으로 허용가능한 제형으로 경구 투여될 수 있다. 경구 투여를 위한 정제의 경우에, 일반적으로 이용되는 담체는 락토오스 및 옥수수 전분을 포함한다. 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제가 또한 전형적으로 첨가될 수 있다. 캡슐 형태의 경구 투여를 위해, 유용한 희석액은 락토오스 및 건조 옥수수 전분을 포함한다. 수용성 현탁액이 경구 투여되는 경우, 활성 성분은 유화제 및 현탁제와 조합된다. 원하는 경우, 감미제 및/또는 착향제 및/또는 착색제가 첨가될 수 있다.
본 발명의 약학조성물은 국소적으로 투여될 수 있고, 이러한 국소 투여는 원하는 치료가 국소 적용에 의해 쉽게 접근할 수 있는 부위 및 기관에 관련된 경우에 특히 유용하다. 피부에의 국소 적용을 위해서는, 약학조성물이 담체 내에 현탁 또는 용해된 활성 성분을 함유하는 적절한 연고로 제제화되어야 한다. 본 발명의 화합물의 국소 투여를 위한 담체로는 미네랄 오일, 액체 석유, 백색 석유, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 약학조성물은 담체 내에 현탁 또는 용해된 활성 화합물을 포함하는 적절한 로션 또는 크림으로 제조될 수 있으며, 적절한 담체는 예를 들면, 미네랄 오일, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알코올 및 물을 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물은 또한 직장 좌약 포뮬레이션에 의해 또는 관장 포뮬레이션으로 하부 장관(lower intestinal tract)에 국소적으로 적용될 수 있다. 국소적-경피성 패취가 또한 본 발명에 포함된다.
본 발명의 약학조성물은 코 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 이와 같은 조성물은 약학적 포뮬레이션의 분야에서 널리 공지된 기술에 따라 제조되며, 벤질 알코올 또는 다른 적합한 보존제, 생체이용율을 높이기 위한 흡수 촉진제, 플루오로카본, 및/또는 당업계에 공지된 다른 용해제 또는 분산제를 채용하여, 식염수 내의 용액으로 제조될 수 있다.
본 발명에서 설명된 필수적인 또는 임의적인 성분들에 대해 선택된 수준 또는 범위는 직접 사용하기 위한 조성물 또는 사용 전에 희석하기 위한 농축물을 제형화하는지 여부, 뿐만 아니라 선택된 특정 성분, 조성물의 궁극적인 최종용도, 및 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 공지된 다른 인자들에 의존할 것임을 당업계의 통상의 지식을 가진 자는 알 수 있을 것이다.
본 발명의 약학조성물에 있어서, 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물의 투여용량은 통상적으로 1회 100 내지 10,000 mg/60kg(체중) 정도, 1일 2-3회 투여하는 것이 바람직하며, 이러한 투여용량은 환자의 연령, 성별, 체중, 질환의 중증도, 건강상태 등에 따라 증감될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학조성물을 국소도포할 경우 투여량 및 빈도수는 치료하고자 하는 환자의 연령, 성별, 체중, 질환의 중증도, 질환부위 면적, 건강상태, 활성성분의 농도 등을 포함하는 많은 인자들에 의존하여 변할 수 있다. 전형적으로, 약학조성물은 대부분의 용도의 경우, 조직 1 평방 센티미터 당 10 밀리그램(㎎/㎠) 이상, 바람직하게는 50 ㎎/㎠ 이상, 보다 바람직하게는 100 ㎎/㎠ 이상, 및 가장 바람직하게는 200 ㎎/㎠ 이상의 투여량으로 전달될 수 있다. 이러한 도포는 1일 이상 동안 매일 1회 또는 수회(예를 들면, 2-6회) 이루어질 수 있고, 전형적으로, 조성물은 1-14일 동안 1 내지 2회/일 도포된다.
본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 하기에 제시한다. 그러나 이러한 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 본 발명이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> H-Z 크림 제조
스테아린산 15 g 을 250 mL 비이커에 담근 후, 80-85 ℃의 수욕상에서 완전히 녹인 용액에, 별도로 200 mL 비이커에 정제수 75 mL를 취한 후 수산화칼륨 0.7 g 과 글리세린 10 mL를 녹인 다음 80-85 ℃로 가열한 용액을 가하여 교반한 후, 상온까지 식혀 바니싱 크림을 제조하였다.
알로에 베라 겔 229.0 g에 상기 제조된 바니싱 크림 100.7 g을 넣고 충분히 교반한 후, 인지질 또는 스핑고신 유도체인 오로니아 대두 레시틴(공급업체: 데라코 내츄럴 소오스 컴퍼니 엘티디) 16.03 g, 알파-토코페롤 1.60 g 및 프로필 벤조에이트 0.50 g을 소량씩 부가하면서 교반하여 미황색의 크림을 제조하였다. 이때, 제조된 조성물은 인지질 또는 스핑고신 유도체로서 1.7 중량%를 함유하였다.
<실시예 2> H-Z 크림 제조
알로에 베라 겔 200.0 g에 트윈 #80 4.00 g을 넣고 충분히 교반한 후, 오로니아 대두 레시틴(공급업체: 데라코 내츄럴 소오스 컴퍼니 엘티디) 20.00 g, 알파-토코페롤 2.00 g 및 프로필 벤조에이트 0.30 g을 소량씩 부가하면서 교반하여 미황색의 크림을 제조하였다. 이때, 제조된 조성물은 인지질 또는 스핑고신 유도체로서 3.24 중량%를 함유하였다.
<실시예 3> H-Z 크림 제조
알로에 베라 겔 127.0 g에 트윈 #80 14.00 g을 넣고 충분히 교반한 후, 인지질 또는 스핑고신 유도체인 지엘-90이(GL-90E, 공급업체: 고센바이오텍) 70.00 g, 알파-토코페롤 7.00 g 및 프로필 벤조에이트 0.30 g을 소량씩 부가하면서 교반하여 미황색의 크림을 제조하였다. 이때, 제조된 조성물은 인지질 또는 스핑고신 유도체로서 29.1 중량%를 함유하였다.
<실험예 1> 대상포진 및 대상포진후신경통의 임상실험분석
실시예 1 내지 실시예 3에 따라 제조된 조성물(H-Z 크림이라 통칭함)을 하기와 같은 방법으로 대상포진 및 대상포진후신경통의 임상실험을 실시하였다.
1. 시행병원명 : ○○병원
2. 시행의사 : ○○과장 ○○○
3. 시행기간 : 2008. 10. 28 ~ 2009. 03. 15
4. 대상질환별 환자수
1) 대상포진: 33명
2) 대상포진후신경통: 8명
5. 나이분포(표 1)
표 1
나 이 환자수 (명)
30∼39세 3
40∼49세 6
50∼59세 14
60∼69세 10
70∼79세 4
80세 이상 4
6. 대상포진 환자 분석
1) 내원시점
① 발진후 72시간 이내: 11명
② 발진후 72시간 이후: 22명 (3일후: 14명, 4일후: 5명, 7일후: 3명)
2) 치료방법
① 팜시클로비르 500 mg(하루 세 번, 7 일간) + H-Z 크림 도포(내원일에 한해 1일1회)
② H-Z 크림 도포(내원일에 한해 1일 1회) 단독 - 김종숙(46), 임정부(67)
③ H-Z 크림 도포방법: 피부병변이 나타난 부위에 3.0mm 정도의 두께로 바른 후 폴리에틸렌 랩(wrap)으로 밀봉
3) 시간에 따른 피부병변 진행단계 (1~6단계)
대상포진 진행단계는 다음과 같이 분류하였고, 그 결과는 표 2와 같다.
(1) 1단계: 피부병변 없으나 통증은 있을 수 있음.
(2) 2단계: 발진에 이은 소수포(small bumps) 생성단계
(3) 3단계: 소수포가 합쳐져 수포(blisters)로 전환되는 단계
(4) 4단계: 수포가 림프액으로 채워지고 터지는 단계
(5) 5단계: 딱지가 생성되고 아무는 단계
(6) 6단계: 피부병변은 거의 사라지고 대상포진후신경통으로 진행되는 단계
표 2
Figure PCTKR2010002879-appb-T000001
Ⅰ내원당일을 “0일”로 해서 1일, 2일, ...로 표시
Ⅱ대상포진의 피부병변의 진행단계를 1~6단계로 분류하여 표시함
Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ소수포단계에서 딱지가 생기는 단계로 이행되지 않고 수포가 가라앉아 소멸되는 경우에 해당
Ⅵ내원하지 않은 날 표시 ‘-’로 함
ⅤII발진 72시간 내 치료 개시
또한, 피부병변 전체에 걸쳐 딱지가 생성되는데 걸리는 시간의 메디안(중위수)을 도 2에 나타내었다.
4) 시간에 따른 급성통증의 강도변화Ⅰ (0~10점)
시간에 따른 급성통증의 강도변화 (0~10점)를 하기 표 3에 나타내었다.
표 3
Figure PCTKR2010002879-appb-T000002
Ⅰ통증해소시점을 통증지수 “2점 이하”일 때로 하고, 3점 이후 내원하지 않은 경우 최종내원일 3일째(*표시일) 통증지수를 2점으로 가정해 아래 <통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수)>를 표시함.
Ⅱ내원당일을 “0일”로해서 1일, 2일, ...로 표시
Ⅲ통증점수: 통증을 0~10점 사이에서 환자가 자신의 통증정도를 표시토록 하여 기록함
Ⅳ내원하지 않은 날 표시 ‘-’로 함
Ⅴ발진 72시간 내 치료 개시
또한, 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수)을 도 3에 나타내었다.
5) 대상포진치료의 메타분석자료와의 비교
-비교자료출처: Can Fam Physicion[Vol. 54, No. 3, March 2008, pp.373-377]
<<Treatment of herpes zoster>> Wim Opstelten, MD PhD, Just Eekhof, MD PhD, Arie Knuistingh Neven, MD PhD and Theo Verheij, MD PhD
대상포진에서 피부병변 전체에 걸쳐 딱지가 생성되는데 걸리는 시간의 메디안(중위수) 비교는 표 4와 같다.
표 4
치료방법 피부병변 전체에 걸쳐 딱지가 생성되는데 걸리는 시간의 메디안(중위수) (일)
팜시클로비르 500mg, 하루 세 번, 7일 + H-Z 크림도포 2
팜시클로비르 500mg, 하루 세 번, 7일 5
플라세보 7
대상포진에 있어 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수) 비교는 표 5와 같다.
표 5
치료방법 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수) (일)
팜시클로비르 500mg, 하루 세 번, 7일 + H-Z 크림도포 3.2
팜시클로비르 500mg, 하루 세 번, 7일 20
플라세보 30
6) 대상포진후신경통으로의 이행
일반적으로 대상포진환자의 20%가 대상포진후신경통으로 이행되나, 실시예에서 제조한 H-Z 크림을 함께 사용한 총 33명의 환자에서는 대상포진후신경통으로의 이행 환자가 없었다.
7. 대상포진후신경통 환자 분석
1) 대상환자의 내원시점(표 6)
표 6
Figure PCTKR2010002879-appb-T000003
2) 치료방법
① H-Z 크림(실시예 2 사용) 도포(내원일에 한해 1일 1회)
② H-Z 크림 도포방법: 통증이 있는 부위에 3.0mm 정도의 두께로 바른 후 폴리에틸렌 랩(wrap)으로 밀봉
3) 시간에 따른 통증의 강도변화Ⅰ (0~10점)(표 7)
표 7
Figure PCTKR2010002879-appb-T000004
Ⅰ통증해소시점을 통증지수 “2점이하”일 때로 하고, 3점이후 내원하지 않은 경우 최종내원일 3일째(*표시일) 통증지수를 2점으로 가정해 아래 <통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수)>를 표시함.
Ⅱ내원당일을 “0일”로해서 1일, 2일, ...로 표시
Ⅲ통증점수: 통증을 0~10점 사이에서 환자가 자신의 통증정도를 표시토록 하여 기록함
Ⅳ내원하지 않은 날 표시 ‘-’로 함
통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수)을 도 4에 도시하였다.
4) 대상포진후신경통치료의 메타분석자료와의 비교
-비교자료출처: Can Fam Physicion[Vol. 54, No. 3, March 2008, pp.373-377]
<<Treatment of herpes zoster>> Wim Opstelten, MD PhD, Just Eekhof, MD PhD, Arie Knuistingh Neven, MD PhD and Theo Verheij, MD PhD
① 대상포진후신경통에 있어 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수) 비교(표 8)
표 8
치료방법 통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수) (일)
H-Z 크림 도포 5
팜시클로비르 500mg, 하루 세 번, 7일 63
플라세보 119
8. 결과 및 분석
1) 대상포진 치료 결과 및 분석
① 전체 33명의 환자 중 2명의 임상실험에서만 H-Z 크림을 단독으로 사용하였고, 나머지 임상실험에서는 팜시클로비르 (1회 1정 500 mg, 1일 3회)와 H-Z 크림(내원시 1회 도포)을 동시에 적용한 경우(31 명)이다. 본 임상실험은 팜시클로비르를 적용한 환자에 대해 H-Z 크림의 효과를 메타분석자료와 간접적으로 비교한 것이다.
② 대상포진에서의 피부병변의 개선효과(피부병변 전체에 걸쳐 딱지가 생성되는데 걸리는 시간의 메디안(중위수))를 비교한 결과 ‘플라세보’, ‘팜시클로비르 단독’과 ‘팜시클로비르 + H-Z 크림’을 비교한 결과 각각‘7일’,‘5일’과 ‘2일’로 나타났다. (표 2, 표 4 및 도 2) 그러나 메타분석에서의 대상 환자가 피부병변 발현 후 72시간 이내 치료를 시작한 경우만을 대상으로 한 점을 감안한다면 피부병변 개선 일수의 단축(3일)에 큰 의미를 두는 것은 무리가 있는 것으로 생각된다.(표 4)
③ 대상포진에서의 급성통증의 개선효과(통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수))를 비교한 결과 ‘플라세보’, ‘팜시클로비르 단독’과 ‘팜시클로비르 + H-Z 크림’을 비교한 결과 각각 ‘30일’, ‘20일’과 ‘3.2일’로 나타났다.(표 3, 표 5 및 도 3) 이 결과는 앞에서 언급한대로 메타분석에서 통계 대상을 피부병변 발현 후 72시간 이내 치료를 시작한 경우만으로 한정한 것을 감안하더라도 그 차이가 커 충분히 유의성이 있는 것으로 보이며, H-Z 크림이 대상포진의 급성통증을 개선하는데 효과가 있음을 뒷받침해 준다.
④ 일반적으로 50세를 기준으로 그 이상의 연령에서 대상포진 발병율과 피부병변 및 통증 그리고 대상포진후신경통으로의 이행율이 급속히 증가하며, 피부병변 발현 후 72시간 이내에 항바이러스제의 투약 여부에 따라 대상포진후신경통 치료 기간이 크게 좌우된다. 따라서 통증 해소 효과를 50세 이상 군, 피부병변 발현 후 72시간 내 치료 개시 군과 전체 군으로 나누어 분석하였다.(도 3)
H-Z 크림의 효과를 메타분석자료와 비교시 통증 해소 정도 및 통증 해소 기간을 크게 줄여 주었으나, H-Z 크림을 적용한 경우는 위에서 언급한 대상 군(50세 이상 군, 72시간 이내 항바이러스 치료 개시 군과 전체 군)에 관계없이 급성통증 경감 정도 및 해소 기간에 차이가 없었다.(도 3 및 표 3) 이는 환자의 연령 및 치료 개시 시작 시점(피부병변 발현 후 72시간)에 관계없이 H-Z 크림이 통증 해소와 통증 해소 기간의 경감에 사용될 수 있음을 의미한다.
⑤ H-Z 크림의 효과에 대하여 피부병변의 개선효과를 50세 이상 군, 피부병변 발현 후 72시간 내 치료 개시 군과 전체 군으로 나누어 분석하였으나 차이가 없었다. 따라서 항바이러스제의 투약 여부와 환자의 연령 및 치료 개시 시작 시점(피부병변 발현 후 72시간)은 피부병변 개선에 크게 영향이 없는 것으로 사료된다.
⑥ 일반적으로 대상포진에서 대상포진후신경통으로의 이행율이 20%이므로, 33명의 대상포진환자를 대상으로 한 경우에 산술적으로는 6.6명이 대상포진후신경통 환자로 이행이 되어야 하지만 H-Z 크림 적용한 본 임상에서는 단 한 명의 대상포진환자도 대상포진후신경통으로 이행하지 않았으며, 모든 환자가 치료 시작 9 일 안에 완치가 되었다. 이는 대상포진 바이러스에 의해 손상된 신경조직을 수복하는 H-Z 크림의 효과를 입증하는 것으로 보여 진다. 현재 항바이러스제를 포함하여 대상포진후신경통으로의 이행율을 낮추는 약물과 방법이 전무하다는 점에서 H-Z 크림 개발이 중요하다고 할 수 있다.
⑦ 보고된 바에 의하면 항바이러스제는 대상포진 치료에 있어 피부병변 개선, 통증 경감 작용, 치유기간 단축 및 대상포진후신경통으로의 이행율과 관련하여서는 어떠한 잇점도 제공하지 못한다. 단지, 피부병변 발현 72시간 이내에 항바이러스제를 복용한 50세 이상의 대상포진 환자에서 대상포진후신경통의 치료기간 단축이라는 장점을 발견할 수 있을 뿐이다(Famciclovir for the Treatment of Acute Herpes Zoster: Effects on Acute Disease and Postherpetic Neuralgia, A Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial. Stephen Tyring, MD, PhD; Rick A. Barbarash, PharmD; James E. Nahlik, MD; Anthony Cunningham, MBBS, MD; John Marley, MD; Madalene Heng, MD; Terry Jones, MD; Ted Rea, MD; Ron Boon, BSc(Hons), CBio, MIBiol; Robin Saltzman, MD; the Collaborative Famciclovir Herpes Zoster Study Group. Annals of Internal Medicine, 1995, 123(2), pp. 89-104). 즉, 대상포진 환자에서의 실질적인 치유의 핵심은 항바이러스 작용보다는 급성통증의 경감과 치유기간 단축, 대상포진후신경통으로의 이행 차단 그리고 대상포진후신경통의 통증경감과 그 치유기간 단축에 있다. 이러한 측면에서 손상된 신경조직의 수복을 통해 대상포진 및 대상포진후신경통의 통증 경감과 치유기간 단축 및 대상포진후신경통으로의 이행 차단을 하는 핵심적인 치유 작용을 하는 H-Z 크림이 유용하다고 할 것이다.
2) 대상포진후신경통 치료 결과 및 분석
① 전체 8명 환자의 임상실험에서는 모두 H-Z 크림을 단독으로 사용하였다.
② 메타분석에서의 대상 환자가 대상포진 발현 72시간 이내 팜시클로비르를 투여한 경우에 있어 대상포진후신경통으로 이행된 경우에 한해 임상 실험한 결과인 반면, 본 임상실험에서는 모든 경우 대상포진의 치료가 본 병원에서 처음부터 이루어지지 않아 그 치료내역을 알 수 없는 경우였음을 밝혀 둔다.
③ 대상포진후신경통에서의 신경통의 개선효과(통증 해소에 걸리는 시간의 메디안(중위수), 도 4)를 비교한 결과 ‘플라세보(대상포진 치료단계에서 팜시클로비르를 투여 않음)’, ‘팜시클로비르(대상포진 치료단계에서의 투약) 단독’과 ‘H-Z 크림’을 비교한 결과 각각 ‘119일’, ‘63일’과 ‘5일’로 나타났다(표 8). 이 결과 역시 메타분석에서의 결과와 비교조건에 있어 차이를 감안한다 하더라도 그 차이가 커 유의성이 있는 것으로 보이며, 특히, 대상포진후신경통의 치유기간을 줄이기 위해 대상포진 단계에서 현재 사용되고 있는 항바이러스제의 투약(피부병변 발현 72시간 이내)의 경우와 비교를 하더라도 H-Z 크림이 대상포진후신경통 치유기간을 경감하는데 있어 더욱 효과가 있음을 보여준다.
3) 결과
대상포진과 대상포진후신경통 환자를 대상으로 한 임상결과에서 가장 주목해야 할 사항은 대상포진에서 대상포진후신경통으로의 이행이 없었다는 점이다. 이는 대상포진 단계에서 생긴 신경조직의 손상이 H-Z 크림의 적용으로 신경조직이 수복되었음을 의미하는 것으로 신경손상을 동반한 타 질환 예를 들면, 급성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 만성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 당뇨병성 말초신경병증, 대상포진, 혈관염신경병증, 유전성 말초신경병증, 뇌졸중, 뇌종양, 퇴행성 신경질환, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차 신경통, 대뇌 피질이나 척수시상로를 따라 발생하는 암성 병변, 외상 후 신경병증, 대상포진후신경통, 환지통, 뇌졸중 후의 중추성 통증 및 시상통의 신경병증 또는 신경병증성 통증에서도 본 약학조성물이 효과적으로 적용될 수 있음을 의미한다.
한편, 상기 H-Z 크림이 대상포진 및 대상포진후신경통에서 나타낸 통증 경감 효과와 대상포진에서 대상포진후신경통 단계로의 차단 효과를 나타내는 것이 대상포진 단계에서 손상된 신경을 H-Z크림이 효과적으로 수복시키는 것에 기인하는 것이라 판단하여 H-Z 크림 또는 H-Z 크림의 주성분이 손상된 신경을 수복시키는 효과를 가지는지 여부를 다음과 같이 검토하였다.
<실험예 2> 좌골신경 압궤 손상 모델에서 H-Z 크림의 신경수복 유효성 검증
실시예 2에서 제조된 H-Z 크림의 말초 신경수복 유효성을 검증하기 위해 좌골신경 압궤 손상 모델에 H-Z 크림을 도포하여 치료한 후 형태학적 평가 및 신경전도도를 측정하여 말초 신경 수복 유효성을 검증하였다.
즉, 7주령의 Sprague-Dawley 수컷 흰쥐 35마리를 분양받아 실험실 환경적응을 위해 1주간 예비 사육한 후 8주령에 실험을 시작하였으며 예비 사육 및 실험 전체 기간 동안 사육환경은 온도 23±2℃, 상대습도 60±10%를 유지하고 12시간의 명암 주기가 유지되는 실내에서 사육하였으며, 실험동물용 사료와 식수를 자유로이 공급하였다. 실험동물은 3군으로 분류하여 각 군마다 10마리씩 배치를 하였으며, 양측 좌골신경에 압궤손상을 유발하고 무처치를 실시한 음성대조군, H-Z 크림 치료를 실시한 실험군으로 구분하였다.
1. 좌골신경의 압궤손상
케타민 염산염(15 mg/100 g, 케타라®, 유한양행)을 복강내 주사하여 전신마취를 유발한 후 양측 대퇴부의 털을 제거한 뒤, 10% 베타딘 용액으로 수술부위를 소독한 다음 무균 조작 하에 통상적인 방법으로 수술을 시행하였다. 좌골신경을 노출시키고 경골 신경과 총비골 신경의 분지점에서 1 cm 위쪽에서 팁의 직경이 1 mm인 겸자(forceps)를 이용하여 30초간 압궤손상을 유발한 후 근육과 피부를 봉합하였다.
2. H-Z 크림 치료
실험군은 압궤손상을 유발한 부위의 피부에 H-Z 크림을 하루 1번씩 1, 2 및 3주간 도포 치료를 실시하였다.
3. 광학현미경 및 투과전자현미경 검사
좌골신경에 압궤손상 유발 전과 후 그리고 H-Z 연고 치료 후 1, 2 및 3주에 전신마취를 유발한 후 손상된 좌골신경을 절취하였으며, 정상 대조군은 압궤손상을 유발하지 않은 상태에서 동일한 방법으로 양측 좌골신경을 절취하여 일반적인 조직처리 과정을 거친 후 광학현미경으로 관찰하여 신경섬유가 주행방향에 직각으로 절단된 부위를 선택하였다.
또, 가장 대표적인 신경 횡단면만을 골라 전자현미경을 이용하여 관찰하였다.
그 결과, 신경조직의 광학현미경 사진은 도 5와 같고, 신경조직의 전자현미경 사진은 도 6과 같다.
4. 전기생리학적 검사
압궤손상 유발 전과 후 그리고 H-Z 연고 치료 후 1, 2 및 3주에 근전도기(Multiliner, Tonnies사, Germany)를 사용하여 검사실 온도를 섭씨 23-27℃로 유지하면서 신경전도검사를 시행하였다. 근전도기의 설정은 자극의 빈도는 초당 1회, 자극시간 0.1 ms, 주파수폭 10 Hz-10 KHz, 기록소인속도 5 ms/div, 기록감응도 10 mV/div로 설정한 다음, 자극의 강도는 복합근 활동전위의 진폭이 최대로 될 때까지 수회 자극하면서 증가시켰다. 좌골신경 검사는 흰쥐를 복와위에서 고정하고, 표면 활동전극을 비복근 중앙부 표피에 부착하여 근육 내에 위치하도록 하고 참고전극은 좌측 족부에 부착하였다. 자극 전극으로는 두 개의 피부하 동축 침상전극을 바로 고정하여 사용하여 노출된 좌골신경을 직접 자극하였다. 신경전도검사는 양측 좌골신경에서 실시하여 신경전도속도(m/s)를 측정하였고, 그 결과는 하기 표 9와 같다.
표 9
Figure PCTKR2010002879-appb-T000005
5. 손상된 유수신경의 비율 측정(화상분석)
광학현미경에 장착된 디지털 카메라로 대표적인 횡절단부를 선택하여 400배로 영상을 촬영한 후 이를 이미지 분석 시스템(image analysis system)을 이용하여 총 유수신경섬유의 수와 변성된 유수신경섬유의 수를 분석하였다.
즉, 신경을 정확하게 횡절단(cross section)하여 광학현미경 촬영을 위한 Epon block을 제작하여 이를 세미 절편화(두께 1μm)하였다. 이러한 절편을 톨루이딘 블루로 염색하여 Olympus BX 51을 이용하여 400배 현미경 사진을 촬영하여 관찰되는 전체 유수신경(myelinated nerve fiber)의 수와 손상된 유수신경의 수를 세었다. 이를 토대로 단위 면적당 손상된 유수신경의 비율을 계산하고 이의 평균을 비교평가하였고, 그 결과는 하기 표 10과 같다.
표 10
Figure PCTKR2010002879-appb-T000006
<실험예 3> 당뇨병성 신경병증 모델에서 H-Z 크림의 신경수복 유효성 검증
실시예 2에서 제조한 H-Z 크림의 말초 신경수복 유효성을 검증하기 위한 두 번째 실험으로 당뇨병성 신경병증 흰쥐 모델에 H-Z 크림을 도포하여 치료한 후 조직 신경의 형태학적 평가 및 신경전도도를 측정하여 말초 신경 수복 유효성을 검증하는 실험을 하였다.
7주령의 Sprague-Dawley 수컷 흰쥐 35마리를 분양받아 실험실 환경적응을 위해 1주간 예비 사육한 후 8주령에 실험을 시작하였으며 예비 사육 및 실험 전 기간 동안 사육환경은 온도 23±2℃, 상대습도 60±10%를 유지하고 12시간의 명암 주기가 유지되는 실내에서 사육하였으며, 실험동물용 사료와 식수를 자유로이 공급하였다. 실험동물은 정상 대조군(n=5), 당뇨 유발 대조군1(n=5), 당뇨 유발 후 4주가 경과한 후 치료를 하지 않은 대조군2(n=5), 당뇨 유발 직후부터 H-Z 크림 처치를 실시한 실험군1(n=5) 및 당뇨 유발 후 4주가 경과한 후부터 H-Z 크림 처치를 실시한 실험군2(n=10)로 구분하였다.
1. 당뇨 및 당뇨병성 말초신경병증 유발
구연산 완충액(pH 4.5)에 녹인 STZ(S-0130, 스트렙토조토신, Sigma-Aldrich, USA)을 100 mg/kg 농도로 복강내 1회 주사하고 48시간 후 공복상태에서 채혈하여 혈당을 측정하여 혈당이 240 dl/ml 이상인 흰쥐를 실험에 사용하였다. 당뇨병성 말초신경병증은 일반적으로 당뇨유발 4주 후에 시작되는 것으로 알려져 있다.
2. H-Z 크림 치료
실험군은 H-Z 크림을 좌우 양쪽 다리의 좌골신경이 분포하는 피부 부위에 하루 1번씩 도포 치료를 실시하였다.
3. 광학현미경 및 투과전자현미경 검사
당뇨병성 신경병증 유발 후 및 연고 치료 후 적정 시점에서 전신마취를 유발한 후 손상된 좌골신경을 절취하였으며, 정상 대조군은 당뇨병성 신경병증을 유발하지 않은 상태에서 동일한 방법으로 좌골신경을 절취하여 일반적인 조직처리 과정을 거친 후 광학현미경으로 관찰하여 신경섬유가 주행방향에 직각으로 절단된 부위를 선택하였다.
또한, 가장 대표적인 신경 횡단면만을 골라 전자현미경을 이용하여 관찰하였다.
그 결과, 신경조직의 광학현미경 사진은 도 7과 같고, 신경조직의 전자현미경 사진은 도 8과 같다.
4. 전기생리학적 검사
당뇨병성 신경병증 유발 전과 유발 후 그리고 H-Z 연고 치료 후 적정 시점에서 근전도기(Multiliner, Tonnies사, Germany)를 사용하여 검사실 온도를 섭씨 23-27℃로 유지하면서 신경전도검사를 시행하였다. 근전도기의 설정은 자극의 빈도는 초당 1회, 자극시간 0.1 ms, 주파수폭 10 Hz-10 KHz, 기록소인속도 5 ms/div, 기록감응도 10 mV/div로 설정한 다음, 자극의 강도는 복합근 활동전위의 진폭이 최대로 될 때까지 수회 자극하면서 증가시켰다. 좌골신경 검사는 흰쥐를 복와위에서 고정하고, 표면 활동전극을 비복근 중앙부 표피에 부착하여 근육 내에 위치하도록 하고 참고전극은 좌측 족부에 부착하였다. 자극전극으로는 두 개의 피부하 동축 침상전극을 바로 고정하여 사용하여 노출된 좌골신경을 직접 자극하였다. 신경전도검사는 양측 좌골신경에서 실시하여, 신경전도속도를 측정하였다.
이때, 당뇨병성 말초신경병증에서 H-Z 크림의 신경 수복 효과 유의성을 검증하기 위해 실험 1(당뇨병 유발 후 4주 동안 H-Z 크림 처치; 당뇨병성 말초신경병증 예방 치료 효과를 살펴보기 위함), 실험 2(당뇨병 유발 후 4주 동안은 아무 처치하지 않고 그 후 1주일간만 H-Z 크림 처치; 당뇨병성 말초신경병증 치료 효과를 살펴보기 위함) 및 실험 3(당뇨병 유발 후 4주 동안은 아무 처치하지 않고 그 후 2주일간만 H-Z 크림 처치; 당뇨병성 말초신경병증 치료 효과를 살펴보기 위함)으로 나누어 검증하였다.
당뇨병 유발 후 4주 동안 H-Z 크림 처치시(실험 1)의 신경전도도는 하기 표 11과 같으며, 분산 분석을 통해 확인한 결과, 신경전도도에서 3군 모두 유의적인 의미가 있었다.
표 11
Figure PCTKR2010002879-appb-T000007
그리고, 당뇨병 유발 후 4주 동안은 아무 처치하지 않고 그 후 1주일간 H-Z 크림을 처치한 경우(실험 2)와, 당뇨병 유발 후 4주 동안은 아무 처치하지 않고 그 후 2주일간 H-Z 크림 처치한 경우(실험 3)의 신경전도도는 하기 표 12와 같다.
표 12
Figure PCTKR2010002879-appb-T000008
5. 손상된 유수신경의 비율 측정(화상분석)
광학현미경에 장착된 디지털 카메라로 대표적인 횡절단부를 선택하여 400배로 영상을 촬영한 후 이를 이미지 분석 시스템(image analysis system)을 이용하여 총 유수신경섬유의 수와 변성된 유수신경섬유의 수를 분석하였다.
즉, 신경을 정확하게 횡절단(cross section)하여 광학현미경 촬영을 위한 Epon block을 제작하여 이를 세미 절편화(두께 1μm)하였다. 이러한 절편을 톨루이딘 블루로 염색하여 Olympus BX 51을 이용하여 400배 현미경 사진을 촬영하여 관찰되는 전체 유수신경(myelinated nerve fiber)의 수와 손상된 유수신경의 수를 세었다. 이를 토대로 단위 면적당 손상된 유수신경의 비율을 계산하고 이의 평균을 비교평가하였고, 그 결과는 하기 표 13과 같다.
표 13
Figure PCTKR2010002879-appb-T000009
- 당뇨유발군: 당뇨 유발 후 4주 동안 무처치군
- 예방처치군: 당뇨 유발 후 4주 동안 H-Z 크림 처치군
- 1주: 당뇨 유발 후부터 4주간은 무처치 그 후 1 주간 H-Z 크림 처치군
- 2주: 당뇨 유발 후부터 4주간은 무처치 그 후 2 주간 H-Z 크림 처치군
<실험예 4> 뇌졸중 모델(MCA-O model)에서 필수 인지질성 물질로 구성된 리포빈®의 신경수복 유효성 검증
실시예에서 제조한 H-Z 크림 중 필수 인지질성 물질의 뇌졸중 치료 효과를 검증하기 위해 MCA-O 모델 흰쥐에 리포빈®을 정맥 주사한 후 뇌내의 뇌경색 정도를 관찰하여 중추신경 수복 유효성을 검증하고자 하였다.
즉, 7 주령 (몸무게 230~250g)의 수컷 Sprague-Dawley 흰쥐를 구입하여 중대뇌동맥폐쇄법(Middle cerebral artery occlusion; MCAO) 수술 마취 후에 나일론 실을 흰쥐의 MCA(middle cerebral artery)에 넣어 혈관을 1시간 동안 폐쇄한 후 재관류 하였다.
리포빈®을 흰쥐의 꼬리 정맥에 MCAO 시술 1시간 전에 시작하여 1일 1회 14일 동안 반복 투여하였다. 실험군은 모의시술군(sham operation; 1차 실험: 3마리, 2차 실험: 3마리), 음성대조군(vehicle control; 1차 실험: 3마리, 2차 실험: 2마리), 리포빈® 0.6ml(1차 실험: 3마리, 2차 실험: 3마리) 및 리포빈® 1.2ml 투여군(1차 실험: 3마리, 2차 실험: 3마리) 등을 포함하여 4개 실험군으로 분류하였다.
1. 일반행동 검사
매일 투여 전/후로 일반 행동을 육안으로 검사하여 대조군과 비교를 하였고, 그 결과 대조군에 비해 음성대조군 및 약물 투여군의 꼬리의 투여부위에서 괴사가 일부 있었으나 전체 실험에 크게 영향을 미치지는 않았다. 체중감소가 큰 동물의 경우에서는 심한 sedation 이 나타났으나 다른 동물들에서는 일반행동에서 큰 변화는 관찰되지 않았다.
2. 체중
체중변화를 매일 1회, 오후 4시에 측정하였고, 도 9에 나타난 바와 같이 음성 대조군의 경우 5일, 11일에서 대조군과 통계적으로 유의미한 차이가 나타났으며, 저용량 약물투여군(0.6ml)의 경우 8일, 9일, 10일, 11일에 대조군과 유의미한 차이가 나타났다. 고용량 약물투여군(1.2ml)의 경우 1일, 2일을 제외한 모든 투여 기간에서 통계적으로 유의미한 체중감소가 관찰되었다(One-Way ANOVA, Tukey's Multiple Comparison Test).
3. 뇌경색면적 판독
리포빈® 투여 14일 후에 뇌를 적출하여 TTC (2,3,5-Triphenylterazolium chloride) 염색한 후 각 실험군의 뇌경색 면적을 비교하였다. 즉, 빛을 차단한 상태에서 37℃로 유지한 2% TTC 용액에 적출한 뇌를 Brain Matrix를 이용하여 전두극(frontal pole)으로부터 2mm 간격으로 수직으로 잘라내어 절편들을 담궈두었다. 약 1~2분이 경과하였을 때 조직에서 손상된 부분 (뇌경색 부위)만 백색으로 남게 되고 정상조식은 붉은색으로 염색이 되었다. 이를 4% 파라포름알데히드 용액으로 옮겨 담아 고정시킨 뒤, 다음날 디지털카메라를 이용하여 조직들을 촬영하였다. 촬영한 사진은 image-pro plus 프로그램을 이용하여 뇌경색 면적을 측정하였고, 이를 Graph-pad Prism 4.0 프로그램을 이용하여 통계 분석하였다.
뇌경색 면적은 각 뇌조직의 전체 면적에 대한 뇌경색 부위의 면적을 %로 표시하였다. 도 10 및 도 11과 같이, 치료효과에 있어 저용량 (0.6ml) 및 고용량(1.2ml) 투여군에서 다소간의 유의미한 경향성을 나타내었다. (One-Way ANOVA, Tukey's Multiple Comparison Test.).

Claims (11)

  1. 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물을 유효성분으로 함유하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2010002879-appb-I000005
    상기 화학식 1에서, X는 OH, SH 또는 O-이고, R1, R2, R3는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, -C(=O)R4, -(CH2)nOH, -(CH2)nNR5R6, -(CH2)nN+R7R8R9, -CH2CH(COOH)NH2, -CH2CH(COO-)NH2, -CH2CH(COOH)NH3 +, 이노시톨, 오탄당, 육탄당, 글리세롤, 포스파티딜글리세롤 또는 H이며, n은 1 내지 10의 정수이고, R4, R5, R6, R7, R8, R9는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, 또는 H이며,
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2010002879-appb-I000006
    상기 화학식 2에서, R1, R2, R3, R4, R5는 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐, -C(=O)R6, 포스포콜린, 인산, 오탄당, 육탄당 또는 그들 당의 유도체, 아미노당류, 알콕시 인산 또는 H이며 R6은 직선 또는 환의 알킬, 알케닐 또는 알카이닐임.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 화합물은 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜세린, 포스파티딜이노시톨, 포스파티드산, 스핑고포스포리피드, 스핑고마이엘린, 플라스말로겐, 스핑고플라스말로겐, 포스파티딜글리세롤, 카르디오리핀, 세레브로사이드, 세라마이드, 이들의 리소(lyso-)형 물질 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  3. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서, 상기 신경손상 및 신경질환은 말초신경손상, 중추신경손상, 신경병증, 신경병증성 통증 또는 뇌질환 중에서 선택된 어느 질환인 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 신경병증 또는 신경병증성 통증은 급성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 만성 염증성 탈수초성 다발성말초신경병증, 당뇨병성 말초신경병증, 대상포진, 혈관염신경병증, 유전성 말초신경병증, 척수 소뇌 변성증, 근위축성 측색경화증, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차 신경통, 대뇌 피질이나 척수시상로를 따라 발생하는 암성 병변, 외상 후 신경병증, 대상포진후신경통, 환지통, 뇌졸중 후의 중추성 통증 및 시상통으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  5. 청구항 3에 있어서, 상기 신경병증 또는 신경병증성 통증은 당뇨병성 말초신경병증, 대상포진, 혈관염신경병증, 통증성 당뇨병성 말초 신경병증, 삼차신경통, 외상 후 신경병증, 대상포진후신경통 및 환지통으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  6. 청구항 3에 있어서, 상기 신경병증 또는 신경병증성 통증은 대상포진 또는 대상포진후신경통에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  7. 청구항 3에 있어서, 상기 뇌질환은 뇌졸중, 뇌종양, 치매, 파킨슨병, 알츠하이머병, 헌틴톤병, 간질 또는 허혈성 뇌질환에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  8. 청구항 3에 있어서, 상기 말초신경손상 또는 중추신경손상은 신경단열증 및 외상성 신경손상으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  9. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서, 추가로 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지 중에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  10. 청구항 9에 있어서, 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지는 알로에 겔; 다시마 추출물, 우뭇가사리 추출물 및 후코이단으로 이루어진 군에서 선택된 해조류 추출물; 이들과 유사한 기능을 하는 식물성 또는 합성 수지; 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  11. 청구항 9에 있어서, 상기 약학조성물은 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 및 이들의 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 화합물 또는 둘 이상의 화합물 0.1 내지 99.9 중량% 및 식물성 겔, 식물성 수지 또는 합성수지 중에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합물 0.1 내지 99.9 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 신경손상 및 신경질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
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Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014517065A (ja) * 2011-06-24 2014-07-17 エーエムアイ ファーム カンパニー リミテッド ホスファチジルコリンを有効成分として含む抗癌剤の毒性減少用組成物（Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇｐｈｏｓｐｈｓｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅａｓａｎａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｆｏｒａｔｔｅｎｕａｔｉｎｇｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｇｅｎｔ）
JP2015514096A (ja) * 2012-03-30 2015-05-18 アコーダ セラピューティクス，インコーポレーテッド 末梢神経損傷を処置するためのニューレグリンの使用
WO2017078440A1 (ko) 2015-11-03 2017-05-11 주식회사 젬백스앤카엘 신경세포 손실 예방 및 재생 효능을 가지는 펩티드 및 이를 포함하는 조성물
US10383926B2 (en) 2013-06-07 2019-08-20 Gemvax & Kael Co., Ltd. Biological markers useful in cancer immunotherapy
US10463708B2 (en) 2014-12-23 2019-11-05 Gemvax & Kael Co., Ltd. Peptide for treating ocular diseases and composition for treating ocular diseases comprising same
US10561703B2 (en) 2013-06-21 2020-02-18 Gemvax & Kael Co., Ltd. Method of modulating sex hormone levels using a sex hormone secretion modulator
US10662223B2 (en) 2014-04-30 2020-05-26 Gemvax & Kael Co., Ltd. Composition for organ, tissue, or cell transplantation, kit, and transplantation method
US10835582B2 (en) 2015-02-27 2020-11-17 Gemvax & Kael Co. Ltd. Peptide for preventing hearing loss, and composition comprising same
US10898540B2 (en) 2016-04-07 2021-01-26 Gem Vax & KAEL Co., Ltd. Peptide having effects of increasing telomerase activity and extending telomere, and composition containing same
US10960056B2 (en) 2012-05-11 2021-03-30 Gemvax & Kael Co., Ltd. Anti-inflammatory peptides and composition comprising the same
US10967000B2 (en) 2012-07-11 2021-04-06 Gemvax & Kael Co., Ltd. Cell-penetrating peptide, conjugate comprising same and composition comprising same
US11015179B2 (en) 2015-07-02 2021-05-25 Gemvax & Kael Co., Ltd. Peptide having anti-viral effect and composition containing same
US11058744B2 (en) 2013-12-17 2021-07-13 Gemvax & Kael Co., Ltd. Composition for treating prostate cancer

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9550830B2 (en) 2012-02-15 2017-01-24 Novo Nordisk A/S Antibodies that bind and block triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (TREM-1)
KR101508560B1 (ko) * 2012-05-24 2015-04-06 (주) 노바렉스 당세라마이드 유도체를 포함하는 기억력 개선, 인지능력 개선, 치매 예방 또는 치료 효과를 나타내는 약학적 조성물
JP2023149484A (ja) * 2022-03-31 2023-10-13 雪印メグミルク株式会社 脳虚血性障害軽減用組成物及び該組成物を含む食品、医薬品、飼料
CN117679520A (zh) * 2022-09-09 2024-03-12 北京达尔文细胞生物科技有限公司 用于防治后遗症期面神经麻痹的药物组合物及其应用

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4585656A (en) * 1984-08-20 1986-04-29 Rosenthal Harold R Treatment of herpes
JPH01135720A (ja) * 1987-11-20 1989-05-29 Eisai Co Ltd 神経線維再生剤
JP2909508B2 (ja) * 1989-02-14 1999-06-23 マルハ株式会社 オキアミリン脂質の分取方法
US5463092A (en) * 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
JPH06116149A (ja) * 1992-10-02 1994-04-26 Eisai Co Ltd 神経修復剤
JPH06157338A (ja) * 1992-11-27 1994-06-03 Sagami Chem Res Center 神経成長因子の産生促進剤
AU1743495A (en) * 1994-02-04 1995-08-21 Cell Therapeutics, Inc. Composition for wound healing, neuron growth and vascularization
CN1200036A (zh) * 1995-09-14 1998-11-25 Lxr生物技术有限公司 含有磷脂混合物并具有抗细胞程序死亡活性的组合物
US6197830B1 (en) * 1995-09-22 2001-03-06 Bruce M. Frome Method for achieving relief from sympathetically mediated pain
US7582678B2 (en) * 1997-07-09 2009-09-01 D-Pharm Limited Use of branched-chain fatty acids and derivatives thereof for the treatment of pain
US5874094A (en) * 1997-08-05 1999-02-23 Costello; Jeremiah Cream formulation for topical application
US6143278A (en) * 1998-02-23 2000-11-07 Elkhoury; George F. Topical application of opioid analgesic drugs such as morphine
SK20012000A3 (sk) * 1998-06-29 2001-08-06 Pharmaceuticals Applications Asociates, Llc Transdermálny prostriedok na zmiernenie bolesti
US6080744A (en) * 1999-02-10 2000-06-27 Ayon-Covarrubias; Blas Topical antifungal treatment
AU7057700A (en) * 1999-08-18 2001-03-13 Atairgin Technologies, Inc. Compounds which modulate the activity of an lpa receptor
JP2004526803A (ja) 2001-04-25 2004-09-02 バイオサイナーゲン、インコーポレーテッド リゾフォスファチジン酸を含む薬剤学的組成物（ａｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃａｃｉｄ）
AU2002354247A1 (en) 2001-12-14 2003-06-30 Takeda Chemical Industries, Ltd. Screening method
JP2004026803A (ja) * 2002-03-29 2004-01-29 Nof Corp 神経細胞死予防剤
JP2005272381A (ja) * 2004-03-25 2005-10-06 Q P Corp 末梢神経障害改善剤及びこれを含有する医薬品組成物、又は食品組成物
JP2007119361A (ja) * 2005-10-25 2007-05-17 Nagase Chemtex Corp ホスホリパーゼａ２阻害剤
CA2637806A1 (en) * 2005-11-07 2007-05-18 Russell M. Jaffe Compositions for regulating metabolic disorders and methods of use thereof
US20080051372A1 (en) * 2006-08-24 2008-02-28 The Scripps Research Institute Methods utilizing cell-signaling lysophospholipids
US9511016B2 (en) * 2007-06-12 2016-12-06 Epicentrx, Inc. Topical composition for treating pain

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See references of EP2428211A4 *

Cited By (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014517065A (ja) * 2011-06-24 2014-07-17 エーエムアイ ファーム カンパニー リミテッド ホスファチジルコリンを有効成分として含む抗癌剤の毒性減少用組成物（Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇｐｈｏｓｐｈｓｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅａｓａｎａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｆｏｒａｔｔｅｎｕａｔｉｎｇｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｇｅｎｔ）
JP2015514096A (ja) * 2012-03-30 2015-05-18 アコーダ セラピューティクス，インコーポレーテッド 末梢神経損傷を処置するためのニューレグリンの使用
JP2021059605A (ja) * 2012-03-30 2021-04-15 アコーダ セラピューティクス，インコーポレーテッド 末梢神経損傷を処置するためのニューレグリンの使用
JP2017149746A (ja) * 2012-03-30 2017-08-31 アコーダ セラピューティクス，インコーポレーテッド 末梢神経損傷を処置するためのニューレグリンの使用
US11857607B2 (en) 2012-05-11 2024-01-02 Gemvax & Kael Co., Ltd. Anti-inflammatory peptides and composition comprising the same
US12156902B2 (en) 2012-05-11 2024-12-03 Gemvax & Kael Co., Ltd. Anti-inflammatory peptides and composition comprising the same
US10960056B2 (en) 2012-05-11 2021-03-30 Gemvax & Kael Co., Ltd. Anti-inflammatory peptides and composition comprising the same
US12168039B2 (en) 2012-05-11 2024-12-17 Gemvax & Kael Co., Ltd. Anti-inflammatory peptides and composition comprising the same
US11369665B2 (en) 2012-05-11 2022-06-28 Gemvax & Kael Co., Ltd. Anti-inflammatory peptides and composition comprising the same
US10967000B2 (en) 2012-07-11 2021-04-06 Gemvax & Kael Co., Ltd. Cell-penetrating peptide, conjugate comprising same and composition comprising same
US10383926B2 (en) 2013-06-07 2019-08-20 Gemvax & Kael Co., Ltd. Biological markers useful in cancer immunotherapy
US10561703B2 (en) 2013-06-21 2020-02-18 Gemvax & Kael Co., Ltd. Method of modulating sex hormone levels using a sex hormone secretion modulator
US11058744B2 (en) 2013-12-17 2021-07-13 Gemvax & Kael Co., Ltd. Composition for treating prostate cancer
US10662223B2 (en) 2014-04-30 2020-05-26 Gemvax & Kael Co., Ltd. Composition for organ, tissue, or cell transplantation, kit, and transplantation method
US10463708B2 (en) 2014-12-23 2019-11-05 Gemvax & Kael Co., Ltd. Peptide for treating ocular diseases and composition for treating ocular diseases comprising same
US11077163B2 (en) 2014-12-23 2021-08-03 Gemvax & Kael Co., Ltd. Peptide for treating ocular diseases and composition for treating ocular diseases comprising same
US10835582B2 (en) 2015-02-27 2020-11-17 Gemvax & Kael Co. Ltd. Peptide for preventing hearing loss, and composition comprising same
US11015179B2 (en) 2015-07-02 2021-05-25 Gemvax & Kael Co., Ltd. Peptide having anti-viral effect and composition containing same
WO2017078440A1 (ko) 2015-11-03 2017-05-11 주식회사 젬백스앤카엘 신경세포 손실 예방 및 재생 효능을 가지는 펩티드 및 이를 포함하는 조성물
US10898540B2 (en) 2016-04-07 2021-01-26 Gem Vax & KAEL Co., Ltd. Peptide having effects of increasing telomerase activity and extending telomere, and composition containing same

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