WO2017116204A1 - 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 - Google Patents

글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 Download PDF

Info

Publication number
WO2017116204A1
WO2017116204A1 PCT/KR2016/015554 KR2016015554W WO2017116204A1 WO 2017116204 A1 WO2017116204 A1 WO 2017116204A1 KR 2016015554 W KR2016015554 W KR 2016015554W WO 2017116204 A1 WO2017116204 A1 WO 2017116204A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
cysteine
glutamine
alanine
lysine
glutamic acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/KR2016/015554
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
오의림
이종석
박영진
임창기
정성엽
권세창
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hanmi Pharmaceutical Co Ltd
Hanmi Pharmaceutical Industries Co Ltd
Original Assignee
Hanmi Pharmaceutical Co Ltd
Hanmi Pharmaceutical Industries Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to CN201680082352.3A priority Critical patent/CN108699125B/zh
Priority to RS20220774A priority patent/RS63541B1/sr
Priority to TNP/2018/000228A priority patent/TN2018000228A1/en
Priority to MA42889A priority patent/MA42889B2/fr
Priority to EP21201279.3A priority patent/EP3985017A1/en
Priority to EA201891360A priority patent/EA038544B1/ru
Priority to EP16882156.9A priority patent/EP3398961B1/en
Priority to CN202211234594.3A priority patent/CN116063454A/zh
Priority to AU2016382393A priority patent/AU2016382393B2/en
Priority to ES16882156T priority patent/ES2925098T3/es
Priority to DK16882156.9T priority patent/DK3398961T3/da
Priority to HK18114910.8A priority patent/HK1255834B/en
Priority to JP2018534682A priority patent/JP6712323B2/ja
Priority to NZ744306A priority patent/NZ744306B2/en
Priority to IL260318A priority patent/IL260318B2/en
Priority to CA3010182A priority patent/CA3010182A1/en
Priority to BR112018013530-5A priority patent/BR112018013530A2/pt
Priority to PE2023002166A priority patent/PE20250556A1/es
Priority to CN202211234307.9A priority patent/CN116063453A/zh
Application filed by Hanmi Pharmaceutical Co Ltd, Hanmi Pharmaceutical Industries Co Ltd filed Critical Hanmi Pharmaceutical Co Ltd
Priority to PH1/2018/501409A priority patent/PH12018501409B1/en
Priority to PL16882156.9T priority patent/PL3398961T3/pl
Priority to MX2018008027A priority patent/MX2018008027A/es
Priority to HRP20220995TT priority patent/HRP20220995T1/hr
Priority to SG11201805586SA priority patent/SG11201805586SA/en
Priority to CR20180380A priority patent/CR20180380A/es
Priority to MA51955A priority patent/MA51955B1/fr
Publication of WO2017116204A1 publication Critical patent/WO2017116204A1/ko
Priority to SA518391903A priority patent/SA518391903B1/ar
Priority to US16/023,994 priority patent/US10370426B2/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Priority to CONC2018/0006982A priority patent/CO2018006982A2/es
Priority to ZA2018/04997A priority patent/ZA201804997B/en
Priority to US16/370,057 priority patent/US11332508B2/en
Priority to AU2019203888A priority patent/AU2019203888B2/en
Priority to US17/700,055 priority patent/US20220213164A1/en
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/57563—Vasoactive intestinal peptide [VIP]; Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/72—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/283—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Definitions

  • the present invention relates to triple activators having activity on all glucagon, GLP-1 and GIP receptors and their use.
  • Diabetes including obesity and type 2 diabetes, is one of the representative metabolic diseases occurring in modern society and is recognized as a global health threat, and the economic costs associated with the onset of the disease are increasing rapidly.
  • GLP-1 Glucagon-like peptide-1
  • GIP Glucose-dependent insuliontropic polypeptide
  • GLP-1 is a hormone secreted by the small intestine stimulated by food intake, which promotes insulin secretion in the pancreas and inhibits glucagon secretion in a blood glucose concentration-dependent manner, thereby lowering blood glucose levels.
  • it acts as a satiety factor to slow the digestive action of the stomach and has a role in reducing food intake by delaying the gastrointestinal transit time of the food digestion.
  • it has been reported that there is an effect of inhibiting food intake and weight loss when administered to rats, and this effect was found to be the same in both normal and obese states, showing the potential as a therapeutic agent for obesity.
  • GIP one of the gastrointestinal hormones stimulated by food in addition to GLP-1, is a hormone composed of 42 amino acids secreted from small K cells in the small intestine, which promote insulin secretion and increase blood glucose levels depending on blood glucose levels. GLP-1 has been reported to increase the activity and anti-inflammatory effects.
  • Glucagon is produced by the pancreas when blood sugar begins to drop due to medication or disease, hormone or enzyme deficiency. Glucagon signals the liver to break down glycogen to release glucose and to raise blood sugar levels to normal levels. In addition, glucagon stimulates fat breakdown and energy metabolism (energy expenditudre) to promote anti-obesity effects by stimulating appetite suppression in animals and humans and hormone sensitive lipase in fat cells in addition to synergistic effects. Indications have been reported.
  • GLP-1 and GIP have a high activity of GLP-1 and GIP to lower blood sugar, but have a lower weight of glucagon, but have a higher glycemic control effect, but GLP-1, GIP, and glucagon have higher activity.
  • One object of the present invention is to provide isolated peptides having activity against glucagon receptor, Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) receptor, and Glucose-dependent insuliontropic polypeptide (GIP) receptor.
  • GLP-1 Glucagon-like peptide-1
  • GIP Glucose-dependent insuliontropic polypeptide
  • Another object of the present invention is to provide a polynucleotide encoding the isolated peptide, a recombinant expression vector comprising the polynucleotide, and a transformant comprising the polynucleotide or the recombinant expression vector.
  • Another object of the present invention is to provide a method for producing the isolated peptide.
  • Another object of the present invention is to provide a composition comprising the isolated peptide.
  • Another object of the present invention is to provide a method for treating a disease in which the isolated peptide or composition comprising the same comprises administering the isolated peptide or composition comprising the same to an individual in need thereof. .
  • Another object of the present invention is to provide the use of said isolated peptide or composition for use in the manufacture of a medicament.
  • One embodiment of the present invention for solving the above problems is an isolated peptide having activity against glucagon receptor, Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) receptor, and Glucose-dependent insuliontropic polypeptide (GIP) receptor.
  • GLP-1 Glucagon-like peptide-1
  • GIP Glucose-dependent insuliontropic polypeptide
  • the peptides undergo modifications selected from the group consisting of substitution, addition, removal, modification, and combinations thereof of at least one or more amino acids in the native glucagon sequence. It is characterized by being an analog of natural type glucagon.
  • the additional amino acid sequence is derived from a native GLP-1, native GIP, or native exendin-4 amino acid sequence.
  • the peptide is an isolated peptide comprising an amino acid sequence represented by the following general formula (1):
  • Xaa1 is histidine (His, H), 4-imidazoacetyl (CA), or tyrosine (Tyr, Y),
  • Xaa2 is glycine (Gly, G), alpha-methyl-glutamic acid, or Aib (aminoisobutyric acid),
  • Xaa 3 is glutamic acid (Glu, E) or glutamine (Gln, Q),
  • Xaa7 is threonine (Thr, T) or isoleucine (Ile, I),
  • Xaa10 is leucine (Leu, L), tyrosine (Tyr, Y), lysine (Lys, K), cysteine (Cys, C), or valine (Val, V),
  • Xaa12 is lysine (Lys, K), serine (Ser, S), or isoleucine (Ile, I),
  • Xaa13 is glutamine (Gln, Q), tyrosine (Tyr, Y), alanine (Ala, A), or cysteine (Cys, C),
  • Xaa14 is leucine (Leu, L), methionine (Met, M), or tyrosine (Tyr, Y),
  • Xaa15 is cysteine (Cys, C), aspartic acid (Asp, D), glutamic acid (Glu, E), or leucine (Leu, L),
  • Xaa16 is glycine (Gly, G), glutamic acid (Glu, E), or serine (Ser, S),
  • Xaa17 is glutamine (Gln, Q), arginine (Arg, R), isoleucine (Ile, I), glutamic acid (Glu, E), cysteine (Cys, C), or lysine (Lys, K),
  • Xaa18 is alanine (Ala, A), glutamine (Gln, Q), arginine (Arg, R), or histidine (His, H),
  • Xaa19 is alanine (Ala, A), glutamine (Gln, Q), cysteine (Cys, C), or valine (Val, V),
  • Xaa20 is lysine (Lys, K), glutamine (Gln, Q), or arginine (Arg, R),
  • Xaa21 is glutamic acid (Glu, E), glutamine (Gln, Q), leucine (Leu, L), cysteine (Cys, C), or aspartic acid (Asp, D),
  • Xaa23 is isoleucine (Ile, I) or valine (Val, V),
  • Xaa24 is alanine (Ala, A), glutamine (Gln, Q), cysteine (Cys, C), asparagine (Asn, N), aspartic acid (Asp, D), or glutamic acid (Glu, E),
  • Xaa27 is valine (Val, V), leucine (Leu, L), lysine (Lys, K), or methionine (Met, M),
  • Xaa28 is cysteine (Cys, C), lysine (Lys, K), alanine (Ala, A), asparagine (Asn, N), or aspartic acid (Asp, D),
  • Xaa29 is cysteine (Cys, C), glycine (Gly, G), glutamine (Gln, Q), threonine (Thr, T), glutamic acid (Glu, E), or histidine (His, H),
  • Xaa30 is cysteine (Cys, C), glycine (Gly, G), lysine (Lys, K), or histidine (His, H) or absent,
  • R1 is cysteine (Cys, C), GKKNDWKHNIT (SEQ ID NO: 106), m-SSGAPPPS-n (SEQ ID NO: 107), or m-SSGQPPPS-n (SEQ ID NO: 108), or absent,
  • m is -Cys-, -Pro-, or -Gly-Pro-,
  • n is -Cys-, -Gly-, -Ser-, or -His-Gly- or absent.
  • Xaa14 is leucine or methionine
  • Xaa15 is characterized by being cysteine, aspartic acid, or leucine.
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine, cysteine, or valine
  • Xaa12 is lysine or isoleucine
  • Xaa13 is tyrosine, alanine, glutamine, or cysteine,
  • Xaa14 is leucine, cysteine, or methionine
  • Xaa15 is cysteine, leucine, glutamic acid, or aspartic acid,
  • Xaa17 is glutamine, arginine, isoleucine, cysteine, glutamic acid, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, glutamine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, valine, or cysteine
  • Xaa20 is lysine, arginine, or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid, glutamine, leucine, cysteine, or aspartic acid,
  • Xaa23 is isoleucine or valine
  • Xaa24 is cysteine, alanine, glutamine, asparagine, glutamic acid, or aspartic acid,
  • Xaa27 is characterized in that it is leucine or lysine.
  • the peptide comprises an amino acid sequence represented by the following general formula 2:
  • Xaa1 is 4-imidazoacetyl, histidine, or tyrosine,
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa10 is tyrosine, or cysteine
  • Xaa13 is alanine, glutamine, tyrosine, or cysteine,
  • Xaa14 is leucine, methionine, or tyrosine
  • Xaa15 is aspartic acid, glutamic acid, or leucine
  • Xaa16 is glycine, glutamic acid, or serine,
  • Xaa17 is glutamine, arginine, isoleucine, glutamic acid, cysteine, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, glutamine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, cysteine, or valine
  • Xaa20 is lysine, glutamine, or arginine
  • Xaa21 is cysteine, glutamic acid, glutamine, leucine, or aspartic acid,
  • Xaa23 is isoleucine or valine
  • Xaa24 is cysteine, alanine, glutamine, asparagine, or glutamic acid,
  • Xaa28 is lysine, cysteine, asparagine, or aspartic acid
  • Xaa29 is glycine, glutamine, cysteine, or histidine
  • Xaa30 is cysteine, glycine, lysine, or histidine
  • Xaa31 is proline or cysteine
  • Xaa40 is cysteine or absent.
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine, cysteine, or valine
  • Xaa12 is lysine or isoleucine
  • Xaa13 is tyrosine, alanine, or cysteine
  • Xaa14 is leucine or methionine
  • Xaa15 is cysteine or aspartic acid
  • Xaa17 is glutamine, arginine, isoleucine, cysteine, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, or cysteine
  • Xaa20 is lysine or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid, cysteine, or aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is alanine, glutamine, cysteine, asparagine, or aspartic acid,
  • Xaa27 is characterized in that it is leucine or lysine.
  • Xaa13 is alanine, tyrosine, or cysteine
  • Xaa15 is aspartic acid or glutamic acid
  • Xaa17 is glutamine, arginine, cysteine, or lysine
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa21 is cysteine, glutamic acid, glutamine, or aspartic acid,
  • Xaa23 is isoleucine or valine
  • Xaa24 is cysteine, glutamine, or asparagine
  • Xaa28 is cysteine, asparagine, or aspartic acid
  • Xaa29 is glutamine, cysteine, or histidine
  • Xaa30 is characterized in that it is cysteine, lysine, or histidine.
  • Xaa2 is alpha-methyl-glutamic acid or Aib
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine or cysteine
  • Xaa12 is lysine or isoleucine
  • Xaa13 is tyrosine, alanine, or cysteine
  • Xaa14 is leucine or methionine
  • Xaa15 is cysteine or aspartic acid
  • Xaa16 is glutamic acid
  • Xaa17 is arginine, isoleucine, cysteine, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, or cysteine
  • Xaa20 is lysine or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid or aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is glutamine, asparagine, or aspartic acid
  • Xaa27 is leucine
  • Xaa28 is characterized by being cysteine, alanine, asparagine, or aspartic acid.
  • Xaa1 is histidine or 4-imidazoacetyl
  • Xaa2 is alpha-methyl-glutamic acid or Aib
  • Xaa3 is glutamine
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine
  • Xaa12 is isoleucine
  • Xaa13 is alanine or cysteine
  • Xaa14 is methionine
  • Xaa15 is aspartic acid
  • Xaa16 is glutamic acid
  • Xaa17 is isoleucine or lysine
  • Xaa18 is alanine or histidine
  • Xaa19 is glutamine or cysteine
  • Xaa20 is lysine
  • Xaa21 is aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is asparagine
  • Xaa27 is leucine
  • Xaa28 is alanine or asparagine
  • Xaa29 is glutamine or threonine
  • Xaa30 is cysteine or lysine, or is absent.
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa3 is glutamine
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine, cysteine, or valine
  • Xaa12 is lysine
  • Xaa13 is tyrosine
  • Xaa14 is leucine
  • Xaa15 is aspartic acid
  • Xaa16 is glycine, glutamic acid, or serine,
  • Xaa17 is glutamine, arginine, cysteine, or lysine
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine or glutamine
  • Xaa20 is lysine or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid, cysteine, or aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is alanine, glutamine, or cysteine
  • Xaa27 is leucine or lysine
  • Xaa29 is characterized in that it is glycine, glutamine, threonine, or histidine.
  • the peptide is a peptide comprising the amino acid sequence of Formula 3 below:
  • Xaa1 is histidine or tyrosine
  • Xaa2 is alpha-methyl-glutamic acid or Aib
  • Xaa13 is alanine, tyrosine or cysteine
  • Xaa17 is arginine, cysteine, or lysine
  • Xaa18 is alanine or arginine
  • Xaa19 is alanine or cysteine
  • Xaa21 is glutamic acid or aspartic acid
  • Xaa24 is glutamine or asparagine
  • Xaa28 is cysteine or aspartic acid
  • Xaa29 is cysteine, histidine, or glutamine
  • Xaa30 is cysteine or histidine
  • Xaa31 is proline or cysteine
  • Xaa40 is cysteine or absent.
  • R1 is cysteine, CSSGQPPPS (SEQ ID NO: 109), GPSSGAPPPS (SEQ ID NO: 110), GPSSGAPPPSC (SEQ ID NO: 111), PSSGAPPPS (SEQ ID NO: 112), PSSGAPPPSG (SEQ ID NO: 113), PSSGAPPPSHG (SEQ ID NO: 114) ), PSSGAPPPSS (SEQ ID NO: 115), PSSGQPPPS (SEQ ID NO: 116), or PSSGQPPPSC (SEQ ID NO: 117), or is absent.
  • amino acids 16 and 20 from the N-terminus in the general formula form a ring with each other.
  • the peptide is characterized in that it comprises an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 102.
  • the peptide is characterized by retaining the activity of at least one of i) to iii):
  • the peptide is characterized by an increased half-life in the body compared to any one of native GLP-1, native glucagon, and native GIP:
  • the peptide is characterized in that its C-terminus is amidated.
  • Another embodiment embodying the present invention is a polynucleotide encoding the isolated peptide, a recombinant expression vector comprising the polynucleotide, and a transformant comprising the polynucleotide or the recombinant expression vector.
  • Another embodiment embodying the invention is a method of making the isolated peptide.
  • Another embodiment embodying the invention is a composition comprising said isolated peptide.
  • the composition is characterized in that the pharmaceutical composition.
  • composition is characterized in that for the prevention or treatment of metabolic syndrome.
  • the metabolic syndrome may be associated with atherosclerosis, hypercholesterolemia, dyslipidemia, obesity, diabetes, hypertension, dyslipidemia, atherosclerosis, atherosclerosis, arteriosclerosis, or coronary heart disease (coronary heart disease). It is characterized by including.
  • Another object of the present invention is to provide a method for treating a disease in which the isolated peptide or composition comprising the same comprises administering the isolated peptide or composition comprising the same to an individual in need thereof. .
  • Another object of the present invention is to provide the use of said isolated peptide or composition for use in the manufacture of a medicament.
  • the peptide according to the present invention has activity against the glucagon receptor, the Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) receptor, and the Glucose-dependent insuliontropic polypeptide (GIP) receptor, and can be applied to the treatment of metabolic syndrome.
  • GLP-1 Glucagon-like peptide-1
  • GIP Glucose-dependent insuliontropic polypeptide
  • One embodiment embodying the present invention provides isolated peptides having activity against glucagon receptor, Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) receptor, and Glucose-dependent insuliontropic polypeptide (GIP) receptor.
  • GLP-1 Glucagon-like peptide-1
  • GIP Glucose-dependent insuliontropic polypeptide
  • Isolated peptides having activity against the glucagon, GLP-1, and GIP receptors can be used interchangeably as triple activators in the present invention.
  • triple activators include various substances, such as various peptides, having significant levels of activity on glucagon, GLP-1, and GIP receptors.
  • the triple activator having a significant level of activity on the glucagon, GLP-1, and GIP receptors may be one or more receptors, specifically two or more of glucagon, GLP-1, and GIP receptors.
  • more specifically all three receptors in in vitro Activity is at least 0.1%, at least 1%, at least 2%, at least 3%, at least 4%, at least 5%, 6, relative to the native ligand (natural glucagon, native GLP-1, and native GIP) of the receptor At least%, at least 7%, at least 8%, at least 9%, at least 10%, at least 20%, at least 30%, at least 40%, at least 50%, at least 60%, at least 70%, at least 80%, at least 90% , 100% or more.
  • Example 2 of the present specification A method for measuring in vitro activity may be referred to Example 2 of the present specification, but is not particularly limited thereto.
  • the triple activator is characterized by having at least one of the following i) to iii), specifically a significant activity:
  • activating the receptor means that the receptor in vitro activity at least 0.1%, at least 1%, at least 2%, at least 3%, at least 4%, at least 5%, at least 6%, at least 7%, at least 8%, at least 9%, at least 10%, 20%
  • activating the receptor means that the receptor in vitro activity at least 0.1%, at least 1%, at least 2%, at least 3%, at least 4%, at least 5%, at least 6%, at least 7%, at least 8%, at least 9%, at least 10%, 20%
  • the case where more than 30%, 40% or more, 50% or more, 60% or more, 70% or more, 80% or more, 90% or more, 100% or more is shown is mentioned. However, it is not limited thereto.
  • the triple activator may be an increased half-life in the body compared to any one of natural GLP-1, natural glucagon, and natural GIP, but is not particularly limited thereto.
  • the glucagon analog may be non-naturally occurring.
  • the isolated peptide may be an analog of natural glucagon, but is not particularly limited thereto.
  • Natural glucagon analogues according to the present invention include peptides having one or more differences in amino acid sequence compared to natural glucagon, peptides modified through modification of the natural glucagon sequence, mimetics of natural glucagon.
  • natural glucagon may have the following amino acid sequence:
  • the isolated peptide has a modification selected from the group consisting of substitution, addition, removal, modification, and combinations thereof, with at least one amino acid in the native glucagon sequence, It may be an analog of natural glucagon, but is not particularly limited thereto.
  • substitution of the said amino acid includes both substitution with an amino acid and substitution with a non-natural type compound.
  • the addition may be at the N-terminus and / or C-terminus of the peptide.
  • the length of the added amino acid is not particularly limited thereto, and at least one, at least two, at least three, at least four, at least five, at least six, at least seven, at least eight, at least nine, at least ten, at least eleven amino acids are to be added. And broadly, including, but not limited to, the addition of polypeptides.
  • the glucagon analogue is 1, 2, 3, 7, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 18 in the natural glucagon amino acid sequence
  • At least 1, at least 2, at least 3, at least 4, at least 5, at least 6, at least 7, selected from the group consisting of 19, 20, 21, 23, 24, 27, 28 and 29, 8 or more, 9 or more, 10 or more, 11 or more, 12 or more, 13 or more, 14 or more, 15 or more, 16 or more, 17 or more, 18 or more, 19 or more, or 20 amino acids may be substituted with other amino acids,
  • at least one, at least two, at least three, at least four, at least five, at least six, at least seven, at least eight, at least nine, at least ten, at least eleven amino acids may be added to the C-terminus.
  • the glucagon analogue is 1, 2, 3, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 19 in the natural type glucagon amino acid sequence.
  • At least 1, at least 2, at least 3, at least 4, at least 5, at least 6, at least 7, at least 8, selected from the group consisting of 20, 21, 23, 24, 27, 28 and 29, 9 or more, 10 or more, 11 or more, 12 or more, 13 or more, 14 or more, 15 or more, 16 or more, 17 or more, 18 or more, 19 amino acids may be substituted with other amino acids, and also independently or additionally C
  • One or more, two or more, three or more, four or more, five or more, six or more, seven or more, eight or more, nine or more, ten or more, or eleven or more amino acids may be added to the end, but is not particularly limited thereto. no.
  • the glucagon analogue is 1, 2, 3, 10, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, At least 1, at least 2, at least 3, at least 4, at least 5, at least 6, at least 7, at least 8, at least 9, at least 10, selected from the group consisting of 21, 23, 24, 28 and 29; 11 or more, 12 or more, 13 or more, 14 or more, 15 or more, 16 or more, 17 amino acids may be substituted with other amino acids, and also independently or additionally at least one, two or more, three or more, 4 or more, 5 or more, 6 or more, 7 or more, 8 or more, 9 or more, 10 or more, or 11 or more amino acids may be added, but is not particularly limited thereto.
  • the glucagon analogue is 1, 2, 13, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 23, 24, 27, 27 in the natural glucagon amino acid sequence. 1 or more, 2 or more, 3 or more, 4 or more, 5 or more, 6 or more, 7 or more, 8 or more, 9 or more, 10 or more, 11 or more, 12 or more, 13 or more, selected from the group consisting of 28 and 29 Or 14 amino acids may be substituted with another amino acid, and independently or additionally at least one, two or more, three or more, four or more, five or more, six or more, seven or more, eight or more, nine or more at the C-terminus thereof , 10 or more, 11 or more amino acids may be added, but is not particularly limited thereto.
  • amino acids introduced from the natural glucagon are tyrosine, alpha-methyl-glutamic acid, Aib, methionine, glutamic acid, histidine, lysine, leucine, isoleucine, glutamine, valine, glycine, alanine, cysteine, serine, alanine, aspartic acid, and arginine It may be selected from the group consisting of, but is not particularly limited thereto.
  • the additional amino acid sequence may be one or more amino acid sequences derived from native GLP-1, native GIP, or native exendin-4 amino acid sequences.
  • Such glucagon analogs or triple activators may comprise intramolecular bridges (eg, covalent or non-covalent bridges) and may specifically be in the form of rings, for example glucagon analogs or triplets Rings may be formed between amino acids 16 and 20 of the activator, but are not particularly limited thereto.
  • Non-limiting examples of such rings may include lactam bridges (or lactam rings).
  • the glucagon analogue or triple activator includes all modified to include an amino acid capable of forming a ring at a desired position to include a ring.
  • the pair of amino acids 16 and 20 of the glucagon analogue or triple activator may be substituted with glutamic acid or lysine, which may form a ring, respectively, but is not limited thereto.
  • Such a ring may be formed between the amino acid side chains in the glucagon analogue or triple activator.
  • the ring may be in a form in which a lactam ring is formed between the side chain of lysine and the side chain of glutamic acid, but is not particularly limited thereto.
  • Examples of analogues of glucagon produced by a combination of these methods include glucagon receptors, GLP-1 receptors, and GIP receptors, wherein the glucagon receptor, the GLP-1 receptor, and the G-receptor have at least one amino acid sequence different from the native glucagon and are free of alpha-carbon at the N-terminal amino acid residue
  • glucagon receptors GLP-1 receptors
  • GIP receptors GIP receptors
  • the present invention is not particularly limited thereto, and the triple activator of the present invention may substitute some amino acids with other amino acids or non-natural compounds to avoid the recognition of activating enzymes in order to increase half-life in the body.
  • the peptide may increase the half-life in the body by avoiding the recognition action of the degrading enzyme by replacing the second amino acid sequence of the amino acid sequence of the triple activator, but the amino acid substitution for avoiding the recognition action of the degradation enzyme in the body or Changes are included without limitation.
  • modifications for the preparation of analogues of natural glucagon may include modifications with L- or D-type amino acids, and / or non-natural amino acids; And / or by modifying a native sequence such as modification of side chain functional groups, covalent intramolecular bonds such as cross-chain side chain formation, methylation, acylation, ubiquitination, phosphorylation, aminohexanation, biotinylation, etc. It includes everything you do.
  • the substituted or added amino acids may use at least 20 amino acids commonly found in human proteins, as well as atypical or non-naturally occurring amino acids.
  • Commercial sources of atypical amino acids include Sigma-Aldrich, ChemPep and Genzyme pharmaceuticals. Peptides and formal peptide sequences containing these amino acids can be synthesized and purchased through commercial peptide synthesis companies, for example, American peptide company or Bachem in the United States, or Anygen in Korea.
  • Amino acid derivatives can also be obtained in the same manner, and for example, 4-imidazoacetic acid can be used.
  • the peptide according to the present invention is chemically modified or protected with an organic terminal, or the amino acid or the like at its N-terminus and / or C-terminus in order to protect from protein cleavage enzymes in vivo and increase stability It may be added and modified form.
  • the peptides according to the present invention include all of the forms of the peptides themselves, salts thereof (eg, pharmaceutically acceptable salts of the peptides), or solvates thereof.
  • the peptide may be in any pharmaceutically acceptable form.
  • the kind of the salt is not particularly limited. However, it is preferable that the form is safe and effective for an individual such as a mammal, but is not particularly limited thereto.
  • pharmaceutically acceptable means a substance that can be effectively used for a desired use without causing excessive toxicity, irritation, or allergic reactions within the scope of medical judgment.
  • salts includes salts derived from pharmaceutically acceptable inorganic acids, organic acids, or bases.
  • suitable acids include hydrochloric acid, bromic acid, sulfuric acid, nitric acid, perchloric acid, fumaric acid, maleic acid, phosphoric acid, glycolic acid, lactic acid, salicylic acid, succinic acid, toluene-p-sulfonic acid, tartaric acid, acetic acid, citric acid, methanesulfonic acid, formic acid , Benzoic acid, malonic acid, naphthalene-2-sulfonic acid, benzene sulfonic acid and the like.
  • Salts derived from suitable bases may include alkali metals such as sodium, potassium, alkaline earth metals such as magnesium, and ammonium and the like.
  • solvate refers to a complex of a peptide or a salt thereof according to the present invention with a solvent molecule.
  • the triple activator may be an isolated peptide comprising an amino acid sequence represented by the following general formula (1).
  • Xaa1 is histidine (His, H), 4-imidazoacetyl (CA), or tyrosine (Tyr, Y),
  • Xaa2 is glycine (Gly, G), alpha-methyl-glutamic acid, or Aib (aminoisobutyric acid),
  • Xaa 3 is glutamic acid (Glu, E) or glutamine (Gln, Q),
  • Xaa7 is threonine (Thr, T) or isoleucine (Ile, I),
  • Xaa10 is leucine (Leu, L), tyrosine (Tyr, Y), lysine (Lys, K), cysteine (Cys, C), or valine (Val, V),
  • Xaa12 is lysine (Lys, K), serine (Ser, S), or isoleucine (Ile, I),
  • Xaa13 is glutamine (Gln, Q), tyrosine (Tyr, Y), alanine (Ala, A), or cysteine (Cys, C),
  • Xaa14 is leucine (Leu, L), methionine (Met, M), or tyrosine (Tyr, Y),
  • Xaa15 is cysteine (Cys, C), aspartic acid (Asp, D), glutamic acid (Glu, E), or leucine (Leu, L),
  • Xaa16 is glycine (Gly, G), glutamic acid (Glu, E), or serine (Ser, S),
  • Xaa17 is glutamine (Gln, Q), arginine (Arg, R), isoleucine (Ile, I), glutamic acid (Glu, E), cysteine (Cys, C), or lysine (Lys, K),
  • Xaa18 is alanine (Ala, A), glutamine (Gln, Q), arginine (Arg, R), or histidine (His, H),
  • Xaa19 is alanine (Ala, A), glutamine (Gln, Q), cysteine (Cys, C), or valine (Val, V),
  • Xaa20 is lysine (Lys, K), glutamine (Gln, Q), or arginine (Arg, R),
  • Xaa21 is glutamic acid (Glu, E), glutamine (Gln, Q), leucine (Leu, L), cysteine (Cys, C), or aspartic acid (Asp, D),
  • Xaa23 is isoleucine (Ile, I) or valine (Val, V),
  • Xaa24 is alanine (Ala, A), glutamine (Gln, Q), cysteine (Cys, C), asparagine (Asn, N), aspartic acid (Asp, D), or glutamic acid (Glu, E),
  • Xaa27 is valine (Val, V), leucine (Leu, L), lysine (Lys, K), or methionine (Met, M),
  • Xaa28 is cysteine (Cys, C), lysine (Lys, K), alanine (Ala, A), asparagine (Asn, N), or aspartic acid (Asp, D),
  • Xaa29 is cysteine (Cys, C), glycine (Gly, G), glutamine (Gln, Q), threonine (Thr, T), glutamic acid (Glu, E), or histidine (His, H),
  • Xaa30 is cysteine (Cys, C), glycine (Gly, G), lysine (Lys, K), or histidine (His, H) or absent,
  • R1 is cysteine (Cys, C), GKKNDWKHNIT (SEQ ID NO: 106), m-SSGAPPPS-n (SEQ ID NO: 107), or m-SSGQPPPS-n (SEQ ID NO: 108), or absent,
  • m is -Cys-, -Pro-, or -Gly-Pro-,
  • n is -Cys-, -Gly-, -Ser-, or -His-Gly- or absent.
  • triple activator examples include an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 102, but may be (mandatory) consisting of an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 102, but is not limited thereto. It doesn't happen.
  • Xaa14 may be leucine or methionine
  • Xaa15 may be cysteine, aspartic acid, or leucine.
  • peptides include, but are not particularly limited to, peptides comprising or consisting essentially of amino acid sequences selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1-12, 14-17, and 21-102.
  • Such peptides may significantly activate one or more of the glucagon receptor, the GLP-1 receptor, and the GIP receptor, but are not particularly limited thereto.
  • the GLP-1 may be significantly activated, or in addition, the glucagon receptor and / or the GIP receptor may be significantly activated, but is not particularly limited thereto.
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine, cysteine, or valine
  • Xaa12 is lysine or isoleucine
  • Xaa13 is tyrosine, alanine, glutamine, or cysteine,
  • Xaa14 is leucine, cysteine, or methionine
  • Xaa15 is cysteine, leucine, glutamic acid, or aspartic acid,
  • Xaa17 is glutamine, arginine, isoleucine, cysteine, glutamic acid, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, glutamine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, valine, or cysteine
  • Xaa20 is lysine, arginine, or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid, glutamine, leucine, cysteine, or aspartic acid,
  • Xaa23 is isoleucine or valine
  • Xaa24 is cysteine, alanine, glutamine, asparagine, glutamic acid, or aspartic acid,
  • Xaa27 may be a peptide, which is a leucine or lysine, but is not particularly limited thereto.
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine, cysteine, or valine
  • Xaa12 is lysine or isoleucine
  • Xaa13 is tyrosine, alanine, or cysteine
  • Xaa14 is leucine or methionine
  • Xaa15 is cysteine or aspartic acid
  • Xaa17 is glutamine, arginine, isoleucine, cysteine, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, or cysteine
  • Xaa20 is lysine or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid, cysteine, or aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is alanine, glutamine, cysteine, asparagine, or aspartic acid,
  • Xaa27 may be leucine or lysine, but is not particularly limited thereto.
  • Xaa2 is alpha-methyl-glutamic acid or Aib
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine or cysteine
  • Xaa12 is lysine or isoleucine
  • Xaa13 is tyrosine, alanine, or cysteine
  • Xaa14 is leucine or methionine
  • Xaa15 is cysteine or aspartic acid
  • Xaa16 is glutamic acid
  • Xaa17 is arginine, isoleucine, cysteine, or lysine,
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine, glutamine, or cysteine
  • Xaa20 is lysine or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid or aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is glutamine, asparagine, or aspartic acid
  • Xaa27 is leucine
  • Xaa28 may be cysteine, alanine, asparagine, or aspartic acid.
  • Xaa1 is histidine or 4-imidazoacetyl
  • Xaa2 is alpha-methyl-glutamic acid or Aib
  • Xaa3 is glutamine
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine
  • Xaa12 is isoleucine
  • Xaa13 is alanine or cysteine
  • Xaa14 is methionine
  • Xaa15 is aspartic acid
  • Xaa16 is glutamic acid
  • Xaa17 is isoleucine or lysine
  • Xaa18 is alanine or histidine
  • Xaa19 is glutamine or cysteine
  • Xaa20 is lysine
  • Xaa21 is aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is asparagine
  • Xaa27 is leucine
  • Xaa28 is alanine or asparagine
  • Xaa29 is glutamine or threonine
  • Xaa30 may be cysteine or lysine, or absent.
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib,
  • Xaa3 is glutamine
  • Xaa7 is threonine
  • Xaa10 is tyrosine, cysteine, or valine
  • Xaa12 is lysine
  • Xaa13 is tyrosine
  • Xaa14 is leucine
  • Xaa15 is aspartic acid
  • Xaa16 is glycine, glutamic acid, or serine,
  • Xaa17 is glutamine, arginine, cysteine, or lysine
  • Xaa18 is alanine, arginine, or histidine
  • Xaa19 is alanine or glutamine
  • Xaa20 is lysine or glutamine
  • Xaa21 is glutamic acid, cysteine, or aspartic acid
  • Xaa23 is valine
  • Xaa24 is alanine, glutamine, or cysteine
  • Xaa27 is leucine or lysine
  • Xaa29 may be, but is not particularly limited to, glycine, glutamine, threonine, or histidine.
  • Such peptides have a significant degree of activation of the GLP-1 receptor and glucagon receptor, and are higher than the degree of activation of the GIP receptor;
  • the degree of activation of the GLP-1 receptor, glucagon receptor and GIP receptor are all significant;
  • the degree of activation of the GLP-1 receptor and the GIP receptor is significant, and may correspond to a case where the activation of the glucagon receptor is high, but is not particularly limited thereto.
  • the degree of activation of the GLP-1 receptor and the GIP receptor is significant and higher than the level of activation of the glucagon receptor, it is possible to provide a peptide with higher blood sugar control ability with weight loss effect, the GLP-1 receptor, the glucagon receptor and If both the degree of activation of the GIP receptor is significant, there is an advantage that the weight loss effect can be maximized.
  • it is not particularly limited thereto.
  • Examples of such peptides include SEQ ID NOs: 8, 9, 21-37, 39, 42, 43, 49-61, 64-83, 85, 86, 88, 89, 91-93, 95-102 Peptides comprising or consisting essentially of an amino acid sequence, but are not particularly limited thereto.
  • the peptide may include an amino acid sequence represented by the following general formula (2).
  • Xaa1 is 4-imidazoacetyl, histidine, or tyrosine;
  • Xaa2 is glycine, alpha-methyl-glutamic acid, or Aib;
  • Xaa10 is tyrosine, or cysteine
  • Xaa13 is alanine, glutamine, tyrosine, or cysteine;
  • Xaa14 is leucine, methionine, or tyrosine
  • Xaa15 is aspartic acid, glutamic acid, or leucine
  • Xaa16 is glycine, glutamic acid, or serine
  • Xaa17 is glutamine, arginine, isoleucine, glutamic acid, cysteine, or lysine;
  • Xaa18 is alanine, glutamine, arginine, or histidine;
  • Xaa19 is alanine, glutamine, cysteine, or valine;
  • Xaa20 is lysine, glutamine, or arginine
  • Xaa21 is cysteine, glutamic acid, glutamine, leucine, or aspartic acid;
  • Xaa23 is isoleucine or valine
  • Xaa24 is cysteine, alanine, glutamine, asparagine, or glutamic acid
  • Xaa28 is lysine, cysteine, asparagine, or aspartic acid
  • Xaa29 is glycine, glutamine, cysteine, or histidine
  • Xaa30 is cysteine, glycine, lysine, or histidine
  • Xaa31 is proline or cysteine
  • Xaa40 is cysteine or absent.
  • Xaa13 is alanine, tyrosine, or cysteine
  • Xaa15 is aspartic acid or glutamic acid
  • Xaa17 is glutamine, arginine, cysteine, or lysine
  • Xaa18 is alanine, Arginine, or histidine
  • Xaa21 is cysteine, glutamic acid, glutamine, or aspartic acid
  • Xaa23 is isoleucine or valine
  • Xaa24 is cysteine, glutamine, or asparagine
  • Xaa28 is cysteine, asparagine, or aspartic acid
  • Xaa29 is glutamine, cysteine, or histidine
  • Xaa30 may be cysteine, lysine, or histidine.
  • Such peptides include amino acid sequences selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 21, 22, 42, 43, 50, 64 to 77, and 95 to 102, more specifically SEQ ID NOs: 21, 22, 42, 43, 50, And peptides comprising or consisting essentially of amino acid sequences selected from the group consisting of 64 to 77, and 96 to 102, but are not particularly limited thereto.
  • the peptide may comprise an amino acid sequence of the general formula (3).
  • Xaa1 is histidine or tyrosine
  • Xaa 2 is alpha-methyl-glutamic acid or Aib;
  • Xaa13 is alanine, tyrosine or cysteine
  • Xaa17 is arginine, cysteine, or lysine
  • Xaa18 is alanine or arginine
  • Xaa19 is alanine or cysteine
  • Xaa21 is glutamic acid or aspartic acid
  • Xaa24 is glutamine or asparagine
  • Xaa28 is cysteine or aspartic acid
  • Xaa29 is cysteine, histidine, or glutamine
  • Xaa30 is cysteine or histidine
  • Xaa31 is proline or cysteine
  • Xaa40 may be cysteine or absent.
  • peptides examples include peptides comprising or consisting essentially of an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 21, 22, 42, 43, 50, 64-71, 75-77, and 96-102. It may be, but is not particularly limited thereto.
  • R1 is cysteine, GKKNDWKHNIT (SEQ ID NO: 106), CSSGQPPPS (SEQ ID NO: 109), GPSSGAPPPS (SEQ ID NO: 110), GPSSGAPPPSC (SEQ ID NO: 111), PSSGAPPPS (SEQ ID NO: 112), PSSGAPPPSG (SEQ ID NO: 113), PSSGAPPPSHG (SEQ ID NO: 114), PSSGAPPPSS (SEQ ID NO: 115), PSSGQPPPS (SEQ ID NO: 116), or PSSGQPPPSC (SEQ ID NO: 117), or may be absent, but is not particularly limited thereto.
  • Another aspect for implementing the present invention provides a polynucleotide encoding the isolated peptide, a recombinant expression vector comprising the polynucleotide, and a transformant comprising the polynucleotide or the recombinant expression vector.
  • the peptide is as described above.
  • the isolated polynucleotide encoding the peptide is a polynucleotide sequence having at least 75%, specifically at least 85%, more specifically at least 90%, more specifically at least 95% sequence identity with the sequence. It is included in the scope of the invention.
  • homology is intended to indicate a similar degree of wild type amino acid sequence and wild type nucleic acid sequence, and the comparison of homology is carried out using a comparison program which is visually or easily purchased. Commercially available computer programs can calculate homology between two or more sequences as a percentage. % Homology can be calculated for adjacent sequences.
  • the term "recombinant vector” refers to a DNA preparation in which a target peptide, such as a peptide, is operably linked to a suitable regulatory sequence so that the target peptide, such as a peptide, can be expressed in a suitable host.
  • the regulatory sequence includes a promoter capable of initiating transcription, any operator sequence for regulating such transcription, a sequence encoding a suitable mRNA ribosomal binding site, and a sequence regulating termination of transcription and translation.
  • the recombinant vector can be transformed into a suitable host cell and then replicated or functioned independently of the host genome and integrated into the genome itself.
  • the recombinant vector to be used in the present invention is not particularly limited as long as it can be replicated in a host cell, and may be produced using any vector known in the art. Examples of commonly used vectors include natural or recombinant plasmids, cosmids, viruses and bacteriophages.
  • the vector usable in the present invention is not particularly limited and known expression vectors can be used.
  • the recombinant vector is used to transform host cells to produce the peptide of the present invention.
  • Such transformed cells which are also part of the present invention, may be cultured cells or cell lines used for propagation of the nucleic acid fragments and vectors of the invention or used for recombinant production of the peptides of the invention.
  • transformation in the present invention means introducing a recombinant vector comprising a polynucleotide encoding a target protein into a host cell to allow the protein encoded by the polynucleotide to be expressed in the host cell.
  • the transformed polynucleotide it includes all of them regardless of whether they are inserted into or located outside the chromosome of the host cell.
  • the polynucleotide also includes DNA and RNA encoding the target protein.
  • the polynucleotide may be introduced in any form as long as it can be expressed by being introduced into a host cell.
  • the polynucleotide may be introduced into a host cell in the form of an expression cassette, which is a gene construct containing all the elements necessary for its expression.
  • the expression cassette may include a promoter, a transcription termination signal, a ribosomal binding site, and a translation termination signal, which are typically operably linked to the polynucleotide.
  • the expression cassette may be in the form of an expression vector capable of self replication.
  • the polynucleotide may be introduced into a host cell in its own form, and may be operably linked to a sequence required for expression in the host cell, but is not limited thereto.
  • operably linked means that the gene sequence and the promoter sequence to initiate and mediate the transcription of the polynucleotide encoding the peptide of interest in the present invention.
  • Suitable hosts for the present invention are not particularly limited as long as they allow expression of the polynucleotide of the present invention.
  • Specific examples of hosts that can be used in the present invention include bacteria of the genus Escherichia , such as E. coli ; Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) and Bacillus (Bacillus), such as bacteria belonging to the genus; Bacteria of the genus Pseudomonas , such as Pseudomonas putida ; Pichia pastoris , Saccharomyces cerevisiae ), Schizosaccharomyces yeast such as pombe ); Insect cells such as Spodoptera luciferda (Sf9); And animal cells such as CHO, COS, BSC and the like.
  • Another embodiment embodying the present invention provides a method for preparing the isolated peptide.
  • the peptide is as described above.
  • peptides of the present invention can be synthesized by methods well known in the art, such as automatic peptide synthesizers, depending on their length, and can also be produced by genetic engineering techniques.
  • peptides of the present invention may be prepared by standard synthetic methods, recombinant expression systems, or any other method of the art.
  • peptides according to the invention can be synthesized in a number of ways, including, for example, by the following methods:
  • a fusion gene encoding a fusion protein comprising a fusion partner and a peptide is prepared, transformed into a host cell, expressed in the form of a fusion protein, and then using a protease or a compound.
  • Peptides can be cleaved and separated from the fusion protein to produce the desired peptide.
  • a DNA sequence encoding an amino acid residue that can be cleaved by a protease such as Factor Xa or enterokinase, a compound such as CNBr or hydroxylamine is inserted between the fusion partner and the polynucleotide encoding the peptide. can do.
  • Another embodiment embodying the present invention provides a composition comprising the isolated peptide.
  • the peptide is as described above.
  • the composition may be a pharmaceutical composition, more specifically, the composition may be for the prevention or treatment of metabolic syndrome.
  • prevention means any action that inhibits or delays the development of metabolic syndrome by administration of the peptide or composition
  • treatment means that the symptoms of metabolic syndrome improve or benefit from administration of the peptide or composition. It means all actions.
  • the term "administration" means introducing a predetermined substance into a patient in any suitable manner, and the route of administration of the composition is not particularly limited, but any general route by which the composition can reach a target in vivo.
  • metabolic syndrome refers to a symptom of various diseases caused by chronic metabolic disorders alone or in combination.
  • diseases corresponding to metabolic syndrome include impaired glucose tolerance, hypercholesterolemia, and abnormalities.
  • the term "obesity" is defined as obesity when the body has an excessive amount of fat tissue and the body obesity index (weight (kg) divided by height (m) squared) is 25 or more.
  • Obesity is usually caused by energy imbalances when consuming too much nutrients relative to energy consumption over a long period of time.
  • Obesity is a metabolic disease that affects the entire body, increasing the likelihood of developing diabetes and hyperlipidemia, increasing the risk of sexual dysfunction, arthritis, and cardiovascular disease, and in some cases, is also associated with cancer.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent.
  • a pharmaceutically acceptable carrier excipient or diluent.
  • Such pharmaceutically acceptable carriers, excipients, or diluents may be unnaturally occurring.
  • the term "pharmaceutically acceptable” means a sufficient amount and side effects that do not cause a therapeutic effect, the type of disease, the age, weight, health, sex, sensitivity of the patient to the drug It can be easily determined by those skilled in the art according to well-known factors in the medical field, such as the route of administration, the method of administration, the frequency of administration, the duration of treatment, the combination or the drug used concurrently.
  • the pharmaceutical composition comprising the peptide of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the carrier is not particularly limited, but oral administration may include binders, lubricants, disintegrants, excipients, solubilizers, dispersants, stabilizers, suspending agents, pigments, flavoring agents, and the like.
  • buffers, Preservatives, analgesic agents, solubilizers, isotonic agents, stabilizers and the like can be mixed and used.
  • bases, excipients, lubricants, preservatives and the like can be used for topical administration.
  • Formulations of the compositions of the present invention can be prepared in a variety of mixtures with the pharmaceutically acceptable carriers described above.
  • oral administration may be in the form of tablets, troches, capsules, elixirs, suspensions, syrups, wafers, etc., and in the case of injections, may be prepared in unit dosage ampoules or multiple dosage forms.
  • other solutions, suspensions, tablets, pills, capsules, sustained release preparations and the like are examples of sustained release preparations and the like.
  • suitable carriers, excipients and diluents suitable for formulation include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, Microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate or mineral oil and the like can be used.
  • fillers, anti-coagulants, lubricants, wetting agents, fragrances, preservatives and the like may be further included.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is any one selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, liquid solutions, emulsions, syrups, sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, lyophilized preparations and suppositories It may have a formulation of.
  • composition may be formulated in a unit dosage form suitable for intrabody administration of a patient, preferably in the form of a formulation useful for the administration of a peptide drug, according to conventional methods in the pharmaceutical art, for administration commonly used in the art.
  • the peptide can be used in admixture with various carriers (pharmaceutically acceptable carrier) such as physiological saline or organic solvents, carbohydrates such as glucose, sucrose or dextran, ascorbic acid (ascorbic) to increase the stability or absorption acids) or antioxidants such as glutathione, chelating agents, low molecular weight proteins or other stabilizers can be used as medicaments.
  • carriers such as physiological saline or organic solvents, carbohydrates such as glucose, sucrose or dextran, ascorbic acid (ascorbic) to increase the stability or absorption acids) or antioxidants such as glutathione, chelating agents, low molecular weight proteins or other stabilizers can be used as medicaments.
  • the dosage and frequency of the pharmaceutical composition of the present invention is determined according to the type of drug which is the active ingredient, along with various related factors such as the disease to be treated, the route of administration, the age, sex and weight of the patient and the severity of the disease.
  • the total effective amount of the composition of the present invention may be administered to a patient in a single dose and may be administered by a fractionated treatment protocol which is administered in multiple doses for a long time.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may vary the content of the active ingredient depending on the extent of the disease.
  • the preferred total dose of peptide of the present invention may be from about 0.0001 mg to 500 mg per kg body weight of the patient per day.
  • the dose of the peptide is determined by taking into consideration various factors such as the age, weight, health condition, sex, severity of the disease, diet and excretion rate, as well as the route and frequency of treatment of the pharmaceutical composition.
  • compositions of the present invention are not particularly limited to its formulation, route of administration and method of administration as long as the effect of the present invention is shown.
  • the pharmaceutical composition of the present invention has excellent sustainability and titer in vivo, the frequency and frequency of administration of the pharmaceutical preparations of the present invention can be significantly reduced.
  • Another aspect for embodying the present invention is a method of treating a disease in which the isolated peptide or composition comprising the same comprises administering the isolated peptide or composition comprising the same to a subject in need thereof. to provide.
  • the disease of interest may be metabolic syndrome.
  • the isolated peptide or composition comprising the same, metabolic syndrome and treatment are as described above.
  • the individual is a subject suspected of metabolic syndrome (metabolic syndrome), the subject suspected of metabolic syndrome (metabolic syndrome) is a mammal, including rats, livestock, etc., including humans with or may develop the disease Means, the subjects treatable with the peptide of the present invention or the composition comprising the same are included without limitation.
  • the method of the present invention may comprise administering a pharmaceutical composition comprising the peptide in a pharmaceutically effective amount.
  • Suitable total daily doses may be determined by the treating physician within the scope of good medical judgment and may be administered once or in divided doses.
  • the specific therapeutically effective amount for a particular patient is determined by the specific composition, including the type and extent of the reaction to be achieved, whether or not other agents are used in some cases, the age, weight, general health of the patient, It is desirable to apply differently depending on various factors and similar factors well known in the medical field, including sex and diet, time of administration, route of administration and rate of composition, duration of treatment, drugs used with or co-specific with the specific composition.
  • Another aspect for practicing the present invention provides the use of said isolated peptide or composition for use in the manufacture of a medicament.
  • the medicament may be for the prevention or treatment of metabolic syndrome.
  • the isolated peptide or composition and metabolic syndrome are as described above.
  • Triple activators were shown that exhibited activity on all GLP-1, GIP and glucagon receptors, and their sequences are shown in Table 1 below.
  • the amino acid represented by X is a non-natural amino acid Aib (aminoisobutyric acid), and the underlined amino acid means that the underlined amino acids form a ring with each other.
  • Aib amino acid
  • CA 4-imidazoacetyl
  • Y means tyrosine.
  • Example 1 In order to measure the activity of the triple activator prepared in Example 1, a method of measuring cell activity in vitro using a cell line transformed with a GLP-1 receptor, a glucagon (GCG) receptor, and a GIP receptor, respectively, is used. It was.
  • Each cell line is transformed to express human GLP-1 receptor, human GCG receptor and human GIP receptor genes in Chinese hamster ovary (CHO), respectively, and is suitable for measuring the activity of GLP-1, GCG and GIP. Therefore, the activity for each part was measured using each transgenic cell line.
  • human GLP-1 was serially diluted from 50nM to 0.000048nM by 4 times, and the triple activator prepared in Example 1 was 400nM to 4 times. Diluted serially to 0.00038 nM.
  • the culture solution was removed from the cultured human GLP-1 receptor-expressing CHO cells, 5 ⁇ l of each serially diluted material was added to the cells, and 5 ⁇ l of the buffer containing the cAMP antibody was added. Incubated at room temperature. Then, 10 ⁇ l each of the detection mix containing the cell lysis buffer was added to lyse the cells and allowed to react at room temperature for 90 minutes.
  • the cell lysate was applied to a LANCE cAMP kit (PerkinElmer, USA) to calculate EC 50 values through accumulated cAMP, and then compared with each other. Relative titers relative to human GLP-1 are shown in Table 2 below.
  • human GCG was continuously diluted from 50 nM to 4 times 0.000048 nM, and the triple activator prepared in Example 1 was continuously 400 to 4 times 0.00038 nM. Diluted with.
  • the culture solution was removed from the cultured human GCG receptor-expressing CHO cells, 5 ⁇ l of each diluted substance was added to the cells, and 5 ⁇ l of the buffer containing the cAMP antibody was added, followed by room temperature for 15 minutes. Incubated at. Then, 10 ⁇ l each of the detection mix containing the cell lysis buffer was added to lyse the cells and allowed to react at room temperature for 90 minutes.
  • the cell lysate was applied to a LANCE cAMP kit (PerkinElmer, USA) to calculate EC 50 values through accumulated cAMP, and then compared with each other. Relative titers relative to human GCG are shown in Table 2 below.
  • human GIP was continuously diluted from 50 nM to 0.000048 nM by 4 times, and the triple activator prepared in Example 1 was continuously from 400 nM to 0.00038 nM by 4 times. Diluted with.
  • the culture solution was removed from the cultured human GIP receptor-expressing CHO cells, 5 ⁇ l of each diluted substance was added to the cells, and 5 ⁇ l of the buffer containing cAMP antibody was added, followed by room temperature for 15 minutes. Incubated at. Then, 10 ⁇ l each of the detection mix containing the cell lysis buffer was added to lyse the cells and allowed to react at room temperature for 90 minutes.
  • the cell lysate was applied to a LANCE cAMP kit (PerkinElmer, USA) to calculate EC 50 values through accumulated cAMP, and then compared with each other. Relative titers relative to human GIP are shown in Table 2 below.
  • novel glucagon analogue prepared above functions as a triple activator capable of activating all GLP-1 receptors, GIP receptors and glucagon receptors, and thus can be used as a therapeutic agent for patients with metabolic syndrome including diabetes and obesity. have.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 글루카곤, GLP-1 및 GIP 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이의 용도에 관한 것이다.

Description

글루카곤, GLP-1 및 GIP 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체
본 발명은 글루카곤, GLP-1 및 GIP 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이의 용도에 관한 것이다.
비만과 2형 당뇨를 포함하는 당뇨는 현대사회에 들어서 발생되는 대표적인 대사질환 중 하나로서 전세계적인 건강위협요소로 인식되고 있으며, 질병의 발병에 수반되는 경제적 비용도 급증하는 추세다.
GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) 및 GIP (Glucose-dependent insuliontropic polypeptide)는 대표적인 위장 호르몬이자 신경 호르몬으로서 음식물 섭취에 따른 혈중 당 농도 조절에 관여하는 물질이다. 글루카곤 (Glucagon)은 췌장에서 분비되는 펩타이드 호르몬으로 전술한 두 물질과 함께 혈중 당 농도 조절 작용에 관여한다.
GLP-1은 음식물 섭취에 자극을 받아 소장에서 분비되는 호르몬으로 혈당 농도 의존적으로 췌장에서의 인슐린 분비를 촉진하고 글루카곤의 분비를 억제하여 혈당 농도를 낮추는 작용을 돕는다. 또한, 포만 인자로 작용하여 위장의 소화작용을 늦추고 음식 소화물의 위장 통과시간을 지연시켜 음식물 섭취를 줄이는 역할을 지닌다. 더욱이 쥐에 투여시 음식 섭취억제와 체중 감소효과가 있음이 보고되었으며, 이러한 효과는 정상과 비만상태 모두에서 동일하게 나타남이 확인되어 비만 치료제로서의 가능성을 보여주었다.
GLP-1과 더불어 음식섭취에 자극을 받아 분비되는 위장 호르몬의 하나인 GIP는 소장의 K 세포로부터 분비되는 42개 아미노산으로 구성된 호르몬으로서 혈당 농도에 의존적으로 췌장에서의 인슐린 분비를 촉진하고 혈당 농도를 낮추는데 도움을 주는 기능을 수행하며 GLP-1의 활성 증가 효과, 항염증 효과 등이 보고되었다.
글루카곤은 약물 치료 또는 질병, 호르몬이나 효소 결핍 등의 원인으로 혈당이 떨어지기 시작하면 췌장에서 생산된다. 글루카곤은 간에 신호하여 글리코겐을 분해하여 글루코스를 방출하도록 유도하고, 혈당 수준을 정상 수준까지 높이는 역할을 한다. 뿐만 아니라, 글루카곤은 혈당 상승효과 이외에 동물과 사람에서의 식욕억제 및 지방세포의 호르몬 민감성 리파제 (hormone sensitive lipase)를 활성화시켜 지방 분해를 촉진 및 에너지대사 (energy expenditudre)를 촉진하여 항-비만 효과를 나타냄이 보고되었다.
이에, GLP-1의 혈당 조절 및 체중감소 효과를 이용하여 당뇨병과 비만의 치료제로서 개발하고자 하는 연구가 활발하게 진행되고 있으며, GLP-1과 약 50% 수준의 아미노산 배열 유사성을 가지는 도마뱀 독액 (lizard venom)으로부터 만들어지는 엑센딘-4 (exendin-4) 역시 동종 질환에 대한 치료제로서의 개발이 진행 중이다. 그러나 현재까지 보고된 바에 따르면 GLP-1과 엑센딘-4를 사용한 치료제의 경우 부작용으로 구토와 메스꺼움을 동반한다는 문제가 발생하는 것으로 알려져 있다 (Syed YY., Drugs., 2015 Jul;75(10):1141-52).
또한, 체중 감소 효과 극대화 및 전술한 GLP-1 기반 치료물질의 대안으로서 GLP-1 수용체와 글루카곤 수용체 양쪽에 활성을 가지는 이중 활성체 (dual agonist)에 대한 연구가 진행되어 왔으며 기존 GLP-1 단독 치료시 보다 글루카곤 수용체의 활성으로 체중감소가 더 우월함이 보고되었다 (Jonathan W et al., Nat Chem Bio., 2009 Oct(5);749-757).
여기에 더하여 최근 GLP-1, GIP, 글루카곤 전체 수용체에 동시에 활성을 갖는 삼중 활성체 (triple agonist)에 관한 연구에서는 위장 호르몬을 분해하여 활성을 상실하게 하는 디펩티딜 펩티다제-IV (dipeptidyl peptidase-Ⅳ, DPP-Ⅳ)에 대한 저항성을 높이도록 아미노산 서열을 치환하고 특정 부위에 아실기를 추가하여 반감기를 증가하는 노력이 진행된 바 있으나 (Finan B et al., Nat Med., 2015 Jan;21(1):27-36), 3가지 다른 수용체의 활성화 효력이 높지 않으며, 다양한 비율의 활성비를 갖는 삼중 활성체를 보여주지 못하였다.
이에, 혈당 조절 및 체중 감소 효과를 가지면서도, 구토와 메스꺼움 같은 부작용이 발생하지 않으며, GLP-1과 GIP, 그리고 글루카곤 수용체를 높게 활성화 시킬 수 있는 신규한 물질의 필요성이 대두되고 있다.
또한, GLP-1, GIP, 글루카곤 수용체에 대한 활성화 비율이 다양한 물질의 개발 필요성 역시 대두되고 있다. 예컨대, 혈당강화를 위해 GLP-1 및 GIP의 활성은 높으면서 상대적으로 글루카곤의 활성은 낮아 체중감소 효력도 있지만 혈당조절능력이 보다 높은 물질이나, GLP-1, GIP, 및 글루카곤 모두의 활성이 높아 체중 감소 효과가 높은 물질이 개발되어야 할 필요성이 대두되고 있다.
본 발명의 하나의 목적은 글루카곤 수용체, GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) 수용체, 및 GIP (Glucose-dependent insuliontropic polypeptide) 수용체에 대해 활성을 갖는, 분리된 펩타이드를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 분리된 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현 벡터, 및 상기 폴리뉴클레오티드 또는 재조합 발현 벡터를 포함하는 형질전환체를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 분리된 펩타이드를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 분리된 펩타이드를 포함하는 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물이 목적하는 질환을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 분리된 펩타이드 또는 조성물의 용도를 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 하나의 양태는 글루카곤 수용체, GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) 수용체, 및 GIP (Glucose-dependent insuliontropic polypeptide) 수용체에 대해 활성을 갖는, 분리된 펩타이드이다.
하나의 구체예로서, 상기 펩타이드는 천연형 글루카곤 서열에서 적어도 하나 이상의 아미노산에 치환(substitution), 추가(addition), 제거(deletion), 수식(modification) 및 이들의 조합으로 이루어지는 군에서 선택된 변형이 일어난, 천연형 글루카곤의 아날로그인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 추가되는 아미노산 서열은 천연형 GLP-1, 천연형 GIP, 또는 천연형 엑센딘-4 아미노산 서열에서 유래되는 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 1로 표시된 아미노산 서열을 포함하는, 분리된 펩타이드인 것을 특징으로 한다:
Xaa1-Xaa2-Xaa3-Gly-Thr-Phe-Xaa7-Ser-Asp-Xaa10-Ser-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21-Phe-Xaa23-Xaa24-Trp-Leu-Xaa27-Xaa28-Xaa29-Xaa30-R1 (일반식 1, 서열번호 103)
상기 일반식 1에서,
Xaa1은 히스티딘 (His, H), 4-이미다조아세틸 (CA), 또는 티로신 (Tyr, Y)이고,
Xaa2는 글리신 (Gly, G), 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib (aminoisobutyric acid)이며,
Xaa3은 글루탐산 (Glu, E) 또는 글루타민 (Gln, Q)이고,
Xaa7은 트레오닌 (Thr, T) 또는 이소류신 (Ile, I)이며,
Xaa10은 류신 (Leu, L), 티로신 (Tyr, Y), 리신 (Lys, K), 시스테인 (Cys, C), 또는 발린 (Val, V)이고,
Xaa12는 리신 (Lys, K), 세린 (Ser, S), 또는 이소류신(Ile, I)이며,
Xaa13은 글루타민 (Gln, Q), 티로신 (Tyr, Y), 알라닌 (Ala, A), 또는 시스테인 (Cys, C)이고,
Xaa14는 류신 (Leu, L), 메티오닌 (Met, M), 또는 티로신 (Tyr, Y)이며,
Xaa15는 시스테인 (Cys, C), 아스파르트산 (Asp, D), 글루탐산(Glu, E), 또는 류신(Leu, L)이며,
Xaa16은 글리신 (Gly, G), 글루탐산 (Glu, E), 또는 세린 (Ser, S)이고,
Xaa17은 글루타민 (Gln, Q), 아르기닌 (Arg, R), 이소류신 (Ile, I), 글루탐산 (Glu, E), 시스테인 (Cys, C), 또는 리신 (Lys, K)이며,
Xaa18은 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 아르기닌 (Arg, R), 또는 히스티딘 (His, H)이고,
Xaa19는 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 시스테인 (Cys, C), 또는 발린 (Val, V)이며,
Xaa20은 리신 (Lys, K), 글루타민 (Gln, Q), 또는 아르기닌 (Arg, R)이고,
Xaa21은 글루탐산 (Glu, E), 글루타민 (Gln, Q), 류신 (Leu, L), 시스테인 (Cys, C), 또는 아스파르트산 (Asp, D)이며,
Xaa23은 이소류신 (Ile, I) 또는 발린 (Val, V)이고,
Xaa24는 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 시스테인 (Cys, C), 아스파라긴 (Asn, N), 아스파르트산 (Asp, D), 또는 글루탐산 (Glu, E)이며,
Xaa27은 발린 (Val, V), 류신 (Leu, L), 리신 (Lys, K), 또는 메티오닌 (Met, M)이고,
Xaa28은 시스테인 (Cys, C), 리신 (Lys, K), 알라닌 (Ala, A), 아스파라긴 (Asn, N), 또는 아스파르트산 (Asp, D)이며,
Xaa29는 시스테인 (Cys, C), 글리신 (Gly, G), 글루타민 (Gln, Q), 트레오닌 (Thr, T), 글루탐산 (Glu, E), 또는 히스티딘 (His, H)이고,
Xaa30은 시스테인 (Cys, C), 글리신 (Gly, G), 리신 (Lys, K), 또는 히스티딘 (His, H)이거나, 부존재하며,
R1은 시스테인 (Cys, C), GKKNDWKHNIT(서열번호 106), m-SSGAPPPS-n (서열번호 107), 또는 m-SSGQPPPS-n (서열번호 108)이거나, 부존재하며,
여기서,
m은 -Cys-, -Pro-, 또는 -Gly-Pro-이고,
n은 -Cys-, -Gly-, -Ser-, 또는 -His-Gly-이거나, 부존재함.
다른 구체예로서,
상기 일반식 1에서
Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인, 아스파르트산, 또는 류신인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서,
상기 일반식 1에서,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
Xaa13은 티로신, 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이고,
Xaa14는 류신, 시스테인, 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인, 류신, 글루탐산, 또는 아스파르트산이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 글루탐산, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 글루타민, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 발린, 또는 시스테인이며,
Xaa20은 리신, 아르기닌, 또는 글루타민이고,
Xaa21은 글루탐산, 글루타민, 류신, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 이소류신 또는 발린이고,
Xaa24는 시스테인, 알라닌, 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 또는 아스파르트산이며,
Xaa27은 류신 또는 리신인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 2로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 한다:
Xaa1-Xaa2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaa10-Ser-Lys-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21-Phe-Xaa23-Xaa24-Trp-Leu-Leu-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31- Ser-Ser-Gly-Gln-Pro-Pro-Pro-Ser-Xaa40 (일반식 2, 서열번호 104)
상기 일반식 2에서,
Xaa1은 4-이미다조아세틸, 히스티딘, 또는 티로신이고,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이며,
Xaa10은 티로신, 또는 시스테인이고,
Xaa13은 알라닌, 글루타민, 티로신, 또는 시스테인이며,
Xaa14는 류신, 메티오닌, 또는 티로신이고,
Xaa15는 아스파르트산, 글루탐산, 또는 류신이며,
Xaa16은 글리신, 글루탐산, 또는 세린이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 글루탐산, 시스테인, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 글루타민, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 시스테인, 또는 발린이며,
Xaa20은 리신, 글루타민, 또는 아르기닌이고,
Xaa21은 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 류신, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 이소류신 또는 발린이고,
Xaa24는 시스테인, 알라닌, 글루타민, 아스파라긴, 또는 글루탐산이며,
Xaa28은 리신, 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이고,
Xaa29는 글리신, 글루타민, 시스테인, 또는 히스티딘이며,
Xaa30은 시스테인, 글리신, 리신, 또는 히스티딘이고,
Xaa31은 프롤린 또는 시스테인이며,
Xaa40은 시스테인이거나, 부존재함.
다른 구체예로서, 상기 일반식 1에서,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
Xaa13은 티로신, 알라닌, 또는 시스테인이고,
Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인 또는 아스파르트산이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이며,
Xaa20은 리신 또는 글루타민이고,
Xaa21은 글루탐산, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 발린이고,
Xaa24는 알라닌, 글루타민, 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며,
Xaa27은 류신 또는 리신인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 일반식 2에서,
Xaa13은 알라닌, 티로신, 또는 시스테인이고,
Xaa15는 아스파르트산 또는 글루탐산이며,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이고,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이며,
Xaa21은 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 또는 아스파르트산이고,
Xaa23은 이소류신 또는 발린이며,
Xaa24는 시스테인, 글루타민, 또는 아스파라긴이고,
Xaa28은 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며,
Xaa29는 글루타민, 시스테인, 또는 히스티딘이고,
Xaa30은 시스테인, 리신, 또는 히스티딘인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 일반식 1에서,
Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신 또는 시스테인이고,
Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
Xaa13은 티로신, 알라닌, 또는 시스테인이고,
Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인 또는 아스파르트산이고,
Xaa16은 글루탐산이며,
Xaa17은 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 또는 리신이고,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이며,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이고,
Xaa20은 리신 또는 글루타민이며,
Xaa21은 글루탐산 또는 아스파르트산이고,
Xaa23은 발린이며,
Xaa24는 글루타민, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이고,
Xaa27은 류신이며,
Xaa28은 시스테인, 알라닌, 아스파라긴, 또는 아스파르트산인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 일반식 1에서,
Xaa1은 히스티딘 또는 4-이미다조아세틸이고,
Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이며,
Xaa3은 글루타민이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신이고,
Xaa12는 이소류신이며,
Xaa13은 알라닌 또는 시스테인이고,
Xaa14는 메티오닌이며,
Xaa15는 아스파르트산이고,
Xaa16은 글루탐산이며,
Xaa17은 이소류신 또는 리신이고,
Xaa18은 알라닌 또는 히스티딘이며,
Xaa19는 글루타민 또는 시스테인이고,
Xaa20은 리신이며,
Xaa21은 아스파르트산이고,
Xaa23은 발린이며,
Xaa24는 아스파라긴이고,
Xaa27은 류신이며,
Xaa28은 알라닌 또는 아스파라긴이고,
Xaa29는 글루타민 또는 트레오닌이며,
Xaa30은 시스테인 또는 리신이거나, 부존재하는 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서,
상기 일반식 1에서,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이며,
Xaa3은 글루타민이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
Xaa12는 리신이며,
Xaa13은 티로신이고,
Xaa14는 류신이며,
Xaa15는 아스파르트산이며,
Xaa16은 글리신, 글루탐산, 또는 세린이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌 또는 글루타민이며,
Xaa20은 리신 또는 글루타민이고,
Xaa21은 글루탐산, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 발린이고,
Xaa24는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이며,
Xaa27은 류신 또는 리신이고,
Xaa29는 글리신, 글루타민, 트레오닌, 또는 히스티딘인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 3의 아미노산 서열을 포함하는, 펩타이드인 것을 특징으로 한다:
Xaa1-Xaa2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Xaa13-Leu-Asp-Glu-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Lys-Xaa21-Phe-Val-Xaa24-Trp-Leu-Leu-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31-Ser-Ser-Gly-Gln-Pro-Pro-Pro-Ser-Xaa40 (일반식 3, 서열번호 105),
상기 일반식 3에서,
Xaa1은 히스티딘 또는 티로신이고,
Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이며,
Xaa13은 알라닌, 티로신 또는 시스테인이고,
Xaa17은 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌 또는 아르기닌이고,
Xaa19는 알라닌 또는 시스테인이며,
Xaa21은 글루탐산 또는 아스파르트산이고,
Xaa24는 글루타민 또는 아스파라긴이며,
Xaa28은 시스테인 또는 아스파르트산이고,
Xaa29는 시스테인, 히스티딘, 또는 글루타민이며,
Xaa30은 시스테인 또는 히스티딘이고,
Xaa31은 프롤린 또는 시스테인이며,
Xaa40은 시스테인 또는 부존재함.
다른 구체예로서, 상기 R1은 시스테인, CSSGQPPPS (서열번호 109), GPSSGAPPPS (서열번호 110), GPSSGAPPPSC (서열번호 111), PSSGAPPPS (서열번호 112), PSSGAPPPSG (서열번호 113), PSSGAPPPSHG (서열번호 114), PSSGAPPPSS (서열번호 115), PSSGQPPPS (서열번호 116), 또는 PSSGQPPPSC (서열번호 117)이거나, 부존재하는 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 일반식에서 N-말단으로부터 16번 아미노산과 20번 아미노산은 서로 고리를 형성하는 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 서열번호: 1 내지 102로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 하기 i) 내지 iii) 중 하나 이상의 활성을 보유하는 것을 특징으로 한다:
i) GLP-1 수용체의 활성화;
ii) 글루카곤 수용체의 활성화; 및
iii) GIP 수용체의 활성화.
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 천연형 GLP-1, 천연형 글루카곤 및 천연형 GIP 중 어느 하나 대비 체내 반감기가 증가된 것을 특징으로 한다:
다른 구체예로서, 상기 펩타이드는 이의 C-말단이 아미드화된 것을 특징으로 한다.
본 발명의 구현하는 다른 양태는 상기 분리된 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현 벡터, 및 상기 폴리뉴클레오티드 또는 재조합 발현 벡터를 포함하는 형질전환체이다.
본 발명의 구현하는 다른 양태는 상기 분리된 펩타이드를 제조하는 방법이다.
본 발명의 구현하는 다른 양태는 상기 분리된 펩타이드를 포함하는 조성물이다.
하나의 구체예로서, 상기 조성물은 약학적 조성물인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 조성물은 대사 증후군의 예방 또는 치료용인 것을 특징으로 한다.
다른 구체예로서, 상기 대사 증후군은 내당증 장애, 고콜레스테롤혈증, 이상지혈증, 비만, 당뇨, 고혈압, 이상지혈증에 의한 동맥경화, 죽상동맥경화증, 동맥경화증, 또는 관상동맥 심질환(관동맥성 심장병)을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 목적은 상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물이 목적하는 질환을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 분리된 펩타이드 또는 조성물의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명에 따른 펩타이드는 글루카곤 수용체, GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) 수용체, 및 GIP (Glucose-dependent insuliontropic polypeptide) 수용체에 대해 활성을 가져, 대사증후군의 치료에 적용될 수 있다.
이하에서는, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
한편, 본원에서 개시되는 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술되는 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 할 수 없다.
본 명세서 전반을 통하여, 천연적으로 존재하는 아미노산에 대한 통상의 1문자 및 3문자 코드가 사용될 뿐만 아니라 Aib (α-아미노이소부티르산), Sar (N-methylglycine), 알파-메틸-글루탐산 (α-methyl-glutamic acid) 등과 같은 다른 아미노산에 대해 일반적으로 허용되는 3문자 코드가 사용된다. 또한 본 명세서에서 약어로 언급된 아미노산은 IUPAC-IUB 명명법에 따라 기재되었다.
알라닌 Ala, A 아르기닌 Arg, R
아스파라긴 Asn, N 아스파르트산 Asp, D
시스테인 Cys, C 글루탐산 Glu, E
글루타민 Gln, Q 글리신 Gly, G
히스티딘 His, H 이소류신 Ile, I
류신 Leu, L 리신 Lys, K
메티오닌 Met, M 페닐알라닌 Phe, F
프롤린 Pro, P 세린 Ser, S
트레오닌 Thr, T 트립토판 Trp, W
티로신 Tyr, Y 발린 Val, V
본 발명을 구현하는 하나의 양태는 글루카곤 수용체, GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) 수용체, 및 GIP (Glucose-dependent insuliontropic polypeptide) 수용체에 대해 활성을 갖는, 분리된 펩타이드를 제공한다.
상기 글루카곤, GLP-1, 및 GIP 수용체에 대해 활성을 갖는 분리된 펩타이드는 본 발명에서 삼중 활성체로 혼용되어 사용될 수 있다.
이러한 삼중 활성체는 글루카곤, GLP-1, 및 GIP 수용체에 대해 유의한 수준의 활성을 가지는 다양한 물질, 예컨대 다양한 펩타이드를 포함한다.
특별히 이에 제한되는 것은 아니나, 상기 글루카곤, GLP-1, 및 GIP 수용체에 대해 유의한 수준의 활성을 가지는 삼중 활성체는 글루카곤, GLP-1, 및 GIP 수용체 중 하나 또는 그 이상의 수용체, 구체적으로 둘 또는 그 이상의 수용체, 보다 구체적으로 세 개의 수용체 모두에 대해 in vitro 활성이 해당 수용체의 천연형 리간드 (천연형 글루카곤, 천연형 GLP-1, 및 천연형 GIP) 대비 0.1% 이상, 1% 이상, 2% 이상, 3 % 이상, 4% 이상, 5% 이상, 6% 이상, 7% 이상, 8% 이상, 9% 이상, 10 % 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50 % 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90 % 이상, 100% 이상을 나타낼 수 있다.
이러한 삼중 활성체의 in vitro 활성을 측정하는 방법은 본원 명세서의 실시예 2를 참조할 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
한편, 삼중 활성체는 하기 i) 내지 iii) 중 하나 이상의 활성, 구체적으로 유의한 활성을 보유하는 것을 특징으로 한다:
i) GLP-1 수용체의 활성화; ii) 글루카곤 수용체의 활성화; 및 iii) GIP 수용체의 활성화.
여기서, 수용체를 활성화시킨다는 것은, 천연형 대비 수용체에 대한 in vitro 활성이 0.1% 이상, 1% 이상, 2% 이상, 3 % 이상, 4% 이상, 5% 이상, 6% 이상, 7% 이상, 8% 이상, 9% 이상, 10 % 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50 % 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90 % 이상, 100% 이상을 나타내는 경우를 예로 들 수 있다. 그러나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 삼중 활성체는 천연형 GLP-1, 천연형 글루카곤 및 천연형 GIP 중 어느 하나 대비 체내 반감기가 증가된 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
특별히 이에 제한되는 것은 아니나, 이러한 상기 글루카곤 아날로그는 비자연적으로 발생하는 (non-naturally occurring) 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 분리된 펩타이드는 천연형 글루카곤의 아날로그일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 천연형 글루카곤 아날로그는 천연형 글루카곤과 비교하여 아미노산 서열에 하나 이상의 차이가 있는 펩타이드, 천연형 글루카곤 서열의 개질 (modification)을 통하여 변형시킨 펩타이드, 천연형 글루카곤의 모방체를 포함한다.
한편, 특별히 이에 제한되는 것은 아니나, 천연형 글루카곤은 다음의 아미노산 서열을 가질 수 있다:
His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (서열번호: 118)
구체적으로, 상기 분리된 펩타이드는 천연형 글루카곤 서열에서 적어도 하나 이상의 아미노산에 치환 (substitution), 추가 (addition), 제거 (deletion), 수식 (modification) 및 이들의 조합으로 이루어지는 군에서 선택된 변형이 일어난, 천연형 글루카곤의 아날로그일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 아미노산의 치환은 아미노산으로의 치환이나 비 천연형 화합물로의 치환을 모두 포함한다.
또한, 추가는 펩타이드의 N-말단 및/또는 C-말단에 이루어질 수 있다. 한편, 추가되는 아미노산의 길이는 특별히 이에 제한되지 않으며, 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11 이상의 아미노산이 추가될 수 있으며, 넓게는 폴리펩타이드의 추가를 포함하나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 구체적으로, 상기 글루카곤 아날로그는 천연형 글루카곤 아미노산 서열에서 1번, 2번, 3번, 7번, 10번, 12번, 13번, 14번, 15번, 16번, 17번, 18번, 19번, 20번, 21번, 23번, 24번, 27번, 28번 및 29번으로 이루어진 군에서 선택된, 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11 이상, 12 이상, 13 이상, 14 이상, 15 이상, 16 이상, 17 이상, 18 이상, 19 이상, 또는 20개의 아미노산이 다른 아미노산이 치환된 것일 수 있으며, 또한 독립적으로 또는 추가적으로 이의 C-말단에 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11개 이상의 아미노산이 추가된 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 더 구체적으로 상기 글루카곤 아날로그는 천연형 글루카곤 아미노산 서열에서 1번, 2번, 3번, 10번, 12번, 13번, 14번, 15번, 16번, 17번, 18번, 19번, 20번, 21번, 23번, 24번, 27번, 28번 및 29번으로 이루어진 군에서 선택된, 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11 이상, 12 이상, 13 이상, 14 이상, 15 이상, 16 이상, 17 이상, 18 이상, 19개의 아미노산이 다른 아미노산이 치환된 것일 수 있으며, 또한 독립적으로 또는 추가적으로 이의 C-말단에 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 또는 11개 이상의 아미노산이 추가된 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 더 구체적으로 상기 글루카곤 아날로그는 천연형 글루카곤 아미노산 서열에서 1번, 2번, 3번, 10번, 13번, 14번, 15번, 16번, 17번, 18번, 19번, 20번, 21번, 23번, 24번, 28번 및 29번으로 이루어진 군에서 선택된, 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11 이상, 12 이상, 13 이상, 14 이상, 15 이상, 16 이상, 17개의 아미노산이 다른 아미노산이 치환된 것일 수 있으며, 또한 독립적으로 또는 추가적으로 이의 C-말단에 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 또는 11개 이상의 아미노산이 추가된 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 더 구체적으로 상기 글루카곤 아날로그는 천연형 글루카곤 아미노산 서열에서 1번, 2번, 13번, 16번, 17번, 18번, 19번, 20번, 21번, 23번, 24번, 27번, 28번 및 29번으로 이루어진 군에서 선택된, 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11 이상, 12이상, 13이상, 또는 14개의 아미노산이 다른 아미노산이 치환된 것일 수 있으며, 또한 독립적으로 또는 추가적으로 이의 C-말단에 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상, 10 이상, 11개 이상의 아미노산이 추가된 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 천연형 글루카곤에서 도입되는 아미노산은 티로신, 알파-메틸-글루탐산, Aib, 메티오닌, 글루탐산, 히스티딘, 리신, 류신, 이소류신, 글루타민, 발린, 글리신, 알라닌, 시스테인, 세린, 알라닌, 아스파르트산, 및 아르기닌으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
예컨대, 상기 추가되는 아미노산 서열은 천연형 GLP-1, 천연형 GIP, 또는 천연형 엑센딘-4 아미노산 서열에서 유래되는 1개 이상의 아미노산 서열일 수 있다.
이러한 글루카곤 아날로그 또는 삼중 활성체는 분자 내 가교 (intramolecular bridge)를 포함할 수 있으며 (예컨대, 공유결합적 가교 또는 비공유결합적 가교), 구체적으로 고리를 포함하는 형태일 수 있으며, 예컨대 글루카곤 아날로그 또는 삼중 활성체의 16번 및 20번 아미노산 사이에 고리가 형성된 형태일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 고리의 비제한적인 예로 락탐 가교 (또는 락탐 고리)를 포함할 수 있다.
또한, 상기 글루카곤 아날로그 또는 삼중 활성체는 고리를 포함하도록, 목적하는 위치에 고리를 형성할 수 있는 아미노산을 포함하도록 변형된 것을 모두 포함한다.
예컨대, 글루카곤 아날로그 또는 삼중 활성체의 16번 및 20번 아미노산 쌍이 각각 고리를 형성할 수 있는 글루탐산 또는 리신으로 치환된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
이러한 고리는 상기 글루카곤 아날로그 또는 삼중 활성체 내의 아미노산 곁사슬 간에 형성될 수 있으며, 그 예로 리신의 곁 사슬과 글루탐산의 곁 사슬 간에 락탐 고리가 형성되는 형태일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
이러한 방법들의 조합으로 제조되는 글루카곤의 아날로그의 예로, 천연형 글루카곤과 아미노산 서열이 하나 이상 다르고, N-말단의 아미노산 잔기의 알파-탄소가 제거된, 글루카곤 수용체, GLP-1 수용체, 및 GIP 수용체에 대해 활성을 보유한 펩타이드 등이 있으나, 이에 제한되지 않으며, 아날로그 제조를 위한 여러 방법들의 조합으로 본 발명에 적용되는 천연형 글루카곤의 아날로그를 제조할 수 있다.
또한, 특별히 이에 제한되지 않으나, 본 발명의 삼중 활성체는 체내 반감기의 증가를 위해 활성체 분해 효소의 인식작용을 회피하기 위하여 일부 아미노산을 타 아미노산 혹은 비 천연형 화합물로 치환할 수 있다.
구체적으로, 상기 삼중 활성체의 아미노산 서열 중 두 번째 아미노산 서열의 치환을 통해 분해효소의 인식 작용을 회피하여 체내 반감기를 증가시킨 펩타이드일 수 있으나, 체내 분해 효소의 인식 작용을 회피하기 위한 아미노산 치환 또는 변경은 제한 없이 포함된다.
또한, 천연형 글루카곤의 아날로그의 제조를 위한 이러한 변형은 L-형 혹은 D-형 아미노산, 및/또는 비-천연형 아미노산을 이용한 변형; 및/또는 천연형 서열을 개질, 예를 들어 측쇄 작용기의 변형, 분자 내 공유결합, 예컨대, 측쇄 간 고리 형성, 메틸화, 아실화, 유비퀴틴화, 인산화, 아미노헥산화, 바이오틴화 등과 같이 개질함으로써 변형하는 것을 모두 포함한다.
또한, 천연형 글루카곤의 아미노 및/또는 카르복시 말단에 하나 또는 그 이상의 아미노산이 추가된 것을 모두 포함한다.
상기 치환되거나 추가되는 아미노산은 인간 단백질에서 통상적으로 관찰되는 20개의 아미노산뿐만 아니라 비정형 또는 비-자연적 발생 아미노산을 사용할 수 있다. 비정형 아미노산의 상업적 출처에는 Sigma-Aldrich, ChemPep과 Genzyme pharmaceuticals가 포함된다. 이러한 아미노산이 포함된 펩타이드와 정형적인 펩타이드 서열은 상업화된 펩타이드 합성 회사, 예를 들어 미국의 American peptide company나 Bachem, 또는 한국의 Anygen을 통해 합성 및 구매 가능하다.
아미노산 유도체도 마찬가지 방식으로 입수할 수 있는데, 그 예를 일부만 들자면 4-이미다조아세트산 (4-imidazoacetic acid) 등을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 펩타이드는 생체 내의 단백질 절단 효소들로부터 보호하고 안정성을 증가시키기 위하여 이의 N-말단 및/또는 C-말단 등이 화학적으로 수식되거나 유기단으로 보호되거나, 또는 펩타이드 말단 등에 아미노산이 추가되어 변형된 형태일 수 있다.
특히, 화학적으로 합성한 펩타이드의 경우, N- 및 C-말단이 전하를 띠고 있기 때문에, 이러한 전하를 제거하기 위하여 N-말단을 아세틸화 (acetylation) 및/또는 C-말단을 아미드화 (amidation)할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않는다.
또한, 본 발명에 따른 펩타이드는 펩타이드 그 자체, 이의 염 (예컨대, 상기 펩타이드의 약학적으로 허용가능한 염), 또는 이의 용매화물의 형태를 모두 포함한다. 또한, 펩타이드는 약학적으로 허용되는 임의의 형태일 수 있다.
상기 염의 종류는 특별히 제한되지는 않는다. 다만, 개체, 예컨대 포유류에게 안전하고 효과적인 형태인 것이 바람직하나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 용어, "약학적으로 허용되는"은 의약학적 판단의 범위 내에서，과도한 독성，자극, 또는 알레르기 반응 등을 유발하지 않고 원하는 용도에 효과적으로 사용 가능한 물질을 의미한다.
본 발명에서 용어, "약학적으로 허용되는 염" 이란 약학적으로 허용되는 무기산, 유기산, 또는 염기로부터 유도된 염을 포함한다. 적합한 산의 예로는 염산, 브롬산, 황산, 질산, 과염소산, 푸마르산，말레산, 인산, 글리콜산, 락트산, 살리실산，숙신산, 톨루엔-p-설폰산, 타르타르산, 아세트산，시트르산, 메탄설폰산，포름산, 벤조산, 말론산, 나프탈렌-2-설폰산，벤젠설폰산 등을 들 수 있다. 적합한 염기로부터 유도된 염은 나트륨, 칼륨 등의 알칼리 금속，마그네슘 등의 알칼리 토금속，및 암모늄 등을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명에서 사용된 용어 "용매화물"은 본 발명에 따른 펩타이드 또는 이의 염이 용매 분자와 복합체를 형성한 것을 말한다.
하나의 구체적인 양태로서, 상기 삼중 활성체는 하기 일반식 1로 표시된 아미노산 서열을 포함하는, 분리된 펩타이드일 수 있다.
Xaa1-Xaa2-Xaa3-Gly-Thr-Phe-Xaa7-Ser-Asp-Xaa10-Ser-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21-Phe-Xaa23-Xaa24-Trp-Leu-Xaa27-Xaa28-Xaa29-Xaa30-R1 (일반식 1, 서열번호 103)
상기 일반식 1에서,
Xaa1은 히스티딘 (His, H), 4-이미다조아세틸 (CA), 또는 티로신 (Tyr, Y)이고,
Xaa2는 글리신 (Gly, G), 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib (aminoisobutyric acid)이며,
Xaa3은 글루탐산 (Glu, E) 또는 글루타민 (Gln, Q)이고,
Xaa7은 트레오닌 (Thr, T) 또는 이소류신 (Ile, I)이며,
Xaa10은 류신 (Leu, L), 티로신 (Tyr, Y), 리신 (Lys, K), 시스테인 (Cys, C), 또는 발린 (Val, V)이고,
Xaa12는 리신 (Lys, K), 세린 (Ser, S), 또는 이소류신(Ile, I)이며,
Xaa13은 글루타민 (Gln, Q), 티로신 (Tyr, Y), 알라닌 (Ala, A), 또는 시스테인 (Cys, C)이고,
Xaa14는 류신 (Leu, L), 메티오닌 (Met, M), 또는 티로신 (Tyr, Y)이며,
Xaa15는 시스테인 (Cys, C), 아스파르트산 (Asp, D), 글루탐산(Glu, E), 또는 류신(Leu, L)이며,
Xaa16은 글리신 (Gly, G), 글루탐산 (Glu, E), 또는 세린 (Ser, S)이고,
Xaa17은 글루타민 (Gln, Q), 아르기닌 (Arg, R), 이소류신 (Ile, I), 글루탐산 (Glu, E), 시스테인 (Cys, C), 또는 리신 (Lys, K)이며,
Xaa18은 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 아르기닌 (Arg, R), 또는 히스티딘 (His, H)이고,
Xaa19는 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 시스테인 (Cys, C), 또는 발린 (Val, V)이며,
Xaa20은 리신 (Lys, K), 글루타민 (Gln, Q), 또는 아르기닌 (Arg, R)이고,
Xaa21은 글루탐산 (Glu, E), 글루타민 (Gln, Q), 류신 (Leu, L), 시스테인 (Cys, C), 또는 아스파르트산 (Asp, D)이며,
Xaa23은 이소류신 (Ile, I) 또는 발린 (Val, V)이고,
Xaa24는 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 시스테인 (Cys, C), 아스파라긴 (Asn, N), 아스파르트산 (Asp, D), 또는 글루탐산 (Glu, E)이며,
Xaa27은 발린 (Val, V), 류신 (Leu, L), 리신 (Lys, K), 또는 메티오닌 (Met, M)이고,
Xaa28은 시스테인 (Cys, C), 리신 (Lys, K), 알라닌 (Ala, A), 아스파라긴 (Asn, N), 또는 아스파르트산 (Asp, D)이며,
Xaa29는 시스테인 (Cys, C), 글리신 (Gly, G), 글루타민 (Gln, Q), 트레오닌 (Thr, T), 글루탐산 (Glu, E), 또는 히스티딘 (His, H)이고,
Xaa30은 시스테인 (Cys, C), 글리신 (Gly, G), 리신 (Lys, K), 또는 히스티딘 (His, H)이거나, 부존재하며,
R1은 시스테인 (Cys, C), GKKNDWKHNIT(서열번호 106), m-SSGAPPPS-n (서열번호 107), 또는 m-SSGQPPPS-n (서열번호 108)이거나, 부존재하며,
여기서,
m은 -Cys-, -Pro-, 또는 -Gly-Pro-이고,
n은 -Cys-, -Gly-, -Ser-, 또는 -His-Gly-이거나, 부존재함.
상기 삼중 활성체의 예로, 서열번호: 1 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 것, 서열번호: 1 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열로 (필수적으로) 구성된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본원에서 '특정 서열번호로 구성되는 펩타이드'라고 기재되어 있다 하더라도, 해당 서열번호의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드와 동일 혹은 상응하는 활성을 가지는 경우라면 해당 서열번호의 아미노산 서열 앞뒤의 무의미한 서열 추가 또는 자연적으로 발생할 수 있는 돌연변이, 혹은 이의 잠재성 돌연변이 (silent mutation)를 제외하는 것이 아니며, 이러한 서열 추가 혹은 돌연변이를 가지는 경우에도 본원의 범위 내에 속하는 것이 자명하다.
이상의 내용은 본 발명의 다른 구체예 혹은 다른 양태에도 적용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
구체적으로, 상기 일반식에서 Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며, Xaa15는 시스테인, 아스파르트산, 또는 류신일 수 있다.
이러한 펩타이드의 예로, 서열번호: 1 내지 12, 14 내지 17, 및 21 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 포함하거나, 이로 (필수적으로) 구성된 펩타이드를 들 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
이러한 펩타이드는 글루카곤 수용체, GLP-1 수용체, 및 GIP 수용체 중 하나 이상을 유의하게 활성화시킬 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로, GLP-1을 유의하게 활성화시키거나, 추가로 글루카곤 수용체 및/또는 GIP 수용체를 유의하게 활성화시키는 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.
보다 더 구체적으로,
상기 일반식 1에서,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
Xaa13은 티로신, 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이고,
Xaa14는 류신, 시스테인, 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인, 류신, 글루탐산, 또는 아스파르트산이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 글루탐산, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 글루타민, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 발린, 또는 시스테인이며,
Xaa20은 리신, 아르기닌, 또는 글루타민이고,
Xaa21은 글루탐산, 글루타민, 류신, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 이소류신 또는 발린이고,
Xaa24는 시스테인, 알라닌, 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 또는 아스파르트산이며,
Xaa27은 류신 또는 리신인, 펩타이드일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 더 구체적으로,
상기 일반식 1에서,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
Xaa13은 티로신, 알라닌, 또는 시스테인이고,
Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인 또는 아스파르트산이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이며,
Xaa20은 리신 또는 글루타민이고,
Xaa21은 글루탐산, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 발린이고,
Xaa24는 알라닌, 글루타민, 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며,
Xaa27은 류신 또는 리신일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않는다.
보다 더 구체적으로,
상기 일반식 1에서,
Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신 또는 시스테인이고,
Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
Xaa13은 티로신, 알라닌, 또는 시스테인이고,
Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
Xaa15는 시스테인 또는 아스파르트산이고,
Xaa16은 글루탐산이며,
Xaa17은 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 또는 리신이고,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이며,
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이고,
Xaa20은 리신 또는 글루타민이며,
Xaa21은 글루탐산 또는 아스파르트산이고,
Xaa23은 발린이며,
Xaa24는 글루타민, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이고,
Xaa27은 류신이며,
Xaa28은 시스테인, 알라닌, 아스파라긴, 또는 아스파르트산일 수 있다.
구체적으로,
상기 일반식 1에서,
Xaa1은 히스티딘 또는 4-이미다조아세틸이고,
Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이며,
Xaa3은 글루타민이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신이고,
Xaa12는 이소류신이며,
Xaa13은 알라닌 또는 시스테인이고,
Xaa14는 메티오닌이며,
Xaa15는 아스파르트산이고,
Xaa16은 글루탐산이며,
Xaa17은 이소류신 또는 리신이고,
Xaa18은 알라닌 또는 히스티딘이며,
Xaa19는 글루타민 또는 시스테인이고,
Xaa20은 리신이며,
Xaa21은 아스파르트산이고,
Xaa23은 발린이며,
Xaa24는 아스파라긴이고,
Xaa27은 류신이며,
Xaa28은 알라닌 또는 아스파라긴이고,
Xaa29는 글루타민 또는 트레오닌이며,
Xaa30은 시스테인 또는 리신이거나, 부존재할 수 있다.
보다 구체적으로,
상기 일반식 1에서,
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이며,
Xaa3은 글루타민이고,
Xaa7은 트레오닌이며,
Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
Xaa12는 리신이며,
Xaa13은 티로신이고,
Xaa14는 류신이며,
Xaa15는 아스파르트산이며,
Xaa16은 글리신, 글루탐산, 또는 세린이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이며,
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
Xaa19는 알라닌 또는 글루타민이며,
Xaa20은 리신 또는 글루타민이고,
Xaa21은 글루탐산, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
Xaa23은 발린이고,
Xaa24는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이며,
Xaa27은 류신 또는 리신이고,
Xaa29는 글리신, 글루타민, 트레오닌, 또는 히스티딘일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
이러한 펩타이드는 GLP-1 수용체 및 글루카곤 수용체의 활성화 정도가 유의하고, GIP 수용체의 활성화 정도에 비해 높거나; GLP-1 수용체, 글루카곤 수용체 및 GIP 수용체의 활성화 정도가 모두 유의하거나; GLP-1 수용체 및 GIP 수용체의 활성화 정도가 유의하고, 글루카곤 수용체의 활성화에 비해 높은 경우에 해당할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.
GLP-1 수용체 및 GIP 수용체의 활성화 정도가 유의하고, 글루카곤 수용체의 활성화 정도에 비해 높은 경우, 체중 감소 효력과 함께 혈당 조절 능력이 보다 높은 펩타이드를 제공할 수 있으며, GLP-1 수용체, 글루카곤 수용체 및 GIP 수용체의 활성화 정도 모두가 유의한 경우, 체중 감소효과가 극대화될 수 있는 이점이 있다. 그러나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
이러한 펩타이드의 예로, 서열번호: 8, 9, 21 내지 37, 39, 42, 43, 49 내지 61, 64 내지 83, 85, 86, 88, 89, 91 내지 93, 95 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 포함하거나, 이로 (필수적으로) 구성된 펩타이드를 들 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
구체적인 양태로서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 2로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것일 수 있다.
Xaa1-Xaa2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaa10-Ser-Lys-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21-Phe-Xaa23-Xaa24-Trp-Leu-Leu-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31- Ser-Ser-Gly-Gln-Pro-Pro-Pro-Ser-Xaa40 (일반식 2, 서열번호 104)
상기 식에서,
Xaa1은 4-이미다조아세틸, 히스티딘, 또는 티로신이고;
Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이며;
Xaa10은 티로신, 또는 시스테인이며
Xaa13은 알라닌, 글루타민, 티로신, 또는 시스테인이며;
Xaa14는 류신, 메티오닌, 또는 티로신이고;
Xaa15는 아스파르트산, 글루탐산, 또는 류신이며;
Xaa16은 글리신, 글루탐산, 또는 세린이고;
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 글루탐산, 시스테인, 또는 리신이며;
Xaa18은 알라닌, 글루타민, 아르기닌, 또는 히스티딘이고;
Xaa19는 알라닌, 글루타민, 시스테인, 또는 발린이며;
Xaa20은 리신, 글루타민, 또는 아르기닌이고;
Xaa21은 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 류신, 또는 아스파르트산이며;
Xaa23은 이소류신 또는 발린이고;
Xaa24는 시스테인, 알라닌, 글루타민, 아스파라긴, 또는 글루탐산이며;
Xaa28은 리신, 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며;
Xaa29는 글리신, 글루타민, 시스테인, 또는 히스티딘이고;
Xaa30은 시스테인, 글리신, 리신, 또는 히스티딘이며;
Xaa31은 프롤린 또는 시스테인이며;
Xaa40은 시스테인이거나, 부존재함.
보다 구체적으로, 상기 일반식 2에서,
Xaa13은 알라닌, 티로신, 또는 시스테인이며;
Xaa15는 아스파르트산 또는 글루탐산이고,
Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이며;
Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이고;
Xaa21은 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 또는 아스파르트산이며;
Xaa23은 이소류신 또는 발린이고;
Xaa24는 시스테인, 글루타민, 또는 아스파라긴이고,
Xaa28은 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며;
Xaa29는 글루타민, 시스테인, 또는 히스티딘이고;
Xaa30은 시스테인, 리신, 또는 히스티딘일 수 있다.
이러한 펩타이드의 예로, 서열번호: 21, 22, 42, 43, 50, 64 내지 77, 및 95 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열, 보다 구체적으로 서열번호: 21, 22, 42, 43, 50, 64 내지 77, 및 96 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 포함하거나, 이로 (필수적으로) 구성된 펩타이드를 들 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
구체적인 양태로서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 3의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
Xaa1-Xaa2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Xaa13-Leu-Asp-Glu-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Lys-Xaa21-Phe-Val-Xaa24-Trp-Leu-Leu-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31-Ser-Ser-Gly-Gln-Pro-Pro-Pro-Ser-Xaa40 (일반식 3, 서열번호 105),
상기 일반식 3에서,
Xaa1은 히스티딘 또는 티로신이고;
Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이며;
Xaa13은 알라닌, 티로신 또는 시스테인이고;
Xaa17은 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이며;
Xaa18은 알라닌 또는 아르기닌이고;
Xaa19는 알라닌 또는 시스테인이며;
Xaa21은 글루탐산 또는 아스파르트산이고;
Xaa24는 글루타민 또는 아스파라긴이며,
Xaa28은 시스테인 또는 아스파르트산이며;
Xaa29는 시스테인, 히스티딘, 또는 글루타민이고;
Xaa30은 시스테인 또는 히스티딘이며;
Xaa31은 프롤린 또는 시스테인이며;
Xaa40은 시스테인 또는 부존재할 수 있다.
이러한 펩타이드의 예로, 서열번호: 21, 22, 42, 43, 50, 64 내지 71, 75 내지 77, 및 96 내지 102로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 포함하거나, 이로 (필수적으로) 구성된 펩타이드를 들 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 일반식 1에서 R1은 시스테인, GKKNDWKHNIT(서열번호 106), CSSGQPPPS (서열번호 109), GPSSGAPPPS (서열번호 110), GPSSGAPPPSC (서열번호 111), PSSGAPPPS (서열번호 112), PSSGAPPPSG (서열번호 113), PSSGAPPPSHG (서열번호 114), PSSGAPPPSS (서열번호 115), PSSGQPPPS (서열번호 116), 또는 PSSGQPPPSC (서열번호 117)이거나, 부존재할 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명을 구현하기 위한 다른 하나의 양태는 상기 분리된 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현 벡터, 및 상기 폴리뉴클레오티드 또는 재조합 발현 벡터를 포함하는 형질전환체를 제공한다.
상기 펩타이드에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다.
또한, 상기 펩타이드를 코딩하는 분리된 폴리뉴클레오티드는 해당 서열과 75% 이상, 구체적으로는 85% 이상, 보다 구체적으로는 90% 이상, 더욱 구체적으로는 95% 이상의 서열 동일성을 가지는 폴리뉴클레오티드 서열을 본 발명의 범주에 포함한다.
용어 "상동성"이란 야생형(wild type) 아미노산 서열 및 야생형 핵산 서열과의 유사한 정도를 나타내기 위한 것으로서, 상동성의 비교는 육안으로나 구입이 용이한 비교 프로그램을 이용하여 수행한다. 시판되는 컴퓨터 프로그램은 2개 이상의 서열간의 상동성을 백분율(%)로 계산할 수 있다. 상동성(%)은 인접한 서열에 대해 계산될 수 있다.
본 발명에서 용어 "재조합 벡터"는 적합한 숙주 내에서 목적 펩티드, 가령 펩타이드를 발현시킬 수 있도록 목적 펩티드, 가령 펩타이드가 적합한 조절 서열에 작동 가능하게 연결된 DNA 제조물을 의미한다.
상기 조절 서열은 전사를 개시할 수 있는 프로모터, 그러한 전사를 조절하기 위한 임의의 오퍼레이터 서열, 적합한 mRNA 리보좀 결합부위를 코딩하는 서열, 및 전사 및 해독의 종결을 조절하는 서열을 포함한다. 재조합 벡터는 적당한 숙주세포 내로 형질전환된 후, 숙주 게놈과 무관하게 복제되거나 기능할 수 있으며, 게놈 그 자체에 통합될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 재조합 벡터는 숙주세포 내에서 복제 가능한 것이면 특별히 한정되지 않으며, 당업계에 알려진 임의의 벡터를 이용하여 제작될 수 있다. 통상 사용되는 벡터의 예로는 천연 상태이거나 재조합된 상태의 플라스미드, 코스미드, 바이러스 및 박테리오파지를 들 수 있다. 본 발명에서 사용 가능한 벡터는 특별히 제한되는 것이 아니며 공지된 발현 벡터를 사용할 수 있다.
상기 재조합 벡터는 본 발명의 펩타이드를 생산하기 위해 숙주세포를 형질전환시키는데 사용된다. 또한 본 발명의 일부인, 이러한 형질전환 세포는 본 발명의 핵산 단편 및 벡터의 증식에 사용되거나, 본 발명의 펩타이드의 재조합 생산에 사용된 배양된 세포 또는 세포주일 수 있다.
본 발명에서 용어 "형질전환"은 표적 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 벡터를 숙주세포 내에 도입하여 숙주세포 내에서 상기 폴리뉴클레오티드가 코딩하는 단백질이 발현할 수 있도록 하는 것을 의미한다. 형질전환된 폴리뉴클레오티드가 숙주세포 내에서 발현될 수 있기만 한다면, 숙주세포의 염색체 내에 삽입되어 위치하거나 염색체 외에 위치하거나 상관없이 이들 모두를 포함한다.
또한, 상기 폴리뉴클레오티드는 표적 단백질을 코딩하는 DNA 및 RNA를 포함한다. 상기 폴리뉴클레오티드는 숙주세포 내로 도입되어 발현될 수 있는 것이면, 어떠한 형태로 도입되는 것이든 상관없다. 예를 들면, 상기 폴리뉴클레오티드는 자체적으로 발현되는데 필요한 모든 요소를 포함하는 유전자 구조체인 발현 카세트(expression cassette)의 형태로 숙주세포에 도입될 수 있다. 상기 발현 카세트는 통상 상기 폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결되어 있는 프로모터(promoter), 전사 종결신호, 리보좀 결합부위 및 번역 종결신호를 포함할 수 있다. 상기 발현 카세트는 자체 복제가 가능한 발현벡터 형태일 수 있다. 또한, 상기 폴리뉴클레오티드는 그 자체의 형태로 숙주세포에 도입되어, 숙주세포에서 발현에 필요한 서열과 작동 가능하게 연결되어 있는 것일 수도 있으며, 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기에서 용어 "작동 가능하게 연결"된 것이란 본 발명에서 목적하는 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 전사를 개시 및 매개하도록 하는 프로모터 서열과 상기 유전자 서열이 기능적으로 연결되어 있는 것을 의미한다.
본 발명에 적합한 숙주는 본 발명의 폴리뉴클레오티드를 발현하도록 하는 한 특별히 제한되지 않는다. 본 발명에 사용될 수 있는 숙주의 특정한 예로는 대장균(E. coli)과 같은 에스케리키아(Escherichia) 속 세균; 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)와 같은 바실러스(Bacillus) 속 세균; 슈도모나스 푸티다(Pseudomonas putida)와 같은 슈도모나스(Pseudomonas) 속 세균; 피키아 파스토리스(Pichia pastoris), 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae), 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)와 같은 효모; 스포도프테라 프루기페르다(Sf9)와 같은 곤충세포; 및 CHO, COS, BSC 등과 같은 동물세포가 있다.
본 발명의 구현하는 다른 양태는 상기 분리된 펩타이드를 제조하는 방법을 제공한다.
상기 펩타이드에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다.
또한, 본 발명의 펩타이드는 그 길이에 따라 이 분야에서 잘 알려진 방법, 예를 들어 자동 펩타이드 합성기에 의해 합성할 수 있으며, 유전자 조작 기술에 의하여 생산할 수도 있다.
구체적으로, 본 발명의 펩타이드는 표준 합성 방법, 재조합 발현 시스템, 또는 임의의 다른 당해 분야의 방법에 의해 제조될 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 펩타이드는, 예를 들어 하기를 포함하는 방법을 포함하는 다수의 방법으로 합성될 수 있다:
(a) 펩타이드를 고체상 또는 액체상 방법의 수단으로 단계적으로 또는 단편 조립에 의해 합성하고, 최종 펩타이드 생성물을 분리 및 정제하는 방법; 또는
(b) 펩타이드를 인코딩하는 핵산 작제물을 숙주세포 내에서 발현시키고, 발현 생성물을 숙주 세포 배양물로부터 회수하는 방법; 또는
(c) 펩타이드를 인코딩하는 핵산 작제물의 무세포 시험관 내 발현을 수행하고, 발현 생성물을 회수하는 방법; 또는
(a), (b) 및 (c)의 임의의 조합으로 펩타이드의 단편을 수득하고, 이어서 단편을 연결시켜 펩타이드를 수득하고, 당해 펩타이드를 회수하는 방법.
보다 구체적인 예로, 유전자 조작을 통하여, 융합파트너 및 펩타이드를 포함하는 융합 단백질을 코딩하는 융합 유전자를 제조하고 이를 숙주 세포에 형질전환시킨 후, 융합 단백질 형태로 발현하고, 단백질 분해효소 또는 화합물을 이용하여 융합 단백질로부터 펩타이드를 절단, 분리하여 원하는 펩타이드를 생산할 수 있다. 이를 위하여 예를 들어 Factor Xa나 엔테로키나제와 같은 단백질 분해효소, CNBr 또는 하이드록실아민과 같은 화합물에 의해 절단될 수 있는 아미노산 잔기를 코딩하는 DNA 서열을 융합파트너와 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 사이에 삽입할 수 있다.
본 발명의 구현하는 다른 양태는 상기 분리된 펩타이드를 포함하는 조성물을 제공한다.
상기 펩타이드에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다.
구체적으로, 상기 조성물은 약학적 조성물일 수 있으며, 보다 구체적으로 상기 조성물은 대사 증후군의 예방 또는 치료용일 수 있다.
본 발명에서 용어 "예방"은 상기 펩타이드 또는 조성물의 투여로 대사 증후군의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"는 상기 펩타이드 또는 조성물의 투여로 대사 증후군의 증세가 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 용어 "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며, 상기 조성물의 투여 경로는 특별히 이에 제한되지 않으나, 상기 조성물이 생체 내 표적에 도달할 수 있는 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 예를 들어 복강 내 투여, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 피 내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비 내 투여, 폐 내 투여, 또는 직장 내 투여 등이 될 수 있다.
본 발명에서 용어 "대사증후군(metabolic syndrome)"은 만성적인 대사 장애로 인하여 일어나는 다양한 질환이 단독 또는 복합적으로 일어나는 증상을 말하며, 특히 대사증후군에 해당하는 질환으로는 내당증 장애, 고콜레스테롤혈증, 이상 지혈증(dyslipidemia), 비만, 당뇨, 고혈압, 이상지혈증에 의한 동맥경화, 죽상동맥경화증, 동맥경화증, 및 관상동맥 심질환(관동맥성 심장병) 등이 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에서 용어 "비만"은 체내에 지방조직이 과다한 상태로, 신체비만지수(체중(kg)을 신장(m)의 제곱으로 나눈 값)가 25 이상이면 비만으로 정의된다. 비만은 오랜 기간에 걸쳐 에너지 소비량에 비해 영양소를 과다하게 섭취할 경우 에너지 불균형에 의해 유발되는 것이 통상적이다. 비만은 신체 전체에 영향을 미치는 대사질환으로 당뇨병 및 고지혈증에 걸릴 가능성이 높아지고, 성기능 장애, 관절염, 심혈관계 질환의 발병 위험이 커지며 일부의 경우 암의 발생과도 연관이 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 또는 희석제는 비자연적으로 발생된 것일 수 있다.
본 발명에서 용어 "약학적으로 허용가능한"이란 치료효과를 나타낼 수 있을 정도의 충분한 양과 부작용을 일으키지 않는 것을 의미하며, 질환의 종류, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 투여 경로, 투여 방법, 투여횟수, 치료 기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물 등 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 펩타이드를 포함한 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 상기 담체는 특별히 이에 제한되지는 않으나, 경구 투여 시에는 결합제, 활택제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소, 향료 등을 사용할 수 있고, 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장화제, 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등을 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약학적으로 허용가능한 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여 시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서, 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수회 투약 형태로 제조할 수 있다. 기타, 용액, 현탁액, 정제, 환약, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형화할 수 있다.
한편, 제제화에 적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
또한, 상기 조성물은 약학적 분야에서 통상의 방법에 따라 환자의 신체 내 투여에 적합한 단위 투여형의 제제, 바람직하게는 펩타이드 의약품의 투여에 유용한 제제 형태로 제형화시켜 당업계에서 통상적으로 사용하는 투여 방법을 이용하여 경구, 또는 피부, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 골수 내, 수막강 내, 심실 내, 폐, 경피, 피하, 복 내, 비강 내, 소화관 내, 국소, 설하, 질 내 또는 직장 경로를 포함하는 비경구 투여 경로에 의하여 투여될 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.
또한, 상기 펩타이드는 생리식염수 또는 유기용매와 같이 약제로 허용된 여러 전달체(carrier)와 혼합하여 사용될 수 있고, 안정성이나 흡수성을 증가시키기 위하여 글루코스, 수크로스 또는 덱스트란과 같은 탄수화물, 아스코르브산(ascorbic acid) 또는 글루타티온과 같은 항산화제(antioxidants), 킬레이트제, 저분자 단백질 또는 다른 안정화제(stabilizers) 등이 약제로 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량과 횟수는 치료할 질환, 투여 경로, 환자의 연령, 성별 및 체중 및 질환의 중등도 등의 여러 관련 인자와 함께, 활성성분인 약물의 종류에 따라 결정된다.
본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법 (fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 펩타이드의 바람직한 전체 용량은 하루에 환자 체중 1 kg당 약 0.0001 mg 내지 500 mg일 수 있다. 그러나 상기 펩타이드의 용량은 약학적 조성물의 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율 등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 상기 본 발명의 조성물의 특정한 용도에 따른 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.
본 발명의 약학적 조성물은 생체 내 지속성 및 역가가 우수하므로, 본 발명의 약학적 제제의 투여 횟수 및 빈도를 현저하게 감소시킬 수 있다.
본 발명을 구현하기 위한 다른 양태는 상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물이 목적하는 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 상기 목적하는 질환은 대사증후군일 수 있다.
상기 분리된 펩타이드 또는 이를 포함하는 조성물, 대사증후군 및 치료는 앞서 설명한 바와 같다.
본 발명에서 상기 개체는 대사증후군 (metabolic syndrome)이 의심되는 개체로서, 상기 대사증후군 (metabolic syndrome) 의심 개체는 해당 질환이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 쥐, 가축 등을 포함하는 포유 동물을 의미하나, 본 발명의 펩타이드 혹은 이를 포함하는 상기 조성물로 치료 가능한 개체는 제한 없이 포함된다.
본 발명의 방법은 상기 펩타이드를 포함하는 약학적 조성물을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
본 발명을 구현하기 위한 다른 양태는 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 분리된 펩타이드 또는 조성물의 용도를 제공한다. 상기 약제는 대사증후군의 예방 또는 치료용일 수 있다.
상기 분리된 펩타이드 또는 조성물 및 대사증후군에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다.
이하, 하기 실시예에 의하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들로 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 삼중 활성체의 제조
GLP-1, GIP 및 글루카곤 수용체에 모두 활성을 나타내는 삼중 활성체를 제조하여, 하기 표 1에 이의 서열을 나타냈다.
서열번호 서열 정보
1 H X Q G T F T S D V S S Y L D G Q A A K E F I A W L V K G C 　
2 H X Q G T F T S D V S S Y L D G Q A Q K E F I A W L V K G C 　
3 H X Q G T F T S D V S S Y L L G Q A A K Q F I A W L V K G G G P S S G A P P P S C 　
4 H X Q G T F T S D V S S Y L L G Q Q Q K E F I A W L V K G C 　
5 H X Q G T F T S D V S S Y L L G Q Q Q K E F I A W L V K G G G P S S G A P P P S C 　
6 H X Q G T F T S D V S S Y L D G Q A A K E F V A W L L K G C 　
7 H X Q G T F T S D V S K Y L D G Q A A K E F V A W L L K G C 　
8 H X Q G T F T S D V S K Y L D G Q A A Q E F V A W L L K G C 　
9 H X Q G T F T S D V S K Y L D G Q A A Q E F V A W L L A G C 　
10 H X Q G T F T S D V S K Y L D G Q A A Q E F V A W L L A G G G P S S G A P P P S C 　
11 CA G E G T F T S D L S K Y L D S R R Q Q L F V Q W L K A G G P S S G A P P P S H G 　
12 CA G E G T F I S D L S K Y M D E Q A V Q L F V E W L M A G G P S S G A P P P S H G 　
13 CA G E G T F I S D Y S I Q L D E I A V Q D F V E W L L A Q K P S S G A P P P S H G 　
14 CA G Q G T F T S D Y S I Q L D E I A V R D F V E W L K N G G P S S G A P P P S H G 　
15 CA G Q G T F T S D L S K Q M D E E A V R L F I E W L K N G G P S S G A P P P S H G 　
16 CA G Q G T F T S D L S K Q M D S E A Q Q L F I E W L K N G G P S S G A P P P S H G 　
17 CA G Q G T F T S D L S K Q M D E E R A R E F I E W L L A Q K P S S G A P P P S H G 　
18 CA G Q G T F T S D L S K Q M D S E R A R E F I E W L K N T G P S S G A P P P S H G 　
19 CA G Q G T F T S D L S I Q Y D S E H Q R D F I E W L K D T G P S S G A P P P S H G 　
20 CA G Q G T F T S D L S I Q Y E E E A Q Q D F V E W L K D T G P S S G A P P P S H G 　
21 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E C R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
22 Y X Q G T F T S D Y S K C L D E K R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
23 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E C R A K E F V Q W L L A Q K G K K N D W K H N I T 고리 형성
24 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E C R A K E F V Q W L K N G G P S S G A P P P S 고리 형성
25 H X Q G T F T S D C S K Y L D E R A A Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S 　
26 H X Q G T F T S D C S K Y L D S R A A Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S 　
27 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E R A C Q D F V Q W L L D Q G G P S S G A P P P S 　
28 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A Q E F V C W L L A Q K G K K N D W K H N I T 　
29 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K A A K E F V Q W L L N T C 고리 형성
30 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K A Q K E F V Q W L L D T C 고리 형성
31 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K A C K E F V Q W L L A Q 고리 형성
32 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K A C K D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S 고리 형성
33 H X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q K C 고리 형성
34 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V N W L L A Q K C 고리 형성
35 H X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L N T K C 고리 형성
36 H X Q G T F T S D Y S K Y L C E K R Q K E F V Q W L L N G G P S S G A P P P S G 고리 형성
37 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E C R Q K E F V Q W L L N G G P S S G A P P P S G 고리 형성
38 CA X Q G T F T S D K S S Y L D E R A A Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S S 　
39 H X Q G T F T S D Y S K Y L D G Q H A Q C F V A W L L A G G G P S S G A P P P S 　
40 H X Q G T F T S D K S K Y L D E R A C Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S 　
41 H X Q G T F T S D K S K Y L D E C A A Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S 　
42 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
43 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K E F V Q W L L D H H C S S G Q P P P S 고리 형성
44 H G Q G T F T S D C S K Q L D G Q A A Q E F V A W L L A G G P S S G A P P P S 　
45 H G Q G T F T S D C S K Y M D G Q A A Q D F V A W L L A G G P S S G A P P P S 　 　
46 H G Q G T F T S D C S K Y L D E Q H A Q E F V A W L L A G G P S S G A P P P S 　
47 H G Q G T F T S D C S K Y L D G Q R A Q E F V A W L L A G G P S S G A P P P S 　
48 H G Q G T F T S D C S K Y L D G Q R A Q D F V N W L L A G G P S S G A P P P S 　
49 CA X Q G T F T S D Y S I C M D E I H Q K D F V N W L L N T K 고리 형성
50 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
51 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L N T C 고리 형성
52 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L D T C 고리 형성
53 H X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q C 　 고리 형성
54 H X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V D W L L A E C 　 고리 형성
55 H X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q C 고리 형성
56 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V N W L L A Q C 고리 형성
57 H X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L N T C 고리 형성
58 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L N T K C 고리 형성
59 CA X Q G T F T S D Y S I C M D E K H Q K D F V N W L L N T K 고리 형성
60 CA X Q G T F T S D Y S I A M D E K H C K D F V N W L L N T K 고리 형성
61 CA X Q G T F T S D Y S I A M D E I A C K D F V N W L L N T K 고리 형성
62 CA X Q G T F T S D K S K Y L D E R A A Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S -
63 CA X Q G T F T S D C S K Y L D E R A A Q D F V Q W L L D G G P S S G A P P P S -
64 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E C A A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성　
65 H X Q G T F T S D Y S K C L D E K R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
66 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E C R A K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
67 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E C A A K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
68 Y X Q G T F T S D Y S K C L D E K A A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
69 Y X Q G T F T S D Y S K C L D E R A A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
70 Y X Q G T F T S D Y S K C L D E K R A K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
71 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E R A C K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
72 Y X Q G T F T S D C S K Y L D E R A A K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
73 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E C R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
74 CA X Q G T F T S D Y S K C L D E K R A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S 고리 형성
75 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K A A K E F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
76 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
77 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K A A K D F V Q W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
78 H X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L D T K C 고리 형성
79 H X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q K C 고리 형성
80 H X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V D W L L A E K C 고리 형성
81 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L N T C 고리 형성
82 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L D T C 고리 형성
83 CA X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q C 고리 형성
84 CA X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V D W L L A E C 고리 형성
85 CA X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q C 고리 형성
86 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V N W L L A Q C 고리 형성
87 CA X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L N T C 　 고리 형성
88 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L N T K C 고리 형성
89 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V Q W L L D T K C 고리 형성
90 CA X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q K C 　 고리 형성
91 CA X E G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V D W L L A E K C 　 고리 형성
92 CA X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L A Q K C 고리 형성
93 CA X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R Q K E F V N W L L A Q K C 고리 형성
94 CA X Q G T F T S D Y S I A M D E I H Q K D F V N W L L N T K C 고리 형성
95 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K E F V Q W L L C H H P S S G Q P P P S 고리 형성
96 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K E F V Q W L L D H C P S S G Q P P P S 고리 형성
97 Y X Q G T F T S D Y S K Y L D E K R A K E F V Q W L L D C H P S S G Q P P P S 고리 형성
98 Y X Q G T F T S D Y S K A L D E K A A K E F V N W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
99 Y X Q G T F T S D Y S K A L D E K A A K D F V N W L L D H H P S S G Q P P P S C 고리 형성
100 Y X Q G T F T S D Y S K A L D E K A A K E F V Q W L L D Q H P S S G Q P P P S C 고리 형성
101 Y X Q G T F T S D Y S K A L D E K A A K E F V N W L L D Q H P S S G Q P P P S C 고리 형성
102 Y X Q G T F T S D Y S K A L D E K A A K D F V N W L L D Q H P S S G Q P P P S C 고리 형성
상기 표 1에 기재된 서열에서 X로 표기된 아미노산은 비천연형 아미노산인 Aib (aminoisobutyric acid)이며, 밑줄로 표시된 아미노산은 밑줄로 표시된 아미노산들이 서로 고리를 형성하는 것을 의미한다. 또한, 상기 표 1에서 CA는 4-이미다조아세틸(4-imidazoacetyl)을, Y는 티로신을 의미한다.
실시예 2: 삼중 활성체의 in vitro 활성 측정
상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체의 활성을 측정하기 위해 GLP-1 수용체, 글루카곤(GCG) 수용체, 및 GIP 수용체가 각각 형질전환된 세포주를 이용하여 in vitro에서 세포 활성을 측정하는 방법을 이용하였다.
상기 각 세포주는 CHO (chinese hamster ovary)에 인간 GLP-1 수용체, 인간 GCG 수용체 및 인간 GIP 수용체 유전자를 각각 발현하도록 형질 전환된 것으로서, GLP-1, GCG 및 GIP의 활성을 측정하기에 적합하다. 따라서, 각 부분에 대한 활성을 각각의 형질 전환 세포주를 이용하여 측정하였다.
상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체의 GLP-1 활성 측정을 위해 인간 GLP-1을 50nM 부터 4배씩 0.000048nM까지 연속적으로 희석하고, 상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체를 400nM 부터 4배씩 0.00038nM까지 연속적으로 희석하였다. 상기 배양된 인간 GLP-1 수용체가 발현된 CHO 세포에서 배양액을 제거하고 연속적으로 희석된 각 물질들을 5㎕씩 상기 세포에 첨가한 다음, cAMP 항체가 포함된 완충액을 5㎕씩 추가 한 뒤 15분 동안 상온에서 배양하였다. 그런 다음 세포용해완충액(cell lysis buffer)이 포함된 detection mix를 10㎕씩 가하여 세포를 용해시키고, 90분 동안 상온에서 반응시켰다. 상기 반응이 완료된 세포용해물을 LANCE cAMP kit (PerkinElmer, USA)에 적용하여 축적된 cAMP를 통해 EC50값을 산출한 후, 상호 비교하였다. 인간 GLP-1 대비 상대 역가는 하기 표 2에 나타내었다.
상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체의 GCG 활성 측정을 위해 인간 GCG을 50nM 부터 4배씩 0.000048nM까지 연속적으로 희석하고, 상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체를 400nM 부터 4배씩 0.00038nM까지 연속적으로 희석하였다. 상기 배양된 인간 GCG 수용체가 발현된 CHO 세포에서 배양액을 제거하고 연속적으로 희석된 각 물질들을 5㎕씩 상기 세포에 첨가한 다음, cAMP 항체가 포함된 완충액을 5㎕씩 추가 한 뒤 15분 동안 상온에서 배양하였다. 그런 다음 세포용해완충액(cell lysis buffer)이 포함된 detection mix를 10㎕씩 가하여 세포를 용해시키고, 90분 동안 상온에서 반응시켰다. 상기 반응이 완료된 세포용해물을 LANCE cAMP kit (PerkinElmer, USA)에 적용하여 축적된 cAMP를 통해 EC50값을 산출한 후, 상호 비교하였다. 인간 GCG 대비 상대 역가는 하기 표 2에 나타내었다.
상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체의 GIP 활성 측정을 위해 인간 GIP을 50nM 부터 4배씩 0.000048nM까지 연속적으로 희석하고, 상기 실시예 1에서 제조된 삼중활성체를 400nM 부터 4배씩 0.00038nM까지 연속적으로 희석하였다. 상기 배양된 인간 GIP 수용체가 발현된 CHO 세포에서 배양액을 제거하고 연속적으로 희석된 각 물질들을 5㎕씩 상기 세포에 첨가한 다음, cAMP 항체가 포함된 완충액을 5㎕씩 추가 한 뒤 15분 동안 상온에서 배양하였다. 그런 다음 세포용해완충액(cell lysis buffer)이 포함된 detection mix를 10㎕씩 가하여 세포를 용해시키고, 90분 동안 상온에서 반응시켰다. 상기 반응이 완료된 세포용해물을 LANCE cAMP kit (PerkinElmer, USA)에 적용하여 축적된 cAMP를 통해 EC50값을 산출한 후, 상호 비교하였다. 인간 GIP 대비 상대 역가는 하기 표 2에 나타내었다.
천연형 펩타이드 대비In vitro 활성 (%)
서열번호 vs GLP-1 vs Glucagon vs GIP
1 3.2 <0.1 <0.1
2 5.9 <0.1 <0.1
3 1.8 <0.1 <0.1
4 8.5 <0.1 <0.1
5 42.1 <0.1 <0.1
6 17.0 <0.1 <0.1
7 13.7 <0.1 <0.1
8 14.2 0.10 <0.1
9 32.1 0.13 <0.1
10 46.0 <0.1 <0.1
11 1.4 <0.1 <0.1
12 0.4 <0.1 <0.1
13 < 0.1 < 0.1 < 0.1
14 28.0 < 0.1 < 0.1
15 79.2 <0.1 <0.1
16 2.1 < 0.1 < 0.1
17 0.2 < 0.1 < 0.1
18 <0.1 <0.1 <0.1
19 <0.1 <0.1 <0.1
20 <0.1 <0.1 <0.1
21 17.8 267 22.7
22 20.1 140 59.7
23 4.01 9.3 <0.1
24 41.2 9.3 < 0.1
25 82.6 0.1 <0.1
26 64.5 0.2 <0.1
27 83.1 0.8 0.9
28 17.2 1.6 <0.1
29 38.5 6.0 <0.1
30 142 0.7 0.8
31 135 2.2 2.4
32 151 1.7 8.8
33 24.5 <0.1 10.4
34 19.1 0.92 0.6
35 7.5 <0.1 1.3
36 37.4 0.39 0.2
37 236 6.21 2.2
38 2.3 - -
39 13.9 0.53 <0.1
40 75.2 <0.1 <0.1
41 34.3 <0.1 <0.1
42 33.9 205.8 7.8
43 12.6 88.4 3.70
44 1.3 <0.1 <0.1
45 6.6 < 0.1 < 0.1
46 1.4 < 0.1 < 0.1
47 2.4 < 0.1 < 0.1
48 1.5 < 0.1 < 0.1
49 29.8 <0.1 3.3
50 67.4 50.5 2.7
51 14.4 2.0 0.1
52 44.1 7.5 0.3
53 161 8.4 1.3
54 30.6 1.4 0.1
55 27.1 0.7 2.4
56 57.9 4.9 0.8
57 11.7 <0.1 0.3
58 39.1 2.6 0.2
59 40.3 <0.1 4.0
60 106.2 <0.1 8.2
61 59.8 <0.1 2.8
62 5.2 <0.1 <0.1
63 15.3 <0.1 <0.1
64 64.6 60.1 92.9
65 95.4 25.2 11.6
66 15.8 172 17.2
67 28.5 46.2 39.8
68 27.9 8.8 107
69 24.3 9.6 62.8
70 15.1 71.3 64.4
71 90.1 12.7 94.7
72 11.5 1.0 1.6
73 22.6 5.4 3.0
74 12.9 0.9 1.0
75 35.1 8.5 18.0
76 10.3 47.6 11.7
77 38.7 12.2 35.5
78 51.0 14.0 0.12
79 41.5 4.9 1.4
80 8.1 0.0 0.1
81 7.8 0.3 <0.1
82 9.5 1.1 <0.1
83 47.3 1.3 0.4
84 4.2 <0.1 <0.1
85 4.3 <0.1 0.3
86 28.4 0.4 0.2
87 0.9 <0.1 <0.1
88 9.6 0.3 <0.1
89 7.1 0.7 <0.1
90 7.4 <0.1 <0.1
91 31.9 16.8 0.3
92 0.8 <0.1 0.4
93 5.7 0.3 0.7
94 0.5 <0.1 <0.1
95 2.1 0.4 <0.1
96 34.4 194.8 5.2
97 10.5 62.8 2.6
98 28.1 8.2 47.1
99 20.9 14.9 57.7
100 42.2 12.7 118.5
101 23.2 13.9 40.1
102 23.3 29.5 58.0
상기에서 제조한 신규한 글루카곤 아날로그는 GLP-1 수용체, GIP 수용체 및 글루카곤 수용체를 모두 활성화시킬 수 있는 삼중 활성체로 기능을 가지는 바, 당뇨병과 비만 등을 포함하는 대사 증후군 환자의 치료제 물질로 이용될 수 있다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (21)

  1. 글루카곤 수용체, GLP-1 (Glucagon-like peptide-1) 수용체, 및 GIP (Glucose-dependent insuliontropic polypeptide) 수용체에 대해 활성을 갖는, 분리된 펩타이드.
  2. 제1항에 있어서, 상기 펩타이드는 천연형 글루카곤 서열에서 적어도 하나 이상의 아미노산에 치환(substitution), 추가(addition), 제거(deletion), 수식(modification) 및 이들의 조합으로 이루어지는 군에서 선택된 변형이 일어난, 천연형 글루카곤의 아날로그인, 분리된 펩타이드.
  3. 제2항에 있어서,
    추가되는 아미노산 서열은 천연형 GLP-1, 천연형 GIP, 또는 천연형 엑센딘-4 아미노산 서열에서 유래되는, 분리된 펩타이드.
  4. 제1항에 있어서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 1로 표시된 아미노산 서열을 포함하는, 분리된 펩타이드:
    Xaa1-Xaa2-Xaa3-Gly-Thr-Phe-Xaa7-Ser-Asp-Xaa10-Ser-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21-Phe-Xaa23-Xaa24-Trp-Leu-Xaa27-Xaa28-Xaa29-Xaa30-R1 (일반식 1, 서열번호 103)
    상기 일반식 1에서,
    Xaa1은 히스티딘 (His, H), 4-이미다조아세틸 (CA), 또는 티로신 (Tyr, Y)이고,
    Xaa2는 글리신 (Gly, G), 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib (aminoisobutyric acid)이며,
    Xaa3은 글루탐산 (Glu, E) 또는 글루타민 (Gln, Q)이고,
    Xaa7은 트레오닌 (Thr, T) 또는 이소류신 (Ile, I)이며,
    Xaa10은 류신 (Leu, L), 티로신 (Tyr, Y), 리신 (Lys, K), 시스테인 (Cys, C), 또는 발린 (Val, V)이고,
    Xaa12는 리신 (Lys, K), 세린 (Ser, S), 또는 이소류신(Ile, I)이며,
    Xaa13은 글루타민 (Gln, Q), 티로신 (Tyr, Y), 알라닌 (Ala, A), 또는 시스테인 (Cys, C)이고,
    Xaa14는 류신 (Leu, L), 메티오닌 (Met, M), 또는 티로신 (Tyr, Y)이며,
    Xaa15는 시스테인 (Cys, C), 아스파르트산 (Asp, D), 글루탐산(Glu, E), 또는 류신(Leu, L)이며,
    Xaa16은 글리신 (Gly, G), 글루탐산 (Glu, E), 또는 세린 (Ser, S)이고,
    Xaa17은 글루타민 (Gln, Q), 아르기닌 (Arg, R), 이소류신 (Ile, I), 글루탐산 (Glu, E), 시스테인 (Cys, C), 또는 리신 (Lys, K)이며,
    Xaa18은 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 아르기닌 (Arg, R), 또는 히스티딘 (His, H)이고,
    Xaa19는 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 시스테인 (Cys, C), 또는 발린 (Val, V)이며,
    Xaa20은 리신 (Lys, K), 글루타민 (Gln, Q), 또는 아르기닌 (Arg, R)이고,
    Xaa21은 글루탐산 (Glu, E), 글루타민 (Gln, Q), 류신 (Leu, L), 시스테인 (Cys, C), 또는 아스파르트산 (Asp, D)이며,
    Xaa23은 이소류신 (Ile, I) 또는 발린 (Val, V)이고,
    Xaa24는 알라닌 (Ala, A), 글루타민 (Gln, Q), 시스테인 (Cys, C), 아스파라긴 (Asn, N), 아스파르트산 (Asp, D), 또는 글루탐산 (Glu, E)이며,
    Xaa27은 발린 (Val, V), 류신 (Leu, L), 리신 (Lys, K), 또는 메티오닌 (Met, M)이고,
    Xaa28은 시스테인 (Cys, C), 리신 (Lys, K), 알라닌 (Ala, A), 아스파라긴 (Asn, N), 또는 아스파르트산 (Asp, D)이며,
    Xaa29는 시스테인 (Cys, C), 글리신 (Gly, G), 글루타민 (Gln, Q), 트레오닌 (Thr, T), 글루탐산 (Glu, E), 또는 히스티딘 (His, H)이고,
    Xaa30은 시스테인 (Cys, C), 글리신 (Gly, G), 리신 (Lys, K), 또는 히스티딘 (His, H)이거나, 부존재하며,
    R1은 시스테인 (Cys, C), GKKNDWKHNIT(서열번호 106), m-SSGAPPPS-n (서열번호 107), 또는 m-SSGQPPPS-n (서열번호 108)이거나, 부존재하며,
    여기서,
    m은 -Cys-, -Pro-, 또는 -Gly-Pro-이고,
    n은 -Cys-, -Gly-, -Ser-, 또는 -His-Gly-이거나, 부존재함.
  5. 제4항에 있어서,
    Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
    Xaa15는 시스테인, 아스파르트산, 또는 류신인, 분리된 펩타이드.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 일반식 1에서,
    Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이고,
    Xaa7은 트레오닌이며,
    Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
    Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
    Xaa13은 티로신, 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이고,
    Xaa14는 류신, 시스테인, 또는 메티오닌이며;
    Xaa15는 시스테인, 류신, 글루탐산, 또는 아스파르트산이고,
    Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 글루탐산, 또는 리신이며,
    Xaa18은 알라닌, 글루타민, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
    Xaa19는 알라닌, 글루타민, 발린, 또는 시스테인이며,
    Xaa20은 리신, 아르기닌, 또는 글루타민이고,
    Xaa21은 글루탐산, 글루타민, 류신, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
    Xaa23은 이소류신 또는 발린이고,
    Xaa24는 시스테인, 알라닌, 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 또는 아스파르트산이며,
    Xaa27은 류신 또는 리신인, 분리된 펩타이드.
  7. 제4항에 있어서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 2로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는, 분리된 펩타이드:
    Xaa1-Xaa2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaa10-Ser-Lys-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21-Phe-Xaa23-Xaa24-Trp-Leu-Leu-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31- Ser-Ser-Gly-Gln-Pro-Pro-Pro-Ser-Xaa40 (일반식 2, 서열번호 104)
    상기 식에서,
    Xaa1은 4-이미다조아세틸, 히스티딘, 또는 티로신이고,
    Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이며,
    Xaa10은 티로신, 또는 시스테인이고,
    Xaa13은 알라닌, 글루타민, 티로신, 또는 시스테인이며,
    Xaa14는 류신, 메티오닌, 또는 티로신이고,
    Xaa15는 아스파르트산, 글루탐산, 또는 류신이며,
    Xaa16은 글리신, 글루탐산, 또는 세린이고,
    Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 글루탐산, 시스테인, 또는 리신이며,
    Xaa18은 알라닌, 글루타민, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
    Xaa19는 알라닌, 글루타민, 시스테인, 또는 발린이며,
    Xaa20은 리신, 글루타민, 또는 아르기닌이고,
    Xaa21은 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 류신, 또는 아스파르트산이며,
    Xaa23은 이소류신 또는 발린이고,
    Xaa24는 시스테인, 알라닌, 글루타민, 아스파라긴, 또는 글루탐산이며,
    Xaa28은 리신, 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이고,
    Xaa29는 글리신, 글루타민, 시스테인, 또는 히스티딘이며,
    Xaa30은 시스테인, 글리신, 리신, 또는 히스티딘이고,
    Xaa31은 프롤린 또는 시스테인이며;
    Xaa40은 시스테인이거나, 부존재함.
  8. 제4항에 있어서,
    상기 일반식 1에서,
    Xaa2는 글리신, 알파-메틸-글루탐산, 또는 Aib이고,
    Xaa7은 트레오닌이며,
    Xaa10은 티로신, 시스테인, 또는 발린이고,
    Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
    Xaa13은 티로신, 알라닌, 또는 시스테인이고,
    Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
    Xaa15는 시스테인 또는 아스파르트산이고,
    Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 또는 리신이며,
    Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이고,
    Xaa19는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이며,
    Xaa20은 리신 또는 글루타민이고,
    Xaa21은 글루탐산, 시스테인, 또는 아스파르트산이며,
    Xaa23은 발린이고,
    Xaa24는 알라닌, 글루타민, 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며,
    Xaa27은 류신 또는 리신인, 분리된 펩타이드.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 일반식 2에서,
    Xaa13은 알라닌, 티로신, 또는 시스테인이고,
    Xaa15는 아스파르트산 또는 글루탐산이며,
    Xaa17은 글루타민, 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이고,
    Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이며,
    Xaa21은 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 또는 아스파르트산이고,
    Xaa23은 이소류신 또는 발린이며,
    Xaa24는 시스테인, 글루타민, 또는 아스파라긴이고,
    Xaa28은 시스테인, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이며,
    Xaa29는 글루타민, 시스테인, 또는 히스티딘이고,
    Xaa30은 시스테인, 리신, 또는 히스티딘인, 분리된 펩타이드.
  10. 제4항에 있어서,
    상기 일반식 1에서,
    Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이고,
    Xaa7은 트레오닌이며,
    Xaa10은 티로신 또는 시스테인이고,
    Xaa12는 리신 또는 이소류신이며,
    Xaa13은 티로신, 알라닌, 또는 시스테인이고,
    Xaa14는 류신 또는 메티오닌이며,
    Xaa15는 시스테인 또는 아스파르트산이고,
    Xaa16은 글루탐산이며,
    Xaa17은 아르기닌, 이소류신, 시스테인, 또는 리신이고,
    Xaa18은 알라닌, 아르기닌, 또는 히스티딘이며,
    Xaa19는 알라닌, 글루타민, 또는 시스테인이고,
    Xaa20은 리신 또는 글루타민이며,
    Xaa21은 글루탐산 또는 아스파르트산이고,
    Xaa23은 발린이며,
    Xaa24는 글루타민, 아스파라긴, 또는 아스파르트산이고,
    Xaa27은 류신이며,
    Xaa28은 시스테인, 알라닌, 아스파라긴, 또는 아스파르트산인, 분리된 펩타이드.
  11. 제4항에 있어서,
    상기 일반식 1에서,
    Xaa1은 히스티딘 또는 4-이미다조아세틸이고,
    Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이며,
    Xaa3은 글루타민이고,
    Xaa7은 트레오닌이며,
    Xaa10은 티로신이고,
    Xaa12는 이소류신이며,
    Xaa13은 알라닌 또는 시스테인이고,
    Xaa14는 메티오닌이며,
    Xaa15는 아스파르트산이고,
    Xaa16은 글루탐산이며,
    Xaa17은 이소류신 또는 리신이고,
    Xaa18은 알라닌 또는 히스티딘이며,
    Xaa19는 글루타민 또는 시스테인이고,
    Xaa20은 리신이며,
    Xaa21은 아스파르트산이고,
    Xaa23은 발린이며,
    Xaa24는 아스파라긴이고,
    Xaa27은 류신이며,
    Xaa28은 알라닌 또는 아스파라긴이고,
    Xaa29는 글루타민 또는 트레오닌이며,
    Xaa30은 시스테인 또는 리신이거나, 부존재하는 분리된 펩타이드.
  12. 제4항에 있어서, 상기 펩타이드는 하기 일반식 3의 아미노산 서열을 포함하는, 펩타이드:
    Xaa1-Xaa2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Xaa13-Leu-Asp-Glu-Xaa17-Xaa18-Xaa19-Lys-Xaa21-Phe-Val-Xaa24-Trp-Leu-Leu-Xaa28-Xaa29-Xaa30-Xaa31-Ser-Ser-Gly-Gln-Pro-Pro-Pro-Ser-Xaa40 (일반식 3, 서열번호 105),
    상기 일반식 3에서,
    Xaa1은 히스티딘 또는 티로신이고,
    Xaa2는 알파-메틸-글루탐산 또는 Aib이며,
    Xaa13은 알라닌, 티로신 또는 시스테인이고,
    Xaa17은 아르기닌, 시스테인, 또는 리신이며,
    Xaa18은 알라닌 또는 아르기닌이고,
    Xaa19는 알라닌 또는 시스테인이며,
    Xaa21은 글루탐산 또는 아스파르트산이고,
    Xaa24는 글루타민 또는 아스파라긴이며,
    Xaa28은 시스테인 또는 아스파르트산이고,
    Xaa29는 시스테인, 히스티딘, 또는 글루타민이며,
    Xaa30은 시스테인 또는 히스티딘이고,
    Xaa31은 프롤린 또는 시스테인이며,
    Xaa40은 시스테인 또는 부존재함.
  13. 제4항에 있어서, 상기 R1은 시스테인, GKKNDWKHNIT(서열번호 106), CSSGQPPPS (서열번호 109), GPSSGAPPPS (서열번호 110), GPSSGAPPPSC (서열번호 111), PSSGAPPPS (서열번호 112), PSSGAPPPSG (서열번호 113), PSSGAPPPSHG (서열번호 114), PSSGAPPPSS (서열번호 115), PSSGQPPPS (서열번호 116), 또는 PSSGQPPPSC (서열번호 117)이거나, 부존재하는,
    분리된 펩타이드.
  14. 제4항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 일반식에서 N-말단으로부터 16번 아미노산과 20번 아미노산은 서로 고리를 형성하는, 분리된 펩타이드.
  15. 제1항에 있어서,
    상기 펩타이드는 서열번호: 1 내지 102로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 분리된 펩타이드.
  16. 제1항에 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 펩타이드는 하기 i) 내지 iii) 중 하나 이상의 활성을 보유하는, 분리된 펩타이드:
    i) GLP-1 수용체의 활성화;
    ii) 글루카곤 수용체의 활성화; 및
    iii) GIP 수용체의 활성화.
  17. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 펩타이드는 천연형 GLP-1, 천연형 글루카곤 및 천연형 GIP 중 어느 하나 대비 체내 반감기가 증가된 것인,
    분리된 펩타이드.
  18. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 펩타이드는 이의 C-말단이 아미드화된, 분리된 펩타이드.
  19. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항의 펩타이드를 코딩하는, 폴리뉴클레오티드.
  20. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항의 펩타이드를 포함하는, 대사 증후군의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  21. 제20항에 있어서, 상기 대사 증후군은 내당증 장애, 고콜레스테롤혈증, 이상지혈증, 비만, 당뇨, 고혈압, 이상지혈증에 의한 동맥경화, 죽상동맥경화증, 동맥경화증, 또는 관상동맥 심질환(관동맥성 심장병)을 포함하는, 조성물.
PCT/KR2016/015554 2015-12-31 2016-12-30 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 Ceased WO2017116204A1 (ko)

Priority Applications (33)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211234307.9A CN116063453A (zh) 2015-12-31 2016-12-30 胰高血糖素/glp-1/gip受体三重激动剂
TNP/2018/000228A TN2018000228A1 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple activator activating glucagon, glp-1 and gip receptor
MA42889A MA42889B2 (fr) 2015-12-31 2016-12-30 Triple activateur activant le récepteur du glucagon, du glp-1 et du gip
EP21201279.3A EP3985017A1 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist
PH1/2018/501409A PH12018501409B1 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist
EP16882156.9A EP3398961B1 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple activator activating glucagon, glp-1 and gip receptor
CN202211234594.3A CN116063454A (zh) 2015-12-31 2016-12-30 胰高血糖素/glp-1/gip受体三重激动剂
AU2016382393A AU2016382393B2 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple glucagon/GLP-1/GIP receptor agonist
ES16882156T ES2925098T3 (es) 2015-12-31 2016-12-30 Activador triple que activa el receptor de glucagón, GLP-1 Y GIP
DK16882156.9T DK3398961T3 (da) 2015-12-31 2016-12-30 Tredobbelt aktivator, der aktiverer glukagon, glp 1 og gip-receptor
HK18114910.8A HK1255834B (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple activator activating glucagon, glp-1 and gip receptor
JP2018534682A JP6712323B2 (ja) 2015-12-31 2016-12-30 グルカゴン、ｇｌｐ−１及びｇｉｐ受容体のすべてに活性を有する三重活性体
NZ744306A NZ744306B2 (en) 2016-12-30 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist
IL260318A IL260318B2 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist
CA3010182A CA3010182A1 (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple activator activating glucagon, glp-1 and gip receptor
BR112018013530-5A BR112018013530A2 (pt) 2015-12-31 2016-12-30 ?peptídeo isolado, polinucleotídeo e composição farmacêutica?
PE2023002166A PE20250556A1 (es) 2015-12-31 2016-12-30 Agonista triple de receptores de glucagon/glp-1/gip
CN201680082352.3A CN108699125B (zh) 2015-12-31 2016-12-30 胰高血糖素/glp-1/gip受体三重激动剂
RS20220774A RS63541B1 (sr) 2015-12-31 2016-12-30 Trojni aktivator koji aktivira glukagonski, glp-1 i gip receptor
EA201891360A EA038544B1 (ru) 2015-12-31 2016-12-30 Тройной агонист рецепторов глюкагона/glp-1/gip
PL16882156.9T PL3398961T3 (pl) 2015-12-31 2016-12-30 Potrójny aktywator aktywujący receptory glukagonu, glp-1 i gip
MX2018008027A MX2018008027A (es) 2015-12-31 2016-12-30 Activador triple que activa receptor de glucagon, glp-1 y gip.
HRP20220995TT HRP20220995T1 (hr) 2015-12-31 2016-12-30 Trostruki aktivator koji aktivira glukagonski, glp-1 i gip receptore
SG11201805586SA SG11201805586SA (en) 2015-12-31 2016-12-30 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist
CR20180380A CR20180380A (es) 2015-12-31 2016-12-30 Agosnista triple de receptores de glucagón/glp-1/gip
MA51955A MA51955B1 (fr) 2015-12-31 2016-12-30 Triple activateur activant le récepteur du glucagon, du glp-1 et du gip
SA518391903A SA518391903B1 (ar) 2015-12-31 2018-06-26 معاضد مستقبل جلوكاجون/الببتيد 1 المشابه للجلوكاجون/البولي ببتيد المحب للأنسولين المعتمد على الجلوكوز الثلاثي
US16/023,994 US10370426B2 (en) 2015-12-31 2018-06-29 Triple glucagon/GLP-1/GIP receptor agonist
CONC2018/0006982A CO2018006982A2 (es) 2015-12-31 2018-07-04 Agonista triple de receptores de glucagón/glp-1/gip
ZA2018/04997A ZA201804997B (en) 2015-12-31 2018-07-25 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist
US16/370,057 US11332508B2 (en) 2015-12-31 2019-03-29 Triple glucagon/GLP-1/GIP receptor agonist
AU2019203888A AU2019203888B2 (en) 2015-12-31 2019-06-04 Triple glucagon/GLP-1/GIP receptor agonist
US17/700,055 US20220213164A1 (en) 2015-12-31 2022-03-21 Triple glucagon/glp-1/gip receptor agonist

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2015-0191082 2015-12-31
KR20150191082 2015-12-31
KR20160163737 2016-12-02
KR10-2016-0163737 2016-12-02

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
US16/023,994 Continuation US10370426B2 (en) 2015-12-31 2018-06-29 Triple glucagon/GLP-1/GIP receptor agonist

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2017116204A1 true WO2017116204A1 (ko) 2017-07-06

Family

ID=59225193

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2016/015554 Ceased WO2017116204A1 (ko) 2015-12-31 2016-12-30 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체
PCT/KR2016/015555 Ceased WO2017116205A1 (ko) 2015-12-31 2016-12-30 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 지속형 결합체

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2016/015555 Ceased WO2017116205A1 (ko) 2015-12-31 2016-12-30 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 지속형 결합체

Country Status (32)

Country Link
US (6) US10370426B2 (ko)
EP (3) EP3398961B1 (ko)
JP (5) JP6712323B2 (ko)
KR (8) KR20170080522A (ko)
CN (6) CN109071624B (ko)
AU (4) AU2016382394B2 (ko)
BR (1) BR112018013530A2 (ko)
CA (2) CA3010182A1 (ko)
CL (6) CL2018001776A1 (ko)
CO (2) CO2018006986A2 (ko)
CR (2) CR20180380A (ko)
DK (1) DK3398961T3 (ko)
DO (2) DOP2018000157A (ko)
EA (2) EA038524B1 (ko)
EC (2) ECSP18053055A (ko)
ES (1) ES2925098T3 (ko)
HK (1) HK1258177A1 (ko)
HR (1) HRP20220995T1 (ko)
HU (1) HUE059737T2 (ko)
IL (2) IL260318B2 (ko)
MX (2) MX2018008027A (ko)
PE (2) PE20250556A1 (ko)
PH (2) PH12018501409B1 (ko)
PL (1) PL3398961T3 (ko)
PT (1) PT3398961T (ko)
RS (1) RS63541B1 (ko)
SA (2) SA518391891B1 (ko)
SG (2) SG11201805586SA (ko)
TN (2) TN2018000228A1 (ko)
TW (4) TWI731015B (ko)
WO (2) WO2017116204A1 (ko)
ZA (2) ZA201804997B (ko)

Cited By (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018143729A1 (ko) 2017-02-03 2018-08-09 한미약품 주식회사 지속성이 증가된 생리활성 물질의 결합체 및 이의 용도
WO2018181864A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Gip receptor activating peptide
WO2019125929A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
WO2019125938A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
WO2020130749A1 (ko) 2018-12-21 2020-06-25 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 인슐린을 포함하는 약학 조성물
WO2021034815A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Eli Lilly And Company Methods of making incretin analogs
WO2021094259A1 (en) 2019-11-11 2021-05-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Npy2 receptor agonists
WO2021126695A1 (en) 2019-12-18 2021-06-24 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
US11185570B2 (en) 2017-02-08 2021-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Method of treating cardiovascular disease and heart failure with modified relaxin polypeptides
WO2022015115A1 (ko) 2020-07-17 2022-01-20 한미약품 주식회사 3중 작용성 지속형 결합체 또는 3중 작용제를 포함하는 조합물의 치료학적 용도
WO2022029231A1 (en) 2020-08-07 2022-02-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Soluble npy2 receptor agonists
WO2022035302A1 (ko) 2020-08-14 2022-02-17 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체를 포함하는 혈압 강하용 약학 조성물
WO2022035271A1 (ko) 2020-08-14 2022-02-17 한미약품 주식회사 삼중 활성체 지속형 결합체를 유효성분으로 포함하는 약학 조성물
WO2022065899A1 (ko) 2020-09-25 2022-03-31 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 지속형 결합체의 다발성 경화증의 치료 용도
WO2022065898A1 (ko) 2020-09-25 2022-03-31 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체를 포함하는 골 질환에 대한 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022065897A1 (ko) 2020-09-25 2022-03-31 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체의 신경퇴행성 질환의 치료 용도
WO2022080991A1 (ko) 2020-10-16 2022-04-21 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 호흡기 감염 질환의 후유증의 치료 용도
WO2022139538A1 (ko) 2020-12-24 2022-06-30 한미약품 주식회사 신규한 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중활성체 및 이의 용도
WO2023277620A1 (ko) 2021-06-30 2023-01-05 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체를 포함하는 조합물의 치료학적 용도
WO2024136573A1 (ko) 2022-12-23 2024-06-27 한미약품 주식회사 신규한 glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2024163535A1 (en) 2023-01-31 2024-08-08 Eli Lilly And Company Gip/glp1/gcg tri-receptor agonists and uses thereof
WO2024252366A1 (en) 2023-06-09 2024-12-12 Sun Pharmaceutical Industries Limited Glp-1/gip dual, glp-1/gcg dual and glp-1/gip/gcg triple receptor agonists

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130049671A (ko) 2011-11-04 2013-05-14 한미사이언스 주식회사 생리활성 폴리펩타이드 결합체 제조 방법
AR090281A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hanmi Science Co Ltd Proceso mejorado para la preparacion de un complejo polipeptidico fisiologicamente activo
AU2015242657B2 (en) * 2014-03-31 2020-05-21 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Method for improving solubility of protein and peptide by using immunoglobulin Fc fragment linkage
MY185334A (en) 2014-12-30 2021-05-06 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Glucagon derivatives with improved stability
EA201890058A1 (ru) 2015-06-30 2018-07-31 Ханми Фарм. Ко., Лтд. Производное глюкагона и композиция, содержащая длительно действующий конъюгат этого производного
WO2017116204A1 (ko) 2015-12-31 2017-07-06 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체
KR102005457B1 (ko) 2016-06-29 2019-07-30 한미약품 주식회사 글루카곤 유도체, 이의 결합체, 및 이를 포함하는 조성물, 및 이의 치료적 용도
CN110545852B (zh) 2017-02-07 2023-05-26 韩美药品株式会社 非肽聚合物接头化合物、包含该接头化合物的缀合物及制备该接头化合物和缀合物的方法
CN109239346B (zh) * 2018-10-31 2019-10-11 中国药科大学 一组代谢标志物在代谢综合征早期诊断方面的应用
EP3939990A4 (en) * 2019-02-15 2023-05-24 Hanmi Fine Chemical Co., Ltd. NOVEL INTERMEDIATE FOR BIOLOGICALLY ACTIVE POLYPEPTIDE AND PROCESS FOR THE PRODUCTION THEREOF
WO2020214013A1 (ko) * 2019-04-19 2020-10-22 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체의 고지혈증에 대한 치료적 용도
WO2020214012A1 (ko) * 2019-04-19 2020-10-22 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체를 포함하는 고지혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 예방 또는 치료 방법
CN114853908B (zh) * 2019-05-16 2024-06-07 浙江道尔生物科技有限公司 一种治疗代谢疾病的融合蛋白
DK3936142T3 (da) * 2019-06-28 2024-03-25 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd Tredobbelt agonist med aktivitet med hensyn til alle glucagon-, GLP-1- og GLP-receptorer til behandling af leversygdom
WO2021066600A1 (ko) * 2019-10-04 2021-04-08 한미약품 주식회사 글루카곤, 및 glp-1 수용체 및 gip 수용체 이중 작용제를 포함하는 조성물 및 이의 치료학적 용도
CN111040022B (zh) * 2019-12-23 2021-12-14 万新医药科技(苏州)有限公司 针对胰高血糖素样肽-1受体、胰高血糖素受体、以及抑胃肽受体的三重激动剂
CN115260313B (zh) 2019-12-31 2023-07-18 北京质肽生物医药科技有限公司 Glp-1和gdf15的融合蛋白以及其缀合物
PE20221595A1 (es) * 2020-01-13 2022-10-10 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Uso terapeutico de un conjugado de accion prolongada de un triple agonista que tiene actividad en todos los receptores de glucagon/glp-1/gip para enfermedades pulmonares
CN119841865A (zh) 2020-02-07 2025-04-18 加舒布鲁姆生物公司 杂环glp-1激动剂
BR112022020531A2 (pt) * 2020-04-20 2022-12-06 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Composição farmacêutica
FI4143183T3 (fi) 2020-04-29 2026-01-07 Gasherbrum Bio Inc Heterosyklisiä glp-1-agonisteja
MX2022014670A (es) * 2020-05-22 2023-02-13 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Formulacion liquida.
BR112022023609A2 (pt) * 2020-05-22 2023-02-07 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Formulação líquida de conjugado de ação prolongada de agonista trigonal de glucagon, glp-1 e gip
PE20231181A1 (es) 2020-08-06 2023-08-11 Gasherbrum Bio Inc Agonistas del glp-1 heterociclicos
CN114729060B (zh) 2020-09-30 2022-11-25 北京质肽生物医药科技有限公司 多肽缀合物和使用方法
WO2022080985A1 (ko) * 2020-10-16 2022-04-21 한미약품 주식회사 Gip 유도체 또는 이의 지속형 결합체를 포함하는 루푸스-관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022080987A1 (ko) * 2020-10-16 2022-04-21 한미약품 주식회사 글루카곤/glp-1/gip 삼중작용제 또는 이의 지속형 결합체를 포함하는 혈관염 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022080984A1 (ko) * 2020-10-16 2022-04-21 한미약품 주식회사 Gip 유도체, 이의 지속형 결합체, 및 이를 포함하는 약학적 조성물
US20230381281A1 (en) * 2020-10-16 2023-11-30 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising glucagon/glp-1/gip triple agonist or long-acting conjugate thereof for preventing or treating lupus-related diseases
EP4236991A1 (en) 2020-10-30 2023-09-06 Novo Nordisk A/S Glp-1, gip and glucagon receptor triple agonists
EP4257597A4 (en) * 2020-12-02 2025-04-02 Dongbao Purple Star (Hangzhou) Biopharmaceutical Co., Ltd. LACTAM-MODIFIED POLYPEPTIDE COMPOUNDS
WO2022159395A1 (en) 2021-01-20 2022-07-28 Viking Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of metabolic and liver disorders
JP2024505943A (ja) * 2021-01-29 2024-02-08 ハンミ ファーマシューティカルズ カンパニー リミテッド Ｇｉｐ誘導体、またはその持続型結合体を含む肺疾患の予防用または治療用の薬学的組成物
US20250129135A1 (en) 2021-05-26 2025-04-24 The United Bio-Technology (Hengqin) Co., Ltd Multi-Agonist and Use Thereof
TW202313667A (zh) * 2021-07-30 2023-04-01 大陸商南京明德新藥研發有限公司 含內醯胺橋的多肽化合物
MX2024003236A (es) 2021-09-15 2024-06-19 Viking Therapeutics Inc Composiciones y metodos para el tratamiento de trastornos metabolicos y hepaticos.
KR20230095665A (ko) * 2021-12-22 2023-06-29 한미약품 주식회사 간 표적 약물 및 이의 용도
CN119137124A (zh) 2022-03-09 2024-12-13 加舒布鲁姆生物公司 杂环glp-1激动剂
WO2023179542A1 (en) 2022-03-21 2023-09-28 Gasherbrum Bio , Inc. 5,8-dihydro-1,7-naphthyridine derivatives as glp-1 agonists for the treatment of diabetes
EP4323413A4 (en) 2022-03-30 2025-10-15 Beijing Ql Biopharmaceutical Co Ltd LIQUID PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS OF POLYPEPTIDE CONJUGATES AND METHODS OF USE THEREOF
WO2023198140A1 (en) 2022-04-14 2023-10-19 Gasherbrum Bio, Inc. Heterocyclic glp-1 agonists
AU2023276018A1 (en) * 2022-05-27 2024-11-21 D&D Pharmatech Inc. Peptide compositions and methods of use threof
WO2025259064A1 (ko) * 2024-06-13 2025-12-18 한미약품 주식회사 Glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 심혈관계 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2025259063A1 (ko) * 2024-06-13 2025-12-18 한미약품 주식회사 Glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 당뇨 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2025259060A1 (ko) * 2024-06-13 2025-12-18 한미약품 주식회사 Glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 지질 대사 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2025259062A1 (ko) * 2024-06-13 2025-12-18 한미약품 주식회사 Glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 신장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN120189527B (zh) * 2025-05-27 2026-04-03 广州富肽生物有限公司 一种多肽与抗体Fc片段的偶联物、药物组合物及其用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004093823A2 (en) * 2003-03-19 2004-11-04 Eli Lilly And Company Polyethelene glycol link glp-1 compounds
US20120329715A1 (en) * 2001-07-31 2012-12-27 The Gov. of the US, as represented by the Secretary, Dept. of Health & Human Services Glp-1, exendin-4, peptide analogs and uses thereof
US20130203659A1 (en) * 2006-04-20 2013-08-08 Leslie P. Miranda Glp-1 compounds
KR20140018462A (ko) * 2012-07-25 2014-02-13 한미약품 주식회사 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 고지혈증 치료용 조성물

Family Cites Families (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5476304A (en) 1977-11-29 1979-06-18 Tokyo Printing Ink Mfg Co Ltd Ink
US5408037A (en) 1991-01-17 1995-04-18 Zymogenetics, Inc. Methods for detecting glucagon antagonists
GB9423277D0 (en) 1994-11-18 1995-01-11 Univ Nottingham Pulsed laser deposition of coatings
US6096871A (en) 1995-04-14 2000-08-01 Genentech, Inc. Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life
JP4046354B2 (ja) 1996-03-18 2008-02-13 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 増大した半減期を有する免疫グロブリン様ドメイン
DK1143989T3 (da) * 1999-01-14 2007-04-16 Amylin Pharmaceuticals Inc Exendiner til glucagonundertrykkelse
US6677136B2 (en) 2000-05-03 2004-01-13 Amgen Inc. Glucagon antagonists
ATE424413T1 (de) * 2000-06-16 2009-03-15 Lilly Co Eli Analoge des glucagon-ähnlichen peptids-1
JP2007537981A (ja) * 2003-09-19 2007-12-27 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ 新規の血漿タンパク質親和性タグ
US8263084B2 (en) 2003-11-13 2012-09-11 Hanmi Science Co., Ltd Pharmaceutical composition for treating obesity-related disease comprising insulinotropic peptide conjugate
ATE555133T1 (de) 2003-11-13 2012-05-15 Hanmi Holdings Co Ltd Igg fc fragment für einen arzneimittelträger und verfahren zu dessen herstellung
US20080027072A1 (en) * 2006-04-20 2008-01-31 Ampla Pharmaceuticals, Inc. Potentiation of MC4 receptor activity
RU2477286C2 (ru) 2007-01-05 2013-03-10 Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн АНАЛОГИ ГЛЮКАГОНА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПОВЫШЕННОЙ РАСТВОРИМОСТЬЮ В БУФЕРАХ С ФИЗИОЛОГИЧЕСКИМ ЗНАЧЕНИЕМ pH
US20090098130A1 (en) 2007-01-05 2009-04-16 Bradshaw Curt W Glucagon-like protein-1 receptor (glp-1r) agonist compounds
JP2008169195A (ja) 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
AU2008216265B2 (en) 2007-02-15 2014-04-03 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists
JP5385266B2 (ja) 2007-06-15 2014-01-08 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ グルカゴン類似体
TWI423821B (zh) 2007-06-19 2014-01-21 Glucose-containing glucagon-like peptide-1 peptide
EP2190872B1 (en) 2007-09-05 2018-03-14 Novo Nordisk A/S Glucagon-like peptide-1 derivatives and their pharmaceutical use
AU2009210570B2 (en) 2008-01-30 2014-11-20 Indiana University Research And Technology Corporation Ester-based insulin prodrugs
DK2300035T3 (en) 2008-06-17 2015-11-16 Univ Indiana Res & Tech Corp Mixed GIP-based agonists for the treatment of metabolic diseases and obesity
EP2300037B1 (en) * 2008-06-17 2016-03-30 Indiana University Research and Technology Corporation Glucagon/glp-1 receptor co-agonists
WO2009155257A1 (en) 2008-06-17 2009-12-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility and stability physiological ph buffers
WO2010096052A1 (en) 2009-02-19 2010-08-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Oxyntomodulin analogs
WO2010148089A1 (en) 2009-06-16 2010-12-23 Indiana University Research And Technology Corporation Gip receptor-active glucagon compounds
AP3329A (en) 2009-07-13 2015-06-30 Zealand Pharma As Acylated glucagon analogues
GB0917072D0 (en) 2009-09-29 2009-11-11 Univ Ulster Peptide analogues of glucagon for diabetes therapy
US8703701B2 (en) * 2009-12-18 2014-04-22 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists
BR112012018104A2 (pt) 2010-01-20 2017-10-17 Zeland Pharma As tratamento de doenças cardíacas
EP2528618A4 (en) * 2010-01-27 2015-05-27 Univ Indiana Res & Tech Corp GLUCAGON ANTAGONISTE AND GIP AGONISTS CONJUGATES AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF METABOLISM DISEASES AND ADIPOSITAS
JP5812627B2 (ja) * 2010-03-10 2015-11-17 公益財団法人相模中央化学研究所 改良Ｆｃ受容体およびその製造方法
EP2552950A1 (en) 2010-03-26 2013-02-06 Novo Nordisk A/S Novel glucagon analogues
WO2011143208A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting g protein-coupled receptor activity
KR101382593B1 (ko) 2010-07-21 2014-04-10 한미사이언스 주식회사 신규한 지속형 글루카곤 결합체 및 이를 포함하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물
US8507428B2 (en) * 2010-12-22 2013-08-13 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting GIP receptor activity
WO2012150503A2 (en) 2011-05-03 2012-11-08 Zealand Pharma A/S Glu-glp-1 dual agonist signaling-selective compounds
KR20240110072A (ko) 2011-05-18 2024-07-12 메더리스 다이어비티즈, 엘엘씨 인슐린 저항성에 대한 개선된 펩티드 제약
UA113626C2 (xx) * 2011-06-02 2017-02-27 Композиція для лікування діабету, що містить кон'югат інсуліну тривалої дії та кон'югат інсулінотропного пептиду тривалої дії
PE20240686A1 (es) 2011-06-10 2024-04-10 Hanmi Science Co Ltd Peptidos derivados de oxintomodulina con actividad sobre el receptor de glucagon y el receptor de peptido similar a glucagon de tipo 1 (glp-1)
PE20230404A1 (es) 2011-06-17 2023-03-07 Hanmi Science Co Ltd Un conjugado que comprende oxintomodulina y un fragmento de inmunoglobulina, y uso del mismo
BR112013032717A2 (pt) * 2011-06-22 2017-01-24 Univ Indiana Res & Tech Corp coagonistas do receptor de glucagon/glp-1
RS56173B1 (sr) * 2011-06-22 2017-11-30 Univ Indiana Res & Tech Corp Koagonisti receptora za glukagon/glp-1 receptora
WO2013004983A1 (en) 2011-07-04 2013-01-10 Imperial Innovations Limited Novel compounds and their effects on feeding behaviour
RU2014117678A (ru) 2011-11-17 2015-12-27 Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн Пептиды глюкагонового суперсемейства, обладающие глюкокортикоидной рецепторной активностью
WO2013170636A1 (zh) 2012-05-18 2013-11-21 爱德迪安（北京）生物技术有限公司 用于糖尿病治疗的蛋白、蛋白缀合物及其应用
CA2877358A1 (en) 2012-06-21 2013-12-27 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting gip receptor activity
HRP20180936T1 (hr) * 2012-06-21 2018-12-14 Indiana University Research And Technology Corporation Analozi glukagona koji pokazuju aktivnost prema receptoru za gip
TW201402611A (zh) * 2012-06-21 2014-01-16 Univ Indiana Res & Tech Corp 具有改變之ｆｃ效應子功能之腸促胰島素受體配體多肽ｆｃ區融合多肽及結合物
AR094821A1 (es) 2012-07-25 2015-09-02 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Formulación líquida de un conjugado de péptido insulinotrópico de acción prolongada
AR092873A1 (es) * 2012-09-26 2015-05-06 Cadila Healthcare Ltd Peptidos como agonistas triples de los receptores de gip, glp-1 y glugagon
PE20151421A1 (es) 2012-11-06 2015-09-24 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Formulacion liquida del conjugado de proteina que comprende la oxintomodulina y un fragmento de inmunoglobulina
KR101993393B1 (ko) * 2012-11-06 2019-10-01 한미약품 주식회사 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 당뇨병 또는 비만성 당뇨병 치료용 조성물
DK2922877T3 (da) 2012-11-20 2019-01-02 Eumederis Pharmaceuticals Inc Forbedrede peptidlægemidler
CN104918961A (zh) 2012-11-20 2015-09-16 梅德瑞斯糖尿病有限责任公司 用于胰岛素抗性的改良的肽药物
HK1211232A1 (en) * 2012-12-21 2016-05-20 Sanofi Exendin-4 derivatives as dual glp1/gip or trigonal glp1/gip/glucagon agonists
CN105324125A (zh) * 2013-03-15 2016-02-10 印第安纳大学研究及科技有限公司 具有长效的前体药物
SI2986313T1 (sl) 2013-04-18 2019-09-30 Novo Nordisk A/S Stabilni koagonisti GLP-1 / glukagonskega receptorja z dolgotrajnim učinkom za medicinsko uporabo
HK1226084A1 (zh) 2013-08-16 2017-09-22 Medimmune Limited 用於治疗糖尿病的gip和glp-1受体双重激动剂
WO2015086733A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Sanofi Dual glp-1/glucagon receptor agonists
AU2014364589B2 (en) 2013-12-18 2020-02-27 The California Institute For Biomedical Research Modified therapeutic agents, stapled peptide lipid conjugates, and compositions thereof
AR100639A1 (es) 2014-05-29 2016-10-19 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Composición para tratar diabetes que comprende conjugados de análogos de insulina de acción prolongada y conjugados de péptidos insulinotrópicos de acción prolongada
TWI684458B (zh) 2014-05-30 2020-02-11 南韓商韓美藥品股份有限公司 包含胰島素及ｇｌｐ-１/昇糖素雙重促效劑之治療糖尿病之組成物
TWI802396B (zh) 2014-09-16 2023-05-11 南韓商韓美藥品股份有限公司 長效glp-1/高血糖素受體雙促效劑治療非酒精性脂肝疾病之用途
ES2822994T3 (es) * 2014-09-24 2021-05-05 Univ Indiana Res & Tech Corp Conjugados de incretina-insulina
MY185334A (en) 2014-12-30 2021-05-06 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Glucagon derivatives with improved stability
KR102418477B1 (ko) 2014-12-30 2022-07-08 한미약품 주식회사 글루카곤 유도체
EA201890058A1 (ru) 2015-06-30 2018-07-31 Ханми Фарм. Ко., Лтд. Производное глюкагона и композиция, содержащая длительно действующий конъюгат этого производного
TW201718629A (zh) 2015-09-25 2017-06-01 韓美藥品股份有限公司 包含多個生理多肽及免疫球蛋白Ｆｃ區之蛋白質接合物
KR20170065016A (ko) 2015-12-02 2017-06-12 한미약품 주식회사 지방산 유도체를 이용한 단백질 결합체 및 이의 제조방법
WO2017116204A1 (ko) 2015-12-31 2017-07-06 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120329715A1 (en) * 2001-07-31 2012-12-27 The Gov. of the US, as represented by the Secretary, Dept. of Health & Human Services Glp-1, exendin-4, peptide analogs and uses thereof
WO2004093823A2 (en) * 2003-03-19 2004-11-04 Eli Lilly And Company Polyethelene glycol link glp-1 compounds
US20130203659A1 (en) * 2006-04-20 2013-08-08 Leslie P. Miranda Glp-1 compounds
KR20140018462A (ko) * 2012-07-25 2014-02-13 한미약품 주식회사 옥신토모듈린 유도체를 포함하는 고지혈증 치료용 조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DRUCKER ET AL.: "The Incretin System: Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Agonists and Dipeptidyl Peptidase-4 Inhibitors in Type 2 Diabetes", THE LANCET, vol. 368, no. 11, 2006, pages 1696 - 1705, XP027947354 *

Cited By (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018143729A1 (ko) 2017-02-03 2018-08-09 한미약품 주식회사 지속성이 증가된 생리활성 물질의 결합체 및 이의 용도
US12097242B2 (en) 2017-02-08 2024-09-24 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of fibrosis, cardiovascular disease and heart failure with modified relaxin polypeptides
US12097241B2 (en) 2017-02-08 2024-09-24 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating kidney failure, and/or improving or stablizing renal function using modified relaxin polypeptides
US11185570B2 (en) 2017-02-08 2021-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Method of treating cardiovascular disease and heart failure with modified relaxin polypeptides
US11364281B2 (en) 2017-02-08 2022-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and pharmaceutical compositions thereof
US10435445B2 (en) 2017-03-31 2019-10-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Peptide compound
US11174301B2 (en) 2017-03-31 2021-11-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Peptide compound
WO2018181864A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Gip receptor activating peptide
WO2019125938A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
US12371465B2 (en) 2017-12-21 2025-07-29 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
US12365716B2 (en) 2017-12-21 2025-07-22 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
WO2019125929A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
WO2020130749A1 (ko) 2018-12-21 2020-06-25 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 인슐린을 포함하는 약학 조성물
US20220088148A1 (en) * 2018-12-21 2022-03-24 Hanmi Pharm, Co., Ltd. A pharmaceutical composition comprising insulin and trigonal glucagon/glp-1/gip receptor agonist
WO2021034815A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Eli Lilly And Company Methods of making incretin analogs
WO2021094259A1 (en) 2019-11-11 2021-05-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Npy2 receptor agonists
US12559529B2 (en) 2019-11-11 2026-02-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh NPY2 receptor agonists
US12054525B2 (en) 2019-11-11 2024-08-06 Boehringer Ingelheim Internatioal Gmbh NPY2 receptor agonists
WO2021126695A1 (en) 2019-12-18 2021-06-24 Eli Lilly And Company Incretin analogs and uses thereof
WO2022015115A1 (ko) 2020-07-17 2022-01-20 한미약품 주식회사 3중 작용성 지속형 결합체 또는 3중 작용제를 포함하는 조합물의 치료학적 용도
US12391737B2 (en) 2020-08-07 2025-08-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Soluble NPY2 receptor agonists
WO2022029231A1 (en) 2020-08-07 2022-02-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Soluble npy2 receptor agonists
WO2022035271A1 (ko) 2020-08-14 2022-02-17 한미약품 주식회사 삼중 활성체 지속형 결합체를 유효성분으로 포함하는 약학 조성물
WO2022035302A1 (ko) 2020-08-14 2022-02-17 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체를 포함하는 혈압 강하용 약학 조성물
WO2022065897A1 (ko) 2020-09-25 2022-03-31 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체의 신경퇴행성 질환의 치료 용도
WO2022065898A1 (ko) 2020-09-25 2022-03-31 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체를 포함하는 골 질환에 대한 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022065899A1 (ko) 2020-09-25 2022-03-31 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 지속형 결합체의 다발성 경화증의 치료 용도
WO2022080991A1 (ko) 2020-10-16 2022-04-21 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 호흡기 감염 질환의 후유증의 치료 용도
WO2022139538A1 (ko) 2020-12-24 2022-06-30 한미약품 주식회사 신규한 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중활성체 및 이의 용도
WO2023277620A1 (ko) 2021-06-30 2023-01-05 한미약품 주식회사 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체를 포함하는 조합물의 치료학적 용도
EP4631973A1 (en) 2022-12-23 2025-10-15 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Novel triple activator having activity on all of glp-1, gip, and glucagon receptors, and pharmaceutical composition for preventing or treating obesity comprising same
WO2024136573A1 (ko) 2022-12-23 2024-06-27 한미약품 주식회사 신규한 glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2024163535A1 (en) 2023-01-31 2024-08-08 Eli Lilly And Company Gip/glp1/gcg tri-receptor agonists and uses thereof
WO2024252366A1 (en) 2023-06-09 2024-12-12 Sun Pharmaceutical Industries Limited Glp-1/gip dual, glp-1/gcg dual and glp-1/gip/gcg triple receptor agonists

Also Published As

Publication number Publication date
ECSP18053055A (es) 2018-07-31
AU2019203891A1 (en) 2019-06-20
IL260310B1 (en) 2023-10-01
JP6712322B2 (ja) 2020-06-17
KR102285377B1 (ko) 2021-08-04
CN116063454A (zh) 2023-05-05
DOP2018000157A (es) 2018-10-15
US20220213164A1 (en) 2022-07-07
CN116059389A (zh) 2023-05-05
US20180311315A1 (en) 2018-11-01
CL2020002034A1 (es) 2020-10-09
IL260318B2 (en) 2024-02-01
HK1258177A1 (en) 2019-11-08
IL260310B2 (en) 2024-02-01
TW202216748A (zh) 2022-05-01
PE20181494A1 (es) 2018-09-18
TW201737945A (zh) 2017-11-01
US20190002520A1 (en) 2019-01-03
DK3398961T3 (da) 2022-08-22
TWI877582B (zh) 2025-03-21
EP3398962A1 (en) 2018-11-07
IL260310A (en) 2018-08-30
PH12018501409B1 (en) 2023-03-10
IL260318A (en) 2018-08-30
TW202330585A (zh) 2023-08-01
PE20250556A1 (es) 2025-02-24
DOP2018000159A (es) 2018-09-30
HK1255834A1 (en) 2019-08-30
TWI807580B (zh) 2023-07-01
PH12018501409A1 (en) 2019-04-08
US10400020B2 (en) 2019-09-03
AU2016382393B2 (en) 2019-07-04
KR20190062344A (ko) 2019-06-05
CR20180381A (es) 2019-01-14
KR102285378B1 (ko) 2021-08-04
CN108699125A (zh) 2018-10-23
JP2019504057A (ja) 2019-02-14
KR20170080521A (ko) 2017-07-10
AU2016382393A1 (en) 2018-08-02
PT3398961T (pt) 2022-09-05
AU2016382394A1 (en) 2018-08-02
CO2018006986A2 (es) 2018-07-10
NZ744321A (en) 2024-04-26
NZ744306A (en) 2024-05-31
HRP20220995T1 (hr) 2022-11-11
CL2020002033A1 (es) 2020-10-09
ZA201804998B (en) 2019-05-29
CN108699125B (zh) 2022-10-28
JP6712323B2 (ja) 2020-06-17
CN116063453A (zh) 2023-05-05
US11332508B2 (en) 2022-05-17
CR20180380A (es) 2018-12-07
EP3985017A1 (en) 2022-04-20
WO2017116205A1 (ko) 2017-07-06
TN2018000228A1 (en) 2019-10-04
CN109071624A (zh) 2018-12-21
CL2022000558A1 (es) 2022-09-23
CO2018006982A2 (es) 2018-07-10
EA038544B1 (ru) 2021-09-13
ECSP18053053A (es) 2018-07-31
PH12018501411B1 (en) 2024-02-23
IL260318B1 (en) 2023-10-01
MX2018008027A (es) 2018-11-29
CA3010182A1 (en) 2017-07-06
RS63541B1 (sr) 2022-09-30
KR102179391B1 (ko) 2020-11-16
JP2022130723A (ja) 2022-09-06
ES2925098T3 (es) 2022-10-13
KR102179392B1 (ko) 2020-11-16
US20190153060A1 (en) 2019-05-23
JP7526039B2 (ja) 2024-07-31
PH12018501411A1 (en) 2019-04-08
CN115920077A (zh) 2023-04-07
KR102367997B1 (ko) 2022-03-02
KR20190060749A (ko) 2019-06-03
CA3010265C (en) 2025-05-20
EP3398961B1 (en) 2022-06-29
JP2019504055A (ja) 2019-02-14
TWI800478B (zh) 2023-05-01
AU2019203891B2 (en) 2021-05-13
BR112018013530A2 (pt) 2018-12-04
KR20190105542A (ko) 2019-09-17
ZA201804997B (en) 2019-05-29
TWI731015B (zh) 2021-06-21
AU2016382394B2 (en) 2019-07-04
MX2018008128A (es) 2018-12-06
BR112018013525A2 (pt) 2018-12-04
KR102401869B1 (ko) 2022-05-25
US20210188937A1 (en) 2021-06-24
PL3398961T3 (pl) 2022-09-26
EP3398961A4 (en) 2019-06-12
KR20200095436A (ko) 2020-08-10
AU2019203888A1 (en) 2019-06-20
CL2018001795A1 (es) 2018-08-10
JP7030894B2 (ja) 2022-03-07
SG11201805586SA (en) 2018-07-30
SA518391903B1 (ar) 2022-08-01
SG11201805573RA (en) 2018-07-30
EA201891359A1 (ru) 2019-01-31
EA038524B1 (ru) 2021-09-09
US20190218269A1 (en) 2019-07-18
CA3010265A1 (en) 2017-07-06
CN109071624B (zh) 2023-01-17
KR20170080522A (ko) 2017-07-10
CN115920077B (zh) 2025-07-04
CL2022000557A1 (es) 2022-09-23
TN2018000231A1 (en) 2019-10-04
SA518391891B1 (ar) 2021-07-12
EP3398961A1 (en) 2018-11-07
CL2018001776A1 (es) 2018-08-10
EP3398962A4 (en) 2019-08-07
KR20190104958A (ko) 2019-09-11
AU2019203888B2 (en) 2021-05-13
HUE059737T2 (hu) 2022-12-28
KR20200096184A (ko) 2020-08-11
EA201891360A1 (ru) 2018-12-28
JP2020128428A (ja) 2020-08-27
JP2020171287A (ja) 2020-10-22
US10981967B2 (en) 2021-04-20
TW201730207A (zh) 2017-09-01
US10370426B2 (en) 2019-08-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2017116204A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체
WO2017003191A1 (en) Glucagon derivative and a composition comprising a long acting conjugate of the same
WO2020130749A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 인슐린을 포함하는 약학 조성물
WO2018004283A2 (ko) 글루카곤 유도체, 이의 결합체, 및 이를 포함하는 조성물, 및 이의 치료적 용도
WO2021066600A1 (ko) 글루카곤, 및 glp-1 수용체 및 gip 수용체 이중 작용제를 포함하는 조성물 및 이의 치료학적 용도
WO2018056764A1 (ko) 인슐린 수용체와의 결합력이 감소된, 인슐린 아날로그 및 이의 용도
CN101790538A (zh) 胰高血糖素/glp-1受体共激动剂
WO2020071865A1 (ko) 글루카곤 및 이를 포함하는 조합물의 치료학적 용도
WO2020263063A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체의 간 질환에 대한 치료적 용도
WO2017116207A1 (ko) Fgf21 아날로그, fgf21 결합체, 및 이의 용도
WO2021145552A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체의 지속형 결합체의 폐질환의 치료 용도
WO2022139538A1 (ko) 신규한 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중활성체 및 이의 용도
WO2020214013A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체의 고지혈증에 대한 치료적 용도
WO2022035302A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체를 포함하는 혈압 강하용 약학 조성물
WO2018174668A2 (ko) 인슐린 수용체와의 결합력이 감소된 인슐린 아날로그의 결합체 및 이의 용도
WO2022139493A1 (ko) TGF-β 신호전달을 억제할 수 있는 신규한 펩타이드 및 이의 용도
WO2024136573A1 (ko) 신규한 glp-1, gip, 및 글루카곤 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 및 이를 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2021215801A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체 또는 이의 결합체를 포함하는 고지혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 예방 또는 치료 방법
WO2022015082A1 (ko) 글루카곤 유도체 또는 이의 결합체의 간질환에 대한 치료적 용도
WO2021235907A1 (ko) 글루카곤 유도체의 지속형 결합체의 액상 제제
WO2020130751A1 (ko) 인슐린 및 글루카곤을 포함하는 약학 조성물
WO2017010790A1 (ko) 나노입자-유리체 기반 단백질 복합체를 유효성분으로 포함하는 혈관신생억제용 조성물 및 이의 용도
WO2023277620A1 (ko) 글루카곤, glp-1 및 gip 수용체 모두에 활성을 갖는 삼중 활성체를 포함하는 조합물의 치료학적 용도
EP1756156B1 (en) Selective vpac2 receptor peptide agonists
WO2022015115A1 (ko) 3중 작용성 지속형 결합체 또는 3중 작용제를 포함하는 조합물의 치료학적 용도

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 16882156

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 260318

Country of ref document: IL

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 3010182

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 11201805586S

Country of ref document: SG

Ref document number: 001215-2018

Country of ref document: PE

Ref document number: MX/A/2018/008027

Country of ref document: MX

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2018534682

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 122021013242

Country of ref document: BR

Ref document number: 12018501409

Country of ref document: PH

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 201891360

Country of ref document: EA

REG Reference to national code

Ref country code: BR

Ref legal event code: B01A

Ref document number: 112018013530

Country of ref document: BR

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: CR2018-000380

Country of ref document: CR

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: DZP2018000384

Country of ref document: DZ

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2016882156

Country of ref document: EP

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2016382393

Country of ref document: AU

Date of ref document: 20161230

Kind code of ref document: A

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2016882156

Country of ref document: EP

Effective date: 20180731

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 112018013530

Country of ref document: BR

Kind code of ref document: A2

Effective date: 20180629