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La présente invention est relative, de manière gêné-' raie, à certainsnouveaux produits chimiques 'antibiotiques utilisables en thérapeutique. Plus particulièrement, êlle concerne des esters et éthersde novobiocine, des sels de ceux-ci, ainsi que des procédés pour la! préparation de ces nouveaux produits chimiques.
La novobiocine (nom générique d'un antibiotique, don une marque est désignée par la dénomination "Cathomycine") est produitepar la croissance,dans des conditions contr8- lées, d'une espèce précédemment inconnue de microorganisme, qui a été appelée Streptomyces shperoides. Ce microorganis- me, qui a été.isolé d'un échantillon de terre provenant d'une vieille pâture gazonnée dans le Verinont, a été désigné sous l'appellation de Streptomyces spheroides MA-
319 dans la collection de cultures de la société Merck &'
Co., Inc., Eahway, New Jersey.
Une culture viable de ce microorganisme a été déposée à la section de fermentation du Northern Utilization Research Bureau du Département de l'Agriculture des Etats-Unis à Peorida, illinois, et ajoutée à sa collection permanente de cultures sous le n NRRL 2449.
Des milieux aqueux convenant pour la culture aérobid de souches de Streptomycesspehides en vue de produire de la novobiocine sont, dé manière générale,ceux convenant pour la production d'autres antibiotiques par culture d'au- tres organismes du genre Streptomyces. Ces milieux contien- nent des sources de carbone assimilable, telles qu'un hydra- te de carbone, des sources d'azote assimilable, telles que liqueur de macération de mais, hydrolysat de caséine, solu-
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bles de distillateur ou analogues, et des sels inorganiques, ainsi que des traces de métaux requis pour assurer un métabolisme convenable du microorganisme.
De préférence,le milieu est maintenu à une température de 24-28 C pendant la période, ordinairement d'environ 1 à 7 jours, pendant laquelle le microorganisme est cultivé et une aération est prévue pour assurer une croissance optimum de l'organisme et la production de novobicine. Les bouillons fermentés produits de cette manière ont une activité d'environ 150-2000 unités de novobiocine, telles que définies plus loin, par cc et les matières solides du bouillon de fermentation ont une activité de l'ordre d'environ 2,25 unités de novobiocine par mgr de matières solides. La matière antibioactive peut être purifiée et récupérée sous forme plus pure par plusieurs procédés.
Ainsi, tout le bouillon peut être filtré à la concentration en ions hydrogène de la récolte, ordinairement à environ pH 7,0-8,0 le filtrat peut être extrait à une concentration en ions hydrogène dans la région acide en dessous d'environ pH 7,0 , à l'aide d'un solvant organique liquide sensiblement neutre, seulement légèrement polaire, non miscible à l'eau, soluble dans de l'acide sulfurique concentré froid et dans de l'acide orthophosphorique sirupeur froid. L'extrait organique peut être extrait à l'aide d'une solution tampon alcaline aqueuse à une concentration en ions hydrogène d'au moins pH 8,5, de manière à obtenir une solution contenant une teneur substantielle en sel de novobiocine.
Les deux stades d'extraction peuvent être répétés en puccession, de manière à obtenir une solution encore plus concentrée,dont la matière novobiochique active peut être récupérée par précipitation à l'acide. Le produit ainsi obtenu peut être purifié par recristallisation dans une so-
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lution alcoolique acide aqueuse.
Le nouvel antibiotique, la novobiocine, comprend les éléments suivants : carbone, hydrogène, azote et oxygène combinés en une substance ayant approximativement la formu- le C31H36N2O11 selon les données dont on dispose actuelle- ment. Il réagit comme un composé organique acide vis-à-vis des réactifs alcalins, tels que des solutions aqueuses d'hydroxydes de carbonates et de bicarbonates de métaux al- calins, et est soluble dans ces réactifs; il comporte deux groupes de liai'son avec des bases et peut]être précipité de sa solution dans des alcalis par acidification.
Il est soluble dans les alcanols inférieurs, les cétones aliphati- ques inférieurs, l'acide acétique, l'acétate d'éthyle, le dioxane; il est insoluble ou seulement peu soluble dans l'éther, le benzène, le chloroforme, le tétrachlorure de carbone, le dichlorure d'éthylène, l'eau et l'acide chlor- hydrique.
De la novobiocine sensiblement pure a été obtenue sous deux formes cristallines : une forme cristallisant sous forme de rosettes et fondant à environ 152-154 c et une autre forme ayant l'aspect d'aiguilles ..plates --fondant à environ 170-172 C Chacune de ces formes cristallines de l'antibiotique peut être convertie en une forme dite norma- lisée, qui peut être une forme amorphe ou sous-microcris-
1 1 talline par dissolution des cristaux dans de l'acétone, par addition rapide à cette solution d'un volume'.relativement grand d'éther de pétrole, et par récupération de la matiè- re normalisée précipitée par filtration.
Les solutions aqueuses alcalines de movobiocine et les suspensions dans de l'huile minérale de la forme normal: sée de l'antibiotique présentent une absorption caractéris- tique, les premières dans les fractions ultraviolettes
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et les dernières dans les fractions infra-rouges du spec- tre. Une solution de novobiocine sensiblement pure dans de l'hydroxyde de sodium aqueux 0,1N présente une pointe o d'absorption d'ultra-violet caractéristique à 3070 A .
Cet-
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te pointe d'absorption est l'indication d'une matière .sensi- blement pure ayant une absorbance spécifique de 600, mesufée à cette longueur d'onde, en utilisant utle solution contenant un gramme de novobiocine pure par 100 cc de la solution, contenue dans une cellule ayant un trajet d'absorption d'un centimètre.
Une solution de-novobiocine pure dans
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de l'acide chlorhydrique itictliaiiolique aqueuse 0,lil présente une pointe d'absorption d'ultra-violet caractéristique.à
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3240 A avec E 1 cm = 390# Une suspension dans de l'huile minérale de novobiocine normalisée sensiblement pure présente des pointes d'absorption d'infra-rouge caractéristiques aux longueurs d'ondes suivantes, exprimées en microns
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5,8-6,0 (large); 6,10, 6' 21, 6 , 30' 6,49, 6:,63, 7 ta.¯ 7,6 (large épaulement); 7,78, 7 96, 8,27 (faible); 8,60 .(épaulmerit); $,7 (épaulement); 9,13, wu, 10,0-10,1 (large); 10,28, 10,60, (large); 12,0-12,30 (large); 12,60- 12,75(large); 13,07 et 13,39.
Les unités de novobiocine indiquent l'activité microbiologique de la novobiocine cristalline sensiblement pure ;
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l'activité inicrohioloxique de la novobiocine sensiblement pure a été fixée arbitraireluent à 50UO unités par mgr et déterminée par des méthodes de diffusion en planue cuvette standard, en utilisant du F3aci1.lus subtilis ATTC 12.432 comme organisme d'essai.
En bref, dits ce procédé, on cultive du 13. subtilis A'1'1'C 12.432 sur des milieux de otiburc inclinés d'infusion de coeur et de cerveau dans de la gélose (Dirco Hanual, die édj -tion, pages 9U,'Jl) pendant 21r heures à 37 C et la culture
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est alorsstockée à 5 C pendant des péroides n'excédant pas un mois. Pour préparer des spores, on prépare Lui inoculum en ajoutant 5 cc d'eau distille,' stérile à une souche
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fraîchement cultivée sur un milieu incliné de 13. subtilis.
Les cellules sont gratt6es .aseptiquement du milieu de culture inclinée, bien Mélangées et transférées dans 50 cc d'eau distill.ée stérile dans un flacon d '.I:!:rlenmeyer. 2 cc de la suspension bactérienne sont introduits, sous forme d'inoculum, dans un flacon de Roux contenant un milieu
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comprenant 3/ de farine de soja, 0,2b de NaCl, 0,4b de solubles de distillateur, U,1>oeJ de lVaC1 et 24,Ù,# de gélose. Après incubation pendant 7 jours à 37'Ce la culture bactérienne obtenue est mise en suspension dans 50 cc d'eau dis- tillée stérile et pasteurisée à 65 C pendant 30 minutes.
4. cc d'une dilution à 1:50 de cette suspension de spores utilisés par litre de milieu d'essai contenant 0, '7:' de
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peptone, 0,.:$/'0 d'extrait de boeuf, U31" d'extrait de levu- re et 1,5% de gélose' à un pH de 5,9-6,1. Des fractions de 15 cc de milieu ensemencé sont réparties dans des boites de Petri profondes à fond - plat.. :
Six cylindres en acier inoxydables sont placés sur la gélose ensemencée.
Trois de cescylindres sont remplis à l'aide d'une solution standard de 4 micro-grammes de novobiocine par cc (ce qui correspond à 20 unités de novo-
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b:iocirie/ec) et les trois autres cylindres sont remplis à l'aide de la solution inconnue diluée apnroxinmtivemcnt jus- qu'à la même activité à l'aide d'un phosphate tampon M/20 à pli de 6,0. Une courbe standard journalière est tracée avec de la novobiocine pure diluée à diverses concentrations
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allant de a lUj1[r/cc.
"près 115 heures d'incubation à 2;OC, I.os diamètres des zones d'inhibition des noiutionn incontlues et standard
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sur chaque plaque sont mesurées. L'activit' du produit incon- nu est déterminée à partir d'un Homographe basé sur le degré de réponse à diverses concentrations établis à partir de la courbe standard journalière.
La novobiocine est optiquement active, % 7D-
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-27 (c=l dans hydroxyde sodique III) et / t('D5 = -440 (c-1 dans pyridine).
La novobiocine est active en ce sens qu'elle inhi- be surtout la croissance de microorganismes à gram positif, bien qu'elle présente également une certaine activité vis- à-vis des microorganismes à gram négatif. Elle inhibe no-. tamment la croissance des organismes suivants :
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M. pyogenes var. a.lbus M. pyogenes var. aureus Dilococcus pneumondae
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Corynebacteriwn'diphteriae type gravis OornebacterlÏ1um diphteriae type iiiteridedius Oorynebacteriul1l, diphtariae type mitis Corytiebacteriwn xerose Neisseria mel1ingitidis Corytiebacteriwn renale Sarcina lutea (VD)
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M. pyogenes var. aureus résistaiit à l'auréomycine M.pyogenes var. aureus résistant à la streptomycine streptothricine M. pyogenes var. aureus résistant à la pénicilline Les sel.s de novobiocine ont également une activité antibiotique.
Ainsi, on a constate que le sel sodique de novobiocine inhibe, lorsqu'il est testé par l'essai de dilution sur gélose, la croissance' de diverses souches de M.
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pyogenes var. aureus, rleisseria moiiingitidis (n 2?g) et Sarcna l.utea (VD) à des concentrations inférieures à
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0,5 megrpar cc. D'autres microorganismes sont également affectés par la novobiocine ou ses sels à divers degrés.
Conformément à la présenteninveentio, on a décou- vert à présent que les esters et éthers de novobiocine et leurs sels, qui peuvent être préparés par les procédés dé- crits plus loin, constituent de nouvelles substances anti- biotiques précieuses. Les esters nobobociniques d'acides carboxyliques comportant 1 à 7, atomes de carbone et les éthers d'hydrocarbures de novobiocine, dans lesquels les hydrocarbures ont 1 à 7 atones de carbone, constituent 'des composés préférés suivant la présente invention, parce que ces composés se préparent aisément à partir de matières pre- mières que l'on peut se procurer facilement et parce qu'ils possèdent une activité antibiotique substantielle.
Comme pour la novobiocine, l'activité de ces nouveaux esters et éthers peut être déterminée par des méthodes de diffusion standard en plaque-cuvette, en utilisant du Bacillus subti- lis comme organisme d'essai et en suivant les modes opéra- toires décrits plus haut.
Il a été constaté que la: novobicoine comporte trois substituants hydroxyle alcooliques, dont les atomes d'hydro- gène peuvent être remplaces par des groupes d'hydrocarbures.
Ainsi, l'invention englobe les éthers mono-, di- et tri- substitués de movobicine. Par ailleurs, la novobiocine réa- git avec des agents d'acylation de manière à produire des dérivés mono-, di- et tri-acylés.
Suivant une forme d'exécution de la présente inven- tion, on a constat- qu'on peut obtenir des esters de novo- biocine en faisant réagir de la novohiocine avec des agents d'acylation appropries, ainsi, lorsqu'on fait réagir de la novobiocine avec des agents joli tels que des anhy- drides d'acides, tels que l'anhydride acétique, l'anhdriide
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propionique, l'anhydride butyrique et analogues, ou avec des halogénures d'acyle, tels que le chlorure d'acétyle, le chlorure de butyryle, le chlorure de benzoyle et analogue en présence d'un alcali, on obtient les dérivés acylés dési- rés de novobiocine.
Le degré d'acylation, c'est-à-dire la production du produit mono-, di- ou tri-acylé, dépendra en partie des conditions de réaction utilisées pour l'acylation et des quantités d'agent d'acylation employées dans la réac- tion. Ainsi, lorsque de grands excès des agents d'acylation et des conditions d'acylation plus sévères sont employées, on obtient le dérivé tri-acylé. Lorsqu'on utilise des quan- tités moindres d'agents d'acylation et lorsqu'on opère ,dans des conditions de réaction plus modérées, on obtient les dérivés mono- .et 'di-acylés.
Les trois groupes fonctionnels de la. novobiocine varient en ce qui concerne la facilité avec laquelle ils peuvent être acylés et la facilita avec laquelle les groupes acyle peuvent être hydrolyses. Un groupe fonctionnel, qui paraît être un groupe hydroxyle, peut être aisément acylé -par réaction de novobiocine avec environ un équivalent d'un agent d'acylation dans des conditions de réaction modérées.
Le substituant acyle peut aussi être hydrolyse très facilement par réaction avec un alcali. Le dérivé di-acylé, qui se prépare par réaction de novobiocine avec environ deux équivalents d'agents d'acylation, peut être hydrolysé par réaction avec environ un équivalent d'un? base, de manière à former le dérivé mono-acylé. Le troisième groupe fonc- tionnel est plus difficile à acyler et la préparation du dérivé tri-acylé se fait par r action avec une quantité d'a- gent d'acylation excédant trois équivalents. La réactivite de ces groupes fonctionnels cie novobiocine constitue un moyen précieux pour la préparation des dérivés acylés.
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Parmi les dérivés acylés de novobiocine, qui peuvent être préparés par le procède décrit plus haut, on peut citer
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Les dérivés monoacjylé, monobutyrylé, monobenzoyl6, dipropiony -le, dibenzoylé, triacétylé, tripropionyl et tribenzoylé de novobiocine.
En se basant sur des études structurelles, on suppose que la novobiocine peut être représentée structurellement comme suit :
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Compte tenu de cette structure, les dérivés acylés de novobiocine suivant la présente invention peuvent être représentés, en ce qui concerne les dérivés mono- et diacylés, par la formule de structure suivante :
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Le dérive llIonoacéty1é est celui de formule' donnée ci-dessus, dans If1ouell.<> RI est un groune UH3GO- et 112 dúnÍ.';llo de l'hydrorgôno. Le dériva diacetylé est celui de l'ormtle <ionnôa cidessus, (Joli:) lnCjue 11.0 IL l e-t K désignent tous doux des groupes aciùty16=. La structure du arrivé triacéty16 ne peut pas
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être définie avec certituae à présent.
L'invention concerne également de;, éthers précieux de novobiocine. Etant donne, comme on l'a .souligne plus haut, que la réactivité des groupes hydroxyle ue novobiocine varie, on peut, cornue dans les r@actions d'acylation en question, préparer des mono-, di- et tri-éthers de novobiocine En général, les éthers de movbiocine peuvent se préparer par n'importe lequel des divers procédés connus pour la prépa- ration d'éthers. Ainsi, les éthers alcoyliques inférieurs peuvent se préparer en faisant réagir-de la novobiocine avec des sulfates dialcoyl.iques, tels que les sulfates de dimé- thyle, de diéthyle ou de diisopropyle.
Les éthers peuvent ainsi ëtre obtenus en faisant réagir de la novobiocine avec
1' halogénure.d'alcool approprié en présence dtoxyde d'ar- gent ou par réaction avec un diazo-alcane, tel que le diazo- méthane.Parmi les éthers de novobiocine qui peuvent être préparés par le procédé suivant l'invention, on peut citer les éthers monométhylique, omomnobutylique, monobenzylique, diétliylique, dipropyloque., triméthylique, tricthylique, tri- butylique et ,tribenzylique de movobicine.
Compte tenu de la structure présentement attribuée à la novobiocine les éthers de novobiocine suivant l'inven- tion peuvent être- représentés par la formule de structure suivante :
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,le ether U1QnométhyJiq.a Ri = R 2 H et R.3 = -CE I.. ther wonométhylique R 1 = U3 = 1I' et P.2= -CH3 III. Ettier cïmétlay3.icltie' RZ = Ii et R2 = R3 = -CH 3 ,.1F. Etlier tritnéthyliq4o R R . 2 = R ¯CH 3 .' V-.
Ether. diiiiétllyliquè R .¯¯ H et Ri = R3 = zich 11 va de soi que ces explications théoriques tou-
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chant le's'"f;3tuc'tú.rs' pdss-ibles des dérivés acétylés et méé- thylés sont basées sur la connaissance actuelle'qu'à la.' demanderesse de .ces produits et n'excluent pas la possibili- -té que .des données expérimentales futures 'établissent que les structures -supposées sont, en fait, incorrectes, En con-
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'séquence, la demanderesse.ne de sire -pas dtrè 'lil\lit(e 'par' 'ces considérations théoriques,'si même Celles-ci peuvent résulter des connaissances 'quelle possède à l'heure actuel-* .
le., Ces explications sont présentées principalement 'pour
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," pérH1ettf> ,'une yrna.il7.eure .conyrâyetxsâ.oi' de l' ïnveÙtiOll. '.' .Les ,X'I\1Pes suivâilia il7.usi;rent 1 'dé" .de, 9] préi?rè.tii1..deg n'cuve'aUx e sters et, éthers de novobiocine suivant l'invention'
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E]#;JPlli '.1. '- .,
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l,fovob-Lociiie trioiioiiiétliylèe (:).-
Une solution'de 10 gr -de novobiocine dans 25 ce dteau et de 32,4 ce d'hydroxyde sodique aqueux 114 est trai-
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tuée' à 5 C pu agitant, avec 4,gr de sulfate de diméthyle et 35e8 ce d'hydroxyde de sodium 11Ï. I7e's fractions suppléinentaires de sulfate de dtmpthyle et' drhydroxyde de sodium
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IN sont égouttces après 15 et 30 minutes.
L'agitation à 5 C est poursuivie pendanb 1,5¯ heures au total. La solutidif est acidifiée et. la matière solide.obtenue est]séchée; en. sorte qu'on obtient. 11 gruz de novobiocine monométhyléo.
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Une/solution de 9 gr du produit dans 25 cc d'àcétàlié est traitée avec.du charbon de bois activé et filtrée sur
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un adjuvant de filtration constitué par de la terre à diato- mées. Par addition d'éther de pétrole au filtrat, le produit
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purifié précipite; L 4¯tµ'? = -37e. (0=1,5 dans dioxane). Analyse : trouvé : N=l, 9i; CH j0- = 9,90ft.
Bl#l'1P ili 2. Novobiocine iiioiioinétllyl6e (11).-
Une solution de 10 gr de novobiocine dans 100 cc de dioxane est traitée à température ambiante avec une solu.
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tion éthérée de ,6'7 gr de diazoinr'tilatie. La réaction est sensiblement instantanée, ainsi que le révèle un dégagement intense d'azote. La dilution de la solution dioxamique avec de l'eau provoque la précipitation de novobiocine monométhylée (II).
EXEMPLE 3
Novobiocine diméthylée (III).:.
. Une solution de 8 gr de novobiocine monométhylés ( I ) (préparée de la manière décrite dans l'exemple 1) dans @ 100 cc de dioxane est traitée avec une solution éthérée de
0,48 gr de diazométhane. La réaction est sensiblement instàn- tanée, ainsi que le révèleun dégagement intense d'azote.
La dilution de la solution dioxamique avec de ,l'eau provo= que la précipitation de novobiocine diméthylée (III).
EXEMPLE 4. -
EMI12.3
Novobiocine triméthylée-. (IU').-
5 gr de novobiocine diméthylée (III) (préparée de la manière décrite dans l'exemple 3) sont dissous dans 20 ce de dioxane chaud. La solution est traitée avec 30 cc d'iodire de méthyle et le mélange est chauffé au reflux pondant 3 à 4 heures, tandis que 5 gr d'oxyde d'argent sont ajoutés titi plusieurs fractions. Le mélange réactionnel est filtré et concentré.
Le procédé de méthylaton (chauffage au re- flux avec de l'iodure de méthyle, en présence d'oxyde d'argent) décrit plus haut est répété, sur le résidu autant de
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fois qu'il est nécessaire pour obtenir une iiiétilylitioil com-
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plète, révélée par des déterminations de groupes méthoxyli- , ques.
EXEPLE 5.-
Novobiocine diméthylée (v).
Une solution de 4 gr de novobiocine riméthylà (IV) (préparée de la manière décritedans l'exemple 4) dans 30 ce de méthanol est traitées avec l équivalent d'une solution d'hydroxyde de sodium en solution IN (5,5 ce).. La solution est maintenue à température ambiante pendant 15 à 45 minutes.
La solution est acidifiée avec de l'acide chlorhydrique. Par dilution avec de l'eau, il précipite de la notobiocin di- méthylée (V).
EXEMPLE 6. -
Nobobicine triacétylée.-
Une solution de 1 gr de nobobiocine dans 5 cc de pyridine est traitée avec 3 ce d'anhydride acétique. La so- lution est maintenue à température ambiante pendant 16 heu- res; puis acidifiée à la température de la glace à l'aide de 25 ce d'acide chlorhydrique 2,5 N. Une' niasse pâteuse se sépare après agitation pendant environ 2 heures. L'ester monoacéthylique solide séché de obobiocine # 25D -41 - (c-1 dans CHOH) pèse, 1,1 gr et fond en se décomposant à 105-110 C,
EXEMPLE 7.- Novobiocine' diacétylée (11).-
Une solution de 1 gr de novobicine dans 5 cc de pyridine anhydre est traitée avec deux équivalents (0,161 gr) d'anhydride acétique.
La solution est maintenue à température ambiante pendant 5 à 10 heures et acidifiée à la température de la glace à l'aide de 25 cc d'acide chlorhdrique 2,5 N. Il se sépare une masse pâteuse, qui se solidifie par agitation. La
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novobiocine diacétylée est séparée par filtration et est purifiée par recristallisation.
EXEMPLE 8.-
Novobiocine monoacétylée (III).-
Une solution de 1 gr de novobiocine diacétylée (II) (préparée de la manière décrite dans l'exemple 7) dans 10 cc de méthanol est traitée avec 2,68 cc d'une solution IN d'hydroxyde de sodium. Après avoir été maintenue à température ambiante pendant ,environ 1 heure, la solution est acidifiée à l'aide d'acide chlorhydrique dilué et est diluée avec de l'eau. La novobiocine monoacétylée (III) précipitée est purifiée par recristallisation..
Les esters et éthers suivant la présente invention possèdent une ,activité antibiotique remarquable tant in vivo qu'in vitro vis-à-vis d'une grande variété de microor- ganismes pathogènes. Ainsi, le tableau I suivant¯montre l'efficacité in vitro de la novobiocine triacétylée et de la movobiocine monométhylée (I) en comparaison de celle de la novobiocine.
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TABLEAU I .
Efficacité in vitro de défivés de la novobiocine Diamètres des,zones en millimètres.-
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<tb> Composés <SEP> Concentrations
<tb>
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C""o 0) 0 [/} F-1 rI)""' C""o ,.... ci lro [/} !> ri) h!J Ou -.-/ t" k;a -'? z 4- ) N ,.... .,ro µ u" ...... -n.... CU::J CUS::S:: rd 0 o.
, ID :>; 0 cu 0 .!:: j ..p qµ ID ::$ (1) '-"J m ù $ o Cti 1 ' 5 -ri r-! 0 o,. ' , x m.d .d Po [J) C) 94 rxl CI) Co ta 0 . j .''' n
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<tb> CI) <SEP> ré <SEP> Vo <SEP> CI) <SEP> CI) <SEP> D <SEP> si
<tb> @ <SEP> tJl
<tb> Novobiocine
<tb>
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triacetylatée 10 mgr/cc 17 l7 . 15Susp.10,'b dan% C2H,.OH Me!lÔ'!!é:;hy1atée ,9,,-mgfc.c:. "." + . 1i 20 13 13. 34 23 22 19 21 18 :50, C2H If NO'Jt\5.oci.l1e -' ¯¯. ¯. p±9$ - mgr/cc-.:
.. - - + 14 - - 15 15 55fJ CZtl 50H 28 NO"rob io cine 1q mg./cc 1$ 22' 26. 20 20 - 23 2$ 21 I mg./cc + 16 21 13 14 - 1$ 20 21 19 18 14 o,1 mg* /cc . 27 16 - 15 14 +
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<tb> 0,01 <SEP> mg. <SEP> cc <SEP> 27 <SEP> 16 <SEP> 15 <SEP> 14
<tb>
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D'autres expériences on démontré que les dérivés tri acétylé et monométhylé (I) sont efficaces pour traiter des
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souris infectées de !'!. pyogènes var. aureus.
Les résultats de ces expériences sont montrés dans le tableau II suivant :
TABLEAU II. - Efficacité in vivo de dérivés de la novobiocine vis-à-vis
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du M.pyogeiies var. aureus 5rnith,-
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<tb>
<tb> Composé <SEP> mg/souris <SEP> Nombre <SEP> de <SEP> survivants/
<tb> total
<tb> Essai <SEP> n <SEP> 1 <SEP> Essai <SEP> n <SEP> 2
<tb> (dose <SEP> sous-cutanée <SEP> (dose <SEP> buccale <SEP>
<tb> unique) <SEP> unique)
<tb> (1,25 <SEP> - <SEP> 1/10
<tb> Novobiocine <SEP> @
<tb> triacétylatée(2,5 <SEP> 2/5 <SEP> 2/10
<tb> ( <SEP> 4/5 <SEP> $/la
<tb> (0,625 <SEP> - <SEP> 2/10
<tb>
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Novobiocine z25 - 7/10 (ED 50 Novobiocine ' ' gi.cz monométhyla- (2p5 1010 mg) ;
+."
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<tb>
<tb> (5,0 <SEP> 5/5 <SEP> 10/10
<tb> (10,0 <SEP> 5/5Animaux <SEP> de
<tb> contrôle <SEP> infectés <SEP> 0/10 <SEP> 0/10
<tb>
Les éthers et esters suivant la présente invention constituent des agents bactéricides de valeur, qui peuvent être utilisés par application topique dans le traitement de plaies et infections. A cet effet, 1 à 10% de ces esters et éthers peuvent être incornorés à des véhicules courants pour onguents. Ces comnosés conviennent particulièrement pour la préparation d'onguents, car ils sont plus solubles dans les huiles que la novobiocine.