WO2012144937A2 - Консорциумы микроорганизмов, штаммы микроорганизмов, способы получения сброженной основы, кваса брожения, безалкогольного кваса, способы получения культуральной жидкости чайного гриба, концентрата чайного гриба, напитков чайного гриба и способ получения экстрактов овощей - Google Patents

Консорциумы микроорганизмов, штаммы микроорганизмов, способы получения сброженной основы, кваса брожения, безалкогольного кваса, способы получения культуральной жидкости чайного гриба, концентрата чайного гриба, напитков чайного гриба и способ получения экстрактов овощей Download PDF

Info

Publication number
WO2012144937A2
WO2012144937A2 PCT/RU2012/000296 RU2012000296W WO2012144937A2 WO 2012144937 A2 WO2012144937 A2 WO 2012144937A2 RU 2012000296 W RU2012000296 W RU 2012000296W WO 2012144937 A2 WO2012144937 A2 WO 2012144937A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
kombucha
fermentation
culture
producing
kvass
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/RU2012/000296
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
WO2012144937A3 (ru
Inventor
Мария Андреевна СКРИПИЦЫНА
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CA2833764A priority Critical patent/CA2833764C/en
Priority to US14/112,760 priority patent/US9532589B2/en
Publication of WO2012144937A2 publication Critical patent/WO2012144937A2/ru
Publication of WO2012144937A3 publication Critical patent/WO2012144937A3/ru
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Preparation or treatment thereof
    • A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
    • A23L2/382—Other non-alcoholic beverages fermented
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23F—COFFEE; TEA; THEIR SUBSTITUTES; MANUFACTURE, PREPARATION, OR INFUSION THEREOF
    • A23F3/00—Tea; Tea substitutes; Preparations thereof
    • A23F3/16—Tea extraction; Tea extracts; Treating tea extract; Making instant tea
    • A23F3/166—Addition of, or treatment with, enzymes or microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Preparation or treatment thereof
    • A23L2/385—Concentrates of non-alcoholic beverages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
    • C12G3/00—Preparation of other alcoholic beverages
    • C12G3/02—Preparation of other alcoholic beverages by fermentation
    • C12G3/021—Preparation of other alcoholic beverages by fermentation of botanical family Poaceae, e.g. wheat, millet, sorghum, barley, rye, or corn
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungi isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi

Definitions

  • the invention relates to biotechnology, the food industry and for a consortium of microorganisms and strains of bacteria and yeast, and is directed to methods for producing in a single technological cycle with
  • non-alcoholic kvass as well as methods for producing kombucha culture fluid, kombucha concentrates in a single technology
  • the currently used methods for preparing drinks mainly consist in the preparation of sugar syrup and blending various types of raw materials (juices, infusions, water, flavorings, etc.).
  • raw materials juices, infusions, water, flavorings, etc.
  • the process of fermentation of the prepared bases with filtration is used, and if necessary, the resulting beverage or the base of the beverage is subsequently aged (collections of soft drinks, kvass from bread raw materials. M., 1983).
  • a known method of obtaining a soft drink by mixing sugar, kombucha concentrate, water-soluble melanin, an aqueous-alcoholic solution of lemon balm with water in the presence of carbon dioxide and holding the drink at a temperature of 7-10 ° C (patent RU 2210952).
  • "Kombucha” Japanese mushroom is a symbiosis of a yeast fungus with an acetic acid bacterium that forms a film on the surface of a sugared tea infusion.
  • Yeast fermenting sugar, contributes to the formation of a small amount of alcohol and carbon dioxide, and the acetic acid bacteria ferment sugar acetic acid, as a result, the liquid (tea kvass) acquires a sweet and sour taste and is slightly carbonated (B.S.E., 1978, M, “Soviet Encyclopedia”).
  • the base consists of a culture fluid and a tea infusion with a sugar-containing product.
  • the base is kept under anaerobic conditions, which is accompanied by a decrease in the mass fraction of solids.
  • the biological activity of the drink depends on the duration of its incubation.
  • One of the disadvantages of this method is the long time to obtain a drink with maximum biological activity.
  • a method of producing a beverage having biological activity comprises fermenting a sugar-containing liquid in
  • Patent RU228012 describes a method for preparing a beverage, comprising fermenting a sugar-containing aqueous solution with the addition of Kombucha under aerobic conditions and filtering it, moreover, before preparation
  • Sugar-containing aqueous solution is pre-filtered and disinfected water is treated with natural minerals (flint, carnelian, opal chalcedony, quartz) by introducing minerals into the water and keeping them in solution throughout the entire fermentation process. Fermentation is carried out in three stages for 28-24 days with a stepwise decrease in temperature from 32-30 ° C to 28-25 °.
  • the constant presence of minerals in water contributes to the favorable growth of cultures of Kombucha microorganisms and inhibits the growth of foreign microorganisms that are not part of the natural symbiotic composition of Kombucha.
  • compositions are also obtained that include a sugar-containing component, kombucha zooglion and chaga infusion by mixing a pre-fermented composition containing sugar, tea fungus culture and chaga infusion and fermenting the resulting mixture, using kvass as a pre-fermented composition.
  • a method is described for preparing zoo gley of kombucha by mixing kombucha culture with sugar and a liquid other than tea, and
  • kvass wort fermented on the basis of ordinary yeast (baker's yeast) cultures, on the basis of kombucha culture, made it possible to obtain a drink resembling kvass with a less foaming texture and a more sour taste.
  • the resulting sourdough is used for the preparation of dairy products.
  • the patent (RU2081911) describes a consortium of yeast and bacteria and a method for producing a low alcohol beverage based on it.
  • a consortium of yeast and bacteria includes Saccharomyces mandshuricus, Klumaspora sp, Torulopsis globosa, Torulopsis sp, Saccharomyces Ludwigii, Saccharomyces lactis,
  • the method involves obtaining a low-alcoholic beverage using a consortium of yeast and bacteria by fermenting a mixture of the feedstock represented by a carbohydrate-containing substrate and a source of nitrogen component at a temperature of 24-32 ° C for 4-5 days. The liquid phase is separated by filtration or centrifugation. Liquid fraction
  • the disadvantage of this method is that the consortium is an indivisible community of yeast and bacteria, which does not allow the use of the beneficial properties of individual microorganisms and thereby expand not only the range and taste and healing qualities of products, but also to optimize methods for their industrial production and develop common technologies getting as Kombucha crops,
  • Kombucha concentrates and various drinks based on Kombucha cultures and its concentrates.
  • the authors of the present invention for the first time proposed a method of producing a fermented base, representing a semi-finished bread kvass and
  • baker's yeast preferably Zygosaccharomyces bisporus yeast, followed by fermentation with a bacterial culture of Giuconoacetobacter hansenii G-001 or the consortium Medusomyces gisevii alfa SA-10, which allows to reduce the alcohol content in the fermented base until it is identified as
  • the substrate is used with maltose concentrates, including kvass wort concentrate, barley-malt extract, malt syrup, and beer wort.
  • maltose concentrates including kvass wort concentrate, barley-malt extract, malt syrup, and beer wort.
  • rye malt extract when used as a carbohydrate-containing substrate, rye malt extract
  • the invention is directed to a method for producing kvass of fermentation on non-alcoholic beverage bottling lines in enterprises that do not have their own fermentation production, providing
  • the invention is directed to a method for the production of non-alcoholic kvass, comprising sequential fermentation carbohydrate-containing raw materials, characterized in that exercise
  • kvass depends on the composition of the fermented raw material (kvass wort concentrate, barley malt extract, maltose syrup, beer wort, as well as syrups based on
  • the invention relates to a method for producing
  • the method for producing the culture fluid of Kombucha according to the invention provides for the saturation of carbohydrate-containing raw materials with air under excessive pressure before the formation of zooglya, the nutrient medium being subjected to additional mixing by circulation. Fermentation of carbohydrate-containing raw materials is carried out using the culture of the consortium Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 or
  • the invention provides a method for producing kombucha concentrates, comprising using kombucha culture fluid prepared according to the invention as a starter culture in a concentrated nutrient medium consisting of fermentable carbohydrates and plant materials.
  • the stabilization of acidity is carried out using Gluconoacetobacter hansenii G-001 or lactic acid bacteria, traditionally used as starter cultures.
  • Another aspect of the present invention relates to a method for producing kombucha drinks, comprising fermenting a nutrient medium consisting of a carbohydrate-based syrup based on the recipe components of a beverage in the presence of kombucha culture, characterized in that it is fermented using a culture fluid obtained according to the proposed production method culture fluid, to achieve prescription acidity
  • Another aspect of the present invention relates to a method for producing drinks of kombucha, characterized in that blended obespechenny or sterilized concentrate of kombucha obtained according to
  • the invention provides consortia of Fungi tea Sa-14, Medusomyces gisevii Sa-12 and Medusomyces gisevii alpha Sa-10, producing a complex of vitamins, organic acids and enzymes.
  • the invention provides strains of Zygosaccharomyces bisporus, Gluconoacetobacter hansenii G-001, and Dekkera anomala D001,
  • the present invention is based on the unexpected discovery that
  • the invention relates to a method for producing
  • the present invention provides a method for producing a fermented base for the production of fermentation kvass on non-alcoholic beverage bottling lines in enterprises that do not have their own fermentation production, providing for the sequential fermentation of carbohydrate-containing raw materials, the main fermentation
  • maltose concentrates are used as the carbohydrate-containing substrate, including kvass wort concentrate, barley-malt extract, maltose syrup, beer wort.
  • a fermented basis for the production of bread kvass is obtained by carrying out the main fermentation using Zygosaccharomyces bisporus yeast without subsequent fermentation.
  • the main fermentation is carried out with the periodic addition of a fresh yeast culture and new portions of carbohydrate-containing raw materials (example 1).
  • the yeast-based fermentation is carried out for at least 8 hours, after which a fresh yeast culture is added and cultivation is continued for the next 18-36 hours, then a maltose concentrate is added to the blend to achieve
  • the initial density and culture fluid Gluconabacter hansenii G-001 in an amount of at least 5% of the volume of the fermented blend; after fermentation at a temperature of 35-38 ° C for 18-36 hours, a maltose concentrate and prescription components are added to the blend until the full prescription norm is reached, followed by fermentation until the acidity is 25 KE (units of acidity).
  • a maltose concentrate and prescription components are added to the blend until the full prescription norm is reached, followed by fermentation until the acidity is 25 KE (units of acidity).
  • a maltose concentrate is added to the blend to achieve a density of 17% and Gluconabacter hansenii G-001 culture fluid in an amount of 10% of the fermented volume blend; after fermentation at a temperature of 35-38 ° C for 24 hours, a maltose concentrate and prescription components are introduced into the blend until a complete prescription norm is reached with
  • the present invention provides a method.
  • the method for producing kvass of fermentation comprises introducing into the bottle a dose of blend syrup (fermented base) followed by
  • the invention provides a method for the production of non-alcoholic kvass, comprising the sequential fermentation of a carbohydrate-containing raw material, characterized in that
  • carbohydrate-containing raw materials use maltose concentrates, including kvass wort concentrate, barley-malt extract, maltose molasses, beer wort, and also syrups based on fruits, berries and vegetables (example 3).
  • maltose concentrates including kvass wort concentrate, barley-malt extract, maltose molasses, beer wort, and also syrups based on fruits, berries and vegetables (example 3).
  • fermentation based on the culture of the strain Dekkera anomala D-001 is carried out for 18-36 hours at a temperature of 30-32 ° C, after which a fresh culture of Dekkera anomala D-001 is added and
  • Gluconabacter hansenii G-001 in an amount of at least 8% to 10% of the fermented blend volume; after fermentation at a temperature of 32-38 ° C for 18-36 hours, a maltose concentrate is introduced into the blend until it reaches full prescription norm, followed by fermentation at a temperature of 36-38 ° C until the alcohol content drops to not more than 0.2% and acidity not less than 25 KE.
  • fermentation based on the culture of the strain Dekkera anomala D-001 is carried out for 18-36 hours at a temperature of 30-32 ° C, after which a fresh culture of Dekkera anomala D-001 is added in an amount of from 10% to 20.0 % of the volume of fermented blend and continue cultivation for the next 48 hours at a temperature of 30-32 ° C; subsequent fermentation is carried out in the presence of Gluconabacter hansenii G-001 in an amount of 10% to 20% of the volume of the fermented blend at a temperature of 32-38 ° C for 48 hours, followed by fermentation at a temperature of 36-38 ° C until the alcohol content drops to not more than 0 , 2% and
  • the invention relates to a method for producing kombucha culture fluid, providing accelerated propagation
  • a method of producing kombucha culture fluid according to the invention involves fermenting a carbohydrate-containing raw material using a kombucha culture, wherein the carbohydrate-containing raw material is saturated with air under a pressure of 0.4-0.7 atmosphere before additional zoogley is formed with additional stirring by circulation (Example 4).
  • the Kombucha culture is a culture of the consortium Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevi alfa Sa-10, or Medusomyces gisevii SA-12.
  • malt extract is used as the carbohydrate-containing raw material.
  • the culture fluid of Kombucha is used according to the invention to obtain concentrates of Kombucha and as a starter culture medium, consisting of
  • fermentable carbohydrates and plant materials that are part of a specific beverage recipe, in particular, in the production of ready-made kombucha drinks, lactic acid products, oat jelly, non-alcoholic kvass, anti-hangover drinks, biologically active food additives with
  • the invention provides a method for producing kombucha concentrates, comprising fermenting a concentrated nutrient medium consisting of fermentable
  • the culture fluid obtained by the proposed method (example 5).
  • the stabilization of acidity is carried out using Gluconoacetobacter hansenii G-001 or lactic acid bacteria, traditionally used as starter cultures.
  • the resulting concentrates are subjected to separation, filtration and sterilization for use in the production of tea kvass and soft drinks based on them.
  • the invention provides a method for producing kombucha drinks, characterized in that the coated or sterilized kombucha concentrate obtained according to
  • the invention provides a method for producing kombucha drinks, comprising fermenting a nutrient medium consisting of a carbohydrate syrup based on the recipe components of a beverage in the presence of kombucha culture, characterized in that it is fermented using a culture fluid obtained according to the proposed method, to achieve the prescription acidity of a freshly prepared drink (example 6).
  • tea and maltose concentrates, honey, skim milk, glucose and glucose-fructose syrups, fruits, berries and vegetables are used as a nutrient medium.
  • vegetable juices with spices and salt are used as a nutrient medium
  • a culture of the Medusomyces gisevii alfa Sa-10 consortium is used as the culture fluid.
  • a culture fluid obtained in accordance with the invention is added to a carbohydrate-based syrup based on the recipe components of the beverage, and after reaching the recipe acidity values of the freshly prepared beverage, the fermentation is made from Gluconoacetobacter hansenii G-001.
  • Kombucha live drink is ready to drink from the first day of bottling. The ripening of the drink occurs in a bottle during the entire shelf life. The drink does not deteriorate for 3 years or more.
  • Pasteurized drinks are also obtained on the basis of tea and maltose concentrates, honey, glucose and glucose-fructose syrups, fruits, berries and vegetables.
  • the invention relates to a method for producing vegetable extracts (fermented vegetable juices) fermented
  • Kombucha culture fluid obtained in accordance with the invention Fermentation is carried out at a temperature of 8-12 ° C until reaching an acidity of 10-12 KE.
  • the invention provides
  • Zygosaccharomyces bisporus and Acetobacter aceti 2 a consortium of yeast and bacteria Medusomyces gisevii Sa-12, consisting of Gluconacetobacter hansenii, Dekkera anomala and Picha membranaaefaciens, and a consortium of yeast and bacteria Medusomyces giseerinobus alfa 10
  • the invention provides a Zygosaccharomyces bisporus strain isolated from the Fungi tea Sa-14 consortium, Gluconoacetobacter hansenii G-001 and Beckega anomala D001 strains isolated from the Medusomyces gisevii Sa-12 consortium producing organic acid and vitamin complex enzymes
  • the strain Zygosaccharomyces bisporus Y-3399 on an agarized complete yeast medium forms cream-colored colonies with a smooth edge and smooth surface.
  • the cells are round and oval (2, -4.5) x (3.5-7.5) ⁇ M.
  • the Gluconoacetobacter hansenii G-001 strain presents rods in pairs or chains. On beer, it has a characteristic growth in the form of a hard leathery film. It does not form endospores. It does not have a brown pigment. Gram is negative. Metabolism is respiratory, oxygen is
  • Strict aerob The optimum growth temperature is 30 ° C, at a pH of 5.4-6.3. It produces cellulose. Does not grow on an environment with ethanol as the only source. Oxidation of ethanol to acetic acid in a neutral and acidic reaction. Acetic and lactic acid are oxidized to COg and NgO.
  • Example 1 A method of obtaining a fermented base.
  • Maltose concentrates are used as a carbohydrate-containing substrate, including kvass must concentrate, barley-malt extract, maltose syrup or beer wort. Fermentation takes place in 4 stages. At the first stage, the blend from the maltose concentrate is subjected to fermentation using any baking yeast or Zygosaccharomyces bisporus. At this stage, various top dressings for yeast are added. The initial density of the nutrient medium in the first stage is about 10-15% achieved by diluting the concentrate with prepared water. Introduced yeast and
  • top dressing and yeast in particular, ERBSLOEH Geisenheim AG, Germany, manufacturer of top dressings Vitamon A, Vitamon Combi, Vitamon Ultra, and Morgan Thorpe, Belgium, manufacturer of top dressing for yeast "Activbrew”).
  • Zygosaccharomyces bisporus culture fluid is added in an amount of 5.0-10.0% of the fermented blend volume.
  • the duration of the first stage of fermentation is 24-48 hours.
  • the second stage the second portion of the maltose concentrate is added to the blend in the calculated amount to achieve the initial density.
  • various top dressings for yeast and a new portion of fresh yeast cultures are added.
  • the duration of the second stage is 48 hours. Yeast is precipitated with the help of special preparations and cooling. Fermented Blend
  • the calculated amount of maltose concentrate is added to the blend to achieve a density of 17.0% and Gluconabacter hansenii G-001 culture fluid in an amount of 10.0% of the volume
  • Fermentation is carried out at a temperature of 35-38 ° C.
  • the duration of the third stage is 24 hours.
  • maltose concentrate and sugar are added to the blend until the full prescription rate is reached.
  • Fermentation is carried out until the acidity of 25 KE. After separation, the fermented base is pasteurized by heating to 80-85 ° C for 10 minutes. At the same time, volatiles are distilled off and returned to the finished concentrate.
  • beer wort concentrate - 330 kg
  • the solids content in the beer wort concentrate is 80.0%;
  • the density of beer wort concentrate is 1, 36.
  • the initial density of the nutrient medium (dry matter content before fermentation) is 10.0% (i.e., 1000 kg of blend must be contained in 1000 liters of blend).
  • the volume of the blend in the second stage is increased to 5000 liters.
  • the density decreases to 8.0%, i.e. in 1000 liters of blend the SV content is 80 kg.
  • the volume of the blend in the third stage is increased to 8000 liters.
  • the density decreases to 7.0%, i.e. in 5000 liters of blend, the CB content is 350 kg.
  • Example 2 Method for the production of kvass fermentation.
  • Fermentation kvass is produced on non-alcoholic bottling lines
  • Example 3 Method for the production of non-alcoholic kvass.
  • maltose As carbohydrate-containing raw materials, maltose
  • concentrates including kvass wort concentrate, barley malt extract, malt syrup, beer wort, as well as fruit, berry and vegetable syrups. Fermentation takes place in 4 stages. The initial density of the nutrient medium in the first stage from 10% to 15% is achieved by diluting the concentrates or syrups with prepared water. The duration of the first stage using a Dekkera anomala D-001 culture fluid is 24-48 hours at a temperature of 30-32 ° C. Dekkera anomala D-001 culture fluid is added in an amount of 10.0 -20.0% of the volume
  • the maltose is introduced into the base concentrate in the calculated amount to achieve the initial density.
  • the duration of the second stage is 24-48 hours at a temperature of 30-32 ° C.
  • the calculated amount of concentrate to achieve the initial density and the culture fluid Gluconabacter hansenii G-001 in an amount of about 10.0% of the fermented blend are added to the base.
  • Fermentation is carried out at a temperature of 32-38 ° C.
  • the duration of the third stage is 24-48 hours.
  • a maltose concentrate is introduced into the blend until the full prescription norm is reached. Fermentation is carried out at a temperature of 36-38 ° C until the alcohol content is not more than 0.2% and the acidity is not less than 25 E.
  • the finished base after separation is pasteurized by heating to 90-95 ° C for 10 minutes. At the same time, volatile substances are distilled off.
  • the calculation of the amount of maltose concentrate is carried out as described in example 1, depending on the recipe of kvass.
  • Composition 1 Low-calorie kvass
  • Composition 1 Water, barley-malt extract, green tea, sourdough, sweetener.
  • Composition 2 (Mead non-alcoholic) - Water, maltose syrup, honey, sugar, sourdough.
  • Composition 3 (Diabetic kvass) - Water, oat-malt extract, green tea, sourdough, steviazide.
  • Composition 4 (Non-alcoholic sbiten): - Water, honey, sugar, apple juice concentrate, kvass wort concentrate, sourdough, green tea, caraway seeds, cloves,
  • coriander extracts of sage, mint and thyme.
  • Peppermint extract - 0.015 kg
  • Example 4 A method of obtaining a culture fluid of Kombucha.
  • Option 1 a nutrient medium consisting of a malt extract with a content of 5.0-10.0% reducing Sugars, is subjected to preliminary fermentation in a closed container using Zygosaccharomyces bisporus at optimal temperatures for this culture (32-36 ° C), culture
  • Zygosaccharomyces bisporus contribute in an amount of from 5.0% to 10.0% of the volume of the nutrient medium.
  • the alcohol formed during pre-fermentation serves as a source of nutrition and speeds up the function of Kombucha. When visible signs of fermentation appear, cultures are added to the culture medium.
  • Option 2 When there are visible signs of fermentation, cultures of the Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 or Medusomyces gisevii SA-14 consortium are introduced into the nutrient medium in an amount of 1% to 5% by volume
  • the nutrient medium is subjected to additional mixing by circulation for 1-2 minutes with a frequency of 4-6 times a day. They conduct the process until the cessation of the reduction in the content of CB is achieved. Under these conditions, kombucha culture fluid is obtained with a concentration of living cells of at least 30 million / cm after resuspension of the pellet.
  • Example 5 A method of obtaining concentrates of Kombucha.
  • Kombucha culture fluid obtained as described in Example 4 is used to prepare kombucha concentrates as a starter culture medium consisting of fermentable carbohydrates and plant materials included in a specific concentrate formulation.
  • tea raw materials are placed in special bags, brewed with boiling water with a 1: 10 hydraulic module. After cooling to 32 ° C, the culture liquid of kombucha in the amount of 10.0% of the volume of fermented raw material is introduced. The process is carried out in a closed container without a glutinous method at temperatures optimal for this culture (32-36 ° C) until a cessation of the decrease in the CB content is achieved. Then reduce and stabilize the acidity of the nutrient medium using Gluconoacetobacter hansenii G-001 or
  • lactic acid bacteria in an amount of at least 1.0% of the volume of fermentable raw materials. Process lead to stability
  • Tea concentrates fermented with Kombucha are separated, laid and packaged in a clean container.
  • the culture fluid of Kombucha is added to the nutrient medium in an amount of 5.0-10.0% of the volume.
  • the process is conducted in a non-ash-free manner until the reduction of the ST content is stopped.
  • After reduction and stabilization acidity using Gluconoacetobacter hansenii G-001 or lactic acid bacteria contribute the calculated amount of maltose concentrate until the initial density is reached and incubated at optimal temperatures until the decrease in CB ceases.
  • the concentrate is subjected to separation, filtration and sterilization by boiling or autoclaving. SV balance is calculated as described above in Example 1.
  • Example 6 A method of producing drinks of kombucha.
  • a blend is prepared according to the following scheme: in a carbohydrate-containing syrup based on prescription
  • the components of the drink is introduced Kombucha culture fluid in the calculated amount (at least 1%) until the formulation of solids and acidity of the freshly prepared drink is achieved.
  • a starter of Gluconoacetobacter hansenii G-001 is introduced in an amount of about 1.0% of the blend volume.
  • the drink is ready to drink from the first day of bottling. Ripening drink
  • Diabetic drinks of Kombucha according to the invention contain residual carbohydrates in an amount of not more than 0.2% with the inclusion of stevia or steviazides in the formulation.
  • raw materials in particular, are hydrolyzed in the presence of malt enzymes, extracts of grain (oats, buckwheat) or tea (green or black tea) raw materials, vegetable juices with spices and salt.
  • malt enzymes extracts of grain (oats, buckwheat) or tea (green or black tea) raw materials
  • vegetable juices with spices and salt The use of sauerkraut juice, cucumbers, apples, watermelon gives the drink the taste of sauerkraut, cucumber pickle, soaked apples and soaked watermelons, respectively.
  • Adding coffee and chicory to the oat-malt extract gives the drink an original aftertaste.
  • a milk drink is obtained.
  • culture liquid of Kombucha is added in a ratio of 3: 1. It is aged at a temperature of 20-25 ° C for 8-12 hours, cooled to + 4 ° C and bottled in consumer packaging. Storage on a cold shelf for no more than 7 days.
  • skim milk in particular, is added optionally to green tea with or without stevia.
  • a blend is prepared according to the following scheme: a carbohydrate culture liquid of Kombucha in the amount of about 10.0% of the blend volume is added to the carbohydrate syrup based on the recipe components of the beverage with a Sugar content of 5.0 to 10.0%. After bottling in glass bottles, the beverage is aged in the chamber at a temperature of +30.0 to + 35 ° C until the recipe acidity of the freshly prepared beverage is reached. Then it is subjected to tunnel pasteurization or autoclaving. The drink does not deteriorate for 180 days at a temperature of +2 to + 25 ° C.
  • Pasteurized drinks are obtained on the basis of tea and maltose concentrates, honey, glucose and glucose-fructose syrups, fruits, berries and vegetables.
  • oatmeal or oatmeal dough is used as a nutrient medium.
  • Oatmeal jelly is obtained with or without stevia, with the addition of berries of choice, in particular lingonberries, blackberries.
  • Oatmeal or oatmeal dough is subjected
  • the dough is washed with water through a sieve, large particles remain on the sieve, and the liquid fraction is blended with the recipe components, brought to a boil when mixed and poured into jars or bottles.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Non-Alcoholic Beverages (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Bakery Products And Manufacturing Methods Therefor (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии, пищевой промышленности и касается консорциумов микроорганизмов и штаммов бактерий и дрожжей, и направлено на способы получения в едином технологическом цикле с помощью консорциумов и штаммов бактерий и дрожжей сброженной основы, представляющей полуфабрикат хлебного кваса, кваса брожения, безалкогольного кваса, а также на способы получения в единой технологии культуральной жидкости чайного гриба, концентратов чайного гриба, напитков чайного гриба, и экстрактов овощей.

Description

Консорциумы микроорганизмов, штаммы микроорганизмов, способы получения сброженной основы, кваса брожения, безалкогольного кваса, способы получения культуральной жидкости чайного гриба, концентрата чайного гриба, напитков чайного гриба и способ получения экстрактов овощей
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к биотехнологии, пищевой промышленности и касается консорциумов микроорганизмов и штаммов бактерий и дрожжей, и направлено на способы получения в едином технологическом цикле с
помощью консорциумов и штаммов бактерий и дрожжей сброженной основы, представляющей полуфабрикат хлебного кваса, кваса брожения,
безалкогольного кваса, а также на способы получения в единой технологии культуральной жидкости чайного гриба, концентратов чайного гриба,
напитков чайного гриба, и экстрактов овощей.
Уровень техники
Используемые в настоящее время способы приготовления напитков, в основном, заключаются в приготовлении сахарного сиропа и купажирования различных видов исходного сырья (соков, настоев, воды, ароматизаторов и т.д.). При производстве кваса, пива, медов используется процесс сбраживания приготовленных основ с фильтрацией, и при необходимости в дальнейшем производится выдержка полученного напитка или основы напитка (Сборники рецептур на напитки безалкогольные, квас из хлебного сырья. М.,1983).
Известен способ получения безалкогольного напитка путем смешивания сахара, концентрата чайного гриба, водорастворимого меланина, водно- спиртового раствора мелиссы с водой в присутствии углекислоты и выдержки напитка при температуре 7-10°С (патент RU 2210952). «Чайный гриб» (японский гриб) представляет собой симбиоз дрожжевого гриба с уксуснокислой бактерией, образующий пленку на поверхности подсахаренного чайного настоя. Дрожжи, сбраживая сахар, способствуют образованию небольшого количества спирта и углекислого газа, а уксуснокислая бактерия сбраживает сахар с выделением уксусной кислоты, в результате жидкость (чайный квас) приобретает кисло- сладкий вкус и слегка газируется (Б.С.Э., 1978, М, «Советская энциклопедия»).
Известен также напиток, способ производства напитка и культуральной жидкости для его производства на основе выращивания биомассы (зооглеи) чайного гриба в настое чая с сахаросодержащим продуктом (патент РФ
N°2153816). Культуральную жидкость, полученную инкубацией зооглеи чайного гриба в аэробных условиях на питательной сахаросодержащей среде и
последующей инкубацией в анаэробных условиях при температуре от 12 до 40°С в течение от 2 до 150 суток, используют для приготовления основы напитка. Основа состоит из культуральной жидкости и настоя чая с сахаросодержащим продуктом. Основу выдерживают в анаэробных условиях, что сопровождается снижением массовой Доли сухих веществ В соответствии с предлагаемым способом биологическая активность напитка зависит от срока его инкубации. Одним из недостатком известного способа является длительный срок получения напитка с максимальной биологической активностью.
Известен способ получения фруктово-хлебного кваса, при котором с помощью культуры дрожжей получают напиток, обогащенный дополнительно полезными веществами по сравнению с обычным квасом, за счет внесения фруктовых соков (RU 2337592), а также способ получения безалкогольного напитка, при котором с помощью культуры чайного гриба получают
витаминизированный напиток с грушевым вкусом за счет использования фруктовых отходов в качестве субстратов (SU 1477364).
Описан способ приготовления напитка, основанный на использовании чайного гриба в сбраживании, помимо чая, иных сахаросодержащих продуктов путем последовательного сбраживания, при котором сначала
сахаросодержащие продукты сбраживаются на основе дрожжевой культуры, отличной от культуры чайного гриба, а затем на основе культуры чайного гриба (RU 2337592). Способ получения напитка, обладающего биологической активностью, включает сбраживание сахаросодержащей жидкости в
присутствии культуры чайного гриба, причем предварительно сбраживают сахаросодержашую жидкость с помощью иной дрожжевой культуры в течение времени от 1 часа до 14 суток при температуре от 20 до 40 градусов, а
сбраживание в присутствии культуры чайного гриба осуществляют в течение времени от 10 часов до 30 суток. Напиток желательно осветлять при
температуре не выше 15°С. Используют сахаросодержашую жидкость, полученную путем смешивания воды с сахаром, или с вареньем, или с медом. Используют также сахаросодержашую жидкость, в которую добавлен
фруктовый сок.
Сбраживание первоначально сахаросодержащей жидкости с помощью дрожжевой культуры (хлебопекарных дрожжей, или винных дрожжей, или иных дрожжевых культур), а затем повторное сбраживание в присутствии культуры чайного гриба позволяет получить напиток, в котором отсутствует остаточный привкус дрожжей и присущая традиционному квасу «сухость» напитка.
В патенте RU228012 описан способ приготовления напитка, включающий брожение сахаросодержащего водного раствора с добавкой чайного гриба в аэробных условиях и его фильтрование, причем перед получением
сахаросодержащего водного раствора предварительно отфильтрованную и обеззараженную воду подвергают обработке природными минералами (кремень, сердолик, опаловидный халцедон, кварц) путем введения минералов в воду и сохранения их в растворе в течение всего процесса брожения. Брожение осуществляют в три стадии в течение 28-24 суток при ступенчатом снижении температуры с 32-30°С до 28-25°.Постоянное присутствие минералов в воде способствует благоприятному росту культур микроорганизмов чайного гриба и препятствуют росту чужеродных микроорганизмов, не входящих в естественный симбиотический состав чайного гриба.
Известны композиции, основанные на сочетании продуктов брожения чайного гриба (симбиоза дрожжевого гриба с уксуснокислыми бактериями) и березового гриба чаги, полученные путем сбраживания смеси
сахаросодержащего вещества, культуральной жидкости чайного гриба и настоя чаги (RU2280394). Причем сброженную смесь дополнительно выдерживают в анаэробных условиях и/или при температуре не выше 10°С. Также получают композиции, включающие сахаросодержащий компонент, зооглею чайного гриба и настой чаги, смешивая предварительно сброженный состав, содержащий сахар, культуру чайного гриба и настой чаги и сбраживая полученную смесь, причем в качестве предварительно сброженного состава используют квас.
Описан способ приготовления зооглеи чайного гриба путем смешивания культуры чайного гриба с сахаром и жидкостью, отличной от чая, и
последующего сбраживания полученной смеси, причем в качестве жидкости может быть использован фруктовый или ягодный сок. При внесении культуры чайного гриба в раствор черносмородинового сока была получена зооглея чайного гриба, твердая фракция которой использовалась в качестве добавки при приготовлении хлебобулочных изделий для имитации сухофруктов
(одновременно достигался эффект угнетения микрофлоры в готовых
хлебобулочных изделиях). Дображивание квасного сусла, сброженного на основе обычных дрожжевых (хлебопекарные дрожжи) культур, на основе культуры чайного гриба, дало возможность получить напиток, напоминающий квас с менее пенящийся консистенцией и более кисловатым вкусом.
Однако, микроорганизмы, образующие консорциум чайного гриба, с использованием которых получают напитки в описанных способах, не
идентифицированы, и более того, составы консорциумов в различных
географических районах неодинаковы, вследствие чего продукты также не имеют постоянного состава, что создаёт трудности в их стандартизации.
Использование микрофлоры чайного гриба Medusomyces gisevii в способе получения закваски для кисломолочных продуктов описано в патенте RU
2165711. Обезжиренное молоко пастеризуют, охлаждают до температуры заквашивания, вносят микрофлору чайного гриба Medusomyces gisevii
непосредственно в молоко в соотношении чайный гриб: молоко 1 :30,
сквашивают при 20-24°С в течение 20-28 ч до образования сгустка кислотностью 95-100°T. Полученную закваску используют для приготовления кисломолочных продуктов.
В патенте (RU2081911) описан консорциум дрожжей и бактерий и способ получения слабоалкогольного напитка на его основе. Консорциум дрожжей и бактерий включает Saccharomyces mandshuricus, Hausemaspora sp, Torulopsis globosa, Torulopsis sp, Saccharomyces Ludwigii, Saccharomyces lactis,
Acetobacter xylinum, Acetobacter aceti, Gluconobacter subaxydans и продуцирует комплекс витаминов, органических кислот, ферментов и целлюлозы. Способ предусматривает получение слабоалкогольного напитка с использованием консорциума дрожжей и бактерий сбраживанием смеси исходного сырья, представленного углеводсодержащим субстратом и источником азотного компонента при температуре 24-32°С в течение 4-5 суток. Жидкую фазу отделяют фильтрацией или центрифугированием. Жидкая фракция
используется в качестве слабоалкогольного тонизирующего напитка.
Недостатком известного способа является то, что используемый консорциум представляет собой неразделяемое сообщество дрожжей и бактерий, что не позволяет использовать полезные свойства отдельных микроорганизмов и тем самым расширить не только ассортимент и вкусовые и целебные качества продуктов, но и оптимизировать способы их промышленного производства и разработать единые технологии получения как культур чайного гриба,
концентратов чайного гриба, так и разнообразных напитков на основе культур чайного гриба и его концентратов.
Более того, эффективность известных способов получения напитков с помощью чайного гриба является достаточно низкой вследствие
одновременного образования зооглеи. Таким образом, разработка способов промышленного производства, позволяющих существенно ускорить процесс продукции напитков, обладающих разнообразным вкусом и целебными
свойствами, является актуальной задачей, решение которой открывает
принципиальную возможность в промышленном масштабе получать на основе чайного гриба стандартизированные напитки, с высокими и разнообразными вкусовыми качествами.
Раскрытие изобретения
Авторами настоящего изобретения впервые предложен способ получения сброженной основы, представляющей полуфабрикат хлебного кваса и
предназначенной для производства квасов брожения на предприятиях, не имеющих собственного бродильного производства, основанный на
последовательном сбраживании углеводосодержащего сырья с помощью культур микроорганизмов, причем основное брожение осуществляют с помощью
хлебопекарных дрожжей, предпочтительно, дрожжей Zygosaccharomyces bisporus, с последующим дображиванием культурой бактерий Giuconoacetobacter hansenii G-001 или консорциума Medusomyces gisevii alfa SA-10, что позволяет снизить содержание спирта в сброженной основе до идентификации ее как
безалкогольного напитка.
Согласно предложенному способу в качестве углеводсодержащего
субстрата используют мальтозные концентраты, включающие концентрат квасного сусла, экстракт ячменно-солодовый, патоку мальтозную, пивное сусло. В одном из воплощений предложенного способа при использовании в качестве углеводсодержащего субстрата ржаного солодового экстракта
получают сброженную основу для производства хлебного кваса, осуществляя основное брожение с помощью дрожжей Zygosaccharomyces bisporus без
последующего дображивания.
В одном из аспектов изобретение направлено на способ получения кваса брожения на линиях по розливу безалкогольных напитков на предприятиях, не имеющих собственного бродильного производства, предусматривающий
смешивание сброженной основы, полученнной согласно предложенному
способу, с рецептурными компонентами и разбавлением ее холодной и
насыщенной диоксидом углерода водой.
В ещё одном из аспектов изобретение направлено на способ производства безалкогольного кваса, предусматривающий последовательное сбраживание углеводосодержащего сырья, отличающийся тем, что осуществляют
предварительное сбраживание на основе культуры штамма Dekkera anomala D- 001 , и последующее сбраживание ведут в присутствии Gluconoacetobacter hansenii G-001. Рецептура безалкогольного кваса брожения зависит от состава сбраживаемого сырья (концентрат квасного сусла, экстракт ячменно- солодовый, патока мальтозная, пивное сусло, а также сиропы на основе
фруктов, ягод и овощей).
В ещё одном из аспектов изобретение касается способа получения
культуральной жидкости чайного гриба, обеспечивающего ускоренное
размножение консорциума чайного гриба, причём, наряду с ускорением процесса получения культуральной жидкости чайного гриба в 15-20 раз по сравнению со способами, известными из предшествующего уровня техники, осуществление способа согласно изобретению препятствует росту зооглеи, которая затрудняет механизацию и автоматизацию производственных процессов при использовании известных способов. Способ получения культуральной жидкости чайного гриба согласно изобретению предусматривает насыщение воздухом под избыточным давлением углеводосодержащего сырья до начала образования зооглеи , причем питательная среда подвергается дополнительному перемешиванию с помощью циркуляции. Сбраживание углеводосодержащего сырья осуществляют с помощью культуры консорциума Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 или
Medusomyces gisevii SA-12.
В одном из предпочтительных воплощений способа осуществляют
предварительное сбраживание с помощью культуры Zygosaccharomyces bisporus с последующим дображиванием культурой Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 или Medusomyces gisevii SA-12.
В соответствии с еще одним аспектом изобретение обеспечивает способ получения концентратов чайного гриба, предусматривающий использование культуральной жидкости чайного гриба, полученную согласно изобретению, в качестве закваски для концентрированной питательной среды, состоящей из сбраживаемых углеводов и растительного сырья. В одном из воплощений способа получения концентратов чайного гриба стабилизацию кислотности осуществляют с помощью Gluconoacetobacter hansenii G-001 или молочнокислых бактерий, традиционно используемых в качестве заквасок.
Ещё один из аспектов настоящего изобретения касается способа получения напитков чайного гриба, предусматривающий сбраживание питательной среды, состоящей из углеводосодержащего сиропа на основе рецептурных компонентов напитка, в присутствии культуры чайного гриба, отличающийся тем, что осуществляют сбраживание с использованием культуральной жидкости, полученной согласно предложенному способу получения культуральной жидкости, до достижении рецептурных показателей кислотности
свежеприготовленного напитка.
Ещё один из аспектов настоящего изобретения касается способа получения напитков чайного гриба, отличающийся тем, что купажируют обеспложенный или стерилизованный концентрат чайного гриба, полученный согласно
предложенному способу получения концентрата чайного гриба, и рецептурные компоненты готового напитка с последующей пастеризацией, или без нее.
В соответствии с еще одним аспектом изобретение обеспечивает консорциумы Fungi tea Sa-14, Medusomyces gisevii Sa-12 и Medusomyces gisevii альфа Sa-10, продуцирующие комплекс витаминов, органических кислот и ферментов.
В ещё одном аспекте изобретение обеспечивает штаммы Zygosaccharomyces bisporus, Gluconoacetobacter hansenii G-001 и Dekkera anomala D001,
продуцирующие комплекс витаминов, органических кислот и ферментов.
Осуществление изобретения
Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии, что
применение штаммов микроорганизмов, выделенных из симбиотической
ассоциации чайного гриба, в частности, Gluconoacetobacter hansenii G-001 в дображивании мальтозных концентратов, сброженных с помощью любых хлебопекарных дрожжей, предпочтительно дрожжей Zygosaccharomyces
bisporus, позволяет снизить содержание спирта в сброженной основе до
идентификации ее как безалкогольного напитка и получить полуфабрикат хлебного кваса брожения, предназначенный для производства квасов
брожения на предприятиях, не имеющих собственного бродильного
производства. Более того, применение штаммов микроорганизмов,
выделенных из симбиотической ассоциации чайного гриба, в частности, использование Dekkera anomala D-001 в сбраживании мальтозных
концентратов и Gluconoacetobacter hansenii G-001 в последующем
дображивании, позволяет получить безалкогольный квас, по вкусу не
уступающий настоящему квасу брожения.
В одном из аспектов изобретение касается способа получения
культуральной жидкости чайного гриба, обеспечивающего ускоренное
размножение микроорганизмов чайного гриба, способных активно
ассимилировать и сбраживать питательные среды из углеводосодержащего сырья различного состава. Более того, наряду с ускорением процесса
получения культуральной жидкости чайного гриба в 15-20 раз по сравнению со способами, известными из предшествующего уровня техники,
осуществление способа согласно изобретению препятствует росту зооглеи, которая затрудняет механизацию и автоматизацию производственных
процессов при использовании известных способов.
Следовательно, в одном из аспектов настоящее изобретение обеспечивает способ получения сброженной основы для производства квасов брожения на линиях по розливу безалкогольных напитков на предприятиях, не имеющих собственного бродильного производства, предусматривающий последовательное сбраживание углеводосодержащего сырья, причем основное брожение
осуществляют с помощью культуры дрожжей, выбираемых из группы,
включающей хлебопекарские дрожжи и Zygosaccharomyces bisporus, с
последующим дображиванием Gluconoacetobacter hansenii G-001 или Medusomyces gisevii alfa Sa- 10 (пример 1)
Согласно изобретению в качестве углеводсодержащего субстрата используют мальтозные концентраты, включающие концентрат квасного сусла, экстракт ячменно-солодовый, патоку мальтозную, пивное сусло. В одном из воплощений предложенного способа при использовании в качестве углеводсодержащего субстрата ржаного солодового экстракта получают сброженную основу для производства хлебного кваса, осуществляя основное брожение с помощью дрожжей Zygosaccharomyces bisporus без последующего дображивания.
В одном из воплощений предложенного способа получения сброженной основы основное брожение осуществляют с периодическим добавлением свежей культуры дрожжей и новых порций углеводосодержащего сырья (пример 1).
Предпочтительно, на первом этапе сбраживание на основе дрожжевой культуры осуществляют в течение, по меньшей мере, 8 часов, после чего добавляют свежую культуру дрожжей и продолжают культивирование в течение следующих 18-36 часов, затем в купаж вносят мальтозный концентрат для достижения
первоначальной плотности и культуральную жидкость Gluconabacter hansenii G- 001 в количестве, по меньшей мере, 5 % от объема сбраживаемого купажа; после ферментации при температуре 35-38° С в течение 18-36 часов в купаж вносят мальтозный концентрат и рецептурные компоненты до достижения полной рецептурной нормы с последующей ферментацией до достижения кислотности 25 КЕ (единиц кислотности). Наиболее предпочтительно, на первом этапе
сбраживание на основе дрожжевой культуры осуществляют в течение 48 часов, после внесения свежей культуры дрожжей культивирование продолжают в течение следующих 48 часов, затем в купаж вносят мальтозный концентрат для достижения плотности 17% и культуральную жидкость Gluconabacter hansenii G- 001 в количестве 10% от объема сбраживаемого купажа; после ферментации при температуре 35-38° С в течение 24 часов в купаж вносят мальтозный концентрат и рецептурные компоненты до достижения полной рецептурной нормы с
последующей ферментацией до достижения кислотности 25 КЕ.
В ещё одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ
получения кваса брожения на линиях по розливу безалкогольных напитков на предприятиях, не имеющих собственного бродильного производства,
предусматривающий смешивание сброженной основы, полученной способом согласно изобретению, с рецептурными компонентами и разбавлением ее холодной и насыщенной диоксидом углерода водой (пример 2). В одном из воплощений способ получения кваса брожения предусматривает внесение в бутылку дозы купажного сиропа (сброженной основы) с последующим
разбавлением его холодной и насыщенной диоксидом углерода водой; в другом воплощении смешение воды и купажного сиропа (сброженной
основы) с последующим насыщением смеси диоксидом углерода
осуществляют до розлива в бутылки. Впервые, в соответствии с
предложенным способом розлив настоящего хлебного кваса брожения на основе полуфабриката хлебного кваса (сброженной основы) может
осуществляться на линиях по розливу безалкогольных напитков на
предприятиях, не имеющих собственного бродильного производства.
В ещё одном аспекте изобретение обеспечивает способ производства безалкогольного кваса, предусматривающий последовательное сбраживание углеводосодержащего сырья, отличающийся тем, что осуществляют
предварительное сбраживание на основе культуры штамма Dekkera anomala D- 001, и последующее сбраживание ведут в присутствии Gluconoacetobacter hansenii G-001. Согласно предложенному способу в качестве
углеводсодержащего сырья используют мальтозные концентраты, включающие концентрат квасного сусла, экстракт ячменно-солодовый, патоку мальтозную, пивное сусло, а также сиропы на основе фруктов, ягод и овощей (пример 3).
Предпочтительно, на первом этапе сбраживание на основе культуры штамма Dekkera anomala D-001 осуществляют в течение 18-36 часов при температуре 30- 32° С, после чего добавляют свежую культуру Dekkera anomala D-001 и
продолжают культивирование в течение следующих 18-36 часов при
температуре 30-32° С, затем в купаж вносят мальтозный концентрат для достижения первоначальной плотности и культуральную жидкость
Gluconabacter hansenii G-001 в количестве, по меньшей мере, от 8% до 10% от объема сбраживаемого купажа; после ферментации при температуре 32-38° С в течение 18-36 часов в купаж вносят мальтозный концентрат до достижения полной рецептурной нормы с последующей ферментацией при температуре 36- 38° С до снижения содержания спирта не более 0,2% и кислотности не менее 25 КЕ.
Наиболее предпочтительно, на первом этапе сбраживание на основе культуры штамма Dekkera anomala D-001 осуществляют в течение 18-36 часов при температуре 30-32° С, после чего добавляют свежую культуру Dekkera anomala D-001 в количестве от 10% до 20,0% от объема сбраживаемого купажа и продолжают культивирование в течение следующих 48 часов при температуре 30-32° С; последующее сбраживание ведут в присутствии Gluconabacter hansenii G-001 в количестве от 10% до 20% от объема сбраживаемого купажа при температуре 32-38° С в течение 48 часов с последующей ферментацией при температуре 36-38° С до снижения содержания спирта не более 0,2% и
кислотности не менее 25 КЕ.
В одном из аспектов изобретение касается способа получения культуральной жидкости чайного гриба, обеспечивающий ускоренное размножение
микроорганизмов чайного гриба, способных активно ассимилировать и
сбраживать питательные среды из углеводосодержащего сырья различного состава. Более того, наряду с ускорением процесса получения культуральной жидкости чайного гриба в 15-20 раз по сравнению со способами, известными из предшествующего уровня техники, осуществление способа согласно
изобретению препятствует росту зооглеи, которая затрудняет механизацию и автоматизацию производственных процессов при использовании известных способов. Способ получения культуральной жидкости чайного гриба согласно изобретению предусматривает сбраживание углеводосодержащего сырья с помощью культуры чайного гриба, причем углеводосодержащее сырьё до начала образования зооглеи насыщают воздухом под давлением 0,4-0,7 атмосферы при дополнительном перемешивании с помощью циркуляции (пример 4).
Предпочтительно, культура чайного гриба представляет культуру консорциума Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevi alfa Sa- 10 или Medusomyces gisevii SA-12. В одном из предпочтительных воплощений осуществляют предварительное сбраживание с помощью культуры Zygosaccharomyces hisporus с последующим дображиванием Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 или Medusomyces gisevii SA-12. Предпочтительно, в способе получения культуральной жидкости чайного гриба согласно изобретению в качестве углеводосодержащего сырья используют солодовый экстракт.
Полученную предложенным способом культуральную жидкость чайного гриба используют согласно изобретению для получения концентратов чайного гриба и в качестве закваски для питательной среды, состоящей из
сбраживаемых углеводов и растительного сырья, входящего в конкретную рецептуру напитка, в частности, в производстве готовых напитков чайного гриба, молочно-кислых продуктов, овсяных киселей, безалкогольного кваса, антипохмельных напитков, биологически активных пищевых добавок с
антиоксидантными свойствами (пример 6).
Следовательно, в ещё одном аспекте изобретение обеспечивает способ получения концентратов чайного гриба, предусматривающий сбраживание концентрированной питательной среды, состоящей из сбраживаемых
углеводов и растительного сырья, культуральной жидкостью, полученной предложенным способом (пример 5). В одном из воплощений стабилизацию кислотности осуществляют с помощью Gluconoacetobacter hansenii G-001 или молочнокислых бактерий, традиционно используемых в качестве заквасок.
Предпочтительно, в способе получения концентратов чайного гриба согласно изобретению в качестве питательной среды используют предварительно
гидролизованные с помощью солодов экстракты зернового сырья.
Полученные концентраты подвергают сепарации, фильтрации и стерилизации для применения в производстве чайных квасов и безалкогольных напитков на их основе.
В ещё одном из аспектов изобретение обеспечивает способ получения напитков чайного гриба, отличающийся тем, что купажируют обеспложенный или стерилизованный концентрат чайного гриба, полученный согласно
предложенному способу, и рецептурные компоненты готового напитка с последующей пастеризацией, или без нее с получением стабильных напитков чайного гриба.
В ещё одном из аспектов изобретение обеспечивает способ получения напитков чайного гриба, предусматривающий сбраживание питательной среды, состоящей из углеводосодержащего сиропа на основе рецептурных компонентов напитка, в присутствии культуры чайного гриба, отличающийся тем, что осуществляют сбраживание с использованием культуральной жидкости, полученной согласно предложенному способу, до достижения рецептурных показателей кислотности свежеприготовленного напитка (пример 6). Согласно способу получения напитков чайного гриба в качестве питательной среды используют чайные и мальтозные концентраты, мед, обезжиренное молоко, глкжозные и глюкозо-фруктозные сиропы, фрукты, ягоды и овощи. В одном из воплощений способа в качестве питательний среды используют овощные соки со специями и солью и в качестве культуральной жидкости используют культуру консорциума Medusomyces gisevii alfa Sa-10.
В ещё одном из воплощений способа для получения живых напитков чайного гриба в питательной среду, состоящую из углеводосодержащего сиропа на основе рецептурных компонентов напитка вносят культуральную жидкость, полученную в соответствии с изобретением, после чего при достижении рецептурных показателей кислотности свежеприготовленного напитка в купаж вносят закваску из Gluconoacetobacter hansenii G-001. Живой напиток чайного гриба готов к употреблению с первого дня розлива в бутылку. Созревание напитка происходит в бутылке в течение всего срока годности. Напиток не портится в течение 3-х и более лет.
В ещё одном из воплощений способа получения напитков чайного гриба согласно изобретению после розлива в стеклянные бутылки напиток
выдерживают в камере при температуте от +30 до +35° С до достижения рецептурных показателей кислотности свежеприготовленного напитка, после чего подвергают туннельной пастеризации или автоклавированию с целью получения пастеризованного напитка, который не портится в течение 180 дней при температуре от +2 до +25° С. Пастеризованные напитки также получают на основе чайных и мальтозных концентратов, меда, глюкозных и глюкозо- фруктозных сиропов, фруктов, ягод и овощей.
В ещё одном из аспектов изобретение касается способа получения экстрактов овощей (сброженные овощные соки), ферментированных
культуральной жидкостью чайного гриба, полученной в соответствии с изобретением. Ферментацию осуществляют при температуре 8-12° С до достижении кислотности 10-12 КЕ.
В соответствии с одним из аспектов изобретение обеспечивает
консорциум дрожжей и бактерий Fungi tea Sa-14, состоящий из
Zygosaccharomyces bisporus и Acetobacter aceti 2, консорциум дрожжей и бактерий Medusomyces gisevii Sa-12, состоящий из Gluconacetobacter hansenii, Dekkera anomala и Picha membranaaefaciens, и консорциум дрожжей и бактерий Medusomyces gisevii alfa Sa-10, состоящий из Gluconacetobacter xylinus,
Brettanomyces anomalus и Zygosaccharomyces rouxii, продуцирующие комплекс витаминов, органических кислот и ферментов и ферментирующие
углеводсодержащие растворы. Для получения консорциумов согласно изобретению природные изоляты чайного гриба подвергали селекции на содержание микрорганизмов с полезными свойствами на средах, содержащих глюкозу (около 10%) и чай при 25-30° С.
В соответствии с ещё одним из аспектов изобретение обеспечивает штамм Zygosaccharomyces bisporus, выделенный из консорциума Fungi tea Sa- 14, штаммы Gluconoacetobacter hansenii G-001 и Беккега anomala D001, выделенные из консорциума Medusomyces gisevii Sa-12, продуцирующие комплекс витаминов, органических кислот и ферментов
Культурал ьно-морфологические признаки :
Штамм Zygosaccharomyces bisporus Y-3399 на агаризованной полной дрожжевой среде образует колонии кремового оттенка с ровным краем и гладкой поверхностью. Клетки круглые и овальные (2,-4,5)х(3,5-7,5) мкМ.
Вегетативное размножение многосторонним почкованием. Аскоспоры круглые или слегка овальные, гладкие, 1-4 (чаще 3-4) в сумке. Сахара сбраживает, нитраты не ассимилирует. Способен развиваться в субстратах с высоким содержанием сахара (до 80%). Образует в больших количествах органические кислоты. В жидких средах способен образовывать как осадок так и плёнку.
Штамм Gluconoacetobacter hansenii G-001 представляет палочки в парах или цепочках. На пиве имеет характерный рост в виде жёсткой кожистой плёнки. Эндоспоры не образует. Не имеет коричневого пигмента. Грам- отрицательный. Метаболизм респираторный, кислород является
терминальным акцептором. Строгий аэроб. Оптимальная температура роста 30° С, при рН 5,4-6,3. Продуцирует целлюлозу. Не растёт на среде с этанолом, как единственным источником. Окисление этанола до уксусной кислоты при нейтральной и кислой реакции. Уксусная и молочная кислота окисляются до СОг и НгО.
Изобретение илюстрируется следующими примерами, представленными для подтверждения, но не ограничения оъёма притязаний.
Примеры.
Пример 1. Способ получения сброженной основы.
В качестве углеводсодержащего субстрата используют мальтозные концентраты, включающие концентрат квасного сусла, экстракт ячменно- солодовый, патоку мальтозную или пивное сусло. Брожение проходит в 4 этапа. На первом этапе купаж из мальтозного концентрата подвергают брожению с помощью любых хлебопекарных дрожжей или Zygosaccharomyces bisporus. На этом этапе добавляют различные подкормки для дрожжей. Начальную плотность питательной среды на первом этапе около 10-15% достигают путем разведения концентрата подготовленной водой. Вносимое количество дрожжей и
температурные режимы поддерживают в соответствии с рекомендациями изготовителей подкормок и дрожжей (в частности, ERBSLOEH Geisenheim AG, Германия, изготовителем подкормок «Витамон А», «Витамон Комби», «Витамон Ультра», и Morgan Thorpe, Бельгия, изготовителем подкормки для дрожжей «Активбрю»). Предпочтительно, культуральную жидкость Zygosaccharomyces bisporus вносят в количестве 5,0-10,0 % от объема сбраживаемого купажа.
Продолжительность первого этапа брожения составляет 24-48 часов. На втором этапе в купаж вносится вторая порция мальтозного концентрата в расчетном количестве для достижения первоначальной плотности. На этом этапе добавляют различные подкормки для дрожжей и новую порцию свежих дрожжевых культур. Продолжительность второго этапа составляет 48 часов. Дрожжи осаждают с помощью специальных препаратов и охлаждения. Сброженный купаж
подвергают декантации. На третьем этапе в купаж вносят расчетное количество мальтозного концентрата для достижения плотности 17,0% и культуральную жидкость Gluconabacter hansenii G-001 в количестве 10,0% от объема
сбраживаемого купажа. Ферментация ведется при температуре 35-38° С.
Продолжительность третьего этапа 24 часа. На четвертом этапе в купаж вносят мальтозный концентрат и сахар до достижения полной рецептурной нормы.
Ферментацию ведут до достижения кислотности 25 КЕ. Сброженная основа после сепарации подвергается пастеризации при нагревании до 80-85° С в течение 10 минут. Одновременно идет отгонка летучих веществ и возврат их в готовый концентрат.
Пример расчёта для следующей рецептуры сброженной основы:
концентрат пивного сусла-330 кг;
сахар- 10 кг;
вода-до 1000 л.
Исходные данные технологического процесса:
Содержание сухих веществ в концентрате пивного сусла-80,0%;
Плотность концентрата пивного сусла- 1 ,36.
Первоначальная плотность питательной среды (содержание сухих веществ до начала брожения)- 10,0% (т.е. в 1000 литров купажа должно содержаться 100 кг СВ).
Расчет количества концентрата для достижения первоначальной плотности 10,0% содержания СВ на первом этапе при объеме купажа 1000 литров: На первом этапе вносят 50 кг сахара, что составляет 49,9 кг СВ.
Оставшийся 50,1% СВ вносят с концентратом пивного сусла.
50,1 кг СВ содержится в 62,5 (50:0,8) кг концентрата.
Для достижения плотности 10,0% СВ к 62,5 кг концентрата пивного сусла и 50 кг сахара добавляют воды до 1000 литров.
Расчет количества концентрата для достижения 10,0% содержания СВ на втором этапе:
Объем купажа на втором этапе увеличивают до 5000 литров.
Для достижения 10,0% содержания СВ в 5000 литрах купажа должно
содержаться 500 кг СВ.
На стадии завершения первого этапа брожения плотность снижается до 8,0%, т.е. в 1000 литрах купажа содержание СВ составляет 80 кг.
Необходимо внести еще 420 (500-80) кг СВ. 49,9 кг СВ вносят с 50 кг сахара. 370,1 кг СВ вносят с концентратом пивного сусла.
370,1 кг СВ содержится в 462,6 (370,1 :0,80) кг концентрата пивного сусла.
Т.е., на втором этапе вносят в купаж 50 кг сахара и 462,6 кг концентрата пивного сусла, и доводят объем купажа водой до 5000 литров.
Расчет количества концентрата для достижения 17,0% содержания СВ на третьем этапе:
Объем купажа на третьем этапе увеличивают до 8000 литров.
Для достижения 17,0% содержания СВ в 8000 литрах купажа должно
содержаться 1360 кг СВ.
На стадии завершения второго этапа брожения плотность снижается до 7,0%, т.е. в 5000 литров купажа содержание СВ составляет 350 кг.
Необходимо внести еще 1010 (1360-350) кг СВ.
1010 кг СВ содержится в 1262,5 (1010:0,8) кг концентрата пивного сусла.
На третьем этапе вносят в купаж 1262,5 кг концентрата и доводят объем
купажа водой до 8000 литров.
Расчет количества концентрата на четвертом этапе: В купаж внесли 62,5кг концентрата на первом этапе, 462,6 кг концентрата на втором этапе и 1262,5 кг на третьем этапе. До полной рецептурной нормы вносят на четвертом этапе 1512,4 (3300-62,5-462.6-1262.5) кг пивного сусла и объем купажа доводят до 10000 литров.
Пример 2. Способ производства кваса брожения.
Квас брожения производят на линиях по розливу безалкогольных
напитков на предприятиях, не имеющих собственного бродильного
производства из сброженной основы внесением в бутылку дозы купажного сиропа из сброженной основы с сахаром и другими рецептурными
компонентами в соответствиии с конкретной рецептурой кваса с
последующим разбавлением его холодной и насыщенной диоксидом углерода водой или смешиванием воды и купажного сиропа в машинах типа
«Постмикс» и других системах с последующим насыщением смеси диоксидом углерода и розливом в бутылки.
Пример одной из рецептур кваса:
Сброженная квасная основа- 100 л;
сахар-60 кг;
углекислота;
вода-до 1000 л
Пример 3. Способ производства безалкогольного кваса.
В качестве углеводсодержащего сырья используют мальтозные
концентраты, включающие концентрат квасного сусла, экстракт ячменно- солодовый, патоку мальтозную, пивное сусло, а также сиропы на основе фруктов, ягод и овощей. Брожение проходит в 4 этапа. Начальная плотность питательной среды на первом этапе от 10% до 15% достигается путем разведения концентратов или сиропов подготовленной водой. Продолжительность первого этапа с использованием культуральной жидкости Dekkera anomala D-001 составляет 24-48 часов при температуре 30-32° С. Культуральную жидкость Dekkera anomala D-001 вносят в количестве 10,0 -20,0% от объема
сбраживаемого купажа. На втором этапе в основу вносится порция мальтозного концентрата в расчетном количестве для достижения первоначальной плотности. Продолжительность второго этапа составляет 24-48 часов при температуре 30- 32° С. На третьем этапе в основу вносится расчетное количество концентрата для достижения первоначальной плотности и культуральная жидкость Gluconabacter hansenii G-001 в количестве около 10,0% от объема сбраживаемого купажа.
Ферментация ведется при температуре 32-38° С. Продолжительность третьего этапа составляет 24-48 часов. На четвертом этапе в купаж вносится мальтозный концентрат до достижения полной рецептурной нормы. Ферментация ведется при температуре 36-38° С до достижения содержания спирта не более 0,2% и кислотности не менее 25 Е. Готовая основа после сепарации подвергается пастеризации при нагревании до 90-95° С в течение 10 минут. Одновременно идет отгонка летучих веществ. Расчет количества мальтозного концентрата производят, как указано в примере 1 , в зависимости от рецептуры кваса.
В частности, получают безалкогольный квас следующего состава
(рецептуры):
Состав 1 (Квас низкокалорийный) - Вода, экстракт ячменно-солодовый, чай зеленый, закваска, подсластитель.
Состав 2 (Медовуха безалкогольная) - Вода, патока мальтозная, мед, сахар, закваска.
Состав 3 (Диабетический квас) - Вода, экстракт овсяно-солодовый, чай зеленый, закваска, стевиазид.
Состав 4 (Сбитень безалкогольный): - Вода, мед, сахар, концентрат яблочного сока, концентрат квасного сусла, закваска, чай зеленый, тмин, гвоздика,
кориандр, экстракты шалфея, мяты и чабреца.
В один из вариантов рецептуры кваса «Сбитень безалкогольный» входят:
Мед-50 кг;
Концентрат квасного сусла-30 кг;
Концентрат яблочного сока- 10 кг;
Закваска чайного гриба на зеленом чае с сахаром- 100 л;
Тмин-0, 1 0 кг; Гвоздика-0,150 кг;
Кориандр-0, 150 кг;
Экстракт шалфея-0,015 кг;
Экстракт мяты-0,015 кг;
Экстракт чабреца-0,015 кг
Пример 4. Способ получения культуральной жидкости чайного гриба.
Для получения культуральной жидкости чайного гриба используют культуры консорциума Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 или
Medusomyces gisevii SA-14.
Вариант 1 : питательную среду, состоящую из солодового экстракта с содержанием 5,0- 10,0% редуцирующих Сахаров, подвергают предварительному брожению в закрытой емкости с помощью Zygosaccharomyces bisporus при оптимальных для этой культуры температурах (32-36°С), культуру
Zygosaccharomyces bisporus вносят в количестве от 5,0% до 10,0 % от объема питательной среды. Образующийся в процессе предварительного брожения спирт служит источником питания и ускоряет работу чайного гриба. При появлении видимых признаков брожения в питательную среду вносят культуры
консорциума Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa-10 или Medusomyces gisevii SA-14 в количестве от 10% до 15 % от объема питательной среды, ведут процесс до достижения прекращения снижения содержания СВ. При этих условиях получают культуральную жидкость чайного гриба с концентрацией живых клеток не менее 30 млн/см3 после ресуспендирования осадка.
Вариант 2: При появлении видимых признаков брожения в питательную среду вносят культуры консорциума Fungi Tea Sa-14, Medusomyces gisevii alfa Sa- 10 или Medusomyces gisevii SA-14 в количестве от 1% до 5% от объема
питательной среды, насыщают обеспложенным воздухом, создают избыточное давление и подогревают до оптимальных для этой культуры температур (32-36° С). Насыщение воздухом питательной среды под избыточным давлением, по крайней мере, 0,4 - 0,7 атмосферы при оптимальных температурах и в
присутствии спирта ускоряет работу чайного гриба в 15-20 раз. В целях недопущения роста зооглеи питетельную среду подвергают дополнительному перемешиваю с помощью циркуляции в течении 1-2 минут с периодичностью 4-6 раз в сутки. Ведут процесс до достижения прекращения снижения содержания СВ. При этих условиях получают культуральную жидкость чайного гриба с концентрацией живых клеток не менее 30 млн/см после ресуспендирования осадка.
Пример 5. Способ получения концентратов чайного гриба.
Культуральную жидкость чайного гриба, полученную как описано в примере 4, используют для получения концентратов чайного гриба в качестве закваски для питательной среды, состоящей из сбраживаемых углеводов и растительного сырья, входящего в конкретную рецептуру концентрата.
Для получения чайных концентратов, ферментированных чайным грибом, чайное сырье помещают в специальные мешочки, заваривают кипятком с гидромодулем 1 : 10. После охлаждения до 32° С вносится культуральная жидкость чайного гриба в количестве 10,0 % от объема ферментируемого сырья. Процесс ведется в закрытой емкости беззооглейным способом при оптимальных для этой культуры температурах (32-36° С) до достижения прекращения снижения содержания СВ. После чего снижают и стабилизируют кислотность питательной среды с помощью Gluconoacetobacter hansenii G-001 или
молочнокислых бактерий в количестве, по меньшей мере, 1,0 % от объема ферментируемого сырья. Процесс ведут до достижения стабильности
кислотности. Чайные концентраты, ферментированные чайным грибом, сепарируют, подвергают обеспложиванию и упаковывают в чистую тару.
При использовании в качестве питательной среды зернового сырья
предварительно гидролизованные с помощью солодов экстракты зернового сырья с содержанием от 13% до 19% СВ подвергают преварительному
сбраживанию с помощью Zygosaccharomyces hisporus. При снижении СВ на 5,0- 6,0% в питательную среду вносят культуральную жидкость чайного гриба в количестве 5,0-10,0% от объема. Ведут процесс беззооглейным способом до прекращения снижения содержания СВ. После снижения и стабилизации кислотности с помощью Gluconoacetobacter hansenii G-001 или молочнокислых бактерий вносят расчетное количество мальтозного концентрата до достижения первоначальной плотности и выдерживают при оптимальных температурах до прекращения снижения СВ. Концентрат подвергают сепарации, фильтрации и стерилизации путем кипячения или автоклавирования. Баланс СВ рассчитывают, как указано выше в примере 1.
Пример 6. Способ получения напитков чайного гриба.
Для получения живого напитка чайного гриба приготавливают купаж по следующей схеме: в углеводосо держащий сироп на основе рецептурных
компонентов напитка вносится культуральная жидкость чайного гриба в расчетном количестве (по меньшей мере 1%) до достижения рецептурных показателей сухих веществ и кислотности свежеприготовленного напитка. В купаж для стабилизации кислотности вносится закваска из Gluconoacetobacter hansenii G-001 в количестве около 1,0 % от объема купажа. Напиток готов к употреблению с первого дня розлива в бутылку. Созревание напитка
происходит в бутылке в течение всего срока годности. Напиток не портится в течение 3-х и более лет.
В зависимости от используемых рецептурных компонентов получают напитки с различным составом и вкусом. Диабетические напитки чайного гриба согласно изобретению содержат остаточные углеводы в количестве не более 0,2% с включением в рецептуру стевии или стевиазидов. Для получения нефильтрованных, непастеризованных напитков чайного гриба в качестве сырья, в частности, используют гидролизованные в присутствии ферментов солода экстракты зернового (овес, гречиха) или чайного (чай зеленый или черный) сырья, овощные соки со специями и солью. Использование сока квашеной капусты, огурцов, яблок, арбуза придаёт напиткам вкус квашеной капусты, огуречного рассола, моченых яблок и моченых арбузов, соответственно.
Добавление кофе и цикория к овсяно-солодовому экстракту придаёт напитку оригинальное послевкусье. При использовании в качестве питательной среды пастеризованного обезжиренного молока получают молочный напиток. В пастеризованное обезжиренное молоко вносится культуральная жидкость чайного гриба в соотношении 3:1. Выдерживается при температуре 20-25° С в течение 8-12 часов, охлаждается до +4° С и разливается в потребительскую тару. Хранение на холодной полке не более, чем в течение 7 дней. При получении молочных напитков в обезжиренное молоко, в частности, добавляют по выбору чай зеленый со стевией или без неё.
Для получения пастеризованных напитков чайного гриба готовят купаж по следующей схеме: в углеводосодержащий сироп на основе рецептурных компонентов напитка с содержанием Сахаров от 5,0 до 10,0% вносится культуральная жидкость чайного гриба в количестве около 10,0 % от объема купажа. После розлива в стеклянные бутылки напиток выдерживается в камере при температуте от +30,0 до +35° С до достижения рецептурных показателей кислотности свежеприготовленного напитка. После чего подвергается туннельной пастеризации или автоклавированию. Напиток не портится в течение 180 дней при температуре от +2 до +25° С.
Пастеризованные напитки получают на основе чайных и мальтозных концентратов, меда, глюкозных и глюкозо-фруктозных сиропов, фруктов, ягод и овощей.
Для получения овсяных киселей используют в качестве питательной среды тесто из овсяных хлопьев или овсяной муки. Овсяные кисели получают со стевией или без неё, с добавлением по выбору ягод, в частности брусники, ежевики. Тесто из овсяных хлопьев или овсяной муки подвергают
ферментации с помощью Zygosaccharomyces hisporus. По достижения рецептурных показателей кислотности тесто промывают водой через сито, крупные частицы остаются на сите, а жидкая фракция купажируется с рецептурными компонентами, доводится при размешивании до кипения и разливается в банки, или бутылки.

Claims

Формула изобретения
1.Консорциум чайного гриба Fungi Tea , продуцент комплекса органических кислот, ферментов и витаминов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под номером ВКПМ Sa-14.
2. Штамм Zygosaccharomyces bisporus, продуцент комплекса органических кислот, ферментов и витаминов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под номером ВКПМ Y-3399.
3. Консорциум Medusomyces gisevii alfa, продуцент комплекса органических кислот, ферментов и витаминов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под номером ВКПМ Sa-10.
4. Gluconoacetobacter hansenii G-001, продуцент комплекса органических кислот, ферментов и витаминов, депонированный во Всероссийской Коллекции
Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под номером ВКПМ В-9519.
5. Dekkera anomala D001, продуцент комплекса органических кислот, ферментов и витаминов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под номером ВКПМ Y-3237.
6. Medusomyces gisevii, продуцент комплекса органических кислот, ферментов и витаминов, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) под номером ВКПМ S А- 12
7. Способ получения сброженной основы для производства квасов брожения на линиях по розливу безалкогольных напитков на предприятиях, не имеющих собственного бродильного производства, предусматривающий последовательное сбраживание углеводосодержащего сырья, причем основное брожение
осуществляют с помощью культур хлебопекарных дрожжей или
Zygosaccharomyces hisporus с последующим дображиванием Gluconoacetobacter hansenii G-001 или Medusomyces gisevii alfa Sa-10.
8. Способ по n. 7, отличающийся тем, что основное брожение осуществляют с периодическим добавлением свежей культуры дрожжей и новых порций углеводосодержащего сырья.
9. Способ по п. 7, отличающийся тем, что в качестве углеводсодержащего субстрата используют ржаной солодовый экстракт и осуществляют основное брожение с помощью дрожжей Zygosaccl arornyces bisporus без последующего дображивания.
10. Способ получения кваса брожения на линиях по розливу безалкогольных напитков на предприятиях, не имеющих собственного бродильного
производства, предусматривающий смешивание сброженной основы,
полученного способом по п. 7, с рецептурными компонентами и разбавлением ее холодной и насыщенной диоксидом углерода водой.
11. Способ производства безалкогольного кваса, предусматривающий
последовательное сбраживание углеводосодержащего сырья, отличающийся тем, что осуществляют предварительное сбраживание на основе культуры штамма Dekkera anomala D-001, и последующее сбраживание ведут в присутствии
Gluconoacetobacter hansenii G-001.
12. Способ получения культуральной жидкости чайного гриба,
предусматривающий сбраживание углеводосодержащего сырья с помощью культуры чайного гриба, отличающийся тем, что углеводосодержащее сырьё до начала образования зооглеи насыщают воздухом под избыточным давлением, причем питательная среда подвергается дополнительному перемешиванию с помощью циркуляции.
13. Способ получения культуральной жидкости чайного гриба по п. 12,
отличающийся тем, что культура чайного гриба представляет культуру
консорциума Fungi Tea Sa-14, Medusomyces giscyii alfa Sa-10 или Medusomyces giscyii SA-14.
14. Способ получения культуральной жидкости чайного гриба по п. 12,
отличающийся тем, что осуществляют предварительное сбраживание
Zygosaccharomyces hisporus с последующим дображиванием Fungi Tea Sa-12, Medusomyces giscyii alfa Sa-10 или Medusomyces giscyii SA-14.
15. Способ получения концентрата чайного гриба, предусматривающий
сбраживание концентрированной питательной среды, состоящей из сбраживаемых углеводов и растительного сырья, культуральной жидкостью, полученной согласно способу по п. 12.
16. Способ получения концентрата чайного гриба по п. 15, отличающийся тем, что стабилизацию кислотности осуществляют с помощью Gluconoacetobacter hansenii G-001 или молочнокислых бактерий.
17. Способ получения напитков чайного гриба, предусматривающий
сбраживание питательной среды, состоящей из углеводосодержащего сиропа на основе рецептурных компонентов напитка, в присутствии культуры чайного гриба, отличающийся тем, что осуществляют сбраживание с использованием культуральной жидкости, полученной согласно способу по п. 12, до достижении - рецептурных показателей кислотности свежеприготовленного напитка.
18. Способ получения напитков чайного гриба по п. 17, отличающийся тем, что созревание напитка происходит в бутылке, причем после розлива в стеклянные бутылки напиток выдерживают в камере при температуте от +30 до +35 град. С до достижения рецептурных показателей кислотности свежеприготовленного напитка, после чего подвергают туннельной пастеризации или
автоклавированию.
19. Способ получения напитков чайного гриба по п. 17, отличающийся тем, что в качестве питательний среды используют овощные соки со специями и солью, и в качестве культуральной жидкости используют культуру консорциума
Medusomyces gisevii alfa Sa-10, Fungi Tea Sa-12, Medusomyces giscyii alfa Sa-10 или Medusomyces giscyii SA-14.
20. Способ получения напитков чайного гриба, отличающийся тем, что
купажируют обеспложенный или стерилизованный концентрат чайного гриба, полученный согласно способу по п. 15, и рецептурные компоненты готового напитка с последующей пастеризацией, или без нее.
21. Способ получения экстрактов овощей, отличающийся тем, что сбраживают овощи с помощью культуральной жидкости, полученной согласно способу по п. 12.
22. Продукт, полученный способом по п. 12.
PCT/RU2012/000296 2011-04-19 2012-04-18 Консорциумы микроорганизмов, штаммы микроорганизмов, способы получения сброженной основы, кваса брожения, безалкогольного кваса, способы получения культуральной жидкости чайного гриба, концентрата чайного гриба, напитков чайного гриба и способ получения экстрактов овощей Ceased WO2012144937A2 (ru)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA2833764A CA2833764C (en) 2011-04-19 2012-04-18 Fermentation methods to produce kvass, kombucha and vegetable extracts using a consortium of microorganisms
US14/112,760 US9532589B2 (en) 2011-04-19 2012-04-18 Consortia and strains of microorganisms, and methods of use thereof

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011115345 2011-04-19
RU2011115345/10A RU2552485C2 (ru) 2011-04-19 2011-04-19 Культуры микроорганизмов, способ получения сброженной основы для производства квасов, способ получения культуральной жидкости чайного гриба, культуральная жидкость чайного гриба, способ получения напитков

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2012144937A2 true WO2012144937A2 (ru) 2012-10-26
WO2012144937A3 WO2012144937A3 (ru) 2013-02-28

Family

ID=47042091

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2012/000296 Ceased WO2012144937A2 (ru) 2011-04-19 2012-04-18 Консорциумы микроорганизмов, штаммы микроорганизмов, способы получения сброженной основы, кваса брожения, безалкогольного кваса, способы получения культуральной жидкости чайного гриба, концентрата чайного гриба, напитков чайного гриба и способ получения экстрактов овощей

Country Status (4)

Country Link
US (1) US9532589B2 (ru)
CA (1) CA2833764C (ru)
RU (1) RU2552485C2 (ru)
WO (1) WO2012144937A2 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105167068A (zh) * 2015-10-12 2015-12-23 蔡凤文 一种柠檬红茶菌饮料
PL450282A1 (pl) * 2024-11-16 2025-06-23 Politechnika Gdańska Sposób otrzymywania napojów fermentowanych oraz napoje fermentowane

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9877494B2 (en) 2014-08-21 2018-01-30 Shantung HSU Active fermentation process and fermented liquid and drinks made by using the same
CN104287017A (zh) * 2014-10-28 2015-01-21 何寒 黄瓜红茶菌饮料
CN104305427A (zh) * 2014-11-07 2015-01-28 何寒 葡萄红茶菌饮料
RU2583512C1 (ru) * 2015-06-19 2016-05-10 Олег Иванович Квасенков Способ производства хлебного кваса
RU2583501C1 (ru) * 2015-07-14 2016-05-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
RU2597291C1 (ru) * 2015-07-16 2016-09-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем химико-энергетических технологий Сибирского отделения РАН (ИПХЭТ СО РАН) Способ получения бактериальной целлюлозы
RU2590149C1 (ru) * 2015-07-17 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2590150C1 (ru) * 2015-07-17 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2590151C1 (ru) * 2015-07-20 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2590143C1 (ru) * 2015-07-20 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2590144C1 (ru) * 2015-07-22 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2584303C1 (ru) * 2015-07-24 2016-05-20 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2584296C1 (ru) * 2015-07-27 2016-05-20 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2608497C1 (ru) * 2015-08-06 2017-01-18 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательский Институт Микотехнологии (Ооо "Нии Микотехнологии") Грибное пиво и способ его получения
RU2582042C1 (ru) * 2015-08-11 2016-04-20 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2582041C1 (ru) * 2015-08-11 2016-04-20 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2582040C1 (ru) * 2015-08-11 2016-04-20 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2582772C1 (ru) * 2015-08-11 2016-04-27 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2582038C1 (ru) * 2015-08-11 2016-04-20 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2697385C2 (ru) * 2015-08-17 2019-08-13 Мальтэроп Груп Композиция компаунда кваса брожения, способ его приготовления и его использование в приготовлении напитков
RU2589204C1 (ru) * 2015-08-19 2016-07-10 Олег Иванович Квасенков Способ производства хлебного кваса
RU2596352C1 (ru) * 2015-09-07 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2596356C1 (ru) * 2015-09-22 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2596354C1 (ru) * 2015-09-22 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2596360C1 (ru) * 2015-09-23 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки хлебного кваса
RU2609679C1 (ru) * 2015-10-02 2017-02-02 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2609307C1 (ru) * 2015-10-02 2017-02-01 Олег Иванович Квасенков Способ производства концентрата квасного сусла
RU2609690C1 (ru) * 2015-10-05 2017-02-02 Олег Иванович Квасенков Способ получения концентрата квасного сусла
RU2609360C1 (ru) * 2015-10-05 2017-02-01 Олег Иванович Квасенков Способ получения концентрата квасного сусла
RU2609350C1 (ru) * 2015-10-05 2017-02-01 Олег Иванович Квасенков Способ получения концентрата квасного сусла
RU2609328C1 (ru) * 2015-10-05 2017-02-01 Олег Иванович Квасенков Способ получения концентрата квасного сусла
RU2609925C1 (ru) * 2015-10-06 2017-02-07 Олег Иванович Квасенков Способ получения концентрата квасного сусла
RU2609936C1 (ru) * 2015-10-06 2017-02-07 Олег Иванович Квасенков Способ получения концентрата квасного сусла
RU2596377C1 (ru) * 2015-10-09 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения кваса из солода
RU2596373C1 (ru) * 2015-10-09 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ производства кваса из солода
RU2596424C1 (ru) * 2015-10-09 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения белого окрошечного кваса
RU2596440C1 (ru) * 2015-10-13 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ производства кваса с мятой
RU2596432C1 (ru) * 2015-10-13 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки кваса ароматного с душицей
RU2596434C1 (ru) * 2015-10-13 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ выработки кваса ароматного с душицей
RU2596472C1 (ru) * 2015-10-14 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения кваса с мятой
RU2596473C1 (ru) * 2015-10-14 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения кваса с мятой
RU2596443C1 (ru) * 2015-10-14 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения кваса с мятой
RU2596650C1 (ru) * 2015-10-20 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ получения окрошечного кваса
RU2596642C1 (ru) * 2015-10-20 2016-09-10 Олег Иванович Квасенков Способ производства окрошечного кваса
CN105475791A (zh) * 2015-12-16 2016-04-13 深圳市中科台富科技有限公司 一种酵素碳酸饮料及其制备方法
PL3694343T3 (pl) * 2017-10-13 2024-02-26 Shaun MOSHASHA Bibułki do skręcania papierosów wykonane z biofilmów z kombuchy
US12098508B2 (en) * 2017-10-13 2024-09-24 Shaun Moshasha Cellulosic fiber additive formed from Kombucha biofilms
US10787634B2 (en) * 2019-02-22 2020-09-29 Clear Craft, Llc Space-efficient, high throughput fermenting system for producing alcohol-limited kombucha
US20230210142A1 (en) * 2020-06-08 2023-07-06 Societe Des Produits Nestle S.A. Method for preparing a comestible product
WO2022094347A1 (en) 2020-10-30 2022-05-05 Imvela Corp. Fermented beverages and methods of production thereof
CA3218163A1 (en) 2021-05-17 2022-11-24 Anne PALERMO Food product comprising a co-culture of bacteria and fungi
WO2023172169A1 (ru) * 2022-03-09 2023-09-14 Расим Бекзадаевич РАМАЗАНОВ Способ производства напитка
CN115141762B (zh) * 2022-07-11 2024-01-30 澄江老仓醋食品科技有限公司 路德类酵母菌及获取方法、复合冻干发酵剂的制备方法及其在制醋中的应用
WO2024128940A1 (ru) * 2022-12-12 2024-06-20 Расим Бекзадаевич РАМАЗАНОВ Способ производства напитка

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4948728A (en) * 1985-09-03 1990-08-14 California Institute Of Technology Monolith reactor containing a plurality of flow passages and method for carrying out biological reactions
RU2081622C1 (ru) * 1995-06-21 1997-06-20 Михаил Николаевич Елисеев Способ производства кваса или напитков брожения из зернового сырья
RU2081911C1 (ru) * 1995-11-28 1997-06-20 Елизавета Васильевна Чекасина Консорциум к-17 дрожжей и бактерий - продуцент комплекса витаминов, органических кислот, ферментов и целлюлозы и способ получения слабоалкогольного напитка с его использованием
RU2153816C1 (ru) * 1999-10-06 2000-08-10 Хачатрян Владимир Хачатурович Напиток, способ производства культуральной жидкости чайного гриба и способ производства напитка
RU2210952C2 (ru) * 2000-08-25 2003-08-27 Огарков Борис Никитович Безалкогольный напиток "мелиссовый"
RU2337592C2 (ru) * 2006-10-06 2008-11-10 Дмитрий Алексеевич Зайцев Способ приготовления напитка, обладающего биологической активностью, и напиток, полученный этим способом

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105167068A (zh) * 2015-10-12 2015-12-23 蔡凤文 一种柠檬红茶菌饮料
PL450282A1 (pl) * 2024-11-16 2025-06-23 Politechnika Gdańska Sposób otrzymywania napojów fermentowanych oraz napoje fermentowane

Also Published As

Publication number Publication date
RU2552485C2 (ru) 2015-06-10
US9532589B2 (en) 2017-01-03
CA2833764C (en) 2020-07-28
WO2012144937A3 (ru) 2013-02-28
RU2011115345A (ru) 2012-10-27
CA2833764A1 (en) 2012-10-26
US20140141123A1 (en) 2014-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2552485C2 (ru) Культуры микроорганизмов, способ получения сброженной основы для производства квасов, способ получения культуральной жидкости чайного гриба, культуральная жидкость чайного гриба, способ получения напитков
Bhat et al. An overview on the biological production of vinegar
GB2134133A (en) A process for the manufacture of a naturally carbonated beverage
Akbarirad et al. Employing of the different fruit juices substrates in vinegar kombucha preparation
Giudici et al. Vinegars
JP2021094015A (ja) ワインテイスト飲料
RU2056770C1 (ru) Способ производства фруктового кваса
RU2337592C2 (ru) Способ приготовления напитка, обладающего биологической активностью, и напиток, полученный этим способом
RU2280394C1 (ru) Композиция ингредиентов, обладающая биологической активностью (варианты), способ ее получения (варианты) и способ получения зооглеи чайного гриба
US20230193175A1 (en) Microorganism Compatible Alcoholic Kombucha Flavorings
Saba et al. Bioenrichment of guava juice with prebiotic and probiotics
KR100767626B1 (ko) 무화과 발효식초의 제조방법 및 그에 의해 제조된 무화과발효식초
WO2021235466A1 (ja) 酵母用培地添加剤
KR102736735B1 (ko) 저온 발효 아로니아 콤부차 및 이의 제조방법
RU2056771C1 (ru) Способ производства фруктового кваса
JP2003024042A (ja) 食酢、その製造方法、及び該食酢を含有する飲食品
Mohammed et al. Comparative quality assessment of wine produced from green and purple grapes using Saccharomyces cerevisiae isolated from fermented milk
JP2021527446A (ja) 発酵気泡酢酸飲料及びその調製方法
JPH0373264B2 (ru)
Thuy et al. Investigation into the Use of Kombucha Tea Fungus Bio-cellulose for Gummy Candy Production
JPS6091970A (ja) 発酵飲料及びその製造方法
KR20100003396A (ko) 유효 미생물을 이용한 농수산물 소재의 기능성 발효제제조개발
JPS6094076A (ja) 発酵飲料及びその製造方法
Gangurde Optimisation of kombucha fermentation: a thesis submitted in partial fulfilment of the requirements for the degree of Master of Food Technology, Massey University, Auckland, New Zealand
RU2041668C1 (ru) Способ производства фруктового кваса

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 12774591

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2833764

Country of ref document: CA

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 14112760

Country of ref document: US

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 12774591

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2