BRPI0622100A2

BRPI0622100A2 - hidroxamatos como inibidores de desacetilase de histona

Info

Publication number: BRPI0622100A2
Application number: BRPI0622100-9A
Authority: BR
Inventors: David Festus Charles Moffat; Francesca Ann Day; Sanjay Ratilal Patel; Andrew James Belfield; Alistair David Graham Donald; Alan Hornsby Davidson; Alan Hastings Drummond
Original assignee: Chroma Therapeutics Ltd
Priority date: 2006-10-30
Filing date: 2006-10-30
Publication date: 2011-12-27
Also published as: EP2077999B1; ES2509342T3; CN101553475A; CN101553475B; CA2668070A1; WO2008053131A1; EA200900617A1; IL198263A0; JP2010508255A; EA017198B1; AU2006350475A1; US8962825B2; US20100317678A1; MX2009004279A; KR20090087013A; EP2077999A1; JP5043120B2

Abstract

HIDROXAMATOS COMO INIBIDORES DE DESACETILASE DE HISTONA. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula (I) e aos sais, N-óxidos, hidratos e solvatos dos mesmos, os quais são inibidores de desacetilase de histona e são úteis no tratamento de doenças proliferativas das células, incluindo cânceres: em que Q, V e W representam independentemente -N= ou C=; B é um radical bivalente selecionado entre (B1), (B2), (B3), (B4), (B5) e (B6) em que a ligação marcada com * é ligada ao anel que contém Q, V e W através do -[Ligante1]-e a ligação marcada com ** é ligada a A atravpes do -[Ligante2]-; A é um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico mono, bi ou tricíclico opcionalmente substituído; o -]Ligante1]- e o -[Ligante2]- representam independentemente uma ligação ou uma radical bivalente do ligante; e R é (a) um radical da fórmula R~ 1~R~ 2~CNHN-Y-L^ 1^-X^ 1^-(CH~ 2~)~ z~- ou (b) um radical da fórmula R-L^ 1-^Y^ 1^- (CH~ 2~)~ z~-.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "HIDROXA- MATOS COMO INIBIDORES DE DESACETILASE DE HISTONA".

A presente invenção refere-se a compostos que inibem ele- mentos da família de enzimas da desacetilase de histona e à sua utilização no tratamento de doenças proliferativas das células, incluindo cânceres, do- enças de poliglutamina, por exemplo, mal de Huntington, doenças neurode- generativas, por exemplo, mal de Alzheimer, doenças autoimunes, por e- xemplo, artrite reumatóide e rejeição ao transplante de órgãos, diabetes, dis- túrbios hematológicos, doença inflamatória, doença cardiovascular, ateros- clerose e as seqüelas inflamatórias de infecção.

Fundamentos da Invenção

Em células eucarióticas, o DNA é acondicionado com histonas, para a formação da cromatina. Cerca de 150 pares de bases de DNA são envolvidos duas vezes em torno de um octâmero de histonas (duas histonas que são 2A, 2B, 3 e 4) para a formação de um nucleossomo, a unidade bá- sica da cromatina. A estrutura requerida da cromatina precisa ser modificada a fim de permitir a transcrição dos genes associados. A regulação transcri- cional é essencial à diferenciação, à proliferação e à apoptose e, portanto, é intensamente controlada. O controle das mudanças na estrutura da cromati- na (e desse modo da transcrição) é mediado por modificações covalentes às histonas, de maneira mais marcante das caudas do N-terminal. As modifi- cações covalentes (por exemplo, metilação, acetilação, fosforilação e ubiqui- tinação) das cadeias laterais de aminoácidos são mediadas enzimaticamen- te (uma revisão das modificações covalentes das histonas e seu papel na regulação transcricional pode ser encontrada em Berger SL 2001 Oncogene 20, 3007-3013; vide Grunstein M 1997 Nature 389, 349-352; Wolffe AP 1996 Science 272, 371-372; e Wade PA et al 1997 Trends Biochem Sci 22, 128- 132 para revisões de acetilação e transcrição de histona).

A acetilação das histonas é associada com as áreas de croma- tina que são transcricionalmente ativas, visto que os nucleossomos com bai- xos níveis de acetilação são, tipicamente, transcricionalmente silenciosos. O status da acetilação das histonas é controlado por duas classes de enzi- mas com atividades opostas; as acetil transferases de histona (HATs) e as desacetilases de histona (HDACs). Em células transformadas, acredita-se que a expressão inadequada de HDACs resulta no silenciamento de genes supressores de tumor (para uma revisão dos papéis potenciais de HDACs na tumorigênese, vide Gray SG e Teh BT 2001 Curr Mol Med 1, 401-429). Os inibidores de enzimas de HDAC foram descritos na literatura, e foi mos- trado que eles induzem a reativação transcricional de determinados genes, tendo por resultado a inibição da proliferação de células de câncer, a indu- ção da apoptose e a inibição do crescimento de tumor em animais (para re- visão, vide Kelly WK et al 2002 Expert Opin Investig Drugs 11, 1695-1713). Tais descobertas sugerem que os inibidores de HDAC têm um potencial te- rapêutico no tratamento de doenças proliferativas tais como o câncer (Kra- mer OH et al 2001 Trends Endocrinol 12, 294-300, Vigushin DM e Coombes RC 2002 Anticancer Drugs 13,1-13).

Além disso, outros propuseram que a atividade de HDAC ou a acetilação de histona aberrante está implicada nas seguintes doenças e dis- túrbios: doença da poliglutamina, por exemplo, mal de Huntington (Hughes RE 2002 Curr Biol 12, R141-R143; McCampbeII A et al. 2001 Proc Soc Natl Acad Sci 98, 15179-15184; Hocklv E et al. 2003 Proc Soc Natl Acad Sci 100, 2041-2046), outras doenças neurodegenerativas, por exemplo, mal de Al- zheimer (Hempen B e Brion JP 1996, J Neuropathol Exp Neurol 55, 964- 972), doença autoimune e rejeição à transplante de órgãos (Skov S et al. 2003 Blood 101, 14 30-1438; Mishra N et al. 2003 J Clin Invest 111, 539- 552), diabetes (Mosley Al e Ozcan S 2003 J Biol Chem 278, 19660-19666) e complicações diabéticas, infecção (incluindo a infecção por protozoários (Darkin-Rattray, SJ et al 1996 Proc Soc Natl Acad Sci 93, 13143-13147)) e distúrbios hematológicos incluindo a talassemia (Witt O et al 2003 Blood 101, 2001-2007). As observações contidas nestes manuscritos sugerem que a inibição de HDAC deve ter o benefício terapêutico nestas e em outras doen- ças relacionadas.

Muitos tipos de compostos inibidores de HDAC foram sugeri- dos e diversos de tais compostos estão sendo atualmente avaliados clinica- mente para o tratamento de cânceres. Por exemplo, as seguintes publica- ções de patente descrevem tais compostos:

Patente U.S. n° 5.369.108 e Pedido de Patente WO 01/18171

Patente U.S. n°. 4.254.220

Pedido de Patente WO 01/70675 Pedido de Patente WO 01/38322 Pedido de Patente WO 02/30879 Pedido de Patente WO 02/26703 Pedido de Patente WO 02/069947 Pedido de Patente WO 02/26696 Pedido de Patente WO 03/082288 Pedido de Patente WO 02/22577 Pedido de Patente WO 03/075929 Pedido de Patente WO 03/076395 Pedido de Patente WO 03/076400 Pedido de Patente WO 03/076401 Pedido de Patente WO 03/076421 Pedido de Patente WO 03/076430 Pedido de Patente WO 03/076422 Pedido de Patente WO 03/082288 Pedido de Patente WO 03/087057 Pedido de Patente WO 03/092686 Pedido de Patente WO 03/066579 Pedido de Patente WO 03/011851 Pedido de Patente WO 04/013130 Pedido de Patente WO 04/110989 Pedido de Patente WO 04/092115 Pedido de Patente WO 04/0224991 Pedido de Patente WO 05/014588 Pedido de Patente WO 05/018578 Pedido de Patente WO 05/019174 Pedido de Patente WO 05/004861

Pedido de Patente WO 05/007091

Pedido de Patente WO 05/030704

Pedido de Patente WO 05/013958

Pedido de Patente WO 05/028447

Pedido de Patente WO 05/02690

Muitos dos inibidores de HDAC conhecidos no estado da técni- ca têm um molde estrutural, o qual pode ser representado como na fórmula (A):

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em que o anel A é um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico com substituintes opcionais Reo [Ligante] é um radical ligante de vários tipos. O grupo hidroxamato funciona como um grupo de ligação de metal, interagindo com o íon de metal no sítio ativo da enzima de HDAC, que se encontra na base de um bolso na estrutura da enzima dobrada. O anel ou o sistema de anel A encontra-se dentro ou na entrada do bolso que contém o íon de me- tal, sendo que o radical -[Ligante]- se estende mais profundamente nesse bolso que liga A ao metal que liga o grupo ácido hidroxâmico. No estado da técnica e ocasionalmente na presente invenção, o anel ou o sistema de anel A são algumas vezes informalmente chamados de "grupo principal" do inibidor.

O Pedido de Patente Internacional n°. PCT/GB2006/001779 descreve e reivindica uma nova classe de inibidores de HDAC cujas estrutu- ras se adaptam ao molde generalizado (A). Essa nova classe consiste em compostos da fórmula (B) e os seus sais, N-óxidos, hidratos e solvatos:

<formula>formula see original document page 5</formula>

em que Q, V e W representam independentemente -N= ou -C=; B é um radical bivalente selecionado entre (B1), (B2), (B3), (B4) e (B5)

<formula>formula see original document page 6</formula>

em que a ligação marcada com * é ligada ao anel que contém Q, V e W a- través do -[Ligantel]- e a ligação marcada com ** é ligada a A através do - [Ligante2]-; A é um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico mono, bi ou tricíclico opcionalmente substituído; e o -[Ligantel]- e o -[Ligante2]- repre- sentam independentemente uma ligação ou um radical bivalente do ligante.

Breve Descrição Resumida da Invenção

A presente invenção é baseada na descoberta que a introdu- ção de um agrupamento de éster de alfa aminoácido no molde molecular do inibidor de HDAC (B) e determinados moldes estruturalmente similares facili- tam a penetração do agente através da membrana da célula e permitem, desse modo, que a atividade da carboxiIesterase intracelular hidrolise o éster para liberar o ácido principal. Sendo carregado, o ácido não é transportado de imediato para fora da célula, e então se acumula, portanto, para aumen- tar a concentração intracelular do inibidor ativo de HDAC. Isto conduz a au- mentos na potência e na duração da ação. A invenção torna disponível, por- tanto, uma classe de compostos que são conjugados de alfa aminoácido das estruturas (B) e determinadas estruturas relacionadas. A porção do éster do alfa aminoácido é um substrato para a carboxilesterase intracelular (também denominada na presente invenção como um "motivo de esterase"). Tais con- jugados e ácidos principais desesterificados correspondentes têm utilidade farmacêutica no tratamento de doenças tais como os cânceres, que se bene- ficiam da inibição intracelular de HDAC. Descrição Detalhada da Invenção

De acordo com a invenção, é apresentado um composto da fórmula (I) ou um sal, um N-óxido, um hidrato ou um solvato do mesmo:

<formula>formula see original document page 7</formula>

em que

m e η são independentemente O ou 1, contanto que pelo menos um entre m e η seja 1;

Q, V e W representam independentemente -N= ou -C=; B é um radical bivalente selecionado entre (B1), (B2), (B3), (B4), (B5) e (B6):

<formula>formula see original document page 7</formula>15

em que a ligação marcada com * é ligada ao anel que contém Q1VeW;

A é um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico mono, bi ou tricíclico opcionalmente substituído;

-[Ligante]- representa uma ligação ou um radical bivalente do ligante; Z1 é (a) um radical da fórmula R1R2CHNH-Y-L1-Xi-(CH2)Z- ou (b) um radical da fórmula R-L1-Y1-(CH2)z-, em que:

R é um radical da fórmula (X) ou (Y)

<formula>formula see original document page 7</formula>

R1 é um grupo ácido carboxílico (-COOH) ou um grupo éster que é hidrolisá- vel por uma ou mais enzimas de esterase intracelulares a um grupo ácido carboxílico;

R6 é hidrogênio; ou alquila CrC6, cicloalquila C3-C7, arila ou heteroarila op- cionalmente substituída, ou -(C=O)R3, -(C=O)OR3 ou -(C=O)NR3, em que R3 é hidrogênio ou alquila (C1-Ce) opcionalmente substituída; R2 é a cadeia lateral de um alfa aminoácido natural ou não natural;

Y é uma ligação, -C(=0)-, -S(=0)2-, -C(=0)0-, -C(=0)NR3-, -C(=S)-NR3l - C(=NH)-NR3 ou -S(=0)2NR3-, em que R3 é hidrogênio ou alquila CrCe op- cionalmente substituída;

Y1 é uma ligação, -(C=O)-, -S(O2)-, -C(=0)0-, -0C(=0)-, -(C=O)NR3-, - NR3(C=O)-, -S(O2)NR3-, -NR3S(O2)- ou -NR3(C=O)NR4 em que R3 e R4 são indepen- dentemente hidrogênio ou alquila (CrC6) opcionalmente substituída, L1 é um radical bivalente da fórmula -(AIk1)m(Q)n(AIk2)p., em que m, η e ρ são independentemente O ou 1,

Q é (i) um radical carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico bivalente opcionalmente substituído que tem 5 a 13 elementos no anel ou (ii), no caso em que ρ é O1 um radical bivalente da fórmula - Q1-X2-, em que X2 é -O-, -S ou NRa-, em que Ra é hidrogênio ou alquila CrC3 opcionalmente substituída e Q1 é um radical carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico bivalente opcionalmente substituído que tem 5 a 13 elementos no anel,

Alk1 e Alk2 representam independentemente radicais cicloalquila C3-C7 biva- lente opcionalmente substituídos ou alquileno C1-C6 linear ou ramificado op- cionalmente substituído, radicais alquenileno C2-C6 ou alquinileno C2-C6 que podem opcionalmente conter ou terminar em uma ligação de éter (-0-), tioé- ter (-S-) ou amino (-NRa"), em que Ra é hidrogênio ou alquila CrC3 opcio- nalmente substituída;

X1 é uma ligação, -C(=0)-; ou -S(=0)2-; -NR4C(=0)-, -C(=0)NR4 -, - NR4C(=0)-NR5-,

-NR4S(=0)2- ou -S(=0)2NR4-, em que R4 e R5 são independentemente hi- drogênio ou alquila CrC6 opcionalmente substituída; e ζ é O ou 1.

Embora a definição acima inclua potencialmente moléculas com peso molecular elevado, é preferível, de acordo com os princípios ge- rais da prática medicinal de química, que os compostos de acordo com a presente invenção tenham pesos molecular de não mais do que 600,

Em um outro amplo aspecto, a invenção apresenta a utilização de um composto da fórmula (I) tal como definido acima ou um N-óxido, um sal, um hidrato ou um solvato do mesmo na preparação de uma composição para inibir a atividade de desacetilase de histona.

Os compostos de acordo com a invenção podem ser utilizados para a inibição da atividade de desacetilase de histona, ex vivo ou in vivo.

Em um aspecto da invenção, os compostos da invenção po- dem ser utilizados na preparação de uma composição para o tratamento de doença de proliferação de células, por exemplo, a proliferação de células do câncer e doenças autoimunes.

Em um outro aspecto, a invenção apresenta um método para o tratamento dos tipos acima de doenças, o qual compreende a administração a um indivíduo que sofre de tal doença de uma quantidade eficaz de um composto da fórmula (I) tal como definido acima.

Terminologia

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "alquila (Ca- Cb)", em que a e b são números inteiros positivos, refere-se a um radical al- quila de cadeia linear ou ramificada que tem a e b átomos de carbono. Des- se modo, quando a é 1 e b é 6, por exemplo, o termo inclui metila, etila, n- propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, t-butila, n-pentila e n-hexila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "radical alqui- leno (Ca-Cb) bivalente", em que a e b são números inteiros positivos, refere- se a uma cadeia de hidrocarboneto saturado que tem a e b átomos de car- bono e duas valências não satisfeitas.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "alquenila (Ca-Cb)",em que a e b são números inteiros positivos, refere-se a uma por- ção alquenila de cadeia linear ou ramificada que tem a e b átomos de carbo- no que têm pelo menos uma ligação dupla de estereoquímica de E ou de Z, onde aplicável. O termo inclui, por exemplo, vinila, alila, 1 e 2-butenila e 2- metil-2-propenila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "radical al- quenileno (Ca-Cb)" refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto que tem a e b átomos de carbono, pelo menos uma ligação dupla e duas valências não satisfeitas.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "alquinila Ca- Cb", em que a e b são números inteiros positivos, refere-se aos grupos hi- drocarboneto de cadeia linear ou de cadeia ramificada que têm a e b átomos de carbono e que têm, além disso, uma ligação tripla. Este termo deve inclu- ir, por exemplo, etinila, 1-propinila, 1 e 2-butinila, 2-metil-2-propinila, 2- pentinila, 3-pentinila, 4-pentinila, 2-hexinila, 3-hexinila, 4-hexinila e 5-hexinila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "radical al- quinileno (Ca-Cb) bivalente", em que a e b são números inteiros positivos, refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto bivalente que tem a e b átomos de carbono e pelo menos uma ligação tripla.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "carbocíclico" refere-se a um radical mono, bi ou tricíclico que tem até 16 átomos no anel, sendo que todos são carbono e incluem arila e cicloalquila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "cicloalquila" refere-se a um radical carbocíclico saturado monocíclico que tem de 3 a 8 átomos de carbono e inclui, por exemplo, ciclopropila, ciclobutila, ciclo- pentila, ciclo-hexila, cicloeptila e ciclooctila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo não qualifi- cado "arila" refere-se a um radical aromático carbocíclico mono, bi ou tricícli- co e inclui os radicais que têm dois anéis aromáticos carbocíclicos monocí- clicos que são ligados diretamente por uma ligação covalente. Os exemplos ilustrativos de tais radicais incluem a fenila, a bifenila e a naftila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo não qualifi- cado "heteroarila" refere-se a um radical aromático mono, bi ou tricíclico que contém um ou mais heteroátomos selecionados entre S, N e O, e inclui os radicais que têm dois tais anéis monocíclicos ou um anel monocíclico e um anel de arila monocíclico, que são ligados diretamente por uma ligação cova- lente. Os exemplos ilustrativos de tais radicais incluem a tienila, benzotieni- la, furila, benzofurila, pirrolila, imidazolila, benzimidazolila, tiazolila, benzotia- zolila, isotiazolila, benzisotiazolila, pirazolila, oxazolila, benzoxazolila, isoxa- zolila, benzisoxazolila, isotiazolila, triazolila, benzotriazolila, tiadiazolila, oxa- diazolila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, triazinila, indolila e in- dazolila.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo não qualifi- cado "heterociclila" ou "heterocíclico" inclui a "heteroarila" tal como definido acima e, em seu significado não aromático, refere-se a um radical não aro- mático mono, bi ou tricíclico que contém um ou mais heteroátomos selecio- nados entre S, N e O, e aos grupos que consistem em um radical não aro- mático monocíclico que contém um ou mais tais heteroátomos que são liga- das de maneira covalente a um outro tal radical ou a um radical carbocíclico monocíclico. Os exemplos ilustrativos de tais radicais incluem os grupos pir- rolila, furanila, tienila, piperidinila, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, tiadiazolila, pirazolila, piridinila, pirrolidinila, pirimidinila, morfolinila, piperazi- nila, indolila, morfolinila, benzofuranila, piranila, isoxazolila, benzimidazolila, metilenodioxifenila, etilenodioxifenila, maleimido e succinimido.

A menos que esteja especificado de alguma outra maneira no contexto em que ocorre, o termo "substituído" tal como aplicado a qualquer parte na presente invenção significa substituído por até quatro substituintes compatíveis, sendo que cada um pode ser independentemente, por exem- plo, alquila (C1-C6), alcóxi (C1-C6), hidróxi, hidróxi alquila (C1-C6), mercapto, mercapto alquila (C1-C6), alquiltio (C1-C6), fenila, halo (incluindo flúor, bromo e cloro), trifluorometila, trifluorometóxi, nitro, nitrila (-CN), oxo, -COOH, - COORa, -CORa, -SO2Ra1 -CONH2, -SO2NH2l -CONHRa1 -SO2NHRa, - CONRaRb, -SO2NRaRb, -NH2, -NHRa1 -NRaRb, -OCONH2, -OCONHRa, - OCONRaRb, -NHCORa, -NHCOORa, -NRbCOORa, -NHSO2ORa, - NRbSO2OH, -NRbSO2ORa, -NHCONH2, -NRaCONH2, -NHCONHRb, - NRaCONHRb, -NHCONRaRb ou -NRaCONRaRb, em que Ra e Rb são inde- pendentemente alquila (C1-C6), cicloalquila (C3-C6), fenila ou heteroarila mo- nocíclica que tem 5 ou 6 átomos no anel, ou Ra e Rb, quando unidos ao mesmo átomo de nitrogênio para formar um grupo amino cíclico (por exem- plo, morfolino, piperidinila, piperazinila ou di-hidropirrolila). Um "substituinte opcional" pode ser um dos grupos substituintes antecedentes.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "substituinte de nitrogênio" significa um substituinte em um átomo de nitrogênio que é selecionado entre os seguintes:

amino alquila C1-6, por exemplo, aminoetila, alquilamino C1-3, alquila C1-6, dialquilamino C1-3, alquila C1-6, hidróxi alquila C1-6, por exemplo, hidróxi etila, alcóxi C1-3 alquila C1-6, por exemplo, metóxi etila, mercapto alquila C1-3, al- quilmercapto alquila C1-3, alquila C1-6, carboxamido alquila C1-6, por exem- plo, -CH2CONH2, amino sulfonil alquila C1-6, por exemplo, -CH2S02NH2, al- quil C1-3 amino sulfonil alquila C1-6 alquila, por exemplo, -CH2SO2NHMe dial- quil C1-3 amino sulfonil alquila C1-6, por exemplo, alcanoila C1-6, alquil sulfo- nila C1-6, aminossulfonila (-SO2NH2), alquil C1-6 amino sulfonila, por exemplo, -SO2NHMe, dialquil C1-6 amino sulfonila, por exemplo, -SO2NMe2, fenil ami- no sulfonila opcionalmente substituída, carboxamido (-CONH2), alquil C1-6 amino carbonila, dialquil C1-6 amino carbonila, morfolinil alquila C1-6, imida- zolil alquila C1-6, triazolil alquila C1-6 ou heterocicloalquila C1-6 monocíclica, opcionalmente substituída no anel de imidazolila, triazolila ou heterociclila, por exemplo, piperidinil alquila C1-6. piperazinil alquila C1-6 ou 4-(C1-6 al- quil)piperazinil alquila C1-6.

Tal como utilizado na presente invenção, o termo "sal" inclui sais de adição de base, sais de adição de ácido e sais quaternários. Os compostos da invenção que são ácidos podem formar sais, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis, com bases tais como hidróxidos de metais alcalinos, por exemplo, hidróxidos de sódio e de potássio; hidróxidos de me- tais alcalino-terrosos, por exemplo, hidróxidos de cálcio, de bário e de mag- nésio; com bases orgânicas, por exemplo, N-metil-D-glucamina, colina tris(hidroximetil)amino-metano, L-arginina, L-lisina, N-etil piperidina, dibenzi- lamina, e similares. Esses compostos (I) que são básicos podem formar sais, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis com ácidos inorgânicos, por exemplo, com ácidos hidroálicos tais como os ácidos clorídrico ou bromídri- co, ácido sulfúrico, ácido nítrico ou ácido fosfórico, e outros ainda, e com ácidos orgânicos, por exemplo, com os ácidos acético, tartárico, succínico, fumárico, maléico, málico, salicílico, cítrico, metano sulfônico, p-tolueno sul- fônico, benzoico, benzeno sulfônico, glutâmico, láctico e mandélico, e similares.

Os compostos da invenção que contêm um ou mais centros quirais reais ou potenciais, por causa da presença de átomos de carbono assimétricos, podem existir como um número de enantiômeros ou de diaste- reoisômeros com estereoquímica de R ou de S em cada centro quiral. A in- venção inclui todos tais enantiômeros ou diastereoisômeros e as misturas destes.

Nos compostos da invenção, em qualquer combinação compa- tível, e considerando que os compostos têm de preferência um peso molecu- lar de menos de 600:

O grupo hidroxamato -C(=0)NH0H

Nos compostos da invenção, o grupo hidroxamato funciona como um grupo de ligação de metal, interagindo com o íon de metal no sítio ativo da enzima de HDAC, que se encontra na base de um bolso na estrutu- ra da enzima dobrada.

O anel que contém Q, V e W

Cada um de Q, V e W pode ser -C= ou pelo menos um entre Q, V e W pode ser -N= ou Q pode ser -C= e V e W podem ser cada um -N=; é atualmente preferido o caso em que Q é -C=, VeW são cada um -N= e o radical H0NHC(=0)- é unido à posição 5 do radical resultante de pirimidin-2ila.

O anel A

Os radicais do anel A podem ser, por exemplo, carbocíclicos aromáticos opcionalmente substituídos tais como fenila ou naftila opcional- mente substituída ou heteroaromáticos opcionalmente substituídos tais como pirrolila, furila, tienila, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila, 1,3,4-triazolila, 1,2,5-triazolila, 1,2,3- oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila, 1,3,4-oxadiazolila, 1,3,4- tiadiazol, piridila, pirimidinila, piridazinila, pirazinila, 1,3,5-triazinila, 1,2,4- triazinila, 1,2,3-triazinila, benzofurila, [2,3-di-idro]benzofurila, isobenzofurila, benzotienila, benzotriazolila, isobenzotienila, indolila, isoindolila, indanila, 3H- indolila, benzimidazolila, indazolila, imidazo[1,2-a]piridila, benzotiazolila, benzoxazolila, quinolizinila, quinazolinila, ftalazinila, quinoxalinila, cinolinila, naftiridinila, pirido[3,4-b]piridila, pirido[3,2-b]piridila, pirido[4,3-b]piridila, qui- nolila, isoquinolila, tetrazolila, 5,6,7,8-di-hidroquinolila, 5,6,7,8-di- hidroisoquinolila, purinila, pteridinila, carbazolila, xantenila ou benzoquinolila opcionalmente substituída.

Os radicais do anel A também podem ser, por exemplo, carbo- cíclicos e heterocíclicos não aromáticos opcionalmente substituídos, tais como radicais ciclopropila, ciclobutila, ciclo-pentila, ciclo-hexila, cicloeptila, 2- ciclobuten-1-ila, 2-ciclopenten-1-ila, 3-ciclopenten-1-ila, 2,4-ciclopentadien-1- ila, 3,5-cicloexadien-1-ila, di-hidrofuranila, pirrolina, por exemplo, 2 ou 3- pirrolinila, pirrolidinila, dioxolanila, por exemplo, 1,3-dioxolanila, imidazolinila, por exemplo, 2-imidazolinila, imidazolidinila, pirazolinila, por exemplo, 2- pirazolinila, pirazolidinila, piranila, por exemplo, 2 ou 4-piranila, piperidinila, 1,4-dioxanila, morfolinila, 1,4-ditianila, tiomorfolinila, piperazinila, 1,3,5- tritianila, oxazinila, por exemplo, 2H-1,3-, 6H-1,3-, H-1,2-, 2H-1,2- ou 4H1,4- oxazinila, 1,2,5-oxatiazinila, isoxazinila, oxatiazinila, por exemplo, 1,2,5 ou 1,2,6-oxatiazinila, ou 1,3,5-oxadiazinila opcionalmente substituídos.

Os radicais específicos do anel A incluem os seguintes siste- mas de anel, opcionalmente substituídos: <formula>formula see original document page 15</formula> <formula>formula see original document page 16</formula> <formula>formula see original document page 17</formula>

em que R10 é hidrogênio ou alquila C1-C6, sendo que a ligação cruzada pela linha ondulada se conecta ao radical do -[Ligante]- e o radical R na fórmula (I) é unido a qualquer átomo disponível no anel.

Os substituintes opcionais em A podem ser, por exemplo, áto- mos de metila, etila, n-propila, isopropila, flúor, cloro, bromo ou iodo, ou meti- lamino, etilamino, hidroximetila, hidroxietila, metiltiol, etiltiol, metóxi, etóxi, n- propóxi, 2-hidróxi etóxi, 3-hidróxi propóxi, 2-aminoetóxi, 3-aminopropóxi, 2- (metilamino)etóxi, 2-(dimetilamino)etóxi, 3-(dimetilamino)propóxi, ciclo- pentila, ciclo-hexila, ciclo-hexilamino, trifluorometila, trifluorometóxi, amino (- NH2), aminometila, aminoetila, dimetilamino, dietilamino, etil(metil)amino, propil(metil)amino, 2-hidróxi etil amino, 3-hidróxi propil amino, 2- aminoetilamino, 3-aminopropilamino, 2-(metilamino)etilamino, 2- (etilamino)etilamino, 2-(isopropilamino)etilamino, 3- (isopropilamino)propilamino, 2-(dimetilamino)etilamino, 2- (dietilamino)etilamino, 2-(metilamino)etil(metil)amino, 3- (metilamino)propil(metil)amino, nitro, ciano, hidroxila, formila, carboxila (- CO2H), -CH2CO2H, -OCH2CO2H, -CO2CH3, -CO2CH2CH3, -CH2CO2CH2CH3, -CH2CO2CH2Ph, t-butóxi carbonil metóxi, acetila, fenacila, tio, tiometila, tioeti- la, sulfonila, metil sulfonila, metil amino sulfonila, etil amino sulfonila, dimetil amino sulfonila, carboxamido, metil amino carbonila, etil amino carbonila, dimetil amino carbonila, dietil amino carbonila, metil amino carbonil metila, - NHC(S)NH2, sulfonilamino (-NHSO2H), metil sulfonilamino, dimetil sulfonila- mino, amino sulfonilamino, (-NHSO2NH2), metil amino sulfonilamino, dimetil amino sulfonilamino, metil amino carbonilamino, dimetil amino carbonilamino, acetil amino, fenil carbonilamino, aminometil carbonilamino, acetil amino me- tila, metóxi carbonil amino, t-butóxi carbonil amino, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, 4-metil piperazinila, homopiperazinila, morfolinila, imidazolila, 1,2,4-triazolila, 1,2,3-triazolila, 1,3,4-triazolila, 1,2,5-triazolila, alquila C1-6 de cadeia linear ou ramificada, amino alquila C1-6, por exemplo, aminoetila, al- quilamino C1-3, alquila C1-6, dialquilamino C1-3, alquila C1-6, hidroxil alquila C1-6, por exemplo, hidróxi etila, alcoxila C1-3, alquila C1-6, por exemplo, me- tóxi etila, alquiltiol C1-3 alquila C1-3, alquiltiol C1-3 alquila C1-6, alcanoila C1-6, alquilsulfonila C1-6, aminossulfonila (-SO2NH2), alquilaminossulfonila C1-6, por exemplo, -SO2NHMe, dialquilaminossulfonila C1-6, por exemplo - SO2NMe2, fenilaminossulfonila opcionalmente substituída, carboxamido (- CONH2), carboxamido alquila C1-6, por exemplo, CH2CONH2, alquilamino- carbonila C1-6, dialquilaminocarbonila C1-6 aminossulfonilalquila Cr6 alquila, por exemplo, CH2SO2NH2, alquilaminossulfonil C1-3 alquila C1-6, por exem- plo, CH2SO2NHMe, dialquilaminossulfonila C-1-3 alquila C1-6, por exemplo CH2SO2NM e 2 morfolinil alquila C1-6, imidazolil alquila C1-6 opcionalmente substituída, triazolil alquila C1-6 opcionalmente substituída, heterocicloalquil C3-6 alquila C1-6 opcionalmente substituída, por exemplo, piperidinil alquila C1-6, piperazinil alquila C1-6 e 4-(alquil C1-6)piperazinil alquila C1-6.

Os anéis A atualmente preferidos incluem fenila, ciclo-hexila, naftila, quinolin-2-ila e 1,3-di-idro-isoindol-2-ila opcionalmente substituída. Os substituintes que podem estar presentes em tais anéis A preferidos incluem halogênio, e em particular o flúor e o cloro. Especificamente, o radical -A na fórmula (I) acima, quando presente, pode ser 1,4-fenileno ou 1,4-ciclo-hexileno.

O radical do [Ligante]

O -[Ligante]- serve para ligar o radical bivalente de B ao anel A, quando presente. Desse modo, ele pode ser selecionado entre os seguintes exemplos:

(i) uma ligação. Este será normalmente o caso em que o anel A não está presente;

(ii) -O-, -S-, -C(=0)-, -S(=0)2-, -NRc-, -C(=0)NRc-, -S(=0)2NRc, -NRcC(=0)-, -NRuS(=0)2-, -NRu(CH2)m-, -NRuC(=0)(CH2)m-, -NRcS(=0)2(CH2)m, -NRDC(=0)NRc-, -NRcC(=0)(CH2)mAr- ou -NRcS(=0)2(CH2)mAr-, em que Rc e R0 são independentemente hidrogênio, alquila Ci-C4 ou um substituinte de nitrogênio, m é O, 1, 2, 3, 4 ou 5 e Ar é um radical fenila ou um radical heteroarila mono ou bicíclico bivalente que tem 5 a 13 elementos no anel; e

(iii) radical alquileno C1-C6, alquenileno C2-C6 ou alquinileno C2-C6 opcional- mente substituído, linear ou ramificado, que pode opcionalmente conter ou terminar em uma ligação de éter (-O-), tioéter (-S-) ou amino (-NRa-), em que Ra é hidrogênio, alquila C1-C3 ou um substituinte de nitrogênio; quando -Ar- está presente no -[Ligante]-, ele pode ser um radical bivalente selecionado entre os seguintes:

<formula>formula see original document page 19</formula>

RESPONDENTES CONSTANTES DA PÁGINA 16 DO TEXTO ORIGINAL, em que X é O, S ou NH. Por exemplo, -Ar- quando presente no -[Ligante]- pode ser um fenileno bivalente, tal como um radical 1,4-fenileno.

Os exemplos de -[Ligante]- incluem aqueles presentes nos compostos dos exemplos especificos da presente invencao.

O grupo Z1 Caso (a): Z é um radical c O grupo R1 no caso Z1 (a) O grupo éster Ri deve ser um que no composto da invenção é hidrolisável por uma ou mais enzimas de carbóxi esterase intracelulares a um grupo ácido carboxílico. As enzimas de carbóxi esterase intracelulares capazes de hidrolisar o grupo éster de um composto da invenção no ácido correspondente incluem os três isótipos de enzimas humanas conhecidos hCE-1, hCE-2 e hCE-3. Embora estas sejam consideradas as enzimas prin- cipais, outras enzimas tais como a bifenil-hidrolase (BPH) também podem ter um papel na hidrolisação do éster. Em geral, se a carbóxi esterase hidrolisa o éster de aminoácido livre em ácido principal, sujeita à dependência de N- carbonila de hCE-2 e hCE-3 discutida acima, também irá hidrolisar o motivo do éster quando conjugada de maneira covalente ao inibidor de HDAC. Des- se modo, o ensaio de célula rompida e/ou o ensaio de carbóxi esterase iso- lado descrito na presente invenção apresentam uma primeira seleção direta, rápida e simples para os ésteres que têm o perfil da hidrólise requerido. Os motivos do éster selecionados dessa maneira podem ser então novamente testados no mesmo ensaio de carbóxi esterase quando conjugados ao inibi- dor através da química escolhida de conjugação, para confirmar que ainda é um substrato de carbóxi esterase nessa base.

Contanto que eles sejam hidrolisáveis pelas enzimas de carbó- xi esterase intracelulares, os exemplos de grupos éster R1 particulares inclu- em aqueles da fórmula -(C=O)ORg em que R9 é R7R8CH-, em que

(i) R7 é hidrogênio ou alquil (C1-C3)-(Z1)a-IaIquiI (C1-C3)]b- ou alquenil (C2-C3)- (Z1)a-IaIquiI (C1-C3)]b- opcionalmente substituída, em que a e b são indepen- dentemente O ou 1 e Zi é -O-, -S- ou -NRi0-, em que Ri0 é hidrogênio ou al- quila C1-C3 e R8 é hidrogênio ou alquila (C1-C3);

(ii) R7 é hidrogênio ou R10RnN-alquila (CrC3) opcionalmente substituída, em que R10 é hidrogênio ou alquila C1-C3 e Rn é hidrogênio ou alquila C1-C3; ou R10 e R11 em conjunto com o nitrogênio ao qual são unidos formam um anel heterocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 5 ou 6 átomos no anel ou um sistema de anel heterocíclico bicíclico de 8 ou 10 átomos no anel e R8 é hidrogênio ou alquila (C1-C3); ou (iii) R7 e Rs considerados em conjunto com o carbono ao qual são unidos formam um anel carbocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 3 a 7 átomos no anel ou sistema de anel carbocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos no anel.

Dentro destas classes, Rg pode ser, por exemplo, metila, etila, n- ou isopropila, n-, sec- ou terc-butila, ciclo-hexila, alila, fenila, benzila, 2-, 3- ou 4-piridil metila, N-metilpiperidin-4-ila, di-hidrofuran-3-ila, metóxi etila, in- danila, norbornila, dimetil amino etila, morfolino etila. É atualmente preferido que Rg seja ciclo-pentila.

Os macrófagos são conhecidos por desempenhar um papel essencial nos distúrbios inflamatórios através da liberação de citocinas, em particular, TNF-α e IL-1 (van Roon et al Arthritis and Rheumatism, 2003, 1229-1238). Na artrite reumatóide, são eles que mais contribuem para a ma- nutenção da inflamação na articulação e da destruição da articulação. Os macrófagos também estão envolvidos no crescimento e no desenvolvimento de tumor (Naldini e Carraro, Curr Drug Targets Inflamm Allergy, 2005, 3-8). Desse modo, os agentes que visam seletivamente a proliferação celular de macrófagos poderiam ser de valor no tratamento do câncer e doenças auto- imunes. Espera-se que o alvejamento de tipos específicos de células condu- za a efeitos colaterais reduzidos. Os autores da presente invenção descobri- ram um método de alvejar dos inibidores para macrófagos que se baseia na observação que a maneira com que o motivo de esterase é ligado ao inibidor determina se este é hidrolisado e, desse modo, se este se acumula ou não em tipos de células diferentes. Especificamente, foi verificado que os macró- fagos contêm a carboxil esterase humana hCE-1, ao passo que outros tipos de células não contêm. Na fórmula geral (I), quando o nitrogênio do motivo de esterase RiCH(R2)NH- não é diretamente ligado a uma carbonila (- C(=0)-), isto é, quando Y não é um radical -C(=0), -C(=0)0- ou C(=0)NR3-, o éster somente será hidrolisado por hCE-1 e, desse modo, os inibidores se acumularão somente nos macrófagos.

A cadeia lateral do aminoácido R2 no caso Z1 (a) Contanto que o grupo éster Ri seja hidrolisável pelas enzimas de carboxil esterase intracelulares, a identidade do grupo de cadeia lateral R2 não é crítica.

Os exemplos de cadeias laterais de aminoácido incluem: Grupos alquila C1-C6, fenila, 2-, 3- ou 4-hidróxi fenila, 2-, 3- ou 4-metóxi feni- la, 2-, 3- ou 4-piridil metila, benzila, fenil etila, 2-, 3- ou 4-hidróxi benzila, 2-, 3- ou 4-benzilóxi benzila, 2-, 3- ou 4-alcóxi benzila e benzilóxi(alquila C1-C6); o grupo caracterizado de um α-aminoácido natural, em que qualquer grupo funcional pode ser protegido;

os grupos -[Alk]nR6 em que Alk é um grupo alquila (C1-C6) ou alquenila (C2- C6) interrompido opcionalmente por um ou mais átomos de -O- ou de -S ou grupos -N(Rr)- [em que R7 é um átomo de hidrogênio ou um grupo alquila (C1-C6)], η é O ou 1 e R6 é um grupo cicloalquila ou cicloalquenila opcional- mente substituído;

um grupo benzila substituído no anel fenila por um grupo da fórmula - OCH2COR8, em que R8 é hidroxila, amino, alcóxi (Ci-C6), fenil alcóxi (Ci-C6)1 alquil (C1-C6) amino, di(alquil (CrC6) amino, fenil alquil (Ci-C6) amino, o re- síduo de um heleto de aminoácido ou de ácido, éster ou amida derivada des- te, em que o dito resíduo é ligado através de uma ligação de amida, em que o dito aminoácido é selecionado entre glicina, α ou β-alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofano, serina, treonina, cisteína, metio- nina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutâmico e áci- do aspártico;

um grupo alquila (C1-C6) heterocíclico, sendo não substituído ou mono ou bissubstituído no anel heterocíclico por halo, nitro, carbóxi, alcóxi (C1-C6)I, ciano, alcanoila (CrC6), trifluorometil alquila (C1-C6), hidróxi, formila, amino, alquil (C1-C6) amino, di- alquil (C1-C6) amino, mercapto, alquiltio (C1-C6), hi- dróxi alquila (C1-C6), mercapto alquila (C1-C6) ou alquil (C1-C6) fenil metila; e um grupo -CRaRbRc em que:

cada um entre Ra, Rb e Rc é independentemente hidrogênio, alquila (C1-C6), alquenila (C2-C6), alquinila (C2-C6), fenil alquila(C1-C6), cicloalquila (C3-C8); ou

Rc é hidrogênio e Ra e Rb são independentemente fenila ou heteroarila, tal como piridila; ou

Rc é hidrogênio, alquila (C1-C6)1 alquenila (C2-C6), alquinila (C2-C6), fenil al- quila (C1-C6) ou cicloalquila (C3-C8), e Ra e Rb em conjunto com o átomo de carbono ao qual são unidos formam um anel de cicloalquila de 3 a 8 elemen- tos ou um anel heterocíclico de 5 a 6 elementos; ou

Ra, Rb e Rc em conjunto com o átomo de carbono ao qual são unidos for- mam um anel tricíclico (por exemplo, adamantila); ou

cada um de Ra e Rb é independentemente alquila (C1-C6), alquenila (C2-C6), alquinila (C2-C6), fenil alquila (C1-C6), ou um grupo como definido para Rc abaixo com exceção do hidrogênio, ou Ra e Rb em conjunto com o átomo de carbono ao qual são unidos formam um anel de cicloalquila ou anel hetero- cíclico e Rc é hidrogênio, -OH, -SH, halogênio, -CN, -CO2H, perfluoroalquila (C1-C4), -CH2OH, -C02-alquila (C1-C6), -O-alquila (C1-C6), -O-alquenila (C2- C6), -S-alquila (C1-C6), -SO-alquila (C1-C6), S02-alquila (C1-C6), -S-alquenila (C2-C6), -SO-alquenila (C2-C6), -SO2- alquenila (C2-C6), ou um grupo -Q-W em que Q representa uma ligação ou -O-, -S-, -SO- ou -SO2- e W represen- ta um grupo fenila, fenil alquila, cicloalquila (C3-C8), cicloalquilalquila (C3-C8), cicloalquenila (C4-C8), cicloalquenilalquila (C4-C8), heteroarila ou heteroari- lalquila, cujo grupo W pode ser opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados independentemente entre hidroxila, halogênio, - CN, -CO2H, -C02-alquila (C1-C6), -CONH2l -CONH-alquila (C1-C6)1 -CONH- alquila (C1-C6)2l -CHO, -CH2OH, perfluoroalquila (C1-C4), -O- alquila (C1-C6), -S-alquila (C1-C6), -SO-alquila (CrC6)alquila, -S02-alquila (C1-C6), -NO2l - NH2l -NH-alquila (C1-C6)1 -N2-alquila (C1-C6), -NHCO-alquila (C1-C6), alquila (C1-C6), alquenila (C2-C6), alquinila (C2-C6), cicloalquia (C3-C8), cicloalquenila (C4-C8), fenila ou benzila.

Os exemplos de grupos R2 particulares incluem o hidrogênio (a "cadeia lateral" de glicina), benzila, fenila, ciclo-hexilmetila, ciclo-hexila, piri- din-3-ilmetila, terc-butóxi metila, iso-butila, sec-butila, terc-butila, 1-benziltio- 1-metiletila, 1 -metiltio-1 -metiletila, 1-mercapto-1-metiletila e feniletila. Os gru- pos R2 atualmente preferidos incluem fenila, benzila e iso-butila, ciclo-hexila e t-butóxi metila. Para os compostos da invenção que devem ser administrados sistemica- mente, os ésteres com uma taxa lenta de clivagem de carboxil esterase são os preferidos, uma vez que eles são menos suscetíveis ao metabolismo pré- sistêmico. A sua capacidade de alcançar seu tecido-alvo intacto é, portanto, aumentada, e o éster pode ser convertido dentro das células do tecido-alvo no produto ácido. No entanto, para a administração local, em que o éster é aplicado diretamente ao tecido-alvo ou direcionado ao mesmo, por exemplo, por meio de inalação, será freqüentemente desejável que o éster tenha uma rápida taxa de clivagem de esterase, para minimizar a exposição sistêmica e os conseqüentes efeitos colaterais indesejados. Nos compostos da presente invenção, se o carbono adjacente ao alfa carbono do éster de alfa aminoáci- do for mono-substituído, isto é, R2 é CH2Rz (Rz é o mono-substituinte), então os ésteres tendem a ser clivados mais rapidamente do que se esse carbono for bi- ou tri-substituído, como no caso em que R2 é, por exemplo, fenila ou ciclo-hexila.

O radical-Y-L1-X1 -fCH2b- no caso Zt (a)

Este radical (ou ligação) surge da estratégia de química parti- cular escolhida para ligar o motivo de éster de aminoácido R1CH(R2)NH- ao anel A (quando presente) ou ao anel B (através do radical do -[Ligante]-). Claramente, a estratégia de química para esse acoplamento pode variar bastante e, desse modo, muitas combinações das variáveis Y, L11 X1 e ζ são possíveis. No entanto, quando o inibidor é ligado à enzima de HDAC em seu sítio ativo, os anéis B e/ou A se situam na parte superior ou dentro do bolso que contém o íon de metal da enzima, então ao ligar o motivo do éster de aminoácido àqueles anéis geralmente se estende em uma direção distante desse bolso e desse modo minimiza ou evita a interferência com o modo de ligação do inibidor. Desse modo, a combinação precisa das variáveis que constituem a química de ligação entre o motivo do éster de aminoácido e os anéis B e/ou A será freqüentemente irrelevante ao modo de ligação primário do composto como um todo. Por outro lado, essa química de ligação pode, em alguns casos, escolher interações de ligação adicionais com a enzima na parte superior ou adjacente ao bolso contendo o íon de metal, intensificando desse modo a ligação.

Também deve ser observado que os benefícios do motivo do éster de aminoácido descrito acima (entrada fácil na célula, hidrólise de car- boxil esterase dentro da célula e acumulação dentro da célula do produto ativo da hidrólise do ácido carboxílico) são mais bem atingidos quando a li- gação entre o motivo do éster de aminoácido e os anéis B e/ou A não é um substrato para a atividade de peptidase dentro da célula, o que pode resultar na clivagem do aminoácido a partir da molécula. Naturalmente que a estabi- lidade às peptidases intracelulares é facilmente testada ao incubar o com- posto com teores de células rompidas e ao analisar quanto a tal clivagem.

Com as observações gerais acima em mente, tomando as va- riáveis que constituem o radical -Y-L1-X1-[CH2]Z-, por sua vez:

z pode ser 0 ou 1, de modo que um radical metileno ligado ao anel A ou ao anel B seja opcional;

os exemplos preferidos específicos de Y quando a seletividade do macrófago não é requerido incluem-(C=0)-, -(C=O)NH- e -(C=O)O-; em que a seletividade do macrófago é requerida, qualquer uma das outras op- ções para Y, incluindo o caso em que Y é uma ligação, é apropriada.

No radical L1, os exemplos dos radicais Alk1 e Alk21 quando presentes, incluem -CH2-, -CH2CH2- -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, - CH=CH-,-CH=CHCH2-, -CH2CH=CH-, CH2CH=CHCH2-CeC-, -CECCH2-, CH2C=C- e CH2CsCCH2. Exemplos adicionais de Alk1 e Alk2 incluem - CH2W-, -CH2CH2W-, -CH2CH2WCH2-, -CH2CH2WCH(CH3)-, CH2WCH2CH2-, -CH2WCH2CH2WCH2- e -WCH2CH2-, em que W é -O-, -S-, -NH-, - N(CH3)- ou -CH2CH2N(CH2CH2OH)CH2-. Exemplos adicionais de Alk1 e Alk2 incluem radicais ciclopropila, ciclo-pentila e ciclo-hexila bivalentes.

Em L1, quando q é O, o radical é uma cadeia de hidrocarboneto (opcionalmente substituída e tendo talvez uma ligação de éter, tioéter ou amino). Atualmente, é preferível que não haja nenhum substituinte opcional em L1. Quando ambos ρ e r são 0, L1 é um radical carbocíclico ou heterocí- clico mono ou bicíclico bivalente com 5 a 13 átomos no anel (opcionalmente substituídos). Quando η é 1 e pelo menos um entre ρ e r são 1, L1 é um radi- cal bivalente que inclui uma cadeia ou cadeias de hidrocarboneto e um radi- cal carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico com 5 a 13 átomos no anel (opcionalmente substituídos). Quando presente, Q1 pode ser, por e- xemplo, um radical fenila bivalente, naftila, ciclopropila, ciclo-pentila ou ciclo- hexila ou um radical mono ou um radical heterocíclico bicíclico que tem 5 a 13 elementos no anel, tais como o radical piperidinila, piperazinila, indolila, piridila, tienila ou pirrolila, mas 1,4-fenileno é atualmente o preferido.

Especificamente, em algumas modalidades da invenção, L1, ρ e r podem ser 0, sendo que q é 1. Em outras modalidades, q e r podem ser 0, sendo que ρ é 1. Em modalidades adicionais, p, qer podem ser todos 0. Contudo, em modalidades adicionais, ρ pode ser 0, q pode ser 1, sendo que Q1 é um radical heterocíclico monocíclico e r pode ser 0 ou 1, Alk1 e Alk2, quando presentes, podem ser selecionados entre -CH2-, -CH2CH2- e - CH2CH2CH2- e Q1 pode ser 1,4-fenileno.

Os exemplos específicos do radical -Y-L1-X1-[CH2]Z- incluem - C(=0)- e -C(=0)NH-, bem como -(CH2)v-, -(CH2)vO-, -C(=0)-(CH2)v-, -C(=0)- (CH2)vO-, -C(=0)-NH-(CH2)w-, -C(=0)-NH-,(CH2)WO- (CH2)wO

<formula>formula see original document page 26</formula>

em que ν é 1, 2, 3 ou 4 e w é 1, 2 ou 3, tais como -CH2-, -CH2O-, -C(=0)- CH2-, -C(=0)-CH20-, -C(=0)-NH-CH2- e -C(=0)-NH-CH20-. Caso (b): Z1 é um radical da fórmula -(CH7)7-V1-L1-R O radical R no caso Z1 (b)

Nas fórmulas (X) e (Y), Ri é um grupo ácido carboxílico ou um grupo éster que é hidrolisável por uma ou mais enzimas de carboxil esterase intracelulares a um grupo ácido carboxílico, tal como definido e discutido a- cima com referência ao caso Z1 (a).

O anel D no caso Z1 (b)

<formula>formula see original document page 27</formula>

Quando R e um grupo da formula (Y), os exemplos de R incluem:

em que R1 e tal como definido acima.

O grupo R6 no caso Z1 (b)

O grupo Re esta presente nos compostos da invencao, neste caso quando R e um radical da formula (X).

Tal como mencionado acima, se o modulador se destina a agir somente nos tipos de células em que hCE-1 está presente, tal como nos macrófagos, o grupo amino do motivo de carboxil esterase deve ser direta- mente ligado a um grupo com exceção de carbonila. Nesses casos, R6 pode ser alquila C1-C6, cicloalquila C3-C7, arila ou heteroarila opcionalmente subs- tituídas, por exemplo, metila, etila, n- ou isopropila, ciclopropila, ciclo-pentila, ciclo-hexila, fenila ou piridila. Nos casos em que a especificidade do macró- fago não é requerida, R6 pode ser hidrogênio ou -(C=O)RD, em que R0 é al- quila (C1-C6) opcionalmente substituída, tal como metila, etila, n- ou isopropi- la, iso- ou sec-butila, cicloalquila (C3-C7) tal como ciclopropila, ciclo-pentila, ciclo-hexila, fenila, piridila, tienila, fenil alquila (C1-C6), tienil alquila (C1-C6) ou piridil alquila (C1-C6), tal como benzila, 4-metóxi fenil metil carbonila, tienil metila ou piridil metila.

R6 também pode ser, por exemplo, -(C=O)ORD ou (C=O)NHRd, em que R0 é hidrogênio ou alquila (C1-C6) opcionalmente subs- tituída, tal como metila, etila ou n- ou isopropila.

Para os compostos da invenção que devem ser administrados sistemicamente, os ésteres com uma taxa lenta de clivagem de esterase são preferidos, uma vez que eles são menos suscetíveis ao metabolismo pré- sistêmico. A sua capacidade de alcançar seu tecido-alvo intacto é, portanto, aumentada, e o éster pode ser convertido dentro das células do tecido-alvo no produto ácido. No entanto, para a administração local, em que o éster é aplicado diretamente ao tecido-alvo ou direcionado ao mesmo, por exemplo, por meio de inalação, será freqüentemente desejável que o éster tenha uma taxa rápida de clivagem de esterase, para minimizar a exposição sistêmica e os conseqüentes efeitos colaterais indesejados. Se um átomo de carbono ao qual o grupo R está unido for não substituído, isto é, R é unido a um radical metileno (-CH2)-, então os ésteres tendem a ser clivados mais rapidamente do que se esse carbono for substituído ou fizer parte de um sistema de anel tal como um anel de fenila ou ciclo-hexila.

O radical - L1-Y1-ICH7I7- no caso Z1 (b)

Tal como no caso Z1 (a), este radical (ou ligação) surge da es- tratégia de química particular escolhida para ligar o motivo R do éster do a- minoácido no substituinte Y ao restante da molécula. Claramente, a estraté- gia de química para esse acoplamento pode variar bastante e, desse modo, muitas combinações das variáveis Y1, L1 e ζ são possíveis. No entanto, quando o inibidor é ligado à enzima em seu sítio ativo, o motivo do éster do aminoácido se estende geralmente em uma direção distante da enzima e, desse modo, minimiza ou evita a interferência com o modo de ligação do inibidor. Desse modo, a combinação precisa da variável que constitui a quí- mica de ligação entre o motivo do éster do aminoácido e o restante da molé- cula será freqüentemente irrelevante ao modo de ligação primário do com- posto como um todo.

Com as observações gerais antecedentes em mente, tomando as variáveis que constituem o radical - L1-Y1-[CH2]Z-, por sua vez:

z pode ser O ou 1, de modo que um radical metileno ligado ao restante da molécula seja opcional;

Y1 pode ser, por exemplo, -NR3-, -S-, -O-, -C(=0)NR3-, -NR3C(=0)- ou -

C(=0)0-, em que R3 é hidrogênio ou alquila C1-C6 opcionalmente substituí- da, tal como -CH2CH2OH;

No radical L1, os exemplos de radicais Alk1 e Alk21 quando pre- sentes, incluem -CH2-, -CH2CH2- -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH=CH- -CH=CHCH2-, -CH2CH=CH-, CH2CH=CHCH2-, -C=C-, -CsCCH2-, CH2CEC- e CH2C=CCH2. Exemplos adicionais de Alk1 e Alk2 incluem -CH2W, - CH2CH2W- -CH2CH2WCH2-, -CH2CH2WCH(CH3)-, -CH2WCH2CH2-, - CH2WCH2CH2WCH2- e -WCH2CH2- em que W é -O-, -S-, -NH-, -N(CH3)- ou - CH2CH2N(CH2CH2OH)CH2-. Exemplos adicionais de Alk1 e Alk2 incluem ra- dicais ciclopropila, ciclo-pentila e ciclo-hexila bivalentes.

Alk1 e Alk2, quando presentes, também podem ser alquila de cadeia ramificada tal como -CH(CH3)-, -C(CH3)2- ou em uma ou outra orien- tação -CH2CH(CH3)-, -CH2C(CH3)2-.

Em L1, quando η é 0, o radical é uma cadeia de hidrocarboneto (opcionalmente substituída e tendo talvez uma ligação de éter, tioéter ou amino). Atualmente, é preferível que não haja nenhum substituinte opcional em L1. Quando m e ρ são 0, L1 é um radical carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico bivalente com 5 a 13 átomos no anel (opcionalmente subs- tituídos). Quando η é 1 e pelo menos um entre m e ρ é 1, L1 é um radical bivalente que inclui uma cadeia ou cadeias de hidrocarboneto e um radical carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico com 5 a 13 átomos no anel (opcionalmente substituídos). Quando presente, Q pode ser, por exemplo, um radical fenila, naftila, ciclopropila, ciclo-pentila ou ciclo-hexila bivalente ou um radical heterocíclico mono ou bicíclico que tem 5 a 13 elementos no anel, tal como o radical piperidinila, piperazinila, indolila, piridila, tienila ou pirrolila, mas o 1,4-fenileno é atualmente o preferido.

Especificamente, em algumas modalidades da invenção, L1, m e ρ podem ser 0, sendo que η é 1. Em outras modalidades, η e ρ podem ser 0, sendo que m é 1. Em modalidades adicionais, m, η e ρ podem ser todos 0. Contudo, em modalidades adicionais, m pode ser 0, η pode ser 1, sendo que Q é um radical heterocíclico monocíclico e ρ pode ser 0 ou 1, Alk1 e Alk2, quando presentes, podem ser selecionados entre -CH2-, -CH2CH2- e - CH2CH2CH2- e Q pode ser 1,4-fenileno.

Os exemplos específicos do radical -L1-Y1-[CH2]Z- incluem - (CH2)3NH-, -CH2C(=0)NH-, -CH2CH2C(=0)NH-, -CH2C(O)O-, -CH2S-, - CH2CH2C(O)O-, -(CH2)4NH-, -CH2CH2S-, -CH2O, -CH2CH2O-. <formula>formula see original document page 30</formula>

Tal como mencionado acima, os compostos de acordo com a invenção são inibidores de HDAC e podem, portanto, ser de utilização no tratamento de doenças proliferativas das células, tais como o câncer, em seres humanos e em outros mamíferos.

Deve ficar compreendido que o nível de dose específico para qualquer paciente particular irá depender de uma variedade de fatores inclu- indo a atividade do composto específico empregado, a idade, o peso corpó- reo, a saúde geral, o sexo, a dieta, o período de administração, a via de ad- ministração, a taxa de excreção, a combinação de fármaco e a gravidade da doença particular que é submetida ao tratamento. Os níveis e a freqüência de dose mais favoráveis serão determinados pela experimentação clínica.

Os compostos de acordo com a invenção podem ser prepara- dos para a administração por qualquer via consistente com as suas proprie- dades farmacocinéticas. As composições administráveis oralmente podem estar na forma de comprimidos, cápsulas, pós, grânulos, losangos, prepara- dos líquidos ou em gel, tais como soluções ou suspensões parenterais orais, tópicas ou estéreis. Os comprimidos e as cápsulas para a administração oral podem estar na forma de apresentação de dose unitária e podem conter ex- cipientes convencionais tais como agentes de ligação, por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanto ou polivinil pirrolidona; cargas, por e- xemplo, lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina; lubrificante de comprimidos, por exemplo, estearato de magnésio, talco, po- lietileno glicol ou sílica; desintegrantes, por exemplo, amido de batata ou a- gentes umectantes aceitáveis, tal como o Iauril sulfato de sódio. Os compri- midos podem ser revestidos de acordo com os métodos bem-conhecidos na prática farmacêutica normal. Os preparados líquidos orais podem estar na forma, por exemplo, de suspensões, soluções, emulsões, xaropes ou elixires aquosos ou oleosos, ou podem ser apresentados como um produto seco para reconstituição com água ou um outro veículo apropriado antes da utili- zação. Tais preparados líquidos podem conter aditivos convencionais tais como agentes de suspensão, por exemplo, sorbitol, xarope, metil celulose, xarope de glicose, gelatina, gorduras hidrogenadas comestíveis; agentes de emulsificação, por exemplo, lecitina, mono-oleato de sorbitano ou acácia; veículos não aquosos (que podem incluir óleos comestíveis), por exemplo, óleo de amêndoas, óleo de coco fracionado, ésteres oleosos tais como a glicerina, propileno glicol ou álcool etílico; conservantes, por exemplo, p- hidróxi benzoato de metila ou de propila ou ácido sórbico e, caso desejado, agentes flavorizantes ou corantes convencionais.

Para a aplicação tópica por meio de inalação, o fármaco pode ser formulado para a aplicação em aerossol, por exemplo, por atomizadores a jato dirigidos por pressão ou por atomizadores ultrassônicos, ou de prefe- rência, por aerossóis aplicados dirigidos por propelente ou pela administra- ção livre de propelente de pós micronizados, por exemplo, cápsulas de ina- lação ou outros "sistemas de aplicação de pó seco". Os excipientes, tais co- mo, por exemplo, os propelentes (por exemplo, Frigen, no caso dos aeros- sóis aplicados), substâncias tensoativas, emuIsificantes, estabilizantes, con- servantes, flavorizantes e cargas (por exemplo, Iactose no caso de inalado- res em pó) podem estar presentes em tais formulações inaladas. Para as finalidades de inalação, um grande número de aparelhos está disponível com os quais aerossóis com tamanho de partícula mais favorável podem ser gerados e administrados, ao utilizar uma técnica de inalação que seja apro- priada para o paciente. Além da utilização de adaptadores (espaçadores, expansores) e de recipientes em formato de pera (por exemplo, Nebulator®, Volumatic®) e dispositivos automáticos que emitem um spray de sopro (Au- tohaler®), para aerossóis aplicados, em particular no caso de inaladores em pó, uma série de soluções técnicas está disponível (por exemplo, Diskha- ler®, Rotadisk®, Turbohaler® ou inaladores, por exemplo, tal como descrito no Pedido de Patente Europeu EP 0505 321).

Para a aplicação tópica à pele, o fármaco pode ser composto em um creme, uma loção ou uma pomada. As formulações em creme ou em pomada que podem ser utilizadas para a fármaco são as formulações con- vencionais bem-conhecidas no estado da técnica, por exemplo, tal como descrito em livros-texto de farmacêutica padrão, tal como a British Pharma- copoeia.

Para a aplicação tópica ao olho, a fármaco pode ser composto em uma solução ou em uma suspensão em um veículo aquoso ou não a- quoso estéril apropriado. Aditivos, por exemplo, tampões, tais como o meta- bissulfito de sódio ou o edeato dissódico; conservantes incluindo agentes bactericidas e fungicidas tais como o acetato de fenila ou nitrato de mercúrio, cloreto de benzalcônio ou clorexidina e agentes espessantes tais como a hipromelose, também podem ser incluídos.

O ingrediente ativo também pode ser administrado parenteral- mente em um meio estéril. Dependendo do veículo e da concentração utili- zados, a fármaco pode ser suspenso ou dissolvido no veículo. Vantajosa- mente, auxiliares tais como agentes anestésicos locais, conservantes e tam- ponantes podem ser dissolvidos no veículo.

Síntese

Há múltiplas estratégias sintéticas para a síntese dos compos- tos (I) de acordo com a presente invenção, mas todos se baseiam na quími- ca conhecida, conhecida pelo químico orgânico de síntese. Desse modo, os compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser sintetizados de acordo com os procedimentos descritos na literatura padrão e são bem-conhecidos pelo elemento versado na técnica. As fontes de literatura típicas são "Ad- vanced organic chemistry", 4a edição (Wiley), J. March, "Comprehensive Or- ganic Transformatiori", 2a edição (Wiley), R. C. Larock, "Handbook of Hete- rocyclic Chemistry', 2a edição (Pergamon), A. R. Katritzky), artigos de revi- são tais como aqueles encontrados em "Synthesis", "Acc. Chem. Res.", "Chem. Rev." ou fontes de literatura principais identificadas por buscas de literatura padrão online ou a partir de fontes secundárias tais como "Chemi- cal Abstracts" ou "Beilsteiri". As vias sintéticas utilizadas na preparação dos compostos dos exemplos abaixo podem ser ajustadas para a preparação de compostos análogos.

Abreviaturas

MeOH = metanol

EtOH = etanol

EtOAc = acetato de etila

Boc = terc-butóxi carbonila

DCM = diclorometano

DMF = dimetilformamida

DMSO = sulfóxido de dimetila

TFA = ácido trifluoroacético

THF = di-hidrofurano

Na2C03 = carbonato de sódio

K2CO3 = carbonato de potássio

HCI = ácido clorídrico

aq = solução aquosa

DIPEA = diisopropiletilamina

NaH = hidrato de sódio

NaOH = hidróxido de sódio

NaHCO3 = carbonato de sódio hidrogenado

Pd/C = paládio em carbono

TBME = éter metil terc-butílico

N2 = nitrogênio

PyBop = benzotriazol-1-il-óxi-tris-pirrolidino-hexafluorofosfato de fosfônio

Na2SO4 = sulfato de sódio

Et3N = trietilamina

NH3 = amônia

TMSCI = trimetil clorossilano

NH4CI = cloreto de amônio

LiAIH4 = hidrato de alumínio e lítio

PyBrOP = bromo-tris-pirrolidino hexafluorofosfato de fosfônio

MgSO4 = sulfato de magnésio

nBuLi = n-butil lítio CO2 = dióxido de carbono

EDCI = A/-(3-dimetilaminopropil)-A/-cloridrato de etil carbodiimida

Et2O = éter dietílico

LiOH = hidróxido de lítio

HOBt = 1-hidróxi benzotriazol

TLC = cromatografia de camada fina

LCMS = cromatografia líquida/espectrometria de massa

ml = mililitro(s)

g = grama(s)

mg = miligrama(s)

mol = moles

mmol = milimole(s)

HPLC = cromatografia líquida de alto desempenho

NMR = ressonância magnética nuclear

RT = temperatura ambiente

h = hora(s)

Os seguintes exemplos ilustram a preparação de compostos específicos da invenção e as propriedades inibidoras de HDAC destes:

Rota I - Utilizados para a preparação do intermediário A e do intermediário B:

<formula>formula see original document page 34</formula>

Rota II - Utilizados para a preparação do intermediário C:

<formula>formula see original document page 34</formula>

Rota III - Utilizados para a preparação do intermediário D:

<formula>formula see original document page 34</formula> Esquema 1

Compostos preparados:

<formula>formula see original document page 35</formula>

Figura 1

Síntese dos compostos esboçados na Figura 1

Rota I (exemplificada para o intermediário B)

Estágio 1 - Formação do éster

<formula>formula see original document page 35</formula>

A uma solução de ácido (S)-2-terc-butoxicarbonilamino-3-ciclo- hexil propiônico (5 g, 19,4 mmols) em DMF (50 ml) a 0°C, foram adicionados ciclopentanol (8,8 ml, 97,15 mmols), EDCI (4,09 g, 21,37 mmols) e finalmen- te DMAP (237 mg, 1,94 mmol). A mistura de reação foi aquecida a TA e agi- tada por 18 horas.

A DMF foi removida in vácuo para se obter um óleo transparen- te. Isto foi separado entre a água e EtOAc. A fase orgânica foi seca (MgSO4) e concentrada in vácuo. O extrato bruto foi purificado por meio de cromato- grafia de coluna (25% de EtOAC em heptano) para se obter o produto dese- jado como um óleo transparente (14,87 g, 55%). 1H NMR (300 MHz, Ci6- DMSO) δ: 7,09 (1Η, d), 5,08 (1Η, t), 3,76 (1H, t), 1,50-1,85 (10H, br m), 1,39 (9H, s), 1,00-1,25 (9H, br m).

Estágio 2 - Desproteção de Boc para se obter o cloridrato de acetato de (2S)-amino(ciclo-hexil)ciclo-pentila (Intermediário B)

<formula>formula see original document page 36</formula>

O produto do estágio 1 (14,87 g, 45,69 mmols) foi dissolvido em DCM (100 ml) e tratado com HCI a 4M/dioxano (22,8 ml, 91,38 mmols) e a mistura de reação foi agitada a TA por 24 horas. A mistura bruta foi con- centrada sob pressão reduzida para se obter um óleo alaranjado. Este foi triturado com Et2O para se obter um precipitado branco. Este foi lavado adi- cionalmente com Et2O para se obter o produto desejado como um pó branco (7,78 g, 65%). 1H NMR (300 MHz, de-DMSO)õ: 8,45 (3H, br s), 5,22 (1H, t), 3,28 (1H, d), 1,95-1,50 (10H, brm), 1,30-0,90 (9H, br m).

Rota II

Estágio 1 - Formação do éster para se obter 4-metil benzeno sulfonato de (1S)-2-(ciclopentilóxi)-2-oxo-1-feniletanamínio (Intermediário C)

<formula>formula see original document page 36</formula>

A uma suspensão de (S)-fenil glicina (5 g, 33,1 mmols) em ciclo-hexano (150 ml), foram adicionados ciclopentanol (29,84 ml, 331 mmols) e ácido p- tolueno sulfônico (6,92 g, 36,4 mmols). A reação foi ajustada com um recep- tor Dean-Stark e aquecida até 135°C para a dissolução completa. Após 12 horas, a reação foi resfriada até a RT, resultando na precipitação de um sóli- do branco. O sólido foi filtrado e lavado com EtOAc antes da secagem sob pressão reduzida para se obter o produto requerido como um pó branco (11,01 g, 85%). 1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ 8,82 (2H, br s), 8,73 (1H, br s), 7,47 (7H, m), 7,11 (2H, d), 5,25 (1H, br s), 5,18 (1H, m), 2,29 (3H, s), 1,87-1,36 (8Η, m).

Rota III

Estágio 1 - Formação do éster

A uma solução de ácido (S)-2-benziloxicarbonilamino-3-terc-birtóxi propiôni- co (25 g, 84,65 mmols) em DMF (250 ml) a 0°C, foram adicionados ciclopen- tanol (15,36 ml, 169,3 mmols), EDCI (17,85 g, 93,11 mmols) e finalmente DMAP (1,03 g, 8,46 mmols). A mistura de reação foi aquecida a TA e agita- da por 18 horas.

A DMF foi removida in vácuo para se obter um óleo amarelo. Este foi dividido entre a água e EtOAc. A fase orgânica foi seca (MgSO4) e concentrada in vácuo. O extrato bruto foi purificado por meio de cromatogra- fia de coluna (25% de EtOAC em heptano) para se obter o produto desejado como um óleo transparente. Este foi utilizado diretamente no estágio seguin- te sem caracterização.

Estágio 2- Desproteção de Cbz para se obter O-íerc-òutil-L-serinato de ciclo- pentila (Intermediário D)

O produto do estágio 1 foi dissolvido em EtOAc (150 ml), trata- do com Pd(OH)2 (10% molar) e agitado sob uma atmosfera de hidrogênio por 32 horas. Quando da conclusão, o catalisador foi removido por meio de filtração através de Celite e o material filtrado foi concentrado in vácuo para se obter o produto desejado como um óleo transparente (15,96 g, 82% em duas etapas). 1H NMR (300 MHz, cfe-DMSO)õ: 5,17 (1H, t), 3,45 (1H, m), 3,34 (2H, q), 1,90-1,50 (9H, br m), 1,08 (9H, s).

Preparação de O-H-isobutoxietiDhidroxilamina (Intermediário E) <formula>formula see original document page 38</formula>

Intermediário E

Esquema 2

O Intermediário E foi preparado ao seguir a metodologia descri- ta no pedido de patente WO 01/60785,

1H NMR (300 MHz1 de-DMSO) δ: 0,85 (6H, d), 1,15 (3H, d), 1,75 (1H, m), 3,18 (1H, dd), 3,42 (1H, dd), 4,53 (1H, q), 5,82 (2H, s).

Preparação de 2-(metilsulfonil)pirimidina-5-carboxilato de etila (Inter- mediário F)

<formula>formula see original document page 38</formula>

Intermediário F

Esquema 3

Estágio 1 - Redução do cloro

<formula>formula see original document page 38</formula>

4-Cloro-2-metiltio-5-pirimidina carboxilato de etila (12,5 g, 53,88 mmols) e pó de Zn (14,1 g, 215,52 mmols) foram combinados, e benzeno (60 ml) e NH4CI a 3M (140 ml) foram adicionados. A suspensão foi agitada vigorosamente e aquecida a 80°C por 30 horas. A mistura de reação foi fil- trada através de Celite e lavada com EtOAc (200 ml). O material filtrado foi concentrado in vácuo até cerca de 50 ml e então dividido entre H2O (400 ml) e EtOAc (400 ml). A camada aquosa foi extraída adicionalmente com EtOAc (250 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e con- centradas in vácuo como um óleo escuro. Este foi purificado por meio de cromatografia de coluna (heptano puro seguido por 1:1:1 hepta- no/CH2CI2/Et20 e finalmente 2:2:0,5 heptano/CH2CI2/Et20). O produto dese- jado foi obtido como um óleo incolor (13 g, 61%). m/z = 199 [M+H]\ 1H NMR (300 MHz, Cf6-DMSO) δ: 1,30 (3H, t), 2,60 (3H, s), 4,35 (2H, q), 9,0 (2H, s).

Estágio 2- Oxidação do sulfeto para se obter 2-(metilsulfonil)pirimidina-5- carboxilato de etila (Intermediário F)

<formula>formula see original document page 39</formula>

A uma solução agitada do produto do estágio 1 (13 g, 47,59 mmols) em THF seco (250 ml) foi lentamente adicionada durante 30 minutos uma solução de mCPBA (47,59 g, 275,76 mmols) em THF (150 ml) a O°C sob N2. A mistura de reação foi colocada para aquecer até a RT e agitada por 2 horas. A mistura de reação foi então concentrada in vácuo até cerca de 100 ml e a mistura de produto/ácido benzóico foi pré-absorvida em sílica-gel. A purificação foi obtida através da cromatografia de coluna (hexano puro inicialmente, a seguir 1:5:3 CH2CI2ZheptanoZEt2O, seguido por 1:1:1 CH2CI2ZheptanoZEt2O). O composto desejado foi obtido como um sólido branco (10 g, 66%). mZz = 231 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, Gf6-DMSO) δ: 1,40 (3H, t), 3,50 (3H, s), 4,40 (2H, q), 9,50 (2H, s).

Preparação de 3-azabiciclor3,1,01hex-6-ilmetanol (Intermediário G)

<formula>formula see original document page 39</formula>

Esquema 4

Estágio 1 - Reação de Diels Alder

<formula>formula see original document page 39</formula> N-benzil maleimida (50 g, 267,1 mmols) foi dissolvida em Et2O (600 ml), tratada com diazoacetato de etila (31 ml, 293,8 mmols) e agitada a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 36 horas. Um precipitado branco foi formado, de modo que foi isolado por meio de filtração, lavado com Et2O ge- lado e seco para se obter o composto desejado como um sólido branco (72 g, 89%). m/z = 302 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 Cf6-DMSO) δ: 1,20 (3H, t), 4,15 (2H, q), 4,55 (2H, s), 4,60 (1H, d), 5,00 (1H, d), 7,15-7,35 (5H, m), 9,60 (1H,s).

Estágio 2 - Condensação

<formula>formula see original document page 40</formula>

O produto do estágio 1 (72 g, 239,2 mmols) foi aquecido a 160°C até que derreta como um óleo amarelo. O óleo foi aquecido adicio- nalmente até 200°C e começou a borbulhar. O óleo foi aquecido até 200°C por 30 minutos até que as borbulhas diminuíram. O óleo agora na cor âmbar foi resfriado até a RT e triturado com Et2O gelado. O precipitado resultante foi filtrado e lavado com mais Et2O gelado para se obter o produto como um sólido creme (37,2 g, 57%). 1H NMR (300 MHz, Cf6-DMSO) δ: 1,20 (3H, t), 2,80 (1H, t), 3,00 (2H, d), 4,15 (2H, q), 4,35 (2H, s), 7,20-7,40 (5H, m).

Estágio 3 - Redução

O produto do estágio 2 (37,2 g, 136,3 mmols) foi dissolvido em THF seco (400 ml). Esta solução foi adicionada por gotejamento a 0°C a uma suspensão de LiAIH4 (20,7 g, 545,3 mmols) em THF seco (200 ml). A suspensão marrom resultante foi aquecida a 60°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 36 horas. A mistura foi então resfriada até 0°C e resfriada bruscamente com cuidado com NH4CIaq saturado. Um sólido cinzento foi formado e mais THF foi adicionado para permitir uma agitação adequada. Na2SO4 sólido foi adicionado à mistura que foi agitada a TA por 30 minutos. A mistura foi então filtrada através de Celite para se obter uma solução ama- rela pálida. Esta foi concentrada in vácuo para se obter o produto desejado como um óleo alaranjado (14,1 g, 51%). m/z = 204 [M+Hf, 1H NMR (300 MHz1 d6-DMSO) δ: 2,25 (2H, d), 2,85 (2H, d), 3,20 (2H, t), 3,55 (2H, s), 4,35 (1H, t), 7,20-7,40 (5H,m).

Estágio 4 - Desproteção do nitrogênio para se obter 3-azabiciclo[3,1,0]hex-6- ilmetanol (Intermediário G)

O produto do estágio 3 (7,5 g, 37,0 mmols) foi dissolvido em MeOH seco (250 ml) a TA. Pd(OH)2 (1,5 g) foi adicionado à solução e a rea- ção foi ajustada com um balão de hidrogênio. A reação foi desgaseificada duas vezes e foi purgada com H2. A reação foi colocada sob agitação por 6 horas e purgada com um balão de hidrogênio fresco e foi colocada para agi- tar por mais 64 horas. A mistura de reação foi então filtrada através de Celi- te. O solvente foi removido in vácuo e o resíduo foi seco para se obter o pro- duto como um sólido branco (4,1 g, 98%). m/z = 114 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ: 0,94 (1H, septeto, J = 3,3Hz), 1,37 (2H, m), 2,89 (2H, d, J = 11,4Hz), 3,02 (2H, d, J = 11,4Hz), 3,54 (2H, d, J = 6,9Hz).

Exemplo 1 <formula>formula see original document page 42</formula> <formula>formula see original document page 43</formula>

Figura 2

Síntese dos compostos esboçados na Figura 2 exemplificados para (1) e(2)

Estágio 1 - Acoplamento

<formula>formula see original document page 43</formula>

Uma suspensão de sal de HCI de piperidina-4-ona (1,16 g, 8,5 mmols) e K2CO3 (11,70 g, 85,0 mmols) foi agitada em DMF (50 ml) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 10 minutos. O Intermediário F (1,97 g, 8,5 mmols) foi então adicionado e a agitação continuou por mais 10 minutos. A reação foi então diluída com água (150 ml) e extraída com EtOAc (2 χ 200 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um sólido amarelo, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 250 [M+H]+.

Estágio 2 - Hidrólise do éster

<formula>formula see original document page 44</formula>

O produto do estágio 1 foi agitado em NaOHaq a 1M (30 ml) e THF (30ml) a TA por 4 dias. A reação foi então acidificada ao pH ~ 3 com HCIaq a 1M, e esta foi extraída com DCM (2 χ 200 ml). As camadas orgâni- cas combinadas foram secas (Is^SO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um sólido amarelo (665 mg, 35% em 2 eta- pas). m/z = 222 [M+H]+.

Estágio 3 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 44</formula>

O produto do estágio 2 (100 mg, 0,45 mmol) foi agitado em DCE (10 ml) com o Intermediário A (106 mg, 0,45 mmol) e NaBH(OAc)3 (142 mg, 0,67 mmol) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 3 dias. A reação foi então diluída com água (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As ca- madas orgânicas combinadas foram secas (Na2S04) e o solvente foi remo- vido in vácuo para se obter o produto como um sólido amarelo, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 405 [M+H]+. Estágio 4 - Formação do hidroxamato protegido <formula>formula see original document page 45</formula>

O produto do estágio 3 (182 mg, 0,45 mmol) foi agitado em DMF (10 ml) com EDCI (103 mg, 0,54 mmol), HOBt (73 mg, 0,54 mmol), Et3N (314 μL, 2,25 mmols) e o intermediário E (310 μΙ, 2,25 mmols) por 16 horas a TA sob uma atmosfera de nitrogênio. A reação foi então diluída com água (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As camadas orgânicas com- binadas então foram secas (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 15% de Me- OH em DCM) para se obter o produto como um óleo amarelo (110 mg, 47%). m/z = 520 [M+H]+.

Estágio 5 - Desproteção do hidroxamato para se obter N-{1-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4-il}-L-leucinato de ciclo-pentila (1)

<formula>formula see original document page 45</formula>

O produto do estágio 4 (110 mg, 0,21 mmol) foi agitado em DCM (20 ml) com TFA (0,5 ml) por 1 hora a TA. O solvente foi então removi- do in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido roxo (12 mg, 11%). 99% de pureza de LCMS1 m/z = 420 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 0,91 (6H, m), 1,46- 1,84 (13H, m), 2,05 (2H, m), 2,90 (2H, m), 3,42 (2H, m), 4,01 (1H, m), 4,91 (1H, m), 5,27 (1H, m), 8,58 (2H, m).

Estágio 6 - Hidrólise do éster <formula>formula see original document page 46</formula>

O produto do estágio 4 (182 mg, 0,45 mmol) foi agitado em THF (10 ml) com KOTMS (115 mg, 0,9 mmol) por 4 dias a TA sob uma at- mosfera de nitrogênio. Após este período, o solvente foi removido in vácuo e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 452 [M+H]+.

Estágio 7 - Desproteção do hidroxamato para se obter N-{1-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4-il}-L-leucina (2)

<formula>formula see original document page 46</formula>

O produto do estágio 6 (0,45 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido cor de rosa (7 mg, 5% em duas etapas). 95% de pureza de LCMS, m/z = 352 [M+H]+, insolúvel em solventes de NMR.

Os análogos esboçados na Figura 2 foram preparados pelo procedi- mento descrito para (1) e (2). Os dados para cada análogo são fornecidos.

(3)

97% de pureza de LCMS, m/z = 440 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,30-1,61 (9H, m), 1,78-1,90 (4H, m), 2,23 (2H, m), 2,90 (2H, m), 5,00 (1H, m), 5,33 (1H, m), 7,53 (5H, m), 8,69 (2H, s).

(4)

98% de pureza de LCMS, m/z = 378 [M+H]+, insolúvel em solventes de N- MR.

(5) 97% de pureza de LCMS1 m/z = 446 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 0,80-1,82 (24Η, m), 2,04 (2H, m), 2,94 (2H, m), 4,86 (1H, m), 5,23 (1H, m), 8,58 (2H, s). (6)

95% de pureza de LCMS, m/z = 372 [M+Hf, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,20 (2H, m), 1,50 (2H, m), 2,15 (2H, m), 2,80 (3H, m), 4,88 (1H, m), 7,37- 7,46 (5H, m), 8,56 (2H, s).

(7)

98% de pureza de LCMS, m/z = 450 [M+Hf, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,25 (9H, s), 1,58-1,77 (8H, br m), 1,96 (2H, m), 2,22 (2H, m), 3,02 (2H, m), 3,55 (1H, m), 3,87 (1H, dd, J = 10,8, 2,7Hz), 3,99 (1H, dd, J = 10,8, 2,7Hz), 4,45 (1H, m), 5,03 (2H, m), 5,35 (1H, m), 8,70 (2H, s).

(8)

98% de pureza de LCMS, m/z = 382 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,25 (9H, s), 1,65 (2H, m), 2,25 (2H, m), 3,01 (2H, t, J = 13,2Hz), 3,57 (1H, m), 3,91 (1H, dd, J = 10,5, 2,7Hz), 4,00 (1H, dd, J = 10,5, 2,7Hz), 4,38 (1H, m), 5,05 (2H, m), 8,70 (2H, s).

(9)

95% de pureza de LCMS, m/z = 394 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,52-1,98 (11H, m), 2,10 (2H, m), 2,87 (3H, m), 3,44 (1H, m), 3,95 (2H, m), 4,18 (1H, m), 5,25 (1H, m), 8,58 (2H, m).

Exemplo 2 <formula>formula see original document page 48</formula>

Esquema 6

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 49</formula>

Figura 3

Síntese dos compostos esboçados na Figura 3 exemplificados para (14) e (15)

Estágio 1 - Acoplamento

<formula>formula see original document page 49</formula>

O Intermediário G (0,97 g, 8,62 mmols) foi agitado em DMF (20 ml) e MeCN (20 ml) com K2CO3 (5,96 g, 43,10 mmols) a TA sob uma atmos- fera de nitrogênio por 10 minutos. O Intermediário F (2,00 g, 8,62 mmols) foi então adicionado e a reação foi colocada sob agitação por mais 20 minutos. A reação foi então diluída com água (100 ml) e extraída com EtOAc (2 χ 100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgS04) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um sólido amarelo claro, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional (1,8 g, 78%). m/z = 264 [M+H]+.

Estágio 2 - Oxidação do álcool <formula>formula see original document page 50</formula>

O produto do estágio 1 (1,80 g, 6,84 mmols) foi agitado em DCM (50 ml) a 0°C e periodinano de Dess-Martin (3,50 g, 8,22 mmols) foi adicionado. A reação foi colocada para aquecer até a RT e agitada por 4 horas. Ela foi então resfriada bruscamente com uma mistura 1:1 de NaH- C03(aq) saturada e Na2S2OKaq) saturada e a mistura resultante foi agitada por 20 minutos. A mistura foi extraída então com DCM (2 χ 100 ml) e os ex- tratos orgânicos combinados foram secos (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 10% de MeOH em DCM) para se obter o produto como um óleo amarelo (1,35 g, 72%). m/z = 262 [M+H]+.

Estágio 3 - Hidrólise do éster

O produto do estágio 2 (1,35 g, 5,17 mmols) foi agitado em NaOHaq a 1M (20 ml) e THF (20 ml) a TA por 3 horas. A reação foi então acidificada ao pH - 3 com HCIaq a 1M, o que causou a precipitação de um sólido branco. Este sólido foi filtrado, seco e retido. O filtrado foi então extra- ído com DCM (2 χ 100 ml) e as camadas orgânicas combinadas foram se- cas (Na2SO4) e o solvente removido in vácuo para se obter um sólido amare- lo claro que foi combinado com o sólido previamente obtido (990 mg, 82%). m/z = 236 [M+H]+.

Estágio 4 - Aminação redutiva <formula>formula see original document page 51</formula>

O produto do estágio 3 (175 mg, 0,75 mmol) foi agitado em DCE (10 ml) com o Intermediário B (196 mg, 0,75 mmol) e NaBH(OAc)3 (222 mg, 1,05 mmol) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 16 horas. A rea- ção foi então diluída com H2O (50 ml) e extraída com Et2O. As camadas or- gânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e o solvente foi removido in vá- cuo para se obter o produto desejado como um óleo amarelo, o qual foi utili- zado na etapa seguinte sem purificação adicional (171 mg, 52%). m/z = 443 [M+H]+.

Estágio 5 - Formação do hidroxamato protegido

<formula>formula see original document page 51</formula>

O produto do estágio 4 (171 mg, 0,39 mmol) foi agitado em DMF (10 ml) com o Intermediário E (539 μl, 3,9 mmols), EDCI (90 mg, 0,47 mmol), HOBt (63 mg, 0,47 mmol) e Et3N (543 μl, 3,9 mmols) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 16 horas. A reação foi então diluída com H2O (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As camadas orgânicas combina- das foram secas (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 10% de MeOH em DCM) para se obter o produto como um óleo incolor (91 mg, 42%). m/z = 558 [M+H]+.

Estágio 6 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil[({3-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]-3-azabiciclo[3,1,0]hex-6- il}metil)amino]acetato de ciclo-pentila (14)

<formula>formula see original document page 52</formula>

O produto do estágio 5 (91 mg, 0,163 mmol) foi agitado em 1:1 MeOH/DCM (4 ml) com TFA (2 ml) a TA por 1 hora. O solvente foi então re- movido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto desejado como um sólido branco (15 mg, 20%). 98% de pureza de LCMS, m/z = 558 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,92-1,38 (6H, m), 1,73-1,95 (16H, m), 3,09 (2H, m), 3,62 (2H, d, J = 11,4Hz), 3,91 (1H, d, J = 3,6Hz), 4,00 (2H, d, J = 11,4Hz), 5,51 (1H, m), 8,67 (2H, s).

Estágio 7 - Hidrólise do éster

<formula>formula see original document page 52</formula>

O produto do estágio 5 (161 mg, 0,29 mmol) foi agitado em THF (10 ml) com KOTMS (74 mg, 0,58 mmol) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 48 horas. Mais KOTMS (112 mg, 0,87 mmol) foi então adicio- nado e a reação foi agitada a 50°C por 48 horas. O solvente foi então remo- vido in vácuo e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adi- cional. m/z = 490 [M+Hf]+.

Estágio 8 - Desproteção do hidroxamato para se obter o ácido (2S)-ciclo- hexil[({3-[5-(hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]-3-azabiciclo[3,1,0]hex-6- il}metil)amino]acético (15) <formula>formula see original document page 53</formula>

O produto do estágio 7 (0,29 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido branco (13 mg, 12%). 99% de pureza de LCMS, m/z = 390 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,96 (1H, m), 1,10-1,47 (6H, m), 1,72-1,87 (6H, m), 1,99 (1H, m), 2,99 (1H, m), 3,18 (1H, m), 3,63 (2H, dd, J = 11,7, 3,3Hz), 3,85 (1H, d, J = 3,3Hz), 3,99 (2H, d, J = 11,7Hz), 8,67 (2H, s).

Os análogos esboçados na Figura 3 foram preparados pelo procedi- mento descrito para (14) e (15). Os dados para cada análogo são fornecidos.

(10)

95% de pureza de LCMS, m/z = 452 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,41-1,64 (6H, m), 1,72-1,93 (5H, m), 2,88 (2H, m), 3,60 (2H, m), 3,97 (2H, d, J = 10,5Hz), 5,26 (1H, s), 5,32 (1H, m), 7,51 (5H, m), 8,67 (2H, s).

(11)

97% de pureza de LCMS, m/z = 384 [M+Hf, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,94 (1H, m), 1,83 (2H, m), 3,01 (2H, d, J = 7,5Hz), 3,62 (2H, m), 3,96 (2H, d, J = 11,7Hz), 5,07 (1H, s), 7,53 (5H, m), 8,67 (2H, s).

(12)

95% de pureza de LCMS, m/z = 462 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,99 (1 Η, m), 1,24 (9H, s), 3,11 (2H, dd, J = 7,5, 2,4Hz), 3,63 (2H, dd, J = 12,0, 3,1Hz), 3,91 (2H, ddd, J = 24,6, 10,8, 3,3Hz), 4,01 (2H, d, J = 11,7Hz), 4,26 (1H, m), 5,35 (1H, m), 8,68 (2H, s).

(13)

98% de pureza de LCMS, m/z = 394 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,01 (1 Η, m), 1,25 (9Η, s), 1,88 (2Η, m), 3,11 (2Η, d, J = 7,5Hz), 3,64 (2Η, dd, J = 11,7, 3,9Hz), 3,90 (2Η, m), 4,01 (2Η, d, J = 11,7Hz), 4,14 (1H, m), 8,67 (2H, s).

Exemplo 3

<formula>formula see original document page 54</formula>

Esquema 7

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 55</formula>

Figura 4

Síntese dos compostos esboçados na Figura 4 exemplificados para (18) e (19)

Estágio 1 - Acoplamento

<formula>formula see original document page 55</formula>

Piperidin-4-il-metanol (2,48 g, 21,55 mmols) foi agitado a 1:1 DMF/MeCN (20 ml) com K2CO3 (8,9 g, 64,65 mmols) por 10 minutos a TA sob uma atmosfera de nitrogênio. 0 Intermediário F (5 g, 21,55 mmols) foi então adicionado e a reação foi colocada sob agitação por 20 minutos. Foi então diluída com H2O (100 ml) e extraída com EtOAc (2 χ 100 ml). As ca- madas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e o solvente foi removi- do in vácuo para se obter o produto como um sólido alaranjado, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional (5,70 g, 99%). m/z = 266 [M+H]+.

Estágio 2- Hidrólise do éster

<formula>formula see original document page 56</formula>

O produto do estágio 1 (5,70 g, 21,51 mmols) foi agitado em 1M de NaOHaq (20 ml) e THF (20 ml) a TA por 48 horas. A reação foi então acidificada ao pH ~ 3 com HCIaq a 2M, causando a precipitação de um sóli- do. Este foi coletado e seco in vácuo para se obter o produto como um sólido branco (4,47 g, 89%). m/z = 238 [M+H]+.

Estágio 3 - Formação do hidroxamato protegido

<formula>formula see original document page 56</formula>

O produto do estágio 2 (4,47 g, 18,86 mmols) foi agitado em DMF (50 ml) com o Intermediário E (13,00 ml, 94,30 mmols), EDCI (4,33 g, 22,60 mmols), HOBt (3,05 g, 22,60 mmols) e Et3N (13,10 ml, 94,30 mmols) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 48 horas. A reação foi então diluída com H2O (200 ml) e extraída com DCM (2 χ 200 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo. O re- síduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 15% de MeOH em DCM) para se obter o produto como um óleo amarelo (5,12 g, 77%). m/z = 353 [M+H]+.

Estágio 4 - Oxidação do álcool Uma solução de (COCI)2 (253 μΙ, 2,90 mmols) em DCM (50 ml) foi agitada sob uma atmosfera de nitrogênio e resfriada até uma temperatura interna de -70°C. A seguir, DMSO (363 μΙ, 5,11 mmols) foi adicionado lenta- mente, mantendo a temperatura a -70°C. Quando a adição estava completa, uma solução do produto do estágio 3 (1,00 g, 2,84 mmols) em DCM (50 ml) foi adicionada lentamente, mantendo outra vez a temperatura interna a - 70°C. Quando a adição estava completa, Et3N (1,70 ml, 12,21 mmols) foi adicionada lentamente, mantendo outra vez a temperatura interna a -70°C. A reação foi colocada para aquecer até a RT e o solvente foi então removido in vácuo. O resíduo foi então purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 10% de MeOH em DCM) para se obter o produto como um óleo incolor (890 mg, 89%). m/z = 351 [M+H]+. Estágio 5 - Aminação redutiva

O produto do estágio 4 (100 mg, 0,28 mmol) foi agitado em DCE (10 ml) com o Intermediário B (73 mg, 0,28 mmol) e NaBH3CN (35 mg, 0,56 mmol) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 16h. A reação foi então diluída com H2O (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As camadas or- gânicas combinadas foram secas (MgSO4) e o solvente foi removido in vá- cuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 10% de MeOH em DCM) para se obter o produto como um óleo incolor (145 mg, 92%). m/z = 560 [M+H]+.

Estágio 6 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil[({1-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4-il}metil)amino]acetato de ciclo- pentila (18)

<formula>formula see original document page 58</formula>

O produto do estágio 5 (145 mg, 0,26 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (0,5 ml) a TA por 10 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido roxo claro (11 mg, 9%). Pureza de LCMS > 95%, m/z 460 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,02-1,37 (8H, m), 1,73-1,94 (19H, m), 3,02 (3H, m), 3,90 (1H, m), 5,37 (1H, m), 8,67 (2H, s).

Estágio 7 - Hidrólise do éster e desproteção do hidroxamato para se obter ácido (2S)-ciclo-hexil[({1-[5-(hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4- il}metil)amino]acético (19)

<formula>formula see original document page 58</formula>

O produto do estágio 5 (78 mg, 0,14 mmol) foi agitado em Na- OHaq 1M (10 ml) e THF (10 ml) por 4 dias a 40°C. Após este período, a rea- ção foi resfriada até a RT e acidificada ao pH ~ 3 com HCIaq a 1M. Esta mis- tura foi agitada por 10 minutos e foi então evaporada até a secagem. O resí- duo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto co- mo um sólido branco (1 mg, 2%). 98% de pureza de LCMS, m/z = 392 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,03-1,25 (9H, m), 1,60-1,87 (8H, m), 2,06 (1H, m), 2,85 (4H, m), 3,44 (1H, m), 8,55 (2H, s).

Os análogos esboçados na Figura 4 foram preparados pelo procedi- mento descrito para (18) e (19). Os dados para cada análogo são fornecidos. (16) 98% de pureza de LCMS1 m/z = 434 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,03 (6H, m), 1,32 (4H, m), 1,71-1,95 (15H, m), 2,90 (1H, m), 3,01 (2H, m), 4,01 (1H, m), 5,37 (1H, m), 8,68 (2H, m). (17) 97% de pureza de LCMS1 m/z = 366 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,92 (6H, m), 1,19 (3H, m), 1,58 (2H, m), 1,75 (4H, m), 1,98 (1H, m), 2,89 (4H, m), 3,70 (1H, m), 8,55 (2H, s). (20) 98% de pureza de LCMS, m/z = 454 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,19-1,62 (10H, m), 1,79-1,92 (6H, m), 2,09 (1H, m), 2,84 (1H, m), 2,97 (2H, m), 5,32 (1H, m), 7,54 (5H, m), 8,67 (2H, m) (21) 98% de pureza de LCMS, m/z = 386 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,08-1,28 (4H, m), 1,77 (2H, m), 1,98 (1H, m), 2,68-2,87 (4H, m), 4,90 (1H, m), 7,39 (5H, m), 8,54 (2H, s). (22) 98% de pureza de LCMS, m/z = 464 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,13 (9H, s), 1,56-1,71 (12H, m), 1,82 (3H, m), 2,04 (1H, m), 2,91 (3H, m), 3,81 (2H, m), 4,14 (1H, m), 5,39 (1H, m), 8,55 (2H, m). (23) 98% de pureza de LCMS, m/z = 396 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,26 (9H, s), 1,31 (4H, m), 1,94 (2H, m), 2,14 (1H, br s), 3,03 (4H, m), 3,95 (2H, m), 4,16 (1H, m), 8,67 (2H, s). (24) 98% de pureza de LCMS, m/z = 408 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,22-1,33 (3H, m), 1,53-1,73 (11H, m), 2,02 (1H, m), 2,93 (4H, m), 3,91 (2H, m), 4,02 (1H, m), 5,23 (1H, m), 8,55 (2H, s). (25) 95% de pureza de LCMS, m/z = 340 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,28 (2H, m), 1,97 (2H, m), 2,15 (1H, m), 3,07 (4H, m), 4,09 (4H, m), 4,93 (1H, m), 8,67 (2H, m). (26)

87% de pureza de LCMS1 m/z = 504 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,02-1,48 (7H, br m), 1,67-1,82 (5H, m), 2,01 (1H, m), 2,97 (2H, m), 3,13 (4H, m), 5,19 (2H, m), 7,49 (3H, m), 7,83 (4H, m), 8,59 (2H, s).

Exemplo 4

<formula>formula see original document page 60</formula>

Esquema 8

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 61</formula>

Figura 5

Síntese dos compostos esboçados na Figura 5 exemplificados para (27) e (28)

Estágio 1 - Proteção de Boc

<formula>formula see original document page 61</formula>

Ácido 4-(aminometil)benzóico (10,00 g, 65,36 mmols) foi agita- do com Boc2O (28,00 g, 130,72 mmols) em H2O (100 ml) e THF (100 ml) a TA. NaHCO3U) saturado foi adicionado até que um pH ~ 6 foi alcançado e a reação foi colocada sob agitação por 16 horas. A reação foi então acidificada com cuidado ao pH ~ 3 com HCIaq 1M, causando a precipitação de um sóli- do. Este foi filtrado e seco para se obter o produto como um sólido branco (16,1 g, 97%). m/z = 274 [M+Na]+.

Estágio 2 - Redução de ácido <formula>formula see original document page 62</formula>

O produto do estágio 1 (16,1 g, 64,14 mmols) foi agitado em THF (300 ml) e dioxano (200 ml) a 0°C sob uma atmosfera de nitrogênio. LiAIH4 foi então adicionado e a reação foi colocada para aquecer até a RT e sob agitação por 16 horas. Foi então resfriada até O°C e resfriada brusca- mente com NH4CIaq saturado. Na2SO4 foi adicionado, e a mistura foi agitada por 30 minutos. Foi então filtrada através de Celite e o material filtrado foi concentrado in vácuo para se obter o produto como um sólido amarelo claro (13,1 g, 94%). m/z = 260 [M+Na]+.

Estágio 3 - Oxidação do álcool

<formula>formula see original document page 62</formula>

O produto do estágio 2 (5,87 g, 24,73 mmols) foi agitado em DCM (200 ml) com MnO2 (16,71 g, 192,20 mmols) por 16 horas a TA. A rea- ção foi então filtrada através de Celite e o solvente removido in vácuo para se obter o produto como um óleo amarelo, o qual foi utilizado na etapa se- guinte sem purificação adicional (4,63 g, 80%). m/z = 258 [M+Na]+.

Estágio 4 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 62</formula>

O produto do estágio 3 (650 mg, 2,70 mmols) foi agitado em DCE (20 ml), no Intermediário A (634 mg, 2,70 mmols) e em NaBH(OAc)3 (918 mg, 4,33 mmols) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 3 horas. Após este período, a reação foi diluída com H2O (50 ml) e extraída com Et2O (2 χ 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um óleo mar- rom, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional (1,1 g, 98%). m/z = 419 [M+H]+.

Estágio 5 - Desproteção de Boc

<formula>formula see original document page 63</formula>

O produto do estágio 4 (1,1 g, 2,63 mmols) foi agitado em DCM (5 ml) com HCI 4M em dioxano (2 ml) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 3 horas. O solvente foi removido in vácuo e o resíduo seco para se obter o produto como um sólido marrom como o sal de HCI (670 mg, 100%). m/z = 319 [M+H]+.

Estágio 6 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 63</formula>

Ácido 2-(4-oxopiperidin-1 -il)pirimidina-5-carboxílico (preparado tal como descrito no exemplo 1-100 mg, 0,45 mmol) foi agitado em DCE (10 ml) com o produto do estágio 5 (159 mg, 0,45 mmol) e NaBH(OAc)3 (191 mg, 0,9 mmol) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 64 horas. A reação foi então diluída com H2O (100 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e o solvente foi re- movido in vácuo. O resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 524 [M+H]+.

Estágio 7 - Formação do hidroxamato protegido <formula>formula see original document page 64</formula>

O produto do estágio 6 (0,45 mmol) foi agitado em DMF (10 ml) com o Intermediário E (621 μΙ, 4,50 mmols), EDCI (103 mg, 0,54 mmol), HOBt (73 mg, 0,54 mmol) e Et3N (313 μΙ, 2,25 mmols) a TA sob uma atmos- fera de nitrogênio por 40 horas. A reação foi então diluída com H2O (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um óleo amarelo, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 639 [M+H]+.

Estágio 8 - Desproteção do hidroxamato para se obter N-{4-[({1-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4-il}amino)metil]benzil}-L-leucinato de ciclo-pentila (27)

<formula>formula see original document page 64</formula>

O produto do estágio 7 (0,45 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido cor de rosa (15 mg, 6% sobre 3 etapas). 96% de pureza de LCMS1 m/z = 639 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,00 (6H, m), 1,61-1,95 (12H, m), 2,28 (2H, m), 3,04 (3H, m), 4,01 (1H, m), 4,29 (4H, m), 5,04 (2H, m), 5,34 (1H, m), 7,60 (4H, m), 8,70 (2H, s).

Estágio 9 - Hidrólise do éster <formula>formula see original document page 65</formula>

O produto do estágio 7 (0,45 mmol) foi agitado em THF (10 ml) com KOTMS (115 mg, 0,9 mmol) por 96 horas a TA sob uma atmosfera de nitrogênio. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 571 [M+H]+. Estágio 10 - Desproteção do hidroxamato para se obter N-{4-[({1-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4-il}amino)metil]benzil}-L-leucina (28)

<formula>formula see original document page 65</formula>

O produto do estágio 9 foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido branco (5mg, 3%). m/z = 471 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, C16- DMSO) δ: 0,9 (6H, d, J = 4,8Hz), 1,51 (2H, m), 1,71 (2H, m), 2,19 (2H, m), 3,00 (4H, m), 4,42 (2H, br s), 3,75 (1H, m), 4,22 (4H, m), 4,80 (2H, m), 7,52 (4H, m), 8,71 (2H, s), 8,98 (2H, brs), 11,01 (1H,s).

Os análogos esboçados na Figura 5 foram preparados pelo procedi- mento descrito para (27) e (28). Os dados para cada análogo são forne- cidos.

(29) 99% de pureza de LCMS, m/z = 565 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, ck-DMSO) δ: 0,88 (2H, m), 1,05-1,30 (5H, m), 1,50-1,85 (18H, m), 2,18 (2H, m), 3,00 (2Η, m), 2,25 (2Η, m), 4,80 (2Η, m), 5,17 (2Η, m), 7,54 (4Η, m), 8,71 (2Η, s), 8,93 (2Η, m), 9,45 (1Η, br s), 11,10 (1H, s).

(30)

95% de pureza de LCMS, m/z = 497 [M+H]\ 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,80-1,34 (6H, m), 1,49-1,68 (5H, m), 1,85 (1H, m), 2,17 (2H, m), 2,93 (4H, m), 3,58 (1H, m), 4,20 (4H, m), 4,93 (2H, m), 7,51 (4H, m), 8,59 (2H, m).

(31)

98% de pureza de LCMS, m/z = 569 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,22 (9H, s), 1,51-1,84 (11H, m), 2,18 (2H, m), 2,93 (3H, m), 3,44 (1H, m), 3,79 (2H, qd, J = 7,8, 3,3Hz), 4,24 (4H, m), 4,93 (2H, m), 5,22 (1H, m), 7,52 (4H, m), 8,59 (2H, s).

(32)

96% de pureza de LCMS, m/z = 501 [M+H]\ 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,25 (9H, s), 1,62 (2H, m), 2,29 (2H, m), 3,07 (4H, m), 3,85 (2H, m), 4,35 (4H, m), 5,07 (2H, m), 7,63 (4H, m), 8,71 (2H, m).

(33)

98% de pureza de LCMS, m/z = 559 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,31-1,93 (12H, m), 2,29 (2H, m), 3,04 (3H, m), 3,56 (1H, m), 4,22 (4H, m), 5,17 (2H, m), 5,30 (1H, m), 7,47-7,43 (9H, m), 8,69 (2H, s).

(34)

95% de pureza de LCMS, m/z = 491 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,63 (2H, m), 2,29 (2H, m), 3,06 (2H, m), 3,29 (2H, m), 3,56 (1H, m), 4,20 (4H, m), 5,07 (1H, m), 7,54 (9H, m), 8,70 (2H, s).

Exemplo 5 <formula>formula see original document page 67</formula>

Esquema 9

Compostos preparados:

<formula>formula see original document page 67</formula>

Figura 6

Estágio 1 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 67</formula>

(2S)-{[4-(aminometil)benzil]amino}(fenil)acetato de ciclo-pentila (preparado tal como descrito no exemplo 4-100 mg, 0,29 mmol) foi agitado com 2-(6-formil-3-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-N-(1 -isobutoxietoxi)pirimidina-5- carboxamida (preparada tal como descrito no exemplo 2-108 mg, 0,29 mmol) e NaBH3CN (36 mg, 0,58 mmol) em DCE (10 ml) a TA sob uma at- mosfera de nitrogênio por 16 horas. A reação foi então diluída com H2O (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo. O resíduo foi purifi- cado por meio de cromatografia de coluna (0 a 10% de MeOH em DCM) pa- ra se obter o produto como um óleo amarelo (56 mg, 29%). m/z = 671 [M+H]+.

Estágio 2 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-[(4-{[({3-[5- (hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]-3-azabiciclo[3,1,0]hex-6- il}metil)amino]metil}benzil)amino](fenil)acetato de ciclo-pentila (35)

<formula>formula see original document page 68</formula>

O produto do estágio 1 (56 mg, 0,08 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 15 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido cor de rosa (12 mg, 25%). m/z = 571 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,98 (1H, m), 1,31-1,64 (6H, m), 1,76- 1,93(4H, m), 3,09 (2H, d, J = 7,5Hz), 3,61 (2H, d, J = 10,5Hz), 3,98 (2H, d, J = 10,5Hz), 4,15 (2H, m), 4,27 (3H, m), 5,31 (1H, m), 7,57 (9H, m), 8,66 (2H, s).

Exemplo 6 <formula>formula see original document page 69</formula>

preparado como descrito no

estágio

Esquema 10

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 70</formula>

Figura 7

Legenda: ciclopentila

Síntese dos compostos esboçados na Figura 7 exemplificados para (38) e (39)

Estágio 1 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 70</formula>

(2S)-{[4-(aminometil)benzil]amino}(4-metilciclo-hexil)acetato de ciclo-pentila (preparado tal como descrito no exemplo 4-100 mg, 0,29 mmol) foi agitado com 2-(4-formilpiperidin-1-il)-N-(1-isobutoxietoxi)pirimidina- 5-carboxamida (preparada tal como descrito no exemplo 3-110 mg, 0,29 mmol) em DCE (10 ml) com NaCNBH3 (36 mg, 0,58 mmol) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 16 horas. A reação foi então diluída com H2O (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um óleo amarelo, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 701 [M+Na]+.

Estágio 2 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil[(4- {[({1-[5-(hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4- il}metil)amino]metil}benzil)amino]acetato de ciclo-pentila (38)

<formula>formula see original document page 71</formula>

O produto do estágio 1 foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido roxo (14 mg, 8% em duas etapas). Pureza de LCMS > 95%, m/z = 579 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,01-1,42 (10H, m), 1,74-2,12 (18H, m), 3,01 (2H, m), 3,82 (1H, m), 4,28 (4H, m), 5,31 (1H, m), 7,61 (4H, m), 8,66 (2H, m).

Estágio 3 - Hidrólise do éster

<formula>formula see original document page 71</formula>

O produto do estágio 1 (100 mg, 0,28 mmol) foi agitado em THF (10 ml) com KOTMS (180 mg, 1,40 mmol) a 50°C sob uma atmosfera de nitrogênio. A reação foi colocada para resfriar até a RT e o solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem puri- ficação adicional, m/z = 611 [M+H]+.

Estágio 4 - Desproteção do hidroxamato para se obter ácido (2S)-ciclo- hexil[(4-{[({1-[5-(hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4- il}metil)amino]metil}benzil)amino]acético (39)

<formula>formula see original document page 72</formula>

O produto do estágio 3 foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido cor de rosa (19 mg, 13% em duas etapas). Pureza de LCMS > 95%, m/z = 511 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,16-1,41 (9H, m), 1,69-1,91 (8H, m), 2,12 (1H, m), 2,99 (4H, m), 4,29 (4H, m), 4,92 (1H, m), 7,62 (4H, m), 8,66 (2H, s).

Os análogos esboçados na Figura 7 foram preparados pelo procedi- mento descrito para (38) e (39). Os dados para cada análogo são forne- cidos.

(36)

98% de pureza de LCMS1 m/z = 553 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, de-DMSO) δ: 0,90 (6H, m), 1,12 (2H, m), 1,28 (2H, d, J = 6,6Hz), 1,65 (9H, m), 1,72 (3H, m), 2,03 (1H, m), 2,73 (2H, m), 2,96 (2H, t, J = 12Hz), 4,20 (4H, m), 4,72 (2H, d, J = 13,5Hz), 5,20 (1H, m), 7,54 (4H, m), 8,66 (2H, s), 8,95 (2H, br s), 9,60 (1H, br s), 11,05 (1H, s).

(37)

97% de pureza de LCMS, m/z = 485 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,87 (6H, m), 1,29 (4H, m), 1,77 (5H, m), 2,00 (1H, m), 2,88 (4H, m), 3,88 (1H, m), 4,18 (4H, m), 7,52 (4H, s), 8,61 (2H, s).

(40)

99% de pureza de LCMS, m/z = 583 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,24 (9H, s), 1,41 (2H, d, J = 6,6Hz), 1,69-1,95 (12H, br m), 2,15 (1H, br s), 3,00 (4H, m), 3,93 (2H, m), 4,20 (1H, m), 4,31 (4H, m), 5,34 (1H, m), 7,63 (4H, m), 8,66 (2H, s).

(41) 99% de pureza de LCMS1 m/z = 515 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 1,25 (9H, s), 1,29 (4H, m), 1,89 (2H, m), 2,12 (1H, br s), 3,01 (4H, m), 3,94 (2H, qd, J = 9,0, 3,9Hz), 4,12 (1H, t, J = 3,6Hz), 4,33 (4H, app. d, J = 18,6Hz), 7,63 (4H, s), 8,66 (2H, s).

(42)

98% de pureza de LCMS, m/z = 573 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, Cf6-DMSO) δ: 1,13-1,83 (12H, br m), 2,04 (1H, m), 2,85 (2H, m), 2,96 (2H, t, J = 12Hz), 3,99 (2H, m), 4,15 (2H, m), 4,70 (2H, d, J = 13,2Hz), 5,16 (2H, m), 7,51 (9H, m), 8,66 (2H, s), 8,97 (2H, br s), 10,13 (1H, br s), 11,05 (1H, s). (43)

99% de pureza de LCMS, m/z = 505 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 0,89 (1H, m), 1,08 (2H, m), 1,77 (3H, m), 2,01 (1H, m), 2,90 (4H, m), 4,08 (4H, m), 4,94 (1H, s), 7,45 (9H, m), 8,55 (2H, s).

(44)

99% de pureza de LCMS, m/z = 528 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,30 (3H, m), 1,67-1,78 (11H, m), 2,12 (1H, m), 3,02 (4H, m), 4,06 (3H, m), 4,33 (4H, app. d, J = 18Hz), 5,34 (1H, m), 7,66 (4H, m), 8,66 (2H, s).

(45)

96% de pureza de LCMS, m/z = 459 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,25 (4H, m), 1,89 (2H, m), 2,15 (1H, m), 2,99 (4H, m), 4,00 (1H, m), 4,09 (2H, m), 4,34 (4H, app. d, J = 21,9Hz), 7,64 (4H, m), 8,66 (2H, s).

Exemplo 7 <formula>formula see original document page 74</formula>

Esquema 11

Legenda:

estágio

dioxano

intermediário

Esquema 11

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 75</formula>

Estágio 1 - Redução de ácido

<formula>formula see original document page 75</formula>

Ácido 4-(aminometil)ciclo-hexano carboxílico (4,00 g, 25,44 mmols) foi agitado em THF (100 ml) a 0°C sob uma atmosfera de nitrogênio. LiAIH4 (2,90 g, 76,33 mmols) foi então adicionado e a reação foi colocada para aquecer até a RT e sob agitação por 3 horas. Foi então resfriada até 0°C e resfriada bruscamente com H2O. Na2SO4 foi então adicionado e a mis- tura foi agitada por 10 minutos. Foi então filtrada através de Celite e o mate- rial filtrado foi concentrado in vácuo para se obter o produto como um óleo incolor solidificado em repouso para se obter o produto como um sólido branco (3,72 g, 100%). 1H NMR (300 MHz, Cf6-DMSO) δ: 0,95 (4H, m), 1,22- 1,47 (5H, m), 1,86 (4H, m), 2,55 (2H, d, J = 6,6Hz), 4,46 (2H, d, J = 6,3Hz). Estágio 2 - Proteção de Boc

<formula>formula see original document page 75</formula>

O produto do estágio 1 (3,72 g, 26,01 mmols) foi agitado com NaOH (1,00 g, 26,01 mmols) e dicarbonato de di-terc-butila (6,24 g, 28,61 mmols) em H2O (50 ml) e dioxano (50 ml) a TA por 16 horas. A reação foi então concentrada in vácuo. Quando cerca de 50% tinham sido evaporados, um sólido se precipitou da solução e foi coletado e seco, para se obter o produto como um sólido branco (5,5 g, 87%). m/z = 266 [M+Na]+, 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ: 0,82 (4H, m), 1,28 (2H, m), 1,37 (9H, s), 1,70 (4H, m), 2,76 (2H, t, J = 6,3Hz), 3,19 (2H, d, J = 6,3Hz), 4,32 (1H, br s), 6,75 (1H, m). Estágio 3 - Oxidação do álcool <formula>formula see original document page 76</formula>

Uma solução de DCM (100 ml) e (COCl)2 (1,58 ml, 18,14 mmols) foi agitada sob uma atmosfera de nitrogênio e resfriada até -78°C. DMSO (2,27 ml, 32,02 mmols) foi então adicionado ao manter a temperatura abaixo de -65°C. Uma solução do produto do estágio 2 (4,5 g, 17,79 mmols) em DCM (50 ml) foi então preparada e adicionada lentamente à mistura de reação, mantendo outra vez a temperatura abaixo de -65°C. Quando a adi- ção estava completa, Et3N (9,99 ml, 71,69 mmols) foi adicionado lentamente, mantendo outra vez a temperatura abaixo de -65°C. Quando a adição estava completa, a reação foi colocada para aquecer até a RT e então o solvente foi removido in vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna (0 a 10% de MeOH em DCM) para se obter o produto como um óleo amarelo claro (5 g, >100% - contém um pouco de Et3N). m/z = 264 [M+Na]+, 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ: 1,02 (2H, m), 1,30 (2H, m), 1,45 (9H, s), 1,90 (2H, m), 2,03 (2H, m), 3,01 (2H, t, J = 6,3Hz), 4,57 (1H, br s), 9,63 (1H, s). Estágio 4 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 76</formula>

O produto do estágio 3 (1,00 g, 4,14 mmols) foi agitado com o Intermediário B (1,08 g, 4,14 mmols) e triacetóxi boro-hidrato de sódio (1,33 g, 6,21 mmols) em DCE (20 ml) a TA por 16 horas. A reação foi então diluída com H2O (100 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um sólido cinzento, o qual foi utilizado na etapa se- guinte sem purificação adicional (1,74 g, 94%). m/z = 451 [M+H]+. Estágio 5 - Desproteção de Boc <formula>formula see original document page 77</formula>

O produto do estágio 4 (1,74 g, 3,87 mmols) foi agitado em DCM (10 ml) com HCI a 4M em dioxano (3 ml) a TA por 16 horas. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi seco sob o vácuo para se obter o produto como um sólido branco (1,36 g, 98%). m/z = 351 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz1 drDMSO) δ: 0,90-1,20 (9H, m), 1,50-2,00 (21H, m), 2,65 (4H, m), 3,85 (1H, m), 5,25 (1H, m), 7,83 (2H, m).

Estágio 6 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 77</formula>

O produto do estágio 5 (216 mg, 0,56 mmol) foi agitado com 2- (4-formilpiperidin-1 -il)-N-(1 -isobutoxietoxi)pirimidina-5-carboxamida (prepa- rada tal como descrito no exemplo 3 - 200 mg, 0,57 mmol) e NaBH3CN (70 mg, 1,12 mmol) em DCE (10 ml) a TA sob uma atmosfera de nitrogênio por 48 horas. A reação foi então diluída com H2O (100 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (MgSO4) e o solvente foi removido in vácuo para se obter o produto como um óleo amare- lo, o qual foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

Estágio 7 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil{[(4- {[({1-[5-(hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4-il}metil)amino]metil}ciclo- hexil)metil]amino}acetato de ciclo-pentila (46)

<formula>formula see original document page 77</formula>

O produto do estágio 6 (0,28 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (0,5 ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido cor de rosa (15 mg, 9% em duas etapas). Pureza de LCMS > 95%, m/z = 585 [M+Hf, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,96- 1,39 (13H, m), 1,72-2,16 (23H, m), 2,81-3,04 (7H, m), 3,84 (2H, d, J = 3,9Hz), 5,36 (1H, m), 8,66 (2H, s).

Estágio 8 - Hidrólise do éster

<formula>formula see original document page 78</formula>

O produto do estágio 6 (0,28 mmol) foi agitado com KOTMS (180 mg, 1,4 mmol) e THF (10 ml) a 50°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 16 horas. A reação foi resfriada até a RT e o solvente foi removido in vácuo, e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional, m/z = 617 [M+H]+.

Estágio 9 - Desproteção do hidroxamato para se obter ácido (2S)-ciclo- hexil{[(4-{[({1-[5-(hidroxicarbamoil)pirimidin-2-il]piperidin-4- il}metil)amino]metil}ciclo-hexil)metil]amino}acético (47)

<formula>formula see original document page 78</formula>

O produto do estágio 8 (0,28 mmol) foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (1ml) a TA por 30 minutos. O solvente foi então removido in vácuo e o resíduo foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter o produto como um sólido branco (5 mg, 3% em duas etapas), m/z = 517 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 1,13-1,44 (11 Η, m), 1,75-1,94 (15H, m), 2,82-3,09 (8H, m), 3,39 (1H, m), 3,65 (1H, m), 4,94 (1H, m), 8,67 (2H, m).

Exemplo 8 <formula>formula see original document page 79</formula>

Legenda:

estágio

intermediário

Esquema 12

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 80</formula>

Figura 9

Estágio 1 - Acoplamento

<formula>formula see original document page 80</formula>

4-Fluorobenzoato de etila (6,75 g, 40,1 mmols) e 1,4-dioxa-8- azaspiro[4,5]decano (2,73 g, 19,1 mmols) foram agitados com K2CO3 (8,5 g, 61,5 mmols) em MeCN (10 ml) a 95°C por uma semana. A mistura foi adi- cionada a EtOAc (50 ml) e lavada com água (3 χ 50 ml). O produto orgânico foi seco (MgS04), filtrado e concentrado in vácuo. O produto foi purificado por meio de cromatografia de evaporação (2% de MeOH em DCM) para se obter um óleo amarelo (5,58 g, 48%). m/z = 292 [M+H]+.

Estágio 2 - Hidrólise do éster

<formula>formula see original document page 80</formula>

O produto do estágio 1 (5,58 g, 19,15 mmols) foi dissolvido em EtOH (25 ml) e agitado com NaOHaq a 50% (25 ml) a 60°C por 3 horas. A mistura foi resfriada até a RT e HCIaq 2M (50 ml) foi adicionado. A mistura foi então agitada a 30°C por 3 dias. O produto foi extraído com DCM (4 χ 50 ml), seco (MgSO4), concentrado in vácuo e recristalizado a partir de EtOH para se obter um sólido branco (1,459 g, 26%). m/z = 294 [M+H]+. Estágio 3 - Desproteção do acetal <formula>formula see original document page 81</formula>

O produto do estágio 2 (509 mg, 1,735 mmols) foi agitado em HCIaq 1M (15 ml) a TA por 30 minutos. A mistura foi concentrada in vácuo, adicionada à água mínima, filtrada e seca em um dessecor. O produto foi obtido como um sólido branco (279 mg, 73%). m/z = 220 [M+H]+.

Estágio 4 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 81</formula>

O produto do estágio 3 (279 mg, 1,27 mmol) e o Intermediário A (303 mg, 1,28 mmol) foram agitados em 1,2-dicloroetano (10 ml) com tria- cetóxi boro-hidrato de sódio (405 mg, 1,91 mmol) a TA até a manhã seguin- te. A mistura foi adicionada a DCM (100 ml) e lavada com água (2 χ 100 ml). 10 As camadas aquosas combinadas foram novamente extraídas com DCM (100 ml), e então os produtos orgânicos combinados foram secos (IS^SO4), filtrados e concentrados in vácuo para se obter um óleo marrom (495 mg, 97%). m/z = 403 [M+H]+.

Estágio 5 - Acoplamento do hidroxamato protegido

<formula>formula see original document page 81</formula>

O produto do estágio 4 (495 mg, 1,20 mmol) foi dissolvido em DMF e agitado com o Intermediário E (0,84 ml, 6,12 mmols), trietilamina (0,84 ml, 6,03 mmols), HOBt (228 mg, 1,49 mmol) e EDCI (295 mg, 1,54 mmol) a TA por 2 dias. A mistura foi adicionada a DCM (100 ml) e lavada com água (2 χ 100 ml). As camadas aquosas combinadas foram novamente extraídas com DCM (100 ml), e então os produtos orgânicos combinados foram secos (Na2S04), filtrados e concentrados in vácuo para se obter um óleo amarelo (638 mg, quant). m/z = 518 [M+H]+.

Estágio 6 - Desproteção do hidroxamato para se obter N-{1-[4- (hidroxicarbamoil)

fenil]piperidin-4-il}-L-leucinato de ciclo-pentila (48)

<formula>formula see original document page 82</formula>

O produto do estágio 5 (309 mg, 597 pmols) foi agitado em DCM (5 ml) e em TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. A mistura de reação foi puri- ficada diretamente por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido branco (75 mg, 30%). 95% de pureza de LCMS, m/z = 418 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7,67 (2H, d, J = 8,5Hz), 7,02 (2H, d, J = 8,5Hz), 5,38 (1H, m), 4,13 (1H, m), 4,04 (2H, d, J = 12,4Hz), 2,92 (2H, m), 1,97 (2H, m), 1,88-1,68 (13H, m), 1,04 (6H, dd, J = 6,2, 7,8Hz).

Estágio 7 - Hidrólise do éster e desproteção do hidroxamato para se obter N- {1-[4-(hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4-il}-L-leucina (49)

<formula>formula see original document page 82</formula>

O produto do estágio 5 (50 mg, 120 pmols) foi agitado em THF (5 ml) e em NaOHaq 1M (5 ml, 5 mmols) a TA por 3 dias. A mistura foi acidifi- cada ao pH ~ 3 com HCIaq 2M e agitada por 20 minutos, foi então concentra- da in vácuo e foi purificada por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido branco ( 5mg, 12%). 90% de pureza de LCMS, m/z = 350 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, dg-DMSO) δ: 10,90 (1H, s), 7,63 (2H, d, J = 8,8Hz), 6,93 (2H, d, J = 9,0Hz), 3,84 (2H, d, J = 12,9Hz), 3,24 (1H, t, J = 6,9Hz), 2,97-2,76 (3H, m), 1,96-1,74 (3H, m), 1,54-1,32 (4H, m), 0,89 (6H, t, J = 6,4Hz). Exemplo 9

<formula>formula see original document page 83</formula>

estágio

Esquema 13

Compostos preparados: <formula>formula see original document page 84</formula>

Figura 10

Estágio 1 - Acoplamento

<formula>formula see original document page 84</formula>

4-Fluorobenzoato de etila (2,740 g, 16,29 mmols) e 4-piperidina metanol (1,876 g, 16,29 mmols) foram agitados em DMSO (100 ml) com K2CO3 (6,765 g, 48,95 mmols) a 100°C até a manhã seguinte. A mistura foi resfriada até a RT e adicionada à água (100 ml). O produto foi extraído com DCM (2 χ 100 ml), seco (Na2SO4) e evaporado in vácuo para se obter um óleo amarelo. Este foi utilizado no estágio seguinte sem purificação ou ca- racterização adicional.

Estágio 2 - Hidrólise do éster

O produto do estágio 1 (16,29 mmols) foi agitado em NaOHaq a 2M (40 ml, 80 mmols) e THF (40 ml) a TA por 2 dias. Uma vez que a reação tinha mostrado pouco progresso, NaOHaq a 50% (10 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada a 55°C por mais 2 dias. A mistura foi então resfriada até a RT e o precipitado resultante foi filtrado e retido. O material filtrado foi acidifi- cado ao pH ~ 3 com HCIaq a 2M e agitado por 1 hora a TA. Uma segunda colheita do precipitado foi então filtrada. Ambas as colheitas foram secas para se obter sólidos brancos (3,052 g combinados, 80%). m/z = 236 [M+H]+.

Estágio 3 - Formação do hidroxamato protegido

<formula>formula see original document page 85</formula>

O produto do estágio 2 (3,031 g, 12,17 mmols) foi agitado em DMF (100 ml) com o Intermediário E (8,0 ml, 58,27 mmols), trietilamina (8 ml, 57,39 mmols), HOBt (2,759 g, 18,02 mmols) e EDCI (3,390 g, 17,72 mmols) a TA até a manhã seguinte. A mistura foi adicionada a DCM (100 ml) e lavada com água (2 χ 100 ml). As camadas aquosas combinadas foram novamente extraídas com DCM (100 ml), o produto orgânico combinado foi então seco (Na2SC>4) e concentrado in vácuo. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia de coluna (1 a 10% de MeOH em DCM) para se obter um óleo amarelo (3,076 g, 75%). m/z = 351 [M+H]+. Estágio 4 - Oxidação de Swern

<formula>formula see original document page 85</formula>

DCM (200 ml) foi agitado com cloreto de oxalila (0,80 ml, 9,17 mmols) a -72°C. DMSO (1,1 ml, 15,50 mmols) foi adicionado por gotejamen- to, mantendo a temperatura a -72°C. O produto do estágio 3 (3,08 g, 8,78 mmols) foi dissolvido em DCM (100 ml) e adicionado à mistura por goteja- mento, mantendo a temperatura a -72°C. A reação foi então agitada nesta temperatura por mais 5 minutos antes de ser colocada para aquecer até a RT. A mistura foi então concentrada in vácuo e purificada por meio de cro- matografia de evaporação (1 a 10% de MeOH em DCM) para se obter um sólido desbotado (3,05 g, quant). m/z = 349 [M+H]+. Estágio 5 - Aminação redutiva <formula>formula see original document page 86</formula>

O produto do estágio 4 (206 mg, 0,591 mmol), foi agitado com o Intermediário B (155 mg, 0,592 mmol) em 1,2-dicloroetano (20 ml). Trieti- Iamina (0,85 ml, 6,10 mmol) e cianoboro-hidreto de sódio (525 mg, 8,35 mmol) foram adicionados e a mistura foi agitada a TA por 2 dias. A reação foi resfriada bruscamente com água (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 50 ml). A fase orgânica foi seca (MgSO4) e concentrada in vácuo para se obter um óleo amarelo (313 mg, 95%). m/z = 558 [M+H]+.

Estágio 6 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil[({1-[4- (hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4-il}metil)amino]acetato de ciclo-pentila (50)

<formula>formula see original document page 86</formula>

O produto do estágio 5 (180 mg, 323 pmols) foi agitado em DCM (10 ml) e TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. O produto foi purificado direta- mente por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido branco (7,4 mg, 5%). 95% de pureza de LCMS, m/z = 458 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7,67 (2H, d, J = 8,3Hz), 7,02 (2H, d, J = 8,3Hz), 5,40 (1H, t, J = 5,4Hz), 3,93 (3H, m), 3,07-2,85 (4H, m), 2,05-1,70 (20H, m), 1,47-1,06 (8H,m).

Estágio 7 - Hidrólise do éster <formula>formula see original document page 87</formula>

O produto do estágio 5 (184 mg, 330 pmols) foi agitado em THF (10 ml) com trimetilsilanolato de potássio (428 mg, 3,34 mmols) a 50°C por 4 dias. A mistura foi concentrada in vácuo e o resíduo foi utilizado cru no estágio seguinte.

Estágio 8 - Desproteção do hidroxamato para se obter ácido (2S)-ciclo- hexil[({1 -[4-(hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4-il}metil)amino]acético (51)

<formula>formula see original document page 87</formula>

O produto do estágio 7 foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. A mistura foi concentrada in vácuo e o produto foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido branco (6,8 mg, 5%). 93% de pureza de LCMS, m/z = 390 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz1 CD3OD) δ: 7,65 (2H, s), 6,99 (2H, s), 3,90 (2H, d, J = 12,5Hz), 3,84 (1H, s), 2,89 (4H, m), 2,01-1,65 (10H, m), 1,45-1,05 (8H, m).

Exemplo 10 <formula>formula see original document page 88</formula>

Esquema 14

Legenda

Preparado como descrito no exemplo

estágio

Compostos preparados:

<formula>formula see original document page 88</formula> Estágio 1 - Aminação redutiva

<formula>formula see original document page 89</formula>

4-(4-formilpiperidin-1-il)-N-(1-isobutoxietoxi)benzamida (prepa- rada tal como descrito no exemplo 9 - 210 mg, 0,603 mmol), foi agitada com (2S)-{[4-(aminometil)benzil]amino}(ciclo-hexil)acetato de ciclo-pentila (prepa- rado tal como descrito no exemplo 4 - 230 mg, 0,604 mmol) em 1,2- dicloroetano (20 ml). Trietilamina (0,85 ml, 6,10 mmols) e cianoboro-hidreto de sódio (540 mg, 8,59 mmols) foram adicionados e a mistura foi agitada a TA por 2 dias. A mistura foi adicionada à água (50 ml) e extraída com DCM (2 χ 50 ml). A fase orgânica foi seca (MgSOzi) e concentrada in vácuo para se obter um óleo marrom (408 mg, 92%). m/z = 677 [M+H]+.

Estágio 2 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil[(4- {[({1 -[4-(hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4-il}metil)amino]metil}benzil) ami- no]acetato de ciclo-pentila (52)

<formula>formula see original document page 89</formula>

O produto do estágio 1 (226 mg, 334 Mmols) foi agitado em DCM (10 ml) e TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. O produto foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido desbotado (33,5 mg, 17%). 95% de pureza de LCMS1 m/z = 577 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7,64 (6H, m), 7,02 (2H, d, J = 8,2Hz), 5,31 (1H, t, J = 5,3Hz), 4,30 (4H, br s), 3,86 (3H, m), 3,01 (1H, s), 2,92 (2H, t, J = 11,1 Hz), 2,05-1,68 (20H, m), 1,48-0,95 (8H, m). Estágio 3 - Hidrólise do éster O produto do estágio 1 (218 mg, 322 pmols) foi agitado em THF (10 ml) com trimetil silanolato de potássio (418 mg, 3,26 mmols) a 50°C por 4 dias. A mistura foi concentrada in vácuo e o resíduo foi utilizado cru no es- tágio seguinte.

Estágio 4 - Desproteção do hidroxamato para se obter {(2S)-2-ciclo-hexil-2- [(4-{[({1-[4-(hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4- il}metil)amino]metil}benzil)amino]acetil}óxi (53)

O produto do estágio 3 foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. A mistura foi concentrada in vácuo e o produto foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido branco (28,0 mg, 17%). 95% de pureza de LCMS, m/z = 509 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7,66 (6H, m), 7,02 (2H, d, J = 8,6Hz), 4,30 (4H, s), 3,89 (2H, d, J = 12,2Hz), 3,76 (1H, d, J = 3,2Hz), 3,01 (2H, d, J = 6,4Hz), 2,90 (2H, t, J = 12,1Hz), 2,03-1,68 (10H, m), 1,46-1,05 (8H, m).

Exemplo 11 <formula>formula see original document page 91</formula>

Esquema 15

Compostos preparados:

<formula>formula see original document page 91</formula>

R = (ciclopentila (54)

R = H (55) Figura 12

Estágio 1 - Aminação redutiva

4-(4-formilpiperidin-1 -il)-N-(1 -isobutoxietoxi)benzamida (prepa- rada tal como descrito no exemplo 9 - 212 mg, 0,608 mmol), foi agitada com (2S)-({[4-(aminometil)ciclo-hexil]metil}amino)(ciclo-hexil)acetato de ciclo- pentila (preparado tal como descrito no exemplo 7 - 236 mg, 0,609 mmol) em 1,2-dicloroetano (20 ml). Trietilamina (0,85 ml, 6,10 mmols) e cianoboro- hidreto de sódio (555 mg, 8,83 mmols) foram adicionados e a mistura foi agi- tada a TA por 2 dias. A mistura foi então adicionada à água (50 ml) e extraí- da com DCM (2 χ 50 ml). A fase orgânica foi seca (MgSO4) e concentrada in vácuo para se obter um óleo marrom (318 mg, 77%). m/z = 683 [M+H]+. Estágio 2 - Desproteção do hidroxamato para se obter (2S)-ciclo-hexil{[(4- {[({1-[4-(hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4-il}metil)amino]metil}ciclo- hexil)metil]amino}acetato de ciclo-pentila (54)

O produto do estágio 1 (257 mg, 376 pmols) foi agitado em DCM (10 ml) e TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. O produto foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido desbotado (18,7 mg, 9%). 98% de pureza de LCMS, m/z = 583 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7,68 (2H, d, J = 8,5Hz), 7,04 (2H, d, J = 8,6Hz), 5,36 (1H, m), 3,04-2,81 (8H, m), 2,06-1,64 (25H, m), 1,53-0,97 (12H, m).

Estágio 3 - Hidrólise do éster O produto do estágio 1 (196 mg, 287 pmols) foi agitado em THF (10 ml) com trimetil silanolato de potássio (399 mg, 3,11 mmols) a 50°C por 4 dias. A mistura foi concentrada in vácuo e o resíduo foi utilizado cru no estágio seguinte.

Estágio 4 - Desproteção do hidroxamato para se obter ácido (2S)-ciclo- hexil{[(4-{[({1-[4-(hidroxicarbamoil)fenil]piperidin-4-il}metil)amino]metil}ciclo- hexil)metil]amino}acético (55)

O produto do estágio 3 foi agitado em DCM (10 ml) com TFA (0,5 ml) a TA por 1 hora. A mistura foi concentrada in vácuo e o produto foi purificado por meio de HPLC preparativa para se obter um sólido desbotado (36,7 mg, 25%). 98% de pureza de LCMS, m/z = 515 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7,68 (2H, d, J = 8,7Hz), 7,05 (2H, d, J = 8,5Hz), 3,89 (2H, d, J = 12,6Hz), 3,79 (1H, d, J = 3,6Hz), 3,03-2,82 (8H, m), 2,07-1,65 (16H, m), 1,54-1,04 (12H, m).

Ensaio de Carboxil Esterase de Célula Rompida

Qualquer composto da presente invenção em que Ri é um grupo éster pode ser testado para determinar se preenche o requisito de ser hidrolisado por esterases intracelulares, por meio de testes no ensaio se- guinte.

Preparação do extrato de células

Células de tumor de U937 ou de HCT 116 109) foram lava- das em 4 volumes de PBS da Dulbecco (~ 1 litro) e foram peletizadas em 525 g por 10 minutos a 4°C. Isto foi repetido duas vezes e a pelota final de células foi novamente suspenso em 35 ml do tampão de homogeneização frio (Trizma a 10 mM, NaCl a 130 mM, CaCl2 a 0,5 mM ao pH 7,0 a 25°C).

Os homogenatos foram preparados pela cavitação de nitrogênio 2,76 MPa (700 psi por 50 minutos a 4°C). O homogenato foi mantido em gelo e foi su- plementado com um coquetel de inibidores a concentrações finais de:

Leupeptina 1 μΜ

Aprotinina 0,1 μΜ

E64 8 μΜ

Pepstatina 1,5 μΜ

Bestatina 162 μΜ

Quimostatina 33 μΜ

Após a clarificação do homogenato de célula por meio de cen- trifugação em 525 g por 10 minutos, o sobrenadante resultante foi utilizado como uma fonte de atividade de esterase e foi armazenado a -80°C até ser requerido.

Medição de clivagem de éster

A hidrólise dos ésteres em ácidos carboxílicos correspondentes pode ser medida ao utilizar o extrato de células, preparado como acima. Pa- ra esta finalidade, o extrato de células (~30 μg/volume total do ensaio de 0,5 ml) foi incubado a 37°C em Tris-HCI a 25 mM, de tampão de NaCI a 125 mM, ao pH 7,5, à 25°C. No tempo zero, o éster (substrato) foi então adicio- nado a uma concentração final de 2,5 μΜ e as amostras foram incubadas a 37°C pelo tempo apropriado (geralmente 0 ou 80 minutos). As reações foram interrompidas pela adição de 3 χ volumes de acetonitrila. Para as amostras do tempo zero, a acetonitrila foi adicionado antes do composto de éster. A- pós a centrifugação em 12.000 g por 5 minutos, as amostras foram analisa- das quanto ao éster e seu ácido carboxílico correspondente à temperatura ambiente por meio de LCMS (Sciex API 3000, bomba binária HP1100, CTC PAL). O cromatografia foi baseada em uma coluna de AceCN (75*2,1 mm) e em uma fase móvel de 5 a 95% de acetonitrila em água/0,1% de ácido fórmico.

Medição das atividades biológicas

Atividade de desacetilase de histona A capacidade dos compostos de inibir atividades de desaceti- Iase de histona foi medida ao utilizar o ensaio de atividade fluorescente co- mercialmente disponível HDAC da Biomol. Em suma, o substrato flúor de Lis™, uma Iisina com uma acetilação de epsilon-amino, foi incubado com a fonte da atividade de desacetilase de histona (extrato nuclear HeLa) na pre- sença ou na ausência do inibidor. A desacetilação do substrato sensibiliza o substrato ao revelador Fluor de Lis®, que gera um fluoróforo. Desse modo, a incubação do substrato com uma fonte da atividade de HDAC resulta em um aumento no sinal que é diminuído na presença de um inibidor de HDAC.

Os dados são expressos como uma porcentagem do controle, medidos na ausência do inibidor, com o sinal do fundo sendo subtraído de todas as amostras, tal como segue:

% de atividade = [(Si- B)/(S°- B)] χ 100

em que Sl é o sinal na presença do substrato, da enzima e do inibidor, S0 é o sinal na presença do substrato, da enzima e do veículo, em que o inibidor é dissolvido e B é o sinal do fundo medido na ausência da enzima.

Os valores de IC5o foram determinados através da análise de regressão não-linear, depois de ajustar os resultados de oito pontos de da- dos à equação para a resposta de dose sigmoidal com inclinação variável (% de atividade contra a concentração de Iog do composto), ao utilizar o softwa- re Grafpad Prism.

A atividade de desacetilase de histona do extrato nuclear bruto derivado das células HeLa foi utilizada para a seleção. O preparado, adqui- rido junto à 4C (Seneffe, Bélgica), foi preparado a partir de células HeLa co- Ihidas enquanto na fase de crescimento exponencial. O extrato nuclear foi preparado de acordo com a metodologia descrita por J. D. Dignam, Nucl. Acid. Res., 1983, 11, 1475-1489, congelado bruscamente em nitrogênio lí- quido e armazenado a -80°C. A composição do tampão final era de Hepes a 20 mM, KCI a 100 mM, de EDTA a 0,2 mM, de DTT a 0,5 mM, PMSF a 0,2 mM e 20% (v/v) de glicerol.

Os resultados de IC50 foram alocados a uma de três faixas, tal como segue: Faixa A: IC50 < 100 nM,

Faixa B: IC50 de 101 nM a 1.000 nM;

Faixa C: IC50 > 1001 nM.

Ensaio de inibição de células U937 e HUT

As linhagens de células de câncer (U937 e HUT) que crescem na fase de Iog foram colhidas e semeadas a 1.000 - 2.000 células/cavidade (100 μΙ de volume final) em placas de cultura de tecido com 96 cavidades. Vinte e quatro horas depois, as células de crescimento foram tratadas com o composto. As placas foram então novamente incubadas por mais 72 a 96 horas antes que um ensaio de viabilidade de células WST-1 fosse realizado de acordo com as instruções dos fornecedores (Roche Applied Science).

Os dados foram expressos como uma porcentagem de inibição do controle, medida na ausência do inibidor, tal como segue: % de inibição = 100-[(S7So) χ 100] em que Sl é o sinal na presença do inibidor e S0 é o sinal na presença de DMSO.

As curvas de resposta de dose foram geradas a partir de oito concentrações (concentração final superior a 10 μΜ, com diluições triplas), ao utilizar seis réplicas.

Os valores de IC50 foram determinados através da análise de regressão não-linear, depois de ajustar os resultados à equação para a res- posta de dose sigmoidal com inclinação variável (% de atividade contra a concentração de Iog do Composto), ao utilizar o software Grafpad Prism.

Os resultados de IC50 foram alocados a uma de três faixas tal como segue:

Faixa A: IC50 < 330 nM,

Faixa B: IC50 de 331 nM a 3.300 nM;

Faixa C: IC50 > 3.301 nM;

e n/d: não-determinado.

Ensaio de inibição de células HeLa

Células HeLa que crescem na fase de Iog foram colhidas e semeadas a 1.000 células/cavidade (200 μΙ de volume final) em placas de cultura de tecido com 96 cavidades. Vinte e quatro horas depois, as células de crescimento foram tratadas com o composto (concentração final de 20 μΜ). As placas foram então novamente incubadas por mais 72 horas antes que um ensaio de viabilidade de células de sulforodamina B (SRB) fosse realizado de acordo com a metodologia descrita por Skehan et al, J. Natl. Canc. Inst., 1990, 82, 1107-1112.

Os dados foram expressos como uma porcentagem de inibição do controle, medida na ausência do inibidor, tal como segue: % de inibição = 100-[(S7S°)x100]

em que Sl é o sinal na presença do inibidor e S0 é o sinal na presença de DMSO.

Os valores de IC50 foram determinados através da análise de regressão não-linear, depois de ajustar os resultados de oito pontos de da- dos à equação para a resposta de dose sigmoidal com inclinação variável (% de atividade contra a concentração de Iog do composto), ao utilizar o softwa- re Grafpad Prism.

Os resultados de IC5o foram alocados a uma de três faixas tal como segue:

Faixa A: IC50 < 330 nM,

Faixa B: IC50 de 331 nM a 3.300 nM;

Faixa C: IC50 > 3.301 nM;

e n/d: não-determinado.

Tabela de Resultados

<table>table see original document page 97</column></row><table> <table>table see original document page 98</column></row><table> <table>table see original document page 99</column></row><table>

Claims

1. Composto de a fórmula (I) ou um sal, um N-óxido, um hidrato ou um solvato do mesmo: <formula>formula see original document page 100</formula> em que m e η são independentemente 0 ou 1, contanto que pelo menos um entre m e η seja 1; Q, V e W representam independentemente -N= ou -C=; B é um radical bivalente selecionado entre (B1), (B2), (B3), (B4), (B5) e (B6): <formula>formula see original document page 100</formula> em que a ligação marcada com * é ligada ao anel que contém Q, V e W; A é um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico mono, bi ou tricíclico opcionalmente substituído; o -[Ligante]- representa uma ligação ou um radical bivalente do ligante; Z1 é (a) um radical da fórmula R1R2CHNH-Y-L1-Xi-(CH2)Z- ou (b) um radical da fórmula R-L1-Y1-(CH2)2-, em que: R é um radical da fórmula (X) ou (Y) <formula>formula see original document page 100</formula> R1 é um grupo ácido carboxílico (-COOH) ou um grupo éster que é hidroli sável por uma ou mais enzimas de esterase intracelulares a um grupo ácido carboxílico; Re é hidrogênio; ou alquila C1-C6, cicloalquila C3-C7l arila ou heteroarila op- cionalmente substituída ou -(C=O)R3 ou -(C=O)OR3 ou -(C=O)NR3, em que R3 é hidrogênio ou alquila (C1-C6) opcionalmente substituída; R2 é a cadeia lateral de um alfa aminoácido natural ou não natural; Y é uma ligação, -C(=0)-, -S(=0)2-, -C(=0)0-, -C(=0)NR3-, -C(=S)-NR3, - C(=NH)-NR3 ou -S(=0)2NR3-, em que R3 é hidrogênio ou alquila Ci-C6 op- cionalmente substituída; Y1 é uma ligação, -(C=O)-, -S(O2)-, -C(=0)0-, -0C(=0)-, -(C=O)NR3-, - NR3(C=O)-, -S(O2)NR3-, -NR3S(O2)- ou -NR3(C=O)NR4-, em que R3 e R4 são independentemente hidrogênio ou alquila (Ci-C6) opcionalmente substituída, L1 é um radical bivalente da fórmula -(AIk1)m(Q)n(AIk2)p-, em que m, η e ρ são independentemente O ou 1, Q é (i) um radical carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico bivalente opcionalmente substituído que tem de 5 a 13 elementos no anel ou (ii), no caso em que ρ é O, um radical bivalente da fórmula - Q1-X2-, em que X2 é -O- , -S- ou NRa-, em que Ra é hidrogênio ou alquila C1-C3 opcionalmente subs- tituída e Q1 é um radical carbocíclico ou heterocíclico mono ou bicíclico biva- lente opcionalmente substituído que tem de 5 a 13 elementos no anel, Alk1 e Alk2 representam independentemente radicais cicloalquila C3-C7 biva- Ientes opcionalmente substituídos ou radicais alquileno Ci-C6, alquenileno C2-C6 ou alquinileno C2-C6 lineares ou ramificados opcionalmente substituí- dos que podem opcionalmente conter ou terminar em uma ligação de éter (- O-), tioéter (-S-) ou amino (-NRA-), em que Ra é hidrogênio ou alquila Ci-C3 opcionalmente substituída; X1 é uma ligação, -C(=0)-; ou -S(=0)2-; -NR4C(=0)-, -C(=0)NR4, -NR4C(=0)- NR5-, -NR4S(=0)2- ou -S(=0)2NR4-, em que R4 e R5 são independentemente hidrogênio ou alquila CrC6 opcionalmente substituída; e ζ é O ou 1.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Q é -C= e cada um de V e W é -N=.

3. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que A é um dos seguintes sistemas de anel, opcionalmente substituído: <formula>formula see original document page 102</formula> <formula>formula see original document page 103</formula> <formula>formula see original document page 104</formula> em que R10 é hidrogênio ou alquila C1-C6, sendo que a ligação cruzada pela linha ondulada se conecta ao radical do -[Ligante]- e R é unido a um átomo disponível no anel.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou a reivindica- ção 2, em que A é selecionado entre fenila, ciclo-hexila, naftila, quinolin-2-ila e 1,3-di-idro-isoindol-2-ila opcionalmente substituída.

5. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que os substituintes opcionais no anel A são selecionados entre flúor e cloro.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que o -[Ligante]- é selecionado entre: (i) uma ligação; (ii)-O-, -S-, -C(=0)-, -S(=0)2-, -NRc-, -C(=0)NRc-, -S(=0)2NRc, -NRcC(=0)-, -NRcS(=0)2-, -NRc(CH2)m-, -NRcC(=0)(CH2)m-, - NRcS(=0)2(CH2)m, -NRDC(=0)NRc- ou -NRcC(=0)(CH2)mAr- ou - NRcS(=0)2(CH2)mAr-, em que Rc e R0 são independentemente hidrogênio, alquila C1-C4 ou um substituinte do nitrogênio, m é 1, 2 ou 3 e Ar é um radi- cal fenila bivalente ou um radical heteroarila mono ou bicíclico bivalente que tem 5 a 13 elementos no anel; e (iii) radical alquileno C1-C6, alquenileno C2-C6 ou alquinileno C2-C6 linear ou ramificado opcionalmente substituído que pode opcionalmente conter ou terminar em uma ligação de éter (-O-), tioéter (-S-) ou amino (-NRa-), em que Ra é hidrogênio, alquila CrC3 ou um substituinte do nitrogênio.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6, em que -Ar- es- tá presente no -[Ligante]- e é um radical bivalente selecionado entre os se- guintes: <formula>formula see original document page 105</formula> em que X é O, S ou NH.

8. Composto de acordo com a reivindicação 6, em que -Ar- es- tá presente no -[Ligante]- e é um radical fenileno bivalente.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, em que o -[Ligante]- é uma ligação quando η é 0.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que z é 0.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que Y é -S(=0)2-, -C(=S)-NR3, -C(=NH)-NR3 ou - S(=0)2NR3-, em que R3 é hidrogênio ou alquila C1-C6.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, em que Y é uma ligação.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que, no radical L1, Alk1 e Alk2, quando presentes, são sele- cionados entre -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- e radicais ciclopropila, ciclo- pentila e ciclo-hexila bivalentes.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que, no radical L1, Q1 é um radical fenila bivalente ou um radical heteroarila mono ou bicíclico bivalente que tem 5 a 13 elementos no anel.

15. Composto de acordo com a reivindicação 12, em que Q1 é -1,4-fenileno.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que, no radical L11 ρ e r são 0.

17. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 15 em que, no radical L1, q e r são 0 e ρ é 1.

18. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 15, em que, no radical L11 p, q e r são todos 0.

19. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que Z1 é um radical da fórmula RiR2CHNH-Y-L1-Xi-(CH2)Z-, em que o radical -Y-L1-X1-[CH2]Z- é selecionado entre -C(=0)-, -C(=0)NH-, - (CH2)v-, -(CH2)vO-, -C(=0)-(CH2)v-, -C(=0)-(CH2)v0-, -C(=0)-NH-(CH2)w-, - C(=0)-NH-(CH2)w0-, -(CH2)wO 4- ou T -(CH2)wO em que ν é 1, 2, 3 ou 4 e w é 1, 2 ou 3.

20. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 18, em que Z1 é um radical da fórmula R1R2CHNH-Y-L1-X1-(CH2)z-, em que o radical -Y-L1-X1-[CH2]z- é -CH2-, -CH2O-, -C(=0)-CH2-, -C(=0)-CH20 -, -C(=0)-NH-CH2- ou -C(=0)-NH-CH20.

21. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que Ri é um grupo éster da fórmula -(C=O)ORg em que Rg é R7R8CH-, em que (i) R7 é hidrogênio ou alquil (C1-C3)-(Z1)a-[alquila (C1-C3)]b- ou alquenil (C2- C3)-(Z1)a-[ alquila (C1-C3)]b- opcionalmente substituída, em que a e b são in- dependentemente 0 ou 1 e Z1 é -O-, -S- ou -NRi0-, em que Ri0 é hidrogênio ou alquila C1-C3 e R8 é hidrogênio ou alquila (C1-C3); (ii) R7 é hidrogênio ou Ri0RnN-alquila (C1-C3) opcionalmente substituída, em que R10 é hidrogênio ou alquila C1-C3 e Rn é hidrogênio ou alquila C1-C3; ou R10 e R11 em conjunto com o nitrogênio ao qual são unidos formam um anel heterocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 5 ou 6 átomos no anel ou um sistema de anel heterocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos no anel e Rs é hidrogênio ou alquila (C1-C3); ou (iii) R7 e Rs tomados em conjunto com o carbono ao qual são unidos formam um anel carbocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 3 a 7 átomos no anel ou sistema de anel carbocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos no anel.

22. Composto de acordo com a reivindicação 21, em que R9 é metila, etila, n- ou isopropila, sec- ou terc-butila, ciclo-hexila, alila, fenila, benzila, 2-, 3- ou 4-piridil metila, N-metilpiperidin-4-ila, di-hidrofuran-3-ila, metóxi etila, indanila, norbornila, dimetil amino etila ou morfolino etila.

23. Composto de acordo com a reivindicação 21, em que Rg é ciclo-pentila.

24. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que Z1 é um radical da fórmula RiR2CHNH-Y-L1 -X1-(CH2)z- e em que R2 é ciclo-hexilmetila, piridin-3-ilmetila, sec-butila, terc-butila, 1- benziltio-1 -metiletila, 1 -metiltio-1 -metiletila, 1-mercapto-1-metiletila ou fenile- tila.

25. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 23, em que Z1 é um radical da fórmula RiR2CHNH-Y-L1-X1-(CH2)2- e em que R2 é hidrogênio.

26. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 23, em que Z1 é um radical da fórmula R1R2CHNH-Y-L1-X1-(CH2)z- e em que R2 é fenila, benzila, iso-butila, ciclo-hexila ou t-butóxi metila.

27. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ter a estrutura de qualquer um dos compostos dos Exemplos específicos da presente invenção.

28. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de com- preender um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, junto com um veículo farmaceuticamente aceitável.

29. Uso de um composto da fórmula (I) de acordo com qual- quer uma das reivindicações 1 a 27, na preparação de uma composição pa- ra inibir a atividade de uma enzima de HDAC.

30. Uso, de acordo com a reivindicação 29, para a inibição da 30. Uso, de acordo com a reivindicação 29, para a inibição da atividade de HDAC1, ex vivo ou in vivo.

31. Método de inibição da atividade de uma enzima de HDAC, caracterizado pelo fato de compreender a colocação da enzima em contato com uma quantidade de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 27 eficaz para tal inibição.

32. Método de acordo com a reivindicação 31, para a inibição da atividade de HDAC1, ex vivo ou in vivo.

33. Método para o tratamento de doença de proliferação de células, doença de poliglutamina, doença neurodegenerativa, doença autoimune, doença inflamatória, rejeição a transplantes de órgãos, diabetes, distúrbios hematológicos e infecção, caracterizado pelo fato de compreender a administração a um indivíduo que sofre de tal doença de uma quantidade eficaz de um composto da fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 27.

34. Método de acordo com a reivindicação 32, para o tratamento da proliferação de células de câncer, mal de Huntington ou mal de Alzheimer.

35. Método de acordo com a reivindicação 32, para o tratamento da artrite reumatóide.