<EMI ID=1.1> <EMI ID=2.1>
La présente invention est relative à de nouveaux
<EMI ID=3.1>
<EMI ID=4.1>
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tuellement substitués et comportent au plus six atomes de carbone, et à leurs sels, ainsi qu'à un procédé particulier pour leur préparation.
Les restes hydrocarbonés aliphatiques inférieurs
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comme les restes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle,
<EMI ID=7.1> <EMI ID=8.1>
terreux thérapeutiquement utilisables, comme le sodium, le potassium ou le calcium, ou des sels avec des bases organiques telles que, par exemple, la triéthylamine,
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procaïne.
Les nouveaux composés possèdent une activité
<EMI ID=10.1> .megatherium et du Staphylococcus aureus, en particulier aussi vis-à-vis de souches pénicillino-résistantes, mais surtout également vis-à-vis des bactéries à Gram- négatif, par exemple vis-à-vis de l'Escherichia coli,
<EMI ID=11.1>
murium. Ils peuvent par suite être utilisés comme médicaments en médecine humaine et vétérinaire, ainsi que comme adjuvants à la nourriture des animaux et pour la conservation de substances alimentaires.
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sels sont particulièrement intéressants.
Les nouveaux composés sont obtenus lorsqu'on
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de la formule (II)
<EMI ID=14.1>
dans laquelle R représente de l'hydrogène ou le groupe <EMI ID=15.1> dant à la formule (III)
<EMI ID=16.1>
.puis, si on le désire, transforme les composés obtenus en leurs sels.
Il est surprenant que le procédé indiqué. puisse être mis en oeuvre avec de bons rendements. Jusqu'à présent, on ne pouvait pas acyler sur l'oxygène les
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pouvait le faire qu'avec un mauvais rendement. Dans les méthodes usuelles, par exemple avec les chlorures d'acide ou les anhydrides d'acide, il se forme, à côté de la lactone, des substances présentant un anneau lactame ouvert et seulement peu de dérivé acylé où pas du tout.
Il était inattendu que la réaction sur les esters de l'acide isocyanique fournisse de façon nette et avec <EMI ID=18.1>
de l'acide isocyanique est effectuée, de préférence, en' présence d'une base organique azotée forte telle qu'une
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diméthylformamide, le chlorure de méthylène, le tétrahydrofuranne ou l'acétonitrile, par exemple. Au cas où
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réaction peut être différent de A-, ou être identique
<EMI ID=22.1>
On peut aussi, à un stade quelconque du procédé, estérifier le groupe carboxylique avec des alcools
<EMI ID=23.1>
lique et saponifier à nouveau l'ester à un stade ultérieur, par exemple avec de l'acide trifluoracétique. La transformation provisoire de l'acide en l'ester convient très bien pour la purification des produits.
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de la formule (Il) qui sont utilisés comme substances de départ sont obtenus en désacétylant les acides 7-
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avec l'acétyl-estérase. La méthode connue pour la préparation de l'acide désacétyl-7-amino-céphalosporanique peut être notablement améliorée en acidifiant la solu-. tion à un pH de 4, 5 lorsque la réaction enzymatique est terminée, l'acide précipitant de la solution et pouvant être séparé.
Les nouveaux composés peuvent être ulules <EMI ID=26.1>
ganique, solide ou liquide, qui est appropriée pour une application entérale, topique ou parentérale, Pour.la formation de cette matière de support, on envisage les substances ne réagissant pas sur les nouveaux composée,
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d'autres excipients connus. Les préparations pharmaceutiques peuvent se présenter, par exemple, à l'état de comprimés, de dragées, d'onguents, de crèmes, de
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stabilisation, des agents mouillants ou émulsifiants,
<EMI ID=31.1>
la pression osmotique, ou des tampons* Elles peuvent aussi renfermer d'autres substances thérapeutiquement précieuses. Les préparations sont obtenues suivant les méthodes usuelles.
L'invention concerne également, à titre de produits industriels nouveaux, les composés obtenus par la mise en oeuvre du procédé défini ci-dessus ; ces produits ne sont toutefois pas protégés par le présent brevet pour leurs emplois en thérapeutique.
L'invention est décrite plus en détail dans les exemples non-limitatifs qui suivent, dans lesquels
<EMI ID=32.1>
<EMI ID=33.1>
sur du gel de silice, on utilise les systèmes suivants :
Système 1 : mélange de butanol normal et d'acide
acétique glacial (10:1), saturé d' eau. Système II mélange d'acétate d'éthyle, de pyridine,
d'acide acétique et d'eau (60:20;6:11). Système III : mélange de butanol normal, de pyridine,
d'acide acétique et d'eau (30:20:6:24).
EXEMPLE 1
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<EMI ID=36.1>
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d'isocyanate de p-chloréthyle (14,7 m.moles). Après
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matière s'est dissoute. On laisse reposer pendant 23 heures à 25[deg.] dans l'obscurité et évapore ensuite la solution réactionnelle sous vide à une température de bain de 30[deg.]. On répartit le résidu huileux entre un
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normale de bicarbonate de sodium. On extrait la phase organique encore avec deux autres portions de la solution normale de bicarbonate de sodium. On ajuste les extraits aqueux à un pH de 2 avec de l'acide phosphorique à 85 % et extrait à plusieurs reprises à l'acétate d'éthyle.
Après avoir séché les extraits sur du sulfate de sodium et les avoir évaporés sous vide, on obtient à l'état brut <EMI ID=40.1>
<EMI ID=41.1>
<EMI ID=42.1>
d'acétate d'éthyle, secoue pendant 10 minutes avec 1,8 g d'un charbon adsorbant, filtre à travers.une mince couche
<EMI ID=43.1>
Les 900 premiers centimètres cubes de filtrat renferment
<EMI ID=44.1>
couche mince, il présente les valeurs de Rf suivantes=
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Après pulvérisation avec le réactif à l'iode, à l'amidon et à l'acide acétique, on obtient des taches incolores sur fond violet.
<EMI ID=46.1>
sous forme cristalline à partir de l'acétone ou d'un mélange d'un-peu de méthanol avec beaucoup d'acétone après évaporation du méthanol. Le produit ainsi obtenu, séché sous vide poussé sur du pentoxyde de phosphore, contient un mol d'acétone
<EMI ID=47.1>
sans fondre; quand on échauffe très vite, le produit fond à
156[deg.]C. Dans le spectre ultra-violet dans l'éthanol on
<EMI ID=48.1>
<EMI ID=49.1>
ainsi obtenu est très facilement soluble dans l'eau.. Il se décompose au-dessus de 130[deg.]C. Dans le spectre
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20
<EMI ID=51.1>
nique en le transformant en l'ester benzhydrylique cristallin et en saponifiant ensuite celui-ci :
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et, tout en agitant; ajoute lentement une solution filtrée de 2,3 g (11,9 m.moles) de diphényl-diazométhane
<EMI ID=53.1>
<EMI ID=54.1>
puis laisse reposer pentant 4 heures au total. On évapore:
<EMI ID=55.1>
_ qui, une fois cristallisé dans un mélange 'de méthanol et d'eau, se présente sous la forme d'une poudre
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<EMI ID=57.1>
de mercure. On reprend le'résidu dans un mélange de benzène et d'acétate d'éthyle (5:2), puis secoue avec une solution aqueuse à 10 % de biphosphate dipotassique.
A partir de la phase aqueuse, on extrait le produit à un
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':..par séchage sur du sulfate de sodium et évaporation,
<EMI ID=59.1> <EMI ID=60.1>
constitué par un mélange de butanol normal et d'acide acétique glacial (10:1) saturé d'eau), le produit est
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spectre d'absorption infra-rouge (dans le nujol), on peut, dans la région du carbonyle, observer des bandes ,
<EMI ID=62.1>
la solution sous vide jusqu'à la moitié de son volume, puis dilue avec 4 parties en volume d'éther. Le sel de potassium précipite sous la forme d'une poudre gris clair.;:
Dans le tableau 1 qui suit, on a indiqué l'ac- tivité in vitro (concentration inhibante minimale en
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(sur la souris, par voie sous-cutanée, en mg/kg, 50 % de survivantes), du composé (1) en comparaison du composé correspondant qui, à la place du reste carbamoyle,
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de la "cephalothine".
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qui est utilisé comme matière de départ peut être préparé comme suit :
<EMI ID=68.1>
et, tout en agitant énergiquement, ajoute goutte-à-goutte une solution 0,2-normale d'hydroxyde de potassium jusqu'à obtenir un pH de 6,7, toute la matière passant en solution. On ajoute ensuite au tout 4 em<3> d'une solution aqueuse d'acétyl-estérase stabilisée avec de l'oxalate de sodium. On neutralise l'acide acétique libéré, à l'aide d'un appareil automatique à titrer, avec une solution 0,2normale d'hydroxyde de potassium (ajustement à un pH
de 6,7). Au bout de 9 heures, on a consommé 81 % de la théorie de la solution d'hydroxyde de potassium. On ajoute maintenant deux autres centimètres cubes de la solution d'acétyl-estérase ; dans les quatorze heures
qui suivent, on consomme toutefois seulement quatre autres pour cent de la solution d'hydroxyde de potassium. On filtre la solution réactionnelle jaune, légèrement trouble, à travers de la célite. On précipite l'acide désacétyl-7-amino-céphalosporanique en acidifiant le filtrat limpide à un pH de 4,5 avec de l'acide acétique ' binormal. Le rendement est de 161 mg. Dans le spectre infra-rouge (dans le nujol), on observe entre autres
<EMI ID=69.1>
n'est indubitablement plus présente. Dans un chromato- gramme en couche mince effectué sur du gel de silice dans un système constitué par un mélange de butanol normal, de pyridine, d'acide acétique et d'eau <EMI ID=70.1>
chiffres indiquant le nombre de centimètres de la migration vers l'anode)
<EMI ID=71.1>
<EMI ID=72.1>
<EMI ID=73.1>
de chlorure de sodium, on homogénéise, en 8 portions
de 200 g, les 1.600 g de flavédo ainsi obtenus. A la bouillie de chaque portion qui se forme, on ajoute aussitôt 20 g de célite et essore à travers un filtre en "nylon". Pour stabiliser l'estérase, on sature de 52 g <EMI ID=74.1>
finalement la solution de l'enzyme et la conserve à 00.
EXEMPLE 2
D'une manière analogue à celle de l'exemple 1,
<EMI ID=75.1>
formule
<EMI ID=76.1>
sur de l'isocyanate de P-chloréthyle et de la triéthyl-
<EMI ID=77.1> de triéthylamine, on fait bouillir pendant 8 heures, sous un léger reflux, 544 mg (2 m,moles) d'acide 7-amino-
<EMI ID=78.1>
<EMI ID=79.1> <EMI ID=80.1>
<EMI ID=81.1>
la sèche sur du sulfate de sodium et l'évaporé de façonménagée. A partir du résidu, on obtient, après recristallisation dans un mélange d'acétone, d'acide acétique et
<EMI ID=82.1>
céphalosporanique sous la forme de cristaux presque
<EMI ID=83.1>
Le sel.de sodium préparé à l'aide d'éthyl-hexanoate
<EMI ID=84.1> chloréthyl-uréido)-céphalosporanique et ajuste le pH à une valeur de 6,7 avec une solution 0,02-normale
<EMI ID=85.1>
solution d'acétyl-estérase et neutralise ensuite l'acide acétique libéré lors de la désacétylation qui se produit, à l'aide d'un appareil automatique de titrage, avec une solution 0,02-normale d'hydroxyde de sodium, à un pH
<EMI ID=86.1>
consommé une quantité de la solution d'hydroxyde de sodium qui correspond à 80 % de la théorie. L'acide
<EMI ID=87.1>
qui s'est formé présente les valeurs de Rf suivantes dans un chromatogramme en couche mince sur du gel de silice (développé avec un réactif à l'iode, à l'amidon et à l'acide acétique) ;
<EMI ID=88.1>
<EMI ID=89.1>
céphalosporanique (fondant à 160[deg.] en se décomposant) qui est utilisé comme substance de départ peut être préparé, suivant le procédé décrit dans l'exemple 2, en faisant réagir de l'acide 7-amino-céphalosporanique sur de
<EMI ID=90.1>
désacétylation enzymatique. Dans un chromatogramme en couche mince sur du .gel de silice, le composé présente les valeurs de Rf suivantes :
<EMI ID=91.1>
EXEMPLE 4
D'une manière analogue à celle décrite dans .les exemples 1 et 2, on prépare l'acide O-désacétyl-0- <EMI ID=92.1>
uréido)-céphalosporanique qui est utilisé comme matière de départ peut être obtenu d'une manière analogue à
<EMI ID=93.1> <EMI ID=94.1>
<EMI ID=95.1>
<EMI ID=96.1>
formule
<EMI ID=97.1>
<EMI ID=98.1>
Dans le système I, la valeur de Rf est de 0,68.
<EMI ID=99.1>
<EMI ID=100.1>
<EMI ID=101.1>
départ peut être préparé suivant le procédé décrit dans l'exemple 2, en faisant réagir de l'acide 7-amino-
<EMI ID=102.1>
<EMI ID=103.1>
EXEMPLE
<EMI ID=104.1>
100 mg de triéthylamine absolue et 100 mg d'isocyanate d'éthyle, puis maintient pendant 2 heures à 50[deg.], à l'abri de l'humidité. Au début de la. réaction, on secoue à l'occasion, jusqu'à ce que la matière non dissoute soit passée en solution. Lorsque la réaction est terminée,
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dans un évaporateur rotatif. On ajoute au résidu une solution aqueuse demi-normale de bicarbonate de sodium et
<EMI ID=106.1>
avoir acidifié à l'acide chlorhydrique, à un pH de 3, la phase aqueuse extraite, on procède à une extraction jusqu'à épuisement avec de 1'acétate d'éthyle, réunit les extraits obtenus à l'acétate d'éthyle, les lave l'eau et avec une solution saturée de chlorure de sodium, les sèche avec du sulfate de sodium et les évapore à sec-. Le résidu presque incolore renferme
<EMI ID=107.1>
céphalosporanique-. Dans le spectre infra-rouge (pris dans le nujol), ce dernier composé présente des bandes
<EMI ID=108.1>
<EMI ID=109.1>
<EMI ID=110.1>
de p-chloréthyle dans le diméthylformamide, on reprend
300 mg (0,65 m.mole) du sel de triéthyl-ammonium de l'acide désacétyl-7-(chloro-tertio-butyl-uréido)-
<EMI ID=111.1>
réaction, on fait agir des ultra-sons d'une fréquence de.45 kHz. On évapore ensuite à sec sous vide, dissout dans un mélange (1;1) d'acétate d'éthyle et d'une solu- <EMI ID=112.1>
puis acidifie à un pH de 2,0 avec de l'acide phosphorique
<EMI ID=113.1>
on ajuste le mélange à un pH de 8,0 avec une solution aqueuse à 50 % de phosphate tripotassique, puis lave à l'acétate d'éthyle. On ajuste la phase aqueuse à un pH de 2,0 avec de l'acide chlorhydrique concentré et extrait le produit à l'acétate d'éthyle. Après avoir séché l'extrait sur du sulfate de sodium et l'avoir évaporé sous vide, on obtient 140 mg d'acide désacétyl-0-((3-
<EMI ID=114.1>
céphalosporanique. En ce qui concerne les concentrations inhibantes minimales in vitro et les valeurs de Rf dans
<EMI ID=115.1>
tableau 2..
EXEMPLE 8
<EMI ID=116.1>
l'exemple 7, 300 mg (0,65 m.mole) du sel de triéthyl- ammonium brut de l'acide désacétyl-7-(chloro-tertio- butyl-uréido)-céphalosporanique sur 1,3 m.mole d'isocyanate de chlorométhyle, on obtient 75 mg d'acide désacétyl-0chlorométhyl-carbamoyl-7-(chloro-tertio-butyl-uréido)céphalosporanique. En ce qui concerne la caractérisation, voir le tableau 2.
<EMI ID=117.1>
<EMI ID=118.1> <EMI ID=119.1>
<EMI ID=120.1>
<EMI ID=121.1>
à 60 % environ, puis traite. On obtient 81 mg d'acide <EMI ID=122.1>
dans le tableau 2.
<EMI ID=123.1>
les propriétés sont indiquées dans le tableau 2,
<EMI ID=124.1>
Chromatogramme en couche mince sur du gel de silice : Indicateur =.
vapeur-d'iode ,Les numéros-souches signifient :
<EMI ID=125.1>
TABLEAU 2 <EMI ID=126.1>
<EMI ID=127.1>
<EMI ID=128.1>
des ampoules de 10 ml capacité et lyophilise. En ajoutant de l'eau destinée ou une solution physiologique de chlorure de sodium on obtient des solutions injectables
<EMI ID=129.1>