WO2011104448A2 - Utilisation d'un vegetal du genre borojoa pour la preparation d'une composition destinee a traiter les signes cutanes du vieillissement - Google Patents

Utilisation d'un vegetal du genre borojoa pour la preparation d'une composition destinee a traiter les signes cutanes du vieillissement Download PDF

Info

Publication number
WO2011104448A2
WO2011104448A2 PCT/FR2011/000110 FR2011000110W WO2011104448A2 WO 2011104448 A2 WO2011104448 A2 WO 2011104448A2 FR 2011000110 W FR2011000110 W FR 2011000110W WO 2011104448 A2 WO2011104448 A2 WO 2011104448A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
borojoa
plant
genus
extract
species
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/FR2011/000110
Other languages
English (en)
Other versions
WO2011104448A3 (fr
Inventor
Ngub Nding
Vincent Bourgeteau
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
EPHYLA Sas
Original Assignee
EPHYLA Sas
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by EPHYLA Sas filed Critical EPHYLA Sas
Publication of WO2011104448A2 publication Critical patent/WO2011104448A2/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Publication of WO2011104448A3 publication Critical patent/WO2011104448A3/fr
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/74—Rubiaceae (Madder family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/0216—Solid or semisolid forms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/92—Oral administration

Definitions

  • the present invention relates to the use of at least one plant of the genus Borojoa, and in particular of the species Borojoa patinoi in or for the preparation of a composition intended to treat, in a preventive and / or curative manner, the cutaneous signs. aging.
  • It relates more particularly to the use of the fruit of Borojoa patinoi in or for the preparation of a topical or oral composition intended to preventatively and / or curatively treat the cutaneous signs of aging.
  • the trees of the genus Borojoa are geographically distributed in Equatorial America. We find mainly the genus Borojoa, in Venezuela, Colombia, Ecuador and Panama. It is a kind of tropical rain forest that adapts up to 1200 m altitude in these regions.
  • Borojo The genus Borojoa, which belongs to the family Rubiaceae, is still known as Borojo.
  • the genus Borojoa is made up of a few species that are often confused under the name Borojo, and essentially represented by the species Borojoa patinoi Cuatrec., Borojoa sorbilis Cuatrec. and Borojoa verticillata (Ducke) Cuatrec. But the genus Boroja is also represented by the species Borojoa atlantica Dwyer, Borojoa claviflora (K. Schum.) Cuatrec, Borojoa duckei Steyerm., Borojoa panamensis Dwyer, Borojoa stipularis (Ducke) Cuatrec. and Borojoa universitatis Steyerm.
  • the species Borojoa patinoi is the most widespread since cultivated, especially in Colombia and Panama by local people for its edible fruit. The fruit is then consumed in fruit juice or marmalade. Thus, in Panama, the company Earthly products Inc. sells a fruit juice in Borojo under the brand Pura Vitta Borojo Juice.
  • the Borojo a vernacular name that can be represented in particular by the species Borojoa patinoi Cuatrec, Borojoa sorbilis Cuatrec and Borojoa verticillata (Ducke) Cuatrec, refers essentially to the fruit of the plant. Rich in essential amino acids, minerals and trace elements, especially in Phosphorus, the Borojo fruit is traditionally consumed as a nutritional supplement with high nutritional value.
  • the fruit is also traditionally used for different medicinal purposes:
  • the first medicinal use goes to the Chocoes Amerindians who used the Borojo fruit to embalm their dead.
  • the Afro-Amerindian culture has evolved the medicinal use of Borojo fruit in the form of poultices or plasters to treat kidney and respiratory problems, but also as sexual stimulant.
  • the inventors of the present invention have now surprisingly and unexpectedly discovered that the use of at least one plant of the genus Borojoa, and in particular of the species Borojoa patinoi, and that at least the fruit extracts present anti-aging and anti-wrinkle activity, and can be used as an agent for improving the appearance of the skin surface.
  • the inventors of the present invention have also been able to demonstrate that this activity is, at least in part, related to an activity for stimulating hyaluronic acid synthesis of fibroblasts.
  • the inventors of the present invention have also been able to surprisingly and unexpectedly demonstrate that the anti-aging and anti-wrinkle activity is, at least in part, related to an inhibition of cellular senescence.
  • Hyaluronic acid is a glycosaminoglycan, it is one of the main components of the extracellular matrix. It is particularly present in the tissues and in particular the skin and the cartilage. In exogenous supply, it is currently used in aesthetic medicine as a wrinkle filler, and in cosmetics for its moisturizing properties.
  • Hyaluronic acid is a polymer essentially produced by fibroblasts and other specialized connective tissue cells, but also by keratinocytes in the epidermis. It consists of repeating units of disaccharides which are composed of D-glucuronic acid and DN-acetylglucosamine linked together by alternating glycosidic bonds beta-1, 4 and beta-1, 3.
  • this polymer In vivo, the size of this polymer generally reaches 100 to 10,000 Kda.
  • This molecule has a three-dimensional structure that has a very large volume relative to its molecular weight. It plays a fundamental role in the extracellular matrix where it attracts water and binds to it, so it can fix up to 1000 times its weight in water.
  • Hyaluronic acid also has a structuring function to maintain the density of the dermis and epidermis, which ensures the firmness of the skin, and gives it a youthful appearance.
  • Hyaluronic acid helps protect against free radical damage, and promotes fibroblast proliferation, and subsequently, the synthesis of collagen and elastin.
  • Young skin is generally smooth and elastic because it contains a significant amount of hyaluronic acid. As we age, the skin's ability to produce hyaluronic acid decreases, and its ability to retain water decreases. The skin becomes thinner, drier, less elastic and less able to restore. Wrinkles form and the skin ages visibly.
  • One of the aims of the present invention is therefore to be able to have a novel product that significantly exhibits a stimulatory effect on the endogenous synthesis of hyaluronic acid, especially at the level of the skin.
  • the stimulating activity of the synthesis of hyaluronic acid by at least one plant of the genus Borojoa, and in particular Borojoa patinoi, and more particularly its fruit has never been described.
  • Beta galactosidase acid is a hydrolase specific for eukaryotic cells located in lysosomes (Suzuki et al., 1995). This enzyme cleaves the residual beta-galactosyl end group of a large number of natural substrates such as glycoproteins and glycosaminoglycans.
  • the activity of beta-galactosidases has been used for many years and in many laboratories around the world to mark cellular senescence in vitro (eg Reznikoff et al., 1996, Serrano et al., 1997, Bodnar et al., 1998).
  • beta-galactosidase serves as a marker of cellular senescence and in particular on fibroblasts (Dimri et al., 1995).
  • the increase in the activity of this enzyme reflects the establishment of senescence processes, so cell aging.
  • the decrease in beta-galactosidase activity reflects the inhibition of senescence processes, thus an anti-aging effect on the cells.
  • Another object of the present invention is therefore to be able to have a novel product that significantly exhibits an inhibitory effect on the activity of the beta-galactosidase enzyme, especially at the level of the skin.
  • cutaneous signs of aging any changes in the external appearance of the skin due to aging, for example wrinkles and wrinkles, wilted skin, soft skin, thinned skin, lack of elasticity of the skin, lack of firmness of the skin, lack of skin tone, but also any internal changes in the skin that do not occur. do not always translate into a modified external appearance, such as, for example, any internal damage to the skin, particularly the decrease in hyaluronic acid content.
  • the preparation of a composition according to the invention having a stimulatory activity for the synthesis of hyaluronic acid, as well as an inhibitory effect on the beta-galactosidase enzyme, contains at least one plant of the genus Borojoa, and in particular of the species Borojoa patinoi, and more particularly its fruit.
  • the dried pulp of the fruit and reduced to a fine powder is used raw, it can constitute on its own the active ingredient of the compositions according to the invention, or in the form of an extract, as a cosmetic agent or food intended to treat in a preventive and / or curative manner, the cutaneous signs of aging, thus giving anti-aging and anti-wrinkle properties to the composition according to the invention.
  • aqueous solvent any solvent consisting wholly or partly of water.
  • hydroalcoholic solvents in any proportion or solvents consisting of water and a compound such as propylene glycol.
  • extract according to the invention is understood to mean the liquid fraction freed from particles in suspension, resulting from the maceration of the plant with the solvent.
  • the extract obtained can constitute by itself the active ingredient in the preparation of a composition according to the invention.
  • the amount of extract or dried pulp of borojo for the preparation of a composition according to the invention is a function of the desired effect and also a function of the concentration of the extract, this quantity may therefore vary to a large extent.
  • the extract or the dried pulp of borojo according to the invention can be used, in a pure state of 0.00001% to 50% of the total weight of the composition and preferably in a quantity representing from 0.0001% to 25% of the total weight of the composition.
  • compositions according to the invention can be in any conceivable dosage and food forms, suitable both for topical application to the skin and / or the mucous membranes and / or the hair, as well as to oral administration.
  • the composition according to the invention may be a cosmetic or dermatological composition.
  • the composition is a cosmetic composition.
  • the composition is a cosmetic composition because it is intended to improve the general cutaneous appearance of the individual who makes use of it.
  • the composition containing the invention may be in any suitable form, particularly in the form of an oral solution, a tablet, a capsule, a capsule or even a nutritional food or a nutritional supplement.
  • the composition further comprises at least one suitable excipient suitable for oral administration.
  • the composition according to the invention comprises a cosmetically acceptable support, compatible with the skin, the mucous membranes, the nails, the hair and can be presented under all conditions.
  • galenic forms especially in the form of an aqueous, hydroalcoholic or oily solution, an oil-in-water emulsion, a water-in-oil emulsion, an aqueous or oily gel, an anhydrous liquid, pasty or solid product .
  • This composition may be more or less fluid and have the appearance of a white or colored cream, an ointment, a milk, a lotion, a serum, a paste, a mousse . It can optionally be applied to the skin in the form of an aerosol. It can also be in solid form, for example in the form of a stick. Examples of formulations, below, allow to illustrate the compositions according to the invention without however limiting the scope.
  • Example 1 Hand cream anti-aging and moisturizing
  • Example 4 Drinkable anti-aging syrup (1 to 2 teaspoons daily)
  • compositions containing extracts of Borojoa patinoi (Rubiaceae) according to the invention are compositions which induce an increase in the hyaluronic acid content in human fibroblast cultures by monolayer.
  • the extracts used for the demonstration are alcoholic extracts prepared from dried pulp powder of Borojoa patinoi.
  • the ethanolic extract of dried pulp powder of Borojoa patinoi has a composition as follows: dried pulp of Borojoa patinoi 33, 33% ethanol 96 48.89% water 17.78% the composition being expressed as a percentage by weight relative to the total weight of said composition. This extract is left in the dark at room temperature for 6 hours and then filtered.
  • compositions containing extracts of Borojo, and in particular of Borojoa patinoi are compositions which induce an increase in the hyaluronic acid content in adult normal human fibroblast cultures grown in monolayers.
  • the active ingredient was solubilized directly in the incubation medium.
  • the hyaluronic acid contained in the culture media was quantified using a sensitive and specific ELISA kit.
  • the proteins contained in the cell lysates were quantified by a spectrocolorimetric method (Bradford method).
  • the results are given in the form of ng of hyaluronic acid per ⁇ g of total protein of the cell layer (average +/- standard deviation, SD).
  • the statistical significance of the differences observed between the "control” and "reference product” conditions was evaluated by a Student t-test; ** : p ⁇ 0.01).
  • the statistical significance of the observed differences between "control” and “test product” conditions was evaluated product-by-product, using one-way analysis of variance (One Way ANOVA), followed, where necessary, by a Holm-Sidak test (*: p ⁇ 0.05).
  • the results relate to the active "PB EtOH” and show that under the experimental conditions retained after 24 hours of incubation, the active "PB EtOH” induces a significant increase in the production of hyaluronic acid, compared to the conditions "control »:
  • the results mentioned above show that TGF-beta at 10 ng / ml induces a significant increase in the production of hyaluronic acid after 24 hours of incubation: + 56.3% (p ⁇ 0.01) .
  • results hereinafter, illustrate the dose effect of PB EtOH active agent for its ability to inhibit the activity of beta-galactosidase enzymes in normal adult human fibroblast cultures grown in monolayers.
  • Confluent monolayers of normal human dermal fibroblasts were obtained by culturing cells from an abdominoplasty performed in a 47-year-old mature woman. The fibroblasts were incubated for 48 hours at 37 ° C., under a humid atmosphere and 5% CO 2, in the absence (culture medium alone) or with increasing concentrations of the active agent under test or in the presence of Resveratrol 100 ⁇ M as product. reference.
  • the active ingredient was solubilized directly in the incubation medium.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Utilisation d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'une composition topique ou orale destinée à traiter de manière préventive et/ou curative, les signes cutanés du vieillissement.

Description

La présente invention se rapporte à l'utilisation d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'une composition destinée à traiter de manière préventive et/ou curative, les signes cutanés du vieilissement.
Elle concerne plus particulièrement l'utilisation du fruit de Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'une composition topique ou orale destinée à traiter de manière préventive et/ou curative, les signes cutanés du vieillissement.
Les arbres du genre Borojoa sont répartis géographiquement en Amérique équatoriale. On retrouve principalement le genre Borojoa, au Vénézuéla, en Colombie, en Equateur et à Panama. C'est un genre des forêts tropicales humides qui s'adapte jusqu'à 1200 m d'altitude dans ces régions.
Le genre Borojoa, qui appartient à la famille des Rubiacées, est encore connu sous le nom de Borojo.
Le genre Borojoa est constitué de quelques espèces qui sont souvent confondues sous le nom Borojo, et essentiellement représenté par les espèces Borojoa patinoi Cuatrec., Borojoa sorbilis Cuatrec. et Borojoa verticillata (Ducke) Cuatrec. Mais le genre Boroja est aussi représenté par les espèces Borojoa atlantica Dwyer, Borojoa claviflora (K. Schum.) Cuatrec, Borojoa duckei Steyerm., Borojoa panamensis Dwyer, Borojoa stipularis (Ducke) Cuatrec. et Borojoa universitatis Steyerm.
L'espèce Borojoa patinoi est la plus répandue puisque cultivée, notamment en Colombie et au Panama par les populations locales pour son fruit comestible. Le fruit est alors consommé en jus de fruit ou en marmelade. Ainsi, à Panama, la société Earthly products Inc. Comercialise un jus de fruit au Borojo sous La marque Pura Vitta Borojo Juice.
Le Borojo, nom vernaculaire pouvant être notamment représenté par les espèces Borojoa patinoi Cuatrec, Borojoa sorbilis Cuatrec et Borojoa verticillata (Ducke) Cuatrec, désigne essentiellement le fruit de la plante. Riche en acides aminés essentiels, en minéraux et oligoéléments, notamment en phosphore, le fruit Borojo est traditionnellement consommé comme un complément alimentaire à haute valeur nutritive.
Le fruit est ausssi traditionnellement utilisé pour différentes applications médicinales :
Le premier usage médicinal revient aux amérindiens Chocoes qui se servaient du fruit Borojo pour embaumer leurs morts. La culture afro-amérindienne a fait évoluer l'utilisation médicinale du fruit Borojo sous la forme de cataplasmes ou emplâtres pour soigner les maux de reins et respiratoires, mais aussi comme stimullant sexuel.
Par conséquent, il n'a été révélé dans la litérature aucune utilisation d'au moins une plante appartenant au genre Borojoa dans ou pour la préparation d'une composition topique ou orale destinée à traiter de manière préventive et/ou curative, les signes cutanés du vieillissement.
C'est justement ce type d'utilisation qui fait l'objet de la présente invention.
En effet, les inventeurs de la présente invention ont maintenant découvert de façon surprenante et inattendue que l'utilisation d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi, et qu'au moins les extraits du fruit présentent une activité anti-vieillissement et antirides, et peuvent être utilisés comme agent destinés à améliorer l'aspect de la surface de la peau. Les inventeurs de la présente invention ont également pu mettre en évidence que cette activité est, au moins en partie, liée à une activité de stimulation de la synthèse d'acide hyaluronique des fibroblastes.
Les inventeurs de la présente invention ont également pu mettre en évidence de façon surprenante et inattendue que l'activité anti-vieillissement et antirides est, au moins en partie, liée à une inhibition de la sénescence cellulaire.
L'acide hyaluronique est un glycosaminoglycane, c'est l'un des principaux composants de la matrice extracellulaire. Il est particulièrement présent dans les tissus et notamment la peau et le cartilage. En apport exogène, Il est actuellement utilisé en médecine esthétique comme produit de comblement des rides, et en cosmétique pour ses propriétés hydratantes. L'acide hyaluronique est un polymère essentiellement produit par les fibroblastes et autres cellules spécialisées du tissu conjonctif, mais aussi par les kératinocytes au niveau de l'épiderme. Il est constitué d'unités récurrentes de disaccharides qui sont composés d'acide D-glucuronique et de D-N- acetylglucosamine liés entre eux par des liaisons glycosidiques alternées béta- 1 ,4 et béta-1 ,3. In vivo, la taille de ce polymère atteint généralement 100 à 10 000 Kda. Cette molécule a une structure tridimensionnelle qui présente un volume très important par rapport à son poids moléculaire. Elle joue un rôle fondamental dans la matrice extracellulaire où elle attire l'eau et se lie à elle, Elle peut ainsi fixer jusqu'à 1000 fois son poids en eau. L'acide hyaluronique présente également une fonction structurante pour le maintien de la densité du derme et de l'épiderme, ce qui assure la fermeté de la peau, et lui confère une apparence jeune.
L'acide hyaluronique participe à la protection contre les dommages radicalaires, et favorise la prolifération des fibroblastes, et par la suite, la synthèse du collagène et de l'élastine.
Une peau jeune est généralement lisse et élastique parce qu'elle contient notamment une quantité importante d'acide hyaluronique. En vieillissant, la capacité de la peau à produire de l'acide hyaluronique diminue, sa capacité à retenir l'eau diminue également. La peau devient alors plus fine, plus sèche, moins élastique et moins capable de se restaurer. Les rides se forment et la peau vieillit de manière apparente.
On comprend alors à la lecture de ce qui précède l'importance de l'acide hyaluronique dans la structure des tissus, particulièrement de la peau, et l'importance de maintenir et stimuler sa présence dans la peau pour lutter contre le vieillissement et les signes cutanés du vieillissement.
Un des buts de la présente invention est donc de pouvoir disposer d'un produit nouveau qui présente, de manière significative, un effet stimulateur sur la synthèse endogène d'acide hyaluronique, notamment au niveau de la peau. A la connaissance de la demanderesse l'activité stimulatrice de la synthèse d'acide hyaluronique par au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi, et plus particulièrement de son fruit, n'a jamais été décrite.
L'acide béta galactosidase est une hydrolase spécifique des cellules eucaryotes localisée dans les lysosomes (Suzuki et al., 1995). Cette enzyme coupe le groupement terminal béta galactosyl résiduel d'un grand nombre de substrats naturels comme les glycoproteines et les glycosaminoglycanes. L'activité des béta galactosidases est utilisée depuis de nombreuses années et dans de nombreux laboratoires de par le monde pour marquer la sénescence cellulaire in vitro ( e.g. Reznikoff et al., 1996 ; Serrano et al., 1997 ; Bodnar et al., 1998 ; Van der loo et al., 1998 ; Tsukamoto et al., 1998 ; Matsunaga et al., 1999 ) et in vivo ( Sigal et al., 1999 ; Mishima et al., 1999). Ainsi, l'activité de la béta galactosidase sert de marqueur de sénescence cellulaire et notamment sur les fibroblastes (Dimri et al., 1995). L'augmentation de l'activité de cette enzyme traduit la mise en place des processus de sénescence, donc de vieillissement cellulaire. A contrario, la diminution de l'activité béta galactosidase traduit l'inhibition des processus de sénescence, donc un effet anti-âge sur les cellules.
On comprend alors à la lecture de ce qui précède l'importance d'inhiber l'activité de la béta galactosidase dans les cellules des tissus, particulièrement de la peau pour lutter contre le vieillissement et les signes cutanés du vieillissement. Un autre but de la présente invention est donc de pouvoir disposer d'un produit nouveau qui présente, de manière significative, un effet inhibiteur sur l'activité de l'enzyme béta galactosidase, notamment au niveau de la peau.
A la connaissance de la demanderesse un effet inhibiteur sur l'activité de l'enzyme béta galactosidase, notamment au niveau de la peau par au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi, et plus particulièrement de son fruit, n'a jamais été décrit. Par signes cutanés du vieillissement on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau dues au vieillissement, comme par exemple les rides et ridules, la peau flétrie, la peau molle, la peau amincie, le manque d'élasticité de la peau, le manque de fermeté de la peau, le manque de tonus de la peau, mais également toutes modifications internes de la peau qui ne se traduisent pas systématiquement par un aspect extérieur modifié, comme par exemple toutes dégradations internes de la peau, particulièrement la diminution de la teneur en acide hyaluronique.
La préparation d'une composition selon l'invention, ayant une activité stimulatrice de la synthèse d'acide hyaluronique, ainsi qu'un effet inhibiteur sur l'enzyme béta galactosidase, contient au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi, et plus particulièrement de son fruit. De manière particulièrement avantageuse, la pulpe séchée du fruit et réduite en fine poudre est utilisée brute, elle peut constituer à elle seule le principe actif des .compositions selon l'invention, ou sous forme d'extrait, en tant qu'agent cosmétique ou alimentaire destiné à traiter de manière préventive et/ou curative, les signes cutanés du vieillissement, conférant ainsi des propriétés anti-âges et anti-rides à la composition selon l'invention.
Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier peut être utilisée pour préparer l'extrait selon l'invention.
On peut en particulier citer les extraits aqueux, alcooliques ou utilisant un solvant organique.
On entend, par solvant aqueux, tout solvant constitué totalement ou pour partie d'eau. A titre d'exemple, on peut citer l'eau elle-même, les solvants hydroalcooliques en toute proportion ou encore les solvants constitués d'eau et d'un composé comme le propylène glycol.
On entend par extrait selon l'invention, la fraction liquide débarrassée des particules en suspension, issue de la macération du végétal avec le solvant. L'extrait obtenu peut constituer à lui seul le principe actif dans la préparation d'une composition selon l'invention. La quantité d'extrait ou de pulpe séchée de borojo pour la préparation d'une composition selon l'invention est fonction de l'effet recherché et fonction également de la concentration de l'extrait, cette quantité peut donc varier dans une large mesure.
Pour donner un ordre de grandeur, on peut utiliser l'extrait ou la pulpe séchée de borojo selon l'invention, à l'état pur de 0,00001 % à 50% du poids total de la composition et préférentiellement en une quantité représentant de 0,0001 % à 25% du poids total de la composition.
La préparation d'une composition selon l'invention peut être sous toutes formes galéniques et alimentaires imaginables, adaptées aussi bien à une application topique sur la peau et/ou les muqueuses et/ou les cheveux qu'à une administration par la voie orale.
La composition selon l'invention peut être une composition cosmétique ou dermatologique. Préférentiellement, la composition est une composition cosmétique. La composition est une composition cosmétique car elle est destinée à améliorer l'aspect cutané général de l'individu qui en fait usage.
Pour une administration par la voie orale, la composition contenant l'invention peut se présenter sous toutes les formes adaptées, particulièrement sous forme d'une solution buvable, d'un comprimé, d'une gélule, d'une capsule ou encore d'un aliment nutritionnel ou d'un complément nutritionnel. Ladite composition comprend en outre au moins un excipient approprié adapté à l'administration orale.
Pour une administration par application topique sur la peau, les cheveux et/ou les muqueuses, la composition selon l'invention comprend un support cosmétiquement acceptable, compatible avec la peau, les muqueuses, les ongles, les cheveux et peut se présenter sous toutes les formes galéniques, notamment sous forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse, d'une émulsion huile dans eau, d'une émulsion eau dans huile, d'un gel aqueux ou huileux, d'un produits anhydre liquide, pâteux ou solide. Cette composition peut être plus ou moins fluide et avoir l'aspect d'une crème blanche ou colorée, d'une pommade, d'un lait, d'une lotion, d'un sérum, d'une pâte, d'une mousse. Elle peut éventuellement être appliquée sur la peau sous forme d'aérosol. Elle peut également se présenter sous forme solide, par exemple sous forme de stick. Des exemples de formulations, ci-dessous, permettent d'illustrer les compositions selon l'invention sans toutefois en limiter la portée.
Exemple 1 : Crème main anti-âge et hydratante
Ingrédients %
Eau QSP
Gomme de Xanthane 0,7
Stéarate de glycéryle 4,5
Sucrose stéarate 1 ,5
Beurre de karité 7
Huile de tournesol 5
Huile de coco 3
Huile de jojoba 1
Glycérine 3
Acide sorbique 0,35
Benzoate de sodium 0,5
Vitamine E 0,2
Parfum 0,5
Extrait Glycériné de Borojoa patinoi 1
Exemple 2 : Sérum visage anti-ride
Ingrédients %
Eau QSP
Activated clay 7
Xanthan gum 0,3
Copaïba 1 ,5
Oléine de karité 5
Huile de tournesol g
Huile de Balanites 9
Glycérine 10
Acide sorbique 0,35
Benzoate de sodium 0,5
Vitamine E 0,2
Parfum 0,5
Extrait glycériné de Borojoâ 2,5 patinoi Exemple 3 : Lotion raffermissante anti-âge
Figure imgf000010_0001
Exemple 4 : Sirop anti-âge buvable (1à 2 cuillère à café par jour)
Ingrédients %
Eau QSP
Acide citrique QS
Ethanol 96° 35
Glucose 3,5
Sorbate de potassium 0,35
Arôme alimentaire 0,15
Extrait alcoolique de Borojoa patinoi 20
Exemple 5 : Gélule anti-âge (1 à 2 gélules de 350 mg)
Composition de la poudre des gélules
Figure imgf000011_0001
Des exemples illustrant l'activité de la préparation selon l'invention sont également décrits.
Comme l'illustrent les résultats d'activité ci-après, les compositions contenant des extraits de Borojoa patinoi (Rubiacées), selon l'invention, sont des compositions qui induisent une augmentation de la teneur en acide hyaluronique dans des cultures de fibroblaste humains en monocouche. Les extraits retenus pour la démonstration sont des extraits alcooliques préparés à partir de poudre de pulpe séchée de Borojoa patinoi.
Ainsi, l'extrait éthanolique de poudre de pulpe séchée de Borojoa patinoi présente une composition telle que suit : pulpe séchée de Borojoa patinoi 33, 33% éthanol 96 48,89 % eau 17,78 % la composition étant exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de ladite composition. Cet extrait est laissé à l'obscurité à température ambiante pendant 6 heures puis filtré.
Le filtrat est récupéré. Cet extrait sera appelé dans ce qui suit "PB EtOH" et sera désigné corne « l'actif ».
Comme l'illustrent les résultats d'activité ci-après, les compositions contenant des extraits de Borojo, et notamment de Borojoa patinoi (Rubiacées), selon l'invention, sont des compositions qui induisent une augmentation de la teneur en acide hyaluronique dans des cultures de fibroblastes humains normaux adultes cultivés en monocouches.
Les résultats ci-après illustrent l'effet dose de l'actif « PB EtOH » dans sa capacité à moduler la production d'acide hyaluronique dans des cultures de fibroblastes humains normaux adultes cultivés en monocouches. Des monocouches confluentes de fibroblastes dermiques humains normaux ont été obtenues en cultivant des cellules issues d'une plastie abdominale réalisée chez une femme de 33 ans. Les fibroblastes ont été incubés 24 heures à 37°C, sous atmosphère humide et 5 % de CO2, en absence (milieu de culture seul), ou en présence de Transforming Growth Factor béta ( TGF- béta) à 10 ng/ml (produit de référence), ou de concentrations croissantes des actifs à l'essai. Ces concentrations (VA/) sont exprimées en volume de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilité. - "PB EtOH" 0,001 ; 0,01 et 0,1 %, v/v.
L'actif a été solubilisé directement dans le milieu d'incubation. A la fin de la période d'incubation, l'acide hyaluronique contenue dans les milieux de culture a été quantifié à l'aide d'un kit E.L.I.S.A. sensible et spécifique.
A la fin de cette période d'incubation, les protéines contenues dans les lysats cellulaires ont été quantifiées par une méthode spectrocolorimétrique (méthode de Bradford). Les résultats sont donnés sous forme de ng d'acide hyaluronique par pg de protéines totales du tapis cellulaire (moyennes +/- la déviation standard, S.D.). La significativité statistique des différences observées entre les conditions "témoin" et "produit de référence" a été évaluée par un test de Student {Student t-test ; ** : p<0,01 ). La significativité statistique des différences observées entre les conditions "Témoin" et "produit à l'essai" a été évaluée produit par produit, par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA), suivie, lorsque cela était nécessaire, d'un test de Holm-Sidak (* : p<0,05). Les résultats concernent l'actif "PB EtOH" et montrent que dans les conditions expérimentales retenues après 24 heures d'incubation, l'actif "PB EtOH" induit une augmentation significative de la production d'acide hyaluronique, par rapport aux conditions « témoin » :
- "PB EtOH" à 0,01 % → + 38,1 % (p<0,05)
- "PB EtOH" à 0,1 % → + 57,6 % (p<0,05) Les résultats qui illustrent la production d'acide hyaluronique dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 24 heures d'incubation, en présence de TGF- béta à 10 ng/ml, montrent que dans les conditions expérimentales retenues, après 24 heures d'incubation, la TGF-béta, qui constitue le produit de référence, induit une augmentation significative de la production d'acide hyaluronique, par rapport aux conditions « témoin » :
- TGF-béta à 10 ng/ml → + 56,3 % d'acide hyaluronique (p<0,01 ) En résumé, les résultats mentionnés ci-dessus montrent que la TGF-béta à 10 ng/ml induit une augmentation significative de la production d'acide hyaluronique après 24 heures d'incubation : + 56,3 % (p < 0,01 ).
Ce résultat était attendu et valide l'expérience.
Les résultats, ci-après, illustrent l'effet dose de l'actif PB EtOH pour sa capacité à inhiber l'activité des enzymes béta-Galactosidases dans des cultures de fibroblastes humains normaux adultes cultivés en monocouches. Des monocouches confluentes de fibroblastes dermiques humains normaux ont été obtenues en cultivant des cellules issues d'une plastie abdominale réalisée chez une femme mature de 47 ans. Les fibroblastes ont été incubés 48 heures à 37°C, sous atmosphère humide et 5 % de C02, en absence (milieu de culture seul) ou de concentrations croissantes de l'actif à l'essai ou en présence de Resveratrol 100 μΜ comme produit de référence. Aucune étude ne fait mention de composé de référence reconnu pour réduire l'activité de la Béta- Galactosidase dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux, nous avons alors tenté d'utiliser le Resveratrol 100 μΜ comme produit de référence dans cette étude. Les concentrations (VA/) de l'actif testé sont exprimées en volume de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est stabilité :
- "PB EtOH" → 0,001 ; 0,01 et 0,1 %, v/v.
L'actif a été solubilisé directement dans le milieu d'incubation.
A la fin de la période d'incubation, l'état de sénescence des cellules a été évalué par la révélation de l'activité Béta-Galactosidase dans les tapis cellulaires. La quantification des cellules « Béta-Galactosidase positive » a été réalisée à l'aide d'un Kit de marquage histochimique de la marque SIGMA « Sénescence histochemical staining kit », par analyse d'images à l'aide du logiciel Image J. Cette quantification a été réalisée sur 3 clichés pris de manière aléatoire dans chacun des puits de culture.
La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produits de référence » (Resveratrol 100 μΜ) a été évaluée par un test de student (Student t-test ; p<0,05).
La significativité statistique des différences observées entre les conditions « contrôle » et « produits à l'essai », a été évaluée par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA ou One Way Ranks), suivie, lorsque cela était nécessaire, d'un test de Holm-Sidak ou de Dunn's (p<0,05). Les résultats présentés concernent l'actif "PB EtOH" et montrent que dans les conditions expérimentales retenues après 48 heures d'incubation, l'actif "PB EtOH" induit une diminution significative de l'activité de la Béta-Galactosidase, par rapport aux conditions « témoin » :
- "PB EtOH" à 0,01 % → - 48,0 % (p<0,05) - "PB EtOH" à 0, 1 % → - 41 ,0 % (p<0,05)
Les résultats de l'activité Béta-Galactosidase dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 24 heures d'incubation, en présence de Resveratrol 100μΜ, montrent que dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures d'incubation, la Resveratrol, qui constitue le produit de référence, induit une diminution significative de l'activité de la Béta-Galactosidase, par rapport au milieu de culture simple:
- Resveratrol à 100 μΜ → - 48 % (p<0,05)
En résumé, les résultats mentionnés ci-dessus montrent que le Resveratrol à 100 μΜ induit une diminution significative de l'activité de la Béta-Galactosidase après 48 heures d'incubation : - 48,0 % (p < 0,05).
Ce résultat était prévisible et valide l'expérience.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation pour la fabrication d'un extrait ayant une activité stimulatrice sur la synthèse d'acide hyaluronique des fibroblastes cutanés d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi.
2. Utilisation selon la revendication 1 , d'au moins un végétal du genre
Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'un extrait augmentant la teneur en acide hyaluronique de la matrice extra-cellulaire des fibroblastes cutanés.
3. Utilisation selon la revendication 1 pour la fabrication d'un produit
cosmétique ayant une activité stimulatrice sur la synthèse d'acide hyaluronique des fibroblastes cutanés d'au moins un extrait de végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi.
4. Utilisation selon les revendications 1 et 2, d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'un extrait favorisant l'hydratation de la matrice extracellulaire fibroblastique cutanée.
5. Utilisation selon les revendications 1 et 2, d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'une composition cosmétique favorisant notamment l'hydratation de la matrice extra-cellulaire fibroblastique cutanée.
6. Utilisation d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'un extrait étant destiné notamment à inhiber la sénescence cellulaire des fibroblastes cutanés, et plus particulièrement l'activité des enzymes béta
galactosidasés.
7. Utilisation d'au moins un végétal du genre Borojoa, et notamment de l'espèce Borojoa patinoi dans ou pour la préparation d'une composition cosmétique étant destinée notamment à inhiber la sénescence cellulaire des fibroblastes cutanés, et plus particulièrement l'activité des enzymes béta galactosidasés.
8. Utilisation selon l'une quelconque revendication, caractérisée en ce que le végétal est séché, et plus particulièrement sa pulpe de fruit.
9. Utilisation selon l'une quelconque revendication, caractérisée en ce que le végétal est sous forme d'extrait, et plus particulièrement sa pulpe est sous forme d'extrait.
10. Utilisation selon les revendications 8 et 9, caractérisée en ce que le végétal ou son extrait est introduit dans la préparation d'une composition cosmétique selon l'invention, à l'état pur de 0,00001 % à 50% du poids total de la composition et préférentiellement en une quantité représentant de 0,0001 % à 25% du poids total de la composition.
PCT/FR2011/000110 2010-02-25 2011-02-24 Utilisation d'un vegetal du genre borojoa pour la preparation d'une composition destinee a traiter les signes cutanes du vieillissement Ceased WO2011104448A2 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1000783A FR2956581B1 (fr) 2010-02-25 2010-02-25 Utilisation d'au moins un vegetal du genre borojoa, et notamment de l'espece borojoa patinoi dans ou pour la preparation d'une composition destinee a traiter de maniere preventive et/ou curative, les signes cutanes du vieillissement
FR1000783 2010-02-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2011104448A2 true WO2011104448A2 (fr) 2011-09-01
WO2011104448A3 WO2011104448A3 (fr) 2012-10-26

Family

ID=42760414

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2011/000110 Ceased WO2011104448A2 (fr) 2010-02-25 2011-02-24 Utilisation d'un vegetal du genre borojoa pour la preparation d'une composition destinee a traiter les signes cutanes du vieillissement

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR2956581B1 (fr)
WO (1) WO2011104448A2 (fr)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103948530A (zh) * 2014-05-06 2014-07-30 广州雅纯化妆品制造有限公司 一种宝乐果保湿组合物及其制备方法
US20160346194A1 (en) * 2013-03-13 2016-12-01 Guangzhou Yijian Biomedical Technology Development Co.Ltd Borojo skin care product and use thereof for natural moisturizing, anti-ageing, anti-uv, anti-anaphylaxis and whitening

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001000156A (ja) * 1999-06-21 2001-01-09 T Hasegawa Co Ltd ボロホ果汁の香味改善方法および該ボロホ果汁を含有する飲食品
US20090246231A1 (en) * 2008-03-25 2009-10-01 Giovanni Valencia Formulations containing borojo

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
None

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160346194A1 (en) * 2013-03-13 2016-12-01 Guangzhou Yijian Biomedical Technology Development Co.Ltd Borojo skin care product and use thereof for natural moisturizing, anti-ageing, anti-uv, anti-anaphylaxis and whitening
US9839605B2 (en) * 2013-03-13 2017-12-12 Guangzhou Yijian Biomedical Technology Development Co.Ltd Borojo skin care product and use thereof for natural moisturizing, anti-ageing, anti-UV, anti-anaphylaxis and whitening
JP2017507157A (ja) * 2014-03-13 2017-03-16 広州市宜健医学技術発展有限公司Guangzhou Yijian Biomedical Technology Development Co.Ltd Ｂｏｒｏｊｏスキンケア及びその天然保湿、老化防止、ＵＶカット、過敏防止や美白の用途
CN103948530A (zh) * 2014-05-06 2014-07-30 广州雅纯化妆品制造有限公司 一种宝乐果保湿组合物及其制备方法
CN103948530B (zh) * 2014-05-06 2016-06-15 广州雅纯化妆品制造有限公司 一种宝乐果保湿组合物及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
FR2956581A1 (fr) 2011-08-26
WO2011104448A3 (fr) 2012-10-26
FR2956581B1 (fr) 2023-10-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3525889B1 (fr) Extrait d&#39;anigozanthos flavidus pour son utilisation cosmétique
EP3116599B1 (fr) Utilisations cosmétiques de la swertiamarine
CA2357862A1 (fr) Utilisation d&#39;au moins un extrait d&#39;au moins un vegetal de la famille des ericaceae, dans des compositions destinees a traiter les signes cutanes du vieillissement
EP2961379B1 (fr) Composition cosmétique contenant un extrait d&#39;algue brune, un extrait de levure et d&#39;acide ascorbique
FR2929511A1 (fr) Nouveau principe actif stimulant la proliferation et/ou l&#39;activite des fibroblastes.
EP3164197B1 (fr) Extraits peptidiques de lupin et fermete de la peau
EP3917492A1 (fr) Nouvelles utilisations cosmétiques d&#39;un extrait de rose
EP4262999B1 (fr) Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d&#39;une souche de lactobacillus crispatus et/ou d&#39;une composition la comprenant
EP2763652B1 (fr) Utilisation de glucanes obtenus a partir de prunus persica comme agent cosmetique anti-age
FR3058641A1 (fr) Utilisation cosmetique, nutraceutique ou pharmaceutique preferentiellement dermatologique d&#39;un extrait de feuilles de la plante lansium domesticum pour diminuer la pigmentation de la peau et/ou des annexes cutanees
WO2011104448A2 (fr) Utilisation d&#39;un vegetal du genre borojoa pour la preparation d&#39;une composition destinee a traiter les signes cutanes du vieillissement
EP3746184A1 (fr) Extraits de fruit de myrciaria dubia riche en acides organiques, compositions cosmetiques le comprenant et leurs utilisations cosmétiques
EP3817715B1 (fr) Utilisation cosmetique de hrgp (hydroxyprolin rich glycoproteins) issues de cellules d&#39;ajuga reptans pour prevenir et/ou lutter contre les effets du vieillissement de la peau
FR3004347A1 (fr) Composition cosmetique comprenant une huile essentielle de sauge et son utilisation
FR2977158A1 (fr) Utilisation d&#39;huile essentielle de bursera graveolens
CA2953260C (fr) Produits de combinaison et compositions cosmetiques pour lutter contre les desordres de la peau et son vieillissement affectant les keratinocytes et/ou les fibroblastes et le derme
EP3687632B1 (fr) Utilisation cosmetique de cellules meristematiques de syringa vulgaris l. pour une action anti-age sur la peau
EP4009940B1 (fr) Nouvelle utilisation cosmétique d&#39;un extrait d&#39;epilobium angustifolium
KR20250147434A (ko) 컴파운드 k를 함유하는 피부 광채 또는 투명도 개선 또는 증가용 조성물
FR3086542A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait d&#39;agave pour renforcer la fonction barriere de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses et moduler le microbiote cutane
FR2997854A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de saba senegalensis dans une composition cosmetique anti-age
FR3091994A1 (fr) Nouvelles utilisations cosmétiques d’un extrait de rose
FR3152983A1 (fr) EXTRAIT DE CITRUS et SON UTILISATION EN TANT QU’AGENT COSMETIQUE
FR2984740A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de ravenala en tant qu&#39;ingredient actif cosmetique anti-age
FR2974511A1 (fr) Composition cosmetique comprenant une huile essentielle de lavande et leur utilisation

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 11711606

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 11711606

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2