BRPI0510113B1 - Compostos de tetraciclinas e análogos das mesmas - Google Patents

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Mark G. Charest
Christian D. Lerner
Jason D. Brubacker
Dionicio R. Siegel
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Abstract

SÍNTESE DE TETRACICLINAS E ANÁLOGOS DA MESMA. A presente invenção refere-se à classe tetraciclina de antibióticos tem desempenhado um grande papel no tratamento de doenças infecciosas nos últimos 50 anos. No entanto, o grande uso de tetraciclinas na medicina humana e veterinária levou à resistência entre muitos organismos anteriormente suscetíveis a antibióticos tetraciclina. A síntese modular de tetraciclinas e análogos de tetraciclina descritos provê uma via eficiente e enantiosseletiva para uma variedade de análogos de tetraciclina e policiclinas anteriormente inacessíveis através de sínteses e métodos semisintéticos de tetraciclina anteriores. Esses análogos podem ser usados como agentes antimicrobianos ou agentes antiproliferativos no tratamento de doenças de seres humanos ou outro animais.

Description

Pedidos Relacionados
O presente pedido reivindica prioridade sob 35 U.S.C. § 119(e) para os pedidos de patente provisórios U.S., USSN 60/660.947 depositado em 11 de março, 2005 e USSN 60/573.623 depositado em 21 de maio, 2004, cada um deles é aqui incorporado a título de referência.
Patrocínio do Governo
O trabalho descrito aqui foi patrocinado, em parte, por doações do National Institutes of Health (R01 AI48825) e da National Science Foundation (sociedade pré-doutoral R10964). O governo dos Estados Unidos pode ter certos direitos na invenção.
Antecedentes da Invenção
As tetraciclinas são agentes antimicrobianos de espectro amplo que são amplamente usadas em medicina humana e veterinária (Schappin- ger e outros, "Tetracyclines: Antibiotic Action, Uptake and Resistance Mechanisms" Arch. Microbiol. 165:359-69, 1996; Mitscher, Medicinal Research Series, Vol. 9, The Chemistry of the Tetracycline Antibiotics, Marcel Dekker Inc. New York, 1978). A produção total de tetraciclinas através de fermentação ou semi-síntese é medida nas milhares de toneladas métricas por ano. A primeira tetraciclina, clorotetraciclina (1) (Aureomicina®), foi isolada da bactéria do solo Streptomyces aureofaciens pelo Lederle Laboratories (Wyeth- Ayerst Research) em 1945 (Duggar, Ann. N.Y. Acad. Sci. 51:177-181, 1948; Duggar, Aureomycin and Preparation of Some,. Patente U.S 2,482,055, 1949; incorporada aqui a título de referência). A oxitetraciclina (2) foi isolada logo depois da S. rimosus por cientistas nos Laboratórios da Pfizer (Finlay e outros Science 111:85, 1950). As estruturas de clorotetraciclina e oxitetraci- clina foram elucidadas por cientistas na Pfizer em colaboração com R.B. Woodward e outros na Harvard University (Hochstein e outros J. Am. Chem. Soc. 74:3708-3709, 1952; Hochstein e outros J. Am. Chem. Soc. 75:545575, 1953; Stephens e outros J. Am. Chem. Soc. 74:4976-77, 1952; Stephens e outros J. Am. Chem. Soc. 76:3568-75, 1954). A tetraciclina (3) foi por último preparada através da hidrogenólise de clorotetraciclina e foi verificada reter atividade antimicrobiana de clorotetraciclina e oxitetraciclina e tinha estabilidade aumentada (Boothe e outros J. Am. Chem. Soc. 75:4621, 1953; Conover e outros J. Am. Chem. Soc. 75:4622-23, 1953). A tetraciclina foi mais tarde verificada ser um produto natural de S. aureofaciens, S. viridofa- ciens e S. rimosus.
Figure img0001
Tetraciclina
As tetraciclinas primárias de importância clínica hoje incluem tetraciclina (3) (Boothe e outros J. Am. Chem. Soc. 75:4621, 1953), oxitetra-ciclina (2, Terramicina®) (Finlay e outros Science 111:85, 1950), doxiciclina (Stephens e outros J. Am. Chem. Soc. 85:2643, 1963) e minociclina (Martell e outros J. Med. Chem. 10:44, 1967; Martell e outros J. Med. Chem. 10:359, 1967). As tetraciclinas exercem sua atividade antimicrobiana através da ini- bição da síntese de proteína bacteriana (Bentley e O'Hanlon, Eds., Anti- Infectives: Recent Advances in Chemistry and Structure-Activity Relationships The Royal Society of Chemistry: Cambridge, UK, 1997). A maioria das tetraciclinas é bacteriostática ao invés de bactericida (Rasmussen e outros Antimicrob. Agents Chemother. 35:2306-11, 1991; Primrose and Wardlaw, Ed. "The Bacteriostatic and Bacteriocidal Action of Antibiotics" Sourcebook of Experiments for the Teaching of Microbiology Society for General
Microbiology, Academic Press Ltd., London, 1982). Foi proposto que após a tetraciclina passar pela membrana citoplásmica de uma bactéria ela quelate Mg*2 e este complexo de tetraciclina-Mg2* se liga à subunidade 30S do ri- bossoma bacteriano (Goldman e outros Biochemistry 22:359-368, 1983). A 5 ligação do complexo ao ribossoma inibe a ligação de aminoacil-tRNAs, resultando em inibição da síntese de proteína (Wissmann e outros Forum Mikro- biol. 292-99, 1998; Epe e outros EMBO J. 3:121-26, 1984). As tetraciclinas foram também verificadas se ligar à subunidade 40S de ribossoma eucarióti- co; no entanto, elas não atingem concentrações suficientes em células euca- 10 rióticas para realizar a síntese de proteína porque elas não são ativamente transportadas em células eucarióticas (Epe e outros FES AMPLOLett. 213:443-47, 1987).
Relações de estrutura-atividade para os antibióticos de tetracicli-na foram determinadas empiricamente desde 50 anos de modificação semi- 15 sintética da presente estrutura (Sum e outros Curr. Pharm. Design 4:119-32, 1998). Permutações com a porção esquerda superior do produto natural, também conhecida como o domínio hidrofóbico, proveram novos agentes terapeuticamente ativos, enquanto modificações do domínio hidrofóbico polar resultam em uma perda de atividade. No entanto, semi-síntese por sua 20 natureza absoluta limitou o número de análogos de tetraciclina que podem ser preparados e estudados.
Figure img0002
Tetracycline (3)
Tetraciclina
As tetraciclinas são compostas de quatro anéis de seis membros linearmente fundidos com uma densidade alta de funcionalidade polar e complexidade estereoquímica. Em 1962, Woodward e outros descreveram a primeira síntese total de 6-desmetil-6-desoxitetraciclina racêmica (sanciclina, 4), a tetraciclina biologicamente ativa mais simples (Conover e outros J. Am. Chem. Soc. 84:3222-24, 1962). A via sintética foi uma conquista notável para o momento e progrediu através da construção em etapas dos anéis em uma sequência linear de 22 etapas (rendimento geral -0,003%). A primeira sintese enantiosseletiva de (-)-tetraciclina (3) da D-glicosamina precursora do anel A (34 etapas, 0,002% de rendimento geral) foi descrita por Tatsuda e outros em 2000 (Tatsuta e outros, Chem. Lett., 646-47, 2000). Outras abordagens para a síntese de antibióticos de tetraciclina, que também prosseguiram através da montagem em etapas do sistema de anel ABCD começando com precursores D ou CD, incluem a síntese de Shemyakin de (±)-12a- desóxi-5a,6-anidrotetraciclina (Gurevich e outros Tetrahedron Lett. 8:131, 1967; incorporado aqui a titulo de referência) e a síntese Muxfeldt de (±)-5- oxitetraciclina (terramicina, 22 etapas, 0,06% de rendimento) (Muxfeldt e ou-tros J. Am. Chem. Soc. 101:689, 1979; incorporado aqui a título de referência). Devido ao comprimento e eficiência pobre das poucas vias existentes para tetraciclinas, que nunca foram designadas quanto à variabilidade sintética, as síntese de análogos de tetraciclina é ainda limitada.
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Sancycline (4)
Sanciclina
Permanece a necessidade de uma via sintética prática e eficiente para análogos de tetraciclina, que seja cômoda para a preparação rápida de análogos específicos que possam ser testados quanto à atividade anti- bacteriana aperfeiçoada e potencialmente antitumor. Tal via permitiria a pre-paração de análogos de tetraciclina que não foram preparados antes. Sumário da Invenção
A presente invenção refere-se a abordagens sintéticas para pre-paração de análogos de tetraciclina. Essas abordagens sintéticas são parti-cularmente úteis na preparação de 6-desoxitetraciclinas, que são mais está-veis com relação a ácido e base do que 6-hidroxitetraciclinas. Doxiciclina e minociclina, as duas tetraciclinas mais clinicamente importantes, bem como tigeciclina, um candidato clínico avançado, são membros da classe 6-
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(S)-minociclina
As abordagens são também úteis na preparação de 6-hidroxite- traciclinas, pentaciclinas, hexaciclinas, tetraciclinas C5-substituídas, tetraciclinas C5-não-substituidas, tetraciclinas com anéis D heterocíclicos e outros análogos de tetraciclina.
Essas novas abordagens sintéticas para análogos de tetraciclina envolvem uma síntese convergente do sistema de anel tetracilina usando uma enona quiral altamente funcionalizada (5) como um intermediário- chave. A primeira abordagem envolve a reação da enona com um ânion formado através da desprotonação de um toluato (6) ou metalação de um haleto benzílico conforme mostrado abaixo. A desprotonação de um toluato é particularmente útil na preparação de 6-desoxitetraciclinas com ou sem um substituinte C5. A metalação (por exemplo, troca de metal-halogênio (por exemplo, troca de lítio-halogênio), troca de metal-metalóide (por exemplo, troca de lítio-metalóide)) é particularmente útil na preparação de 6-desoxite- traciclinas com ou sem um substituinte C5 bem como pentaciclinas. Qualquer reagente organometálico pode ser usado no processo de ciclização. Reagentes particularmente úteis podem incluir reagentes de lítio, reagentes Grignard, reagentes de metal valente zero e complexos ato. Em certas modalidades, condições mais suaves para a reação de ciclização podem ser
A segunda .abordagem envolve reação da enona (5) em uma reação do tipo DieJs..AJderpom umdieno (7} ou um benz:ociclobutenol (8).
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Em ambas abordagens, a enona quiral provê os anéis A e B fun- cionalizados do núcleo tetraciclina e o anel D é derivado do toluato (6), hale- to benzilic© ou benzociclobutenol (8). Ao pôr essas duas porções da molécu- 5 la juntas de uma maneira enantiosseletiva o anel C é formado. Essas abordagens não apenas permitem a síntese estereosseletiva e eficiente de uma ampla variedade de análogos de tetraciclina nunca antes preparados, mas também permitem a preparação de análogos de tetraciclina onde o anel D é substituído com um anel de 5 membros, heterociclo, ou outro sistema de 10 anel. Elas também permitem a preparação de várias pentaciclinas ou ciclinas superiores contendo carbociclos e heterociclos aromáticos e não-aromáticos.
Através da oxidação em C6 de análogos de 6-desoxitetraciclina, análogos de 6-oxitettaciclina podem ser preparados conforme mostrado no esquema abaixo:
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A 6-desoxitetraciclina é transformada em um intermediário naftol aromático que sofre auto-oxidação espontânea para formar o hidroperóxido. Hidrogenólise do hidroperóxido resulta na 6-oxitetraciclina. Esta oxidação de análogos de 6-desoxitetraciclina pode ser usada para preparar tetraciclinas onde o anel D é substituído com um anel de 5 membros, heterociclo, ou outros sistemas de anel bem como pentaciclinas e outras policiclinas contendo carbociclos e heterociclos aromáticos e não-aromáticos.
A presente invenção não apenas provê métodos sintéticos para preparação desses análogos de tetraciclina mas também os intermediários, incluindo enonas quirais (5), toluatos (6), dienos (7), haletos benzílicos e benzociclobutenol (8), usados nessas sínteses, e novos derivados acessados através deles.
Algumas das classes amplas de compostos disponíveis através dessas novas abordagens e consideradas ser uma parte da presente invenção incluem tetraciclinas e vários análogos. Subclasses importantes de tetraciclinas incluem 6-desoxitetraciclinas com ou sem um grupo hidroxila C5 e 6-hidroxitetraciclinas com ou sem um grupo hidroxila C5. Muitos dos análogos disponíveis através dessas novas abordagens nunca foram sintetizados antes dadas as limitações de abordagens semi-sintéticas e sínteses totais anteriores. Por exemplo, certas substituições no anel D se tornam acessíveis usando as novas metodologias da presente invenção. Em certas classes de compostos da invenção, o anel D do análogo tetraciclina, que é geralmente um anel fenila, é substituído com uma porção heterocíclica, que pode ser bicíclica ou tricíclica. Em outras classes, o anel D é substituído com um anel não-aromático. O tamanho do anel D não é também limitado a anéis de seis membros, mas do contrário ele pode ser de três membros, quatro membros, cinco membros, seis membros, sete membros ou maior. No caso de pentaci- clinas, os anéis de cinco membros podem ou não ser lineares em disposição. Cada um dos anéis D e E pode ser heterocíclico ou carbocíclico, pode ser aromático ou não-aromático e pode conter qualquer número de átomos variando de três a dez átomos. Ainda, ciclinas superiores tal como hexacicli- nas podem ser preparadas. Em certas classes, o anel C pode não ser completamente formado, levando a diciclinas com o sistema de anel A-B fundido intacto. Os compostos da invenção incluem isômeros, estereoisômeros, e- nantiômeros, diastereômeros, tautômeros, formas protegidas, pró-fármacos, sais e derivados de qualquer composto particular.
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A presente invenção inclui também intermediários úteis na síntese de compostos da presente invenção. Esses intermediários incluem enonas quirais, toluatos, haletos benzílicos e benzociclobutenol. Os intermediários incluem várias formas substituídas, isômeros, tautômeros, estereoisô- meros, sais e seus derivados.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê métodos de tratamento e composição farmacêutica incluindo os compostos da presente invenção. As composições farmacêuticas podem também incluir um excipi- ente farmaceuticamente aceitável. Os métodos e composições farmacêuti- 10 cas podem ser usados para tratar qualquer infecção incluindo cólera, influenza, bronquite, acne, malária, infecções do trato urinário, doenças sexual- mente transmitidas incluindo sífilis e gonorréia, doença de Legionnaires, do-ença de Lyme, febre pintada da Montanha Rochosa, febre Q, tifo, peste bubônica, gangrena gasosa, leptospirose, coqueluche e anthrax. Em certas modalidades, as infecções são causadas por organismos resistentes à tetra- 5 ciclina. Em certos casos, os compostos da invenção exibem atividade anti- neoplásica ou antiproliferativa, caso onde os compostos podem ser úteis no tratamento de doenças tal como câncer, doença autoimune, doenças inflamatórias e retinopatia diabética. Os métodos e composições podem ser usados para tratar doença em seres humanos e outros animais incluindo ani- 10 mais domésticos. Qualquer modo de administração incluindo administração oral e parenteral da composição farmacêutica pode ser usado.
Dado trabalho passado na síntese de tetraciclinas, as estratégias da presente invenção representam um avanço, provendo novas vias sintéticas para tetraciclinas e vários análogos. A habilidade em preparar uma 15 ampla variedade de análogos de tetraciclina e o uso de alguns desses compostos no tratamento de doenças tal como câncer e doenças infecciosas marcam um avanço não apenas na química orgânica sintética mas também na medicina. A classe de antibióticos tetraciclina tem desempenhado um papel principal no tratamento de doenças infecciosas em medicina humana e 20 veterinária nos últimos 50 anos; no entanto, com o grande uso de antibióticos por muitos anos resistência se tornou um problema grande. A presente invenção felizmente permite o desenvolvimento de análogos de tetraciclina com atividade contra organismos resistentes à tetraciclina. Deste modo, os desenvolvimentos descritos aqui vão permitir que a classe de tetraciclina de 25 antibióticos permaneça parte de um armamento médico contra doenças infecciosas.
Definições
Definições de grupos funcionais específicos e termos químicos são descritas em mais detalhes abaixo. Para propósitos da presente inven- 30 ção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica de Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75a Ed., capa interna, e grupos funcionais específicos são geralmente definidos conforme aqui descrito. Ainda, princípios gerais de química orgânica, bem como porções funcionais específicas e reatividade, são descritos em "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, cujos conteúdos em sua totalidade são aqui incorporados a titulo de referên- 5 cia.
Certos compostos da presente invenção podem existir em formas geométricas ou estereoisoméricas particulares. A presente invenção compreende todos tais compostos, incluindo isômeros c/s- e trans-, enantiô- meros R- e S-, diastereômeros, isômeros(D), isômeros (L), suas misturas 10 racêmicas e outras suas misturas, que se encaixem no escopo da invenção. Átomos de carbono assimétricos adicionais podem estar presentes em um substituinte tal como um grupo alquila. Todos tais isômeros, bem como suas misturas, pretendem ser incluídos na presente invenção.
Misturas isoméricas contendo qualquer uma de uma variedade 15 de razões de isômero podem ser utilizadas de acordo com a presente inven- ‘ ção. Por exemplo, onde apenas dois isômeros forem combinados, misturas contendo razões de isômero de 50:50, 60:40, 70:30, 80:20, 90:10, 95:5, 96:4, 97:3, 98:2, 99:1 ou 100:0 são todas compreendidas pela presente invenção. Aqueles versados na técnica vão compreender imediatamente que 20 razões análogas são compreendidas para misturas de isômero mais complexas. Se, por exemplo, um enantiômero particular de um composto da presente invenção for desejado, ele pode ser preparado através de síntese assimétrica, ou através de derivação com um auxiliar quiral, onde a mistura 25 estereoisomérica resultante é separada e o grupo auxiliar clivado para prover os enantiômeros puros desejados. Alternativamente, onde a molécula contém um grupo funcional básico, tal como amino, ou um grupo funcional ácido, tal como carboxila, sais diastereoméricos são formados com um ácido ou base opticamente ativo apropriado, seguido por separação dos diastere- 30 ômeros então formados através de cristalização fracionai ou meios cromato- gráficos bem conhecidos na técnica, e subseqüente recuperação dos enantiômeros puros.
Uma pessoa versada na técnica vai compreender que os métodos sintéticos, conforme aqui descrito, utilizam uma variedade de grupos de proteção. Com o termo "grupo de proteção", conforme aqui usado, se quer dizer que uma porção funcional particular, por exemplo, O, S ou N, é tempo- 5 rariamente bloqueada de modo que a reação pode ser realizada seletivamente em um outro sítio reativo em um composto multifuncional. Em modalidades preferidas, um grupo de proteção reage seletivamente em bom rendimento para dar um substrato protegido que é estável para as reações projetadas; o grupo de proteção deve ser seletivamente removível em bom ren- 10 dimento por reagentes não-tóxicos de preferência, prontamente disponíveis, que não atacam os outros grupos funcionais; o grupo de proteção forma um derivado facilmente separado (com mais preferência sem a geração de novos centros estereogênicos); e o grupo de proteção tem um mínimo de funcionalidade adicional para evitar sítios de reação adicionais. Conforme aqui 15 detalhado, grupos de proteção de oxigênio, enxofre, nitrogênio e carbono podem ser utilizados. Grupos de proteção hidroxila incluem metila, metoxil- metila (MOM), metiltiometila (MTM), f-butiltiometila, (fenildimetilsilil)meto- ximetila (SMOM), benziloximetila (BOM), p-metoxibenziloximetila (PMBM), (4-metoxifenóxi)metila (p-AOM), guaiacolmetila (GUM), f-butoximetila, 20 4-penteniloximetila (POM), siloximetila, 2-metoxietoximetila (MEM), 2,2,2- tricloroetoximetila, bis(2-cloroetóxi)metila, 2-(trimetilsilil)etoximetila (SEMOR), tetraidropiranila (THP), 3-bromotetraidropiranila, tetraidrotiopiranila, 1-meto- xicicloexila, 4-metoxitetraidropiranila (MTHP), 4-metoxitetraidro-tiopiranila, S,S-dióxido de 4-metoxitetraidrotiopiranila, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4- 25 metoxipiperidin-4-ila (CTMP), 1,4-dioxan-2-ila, tetraidrofuranila, tetraidrotiofu- ranila, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ila, 1-etoxietila, 1-(2-cloroetóxi)etila, 1-metil-1-metoxietila, 1-metil-1-benziloxieti- la, 1-metil-1-benzilóxi-2-fluoretila, 2,2,2-tricloroetila, 2-trimetilsililetila, 2-(fenil- selenil)etila, f-butila, alila, p-clorofenila, p-metoxifenila, 2,4-dinitrofenila, ben- 30 zila, p-metoxibenzila, 3,4-dimetoxibenzila, o-nitrobenzila, p-nitrobenzila, p-halobenzila, 2,6-diclorobenzila, p-cianobenzila, p-fenilbenzila, 2-picolila, 4-picolila, /V-óxido de 3-metil-2-picolila, difenilmetila, p,p'-dinitrobenzidrila, 5-dibenzossuberila, trifenilmetila, α-naftildifenilmetila, p-metoxifenildifenilme- t tila, di(p-metoxifenil)fenilmetila, tri(p-metoxifenil)metila, 4-(4’-bromofenaciloxi- fenil)difenilmetila, 4,4',4"-tris(4,5-dicloroftalimidofenil)metila, 4,4',4"-tris(levuli- noiloxifenil)metila, 4,4',4"-tris(benzoiloxifenil)metila, 3-(imidazol-1 -il)bis(4',4"- dimetoxifenil)metila, 1,1-bis(4-metoxifenil)-r-pirenilmetila, 9-antrila, 9-(9- fenil)xantenila, 9-(9-fenil-10-oxo)antrila, 1,3-benzoditiolan-2-ila, S,S-dióxido de benzisotiazolila, trimetilsilila (TMS), trietilsilila (TES), triisopropilsilila (TIPS), dimetilisopropilsilila (IPDMS), dietilisopropilsilila (DEIPS), dimetiltexil- silila, f-butildimetilsilila (TBDMS), f-butildifenilsilila (TBDPS), tribenzilsilila, tri- p-xililsilila, trifenilsilila, difenilmetilsilila (DPMS), f-butilmetoxifenilsilila (TBMPS), formiato, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxia- cetato, p-clorofenoxiacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (levulinato), 4,4-(etilenoditio)pentanoato (levulinoilditioacetal), pivaloato, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilben- ■ " zoato (mesitoato), alquil metil carbonato, carbonato de 9-fluorenilmetila (Fmoc), alquil etil carbonato, alquil 2,2,2-tricloroetil carbonato (Troe), carbo-nato de 2-(trimetilsilil)etila (TMSEC), carbonato de 2-(fenilsulfonil) etila (Psec), carbonato de 2-(trifenilfosfônio) etila (Peoc), alquil isobutil carbonato, 20 alquil vinil carbonato, alquil alii carbonato, alquil p-nitrofenil carbonato, alquil benzil carbonato, alquil p-metoxibenzil carbonato, alquil 3,4-dimetoxibenzil carbonato, alquil o-nitrobenzil carbonato, alquil p-nitrobenzil carbonato, alquil S-benzil tiocarbonato, carbonato de 4-etóxi-1 -naftila, ditiocarbonato de media, 2-iodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromo- metil)benzoato, 2-formilbenzenossulfonato, 2-(metiltiometóxi)etila, 4-(metiltio- metóxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato, 2,6-dicloro-4-metilfenoxiace- tato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1 -dimetil- propil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, isobutirato, monossuccinoato, (E)-2- metil-2-butenoato, o-(metoxicarbonil)benzoato, α-naftoato, nitrato, N,N,N',N'- tetrametilfosforodiamidato de alquila, /V-fenilcarbamato de alquila, borato, dimetilfosfinotioila, 2,4-dinitrofenilsulfenato de alquila, sulfato, metanossulfo- nato (mesilato), benzilsulfonato e tosilato (Ts). Para proteção de 1,2- ou 1,3- dióis, os grupos de proteção incluem metileno acetal, etilideno acetal, 1-f- butiletilideno cetal, 1 -feniletilideno cetal, (4-metoxifenil)etilideno acetal, 2,2,2- tricloroetilideno acetal, acetonida, ciclopentilideno cetal, cicloexilideno cetal, cicloeptilideno cetal, benzilideno acetal, p-metoxibenzilideno acetal, 2,4- dimetoxibenzilideno cetal, 3,4-dimetoxibenzilideno acetal, 2-nitrobenzilideno acetal, metoximetileno acetal, etoximetileno acetal, dimetoximetileno orto éster, 1-metoxietilideno orto éster, 1-etoxietilidina orto éster, 1,2- dimetoxietilideno orto éster, α-metoxibenzilideno orto éster, derivado de 1-(/V,/V-dimetilamino)etilideno, derivado de α-(Δ/,/V'-dimetilamino)benzilideno, 2-oxaciclopentilideno orto éster, grupo di-/-butilsilileno (DTBS), derivado de 1,3-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxanilideno) (TIPDS), derivado de tetra-F butoxidissiloxano-1,3-diilideno (TBDS), carbonatos cíclicos, boronatos cícli-cos, boronato de etila e boronato de fenila. Grupos de proteção amino incluem carbamato de metila, carbamato de etila, carbamato de 9-fluorenilmetila (Fmoc), carbamato de 9-(2-sulfo)fluorenil metila, carbamato de 9-(2,7- dibromo)fluoroenilmetila, carbamato de 2,7-di-t-butil-[9-(10,10-dioxo- 10,10,10,10-tetraidrotioxantil)]metila (DBD-Tmoc), carbamato de 4- metoxifenacila (Fenoc), carbamato de 2,2,2-tricloroetila (Troe), carbamato de 2-trimetilsililetila (Teoc), carbamato de 2-feniletila (hZ), carbamato de 1-(1- adamantil)-1-metiletila (Adpoc), carbamato de 1,1-dimetil-2-haloetila, carba-mato de 1,1-dimetil-2,2-dibromoetila (DB-t-BOC), carbamato de 1,1-dimetil- 2,2,2-tricloroetila (TCBOC), carbamato de 1 -metil-1 -(4-bifenilil)etila (Bpoc), carbamato de 1-(3,5-di-Fbutilfenil)-1-metiletila (FBumeoc), carbamato de 2(2 - e 4’-piridil)etila (Pioc), carbamato de 2-(A/,/V-dicicloexilcarboxamido)etila, carbamato de t-butila (BOC), carbamato de 1-adamantila (Adoc), carbamato de vinila (Voc), carbamato de alila (Alloc), carbamato de 1 -isopropilalila (Ipaoc), carbamato de cinamila (Coc), carbamato de 4-nitrocinnmila (Noc), carbamato de 8-quinolila, carbamato de /V-hidroxipiperidinila, carbamato de alquilditio, carbamato de benzila (Cbz), carbamato de p-metoxibenzila (Moz), carbamato de p-nitrobenzila, carbamato de p-bromobenzila, carbamato de p-clorobenzila, carbamato de 2,4-diclorobenzila, carbamato de 4- metilsulfinilbenzila (Msz), carbamato de 9-antrilmetila, carbamato de difenil- metila, carbamato de 2-metiltioetila, carbamato de 2-metilsulfoniletila, car-bamate de 2-(p-toluenossulfonil)etila, carbamato de [2-(1,3-ditianil)]metila (Dmoc), carbamato de 4-metiltiofenila (Mtpc), carbamato de 2,4- dimetiltiofenila (Bmpc), carbamato de 2-fosfonioetila (Peoc), carbamato de 5 2-trifenilfosfonioisopropila (Ppoc), carbamato de 1,1-dimetil-2-cianoetila, carbamato de m-cloro-p-aciloxibeπzila, carbamato de p-(diidroxiboril)benzila, carbamato de 5-benzisoxazolilmetila, carbamato de 2-(trifluormetil)-6- cromonilmetila (Tcroc), carbamato de m-nitrofenila, carbamato de 3,5- dimetoxibenzila, carbamato de o-nitrobenzila, carbamato de 3,4-dimetóxi-6- 10 nitrobenzila, carbamato de fenil(o-nitrofenil)metila, derivado de fenotiazinil- (IO)-carbonila, derivado de A/'-p-toluenossulfonilaminocarbonila, derivado de A/’-fenilaminotiocarbonila, carbamato de t-amila, tiocarbamato de S-benzila, carbamato de p-cianobenzila, carbamato de ciclobutila, carbamato de ciclo- exila, carbamato de ciclopentila, carbamato de ciclopropilmetila, carbamato 15 de p-deciloxibenzila, carbamato de 2,2-dimetoxicarbonilvinila, carbamato de o-(/V,A/-dimetilcarboxamido)benzila, carbamato de 1,1-dimetil-3-(/\/,A/- dimetilcarboxamido)propila, carbamato de 1,1-dimetilpropinila, carbamato de di(2-piridil)metila, carbamato de 2-furanilmetila, carbamato de 2-iodoetila, carbamato de isoborinila, carbamato de isobutila, carbamato de isonicotini- 20 la, carbamato de p-(p'-metoxifenilazo)benzila, carbamato de 1- metilciclobutila, carbamato de 1-metilcicloexila, carbamato de 1-metil-1- ciclopropilmetila, carbamato de 1-metil-1-(3,5-dimetoxifenil)etila, carbamato de 1-metil-1-(p-fenilazofenil)etila, carbamato de 1-metil-1-feniletila, carbamato de 1-metil-1-(4-piridil)etila, carbamato de fenila, carbamato de p25 (fenilazo)benzila, carbamato de 2,4,6-tri-t-butilfenila, carbamato de 4- (trimetilamõnio)benzila, carbamato de 2,4,6-trimetilbenzila, formamida, ace- tamida, cloroacetamida, tricloroacetamida, trifluoracetamida, fenilacetamida, 3-fenilpropanamida, picolinamida, 3-piridilcarboxamida, derivado de /V-benzoilfenilalanila, benzamida, p-fenilbenzamida, o-nitofenilacetamida, o- 30 nitrofenoxiacetamida, acetoacetamida, (A/’-ditiobenziloxicarbonilamino)ace- tamida, 3-(p-hidroxifenil)propanamida, 3-(o-nitrofenil)propanamida, 2-metil-2- (o-nitrofenóxi)propanamida, 2-metil-2-(o-fenilazofenóxi)propanamida, 4-cloro- butanamida, 3-metil-3-nitrobutanamida, o-nitrocinamida, derivado de A/-acetilmetionina, o-nitrobenzamida, o-(benzoiloximetil)benzamida, 4,5- difenil-3-oxazolin-2-ona, AZ-ftalimida, A/-ditiassuccinimida (Dts), N-2,3- difenilmaleimida, /V-2,5-dimetilpirrol, aduto de A/-1,1,4,4-tetrametildisililaza- 5 ciclopentano (STABASE), 1,3-dimetil-1,3,5-triazaciclohexan-2-ona 5-substi- tuida, 1,3-dibenzil-1,3,5-triazacicloexan-2-ona 5-substituida, 3,5-dinitro-4- piridona 1-substituída, /V-metilamina, AZ-alilamina, A/-[2-(trimetilsilil)etóxi]- metilamina (SEM), A/-3-acetoxipropilamina, A/-(1-isopropil-4-nitro-2-oxo-3- piroolin-3-il)amina, sais de amónio quaternário, AAbenzilamina, /V-di(4- 10 metoxifenil)metilamina, A/-5-dibenzossuberilamina, A/-trifenilmetilamina (Tr), A/-[(4-metoxifenil)difenilmetil]amina (MMTr), /V-9-fenilfluorenilamina (FF), N- 2,7-dicloro-9-fluorenilmetilenoamina, ZV-ferrocenilmetilamino (Fem), /V-óxido de /V-2-picolilamino, A/-1,1-dimetiltiometilenoamina, AAbenzilidenoamina, N-p- metoxibenzilidenoamina, /V-difenilmetilenoamina, /V-[(2-piridil)mesitil]metile- 15 noamina, A/-(A/',A/'-dimetilaminometileno)amina, /V,/V-isopropilidenodiamina, /V-p-nitrobenzilidenoamina, /V-salicilidenoamina, A/-5-clorossalicilidenoamina, A/-(5-cloro-2-hidroxifenil)fenilmetilenoamina, /V-cicloexilidenoamina, A/-(5,5- dimetil-3-oxo-1-cicloexenil)amina, derivado de /V-borano, derivado e ácido N- difenilborônico, A/-[fenil(pentacarbonilcromo ou tungstênio)carbonil]amina, 20 quelato de /V-cobre, quelato de A/-zinco, A/-nitroamina, /V-nitrosoamina, N- óxido de amina, difenilfosfinamida (Dpp), dimetiltiofosfinamida (Mpt), difenil- tiofosfinamida (Ppt), dialquil fosforamidatos, dibenzil fosforamidato, fosfora- midato de difenila, benzenossulfenamida, o-nitrobenzenossulfenamida (Nps), 2,4-dinitrobenzenossulfenamida, pentaclorobenzenossulfenamida, 2-nitro-4- 25 metoxibenzenossulfenamida, trifenilmetilsulfenamida, 3-nitropiridinossulfe- namida (Npis), p-toluenossulfonamida (Ts), benzenossulfonamida, 2,3,6,trimetil-4-metoxibenzenossulfonamida (Mtr), 2,4,6-trimetoxibenzenos- sulfonamida (Mtb), 2,6-dimetil-4-metoxibenzenossulfonamida (Pme), 2,3,5,6- tetrametil-4-metoxibenzenossulfonamida (Mte), 4-metoxibenzenossulfona- 30 mida (Mbs), 2,4,6-trimetilbenzenossulfonamida (Mts), 2,6-dimetóxi-4- metilbenzenossulfonamida (iMds), 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonamida (Pmc), metanossulfonamida (Ms), β-trimetilsililetanossulfonamida (SES), 9-antracenossulfonamida, 4-(4',8'-dimetoxinaftilmetil)benzenossulfonamida (DNMBS), benzilsulfonamida, trifluormetilsulfonamida e fenacilsulfonamida. Grupos de proteção exemplares são detalhados aqui, no entanto, será com-preendido que a presente invenção não pretende ser limitada a esses gru- 5 pos de proteção; pelo contrário, uma variedade de grupos de proteção equivalentes adicionais pode ser prontamente identificada usando os critérios acima e utilizada no método da presente invenção. Ainda, uma variedade de grupos de proteção é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, Third Ed. Greene, T.W. e Wuts, P.G., Eds., John Wiley & Sons, New York: 10 1999, cujos conteúdos em sua totalidade são aqui incorporados a título de referência.
Será compreendido que os compostos, conforme aqui descrito, podem ser substituídos com qualquer número de substituintes ou porções funcionais. Em geral, o termo "substituído" seja precedido pelo termo "opcio- 15 nalmente" ou não e substituintes contidos nas fórmulas da presente invenção referem-se à substituição de radicais hidrogênio na estrutura dada com o radical de um substituinte especificado. Quando mais de uma posição em qualquer dada estrutura pode ser substituída com mais de um substituinte selecionado de um grupo especificado, o substituinte pode ser igual ou dife- 20 rente em cada posição. Conforme aqui usado, o termo "substituído" pretende incluir todos os substituintes permissíveis de compostos orgânicos. Em um aspecto amplo, os substituintes permissíveis incluem substituintes acíclicos e cíclicos, ramificados e não-ramificados, carbocíclicos e heterocíclicos, a- romáticos e não-aromáticos de compostos orgânicos. Para propósitos da 25 presente invenção, heteroátomos tal como nitrogênio podem ter substituintes hidrogênio e/ou quaisquer substituintes permissíveis de compostos orgânicos descritos aqui que satisfaçam as valências dos heteroátomos. Ainda, a presente invenção não pretende ser limitada de modo algum aos substituintes permissíveis de compostos orgânicos. Combinações de substituintes e 30 variáveis pretendidas pela presente invenção são de preferência aquelas que resultam na formação de compostos estáveis úteis no tratamento, por exemplo, de doenças infecciosas ou distúrbios proliferativos. O termo "está- vel", conforme aqui usado, refere-se de preferência a compostos que possu- . em estabilidade suficiente para permitir fabricação e que mantenham a integridade do composto por um período de tempo suficiente para que sejam detectados e de preferência por um período de tempo suficiente para que 5 sejam úteis para os propósitos detalhados aqui.
O termo "alifático", conforme aqui usado, inclui ambos hidrocar- bonos saturados e insaturados, de cadeia reta (isto é, não-ramificados), ramificados, acíclicos, cíclicos ou policíclicos, que são opcionalmente substituídos com um ou mais grupos funcionais. Como será compreendido por uma 10 pessoa versada na técnica, "alifático" pretende incluir aqui, mas não está limitado a, porções alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila e cicloalquinila. Deste modo, conforme aqui usado, o termo "alquila" inclui grupos alquila retos, ramificados e cíclicos. Uma convenção análoga se aplica a outros termos genéricos tal como "alquenila", "alquinila" e similar. Ainda, 15 conforme aqui usado, os termos "alquila", "alquenila", "alquinila" e similar μ compreendem ambos grupos substituídos e não-substituídos. Em certas modalidades, conforme aqui usado, "alquila inferior" é usado para indicar aqueles grupos alquila (cíclicos, acíclicos, substituídos, não-substituídos, ramificados ou não-ramificados) tendo 1-6 átomos de carbono.
Em certas modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila empregados na invenção contêm 1-20 átomos de carbono alifáticos. Em certas outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila empregados na invenção contêm 1-10 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila empregados na inven- 25 ção contêm 1-8 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila empregados na invenção contêm 1-6 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, as porções alquila, alquenila e alquinila empregadas na invenção contêm 1-4 átomos de carbono. Grupos alifáticos ilustrativos incluem então, mas não estão limita- 30 dos a, por exemplo, porções metila, etila, n-propila, isopropila, ciclopropila, - CH2-ciclopropila, vinila, alila, n-butila, sec-butila, isobutila, terc-butila, ciclobu- tila, -CH2-ciclobutila, n-pentila, sec-pentila, isopentila, terc-pentila, ciclopenti- la, -CH2-ciclopentila, n-hexila, sec-hexila, cicloexila, -CH2-cicloexila e similar, que novamente, pode carregar um ou mais substituintes. Grupos alquenila incluem, mas não estão limitados a, por exemplo, etenila, propenila, butenila, 1-metil-2-buten-1-ila e similar. Grupos alquinila representativos incluem, mas 5 não estão limitados a, etinila, 2-propinila (propargila), 1-propinila e similar.
O termo "alcóxi" ou "tioalquila" conforme aqui usado refere-se a um grupo alquila, conforme anteriormente definido, ligado à molécula de origem através de um átomo de oxigênio ou através de um átomo de enxofre. Em certas modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila contêm 1-20 10 átomos de carbono alifáticos. Em certas outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila contêm 1-10 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila empregados na invenção contêm 1-8 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila contêm 1-6 átomos de 15 carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alquila, alquenila e alquinila contêm 1-4 átomos de carbono alifáticos. Exemplos de grupos alcóxi incluem, mas não estão limitados a, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, n-butóxi, terc-butóxi, neopentóxi e n-hexóxi. Exemplos de tioalquila incluem, mas não estão limitados a, metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, n-butiltio e 20 similar.
O termo "alquilamino" refere-se a um grupo tendo a estrutura - NHR', onde R' é alifático, conforme aqui definido. Em certas modalidades, o grupo alifático contém 1-20 átomos de carbono alifáticos. Em certas outras modalidades, o grupo alifático contém 1-10 átomos de carbono alifáticos. Em 25 ainda outras modalidades, o grupo alifático empregado na invenção contém 1-8 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, o grupo alifático contém 1-6 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, o grupo alifático contém 1-4 átomos de carbono alifáticos. Exemplos de grupos alquilamino incluem, mas não estão limitados a, metilamino, etilami- 30 no, n-propilamino, iso-propilamino, ciclopropilamino, n-butilamino, terc- butilamino, neopentilamino, n-pentilamino, hexilamino, cicloexilamino e similar.
O termo "dialquilamino" refere-se a um grupo tendo a estrutura - NRR', onde R e R' são, cada um, um grupo alifático, conforme aqui definido. R e R' podem ser iguais ou diferentes em uma porção dialquilamino. Em certas modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-20 átomos de carbono alifáti- 5 cos. Em outras modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-10 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alifáticos empregados na invenção contêm 1-8 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-6 átomos de carbono alifáticos. Em ainda outras modalidades, os grupos alifáticos contêm 1-4 áto- 10 mos de carbono alifáticos. Exemplos de grupos dialquilamino incluem, mas não estão limitados a, dimetilamino, metil etilamino, dietilamino, metilpropi- lamino, di(n-propil)amino, di(isopropil)amino, di(ciclopropil)amino, di(n- butil)amino, di(terc-butil)amino, di(neopentil)amino, di(n-pentil)amino, di(hexil)amino, di(cicloexil)amino e similar. Em certas modalidades, R e R’ são ligados para formarem uma estrutura cíclica. A estrutura cíclica resultante pode ser aromática ou não-aromática. Exemplos de grupos diaminoalquila cíclicos incluem, mas não estão limitados a, aziridinila, pirrolidinila, piperidini- la, morfolinila, pirrolila, imidazolila, 1,3,4-trianolila e tetrazolila.
Alguns exemplos de substituintes das porções alifáticas acima 20 descritas (e outras) de compostos da invenção incluem, mas não estão limitados a alifáticos; heteroalifático; heteroarila; arilalquila; heteroarilalquila; al- cóxi; arilóxi; heteroalcóxi; heteroarilóxi; alquiltio; ariltio; heteroalquiltio; hete- roariltio; F; Cl; Br; I; -OH; -NO2; -CN; -CF3; -CH2CF3; -CHCI2; -CH2OH; - CH2CH2OH; -CH2NH2; -CH2SO2CH3; -C(O)RX; -CO2(RX); -CON(RX)2; - 25 OC(O)RX; -OCO2RX; -OCON(RX)2; -N(RX)2; -S(O)2RX; -NRX(CO)RX onde cada ocorrência de Rx inclui independentemente, mas não está limitado a, alifático, heteroalifático, arila, heteroarila, arilalquila ou heteroarilalquila, onde qualquer um dos substituintes alifáticos, heteroalifáticos, arilalquila ou hete-roarilalquila descritos acima e aqui podem ser substituídos ou não- 30 substituídos, ramificados ou não-ramificados, cíclicos ou acíclicos, e onde qualquer um dos substituintes arila ou heteroarila descritos acima e aqui podem ser substituídos ou não-substituídos. Exemplos adicionais de substituin- tes geralmente aplicáveis são ilustrados pelas modalidades específicas mostradas nos Exemplos que são descritos aqui.
Em geral, os termos "arila" e "heteroarila", conforme aqui usado, referem-se a porções insaturadas mono- ou policíclicas, heterocíclicas, poli- 5 cíclicas e poli-heterocíclicas estáveis tendo de preferência 3-14 átomos de carbono, cada um dos quais pode ser substituído ou não-substituído. Os substituintes incluem, mas não estão limitados a, qualquer um dos substituintes anteriormente mencionados, isto é, os substituintes mencionados para porções alifáticas, ou para outras porções conforme aqui descrito, resultando na formação de um composto estável. Em certas modalidades da presente invenção, "arila" refere-se a um sistema de anel carbocíclico mono- ou bicí- clico tendo um ou dois anéis aromáticos incluindo, mas não limitado a, fenila, naftila, tetraidronaftila, indanila, indenila e similar. Em certas modalidades da presente invenção, o termo "heteroarila", conforme aqui usado, refere-se a um radical aromático cíclico tendo de a partir de cinco a dez átomos do anel dos quais um átomo no anel é selecionado de S, O e N; zero, um ou dois átomos no anel são heteroátomos adicionais independentemente selecionados de S, O e N; e os átomos no anel restantes são carbono, o radical sendo unido ao resto da molécula através de qualquer um dos átomos no anel, tal como, por exemplo, piridila, pirazinila, pirimidinila, pirrolila, pirazolila, imida- zolila, tiazolila, oxazolila, isoxazolila, tiadiazolila, oxadiazolila, tiofenila, furani- la, quinolinila, isoquinolinila e similar. Será compreendido que grupos arila e heteroarila podem ser não-substituídos ou substituídos, onde a substituição inclui substituição de 25 um, dois, três ou mais dos átomos de hidrogênio neles independentemente com qualquer uma ou mais das porções que seguem incluindo, mas não limitado a: alifático; heteroalifático; arila; heteroarila; arilalquila; heteroarilalqui- la; alcóxi; arilóxi; heteroalcóxi; heteroarilóxi; alquiltio; ariltio; heteroalquiltio; heteroariltio; -F; -Cl; -Br; -I; -OH; -NO2; -CN; -CF3; -CH2CF3; -CHCI2; -CH2OH; -CH2CH2OH; -CH2NH2; -CH2SO2CH3; -C(O)RX; -CO2(RX); -CON(RX)2; -OC(O)RX; -OCO2RX; -OCON(RX)2; -N(RX)2; -S(O)2RX; -NRX(CO)RX, onde cada ocorrência de Rx inclui independentemente, mas não está limitado a, alifático, heteroalifático, arila, heteroarila, arilalquila ou heteroarilalquila, onde qualquer um dos substituintes alifáticos, heteroalifáti- cos, arilalquila ou heteroarilalquila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituido, ramificado ou não-ramificado, cíclico ou acíclico, e 5 onde qualquer um dos substituintes arila ou heteroarila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído. Exemplos adicionais de substituintes geralmente aplicáveis são ilustrados pelas modalidades específicas mostradas nos Exemplos que são descritos aqui.
O termo "cicloalquila", conforme aqui usado, refere-se especifi- 10 camente a grupos tendo três a sete, de preferência três a dez átomos de carbono. Cicloalquila adequada inclui, mas não está limitada a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, cicloeptila e similar, que, como no caso de outras porções alifáticas, heteroalifáticas ou heterocíclicas, pode ser opcionalmente substituída com substituintes incluindo, mas não limitado a, alifáti- 15 co; heteroalifático; arila; heteroarila; arilalquila; heteroarilalquila; alcóxi; ariló- xi; heteroalcóxi; heteroarilóxi; alquiltio; ariltio; heteroalquiltio; heteroariltio; F; - Cl; -Br; -I; -OH; -NO2; -CN; -CF3; -CH2CF3; -CHCI2; -CH2OH; -CH2CH2OH; - CH2NH2; -CH2SO2CH3; -C(O)RX; -CO2(RX); -CON(RX)2; -OC(O)RX; -OCO2RX; - OCON(RX)2; -N(RX)2; -S(O)2RX; -NRX(CO)RX, onde cada ocorrência de Rx in- 20 clui independentemente, mas não está limitado a, alifático, heteroalifático, arila, heteroarila, arilalquila ou heteroarilalquila, onde qualquer um dos substituintes alifáticos, heteroalifáticos, arilalquila ou heteroarilalquila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado, cíclico ou acíclico, e onde qualquer um dos substituintes arila ou 25 heteroarila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído. Exemplos adicionais de substituintes geralmente aplicáveis são ilustrados pelas modalidades específicas mostradas nos Exemplos que são descritos aqui.
O termo "heteroalifático", conforme aqui usado, refere-se a por- 30 ções alifáticas que contêm um ou mais átomos de oxigênio, enxofre, nitrogênio, fósforo ou silício, por exemplo, no lugar de átomos de carbono. Porções heteroalifáticas podem ser ramificadas, não-ramificada, cíclicas ou acíclicas e incluem heterociclos saturados e insaturados tai como morfolino, pirrolidini- la, etc. Em certas modalidades, porções heteroalifáticas são substituídas através de substituição independente de um ou mais átomos de hidrogênio nelas com uma ou mais porções incluindo, mas não limitado a; heteroalifáti- 5 cas; arila; heteroarila; arialquila; heteroarilalquila; alcóxi; arilóxi; heteroalcóxi; heteroarilóxi; alquiltio; ariltio; heteroalquiltio; heteroariltio; F; -Cl; -Br; -I; -OH; - NO2; -CN; -CF3; -CH2CF3; -CHCI2; -CH2OH; -CH2CH2OH; -CH2NH2; - CH2SO2CH3; -C(O)RX; -CO2(RX); -CON(RX)2; -OC(O)RX; -OCO2RX; - OCON(RX)2; -N(RX)2; -S(O)2RX; -NRX(CO)RX, onde cada ocorrência de Rx in- 10 clui independentemente, mas não está limitado a, alifático, heteroalifático, arila, heteroarila, arilalquila ou heteroarilalquila, onde qualquer um dos substituintes alifáticos, heteroalifáticos, arilalquila ou heteroarilalquila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado, cíclico ou acíclico, e onde qualquer um dos substituintes arila ou 15 heteroarila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído.
Exemplos adicionais de substituintes geralmente aplicáveis são ilustrados pelas modalidades específicas mostradas nos Exemplos que são descritos aqui.
Os termos "halo" e "halogênio" conforme aqui usado referem-se 20 a um átomo selecionado de flúor, cloro, bromo e iodo.
O termo "haloalquila" significa um grupo alquila, conforme aqui definido, tendo um, dois ou três átomos de halogênio ligados a ele e é e-xemplificado por grupos tal como clorometila, bromoetila, trifluormetila e similar.
O termo "heterocicloalquila" ou "heterociclo", conforme aqui usa do, refere-se a um anel de 5-, 6- ou 7-membros não-aromático ou um grupo policiclico, incluindo mas não limitado a um grupo bi- ou tri-cíclico compreendendo anéis de seis membros fundidos tendo entre um e três heteroáto- mos independentemente selecionados de oxigênio, enxofre e nitrogênio, on- 30 de (i) cada anel de 5 membros tem 0 a 1 ligação dupla e cada anel de 6 membros tem 0 a 2 ligações duplas, (ii) os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados, (iii) o heteroátomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado e (iv) qualquer um dos anéis heterocí- clicos acima pode ser fundido a um anel benzeno. Heterociclos representativos incluem, mas não estão limitados a, pirrolidinila, pirazolinila, pirazolidini- la, imidazolinila, imidazolidinila, piperidinila, piperazinila, oxazolidinila, isoxa- 5 zolidinila, morfolinila, tiazolidinila, isotiazolidinila e tetraidrofurila. Em certas modalidades, um grupo "heterocicloalquila ou heterociclo substituído" é utilizado e conforme aqui usado, refere-se a um grupo heterocicloalquila ou heterociclo, conforme acima definido, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos átomos de hidrogênio nele mas não está limitado 10 a alifático; heteroalifático; arila; heteroarila; arilalquila; heteroarilalquila; alcó- xi; arilóxi; heteroalcóxi; heteroarilóxi; alquiltio; ariltio; heteroalquiltio; heteroa- riltio; F; -Cl; -Br; -I; -OH; -NO2; -CN; -CF3; -CH2CF3; -CHCI2; -CH2OH; -CH2CH2OH; -CH2NH2; -CH2SO2CH3; -C(O)RX; -CO2(RX); -CON(RX)2; -OC(O)RX; -OCO2RX; -OCON(RX)2; -N(RX)2; -S(O)2RX; -NRX(CO)RX, onde cada ocorrência de Rx inclui independentemente, mas não está limitado a, alifático, heteroalifático, arila, heteroarila, arilalquila ou heteroarilalquila, onde qualquer um dos substituintes alifáticos, heteroalifáti- cos, arilalquila ou heteroarilalquila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado, cíclico ou aciclico, e 20 onde qualquer um dos substituintes arila ou heteroarila descritos acima e aqui pode ser substituído ou não-substituído. Exemplos adicionais de substituintes geralmente aplicáveis são ilustrados pelas modalidades especificas mostradas nos Exemplos que são descritos aqui. "Carbociclo": O termo "carbociclo", conforme aqui usado, refere- 25 se a um anel aromático ou não-aromático onde cada átomo do anel é um átomo de carbono. "Independentemente selecionado": O termo "independentemente selecionado" é usado aqui para indicar que os grupos R podem ser idênticos ou diferentes. "Rotulado": Conforme aqui usado, o termo "rotulado" pretende significar que um composto tem pelo menos um elemento, isótopo ou composto químico ligado para permitir a detecção do composto. Em geral, os rótulos tipicamente se encaixam em três classes: a) rótulos isotópicos, que podem ser isótopos radioativos ou pesados, incluindo, mas não limitado a, 2H, 3H, 32P, 35S, 67Ga, "mTc (Tc-99m), 111In, 123l, 1251, 169lb e 186Re; b) imu- norrótulos, que podem ser anticorpos ou antígenos, que podem ser ligados a enzimas (tal como peroxidase de rábano silvestre) que produzem agentes detectáveis; e c) corantes coloridos, luminescentes, fosforescentes ou fluorescentes. Será compreendido que os rótulos podem ser incorporados ao composto em qualquer posição que não interfira com a atividade biológica ou característica do composto que está sendo detectado. Em certas modalidades, átomos de hidrogênio no composto são substituídos com átomos de deutério (2H) para deixar mais lenta a degradação de composto in vivo. Devido a efeitos de isótopo, a degradação enzimática das tetraciclinas deutera- das pode ser deixada mais lenta deste modo aumentando a meia-vida do composto in vivo. Em certas modalidades da invenção, rotulação de fotoafi- nidade é utilizada para a elucidação direta de interações intermoleculares em sistemas biológicos. Uma variedade de fotóforos conhecidos pode ser empregada, a maioria se apoiando em fotoconversão de compostos diazo, azidas ou diazirinas a nitrenos ou carbenos (vide, Bayley, H., Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology (1983), Elsevier, Amsterdam.), cujos conteúdos em sua totalidade são aqui incorporados a título de referência. Em certas modalidades da invenção, os rótulos de fotoafinida- de empregados são o-, m- e p-azidobenzóis, substituídos com uma ou mais porções halogênio, incluindo, mas não limitado a, ácido 4-azido-2,3,5,6- tetrafluorbenzóico. "Tautômeros": conforme aqui usado, o termo "tautômeros" são isômeros particulares de um composto onde um hidrogênio e ligação dupla mudaram a posição com relação aos outros átomos da molécula. Para um par de tautômeros existir deve haver um mecanismo para interconversão. Exemplos de tautômeros incluem formas ceto-enol, formas imina-enamina, formas de amida-álcool imino, formas amidina-aminidina, formas nitrosooxima, formas de cetona-enotiol, formas /V-nitroso-hidroxiazo, formas nitro- aci-nitro e formas piridinona-hidroxipiridina.
Definições de termos não-químicos usados no pedido incluem: . "Animal": O termo animal, conforme aqui usado, refere-se a se res humanos bem como animais não-humanos, incluindo, por exemplo, mamíferos, aves, répteis, anfíbios e peixe. De preferência, o animal não- 5 humano é um mamífero (por exemplo, um roedor, um camundongo, um rato, um coelho, um macaco, um cachorro, um gato, um primata ou um porco). Um animal não-humano pode ser um animal transgênico. "Associado com": Quando duas entidades estão "associadas uma com a outra" conforme aqui descrito, elas estão ligadas por uma intera- 10 ção covalente ou não-covalente direta ou indireta. De preferência, a associação é covalente. Interações não-covalentes desejáveis incluem ligação de hidrogênio, interações van der Waals, interações hidrofóbicas, interações magnéticas, interações eletrostáticas, etc. "Quantidade eficaz": Em geral, a "quantidade eficaz" de um a- 15 gente ativo ou das micropartículas refere-se a uma quantidade suficiente para elicitar a resposta biológica desejada. Como será compreendido por aqueles versados na técnica, a quantidade eficaz de um composto da invenção pode variar dependendo de fatores tal como o ponto final biológico desejado, os farmacocinéticos do composto, a doença sendo tratada, o modo de 20 administração e o paciente. Por exemplo, a quantidade eficaz de um antibiótico análogo de tetraciclina é quantidade que resulta em uma concentração suficiente no local da infecção para matar o microorganismo causador da infecção (bacteriocida) ou inibir a reprodução de tais microorganismos (bac- teriostático). Em um outro exemplo, a quantidade eficaz de antibiótico análo- 25 go de tetraciclina é a quantidade suficiente para reverter sinais e sintomas clínicos da infecção, incluindo febre, vermelhidão, calor, dor, calafrios, culturas e produção de pus.
Breve Descrição do Desenho
A Figura 1 mostra a síntese modular de tetraciclina e análogos 30 de tetraciclina partindo de ácido benzóico. A Figura 2 mostra a síntese total de (-)-tetraciclina partindo de ácido benzóico e envolvendo uma reação Diels-Alder de o-quinona dimetida entre a enona quiral 10 e o benzociclobutenol 11.0 rendimento geral da síntese da etapa 17 era 1,1%.
A Figura 3 é a síntese total de (-)-doxiciclina em 18 etapas (rendimento geral 8,2%). A síntese inclui a reação da enona quiral 23 com o â- 5 nion 24 para dar o núcleo tetraciclina. As primeiras sete etapas são idênticas às primeiras sete etapas na síntese de (-)-tetraciclina mostrada na Figura 2.
A Figura 4 mostra uma síntese de isoxazol 4 de primeira e segunda gerações usado na síntese de (-)-tetraciclina e (-)-doxiciclina conforme mostrado na Figura 2.
A Figura 5 mostra a síntese de benzociclobutenol 11 usado na síntese de (-)-tetraciclina conforme mostrado na Figura 2.
A Figura 6 mostra a síntese de diciclinas. As diciclinas preservam a região hidrofílica imaginada ser importante para a atividade antimicrobiana das tetraciclinas.
A Figura 7 mostra a síntese de triciclinas via uma reação Diels- Alder com a enona quiral 10 e um dieno (41). As triciclinas preservam a região hidrofílica imaginada ser importante para atividade antimicrobiana.
A Figura 8 mostra a síntese de pentaciclinas. A Figura 9 mostra a síntese de pentaciclinas em ponte através 20 de reação de ânion 47 com uma enona quiral.
A Figura 10 mostra cinco compostos que podem ser usados como plataformas análogas para a síntese de análogos de tetraciclina. A Figura 11 é um esquema mostrando a síntese de um análogo de piridona/hidroxipiridina de sanciclina.
A Figura 12 mostra a síntese total de 6-desoxitetraciclina a partir de ácido benzóico nas 14 etapas (rendimento geral 8%). As primeiras etapas são idênticas às primeiras 10 etapas na síntese de (-)-tetraciclina mostrada na Figura 2.
A Figura 13A mostra a síntese de análogos de piridina de sanci- clina, 7-aza-10-desoxissanciclina. A Figura 13B mostra a síntese de 10- desoxissanciclina.
As Figuras 14A e 14B mostram vários exemplos de heterocicli- nas, análogos de tetraciclina, pentaciclinas e policiclinas potencialmente acessíveis através do método da invenção.
A Figura 15 mostra as estruturas químicas de vários antibióticos de tetraciclina. (-)-Tetraciclina (1) foi primeiro produzida semi-sinteticamente, 5 através de hidrogenólise do produto de fermentação aureomicina (7-clorotetraciclina), mas mais tarde foi verificada ser um produto natural e é agora produzida através de fermentação (M. Nelson, W. Hillen, R. A. Greenwald, Eds., Tetraciclines in Biology, Chemistry and Medicine (Birkhauser Verlag, Boston, 2001); incorporado aqui a título de referência). (-)-Doxiciclina (2) e minociclina (3) são antibióticos não-naturais clinicamente importantes e são ambos fabricados através de transformações químicas multietapa de produtos de fermentação (semi-síntese) (M. Nelson, W. Hillen, R. A. Greenwald, Eds., Tetracyclines in Biology, Chemistry and Medicine (Birkhauser Verlag, Boston, 2001); incorporado aqui a título de referência).
As estruturas 4-6 são representativas de moléculas do tipo tetraciclina que não podem ser preparadas através de qualquer curso semi-sintético conhecido, mas que são agora acessíveis através da montagem convergente mostrada na Figura 15B. A Figura 15B mostra uma seqüência de reação Micha- le-Dieckman generalizada que forma o anel C de tetraciclinas a partir do a- coplamento de precursores de anel D carbaniônico estruturalmente variados com qualquer um dos precursores AB 7 ou 8.
A Figura 16 mostra a transformação de ácido benzóico em 7 etapas no intermediário 14 bicíclico-chave. Este produto é então usado para preparar o precursor enona AB 7 através da seqüência de 4 etapas mostra- 25 da, ou para enona 8, precursor AB para derivados de 6-desóxi-5- hidroxitetraciclina, através da seqüência de 8 etapas mostrada.
A Figura 17 mostra a síntese de antibiótico clinicamente importante (-)-desoxiciclina (2) através do acoplamento convergente do ânion de o-toluato derivado de 18 e do precursor AB enona 8.
A Figura 18 mostra a síntese de 6-desoxitetraciclinas estrutural mente diversas através de acoplamento de precursores de anel D estruturalmente diversos e precursores AB 7 ou 8. O número de etapas e rendimen- tos gerais de ácido benzóico são mostrados em parênteses abaixo de cada estrutura sintetizada. Valores MIC (μg/mL) são também mostrados para teste antibacteriano de célula integral de cada análogo contra microorganismos 5-Gram-positivos e 5-Gram-negativos. MICs correspondentes para tetracicli- 5 na (1), um controle de teste, aparecem na parte inferior.
A Figura 19 mostra um aduto Michael cristalino como o produto de um ânion de lítio e uma enona quiral. A Figura 20 mostra a síntese de pentaciclina através de uma sequência de reação Michael-Dieckman.
A Figura 21 mostra a síntese de vários novos análogos de tetra ciclina e seu precursor de anel D correspondente. Esses compostos representam lacunas significantes nos campos de tetraciclina, da mesma maneira havendo falta na literatura de síntese viável.
A Figura 22 mostra seqüências alternativas para precursores 15 enona AB a partir de ácido 1S,2R-cis-diidroxibenzóico. A Figura 23 mostra novas vias para precursores AB. Essas vias não envolvem a diidroxilação microbiana de ácido benzóico.
Descrição Detalhada de Certas Modalidades Preferidas da Invenção
A presente invenção provê uma estratégia para a síntese de a- 20 nálogos de tetraciclina através de uma síntese convergente usando um intermediário, a enona quiral altamente funcionalizada 9 conforme mostrado abaixo:
Figure img0010
onde R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou 25 não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou alicí- clico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORc; =O; -C(=O)Rc; -CO2RC; -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -NO2; -N(RC)2; -NHC(O)RC; OU -C(RC)3; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porçãalcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou o heteroa- riltio; R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou aliciclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORD; =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SRD; -SORD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; ou -C(RDh;onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he-teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Rs é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou aliciclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORE; -CN; -SCN; -SRE; OU -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Re é selecionado do grupo consistindo em grupos hidrogênio, halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, -CN, -SCN, -SH, alquiltio, ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio ou um grupo de proteção. A enona quiral 9 pode ser reagida com 5 ânions de ftalaldeido, ânions de toluatos, benzociclobutenol ou dienos para dar análogos de tetraciclina incluindo tetraciclinas, diciclinas, triciclinas, pen- taciclinas heterocíclicas, pentaciclinas, policiclinas heterocíclicas e policicli- nas heterocíclicas. Esses novos compostos são testados quanto à atividade antimicrobiana contra micróbios incluindo organismos tradicionalmente sen- 10 síveis à tetraciclina bem como organismos sabidos ser resistentes à tetraciclina. Os compostos verificados ser bacteriocidas ou bacteriostáticos são usados em formulação de agente farmacêutico para o tratamento de infecções em medicina humana e veterinária. Os compostos são também testados quanto à atividade antiproliferativa. Tais compostos são úteis no trata- 15 mento de doenças antiproliferativas incluindo câncer, doenças antiinflamató- rias, doenças autoimunes, neoplasmas benignos e retinopatia diabética. A abordagem da invenção para a síntese de análogos de tetraciclina permite a síntese eficiente de muitos compostos nunca antes preparados ou disponíveis usando vias anteriores e técnicas semi-sintéticas.
Compostos
Os compostos da presente invenção incluem análogos de tetraciclina, análogos de tetraciclina heterocíclicos, diciclinas, triciclinas, pentaciclinas, pentaciclinas heterocíclicas, pentaciclinas em ponte, policiclinas heterocíclicas, policiclinas em ponte e outras policiclinas. Compostos particular- 25 mente úteis da presente invenção incluem aqueles com atividade biológica. Em certas modalidades, os compostos da invenção exibem atividade antimicrobiana. Por exemplo, o composto pode ter uma concentração inibidora média, com relação a uma bactéria particular, de menos do que 50 μg/mL, de preferência menos do que 25 μg/mL, com mais preferência menos do que 30 5 μg/mL e com mais preferência menos do que 1 μg/mL. Por exemplo, a in fecção causada pelos organismos que seguem pode ser tratada com compostos antimicrobianos da invenção. Gram-positivos—Staphylocococcus aureus, Streptococcus Grupo A, Streptococcus viridans, Streptococcus pneumoniae; Gram-negativos—Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoe- ae, Haemofilus influenzae, Escherichia coli, Bacteroidas fragilis, outros Bac- teróides; e Outros—Mycoplasma pneumoniae, Treponema pallidum, Rickett- 5 sia e Chlamydia. Em outras modalidades, os compostos da invenção exibem atividade antiproliferativa.
Em certas modalidades, os análogos de tetraciclina da presente invenção são representados pela fórmula:
Figure img0011
O anel D de 10 pode incluir uma, duas ou três ligações duplas.
Em certas modalidades, o anel D é aromático. Em outras modalidades, o anel D inclui apenas uma ligação dupla, e em ainda outras modalidades, o anel D inclui duas ligações duplas que podem ou não estar em conjugação. O anel D pode ser substituído com vários grupos Rz, Re θ Re conforme definido abaixo.
Em 10, R1 pode ser hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- 20 ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -ON; -SON; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; OU -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é inde-pendentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção 25 heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, Ri é hidrogênio. Em outras modalidades, Ri é alquila, alquenila ou alquinila inferior. Em ainda outras modalidades, Ri é metila, etila, n-propila, ciclopropila ou isopro- pila. Em ainda outras modalidades, R1 é metila.
R2 pode ser hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático 5 cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORB; =0; -C(=O)RB; -CO2RB; -CN; -SCN; -SRB; -SORB; -SO2RB; 10 -NO2; -N(RB)2; -NHC(O)RB; OU -C(RB)3; onde cada ocorrência de RB é inde pendentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, R2 é hidrogê- nio. Em outras modalidades, R2 é hidroxila ou um grupo hidroxila protegido. Em certas modalidades, R2 é alcóxi. Em ainda outras modalidades, R2 é um grupo alquila, alquenila ou alquinila inferior. Em certas modalidades, Ri é metila e R2 é hidroxila. Em outras modalidades, RT é metila e R2 é hidrogênio. Em certas modalidades, Ri e R2 são tomados juntos para formarem um 20 sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico espiro-ligado a 10.
R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila 25 substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORci =0; -C(=O)Rc; -CO2RC; -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -NO2; -N(RC)2; -NHC(O)RC; OU -C(RC)3; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- 30 teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, R3 é hidrogênio. Em outras modalidades, R3 é um grupo hidroxila ou um grupo hidroxila protegido. Em ainda outras modalidades, R3 é alcóxi. Em modalidades ainda adicionais, R3 é alquila, alquenila ou alquinila inferior.
R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORD; =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SRD; -SORD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; OU -C(RD)3; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, R4 é hidrogênio. Em outras modalidades, R4 é um grupo hidroxila ou um grupo hidroxila protegido. Em ainda outras modalidades, R4 é alcóxi. Em modalidades ainda adicionais, R4 é alquila, alquenila ou alquinila inferior. Em certas modalidades, ambos R3 e R4 são hidrogênio. Em outras modalidades, R3 e R4 são tomados juntos para formarem um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico espiro-ligado ao anel B de 10. Rs pode ser hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado; acila substituída ou não-substituida, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORE; -CN; -SCN; -SRE; OU -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, Rs é amino, alquilamino ou dialquilamino; de preferência dimetilamino, dieti- lamino, metil(etil)amino, dipropilamino, metil(propil)amino ou e- til(propil)amino. Em outras modalidades, R5 é hidroxila, hidroxila protegida, ou alcóxi. Em ainda outras modalidades, R5 é sulfidrila, sulfidrila protegida ou 5 alquiltióxi.
R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila 10 substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; OU -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- 15 teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, R7 é hidroxila, hidroxila protegida, alcóxi, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior ou halogênio.
R6 e Re estão ausentes se a linha pontilhada entre os átomos de carbono aos quais R6 e Re estão ligados representar uma ligação, ou são, cada um, selecionados independentemente do grupo consistindo em grupos hidrogênio, halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, 25 -CN, -SCN, -SH, alquiltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino. Em certas modalidades, Re e R8 estão ausentes. Em outras modalidades, Re ou R8 está ausente.
A variável n é um inteiro na faixa de 0 a 8, inclusive. Como será compreendido por um versado na técnica, quando o anel D é aromático n é 30 um inteiro entre 0 e 4, de preferência entre 1 e 3, com mais preferência entre 1 e 2. Em certas modalidades, quando n é 2, os substituintes R7 estão na configuração orto. Em outras modalidades, quando n é 2, os substituintes R7 estão na configuração para. E em ainda outras modalidades, quando n é 2, os substituintes R7 estão na configuração meta.
Uma linha pontilhada na fórmula 10 pode representar uma ligação ou a ausência de uma ligação.
Como será compreendido por um versado na presente técnica, compostos da fórmula 10 incluem seus derivados, formas rotuladas, sais, pró-fármacos, isômeros e tautômeros. Os derivados incluem formas protegidas. Os sais incluem quaisquer sais farmaceuticamente aceitáveis incluindo sais de HCI, HBr, Hl, acetato e ácido graxo (por exemplo, lactato, citrato, miristoleato, oleato, valerato). Em certas modalidades, o composto da invenção existe em forma zwitteriônica em pH neutro com R5 sendo um grupo amino protonado e o grupo C-3 hidroxila desprotonado conforme mostrado na fórmula 10a.
Figure img0012
Isômeros incluem isômeros, diastereômeros e enantiômeros geométricos. Tautômeros incluem ambas formas ceto e enol de porções carbonila bem como várias formas tautoméricas de heterociclos substituídos e não-substituídos. Por exemplo, o anel B conforme mostrado na fórmula 10 inclui uma porção enol conforme desenhado, mas o enol pode existir como a forma ceto em certos compostos conforme mostrado abaixo nas fórmulas 10b e 10c:
Figure img0013
Figure img0014
Outras formas tautoméricas serão compreendidas por um versado na técnica e vão depender do padrão de substituição da estrutura de anel no núcleo. As fórmulas desenhadas são apenas dadas como exemplos e não de modo a representarem a faixa completa de tautômeros que podem 5 existir para um composto particular.
Várias subclasses de compostos da fórmula 10 que incluem um anel D aromático substituído ou não-substituído são mostradas abaixo. Es sas subclasses incluem anel D não-substituído, monossubstituído, dissubsti-
Figure img0015
Figure img0016
onde as definições de Ri, R2, R3, R4 e R5 são conforme acima descrito, e R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não- substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituí- 5 da ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -N02; -N(RG)2; -NHC(O)RG; ou -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, 10 um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, R7 é hidroxila, hidroxila protegida, alcóxi, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior ou halogênio. Em outras mo- 15 dalidades, R7 é alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado. Em ainda outras modalidades, R? é amino, alquilamino ou dialquilamino. Em outras modalidades, R7 é cíclico, heterocíclico, arila ou heteroarila substituída ou não-substituída.
Em certas modalidades, R7 é acila ramificada ou não-ramificada. Várias subclasses de compostos da fórmula 10 que incluem um grupo hidroxila em C10 são mostradas:
Figure img0017
Figure img0018
onde as definições de Rb R2, Ra, R4, R5, RE θ R7 são conforme acima descrito. Em certas modalidades, os compostos são 6-desoxitetraciclinas conforme mostrado nas fórmulas abaixo:
Figure img0019
Figure img0020
me acima descrito.
Em um outro aspecto da invenção, o anel D carbocíclico de tetraciclina é substituído com uma porção heterocíclica ou carbocílica confor- me mostrado na fórmula (11):
Figure img0021
As definições de R1t R2, R3, R4 θ R5 são conforme acima descrito para a fórmula 10. O anel D representado por
Figure img0022
pode ser uma porção arila, heteroarila, carbocíclica ou heterocíclica substituída ou não-substituída, onde cada ocorrência de X é selecionada do grupo consistindo em -O-, -S-, -NR7-, -C(RZ)2-; n é um inteiro na faixa de 1 a 5, inclusive; e as ligações entre por- ções X adjacentes são ou ligações simples ou duplas. Em certas modalida- (X)n des,
Figure img0023
é um sistema de anel policíclico tal como uma porção bicíclica (X)„ ou tricíclica. Em outras modalidades,
Figure img0024
é uma porção monocíclica. Em (X)„ outras modalidades,
Figure img0025
é uma porção heterocíclica substituída ou não- (X)n substituída. Em certas modalidades,
Figure img0026
não é um anel fenila (X). substituído ou não-substituído. Em outras modalidades,
Figure img0027
é uma porção piridinila conforme mostrado:
Figure img0028
Em uma outra modalidade,
Figure img0029
é selecionado do grupo consistindo em Em ainda uma outra modalidade,
Figure img0030
e um anel heterocíclico de cinco membros selecionado do grupo consistindo em:
Figure img0031
Várias tetraciclinas (heterociclinas) da invenção são também mostradas na Figura 14. Outros compostos da invenção incluem pentaciclinas da fórmula:
Figure img0032
modalidades, os anéis do composto são lineares. Em outras modalidades, o (XX, sistema de anel não é linear. Cada ocorrência do anel
Figure img0033
, em certas (Xx, modalidades, é um sistema de anel monociclico. Cada ocorrência de
Figure img0034
(Xx, I é um heterocíclico ou carbocíclico.
Figure img0035
é de três membros, quatro membros, cinco membros, seis membros ou sete membros; de preferência cinco membros ou seis membros. Outras classes de pentaciclinas incluem com-
Figure img0036
Figure img0037
onde Ri, Ra, R3, R4, R5 e R7 são conforme acima definido. Nas fórmulas 12, (X). 13, e 14,
Figure img0038
representa uma porção arila, heteroarila, carbocíclica ou heterocíclica substituída ou não-substituída, onde cada ocorrência de X é selecionada do grupo consistindo em -O-, -S-, -NR8-, -C(R8)2-; n é um inteiro 5 na faixa de 1 a 5, inclusive; e as ligações entre porções X adjacentes são ou (Xx. ligações simples ou duplas. Em certas modalidades,
Figure img0039
é um sistema de anel policíclico tal como uma porção bicíclica ou tricíclica. Em outras modali- (X)o I (XX. dades,
Figure img0040
é uma porção monocíclica. Em outras modalidades,
Figure img0041
é uma porção carbocíclica substituída ou não-substituída, aromática ou não- 10 aromática, por exemplo, um anel fenila. Em ainda outras modalidades, (XX.
Figure img0042
é uma porção heterocíclica substituída ou não-substituída. Em certas (Xx, modalidades,
Figure img0043
é um anel fenila substituído ou não-substituído. Em ou- tras modalidades
Figure img0044
é uma porção piridinila conforme mostrado:
Figure img0045
Em uma outra modalidade,
Figure img0046
é seleçionado do grupo <Xln• sistindo em:
Figure img0047
Em ainda uma outra modalidade,
Figure img0048
é um anel heterocíclico de cinco membros selecionado do grupo consistindo em:
Figure img0049
Várias subclasses da fórmula (12) incluem:
Figure img0050
Figure img0051
Várias subclasses da fórmula (13) incluem:
Figure img0052
Figure img0053
Várias subclasses da fórmula (14) incluem:
Figure img0054
Figure img0055
Várias pentaciclinas da invenção são também mostradas na Figura 14. Em certas modalidades, os análogos de tetraciclina da presente invenção são representados pela fórmula:
Figure img0056
onde X é nitrogênio, enxofre e oxigênio, e Ri, R3, R4, R5, Re. R7, Re. θ n são conforme acima definido com a advertência de que quando X for S ou O, Ri esteja ausente.
Outras classes de compostos da invenção incluem diciclinas da fórmula (15):
Figure img0057
onde R3, R4 e R5 são conforme acima definido. P é hidrogênio ou um grupo de proteção. Rg é hidrogênio; alifático cíclico ou aliciclico; substituído ou não- substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou aliciclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou 10 não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORi; -CN; -SCN; -SRi; ou -N(R|)2; onde cada ocorrência de Ri é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquil- 15 tio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio. Em certas modalidades, R9 é hidrogênio ou (C-i-C6)alquila, alquenila ou alquinila inferior. Em outras modalidades, Rg é um grupo vinila. Em ainda outras modalidades, Rg é um grupo arila substituído ou não-substituído. Em ainda outras modalidades, R9 é um grupo heterocíclico substituído ou não- 20 substituído; R-io é um alifático cíclico ou aliciclico; substituído ou não- substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou aliciclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; porção heteroarila 25 substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada. Em certas modalidades, R10 θ um anel fenila substituído ou não-substituído. Em certas modalidades, R10 é um anel heterocíclico substituído ou não-substituído. Em certas modalidades, Ri0 é um anel arila substituído ou não-substituído. Em outras modalidades, R-i0 é (Ci-C6)alquila, alquenila ou alquinila inferior. Métodos de Sintese
A presente invenção também inclui todas as etapas de metodo-logias usadas na preparação dos compostos da invenção bem como inter- mediários junto com a via sintética. A presente invenção provê a síntese modular de tetraciclinas e seus vários análogos ao unir uma enona quiral altamente funcionalizada, que vai se tomar os anéis A- e B- do núcleo tetra- ciclina, com uma molécula que vai se tornar o anel D do núcleo tetraciclina. A união desses dois intermediários resulta na formação do anel C, de prefe- rência de uma maneira enantiosseletiva. Esta metodologia também permite a síntese de pentaciclinas, hexaciclinas ou sistemas de anel superiores bem como a incorporação de heterociclos no sistema de anel. Em particular, a união desses dois fragmentos inclui várias reações de adição nucleofílica e reações de cicloadição com enona (9) conforme acima descrito.
A síntese começa com a preparação da enona (9) partindo de ácido benzóico. Conforme mostrado na Figura 2, a primeira etapa da síntese envolve a diidroxilação microbiana de ácido benzóico usando Alcaligenes eutrophus. O diol (1 na Figura 2), que é de preferência opticamente puro, então sofre epoxidação direcionada a hidroxila para dar o epóxido alifático (2 na Figura 2). Proteção e rearranjo de epóxido alílico 2 deram o epóxido alíli- co isomérico (3 na Figura 2). O isoxazol metalado (4 na Figura 2) foi adicionado ao epóxido alílico isomérico para dar 5 (Figura 2), que foi subseqüen- temente metalado para fechar o anel de seis membros através de ataque nucleofílico do epóxido. O intermediário 6 (Figura 2) foi então rearranjado, desprotegido e oxidado para dar a enona quiral 9 (Figura 2). Como será compreendido por uma pessoa versada na técnica, funcionalização e rear-ranjo dos intermediários 6, 7, 8 e 9 na Figura 2 vão permitir a preparação de classes diferentes de compostos da invenção.
Em uma modalidade, enona (9) é reagida com um ânion resul- tante da desprotonação de toluato (6). O toluato da fórmula:
Figure img0058
onde Ri é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituí- 5 da ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -N02; -N(RA)2; -NHC(O)RA; OU -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma 10 porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroaril-tio; R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituí-do ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico 15 ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituida, ramificada ou não-ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -S0RG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; or -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he-teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, hete-roarilóxi; ou heteroariltio; e n é um inteiro na faixa de 0 a 3, inclusive; Rg é -ORi; -CN; -SCN; -SR,; ou -N(R|)2; onde cada ocorrência de R-i é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática cíclica ou acíclica, substituída ou não-substituída; uma porção hete- roalifática cíclica ou acíclica, substituída ou não-substituída; uma porção arila substituída ou não-substituída; uma porção heteroarila substituída ou não- substituída; e P é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, grupo (Ci- Ce)alquila inferior, um grupo acila e um grupo de proteção; é desprotonado sob condições básicas (por exemplo, LDA, HMDS) e o ânion resultante é reagido com uma enona da fórmula:
Figure img0059
onde R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou ací-clico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORc; =0; -C(=O)Rc; -CO2RC; -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -NO2; -N(RC)2; -NHC(O)Rc; ou -C(RC)3; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORQ; =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SR0; -SORD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; OU -C(RD)3; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, hete- roarilóxi; ou heteroariltio; R5 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituí-do ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORE; -CN; -SCN; -SRE; OU -N(RE)21 onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porçãalcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, hete- roarilóxi; ou o heteroariltio; R6 é selecionado do grupo consistindo em grupos hidrogênio, halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, -CN, -SCN, -SH, alquiltio, ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; e P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio ou um grupo de proteção: para formar o produto:
Figure img0060
onde Ri, R3, R«, R5, R?,Pen são conforme acima definido; R2 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituí-do ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORB; =0; -C(=O)RB; -CO2RB; -CN; -SCN; -SRB; -SORB; -SO2RB; -N02; -N(RB)2; -NHC(O)RB; ou -C(RB)3; onde cada ocorrência de RB é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, hete-roarilóxi; ou heteroariltio. Como será compreendido por um versado nesta técnica, o toluato pode ser substituído mais em certas modalidades. Ainda, o
Figure img0061
Outros toluatos são mostrados na Figura 21. Em certas modalidades, toluatos policíclicos são usados na seqüência da reação Michael- Dieckman para formar pentaciclinas, hexaciclinas ou ciclinas superiores. Toluatos úteis na preparação de pentaciclinas são exemplificados pela fórmula:
Figure img0062
onde Ri é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; ou -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R7 é independentemente hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; OU -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é inde-pendentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio;
Figure img0063
representa uma porção arila, heteroarila, carbocíclica ou heterocíclica substituída ou não-substituída, onde cada ocorrência de X é selecionada do grupo consistindo em -O-, -S-, -NR8-, -C(Re)2-; R8 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída -C(=O)RH; -NHC(O)RH; OU -C(RH)3; onde cada ocorrência de RH é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção he- teroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio; n é um inteiro na faixa de 1 a 5, inclusive; e as ligações entre as porções X adjacentes ou são ligações simples ou duplas; e R9 é selecionado do grupo consistindo em grupos arila ou heteroarila substituídos ou não-substituídos.
Em uma outra modalidade, enona (9) é reagida com um ânion, que é gerado através de metalação (por exemplo, troca de metal-halogênio, troca de metal-metalóide, troca de lítio-halogênio, troca de lítio-estanho, etc, através de reação do toluato com um reagente de metal apropriado) de um toluato da fórmula que segue:
Figure img0064
onde RÍ é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORAJ =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; ou -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; OU -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou o heteroariltio; n é um inteiro na faixa de 0 a 3, inclusive; Rg é selecionado do grupo consistindo em grupos arila ou heteroarila substituídos ou não-substituídos; e Y é halogênio ou Sn(RY)3. onde RY é alquila. O ânion gerado é reagido com uma enona da fórmula:
Figure img0065
onde R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORC; =0; -C(=O)Rc; -CO2Rc; -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -NO2; -N(RC)2; -NHC(O)RC; OU -C(RC)31 onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou o heteroariltio; R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORD; =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SRD; -SORD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; OU -C(RD)3; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Rs é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORE; -CN; - SCN; -SRE; OU -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Re é selecionado do grupo consistindo em grupos hidrogênio, halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, -CN, -SCN, -SH, alquiltio, ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; e P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio ou um grupo de proteção; para formar o produto de fórmula:
Figure img0066
onde Ri, R3, R4, Rs, R7, Pen são conforme acima definido; R2 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORB; =0; -C(=O)RB; -CO2RB; -CN; -SCN; -SRB; -SORB; -SO2RB; -NO2; -N(RB)2; -NHC(O)RB; OU -C(RB)3; onde cada ocorrência de RB é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio. Qualquer metal pode ser usado na reação de metalação para gerar o reagente aniônico de metal a ser reagido com a enona. Em certas modalidades, o metal é um elemento do Grupo I na tabela periódica. Em outras modalidades, o metal é um elemento do Grupo II na tabela periódica. Em outras modalidades, o metal é um metal de transição. Metais exemplares úteis na reação de metalação incluem sódio, litio, cálcio, alumínio, cádmio, cobre, berílio, arsênico, antimônio, estanho, magnésio, titânio, zinco, manganês, ferro, cobalto, níquel, zinco, platina, paládio, mercúrio e rutênio. Em certas modalidades preferidas, o metal é escolhido de litio, magnésio, titânio, zinco e cobre. Em ainda outras modalidades, o metal é magnésio, litio, só- dio, berílio, zinco, mercúrio, arsênico, antimônio ou estanho. Em certas modalidades particulares, uma troca de lítio-halogênio é usada. A troca de lítio- halogênio pode ser realizada in situ na presença da enona. A troca de lítio- halogênio pode ser realizada usando qualquer reagente de litio incluindo, por 5 exemplo, reagentes de alquillítio, n-butillítio, t-butillitio, fenillítio, mesitillítio e metillítio. Em certas modalidades, outros reagentes organometálicos são gerados e reagidos com a enona. Exemplos incluem reagentes Grignard, complexos de metal zero-valente, complexos ate, etc. Em certas modalidades, o reagente metal é um reagente de magnésio incluindo, mas não limita- 10 do a, metal de magnésio, antraceno de magnésio, giros de magnésio ativo, etc. Em certas modalidades, o reagente é à base de zinco. O reagente pode ser gerado in situ na presença da enona, ou o reagente pode ser gerado separadamente e mais tarde contatado com a enona. Em certas modalidades, condições mais suaves para a ciclização são usadas (por exemplo, um rea- 15 gente de zinco). Como será compreendido por um versado na técnica, o toluato pode ser substituído mais em certas modalidades. Ainda, o anel fenila do toluato pode substituir um anel heterocíclico aromático ou sistema de anel tal como um anel piridina. Exemplos de análogos carbocíclicos e heterocíclicos 20 de toluato incluem:
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Em certas modalidades, o halogênio Y é bromo. Em outras mo dalidades, Y é iodo. Em ainda outras modalidades, Y é cloro. Em certas mo dalidades, Y é um metalóide (por exemplo, estanho, selênio, telúrio, etc). Em certas modalidades Y é -SnR3, onde cada ocorrência de R é independente- mente alquila (por exemplo, -Sn(CH3)3). Após a reação de metalação, Y é um metal tal como litio, magnésio, zinco, cobre, antimônio, sódio, etc. Em certas modalidades, Ri é hidrogênio ou (CrCeJalquila inferior. Em certas modalidades particulares, Ri é hidrogênio. Outros toluatos são mostrados na Figura 21.
Em outras modalidades, os toluatos policíclicos podem ser usa- dos para preparar pentaciclinas, hexaciclinas ou ciclinas superiores. Toluatos úteis na preparação de tais ciclinas são da fórmula:
Figure img0068
onde Ri é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; OU -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; cada R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; ou -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio;
Figure img0069
representa uma porção arila, heteroarila, carbocíclica ou heterocíclica substituída ou não-substituída, onde cada ocorrência de X é selecionada do grupo consistindo em -O-, -S-, -NR8-, -C(Re)2-; R8 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituida, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORH; =0; -C(=O)RH; -CO2RH; -CN; -SCN; -SRH; -SORH; -SO2RH; -NO2; -N(RH)2; -NHC(O)RH; OU -C(RH)31 onde cada ocorrência de RH é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio; n é um inteiro na faixa de 1 a 5, inclusive; e as ligações entre as porções X adjacentes ou são ligações simples ou duplas; e R9 é selecionado do grupo consistindo em grupos arila ou heteroarila substituídos ou não-substituídos; e Y é um halogênio ou SΠ(RY)3, onde Ry é alquila. Em certas modalidades, o halogênio Y é bromo. Em outras modalidades, Y é iodo. Em ainda outras modalidades, Y é cloro. Em certas modalidades, Y é um meta- lóide (por exemplo, estanho, selênio, telúrio, etc). Em certas modalidades, Y é -SnR3, onde cada ocorrência de R é independentemente alquila (por exemplo, -Sn(CH3)3). Após a reação de metalação, Y é um metal tal como litio, magnésio, zinco, cobre, sódio, mercúrio, antimônio, etc. Em certas modalidades, Ri é hidrogênio ou (Ci-C6)alquila inferior. Em certas modalidades particulares, Ri é hidrogênio. Em certas modalidades, R9 é fenila ou fenila substituída. Em certas modalidades, orto-R? é alcóxi tal como metóxi. Em outras modalidades, R7 é hidrogênio. Toluatos policíclicos exemplares inclu em:
Figure img0070
Os compostos da fórmu:la abaixo com um anel heterocídrco C:
Figure img0071
podem ser preparados através de fechamento Michael-Dieckman de um precursor de anel D derivado da anilida, fenol ou tiofenol correspondente. Um exemplo representativo usando ácido antranilico (isto é, anilida como o
Figure img0072
Em uma outra modalidade, a enona (9) é reagida com um ben- zociclobutenol em uma reação Diels-Alder de o-quinona dimetida. A enona da fórmula:
Figure img0073
onde R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORC; =0; -C(=O)Rc; -CO2Rc: -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -NO2; -N(RC)2; -NHC(O)RC; ou -C(Rc)a; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORD, =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SRD; -S0RD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; OU -C(RD)3; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio; R5 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituí- do ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORE; -CN; -SCN; -SRE; OU -N(RE)2’. onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R6 é selecionado do grupo consistindo em grupos hidrogênio, halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, -CN, -SCN, -SH, alquiltio, ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; e P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio ou um grupo de proteção; é reagido sob condições adequadas (por exemplo, calor) com um benzociclobutenol da fórmula:
Figure img0074
onde Ri é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; ou -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; OU -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Cada P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio ou um grupo de proteção;.e n é um inteiro na faixa de 0 a 3, inclusive; para formar o produto da fórmula:
Figure img0075
onde Rb R3, R4, Rs, R7e P são conforme acima definido; e R2 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORB; =0; -C(=O)RB; -CO2RB; -CN; -SCN; -SRB; -SORB; -SO2RB; -NO2; -N(RB)2; -NHC(O)RB; OU -C(RB)3; onde cada ocorrência de RB é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, hete- roarilóxi; ou heteroariltio. Como será compreendido por um versado nesta técnica, os reagentes podem ser substituídos mais e ainda se encaixarem na invenção reivindicada. Por exemplo, o anel fenila do anel benzociclobutenol pode ser substituído mais.
Em uma outra modalidade, a enona é reagida com um dieno em uma reação Diels-Alder para dar uma triciclina. A enona da fórmula:
Figure img0076
onde R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORc; =0; -C(=O)Rc; -CO2Rc; -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -NO2; -N(RC)2; -NHC(O)Rc; ou -C(RC)3; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituida, ramificada ou não-ramificada; -ORD; =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SRD; -SORD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; OU -C(RD)3; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R5 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico 5 ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORE; -CN; -SCN; -SRE; OU -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente 10 um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Re é selecionado do grupo consistindo em grupos hidrogênio, 15 halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, -CN, -SCN, -SH, alquiltio, ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; conforme acima definido; e P é independentemente selecionado do grupo consistindo em 20 hidrogênio ou um grupo de proteção; é reagido sob condições adequadas (por exemplo, calor) com um dieno da fórmula:
Figure img0077
onde R1 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila 25 substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; ou -C(RA)3I onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio;
Cada P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio e grupos de proteção; Para dar uma triciclina protegida da fórmula:
Figure img0078
onde R2 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não- ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não- ramificada; -ORB; =0; -C(=O)RB; -CO2RB: -CN; -SCN; -SRB; -SORB; -SO2RB; -NO2; -N(RB)21 -NHC(O)RB; OU -C(RB)3’, onde cada ocorrência de RB é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio. Como será compreendido por um versado nesta técnica, a enona e o dieno podem ser substituídos mais e ainda ser compreendidos dentro da presente invenção.
Em ainda uma outra modalidade, a enona é reagida com um ânion de uma ftalida ou ciano-ftalida. A enona da fórmula:
Figure img0079
onde R3 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituí- 5 da ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORc; =0; -C(=O)Rc; -CO2RC; -CN; -SCN; -SRC; -SORC; -SO2RC; -N02; -N(RC)2; -NHC(O)Rc; ou -C(RC)3; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma 10 porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R4 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico 15 ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORD; =0; -C(=O)RD; -CO2RD; -CN; -SCN; -SRD; -SORD; -SO2RD; -NO2; -N(RD)2; -NHC(O)RD; OU -C(RD)3Í onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R5 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituí do ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORE; -CN; -SCN; -SRE; OU -N(RE)2Í onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; Re é selecionado do grupo consistindo em grupos hidrogênio, halogênio, alifático substituído ou não-substituído, heteroalifático substituído ou não-substituído, alcóxi substituído ou não-substituído, -OH, -CN, -SCN, -SH, alquiltio, ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; conforme acima definido; e P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio ou um grupo de proteção; é reagido sob condições adequadas (por exemplo, LDA, PhaCLi) com o ânion da ftalida da fórmula:
Figure img0080
onde RT é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORA; =0; -C(=O)RA; -CO2RA; -CN; -SCN; -SRA; -SORA; -SO2RA; -NO2; -N(RA)2; -NHC(O)RA; OU -C(RA)3; onde cada ocorrência de RA é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio; R7 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituí- do ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORG; =0; -C(=O)RG; -CO2RG; -CN; -SCN; -SRG; -SORG; -SO2RG; -NO2; -N(RG)2; -NHC(O)RG; OU -C(RG)3; onde cada ocorrência de RG é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou porção heteroariltio;
Cada P é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, grupo alquila inferior, grupo acila ou um grupo de proteção; e n é um inteiro na faixa de 0 a 3, inclusive; para formar o produto da fórmula:
Figure img0081
onde R2 é hidrogênio; halogênio; alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; heteroalifático cíclico ou acíclico, substituído ou não-substituído, ramificado ou não-ramificado; acila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; arila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; heteroarila substituída ou não-substituída, ramificada ou não-ramificada; -ORB; =0; -C(=O)RB; -CO2RB; -CN; -SCN; -SRB; -SORB; -SO2RB; -NO2; -N(RB)2; -NHC(O)RB; ou -C(RB)3; onde cada ocorrência de RB é independentemente um hidrogênio, um grupo de proteção, uma porção alifática, uma porção heteroalifática, uma porção acila; uma porção arila; uma porção heteroarila; porção alcóxi; arilóxi; alquiltio; ariltio; amino, alquilamino, dialquilamino, heteroarilóxi; ou heteroariltio.
Os produtos das reações acima são então funcionalizados, re duzidos, oxidados, rearranjados, protegidos e desprotegidos mais para dar o produto desejado final. Várias reações exemplares usadas nas sínteses finais dos compostos da invenção são mostradas nas Figuras 2, 3, 11, 12 e 13. Como será compreendido por um versado na técnica, várias técnicas de 5 isolamento e purificação incluindo cromatografia instantânea, cristalização, destilação, HPLC, cromatografia de camada fina, extração, filtragem, etc. podem ser usadas durante a sintetização de compostos da invenção. Essas técnicas podem ser usadas na preparação ou purificação de intermediários, reagentes, produtos, materiais de partida ou solventes.
Composições Farmacêuticas
A presente invenção também provê uma preparação farmacêutica compreendendo pelo menos um dos compostos conforme acima descrito e aqui, ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, compostos que inibem o crescimento de ou matam microorganismos, e, em certas modali- 15 dades, de interesse especial são aqueles que inibem o crescimento de ou matam os organismos resistentes à tetraciclina incluindo organismos resistentes à clortetraciclina, organismos resistentes à oxitetraciclina, organismos resistentes à demeclociclina, organismos resistentes à desoxiciclina, orga-nismos resistentes à minociclina ou quaisquer organismos resistentes a anti- 20 bióticos da classe tetraciclina usados em medicina humana ou veterinária. Em outras modalidades, os compostos mostram atividade citostática ou cito- tóxica contra células neoplásticas tal como células de câncer. Em ainda outras modalidades, os compostos inibem o crescimento ou morte de células em divisão rápida tal como células inflamatórias estimuladas.
Conforme acima discutido, a presente invenção provê compos tos tendo atividade antimicrobiana e antiproliferativa, e então os compostos da invenção são úteis para o tratamento de uma variedade de condições médicas incluindo doenças infecciosas, câncer, doenças autoimunes, doenças inflamatórias e retinopatia diabética. Deste modo, em um outro aspecto 30 da presente invenção, as composições farmacêuticas são providas, onde essas composições compreendem qualquer um dos compostos conforme aqui descrito, e opcionalmente compreendem um veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, essas composições compreendem ainda opcionalmente um ou mais agentes terapêuticos adicionais, por exemplo, um outro agente antimicrobiano ou um outro agente antiproliferativo. Em outras modalidades, essas composições compreendem ainda um agente antiinfla- matório tal como aspirina, ibuprofeno, acetaminofeno, etc, aliviador de dor ou antipirético.
Será também compreendido que certos dos compostos da presente invenção podem existir na forma livre para tratamento, ou, onde apropriado, como um seu derivado farmaceuticamente aceitável. De acordo com a presente invenção, um derivado farmaceuticamente aceitável inclui, mas não está limitado a, sais, ésteres, sais de tais ésteres, farmaceuticamente aceitáveis ou qualquer outro aduto ou derivado que quando da administração a um paciente com necessidade seja capaz de prover, diretamente ou indiretamente, um composto conforme de outro modo aqui descrito, ou um seu metabólito ou resíduo, por exemplo, um pró-fármaco.
Conforme aqui usado, o termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se àqueles sais que são, dentro do escopo do julgamento médico importante, adequados para uso em contato com os tecidos humanos e animais inferiores sem toxidez, irritação, resposta alérgica e similar indevida, e são proporcionados com uma razão de beneficio/risco razoável. Os sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, S.M. Berge, e outros descreve sais farmaceuticamente aceitáveis em detalhes em J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, 1977; incorporado aqui a título de referência. Os sais podem ser preparados in situ durante isolamento e purificação finais dos compostos da invenção ou separadamente através de reação da funcionalidade de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado. Exemplos de sais de adição de ácidos não-tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis, são sais de um grupo amino formado com ácidos inorgânicos tal como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico ou com ácidos orgânicos tal como ácido acético, ácido oxálico, ácido maléico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malônico ou usando outros métodos usados na técnica tal como troca de ion. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adipate, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, formiato, fumarato, glucoeptona- to, glicerofosfato, gluconato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, iodrato, 2-hidróxi-etanossulfonato, lactobionato, lacatato, laurato, lauril sulfato, mala- to, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinate, persulfate, 3-fenilpropionato, fosfato, picrate, pivalate, propionate, estearato, succinate, sulfato, tartrate, tiocianato, p-toluenossulfonato, undecanoato, valerate e similar. Sais de metal alcalino ou alcalino-terroso representativos incluem sais de sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio e similar. Sais farmaceuticamente aceitáveis adicionais incluem, quando apropriado, cátions de amónio, amónio quaternário e amina não-tóxicos formados usando contra-ions tal como haleto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonate de alquila inferior e sulfonate de arila.
Ainda, conforme aqui usado, o termo "éster farmaceuticamente aceitável" refere-se a ésteres que hidrolisam in vivo e inclui aqueles que quebram prontamente no corpo humano para deixar o composto de origem ou um seu sal. Os grupos éster adequados incluem, por exemplo, aqueles derivados de ácidos carboxilicos farmaceuticamente aceitáveis, particularmente, ácidos alcanóicos, alquenóicos, cicloalcanóicos e alcanodióicos, onde cada porção alquila ou alquenila vantajosamente não tem mais do que 6 átomos de carbono. Exemplos de ésteres particulares incluem formiatos, acetatos, propionates, butiratos, acrilatos e etilsuccinatos. Em certas modalidades, os ésteres são clivados por enzimas tal como estearases.
Ainda, o termo "pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis" conforme aqui usado refere-se àqueles pró-fármacos dos compostos da presente invenção que são, dentro do escopo do julgamento médico importante, adequadas para uso em contato com os tecidos de humanos e animais inferiores com toxidez, irritação, resposta alérgica e similar indevida, proporcionada com uma razão de benefício/risco razoável e eficaz para seu uso pre- tendido, bem como as formas zwitteriônicas, onde possível, dos compostos da invenção. O termo "pró-fármaco" refere-se a compostos que são rapidamente transformados in vivo para dar o composto de origem da fórmula acima, por exemplo, através de hidrólise em sangue. Uma discussão integral é 5 provida em T. Higuchi e V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 do A.C.S. Symposium Series e em Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association e Pergamon Press, 1987, ambos aqui incorporados a título de referência.
Conforme acima descrito, as composições farmacêuticas da 10 presente invenção compreendem ainda um veículo farmaceuticamente aceitável, que, conforme usado aqui, inclui qualquer um e todos os solventes, diluentes ou outros veículos líquidos, auxiliares de dispersão ou suspensão, agentes tensoativos, agentes isotõnicos, agentes de espessamento ou e- mulsificantes, conservantes, aglutinantes sólidos, lubrificantes e similar, con- 15 forme adequado para a forma de dosagem particular desejada. Remington's Pharmaceutical Sciences, Décima Quinta Edição, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1975) descreve vários veículos usados na formulação de composições farmacêuticas e técnicas conhecidas para sua preparação. Exceto enquanto qualquer meio veículo convencional for incompatível 20 com os compostos anticâncer da invenção, tal como através de produção de qualquer efeito biológico indesejado ou outra interação de uma maneira prejudicial com qualquer outro(s) componente(s) da composição farmacêutica, seu uso é compreendido estar dentro do escopo da presente invenção. Alguns exemplos de materiais que podem servir como veículos farmaceutica- 25 mente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, açúcares tal como lactose, glicose e sacarose; amidos tal como amido de milho e amido de batata; celulose e seus derivados tal como carboximetil celulose de sódio, etil celulose e acetato de celulose; tragacanto em pó; malte; gelatina; talco; Cremo- phor; Solutol; excipientes tal como manteiga de cacau e ceras de supositó- 30 rio; óleos tal como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão; óleo de açafrão; óleo de sésamo; óleo de oliva; óleo de milho e óleo de soja; glicóis; tal como propileno glicol; ésteres tal como oleato de etila e laurato de etila; ágar; agentes de tamponamento tal como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; ácido algínico; água livre de pirogênio; solução salina isotônica; 4 solução de Ringer; álcool etílico e soluções de tampão de fosfato, bem como outros lubrificantes compatíveis não-tóxicos tal como lauril sulfato de sódio e 5 estearato de magnésio, bem como agentes de coloração, agentes de liberação, agentes de revestimento, adoçante, agentes de aromatização e perfume, conservantes e antioxidantes podem também estar presente na composição, de acordo com o julgamento do formulador.
Usos de Compostos e Composições Farmacêuticas
A invenção provê ainda um método de tratamento de infecções e inibição de crescimento de tumor. O método envolve a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável a um indivíduo (incluindo, mas não limitado a, humano ou animal) com necessidade dele.
Os compostos e composições farmacêuticas da presente inven ção podem ser usados no tratamento ou prevenção de quaisquer doença ou , condições incluindo infecções (por exemplo, infecções da pele, infecção do Gl, infecções do trato urinário, infecções genito-urinárias, infecções sistêmi-cas), doenças proliferativas (por exemplo, câncer) e doenças autoimunes (por exemplo, artrite reumatóide, lúpus). Os compostos e composições far-macêuticas podem ser administrados a animais, de preferência mamíferos (por exemplo, animais domesticados, gatos, cachorros, camundongos, ratos) e com mais preferência seres humanos. Qualquer método de administração pode ser usado para aplicar o composto de composições farmacêuticas ao animal. Em certas modalidades, o composto ou composição farmacêutica é administrado oralmente. Em outras modalidades, o composto ou composição farmacêutica é administrado parenteralmente.
Em um outro aspecto, de acordo com os métodos de tratamento da presente invenção, bactérias são mortas ou seu crescimento é inibido 30 através de contato das bactérias com um composto ou composição da invenção, conforme aqui descrito. Deste modo, em ainda um outro aspecto da invenção, um método para o tratamento de infecção é provido, compreen dendo administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou uma composição farmacêutica compreendendo um composto da invenção a um indivíduo com necessidade dele, em tais quantidades e por tempo tal conforme necessário para atingir o resultado desejado. Em certas modalidades da presente invenção, uma "quantidade terapeuticamente eficaz" do composto ou composição farmacêutica da invenção é aquela quantidade eficaz para matar ou inibir o crescimento de bactérias. Os com-postos e composições, de acordo com o método da presente invenção, podem ser administrados usando qualquer quantidade e qualquer via de admi- nistração eficaz para matar ou inibir o crescimento de bactérias. A quantidade exata requerida vai variar de indivíduo para indivíduo, dependendo da espécie, idade e condição geral do indivíduo, da severidade da infecção, do composto particular, seu modo de administração, seu modo de atividade e similar. Os compostos da invenção são de preferência formulados em forma de unidade de dosagem para facilidade de administração e uniformidade da dosagem. Será compreendido, no entanto, que o uso diário total dos compostos e composições da presente invenção será decidido pelo médico acompanhante dentro do escopo do julgamento médico importante. O nível de dose terapeuticamente eficaz específico para qualquer paciente ou organis- mo particular vai depender de uma variedade de fatores incluindo o distúrbio sendo tratado e a severidade do distúrbio; a atividade do composto específico empregado; a composição específica empregada; a idade, peso do corpo, saúde geral, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração, via de ad-ministração e taxa de excreção do composto específico empregado; a dura- ção do tratamentos; fármacos usados em combinação ou coincidentes com o composto específico empregado; e fatores similares bem conhecidos nas técnicas médicas. Ainda, após formulação com um veículo farmaceuticamente apropriado em uma dosagem desejada, as composições farmacêuticas da 30 presente invenção podem ser administradas a seres humanos e outros animais oralmente, retalmente, parenteralmente, intracisternalmente, intravagi- nalmente, intraperitonealmente, topicamente (como através de pós, ungüen- tos ou gotas), bucalmente, como um spray oral ou nasal, ou similar, depen-dendo da severidade da infecção sendo tratada. Em certas modalidades, os compostos da invenção podem ser administrados oralmente ou parenteral- mente em níveis de dosagem suficientes para aplicar de a partir de 0,001 5 mg/kg a cerca de 100 mg/kg, de a partir de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de mg/kg, de preferência de a partir de cerca de 0,1 mg/kg a cerca de 40 mg/kg, de preferência de a partir de cerca de 0,5 mg/kg a cerca de 30 mg/kg, de a partir de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 10 mg/kg, de a partir de cerca de 0,1 mg/kg a cerca de 10 mg/kg e com mais preferência de a partir de cer- 10 ca de 1 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, de peso do corpo do indivíduo por dia, uma ou mais vezes por dia, para se obter o efeito terapêutico desejado. A dosagem desejada pode ser aplicada três vezes por dia, duas vezes por dia, uma vez por dia, dia-sim-dia-não, a cada três dias, semanalmente, a cada duas semanas, a cada três semanas ou a cada quatro semanas. Em 15 certas modalidades, a dosagem desejada pode ser aplicada usando admi nistrações múltiplas (por exemplo, duas, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, novo, dez, onze, doze, treze, quatorze ou mais administrações).
As formas de dosagem líquidas para administração oral e paren-teral incluem, mas não estão limitadas a, emulsões, microemulisões, solu- 20 ções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Em adição aos compostos ativos, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes geralmente usados na técnica tal como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubilização e emulsificantes tal como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool 25 benzílico, benzoato de benzila, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, dimetil- formamida, óleos (em particular óleo de semente de algodão, amendoim, milho, germe, oliva, rícino e sésamo), glicerol, álcool de tetraidrofurfurila, po- lietileno glicóis e ésteres de ácido graxo de sorbitano e suas misturas. Além de diluentes inertes, as composições orais podem também incluir adjuvantes 30 tal como agentes umectantes, agentes emulsificantes e de suspensão, ado çante, aromatizante e agentes de perfume. Em certas modalidades para administração parenteral, os compostos da invenção são misturados com agentes solubilizantes tal como Cremophor, álcoois, óleos, óleos modificados, glicóis, polissorbatos, ciclodextrinas, polímeros e suas combinações.
Preparações injetáveis, por exemplo, suspensões aquosas ou oleaginosas injetáveis estéreis podem ser formuladas de acordo com a técnica conhecida usando agentes de dispersão ou umectantes e agentes de suspensão adequados. A preparação injetável estéril pode ser também uma solução, suspensão ou emulsão injetável estéril em um diluente ou solvente parenteralmente aceitável não-tóxico, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Dentre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão água, solução de Ringer, U.S.P. e solução de cloreto de sódio isotônica. Em adição, óleos estéreis, fixos, são convencionalmente empregados como um solvente ou meio de suspensão. Para este propósito, qualquer óleo fixo suave pode ser empregado, incluindo mono- ou diglicerí- deos sintéticos. Ainda, ácidos graxos tal como ácido oléico são usados na preparação de injetáveis.
As formulações injetáveis podem ser esterilizadas, por exemplo, através de filtragem em um filtro de retenção bacteriana ou através de incor-poração de agentes de esterilização na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril ou outro meio injetável estéril antes do uso.
A fim de prolongar o efeito de um fármaco, é muitas vezes desejável deixar mais lenta a absorção do fármaco a partir de injeção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser realizado através do uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo com solubilidade pobre em água. A taxa de absorção do fármaco depende então de sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho de cristal e da forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de uma forma de fármaco parente-ralmente administrado é realizada através de dissolução ou suspensão do fármaco em um veículo oleoso. Formas depósito injetáveis são feitas através da formação de matrizes de microencapsulação do fármaco em polímeros biodegradáveis tal como polilactídeo-poliglicolídeo. Dependendo da razão de fármaco para polímero e da natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação de fármaco pode ser controlada. Exemplos de outros polí-meros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). Formulações injetáveis depósito são também preparadas aprisionando o fármaco em lipossomas ou emulsões que são compatíveis com tecidos do corpo.
As composições para administração retal ou vaginal são de pre ferência supositórios que podem ser preparados através de mistura dos compostos da presente invenção com excipientes ou veículos não-irritantes adequados tal como manteiga de cacau, polietileno glicol ou uma cera de supositório que são sólidos em temperatura ambiente mas líquidos na tem- 10 peratura do corpo e então derretem no reto ou cavidade vaginal e liberam o composto ativo.
As formas de dosagem sólidas para administração oral incluem cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos. Em tais formas de dosagem sólidas, o composto ativo é misturado com pelo menos um excipiente ou ve- 15 ículo farmaceuticamente aceitável, inerte, tal como citrato de sódio ou fosfato de dicálcio e/ou a) cargas ou extensores tal como amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol e ácido silícico, b) ligantes, tal como, por exemplo, carboxi- metilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarose e acácia, c) umectantes tal como glicerol, d) agentes de desintegração tal como ágar- 20 ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicates e carbonato de sódio, e) agentes de retardo de solução tal como parafina, f) aceleradores de absorção tal como compostos de amónio quaternário, g) agentes umectantes tal como, por exemplo, álcool cetílico e mo- noestearato de glicerol, h) absorventes tal como caulim e bentonita; e i) lubri- 25 ficantes tal como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietileno glicóis sólidos, lauril sulfato de sódio e suas misturas. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem pode também compreender agentes de tamponamento.
Composições sólidas de um tipo similar podem ser também em- 30 pregadas como cargas em cápsulas de gelatina enchidas macias e duras usando excipientes tal como lactose ou açúcar de leite bem como polietileno glicóis de alto peso molecular e similar. As formas de dosagem sólidas de 84 comprimidos, drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e cascas tal como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Elas podem conter opcionalmente agentes opacificantes e podem ser também de 5 uma composição que elas liberam o(s) ingrediente(s) ativo(s) apenas, ou de preferência, em uma certa parte do trato intestinal, opcionalmente, de uma maneira retardada. Exemplos de composições de embebimento que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras. As composições sólidas de um tipo similar podem ser também empregadas como cargas em 10 cápsulas de gelatina enchidas macias ou duras usando excipientes tal como lactose ou açúcar de leite bem como polietileno glicóis de alto peso molecular e similar.
Os compostos ativos podem estar também em forma microen- capsulada com um ou mais excipientes conforme acima mencionado. As 15 formas de dosagem sólidas de comprimidos, drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e cascas tal como revestimentos entéricos, revestimentos de controle de liberação e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Em tais formas de dosagem sólidas o composto ativo pode ser misturado com pelo 20 menos um diluente inerte tal como sacarose, lactose ou amido. Tais formas de dosagem podem também compreender, como é prática normal, substâncias adicionais outras que não diluentes inertes, por exemplo, lubrificantes de formação de comprimido e outros auxiliares de formação de comprimido tal como estearato de magnésio e celulose microcristalina. No caso de cáp- 25 sulas, comprimidos e pílulas, as formas de dosagem podem também com-preender agentes de tamponamento. Elas podem conter opcionalmente agentes de opacificação e podem também ser de uma composição que elas liberam o(s) ingrediente(s) ativo(s) apenas, ou de preferência, em uma certa parte do trato intestinal, opcionalmente, de uma maneira retardada. Exem- 30 pios de composições de embebimento que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras.
As formas de dosagem para administração tópica ou transdérmi- ca de um composto da presente invenção incluem ungüentos, pastas, cre- . mes, loções, géis, pós, soluções, sprays, inalantes ou emplastros. O compo nente ativo é misturado sob condições estéreis com um veículo farmaceuti- camente aceitável e quaisquer conservantes ou tampões necessários con- forme requerido. Formulações oftálmicas, gotas para o ouvido e colírios são também compreendidos como estando dentro do escopo da presente inven-ção. Adicionalmente, a presente invenção compreende o uso de emplastros transdermais, que têm a vantagem adicional de prover aplicação controlada de um composto ao corpo. Tais formas de dosagem podem ser feitas dissol- vendo ou aplicando o composto no meio apropriado. Aumentadores de absorção podem ser também usados para aumentar o fluxo do composto através de pele. A taxa pode ser controlada ou provendo uma membrana de controle de taxa ou através de dispersão do composto na matriz de polímero ou gel. 15 Será também compreendido que os compostos e composições k farmacêuticas da presente invenção podem ser empregados em terapias de * combinação, isto é, os compostos e composições farmacêuticas podem ser administrados concomitantemente com, antes de ou subseqüente a um ou mais outros agentes terapêuticos ou procedimentos médicos desejados.
A combinação particular de terapias (agentes terapêuticos ou procedimentos) para empregar em um regime de combinação vai levar em consideração a compatibilidade dos agentes terapêuticos e/ou procedimentos desejados e o efeito terapêutico desejado a ser atingido. Será também compreendido que as terapias empregadas podem atingir um efeito desejado para o mesmo distúrbio (por exemplo, um composto da invenção pode ser administrado concomitantemente com um outro agente anticâncer) ou eles podem atingir efeitos diferentes (por exemplo, controle de efeitos adversos). . Em ainda um outro aspecto, a presente invenção também provê um pacote ou estojo farmacêutico compreendendo um ou mais recipientes 30 enchidos com um ou mais dos ingredientes das composições farmacêuticas da invenção, e em certas modalidades inclui um agente terapêutico aprovado adicional para uso como uma terapia de combinação. Opcionalmente as- sociada com tal(ais) recipiente(s) pode estar uma nota na forma prescrita por uma agência do governo que regula a fabricação, uso ou venda de produtos farmacêuticos, nota que reflete a aprovação pela agência da fabricação, uso ou venda para administração humana.
Esses e outros aspectos da presente invenção serão compreen didos mais quando da consideração dos Exemplos que seguem, que preten-dem ilustrar certas modalidades particulares da invenção mas não pretendem limitar seu escopo, conforme definido pelas reivindicações.
Exemplos Exemplo 1 - Síntese de (-)-Tetraciclina
Procedimentos gerais. Todas as reações foram realizadas em frascos Schlenk (formato Kjeldah) modificados ou de fundo redondo secos com chama equipados com separações de borracha sob uma pressão positiva de argônio, a menos que de outro modo indicado. Líquidos e soluções 15 sensíveis a ar e umidade foram transferidos através de seringa ou cânula de aço inoxidável. Onde necessário (então mencionado), as soluções foram desoxigenadas através de ciclos de congelamento (nitrogênio líqui- do)/evacuação/descongelamento alternativos (2 três interações). As soluções orgânicas foram concentradas através de evaporação giratória a ~25 20 Torr (vácuo de alojamento). Cromatografia de coluna instantânea foi realizada em sílica-gel (60 Â, grau padrão) conforme descrito por Still e outros (Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. J. Org. Chem. 1978, 43, 2923-2925; incorporado aqui a título de referência). Cromatografia de camada fina analítica foi realizada usando placas de vidro pré-revestidas com 0,25 mm de sílica-gel de 25 230-400 mesh impregnada com um indicador fluorescente (254 nm). Placas de cromatografia de camada final foram visualizadas através de exposição à luz ultravioleta e/ou exposição a molibdato de amónio cérico ou uma solução ácida de p-anisaldeído seguido por aquecimento em uma placa quente.
Materiais. Reagentes e solventes comerciais foram usados con- 30 forme recebido com as exceções que seguem. Clorotrimetilsilano, trietilami- na, diisopropilamina, 2,2,6,6-tetrametilpiperidina, N,N, A/',A/'-tetrametiletileno- diamina, DMPU, HMPA e A/,/V-diisopropiletilamina foram destilados a partir de hidreto de cálcio sob atmosfera de dinitrogênio. Benzeno, diclorometano, éter de etila, metanol, piridina, tetraidrofurano hexana, acetonitrila, N,N- dimetilformamida e tolueno foram purificados através do método de Pang- born e outros (Pangborn, A. B.; Giardello, M. A.; Grubbs, R. H.; Rosen, R. K.; Timmers, F. J. Organometallics 1996, 15, 1518-1520; incorporados aqui a título de referência). A molaridade de n-butillitio, s-butillito e f-butillítio foi determinada através de titração com uma solução de tetraidrofurano de 2-butanol usando trifenilmetano como um indicador (Duhamel, L; Palque- vent, J.C. J. Org. Chem. 1979, 44, 3404-3405; incorporado aqui a titulo de 10 referência). Instrumentação. Espectros de ressonância magnética nuclear de próton (1H RMN) e ressonância magnética nuclear de carbono (13C RMN) foram registrados com espectrômetros de RMN Varian Unity/lnova 600 (600 MHz), Varian Uniti/lnova 500 (500 MHz/125 MHz) ou Varian Mercury 400 15 (400 MHz/100 MHz). As mudanças químicas para prótons são descritas em * escala de partes por milhão (escala δ) a jusante a partir de tetrametilsilano e > são referidas como protium residual nos solventes de RMN (CHCI3: δ 7,26, C6D5H: δ 7,15, D2HCOD: δ 3,31, CDHCI2: δ 5,32, (CD2H)CD3SO: δ 2,49). As mudanças químicas para carbono são descritas em partes por milhão (esca- 20 la δ) a jusante a partir de tetrametilsilano e são referidas a ressonâncias de carbono do solvente (CDCI3: δ 77,0, CβDβ: δ 128,0, D3COD: δ 44,9, CD2CI2: δ 53,8, (C03)2SO: δ 39,5). Os dados são representados como segue: mudança química, multiplicidade (s = singleto, d = dupleto, t = tripleto, q = quarteto, m = multipleto, br = amplo), integração, constante de acoplamento em Hz e 25 determinação. Espectros infravermelho (IR) foram obtidos usando um espec- trofotômetro Perkin-Elmer 1600 FT-IR referido a um padrão de poliestireno. Os dados são representados como segue: freqüência da absorção (cm-1), intensidade de absorção (s = forte, sb = amplo forte, m = média, w = fraca, br = ampla) e determinação (onde apropriado). Os giros ópticos foram determi- 30 nados em um polarímetro digital JASCO DIP-370 equipado com uma fonte de lâmpada de sódio usando uma pilha de solução de 200 μL ou 2 ml_. Espectros de massa de alta resolução foram obtidos nas Instalações da Har- vard University Mass Spectrometry. Produto de Diidroxilação Microbiana DRS1:
Figure img0082
ácido benzóico
Preparação de Soluções Estoque de Glicerol
Células B9 de Alcaligenes eutrophus (pó liofilizado, 20 mg, gene- rosamente fornecidas pela Prof. George D. Hegeman (Indiana University); Reiner, A. M.; Hegeman, G. D. Biochemistry 1971, 10, 2530.) foram suspensas em caldo nutriente (5 mL, preparado dissolvendo 8 g de Difco Bacto® Nutrient Broth em 1 L de água nanopura seguido por esterilização em um autoclave a 125°C) em um tubo de cultura estéril de 20 mL. Solução de suc- cinato de sódio aquosa (16,7 μL de uma solução 2,5M aquosa, 5 mM de concentração final) foi adicionada e o tubo da cultura foi agitado a 250 rpm a 30°C até que o crescimento de célula se tornasse aparente (3 d). Uma alí-quota (250 μL) da suspensão celular foi então transferida para 5 mL de meio de base mineral de Hunter (HMB, vide parágrafo abaixo) contendo succinato de sódio (16,7 μL de uma solução aquosa de 2,5M, 5 mM de concentração final) em um tubo de cultura estéril de 20 mL. O tubo de cultura foi agitado a 250 rpm por 2 d a 30°C, com o que uma alíquota (250 μL) da solução de fermentação foi subculturada em um frasco Erlenmeyer estéril contendo 50 mL de HMB e solução de succinato de sódio aquosa (167 μL de uma solu- ção 2.5M, 5 mM de concentração final). O frasco foi agitado a 250 rpm por 24 h a 30°C. A solução resultante foi usada diretamente para a preparação de soluções estoque de glicerol. Deste modo, uma porção da suspensão celular subclonada (5 mL) foi diluída com um volume igual de glicerol estéril e a solução resultante foi dividida igualmente em dez tubos Eppendorf esté- reis de 2 mL. As soluções estoque individuais foram então armazenadas a - 80°C.
Meio de Base Mineral de Hutner
Meio de base mineral de Hutner (HMB) foi preparado como segue. Hidróxido de potássio sólido (400 mg) foi dissolvido em 500 mL de água nanopura em um frasco Erlenmeyer de 2 L. Ácido nitrilotriacético (200 mg), sulfato de magnésio (283 mg), biidrato de cloreto de cálcio (67 mg), molibda- to de amónio (0,2 mg), sulfato de ferro (II) (2,0 mg), solução de Metais de Hutner 44 (1 ml_, vide parágrafo abaixo), sulfato de amónio (1,0 g), diidroge- no fosfato de potássio (2,72 g) e heptaidrato de monoidrogeno fosfato de sódio (5,36 g) foram adicionados seqüencialmente. A solução foi diluída para um volume total de 1 L e o pH foi ajustado para 6,8 com ácido clorídrico con-centrado. O meio foi esterilizado através de filtragem ou através de aqueci-mento em um autoclave.
Solução de Metais de Hutner 44 foi preparada como segue. Áci do sulfúrico concentrado (100 μL) foi adicionado à água nanopura (50 ml_) em um frasco Erlenmeyer de 250 mL. EDTA sólido (0,50 g), heptaidrato de sulfato de zinco (2,20 g), heptaidrato de sulfato de ferro (II) (1,0 g), sulfato de cobre (I) (0,39 g), hexaidrato de nitrato de cobalto (II) (50 mg) e decaidrato de tetraborato de sódio (36 mg) foram então adicionados em seqüência, seguido por 50 mL de água nanopura. * Diidroxilacão Celular de Benzoato de Sódio
Uma ponta de pipeta estéril foi passada rapidamente através da superfície de uma solução estoque de glicerol congelada para produzir pe- 20 quenos cacos (cerca de 10 mg). Os cacos congelados foram adicionados a um frasco Erlenmeyer de 125 mL estéril contendo HMB (25 mL) e solução de succinato de sódio aquosa (140 μL de uma solução 1,5M, 5 mM de concentração final). O frasco foi agitado a 250 rpm por 2 dias a 30°C. Uma alíquota (10 mL) da solução branca, heterogênea, foi transferida usando uma 25 pipeta estéril para uma jarra de crescimento de célula de mamífero contendo HMB (6 L) e solução de succinato de sódio aquosa (20 mL de uma solução 1,5 M, concentração final 5 mM). A jarra foi aquecida em uma placa quente . para uma temperatura interna de 30°C; ar filtrado em algodão foi espalhado no meio. Após 2 dias, a solução heterogênea, branca, foi tratada com solu- 30 ção de benzoato de sódio aquosa (18 mL de uma solução 1,0M) e uma solução de succinato de sódio aquosa (10 mL de uma solução 1,5M), induzindo hidroxilação. A mistura resultante foi aerada vigorosamente por 6 horas em uma temperatura interna de 30°C. Após indução, solução de benzoato de sódio aquosa suficiente (24 a 48 ml_ de uma solução 1,0M, dependendo da taxa de consumo) foi adicionada de hora em hora para manter uma concentração de 10-20 mM (determinada através de absorbância de UV a 225 nm).
Solução de succinato de sódio aquosa (10 mL de uma solução 1,5M) foi adi-cionada a cada quatro horas. Essas adições prosseguiram durante 18 horas, então a solução foi aerada da noite para o dia em uma temperatura interna de 30°C, para assegurar conversão completa. O caldo de fermentação foi centrifugado, em porções, a 6000 rpm (rotor Sorvall GS-3, modelo SLA- 3000) para remover material celular. O sobrenadante foi concentrado para um volume de 400 mL usando um evaporador giratório (temperatura do ba-nho <45°C). O concentrado foi esfriado para 0°C e então acidificado para pH 3,0 usando ácido clorídrico aquoso concentrado. A solução aquosa acidifica-da foi extraída repetidamente com acetato de etila (8 x 500 mL, 4 x 800 mL, 8 x 1 L). Os extratos de acetato de etila foram secos sem sulfato de sódio antes da concentração, usando um evaporador giratório (temperatura do banho <45°C), provendo um resíduo sólido amarelo pálido. Trituração do resíduo com diclorometano (2 x 200 mL) seguido por secagem a vácuo deu ácido (1S,2/?)-1,2-diidroxicicloexa-3,5-dieno-1-carboxílico (DRS1) puro como um pó branco, p.f.: 95-96°C dec. (38 g, 74%, [a]o -114.8 (c 0,5 em EtOH), lit, [α]o -106 (c 0,5 em EtOH) Jenkins, G. N.; Ribbons, D. W.; Widdowson, D. A.; Slawin, A. M. Z.; Williams, D. J. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 1995, 2647.). Epóxido DRS2:
Figure img0083
25 Ácido m-cloroperoxibenzóico (mCPBA foi purificado como se gue: 50 g de mCPBA 77% (Aldrich) foram dissolvidos em benzeno (1 L), a solução de benzeno foi então lavada com tampão de fosfato pH 7,4 (3x1 L) e seca em Na2SO4 por 3 horas e concentrada (<40°C, perigo de detonação térmica) para prover mCPBA puro como um sólido branco; 10,7 g, 62,3 mmoles, 1,2 equivalente) foram adicionados em três porções iguais durante minutos a uma suspensão do produto de diidroxilação microbiana DRS1 (8,10 g, 51,9 mmoles, 1,0 equiv.) em acetato de etila (400 mL) a 23°C. A solução heterogênea foi agitada por 10 horas, então foi diluída com benzeno (80 mL) e agitada por uma hora. O sobrenadante foi decantado e o re- síduo sólido foi triturado com benzeno (2x15 mL). O sólido pastoso resultante foi seco a vácuo para prover o epóxido DRS2 como um pó branco amorfo (7,36 g, 83%). p.f. 87-91 °C; 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 6,23 (dd, 1H, J = 9,6, 3,9 Hz, =CHC(OCH)), 5,92 (dd, 1H, J = 9,6, 1,9 Hz, =CHC(CO2H)), 4,40 (d, 1H, J = 1,3 Hz, CHOH), 3,58 (dd, 1H, J = 4,4, 1,3 Hz, CHCHOH), 3,49 (m, 1H, =CCHO); 13C RMN (100 MHz, CD3OD) 0175,8, 135,1, 128,8, 75,4, 70,9, 57,5, 50,3; FTIR (puro), cm’1 3381 (s, OH), 1738 (s, C=O), 1608 (m), 1255 (m), 1230 (m), 1084 (m, C-O); HRMS (Cl) m/z calc, para (C7Hθθ5+NH4)+ 190,0715, encontrado 190,0707. Epóxido DJB1:
Figure img0084
Uma solução de trimetilsilildiazometano em hexano (2,0M, 25,5 mL, 51,0 mmoles, 1,2 equiv.) foi adicionada a uma solução do epóxido DRS2 (7,36 g, 42,8 mmoles, 1,0 equiv.) em metanol-benzeno (1:3, 160 mL) a 23°C. Evolução de gás extensiva foi observada quando da adição. A solução amarela foi agitada por 5 min, então ela foi concentrada, dando um sólido amarelo-claro. O sólido foi seco através de destilação azeotrópica a partir de benzeno (2 x 25 mL) e o sólido seco foi suspenso em diclorometano (200 mL). Trietilamina (20,8 ml, 149 mmoles, 3,5 equiv.) e terc-butildimetilsilil trifluor- metanossulfonato (29,4 mL, 128 mmoles, 3,0 equiv.) foram então adicionados em seqüência, provendo uma solução homogênea. A solução de reação foi agitada a 23°C por 30 min. Uma solução de tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2M, 300 mL) foi adicionada seguido por diclorometano (100 ml). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instan-tânea (5:95 de acetato de etil-hexanos), dando o epóxido DJB1 como um óleo amarelo-claro (12,4 g, 70% em duas etapas). Rf 0,50 (1:4 acetato de etil-hexanos); H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 5,95 (dd, 1H, J = 9,8, 3,4 Hz, =CHCOTBS), 5,89 (ddd, 1H, J = 9,8, 2,9, 1,5 Hz, =CHCHOCCO2), 4,63 (d, 1H, J = 3,9 Hz, O2CCCHOTBS), 4,42 (m, 1H, =CCHOTBS), 3,78 (s, 3H, OCH3), 3,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz, CHOCCO2), 0,90 (s, 9H, C(CH3)3), 0,89 (s, 9H, C(CH3)3), 0,09 (s, 3H, SiCH3), 0,08 (s, 6H, Si- CH3), 0,07 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 170,2, 138,7, 122,6, 69,3, 68,4, 59,7, 52,5, 52,0, 25,9, 25,7, 18,3, 18,2, -4,18, -4,27, -4,45, -5,21; FTIR (puro), cm’1 1759 (m, C=O), 1736 (s, C=O), 1473 (m), 1256 (w), 1253 (s), 1150 (s, C-O), 1111 (m, C-O), 1057 (s, C-O), 940 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C2oH3805Si2)+ 414,2258, encontrado 414,2239. Isoxazol MGC2 (Método A):
Figure img0085
A solução foi agitada a 0°C por duas horas, então foi deixada aquecer para 23°C; a agitação foi continuada nesta temperatura por 24 horas. A solução foi dividida entre solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada-salmoura (2:1, 300 mL) e acetato de etil-hexanos (1:1, 500 mL). A fase orgânica foi separada e lavada com salmoura (2 x 200 mL) e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando um re-síduo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:4 a 1:1 de acetato de etil-hexanos), dando o isoxazol MGC2 como um óleo amarelo-claro (40,1 g, 74%). Rr 0,34 (1:1 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,43-7,31 (m, 5H, ArH), 5,82 (s, 1H, =CH), 5,23 (s, 2H, OCH2Ar), 3,48 (s, 2H, CH2N(CH3)2), 2,27 (s, 6H, N(CH3)2); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 171,9, 171,2, 136,1, 128,8, 128,5, 128,7, 94,8, 71,7, 55,1, 45,3; FTIR (puro), cm-1 2950 (s, CH), 1615 (s), 1494 (s), 1452 (s), 1136 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C13H16N2O2)+232,1212, encontrado 232,1220.
Figure img0086
Dimetilamina fria (condensada em um recipiente de reação sub-merso em um banho a 0°C usando um dedo frio com gelo seco/acetona, 106 mL, 1,94 mol, 2,2 equiv.) foi adicionada em gotas através de cânula a uma solução do isoxazol MGC3 (preparado em duas etapas a partir de ácido glio- xílico conforme descrito por: Pevarello, P.; Varasi, M. Synth. Commun. 1992, 22, 1939,) (174 g, 0,884 mol, 1,0 equiv) em acetonitrila (2 L) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por duas horas, então o banho de esfriamento foi removido. A mistura de reação foi deixada aquecer para 23°C; a agitação foi continuada nesta temperatura por 8 horas. A mistura foi dividida entre solução de salmoura-bicarbonato de sódio aquoso saturado (1:1, 1,5 L) e acetato de etila (1,5 L). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com acetato de etila (3 x 400 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado para um volume de 500 mL, resultando na formação de um precipitado branco. O concentrado foi filtrado e o filtrado foi concentrado, provendo o isoxazol MGC4 como um óleo laranja (143 g, 79%).
Uma amostra analítica foi preparada através de cromatografia de coluna ins-tantânea (1:9 a 2:8 de acetato de etil-hexanos), dando o isoxazol MGC4 como um óleo amarelo-claro. 0,30 (1:4 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,26 (s, 1H, vinil), 3,63 (s, 2H, CH2N(CH3)2). 2,30 (s, 6H, N(CH3)2); 13C RMN (100 10 MHz, CDCI3) δ 172,1, 140,5, 106,8, 54,5, 45,3; FTIR (puro), cm "1 3137 (w), 2945 (m), 2825 (m), 2778 (m), 1590 (s), 1455 (m), 1361 (m), 1338 (s), 1281 (s), 1041 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (CθH9BrN2O+H)+ 204,9976, encontrado 204,9969. Isoxazol MGC2 (Método B):
Figure img0087
álcool benzilico
Metal de sódio (32,63 g, 1,42 mol, 2,03 equiv.) foi adicionado em porções durante 8 horas a álcool benzilico (1L) a 23°C. A mistura resultante foi agitada vigorosamente por 24 horas, então foi transferida através de cânula de furo grande para o isoxazol puro MGC4 (143 g, 0,700 mol, 1,0 e- quiv.) a 23°C. A mistura marrom-clara resultante foi posta em um banho de 20 óleo preaquecido para 120°C e foi agitada por 20 horas nesta temperatura.
Acetato de etila (2 L) foi adicionado e a mistura de reação esfriada e a agita-ção foi continuada por 15 min. Ácido clorídrico aquoso (1,0M, 2L) foi adicionado e a fase aquosa foi separada. A fase orgânica foi extraída mais com duas porções de 300 mL de ácido clorídrico aquoso 1,0M. As fases aquosas 25 foram combinadas e o pH ajustado para 9 através da adição lenta de hidróxido de sódio aquoso (6,0M, aprox. 350 mL). A mistura resultante foi extraída com diclorometano (3 x 500 mL). Os extratos orgânicos foram combinados e secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando o isoxazol MGC2 como um óleo amarelo (102 g, 63%). Uma amostra analítica foi preparada através de cromatografia de coluna instantânea (3:7 de acetato de etil-hexanos, então 5:95 de metanol em acetato de etila) dando o isoxazol MGC2 como um óleo amarelo-claro (os dados es- pectroscópicos eram idênticos àqueles obtidos para material preparado atra-vés do Método A). Cetona MGC5:
Figure img0088
Uma solução de n-butillítio em hexanos (2,47 M, 16,0 mL, 39,5 mmoles, 1,0 equiv.) foi adicionada a uma solução do isoxazol MGC2 (9,16 g, 39,5 mmoles, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (150 mL) a -78°C. A solução de cor de ferrugem resultante foi agitada a -78°C por uma hora, com o que uma solução do éster de metila DJB1 (9,82 g, 23,7 mmoles, 0,6 equiv.) em tetrai-drofurano (6 mL) foi adicionada em gotas através de cânula.
A transferência foi quantificada com duas porções de 1 mL de tetraidrofurano. A solução marrom resultante foi agitada a -78°C por uma hora, então uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 250 mL) foi adicionada. A mistura bifásica foi deixada aquecer para 23°C, então foi extraída com diclorometano (2 x 300 mL). Os extratos orgânicos foram com- binados e secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:9 a 1:3 de acetato de etil- hexanos), dando a cetona MGC5 como um sólido amarelo-claro (10,6 g, 73%). Rf 0,59 (1:3 de acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,447,35 (m, 5H, ArH), 5,90 (ddd, 1H, J = 9,8, 5,9, 2,0 Hz, =CHCHOSi), 5,82 (dd, 1H, J = 9,8, 3,4 Hz, =CHCHOCC), 5,31 (m, 2H, OCH2Ar), 4,58 (d, 1H, J = 4,2 Hz, (O)CCCHOSi), 4,27 (m, 1H, =CHCHOSi), 3,94 (d, 1H, J = 15,6 Hz, C- HH'N), 3,77 (d, 1H, J - 15,6 Hz, CHH'N), 3,17 (dd, 1H, J = 3,4, 1,5 Hz, HCOCC(O)), 2,35 (s, 6H, N(CH3)2), 0,89 (s, 9H, C(CH3)3), 0,83 (s, 9H, C(CH3)3), 0,06 (s, 3H, SiCH3), 0,05 (s, 3H, SiCH3), 0,04 (s, 3H, SiCH3), -0,07 5 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 191,8, 176,3, 168,9, 136,5, 135,5, 128,8, 128,7, 125,0, 106,9, 72,4, 69,6, 67,8, 67,4, 55,3, 52,6, 45,9, 26,2, 26,0, 18,5, 18,3, -3,1, -3,8, -3,8, -5,1; FTIR (pure), cm"1 2952 (s, CH), 1682 (s, C=O), 1594 (s), 1502 (s), 1456 (m), 1097 (s, C-O), 774 (s); HRMS (FAB) m/z calc, para (C^Hso^OβSiz+Na)* 637,3105, encontrado 637,3097. Cetonas MGC6 e MGC7:
Figure img0089
tolueno Trifluormetanossulfonato de litio sólido (76,0 mg, 0,490 mmol, 0,05 equiv.) foi adicionado a uma solução da cetona MGC5 (6,02 g, 9,80 mmoles, 1,0 equiv.) em tolueno (500 mL) a 23°C. A mistura amarelo-clara 15 heterogênea resultante foi posta em um banho de óleo preaquecido para 65°C e foi agitada nesta temperatura por 3 horas. A mistura de reação foi esfriada para 23°C e foi filtrada. Os sólidos foram lavados com tolueno (50 mL) e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O óleo foi coberto com diclorometano-ácido trifluoracético (10:1, 165 mL) e a mistura resul- tante foi agitada a 23°C por 18 horas. Solução de bicarbonato de sódio aquosa (300 mL) foi adicionada e evolução de gás extensiva foi observada quando da adição. A mistura bifásica foi extraída com éter de dietila (4 x 300 mL) e os extratos orgânicos foram combinados e secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:9 a 1:5 de acetato de etil-hexanos), dando a cetona MGC6 como uma espuma branca (3,20 g, 62%) e cetona MGC7 como um óleo a- mareio viscoso (1,68 g, 28%). Cetona MGC6: Rf 0,52 (1:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,45 (m, 2H, ArH), 7,36-7,30 (m, 3H, ArH), 5,96 (s amplo, 1H, =CH), 5,45 (s amplo, 5 1H, =CH), 5,32 (m, 2H, OCHH Ar), 5,33 (s amplo, 1H, CHOSi), 4,15 (d, 1H, J = 8,8 Hz, CHOSi), 3,59 (d, 1H, J = 3,9 Hz, CHN(CH3)2), 3,34 (s amplo, 1H, C3CH), 2,57 (s amplo, 1H, OH), 2,39 (s, 6H, N(CH3)2), 0,90 (s, 9H, C(CH3)3), 0,16 (s, 3H, SiCH3), 0,11 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (100 MHz, C6D6) δ 189,2, 178,3, 168,6, 135,3, 128,5, 128,4, 128,3, 125,4, 106,4, 79,8, 72,3, 72,2, 67,1, 10 63,6, 42,9, 26,1, 18,5, -4,0, -4,8; FTIR (puro), cm-1 3549 (s amplo, OH), 3455 (s amplo, OH), 2942 (s, CH), 1698 (s, C=O), 1617 (m), 1508 (s), 1032 (s, C-O), 906 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C26H36N2O6Si+H)+ 501,2421, encontrado 501,2422. Cetona MGC7: R, 0,64 (1:5 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,50 (d, 2H, J = 1,5 Hz, ArH), 7,40-7,32 (m, 3H, ArH), 5,94 (dd, 1H, J = 9,7, 6,4 Hz, =CHCHCHOSi), 5,76 (d, 1H, J = 9,7 Hz, =CHCOH), 5,37 (d, 1H, J= 12,2 Hz, OCHH'Ph) 5,32 (d, 1H, J = 12,2 Hz, OCHH'Ph) 4,09 (d, 1H, J = 2,9 Hz, HOCCHOSi), 4,03 (s, 1H, OH), 3,88 (m, 1H, NCHCHCHOSi), 3,74 (d, 1H, J = 3,9 Hz, (CH3)2NCH), 2,46 (s, 6H, N(CH3)2), 0,91 (s, 9H, C(CH3)3), 0,87 (s, 9H, C(CH3)3), 0,06 (s, 3H, SiCH3), 0,05 (s, 3H, SiCH3), 0,04 (s, 3H, SiCH3), 0,03 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 194,9, 173,9, 170,5, 135,8, 132,6, 128,8, 128,5, 128,3, 127,9, 106,2, 81,6, 74,8, 72,0, 71,7, 69,5, 44,6, 43,2, 26,1, 25,9, 18,7, 18,2, -3,6, -4,1, -4,3, -4,3; FTIR (puro), cm-1 3461 (s amplo, OH), 2940 (s, CH), 1693 (s, C=O), 1663 (s), 1647 (m), 1503 (m), 1080 (s, C-O), 774 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C32H50N2O6Si2+H)+ 615,3285, encontrado 615,3282. Alceno DRS3:
Figure img0090
Azodicarboxilato de dietila (472 μL, 3,00 mmoles, 3,0 equivalentes) foi adicionado a uma solução da cetona MGC6 (500 mg, 1,00 mmol, 1,0 equiv.) e trifenilfosfma (789 mg, 3,00 mmoles, 3,0 equiv.) em tolueno (6,0 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 90 minutos com o que uma solu- 5 ção de 2-nitrobenzenossulfonil hidrazina (651 mg, 3,0 mmoles, 3,0 equiv.) em tetraidrofurano (3 mL) foi adicionada em gotas através de cânula. A mistura resultante foi agitada a 0°C por 10 minutos, então foi deixada aquecer para 23°C; a agitação foi continuada nesta temperatura por 23 horas. Uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 30 mL) foi 10 adicionada e a mistura bifásica resultante foi extraída com diclorometano (2 x 50 mL). Os extratos orgânicos foram combinados e secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um sedimento amarelo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (95:5 a 1:9 de acetato de etil-hexanos, dando o alceno 15 DRS3 como um sólido branco (356 mg, 74%). Rz 0,65 (1:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,46 (d, 2H, J = 6,8 Hz, ArH), 7,39-7,34 (m, 3H, ArH), 5,81 (m, 1H, =CHCH2), 5,55 (dd, 1H, J = 10,3, 2,0 Hz, =CHCOSi), 5,39 (d, 1H, J = 12,2 Hz, OCHH’Ph) 5,35 (d, 1H, J = 12,2 Hz, OCHH’Ph) 4,15 (s, 1H, CHOSi), 4,04 (s amplo, 1H, 20 OH), 3,76 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 2,58 (dd, 1H, J = 10,7, 3,9 Hz, C3CH), 2,47 (m, 8H, N(CH3)2, =CCH2), 0,86 (s, 9H, C(CH3)3), -0,05 (s, 3H, SiCH3), -0,13 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 191,5, 183,3, 167,9, 135,3, 128,8, 128,7, 128,5, 127,4, 106,8, 78,3, 72,6, 72,0, 67,9, 60,7, 43,0, 42,1, 26,0, 25,8, 23,6, 18,2, -4,6, -5,0; FTIR (puro), cm"1 3528 (w, 25 OH), 2933 (s, CH), 1702 (s, C=O), 1600 (m), 1507 (s), 1092 (s, C-O), 1061 (s, C-O); HRMS (ES) m/z calc. para (C26H36N2O5Si+H)+ 485,2472, encontrado 485,2457. Diol DRS4:
Figure img0091
Ácido acético (83,0 μL, 1,44 mmol, 2,0 equiv.) e uma solução de - fluoreto de tetrabutilamônio em tetraidrofurano (1,0 M, 1,44 mL, 1,44 mmol, 2,0 equiv.) foram adicionados em seqüência a uma solução da olefina DRS3 (350 mg, 0,723 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (7,0 mL) a 0°C.
A solução cinza-claro resultante foi agitada a 0°C por 30 min, então deixada aquecer para 23°C; a agitação foi continuada nesta temperatura por 5 horas. Então a mistura de reação foi concentrada, provendo um óleo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:4 a 1:1 de acetato de etil-hexanos), dando o diol DRS4 como um sólido branco 10 ceroso (202 mg, 76%). Rf 0,38 (1:1 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,51-7,48 (m, 2H, ArH), 7,42-7,36 (m, 3H, ArH), 5,84 (m, 1H, =CHCH2), 5,55 (m, 1H, =CHCOH), 5,36 (m, 2H, OCH2F), 4,15 (d, 1H, J = 8,1 Hz, CHOH), 3,69 (d, 1H, J = 8,8 Hz, CHN(CH3)2), 2,67 (m, 1H, C3CH), 2,47 (s, 6H, N(CH3)2), 2,43 15 (dd, 1H, J = 7,7, 1,5 Hz, =CCHH'), 2,36 (m, 1H, =CCHH'); FTIR (puro), cm"1 3492 (w, OH), 3272 (s, OH), 1703 (s, C=O), 1606 (m), 1509 (s), 1008 (s, CO), 732 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C20H22N2O5+H)+ 371,1607, encontrado 371,1601. Cicloexenona DRS5:
Figure img0092
Ácido o-iodoxibenzóico sólido (558 mg, 1,99 mmol, 3,0 equiv.) foi adicionado a uma solução do diol DRS4 (246 mg, 0,665 mmol, 1,0 equiv.) em sulfóxido de dimetila (5,0 mL) a 23°C. A mistura heterogênea resultante foi agitada por 5 minutos com o que ela ficou homogênea. A mistura de reação marrom foi agitada a 23°C por 36 horas. Água (10 mL) foi adicionada resultando na precipitação de ácido o-iodoxibenzóico em excesso. A mistura foi filtrada e o filtrado foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada-salmoura (1:1, 20 mL) e acetato de etil-hexanos (2:1, 45 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção de 45 mL de acetato de etil-hexanos (2:1). Os extratos orgânicos foram combinados e lavados com solução de sulfeto de sódio aquosa (2,0 M, 50 mL), salmoura (50 mL) e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo a cicloexenona 5 DRS5 como uma espuma marrom-clara (206 mg, 84%). Rf 0,15 (1:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,48 (d, 2H, J = 7,3 Hz, ArH), 7,40-7,34 (m, 3H, ArH), 6,98 (m, 1H, =CHCH2), 6,12 (ddd, 1H, J = 12,2, 2,0, 2,0 Hz, =CHC(O)), 5,35 (m, 2H, OCH2Ar), 4,75 (s amplo, 1H, OH), 3,85 (d, 1H, J = 9,8 Hz, CHN(CH3)2), 2,82 (m, 3H, C3CH, 10 =CCH2), 2,48 (s, 6H, N(CH3)2); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 192,8, 188,2, 182,8, 167,6, 149,7, 135,0, 128,9, 128,8, 128,6, 128,3, 107,9, 79,7, 72,8, 60,4, 45,5, 42,4, 25,4; FTIR (puro), cm"1 3447 (w, OH), 1707 (s, C=O), 1673 (s, C=O), 1600 (m), 1512 (s), 1018 (s, C-O), 730 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C2oH20N205+H)+ 369,1450, encontrado 369,1454. Silil-cicloexenona DRS6:
Figure img0093
lutidina 2,6-Lutidina (75,0 μL, 0,640 mmol, 5,0 equiv.) e terc-butildimetil- silil trifluormetanossulfonato (88,0 μL, 0,380 mmol, 3,0 equiv.) foram adicio-nados em sequência a uma solução da cicloexanona DRS5 (47,0 mg, 0,130 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano (3 mL) a 23°C. A mistura foi agitada a 23°C por 3 horas, então uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2M , 15 mL) foi adicionada. A mistura bifásica foi extraída com diclorometano (2 x 20 mL) e os extratos orgânicos foram combinados e secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi con- centrado, dando a silil-cicloexenona DRS6 como um sólido cristalino branco (56,0 mg, 91%). P.f. 157-158°C (dec); R, 0,54 (1:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,51 (d, 2H, J = 1,5 Hz, ArH), 7,50-7,34 (m, 3H, ArH), 6,94 (m, 1H, =CHCH2), 6,10 (ddd, 1H, J = 10,3, 1,5, 1,5 Hz, =CHC(O)), 5,36 (m, 2H, OCH2Ar), 3,79 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 2,83 (m, 2H, =CCH2), 2,78 (m, 1H, C3CH), 2,46 (s, 6H, N(CH3)2), 0,84 (s, 9H, C(CH3)3), 0,27 (s, 3H, SiCH3), 0,06 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 193,4, 187,9, 181,6, 167,7, 149,5, 135,2, 128,8, 128,8, 128,8, 128,6, 108,6, 83,5, 72,8, 59,8, 48,1, 42,2, 26,3, 25,8, 19,3, -2,2, -3,8; FTIR (puro), cm-1 2942 (s), 1719 (s, C=O), 1678 (s, C=O), 1602 (m), 1510 (s), 1053 (s, C-O), 733 (s); HRMS (ES) m/z calc, para (C26H34N2O5Si+H)+ 483,2315, encontrado 483,2321. Cetona MGC9:
Figure img0094
Uma solução de brometo de metilmagnésio em éter (3,15 M, 11,6 mL, 36,7 mmoles, 1,07 equiv.) foi adicionada a uma solução do aldeído MGC8 (sintetizado em duas etapas a partir de álcool benzil 3-benzilóxi co-mercialmente disponível conforme descrito por: Hollinshed, S. P.; Nichols, J. B.; Wilson, J. W. J. Org. Chem. 1994, 59, 6703,) (10,0 g, 34,3 mmoles, 1,0 equiv) em tetraidrofurano (90 mL) a -5°C (NaCI/banho frio). A solução marrom-clara foi agitada a -5°C por 60 minutos, então foi dividida entre solução de cloreto de amónio aquosa saturada (400 L) e acetato de etila (400 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo-claro (10,1 g, 95% bruto). O produto foi usado sem purificação adicional.
Brometo de sódio (846 mg, 8,22 mmoles, 0,25 equiv.) e 2,2,6,6- tetrametil-1 -piperidiniloxila (51,0 mg, 0,329 mmol, 0,01 equiv.) foram adicio-nados em seqüência a uma solução do óleo amarelo-claro preparado acima (10,1 g, 32,8 mmoles, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (30 mL) a 0°C. Uma solução recém-preparada de bicarbonato de sódio (690 mg, 8,22 mmoles, 0,25 equiv.) em alvejante Clorox comercial (90 mL) foi esfriada para 0°C e foi adicionada em porção à mistura preparada acima a 0°C. A mistura amarelo- clara resultante foi agitada vigorosamente a 0°C por 1,5 h, com o que sulfito de sódio (1,0 g) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada por 15 minutos a 23°C, então foi dividida entre água (400 mL) e acetato de etila (400 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solu- 5 ção seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo marrom- claro. O produto foi cristalizado a partir de etanol, dando a cetona MGC9 como um sólido branco (8,08 g, 80% em duas etapas). R, 0,80 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,26-7,48 (m, 6H, ArH), 6,98 (m, 2H, ArH), 5,19 (s, 2H, OCH2F), 2,62 (s, 3H, 10 C(=O)CH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 202,4, 155,5, 144,4, 136,3, 128,9, 128,7, 128,3, 127,2, 120,3, 115,2, 109,1, 71,3, 30,9; FTIR (puro), cm "1 3065 (w), 3032 (w), 2918 (m), 1701 (s, C=O), 1565 (m), 1426 (m), 1300 (s), 1271 (s), 1028 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (Ci5Hi3O2Br+H)+ 304,0099, encontrado 304,0105. Epóxido MGC10:
Figure img0095
Sulfóxido de dimetila (90 mL) foi adicionado em gotas através de seringa a uma mistura de iodeto de trimetilsulfoxônio sólido (694 mg, 3,15 mmoles, 1,3 equiv.) e hidreto de sódio sólido (60% em óleo, 126 mg, 3,15 mmoles, 1,3 equiv., lavado com três porções de 2 mL de n-hexano) a 23°C.
Evolução de gás vigorosa foi observada quando da adição. A mistura cinza nebulosa resultante foi agitada a 23°C por 40 min, então uma solução da cetona MGC9 (8,08 g, 26,5 mmoles, 1,0 equiv.) em sulfóxido de dimetila (30 mL) foi adicionada em gotas através de cânula. A transferência foi quantificada com uma porção de 2 mL de sulfóxido de dimetila. A mistura laranja 25 resultante foi agitada a 23°C por 35 h, então foi dividida entre salmoura (1 L) e éter (500 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção de 500 mL de éter. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o fil trado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de cromatografia flash (5:95 de acetato de etil-hexanos), dando o epóxido MGC10 como um óleo transparente (7,94 g, 94%). Rf 0,90 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,20-7,52 (m, 6H, ArH), 7,10 (dd, 1H. J=7,5, 1,2 Hz, o-ArH), 6,88 (dd, 1H, J = 8,1, 1,2 Hz, o-ArH), 5,16 (s, 2H, OCH2F), 3,03 (d, 1H, J = 4,8 Hz, CHH OCCH3), 2,87 (d, 1H, J= 4,8 Hz, CHH'OCCH3), 1.67 (s, 3H, COCH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 155,0, 143,4, 136,7, 128,8, 128,4, 128,2, 127,2, 121,2, 112,8, 112,3, 71,2, 59,7, 55,9, 22,9; FTIR (puro), cm "1 3034 (w), 2981 (w), 2925 (w), 1595 (w), 1567 (s), 1469 (s), 1423 (s), 1354 (s), 1300 (s), 1266 (s), 1028 (s); HRMS (ES) m/z calc. 318,0254.
Benzociclobutenol MGC11: um sólido esbranquiçado. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:9 a 2:9 de acetato de etil-hexanos), dando o trans- benzociclobutenol (MGC11 como um sólido branco (1,57 g, 67%). Rr 0,50 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,44 (d 5 amplo, 2H, J = 7,5 Hz, ArH), 7,38 (t amplo, 2H, J = 7,5 Hz, ArH), 7,22-7,34 (m, 2H, ArH), 6,82 (d, 1H, J = 8,5 Hz, o-ArH), 6,75 (d, 1H, J = 7,5 Hz, o-ArH), 5,35 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH’Ph) 5,25 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH’Ph)), 4,71 (d amplo, 1H, J = 5,5 Hz, CHOH), 3,31 (q amplo, 1H, J = 7,0 Hz, CH- CH3), 2,21 (d amplo, 1H, J = 7,0 Hz, OH), 1,38 (d, 3H, J = 7,0 Hz, CHCH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 154,0, 148,9, 137,4, 131,5, 128,5, 128,4, 127,8, 127,3, 115,2, 114,6, 77,6, 71,2, 50,6, 16,5; FTIR (puro), cm "1 3249 (m, OH), 2958 (w), 1602 (m), 1580 (s), 1453 (s), 1261 (s), 1039 (s); HRMS (ES) m/zcalc. para (CieHi6O2+H)+ 240,1150, encontrado 240,1154.
Benzociclobutenol MGC12:
Figure img0096
Trietilamina (336 μL, 2,41 mmoles, 1,4 equiv.) e trifluormetanos- sulfonato de trietilsilila (468 μL, 2,07 mmoles, 1,2 equiv.) foram adicionados em sequência a uma solução do benzociclobutenol MGC11 (500 mg, 1,72 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano ( 10 mL) a 23°C. A solução amarelo- clara foi agitada a 23°C por 15 minutos, então foi dividida entre água (30 mL) 20 e diclorometano (30 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (5:95 de acetato de etil-hexanos), dando o benzociclobutenol <GC12 (609 mg, 99%) como um óleo transparente. Rf 0,85 (1:4 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,48-7,32 (m, 5H, ArH), 7,24 (m, 2H, ArH), 6,82 (d, 1H, J = 8,4 Hz, o-ArH), 6,74 (d, 1H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 5,37 (d, 1H, J = 11,2 Hz, CHH’Ph), 5,20 (d, 1H, J = 11,2 Hz, CHH’Ph) 4,87 (d, 1H, J = 1,6 Hz, CHOTES), 3,45 (dq, 1H, J = 7,2, 1,6 Hz, CHCH3), 1,42 (d, 3H, J = 7,2 Hz, CHCH3), 0,98 (t, 9H, J = 7,6 Hz, TES), 0,56 (q, 6H, J = 7,6 Hz, TES); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 154,2, 148,8, 137,6, 131,3, 129,0, 128,7, 128,1, 127,8, 115,1, 114,7, 71,7, 49,9, 16,9, 7,1, 5 5,2, 5,1; FTIR (puro), cm *1 2952 (w), 2923 (w), 2854 (w), 1606 (w), 1469 (w), 1371 (m), 1265 (s), 1086 (s), 1057 (s), 1048 (s); HRMS (ES) m/z calc, para (C22H30O2Si+H)+ 354,2015, encontrado 354,2006. Sulfeto de Vinila MGC13:
Figure img0097
Perbrometo de bromidrato de piridínio sólido (293 mg, 0,917 10 mmol, 2,5 equiv.) foi adicionado a uma solução da cicloexenona DRS5 (135 mg, 0,367 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano (4 mL) a 23°C. A solução marrom foi agitada vigorosamente a 23°C por 17 horas com o que sulfeto de sódio (150 mg, 1,19 mmol, 3,25 equiv.) foi adicionado. A mistura resultante foi dividida entre uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 15 7,0, 0,2 M, 30 mL) e diclorometano (30 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um sólido espumante marrom-claro. O produto foi usado imediatamente sem purificação adicional. Rr 0,45 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 7,24 (d, 2H, 20 J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,02 (t, 2H, J = 7,0 Hz, m-ArH), 6,99 (d, 1H, J = 7,0 Hz, p- ArH), 6,42 (ddd, 1H, J = 6,0, 3,5, 2,0 Hz, CH=CBr), 5,12 (d, 1H, J = 12,5 Hz, CHH’Ph)), 5,03 (d, 1H, J = 12,5 Hz, CHH’Ph) 4,00 (s amplo, 1H, OH), 3,25 (d, 1H, J = 11,0 Hz, CHN(CH3)2), 2,28-2,22 (m, 2H, CH2CH, CH2CH), 2,16 (dd, 1H, J = 18,0, 6,0 Hz, CH2CH), 1,83 (s, 6H, N(CH3)2); FTIR (puro), cm’1 25 3397 (m, OH), 3063 (m), 2943 (m), 1714 (s, C=O), 1606 (s), 1514 (s), 1477 (s), 1371 (m), 1022 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (C2oHi9θ5BrN2)+ 447,0555, encontrado 447,0545.
Benzenotiol (39,0 μL, 0,378 mmol, 1,03 equiv) e 1,8- diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (56,0 μL, 0,378 mmol, 1,03 equiv) foram adicionados em seqüência a uma solução do produto preparado acima (164 mg, 0,367 mmol, 1,0 equiv.) em N,/V-dimetilformamida (4 mL) a 0°C. A mistura marrom escura resultante foi agitada vigorosamente a 0°C por 25 min, então foi dividida entre acetato de etil-hexanos (1:1, 30 mL) e uma solução de tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 15 mL de acetato de etil-hexanos (1:1). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (15:85 a 1:4 de acetato de etil- hexanos), dando o sulfeto de vinila MGC13 como uma espuma branca (116 mg, 66% em duas etapas). RÍ 0,47 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 7,34 (dd, 2H, J = 7,0, 1,0 Hz, o-ArH), 7,23 (d, 2H, J = 6,5 Hz, o-ArH), 6,85-7,04 (m, 6H, ArH), 6,27 (ddd, 1H, J = 6,0, 3,0, 1,0 Hz, CH=CSF), 5,11 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 5,02 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH’Ph) 4,62 (s amplo, 1H, OH), 3,42 (d, 1H, J = 10,5 Hz, CHN(CH3)2), 2,44 (ddd, 1H, J = 20,0, 5,5, 3,0 Hz, CH2CH), 2,27-2,34 (m, 2H, CH2CH, CH2CH), 1,87 (s, 6H, N(CH3)2); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 188,9, 187,4, 182,5, 167,6, 145,4, 135,3, 135,2, 132,8, 132,6, 129,5, 128,6, 128,4, 128,3, 128,0, 127,8, 108,1,80,3, 72,5, 59,8, 45,7, 41,4, 25,9; FTIR (puro), cm-1 3445 (w, OH), 3056 (w), 2943 (m), 2800 (w), 1711 (s, C=O), 1682 (s), 1600 (m), 1507 (s), 1471 (s), 1451 (m), 1333 (m), 1020 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C26H24O5N2S+H)+ 477,1484, encontrado 447,1465.
Produção de Adição de Diels-Alder MGC14 e Lactona MGC15:
Figure img0098
Um recipiente de reação contendo uma mistura de sulfeto de vinila MGC13 (131 mg, 0,275 mmol, 1,0 equiv.) e o benzociclobutenol MGC12 (750 mg, 2,11 mmoles, 7,7 equiv.) foi posto em um banho de óleo preaquecido para 85°C. A solução amarelo-clara foi agitada a 85°C por 48 horas, então foi deixada esfriar para 23°C. A mistura esfriada foi purificada através de cromatografia de coluna instantânea (1:19 a 1:4 de acetato de etil-hexanos), dando o produto de adição de Diels-Alder MGC14 como um sólido espumante esbranquiçado (145 mg, 64%), a lactona MGC15 como um óleo transparente (20,0 mg, 9%) e o benzociclobutenol recuperado MGC12 como um óleo claro (650 mg).
Produto de Adição de Diels-Alder MGC14: p.f. 178-179 °C; R/ 0,55 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, C6D6) δ 7,27 (d, 2H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 7,06-7,22 (m, 8H, ArH), 6,92-6,96 (m, 3H, ArH), 6,85 (d, 1H, J = 7,2 Hz, ArH), 6,70-6,75 (m, 3H, ArH), 6,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz, o-ArH), 5,75 (s, 1H, CHOTES), 5,29 (s amplo, 1H, OH), 5,16 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 5,10 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 4,66 (d, 1H, J = 10,8 Hz, OCHH'Ph'), 4,63 (d, 1H, J = 10,8 Hz, OCHH'Ph’), 4,36 (d, 1H, J = 6,6 Hz, CHN(CH3)2), 3,02 (dq, 1H, J = 7,8, 6,0 Hz, CH3CH), 2,77 (ddd, 1H, J = 6,6, 6,0, 4,2 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,41-2,52 (m, 2H, CHC- HH'CH, CH3CHCHCH2), 2,08 (s, 6H, N(CH3)2), 1,83 (ddd, 1H, J = 13,2, 4,2, 4,2 Hz, CHCHH'CH), 1,34 (d, 3H, J = 7,8 Hz, CH3CH), 0,70 (t, 9H, J = 7,8 Hz, Si(CH2CH3)3), 0,48 (d, 6H, J = 7,8 Hz, Si(CH2CH3)3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 196,3, 186,1, 181,4, 168,3, 156,3, 143,9, 137,6, 136,6, 135,4, 130,6, 129,8, 129,3, 128,6, 128,5, 128,4, 128,2, 128,0, 127,8, 125,4, 121,1, 109,3, 108,4, 80,6, 72,4, 70,2, 66,0, 62,5, 61,7, 43,2, 42,0, 38,1, 37,2, 27,4, 20,5, 6,9, 4,9; FTIR (puro), cm'1 3490 (w, OH), 3063 (w), 3023 (w), 2951 (m), 2871 (m), 1715 (s, C=O), 1602 (m), 1589 (m), 1513 (s), 1457 (s), 1366 (m), 1260 (s), 1065 (s), 1012 (s); HRMS (FAB) m/z calc. para (C48H54O7N2SSi+Na)+ 853,3318, encontrado 853,3314. Lactona MGC15: R, 0,55 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, C6D6) δ 7,34 (d, 2H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 7,02-7,18 (m, 11H, ArH), 6,72-6,84 (m, 4H, ArH), 6,54 (d, 1H, J = 7,8 Hz, o-ArH), 5,73 (s, 1H, CHOTES), 5,49 (d, 1H, J = 6,6 Hz, (C=O)OCHC=O), 5,20 (s, 2H, OCH2F), 4,60 (d, 1H, J= 11,4 Hz, OCHH’Ph'), 4,57 (d, 1H, J = 11,4 Hz, OCHH'Ph'), 3,49 (d, 1H, J = 11,4 Hz, CHN(CH3)2), 3,23 (dq, 1H, J = 9,0, 7,2 Hz, CH3CH), 2,49 (m, 1H, CH3CHCHCHH'), 2,302,40 (m, 2H, CHCHN(CH3)2, CH3CHCHCH2), 2,16 (dd, 1H, J = 12,0, 0,6 Hz, CHjjCHCHCHH’), 1,96 (s, 6H, N(CH3)2), 1,33 (d, 3H, J = 7,2 Hz, CH3CH), 0,73 (t, 9H, J = 7,8 Hz, Si(CH2CH3)3), 0,46-0,62 (m, 6H, Si(CH2CH3)3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 196,4, 176,0, 170,0, 157,9, 156,0, 144,0, 136,6, 136,5, 135,6, 129,8, 129,7, 129,4, 128,9, 128,6, 128,4, 128,3, 128,2, 128,1, 127,8, 125,1, 121,2, 108,8, 101,9, 75,9, 72,1, 70,1, 64,7, 64,6, 62,9, 41,4, 36,7, 35,6, 27,7, 21,7, 6,9, 4,9; FTIR (puro), cm"1 3062 (w), 3033 (w), 2950 (m), 2874 (m), 1731 (s, C=O), 1599 (m), 1590 (m), 1514 (s), 1453 (s), 1365 (m), 1259 (s), 1120 (s), 1059 (s), 1010 (s); HRMS (ES) m/z calc, para (C48H54θ7N2SSi+H)+ 831,3499, encontrado 831,3509. Álcool MGC16:
Figure img0099
Trifluoreto de trietilamina (200 μL, 1,23 mmol, 8,5 equiv.) foi adi-cionado a uma solução do produto de adição de Diels-Alder MGC14 (120 mg, 0,144 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (6 mL) a 23°C. A mistura foi agitada vigorosamente a 23°C por 12 horas, então foi dividida entre uma so- lução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 30 mL) e acetato de etila (30 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um sólido marrom-claro. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:4 a 1:1 de acetato de etil-hexanos), dando o álcool MGC16 como um óleo incolor (78,3 mg, 76%). RF 0,20 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, C6D6) δ 7,69 (dd, 2H, J = 7,2, 0,6 Hz, o-ArH), 7,24 (d, 2H, J = 7,2 Hz, ArH), 6,92-7,06 (m, 12H, ArH), 6,76 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,47 (d, 1H, J = 8,4 Hz, o-ArH), 5,44 (s amplo, 1H, CHOH), 5,18 (d, 1H, J=12,0 Hz, OCHH'Ph) 5,16 (d, 1H, J=12,0 Hz, OCHH’Ph) 4,57 (d, 1H, J = 12,6 Hz, OCHH’Ph’), 4,52 (d, 1H, J = 12,6 Hz, OCHH’Ph’), 3,44 (dq, 1H, J = 6,6, 5,4 Hz, CH3CH), 2,98 (d, 1H, J = 3,0 Hz, CHN(CH3)2), 2,90 (m, 1H, CHCHN(CH3)2), 2,76 (s amplo, 1H, OH), 2,32 (m, 1H, CH3CHCHCH2), 1,94 (m, 1H, CH3CHCHCH2), 1,79 (s, 6H, N(CH3)2), 1,07 (m, 1H, CH3CHCHCH2), 0,84 (d, 3H, J = 6,6 Hz, CH3CH); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) 8 202,5, 185,6, 179,2, 168,9, 156,9, 139,4, 139,1, 137,1, 136,5, 135,3, 130,5, 129,6, 128,8, 128,7, 128,6, 128,5, 128,4, 128,3, 127,8, 126,9, 124,7, 119,3, 110,0, 106,8, 82,3, 72,5, 69,9, 66,4, 64,2, 59,3, 43,0, 39,1, 37,8, 32,6, 25,3, 16,8; FTIR (puro), cm'1 3435 (w, OH), 3066 (w), 2964 (w), 2933 (w), 2871 (w), 1738 (s, C=O), 1698 (s, C=O), 1614 (m), 1583 (m), 1513 (s), 1471 (s), 1453 (s), 1369 (m), 1263 (m), 1035 (m), 1014 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (C42H4o07N2S+H)+ 717,2634, encontrado 717,2631. Tricetona MGC17:
Figure img0100
Ácido o-iodoxibenzóico sólido (459 mg, 1,64 mmol, 15,0 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do álcool MGC16 (78,3 mg, 0,109 mmol, 1,0 equiv) em sulfóxido de dimetila (3,0 mL) a 23°C. A mistura heterogênea resultante foi agitada por 5 min, com o que ela se tornou homo-gênea. O recipiente de reação foi protegido da luz e foi posto em um banho de óleo preaquecido par 35°C. A solução marrom foi agitada vigorosamente a 35°C por 18 horas, então foi dividida entre solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada-salmoura-água ( 2:1:1, 75 mL) e acetato de etila-éter (1:2, 35 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 25 mL de acetato de etila-éter (1:2). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:2 de acetato de etil-hexanos), dando a cetona MGC17 como um óleo amarelo (61,7 mg, 79%). Rf 0,45 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, C6D6) δ 7,57 (d, 2H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 7,40 (d, 2H, J = 7,2 Hz, ArH), 7,18-7,23 (m, 3H, ArH), 6,94-7,06 (m, 6H, ArH), 6,76-6,84 (m, 3H, ArH), 6,59 (d, 1H, J = 7,8 Hz, A- rH), 6,53 (d, 1H, J = 8,4 Hz, o-ArH), 5,09 (d, 1H, J = 12,6 Hz, OCHH’Ph) 4,96 5 (d, 1H, J = 12,6 Hz, OCHH'Ph) 4,77 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph'), 4,72 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph'), 4,48 (s amplo, 1H, OH), 4,06 (dq, 1H, J = 7,2, 3,0 Hz, CH3CH), 3,15 (d, 1H, J = 12,0 Hz, CHN(CH3)2), 2,20 (ddd, 1H, J = 12,6, 5,4, 3,0 Hz, CH3CHCHCH2), 2,13 (ddd, 1H, J = 12,0, 3,0, 0,6 Hz, CH- CHN(CH3)2), 1,81-1,88 (m, 7H, N(CH3)2, CH3CHCHCHH'), 1,78 (ddd, 1H, J = 10 13,8, 5,4, 0,6 Hz, CH3CHCHCHH'), 1,01 (d, 3H, J = 7,2 Hz, CH3CH); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 200,3, 187,5, 183,1, 167,8, 160,6, 146,4, 138,2, 137,1, 135,3, 134,3, 131,7, 129,6, 128,9, 128,6, 128,5, 128,4, 128,3, 127,7, 126,7, 121,3, 118,0, 112,8, 108,3, 82,9, 77,5, 72,4, 70,3, 58,1, 47,0, 44,1, 32,4, 18,7, 18,0, 16,3; FTIR (puro), cm"1 3457 (w, OH), 3063 (w), 2939 (w), 15 2878 (w), 2795 (w), 1727 (s, C=O), 1704 (s, C=O), 1667 (m, C=O), 1593 (s), 1513 (s), 1471 (s), 1453 (s), 1371 (m), 1276 (m), 1044 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (C42H3sO7N2S+H)+ 715,2478, encontrado 715,2483. Peróxido MGC18:
Figure img0101
Uma solução de ácido trifluoracético em diclorometano (1,0 M, 20 0,189 mL, 0,189 mmol, 2,5 equiv) e uma solução de ácido m- cloroperoxibenzóico em diclorometano (0,5 M, 0,228 mL, 0,114 mmol, 1,5 equiv) foram adicionadas em seqüência a uma solução do sulfeto MGC17 (54,2 mg, 0,0758 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano (4,0 mL) a -78°C. A mistura nebulosa resultante foi agitada a -78°C por 10 min, então o banho 25 de -78°C foi substituído com um banho a 0°C. A mistura se tornou homogênea quando do aquecimento. A solução foi agitada a 0°C por 30 min, então foi dividida entre uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 10 mL) e diclorometano (10 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo brilhante. O óleo foi tomado em tolueno (1 mL) e seco através de destilação azeotrópica a 40°C sob vácuo alto. O óleo amarelo resultante foi dissolvido em clorofórmio (2 mL) e o recipi- 5 ente de reação foi exposto a oxigênio atmosférico. A mistura foi deixada descansar até oxidação estar completa conforme evidenciado através de espectrometria de 1H RMN. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo o peróxido MGC18 como um óleo marrom. O produto foi reduzido imediatamente à tetraciclina.
O peróxido MGC18 pode ser também preparado seguindo o pro cedimento descrito por Wasserman (J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 42374238):
Uma solução de ácido trifluoracético em diclorometano (1,0M, 24,5 μL, 0,0245 mmol, 2,5 equiv.) e uma solução de ácido m, 15 cloroperoxibenzócio em diclorometano (0,5 M, 29,4 μL, 0,0147 mmol, 1,5 equiv.) foram adicionadas seqüencialmente a uma solução do sulfeto ‘ MGC17 (7,00 mg, 0,00979 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano (0,5 mL) a - 78°C. A mistura nebulosa resultante foi agitada a -78°C por 10 min, então o banho de -78°C foi substituído com um banho a 0°C. A mistura se tornou 20 homogênea quando sob aquecimento. A solução foi agitada a 0°C por 30 min, então foi dividida entre uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 8 mL) e diclorometano (8 mL). A fase orgânica foi separada e seca em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo brilhante. O óleo foi toma- 25 do em tolueno (1 mL) e seco através de destilação azeotrópica a 40°C sob vácuo alto. O óleo amarelo resultante foi dissolvido em clorofórmio (2 mL) e meso-tetrafenilporfina (0,6 mg, 0,979 μmol, 0,10 equiv.) foi adicionado em uma porção. Gás oxigênio foi borbulhado na mistura resultante sob irradiação de UV (lâmpada de Hg de 200W) por 10 min. A mistura foi concentrada 30 para 0,5 mL e foi diluída com metanol (5 mL) resultando em precipitação de meso-tetrafenilporfina. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo peróxido MGC18 como um sólido amarelo-claro. Rf 0,10 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CβDβ, tautômero ceto descrito) δ 8,95 (s amplo, 1H, OOH), 7,48 (d, 2H, J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,28 (d, 2H, J = 7,0 Hz, ArH), 6,96-7,16 (m, 8H, ArH), 6,53 (d, 1H, J = 8,0 Hz, ArH), 5,14 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH’Ph) 5,03 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'- 5 Ph) 4,83 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph'), 4,74 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’- Ph'), 4,60 (s amplo, 1H, OH), 3,54 (d, 1H, J= 11,0 Hz, CHCHN(CH3)2), 3,12 (dd, 1H, J = 18,0, 0,5 Hz, CHCHH'CH), 2,82 (dd, 1H, J= 18,0, 4,5 Hz, CHC- HH'CH), 2,44 (ddd, 1H, J = 11,0, 4,5, 0,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 1,86 (s, 6H, N(CH3)2), 1,01 (s, 3H, CH3); 13C RMN (100 MHz, C6D6, tautômeros ceto e 10 enol descritos) δ 194,4, 188,6, 187,8, 187,2, 182,3, 178,4, 171,9, 167,7, 165,6, 159,5, 158,4, 147,9, 145,9, 137,0, 136,8, 136,6, 135,4, 135,3, 134,5, 134,3, 133,5, 133,4, 133,1, 132,9, 131,0, 130,8, 130,2, 129,9, 129,7, 129,2, 128,9, 126,8, 126,7, 124,5, 124,3, 122,2, 118,6, 116,9, 116,5, 113,4, 113,3, 113,2, 108,2, 107,9, 103,3, 83,7, 81,7, 80,1, 79,1, 72,4, 70,7, 70,4, 63,9, 59,1, 46,1,44,9, 41,4, 40,8, 31,5, 30,0, 26,8, 22,9, 21,4; FTIR (película pura), cm"1 3035 (w), 2946 (w), 1907 (w), 1731 (s, C=O), 1410 (s), 1379 (m), 1235 (m), 1170 (m), 1136 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (C36H32O9N2+H)+ 637,2186, encontrado 637,2190.
Figure img0102
Negro de Pd (14,1 mg, 0,133 mmol, 1,75 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do peróxido MGC18 (48,2 mg, 0,0758 mmol, 1,0 equiv.) em dioxana (3 mL) a 23°C. Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com 25 hidrogênio puro (1 atm). O catalisador de Pd estava inicialmente presente como uma dispersão fina, mas agregou em grumos dentro de 5 minutos. A mistura heterogênea amarela foi agitada a 23°C por duas horas, então foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concentrado, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Polymerx DVB (10 μM, 250 x 10 mm, taxa de fluxo de 4,0 mL/min, Solvente A: metanol-0,005 N aq. HCI (1:4), Solvente B: ace- tonitrila) usando um volume de injeção de solvente A (500 μL) contendo áci- do oxálico (10 mg) e uma eluição isocrática de 5% de B por 2 min, então uma eluição de gradiente de 5-50% de B por 20 min. A eluição de pico a 1116 min foi coletada e concentrada, dando cloridrato de (-)-tetraciclina como um pó amarelo (16,0 mg, 44% de tricetona MGC17), que era idêntica a cloridrato de (-)-tetraciclina natural em todos os aspectos. 1H RMN (600 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 7,50 (dd, 1H, J = 8,4, 7,8 Hz, ArH), 7,13 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,91 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 4,03 (s, 1H, CHN(CH3)2), 2,96-3,04 (m, 7H, HOC(CH3)CH, N(CH3)2), 2,91 (amplo dd, 1H, J = 12,6, 2,4 Hz, (CH3)2NCHCH), 2,18 (ddd, 1H, J= 12,6, 6,0, 2,4 Hz, CHC- HH'CH), 1,90 (ddd, 1H, J = 12,6, 12,6, 12,0 Hz, CHCHH'CH), 1,60 (s, 3H, 15 CH3); 13C RMN (100 MHz, CD3OD) δ 195,4, 174,5, 163,8, 148,3, 137,8, 118,7, 116,4, 116,0, 107,5, 96,5, 74,7, 71,2, 70,1, 43,5, 43,0, 35,9, 27,8, 22,9; UV max (0,1 N HCI), nm 217, 269, 356; [a]D = -251° (c = 0,12 em 0,1 M HCI); lit. (Te Merck Index: An Encyclopedia of Chemicals, Drugs and Biologicals, 12a ed. Budavari, S.; O'Neal, M. J.; Smith, A.; Heckelman, P. E.; Kinneary, J. F., Eds.; Merck & Co.: Whitehouse Station, NJ, 1996; entrada 9337), UV max (0,1 N HCI), nm 220, 268, 355; [a]D = -257,9° (c = 0,5 em HCI 0,1 M); HRMS (ES) m/z calc. para (C22H24O8N2+H)+ 445,1611, encontrado 445,1608. Exemplo 2 - Síntese de (-)-Doxiciclina Brometo Alilico MGC19:
Figure img0103
Trifenilfosfina (297 mg, 1,13 mmol, 3,5 equiv.) e tetrabrometo de carbono (376 mg, 1,13 mmol, 3,5 equiv.) foram adicionados em seqüência a uma solução do álcool alilico MGC6 (162 mg, 0,324 mmol, 1,0 equiv.) em acetonitrila (2,5 mL) a 0°C. A suspensão marrom resultante foi agitada a 0°C por 10 min, então o banho de esfriamento foi removido. A mistura foi deixada aquecer para 23°C e a agitação foi continuada nesta temperatura por 10 min. A mistura foi dividida entre acetato de etila (50 mL) e solução de bicar- 5 bonato de sódio aquosa saturada (40 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção adicional de 50 mL de acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um sólido oleoso marrom. O produto foi purificado através de cromatografia 10 de coluna instantânea (1:9 a 2:8 de acetato de etil-hexanos), dando o brometo alílico MGC19 (164 mg, 90%) como um sólido branco. RÍ 0,30 (3:7 acetato de etil-hexanos);1 H RMN (500 MHz, C6D6) δ 7,30 (d, 2H, J = 7,0, o-ArH), 7,06 (dd, 2H, J = 7,0, 6,0 Hz, m-ArH), 7,01 (d, 1H, J = 6,0, p- ArH), 5,75 (dd, 1H, J = 10,5, 2,5 Hz, =CHCHBr), 5,71 (m, 1H, CH=CHCHBr), 15 5,17 (d, 1H, J = 11,5 Hz, OCHH'Ph) 5,07 (d, 1H, J = 11,5 Hz, OCHH'Ph) 4,69 (m, 1H, =CHCHBr), 4,43 (s amplo, 1H, OH), 4,24 (d, 1H, J = 7,0 Hz, CHOTBS), 3,57 (d, 1H, J = 10,0 Hz, CHN(CH3)2), 2,69 (ddd, 1H, J = 10,0, 4,5, 0,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 1,92 (s, 6H, N(CH3)2), 0,99 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,22 (s, 3H, SiCH3), -0,02 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, C6D6) δ 189,3, 20 181,3, 167,8, 135,2, 129,5, 128,6, 128,6, 128,5, 128,2, 127,6, 107,3, 80,8, 76,9, 72,4, 64,8, 54,6, 46,3, 41,5, 26,2, 18,4, -2,9, -4,2; FTIR (puro), cm ~1 3499 (m, OH), 2930 (m), 2856 (m), 2799 (w), 1704 (s, C=O), 1605 (s), 1514 (s), 1471 (s), 1362 (s), 1255 (s), 1144 (s), 1053 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C26H35BrN20sSi+H)+ 563,1577, encontrado 563,1575. Sulfeto Alílico MGC20:
Figure img0104
Trietilamina (0,229 mL, 1,64 mmol, 1,3 equiv.) e benzenotiol (0,150 mL, 1,45 mmol, 1,15 equiv.) foram adicionados em seqüência a uma solução do brometo alílico MGC19 (712 mg, 1,26 mmol, 1,0 equiv.) em ace- tonitrila (17 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 20 min, então o banho de esfriamento foi removido. A mistura de reação foi deixada aquecer para 23°C e a agitação foi continuada nesta temperatura por 10 min. A mistura de reação foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 100 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção adicional de 30 mL de acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando um óleo claro. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (0,01:2:8 a 0,013:7 de trietilamina-acetato de etil- hexanos), dando o sulfeto alílico MGC20 como um sólido espumante branco (728 mg, 97%). Rf 0,65 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (400 MHz, C6D6) δ 7,35 (d, 2H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 7,19 (m, 2H, o-ArH), 6,95 (m, 3H, p,m-ArH), 6,89 (m, 2H, p,m-ArH), 6,83 (d, 1H, J = 7,2 Hz, p-ArH), 5,51 (m, 1H, CH=CHCHSF), 5,12 (m, 2H, CHOTBS, OCHH’Ph) 5,05 (d, 1H, J = 12,4 Hz, OCHH’Ph) 4,73 (dt, 1H, J = 10,0, 2,0 Hz, CH=CHCHSF), 4,38 (m, 1H, CH=CHCHSF), 3,47 (m, 1H, CHCHN(CH3)2), 2,92 (d, 1H, J = 2,0 Hz, CHCHN(CH3)2), 1.75 (s, 6H, N(CH3)2), 1,14 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,35 (s, 3H, SiCH3), 0,31 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, C6D6) δ 189,9, 177,0, 168,9, 136,7, 135,2, 131,3, 130,3, 129,2, 128,5, 128,4, 128,3, 126,2, 124,0, 106,2, 79,2, 72,4, 71,7, 63,2, 49,8, 43,4, 39,0, 26,6, 19,1, -2,9, -4,5; FTIR (puro), cm “1 3310 (m, OH), 2927 (m), 2854 (m), 2792 (w), 1697 (s, C=O), 1621 (s), 1505 (s), 1470 (s), 1365 (s), 1254 (s), 1145 (s), 1089 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C32H4oN205SSi+H)+ 593,2505, encontrado 593,2509. Sulfóxido Rf Inferior MGC21:
Figure img0105
diast. Rf inferior (-)-[(8,8)-(Diclorocanforil)sunfonil]oxaziridina (118 mg, 0,395 mmol, 1,5 equiv) foi adicionado a uma solução do sulfeto alílico MGC20 (156 mg, 0,263 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano (2 mL) a 23°C. A mistura foi agitada a 23°C por 20 horas, então foi concentrada, provendo um sólido 5 marrom-claro. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (0,001:2:8 a 0,001:3:7 de trietilamina-acetato de etil-hexanos), dando o sulfóxido alílico Rf inferior MGC21 como um sólido branco (165 mg, 99%). Rf 0,18 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (400 MHz, C6D6) δ 7,43 (dd, 10 2H, J = 8,0, 1,5 Hz, o-ArH), 7,16 (m, 2H, o-ArH), 6,92 (m, 6H, p,m-ArH), 5,43 (m, 1H, CH=CHCHS(O)F), 5,33 (d, 1H, J = 5,0 Hz, CHOTBS), 5,09 (d, 1H, J = 11,5 Hz, OCHH'Ph) 5,02 (m, 2H, CH=CHCHS(O)F, OCHH'Ph) 3,73 (m, 1H, CH=CHCHS(O)F), 3,41 (m, 1H, CHCHN(CH3)2), 2,85 (d, 1H, J= 2,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 1,70 (s, 6H, N(CH3)2), 1,12 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,39 (s, 3H, 15 SiCH3), 0,36 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (125 MHz, C6D6) δ 189,5, 176,9, 168,8, 145,5, 135,2, 130,2, 129,9, 129,0, 128,5, 128,4, 128,3, 127,8, 124,3, 122,9, 106,1, 79,3, 72,4, 70,6, 67,8, 63,1, 43,4, 38,5, 26,6, 19,2, -2,6, -4,7; FTIR (puro), cm "1 3310 (m, OH), 2927 (m), 2854 (m), 2792 (w), 1697 (s, C=O), 1621 (s), 1505 (s), 1470 (s), 1365 (s), 1254 (s), 1145 (s), 1089 (s); 20 HRMS (ES) m/z calc. para (C32H4oN206SSi+H)+ 609,2455, encontrado 609,2452. Álcool Alílico Rearranjado MGC22:
Figure img0106
Trimetilfosfito (0,620 mL, 5,26 mmoles, 20,0 equiv.) foi adiciona- 25 do a uma solução do sulfóxido alílico Rf inferior MGC21 (160 mg, 0,263 mmol, 1,0 equiv.) em metanol (5 mL) a 23°C. A solução foi posta em um ganho de óleo preaquecido para 65°C e foi agitada nesta temperatura por 36 h. A solução foi concentrada, provendo um óleo amarelo-claro. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (0,001:1:9 a 0,001:2:8 de trietilamina-acetato de etil-hexanos), dando o álcool alílico MGC22 como um sólido branco (100 mg, 76%). Rf 0,40 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 7,30 (d, 2H, 5 J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,06 (dd, 2H, J = 7,5, 7,0 Hz, m-ArH), 7,00 (d, 1H, J = 7,5 Hz, p-ArH), 5,85 (m, 1H, =CHCHOH), 5,42 (d amplo, 1H, J = 10,5 Hz, =CHCHOTBS), 5,16 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph) 5,06 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph) 4,44 (m, 1H, =CHCHOH), 4,31 (s amplo, 1H, OH), 4,07 (s amplo, 1H, =CHCHOTBS), 3,34 (s amplo, 1H, OH), 3,33 (d, 1H, J = 11,5 Hz, CH- CHN(CH3)2), 2,75 (d amplo, 1H, J = 11,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,03 (s, 6H, N(CH3)2), 0,89 (s, 9H, SiC(CH3)3), -0,11 (s, 3H, SiCH3), -0,13 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (100 MHz, C6D6) δ 189,7, 182,2, 167,7, 135,2, 129,2, 128,8, 128,3, 128,2, 106,6, 78,6, 71,9, 68,1, 64,1, 59,6, 48,8, 41,2, 25,5, 17,8, -5,2, -5,6; FTIR (puro), cm "1 3515 (m, OH), 2917 (m), 2852 (m), 1708 (s, C=O), 1601 (s), 1511 (s), 1471 (m), 1369 (m), 1254 (m), 1100 (m), 1022 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C26H36N2O6Si+H)+ 501,2421, encontrado 501,2424. Carbonato de Benzila MGC23:
Figure img0107
Cloroformiato de benzila (120 μL, 0,841 mmol, 2,95 equiv.) e 4-(dimetilamino)piridina (104 mg, 0,852 mmol, 3,0 equiv.) foram adicionados em seqüência a uma solução do álcool alílico MGC22 (142 mg, 0,284 mmol, 1,0 equiv.) em diclorometano (3 mL) a 23°C. A mistura de reação foi agitada a 23°C por duas horas, então foi dividida entre acetato de etila (50 mL) e solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (50 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção de 30 mL adicional de acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo claro (180 mg, 99%). O produto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Uma amostra analítica foi preparada a través de purificação da mistura de reação bruta através de cromatografia de coluna instantânea (0,001:2:8 a 0,001:3:7 de trietilamina-acetato de etil- hexanos), dando o carbonato de benzila MGC23 como um sólido branco. Rr 0,60 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 7,26 (d, 2H, J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,02 (m, 8H, ArH), 5,75 (d amplod, 1H, J = 10,5, 3,0 Hz, =CHCHOCO2Bn), 5,70 (d amplod, 1H, J = 10,5, 2,5 Hz, =CHCHOTBS), 5,37 (m, 1H, =CHCHOCO2Bn), 5,10 (d, 1H, J= 12,5 Hz, OCHH'Ph) 5,06 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH'Ph) 4,91 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH’Ph'), 4,88 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph'), 4,41 (m, 1H, =CHCHOTBS), 3,38 (d, 1H, J = 7,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 3,11 (m, 1H, CHCHN(CH3)2), 1,92 (s, 6H, N(CH3)2), 0,92 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,02 (s, 3H, SiCH3), -0,02 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (100 MHz, C6D6) δ 188,9, 179,9, 168,3, 155,2, 135,6, 135,4, 133,2, 128,6, 128,5, 128,4, 128,3, 127,7, 124,9, 107,0, 77,3, 72,2, 71,6, 69,6, 66,6, 60,3, 44,4, 42,2, 25,9, 18,2, -4,8, -4,8; FTIR (puro), cm '1 3532 (w, OH), 2948 (m), 2842 (m), 1738 (s, C=O), 1708 (s, C=O), 1608 (s), 1512 (s), 1471 (m), 1383 (m), 1258 (s), 1101 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C34H42N2O8Si+H)+ 635,2789. Diol MGC24: BnOjCO u ÈKCH3)2 BnOjCO bl(CH3)2
Figure img0108
etapas
Ácido acético (40,0 μL, 0,709 mmol, 2,5 equiv.) e uma solução de fluoreto de tetrabutilamônio em tetraidrofurano (1,0 M, 0,709 mL, 0,709 mmol, 2,5 equiv.) foram adicionados em seqüência a uma solução do carbonato de benzila MGC23 (180 mg, 0,284 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (3 mL) a 23°C. A solução amarela resultante foi agitada a 23°C por 4 horas, então foi dividida entre acetato de etila (50 mL) e uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 50 mL).
A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 20 mL de acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (2:8 a 1:1 de acetato de etil-hexanos), dando o diol MGC24 como um sólido branco (135 mg, 92% em duas etapas). Rf 0,15 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 7,24 (d, 2H, J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,02 (m, 8H, ArH), 5,68 (amplo dd, 1H, J = 10,5, 2,5 Hz, =CHCHOCO2Bn), 5,63 (d amplod, 1H, J = 10,5, 3,0 Hz, =CHCHOH), 5,26 (m, 1H, =CHCHOCO2Bn), 5,09 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 5,05 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 4,89 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph'), 4,86 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph’), 4,16 (m, 1H, =CHCHOH), 3,24 (d, 1H, J = 6,5 Hz, CH- CHN(CH3)2), 2,94 (m, 1H, CHCHN(CH3)2), 2,25 (s amplo, 1H, OH), 1,82 (s, 6H, N(CH3)2); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 168,1, 154,8, 135,1, 134,9, 132,2, 128,9, 128,9, 128,8, 128,7, 128,6, 126,4, 106,7, 76,6, 72,9, 71,3, 70,3, 64,9, 60,3, 44,4, 43,3; FTIR (puro), cm "1 3468 (m, OH), 3034 (w), 2949 (m), 2798 (m), 1738 (s, C=O), 1705 (s, C=O), 1606 (s), 1513 (s), 1475 (m), 1379 (m), 1261 (s), 1022 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C28H28N2O8+H)+ 521,1929, encontrado 521,1926. Cicloexenona MGC25:
Figure img0109
Ácido o-iodoxibenzóico sólido (79,0 mg, 0,281 mmol, 6,5 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do diol MGC24 (22,5 mg, 0,0433 mmol, 1,0 equiv.) em sulfóxido de dimetila (0,7 mL) a 23°C. A mistura de reação era inicialmente heterogênea, mas ficou homogênea dentro de 5 min. A mistura de reação marrom foi protegida da luz e foi agitada vigorosamente a 23°C por 12 horas. A mistura de reação laranja resultante foi dividida entre éter (20 mL) e água (20 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 10 mL de éter. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (8 mL, contendo 30 mg de bissulfeto de sódio) e salmoura (10 mL). A solução lavada foi seca em sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado, dando a cicloexanona MGC25 como um sólido oleoso branco (22,2 mg, 99%). Rf 0,33 (2:3 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (400 MHz, C6D6) δ 7,22 (d, 2H, J = 6,8 Hz, o-ArH), 6,99 (m, 8H, ArH), 6,12 (ddd, 1H, J = 10,4, 4,0, 1,2 Hz, CH=CHCHOCO2Bn), 5,74 (dd, 1H, J = 10,4, 1,2 Hz, CH=CHCHOCO2Bn), 5,41 (ddd, 1H, J = 4,0, 1,2, 1,2 Hz, CH=CHCHOCO2Bn), 5,18 (s amplo, 1H, OH), 5,08 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH’Ph) 5,01 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 4,89 (d, 1H, J = 12,4 Hz, OCHH’Ph'), 4,83 (d, 1H, J = 12,4 Hz, OCHH'Ph'), 3,28 (d, 1H, J = 8,4 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,85 (ddd, 1H, J = 8,4, 4,0, 1,2 Hz, CHCHN(CH3)2), 1,92 (s, 6H, N(CH3)2); 13C RMN (100 MHz, C6D6) δ 192,3, 186,2, 180,5, 167,8, 154,8, 141,8, 135,3, 135,2, 129,9, 128,6, 128,6, 128,5, 128,4, 127,8, 107,7, 78,9, 72,5, 69,9, 59,9, 48,4, 41,9; FTIR (puro), cm "1 3442 (m, OH), 3030 (w), 2948 (m), 2793 (m), 1742 (s, C=O), 1711 (s, C=O), 1608 (s), 1510 (s), 1448 (m), 1376 (m), 1258 (s), 1056 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C28H26N2O8+H)+ 519,1767, encontrado 519,1773, Silil-cicloexenona MGC26:
Figure img0110
Trietilamina (172 μL, 1,24 mmol, 3,5 equiv.) e terc-butildimetilsilil trifluormetanossulfonato (243 μL, 1,06 mmol, 3,0 equiv.) foram adicionados em seqüência a uma solução da cicloexanona MGC25 (183 mg, 0,353 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (8 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 40 min, então foi dividida entre acetato de etila (50 mL) e uma so-lução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 50 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção de 25 mL de acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um sólido oleoso amarelo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:9 a 2:8 de acetato de etil-hexanos) dando a silil-cicloexanona MGC26 como um oleo transparente (207 mg, 93%). Rf 0,50 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (400 MHz, C6D6) δ 7,21 (dd, 2H, J = 7,5, 1,0 Hz, o-ArH), 7,15 (d, 2H, J = 8,0 Hz, o-ArH), 7,05 (t, 2H, J = 8,0 Hz, m-ArH), 6,98 (m, 4H, m,p-ArH), 6,30 (ddd, 1H, J = 10,5, 5,0, 2,0 Hz, CH=CHCHOCO2Bn), 5,68 (dd, 1H, J = 10,5, 1,0 Hz, CH=CHCHOCO2Bn), 5,65 (d amplo, 1H, J= 5,0 Hz, CH=CHCHOCO2Bn), 5,10 (d, 1H, J= 12,5 Hz, OCHH'Ph) 5,01 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph) 4,95 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph'), 4,82 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph'), 3,11 (d, 1H, J = 11,0 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,94 (d amplo, 1H, J = 11,0 Hz, CHCHN(CH3)2), 1,96 (s, 6H, N(CH3)2), 1,08 (s, 9H, SiC(CH3)3), 0,59 (s, 3H, SiCH3), 0,29 (s, 3H, SiCH3); 13C RMN (100 MHz, C6D6) δ 193,3, 186,7, 180,3, 167,8, 154,9, 140,9, 135,6, 135,3, 129,9, 128,6, 128,5, 128,5, 128,4, 128,0, 127,8, 108,6, 82,4, 72,4, 69,6, 69,3, 59,7, 50,2, 41,4, 26,5, 19,6, -1,9, -3,4; FTIR (puro), cm "1 2930 (m), 2855 (m), 1745 (s, C=O), 1722 (s, C=O), 1691 (m), 1613 (m), 1513 (s), 1473 (m), 1455 (m), 1378 (m), 1264 (s), 1231 (s), 1046 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C34H4oN208+H)+ 633,2632, encontrado 633,2620. Produto de Adição de Michael-Dieckmann MGC27:
Figure img0111
Uma solução de n-butillítio em hexanos (1,55 M, 155 μL, 0,241 mmol, 5,1 equiv.) foi adicionada a uma solução de N,N,N’,N'- tetrametiletilenodiamina (39,0 μL, 0,261 mmol, 5,5 equiv.) e diisopropil amina (34,0 μL, 0,249 mmol, 5,25 equiv.) em tetraidrofurano (1 mL) a -78°C. A mistura resultante foi agitada vigorosamente a -78°C por 30 min, com o que uma solução do éster CDL-l-280 (73,0 mg, 0,213 mmol, 4,5 equiv.) em tetraidrofu-rano (1 mL) foi adicionada em gotas através de cânula. A mistura vermelho- escura resultante foi agitada vigorosamente a -78°C por 75 minutos, então uma solução da silil-cicloexenona MGC26 (30,0 mg, 0,0474 mmol, 1,0 e- quiv.) em tetraidrofurano (1 mL) foi adicionada em gotas através de cânula. A mistura vermelho-clara resultante foi deixada aquecer lentamente para 0°C 5 durante duas horas, então foi dividida entre uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 10 mL) e diclorometano (10 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 10 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concen- 10 trado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere ODS (10 μM, 250 x 10 mm, taxa de fluxo de 3,5 mL/min, Solvente A: metanol, Solvente B: água) usando um volume de injeção de 400 μL (metanol) e uma eluição isocrática de 10% de B por 75 min. A eluição pico a 36-42 min foi coletada e concentrada, dan- 15 do o produto de adição de Michael-Dieckman MGC27 (33,0 g, 80%) como um sólido amarelo-claro. 0,35 (1:4 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 16,55 (s amplo, 1H, enol), 7,26 (d, 2H, J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,14 (d, 2H, J = 7,5 Hz, ArH), 6,85-7,05 (m, 6H, ArH), 6,66-6,74 (m, 2H, ArH), 6,51 (dd, 1H, J = 9,0, 20 1,5 Hz, ArH), 5,73 (d amplo, 1H, J = 4,0 Hz, BnOCO2CH), 5,17 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph) 5,03 (d, 1H, J= 12,5 Hz, OCHH’Ph) 4,99 (d, 1H, 12,5 Hz, OCHH’Ph'), 4,93 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH’Ph’), 3,58 (d, 1H, J = 11,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 3,35 (dd, 1H, J = 12,5» 4,0 Hz, CH3CHCH), 2,99 (d, 1H, Js 11,5 Hz» CHCHN(CH3)2). 2,56 (dq, 1H, J = 12,5, 7,0 Hz, CH3CH), 2,18 (s, 25 6H, N(CH3)2), 1,33 (s, 9H, C(CH3)3), 1,16 (d, 3H, J = 7,0 Hz, CH3CH), 1,11 (s, 9H, C(CH3)3), 0,61 (s, 3H, CH3), 0,36 (s, 3H, CH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 189,7, 186,3, 180,9, 178,4, 167,9, 154,7, 152,1, 150,8, 145,9, 136,1, 135,5, 133,9, 128,7, 128,6, 128,5, 127,3, 123,8, 122.7. 122.6. 108.9, 105,5, 83,0, 82,9, 74,8, 72,4, 69,2, 60,8, 52,7, 43,2, 38,4, 27,5, 26,6, 19,5, 30 16,3, -1,8, -2,7; FTIR (película pura), cm'1 2974 (w), 2933 (w), 2851 (w), 1760 (s, C=O), 1748 (s, C=O), 1723 (s, CO), 1606 (m), 1513 (m), 1471 (m), 1370 (m). 1260 (s), 1232 (s), 1148 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C48H56O12N2Si)+ 881,3681, encontrado 881,3684. Desproteção inicial de Produto de Adição de Michale-Dieckman MGC28: o o
Figure img0112
Ácido fluorídrico (1,2 mL, 48% aquoso) foi adicionado a um recipiente de reação de polipropileno contendo uma solução do produto de 5 adição de Michael-Dieckman MGC27 (33,0 mg, 0,0375 mmol, 1,0 equiv.) em acetonitrila (7,0 mL) a 23°C. A mistura resultante foi agitada vigorosamente a 23°C por 60 horas, então foi vertida em água (50 mL) contendo K2HPO4 (7,0 g). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 20 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solu- 10 ção seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando o fenol pentacíclico MGC28 como um óleo amarelo (25,0 mg, 99%). O produto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Rf 0,05 (1:4 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, C6D6, bruto) δ 14,86 (s amplo, 1H, enol), 11,95 (s, 1H, fenol), 7,23 (d, 2H, J = 7,8 Hz, o- 15 ArH), 7,14 (d, 2H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 6,94-7,02 (m, 6H, ArH), 6,86 (t, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,76 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,28 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 5,46 (dd, 1H, J= 3,6, 3,0 Hz, BnOCO2CH), 5,12 (d, 1H, J= 12,0 Hz, OCHH'Ph) 5,04 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 4,92 (s, 2H, OCH2F), 3,41 (d, 1H, J = 9,6 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,82 (dd. 1H, J = 9,6, 3,0 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,65 20 (dd, 1H, J = 13,2, 3,6 Hz, CH3CHCH), 2,78 (dq, 1H, J = 13,2, 7,2 Hz, CH3CH), 2,05 (s, 6H, N(CH3)2), 1,04 (d, 3H, J = 7,2 Hz, CH3CH); 13C RMN (100 MHz, C6D6, bruto) δ 193,4, 186,2, 181,3, 172,3, 167,9, 163,3, 154,6, 145,8, 136,6, 135,8, 128,6, 128,4, 127,2, 116,8, 116,0, 115,6, 107,6, 104,7, 76,8, 73,9, 72,5, 69,5, 60,3, 48,7, 43,0, 41,8, 37,5, 15,3; FTIR (película pura), 25 cm"1 3424 (m, OH), 3059, 3030, 2925, 2857, 1744 (s, C=O), 1713 (s, C=O), 1614 (s), 1582 (s), 1455 (s), 1252 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C37H34O10N2+H)+ 667,2292, encontrado 667,2300. (-)-Doxiciclina (MGC30):
Figure img0113
Negro de Pd (7,00 mg, 0,0657 mmol, 1,75 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do fenol pentaciclico MGC28 (25,0 mg, 0,0375 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano-metanol (1:1, 2,0 mL) a 23°C.
Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). O catalisador de Pd estava inicialmente presente como uma dispersão fina, mas agregou em grumos dentro de 5 min. A mistura heterogênea amarela foi agitada a 23°C por 2 h, então foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concen- trado, dando um óleo amarelo (>95% de doxiciclina baseado em análise de 1H RMN). O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenox Polimerx DVB (10 μM, 250 x 10 mm, taxa de fluxo 4,0 mL/min, Solvente A: metanol- HCI aq. 0,005 N (1:4), Solvente B: acetonitrila) usando um volume de injeção de solvente A (400 μL) contendo ácido oxálico (10 mg) e uma eluição isocrática de B 5% por 2 minutos, então uma eluição de gradiente de B 5-50% por 20 min. A eluição pico a 12-17 min foi coletada e concentrada, dando cloridrato de (-)-doxicilina como um pó amarelo (16,2 mg, 90%) que era idêntico ao cloridrato de (-)-doxiciclina natural em todos os aspectos. 1H RMN (600 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 7,47 (t, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,83 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 4,40 (s, 1H, (CH3)2NCH), 3,53 (dd, 1H, J = 12,0, 8,4 Hz, CHOH), 2,95 (s, 3H, N(CH3)CH3’), 2,88 (s, 3H, N(CH3)CH3’), 2,80 (d, 1H, J = 12,0 Hz, CH- CHN(CH3)2), 2,74 (dq, 1H, J = 12,6, 6,6 Hz, CH3CH), 2,58 (dd, 1H, J = 12,6, 8,4 Hz, CH3CHCH), 1,55 (d, 3H, J = 6,6 Hz, CH3CHCH); 13C RMN (100 MHz, CD3OD) δ 195,3, 188,2, 173,8, 172,1, 163,2, 149,0, 137,7, 117,1, 116,9, 116,6, 108,4, 96,0, 74,5, 69,8, 66,9, 47,5, 43,4, 43,0, 41,9, 40,0, 16,3; UV max (HCI metanólico 0,01 N), nm 218, 267, 350; [α]D = -109° (c = 0,16 em HCI metanólico 0,01 M); lit. (The Merck Index: An Encyclopedia of Chemicals, Drugs and Biologicals, 12* ed. Budavari, S.; O'Neal, M. J.; Smith, A.; Heckelman, P. E.; Kinneari, J. F., Eds.; Merck & Co.: Whitehouse Station, NJ, 1996; entrada 3496,) UV max (HCI metanólico 0,01 N), nm 267, 351; [α]D = -110° (c = 1 em HCI metanólico 0,01 M); HRMS (ES) m/z calc, para (C22H24θ8N2+H)+ 445,1611, encontrado 445,1603. Exemplo 3 - Síntese de 6-Desoxitetraciclina Éster CDL-l-280:
Figure img0114
Uma solução de sec-butillitio em cicloexano (1,40 M, 24,0 mL, 33,6 mmoles, 2,6 equiv.) foi adicionada a uma solução de N,N,N’,N‘- tetrametiletilenodiamina (4,9 mL, 33 mmoles, 2,5 equiv.) em tetraidrofurano (25 mL) a -78°C. A solução amarela resultante foi esfriada para -90°C (tem-peratura interna) em um banho de nitrogênio líquido-etanol. Uma solução de ácido o-anísico (2,00 g, 13,1 mmoles, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (10 mL) foi adicionada em gotas através de cânula durante um período de 30 min à solução amarela. A suspensão laranja resultante foi agitada por mais 30 min a -90°C, então foi deixada aquecer para -78°C durante 15 min, com o que iodoetano (4,2 mL, 52 mmoles, 4,0 equiv.) foi adicionado. A mistura foi dei-xada aquecer para 23°C durante 15 min, então foi dividida entre água (50 mL) e éter (50 mL). A camada aquosa foi separada e diluída com ácido clo-rídrico aquoso (1,0M, 100 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4 x 80 mL). As camadas orgânicas foram combinadas e então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concen-trado, provendo um óleo marrom (1,8 g). 1H RMN (500 MHz, CDCI3) análise do produto bruto mostrou uma razão 8:2 do ácido carboxílico CDL-l-279 (δ 3,89, 0CH3) e ácido anísico não-reagido (δ 4,07, OCH3). Cloreto de oxalila (1,0 mL, 11 mmoles, 0,8 equiv.) e N./V-dimetilformamida (100 μL) foram adi-cionados em seqüência a uma solução do resíduo em diclorometano (20 mL) a 23°C. Evolução de gás vigorosa foi observada quando da adição de N,/V- 5 dimetilformamida. A mistura de reação foi agitada por duas horas a 23°C, com o que fenol (1,4 g, 15 mmoles, 1,1 equiv.), piridina (2,4 mL, 30 mmoles, 2,3 equiv.) e 4-(dimetilamino)piridina (10 mg,0,081 mmol, 0,006 equiv.) foram adicionados em seqüência a 23°C. A mistura de reação marrom resultante foi então agitada por duas horas a 23°C. Ácido clorídrico aquoso (1 M, 50 10 mL) foi adicionado e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, então lavadas com uma solução de hidróxido de sódio aquosa (0,1 M, 50 mL), seguido por salmoura (50 mL) e foram então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo transparente. O produ- 15 to foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (5:95 de acetato de etil-hexanos), dando o éster CDL-l-280 como um óleo incolor (1,7 g, 50%). Rf 0,28 (5:95 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,56 (t, 2H, J = 7,8 Hz, ArH), 7,37 (t, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 7,31-7,26 (m, 3H, ArH), 20 6,93 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,85 (d, 1H, J = 8,3 Hz, ArH), 3,91 (s, 3H, O- CH3), 2,79 (q, 2H, J = 7,8 Hz, CH2CH3), 1,33 (t, 3H, J = 7,8 Hz, CH2CH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 166,9, 156,5, 150,8, 142,8, 130,9, 129,5, 125,9, 122,5, 121,6, 120,9, 108,5, 55,9, 26,6, 15,6; FTIR (película pura), cm-1 2970 (m), 1740 (s, C=O), 1583 (s), 1488 (s), 1471 (s), 1438 (m), 1298 (w), 1270 25 (s), 1236 (s), 1186 (s), 1158 (m), 1091 (m), 1046 (s), 1001 (w); HRMS (ES) m/z calc. para (C16HI6O3+H)+ 257,1178, encontrado 257,1183. Fenol CDL-l-298:
Figure img0115
Uma solução de tribrometo de boro em diclorometano (1,0 M, 5,2 mL, 5,2 mmoles, 2,0 equiv.) foi adicionada a uma solução do éster CDL- I-280 (662 mg, 2,58 mmoles, 1,0 equiv.) em diclorometano (10 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi agitada por 70 minutos a 0°C, com o que a solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (50 mL) foi adicionada. A mistura bifásica resultante foi agitada por 20 minutos a 0°C, diclorometano (50 mL) foi adicionado, as camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída mais com diclorometano (50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas e então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo o fenol CDL-l-298 como um óleo incolor (605 mg, 97%). RÍ 0,47 (5:95 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 10,94 (s, 1H, OH), 7,49 (t, 2H, J = 7,8 Hz, ArH), 7,41 (t, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 7,35 (t, 1H, J = 7,3 Hz, ArH), 7,24 (d, 2H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,93 (d, 1H, J = 8,3 Hz, ArH), 6,85 (d, 1H, J = 8,3 Hz, ArH), 3,13 (q, 2H, J = 7,8 Hz, CH2CH3), 1,34 (t, 3H, J = 7,8 Hz, CH2CH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 170,3, 163,2, 149,8, 147,8, 135,1, 129,7, 126,4, 122,0, 121,6, 115,9, 111,1, 29,8, 16,4; FTIR (película pura), cm-1 2973 (w), 1670 (s, C=O), 1609 (m), 1588 (m), 1490 (w), 1444 (m), 1311 (m), 1295 (m), 1234 (m), 1187 (s), 1162 (s), 1105 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (Ci5H14O3+H)+ 243,1021, encontrado 243,1014. Éster CDL-l-299:
Figure img0116
N,/V-diisopropiletilamina (520 μL, 2,99 mmoles, 1,2 equiv.), dicarbonato de di-t-butila (645 mg, 2,96 mmoles, 1,2 equiv.) e 4-(dimetil- amino)piridina (31 mg, 0,25 mmol, 1,5 equiv.) foram adicionados em se- qüência a uma solução do fenol CDL-l-298 (605 mg, 2,50 mmoles, 0,1 e- quiv.) em diclorometano (10 mL) a 23°C. A mistura de reação foi agitada por uma hora a 23°C, com o que solução de cloreto de amónio aquosa saturada (50 mL) foi adicionada. Diclorometano (50 mL) foi adicionado, as camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com diclorometano (50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas e então secas em sulfato de sódio. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo marrom. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (1:9 de éter-hexanos), dando o éster CDL-l-299 como um óleo incolor, 5 que cristalizou quando descansando a -14°C (733 mg, 86%), p.f. 58°C. Rr 0,23 (1:9 éter-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,46-7,42 (m, 3H, ArH), 7,31-7,26 (m, 3H, ArH), 7,22 (d, 1H, J = 7,3 Hz, ArH), 7,15 (d, 1H, J = 7,3 Hz, ArH), 2,86 (q, 2H, J = 7,3 Hz, CH2CH3), 1,46 (s, 9H, Boc), 1,31 (t, 3H, J = 7,3 Hz, CH2CH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 165,1, 151,6, 150,6, 10 148,7, 144,5, 131,3, 129,4, 126,8, 126,1, 125,4, 121,7, 120,5, 83,8, 27,5, 26,8, 15,6; FTIR (película pura), cm"1 2964 (w), 1754 (s, C=O), 1586 (w), 1491 (w), 1467 (w), 1457 (w), 1368 (w), 1278 (s), 1234 (s), 1190 (s), 1145 (s), 1051 (m); HRMS (ES) m/z calc. para (C20H22O5+NH4)+ 360,1811, encontrado 360,1808. Produto de Adição de Michale-Dieckman CDL-l-287:
Figure img0117
Uma solução de n-butillíto em hexanos (1,45 M, 47 μL, 0,068 mmol, 6,8 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (10 μL, 0,071 mmol, 7,1 equiv.) e N,N,N',N'-tetrametiletilenodiamina (10 μL, 0,066 mmol, 6,6 equiv.) em tetraidrofurano (300 μL) a -78°C. A solução resultante foi agitada a -78°C por 30 minutos, com o que uma solução do éster CDL-I- 299 (17 mg, 0,050 mmol, 5,0 equiv.) em tetraidrofurano (200 μL) foi adicio nada, formando uma solução vermelho-escura. A solução foi agitada a -78°C por 75 minutos, então uma solução da enona DRS6 (5,0 mg, 0,010 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (100 μL) foi adicionada a -78°C. A cor da mistura de reação permaneceu vermelho-escura seguindo a adição. A mistura foi deixada aquecer para 0°C durante 150 minutos. Quando atingiu 0°C, uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 15 mL) foi adicionada. A mistura amarela resultante foi extraída com diclorometano (3 x 15 mL). As camadas orgânicas foram combinadas e então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere ODS (5 μm, 250 x 10 mm, taxa de fluxo 3,5 mL/min, Solvente A: águar, Solvente B: metanol, detecção de UV a 350 nm) usando um volume de injeção de 500 μL de metanol com uma elui- 10 çâo isocrática de 89,5% de B. A eluição pico a 31-40 min foi coletada e con centrada dando o produto Michael-Dieckman CDL-l-287 como um sólido amarelo-claro (6,1 mg, 83%), p.f. 114°C. R/0,37 (2:8 tetraidrofurano-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ (s, 1H, 16,24, enol-OH), 7,55-7,50 (m, 3H, ArH), 7,40-7,35 (m, 4H, ArH), 15 7,10 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 5,39-5,34 (m, 2H, OCH2F), 3,92 (d, 1H, J = 10,7 Hz. CHN(CH3)2), 2,81-2,71 (m, 2H, CH3CH, CH3CHCH), 2,55 (dd, 1H, J = 10,7, 5,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,48 (s, 6H, N(CH3)2), 2,40 (d, 1H, J = 14,7 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 2,31 (ddd, 1H, J = 14,7, 9,3, 5,7, CHH’CH- CHN(CH3)2), 1,56 (s, 3H, CH3), 1,55 (s, 9H, Boc), 0,84 (s, 9H, TBS), 0,27 (s, 20 3H, TBS), 0,13 (s, 3H, TBS); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 187,4, 183,1, 182,8, 181,6, 167,6, 151,7, 150,2, 147,4, 135,0, 134,0, 128,5, 128,5, 123,4, 123,0, 122,4, 108,3, 107,4, 94,8, 83,9, 81,5, 72,5, 61,5, 46,4, 41,9, 39,5, 34,9, 27,7, 26,0, 20,7, 19,0, 16,0, -2,6, -3,7; FTIR (película pura), cm’1 2923 (m), 2841 (m), 1759 (s, CO), 1718 (s, CO), 1605 (s), 1508 (s), 1467 (m), 25 1456 (m), 1369 (m), 1277 (s), 1262 (m), 1231 (s), 1144 (s), 1005 (w); HRMS (ES) m/z cate, para (C^HsoNaOgSi+H)* 731,3364, encontrado 731,3370. 64)esoxitetraciçJinaCDL4á22
Figure img0118
Ácido fluorídrico (0,6 mL, 48% aquoso) foi adicionado a um reci-piente de reação de polipropileno contendo uma solução de produto de adi-ção de Michael-Dieckman CDL-l-287 (15 mg, 0,021 mmol, 1,0 equiv.) em acetonitrila (3,5 mL) a 23°C. A mistura de reação foi agitada a 23°C por 55 horas, então foi vertida em água (20 mL) contendo K2HPO4 (4,0 g). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4 x 20 mL). As fases orgânicas foram combinadas e então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo-claro. Negro de Pd (7,6 mg, 0,071 mmol, 3,4 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do resíduo em metanol-tetraidrofurano (1:1, 2 mL). Uma atmosfera de gás hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura foi agitada a 23°C por duas horas. Dentro de 5 min, a cor mudou de amarelo-claro para amarelo escuro. A mistura de reação foi filtrada em uma almofada de algo-dão. O filtrado foi concentrado, dando um óleo amarelo (10 mg). O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenox Po- limerx DVB (10 μm, 250 x 10 mm, taxa de fluxo 5 mL/min, Solvente A: meta-nol- HCI 0,02 N (1:4), Solvente B: acetonitrila, detecção UV a 365 nm) usando um volume de injeção de 400 μL de metanol contendo monoidrato de ácido oxálico (10 mg) e uma eluição isocrática de 18% de B por 15 min, então uma eluição de gradiente linear de 18-60% de B em 15 min. A eluição pico a 17,5-22,5 min foi coletada e concentrada para dar cloridrato de 6- desoxitetraciclina (DCL-I-322 HCI) como um pó amarelo (8,1 mg 81%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 7,49 (t, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,95 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,84 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 4,09 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,03 (s amplo, 3H, N(CH3)), 2,97 (s amplo, 3H, N(CH3)), 2,90 (d amplo, 1H, J = 12,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,67 (ddd, 1H, J = 12,7, 12,7, 5,2 Hz, CH3CHCH), 2,61-2,56 (m, 1H, CH3CH), 2,30 (ddd, J = 13,7, 5,2, 2,9 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 1,54 (ddd, J = 13,7, 12,7, 12,7 Hz, CHH’CH- CHN(CH3)2), 1,38 (d, 3H, J = 6,8 Hz, CH3CH). HRMS (ES) m/z calc. para (C22H24N2O7+H)+ 429,1662, encontrado 429,1660. Exemplo 4 - Síntese de Análogo de Pirídona Sanciclina Fenil Éster CDL-l-464:
Figure img0119
Cloreto de 2,4,6-triclorobenzoíla (365 μL, 2,28 mmoles, 1,1 e- quiv.) foi adicionado a uma solução do ácido carboxílico CDL-ll-417 (descrito por A.N. Osman, M.M Ismail, M.A. Barakat, Revue Roumaine de Chime 1986, 31, 615-624) (534 mg, 2,08 mmoles, 1,0 equiv.) e trietilamina (320 μL, 2,28 mmoles, 1,1 equiv.) em tetraidrofurano (25 mL) a 23°C. Um precipitado branco foi formado quando da adição. A mistura de reação foi agitada por 30 min a 23°C. Uma solução de fenol (489 mg, 5,20 mmoles, 2,5 equiv.) e 4- (dimetilamino)piridina (583 mg, 5,20 mmoles, 2,5 equiv.) em tetraidrofurano (10 mL) foram adicionados através de cânula à mistura de reação preparada acima a 0°C. A mistura resultante foi deixada aquecer para 23°C durante 10 min e foi agitada por 90 min nesta temperatura. Uma solução tampão de fos-fato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 30 mL) foi então adicionada e a mis-tura resultante foi extraída com diclorometano (3 x 30 mL). Os extratos orgâ-nicos foram combinados e então secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado concentrado, provendo um óleo incolor. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (6:94 de acetato de etil-hexanos), sando o fenil éster CDL-ll-464 como um sólido branco (590 mg, 85%), p.f. 65°C. Rf 0,33 (1:9 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 7,49 (d, 2H, J = 7,3 Hz, ArH), 7,40-7,24 (m, 6H, ArH), 7,14 (d, 2H, J = 7,3 Hz, ArH), 6,69 (s, 1H, pir-H), 5,49 (s, 2H, CH2F), 2,47 (s, 3H, CH3), 2,43 (s, 3H, CH3); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 165,9, 160,1, 157,8, 150,7, 148,5, 137,3, 129,4, 128,3, 127,7, 127,6, 125,9, 121,7, 118,1, 113,4, 67,8, 24,1, 19,2; FTIR (película pura), cm 1 1738 (s, C=O), 1600 (s), 1569 (s), 1492 (m), 1441 (m), 1400 (m), 1333 (s), 1272 (s), 1185 (s), 1159 (m), 1097 (m), 1051 (s); HRMS (ES) m/z calc, para (C21H19NO3+H)* 334,1443, encontrado 334,1442. Produto de Adição de Michael-Dieckmann CDL-ll-466:
Figure img0120
Uma solução de n..butillítio em hexanos (1 ,67 M, 80 J.LL, 0,13 mmol, 4,2 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (20 μL, 0,14 mmol, 4,5 equiv.) em tetraidrofurano (2,5 mL) a -78°C. A solução resultante foi deixada aquecer para 0’C durante 15 min. N,N’- dimetilpropilenouréia (17 μL, 0,14 mmol, 4,5 equiv.) foi adicionado à mistura preparada acima a 0°C, com o que a mistura foi esfriada para -78°C. Uma solução do éster CDL-ll-464 (31 mg, 0,093 mmol, 3,0 equiv.) em tetraidrofurano (250 μL) foi então adicionada a -78°C. A solução amarela resultante foi agitada por 5 min a -78°C, então uma solução da enona DRS6 (15 mg, 0,031 mmol, 1,0 equiv.) em tetraidrofurano (250 μL) foi adicionada a -78°C. A mistura vermelho-escura resultante foi deixada aquecer para 0°C durante 4 horas. Ácido acético (40 μL) foi adicionado á mistura vermelho-escura a 0°C, seguido por uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 15 mL). A mistura amarela resultante foi extraída com diclorometano (3x15 mL). Os extratos orgânicos foram combinados e então secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere ODS (5 μm, 250 x 10 mm, taxa de fluxo 3,5 mL/min, Solvente A: água, Solvente B: metanol, detecção de UV a 350 nm) usando um volume de injeção de 500 μL de DMSO e uma eluição de gradiente de 92-100% de B durante 30 min. O pico eluindo a 2129 min foi coletado e concentrado para dar enol CDL-ll-466 como um sólido amarelo-claro (15,0 mg, 67%). Rf 0,55 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, CD2CI2) δ 16,05 (s, 1H, enol-OH), 7,52-7,26 (m, 10H, ArH), 6,66 (s, 1H, pir-H), 5,57 (d, 1H, J = 12,7 Hz, OCHH'Ph), 5,43 (d, J = 12,7 Hz, 1H, OCHH'Ph), 5,33-5,28 (m, 2H, OCH2F), 3,99 (d, 2H, J = 10,5 Hz, CHN(CH3)2), 3,04-3,00 (m, 1H, CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,84 (dd, 1H, J = 16,1, 4,9 Hz, CHH’CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,74 (dd, 1H, J = 16,1, 16,1 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,53 (dd, 1H, J = 10,5, 3,9 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,512,43 (m, 10H, N(CH3)2, Ar-CH3, CHH’CHCHN(CH3)2), 2,07 (d, 1H, J = 14,2 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 0,82 (s, 9H, TBS), 0,22 (s, 3H, TBS), 0,10 (s, 3H, TBS); 13C RMN (100 MHz, CD2CI2) δ 187,9, 185,2, 182,5, 178,8, 167,9, 161,9, 161,8, 154,8, 137,9, 135,6, 129,1, 129,0, 129,0, 128,7, 127,9, 127,9, 116,4, 111,6, 108,6, 107,5, 82,0, 73,0, 68,1, 61,7, 46,9, 42,0, 39,2, 28,6, 26,1, 24,6, 23,0, 19,3, -2,4, -3,5; FTIR (película pura), cm-1 2939 (m), 2857 (w), 1720 (s, C=O), 1593 (s), 1510 (s), 1469 (m), 1449 (m), 1326 (s), 1254 (m), 1187 (w), 1157 (m), 1090 (m), 1064 (m), 1007 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (C4iH47N3O7Si+H)+ 722,3262, encontrado 722,3261. Análogo de Piridona Sanciclina CDL-ll-460:
Figure img0121
Hidróxido de paládio sobre carbono (20% em peso de Pd, máx. de água 50%, 10 mg, 0,0094 mmol, 0,7 equiv.) foi adicionado a uma solução o produto de adição de Michael-Dieckman CDL-ll-466 (10 mg, 0,014 mmol, 1,0 equiv.) em dioxana-metanol (1:1, 10 mL) a 23°C. Uma atmosfera de gás hi-drogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchi-mento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura resultante foi agitada a 23°C por duas horas. A cor ficou verde após 5 min e então gradualmente para ama- relo dentro do tempo de reação. A mistura foi filtrada em uma almofada de algodão e então concentrada para um óleo amarelo. Ácido clorídrico aquoso (37%, 100 μL) foi adicionado a uma solução do resíduo em metanol (10 mL) a 23°C. A reação foi monitorada através de HPLC preparativa em uma coluna
Coulter Ultrasphere CDS (5 μm, 250 x 4,6 mm, taxa de fluxo 1 mL/min, Solvente A: água, Solvente B: TFA 0,1% em acetonitrila, detecção de UV a 395 nm) com uma eluição de gradiente de 10-100% de B durante 15 min. O pico em 7,0 min indicou o produto desejado. Após agitar por 3 h a 23°C a desproteção foi completada e a mistura foi concentrada para dar um óleo amarelo. A mistura bruta foi purificada através de HPLC preparativa em uma coluna Phe- nomenex Polymerx DVB (10 μm, 250 x 10 mm, taxa de fluxo de 4 ml/min, Sol-vente A: ácido clorídrico aquoso 0,01 N, Solvente B: acetonitrila, detecção de UV a 365 nm) usando um volume de injeção de 500 μl de metanol contendo monoidrato de ácido oxálico (30 mg) e um gradiente linear de 0-20% de B du- rante 40 minutos. O pico eluindo a 20-29 minutos foi coletado e concentrado para dar o cloridrato de CDL-ll-460 como um pó amarelo (4,8 mg, 74%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 6,37 (s, 1H, ArH), 4,06 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,05-2,95 CH2CHCHN(CH3)2), 2,79 (m, (dd, 8H, 1H, N(CH3)2, J = 16,1, CHCHN(CH3)2, CH- 3,9 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,55 (dd, 1H, J = 16,1, 16,1 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2)), 2,40 (s, 3H, Ar-CH3), 2,18 (br. d, 1H, J = 12,7 Hz, C- HH'CHCHN(CH3)2), 1,59 (ddd, 1H, J = 12,7, 12,7, 12,7 Hz, CHH'CH- CHN(CH3)2); 13C RMN (100 MHz, (CD3)2SO) δ 187,3, 183,5, 177,8, 172,1, 160,6, 159,8, 153,3, 115,3, 107,2, 106,9, 95,6, 74,2, 68,4, 41,5, 35,7, 34,5, 25 33,9, 31,0, 19,2; HRMS (ES) m/z calc. para (C21H23N3O7+H)+ 430,1614, en contrado 430,1607. Exemplo 5 - Síntese de Análogo de Piridino Sanciclina (7-Aza-10- Desoxisanciclina)
Figure img0122
Uma solução de etil éster do ácido 2-metil-nicotínico JDB1-67- SM (0,589 g, 3,56 mmoles, 1,0 equiv.), hidróxido de sódio aquoso (1,0 M, 3,9 mL, 3,9 mmoles, 1,1 equiv.) e etanol (5 mL) foi aquecida em refluxo por 18 horas. A mistura de reação foi deixada esfriar para 23°C e foi concentrada, 5 dando o sal de carboxilato (710 mg) como um sólido branco. Cloreto de oxalila (357 μL, 4,09 mmoles, 1,15 equiv.) foi adicionado a uma mistura do sal de carboxilato em diclorometano (20 mL) a 23°C. Evolução de gás vigorosa foi observada quando da adição. A mistura de reação foi agitada a 23°C por 30 min, então /\/,/V-dimetilformamida (20 μL) foi adicionada. Após agitar por 10 mais 30 min a 23°C, fenol (837 mg, 8,90 mmoles, 2,5 equiv.), piridina (864 μL, 10,7 mmoles, 3,0 equiv.) e dimetilaminopiridina (3 mg) foram adicionados em seqüência. A solução resultante foi agitada por 90 min a 23°C, com o que uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,05, 0,2 M, 5,0 mL) foi adicionada. A mistura resultante foi dividida entre água (30 mL) e 15 acetato de etila (50 mL). A fase aquosa foi extraída com uma porção adicional de 50 mL de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e lavada com uma solução de hidróxido de sódio aquosa (50 mL, 1 M), salmoura (50 mL) e então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi decantada e concentrada, dando um óleo incolor (900 mg). O produto foi 20 purificado através de cromatografia de coluna instantânea (25:75 de acetato de etil-hexanos), provendo o éster JDB1-67 como um óleo incolor (500 mg, 66%). Rf 0,15 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 8,70 (dd, 1H, J = 1,7, 4,95 Hz, pir-H), 8,44 (dd, 1H, J = 1,7, 7,8 Hz, pir-H), 7,48-7,43 25 (m, 2H, ArH), 7,33-7,20 (m, 4H, ArH, pir-H), 2,93 (s, 1H, CH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 164,8, 160,8, 152,4, 150,5, 138,9, 129,5, 126,1, 124,5, 121,6, 121,0, 25,0; FTIR (película pura), cm-1 3406 (m), 1948 (w), 1747 (s), 1578 (s), 1487 (s), 1435 (s), 1273 (s), 1237 (s), 1191 (s), 1046 (s), 915 (m), 822 (m), 749 (s), 689 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C13HnNO2+H)+ 214,0868, 30 encontrado 214,0866.
Figure img0123
Uma solução de n-butillítio em hexanos (1,47 M, 136 μL, 0,200 mmol, 8,03 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (26,5 μL, 0,202 mmol, 8,05 equiv.) em tetraidrofurano (0,750 mL) a -78°C. A mistura de reação foi rapidamente (10 min) transferida para um banho frio, com agitação, então foi esfriada para -78°C. Hexametilfosforoamida (49,0 μL, 0,399 mmol, 16,0 equiv.) foi adicionada à mistura preparada acima a -78°C. A mistura resultante foi agitada por 5 minutos com o que uma solução incolor se formou. A solução resultante foi adicionada em gotas através de cânula a uma solução do éster JDB1-67 (36,0 mg, 0,169 mmol, 6,97 equiv.) e a enona DRS6 (12,2 mg, 0,0249 mmol, 1,00 equiv.) em tetraidrofurano (1 mL) a - 95°C em gotas através de cânula. A mistura vermelho-claro foi deixada aquecer para -50°C durante 50 min e foi então dividida entre uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 5,0 mL) e diclorometano (25 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com diclorometano (3x15 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi decantada e concentrada, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC prepara-tiva em uma coluna Coulter Ultrasphere ODS (5 μm, 250 x 10 mm, 3,5 mL/min, Solvente A: água, Solvente B: metanol, detecção de UV a 350 nm) usando um volume de injeção de 500 μL de metanol e uma eluição de gradiente linear de 85-100% de B durante 30 min. O pico em 21-17 min foi coletado e concentrado para dar JDB1-87 como um sólido branco (11,0 mg, 72%). RÍ 0,07 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CD2CI2) δ 15,21 (s, 25 1H, enol), 8,63 (d, 1H, J = 4,5 Hz, pir-H), 8,19 (d, 1H, J = 7,5 Hz, pir-H), 7,54 7,43 (m, 5H, ArH), 7,34 (d, 1H, J = 4,5, 7,5 Hz, pir-H), 5,36 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph), 5,33 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph), 4,03 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 3,36-3,31 (m, 1H, CHCH2CHCHN(CH3)2), 3,23 (dd, 1H, J = 16,3, 5,6 Hz, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,99 (dd, 1H, J = 16,3, 16,3 Hz, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,63 (ddd, 1H, J = 1,6, 4,4, 10,7 Hz, CH- CHN(CH3)2). 2,54-2,48 (m, 7H, N(CH3)2, CHH'CHCHN(CH3)2), 2,19 (dd, 1H, J= 1,6, 14,5 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 0,87 (s, 9H, TBS), 0,26 (s, 3H, TBS), 0,13 (s, 3H, TBS); 13C RMN (100 MHz, CD2CI2) δ 187,7, 183,5, 182,6, 182,2, 167,9, 161,2, 153,4, 137,6, 134,1, 129,2, 129,1, 129,1, 126,8, 123,0, 108,7, 106,9, 82,2, 73,0, 61,8, 47,0, 42,1, 41,4, 30,1, 28,4, 26,1, 23,2, 19,3, -2,4, - 3,5; HRMS (ES) m/z calc, para (C33H39N3O6Si+H)+ 602,2686, encontrado 602,2686.
Figure img0124
Negro de Pd (3,0 mg, 0,028 mmol, 2,6 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do enol JDB1-87 (6,5 mg, 0,11 mmol, 1,0 equiv.) em dioxana-metanol (7:2, 9,0 mmoles) a 23°C. Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura verde foi agitada por 7 h e então fil trada em uma almofada de algodão. O nitrato foi concentrado, provendo a carboxamida como um óleo amarelo (7,0 mg). Ácido fluorídrico aquoso (48%, 0,5 mL) foi adicionado a um recipente de reação de polipropileno contendo uma solução da carboxamida em acetonitrila (4,5 mL) a 23°C. A mistu- ra de reação foi aquecida para 35°C e foi agitada nesta temperatura por 27 horas. O ácido fluorídrico em excesso foi extinto com metoxitrimetilsilano (3,5 mL, 25 mmoles). A mistura de reação foi concentrada, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma co-luna Phenomenex Polymerx DVB (10 μm, 250 x 10 mm, 4 mL/min, Solevnte 25 A: ácido trifluoracético 0,5% em água, Solvente B: ácido trifluoracético 0,5% em metanol-acetonitrila (1:1), detecção de UV a 350 nm) usando um volume de injeção de 500 μL de metanol em um gradiente linear de 0-20% de B du- rante 40 min. O pico a 35-45 minutos foi coletado e concentrado para dar um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em 1 mL de metanol, tratado com ácido clorídrico concentrado (20 μL) e então concentrado para dar o cloridrato de JDB1-109 como um pó amarelo (3,7 mg, 86%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 8,79-8,77 (m, 2H, pir-H) 7,91 (dd, 1H, J = 6,8, 6,8 Hz, pir-H), 4,12 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,41-3,22 (m, 2H, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2, CHCH2CHCHN(CH3)2), 3,11-3,00 (m, 8H, CHH’CHCH2CHCHN(CH3)2I CHCHN(CH3)2, N(CH3)2), 2,34 (ddd, 1H, J = 12,9, 4,4, 2,4 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 1,77 (ddd, 1H, J = 12,9, 12,9, 12,9 10 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2); HRMS (ES) m/z calc. para (C20H2IN3O6+H)+ 400,1508, encontrado 400,1504. Exemplo 6. Síntese de 10-Desoxisanciclina
Figure img0125
/V,/V-Dimetilformamida (20 μL) foi adicionada a uma solução do ácido carboxílico JDB1-113-SM 500 mg, 3,67 mmoles, 1,0 equiv.) e cloreto de oxalila (367 μl, 4,22 mmoles, 1,15 equiv.) em diclorometano (20 mL) a 23°C. Evolução de gás vigorosa foi observada. Após agitar por 80 minutos a 23°C, fenol (863 mg, 9,18 mmoles, 2,5 equiv.), piridina (890 μL, 11,0 mmoles, 3,0 equiv.) e dimetilaminopiridina (3 mg) foram adicionados em seqüên- cia. A solução resultante foi agitada por 90 minutos a 23°C, com o que uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,05, 0,2 M, 5,0 mL) foi adicionada. A mistura resultante foi dividida entre água (30 mL) e acetato de etila (50 mL). A fase aquosa foi extraída com uma porção adicional de 50 mL de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com uma solução de hidróxido de sódio aquosa (50 mL, 1M), salmoura (50 mL) e então secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi decantada e con-centrada, dando um óleo incolor (850 mg). O produto foi purificado através de cromatografia de coluna instantânea (25:75 de acetato de etil-hexanos), provendo o éster JDB1-113 como um óleo incolor (774 mg, 99%). Rz 0,43 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 8,18 (d, 1H, J = 8,1 Hz, ArH), 7,49-7,20 (m, 8H, ArH, OArH), 2,69 (s, 3H, ArCH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 165,8, 150,9, 141,3, 132,7, 132,0, 5 131,2, 129,5, 128,5, 125,9, 125,8, 121,8, 22,0; FTIR (película pura), cm-1 3046 (w), 2923 (w), 1739 (s), 1594 (m), 1487 (m), 1287 (m), 1241 (s), 1189 (s), 1159 (m), 1041 (s), 733 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (Ci4H12O2+NH4)* 230,1181, encontrado 230,1187.
Figure img0126
Uma solução de n-butillítio em hexanos (1,47 M, 38,0 μL, 0,0565 mmol, 8,26 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (7,4 μL, 0,057 mmol, 8,3 equiv.) em tetraidrofurano (0,50 mL) a -78°C. A mistura de reação foi rapidamente (10 min.) transferida para um banho frio, com agita-ção, então foi esfriada para -78°C. Hexametilfosforamida (13,9 μL, 0,113 mmol, 16,5 equiv.) foi adicionada à mistura preparada acima a -78°C. A mis- tura resultante foi agitada por 5 minutos com o que uma solução incolor se formou. A solução resultante foi adicionada em gotas através de cânula a uma solução do éster JDB1-113 (10,0 mg, 0,0471 mmol, 6,88 equiv.) e a enona DRS6 (3,3 mg, 0,00684 mmol, 1,00 equiv.) em tetraidrofurano (0,50 mL) a -95°C em gotas através de cânula. A mistura vermelho-clara foi deixa- da aquecer para -70°C durante 30 min e foi então dividida entre uma solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 5,0 mL) e diclorometano (20 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção adicional de 20 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi decantada e concentrada, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere ODS (10 μm, 250 x 10 mm, 3,5 mL/min, Solvente A: água, Solvente B: metanol, de- tecção de UV a 350 nm) usando um volume de injeção de 500 μL de metanol e uma eluição de gradiente linear de 85-100% de B durante 30 minutos. O pico em 25-30 min foi coletado e concentrado para dar enol JDB1-87 como um sólido branco (3,5 mg, 85%). Rf 0,46 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CD2CI2) δ 15,53 (s, 1H, enol), 7,94 (d, 1H, J = 7,9 Hz, ArH), 7,54 - 7,28 (m, 8H, ArH, OCH2ArH), 5,37-5,34 (m, 2H, OCH2F), 4,05 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 3,24-3,18 (m, 1H, CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,99 (dd, 1H, J = 15,5, 5,6 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,88 (dd, 1H, J = 15,5, 15,5 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,61 (dd, 1H, J = 4,4, 10,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,542,44 (m, 7H, N(CH3)2, CHH'CHCHN(CH3)2), 2,14 (d, 1H, J = 14,3 Hz, CHH- CHCHN(CH3)2), 0,86 (s, 9H, TBS), 0,25 (s, 3H, TBS), 0,12 (s, 3H, TBS); 13C RMN (100 MHz, CD2CI2) δ 187,8, 183,0, 182,8, 182,4, 167,7, 141,7, 135,4, 133,4, 130,9, 129,0, 128,9, 128,9, 128,1, 127,5, 126,5, 108,5, 106,8, 82,1, 72,8, 61,5, 58,5, 46,9, 41,9, 38,6, 29,0, 25,9, 23,1, 19,1, -2,6, -3,7; HRMS (ES) m/z calc, para (C34H4oN3OeSi+H)+ 601,2734, encontrado 601,2730.
Figure img0127
Ácido fluorídrico (1,1 mL, 48% aquoso) foi adicionado a um reci piente de reação de polipropileno contendo uma solução do enol JDB1-114 20 (15,1 mg, 0,0251 mmol, 1,0 equiv.) em acetonitrila (10 mL) a 23°C. A mistura resultante foi agitada vigorosamente a 23°C por 12 horas, então foi vertida em água (50 mL) contendo K2HPO4 (4,7 g). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 25 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filrado foi 25 concentrado, dando um álcool intermediário como um sólido amarelo (12,2 mg, 99%). O negro de Pd foi adicionado em uma porção a uma solução do resíduo em metanol-dioxana (1:1, 3,0 mL). Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura foi agitada a 23°C por 20 minutos. Dentro de 5 minutos, a cor mudou de amarelo-claro para verde. A mistura de reação foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concentrado para um 5 sólido amarelo (13 mg). O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Plymerx DVB (10 μm, 250 x 10 mm, taxa de fluxo de 5 mL/min, Solvente A: HCL 0,01 N; Solvente B: acetonitrila, detecção de UV a 350 nm) usando um volume de injeção de 450 μL de metanol contendo monoidrato de ácido oxálico (10 mg) em duas injeções e uma eluição 10 de gradiente linear de 5-50% de B em 30 minutos. O pico eluindo em 16-22 minutos foi coletado e concentrado para dar cloridrato de 10- desoxisanciclina (JDB1-130-HCI) como um pó branco (9,1 mg, 91%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 7,96 (d, 1H, J = 7,3 Hz, ArH) 7,51 (dd, 1H, J = 7,3, 7,3 Hz, ArH), 7,39 (dd, 1H, J = 7,3, 7,3 Hz, ArH), 7,30 (d, 15 1H, J = 7,3 Hz, ArH), 4,04 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,31-2,99 (m, 8H, CH- CH2CHCHN(CH3)2, CHCHN(CH3)2, N(CH3)2), 2,87 (dd, 1H, J = 15,4, 4,3 Hz, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,61 (dd, 1H, J = 15,4, 15,4 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,21 (ddd, J = 12,8, 5,0, 2,5 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 1,66 (ddd, 1H, J= 12,8, 12,8, 12,8 Hz, CHH’CHCHN(CH3)2). Exemplo 7: Uma Via Sintética Convergente, Enantiosseletiva, para Anticorpos Desoxitetraciclina Estruturalmente Diversos
Dentre as tetraciclinas, abordagens semi-sintéticas levaram ao encontro da 6-desoxitetraciclina desoxiciclina (2 na Figura 15A) e minociclina (3 na Figura 15A), clinicamente os agentes mais importantes na classe. A 625 desoxitetraciclina exibe estabilidade química consideravelmente aperfeiçoada comparado com seus contrapartes 6-hidróxi e mostra potências iguais ou maiores em ensaios antibacterianos (Stephens e outros, J. Am. Chem. Soc. 85, 2643 (1963); M. Nelson, W. Hillen, R. A. Greenwald, Eds., Tetracyclines in Biology, Chemistry and Medicine (Birkhauser Verlag, Boston, 2001); cada 30 um deles aqui incorporado a título de referência). É evidente que no momento nenhuma semi-sintese nem biossíntese modificada é capaz de se direcionar à maioria das novas estruturas que um químico poderia desejar explorar em busca de uma estrutura importante tal como tetraciclina; estruturas tal como os análogos heterocíclicos 4 e 5 de anel D na Figura 15A ou novos sistemas de anel tal como a pentaciclina 6 (Figura 15A) são exemplos. Ausente um curso sintético de laboratório viável, essas estruturas e regiões de 5 espaço químico complexo que elas representam devem ser renunciadas na pesquisa por novos antibióticos. Aqui é descrita uma via curta e eficiente para a síntese de membros enantiomericamente puros de 6- desoxitetraciclinas a partir de ácido benzóico. A via descrita permite a síntese de 6-desoxitetraciclinas (ambos com ou sem um grupo hidroxila em C5) 10 através de uma reação de acoplamento de último estágio dos precursores AB 7 ou 8 (Figura 15B) com uma variedade de precursores de anel D dife-rentes e proveu compostos tal como doxiciclina (2 na Figura 15A), os análo-gos heterocíclicos 4 e 5 (Figura 15A), a pentanciclina (Figura 15A), bem como outros análogos de 6-desoxitetraciclina.
A vantagem estratégica de uma abordagem sintética envolvendo uma construção de anel C de último estágio (AB + D -> ABCD, Figura 15B) é que muito da funcionalidade polar sabida desempenhar um papel na ligação de tetraciclinas ao ribossoma bacteriano se encontra dentro do fragmento AB (D. E. Brodersen e outros, Cell 103, 1143 (2000); M. Pioletti e outros, 20 EMBO J. 20, 1829 (2001); cada um deles é aqui incorporado a título de refe rência), enquanto variação estrutural enorme no ou próximo do anel D não é apenas permissível, mas foi citada com um meio de superar a resistência bacteriana. O candidado clínico avançado tigeciclina (P.E. Sum, P. Petersen, Bioorg. Med. Chem. Lett. 9, 1459 (1999); incorporado aqui a título de refe- 25 rência), um derivado de aminociclina com um substituinte no anel D, é exemplar, e é descrito ser um dos novos antibióticos mais promissores sob avaliação pela FDA (K. Bush, M. Macielag, M. Weidner-Wells, Curr. Opin. Microbiol. 7, 466 (2004); incorporada aqui a título de referência). Classicamente, abordagens para a síntese de antibióticos de tetraciclina foram reali- 30 zadas através da montagem em etapas do sistema de anel ABCD e começa com precursores D ou CD, conforme exemplificado pela síntese Woodward de (±)-6-desóxi-6-demetiltetraciclina (sanciclina, 25 etapas, -0,002% de ren- dimento) (J. J. Korst e outros, J. Am. Chem. Soc. 90, 439 (1968); incorporado aqui a titulo de referência), a síntese Shemyakin de (±)-12a-desóxi-5a,6- anidrotetraciclina (A.I. Gurevich e outros, Tetrahedron Lett. 8, 131 (1967); incorporado aqui a título de referência) e a síntese Muxfeldt de (±)-55 oxitetraciclina (terramicina, 22 etapas, 0,06% de rendimento) (H. Muxfeldt e outros, J. Am. Chem. Soc. 101, 689 (1979); incorporado aqui a título de refe-rência). Apenas a síntese publicada de (-)-tetraciclina apareceu, isto a partir de D-glucosamina (um precursor do anel A, 34 etapas, 0,002% de rendimen-to) (K. Tatsuta e outros, Chem. Lett. 646 (2000); incorporado aqui a título de 10 referência), enquanto a construção mais eficiente do sistema de anel tetraci-clina é sem dúvida a síntese de (±)-12a-desoxitetraciclina pelo laboratório Stork (16 etapas, 18-25% de rendimento) (G. Stork e outros, J. Am. Chem. Soc. 118, 5304 (1996); incorporado aqui a título de referência). A última pesquisa serviu para identificar oxigenação de C12a como talvez o maior desa- 15 fio na síntese de tetraciclina (ela não poderia ser conseguida com 12a- tetraciclina como substrato), uma conclusão apoiada pelos resultados dos esforços sintéticos anteriores (J. J. Korst e outros, J. Am. Chem. Soc. 90, 439 (1968); A.l. Gurevich e outros, Tetrahedron Lett. 8, 131 (1967); H. Muxfeldt e outros, J. Am. Chem. Soc. 101,689 (1979); cada um deles aqui incor- 20 porado a título de referência. O problema é significante porque a oxigenação de C12a parece aumentar muito a atividade antimicrobiana (W. Rogalski, in Handbook of Experimental Pharmacology, J. J. Hlavka, J. H. Boothe, Eds. (Springer-Verlag, New York, 1985), vol. 78, cap. 5; incorporado aqui a título de referência). Uma característica-chave da abordagem sintética para 625 desoxitetraciclinas que foi desenvolvida é que ela introduz o grupo C12a hi-droxila na primeira etapa da seqüência (Figura 16) e usa o centro estereo- gênico produzido nesta etapa para elaborar todos os outros na molécula alvo. Para proteger a função vinilógo de ácido carbâmico do anel A foi usado o grupo 5-benziloxiisoxazol desenvolvido por Stork e Haggedorn para este 30 propósito (G. Stork, A. A. Hagedorn, III, J. Am. Chem. Soc. 100, 3609 (1978); incorporado aqui a título de referência), uma inovação que provou ser criti-camente permissível no presente trabalho, enquanto o grupo dimetilamino do anel A foi incorporado sem modificação.
A síntese de 6-desoxitetraciclinas da requerente foi iniciada através de diidroxilação microbiana, de célula integral, de ácido benzóico com uma cepa mutante de Mcaligenes eutrophus (A.M. Reiner, G. D. Hegeman,
Biochemistry 10, 2530 (1971); A.G. Miers e outros, Org. Lett. 3, 2923 (2001); cada um dos quais é aqui incorporado a título de referência), produzindo o diol 9(Figura 16) com >95% de ee em 79% de rendimento (90-g batelada, ~13 g/L, Figure 16). Epoxidação direcionada por hidroxila do produto micro- cristalino (9, m-CPBA, EtOAc) proveu o epóxido a-orientado 10 (Figura 16) em 83% de rendimento; a esterificação deste produto (trimetilsilildiazometa- no) seguido por bis-sililação e isomerização de epóxido concomitante na presença de triflato de terc-butildimetilsilila (3 equiv.), deu o epóxi éster 11 (Figura 16) em 70% de rendimento (A.G. Miers e outros, Org. Lett. 3, 2923 (2001); incorporado aqui a título de referência). Separadamente, 3-benzilóxi- 5-dimetilaminometilisoxazol, preparado na escala em mol através de uma seqüência de quatro etapas simples a partir de ácido glioxílico (D. M. Vyas, I. Chiang, T. W. Doyle, Tetrahedron Lett. 25, 487 (1984); P. Pevarello, M. Va- rasi, Synth. Commun. 22, 1939 (1992); cada um dos quais é aqui incorporado a titulo de referência), foi desprotonado com C4 com n-butillitio, e o rea- gente organolítio resultante (12 na Figura 16) foi então adicionado ao epóxi éster 11 (Figura 16), formando a cetona 13 (73%) (Figura 16). Em uma transformação notável, uma etapa chave da síntese, exposição da cetona 13 (Figura 16) a triflato de lítio (5% em mol) a 60°C, seguido por remoção seletiva do silil éter alílico do produto rearranjado (TFA), deu o precursor de AB triciclico 14 (Figura 16) em 62% de rendimento após purificação através de cromatografia de coluna instantânea. A transformação de 13 em 14 (Figura 16) é acreditada envolver abertura de primer-SN inicial do epóxido alílico pelo grupo N,/V-dimetilamino através de formação de ilídeo e rearranjo [2,3]- sigmatrópico, um processo que é reminescente do rearranjo Sommelet- Hauser (S. H. Pine, Organic Reactions, 18, 403 (1970); incorporado aqui a titulo de referência). O composto 14 (Figura 16) possui o requisito de estere- oquímica cis da fusão AB bem como um substituinte /V,/V-dimetilamino a- orientado (confirmado através de análise cristalográfica de raio-X de um de-rivado) e serve como um intermediário comum para a síntese de ambos pre-cursor enona AB 7 (4 etapas, 49% de rendimento, Figura 16) e o precursor AB de 5-a-hidróxi-6-desoxitetraciclinas, enona 8 (8 etapas, 56% de rendi- 5 mento, Figura 16) conforme detalhado na seqüência abaixo.
Para sintetizar o precursor AB de enona 7 (Figura 15), o inter-mediário 14 foi submetido a uma transposição redutiva (A. G. Myers, B. Zheng, Tetrahedron Lett. 37, 4841 (1996); incorporado aqui a título de referência) na presença de trifenilfosfina, dietil azodicarboxilato e hidrazida de o- 10 nitrobenzenossulfonila (adicionada por último, uma variante de procedimento), dando o cicloalcano transposto 15 em 74% de rendimento. Hidrólise do grupo silil éter dentro de 15 (HCI, metanol), oxidação do álcool alílico resultante (IBX, DMSO) (M. Frigerio, M. Santagostino, Tetrahedron Lett. 35, 8019 (1994); incorporado aqui a título de referência) e proteção do carbinol restan- 15 te (terciário) (TBSOTf, 2,6-lutidina) (E.J. Corey e outros, Tetrahedron Lett. 22, 3455 (1981); incorporado aqui a título de referência) então provê a enona 7 (Figura 15) em 66% de rendimento (3 etapas) após cromatografia de coluna instantânea. Através de uma seqüência um pouco mais longa mas ligeiramente mais eficiente o intermediário 14 (Figura 15) poderia ser também 20 transformado na enona 8 (Figura 15), o precursor AB para 5-a-hidróxi-6- desoxitetraciclinas. Esta seqüência envolvia a transformação de 14 (Figura 15) em feniltio éter 16 (com retenção líquida), sulfoxidação diastereosseleti- va usando um oxidante quiral (F.A. Davis e outros, J. Org. Chem. 57, 7274 (1992); incorporado aqui a título de referência) (99:1 de seletividade) e rear- 25 ranjo Mislow-Evans (E. N. Prilezhaeva, Russ. Chem. Rev. 70, 897 (2001); incorporado aqui a título de referência), produzindo álcool alílico 17 em 66% de rendimento (4 etapas). Diastereosseletividade alta na etapa de sulfoxidação foi essencial, porque apenas um diastereômero (o isômero principal sob as condições especificadas) sofreu rearranjo térmico eficiente. Após prote- 30 ção do álcool alílico 17 (Figura 15) usando cloroformiato de benzila, uma seqüência quase idêntica ás três etapas finais da síntese de 7 (Figura 15) foi empregada para transformar o carbonato de benzila resultante em enona 8 (Figura 15) em 85% de rendimento (56% de rendimento e 8 etapas de 14). 6-Desoxitetraciclinas foram montadas com todo requisito de funcionalidade e estereoquimica em uma única operação. Neste processo os precursores AB 7 ou 8 (Figura 15) são acoplados com uma faixa de precur- sores de anel D carbaniônicos diferentes em uma seqüência de reação Mi- chael-Dieckman (T.L. Ho, Tandem Organic Reactions (Wilei, New York, 1992); incorporado aqui a título de referência) que forma duas ligações carbono-carbono e o anel C das 6-desoxitetraciclinas (Figuras 15B, 17 e 18). O processo talvez seja melhor ilustrado em detalhes pela síntese de 3 eta- pas de (-)-doxiciclina do precursor AB 8 (Figura 17). Desprotonação do precursor de anel D 18 (4,5 equiv., LDA, TMEDA, THF, -78°C), sintetizado em 5 etapas (42% de rendimento) a partir de ácido anísico, seguido pela adição da enona 8 (1 equiv., -78 -> 0°C), proveu o produto de acoplamento de tetraciclina 19 (Figura 17) em forma diastereomericamente pura em 79% de rendimento após purificação através de rp-HPLC. Remoção dos grupos de proteção (2 etapas 90% de rendimento) e purificação (rp-HPLC) deram clori-drato de (-)-doxiciclina (18 etapas, 8,3% de rendimento a partir de ácido benzóico). Uma característica notável da reação de acoplamento convergente que produz o produto tetracíclico 19 (Figura 17) é sua estereosseletivida- de. Embora na teoria quatros produtos diastereoméricos possam ser formados, abundantemente um foi produzido, correspondendo em configuração (5aR, 6R) àquela de 6-desoxitetraciclinas biologicamente ativas. Uma impureza diastereomérica menor, acreditada ser 6-epi-19 (Figura 17), foi isolada em frações de rp-HPLC separadas (<7% de rendimento). Seqüências de ciclização de Michael-Dieckmann (T.L. Ho, Tandem Organic Reactions (Wilei, New York, 1992); incorporado aqui a título de referência) e e condensação de ânions de o-toluato em particular (F. J. Leeper, J. Staunton, J.C.S. Chem. Comm., 406 (1978); F. M. Hauser, R. P. Rhee, J. Org. Chem. 43, 178, (1978); J. H. Dodd, S. M. Weinreb, Tetrahedron Lett. 20, 3593 (1979); cada um dos quais aqui incorporado a título de referência) são extensivamente precedentes em síntese, mas não se tem ciência de nenhum exemplo exibindo o alto grau de diastereosseletividade do presente caso. Ativação de 147 fenil éster em condensações de toluato é também precedente, embora em um sistema que forma um produto de ciclização completamente aromatizado (White e outros, J. Org. Chem. 51, 1150 (1986); incorporado aqui a titulo de referência). Foi observado que a presença do grupo fenil éster do precursor 5 18 do anel D (Figura 17) era essencial para ciclização bem sucedida aconte cer; ânions derivados de alquil ésteres simples e ânions derivados de ftalida sofreram adição Michael, mas os adutos resultantes não ciclizaram. Talvez ainda mais notável do que a condensação que produziu 19 (Figura 17) seja a transformação paralela de 18 com a enona 7 (Figura 18, entrada 1), que 10 forma (-)-6-desoxitetraciclina em forma protegida com >20:1 de diastereos- seletividade, em 81% de rendimento após purificação através de rp-HPLC (diastereomericamente pura; um diastereômero menor, epimérico em C6, foi também isolado separadamente). Parece que as adições 7 e 8 prosseguem quase que exclusivamente através da adição à face de "topo" de cada enona 15 (conforme descrito), produzindo estereoquimica de C5 correspondendo às tetraciclinas naturais, embora porque esse seria o caso não seja óbvio.
Como os exemplos de entradas 2-5 (Figura 18) mostram, condensações eficientes e estereosseletivas não são restritas ao ânion de o- toluato derivado do substrato de anel D 18 (Figura 17); os novos análogos 20 heterocíclicos do anel D 4 e 5 (Figura 18) foram sintetizados através de uma seqüência relacionada de ânions de o-toluato de estruturas muito diferentes, como foi o derivado de pentaciclina 6 (Figura 18). Em cada caso foi necessário otimizar as condições especificas para a geração e aprisionamento de ânion de o-toluato. Para as entradas 3-5 (Figura 18) a geração de ânion foi 25 melhor conduzida in situ, na presença da enona 7, ou através de desproto- nação seletiva (entrada 3) ou através de troca de lítio-halogênio (entradas 4 e 5). Várias seqüências de reação não-produtivas potencialmente de competição (por exemplo, enolização de 7) podem ter acontecido durante a geração de ânion in situ-, as eficiências observadas das transformações são sur- 30 preendentes à luz disto. É também notável que geração de ânion in situ permite o uso de o-toluatos sem um substituinte o-alcóxi (entradas 3 e 4), substratos sabidos ser problemáticos a partir dos estudos anteriores (F. M. Hauser e outros, Synthesis 72 (1980); incorporado aqui a titulo de referência). Finalmente, a formação de ânion de o-toluato in situ ou troca de halo- gênio-metal em etapas (entradas 4 e 5) é não-procedente.
As eficiências das sequências sintéticas permitiram a prepara- 5 ção de quantidades suficientes de cada análogo de tetraciclina para teste antibacteriano usando técnicas de diluição serial padrão (quantidades de 520 mg). Concentrações de inibição mínimas (MICs) são descritas para cada análogo em ensaios antimicrobianos de célula integral usando cinco organismos Gram-positivos e cinco organismos Gram-negativos (Figura 18). Até agora, o derivado de pentaciclina 6 (Figura 18) mostrou as propriedades an- tibacterianas mais promissoras, com atividade igual a ou maior do que a te-traciclina em cada uma das cepas Gram-positivas examinadas, incluindo cepas com resistência à tetraciclina, meticinlina e vancomicina.
Experimentos
Procedimentos Gerais. Todas as reações foram realizadas em frascos Schlenk de fundo redondo ou modificados (formato Kjeldahl) secos com chama equipados com uma separação de borracha sob uma pressão positiva de argônio, a menos que de outro modo mencionado. Líquidos e soluções sensíveis a ar e umidade foram transferidos através de seringa ou cânula de aço inoxidável. As soluções orgânicas foram concentradas através de evaporação giratória a ~25 Torr (vácuo de alojamento). Cromatografia de coluna instantânea foi realizada em sílica-gel (60 Â, grau padrão) conforme descrito por (Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. J. Org. Chem. 1978, 43, 29232925; incorporado aqui a título de referência). Cromatografia de camada fina analítica foi realizada usando placas de vidro pré-revestidas com 0,25 mm de sílica-gel de 230-400 mesh impregnada com um indicador fluorescente (254 nm). As placas de cromatografia de camada fina foram visualizadas através de exposição à luz ultravioleta e/ou exposição a molibtado de amónio cérico e/ou uma solução ácida de p-anisaldeido seguido por aquecimen- 30 to em uma placa quente.
Materiais. Reagentes e solventes comerciais foram usados con-forme recebido com as exceções que seguem. Trietilamina, diisopropilamina, N,N,N',N’-tetrametileno-diamina, DMPU, HMPA e N,A/-diisopropiletilamina foram destiladas a partir de hidreto de cálcio sob uma atmosfera de dinitro- gênio. Diclorometano, metanol, tetraidrofurano, acetonitrila e tolueno foram purificados através do método de (Pangborn, A.B.; Giardello, M.A.; Grubbs, 5 R. H.; Rosen, R. K.; Timmers, F. J. Organometallics 1996, 15, 1518-1520; incorporado aqui a titulo de referência). Instrumentação. Espectros de ressonância magnética nuclear de próton (1H RMN) e espectros de ressonância magnética nuclear de carbono (13C RMN) foram registrados com espectrômetros de RMN Varian 10 Unity/lnova 600 (600 MHz), Varian Unity/lnova 500 (500 MHz/125 MHz) ou Varian Mercury400 (400 MHz/100 MHz) RMN. As mudanças químicas para prótons são descritas em partes por milhão (escala δ) e são referidas como prótio residual nos solventes de RMN (CHCI3: δ 7,26, C6D5H: δ 7,15, D2HCOD: δ 3,31, CDHCI2: δ 5,32, (CD2H)CD3SO: δ 2,49). As mudanças 15 químicas para carbono são descritas em partes por milhão (escala δ) e são referidas às ressonâncias de carbono do solvente (CDCI3: δ 77,0, C6D6: δ 128,0, CD3OD: δ 44,9, CD2CI2: δ 53,8, (CD3)2SO: δ 39,5). Os dados são representados como segue: mudança química, multiplicidade (s = singleto, d = dupleto, t = tripleto, q = quarteto, m = multipleto, br = amplo), integração, 20 constante de acoplamento em Hz e avaliação. Espectros de absorbância infravermelha (IR) foram obtidos usando um espectrofotômetro FT-IR Perkin- Elmer 1600 referido como padrão poliestireno. Os dados são representados como segue: freqüência da absorção (cm-1), intensidade da absorção (s = forte, m = média, w = fraca, br = ampla) e avaliação (onde apropriado). As 25 rotações ópticas foram determinadas usando um polarímetro digital JASCO DIP-370 equipado com uma fonte de lâmpada de sódio. Espectros de massa de alta resolução foram obtidos nas Instalações de Espectrometria de Massa da Harvard University. Síntese de (-)-Doxiciclina Etapa de Ciclização:
Figure img0128
Uma solução de n-butillitio em hexanos (1,55 M, 155 μL, 0,240 mmol, 5,1 equiv.) foi adicionada a uma solução de N,N,N',N- tetrametiletilenodiamina (39 μL, 0,26 mmol, 5,5 equiv.) e diisopropilamina (34 μL, 0,25 mmol, 5,1 equiv.) em tetraidrofurano (1 mL) a -78°C. A mistura resultante foi agitada vigorosamente a -78°C por 30 minutos, com o que uma solução de 2-(fenoxicarbonil)-3-etilfenil t-butil carbonato (73,0 mg, 0,213 mmol, 4,5 equiv.) em tetraidrofurano (1 mL) foi adicionada em gotas através de cânula. A mistura vermelho-escura resultante foi agitada vigorosamente a -78°C por 75 min, então uma solução de enona 8 (30,0 mg, 0,0474 mmol, 1 equiv.) em tetraidrofurano (1 mL) foi adicionada em gotas através de cânula. A mistura vermelho-claro resultante foi deixada lentamente aquecer para 0°C durante 2 h. A solução de produto gelada foi então dividida entre solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 10 mL) em diclorome- tano (10 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 10 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere CDS [10 μm, 250 x 10 mm, detecção UV a 350 nm, volume de injeção: 400 μL (metanol), eluição isocrática com metanol-água (9:1), taxa de fluxo: 3,5 mL/min]. Frações eluindo a 36-42 minutos foram coletadas e concentradas, dando o produto de adição pentacíclico mostrado em forma diastereomeri- camente pura (33,0 mg, 79%, um sólido amarelo-claro). Rf 0,35 (1:4 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, C6D6) δ 16,55 (s amplo, 1H, enol), 7,26 (d, 2H, J = 7,0 Hz, o-ArH), 7,14 (d, 2H, J = 7,5 Hz, ArH), 6,85-7,05 (m, 6H, ArH), 6,66-6,74 (m, 2H, ArH), 6,51 (dd, 1H, J = 9,0, 1,5 Hz, ArH), 5,73 (d amplo, 1H, J = 4,0 Hz, BnOCO2CH), 5,17 (d, 1H, J = 5 12,5 Hz, OCHH’Ph) 5,03 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH'Ph) 4,99 (d, 1H, J =12,5 Hz, OCHH'Ph'), 4,93 (d, 1H, J = 12,5 Hz, OCHH'Ph'), 3,58 (d, 1H, J = 11,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 3,35 (dd, 1H, J = 12,5, 4,0 Hz, CH3CHCH), 2,99 (d, 1H, J = 11,5 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,56 (dq, 1H, J= 12,5, 7,0 Hz, CH3CH), 2,18 (s, 6H, N(CH3)2), 1,33 (s, 9H, C(CH3)3), 1,16 (d, 3H, J - 7,0 Hz, CH3CH), 1,11 10 (s, 9H, C(CH3)3), 0,61 (s, 3H, CH3), 0,36 (s, 3H, CH3); 13C RMN (100 MHz, CDCI3) δ 189,7, 186,3, 180,9, 178,4, 167,9, 154,7, 152,1, 150,8, 145,9, 136,1, 135,5, 133,9, 128,7, 128,6, 128,5, 127,3, 123,8, 122,7, 122,6, 108,9, 105,5, 83,0, 82,9, 74,8, 72,4, 69,2, 60,8, 52,7, 43,2, 38,4, 27,5, 26,6, 19,5, 16,3, -1,8, -2,7; FTIR (película pura), cm"1 2974 (w), 2933 (w), 2851 (w), 15 1760 (s, C=O), 1748 (s, C=O), 1723 (s, C=O), 1606 (m), 1513 (m), 1471 (m), 1370 (m). 1260 (s), 1232 (s), 1148 (s); HRMS (ES) m/z calc, para (C4BH56 N2Oi2Si)+ 881,3681, encontrado 881,3684. Etapa de Desproteção 1:
Figure img0129
Ácido fluorídrico aquoso concentrado (48% em peso, 1,2 mL) foi 20 adicionado a um recipiente de reação de polipropileno contendo uma solução do produto de adição pentacíclico purificado do experimento acima (33,0 mg, 0,0375 mmol, 1 equiv.) em acetonitrila (7,0 mL) a 23°C. A mistura resultante foi agitada vigorosamente a 23°C por 60 horas, então foi vertida em água (50 mL) contendo hidrogenofosfato de dipotássio (7,0 g). A mistura re- 25 sultante foi extraída com acetato de etila (3 x 20 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando o produto mostrado como um óleo amarelo (25,0 mg, 100%). Este produto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. RÍ 0,05 (1:4 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, C6De, bruto) δ 14,86 (s amplo, 1H, enol), 11,95 (s, 1H, fenol), 7,23 (d, 2H, J = 7,8 Hz, o- ArH), 7,14 (d, 2H, J = 7,2 Hz, o-ArH), 6,94-7,02 (m, 6H, ArH), 6,86 (t, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,76 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,28 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 5,46 (dd, 1H, J = 3,6, 3,0 Hz, BnOCO2CH), 5,12 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph) 5,04 (d, 1H, J= 12,0 Hz, OCHH’Ph) 4,92 (s, 2H, OCH2F), 3,41 (d, 1H, J = 9,6 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,82 (dd, 1H, J = 9,6, 3,0 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,65 (dd, 1H, J = 13,2, 3,6 Hz, CH3CHCH), 2,78 (dq, 1H, J = 13,2, 7,2 Hz, CH3CH), 2,05 (s, 6H, N(CH3)2), 1,04 (d, 3H, J = 7,2 Hz, CH3CH); 13C RMN (100 MHz, C6D6, bruto) δ 193,4, 186,2, 181,3, 172,3, 167,9, 163,3, 154,6, 145,8, 136,6, 135,8, 128,6, 128,4, 127,2, 116,8, 116,0, 115,6, 107,6, 104,7, 76,8, 73,9, 72,5, 69,5, 60,3, 48,7, 43,0, 41,8, 37,5, 15,3; FTIR (película pura), cm"1 3424 (m, OH), 3059, 3030, 2925, 2857, 1744 (s, C=O), 1713 (s, C=O), 1614 (s), 1582 (s), 1455 (s), 1252 (s); HRMS (ES) m/z calc. para (C37H34N2O1{Í+H)+ 667,2292, encontrado 667,2300. Etapa de Desproteção 2:
Figure img0130
Negro de Pd (7,00 mg, 0,0657 mmol, 1,75 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução do produto do procedimento acima (25,0 mg, 0,0375 mmol, 1 equiv.) em tetraidrofurano-metanol (1:1, 2,0 mL) a 23°C. Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). O catalisador de pa-ládio foi inicialmente observado ser uma dispersão fina, mas agregou em grumos dentro de 5 minutos. A mistura heterogênea amarela foi agitada a 23°C por duas horas, então foi filtrada em uma almofada de algodão. O fil- trado foi concentrado, dando um óleo amarelo. O produto foi purificado atra-vés de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Polymerx DVB (10 μm, 250 x 10 mm, detecção de UV a 350 nm, Solvente A: metanol-HCI aq. 0,005 N (1:4). Solvente B: acetonitrila, volume de injeção: 400 μL (solvente A 5 contendo 10 mg de ácido oxálico), eluição isocrática com 5% de B por 2 mi nutos, então eluição de gradiente com 5->50% de B por 20 minutos, taxa de fluxo: 4,0 mL/min]. As frações eluindo a 12-17 minutos foram coletadas e concentradas, dando cloridrato de (-)-doxiciclina como um pó amarelo (16,2 mg, 90%), que era idêntico ao cloridrato de (-)-doxiciclina natural [HPLC de 10 fase reversa (co-injeção), 1H RMN (incluindo medição de uma mistura de doxiciclina sintética e natural), 13C RMN, [a]D, UV). 1H RMN (600 MHz, CD3OD, cloridrato) Ô 7,47 (t, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 6,83 (d, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 4,40 (s, 1H, (CH3)2NCH), 3,53 (dd, 1H, J = 12,0, 8,4 Hz, CHOH), 2,95 (s, 3H, 15 N(CH3)CH3'), 2,88 (s, 3H, N(CH3)CH3’), 2,80 (d, 1H, J = 12,0 Hz, CH- CHN(CH3)2), 2,74 (dq, 1H, J= 12,6, 6,6 Hz, CH3CH), 2,58 (dd, 1H, J= 12,6, 8,4 Hz, CH3CHCH), 1,55 (d, 3H, J = 6,6 Hz, CH3CHCH); 13C RMN (100 MHz, CD3OD) δ 195,3, 188,2, 173,8, 172,1, 163,2, 149,0, 137,7, 117,1, 116,9, 116,6, 108,4, 96,0, 74,5, 69,8, 66,9, 47,5, 43,4, 43,0, 41,9, 40,0, 16,3; UV 20 max (0,01 M HCI metanólico), nm 218, 267, 350; [afo = -109° (c = 0,16 em HCI metanólico 0,01 M); HRMS (ES) m/z calc. para (C22H24N2O8+H)+ 445,1611, encontrado 445,1603.
Valores da literatura (The Merck Index: An Encyclopedia of Chemicals, Drugs and Biologicals, 12a ed. Budavari, S.; O'Neal, M. J.; Smith, A.; 25 Heckelman, P. E.; Kinneary, J. F., Eds.; Merck & Co.: Whitehouse Station, NJ, 1996; entrada 3496,): UV máx (HCI metanólico 0,01), nm 267, 351; [α]o = -110° (c = 1 em HCI metanólico 0,01 M). Síntese de (-)-6-Desoxitetraciclina Etapa de Ciclização:
Figure img0131
Uma solução de /V-butillíto em hexanos (1,65 M, 75 μL, 0,12 mmol, 3,9 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (17 μL, 0,12 mmol, 3,9 equiv.) e /V,/V,A/',/V-tetrametiletilenodiamina (19 μL, 0,13 mmol, 4,1 equiv.) em tetraidrofurano (1 mL) a -78°C. A solução resultante foi agitada a -78°C por 30 minutos, com o que uma solução de 2-(fenoxicar- bonil)-3-etilfenil t-butil carbonato (31,8 mg, 0,093 mmol, 3,0 equiv.) em tetraidrofurano (250 μL) foi adicionada em gotas através de uma seringa. A mistura vermelho-escura resultante foi agitada a -78°C por 90 minutos, então uma solução de enona 7 (15,0 mg, 0,031 mmol, 1 equiv.) em tetraidrofurano (250 μL) foi adicionada em gotas através de seringa. A mistura vermelho-escura resultante foi deixada aquecer lentamente para 0°C durante 3 horas. A solução de produto gelado foi então dividida entre solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 15 mL) e diclorometano (15 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 15 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere ODS [5 μm, 250 x 10 mm, deteção UV a 350 nm, volume de injeção: 500 μL (metanol), eluição isocráti- ca com metanol-água (89:11), taxa de fluxo: 3,5 mL/min]. Frações eluindo a 39-60 min foram coletadas e concentradas, dando o produto de adição pen- tacíclico mostrado em forma diastereomericamente pura (18,5 mg, 81%, uma espuma amarelo-clara). Rf 0,37 (2:8 tetraidrofurano-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ (s, 1H, 16,24, enol-OH), 7,55-7,50 (m, 3H, ArH), 7,40-7,35 (m, 4H, ArH), 7,10 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 5,39-5,34 (m, 2H, OCH2F), 3,92 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 2,81-2,71 (m, 2H, CH3CH, CH3CHCH), 2,55 (dd, 1H, J = 10,7, 5 5,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,48 (s, 6H, N(CH3)2), 2,40 (d, 1H, J = 14,7 Hz, C- HH'CHCHN(CH3)2), 2,31 (ddd, 1H, J = 14,7, 9,3, 5,7, CHH’CHCHN(CH3)2), 1,56 (s, 3H, CH3), 1,55 (s, 9H, Boc), 0,84 (s, 9H, TBS), 0,27 (s, 3H, TBS), 0,13 (s, 3H, TBS); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 187,4, 183,1, 182,8, 181,6, 167,6, 151,7, 150,2, 147,4, 135,0, 134,0, 128,5, 128,5, 123,4, 123,0, 122,4, 10 108,3, 107,4, 94,8, 83,9, 81,5, 72,5, 61,5, 46,4, 41,9, 39,5, 34,9, 27,7, 26,0, 20,7, 19,0, 16,0, -2,6, -3,7; FTIR (película pura), cm-1 2923 (m), 2841 (m), 1759 (s, C=O), 1718 (s, C=O), 1605 (s), 1508 (s), 1467 (m), 1456 (m), 1369 (m), 1277 (s), 1262 (m), 1231 (s), 1144 (s), 1005 (w); HRMS (ES) m/z calc, para (C4oH5oN209Si+H)* 731,3364, encontrado 731,3370. Desproteção:
Figure img0132
negro de Pd
Solução de ácido fluorídrico aquosa concentrada (48% em peso, 0,6 mL) foi adicionada a um recipiente de reação de polipropileno contendo uma solução do produto de adição pentacíclico purificado do experimento 20 acima (15,0 mg, 0,0205 mmol, 1 equiv.) em acetonitrila (3,5 mL) a 23°C. A mistura de reação foi agitada a 23°C por 55 h, então foi vertida em água (20 mL) contendo hidrogenofosfato de potássio (4,0 g). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4 x 20 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o fil- 25 trado foi concentrado, dando um óleo amarelo-claro. O resíduo foi dissolvido em metanol-tetraidrofurano (1:1, 2 mL) e à solução resultante foi adicionado negro-de-paládio (7,6 mg, 0,071 mmol, 3,5 equiv.) em uma porção. Uma atmosfera de gás hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura amarela foi agitada a 23°C por 2 h, então foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concentrado, dando um óleo amarelo (10 mg). O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Polymerx DVB [10 μm, 250 x 10 mm, detecção UV a 365 nm, Solvente A: metanol-HCI 0,02 N (1:4), Solvente B: acetonitrila, volume de injeção: 400 μL (metanol contendo 10 mg de ácido oxálico), eluição isocrática com 18% de B por 15 min, então eluição de gradiente com 18->60% de B durante 15 min, taxa de fluxo: 5 mL/min]. Frações eluindo a 17,5-22,5 min foram coletadas e concentradas, dando cloridrato de 6-desoxitetraciclina como um pó amarelo (8,1 mg, 85%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 7,49 (t, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,95 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 6,84 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 4,09 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,03 (s amplo, 3H, N(CH3)), 2,97 (s amplo, 3H, N(CH3)), 2,90 (d amplo, 1H, J = 12,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,67 (ddd, 1H, J = 12,7, 12,7, 5,2 Hz, CH3CHCH), 2,61-2,56 (m, 1H, CH3CH), 2,30 (ddd, 1H, J = 13,7, 5,2, 2,9 Hz, CHH’CHCHN(CH3)2), 1,54 (ddd, 1H, J = 13,7, 12,7, 12,7 Hz, CHH’CH- CHN(CH3)2), 1,38 (d, 3H, J = 6,8 Hz, CH3CH); UV máx (HCL metanólico 0,01 M), nm 269, 353; [a]D = -142° (c = 0,20 em HCI metanólico 0,01 M); HRMS (ES) m/z calc. para (C22H24N2O7+H)+ 429,1662, encontrado 429,1660. Síntese de Análogo de Piridona de Anel (-)-D de Tetraciclina Etapa de Ciclização:
Figure img0133
Uma solução de n-butillíto em hexanos (1,67 M, 80 μL, 0,13 mmol, 4,3 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (20 μL, 0,14 mmol, 4,6 equiv.) em tetraidrofurano (2,5 mL) a -78°C. A solução resul tante foi deixada aquecer para 0°C durante 15 minutos. N,N- Dimetilpropilenouréia (17 μL, 0,14 mmol, 4,5 equiv.) foi adicionada e a solução resultante foi esfriada para -78°C. Uma solução de 2-(benzilóxi)-4,6- dimetilpiridino-3-carboxilato (31,0 mg, 0,0930 mmol, 2,99 equiv.) em tetrai- drofurano (250 μL) foi então adicionada através de seringa à solução de reação esfriada. A solução amarela resultante foi agitada por 5 minutos a -78°C, então uma solução de enona 7 (15,0 mg, 0,0311 mol, 1 equiv.) em tetraidro-furano (250 μL) foi adicionada através de seringa. A mistura vermelho- escura resultante foi deixada aquecer para 0°C durante 4 h. Ácido acético (40 μL) foi adicionado à mistura vermelho-escura a 0°C. A solução de produ to gelado foi então dividida entre solução tampão de fosfato de potássio a-quosa (pH 7,0, 0,2 M, 15 mL) e diclorometano (15 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com duas porções de 15 mL de diclorometano. Os extratos orgânicos foram combinados e então secos em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, provendo um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere CDS [5 μm, 250 x 10 mm, detecção UV a 350 nm, Solvente A: água, Solvente B: metanol, volume de injeção: 500 μL (metanol), gradiente de eluição com 92->100% de B durante 30 min, taxa de fluxo: 3,5 mL/min]. As frações eluindo em 21-29 min foram coletadas e concentradas, dando o produto de adição pentaciclico mostrado em forma diastereomericamente pura (15,0 mg, 67%, um sólido amarelo- claro). Rr 0,55 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (600 MHz, CD2CI2) δ 16,05 (s, 25 1H, enol-OH), 7,52-7,26 (m, 10H, ArH), 6,66 (s, 1H, pir-H), 5,57 (d, 1H, J = 12,7 Hz, OCHH'Ph), 5,43 (d, J = 12,7 Hz, 1H, OCHH'Ph), 5,33-5,28 (m, 2H, OCH2F), 3,99 (d, 2H, J = 10,5 Hz, CHN(CH3)2), 3,04-3,00 (m, 1H, CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,84 (dd, 1H, J = 16,1, 4,9 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,74 (dd, 1H, J = 16,1, 16,1 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,53 (dd, 1H, J = 10,5, 3,9 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,512,43 (m, 10H, N(CH3)2, Ar-CH3, CHH’CHCHN(CH3)2), 2,07 (d, 1H, J = 14,2 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 0,82 (s, 9H, TBS), 0,22 (s, 3H, TBS), 0,10 (s, 3H, TBS); 13C RMN (100 MHz, CD2CI2) δ 187,9, 185,2, 182,5, 178,8, 167,9, 161,9, 161,8, 154,8, 137,9, 135,6, 129,1, 129,0, 129,0, 128,7, 127,9, 127,9, 116,4, 111,6, 108,6, 107,5, 82,0, 73,0, 68,1, 61,7, 46,9, 42,0, 39,2, 28,6, 26,1, 24,6, 23,0, 19,3, -2,4, -3,5; FTIR (película pura), cm"1 2939 (m), 2857 5 (w), 1720 (s, C=O), 1593 (s), 1510 (s), 1469 (m), 1449 (m), 1326 (s), 1254 (m), 1187 (w), 1157 (m), 1090 (m), 1064 (m), 1007 (m); HRMS (ES) m/z calc, para (C4iH47N3O7Si+H)+ 722,3262, encontrado 722,3261. Desproteção:
Figure img0134
dioxana
Catalisador de Pearlman (10 mg, 0,0094 mmol, 0,68 equiv.) foi adicionado a uma solução do produto de adição pentacíclico purificado do experimento acima (10 mg, 0,014 mmol, 1 equiv.) em dioxana-metanol (1:1, 10 mL) a 23°C. Uma atmosfera de gás hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm).
A mistura de reação foi observada para formar uma cor verde dentro de 10 minutos. Após agitar a 23°C por 2 h, a mistura de reação foi filtrada em uma almofada de algodão e o filtrado foi concentrado. O resíduo amarelo oleoso foi dissolvido em metanol (10 mL) e à solução resultante foi adicionada solução de ácido clorídrico aquosa concentrada (37% em peso, 100 μL) a 23°C.
A mistura de reação foi agitada a 23°C por 3 h, então foi concentrada. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Pheno- menex Polymerx DVB [10 μm, 250 x 10 mm, deteção UV a 365 nm, Solvente A: ácido clorídrico aquoso 0,01 N, Solvente B: acetonitrila, volume de injeção: 500 μL (metanol contendo 30 mg de ácido oxálico), gradiente linear com 0-»20% de B durante 40 min., taxa de fluxo: 4 ml/min]. As frações eluindo a 29 min foram coletadas e concentradas, dando o cloridrato de piridona do anel D como um pó amarelo (4,8 mg, 74%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 6,37 (s, 1H, ArH), 4,06 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,05-2,95 (m, 8H, N(CH3)2, CHCHN(CH3)2, CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,79 (dd, 1H, J = 16,1, 3,9 Hz, CHH’CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,55 (dd, 1H, J = 16,1, 16,1 Hz, CHH’CH- CH2CHCHN(CH3)2)), 2,40 (s, 3H, Ar-CH3), 2,18 (d amplo, 1H, J = 12,7 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 1,59 (ddd, 1H, J = 12,7, 12,7, 12,7 Hz, CHH'CH- CHN(CH3)2); 13C RMN (100 MHz, (CD3)2SO) δ 187,3, 183,5, 177,8, 172,1, 160,6, 159,8, 153,3, 115,3, 107,2, 106,9, 95,6, 74,2, 68,4, 41,5, 35,7, 34,5, 33,9, 31,0, 19,2; UV max (0,01 M HCI metanólico), nm 267, 370; [α]D = -146° (c = 0,43 em HCI metanólico 0,01 M); HRMS (ES) m/z calc, para (C21H23N3O7+H)+ 430,1614, encontrado 430,1607. Síntese de uma (-)-Pentaciclina Etapa de Ciclização:
Figure img0135
Uma solução de n-butillítio em hexanos (2,65 M, 107 μL, 0,284 mmol, 4,03 equiv.) foi adicionada a uma solução de 3-(bromometil)-1- metoxinaftaleno-2-carboxilato de fenila (105 mg, 0,283 mmol, 4,02 equiv.) e enona 7 (34,0 mg, 0,0705 mmol, 1 equiv.) em tetraidrofurano (2,80 mL) a - 100°C. A mistura de reação vermelho-clara resultante foi deixada aquecer para 0°C durante 70 min. A solução de produto gelado foi então dividida entre solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 15 mL) e diclorometano (15 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi ex-traída mais com duas porções de 15 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere [10 μm, 250 x 10 mm, detecção UV a 350 nm, Solvente A: água, Solvente B: metanol, duas injeções separadas (750 μL cada, acetonitrila), eluição isocrática com 94% de B por 20 minutos seguido por uma eluição de gradiente linear com 94->100% de B durante 20 min, taxa de fluxo: 3,5 mL/min]. As frações eluindo a 24-38 min foram coletadas e concentradas, dando o produto de adição hexacíclico em forma diastereomericamente pura (36,1 mg, 75%, como um sólido branco). Rf 0,37 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 16,25 (s, 1H, enol-OH), 8,30 (d, 1H, J = 8,3 Hz, ArH), 7,75 (d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH), 7,59-7,34 (m, 7H, ArH), 7,26 (s, 1H, ArH), 5,38 (s, 2H, OCH2F), 4,02 (s, 3H, OCH3), 3,99 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 3,08-3,05 (m, 2H, CH- CH2CHCHN(CH3)2, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,95-2,90 (m, 1H, CHH- CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,58 (dd, 1H, J = 10,7, 5,9 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,51 (s, 6H, N(CH3)2), 2,50-2,48 (m, 1H, CHH'CHCHN(CH3)2), 2,20-2,14 (m, 1H, CHH'CHCHN(CH3)2), 0,82 (s, 9H, TBS), 0,29 (s, 3H, TBS), 0,13 (s, 3H, TBS); 13C RMN (125 MHz, CDCI3) δ 187,9, 184,1, 183,0, 182,0, 167,8, 159,2, 137,5, 136,7, 135,3, 129,5, 128,8, 128,7, 128,5, 127,5, 126,4, 124,2, 121,8, 119,5, 108,7, 108,7, 82,4, 72,8, 63,8, 61,6, 46,8, 42,1, 40,7, 29,3, 26,2, 23,1, 19,3, -2,2, -3,5; FTIR (película pura), cm"1 2934 (m), 2852 (m), 1718 (s, C=O), 1610 (s), 1513 (s), 1472 (m), 1452 (m), 1369 (m), 1339 (w), 1293 (m), 1252 (m), 1190 (w), 1159 (m), 1067 (m), 1026 (w), 1011 (w); HRMS (ES) m/z calc. para (C3gH44N2O7Si+H)+ 681,2996, encontrado 681,2985. Desproteção:
Figure img0136
Solução de ácido fluorídrico aquosa concentrada (48% em peso, 1,0 mL) foi adicionada a um recipiente de reação de polipropileno contendo uma solução do produto de adição pentacíclico purificado do experimento acima (24,0 mg, 0,035 mmol, 1 equiv.) em acetonitrila (9,0 mL) a 23°C. A mistura de reação foi agitada a 23°C por 22 horas, então foi vertida em água (50 mL) contendo hidrogenofosfato de dipotássio (12,0 g). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando um óleo amarelo-claro. O resíduo foi dissolvido em metanol-dioxana (1:1, 5 mL) e à solução resultante foi adi-cionado negro-de-paládio (10,0 mg, 0,0940 mmol, 2,67 equiv.) em uma porção. Uma atmosfera de gás hidrogênio foi introduzida através de evacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura amarela foi agitada a 23°C por 4 horas, então foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concentrado, dando um óleo amarelo. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (4,5 mL) e à solução resultante foi adicionada uma solução de tribrometo de boro (1,0 M em diclorometano, 0,5 mL, 14 e- quiv.) a -78°C. A mistura vermelho-escura foi agitada a -78°C por 15 min, então a 23°C por 3,5 h. Metanol (20 mL) foi adicionado e a solução amarela resultante foi agitada a 23°C por 1 h. A solução foi concentrada, dando um óleo amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Polymerx DVB [7 μm, 150 x 21,2 mm, detecção UV a 365 nm, Solvente A: metanol-HCI 0,01 N (1:4), Solvente B: acetonitrila, vo- lume de injeção: 500 μL (metanol contendo 10 mg de ácido oxálico), eluição isocrática com 25->50% de B por 60 min, taxa de fluxo: 6 mL/min]. Frações eluindo a 30-35 min foram coletadas e concentradas, dando cloridrato de pentanciclina como um pó amarelo (13,1 mg, 74%). 1H RMN (600 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 8,36 (d, 1H, J = 7,7 Hz, ArH), 7,74 20 (d, 1H, J = 7,7 Hz, ArH), 7,64 (dd, 1H, J = 7,7, 7,7 Hz, ArH), 7,50 (dd, 1H, J = 7,7, 7,7 Hz, ArH), 7,1 (s, 1H, ArH), 4,10 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,13-2,97 (m, 9H, N(CH3)2, CHCHN(CH3)2, CHCH2CHCHN(CH3)2, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,67 (dd, 1H, J = 14,3, 14,3 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,22 (ddd, 1H, J = 13,6, 4,9, 2,9 Hz, CHH'CH- CHN(CH3)2), 1,64 (ddd, 1H, J = 13,6, 13,6, 13,6 Hz, CHH’CHCHN(CH3)2); UV max (0,01 M HCI metanólico), nm 268, 345, 402; [a]D = -113° (c = 0,18 in 0,01 M HCI metanólico); HRMS (ES) m/z calc. para (C25H24N2O7+H)+ 465,1662, encontrado 465,1656. Síntese de (-)-7-Aza-10-Desoxisanciclina Etapa de Ciclização:
Figure img0137
Uma solução de n-butillítio em hexanos (2,65 M, 33,0 μL, 0,0945 mmol, 5,00 equiv.) foi adicionada a uma solução de diisopropilamina (13,2 μL, 5 0,0945 mmol, 5,0 equiv.) em tetraidrofurano (0,750 mL) a -78°C. A solução resultante foi rapidamente aquecida em um banho frio (10 min), então foi es-friada para -78°C. Hexametilfosforamida (33,0 μL, 0,189 mmol, 10,0 equiv.) foi adicionada, produzindo uma solução incolor, e esta solução foi então transferida (fria) em gotas através de cânula a uma solução contendo 2-metilpiridino- 10 3-carboxilato de fenila (16,0 mg, 0,0755 mmol, 4,00 equiv.) e enona 7 (9,1 mg, 0,019 mmol, 1 equiv.) em tetraidrofurano (0,750 mL) a -95°C, formando uma mistura vermelho-clara. A solução de reação foi aquecida para -50°C durante 50 min. A solução de produto foi então dividida entre solução tampão de tostado de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 10 mL) e diclorometano (25 mL). A 15 fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com três porções de 15 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi concentrado, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere [10 μm, 250 x 10 mm, detec- 20 ção UV a 350 nm, Solvente A: água, Solvente B: metanol, volume de injeção: 500 μL (metanol), eluição de gradiente de 85->100% de B durante 30 min, taxa de fluxo: 3,5 mL/min]. As frações eluindo a 21-27 min foram coletadas e concentradas, dando o produto de adição pentacíclico em forma diastereome- ricamente pura (8,6 mg, 76%, como um sólido branco). R, 0,07 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CD2CI2) Ô 15,21 (s, 1H, enol), 8,63 (d, 1H, J = 4,5 Hz, pir-H), 8,19 (d, 1H, J = 7,5 Hz, pir-H), 7,547,43 (m, 5H, ArH), 7,34 (d, 1H, J = 4,5, 7,5 Hz, pir-H), 5,36 (d, 1H, J = 12,0 Hz, OCHH'Ph), 5,33 (d, 1H, J= 12,0 Hz, OCHH'Ph), 4,03 (d, 1H, J= 10,7 Hz, CHN(CH3)2). 3,36-3,31 (m, 1H, CHCH2CHCHN(CH3)2), 3,23 (dd, 1H, J = 16,3, 5,6 Hz, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,99 (dd, 1H, J = 16,3, 16,3 Hz, CHH’- CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,63 (ddd, 1H, J = 1,6, 4,4, 10,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,54-2,48 (m, 7H, N(CH3)2, CHH’CHCHN(CH3)2), 2,19 (dd, 1H, J = 1,6, 14,5 5 Hz, CHH’CHCHN(CH3)2), 0,87 (s, 9H, TBS), 0,26 (s, 3H, TBS), 0,13 (s, 3H, TBS); 13C RMN (100 MHz, CD2CI2) δ 187,7, 183,5, 182,6, 182,2, 167,9, 161,2, 153,4, 137,6, 134,1, 129,2, 129,1, 129,1, 126,8, 123,0, 108,7, 106,9, 82,2, 73,0, 61,8, 47,0, 42,1, 41,4, 30,1, 28,4, 26,1, 23,2, 19,3, -2,4, -3,5; HRMS (ES) m/z calc, para (C33H39N3O6Si+H)+ 602,2686, encontrado 602,2686. 10 Desproteção:
Figure img0138
negro de Pd dioxana Negro-de-paládio (3,0 mg, 0,028 mmol, 2,6 equiv.) foi adicionado em uma porção a uma solução de produto de adição pentacíclico purificado do experimento acima (6,5 mg, 0,011 mg, 1 equiv.) em dioxana-metanol (7:2, 9,0 mL) a 23°C. Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de e vacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura verde resultante foi agitada a 23°C por 7 horas, então foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concentrado, dando um óleo amarelo (7,0 mg). O resíduo foi dissolvido em acetonitrila (4,5 mL), transferi- do para um recipiente de reação de polipropileno e solução de ácido fluorídrico aquosa concentrada (48% em peso, 0,5 mL) foi adicionada à solução resultante a 23°C. A mistura de reação foi aquecida para 35°C por 27 horas. Ácido fluorídrico em excesso foi extinto através da adição de metoxitrimetilsi- lano (3,5 mL, 25 mmoles). A mistura de reação foi concentrada, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Polymerx DVB [10 μm, 250 x 10 mm, detecção UV a 350 nm, Solvente A: ácido trifluoracético 0,5% em água, Solvente B: ácido trifluoracético 0,5% em metanol-acetonitrila (1:1), volume de injeção: 500 μL (metanol), eluição de gradiente com 0->20% de B durante 40 min, taxa de fluxo: 4 mL/min], Frações eluindo a 35-45 min foram coletadas e concentradas para dar um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em HCI metanólico (1,0 mL, 0,10 M) e concentrado, dando cloridrato de 7-aza-10-desoxisanciclina como um pó amarelo (3,7 mg, 79%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) Ô 8,79-8,77 (m, 2H, pir-H) 7,91 (dd, 1H, J = 6,8, 6,8 Hz, pir-H), 4,12 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,41-3,22 (m, 2H, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2, CH- CH2CHCHN(CH3)2), 3,11-3,00 (m, 8H, CHH’CHCH2CHCHN(CH3)2, CH- CHN(CH3)2I N(CH3)2), 2,34 (ddd, 1H, J = 12,9, 4,4, 2,4 Hz, CHH'CH- CHN(CH3)2), 1,77 (ddd, 1H, J = 12,9, 12,9, 12,9 Hz, CHH’CHCHN(CH3)2); UV max (HCI metanólico 0,01 M), nm 264, 345; [a]D = -154° (c = 0,15 em HCI metanólico 0,01 M); HRMS (ES) m/z calc. para (C20H2IN3O6+H)+ 400,1508, encontrado 400,1504. Síntese de (-)-IO-Desoxisanciclina Etapa de Ciclização:
Figure img0139
Uma solução de n-butillítio em hexano (2,65 M, 59 μL, 0,16 mmol, 4,0 equiv.) foi adicionada a uma solução de 2-(bromometil)benzoato de fenila (45,6 mg, 0,157 mmol, 3,97 equiv.) e enona 7 (19,0 mg, 0,0394 mmol, 1 equiv.) em tetraidrofurano (1,57 mL) a -100°C. A solução vermelho- clara resultante foi deixada aquecer para 0°C durante 30 min. A solução de produto gelado foi então dividida entre solução tampão de fosfato de potássio aquosa (pH 7,0, 0,2 M, 5 mL) e diclorometano (25 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais com uma porção adicional de 15 mL de diclorometano. As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e o filtrado foi combinado, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Coulter Ultrasphere [10 μm, 250 x 10 mm, Solvente A: água, Solvente B: metanol, volume de injeção: 1,0 mL (metanol), eluição de gradiente de 85->100% de B durante 30 min, detecção de UV a 350 nm, taxa de fluxo: 3,5 mL/min]. As frações eluindo a 25-30 min foram coletadas e concentradas, dando o produto de adição pentacíclico em forma diastereo- mericamente pura (19,2 mg, 81%, como um sólido branco). Rf 0,46 (3:7 acetato de etil-hexanos); 1H RMN (500 MHz, CD2CI2) δ 15,53 (s, 1H, enol), 7,94 (d, 1H, J = 7,9 Hz, ArH), 7,54 - 7,28 (m, 8H, ArH, OCH2ArH), 5,37-5,34 (m, 2H, OCH2F), 4,05 (d, 1H, J = 10,7 Hz, CHN(CH3)2), 3,24-3,18 (m, 1H, CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,99 (dd, 1H, J = 15,5, 5,6 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,88 (dd, 1H, J = 15,5, 15,5 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,61 (dd, 1H, J = 4,4, 10,7 Hz, CHCHN(CH3)2), 2,542,44 (m, 7H, N(CH3)2, CHH'CHCHN(CH3)2), 2,14 (d, 1H, J = 14,3 Hz, CHH- CHCHN(CH3)2), 0,86 (s, 9H, TBS), 0,25 (s, 3H, TBS), 0,12 (s, 3H, TBS); 13C RMN (100 MHz, CD2CI2) δ 187,8, 183,0, 182,8, 182,4, 167,7, 141,7, 135,4, 133,4, 130,9, 129,0, 128,9, 128,9, 128,1, 127,5, 126,5, 108,5, 106,8, 82,1, 72,8, 61,5, 58,5, 46,9, 41,9, 38,6, 29,0, 25,9, 23,1, 19,1, -2,6, -3,7; HRMS (ES) m/z calc. para (C34H4oN3OeSi+H)+ 601,2734, encontrado 601,2730. Desproteção:
Figure img0140
negro de Pd dioxana
Solução de ácido fluorídrico aquosa concentrada (48% em peso, 1,1 mL) foi adicionada a um recipiente de reação de polipropileno contendo uma solução do produto de adição de ácido pentacíclico do experimento a-cima (15,1 mg, 0,0251 mmol, 1 equiv.) em acetonitrila (10 mL) a 23°C. A so-lução resultante foi agitada vigorosamente a 23°C por 12 horas, então foi vertida em água (50 mL) contendo hidrogenofosfato de dipotássio (4,7 g) e o produto foi extraído com acetato de etila (3 x 25 mL). As fases orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro. A solução seca foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado, dando um sólido amarelo (12,2 mg, 99%). O resíduo foi dissolvido em metanol-dioxana (1:1, 3,0 mL) e negro-de- paládio (6,5 mg, 0,061 mmol, 2,4 equiv.) foi adicionado à solução resultante em uma porção. Uma atmosfera de hidrogênio foi introduzida através de e-vacuação rápida do frasco, então enchimento com hidrogênio puro (1 atm). A mistura amarelo-clara resultante foi agitada a 23°C por 20 minutos, então 5 foi filtrada em uma almofada de algodão. O filtrado foi concentrado, dando um sólido amarelo. O produto foi purificado através de HPLC preparativa em uma coluna Phenomenex Polymerx DVB [10 μm, 250 x 10 mm, detecção UV a 350 nm, Solvente A: HCI 0,01 N, Solvente B: acetonitrila, volume de injeção: 1,0 mL (metanol contendo 10 mg de ácido oxálico), eluição de gradiente 10 com 5->50% de B durante 30 minutos, taxa de fluxo: 5 mL/min], Frações elu- indo a 16-22 minutos foram coletadas e concentradas, dando cloridrato de 10-desoxisanciclina como um pó branco (91 mg, 83%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, cloridrato) δ 7,96 (d, 1H, J = 7,3 Hz, ArH) 7,51 (dd, 1H, J = 7,3, 7,3 Hz, ArH), 7,39 (dd, 1H, J = 7,3, 7,3 Hz, ArH), 15 7,30 (d, 1H, J = 7,3 Hz, ArH), 4,04 (s, 1H, CHN(CH3)2), 3,31-2,99 (m, 8H, CH- CH2CHCHN(CH3)2, CHCHN(CH3)2, N(CH3)2), 2,87 (dd, 1H, J = 15,4, 4,3 Hz, CHH'CHCH2CHCHN(CH3)2), 2,61 (dd, 1H, J = 15,4, 15,4 Hz, CHH'CH- CH2CHCHN(CH3)2), 2,21 (ddd, J= 12,8, 5,0, 2,5 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2), 1,66 (ddd, 1H, J = 12,8, 12,8, 12,8 Hz, CHH'CHCHN(CH3)2); UV max (0,01 M HCI 20 metanólico), nm 264, 348; [a]D = -147° (c = 0,15 em HCI metanólico 0,01 M); HRMS (ES) m/z calc, para (C2IH22N2O6+H)+ 399,1556, encontrado 399,1554.
Teste Biológico
A atividade antibacteriana de célula integral foi determinada de acordo com métodos recomendados pelos NCCLS (National Committee for 25 Clinical Laboratory Standards. 2002. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically: approved standard-fifth edition, document M100-S12 NCCLS, National Committee for Clinical Laboratory Standards. Waine, P.A.; incorporado aqui a título de referência). Os compostos de teste foram dissolvidos em sulfóxido de dimetila (DMSO) e 30 as soluções resultantes foram diluída em água (1:10) para produzir soluções de estoque com uma concentração final de 256 μg de análogo de tetraciclina por mL. Em uma placa de microtitulação de 96 cavidades, alíquotas de 50 μL de soluções de estoque foram diluídas serialmente em caldo de Mueller- Hinton ajustado com cátion (MHB; Becton-Dickinson, Cockeysville, MD). Os organismos de teste (alíquotas de 50 μL de soluções -5 x 1O-5 CFU/mL) foram então adicionados às cavidades apropriadas da placa de microtitulação. Placas inoculadas foram incubadas aerobicamente a 35°C por 18-24 horas. A MIC era a concentração menor de composto determinada inibir crescimento visível. Cinco cepas de bactéria Gram-positiva e cinco Gram-negativas foram examinadas em ensaios de concentração de inibição mínima (MIC). As cepas Gram-positivas eram Staphilococcus aureus ATCC 29213, Staphi- 10 lococcus epidermidis ACH-0016, Staphilococcus haemoliticus ACH-0013, Enterococcus faecalis ATCC 700802 (uma cepa de enterococus resistente a VRE ou vancomicina) e Staphilococcus aureus ATCC 700699 (carregando o gene de resistência a tetM). As cepas Gram-negativas eram Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, E. coli ATCC 15 25922, E. coli ACH-0095 (resistente a antibiótico múltiplo) e E. coli ATCC 53868::pBR322 (contendo uma resistência à tetraciclina codificando plasmi- deo). Essas cepas são listadas novamente abaixo, junto com certos outros detalhes de suas origens e resistência conhecida a antibióticos. Cepas bacterianas Organismos Gram-Positivos: com um rótulo de resistência à tetraciclina Isolate clínico multiplamente resistente (co- leta de cepa Achillion) Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Cepa QC para teste de MIC Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853Cepa QC para teste de MIC ATCC = American Tipe Culture Collection, Manassas, VA Exemplo 8 - Vias Alternativas para Análogos de Tetraciclina Muitos dos estudos descritos acima mostram a geração do pre-cursor de anel D carbaniônico através de metalização de fenil ésteres de derivado de o-toluato. As reações de autocondensação de vez em quando requereram usar até 4-5 equivalentes de um dado precursor de anel D. A presença de um substituinte de retirada de elétron no a-carbono melhora bastante a eficiência de metalação e acoplamento conforme descrito no Exemplo 7 e em um outro ponto aqui. Troca de lítio-halogênio de brometos benzílicos conduzida in situ na presença do eletrófilo AB foi verificada prover produtos de acoplamento onde metalação benzílica falha (vide Exemplo 7). Esses brometos benzílicos podem ser preparados com eficiências surpreendentes (rendimentos quase quantitativos) e são surpreendentemente estáveis. Os desenvolvimentos podem levar a uma reação de acoplamento que poderia ser conduzível em uma escala multi-quilo. Muitos substituintes fenil éster diferentes (vide abaixo) podem ser usados para otimizar uma reação de acoplamento.
Figure img0141
O grupo ótimo para metalação benzílica, no entanto, pode não ser o mesmo grupo ótimo para troca de lítio-halogênio. Ainda, para processo de troca de lítio-halogênio, além de modificação de éster, outros reagentes de metal podem ser usados incluindo, mas não limitado a, outros reagentes de alquillítio (por exemplo, fenillítio, mesitillítio), reagentes Grignard (por exemplo, cloreto de iso-propilmagnésio) e sistemas à base de zinco. Acopla- 5 mentos do tipo Barbier serão explorados usando uma variedade de metais valentes zero para acoplamento.
Precursores de anel AB podem ser também preparados através de vias alternativas. A etapa de contagem para a síntese da maioria dos análogos de 6-desoxitetraciclina é 14 de ácido benzóico. Onze dessas 14 10 etapas são dedicadas à síntese do precursor de anel AB. Quaisquer aperfeiçoamentos no comprimento ou eficiência da via desses precursores de anel AB terão um impacto substancial sobre a síntese geral. Sínteses alternativas do precursor de anel AB são mostradas nas Figuras 22 e 23. Dentre as estratégias para seqüências de fechamento de anel A alternativas estão adi- 15 ções Michael, processos mediados por paládio e fechamentos induzidos por íon iminio. Reagentes de iodo hipervalentes podem ser também usados ao invés de diidroxilação microbiana na síntese de precursores de anel AB conforme mostrado na Figura 23.
Outras Modalidades
O acima foi uma descrição de certas modalidades preferidas não-limitantes da invenção. Aqueles versados na técnica vão compreender que várias mudanças e modificações nesta descrição podem ser feitas sem se afastar do espirito ou escopo da presente invenção, conforme definido nas reivindicações que seguem.

Claims (20)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0142
e sais, isômeros e tautômeros do mesmo; onde R5 é hidrogênio; halogênio; alquila ou -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila; arila ou heteroarila; e P é independentemente hidrogênio, metila, metoxilmetila (MOM), metiltiometila (MTM), t-butiltiometila, (fenildimetilsilil)metoximetila (SMOM), benziloximetila (BOM), p-metoxibenziloximetila (PMBM), (4- metoxifenóxi)metila (p-AOM), guaiacolmetila (GUM), benzila, p- metoxibenzila, 3,4-dimetoxibenzila, o-nitrobenzila, p-nitrobenzila, p- halobenzila, 2,6-diclorobenzila, p-cianobenzila, p-fenilbenzila, trimetilsilila (TMS), trietilsilila (TES), triisopropilsilila (TIPS), dimetilisopropilsilila (IPDMS), dietilisopropilsilila (DEIPS), dimetilhexilsilila, t-butildimetilsilila (TBDMS), t- butildifenilsilila (TBDPS), tribenzilsilila, tri-p-xililsilila, trifenilsilila, difenilmetilsilila (DPMS), t-butilmetoxifenilsilila (TBMPS),p-nitrofenil carbonato, benzil carbonato, p-metoxibenzil carbonato, 3,4-dimetoxibenzil carbonato, o-nitrobenzil carbonato ou p-nitrobenzil carbonato cada exemplo de alifático, sozinho ou parte de outro grupo, refere-se a alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalaquenila ou cicloalquinila contendo 1-20 átomos de carbono; cada exemplo de heteroalifático refere-se a um grupo alifático contendo 1-20 tomos de carbono e contendo ainda um ou mais átomos de oxigênio, enxofre ou nitrogênio, no lugar de átomos de carbono; cada exemplo de arila, sozinha ou parte de outro grupo, refere- se a uma arila substituída ou não substituída contendo 6-14 carbonos; e cada exemplo de heteroarila, sozinha ou em parte de outro grupo, refere-se a uma heteroarila substituída ou não substituída contendo 5-10 átomos no anel, dos quais pelo menos um átomo do anel é selecionado de enxofre, oxigênio e nitrogênio.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0143
3. Composto, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0144
e sais, isômeros e tautômeros do mesmo; onde R3 é hidrogênio; halogênio; alquila ou -ORC; onde cada ocorrência de Rc é independentemente um hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila, arila ou heteroarila; R4 é hidrogênio; halogênio; alquila ou -ORD; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila, arila ou heteroarila; R5 é hidrogênio; halogênio; alquila ou -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente um hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila, arila, ou heteroarila; R6 é hidrogênio, halogênio ou ariltio, -NO2, amino, alquilamino e dialquilamino; P é independentemente hidrogênio, metila, metoxilmetila (MOM), metiltiometila (MTM), t-butiltiometila, (fenildimetilsilil)metoximetila (SMOM), benziloximetila (BOM), p-metoxibenziloximetila (PMBM), (4- metoxifenóxi)metila (p-AOM), guaiacolmetila (GUM), benzila, p- metoxibenzila, 3,4-dimetoxibenzila, o-nitrobenzila, p-nitrobenzila, p- halobenzila, 2,6-diclorobenzila, p-cianobenzila, p-fenilbenzila, trimetilsilila (TMS), trietilsilila (TES), triisopropilsilila (TIPS), dimetilisopropilsilila (IPDMS), dietilisopropilsilila (DEIPS), dimetilhexilsilila, t-butildimetilsilila (TBDMS), t- butildifenilsilil (TBDPS), tribenzilsilil, tri-p-xililsilil, trifenilsilil, difenilmetilsilil (DPMS), t-butilmetoxifenilsilil (TBMPS), p-nitrofenil carbonato, benzil carbonato, p-metoxibenzil carbonato, 3,4-dimetoxibenzil carbonato, o- nitrobenzil carbonato ou p-nitrobenzil carbonato; cada exemplo de alifático, sozinho ou parte de outro grupo, refere-se a alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila ou cicloalquinila contendo 1-20 átomos de carbono; cada exemplo de heteroaliftico refere-se a um grupo alifático contendo 1-20 átomos de carbono e contendo ainda um ou mais átomos de oxigênio, enxofre, nitrogênio, ou silício no lugar de átomos de carbono; cada exemplo de arila, sozinha ou parte de outro grupo, refere- se a uma arila substituída ou não substituída contendo 6-14 carbonos; e cada exemplo de heteroarila, sozinha ou em parte de outro grupo, refere-se a um heteroarila substituída ou não substituída contendo 510 átomos no anel, dos quais pelo menos um átomo do anel é selecionado de enxofre, oxigênio e nitrogênio,
4. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que cada de R3 e R4 é independentemente hidrogênio; -ORC OU - ORD.
5. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que ambos R3 e R4 são hidrogênio.
6. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R3 é metila; e R4 é hidrogênio.
7. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 3, caracterizado pelo fato de que R5 é -N(RE)2,
8. Composto de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que RE é hidrogênio ou um grupo (C1-C6) alquila inferior.
9. Composto de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fati de que ambos RE são grupos metila.
10. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R6 é hidrogênio.
11. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado 5 pelo fato de que R6 é -SAr, onde Ar é uma arila ou heteroarila não- substituída.
12. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R6 é -SPh, onde Ph é uma porção fenila não-substituída.
13. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado 10 pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0145
14. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0146
15. Composto, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0147
e sais, isômeros e tautômeros do mesmo; onde R3 é hidrogênio; halogênio; ou -ORC; onde cada ocorrência de Rc é independentemente hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila, arila ou heteroarila; R4 é hidrogênio; halogênio; ou -ORD; onde cada ocorrência de RD é independentemente um hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila, arila ou heteroarila; R5 é hidrogênio; halogênio; ou -N(RE)2; onde cada ocorrência de RE é independentemente hidrogênio, alifático, heteroalifático, acila, arila ou heteroarila; P é hidrogênio,metila, metoxilmetila (MOM), metiltiometila (MTM), t-butiltiometila, (fenildimetilsilil)metoximetila (SMOM), benziloximetila (BOM), p-metoxibenziloximetila (PMBM), (4-metoxifenóxi)metila (p-AOM), guaiacolmetila (GUM), benzila, p-metoxibenzila, 3,4-dimetoxibenzila, o- nitrobenzila, p-nitrobenzila, p-halobenzila, 2,6-diclorobenzila, p-cianobenzila, p-fenilbenzila, trimetilsilila (TMS), trietilsilila (TES), triisopropilsilila (TIPS), dimetilisopropilsilila (IPDMS), dietilisopropilsilila (DEIPS), dimetilhexilsilila, t- butildimetilsilila (TBDMS), t-butildifenilsilil (TBDPS), tribenzilsilil, tri-p-xililsilil, trifenilsilil, difenilmetilsilil (DPMS), t-butilmetoxifenilsilil (TBMPS), p-nitrofenil carbonato, benzil carbonato, p-metoxibenzil carbonato, 3,4-dimetoxibenzil carbonato, o-nitrobenzil carbonato ou p-nitrobenzil carbonato; R9 é alquila substituída ou não-substituída, alquenila substituída ou não-substituída, heteroalifático cíclico, substituído ou não-substituído,; ou arila substituída ou não-substituída; e R10 é alquila substituída ou não-substituída; heteroalifático cíclico, substituído ou não-substituído; arila substituída ou não-substituída;; cada exemplo de alquila substituída, alquenila substituída, heteroalifático substituído, e arila substituída refere-se à substituição desse grupo por um ou mais grupos selecionados de alifático; heteroalifático; arila contendo 6-14 átomos de carbono; heteroarila contendo 5-10 átomos no anel, dos quais pelo menos um átomo do anel é selecionado de enxofre, oxigênio e nitrogênio; arilalquila; heteroarilalquila; alcoxi; ariloxi; heteroalcoxi; heteroariloxi; alquiltio; ariltio; heteroalquiltio; heteroariltio; -F; -Cl; -Br; -I; -OH; -NO2; -CN; -CF3; -CH2CF3; -CHCl2; -CH2OH; -CH2CH2OH; -CH2NH2; - CH2SO2CH3; -C(O)Rx; - CO2(Rx); -CON(Rx)2; -OC(O)Rx; -OCO2Rx; - OCON(Rx)2; -N(Rx)2; -S(O)2Rx; and - NRx(CO)Rx, e em que cada Rx é independentemente selecionado de alifático; heteroalifático; arila contendo 6-14 átomos de carbono; heteroarila contendo 5-10 átomos no anel, dos quais pelo menos um átomo do anel é selecionado de enxofre, oxigênio e nitrogênio; arilalquila; e heteroarilalquilo; e cada exemplo de alifático, sozinho ou parte de outro grupo, refere-se a alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila ou cicloalquinila contendo 1-20 átomos de carbono; cada exemplo de heteroalifático refere-se a um grupo alifático contendo 1-20 tomos de carbono e contendo ainda um ou mais átomos de oxigênio, enxofre, nitrogênio, fósforo ou silício no lugar de átomos de carbono; cada exemplo de alqu- ou alquil fornecido em alcoxi, alquiltio, alquilamino e dialquilamino refere-se a um alifático cíclico ou acíclico, substituído ou não substituído, ramificado ou não ramificado contendo 1-20 átomos de carbono; cada exemplo de arila, sozinha ou parte de outro grupo, refere- se a uma arila substituída ou não substituída contendo 6-14 carbonos; e cada exemplo de heteroarila, sozinha ou em parte de outro grupo, refere-se a um heteroarila substituída ou não substituída contendo 510 átomos no anel, dos quais pelo menos um átomo do anel é selecionado de enxofre, oxigênio e nitrogênio.
16. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R5 é -N(RE)2, onde RE é hidrogênio ou (C1-C6) alquila inferior.
17. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R4 é hidrogênio.
18. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R9 é uma (C1-C6) alquila, alquenila ou alquinila inferior.
19. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R10 é uma arila substituída ou não-substituída.
20. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R10 é um anel fenila substituído ou não-substituído.
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