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AGENT ECLAIRCISSANT POUR TISSUS HISTOLOGIQUES.
La présente invention se rapporte à la préparation d'échantil- lons tissulaires histologiques en vue de leur examen microscopique, et plus particulièrement à des agents éclairecissants servant à traiter ces tissus au cours d'une telle préparation.
La préparation d'un tissu en vue de son examen microscopique exige que ce tissu subisse de multiples traitements avant que des coupes soient prélevées sur l'échantillon pour être teintes et enfin montées sur les lamelles d'examen. Plus particulièrement, dans la préparation du tis- su, il est nécessaire d'immerger ce dernier successivement et pour des du- rées déterminées dans plusieurs agents liquides destinés, en premier lieu, à fixer le tissu, puis de laver celui-ci pour éliminer le fixateur, puis de le déshydrater, ordinairement en l'immergeant successivement dans un certain nombre d'alcools ou autres agents déshydratants, puis de l'immer- ger dans un agent apte à le rendre transparent et ensuite de l'imprégner d'un agent d'infiltration comme par exemple la paraffine, la celloïdine, etc..
A la suite de ce traitement, on découpe le tissu en tranches de l'é- paisseur voulue dont on élimine ensuite la paraffine ou autre agent d'in- filtration ordinairement à l'aide d'un solvant, après quoi on colore les coupes et on les monte sur des lamelles.
Gomme nul pathologiste ne l'ignore, le traitement d'un tissu. au moyen d'un agent éclaircissant préalablement à son infiltration au moy- en de paraffine consiste à éliminer du tissu tout le liquide qui, s'il y demeurait, serait de nature à diminuer l'indice de réfraction du tissu et à empêcher la paraffine de s'infiltrer parfaitement, en donnant ainsi des coupes de mauvaise venue. Il importe donc au plus haut point que l'agent d'éclaircissement du tissu soit apte à débarrasser le tissu de tout liqui- de de ce genre et qu'il possède une grande aptitude à dissoudre la paraffi- ne ou à se mélanger avec elle, afin de faciliter l'infiltration de celle- ci dans le tissu.
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Il importe aussi au plus haut point que l'agent éclaircissant. soit d'une nature telle qu'il ne durcisse pas le tissu et ne nuise pas aux structures cytologiques de ce dernier. De plus, et entre autres, il est désirable que l'agent éclaircissant soit peut volatil et possède un point éclair élevé. L'agent éclaircissant suivant la présente invention possède, entre autres, ces propriétés et avantages désirables ainsi qu'on va le mettre plus nettement en lumière; il est, en outre, moins coûteux que l'a- gent éclaircissant préféré jusqu'à ce jour par le pathologiste.
L'agent éclaircissant préféré était, jusqu'à présent, l'acétate de butyle. Cette substance, bien qu'assez satisfaisante sous certains rap- ports, ne l'est pas sous d'autres qui sont d'une extrême importance, sur- tout parce que le butyl acétate n'est pas un aussi bon solvant de la paraf- fine qu'on pourrait le souhaiter, parce qu'en outre il a une odeur repous- sante et qu'il est plutôt coûteux.
L'objet essentiel de la-présente invention est de créer un agent éclaircissant perfectionné notamment du point de vue de son aptitude à ren- dre le tissu'transparent et à dissoudre la paraffine, de son haut point d'é- bullition et de son haut point éclair, de sa non-tendance à durcir le tis- su mais bien plutôt de lui conserver sa structure propre, de l'absence de toute odeur déplaisante et de son bas prix.
Suivant l'invention, l'agent éclaircissant comprend de l'essence d'aiguilles de pin comme constituant principal. Cette substance possède un excellent pouvoir éclaircissant pour les tissus; c'est un excellent solvant de la paraffine, qui s'y dissout mieux que dans l'acétate de butyle; son point d'ébullition est élevé (215 5 C.) de même que son point éclair (85 3 C.); elle ne durcit pas les tissus, leur conserve leur structure, est moins coû- teuse que l'acétate de butyle et a une odeur agréable. L'huile d'aiguilles de pin employé suivant la présente invention sera, de préférence, incolore et transparente.
Il est préférable d'abaisser la viscosité de cette essen- ce d'aiguilles de pin, en-vue de quoi il est utile d'employer de l'acétate de butyle qui, en conséquence, sera incorporé à l'agent d'éclaircissement suivant le mode actuellement préféré de mise en oeuvre de la présente inven- tion. De plus, on peut augmenter l'aptitude de l'agent éclaircissant à dis- soudre la paraffine en l'additionnant d'une substance possédant une grande aptitude à dissoudre celle-ci, en vue de quoi il y a intérêt à employer un hydrocarbure chloré, comme par exemple celui que la firme UNION CARBIDE AND CARBON CORPORATION fabrique sous l'appellation commerciale "Hallowax 1000".
L'hydrocarbure chloré doit être un liquide incolore ou de couleur jaune 'paille pâle dont le poids spécifique ne doit pas dépasser environ 1,25 et dont la viscosité doit être comprise entre environ 33 à 37 sec. à l'échel- le Saybolt à la température de 25 C. et dont l'hydrocarbure qui lui donne naissance doit être une fraction passant entre environ 250 et 310 C. Comme la "Hallowax 100011 possède ces propriétés et que son point d'éclair est de 95 C., qu'elle ne durcit pas le tissu et qu'on la trouve facilement sur le marché, c'est elle qu'on a choisie de préférence ainsi qu'il a été dit.
Un exemple d'une composition présentement préférée d'un agent éclaircissant suivant la présente invention est donné ci-après : Essence d'aiguilles de pin (incolore et transparente) 85 parties Acétate de butyle .................... 10 parties "Hallowax 100011 ...... 5 parties.
On prépare la composition en mélangeant ses éléments à la tem- pérature normale. Il va sans dire que les proportions sus-indiquées peuvent être modifiées pour autant que soient conservées les propriétés de la com- position qui constituent l'objet essentiel de l'invention, ce qui apparaî- tra clairement aux yeux des techniciens et à la lumière de-la présente des- cription.
Bien entendu, dans l'emploi de l'agent éclaircissant suivant la présente invention, on y immerge le tissu après 1;lavoir déshydraté et avant
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de lui faire subir le traitement par infiltration de paraffine. Les blocs de tissu composés de tissus, qu'on aura traités au moyen de l'agent d'é- claircissement suivant la présente invention, se comportent infiniment mieux à la coupe; les structures cytologiques de ces tissus sont réelle- ment conservées et la présentation des coupes est considérablement amélio- rée.
On conçoit que diverses modifications peuvent être apportées dans la composition de l'agent éclaircissant suivant l'invention sans qu'on sorte pour cela des limites de cette dernière.
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1. Agent éclaircissant pour servir dans la préparation de tis- sus histologiques en vue de leur examen microscopique, caractérisé en ce qu'il comprend, comme constituant principal,, un liquide contenant de l'es- sence d'aiguilles de pin.