WO2020002696A1 - Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes - Google Patents

Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Download PDF

Info

Publication number
WO2020002696A1
WO2020002696A1 PCT/EP2019/067501 EP2019067501W WO2020002696A1 WO 2020002696 A1 WO2020002696 A1 WO 2020002696A1 EP 2019067501 W EP2019067501 W EP 2019067501W WO 2020002696 A1 WO2020002696 A1 WO 2020002696A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
radical
formula
polyamino acid
hydrophobic
molecule
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/EP2019/067501
Other languages
English (en)
Inventor
Alexandre Geissler
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Adocia SAS
Original Assignee
Adocia SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US16/212,960 external-priority patent/US20190274953A1/en
Application filed by Adocia SAS filed Critical Adocia SAS
Publication of WO2020002696A1 publication Critical patent/WO2020002696A1/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions

Definitions

  • PH N Neutral Protamine Hagedorn; Humulin NPH ®, Insulatard ®
  • This formulation is the result of a precipitation of human insulin (anionic at neutral pH) by a cationic protein, protamine.
  • the microcrystals thus formed are dispersed in an aqueous suspension and dissolve slowly after subcutaneous injection. This slow dissolution ensures a sustained release of insulin. However, this release does not ensure a constant concentration of insulin over time.
  • the release profile is bell-shaped and lasts only between 12 and 16 hours. So it is injected two times a day.
  • This N PH basal insulin is much less efficient than modern basal insulins, Levemir ® and Lantus ® .
  • NPH is a basal acting insulin.
  • Insulin glargine is considered today as the most used basal insulin.
  • the invention thus relates to physically stable compositions in the form of an injectable aqueous solution, the pH of which is between 6.0 and 8.0, comprising at least:
  • a basal insulin whose isoelectric point (pi) is between 5.8 and 8.5, and b) meal insulin,
  • the invention relates to a physically stable composition in the form of an injectable aqueous solution, the pH of which is between 6.0 and 8.0, comprising at least:
  • GpA is a radical of formulas III or IIG:
  • GpC is a radical of formula IV
  • - d is an integer equal to 0, 1 or 2;
  • a divalent linear or branched alkyl radical comprising from 2 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula II or from 1 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula IG or II ", said alkyl radical carrying one or more -CONH2 functions, and
  • - B is a radical chosen from the group consisting of an unsubstituted ether or polyether radical comprising from 4 to 14 carbon atoms and from 1 to 5 oxygen atoms or a linear or branched alkyl radical, optionally comprising an aromatic ring, comprising from 1 to 9 carbon atoms;
  • x is between 9 and 25 (9 ⁇ x ⁇ 25): o if p is equal to 2, x is between 9 and 15 (9 ⁇ x ⁇ 15),
  • GpC is a radical of formula IV
  • a divalent linear or branched alkyl radical comprising from 2 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula II or from 1 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula I or II ", said alkyl radical carrying one or more -CONH2 functions, and
  • an ether or unsubstituted polyether radical comprising from 4 to 14 carbon atoms and from 1 to 5 oxygen atoms;
  • - A is a linear or branched alkyl radical comprising from 1 to 8 carbon atoms and optionally substituted by a radical derived from a saturated, unsaturated or aromatic ring;
  • the GpR group linked to the PLG is chosen from the GpRs of formula II ".
  • x is between 11 and 25 (11 ⁇ x ⁇ 25);
  • compositions in the form of an injectable aqueous solution according to the invention are clear solutions.
  • nuclear solution means compositions which satisfy the criteria described in the American and European pharmacopoeias concerning injectable solutions.
  • the solutions are defined in the section ⁇ 1151> referring to the injection ( ⁇ 1>) (referring to ⁇ 788> according to USP 35 and specified in ⁇ 788> according to USP 35 and in ⁇ 787> , ⁇ 788> and ⁇ 790> USP 38 (from 1 August 2014), according to USP 38).
  • injectable solutions must meet the criteria given in sections 2.9.19 and 2.9.20.
  • compositions which satisfy the criteria of visual inspection described in the European, American and international pharmacopoeia, that is to say compositions which are clear and which do not contain visible particles, but also colorless.
  • co-polyamino acid consisting of glutamic or aspartic units is understood to mean non-cyclic linear sequences of glutamic acid or aspartic acid units linked together by peptide bonds, said sequences having a C-terminal part, corresponding to the carboxylic acid at one end, and an N-terminal part, corresponding to the amine at the other end of the chain.
  • soluble is intended to allow a clear solution free of particles to be prepared at a concentration of less than 100 mg / ml in distilled water at 25 ° C.
  • alkyl radical means a carbon chain, linear or branched, which does not include a heteroatom.
  • the co-polyamino acid is a statistical or block co-polyamino acid.
  • composition according to the invention is characterized in that Hy comprises between 15 and 100 carbon atoms.
  • Hy comprises more than 30 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the pH is between 6.0 and 8.0.
  • the composition is characterized in that the pH is between 6.6 and 7.8.
  • the composition is characterized in that the pH is between 7.0 and 7.8.
  • the * indicate the sites of attachment of the hydrophobic radicals to the co-polyamino acid.
  • the -Hy radicals are attached to the co-polyamino acid via amide functions.
  • radicals -Hy, GpR, GpA, and GpC, and D are each independently identical or different from one monomer unit to another.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II in which R is a divalent alkyl radical comprising of 2 to 6 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II in which R is a divalent linear alkyl radical comprising from 2 to 4 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II in which R is a divalent alkyl radical comprising 2 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula IG in which R is a divalent linear alkyl radical comprising from 1 to 11 carbon atoms. In one embodiment, the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula IG in which R is a divalent alkyl radical comprising from 1 to 6 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II or IG in which R is a chosen radical in the group formed by the radicals represented by the formulas below:
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II, I or II ", in which R is an ether radical comprising from 4 to 6 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, Ic ', V or VI in which GpR is a radical of formula II, IG or II "in which R is an ether radical represented by the formula
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, V or VI in which GpR is a radical of formula II, IG or II ", in which R is a radical polyether.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II, I or II ", in which R is a linear polyether radical comprising from 6 to 10 carbon atoms and from 2 to 3 oxygen atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical of formula I, the ', V or VI in which GpR is a radical of formula II, IG or II ", in which R is a radical polyether chosen from the group consisting of radicals represented by the formulas below:
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals of formulas IVa, IVb or IVc below represented:
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical is of formula IVa.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of linear alkyl radicals.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of branched alkyl radicals.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of alkyl radicals comprising between 11 and 14 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of alkyl radicals comprising between 15 and 16 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen in the group consisting of the radicals represented by the formula below;
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of alkyl radicals comprising between 17 and 25 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of alkyl radicals comprising between 17 and 18 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of the alkyl radicals represented by the formula below:
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of alkyl radicals comprising between 18 and 25 carbon atoms.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical is a radical of formula I, the ', V or VI in which the GpC radical of formula IV is chosen from the group consisting of radicals in which Cx is chosen from the group consisting of the alkyl radicals represented by the formulas below:
  • composition is characterized in that the co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is chosen from the co-polyamino acids of formula VII below:
  • D independently represents either a -CH2- group (aspartic unit) or a -CH2-CH2- group (glutamic unit);
  • Hy is a hydrophobic radical chosen from hydrophobic radicals of formulas I, V or VI
  • Ri is a hydrophobic radical chosen from the hydrophobic radicals of formulas I, V or VI, or a radical chosen from the group consisting of an H, a linear acyl group from C2 to CIO, a branched acyl group from C3 to CIO, a benzyl, a terminal "amino acid" unit and a pyroglutamate;
  • ⁇ R is a hydrophobic radical chosen from hydrophobic radicals of formulas
  • X represents an H or a cationic entity chosen from the group comprising metal cations
  • n + m represents the degree of polymerization DP of the co-polyamino acid, that is to say the average number of monomeric units per chain of co-polyamino acid and 5 ⁇ n + m ⁇ 250.
  • statistical co-polyamino acid means a co-polyamino acid carrying carboxylate charges and at least one hydrophobic radical, a co-polyamino acid of formula Vlla.
  • R'i is a radical chosen from the group consisting of an H, a linear C2 to CIO acyl group, a branched C3 to CIO acyl group, a benzyl, a terminal "amino acid” unit and a pyroglutamate;
  • R'2 is a radical -IMR'R ", R 'and R" identical or different being chosen from the group consisting of H, linear or branched or cyclic C2 to CIO alkyl, benzyl and said R' and R " alkyls which can together form one or more saturated, unsaturated and / or aromatic carbon rings and / or which may contain heteroatoms, chosen from the group consisting of O, N and S.
  • the composition is characterized in that the co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is chosen from the co-polyamino acids of formulas Vlla in which Hyd is of formula V, GpR is of formula II, GpA is of formula IIG in which A is the radical
  • the composition is characterized in that the co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is chosen from the co-polyamino acids of formulas Vlla in which Hyd is of formula V, GpR is of formula II in which R is -CH2-CH2-, GpA is of formula IIG in which A is the radical
  • the composition is characterized in that the co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is chosen from the co-polyamino acids of formulas VII, Vlla or Vllb in which group D is a group -CH2- (aspartic unit).
  • the composition is characterized in that the co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is chosen from the co-polyamino acids of formulas VII, Vlla or Vllb in which group D is a group -CH2-CH2- (glutamic unit).
  • the composition is characterized in that the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.007 and 0.3.
  • the composition is characterized in that the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.01 and 0.3.
  • the composition is characterized in that the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.02 and 0.2.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula VI and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.007 and 0, 15.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula VI and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.02 and 0.08.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula VI in which the Cx radical comprises between 11 and 12 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.015 and 0.1.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula VI in which the Cx radical comprises between 11 and 12 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.02 and 0.08.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula VI in which the Cx radical comprises between 13 and 15 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.01 and 0.1.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula VI in which the Cx radical comprises between 13 and 15 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.01 and 0.06.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula V and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.007 and 0, 3.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula V and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.015 and 0, 2.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula V in which the Cx radical comprises between 11 and 14 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0, 1 and 0.2.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula V in which the Cx radical comprises between 15 and 16 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.04 and 0.15.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula V in which the Cx radical comprises between 17 and 18 atoms of carbon and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.02 and 0.06.
  • the composition is characterized in that the hydrophobic radical corresponds to formula V in which the Cx radical comprises between 19 and 25 carbon atoms and the ratio i between the number of hydrophobic radicals and the number of glutamic or aspartic units is between 0.01 and 0.06.
  • composition according to the invention is characterized in that n + m is between 10 and 200.
  • composition according to the invention is characterized in that n + m is between 15 and 150.
  • composition according to the invention is characterized in that n + m is between 15 and 100.
  • composition according to the invention is characterized in that n + m is between 15 and 80.
  • composition according to the invention is characterized in that n + m is between 20 and 50.
  • composition according to the invention is characterized in that n + m is between 20 and 40.
  • the invention also relates to said co-polyamino acids carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals of formula I and the precursors of said hydrophobic radicals.
  • the concentration of co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is at most 60 mg / ml.
  • the concentration of co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is at most 40 mg / ml. In one embodiment, the concentration of co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is at most 20 mg / ml.
  • the concentration of co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is at most 10 mg / ml.
  • the concentration of co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic radicals is at most 2.5 mg / ml.
  • the invention further relates to a method for preparing stable injectable compositions.
  • the copolyamino acid is a sodium poly-L-glutamate modified at one of its ends of the formula below represented described described in Example AB24.
  • the copolyamino acid is a sodium poly-L-glutamate modified at one of its ends of the formula below represented described described in Example AB22.
  • the copolyamino acid is a sodium poly-L-glutamate modified at one of its ends of the formula below represented described described in the example
  • the copolyamino acid is a sodium poly-L-glutamate modified at one of its ends of the formula below represented described described in example BB15, BB17, BB18 and BB19.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid comes from a polyamino acid obtained by polymerization.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid comes from a polyamino acid obtained by polymerization of a derivative of N-carboxyanhydride of glutamic acid or of a derivative of N-carboxyanhydride of aspartic acid as described in the article Deming, TJ., Adv. Polym. Sci. 2006, 202, 1--18.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by polymerization of a derivative of N-carboxyanhydride of glutamic acid.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by polymerization of an N-carboxyanhydride derivative of glutamic acid chosen from the group consisting by N-carboxyanhydride poly-methyl glutamate (GluOMe-NCA), N-carboxyanhydride poly-benzyl glutamate (GluOBzl-NCA) and N-carboxyanhydride poly t-butyl glutamate (GluOtBu-NCA).
  • an N-carboxyanhydride derivative of glutamic acid chosen from the group consisting by N-carboxyanhydride poly-methyl glutamate (GluOMe-NCA), N-carboxyanhydride poly-benzyl glutamate (GluOBzl-NCA) and N-carboxyanhydride poly t-butyl glutamate (GluOtBu-NCA).
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by polymerization of an N-carboxyanhydride derivative of glutamic acid or of a derivative of N -carboxyanhydride of aspartic acid using as initiator an organometallic complex of a transition metal as described in the publication Deming, TJ., Nature 1997, 390, 386-389.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by polymerization of a derivative of N-carboxyanhydride of glutamic acid or of a derivative of N -carboxyanhydride of aspartic acid using as initiator hexamethyldisilazane as described in the publication Lu H. ; et al., 3. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 14114-14115 or a silylated amine as described in the publication Lu H. ; et al., J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 12562-12563.
  • the composition according to the invention is characterized in that the process for the synthesis of the polyamino acid obtained by polymerization of a derivative of N-carboxyanhydride of glutamic acid or of a derivative of N-carboxyanhydride of aspartic acid from which the co-polyamino acid is derived comprises a step of hydrolysis of ester functions.
  • this step of hydrolysis of ester functions can consist of hydrolysis in acid medium or hydrolysis in basic medium or be carried out by hydrogenation.
  • this step of hydrolysis of ester groups is a hydrolysis in an acid medium.
  • this step of hydrolysis of ester groups is carried out by hydrogenation.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by depolymerization of a polyamino acid of higher molecular weight.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid comes from a polyamino acid obtained by enzymatic depolymerization of a polyamino acid of higher molecular weight.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by chemical depolymerization of a polyamino acid of higher molecular weight.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by enzymatic and chemical depolymerization of a polyamino acid of higher molecular weight.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by depolymerization of a polyamino acid of higher molecular weight chosen from the group consisting of polyglutamate sodium and sodium polyaspartate.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is derived from a polyamino acid obtained by depolymerization of a sodium polyaspartate of higher molecular weight.
  • the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is obtained by grafting a hydrophobic group on a poly-L-glutamic acid or poly-L-aspartic acid using the methods of amide bond formation used for peptide synthesis. In one embodiment, the composition according to the invention is characterized in that the co-polyamino acid is obtained by grafting a hydrophobic group on a poly-L-glutamic acid or poly-L-aspartic acid as described in patent FR 2,840,614.
  • the invention also relates to the co-polyamino acid carrying carboxylate charges and hydrophobic Hy radicals, said co-polyamino acid consisting of glutamic or aspartic units and said hydrophobic Hy radicals chosen from the radicals of formula I as defined below. below: Formula I
  • - GpR is a radical of formulas II, IG or II ":
  • GpA is a radical of formulas III or IIG;
  • - GpC is a radical of formula IV:
  • - a is an integer equal to 0 or 1;
  • - b is an integer equal to 0 or 1;
  • GpA is a radical of formula IIG and
  • - c is an integer equal to 0 or 1, and if c is equal to 0 then d is equal to 1 or 2; - d is an integer equal to 0, 1 or 2;
  • the hydrophobic radical of formula I is linked to the co-polyamino acid via a covalent bond between a carbonyl of the hydrophobic radical and a nitrogen atom in the N-terminal position of the co-polyamino acid, thus forming an amide function resulting from the reaction of an amine function in the N-terminal position of the co-polyamino acid precursor and an acid function carried by the precursor of the hydrophobic radical, and
  • R is a radical chosen from the group consisting of a divalent, linear or branched alkyl radical comprising from 1 to 12 carbon atoms, a divalent, linear or branched alkyl radical comprising from 1 to 12 carbon atoms carrying one or more functions - CONH2 or an unsubstituted ether or polyether radical comprising from 4 to 14 carbon atoms and from 1 to 5 oxygen atoms, a divalent, linear or branched alkyl radical comprising from 1 to 12 carbon atoms carrying one or more unsaturated rings or an unsubstituted ether or polyether radical comprising from 4 to 14 carbon atoms and from 1 to 5 oxygen atoms; more precisely, R is a radical chosen from the group consisting of:
  • a divalent linear or branched alkyl radical comprising from 2 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula II or from 1 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula IG or II ", said alkyl radical carrying one or more -COIMH2 functions, and
  • - B is a linear or branched alkyl radical, optionally comprising an aromatic ring, comprising from 1 to 9 carbon atoms;
  • - C x is a linear or branched monovalent alkyl radical, optionally comprising a cyclic part, in which x indicates the number of carbon atoms and:
  • the degree of DP polymerization in glutamic or aspartic units is between 5 and 250;
  • the free acid functions being in the form of an alkali cation salt chosen from the group consisting of Na + and K +
  • the invention also relates to the Hy 'precursor of the hydrophobic radical Hy of formula I as defined below:
  • a is an integer equal to 0 or 1;
  • b is an integer equal to 0 or 1;
  • p is an integer equal to 1 or 2 and
  • GpA is a radical of formula IIG and
  • d is an integer equal to 0, 1 or 2;
  • r is an integer equal to 0, 1 or 2
  • the hydrophobic radical of formula I is linked to the co-polyamino acid via a covalent bond between a carbonyl of the hydrophobic radical and a nitrogen atom in the N-terminal position of the co-polyamino acid, thus forming an amide function resulting from the reaction of an amine function in the IM terminal position of the precursor of the co-polyamino acid and an acid function carried by the precursor of the hydrophobic radical, and
  • a divalent linear or branched alkyl radical comprising from 2 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula II or from 1 to 11 carbon atoms if GpR is a radical of formula IG or II ", said alkyl radical carrying one or more -CONH2 functions, and
  • an ether or unsubstituted polyether radical comprising from 4 to 14 carbon atoms and from 1 to 5 oxygen atoms;
  • - A is a linear or branched alkyl radical comprising from 1 to 8 carbon atoms and optionally substituted by a radical derived from a saturated, unsaturated or aromatic ring;
  • - B is a radical chosen from the group consisting of an unsubstituted ether or polyether radical comprising from 4 to 14 carbon atoms and from 1 to 5 oxygen atoms or a linear or branched alkyl radical, optionally comprising an aromatic ring, comprising from 1 to 9 carbon atoms;
  • the invention also relates to the precursors of said hydrophobic radicals of formula V 'and VI':
  • the units used are for insulins those recommended by the pharmacopoeias whose correspondences in mg / ml are given in the table below:
  • basic insulin the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5, is understood to mean insulin insoluble at pH 7 and the duration of action of which is between 8 and 24 hours or more in standard models of diabetes. .
  • basal insulins whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 are recombinant insulins whose primary structure has been modified mainly by the introduction of basic amino acids such as Arginine or Lysine. They are described for example in the following patents, patent applications or publications WO 2003/053339, WO 2004/096854, US 5,656,722 and US 6,100,376, the content of which is incorporated by reference.
  • the basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 is insulin glargine.
  • Insulin glargine is marketed under the brand name Lantus ® (100 U / ml) or Toujeo ® (300 U / ml) by SANOFI.
  • compositions according to the invention comprise between 40 and 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 40 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 100 U / ml (or approximately 3.6 mg / ml) of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 150 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 200 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 225 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 250 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 300 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 400 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • the mass ratio between basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5, and the co-polyamino acid, ie co-polyamino acid / basal insulin is between 0.2 and 8. [000229] In one embodiment, the mass ratio is between 0.2 and 6.
  • the mass ratio is between 0.2 and 4.
  • the mass ratio is between 0.2 and 3.
  • the mass ratio is between 0.2 and 2.
  • the mass ratio is between 0.2 and 1.
  • mealtime insulin is meant a so-called rapid or “regular” insulin.
  • the so-called rapid meal insulins are insulins which must meet the needs caused by the ingestion of proteins and carbohydrates during a meal, they must act in less than 30 minutes.
  • the so-called "regular” mealtime insulin is human insulin.
  • Human insulin is marketed under such brands Humulin ® (Eli Lilly) and Novolin ® (Novo Nordisk).
  • the so-called very fast prandial insulins are insulins which are obtained by recombination and whose primary structure has been modified to reduce their action time.
  • the meal insulin is insulin lispro.
  • the meal insulin is insulin glulisine.
  • the meal insulin is insulin aspart.
  • compositions according to the invention comprise in total between 60 and 800 U / ml of insulin with a combination of mealtime insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5.
  • compositions according to the invention comprise in total between 100 and 500 U / ml of insulin with a combination of mealtime insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5. In one embodiment, the compositions according to the invention comprise in total 800 U / ml of insulin with a combination of prandial insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 700 U / ml of insulin with a combination of prandial insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 600 U / ml of insulin with a combination of prandial insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 500 U / ml of insulin with a combination of prandial insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 400 U / ml of insulin with a combination of mealtime insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 300 U / ml of insulin with a combination of prandial insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 266 U / ml of insulin with a combination of mealtime insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 200 U / ml of insulin with a combination of prandial insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • compositions according to the invention comprise a total of 100 U / ml of insulin with a combination of mealtime insulin and basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8, 5.
  • the proportions between the basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 and the mealtime insulin are for example in percentage of 25/75, 30/70, 40/60, 50/50 , 60/40, 63/37, 70/30, 75/25, 80/20, 83/17, 90/10 for formulations as described above comprising from 60 to 800 U / m L. However, any other proportion can be achieved.
  • the basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 and the mealtime insulin are present respectively in the following concentrations (in U / ml) 75/25, 150 / 50, 200/66 or 300/100. In one embodiment, the basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 and the mealtime insulin are present respectively in the following concentrations (in U / ml) 75/25.
  • the basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 and the mealtime insulin are present respectively in the following concentrations (in U / ml) 150/50.
  • compositions according to the invention include a gastrointestinal hormone.
  • gastrointestinal hormones means the hormones chosen from the group consisting of GLP-1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) and GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), oxyntomodulin (a derivative proglucagon), peptide YY, amylin, cholecystokinin, pancreatic polypeptide (PP), ghreline and enterostatin, their analogs or derivatives and / or their pharmaceutically acceptable salts.
  • GLP-1 RA Glucagon like peptide-1 receptor agonist
  • GIP Glucose-dependent insulinotropic peptide
  • oxyntomodulin a derivative proglucagon
  • peptide YY amylin
  • cholecystokinin pancreatic polypeptide
  • enterostatin enterostatin
  • Amylin or "amyloid polypeptide islet" (IAPP) is a peptide hormone with 37 residues. It is co-secreted with insulin from pancreatic beta cells in the ratio of about 100/1. Amylin plays a role in glycemic regulation by stopping the secretion of endogenous glucagon and slowing gastric emptying and promoting satiety, thus reducing postprandial glycemic excursions in blood glucose levels.
  • IAPP is treated from a coding sequence of 89 residues.
  • the amyloid pro-islet polypeptide (proIAPP, proamyline, proislet protein) is produced in pancreatic beta cells (beta cells) as a 67 amino acid pro-peptide, 7404 Dalton, and undergoes post-translational modifications including protease cleavage to produce insulin glargine.
  • amylin as mentioned refers to the compounds described in US patents 5,124,314 and US 5,234,906.
  • analogue is understood to mean, when used with reference to a peptide or a protein, a peptide or a protein, in which one or more amino acid residues constituting the primary sequence have been substituted with d other amino acid residues and / or in which one or more constituent amino acid residues have been deleted and / or in which one or more constitutive amino acid residues have been added.
  • the percentage of homology accepted for the present definition of an analogue is 50%.
  • an analog may for example be derived from the primary amino acid sequence of amylin by substituting one or more natural or non-natural or peptidomimetic amino acids.
  • derivative means, when used with reference to a peptide or a protein, a peptide or a protein or an analog chemically modified by a substituent which is not present in the reference peptide or protein or analog, that is to say a peptide or protein which has been modified by creation of covalent bonds, to introduce non-amino type substituents acid.
  • the gastrointestinal hormones are analogs or derivatives of GLP-1 RA chosen from the group consisting of exenatide or Byetta ® (ASTRA-ZEI ⁇ IECA), liraglutide or Victoza ® ( NOVO NORDISK), lixisenatide or Lyxumia ® (SANOFI), albiglutide or Tanzeum ® (GSK) or dulaglutide or Trulicity ® (ELI LILLY & CO), their analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts.
  • GLP-1 RA GLP-1 RA chosen from the group consisting of exenatide or Byetta ® (ASTRA-ZEI ⁇ IECA), liraglutide or Victoza ® ( NOVO NORDISK), lixisenatide or Lyxumia ® (SANOFI), albiglutide or Tanzeum ® (GSK) or dulaglutide or Trulicity ® (ELI LILLY & CO), their analogs or derivatives and their pharmaceutical
  • the gastrointestinal hormone is exenatide or Byetta ® , its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts.
  • the hormone is gastrointestinal liraglutide or Victoza ®, analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts.
  • the gastrointestinal hormone is lixisenatide or Lyxumia ® , its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts.
  • the gastrointestinal hormone is dulaglutide or Trulicity ® , its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts.
  • the hormone is pramlintide or gastrointestinal Symlin ®, analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts.
  • analogue is understood to mean, when used with reference to a peptide or a protein, a peptide or a protein, in which one or more constituent amino acid residues have been substituted by other residues d amino acids and / or in which one or more constituent amino acid residues have been deleted and / or in which one or more constitutive amino acid residues have been added.
  • the percentage of homology accepted for the present definition of an analogue is 50%.
  • derivative means, when used with reference to a peptide or a protein, a peptide or a protein or an analog chemically modified by a substituent which is not present in the peptide or the protein or the reference analogue, that is to say a peptide or a protein which has been modified by creation of covalent bonds, to introduce substituents.
  • the substituent is chosen from the group consisting of fatty chains.
  • the concentration of gastrointestinal hormone is in the range of 0.01 to 100 mg / mL.
  • the concentration of liraglutide, its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts is in the range from 1 to 10 mg / ml.
  • the concentration of lixisenatide, its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts is in the range of 0.01 to 1 mg / ml.
  • the concentration of albiglutide, its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts is between 5 to 100 mg / ml.
  • the concentration of dulaglutide, its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts is between 0.1 and 10 mg / ml.
  • the concentration of pramlintide, its analogs or derivatives and their pharmaceutically acceptable salts is between 0.1 and 5 mg / ml.
  • compositions according to the invention are produced by mixing commercial solutions of basal insulin the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and commercial solutions of GLP-1 RA, GLP-1 RA analog or derivative in volume ratios in the range of 10/90 to 90/10.
  • the composition according to the invention comprises a daily dose of basal insulin and a daily dose of gastrointestinal hormone.
  • compositions according to the invention comprise between 40 U / mL and 500 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 1 to 10 mg / mL of liraglutide.
  • compositions according to the invention comprise between 40 U / mL and 500 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.01 1 mg / mL lixisenatide. In one embodiment, the compositions according to the invention comprise between 40 U / mL and 500 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 5 to 100 mg / mL albiglutide.
  • compositions according to the invention comprise between 40 U / mL and 500 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5, 8 and 8.5 and, from 0.1 10 mg / mL dulaglutide.
  • compositions according to the invention comprise 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.04 to 0.5 mg / mL of exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 1 to 10 mg / ml of liraglutide.
  • compositions according to the invention comprise 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.01 to 1 mg / ml of lixisenatide.
  • compositions according to the invention comprise 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 5 to 100 mg / ml of albiglutide .
  • compositions according to the invention comprise 500 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.1 to 10 mg / ml of Dulaglutide.
  • compositions according to the invention comprise 400 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.04 to 0.5 mg / mL of exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 400 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 1 to 10 mg / ml of liraglutide.
  • compositions according to the invention comprise 400 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.01 to 1 mg / ml of lixisenatide.
  • compositions according to the invention comprise 400 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.1 to 10 mg / mL of Dulaglutide. In one embodiment, the compositions according to the invention comprise 300 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.04 to 0.5 mg / mL of exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 300 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 1 to 10 mg / ml of liraglutide.
  • compositions according to the invention comprise 300 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.01 to 1 mg / mL of lixisenatide.
  • compositions according to the invention comprise 300 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 5 to 100 mg / ml of albiglutide .
  • compositions according to the invention comprise 300 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.1 to 10 mg / ml of Dulaglutide.
  • compositions according to the invention comprise 225 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.04 to 0.5 mg / mL of exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 225 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.01 to 1 mg / ml of lixisenatide.
  • compositions according to the invention comprise 200 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.04 to 0.5 mg / mL of exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 100 U / ml (or approximately 3.6 mg / ml) of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, 0.04 to 0.5 mg / mL exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 100 U / ml (or approximately 3.6 mg / ml) of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, 1 to 10 mg / mL of liraglutide.
  • compositions according to the invention comprise 100 U / ml (or approximately 3.6 mg / ml) of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, 0.01 to 1 mg / mL of lixisenatide.
  • compositions according to the invention comprise 100 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.1 to 10 mg / ml of Dulaglutide.
  • compositions according to the invention comprise 40 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.04 to 0.5 mg / mL of exenatide.
  • compositions according to the invention comprise 40 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 1 to 10 mg / ml of liraglutide.
  • compositions according to the invention comprise 40 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.01 to 1 mg / ml of lixisenatide.
  • compositions according to the invention comprise 40 U / ml of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 5 to 100 mg / ml of albiglutide . In one embodiment, the compositions according to the invention comprise 40 U / mL of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5 and, from 0.1 to 10 mg / mL of Dulaglutide.
  • compositions according to the invention further comprise zinc salts at a concentration between 0 and
  • compositions according to the invention also comprise zinc salts at a concentration between 0 and
  • compositions according to the invention further comprise zinc salts at a concentration between 0 and
  • compositions according to the invention also comprise zinc salts at a concentration between 0 and
  • compositions according to the invention further comprise zinc salts at a concentration between 0 and
  • compositions according to the invention also comprise zinc salts at a concentration of between 50 and
  • compositions according to the invention also comprise zinc salts at a concentration of between 100 and
  • compositions according to the invention also comprise zinc salts at a concentration of between 200 and
  • compositions according to the invention further comprise buffers.
  • compositions according to the invention comprise buffers at concentrations between 0 and 100 mM.
  • compositions according to the invention comprise buffers at concentrations between 15 and 50 mM.
  • compositions according to the invention comprise a buffer chosen from the group consisting of a phosphate buffer, Tris (trishydroxymethylaminomethane) and sodium citrate.
  • the buffer is sodium phosphate. In one embodiment, the buffer is Tris (trishydroxymethylaminomethane).
  • the buffer is sodium citrate.
  • compositions according to the invention also comprise preservatives.
  • the preservatives are chosen from the group consisting of m-cresol and phenol, alone or as a mixture.
  • the concentration of preservatives is between 10 and 50 mM.
  • the surfactant is chosen from the group consisting of propylene glycol and polysorbate.
  • the tonicity agents are chosen from the group consisting of glycerin, sodium chloride, mannitol and glycine.
  • compositions according to the invention may also comprise all the excipients in accordance with the pharmacopoeias and compatible with the insulins used at the usual concentrations.
  • the invention also relates to a pharmaceutical formulation according to the invention, characterized in that it is obtained by drying and / or lyophilization.
  • the modes of administration envisaged are by the intravenous, subcutaneous, intradermal or intramuscular route.
  • transdermal, oral, nasal, vaginal, ocular, oral, pulmonary administration routes are also envisaged.
  • composition according to the invention is characterized in that it is administered 1 time per day.
  • composition according to the invention is characterized in that it is administered at least 2 times a day.
  • composition according to the invention is characterized in that it is administered 2 times a day.
  • the composition according to the invention is characterized in that it further comprises a mealtime insulin. In one embodiment, the composition according to the invention further comprising at least one prandial insulin is characterized in that it is administered 1 time per day.
  • composition according to the invention further comprising at least one prandial insulin is characterized in that it is administered at least 2 times a day.
  • composition according to the invention further comprising at least one prandial insulin is characterized in that it is administered 2 times a day.
  • composition according to the invention is characterized in that it also comprises a gastrointestinal hormone.
  • composition according to the invention further comprising at least one gastrointestinal hormone is characterized in that it is administered
  • composition according to the invention further comprising at least one gastrointestinal hormone is characterized in that it is administered at least 2 times a day.
  • composition according to the invention further comprising at least one gastrointestinal hormone is characterized in that it is administered
  • composition according to the invention is characterized in that the gastrointestinal hormone is a GLP-1 RA.
  • composition according to the invention further comprising a GLP-1 RA is characterized in that it is administered 1 time per day.
  • composition according to the invention further comprising at least one GLP-1 RA is characterized in that it is administered 2 times a day.
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between 6.0 and 8.0 comprising a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 and a mealtime insulin.
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between 6.0 and 8.0 comprising a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 and a gastrointestinal hormone, as defined above.
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between 6.0 and 8.0 comprising a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5, a meal insulin and a gastrointestinal hormone, as defined above.
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between
  • 6.6 and 7.6 comprising a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between
  • 6.6 and 7.6 comprising a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and
  • the invention also relates to single-dose formulations at pH between
  • the single-dose formulations further comprise a co-polyamino acid as defined above.
  • the formulations are in the form of an injectable solution.
  • the basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5 is insulin glargine.
  • the meal insulin is human insulin.
  • the insulin is a recombinant human insulin as described in the European Pharmacopoeia and the American Pharmacopoeia.
  • the prandial insulin is selected from the group consisting of insulin lispro (Humalog ®), insulin glulisine (Apidra ®) and insulin aspart (NovoLog ®).
  • the meal insulin is insulin lispro.
  • the meal insulin is insulin glulisine.
  • the meal insulin is aspart insulin.
  • GLP-1 RA analog or derivative of GLP- 1 RA is chosen from the group comprising exenatide (Byetta ® ), liraglutide (Victoza ® ), lixisenatide (Lyxumia ® ), albiglutide (Tanzeum ® ), dulaglutide (Trulicity ® ) or one of their derivatives.
  • the gastrointestinal hormone is exenatide.
  • the gastrointestinal hormone is liraglutide.
  • the gastrointestinal hormone is lixisenatide.
  • the gastrointestinal hormone is albiglutide.
  • the gastrointestinal hormone is dulaglutide.
  • the solubilization at pH between 6.6 and 7.8 of the basal insulins whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5, by the co-polyamino acids carrying carboxylate charges and at least one radical hydrophobic according to the invention, can be observed and controlled in a simple manner, with the naked eye, by virtue of a change in appearance of the solution.
  • the Applicant has been able to verify that a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5, solubilized at pH between 6.0 and 8.0 in presence of a co-polyamino acid carrying carboxylate charges and at least one hydrophobic radical according to the invention retains its slow insulin action, whether alone or in combination with a prandial insulin or a gastrointestinal hormone.
  • the Applicant has also been able to verify that a mixed meal insulin mixed at a pH of between 6.0 and 8.0 in the presence of a co-polyamino acid carrying carboxylate charges and at least one hydrophobic radical according to the invention and a basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5, retains its rapid insulin action.
  • the preparation of a composition according to the invention has the advantage of being able to be carried out by simple mixing of an aqueous solution of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5, and d 'A co-polyamino acid carrying carboxylate charges and at least one hydrophobic radical according to the invention, in aqueous solution or in lyophilized form. If necessary, the pH of the preparation is adjusted to pH between 6 and 8.
  • the preparation of a composition according to the invention has the advantage of being able to be carried out by simple mixing of an aqueous solution of basal insulin, the isoelectric point of which is between 5.8 and 8.5, a solution of prandial insulin, and of a co-polyamino acid carrying carboxylate charges and of at least one hydrophobic radical according to the invention, in aqueous solution or in lyophilized form. If necessary, the pH of the preparation is adjusted to pH between 6 and 8.
  • the preparation of a composition according to the invention has the advantage of being able to be carried out by simple mixing of an aqueous solution of basal insulin whose isoelectric point is between 5.8 and 8.5, d '' a solution of prandial insulin, a solution of GLP-1 RA or an analog or derivative of GLP-1 RA and a co-polyamino acid carrying carboxylate charges and at least one hydrophobic radical according to l invention, in aqueous solution or in lyophilized form. If necessary, the pH of the preparation is adjusted to pH between 6 and 8.
  • the mixture of basal insulin and co-polyamino acid is concentrated by ultrafiltration before mixing with the mealtime insulin in aqueous solution or in lyophilized form.
  • composition of the mixture is adjusted by excipients such as glycerin, m-cresol, zinc chloride, and polysorbate (Tween ®) by addition of concentrated solutions of these excipients in the mixture.
  • excipients such as glycerin, m-cresol, zinc chloride, and polysorbate (Tween ®)
  • pH of the preparation is adjusted to pH between 6 and 8.
  • the sodium chloride is present in a concentration ranging from 2 to 25 mM
  • the sodium chloride is present in a concentration ranging from 2.5 to 20 mM
  • the sodium chloride is present in a concentration ranging from 4 to 15 mM
  • the sodium chloride is present in a concentration ranging from 5 to 10 mM
  • hydrophobic intermediate compounds are represented in the following table by the corresponding hydrophobic molecule before grafting on the co-polyamino acid.
  • Example AAI AAI molecule
  • Molecule Al Product obtained by the reaction between palmitoyl chloride and L-proline.
  • the opalescent reaction medium is then cooled to 0 ° C.
  • the precipitate obtained is filtered on a frit and then washed with water (5 x 50 mL) until filtrates of physiological pH between 6.0 and 8.0 are obtained, then they are dried in an oven at 50 ° C. empty overnight.
  • the product is purified by recrystallization from diisopropyl ether. A white solid is obtained.
  • Molecule A2 Product obtained by reaction between the molecule Al and / V-Boc-ethylenediamine.
  • Molecule A3 15-methylhexadecan-l-ol.
  • aqueous phase is extracted with dichloromethane and the combined organic phases are dried over Na2SO4, filtered and concentrated in vacuo. After purification by chromatography on silica gel (cyclohexane, ethyl acetate, acetic acid), a white solid is obtained.
  • the medium is treated with a 1N aqueous HCl solution to pH 1.
  • the aqueous phase is extracted with dichloromethane (2 x 125 mL).
  • the combined organic phases are washed with a 1N aqueous HCl solution (2 x 100 mL), water (100 mL), then an aqueous solution saturated with NaCl (100 mL).
  • the organic phase is filtered, concentrated under vacuum and the residue is purified by chromatography on silica gel (cyclohexane, ethyl acetate, acetic acid)
  • A6 molecule Product obtained by reaction between the A5 molecule and / V-Boc-ethylenediamine.
  • Molecule A7 Product obtained by the reaction between the molecule Al and Boc- tri (ethylene glycol) diamine.
  • Molecule A8 Product obtained by the reaction between the molecule Al and Boc-1- amino-4,7,10-trioxa-13-tridecane amine.
  • Molecule A9 1 Product obtained by reaction between the molecule Al and the methyl ester of / V-Boc-L-lysine.
  • Molecule A10 Product obtained by treatment of the molecule A9 with ammonia.
  • Molecule Ai l Product obtained by the reaction between stearoyl chloride and L-proline.
  • Molecule Al 2 1 Product obtained by reaction between the molecule Ai l and Boc- tri (ethylene glycol) diamine.
  • Molecule A14 Product obtained by the reaction between the molecule A13 and Boc-1-amino-4,7,10-trioxa-13-tridecane amine.
  • A16 molecule Product obtained by the reaction between the A15 molecule and the methyl ester of L-proline
  • Molecule A18 Product obtained by the reaction between / V-Boc-ethylenediamine and the molecule A17.
  • Molecule A19 Product obtained by the reaction between lauric acid and L-phenylalanine.
  • Molecule A20 Product obtained by the reaction between the molecule A19 and the hydrochloride salt of the methyl ester of L-proline.
  • Molecule A23 Product obtained by the reaction between the molecule B7 and N- Boc- ethylenediamine
  • Molecule A24 Product obtained by the reaction between the molecule B7 and Boc-1-amino-4,7,10-trioxa-13-tridecane amine.
  • Example AA12 AAI 2 molecule
  • Molecule A25 Product obtained by the reaction between the molecule B4 and N-Boc-ethylenediamine.
  • Molecule A26 Product obtained by coupling between the molecule B1 and / V-Boc-ethylenediamine.
  • Molecule A27 Product obtained by hydrogenation of phytol.
  • A28 molecule Product obtained by oxidation of the A27 molecule
  • reaction medium is then stirred for 4 h 30 at reflux, cooled to 10 ° C. and then acidified to pH 1 with a solution of 6N HCl (20 mL).
  • A2SC 53.90 g is gradually added while maintaining the temperature at 10 ° C. and the medium is stirred until complete discoloration.
  • Water 200 mL is added, the phases are separated and the aqueous phase is extracted with DCM (2 x 400 mL). The combined organic phases are washed with an aqueous solution of 10% HCl (20 mml), water (2 x 200 mL), aqueous saturated NaCl (200 mL), dried over Na2S0 4, filtered and concentrated under reduced pressure.
  • a yellow oil of molecule A28 is obtained after purification by flash chromatography
  • A29 molecule Product obtained by coupling between the A28 molecule and methyl L-prolinate.
  • a yellow oil of molecule A29 is obtained after washing the organic phase with a saturated aqueous solution of NaHCC (2 x 150 mL), a solution aqueous 10% HCl (2 x 150 mL), an aqueous solution saturated with NaCl (2 x 150 mL), then drying over Na2SO 4 , filtration and concentration under reduced pressure.
  • Molecule A3 ⁇ Product obtained by the saponification of the molecule A29.
  • Molecule A31 Product obtained by coupling between the molecule A30 and Boc-1-amino- 4,7,10-trioxa- 13-tridecane amine.
  • the AAI 5 molecule is obtained by the conventional method of solid phase peptide synthesis (SPPS) on 2-chlorotrityl resin.
  • palmitic acid (3 equivalents) are successively coupled using l- [bis (dimethylamino) methylene] -lH-1,2,3-triazolo [4,5- bjpyridinium 3-oxide hexafluorophosphate (HATU, 3 equivalents) as coupling agent in the presence of DIPEA (6 equivalents) in a DCM / DMF 1: 1 mixture.
  • DIPEA 6- equivalents
  • DCM / DMF 1: 1 mixture A 20% piperidine solution in DMF is used for the stages of cleavage of the protective group
  • the resin is washed with DCM, DMF and isopropanol after each coupling and deprotection step.
  • the cleavage of the product from the resin is carried out using a TFA / DCM 1: 1 mixture.
  • the solvents are evaporated under reduced pressure, the residue is dissolved in DCM (50 ml) and the organic phase is washed with an aqueous solution of 1 N NaOH (1 x 50 mL) then a saturated NaCl solution (2 x 50 mL). After drying over a2SÜ4, the organic phase is filtered, concentrated under reduced pressure and the residue is purified by chromatography on silica gel (dichloromethane, methanol, NH4OH).
  • the molecule AA16 is obtained in the form of a yellow oil.
  • the AA18 molecule is obtained in the form of a white solid.
  • Example AB1 Co-polyamino acid AB1 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AAI and having a number-average molar mass (Mn) of 2900 g / mol
  • Co-polvamino acid AB1-1 poly-L-glutamic acid with a number-average molar mass (Mn) relative 3861 g / mol resulting from the polymerization of y-benzyl-L-glutamate / V-carboxyanhydride initiated by hexylamine
  • the white precipitate is recovered by filtration, washed with diisopropyl ether (2 x 200 mL) then dried under vacuum at 30 ° C to give a poly (gamma-benzyl-L-glutamic acid) (PBLG).
  • PBLG poly (gamma-benzyl-L-glutamic acid)
  • the solid obtained is then dissolved in water (1.5 L) by adjusting the pH to 7 by adding a 10N aqueous sodium hydroxide solution and then a 1N aqueous sodium hydroxide solution. After solubilization, the theoretical concentration is adjusted to 20 g / L theoretical by adding water to obtain a final volume of 2, 1 L.
  • the solution is filtered on a 0.45 ⁇ m filter and then purified by ultrafiltration against a 0.9% NaCl solution, then water until the conductimetry of the permeate is less than 50 pS / cm.
  • the co-polyamino acid solution is then concentrated until a final volume of 1.8 L is obtained.
  • the co-polyamino acid AB1-1 (10.0 g) is dissolved in DMF (700 mL) at 30-40 ° C and then cooled to 0 ° C.
  • the AAI molecule in the form of the hydrochloride salt (1.64 g, 3.8 mmol) is suspended in DMF (23 mL) and triethylamine (0.39 g, 3.8 mmol) is then added and the mixture is slightly heated with stirring until complete dissolution.
  • N-methylmorpholine NMM, 7.6 g, 75 mmol
  • ECF ethyl chloroformate
  • the white solid obtained is taken up in water (500 mL) and the pH is adjusted to 7 by slow addition of a 1N aqueous NaOH solution. After filtration through a 0.45 ⁇ m filter, the clear solution obtained is purified. by ultrafiltration against a 0.9% NaCl solution and then water, until the conductimetry of the permeate is less than 50 pS / cm. After unloading, the solution is filtered through a 0.2 ⁇ m filter and stored at 2-8 ° C.
  • the calculated average molar mass of the co-polyamino acid AB1 is 3945 g / mol.
  • Example AB2 Co-polyamino acid AB2 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AAI and having a number-average molar mass (Mn) of 3700 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB2 co-polyamino acid is 5972 g / mol.
  • the calculated average molar mass of the AB3 co-polyamino acid is 6594 g / mol.
  • Example AB4 Co-polyamino acid AB4 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA2 and having a number-average molar mass (Mn) of 1800 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB4 co-polyamino acid is 6022 g / mol.
  • Example AB5 Co-polyamino acid AB5 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA6 and having a number-average molar mass (Mn) of 2600 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB5 co-polyamino acid is 4079 g / mol.
  • Example AB6 Co-polyamino acid AB6 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA7 and having a number-average molar mass (Mn) of 4000 g / mol
  • a poly-L-glutamic acid of average mass Mn 3500 g / mol and of degree of polymerization 22 (10.0 g) obtained by a process similar to that used for the preparation of the co-polyamino acid AB1-1 is solubilized in DMF (420 mL) at 30-40 ° C then maintained at this temperature.
  • the hydrochloride salt of the molecule AA7 (1.47 g, 2.3 mmol) is suspended in DMF (12 mL) and triethylamine (0.23 g, 2.3 mmol) is added , then the mixture is slightly heated with stirring until complete dissolution.
  • the pH is readjusted to 2 with a 37% HCl solution, and the suspension is left to stand overnight.
  • the precipitate is collected by filtration, then rinsed with 100 ml of water.
  • the white solid obtained is solubilized in 500 ml of water by slow addition of a 1N aqueous NaOH solution to pH 7 with stirring, then the solution is filtered through a 0.45 ⁇ m filter.
  • the clear solution obtained is purified by ultrafiltration against a 0.9% NaCl solution and then with water, until the conductimetry of the permeate is less than 50 pS / cm.
  • the solution is filtered through a 0.2 ⁇ m filter and stored at 2-8 ° C.
  • the calculated average molar mass of the AB6 co-polyamino acid is 3369 g / mol.
  • Example AB7 Co-polyamino acid AB7 - sodium poly-L-glutamate capped at one of its ends by an acetyl group and modified by the molecule AA7 and having a number-average molar mass (Mn) of 3300 g / mol
  • Co-polvaminoactde AB7-1 poly-L-glutamic acid of average molar mass in number (Mn) relative 3600 g / mol and of DP 21 resulting from the polymerization of g-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride initiated by hexylamine and capped at one of its ends by an acetyl group
  • the precipitate is recovered by filtration, washed twice with diisopropyl ether (225 ml) and then dried to give a white solid which is dissolved in 450 ml of THF.
  • DIPEA 31 mL, 176 mmol
  • acetic anhydride 17 mL, 176 mmol
  • the solution is poured slowly into diisopropyl ether (3 L) with stirring.
  • the precipitate is filtered, washed twice with diisopropyl ether (250 ml) then dried under vacuum at 30 ° C to give a poly (gamma -benzyl-L-glutamic acid) capped at one of its ends. by an acetyl group.
  • the aqueous solution is then acidified by adding 37% hydrochloric acid solution until reaching a pH of 2. After 4 h of stirring, the precipitate obtained is filtered, washed with water (330 mL) then dried under vacuum at 30 ° C to give a poly-L-glutamic acid of number average molar mass (Mn) 3600 g / mol relative to a polyoxyethylene (PEG) standard, and of average degree of polymerization 21 .
  • Mn number average molar mass
  • PEG polyoxyethylene
  • the calculated average molar mass of the AB7 co-polyamino acid is 3677 g / mol.
  • Example AB8 Co-polyamino acid AB8 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA7 and having a number-average molar mass (Mn) of 3600 g / mol
  • Co-polvamino acid AB8-1 poly-L-glutamic acid of number-average molar mass (Mn) 3800 g / mol and of degree of polymerization 24 resulting from the polymerization of y-methyl- L-glutamate / V-carboxyanhydride initiated by ammonia
  • the calculated average molar mass of AB8 co-polyamino acid is 4099 g / mol.
  • Example AB9 Co-polyamino acid AB9 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA3 and having a number-average molar mass (Mn) of 3200 g / mol
  • the calculated average molar mass of AB9 co-polyamino acid is 6192 g / mol.
  • Example ABIO Co-polyamino acid ABIO - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA4 and having a number-average molar mass (Mn) of 2600 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB10 co-polyamino acid is 4870 g / mol.
  • Aqueous HPLC-SEC PEG calibrator
  • Mn 2600 g / mol.
  • Example ABU Co-polyamino acid ABU - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA5 and having a number-average molar mass (Mn) of 2700 g / mol
  • the calculated average molar mass of the ABU co-polyamino acid is 4072 g / mol.
  • Example AB12 Co-polyamino acid AB12 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA8 and having a number-average molar mass (Mn) of 3000 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB12 co-polyamino acid is 4477 g / mol.
  • Example AB13 Co-polyamino acid AB13 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA9 and having a number-average molar mass (Mn) of 3300 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB13 co-polyamino acid is 7226 g / mol.
  • Aqueous HPLC-SEC (PEG calibrator): Mn 3300 g / mol.
  • Example AB21 Co-polyamino acid AB21 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA7 and having a number-average molar mass (Mn) of 3400 g / mol
  • the calculated average molar mass of the AB21 co-polyamino acid is 4090 g / mol.
  • Example AB22 Co-polyamino acid AB22 - sodium poly-L-glutamate capped at one of its ends by an acetyl group and modified by the molecule AAIO and having a number-average molar mass (Mn) of 4000 g / mol
  • the hydrochloride salt of the molecule AA10 (4.56 g, 11.29 mmol) is dissolved in chloroform (60 mL) and triethylamine (1.14 g, 11.29 mmol) is added .
  • reaction medium is then cooled to 0 ° C, then EDC (4.33 g, 22.58 mmol) is added, the medium is stirred for 1 hour at 0 ° C and then the solution of molecule AA10 is added.
  • the reaction mixture is stirred for 2 h between 0 ° C and room temperature.
  • the reaction medium is filtered through a 0.2 mm woven filter and poured dropwise onto 3.95 L of water containing NaCl at 15% by mass and HCl (pH 2) with stirring. At the end of the addition, the pH is readjusted to 2 with a 37% HCl solution, and the suspension is left to stand overnight.
  • the precipitate is collected by filtration, then dissolved in 780 ml of water by slow addition of a 1N aqueous NaOH solution to pH 7 with stirring. After filtration through a 0.45 ⁇ m filter, the solution is diluted by adding water and then acetone is added to obtain a solution containing 30% by mass of acetone. This solution is filtered on an activated carbon filter and then the acetone is distilled (40 ° C, 100 mbar).
  • the product After filtration through a 0.45 ⁇ m filter, the product is purified by ultrafiltration against a 0.9% aqueous NaCl solution, a carbonate buffer solution (150 mM), a 0.9% aqueous NaCl solution, a solution phosphate buffer (150 mM), 0.9% aqueous NaCl solution, then water until the conductivity of the permeate is less than 50 pS / cm. The solution is then concentrated, filtered through a 0.2 ⁇ m filter and stored at 2-8 ° C.
  • the calculated average molar mass of the AB22 co-polyamino acid is 7877 g / mol.
  • Example AB23 Co-polyamino acid AB23 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AA10 and having a number-average molar mass (Mn) of 7600 g / mol
  • Co-polvamino acid AB23-1 poly-L-glutamic acid resulting from the polymerization of y-benzyl-L-glutamate / V-carboxyanhydride initiated by hexylamine and capped at one of its ends by a pyroglutamate group
  • a poly-L-glutamic acid (20.0 g) obtained by a process similar to that used for the preparation of the co-polyamino acid AB1-1 is dissolved in DMF at 80 ° C and then maintained at this temperature. After 24 h, the reaction medium is poured into a 15% NaCl solution at pH 2. After 4 h, the white solid is collected by filtration, rinsed with water, then dried under vacuum at 30 ° C.
  • the calculated average molar mass of the AB23 co-polyamino acid is 11,034 g / mol.
  • Example AB24 Co-polyamino acid AB24 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AAIO and having a number-average molar mass (Mn) of 4300 g / mol
  • Example AB25 Co-polyamino acid AB25 - sodium poly-L-glutamate modified by the molecule AAIO and having a number-average molar mass (Mn) of 4200 g / mol

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

L'invention concerne une composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins: a) de l'insuline glargine, b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule (I), c) du chlorure de sodium. Elle concerne également une composition caractérisée en ce qu'elle comprend une insuline prandiale et/ou une hormone gastrointestinale.

Description

SOLUTION INJECTABLE A PH 7 COMPRENANT AU MOINS UNE INSULINE BASALE DONT LE PI EST COMPRIS ENTRE 5,8 ET 8,5 ET UN CO-POLYAMINOACIDE PORTEUR DE CHARGES
CARBOXYLATES ET DE RADICAUX HYDROPHOBES
[0001] L'invention concerne les thérapies par injection d'insuline(s) pour traiter le diabète.
[0002] L'invention concerne des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5 et un co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes.
[0003] Elle concerne plus particulièrement des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5 en association avec soit une insuline prandiale soit une hormone gastrointestinale soit une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes.
[0004] L'insulinothérapie, ou thérapie du diabète par injection d'insuline, a connu ces dernières années des progrès remarquables grâce notamment à la mise au point de nouvelles insulines offrant une meilleure correction de la glycémie des patients en comparaison de l'insuline humaine et qui permettent de mieux simuler l'activité physiologique du pancréas.
[0005] Lorsqu'un diabète de type II est diagnostiqué chez un patient, un traitement graduel est mis en place. Le patient prend en premier lieu des antidiabétiques oraux (OAD) comme la Metformine. Lorsque les OAD seuls ne suffisent plus à réguler le niveau de glucose dans le sang, un changement dans le traitement doit être fait et, en fonction des spécificités des patients, différentes associations de traitements peuvent être mises en place. Le patient peut par exemple avoir un traitement à base d'une insuline basale de type insuline glargine ou insuli ne detemir en complément des OAD, puis ensuite en fonction de l'évolution de la pathologie un traitement à base d'insuline basale et d'insuline prandiale.
[0006] Par ailleurs, aujourd'hui, pour assurer la transition des traitements par les OAD, lorsque ceux-ci ne sont plus en mesure de contrôler le niveau de glucose dans le sang, vers un traitement insuline basale/insuline prandiale, l'injection d'analogues de GLP-1 RA est préconisée.
[0007] Les GLP-1 RA pour agonistes du récepteur Glucagon-Like Peptide- 1, sont des peptides insulinotropiques ou incrétines, et appartiennent à la famille des hormones gastro intestinales (ou Gut Hormones) qui stimulent la sécrétion d'insuline lorsque la glycémie est trop élevée, par exemple après un repas. [0008] Les hormones gastro-intestinales (Gut hormones) sont aussi appelées hormones de satiété. Elles comprennent notamment le GLP-1 RA (Glucagon like peptide- 1 receptor agonist) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), l'oxyntomoduline (un dérivé du proglucagon), le peptide YY, l'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancréatique (PP), la ghreline et l'entérostatine qui ont des structures peptidiques ou protéiques. Elles stimulent également la sécrétion d'insuline, en réponse au glucose et aux acides gras et sont donc à ce titre des candidats potentiels pour le traitement du diabète.
[0009] Parmi celles-ci, les GLP- 1 RA sont celles qui ont apporté à ce jour les meilleurs résultats dans le développement de médicaments. Elles ont permis à des patients atteints de diabète de type II de perd re du poids tout en ayant un meilleur contrôle de leur glycémie.
[00010] Des analogues ou des dérivés de GLP-1 RA ont ainsi été développés notamment pour améliorer leur stabilité.
[00011] D'autre part, pour couvrir ses besoins journaliers en insuline, un patient diabétique dispose, actuellement, de façon schématisée, de deux types d'insulines ayant des actions complémentaires : les insulines prandiales (ou insulines dites à action rapide) et les insulines basales (ou insulines dites à action lente).
[00012] Les insulines prandiales permettent une prise en charge rapide (métabolisation et/ou stockage) du glucose apporté lors des repas et collations. Le patient doit s'injecter une insuline prandiale avant chaque prise alimentaire, soit environ 2 à 3 injections par jour. Les insulines prandiales les plus utilisées sont : l'insuline humaine recombinante, NovoLog® (insuline aspart de NOVO NORDISK), Humalog® (insuline lispro de ELI LILLY) et Apidra® (insuline glulisine de SANOFI).
[00013] Les insulines basales assurent le maintien de l'homéostasie glycémique du patient, en dehors des périodes de prise alimentaire. Elles agissent essentiellement pour bloquer la production endogène de glucose (glucose hépatique). La dose journalière d'insuline basale correspond généralement à 40-50% des besoins totaux journaliers en insuline. Selon l'insuline basale utilisée, cette dose est dispensée en 1 ou 2 injections, régulièrement réparties au cours de la journée. Les insulines basales les plus utilisées sont Levemir® (insuline detemir de NOVO NORDISK) et Lantus® (insuline glargine de SANOFI) .
[00014] On notera pour être exhaustif que la N PH (insuline NPH pour Neutral Protamine Hagedorn ; Humuline NPH®, Insulatard®) est la plus ancienne insuline basale. Cette formulation est le résultat d'une précipitation de l'insuline humaine (anionique à pH neutre) par une protéine cationique, la protamine. Les microcristaux ainsi formés sont dispersés dans une suspension aqueuse et se dissolvent lentement après injection sous-cutanée. Cette dissolution lente assure une libération prolongée de l'insuline. Cependant cette libération n'assure pas une concentration constante d'insuline au cours du temps. Le profil de libération est en forme de cloche et dure seulement entre 12 et 16 heures. Elle est donc injectée deux fois par jour. Cette insuline basale N PH est bien moins performante que les insulines basales modernes, Levemir® et Lantus®. La NPH est une insuline basale à action intermédiaire.
[00015] Le principe de la NPH a évolué avec l'apparition des insulines ana logues rapides pour donner des produits appelés « Premix » offrant à la fois une action rapide et une action intermédiaire. NovoLog Mix® ( OVO NORDISK) et Humalog Mix® (ELI LILLY) sont des formulations comprenant une insuline analogue rapide, Novolog® et Humalog®, complexée partiellement par la protamine. Ces formulations contiennent ainsi des microcristaux d'insuline analogue dont l'action est dite intermédiaire et une partie d'insuline restée soluble dont l'action est rapide. Ces formulations offrent bien l'avantage d'une insuline rapide mais elles ont aussi le défaut de la NPH, c.-à-d . une durée d'action limitée entre 12 et 16 heures et une insuline libérée en « cloche ». Cependant, ces produits permettent au patient de s'injecter en une seule fois une insuline basale à action intermédiaire avec une insuline prandiale à action rapide. Or nombreux sont les patients soucieux de réduire leur nombre d'injections.
[00016] Les insulines basales actuellement commercialisées peuvent être classées en fonction de la solution technique qui permet d'obtenir l'action prolongée et à ce jour deux approches sont utilisées.
[00017] La première, celle de l'insuline detemir est la liaison à l'albumine in vivo. Il s'agit d'un analogue, soluble à pH 7, qui comprend une chaîne latérale d'acide gras (tetradecanoyl) fixée à la position B29 qui, in vivo, permet à cette insuline de s'associer à l’albumine. Son action prolongée est principalement due à cette affinité pour l'albumine après injection sous- cutanée.
[00018] Cependant son profil pharmacocinétique ne permet pas de couvrir une journée, ce qui fait qu’elle est le plus souvent utilisée en deux injections par jour.
[00019] Une autre insuline soluble à pH 7, est l'insuline degludec commercialisée sous le nom de Tresiba®d. Elle comprend également une chaîne latérale d'acide gras fixée sur l'insuline (hexadecandioyl-y-L-Glu).
[00020] La seconde, celle de l'insuline glargine, est la précipitation à pH physiologique. L'insuline glargine est un analogue de l'insuline humaine obtenu par élongation de la partie C-terminale de la chaîne B de l'insuline humaine par deux résidus arginine, et par substitution du résidu d'asparagine A21, par un résidu de glycine (US 5,656,722). L'addition de deux résidus d'arginine a été pensée pour ajuster le pi (point isoélectrique) d'insul ine glargine au pH physiologique, et ainsi rendre cet analogue de l'insuline humaine insoluble en milieu physiologique.
[00021] Aussi, la substitution de IΆ21 a été pensée afin de rendre l'insuline glargine stable à pH acide et pouvoir ainsi la formuler sous forme de solution injectable à pH acide. Lors de l'injection sous-cutanée, le passage de l'insuline glargine d'un pH acide (pH 4-4,5) à un pH physiologique (pH neutre) provoque sa précipitation sous la peau . La redissolution lente des micro-particules d'insuline glargine assure une action lente et prolongée.
[00022] L'effet hypoglycémiant de l'insuline glargine est quasi -constant sur une durée de 24 heures ce qui permet à la plupart des patients de se limiter à une seule injection par jour.
[00023] L'insuline glargine est considérée aujourd'hui comme l'insuline basale la plus utilisée.
[00024] Cependant le pH nécessairement acide des formulations d'insulines basales, dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, de type insuline glargine, peut être un réel inconvénient, car ce pH acide de la formulation d'insuline glargine entraîne parfois chez les patients des douleurs à l'injection et surtout empêche toute formulation avec d'autres protéines et en particulier avec les insulines prandiales car ces dernières ne sont pas sta bles à pH acide. L'impossibilité de formuler une insuline prandiale, à pH acide, tient au fait qu'une insuline prandiale subit, dans ces conditions, une réaction secondaire de déamidation en position A21, ce qui ne permet pas de répondre aux exigences de stabilité applicables aux médicaments injectables.
[00025] A ce jour, dans les demandes WO 2013/021143 Al, WO 2013/104861 Al, WO 2014/124994 Al et WO 2014/124993 Al il a été démontré qu'il était possible de solubiliser ces insulines basales, de type insuline glargine dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, à pH neutre, tout en maintenant une différence de solubilité entre le milieu in- vitro (le contenant) et le milieu in -vivo (sous la peau), indépendamment du pH.
[00026] La demande WO 2013/104861 Al, en particulier, décrit des compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins (a) une insuline basale dont le point isoélectrique pi est compris entre 5,8 et 8,5 et (b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates substitué par des radicaux hydrophobes.
[00027] Ces compositions de l'art antérieur ont l'inconvénient majeur de ne pas être suffisamment stables pour répondre aux cahiers des charges applicables aux formulations pharmaceutiques.
[00028] Dans les exemples de la partie expérimentale de la présente demande de brevet il est démontré que les compositions décrites en particulier dans WO 2013/104861 Al présentent une stabilité insatisfaisante dans le temps.
[00029] Il existe donc un besoin de trouver u ne solution qui permet de solubiliser une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5 tout en conservant son profil basal après injection mais qui permettent également de satisfaire à des conditions de stabilité physique standard pour les produits pharmaceutiques à base d'insuline. [00030] De manière surprenante, la demanderesse a trouvé que les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes selon l'invention permettent d'obtenir des compositions sous forme de solutions qui non seulement répondent aux exigences décrites dans WO 2013/104861 Al mais qui de plus sont en mesure de conférer une stabilité physique améliorée auxdites compositions sans avoir à augmenter la quantité d'excipients utilisée.
[00031] Ces performances a priori jamais atteintes sont de plus conservées lorsque l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est associée dans la composition avec une insuline prandiale et/ou une hormone gastro-intestinale.
[00032] Ainsi , de façon surprenante, l'affinité des co-polyaminoacides selon l'invention pour l'insuline glargine a été augmentée en ce qu'elle permet d'obtenir une solubilisation et une stabilisation des solutions d'insuline glargine à un ratio [Hy]/[insuline basale] inférieur à celui de l'art antérieur ; ces résultats sont de plus obtenus sans altérer, voire en améliorant, la propension de l'insuline glargine à précipiter comme cela est démontré dans la partie expérimentale.
[00033] Cette amélioration de l'affinité permet en outre dans le cadre de traitements chroniques de limiter le niveau d'exposition auxdits excipients.
[00034] Les co-polyaminoacides porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy selon l'invention présentent une excellente résistance à l'hydrolyse. Ceci peut notamment être mis en évidence en conditions accélérées, par exemple par des tests d'hydrolyse à pH basique (pH 12).
[00035] En outre des tests d'oxydation forcée, par exemple du type oxydation de fenton, montrent que les co-polyaminoacides porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy présentent une bonne résistance à l'oxydation.
[00036] L'invention concerne ainsi des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5,
b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe de formule I, et
c) du chlorure de sodium .
[00037] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5, et b) une insuline prandiale,
c) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe de formule I, et
d) chloru re de sodium.
[00038] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5, et
b) une hormone gastrointestinale,
c) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe de formule I, et
d) du chlorure de sodium .
[00039] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5 , et
b) une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale,
c) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe de formule I, et
d) du chlorure de sodium .
[00040] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une composition stable physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5, et b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante :
Figure imgf000007_0001
Formule I
dans laquelle GpR est un radical de formules
Figure imgf000008_0001
Figure imgf000008_0002
GpA est un radical de formules III ou IIG :
Figure imgf000008_0003
GpC est un radical de formule IV
Figure imgf000008_0004
- les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes;
- a est un entier égal à O ou à 1 ;
- b est un entier égal à 0 ou à 1 ;
p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule IIG et,
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III;
- c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2;
- d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
- r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et
o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide : ■ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co- polyaminoacide ou
• via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co-polyaminoacide;
- R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions - COI H2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II" ;
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;
- A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, in saturé ou aromatique ;
- B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) : o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15),
le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ;
le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+,
ladite composition comprenant du chlorure de sodium.
[00041] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne une composition stable physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5, b) une insuline prandiale et/ou une hormone gastrointestinale, et
c) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante :
*-(GPR )-(-GPA)— ( GPC)
r 3 Formule i
dans laquelle
- GpR est un radical de formule II ou IG :
Figure imgf000010_0001
- GpA est un radical de formule III ou IIG :
Figure imgf000010_0002
GpC est un radical de formule IV
Figure imgf000011_0001
- les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes;
- a est un entier égal à 0 ou à 1 ;
- b est un entier égal à 0 ou à 1 ;
p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule IIG et,
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III;
~ c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2;
- d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
- r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et
o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :
■ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co- polyaminoacide ou
» via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co-polyaminoacide; - R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions - CONH2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule I ou II" ;
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule I ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;
- A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, insaturé ou aromatique ;
- B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) :
o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15),
le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ;
le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+ ; [00042] Dans un mode de réalisation, lorsque r=2 alors le groupe GpR lié au PLG est choisi parmi les GpR de formule II.
[00043] Dans un mode de réalisation, lorsque r=2 alors le groupe GpR lié au PLG est choisi parmi les GpR de formule II et le deuxième GpR est choisi parmi les GpR de formule II".
[00044] Dans un mode de réalisation, lorsque r=2 alors le groupe GpR lié au PLG est choisi parmi les GpR de formule II".
[00045] Dans un mode de réalisation, lorsque r=2 alors le groupe GpR lié au PLG est choisi parmi les GpR de formule II" et le deuxième GpR est choisi parmi les GpR de formule
II.
[00046] Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 11 et 25 (11 < x < 25) ;
o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15).
[00047] Ledit co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy est soluble en solution aqueuse à pH compris entre 6,0 et 8,0, à une température de 25 °C et à une concentration inférieure à 100 mg/ml.
[00048] Les compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable selon l'invention sont des solutions limpides.
[00049] On entend par « solution limpide », des compositions qui satisfont aux critères décrits dans les pharmacopées américaines et européenne concernant les solutions injectables. Dans la pharmacopée américaine, les solutions sont définies dans la partie < 1151 > faisant référence à l'injection (< 1 >) (faisant référence à <788> selon USP 35 et précisé dans <788> selon USP 35 et dans <787>, <788> et <790> USP 38 (à partir du 1er août 2014), selon USP 38). Dans la pharmacopée européenne, les solutions injectables doivent remplir les critères donnés dans les sections 2.9.19 et 2.9.20.
[00050] On entend par « composition stable physiquement » des compositions qui satisfont aux critères de l'inspection visuelle décrite dans la pharmacopée européenne, américaine et internationale, c'est-à-dire des compositions qui sont claires et qui ne contiennent pas de particules visibles, mais également incolores.
[00051] On entend par « co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques » des enchaînements linéaires non cycliques d'unités acide glutamique ou acide aspartique liées entre elles par des liaisons peptidiques, lesdits enchaînements présentant une partie C-terminale, correspondant à l'acide carboxylique d'une extrémité, et une partie N-terminale, correspondant à l'amine de l'autre extrémité de l'enchaînement. [00052] On entend par « soluble », susceptible de permettre de préparer une solution limpide et dépourvue de particules à une concentration inférieure à 100 mg/ml dans de l'eau distillée à 25 °C.
[00053] On entend par « solution », une composition liquide dépourvue de particules visibles, en utilisant la procédure conforme aux pharmacopées européenne 8.0, au point 2.9.20, et américaine.
[00054] On entend par « composition stable chimiquement », des compositions qui, après stockage un certain temps et à une certaine température, présentent une recouvrance minimum des principes actifs et sont conformes aux cahiers des charges applicables aux produits pharmaceutiques.
[00055] On entend par « solution aqueuse injectable » des solutions à base d'eau qui répondent aux conditions des pharmacopées européenne et américaine, et qui sont suffisamment liquides pour être injectées.
[00056] On entend par « radical alkyl », une chaîne carbonée, linéaire ou ramifiée, qui ne comprend pas d'hétéroatome.
[00057] Le co-polyaminoacide est un co-polyaminoacide statistique ou bloc.
[00058] Le co-polyaminoacide est un co-polyaminoacide statistique dans l'enchaînement des unités glutamiques et/ou aspartiques.
[00059] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Hy comprend entre 15 et 100 atomes de carbone.
[00060] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Hy comprend entre 30 et 70 atomes de carbone.
[00061] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Hy comprend entre 40 et 60 atomes de carbone.
[00062] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Hy comprend entre 20 et 30 atomes de carbone
[00063] Dans un mode de réalisation, Hy comprend plus de 15 atomes de carbone.
[00064] Dans un mode de réalisation, Hy comprend plus de 30 atomes de carbone.
[00065] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le pH est compris entre 6,0 et 8,0.
[00066] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le pH est compris entre 6,6 et 7,8.
[00067] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le pH est compris entre 7,0 et 7,8.
[00068] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le pH est compris entre 6,8 et 7,4. [00069] Dans les formules les * indiquent les sites de rattachements des différents éléments représentés.
[00070] Dans les formules, les * indiquent les sites de rattachement des radicaux hydrophobes au co-polyaminoacide. Les radicaux -Hy sont rattachés au co-polyaminoacide via des fonctions amides.
[00071] Dans les formules II et IG ou I , les * indiquent, les sites de rattachement de GpR :
au co-polyaminoacide et
à GpA si a = l ou à GpC si a=0.
[00072] Dans les formules III et IIG, les * indiquent, de gauche à droite respectivement, les sites de rattachement de GpA :
à GpR si r= l ou 2 ou au co-polyaminoacide si r=0 et
à GpC.
[00073] Dans la formule IV, le * indique le site de rattachement de GpC :
à GpA si a = l, GpR si r= l ou 2 et a = 0 ou,
au co-polyaminoacide si r=0 et a = 0.
[00074] Tous les rattachements entre les différents groupes GpR, GpA, et GpC sont des fonctions amides.
[00075] Les radicaux -Hy, GpR, GpA, et GpC, et D sont chacun indépendamment identiques ou différents d'une unité monomérique à l'autre.
[00076] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle si p est égal à 1 (p= l ) et si x est inférieur ou égal à 14 (x < 14) alors r=0 ou r= l .
[00077] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle si p est égal à 1 (p= l) et si x est compris entre 15 et 16 (15 < x < 16), alors r= l .
[00078] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle si p est égal à 1 (p= l) et si x est supérieur à 17 ( 17 < x) alors r= l et R est un radical éther ou polyéther.
[00079] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle si p est égal à 1 (p= l) alors x est compris entre 17 et 25 ( 17 < x < 25).
[00080] Dans un mode de réalisation, ledit au moins un radical hydrophobe — Hy est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle r = 2 de formule le', telle que définie ci - dessous :
*— GpR— GpR - (GpA) - (GpC)
a p Formule le' dans laquelle GpRi est un radical de formule II.
Figure imgf000016_0001
Formule II
dans laquelle GpR, GpA, GpC, R, a, et p ont les définitions données précédemment.
[00081] Dans un mode de réalisation, ledit au moins un radical hydrophobe — Hy est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle r = 2 de formule le', telle que définie ci - dessous :
* GpR— GpR - (G p A)— (GpC)
a P Formule le'
dans laquelle GpRi est un radical de formule II".
Figure imgf000016_0002
Formule II"
dans laquelle GpR, GpA, GpC, R, a, et p ont les définitions données précédemment.
[00082] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle p= l, représentée par la formule V suivante :
Figure imgf000016_0003
formule V
GpR, GpA, GpC, r et a ont les définitions données précédemment.
[00083] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle a= l et p=2, représentée par la formule VI suivante :
‘-{ GpR V- GpA— { Gpc)
r 2 Formule VI
dans laquelle
GpR, GpA, GpC et r ont les définitions données précédemment.
[00084] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formules I, V ou VI dans lesquelles : r est égal à 1 (r= l) et a est égal à 0 (a=0).
[00085] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formules I, le', V ou VI dans lesquelles : r est égal à 2 (r=2) et a est égal à 0 (a=0) . [00086] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, V ou VI dans laqueller est égal à 1 (r = 1) et a est égal à 1 (a = l).
[00087] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans lesquelles r est égal à 2 (r = 2) et a est égal à 1 (a = l).
[00088] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, V ou VI dans laquelle a est égal à 0 (a = 0) et r est égal à 0 (r=0).
[00089] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule V dans laquelle r = 1 , a = 1, GpR répond à la formule
II, GpA répond à la formule IIG dans laquelle A est
Figure imgf000017_0001
répond à la formule IVd.
[00090] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule V dans laquelle r = 1, a = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est un alkyle linéaire divalent, GpA répond à la formule IIG dans laquelle A est
Figure imgf000017_0002
répond à la formule IVd.
[00091] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule V dans laquelle r = 1, a = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule IIG dans laquelle A est
Figure imgf000017_0003
, GpC répond à la formule IVd
[00092] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule V dans laquelle r = 1, a = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH -CH -, GpA répond à la formule IIG dans laquelle A est
Figure imgf000018_0001
[00093] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II.
[00094] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 2 à 12 atomes de carbone.
[00095] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle divalent comprenant de 2 à 6 atomes de carbone.
[00096] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 2 à 6 atomes de carbone.
[00097] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle divalent comprenant de 2 à 4 atomes de carbone.
[00098] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 2 à 4 atomes de carbone.
[00099] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle divalent comprenant 2 atomes de carbone.
[000100] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule I .
[000101] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule IG dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 1 à 11 atomes de carbone. [000102] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule IG dans laquelle R est un radical alkyle divalent comprenant de 1 à 6 atomes de carbone.
[000103] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IG, dans laquelle R est un radical alkyle divalent, comprenant de 2 à 5 atomes de carbone et portant une ou plusieurs fonctions amide (-CONH2).
[000104] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule IG ou II, dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent, comprenant de 2 à 5 atomes de carbone et portant une ou plusieurs fonctions amide (-CONH2) .
[000105] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IG dans laquelle R est un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000019_0001
[000106] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical R est lié au co-polyaminoacide via une fonction amide portée par le carbone en position delta ou epsilon (ou en position 4 ou 5) par rapport à la fonction amide (-CONH2) .
[000107] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II, I ou II" , dans laquelle R est un radical linéaire éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène.
[000108] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II, I ou II", dans laquelle R est un radical éther.
[000109] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II, I ou II", dans laquelle R est un radical éther comprenant de 4 à 6 atomes de carbone. [000110] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, Ic',V ou VI dans lesquelles GpR est un radical de formule II, IG ou II" dans laquelle R est un radical éther représenté par la formule
Figure imgf000020_0001
[000111] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, V ou VI dans lesquelles GpR est un radical de formule II, IG ou II", dans laquelle R est un radical polyéther.
[000112] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II, I ou II", dans laquelle R est un radical linéaire polyéther comprenant de 6 à 10 atomes de carbone et de 2 à 3 atomes d'oxygène.
[000113] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II, IG ou II", dans laquelle R est un radical polyéther choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000020_0002
[000114] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe de formule I, le', V ou VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical polyéther choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000020_0003
[000115] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle a est égal à 1 (a = l) et le radical GpA est un radical de formule IIG dans laquelle A est choisi dans le groupe constitué des radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000021_0002
[000116] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle a est égal à 1 (a = l) et le radical GpA est un radical de formule III dans laquelle A est choisi dans le groupe constitué des radicaux représentés par la formule ci-dessous ;
Figure imgf000021_0001
[000117] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux de formules IVa, IVb ou IVc ci-après représentées :
Figure imgf000022_0001
[000118] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC est de formule IVa .
[000119] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux de formules IVa, IVb ou IVc dans lesquels b est égal à 0, répondant respectivement aux formules IVd, IVe, et IVf ci -a près représentées ;
Figure imgf000023_0001
[000120] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC répond à la formule IV ou IVa dans lesquelles b=0, et répond à la formule IVd.
[000121] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV dans laquelle b= l est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels B est un résidu d'acide aminé choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000024_0001
[000122] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV ou IVa dans lesquelles b= l, est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels B est un résidu d'acide aminé choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000024_0002
[000123] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles linéaires.
[000124] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles ramifiés.
[000125] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant entre 11 et 14 atomes de carbone.
[000126] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000025_0002
[000127] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant entre 15 et 16 atomes de carbone.
[000128] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par la formule ci-dessous ;
Figure imgf000025_0003
[000129] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par la formule ci-dessous
Figure imgf000025_0001
[000130] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant entre 17 et 25 atomes de carbone.
[000131] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant entre 17 et 18 atomes de carbone. [000132] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux aikyles représentés par la formule ci-dessous :
Figure imgf000026_0002
[000133] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux aikyles comprenant entre 18 et 25 atomes de carbone.
[000134] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule I, le', V ou VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux aikyles représentés par les formules ci-dessous :
Figure imgf000026_0003
[000135] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII suivante :
Figure imgf000026_0001
dans laquelle,
• D représente, indépendamment, soit un groupe -CH2- (unité aspartique) soit un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique) ;
• Hy est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI,; • Ri est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI , ou un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à CIO, un groupe acyle ramifié en C3 à CIO, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate ;
· R est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules
I, V ou VI dans lesquelles r= l et GpR est un radical de formule II, ou un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à CIO, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S ;
• X représente un H ou une entité cationique choisie dans le groupe comprenant les cations métalliques ;
• n + m représente le degré de polymérisation DP du co-polyaminoacide, c'est - à-dire le nombre moyen d'unités monomériques par chaîne de co- polyaminoacide et 5 < n + m < 250.
[000136] Le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe de formule I peut également être appelé « co-polyaminoacide » dans la présente description.
[000137] On appelle « co-polyaminoacide statistique » un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe, un co-polyaminoacide de formule Vlla.
[000138] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, dans laquelle Ri=R'i et R2=R'2, de formule Vlla suivante :
Figure imgf000028_0001
dans laquelle,
- m, n, X, D et Hy ont les définitions données précédemment ;
- R'i est un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à CIO, un groupe acyle ramifié en C3 à CIO, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate ;
R'2 est un radical -IMR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à CIO, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S. Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co- polyaminoacides de formules Vlla dans laquelle Hyd est de formule V, GpR est de formule II, GpA est de formule IIG dans laquelle A est le radical
Figure imgf000028_0002
répond à la formule IVd. [000139] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules Vlla dans laquelle Hyd est de formule V, GpR est de formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA est de formule IIG dans laquelle A est le radical
Figure imgf000029_0001
répond à la formule IVd.
[000140] On appelle « co-polyaminoacide défini » un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe, un co-polyaminoacide de formule Vllb.
[000141] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n=0 de formule Vllb suivante :
Figure imgf000029_0002
Vllb
dans laquelle m, X, D, Ri et Rå ont les définitions données précédemment et au moins Ri ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI.
[000142] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n=0 de formule Vllb et Ri ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI.
[000143] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule Vllb dans laquelle Ri est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI dans lesquelles r=0 ou r= l et GpR est de formule IG.
[000144] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules Vllb dans laquelle R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI dans lesquelles r= l et GpR est de formule II.
[000145] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que Ri est un radical choisi dans le groupe constitué par un groupe acyle linéaire en C2 à Cio, un groupe acyle ramifié en C3 à Cio, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate.
[000146] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que Ri est un radical choisi dans le groupe constitué par un groupe acyle linéaire en C2 à Cio ou un groupe acyle ramifié en C3 à Cio.
[000147] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, Vlla ou Vllb dans lesquels le groupe D est un groupe -CH2- (unité aspartique).
[000148] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, Vlla ou Vllb dans lesquels le groupe D est un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique).
[000149] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,007 et 0,3.
[000150] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0,3.
[000151] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,02 et 0,2.
[000152] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,007 et 0,15.
[000153] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0, 1.
[000154] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,02 et 0,08.
[000155] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend entre 9 et 10 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,03 et 0,15.
[000156] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend entre 11 et 12 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,015 et 0,1.
[000157] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend entre 11 et 12 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,02 et 0,08.
[000158] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend entre 13 et 15 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0,1.
[000159] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend entre 13 et 15 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0,06.
[000160] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,007 et 0,3.
[000161] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0,3.
[000162] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,015 et 0,2.
[000163] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V dans laquelle le radical Cx comprend entre 11 et 14 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0, 1 et 0,2.
[000164] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V dans laquelle le radical Cx comprend entre 15 et 16 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,04 et 0, 15.
[000165] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V dans laquelle le radical Cx comprend entre 17 et 18 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,02 et 0,06.
[000166] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V dans laquelle le radical Cx comprend entre 19 et 25 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0,06.
[000167] Dans un mode de réalisation, la composition est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule V dans laquelle le radical Cx comprend entre 19 et 25 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 0,01 et 0,05.
[000168] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 10 et 250.
[0001] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 10 et 200.
[0002] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 15 et 150.
[0003] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 15 et 100.
[0004] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 15 et 80.
[000169] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 15 et 65.
[0005] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 20 et 60.
[0006] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 20 et 50.
[000170] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris entre 20 et 40.
[000171] L'invention concerne également lesdits co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes de formule I et les précurseurs desdits radicaux hydrophobes.
[000172] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 60 mg/mL.
[000173] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 40 mg/mL. [000174] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 20 mg/mL.
[000175] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 10 mg/mL.
[000176] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus 5 mg/ml .
[000177] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus 2,5 mg/ml .
[000178]
[000179] L'invention concerne en outre en une méthode de préparation de compositions injectables stables.
[000180] Dans un mode de réalisation, le copolyaminoacide est un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités de formule ci-après représentée décrit à l'exemple AB24.
Figure imgf000033_0001
[000181] Dans un mode de réalisation, le copolyaminoacide est un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités de formule ci-après représentée décrit à l'exemple AB22.
Figure imgf000034_0001
[000182] Dans un mode de réalisation, le copolyaminoacide est un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités de formule ci-après représentée décrit à l'exemple
AB35.
Figure imgf000034_0002
[000183] Dans un mode de réalisation, le copolyaminoacide est un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités de formule ci-après représentée décrit à l'exemple BB15, BB17, BB18 et BB19.
Figure imgf000035_0001
Figure imgf000036_0001
[000184] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation.
[000185] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation par ouverture de cycle d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N -ca rboxya n hyd ri d e d'acide aspartique.
[000186] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique comme décrit dans l'article Deming, TJ., Adv. Polym. Sci . 2006, 202, 1- 18.
[000187] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique.
[000188] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique choisi dans le groupe constitué par le N- carboxyanhydride poly-glutamate de méthyle (GluOMe-NCA), le N-carboxyanhydride poly- glutamate de benzyle (GluOBzl-NCA) et le N-carboxyanhydride poly glutamate de t-butyle (GluOtBu-NCA).
[000189] Dans un mode de réalisation, le dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique est le N-carboxyanhydride poly-L-glutamate de méthyle (L-GluOMe-NCA) .
[000190] Dans un mode de réalisation, le dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique est le N-carboxyanhydride poly-L-glutamate de benzyle (L-GluOBzl-NCA) .
[000191] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N -carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur un complexe organométallique d'un métal de transition comme décrit dans la publication Deming, T.J ., Nature 1997, 390, 386-389.
[000192] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N -carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur l'ammoniaque ou une amine primaire comme décrit dans le brevet FR 2,801,226 et les références citées par ce brevet.
[000193] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N -carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur l'hexaméthyldisilazane comme décrit dans la publication Lu H . ; et al ., 3. Am . Chem. Soc. 2007, 129, 14114-14115 ou une amine silylée comme décrit dans la publication Lu H . ; et al ., J. Am. Chem . Soc. 2008, 130, 12562-12563.
[000194] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le procédé de synthèse du polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique dont est issu le co-polyaminoacide comprend une étape d'hydrolyse de fonctions ester. [000195] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de fonctions ester peut consister en une hydrolyse en milieu acide ou une hydrolyse en milieu basique ou être effectuée par hydrogénation .
[000196] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de groupements ester est une hydrolyse en milieu acide.
[000197] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de groupements ester est effectuée par hydrogénation .
[000198] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.
[000199] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation enzymatique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.
[000200] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation chimique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.
[000201] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation enzymatique et chimique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.
[000202] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire choisi dans le groupe constitué par le polyglutamate de sodium et le polyaspartate de sodium.
[000203] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyglutamate de sodium de plus haut poids moléculaire.
[000204] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaspartate de sodium de plus haut poids moléculaire.
[000205] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L- glutamique acide ou poly-L-aspartique acide en utilisant les procédés de formation de liaison amide bien connus de l'homme de l'art.
[000206] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L- glutamique acide ou poly-L-aspartique acide en utilisant les procédés de formation de liaison amide utilisés pour la synthèse peptidique. [000207] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L- glutamique acide ou poly-L-aspartique acide comme décrit dans le brevet FR 2,840,614.
[000208] L'invention concerne également le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy choisis parmi les radicaux de formule I telle que définie ci-dessous :
Figure imgf000039_0001
Formule I
dans laquelle
- GpR est un radical de formules II, IG ou II" :
Figure imgf000039_0002
GpA est un radical de formules III ou IIG ;
Figure imgf000039_0003
- GpC est un radical de formule IV :
Figure imgf000039_0004
- les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes;
- a est un entier égal à 0 ou à 1 ;
- b est un entier égal à 0 ou à 1 ;
p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule IIG et,
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III;
- c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2; - d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
- r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et
o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :
• via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co- polyaminoacide ou
• via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co-polyaminoacide;
- R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions - CONH2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II" ;
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusi eurs fonctions -COIMH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; - A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, insaturé ou aromatique ;
- B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- B est un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) :
o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15),
le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ;
le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+
[0007] L'invention concerne également le précurseur Hy' du radical hydrophobe Hy de formule I telle que définie ci-dessous :
-(GpR )-(-GpA)-( Gpc)
r a t
Formule
dans laquelle
GpR est un radical de formule II, I ou II" :
Figure imgf000041_0001
GpA est un radical de formule III ou IIG ;
Figure imgf000042_0001
GpC est un radical de form
Figure imgf000042_0002
Figure imgf000042_0003
les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes;
a est un entier égal à 0 ou à 1 ;
b est un entier égal à 0 ou à 1 ;
p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule IIG et,
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III ; c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2;
d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position IM terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et
o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :
■ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co- polyaminoacide ou ■ via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hyd rophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co-polyaminoacide;
- R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions - COIMH2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II" ;
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;
- A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, insaturé ou aromatique ;
- B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) :
o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15),
le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ; - le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+ .
[000209] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne également les précurseurs desdits radicaux hydrophobes de formule V' et VI' :
H-(GpR)-(GpA)- GpC formule V.
G cl
formule VI1
Figure imgf000044_0001
dans lesquelles GpR, GpA, GpC, r et a ont les définitions données précédemment.
[000210] Dans la suite, les unités utilisées sont pour les insulines celles recommandées par les pharmacopées dont les correspondances en mg/ml sont données dans le tableau ci - après :
Figure imgf000044_0002
[000211] On entend par insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 une insuline insoluble à pH 7 et dont la durée d'action est comprise entre 8 et 24 heures ou supérieure dans les modèles standards de diabète.
[000212] Ces insulines basales dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 sont des insulines recombinantes dont la structure primaire a été modifiée principalement par introduction d'aminoacides basiques comme l'Arginine ou la Lysine. Elles sont décrites par exemple dans les brevets, demandes de brevets ou publications suivants WO 2003/053339, WO 2004/096854, US 5,656,722 et US 6,100,376 dont le contenu est incorporé par référence. [000213] Dans un mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est l'insuline glargine.
[000214] L'insuline glargine est commercialisée sous la marque Lantus® (100 U/ml) ou Toujeo® (300 U/ml) par SANOFI.
[000215] Dans un mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est une insuline glargine biosimilaire.
[000216] Une insuline glargine biosimilaire est en voie de commercialisation sous la marque Abasaglar® ou Basaglar® par ELI LILLY.
[000217] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent entre 40 et 500 U/mL d'insuli ne basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000218] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000219] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 75 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000220] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000221] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 150 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000222] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000223] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000224] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 250 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000225] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000226] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000227] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000228] Dans un mode de réalisation, le ratio massique entre l'insuline basale, dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, et le co-polyaminoacide, soit co- polyaminoacide /insuline basale, est compris entre 0,2 et 8. [000229] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris entre 0,2 et 6.
[000230] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris entre 0,2 et 5.
[000231] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris entre 0,2 et 4.
[000232] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris entre 0,2 et 3.
[000233] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris entre 0,2 et 2.
[000234] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris entre 0,2 et 1.
[000235] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent une insuline prandiale. Les insulines prandiales sont solubles à pH 7.
[000236] On entend par insuline prandiale une insuline dite rapide ou « regular ».
[000237] Les insulines prandiales dites rapides sont des insulines qui doivent répondre aux besoins provoqués par l'ingestion des protéines et des glucides durant un repas, elles doivent agir en moins de 30 minutes.
[000238] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale dite « regular » est de l'insuline humaine.
[000239] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est une insuline humaine recombinante telle que décrite dans la Pharmacopée Européenne et la Pharmacopée américaine.
[000240] L'insuline humaine est par exemple commercialisée sous les marques Humulin® (ELI LILLY) et Novolin® (NOVO NORDISK).
[000241] Les insulines prandiales dites très rapides (fast acting) sont des insulines qui sont obtenues par recombinaison et dont la structure primaire a été modifiée pour diminuer leur temps d'action.
[000242] Dans un mode de réalisation, les insulines prandiales dites très rapides (fast acting) sont choisies dans le groupe comprenant l'insuline lispro (Humalog®), l 'insuline glulisine (Apidra®) et l'insuline aspart (NovoLog®).
[000243] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l’insuline lispro.
[000244] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline glulisine.
[000245] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline aspart.
[000246] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total entre 60 et 800 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000247] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total entre 100 et 500 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5. [000248] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 800 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000249] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 700 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000250] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 600 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000251] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 500 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d 'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000252] Dans un mode de réal isation, les compositions selon l'invention comprennent au total 400 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000253] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 300 U/mL d 'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000254] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 266 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000255] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 200 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000256] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 100 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5.
[000257] Les proportions entre l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et l'insuline prandiale sont par exemple en pourcentage de 25/75, 30/70, 40/60, 50/50, 60/40, 63/37, 70/30, 75/25, 80/20, 83/17, 90/10 pour des formulations telles que décrites ci-dessus comprenant de 60 à 800 U/m L. Cependant toute autre proportion peut être réalisée.
[000258] Dans un mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et l'insuline prandiale sont présentes respectivement dans les concentrations suivantes (en U/ml ) 75/25, 150/50, 200/66 ou 300/100. [000259] Dans un mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et l'insuline prandiale sont présentes respectivement dans les concentrations suivantes (en U/ml ) 75/25.
[000260] Dans un mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et l'insuline prandiale sont présentes respectivement dans les concentrations suivantes (en U/ml) 150/50.
[000261] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'i nvention comprennent une hormone gastrointestinale.
[000262] On entend par « hormones gastrointestinales », les hormones choisies dans le groupe constitué par le GLP- 1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), l'oxyntomoduline (un dérivé du proglucagon), le peptide YY, l'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancréatique (PP), la ghreline et l'entérostatine, leurs analogues ou dérivés et/ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000263] L'amyline , ou « islet amyloid polypeptide » (IAPP), est une hormone peptidique à 37 résidus. Elle est co-sécrétée avec de l'insuline à partir des cellules béta pancréatiques dans le rapport d'environ 100/1. L'amyline joue un rôle dans la régulation glycémique en stoppant la sécrétion du glucagon endogène et en ralentissant la vidange gastrique et en favorisant la satiété, réduisant ainsi les excursions glycémiques post-prandiales dans les niveaux de glucose sanguin.
[000264] L’IAPP est traité à partir d'une séquence codante de 89 résidus. Le pro-islet polypeptide amyloïde (proIAPP, proamyline, protéine proislet) est produit dans les cellules bêta pancréatiques (cellules béta) sous la forme d'un pro-peptide de 67 acides aminés, 7404 Dalton, et subit des modifications post-traductionnelles comprenant le clivage de protéase pour produire de l'insuline glargine.
[000265] Dans la présente demande, l'amyline telle que mentionnée fait référence aux composés décrits dans les brevets US 5,124,314 et US 5,234,906.
[000266] On entend par « analogue », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine, dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs de la séquence primaire ont été substitués par d'autres résidus d'acides aminés et / ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été supprimés et / ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été ajoutés. Le pourcentage d'homologie admis pour la présente définition d'un analogue est de 50 %. Dans le cas de l'amyline, un analogue peut être par exemple dérivé de la séquence d'acide aminé primaire de l'amyline en substituant un ou plusieurs acides aminés naturels ou non naturels ou peptidomimétiques.
[000267] On entend par « dérivé », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine ou un analogue chimiquement modifié par un substituant qui n'est pas présent dans le peptide ou la protéine ou l'analogue de référence, c'est-à-dire un peptide ou une protéine qui a été modifié par création de liaisons covalentes, pour introduire des substituants de type non amino-acide.
[000268] Dans un mode de réalisation, les hormones gastro-intestinales sont des analogues ou dérivés de GLP-1 RA choisis dans le groupe constitué par l'exenatide ou Byetta®(ASTRA-ZEI\IECA) , le liraglutide ou Victoza® (NOVO NORDISK), le lixisenatide ou Lyxumia® (SANOFI), l'albiglutide ou Tanzeum® (GSK) ou le dulaglutide ou Trulicity® (ELI LILLY & CO), leurs analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000269] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastro-intestinale est le pramlintide ou Symlin® ®(ASTRA-ZENECA).
[000270] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'exenatide ou Byetta®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000271] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le liraglutide ou Victoza®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000272] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide ou Lyxumia®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000273] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'albiglutide ou Tanzeum®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000274] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide ou Trulicity®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000275] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le pramlintide ou Symlin®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
[000276] On entend par « analogue », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine, dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été substitués par d'autres résidus d'acides aminés et/ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été supprimés et/ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été ajoutés. Le pourcentage d'homologie admis pour la présente définition d'un analogue est de 50%.
[000277] On entend par « dérivé », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine ou un analogue chimiquement modifié par un substituant qui n'est pas présent dans le peptide ou la protéine ou l'analogue de référence, c'est-à-dire un peptide ou une protéine qui a été modifié par création de liaisons covalentes, pour introduire des substituants.
[000278] Dans un mode de réalisation, le substituant est choisi dans le groupe constitué des chaînes grasses. [000279] Dans un mode de réalisation, la concentration en hormone gastrointestinale est comprise dans un intervalle de 0,01 à 100 mg/mL.
[000280] Dans un mode de réalisation, la concentration en exenatide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 0,04 à 0,5 mg/mL.
[000281] Dans un mode de réalisation, la concentration en liraglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 1 à 10 mg/mL.
[000282] Dans un mode de réalisation, la concentration en lixisenatide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 0,01 à 1 mg/mL.
[000283] Dans un mode de réalisation, la concentration en albiglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise entre 5 à 100 mg/mL.
[000284] Dans un mode de réalisation, la concentration en dulaglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise entre 0, 1 à 10 mg/mL.
[000285] Dans un mode de réalisation, la concentration en pramlintide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise entre 0, 1 à 5 mg/mL.
[000286] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention sont réalisées par mélange de solutions commerciales d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et de solutions commerciales de GLP- 1 RA, d 'analogue ou de dérivé de GLP-1 RA en ratios volumiques compris dans un intervalle de 10/90 à 90/10.
[000287] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend une dose journalière d'insuline basale et une dose journalière d'hormone gastro-intestinale.
[000288] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, entre 0,05 et 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000289] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000290] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide. [000291] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000292] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent entre 40 U/mL et 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5 ,8 et 8,5 et, de 0,1 à 10 mg/mL de dulaglutide.
[000293] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000294] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000295] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000296] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000297] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.
[000298] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000299] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000300] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000301] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000302] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,1 à 10 mg/mL de dulaglutide. [000303] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000304] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000305] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000306] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000307] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.
[000308] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000309] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000310] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000311] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000312] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,1 à lOmg/mL de dulaglutide.
[000313] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000314] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide. [000315] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000316] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000317] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,1 à 10 mg/mL de dulaglutide.
[000318] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000319] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000320] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000321] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.
[000322] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.
[000323] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.
[000324] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.
[000325] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.
[000326] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide. [000327] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.
[000328] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 0 et
5000 mM.
[000329] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 0 et
4000 pM.
[000330] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 0 et
3000 pM.
[000331] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 0 et
2000 pM.
[000332] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 0 et
1000 pM.
[000333] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 50 et
600 pM.
[000334] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 100 et
500 pM .
[000335] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise entre 200 et
500 pM.
[000336] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des tampons.
[000337] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises entre 0 et 100 mM.
[000338] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises entre 15 et 50 mM.
[000339] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent un tampon choisi dans le groupe constitué par un tampon phosphate, le Tris (trishydroxyméthylaminométhane) et le citrate de sodium.
[000340] Dans un mode de réalisation, le tampon est le phosphate de sodium. [000341] Dans un mode de réalisation, le tampon est le Tris (trishydroxyméthylaminométhane).
[000342] Dans un mode de réalisation, le tampon est le citrate de sodium.
[000343] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des conservateurs.
[000344] Dans un mode de réalisation, les conservateurs sont choisis dans le groupe constitué par le m-crésol et le phénol, seuls ou en mélange.
[000345] Dans un mode de réalisation, la concentration des conservateurs est comprise entre 10 et 50 mM .
[000346] Dans un mode de réalisation, la concentration des conservateurs est comprise entre 10 et 40 mM .
[000347] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre un tensioactif.
[000348] Dans un mode de réalisation, le tensioactif est choisi dans le groupe constitué par le propylène glycol et le polysorbate.
[000349] Les compositions selon l'invention peuvent en outre comprendre des additifs tels que des agents de tonicité.
[000350] Dans un mode de réalisation, les agents de tonicité sont choisis dans le groupe constitué par la glycérine, le chlorure de sodium, le mannitol et la glycine.
[000351] Les compositions selon l'invention peuvent comprendre en outre tous les excipients conformes aux pharmacopées et compatibles avec les insulines utilisées aux concentrations d'usage.
[000352] L'invention concerne également une formulation pharmaceutique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle est obtenue par séchage et/ou lyophilisation.
[000353] Dans le cas des libérations locale et systémique, les modes d'administration envisagés sont par voie intraveineuse, sous-cutanée, intradermique ou intramusculaire.
[000354] Les voies d'administration transdermique, orale, nasale, vaginale, oculaire, buccale, pulmonaire sont également envisagées.
[000355] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle est administrée 1 fois par jour.
[000356] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle est administrée au moins 2 fois par jour.
[000357] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle est administrée 2 fois par jour.
[000358] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une insuline prandiale. [000359] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins une insuline prandiale est caractérisée en ce qu'elle est administrée 1 fois par jour.
[000360] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins une insuline prandiale est caractérisée en ce qu'elle est administrée au moins 2 fois par jour.
[000361] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins une insuline prandiale est caractérisée en ce qu'elle est administrée 2 fois par jour.
[000362] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une hormone gastro-intestinale.
[000363] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins une hormone gastro-intestinale est caractérisée en ce qu'elle est administrée
1 fois par jour.
[000364] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins une hormone gastro-intestinale est caractérisée en ce qu'elle est administrée au moins 2 fois par jour.
[000365] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins une hormone gastro-intestinale est caractérisée en ce qu'elle est administrée
2 fois par jour.
[000366] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que l'hormone gastro-intestinale est un GLP- 1 RA.
[000367] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au un GLP-1 RA est caractérisée en ce qu'elle est administrée 1 fois par jour.
[000368] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins un GLP- 1 RA est caractérisée en ce qu'elle est administrée au moins 2 fois par jour.
[000369] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprenant en outre au moins un GLP- 1 RA est caractérisée en ce qu'elle est administrée 2 fois par jour.
[000370] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre 6,0 et 8,0 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et une insuline prandiale.
[000371] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre 6,0 et 8,0 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.
[000372] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre 6,0 et 8,0 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8.5 , une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.
[000373] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre
6.6 et 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et
8.5 et une insuline prandiale.
[000374] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre
6.6 et 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et
8.5 et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.
[000375] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre
6.6 et 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et
8.5 , une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.
[000376] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre
6.6 et 7,6 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et
8.5 et une insuline prandiale.
[000377] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre
6.6 et 7,6 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et
8.5 et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.
[000378] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre
6.6 et 7,6 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et
8,5 , une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.
[000379] Dans un mode de réalisation, les formulations unidoses comprennent en outre un co-polyaminoacide tel que défini précédemment.
[000380] Dans un mode de réalisation, les formulations sont sous forme d'une solution injectable.
[000381] Dans un mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est l'insuline glargine.
[000382] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline humaine.
[000383] Dans un mode de réalisation, l'insuline est une insuline humaine recombinante telle que décrite dans la Pharmacopée Européenne et la Pharmacopée américaine.
[000384] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est choisie dans le groupe comprenant l 'insuline lispro (Humalog®), l'insuline glulisine (Apidra®) et l'insuline aspart (NovoLog®).
[000385] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline lispro.
[000386] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline glulisine.
[000387] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline aspart. [000388] Dans un mode de réalisation, le GLP-1 RA, analogue ou dérivé de GLP- 1 RA est choisi dans le groupe comprenant exenatide (Byetta®), liraglutide (Victoza®), lixisenatide (Lyxumia®), albiglutide (Tanzeum®), dulaglutide (Trulicity®) ou l'un de leurs dérivés.
[000389] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l 'exenatide.
[000390] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le liraglutide.
[000391] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide.
[000392] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'albiglutide.
[000393] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide.
[000394] La solubilisation à pH compris entre 6,0 et 8,0 des insulines basales dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, par les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, peut être constatée et contrôlée de manière simple, à l'œil nu, grâce à un changement d'aspect de la solution.
[000395] La solubilisation à pH compris entre 6,6 et 7,8 des insulines basales dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, par les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, peut être constatée et contrôlée de manière simple, à l'œil nu, grâce à un changement d'aspect de la solution.
[000396] Par ailleurs et de façon toute aussi importante, la demanderesse a pu vérifier qu'une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 , solubilisée à pH compris entre 6,0 et 8,0 en présence d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention conserve son action d'insuline lente que ce soit seule ou en combinaison avec une insuline prandiale ou une hormone gastrointestinale.
[000397] La demanderesse a également pu vérifier qu'une insuline prandiale mélangée à pH compris entre 6,0 et 8,0 en présence d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention et d'une insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, conserve son action d'insuline rapide.
[000398] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris entre 6 et 8.
[000399] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, d'une solution d'insuline prandiale, et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris entre 6 et 8. [000400] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, d'une solution de GLP-1 RA, un analogue ou un dérivé de GLP-1 RA, et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris entre 6 et 8.
[000401] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le poi nt isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5, d'une solution d'insuline prandiale, d'une solution de GLP-1 RA ou d'un analogue ou dérivé de GLP-1 RA et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris entre 6 et 8.
[000402] Dans un mode de réalisation, le mélange d'insuline basale et de co- polyaminoacide est concentré par ultrafiltration avant le mélange avec l'insuline prandiale en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée.
[000403] Si nécessaire, la composition du mélange est ajustée en excipients tels que glycérine, m-crésol, chlorure de zinc, et polysorbate (Tween®) par ajout de solutions concentrées de ces excipients au sein du mélange. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris entre 6 et 8.
[000404] Dans un mode de réalisation le chlorure de sodium est présent en une concentration allant de 2 à 25 mM
[000405] Dans un mode de réalisation le chlorure de sodium est présent en une concentration allant de 2,5 à 20 mM
[000406] Dans un mode de réalisation le chlorure de sodium est présent en une concentration allant de 4 à 15 mM
[000407] Dans un mode de réalisation le chlorure de sodium est présent en une concentration allant de 5 à 10 mM
[000408] Partie A
AA : Synthèse des composés intermédiaires hydrophobes Hv permettant d'obtenir les radicaux -Hv dans lesquelles o = 1
[000409] Les composés intermédiaires hydrophobes sont représentés dans le tableau suivant par la molécule hydrophobe correspondante avant greffage sur le co-polyaminoacide.
Figure imgf000060_0001
Figure imgf000061_0001
Figure imgf000062_0001
Tableau IA : liste et structures des molécules hydrophobes synthétisées selon l'invention.
Exemple AAI : molécule AAI
Molécule Al : Produit obtenu par la réaction entre le chlorure de palmitoyle et la L-proline.
[000410] À une solution de L-proline ( 10,6 g, 92, 1 mmol) dans de la soude aqueuse 1
[000411] N (230 mL ; 230 mmol) est ajoutée goutte-à-goutte pendant 90 min une solution de chlorure de palmitoyle (23,0 g, 83,7 mmol) dans l'acétone ( 167 mL) . Après 14 h d'agitation à température ambiante, le mélange hétérogène est refroidi à 0 °C, puis filtré sur fritté pour donner un solide blanc qui est lavé avec de l'eau (2 x 100 mL) puis du diisopropyléther ( 100 mL). Le solide est séché sous pression réduite. Le solide est alors dissout à reflux dans 200 mL d'eau puis 8 mL d'une solution d'acide chlorhydrique à 37 % sont ajoutés pour obtenir un pH = 1. Le milieu réactionnel opalescent est alors refroidi à 0 °C. Le précipité obtenu est filtré sur fritté puis lavé avec de l'eau (5 x 50 mL) jusqu'à obtenir des filtrats de pH physiologique compris entre 6,0 et 8,0 pour être ensuite séché dans une étuve à 50 °C sous vide pendant une nuit. Le produit est purifié par recristallisation dans le diisopropyléther. Un solide blanc est obtenu.
Rendement : 22,7 g (77 %). RMN !H (CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1 , 19- 1,45 (24H) ; 1,58-1,74 (2H) ; 1,88-2, 14 (3H) ; 2,15-2,54 (3H) ; 3,47 ( 1H) ; 3,58 (1 H) ; 4,41 (0,1H) ; 4,61 (0,9H) 6,60-8,60 ( 1 H).
Molécule A2 : Produit obtenu par réaction entre la molécule Al et la /V-Boc-éthylènediamine.
[000412] À une solution de molécule Al (75,1 g, 212,4 mmol) dans 1500 mL de chloroforme sont ajoutés successivement et à température ambiante de la N,N- diisopropyléthylamine (DIPEA) (68,8 g, 532,3 mmol), du 1-hydroxybenzotriazole (HOBt) (37,1 g, 274,6 mmol) puis du /V-(3-diméthylaminopropyl)-/V'-éthylcarbodiimide (EDC) (53,1 g, 277,0 mmol). Après 15 min d'agitation à température ambiante, une solution de /V-Boc- éthylènediamine (BocEDA) (37,6 g, 234,7 mmol) dans 35 mL de chloroforme est additionnée. Après 18 h d'agitation à température ambiante, une solution de HCl 0,1 N (2,1 L), puis une solution saturée de NaCI ( 1 L) sont ajoutées. Les phases sont séparées puis la phase organique est lavée successivement avec une solution de HCl 0,1 N / NaCI saturée (2,1 L/l L), une solution de NaCI saturée (2 L), une solution de NaHCCb saturée (2 L), puis une solution de NaCI saturée (2 L). La phase organique est séchée sur sulfate de sodium anhydre, filtrée puis concentrée sous pression réduite. Le solide obtenu est purifié par triturations dans le diisopropyléther (3 x 400 mL), pour donner un solide après séchage sous vide à 40 °C. Rendement : 90,4 g (86 %).
RMN (CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,20-1,37 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,54- 1,70 (2H) ; 1,79-1,92 (1H) ; 1,92-2,04 ( 1H) ; 2,03-2, 17 (1 H) ; 2,17-2,44 (3H) ; 3, 14-3,36 (4H) ; 3,43 (1 H) ; 3,56 (1H) ; 4,29 (0,1 H) ; 4,51 (0,9 H) ; 4,82 (0,1H) ; 5,02 (0,9H) ; 6,84 (0,1 H) ; 7,22 (0,9H).
Molécule AAI
[000413] À une solution de molécule A2 (20, 1 g, 40,5 mmol) dans 330 mL de dichlorométhane est ajoutée goutte-à-goutte et à 0 °C une solution d'acide chlorhydrique 4 N dans le dioxane (100 mL, 400 mmol). Après 3 h 30 d'agitation à température ambiante, la solution est concentrée sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane) pour donner un solide blanc de molécule AAI sous forme de sel de chlorhydrate.
Rendement : 16,3 g (93 %).
RMN ^ (CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1 ,07- 1,40 (24H) ; 1,49-1,63 (2H) ; 1,77-2, 18 (4H) ; 2, 18-2,45 (2H) ; 3, 14-3,32 (2H) ; 3,42-3,63 (2H) ; 3,63-3,84 (2H) ; 4,37 (0,1H) ; 4,48 (0,9H ) ; 6,81-8,81 (4H).
LC/MS (ESI) : 396,5 ; (calculé ([M+ H]+) : 396,4). Exemple AA2 : molécule AA2
Molécule A3 : 15-méthylhexadécan- l-ol .
[000414] Dans un tricol sous argon est introduit du magnésium (9,46 g, 389 mmol ) en copeaux. Le magnésium est recouvert de THF (40 mL) anhydre et quelques gouttes de 1- bromo-3-méthylbutane sont ajoutées à température ambiante pour initier la réaction. Après l'observation d'un exotherme et un léger trouble du milieu, le reste du l -bromo-3- méthylbutane (53,87 g, 357 mmol) est ajouté au goutte-à-goutte en 90 min alors que la température du milieu reste stable entre 50 et 60 °C. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 70 °C pendant 2 h.
[000415] Dans un tricol sous argon, à une solution de CuCI (482 mg, 4,86 mmol) dissout dans la NMP (62 mL) à 0 °C est ajoutée au goutte-à-goutte une solution de 12-bromo-l- dodécanol (43 g, 162, 1 mmol) dans le THF (60 mL) . À cette solution est ensuite ajoutée au goutte-à-goutte la solution de l'organomagnésien chaude fraîchement préparée de façon à maintenir la température du milieu en dessous de 20 °C. Le mélange est ensuite agité à température ambiante pendant 16 h. Le milieu est refroidi à 0 °C et la réaction est stoppée par addition d'une solution aqueuse d'HCI 1 N jusqu'à pH 1 et le milieu est extrait à l'acétate d'éthyle. Après lavage de la phase organique avec une solution saturée en NaCI et séchage sur Na2S04, la solution est filtrée et concentrée sous vide pour donner une huile. Après purification par DCVC sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle), une huile qui cristallise à température ambiante est obtenue.
Rendement : 32,8 g (74 %)
RMN *H (CDCI3, ppm) : 0,87 (6H) ; 1, 14 (2H) ; 1,20- 1,35 (22H) ; 1,50-1 ,55 (3H) ; 3,64 (2H). Molécule A4 : acide 15-méthylhexadécanoïque.
[000416] À une solution de molécule A3 (20,65 g, 80,5 mmol) et bromure de tétrabutylammonium ( 14,02 g, 42,5 mmol) dans un mélange d'acide acétique/dichloréthane/eau (124/400/320 mL) à température ambiante est ajouté par petites portions du permanganate de potassium (38,2 g, 241,5 mmol) . Après agitation à reflux pendant 5 h et retour à température ambiante, le milieu est acidifié à pH 1 par ajout progressif de HCl 5 N. Na2SÜ3 (44,6 g, 354,3 mmol ) est ensuite ajouté progressivement jusqu'à décoloration du milieu. La phase aqueuse est extraite au dichlorométhane et les phases organiques combinées sont séchées sur Na2S04, filtrées et concentrées sous vide. Après purification par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, acide acétique), un solide blanc est obtenu.
Rendement : 19,1 g (quantitatif)
RMN (CDC , ppm) : 0,87 (6H) ; 1,14 (2H) ; 1,22- 1,38 (20H) ; 1,51 (1H) ; 1,63 (2H) ; 2,35 (2H). Molécule AS : Produit obtenu par réaction entre la molécule A4 et la L-proline.
[000417] À une solution de molécule A4 ( 10 g, 37 mmol) dans le THF (360 mL) à 0 °C sont ajoutés successivement du dicyclohexyle carbodiimide (DCC) (8,01 g, 38,8 mmol) et du N- hydroxysuccinimide (NHS) (4,47 g, 38,8 mmol). Après 17 h d'agitation à température ambiante, le milieu est refroidi à 0 °C pendant 20 min, filtré sur fritté. De la L-proline (4 g, 37,7 mmol), de la triéthylamine (34 mL) et de l'eau (30 mL) sont ajoutées au filtrat. Après 20 h d'agitation à température ambiante, le milieu est traité avec une solution aqueuse d'HCI 1 N jusqu'à pH 1. La phase aqueuse est extraite avec du dichlorométhane (2 x 125 mL). Les phases organiques combinées sont lavées avec une solution aqueuse de HCl 1 N (2 x 100 mL), de l'eau ( 100 mL), puis une solution aqueuse saturée en NaCI (100 mL). Après séchage sur Na2SC>4, la phase organique est filtrée, concentrée sous vide et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, acide acétique)
Rendement : 9,2 g (72 %)
RMN XH (CDCh, ppm) : 0,86 (6H) ; 1,14 (2H) ; 1,22- 1,38 (20H) ; 1,50 (1H ) ; 1,67 (2H) ; 1,95-2, 10 (3H) ; 2,34 (2H) ; 2,49 (1H) ; 3,47 ( 1H) ; 3,56 ( 1H) ; 4,61 ( 1 H).
LC/ S (ESI) : 368,3 ; (calculé ([M + H]+) : 368,6).
Molécule A6 : Produit obtenu par réaction entre la molécule A5 et la /V-Boc-éthylènediamine.
[000418] À une solution de molécule A5 (9,22 g, 25,08 mmol) dans un mélange THF/DMF (200/50 mL) sont ajoutés de la triéthylamine (TEA) (5,23 mL) et du 2-(lH-benzotriazol-l- yl)- l, l,3,3-tétraméthyluronium tétrafluoroborate (TBTU) à température ambiante. Après 10 min d'agitation, de la BocEDA (4,42 g, 27,6 mmol) est ajoutée. Après agitation à température ambiante pendant 17 h, le mélange est dilué avec de l'eau (300 mL) à 0 °C et agité à froid pendant 20 min. Le précipité formé est filtré sur fritté et le filtrat est extrait à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques combinées sont lavées avec une solution saturée de NaHCC , séchées sur Na2S04, filtrées, concentrées sous vide et le résidu est purifié par chromatographie flash (acétate d'éthyle, méthanol) .
Rendement : 6,9 g (54 %)
RMN !H (CDCh, ppm) : 0,86 (6H) ; 1,15 (2H) ; 1,22- 1,38 (20H) ; 1,43 (9H) ; 1,50 ( 1H) ; 1,64 (4H) ; 1,85 (1 H) ; 1,95 (1 H) ; 2,10 (1H) ; 2,31 (2H) ; 3,20-3,35 (3H) ; 3,45 (1H ) ; 3,56 ( 1H) ; 4,51 (1 H) ; 5,05 ( 1H) ; 7,24 ( 1 H).
LC/MS (ESI) : 510,6 ; (calculé ([M + H]+) : 510,8).
Molécule AA2
[000419] À une solution de la molécule A6 (5,3 g, 10,40 mmol) dans le dichlorométhane (50 mL) à 0 °C est ajoutée une solution de HCl 4 N dans le dioxane ( 13 mL). Après 5 h d'agitation à 0 °C, le milieu est concentré sous vide, repris dans de l'eau et lyophilisé pour donner un solide blanc de molécule AA2 sous forme de sel de chlorhydrate. Rendement : 4,6 g (99%)
RMN H (DzO, ppm) : 0,91 (6H) ; 1,22 (2H) ; 1,22- 1,50 (20H) ; 1,63 (3H) ; 1,98 ( 1H) ; 2,10 (2H) ; 2,26 ( 1H) ; 2,39 (1H) ; 2,43 (1H) ; 3,22 (2H) ; 3,45-3,60 (3H) ; 3,78 (1H) ; 4,42 (1H).
LC/MS (ESI) : 410,4 ; (calculé ([M+ H]+) : 410,7).
Exemple AA3 : molécule AA3
[000420] Molécule A7 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule Al et la Boc- tri(éthy!èneglycol)diamine.
[000421] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule Al (4,0 g, 11,3 mmol) et à la Boc-tri(éthylèneglycol)diamine (3,1 g, 12,4 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, toluène).
Rendement : 5,5 g (84 %).
RMN XH (CDCIa, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,09-1,39 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,64 (2H) ; 1,79-2,01 (2H) ; 2,06-2,43 (4H) ; 3,23-3,68 ( 14H) ; 4,33 (0,2H) ; 4,56 (0,8H) ; 5,25 (1H) ; 6,49 (0,2H) ; 7, 13-7,50 (0,8H).
Molécule AA3
[000422] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A7 (5,5 g, 9,4 mmol), un solide blanc de molécule AA3 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane).
Rendement : 4,3 g (92 %).
RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,08-1,40 (24H) ; 1,40-1,52 (2H) ; 1,71-2,02 (4H) ; 2,02-2,31 (2H) ; 2,90-2,98 (2H) ; 3,15-3,47 (5H) ; 3,50-3,66 (7H) ; 4,24 (0,6H) ; 4,32 (0,4H) ; 7,83 (0,6H) ; 7,95 (3H) ; 8, 17 (0,4H).
LC/MS (ESI) : 484,6 ; (calculé ([M+ H]+ ) : 484,4).
Exemple AA4 : molécule AA4
[000423] Molécule A8 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule Al et la Boc-1- amino-4,7,10-trioxa-13-tridécane amine.
[000424] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule Al (4,5 g, 12,7 mmol) et à la Boc-l-amino-4,7,10-trioxa- 13-tridécane amine (4,5 g, 14,0 mmol), une huile jaune est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane) .
Rendement : 7,7 g (92 %). RMN *H (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,22-1,37 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,59-1,67 (2H) ; 1,67-2,00 (6H) ; 2,06-2,45 (4H) ; 3,18-3,76 (18H) ; 4,28 (0,2H) ; 4,52 (Q,8H) ; 4,69-5,04 (1H) ; 6,77 (0,2H) ; 7,20 (0,8H).
Molécule AA4
[000425] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A8 (7,7 g, 11,8 mmol), une huile jaune est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Une co-évaporation avec du diisopropyléther permet d'obtenir la molécule AA4 sous forme de sel de chlorhydrate sous forme d'un solide blanc qui est séché sous vide à 50 °C.
Rendement : 5,4 g (76 %).
RMN !H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,08-1,40 (24H) ; 1,49-1,65 (2H) ; 1,76-2,39 (10H) ; 3,07-3,28 (3H) ; 3,34-3,80 (15H) ; 4,34 (0,05H) ; 4,64 (0,95H) ; 7,35 (0,05H) ; 7,66-8,58 (3,95H).
LC/MS (ESI) : 556,7 ; (calculé ([M+H]+) : 556,5).
Exemple AA5 : molécule AA5
[000426] Molécule A9 1 Produit obtenu par réaction entre la molécule Al et l'ester méthylique de la /V-Boc-L-lysine.
[000427] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule Al (4 g, 11,3 mmol) et à l'ester méthylique de la /V-Boc-L-lysine (3,2 g, 12,4 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane).
Rendement : 4,9 g (73 %).
RMN CH (CDC , ppm) : 0,88 (3H) ; 0,99-1,54 (37H) ; 1,54-1,75 (3H) ; 1,75-2,04 (3H) ; 2,04-2,41 (4H) ; 2,94-3,19 (2H) ; 3,19-3,81 (5H) ; 4,28-4,64 (2H) ; 4,94 (1H) ; 6,45 (0,1H) ; 7,36 (0,9H).
LC/ MS (ESI) : 596,7 ; (calculé ([M+H]+) : 596,5).
Molécule A10 : Produit obtenu par traitement de la molécule A9 avec de l'ammoniaque.
[000428] À une suspension de molécule A9 (4,9 g, 8,2 mmol) dans 10 mL de méthanol sont ajoutés 320 mL d'une solution d'ammoniaque 7 N dans le méthanol. Après 19 h d'agitation à température ambiante en atmosphère fermée, 100 mL supplémentaires de solution d'ammoniaque sont ajoutés. Après 24 h d'agitation à température ambiante en atmosphère fermée, le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite. Le résidu est purifié par trituration dans le diisopropyléther à reflux (100 mL), pour donner un solide blanc qui est séché sous vide à 50 °C.
Rendement : 4,1 g (85 %). (CDC , ppm) : 0,88 (3H) ; 1,06-1,57 (37H) ; 1,57- 1,79 (3H) ; 1,88-2,41 (7H) ; 3,09 (2H) ; 3,49 ( 1H) ; 3,62 (1H) ; 4,34 ( 1H) ; 4,51 (1 H) ; 4,69-4,81 ( 1H) ; 5,43 (0,95H) ; 5,57 (0,05H) ; 6,25 (0,05H) ; 6,52 (0,95H) ; 6,83 (0,05H) ; 7, 11 (0,95H) .
Molécule AA5
[000429] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A10 (388 mg, 0,67 mmol), un solide blanc de molécule AA5 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après purification par trituration dans le diisopropyléther. Rendement : 292 mg (85 %) .
RMN *H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,06-2,34 (38H) ; 2,61-2,81 (2H) ; 3,29-3,68 (2H) ; 4,05-4,17 (1,7H) ; 4,42 (0,3H) ; 7,00 ( 1 H) ; 7, 16 (0,7H) ; 7,43 (0,3H) ; 7, 73-8, 04(3, 7H) ; 8, 16 (0,3H).
LC/MS (ESI) : 481,6 ; (calculé ([M + H]+) : 481,4) .
Exemple AA6 : molécule AA6
Molécule Ai l : Produit obtenu par la réaction entre le chlorure de stéaroyle et la L-proline.
[000430] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule Al appliqué à la L-proline (5,0 g, 43,4 mmol) et au chlorure de stéaroyle (12,0 g, 39,6 mmol), un solide blanc est obtenu après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane).
Rendement : 5,37 g (36 %)
(CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,26-1,37 (28H) ; 1,64-1,70 (2H) ; 1,88-2, 10 (3H) ; 2,36 (2H) ; 2,54-2,58 (1 H) ; 3,46 ( 1H) ; 3,56 (1H) ; 4,62 (1H).
LC/MS (ESI) : 382,6 ; (calculé ([M + H]+) : 382,3).
Molécule Al 2 1 Produit obtenu par réaction entre la molécule Ai l et la Boc- tri(éthylèneglycol)diamine.
[000431] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A6 appliqué à la molécule Ai l (33,81 g, 88,6 mmol) et à la Boc-tri(éthylèneglycol)diamine (26,4 g, 106,3 mmol) dans le THF en utilisant la DIPEA au lieu de la TEA, un solide blanc est obtenu après purification par chromatographie flash (acétate d'éthyle, méthanol ).
Rendement : 43,3 g (80 %)
RMN !H (CDCb, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,24 (30H) ; 1,43 (9H) ; 1,61 (2H) ; 1,82 (1H) ; 1,96 ( 1H) ; 2,25-2,45 (2H) ; 3,25-3,65 ( 14H) ; 4,30 (0,15H) ; 4,53 (0,85H) ; 5,25 (1H) ; 6,43 (0, 15H) ; 7,25 (0,85H).
LC/MS (ESI) : 612,6 ; (calculé ([M+H]+) : 612,9). Molécule AA6
[000432] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA2 appliqué à la molécule A12 (43 g, 70,3 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide est trituré dans l'acétonitrile. La suspension est filtrée et le solide lavé avec de l'acétonitrile puis de l'acétone. Après séchage sous vide, un solide blanc de molécule AA6 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu.
Rendement : 31,2 g (81 %)
(DMSO-de, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,23 (28H) ; 1 ,45 (2H) ; 1,70-2,05 (4H) ; 2,13 ( 1 H) ; 2,24 ( 1H) ; 2,95 (2H) ; 3,10-3,25 (2H) ; 3,30-3,65 ( 10H) ; 4,20-4,45 ( 1H) ; 7,85-8,25 (4H). LC/ MS (ESI) : 512,4 ; (calculé ([M + H]+) : 512,8).
Exemple AA7 : molécule AA7
Molécule Al 3 ; Produit obtenu par réaction entre l'acide arachidique et la L-proline.
[000433] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A5 appliqué à l'acide arachidique (15,51 g, 49,63 mmol) et à la L-proline (6 g, 52,11 mmol) en utilisant la DIPEA à la place de la TEA, un solide blanc est obtenu après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, acide acétique).
Rendement : 12,9 g (63 %)
RMN (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,28 (34H) ; 1,66 (2H) ; 1,95-2, 15 (2H) ; 2,34 (2H) ; 2,45 (1H) ; 3,47 (1H) ; 3,56 ( 1H) ; 4,60 (1H).
LC/MS (ESI) : 410,4 ; (calculé ([M+H]+) : 410,6).
Molécule A14 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule A13 et la Boc-l-amino-4,7,10- trioxa-13-tridécane amine.
[000434] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A12 appliqué à la molécule A13 (10,96 g, 26,75 mmol) et à la Boc-l-amino-4,7,10-trioxa-13- tridécane (10,29 g, 32,11 mmol), un solide est obtenu après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, méthanol).
Rendement : 14,2 g (75 %)
RMN *H (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,24 (32H) ; 1,43 (9H) ; 1,61 (2H) ; 1,80 (1H) ; 1,96 (1H) ; 2, 10-2,45 (4H) ; 3,20-3,75 (18H) ; 4,30 (0,20H) ; 4,55 (0,80H) ; 5,03 (1H) ; 6,75 (0,20H) ; 7,20 (0,80H).
LC/MS (ESI) : 712,8 ; (calculé ([M+H]+) : 713,1).
Molécule AA7
[000435] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA2 appliqué à la molécule A14 (14,25 g, 20,01 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide du milieu réactionnel est dissout dans le méthanol et évaporé sous pression réduite, l'opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule AA7 sous forme de sel de chlorhydrate.
Rendement : 12,7 g (98 %)
RMN ^ (DMSO-de, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,23 (32H) ; 1,45 (2H) ; 1,64 (2H) ; 1,70-2,05 (6H) ; 2, 10-2,30 (2H) ; 2,82 (2H) ; 3,08 (2H) ; 3,30-3,60 (15H) ; 4,15-4,30 ( 1H) ; 7,73-8, 13 (4H).
LC/MS (ESI) : 612,7 ; (calculé ([M+H]+) : 612,9) .
Exemple AA8 : molécule AA8
Molécule A1B : Produit obtenu par la réaction entre la L-leucine et le chlorure de palmitoyle.
[000436] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule Al appliqué à de la L-leucine (15,0 g, 114,4 mmol) et au chlorure de pal mitoyle (34,5 g, 125 mmol), un solide blanc est obtenu par trituration dans le diisopropyléther.
Rendement : 13,0 g (31 %)
RMN ^ (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 0,96 (6H) ; 1, 16-1,35 (24H) ; 1,55-1,77 (5H) ; 2,23 (2H) ; 4,55-4,60 ( 1 H) ; 5,88 ( 1H).
Molécule A16 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule A15 et l'ester méthylique de la L-proline
[000437] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule A15 (6,00 g, 16,2 mmol) et à l'ester méthylique de la L-proline (3,23 g, 19,5 mmol), une huile légèrement jaune est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane).
Rendement : 5,8 g (74 %)
RMN (CDCh, ppm) : 0,83-1,00 (9H) ; 1,18-1 ,32 (24H) ; 1,40-1,73 (5H) ; 1,84-2,33 (6H) ; 3,47-3,89 (2H) ; 3,70 (1, 14H) ; 3,71 ( 1,21 H) ; 3,74 (0,53H) ; 3,76 (0,12H) ; 4,40-4,56 ( 1H) ; 4,63-4,67 (0,04H) ; 4,84 (0,38) ; 4,90 (0,40) ; 5,06 (0, 18) ; 5,99 (0, 18H) ; 6,08-6,21 (0,82).
LC/ MS (ESI) : 481,6 ; (calculé ([M + H]+) : 481,4).
Molécule Al? : Produit obtenu par la saponification de l'ester méthylique de la molécule A16.
[000438] À une solution de molécule A16 (5,8 g, 12,06 mmol) dans 30 mL de méthanol est ajoutée de la soude 1 N ( 13,5 mL, 13,5 mmol). Après 20 h d'agitation à température ambiante, la solution est diluée avec de l'eau puis acidifiée par 20 mL d'acide chlorhydrique 1 N à 0 °C. Le précipité est filtré puis rincé avec de l'eau (50 mL) avant d'être solubilisé dans 50 mL de dichlorométhane. La phase organique est séchée sur NazSC , filtrée puis concentrée sous pression réduite pour donner une huile incolore.
Rendement : 4,5 g (80 %) RMN ^ (CDCb, ppm) : 0,85-0,99 (9H) ; 1,14-1,41 (24H) ; 1,43-1,72 (5H) ; 1,87-2,47 (7H) ; 3,48-3,55 (0,6H) ; 3,56-3,62 (0,4H) ; 3,83-3,90 (0,4H) ; 3,90-3,96 (0,6H) ; 4,52-4,56 (0,6H) ; 4,56-4,59 (0,4H) ; 4,80-4,86 (0,4H) ; 4,86-4,91 (0,6H) ; 6,05 (0,4H) ; 6,11 (0,6H). LC/MS (ESI) : 467,6 ; (calculé ([M + H]+) : 467,4).
Molécule A18 : Produit obtenu par la réaction entre la /V-Boc-éthylènediamine et la molécule A17.
[000439] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule A17 (4,5 g, 9,64 mmol) et à la BocEDA ( 1,70 g, 10,61 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane).
Rendement : 2,0 g (34 %)
RMN !H (CDCb, ppm) : 0,83-0,99 (9H) ; 1, 19- 1,32 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1 ,48-2,37 (14H) ; 3,09-3,99 (4H) ; 4,28-5,01 (2H) ; 5,64-6,04 (1H) ; 6,87-7,06 (1H).
LC/ MS (ESI) : 609,7 ; (calculé ([M + H]+) : 609,5).
Molécule AAS
[000440] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A18 (2 g, 3,28 mmol), un solide de molécule AA8 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane).
Rendement : 1,5 g (90 %)
RMN *H (CDCb, ppm) : 0,83-1,00 (9H) ; 1,18-1,32 (24H) ; 1,37-1,77 (5H) ; 1,93-2,41 (6H) ; 3,07-3,97 (6H) ; 4,44-4,77 (2H) ; 7,66-8,21 (2H).
LC/ MS (ESI) : 509,6 ; (calculé ([M+ H]+) : 509,4).
Exemple AA9 : molécule AA9
Molécule A19 : Produit obtenu par la réaction entre l'acide laurique et la L-phénylalanine.
[000441] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A5 appliqué à l'acide laurique (8,10 g, 40,45 mmol) et à la L-phénylalanine (7 g, 42,38 mmol), un solide blanc est obtenu.
Rendement : 12,7 g (98 %)
(DMSO-de, ppm) : 0,86 (3H) ; 1,10-1,30 ( 16H) ; 1,36 (2H) ; 2,02 (2H) ; 2,82 (1H) ; 3,05 (1H) ; 4,42 (1H) ; 7,15-7,30 (5H) ; 8,05 ( 1H) ; 12,61 (1H) .
LC/ MS (ESI) : 348,2 ; (calculé ([M + H]+) : 348,5). Molécule A20 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule A19 et le sel de chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-proline.
[000442] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A6 appliqué à la molécule A19 (9,98 g, 28,72 mmol) et au sel chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-proline (5,23 g, 31,59 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle).
Rendement : 5,75 g (44 %)
(CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1, 10-1,30 ( 16H) ; 1,50-1,75 (3H) ; 1,80-2,02 (3H) ; 2,17 (2H) ; 2,65 (0,5H) ; 2,95 (1H) ; 3,05-3,20 (1,5H) ; 3,50-3,65 ( 1 H) ; 3,75 (3H) ; 4,29 (0,5H) ; 4,46 (0,5H) ; 4,70 (0, 1H) ; 4,95 (0,9H) ; 6,20-6,30 (1H) ; 7, 15-7,30 (5H).
LC/ MS (ESI) : 459,2 ; (calculé ([M+H]+) : 459,6) .
Molécule A21 : Produit obtenu par saponification de la molécule A20.
[000443] À une solution de molécule A20 (5,75 g, 12,54 mmol) dans un mélange THF/méthanol/eau (40/40/40 mL) à 0 °C est ajoutée de l 'hydroxyde de lithium (LiOH) (600,49 mg, 25,07 mmol) puis le mélange est agité à température ambiante pendant 20 h. Après évaporation des solvants organiques sous vide, la phase aqueuse est diluée dans l'eau, acidifiée avec une solution aqueuse de HCl 1 N jusqu'à pH 1. Le produit est alors extrait à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques combinées sont lavées avec une solution aqueuse saturée de NaCI, séchées sur Na2S04, filtrées et concentrées sous pression réduite pour donner une huile incolore.
Rendement : 5,7 g (quantitatif)
RMN !H (CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,10-1,30 ( 16H) ; 1,50-1,80 (3H) ; 1,67-2,02 (2H) ; 2,20 (2H) ; 2,25 (0,4H) ; 2,60 (0,6H) ; 2,85-3, 10 (2,6H) ; 3,55-3,65 ( 1,4H) ; ; 4,35 (0,6H) ; 4,55 (0,4H) ; 4,94 ( 1 H) ; 6,28 (0,4H) ; 6,38 (0,6H) ; 7,20-7,30 (5H).
LC/ MS (ESI) : 445,2 ; (calculé ([M + H]+) : 445,6).
Molécule A22 ; Produit obtenu par réaction entre la /V-Boc-éthylènediamine et la molécule A21.
[000444] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A6 appliqué à la molécule A21 (5,67 g, 12,75 mmol) et à la BocEDA (2,25 g, 14,03 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (dichlorométhane, méthanol).
Rendement : 5,7 g (76%)
(CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,25 (16H) ; 1,43 (9H) ; 1,58 (2,6H) ; 1,75-1,95 ( 1,4H) ; 2,15-2,30 (3H) ; 2,64 (0,5H) ; 2,95-3,10 (2,5H) ; 3,20-3,40 (4H) ; 3,45 (0,5H) ; 3,55 (0,2H) ; 3,66 ( 1H) ; 4,44 (1H) ; 4,50 (0,2H) ; 4,60 (0,6H) ; 4,99 (0,7H) ; 5,54 (0,5H) ; 5,95 (0,2H) ; 6, 17 ( 1H) ; 6,60 (0,5H) ; 7,07 (0,5H) ; 7,20-7,40 (5H) . LC/MS (ESI) : 587,4 ; (calculé ([M + H]+) : 587,8),
Molécule AA9
[000445] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA2 appliqué à la molécule A22 (5,66 g, 9,65 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide du milieu réactionnel est dissout dans le méthanol et évaporé sous pression réduite, l'opération étant répétée 4 fois pour donner une mousse blanche de molécule AA9 sous forme de sel de chlorhydrate.
Rendement : 4,9 g (97 %)
RMN h (DMSO-de, 120 °C, ppm) : 0,89 (3H) ; 1,26 (16H) ; 1 ,43 (2H) ; 1,68 (0,6H) ; 1,75- 2,00 (3H) ; 2,05-2,25 (2,4H) ; 2,82-3,05 (5H) ; 3,38 (2H) ; 3,50-3,70 ( 1,4H ) ; 4,25 (0,6H) ; 4,63 (0,4H) ; 4,77 (0,6H) ; 7,25-7,50 (5H) ;7, 55-8, 20 (4H).
LC/ MS (ESI) : 487,4 ; (calculé ([M + H]+) : 487,7).
Exemple AAIO : molécule AA10
Molécule A23 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B7 et la N- Boc- éthylènediamine
[000446] À une solution de molécule B7 (190,00 g, 583,73 mmol ) à 0 °C dans le DCM (2,9
L) sont ajoutés successivement du HOBt (8,94 g, 58,37 mmol) puis de la BocEDA (112,20 g,
700,00 mmol) en solution dans le DCM (150 mL). De l'EDC (123,10 g, 642,00 mmol) est ajouté puis le mélange est agité 17 h entre 0 °C et température ambiante. Le mélange réactionnel est ensuite lavé avec une solution aqueuse saturée en Na HCC (2x1,5 L), une solution aqueuse de HCl 1 N (2x1,5 L) puis une solution aqueuse saturée en NaCI ( 1,5 L), séché sur Na2S04, filtré et concentré sous pression réduite. Un solide blanc est obtenu après recristallisation dans l'acétonitrile.
Rendement : 256,50 g (93 %)
RMN *H (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 1, 16-1,38 (20H) ; 1,44 (9H) ; 1,56- 1,71 (2H) ; 1 ,78-2,45 (6H) ; 3, 11-3,72 (6H) ; 4,30 (0, 1H) ; 4,51 (0,9H) ; 4,87 (0,1H) ; 5,04 (0,9H) ; 6,87 (0,1H) ; 7,23 (0,9H).
LC/MS (ESI) : 468,0 ; (calculé ([M+ H]+) : 468,4).
Molécule AAIO
[000447] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A23 (256,50 g, 548,43 mmol), un solide blanc de molécule AA10 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu par trituration dans du pentane ( 1,6 L) et séchage sous pression réduite à 40 °C. [000448] Rendement : 220,00 g (99 %)
[000449] RMN H (MeOD-d4, ppm) : 0,90 (3H) ; 1 ,21-1,43 (20H) ; 1 ,54-1,66 (2H) ; 1,85- 2,28 (4H) ; 2,39 (2H) ; 3,00-3, 17 (2H) ; 3,30-3,40 ( 1H) ; 3,43-3,71 (3H) ; 4,29 (0,94H) ; 4,48 (0,061-1).
LC/MS (ESI) : 368,2 ; (calculé ([M+H]+) : 368,3).
Exemple AA11 : molécule AA11
Molécule A24 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B7 et le Boc- l-amino-4,7, 10- trioxa-13-tridécane amine.
[000450] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A23 appliqué à la molécule B7 (24,00 g, 73,73 mmol) et au Boc-l-amino-4,7,10-trioxa-13- tridécane amine (28,35 g, 88,48 mmol), une huile orange de molécule A24 est obtenue. Rendement : 44,50 g (96 %)
RMN 1H (CDCh, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,08-1,56 (20H) ; 1,43 (9H) ; 1,58- 1,67 (2H) ; 1 ,70- 2,00 (6H) ; 2,04-2,41 (4H) ; 3,16-3,77 (18H) ; 4,26-4,29 (0,2H) ; 4,50-4,54 (0,8H) ; 4,68- 5, 10 (1H) ; 6,74 (0,2H) ; 7, 19 (0,8H).
LC/ MS (ESI) : 628,4 ; (calculé ([M+H]+) : 628,5).
Molécule AA11
[000451] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A24 (43,40 g, 69, 12 mmol), un solide blanc de molécule AA11 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après trituration 3 fois dans le diéthyléther, solubilisation du résidu dans l'eau et lyophilisation .
Rendement : 38,70 g (98 %)
RMN 1H (DMSO, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,07-1,38 (20H) ; 1 ,41- 1,52 (2H) ; 1,55-1,66 (2H) ; 1,70-2,02 (6H) ; 2,08-2,30 (2H) ; 2,78-2,87 (2H) ; 3,00-3,16 (2H) ; 3,29-3,66 (14H) ; 4,16- 4,22 (0,65 H) ; 4,25-4,30 (0,35H) ; 7,74 (0,65H) ; 7,86 (3H) ; 8,10 (0,35H).
LC/MS (ESI) : 528,4 ; (calculé ([M+H]+) : 528,4).
Exemple AA12 : molécule AAI 2
Molécule A25 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B4 et la N- Boc- éthylènediamine.
[000452] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A23 appliqué à la molécule B4 (12,00 g, 40,35 mmol) et à la BocEDA (7,76 g, 48,42 mmol), une huile incolore est obtenue et utilisée sans autre purification .
Rendement : 17,40 g (94 %) RM N 1 H (CDCIB, ppm) : 0,86 (3H) ; 1, 11-1,68 ( 18H) ; 1,41 (9H) ; 1,80-2,38 (6H) ; 3,06- 3,35 (4H) ; 3,37-3,49 ( 1H) ; 3,51-3,73 ( 1H) ; 4,26-4,31 (0, 1H) ; 4,45-4,52 (0,9H) ; 4,91- 5, 19 (1H) ; 6,97 (Q, 1H) ; 7,23 (0,9H). LC/MS (ESI) : 440,4 (calculé ([M + H]+) : 440,3).
Molécule AAI 2
[000453] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A25 (8,85 g, 20, 13 mmol), un solide blanc de molécule AA12 est obtenu après lavage basique, concentration sous pression réduite puis recristallisation dans l'acétonitrile.
Rendement : 6,53 g (96 %)
RMN 1H (DMSO, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,07-1,56 (20H) ; 1,68-2,03 (4H) ; 2,09-2,29 (2H) ; 2,50-2,58 (2H) ; 2,96-3,11 (2H) ; 3,21-3,59 (2H) ; 4,17-4,21 (0,65H) ; 4,25-4,29 (0,35H) ; 7,68 (0,65H) ; 8,00 (0,35H)
LC/MS (ESI) : 340,3 ; (calculé ([M + H]+) : 340,3).
Exemple AA13 : molécule AA13
Molécule A26 : Produit obtenu par couplage entre la molécule B1 et la /V-Boc-éthylènediamine.
[000454] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A23 appliqué à la molécule B1 (30,00 g, 111,36 mmol) et à la BocEDA(21 ,41 g, 133,64 mmol), un solide blanc est obtenu après recristallisation dans l'acétonitrile.
Rendement : 34,90 g (76 %)
RMN 1H (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,10-1,70 ( 14H) ; 1,43 (9H) ; 1,80- 1,91 (1H) ; 1,92- 2,01 (1H) ; 2,04-2,42 (4H) ; 3,13-3,70 (6H) ; 4,27-4,31 (0, 15H) ; 4,47-4,53 (0,85H) ; 4,83 (0,15H) ; 5 ,02 (0,85H) ; 6,85 (0, 15H) ; 7,21 (0,85H).
LC/ MS (ESI) : 412,2 ; (calculé ([M + H]+) : 412,3).
Molécule AA13
[000455] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A26 (34,90 g, 84,79 mmol), un solide blanc de molécule AA13 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après solubilisation dans un mélange
DCM/acétonitrile et concentration sous pression réduite.
Rendement : 29,50 g (99 %)
RMN 1 H (DMSO, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,07-1,61 (14H) ; 1,70-2,06 (4H) ; 2,10-2,35 (2H) ; 2,76-2,87 (2H) ; 3,24-3,47 (3,25H) ; 3,56-3,64 (0,75H) ; 4,13-4,19 (0,75H) ; 4,31-4,36 (0,25H) ; 8,05-8,36 (3,75H) ; 8,50 (0,25H).
LC/ MS (ESI) : 312,2 ; (calculé ([M+H]+) : 312,3). Exemple AA14 : molécule AA14
Molécule A27 : Produit obtenu par hydrogénation du phytol .
[000456] À une solution de phytol (30,00 g, 101,20 mmol) dans le THF (450 mL) sous argon est ajouté de l'oxyde de platine (PtÜ2, 1, 15 g, 6,61 mmol) et le milieu est placé sous 1 bar de dihydrogène puis agité pendant 4 h à température ambiante. Après filtration sur célite en rinçant au THF, une huile noire de molécule A27 est obtenue après concentration sous pression réduite.
Rendement : 29,00 g (96 %)
RMN *H (CDCh, ppm) : 0,84 (6H) ; 0,86 (6H) ; 0,89 (3H) ; 1,00-1,46 (22H) ; 1,46- 1,68 (3H) ; 3,61-3,73 (2H).
Molécule A28 : Produit obtenu par oxydation de la molécule A27
[000457] À une solution de molécule A27 (29,0 g, 97,13 mmol) dans un mélange dichloroéthane/eau (485 m L/388 mL) sont ajoutés successivement du bromure de tétrabutylammonium (16,90 g, 52,45 mmol), de l'acétide acétique ( 150 mL, 2,62 mol) puis du KMn04 (46,05 g, 291,40 mmol) par petites fractions en maintenant la température entre
16 et 19 °C. Le milieu réactionnel est ensuite agité pendant 4 h 30 au reflux, refroidi à 10 °C puis acidifié jusqu'à pH 1 avec une soluition de HCl 6 N (20 mL). Du a2SC (53,90 g) est ajouté progressivement en maintenant la température à 10 °C et le milieu est agité jusqu'à décoloration complète. De l'eau (200 mL) est ajoutée, les phases sont séparées et la phase aqueuse est extraite au DCM (2 x 400 mL). Les phases organiques combinées sont lavées par une solution aqueuse de HCl à 10 % (20 mmL), de l'eau (2 x 200 mL), une solution aqueuse saturée en NaCI (200 mL), séchées sur Na2S04, filtrées et concentrées sous pression réduite.
Une huile jaune de molécule A28 est obtenue après purification par chromatographie flash
(éluant : cyclohexane, AcOEt) .
Rendement : 28,70 g (94 %)
RMN !H (CDCh, ppm) : 0,84 (6H) ; 0,86 (6H) ; 0,97 (3H) ; 1,00-1,41 (20H) ; 1,52 (1H) ; 1,96 (1 H) ; 2,14 ( 1H) ; 2,35 ( 1H) ; 11,31 (1H).
LC/MS (ESI) : 311, 1 (calculé ([M-H]-) : 311,3) .
Molécule A29 : Produit obtenu par couplage entre la molécule A28 et la L-prolinate de méthyle.
[000458] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule A28 ( 18,00 g, 57,59 mmol) et au chlorhydrate de L-prolinate de méthyle (14,31 g, 86,39 mmol), une huile jaune de molécule A29 est obtenue après lavage de la phase organique par une solution aqueuse saturée en NaHCC (2 x 150 mL), une solution aqueuse de HCl à 10 % (2 x 150 mL), une solution aqueuse saturée en NaCI (2 x 150 mL), puis séchage sur Na2S04, filtration et concentration sous pression réduite.
Rendement : 23,20 g (95 %)
RMN !H (DMSO-de, ppm) : 0,78-0,89 (15H) ; 0,97-1,43 (20H) ; 1,43-1,56 ( 1H) ; 1 ,70- 1,96 (4H) ; 1 ,96-2,32 (3H) ; 3,33-3,56 (2H) ; 3,59 (0,6H) ; 3,67 (2,4H) ; 4,27 (0,8H) ; 4,57 (0,2H).
LC/ MS (ESI) : 424,4 (calculé ([M + H]+) : 424,4) .
Molécule A3Û : Produit obtenu par la saponification de la molécule A29.
[000459] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A21 appliqué à la molécule A29 (21,05 g, 49,68 mmol), une huile jaune de molécule A30 est obtenue.
Rendement : 20,40 g (99 %)
RMN *H (DMSO-de, ppm) : 0,77-0,91 ( 15H) ; 0,97-1,43 (20H) ; 1,43-1,56 ( 1H) ; 1,67- 1,96 (4H) ; 1,96-2,29 (3H) ; 3,26-3,56 (2H) ; 4,20 (0,8H) ; 4,41 (0,2H) .
LC/ MS (ESI) : 410,3 (calculé ([M + H]+) : 410,4).
Molécule A31 : Produit obtenu par le couplage entre la molécule A30 et le Boc- l-amino- 4,7, 10-trioxa- 13-tridécane amine.
[000460] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A23 appliqué à la molécule A30 (8,95 g, 21 ,85 mmol) et au Boc-l-amino-4,7,10-trioxa-13- tridécane amine (8,40 g, 26,21 mmol), une huile incolore de molécule A31 est obtenue après purification par chromatographie flash (éluant : DCM, AcOEt, méthanol).
Rendement : 10,08 g (65 %)
RMN !H (DMSO-de, ppm) : 0,78-0,89 ( 15H) ; 0,97- 1,43 (29H) ; 1,43-1,55 ( 1H) ; 1 ,55-1,66 (4H) ; 1,71-2,30 (7H) ; 2,95 (2H) ; 3,00-3,19 (2H) ; 3,34-3,58 ( 14H) ; 4,17-4,29 (1H) ; 6,30-6,79 (1H) ; 7,67 (0,65H) ; 8,00 (0,35H).
LC/ MS (ESI) : 712,6 (calculé ([M + H]+) : 712,6).
Molécule AA14
[000461] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI appliqué à la molécule A31 (10,08 g, 14, 16 mmol), le résidu obtenu après concentration sous pression réduite est solubilisé dans le DCM (200 mL), la phase organique est lavée par une solution aqueuse de NaOH 2 N (2 x 100 mL), séchée sur a2S04, filtrée et concentrée sous pression réduite. Une huile incolore de molécule AA14 sous forme d'amine neutre est obtenue. Rendement : 8,23 g (95 %) RMN *H (DMSO-de, ppm) : 0,78-0,89 (15H) ; 0,97-1,43 (20H) ; 1,43-1 ,69 (6H) ; 1,69-2,30 (8H) ; 2,56 (2H) ; 2,99-3,19 (2H) ; 3,31-3,58 ( 14H) ; 4,15-4,29 (1H) ; 7,70 (0,65H) ; 8,04 (0,3514).
LC/MS (ESI) : 612,5 (calculé ([M + H]+) : 612,5).
Exemple AA15 : molécule AA15
[000462] La molécule AAI 5 est obtenue par la méthode conventionnelle de synthèse peptidique en phase solide (SPPS) sur résine 2-chlorotrityle.
[000463] À une solution de 4,7, 10-trioxa-l, 13-tridécanediamine (TOTA, 10,87 mL, 49,60 mmol) dans du DCM (50 mL) est ajoutée de la DIPEA (8,64 mL, 49,60 mmol). Cette solution est ensuite versée sur de la résine 2-chlorotrityle (4,00 g , 1,24 mmol/g) préalablement lavée au DCM dans un réacteur adapté à la SPPS. Après 2 h d'agitation à température ambiante, du méthanol (0,8 mL/g, 3,2 mL) est ajouté et le milieu est agité pendant 15 min. La résine est filtrée, lavée successivement avec du DCM (3 x 50 mL), du DMF (2 x 50 mL), du DCM (2 x 50 mL), de l'isopropanol (1 x 50 mL) et du DCM (3 x 50 mL). Les acides aminés protégés
/V-Fmoc-L-glycine et N-Fmoc-L-proline puis l'acide palmitique (3 équivalents) sont couplés successivement en utilisant le l-[bis(diméthylamino)methylène]-lH-l,2,3-triazolo[4,5- bjpyridinium 3-oxide hexafluorophosphate (HATU, 3 équivalents) comme agent de couplage en présence de DIPEA (6 équivalents) dans un mélange DCM/DMF 1 : 1. Une solution de pipéridine à 20 % dans le DMF est utilisée pour les étapes de clivage du groupe protecteur
Fmoc. La résine est lavée par du DCM, du DMF et de l'isopropanol après chaque étape de couplage et de déprotection. Le clivage du produit de la résine est effectué en utilisant un mélange TFA/DCM 1 : 1. Les solvants sont évaporés sous pression réduite, le résidu est solubilisé dans du DCM (50 mL) et la phase organique est lavée avec une solution aqueuse de NaOH 1 N (1 x 50 mL) puis une solution saturée de NaCI (2 x 50 mL) . Après séchage sur a2SÜ4, la phase organique est filtrée, concentrée sous pression réduite et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (dichlorométhane, méthanol, NH4OH).
Rendement : 1,65 g (54 % global sur 7 étapes).
RMN (CDCb, ppm) : 0,88 (3H) ; 1 ,18-2,39 (38H) ; 2,79 (2H) ; 3,23-3,44 (2H) ; 3,47-3,69 ( 14H) ; 3,76 (0,92H) ; 3,82 (0,08H) ; 3,98 (0,08H) ; 4,03 (0,92H) ; 4,34 (0,08H) ; 4,39 (0,92H) ; 7,00-7,40 (2H).
LC/ MS (ESI) : 613,7 ; (calculé ([M + H]+) : 613,5) .
Exemple AA16 : molécule AA16
[000464] Par un procédé de SPPS similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule
AA15 et en utilisant de la /V-Fmoc-L-phénylalanine (3 équivalents) à la place de la N-Fmoc-L- glycine, la molécule AA16 est obtenue sous forme d'une huile jaune.
Rendement : 14,07 g (69 %) RMN !H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,19-1,34 (24H) ; 1,41-1,61 (2H) ; 1,68-2,28 ( 12H) ; 2,84 (2H) ; 3,14 (2H) ; 3,23-3,67 ( 16H) ; 4,19-4,25 (0, 1H) ; 4,38-4,45 (0,9H) ; 4,59-4,69 (1H) ; 6,86 ( 1 H) ; 7,03 ( 1H) ; 7, 12-7,30 (5H).
LC/MS (ESI) : 703,5 ; (calculé ([M+H]+) : 703,5).
Exemple AA17 : molécule AA17
Par un procédé de SPPS similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA15 et en utilisant du EDA (30,48 mL, 0,456 mol) à la place du TOTA, la molécule AA17 est obtenue sous forme d'un solide blanc.
Rendement : 9,19 g (89 %)
RMN Ή (MeOD-d4, ppm) : 0,90 (3H) ; 1,22-1,43 (24H) ; 1,55-1,67 (2H) ; 1 ,91-2,04 (2H) ; 2,04-2,15 (1H) ; 2,17-2,29 (1H) ; 2,39 (2H) ; 2,69-2,82 (2H) ; 3,25-3,36 (2H) ; 3,58-3,70 (2H) ; 3,70-3,97 (2H) ; 4,25-4,34 (0,9H) ; 4,44-4,50 (0,1H).
LC/ MS (ESI) : 453,3 ; (calculé ([M + H]+) : 453,4) .
Exemple AA1S : molécule AA1S
Par un procédé de SPPS similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AAI 5 et en utilisant successivement de l'éthylènediamine (20 équivalents), de la /V-Fmoc-L-phénylalanine (1,5 équivalents) et la molécule B7 ( 1,5 équivalents), la molécule AA18 est obtenue sous forme d'un solide blanc.
Rendement : 12,76 g (85 %)
RMN !H (MeOD-d4, ppm) : 0,90 (3H) ; 1,14-1 ,65 (22H) ; 1,73-2,41 (6H) ; 2,56-2,70 (2H) ; 2,91-3,26 (4H) ; 3,41-3,63 (2H) ; 4,30 (0,8H) ; 4,39 (0,2H) ; 4,53 (0,8H) ; 4,61 (0,2H) ; 7,19-7,31 (5H).
LC/MS (ESI) : 515,4 ; (calculé ([M+H]+) : 515,4).
AB : Synthèse des co-polyaminoacides
Co-polyaminoacides statistiques de formule VII ou Vlla
Figure imgf000080_0001
Figure imgf000081_0001
Figure imgf000082_0001
Figure imgf000083_0001
Figure imgf000084_0001
Figure imgf000085_0001
Figure imgf000086_0001
Figure imgf000087_0001
Figure imgf000088_0001
Figure imgf000089_0001
Figure imgf000090_0001
Figure imgf000091_0001
Figure imgf000092_0001
Figure imgf000093_0001
Figure imgf000094_0001
Tableau lb Liste des co-polyaminoacides synthétisés selon l’invention
Co-polyaminoacides de formule VII ou Vllb :
Figure imgf000094_0002
Figure imgf000095_0001
Figure imgf000096_0001
Figure imgf000097_0001
Tableau le : Liste des co-polyaminoacides synthétisés selon l'invention. Partie AB : synthèse des co-polyaminoacides
Exemple AB1 : Co-polyaminoacide AB1 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2900 g/mol
Co-polvaminoacide AB1-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3861 g/mol issu de la polymérisation du y-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride initiée par l'hexylamine
[000465] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y-benzyl- L-glutamate N-ca rboxya n hyd ri de (89,9 g, 341 mmol) pendant 30 min, puis du DMF anhydre (200 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (2,05 mL 15,5 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 65 °C pendant 2 h, refroidi à température ambiante puis coulé goutte- à-goutte dans du diisopropyléther (3 L) sous agitation . Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec du diisopropyléther (2 x 200 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L-glutamique) (PBLG).
[000466] À une solution de PBLG (74,8 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 340 mL) à 4
°C est ajoutée goutte-à-goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans l'acide acétique (240 mL, 1,37 mol). Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h, puis coulé goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 mL) puis avec de l'eau (340 mL) .
[000467] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau ( 1,5 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2, 1 L.
[000468] La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée jusqu'à obtenir un volume final de 1,8 L.
[000469] La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37 % jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (2 x 340 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L- glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3861 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG).
Co-polyaminoacide AB1
[000470] Le co-polyaminoacide AB1-1 ( 10,0 g) est solubilisé dans le DMF (700 mL) à 30- 40 °C puis refroidi à 0 °C. La molécule AAI sous forme de sel de chlorhydrate (1,64 g, 3,8 mmol) est mise en suspension dans du DMF (23 mL) et de la triéthylamine (0,39 g, 3,8 mmol) est ensuite ajoutée et le mélange est légèrement chauffé sous agitation jusqu'à complète dissolution. À la solution de co-polyaminoacide à 0 °C, de la N-méthylmorpholine (NMM, 7,6 g, 75 mmol) dans le DMF ( 14 mL) et du chloroformate d'éthyle (ECF, 8,2 g, 75 mmol) sont ajoutés. Après 10 min à 0 °C, la solution contenant la molécule AAI est ajoutée et le milieu maintenu à 30 °C durant 2 h. Le milieu réactionnel est coulé goutte-à-goutte sur 5,5 L d'eau contenant du NaCI à 15 % massique et du HCl (pH 2), puis laissé reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration et séché sous vide pendant environ 30 min. Le solide blanc obtenu est repris dans de l'eau (500 mL) et le pH est ajusté à 7 par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N. Après filtration sur filtre 0,45 pm, la solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. Après déchargement, la solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C.
Extrait sec : 24,9 mg/g
[000471] Un degré de polymérisation moyen (DP) de 23 est estimé par RMN 1H dans D O en comparant l'intégration des signaux provenant de l 'hydrophobe greffé à celle des signaux provenant de la chaîne principale.
D'après la RMN 1H : i = 0,05 [000472] La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB1 est calculée sur la base des masses molaires des radicaux Ri et R2, des résidus aspartate et/ou glutamate (y compris une liaison amide), du radical hydrophobe, du DS et du DP.
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB1 est de 3945 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2900 g/mol .
Exemple AB2 : Co-polyaminoacide AB2 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3700 g/mol
[000473] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AAI (1,64 g, 3,8 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de Mn relative 5200 g/mol ( 10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI est obtenu.
Extrait sec : 14,1 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 35
D'après la RM
Figure imgf000099_0001
0,05
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB2 est de 5972 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3700 g/mol.
Exemple AB3 : Co-polyaminoacide AB3 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4900 g/mol
[000474] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AAI (3,30 g, 7,6 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse moyenne en nombre (Mn) relative 5200 g/mol (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI est obtenu.
Extrait sec : 23,4 mg/g
DP (estimé d'après la RMN CH) : 35
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB3 est de 6594 g/mol .
D'après la RMN ^ : \ = 0,10
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4900 g/mol.
Exemple AB4 : Co-polyaminoacide AB4 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 1800 g/mol
[000475] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA2 ( 1,09 g, 2,4 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse moyenne Mn = 5600 g/mol (6,3 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1 mais avec une étape de déprotection des esters benzyliques utilisant l'iodure de triméthylsilane selon le protocole décrit dans la publication J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 26-34 (Subramanian G. , et al .), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA2 est obtenu.
Extrait sec : 21 ,5 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000100_0001
: 35
D'après la RM
Figure imgf000100_0002
0,052
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB4 est de 6022 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 1800 g/mol .
Exemple AB5 : Co-polyaminoacide AB5 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2600 g/mol
[000476] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (2,06 g, 3,8 mmol) et à un acide poly-L-glutamique (9,8 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA6 est obtenu .
Extrait sec : 20,9 mg/g
DP (estimé d' MN :H) : 23
D'après la RM
Figure imgf000100_0003
0,05
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB5 est de 4079 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2600 g/mol .
Exemple AB6 : Co-polyaminoacide AB6 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4000 g/mol
[000477] Un acide poly-L-glutamique de masse moyenne Mn = 3500 g/mol et de degré de polymérisation 22 (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1 est solubilisé dans le DMF (420 mL) à 30-40 °C puis maintenu à cette température. En parallèle, le sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (1,47 g, 2,3 mmol) est mis en suspension dans du DMF (12 mL) et de la triéthylamine (0,23 g, 2,3 mmol) est ajoutée, puis le mélange est légèrement chauffé sous agitation jusqu'à complète dissolution. À la solution de co-polyaminoacide dans le DMF, de la NMM (7,6 g, 75 mmol), la solution de AA7 puis de la N- oxyde de 2-hydroxypyridine (HOPO, 0,84 g, 7,5 mmol) sont ajoutées successivement. Le milieu réactionnel est alors refroidi à 0 °C, puis du EDC (1,44 g, 7,5 mmol) est ajouté et le milieu est remonté à température ambiante durant 2 h. Le milieu réactionnel est filtré sur filtre tissé 0,2 mm et coulé au goutte-à-goutte sur 3,5 L d'eau contenant du NaCI à 15 % massique et du HCl (pH 2) sous agitation . À la fin de l'ajout, le pH est réajusté à 2 avec une solution de HCl 37 %, et la suspension est laissée reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration, puis rincé par 100 mL d'eau . Le solide blanc obtenu est solubilisé dans 500 mL d'eau par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N jusqu'à pH 7 sous agitation, puis la solution est filtrée sur filtre 0,45 pm. La solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C.
Extrait sec : 21,6 mg/g
DP (estimé d' MN XH) : 20
D'après la RM
Figure imgf000101_0001
0,025
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB6 est de 3369 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4000 g/mol .
Exemple AB7 : Co-polyaminoacide AB7 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 g/mol
Co-polvaminoactde AB7- 1 i acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3600 g/mol et de DP 21 issu de la polymérisation du g-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride initiée par l'hexylamine et cappé à l'une de ses extrémités par un groupement acétyle
[000478] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y-benzyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride (Glu(OBn)-NCA, 100,0 g, 380 mmol) pendant 30 min puis du DMF anhydre (225 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine ( 1,78 g, 17 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours puis précipité dans du diisopropyléther (3,4 L). Le précipité est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (225 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissout dans 450 mL de THF. À cette solution sont ajoutés successivement de la DIPEA, (31 mL, 176 mmol) puis de l'anhydride acétique ( 17 mL, 176 mmol) . Après une nuit d'agitation à température ambiante, la solution est versée lentement dans du diisopropyléther (3 L) sous agitation . Après 1 h d'agitation, le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (250 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma -benzyl-L- glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle.
[000479] À une solution du co-polyaminoacide ci-dessus (72 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 335 mL) à 4 °C est ajoutée goutte-à-goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans l'acide acétique (235 mL) . Le mélange est agité à température ambiante pendant 3 h 30, puis coulé goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 mL) puis avec de l'eau (340 mL). [000480] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau ( 1,5 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10N puis une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la solution est diluée par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2,1 L. La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée jusqu'à obtenir un volume final de 1,8 L.
[000481] La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhyd rique 37 % jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (330 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3600 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG), et de degré moyen de polymérisation 21.
Co-polyaminoacide AB7 :
[000482] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA 7 (1,43 g, 2,2 mmol) et au co- polyaminoacide AB7-1 ( 10,0 g), un acide poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 est obtenu .
Extrait sec : 24,3 mg/g
DP (estimé d'après la RMN
Figure imgf000102_0001
: 21
D'après la RMN Ή : i = 0,03
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB7 est de 3677 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol.
Exemple AB8 : Co-polyaminoacide AB8 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3600 g/mol
Co-polvaminoacide AB8-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3800 g / mol et de degré de polymérisation 24 issu de la polymérisation du y-méthyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride initiée par l'ammoniac
[000483] Par un procédé similaire à celui décrit dans la demande de brevet FR-A-2 801 226 appliqué au g-méthyl-L-acide glutamique /V-ca rboxya n hyd ri de (25,0 g, 133,6 mmol) et à une solution d'ammoniaque 0,5 N dans le dioxane ( 12,1 mL, 6,05 mmol), un acide poly-L- glutamique est obtenu. Co-polyaminoacide AB8 :
[000484] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (2,1 g, 3,24 mol) et au co- polyaminoacide AB8-1 ( 14,3 g), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 est obtenu.
Extrait sec : 25,2 mg/g
DP (estimé d'après la RMN XH) : 24
D'après la RMN H : i = 0,03
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB8 est de 4099 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3600 g/mol.
Exemple AB9 : Co-polyaminoacide AB9 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3200 g/mol
[000485] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA3 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA3 est obtenu.
Extrait sec : 14,7 mg/g
DP (estimé d' MN *H) : 30
D'après la RM
Figure imgf000103_0001
0, 12
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB9 est de 6192 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3200 g/mol.
Exemple ABIO : Co-polyaminoacide ABIO - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2600 g/mol
[000486] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB7 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA4 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA4 est obtenu.
Extrait sec : 18,3 mg/g
DP (estimé d' MN 'Ή) : 25
D'après la RM
Figure imgf000103_0002
0,08
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB10 est de 4870 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2600 g/mol. Exemple ABU : Co-polyaminoacide ABU - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA5 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2700 g/mol
[000487] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA5 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA5 est obtenu.
Extrait sec : 20,2 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000104_0001
: 23
D'après la RM
Figure imgf000104_0002
0,05
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide ABU est de 4072 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2700 g/mol.
Exemple AB12 : Co-polyaminoacide AB12 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA8 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3000 g/mol
[000488] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA8 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA8 est obtenu.
Extrait sec : 19,5 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 26
D'après la RM
Figure imgf000104_0003
0,04
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB12 est de 4477 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3000 g/mol.
Exemple AB13 : Co-polyaminoacide AB13 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA9 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 g/mol
[000489] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA9 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1- 1 en utilisant l'isoamylamine comme initiateur en place de l'hexylamine, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA9 est obtenu.
Extrait sec : 22,3 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000104_0004
: 35
D'après la RM
Figure imgf000104_0005
0,12
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB13 est de 7226 g/mol . HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol.
Exemple AB21 : Co-polyaminoacide AB21 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3400 g/mol
[000490] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (2,44 g, 2,4 mmol) et à un acide poly-L-glutamique ( 10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 est obtenu.
Extrait sec : 22,7 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 22
D'après la RM
Figure imgf000105_0001
0,056
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB21 est de 4090 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3400 g/mol .
Exemple AB22 : Co-polyaminoacide AB22 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule AAIO et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4000 g/mol
[000491 ] Le sel de chlorhydrate de la molécule AA10 (4,56 g, 11,29 mmol) est mis en solution dans du chloroforme (60 mL) et de la triéthylamine ( 1,14 g, 11,29 mmol) est ajoutée. À une solution de co-polyaminoacide ( 10,0 g, 75,3 mmol) obtenu selon un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide B7- 1 dans le DMF (420 mL), de la NMM (7,6 g, 75,26 mmol), puis de la HOPO (2,51 g, 22,58 mmol) sont ajoutées successivement. Le milieu réactionnel est alors refroidi à 0 °C, puis du EDC (4,33 g, 22,58 mmol) est ajouté, le milieu est agité 1 h à 0 °C puis la solution de molécule AA10 est ajoutée. Le mélange réactionnel est agité durant 2 h entre 0 °C et température ambiante. Le milieu réactionnel est filtré sur filtre tissé 0,2 mm et coulé au goutte-à-goutte sur 3,95 L d'eau contenant du NaCI à 15 % massique et du HCl (pH 2) sous agitation . À la fin de l'ajout, le pH est réajusté à 2 avec une solution de HCl 37 %, et la suspension est laissée reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration, puis solubilisé dans 780 mL d'eau par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N jusqu'à pH 7 sous agitation . Après filtration sur filtre 0,45 pm, la solution est diluée par addition d'eau puis de l'acétone est ajoutée pour obtenir une solution contenant 30 % massique d'acétone. Cette solution est filtrée sur filtre de charbon actif puis l'acétone est distillée (40 °C, 100 mbar). Après filtration sur filtre 0,45 pm, le produit est purifié par ultrafiltration contre une solution aqueuse de NaCI à 0,9 %, une solution de tampon carbonate (150 mM), une solution aqueuse de NaCI à 0,9 %, une solution de tampon phosphate ( 150 mM), une solution aqueuse de NaCI à 0,9 %, puis de l 'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm . La solution est ensuite concentrée, filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C.
Extrait sec : 19,7 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 38
D'après la RM
Figure imgf000106_0001
0, 16
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB22 est de 7877 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4000 g/mol .
Exemple AB23 : Co-polyaminoacide AB23 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 7600 g/mol
Co-polvaminoacide AB23- 1 : acide poly-L-glutamique issu de la polymérisation du y-benzyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride initiée par l'hexylamine et cappé à l'une de ses extrémités par un groupement pyroglutamate
[000492] Un acide poly-L-glutamique (20,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1 est solubilisé dans le DMF à 80 °C puis maintenu à cette température. Après 24 h, le milieu réactionnel est coulé dans une solution de NaCI à 15 % et à pH 2. Après 4 h, le solide blanc est collecté par filtration, rincé à l'eau, puis séché sous vide à 30 °C.
[000493]
Co-polyamïnoamide AB23
[000494] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB22 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA10 (2,742 g, 6,79 mmol) et au co- polyaminoacide AB23- 1 (9,0 g), un acide poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 est obtenu.
Extrait sec : 21 ,9 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000106_0002
: 60
D'après la RM
Figure imgf000106_0003
0,1
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB23 est de 11034 g/mol .
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 7600 g/mol .
Exemple AB24 : Co-polyaminoacide AB24 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAIO et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4300 g/mol
[000495] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA10 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 est obtenu . Extrait sec : 22,9 mg/g
DP (estimé d'après la RMN
Figure imgf000107_0001
: 39
D'après la RMN Ή : i = 0, 15
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB24 est de 7870 g/mol, HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4300 g/mol .
Exemple AB25 : Co-polyaminoacide AB25 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAIO et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4200 g/mol
[000496] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA10 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à cel ui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 est obtenu .
Extrait sec : 25,9 mg/g
DP (estimé d'après la RMN 1H) : 39
D'après la RMN XH : i = 0,2
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB25 est de 8509 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4200 g/mol.
Exemple AB26 : Co-polyaminoacide AB26 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAIO et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2700 g/mol
[000497] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA10 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 est obtenu.
Extrait sec : 23,9 mg/g
DP (estimé d'après la RMN *H) : 22
D'après la RMN XH : i = 0,21
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB26 est de 4899 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 2700 g/mol.
Exemple AB27 : Co-polyaminoacide AB27 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA11 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4500 g/mol
[000498] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA11 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA11 est obtenu.
Extrait sec : 26,8 mg/g
DP (estimé d'après la RMN 1H) : 39
D'après la RM :H : i = 0,15
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB27 est de 8808 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4500 g/mol.
Exemple AB28 : Co-polyaminoacide AB28 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI 2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4000 g/mol
[000499] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA12 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA12 est obtenu .
Extrait sec : 22,9 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000108_0001
: 39
D'après la RM
Figure imgf000108_0002
0,15
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB28 est de 7706 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4000 g/mol.
Exemple AB29 : Co-polyaminoacide AB29 - poly- L-g I uta m ate de sodium modifié par la molécule AA13 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4000 g/mol
Co-polvaminoacide AB29-1 : acide poly-L-glutamique issu de la polymérisation du y-benzyl- L-glutamate N-ca rboxya n hydri de initiée par l'hexylamine
[000500] Dans un réacteur à double enveloppe, du g-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride (500 g, 1,90 mol) est solubilisé dans du DMF anhydre (1100 mL). Le mélange est alors agité jusqu'à complète dissolution, refroidi à 0 °C, puis de l'hexylamine (6,27 mL, 47,5 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité à 0 °C pendant 5 h, entre 0 °C et 20 °C pendant 7 h, puis à 20 °C pendant 7 h. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 65 °C pendant 2 h, refroidi à 55 °C et du méthanol (3300 mL) est introduit en 1 h 30. Le mélange réactionnel est alors refroidi à 0 °C et laissé sous ag itation pendant 18 h. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé au diisopropyléther (2 x 800 mL) puis séché sous pression réduite à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L-glutamique) (PBLG). [000501] À une solution de PBLG ( 180 g) dans du L/,/V-diméthylacétamide (DMAc, 450 mL) est ajouté du Pd/AbCb (36 g) sous atmosphère d'argon. Le mélange est placé sous atmosphère d'hydrogène (10 bar) et agité à 60 °C pendant 24 h. Après refroidissement à température ambiante et filtration du catalyseur sur fritté P4 puis sur membrane Omnipore 0,2 mGh PTFE hydrophile, une solution d'eau à pH 2 (2700 mL) est coulée goutte-à-goutte sur la solution de DMAc, sur une période de 45 min et sous agitation . Après 18 h sous agitation, le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec de l'eau puis séché sous pression réduite à 30 °C
Co-polyaminoacide AB29
[000502] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA13 et au co-polyaminoacide AB29-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAI 3 est obtenu.
Extrait sec : 16,1 mg/g
DP (estimé d'après la RMN 1H) : 40
Figure imgf000109_0001
0, 15
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB29 est de 7734 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4000 g/mol.
Exemple AB30 : Co-polyaminoacide AB30 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAIO et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4300 g/mol
[000503] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB29 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA10 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB29- 1 en utilisant la molécule AA10 comme initiateur en place de l'hexylamine, un poly-L- glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 est obtenu.
Extrait sec : 29,2 mg/g
DP (estimé d'après la RMN 1H) : 40
D'après la RMN JH : i = 0, 125
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB30 est de 7682 g/mol .
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4300 g/mol.
Exemple AB31 : Co-polyaminoacide AB30 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AAIO et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6300 g/mol
[000504] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB29 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA10 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB29- 1 en utilisant la molécule AA10 comme initiateur en place de l'hexylamine, un poly-L- glutamate de sodium modifié par la molécule AA10 est obtenu.
Extrait sec : 23,1 mg/g
DP (estimé d' MN XH) : 40
D'après la RM
Figure imgf000110_0001
0, 175
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB31 est de 8337 g/mol .
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 6300 g/mol.
Exemple AB32 : Co-polyaminoacide AB32 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA14 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4700 g/mol
[000505] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB29 appliqué à la molécule AA14 et à l'acide poly-L-glutamique AB29-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA14 est obtenu .
Extrait sec : 13,5 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 40
D'après la RM
Figure imgf000110_0002
0,109
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB32 est de 8599 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4700 g/mol.
Exemple AB38 : co-polyaminoacide AB38 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA18 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4700 g/mol
[000506] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB29 appliqué à la molécule AA18 et à l'acide poly-L-glutamique AB29-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA18 est obtenu.
Extrait sec : 25 mg/g
DP (estimé d'après la RMN 1H) : 40
D'après la RMN CH : i = 0,15
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB38 est de 8954 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 4700 g/mol . Co-polyaminoacides de formule VII ou Vllb
Exemple AB14 : Co-polyaminoacîde AB14 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AAI et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3400 g/mol
[000507] Dans un contenant adapté sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molécule AAI (2,03 g, 4,70 mmol), du chloroforme (5 mL), du tamis moléculaire 4 Â ( 1,3 g), ainsi que de la résine échangeuse d'ion Amberlite IRN 150 ( 1,3 g). Après 1 h d'agitation sur rouleaux, le milieu est filtré et la résine est rincée avec du chloroforme. Le mélange est évaporé puis co-évaporé avec du toluène. Le résidu est solubilisé dans du DMF anhydre (30 mL) pour être utilisé directement dans la réaction de polymérisation.
[000508] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du y-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride (25,59 g, 97,2 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre ( 140 mL) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la solution de molécule AAI préparée comme décrit précédemment est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours, puis chauffé à 65 °C pendant 2 h . Le mélange réactionnel est alors refroidi à température ambiante puis versé goutte-à-goutte dans du diisopropyléther (1,7 L) sous agitation. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther ( 140 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour obtenir un solide blanc. Le solide est dilué dans du TFA ( 160 mL), et une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans de l'acide acétique (62 mL, 354 mmol) est alors ajoutée goutte-à-goutte et à 0 °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther/eau et sous agitation (1,9 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (280 mL) puis avec de l'eau ( 140 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (530 mL) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 800 mL. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm . La solution de co- polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7,0. La solution aqueuse est filtrée sur 0,2 pm et conservée à 4 °C.
Extrait sec : 24,1 mg/g
DP (estimé par RMN ^) = 25 donc i = 0,04
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB14 est de 3378 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3400 g/mol. Exemple AB15 : Co-polyaminoacide AB15 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) 4100 g/mol
[000509] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (2,16 g, 3,94 mmol) et à 25,58 g (97,2 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 est obtenu .
Extrait sec : 45,5 mg/g
DP (estimé par RM N ^) = 30 donc i = 0,033
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB15 est de 5005 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4100 g/mol .
Exemple AB16 : Co-polyaminoacide AB16 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6500 g/mol
[000510] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (2,39 g, 4,36 mmol) et à 50,0 g (189,9 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 est obtenu.
Extrait sec : 28,5 mg/g
DP (estimé par RMN 1H) = 48 donc i = 0,021
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB16 est de 7725 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (cal ibrant PEG) : Mn = 6500 g/mol .
Exemple AB17 : Co-polyaminoacide AB17 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3500 g/mol
[000511] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (2,80 g, 4,32 mmol) et à 25,0 g (94,9 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 est obtenu.
Extrait sec : 25,2 mg/g
DP (estimé par RMN ^) = 26 donc i = 0,038
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB17 est de 4500 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3500 g/mol . Exemple AB18 : Co-polyaminoacide AB18 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3700 g/mol
[000512] Un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 est obtenu par polymérisation du g-méthyl /V-carboxyanhydride d'acide glutamique (25,0 g, 133,6 mmol) en utilisant le sel chlorhydrate de la molécule AA7 (2,80 g, 4,32 mmol) comme initiateur et en effectuant une déprotection des esters méthyliques par utilisation d'une solution d'acide chlorhydrique à 37 % selon le procédé décrit dans la demande de brevet FR- A-2 801 226.
Extrait sec : 44,3 mg/g
DP (estimé par RMN
Figure imgf000113_0001
= 22 donc i = 0,045
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB18 est de 3896 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3700 g/mol.
Exemple AB19 : Co-polyaminoacide AB19 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 10500 g/mol
[000513] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 ( 1,64 g, 2,99 mmol) et au y-benzyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride (49,3 g, 187 mmol), un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 est obtenu.
Extrait sec : 23,4 mg/g
DP (estimé par RM N 1H) = 65 donc i = 0,015
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB19 est de 10293 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10500 g/mol.
Exemple AB20 : Co-polyaminoacide AB20 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 10400 g/mol
[000514] Dans un contenant adapté sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (0,545 g, 1 ,00 mmol), du chloroforme (10 mL), du tamis moléculaire 4 Â (3 g), ainsi que de la résine échangeuse d'ion Amberlite IRN 150 (3 g). Après 1 h d'agitation sur rouleaux, le milieu est filtré et la résine est rincée avec du chloroforme. Le mélange est évaporé puis co-évaporé avec du toluène. Le résidu est solubilisé dans du DMF anhydre (10 mL) pour être utilisé directement dans la réaction de polymérisation .
[000515] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du g-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride ( 17,0 g, 64,6 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre (30 ml_) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la solution de molécule AA6 préparée comme décrit précédemment est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours, puis précipité dans du diisopropyléther (0,6 L). Le précipité est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (40 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissout dans 80 mL de THF. À cette solution sont ajoutés successivement de la DIPEA, (1,7 mL, 9,8 mmol) puis de l'anhydride acétique (0,9 mL, 9,5 mmol). Après une nuit d'agitation à température ambiante, la solution est versée lentement dans du diisopropyléther (480 mL) sur une durée de 30 min et sous agitation. Après 1 h d'agitation, le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (80 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L-glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié à l'autre de ses extrémités par la molécule AA6 sous la forme d'un solide blanc.
[000516] Le solide est dilué dans du TFA (65 mL), et une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans de l'acide acétique (45 mL, 257,0 mmol) est alors ajoutée goutte-à-goutte et à 4 °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte- à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther/eau et sous agitation (780 mL). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (70 mL) puis avec de l'eau (70 mL) . Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (300 mL) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 440 mL. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7,0. La solution aqueuse est filtrée sur 0,2 pm et conservée à 4 °C.
Extrait sec : 21,5 mg/g
DP (estimé par RMN *H) = 60 donc i = 0,017
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB20 est de 9619 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10400 g/mol.
Exemple AB33 : Co-polyaminoacide AB33 - poly-L-g I uta m ate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA15 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 1800 g/mol
[000517] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB14 appliqué à la molécule AA15 (0,82 g, 1,34 mmol) et à 7,75 g (29,4 mmol) de y-benzyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride, une solution de poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA15 est obtenu .
Extrait sec : 16,8 mg/g
DP (estimé par RM IM CH) = 22 donc i = 0,045
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB33 est de 3897 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : n = 1800 g/mol .
Exemple AB34 : Co-polyaminoacide AB34 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2600 g/mol
[000518] Dans un ballon préalablement séché à l 'étuve, du g-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride (70,9 g, 269,3 mmol) est solubilisé dans du DMF anhydre ( 125 mL) . Le mélange est refroidi à 4 °C, puis une solution de molécule AA4 sous forme d'amine neutre (6,80 g, 12,23 mmol) dans le DMF (35 mL) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 18 h, puis chauffé à 65 °C pendant 2 h . Le milieu réactionnel est alors refroidi à température ambiante et versé goutte-à-goutte dans du diisopropyléther (2,4 L) sous agitation . Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec du diisopropyléther (2 x 125 mL) puis séché sous pression réduite à 30 °C pour donner un solide blanc. Le solide est solubilisé dans du L/,/V-diméthylacétamide (DMAc, 150 mL) puis du Pd/AhCb (6 g) est ajouté sous atmosphère d'argon. Le mélange est placé sous atmosphère d'hydrogène ( 10 bar) et agité à 60 °C pendant 24 h. Après refroidissement à température ambiante et filtration du catalyseur sur fritté P4 puis sur membrane Omnipore 0,2 pm PTFE hydrophile, une solution d'eau à pH 2 (900 mL) est coulée goutte-à-goutte sur la solution de DMAc, sur une période de 45 min et sous agitation. Après 18 h sous agitation, le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec de l'eau puis séché sous pression réduite à 30 °C. Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (1,25 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 1 N . Le pH est ensuite ajusté à pH 12 et la solution est maintenue sous agitation pendant 1 h . Après neutralisation à pH 7, la solution est filtrée sur 0,2 pm, diluée avec de l'éthanol afin d'obtenir une solution contenant 30 % massique d'éthanol, puis filtrée sur filtre de charbon actif (3M R53SLP). La solution obtenue est filtrée sur 0,45 pm et purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7. La solution aqueuse est filtrée sur 0,2 pm et conservée à 4 °C.
Extrait sec : 38,1 mg/g
DP (estimé par RMN *H) = 23 donc i = 0,043
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB34 est de 3991 g/mol .
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 2600 g/mol. Exemple AB35 : Co-polyaminoacide AB35 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA14 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2600 g/mol
[000519] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB34 appliqué à la molécule AA14 (0,4 g, 0,65 mmol) en solution dans le chloroforme (6,5 ml_) et à 3,79 g ( 14,4 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride en solution dans le DMF (6,5 mL), et en omettant l'étape de filtration sur charbon actif, une solution de poly- L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA14 est obtenu. Extrait sec : 21 ,0 mg/g
DP (estimé par RM N
Figure imgf000116_0001
= 22 donc i = 0,045
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB35 est de 3896 g/mol .
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 2600 g/mol .
Exemple AB36 : Co-polyaminoacide AB36 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA16 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2800 g/mol
[000520] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB34 appliqué à la molécule AA16 (3,28 g, 4,67 mmol) et à 27,02 g ( 102,6 mmol) de y- benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, une solution de poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA16 est obtenu.
Extrait sec : 23,9 mg/g
DP (estimé par RM N 1H) = 22 donc i = 0,045
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB36 est de 3987 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 2800 g/mol .
Exemple AB37 : Co-polyaminoacide AB37 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA17 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2800 g/mol
Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB34 appliqué à la molécule AA17 (4,50 g, 9,73 mmol) et à 56,33 g (214,0 mmol) de y-benzyl-L- glutamate /V-carboxyanhydride, une solution de poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA17 est obtenu .
Extrait sec : 26,8 mg/g
DP (estimé par RMN ^) = 24 donc i = 0,042
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB37 est de 4049 g/mol .
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 2800 g/mol. Partie B:
BB : synthèse des des composés intermédiaires hydrophobes Hy permettant d'obtenir les radicaux -Hy dans lesquelles p = 2
[000521] Les composés intermédiaires hydrophobes sont représentés dans le tableau suivant par la molécule hydrophobe correspondante avant greffage sur le co-poiyaminoacide.
Figure imgf000117_0001
Figure imgf000118_0001
Tableau ld : Liste des composés intermédiaires hydrophobes synthétisées selon l'invention. Part BA : Synthèse des composés intermédiaires hydrophobes dans lesquelles p = 2
Exemple BAI : molécule BAI
Molécule B1 i Produit obtenu par la réaction entre l'acide décanoïque et la L-proline.
[000522] À une solution d'acide décanoïque (14,28 g, 82,91 mmol) dans le THF (520 mL) à 0 °C sont ajoutés successivement du dicyclohexyle carbodiimide (DCC) (16,29 g, 78,96 mmol) et du /V-hydroxysuccinimide (NHS) (9,09 g, 78,96 mmol) . Après 60 h d'agitation à température ambiante, le milieu est refroidi à 0 °C pendant 20 min, filtré sur fritté. De la L- proline ( 10 g, 86,86 mmol), de la diisopropyléthylamine (DIPEA) (68,8 mL) et de l'eau (60 mL) sont ajoutés au filtrat. Après 24 h d'agitation à température ambiante, le milieu est dilué avec de l'eau (300 mL). La phase aqueuse est lavée avec de l'acétate d'éthyle (2 x 250 mL), acidifiée jusqu'à pH ~ 1 avec une solution aqueuse d'HCI 1 N puis extraite avec du dichlorométhane (3 x 150 mL). Les phases organiques combinées sont séchées sur Na2S04, filtrées, concentrées sous vide et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle).
Rendement : 14,6 g (69 %)
RMN XH (CDCh, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,26 (12H) ; 1,65 (2H) ; 2,02 (3H) ; 2,34 (2H) ; 2,41 ( 1H) ; 3,48 ( 1 H) ; 3,56 ( 1H) ; 4,58 ( 1H).
LC/ MS (ESI) : 270,2; (calculé ([M + H]+) : 270,4) .
Molécule B2 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B1 et la L-lysine.
[000523] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à la molécule B1 (14,57 g, 54,07 mmol) et à la L-lysine (4,15 g, 28,39 mmol), une huile jaune est obtenue.
Rendement : 16,4 g (93 %)
RMN (CDCh, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,26 (24H) ; 1,35-1,65 (8H) ; 1,85-2,35 (12H) ; 2,53 (0,2H) ; 2,90 (0,8H) ; 3,45-3,75 (5H) ; 4,50-4,70 (3H) ; 7,82 (1H).
LC/ MS (ESI) : 649,6; (calculé ([M+ H]+) : 649,9) .
Molécule 83 : Produit obtenu par réaction entre la molécule B2 et la N-Boc-éthylènediamine.
[000524] À une solution de molécule B2 ( 16,4 g, 25,27 mmol) dans le THF ( 170 mL) sont ajoutés de la DIPEA (8,80 mL) et du 2-( lH-benzotriazol-l-yl)-l ,l,3,3-tétraméthyluronium tétrafluoroborate (TBTU, 8,52 g, 26,54 mmol) à température ambiante. Après 30 min d'agitation, de la BocEDA (4,45 g, 27,8 mmol) est ajoutée. Après agitation à température ambiante pendant 2 h, le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est dilué avec de l'acétate d'éthyle (400 mL). La phase organique est lavée avec de l'eau (250 mL), une solution aqueuse saturée de NaHCC (250 ml), une solution aqueuse de 1 N HCl (250 mL), une solution aqueuse saturée en NaCI (250 mL) et est séchée sur Na 2S04. Après filtration et concentration sous vide, le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle, méthanol) pour donner une huile incolore.
Rendement : 12,8 g (64 %)
RM IM *H (CDCh, ppm) : 0,87 (6H) ; 1,25-1,60 (42H) ; 1,80-2,05 (4H) ; 2,15-2,45 (9H) ; 3, 10- 3,75 (10H) ; 4,30 (1 H) ; 4,50 (2H) ; 5,50 (0,6H) ; 5,89 (0,2H) ; 6,15 (0,2H) ; 7,03 (1H) ; 7,47 (1H).
LC/MS (ESI) : 791,8; (calculé ([M+ H]+) : 792,1) .
Molécule BAI
[000525] À une solution de la molécule B3 (12,78 g, 16,15 mmol) dans le dichlorométhane (110 mL) à 5 °C est ajoutée une solution de HCl 4 N dans le dioxane (20,2 mL). Après 20 h d'agitation à 5 °C, le milieu est concentré sous vide. Le résidu obtenu est dissout dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BAI sous forme de sel de chlorhydrate.
Rendement : 11,4 g (97 %)
R N (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,25- 1,50 (33H) ; 1 ,57 (1H) ; 1 ,70-2,40 ( 12H) ; 2,82 (2H) ; 3,00 (2H) ; 3,25-3,70 (6H) ; 4,05-4,50 (3H) ; 7,75-8,45 (6H).
LC/MS (ESI) : 691,6 ; (calculé ([M+H]+) : 692,0).
Exemple BA2 : molécule BA2
Molécule B4 : Produit obtenu par la réaction entre l'acide laurique et la L-proline.
[000526] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à l'acide laurique (31,83 g, 157,9 mmol) et à la L-proline (20 g, 173,7 mmol), une huile jaune est obtenue.
Rendement : 34,3 g (73 %)
RMN l (CDCh, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,26 ( 16H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2,10 (3H) ; 2,35 (2H) ; 2,49 (1H) ; 3,48 ( 1H) ; 3,56 ( 1 H) ; 4,60 (1H) .
LC/MS (ESI) : 298,2 ; (calculé ([M + H]+) : 298,4) .
Molécule B5 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B4 et la L-lysine.
[000527] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à la molécule B4 (33,72 g, 113,36 mmol) et à la L-lysine (8,70 g, 59,51 mmol), un solide blanc est obtenu.
Rendement : 26,2 g (66 %)
RMN (CDCh, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,26 (32H) ; 1,35-1,65 (8H) ; 1,85-2,35 ( 15H) ; 2,87 (1H) ; 3,40-3,75 (5H) ; 4,50-4,75 (3H) ; 7,87 ( 1 H).
LC/ MS (ESI) : 705,6 ; (calculé ([M + H]+) : 706,0). Molécule 86 : produit obtenu par réaction entre la IM-Boc-éthylènediamine et la molécule B5.
[000528] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B5 (25,74 g, 36,51 mmol) et à la BocEDA (6,43 g, 40,16 mmol), une huile incolore est obtenue.
Rendement : 30,9 g (quantitatif)
RMN !H (CDCh, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,35- 1,65 (50H) ; 1,85-2,35 ( 13H) ; 3,05-3,75 ( 10H) ; 4,25-4,65 (3H) ; 5,50 (0,4H) ; 5,88 (0,2H) ; 6,16 (0,2H) ; 7,08 (1H) ; 7,26 (1H) ; 7,49 (0,2H).
LC/MS (ESI) : 847,8 ; (calculé ([M+H]+) : 848,2).
Molécule BA2
[000529] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BAI appliqué à la molécule B6 (30,9 g, 36,47 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide est dissout dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA2 sous forme de sel de chlorhydrate après séchage sous pression réduite.
Rendement : 27,65 g (97 %)
RMN Ή (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,10-2,40 (54H) ; 2,75-3,15 (4H) ; 3,25-3,60 (6H) ; 4,05-4,50 (3H) ; 7,50-8,50 (6H).
LC/MS (ESI) : 747,6 ; (calculé ([M + H]+) : 748, 1).
Exemple B A3 : molécule B A3
Molécule B7 : Produit obtenu par la réaction entre l'acide myristique et la L-proline.
[000530] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à l'acide myristique ( 18,93 g, 82,91 mmol) et à la L-proline ( 10 g, 86,86 mmol), une huile jaunâtre est obtenue.
Rendement : 20 g (78 %)
RMN !H (CDCh, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,28 (20H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2, 10 (3H) ; 2,36 (2H) ; 2,51 (1H) ; 3,47 (1H) ; 3,56 ( 1H) ; 4,61 (1H) .
LC/MS (ESI) : 326,2; (calculé ([M+H]+) : 326,6) .
Molécule B8 : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B7 et la L-lysine
[000531] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à la molécule B7 (20,02 g, 61,5 mmol) et à la L-lysine (4,72 g, 32,29 mmol), un solide blanc est obtenu.
Rendement : 12,3 g (53 %) RMN (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,26 (40H) ; 1,35-1,50 (6H) ; 1,50-2,10 ( 10H) ; 2,10- 2,25 (4H) ; 3,01 (2H) ; 3,31-3,55 (4H) ; 4, 10-4,40 (3H) ; 7,68 (0,6H) ; 7,97 ( 1H) ; 8,27 (0,41-1) ; 12,50 ( 1H).
LC/MS (ESI) : 761,8 ; (calculé ([M + H]+) : 762,1) .
Molécule B9 : Produit obtenu par la réaction entre la N-Boc-éthylènediamine et la molécule B8.
[000532] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B8 ( 12 g, 15,77 mmol) et à la BocEDA (3,03 g, 18,92 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (acétate d'éthyle, méthanol).
Rendement : 12,5 g (88 %)
RMN *H (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,20- 1,55 (55H) ; 1,50-2,25 ( 14H) ; 2,95-3,10 (6H) ; 3,31-3,55 (4H) ; 4, 10-4,40 (3H) ; 6,74 ( 1H) ; 7,60-8,25 (3H) .
LC/ MS (ESI) : 904, 1 ; (calculé ([M + H]+) : 904,3) .
Molécule BA3
[000533] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BAI appliqué à la molécule B9 ( 12,5 g, 13,84 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide est dissout dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA3 sous forme de sel de chlorhydrate après séchage sous pression réduite.
Rendement : 9,2 g (79 %)
RMN lH (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1 , 10-1,65 (48H) ; 1,70-2,35 ( 12H) ; 2,85 (2H) ; 3,01 (2H ) ; 3,25-3,65 (6H) ; 4, 10-4,50 (3H) ; 7,70-8,40 (6H).
LC/ MS (ESI) : 803,9 ; (calculé ( [M + H]+) : 804,2).
Exemple BA4 : molécule BA4
Molécule BIP : Produit obtenu par la réaction entre la molécule B8 et le Boc-l-amino-4,7,10- trioxa-13-tridécane amine.
[000534] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B8 (29,80 g, 39, 15 mmol) et au Boc-l-amino-4,7,10-trioxa-13- tridécane amine (15,05 g, 46,96 mmol), une huile épaisse incolore est obtenue.
Rendement : 25,3 g (61 %)
RMN H (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,25-2,35 (75H) ; 2,85-3,20 (6H) ; 3,25-3,65 (16H) ; 4, 10-4,45 (3H) ; 6,38 (0,1H) ; 6,72 (0,9H) ; 7,50-8,25 (3H) .
LC/MS (ESI) : 1064,2 ; (calculé ([M+H]+) : 1064,5). Molécule BA4
[000535] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BAI appliqué à la molécule B10 (25,3 g, 23,8 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide est dissout dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA4 sous forme de sel de chlorhydrate après séchage sous pression réduite.
Rendement : 20,02 g (84 %)
RMN *H (DMSO-de, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,15-2,35 (66H) ; 2,80-3,20 (6H) ; 3,30-3,65 (16H) ; 4, 10-4,45 (3H) ; 7,55-8,60 (6H).
LC/MS (ESI) : 964,9 ; (calculé ([M+H]+) : 964,6).
Exemple BA5 : molécule BA5
Molécule Bl l ; Produit obtenu par réaction entre la molécule Al et la L-Lysine
[000536] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à la molécule Al ( 19,10 g, 54,02 mmol ) et à la L-lysine (4,15 g, 28,36 mmol), un résidu huileux est obtenu après concentration du milieu réactionnel sous pression réduite. Ce résidu est dilué dans de l'eau (150 mL), lavé à l'acétate d'éthyle (2 x 75 mL) puis la phase aqueuse est acidifiée jusqu'à pH 1 par addition lente de HCl 6 N . Le produit est extrait 3 fois au dichlorométhane, la phase organique est séchée sur Na2S04 puis filtrée et concentrée sous pression réduite pour donner 11 ,2 g de résidu huileux jaune. Parallèlement, la phase organique d'acétate d'éthyle précédente est lavée avec une solution aqueuse de HCl 2 N (2 x 75 mL), une solution aqueuse saturée en NaCI (75 mL), séchée sur Na2S04, filtrée et concentrée pour donner 10,2 g de résidu huileux jaune. Un solide blanc est obtenu après recristallisation de chacun de ces résidus dans l'acétone.
Rendement : 11,83 g (54 %)
RMN JH (CDCh, ppm) : 0,87 (6H) ; 1,06-2,44 (70H) ; 2,78-2,96 ( 1H) ; 3,35-3,75 (5H) ; 4,28-4,43 (0,1 H) ; 4,43-4,52 (0,2H) ; 4,52-4,61 (1,8H) ; 4,61-4,75 (0,9H) ; 7,74-8,02 (2H). LC/ MS (ESI) : 818,0 ; (calculé ([M+H]+) : 818,7).
Molécule B12 : Produit obtenu par couplage entre la molécule Bl l et la N-Boc- éthylènediamine
[000537] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule Bll (18,00 g, 22,02 mmol) en solution dans le THF et à la BocEDA (4,23 g, 26,43 mmol), un solide blanc est obtenu après recristallisation deux fois dans l'acétonitrile.
Rendement : 17,5 g (83 %)
RMN *H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1 , 15-2,29 (79H) ; 2,92-3, 12 (6H) ; 3,30-3,59 (4H) ; 4,06-4,13 (0,65H) ; 4,16-4,29 (2H) ; 4,38-4,42 (0,35H) ; 6,71-6,76 ( 1H) ; 7,60-7,69 ( 1,3H) ; 7,76-7,81 (0,65H) ; 7,93-7,97 (0,35H) ; 8,00-8,04 (0,35H) ; 8,10-8,17 (0,35H). LC/MS (ESI) : 960,4 ; (calculé ([M + H]+) : 960,8).
Molécule BA5
[000538] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BAI appliqué à la molécule B12 (24,4 g, 25,43 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide est solubilisé dans du dichlorométhane (150 mL), la phase organique est lavée 2 fois avec une solution aqueuse de soude 2 N (90 mL). De l'acétonitrile ( 120 mL) est ajouté et le dichlorométhane est éliminé par concentration sous pression réduite. Le milieu est ensuite laissé au repos pendant 72 h et un solide blanc est obtenu après filtration et rinçage à l'acétonitrile puis séchage sous pression réduite. Cette opération est répétée 4 fois.
Rendement : 14,28 g (65 %)
RMN (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,06-2,32 (70H) ; 2,53-2,63 (2H) ; 2,89-3,61 ( 10H)
; 4,04-4,43 (3H) ; 7,55-7,62 (0,65H) ; 7,65-7,72 (0,65H) ; 7,80 (0,65H) ; 7,91 (0,35H) ; 8,03 (0,35H) ; 8, 14-8,23 (0,35H).
LC/MS (ESI) : 860,0 ; (calculé ([M+H]+) : 860,8).
Exemple BA6 : molécule BA6
Molécule B13 : Produit obtenu par la réaction entre le /V-(fert-butoxycarbonyl)- l,6- diaminohexane et la molécule B8.
[000539] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B8 (10 g, 13, 14 mmol) et au /V-(fert-butoxycarbony()-l,6- diaminohexane (3,41 g, 15,77 mmol ) dans le dichlorométhane, un solide blanc est obtenu après recristallisation dans l'acétonitrile.
Rendement : 10,7 g (85 %)
RMN ^ (CDCh, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,17-2,40 (79H) ; 3,00-3,71 (10H) ; 4,26-4,58 (3H) ; 4,67 (1H) ; 6,74 (1H) ; 7,34-7,49 (2H).
LC/MS (ESI) : 959,9 ; (calculé ([M+H]+) : 959,8).
Molécule BA6
[000540] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BAI appliqué à la molécule B13 (10,5 g, 10,94 mmol), une solution aqueuse de NaOH 2 N est ajoutée goutte-à-goutte au milieu réactionnel refroidi à 0 °C. La phase aqueuse est extraite au dichlorométhane puis la phase organique est lavée 3 fois avec une solution aqueuse de NaCI 5 %. Après séchage sur aîSC , la phase organique est filtrée, concentrée sous vide et le résidu est recristallisé dans l'acétonitrile.
Rendement : 5,4 g (58 %)
RMN *H (CDCh, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,19-2,40 (72H) ; 2,67 (2H) ; 3,03-3,70 (8H) ; 4,26-4,57 (3H) ; 6,71 ( 1H) ; 7,39-7,49 (2H). LC/ MS (ESI) : 859,8 ; (calculé ([M + H]+) : 859,7).
Exemple BA7 : molécule BA7
Molécule B 14 : Produit obtenu par couplage entre la molécule B7 et l'acide 2,3- diaminopropionique
[000541] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à la molécule B7 (80,00 g, 245,78 mmol) et au dichlorhydrate de l'acide 2,3 - diaminopropionique (22,84 g, 129,04 mmol), un solide blanc est obtenu après recristallisation dans l'acétonitrile.
Rendement : 69 g (78 %)
(DMSO-d6, ppm) : 0,86 (6H) ; 1,08-1,38 (40H) ; 1 ,40-1,55 (4H) ; 1,68-2,30 (12H) ; 3,16-3,66 (6H) ; 4,20-4,39 (3H) ; 7,67-8,31 (2H) ; 12,70 (1H) .
LC/ MS (ESI) : 719,4 ; 741 ,5 ; (calculé ([M+H]+) : 719,6 ; ([M + Na]+) : 741,6).
Molécule B15 : Produit obtenu par couplage entre la molécule B14 et la N-Boc- éthylènediamine
[000542] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B14 (32,00 g, 44,50 mmol) en solution dans le dichlorométhane et à la BocEDA (8,56 g, 53,40 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle, méthanol).
Rendement : 24,5 g (64 %)
RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,16-2,42 (65H) ; 2,89-3, 14 (4H) ; 3, 17-3,66 (6H) ; 4,11-4,43 (3H) ; 6,77 ( 1H) ; 7,38-8,23 (3H).
LC/MS (ESI) : 861,7 ; (calculé ([M+ H]+) : 861,7).
Molécule BA7
[000543] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BAI appliqué à la molécule B15 (24,50 g, 28,45 mmol), le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite, le résidu est solubilisé dans le dichlorométhane, la phase organique est lavée par une solution aqueuse de NaOH 2 N), séchée sur Na2S04, filtrée et concentrée sous pression réduite. Un solide blanc est obtenu après recristallisation dans l'acétonitrile.
Rendement : 19,7 g (91 %)
RMN (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,10-2,40 (58H) ; 2,51-2,62 (2H) ; 2,90-3,16 (2H) ; 3,16-3,67 (6H) ; 4,04-4,47 (3H) ; 7,33-8,27 (3H).
LC/ MS (ESI) : 761,5 ; (calculé ([M+H]+) : 761,6). BB : Synthèse des copolvaminoacides
Co-polvaminoacides de formule VII ou Vlla
Figure imgf000126_0001
Figure imgf000127_0001
Figure imgf000128_0001
Figure imgf000129_0001
Figure imgf000130_0001
Figure imgf000131_0001
Figure imgf000132_0001
Figure imgf000133_0001
Figure imgf000134_0001
Figure imgf000135_0001
Figure imgf000136_0001
Figure imgf000137_0001
Figure imgf000138_0001
Figure imgf000139_0001
Tableau le : Liste des co-polyaminoacides synthétisés selon l'invention
Co-polyaminoacides de formule VII ou Vllb
Figure imgf000140_0001
Figure imgf000141_0001
Figure imgf000142_0001
Figure imgf000143_0001
Figure imgf000143_0002
Figure imgf000144_0001
Figure imgf000145_0001
Tableau lf : Liste des co-polyaminoacides synthétisés selon l'invention .
Part BB : synthèse des co-polyaminoacides
Exemple BB1 : Co-polyaminoacide BB1 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2400 g/mol
Co-Dolvaminoacide BB1-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3860 g/mol issu de la polymérisation du y-benzyl-L-glutamate /V-carboxy anhydride initiée par l'hexylamine
[000544] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y-benzyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride (90,0 g, 342 mmol) pendant 30 min, puis du DMF anhydre (465 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (1,8 mL 14 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 65 °C pendant 4 h, refroidi à température ambiante puis coulé goutte-à- goutte dans du diisopropyléther froid (6 L) sous agitation . Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec du diisopropyléther (500 mL puis 250 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(y-benzyl-L-glutamique) (PBLG).
[000545] À une solution de PBLG (42,1 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 325 mL) à 4 °C est ajoutée goutte-à-goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans l'acide acétique ( 135 mL, 0,77 mol). Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h, puis coulé goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (1,6 L). Après 1 h 30 d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (200 mL).
[000546] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (1 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 25 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 1,5 L.
[000547] La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm.
[000548] La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37 % jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3860 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG).
Co-polyaminoacide BB1
[000549] Le co-polyaminoacide BB1-1 ( 10,0 g) est solubilisé dans le DMF (700 mL) à 30- 40 °C puis refroidi à 0 °C. Le sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (2,95 g, 3,8 mmol) est mis en suspension dans du DMF (45 mL) et de la triéthylamine (0,39 g, 3,8 mmol) est ensuite ajoutée à cette suspension puis le mélange est légèrement chauffé sous agitation jusqu'à complète dissolution . À la solution de co-polyaminoacide à 0 °C, de la /V-méthylmorpholine (NMM, 7,6 g, 75 mmol) dans le DMF ( 14 mL) et du chloroformate d'éthyle (ECF, 8,1 g, 75 mmol) sont ajoutés. Après 10 min à 0 °C, la solution de molécule BA2 est ajoutée et le milieu maintenu à 30 °C durant 1 h . Le milieu réactionnel est coulé goutte-à-goutte sur 6 L d'eau contenant du NaCI à 15 % massique et du HCl (pH 2), puis laissé reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration, lavé par la solution de chlorure de sodium à pH 2 (1 L) et séché sous vide pendant environ 1 h . Le solide blanc obtenu est repris dans de l'eau (600 mL) et le pH est ajusté à 7 par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N. Le volume est ajusté à 700 mL par ajout d'eau . Après filtration sur filtre 0,45 pm, la solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. Après déchargement, la solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C.
Extrait sec : 19,7 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 23
D'après la RM
Figure imgf000147_0001
0,05
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB1 est de 4350 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2400 g/mol.
Exemple BB2 : co-polyaminoacide BB2 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une mase molaire moyenne en nombre (Mn) de 4900 g/mol
[000550] Un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 4100 g/mol (5,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB1-1 est solubilisé dans le DMF (205 mL) à 30-40 °C puis maintenu à cette température. En parallèle, le sel de chlorhydrate de la molécule BA2 ( 1,44 g, 1,84 mmol) est mis en suspension dans du DMF (10 mL) et de la triéthylamine (0,19 g, 1,84 mmol) est ajoutée, puis le mélange est légèrement chauffé sous agitation jusqu'à complète dissolution. À la solution de co-polyaminoacide dans le DMF, de la NMM (3,7 g, 36,7 mmol), la solution de molécule BA2 puis de la /V-oxyde de 2-hydroxypyridine (HOPO, 0,31 g, 2,76 mmol) sont ajoutées successivement. Le milieu réactionnel est alors refroidi à 0 °C, puis du EDC (0,53 g, 2,76 mmol) est ajouté et le milieu est remonté à température ambiante durant 3 h. Le milieu réactionnel est coulé au goutte-à-goutte sur 1,55 L d'eau contenant du NaCI à 15 % massique et du HCl (pH 2) sous agitation . A la fin de l'ajout, le pH est réajusté à 2 avec une solution de HCl 1 N, et la suspension est laissée reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration, puis rincé par 100 mL d'eau. Le solide blanc obtenu est solubilisé dans 200 mL d'eau par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N jusqu'à pH 7 sous agitation, puis la solution est filtrée sur filtre 0,45 pm. La solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution obtenue est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C. Extrait sec : 16,3 mg/g
DP (estimé d'après la RM CH) : 21
D'après la RMN XH : i = 0,047
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB2 est de 3932 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4900 g/mol . Exemple BB3 : Co-polyaminoacide BB3 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6400 g/mol
Co-Dolvaminoacide BB3- 1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 17500 g/mol issu de la polymérisation du g-méthyl-L-glutamate N-ca rboxya n hyd ri de initiée par la L-leucinamide
[000551] Un acide poly-L-glutamique de masse moyenne en nombre (Mn) 17500 g/mol relative à un standard polymétacrylate de méthyle (PMMA) est obtenu par polymérisation du g-méthyl /V-carboxyanhydride d'acide glutamique en utilisant la L-leucinamide comme initiateur et en effectuant une déprotection des esters méthyliques par utilisation d'une solution d'acide chlorhydrique à 37 % selon le procédé décrit dans la demande de brevet FR- A-2 801 226.
[000552] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (3,23 g, 4, 1 mmol) et au co- polyaminoacie BB3-1 ( 11 g), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu.
Extrait sec : 27,5 mg/g
DP (estimé d'après la RMN *H) : 34
D'après la RMN 1H : li = 0,049
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB3 est de 6405 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6400 g/mol.
Exemple BB4 : co-polyaminoacide BB4 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 10500 g/mol
[000553] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (5 g, 6,35 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 10800 g / mol (21 ,7 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1- 1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu.
Extrait sec : 28,2 mg/g
DP (estimé d'après la RMN ^) : 65
D'après la RMN JH : i = 0,04
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB4 est de 11721 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10500 g/mol . Exemple BB5 : Co-polyaminoacide BB5 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3600 g/mol
Co-polvaminoadde BB5-1 : acide poly-L-glutamique de Mn 3700 g/mol issu de la polymérisation du g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride initiée par l'hexylamine et cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle
[000554] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y-benzyl- L-glutamate /V-carboxyanhydride ( 100,0 g, 380 mmol) pendant 30 min puis du DMF anhydre (250 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (2,3 mL, 17 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours puis précipité dans du diisopropyléther (3,4 L). Le précipité est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (225 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissout dans 450 mL de THF. À cette solution sont ajoutés successivement de la L/,/V-diisopropyléthylamine (DIPEA, 31 mL, 176 mmol) puis de l'anhydride acétique ( 17 mL, 176 mmol). Après une nuit d'agitation à température ambiante, la solution est versée lentement dans du diisopropyléther (3 L) sur une durée de 30 min et sous agitation . Après 1 h d'agitation, le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (200 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(y-benzyl-L-glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle.
[000555] À une solution du co-polyaminoacide cappé (72 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 335 mL) à 4 °C est ajoutée goutte-à-goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans l'acide acétique (235 mL, 1 ,34 mol). Le mélange est agité à température ambiante pendant 3 h 30, puis coulé goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 mL) puis avec de l'eau (340 mL). Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (1,5 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 Npuis une solution aqueuse de soude 1 IM . Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2,1 L. La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie d u perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée jusqu'à obtenir un volume final de 1,8 L. La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37 % jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (330 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3700 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG) .
Co-polyaminoacide BB5
[000556] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (6,92 g, 8,8 mmol) et au co- polyaminoacide BB5- 1 (30,0 g), un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 est obtenu.
Extrait sec : 29,4 mg/g
DP (estimé d'après la RMN
Figure imgf000150_0001
: 23
D'après la RMN JH : i = 0,042
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB5 est de 4302 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3600 g/mol .
Exemple BB6 : Co-polyaminoacide BB6 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4100 g/mol
[000557] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (5,8 g, 7,4 mmol) et à un acide poly-L- glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3800 g / mol (25 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB5- 1 en utilisant l'ammoniac à la place de l'hexylamine, un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 est obtenu .
Extrait sec : 27,6 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 24
D'après la RM
Figure imgf000150_0002
0,04
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB6 est de 4387 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4100 g/mol.
Exemple BB7 : Co-polyaminoacide BB7 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4200 g/mol
[000558] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (7,07 g, 9,0 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3600 g / mol (30,0 g) obtenu pa r un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1- 1, un poly- L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu .
Extrait sec : 28,3 mg/g
DP (estimé d'après la RMN 1H) : 22 D'après la RMN ^ : i = 0,042
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB7 est de 4039 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4200 g/mol .
Exemple BB8 : co-polyaminoacide BBS - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 5200 g/mol
[000559] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (0,85 g, 1, 1 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 4100 g / mol (5,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1-1, un poly- L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu.
Extrait sec : 28,6 mg/g
DP (estimé MN *H) : 21
D'après la
Figure imgf000151_0001
0,026
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB8 est de 3620 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 5200 g/mol.
Exemple BB9 : co-polyaminoacide BB9 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4700 g/mol
[000560] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (3,05 g, 3,6 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 4100 g / mol ( 10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1-1, un poly- L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 est obtenu .
Extrait sec : 28,6 mg/g
DP (estimé d' MN ^) : 26
D'après la RM
Figure imgf000151_0002
0,05
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB9 est de 4982 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4700 g/mol .
Exemple BBIO : co-polyaminoacide BBIO - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4200 g/mol
[000561] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 ( 1,90 g, 2,3 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3500 g / mol ( 10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1- 1, un poly- L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 25,9 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000152_0001
: 22
D'après la RM
Figure imgf000152_0002
0,029
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB10 est de 3872 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4200 g/mol.
Exemple BB11 : co-polyaminoacide BB11 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3900 g/mol
[000562] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA4 (2,21 g, 2,2 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse moyenne en nombre Mn = 3700 g / mol (10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB5-1, un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA4 est obtenu.
Extrait sec : 28,1 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000152_0003
: 22
D'après la RM
Figure imgf000152_0004
0,032
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB11 est de 4118 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3900 g/mol.
Exemple BB12 : co-polyaminoacide BB12 - poly- L-g I uta mate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3900 g/mol
[000563] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (1,9 g, 2,3 mmol) et à un acide poly-L- glutamique de masse moyenne en nombre Mn = 3600 g / mol (10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB5-1, un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA3 est obtenu.
Extrait sec : 26,7 mg/g
DP (estim MN *H) : 23
D'après la
Figure imgf000152_0005
0,03
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB12 est de 4145 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3900 g/mol. Exemple BB13 : co-polyaminoacide BB13 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BAI et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2800 g/mol
[000564] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule BAI (3,65 g, 5 mmol) et à un acide poly- L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3600 g / mol ( 10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1-1, un poly- L-glutamate de sodium modifié par la molécule BAI est obtenu.
Extrait sec : 25,6 mg/g
DP (estimé d' MN
Figure imgf000153_0001
: 25
D'après la RM
Figure imgf000153_0002
0,08
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB13 est de 5253 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2800 g/mol.
Exemple BB19 : Co-polyaminoacide BB19 - poly-L-glutamate de sodium et modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 7700 g/mol
[000565] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB23 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule BA3 et au co-polyaminoacide AB23-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 est obtenu.
Extrait sec : 25,3 mg/g
DP (estimé d'après la RMN *H) : 60
D'après la RMN 1H : i = 0,045
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB19 est de 11188 g/mol.
HPLC-SEC organique (calibrant PEG) : Mn = 7700 g/mol .
Exemple BB14 : co-polyaminoacide BB14 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4020 g/mol
[000566] Dans un contenant adapté sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (2, 12 g, 2,70 mmol), du chloroforme (40 mL), du tamis moléculaire 4 Â (1,5 g), ainsi que de la résine échangeuse d'ion Amberlite IRN 150 (1,5 g). Ap rès 1 h d'agitation sur rouleaux, le milieu est filtré et la résine est rincée avec du chloroforme. Le mélange est évaporé puis co-évaporé avec du toluène. Le résidu est solubilisé dans du DMF anhydre (20 mL) pour être utilisé directement dans la réaction de polymérisation .
[000567] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du g-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride (18 g, 68,42 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre ( 100 mL) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la solution de molécule BA2 préparée comme décrit précédemment est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours, puis chauffé à 65 °C pendant 2 h. Le mélange réactionnel est alors refroidi à température ambiante puis versé goutte-à-goutte dans du diisopropyléther (1,2 L) sous agitation. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther ( 100 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour obteni r un solide blanc. Le solide est dilué dans du TFA ( 105 mL), et une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans de l'acide acétique (38 mL, 220 mmol) est alors ajoutée goutte-à-goutte et à 0 °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther/eau et sous agitation (600 mL). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (200 mL) puis avec de l'eau ( 100 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (450 mL) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7,0. La solution aqueuse est filtrée sur 0,2 pm et conservée à 4 °C.
Extrait sec : 22,3 mg/g
DP (estimé par RMN 1H) = 29 donc i = 0,034
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB14 est de 5089 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4020 g/mol .
Exemple BB15 : co-polyaminoacide BB15 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3389 g/mol
[000568] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (3,62 g, 4,32 mmol) et à 25,0 g (94,97 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu.
Extrait sec : 30,4 mg/g
DP (estimé par RMN ^) = 24 donc i = 0,042
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB15 est de 4390 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3389 g/mol . Exemple BB16 : co-polyaminoacide BB16 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 g/mol
[000569] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA4 (5,70 g, 5,70 mmol) et à 29,99 g ( 113,9 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA4 est obtenu.
Extrait sec : 32,3 mg/g
DP (estimé par RMN JH) = 23 donc i = 0,043
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB16 est de 4399 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol .
Exemple BB17 : co-polyaminoacide BB17 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre de 10700 g/mol
[000570] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (2,51 g, 3 mmol) et à 52,7 g (200 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu.
Extrait sec : 24,5 mg/g
DP (estimé par RM ^) = 65 donc i = 0,015
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB17 est de 10585 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10700 g/mol.
Exemple BB18 : co-polyaminoacide BB18 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule B A3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre de 6600 g/mol
[000571] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (2,51 g, 3 mmol) et à 31,6 g ( 120 mmol) de g-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu .
Extrait sec : 27,3 mg/g
DP (estimé par RMN ^) = 40 donc i = 0,025
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB18 est de 6889 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6600 g/mol . Exemple BB20 : co-polyaminoacide BB20 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA5 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2800 g/mol
[000572] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué à la molécule BA5 sous forme d'amine libre (1,70 g, 1,98 mmol) et de y- benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride (11,46 g, 43,5 mmol), un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA5 est obtenu.
Extrait sec : 20,7 mg/g
DP (estimé par RMN JH) = 23 donc i = 0,043
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB20 est de 4295 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2800 g/mol.
Exemple BB21 : co-polyaminoacide BB21 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 1100 g/mol
[000573] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué à la molécule BA3 sous forme d'amine libre (3,814 g, 4,75 mmol) et de y- benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride (10,0 g, 38,0 mmol), un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu.
Extrait sec : 16,1 mg/g
DP (estimé par RM *H) = 9 donc i = 0,11
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB21 est de 2123 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 1100 g/mol.
Exemple BB22 : co-polyaminoacide BB22 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 g/mol
[000574] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué à la molécule BA6 sous forme d'amine libre (4,45 g, 5,18 mmol) et à 30,0 g (113,96 mmol) de y-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA6 est obtenu.
Extrait sec : 29,0 mg/g
DP (estimé par RMN 1H) = 25 donc i = 0,04
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB22 est de 4597 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol. Exemple BB23 : co-polyamînoacide BB23 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2900 g/mol
[000575] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB14 appliqué à la molécule BA7 sous forme d'amine libre (3,05 g, 4,01 mmol) et de y- benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride (22,78 g, 86,5 mmol), un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA7 est obtenu.
Extrait sec : 16,9 mg/g
DP (estimé par RMN 1H) = 21 donc i = 0,048
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB23 est de 3894 g/mol .
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2900 g/mol .
Exemple BB24 : co-polyaminoacide BB24 - poly-L-glutamate de sodium modifié à l'une de ses extrémités par la molécule BA3 et modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2300 g/mol
Co-polyaminoacide BB24-1 : acide poly-L-glutamique modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 et cappé à l'autre extrémité par l'acide pidolique.
[000576] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du y-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride ( 122,58 g, 466 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre (220 mL) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à -10 °C, puis une solution de molécule BA3 sous forme d'amine libre ( 17,08 g, 21 ,3 mmol) dans le chloroforme (40 mL) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 0 °C et température ambiante pendant 2 jours, puis chauffé à 65 °C pendant 4 h . Le mélange réactionnel est alors refroidi à 25 °C puis est ajouté de l'acide pidolique ( 13,66 g, 105,8 mmol), du HOBt (2,35 g, 15,3 mmol) et de l'EDC (20,28 g, 105,8 mmol). Après 24 h d'agitation à 25 °C, la solution est concentrée sous vide pour éliminer le chloroforme et 50 % du DMF. Le mélange réactionnel est alors chauffé à 55 °C et 1150 mL de méthanol sont introduit en 1 h . Le mélange réactionnel est alors refroidi à 0 °C. Après 18 h, le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé trois fois avec 270 mL de diisopropyl éther puis séché sous vide à 30 °C pour obtenir un solide blanc. Le solide est dilué dans du TFA (390 mL), et u ne solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans de l'acide acétique (271 mL, 1547 mmol) est alors ajoutée goutte-à-goutte et à 0 °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther / eau et sous agitation (970 mL). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec du diisopropyl éther (380 mL) puis deux fois avec de l 'eau (380 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (3,6 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N . Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, une solution de NaOH 0,1 N , une solution de NaCI 0,9 %, une solution de tampon phosphate (150 mM), une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique, filtrée sur 0,2 pm puis acidifié à pH 2 sous agitation par addition d'une solution de HCl à 37 %. Le précipité est alors récupéré par filtration, lavé deux fois avec de l'eau pui s séché sous vide à 30 °C pour obtenir un solide blanc.
Co-polyaminoacide BB24
[000577] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB2 appliqué à la molécule BA3 sous forme d'amine libre (1,206 g, 1,50 mmol) et au co- polyaminoacide BB24-1 (5,5 g, 33,4 mmol), un poly-L-glutamate de sodium modifié à l'une de ses extrémités par la molécule BA3 et modifié par la molécule BA3 est obtenu .
Extrait sec : 19,0 mg/g
DP (estimé d'après la RM 1H) : 22
D'après la RMN :H : i = 0,089
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB24 est de 4826 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2300 g/mol .
Exemple BB25 : co-polyaminoacide BB25 - poly-L-glutamate de sodium modifié à un de ses extrémités par la molécule BA3 et à l'autre extrémité par la molécule B8 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2000 g/mol
[000578] À une solution de molécule B8 (0,946 g, 1,24 mmol) dans le DMF (8 mL) sont introduits du DCC (0,257 g, 1,24 mmol) et du NHS (0, 143 g, 1,24 mmol). Après 16 h d'agitation à température ambiante, la solution est filtrée pour être utilisée directement dans la réaction suivante.
[000579] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du y-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride (6,0 g, 22,8 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre ( 14 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 0 °C, puis une solution de molécule BA3 sous forme d'amine libre (0,832 g, 1,04 mmol) dans le chloroforme (2,0 mL) est introduit rapidement. Après 18 h d'agitation à 0 °C, la solution de molécule B8 préparée précédemment est additionnée. La solution est agitée entre 0 °C et température ambiante pendant 22 h puis coulée goutte-à-goutte dans du diisopropyléther (0,34 L) sous agitation. Le précipité est récupéré par filtration, lavé avec du diisopropyléther (7 fois 15 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un solide blanc. Le solide est dilué dans du TFA (23 mL), puis la solution est refroidie à 4 °C. Une solution de HBr à 33 % dans l'acide acétique (15 mL, 85,7 mmol) est alors ajoutée goutte-à-goutte. Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h, puis coulé goutte-à-goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (0,28 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé deux fois avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (24 mL) puis deux fois avec de l'eau (24 mL) . Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (0,16 L) en ajustant le pH à 12 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N . Après 30 min le pH est ajusté à 7 par ajout lent d'une solution aqueuse de HCl 1 N. La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm . La solution obtenue est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8°C. Extrait sec : 18,9 mg/g
DP (estimé d' MN 1H) : 22
D'après la RM
Figure imgf000159_0001
0,09
La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB25 est de 4871 g/mol.
HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2000 g/mol .
Partie C Compositions d'insuline analogues rapides et insuline basale
Exemple Cl Sol llQnjij SüliDe rapide (Humalog®) à 100 U/mL
[000580] Cette solution est une solution commerciale d'insuline lispro commercialisée pa r la société ELI LILLY sous le nom de Humalog®. Ce produit est une insuline analogue rapide. Les excipients dans Humalog® sont le méta-crésol (3, 15 mg/mL), le glycérol ( 16 mg/mL), le phosphate de disodium (1,88 mg/mL), l'oxyde de zinc (pour avoir 0,0197 mg d'ion zinc/mL), l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7-7,8) et de l'eau.
Exemple C2 : Solutionjd Dslillnê-rgpjde lispro à 600 U/mL
[000581] Cette solution est une solution d'insuline préparée à partir d'une poudre d'insuline lispro. Ce produit est une insuline analogue rapide. Les excipients utilisés sont le méta-crésol, le glycérol, l'oxyde de zinc, l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7-7,8) et de l'eau. La concentration d'oxide de zinc est de 1800 mM et celle de glycérol est de 230 mM . La concentration de m-crésol varie selon les concentrations souhaitées dans les préparations finales.
Exemple C3 : Solution d'insuline analogue basale fLantus®j à 100 U/mL
[000582] Cette solution est une solution commerciale d'insuline glargine commercialisée par la société SANOFI sous le nom de Lantus®. Ce produit est une insuline analogue basale. Les excipients de Lantus® sont le chlorure de zinc (460 mM), le méta-crésol (2,7 mg/mL), le glycérol (85%) (20 mg/mL), le Tween 20 ( 16 mM), l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 4) et de l'eau. Exemple C4 ; Solution d'insuline glargine à 100-400 U /mL.
[000583] Cette solution est une solution d'insuline glargine préparée à partir de poudre d'insuline glargine. Ce produit est une insuline analogue lente. Les excipients utilisés sont le chlorure de zinc, le méta-crésol, le glycérol, l 'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 4) et de l'eau . La concentration de zinc est de 4.5 mM pour 1 UI/ml d'insuline. La concentration de glycérol et des excipients phénoliques m-crésol et phénol varient selon les concentrations souhaitées dans les préparations finales.
Exemple CA : Détermination des ratios mininimum pour solubiliser l'insuline glargine
Protocole pour la déterminatlQn de la concentration minimale pour . solubiliser l'insuline alaraLng. à_5Q..U/mL à pH 7,1 ,
[000584] À une solution mère de co-polyaminoacide à pH 7,2 ± 0,3 sont ajoutées des solutions concentrées de chlorure de zinc, chlorure de sodium, m-crésol et glycérine. 0,5 mL d'une solution d'insuline glargine à une concentration de 100 U/mL, préparée selon l'exemple C3 ou C4, est ajouté à un volume de 0,5 mL de la solution de co-polyaminoacide et d'excipients pour obtenir une composition co-polyaminoacide/insuline glargine 50 U/mL. La quantité d'excipients ajoutée est choisie de manière à obtenir une concentration de chlorure de zinc de 0-1 mM, de chlorure de sodium de 5-10 mM, de m-crésol de 35 mM et de glycérine de 184 mM dans la composition co-polyaminoacide / insuline glargine 50 U/mL. La concentration en co-polyaminoacide varie d'une préparation à l'autre : des solutions ayant des concentrations en co-polyaminoacide variant au plus de 0,25 mg/ml sont préparées de cette manière.
[000585] Suite à l'ajout de la solution de glargine un trouble apparaît. Le pH est ajusté à pH 7, 1 par ajout de NaOH concentré et la solution est placée dans une étuve à 40 °C pendant 1 nuit. Après la nuit à 40 °C les échantillons sont inspectés visuellement et soumis à une mesure de diffusion statique de la lumière à un angle de 173° à l'aide d'un zetasizer (Malvern). La concentration minimale de co-polyaminoacide permettant de solubiliser l'insuline glargine est définie comme la concentration la plus basse pour laquelle le mélange co-polyaminoacide / insuline glargine à pH 7, 1 ± 0,1 est visuellement limpide, ne contient pas de particules visibles et présente une intensité diffusée inférieure à 1500 kcps.
Figure imgf000161_0001
Tableau 1 : Ratio minimum pour solubiliser l'insuline glargine.
[000586] L'ajout de sel permet de diminuer la concentration de co-polyaminoacide requise pour solubiliser l'insuline glargine. Exemple CB : Compositions comprenant de l'insuline glargine
Procédé _ de _ BrgBara.tign.. CB1 ; _ Préparation _ d.'un_e _ composition concentrée co- polvaminoacide/insuiine glargine à pH 7,2. suivant un procédé utilisant l'insuline glargine sous forme liquide (en solution) et un co-potyaminoadde SQus.forme liquide (en solution).
[000587] A une solution mère de co-polyaminoacide à pH 7,1 sont ajoutées des solutions concentrées de ISIaCI et de chloru re du zinc de manière à atteindre les concentrations visées dans la composition finale. A cette solution de co-polyaminoacide est ajoutée une solution de l'insuline glargine décrite dans l'exemple Cl . Un trouble apparaît. Le pH est ajusté à pH 7,5 par ajout de NaOH concentrée et la solution est placée en statique à +40 °C jusqu'à solubilisation complète. La solution obtenue est visuellement limpide et est laissée à refroidir jusqu'à 20-25 °C. Le pH est ajusté à 7,2 par ajout d'une solution d'acide chlorhydrique.
[000588] Selon le procédé de préparation CB1 , des compositions co- polyaminoacide/insuline glargine ont été préparées avec des concentrations en insuline glargine entre 50 UI/mL et 200 UI/mL.
Exemple CC : Compositions comprenant de l'insuline glargine et de l'insuline lispro à pH 7,2
[000589] Procédé de _ préparation _ (XQ ; . Préparation _ d'une composition co- p yamiQoacidê/iDsuline . qtarqine/insytfoe lisprp à pH 7,2
[000590] A la composition concentrée co-polyaminoacide/insuline glargine à pH 7,2 décrite dans l'exemple CB1 est ajoutée une solution de lispro décrite dans l'exemple C2 et si nécessaire de l'eau . La quantité d'excipients ajoutée est choisie de manière à obtenir une concentration de chlorure de zinc de 0-1 mM, de chlorure de sodium de 5-10 mM, de m-crésol de 35 mM et de glycérine de 230 mM dans la composition co-polyaminoacide/insuline glargine/insuline lispro. La solution obtenue est limpide Si nécessaire, le pH est ajusté à la cible de 7,2 par ajout de solutions d'acide chlorhydrique ou d'hydroxyde de sodium.
[000591] Les compositions sont filtrées (0,22 pm) et conservées à 4 °C.
Figure imgf000163_0001
Tableau 2: Compositions d'insuline glargine et d'insuline lispro en présence de co- polyaminoacide. [000592] Les co-polyaminoacides selon l'invention permettent de solubiliser l'insuline glargine en présence d'insuline lispro à pH neutre et conduisent à des solutions limpides.
Partie CD : Résultats Partie CD1 : Mise en évidence de la stabilité physique des compositions selon l'invention par l'étude des compositions précédemment préparées.
[000593] Protocole . JOBl _ _ Etydg__dê__ja_st3biiité . physique . des compositions co- poly¾minoaC)de. insuline qlarqlne/insuline lispro à pH 7,2.
[000594] Au moins 5 cartouches en verre de 3 mL remplies avec 1 mL de composition co- polyaminoacide/insuline glargine/insuline prandiale sont placées dans une étuve à 30 °C en conditions statiques. Les cartouches sont inspectées visuellement à une fréquence bimensuelle afin de détecter l'apparition de particules visibles ou d'une turbidité. Cette inspection est réalisée selon les recommandations de la Pharmacopée Européenne (EP 2.9,20) : les cartouches sont soumises à un éclairage d'au moins 2000 Lux et sont observées face à un fond blanc et un fond noir. Le nombre de semaines de stabilité correspond à la durée à partir de laquelle la majorité des cartouches présente des particules visibles ou est turbide. Les résultats sont présentés dans le tableau 3.
Figure imgf000164_0001
Tableau 3: Stabilité physique des compositions de l'invention CC2, CC5 et CC6.
[000595] Les compositions CC2, CC5 et CC6 présentent une bonne stabilité physique.
Partie D Pharmacocinétique
Dl : Protocole de mesure de la pharmacocinétique de formulations d'insuline glargine et d'insuline lispro.
[000596] Des études chez le chien ont été conduites dans l'objectif d'évaluer la pharmacocinétique des insulines après administration de la composition CC5 comprenant co- polyaminoacide AB35/insuline glargine (150 UI/mL)/insuline lispro (50 UI/mL) .
[000597] Les profils pharmacocinétiques de l'insuline glargine (somme de la concentration circulante en insuline glargine et en son principal métabolite Ml) et de l'insuline lispro ont été obtenus pour cette composition.
[000598] Dix animaux qui ont été mis à jeun depuis 17,5 heures environ ont été injectés par voie sous-cutanée à la dose de 0,68 U/ kg d'insuline. Des prélèvements sanguins sont réalisés pendant les 16h suivant l'administration pour décrire la pharmacocinétique des insulines. Les niveaux de glargine, de glargine-Ml et de lispro sont déterminés par une méthode de bioanalyse spécifique.
[000599] Les paramètres pharmacocinétiques déterminés sont les suivants :
- AUCo -lh/ AUCo h, AUCio-i6h, AUCi3-i6h correspondant à la surface sous la courbe des concentrations d'insuline glargine (et son métabolite Ml) en fonction du temps entre respectivement 0 et 1 h, 0 et 2 h, 10 et 16 h et 13 et 16 h post-administration ; - AUCo -30min, AUCo -lh, AUCs -i6h correspondant à la surface sous la courbe des concentrations d'insuline lispro en fonction du temps entre respectivement 0 et 0,5 h, 0 et 1 h et 8 et 16 h post-administration ;
- AUCiast correspondant à la surface sous la courbe entre le temps 0 et le dernier temps de mesure effectuée sur le sujet..
[000600] Le tableau 4 suivant reporte différents paramètres pharmacocinétiques d'insuline glargine et d'insuline lispro.
Figure imgf000165_0001
Tableau 4 : Paramètres pharmacocinétiques moyens (ratio des moyennes) de la composition
CC5 comprenant le co-polyaminoacide AB35/insuline glargine 150 U/mL/insuline lispro 50 U/mL.
[000601] Les résultats obtenus montrent que, d'une part, la composante glargine de la formulation est absorbée rapidement (AUCo-ih et AUCo-2h) tout en conservant son caractère basal avec une couverture importante sur la partie terminale du temps d'observation (AUCio- 16h et AUC13 -16h) .
[000602] D'autre part la composante lispro est rapidement absorbée (AUCo-3Qmin et AUCo- ih) et conserve son caractère prandial. En effet il n'y a plus de lispro observée au-delà de 8h (AUC8-16h).

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6,0 et 8,0, comprenant au moins :
a) une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris entre 5,8 et 8,5, b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante :
Figure imgf000166_0001
Formule I
dans laquelle
GpR est un radical de formules
Figure imgf000166_0002
Figure imgf000166_0003
GpA est un radical de formules III ou IIG :
Figure imgf000166_0004
- GpC est un radical de formule IV
Figure imgf000166_0005
les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes ;
a est un entier égal à 0 ou à 1 ;
b est un entier égal à 0 ou à 1 ; p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule III' et,
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III; - c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2;
- d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
- r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position IM terminale du co- polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position IM terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :
■ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co-polyaminoacide ou
■ via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co- polyaminoacide;
R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions -COIM H2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule I ou II" ; o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;
- A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, insaturé ou aromatique ;
10 - B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement
15 comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) : o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15), le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités
20 glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hyd rophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ;
le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
25 les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+,
ladite composition comprenant du chlorure de sodium.
2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le chlorure de 30 sodium est présent à une concentration comprise entre 2 et 25 mM,
3. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une insuline prandiale et/ou une hormone gastrointestinale.
35
4. Composition selon l'une quelconque des revendications, caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis par i les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle p = 1, représentée par la formule V suivante :
Figure imgf000169_0001
formule V
GpR, GpA, GpC, r et a tels que définis dans la revendication 1.
5. Composition selon l'une quelconque des revendications, caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle a = 1 et p = 2, représentée par la formule VI suivante :
Figure imgf000169_0002
Formule VI dans laquelle
GpR, GpA, GpC, r et a tels que définis dans la revendication ! ..
6. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hyd rophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII suivante :
Figure imgf000169_0003
formule VII dans laquelle,
• D représente, indépendamment, soit un groupe -CH2- (unité aspartique) soit un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique) ;
• Hy est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI,; • Ri est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI dans lesquelles r=0, r= l ou r= 2, ou un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à CIO, un groupe acyle ramifié en C3 à CIO, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate ;
• R2 est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI, ou un radical - R'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à CIO, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S ;
• X représente un H ou une entité cationique choisie dans le groupe comprenant les cations métalliques ;
« n + m représente le degré de polymérisation DP du co-polyaminoacide, c'est-à-dire le nombre moyen d'unités monomériques par chaîne de co- polyaminoacide et 5 < n + m < 250,
• ledit copolyaminoacide comprenant au moins un radical -Hy.
7. Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, dans laquelle Ri = R'i et R2 = R'2, de formule Vlla suivante :
Figure imgf000170_0001
Formule Vlla
dans laquelle,
- m, n, X, D et Hy tels que définis dans la revendication 6; - R'i est un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à CIO, un groupe acyle ramifié en C3 à CIO, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate ;
- R est un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à
CIO, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S.
8. Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n = 0 de formule Vllb suivante :
Figure imgf000171_0001
Formule Vllb
dans laquelle m, X, D, Ri et Rå tels que définis dans la revendication 6 et au moins Ri ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI.
9. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est l'insuline glargine.
10. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la teneur en insuline basale dont le point isoélectrique est compris entre 5,8 et 8,5 est comprise entre 40 et 500 U/Ml.
11. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le ratio massique entre l'insuline basale et le co-polyaminoacide, soit co-polyaminoacide /insuline basale, est compris entre 0,2 et 8.
12. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 60 mg/mL.
13. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une insuline prandiale.
14. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les proportions entre l'insuline basale et l'insuline prandiale sont en pourcentage de 25/75, 30/70, 40/60, 50/50, 60/40, 63/37, 70/30, 75/25, 80/20, 83/17 ou de 90/10.
15. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une hormone gastrointestinale.
16. Co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy choisi parmi les radicaux de formule I telle que définie ci-dessous :
Figure imgf000172_0001
Formule I
dans laquelle
- GpR est un radical de formules II, IG ou P" :
Figure imgf000172_0002
- GpA est un radical de formules III ou II ;
Figure imgf000172_0003
GpC est un radical de formule IV ;
Figure imgf000173_0001
- les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes;
- a est un entier égal à 0 ou à 1 ;
- b est un entier égal à 0 ou à 1 ;
p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule
IIG et
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III;
- c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2;
- d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
- r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co- polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :
■ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co-polyaminoacide ou
■ via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co- polyaminoacide; - R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions -CONH2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II" ;
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule I ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;
- A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, insaturé ou aromatique ;
- B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) :
o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15),
le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ;
le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+
17. Précurseur Hy' du radical hydrophobe Hy de formule I telle que définie ci- dessous :
Figure imgf000175_0001
Formule !'
dans laquelle
GpR est un radical de formules II, G ou II"
Figure imgf000175_0002
GpA est un radical de formules III ou IIG :
Figure imgf000175_0003
GpC est un radical de formule IV :
Figure imgf000175_0004
- les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes;
- a est un entier égal à 0 ou à 1 ;
- b est un entier égal à 0 ou à 1 ;
p est un entier égal à 1 ou à 2 et
o si p est égal à 1 alors a est égal à 0 ou à 1 et GpA est un radical de formule IIG et,
o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III;
- c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2;
- d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2;
- r est un entier égal à 0, à 1 ou à 2, et
o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co- polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et o si r est égal à 1 ou 2 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :
■ via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par le précurseur du co-polyaminoacide ou
* via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction amine en position N terminale portée par le précurseur du co- polyaminoacide;
- R est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant une ou plusieurs fonctions -CONH2 ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène, un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 12 atomes de carbone portant un ou plusieurs cycles insaturés ou un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; plus précisément, R est un radical choisi dans le groupe constitué par :
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 12 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II" ;
o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant, de 2 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule II ou de 1 à 11 atomes de carbone si GpR est un radical de formule IG ou II", ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et
o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;
- A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 8 atomes de carbone et éventuellement substitué par un radical issu d'un cycle saturé, insaturé ou aromatique ; B est un radical choisi dans le groupe constitué par un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;
Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant une partie cyclique, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :
o si p est égal à 1, x est compris entre 9 et 25 (9 < x < 25) :
o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 < x < 15),
le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre 0 < i < 0,5 ;
lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents ;
le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris entre 5 et 250 ;
les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par Na+ et K+ .
18. Utilisation de chlorure de sodium pour améliorer la stabilité physico-chimique des compositions.
PCT/EP2019/067501 2018-06-29 2019-06-28 Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Ceased WO2020002696A1 (fr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1856067A FR3083089A1 (fr) 2018-06-29 2018-06-29 Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR1856067 2018-06-29
US16/212,960 2018-12-07
US16/212,960 US20190274953A1 (en) 2017-12-07 2018-12-07 Ph 7 injectable solution comprising at least one basic insulin with a pi comprised from 5.8 to 8.5 and a co-polyaminoacide bearing carboxylate charges and hydrophobic radicals

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2020002696A1 true WO2020002696A1 (fr) 2020-01-02

Family

ID=65031347

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2019/067501 Ceased WO2020002696A1 (fr) 2018-06-29 2019-06-28 Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR3083089A1 (fr)
WO (1) WO2020002696A1 (fr)

Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5124314A (en) 1987-08-26 1992-06-23 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions containing amylin
US5234906A (en) 1991-01-10 1993-08-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Hyperglycemic compositions
US5656722A (en) 1988-11-08 1997-08-12 Hoechst Aktiengesellschaft A21 -, B30 - modified insulin derivatives having an altered action profile
US5866538A (en) * 1996-06-20 1999-02-02 Novo Nordisk A/S Insulin preparations containing NaCl
FR2801226A1 (fr) 1999-11-23 2001-05-25 Flamel Tech Sa Suspension colloidale de particules submicroniques de vectorisation de principes actifs et son mode de preparation
WO2003053339A2 (fr) 2001-12-20 2003-07-03 Eli Lilly And Company Molecule d'insuline a duree d'action prolongee
FR2840614A1 (fr) 2002-06-07 2003-12-12 Flamel Tech Sa Polyaminoacides fonctionnalises par de l'alpha-tocopherol et leurs applications notamment therapeutiques
WO2004096854A2 (fr) 2003-04-29 2004-11-11 Eli Lilly And Company Analogues de l'insuline ayant une action prolongee
WO2013021143A1 (fr) 2011-08-10 2013-02-14 Adocia Solution injectable d'au moins une insuline basale
WO2013104861A1 (fr) 2012-01-09 2013-07-18 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide substitue
WO2014124993A1 (fr) 2013-02-12 2014-08-21 Adocia Solution injectable a ph7 comprenant au moins une insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et un polymere anionique hydrophobise
WO2014124994A1 (fr) 2013-02-12 2014-08-21 Adocia Solution injectable a ph7 comprenant au moins une insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et un compose anionique porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
US20170216405A1 (en) * 2010-07-30 2017-08-03 Ferring B.V. Stabilization of fsh
FR3052071A1 (fr) * 2016-06-07 2017-12-08 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon et un co-polyaminoacide
WO2017211917A1 (fr) * 2016-06-07 2017-12-14 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide statistique
WO2017211916A1 (fr) * 2016-06-07 2017-12-14 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5, une insuline prandiale et/ou une hormone gastrointestinale, et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Patent Citations (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5124314A (en) 1987-08-26 1992-06-23 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions containing amylin
US5656722A (en) 1988-11-08 1997-08-12 Hoechst Aktiengesellschaft A21 -, B30 - modified insulin derivatives having an altered action profile
US6100376A (en) 1988-11-08 2000-08-08 Hoechst Aktiengesellschaft A21, B30, modified insulin derivatives having an altered action profile
US5234906A (en) 1991-01-10 1993-08-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Hyperglycemic compositions
US5866538A (en) * 1996-06-20 1999-02-02 Novo Nordisk A/S Insulin preparations containing NaCl
FR2801226A1 (fr) 1999-11-23 2001-05-25 Flamel Tech Sa Suspension colloidale de particules submicroniques de vectorisation de principes actifs et son mode de preparation
WO2003053339A2 (fr) 2001-12-20 2003-07-03 Eli Lilly And Company Molecule d'insuline a duree d'action prolongee
FR2840614A1 (fr) 2002-06-07 2003-12-12 Flamel Tech Sa Polyaminoacides fonctionnalises par de l'alpha-tocopherol et leurs applications notamment therapeutiques
WO2004096854A2 (fr) 2003-04-29 2004-11-11 Eli Lilly And Company Analogues de l'insuline ayant une action prolongee
US20170216405A1 (en) * 2010-07-30 2017-08-03 Ferring B.V. Stabilization of fsh
WO2013021143A1 (fr) 2011-08-10 2013-02-14 Adocia Solution injectable d'au moins une insuline basale
WO2013104861A1 (fr) 2012-01-09 2013-07-18 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide substitue
WO2014124993A1 (fr) 2013-02-12 2014-08-21 Adocia Solution injectable a ph7 comprenant au moins une insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et un polymere anionique hydrophobise
WO2014124994A1 (fr) 2013-02-12 2014-08-21 Adocia Solution injectable a ph7 comprenant au moins une insuline basale dont le point isoelectrique est compris entre 5,8 et 8,5 et un compose anionique porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR3052071A1 (fr) * 2016-06-07 2017-12-08 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon et un co-polyaminoacide
WO2017211917A1 (fr) * 2016-06-07 2017-12-14 Adocia Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide statistique
WO2017211916A1 (fr) * 2016-06-07 2017-12-14 Adocia Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5, une insuline prandiale et/ou une hormone gastrointestinale, et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DEMING, T.J., ADV. POLYM. SCI., vol. 202, 2006, pages 1 - 18
DEMING, T.J., NATURE, vol. 390, 1997, pages 386 - 389
J. AM. CHEM. SOC., vol. 122, 2000, pages 26 - 34
LU H. ET AL., J. AM. CHEM. SOC., vol. 129, 2007, pages 14114 - 14115
LU H. ET AL., J. AM. CHEM. SOC., vol. 130, 2008, pages 12562 - 12563

Also Published As

Publication number Publication date
FR3083089A1 (fr) 2020-01-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3463292B1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
EP3463294B1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide statistique
EP3740229B1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
EP3562500B1 (fr) Compositions sous forme de solution aqueuse injectable comprenant de l&#39;amyline, un agoniste au récepteur de l&#39;amyline ou un analogue d&#39;amyline et un co-polyaminoacide
WO2019110773A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
EP3723728A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR3052071A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon et un co-polyaminoacide
EP3720472A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
WO2019110838A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide
WO2019243628A1 (fr) Composition injectable a ph 7 comprenant un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes et au moins une insuline basale presentant au moins un effet prandial et un effet basal
WO2019115411A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant de l&#39;amyline, un agoniste au recepteur de l&#39;amyline ou un analogue d&#39;amyline et un co-polyaminoacide
EP3672638A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris de 5,8 a 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
WO2020002696A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
US20190274953A1 (en) Ph 7 injectable solution comprising at least one basic insulin with a pi comprised from 5.8 to 8.5 and a co-polyaminoacide bearing carboxylate charges and hydrophobic radicals
FR3061023A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant de l&#39;amyline, un agoniste au recepteur de l&#39;amyline ou un analogue d&#39;amyline et un co-polyaminoacide
FR3067247A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide
FR3061660A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide
FR3074680A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant de l&#39;amyline, un agoniste au recepteur de l&#39;amyline ou un analogue d&#39;amyline et un co-polyaminoacide
FR3083086A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant de l&#39;amyline, un agoniste au recepteur de l&#39;amyline ou un analogue d&#39;amyline et un co-polyaminoacide
FR3083088A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR3074422A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes
FR3083087A1 (fr) Compositions sous forme d&#39;une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide
FR3084585A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un compose amphiphile porteur de radicaux hydrophobes
FR3074681A1 (fr) Solution injectable a ph 7 comprenant au moins une insuline basale dont le pi est compris entre 5,8 et 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19737685

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19737685

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1