BRPI0409319B1 - composto, composição farmacêutica, forma de dosagem unitária, e, uso de um composto - Google Patents

Abstract

"composto, composição farmacêutica, forma de dosagem unitária, e, métodos para modular terminação de translação prematura ou deterioração de mrna mediada-sem sentido em uma célula, para tratar ou prevenir uma doença genética ou melhorar um ou mais sintomas associados com a ou manifestações de uma doença genética, para tratar, evitar ou melhorar câncer ou um ou mais sintomas associados com ou manifestações de câncer, e, para tratar, prevenir ou melhorar um ou mais sintomas associados com a ou manifestações de uma doença". são descritos novos compostos do ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico, métodos de utilização e composições farmacêuticas compreendendo um derivado do ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico. os métodos incluem métodos de tratar ou evitar uma doença melhorada por modulação de terminação de translação prematura ou deterioração de mrna mediado-sem sentido, ou melhoria de um ou mais sintomas associados com ela.

Description

“COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, FORMA DE DOSAGEM UNITÁRIA, E, MÉTODOS PARA MODULAR

TERMINAÇÃO DE TRANSLAÇÃO PREMATURA OU DETERIORAÇÃO DE MRNA MEDIADA-SEM SENTIDO EM UMA CÉLULA, PARA - 5 TRATAR OU PREVENIR UMA DOENÇA GENÉTICA OU MELHORAR

UM OU MAIS SINTOMAS ASSOCIADOS COM A OU MANIFESTAÇÕES DE UMA DOENÇA GENÉTICA, PARA TRATAR, EVITAR OU MELHORAR CÂNCER OU UM OU MAIS SINTOMAS ASSOCIADOS COM OU MANIFESTAÇÕES DE CÂNCER, E, PARA 10 TRATAR, PREVENIR OU MELHORAR UM OU MAIS SINTOMAS

ASSOCIADOS COM A OU MANIFESTAÇÕES DE UMA DOENÇA”

1. CAMPO DA INVENÇÃO

A invenção refere-se a compostos do ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico ácido, composições compreendendo os compostos e métodos para tratar ou evitar doenças associadas com mutações sem sentido de mRNA, pela administração destes compostos ou composições.

2. FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

---------- ------- A expressão genética em células depende dos processos seqüenciais de transcrição e translação. Juntos, estes processos produzem uma 20 proteína da seqüência de nucleotídeo de seu correspondente gene.

A transcrição envolve a síntese do mRNA do DNA pela RNA polimerase. A transcrição começa em uma região promotora do gene e continua até a terminação ser induzida, tal como pela formação de uma estrutura de alça de tronco no RNA nascente ou a ligação do produto genético 25 rho.

A proteína é então produzida de mRNA pelo processo de translação ocorrendo no ribossoma, com o auxílio de tRNA, sintetases de tRNA e várias outras espécies de proteína e RNA. A translação compreende as três fases de iniciação e terminação. A translação é iniciada pela formação de um complexo de iniciação, consistindo de fatores de proteína, mRNA, • tRNA, cofatores e as subunidades ribossomais que reconhecem os sinais do mRNA que dirigem a maquinaria de translação para começar a translação no mRNA.

Uma vez o complexo de iniciação seja formado, ocorre o . crescimento da cadeia de polipeptídeos, pela adição repetitiva de amino ácidos pela atividade da peptidil transferase do ribossoma, bem como ’ tRNA e sintetases de tRNA. A presença de uma das três códons de terminação (UAA, UAG, UGA) no sítio A do ribossoma sinaliza os fatores 10 de liberação de cadeia de polipeptídeo RFs) para ligarem-se e reconhecerem o sinal de terminação. Subseqüentemente, a ligação éster, entre o nucleotídeo 3’ do tRNA localizado no sítio P do ribossoma e a cadeia de polipeptídeo nascente, é hidrolisada. A cadeia de polipeptídeo completada é liberada e as subunidades de ribossoma são recicladas para 15 outro ciclo de translação.

As mutações da seqüência de DNA, em que o número de bases l

é alterado, são categorizadas como mutações de inserção ou deleção (mutações de mudança de estrutura) e podem resultar em maiores rompimentos do genoma. As mutações do DNA que mudam uma base em 20 outra são rotuladas mutações sem sentido e são subdivididas nas classes de transições (uma purina para outra purina, ou uma pirimidina para outra pirimidina) e transversões (uma purina para uma pirimidina ou uma pirimidina para uma purina).

As mutações de inserções, deleções, transição e transversão podem todas resultar em uma mutação sem sentido ou mutação de terminação de cadeia, em que a mutação base ou mutação de mudança de estrutura muda um códon amino ácido em um dos três códons de parada. Estes códons de parada prematuros podem produzir proteínas aberrantes nas células, como resultado da terminação de translação prematura. Uma mutação sem sentido em um gene essencial pode ser letal e pode também • resultar em numerosas doenças, tais como cânceres, distúrbios de armazenagem lisossomal, distrofias musculares, fibrose cística e hemofilia, para citar algumas.

'5 Nas cepas bacterianas e eucarióticas com mutações sem . sentido, a supressão da mutação sem sentido pode surgir como resultado de uma mutação em uma das moléculas de tRNA, de modo que o tRNA ’ mutante pode reconhecer o códon sem sentido, como resultado de mutações em proteínas que são envolvidas no processo de translação, como resultado de mutações no ribossoma (RNA ribossomal ou proteínas ribossomais), ou pela adição de compostos sabidos alterarem o processo de translação (por exemplo, cicloeximida ou os antibióticos de aminoglicosídeo). O resultado é que um amino ácido será incorporado dentro da cadeia de polipeptídeo no sítio da mutação sem sentido e a translação não terminará prematuramente no códon sem sentido. O amino ácido inserido não será necessariamente idêntico ao amino ácido original da proteína tipo selvagem; entretanto, muitas substituições amino ácidas não têm um efeito maciço sobre a estrutura ou função da proteína. Assim, uma proteína produzida pela supressão de uma mutação sem sentido seria provável possuir atividade 20 próxima daquela da proteína tipo selvagem. Este cenário prove uma oportunidade para tratar doenças associadas com mutações sem sentido, pela evitação de terminação prematura de translação, através da supressão da mutação sem sentido.

A capacidade dos antibióticos de aminoglicosídeo promoverem transleitura (transcrição de uma seqüência de ácidos nucléicos além de sua seqüência de terminação normal) dos códons de parada eucarióticos tem atraído interesse por estes medicamentos como agentes terapêuticos potenciais, em doenças humanas causadas por mutações sem sentido. Uma doença para a qual tal estratégia terapêutica pode ser viável é lipofúscinose ceróide neuronal infantil tardia clássica (LINCL), uma doença neurodegenerativa da infância fatal, sem atualmente tratamento eficaz. As mutações de códon de parada prematuras do gene CLN2, codificando a tripeptidil-peptidase lisossomal 1 (TPP-I), são associadas '5 com a doença em aproximadamente metade das crianças diagnosticadas . com LINCL. A capacidade da gentamicina de aminoglicosídeo restaurar a atividade de TPP-I nas linhagens de células LINCL foi examinada. Em *’ uma linhagem de célula derivada de paciente, que era heterozigoto composto para uma mutação comumente vista sem sentido (Arg208Stop) e 10 uma diferente mutação sem sentido rara, aproximadamente 7% dos níveis normais de TPP-I foram maximamente restaurados com tratamento com gentamicina. Estes resultados sugerem que a supressão farmacológica das mutações sem sentido, por aminoglicosídeos ou farmacêuticos íuncionalmente similares, pode ter potencial terapêutico em LINCL (Sleat 15 e outros, Eur. J. Ped. Neurol. 5: Suppl A 57-62 (2001)).

Em células cultivadas tendo códons de parada prematuros no gene Regulador da Condutância Transmembrana da Fibrose Cística (CFTR), õ tratamento com aminõglicosídeos resultou na produção de CFTR de comprimento total (Bedwell e outros, Nat. Méd. 3:1280-1284 20 (1997); Howard e outros, Nat. Méd. 2: 467-469 (1996)). Em um modelo de camundongo para distrofia muscular Duchenne, o sulfato de gentamicina foi observado suprimir a terminação translacional em um códon de parada prematuro, resultando em distrofina de comprimento total (Barton-Davis e outros, J. Clin. Invest. 104:375-381 (1999)). Um pequeno aumento da 25 quantidade de distrofina de comprimento total proveu proteção contra avaria induzida por contração em camundongos mdx. O amino ácido inserido no sítio do códon sem sentido não foi determinado estes estudos.

Terapêuticos ou profiláticos de molécula pequena, que suprimem a terminação de translação prematura mediando a leitura errada do códon sem sentido, seriam úteis para o tratamento de numerosas doenças. A descoberta de medicamentos de molécula pequena, particularmente medicamentos biodisponíveis oralmente, pode resultar na introdução de um largo espectro de terapêuticos seletivos, que podem ser '5 usados contra doença causada por mutações sem sentido.

. 3. SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A invenção abrange novos compostos, novas composições ’ farmacêuticas e novos métodos de tratamento. Os compostos, composições e métodos são, em parte, baseados na modulação de terminação de 10 translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediado-sem sentido, que representam um papel em uma variedade de doenças. Tais doenças podem ocorrer devido à quantidade diminuída de proteína ativa, produzida como resultado de terminação prematura da translação. Os compostos da invenção permitem que a translação do mRNA continue além da mutação 15 sem sentido, resultando na produção de proteína de comprimento total. Assim, a invenção abrange compostos, composições e métodos para tratar e prevenir uma variedade de doenças, em particular doenças genéticas.

Esta invenção abrange compostos do ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico de Fórmula I:

ou seus sais, hidratos, clatratos, promedicamentos, polimorfos, estereoisômeros, incluindo enantiômeros, diastereômeros, racematos ou misturas de estereoisômeros, em que:

Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila • substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não substituída;

'5 R¹ é hidrogênio, arila substituída ou não substituída, , cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, -(CH₂CH₂)_nOR⁶ ou qualquer grupo biohidrolisável;

R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcóxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF₃, OCF₃, OCHF₂, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, NO2, NH₂ ou N(R⁷)₂;

cada ocorrência de R é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída 20 ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcóxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃; e n é um inteiro de 1 a 7.

Em uma forma de realização relacionada, a invenção abrange compostos do ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico de Fórmula II:

ou seus sais, hidratos, clatratos ou estereoisômeros, em que Z é definido como na Fórmula I e R é hidrogênio ou halogênio.

Em uma forma de realização preferida da invenção, os compostos de formulas I e II são sais, hidratos, clatratos, promedicamentos, polimorfos, ésteres bio-hidrolisáveis, racematos ou estereoisômeros purificados farmaceuticamente aceitáveis, incluindo mas não limitado a enantiômeros e diastereômeros opticamente puros.

A invenção abrange ainda métodos de tratar ou evitar uma doença melhorada pela modulação de terminação de translação prematura ou deterioração de mRNA mediado-sem sentido, ou melhorar um ou mais sintomas associados com ela, compreendendo administrar a um paciente em necessidade uma quantidade terapêutica e profilaticamente eficaz de um composto de fórmula I ou I e seus sais, hidratos, solvatos, clatratos, promedicamentos ou polimorfos farmaceuticamente aceitáveis. Em uma forma de realização preferida, a doença é uma doença genética; Uma doença do SNC; uma doença inflamatória; uma doença neurodegenerativa; uma doença autoimune; uma doença proliferativa, em particular câncer; uma doença cardiovascular; ou uma doença pulmonar; mais preferivelmente, a doença inclui mas não é limitada a amiloidose, LINCL, hemofilia, mal de Alzheimer, aterosclerose, gigantismo, nanismo, hipotiroidismo, hipertiroidismo, fibrose cística, envelhecimento, obesidade, mal de Parkinson, doença de Niemann Pick, fibrose cística, hipercolesterolemia familiar, retinite pigmentosa, distrofia muscular de Duchenne ou síndrome de Marfan.

A invenção abrange ainda métodos de tratar ou prevenir ou - melhorar uma doença genética, um ou mais sintomas associados com ou . manifestações de uma doença genética, compreendendo administrar a um paciente em necessidade uma quantidade terapêutica ou profilaticamente *5 eficaz de um composto de Fórmula I ou II, e seus sais, hidratos, solvatos, . clatratos, promedicamentos ou polimorfos farmaceuticamente aceitáveis. Em uma forma de realização preferida, a doença é uma doença do SNC; uma ^s doença inflamatória; uma doença neurodegenerativa; uma doença cardiovascular; uma doença autoimune; câncer; mais preferivelmente, a 10 doença genética inclui mas não é limitada a amiloidose, LINCL, hemofilia, mal de Alzheimer, aterosclerose, gigantismo, nanismo, hipotiroidismo, hipertiroidismo, fibrose cística, envelhecimento, obesidade, mal de Parkinson, doença de Niemann Pick, fibrose cística, hipercolesterolemia familiar, retinite pigmentosa, distrofia muscular de Duchenne ou síndrome de Marfan.

A invenção refere-se ainda a métodos de tratar, prevenir ou melhorar o câncer ou um ou mais sintomas associados com ou manifestações de câncer, compreendendo administrar a um paciente em necessidade uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um composto de Fórmula I ou II e seus sais, hidratos, solvatos, clatratos, promedicamentos ou 20 polimorfos farmaceuticamente aceitáveis.

Em uma forma de realização preferida da invenção, o paciente é um mamífero, mais preferivelmente um humano susceptível a ou sob risco de adquirir uma doença genética. Em uma forma de realização alternativa, o paciente sofreu um processo de avaliação para determinar a presença de uma 25 mutação sem sentido, compreendendo as etapas de avaliar um indivíduo ou células extraídas dele por ensaio de avaliação de mutação sem sentido aceitável. Em uma forma de realização relacionada, a terapia é personalizada pelo fato de o paciente ser avaliado por um ensaio de avaliação de mutação sem sentido e tratado pela administração de um ou mais compostos da invenção; particulannente, o paciente pode ser tratado com um composto

- particularmente adequado para as mutações em questão, p. ex., dependendo do tipo de doença, tipo de célula e do gene em questão. Em uma outra forma de realização, o paciente é um infante ou criança. Em ainda outra forma de '5 realização, a invenção abrange o tratamento de mulher grávida ou do feto . diretamente.

Em ainda uma forma de realização preferida da invenção, o “ composto é administrado parenteral, transdérmica, mucosa, nasal, bucal, sublingual ou oralmente; mais preferivelmente, o composto é administrado 10 oralmente, muitíssimo preferivelmente, o composto é administrado oralmente na forma de um tablete, cápsula ou líquido.

A invenção abrange métodos para modular terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediado-sem sentido. A invenção abrange ainda um método para suprimir terminação de translação 15 prematura e/ou deterioração de mRNA mediado-sem sentido em uma célula, compreendendo contatar uma célula, exibindo terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediado sem-sentido, com uma quantidade~eficazde”um~composto~de”FórmulaHEouriI^Arinvençãoabrange--ainda um método para induzir supressão sem sentido em uma célula, 20 compreendendo contatar uma célula, exibindo uma mutação sem sentido, com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I ou II. Um códon sem sentido pode estar presente no DNA ou RNA de qualquer tipo de célula e pode surgir naturalmente ou resultar de mutagênese. Portanto, as células abrangidas pelos presentes métodos incluem células animais, células de 25 mamífero, células bacterianas, células de planta e células infectadas viralmente. Em uma forma de realização, o códon sem sentido estava presente no DNA progenitor. Em outra forma de realização, o códon sem sentido resultou de mutagênese.

Sem ficarmos limitados a qualquer teoria particular, a capacidade dos compostos de Fórmula I ou II, de promover transleitura de • códons de parada, toma-os úteis no tratamento ou prevenção de qualquer doença que seja causada no todo ou em parte por uma mutação sem sentido. Tais doenças podem ocorrer devido à quantidade diminuída de proteína ativa, 5 produzida como resultado de terminação prematura de translação. Sem .. ficarmos limitados a qualquer teoria particular, os compostos de Fórmula I ou II permitem que a translação do mRNA continue além da mutação sem ' sentido, resultando na produção de proteína de comprimento total. Um aspecto poderoso da invenção é que a atividade terapêutica dos compostos de 10 Fórmula I ou II não é necessariamente específica de doença, ao contrário, são eficazes no tratamento ou prevenção de qualquer doença associada com uma mutação sem sentido. Além disso, os métodos da invenção podem ser específicos de paciente. Isto é, um paciente pode ser avaliado para determinar se esta doença é associada com uma mutação sem sentido. Se assim for, ele 15 pode ser tratado com um composto da invenção.

Os compostos de Fórmula I ou II são úteis para tratar ou prevenir doenças genéticas. Doenças genéticas que podem ser tratadas ou evitadas pelos compostos de Formula I du Π incluem câncer, doença autoimune, doença sangüínea, doença de colágeno, diabetes, doenças 20 inflamatórias ou uma doença do sistema nervoso central.

3.1________DEFINIÇÕES

Como aqui usado, “terminação de translação prematura” refere-se ao resultado de uma mutação que muda um códon correspondendo a um amino ácido para um códon de parada.

Como aqui usado, “deterioração de mRNA mediada-sem sentido” refere-se a qualquer mecanismo que medeie a deterioração de mRNAs contendo um códon de terminação de translação prematura.

Como aqui usado, um “códon de terminação prematura” ou “códon de parada prematura” refere-se à ocorrência de um códon de parada em que um códon, correspondendo a um amino ácido deve estar.

Como aqui usado, uma “mutação sem sentido” é uma mutação pontual mudando um códon correspondendo a um amino ácido para um códon de parada.

Como aqui usado, “supressão sem sentido” refere-se à inibição ou supressão de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediadasem sentido.

Como aqui usado, “modulação de terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido” refere-se à regulação da expressão genética alterando-se o nível de supressão sem sentido. Por exemplo, se for desejável aumentar a produção de uma proteína defeituosa por um gene com um códon de parada prematuro, isto é, para permitir transleitura do códon de parada prematuro do gene doente, então a modulação da terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido acarreta regulação ascendente de supressão sem sentido. Ao contrário, se for desejável promover a degradação de um mRNA com um códon de parada prematuro, então a modulação da terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido acarreta regulação descendente da supressão sem sentido.

Como aqui usado, o termo “paciente” significa um animal (p. ex., vaca, cavalo, carneiro, porco, galinha, peru, codoma, gato, cão, camundongo, rato, coelho, porquinho da índia etc.), preferivelmente um mamífero, tal como um não-primata e um primata (p. ex., macaco e humano), muitíssimo preferivelmente um humano. Em certas formas de realização, o paciente é um infante, criança, adolescente ou adulto. Em uma forma de realização, foi determinado, através de pré-avaliação, que o paciente possui uma mutação sem-sentido. Em outra forma de realização, foi determinado, através de pré-avaliação, que o paciente tem mutação sem sentido (isto é, UAA, UGA ou UAG). Em outra forma de realização, o paciente é infectado com células bacterianas (p. ex., Pseudomonas aeruginosa}. Em outra forma de realização, as células do paciente são viralmente infectadas.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “substituído” significa um grupo substituído por um a quarto ou mais substituintes, tais como halo, trifluorometila, trifluorometóxi, hidróxi, alcoxi, cicloalquilóxi, heterocicloóxi, oxo, alcanoíla, alquilcarbonila, cicloalquila, arila, arilóxi, aralquila, alcanoilóxi, ciano, azido, amino, alquilamino, arilamino, aralquilamino, cicloalquilamino, heterocicloamino, amino mono e dissubstituído, em que os dois substituintes do grupo amino são selecionados de alquila, arila, aralquila, alcanoilamino, aroilamino, aralcanoilamino, alcanoilamino substituído, arilamino substituído, aralcanoilamino substituído, tiol, alquiltio, ariltio, aralquiltio, cicloalquiltio, hetrociclotio, alquiltiono, ariltiono, aralquiltiono, alquilsulfonila, arilsulfonila, aralquilsulfonila, sulfonamido (p. ex., SO₂NH₂), sulfonamido substituído, nitro, carbóxi, carbamila (p. ex., CONH₂), carbamila substituída (p. ex., CONH alquila, CONH arila ou exemplos em que há dois substituintes no nitrogênio, selecionados de alquila, arila ou aralquila), alcoxicarbonila, arila, arila substituída, guanidino e heterociclo, tais como, indolila, imidazolila, furila, tienila, tiazolila, pirrolidila, piridila, pirimidila e similares. Em que, como citado acima, os próprios substituintes são ainda substituídos, tais outros substituintes são selecionados do grupo consistindo de halogênio, alquila, alcoxi, arila e aralquila. Em uma forma de realização particular, o termo substituído não significa ciano.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “alquila” significa um hidrocarboneto não-cíclico de cadeia reta ou ramificada, saturado, tendo de 1 a 20 átomos de carbono, preferivelmente 1 10 átomos de carbono e, muitíssimo preferivelmente, 1-4 átomos de carbono. Alquilas de cadeia reta saturadas representativas incluem -metila, -etila, -npropila, -n-butila, -n-pentila, -n-hexila, -n-heptila, -n-octila, -n-nonila e -n decila; enquanto as alquilas ramificadas saturadas incluem -isopropila, -secbutila, -isobutila, -terc-butila, -isopentila, 2-metilbutila, 3-metilbutila, 2metilpentila, 3-metilpentila, 4-metilpentila, 2-metilexila, 3-metilexila, 4metilexila, 5-metilexila, 2,3-dimetilbutila, 2,3-dimetilpentila, 2,4dimetilpentila, 2,3-dimetilexila, 2,4-dimetilexila, 2,5-dimetilexila, 2,2dimetilpentila, 2,2-dimetilexila, 3,3-dimetilpentila, 3,3-dimetilexila, 4,4dimetilexila, 2-etilpentila, 3-etilpentila, 2-etilexila, 3-etilexila, 4-etilexila, 2metil-2-etilpentila, 2-metil-3-etilpentila, 2-metil-4-etilpentila, 2-metil-2etilexila, 2-metil-3-etilexila, 2-metil-4-etilexila, 2,2-dietilpentila, 3,3dietilexila, 2,2-dietilexila,3,3-dietilexila e similares. Um grupo alquila pode ser não substituído ou substituído. Grupos alquila insaturados incluem grupos alquenila e grupos alquinila, que são discutidos abaixo.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, a expressão “grupo alquenila” significa um hidrocarboneto não-cíclico de cadeia reta ou ramificada, tendo de 2 a 20 átomos de carbono, mais preferivelmente 2-10 átomos de carbono, muitíssimo preferivelmente 2-6 átomos de carbono e incluindo pelo menos uma dupla ligação carbonocarbono. (C2-Ci₀)alquenilas de cadeia reta e ramificada representativas incluem-vinila, -alila, -1-butenila, 2-butenila, -isobutilenila, -1-pentenila, -2pentenila, -3-metil-1-butenila, -2-metil-2-butenila, -2,3-dimetil-2-butenila, -1hexenila, -2-hexenila, -3-hexenila, -1-heptenila, -2-heptenila, -3-heptenila, -1octenila, -2-octenila, -3-octenila, -1-nonenila, -2-nonenila, -3-nonenila, -1decenila, —2—decenila, —3-decenila e similares. .A. dupla ligaçao de um grupo alquenila pode ser não conjugado ou conjugado com outro grupo insaturado. Um grupo alquenila pode ser não substituído ou substituído.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, a expressão “grupo alquinila” significa um hidrocarboneto não-cíclico de cadeia reta ou ramificada, tendo de 2 a 20 átomos de carbono, mais preferivelmente 2-10 átomos de carbono,muitíssimo preferivelmente, 2-6 átomos de carbono e incluindo pelo menos uma tripla ligação carbono-carbono. -(C2Cio)alquinilas de cadeia reta ou ramificada representatives incluem acetilenila, -propinila, -1-butinila, -2-butinila, -1-pentinila, 2-pentinila, -3metil-l-butinila, -4-pentinila, -1-exinila, -2-hexinila, -5-hexinila, -1-heptinila, -2-heptinila, -6-heptinila, -1-octinila, -2-octinila, -7-octinila, -1-noninila, -2noninila, -8-noninila, -1-decinila, -2-decinila, -9-decinila e similares. A tripla ligação de um grupo alquinila pode ser não conjugada ou conjugada a outro grupo não saturado. Um grupo alquinila pode ser não-substituído ou substituído.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, 0 termo “halogênio” ou “halo” significa flúor, cloro, bromo ou iodo.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, 0 termo “alquil sulfonila” significa -alquil-SO₃H ou -SO₃-alquila, em que alquila é definida acima, incluindo -SO2-CH₃, -SO2-CH2 CH₃, -SO₂(CH₂)₂CH₃, -SO₂-(CH₂)₃CH3, -SO₂-(CH₂)₄CH₃, -SO₂- (CH₂)₅CH₃, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, 0 termo “carboxíla” e “carbóxi” significam -COOH. ~

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, 0 termo “alcoxi” significa -O- (alquila), em que alquila é definida acima, incluindo -OCH₃, -OCH₂CH₃, -O(CH₂)₂CH₃, -O(CH₂)₃ CH₃, -O(CH₂)₄CH₃, O(CH₂)₅CH₃, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “alcoxicarbonila” significa -C(=O)O- (alquila), em que alquila é definida acima, incluindo -C(=O)O-CH₃, -C(=O)O-CH₂CH₃, -C(=O)O(CH₂)₂CH₃, -C(=O)O-(CH₂)₃CH₃, -C(=O)O-(CH₂)₄CH₃, -C(=O)O(CH₂)₅CH₃, e similares. Em uma forma de realização preferida, os ésteres são bio-hidrolisáveis (isto é, 0 éster é hidrolisado em um ácido carboxílico in vitro ou in vivo).

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “alcoxialquila” significa -(alquila)-O-(alquila), em que cada “alquila” é independentemente um grupo alquila como definido acima, incluindo CH₂OCH₃, -CH₂OCH₂CH₃, -(CH₂)₂OCH₂CH₃, -(CH₂)₂O(CH₂)₂CH₃, e '5 similares.

. Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “arila” significa um anel aromático carbocíclico, contendo de 5 a 14 ' átomos no anel. Os átomos do anel de um grupo arila carbocíclico são todos átomos de carbono. As estruturas de anel arila incluem compostos tendo uma 10 ou mais estruturas de anel, tais como compostos mono-, bi-, ou tricíclicos, bem como porções carbocíclicas benzo-fundidas, tais como 5,6,7,8tetraidronaftila e similares. Preferivelmente, o grupo arila é um anel monocíclico ou anel bicíclico. Grupos arila representativos incluem fenila, tolila, antracenila, fluorenila, indenila, azulenila, fenantrenila e naftila. Um 15 grupo arila carbocíclico pode ser não-substituído ou substituído.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “heteroarila” significa um anel aromático carbocíclico, contendo de 5 a 14 átomos no anel e os átomos do anel contêm pelo menos um heteroátomo, preferivelmente 1 a 3 heteroátomos, independentemente selecionados de 20 nitrogênio, oxigênio ou enxofre. As estruturas de anel heteroarila incluem compostos tendo uma ou mais estruturas de anel, tais como compostos mono, bi ou tricíclicos, bem como porções heterocíclicas fundidas. Heteroarilas representativas são triazolila, tetrazolila, oxadiazolila, piridila, fiirila, benzofuranila, tiofenila, benzotiofenila, benzoisoxazolila, benzoisotiazolila, 25 quinolinila, pirrolila, indolila, oxazolila, benzoxazolila, imidazolila, benzimidazolila, tiazolila, benzotiazolila, isoxazolila, pirazolila, isotiazolila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, triazinila, cinolinila, ftalazinila, quinazolinila, benzoquinazolinila, acridinila, pirimidila e oxazolila. Um grupo pode ser não-substituído ou substituído.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “arilóxi” significa grupo -O-arila, em que arila é como definida acima. Um grupo arilóxi pode ser não-substituído ou substituído.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “arilalquila” significa -(alquila)-(arila), em que a alquila e arila são definidas acima, incluindo mas não limitado a -(CH₂) fenila, -(CH₂)₂fenila, (CH₂)₃fenila, -CH(fenila)₂, -CH(fenila)₃, -(CH₂)tolila, -(CH₂) antracenila, (CH₂)fluorenila, -(CH₂)indenila, -(CH₂)azulenila, -(CH₂) naftila, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “heteroarilalquila” significa -(alquil)-(heteroarila), em que alquila e heteroarila são definidos acima, incluindo mas não limitado a -(CH₂) Piridila, -(CH₂)₂ piridila, -(CH₂)₃(piridila), -CH (piridila)₂, -C(piridila,)₃, -(CH₂) triazolila, -(CH₂)tetrazolila, -(CH₂) oxadiazolila, -(CH₂) furila, -(CH₂) benzofuranila, -(CH₂) tiofenila, -(CH₂) benzotiofenila, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “arilalquilóxi” significa -O-(alquila)-(arila), em que alquila e arila são definidas acima, incluindo mas não limitado a -O-(CH₂)₂fenila, -O(CH₂)₃fenila, -O-CH (fenila)₂, -O-CH (fenila)₃, -O-(CH₂)tolila, -O(CH₂)antracenila, -O-(CH₂) fluorenila, -O-(CH₂) indenila, -O-(CH₂) azulenila, -O-(CH₂) naftila, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “cicloalquila” significa um anel monocíclico ou policíclico saturado, compreendendo átomos de carbono e hidrogênio e não tendo múltiplas ligações carbono-carbono. Um grupo cicloalquila pode ser não-substituído ou substituído. Exemplos de grupos cicloalquila incluindo mas não limitado a grupos (C₃-C7)cicloalquila, incluindo ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila e cicloeptila e terpenos cíclicos e bicíclicos. Um grupo cicloalquila pode ser não-substituído ou substituído. Preferivelmente, o grupo cicloalquila é um anel monocíclico ou anel bicíclico.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “heterociclila” significa um anel monocíclico ou policíclico, compreendendo átomos de carbono e hidrogênio, opcionalmente tendo 1 a 4 múltiplas ligações e os átomos do anel contêm pelo menos um heteroátomo, '5 preferivelmente 1 a 3 heteroátomos, independentemente selecionados de . nitrogênio, oxigênio e enxofre. As estruturas de anel heterociclila incluem compostos tendo uma ou mais estruturas de anel, tais como compostos mono, bi ou tricíclicos. Preferivelmente, o grupo heterociclila é um anel monocíclico ou anel bicíclico. Heterociclos representatives incluem mas não são limitados 10 a morfolinila, pirrolidininonila, pirrolidinila, piperidinila, hidantoinila, valerolactamila, oxiranila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, tetraidropiridinila, tetraidropirimidinila, tetraidrotiofenila, tetraidrotiopiranila e similares. Um anel heterociclila pode ser não-substituído ou substituído.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o 15 termo “cicloalquilóxi” significa -O-(cicloalquila), em que cicloalquila é definida acima.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o ~termo “cicloalquilalquilóxi” significa -O-(alquila)-(cicloalquila), em que cicloalquila e alquila são definidos acima, incluindo mas não limitado a -O20 ciclopropila, -O-ciclobutila, -O-ciclopentila, -O-cicloexila, -O-cicloeptila e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “aminoalcóxi” significa -O-(alquila)-NH₂, em que alquila é definida acima, incluindo mas não limitado a -O-CH₂-NH₂, -O-(CH₂)₂-NH₂, -O25 (CH₂)₃-NH₂, -O-(CH₂)₄-NH₂, -O-(CH₂)5-NH₂, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “alquilamino” significa -NH(alquila) ou -N-(alquila)(alquila), em que alquila é definida acima, incluindo mas não limitado a NHCH₃, -NHCH₂CH₃, -NH(CH₂)₂CH₃, -NH(CH₂) ₃CH₃, -NH (CH₂)₄CH₃, -NH(CH₂)₅CH₃, -N(CH₃)₂,

-N(CH₂CH₃)2, -N ((CH₂) ₂CH₃)2, -N(CH₃)(CH₂CH₃), e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, ο termo “arilamino” significa -NH(arila), em que arila é definida acima, incluindo mas não limitado a -NH(fenila), -NH(tolila), -NH(antracenila), NH(fluorenila), -NH(indenila), -NH(azulenila), -NH(piridinila), -NH(naftila) e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “arilalquilamino” significa -NH-(alquila)-(arila), em que alquila e arila são definidas acima, incluindo -NH-CH₂-(fenila), -NH-CH₂-(tolyl), -NH-CH₂(antracenila), -NH-CH₂-(fluorenila), -NH-CH₂-(indenila), -NH-CH₂(azulenila), -NH-CH₂-(piridinila), -NH-CH₂-(naftila), -NH-(CH₂)₂-(fenila) e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “arilalquilamino” significa -NH-(cicloalquila), em que cicloalquila é definido acima, incluindo-NH-ciclopropila, -NH-ciclobutila, -NHciclopentila, -NH-cicloexila, -NH-cicloeptila, e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “aminoalquila” significa -(alquila)-NH₂, em que alquila é definida acima, incluindo -CH₂-NH₂, -(CH₂)₂-NH₂, -(CH₂)₃-NH₂, -(CH₂) ₄-NH₂, (CH₂)₅-NH₂ e similares.

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, o termo “alquilaminoalquila” significa -(alquila) -NH (alquila) ou -(alquila)N(alquila)(alquila), em que cada “alquila” é independentemente um grupo alquila definido acima, incluindo -CH₂-NH-CH₃, -CH₂-NHCH₂CH₃, -CH₂NH (CH₂) ₂CH_3j -CH₂-NH (CH₂)₃ CH₃, -CH₂-NH (CH₂)₄CH₃, -ch₂NH(CH₂)₅CH₃, -(CH₂)₂-NH-CH₃, -CH₂-N(CH₃)₂, -CH₂-N(CH₂CH₃)₂, -ch₂N((CH₂)₂CH₃)₂, -CH₂-N(CH₃)(CH₂CH₃), -(CH₂)₂-N(CH₃)₂, e similares.

Como aqui usado, uma “quantidade terapeuticamente eficaz” refere-se àquela quantidade do composto da invenção, ou outro ingrediente ativo, suficiente para prover um benefício terapêutico no tratamento ou controle da doença ou para retardar ou minimizar sintomas associados com a doença. Além disso, uma quantidade terapeuticamente eficaz, com respeito a um composto da invenção, significa aquela quantidade de agente terapêutico sozinho, ou em combinação com outras terapias, que provê um benefício terapêutico no tratamento ou controle da doença. Usado com relação a uma quantidade de um composto da invenção, o termo pode abranger uma quantidade que melhora a terapia total, reduz ou evita sintomas ou causas da doença, ou aumenta a eficácia terapêutica de ou sinergias com outro agente terapêutico.

Como aqui usado, uma “quantidade profilaticamente eficaz” refere-se àquela quantidade de um composto da invenção ou outro ingrediente ativo suficiente para resultar na prevenção, recorrência ou espalhamento da doença. Uma quantidade profilaticamente eficaz pode referir-se à quantidade suficiente para evitar doença inicial ou a recorrência ou espalhamento da doença ou a ocorrência da doença em um paciente, incluindo mas não limitado a àqueles predispostos à doença. Uma quantidade profilaticamente eficaz pode também referir-se à quantidade que provê um benefício profilático na prevenção da doença. Além disso, uma quantidade profilaticamente eficaz, com respeito a um composto da invenção, significa aquela quantidade sozinha, ou em combinação com outros agentes, que provê um benefício profilático na prevenção da doença. Usado com relação a uma quantidade de um composto da invenção, o termo pode abranger uma quantidade que melhora a profilaxia total ou aumenta a eficácia de ou sinergias com outro agente profilático.

Como aqui usado, um “protocolo terapêutico” refere-se a um regime de tempo e dosagem de um ou mais agentes terapêuticos.

Como aqui usado, um “protocolo profilático” refere-se a um regime de tempo e dosagem de um ou mais agentes profiláticos.

Como aqui usado, um “protocolo” inclui programas de dosagem e regimes de dosagem.

Como aqui usado, “em combinação” refere-se ao uso de mais do que um agentes profilático e/ou terapêutico.

Como aqui usado, os termos “controlar” e “controle” referemse aos efeitos benéficos que um indivíduo obtém de um agente profilático ou terapêutico, que não resulta em uma cura da doença. Em certas formas de realização, é administrado a um indivíduo um ou mais agentes profiláticos ou terapêuticos para “controlar” uma doença, a fim de prevenir a progressão ou piora da doença.

Como aqui usado, os termos “prevenir” e “prevenção” referese à prevenção da recorrência, espalhamento iniciais da doença em um indivíduo, resultando da administração de um agente profilático ou terapêutico.

Como aqui usados, os termos “tratar” e “tratamento” referemse à erradicação ou melhoria da doença ou sintomas associados com a doença. Em certas formas de realização, tais termos referem-se a minimização do espalhamento ou piora da doença, resultando da administração de um ou mais agentes profiláticos ou terapêuticos a um indivíduo com tal doença.

Como aqui usado, o termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” refere-se a sais preparados de ácidos ou bases não tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis, incluindo ácidos e bases inorgânicos e ácidos e bases orgânicos. Sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis adequados, para o composto da presente invenção, incluem mas não são limitados a sais metálicos produzidos de sais de alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio e zinco ou sais orgânicos produzidos de lisina, N,N’dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilenodiamina, meglumina (N-metilglucamina) e procaína. Ácidos não-tóxicos adequados incluem mas não são limitados a ácidos inorgânicos e orgânicos, tais como ácido acético, algínico, antranílico, benzenossulfônico, benzóico, canforsulfônico, cítrico, etenossulfônico, fórmico, fumárico, furóico, galacturônico, glicônico, glicurônico, glutâmico, glicólico, bromídrico, clorídrico, isetiônico, lático, maleico, málico, mandélico, metanossulfônico, ’ 5 múcico, nítrico, pamóico, pantotênico, fenilacético, fosfórico, propiônico, . salicílico, esteárico, succínico, sulfanílico, sulfurico, tartárico e ptuluenossulfônico. Ácidos não-tóxicos específicos incluem ácido clorídrico, bromídrico, fosfórico, sulfurico e metanossulfônico. Exemplos de sais específicos incluem, assim, sais cloridreto e mesilato. Outros exemplos de 10 sais são bem conhecidos na arte, vide, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a. ed., Mack Publishing, Easton PA (1990).

Como aqui usado, a menos que de outro modo especificado, ο termo “promedicamento” significa um derivado de um composto que pode hidrolisar-se, oxidar-se ou de outro modo reagir sob condições biológicas (in 15 vitro ou in vivo), para fornecer um composto ativo, particularmente um composto da invenção. Exemplos de promedicamentos incluem mas não são limitados a derivados e metabólitos de um composto da invenção, que incluem porções bio-hidrolisáveis, tais como amidas bio-hidrolisáveis, ésteres bio-hidrolisáveis, carbamatos bio-hidrolisáveis, carbonatos bio-hidrolisáveis, 20 ureídos bio-hidrolisáveis e análogos de fosfato bio-hidrolisáveis.

Preferivelmente, promedicamentos dos compostos com grupos funcionais carboxila são os ésteres de alquila inferior do ácido carboxílico. Os ésteres de carboxilato são convenientemente formados esterificando-se quaisquer das porções de ácido carboxílico presentes na molécula. Os promedicamentos 25 podem tipicamente ser preparados utilizando-se métodos bem conhecidos, tais como aqueles descritos por Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 6a. ed. (Donald J. Abraham ed., 2001, Wiley) e Design and Application of Prodrugs (H. Bundgaard ed., 1985, Harwood Academic Publishers Gmfh).

Como aqui usados, a menos que de outro modo indicado, os termos “amida bio-hidrolisável”, “éster bio-hidrolisável”, “carbamato biohidrolisável”, “carbonato bio-hidrolisável”, “ureído bio-hidrolisável”, “fosfato bio-hidrolisável” significa uma amida, éster, carbamato, carbonato, ureído ou fosfato, respectivamente, de um composto que: 1) não interfere com a atividade biológica do composto, porém pode conferir àquele composto propriedades vantajosas in vivo, tal como absorção, duração da ação ou início da ação; ou 2) é biologicamente inativo, porém é convertido in vivo no composto biologicamente ativo.Exemplos de ésteres bio-hidrolisáveis incluem mas não são limitados a ésteres de alquila inferior, ésteres de alcoxiacilóxi, ésteres de alquil acilamino alquila e ésteres de colina. Exemplos de amidas bio-hidrolisáveis incluem mas não são limitados a amidas de alquila inferior, amidas oc-amino ácidas, amidas de alcoxiacila e amidas de alquilaminoalquilcarbonila. Exemplos de carbamatos bio-hidrolisáveis incluem mas não são limitados a alquilaminas inferiores, etilenodiaminas substituídas, aminoácidos, hidroxialquilaminas, aminas heterocíclicas e heteroaromáticas e poliéter aminas.

Como aqui usado, amenos que de outro modo indicado, o termo “opticamente puro” ou “estereomericamente puro” significa que o estereoisômero de um composto é substancialmente livre dos outros estereoisômeros daquele composto. Por exemplo, um composto estereomericamente puro, tendo um centro quiral, será substancialmente livre do enantiômero oposto do composto. Um composto estereomericamente puro, tendo dois centros quirais, será substancialmente livre de outros diastereômeros do composto. Um composto estereomericamente puro típico compreende mais do que cerca de 80% em peso de um estereoisômero do composto e menos do que cera de 20% em peso de outros estereoisômeros do composto, mais preferivelmente mais do que cera de 90% em peso de um estereoisômero do composto e menos do que cera de 10% em peso dos outros estereoisômeros do composto, mesmo mais preferivelmente mais do que cerca de 95% em peso de um estereoisômero do composto e menos do que cerca de 5% em peso dos outros estereoisômeros do composto e, muitíssimo preferivelmente, mais do que cera de 97% em peso de um estereoisômero do composto e menos do que cera de 3% em peso dos outros estereoisômeros do composto.

Como aqui usado, a menos que de outro modo indicado, o termo “enantiomericamente puro” significa uma composição estereomericamente puro de um composto tendo um centro quiral.

Deve ser citado que, se houver uma discrepância entre uma estrutura representada e um nome dado àquela estrutura, é para ser conferido mais peso à estrutura representada. Além disso, se a estereoquímica de uma estrutura ou uma parte de uma estrutura não for indicada com, por exemplo, linhas cheias ou tracejadas, a estrutura ou parte da estrutura é para ser interpretada como abrangendo todos seus estereoisômeros.

4. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

4.1 COMPOSTOS DA INVENÇÃO

Esta invenção abrange compostos do ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico de Fórmula I:

ou seus sais, hidratos, clatratos, promedicamentos ou polimorfos, estereoisômeros, incluindo enantiômeros, diastereômeros, racematos ou misturas de estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis, em que:

Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não substituída;

'5 R¹ é hidrogênio, arila substituída ou não substituída,

- cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, -(CH₂CH₂)_nOR⁶ ou qualquer grupo biohidrolisável;

R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF₃, OCF₃, OCHF₂, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, NO2, NH₂ ou N(R⁷)₂;

cada ocorrência de R é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída 20 ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃; e n é um inteiro de 1 a 7.

Em uma forma de realização alternativa, a invenção abrange um composto de Fórmula I, em que R¹, R², R³, R⁴ e R⁵ são hidrogênio, Z não é metila, 2-carbóxi etila, 3-(4-piridinil)propila ou 2-(4-piridinil)etila.

Em uma forma de realização preferida, a invenção abrange um composto de Fórmula I, em que R¹ é H.

Em uma forma de realização preferida, a invenção abrange um composto de Fórmula I, em que R¹ é qualquer grupo bio-hidrolisável que não H.

Em uma forma de realização relacionada, a invenção abrange compostos de ácido 1,2,4-oxadiazol benzóico de Fórmula II:

ou seus sais, hidratos, clatratos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis, Z é arila substituída ou não-substituída, heteroarila substituída ou não-substituída, cicloalquila substituída ou não-substituída, alquila substituída ou não-substituída, alquenila substituída ou não-substituída, heterociclo substituído ou não-substituído, arialquila substituída ou não-substituída; e R é hidrogênio ou halogênio.

Em uma forma de realização R é o halogênio, flúor. Em uma forma de realização preferida, R é hidrogênio.

Em uma forma de realização preferida, a invenção abrange um composto de Fórmula I ou II, em que Z é p-Tolila; (4-clorometilfenila); (2-cloro-piridin-3-ila); (2-fluoro-fenila); (3,4-difluoro-fenila; (4metóxi-fenila); benzo[l,3]dioxol-ila; (4-etil-fenila); o-Tolila; (2-clorofenila); (3-metil-tiofen-2-ila); benzo[b]tiofen-2-ila; (3-fluoro-fenila); 4terc-butil-fenila); (2-metóxi-fenila); (2-difluoro-fenila); tiofen-2-ila; (2,4difluoro-fenila); (3-cloro-fenila); m-tolila; (4-trifluorometil-fenila); (4fluoro-fenila); (3-metóxi-fenila); fenila; (2,6-difluoro-fenila); (2,dimetilfuran-3-ila); (4-pirrol-l-il-fenila); (3-dimetilamino-fenila); bifenil-4-ila; (4dimetilamino-fenila); benzo[l,2,5]oxadiazol-ila; m-Tolila; (2trifluorometil-fenila); (6-cloro-piridin-3-ila); (3,bis-trifluorometil-fenila); Furan-2-ila; (4-nitro-fenila); (3,4-dimetóxi-fenila); (3-trifluorometóxi26 fenila); Naftalen-l-ila; Cicloexila; Piridin-3-ila; Piridin-4-ila; Ciclopentila;

Ciclopropila; (4-Pentilóxi-fenila); (3,4-trimetóxi-fenila); (4-isobutil-fenila); ciclobutila; (l-acetil-piperidin-4-ila); Isoxazol-ila; [2-cloro-6-fluorofenila)-metil-isoxazol-4-ila] ou [2-cloro-fenil)-metil-isoxazol-4-ila]; mais ’ 5 preferivelmente Z é (3-fluoro-fenila), mais preferivelmente Z é (4-fluoro> fenila), mesmo mais preferivelmente Z é (2-fluoro-fenila).

Em uma forma de realização específica, a invenção abrange um composto de Fórmula I ou II, em que Z não é 4-ciano-fenila.

Compostos preferidos da invenção incluem mas não são 10 limitados a,

Ácido 3-(5-p-Tolila-[l,2,4] oxadiazol-3-ila) -benzóico acid;

Ácido 3- [5-(4-Clorometil-fenil)- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico Ácido

3-[5-(2-Cloro-piridin-3-ila)- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido3- [5-(2-Fluoro-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3- [5-(3,4-Difluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3- [5-(4-Metóxi-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico;

Ácido 3-(5-Benzo [l,3]dioxol-5-ila- [1,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3- [5-(4-Etil-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico; Ácido 3-(5-oTolil-[ 1,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3- [5-(2-Cloro-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico;

Ácido 3- [5-(3-Metil-tiofen-2-ila)- [1, 2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Benzo[b]tiophen-2-ila-[l,2,4] oxadiazol-3-ila) -benzóico; Ácido [5(3-Fluoro-fenil- [1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3- [5-(4-terc-Butil-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(2-Metóxi-fenil- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(2, 5-Difluoro-fenil- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-(5-Tiofen-2-ila- [1,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3-[5-(2, 4-Difluoro-fenil-[l,2, 4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(3-Cloro-fenil-[ 1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5 -m-Tolil27 [1.2.4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-Trifluorometil-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Fluoro-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(3-Metóxi-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico;

-(5 -F enil- [ 1,2,4]oxadiazol-3 -ila)-benzóico; Ácido 3 - [5 -(2,6-Difluorofenil- [1,2,4] oxadiazol-3 -ila] -benzóico;

Ácido 3-[5-(2, 5-Dimetilfuran-3-ila)- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Pirrol-l-ila-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3[5-(3-Dimetilamino-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5Bifenil-4-il-[l,2, 4]oxadiazol-3-il)-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-Dimetilamino-fenil- [1,2, 4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-(5-Benzo[l,2,5]oxadiazol-5-il-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3-(5-m-Tolil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-[5-(2Trifluorometil-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(6-Cloropiridin-3-ila)- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(3,5-BisTrifluorometil-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Furan-

2- ila-[l ,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Nitro-fenil- [1.2.4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(3, 4-Dimetóxi-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico; Ácido

3- [5-(3-Trifluorometilóxi-fenil- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3(5-Napftalen-l-ila- [1,2,4] oxadiazol-3-ila) -benzóico;

Ácido 3-(5-Cicloexil-[l,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-(5-Piridin3 -ila- [ 1,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-(5-Piridin-4-ila- [1.2.4] oxadiazol-3-ila-)benzóico;

Ácido 3-(5-Ciclopentil-[l ,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico;

Ácido 3-(5-Ciclopropil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-[5-(4Pentilóxi-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(3, 4,5-Trimetóxi-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Isobutil-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(528

Ciclobutil - [ 1,2,4] oxadiazol-3 -ila)-benzóico; Ácido 3 - [5 -(1 - Acetilpiperidin-4-ila)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Isoxazol-5, ila-[1,2,4] oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-{5-[3-(2-Cloro-6-fluorofenil-5-metil-isoxazol-4-ila]-[l,2,4] oxadiazol-3-ila}-benzóico;

Ácido 3-(5-Isopropil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3-(5-terc-Butil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico;

Ácido 3-(5-Butil-[l,2,4]oxadiazol-3- ila-)benzóico;

^! Ácido 3-(5-Propenila-[l,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-[5-(4Cloro-benzil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3 -ila] -benzóico; Ácido 3 - [5 -(4-Cloro10 fenoximetil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Benzil- [l,2,4]oxadiazol-3-il)-benzóico; Ácido 3-(5-Metóximetil[l,2,4]oxadiazol3-il)-benzóico; Ácido 3-[5-(l-Fenil-propil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]benzóico; Ácido 3-[5-(4-Fluoro-benzil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(Ácido 3-Cloro-fenoximetil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila] benzóico;

Ácido 3-[5-(6-Cloro-piridin-3-il)-[l,2, 4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Ciclopentilmetil [l,2,4]oxadiazol-3-il)-benzóico; Ácido 3-[5-(4Metóxi-benzil)-[l,2, 4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(2,3- 3-Difluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(2-Fluoro-5-metil-fenil-[ 1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[520 (2-Metilsulfanil-piridin-3-il)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5(2,2-Difluoro-benzo[l,3]dioxol-5-il)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 4-Fluoro-3-[5-(4-fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 2-Fluoro-5-[5-(4-fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-Cloro-2-fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido

3-[5-(4-Bromo-2-fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5(3-Fluoro-bifenil-4-il)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-{5-[3-(2Cloro-fenil-5-metil-isoxazol-4-ila]-[l,2,4]oxadiazol-3-ila}-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-Ciano-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Sal de sódio do ácido 3-[5-(2-Fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Éster metílico do ácido 3-[5-(4-Fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 5-[5-(4-Fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-2-Metóxi-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-Bromo-2-fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(3-Fluoro-bifenil-4-il)-[ 1,2,4]oxadiazol-3 -ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(6-Pirrolidin-l-il-piridin-3-il)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3 -[5 -(6-Morfolin-4-il-piridin-3 -il)-[1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(3, 4, 5, 6-Tetraídro-2H-[l,2']bipiridinil-5'-il)-[l,2,4] oxadiazol-3 -ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(2-Fluoro-6-hidróxi-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Éster metílico do ácido 3-[5-(2-Fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]benzóico;

2-metóxi-etil éster do ácido 3-[5-(2-Fluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]benzóico; 2-(2-metóxi-etóxi)-etil éster do ácido 3-[5-(2-Fluoro-fenil)-[l, 2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

2-{2-[2-(2-metóxi-etóxi)-etóxi]-etóxi}-etil éster do ácido 3-[5-(2-Fluorofenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

2-(2-{2-[2-(2-metóxi-etóxi]-etóxi]-etóxi}-etóxi)-etil éster do ácido 3-[5-(2fluoro-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico;2-[2-(2-{2-[2-(2-hidróxietóxi)-etóxi]-etóxi}-etóxi)-etóxi]-etil éster do ácido 3-[5-(2-Fluoro-fenil[1,2, 4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-amino-fenil)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico;

Ácido 3-[5-(4-azido-fenil)-[ 1,2,4]oxadiazol-3-il-benzóico; e

Ácido 3-[5-(4-benzilóxi-fenil)-[l,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico e seus sais, hidratos, solvatos, clatratos e estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos de fórmulas I e II e aqueles listados acima são aqui referidos como “compostos da invenção”. Os compostos exemplificativos da invenção são representados na Tabela 1 abaixo.

Tabela I: Composto	Composto	Nome do composto
N-°< ifV* VZ Cl <Âo'H 01	Ácido 3[5-(3-cloro-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico
N'° /=^. O^OH 02	Ácido 3-(5-pentilóxifenil)-[l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	***
ZA N-°, )=< (ZOH 03	Ácido 3-(5-naftalen-l-il[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****
N-O /=^ qaH>ctoh 04	Ácido 3-(5-p-tolil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico
N'°\ /==^ p^Z~O~F CTOH 05	Ácido 3-(5-(4-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
N'°\ /=\ /=^ H ò—< V.Z\ V#v_/ Η'ίχΑ) 06	Ácido 3-(5-bifenil-4-il[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****
N'°\ /=\ çaH>> <to'h 07	Ácido 3-[5-(4-isobutilfenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3il]-benzóico	**
n'Q /=\ çjA/O O^O'H 08	Ácido 3-(5-fenil[ 1,2,4]oxadiazol-3 -il] benzóico

N'Q r-y JL > Çr^ <ArH 09	Ácido 3-(5-cicloexil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
\ p Y /° θΑ/Η 10	Ácido 3-[5-(3,4,5- trimetóxi-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	***
n-°x /^\ 0 - JL 'Z V. Á~-fl fj N Xh 11	Ácido 3-[5[(4-nitro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	****
N'°\ / (Y·^ oXH 12	Ácido 3-[5-(4-metóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
NJ°X J==\ Y/v ϋ^ο'* 13	Ácido 3-[5-(o-tolil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico
N-O /=\ j cAc^ 14	Ácido 3-(5benzo[l,3]dioxol-5-il[1,2,4] oxadiazol-3 -il)benzóico
N'Q / ji y—( φ Λ)'Η 15	Ácido 3-(5-isopropil[l,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico	****
F\ F N'°\ |Χ^γ^·Ν F F o^oH 16	Ácido 3-[5-(3,5-bistrifluorometil-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****

Ν'°\ Ζ=\ Ε F 17	Ácido 3-[5-(4trifluorometil-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico
Ν°\ / cAo'H 18	Ácido 3-[5-(4dimetilamino-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
Ν'°\ /=\ ρΛΛΟ γ °κ ΟΥΗ	Ácido 3-[5-(2-metóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	***
)ο οΧΗ 20	Ácido 3-[5-(3-metóxifenil-[ 1,2,4] oxadiazol-3 il]-benzóico	****
Ν°\ ΡρΛΌ ο^ο'Η 21	Ácido 3-(5-furan-2-il)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
γΜ οΧΗ 22	Ácido 3-(5-terc-butil[ 1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	*
ν-9. 9 çr οζο 23	Ácido 3-(5-benzo[l,2,5oxadiazol-5-il[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
Ν°χ /=s\ Cl oArH 24	Ácido 3-[5-(4-clorometilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico

n-Q /to v ,	Ácido 3-[5-(4-terc-butilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
25	0-X0'h
26	_ JL r-7 ' <X'H	Ácido 3-(5-butil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
27	No< ji a—<7 ÇP o o	Ácido 3-(5-ciclopropil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
28	E N-°x >=\ gA?~O oXH	Ácido 3-[5-(2-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
29	N'Q oArH	Ácido 3-(5-tiofen-2-il[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
30	N'R 1 //-¾ li^l N 0^0	Ácido 3-(5-propenil[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
31	N-0 Jf J>—( ] o^H	Ácido 3-(5-ciclopentil[ 1,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico	****
32	N'° A? JL C^j'^ ---H O	Ácido 3-(-tiofen-2-ilmetil[1,2,4] oxadiazol-3 -il)benzóico	****

n-Q /==/ jl }—< çn oX-H 33	Ácido 3-[5-(4-clorobenzil)- [ 1,2,4]oxadiazol3-il]-benzóico	****
N'°^__P~ÇI çX Σ Ή Ο-τ) 34	Ácido 3-[5-(4-clorofenoximetil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****
F F . N'°\ /=\ oXH 35	Ácido 3-[5-(2- trifluorometil-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****
F. n-Q >=\ ρΛΛΡ M F ΧΛ,H Ο^Ό 36	Ácido 3-(5-(2,6-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
N'O. /=<F JL X C / qAn-W CTO 37	Ácido 3-[5-(3-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
N'°\ / V__Z ϋ^-cf^ 38	Ácido 3-[5-(4-etil-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il]benzóico
n-Q /=/ Λ K /—p VzZ r 0^0 39	Ácido 3-(5((3,4-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico

N-P /=4 Ο·ΧΟ'Η 40	Ácido 3-(5-m-tolil[l,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico
Ν'Ρ 7==\ Ο*υΗ 41	Ácido 3-[5(4-pirrol-lfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
Ο Ν'Ρ JL /—·' çtn 1 Ή TO 42	Ácido 3-(5-benzil[l,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico	***
Ν'Ρ ΡJI Ò—J çrN J. ,Η Cr O 43	Ácido 3-(5-metoximetil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	*
R ΝΡ Λ=λ pp V/ oArH 44	Ácido 3-[5[(2,5-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
Ν°ν Γ“~ _ ιι >-/ V 0 X.__,Η Ο^Ο 45	Ácido 3-[5-(l-fenilpropil)- [ 1,2,4] oxadiazol3-il]-benzóico	*
cr Ν-Ρ >==\ ργ^Ν~ν_/ cr\TH 46	Ácido 3-[5-(2-cloro-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico
F~y ΝΟ« /^/° ÇjA-GÍ οΧΗ 47	Ácido 3-[5[(3trifluorometóxi-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****

___ZF Ο N'°\ \=Z ji <X'H 48	Ácido 3-[5[(4-fluorobenzil)- [l,2,4]oxadiazol3-il]-benzóico	****
CrO' H 49	Ácido 3-(5-(2,5-dimetilfuran-3-il)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****
n-Q ,s-n λ>~<3 pp. / oXH 50	Ácido 3-[5-(3-metil-tiofen2-il)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
ycl N'Q Ρ'Υλ _ Λ y—7 \ /) Ιργ-^Ν o^crH 51	Ácido 3-[5-(3-clorofenoximetil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	**
N-Q ,0-N jl #—C 11 N oX'H 52	Ácido 3-(5-isoxazol-5-il[1,2,4] oxadiazol-3 -il)benzóico	**
N'°v z=N .. JL * ά /)—ci V# 53	Ácido 3-[5-(6-cloropiridin-3-il)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
(X Xh 54	Ácido 3-{5-[3-(2-clorofenil)-5-metil-isoxazol-4il]- [ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico

yi

Λ 0·Χ0'η 55	Ácido 3-{5-[3-(2-cloro-6fluoro-fenil)-5-metilisoxazol-4-il][ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico
n-Q Ji è—\ Ç)O ο*τ>'Η 56	Ácido 3-(5ciclopentilmetil[ 1,2,4] oxadiazol-3-il)benzóico	***
Μ-Q z=\ _ >-F çr r orxrH 57	Ácido 3-[5-(2,4-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
. N-°v /=N V_/ [1 J 58	Ácido 3-(5-piridin-3-il[ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	***
N-°x Z=\ c/o'h 59	Ácido 3-(5-piridin-4-il[ 1,2,4]oxadiazol-3 -il] benzóico	***
N'°\ /\ Jt —o ÇP O^o'H 60	Ácido 3-(5-ciclobutil- [1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	**
\ p o N-q jj A—' ÇP oXO'H 61	Ácido 3-[5-(4-metóxibenzil)- [ 1,2,4] oxadiazol3-il]-benzóico	**

xo /=( r A* 62	Ácido 3-[5-(3,4-dimetóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
ci ΐΙ^γ^Ν V_/ oArH 63	Ácido 3-[5-(2-cloropiridin-3-il)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
çaRK <X-h 64	Ácido 3-[5[(l-acetilpiperidin-4-il)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	*
NQ oX0'H 65	Ácido 3-(5-benzo[b]tíofen- 2-il- [1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
\ Fl-'. N'Q /=/ ρΛΛΟ oXH 66	Ácido 3-[5-(3dimetilamino-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
_ \ F n-Q /=/ V/ <ÃrH 67	Ácido 3-[5-(2,3-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
R n-q >=>. í|7^n -f o·^ o 68	Ácido 3-[5-(2-fluoro-5metil-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	***

οΑτΗ 69	Ácido 3-[5-(2metilsulfanil-piridm-3 -il)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	****
F Ν'θ pyArvZ0 Α>-η 70	Ácido 3-(5-(2,2,-difluorobenzofl,3]dioxol-5-il)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	***
F N-Q /==, Â^N^O~P oArH 71	Ácido 4-fluoro-3-[5-(4fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	*
N-Q /=\ ρΛίΓΛ^ 0<Áo-H 72	Ácido 2-fluoro-5-[5-(4fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	***
F Cj ΝXAci 73	Ácido 3-[5-(4-cloro-2fluoro-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
F Η°2°Ύ—. u^V» 74	Ácido 3-[5(4-bromo-2fluoro-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3 -il] benzóico	***
F Ηθζ0^ F\k 75	Ácido 3-[5-(3-fluorobifenil-4-il)- [ 1,2,4]oxadiazol-3 -il] benzóico	****
u 1 * A y~\. // F ΗΌΛγ<%ί<'Ν Ί6	Ácido 5-[5-(4-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	*

Ν Ύ/=\ Π Ί — cYo-H 77	Ácido 3-[5-(4-cianofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
F N”0. Υ\ oAy^4· 78	Sal sódico do acido 3-[5(2-fluoro-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico
Ν—õ X X (fjT Ν yY (Xo 1 7£>	Metil éster do ácido 3-[5(4-fluoro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	***
0 Ν°\ /=\ hUY 1 ζ<Λ //~F 0 80	Ácido 5-[5-(4-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	*
nxa f =ΥΥ 0-Η Τ J «	Ácido 3-[5-(3-fluorobifenil-4-il)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	**
N-C> (ΥΎΧΟ ηχΑ> 82	Ácido 3-[5[(6-pirrlidin-lil-iridin-3-il)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****
Ν'°\ /=\ r~y I ζΖ~Ά\ Ζ>~Ν 0 ,pN VN Z \_y ηό·^ο 83	Ácido 3-[5-(6-morfolin-4il-piridin-3-il)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	****

' Ν°\ 1 4 '/-Ν ; Ν ^~Ν ι Π-Ο^Ο 84	Ácido 3-[5-(3,4,5,6tetraidro-2H[l,2’]bipiridinil-5’-il)[ 1,2,4]oxadiazol-3 -il] benzóico	****
85	Ácido 3-[5-(2-fluoro-6hidróxi -fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	**
Ν-°. Ζ=ξ (PjAír~y) 86	Metil ester do ácido 3-[5(2-fluoro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	**
F N-Q Λ=χ ί^Ύ^’^θ 0Χ0— 87	2-metóxi-etil estr do ácido 3 - [5-(2-fluoro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	***
ç/'zb Q^'Q'^'°'^'O'' 88	2-(2-metóxi-etóxi)-etil éster do ácido 3-[5-(2fluoro-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	**
F Ν'0. )=¾ L Jj 89	2- [2-(2-metóxi-etóxi)etóxi]-etil éster do ácido 3- [5-(2-fluoro-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]- benzóico	**
E O^qX'x^O'^XXqX'x^O,^-^- 90	2- {2-[2-(2-metóxi-etóxi)etóxi]-etóxi}-etil éster do ácido 3-[5-(2-fluorofenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3il]-benzóico	**

E 91	2-(2- {2-[2-(2-metóxietóxi)-etóxi] -etóxi} etóxi)-etil éster do ácido 3 - [5-(2-fluoro-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	***
F 92	2- (2-(2- {2-(2-hidróxietóxi)-etóxi} -etóxi)- etóxi]-etil éster do ácido 3- [5-(2-fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]- benzóico	***
N-0 H. / H οΆθ 93	Ácido 3-[5-(4-aminofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	****
N-q (Wx °Λ ft- 94	Ácido 3-[5-(4-azidofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico
95	Ácido 3-[5-(4-benzilóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	*

As medições de atividade na Tabela I foram realizadas em um ensaio repórter de luciferase baseado em célula (como descrito na seção 4.2), compreendendo um construct© repórter de luciferase, contendo um códon de terminação prematuro UGA, que foi estavelmente transfectado em células de Rim Embriônico Humanas 293T. Uma molécula pequena, ácido 3-(3-(4isopropil-fenil)-2,5-dioxo-imidazolidin-1 -il]benzóico, sabido permitir transleitura de códons de terminação prematura, foi usada como um padrão interno. As medições de atividade são baseadas na relação qualitativa entre a concentração mínima de composto, requerida para produzir uma dada proteína em uma célula (potência) e a quantidade máxima de proteína produzida pela célula (eficácia). As atividades de potência e eficácia são classificadas como extremamente elevadas, muito elevadas ou significativas.

A combinação destas atividades é usada para determinar a classificação de atividade. Os compostos que foram constatados terem tanto potência . extremamente elevada como eficácia extremamente elevada da síntese de proteína são classificados como “*****”. Os compostos que foram ' 5 constatados terem potência extremamente elevada de síntese de proteína e eficácia muito elevada foram classificados como “****”. Os compostos que foram constatados terem potência muito elevada de síntese de proteína e eficácia extremamente elevada foram classificados como “****”. Os compostos que foram constatados terem tanto potência muito elevada como 10 eficácia muito elevada de síntese de proteína são classificados como “***”.

Os compostos que foram constatados terem uma potência muito elevada de síntese de proteína e eficácia significativa foram classificados como Os compostos que foram constatados terem potência significativa de síntese de proteína e eficácia muito elevada foram classificados como

Similarmente, os compostos que foram constatados terem potência e eficácia significativas de síntese de proteína foram classificados com (vide tabela abaixo).

Potência	Eficácia	Classificação
Extremamente elevada	Extremamente elevada	*****
Extremamente elevada	Muito elevada	****
Muito elevada	Extremamente elevada	****
Muito elevada	Muito elevada	***
Muito elevada	Significativa	**
Significativa	Muito elevada	**
Significativa	Significativa	*

Os compostos tendo menos do que potência ou eficácia significativas de síntese de proteína ou ambas no ensaio de luciferase baseado 20 em célula, foram classificados sem asteriscos. Contudo, estes compostos acredita-se terem utilidade nos métodos in vivo da invenção.

A presente invenção abrange o uso in vitro ou in vivo de um composto da invenção e a incorporação de um composto da invenção dentro das composições farmacêuticas e formas de dosagem unitária únicas, úteis no tratamento e prevenção de uma variedade de doenças e distúrbios. Doenças e distúrbios específicos incluem aqueles melhorados pela supressão de uma mutação sem sentido do RNA mensageiro.

As composições farmacêuticas incluindo formas de dosagem da invenção, que compreendem um composto da invenção ou um seu polimorfo, promedicamento, sal, clatratos, solvatos ou hidrato farmaceuticamente aceitável, podem ser usadas nos métodos da invenção.

Sem ficarmos limitados por teoria, acredita-se que um composto da invenção pode modular a terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido. Conseqüentemente, uma primeira forma de realização da invenção refere-se a um método de modular a terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediado-sem sentido, compreendendo contatar uma célula exibindo uma mutação sem sentido com uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um seu promedicamento, metabólico, polimorfo, sal, solvatos, hidrato ou clatratos farmaceuticamente aceitável. Em uma forma de realização particular, a invenção refere-se a um método de induzir supressão sem sentido, compreendendo contatar uma célula exibindo uma mutação sem sentido com uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um seu promedicamento, metabólico, polimorfo, sal, solvatos, hidrato ou clatratos farmaceuticamente aceitável.

4,2_______ENSAIOS BIOLÓGICOS E ESTUDOS ANIMAIS

Os compostos que modulam terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido, podem ser identificados por numerosas técnicas. Por exemplo, métodos de avaliar compostos que modulam a expressão pós-transcricional de qualquer gene com um códon de parada de translação prematura são descritos na Publicação de Patente Internacional No. WO 01/44516 A2, incorporada aqui em sua totalidade por referência. Em uma forma de realização preferida, um mRNA com um códon de terminação prematura é transladado in vitro e é usado para avaliar uma biblioteca de compostos de teste. Em uma forma de realização _r preferida, o mRNA com um códon de terminação prematura é um gene repórter com um códon de terminação prematura.

' 5 Dois ensaios foram desenvolvidos para uso em avaliações de

·. alta produção, para identificar pequenas moléculas que promovem supressão sem-sentido. Cada ensaio utilizou luciferase, porque é um ensaio de gene repórter funcional (luz é somente produzida se a proteína for funcional) e é extremamente sensível (a intensidade de luz é proporcional à concentração de 10 luciferase na faixa nM). O primeiro ensaio é um ensaio repórter de luciferase baseado em célula e o segundo é um ensaio bioquímico consistindo de lisado de reticulócito de coelho e um mRNA repórter de luciferase contendo-sem sentido. No ensaio baseado em célula, um constructo repórter de luciferase, contendo um códon de terminação prematura UGA, foi estavelmente 15 transfectado em células de Rim Embriônicas Humanas 293T. No ensaio bioquímico, mRNA contendo um códon de terminação prematura UGA foi usado como um repórter em uma reação de translação in vitro, empregando-se lisado de reticulócito de coelho, suplementado com tRNA, hemina, creatina cinase, amino-ácidos, KOAc, Mg(OAc)2 e fosfato de creatina. A translação 20 do mRNA foi iniciada dentro de uma seqüência líder derivada de vírus, que significativamente reduziu o custo do ensaio, porque não foi necessário RNA coberto. mRNA sintético foi preparado in vitro, utilizando-se o promotor T7 e o MegaScript em kit de transcrição in vitro (Ambion). Em ambos os ensaios bioquímico e baseado em célula, a adição de uma molécula pequena, sabida 25 permitir transleitura de códons de terminação prematura, ácido 3-[3-(4isopropil-fenil)-2,5-dioxo-imidazolidin-1 -il]-benzóico, resultou em aumentada atividade de lucíferas e foi, portanto, usada como um padrão interno.

Sistemas de modelo animal podem também ser usados para demonstrar a segurança e eficácia dos compostos de Fórmula I ou II. Os compostos de Fórmula I ou II podem ser testados quanto à atividade biológica . empregando-se modelos animais para uma doença, condição ou síndrome de interesse. Estes incluem animais preparados para conter o elemento de RNA ’ 5 alvo acoplado a um sistema de transferência de dados funcional, tal como um _ camundongo transgênico.

Exemplos de modelos animais para fibrose cística incluem mas não são limitados a camundongos cftr(-/+) (vide, p. ex., Freedman e outros, 2001, Gastroenterology 121 (4):950-7), camundongo cftr(tmlHGU/tmlHGU) (vide, p. ex., Bernhard e outros, 2001, Exp Lung Res 27(4):349-66), camundongo CFTR-deficiente com condutância Cl(-) mediada cAMP defeituosa (vide, p. ex., Stotland e outros, 2000, Pediatr Pulmonol 30(5):413-24) e camundongo nocaute C57BL/6CFTR(mlUNC)/Cftr(mlUNC) (vide, p.ex., Etotland e outros, 2000, Pediatr 15 Pulmonol 30(5): 413 -24).

Exemplos de modelos animais para distrofia muscular incluem mas não são limitados a camundongo, hamster, gato, cão e C. elegans. Exemplos de modelos de camundongo para distrofia muscular incluem mas não são limitados ao camundongo dy-/- (vide, p. ex., Connolly e outros, 2002, 20 J. Neuroimmunol 217 (1-2):80-7), uma mutação de camundongo de distrofia muscular com miosite (mdm) (vide, p. ex., Garvey e outros, 2002, Genomics 79(2):146-9), o camundongo mdx (vide, p.ex., Nakamura e outros, 2001, Neuromuscul Disord 11(3):251-9), camundongo nocaute utrofina-distrofina (dko) (vide, p. ex., Nakamura e outros, 2001, Neuromuscu Disord 11 (3): 25125 9), o camundongo dy/dy (vide, p.ex., Dubowitz e outros, 2000, Neuromuscul

Disord 10(4-5):298-8), modelo de camundongo mdx(Cv3) (vide, p. ex., Pillers e outros, 1999, Laryngoscope 109(8):1310-1) e os camundongos mutantes ADR-MDX miotônicos (vide, p. ex., Kramer e outros, 1998, Neuromuscul Disord 8(8): 542-50). Exemplos de modelos de hamster para distrofia muscular incluem mas não são limitados a hamster sarcoglicanodeficientes (vide, p. ex., Nakamura e outros, 2001, Am J Physiol Cell Physiol 281(2):C690-9) e o hamster BIO 14.6 distrófico (vide, p. ex., Schlenker & Burbach, 1991, J Appl Physiol 71 (5): 1655-62). Um exemplo de um modelo felino para distrofia muscular inclui mas não é limitado a modelo de distrofia muscular felina hipertrófica (vide, p. ex., Gaschen & Burgunder, 2001, Acta Neoropathol (Berl) 101 (6):591 -600). Modelos caninos para distrofia muscular incluem mas não são limitados a distrofia muscular recuperadora de ouro (vide, p.ex., Fletcher e outros, 2001, Neuromuscular Disord 11(3):239-43) e distrofia muscular X-ligada canina (vide, p. ex., Valentine e outros, 1992, Am J Méd Genet 42(3): 352-6). Exemplos de modelos C. elegans para distrofia muscular são descritos em Chamberlain & Benian, 2000, Curr Biol 10(21):R795-7 e Culette & Sattelle, 2000, Hum Mol Genet 9(6): 869-77.

Exemplos de modelos animais para hipercolesterolemia familiar incluem mas não são limitados a camundongos não tendo genes receptores LDL funcionais (vide, por exemplo, Aji e outros, 1997, Circulation 95(2):430-7), Yoshida rats (vide, p. ex., Fantappie e outros, 1992, Life Sci 50(24): 1913-24), the rat JCR:LA-cp (vide, p. ex., Richardson e outros, 1998, Atherosclerosis 138 (1): 135-46), suíno (vide, p. ex., Hasler-Rapacz e outros, 1998, Am J Méd Genet 76(5): 379-86) e o coelho hiperlipidêmico herdável Watanabe (vide, p. ex., Tsutsumi e outros, 2000, Arzneimittelforschung 50(2): 118-21; Harsch e outros, 1998, Br J Pharmacol 124(2): 227-82; e Tanaka e outros, 1995, Atherosclerosis 114(1): 73-82).

Um exemplo de um modelo animal para câncer humano em geral inclui mas não é limitado a tumores ocorrendo espontaneamente de animais de companhia (vide, p.ex., Vail & MacEwen, 2000, Câncer Invest 18(8): 781-92). Exemplos de modelos animais para câncer de pulmão incluem mas não são limitados a modelos animais de câncer de pulmão, descritos por Zhang & Roth (1994, In Vivo 8(5): 755 - 69) e um modelo de camundongo transgênico com função p53 rompida (vide, p.ex., Morris e outros, 1998, J La State Med Soc 150(4): 179 - 85). Um exemplo de um modelo animal para , câncer de mama inclui mas não é limitada a um camundongo transgênico, que superexpressa ciclina Dl (vide, p. ex., Hosokawa e outros, 2001, Transgenic ‘ 5 Res 10(5): 471 - 8). Um exemplo de um modelo animal para câncer de cólon inclui mas não é limitado a um camundongo duplo nocaute TCRbeta e p53 (vide, p. ex., Kado e outros, 2001, Câncer Res 61 (6): 2395 - 8). Exemplos de modelos animais para câncer pancreático incluem mas não são limitados a um modelo metastático de adenocarcinoma pancreático de murino Panc02 (vide, 10 p. ex., Wang e outros, 2001, Int J Pancreatol 29(1): 37-46) e camundongos nu-nu gerados em tumores pancreáticos subcutâneos (vide, por exemplo Ghaneh e outros, 2001, Gene Ther 8(3):1998-208). Exemplos de modelos animais para linfoma de non-Hodgkin incluem mas não são limitados a camundongo de imunodeficiência combinada severa (“SCID”) (vide, p. ex., 15 Bryant e outros, 2000, Lab Invest 80(4):553-73) e um camundongo transgênico IgHmu-HOXll (vide, por exemplo, Hough e outros, 1998, Proc.Natl. Acad. Sci. USA 95(23):13853-8). Um exemplo de um modelo animal para câncer esofágico inclui mas não é limitado a um camundongo transgênico para o oncogene de papillomavirus tipo 16E7 humano (vide, p. 20 ex., Herber e outros, 1996, J Virol 70(3):1873-81). Exemplos de modelos animais para carcinomas colorretais incluem mas não são limitados a modelos de camundongo Ape (vide, p. ex., Fodde & Smits, 1002, Trends Mol Méd 7(8): 369-73 e Kuraguchi e outros, 2000, Oncogene 19(50): 5755-63). Um exemplo de um modelo animal para neurofibromatose inclui mas não é 25 limitado a camundongos NF1 mutantes (vide, p.ex., Cichowski e outros, 1996, Semin Cancer Biol 7(5):291-8). Exemplos de modelos animais para retinoblastoma incluem mas não são limitados a camundongos transgênicos que expressam o antígeno 40T de vírus de símio da retina (vide, p. ex., Howes e outros, 1994, Invest Ophthalmol Vis Sci 35(2): 342 - 51 e Windle e outros,

1990, Nature 343(6259): 665-9) e ratos congênitos (vide, p.ex., Nisida e outros, 1981, Curr Eye Res 1(1): 53 - 5 e Kobayashi e outros, 1982, Acta Neuropathol (Berl) 57 (2-3): 203 - 8). Exemplos de modelos animais para tumor de Wilm incluem mas não são limitados a camundongos nocaute WT1 (vide, p. ex., Schamhorst e outros, 1997, Cell Growth Differ 8(2): 133-43), uma sub linhagem de rato com uma alta incidência de neufroblastoma (vide, p. ex., Mesfin & Breech, 1996, Lab Anim Sci 46(3): 321-6) e um rato Wistar/Furth com tumor de Wilms (vide, por exemplo, Murphy e outros, 1997, Anticancer Res 7(4B): 717-9).

Exemplos de modelos animais para retinite pigmentosa incluem mas não são limitados ao rato do Royal College of Surgeons (“RCS”) (vide, p. ex., Vollrath e outros, 2001, Proc.Natl. Acad. Sci. USA 98(22); 12584-9 e Hanitzsch e outros, 1998, Acta Anat (Basel 162(2-3): 119 - 26), um camundongo nocaute rodopsina (vide, p. ex., Jaissle e outros, 2001, Invest Ophthalmol Vis Sci 42(2): 506 - 13) e ratos Wag/Rij (vide, p. ex., Lai e outros, 1980, Am J Pathol 98(1): 281-4).

Exemplos de modelos animais para cirrose incluem mas não são limitados a ratos CCU-expostos (vide, p. ex., Kloehn e outros, 2001, Horm Metab Res 33(7): 394 - 401) e modelos de roedores instigados por componentes de célula bacteriana ou colite (vide, p. ex., Vierling, 2001, Best Pract Res Clin Gastroenterol 15(4): 591-610).

Exemplos de modelos animais para hemofilia incluem mas não são limitados a modelos de roedores para hemofilia A (vide, p. ex.,Reipert e outros, 2000, Thromb Haemost 84(5):826-32; Jarvis e outros, 1996, Thromb Haemost 75(2)318-25; e Bi e outros, 1995, Nat Genet 10(1): 119 - 21), modelos caninos para hemofilia A (vide, p. ex., Gallo-Penn e outros, 1999, Hum Gene Ther 10(11): 1791 - 802 e Connelly e outros, 1998, Bloos 91(9); 3273-81), modelos de murino para hemofilia B (vide, p. ex., Snyder e outros, 1999, Nat Méd 5(1): 64-70; Wang e outros, 1997, Proc.Natl. Acad. Sci. USA

94(21): 11563 - 6: e Fang e outros, 1996, Gene Gher 3(3): 217-22), modelos caninos para hemofilia B (vide, p. ex., Mount e outros, 2002, Blood 99(8): 2670-6; Snyder e outros, 1999, Nat Méd 5(1): 64-70: Fang e outros, 1996, Gene Ther 3(3):217-22); e Kay e outros, 1994, Proc.Natl. Acad. Sci. USA ‘5 91(6):2353-7) e um modelo de macaco resus para hemofilia B (vide, p. ex., v Lozier e outros, 1999, Blood 93(6); 1875-81).

. Exemplos de modelos animais para doença de von Willebrand incluem mas não são limitados a uma cepa de camundongo congênita RIIIS/J (vide, p. ex., Nichols e outros, 1994, 83(11): 3225 - 31 e Sweeney e outros, 10 1990, 76(11):2258-65), ratos injetados com botrocetina (vide, p. ex., Sanders e outros, 1988, Lab Invest 59(4): 443-52) e modelos porcinos para doença de von Willebrand (vide, p. ex., Nichols e outros, 1995, Proc.Natl. Acad. Sci. USA 92(7): 2425-9; Johnson & Bowie, 1992, J Lab Clin Méd 120 (4): 553-8); e Brinkhous e outros, 1991, Mayo Clin Proc 66(7):733-42).

Exemplos de modelos animais para b-talassemia incluem mas não são limitados a modelos murinos com mutações nos genes globina (vide, p. ex., Lewiw e outros, 1998, Blood 91(6): 2152-6; Raja e outros, 1994, Br J Haematol 86(1): 156-62; Popp e outros, 1984, 445:432-44; e Skow e outros, 1983, Cell 34(3); 1043-52).

Exemplos de modelos animais para pedrados dos rins incluem mas não são limitados a ratos hipercalciúricos genéticos (vide, p.ex., Bushinsky e outros, 1999, Kidney Int 55(1): 234 - 43 e Bushinsky e outros, 1995, Kidney Int 48(5): 1705 - 13), ratos quimicamente tratados (vide, p. ex., Grases e outros, 1998, Scand J Urol Nephrol 32(4): 261-5; Burgess e outros, 1995, Urol Res 23(4):

239-42; Kumar e outros, 1991, J Urol 146(5): 1384-9; Okada e outros, 1985,

Hinyokika Kiyo 31(4): 565 - 77; e Bluestone e outros, 1975, Lab Invés 33(3): 273-9), ratos hiperoxalúricos (vide, p. ex., Jones e outros, 1991, J Urol 145(4:86874), porcos com nefroscopia flexível retrógrada unilateral (vide, p. ex., Seifmah e outros, 2001, 57(4): 832-6) e coelhos com um trato urinário superior obstruído (vide, p. ex., Itatani e outros, 1979, Invest Urol 17(3): 234-40).

Exemplos de modelos animais para ataxia-telangiectasia incluem mas não são limitados a modelos de murino de ataxia-telangiectasia (vide, p. ex., Barlow e outros, 1999, Proc.Natl. Acad. Sci. USA 96(17):9915-9 ' 5 e Inoue e outros, 1986, Câncer Res 46(8): 3979-82).

. Exemplos de modelos animais para doenças de armazenagem lisossomal incluem mas não são limitados a modelos de camundongo para mucopolissacaridose tipo VII (vide, p. ex., Brooks e outros, 2002, Proc.Natl.

Acad. Sci. USA 99(9): 6216-21; Monroy e outros, 2002, Boné 30(20): 352-9; 10 Vogler e outros, 2001, Pediatr Dev Pathol. 4(5): 421-33; Vogler e outros,

2001, Pediatr Res. 49(3): 342-8; e Wolfe e outros, 2000, Mol Ther. 2(6): 5526), um modelo de camundongo para leucodistrofia metacromática (vide, p.

ex., Matzner e outros, 2002, Gene Ther. 9 (1): 53 -63), um modelo de camundongo de doença Sandhoff (vide, p.ex., Sango e outros, 2002, 15 Neupathol App Neurobiol. 28(1): 23-34), modelos de camundongo para mucopolissacaridose tipo III A (vide, por exemplo, Bhattacharyya e outros, 2001, Glycobiology 11 (1): 99 - 10 e Bhaumik e outros, 1999, Glycobiology 9(12): 1389-96), camundongo deficiente de arilsulfatase A (ASA) (vide, p.

ex., D’Hooge e outros, 1999, Brain REs. 847(2): 352-6 e D’Hooge e outros, 20 1999,Neurosci Lett. 273(2): 93-6); camundongos com uma mutação de aspartilglicosaminuria (vide, p. ex., Jalanko e outros, 1998, Hum Mol Genet.

7(2): 265-71); modelos felinos de mucopolisacaridose tipo VI (vide, por exemplo, Crawley e outros, 1998, J Clin Invest. 101(1): 109-19 e Norrdin e outros, 1995, Boné 17(5): 485 - 9); um modelo felino de doença de Niemann25 Pick tipo C (vide, p. ex., March e outros, 1997, Acta Neuropathol (Berl).

94(2):164 - 71); camundongos deficientes de esfingomielinase ácida (vide, p.

ex., Otterbach & Stoffel, 1995, Cell 81(7): 1053-6) e manosidose bovina (vide, p.ex., Jolly e outros, 1975, Birth Defects Orig Arctic Ser. 11(6):273-8).

Exemplos de modelos animais para esclerose tuberosa (“TSC”) incluem mas não são limitados a um modelo de camundongo de TSC1 (vide, p. ex., Kwiatkowski e outros, 2002, Hum Mol Genet. 11(5): 52534), um camundongo nocaute Tscl (homólogo TSC1) (vide, p. ex., Kobayashi e outros, 2001, Proc.Natl. Acad. Sei. USA 2001 17 de julho; ‘ 5 98(15): 8762-7), um modelo de rato mutante de gene TSC2 (Eker) vide, p.

>. ex., Hino 2000, Nipoon Rinsho 58(6): 1255 - 61; Mizuguchi e outros, 2000, J

Neuropathol Exp Neurol. 59(3): 188-9; e Hino e outros, 1999, Prog Exp Tumor REs. 35:95-108; e camundongosTsc2(±) (vide, p. ex., Onda e outros, 1999, J Clin Invest. 104(6): 687-95).

4,3 SÍNTESE E PREPARAÇÃO

Os compostos da invenção podem ser obtidos via metodologia sintética bem conhecida, padrão, vide, p. ex., March, J. Advanced Organic Chemistry; Reactions Mechanisms and Structure, 4a. ed. 1992. Materiais de partida úteis para preparar os compostos a invenção e intermediários para eles 15 são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados de materiais comercialmente disponíveis, empregando-se métodos e reagentes sintéticos conhecidos.

Os compostos de Fórmulas I ou II podem ser sintetizados empregando-se a síntese representada nos Esquemas A e B abaixo. Os 20 compostos da presente invenção podem ser preparados pelos métodos discutidos na seguinte seção.

Os compostos de fórmula I podem ser preparados utilizando-se metodologia representada no Esquema A.

Esquema A.

A8

A resina instável em ácido Al comercialmente disponível, tal como resina de tritila, resina de cloreto de 2-clorotritila, resina de fenilacetamidometila (PAM) e resina de álcool de p-alcoxibenzila podem ser usados nesta invenção. A união do composto de ácido benzóico A2 e resina de tritila (aqui X = cloreto de 2-clorotritila) pode ser realizado em um solvente adequado, tal como diclorometano, dimetilformamida, tolueno na presença de um reagente de amina terciária, tal como diisopropiletilamina ou trietilamina. Em um método alternativo, a resina acrilada A3 é convenientemente preparada utilizando-se condições de formação de ligação éster padrão, empregando-se diisopropilcarbodiimida (para resina de fenilacetamidometila e resina de álcool p-alcoxibenzílico) ou equivalentes, tais como hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-óxi-tris-pirrolidino-fosfônio (PyBOP), hexafluorofosfato de bromo-tris-pirrolidino-fosfônio (PyBrOP), cloridreto de l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) sem ou com diisopropiletilamina em dimetilformamida. O éster cianobenzóico ligado a _f resina pode ser tratado com hidroxilamina em um solvente inerte, tal como etanol, tetraidrofurano, dioxano e dimetilformamida ou misturas com ou sem ‘ 5 diisopropiletilamina, para propiciar o composto de hidroxiamidina A4. A resina de hidroxiamidina A4 pode ser usada como um ligador comum para a síntese de compostos de biblioteca de 1,2,4-oxadiazol com variação do resto do composto de estrutura I como mostrado no Esquema A. O composto de hidroxiamidina ligado-resina é acilado com um reagente A5, em que o grupo 10 Y representa alguns grupos de partida, tais como halo, imidazoíla, pnitrofenol etc., na presença de um reagente de base, tal como diisopropiletilamina ou trietilamina, em um solvente inerte, tal como diclorometano, tetraidrofurano e dimetilformamida ou misturas. Um método alternativo, a acilação, é convenientemente realizada com um reagente 5, em 15 que o grupo Y representa hidróxi, empregando-se diisopropilcarbodiimida ou equivalentes, tais como hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-óxi-trispirrolidino-fosfônio, hexafluorofosfato de bromo-tris-pirrolidino-fosfônio, cloridreto de l-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida, sem ou com diisopropiletilamina em dimetilformamida. O composto acilado ligado-resina 20 A6 é clivado sob condições acídicas, tais como ácido trifluoroacético 2 molar em diclorometano ou ácido acético 3 molar em diclorometano, para propiciar o desejado composto A7. Uma reação de fechamento de anel no composto de ácido livre A7 pode ser realizada pelo refluxo em um solvente inerte, tal como tolueno, tetraidrofurano, dioxano e dimetilformamida ou misturas com ou sem 25 um reagente base, tal como diisopropiletilamina, trietilamina ou fluoreto de tetrabutilamônio, para propiciar o composto 1,2,4-oxadiazol. Uma reação de fechamento de anel alternativa pode ser realizada por deidrociclização do composto ligado por resina A6 (Esquema A). Esta transformação pode ser realizada com ou sem um reagente base, tal como trietilamina, diisopropiletilamina ou fluoreto de tetrabutilamônio em um solvente inerte, tal como tolueno, tetraidrofurano, dioxano e dimetilformamida ou misturas. As _ temperaturas de reação variam de ambiente para refluxo do solvente.

A química da fase sólida descrita acima pode ser aplicada à ' 5 síntese de fase de solução dos compostos de estrutura I. Isto é descrito no . Esquema B abaixo.

Esquema B

B1

B4 ¹

O composto ciano bl é hidroxiamidinado com hidroxil amina.

Esta reação é usualmente realizada na presença de um reagente base, tal como trietil amina, carbonato de potássio ou diisopropiletilamina, em um solvente tal como metanol, etanol, tec-butanol, tetraidrofurano ou dimetilformamida e as temperaturas variando de ambiente para temperatura de refluxo do solvente escolhido. O composto de hidroxiamidina B2 é acilado com um reagente B3, em que o grupo Y representa alguns grupos de partida, tais como halo, imidazoíla, p-nitrofenol etc. A reação é usualmente realizada com um reagente básico, tal como trietil amina ou diisopropiletilamina, em um solvente tal como diclorometano, tetraidrofurano ou dimetilformamida. Um método alternativo, a acilação é convenientemente realizada sob reações de formação de ligação éster usuais, em que o grupo Y representa hidróxi, empregando-se diisopropilcarbodiimida ou equivalentes, tais como hexafluorofosfato de _b benzotriazol-1 -il-óxi-tris-pirrolidino-fosfônio, hexafluorofosfato de bromotris-pirrolidino-fosfônio, cloridreto de l-etil-3-(3' 5 dimetilaminopropil)carbodiimida, sem ou com diisopropiletilamina. O ·, fechamento de anel do composto acilado B4 pode ser realizado com ou sem um reagente básico, tal como trietil amina ou diisopropiletilamina, em um solvente tal como diclorometano, tetraidrofurano, tolueno ou dimetilformamida, e temperaturas variando de ambiente à temperatura de 10 refluxo do solvente escolhido.

4,4 MÉTODOS DE USO

A invenção abrange métodos de tratar e evitar doenças ou distúrbios melhorados pela supressão de terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediado-sem sentido, em um 15 paciente, que compreende administrar a um paciente em necessidade de tal tratamento ou prevenção uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção ou um seu promedicamento, solvato, metabólito, polimorfo, sal, hidrato ou clatrato farmaceuticamente aceitável.

Em uma forma de realização, a presente invenção abrange o tratamento ou prevenção de qualquer doença que seja associada com um gene exibindo terminação de translação prematura e/ou deterioração mRNA mediada-sem sentido. Em uma forma de realização, a doença é devida, em parte, à falta de expressão do gene resultante de um códon de parada prematuro. Exemplos específicos de genes, que podem exibir 25 terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediadasem sentido e doenças associadas com terminação de translação prematura e/ou deterioração mRNA mediada-sem sentido são encontrados no Pedido de Patente U.S. No. 60/390.747, intitulado: Methods For Identifying Small Molecules That Modulate Premature Translation Termination and

Nonsense Mediated mRNA Decay, depositado em 21 de junho de 2002, que é incorporado aqui por referência em sua totalidade.

Doenças melhoradas pela supressão da terminação de translação prematura e/ou deterioração mRNA mediada-sem sentido ' 5 incluem mas não são limitadas a: doença genética, câncer, uma doença > autoimune, uma doença sangüínea, uma doença de colágeno, diabetes, uma doença neuro degenerativa, uma doença proliferativa, uma doença cardiovascular, uma doença pulmonar, uma doença inflamatória ou doença do sistema nervoso central.

Doenças genéticas específicas, dentro do escopo dos métodos da invenção, incluem mas não são limitadas a amiloidose, hemofilia, mal de Alzheimer, doença Tay Sachs, aterosclerose, gigantismo, nanisno, hipotiroidismo, hipertiroidismo, envelhecimento, obesidade, mal de Parkinson, doença de Niemann Pick, fibrose cística, distrofia muscular, 15 doença do coração, pedras de rins, ataxia-telangiectasia, hipercolesterolemia família, retinite pigmentosa, doença de armazenagem lisossomal, esclerose tuberosa, distrofia muscular de Duchenne e síndrome de Marfan. Tanto tumores sólidos e outros cânceres estão incluídos dentro dos métodos da invenção.

Em outra forma de realização, a doença genética é uma doença autoimune. Em uma forma de realização, a doença autoimune é artrite reumatóide ou doença de enxerto versus hospedeiro.

Em outra forma de realização, a doença genética é uma doença sangüínea. Em uma forma de realização preferida, a doença 25 sangüínea é hemofilia, doença de Von Willebrand, ataxia-telangiectasia, btalassemia ou pedras dos rins.

Em outra forma de realização, a doença genética é uma doença de colágeno. Em uma forma de realização, a doença de colágeno é osteogênese imperfeita ou cirrose.

Em outra forma de realização, a doença genética é diabetes. Em outra forma de realização, a doença genética é uma doença inflamatória. Em uma forma de realização preferida, a doença inflamatória é artrite.

• 5 Em outra forma de realização, a doença genética é uma _% doença do sistema nervoso central. Em uma forma de realização, a doença do sistema nervoso central é uma doença neurodegenerativa. Em uma forma de realização preferida, a doença do sistema nervoso central é esclerose múltipla, distrofia muscular, distrofia muscular de Duchenne, mal de Alzheimer, doença de Tay Sachs, lipofuscinose ceróide neuronal infantil (LINCL) ou mal de Parkinson.

Em outra forma de realização, a doença genética é câncer. Em uma forma de realização preferida, o câncer é da cabeça, pescoço, olhos, pele, boca, garganta, esôfago, peito, ossos, pulmões, cólon, 15 sigmóide, reto, estômago, próstata, mama, ovários, rins, fígado, pâncreas, cérebro, intestino, coração ou adrenal.

Em outra forma de realização, o câncer é associado com genes supressores de tumor (vide, p. ex., Garinis e outros, 2002, Hum Gen 111:115-117; Meyers e outros, 1998, Proc.Natl. Acad. Sei. USA, 95: 20 15587-15591; King e outros 2000, Nature Medicine 6 (12): 1335-1340.

Tais genes supressores de tumor incluem mas não são limitados a APC, ATM, BRAC1, BRAC2, MSH1, pTEN, Rb e p53.

Em uma forma de realização particularmente preferida, o gene supressor de tumor é o gene p53. Mutações sem sentido foram 25 identificados no gene p53 e têm estado implicadas no câncer. Diversas mutações sem-sentido do gene p53 foram identificadas (vide, p.ex., Masuda e outros, 2000, Tokai J Exp Clin Méd. 25(2): 69-77; Oh e outros, 2000, Mol Cells 10(3): 275-80; Li e outros, 2000, Lab Invest. 80 (4): 4939; Yang e outros, 1999, Zhonghua Zhong Liu Za Zhi 21(2): 114-8;

Finkelstein e outros, 1998, Mod. Diagn. 3(1): 37-41; Kajiyama e outros, 1998, Dis Esophafus. 11(4):29-83; Kawamura e outros, 199, Leuk Res. 23(2): 115-26; Radig e outros, 1988, Hum Pathol. 29(11): 1310-6; Schuyer e outros, 1998, Int J Cancer 76(3):299-303; Wang-Gohrke e outros, 1998, * 5 Oncol Rep. 5(1): 65-8; Fulop e outros, 1998, J Reprod Méd. 43(2): 119-27; „ Ninomiya e outros, 1997, J Dermatol Sci. 14(3): 173-8; Hsieh e outros, 1996, Câncer Lett. 100(1-2): 107-13; Rail e outros, 1996, Pâncreas. 12(1): 10-7; Fukutomi e outros, 1995, Nipon Rinsho. 53(11):2764-8; Frebourg e outros, 1995, Am J Hum Genet. 56(3): 608-15; Dove e outros, 1995, 10 Cancer Surv. 25:335-55; Adamson e outros, 1995, Br J Haematol. 89(2):

61-6; Grayson e outros, 1994, Am J Pediatr Hematol Oncol. 16(4): 341-7; Lepelley e outros, 1994, Leukemia. 8(8): 1342-9; McIntyre e outros, 1994, J Clin Oncol. 12(5):925-30; Horio e outros, 1994, Oncogene. 9(4): 1231-5; Nakamura e outros, 1992, Jpn J Cancer Res. 83(12): 1293-8; Davidoff e 15 outros, 1992, Oncogene. 7(1): 127-33; e Ishioka e outros, 1991, Biochem

Biophys Res Commun. 177(3): 901-6; cujas descrições são por este meio incorporadas por referência em suas totalidades). Qualquer doença associada com um gene p53 codificando um códon de translação prematura, incluindo mas não limitada às mutações sem sentido descritas 20 nas referências citadas acima, podem ser tratadas ou evitadas pelos compostos de Fórmula I ou II, sem sermos limitados por teoria estes compostos mediam a terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido.

Em outras formas de realização, as doenças a serem tratadas ou evitadas, administrando-se a um paciente em necessidade uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, incluem tumor sólido, sarcoma, carcinomas, fibrossarcoma, mixossarcoma, lipossarcoma, condrossarcoma, sarcoma osteogênico, cordoma, angiossarcoma, endoteliossarcoma, linfagiossarcoma, linfangioendoteliossarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiossarcoma, rabdomiossarcoma, carcinoma de cólon, câncer pancreático, câncer de mama, câncer ovariano, câncer de próstata, carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula basal, adenocarcinoma, carcinoma de glândula sudoripara, carcinoma de glândula sebácea, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, cistadenocrcinoma, carcinoma medular, ·, carcinoma broncogênico, carcinoma de célula renal, hepatoma, carcinoma de duto biliar, cloriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionário, tumor de Wilms, câncer cervical, tumor testicular, carcinoma do pulmão, carcinoma do pulmão de célula pequena, carcinoma da bexiga, carcinoma epitelial, gioma, 10 astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, sarcoma de Kaposi, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma menangioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma, um tumor sustentado pelo sangue, leucemia linfoblástica aguda, leucemia de célula-B linfoblástica, leucemia de célula-T linfoblástica aguda, leucemia mieloblástica 15 aguda, leucemia promielocitica aguda, leucemia monoblástica aguda, leucemia eritroleucêmica aguda, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia mielomonocítica aguda, leucemia não-linfocítica aguda, leucemia não diferenciada aguda, leucemia mielocítica crônica, leucemia linfocítica crônica, leucemia de células pilosas, ou mieloma múltiplo. Vide por exemplo 20 Harrison’s Principles of Internal Medicine, Eugene Braunwald e outros, eds., pp.491-762 (15a. ed. 2001).

Em uma forma de realização preferida, a invenção abrange um método de tratar ou evitar uma doença melhorada pela modulação da terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem 25 sentido, ou melhorar um ou mais sintomas associados com ela, compreendendo contatar uma célula com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I ou II. As células abrangidas pelos presentes métodos incluem células animais, células mamíferas, células bacterianas, células de planta e células infectadas viralmente. Em uma forma de realização, o códon sem sentido estava presente no DNA progenitor. Em outra forma de realização, o códon sem sentido resultou de mutagênese.

. Em certas formas de realização, um composto de Fórmula I ou

II, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é administrado a um paciente, ' 5 preferivelmente um mamífero, mais preferivelmente um humano, como uma medida preventiva contra uma doença associada com terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido.

Em uma forma de realização preferida, é primeiro determinado se o paciente está sofrendo de uma doença associada com terminação de 10 translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido. Em outra forma de realização, o paciente sofreu um processo de avaliação, para determinar a presença de uma mutação sem sentido, compreendendo as etapas de avaliar um indivíduo, ou células extraídas dele, por um ensaio de avaliação de mutação sem sentido aceitável. Em uma forma de realização preferida, o 15 DNA do paciente pode ser seqüenciado ou sujeito a Southern Blot, Reação de Cadeia de Polimerase (PCR), uso de Short Tandem Repeat (STR) (Repetição em Tandem Curto) ou análise de fragmentos de restrição de comprimento (RFLP), para determinar se uma mutação sem sentido está presente no DNA do paciente. Altemativamente, pode ser determinado se níveis alterados da 20 proteína com a mutação sem sentido são espessos no paciente por western blot ou outros imunoensaios. Em outra forma de realização, o paciente é uma criança ainda não nascida, que sofreu avaliação in utero quanto à presença de uma mutação sem sentido. A administração de um composto de Fórmula I ou II pode ocorrer antes ou após o nascimento. Em uma forma de realização 25 relacionada, a terapia é personalizada pelo fato de que o paciente é avaliado por um ensaio de avaliação de mutação sem sentido e tratado pela administração de um ou mais compostos da invenção; particularmente, o paciente pode ser tratado com um composto particularmente adequado para as mutações em questão; p.e., dependendo do tipo de doença, tipo de célula e do gene em questão. Tais métodos são bem conhecidos de uma pessoa hábil na arte.

. Em outra forma de realização, as células (p. ex., células animais, células de mamífero, células bacterianas, células de plantas e células ‘ 5 viralmente infectadas) são avaliadas quanto à terminação de translação prematura e/ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido, com um método tal como aquele descrito acima (isto é, o DNA da célula pode ser seqüenciado ou submetido a Southern Blot, Reação de Cadeia de Polimerase (PCR), uso da Short Tandem Repeat (STR) ou análise de fragmentos de restrição de 10 comprimento polimórfico (RFLP), para determinar se uma mutação sem sentido está presente no DNA da célula).

Métodos específicos da invenção compreendem ainda a administração de um de agente terapêutico adicional (isto é, um agente terapêutico que não um composto da invenção). Em certas formas de 15 realização da presente invenção, os compostos da invenção podem ser usados em combinação com pelo menos um agente terapêutico. Agentes terapêuticos incluem mas não são limitados a analgésicos não-opióides; agentes antiinflamatórios não-esteróides; antieméticos; bloqueadores β-adrenérgicos;

t anticonvulsantes; antidepressores; bloqueadores do canal-Ca ; agente 20 anticâncer e suas misturas.

Em certas formas de realização, os compostos de Fórmula I ou II podem ser administrados ou formulados em combinação com agentes anticâncer. Agentes anticâncer adequados incluem mas não são limitados a agentes alquilantes; mostarda nitrogenada; antagonistas de foliato; 25 antagonistas de purina; antagonistas de pirimidina; venenos de fuso; inibidores de topoisomerase; agentes indutores da apoptose; inibidores da angiogênese; podofilotoxinas; nitrosouréias; cisplatina; carboplatina; interferon; asparginase; tamoxifeno; leuprolida; flutamida; megestrol; mitomicina; bleomicina; doxorrubicina; irinotecano e taxol.

Em certas formas de realização, os compostos de Fórmula I ou II podem ser administrados ou formulados em combinação com antibióticos. . Em certas formas de realização, o antibiótico é um macrolídeo (p.ex., tobramicina (Tobi®)), uma cefalospirina (p.ex., cefalexina (Keflex®), ' 5 cefradina (Velosef®), cefuroxima (Ceftin®), cefprozila (Cefzil®), cefaclor _% (Ceclor®), cefixima (Supra®) ou cefadroxila (Duricef®)), uma claritromicina (p. ex., claritromicina (Biaxin®)), uma eritromicina (p. ex., eritromicina (EMycin®)), uma penicilina (p. ex., penicilina V (V-Cillin K® ou Pen Vee K®)) ou uma quinolona (p.ex., ofloxacina (Floxin®), ciprofloxacina (Cipro®) 10 ou norfloxacina (Noroxin®)). Em uma forma de realização preferida, o antibiótico é ativo contra Pseudomonas aeruginosa.

Os compostos da invenção e os outros agentes terapêuticos podem atuar aditivamente ou, mais preferivelmente, sinergicamente. Em uma forma de realização preferida, uma composição compreendendo um composto 15 da invenção é administrado concomitantemente com a administração de outro agente terapêutico, que pode ser parte da mesma composição ou de uma diferente composição daquela compreendendo os compostos da invenção. Em outra forma de realização, um composto da invenção é administrado antes de ou subseqüente à administração de outro agente terapêutico.

A magnitude de uma dose profilática ou terapêutica de um ingrediente ativo particular da invenção no controle agudo ou crônico de uma doença ou condição variará, entretanto, com a natureza e severidade da doença ou condição e com a via pela qual o ingrediente ativo é administrado. A dose e, talvez, a frequência da dose, também variará de acordo com a idade, 25 peso corporal e resposta do paciente individual. Regimes de dosagem adequados podem ser prontamente selecionados por aqueles hábeis na arte, com a devida consideração de tais fatores. Em geral, a faixa de dose diária recomendada para as condições descritas aqui situa-se dentro da faixa de cerca de 0,1 mg a cerca de 2000 mg por dia, dada como uma única dose uma vez por dia, preferivelmente como doses divididas através do dia. Em uma forma de realização, a dose diária é administrada em uma única dose ou em _b doses igualmente divididas. Especificamente, uma faixa de dose diária deve ser de cerca de 5 mg a cerca de 500 mg por dia, mais especificamente, entre ‘ 5 cerca de 10 mg e cerca de 200 mg por dia. No controle do paciente, a terapia

·. deve ser iniciada em uma dose mais baixa, talvez cerca de 1 mg a cerca de 25 mg e aumentada, se necessário, até cerca de 200 mg a cerca de 2000 mg por dia, como uma dose única ou doses divididas, dependendo da resposta global do paciente.

Pode ser necessário utilizarem-se dosagens do ingrediente ativo fora das faixas descritas aqui em alguns casos, como será evidente para aqueles hábeis na arte. Além disso, observamos que o médico clínico ou de tratamento saberá como e quando interromper, ajustar ou terminar a terapia em conjunto com uma resposta de paciente individual.

As frases “quantidade terapeuticamente eficaz”, “quantidade profilaticamente eficaz” e “quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz “, como aqui usadas, abrangem as quantidades de dosagem acima descritas e programas de freqüência de dose. Diferentes quantidades terapeuticamente eficazes podem ser aplicáveis para diferentes doenças e condições, como será 20 prontamente sabido por aqueles de habilidade comum na arte. Similarmente, quantidades suficientes para tratar ou evitar tais doenças, porém insuficientes para causar ou suficiente para reduzir efeitos adversos associados com as terapias convencionais, são também abrangidos pelas quantidades de dosagem acima descritas e os programas de freqüência de dose.

4.5 COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

As composições farmacêuticas e as formas de dosagem unitária únicas, compreendendo um composto da invenção, ou um seu polimorfo, promedicamento, sal, solvato, hidrato ou clatrato farmaceuticamente aceitável, são também abrangidas pela invenção. Formas de dosagem individuais da invenção podem ser adequadas para administração oral, mucosa (incluindo sublingual, bucal, retal, nasal ou vaginal), parenteral (incluindo subcutânea, intramuscular, injeção de bolo, intraarterial ou intravenosa), transdérmica ou tópica.

* 5 As composições farmacêuticas e formas de dosagem da

·. invenção compreendem um composto da invenção ou um seu promedicamento, polimorfo, sal, solvato, hidrato ou clatrato farmaceuticamente aceitável. As composições farmacêuticas e formas de dosagem da invenção tipicamente também compreendem um ou mais 10 excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

Uma composição farmacêutica particular abrangida por esta forma de realização compreende um composto da invenção ou um seu promedicamento, polimorfo, sal, solvato, hidrato ou clatrato farmaceuticamente aceitável e pelo menos um agente terapêutico adicional.

Exemplos de agentes terapêuticos adicionais incluem mas não são limitados a: medicamentos anti-câncer e terapias antiinflamação, incluem mas não são limitados aqueles listados acima na Seção 4.3.

As formas de dosagem unitária única da invenção são adequadas para administração oral, mucosa (p.ex., nasal, sublingual, vaginal, 20 bucal ou retal), parenteral (p. ex., subcutânea, intravenosa, injeção de bolo, intramuscular ou intra-arterial) ou transdérmica a um paciente. Exemplos de formas de dosagem incluem mas não são limitados a: tabletes, tabletes em forma de cápsula; cápsulas, tais como cápsulas de gelatina elástica macia; cápsula em forma de selo; trociscos; pastilhas; dispersões; supositórios; 25 pomadas; cataplasmas (mingais grossos); pastas; pós; curativos; cremes; emplastros; soluções; placas; aerossóis (p. ex., sprays nasais ou inaladores); géis; formas de dosagem líquidas, adequadas para administração oral ou mucosa a um paciente, incluindo suspensões (p. ex., suspensões líquidas aquosas ou não-aquosas, emulsões de óleo-em-água ou emulsões líquidas de água-em-óleo), soluções e elixires; formas de dosagem líquidas, adequadas para administração oral a um paciente; e sólidos estéreis (p. ex., sólidos . cristalinos ou amorfos), que podem ser reconstituídos para prover formas de dosagem líquidas, adequadas para administração parenteral a um paciente,.

* 5 A composição, formato e tipo de formas de dosagem da

·. invenção tipicamente variarão, dependendo de seu uso. Por exemplo, uma forma de dosagem usada no tratamento agudo da inflamação ou uma doença relacionada pode conter maiores quantidades de um ou mais dos ingredientes ativos que ela compreende do que uma forma de dosagem usada no 10 tratamento crônico da mesma doença. Similarmente, uma forma de dosagem parenteral pode conter menores quantidades de um ou mais dos ingredientes ativos que ela compreende do que uma forma de dosagem oral usada para tratar a mesma doença ou distúrbio. Estas e outras maneiras, pelas quais as formas de dosagem específicas, abrangidas por esta invenção, variarão entre 15 si, serão prontamente evidentes para aqueles hábeis na arte. Vide, p. ex.,

Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a. ed., Mack Publishing, Easton PA (1990).

Composições farmacêuticas típicas e formas de dosagem compreendem um ou mais veículos, excipientes ou diluentes. Excipientes 20 adequados são bem conhecidos daqueles hábeis na arte de farmácia e exemplos não-limitativos de excipientes adequados são aqui providos. Se um excipiente particular é adequado para incorporação dentro de uma composição farmacêutica ou forma de dosagem depende de uma variedade de fatores bem conhecidos na arte, incluindo mas não limitados à maneira pela 25 qual a forma de dosagem será administrada a um paciente. Por exemplo, formas de dosagem oral, tais como tabletes, podem conter excipientes não adequados para uso nas formas de dosagem parenteral. A adequabilidade de um excipiente particular pode também depender dos ingredientes ativos específicos da forma de dosagem.

Esta invenção ainda abrange composições farmacêuticas anidras e formas de dosagem compreendendo ingredientes ativos, uma vez que a água pode facilitar a degradação de alguns compostos. Por exemplo, a adição de água (p. ex., 5%) é largamente aceita nas artes farmacêuticas como * 5 um meio de simular armazenagem de longo termo, a fim de determinar .. características tais como vida em prateleira ou a estabilidade das formulações durante o tempo. Vide, por exemplo, Jens T. Carstensen, Drug Stability. Principles & Practice, 2d. Ed., Marcel Dekker, NY, NY, 1995, págs. 379-80. Na realidade, água e calor aceleram a decomposição de alguns compostos. 10 Assim, o efeito da água em uma formulação pode ser de grande significância, uma vez que a umidade é comumente encontrada durante a manufatura, manuseio, embalagem, armazenagem, embarque e uso das formulações.

As composições farmacêuticas anidras e formas de dosagem da invenção podem ser preparadas utilizando-se ingredientes anidras ou 15 contendo baixa umidade e condições de baixa umidade. As composições farmacêuticas e formas de dosagem que compreendem lactose e pelo menos um ingrediente ativo que compreende uma amina primária ou secundária são preferivelmente anidras, se substancial contato com umidade durante a manufatura, embalagem e/ou armazenagem for esperado.

Uma composição farmacêutica anidra deve ser preparada e armazenada de modo que sua natureza anidra seja mantida. Portanto, as composições anidras são preferivelmente embaladas utilizando-se materiais sabidos evitarem exposição á água, de modo que eles podem ser incluídos em kits formulários adequados. Exemplos de embalagens adequadas incluem mas 25 não são limitados a folhas hermeticamente seladas, plásticos, recipientes de dose unitária (p. ex., frascos), embalagens de bolha e embalagens de tira.

A invenção abrange ainda composições farmacêuticas e formas de dosagem que compreendem um ou mais compostos que reduzem a taxa pela qual um ingrediente ativo decompor-se-á. Tais compostos, que são referidos aqui como “estabilizadores”, incluem mas não são limitados a antioxidantes, tais como ácido ascórbico, tampões pH ou tampões de sal.

Como as quantidades e tipos de excipientes,as quantidades e tipos específicos de ingredientes ativos de uma forma de dosagem podem diferir, dependendo de fatores tais como mas não limitado a eles, a via pela qual é para ser administrado aos pacientes. Entretanto, formas de dosagem típicas da invenção compreendem um composto da invenção ou um seu sal, solvato, clatrato, hidrato, polimorfo ou promedicamento farmaceuticamente aceitável, situando-se dentro da faixa de cerca de 0,1 mg a cerca de 2000 mg por dia, dadas como uma única dose uma vez por dia de manhã, porém preferivelmente como doses divididas por todo o dia, tomadas com alimento. Mais especificamente, a dose diária é administrada duas vezes diariamente em doses igualmente divididas. Especificamente, uma faixa de dose diária deve ser de cerca de 5 mg a cerca de 500 mg por dia, mais especificamente entre cerca de lOmg e cerca de 200 mg por dia. No controle do paciente, a terapia deve ser iniciada em uma dose mais baixa, talvez cerca de 1 mg a cerca de 25 mg, e aumentada, se necessário, até cerca de 200 mg a cerca de 2000 mg por dia, como uma dose única ou doses divididas, dependendo da resposta global do paciente.

4.5.1 FORMAS DE DOSAGEM ORAL

As composições farmacêuticas da invenção, que são adequadas para administração oral, podem ser apresentadas como distintas formas de dosagens, tais como mas não limitado a tabletes (p.ex., tabletes mastigáveis), tabletes em forma de cápsula, cápsulas e líquidos (p. ex., xaropes aromatizados). Tais formas de dosagem contêm predeterminadas quantidades de ingredientes ativos e podem ser preparadas por métodos de farmácia, bem conhecidos daqueles hábeis na arte. Vide genericamente Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a. ed., Mack Publishing, Easton PA (1990).

As formas de dosagem oral típicas da invenção são preparadas combinando-se o(s) ingrediente(s) ativo(s) em uma mistura íntima com pelo menos um excipiente de acordo com técnicas de composição farmacêutica convencionais. Os excipientes podem tomar uma larga variedade de formas, ’ 5 dependendo da forma de preparação desejada pra administração. Por exemplo, excipientes adequados para uso em formas de dosagem líquida oral ou aerossol incluem mas não são limitados a água, glicóis, óleos, álcoois, agentes aromatizantes, preservativos e agentes colorantes. Exemplos de excipientes adequados, para uso em formas de dosagem oral sólida (p. ex., 10 pós, tabletes, cápsulas e tabletes em forma de cápsula) incluem mas não são limitados a amidos, açúcares, celulose microcristalina, diluentes, agentes de granulação, lubrificantes, aglutinantes e agentes desintegrantes.

As preparações líquidas para administração oral podem tomar a forma de, por exemplo, soluções, xaropes ou suspensões ou podem ser 15 apresentadas como um produto seco para constituição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Tais preparações líquidas podem ser preparadas por meios convencionais com aditivos farmaceuticamente aceitáveis, tais como agentes de suspensão (p. ex., xarope de sorbitol, derivados de celulose ou gorduras comestíveis hidrogenadas); agentes 20 emulsificantes (p. ex., lecitina ou goma arábica); veículos não aquosos (p. ex., óleo de amêndoa, ésteres oleosos, álcool etílico ou óleos vegetais fracionados); e preservativos (p. ex., metil ou propil-p-hidroxibenzoatos ou ácido sórbico). As preparações podem também conter sais tampão, agentes aromatizantes, colorantes e adoçantes, como apropriado.

Por causa de sua facilidade de administração, os tabletes e cápsulas representam uma vantajosa forma unitária de dosagem oral, em cujo caso são empregados excipientes sólidos. Se desejado, os tabletes podem ser revestidos por técnicas aquosas ou não-aquosas padrão. Tais formas de dosagem podem ser preparadas por quaisquer dos métodos de farmácia. Em geral, as composições farmacêuticas e formas de dosagem são preparadas misturando-se uniforme e intimamente os ingredientes ativos com veículos líquidos, veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e então conformando-se o produto na apresentação desejada, se necessário.

^r 5 Por exemplo, um tablete pode ser preparado por compressão ou moldagem. Os tabletes comprimidos podem ser preparados comprimindose em uma máquina adequada os ingredientes ativos em uma forma de fluxo livre, tal como pó ou grânulos, opcionalmente misturados com um excipientes. Os tabletes moldados podem ser produzidos por moldagem em 10 uma máquina adequada uma mistura do composto em pó umedecida com um diluente líquido inerte.

Exemplos de excipientes que podem ser usados nas formas de dosagem oral da invenção incluem mas não são limitados a aglutinantes, cargas, desintegrantes e lubrificantes. Aglutinantes adequados, para uso nas 15 composições farmacêuticas, e as formas de dosagem incluem mas não são limitados a amido de milho, amido de batata ou outros amidos, gelatina, gomas naturais e sintéticas, tais como goma arábica, alginato de sódio, ácido algínico, outros alginatos, tragacanto em pó, goma guar, celulose e seus derivados (p. ex., etil celulose, acetato de celulose, carboximetil celulose 20 cálcio, carboximetil celulose sódica), polivinil pirrolidona, metil celulose, amido pré-gelatinizado, hidroxipropil metil celulose (p. ex., Nos. 2208, 2906, 2910), celulose microcristalina e suas misturas.

Exemplos de cargas adequadas para uso nas composições farmacêuticas e formas de dosagem aqui descritos incluem mas não são 25 limitados a talco, carbonato de cálcio (p. ex., grânulos ou pó), celulose microcristalina, celulose em pó, dextratos, caulim, manitol, ácido silícico, sorbitol, amido, amido pregelatinizado e suas misturas. O aglutinante ou carga das composições farmacêuticas da invenção está tipicamente presente em de cerca de 50 a cerca de 99% em peso da composição farmacêutica ou forma de dosagem.

Formas adequadas de celulose microcristalina incluem mas não são limitadas aos materiais vendidos como AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103, AVICEL RC-581, AVICEL PH-105 (disponíveis na ' 5 FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales,Marcus Hook,

-. PA) e suas misturas. Um aglutinante específico é uma mistura de celulose microcristalina e carboximetil celulose sódica, vendida como AVICEL RC581. Excipientes ou aditivos anidros ou de baixa umidade adequados incluem AVICEL-PH-103™ e Starch 1500 LM.

Os desintegrantes são usados nas composições da invenção para prover tabletes que desintegram quando expostos a um ambiente aquoso. Os tabletes que contêm demasiado desintegrante podem se desintegrar na armazenagem, enquanto aqueles que contêm demasiado pouco podem não se desintegrar em uma desejada taxa ou sob as desejadas 15 condições. Assim, uma quantidade suficiente de desintegrante, que não é demasiada nem demasiado pouca para prejudicialmente alterar a liberação dos ingredientes ativos deve ser usada para formar formas de dosagem oral sólidas da invenção. A quantidade de desintegrante usado varia com base no tipo de formulação e é prontamente discemível para aqueles de 20 habilidade comum na arte. Composições farmacêuticas típicas compreendem de cerca de 0,5 a cerca de 15% em peso de desintegrante, especificamente de cerca de 1 a cerca de 5% em peso de desintegrante.

Os desintegrantes que podem ser usados nas composições farmacêuticas e as formas de dosagem da invenção incluem mas não são 25 limitados a ágar-ágar, ácido algínico, carbonato de cálcio, celulose microcristalina, croscarmelose sódica, crospovidona, polacrilina potássica, glicolado de amido sódico, amido de batata ou tapioca, amido prégelatinizado, outros amidos, argilas, outras alginas, outras celuloses, gomas e suas misturas.

Os lubrificantes que podem ser usados nas composições farmacêuticas e as formas de dosagem da invenção incluem mas não são limitados a estearato de cálcio, estearato de magnésio, óleo mineral, óleo mineral leve, glicerina, sorbitol, manitol, polietileno glicol, outros glicóis, 5 ácido esteárico, lauril sulfato de sódio, talco, óleo vegetal hidrogenado (p. ex., óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de girassol, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja), estearato de zinco, oleato de etila, etil laureato, ágar e suas misturas. Lubrificantes adicionais incluem, por exemplo, um gel de silica silóide (AEROSIL 200, 10 manufaturado pro W.R. Grace Co. of Baltimores, MD), um aerossol coagulado de silica sintética (comercializado por Degussa Co. of Plano, TX), CAB-O-SIL (um produto de bióxido de silício pirogênico, vendido por Cabot Co. of Boston, MA) e suas misturas. Se usados, os lubrificantes são tipicamente usados em uma quantidade de menos do que cerca de 1% 15 em peso das composições farmacêuticas ou formas de dosagem dentro das quais eles são incorporados.

4,5.2_____FORMAS DE DOSAGEM DE LIBERAÇÃO RETARDADA

Os ingredientes ativos da invenção podem ser administrados por meios de liberação controlada ou por dispositivos de suprimento que 20 são bem conhecidos daqueles hábeis na arte. Exemplos incluem mas não são limitados àqueles descritos nas Patentes U.S. Nos. 3.845.770; 3.916.899; 3.536.809; 3.598.123; e 4.008.719, 5.674.533, 5.059.595, 5.591.767. 5.120.548, 5.073.543, 5.639.476, 5.354.5564 e 5.733.566, cada uma das quais é incorporada aqui por referência. Tais formas de dosagem 25 podem ser usadas para prover liberação lenta ou controlada de um ou mais ingredientes ativos, empregando-se, por exemplo, hidroxipropil metil celulose, outras matrizes poliméricas, géis, membranas permeáveis, sistemas osmóticos, revestimentos de multicamadas, micropartículas, lipossomas, microesferas ou uma combinação deles, para prover o desejado perfil de liberação em proporções variáveis. As formulações de liberação controlada adequadas, conhecidas daqueles de habilidade comum na arte, incluindo aquelas aqui descritas, podem ser prontamente selecionadas para uso com os ingredientes ativos da invenção. A invenção abrange, assim, ' 5 formas únicas de dosagem unitária, adequadas para administração oral, tais como mas não limitado a tabletes, cápsulas, cápsulas de gelatina e tabletes e forma de cápsulas,que são adaptadas para liberação controlada.

Todos os produtos farmacêuticos de liberação controlada têm um objetivo comum de melhorar a terapia do medicamento em relação 10 aquela conseguida por suas contrapartes não-controladas. Idealmente, o uso de uma preparação de liberação controlada otimamente projetada no tratamento médico é caracterizado por um mínimo de substância medicamentosa sendo empregada para curar ou controlar a condição em um tempo mínimo. As vantagens das formulações de liberação controlada 15 incluem atividade prolongada do medicamento, reduzida freqüência de dosagem e aumentada complacência do paciente. Além disso, as formulações de liberação controlada podem ser usadas para afetar o tempo de início da ação ou outras características, tais como níveis sangüíneos do medicamento e podem, assim, afetar a ocorrência de efeitos colaterais (p. 20 ex., adversos).

A maioria das formulações de liberação controlada são projetadas para inicialmente liberar uma quantidade de medicamento (ingrediente ativo) que prontamente produza o desejado efeito terapêutico e gradual e continuamente liberar outras quantidades de medicamento, para 25 manter este nível de efeito terapêutico ou profilático em um período de tempo prolongado. A fim de manter este nível de medicamento constante no corpo, o medicamento deve ser liberado da forma de dosagem em uma taxa que substitua a quantidade de medicamento sendo metabolizada e excretada pelo corpo. A liberação controlada de um ingrediente ativo pode ser estimula a por várias condições, incluindo mas não limitado a pH, temperatura, enzimas, água ou outras condições ou compostos fisiológicos.

4.5.3 FORMAS DE DOSAGEM PARENTERAIS

As formas de dosagem parenterais podem ser administradas ' 5 aos pacientes por várias vias, incluindo mas não limitado a subcutânea,

... intravenosa (incluindo injeção de bolo), intramuscular e intraarterial. Em razão de sua administração tipicamente desviar-se das defesas naturais dos pacientes contra contaminantes, as formas de dosagem parenterais são preferivelmente estéreis ou capazes de serem esterilizadas antes da 10 administração a um paciente. Exemplos de formas de dosagem parenteral incluem mas não são limitados a soluções prontas para injeção, produtos secos prontos para serem dissolvidos ou suspensos em um veículo farmaceuticamente aceitável para injeção, suspensões prontas para injeção, e emulsões.

Veículos adequados, que podem ser usados para prover as formas de dosagem parenterais da invenção, são bem conhecidos daqueles hábeis na arte. Exemplos incluem mas não são limitados a: Água para Injeção USP; veículos aquosos tais como mas não limitado a Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção de Dextrose, Injeção de 20 Dextrose e Cloreto de Sódio, e Injeção de Ringer Lactada; veículos miscíveis com água, tais como mas não limitados a álcool etílico, polietileno glicol e polipropileno glicol; e veículos não aquosos, tais como mas não limitados a óleo de milho, óleo de semente de algodão, óleo de amendoim, óleo de gergelim, etil oleato, isopropil miristato e benzil 25 benzoato.

Os compostos que aumentam a solubilidade de um ou mais dos ingredientes ativos aqui descritos podem também ser incorporados dentro das formas de dosagem parenterais da invenção.

4.5.4 FORMAS DE DOSAGEM TRANSDÉRMICAS E TÓPICAS

As formas de dosagem transdérmicas e tópicas da invenção incluem mas não são limitadas a cremes, loções, pomadas, géis, soluções, emulsões, suspensões ou outras formas conhecidas de uma pessoa hábil na arte. Vide, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a. ed., '5 Mack Publishing, Easton PA (1990); e Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4a. ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985). As formas de dosagem transdérmicas incluem placas “tipo reservatório” ou ’’tipo matriz”, que podem ser aplicadas à pele e usadas por um período específico de tempo, para permitir a penetração de uma desejada quantidade de 10 ingredientes ativos.

Excipientes (p. ex., veículos e diluentes) e outros materiais adequados, que podem ser usados pra prover formas de dosagem transdérmicas e tópicas abrangidas por esta invenção, são bem conhecidos daqueles hábeis nas artes farmacêuticas e dependem do tecido particular a 15 que uma dada composição farmacêutica ou forma de dosagem será aplicada. Comesse fato em mente, os excipientes típicos incluem mas não são limitados a água, acetona, etanol, etileno glicol, propileno glicol, butano-l,3-diol, isopropil miristato, isopropil palmitato, óleo mineral e suas misturas, para formar loções, tinturas, cremes, emulsões, géis ou 20 pomadas, que não sejam tóxicas e farmaceuticamente aceitáveis.

Umidificadores ou umectantes podem também ser adicionados as composições farmacêuticas e formas de dosagem, se desejado. Exemplos de tais ingredientes adicionais são bem conhecidos na arte. Vide, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a. ed., Mack 25 Publishing, Easton PA (1990).

Dependendo do tecido específico a ser tratado, componentes adicionais podem ser usados antes de, em conjunto com ou subseqüente ao tratamento com ingredientes ativos da invenção. Por exemplo, intensificadores de penetração podem ser usados para auxiliar no suprimento dos ingredientes ativos no tecido. Intensificadores de penetração adequados incluem mas não são limitados a: acetona; vários álcoois tais como etanol, oleíla e tetraidrofurila; sulfóxidos de alquila, tais como sulfóxido de dimetila; dimetil acetamida; dimetil formamida;

polietileno glicol; pirrolidonas tais como polivinilpirrolidona; graus . Kollidon (Povidona, Polividona); uréia; e vários ésteres de açúcar solúveis ou insolúveis em água, tais como Tween 80 (polissorbato 80) e Span 60 (monoestearato de sorbitano).

O pH de uma composição farmacêutica ou forma de 10 dosagem, ou do tecido a que a composição farmacêutica ou forma de dosagem é aplicada, pode também ser ajustado para melhorar o suprimento de um ou mais ingredientes ativos. Similarmente, a polaridade de um veículo solvente, sua intensidade iônica, ou tonicidade, podem ser ajustadas para melhorar o suprimento. Compostos tais como estearatos 15 podem também ser adicionados às composição farmacêutica ou formas de dosagem, para vantajosamente alterar a hidrofilicidade ou lipofilicidade de um ou mais ingredientes ativos, a fim de melhorar o suprimento. A este respeito, os estearatos podem servir como um veículo lipídico para a formulação, como um agente ou tensoativo emulsificante e como um 20 agente intensificador de suprimento ou intensificador de penetração. Diferentes sais, hidratos ou solvatos dos ingredientes ativos podem ser usados para ajustar mais as propriedades da composição resultante.

4,5.5 FORMAS DE DOSAGEM MUCOSAS

As formas de dosagem mucosas da invenção incluem mas 25 não são limitadas a soluções oftálmicas, sprays e aerossóis, ou outras formas conhecidas por uma pessoa hábil na arte. Vide, p. ex., Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a. ed., Mack Publishing, Easton PA (1990); e Introduction to Pharmaceutical Dosagem Forms, 4a. ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985). As formas de dosagem adequadas para tratar tecidos mucosos dentro da cavidade oral podem ser formuladas como colutórios ou como géis orais. Em uma forma de realização, o aerossol compreende um veículo. Em outra forma de realização, o aerossol é livre de veículo.

Um composto de Fórmula I ou II pode também ser <* ^r 5 administrado diretamente ao pulmão por inalação (vide, p. ex., Tong e ·.. outros, Pedido PCT, WO 97/39745; Clark e outros, Pedido PCT WO 99/47196, que são incorporados aqui por referência). Para administração por inalação, um composto de Fórmula I ou II pode ser convenientemente suprido ao pulmão por numerosos diferentes dispositivos. Por exemplo, um 10 Inalador de Dose Medida (“MDI”), que utiliza recipientes que contêm um adequado propelente de baixa ebulição, p. ex., diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, bióxido de carbono ou outro gás adequado, pode ser usado para suprir um composto de Fórmula I diretamente ao pulmão. Os dispositivos MDI são disponíveis em 15 numerosos fornecedores, tais como 3M Corporation, Aventis, Boehringer Ingleheim, Forest Laboratories, Glaxo-Wellcome, Schering Plough and Vectura.

Altemativamente, um dispositivo Inalador de Pó Seco (DPI) pode ser usado para administrar um composto de Fórmula I ao pulmão 20 (vide, p. ex., Raleigh e outros, Proc. Amer. Assoc. Cancer Research Annual Meeting, 1999, 40, 397, que é aqui incorporado por referência). Os dispositivos DPI tipicamente utilizam um mecanismo tal como uma explosão de gás para criar uma nuvem de pó seco dentro de um recipiente, que pode então ser inalada pelo paciente. Os dispositivos DPI são também 25 bem conhecidos na arte e podem ser comprados de numerosos vendedores, que incluem, por exemplo, Fisons, Glaxo-Wellcome, Inhale Therapeutic Systems, ML Laboratories, Qdose e Vectura. Uma variação popular é o sistema DPI de múltiplas doses (“MDDPI”), que permite o suprimento de mais do que uma dose terapêutica. Os dispositivos MDDPI são disponíveis nas companhias, tais como Astrazeneca, Glaxo Wellcome, IVAX, Schering Plough, SkyePharma e Vectura. Por exemplo, cápsulas e cartuchos de gelatina, para uso em um inalador ou insuflador, podemser formuladas contendo uma mistura de pó do composto e uma base de pó adequada, tal ^r 5 como lactose ou amido para estes sistemas.

Outro tipo de dispositivo que pode ser usado pra suprir um composto de Fórmula I ou II ao pulmão é um dispositivo de spray líquido, suprido, por exemplo, por Aradigm Corporation. Os sistemas de spray líquido utilizam furos de bico extremamente pequenos, para aerossolizar 10 formulações de medicamento líquido, que podem então ser diretamente inaladas para dentro do pulmão.

Em uma forma de realização preferida, um dispositivo nebulizador é usado para suprir um composto de Fórmula I ou II ao pulmão. Os nebulizadores criam aerossóis de formulações de medicamento 15 líquidas empregando, por exemplo, energia ultrassônica para formar finas partículas, que podem ser prontamente inaladas (vide, p. ex., Verschoyle e outros, British J Cancer, 1999, 80, Sup. 2, 96, que é aqui incorporado por referência). Exemplos de nebulizadores incluem dispositivos supridos por Sheffield/Systemic Pulmonary Delivery Ltd. (vide Aimer e outros, Patente 20 U.S. No. 5.954.047; van der Linden e outros, Patente U.S. No. 5.950.619;

van der Linden e outros, Patente U.S. No. 5.970.974, que são aqui incorporadas por referência), Aventis e Batelle Pulmonary Therapeutics. O composto inalado de Fórmula I, suprido por dispositivos nebulizadores, está atualmente sob investigação como um tratamento para câncer 25 aerodigestivo (Engelke e outros, Poster 342 na American Association of Cancer Research, San Francisco, Calif., 1 - 5 de abril de 2000) e câncer do pulmão (Dahl e outros, Poster 524 da American Association of Cancer Research, San Francisco, Calif., 1 - 5 de abril de 2000).

Em uma forma de realização particularmente preferida, um dispositivo de aerossol eletroidrodinâmico (“EHD”) é usado para suprir um composto de Fórmula I ou II ao pulmão. Os dispositivos de aerossol EHD utilizam energia elétrica para aerossolizar as soluções ou suspensões de medicamento líquido (vide, p. ex., Noakes e outros, Patente U.S. No.

r 5 4.765.539; Coffee, Patente U.S. No. 4.962.885; Coffee, Pedido PCTWO

.. 94/12285; Coffee, Pedido PCT WO 94/14543; Coffee, Pedido PCTWO

95/26234, Coffee, Pedido PCT WO 95/26235, Coffee, Pedido PCTWO

95/32807, que são incorporados aqui por referência). As propriedades eletroquímicas da formulação do composto de Fórmula I podem ser 10 importantes parâmetros para otimizar quando suprindo este medicamento ao pulmão com um dispositivo aerossol EHF e tal otimização é rotineiramente realizada por uma pessoa hábil na arte. Os dispositivos de aerossol EHF podem mais eficientemente suprir medicamentos ao pulmão do que as existentes tecnologias de suprimento pulmonar. Outros métodos 15 de suprimento intra-pulmonar de um composto de Fórmula I ou II serão conhecidos do artífice hábil e estão dentro do escopo da invenção.

As formulações de medicamento líquidas, adequadas para uso com os nebulizadores e dispositivos de spray líquido e dispositivos de aerossol EHF tipicamente incluirão um composto de Fórmula I com um 20 veículo farmaceuticamente aceitável. Preferivelmente, o veículo farmaceuticamente aceitável é um líquido, tal como álcool, água, polietileno glicol ou um perfluorocarbon©. Opcionalmente, outro material pode ser adicionado para alterar as propriedades do aerossol da solução ou suspensão de um composto de Fórmula I ou II. Preferivelmente, este 25 material é líquido, tal como um álcool, glicol, poliglicol ou um ácido graxo. Outros métodos de formular soluções ou suspensões de medicamento líquidas, adequadas para uso em dispositivos de aerossol, são conhecidos daqueles hábeis na arte (vide, por exemplo, Biesalski, Patentes U.S. Nos. 5.112.598; Biesalski, 5.556.611, que são aqui incorporadas por referência). Um composto de Fórmula I pode também ser formulado em composições retais ou vaginais, tais como supositórios ou enemas de retenção, p.ex., contendo bases supositórias convencionais, tais como manteiga de cacau ou outros glicerídeos.

* 5 Além das formulações descritas anteriormente, um composto r, de Fórmula I ou II pode também ser formulado como uma preparação depósito. Tais formulações de longa ação podem ser administradas por implantação (por exemplo, subcutânea ou intramuscularmente) ou por injeção intramuscular. Assim, por exemplo, os compostos podem ser formulados com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (por exemplo, como uma emulsão em um óleo aceitável) ou resinas de troca iônica ou como derivados moderadamente solúveis, por exemplo, como um sal moderadamente solúvel.

Altemativamente, outros sistemas de suprimento farmacêuticos podem ser empregados. Lipossomas e emulsões são exemplos bem conhecidos de veículos de suprimento, que podem ser usados para suprir um composto de Fórmula I ou II. Certos solventes orgânicos, tais como dimetilsulfóxido, podem também ser empregados, embora usualmente ao custo de maior toxicidade. Um composto de 20 Fórmula I pode também ser suprido em um sistema de liberação controlada. Em uma forma de realização, uma bomba pode ser usada (Sefton, CRC Crit. Ref Biomed Eng., 1987, 14, 201; Buchwald e outros, Surgery, 1980, 88, 507; Saudek e outros, N. Engl. J Med, 1989, 321, 574). Em outra forma de realização, materiais poliméricos podem ser usados 25 (vide Medical Applications of Controled Release, Langer e Wise (eds.), CRC Press, Boca Raton, Fla. (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen e Ball (eds), Wiley, New York (1984); Ranger e Peppas, J Macromol. Sci., Rev. Macromol. Chem., 1983, 23, 61; vide também Levy e outros, Science 1985, 228,190: During e outros, Ann. Neurol., 1989, 25, 351; Howard e outros, 1989, J. Neurosurg. 71, 105). Em ainda outra forma de realização, um sistema de liberação controlada pode ser colocado em proximidade do alvo dos compostos da invenção, p.ex., o pulmão, assim requerendo somente uma fração da dose sistêmica (vide, por exemplo, Goodson, em Medical Applications of Controled Release, supra, vol. 2, págs. 115 (1984)). Outro sistema de liberação controlada pode ser usado (vide, p. ex.„ Langer, Science, 1990, 249, 1527).

Excipientes adequados (p. ex., veículos e diluentes) e outros materiais, que podem ser usados para prover formas de dosagem mucosas abrangidas por esta invenção, são bem conhecidos daqueles hábeis nas artes farmacêuticas e dependem do sítio particular em que ou método pelo qual uma dada composição farmacêutica ou forma de dosagem será administrada. Com esse fato em mente, excipientes típicos incluem mas não são limitados a água, etanol, etileno glicol, propileno glicol, butano-l,3-diol, isopropil miristato, isopropil palmitato, óleo mineral e suas misturas, que não são tóxicos e farmaceuticamente aceitáveis. Exemplos de tais ingredientes adicionais são bem conhecidos na arte. Vide, p.ex., Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing, Easton PA (1990).

O pH de uma composição farmacêutica ou forma de dosagem, ou do tecido a que a composição farmacêutica ou forma de dosagem é aplicada, pode ser ajustado para melhorar o suprimento de um ou mais dos ingredientes ativos. Similarmente, a polaridade de um veículo solvente, sua intensidade iônica ou tonicidade podem ser ajustados para melhorar o 25 suprimento. Compostos tais como estearatos podem também ser adicionados às composições farmacêuticas ou formas de dosagem, para vantajosamente alterar a hidrofilicidade ou lipofilicidade de um ou mais ingredientes ativos, a fim de melhorar o suprimento. A este respeito, os estearatos podem servir como um veículo lipídico para a formulação, como um agente emulsificante ou tensoativo, e como um agente intensificador de suprimento ou aumentador da penetração. Deferentes sais, hidratos ou solvatos dos ingredientes ativos podem ser usados para ajustar mais as propriedades da composição resultante.

5. EXEMPLOS • 5 Os seguintes exemplos empregam metodologia que pode ser . usada para preparar todos os compostos personificados nesta invenção, desde que apropriados reagentes e substratos sejam utilizados e menores variações das condições descritas sejam mantidas. Tais variações seriam facilmente realizadas por uma pessoa hábil na arte, sem indevida experimentação, dada a 10 descrição abaixo.

5.1 Exemplo 1: Preparação de ácido 3-r5-(4-fluoro-fenil)-[L2,4]oxadiazol-3ill-benzóico /=\ oX^H g de resina de cloreto de 2-clorotritila (Rapp Polymere, Alemanha) foram suspensas em dimetilformamida (200 ml) por 10 min e o solvente foi drenado. À resina foi adicionada uma solução de ácido 3cianobenzóico (12,71 g, 96,4 mmol) em 300 ml de dimetilformamida e agitado 4 h em temperatura ambiente. Os solventes foram drenados e a resina foi lavada com diclorometano (3 x 200 ml x 1 min), dimetilformamida (3 x 200 ml x 1 min), metanol (3 x 200 ml x 1 min) e diclorometano (3 x 200 ml x

1 min). A resina foi secada a vácuo por 4 h. O produto desejado foi analisado por divagem de uma pequena quantidade da resina reagida com trietilsilano/ácido trifluoroacético/diclorometano (10/50/40. LC/MS (ESI) m/z 148 [M+H]⁺ e 97% de pureza.

A resina de tritila 3-cianobenzóica em etanol (300 ml) foi agitada por 10 min em temperatura ambiente e em seguida o solvente foi drenado. A uma solução de cloridreto de hidróxi amina (35,81 g, 516 mmol) em etanol (200 ml) foi adicionado diisopropiletilamina (89,3 ml, 516 mmol) e agitado 5 min em temperatura ambiente. A resina foi adicionada a mistura de reação e agitado 24 h a 40°C. Os solventes foram drenados e a resina foi lavada com diclorometano (3 x 200 ml x 10 min), dimetilformamida (3 x 100 ^? 5 mix 10 min), metanol (3 x 200 ml x 10 min) e diclorometano (3 x 200 ml x 10 ·. min). A resina foi secada a vácuo por 4 h. O produto desejado foi analisado ' por divagem de uma pequena quantidade da resina reagida com trietilsilano/ácido trifluoroacético/diclorometano (10/50/40). LC/MS (ESI) m/z 181 [M+H]⁺ e 90% de pureza.

A uma suspensão de resina de hidroxiamidina (500 mg, 0,4 mmol) em diclorometano anidro (3 ml) foi adicionado cloreto de 4fluorobenzoíla (95 μΐ, 0,8 mmol) e diisopropiletilamina (138 μΐ, 0,8 mmol). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. Os solventes foram drenados e a resina foi lavada com diclorometano (3 x 10 ml x 10 min), dimetilformamida (3 x 10 ml x 10 min), metanol (3 x 10 ml x 10 min) e diclorometano (3xlOmlxlO min). A resina foi secada a vácuo por 4 h. O produto desejado foi analisado por divagem de uma pequena quantidade da resina reagida com trietilsilano/ácido trifluoroacético/diclorometano (10/50/40). LC/MS (ESI) m/z 303 [M+H]⁺ e 65% pureza.

A uma suspensão de resina acilada em diclorometano anidro (1,5 ml) foram adicionados 50% de ácido trifluoroacético em diclorometano (1,5 ml).

A mistura de reação foi agitada 2 h em temperatura ambiente. A resina foi removida e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 10% de dimetilformamida em tolueno (4 ml) e então agitado por 2 25 ha 130°C. Os solventes foram removidos e o desejado produto foi purificado por LC/MS preparativa. LC/MS (ESI) m/z 285 [M+H]⁺ e 98% pureza.

Os seguintes compostos são preparados utilizando-se os procedimentos descritos acima. Os compostos são analisados por uma LC/MS empregando-se ionização de Eletropulverização (ESI).

Tabela 2: Composto	Nome Composto	[M+H]+
N-°\ /=\ ¢/-^/ Cl <ArH	Ácido 3[5-(3-cloro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	301,7
N'0\/=\ ;__/ V_/~o cAoH	Ácido 3-(5-pentilóxi-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	353,4
N'°\ /=/ ji /—(\ )> //>/^n \L_y M O^OH	Ácido 3-(5-naftalen-l-il[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	317,3
N'°x /=\ çfKKcAoh	Ácido 3-(5-p-tolil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	281,3
Ν-°χ /=\ ΐΥγ^Ν V-/ / / Π'Ό'Χ)	Ácido 3-(5-bifenil-4-il[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	343,3

N'°\ /=\ \__ OÍO H	Ácido 3-[5-(4-isobutil-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	323,4
N°\ /=\ v__/ oXH	Ácido 3-(5-fenil[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	267,3
n-Q. /-—\ lr~( \ rj^T^N \_/ cArH	Ácido 3-(5-cicloexil[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	273,3
\ 0 N'°\ /=/ , /° oArH	Ácido 3-(5-(3,4,5-trimetóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	357,3
rO\/==\ ,0' oX'H	Ácido 3-(5[(4-nitro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	312,2

N'°\ /=\ , qÍq'H	Ácido 3-[5-(4-metóxi-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	297,3
N'°\ \=\ çy-uó oX'H	Ácido 3-[5-(o-tolil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	281,3
N'Q /=^ U v-1 cAO'H .	Ácido 3-(5-benzo[l,3]dioxol5-il-[l,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico	311,3
n-q / Λ >-< ίί^Ί^Ν \ OÁO-H	Ácido 3-(5-isopropil[ 1,2,4] oxadiazol-3-il)benzóico	233,2
fl F Ν'θχ/^ξ-1^ F F ΟΛΟ'Η	Ácido 3-[5-(3,5-bistrifluorometil-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	403,2

n'°\_y=\ F\ F IL J F 0 O	Ácido 3-[5-(4-trifluorometilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	335,2
ν'°\/=Λ , Ύ 1 \ oI0 h	Ácido 3-[5-(4-dimetilaminofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	310,3
N°\ /==\ jl y—<\ \ Υ M (1 J o x oY	Ácido 3-[5-(2-metóxi-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	297,3
\ n~Q /=(° O O	Ácido 3-[5-(3-metóxi-fenil[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	297,3
N'°\ /Y γΝΗ) ΰ^οH	Ácido 3-(5-furan-2-il)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	257,2

	Ácido 3-(5-terc-butil[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	247,3
N'°\ /r~\ jl J—(/	Λο l 1 >=N	Ácido 3-(5-benzo[l,2,5oxadiazol-5-il[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	309,2
<XH
nA /==\	α	Ácido 3-[5-(4-clorometilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	315,7
oA'h
N°\ /=/ JL //—<\ /> W	\/	Ácido 3-[5-(4-terc-butil-fenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	323,4
o^oH
n-Q / JL 'J—7 (XN		Ácido 3-(5-butil[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	247,3
crXH

n-Q //	Ácido 3-(5-ciclopropil[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	231,2
	Ν' Ã'H
	Ν'°\ z3^ Α Ζ>~<Ί] VJJ	Ácido 3-(5-tiofen-2-il[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	273,3
Cr	Ό'Η
c	ntQ Al	Ácido 3-(5-propenil- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	231,2
CT	-Ο'Η
	Νθ // /)—/>	Ácido 3-(5-ciclopentil[ 1,2,4] oxadiazol-3-il)benzóico	259,3
II	γ^Ν VJ
(Τ'	Ο'Η
	Η Ν'°\ Α/ ji y—J	Ácido 3-(-tiofen-2-ilmetil[1,2,4] oxadiazol-3-il)benzóico	287,3
CrQ'	,Η

.C! ο Ν-θ W JI #— lí^y'N cr	Ácido 3-[5-(4-cloro-benzil)[ 1,2,4]oxadiazol-3 -il] benzóico	315,7
N^°\ /0_í~Xci JI }—/ ÇX O^U	Ácido 3-[5-(4-clorofenoximetil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	331,7
H F F Λ n-Q /=\ X^N/XO CrO	Ácido 3-[5-(2-trifluorometilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	335,3
E N-0 >=. ^a >-O ί|Ψ^Ν F Λ«	Ácido 3-(5-(2,6-difluorofenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	303,2
Ν'Ο\ /=Λ oArH	Ácido 3-[5-(4-etil-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	296,3

[f (A	F N'°\ /=/ A X—A A—F =^X^N V# /'H	Ácido 3-[5[(3,4-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	304,2
íj^	N'Q /=/	Ácido 3-(5-m-tolil[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il)benzóico	281,3
cr	A
	N-Q. /=\ /-.	Ácido 3-[5(4-pirrol-l-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	332,0
CT	O'H
	N'°\ / Λ /-7 X/T	Ácido 3-(5-benzil[ 1,2,4] oxadiazo 1-3 -i 1)benzóico	281,3
o'	X
	N'°\ P~~ ji /—' -^X^N	Ácido 3-(5-metoximetil[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	235,2
O'	A

cX	E N'°\ / jl Ch	F	Ácido 3-(5((2,5-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	303,2
[1	Ν'θ ji	O	Ácido 3-[5-(l-fenil-propil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 - i 1] benzóico	309,3
0'	IO,H
	Clx N'°\ /	T 1 -.	Ácido 3-(5-(2-cloro-fenil)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	301,7
ί|
cr	O'H
	N°\ / II />—(i	F\ F fA O	Ácido 3-(5[(3-trifluorometóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	351,2
c	JH // λ\ ϊγ^'Ν X
cr	-O'H
	N'°x Λ	/ (~S	Ácido 3-[5[(4-fluoro-benzil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	299,3
On	-O'H

N~°\ JI ÇTN	7 0	Ácido 3-[5-(2,5-dimetil-furan3-il)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	285,3
n-Q Λ Λ- [Γί^ν	Ό	Ácido 3-[5-(3-metil-tiofen-2il)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	287,3
cAo-H
’ Ν'°ν 9 JI /)—/	Cl ~W	Ácido 3-[5-(3-clorofenoximetil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	331,7
Á A 0^0'
N°\ JI ÇrN	1 \ °'<Z	Ácido 3-(5-isoxazol-5-il[ 1,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico	258,2
oXH
N°\ Γ-	=N J>-C|	Ácido 3-[5-(6-cloro-piridin-3il)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	302,7

Qc,· Ν-θ XN 1! —(\ À o^oh	Ácido 3-{5-[3-(2-cloro-fenil)5-metil-isoxazol-4-il][1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	382,8
F^O^Cl N-°x Xn Çr1 r oXrH	Ácido 3-{5-[3-(2-cloro-6fluoro-fenil)-5-metil-isoxazol4-il]- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	400,0
ftQ JI X ψ N 0 oX/H	Ácido 3-(5-ciclopentilmetil[1,2,4] oxadiazol-3 -il)benzóico	273,3
Ν-°χ /=\ oYyH	Ácido 3-[5-(2,4-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	303,2
n-Q /=n ii r~\\ /) V—7 M oX'H	Ácido 3-(5-piridin-3-il[1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	268,2

c	N'Q. JL #— Υν	o	Ácido 3-(5-piridin-4-il[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	268,2
cr	Ό'Η
	N'°x JL J YN		Ácido 3-(5-ciclobutil[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	245,2
0'	XO.H
	N-°x JL J>— N	\ o	Ácido 3-[5-(4-metóxi-benzil)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	311,3
	o'H
' c	N-°K Λ Y	\ o o~°	Ácido 3-[5-(3,4-dimetóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	327,3
	O'H
(Γ	n-Q Jl x-	Cl λ=Ν V?	Ácido 3-[5-(2-cloro-piridin-3il)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	302,7
CT	o'H

N-°\ 1 }—< ÇrN X χΗ cXo	\ Nx x—7 0	Ácido 3-(5((1-acetil-piperidin4-il)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	316,3
N'Q, íi Ç) N	co	Ácido 3-(5-benzo[b]tiofen-2il- [ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	323,3
X xH CT 0
n-Q	\	Ácido 3-[5-(3-dimetilaminofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	310,3
X	'^-xz
X^H Cr O
N'Q U Λ—	F\__ /·“ ^y.	Ácido 3-(5-(2,3-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	303,2
gX
ΑλχΗ CT 0
n-Q jj A (XN	E /•—LA	Ácido 3-[5-(2-fluoro-5-metilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	299,3
<XH

sz ÍT°\ /=N Α z—λ çp^z	Ácido 3-[5-(2-metilsulfanilpiridin-3-il)- [l,2,4]oxadiazol3-il]-benzóico	314,3
N'O /=(0^ cAa	Ácido 3-(5-(2,2,-difluorobenzo[ 1,3]dioxol-5-il)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	347,2
Jt. λ \-F Aj N VA fA^ <Z0'H	Ácido 2-fluoro-5-[5-(4-fluorofenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	303,2
H02C\^X £*9 X> u z^nAÍ JL \A ΖΑ	Ácido 3-[5(4-bromo-2-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	364,1
ho2c._ F/ nA JVz^	Ácido 3-[5-(3-fluoro-bifenil- 4-il)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	361,3

N'°\ /=4^ cA>'H	Ácido 3-[5-(3-fluoro-fenil)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	285,2
fl F Ν'°\λ=< λΑι!/ cAo-H	Ácido 3-[5-(2,3-difluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	303,2
E N'°\ /=\ Ji 4—}> ÇkN H. okH	Ácido 3-[5-(2-fluoro-5-metilfenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	299,3
sz N-O /=N . /£ /)--G \ ÇC^-7 cA>'h	Ácido 3-[5-(2-metilsulfanilpiridin-3-il)- [l,2,4]oxadiazol3-il]-benzóico	314,3
oJF N'OV /=< Γ JL V—<\ λ-ο VzZ o-^o	Ácido 3-[5-(2,2-difluorobenzo[l,3]dioxol-5-il)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	347,2

E Ν'°\ /=\	Ácido 3-[5-(2-fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	285,1
A H />-F qXXX Π'Ο^ΟΗ	Ácido 3-[5-(4-fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	285,2
n-A ΛΛ 1 zH cXX	Ácido 3-[5-(4-ciano-fenil)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	292,08
F nA X\ a ? Aj N \L_# zA ^Na+ O^O	Sal sódico do ácido 3-[5-(2fluoro-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	306,04
N'°\ xx XX F 0^0^	Metil éter do ácido 3-[5-(2fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	299,08

5.2___________Exemplo 2: Preparação de ácido 3-r5-(2-fluoro-fenil)n,2,4]oxadiazol-3-ill-benzóico

100

A uma solução de ácido 3-cianobenzóico (44,14 g, 300 mmol) em DMF (0,6 1) foi adicionado K₂CO₃ (62,19 g, 450 mmol) e então a solução foi agitada por 30 min em temperatura ambiente. A suspensão foi adicionado iodeto de metila (28 ml, 450 mmolO durante 20 min e a mistura de reação foi agitada por mais 4 h em temperatura ambiente. A mistura de reação foi vertida em 1,2 1 de água gelada e agitada por 30 min e o precipitado foi filtrado. A torta branca foi dissolvida em metanol (70 ml) e então recipritada em água fria. O produto desejado foi obtido como um pó branco com produção de 79% (38 g, 99% de pureza por LC/UV). ^!H-NMR (CDC1₃) δ 8,85 (2H), 8,28 1H), 8,02 (1H), 4,17 (3H).

A uma solução de metil éster do ácido 3-cianobenzóico (50g, 310 mmol) em etanol (500mL) foram adicionados 50% de hidroxialamina aquosa (41 mL, 620 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada por lha 100°C e os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo oleoso foi dissolvido em 20/80 etanol/tolueno (50 ml x 2) e então novamente concentrado. O éster desejado (61 g, produção quant.) foi obtido como um pó branco com 98% de pureza (LC/UV). ^-NMR (CDC1₃) δ 9,76 (1H), 8,24 (1H), 7,82 (2H), 7,51 (1H), 5.92 (2H), 3.82 (3H).

A uma solução de metil éster do ácido 3-(Nhidroxicarbamimidoil)-benzóico (60 g, 310 mmol) em THF anidro (200 ml) foi adicionado diisopropiletilamina (75 ml, 434 mmol) a 5 °C e então foi adicionado à mistura cloreto de 2-fluorobenzoila (48,lml, 403 mmol) durante 20min. A mistura de reação foi agitada por 1 h em temperatura ambiente. O precipitado foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em etil acetato (400 ml) e então lavado com água (200

101 ml x 2). O solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto desejado foi cristalizado em 60% acetato de etila em hexano, para produzir o produto desejado (81 g, produção 83%) como um sólido branco. ^-NMR (CDC1₃) δ 8,18 (1H), 8,03 (2H), 7,48 (2H), 7,18 (2H), 5,61 (2H), 3,82 (3H).

’5 44 g de éster metílico do ácido 3-(N-2fluorobenzoilcarbamimidoil)-benzóico em tolueno (500 ml) foram refluxados por 4 h a 130°C, utilizando-se aparelho Dean-Stark. A mistura de reação foi agitada a 5 °C por 18 h. O precipitado branco foi filtrado e o filtrado foi concentrado, cristalizado novamente em tolueno. O oxadiazol desejado (38 g, 10 92% produção) foi obtido como um sólido branco com 99% de pureza (LC/UV). ’H-NMR (CDC1₃) δ 8,91 (1H), 8,38 (1H), 8,15 (2H), 7,62 (2H), 7,35 (2H), 3,95 (3H).

A uma solução de éster metílico do ácido 3-[5-(2-fluoro-fenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico (33 g, 111 mol) em THF (400 ml) foi 15 adicionado NaOH aquoso 1,5 M (100 ml, 144 mmol). A mistura de reação foi refluxada por 2 h a 100°C. O solvente orgânico foi removido sob pressão reduzida e a solução aquosa foi agitada 2 h a 5 °C. O precipitado branco foi filtrado e o filtrado foi concentrado e precipitado novamente em água. A torta branca foi lavada com água fria e então secada utilizando-se liofilizador. O sal 20 desejado (33 g, 96% produção) foi obtido como um pó branco com 98,6% pureza (LC/UV).

A uma solução de metil éster do ácido 3-[5-(2-fluoro-fenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico (3,3 g, 11 mmol) em THF (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso 1,5 M (10 ml, 14 mmol). A mistura de reação foi 25 refluxada por 2 h a 100°C. O solvente orgânico foi removido e a solução aquosa foi diluída com água (50 ml) e então acidificada com HCI aquoso. O precipitado branco foi filtrado e a torta branca foi lavada com água fria e então secado utilizando-se liofilizador. O ácido desejado (3,0 g, produção 96%) foi obtido como um pó branco com pureza de 98% (LC/UV). Ponto de

102 fosão 242°C; IV υ 3000 (C-H aromático), 1710 (C=O); Ή-NMR (D₆-DMSO) δ 8,31 (1H), 8,18 (2H), 8,08 (1H), 7,88 (2H), 7,51 (2H); ¹³C- NMR (D6DMSO) δ 172,71, 167,38, 166,48, 161,25, 135,80, 132,24, 131,79, 131,79, ' 131,08, 130,91, 129,81, 127,76, 125,48, 117,38, 111,70; ¹⁹F-NMR (D6'-5 DMSO)Ô109,7.

_ Os seguintes compostos são preparados utilizando-se os procedimentos descritos acima.

Tabela 3: Composto	Nome Composto	[M+H]+
cXoh	Ácido 3-[5-(4-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	285,2
E N-°v cr o	Ácido 3-[5-(2-fluorofenil-[ 1,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	285,1
n zF N'Q /=Z o7o'h	Ácido 3-[5-(3-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	285,2
f N~°v /^X (X V H	Ácido 4-fluoro-3-[5-(4fluorofenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	303,2

103

Ο Ν'θν/Α-σ u Ji Λ Ji //~y\ /r~r	Ácido 5-[5-(4-fluorofenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3il]-benzóico	315,3
ho2c.^ n-o / 1 X^ <^C1	Ácido 3-[5-(4-cloro-2fluoro-fenil)- [ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	319,7
HO-CV^V?”\_L~, n /Xq	Ácido 3-[5-(3-fluorobifenil-4-il)- [ 1,2,4] oxadiazol-3 -il]benzóico	361,3
ho2c^^^_c? T 'x \^ X^Z^Br	Ácido 3-[5-(4-bromo-2fluoro-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	364,1
N--O γγ θΑ	Éster metílico do ácido 3[5-(4-fluoro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	299,08
/ 7=\ j? Ή SV/ST^ CX	Ácido 5-[5-(4-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	339,13

104

E |ΡγΑ/-γ/-ΒΓ cYcfH	Ácido 3-[5-(4-bromo-2fluoto-fenil- [ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	365,05
U__ H 2v2 xiU, X UM o	Ácido 3-[5-(3-fluorobifenil-4-il[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	361,16
N'°\/==\ qxMvUC Jo	Ácido 3-[5-(6-pirrolidinl-il-piridin-3-il)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	337,20
A MM 1! /)—\\ /Z~N P V_N \—/ ΗχΑθ	Ácido 3-[5-(6-morfolin-4il-piridin-3-il[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	353,18
iHK) N N X—' H'crU	Ácido 3-[5-(3,4,5,6tetraidro-2H[ 1,2 ’]bipiridinil-5 ’-il)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il] benzóico	351,18
r\-tl °'H h y=Xwxá b-U L II o	Ácido 3-[5-(2-fluoro-6hidróxi-fenil)[1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	301,18

105

Ν'°κ Λ-χ Ç^N Ο	2-metóxi-etil éster do ácido 3-(5-(2-fluorofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	343,16
Ν-0 Λ λ-< /) Ο^Ο^Χ/θΧ^Ο^	2-(2-metóxi-etóxi)-etil éster do ácido 3-(5-(2fluoro-fenil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	387,49
F Ν'°\ ,¼ οΧο/Ρ^ο-χΡ	2-[2-(2-metóxi-etóxi)etóxi-etil éster do ácido 3(5-(2-fluoro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] benzóico	431,31
Ε n-Q >=>. θ^Ν^Ό οΧο χ^'ο'-^οχ^°^χο-χ	2- {2-[2-(2-metóxi-etóxi)etóxi]-etóxi}-etil éster do ácido 3-[5-(2-fluro-fenil)[ 1,2,4] oxadiazol-3-il]benzóico	475,26
Ε Ν-°. /=\ ο<Χο-Χ^0χ^^-ο-Χ^°χ^^0-Χ/0\	2-(2- {2-[2-(2-metóxietóxi)-etóxi-etóxi} -etóxi)etil éster do ácido 3-(5-(2fluoro-fenil)[l,2,4]oxadiazol-3-il]benzóico	519,33
F Ν'°)=\ οΧο^^θχζ^·0χ^Ο'^Ό'^°χζ^0'Η	2-(2-(2- {2-[2-(2-hidróxietóxi)-etóxi]-etóxi]etóxi}-etóxi]-etil éster do ácido 3-[5-(2-fluorofenil)- (l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	549,35

106

N-O A A. ZX A \ zH h H	Ácido 3-[5[(4-aminofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	282,20
N-0 r j. H / N + '°Λ NH	Ácido 3-[5-(4-azidofenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	309,20
/aA >==/ o=( L 1 H Ό	Ácido 3-[5-(4-benzilóxifenil)- [l,2,4]oxadiazol-3il]-benzóico	373,16

5.3__________Exemplo 3: Identificação e caracterização dos compostos que promovem supressão sem-sentido e modulam a terminação de translação.

Os ensaios descritos acima na Seção 4.2 foram usados em duas avaliações de alta produção. Os compostos foram avaliados nos ensaios baseados em célula e bioquímicos. Os compostos foram testados, ressintetizados e testados novamente, para confirmar as estruturas químicas. O sal sódico do ácido 3-[2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)-acetilamino]-benzóico foi caracterizado mais com o ensaio de supressão sem-sentido de luciferase in 10 vitro. Para assegurar que a atividade de supressão sem-sentido observada dos compostos selecionados não era limitada ao sistema de ensaio de reticulócito de coelho, extrato de célula bela foi preparado e otimizado (Lee & Mcdonald, 1999, Development 126(22): 4989-4996 e Lie & Macdonald, 2000, Biochem. Biophys. Res. Commun. 270(2):473-481).

5.4__________Exemplo 4: Caracterização de compostos que aumentam a

107 supressão sem-sentido e produzem proteína funcional

Foi previamente demonstrado que os compostos da invenção aumentam o nível de supressão sem-sentido no ensaio bioquímico três a quatro vezes em relação aos extratos não-tratados. Para determinar se os '5 compostos também funcionam in vivo, uma linhagem de célula estável, . abrigando o gene luciferase contendo sem-sentido UGA, foi tratada com compostos selecionados. As células foram cultivadas em meio padrão, suplementado com 1% de penicilina-estreptomicina (P/S) e 10% de soro de bovino fetal (FBS) a 70% de confluência divisão 1:1 no dia antes do 10 tratamento. No dia seguinte, as células foram tripsinadas e 40000 células foram adicionadas a cada poço de uma placa de cultura de tecido com 96 poços. Diluições seriais de cada composto foram preparadas para gerar uma curva de resposta de dose de seis-pontos, abarcando 2 logs (30 μΜ a 0,3 μΜ). Α concentração final do solvente DMSO permaneceu constante a 1% em cada 15 poço. As células tratadas com 1 % DMSO serviram como o padrão de segundo plano e as células tratadas com gentamicina serviram com um controle positivo.

5.5 Exemplo 5: Sal sódico do Ácido 3-r2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)acetilamino]-benzóico altera a acessibilidade dos agentes de modificação 20 química para nucleotídeos específicos do rRNA 28 S

Estudos anteriores demonstraram que a gentamicina e outros membros da família de aminoglicosídeo diminuíram a fidelidade da ligação de translação ao sítio A do rRNA 16S. Por área de cobertura química, reticulação UV e NMR, a gentamicina mostrou ligar-se ao sítio A 25 (consistindo de nucleotídeos 1400-1410 e 1490-1500, E. coli numbering) do rRNA nos nucleotídeos 1406, 1407, 1494 e 1496 (Moazed & Noller, 1987, Nature 327(6221): 389 - 394; Woodcock e outros, 1991, EMBO J. 10(10): 3099-3103; e Schroeder e outros, 2000, EMBO J. 19:1-9.

Os ribossomas preparados pelas células HeLa foram incubados

108

Os ribossomas preparados pelas células HeLa foram incubados com as moléculas pequenas (em uma concentração de 10 μΜ), seguido por tratamento com agentes de modificação química (sulfato de dimetila [DMS] e cetoxal [KE]). Em seguida a modificação química, o rRNA foi extraído por '5 fenol-clorofórmio, precipitado por etanol, analisado nas reações de extensão . de imprimador, utilizando-se oligonucleotídeos etiquetados na extremidade, hibridizando em diferentes regiões dos três rRNAs e resolvido em géis de 6% poliacrilamida. As sondas usadas para extensão de imprimador cobrem os inteiros rRNAs 18S (imprimadores de 7 oligonucleotídeos), 28S 10 (imprimadores de 24 oligonucleotídeos) e 5S (um imprimador). Os controles destes experimentos incluem DMSO (um controle para mudanças de acessibilidade de rRNA induzida por DMSO), paromomicina (um marcador para ligação rRNA 18S) e anisomicina (um marcador para ligação rRNA 28S).

Os resultados destes experimentos de área de cobertura indicaram que o sal sódico do ácido 3-[2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)acetilamino]-benzóico altera a acessibilidade dos agentes de modificação química a nucleotídeos específicos do rRNA 28S. Mais especificamente, as regiões protegidas por sal de sódio do ácido 3-[2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)20 acetilamino]-benzóico incluem (1) uma região conservada nas vizinhanças do centro da peptidil transferase (domínio V), implicada na formação da ligação de peptídeo e (2) uma região conservada no domínio II, que pode interagir com 0 centro da peptidil transferase, com base na ligação de vemamicina B a ambas estas áreas.

5.6__________Exemplo 6: Transleitura dos códons de terminação prematura dos modelos de doença baseados em célula

Para consignar os efeitos dos compostos de supressão-sem sentido nos mRNAs alterados em doenças específicas herdadas, uma linhagem de célula epitelial brônquica, abrigando um códon sem-sentido no

109 amino ácido 1282 (W1282X) foi tratada com sal de sódio do ácido 3-(2-(4isopropil-3-metil-fenóxi)-acetilamino]-benzóico (20 μΜ) e a função CFTR foi monitorada como um canal de cloreto ativado cAMP, empregando-se o ensaio SPQ (Yang e outros, 1993, Hum Mol Genet. 2(8):1253-1261 e Howard e '5 outros, 1996, Nat. Med. 2(4):467-469). Estes experimentos mostraram que o tratamento cAMP destas células resultou em um aumento da fluorescência SPQ, consistente com o estímulo do efluxo de haleto mediado-CFTR. Não foi observado aumento de fluorescência, quando as células não foram tratadas com o composto ou se as células não fossem estimuladas com cAMP. Estes 10 resultados indicam que a CFTR de comprimento total expressada por este alelo contendo sem-sentido, em seguida a tratamento com composto, também funciona como um canal de ânion estimulado-cAMP, assim demonstrando que as linhagens de células de fibrose cística aumentam a atividade do canal de cloreto, quando tratadas com sal de sódio do ácido 3-[2-(4-isopropil-315 metil-fenóxi)-acetilamino]-benzóico.

5.7._________Exemplo 7: Células primárias do camundongo contendo-sem sentido mdx expressam proteína de distrofina de comprimento total, quando tratadas com sal de sódio do ácido 3-(2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)acetilamino]-benzóico

A mutação do camundongo mdx da terminação prematura do polipeptídeo de distrofina de 427 kDa mostrou ser uma transição C para T nas posições 3185 do exon 23 (Sicinski e outros, 1989, Science. 244(4912): 15781580). Culturas de músculo esquelético primárias de camundongo, derivadas de camundongos mdx com a idade de 1 dia, foram preparadas como descrito 25 anteriormente (Barton-Davis e outros, 1999, J Clin Invest. 104(4):375-381).

As células foram cultivadas por 10 dias, na presença de sal de sódio do ácido 3-[2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)-acetilamino]-benzóico (20 μΜ). O meio de cultura foi substituído cada quatro dias e a presença de distrofina nas culturas de mioblastos foi detectada por imunotingimento, como descrito

110 anteriormente (Barton-Davis e outros, 1999, J Clin Invest. 104(4): 375-381). Um anticorpo monoclonal primário para o término-C da proteína distrofina (Fl9Al2) foi usado não diluído e rodamina conjugada anti-camundongo IgG foi usada como o anticorpo secundário. O anticorpo F19A12 detecta a '5 proteína de comprimento total, produzida pela supressão do códon sem. sentido. O tingimento foi visto empregando-se um microscópio DMR Leica, câmera digital e software de imageamento associado da Universidade de Pennsylvania.

5.8 __________Exemplo 8: Transleitura de códons de terminação prematura do camundongo mdx.

Como anteriormente descrito (Barton-Davis e outros, 1999, J Clin Invest. 104(4): 375-381), o composto foi suprido por bombas osmóticas Alzet, implantadas sob a pele de camundongos anestesiados. Duas doses de sal de sódio do ácido 3-[2-(4-isopropil-3-metil-fenóxi)-acetilamino]-benzóico 15 foram administradas. A gentamicina serviu como um controle positivo e bombas enchidas com solvente somente serviram como controle negativo. As bombas foram carregadas com o apropriado composto, de modo que as doses calculadas, a que o tecido foi exposto, foram de 10 μΜ e 20 μΜ. A concentração de gentamicina foi calculada para obter-se exposição do tecido 20 de aproximadamente 200 μΜ. No experimento inicial, os camundongos foram tratados por 14 dias, após o que os animais foram anestesiados com cetamina e exsanguinados. O músculo anterior tibialis (TA) dos animais experimentais foi então extirpado, congelado e empregado para análise de imunofluorescência da incorporação de distrofina dentro do músculo esfriado. 25 A presença da distrofina nos músculos TA foi detectada por imunotingimento, como descrito anteriormente (Barton-Davis e outros, 1999, J Clin Invest. 104(4): 375-381).

5.9 Exemplo 9: cápsula de dosagem de 200 mg

A Tabela 3 ilustra uma formulação de batelada e formulação

111 de dosagem única para uma unidade de dose única de 200 mg, isto é, cera de 40% em peso.

Tabela 3. Formulação para cápsula de 200 mg

Material	Percentagem em Peso	Quantidade (mg/tablete)	Quantidade (kg/batelada)
Composto da invenção	40,0%	200 mg	16,80 kg
Amido de milho pregelatinizado,NF5	9,5%	297,5 mg	24,99 kg
Estearato de magnésio	0,5%	2,5 mg	0,21 kg
Total	100,0%	500 mg	42,00 kg

O amido de milho pregelatinizado (SPRESS B-820) e os componente do composto da invenção são passados através de uma peneira de 710 pm e em seguida são carregados dentro de um Misturador de Difusão com uma inserção defletora e misturado por 15 minutos. O estearato de magnésio é passado através de uma peneira de 210 pm e é adicionado ao Misturador de Difusão. A combinação é então encapsulada em um cápsula de tamanho #40, 500 mg por cápsula (tamanho de batelada de 8400 cápsulas), empregando-se uma máquina de enchimento de cápsula tipo Dosator.

5.10________Exemplo 10: Forma de dosagem oral de 100 mg

A Tabela 4 ilustra uma formulação de batelada e uma formulação unitária de dosa única, contendo 100 mg de um composto da invenção.

Tabela 4. Formulação para tablete de 100 mg

Material	Percentagem em Peso	Quantidade (mg/tablete)	Quantidade (kg/batelada)
Composto da invenção	40%	100,00	20,00
Celulose Microcristalina, NF	53,5%	133,75	26,75
Tensoativo Pluronic F-68	4,0%	10,00	2,00
Croscarmelose Sódio Tipo A, NF	2,0%	5,00	1,00
Estearato de magnésio, NF	0,5%	1,25	0,25
Total	100,0%	250,00 mg	50,00 kg

A celulose microcristalina, croscarmelose sódio e os componentes do composto da invenção são passados através de uma peneira de malha #30 (cerca de 430 p a cerca de 655 p). O tensoativo Pluronic F-68®, (manufaturado por JRH Biosciences, Inc. of Lenexa, KS) é passado através de uma peneira de malha #20 (cerca de 457 p a cerca de 1041 p). O tensoativo

112

Pluronic F-68® e 0,5 kg de croscarmelose sódio são carregados dentro de um misturador de queda de duplo envoltório de 16 qt. e são misturados por cerca de 5 minutos. A mistura é então transferida para um misturador de queda de duplo envoltório de 85 dm , em que a celulose microcristalina é adicionada e '5 misturada por cerca de 5 minutos. O composto é adicionado e misturado por mais 25 minutos. Esta pré-mistura é passada através de um compactador de rolo com um moinho de martelo fixado na descarga do compactador de rolo e movido de volta para o misturador de queda. O resto da croscarmelose sódio e estearato de magnésio é adicionado ao misturador de queda e misturado por 10 cerca de 3 minutos. A mistura final é comprimida em uma prensa de tablete rotativa com 250 mg por tablete (tamanho de batelada 200.000 tabletes).

5.11 Exemplo 11: Forma de dosagem Aerossol

Um concentrado é preparado combinando-se um composto da invenção e uma porção de 12,6 kg do tricloromonofluorometano em um vaso 15 de aço inoxidável, equipado com um misturador de alto cisalhamento. A mistura é realizada por cerca de 20 minutos. A suspensão da massa é então preparada no vaso selado, combinando-se o concentrado com o resto dos propelentes em um tanque de produto em massa, que é controlado em temperatura a 21 a 27 °C e controlado em pressão a 2,8 a 4,0 BAR.

Recipientes de aerossol de 17 ml, que têm uma válvula dosadora que é projetada para prover 100 inalações da composto da invenção. Cada recipiente é provido com o seguinte:

Composto da invenção 0,0141g

Tricloromonofluorometano 2,6939g

Diclorodifluorometano 3,7028 g

Diclorotetrafluoroetano____________1,5766g

Total 7,0000g

Claims (38)

1. 

   

   em que

   Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída

   5 ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não substituída;

   R¹ é hidrogênio, arila substituída ou não substituída, 10 cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, -(CH₂CH₂)nOR⁶ ou qualquer grupo bio-hidrolisável;

   R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, 15 alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF3, OCF3, OCHF2, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, NO2, NH2 ou N(R⁷)2;

   20 cada ocorrência de R é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃;

   n é um inteiro de 1 a 7.

   com a condição de que, quando R¹, R², R³, R⁴ e R⁵ forem cada um hidrogênio, Z não seja metila, 2-carbóxi etila, 3-(4-pridinil)propila ou 2-45 (piperidinil) etila.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela fórmula II:

   

   

   ou seus sais, hidratos, clatratos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis, em que Z é arila substituída ou não-substituída, heteroarila 10 substituída ou não-substituída, cicloalquila substituída ou não-substituída, alquila substituída ou não-substituída, alquenila substituída ou nãosubstituída, heterociclo substituído ou não-substituído, arialquila substituída ou não-substituída; e R é hidrogênio ou halogênio.
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado 15 pelo fato de R¹ ser um éster bio-hidrolisável.
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de Z ser p-Tolila; (4-clorometil-fenila); (2-cloropiridin-3-ila); (2-fluoro-fenila); (3,4-difluoro-fenila; (4-metóxi-fenila); benzo[l,3]dioxol-ila; (4-etil-fenila); o-Tolila; (2-cloro-fenila); (3-metil-tiofen-

   20 2-ila); benzo[b]tiofen-2-ila; (3-fluoro-fenila); 4-terc-butil-fenila); (2-metóxifenila); (2-difluoro-fenila); tiofen-2-ila; (2,4-difluoro-fenila); (3-cloro-fenila); m-tolila; (4-trifluorometil-fenila); (4-fluoro-fenila); (3-metóxi-fenila); fenila; (2,6-difluoro-fenila); (2,dimetil-furan-3-ila); (4-pirrol-l-il-fenila); (3dimetilamino-fenila); bifenil-4-ila; (4-dimetilamino-fenila); benzofl,2,5]oxadiazol-ila; m-Tolila; (2-trifluorometil-fenila); (6-cloropiridin-3-ila); (3,bis-trifluorometil-fenila); Furan-2-ila; (4-nitro-fenila); (3,4dimetóxi-fenila); (3-trifluorometóxi-fenila); Naftalen-l-ila; Cicloexila; Piridin-3-ila; Piridin-4-ila; Ciclopentila; Ciclopropila; (4-Pentilóxi-fenila);

   ’5 (3,4-trimetóxi-fenila); (4-isobutil-fenila); ciclobutila; (l-acetil-piperidin-4. ila); Isoxazol-ila; [2-cloro-6-fluoro-fenil)-metil-isoxazol-4-ila] ou [2-clorofenil)-metil-isoxazol-4-ila];
5. 5. Composto caracterizado pelo fato de ser selecionado do grupo consistindo de: ’

   10 Ácido 3-(5-p-Tolila-[l,2,4] oxadiazol-3-ila) -benzóico;

   Ácido 3- (5-(4-Clorometil-fenil)- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico Ácido 3(5-(2-Cloro-piridin-3-ila)- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3- [5-(2-Fluoro-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3- [5-(3,4-Difluoro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   15 Ácido 3- [5-(4-Metóxi-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico;

   Ácido 3-(5-Benzo [l,3]dioxol-5-ila- [1,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

   Ácido 3- [5-(4-Etil-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico; Ácido 3-(5-oTolil- [1,2,4] oxadiazol-3 -ila)-benzóico;

   Ácido 3- [5-(2-Cloro-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico;

   20 Ácido 3- [5-(3-Metil-tiofen-2-ila)- [1, 2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3(5-Benzo[b]tiophen-2-ila-[l,2,4] oxadiazol-3-ila) -benzóico; Ácido [5-(3Fluoro-fenil- [1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3- [5-(4-terc-Butil-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-[5-(2-Metóxi-fenil- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   25 Ácido 3-[5-(2, 5-Difluoro-fenil- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-(5-Tiofen-2-ila- [1,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

   Ácido 3-[5-(2, 4-Difluoro-fenil-[l,2, 4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-[5-(3-Cloro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-mTolil-[1,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico;

   Ácido 3-[5-(4-Trifluorometil-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3[5-(4-Fluoro-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-[5-(3-Metóxi-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico;

   3-(5-Fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-[5-(2,6-Difluoro-fenil'5 [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   . Ácido 3-[5-(2, 5-Dimetilfuran-3-ila)- [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido

   3 - [5 -(4-Pirrol-1 -ila-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3 -ila]-benzóico; Ácido 3 - [5 -(3 Dimetilan±io-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Bifenil-4-il- [1.2.4] oxadiazol-3-il)-benzóico;

   10 Ácido 3-[5-(4-Dimetilamino-fenil- [1,2, 4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Benzo[ 1,2,5]oxadiazol-5-il-[ 1,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-(5m-Tolil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-[5-(2-Trifluorometil-fenil- [1.2.4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(6-Cloro-piridin-3-ila)- [1.2.4] oxadiazol-3 -ila]-benzóico; Ácido 3 - [5 -(3,5 -Bis-Trifluorometil-fenil-

   15 [1,2,4] oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Furan-2-ila-[l,2,4] oxadiazol-3ila)-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Nitro-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-[5-(3, 4-Dimetóxi-fenil- [1,2,4] oxadiazol-3-ila] -benzóico; Ácido 3[5-(3-Trifluorometilóxi-fenil- [l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5Napftalen-l-ila- [1,2,4] oxadiazol-3-ila) -benzóico;

   20 Ácido 3-(5-Cicloexil-[l,2,4] oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3-(5-Piridin-3ila-[l,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-(5-Piridin-4-ila[ 1,2,4]oxadiazol-3 -ila-)benzóico;

   Ácido 3-(5-Ciclopentil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico;

   Ácido 3-(5-Ciclopropil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-[5-(425 Pentilóxi-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-[5-(3, 4,5-Trimetóxi-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3[5-(4-Isobutil-fenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Ciclobutil- [1.2.4] oxadiazol-3-ila)-benzóico; Ácido 3 - [5-(1 -Acetil-piperidin-4-ila)[ 1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Isoxazol-5-ila-[ 1,2,4]oxadiazol

   3-ila-)benzóico; Ácido 3- {5-(3-(2-Cloro-6-fluoro-fenil)-5-metil-isoxazol-4ila] - (1,2,4] oxadiazol-3-ila} -benzóico;

   Ácido 3-(5-Isopropil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico;

   Ácido 3-(5-terc-Butil-[l ,2,4]oxadiazol-3-ila)-benzóico;

   *5 Ácido 3-(5-Butil-[ 1,2,4]oxadiazol-3- ila-)benzóico;

   Ácido 3-(5-Propenil-[l,2,4]oxadiazol-3-ila-)benzóico; Ácido 3-[5-(4-Clorobenzil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Cloro-fenoximetil)[ 1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-Benzil-[l,2,4]oxadiazol-3-il)benzóico; Ácido 3-(5-Metoximetil[l,2,4]oxadiazol-3-il)-benzóico; Ácido 310 [5-(l-Fenil-propil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Fluorobenzil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-[5-(3-Cloro-fenoximetil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila] benzóico;

   Ácido 3-[5-(6-Cloro-piridin-3-il)-[l,2, 4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3(5-Ciclopentilmetil [l,2,4]oxadiazol-3-il)-benzóico; Ácido 3-[5-(4-Metóxi15 benzil)-[l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-(5-(2,3- 3-Difluoro-fenil-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3(5-(2-Fluoro-5-metil-fenil-(1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-(2Metilsulfanil-piridin-3-il)-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-(2,2Difluoro-benzo(l,3]dioxol-5-il)-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   20 Ácido 4-Fluoro-3-(5-(4-fluoro-fenil)-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 2-Fluoro-5-(5-(4-fluoro-fenil)-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5(4-Cloro-2-fluoro-fenil)-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-(4Bromo-2-fluoro-fenil-(l,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-(5-(3-Fluorobifenil-4-il)-(1,2,4]oxadiazol-3-ila]-benzóico; Ácido 3-{5-[3-(2-Cloro-fenil)25 5-metil-isoxazol-4-il]-[l,2,4]oxadiazol-3-ila}-benzóico;

   Sal de sódio do ácido 3-(5-(2-fluoro-fenil)- (l,2,4]oxadiazol-3-il}-benzóico;

   Metil éster do ácido 3-[5-(4-fluoro-fenil)- (l,2,4]oxadiazol-3-il}-benzóico;

   Metil éster do ácido 5-[5-(4-fluoro-fenil)- (1,2,4]oxadiazol-3-ila}-benzóico;

   Ácido 3-(5-(3-fluoro-bifenil-4-il)-(l,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico;

   Ácido3 - [5-(6-pirrolidin-1 -il-piridin-3 -il-[ 1,2,4]oxadiazol-3 -ila} -benzóico; Ácido 3-(5-(6-morfolin-4-il-piridin-3-il)- [ 1,2,4]oxadiazol-3-ila}-benzóico;

   Ácido 3-[5-(3,4,5,6-tetraídro-2H-(l,2’]bipiridinil-5’-il)- (l,2,4]oxadiazol-3ila} -benzóico;

   '5 Ácido 3-[5-(2-fluoro-6-hidróxi-fenil)- [l,2,4]oxadiazol-3-il}-benzóico;

   Metil éster do ácido 3-[5-(2-fluoro-fenil)- (l,2,4]oxadiazol-3-il}-benzóico; 2-metóxi-etil éster do ácido 3-[5-(2-fluoro-fenil)- (l,2,4]oxadiazol-3-ila}benzóico;

   2-(2-metóxi-etóxi)-etil éster do ácido 3-(5-(2-Fluoro-fenil)-(l, 2,4] oxadiazol10 3-ila]-benzóico;

   2-[2-(2-metóxi-etóxi)-etóxi]-etil éster do ácido 3-[5-(2-Fluoro-fenil[ 1,2,4]oxadiazol-3 -ila]-benzóico;

   2-{2-[2-(2-metóxi-etóxi)-etóxi]-etóxi}-etil éster do ácido 3-[5-(2-fluorofenil)- [ 1,2,4]oxadiazol-3 -il]benzóico;

   15 2-(2-{2-[2-(2-metóxi-etóxi)-etóxi]-etóxi}-etóxi)-etil éster do ácido 3-(5-(2fluoro-fenil)-[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico;2-[2-(2-{2-(2-(2 -hidróxi-etóxi)etóxi]-etóxi}-etóxi)-etóxi]-etil éster do ácido 3-(5-(2-Fluoro-fenil-(l,2, 4] oxadiazol-3-ila]-benzóico;

   Ácido 3-(5-(4-amino-fenil)-(l,2,4]oxadiazol-3-il]-benzóico;

   20 Ácido 3-(5-(4-azido-fenil)-(l,2,4]oxadiazol-3-il-benzóico; e

   Ácido 3-(5-(4-benzilóxi-fenil)-( 1,2,4] oxadiazol-3-il]-benzóico e seus sais, hidratos, solvatos, clatratos e estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis.
6. 6. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de 25 compreender um composto como definido na reivindicação 1 ou 5 e um veículo farmaceuticamente aceitável.
7. 7. Forma de dosagem unitária, caracterizada pelo fato de compreender um composto como definido na reivindicação 1 ou 5 e um veículo farmaceuticamente aceitável.
8. 8. Método para modular terminação de translação prematura ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido em uma célula, caracterizado pelo fato de compreender contatar uma célula exibindo terminação de translação prematura ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido, com 5 uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula:

   

   em que:

   Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, 10 heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não substituída;

   R¹ é hidrogênio, arila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou 15 não substituída, -(CH₂CH₂)_nOR⁶ ou qualquer grupo bio-hidrolisável;

   R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída 20 ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF3, OCF3, OCHF2, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, NO2, NH2ouN(R⁷)2;

   cada ocorrência de R é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcóxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃; e

   5 n é um inteiro de 1 a 7.
9. 9. Método de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de compreender contatar uma célula exibindo terminação de translação prematura ou deterioração de mRNA mediada-sem sentido com uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula II:

   

   
10. 10 ou seus sais, hidratos, clatratos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis, Z é arila substituída ou não-substituída, heteroarila substituída ou não-substituída, cicloalquila substituída ou não-substituída, alquila substituída ou não-substituída, alquenila substituída ou não-substituída, heterociclo substituído ou não-substituído, arialquila substituída ou não-substituída; e R é 15 hidrogênio ou halogênio.

    10. Método de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado pelo fato de dita doença ser uma doença genética.
11. 11. Método de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado pelo fato de dita doença genética ser uma doença autoimune,

    20 uma doença sangüínea, uma doença de colágeno, diabetes, uma doença inflamatória ou uma doença do sistema nervoso central.
12. 12. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de a doença autoimune ser artrite reumatóide ou doença de enxerto versus hospedeiro.
13. 13. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de a doença inflamatória ser artrite.
14. 14. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de a doença do sistema nervoso central ser esclerose múltipla, '5 distrofia muscular, lifofuscinose ceróide neuronal infantil tardia, distrofia muscular de Duchenne, mal de Alzheimer, doença de Tay Sachs, uma doença neurodegenerativa ou mal de Parkinson.
15. 15. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de a doença sanguínea ser hemofilia, doença de von Willebrand,

    10 ataxia-telangiectasia, b-talassemia ou pedras dos rins.
16. 16. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de a doença de colágeno ser osteogênese imperfeita ou cirrose.
17. 17. Método de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de a doença genética ser policitemia familiar, imunodeficiência,

    15 doença dos rins, fibrose cística, hipercolesterolemia familiar, retinite pigmentosa, amiloidose, aterosclerose, gigantismo, nanismo, hipotiroidismo, hipertiroidismo, envelhecimento, obesidade, doença de Niemann Pick ou síndrome de Marfan.
18. 18. Método de tratar ou prevenir uma doença genética ou 20 melhorar um ou mais sintomas associados com a ou manifestações de uma doença genética, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um paciente em necessidade uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um composto de Fórmula:

    

    em que

    Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, '5 heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não . substituída;

    R¹ é hidrogênio, arila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou 10 não substituída, -(CH₂CH₂)nOR⁶ ou qualquer grupo bio-hidrolisável;

    R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída 15 ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF3, OCF3, OCHF2, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, NO2, NH2 ou N(R⁷)2;

    cada ocorrência de R⁷ é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, 20 alquinila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃; e n é um inteiro de 1 a 7.

    25
19. 19. Método de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um paciente em necessidade uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um composto de Fórmula II:

    

    ou seus sais, hidratos, clatratos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis, Z é arila substituída ou não-substituída, heteroarila substituída ou não-substituída, cicloalquila substituída ou não-substituída, alquila substituída ou não-substituída, alquenila substituída ou não-substituída, heterociclo substituído ou não-substituído, arialquila substituída ou não-substituída; e R é hidrogênio ou halogênio.
20. 20. Método de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizado pelo fato de dita doença genética ser uma doença autoimune, uma doença sangüínea, uma doença de colágeno, diabetes, uma doença inflamatória ou uma doença do sistema nervoso central.
21. 21. Método de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de a doença autoimune ser artrite reumatóide ou doença de enxerto versus hospedeiro.
22. 22. Método de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de a doença infamatória ser artrite.
23. 23. Método de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de a doença do sistema nervoso central ser esclerose múltipla, distrofia muscular, lipofuscinose ceróide neuronal infantil tardia, distrofia muscular de Duchenne, mal de Alzheimer, doença Tay Sachs, uma doença neurodegenerativa ou mal de Parkinson.
24. 24. Método de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de a doença sangüínea ser hemofilia, doença de Von Willebrand, ataxia-telangiectasia, b-talassemia ou pedras dos rins.
25. 25. Método de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de a doença de colágeno ser osteogênese imperfeita ou cirrose.
26. 26. Método de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado pelo fato de a doença genética ser policitemia familiar, imunodeficiência, doença dos rins, fibrose cística, hipercolestereolomia '5 familiar, retinite pigmentosa, amiloidose, aterosclerose, gigantismo, nanismo, hipotiroidismo, hipertiroidismo, envelhecimento, obesidade, doença de Neimann Pick ou síndrome de Marfan.
27. 27. Método para tratar, evitar ou melhorar câncer ou um ou mais sintomas associados com ou manifestações de câncer, caracterizado pelo

    10 fato de compreender administrar a um paciente em necessidade uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um composto de Fórmula:

    

    em que

    Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída 15 ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não substituída;

    R¹ é hidrogênio, arila substituída ou não substituída,

    20 cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, -(CH₂CH₂)_nOR⁶ ou qualquer grupo bio-hidrolisável;

    R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcóxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF₃, OCF₃, OCHF₂, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, '5 NO2, NH2 ou N(R⁷)₂;

    cada ocorrência de R é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída 10 ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcóxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃; e n é um inteiro de 1 a 7.
28. 28. Método de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um paciente em necessidade uma 15 quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um composto de Fórmula II:

    

    ou seus sais, hidratos, clatratos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis, Z é arila substituída ou não-substituída, heteroarila substituída ou não-substituída, cicloalquila substituída ou não-substituída, alquila substituída 20 ou não-substituída, alquenila substituída ou não-substituída, heterociclo substituído ou não-substituído, arialquila substituída ou não-substituída; e R é hidrogênio ou halogênio.
29. 29. Método de acordo com a reivindicação 27 ou 28, caracterizado pelo fato de dito câncer ser da cabeça e pescoço, olhos, pele, boca, garganta, esôfago, peito, ossos, pulmão, cólon, sigmóide, reto, estômago, próstata, mama, ovários, rins, fígado, pâncreas, cérebro, intestino, coração, adrenais, tumor sólido, sarcoma, carcinomas, fibrossarcoma, mixossarcoma, lipossarcoma, condrossarcoma, sarcoma osteogênico, 5 cordoma, angiossarcoma, endoteliossarcoma, linfagiossarcoma, linfangioendoteliossarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiossarcoma, rabdomiossarcoma, carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula basal, adenocarcinoma, carcinoma de glândula sudorípara, carcinoma de glândula sebácea, carcinoma papilar,

    10 adenocarcinomas papilares, cistadenocrcinoma, carcinoma medular, carcinoma broncogênico, carcinoma de célula renal, hepatoma, carcinoma de duto biliar, cloriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionário, tumor de Wilms, câncer cervical, tumor testicular, carcinoma do pulmão, carcinoma do pulmão de célula pequena, carcinoma da bexiga, carcinoma epitelial, gioma, 15 astrocitoma, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, sarcoma de Kaposi, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma menangioma, melanoma, neuroblastoma, retinoblastoma, um tumor sustentado pelo sangue, leucemia linfoblástica aguda, leucemia de célula-B linfoblástica, leucemia de célula-T linfoblástica aguda, leucemia mieloblástica 20 aguda, leucemia promielocitica aguda, leucemia monoblástica aguda, leucemia eritroleucêmica aguda, leucemia megakarioblástica aguda, leucemia mielomonocítica aguda, leucemia não-linfocítica aguda, leucemia não diferenciada aguda, leucemia mielocítica crônica, leucemia linfocítica crônica, leucemia de células pilosas, mieloma múltiplo ou p5 3-associada.

    25
30. 30. Método de acordo com a reivindicação 18, 19, 27 ou 28, caracterizado pelo fato de o paciente ser um mamífero.
31. 31. Método de acordo com a reivindicação 18, 19, 27 ou 28, caracterizado pelo fato de o composto ser administrado parenteral, transdérmica, mucosa, nasal, bucal, sublingual ou oralmente.
32. 32. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de o composto ser administrado oralmente.
33. 33. Método de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de o composto ser administrado oralmente em uma forma de tablete, líquido ou cápsula.
34. 34. Método de acordo com a reivindicação 18, 19, 27 ou 28, caracterizado pelo fato de a quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz ser de cerca de 1 mg a cerca de 2000 mg por dia.
35. 35. Método de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de a quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz ser de cerca de 5 mg a cerca de 500 mg por dia.
36. 36. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de a quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz ser de cerca de 10 mg a cerca de 200 mg por dia.
37. 37. Método para tratar, prevenir ou melhorar um ou mais sintomas associados com a ou manifestações de uma doença autoimune, uma doença sangüínea, uma doença de colágeno, diabetes ou doença inflamatória, ou uma doença do sistema nervoso central, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um paciente em necessidade uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula:

    

    em que:

    Z é arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, heterociclo substituído ou não substituído, arilalquila substituída ou não substituída;

    R¹ é hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, -(CH₂CH₂)_nOR⁶ ou qualquer grupo bio-hidrolisável;

    R², R³, R⁴, R⁵, e R⁶ são independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída; cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio, CF3, OCF3, OCHF2, CN, COOH, COOR⁷, SO2R⁷, NO2, NH2 ou N(R⁷)2;

    cada ocorrência de R é independentemente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, alquinila substituída ou não substituída, cicloalquila substituída ou não substituída, heterocicloalquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, heteroarila substituída ou não substituída, alcoxi, arilóxi, heteroarilóxi, halogênio ou CF₃; e n é um inteiro de 1 a 7.
38. 38. Método de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de dita doença ser artrite reumatóide, doença de enxerto versus hospedeiro, artrite, esclerose múltipla, distrofia muscular, lipofuscinose ceróide neuronal infantil tardia, distrofia muscular de Duchenne, mal de Alzheimer, doença de Tay Sachs, doença neurodegenerativa, mal de Parkinson, doença de Niemann Pick, hemofilia, doença de Von Willebrand, ataxia-telangiectasia, b-talassemia, pedras dos rins, osteogênese imperfeita, cirrose, policitemia familiar, imunodeficiência, doença dos rins, fibrose cística, hipercolesterolemia familiar, retinite pigmentosa, amiloidose, aterosclerose, gigantismo, nanismo, hipotiroidismo, hipertiroidismo, envelhecimento, obesidade ou sindrome de Marfan.