BG99736A - Сескитерпени,тяхното получаване и използването им като инхибитори на гамк-бензодиазепиновите рецептори - Google Patents
Сескитерпени,тяхното получаване и използването им като инхибитори на гамк-бензодиазепиновите рецептори Download PDFInfo
- Publication number
- BG99736A BG99736A BG99736A BG9973695A BG99736A BG 99736 A BG99736 A BG 99736A BG 99736 A BG99736 A BG 99736A BG 9973695 A BG9973695 A BG 9973695A BG 99736 A BG99736 A BG 99736A
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- formula
- sesquiterpenes
- compound
- fermentation
- strain
- Prior art date
Links
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 title claims abstract description 34
- 150000004354 sesquiterpene derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 34
- 229940049706 benzodiazepine Drugs 0.000 title abstract description 11
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 59
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 30
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 30
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 19
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 18
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 241000228417 Sarocladium strictum Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 12
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 102000004300 GABA-A Receptors Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000839 GABA-A Receptors Proteins 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 7
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 claims description 5
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 claims description 5
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 5
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 claims description 4
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000001773 anti-convulsant effect Effects 0.000 claims description 3
- 229960003965 antiepileptics Drugs 0.000 claims description 3
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003326 hypnotic agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 2
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 230000006993 memory improvement Effects 0.000 claims 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 abstract description 9
- SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 1h-1,2-benzodiazepine Chemical compound N1N=CC=CC2=CC=CC=C12 SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 18
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 13
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 10
- JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N compound E Chemical class N([C@@H](C)C(=O)N[C@@H]1C(N(C)C2=CC=CC=C2C(C=2C=CC=CC=2)=N1)=O)C(=O)CC1=CC(F)=CC(F)=C1 JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N 0.000 description 10
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 7
- 241001019659 Acremonium <Plectosphaerellaceae> Species 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 150000001557 benzodiazepines Chemical class 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- -1 hypnotic Substances 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000000147 hypnotic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Substances [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N chlordiazepoxide Chemical compound O=N=1CC(NC)=NC2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical group [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUJAGMICFDYKNR-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzodiazepine Chemical group N1C=CN=CC2=CC=CC=C12 GUJAGMICFDYKNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FSEXLNMNADBYJU-UHFFFAOYSA-N 2-phenylquinoline Chemical class C1=CC=CC=C1C1=CC=C(C=CC=C2)C2=N1 FSEXLNMNADBYJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSNMPAVSZJSIMT-UHFFFAOYSA-N COc1c(C)c2COC(=O)c2c(O)c1CC(O)C1(C)CCC(=O)O1 Chemical compound COc1c(C)c2COC(=O)c2c(O)c1CC(O)C1(C)CCC(=O)O1 WSNMPAVSZJSIMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000043261 Hevea brasiliensis Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000001785 acacia senegal l. willd gum Substances 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000003281 allosteric effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 229940005530 anxiolytics Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008038 benzoazepines Chemical class 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 229960004782 chlordiazepoxide Drugs 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000003179 convulsant agent Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 229960003529 diazepam Drugs 0.000 description 1
- AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N diazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical class CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000004276 hyalin Anatomy 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000002102 hyperpolarization Effects 0.000 description 1
- 125000004857 imidazopyridinyl group Chemical class N1C(=NC2=C1C=CC=N2)* 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 229960004393 lidocaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- YECIFGHRMFEPJK-UHFFFAOYSA-N lidocaine hydrochloride monohydrate Chemical compound O.[Cl-].CC[NH+](CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C YECIFGHRMFEPJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229940035363 muscle relaxants Drugs 0.000 description 1
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 description 1
- 229920003052 natural elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229920001194 natural rubber Polymers 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910000069 nitrogen hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUESFIVIIFEDFI-UHFFFAOYSA-N octadecylsilicon Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[Si] FUESFIVIIFEDFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002287 radioligand Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012262 resinous product Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 1
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 125000004084 sesquiterpene group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 238000009495 sugar coating Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 210000003568 synaptosome Anatomy 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N vanadium Chemical compound [V]#[V] GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- AIFRHYZBTHREPW-UHFFFAOYSA-N β-carboline Chemical class N1=CC=C2C3=CC=CC=C3NC2=C1 AIFRHYZBTHREPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/06—Peri-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
Изобретението се отнася до сескитерпени и до техни фармацевтично и ветеринарно приемливи соли, инхибитори на свързването на бензодиазепин с -аминомаслена киселина (ГАМК)-бензодиазепин-Сl- йонофорен рецепторен комплекс. Съединенията се получават чрез ферментация в присъствие на източник на въглерод, азот и неорганични соли на щам от гъба Acremonium strictum, означен с ХО6/15/458 (IMI 3544451), или негов мутант, продуциращ посочените сескитерпени, изолиране на сескитерпените от ферментационната среда и по желание превръщане на получените сескитерпени в тяхна фармацевтично или ветеринарно приемлива сол.
Description
Нстоящото изобретение се отнася до нови съединения, свързващи бензодиазепиновите рецептори. Изобретението се отнася и до метод за получаване на тези съединения, до фармацевтични и ветеринарни състави, които ги съдържат и до микроорганизма, от който се получават.
Бензодиазепинът (Bz) е обичайно понятие, което се използва за описване на структурносвързни съединения с основната бензо-1,4 диазепинова структура (Haelely et al, Advances in Drug Res. 14, 165- 322 (1985)). Фармакологичният скрининг на някои от по рано синтезираните аналози от тази нова пръстенна система е показал, че бензодиазепините притежават транквилизираща и антиконвулсна активност.Понататъшни изследвания са довели до пускането на хлордиазепоксида (Librium) за терапевтична употреба през I960 г.
След обширни електрофизиологични и изследвания за свързването е установено, че механизмът на действието на бензодиазепина включва алостерична модулация на главния инхибиторен невротрансмитер, гамааминомаслената киселина (ГАМК). По-специално, този ефект се дължи на хиперполяризацията на невроните от увеличения приток на < I йон през ΓΑΜΚ-Βζ-СГ йонофорния рецепторен комплекс. Този рецепторен комплекс е означен като подтип А , или ГАМКд.
Болшинството от предписваните понастоящем бензодиазепини са агонисти и действуват чрез потенциране на ГАМК инхибиращото действие. Вследствие на това, те упражняват седативно, хипнотично, антиконвулсно и анксиолитично действие. Отделни (с ниска ефективност) агонисти също представляват интерес, тъй като използуването им може да намали нежеланите действия при бенздиазепиновата терапия като седативният ефект, толерантност и лекарствената зависимост все още съпровождат техния клиничен ефект. Обратни агонисти, притежаващи биологична активност противоположна на класическите бензодиазепинови ефекти, т.е. конвулсивни средства, също имат определена роля за засилване на паметта. Антагонистите им са лишени от биологична активност, но са намерили приложение при противодействуване на излишък от горните действия, т.е. при свръх до тира не.
Взаимовръзката структура - действие (SAR) за бензодиазепините е напълно охарактеризирана и са идентифицирани фармакофорите.Вследствие на това, допълнителен акцент се поставя на ендогенната рецепторна лиганда, или на новите структури, като потенциално нови възможности за лекарства. За различни химични класове (напр. бензазепини, β-карболини, циклопиролони, фенилхинолини, триазолпиридазини и имидазопиридини) е установено, че са активни на това място. Цопиклонът ( едно циклопиролоново производно) и цолпидемът (имидазопириди ново производно) са пуснати в употреба като хипнотици.
Сега е намарено, че при ферментация на хранителна среда съдържаща щам от гъбата Acremonium strictum ( Xenova organism XO6/15/458, IMI 354451) се продуцират нови съединения, които инхибират свързването на бензодиазепините с бензодиазепиновия рецептор, намиращ се в ГАМК-Bz СГ йонофорния рецепторен комплекс. Тези съединения са сескитерпени, които заедно с техните синтетични производни образуват нов клас.
В съответствие с горното, настоящото изобретение се отнася до сескитерпени с формула I:
в която всяка една от връзките и -_г : : - означава проста връзка или едната е проста, а другата е двойна връзка,
А заедно c ---/--, и въглеродните атоми, <
които са свързани образуват пръстен като:
(а) където R е II или Oi l (Ь)
(с)
(d) и У означава двойна връзка или, когато А означава пръстен (а) както е дефиниран по горе, У означава или двойна връзка или образува заедно < въглеродните атоми, към които е свързан епоксидна връзка 4 р и техни фарма цевтичноприемливи или ветеринарноприемливи соли.
Съгласно едно изпълнение, сескитерпените с формула I имат следната структура II:
в която -У- означава двойна връзка или образува заедно с въглеродните атоми, към които са свързани епоксидна връзка ^()/ .
В друго изпълнение, сескитерпените с формула 1 имат следната структура III:
н н
в която R означава II или ОН.
В следващо изпълнение, сескигерпените с формула I означават съединение със следната формула IV:
(IV) в която X означава
Сескитерпенът с
Аз формула II, в която У означава двойна връзка по-нататък е означен къто съединение А.
Сескитерпенът с формула II, в която У образува с въглеродните атоми, към които е свързан, епоксидна връзка, е означен каго съединение А'. Сескитерпенът с формула III, в която R означава ОН е означен по-нататък като съединения В.
Сескитерпенът с формула III, в която R означава Н, е означен като съединение С. Натриевата сол (15-ONa) на съединение А е съединението
D.
Сескитерпенът с формула
IV, в която X о знача в а е съединението
Е.
Сескитерпенът с формула
IV, в която X означава е съединението
F.
Съединение F е 15,16 орто производно на съединение Е. Изразът настоящите съединения, когато е използван тук се отнася общо до всички сескигерпени с формула I и техните фармацевтичноприемливи и ветеринарноприемливи соли.
Сески герпенит е с формула I са изолирани от микроорганизъм означен като ХО6/15/458 и който е идентифициран като щам от гъбата Acremonium strictum въз основа на следните морфологични данни:
При растеж върху 2% агар с малцов екстракт в продължение на 10 дни, колониите на щама ХО6/15/458 са 15-20 mm в диаметър, в сравнение с 37-40 mm, с изобилно спорообразуване, по-скоро чисто бели, отколкото вариращи в нюанси на белезникаво, включващи по-скоро плътен, компактен, отколкото рехав мицел, спираловиден и флокулозен само в центъра, вместо влакнест в центъра, ръбът е неправилен, въздушен, не рязко от граничен и снишаващ се, конидиофорите са плектонсматозни до синематозни и са повече над повърхността, отколкото под повърхността, повече ортофиални, рядко по-сложни, прави, постепенно изострени, повече хиалинни, отколкото хрома гофилни, дълги до 40 54 μιη и широки 1,5 μιη, в сравнение с 20 40 х 1,5 2,0 μπτ. Конидиите са в слизести бели маси, цилиндрични, 3,0 7,0 х 1,5 μ ш.
Организми показва следните различия от типичните щамове на Acremonium slriclum: по бавен растеж, чисто бели компактни колонии, краищата въздушни, неправилни и дифузни, конидиофорите са въздушни и клонящи към синематозни, дължината на главната конидиофора е погол ям а.
От гореописаните микроскопски и общи морфологични характеристики , изолатът от гъбата ХОб/15/458 се класифицира по добре като Acremonium c.f. strictum W.Gams както е описано в Gams, W. (1977) Cephalospori um artige Sc himmelpilze, Gustav Fischer publ.
Щамът ХОб/15/458 е депозиран съгласно Будапещенския договор в International Mycologlcal Institute, Egham, Surrey, U.K. на 7.10.1992, c входящ номер IMI 354451.
Горното описание илюстрира щама Acremonium strictum, който може да се използва за продуциране на сескитерпените съгласно настоящото изобретение. Настоящото изобретение се отнася и до мутанти на гореописания микроорганизъм. Например получения чрез естествен подбор или получения посредством мутиращи агенти, включително йонизираща радиация като ултравиолетово облъчване или посредством химически мутагени като нитрозогуанидин или посредством подобни третирания, които също са включени в обхвата на настоящото изобретение.
Настоящото изобретение се отнася освен това и до метод за получаване на настоящите съединения, който се състои от (1) ферментация на щам от гъба ХО6/15/458 (1М1 354451) или негов мутант, в среда от въглерод, азот и неорганични соли, продуциращ сескитерпени с формула I, (2) изолиране на получените сескитерпени от ферментационната среда, (3) и при желание окисляване на сескитерпени!е с формула I, в която А означава пръстен (с) до сескитерпени с формула I, в коя го А означава пръс тен D, и/или (4) при желание превръщане на получените сескитерпени във фармацевтичноприемливи или ветери нарноириемливи 1 ехни сол и
Сескитерпените с формула I обикновено се продуцираг през време на аеробна ферментация на водна хранителна среда, при условията описани по-долу, с продуциращ щам от Acremonium stricluni XO6/I5/45H. Подходяща е водна среда като използваната за продуциране на редица антибиогични субстанции. Такава хранителна среда съдържа източници на въглерод и азот, които могат да се усвоят от микроорганизма. При желание могат да се прибавят неорганични соли, обикновено в ниски концентрации. Освен това фермен! ационната с реда може да съдържа микроелементи, необходими за растежа на микроорганизма и «редуцирането на желаното съединение. Обикновено те се намират в достатъчни концентрации в комплексни източници на въглерод и азот, които могат да се използват като хранителни източници, но могат да се прибавят и поотделно към с редата, ако това с е желае. Друг аспект на изобретението е биологичночистата култура на щама от гъбата Х<)б/15/458 или негов мутант, които продуцират <е<китерпени с формула I. Такива култури по същество не съдържат други м и к ρ ο ο р та н и з м и.
Усвояеми източници на въглерод, азот и минерали могат да се осигурят или от отделни, или от комплексни хранителни вещества. Източниците на въглерод обикновено включват глюкоза, малтоза, нишесте, глицерол, меласи, декстрин, лактоза, захароза, фруктоза, карбоксилни киселини, аминокиселини, глицериди, алкохоли, алкани и растителни масла. И τι очниците на въглерод обикновено съставляват от 0,5 до 10 тегловни % от ферментационната среда.
Източниците на азот обикновено включват соево брашно, царевичен екстракт, разтворими продукти от <пиртоварни, дрождеви екстракти, брашно от памучни семена, пептони, фъстъчено брашно, малцов екстракт, меласи, казеин, смеси на аминокиселини, амоняк (газ или разтвор), амониеви соли или нитрати. Могат да се използват също и карбамид и други а миди. Източниците на азот обикновено представляват <>г 0J до 10 тегловни % от ферментационната среда.
Хранителните минерални соли, които могат да се включват в културалната среда са обичайно използвани соли, способни да доставят натрий, калий, амоний, желязо, магнезий, цинк, никел, кобалт, манган, ванадий, хром, калций, мед, молибден, бор, фосфатни, сулфатни, хлорни и карбонатни йони.
За да се контролира излишното пенене, на интервали може да се прибави противопенител, ако това е необходимо.
Ферментацията при използване на Acremonium slrictum ХО6/15/458 може да се провежда при температури от 20'С до 30С, за предпочитане 24 30°С. За оптимални резултати най-удобно е ферментацията да се провежда при температура от порядъка на 24-26°С. Подходящото pH на хранителната среда за продуциране на съединенията може да варира от 5,0 до Н,5, < предпочитан обхват от 6,0 до 7,5.
Ферментация в малък мащаб удобно се провежда чрез поставяне на подходящи количества хранителна среда в стъклена колба по известните стерилни техники, инокулиране или със спори или с вегетативен клетъчен растеж от Acremonium strlctum, леко затваряне на колбата с памук и провеждане на ферментацията при постоянна стайна температура при около 25°С, на ротационна клатачна машина, при 95-300 rpm, в продължение на 2 до 10 дни.
При работа в по голям мащаб, за предпочитане е ферментацията да се провежда в подходящи резервоари, снабдени с бъркалка и средство за аериране на ферментационната среда. Хранителната среда се приготвя в резервоара и след стерилизация се инокулира с източник на вегетативен клетъчен растеж от Acremonium stictum. Ферментацията продължава от 1 до 8 дни, при разбъркване и/или аериране на хранителната «реда, при температура от порядъка на 24 30'С. Степента на аерация зависи от няколко фактора като размера на ферментатора и скоростта на разбъркване. Обикновено при по-големи мащаби на ферментация, ферментационната течност се разбърква при около 95 до 500 rpm и се аерира при около 0,1 до 1,0 vvm.
Соски терпените с формула I първо са намерени в мицела от края на ферментацията и могат да се съберат и пречистят. Разделянето и пречистването на съединенията от ферментационния бульон и извличането им може да се постигне като се използва екстракция с разтворител и след това общоприети хроматографски фракционирания с различни хроматографски техники и системи разтворители. Сескитерпените могат да се получат в по същество чиста форма.
Сескитерпените с формула I са разтворими в органични разтворители, включително етилацетат, метанол и ацетон. Това свойство може да се използва за извличането им от ферментационния мицел. Подходящо е ферментационният мицел да се смеси с приблизително равен обем от органичния разтворител, например ацетон. Полученият в резултат суров екстракт след това може да се концентрира под намалено налягане, като се получава водна суспензия, която отново се екстрахира с органичен разтворител като се получава суров органичен екстракт. Общият екстракт се филтрира (или центрофугира) и разтворителят се концентрира под намалено налягане. Органичният остатък след това се пречиства първоначално посредствном хроматография, например колонна хроматография на колона със Sephadex LH-20 с елуент метанол.
Желаният продукт и някои онечиствания се задържат в колоната, докато много от онечистванията (особено неполярните онечиствания) не се задържат. Колоната се промива с неполярен органичен разтворител като хексан или толуен, за да се отстранят други онечиствания и след това с последователни смеси от дихлорметан или хлороформ и друг органичен разтворител като метанол или етилацетат. Разтворителят се изпарява и остатъкът се хроматографира след това например чрез колонна хроматография, тънкослойна хроматография, хроматография на препарагивен слой или високоефективна течна хроматография. Съгласно предпочитано изпълнение на изобретението етапът на хроматографското пречистване се състои в повтаряща се HPLC на С18 с обърната фаза (25 х 10 cm, СНзСМ:Н2О градиентно елуиране).
Подходящи адсорбенти са силикагел и свързан с октадецил силициев диоксид, а като елуент могат да се използват различни разтворители или комбинации от разтворители. Фракциите от елуата след гова се изследват чрез тънкослойна хроматография, високоефективна течна хроматография или други обичайни техники за откриване присъствието на желаното съединение или за изолиране. Използването на техниките описани по-горе води до получаване на пречистени състави, съдържащи желания сескитерпен, наличието на когото се определя чрез анализиране на различни хроматографски фракции за физикохимични характеристики и/или активност на свързване на бензодиазепинрецепторния комплекс.
Сескитерпенът с формула I, в която А означава пръстен (с) (съединение Е) може да се окисли до неговото 15,1 б-ортохиноново производно, което е сескитерпен с формула 1, в която А означава пръстен (d) (съединение Е). Съединение F има следната структура:
Окислението може да се осъществи като се остави разтвор на съединение Е да стои на въздуха. Окислението може да се извърши и по друг начин или окислението на въздуха както е описано но-горе се ускори чрез прибавяне на окисляващо средство към разтвора на съединение Е. Подходящ пример за окисляващо средство е натриевият перйодат (NalO^.
Сескитерпените с формула I могат да се превърнат във фармацевтичноприемлива или ветеринариоприемлива сол.
Примери за подходящи голи са тези с алкални метали като натриеви и калиеви и амониеви соли. Съединение I), натриева сол на съединение А, може да се получи например взаимодействие на съединение А с натриев хидроксид в метанол.
Настоящите съединения са активни при лечение на заболявания повлиявани от лигандите за бензодиазепиновия рецептор, съдържащ се в ΓΑΜΚ-Βζ-СГ йонофорния рецепторен комплекс. Съгласно настоящото изобретение пациентът се лекува по метод, който се състои в даване на пациента терапевтичноефективно количество от едно от настоящите съединения. По такъв начин настоящите съединения притежаващи активност на агонисти, могат да се използват за контрол на състояния, причинени от свързване на бензодиазепина с бензодиазепиновия рецептор, съдържащ се в ΓΑΜΚ-Βζ-СГ йонофорния рецепторен комплекс. Следователно, те могат да се използват например като антиконвулеивни средства, анксиолитици, мускулни релаксанти и хипнотици. По такъв начин състоянието на човека или животното може да бъде подобрено.
Настоящите съединения покозват активност при опити за свързване на бензодиазепиновия рецептор, при които се използва белязана с тритий лиганда специфична за рецептора, намиращ се в пречистения ΓΑΜΚ-Βζ-СГ йонофорния рецепторен комплекс. Подробносите от тези опити са дадени в пример 5, който следва.
Настоящите съединения могат да се приемат под различни дозирани форми, например орално под формата на таблети, капсули, филмтаблети или покрити със захар таблети, течни разтвори или суспензии или парентерално, например мускулно, венозно или подкожно. Следователно, настоящите съединения могат да се прилагат чрез инжекции или инфузия.
Дозата зависи от различни фактори, включително възрастта, теглото и състоянието на пациента и начина на приемане. Обикновено, все пак, дозата възприета при всеки
Hi начин на приложение за възрастни хора е 0,001 до 10 mg/kg, най-често от порядъка на 0,01 до 5 mg/kg телесно тегло. Такава доза може да бъде дадена например от 1 до 5 пъти дневно орално или чрез инфузия на болуси, инфузия в течение на няколко часа и/или повтарящо се приемане.
Настоящите съединения се приготвят във форми за приемане каго фармацевтични или ветеринарни състави, съдържащи също фармацевтичноприемлив или ветеринарноприемлив носител или разредител. Съставите обикновено се приготвят като се съблюдават общоприети методи и се приемат във фармацевтичноподходяща или ветеринарноподходяща форма.
Например, твърдите орални форми могат да съдържат заедно < активното съединение разредители като лактоза, декстроза, захароза, целулоза, царевично нишесте или картофено нишесте, смазващи вещества като силициев диоксид, талк, стеаринова киселина, магнезиев или калциев стеарат и/или полиетиленгликоли, свързващи средства каго нишестета, арабска гума, желатина, метилцелулоза, карбоксиметилцелулоза или поливинилпиролидон, разпадащи с редства каго нишесте, алгинова киселина, алгинати или на триевони тестен гликолат, ефервесцентни смеси, оцветители, подсладители, омокрящи средства като лецитин, полисорбати, лаурилсулфати. Такива препарати могат да се произвеждат по известен начин, например чрез смесване, гранулиране, таблетираие, покриване със захар или филмиране.
Течните дисперсии за орално приложение могат да бъдат сиропи, емулсии и суспензии. Сиропите могат да съдържат като носител например захароза или захароза с глицерин и/или манитол и/или сорбитол. В частност, сироп за диабетични поциенти, може да съдържа като носители само продукти например сорбитол, които не метаболи зират до глюкоза или метаболизират много малко количество до глюкоза. Суспензиите и емулсиите могат да съдържат като носител например природна гума, arap, натриев алгинат, пектин, метилцелулоза, карбоксимегилцелулоза или поливинилалкохол.
Суспензиите или разтворите за мускулни инжекции могат да съдържат заедно с активното съединение и фармацевтичноприемлив носител като стерилна вода, маслинено масло, етилолеат, гликоли като пропиленгликол и при желание подходящо количество лидокаинхидрохлорид. Разтворите за венозно инжектиране или инфузии могат да съдържат носител например стерилна вода, която най-общо е вода за инжекции. За предпочитане е все пак те да приемат формата на стерилен воден изотоничен солев разтвор. Алтернативно, настоящите съединения могат да се микрокапсулират в липозоми.
Следващите примери илюстрират изобретението:
ПРИМЕР 1
ХО6/15/458 култура в течна среда
Изходният материал за щама ХО6/15/458 се произвежда посредством суспендиране на зряла коса култура, растяща на МЕА (2% малцов екстракт, 1,5% агар), в 5 mL 10%ен воден глицерол. От тази суспензия 1 mL, в 1,5 mL cryovial, съдържащ изходния материал, се съхранява при -135°С. Предкултурата се приготвя чрез асептично преместване на 0,5 mL изходен материал в 10 ml. хранителен разтвор S (1,5% глицерол, 1,5% соев пептон, 1% D-глюкоза, 0,5% малцов екстракт, 0,3% NaCl, 0,1% СаСОу, 0,1% Tween 80, 0,1% Junlon PW110 (доставени от Honeywell and Stein Ltd., Times House, Throwley Way, Sutton, Surrey, SMI 4AF), при pH 6 в епруветка (25 mm x 200 mm) рзклащана при 240 ipm в продължение на 4 дни при 25‘ С.
Междинна култура се приготвя след това, чрез асептично преместване на предкултурата в 300 mL хранителен разтвор S в 21 Ерленмайерови колби и инкубиране на ротационна клатачна машина при 240 rpm в продължение на 3 дни при 25°С.
Производствена култура се получва посредством асептично премествне на междинна култура в 14 литров разбъркван ферментатор съдържащ 10 L хранителен разтвор Р (2,38% трехалоза, 0,69% дрождев екстракт, 0,1% карбокс имегилцелулоза, 0,1% t ween 80, 0,98% MES, при pH 6). Резервоарите се рзбъркват при 340 prm и аерират при 0,7 vvm. Стойността на pH не се контролира, но остава в границите 6,0 до 7,0. По време на ферментацията във ферментатора се поддържа постоянна темпертура от 25°С. След седем дни ферментцията се спира и биомаата се събира за екстракция на продукта.
Ферментация в по-голяма степен се извършва в 75 литрови ферментатори както следва. Приготвя се предкултура 40 mL както е описано по горе (четири х '200 mm епруветки) и се прехвърля в 2 литра хранителна среда S в 3 литров ферментатор. Резервоарът се разбърква при 500 rpm и аерира при 0,25 vvm. Стойността на pH не се контролира, а температурата с поддържа при 25С. След 4 дни тази междинна култура се прехвърля асептично в 75 литров ферментатор съдържащ 50 литра хранителна среда Р. Този 75 литров резервоар се аерира при 0,5 vvm и се разбърква при 350 rpm, за да се поддържа налягането на разтворения кислород >70% през време на ферментацията. Стойността на pH не се контролира, но остава между 6,0 и 7,0, а температурата се поддържа постоянна при 25°€. След 7 дни ферментацията се спира и биомасата се събира.
ПРИМЕР 2
Екстрахиране и пречистване на съединение А Ферментационен бульон 14 L се центрофугира и мицелът (-344 д) се екстрахира с ацетон (3x5 L). Екстрактът <е концентрира до сухо (В,0 q) и се разтваря в чист метанол. Пречистването се осъществява с помощта на препаративна HPLC е обърната фала кг? то <е използва Walers Della Рак С 18 (100А, 15 pm) колона (1D 10,0 mm, дължина 25,0 cm) и градиентна подвижна фаза от 4 минути (80% воден ацетон и трил, 12 mL/min скорост на изтичане) бързо нарастваща линейно до 20 минути (100% ацетонитрил, 12 mL/min скорост на изтичане). Измерването става при дължина /0 на вълната 280 ппт
Събират <е фракции те при 17-18 минути и се подлагат на по-нататъшно пречистване като се използва същата колона, но с градиент на подвижна фаза от 15 минута (40% воден ацетонитрил, 12 inL/niin скорост иа изтичане) бързо нарастваща линейно до 20 минути (100% ацегони трил, 12 mL/min скорост на изтичане).
Събират се фракциите между 9 и 10 минути, които са сескитерпен с формула II, в която У означава двойна връзка. Съединението има следните физични характеристики:
Молекулна формула: С 22Η30θ4
Μ о л е к у л н о т е г л о: 3 5 8
Разтворимост в метанол, ацетон, етилацетат
| У В: Rmax( nm)(f.) | |
| 2 7 6,6 (4900) | МеОН |
| 20 7,6 (30000) | МеОН КОН |
| 3 11,2 (4100) |
Масспектър: (m/z (интензитет (%)):
DEI 358 (М+, 100), 233 (55), 203 ( 1 5), 155 (20)
DCI 359 (МН+, 100) 233 ( 1 0), 203 (20), 155 (20)
Виеокоразрешителен Е1: 359,2 270, ¢-22^3()()4, изчислено 359,2214
ИЧ (КВг): (υ в с m 1 }: 3395,2, 2930,2, 1 730,4 ^НЯМР: (400 MHz, CD3OD, δ (m, J, позиция)):
1,13 (ЗН, S, ЗН 21), 1,14 (ЗН, s, ЗН 20), 1,37 (1 Н, m,
Н 10а), 1,51 (ЗН, s, ЗН 19, 1,58 (1Н, bddd, 13,2, 10,1, 6,8,(Н 10а),
1,72 (ЗН, s, ЗН 22), 1,85 (1Н, bdd, 13,0, 4,5, Н 6а), 2,08 1Н, bdd,
12,5, 7,1, Н 9а), 2,22 (1Н, bdd, 9,8, 5,2, Н 11), 2,23 (1 Н, bdd, 11,6
Н 9Ь), 2,33 (1Н, bdd, 12,7, 12,7, Н 6Ь), 2,38 (111, dd, 14,5, 9,9, Н
2а), 2,70 (111, bddd, 14,5, 2,2, 1,6, H 2b), 3,02 (1H, ddd, 7,8, 5,6, 1,5, H-17), 3,67 ( 1H, dd, 5,8, 5,8, H 13), 3,80 (1H, dd, 9,3, 7,9, H18a), 3,83 (111, bdd, 6,0, 6,0, H 12), 4,03 (111, bdd, 9,3, 1,5, H 18b), 5,1 7 (111, m, H 7), 5,24 (111, dd, 15,9, 1,5, H 4), 5,32 (1H, ddd, 15,9, 10,0, 2,2, 11-3).
13СЯМР : (100 MHz, CD3OD, δ (m, позиция)]:
17,66 (q, C 22), 23,7 1 (q, €19), 24,92 (q, € 20), 30,85 (q, C-21), 32,24 (t, C IO), 37,37 (I, € 9), 39,37 (s, C 5), 42,22 (d, (13), 43,11 (t, C 6), 45,01 (d, € 11), 45,17 (t, C 2, 48,97 (d, C1 7), 70,86 (t, C 18), 83,70 (d, €12), 88,94 (s, C l), 121,90 (d, C 3), 1 24,68 (d, C 7), 135,25 (s, C 1 5), 137,39 (s, C-8), 144,73 (d, C 4), 166,96 (s, C 14), 200,99 (s, €16).
ПРИМЕР 3
Екстрахиране и пречистване на съединение В Ферментационна течност 75 L се центрофугира и мицелъг се екстрахира с етилацетат (5 х 10 L). Този екстракт ге концентрира до сухо и се разтваря в метанол. Пречистването се осъществява чрез препаративна HPLC с обърната фаза като се използва Waters Delta Рак С1Н (ЮОА, 15 μΐη) колона (ID 10,0 in ni, дължина 25,0 cm) и подвижна фаза от 5 минути при 80% воден ацетонитрил (10 mL/min скорост на изтичане). Измерването става при дължина на вълната '280 пш. Съединението, което се елуира между 23 и 25 минути е съединение В, сескитерпен с формула III, в която R е ОН. Съединението има следните физични характеристики:
Молекулна формула: Ο^Η^θΟθ
Μ о л е к у л н о т е г л о: 4 1 1
Разтворимост в метанол, етилацетат, хлороформ, а цетои
2
| УВ: [Xmax(nm)(E)J: | ||
| 2 00 | HPLC разтворител (H2O-CH3CN) | |
| 2 68 | ||
| 277,0 | (29500) | МеОН |
| 3 53,5 | (3900) | |
| 289,8 | (32100) | МеОН КОН |
| 344,4 | (3800) | |
| 2 71,6 | (47000) | МеОН CF3CO2H |
| 324,8 | (3400) |
Масс пектър: Jm/z (интензитет (%)]:
DEI 414 (M + , 100), 331 (45), 277 (20), 2 11 (50)
DC1 (NII3) 415 |MH + , 100)
Ви(окоразрешителен El: 4 14,2050, изчислено 4 14,2034 и 2 11,0240, СдНуОц, изчислено 21 1,0240
ИЧ (КВг): ]о в cm 1}:
3265, 2960, 2930, 2855, 1 735, 1625
1НЯМР: [400 MHz, CDCI3, δ (m, J, позиция)]:
1,4 (I), 1,7 (dd), 1,75 (dd), 2,05 (dd), 2,16 (d + dd), 2,3 (t), 2,4 (dd), 2,7 (dt), 4,9 (d + td), 5,05 (d + d), 5,2 (dd), 5,25 (dd).
13СЯМР: [100 MHz, CDC1;1, δ (m, позиция)]:
160,4, 150, 146,1, 1 44,2, 144, 1 42,1, 136, 1 26,9, 1 23,7,
23, 118,7, 86,9, 84,3. 72,3, 43,5, 4 1,4, 40,7, 38,2, 37,7, 29,4, 28,2, 24,2, 2 2,7, 7,17.
ПРИМЕР 4
Екстрахираме и пречистване на съединение С
Ферментационна течност 75 L се центрофугира и мицелъг се екстрахира с етилацетат (5 х 10 L). Този екстракт се концентрира до с ухо и се разтваря в метанол.
Пречистването се осъществява с помощта на препаративна
HPLC < обърната фаза като се използва Waters Delta Рак РгерРак 300(1 патрона (С 18, ЮОА, 15μητ, ID 47 mm, дължина 30,0 cm) и градиентна подвижна фаза от 0,5 минути при 80% воден ацетонитрил (50 mL/min скорост на изтичане) бързо нарастваща линейно до 30 минути при 100% ацетонитрил (50 mL/min скорост па изтичане). Съединението, което се елуира между 18 и 19 минути е съединение С, ссскитернен с формула II, в която R е водород. Готи пик след това се пречиства като се използва същата колона, но с градиентна подвижна фаза от 5 минути при 30% воден ацетонитрил (50 ml/min скорост на изтичане) бързо нарастваща линейно до 10 минути при 15% воден ацетонитрил (50 mL/min скорост на изтичане). Гози разтворител след това се държи в продължение на 15 минути при 15% воден ацетонитрил (50 ml/min скорост на изтичане) и след това нараства бързо линейно за период от 5 минути до 100% ацетонитрил (50 mL/min скорост на изтичане). Търсеният пик, съединение С, се елуира между 22^и 24 минути при този градиент. Съединението има следните физични ха рактерис гики:
Молекулна формула: С24Н30О5
Молекулно тегло: 398
Разтворимост в метанол, ацетон, етилацетат
У В : (*max<nn|HeH:
| 2 70,6 | (41700) | МеОН |
| 338,4 | (3800) | |
| 209,3 | (13300) | МеОН-КОН |
| 282,3 | (41400) | |
| 326,4 | (3200) | |
| 34 2,8 | (3900) |
390,0 (3000) t ,2 (52 200) MeOH-CF3CO2H
316,6 (4300)
Масспектьр: (m/z (интензитет (%)]:
DEI 398 (M + , 100), 315 (90), 256 (100),233 (95), 195 (40) DC I (NHj) 399 (MH+, 100), 222 ( 10), 205 (90), 195 (20), 172 (70)
Високоразрешителен El 390,2093, C24H30O5, и 3 ч и c лен ο 3 9 0,20 8 5
ИЧ (КВг): [υ в cm Ц:
3400 (sh), 3200, 2928, 1750, 1600, 1380.
^НЯМР: [400 MHz, €βΗθ], сравнени с 7,16 ppm, δ (m,
J, позиция)]:
0,75* (ЗН, s, ЗН 23), 0,93* (ЗН, s, ЗН-22), 1,01 (ЗН, s, ЗН-21), 1,11 (1Н, 1, 11,7, Н-10а), 1,40 (1Н, bdd, 14,9, 7,6, Н 10b),
I, 45 (ЗН, bs, ЗН 24),1,63 ( 1 Н, dd, 13,0, 5,0, Н-6а), 2,05 (1Н, bt,
II, 5, Н-6Ь), 2,10 (1Н. m, Н 2а), 2,11 (1Н, т, Н 9а), 2,17 (III, dd, 11,0, 3,8, Н 11), 2,60 (1Н, I, 12,1, Н 9Ь), 2,74 (1Н, bd, 14,5, Н 2Ь), 4,37 (11-1, dd, 12,9, 1,6, Н 20а), 4,44 (1Н, dd, 13,0, 3,2, Н 20Ь), 4,59 (1Н, bdt, 11,2, 3,0, Н 12), 5,01 (1Н, dd, 15,8, 1,5, Н 4), 5,11 (III, dd, 15,8, 2,8, Н 3), 5,15 (111, bdd, 10,0, 3,2, Н 7), 6,57 (1Н, s, Н-18).
,JC-HMP: [100 MHz, CjjD^, сравнени с 128,00 ррт, δ (т, позиция)]:
17,20 (q, С 2 4), 22,82 (q, С-21), 24,21' (q, С-23), 28,61 (1, С 10), 29,55* (q, С-22), 38,28 (I, С 9), 38,33 (s, С 5), 41,44 (d,
С 11), 41,93 (1, С 6), 43,98 (I, С-2), 75,35 (I, С-20), 85,28 (d, С
2), 86,75 (s, С- 1), 108,49 (d, С- 18), 1 20,05 (d, С-3), 1 24,20 (d, С
7), 1 27,94 (s, С-13), 136,22 (s, С-«), 137,45 (s, С 19), 143,74 (d, С
4), 147,96 (s, (14), 149,71 (s, C 15), 160,00 (s, ( 17, 165,58 (s, C 16).
ПРИМЕР 5
Екс трхиране и пречиствне на съединение А' Биомасата от ХО6/15/458 се събира чрез филтриране, екстрахира се последователно с ацетон (25 L) и екстрактът се отделя от биомасата чрез филтриране. Ацетонът се отстранява посредством ротационен изпрител, а получената водна суспензия се суши чрез замразяване като се получава смолист продукт. Смолистият продукт се разтваря в метанол (250 mL), филтрира се и след това се изпарява (150 mL). Хроматографира се проба на HPLC с обърната фаза като се изполлзва 47 х 100 mm (j 3 (октадецилсилициев диоксид) Della Рак патрони <;. 15 микрона пълнеж. Използва се скорост на изтичане ог 100 mL/min с градиент от 80% вода 20% ацетонитрил до 20% вода 80% ацетонитрил за период от 30 минути. Съединение А се отчита при 278 пш. Активната фракция се хроматографира повторно като се използва същата колона и скорост на изтичане с градиент от 60% вода 40% ацетонитрил до 35% вода 65% ацетонитрил за период от 40 минути. Активната фракция се концентрира на ротационен изпарител като се отстранява а цетонитрил ъ г и след това се суши чрез замразяване като се получава твърд продукт (съединение А, количество 1).
Следващото пречистване се провежда чрез хроматография при нормална фаза като се използва флаш колона (30 cm х 1,4 cm), напълнена до дълбочина 16 cm със силикагел (MERCK, 230 400 меша,частици 0,040 - 0,063 mm) и изократно елуирана < 10% хексан 60% етилацетат 1% оцетна киселина. Летливият разтворител се отстранява под намалено налягане като се получава безцветно масло,а останалият разтворител се отстранява посредством сушене чрез замразяване като се получава бяло кристално твърдо вещество (съединение А, количество 3).
Продуктът се съхранява във фризер в продължение на шест седмици. След това съхраняване се провежда HPI.C ( обърната фаза на твърдия продукт на Prep 3000 като се използва 25 х 100 mm патрони напълнени с C^g Nova Рак HR (6 микрона). Използва се скорост на изтичане от 2 0 mL/min < градиент от 70% вода 30% ацетонитрил до 100% ацетонитрил за период от 20 минути. Освен съединение А, се изолира втори
LN по полярен компонент, идентифициран като 7,8-епоксид на съединение А, съединение А’. Алтернативен метод за отделяне на съединение А от неговия 7,8-епоксид е използването на Della-Prep с градиент от 60% вода 40% ацетонитрил до 40% вода 60% ацетонитрил за период ог 20 минути.
Идентифицирането на съединение А' е направено при сравнение на данните от У В, мас спектъра и ЯМР със съответните данни получени за съединение А (виж пример 2).
Съединение А' има следните физични х а р актери сти к и:
Молекулна формула: C22lJ30^5
Молекулно тегло: 37 4
Разтворимост: МеОН (добра)
УВ: Rmax (nm)]
278 (метанол)
Масспектър: Техника m/z интензитет (%)
CI МН +
5
100
7
| М Ml ,+ 4 | 39 2 | 2 |
| м+ | 37 4 | |
| 2 19 | 2 0 | |
| 153 | 40 | |
| 43 | 100 |
ИЧ (КВг): υ в cm 3383 широк, 2 959 широк, 1624,
1387.
| 1 Н ЯМР | : δ/ppm в | CD3OD: | 1,13 | (ЗН, s), 1,29 (ЗН, | s), | ||
| 1,39 | (3 Н, | s), 1,45 | (111, т), 1 | ,49 (ЗН, | dd), | 1,53 (2Н, т), 1,82 | (11-1, |
| dd), | 2,00 | (1Н, т), | 2,10 (211, | т), 2,55 | ( 1 Η, | т), 2,75 (1Н, т), | 2,80 |
| (1 Н, | ш), | 3,00 (1 н, | т), 3,7 0 | (1Н, dd), | 3,75 | (11-1, dd), 3,80 (1Н | 1, dd) |
| 5,5 5 | (211, | d). |
13С-ЯМР: δ/ppm в CD3OD: 200,7 (Cltt), 165,9 (С14),
143,4 (С4), 135,0 (С15), 122,6 (С3), 87,6 (С4), 82,6 (С12), 70,7 (С1в), 63,7 (С8), 62,3 (С7), 47,6 (Сн), 44,9 (С2), 42,1 (С13), 41,4 (С6), 36,6 (С5), 36,5 (Сд), 31,2 (С 2), 27,4 (С|0), 24,7 (С20), 23,1 К{д), 17,6 (С22), 48,6 (Сj 7) - зас енчен от разтворителя.
ПРИМЕР 6
Екстрахиране и пречистване на съединение Е
Ферментационен бульон 75 L от ХОб/15/458 се центрофугира и мицелът се екстрахира с етилацетат (5 х 10 L). Този екстракт се концентрира до сухо и се разтваря в чист метанол. Пречистването се осъществява посредством п репа ра ти вна HPLC с обърната фаза като се използва Waters Deila Рак РгерРак 1000 патрона (С18, ЮОЛ, 15pm, ID 47 mm, дължина 30,0 cm) и изократна подвижна фаза от 40% воден ацетонитрил (50 mL/min скорост на изтичане) в продължение на 50 минути, и след това струя ацетонитрил в продължение на 10 минути. Съединението, което се елуира между 44 и 48 минути е обектът на вниманието, съединение Е. Измерването става при дължина на вълната 200 nm. Готи пик след това се пречиства чрез семипрепаративна HPLC с обърната фаза като се използва Waters Delta Рак колона (С18, ЮОЛ, 15 pm, ID 10,0 mm, дължина 25,0 cm) и изократна подвижна фаза от 55% ацетонитрил (15 mL/min скорост на изтичане) в продължение на 28 минути, последвана от струя ацетонитрил в продължение на 10 минути. Съединението, което се елуира между 23 и 28 минути е желаното съединение Е. Измерването става при дължина на вълната 200 nm.
Съединение Е има следните физични характеристики:
Молекулна формула: С23Н30О4
Молекулно тегло: 370
Разтворимост: метанол, етилацетат
| Rmax(nm)[ | (ε) | разтворител): |
| 213,4 | 2 4 400 | МеОН |
| 230,Osh | 7500 | |
| 2 7 7, з | 9 2 00 | |
| 215,6 | 6900 | МеОН КОН |
| 228,2SH | 5 400 | |
| 286,1 | 5 2 00 |
Масспектър: [m/z (интензитет %)[:
EI 370 (М + , 2%), 167 (80), 166 (100)
DCI |NH3|: 371 (ΜΙΓ, 30%), 205 (100), 167 ( 100) 149 (40), 135 (25), 1 23 (40), 12 1 (30), 109 (40)
ИЧ (КВг): [и в с m 1J:
3333,4, 2932,2, 2862,7, 1 720,7, 1622,3, 1496,9, 1381,2,
1329,1, 1 286,7, 1 167,1 hl-ЯМР: [400 MHz CfiDf)/CD3OD (сравнени < CD3OD при 3,40 ppm), δ (m, J, позиция)]:
| 0,86* (ЗН, | s, ЗН 22), | 1,0 7* (3H | , s, 3H-21), | 1.26 (3H, s, | |||
| 311 20), 1,36 (1Н, dd | , 13,6, п,: | L H- | 10a), | 1,62 (3H, bs, 3H-23), | 1,68 | ||
| (1Н, т, Н 10Ь), | , 1,75 | (1 Н, т, Н | -6a) | , 2,09 | (1H, dd, 9, | 8, 8,6, H | 11), |
| 2,2 1 (1Н, 1, 12, | 3, н- | f»b), 2,2 7 (ΓΗ, ι | dd, 1 2, | 7, 7,1, H-9a | ), 2,34 Mil. | ||
| dd, 14,5, 10,3, ] | Н 2а) | , 2,70 (1Η, | bt, | 1 1,7, | H 9b), 2,84 | (1 Η, d t, | 14,5, |
| 2,1, II 2Ь), 4,81 | (1Н, | dd, 1 1,4, | 1,2, | H 19a), 4,88 (1H, | bddd, 10 | ,2, | |
| 2,3, 1,5, П 12), | 5,0 2 | (1H, ddd, | 1 1,3 | , 2,5, | 0,9, H 19b), | 5,19 (1H | , dd, |
| 15,9, 1,7, Н-4), | 5,24 | (111, bddd, | 11, | 9, 4,5 | , 1,2, H 7), | 5,3 3 (1H, | ddd, |
| 15,9, 10,3, 2,4, | П 3), | 6,64 (1H, | bs, | H 17). |
1 3C ЯМР : ] 100 Mil/, C6D6/CD3<>D ( сравнени c
C'D-iOl) при 49,00 ppm), δ (m, позиция)]:
17,8 (q, C 23), 22,20 (q, C 20), 2 4,1 1* (q, C-22), 29,56 (t,
C- 10), 30,32* (q, C 21), 38,33 (s, C 5), 38,55 (t, C-9), 42,12 (I, C 6), 43,72 (d, C 11), 43,89 (1, C 2), 73,50 (t, C 19), 83,12 (d, C 12), 80,05 (s, C l), 101,43 (d, C 17), 119,23 (s, C 13), 121,10 (d, C 3), 1 23,414 (d, 07), 131,08** (s, CIS), 131,08“ (s, C 18), 136,89 (s, C 8), 140,31 (s, C 14), 1 43,02 (d, ¢ -4), 1 47,54 (s, C 16).
*,“: означенияга могат да бъдат разместени.
ПРИМЕР 7
Получаване и идентифициране на съединение F
Разтвор на съединение Е, описано в пример 6, в метанол се подлага на въздушно окисление ускорявано от η ри ба вяне на и зл и шък N а 10q.
Пречиtιвнего на съединението се осъществява с помощта на препаративна HPLC с обърна ι а фаза като <е използва Waters Delta Рак колона (С18, ЮоЛ, 15 pm, ID 10,0 mm, дължина 25,0 cm) с разтворител със стъпаловидна градиентна концентрация от 25% воден ацетонитрил (12 mL/min) в продължение на 5 минути, бързо нарастваща до 80% воден ацетонитрил (12 mL/min) при време 35 минути.
Съединението елуирано между 30 и 32 минути е желаното съединение F. Измерването става при дължина на вълната 200 ηιη.
Съединението F има следните физични характеристики:
Молекулна формула: С23Н7ПО4
Молекулно тегло: 368
Разтворимост: метанол УВ: lAmax<nm) (е)
4
Разтворител):
СН3С\:Н2О
HPLC разтворител
300
482 1Н ЯМР: [400 MHz, CD3OD (в сравнение с CD3OD при
3,4 0 ρ р m ), δ (m , J) [:
6,03 (1Н, bs), 5,24 (1H, dd, J- 1,8, 15,9), 5,07 (1H, bdd,
J= 3,4, 10,9), 5,00 (1H, ddd, J= 2,5, 10,6, 15,9), 4,79 (1H, dd, .1
1,2, 15,6), 4,65 (1H, dd, J= 2,2, 15,5), 4,55 (1H, d, 9,7), 2,63 (1H, dt, J- 2,1, 14,8), 2,44 (1H, dd, .1= 10,5, 14,7), 2,27 (2H, m), 2,11 (1H, dd, J= 7,2, 12,9), 1,88 (1H, d, J= 9,0), 1,77 (1H, m), 1,65 (3H, s), 1,50 (1H, bl, J == 11,0), 1,27 (3H, s), 1,07 (3H, s), 1,04 (3H, s).
^С-ЯМР: [100 MHz, CD3OD (в сравнение c CD3OD при
9,00 ppm), δ (m) ]:
180,16 (s), 175,03 (s), 159,46 (s), 144,57 (d), 137,71 (s),
124,25 (d), 120,6 (d), 114,37 (d), 88,75 (s), 81,63 (d), 71,91 (1), 43,40 (I), 42,68 (t), 42,58 (I), 39,19 (s), 38,96 (t), 30,52 (q), 30,22 (t), 24,50 (q), 21,90 (q), 17,21 (q).
ПРИМЕР 8
Изпитване на съединенията съгласно изобретението чрез анализ на свързването на бензодиазепинов рецептор
Рецепторният екстракт представлява суров синаптосомен препарат изолиран от мозъчната кора на вол по метода на LANG и сътр. ( Febs Lett.,104, 14 9-153,1 979). Свързването на рецептора се определя като се използува модификация описана от O'Beirne и Williams (Eur.J.
Biio< hem., 1 75,4 1 3-42 1,1 988) на метода на Braestrup и Squires (PNAS 7 4,3805-3809, 1977). Рецепторният препарат се инкубира в 50 птМ Tris/Cl, pH 7,4, със съединението Л и pHJ флунитразеиам (агонист) при крайна концентрация от сх пМ. Свързаната радиолиганда се събира върху филтри от стъклени влакна и се измерва посредством течностен (цинтиломегър. Неспецифичното свързване се определя чрез заместване на лигандата с диазепам.
Данните за свързването се налагат към един или два участъкови модели чрез утежнен нелиеен регресионен анализ като се използува компютърна програма Liga nd( М unson and Rod ba rd: Analytic Biochem 107, 220 239,1980) и EBDA (Me Pherson Computer Prog, in Biomed. 1 7 107 1 1 4, 1983).
Методът описан по горе се повтаря като се използува всяко от съединенията В и С описано в примерите 3 и 4 респективно и също като се използува съединението D , което е натриевата сол на съединението А.
JC50 стойностите се определят също и за съединенията А', Е и F описани в примерите 5 до 7 респективно.
Получените резултати са какго следва:
- з2 ТАБЛИЦА 1 Инхибиране свързването на бензодиазепина до бензодиазепиновия рецептор посредством настоящите съединения
| Съединение | Концентрация | %Инхибиране | I |
| А | 93дМ | 107 | 40пМ |
| 28 | 106 | ||
| 9 | 99 | ||
| 3 | 93 | ||
| 930ПМ | 92 | ||
| 280 | 80 | ||
| 93 | 65 | ||
| 28 | 44 | ||
| 9 | 35 | ||
| 3 | 11 | ||
| В | 177дМ | 78 | 5дМ |
| 53 | 92 | ||
| 18 | 82 | ||
| 5 | 69 | ||
| 2 | 53 | ||
| 530ПЙ | 42 | ||
| 177 | 36 | ||
| 53 | 21 | ||
| 18 | 21 | ||
| ,с | 2 42М15 | ъ 88 | 20μΜ |
| 80 | 77 | ||
| 24 | 54 | ||
| 8 | 35 | ||
| 2 | 12 | ||
| 800пН | 9 | ||
| 240 | -3 | ||
| 80 | 9 | ||
| D | ΙΟΟμΗ | 92 | ЮпМ |
| 50 | 103 | ||
| 10 | 100 | ||
| 5 | 98 | ||
| 1 | 86 | ||
| 500пИ | 81 | ||
| 100 | 65 | ||
| 50 | 70 | ||
| 10 | 45 | ||
| 5 | 45 |
- зЗ -
| к· | 2.8Х10*5 М | 104 | 85ПМ |
| 9.3x10*® | 103 | ||
| 2.8x10*® | 85 | ||
| 9.3Х10*7 | 83 | ||
| 2.8Х10*7 | 79 | ||
| 9.3X10*® | 51 | ||
| 2.8X10*® | 32 | ||
| 9.3x10*’ | 19 | ||
| 2.8X10*’ | 8 | — | |
| Е | 9.5Х10*5 М | 104 | 500ПМ |
| 4.8X10*5 | 101 | ||
| 9.5x10*® | 93 | ||
| 4.8Х10*6 | 88 | ||
| 9.5Х10*7 | 65 | ||
| 4.8Х10*7 | 52 | ||
| 9.5x10’® | 42 | ||
| 4.8x10*® | 37 | ||
| 9.5X10*’ | 27 | ||
| 4.8x10*’ | 22 | ||
| F | 2.7х10ч М | 94 | З.ОдМ |
| 9.0x10*5 | 89 | ||
| 2.7Х10*5 | 77 | ||
| 9.0X10*® | 65 | ||
| 2.7x10*® | 48 | ||
| 9.0Х10*7 | 41 | ||
| 2.7Х10’7 | 33 | ||
| 9.0x10’® | 27 | ||
| 2.7x10’® | 24 | ||
| 9.0x10*’ | 15 |
ПРИМЕР 9
Фармацевтичен състав
Таблети, всяка с тегло 0,15 g и концентраация 25 mg на едно от настоящите съединения, могат да се получаат както следна:
Състав за 10 000 таблети
Едно от настоящите съединения (250 д)
Лактоза (800 д)
Царевично нишесте (415 д)
Талк на прах (30 д)
Магнезиев сгеараат (5 д)
Съединението съгласно изобретението, лактозаата и половината от царевичното нишесте се смесват. Сместа след товаа се прекарва през сито с 0,5 mm големина на отворите. Царевично нишесте (10 д) се суспендира в гореща вода (90 mL). Получената паст се гранулир до прах. Гранулагът се суши и стрина през сито с 1,4 mm големина на отворите. Прибавя се останалото количество нишесте, талк и магнезиев стеарат, стрива се грижливо и се пресова на таблети.
Claims (11)
- ПА I EH I НИ ПРЕТЕНЦИИ1. Сескитерпени с формула I проста връзка или едната е проста, а другата е двойна в р ъ з к а,А заедно < и въглеродните атоми, с които са свързани образуват пръстен като:R (а) където R е Н или Oi l (Ь) и У означава двойна връзка или, когато А е пръстен (а) както е дефиниран по горе, У означава или двойна връзка или образува заедно с въглеродните атоми, към коиго е свързан епоксидна връзка ν· θ/ и техни фармацевтично приемливи или ветеринарноприемливи соли.
- 2. Сескигерпен съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че има формула II:в която У означава двойна връзка или образува заедно с въглеродните атоми към които са свързани епоксидна връзка 4 Ο , или техни фармацевтичноприемливи и ветеринарно приемливи соли.
- 3. Сескитерпен съгласно претенция 1,характеризиращ се с това, че има формула III:в която R означава Н или ОН или техни фар м а цевти чн«при е м ли в и и в ете р и нар нои р и е мл и в и сол и.
- 4. Сескитерпен с формула IV:в която означава
\/υΗ \ о или / \)Н или техни фармацевтичноприемливи или ветеринарноприемливи соли. - 5. Метод за получаване на съединения както са дефинирани в преденция 1, характеризиращ се с това, че (1) се подлага на ферментация щам от гъба Acremonium strictum означен ХО6/15/458 (IM1 354451) или негов мутант, в среда от въглерод, азот и неорганични соли, продуциращ сескитерпени с формула I, (2) изолиране на получените сескитерпени от ферментационната среда, (3) и при желание окисляване на с ескитерпените < формула 1, rt която А означава пръстен (с) до сескитерпени с формула I, в която А означава пръстен (d), и/или (4) при желание превръщане на получените сескитерпени във фармацевтичноприемливи или ветеринарноприемливи техни соли.
- 6. Съединение съгласно някоя от претенции 1 до 4 за използване при метод за лечение на хора или животни.
- 7. Съединение съгласно претенция 6 за използване при лечение на състояния повлиявани от лигандите за бензодиазепиновия рецептор, съдържащ се в гамаамино маслена киселина бензодиазепин-CI йонофорния рецепторен комплекс.
- 8. Съединение съгласно претенция 7, за използване като антиконвулсно, анксиолитично, мускулнорелаксирагцо или хипнотично средство или за използване за засилване на паметта или за терапия при свръхдозиране.
- 9. Фармацевтичен или ветеринарен състав, характеризиращ се с това, че съдържа фармацевтичноприемлив или ветеринарноприемлив носител или разредител и като активен компонент съединение, както е дефинирано в която и да е от претенции 1 до 4.
- 10. Биологично чиста култура от щам от гъба Acremonium strictum означен ХО6/15/458 (1Μ1 354451) или негов мутант, продуциращ сескитерпени с формула 1 както са дефинирани в претенция 1.
- 11. Метод за ферментация на щам от гъбаAcremonium strictum означен ХО6/15/458 (IMI 354451) или негов мутант, продуциращ сескитерпени с формула I както са дефинирани в претенция 1, характеризиращ се с това, че на ферментация се подлага щам ХО6/15/458 или негов мутант в среда от въглерод, азот и неорганични соли.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929226724A GB9226724D0 (en) | 1992-12-22 | 1992-12-22 | Pharmaceutical compounds |
| PCT/GB1993/002632 WO1994014814A1 (en) | 1992-12-22 | 1993-12-22 | Sesquiterpenes, their preparation and their use as inhibitors acting on the gaba-benzodiazepine receptor |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BG99736A true BG99736A (bg) | 1996-04-30 |
Family
ID=10727034
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BG99736A BG99736A (bg) | 1992-12-22 | 1995-06-21 | Сескитерпени,тяхното получаване и използването им като инхибитори на гамк-бензодиазепиновите рецептори |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5565486A (bg) |
| EP (1) | EP0675888A1 (bg) |
| JP (1) | JPH08504804A (bg) |
| KR (1) | KR950704324A (bg) |
| AU (1) | AU677272B2 (bg) |
| BG (1) | BG99736A (bg) |
| BR (1) | BR9307712A (bg) |
| CA (1) | CA2151251A1 (bg) |
| CZ (1) | CZ284121B6 (bg) |
| FI (1) | FI953081A0 (bg) |
| GB (2) | GB9226724D0 (bg) |
| HU (1) | HUT71859A (bg) |
| IL (1) | IL108140A (bg) |
| MX (1) | MX9400174A (bg) |
| NO (1) | NO952483L (bg) |
| NZ (1) | NZ258986A (bg) |
| PL (1) | PL309628A1 (bg) |
| RU (1) | RU95113350A (bg) |
| SG (1) | SG67345A1 (bg) |
| SK (1) | SK77595A3 (bg) |
| TW (1) | TW242141B (bg) |
| WO (1) | WO1994014814A1 (bg) |
| ZA (1) | ZA939626B (bg) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070161095A1 (en) * | 2005-01-18 | 2007-07-12 | Gurin Michael H | Biomass Fuel Synthesis Methods for Increased Energy Efficiency |
| CA2797033C (en) | 2010-04-22 | 2021-10-19 | Longevity Biotech, Inc. | Highly active polypeptides and methods of making and using the same |
| WO2014145718A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Longevity Biotech, Inc. | Peptides comprising non-natural amino acids and methods of making and using the same |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6348284A (ja) * | 1986-08-18 | 1988-02-29 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | 新抗生物質ｙｐ−０２９０８ｌ−ａおよびその製造法 |
| EP0301102B1 (en) * | 1987-02-06 | 1991-11-06 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | NOVEL 7$g(b)-HYDROXY-4-PREGNENE-3,20-DIONE DERIVATIVES AND PROCESS FOR THEIR PREPARATION |
| US5120723A (en) * | 1987-08-25 | 1992-06-09 | University Of Southern California | Method, compositions, and compounds for modulating brain excitability |
| JP2842613B2 (ja) * | 1989-04-28 | 1999-01-06 | 塩野義製薬株式会社 | フォスフォリパーゼａ▲下２▼阻害物質 |
| JPH03108490A (ja) * | 1989-06-30 | 1991-05-08 | Shionogi & Co Ltd | フォスフォリパーゼａ↓２阻害物質 |
| US5130430A (en) * | 1990-10-31 | 1992-07-14 | Neurogen Corporation | 2-substituted imidazoquinoxaline diones, a new class of gaba brain receptor ligands |
| US5189050A (en) * | 1991-06-03 | 1993-02-23 | Merck & Co., Inc. | Fermentation analogs of virginiamycin m1 to treat panic and anxiety disorder |
-
1992
- 1992-12-22 GB GB929226724A patent/GB9226724D0/en active Pending
-
1993
- 1993-12-22 GB GB9503413A patent/GB2284603B/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-22 IL IL108140A patent/IL108140A/xx not_active IP Right Cessation
- 1993-12-22 CA CA002151251A patent/CA2151251A1/en not_active Abandoned
- 1993-12-22 AU AU57096/94A patent/AU677272B2/en not_active Ceased
- 1993-12-22 KR KR1019950702562A patent/KR950704324A/ko not_active Withdrawn
- 1993-12-22 RU RU95113350/04A patent/RU95113350A/ru unknown
- 1993-12-22 CZ CZ951646A patent/CZ284121B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-12-22 PL PL93309628A patent/PL309628A1/xx unknown
- 1993-12-22 WO PCT/GB1993/002632 patent/WO1994014814A1/en not_active Ceased
- 1993-12-22 JP JP6514956A patent/JPH08504804A/ja active Pending
- 1993-12-22 SG SG1996008418A patent/SG67345A1/en unknown
- 1993-12-22 BR BR9307712-2A patent/BR9307712A/pt not_active Application Discontinuation
- 1993-12-22 NZ NZ258986A patent/NZ258986A/en unknown
- 1993-12-22 FI FI953081A patent/FI953081A0/fi not_active Application Discontinuation
- 1993-12-22 HU HU9501840A patent/HUT71859A/hu unknown
- 1993-12-22 SK SK775-95A patent/SK77595A3/sk unknown
- 1993-12-22 US US08/464,737 patent/US5565486A/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-22 ZA ZA939626A patent/ZA939626B/xx unknown
- 1993-12-22 TW TW082110885A patent/TW242141B/zh active
- 1993-12-22 EP EP94902938A patent/EP0675888A1/en not_active Ceased
-
1994
- 1994-01-03 MX MX9400174A patent/MX9400174A/es unknown
-
1995
- 1995-06-21 NO NO952483A patent/NO952483L/no unknown
- 1995-06-21 BG BG99736A patent/BG99736A/bg unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2284603A (en) | 1995-06-14 |
| CZ164695A3 (en) | 1995-11-15 |
| FI953081A7 (fi) | 1995-06-21 |
| HUT71859A (en) | 1996-02-28 |
| TW242141B (bg) | 1995-03-01 |
| CZ284121B6 (cs) | 1998-08-12 |
| SK77595A3 (en) | 1995-12-06 |
| NO952483L (no) | 1995-08-15 |
| EP0675888A1 (en) | 1995-10-11 |
| JPH08504804A (ja) | 1996-05-28 |
| US5565486A (en) | 1996-10-15 |
| GB2284603B (en) | 1996-03-27 |
| BR9307712A (pt) | 1999-08-31 |
| FI953081A0 (fi) | 1995-06-21 |
| MX9400174A (es) | 1994-07-29 |
| NO952483D0 (no) | 1995-06-21 |
| RU95113350A (ru) | 1997-06-10 |
| NZ258986A (en) | 1996-11-26 |
| AU677272B2 (en) | 1997-04-17 |
| WO1994014814A1 (en) | 1994-07-07 |
| ZA939626B (en) | 1994-08-18 |
| SG67345A1 (en) | 1999-09-21 |
| AU5709694A (en) | 1994-07-19 |
| GB9226724D0 (en) | 1993-02-17 |
| PL309628A1 (en) | 1995-10-30 |
| KR950704324A (ko) | 1995-11-17 |
| GB9503413D0 (en) | 1995-04-12 |
| IL108140A (en) | 1997-06-10 |
| HU9501840D0 (en) | 1995-08-28 |
| IL108140A0 (en) | 1994-04-12 |
| CA2151251A1 (en) | 1994-07-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2494742C (en) | Tiacumicin production | |
| CA2174645C (en) | Polycyclic antiparasitic agents, process and strain for their preparation and their use | |
| US20070191415A1 (en) | Production of tacrolimus (fk-506) using new streptomyces species | |
| PL179581B1 (pl) | kompozycja farmaceutyczna oraz substancja farmakologicznie czynna PL PL PL PL PL PL PL PL | |
| US5468849A (en) | Rebeccamycin analogs by tryptophan analogs feeding | |
| US5565486A (en) | Sesquiterpenes, their preparation and their use as inhibitors acting on the gaba-benzodiazepine receptor | |
| CN119736186A (zh) | 一株拟无枝酸菌yinm00005及其在制备安莎霉素类化合物中的应用 | |
| US5789602A (en) | Physiologically active substances PF1092A, PF1092B and PF1092C, process for the production thereof, and contraceptives and anticancer drugs containing the same as active ingredients | |
| US4803217A (en) | Hapalindolinone compounds as vassopressin antagonists | |
| EP0504711B1 (en) | Compound UCA1064-B | |
| CA2037783C (en) | Rebeccamycin analogs by tryptophan analogs feeding | |
| JPS59161396A (ja) | 新規抗生物質スピカマイシン | |
| JPH02193940A (ja) | 化合物ｔａｎ―１１４０およびその製造法 |