BRPI0615292A2

BRPI0615292A2 - método de estabilização de um agente farmacêutico, composição, métodos para sua preparação, frasco selado e kit compreendendo as ditas composições, bem como uso das mesmas

Info

Publication number: BRPI0615292A2
Application number: BRPI0615292-9A
Authority: BR
Inventors: Neil P Desai; Zachary Yim; Patrick M D Soon-Shiong; Tapas De; Andrew Yang
Original assignee: Abraxis Bioscience Llc
Priority date: 2005-08-31
Filing date: 2006-08-30
Publication date: 2011-05-17
Also published as: US7981445B2; EP1928435A2; US20070082838A1; CA2620389C; IL189600A0; CN101291658A; IL272236A; JP2009507027A; EP1928435B8; KR20130091790A; EP1928435B1; NZ592132A; NO20081576L; AU2006284657A1; CN101291658B; AU2006284657B2; NZ566705A; NO20190526A1; KR101457834B1; BRPI0615292A8

Abstract

MéTODO DE ESTABILIZAçãO DE UM AGENTE FARMACêUTICO, COMPOSIçãO, MéTODOS PARA SUA PREPARAçãO, FRASCO SELADO E KIT COMPREENDENDO AS DITAS COMPOSIçõES, BEM COMO USO DAS MESMAS. A presente invenção refere-se a composições farmacêuticas estáveis de agentes farmacêuticos de má solubilidade em água e agentes estabilizantes que funcionam para aumentar uma estabilidade das composições. O uso de agentes de estabilização fornece prolongada estabilidade de nanoparticula suspensões e outras formulações de agentes farmacêuticos pobremente solúveis em água tal como docetaxel sob certas condições, por exemplo, em diluição para administração.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MÉTODO DEESTABILIZAÇÃO DE UM AGENTE FARMACÊUTICO, COMPOSIÇÃO,MÉTODOS PARA SUA PREPARAÇÃO, FRASCO SELADO E KIT COM-PREENDENDO AS DITAS COMPOSIÇÕES, BEM COMO USO DAS MES-MAS".

Referência Cruzada a Pedidos Relacionados

Este pedido reivindica o benefício de prioridade do Pedido Provi-sório dos Estados Unidos 60/712.865 depositado em 31 de agosto de 2005,Pedido Provisório dos Estados Unidos 60/736.962 depositado em 14 de no-vembro de 2005, e Pedido Provisório dos Estados Unidos 60/736.931 depo-sitado em 14 de novembro de 2005, a totalidade dos quais são por meio domesmo incorporados aqui através de referência em suas totalidades.

Antecedentes da Invenção

Existe um número sempre crescente de fármacos farmacêuticossendo formulados que são de má solubilidade ou insolúveis em soluçõesaquosas. Tais fármacos fornecem desafios para liberação dos mesmos emuma forma injetável tal como por meio de administração parenteral. Umaformulação bem planejada deve, em um mínimo, ser capaz de apresentaçãode uma quantidade terapeuticamente eficaz do fármaco pobremente solúvelao sítio de absorção desejado, em uma forma absorvível. Além disso, estascomposições tendem a ser instáveis, com sedimentação e/ou precipitaçãoocorrendo em 24 horas seguinte a reidratação ou reconstituição.

Taxanos, em particular os dois fármacos de taxano correntemen-te disponíveis, paclitaxel e docetaxel, são agentes antitumor potentes. Pacli-taxei é muito pobremente solúvel em água (menos do que 10 pg/mL), e co-mo um resultado, não pode ser praticamente formulado com um meio aquo-so para administração IV. Correntemente, paclitaxel é formulado para admi-nistração IV a pacientes com câncer em uma solução com óleo de rícino po-lioxietilado (Polyoxyl 35 ou Cremophor®) como o solvente/tensoativo primá-rio, com altas concentrações de etanol empregado como co-solvente. Umadas maiores dificuldades na administração de paclitaxel é a ocorrência dereações de hipersensibilidade. Estas reações, que incluem erupções de peleseveras, urticária, eritema, dispnéia, taquicardia e outros, podem ser atribuídaspelo menos em parte às altas concentrações de etanol e Cremophor usadoscomo solventes na formulação. Docetaxel, um análogo de paclitaxel, é semi-sinteticamente produzido de bacatina III de 10-deacetila, um precursor não cito-tóxico extraído das agulhas de Taxus baccata e esterificado com uma cadeialateral quimicamente sintetizado (Cortes e Pazdur, 1995, J CUn. Oncol.13(10):2643- 55). Assim como paclitaxel, docetaxel é muito pobremente solúvelem água. Correntemente, o solvente/tensoativo mais preferido usado para dis-solver docetaxel é polissorbato 80 (Tween 80) (Bissery e outros 1991 CâncerRes. 51(18):4845-52; Tomiak e outros 1992). Assim como Cremophor, Tweenfreqüentemente causa hipersensibilidade reações em pacientes. Além disso,Tween 80 não pode ser usado com aparelho de liberação de PVC por causa desua tendência a Iixiviar ftalato de dietilhexila, que é altamente tóxico.

Purificação de paclitaxel e docetaxel semi-sintético é um problemadesafiante devido à formação de vários produtos de degradação ao longo darotina sintética. Além do mais, taxanos purificados são constatados sofreremdegradação, até sob condições de armazenagem controladas. Por esse motivo,torna-se desejável desenvolver formas estáveis destas moléculas que retêm aspropriedades anticâncer desejáveis. Esforços anteriores na obtenção de doce-taxel adequado foram concentrando-se em processos de preparo de formas detriidrato de docetaxel, que acreditaram possuir estabilidade substancialmentemaior do que aquela do produto anidro (daqui em diante referido como anidro-so). Veja, por exemplo, Patente dos Estados Unidos Nos 6.022.985; 6.838.569.

A fim de conseguir os efeitos terapêuticos esperados de agentespobremente solúveis em água tais como paclitaxel e docetaxel, é geralmenterequerido que uma forma solubilizada ou forma nanodispersa do agente sejaadministrada a um paciente.

Desta forma, vários métodos foram desenvolvidos os quais sãocom base no uso de: solventes auxiliares; tensoativos; formas solúveis dofármaco, por exemplo, sais e solvatos; formas quimicamente modificadas dofármaco, por exemplo, pró-droga/pró-fármacos; complexos de polímero-fármaco solúveis; veículos de fármaco especiais tais como lipossomas; eoutros. Realmente, o uso de micelas de copolímero de bloco anfifílico atraiuuma grande parte de interesse como um veículo de fármaco potencialmenteeficaz que é capaz de solubilização de um fármaco hidrofóbico em um am-biente aquoso.

Cada um dos métodos acima é impedido por um ou mais pro-

blemas particulares. Por exemplo, o método com base no uso de micelastensoativas para solubilizar fármacos hidrofóbicos possui problemas pelofato de que alguns dos tensoativos são relativamente tóxicos e precipitaçãode fármacos hidrofóbicos ocorre quando submetidos à diluição.

Anteriormente, formulações de Iipossoma com base em fosfoli-pídeo para paclitaxel, Taxotere, e outros taxanos ativos foram desenvolvidas(Straubinger e outros 1993, J Natl. Câncer Inst. Monogr. (15):69-78; Strau-binger e outros 1994; Sharma e outros 1993, Câncer Res. 53(24):557-81;Sharma e Straubinger 1994, Pharm. Res. I l(6):889-96; A. Sharma e outros1995, J Pharm. Scl 84(12): 1400-4), e as propriedades físicas destas e ou-tras formulações de taxano foram estudadas (Sharma e Straubinger 1994,Pharm. Res. 11(6):889-96; U.S. Sharma e outros 1995, J Pharm. Set 84(10):1223-30; Balasubramanian e Straubinger 1994, Biochemistry 33(30):8941-7;Balasubramanian e outros 1994, J Pharm. Scl 83(10):1470-6). A utilidadeprincipal destas formulações é a eliminação de toxicidade relacionada aoexcipiente de Cremophor EL, e uma redução na toxicidade do taxano pro-priamente dito, tal como demonstrado em diversos modelos de tumor animal(Sharma e outros 1993, Câncer Res. 53(24):557- 81; A. Sharma e outros1995, J Pharm. Sei. 84(12): 1400-4; Sharma e outros 1996, câncer Lett.107(2):265-272). Esta observação é valida para diversos taxanos além depaclitaxel (A. Sharma e outros 1995, J Pharm. Sei. 84(12): 1400-4). Em al-guns casos, a potência antitumor do fármaco parece ser levemente maiorpara as formulações com base em Iipossoma (Sharma e outros 1993, Cân-cer Res. 53(24):557-81).

Estas formulações lipossômicas compreendem fosfolipídeos eoutros aditivos, além do taxano, e podem ser armazenadas em um estadoseco. Na adição de uma fase aquosa à mistura, partículas formam-se es-pontaneamente e podem tomar a forma de Iipossomas (Straubinger e outros1993). Lipossomas são estruturas vesiculares fechadas consistindo em umamembrana de bicamada Iimitante circundando um núcleo aquoso. Umacomposição de formulação preferida (Sharma e Straubinger 1994) contémum fosfolipídeo neutro (híbrido) tal como Iecitina (fosfatidilcolina, 80 a 90%em relação em mol), junto com um fosfolipídeo negativamente carregado talcomo fosfatidilglicerol (10 a 20%). O último previne agregação das partículaspor meio de repulsão eletrostática. O conteúdo de taxano mais estável é nafaixa de 3 a 4% em mol (relativo ao conteúdo de fosfolipídeo total); tais Ii-possomas podem ser fisicamente e/ou quimicamente estáveis durante 2meses depois de hidratação. Sob a maioria das condições, formulações depaclitaxel contendo concentrações de fármaco elevadas (por exemplo, 8%em mol) são muito instáveis e podem precipitar dentro de minutos de prepa-ração (Sharma e Straubinger 1994).

O maior interesse por estas formulações tem sido o conteúdo detaxano relativamente baixo de formulações aceitavelmente estáveis (3 a 5%em mole), que necessita da administração de uma grande quantidade defosfolipídeo (5 a 10 gm) a pacientes a fim de fornecer a dose prevista defármaco. Ainda que seres humanos freqüentemente tenham fornecido gran-des quantidades de lipídeos intravenosamente para Nutrição Parenteral To-tal (TPN), um objetivo de desenvolvimento principal foi produzir Iipossomasde taxano possuindo um conteúdo de taxano elevado.

Outros métodos para formulação de fármaco pobremente solú-vel para liberação oral ou parenteral incluem, por exemplo, formulações nasquais o fármaco pobremente solúvel é uma emulsão óleo em água, umamicroemulsão, ou uma solução de micelas ou outras partículas portadorasmulti-lamelares. Embora tais métodos possam ser apropriados para algunsagentes terapêuticos hidrofóbicos ionizáveis assim como não ionizáveis, e-les fracassam em tirar vantagem das propriedades químicas de base de á-cido único, e propriedades de solubilidade associadas, de compostos ioni-záveis.

Fármacos que são insolúveis em água podem possuir benefíciossignificantes quando formulados como uma suspensão estável de partículasde submícron. Controle acurado de tamanho de partícula é essencial parauso seguro e eficaz destas formulações. As partículas devem ser menoresdo que sete mícrons de diâmetro para passar seguramente por meio de va-sos capilares sem causar embolias (Allen e outros, 1987; Davis e Taube,1978; Schroeder e outros, 1978; Yokel e outros, 1981, Toxicol. Lett. 9(2):165-70).

Outro método é descrito na Patente dos Estados Unidos Ne5.118.528 que descreve um processo para preparo de nanopartículas.O processo inclui as etapas de: (1) preparo de uma fase líquida de umasubstância em um solvente ou uma mistura de solventes aos quais podemser adicionados um ou mais tensoativos, (2) preparo de uma segunda faselíquida de um não solvente ou uma mistura de não solventes, o não solventesendo miscível com o solvente ou mistura de solventes para a substância,(3) adição entre si das soluções de (1) e (2) com agitação e (4) remoção desolventes indesejáveis para produzir uma suspensão coloidal de nanopartí-culas. A patente '528 descreve que ele produz partículas da substância me-nores do que 500 nm sem o fornecimento de energia. Em particular a paten-te '528 estabelece que é indesejável usar equipamento de energia alta talcomo sonicadores e homogeneizadores.

Patente dos Estados Unidos Ng 4.826.689 descreve um métodopara fabricação de partículas uniformemente feito sob medida de fármacosinsolúveis em água ou outros compostos orgânicos. Primeiramente, umcomposto orgânico sólido adequado é dissolvido em um solvente orgânico, ea solução pode ser diluída com um não solvente. Em seguida, um líquido deprecipitação aquoso é infundido, precipitando partículas não agregadas comdiâmetro médio substancialmente uniforme. As partículas são em seguidaseparadas do solvente orgânico. Dependendo do composto orgânico e dotamanho de partícula desejado, os parâmetros de temperatura, relação denão solvente para solvente orgânico, taxa de infusão, taxa de agitação, evolume podem ser variados de acordo com a patente. A patente '689 des-creve que este processo forma um fármaco em um estado metaestável queé termodinamicamente instável e que eventualmente converte a um estadocristalino mais estável. A patente '689 descreve captura do fármaco em umestado metaestável no qual a energia livre situa-se entre aquela da soluçãode fármaco de partida e da forma cristalina estável. A patente '689 descreveutilização de inibidores de cristalização (por exemplo, polivinilpirrolidinona) eagentes tensoativos (por exemplo, poli(oxietileno-co-oxipropileno)) para ren-der o precipitado estável o bastante para ser isolado por centrifugação, fil-tragem por membrana ou osmose reversa.

Outro método para fornecimento de fármacos insolúveis paraliberação parenteral é descrito na Patente dos Estados Unidos N05.145.684. A patente '684 descreve a moagem úmida de um fármaco inso-lúvel na presença de um modificador de superfície para fornecer uma partí-cula de fármaco possuindo um tamanho de partícula eficaz médio de menosdo que 400 nm. A patente '684 descreve que o modificador de superfície éadsorvido na superfície da partícula de fármaco em uma quantidade sufici-ente para prevenir aglomeração em partículas maiores. Nanopartículas de-fármacos insolúveis preparadas sob condições de forças de cisalhamentoelevadas (por exemplo, sonicação, homogeneização por pressão alta, ousimilares) com polímeros biocompatíveis (por exemplo, albumina) são des-critas em, por exemplo, Patentes dos Estados Unidos Nos 5.916.596,6.506.405, e 6.537.579 e também na Publicação de Patente dos EstadosUnidos 2005/0004002 Al.

Em vista dos antecedentes, há uma necessidade por composi-ções farmacêuticas compreendendo fármacos pobremente solúveis em á-gua com estabilidade física e química aumentada, que eliminam o uso desolventes e excipientes fisiologicamente nocivos, e métodos de produçãodos mesmos. É desejável que tais composições farmacêuticas não se de-gradem, fiquem estáveis sob condições de armazenagem e fiquem fisica-mente e/ou quimicamente estáveis depois de reidratação. Também seriadesejável possuir uma composição farmacêutica compreendendo uma for-ma anidrosa de fármaco pobremente solúvel em água que possui maior so-Iubilidade em solventes e excipientes tradicionalmente usados, assim comoem solventes e excipientes que não são fisiologicamente nocivos. A presen-te invenção fornece tais composições e métodos farmacêuticos.

As descrições de todas as publicações, patentes, pedidos depatente e pedidos de patente publicadas referidas aqui são por meio domesmo incorporados aqui através de referência em suas totalidades.

Breve Sumário da Invenção

A invenção fornece composições e métodos de produção deformulações farmacêuticas estáveis de docetaxel. Em uma modalidade, ainvenção fornece formulações farmacêuticas de docetaxel compreendendocitrato ou derivados dos mesmos. Em uma segunda modalidade, a invençãofornece formulações farmacêuticas de docetaxel compreendendo pirofosfatode sódio. Em uma terceira modalidade, a invenção fornece formulaçõesfarmacêuticas de docetaxel compreendendo EDTA ou derivado dos mes-mos. Em uma quarta modalidade, a invenção fornece formulações farma-cêuticas de docetaxel compreendendo gliconato de sódio. Em uma quintamodalidade, a invenção fornece formulações farmacêuticas de docetaxelcompreendendo citrato e cloreto de sódio. Em uma sexta modalidade, a in-venção fornece uma formulação de docetaxel compreendendo um tensoati-vo, em que o docetaxel usado para preparo da formulação está em umaforma anidrosa antes de ser incorporada na formulação.

Desse modo, em um aspecto, a invenção fornece composições(tais como composições farmacêuticas) compreendendo um agente farma-cêutico pobremente solúvel em água (tal como docetaxel) e um agente deestabilização, em que a estabilidade da composição é realçada quandocomparada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Emalgumas modalidades, as composições além disso compreendem um polí-mero biocompatível (tal como proteínas veículo descritas aqui). O agente deestabilização inclui, por exemplo, agentes de quelação (tal como citrato, áci-do málico, edetato, e pentetato), pirofosfato de sódio, e gliconato de sódio.Em outro aspecto, nesse ponto são fornecidas várias composições (tais co-mo composições farmacêuticas), compreendendo docetaxel, em que o do-cetaxel usado para preparação da composição está em forma anidrosa (porexemplo, o docetaxel pode estar anidroso antes de ser incorporado na com-posição). Em algumas modalidades, a composição além disso compreendeum polímero biocompatível (tal como uma proteína veículo descrita aqui).

Em algumas modalidades, a composição além disso compreende um agen-te de estabilização (tal como agentes de estabilização descritos aqui). Emalgumas modalidades, a composição compreende tanto um polímero bio-compatível (tal como proteínas veículo descritas aqui) quanto um agente deestabilização. Em algumas modalidades, a invenção fornece composições(tal como composições farmacêuticas) compreendendo docetaxel e um ten-soativo, em que o docetaxel usado para preparação da composição está emforma anidrosa (por exemplo, o docetaxel pode estar anidroso antes de serincorporado na composição). Em algumas modalidades, a composição alémdisso compreende um agente de estabilização (tal como agentes de estabi-lização descritos aqui).

Também fornecidas são formas de dosagem unitárias de com-posições descritas aqui, artigos de fabricação compreendendo o inventivascomposições ou formas de dosagem unitárias em embalagem adequada, eestojos compreendendo as composições. A invenção também fornece mé-todos de fabricação e uso destas composições tal como descrito aqui.

Deve ser entendido que uma, algumas, ou a totalidade das pro-priedades das várias modalidades descritas aqui podem ser combinadaspara formar outras modalidades da presente invenção.

Breve Descrição das Figuras

A Figura 1 mostra perda de peso corporal de ratos em 5 mg/kgde dose de docetaxel para uma formulação de albumina de nanopartículade docetaxel (Λ/ab-docetaxel) e Tween 80-docetaxel (Taxotere®). Dosagemocorreu nos dias 0, 4, e 8.

A Figura 2 mostra comparação de neutropenia em ratos em 5mg/kg de dose para Nab-docetaxel e Tween 80-docetaxel (Taxotere®). Do-sagem ocorreu nos dias 0, 4, e 8.

As Figuras 3A a 3D mostram a comparação farmacocinética deΛ/ab-docetaxel e Taxotere. As Figuras 3A a 3C mostram concentração deplasma de Nab-docetaxel e Taxotere em 10 mg/kg, 20 mg/kg, e 30 mg/kg dedoses, respectivamente. À Figura 3D mostra a relação linear entre AUC(Área sob Curva) e dose para Λ/ab-docetaxel e relação não linear entre AUCe dose para Taxotere. Nab-docetaxel exibiu uma relação linear ajustada pe-la, equação AUC=218*Dose; Taxotere exibiu uma curva exponencial ajusta-da pela equação AUC=722*exp(0,10*Dose).

A Figura 4 mostra a inibição de fármaco ligando-se a albuminana presença de tensoativo Tween 80 e Cremophor EL®/EtOH.

As Figuras 5A e 5B mostram atividade antitumor (5A) e perda depeso corporal (5B) com Nab-docetaxel em camundongos de xenoenxerto detumor de cólon H29. Os camundongos foram dosados com Λ/ab-docetaxelem 15 mg/kg, q4dx3.

As Figuras 6A e 6B mostram atividade antitumor (6A) e perda depeso corporal (6B) em um camundongo de xenoenxerto de tumor de cólonHCTI 16 dosado com salina, A/a/>docetaxel (22 mg/kg), e Taxotere (15mg/kg).

As Figuras 7A e 7B mostram perda de peso corporal (7A) e ati-vidade antitumor (7B) em um camundongo de xenoenxerto de tumor depróstata PC3 dosado com salina, Λ/ab-docetaxel (10, 15, 20, 30 mg/kg), eTween 80-docetaxel (10 mg/kg).

Descrição Detalhada da Invenção

A presente invenção em uma de suas modalidades fornececomposições e métodos de preparação de docetaxel e outros agentes far-macêuticos pobremente solúveis em água ou fármacos que retêm os efeitosterapêuticos desejáveis e permanecem fisicamente e/ou quimicamente es-táveis em exposição a certas condições tais como armazenagem prolonga-das, temperatura elevada, ou diluição para administração parenteral.

Uma composição estável é, por exemplo, uma que permaneçafisicamente e/ou quimicamente estável e por esse motivo não mostre evi-dência de precipitação ou sedimentação durante pelo menos cerca de 8 ho-ras, incluindo por exemplo pelo menos cerca de qualquer de 24 horas, 48horas, ou até cerca de 96 horas seguinte reconstituição ou re-hidratação.Por exemplo, as composições podem permanecer estáveis durante pelomenos 24 horas seguintes a reconstituição ou re-hidratação.

A estabilidade de uma suspensão é geralmente (mas não ne-cessariamente) avaliada em condições usuais de transporte e armazena-gem esperadas durante distribuição de produto (tal como temperatura ambi-ente (tal como 20 a 25°C) ou condições refrigeradas (tal como 4°C)). Porexemplo, uma suspensão é estável em uma temperatura de armazenagemse ela não exibe nenhuma floculação ou aglomeração de partícula visível aoolho nu ou quando vista sob o microscópio óptico em 1000 vezes (ou outrastécnicas de caracterização de partícula adequadas), em cerca de quinzeminutos depois de preparação da suspensão. Estabilidade pode também seravaliada sob condições exageradas de temperatura, umidade, luz, e/ou ou-tras, para testar a estabilidade das composições em um teste acelerado. Porexemplo, estabilidade pode ser avaliada em uma temperatura que é maiordo que cerca de 40°C. A estabilidade da composição pode também ser ava-liada, por exemplo, pela capacidade da composição permanecer suspensasem apresentação de evidência de sedimentação ou encremação, ou pelacapacidade da composição permanecer não carregada (isto é, nenhumadiferença visível) em termos de cor ou consistência. A estabilidade de umacomposição seca (tal como uma liofilizada) pode ser avaliada com base nocomportamento da suspensão líquida resultante de reconstituição ou rehi-dratação da composição seca.

É um objetivo da invenção fornecer composições farmacêuticascapazes de manutenção de quantidades terapeuticamente eficazes fisica-mente e/ou quimicamente estabilizadas de agentes farmacêuticos pobre-mente solúveis em água. É outro objetivo da invenção fornecer composiçõesfarmacêuticas capazes de manutenção de agentes farmacêuticos pobre-mente solúveis em água fisicamente e/ou quimicamente estabilizados emdiluição para administração a um paciente. É um objetivo adicional da in-venção fornecer composições farmacêuticas capazes de manutenção dequantidades terapeuticamente eficazes fisicamente e/ou quimicamente es-tabilizadas de agentes farmacêuticos pobremente solúveis em água comtoxicidades reduzidas. É um objetivo adicional da invenção fornecer formu-lações farmacêuticas estáveis usando docetaxel anidroso, igualmente com-posições resultantes de uso de docetaxel anidroso.

É um objetivo adicional da invenção fornecer métodos melhora-dos de preparo de composições farmacêuticas capazes de manutenção dequantidades terapeuticamente eficazes fisicamente e/ou quimicamente es-tabilizadas de agentes farmacêuticos pobremente solúveis em água. É umobjetivo adicional da invenção fornecer métodos melhorados de preparo decomposições farmacêuticas capazes de manutenção de um agente farma-cêutico pobremente solúvel em água fisicamente e/ou quimicamente estabi-lizado em diluição para administração a um paciente. É um objetivo adicio-nal da invenção fornecer métodos melhorados de preparo de composiçõesfarmacêuticas capazes de manutenção de quantidades terapeuticamenteeficazes fisicamente e/ou quimicamente estabilizadas de agentes farmacêu-ticos pobremente solúveis em água com toxicidades reduzidas.

Em uma modalidade, a invenção fornece uma composição far-macêutica estéril para administração parenteral compreendida de um agentefarmacêutico pobremente solúvel em água, que é fisicamente e/ou quimica-mente estabilizado pela adição de excipientes à composição. Antes da pre-sente invenção, a estabilidade relativa de certos agentes farmacêuticos po-bremente solúveis limitou seu uso em composições farmacêuticas parente-ral devido à degradação sob condições de armazenagem e/ou precipitaçãoem diluição. Muitos agentes farmacêuticos diferentes não podem ser satisfa-toriamente preparados como parenterais devido à ausência de uma compo-sição estável.

A presente invenção envolve a descoberta surpreendente deque excipientes comuns tais como citrato são capazes de estabilização deagentes farmacêuticos pobremente solúveis em água tais como docetaxel. Épor esse motivo um objetivo primário da invenção fornecer composiçõescompreendendo docetaxel (e outros agentes farmacêuticos pobremente so-lúveis em água) e excipientes para obter composições farmacêuticas paren-terais estáveis. Por esse motivo, em uma modalidade, a invenção forneceuma composição farmacêutica compreendendo docetaxel e citrato. Em outramodalidade, a invenção fornece uma composição farmacêutica compreen-dendo docetaxel, citrato e cloreto de sódio.Várias Modalidades da Invenção

A invenção fornece composições (tais como composições far-macêuticas) compreendendo um agente farmacêutico pobremente solúvelem água e um agente de estabilização, em que a estabilidade da composi-ção é realçada quando comparada àquela de uma composição sem o agen-te de estabilização. Por exemplo, a composição pode compreender doceta-xel e um agente de estabilização, em que a estabilidade da composição érealçada quando comparada àquela de uma composição sem o agente deestabilização. Em algumas modalidades, as composições também compre-endem um polímero biocompatível. Em algumas modalidades, o polímerobiocompatível é uma proteína veículo (tal como uma albumina, por exemplo,albumina de soro humano (HSA)). Em algumas modalidades, a estabilidadeda composição é pelo menos 1,5 vezes (incluindo por exemplo pelo menoscerca de qualquer de 2x, 3x, 4x, 5x, 6x, 7x, 8x, 9x, 10x, 15x, 20x, 25x, 30x,ou mais) maior quando comparada àquela de uma composição sem o agen-te de estabilização. Em algumas modalidades, o agente farmacêutico po-bremente solúvel em água é instável em uma composição não compreen-dendo o agente de estabilização.

Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma compo-sição compreendendo um agente farmacêutico pobremente solúvel em águae um agente de estabilização, em que o agente de estabilização é um agen-te de quelação, e em que a estabilidade da composição é realçada quandocomparada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Emalgumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma composição compre-endendo docetaxel e um agente de estabilização, em que o agente de esta-bilização é um agente de quelação, e em que a estabilidade da composiçãoé realçada quando comparada àquela de uma composição sem o agente deestabilização. Em algumas modalidades, a composição além disso compre-ende um polímero biocompatível. Em algumas modalidades, o polímero bio-compatível é uma proteína veículo (tal como albumina, por exemplo, HSA).

Em algumas modalidades, o agente de estabilização é um agente de quela-ção polidentado. Em algumas modalidades, o agente de estabilização com-preende um ou mais grupos de ácido carboxílico. Em algumas modalidades,o agente de quelação não é deferoxamina (isto é, é outro que não defero-xamina). Em algumas modalidades, o agente de quelação é qualquer de (eem algumas modalidades selecionadas do grupo consistindo em) edetato,citrato, ácido málico, pentetato, trometamina, derivados dos mesmos, e mis-turas dos mesmos. Em algumas modalidades, o agente de estabilização éum citrato ou um derivado do mesmo (tal como citrato de sódio e em algu-mas modalidades ácido cítrico). Em algumas modalidades, a composiçãocompreende citrato de sódio e cloreto de sódio. Em algumas modalidades, acomposição compreende cerca de 200 mM de citrato e cerca de 300 mM swcloreto de sódio. Em algumas modalidades, o agente de estabilização é umedetato ou um derivado dos mesmos (tal como EDTA).

Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma compo-sição compreendendo um agente farmacêutico pobremente solúvel em águae um agente de estabilização, em que o agente de estabilização é gliconatode sódio, e em que a estabilidade da composição é realçada quando com-parada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Em al-gumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma composição compreen-dendo docetaxel e um agente de estabilização, em que o agente de estabili-zação é gliconato de sódio, e em que a estabilidade da composição é real-çada quando comparada àquela de uma composição sem o agente de esta-bilização. Em algumas modalidades, a composição além disso compreendeum polímero biocompatível. Em algumas modalidades, o polímero biocom-patível é uma proteína veículo (tal como albumina, por exemplo, HSA).

Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma compo-sição compreendendo um agente farmacêutico pobremente solúvel em águae um agente de estabilização, em que o agente de estabilização é pirofosfa-to de sódio, e em que a estabilidade da composição é realçada quandocomparada àquela de uma composição sem o agente de estabilização, emalgumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma composição compre-endendo docetaxel e um agente de estabilização, em que o agente de esta-bilização é pirofosfato de sódio, e em que a estabilidade da composição érealçada quando comparada àquela de uma composição sem o agente deestabilização. Em algumas modalidades, a composição além disso compre-ende um polímero biocompatível. Em algumas modalidades, o polímero bio-compatível é uma proteína veículo (tal como albumina, por exemplo, HSA).

Em algumas modalidades, a composição compreende um agen-te farmacêutico pobremente solúvel em água, uma albumina, e um agentede estabilização, em que a relação de peso da albumina para o agente far-macêutico pobremente solúvel em água na composição é cerca de 0,01:1 acerca de 100:1, e em que a estabilidade da composição é realçada quandocomparada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Emalgumas modalidades, a composição compreende um agente farmacêuticopobremente solúvel em água, uma albumina, e um agente de estabilização,em que a relação de peso da albumina para o agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água na composição é cerca de 18:1 ou menos (incluindopor exemplo qualquer de cerca de 1:1 a cerca de 18:1, cerca de 2:1 a cercade 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cerca de 4:1 a cerca de 10:1, e cercade 9:1), e em que a estabilidade da composição é realçada quando compa-rada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Em algu-mas modalidades, a composição compreende docetaxel, uma albumina, eum agente de estabilização, em que a relação de peso da albumina para odocetaxel na composição é cerca de 18:1 ou menos (incluindo por exemploqualquer de cerca de 1 :1 a cerca de 18:1, cerca de 2:1 a cerca de 15:1,cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cerca de 4:1 a cerca de 10:1, e cerca de 9:1),e em que a estabilidade da composição é realçada quando comparada à-quela de uma composição sem o agente de estabilização. Em algumas mo-dalidades, o agente de estabilização é um agente de quelação, tal comoqualquer de (e em algumas modalidades selecionadas do grupo consistindoem) edetato, citrato, ácido málico, pentetato, trometamina, derivados dosmesmos, e misturas dos mesmos. Em algumas modalidades, o agente deestabilização é um citrato ou um derivado dos mesmos (tal como citrato desódio). Em algumas modalidades, a composição compreende citrato de só-dio e cloreto de sódio. Em algumas modalidades, o agente de estabilizaçãoé um edetato ou um derivado dos mesmos (tal como EDTA). Em algumasmodalidades, o agente de estabilização é gliconato de sódio. Em algumasmodalidades, o agente de estabilização é pirofosfato de sódio.

Em algumas modalidades, a proteína/agente farmacêutico estáem forma(s) particulada(s), que em várias modalidades podem ser de diâ-metros médios tais como descrito aqui. Em algumas modalidades, a compo-sição compreende um agente farmacêutico pobremente solúvel em águaassociado a proteína e um agente de estabilização, em que a estabilidadeda composição é realçada quando comparada àquela de uma composiçãosem o agente de estabilização. Em algumas modalidades, a composiçãocompreende um docetaxel associado a proteína e um agente de estabiliza-ção, em que a estabilidade da composição é realçada quando comparadaàquela de uma composição sem o agente de estabilização. Em algumasmodalidades, o agente de estabilização é um agente de quelação, tal comoqualquer de (e em algumas modalidades selecionadas do grupo consistindoem) edetato, citrato, ácido málico, pentetato, trometamina, derivados dosmesmos, e misturas dos mesmos. Em algumas modalidades, o agente deestabilização é um citrato ou um derivado dos mesmos (tal como citrato desódio). Em algumas modalidades, a composição compreende citrato de só-dio e cloreto de sódio. Em algumas modalidades, o agente de estabilizaçãoé um edetato ou um derivado dos mesmos (tal como EDTA). Em algumasmodalidades, o agente de estabilização é gliconato de sódio. Em algumasmodalidades, o agente de estabilização é pirofosfato de sódio.

Em algumas modalidades, a composição compreende (1) partí-culas (tais como nanopartículas) compreendendo (em várias modalidadesconsistindo em ou consistindo essencialmente em) um agente farmacêuticopobremente solúvel em água e polímero biocompatível (tal como uma prote-ína veículo, que pode ser albumina tal como HSA); e (2) um agente de esta-bilização, em que a estabilidade da composição é realçada quando compa-rada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Em algu-mas modalidades, a composição compreende partículas (tais como nano-partículas) compreendendo (em várias modalidades consistindo em ou con-sistindo essencialmente em) (1) docetaxel e polímero biocompatível (tal co-mo proteína veículo, que pode ser albumina tal como HSA); e (2) um agentede estabilização, em que a estabilidade da composição é realçada quandocomparada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Emalgumas modalidades, o docetaxel é revestido com o polímero biocompatí-vel (tal como proteína veículo). Em algumas modalidades, o agente de esta-bilização é um agente de quelação, tal como qualquer de (e em algumasmodalidades selecionado do grupo consistindo em) edetato, citrato, ácidomálico, pentetato, trometamina, derivados dos mesmos, e misturas dosmesmos. Em algumas modalidades, o agente de estabilização é um citratoou um derivado dos mesmos (tal como citrato de sódio). Em algumas moda-lidades, a composição compreende citrato de sódio e cloreto de sódio. Emalgumas modalidades, o agente de estabilização é um edetato ou um deri-vado dos mesmos (tal como EDTA). Em algumas modalidades, o agente deestabilização é uma ácido málico. Em algumas modalidades, o agente deestabilização é gliconato de sódio. Em algumas modalidades, o agente deestabilização é pirofosfato de sódio.

Em algumas modalidades, a composição compreende (1) partí-culas (tais como nanopartículas) compreendendo (em várias modalidadesconsistindo em ou consistindo essencialmente em) um agente farmacêuticopobremente solúvel em água e albumina; e (2) um agente de estabilização,em que a relação de peso da albumina para o agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água na composição é cerca de 0,01:1 a cerca de 100:1,e em que a estabilidade da composição é realçada quando comparada à-quela de uma composição sem o agente de estabilização. Em algumas mo-dalidades, o agente pobremente solúvel em água é revestido com albumina.

Em algumas modalidades, a composição compreende (1) partí-culas (tais como nanopartículas) compreendendo (em várias modalidadesconsistindo em ou consistindo essencialmente em) um agente farmacêuticopobremente solúvel em água e albumina; e (2) um agente de estabilização,em que a relação de peso da albumina para o agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água na composição é cerca de 18:1 ou menos (incluindopor exemplo qualquer de cerca de 1 : 1 a cerca de 18:1, cerca de 2 : 1 acerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cerca de 4:1 a cerca de 10:1, ecerca de 9:1), e em que a estabilidade da composição é realçada quandocomparada àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Emalgumas modalidades, o agente pobremente solúvel em água é revestidocom albumina. Em algumas modalidades, a composição compreende (1)partículas (tais como nanopartículas) compreendendo (em várias modalida-des consistindo em ou consistindo essencialmente em) docetaxel e albumi-na; e (2) um agente de estabilização, em que a relação de peso de albuminae o docetaxel na composição é cerca de 0,01:1 a cerca de 100:1, e em quea estabilidade da composição é realçada quando comparada àquela de umacomposição sem o agente de estabilização. Em algumas modalidades, acomposição compreende (1) partículas (tais como nanopartículas) compre-endendo (em várias modalidades consistindo em ou consistindo essencial-mente em) docetaxel e albumina; e (2) um agente de estabilização, em quea relação de peso de albumina e o docetaxel na composição é cerca de 18:1ou menos (incluindo por exemplo qualquer de cerca de 1:1 a cerca de 18:1,cerca de 2:1 a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cerca de 4:1 acerca de 10:1, e cerca de 9:1), e em que a estabilidade da composição érealçada quando comparada àquela de uma composição sem o agente deestabilização, hi algumas modalidades, o docetaxel é revestido com albumi-na. Em algumas modalidades, a composição é substancialmente livre (talcomo livre) de tensoativo. Em algumas modalidades, a composição compre-ende uma suspensão aquosa estável de partículas (tais como nanopartícu-las) compreendendo docetaxel e albumina (tal como partículas de docetaxelrevestido com albumina), em que a composição também compreende umagente de estabilização, em que a relação de peso de albumina e o doceta-xel na composição é cerca de 18:1 ou menos (incluindo por exemplo cercade 1:1 a cerca de 18:1, cerca de 2:1 a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cercade 12:1, cerca de 4:1 a cerca de 10:1, e cerca de 9:1), e em que a estabili-dade da composição é realçada quando comparada àquela de uma compo-sição sem o agente de estabilização. Em algumas modalidades, a composi-ção compreende uma composição seca (tal como liofilizada) que pode serreconstituída, ressuspensa, ou rehidratada para formar geralmente uma sus-pensão aquosa estável de partículas (tais como nanopartículas) compreen-dendo docetaxel e albumina (tal como docetaxel revestido com albumina),em que a composição também compreende um agente de estabilização, emque a relação de peso de albumina e o docetaxel na composição é cerca de18:1 ou menos (incluindo por exemplo qualquer de cerca de 1:1 a cerca de18:1, cerca de 2:1 a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cerca de4:1 a cerca de 10:1, e cerca de 9:1), e em que a estabilidade da composiçãoé realçada quando comparada àquela de uma composição sem o agente deestabilização. Em algumas modalidades, o agente de estabilização é umagente de quelação, tal como qualquer de (e em algumas modalidades se-lecionadas do grupo consistindo em) edetato, citrato, ácido málico, penteta-to, trometamina, derivados dos mesmos, e misturas dos mesmos. Em algu-mas modalidades, o agente de estabilização é um citrato ou um derivadodos mesmos (tal como citrato de sódio). Em algumas modalidades, a com-posição compreende citrato de sódio e cloreto de sódio. Em algumas moda-lidades, o agente de estabilização é um edetato ou um derivado do mesmo(tal como EDTA). Em algumas modalidades, o agente de estabilização égliconato de sódio. Em algumas modalidades, o agente de estabilização épirofosfato de sódio.

Em algumas modalidades, as partículas (tais como nanopartícu-las) na composição possuem um diâmetro mediano ou médio de não maiordo que cerca de qualquer de 1000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200,e 100 nm. Em algumas modalidades, o diâmetro mediano ou médio das par-tículas está entre cerca de 20 a cerca de 400 nm. Em algumas modalidadeso diâmetro mediano ou médio das partículas está entre cerca de 40 a cercade 200 nm. Em algumas modalidades, as partículas ou gotas são estéreisfiltráveis.As composições descritas aqui podem ser uma suspensão a-quosa estável do agente farmacêutico pobremente solúvel em água, tal co-mo uma suspensão aquosa estável do agente farmacêutico pobrementesolúvel em água em uma concentração de qualquer de cerca de 0,1 a cercade 100 mg/ml, incluindo, por exemplo, cerca de 0,1 a cerca de 50 mg/ml,cerca de 0,1 a cerca de 20 mg/ml, cerca de 1 a cerca de 15 mg/ml, cerca de1 a cerca de 10 mg/ml, cerca de 2 a cerca de 8 mg/ml, cerca de 4 a cerca de6 mg/ml, e cerca de 5 mg/ml. Em algumas modalidades, a concentração doagente farmacêutico pobremente solúvel em água é pelo menos cerca dequalquer de 1 mg/ml, 1,3 mg/ml, 1,5 mg/ml, 2 mg/ml, 3 mg/ml, 4 mg/ml, 5mg/ml, 6 mg/ml, 7 mg/ml, 8 mg/ml, 9 mg/ml, 10 mg/ml, 15 mg/ml, 20 mg/ml,25 mg/ml, 30 mg/ml, 40 mg/ml, e 50 mg/ml.

Em algumas modalidades, a composição é uma composiçãoseca (tal como liofilizada) que pode ser reconstituída, ressuspensa, ou re-hidratada geralmente para formar uma suspensão aquosa estável do agentefarmacêutico pobremente solúvel em água. Em algumas modalidades, acomposição é uma composição líquida (tal como aquosa) obtida através dereconstituição ou ressuspensão de uma composição seca. Em algumas mo-dalidades, a composição é uma composição líquida intermediária (tal comoaquosa) que pode ser seca (tal como liofilizada).

Em algumas modalidades, a composição é adequada para ad-ministração parenteral (tal como intravenosa). Em algumas modalidades, acomposição é adequada para administração de multidose. Em algumas mo-dalidades, a composição é estéril filtrável. Em algumas modalidades, acomposição não causa efeitos colaterais significantes em um indivíduo (talcomo ser humano) quando administrada ao indivíduo. Em algumas modali-dades, as composições descritas aqui são substancialmente livres (tal comolivre) de tensoativos. O agente de estabilização contendo composições des-critas aqui pode também compreender um açúcar (incluindo, por exemplo,sacarose, manitol, frutose, lactose, maltose, e trealose) ou outros auxiliaresde liofilização ou reconstituição.

Em algumas modalidades, a quantidade do agente de estabili-zação na composição está abaixo do nível que induz um efeito toxicológico(isto é, acima de um nível clinicamente aceitável de toxicidade) ou está emum nível onde um efeito colateral potencial pode ser controlado ou toleradoquando a composição é administrada a um indivíduo.

Em outro aspecto, nesse ponto são fornecidas composições(tais como composição farmacêutica) compreendendo docetaxel, em que odocetaxel usado para preparação da composição está em forma anidrosa(por exemplo, o docetaxel pode estar anidroso antes de ser incorporado nacomposição). Em algumas modalidades, a composição além disso compre-ende um agente de estabilização (tal como os agentes de estabilização des-critos aqui). Composições que incluem uso de docetaxel anidroso são tam-bém descritas em uma seção abaixo.

Em algumas modalidades, a composição compreende docetaxele um polímero biocompatível (tal como uma proteína veículo, por exemplo,albumina), em que o docetaxel usado para preparação da composição estáem forma anidrosa. Em algumas modalidades, a composição compreendepartículas (tais como nanopartículas) compreendendo docetaxel e um polí-mero biocompatível (tal como uma proteína veículo, por exemplo, albumina),em que o docetaxel usado para preparação da composição está em formaanidrosa. Em algumas modalidades, a composição compreende nanopartí-culas compreendendo docetaxel e albumina, em que o docetaxel usado pa-ra preparação da composição está em forma anidrosa. Em algumas modali-dades, a relação de peso de albumina e docetaxel na composição é menosdo que cerca de 18:1, incluindo por exemplo qualquer de cerca de 1:1 a cer-ca de 18:1, cerca de 2:1 a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cer-ca de 4:1 a cerca de 10:1, cerca de 9:1. Em algumas modalidades, o doce-taxel é revestido com albumina. Em algumas modalidades, as nanopartícu-las na composição possuem um tamanho mediano ou médio de partícula denão maior do que cerca de 200 nm. Em algumas modalidades, as partículasna composição são estéreis filtráveis. Em algumas modalidades, as nano-partículas nas composições possuem duas ou mais destas propriedades.

Em algumas modalidades, a composição compreende docetaxele um tensoativo, em que o docetaxel usado para preparação da composiçãoestá em forma anidrosa. Em algumas modalidades, o tensoativo usado napreparação da composição é anidroso. Em algumas modalidades, o tensoa-tivo é um polissorbato (tal como Tween 80). Em algumas modalidades, otensoativo é Cremophor. Em algumas modalidades, a composição além dis-so compreende um agente de estabilização (tal como os agentes de estabi-lização descritos aqui). As composições preparadas com docetaxel anidrosopodem ser composições secas (tais como liofilizadas), hi algumas modali-dades, a composição é uma composição líquida (tal como aquosa) obtidaatravés de reconstituição ou ressuspensão de uma composição seca. Emalgumas modalidades, a composição é uma composição líquida intermediá-ria (tal como aquosa) que pode ser seca (tal como liofilizada).

Também fornecidas são formas de dosagem unitárias de com-posições descritas aqui, artigos de fabricação compreendendo as composi-ções inventivas ou formas de dosagem unitárias em embalagem adequada(tais como frascos ou recipientes (incluindo frascos ou recipientes selados efrascos ou recipientes selados estéreis)), e estojos compreendendo as com-posições. A invenção também fornece métodos de fabricação das composi-ções tais como descritos aqui. Também fornecidos são métodos de estabili-zação um agente farmacêutico pobremente solúvel em água em uma com-posição. Em algumas modalidades, forneceram um método de estabilizaçãode um agente farmacêutico pobremente solúvel em água em uma composi-ção (tal como uma composição de nanopartícula), compreendendo combi-nação da composição (tal como composição de nanopartícula) compreen-dendo um agente farmacêutico pobremente solúvel em água com um agen-te de estabilização, em que a composição resultante é estável sob a mesmacondição sob a qual a composição é instável antes da adição do agente deestabilização. Em algumas modalidades, o método além disso compreendeidentificação e seleção de uma composição que é instável sob uma ou maiscondições. Em algumas modalidades, a composição para seleção compre-ende um agente farmacêutico pobremente solúvel em água e uma proteínaveículo (tal como albumina).Métodos de uso das composições descritas aqui são tambémfornecidos. Por exemplo, em algumas modalidades, forneceram um métodode tratamento de câncer em um indivíduo (tal como ser humano), compre-endendo administração ao indivíduo de uma quantidade eficaz de umacomposição compreendendo um agente antineoplásico pobremente solúvelem água, uma proteína veículo (tal como albumina), e um agente de estabi-lização, em que a estabilidade da composição é realçada quando compara-da àquela de uma composição sem o agente de estabilização. Em algumasmodalidades, forneceram um método de tratamento de câncer em um indi-víduo (tal como ser humano), compreendendo administração ao indivíduo deuma quantidade eficaz de uma composição compreendendo docetaxel, umaproteína veículo (tal como albumina), e um agente de estabilização, em quea estabilidade da composição é realçada quando comparada àquela de umacomposição sem o agente de estabilização. Em algumas modalidades, acomposição compreende partículas (tais como nanopartículas) compreen-dendo docetaxel e proteína veículo. Em algumas modalidades, a composi-ção compreende partículas (tais como nanopartículas) compreendendo do-cetaxel e albumina (tal como formulações de nanopartícula compreendendoalbumina de docetaxel ou Nab-docetaxel). Em algumas modalidades, acomposição compreende Nab-docetaxel e citrato. Em algumas modalidades,a composição compreende Nab-docetaxel, citrato, e cloreto de sódio (talcomo cerca de 200 mM de cloreto de sódio e cerca de 300 mM de citrato desódio). Em algumas modalidades, o câncer é qualquer de: câncer de prósta-ta, câncer de cólon, câncer de cabeça e pescoço, câncer de mama, câncerpancreático, câncer de pulmão, e câncer ovariano. Em algumas modalida-des, o câncer é tumor sólido. Em algumas modalidades, a composição éadministrada pelo menos cerca de qualquer de uma vez a cada três sema-nas, uma vez a cada duas semanas, uma vez em uma semana, duas vezesem uma semana, três vezes em uma semana, quatro vezes em uma sema-na, cinco vezes em uma semana, seis vezes em uma semana, ou diaria-mente. Em algumas modalidades, a composição é administrada (com ousem intervalos) durante pelo menos cerca de qualquer de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7,8, 9, 10, 11, 12, ou mais mês(ses). Em algumas modalidades, a composiçãoé administrada por meio de quaisquer das rotinas intravenosa, intra-arterial,oral, tópica, ou inalatória.

Referência geral a "as composições" ou "composições" inclui e éaplicável a composições da invenção. A invenção também fornece composi-ções farmacêuticas compreendendo os componentes descritos aqui.

Referência a docetaxel aqui aplica-se a docetaxel ou seus deri-vados (ou análogos) e desse modo a invenção contempla e inclui ambasestas modalidades. Referência a "docetaxel" é para simplificar a descrição eé exemplar. Derivados ou análogos de docetaxel incluem, mas não são limi-tados a, compostos que são estruturalmente similares a docetaxel ou estãona mesma classe química geral como docetaxel, por exemplo, taxanos. Emalgumas modalidades, o derivado ou análogo de docetaxel retém proprieda-de biológica, farmacológica, química e/ou física (incluindo, por exemplo, fun-cionalidade) similar de docetaxel. Exemplos de derivados ou análogos dedocetaxel incluem paclitaxel e ortataxel. Este mesmo princípio de descriçãoaplica-se a outros agentes fornecidos aqui tais como incluindo, por exemplo,agentes de estabilização e agentes farmacêuticos pobremente solúveis emágua (tais como taxano (incluindo paclitaxel, ortataxel, ou outros taxanos),geldanamicina, geldanamicina de amino de 17-alila, tiocolchicina e seus dí-meros, rapamicina, ciclosporina, epotilona, radicicol, e combretastatina).

É entendido que aspectos e modalidades da invenção descritosaqui incluem "consistindo" e/ou "consistindo essencialmente em aspectos emodalidades.

Agentes de Estabilização

Várias composições descritas aqui compreendem um agente deestabilização.

"Agente de estabilização" usado aqui refere-se a um agente querealça a estabilidade da composição quando comparado a uma composiçãosem adição do agente de estabilização. Em algumas modalidades, a estabi-lidade da composição contendo agente de estabilização é pelo menos cercade 1,5x (incluindo por exemplo pelo menos cerca de qualquer de 2x, 3x, 4x,5χ, 6, 7x, 8x, 9x, 10x, 15x, 20x, 25x, 30x, ou mais) maior quando comparadaàquela de uma composição sem o agente de estabilização.

Tal como descrito acima, a estabilidade de uma composiçãopode ser avaliada pela capacidade do agente farmacêutico pobremente so-lúvel em água permanecer não precipitado ou não sedimentado (por exem-plo, com base em observação visual e/ou observação microscópica) emuma suspensão líquida durante um certo período de tempo. A estabilidadede uma composição seca (tal como uma liofilizada) pode ser avaliada combase no comportamento da suspensão líquida resultante de reconstituiçãoou rehidratação da composição seca.

Em algumas modalidades, o agente de estabilização atrasa ouprevine precipitação ou sedimentação do agente farmacêutico pobrementesolúvel em água em uma suspensão líquida. Em algumas modalidades, oagente de estabilização atrasa ou previne cristalização do agente farmacêu-tico pobremente solúvel em água na composição. Em algumas modalidadesquando a composição compreende partículas de agentes pobremente solú-veis em água, o agente de estabilização pode prevenir ou atrasar mudançasde tamanhos de partícula na composição.

Os agentes de estabilização são particularmente úteis para com-posições que de outra maneira exibiriam significante instabilidade. Por e-xemplo, em algumas modalidades, a composição antes da adição do agentede estabilização é estável durante menos do que cerca de 24 horas (incluin-do por exemplo menos do que cerca de qualquer de 12, 10, 8, 6, 4, ou 2horas). Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobremente solú-vel em água em uma suspensão líquida antes da adição do estabilizanteprecipita ou sedimenta em menos do que cerca de 24 horas (incluindo porexemplo menos do que cerca de qualquer de 12, 10, 8, 6, 4, ou 2 horas).Em algumas modalidades, a composição antes da adição do agente de es-tabilização precipita ou sedimenta em menos do que cerca de 24 horasquando a concentração do agente farmacêutico pobremente solúvel em á-gua é mais do que cerca de 0,1 mg/ml (incluindo por exemplo mais do quecerca de qualquer de 0,5 mg/ml, 1 mg/ml, 1,3 mg/ml, 1,5 mg/ml, 2mg/ml, 3mg/ml, 4 mg/ml, 5 mg/ml, ou 10 mg/ml). Em algumas modalidades, a com-posição antes da adição do agente de estabilização precipita ou sedimentaem diluição da composição para administração parental. Adição de agentede estabilização àquelas composições permite as composições permanece-rem estáveis (por exemplo não precipitarem ou sedimentarem) sob condi-ções similares. Desse modo, em algumas modalidades, nesse ponto é for-necida uma composição compreendendo um agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água e um agente de estabilização, em que a composição(tal como uma composição de nanopartícula) é estável sob a mesma condi-ção sob a qual a composição sem o agente de estabilização é instável. Emalgumas modalidades, o agente de estabilização atrasa ou previne precipi-tação ou sedimentação do agente farmacêutico pobremente solúvel em á-gua em uma suspensão líquida de uma composição sob uma condição ondeo agente farmacêutico pobremente solúvel em água de outra maneira preci-pitaria ou sedimentaria.

Agentes de estabilização adequados incluem, mas não são limi-tados a citrato de sódio (todas as formas, 0,01 a 20% de peso/volume), piro-fosfato de sódio (0,1 a 10% de peso/volume), EDTA (todas as formas, 0,01a 20%), pentetato (todas as formas, 0,01 a 20%), gliconato de sódio (0,1 a10% de peso/volume) e combinações adequadas dos mesmos. A porcenta-gem em peso (peso/volume) refere-se à porcentagem do agente de estabili-zação em uma composição líquida, ou, no caso de uma composição sólida,a porcentagem em peso (peso/volume) do agente de estabilização em re-constituição ou rehidratação. O agente de estabilização deve ser usado emuma quantidade suficiente para aumentar a estabilidade da formulação. Depreferência, a quantidade do agente de estabilização usada fornecerá umacomposição estável que não mostra evidência de precipitação ou sedimen-tação durante pelo menos cerca de 8 horas, mais preferivelmente pelo me-nos cerca de 24 horas depois de reconstituição ou rehidratação, mais prefe-rivelmente durante pelo menos cerca de 48 horas, mais preferivelmente du-rante pelo menos cerca de 72 horas.

Em algumas modalidades, o agente de estabilização é um agen-te de quelação. Estes agentes de quelação são ou específicos a um íon demetal particular (tal como cálcio, zinco, magnésio, etc.), ou mostram um am-plo espectro de especificidade de íon de metal. Em algumas modalidades, oagente de quelação é um polidentado. Em algumas modalidades, o agentede quelação compreende um ou mais grupos de ácido carboxílico. Em al-gumas modalidades, o agente de quelação não é deferoxamina. Agentes dequelação adequados incluem, mas não são limitados a, edetato, citrato, áci-do málico, pentetato, trometamina, e derivados dos mesmos.

Um agente de estabilização contemplado aqui é um edetato, istoé, ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA) e derivados dos mesmos. Edeta-tos adequados incluem edetato de dissódio, edetato de trissódio, edetato detetrassódio e edetato de cálcio de dissódio. Em algumas modalidades, oedetato está presente nas composições em uma concentração de cerca de0,01 mg/ml a cerca de 200 mg/ml, incluindo por exemplo cerca de 0,05mg/ml a cerca de 150 mg/ml, cerca de 0,1 mg/ml a cerca de 100 mg/ml, cer-ca de 0,2 a cerca de 50 mg/ml, cerca de 0,5 mg/ml a cerca de 20 mg/ml,cerca de 1 mg/ml a cerca de 10 mg/ml, e cerca de 1 mg/ml a cerca de 5mg/ml. Em algumas modalidades, a relação de peso do edetato e o agentefarmacêutico pobremente solúvel em água (tal como docetaxel) na composi-ção é cerca de 0,002:1 a cerca de 40:1, incluindo por exemplo cerca de0,01:1 a cerca de 30:1, cerca de 0,02:1 a cerca de 20:1, cerca de 0,04:1 acerca de 10:1, cerca de 0,1:1 a cerca de 4:1, cerca de 0,2:1 a cerca de 2:1,cerca de 0,2:1 a cerca de 1:1.

Outro agente de estabilização contemplado aqui é citrato ou um derivado do mesmo (isto é, ácido cítrico ou derivado do mesmo), tal comocitrato de sódio. Concentrações adequadas de citrato incluem, por exemplo,cerca de 0,1 mg/ml a cerca de 200 mg/ml, incluindo por exemplo qualquerde cerca de 0,2 mg/ml a cerca de 100 mg/ml, cerca de 0,3 mg/ml a cerca de50 mg/ml, cerca de 0,5 mg/ml a cerca de 10 mg/ml, e cerca de 1 mg/ml acerca de 5 mg/ml. Em algumas modalidades, a concentração de citrato émenos do que cerca de 200 mg/ml, tal como menos do que cerca de qual-quer de 100, 50, 30, 20, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4,0,3, ou 0,2 mg/ml. Em algumas modalidades, a relação de peso do citrato eo agente farmacêutico pobremente solúvel em água (tal como citrato) nacomposição é cerca de 0,02:1 a cerca de 40:1, incluindo por exemplo qual-quer de cerca de 0,04:1 a cerca de 20:1, cerca de 0,06:1 a cerca de 10:1,cerca de 0,1:1 a cerca de 2:1, e cerca de 0,2:1 a cerca de 1:1. Em algumasmodalidades, a relação de peso do citrato e o agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água na composição é menos do que cerca de qualquerde 20:1, 10:1, 8:1, 5:1, 2:1, 1:1, 0,8:1, 0,5:1, 0,2:1, e 0,1:1.

Qualquer forma de citrato é aceitável para uso na presente in-venção, e inclui, por exemplo, ácido cítrico e citrato de sódio. Citrato de só-dio é particularmente preferido. Quando citrato de sódio é utilizado, concen-trações adequadas incluem de cerca de 1 to 600 mM. quando citrato e clore-to de sódio são utilizado, concentrações adequadas incluem de cerca de 1 a600 mM e 1 a 1000 mM, respectivamente. Em algumas modalidades, asconcentrações de citrato e cloreto de sódio são cerca de 50 a cerca de 200mM e cerca de 300 a cerca de 500 mM, respectivamente. Em algumas mo-dalidades, a composição compreende cerca de 50 mM de citrato (tal comocitrato de sódio) e cerca de 500 mM de cloreto de sódio. Em algumas moda-lidades, a composição compreende cerca de 200 mM de citrato (tal comocitrato de sódio) e cerca de 300 mM de cloreto de sódio. Em algumas moda-lidades, a composição é uma composição seca (tal como liofilizada), em quea relação de peso do citrato para docetaxel na composição é cerca de 17:1e, quando cloreto de sódio está presente, a relação de peso do cloreto desódio para docetaxel é cerca de 3,5:1. Em outras modalidades, o agente deestabilização não é um citrato (isto é, outro que não citrato).

O agente de estabilização pode também ser um pentetato (inclu-indo pentetato de trisódio de cálcio). Em algumas modalidades, a quantida-de de pentetato está em uma concentração de cerca de 0,01 mg/ml a cercade 200 mg/ml, incluindo por exemplo qualquer de cerca de 0,05 mg/ml acerca de 150 mg/ml, cerca de 0,1 mg/ml a cerca de 100 mg/ml, cerca de 0,2a cerca de 50 mg/ml, cerca de 0,5 mg/ml a cerca de 20 mg/ml, cerca de 1mg/ml a cerca de 10 mg/ml, e cerca de 1 mg/ml a cerca de 5 mg/ml. Em al-gumas modalidades, a relação de peso do pentetato e o agente farmacêuti-co pobremente solúvel em água (tal como docetaxel) na composição é cercade 0,002:1 a cerca de 40:1, incluindo por exemplo qualquer de cerca de0,01:1 a cerca de 30:1, cerca de 0,02:1 a cerca de 20:1, cerca de 0,04:1 acerca de 10:1, cerca de 0,1:1 a cerca de 4:1, cerca de 0,2:1 a cerca de 2:1,cerca de 0,2:1 a cerca de 1:1.

Outro agente de estabilização contemplado aqui é trometamina.Trometamina tal como usada aqui, refere-se a 2-amino-2-hidroximetil-1,3-propanodiol, também conhecido como TRIS. Em algumas modalidades,trometamina está em uma concentração de cerca de 0,1 mg/ml a cerca de100 mg/ml, incluindo por exemplo, cerca de 0,5 mg/ml a cerca de 50 mg/ml,cerca de 1 mg/ml a cerca de 10 mg/ml, e cerca de 2 mg/ml a cerca de 5mg/ml.

Em algumas modalidades, a relação de peso da trometamina eo agente farmacêutico pobremente solúvel em água na composição é cercade 0,02:1 a cerca de 20:1, incluindo por exemplo 0,1 :1 a cerca de 10:1, cer-ca de 0,2:1 a cerca de 2:1, e cerca de 0,4:1 a cerca de 1:1.

Outros agentes de estabilização de quelação de metal adequa-dos e sua quantidade exemplar incluem, mas não são limitados a, sorbatode potássio (0,5 mg/ml), ascorbato de sódio (1 mg/ml), sulfoxilato de formal-deído de sódio (0,1 mg/ml), e monotiolglicerol (5 mg/ml).

Em algumas modalidades, o agente de estabilização é pirofosfa-to de sódio. Concentração adequada de pirofosfato de sódio inclui qualquerde cerca de 0,1 a cerca de 10% (peso/volume), cerca de 0,5 a cerca de 5%,e cerca de 1 a cerca de 2%. Em algumas modalidades, a relação de pesodo pirofosfato de sódio e o agente farmacêutico pobremente solúvel em á-gua na composição é qualquer de cerca de 0,2:1 a cerca de 20:1, cerca de1:1 a cerca de 10:1, cerca de 2:1 a cerca de 4:1.

Em algumas modalidades, o agente de estabilização é gliconatode sódio. Concentração adequada de gliconato de sódio inclui qualquer decerca de 0,1 a cerca de 10% (peso/volume), cerca de 0,5 a cerca de 5%, ecerca de 1 a cerca de 2%. Em algumas modalidades, a relação de peso dogliconato de sódio e o agente farmacêutico pobremente solúvel em água nacomposição é qualquer de cerca de 0,2:1 a cerca de 20:1, cerca de 1:1 acerca de 10:1, cerca de 2:1 a cerca de 4:1.

Em algumas modalidades, as composições descritas aqui com-preendem pelo menos dois (incluindo por exemplo pelo menos qualquer de2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou 10) agentes de estabilização diferentes (tais comoagentes de estabilização descritos aqui).Agentes Farmacêuticos Pobremente Solúveis em Água

As composições descritas aqui compreendem agentes farma-cêuticos pobremente solúveis em água. Por exemplo, a solubilidade em á-gua do agente pobremente solúvel em água em 20 a 25°C pode ser menosdo que cerca de 10 mg/ml, incluindo por exemplo menos do que cerca dequalquer de 5, 2, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05, 0,02, e 0,01 mg/ml.

Agentes farmacêuticos pobremente solúveis em água contem-piados para uso na prática da presente invenção incluem agentes farmaceu-ticamente ativos pobremente solúveis em água, agentes de diagnósticos,agentes de valor nutricional e similares. Agentes farmacêuticos pobrementesolúveis em água podem ser, por exemplo, analgésicos/antipiréticos, anes-tésicos, antiasmáticos, antibióticos, antidepressivos, antidiabeticos,agentes antifúngicos, agentes anti-hipertensivos, antiinflamatórios, antineo-plásicos, agentes anti-ansiedade, agentes imunossupressores, agentes anti-enxaqueca, sedativos, agentes antianginais, agentes antipsicóticos, agentesantimaníacos, antiarrítmicos, agentes antiartríticos, agentes antigota, antico-agulantes, agentes trombolíticos, agentes antifibrinolíticos, agentes hemor-reológicos, agentes antiplaquetas, anticonvulsivantes, agentes antiparkin-son, antihistaminas/antipruriginosos, agentes úteis para regulação de cálcio,agentes antibacterial, agentes antivirais, antimicrobianos, antiinfecciosos,broncodilatadores, hormônios, agentes hipoglicêmicos, agentes hipolipidê-micos, agentes anti-úlcera/anti-refluxo, antinauseantes/antieméticos, vitami-nas solúveis em óleo (por exemplo, vitaminas A, D, Ε, K, e outras mais).

Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobrementesolúvel em água é um agente antineoplásico. Em algumas modalidades, oagente farmacêutico pobremente solúvel em água é um agente quimotera-pêutico.

Agentes farmacêuticos pobremente solúveis em água adequa-dos incluem, mas não são limitados a, taxanos (tais como paclitaxel, doce-taxel, ortataxel e outros taxanos), epotilonas, camptotecinas, colchicinas,geladanamicinas, amiodaronas, hormônios de tiróide, anfotericina, corticos-teróides, propofol, melatonina, ciclosporina, rapamicina (sirolimus) e deriva-dos, tacrolimus, ácidos micofenólicos, ifosfamida, vinorelbina, vancomicina,gencitabina, SU5416, tiotepa, bleomicinã, agentes de radiocontraste de di-agnóstico, e derivados dos mesmos. Outros agentes farmacêuticos pobre-mente solúveis em água que são úteis nas composições inventivas são des-critas em, por exemplo, Patente dos Estados Unidos Nes 5.916.596,6.096.331, 6.749.868, e 6.537.539. Exemplos adicionais de agentes farma-cêuticos pobremente solúveis em água incluem aqueles compostos que sãopobremente solúveis em água e que são listados no "Therapeutic Categoryand Biological Activity Index" do índice de Merck (12th Edition, 1996).

Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobrementesolúvel em água é qualquer de (e em algumas modalidades selecionado dogrupo consistindo em) paclitaxel, docetaxel, ortataxel ou outro taxano ouanálogo de taxano, geldanamicina de amino de 17-alila (17-AAG), geldana-micina 18-derivada, camptotecina, propofol, amiodarona, ciclosporina, epoti-lona, radicicol, combretastatina, rapamicina, anfotericina, liotironina, epotilo-na, colchicina, tiocolchicina e seus dímeros, hormônio de tiróide, peptídeointestinal vasoativo, corticosteróides, melatonina, tacrolimus, ácidos micofe-nólicos, epotilonas, radicicóis, combretastatinas, e análogo ou derivado dosmesmos. Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobremente so-lúvel em água é qualquer de (e em algumas modalidades selecionado dogrupo consistindo em) paclitaxel, docetaxel, ortataxel ou outros taxanos, gel-danamicina, geldanamicina de amino de 17-alila, tiocolchicina e seus díme-ros, rapamicina, ciclosporina, epotilona, radicicol, e combretastatina. Em al-gumas modalidades, o agente farmacêutico pobremente solúvel em água érapamicina. Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobrementesolúvel em água é 17-AAG. Em algumas modalidades, o agente farmacêuti-co pobremente solúvel em água é um dímero de tiocolchicina (tal comoIDN5404).

Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobrementesolúvel em água é um taxano ou derivado dos mesmos, que inclui, mas nãoé limitado a, paclitaxel, docetaxel e IDN5109 (ortataxel), ou um derivado dosmesmos. Em algumas modalidades, a composição compreende um taxanonão cristalino e/ou amorfo (tal como paclitaxel ou um derivado dos mesmos).Em algumas modalidades, a composição é preparada através do uso de umtaxano anidroso (tal como docetaxel anidroso ou um derivado do mesmo).

Em algumas modalidades, o agente farmacêutico pobrementesolúvel em água é docetaxel ou um derivado do mesmo. Em algumas moda-lidades, o docetaxel na composição é não cristalino ou amorfo. Em algumasmodalidades, o docetaxel está em qualquer uma ou mais das seguintes for-mas: formas de anidrato, hemi-hidrato, diidrato, e triidrato. Docetaxel anidro-so mostrou produzir formulação mais estável do que aquelas produzidascom um docetaxel hidratado tal como triidrato de docetaxel ou hemi-hidrato,e é particularmente útil para a preparação das composições de docetaxeldescritas aqui.

Polímeros Biocompatíveis e Proteínas veículo

As composições descritas aqui podem também compreenderpolímeros biocompatíveis, tais como proteínas veículo também descritasaqui.

Tal como usado aqui, o termo "biocompatível" descreve umasubstância que não altera ou afeta apreciavelmente de qualquer modo ad-verso, o sistema biológico no qual ela é introduzida. Polímero biocompatívelinclui materiais biocompatíveis de ocorrência natural ou sintéticos tais comoproteínas, polinucleotídeos, polissacarídeos (por exemplo, amido, celulose,dextranos, alginatos, quitosana, pectina, ácido hialurônico, e similares), elipídeos. Polímeros biocompatíveis adequados incluem, por exemplo, proteí-nas de ocorrência natural ou sintéticas tais como albumina, insulina, hemo-globina, lisozima, imunoglobulinas, α-2-microglobulina, fibronectina, vitronec-tina, fibrinogênio, caseína e similares, assim como combinações de quais-quer dois ou mais dos mesmos. Polímeros sintéticos incluem, por exemplo,polialquileno glicóis (por exemplo, cadeia linear ou ramificada), álcool depolivinila, poliacrilatos, metacrilato de poli-hidroxietila, ácido poliacrílico, poli-etiloxazolina, poliacrilamidas, acrilamidas de poliisopropila, polivinilpirrolido-na, polilactídeo/glicolídeo e similares, e combinações dos mesmos.

O termo "proteínas" refere-se a polipeptídeos ou polímeros deaminoácidos de qualquer comprimento (incluindo comprimento total oufragmentos), os quais podem ser lineares ou ramificados, compreendemaminoácidos modificados, e/ou ser interrompidos por não aminoácidos. Otermo também abrange um polímero de aminoácido que foi modificado natu-ralmente ou por intervenção; por exemplo, formação de ligação de dissulfe-to, glicosilação, lipidação, acetilação, fosforilação, ou qualquer outra manipu-lação ou modificação. Também incluídos dentro do mesmo termo estão, porexemplo, polipeptídeos contendo um ou mais análogos de um aminoácido(incluindo, por exemplo, aminoácidos antinaturais, etc.), assim como outrasmodificações conhecidas na técnica. As proteínas descritas aqui podem serde ocorrência natural, isto é, obtidas ou derivadas de uma fonte natural (talcomo sangue), ou sintetizadas (tais como quimicamente sintetizadas ou con-forme sintetizadas por técnicas de DNA recombinante).

Exemplos de proteínas adequadas incluem proteínas normal-mente encontradas em sangue ou plasma, as quais incluem, mas não sãolimitadas a, albumina, imunoglobulina incluindo IgA, lipoproteínas, apolipo-proteína B, glicoproteína de α-ácido, β-2-macroglobulina, tiroglobulina, trans-ferrina, fibronectina, fator VII, fator VIII, fator IX, fator X, e similares. Em al-gumas modalidades, a proteína veículo é proteína não sangue, tal como ca-seína, a-lactalbumina, β-lactoglobulina. As proteínas podem ou ser naturaisna origem ou sinteticamente preparadas. Em algumas modalidades, a prote-ína é albumina, tal como HSA. HSA é uma proteína globular altamente solú-vel de Mr 65K e consiste em 585 aminoácidos. HSA é a proteína mais abun-dante no plasma e é responsável por 70 a 80 % da pressão osmótica decolóide de plasma humano. A seqüência de aminoácido de HSA contém umtotal de 17 pontes de dissulfeto, um tiol livre (Cys 34), e um triptofano único(Trp 214). Uso intravenoso de solução de HSA tem sido indicado para aprevenção e tratamento de choque hipovolúmico (veja, por exemplo, Tullis,JAMA, 237, 355-360, 460-463, (1977)) e Houser e outros, Surgery, Gyneco-logy e Obstetrics, 150, 811-816 (1980)) e em conjunção com permuta detransfusão no tratamento de hperbilirubinemia neonatal (veja, por exemplo,Finlayson, Seminars in Thrombosis e Hemostasis, 6, 85-120, (1980)). Outrasalbuminas são contempladas, tais como albumina de soro bovino. Uso detais albuminas não humanas pode ser apropriado, por exemplo, no contextode uso destas composições em mamífero não humano, tal como os animaisde veterinária (incluindo animais domésticos e animais agrícolas).

Albumina de soro humano (HSA) possui sítios de ligação hidro-fóbica múltipla (um total de oito para ácidos graxos, um ligando endógenode HSA) e liga-se a um grupo diverso de agentes farmacêuticos, especial-mente compostos hidrofóbicos neutros e negativamente carregados (Good-man e outros, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th ed, McGraw-Hill New York (1996)). Dois sítios de ligando de alta afinidade foram propos-tos em subdomínios HA e IIIA de HSA, que são bolsões hidrofóbicos alta-mente alongados com resíduos de Iisina e arginina carregados perto da su-perfície a qual funciona como pontos de ligação para características de li-gando polar (veja, por exemplo, Fehske e outros, Biochem. Pharmcol, 30,687-92 (1981), Vorum, Dan. Med. Bull., 46, 379-99 (1999), Kragh-Hansen,Dan. Med. Bull., 1441, 131-40 (1990), Curry e outros, Nat. Struct. Biol, 5,827-35 (1998), Sugio e outros, Protein. Eng., 12, 439-46 (1999), He e ou-tros, Nature, 358, 209-15 (1992), e Carter e outros, Adv. Protein. Chem., 45,153-203 (1994)). Paclitaxel e propofol mostraram ligarem-se HSA (veja, porexemplo, Paal e outros, Eur. J. Biochem., 268(7), 2187-91 (2001), Purcell eoutros, Biochim. Biophys. Acta, 1478(1), 61-8 (2000), Altmayer e outros,Arzneimittelforschung, 45, 1053-6 (1995), e Garrido e outros, Rev. Esp. A-nestestiol. Reanim., 41, 308-12 (1994)). Além disso, docetaxel mostrou ligar-se a proteínas de plasma humano (veja, por exemplo, Urien e outros, Invest.New Drugs, 14(2), 147-51 (1996)).Para fornecer um exemplo, proteínas veículo são também des-critas abaixo. É entendido que esta descrição geralmente aplica-se a polí-meros biocompatíveis. A proteína veículo (tal como albumina) na composi-ção geralmente serve como um veículo para o agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água, isto é, a proteína veículo na composição torna oagente farmacêutico pobremente solúvel em água mais facilmente suspen-sos em um meio aquosò ou ajuda manter a suspensão quando comparadaa composições não compreendendo uma proteína veículo. Isto pode evitar ouso de solventes tóxicos para solubilização do agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água, e desse modo pode reduzir um ou mais efeitos co-laterais de administração do agente farmacêutico pobremente solúvel emágua em um indivíduo (tal como um ser humano). Desta forma, em algumasmodalidades, a composição descrita aqui é substancialmente livre (tal comolivre) de tensoativos (tal como Tween 20). Uma composição é "substancial-mente livre de tensoativo" se a quantidade de tensoativo na composição nãoé suficiente para causar um ou mais efeito(s) colateral(is) em um indivíduoquando a composição é administrada ao indivíduo.

Em algumas modalidades, a proteína veículo é associada com oagente farmacêutico pobremente solúvel em água, isto é, a composiçãocompreende agente farmacêutico pobremente solúvel em água associado àproteína veículo. "Associação" ou "associadas" é usado aqui em um sentidogeral e refere-se à proteína veículo afetando o comportamento e/ou proprie-dade do agente farmacêutico pobremente solúvel em água em uma compo-sição aquosa. Por exemplo, a proteína veículo e o agente farmacêutico po-bremente solúvel em água são considerados como sendo "associados" se aproteína veículo torna o agente farmacêutico pobremente solúvel em águamais facilmente suspensível em um meio aquoso quando comparado a umacomposição sem a proteína veículo. Como outro exemplo, a proteína veículoe o agente farmacêutico pobremente solúvel em água é associado se a pro-teína veículo estabiliza o agente farmacêutico pobremente solúvel em águaem uma suspensão aquosa. Por exemplo, a proteína veículo e o agentefarmacêutico pobremente solúvel em água podem estar presentes em umapartícula ou uma nanopartícula, que são também descritas aqui.

Um agente farmacêutico pobremente solúvel em água é "estabi-lizado" por uma proteína veículo em uma suspensão aquosa se ele perma-nece suspenso em um meio aquoso (tal como sem precipitação ou sedimen-tação visível) durante um período prolongada de tempo, tal como durantepelo menos cerca de qualquer de 0,1, 0,2, 0,25, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9,10, 11, 12, 24, 36, 48, 60, ou 72 horas. A suspensão é geralmente, mas nãonecessariamente, adequada para administração a um indivíduo (tal comoser humano). Tal como descrito acima, estabilidade da suspensão é em al-gumas modalidades avaliada em temperatura ambiente (tal como 20 a25°C) ou condições refrigeradas (tal como 4°C). A estabilidade pode tam-bém ser avaliada sob condições de teste aceleradas, tais como em umatemperatura que é maior do que cerca de 40°C. Tal como descrito acima, aestabilidade da suspensão pode também ser realçada por adição dos agen-tes de estabilização descritos aqui. A proteína veículo e o agente farmacêu-tico pobremente solúvel em água na composição pode ser associada de vá-rias maneiras. Por exemplo, em algumas modalidades, a proteína veículoestá em mistura com o agente farmacêutico pobremente solúvel em água.Em algumas modalidades, a proteína veículo encapsula ou captura o agentefarmacêutico pobremente solúvel em água. Em algumas modalidades, aproteína veículo é ligada (tal como não covalentemente ligada) ao agentefarmacêutico pobremente solúvel em água. Em algumas modalidades, acomposição pode exibir um ou mais dos aspectos acima.

Em algumas modalidades, a composição compreende partículas(tais como nanopartículas) compreendendo (em várias modalidades consis-tindo essencialmente em) um agente farmacêutico pobremente solúvel emágua e uma proteína veículo. Quando o agente farmacêutico pobremente so-lúvel em água está em uma forma líquida, as partículas ou nanopartículas sãotambém referidas como gotas ou nanogotas. Em algumas modalidades, oagente pobremente solúvel em água é revestido com a proteína veículo. Par-tículas (tais como nanopartículas) de agentes farmacêuticos pobremente so-lúveis em água foram descritas nas, por exemplo, Patentes dos Estados Uni-dos Nqs 5.916.596; 6.506.405; e 6.537.579 e também na Publicação de Pedi-do de Patente dos Estados Unidos N9 2005/0004002A1.

Em algumas modalidades, a composição compreende partículas(tais como nanopartículas) com um diâmetro mediano ou médio de não maiordo que cerca de 1000 nanômetros (nm), tal como menos do que cerca dequalquer de 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200, e 100 nm. Em algumasmodalidades, o diâmetro mediano ou médio das partículas é no maior do quecerca de 200 nm. Em algumas modalidades, o diâmetro mediano ou médiodas partículas é entre cerca de 20 a cerca de 400 nm. Em algumas modalida-des, o diâmetro mediano ou médio das partículas é entre cerca de 40 a cercade 200 nm. Em algumas modalidades, as nanopartículas na composição pos-suem um tamanho mediano ou médio de partícula de não maior do que cercade 200 nm. Em algumas modalidades, as partículas são estéreis filtráveis. Aspartículas (tais como nanopartículas) descritas aqui podem estar presentesem uma formulação seca (tal como composição liofilizada) ou suspensa emum meio biocompatível. Meios biocompatíveis adequados incluem, mas nãosão limitados a, água, meios aquosos tamponados, salina, salina tamponada,soluções opcionalmente tamponadas de aminoácidos, soluções opcionalmen-te tamponadas de proteínas, soluções opcionalmente tamponadas de açúca-res, soluções opcionalmente tamponadas de vitaminas, soluções opcional-mente tamponadas de polímeros sintéticos, emulsões contendo lipídeo, e si-milares.

A quantidade de proteína veículo na composição descrita aquivariará dependendo do agente farmacêutico pobremente solúvel em água eoutros componentes na composição. Em algumas modalidades, a composi-ção compreende uma proteína veículo em uma quantidade que seja sufici-ente para estabilizar o agente farmacêutico pobremente solúvel em água emuma suspensão aquosa, por exemplo, na forma de uma suspensão coloidalestável (tal como uma suspensão estável de nanopartículas). Em algumasmodalidades, a proteína veículo está em uma quantidade que reduzi a taxade sedimentação do agente farmacêutico pobremente solúvel em água emum meio aquoso. Para composições contendo partícula, a quantidade daproteína veículo também depende do tamanho e densidade de partículas doagente farmacêutico pobremente solúvel em água.

Em algumas modalidades, a proteína veículo está presente emuma quantidade que é suficiente para estabilizar o agente farmacêutico po-bremente solúvel em água em uma suspensão aquosa em uma certa con-centração. Por exemplo, a concentração do agente farmacêutico pobremen-te solúvel em água na composição é cerca de 0,1 a cerca de 100 mg/ml,incluindo por exemplo qualquer de cerca de 0,1 a cerca de 50 mg/ml, cercade 0,1 a cerca de 20 mg/ml, cerca de 1 a cerca de 10 mg/ml, cerca de 2 acerca de 8 mg/ml, e cerca de 4 a cerca de 6 mg/ml. Em algumas modalida-des, a concentração do agente farmacêutico pobremente solúvel em água épelo menos cerca de qualquer de 1,3 mg/ml, 1,5 mg/ml, 2 mg/ml, 3 mg/ml, 4mg/ml, 5 mg/ml, 6 mg/ml, 7 mg/ml, 8 mg/ml, 9 mg/ml, 10 mg/ml, 15 mg/ml,20 mg/ml, 25 mg/ml, 30 mg/ml, 40 mg/ml, e 50 mg/ml. Em algumas modali-dades, a proteína veículo está presente em uma quantidade que evita usode tensoativos (tais como Tween 80 ou Cremophor), a fim de que a compo-sição seja livre ou substancialmente livre de tensoativo (tal como Tween 80ou Cremophor).

Em algumas modalidades, a composição, em forma líquida,compreende de cerca de 0,1% a cerca de 50% (peso/volume) (por exemplo,cerca de 0,5% (peso/volume), cerca de 5% (peso/volume), cerca de 10%(peso/volume), cerca de 15% (peso/volume), cerca de 20% (peso/volume),cerca de 30% (peso/volume), cerca de 40% (peso/volume), cerca de 50%(peso/volume)) da proteína veículo. Em algumas modalidades, a composi-ção, em forma líquida, compreende cerca de 0,5% a cerca de 5% (pe-so/volume) da proteína veículo.

Em algumas modalidades, a relação de peso de proteína veícu-lo, por exemplo, albumina, para o agente farmacêutico pobremente solúvelem água é de modo que uma quantidade suficiente de agente farmacêuticopobremente solúvel em água ligue-se a, ou seja, transportado por, a célula.Embora a relação de peso de proteína veículo para agente farmacêuticodeverá ser otimizada para combinações de fármaco e proteína veículo dife-rentes, geralmente a relação de peso de proteína veículo, por exemplo, al-bumina, para agente farmacêutico (peso/peso) é cerca de 0,01:1 a cerca de100:1, incluindo por exemplo qualquer de cerca de 0,02:1 a cerca de 50:1,cerca de 0,05:1 a cerca de 20:1, cerca de 0,1:1 a cerca de 20:1, cerca de1:1 a cerca de 18:1, cerca de 2:1 a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de12:1, cerca de 4:1 a cerca de 10:1, cerca de 5:1 a cerca de 9:1, e cerca de9:1. Em algumas modalidades, a relação de peso de proteína veículo paraagente farmacêutico é cerca de qualquer de 18: 1 ou menos, tal como cercade qualquer de 15:1 ou menos, 14:1 ou menos, 13:1 ou menos, 12:1 ou me-nos, 11 :1 ou menos, 10:1 ou menos, 9:1 ou menos, 8:1 ou menos, 7:1 oumenos, 6:1 ou menos, 5:1 ou menos, 4:1 ou menos, e 3:1 ou menos. Emalgumas modalidades, a proteína veículo permite a composição ser adminis-trada a um indivíduo (tal como ser humano) sem significantes efeitos colate-rais. Em algumas modalidades, a proteína veículo (tal como albumina) estáem uma quantidade que é eficaz para reduzir um ou mais efeitos colateraisde administração do agente farmacêutico pobremente solúvel em água a umhumano. O termo "redução de um ou mais efeitos colaterais de administra-ção do agente farmacêutico pobremente solúvel em água" refere-se a redu-ção, alívio, eliminação, ou evitação de um ou mais efeitos indesejáveis cau-sados pelo agente farmacêutico pobremente solúvel em água, assim comoefeitos colaterais causados por liberação de veículos (tais como solventesque administram os agentes farmacêuticos pobremente solúveis em águaadequados para injeção) usados para liberar o agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água. Tais efeitos colaterais incluem, por exemplo, mie-lossupressão, neurotoxicidade, hipersensibilidade, inflamação, irritação ve-nosa, flebite, dor, irritação de pele, neuropatia periférica, febre neutropênica,reação anafilática, trombose venosa, extravasamento, e combinações dosmesmos. Estes efeitos colaterais, no entanto, são meramente exemplares eoutros efeitos colaterais, ou combinação de efeitos colaterais, associadoscom vários agentes farmacêuticos podem ser reduzidos.

Em algumas modalidades, a composição compreende partículas(tais como nanopartículas) compreendendo (em várias modalidades consis-tindo em ou consistindo essencialmente em) um agente farmacêutico po-bremente solúvel em água e uma albumina, em que a relação de peso daalbumina para o agente farmacêutico pobremente solúvel em água na com-posição (peso/peso) é cerca de 0,01:1 a cerca de 100:1, incluindo por e-xemplo qualquer de cerca de 0,02:1 a cerca de 50:1, cerca de 0,05:1 a cer-ca de 20:1, cerca de 0,1:1 a cerca de 20:1, cerca de 1:1 a cerca de 18:1,cerca de 2:1 a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1, cerca de 4:1 acerca de 10:1, cerca de 5:1 a cerca de 9:1, e cerca de 9: 1. Em algumasmodalidades, a relação de peso de proteína veículo para agente farmacêuti-co é cerca de qualquer de 18:1 ou menos, 15:1 ou menos, 14:1 ou menos,13:1 ou menos. 12:1 ou menos, 11:1 ou menos, 10:1 ou menos, 9:1 ou me-nos, 8:1 ou menos, 7:1 ou menos, 6:1 ou menos, 5:1 ou menos, 4:1 ou me-nos, e 3:1 ou menos. Em algumas modalidades, o agente farmacêutico po-bremente solúvel em água é revestido com a albumina. Em algumas moda-lidades, as partículas (tais como nanopartículas) compreendendo um agentefarmacêutico pobremente solúvel em água e albumina estão suspensas emum meio aquoso (tal como um meio aquoso contendo albumina). Por exem-plo, a composição pode ser uma suspensão coloidal das partículas de agen-te farmacêutico pobremente solúvel em água (tais como nanopartículas).

Em algumas modalidades, a composição é uma composição seca (tal comoliofilizada) que pode ser reconstituída ou ressuspensa a uma suspensão es-tável de partículas ou descrita aqui. A concentração do agente farmacêuticopobremente solúvel em água na composição líquida ou composição recons-tituída pode ser diluída (0,1 mg/ml) ou concentrada (100 mg/ml), incluindopor exemplo qualquer de cerca de 0,1 a cerca de 50 mg/ml, cerca de 0,1 acerca de 20 mg/ml, cerca de 1 a cerca de 10 mg/ml, cerca de 2 mg/ml a cer-ca de 8 mg/ml, cerca de 4 a cerca de 6 mg/ml, e 5 mg/ml. Em algumas mo-dalidades, a concentração do agente farmacêutico pobremente solúvel emágua (tal como docetaxel) é maior do que cerca de 0,1 mg/ml. Em algumasmodalidades, a concentração do agente farmacêutico pobremente solúvelem água é maior do que cerca de qualquer de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7,8,9,10,11,12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, ou 50 mg/ml. Em algu-mas modalidades, o agente farmacêutico pobremente solúvel em água é umtaxano ou um derivado dos mesmos (tal como docetaxel ou um derivadodos mesmos).

Em algumas modalidades, a composição compreende partículas(tais como nanopartículas) compreendendo docetaxel, tais como nanopartí-culas com um diâmetro mediano ou médio de entre cerca de 20 a cerca de400 nm. Em algumas modalidades, as partículas possuem um diâmetro me-diano ou médio de entre cerca de 40 a cerca de 200 nm. Em algumas mo-dalidades, a composição compreende partículas (tais como nanopartículas)compreendendo (em várias modalidades consistindo essencialmente em)docetaxel e albumina. Em algumas modalidades, o docetaxel é revestidocom albumina. Em algumas modalidades, a relação de peso da albuminapara o docetaxel (peso/peso) na composição é cerca de 0,01 :1a cerca de100:1, incluindo por exemplo qualquer de cerca de 0,02:1 a cerca de 50:1,cerca de 0,05:1 a cerca de 20:1, cerca de 1:1 a cerca de 18:1, cerca de 2:1a cerca de 15:1, cerca de 3:1 a cerca de 12:1. hi algumas modalidades, arelação de albumina para docetaxel (peso/peso) é cerca de qualquer de18:1 ou menos, 15:1 ou menos, 14:1 ou menos, 13:1 ou menos, 12:1 oumenos, 10:1 ou menos, 9:1 ou menos, 8:1 ou menos, 7:1 ou menos, 6:1 oumenos, 5:1 ou menos, 4:1 ou menos, e 3:1 ou menos.

Em algumas modalidades, as partículas (tais como nanopartícu-las) compreendendo docetaxel e albumina estão suspensas em um meioaquoso (tal como um meio aquoso contendo a albumina). Por exemplo, acomposição pode ser uma suspensão coloidal das partículas contendo do-cetaxel (tais como nanopartículas). Em algumas modalidades, a composiçãoé uma composição seca (tal como liofilizada) que pode ser reconstituída auma suspensão aquosa das partículas contendo docetaxel. Em algumasmodalidades, a concentração do docetaxel na composição é entre cerca de0,1 mg/ml e cerca de 100 mg/ml, incluindo por exemplo qualquer de cercade 0,1 a cerca de 50 mg/ml, cerca de 0,1 a cerca de 20 mg/ml, cerca de 1 acerca de 10 mg/ml, cerca de 2 a cerca de 8 mg/ml, cerca de 4 a cerca de 6mg/ml, e cerca de 5 mg/ml. Em algumas modalidades, a concentração dedocetaxel é pelo menos cerca de qualquer de 1,3 mg/ml, 1,5 mg/ml, 2mg/ml, 3 mg/ml, 4 mg/ml, 5 mg/ml, 6 mg/ml, 7 mg/ml, 8 mg/ml, 9 mg/ml, 10mg/ml, 15 nig/ml, 20 mg/ml, 25 mg/ml, 30 mg/ml, 40 mg/ml, e 50 mg/ml.

Docetaxel anidroso

Além do uso de agentes de estabilização descritos aqui (taiscomo citrato de sódio e citrato de sódio/cloreto de sódio), foi surpreenden-temente constatado que o uso de docetaxel anidroso resulta em uma formu-lação mais estável que pode ser produzida com um docetaxel hidratado talcomo triidrato de docetaxel ou hemi-hidrato. As formulações de docetaxelanidrosas da presente invenção também melhoram a estabilidade das sus-pensões de nanopartícula aquosas de modo que a estabilidade das suspen-sões, ou antes de ou depois de liofilização, exceda 1 dia. Além disso, os be-nefícios de estabilidade adicionada de docetaxel anidroso também exten-dem-se a formulações convencionais tais como uma formulação em Tween80, Cremophor ou outros tensoativos conhecidos.

Desta forma, de acordo com a presente invenção, docetaxel po-de ser dissolvido em solvente farmaceuticamente aceitável ou solventes emuma concentração final na faixa de cerca de 1 a 99% v/v, mais preferivel-mente na faixa de cerca de 5 a 25% v/v. Solventes incluem, por exemplo,solventes clorados, acetato de etila, etanol, tetraidrofurano, dioxano, aceto-nitrilo, acetona, sulfóxido de dimetila, formamida de dimetila, pirrolidinona demetila, óleos tais como óleo de soja, óleo de açafroa e outros óleos injetá-veis e similares.

Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecida uma compo-sição compreendendo docetaxel, em que o docetaxel usado para prepara-ção da composição está em uma forma anidrosa. Em algumas modalidades,a invenção fornece uma composição compreendendo docetaxel, em quepelo menos alguns do docetaxel na composição está em uma forma anidro-sa. Por exemplo, em algumas modalidades, pelo menos cerca de 10% (talcomo pelo menos cerca de qualquer de 20%, 30%, 40%, e 50%) do doceta-xel na composição está em uma forma anidrosa. Em algumas modalidades,a composição além disso compreende um agente de estabilização (tal comoo agente de estabilização descrito aqui).

Em algumas modalidades, a composição compreende docetaxele um polímero biocompatível (tal como uma proteína veículo descrita aqui,por exemplo, albumina), em que o docetaxel usado para preparação dacomposição está em uma forma anidrosa. Em algumas modalidades, acomposição compreende docetaxel, um polímero biocompatível (tal comouma proteína veículo descrita aqui, por exemplo albumina) e um agente deestabilização (tal como um agente de estabilização descrito aqui), em que odocetaxel usado para preparação da composição está em uma forma ani-drosa. Em algumas modalidades, a composição é substancialmente livre (talcomo livre) de tensoativos. Em algumas modalidades, a composição com-preende tensoativo.

Em algumas modalidades, a invenção fornece uma composiçãocompreendendo docetaxel e um polímero biocompatível (tal como uma pro-teína veículo, por exemplo, albumina), em que pelo menos alguns do doce-taxel na composição está em uma forma anidrosa. Por exemplo, em algu-mas modalidades, pelo menos cerca de 10% (tal como pelo menos cerca dequalquer de 20%, 30%, 40%, e 50%) do docetaxel na composição está emuma forma anidrosa. Em algumas modalidades, a composição além dissocompreende um agente de estabilização (tal como o agente de estabilizaçãodescrito aqui).

Em algumas modalidades, a invenção fornece uma composiçãocompreendendo docetaxel e um tensoativo (tal como anidroso tensoativo),em que o docetaxel usado para preparação da composição está em umaforma anidrosa. Em algumas modalidades, o tensoativo usado para prepa-ração da composição está em uma forma anidrosa. Tensoativos adequadosincluem, por exemplo, polissorbato (tal como Tweens) e Cremophor. Emalgumas modalidades, a composição pode também compreender um agentede estabilização descrito aqui. Em algumas modalidades, a invenção forne-ce uma composição compreendendo docetaxel e um tensoativo, em quepelo menos alguns do docetaxel na composição está em uma forma anidro-sa. Por exemplo, em algumas modalidades, pelo menos cerca de 10% (talcomo pelo menos cerca de qualquer de 20%, 30%, 40%, e 50%) do doceta-xel na composição está em uma forma anidrosa.

Em algumas modalidades, a composição descrita aqui é umacomposição seca (tal como liofilizada) que pode ser reconstituída, ressus-pensa, ou re-hidratada geralmente para formar uma suspensão aquosa es-tável do docetaxel. Em algumas modalidades, a composição é uma compo-sição líquida (tal como aquosa) obtida através de reconstituição ou ressus-pensão de uma composição seca. Em algumas modalidades, a composiçãoé uma composição líquida intermediária (tal como aquosa) que pode ser se-ca (tal como liofilizada).

Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecido um métodode preparo de composições compreendendo docetaxel e um tensoativo, emque o método compreende combinação de um docetaxel anidroso com otensoativo. Em algumas modalidades, o tensoativo usado para preparaçãoda composição é anidroso. Em certa modalidade, nesse ponto é fornecidoum método de preparo de uma composição compreendendo docetaxel e umpolímero biocompatível (tal como as proteínas veículo, por exemplo, albumi-na), em que o método compreende combinação de um docetaxel anidrosocom um polímero biocompatível (tal como uma proteína veículo, por exem-pio albumina). Também fornecidas são composições produzidas por méto-dos descritos aqui.

Outros Componentes nas Composições

As composições descritas aqui podem incluir outros agentes,excipientes, ou estabilizantes para melhorar as propriedades da composi-ção. Exemplos de excipientes e diluentes adequados incluem, mas não sãolimitados a, lactose, dextrose, sacarose, sorbitol, manitol, amidos, goma deacácia, fosfato de cálcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de cálcio,celulose microcristalina, polivinilpirrolidona, celulose, água, solução de sali-na, xarope, metilcelulose, metil- e propil-hidroxibenzoatos, talco, estearatode magnésio e óleo mineral. As formulações podem adicionalmente incluiragentes lubrificantes, agentes umectantes, agentes de emulsificação e sus-pensão, agentes conservantes, agentes adoçantes ou agentes aromatizan-tes. Exemplos de agentes de emulsificação incluem ésteres de tocoferol taiscomo succinato de polietileno glicol de tocoferila e similares, pluronic®, e-mulsificantes com base em compostos de polióxi etileno, Span 80 e com-postos relacionados e outros emulsificantes conhecidos na técnica e apro-vados para uso em formas de dosagem animais ou humanas. As composi-ções podem ser formuladas a fim de fornecer liberação rápida, prolongadaou atrasada do ingrediente ativo depois de administração ao paciente poremprego de procedimentos bem conhecidos na técnica.

Composições preferidas para administração através de injeçãoincluem aquelas compreendendo um agente farmacêutico pobremente solú-vel em água como o ingrediente ativo em associação com um agente tenso-ativo (ou agente umectante ou tensoativo), ou na forma de uma emulsão(por exemplo, como uma emulsão água em óleo ou óleo em água). Outrosingredientes podem ser adicionados, por exemplo, manitol ou outros veícu-los farmaceuticamente aceitáveis, se necessário.

Em algumas modalidades, a composição é adequada paraadministração a um ser humano. Em algumas modalidades, a composição éadequada para administração a um mamífero tal como, no contexto veteri-nário, incluindo animais domésticos e animais agrícolas. Há uma larga vari-edade de formulações adequadas da composição inventiva (veja, por exem-plo, Patente dos Estados Unidos Nes 5.916.596 e 6.096.331). As seguintesformulações e métodos são meramente exemplares e não são de nenhummodo limitantes. Formulações adequadas para administração oral podemconsistir em (a) soluções líquidas, tais como uma quantidade eficaz do com-posto dissolvido em diluentes, tais como água, salina, ou suco de laranja, (b)cápsulas, sachês ou comprimidos, cada um contendo uma quantidade pre-determinada do ingrediente ativo, como sólidos ou grânulos, (c) suspensõesem um líquido apropriado, (d) emulsões adequadas, e (e) pós. Formas decomprimido podem incluir um ou mais de lactose, manitol, amido de milho,amido de batata, celulose macrocristalina, acácia, gelatina, dióxido de silíciocoloidal, croscarmelose sódica, talco, estearato de magnésio, ácido esteári-co, e outros excipientes, corantes, diluentes, agentes de tamponamento,agentes umectantes, conservantes, agentes aromatizantes, e excipientesfarmacologicamente compatíveis. Formas de losango podem compreender oingrediente ativo em um aromatizante, geralmente sacarose e acácia ou tra-gacanto, assim como pastilhas compreendendo o ingrediente ativo em umabase inerte, tal como gelatina e glicerina, ou sacarose e acácia, emulsões,géis, e similares contendo, além do ingrediente ativo, tais excipientes comosão conhecidos na técnica.

Formulações adequadas para administração parenteral incluemsoluções de injeção estéreis isotônicas aquosas e não-aquosas, que podemconter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos, e solutos que administram aformulação compatível com o sangue do receptor planejado, e suspensõesestéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão,solubilizantes, agentes de espessamento, estabilizantes, e conservantes. Asformulações podem ser apresentadas em recipientes selados de dose unitá-ria ou multidose, tais como ampolas e frascos, e podem ser armazenadasem uma condição seca por congelamento (IiofiIizada) requerendo apenas aadição do excipiente líquido estéril, por exemplo, água, para injeções, imedi-atamente antes do uso. Soluções e suspensões de injeção extemporâneapodem ser preparadas de pós, grânulos, e comprimidos estéreis do tipo an-teriormente descrito.

Formulações adequadas para administração por aerosol compre-endem a composição inventiva que incluem soluções estéreis isotônicas a-quosas e não aquosas, que podem conter antioxidantes, tampões, bacterios-táticos, e solutos, assim como suspensões estéreis aquosas e não aquosasque podem incluir agentes de suspensão, solubilizantes, agentes de espes-samento, estabilizantes, e conservantes, sozinhos ou em combinação comoutros componentes adequados, que podem ser produzidos em formulaçõesde aerosol para serem administrados por meio de inalação. Estas formula-ções de aerosol podem ser colocadas em propelentes aceitáveis pressuriza-dos, tais como diclorodifluorometano, propano, nitrogênio, e similares. Elastambém podem ser formuladas como farmacêuticos para preparações nãopressionadas, tais como em um nebulizador ou um atomizador.Em algumas modalidades, a composição é formulada para pos-suir um pH na faixa de cerca de 4,5 a cerca de 9,0, incluindo por exemplo,pH nas faixas de qualquer de cerca de 5,0 a cerca de 8,0, cerca de 6,5 acerca de 7,5, e cerca de 6,5 a cerca de 7,0. Em algumas modalidades, o pHda composição é formulado a não menos do que cerca de 6, incluindo porexemplo não menos do que cerca de qualquer de 6,5, 7, ou 8 (tal como cer-ca de 7,5 ou cerca de 8). A composição pode também ser produzida paraser isotônica com o sangue pela adição de um modificador de tonicidadeadequado, tal como glicerol.

Também fornecidos são artigos de fabricação compreendendoas composições descritas aqui em embalagem adequada. Embalagem ade-quada para composições descritas aqui são conhecidas na técnica, e inclu-em, por exemplo, frascos (tais como frascos selados), recipientes (tais comorecipientes selados), ampolas, garrafas, jarras, embalagem flexível (por e-xemplo, bolsas plásticas ou Mylar de seladas), e similares. Estes artigos defabricação podem também ser esterilizados e/ou selados. Também forneci-das são formas de dosagem unitárias compreendendo as composições des-critas aqui. Estas formas de dosagem unitárias podem ser armazenadas emuma embalagem adequada em dosagens unitárias únicas ou múltiplas epodem também ser além disso esterilizadas e seladas.

A presente invenção também fornece estojos compreendendocomposições (ou formas de dosagens unitárias e/ou artigos de fabricação)descritas aqui e podem também compreender instrução(ões) em métodosde uso da composição, tais como usos também descritos aqui. Em algumasmodalidades, o estojo da invenção compreende a embalagem descrita aci-ma. Em outras modalidades, o estojo da invenção compreende a embala-gem descrita acima e uma segunda embalagem compreendendo um tam-pão. Ela pode também incluir outros materiais desejáveis de um ponto devista comercial e do usuário, incluindo outros tampões, diluentes, filtros,agulhas, seringas, e suplementos de embalagem com instruções para de-sempenho de quaisquer métodos descritos aqui.

Estojos podem também ser com a condição de que contenhamdosagens suficientes do agente farmacêutico pobremente solúvel em água(tal como docetaxel) tal como descrito aqui para fornecer tratamento eficazpara um indivíduo durante um período prolongada, tal como qualquer de umasemana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 6 semanas, 8 semanas, 3 me-ses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses ou mais. Esto-jos podem também incluir doses unitárias múltiplas do agente farmacêuticopobremente solúvel em água e composições farmacêuticas e instruções parauso e embaladas em quantidades suficientes para armazenagem e uso emfarmácias, por exemplo, farmácias de hospital e farmácias de composição.

Método de Fabricação e Uso das Composições

Também fornecidos são métodos de fabricação e uso de compo-sições descritas aqui. Por exemplo, nesse ponto é fornecido um método depreparo de uma composição compreendendo um agente farmacêutico po-bremente solúvel em água (tal como um taxano, por exemplo, paclitaxel, do-cetaxel, ou ortataxel), opcionalmente um polímero biocompatível (tal comouma proteína veículo, por exemplo, albumina), e um agente de estabilização,em que a estabilidade da composição é realçada quando comparada àquelade uma composição sem o agente de estabilização, compreendendo combi-nação de (tal como mistura) uma composição contendo um agente farmacêu-tico pobremente solúvel em água e opcionalmente um polímero biocompatível(tal como uma proteína veículo) com um agente de estabilização.

Também fornecidos são métodos para a formação de nanopar-tículas de docetaxel preparadas sob condições de forças de cisalhamentoelevadas (por exemplo, sonicação, homogeneização por pressão alta ousimilares). A preparação de nanopartículas de polímeros biocompatíveis (porexemplo, albumina) é descrita em, por exemplo, Patentes dos Estados Uni-dos Nqs 5.916.596; 6.506.405 e 6.537.579 e também na Publicação de Pa-tente dos Estados Unidos 2005/0004002 Al, incorporadas aqui através dereferência.

Resumidamente, o agente farmacêutico pobremente solúvel emágua (tal como docetaxel) é dissolvido em um solvente orgânico, e a soluçãopode ser adicionada a uma solução de albumina aquosa. A mistura é sub-metida à homogeneização por pressão alta. O solvente orgânico pode emseguida ser removido através de evaporação. A dispersão obtida pode sertambém liofilizada. Solventes orgânicos adequados incluem, por exemplo,cetonas, ésteres, éteres, solventes clorados, e outros solventes conhecidosna técnica. Por exemplo, o solvente orgânico pode ser cloreto de metilenoou clorofórmio/etanol (por exemplo, com uma relação de 1 :9, 1 :8, 1 :7, 1 :6,1 :5, 1 :4, 1 :3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, ou 9:1).

Foi surpreendentemente constatado que composições de doce-taxel, tais como aquelas preparadas nas referências citadas acima, possu-em estabilidade durando menos do que 1 dia. De fato, quando testadas,muitas das composições foram estáveis durante apenas 4 a 8 horas. A pre-sente invenção permite aumento de estabilidade líquida e estabilidade pós-reconstituição através de adição de certos estabilizantes antes da formaçãode nanopartículas ou depois que as nanopartículas foram formadas.

Há por esse motivo métodos fornecidos de estabilização de umacomposição compreendendo um agente farmacêutico pobremente solúvelem água, compreendendo combinação da composição com um agente dêestabilização, em que a composição resultante é estável sob a mesma con-dição sob a qual a composição é instável antes da adição do agente de es-tabilização. Em algumas modalidades, o método além disso compreendeidentificação e seleção de uma composição que é instável sob certas condi-ções. Em algumas modalidades, a composição para seleção compreendeum agente farmacêutico pobremente solúvel em água e uma proteína veícu-lo (tal como albumina). Em algumas modalidades, a composição para sele-ção compreende partículas (tais como nanopartículas) compreendendo oagente farmacêutico pobremente solúvel em água e uma proteína veículo(tal como albumina).

Excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem também seradicionados à composição. Os excipientes farmaceuticamente aceitáveispodem ser uma solução, emulsão ou suspensão. Por exemplo, uma emul-são de propofol em óleo e estabilizada por lecitina, é bem conhecida na téc-nica. Outras formulações de emulsão ou nanopartícula da invenção podemtambém ser preparadas. Uma emulsão é formada através de homogeneiza-ção sob forças de cisalhamento elevadas e pressão alta. Tal homogeneiza-ção é convenientemente realizada em um homogenizador por pressão alta,tipicamente operado em pressões na faixa de cerca de 20,68 até 206,84MPa (3.000 até 30.000 psi). De preferência, tais processos são realizadosem pressões na faixa de cerca de 41,37 até 172,37 MPa (6.000 até 25.000psi). A emulsão resultante compreende muitas pequenas nanogotas do sol-vente não aquoso contendo o agente farmacologicamente ativo dissolvido emuitas pequenas nanogotas do agente de estabilização de proteína. Méto-dos aceitáveis de homogeneização incluem processos conferindo cisalha-mento elevado e cavitação tal como, por exemplo, homogeneização depressão alta, misturadores por cisalhamento elevado, sonicação, impulsoresde cisalhamento elevado e similares.

Sistemas coloidais preparados de acordo com a presente inven-ção podem ser também convertidos em forma de pó através de remoção daágua, por exemplo, através de liofilização em um perfil de temperatura-tempo adequado. A proteína (por exemplo, HSA) propriamente dita age co-mo um crioprotetor, e o pó é facilmente reconstituído por adição de água,salina ou tampão, sem a necessidade de usar crioprotetores convencionaistais como manitol, sacarose, glicina e similares. Enquanto não requerido, écertamente entendido que crioprotetores convencionais podem ser adicio-nados às composições farmacêuticas se desse modo desejado.

O agente de estabilização pode ou ser misturado com o agentefarmacêutico pobremente solúvel em água e/ou a proteína veículo durantepreparação da composição de agente farmacêutico pobremente solúvel emágua/proteína veículo, ou adicionado depois que a composição de agentefarmacêutico pobremente solúvel em água/proteína veículo é preparada. Porexemplo, o agente de estabilização pode estar presente em uma proteína so-lução antes de formação da composição de agente farmacêutico pobrementesolúvel em água/proteína veículo. O agente de estabilização pode também seradicionado junto com um meio aquoso usado para reconstituir/suspender acomposição de agente farmacêutico pobremente solúvel em água/proteínaveículo ou adicionado a uma suspensão aquosa da proteína veículo-associadas agente farmacêutico pobremente solúvel em água. Em algumasmodalidades, o agente de estabilização é misturado com a composição deagente farmacêutico pobremente solúvel em água/proteína veículo antes deliofilização. Em algumas modalidades, o agente de estabilização é adicionadocomo um componente seco à composição de agente farmacêutico/proteínaveículo liofilizada. Em algumas modalidades quando a composição compre-ende partículas (tais como nanopartículas), o agente de estabilização podeser adicionado ou antes ou depois que as partículas são formadas.

Em algumas modalidades quando a adição do agente de estabi-lização muda o pH da composição, o pH na composição é geralmente (masnão necessariamente) ajustado a um pH desejado. Valores de pH exempla-res das composições incluem, por exemplo, cerca de 5 a cerca de 8,5. Emalgumas modalidades, o pH da composição é ajustado a não menos do quecerca de 6, incluindo por exemplo não menos do que cerca de qualquer de6,5, 7, ou 8 (tal como cerca de 7,5 ou 8).

Também fornecidos são métodos de fabricação de composiçõesfarmacêuticas compreendendo combinação de quaisquer das composiçõesdescritas aqui (incluindo aquelas acima) com um excipiente farmaceutica-mente aceitável.

Também fornecidos aqui são métodos de uso das composiçõesda presente invenção. Em algumas modalidades, forneceram um métodopara tratamento de uma doença ou condição que é responsiva a um agentefarmacêutico pobremente solúvel em água compreendendo administraçãode uma composição compreendendo uma quantidade eficaz de um agentefarmacêutico pobremente solúvel em água, opcionalmente um polímero bio-compatível (tal como uma proteína veículo), e um agente de estabilização,em que a estabilidade da composição é realçada quando comparada àquelade uma composição sem o agente de estabilização. Por exemplo, em algu-mas modalidades, forneceram um método de tratamento de câncer em umindivíduo (tal como ser humano) compreendendo administração ao indivíduode uma composição compreendendo uma quantidade eficaz de uma agenteanti-neoplásico pobremente solúvel em água (tal como docetaxel), opcio-nalmente uma proteína veículo, e um agente de estabilização, em que a es-tabilidade da composição é realçada quando comparada àquela de umacomposição sem o agente de estabilização. Em algumas modalidades, aquantidade do agente de estabilização na composição não causa quaisquerefeitos toxicológicos quando a composição é administrada em um indivíduo(tal como ser humano). Em algumas modalidades, a invenção fornece ummétodo de tratamento de câncer em um indivíduo (tal como ser humano)compreendendo administração ao indivíduo de uma quantidade eficaz dedocetaxel, em que o docetaxel usado para preparação da composição estáem forma anidrosa. Por exemplo, o docetaxel pode estar anidroso antes deser incorporado na composição.

O termo "quantidade eficaz" usado aqui refere-se a uma quanti-dade de um composto ou composição suficiente para tratar um distúrbio,condição ou doença especificado tal como melhorar, paliar, diminuir, e/ouatrasar um ou mais de seus sintomas. Em referência a cânceres ou outraproliferação celular indesejável, uma quantidade eficaz compreende umaquantidade suficiente para induzir um tumor encolher e/ou diminuir o taxa dedesenvolvimento do tumor (tal como suprimir desenvolvimento de tumor).

Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz é uma quantidade sufici-ente para atrasar desenvolvimento. Em algumas modalidades, uma quanti-dade eficaz é uma quantidade suficiente para prevenir ocorrência e/ou re-corrência. Uma quantidade eficaz pode ser administrada em uma ou maisadministrações.

Cânceres a serem tratados por composições descritas aqui (talcomo uma composição compreendendo um agente anti-neoplásico pobre-mente solúvel em água tal como docetaxel, rapamicina, e 17-AAG) incluem,mas não são limitados a, carcinoma, linfoma, blastoma, sarcoma, e leuce-mia. Exemplos de cânceres que podem ser tratados por composições des-critas aqui incluem, mas não são limitados a, câncer de célula escamosa,câncer de pulmão (incluindo câncer de pulmão de célula pequena, câncerde pulmão de célula não pequena, adenocarcinoma do pulmão, e carcinomaescamoso do pulmão), câncer do peritôneo, câncer hepatocelular, câncergástrico ou de estômago (incluindo câncer gastrointestinal), câncer pancreá-tico, glioblastoma, câncer cervical, câncer ovariano, câncer de fígado, cân-cer de bexiga, heptoma, câncer de mama, câncer de cólon, melanoma, car-cinoma endometrical ou uterino, carcinoma de glândula salivar, câncer derim ou renal, câncer de fígado, câncer de próstata, câncer vulval, câncer detiróide, carcinoma hepático, câncer de cabeça e pescoço, câncer colorretal,câncer retal, sarcoma de tecido macio, sarcoma de Kaposi, Iinfoma de célulaB (incluindo Iinfoma de não Hodgkin de grau baixo/folicular (NHL), NHL Iin-focítico pequeno (SL), NHL de grau intermediário/folicular, NHL de grau difu-so intermediário, NHL imunoblástico de grau alto, NHL linfoblástico de graualto, NHL de célula não clivada pequena de grau alto, NHL de doença volu-mosa, linfoma de célula de manto, linfoma relacionado a auxiliares, e ma-croglobulinemia de Waldenstrom), leucemia linfocítica crônica (CLL), Ieuce-mia linfoblástica aguda (ALL), mieloma, leucemia de célula pilosa, leucemiamieloblástica crônica, e distúrbio Iinfoproliferativo pós-transplante (PTLD),assim como proliferação vascular anormal associada com facomatoses, e-dema (tal como aquele associado com tumores cerebrais), e síndrome deMeigs. Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecido um método detratamento de câncer metastático (que é, câncer que metastizou do tumorprimário). Em algumas modalidades, nesse ponto é fornecido um método deredução de proliferação celular e/ou migração celular. Em algumas modali-dades, nesse ponto é fornecido um método de tratamento de hiperplasia.

Em algumas modalidades, nesse ponto são fornecidos métodosde tratamento de câncer em estágio(s) avançado(s). Em algumas modalida-des, nesse ponto são fornecidos métodos de tratamento de câncer de ma-ma (que podem ser positivo de HER2 ou negativo de HER2), incluindo, porexemplo, câncer de mama avançado, câncer de mama de estágio IV, câncerde mama localmente avançado, e câncer de mama metastático. Em algu-mas modalidades, o câncer é câncer de pulmão, incluindo, por exemplo,câncer de pulmão de célula não pequena (NSCLC, tal como NSCLC avan-çado), câncer de pulmão de célula pequena (SCLC, tal como SCLC avança-do), e malignidade de tumor sólido avançado no pulmão. Em algumas mo-dalidades, o câncer é câncer ovariano, câncer de cabeça e pescoço, malig-nidades gástricas, melanoma (incluindo melanoma metastático), câncer co-lorretal, câncer pancreático, e tumores sólidos (tais como tumores sólidosavançados). Em algumas modalidades, o câncer é qualquer de (e em algu-mas modalidades selecionadas do grupo consistindo em) câncer de mama,câncer colorretal, câncer retal, câncer de pulmão de célula não pequena,linfoma de não Hodgkins (NHL), câncer de célula renal, câncer de próstata,câncer de fígado, câncer pancreático, sarcoma de tecido macio, sarcoma deKaposi, carcinoma carcinóide, câncer de cabeça e pescoço, melanoma,câncer ovariano, mesotelioma, gliomas, glioblastomas, neuroblastomas, emieloma múltiplo. Em algumas modalidades, o câncer é um tumor sólido.Em algumas modalidades, o câncer é qualquer de (em algumas modalida-des, selecionado do grupo consistindo em) câncer de próstata, câncer decólon, câncer de mama, câncer de cabeça e pescoço, câncer pancreático,câncer de pulmão, e câncer ovariano.

Indivíduos adequados para recebimento destas composiçõesdepende da natureza do agente farmacêutico pobremente solúvel em água,assim como a doença/condição/distúrbio a ser tratado e/ou prevenido. Des-se modo, o termo indivíduo inclui qualquer dos vertebrados, mamíferos, eseres humanos dependendo do uso adequado pretendido. Em algumas mo-dalidades, o indivíduo é um mamífero. Em algumas modalidades, o indiví-duo é qualquer um ou mais de ser humano, bovino, eqüino, felino, canino,roedor, ou primata. Em algumas modalidades, o indivíduo é um ser humano.

Em outro aspecto, nesse ponto é fornecido um método de tra-tamento de carcinoma (tal como carcinoma de cólon) em um indivíduo, emque o método compreende administração ao indivíduo de uma composiçãocompreendendo uma quantidade eficaz de docetaxel e uma proteína veículo(tal como albumina). Em algumas modalidades, a composição além dissocompreende um agente de estabilização descrito aqui, tal como citrato. Emalgumas modalidades, o docetaxel usado para preparação da composiçãoque é administrada ao indivíduo está em uma forma anidrosa. O docetaxel ea proteína veículo podem estar presentes na formas de nanopartículas (taiscomo nanopartículas descritas aqui).

As composições descritas aqui podem ser administradas sozi-nhas ou em combinação com outros agentes farmacêuticos, incluindo agentesfarmacêuticos pobremente solúveis em água. Por exemplo, quando a compo-sição compreende um taxano (tal como docetaxel), ela pode ser co-administrada com um ou mais outros agentes quimoterapêuticos incluindo,mas não são limitados a, carboplatina, navelbine® (vinorelbina), antraciclina(Doxil), Iapatinib (GW57016), Herceptin, gencitabina (Gemzar®), capecitabina(Xeloda®), alimta, cisplatina, 5-fluorouracila, epirubicina, ciclofosfamida, avas-tina, velcade®, etc. Em algumas modalidades, a composição de taxano é co-administrada com um agente quimoterapêutico selecionado do grupo consis-tindo em anti-metabólitos (incluindo análogos de nucleosídeo), agentes combase em platina, agentes de alquilação, inibidores de tirosina cinase, antibióti-cos de antraciclina, alcalóides de vinca, inibidores de proteassoma, macrolí-deos, e inibidores de topoisomerase. Estes outros agentes farmacêuticos po-dem estar presentes na mesma composição como o fármaco (tal como taxa-no), ou em uma composição separada que é administrada simultaneamenteou seqüencialmente com a composição contendo fármaco (tal como taxano).Métodos de terapia de combinação usando formulações de nanopartícula detaxano com outros agentes (ou métodos terapêuticos) foram descritos no Pe-dido de Patente Internacional N9 PCT/US2006/006167.

A dose da composição inventiva administrada a um indivíduo (talcomo ser humano) variará com a composição particular, o método de admi-nistração, e a doença particular que está sendo tratada. A dose deve ser sufi-ciente para efetuar uma resposta desejável, tal como uma resposta terapêuti-ca ou profilática contra uma doença ou condição particular. Por exemplo, adosagem de docetaxel administrada pode ser cerca de 1 a cerca de300mg/m2, incluindo por exemplo cerca de 10 a cerca de 300 mg/m2, cerca de30 a cerca de 200 mg/m2, e cerca de 70 a cerca de 150 mg/m2, tipicamente, adosagem de docetaxel na composição pode ser na faixa de cerca de 50 acerca de 200 mg/m2 quando dada em uma programação de 3 semanas, oucerca de 10 a cerca de 100 mg/m2 quando dada em uma programação sema-nal. Além disso, se dada em um regime metronômico (por exemplo, diaria-mente ou algumas vezes por semana), a dosagem pode ser na faixa de cercade 1 a 50 mg/m2.

Freqüência de dosagem para a composição inclui, mas não é limi-tado a, pelo menos cerca de qualquer de uma vez a cada três semanas, umavez a cada duas semanas, uma vez em uma semana, duas vezes em umasemana, três vezes em uma semana, quatro vezes em uma semana, cincovezes em uma semana, seis vezes em uma semana, ou diariamente. Em al-gumas modalidades, o intervalo entre cada administração é menor do quecerca de uma semana, tal como menor do que cerca de qualquer de 6, 5, 4, 3,2, ou 1 dia. Em algumas modalidades, o intervalo entre cada administração éconstante. Por exemplo, a administração pode ser realizada diariamente, acada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, ousemanalmente. Em algumas modalidades, a administração pode ser realizadaduas vezes diariamente, três vezes diariamente, ou mais freqüente.

A administração da composição pode ser prolongada duranteum período prolongado de tempo, tal como de cerca de um mês até cercade três anos. Por exemplo, o regime de dosagem pode ser prolongado du-rante um período de qualquer de cerca de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,18, 24, 30, e 36 meses. Em algumas modalidades, não há nenhum intervalona programação de dosagem. Em algumas modalidades, o intervalo entrecada administração é não mais do que cerca de uma semana.

As composições descritas aqui podem ser administradas a umindivíduo (tal como ser humano) por meio de várias rotinas, incluindo, porexemplo, intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intrapulmonar, oral, ina-lação, intravesicular, intramuscular, intratraqueal, subcutânea, intra-ocular,intratecal, transmucosal, e transdérmica. Por exemplo, a composição inven-tiva pode ser administrada por inalação para tratar condições do trato respi-ratório. A composição pode ser usada para tratar condições respiratórias talcomo fibrose pulmonar, bronquiolite obliterante, câncer de pulmão, carcino-ma broncoalveolar, e similares. Em uma modalidade da invenção, nanopar-tículas (tais como nanopartículas de albumina) dos compostos inventivospodem ser administrados por qualquer rotina aceitável incluindo, mas nãolimitado a, oral, intramuscular, transdérmica, intravenosamente, por meio deum inalador ou outros sistemas de liberação originada do ar e similares.

Quando prepara-se a composição para injeção, particularmentepara liberação intravenosa, a fase contínua de preferência compreende umasolução aquosa de modificadores de tonicidade, tamponada a uma faixa depH de cerca de 5 a cerca de 8,5. O pH pode também ser abaixo de 7 ou a-baixo de 6. Em algumas modalidades, o pH da composição é não menos doque cerca de 6, incluindo por exemplo não menos do que cerca de qualquerde 6,5, 7, ou 8 (tal como cerca de 7,5 ou 8).

As nanopartículas desta invenção podem ser fechadas em umacápsula dura ou macia, podem ser prensadas em comprimidos, ou podemser incorporadas com bebidas ou alimento ou de outra maneira incorpora-das na dieta. Cápsulas podem ser formuladas por mistura das nanopartícu-las com um diluente farmacêutico inerte e inserção da mistura em uma cáp-sula de gelatina dura do tamanho apropriado. Se cápsulas macias são dese-jadas, uma suspensão das nanopartículas com um óleo vegetal aceitável,petróleo leve ou outro óleo inerte pode ser encapsulada por máquina emuma cápsula de gelatina.

Também fornecidos aqui são métodos de redução de efeitoscolaterais associados com administração de um agente farmacêutico po-bremente solúvel em água a um ser humano, compreendendo administra-ção a um ser humano de uma composição farmacêutica compreendendo oagente farmacêutico pobremente solúvel em água, um polímero biocompatí-vel (tal como uma proteína veículo), e um agente de estabilização, em que aestabilidade da composição é realçada quando comparada àquela de umacomposição sem o agente de estabilização. Por exemplo, a invenção forne-ce métodos de redução de vários efeitos colaterais associados com adminis-tração do agente farmacêutico pobremente solúvel em água, incluindo, masnão limitado a, mielossupressão, neurotoxicidade, hipersensibilidade, infla-mação, irritação venosa, flebite, dor, irritação de pele, neuropatia periférica,febre neutropênica, reação anafilática, toxicidade hematológica, e toxicidadecerebral ou neurológica, e combinações dos mesmos. Em algumas modali-dades, nesse ponto é fornecido um método de redução de reações de hi-persensibilidade associado com administração do agente farmacêutico po-bremente solúvel em água, incluindo, por exemplo, erupções de pele seve-ras, urticária, eritema, dispnéia, taquicardia, e outros.

Além disso, há um método de realce de estabilidade de compo-sição compreendendo um agente farmacêutico pobremente solúvel em águae opcionalmente um polímero biocompatível (tal como uma proteína veícu-lo), compreendendo adição à composição de um agente de estabilização emuma quantidade que é eficaz para realçar estabilidade da composição. Emalgumas modalidades, forneceram um método de preparo de uma composi-ção compreendendo um agente pobremente solúvel em água (tal como do-cetaxel), um polímero biocompatível (tal como uma proteína veículo, por e-xemplo, albumina), e um agente de estabilização, compreendendo combina-ção do (tal como mistura) agente pobremente solúvel em água e do políme-ro biocompatível com o agente de estabilização. Em algumas modalidades,a composição é uma composição líquida. Em algumas modalidades, a com-posição é uma composição pós-reconstituição.

O agente de estabilização pode ou ser misturado com o agentefarmacêutico pobremente solúvel em água e/ou a proteína veículo durantepreparação da composição de agente farmacêutico pobremente solúvel emágua/proteína veículo, ou adicionado junto com um meio aquoso usado parareconstituir a composição farmacêutica/de proteína veículo. Em um aspectoadicional da invenção é fornecido uso das composições descritas aqui nafabricação de um medicamento. Particularmente, a fabricação de um medi-camento para uso no tratamento de condições descritas aqui. Além disso, acomposição farmacêutica dos mesmos, variavelmente descritos aqui, étambém pretendida para uso na fabricação de um medicamento para usoem tratamento das condições e, de acordo com os métodos, descritos aqui,a não ser que de outra maneira mencionada.

Aqueles versados na técnica reconhecerão que diversas varia-ções são possíveis dentro do escopo e espírito desta invenção. A invençãoagora será descrita em maior detalhe através de referência aos seguintesexemplos não limitantes. A não ser que de outra maneira indicado, as esta-bilidades das composições nos exemplos abaixo são avaliadas ou em 25°Cou 4°C.

Exemplo 1

Este exemplo demonstra a instabilidade de uma preparação decomposições farmacêuticas compreendendo docetaxel e albumina prepara-da tal como descrito na Publicação de Patente dos Estados Unidos2005/0004002 Al.

30 Mg de docetaxel foram dissolvidos em 2 mL de clorofór-mio/etanol. A solução foi em seguida adicionada em 27,0 mL de solução deHSA (3% de peso/volume). A mistura foi homogeneizada durante 5 minutosem RPM baixo (Vitris homogenizer model Tempest LQ.) a fim de formar umaemulsão bruta, e em seguida transferida em um homogenizador por pressãoalta (Avestin). A emulsificação foi desempenhada em 62,05 a 275,79 MPa(9000 a 40.000 psi). O sistema resultante foi transferido em um Rotavap e osolvente foi rapidamente removido em pressão reduzida. A dispersão resul-tante era translúcida e o diâmetro médio típico das partículas resultantes erana faixa 50 a 220 nm (Z-average, Malvern Zetasizer). A dispersão foi tam-bém Iiofilizada durante 48 horas. O bolo resultante foi facilmente reconstituí-do à dispersão original por adição de água estéril ou salina. O tamanho departícula depois de reconstituição era o mesmo tal como antes de Iiofiliza-ção. Quando a suspensão líquida antes de liofilização foi armazenada, foisurpreendentemente constatado que, enquanto a suspensão estava estávelem cerca de 4 a 8 horas depois de preparação, em 24 horas, houve algumasedimentação indicando instabilidade. Similarmente, para a suspensão re-constituída Iiofilizada foi surpreendentemente constatado que, enquanto asuspensão estava estável em cerca de 4 a 8 horas depois de preparação,em 24 horas, houve alguma sedimentação indicando instabilidade. Esta ins-tabilidade em 24 horas não foi anteriormente observada pelos inventoresquando o período de monitoramento depois de preparação e reconstituiçãode formulação inicial foi tipicamente apenas 4 a 8 horas.

Exemplo 2

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas por sonicação.

25,9 Mg de docetaxel foram adicionados a um frasco de cintila-ção de 20 mL e dissolvidos em 0,3 mL de clorofórmio. 4,7 mL de HSA(3,0%, peso/volume) foram adicionados à mistura dissolvida em docetaxel.A composição que foi sonicada (Sonic Dismembrator, model 550, Fisher Sci-entific Company, Pittsburgh, PA 155275) em 50% de capacidade durante 1minuto. A mistura foi transferida em um evaporador giratório, e clorofórmio-etanol foi rapidamente removido em 45°C, em pressão reduzida. O diâmetrodas partículas de docetaxel resultantes era 250 a 300 nm (Z- average, Mal-vern Zetasizer). A suspensão precipitou-se em menos do que 1 dia.

Exemplo 3

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas por sonicação de óleo de soja teste como um estabili-zante.

18,0 Mg de docetaxel foram adicionados a um frasco de cintila-ção de 20 mL e dissolvidos em 0,1 mL de mistura de clorofórmio-etanol.0,05 mL de óleo de soja e 2,35 mL de HSA (5,0%, peso/volume) foram adi-cionados ao solvente orgânico acima. A amostra foi sonicada (Sonic Dis-membrator, model 550, Fisher Scientific Company, Pittsburgh, PA 155275)durante 2 minutos. A mistura é transferida em um evaporador giratório, eclorofórmio-etanol é rapidamente removido em 45°C, em pressão reduzida.

O diâmetro das partículas de docetaxel resultantes foi -270 nm (Z-average,Malvern Zetasizer). A suspensão precipitou-se em menos do que 1 dia.

Exemplo 4

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas de do-cetaxel preparadas por sonicação usando uma mistura de acetato de etila-acetato de n-butila. 22,7 mg de docetaxel foram adicionados a um frasco decintilação de 20 mL e dissolvidos em 1,0 mL de mistura de acetato de etila-acetato de n-butila. 2,4 mL de HSA (5,0%, peso/volume) foram adicionadosao docetaxel dissolvido em solvente orgânico. A amostra foi sonicada (SonicDismembrator, model 550, Fisher Scientific Company, Pittsburgh, PA 155275)em 50% de capacidade durante 1 minuto. A mistura foi transferida em um e-vaporador giratório, e acetato de etila e acetato de n-butila são removidos empressão reduzida. A composição precipitou-se dentro de uma hora.

Exemplo 5

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas através de homogeneização por pressão alta.

49,0 Mg de docetaxel foram dissolvidos em 0,56 mL de cloro-fórmio. A solução foi adicionada a 9,6 mL de HSA (5%, peso/volume). A mis-tura foi pré-homogeneizada para formar uma emulsão bruta, e em seguidatransferida em um homogenizador por pressão alta (Avestin). A emulsifica-ção foi desempenhada em 1.265 kg/cm2 a 1.406 kg/cm2. O sistema resultan-te foi transferido em um evaporador giratório, e clorofórmio e álcool det-butila foram removidos em pressão reduzida. O diâmetro das partículas dedocetaxel resultantes era 160 a 175 nrri (Z-average, Malvern Zetasizer).

Precipitação foi observada em < 1 dia. Em exame microscópico, os precipi-tados cristalinos foram vistos.

Exemplo 6

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas através de homogeneização por pressão alta usandolecitina.

55,3 Mg de docetaxel e 48,8 mg de lecitina de ovo foram dissol-vidos em 0,56 mL de mistura de álcool de t-butila estéril de clorofórmio. Asolução foi adicionada a 9,6 mL de HSA (5%, peso/volume). A mistura foipré-homogeneizada para formar uma emulsão bruta, e transferida em umhomogenizador por pressão alta (Avestin). A emulsificação foi desempenha-da em 1.265 kg/cm2 a 1.406 kg/cm2. O sistema resultante foi transferido emum evaporador giratório, e clorofórmio e álcool de t-butila foram removidosem pressão reduzida. O diâmetro das partículas de docetaxel resultantesera 190 a 220 nm (Z-average, Malvern Zetasizer). Precipitação foi observa-da em < 24 horas.Exemplo 7

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas através de homogeneização por pressão alta de ácidopolilaticoglicólico teste (PLGA). 56,3 mg de docetaxel e 40,8 mg de PLGA(50:50) foram dissolvidos em 0,56 mL de clorofórmio. A solução foi adicio-nada a 9,6 mL de HSA (5%, peso/volume). A mistura foi pré-homogeneizadapara formar uma emulsão bruta, e transferida em um homogenizador porpressão alta (Avestin). A emulsificação foi desempenhada em 1.265 kg/cm2a 1.406 kg/cm2. O sistema resultante foi transferido em um evaporador gira-tório, e clorofórmio e álcool de t-butila foram removidos em pressão reduzi-da. O diâmetro das partículas de docetaxel resultantes era 575 nm (Z-average, Malvern Zetasizer). Precipitação foi observada em < 24 horas.

Exemplo 8

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas através de homogeneização por pressão alta de ácidobenzóico de teste.

50,3 Mg de docetaxel e 3,0 mg de ácido benzóico foram dissol-vidos em 0,56 mL de mistura de clorofórmio e álcool de t-butila. A soluçãofoi adicionada a 10,0 mL de HSA (5%, peso/volume). A mistura foi pré-homogeneizada para formar uma emulsão bruta, e transferida em um ho-mogenizador por pressão alta (Avestin). A emulsificação foi desempenhadaem 1.265 kg/cm2 a 1.406 kg/cm2. A emulsão resultante foi transferida em umevaporador giratório, e clorofórmio e álcool de t-butila foram removidos empressão reduzida. O diâmetro das partículas de docetaxel resultantes era160 nm (Z-average, Malvern Zetasizer). A composição precipitou-se em < 24horas.

Exemplo 9

Este exemplo demonstra a instabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas através de homogeneização por pressão alta de co-lesterol de teste.

51,0 Mg de docetaxel e 16,5 mg de colesterol foram dissolvidosem 0,56 mL de mistura de clorofórmio e álcool de t-butila. A solução foi adi-cionada a 10,0 mL de HSA (5%, peso/volume). A mistura foi pré-homogeneizada para formar uma emulsão bruta, e transferida em um ho-mogenizador por pressão alta (Avestin). A emulsificação foi desempenhadaem 1.265 kg/cm2 a 1.406 kg/cm2. A emulsão resultante foi transferida em umevaporador giratório, e clorofórmio e álcool de t-butila foram removidos empressão reduzida. Precipitação ocorreu em < 24 horas.

Exemplo 10

Este exemplo demonstra a estabilidade de nanopartículas dedocetaxel preparadas através de homogeneização por pressão alta de citra-to de sódio de teste.

50,0 mg de docetaxel foram dissolvidos em 0,56 mL de misturade clorofórmio e álcool de t-butila (10,2: 1 (v/v)). A solução foi adicionada a9,6 mL de HSA (5%, peso/volume) contendo 100 mM (2,94% de pe-so/volume) de tricitrato de sódio. A mistura foi pré-homogeneizada para for-mar uma emulsão bruta, e transferida em um homogenizador por pressãoalta (Avestin). A emulsificação foi desempenhada em 1.265 kg/cm2 a 1.406kg/cm2 (18.000 - 20.000 psi). A emulsão resultante foi transferida em umevaporador giratório, e clorofórmio e álcool de t-butila foi removido em pres-são reduzida. O diâmetro das. partículas de docetaxel resultantes foi de 150a 225 nm (Z-average, Malvem Zetasizer). A formulação foi surpreendente-mente estável >24 horas sem precipitado observável.

Exemplo 11

Este exemplo demonstra a estabilidade de preparação de nano-partícula de docetaxel com citrato (3,9%, 133 mM) e cloreto de sódio(1,75%, 300 mM). A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% empeso), citrato de sódio (3,9% em peso) e cloreto de sódio (1,75% em peso)em água para injeção e agitada até que dissolveu-se. A fase orgânica foipreparada através de dissolução de docetaxel (7% em peso) em uma mistu-ra de solvente (6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitada atéque dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânica foi adicionada à fase aquosae misturada com um misturador rotoestator. O tamanho da batelada era 20ml. A emulsão bruta foi homogeneizada por pressão alta em 1.406 kg/cm2(20.000 psi). O clorofórmio e etanol na emulsão foram em seguida removi-dos usando um evaporador giratório em uma pressão reduzida. A suspen-são foi filtrada através de filtragem em série (1,2 μιτι, 0,8 pm, e 0,45 pm) eem seguida Iiofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida é homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de 165,6 nm. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5 pm. A suspensão foi armazenada em tanto 4°C quanto 25°C. Surpreen-dentemente, a suspensão estava estável até 3 dias em 4°C e > 1 dia em25°C. A suspensão não exibiu qualquer sedimentação ou precipitação, enão mudou a cor ou consistência. Além do mais, o produto Iiofilizado apare-ceu como uma torta sólida. A reconstituição da torta Iiofilizada empregou <5min. Depois de reconstituição, as partículas tinham um tamanho médio departícula de 164,6 nm. A suspensão reconstituída foi armazenada em 4°C esurpreendentemente permaneceu estável > 1 dia.

Exemplo 12

Este exemplo demonstra a estabilidade de preparação de nano-partícula de docetaxel com citrato (2,9%, 100 mM) e cloreto de sódio(1,75%, 300 mM). A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% empeso), citrato de sódio (2,9% em peso) e cloreto de sódio (1,75% em peso)em água para injeção e agitada até que dissolveu-se. A fase orgânica foipreparada através de dissolução de docetaxel (7% em peso) em uma mistu-ra de solvente (6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitada atéque dissolveu-se. A fase orgânica foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. A emulsão bruta foi homogeneizada porpressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000 psi). O clorofórmio e etanol na emul-são foram removidos usando um evaporador giratório em pressão reduzida.A suspensão foi filtrada através de filtragem em série (1,2pm, 0,8pm, e0,45pm) e Iiofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de 157,1 nm. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5 pm. A suspensão foi armazenada em tanto 4°C quanto 25°C. Surpreen-dentemente, a suspensão estava estável até 3 dias em 4°C e > 1 dia em25°C. A suspensão não exibiu qualquer sedimentação ou encremação, enão mudou a cor ou consistência.

O produto liòfilizado apareceu como uma torta sólida. A reconsti-tuição da torta Iiofilizada empregou < 5 min. Depois de reconstituição, aspartículas tinham um tamanho médio de partícula de 150,9 nm. A suspen-são reconstituída foi armazenada em 4°C e permaneceu estável > 1 dia.

Exemplo 13

Este exemplo demonstra a estabilidade de preparação de nano-partícula de docetaxel com citrato (3,9%, 133 mM).

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (3,9% em peso) em água para injeção e agitada até que dis-solveu-se. A fase orgânica foi preparada através de dissolução de docetaxel(5% em peso) em uma mistura de solvente (6% em volume) contendo cloro-fórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânicafoi adicionada à fase aquosa e misturada usando um misturador rotoresta-tor. O tamanho da batelada era 20 ml. A emulsão bruta foi homogeneizadapor pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000 psi). O clorofórmio e etanol naemulsão foram removidos usando um evaporador giratório em pressão re-duzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem em série (1,2 pm, 0,8μm, 0,45 pm e 0,22 pm) e em seguida liofilizada (Secador por Congelamen-to de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de 131 nm. A amostra foi tambémexaminada através de microscopia e a maior parte das partículas era < 0,5u.m. Surpreendentemente a suspensão de nanopartícula estava estável du-rante > 1 dia.Exemplo 14

Este exemplo demonstra a estabilidade de preparação de nano-partícula de docetaxel com citrato (11,7%, 400 mM).

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (11,7% em peso) e em água para injeção e agitada até quedissolveu-se. A fase orgânica foi preparada através de dissolução de doce-taxel (5% em peso) em uma mistura de solvente (6% em volume) contendoclorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase or-gânica foi adicionada à fase aquosa e misturada usando um misturador roto-restator. O tamanho da batelada era 20 ml. A emulsão bruta foi homogenei-zada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000 psi). O clorofórmio e etanolna emulsão foram em seguida removidos usando um evaporador giratórioem uma pressão reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem emsérie (1,2 μm, 0,8 μm, 0,45 μm e 0,22 μm) e em seguida liofilizada (Secadorpor Congelamento de Bandeja FTS). A suspensão líquida era homogênea eesbranquiçada. A análise de tamanho de partícula foi desempenhada usan-do um Malvern Zetasizer. As partículas tinham um tamanho médio de 143,5nm. A amostra foi também examinada através de microscopia e a maior par-te das partículas era < 0,5 μm. A suspensão foi armazenada em tanto 4°Cquanto 25°C. Surpreendentemente, a suspensão estava estável até 3 diasem 4°C e >1 dia em 25°C. A suspensão não exibiu qualquer sedimentaçãoou encremação, e não mudou a cor ou consistência.

O produto liofilizado apareceu como uma torta sólida. A reconsti-tuição da torta Iiofilizada empregou < 5 min. Depois de reconstituição, aspartículas tinham um tamanho médio de partícula de 151,8 nm. Surpreen-dentemente, a suspensão reconstituída foi armazenada em 4°C e permane-ceu estável > 1 dia.

Exemplo 15

Este exemplo demonstra a estabilidade de preparação de nano-partícula de docetaxel com citrato (7,7%, 200 mM).

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (7,7% em peso) e em água para injeção e agitada até quedissolveu-se. A fase orgânica foi preparada através de dissolução de doce-taxel (5% em peso) em uma mistura de solvente (6% em volume) contendoclorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase or-gânica foi adicionada à fase aquosa e misturada usando um misturador roto-restator. O tamanho da batelada era 20 ml. A emulsão bruta foi homogenei-zada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000 psi). O clorofórmio e etanolna emulsão foram removidos usando um evaporador giratório em pressãoreduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem em série (1,2 pm, 0,8μm, 0,45 μm e 0,22 μm) e em seguida Iiofilizada (Secador por Congelamen-to de Bandeja FTS).

A suspensão líquida é homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvem Zetasizer.As partículas possuem um tamanho médio de 226,4 run. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5 μm. A suspensão foi armazenada em tanto 4°C quanto 25°C. Surpreen-dentemente, a suspensão estava estável até 3 dias em 4°C e > 1 dia em25°C. A suspensão não exibiu qualquer sedimentação ou encremação, enão mudou a cor ou consistência.

O produto liofilizado apareceu como uma torta sólida. A reconsti-tuição da torta liofilizada empregou < 5 min. Depois de reconstituição, aspartículas tinham um tamanho médio de partícula de 211,4 nm. A suspen-são reconstituída foi armazenada em 4°C e permaneceu estável > 1 dia.

Exemplo 16

Este exemplo demonstra a estabilidade de preparação de nano-partícula de docetaxel com citrato/NaCl.

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (5,88%, 200 mM) e NaCI (1,75%, 300 mM) e em água parainjeção e agitada até que dissolveu-se. A fase orgânica foi preparada atra-vés de dissolução de docetaxel (5% em peso) em uma mistura de solvente(6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânica foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 20 ml. Aemulsão bruta foi homogeneizada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando um evaporador gira-tório em pressão reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem emsérie e em seguida liofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de < 200 nm. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5 u.m. A suspensão foi armazenada e surpreendentemente, a suspensãoestava estável sem precipitados ou sedimento durante > 1 dia.

O produto liofilizado apareceu como uma torta sólida. A reconsti-tuição da torta liofilizada empregou < 5min. A suspensão reconstituída foiarmazenada e surpreendentemente permaneceu estável > 1 dia.

Exemplo 17

Este exemplo demonstra a estabilidade de uma preparação denanopartícula de docetaxel com citrato/NaCI.

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (2,94%, 100 mM) e NaCI (2,9%, 500 mM) e em água parainjeção e agitada até que dissolveu-se. A fase orgânica foi preparada atra-vés de dissolução de docetaxel (5% em peso) em uma mistura de solvente(6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânica foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 20 ml. Aemulsão bruta foi homogeneizada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando um evaporador gira-tório em pressão reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem emsérie e em seguida liofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

O produto Iiofilizado apareceu como uma torta sólida. A reconsti-tuição da torta Iiofilizada empregou < 5 min. A suspensão reconstituída foiarmazenada e surpreendentemente permaneceu estável > 1 dia.

Exemplo 18

Este exemplo demonstra a estabilidade de uma preparação denanopartícula de docetaxel com citrato/NaCl.

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (2,94%, 100 mM) e NaCl (3,5%, 600 mM) e em água parainjeção e agitada até que dissolveu-se. A fase orgânica foi preparada atra-vés de dissolução de docetaxel (5% em peso) em uma mistura de solvente(6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânica foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 20 ml. Aemulsão bruta foi homogeneizada por pressão alta em 1.406" kg/cm2 (20.000psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando um evaporador gira-tório em pressão reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem emsérie e em seguida Iiofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de < 200 nm. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5 pm. A suspensão foi armazenada e surpreendentemente, a suspensãoestava estável sem precipitados ou sedimento durante > 1 dia.

O produto liofilizado apareceu como uma torta sólida. A reconsti-tuição da torta liofilizada empregou < 5 min. A suspensão reconstituída foiarmazenada e surpreendentemente permaneceu estável > 1 dia.

Exemplo 19

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (1,47%, 50 mM) e NaCl (2,9%, 500 mM) e em água parainjeção e agitada até que dissolveu-se. A fase orgânica foi preparada atra-vés de dissolução de docetaxel (5% em peso) em uma mistura de solvente(6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânica foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 20 ml. Aemulsão bruta foi homogeneizada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando um evaporador gira-tório em pressão reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem emsérie e em seguida liofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de < 200 nm. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5pm. A suspensão foi armazenada e surpreendentemente, a suspensãoestava estável sem precipitados ou sedimento durante > 1 dia.

Exemplo 20

Este exemplo demonstra o efeito de preparação de nanopartícu-la de docetaxel anidrosa versus hidratada com citrato/NaCl.

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (200 mM) e NaCl (300mM) e em água para injeção e agitadaaté que dissolveu-se. A fase orgânica para três diferentes formulações foipreparada através de dissolução de ou docetaxel anidroso, triidrato de doce-taxel ou hemi-hidrato de docetaxel (hidrato parcial) (5% em peso) em umamistura de solvente (6% em volume) contendo clorofórmio e etanol e agitadaaté que dissolveu-se. Lentamente, a fase orgânica foi adicionada à fase a-quosa e misturada usando um misturador rotorestator. A emulsão bruta foihomogeneizada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000 psi). Os solven-tes na emulsão foram removidos usando um evaporador giratório em pres-são reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem em série e emseguida liofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas possuem um tamanho médio de < 200 nm. As três suspen-sões foram armazenadas e surpreendentemente, a suspensão contendo odocetaxel anidroso foi a mais estável sem precipitado ou sedimento durante> 1 dia. Ambas as preparações de docetaxel hidratado mostraram precipita-do ou sedimento em < 1 dia. A mesma observação foi vista para a suspen-são liofilizada em reconstituição. Desta forma foi determinado que a formaanidrosa de docetaxel foi mais adequada para uma preparação de docetaxelde nanopartícula.Exemplo 20A

Este exemplo fornece uma comparação de docetaxel anidroso,triidrato de docetaxel e hemi-hidrato de docetaxel através de Calorimetria deVarredura Diferencial (DSC). Os três diferentes tipos de docetaxel foramsubmetidos a DSC usando técnicas padrão. AU mostraram uma endotermade fusão em cerca de 162 a 166°C. No entanto apenas os 2 materiais hidra-tados mostraram uma endoterma de desidratação de água entre cerca de74 a 80°C.

Exemplo 20B

Este exemplo fornece uma comparação de docetaxel anidroso,triidrato de docetaxel e hemi-hidrato de docetaxel através de Difração de Póde Raios X (XRD). Os três diferentes tipos de docetaxel foram submetidos aXRD usando técnicas padrão. Os três materiais mostraram totalmente umavariedade de picos agudos indicando cristalinidade. No entanto, o materialanidroso mostrou um espectro diferente quando comparado aos dois mate-riais hidratados. Em particular era um pico ocorrendo em 2-teta de 7-8 paraa amostra anidrosa que estava ausente do material hidratado. Isto indicouuma estrutura de cristal diferente para o docetaxel anidroso versus os doce-taxeis hidratados.

Exemplo 21

Este exemplo demonstra que o grau de hidratação afeta a solu-bilidade de docetaxel e fornece uma comparação da solubilidade de doceta-xel anidroso, triidrato de docetaxel e hemi-hidrato de docetaxel.

Para comparar se os diferentes tipos de materiais de docetaxeltinham perfis de solubilidade diferentes como um resultado de suas estrutu-ras diferentes, suas taxas de solubilidade foram comparadas no acetonitrilosolvente. Acetonitrilo foi adicionado a uma quantidade fixa de docetaxel dediferentes fornecedores para obter uma concentração de 5 mg/mL (baseanidrosa). A taxa na qual dissolução dos docetaxels diferentes ocorreu foiobservada. Foi observado que o docetaxels anidrosos (de 2 diferentes for-necedores) dissolveram completamente em menos do que 1 minuto. Emcontraste os materiais hidratados (triidrato e hidrato parcial de 2 diferentesfornecedores) não dissolveram facilmente e solvente adicional devia ser adi-cionado a uma concentração final de 2,5 mg/mL. Sob estas condições diluí-das adicionais, o tempo para dissolver foi entre 5 e 10 minutos para os ma·teriais hidratados. Uma observação similar foi feita quando usando o cloro-fórmio solvente. Desta forma, é surpreendentemente constatado que o graude hidratação ou natureza anidrosa pode substancialmente afetar a solubili-dade de docetaxel.

Exemplo 22

Este exemplo demonstra que o grau de hidratação de docetaxelafeta a estabilidade e fornece uma comparação das formulações de triidratode docetaxel, hemiidrato e docetaxel anidroso em Tween 80.

É bem conhecido que docetaxel é formulado com Tween 80como um solubilizante ou emulsificante para o produto comercial Taxotere.

Os diferentes docetaxels foram dissolvidos em Tween 80 em uma concen-tração de 40 mg/mL (em base anidrosa). 2 mL destas soluções foram ob-servadas quanto a estabilidade durante o tempo. Foi surpreendentementeconstatado que depois de algumas dias, um sedimento ou precipitado foiobservado para o docetaxel hidratado mas nenhum precipitado foi observa-do com o docetaxel anidroso. Desta forma, o docetaxel anidroso é preferidona formulação de Tween. Além disso ele pode ser útil para usar um Tween80 ou tensoativo equivalente que é anidroso ou muito baixo em conteúdo deágua quando a forma anidrosa de docetaxel pode absorver água para for-mar a forma hidratada que resultaria em precipitação.

Exemplo 23

Este exemplo demonstra a estabilidade de uma preparação denanopartícula de docetaxel com docetaxel anidroso e sem estabilizantesadicionados. A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso)a água para injeção. A fase orgânica foi preparada através de dissolução dedocetaxel anidroso (5% em peso) em uma mistura de solvente (6% em vo-lume) contendo clorofórmio e etanol e agitada até que dissolveu-se. Lenta-mente, a fase orgânica foi adicionada à fase aquosa e misturada usando ummisturador rotorestator. A emulsão bruta foi homogeneizada por pressãoalta em 1.406 kg/cm2 (20.000 psi). Os solventes na emulsão foram removi-dos usando um evaporador giratório em pressão reduzida. A suspensão foifiltrada através de filtragem em série e em seguida liofilizada (Secador porCongelamentodeBandejaFTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de < 200 u.m. A amostra foi tam-bém examinada através de microscopia e a maior parte das partículas era <0,5 μm. A suspensão foi armazenada e surpreendentemente, a suspensãoestava estável sem precipitados ou sedimento durante aproximadamente 1dia. Desta forma, na ausência de estabilizantes, Nab-docetaxel preparadocom docetaxel anidroso parece ser mais estável do que quando preparadocom uma forma hidratada de docetaxel para a qual a estabilidade é muitomenor do que 1 dia, tipicamente apenas algumas horas.

Exemplo 24

Este exemplo demonstra a preparação de preparado de nano-partícula de docetaxel anidroso com citrato/NaCl.

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (8,5% em peso)e citrato de sódio (200 mM) e NaCl (300 mM) e em água para injeção e agi-tada até que dissolveu-se. O orgânico foi preparado através de dissoluçãode docetaxel anidroso (133 mg/ml) em uma mistura de solvente contendoclorofórmio e etanol (1:1) e agitação até que dissolveu-se. Lentamente, afase orgânica (6% em volume) foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 200 ml. Aemulsão bruta foi homogeneizada por pressão alta em 1.406 kg/cm2 (20.000psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando um evaporador gira-tório em pressão reduzida. A suspensão foi filtrada através de filtragem emsérie e em seguida liofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de < 200 nm. A suspensão foi ar-mazenada e surpreendentemente, mostraram nenhum precipitado ou sedi-mento durante > 1 dia. A mesma observação foi vista para a suspensão liofi-lizada em reconstituição.

Exemplo 25

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (200 mM) e NaCI (300 mM) e em água para injeção e agita-da até que dissolveu-se. A fase orgânica foi preparada através de dissolu-ção de docetaxel anidroso (160 mg/ml) em uma mistura de solvente conten-do clorofórmio e etanol (1:1) e agitação até que dissolveu-se. Lentamente, afase orgânica (8% em volume) foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 200 ml. Aemulsão bruto foi submetida à homogeneização por pressão alta em 1.406kg/cm2 (20.000 psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando umevaporador giratório em pressão reduzida. A suspensão foi filtrada atravésde filtragem em série e em seguida Iiofilizada (Secador por Congelamentode Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de menos do que 200 nm. A sus-pensão foi armazenada e, surpreendentemente, mostraram nenhuma preci-pitação ou sedimentação para mais do que um dia. A mesma observação foivista para a suspensão liofilizada em reconstituição.

Exemplo 26

A fase aquosa foi preparada por adição de HSA (5% em peso) ecitrato de sódio (200 mM) e NaCI (300 mM) e em água para injeção e agita-da até que dissolveu-se. A fase orgânica foi preparada através de dissolu-ção de docetaxel anidroso (160 mg/ml) em uma mistura de solvente conten-do clorofórmio e etanol (1:1) e agitação até que dissolveu-se. Lentamente, afase orgânica (8% em volume) foi adicionada à fase aquosa e misturadausando um misturador rotorestator. O tamanho da batelada era 200 ml. Aemulsão bruta foi submetida a homogeneização por pressão alta em 1.406kg/cm2 (20.000 psi). Os solventes na emulsão foram removidos usando umevaporador giratório em pressão reduzida. Albumina adicional foi adicionadaà suspensão evaporada para aumentar a albumina: relação de fármaco a8:1 em peso. A suspensão foi filtrada através de filtragem em série e emseguida Iiofilizada (Secador por Congelamento de Bandeja FTS).

A suspensão líquida era homogênea e esbranquiçada. A análisede tamanho de partícula foi desempenhada usando um Malvern Zetasizer.As partículas tinham um tamanho médio de menos do que 200 nm. A sus-pensão foi armazenada e, surpreendentemente, não mostrou nenhum pre-cipitado ou sedimento durante mais do que um dia. A mesma observação foivista para suspensão Iiofilizada em reconstituição.

Exemplo 27

Este exemplo demonstra efeito de pH em estabilidade da sus-pensão de nanopartícula assim como em degradação química de docetaxel.

Formulações de docetaxel de nanopartícula foram preparadastais como descrito nos exemplos acima. O efeito de pH nestas formulaçõesfoi testado entre pH 4 e pH 9. Aumento de pH acima de pH 6 foi constatadoaumentar estabilidade física medida em termos de tamanho de nanopartícu-la e sedimentação da formulação enquanto ao mesmo tempo aumentando aquantidade de degradação de docetaxel a 7-epi docetaxel em temperaturaambiente. Uma faixa de pH ideal na qual tanto a estabilidade física quantoestabilidade química era aceitável foi desta forma constatada ser entre 6 a8,5. Uma faixa mais preferível de pH era 6,5 a 8 e uma faixa mais preferívelfoi constatada ser pH 7,25 a 7,75.Exemplo 28

Este exemplo compara a estabilidade de Nab-docetaxel prepa-rado com ou formas hidratadas de docetaxel ou docetaxel anidroso na pre-sença ou ausência de estabilizantes adequados.

A estabilidade destas preparações foi examinada visualmenteantes de liofilização e bem como em reconstituição das preparações Iiofiii-zadas. Além disso, a estabilidade de preparações Iiofilizadas (contendo es-tabilizantes) em reconstituição foi avaliada em diferente concentração dedocetaxel na suspensão reconstituída. Os resultados são apresentados nasTabelas 1 a 3 abaixo.

Tabela 1. Avaliação de estabilidade de suspensão de nanopartícula de Nab-docetaxel antes de liofilização

<table>table see original document page 76</column></row><table>

Tal como mostrado na Tabela 1, estabilidade de Λ/ab-docetaxelpreparado usando docetaxel anidroso foi significantemente melhor do queNab-docetaxel preparado usando formas hidratadas de docetaxel se os es-tabilizantes estavam presentes na formulação ou não. Adição de estabilizan-tes (200 mM citrato/300 mM NaCl) significantemente melhorou estabilidadede preparações de Nab-docetaxel contendo nenhum estabilizante.

Adição de estabilizantes melhorou estabilidade de preparaçõesde Nab-docetaxel feitas de triidrato de docetaxel.

Tabela 2. Reconstituição de estabilidade de pó Iiofilizado de A/ab-docetaxelcontendo estabilizante (200 mM de citrato/300 mM de NaCI) reconstituído a5 mg/mL de docetaxel em água para injeção

<table>table see original document page 77</column></row><table>

Código: 1 - Nenhuma sedimentação

2 - Leve sedimentação

3 - Mais sedimentação

4 - Sedimentação espessa

5 - Sedimentação completaTabela 3. Reconstituição de estabilidade de pó liofilizado de Nab-docetaxelcontendo estabilizante (200mM de citrato/300mM de NaCl) reconstituída a 1mg/mL de docetaxel em água para injeção.

<table>table see original document page 78</column></row><table>

Código: 1 - Nenhuma sedimentação

2 - Leve sedimentação

3 - Mais sedimentação

4 - Sedimentação espessa

5 - Sedimentação completa

Tal como mostrado nas Tabelas 2 e 3, estabilidade de Nab-docetaxel reconstituído contendo estabilizante é significantemente melhora-da em uma concentração elevada de 5 mg/ml de docetaxel versus uma con-centração inferior de cerca de 1 mg/ml de docetaxel. Estabilidade da formu-lação de Nab-docetaxel reconstituída contendo estabilizante preparado comdocetaxel anidroso é significantemente melhor do que Nab-docetaxel prepa-rado com triidrato de docetaxel.

Exemplo 29

Este exemplo demonstra os perfis de toxicidade de formulação dealbumina de nanopartícula de docetaxel {Nab-docetaxel) versus Taxotere.

Dose Tolerada Máxima (MTD) para Nab-docetaxel e Taxotere®(Tween 80- docetaxel) foram determinadas durante um estudo de escaladade dose em camundongos nus. Camundongos nus, tamanho de grupo de10 por grupo, foram tratados com aumento de dose de Taxotere (0 mg/kg, 7mg/kg, 15 mg/kg, 22 mg/kg, 33 mg/kg, e 50 mg/kg) usando uma programa-ção q4dx3. Camundongos nus, tamanho de grupo de 6 por grupo, foramtratados com aumento de dose de Nab-docetaxel (O mg/kg, 15 mg/kg, 22mg/kg, 33 mg/kg, 50 mg/kg, e 75 mg/kg) usando uma programação deq4dx3. Os animais foram pesados a cada outro dia. A perda de peso corpo-ral máxima foi plotada versus dose e ajustada usando uma equação de Hill.A MTD definida como perda de peso igual a 20% foi calculada usando osdados ajustados. A MTD foi 2,3 vezes maior para Nab-óocetaxel versus Ta-xotere (Tween 80 docetaxel). As MTDs foram 47,2 mg/kg e 20,6 mg/kg paraA/aí>docetaxel e Taxotere, respectivamente.

Exemplo 30

Este exemplo demonstra a eficácia antitumor da invenção doce-taxel de nanopartícula (Nab-docetaxel) com estabilizante versus Taxotere.

A eficácia de Λ/ab-docetaxel (preparado com 200mM de citrato e300mM de NaCI) foi comparada contra Taxotere em um modelo de tumor dexenoenxerto em camundongos nus portando tumor de cólon de HCT-116 hu-mano. 10 camundongos por grupo foram usados para o estudo. Taxotere foidosado em 15 mg/kg e Nab-docetaxel foi dosado em 22 mg/kg, ambas emuma programação de q4dx3. Nab-docetaxel (22 mg/kg) foi mais eficaz emsupressão de tumor do que Taxotere (15 mg/kg, MTD) com ρ < 0,0001. Alémdisso, Nab-Docetaxel exibiu maior índice terapêutico do que Taxotere quandoperda de peso máxima no grupo de Taxotere foi 20%, enquanto que paraNab-docetaxel foi cerca de 17%, a despeito de uma dose superior a 50%.

Exemplo 31

Este exemplo demonstra um estudo de infusão de Nab-docetaxel (200mM de citrato/300mM de NaCI).

Um estudo em ratos foi conduzido com infusão de 5 minutos deNab-docetaxel, com aumento de taxas de infusão de formulação de Nab-docetaxel contendo aproximadamente 200mM de citrato/300mM de NaCI.Uma infusão de 5 minutos em ratos pode ser considerada equivalente a in-fusão de 30 minutos em seres humanos.

Taxa de infusão segura máxima foi -0,5 ml/minuto. Isto é equi-valente a 0,23 mmol/kg/minuto ou 68 mg/kg/minuto de citrato para infusãode 5 minutos em ratos. Trasladada a dose humana, esta foi equivalente aaproximadamente 170 mg de docetaxel/m em uma infusão de 30 minutos.

Exemplo 32

Este exemplo demonstra a biocompatibilidade de sangue de 5mg/ml de Nab- docetaxel (200mM de citrato/300mM de NaCI).

Um estudo de hemólise in vitro em sangue de rato foi conduzidousando uma formulação de placebo (todos os componentes exceto doceta-xel) e a formulação de nab-docetaxel. O placebo não causaria hemólise aténa relação de sangue de rato:placebo mais alta de 1 : 1. A formulação deNab-docetaxel interferiu com a leitura de absorção devido à difusão de luzcaracterística por nanopartículas, mas quando fundamentos/controles apro-priados foram desempenhados, nenhuma hemólise foi detectada na relaçãode sangue de rato: Nab-docetaxel mais alta de 1 : 1. Isto demonstra queNab-docetaxel com estabilizante tal como indicado é compatível com san-gue de rato.

Exemplo 33

Este exemplo fornece um estudo de escalada de dose múltiplapiloto em ratos. Todas as formulações de Nab-docetaxel descritas aqui con-têm 200 mM de citrato e 300 mM de NaCl.

Para comparar a segurança da formulação de Nab-docetaxelcom a formulação de Taxotere, ratos foram dosados com ou docetaxel deTween 80 (mesma formulação como Taxotere) ou Nab-docetaxel em 5,0,10,0, 15,0, 30,0, e 50 mg/kg usando uma infusão de 10 minutos por meio decateteres de jugular de demora nos dias 0, 4, e 8 para um total de três tra-tamentos. Salina (1 ml/kg/minuto) foi usada como um controle.

Cada animal foi observado e pesado diariamente durante dias 0a 25. O peso corporal foi registrado diariamente para cada animal tratado.Sinais de sofrimento clínico foram registrados diariamente. Sangue foi cole-tado nos dias 13, 16, e dia 25 em tubos tratados por EDTA e submetidos aanálise diferencial. Necropsia foi conduzida no dia 25.

O resultado do estudo é mostrado na Tabela 4. Tal como mos-trado na tabela, animais em todos os grupos de dose toleraram o primeirotratamento sem toxicidades relacionadas à infusão ou aguda até na maisalta dose de 50 mg/kg. No entanto, apenas os animais no nível de dose infe-rior de 5 mg/kg e a salina de controle sobreviveram até o término do experi-mento (todos os três tratamentos). Todos os animais recebendo doses ele-vadas, morreram ou entre a segunda e terceira doses ou seguinte a terceiradose.

Tabela 4: Perda de peso e Mortalidade em estudo de escala de dose

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Perda de peso dos animais tratados é mostrada na Figura 1.Comparação de neutropenia em 5 mg/kg de dose de docetaxel para Nab-docetaxel e Tween 80-docetaxel é mostrado na Figura 2. Perda de peso pa-ra o grupo sobrevivente de 5 mg/kg de A/a/>docetaxel foi significantementemenor do que aquela do grupo de 5 mg/kg de Tween-docetaxel (p=0,02+,ANOVA). Isto foi paralelo por neuropenia severa significantemente elevadapara Tween-docetaxel (5 mg/kg) versus Nab-docetaxel (5 mg/kg), ρΟ,ΟΟΟΙ,ANOVA, Figura 2) no dia 13. Necropsia no término do experimento (dia 25)nos grupos de 5 mg/kg sobreviventes revelou anormalidades em 2/3 dosanimais no grupo de Tween-docetaxel (um caso de acúmulo de fluido Ieitosona cavidade toráxica e um caso de aderência de baço anormal à paredeabdominal, estômago, e pâncreas). Animais de A/afxJocetaxel (5 mg/kg) esalina estavam normais.

Este estudo piloto mostrou significante melhora em segurançapara Nab- docetaxel em termos de perda de peso corporal total. Neutrope-nia era significantemente elevada para Tween-docetaxel.

Exemplo 34

Este exemplo demonstra a cinética sangüínea de Nab-docetaxel. Todas as formulações de Nab- docetaxel descritas aqui contêm200 mM de citrato e 300 de mMNaCI. Os ratos foram divididos em seis gru-pos (3 por grupo). No dia 1, cada animal foi pesado e administrado uma do-se intravenosa única do artigo apropriado mostrado abaixo:

Grupo A: Taxotere, 10 mg/kgGrupo B: Taxotere, 20 mg/kgGrupo C: Taxotere, 30 mg/kgGrupo D: Λ/ab-docetaxel, 10 mg/kgGrupo E: Nab-docetaxel, 20 mg/kgGrupo F : Nab-docetaxel, 30 mg/kg

Os artigos de teste foram administrados durante um período deinfusão de 10 +/- 1 minuto. Amostras de sangue (200 μΙ_) foram coletadasda veia da cauda de cada rato nos seguintes intervalos: antes da infusão(linha de base); durante infusão (5 minutos em infusão, t = -5 minutos); e notérmino da infusão (t = 0). O sangue foi também coletado nos seguintes pon-tos do tempo depois de término da infusão: 5, 10, e 20 minutos; 40 + 3 mi-nutos; duas horas + 5 minutos; 3 horas + 10 minutos; 4 horas + 10 minutos;8 horas + 10 minutos; 24 + uma hora; 48 + uma hora; e 120 + 2 horas.Amostras de sangue foram coletadas em tubos de topo verde (heparina desódio) e processadas para coleta de plasma através de centrifugação emaproximadamente 2.000 rpm durante aproximadamente 10 minutos. Amos-tras de plasma foram armazenadas congeladas até serem expedidas emgelo seco para ALTA Analytical (El Dorado Hills, CA) para análise de LC/MSde níveis de docetaxel.

Os resultados dos experimentos são mostrados na Figura 3 eTabela 5. Não houveram nenhuma diferenças significantes entre os perfisde PK de Nab-docetaxel versus Taxotere em 10 mg/kg. No entanto, as dife-renças entre Nab-docetaxel e Taxotere foram significantes em 20 mg/kgcom Cmax e AUC, 53% e 70% de Taxotere respectivamente e Vz e Vss fo-ram 177% e 243% de Taxotere respectivamente. Em 30 mg/kg, de novo asdiferenças foram significantes com Cmax e AUC para nab-docetaxel 46% e47% de Taxotere respectivamente e Vz e Vss foram 225% e 375% de Taxo-tere respectivamente.

Tabela 5: Parâmetros de PK para Nab-docetaxel e Taxotere

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Quando AUC foi plotada versus dose, a não linearidade paraTaxotere era claramente evidente, com AUC de Nab-docetaxel sendo linearcom respeito a dose (Figura 3D). Isto pode ser explicado pela propriedadede formação de micela de Tween 80, a solubilidade alta de docetaxel nonúcleo de micela hidrofóbica e correspondente seqüestro de docetaxel noplasma (6). Além do mais, a rápida distribuição de tecido para Nab-docetaxel pode também ser explicada por utilização da transcitose mediadapor albumina/caveolae por meio de células endoteliais, um processoanteriormente descrito para Abraxano (Nab-paclitaxel).

O dado de PK sugere que Tween 80 em Taxotere exibiu se-qüestro de docetaxel em plasma similar àquele visto com Cremophor EL nocaso de Taxol. Isto resultou em Cmax e AUC elevados e volumes inferioresde distribuição para Taxotere do que para Λ/aò-docetaxel. O PK de Nab-docetaxel é linear enquanto que para Tween 80-docetaxel (Taxotere) é nãolinear com respeito a dose. As dosagens descritas aqui, isto é, 10 mg/kg, 20mg/kg, e 30 mg/kg, são equivalentes a uma dosagem humana de cerca de60 mg/m2, cerca de 120 mg/m2, e cerca de 180 mg/m2. Tipicamente, a faixalinear de PK do Nab-docetaxel é cerca de 10 a 180 mg/m2.Exemplo 35

Este exemplo demonstra a inibição de interação de fármaco-albumina por tensoativos tais como Tween 80. O experimento foi feito usan-do um paclitaxel rotulado por fluorescente (FIutax) como um substituto parapaclitaxel/docetaxel. Flutax foi mostrado possuir ligando similar a albuminacomo paclitaxel.

HSA foi imobilizada em microplaca plástica de 96 cavidades.A albumina imobilizada foi reagida durante uma hora com concentraçãoconstante de Flutax e aumento de concentração de solventes (CremophorELVEtOH1 Tween 80, e TPGS). Os Iigantes não ligados foram lavados comtampão. Ligantes ligados foram quantificados usando um fluorômetro.O IC50 foi determinado usando uma equação de desintegração exponencial.

Os resultados do experimento foram mostrados na Figura 4. Talcomo mostrado na Figura 4, interação de albumina-paclitaxel foi inibida porsolvente comumente usado na formulação de fármaco insolúvel em água talcomo Cremophor EL/EtOH, Tween 80, e TPGS (IC50 de 0,009%, 0,003%, e0,008%, respectivamente). Inibição completa ocorreu em 0,02% ou 0,2 μΙ deTween 80/ml. Isto é clinicamente relevante quando pacientes tratados porTaxotere exibiram 0,07 a 0,41 μΙ de Tween 80/ml de sangue no término deinfusão de fármaco.

Este experimento demonstra que Tween 80 na formulação deTaxotere pode inibir ligação de docetaxel a albumina e prevenir sua transci-tose endotelial por meio do mecanismo gp60/caveolar. Os dados de PK nosestudos acima também sustentam esta observação.

Exemplo 36

Este exemplo fornece avaliação de atividade antitumor de Nab-docetaxel contra xenoenxerto de carcinoma de cólon de H29 em camun-dongos nus atímicos. Os camundongos foram divididos no grupo de controlee no grupo de Nab-docetaxel (N = 4 camundongos por grupo, cada com tu-mores bilaterais). Todas as formulações de Nab-docetaxel descritas aquicontêm 200 mM de citrato e 300 mM de NaCl.

Resumidamente, tumores de H29 foram implantados subcuta-neamente em camundongos nus atímicos, deixados desenvolver a 100 mm3e em seguida tratados com ou o controle (nenhum fármaco) ou Nab- doce-taxel (15 mg/kg, q4dx3, bolo iv). Avaliações de tamanho de tumor e pesocorporal foram obtidas três vezes semanalmente e plotadas na Figura 5.Tal como mostrado na Figura 5, houve inibição de significantede tumor de HT29 in vivo, p<0,0001 versus controle, ANOVA. Na dose de 15mg/kg de Λ/ab-docetaxel, perda de peso média entre 10 a 20% sugerindoque esta dose pode estar perto da MTD para Nab- docetaxel. A MTD paraTaxotere foi relatada ser 15 mg/kg nesta programação.

Exemplo 37

Este exemplo compara a atividade antitumor de Nab-docetaxel eTaxotere usando o xenoenxerto de carcinoma de cólon de HCTI 16 em ca-mundongos nus atímicos com uma dose superior a 50% de Nab-docetaxelquando comparado a Taxotere. Os camundongos foram divididos no grupode controle, no grupo de Nab-docetaxel, e no grupo de Taxotere (N = 10camundongos por grupo). Todas as formulações de Λ/ab-docetaxel descritasaqui contêm 200 mM de citrato e 300 mM de NaCI.

Resumidamente, atividade antitumor de Nab-docetaxel e Taxo-tere foram comparadas em doses de 22 mg/kg de q4x3 e 15 mg/kg de q4x3,respectivamente no xenoenxerto de carcinoma de cólon de HCTI 16. Os re-sultados dos experimentos são mostrados na Figura 6.

Tal como mostrado na Figura 6, tanto Nab-docetaxel quanto Ta-xotere mostraram inibição de tumor com respeito ao controle. Tal comomostrado abaixo, inibição de tumor foi melhorada com Λ/ab-docetaxel versus

Taxotere (p=0,03, ANOVA) e perda de peso foi um pouco inferior mas nãoestatisticamente significante (p=ns, ANOVA) entre os dois grupos.

Neste estudo piloto, a atividade antitumor de Λ/aò-docetaxel foisuperior àquela de Taxotere. Os camundongos toleraram dose superior a50% de docetaxel para Nab-docetaxel com perda de peso corporal total umpouco inferior comparado a Taxotere.

Exemplo 38

Este exemplo compara a toxicidade de preparação de Nab-docetaxel com estabilizantes (citrato/NaCI) versus Taxotere (Tween-docetaxel) em ratos dado uma dose única de cada preparação.

Ratos Sprague-Dawley machos (160 a 180 g, n=3/grupo) foraminfundidos com Taxotere, ou tempo de infusão de Nab-docetaxel (citrato/NaCI)foi 10 minutos e os seguintes níveis de dose de docetaxel foram usados: 25,50, 75, 100, e 125 mg/kg. Os animais foram pesados e monitorados diaria-mente quanto a sinais de toxicidade/mortalidade. Mortalidade em porcenta-gem (%) em 7 dias seguinte ao tratamento foi mostrada na Tabela 6.

Tabela 6. Mortalidade em porcentagem em ratos tratados por Taxotere eNab-docetaxel.

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Tal como mostrado na Tabela 6, a formulação de Nab-docetaxelfoi significantemente menos tóxico do que Taxotere (Tween-docetaxel). Esteefeito foi particularmente pronunciado em doses de 25 e 50 mg/kg. O LD50foi calculado ser 63 mg/kg para Nab-6ocetaxel versus aproximadamente12,5 mg/kg para Tween-docetaxel.

Exemplo 39

Este exemplo mostra a eficácia de Nab-docetaxel no tratamentode câncer de próstata em um modelo de tumor de xenoenxerto de próstatade PC3.

Tumor de PC3 foi implantado subcutaneamente em camundongosnus atímicos, deixados desenvolver a 100 mm3 e em seguida tratados q4 χ 3,i.v. com ou a salina ou Λ/afr-docetaxel (10, 15, 20, ou 30 mg/kg) ou Tween-docetaxel (10 mg/kg). Seis camundongos em cada grupo foram avaliados.

Os resultados do estudo são mostrados na Figura 7. Todos osseis camundongos tratados por Tween-docetaxel morreram durante o cursodo estudo. Por contraste, Nab-docetaxel foi bem tolerado em todos os níveisde dose. Houve apenas uma morte em 15 mg/kg, e nenhuma foi observadanos níveis de dose elevados de 20 mg/kg e 30 mg/kg. Supressão de tumorfoi observada em todos os níveis de dose de Nab-docetaxel. Em particular,em dose de 30 mg/kg, houveram seis fora das seis regressões completas.

Ainda que a invenção antecedente fosse descrita em algum deta-lhe a título de ilustração e exemplo para propósitos de claridade de entendi-mento, é aparente àqueles versados na técnica que certas mudanças e modi-ficações menores serão praticadas. Por esse motivo, a descrição e exemplosnão devem ser interpretados como Iimitante do escopo da invenção.

Claims

1. Composição caracterizada pelo fato de que compreende do-cetaxel, em que o docetaxel usado para a preparação da composição estáem uma forma anidra, e em que a composição é uma composição farmacêu-tica.

2. Composição caracterizada pelo fato de que compreende do-cetaxel, em que pelo menos algum do docetaxel na composição está emuma forma anidra, e em que a composição é uma composição farmacêutica.

3. Composição de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracte-rizada pelo fato de que compreende ainda um agente de estabilização.

4. Composição caracterizada pelo fato de que compreende do-cetaxel e um agente de estabilização, em que a estabilidade da composiçãoé realçada quando comparada àquela de uma composição sem o agente deestabilização.

5. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 2 a 4, caracterizada pelo fato de que o docetaxel usado para a prepa-ração da composição está em uma forma anidra.

6. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um polímerobiocompatível.

7. Composição de acordo com a reivindicação 6, caracterizadapelo fato de que o polímero biocompatível é uma proteína veículo.

8. Composição de acordo com a reivindicação 7, caracterizadapelo fato de que a proteína veículo é albumina.

9. Composição de acordo com a reivindicação 8, caracterizadapelo fato de que a albumina é albumina sérica humana.

10. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 9, caracterizada pelo fato de que compreende nanopartículas dedocetaxel.

11. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 6 a 10, caracterizada pelo fato de que compreende nanopartículascompreendendo docetaxel revestido com um polímero biocompatível.

12. Composição de acordo com a reivindicação 10 ou 11, carac-terizada pelo fato de que as nanopartículas possuem um tamanho médio deaproximadamente cerca de 200 nm.

13. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 8 a 12, caracterizada pelo fato de que a relação em peso de albuminapara docetaxel na composição é de cerca de 18:1 ou menos.

14. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um tensoativo.

15. Composição de acordo com a reivindicação 14, caracteriza-da pelo fato de que o tensoativo é Tween 80.

16. Composição de acordo com a reivindicação 14 ou 15, carac-terizada pelo fato de que o tensoativo é anidro.

17. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 3 a 16, caracterizada pelo fato de que o agente de estabilização é dife-rente de deferoxamina.

18. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 3 a 17, caracterizada pelo fato de que o agente de estabilização é umagente de quelação.

19. Composição de acordo com a reivindicação 18, caracteriza-da pelo fato de que o agente de quelação é qualquer um de citrato, edetato,ácido málico, pentetato, trometamina, derivados dos mesmos, e misturasdos mesmos.

20. Composição de acordo com a reivindicação 19, caracteriza-da pelo fato de que o agente de estabilização é citrato.

21. Composição de acordo com a reivindicação 20, caracteriza-da pelo fato de que citrato é citrato de sódio.

22. Composição de acordo com a reivindicação 20 ou 21, carac-terizada pelo fato de que compreende ainda cloreto de sódio.

23. Composição de acordo com a reivindicação 22, caracteriza-da pelo fato de que compreende cerca de 200 mM de citrato de sódio e cer-ca de 300 mM de cloreto de sódio.

24. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 3 a 16, caracterizada pelo fato de que o agente de estabilização é piro-fosfato de sódio ou gliconato de sódio.

25. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 24, caracterizada pelo fato de que é uma suspensão líquida.

26. Composição de acordo com a reivindicação 25, caracteriza-da pelo fato de que é uma suspensão liquida de docetaxel em uma concen-tração de pelo menos cerca de 1 mg/ml.

27. Composição de acordo com a reivindicação 25, caracteriza-da pelo fato de que é uma suspensão líquida de docetaxel em uma concen-tração de pelo menos cerca de 15 mg/ml.

28. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 24, caracterizada pelo fato de que é uma composição seca que po-de ser reconstituída a uma suspensão líquida com pelo menos cerca de 1mg/ml de docetaxel.

29. Composição de acordo com a reivindicação 28, caracteriza-da pelo fato de que é uma composição seca que pode ser reconstituída auma suspensão líquida com pelo menos cerca de 15 mg/ml de docetaxel.

30. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 24, 28 e 29, caracterizada pelo fato de que a referida composiçãoseca é uma composição liofilizada.

31. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 30, caracterizada pelo fato de que é fisicamente estável e é isentade evidências de precipitação ou sedimentação por pelo menos cerca de 8horas após a reconstituição ou re-hidratação.

32. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 31, caracterizada pelo fato de que o pH da composição é de no mí-nimo 7.

33. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 32, caracterizada pelo fato de que é uma composição farmacêutica.

34. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 33, caracterizada pelo fato de que é estéril.

35. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 34, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um açúcar.

36. Composição de acordo com a reivindicação 35, caracteriza-da pelo fato de que o açúcar é sacarose.

37. Composição de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 36, caracterizada pelo fato de que é adequada para administraçãoparenteral.

38. Frasco selado caracterizado pelo fato de que compreendeuma composição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 37.

39. Kit caracterizado pelo fato de que compreende uma compo-sição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 38, e que com-preende ainda instruções para uso da composição para tratar câncer.

40. Método de preparar uma composição compreendendo doce-taxel e um polímero biocompatível, caracterizado pelo fato de que o compre-ende combinar docetaxel anidro com um polímero biocompatível.

41. Método de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pe-lo fato de que compreende:-1) dissolver docetaxel anidro em um solvente orgânico;-2) adicionar a solução de docetaxel a uma solução aquosa quecompreende o polímero biocompatível; e-3) submeter a mistura da solução de docetaxel e solução aquosacompreendendo o polímero biocompatível a homogeneização por alta pres-são.

42. Método de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pe-lo fato de que compreende ainda remover o solvente orgânico da mistura porevaporação.

43. Método de preparar uma composição compreendendo doce-taxel e um tensoativo, caracterizado pelo fato de que compreende combinardocetaxel anidro com um tensoativo.

44. Método de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pe-lo fato de que o tensoativo é Tween 80.

45. Método de acordo com a reivindicação 43 ou 44, caracteri-zado pelo fato de que o tensoativo é anidro.

46. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 40a 45, caracterizado pelo fato de que compreende ainda adicionar um agentede estabilização à composição.

47. Método de estabilização de um agente farmacêutico pobre-mente solúvel em água em uma composição, caracterizado pelo fato de quecompreende combinar a composição compreendendo um agente farmacêu-tico pobremente solúvel em água com um agente de estabilização, em que acomposição resultante é estável sob a mesma condição sob a qual a com-posição é instável antes da adição do agente de estabilização.

48. Método de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pe-lo fato de que compreende ainda a identificação e seleção de uma composi-ção que é instável sob uma ou mais condições.

49. Método de acordo com a reivindicação 47 ou 48, caracteri-zado pelo fato de que a composição compreende nanopartículas que com-preendem o agente farmacêutico pobremente insolúvel em água.

50. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 47a 49, caracterizado pelo fato de que o agente pobremente insolúvel em águaé docetaxel.

51. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 47a 50, caracterizado pelo fato de que a composição compreende ainda umpolímero biocompatível.

52. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 40a 42 e 51, caracterizado pelo fato de que o polímero biocompatível é umaproteína de veículo.

53. Método de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pe-lo fato de que a proteína de veículo é albumina.

54. Método de acordo com a reivindicação 53, caracterizado pe-lo fato de que a albumina é albumina sérica.

55. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 46a 54, caracterizado pelo fato de que o agente de estabilização é diferente dedefermoxamina.

56. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 46a 55, caracterizado pelo fato de que o agente de estabilização é um agentede quelação.

57. Método de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pe-lo fato de que o agente de estabilização é qualquer um de citrato, edetato,ácido málico, pentetato, trometamina, derivados dos mesmos, e misturasdos mesmos.

58. Método de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pe-lo fato de que o agente de estabilização é citrato.

59. Método de acordo com a reivindicação 58, caracterizado pe-lo fato de que o citrato é citrato de sódio.

60. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 57a 59, caracterizado pelo fato de que composição compreende ainda cloretode sódio.

61. Método de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pe-lo fato de que composição compreende cerca de 200 mM de citrato de sódioe cerca de 300 mM de cloreto de sódio.

62. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 46a 55, caracterizado pelo fato de que o agente de estabilização é pirofosfatode sódio ou gliconato de sódio.

63. Uso de uma composição como definida em qualquer umadas reivindicações 1 a 37, caracterizado pelo fato de ser para a fabricaçãode um medicamento para o tratamento de câncer.

64. Uso de acordo com a reivindicação 63, caracterizado pelofato de que o câncer é qualquer um de câncer de próstata, câncer de cólon,câncer de mama, câncer de cabeça e pescoço, câncer pancreático, câncerde pulmão, e câncer ovariano.