BRPI0717376A2 - Peptídeos inibidores da exocitose neuronal - Google Patents

Description

PEPTÍDEOS INIBIDORES DA EXOCITOSE NEURONAL

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção se refere a peptídeos capazes de regular a exocitose neuronal e as composições cosméticas ou farmacêuticas que contém tais peptídeos de utilidade no tratamento daquelas condições que requeiram uma regulação da exocitose neuronal, como por exemplo, a espasmodicidade dos músculos, a assimetria facial e/ou as rugas faciais, principalmente as rugas de expressão.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Um dos sinais mais visíveis do envelhecimento do ser humano são as mudanças por que passa a pele: ressecamento, aparecimento de manchas, flacidez e rugas. Estes efeitos podem ser causados por agentes externos como a exposição

constante ao sol, a contaminação atmosférica ou o contato com agentes químicos presentes em, por exemplo, produtos de limpeza, mas também são conseqüência de trocas fisiológicas, bioquímicas e histológicas intrínsecos do organismo humano, devidos a diminuição da síntese de

2 0 proteínas como o colágeno ou a elastina, a um aumento da

proteólise, e a uma ruptura geral da barreira da pele, do tecido conectivo e da coesão.

Diferentes princípios ativos têm sido descritos para a prevenção ou diminuição dos sintomas do envelhecimento,

como por exemplo: retinóides, hidroxiácidos, flavonóides ou derivados de vitamina C e E. Tais compostos atuam normalmente melhorando a hidratação da pele, aumentando a renovação celular ou prevenindo a degeneração dos tecidos que formam a pele; sem dúvida, sua eficácia na prevenção ou

3 0 tratamento das rugas faciais motivadas pela contração dos músculos é limitada. A base ou mecanismo de formação das rugas faciais de expressão é uma tensão dos músculos da epiderme que arrastam a pele até o interior. Esta tensão muscular é o resultado de uma hiperatividade dos nervos dos músculos faciais. A hiperatividade nervosa se caracteriza por uma liberação incontrolada e excessiva de neurotransmissores que excitam as fibras musculares. Por êle, as moléculas que regulam a exocitose neuronal contribuem para relaxar a tensão muscular e, consequentemente, a eliminar as rugas faciais.

Existe, pois, a necessidade de desenvolver novos princípios ativos com eficácia provada para a preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica para regular a exocitose neuronal e, portanto, para tratar a elasticidade dos músculos e reduzir e/ou eliminar a assimetria facial e/ou as rugas faciais, especialmente as rugas de expressão.

Se entende por rugas de expressão aquelas que são conseqüência do estresse que exercem as contrações dos músculos faciais responsáveis de produzir as expressões do 2 0 rosto sobre a pele do rosto. As rugas de expressão estão normalmente localizadas na testa, no espaço entre as sobrancelhas, ao redor da boca e/ou ao redor dos olhos. Dependendo da forma do rosto, a freqüência das expressões e a existência de tics (movimentos convulsivos, que se

2 5 repetem com freqüência, produzidos pela contração

involuntária de um ou vários músculos, neste caso do rosto) as rugas de expressão podem aparecer inclusive na adolescência. Os fatores externos como a exposição ao sol acentuam sua profundidade e sua visibilidade.

3 0 Com o objetivo de reduzir e/ou eliminar as rugas de expressão se tem empregado amplamente as toxinas botulínicas, em especial o serotipo A (BOTOX® Cosmetic, Allergan Inc.) [Carruthers J.D. e Carruthers J.A. (1992) nTreatment of glabellar frown Iines with C. botulinum-A exotoxin" J. Dermatol. Surg. Oncol. 18, 17-21; Mendez- Eastman S.K. (2003) nBotox: a review" Plast. Surg. Nurs. 23, 64-69]). O tratamento terapêutico e cosmético com BOTOXs consiste na injeção localizada de preparados farmacêuticos (complexo botulina A-hematoglutinina, 500 kDa) diluídos nas zonas onde se localiza a tensão muscular. Os efeitos paralisantes da toxina são reversíveis com uma duração média de 6 meses [Jankovlc J. e Brin F.M. (1991) nTherapeutic uses of botulinum toxin" New Engl. J. Med. 324, 1186-1194; Jankovic J. (1994) nBotulinum toxin in movement disorders" Curr. Opin. Neurol. 6, 358-366]. 0 tratamento, portanto, requer a injeção repetida de toxina botulínica. 0 problema principal deste tratamento é a possibilidade de que se desencadeie uma reação imune contra o preparado farmacêutico devido a que, pelo seu tamanho

2 0 molecular, pode ser objeto de reconhecimento pelo sistema

imunológico do paciente. A aparição de anticorpos contra a toxina botulínica constitui um grave problema já que contribui a uma clara perda de eficácia do tratamento [Jankovic J. e Brin F.M. (1991) nTherapeutic uses of botulinum toxin" New Engl. J. Med. 324, 1186-1194; Jankovic J. (1994) nBotulinum toxin in movement disorders" Curr. Opin. Neurol. 6, 358-3 66; Jankovic J. e Brin M.F. (1997) nBotulinum toxin: historical perspective and potential new indications" Muscle Nerve Suppl. 6, S129-S145; Davis L.E.

3 0 (1993) nBotulinum toxin-from poisão to medicine" West J. Med. 128, 25-28; Hughes A.J. (1994) nBotulinum toxin in clinicai practise" Drugs 48, 888-893; Hambleton P. (1992) nClostridium botulinum toxins a geral review of invellvement in disease, structure, mode of action and preparation for clinicai use" J. Neurol. 239, 16-20; Borodic G.E. e Pearces L.B. (1994) nNew concepts in botulinum toxin therapy" Drug Safety 11, 145-152; Brin M.F., Blitzer Ά., Stewart C., Pine Z., Borg-Stein J., Miller J., Nagalapura N.S. e Rosenfeld D.B. (1993) nDisorders with excesive muscle contraction: Candidates for treatment with intramuscular botulinum toxin (BoTox*')"

Botulinum and Tetanus Neurotoxins (Ed. B.R. DasGupata),

®

559-576]. Esta perda de eficácia do tratamento com BOTOX implica na necessidade de aumentar a concentração do preparado em tratamentos posteriores, que, por sua vez, produz uma potencialização da resposta imunológica. Como alternativa ao tratamento com toxina botulínica do sorotipo A se tem discutido o uso de sorotipos diferentes das toxinas botulinicas, tais como BoTox B, BoTox F e BoTox E.

2 0 Não obstante, a aplicação de preparados farmacêuticos com

sorotipos diferentes não pode ser considerada como uma solução ao problema já que, mais cedo ou mais tarde, a reação imunológica pode voltar a acontecer. Além disso, o tratamento com toxinas butolinicas é caro devido, principalmente, ao trabalho e a instabilidade das preparações farmacêuticas que as contenham.

Existe, portanto, uma necessidade imperiosa de desenvolver moléculas que imitem os efeitos paralisantes das toxinas botulinicas, mas que estejam dotadas de

3 0 estruturas moleculares muito mais sensíveis e estáveis, que não induzam reações imunológicas, e cujo custo de produção seja econômico. As moléculas de natureza peptídica cumprem estas propriedades.

A nível molecular, as toxinas botulínicas são proteases que degradam proteínas neuronais que estão envolvidas no mecanismo de exocitose ativada pelo íon cálcio [Schiavo G. , Rossetto O. e Montecucco C. (1996) nBases Moleculares do tétanos e do botulismo" Investigação e Ciência 234, 46-55; Montecucco C. e Schiavo G. (1994) nMechanism of action of tetanus and botulinum neurotoxins" Mol. Microbiol. 13, 1-8; Schiavo G., Rosetto O., Benfenati F., Poulain B. e Montecucco, C. (1994) wTetanus and botulinum neurotoxins are zinc proteases specific for components of the neuroexocytosis apparatus" Ann. NY Acad. Sei. 710, 65-75], Por exemplo, a toxina botulínica A, a mais comumente utilizada em clínica e cosmética por suas aplicações na eliminação das rugas faciais e da assimetria facial, e para suavizar a sintomatologia de enfermidades espasmódicas, trunca a proteína neuronal SNAP-25. Esta proteína SNAP-25 joga um papel fundamental na neuro secreção já que está envolvida na formação de um complexo protéico (conhecido com o nome de complexo SNARE ou de fusão) que dirige e controla a liberação da acetilcolina acumulada nas vesículas. o núcleo de tal complexo de fusão é constituído das proteínas SNAP-25 e sintaxina, localizadas na membrana plasmática presináptica, e a proteína sinaptobrevina ou VAMP, localizada na membrana plasmática vesicular [Calakos N. e Scheller R.H. (1996) nSynaptic vesicle biogenesis, docking and fusion: a molecular description" Physiol. Rev. 76, 1-29; Sutton R.B., Fasshauer D., Jahn R. e Brunger Α. Τ. (1998) nCrystal structure of a SNARE complex invellved in synaptic exocytosis at 2.4Ã resolution" Nature 395, 347-353]. A função principal do complexo de fusão é aproximar e colocar em contato a vesícula carregada de neurotransmissor (acetilcolina) com a membrana plasmática pré-sináptica [Calakos N. e Scheller R.H. (1996) nSynaptic vesicle biogenesis, docking and fusion: a molecular description" Physiol. Rev. 76, 1-29; Sutton R.B., Fasshauer D., Jahn R. e Brunger A.T. (1998) nCrystal structure of a SNARE complex invellved in synaptic exocytosis at 2.4Â resolution" Nature 395, 347-353]. Desta forma, em resposta a uma elevação da concentração de cálcio, se favorecerão a fusão de ambas as membranas plasmáticas, produzindo assim a liberação do neurotransmissor. Portanto, tal complexo protéico SNARE de acoplagem e fusão vesicular constitui um alvo para controlar a neuro secreção. 0 truncamento de qualquer das proteínas que formam o complexo de fusão impede sua montagem e, assim, inibe a liberação vesicular e regula a 2 0 exocitose neuronal.

É conhecido, tecnicamente, que determinados peptídeos derivados das seqüências das proteínas que formam o complexo SNARE são capazes de inibir a exocitose neuronal, como por exemplo os peptídeos derivados dos domínios amino e carboxilo da proteína SNAP-25 [Apland J.P., Biser J.A. , Adler M., Ferrer-MontiO Α. V., Montai M., Canaves J.M. e Filbert, M.G. (1999) nPeptides that mimic the carboxy- terminal domain of SNAP-25 block acetylcholine release at an aplysia synapse" J. Appl. Toxicol. 19, Suppl.1: S23-S26; Mehta P.P., Batternger E. e Wilsão M. (1996) nSNAP-25 and synaptotagmin invellvement in the final Ca2+ -dependent triggering of neurotransmitter exocytosis" Proc. Natl. Acad. Sei. USA 93, 10471-10476; Ferrer-MontiO Α. V. , Gutierrez L.M. , Apland J.P., Canaves J.M., Gil A., Viniegra S., Biser J.A., Adler M. e Montai M. (1998) nThe 26-mer peptide released from cleavage by botulinum neurotoxin E inhibits vesicle docking" FEBS Lett. 435, 84-88; Gutierrez L.M. , Canaves J.M., Ferrer-MontiO Α. V., Reig J.A., Montai M. e Viniegra S. (1995) nA peptide that mimies the carboxy- terminal domain of SNAP-25 blocks Ca2+-dependent exocytosis in chromaffin cells" FEBS Lett. 372, 39-43; Gutierrez L.M., Viniegra S., Rueda J., Ferrer-MontiO Α. V. , Canaves J.M. e Montai M. (1997) nA peptide that mimies the C-terminal sequence of SNAP-25 inhibits secretory vesicle docking in chromaffin cells" J. Biol. Chem. 272, 2634-2639; Blanes- Mira C, Valera E., Fernández-Ballester G., Merino J.M. , Viniegra S. , Gutierrez L.M. , Perez-Payá E. e Ferrer-MontiO A. (2004) "Small peptides patterned after the N-terminus domain of SNAP-25 inhibit SNARE complex assembly and regulated exocytosis" J. Neurochem. 88, 124-135], os peptídeos derivados da seqüência de aminoácidos da sintaxina [Martin F., Salinas E., Vazquez J., Soria B. e Reig J.A. (1996) nInhibition of insulin release by synthetic peptides show that the H3 region a t the C- terminal domain of syntaxin-1 is crucial for Ca2+-but not for guanosine 5 "-[gamma-thio]thriphosphate-induced

secretion" Biochem. J. 320, 201-205], da sinaptobrevina [Cornille F., Deloye F., Fournie-Zaluski M.C., Roques B.P. e Poulain B. (1995) nInhibition of neurotransmitter release 3 0 by synthetic proline-rich peptides shows that the N- terminal domain of vesicle-associated membrane protein/synaptobrevin is criticai for neuro-exocytosis" J. Biol. Chew. 270, 16826-16830] , da sinaptotagmina [Mehta P.P., Batternger E. e Wilsão M. (1996) "SNAP-25 and synapt otagmin invellvement in the final Ca2+-dependent triggering of neurotransmitter exocytosis" Proc. Natl. Acad. Sei. USA 93, 10471-10476] e da proteína snapin [ I lardi J.M., Mochida S. e Sheng Z.H. (1999) "Snapin: A SNARE associated protein implicated in synaptic transmisiôn" Nat. Neurosci. 2, 119-124]. Do mesmo modo, se tem descrito também peptídeos sintéticos obtidos por desenho racional ou por rastreamento de quimiotecas sintéticas que são capazes de interferir na formação do complexo SNARE inibindo a exocitose neuronal [Blanes-Mira C. , Pastor Μ.Τ. , Valera Ε., Fernández-Ballester G., Merino J.M. , Gutierrez L.M. , Perez-Paya E. e Ferrer-MontiO A. (2003) "Identification of SNARE complex modulators that inhibit exocytosis form an a-helix-constrained combinatorial library" Biochem J. 375, 159-166].

A aplicação industrial deste tipo de compostos tem sido limitada. A indústria cosmética tem realizado importantes esforços para desenvolver compostos que imitem a ação das toxinas botulínicas com uso exclusivo no tratamento e prevenção da formação das rugas de expressão [Blanes-Mira C. , Clemente J. , Jodas G. , Gil A. , Fernández- Ballester G., Ponsati B., Gutierrez L.M. , Pérez-Payá E. e Ferrer-Montiel, A. (2002) wA synthetic hexapeptide (Argireline&) with anti-wrinkle activity" Int. J. Cosmetic Res. 24, 303-310]. Especificamente, a patente EP1,180,524 de Lipotec, S.A. descreve peptídeos derivados do fragmento amino-terminal da proteína SNAP-25 que possuem efeitos anti-rugas, e a solicitação internacional W097/34620 de screve também peptídeos derivados da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25, especificamente de sua região carboxi-terminal, ou da sinaptobrevina ou da sintaxina capazes de inibir a exocitose neuronal.

Nenhuma das patentes descritas anteriormente se refere a derivados modificados quimicamente de maneira irreversível dos peptídeos derivados da proteína SNAP-25 como agentes reguladores da exocitose neuronal. A patente EPl,18 0,524 descreve potenciais modificações químicas reversíveis dos peptídeos do extremo amino-terminal da proteína SNAP-25 com a finalidade de aumentar sua biodisponibilidade e sua facilidade de passagem da barreira hematoencefálica e do tecido epitelial, tais como a esterificação das cadeias laterais dos resíduos de aspártico e glutâmico, que posteriormente vão ser degradados em vivo por esterases intracelulares, recuperando-se o peptídeo não modificado responsável pela atividade biológica. Surpreendentemente, o solicitante da presente invenção descobriu que modificações quimicamente irreversíveis dos extremos amino- e/ou carboxi-terminal de tais peptídeos não só lhes conferem maior resistência à degradação frente a proteases intracelulares provocando uma maior duração de seu efeito como reguladores da exocitose neuronal, surpreendentemente, mas são capazes de potencializar sua eficácia in vitro de duas a trinta vezes relativamente ao correspondente peptídeo não modificado.

A modificação de proteínas com cadeias lipídicas está descrita como modificação irreversível quando esta se realiza sobre grupos amino presentes em suas seqüências, quer seja era seu extremo amino-terminal, quer seja nas cadeias laterais dos resíduos de lisina, considerando que quando esta se realiza sobre os grupos tiol dos resíduos de cisteína se considera reversível, já que o peptídeo ou proteína modificados são hidrolisados in vivo pelas correspondentes tioesterases [Magee A.I. (1990) nLipid modification of proteins and its relevance to protein targeting" J. Cell Sei. 97, 581-584; Mumby S.M. (1997) nReversible palmitoylation of signaling proteins" Curr. Opin. Cell Biol. 9, 148-154], Na técnica atual, se encontram descritos exemplos de modificações irreversíveis de peptídeos com derivados de cadeias de ácidos graxos com o objetivo de melhorar sua eficiência in vivo, aumentando sua permeação através da pele [Lintner K. e Peschard O. (2000) nBiologically active peptides: from a laboratory bench curiosity to a functional skin care product" Int. J. Cosmet. Sei. 22, 2 07-218] ou conseguindo uma melhor resposta imunológica para seu desenvolvimento como potenciais vacinas [Gahery Η. , Choppin J. , Bourgault I. , Fischer E., Maillere B. e Guillet J.G. (2005) nHIV preventive vaccine research at the ANRS: the lipopeptide vaccine approach" Therapie 60, 243-248], assim como para induzir um maior efeito citotóxico quer seja em bactérias [Eisenstein B.I. (2004) nLipopeptides, focusing on daptomycin, for the treatment of Gram-positive infections" Expert Opin. Investig. Drugs 13, 1159-1169] ou em fungos [Avrahami D. e Shai Y. (2004) nA New Group of Antifungal and Antibacterial Lipopeptides Derived from Non-membrane 3 0 Active Peptides Conjugated to Palmitic Acid" J. Biol. Chem. 279, 12277-12285]. Este tipo de modificações nem sempre provoca uma mudança na eficácia in vitro de tais peptídeos; por exemplo a palmitoilação do tripeptídeo GHK não modifica sua capacidade de induzir a síntese de colágeno em fibroblastos [Lintner K. e Peschard O. (2000) nBiologically active peptides: from a laboratory bench curiosity to a functional skin care product" Int. J. Cosmet. Sei. 22, 207- 218] , de modo que um conhecedor da matéria no presente momento desta invenção não poderia dizer se a modificação de um peptídeo com um grupo hidrocarbonado aumentaria, diminuiria ou deixaria inalterada sua eficácia in vitro como a do correspondente peptídeo sem modificação.

É também conhecido, tecnicamente, a modificação química irreversível de peptídeos e proteínas mediante a incorporação covalente de unidades repetitivas de polietilenglicol, conhecida como "PEGilação", basicamente com a finalidade de aumentar o tempo de vida médio in vivo, diminuir a toxicidade e reduzir a imunogenicidade e antigenicidade dos peptídeos e proteínas [Savelca K.V. , Abuchowski Ά., van é T., Davis F.F. e Palczuk N.C. (1979) nPreparation of a non-immunogenic arginase by the covalent attachment of polyethylene glycol" Biochim. Biophys. Acta 578, 47-53,- Hershfield M.S., Buekley R.H., Greenberg M.L., Melton A.L., Sehiff R., Hatem C., Kurtzberg J., Markert M.L., Kobayashi R.H., Kobayashi A.L., et al. (1987) nTreatment of adenosine deaminase defieieney with polyethylene glycol-modified adenosine deaminase" N. Engl. J. Med. 316, 589-596; Katre N.V. (1990) nImmunogenieity of reeombinant IL-2 modified by covalent attachment of polyethylene glycol" J. Immunol. 144, 209-213; Nang Q.C., Pai L. H. , Debinski W., FitzGerald D.J. e Pastan I. (1993) nPolyethylene glycol-modified chimeric toxin composed of transforming growth factor oc and Pseudomonas exotoxin" Câncer Res. 53, 4588-4594; Clark R., Olsão K., Fuh G., Marian Μ. , Mortensen D. , Teshima G. , Chang S. , Chu Η. , Mukku V., Canova-Davis E., Somers T., Cronin M., Winkler M. e Wells J.A. (1996) nLong-acting growth hormones produced by conjugation with polyethylene glycol" J. Biol. Chem. 271, 21969-21977; He X.H., Shaw P.C. e Tam S.C. (1999) nReducing the immunogenicity and improving the in vivo activity of trichosanthin by site-directed pegylation" Life Sci. 55, 355-368; Harris J.M. e Chess R.B. (2003) nEffect of PEGylation on pharmaceuticals" Nat. Rev. Drug Discov. 2, 214-221], Os exemplos existentes tecnicamente conhecidos descrevem modificações dos peptídeos e proteínas com o objetivo de melhorar suas propriedades farmacológicas de distribuição e eliminação e assim melhorar sua atividade biológica in vivo sem alterar sua atividade biológica in vitro, mas em nenhum caso sugerem que o potencial PEGilação possa incrementar a atividade biológica da proteína in vitro, muito pelo contrário, existem exemplos descritos como o caso do interferon PEGilado em que a atividade in vitro se vê reduzida comparando-a com a do interferon nativo [Rajender Reddy K., Modi M.W. e Pedder S. (1992) nUse of peginterferon alfa-2a (40 KD) (Pegasys) for the treatment of hepatitis C" Adv. Drug Deliv. Rev. 54 (4), 571- 86] .

Surpreendentemente, com a presente invenção se demonstra que a modificação química de maneira irreversível 3 0 de seqüências peptídicas derivadas da proteína SNAP-25 é capaz de aumentar a eficácia de tais seqüências na inibição da exocitose neuronal. Não existe nenhum indício, no estado da técnica, de que tais modificações devam incrementar a eficácia inibidora de tais peptídeos, motivo pelo qual um experiente na matéria não poderia deduzir a natureza das modificações requeridas dos peptídeos para potencializar sua capacidade inibidora da exocitose neuronal.

Assim, a presente invenção proporciona uma nova solução para as necessidades existentes que compreende o descobrimento de umas seqüências peptídicas derivadas da proteína SNAP-25 modificadas quimicamente de maneira irreversível capazes de inibir a exocitose neuronal de maneira mais eficaz e prolongada que os correspondentes peptídeos não modificados já conhecidos no estado da técnica.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

A presente invenção proporciona uma solução sensível, eficaz e sem riscos para a regulação da exocitose neuronal, que compreende na aplicação no corpo de um mamífero de uma composição que contém, ao menos, um peptídeo que tem uma seqüência de aminoácidos derivada da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25 estando modificado quimicamente de maneira irreversível em suas extremidades amino e/ou carboxi-terminal. Portanto, um primeiro aspecto da invenção se refere a

um peptídeo capaz de regular a exocitose neuronal, segundo a fórmula geral (I):

R1-AA-R2 (I)

3 0 seus estereoisômeros e misturas dos mesmos, racêmicos ou nao, e os sais cosmeticamente ou f armacêuticamente aceitáveis dos mesmos, onde

AA é uma seqüência de 3 a 40 aminoácidos adjacentes contida na seqüência de aminoácidos SEQ ID No. 1;

R1 é selecionado do grupo formado por H ou grupo

alquil, aril, aralquil ou acil;

e R2 é selecionado do grupo formado por amino, hidroxil ou tiol, substituídos ou não com grupos alifáticos ou cíclicos;

com a condição de que quando R1 é H ou acetil, R2 não

é amino, hidroxil ou tiol não substituídos.

As estruturas preferidas dos peptídeos representados na fórmula geral (I) são aquelas onde

R1 é H ou acetil ou um grupo acil de C3 a C24 linear,

ramificado ou cíclico, saturado ou insaturado ou um polímero de polietil englicol;

R2 é amino ou hidroxil substituídos opcionalmente com grupos alifáticos de C1 a C24 lineares, ramificados ou cíclicos, saturados ou insaturados;

2 0 com a condição de que quando R1 é H ou acetil, R2 não

é amino nem hidroxil não substituídos.

Estruturas mais preferida são aquelas em que o

polímero de polietilenglicol é

0 0

VH H q η

onde η pode variar de 1 a 100, e mais preferencialmente pode variar entre 1 e 5.

Adicionalmente, estruturas preferidas são aquelas onde R1 é um grupo acil de fórmula CH3-(CH2)m-CO-, onde m pode

3 0 variar entre 1 e 22. Os peptídeos da presente invenção podem existir como estereoisômeros ou misturas de estereoisômeros; por exemplo: os aminoácidos que os compõem podem ter configuração L-, D-, ou ser racêmicos independentemente um do outro. Portanto, é possível obter misturas isoméricas assim como racêmicas ou misturas diastereoméricas, ou diasteroisômeros puros ou enantiômeros, dependendo do número de carbonos assimétricos e de quais isômeros ou misturas isoméricas estejam presentes. As estruturas preferidas dos peptídeos da invenção são isômeros puros, tais como, enantiômeros ou diasteroisômeros.

Dentro do contexto da presente invenção, o termo "grupo alifático" se refere a um grupo hidrocarbonado saturado ou insaturado, linear ou cíclico.

0 termo "grupo hidrocarbonado" se utiliza, na presente invenção, para abarcar, por exemplo, os grupos alquil, alquenil e alquinil.

O termo "grupo alquil" se refere a um grupo hidrocarbonado saturado linear ou ramificado, incluindo, por exemplo , metil, etil, isopropil, isobutil, t-butil, heptil, dodecil, hexadecil, octadecil, amil, 2-etilhexil, 2-metilbutil, 5-metilhexil e similares.

0 termo "grupo alquenil" se refere a um grupo hidrocarbonado não saturado, linear ou ramificado com uma ou mais ligações duplas carbono-carbono, tal como o grupo vinil.

O termo "grupo alquinil" se refere a um grupo hidrocarbonado não saturado, linear ou ramificado com um ou mais ligações triplas carbono-carbono.

O termo "grupo cíclico" se refere a um anel fechado hidrocarbonado, que pode ser classificado como grupo alicíclico, aromático ou heterocíclico.

O termo "grupo alicíclico" se refere a um grupo hidrocarbonado cíclico com propiedades parecidas aos grupos alifáticos.

O termo "grupo aromático" ou o "grupo aril" se referem a um grupo hidrocarbonado aromático mono ou policíclico.

0 termo "grupo heterocíclico" se refere a um anel fechado hidrocarbonado, no qual um ou mais de um dos átomos

do anel é um elemento diferente do carbono (por exemplo, nitrógeno, oxigênio, enxofre, etc.)·

O termo "polímero de polietilenoglicol" se refere a cadeias hidrocarbonadas, substituídas ou não, que contêm unidades repetitivas do grupo -CH2CH2O-.

Conforme o entendimento nesta área técnica, a

existência de um alto grau de substituição não é unicamente tolerado, mas sim aconselhado. Portanto, pode existir substituição nos peptídeos da presente invenção. Com a finalidade de simplificar a presente descrição da invenção,

2 0 os termos "grupo" e "bloqueado" serão utilizados para

diferenciar entre espécies químicas que permitem substituição ou que podem ser substituídas ("grupo"), e aquelas que não permitem substituição ou que não podem ser substituídas ("bloqueado"). Desta forma, quando o termo

"grupo" é usado para descrever um substituinte químico, o material químico descrito inclui tanto o grupo não substituído como aquele que contêm os átomos de O, N ou S.

Por outro lado, quando o termo "bloqueado" é utilizado para descrever um composto químico ou substituinte, somente

3 0 poderá ser incluído material químico não substituído. Por exemplo, a expressão "grupo alquil" incluirá não somente substituintes alquilicos saturados de cadeia aberta, tais como metil, etil, propil, isobutil e similares, mas também substituintes alquilicos que contenham outros substituintes conhecidos tecnicamente, tais como hidroxi, alcoxi, amino, carboxil, carboxamido, átomos de halógeno, ciano, nitro, alquilsulfonil, e outros. Deste modo, "grupo alquil" inclui grupos éteres, haloalquilos, alcoóis, tióis, carboxilas, aminas, hidroxialquilas, sulfoalquilas, guanidinas, e outros. Por outro lado, a expressão "bloqueado alquil" se limita unicamente à inclusão de substituintes alquilicos saturados de cadeia aberta, tais como metil, etil, propil, isobutil e similares.

No contexto da presente invenção "seqüência de aminoácidos derivada da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25" significa qualquer seqüência de aminoácidos ou fragmento contido na seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25, definida pela SEQ ID No.l, ou qualquer seqüência de aminoácidos que seja diferente de uma seqüência contida na seqüência SEQ ID No.l por mutação, inserção, deleção ou substituição de pelo menos um aminoácido, ou por degeneração do código genético, sempre e quando corresponda a um peptídeo que possua a atividade da proteína SNAP-25. As mutações, inserções ou substituições podem ter lugar mediante aminoácidos codificados geneticamente ou mediante aminoácidos não codificados, naturais ou não, como, por exemplo, e sem signiifiçado limitado, citrulina, ornitina, sarcosina, desmosina, norvalina, ácido 4-aminobutírico, ácido 2-aminobutírico, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 6-aminohexanoico, 1- naftilalanina, 2-naftilalanina, ácido 2-aminobenzoico, ácido 4-aminobenzoico, 4-clorofenilalanina, ácido 2,3- diaminopropiónico, ácido 2,4-diaminobutírico, cicloserina, carnitina, cistina, penicilamina, ácido piroglutámico, tienilalanina, hidroxiprolina, alio-isoleucina, allo- treonina, ácido isãoipecótico, isoserina, fenilglicina, estatina, β-alanina, norleucina, N-metilaminoácidos, S- aminoácidos ou γ-aminoácidos entre outros, assim como seus derivados. Uma lista dos aminoácidos não naturais pode ser encontrada no artigo "Unusual amino acids in peptide synthesis" de Roberts D.C. e Vellaccio F., em The Peptides, Vell. 5 (1983), Chapter VI, Gross E. and Meienhofer J., Eds., Academic Press, New York, USA ou também nos catálogos comerciais das empresas especializadas do setor, como por exemplo NeoMPS, Bachem, Novabiochem, Sigma-Aldrich,

Peptides International, Advanced ChemTech, Chem-Impex, Maybridge Chemical, Chirotech Technology, Península Laboratories ou RSP Amino Acid Analogues entre outras.

Dentro dos peptídeos da invenção derivados da seqüência de aminoácidos de SNAP-25 definida pela SEQ ID No.1 e modificados quimicamente de maneira irreversível, as seqüências preferidas são aquelas que possuem uma seqüência de aminoácidos contida na seqüência da regão amino-terminal da proteína SNAP-25, definida pela SEQ ID No. 2, ou da região carboxi-terminal da proteína SNAP-25, definida pela SEQ ID No. 3, mais preferencialmente contidas na região compreendida entre os resíduos 10 a 22, definida pela SEQ ID No.4, ou contidas na região compreendida entre os resíduos 25 a 40, definida pela SEQ ID No.5, ou contidas na região compreendida entre os resíduos 65 a 81, definida pela SEQ ID No.6, ou contidas na região compreendida entre os resíduos 181 a 206, definida pela SEQ ID No. 7, mais concretamente contidas na região compreendida entre os resíduos 12 a 19, definida pela SEQ ID No.8, ou contidas na região compreendida entre os resíduos 26 a 38, definida pela SEQ ID No.9, ou contidas na região compreendida entre os resíduos 68 a 79, definida pela SEQ ID No. 10, e especificamente contidas na região compreendida entre os resíduos 12 a 17, definida pela SEQ ID No.11.

Assim mesmo, a invenção também inclui peptídeos

substancialmente homólogos aos peptídeos derivados da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25, modificados quimicamente de maneira irreversível. Por "peptídeos substancialmente homólogos" se entende aquelas seqüências

de aminoácidos que são no mínimo 60%, preferencialmente 80% e mais preferencialmente 95% idênticas à seqüência SEQ ID No.l. 0 "percentual de identidade" se refere ao percentual de aminoácidos que são idênticos entre duas seqüências de aminoácidos que se comparam, depois de um alinhamento ótimo

2 0 destas seqüências, onde tal porcentagem é meramente estatística e as diferenças entre as duas seqüências de aminoácidos se distribuem aleatoriamente ao longo da seqüência. Por "alinhamento ótimo" se entende aquele alinhamento das seqüências de aminoácidos que dá lugar a um

2 5 maior percentual de identidade. 0 percentual de identidade

se calcula determinando o número de posições idênticas na qual um aminoácido é idêntico nas duas seqüências que se comparam, dividindo o número de posições idênticas pelo número de posições comparadas e multiplicando o resultado

3 0 obtido por 100 para obter o percentual de identidade entre as duas seqüências. As comparações de seqüências entre duas seqüências de aminoácidos podem ser feitas manualmente ou através de programas informatizados como, por exemplo, o algoritmo BLAST (Basic Local Alignment Search Tool), acessível pela internet no site

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/.

Dentro do âmbito da presente invenção se encontram os sais cosmética ou farmacêuticamente aceitáveis dos peptídeos proporcionados por esta invenção. O termo "sais cosmeticamente ou farmacêuticamente aceitáveis" inclui os sais habitualmente utilizados para formar sais metálicos ou sais de adição de ácidos, podendo ser orgânicos (como, por exemplo, acetato, citrato, oleato, trifluoroacetato, oxalato ou gluconato entre outros) ou inorgânicos (como por exemplo cloro, sulfato, borato ou carbonato entre outros). A natureza do sal não é crítica, sempre e quando seja cosmeticamente ou farmacêuticamente aceitável. Os sais cosmeticamente ou farmacêuticamente aceitáveis dos peptídeos da invenção podem ser obtidos por métodos 2 0 convencionais, bem conhecidos pelo estado da técnica.

A síntese dos peptídeos da invenção pode realizar-se segundo métodos convencionais, conhecidos pelo estado da técnica, como, por exemplo, a adaptação dos métodos de síntese de peptídeos em fase sólida [Stewart J.M. e Young J.D. (1984) nSolid Phase Peptide Synthesisf 2nd edition" Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois; Bodanzsky M. e Bodanzsky A. (1984) "The practice of Peptide Synthesis" Springer Verlag, New Cork; Lloyd-Williams P., Albericio F. e Giralt E. (1997) nChemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins" CRCr Boca Raton (FL, USA)], a síntese em solução, uma combinação dos métodos de síntese em fase sólida e em solução ou a síntese enzimática [Kullmann W. (1980) nProteases as catalysts for enzymic syntheses of opioid peptides" J.Biol.Chem. 255, 8234-8238].

Os peptídeos podem ser obtidos tanto por fermentação de uma cepa bacteriana, modificada ou não por engenharia genética com o objetivo de produzir as seqüências desejadas, ou também por hidrólise controlada de proteínas de origem animal ou vegetal, preferencialmente vegetal, que libere fragmentos peptídicos que contenham, pelo menos, a seqüência desejada.

Por exemplo, um método de obtenção dos peptídeos da invenção é aquele no qual se faz reagir um fragmento do peptídeo da invenção que possui um grupo carboxil livre ou um derivado reativo deste, com um fragmento complementar, que possui um grupo amina, com pelo menos um átomo de hidrogênio livre, com a conseqüente formação de uma ligação tipo amida, e onde tais fragmentos apresentam os grupos funcionais que não participam na formação da ligação tipo

2 0 amida, se houver, convenientemente protegidas, com grupos

protetores temporários ou permanentes.

Outro exemplo de método de obtenção dos peptídeos da presente invenção é aquele no qual se faz reagir um fragmento do peptídeo da invenção que possui um grupo cessante, como por exemplo o grupo tosil, o grupo mesil e grupos halógenos entre outros, com um fragmento complementar que possui um grupo amino com pelo menos um átomo de higrogênio livre mediante uma reação de substituição nucleófila, e onde tais fragmentos apresentam

3 0 os grupos funcionais que não participan na formação da ligação N-C, se houver, convenientemente protegidos, com grupos protetores temporários ou permanentes. Exemplos de grupos protetores, sua introdução e sua eliminação, podem ser encontradas descritas na literatura [Greene T.W. (1981) nProtective groups in organic synthesis" John Wiley & Sãos, New Cork; Atherton B. e Sheppard R.C. (1989) nSolid Phase Peptide Synthesis: A practical approach" IRL Oxford University Press] . 0 termo "grupos protetores" inclui também os suportes poliméricos empregados na síntese em fase sólida.

Quando a síntese se realiza total ou parcialmente em fase sólida, podem ser relacionados como suportes sólidos para utilizar no método da invenção, os suportes de poliestireno, polietilenglicol injetado em poliestireno e similares, como por exemplo resinas p-metilbenzhidrilamina (MBHA) [Matsueda G.R. e Stewart J.M. (1981) nA p- methy lbenzhydry lamine resin for improved solid-phase synthesis of peptide amides" Peptides 2, 45-50], resinas 2- clorotritilo [(a) Barlos K., Gatos D., Kallitsis J., Papaphotiu G., Sotiriu P., Wenqing Y. e Schàfer W. (1989) nDarstellung geschützter peptid-fragmente unter einsatz substituierter tr ipheny lmethy 1-harze" Tetrahedron Lett. 30, 3943-3946; (b) Barlos K., Gatos D., Kapolos S., Papaphotiu G. , Schàfer W. e Wenqing Y. (1989) nVeresterung veln partiell geschützten peptid-fragmenten mi t harzen. Einsatz veln 2-chlorotritylchlorid zur synthese veln Leul5 -gastrin I" Tetrahedron Lett. 30, 3947-3951], resinas TentaGel® (Rapp Polymere GmbH), resinas ChemMatrix® (Matrix Innovation, Inc) e similares, que podem incluir ou não um 3 0 espaçador labial, tal como ácido 5-(4-aminometil-3,5- dimetoxifenoxi) valérico (PAL) [Alberício F., Kneib- Cordonier N., Biancalana S., Gera L., Masada R.I., Hudsão D. e Barany G. (1990) nPreparation and application of the 5(4- (9-fluorenylmethyloxycarbonyl) aminomethyl3,5-dimethoxy- phenoxy) -valeric acid (PAL) handle for the solid-phase synthesis of C-terminal peptide amides under mild conditions" J. Org. Chem. 55, 3730-3743], ácido 2- [4- aminometil-(2,4-dimetoxifenil) ] fenoxiacético (AM) [Rink H. (1987) nSolid-phase synthesis of protected peptide

fragments using a trialkoxy-diphenyl-methylester resin" Tetrahedron Lett. 28, 3787-3790], Wang [Wang S.S. (1973) np-Alkoxybenzyl Alcohol Resin and p-

Alkoxybenzyloxycarbonylhydrazide Resin for Solid Phase Synthesis of Protected Peptide Fragments" J.Am.Chem.Soc.

95, 1328-1333] e similares, que permitem a desproteção e excisão simultânea do composto do suporte polimérico.

Os peptídeos da invenção podem ser administrados para regular a exocitose neuronal por qualquer meio que produza o contato dos compostos com o local de ação do mesmo no

2 0 corpo de um mamífero, preferencialmente o do ser humano, em

forma de composição que os contêm. Neste sentido, a invenção proporciona uma composição cosmética ou farmacêutica que compreende pelo menos um peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosmética ou

farmacêuticamente aceitáveis. Tais composições podem ser preparadas mediante métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na matéria.

Os peptídeos da invenção são utilizados na composição cosmética ou farmacêutica da presente invenção em

3 0 concentrações cosmética ou farmacêuticamente efetivas para conseguir o efeito desejado; de forma preferida entre 0.00000001% (em pêso) e 20% (em pêso); preferencialmente entre 0.00001% (em pêso) e 10% (em pêso) e mais especificamente entre 0.0001% (em pêso) e 5% (em pêso).

Os peptídeos objeto da presente invenção tem uma

solubilidade em água variável, segundo a natureza de sua seqüência ou a modificação nas extremidades amino e carboxi-terminal que apresentem. Aqueles que não sejam solúveis em água podem solubilizar-se em solventes convencionais cosmética ou farmacêuticamente aceitáveis tais como, por exemplo: etanol, propanol ou isopropanol, propilenglicol, glicerina, butilenglicol ou

polietilenglicol.

A quantidade farmacêuticamente efetiva dos peptídeos e/ou composições farmacêuticas segundo a invenção, que deve ser administrada para tratar um estado patológico, assim como sua dosagem, dependerá de numerosos fatores, incluindo a idade, estado do paciente, a gravidade da alteração ou transtorno, a via e freqüência de administração dos peptídeos em particular a utilizar.

As composições farmacêuticas que contêm os peptídeos da invenção podem apresentar-se em qualquer forma de administração, por exemplo, sólida ou líquida, e podem administrar-se por qualquer via apropriada, por exemplo,

2 5 por via oral, nasal, parenteral, retal, tópica ou

transdérmica, para o qual se incluirão os excipientes farmacêuticamente aceitáveis necessários para a formulação da forma de administração desejada. No contexto da presente invenção, o termo "parenteral" inclui injeções subcutâneas,

3 0 intradérmicas, intravasculares como, por exemplo intravenosas, intramusculares, espinhais, intracranianas, intraarticulares, intratecais e intraperitoniais, assim como qualquer outra injeção similar ou técnica de infusão. Uma revisão das diferentes formas farmacêuticas de administração de medicamentos e dos excipientes necessários para a obtenção das mesmas pode ser encontrado, por exemplo, no "Tratado de Farmácia Galénica", C. Fauli i Trillo, 1993, Luzán 5, S.A. Ediciones, Madrid.

Os peptídeos da invenção também podem ser incorporados previamente em sistemas de transporte e/ou em sistemas de liberação sustentada de cosméticos ou farmacêuticos como liposomas, milipartículas, micropartículas e

nanoparticulas, esponjas, vesículas, micelas, miliesferas, microesferas e nanoesferas, lipoesferas, milicápsulas, microcápsulas e nanocápsulas, assim como em microemulsões e nanoemulsões, com a finalidade de conseguir uma maior penetração do princípio ativo e/ou melhorar as propriedades farmacocinéticas e farmacodinâmicas do mesmo. As formulações de liberação controlada podem ser preparadas 2 0 através de métodos conhecidos tecnicamente, e podem administra-se, por exemplo, por administração tópica incluindo os adesivos, ou por via oral, retal ou implantação subcutânea, ou por implantação direta em uma parte do corpo concreta, e preferencialmente devem liberar

2 5 uma quantidade relativamente constante dos peptídeos da

invenção. A quantidade de peptídeo contida na formulação de liberação controlada dependerá, por exemplo, do local de administração, a cinética e duração da liberação do peptídeo da invenção assim como a natureza da condição a

3 0 ser tratada ou prevenida. Os peptídeos da presente invenção também podem adsorver-se sobre polímeros orgânicos sólidos ou suportes minerais como talco, bentonita, silício , amido ou maltodextrina entre outros.

As preparações cosméticas ou farmacêuticas que

contenham peptídeos da presente invenção podem ser usados em diferentes tipos de formulações de aplicação tópica como por exemplo, e sem significado limitado, cremes, emulsões de óleos e/ou silicone em água, emulsões de água em óleo e/ou silicone, óleos, leites, bálsamos, espumas, loções, géis, linimentos, soros, sabões, ungüentos, mousses, pomadas, barras, lápis e vaporizadores ("sprays"), incluindo as formulações de permanência ("leave on") e as de enxague ("rinse-off"), assim como podem ser incorporadas mediante técnicas conhecidas por especialistas na matéria a diferentes tipos de acessórios sólidos tais como por exemplo toalhas, hidrogéis, adesivos (ou não adesivos) ou máscaras faciais, ou podem incorporar-se a diferentes produtos da linha de maquiagem tais como fundos de

2 0 maquiagem, loções, leites demaquilantes, corretores de

olheiras, sombras de olhos e batons entre outros.

Os peptídeos também podem incorporar-se a tecidos para a confecção de vestuários que estejam em contato direto com a pele do corpo, de modo que liberem os peptídeos da invenção ou por biodegradação do sistema de ancoragem ao tecido ou pela fricção do vestuário com o corpo, pela humidade corporal, pelo pH da pele ou pela temperatura corporal. Exemplos de vestuários, tecidos e meios de envolvimento dos peptídeos aos tecidos, entre os que se

3 0 encontram a microencapsulação, podem encontrar-se descritos na literatura e são conhecidos tecnicamente [Schaab C.K. (1986) "Impregnating Fabrics With Microcapsules", HAPPI May 1986; Nelsão G. (2002) nApplication of microencapsulation in textiles" Int. J. Pharm. 242, 55-62], Vestuários preferidos são ligaduras.

A composição cosmética ou farmacêutica objeto da presente invenção pode aplicar-se nas partes do corpo que requeiram tratamento ou cuidado mediante injeção subcutânea, injeção intradérmica, cura oclusiva ou mediante iontoforese, com a finalidade de conseguir uma maior penetração do princípio ativo. A zona de aplicação será determinada pela natureza da condição a tratar. Uma zona preferida para a aplicação é a zona da testa que apresenta rugas de expressão assim como no espaço entre as sobrancelhas, as rugas e linhas finas ao redor da boca e/ou ao redor dos olhos.

A composição cosmética ou farmacêutica reivindicada na presente invenção pode conter ingredientes adicionais comumente empregados em composições para o cuidado, limpeza 2 0 e tratamento da pele, tais como, por exemplo, e sem significado limitante, agentes emulsionantes, emolientes, dissolventes orgânicos, acondicionadores da pele como por exemplo humectantes, alfahidroxiácidos, hidratantes,

vitaminas, pigmentos ou corantes, polímeros gelificantes, espessantes, suavizantes, agentes anti-rugas, agentes capazes de diminuir ou tratar as bolsas embaixo dos olhos, agentes branqueadores ou despigmentantes, agentes esfoliantes, agentes anti-envelhecimento, agentes capturadores de radicais livres e/ou anti-contaminação atmosférica, agentes inibidores da NO-sintase, agentes antioxidantes, agentes anti-glicação, agentes anti- microbianos, agentes anti-fungicos, agentes estimuladores da síntese de macromoléculas dérmicas ou epidérmicas e/ou capazes de inibir sua degradação, como por exemplo agentes estimuladores da síntese de colágeno, agentes estimuladores da síntese de elastina, agentes estimuladores da síntese de decorina, agentes estimuladores da síntese de laminina, agentes inibidores da degradação de colágeno, agentes inibidores da degradação de elastina, agentes estimuladores da proliferação de fibroblastos, agentes estimuladores da proliferação de queratinócitos, agentes estimuladores da diferenciação de queratinócitos, agentes estimuladores da síntese de lipídios e componentes do extrato córneo (ceramidas, ácidos graxos, etc.), agentes dermorelaxantes, agentes estimuladores da síntese de glicosaminoglicanos, agentes reafirmantes, agentes antiestrías, agentes calmantes, agentes anti-inflamatórios, agentes que atuem sobre a circulação capilar e/ou a microcirculação, agentes que atuem sobre o metabolismo das células, agentes

2 0 estimuladores e/ou inibidores da síntese de melanina,

agentes destinados a melhorar a união derme-epiderme, conservantes, perfumes, agentes quelantes, extratos vegetais, óleos essenciais, extratos marinhos, agentes provenientes da biofermentação, sais minerais, extratos celulares e filtros solares (agentes fotoprotetores de natureza orgânica ou mineral ativos contra os raios ultravioleta AeB) entre outros, sempre que sejam física e quimicamente compatíveis com o resto de componentes da composição e em especial com os peptídeos de fórmula geral

3 0 (!) contidos na composição da presente invenção. A natureza de tais ingredientes adicionais pode ser sintética ou de origem natural, como por exemplo extratos vegetais, ou vir de um processo de biofermentação.

Um aspecto adicional da presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que contêm uma quantidade cosmética ou farmacêuticamente eficaz de pelo menos um peptídeo da invenção, e além disso uma quantidade cosmética ou farmacêuticamente eficaz de pelo menos um extrato com atividade anti-rugas e/ou anti-envelhecimento como por exemplo e sem significado limitativo os extratos de Vitis vinifera, Rosa canina, Curcuma longa, Iris pallida, Theobroma cacao, Ginkgo biloba, ou Dunaliella salina entre outros ou também, além disso, pelo menos um composto sintético, extrato ou produto de biofermentação

com atividade anti-rugas e/ou anti-envelhecimento como por

®

exemplo e sem significado limitativo Matrixyl

® ®

comercializado por Sederma, Vialox ou Syn-ake

comercializados por Pentapharm, Myoxinol™ comercializado

® . . ®

por Cognis, Algisum C ou Hydroxyprolisilane CN ,

® Φ

2 0 comercializados por Exsymol, Argireline , Leuphasyl ,

-. -. ■ ® .-1® ■ -. ® ,- ■ Ί ®

Aldenme , Decormyl , Decormol ou Lipochroman

(D

comercializados por Lipotec, Kollaren comercializado por

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Institut Europeen de Biologie Cellulaire, Collaxyl ou ® · · · j

Quintescine comercializados por Vmcience, antagonistas do canal de Ca2+ como a alverina, os sais de manganês ou de magnésio, certas aminas secundárias ou terciárias, retinol e seus derivados, idebenona e seus derivados, Coenzima QlO e seus derivados, ácido bosvélico e seus derivados, ácido gamma-aminobutírico ou agonistas de canais de cloro entre

3 0 outros. Assim mesmo, as composições da presente invenção podem conter ou podem ser administradas junto com compostos analgésicos e/ou compostos anti-inflamatórios com a finalidade de diminuir o inchaço e a irritação associadas a peles sensíveis. Entre tais compostos podem destacar-se compostos do tipo esteroideo como a hidrocortisona, do tipo não esteroidal como o paracetamol ou o ácido acetilsalicílico ou extratos naturais ou óleos essenciais com atividade analgésica e anti-inflamatória intrínseca.

Os peptídeos da invenção possuem um mecanismo de ação

similar ao da toxina botulínica inibindo a exocitose neuronal, pelo que se pode considerar que os peptídeos demostraram eficácia no tratamento das rugas faciais e/ou a assimetria facial, assim como no tratamento daquelas

condições que cursem com espasmodicidademuscular, como as distonias, estrabismo, blefarospasmo, torticolis, tics, etc.

Portanto, um aspecto adicional desta invenção se refere ao uso de pelo menos um peptídeo de fórmula geral

2 0 (I) na elaboração de uma composição cosmética ou

farmacêutica para o tratamento daquelas condições dos mamíferos, preferencialmente dos humanos, que requeiram regular a exocitose neuronal. Outro aspecto da presente invenção se refere ao uso de pelo menos um peptídeo de

fórmula geral (I) na elaboração de uma composição cosmética ou farmacêutica para o tratamento, limpeza ou cuidado da pele. Um aspecto adicional desta invenção se refere ao uso de pelo menos um peptídeo derivado da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25 modificado quimicamente de

3 0 maneira irreversível na elaboração de uma composição cosmética ou farmacêutica para reduzir e/ou eliminar a assimetria facial e as rugas faciais, preferencialmente as rugas de expressão. Outro aspecto adicional desta invenção se refere ao uso de pelo menos um peptideo derivado da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25 modificado químicamente de maneira irreversível na elaboração de uma composição cosmética ou farmacêutica para tratar aquelas patologias ou desordens neurológicas de andamento com espasmodicidademuscular, como são as distonias, estrabismo, blefarospasmo, tortícolis, tics, etc.

Outro aspecto da presente invenção se refere a um método cosmético ou farmacêutico para tratar aquelas condições dos mamíferos que requeiram uma regulação da exocitose neuronal, preferencialmente dos humanos, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de pelo menos um peptideo de fórmula geral (I) , preferencialmente em forma de uma composição cosmética ou farmacêutica que os contenha. A presente invenção proporciona, alem disso, um método cosmético ou farmacêutico para reduzir e/ou eliminar

2 0 as rugas do rosto ou para tratar a assimetria facial que

compreende a aplicação na pele do rosto de uma composição cosmética ou farmacêutica que contem pelo menos um peptideo da invenção ou seus sais cosméticamente ou farmacêuticamente aceitáveis. Assim mesmo, a presente invenção proporciona um método cosmético ou farmacêutico para tratar aquelas patologias ou desordens neurológicas de andamento com espasmodicidademuscular, como são as distonias, estrabismo, blefarospasmo, tortícolis, tics, etc. que compreende a aplicação de uma composição cosmética

3 0 ou farmacêutica que contêm pelo menos um peptideo da invenção ou seus sais cosmeticamente ou farmacêuticamente aceitáveis.

A freqüência da aplicação pode variar amplamente, dependendo das necessidades de cada indivíduo, sugerindo-se uma faixa de aplicação desde uma vez ao mês até 10 vezes ao dia, preferencialmente desde uma vez na semana até 4 vezes ao dia, mais preferencialmente desde três vezes por semana até duas vezes ao dia, ainda mais preferencialmente uma vez ao dia.

Método cosmético ou farmacêutico preferido é aquele em

que a aplicação se realiza naquelas áreas do rosto ou na testa marcadas com rugas de expressão, preferencialmente sobre as rugas ao redor da boca e/ou dos olhos, e/ou sobre as rugas da testa e/ou sobre as rugas do espaço entre as sobrancelhas.

DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

A figura 1 mostra que em presença dos peptídeos da invenção a uma concentração O.lmM, a liberação de [3H]-L- glutamato de cultivos primários de neurônios de hipocampo de rata se inibiu mais de 40%, indicando que os compostos são inibidores da exocitose neuronal. A inibição da liberação de [3H]-L-glutamato pelo peptídeo não modificado derivado da seqüência de aminoácidos da proteína SNAP-25 definido pela SEQ ID No. 11 à mesma concentração foi de só 5%, requerendo-se concentrações em uma faixa de 30 vezes superiores (3mM) para alcançar níveis de inibição comparáveis aos dos peptídeos modificados

irreversivelmente. EXEMPLOS DE REALIZAÇÃO Os seguintes exemplos específicos que aqui são apresentados servem para ilustrar a natureza da presente invenção. Estes exemplos se incluem somente com fins ilustrativos e não devem ser interpretados como limitações à invenção que aqui se reivindica.

Metodologia Geral Síntese química

Todos os processos sintéticos foram feitos em seringas de polipropileno equipadas com discos de polietileno poroso. Todos os reativos e solventes são indicados para síntese e são utilizados sem nenhum tratamento adicional. Os solventes e os reagentes solúveis são eliminados por sucção. A eliminação do grupo Fmoc é feito com piperidina- DMF (2:8, v/v) (1 χ Imin, 1 χ 5min; 5mL/g resina) [Lloyd- Williams P., Albericio F. e Gira.lt, E. (199 7) "Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins" CRC, Boca Raton (FL, USA)]. As lavagens entre as etapas de desproteção, acoplamento, e, outra vez, desproteção foram feitos com DMF (3 χ lmin) usando a cada vez IOmL solvente/g resina. As reações de acoplamento foram realizadas com 3mL solvente/g resina. 0 controle dos acoplamentos se realiza mediante o ensaio da ninhidrina [Kaiser E., Colescott R.L., Bossinger C.D. e Cook P.I. (1970) nColor test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides" Anal. Biochem. 34, 595-598]. Todas as transformações sintéticas e lavagens foram realizadas a ° C.

A análise por espectrometria de massas por eletron spray foi realizada em um equipamento Shimadzu (Kyoto, Japón) LCMS-QP 8000, empregando uma mistura de MeCNiH2O 4:1 3 0 (+0.1% TFA) como fase móvel e um fluxo de 0.2mL/min. Abreviaturas :

As abreviaturas empregadas para os aminoácidos seguem as regras da Comissão de Nomenclatura Bioquímica da IUPAC-IUB especificadas em Eur. J. Biochem. (1984) 138, 9- 37 e em J. Biol. Chem. (1989) 264, 633-673.

AM, ácido 2- [4-aminometil-(2,4-dimetoxifenil)]-

fenoxiacético; BoNT A, toxina botulínica serotipo A; cps, centipoise; DCM, diclorometano; DIEA, NfN-

diisopropiletilamina; DIPCDI, Nf N'-diisopropilcarbodiimida; DMF, NfN- dimetilformamida; DPPC,

dipalmitoilfosfatidilcolina; eq., equivalente; Fmoc, fluorenilmetoxicarbonilo; HOBt, 1-hidroxibenzotriazol; INCI, International Nomenclature of Cosmetic Ingredients; MBHA, resina p-metilbenzhidrilamina; MeCN, acetonitrilo; mLV, vesículas multilaminares; MeOH, metanol; NMP, N- metilpirrolidona; Pbf, 2,2,4,6,7-

pentametildihidrobenzofuran-5 -sulfonilo; PEG,

polietilenglicol; PEGn, - [NH-CH2-(CH2CH2O) 3-(CH2) 3-NH-CO- CH2CH2-COJn; rpm, revoluções por minuto; SNAP-25, "synaptosomal associated protein (25kDa)"; tBu, terc- butilo; TFA, ácido trifluoroacético; THF, tetrahidrofurano; ULV, vesículas unilaminares. EXEMPLO 1

Obtenção de Fmoc-Glu(OtBu) -Glu (OtBu) -Met-Gln-Arg (Pbf) - 2 5 Arg(Pbf)-AM-MBHA

Se tratam 151.3g da resina Fmoc-AM-MBHA de funcionalização 0.628mmol/g (95mmol, leq.) com piperidina- DMF segundo o protocolo geral descrito com o objetivo de eliminar o grupo Fmoc. Sobre a resina desprotegida se incorporam 154.Ig de Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH (237mmol, 2.5eq.) na presença de DIPCDI (36.6mL, 237mmol, 2.5eq.) e HOBt (35.6g, 23 7mmol, 2.5eq.) utilizando DMF como solvente durante Ih.

A resina é lavada posteriormente como o descrito nos métodos gerais e se repete o tratamento de desproteção do grupo Fmoc para incorporar o aminoácido seguinte. Seguindo os protocolos descritos se adicionam seqüencialmente 154.Ig de Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH (237mmol, 2.5eq.), 87.5g de Fmoc-Gln- OH (474mmol, 5eq.)( 88.2g de Fmoc-L-Met-OH (237mmol, 2.5eq.), 105.3g de Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH (237mmol, 2.5eq.) e 105.3g de Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH (237mmol, 2.5eq.) em presença em cada acoplamento de 36.5g de HOBt (237mmol, 2.5eq.) e 3 6.6mL de DIPCDI (237mmol, 2.5eq.), exceto na etapa de incorporação de Fmoc-L-Gln-OH na qual foram empregados 71.3g de HOBt (474mmol, 5eq.).

A Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Met-Gln-Arg(Pbf)-Arg(Pbf) - AM-MBHA obtida é lavada com DMF (5 χ lmin), DCM (4 χ lmin), éter dietílico (4 χ lmin) e sêca à vácuo. EXEMPLO 2

Obtenção de CH3-(CH2)w-CO-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2

Se desprotege o grupo Fmoc amino-terminal de 1.68g de Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Met-Gln-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-AM-MBHA (0.5mmol, 0.2 96mmol/g, Ieq.) como descrito nos métodos gerais, e se incorpora CH3-(CH2)m-COOH (5mmol, IOeq.) pré- dissolvido em DMF (IOmL) , na presença de 770mg de HOBt (5mmol, lOeq.) e 770pL de DIPCDI (5mmol, IOeq.). Se deixa reagir durante 15h, passadas as quais a resina é lavada THF (5 χ lmin), DCM (5 χ lmin), DMF (5 χ lmin), MeOH (5 χ lmin), DMF (5 χ lmin), THF (5 χ lmin), DMF (5 χ lmin), DCM (4 χ lmin), éter (3 χ lmin), e sêca à vácuo. l.OOg da peptidil-resina seca é tratada com 15mL de TFA-iPr3Si-H2O (90:5:5) durante 2h a temperatura ambiente. Os filtrados são coletados sobre éter dietílico frio (IOOmL), é centrifugado a 5min a 4000rpm e decantado a solução etérea. Se repetem as lavagens com éter 5 vezes. 0 precipitado final é sêco à vácuo._

m quantidade obtida pureza PM teórico PM experimental 6 291.2mg 88 . 2% [M+H] + 972 . 5 = [M+H+] = 973.8 [M+2H+/2] 487 . 5 8 24 0.Img 87 . ,2% [M+H] + 1000.5 = [M+H+] = 1001.8 [M+2H+/2] 501. 5 12 327.5mg 80 . . 7% [M+H] + 1056.6 = [M+H+] = 1057.8 [M+2H+/2] 529 . 5 14 292.8mg 80 . 9% [M+H] + 1084 . 6 = [M+H+] = 1085.9 [M+2H+/2] 543 . 7 233.7mg 85 . 1% [M+H] + 1168.74 = [M+H+] =1170.0 [M+2H+/2] 585 . 7

EXEMPLO 3

Obtenção de Ac-PEGn-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2

Se desprotege o grupo Fmoc amino-terminal de 321.Omg de Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu) -Met-Gln-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-AM- MBHA (0.0 95mmol, 0.296mmol/g, leq.) como o descrito nos métodos gerais, e se incorporam Fmoc-PEGi-OH (2.5eq.) pré- dissolvido em NMP, na presença de 3 6.5mg de HOBt (0.237mmol, 2.5eq.) e 36.6pL de DIPCDI (0.237mmol, 2.5eq.), durante 40-60min. Se desprotege o grupo Fmoc amino-terminal como descrito nos métodos gerais, e se faz a reação de incorporação de Fmoc-PEG1-OH e a desproteção do Fmoc (n-1) vezes, onde η = 1-100 para a obtenção dos diferentes derivados. A acetilação da extremidade amino-terminal é feita com Ac2O (2.5eq.) e DIEA (2.5eq.) em DMF durante 3Omin.

A Ac-PEGn-Glu(OtBu) -Glu(OtBu) -Met-Gln-Arg(Pbf) -

Arg(Pbf)-AM-MBHA resina é lavada com DMF (5 χ lmin) , DCM (4 χ lmin), éter dietilico (4 χ lmin) e sêca à vácuo.

22.4 mg de Ac-PEGn-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Met-Gln- Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-AM-MBHA é tratada com l,57mL do cócto TFA-iPr3Si-H2O (95:2.5:2.5) durante 5min a 0°C seguidos de 90 min a temperatura ambiente. São coletados os filtrados sobre éter dietilico frio (IOmL) , são centrifugados por 5min a 4000rpm e se decanta a solução etérea. São repetidos as lavagens com éter 5 vêzes. 0 resíduo oleoso final é dissolvido em MeCN = H2O 1:1 e se liofiliza._

η quantidade pureza PM teórico PM experimental

obtida

3

4

2

1

7 . 7mg

10.Omg

10.4mg

13.7mg

72% [M+H] +=1191. 6 [M+2H+/2] = 596.4

[M+3H+/3]= 398.0 60% [M+H]+ = 1494 . 7 [M+2H+/2]= 747.6

[M+3H+/3]= 498.7 64% [M+H]+=1796 . 1 [M+2H+/2]= 898.7

[M+3H+/3]= 599.6 [M+4H+/4]= 449.8 65% [M+H]+ = 2099.5 [ [M+2H+/2]= 1050

[M+3H+/3]= 700.4 [Μ+4Η+/4]= 525.4 [Μ+5Η+/ 5]= 420.5

10 . 4mg 65% [Μ+Η] +=2400 . 3 [Μ+2Η+/2] = 1201. 1

[Μ+3Η+/3]= 801.1 [Μ+4Η+/4]= 601.0 [Μ+5Η+/5]= 481.0 [Μ+6Η+/6]= 400.9

EXEMPLO 4

Obtenção de Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH- (CH2) S~CH3

Se incorporam 2.IOg de Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH (3.23mmol, leq.) dissolvidos em 20mL de DCM aos quais foram adicionados 500pL de DIEA (2.9mmol, 0.90eq.) sobre a resina 2-clorotritil (2.0g, 3.3mmol) seca. Se agita durante 5min, passados os quais se adiicionam ImL de DIEA (5.9mmol, 1.8leq.). Deixar reagir durante 4Omin. São bloqueados os grupos cloro remanescentes por tratamento com 1.6mL de MeOH.

Sobre lmmol da aminoacil-resina Fmoc-Arg(Pbf)-ClTrt é desprotegido o grupo Fmoc amino-terminal como o descrito nos métodos gerais e é incorporado 3.24g de Fmoc-L- Arg(Pbf)-OH (5mmol, 5eq.) na presença de DIPCDI (770μL, 5mmol, 5eq.) e HOBt (770mg, 5mmol, 5eq.) utilizando DMF como solvente durante Ih. A resina é lavada posteriormente como o descrito nos métodos gerais e se repete o tratamento de desproteção do grupo Fmoc para incorporar o aminoácido seguinte. Seguindo os protocolos descritos se adicionam seqüencialmente 1.84g de Fmoc-L-Gln-OH (5mmol, 5eq.), 1.86g de Fmoc-L-Met-OH (5mmol, 5eq.), 2.12g de Fmoc-L-Glu(OtBu)- OH e 2.12g de Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH (5mmol, 5eq.) na presença em cada acoplamento de 770mg de HOBt (5mmol, 5eq.) e 770pL de DIPCDI (5mmol, 5eq.), exceto na etapa de incorporação de Fmoc-L-Gln-OH em que se adicionam 1.54g de HOBt (lOmmol, IOeq.).

0 grupo Fmoc amino-terminal é desprotegido como descrito nos métodos gerais, se trata a peptidil-resina durante 30min com 2.36mL de anidro acético (25mmol, 25eq.) em presença de 4.28mL de DIEA (25mmol, 25eq.) utilizando DMF como solvente, é lavado com DMF (5 χ lmin) , DCM (4 χ lmin), éter dietilico (4 χ lmin) e seca à vácuo. O peptídeo completamente protegido [Ac-Glu(OtBu)-

Glu(OtBu)-Met-Gln-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-OH] é obtido por tratamento da peptidil-resina durante 5min, previamente seca a vácuo na presença de KOH, com uma solução do 3% de TFA em DCM. Os filtrados são coletados sobre éter dietilico frio e se repete o tratamento três vezes. As soluções etéreas são submetidas ao evaporador rotativo até secar, em temperatura ambiente, o precipitado é ressuspenso em 50% de MeCN em H2O e se liofiliza. São pesados 279mg do material bruto obtido (367μπιο1) em um balão, se adicionam 3eq. de CH3-(CH2)3-NH2 e 30mL de DMF anidra. Adicionam-se 120pL de DIPCDI (2eq.), e deixa-se reagir com agitação magnética a 47 ° C. A reação é controlada mediante HPLC por desaparição do produto inicial, sendo completa após 24h. Evapora-se o solvente até secagem e se coevapora duas vêzes com DCM. O resíduo obtido [Ac-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Met-Gln-Arg(Pbf)- Arg (Pbf) -NH- (CH2) S-CH3] é ressuspenso em 50mL de uma mistura de TFA-iPr3Si-H2O (90:5:5) e deixa-se reagir durante 30min à temperatura ambiente. Se adicionam 250mL de éter dietilico frio, o solvente é submetido ao evaporador rotativo e são realizadas duas coevaporações adicionais com éter. O resíduo é dissolvido em uma mistura de 50% de MeCN em H2O e se liofiliza. s quantidade pureza PM teórico PM obtida experimental 11 391.2mg 92.2% [M+H]+= [M+H+] 1058.3 =1057.9 [M+2H+/2] =529.8 424.5mg 90.5% [M+H] += [M+H+] 1114.74 =1114.0 [M+2H+/2] = 557 . 6

EXEMPLO 5

Seguindo os protocolos gerais descritos nos exemplos 1 a 4, variando de maneira rotineira a natureza dos reagentes e das seqüências peptidicas, se obtiveram adicionalmente os seguintes peptídeos modificados quimicamente de maneira irreversível derivados da seqüência da proteína SNAP-25, incluídos no alcance da presente invenção.

Estrutura Peso molecular 1. CH3 - (CH2) 4 " CO - EEMQRR - NH2 945,1 2 . CH3- (CH2) io-CO-EEMQRR-NH2 1029,2 3 . CH3- (CH2) I6-CO-EEMQRR-NH2 1113,4 4 . CH3- (CH2) I8-CO-EEMQRR-NH2 1041,4 . CH3 - (CH2) 4 - CO - EEMQRRA- NH2 1016,4 6 . CH3- (CH2)e-CO-EEMQRRA-NH2 1044,4 7 . CH3- (CH2) 8-CO-EEMQRRA-NH2 1072,5 8 . CH3- (CH2) io-CO-EEMQRRA-NH2 1100,5 9 . CH3- (CH2) i2-CO-EEMQRRA-NH2 1128,6 . CH3- (CH2) I4-CO-EEMQRRA-NH2 1156,6 11 . CH3- (CH2) 16-CO-EEMQRRA-NH2 1184 , 7 12 . CH3- (CH2) i8-CO-EEMQRRA-NH2 1112,7 13 . CH3- (CH2) 20-CO-EEMQRRA-NH2 1240,8 14 . CH3 - (CH2) 4 - CO - EEMQRRAD - NH2 1131,3 . CH3 - (CH2) 6 - CO - EEMQRRAD - NH2 1159,3 16 . CH3 - (CH2) 8 - CO - EEMQRRAD - NH2 1187,4 17 . CH3- (CH2) 10-CO-EEMQRRAD-NH2 1215,4 18 . CH3- (CH2) 12-CO-EEMQRRAD-NH2 1243,5 19 . CH3- (CH2) 14-CO-EEMQRRAD-NH2 1271,5 . CH3- (CH2) Ig-CO-EEMQRRAD-NH2 1299,6 21. CH3 - (CH2) I8 - CO - EEMQRRAD - NH2 1227,6 22 . CH3 - (CH2) 2 o - CO - EEMQRRAD - NH2 1355,7 23 . CH3- (CH2)4-CO-ELEEMQRRADQLA- NH2 1685,9 24 . CH3- (CH2) 6-C0-ELEEMQRRADQLA- NH2 1713,9 . CH3- (CH2) 8-C0-ELEEMQRRADQLA- NH2 1742,0 26 . CH3- (CH2) io-CO-ELEEMQRRADQLA- NH2 1770,0 27 . CH3- (CH2) I2-CO-ELEEMQRRADQLA- NH2 1798, 1 28 . CH3- (CH2) i4-CO-ELEEMQRRADQLA- NH2 1826,1 29 . CH3- (CH2) i6 - CO- ELEEMQRRADQLA- NH2 1854 , 2 . CH3- (CH2) !s-CO-ELEEMQRRADQLA- NH2 1782, 2 31. ch3- (ch2) 20-co-eleemqrradqla- nh2 1910,3 32 . ch3- (ch2) 4-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2675,o 33 . ch3- (ch2) 6-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2703,o 34 . ch3- (ch2) 8-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2731,1 . ch3- (ch2) 10-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2759,1 36 . ch3- (ch2) I2-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2787,2 37 . ch3- (ch2) I4-CO- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2815,2 38 . ch3- (ch2)16-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2843,3 39 . ch3- (ch2) 18-c0- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2771,3 40 . ch3- (ch2)20-co- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 2899,4 41. Ch3- (ch2)4-co-deanqratkmlgsg- nh2 1574,8 42 . ch3- (ch2) 6-co-deanqratkmlgsg- nh2 1602,8 43 . ch3- (ch2) β - co - deanqratkmlgs g - nh2 1630,9 44 . ch3- (ch2) i0- co - deanqratkmlgsg- nh2 1658,9 45 . ch3- (ch2) i2-co-deanqratkmlgsg- nh2 1687,o 46 . CH3- (CH2) 14-CO-DEANQRATKMLGSG- NH2 1715,0 47 . CH3- (CH2) I6-CO-DEANQRATKMLGSG- NH2 1743,1 48 . CH3- (CH2) !8-CO-DEANQRATKMLGSG- NH2 1671,1 49 . CH3- (CH2) 20-CO-DEANQRATKMLGSG- NH2 1799,2 50 . CH3 - (CH2) 4 - CO - EEMQRRADQ -NH2 1259,4 51. CH3- (CH2) 6-CO-EEMQRRADQ-NH2 1287,4 52 . CH3- (CH2) 8-CO-EEMQRRADQ-NH2 1315,5 53 . CH3- (CH2) io-CO-EEMQRRADQ-NH2 1343 , 5 54 . CH3 - (CH2) 12 - CO - EEMQRRADQ - NH2 1371,6 55 . CH3- (CH2) 14-CO-EEMQRRADQ-NH2 1399,6 56 . CH3- (CH2) 16-CO-EEMQRRADQ-NH2 1427,7 57 . CH3- (CH2) I8-CO-EEMQRRADQ-NH2 1355,7 58 . CH3 - (CH2) 2 o - CO - EEMQRRADQ - NH2 1483,8 59 . CH3 - (CH2) 4 - CO - EEMQRRADQL - NH2 1372,6 60 . CH3 - (CH2) 6 - CO - EEMQRRADQL - NH2 1400,6 61. CH3 - (CH2) 8 " CO - EEMQRRADQL - NH2 1428,7 CN VO CH3- (CH2) 10-CO-EEMQRRADQL-NH2 1456,7 63 . CH3- (CH2) 12-CO-EEMQRRADQL-NH2 1484,8 64 . CH3- (CH2) 14-CO-EEMQRRADQL-NH2 1512,8 65 . CH3- (CH2) 16-CO-EEMQRRADQL-NH2 1540,9 66 . CH3- (CH2) 18-CO-EEMQRRADQL-NH2 1468,9 67 . CH3- (CH2) 20-CO-EEMQRRADQL-NH2 1597,0 68 . CH3- (CH2) 4-CO-ELEEMQRR-NH2 1187,4 69 . CH3- (CH2) 6-CO-ELEEMQRR-NH2 1215,4 70 . CH3- (CH2) 8-CO-ELEEMQRR-NH2 1243,5 71. CH3- (CH2) ίο - CO - ELEEMQRR - NH2 1271,5 72 . CH3- (CH2) 12-CO-ELEEMQRR-NH2 1299,6 73 . CH3- (CH2) ΐ4-CO-ELEEMQRR-NH2 1327,6 74 . CH3- (CH2) I6-CO-ELEEMQRR-NH2 1355,7 75 . CH3- (CH2) i8-CO-ELEEMQRR-NH2 1283,7 76 . CH3- (CH2) 20-CO-ELEEMQRR-NH2 1411,8 77 . CH3- (CH2) 4-CO-ELEEMQRRA-NH2 1258,5 78 . CH3- (CH2) 6-CO-ELEEMQRRA-NH2 1286,5 79 . CH3- (CH2) 8-CO-ELEEMQRRA-NH2 1314,6 80 . CH3- (CH2) I0-CO-ELEEMQRRA-NH2 1342,6 81 . CH3- (CH2) 12-CO-ELEEMQRRA-NH2 1370,7 82 . CH3- (CH2) i4-CO-ELEEMQRRA-NH2 1398,7 83 . CH3- (CH2) 16-CO-ELEEMQRRA-NH2 1426,8 84 . CH3- (CH2) i8-CO-ELEEMQRRA-NH2 1354,8 85 . CH3- (CH2) 20-CO-ELEEMQRRA-NH2 1482,9 00 CH3 - (CH2) 4-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1373,6 87 . CH3 - (CH2) 6 - CO - ELEEMQRRAD - NH2 1401,6 88 . CH3 - (CH2) 8 - CO - ELEEMQRRAD - NH2 1429,7 89 . CH3- (CH2) io-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1457,7 90 . CH3- (CH2) i2-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1485,8 91. CH3- (CH2) I4-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1513,8 92 . CH3- (CH2) I6-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1541,9 93 . CH3- (CH2) I8-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1469,9 94 . CH3- (CH2) 20-CO-ELEEMQRRAD-NH2 1598,0 95 . CH3 - (CH2) 4 - CO - ELEEMQRRADQ - NH2 1501,7 96 . CH3 - (CH2) 6 - CO - ELEEMQRRADQ - NH2 1529,7 97 . CH3 - (CH2) 8 - CO - ELEEMQRRADQ - NH2 1557,8 98 . CH3- (CH2) !o-CO-ELEEMQRRADQ-NH2 1585,8 99 . CH3- (CH2) I2-CO-ELEEMQRRADQ-NH2 1613,9 100 . CH3- (CH2) 14-CO-ELEEMQRRADQ-NH2 1641,9 101. CH3- (CH2) i6-CO-ELEEMQRRADQ-NH2 1670,0 102 . CH3- (CH2) 18- CO- ELEEMQRRADQ -NH2 1598,0 103 . CH3 - (CH2) 2 o - CO - ELEEMQRRADQ - NH2 1726,1 104 . CH3 - (CH2) 4 - CO - ELEEMQRRADQL - NH2 1614,9 105 . CH3 - (CH2) 6 - CO - ELEEMQRRADQL - NH2 1642,9 106 . CH3- (CH2) 8-CO-ELEEMQRRADQL-NH2 1671,0 107 . CH3- (CH2) io-CO-ELEEMQRRADQL- NH2 1699,0 108 . CH3- (CH2) I2-CO-ELEEMQRRADQL- NH2 1727,1 109 . CH3 - (CH2) I4 - CO - ELEEMQRRADQL - NH2 1755,1 110 . CH3 - (CH2) 16 -CO-ELEEMQRRADQL- NH2 1783,2 111. CH3- (CH2) I8-CO-ELEEMQRRADQL- NH2 1711,2 112 . CH3 - (CH2) 2o -CO-ELEEMQRRADQL- NH2 1839,3 113 . CH3 - (CH2) 4 - CO - KNLTDL - NH2 800, 0 114 . CH3 - (CH2) 6 - CO - KNLTDL - NH2 828, 0 115 . CH3 - (CH2) s - CO - KNLTDL -NH2 856, 1 116 . CH3- (CH2) io-CO-KNLTDL-NH2 884, 1 117 . CH3- (CH2) I2-CO-KNLTDL-NH2 912,2 118 . CH3 - (CH2) i4 - CO - KNLTDL - NH2 940, 2 119 . CH3- (CH2) I6-CO-KNLTDL-NH2 968, 3 120 . CH3- (CH2) i8-CO-KNLTDL-NH2 896, 3 121. CH3- (CH2) 20-CO-KNLTDL-NH2 1024,4 122 . CH3 - (CH2) 4 - CO - LEEMQRR - NH2 1058,3 123 . ch3- (ch2) 6-co-leemqrr-nh2 1086,3 124 . ch3- (ch2) 8-co-leemqrr-nh2 1114 , 4 125 . ch3- (ch2) ίο-co-leemqrr-nh2 1142,4 126 . ch3- (ch2) 12-co-leemqrr-nh2 1170,5 127 . ch3- (ch2) ΐ4-co-leemqrr-nh2 1198,5 128 . ch3- (ch2) 16-c0-leemqrr-nh2 1226,6 129 . ch3- (ch2) 18-c0-leemqrr-nh2 1154,6 130 . ch3 - (ch2) 20 - co - leemqrr-nh2 1282,7 131. ch3- (ch2) 4-co-leemqrra-nh2 1129,4 132 . ch3- (ch2) 6-co-leemqrra-nh2 1157,4 133 . Ch3 - (ch2) 8 - co - Leemqrra-Nh2 1185,5 134 . ch3- (ch2) IO-co-LEEMQRRA-nh2 1213,5 135 . ch3- (ch2) 12-co-Leemqrra-NH2 1241,6 136 . ch3- (ch2) i4-co-Leemqrra-Nh2 1269,6 137 . Ch3- (ch2) 16-co-leemqrra-nh2 1297,7 138 . ch3- (ch2) I8-co-Leemqrra-Nh2 1225,7 139 . Ch3- (ch2) 20-co-Leemqrra-Nh2 1353,8 140 . ch3 - (ch2) 4 - co - leemqrrad - nh2 1326,7 141. ch3 - (ch2) 6 - co - leemqrrad - nh2 1354,7 142 . ch3- (ch2) g-co-leemqrrad-nh2 1382,8 143 . ch3- (ch2) 10-co-leemqrrad-nh2 1410,8 144 . ch3- (ch2) i2-co-leemqrrad-nh2 1438,9 145 . ch3- (ch2) I4-co-leemqrrad-nh2 1466,9 146 . ch3- (ch2) I6-co-leemqrrad-nh2 1495,0 147 . ch3- (ch2) I8-co-leemqrrad-nh2 1423,0 148 . ch3 - (ch2) 2 o - co - leemqrrad - nh2 1551,1 149 . ch3- (ch2) 4-co-leemqrradq-nh2 1372,6 150 . ch3 - (ch2) 6 - co - leemqrradq - nh2 1400,6 151 ch3- (ch2) 8-co-leemqrradq-nh2 1428,7 152 ch3- (ch2) ίο-co-leemqrradq-nh2 1456,7 153 Ch3- (ch2) i2-co-leemqrradq-nh2 1484,8 154 ch3- (ch2) i4-co-leemqrradq-nh2 1512,8 155 Ch3- (ch2) i6-co-leemqrradq-nh2 1540,9 156 Ch3- (CH2) i8-co-leemqrradq-nh2 1468,9 157 . ch3- (ch2) só-co-leemqrradq-nh2 1597,0 158 . Ch3- (ch2) 4-co-leemqrradql-nh2 1485,8 159 . ch3- (ch2) 6- co -leemqrradql-nh2 1513 , 8 160 . Ch3- (ch2) 8-co-leemqrradql-nh2 1541,9 161. Ch3- (Ch2) ίο-co- leemqrradql-nh2 1569,9 162 . Ch3- (ch2) I2-co-leemqrradql-nh2 1598,0 163 . Ch3- (ch2) I4-co-leemqrradql-nh2 1626,0 164 . Ch3- (Ch2) 16-co-leemqrradql-nh2 1654 , 1 165 . Ch3- (ch2) I8-co-leemqrradql-nh2 1582,1 166 . ch3- (ch2) 2o-co-leemqrradql-nh2 1710,2 167 . ch3- (ch2)4-co- maedadmrneleemqrradql - nh2 2649,0 168 . ch3- (ch2)6-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2677,0 169 . ch3- (ch2)8-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2705, 1 170 . ch3- (ch2) 10-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2733,1 171 . ch3- (ch2)x2-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2761,2 172 . ch3- (ch2)I4-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2789,2 173 . ch3- (ch2)I6-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2817,3 174 . CH3- (CH2)18-CO- MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH2 2745,3 175 . ch3- (ch2)20-co- maedadmrneleemqrradql-nh2 2873,4 176 . CH3- (CH2) 4-co-Nqratkmlgsg-NH2 1259,5 177 . ch3- (ch2) 6-co-nqratkmlgsg-nh2 1287,5 178 . Ch3- (ch2) β-co-nqratkmlgsg-nh2 1315,6 179 . Ch3- (Ch2) ίο-co-nqratkmlgsg-nh2 1343,6 180 . ch3- (ch2) I2-co-nqratkmlgsg-nh2 1371,7 181 . Ch3- (Ch2) I4-co-nqratkmlgsg-nh2 1399,7 182 . ch3- (ch2) I6-co-NQRATKMLGSG-nh2 1427,8 183 . ch3- (ch2) 18-co-nqratkmlgsg-nh2 1355,8 184 . Ch3- (Ch2) 20-co-Nqratkmlgsg-Nh2 1483,9 185 . ch3- (ch2)4-co-qratkmlgsg-nh2 1145,4 186 . Ch3- (ch2) 6-co-qratkmlgsg-nh2 1173,4 187 . Ch3- (ch2) 8-co-Qratkmlgsg-Nh2 1201,5 188 . ch3- (ch2) 10-co-qratkmlgsg-nh2 1229,5 189 . ch3- (ch2) 12-co-qratkmlgsg-nh2 1257,6 190 . Ch3- (ch2) 14-co-Qratkmlgsg-Nh2 1285,6 191. Ch3- (ch2) 16-co-qratkmlgsg-nh2 1313,7 192 . ch3- (ch2) i8-co-qratkmlgsg-nh2 1241,7 193 . Ch3- (ch2) 20-co-Qratkmlgsg-NH2 1369,8 194 . ch3-(ch2)4-co- snktrideanqratkmlgsg - nh2 2274,6 195 . ch3- (ch2) 6-c0- snktrideanqratkmlgsg-nh2 2302,6 196 . ch3-(ch2)8-co- snktrideanqratkmlgsg-nh2 2330,7 197 . ch3- (ch2)I0-co- 2358,7 snktrideanqratkmlgsg-nh2 198 . ch3- (ch2) ia-co- snktrideanqratkmlgsg-nh2 2386,8 199 . ch3- (ch2) 14-co- snktrideanqratkmlgs g-nh2 2414,8 200 . ch3- (ch2) I6-co- snktrideanqratkmlgsg-nh2 2442,9 201. ch3- (ch2) 18-co- snktrideanqratkmlgsg-nh2 2370, 9 202 . ch3- (ch2) 2o-co- snktrideanqratkmlgs g-nh2 2499,0 203 . ch3-(ch2)4-co- trideanqratkmlgsg-nh2 1945,3 204 . ch3- (ch2) 6-co- trideanqratkmlgsg-nh2 1973,3 205 . ch3- (ch2) 8-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2001,4 206 . ch3- (ch2)10-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2029,4 207 . ch3- (ch2) I2-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2057,5 208 . ch3- (ch2) 14-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2085,5 209 . ch3- (ch2)I6-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2113,6 210 . ch3- (ch2) I8-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2041,6 211 . ch3- (ch2)20-co- trideanqratkmlgsg-nh2 2169,7 212 ch3- (ch2) 4-c0-lestrrmlqlvee- 1701,0 NH2 213 . CH3- (CH2) g - CO- LESTRRMLQLVEE - NH2 1729,0 214 . CH3- (CH2) 8-CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1757,1 215 . CH3- (CH2) 10-CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1785,1 216 . CH3- (CH2) 12-CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1813,2 217 . CH3- (CH2) i4-CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1841,2 218 . CH3- (CH2) I6-CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1869,3 219 . CH3- (CH2) I8-CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1797,3 220 . CH3- (CH2) 20 - CO-LESTRRMLQLVEE- NH2 1925,4 221. CH3- (CH2) 4-CO-NKDMKEAEKNLT-NH2 1517,8 222 . CH3- (CH2) 6-CO-NKDMKEAEKNLT-NH2 1545,8 223 . CH3- (CH2) 8-CO-NKDMKEAEKNLT-NH2 1573,9 224 . CH3- (CH2) 10-CO-NKDMKEAEKNLT- NH2 1601,9 225 . CH3- (CH2) 12-CO-NKDMKEAEKNLT- NH2 1630,0 226 . CH3- (CH2) I4 -CO-NKDMKEAEKNLT- NH2 1658,0 227 . CH3- (CH2) I6-CO-NKDMKEAEKNLT- NH2 1686,1 228 . CH3- (CH2) 18-CO-NKDMKEAEKNLT- NH2 1614,1 229 . ch3- (ch2) 20-co-nkdmkeaeknlt- nh2 1742,2 230 . ch3- (ch2)4-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 2962,4 231. ch3- (ch2) 6-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 2990,4 232 . ch3- (ch2) 8-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3018,5 233 . ch3- (ch2)10-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3046,5 234 . ch3- (ch2)12-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3074,6 235 . ch3- (ch2) 14-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3102,6 236 . ch3- (ch2)16-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3130,7 237 . ch3- (ch2)18-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3058,7 238 . ch3- (ch2)20-co- imekadsnktrideanqratkmlgsg-nh2 3186,8 239 . ac-eemqrr-nh- (ch2) 5-ch3 973 , 1 240 . ac-eemqrr-nh- (ch2) 7-ch3 1001,1 241. ac-eemqrr-nh- (ch2) 9-ch3 1029,2 242 . ac-eemqrr-nh- (ch2) 13-ch3 1085,3 243 . ac-eemqrr-nh- (ch2) 17-ch3 1141,4 244 . ac-eemqrra-nh- (ch2)5-ch3 1044 , 4 245 . Ac - EEMQRRA- nh - (ch2) 7"ch3 1072,4 246 . ac-eemqrra-nh- (ch2) 9-ch3 1100,5 247 . ac-eemqrra-nh- (ch2) h-ch3 1128,6 248 . Ac-EEMQRRA-NH - (CH2) I3-CH3 1156,6 249 . Ac-EEMQRRA-NH- (CH2) I5CH3 1184,7 250 . Ac - EEMQRRA -NH- (CH2) 17-CH3 1212,7 251. Ac - EEMQRRAD - NH - (CH2) 5 - CH3 1159,3 252 . Ac - EEMQRRAD - NH - (CH2) 7 - CH3 1187,3 253 . Ac-EEMQRRAD-NH- (CH2) 9-CH3 1215,4 254 . Ac-EEMQRRAD-NH- (CH2) H-CH3 1243,5 255 . Ac-EEMQRRAD-NH- (CH2) I3-CH3 1271,5 256 . Ac-EEMQRRAD-NH- (CH2) I5-CH3 1299,6 257 . Ac-EEMQRRAD-NH- (CH2) I7-CH3 1327,6 258 . Ac-ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) 5-CH3 1713,9 259 . Ae -ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) 7-CH3 1741,9 260 . Ac-ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) 9-CH3 1770,0 261 . Ac-ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) I1- CH3 1798,1 262 . Ac-ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) 13- CH3 1826,1 263 . Ac-ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) 15- CH3 1854,2 264 . Ac-ELEEMQRRADQLA-NH- (CH2) 17- CH3 1882,2 265 . Ac -ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2)5-CH3 2660,0 266 . Ac - ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2) 7-CH3 2688,0 267 . Ac-ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2) 9-CH3 2716,1 268 . Ac - ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2)11-CH3 2744,2 269 . Ac-ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2) I3-CH3 2772,2 270 . Ac-ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2) I5-CH3 2800,3 271. Ac-ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI- NH- (CH2)i7-CH3 2828,3 272 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 5- CH3 1559,8 273 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 7- CH3 1587,8 274 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 9- CH3 1615,9 275 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) I1- CH3 1644,0 276 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 13- CH3 1672,0 277 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 15- CH3 1700, 1 278 . Ac-DEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 17- CH3 1728, 1 279 . Ac-EEMQRRADQ-NH- (CH2)5-CH3 1244,4 280 . Ac - EEMQRRADQ - NH - (CH2) 7 -CH3 1272,4 281. Ac-EEMQRRADQ-NH- (CH2) 9-CH3 1300,5 282 . Ac-EEMQRRADQ-NH- (CH2) H-CH3 1328,6 283 . Ac-EEMQRRADQ-NH- (CH2) I3-CH3 1356,6 284 . Ac-EEMQRRADQ-NH- (CH2) I5-CH3 1384,7 285 Ae-EEMQRRADQ-NH- (CH2) I7-CH3 1412,7 286 Ae-EEMQRRADQL-NH- (CH2)5-CH3 1357,6 287 Ae-EEMQRRADQL-NH- (CH2) 7-CH3 1385,6 288 . Ac - EEMQRRADQL - NH - (CH2) 9-CH3 1413,7 289 . Ac-EEMQRRADQL-NH- (CH2) H-CH3 1441,8 290 . Ac-EEMQRRADQL-NH- (CH2) I3-CH3 1469,8 291. Ae-EEMQRRADQL-NH- (CH2) I5-CH3 1497,9 292 . Ae-EEMQRRADQL-NH- (CH2) I7-CH3 1525,9 293 . Ac-ELEEMQRR-NH- (CH2) 5-CH3 1172,4 294 . Ac-ELEEMQRR-NH- (CH2) 7-CH3 1200,4 295 . Ae-ELEEMQRR-NH- (CH2) 9-CH3 1228,5 296 . Ac-ELEEMQRR-NH- (CH2) H-CH3 1256,6 297 . Ac-ELEEMQRR-NH- (CH2) I3-CH3 1284 , 6 298 . Ac-ELEEMQRR-NH- (CH2) I5-CH3 1312,7 299 . Ac-ELEEMQRR-NH- (CH2) I7-CH3 1340,7 300 . Ac - ELEEMQRRA - NH - (CH2) 5-CH3 1243 , 5 301. Ac-ELEEMQRRA-NH- (CH2) 7-CH3 1271,5 302 . Ac-ELEEMQRRA-NH- (CH2) 9-CH3 1299,6 303 . Ac-ELEEMQRRA-NH- (CH2) H-CH3 1327,7 304 . Ac-ELEEMQRRA-NH- (CH2) I3-CH3 1355,7 305 . Ac-ELEEMQRRA-NH- (CH2) I5-CH3 1383,8 306 . Ac-ELEEMQRRA-NH- (CH2) I7-CH3 1411,8 307 . Ac - ELEEMQRRAD - NH - (CH2) 5-CH3 1358,6 308 . Ac - ELEEMQRRAD - NH - (CH2) 7 - CH3 1386,6 309 . Ac-ELEEMQRRAD-NH- (CH2) 9-CH3 1414,7 310 . Ac-ELEEMQRRAD-NH- (CH2) H-CH3 1442,8 311. Ac-ELEEMQRRAD-NH- (CH2) I3-CH3 1470,8 312 . Ac-ELEEMQRRAD-NH- (CH2) I5-CH3 1498,9 313 . Ac-ELEEMQRRAD-NH- (CH2) I7-CH3 1526,9 314 . Ac - ELEEMQRRADQ - NH - (CH2) 5-CH3 1486,7 315 . Ac - ELEEMQRRADQ - NH - (CH2) 7-CH3 1514,7 316 . Ac-ELEEMQRRADQ-NH- (CH2) 9-CH3 1542 , 8 317 . Ac - ELEEMQRRADQ - NH - (CH2) H-CH3 1570,9 318 . Ac - ELEEMQRRADQ -NH - (CH2) I3-CH3 1598,9 319 . Ac-ELEEMQRRADQ-NH- (CH2) I5-CH3 1627,0 320 . Ac-ELEEMQRRADQ-NH- (CH2) I7-CH3 1655,0 321. Ac -ELEEMQRRADQL-NH- (CH2) 5-CH3 1599,9 322 . Ac - ELEEMQRRADQL - NH - (CH2) 7-CH3 1627,9 323 . Ac-ELEEMQRRADQL-NH- (CH2)9-CH3 1656,0 324 . Ac-ELEEMQRRADQL-NH- (CH2) H-CH3 1684, 1 325 . Ac-ELEEMQRRADQL-NH- (CH2)i3-CH3 1712,1 326 . Ac-ELEEMQRRADQL-NH- (CH2) I5-CH3 1740,2 327 . Ac-ELEEMQRRADQL-NH- (CH2) I7-CH3 1768,2 328 . Ac - KNLTDL - NH - (CH2) 5-CH3 785, 0 329 . Ac-KNLTDL-NH- (CH2) 7-CH3 813 , 0 330 . Ac-KNLTDL-NH- (CH2) 9-CH3 841, 1 331. Ac-KNLTDL-NH- (CH2) H-CH3 869,2 332 . Ac-KNLTDL-NH- (CH2) I3-CH3 897, 2 333 . Ae-KNLTDL-NH- (CH2) I5-CH3 925, 3 334 . Ac-KNLTDL-NH- (CH2)x7-CH3 953 , 3 335 . Ac-LEEMQRR-NH- (CH2) 5-CH3 1043,3 336 . Ac - LEEMQRR-NH - (CH2) 7-CH3 1071,3 337 . Ac-LEEMQRR-NH- (CH2)9-CH3 1099,4 338 . Ac-LEEMQRR-NH- (CH2) Ii-CH3 1127,5 339 . Ac-LEEMQRR-NH- (CH2)i3-CH3 1155,5 340 . Ac-LEEMQRR-NH- (CH2) I5-CH3 1183,6 341 . Ac-LEEMQRR-NH- (CH2)i7-CH3 1211,6 342 . Ac-LEEMQRRA-NH- (CH2) 5"CH3 1114,4 343 . Ac -LEEMQRRA-NH- (CH2) 7-CH3 1142,4 344 . Ac-LEEMQRRA-NH- (CH2) 9-CH3 1170,5 345 . Ac-LEEMQRRA-NH- (CH2) H-CH3 1198,6 346 . Ac - LEEMQRRA - NH - (CH2) I3-CH3 1226,6 347 . Ac -LEEMQRRA-NH- (CH2) I5-CH3 1254,7 348 . Ac-LEEMQRRA-NH- (CH2) I7-CH3 1282,7 349 . Ac - LEEMQRRAD -NH - (CH2) 5 - CH3 1229,5 350 . Ac-LEEMQRRAD-NH- (CH2) 7-CH3 1257,5 351. Ac-LEEMQRRAD-NH- (CH2) 9-CH3 1285,6 352 . Ac-LEEMQRRAD-NH- (CH2) H-CH3 1313,7 353 . Ac-LEEMQRRAD-NH- (CH2) I3-CH3 1341,7 354 . Ac-LEEMQRRAD-NH- (CH2) I5-CH3 1369,8 355 . Ac-LEEMQRRAD-NH- (CH2) I7-CH3 1397,8 356 . Ac - LEEMQRRADQ - NH - (CH2) 5-CH3 1357,6 357 . Ac - LEEMQRRADQ - NH - (CH2) 7-CH3 1385,6 358 . Ac-LEEMQRRADQ-NH- (CH2) 9-CH3 1413,7 359 . Ac-LEEMQRRADQ-NH- (CH2) H-CH3 1441,8 360 . AC-LEEMQRRADQ-NH- (CH2) I3-CH3 1469,8 361. Ac-LEEMQRRADQ-NH- (CH2) I5-CH3 1497,9 362 . Ae-LEEMQRRADQ-NH- (CH2) I7-CH3 1525,9 363 . Ac-LEEMQRRADQL-NH- (CH2) 5-CH3 1470,8 364 . AC-LEEMQRRADQL-NH- (CH2)7-CH3 1498,8 365 . Ac-LEEMQRRADQL-NH- (CH2) 9-CH3 1526,9 366 . Ac-LEEMQRRADQL-NH- (CH2) H-CH3 1555,0 367 . Ac-LEEMQRRADQL-NH- (CH2) I3-CH3 1583,0 368 . Ac-LEEMQRRADQL-NH- (CH2) I5-CH3 1611,1 369 . Ac-LEEMQRRADQL-NH- (CH2) I7-CH3 1639,1 370 . Ac-MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- (CH2)5-CH3 2634,0 371. Ac-MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- (CH2)7-CH3 2662,0 372 . Ac -MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- 2690,1 (CH2) 9-CH3 373 . Ac-MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- (CH2)11-CH3 2718,2 374 . Ac-MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- (CH2)13-CH3 2746,2 375 . Ac-MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- (CH2)15-CH3 2774,3 376 . Ac-MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH- (CH2) 17-CH3 2802,3 377 . Ae - NQRATKMLGSG- NH - (CH2) 5-CH3 1244, 5 378 . Ae - NQRATKMLGSG-NH - (CH2) 7-CH3 1272,5 379 . Ae-NQRATKMLGSG-NH- (CH2) 9-CH3 1300,6 380 . Ae-NQRATKMLGSG-NH- (CH2) H-CH3 1328,7 381. Ae-NQRATKMLGSG-NH- (CH2) 13-CH3 1356,7 382 . Ae-NQRATKMLGSG-NH- (CH2) 15-CH3 1384,8 383 . Ae-NQRATKMLGSG-NH- (CH2) 17-CH3 1412,8 384 . Ac-QRATKMLGSG-NH- (CH2) 5-CH3 1130,4 385 . Ae-QRATKMLGSG-NH- (CH2) 7-CH3 1158,4 386 . Ae-QRATKMLGSG-NH- (CH2) 9-CH3 1186,5 387 . Ae-QRATKMLGSG-NH- (CH2) H-CH3 1214,6 388 . Ac-QRATKMLGSG-NH- (CH2) 13-CH3 1242,6 389 . Ae-QRATKMLGSG-NH- (CH2) 15-CH3 1270,7 390 . Ae-QRATKMLGSG-NH- (CH2) 17-CH3 1298,7 391. Ae-SNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)5-CH3 2259,6 392 . Ae-SNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 7-CH3 2287,6 393 . Ae-SNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 9-CH3 2315,7 394 . Ac - SNKTRIDEANQRATKMLGSG -NH - (CH2)11-CH3 2343,8 395 . Ac - SNKTRIDEANQRATKMLGSG - NH - (CH2) 13-CH3 2371,8 396 . Ac - SNKTRIDEANQRATKMLGSG - NH - (CH2)15-CH3 2399,9 397 . Ac - SNKTRIDEANQRATKMLGSG - NH - (CH2)17-CH3 2427,9 398 . Ae-TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)5-CH3 1930,3 399 . Ac-TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)7-CH3 1958,3 400 . Ae-TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 9-CH3 1986,4 401. Ae-TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)11-CH3 2014,5 402 . Ae-TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)13-CH3 2042,5 403 . Ae -TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)15-CH3 2070,6 404 . Ae-TRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 17-CH3 2098,6 405 . Ae -LESTRRMLQLVEE-NH- (CH2) 5-CH3 1729,0 406 . Ae-LESTRRMLQLVEE-NH- (CH2)7-CH3 1757,0 407 . Ae-LESTRRMLQLVEE-NH- (CH2) 9-CH3 1785, 1 408 . Ae-LESTRRMLQLVEE-NH- (CH2) 1X- CH3 1813,2 409 . Ae-LESTRRMLQLVEE-NH- (CH2) 13- CH3 1841,2 410 . Ae-LESTRRMLQLVEE-NH- (CH2) 15- 1869,3 CH3 411 Ac - LESTRRMLQLVEE - NH - (CH2) 1Ί- CH3 1897,3 412 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2)5-CH3 1545,8 413 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2)7-CH3 1573,8 414 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2) 9-CH3 1601,9 415 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2) H-CH3 1630,0 416 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2) I3-CH3 1658,0 417 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2) I5-CH3 1686,1 418 . Ac-NKDMKEAEKNLT-NH- (CH2) I7-CH3 1714,1 419 . Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)5-CH3 2990,4 420 . Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)7-CH3 3018,4 421. Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 9-CH3 3046,5 422 . Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) I1-CH3 3074,6 423 . Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2)13-CH3 3102,6 424 . Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- (CH2) 15-CH3 3130,7 425 . Ac- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH- 3158,7 ( CH2 ) 17 ~ CH3 426 Ac - PEGi - Eemqrra-NH2 1262,6 427 . Ac - PEG2 - EEMQRRA-NH2 1565,0 428 . Ac - PEG3 - EEMQRRA-NH2 1867,4 429 . Ac - PEG4 - EEMQRRA-NH2 2169,7 430 . Ac - PEG5 - EEMQRRA-NH2 2472,1 431 . Ac - PEGi" E EMQRRAD - NH2 1377,5 432 . Ac - PEG2 - EEMQRRAD - NH2 1679,9 433 . Ac - PEG3 - EEMQRRAD - NH2 1982, 3 434 . Ac - PEG4 - EEMQRRAD - NH2 2284 , 6 435 . Ac - PEG5 - EEMQRRAD -NH2 2587,0 436 . Ac - PEGi - ELEEMQRRADQLA - NH2 1932,1 437 . Ac - PEG2 - ELEEMQRRADQLA- NH2 2234,5 438 . Ac - PEG3 - ELEEMQRRADQLA-NH2 2536,9 439 . Ac - PEG4 - ELEEMQRRADQLA- NH2 2839,2 440 . Ac - PEG5 - ELEEMQRRADQLA- NH2 3141,6 441. Ac-PEGi- ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI-NH2 2921,2 442 . Ac-PEG2- ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI-NH2 3223, 6 443 . AC-PEG3- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 3526,0 444 . ae - peg4 - adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 3828,3 445 . ac-peg5- adeslestrrmlqlveeskdagi-nh2 4130,7 446 . Ae-PEGi- DEANQRATKMLGSG - NH2 1821,0 447 . AC - PEG2 -DEANQRATKMLGSG-NH2 2123,4 448 . Ae - PEG3 - DEANQRATKMLGSG-NH2 2425, 8 449 . Ac - PEG4 - DEANQRATKMLGSG - NH2 2728,1 450 . Ac -PEG5- DEANQRATKMLGSG - NH2 3030,5 451. Ac - PEGi - EEMQRRADQ - NH2 1505,6 452 . Ac - PEG2 - EEMQRRADQ - NH2 1808,0 453 . Ac - PEG3 - EEMQRRADQ - NH2 2110,4 454 . Ae - PEG4 - EEMQRRADQ - NH2 2412,7 455 . Ae - PEG5 - EEMQRRADQ - NH2 2715,1 456 . Ae - PEG1 - EEMQRRADQL - NH2 1618,8 457 . Ae - PEG2 - EEMQRRADQL -NH2 1921,2 458 . Ac-PEG3- EEMQRRADQL - NH2 2223,6 459 . Ae - PEG4 - EEMQRRADQL - NH2 2525,9 460 . Ae - PEG5 - EEMQRRADQL - NH2 2828,3 461. Ae - PEGi - ELEEMQRR - NH2 1433, 6 462 . Ae - PEG2 - ELEEMQRR - NH2 1736,0 463 . Ae - PEG3 - ELEEMQRR - NH2 2038,4 464 . Ae - PEG4 - ELEEMQRR - NH2 2340,7 465 . Ae - PEG5 - ELEEMQRR - NH2 2643, 1 466 . Ae - PEGi - ELEEMQRRA-NH2 1504,7 467 . Ae - PEG2 - ELEEMQRRA-NH2 1807,1 468 . Ae - PEG3 - ELEEMQRRA - NH2 2109,5 469 . Ae - PEG4 - ELEEMQRRA-NH2 2411,8 470 . Ae - PEG5 - ELEEMQRRA- NH2 2714,2 471. Ae - PEGi - ELEEMQRRAD - NH2 1619,8 472 . Ae - PEG2 - ELEEMQRRAD - NH2 1922,2 473 . Ae - PEG3 - ELEEMQRRAD - NH2 2224,6 474 . Ae - PEG4 - ELEEMQRRAD - NH2 2526,9 475 . Ae - PEG5 - ELEEMQRRAD - NH2 2829,3 476 . Ae - PEGi - ELEEMQRRADQ -NH2 1747,9 477 . Ac - PEG2 - ELEEMQRRADQ - NH2 2050,3 478 . Ac - PEG3 - ELEEMQRRADQ - NH2 2352,7 479 . Ac - PEG4 - ELEEMQRRADQ - NH2 2655,0 480 . Ac -PEG5- ELEEMQRRADQ - NH2 2957,4 481. Ac - PEGi - ELEEMQRRADQL - NH2 1861,1 482 . Ac - PEG2 - ELEEMQRRADQL - NH2 2163,5 483 . Ac - PEG3 - ELEEMQRRADQL - NH2 2465,9 484 . Ae - PEG4 - ELEEMQRRADQL - NH2 2768,2 485 . Ae - PEG5 - ELEEMQRRADQL - NH2 3070,6 486 . Ac - PEGi - KNLTDL - NH2 1046,2 487 . Ac-PEG2- KNLTDL - NH2 1348,6 488 . Ac - PEG3 - KNLTDL - NH2 1651,0 489 . Ac - PEG4 - KNLTDL - NH2 1953,3 490 . Ac - PEG5 - KNLTDL - NH2 2255,7 491. Ac-PEGi- LEEMQRR - NH2 1304,5 492 . Ac - PEG2 - LEEMQRR - NH2 1606,9 493 . Ac - Peg3 - Leemqrr-Nh2 1909,3 494 . Ac - PEG4 - LEEMQRR - NH2 2211,6 495 . Ac - PEG5 - LEEMQRR - NH2 2514,0 496 . ae - pegi - leemqrra-nh2 1375,6 497 . ae - Peg2 - leemqrra-nh2 1678,0 498 . ae - peg3 - leemqrra-nh2 1980,4 499 . ae - peg4 - leemqrra-nh2 2282,7 500 . ae - peg5 - Leemqrra-Nh2 2585,1 501. Ae - PEGi - LEEMQRRAD - NH2 1572,9 502 . Ae - PEG2 - LEEMQRRAD - NH2 1875,3 503 Ae - PEG3 - LEEMQRRAD - NH2 2177,7 504 Ae - PEG4 - LEEMQRRAD - NH2 2480,0 505 Ae - PEG5 - LEEMQRRAD - NH2 2782,4 506 . Ac - PEG1 - LEEMQRRADQ - NH2 1618,8 507 . Ac - PEG2 - LEEMQRRADQ - NH2 1921,2 508 . Ac - PEG3 - LEEMQRRADQ - NH2 2223,6 509 . Ac - PEG4 - LEEMQRRADQ - NH2 2525,9 510 . Ac - PEG5 - LEEMQRRADQ - NH2 2828,3 511. Ae - PEG1 - LEEMQRRADQL - NH2 1732,0 512 . Ae - PEG2 - LEEMQRRADQL - NH2 2034 , 4 513 . Ac - PEG3 - LEEMQRRADQL - NH2 2336,8 514 . Ae - PEG4 - LEEMQRRADQL - NH2 2639,1 515 . Ae - PEG5 - LEEMQRRADQL - NH2 2941,5 516 . Ac-PEG1- MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH2 2895,2 517 . Ac-PEG2- MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH2 3197,6 518 . Ac-PEG3- MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH2 3500,0 519 . Ae - PEG4 - MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH2 3802,3 520 . Ac-PEG5- MAEDADMRNELEEMQRRADQL-NH2 4104,7 521. ae - Peg1-Nqratkmlgsg-Nh2 1505,7 522 . ae - Peg2 -Nqratkmlgsg-NH2 1808,1 523 . Ae - PEG3 - NQRATKMLGSG - NH2 2110,5 524 . Ae - PEG4 - NQRATKMLGSG - NH2 2412,8 525 . ac - peg5-nqratkmlgsg-nh2 2715,2 526 . Ae - PEG1 - QRATKMLGSG - NH2 1391,6 527 . Ae - PEG2 - QRATKMLGSG - NH2 1694,0 528 . ae - peg3 - Qratkmlgsg-NH2 1996, 4 529 . Ac - peg4-qratkmlgsg-nh2 2298,7 530 . Ac - Peg5 - Qratkmlgsg-Nh2 2601,1 531. Ac - PEG1 - SNKTRIDEANQRATKMLGSG - NH2 2520,8 532 . Ac - PEG2 - SNKTRIDEANQRATKMLGSG - NH2 2823 , 2 533 . Ac - PEG3 - SNKTRIDEANQRATKMLGSG- NH2 3125,6 534 . Ac - PEG4 - SNKTRIDEANQRATKMLGSG- NH2 3427,9 535 . Ac - PEG5 - SNKTRIDEANQRATKMLGSG- NH2 3730, 3 536 . Ac - PEGi - TRIDEANQRATKMLGSG - NH2 2191,5 537 . Ac - PEG2 - TRIDEANQRATKMLGSG-NH2 2493,9 538 . Ac - PEG3 - TRIDEANQRATKMLGSG-NH2 2796,3 539 . Ac - PEG4 - TRIDEANQRATKMLGSG-NH2 3098,6 540 . Ac - PEG5 - TRIDEANQRATKMLGSG- NH2 3401,0 541. Ac - PEGi" LESTRRMLQLVEE - NH2 1947,2 542 . Ae - PEG2 - LESTRRMLQLVEE -NH2 2249,6 543 . Ac - PEG3 - LESTRRMLQLVEE -NH2 2552,0 544 . Ac - PEG4 - LESTRRMLQLVEE -NH2 2854 , 3 545 . Ac - PEG5 - LESTRRMLQLVEE - NH2 3156,7 546 . Ac - PEGi - NKDMKEAEKNLT - NH2 1764,0 547 . Ac - PEG2 - NKDMKEAEKNLT - NH2 2066 , 4 548 . Ac -PEG3- NKDMKEAEKNLT - NH2 2368,8 549 . Ac - PEG4 - NKDMKEAEKNLT - NH2 2671,1 550 . Ac - PEG5 - NKDMKEAEKNLT - NH2 2973,5 551. Ac-PEGi- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH2 3208 , 6 552 . Ac-PEG2- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH2 3511,0 553 . Ac-PEG3- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH2 3813,4 554 . Ac-PEG4- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH2 4115,7 555 . Ac-PEG5- IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG-NH2 4418,1

EXEMPLO 6

Ensaio da atividade dos peptídeos derivados da proteína SNAP-25 modificados quimicamente de maneira irreversível sobre a exocitose neuronal de [3H] -L-Glutamato.

Para determinar se os peptídeos da invenção inibem a

exocitose neuronal de neurotransmissores foi observada sua atividade sobre a liberação do neurotransmisor L-glutamato de cultivos primários de neurônios de hipocampo de rata. A exocitose deste neurotransmissor em cultivos neuronais pode ser conseguido mediante despolarização elétrica das células. Os cultivos primários de hipocampo embrionário de rata são preparados mediante métodos convencionais [Blanes- Mira C., Merino J.M., Valera E., Fernández-Ballester G., Gutiérrez L.M. , Viniegra SPérez-Payá E. e Ferrer-MontiO A. nSmall peptides patterned after the N-terminus domain of SNAP25 inhibit SNARE complex assembly and regulated exocytosis" J. Neurochem. 88, 124-135] e se mantém em cultivo durante 14 dias em incubadora a 37 0C e 5% CO2. Os cultivos são incubados com [3H]-L-glutamina para carregá- Ios de [3H]-L-glutamato durante 3h a 37°C. Posteriormente, é lavado o excesso de [3H] -L-glutamina, e são incubados com O.lmM os peptídeos a estudar durante Ih a 37°C. A liberação de [3H]-L-glutamato se realiza mediante despolarização com 75mM KCl e 2mM CaCl2 tamponado em tampão fisiológico durante IOmin a 37°C. 0 meio de cultivo é coletado e se quantifica a quantidade de [3H]-L-glutamato em um contador de radioatividade beta. Os resultados são organizados em relação a liberação de [3H]-L-glutamato na ausência do peptideo e se corrige pela liberação basal na ausência de cálcio. EXEMPLO 7

Preparação de uma composição cosmética contendo CH3-(CH2)14- CO-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg - CONH2

A seguinte formulação foi preparada segundo o descrito na presente invenção:

Em um reator suficientemente grande são pesados os componentes da Fase A e se aquece a mistura a 80 0C para fundir as cêras. Em um recipiente adequado para todo o conteúdo são pesados os componentes da Fase B e aquecidos a 70°C. Se adiciona a Fase A sobre a Fase B lentamente e sob intensa agitação, e posteriormente se adiciona a Fase C na 2 0 mistura anterior sob agitação. Acabada a adição, deixar esfriar com agitação suave e quando a mistura se encontrar à temperatura ambiente se adiciona uma solução aquosa de CH3-(CH2) i4-CO-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-CONH2 e a lecitina, faça a homogeneização e a correção do pH com trietanolamina, se necessário.

0 creme que se obtém tem um pH entre 6 e 7 e uma viscosidade de 10.000-15.000 cps (6/50).

INGREDIENTE(Nomenclatura INCI) % EM PESO FASE A MINERAL OIL 8 . 0 STEARIC ACID 2.4 CETEARYL ALCOHOL 1.6 BEESWAX 0 . 8 FASE B GLYCERIN 2.4 AQUA (WATER) 63 .4 FASE C CARBOMER 0 . 3 TRIETHANOLAMINE 0 . 9 FASE D AQUA (WATER) 15 . 0 CH3- (CH2) I4-CO-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-CONH2 (0.05%) 5 . 0 LECITHIN 0.4

EXEMPLO 8

Preparação de lipossomas contendo CH3-(CH2)14-CO- ELEEMQRRADQLA-NH2

Pesa-se dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) e se dissolve em clorofórmio. 0 solvente é evaporado a vácuo até obter uma capa fina de fosfolipídio. Esta capa é hidratada

por tratamento a 55 0C com uma solução aquosa que contêm o

® \

peptídeo na concentração desejada (contendo Phenonip ) , obtendo os liposomas mLV. Os liposomas ULV são obtidos submergindo os liposomas mLV em um banho de ultra som a 550C durante 8 ciclos de 2min em intervalos de 5min._

INGREDIENTE %EM PESO DIPALMITOILFOSFATIDILCOLINA 4 . 0 CH3 - (CH2) 14 - C0-ELEEMQRRADQLA-NH2 0 . 2 PHENONIP® 0 . 5 Em um primeiro aspecto, a presente invenção se refere a um peptídeo de fórmula geral (I):

R1-AA-R2 (I)

Seus estereoisômeros, seus sais cosméticamente e

farmacêuticamente aceitáveis e misturas dos mesmos, onde:

AA é uma seqüência de 3 a 40 aminoácidos adjacentes contida na seqüência de aminoácidos SEQ ID No. 1;

R1 é selecionado do grupo formado por H ou grupo alquil, aril, aralquil ou acil;

e R2 é selecionado do grupo formado por amino, hidroxil ou tiol, substituídos ou não com grupos alifáticos ou cíclicos,

com a condição de que quando R1 é H ou acetil, R2 não é amino, hidroxil ou tiol não substituídos.

Num segundo aspecto importante, no peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida R1 é acil de C3 a C24, linear, ramificado ou cíclico, saturado ou insaturado. De forma preferemte R1 é acil de fórmula CH3-(CH2)m-CO-, onde m pode

variar entre 1 e 22.

Outro aspecto importante da invenção no peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida R1 é um polímero de polietil englicol.

Outro aspecto importante da invenção no peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida R1 é um polímero de polietil englicol com um pêso molecular compreendido entre

200 e 35.000 daltons.

Outro aspecto importante da invenção no peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida R1 é um polímero de polietilenglicol de fórmula Ο—N-^^

π On

onde η pode variar entre 1 e 100. Em um aspecto preferido da invenção, η pode variar entre 1 e 5.

Segundo um aspecto importante da invenção o peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida R2 é amino ou hidroxil, substituídos ou não com grupos alifáticos de C1 a C24 lineares, ramificados ou cíclicos, saturados ou insaturados.

Segundo um aspecto importante da invenção no peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida AA consiste em uma seqüência de 3 a 40 aminoácidos adjacentes contida em uma seqüência selecionada do grupo formado pelas seqüências de aminoácidos MAEDADMRNELEEMQRRADQL, ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI, ELEEMQRRADQLA, ELEEMQRRADQL, ELEEMQRRADQ, ELEEMQRRAD, ELEEMQRRA, ELEEMQRR, LEEMQRRADQL, LEEMQRRADQ, LEEMQRRAD, LEEMQRRA, LEEMQRR, EEMQRRADQL, EEMQRRADQ, EEMQRRAD, EEMQRRA, EEMQRR, LESTRRMLQLVEE, NKDMKEAEKNLT, KNLTDL, IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG, SNKTRIDEANQRATKMLGSG,

TRIDEANQRATKMLGSG, DEANQRATKMLGSG, NQRATKMLGSG e

QRATKMLGSG.

2 0 Segundo outro aspecto importante, a presente invenção

se refere a um procedimento de obtenção de um peptídeo de fórmula geral (I), que se baseia em síntese de peptídeos em fase sólida.

Segundo outro aspecto importante, a presente invenção 2 5 se refere a um procedimento de obtenção de um peptídeo de fórmula geral (I) , que emprega grupos protetores selecionados do grupo formado por Fmoc/tButil, Fmoc/tritil e Fmoc/alil. Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que compreende uma quantidade cosmética ou farmacêuticamente eficaz de pelo menos um peptídeo de fórmula (I) e pelo menos um excipiente ou adjuvante cosmética ou farmacêuticamente aceitável.

Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que compreende pelo menos um peptídeo de fórmula geral (I) incorporado a um veículo e/ou sistema de liberação sustentada cosméticamente ou farmacêuticamente aceitável selecionado do grupo formado por lipossomas, milicápsulas, microcápsulas, nanocápsulas, esponjas, vesículas, micelas, miliesferas, microesferas, nanoesferas, lipoesferas, microemulsões, nanoemulsões, milipartículas,

micropartículas e nanopartículas.

Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que compreende pelo menos um peptídeo de fórmula geral (I) 2 0 adsorvido sobre um polímero orgânico sólido ou suporte mineral selecionado do grupo formado por talco, bentonita, silício, amido e maltodextrina.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica na

2 5 qual o peptídeo de fórmula geral (I) se apresenta em uma

formulação selecionada do grupo formado por cremes, emulsões de óleo e/ou silicone em água, emulsões de água em óleo e/ou silicone, óleos, leites, bálsamos, espumas, loções, géis, linimentos, soros, sabões, ungüentos, musses,

3 0 pomadas, barras, lápis e vaporizadores. Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica na qual o peptídeo de fórmula geral (I) se encontra incorporado em suportes sólidos selecionados do grupo formado por toalhas, hidrogéis, curativos adesivos, curativos não adesivos e máscaras faciais.

Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica na qual o peptídeo de fórmula geral (I) se encontra incorporado em tecidos, preferencialmente na forma de vestuários.

Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que contem um peptídeo de fórmula geral (I) incorporado em produtos da linha de maquiagem selecionados do grupo formado por corretores de olheiras, fundos de maquiagem, loções e leites desmaquiantes, sombras de olhos e batons.

Segundo outro aspecto importante, a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que

2 0 contem um peptídeo de fórmula geral (I) em uma concentração

entre 0.00000001% (em pêso) e 20% (em peso).

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica na qual o peptídeo de fórmula geral (I) de forma preferida se encontra em uma concentração entre 0.0001% e 5% em peso.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica que compreende uma quantidade adicional cosmética ou farmaceuticamente eficaz de um agente ativo selecionado do

3 0 grupo formado por um agente esfoliante, um agente hidratante, um agente despigmentante ou branqueante, um agente propigmentante, um agente anti-rugas, um agente capaz de reduzir ou eliminar as bolsas embaixo dos olhos, um agente antioxidante, um agente antiglicação, um inibidor da NO-sintase, um agente anti-envelhecimento, um agente estimulador da síntese de moléculas dérmicas ou epidérmicas e/ou para prevenir sua degradação, um agente estimulador da proliferação de fibroblastos e/ou queratinócitos ou para estimular a diferenciação de queratinócitos, um agente dermo-relaxante, um agente reafirmante, um agente anti- contaminação atmosférica e/ou anti-radicais livres, um agente que atue sobre a circulação capilar e/ou a micro circulação, um agente calmante, um agente antiinflamatório, um agente que atue sobre o metabolismo das células, um agente fotoprotetor, de natureza orgânica ou mineral, ativo contra os raios ultravioleta A e/ou B, e mistura deles. De forma preferencial, o agente ativo é de origem sintética ou um extrato vegetal ou provêm de biofermentação.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere a uma composição cosmética ou farmacêutica na

qual o agente anti-rugas e/ou antienvelhecimento

® Ί®

selecionado do grupo formado por Argireline , Leuphasyl , Decorinyl^, Decorinol®, Lipochroman® e Aldenine , comercializados por Lipotec.

2 5 Segundo um aspecto importante, a presente invenção se

refere ao uso de um peptídeo de fórmula (I) ou seus sais cosméticamente ou farmacêuticamente aceitáveis na elaboração de uma composição cosmética ou farmacêutica que regula a exocitose neuronal.

3 0 Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere ao de um peptídeo de fórmula (I) ou seus sais cosméticamente ou farmaceuticamente aceitáveis na elaboração de uma uma composição cosmética ou farmacêutica para o tratamento, limpeza e cuidado da pele.

Segundo um aspecto importante a presente invenção se refere ao uso do peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosméticamente ou farmaceuticamente aceitáveis na preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas faciais e/ou a assimetria facial.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere ao uso do peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosméticamente ou farmaceuticamente aceitáveis na preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas faciais de expressão.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere ao peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosméticamente ou farmacêuticamente aceitáveis na preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas faciais de expressão mediante aplicação tópica na testa, no espaço entre as sobrancelhas e/ou nas rugas e linhas finas ao redor da boca e/ou ao redor dos olhos.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere ao uso do peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosmeticamente ou farmacêuticamente aceitáveis na preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas faciais de expressão mediante aplicação por iontoforese na testa, no espaço entre as sobrancelhas e/ou nas rugas e linhas finas ao redor da boca e/ou ao redor dos olhos.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção se refere ao uso do peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosméticamente ou farmaceuticamente aceitáveis na preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas faciais de expressão mediante aplicação por injeção subcutânea ou intradérmica na testa, no espaço entre as sobrancelhas e/ou nas rugas e linhas finas ao redor da boca e/ou ao redor dos olhos.

Segundo outro aspecto importante a presente invenção

se refere ao uso do peptídeo de fórmula geral (I) ou seus sais cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis na preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina a espasmodicidademuscular. LISTAGEM DE SEQUENCIA

<110> LIPOTEC S.A.

<120> PÉPTIDOS INIBIDORES DA EXOCITOSE NEURONAL <130> P-INCI-N-06-0193 <160> 11

<17 0> Versão da patente 3.3

<210> 1

<211> 206

<212 > PRT

<213> Homo sapiens

<400> 1

Met Ala Glu Asp Ala Asp Met Arg Asn Glu Leu Glu Glu Met Gln Arg 10 15

Arg Ala Asp Gln Leu Ala Asp Glu Ser Leu Glu Ser Thr Arg Arg Met 25 30

Leu Gln Leu Val Glu Glu Ser Lys Asp Ala Gly Ile Arg Thr Leu Val 40 45

Met Leu Asp Glu Gln Gly Glu Gln Leu Glu Arg Ile Glu Glu Gly Met 50 55 60

Asp Gln Ile Asn Lys Asp Met Lys Glu Ala Glu Lys Asn Leu Thr Asp 65 70 75 80

Leu Gly Lys Phe Cys Gly Leu Cys Val Cys Pro Cys Asn Lys Leu Lys

85 90 95

Ser Ser Asp Ala Tyr Lys Lys Ala Trp Gly Asn Asn Gln Asp Gly Val 100 105 110

Val Ala Ser Gln Pro Ala Arg Val Val Asp Glu Arg Glu Gln Met Ala 115 120 125

Ile Ser Gly Gly Phe Ile Arg Arg Val Thr Asn Asp Ala Arg Glu Asn

130 135 140

Glu Met Asp Glu Asn Leu Glu Gln Val Ser Gly Ile Ile Gly Asn Leu 145 150 155 160

Arg His Met Ala Leu Asp Met Gly Asn Glu Ile Asp Thr Gln Asn Arg

165 170 175

Gln Ile Asp Arg Ile Met Glu Lys Ala Asp Ser Asn Lys Thr Arg Ile 180 185 190 Asp Glu Ala Asn Gln Arg Ala Thr Lys Met Leu Gly Ser Gly 195 200 205

<210> 2

<211> 84

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<4 0 0 > 2

Met Ala Glu Asp Ala Asp Met Arg Asn Glu Leu Glu Glu Met Gln Arg 10 15

Arg Ala Asp Gln Leu Ala Asp Glu Ser Leu Glu Ser Thr Arg Arg Met

25 30

Leu Gln Leu Val Glu Glu Ser Lys Asp Ala Gly Ile Arg Thr Leu Val 40 45

Met Leu Asp Glu Gln Gly Glu Gln Leu Glu Arg Ile Glu Glu Gly Met 50 55 60

Asp Gln Ile Asn Lys Asp Met Lys Glu Ala Glu Lys Asn Leu Thr Asp 65 70 75

Leu Gly Lys Phe 80

<210> 3

<211> 37

<212 > PRT

<213> Homo sapiens

<4 0 0 > 3

Glu Ile Asp Thr Gln Asn Arg Gln Ile Asp Arg Ile Met Glu Lys Ala 10 15

Asp Ser Asn Lys Thr Arg Ile Asp Glu Ala Asn Gln Arg Ala Thr Lys

25 30

Met Leu Gly Ser Gly 35

<210> 4

<211> 13

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 4 Glu Leu Glu Glu Met Gln Arg Arg Ala Asp Gln Leu Ala 10

<210> 5

<211> 16

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 5

Ser Leu Glu Ser Thr Arg Arg Met Leu Gln Leu Val Glu Glu Ser Lys 1 5 10 15

<210> 6

<211> 17

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<4 00> 6

Asp Gln Ile Asn Lys Asp Met Lys Glu Ala Glu Lys Asn Leu Thr Asp 1 5 10 15

Leu

<210> 7

<211> 26

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<4 0 0 > 7

Ile Met Glu Lys Ala Asp Ser Asn 1 5

Gln Arg Ala Thr Lys Met Leu Gly 20

<210> 8

<211> 8

<212 > PRT

<213> Homo sapiens

<400> 8

Glu Glu Met Gln Arg Arg Ala Asp 1 5

<210> 9

<211> 13

<212 > PRT

<213> Homo sapiens

Lys Thr Arg Ile Asp Glu Ala Asn 15

Ser Gly 25 <4 0 0 > 9

Leu Glu Ser Thr Arg Arg Met Leu Gln Leu Val Glu Glu 10

<210> 10

<211> 12

<212 > PRT

<213> Homo sapiens

<400> 10

Asn Lys Asp Met Lys Glu Ala Glu Lys Asn Leu Thr 10

<210> 11

<211> 6

<212 > PRT

<213> Homo sapiens

<4 0 0 > 11

Glu Glu Met Gln Arg Arg 1 5

Claims (15)

1. Peptídeo de fórmula geral (I) R1-AA-R2 seus estereoisômeros, misturas dos mesmos, e seus sais cosmética e farmaceuticamente aceitáveis, caracterizado pelo fato de que AA é uma seqüência de 3 a 40 aminoácidos adjacentes contidos na seqüência de aminoácidos SEQ ID No. 1 selecionada do grupo com base em MAEDADMRNELEEMQRRADQL, ADESLESTRRMLQLVEESKDAGI, ELEEMQRRADQLA, ELEEMQRRADQL, ELEEMQRRADQ, ELEEMQRRAD, ELEEMQRRA, ELEEMQRR, LEEMQRRADQL, LEEMQRRADQ, LEEMQRRAD, LEEMQRRA, LEEMQRR, EEMQRRADQL, EEMQRRADQ, EEMQRRAD, EEMQRRA, EEMQRR, LESTRRMLQLVEE, NKDMKEAEKNLT, KNLTDL, IMEKADSNKTRIDEANQRATKMLGSG, SNKTRIDEANQRATKMLGSG, TRIDEANQRATKMLGSG, DEANQRATKMLGSG, NQRATKMLGSG e QRATKMLGSG; R1 é selecionado do grupo com base em H ou grupo alquil, aril, aralquil, ou acil; e R2 é selecionado do grupo com base em amino, hidroxil, ou tiol, substituídos ou não substituídos com grupos alifáticos ou cíclicos, com a condição de que quando R1 é H ou acetil, R2 é amino, hidroxi ou tiol não substituídos.

2. Peptídeo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é um acil C3 a C24 linear, ramificado ou cíclico, saturado ou insaturado.

3. Peptídeo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é um polímero de polietileno glicol onde η pode variar entre 1 e 10 0.

4. Peptídeo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que η varia entre 1 e 5.

5. Peptídeo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é amino ou hidroxil substituído ou não substituído com grupos alifáticos Cl a C24 lineares, ramificados ou cíclicos saturados ou insaturados.

6. Processo para a obtenção de um peptídeo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato de que se realiza em fase sólida.

7. Composição cosmética ou farmacêutica que compreende uma quantidade cosmética ou farmaceuticamente efetiva de ao menos um peptídeo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato de que compreende ao menos um excipiente ou adjuvante cosmética ou farmaceuticamente aceitável.

8. Composição cosmética ou farmacêutica, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o peptídeo de fórmula geral (I) está incorporado em um sistema de liberação sustentada ou em um veículo selecionado do grupo com base em lipossomas, milicápsulas, microcápsulas, nanocápsulas, esponjas, vesículas, micelas, miliesferas, microesferas, nanoesferas, lipoesferas, microemulsões, nanoemulsões, milipartículas, micropartículas e nanopartículas.

9. Composição cosmética ou farmacêutica, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o peptideo de fórmula geral (I) está adsorvido sobre um suporte de polímero orgânico ou mineral sólido cosmética ou farmaceuticamente aceitável selecionado do grupo com base de talco, bentonita, silício , amido ou maltodextrina.

10. Composição cosmética ou farmacêutica que compreende uma quantidade cosmética ou farmaceuticamente efetiva de pelo menos um peptideo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizada pelo fato de compreender uma quantidade adicional cosmética ou farmaceuticamente efetiva de um agente ativo selecionado do grupo com base em um agente exfoliante, um agente humectante, um agente de despigmentação ou clareador, um agente de pró-pigmentação, um agente de marcação anti- estiramento, um agente anti-rugas, um agente anti-oxidante, um agente anti-glicação, um inibidor da NO-sintase, um agente anti-envelhecimento, um agente que pode reduzir e/ou eliminar as bolsas embaixo dos olhos, um agente para a estimulação da síntese de moléculas dérmicas ou epidérmicas e/ou para prevenir sua degradação, um agente que estimula a proliferação de fibroblastos e/ou queratinócitos e para estimular a diferenciação queratinocítica, agentes previstos para melhorar a união dérmica-epidérmica, um agente relaxante da pele, um agente reafirmante, um agente anti-poluição atmosférica e/ou anti- radicais livres, um agente que atue sobre a circulação capilar e/ou microcirculação, um agente calmante, um agente anti- inflamatório, um agente anti-microbiano, um agente anti- fúngico, um agente que atue sobre o metabolismo celular, um agente que atue sobre a circulação capilar e/ou microcirculação, vitaminas, um agente quelante, um agente de fotoproteção orgânico ou mineral que é ativo contra os raios ultravioleta A e/ou B, e mistura dos mesmos.

11. Uso de um peptídeo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica para ou tratamento dessas condições em mamíferos que requeiram regulação da exocitose neuronal.

12. Uso de um peptídeo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica para tratamento, limpeza ou cuidado da pele.

13. Uso de um peptídeo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas faciais e/ou a assimetria facial.

14. Uso de um peptídeo de fórmula geral (I), de acordo com a reivindicação 13 caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina as rugas de expressão facial.

15. Uso de um peptídeo de fórmula geral (I) das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição cosmética ou farmacêutica que reduz e/ou elimina a espasmodicidademuscular.