BRPI0806335A2 - produto alimentìcio, produto de ração animal, produto nutracêutico e métodos de preparação dos mesmos - Google Patents

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Abstract

PRODUTO ALIMENTìCIO, PRODUTO DE RAçãO ANIMAL, PRODUTO NUTRACêUTICO E MéTODOS DE PREPARAçãO DOS MESMOS. A presente invenção refere-se ao aprimoramento de itens alimentícios por meio da utilização aumentada de ácido estearidónico derivado de plantas. Muitos ácidos graxos de cadeia longa foram classificados como sendo Èmega-3 e demonstraram fornecer vários benefícios para a saúde, incluindo saúde cardíaca. De acordo com a presente invenção, o ácido estearidónico derivado de plantas (18:4<sym>3) foi incorporado em uma ampla gama de produtos alimentícios por utilização de óleo ou farinha processada a partir de sojas com níveis aumentados de ácido estearidónico. Esses alimentos variam de produtos baseados em óleo (molho de saladas, maionese) e produtos derivados do leite (leite, queijo), até alimentos preparados (entradas, acompanhamentos). Além dos benefícios aumentados para a saúde, a presente invenção fornece alimentos ricos em ácidos graxos Èmega-3 que possuem características aprimoradas de armazenamento e/ou em relação ao prazo de validade.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSI- ÇÕES ALIMENTÍCIAS QUE INCORPORAM ÁCIDO ESTEARIDÔNICO".
CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se à utilização de ácido estearidôni- co derivado transgenicamente no desenvolvimento de produtos alimentícios funcionais. Mais especificamente, ela refere-se a um aprimoramento tanto da qualidade nutricional quanto do prazo de validade de produtos alimentícios por meio do uso de ácido estearidônico transgênico derivado de plantas.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se a um método para o aprimora- mento de gêneros alimentícios por meio da utilização de ácido estearidônico derivado de plantas ("SDA"). Especificamente, o inventor fornece técnicas e métodos para a utilização de SDA derivado de plantas em gêneros alimentí- cios que aprimora a qualidade nutricional. No passado acreditava-se que as gorduras dietéticas eram componentes dietéticos sem valor ou até mesmo prejudiciais. Muitos estudos fizeram uma ligação fisiológica entre gorduras dietéticas e obesidade e outras patologias como, por exemplo, aterosclero- se. Considerando essa percepção de baixo valor nutricional, o consumo de gorduras foi desencorajado por muitos no ambiente médico.
No entanto, estudos recentes determinaram que, apesar de suas estruturas biológicas relativamente simples, há alguns tipos de gorduras que parecem melhorar o funcionamento do corpo de várias formas e que podem, na verdade, ser essenciais para certos processos fisiológicos. A ampla clas- se de moléculas de gordura inclui ácidos graxos, isoprenóis, esteroides, ou- tros lipídeos e vitaminas lipossolúveis. Dentre esses estão os ácidos graxos. Os ácidos graxos são ácidos carboxílicos, que possuem de 2 a 26 carbonos em sua "estrutura central", com nenhum ou vários números de insaturações em sua estrutura de carboidratos. Eles geralmente possuem constantes de dissociação (pKa) de cerca de 4,5, o que indica que em condições corporais normais (pH fisiológico de 7,4) a grande maioria estará em uma forma disso- ciada.
Com o aumento da importância nutricional para as gorduras e, em particular, ácidos graxos, muitos na indústria de alimentos começaram a se concentrar na tecnologia de ácidos graxos e de lipídeos como um novo foco para a produção de alimentos. Esse foco tem sido particularmente in- tenso para a produção e incorporação de ácidos graxos Ômega-3 na dieta.
Os ácidos graxos Ômega-3 são ácidos graxos poli-insaturados de cadeia longa (18-22 átomos de carbono de comprimento da cadeia) com a primeira das ligações duplas ("insaturações") começando com o terceiro átomo de carbono. Eles são denominados "poli-insaturados" porque suas moléculas possuem duas ou mais "insaturações" de ligações duplas em sua cadeia de carboidratos. Eles são denominados ácidos graxos "de cadeia longa" já que sua estrutura central de carbono possui pelo menos 18 átomos de carbono. Além do ácido estearidônico "SDA", a família Ômega-3 de ácidos graxos in- clui ácido alfa-linolênico ("ALA"), ácido eicosapentaenoico ("EPA") e ácido docosahexaenoico ("DHA"). ALA é o ácido graxo Ômega-3 "base", da qual EPA e DHA são feitos no corpo por meio de uma série de reações enzimáti- cas, que incluem a produção de SDA. A maioria dos nutricionistas aponta para o DHA e EPA como os mais fisiologicamente importantes dos ácidos graxos Ômega-3. Esses processos de síntese a partir de ALA são denomi- nados "alongamento" (a molécula se torna mais longa por incorporação de novos átomos de carbono) e "dessaturação" (são criadas novas ligações duplas), respectivamente. Na natureza, ALA é encontrado basicamente em certas sementes de plantas (por exemplo, linhaça), enquanto o EPA e o DHA ocorrem principalmente nos tecidos de peixes predadores de águas frias (por exemplo, atum, truta, sardinhas e salmão), e em algumas algas ou micróbios marinhos com os quais eles se alimentam.
Também não é amplamente conhecido que os peixes marinhos de águas frias colhidos por seus Ômegas-3 e seu uso como alimento na verdade não produzem os ácidos graxos poli-insaturados (PUFAs), EPA e DHA de Ômega-3 essenciais. Em vez disso, os PUFAs de cadeia longa são biossintetizados por micróbios ou algas e entram na cadeia alimentar e são coletados nos tecidos de espécies predatórias. Atualmente, há dois óleos marinhos de célula individualizada comercialmente disponíveis ricos em DHA produzidos por uma empresa dos Estados Unidos - Martek, um de um dinoflagelado heterotrófico (Crypthecodinium cohnii) e o outro de um thraus- tochytrid marinho (Schizochytrium sp.). Infelizmente, o custo de produção é simplesmente muito elevado para justificar comercialmente a produção em larga escala e o suprimento disponível permanece pequeno.
Além das dificuldades para simplesmente assegurar um supri- mento de ácidos graxos Ômega-3, existem os custos para processar ácidos graxos Ômega-3 em produtos alimentícios. Mesmo após a colheita, esses custos também são proibitivos para empresas de alimentos. A razão para os custos adicionais de processamento é a instabilidade química relativa de EPA e DHA. Esses ácidos graxos Ômega-3 podem ser rapidamente oxida- dos, produzindo odores e sabores desagradáveis. Para reduzir a taxa de oxidação, os processadores de alimentos devem, portanto, distribuir o óleo em uma condição congelada ou encapsular os ácidos graxos desejáveis, cada um aumentando enormemente o custo de processamento e o custo conseqüente para o consumidor. Apesar desse gasto aumentado, as empre- sas de alimentos estão interessadas em fornecer ácidos graxos Ômega-3, pois acreditam que consumidores conscientes com a saúde podem desejar pagar um pequeno acréscimo por uma dieta aprimorada caso um suprimento confiável possa ser desenvolvido.
Junto com o movimento de empresas de alimentos para o de- senvolvimento de gorduras e óleos essenciais como um componente impor- tante em uma dieta saudável, os governos começaram a desenvolver regu- lamentações em direção à adoção de PUFAs na dieta. A dificuldade em sa- tisfazer essas necessidades tem sido a incapacidade de desenvolver um suprimento suficientemente grande de óleo Ômega-3 para atender à de- manda crescente do mercado. Como mencionado anteriormente, os ácidos graxos Ômega-3 considerados como tendo o valor mais elevado, EPA e DHA, também se degradam quimicamente muito rapidamente ao longo do tempo, o que limita o acesso comercial. Significativamente, durante o rápido processo de oxidação de EPA e DHA, esses ácidos graxos de cadeia longa desenvolvem um ranço ou simplesmente propriedades sensoriais insatisfató- rias que tornam sua inclusão difícil ou impossível em muitos gêneros alimen- tícios do ponto de vista da aceitação comercial. Além disso, com a demanda aumentada por ácidos graxos Ômega-3, veio a percepção de que os esto- ques globais de peixe já saturados não conseguem atender a qualquer cres- cimento significativo em termos das necessidades nutricionais humanas futu- ras por Ômegas-3. Essas limitações no fornecimento, estabilidade e fontes aumentam enormemente os custos e, consequentemente, limitam a disponi- bilidade de Ômegas-3 dietéticos.
Consequentemente, há necessidade de um fornecimento de um suprimento estável em larga escala de ácidos graxos Ômega-3 ou de seus precursores críticos que possam ser incluídos em formulações de alimentos e rações de uma forma comercialmente aceitável. A presente invenção for- nece essa alternativa aos ácidos graxos Ômega-3 fornecidos por peixes ou micróbios e o faz utilizando um ácido graxo Ômega-3 quimicamente estável comparativamente, SDA, como uma fonte que oferece sabor neutro, produ- ção compensadora quanto aos custos e fornecimento abundante, já que é derivado de plantas transgênicas. O SDA é o produto metabólico imediato do ácido α-linoleico ("ALA") e, uma vez no corpo, é prontamente metabolizado em EPA. As espécies de plantas que são especificamente incluídas dentro do grupo daquelas que poderiam atender à demanda são: sojas, milho e ca- nola, mas também podem incluir outras plantas, se necessário. Uma vez produzido, o SDA da invenção pode ser usado para aprimorar as caracterís- ticas saudáveis de uma grande variedade de produtos alimentícios. Essa produção também pode ser escalonada, como necessário, tanto para reduzir a necessidade de utilizar estoques de peixes selvagens quanto para fornecer componentes essenciais de ácido graxo para operações de aquicultura, ca- da uma reduzindo a pressão sobre os estoques de peixes globais.
Significativamente, a técnica estabelecida sugere que composi- ções alimentícias que compreendem ácido alfa-linolênico não são converti- das em EPA em qualquer grau fisiologicamente significativo quando formu- ladas em alimentos e/ou bebidas para venda comercial e consumo pelo usu- ário. A dificuldade aqui é o volume necessário de ALA em relação ao volume razoável de gêneros alimentícios para o consumidor. Os meios tradicionais para a obtenção de quantidades fisiologicamente relevantes de EPA ou DHA incluem a adição de óleos de peixe ou óleos de alga que possuem atributos negativos de sabores desagradáveis e pouca estabilidade. A fim de conter uma concentração de ALA que produzirá uma concentração fisiologicamente significativa de EPA e DHA no corpo, é necessária uma quantidade excessi- va de ALA, o que causa dificuldades na formulação de produtos alimentícios e tamanhos de porções que são simplesmente impraticáveis.
Surpreendentemente, o inventor verificou que a concentração de SDA das fontes da planta transgênica da invenção exige uma concentração bem menor em certo produto alimentício ou bebida para ser fisiologicamente significativa, e essas faixas estão dentro de parâmetros de volume bem acei- táveis para produtos alimentícios típicos. Um benefício adicional é encontra- do no sabor e estabilidade aprimorados em comparação com outros meios de obtenção de benefícios similares, tais como adição direta de óleos que contêm DHA como, por exemplo, óleo de peixe. Dessa forma, as composi- ções de SDA da invenção são ácidos graxos singularmente adequados para composições alimentícias saudáveis e estáveis.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
A presente invenção engloba a produção de óleo a partir de so- jas transgênícas projetadas para conter quantidades significativas de ácido estearidônico (18:4ω3) para uso em produtos alimentícios para melhorar a saúde de um consumidor final. Foram desenvolvidas quantidades suficientes de sojas enriquecidas em SDA para permitir a liberação de óleo de soja com um componente de SDA substancial. Esse "óleo de SDA" fornece um sabor limpo inicial, estabilidade e prazo de validade mais longos e qualidade nutri- cional aumentada em relação a outras fontes de óleos Ômega-3. Também foram desenvolvidos meios para se manter a qualidade do óleo durante o armazenamento. Foram produzidos vários produtos alimentícios feitos a par- tir do óleo de SDA e verificou-se que eles contêm propriedades de gosto e sensoriais similares, comparados a produtos feitos a partir de óleos conven- cionais, por exemplo, óleo de soja. Também de acordo com a presente invenção, também foram feitos testes do prazo de validade de produtos alimentícios, e o óleo de SDA derivado de plantas possui características substancialmente aprimoradas quanto ao prazo de validade em relação a outros produtos que contêm Ô- mega-3. Portanto, uma modalidade preferida da presente invenção é a utili- zação do óleo de SDA produzido por plantas transgênicas na produção de produtos alimentícios para consumo humano.
Estudos nutricionais demonstraram que, comparado ao ácido alfa-linolênico, SDA é convertido cerca de 5 vezes mais eficientemente in vivo em EPA. Consequentemente, em outra modalidade da presente inven- ção, o SDA derivado de plantas pode ser utilizado como um suplemento nu- tracêutico ou aditivo dietético para certas condições patológicas.
Especificamente, a presente invenção demonstra que podem ser feitos produtos alimentícios aceitáveis com ácido estearidônico, aumentando seu prazo de validade além daquele de óleos de PUFA competitivos.
Além disso, o método da presente invenção também permite a otimização de formulações alimentícias para otimizar melhoras da saúde em consumidores finais, na forma de um óleo comestível, com o processamento do óleo ou composição de óleo, uma extração do grão inteiro para uso em uma formulação de leite de soja ou como uma composição por extração par- cial do tipo farinha.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de SDA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de peixes criados por aquicultura e/ou de produtos desses peixes.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de SDA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de gado de corte para melhorar as características nutricionais da carne bovi- na e/ou de produtos da carne bovina. Modalidades adicionais da presente invenção também podem melhorar a função reprodutiva.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de SDA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de porcos para melhorar as características nutricionais da carne de porco e/ou de produtos da carne de porco. Modalidades adicionais da presente invenção também podem melhorar a função reprodutiva.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de SDA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de galinhas para melhorar as características nutricionais de galinhas e/ou de produtos de galinhas. Modalidades adicionais da presente invenção também podem melhorar a função reprodutiva.
Outras características e vantagens desta invenção ficarão evi- dentes na descrição detalhada seguinte de modalidades preferidas desta invenção, consideradas com referência às figuras que as acompanham.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
A figura 1 mostra a via biossintética do metabolismo do PUFA.
A figura 2 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para o Molho Italiano A-E.
A figura 3 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para molho do tipo Ranch A-E.
A figura 4 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para Maionese A-D.
A figura 5 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para o Leite de Soja A-B.
A figura 6 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para Smoothies de frutas A-C.
A figura 7 mostra um gráfico que representa a bioatividade rela- tiva de ácidos graxos Ômega-3.
A figura 8 mostra um diagrama de fluxo do processo para a pro- dução de leite de soja.
A figura 9 mostra um diagrama de fluxo do processo para a pro- dução de leite de soja de baunilha.
A figura 10 mostra um diagrama de fluxo do processo para a produção de margarina.
A figura 11 mostra um modelo de ácido estearidônico.
DESCRIÇÃO DA MODALIDADE PREFERIDA As abreviações a seguir possuem os significados designados na
especificação: Abreviação: AA Ácido araquidônico ALA Ácido a-linolênico DHA Ácido docosahexanoico DNA Ácido desoxirribonucleico EPA Ácido eicosapentanoico GLA Ácido γ-linolênico LA Ácido Iinoleico mRNA Ácido ribonucleico mensageiro PUFA Ácidos graxos poli-insaturados SDA Ácido estearidônico Explanação de termos:
Expressão - O processo da transcrição de um gene para produ- zir o mRNA correspondente e a tradução desse mRNA para produzir o pro- duto gênico correspondente (ou seja, um peptídeo, um polipeptídeo ou uma proteína).
Ração - Materiais disponíveis para a alimentação de animais que incluem, sem limitação, forragem, alfafa e concentrados.
Alimento - Substâncias que são ingeridas por seres humanos e contêm nutrientes que podem ser metabolizados para a produção de energi- a.
Gene - DNA cromossômico, DNA de plasmídeo, cDNA, DNA sintético ou outro DNA que codifica um peptídeo, um polipeptídeo, uma pro- teína ou uma molécula de RNA.
Hospedeiro ou organismo hospedeiro - Células de bactérias, fungos, animais e células de animais, plantas e células de planta ou quais- quer partes ou tecidos de plantas incluindo protoplastos, calos, raízes, tubér- culos, sementes, caules, folhas, mudas, embriões e pólen.
Sensação bucal - Significa como a substância é sentida na boca de um ser humano. Com relação aos perfis do teste de sabor, refere-se à viscosidade, textura e suavidade da substância que está sendo testada.
Barra nutricional alimentícia - Como aqui usado, o termo "barra nutricional alimentícia" significa uma barra de alimento projetada para pro- mover a saúde.
Transformação - Refere-se à introdução de ácido nucleico em um hospedeiro receptor.
Transgene - Qualquer pedaço de uma molécula de ácido nuclei- co que é inserido pelo técnico em uma célula, ou um ancestral desta, e se torna parte do genoma da planta ou animal que se desenvolve a partir da- quela célula. Esse transgene pode incluir um gene que é parcial ou inteira- mente exógeno (ou seja, estranho) à planta ou animal transgênico, ou pode representar um gene que possui identidade para um gene endógeno da planta ou do animal.
Transgênico - Qualquer célula que inclua uma molécula de ácido nucleico que foi inserida pelo técnico em uma célula, ou um ancestral desta, e se torna parte do genoma da planta ou do animal que se desenvolve a par- tir daquela célula.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se a um sistema para um método aprimorado de produção de ácido estearidônico e sua incorporação nas die- tas de seres humanos e animais de criação em um esforço para melhorar a saúde humana. Essa produção ocorre por meio da utilização de plantas transgênicas projetadas para produzir SDA em alto rendimento para permitir a incorporação comercial em produtos alimentícios. Para os objetivos da presente invenção, o ácido e as formas de sal de ácidos graxos, por exem- plo, ácido butírico e butirato, ácido araquidônico e araquidonato, serão con- siderados formas químicas intercambiáveis.
Em relação à FIG. 1, todas as plantas superiores possuem a ha- bilidade para sintetizar os principais PUFAs de 18 carbonos, LA e ALA, e, em alguns casos, SDA (C18:4cd3, SDA), mas poucos são capazes de alon- gar e dessaturar ainda mais esses para produzir AA1 EPA ou DHA. Portanto, a síntese de EPA e/ou DHA em plantas superiores exige a introdução de vários genes que codificam todas as enzimas biossintéticas necessárias pa- ra converter LA em AA, ou ALA em EPA e DHA. Levando-se em conta a im- portância dos PUFAs na saúde humana, a produção bem-sucedida de PU- FAs (especialmente a classe n-3) em sementes oleaginosas transgênicas, de acordo com a presente invenção, pode então fornecer uma fonte susten- tável desses ácidos graxos essenciais para uso dietético. A via aeróbica "convencional" que opera na maioria dos organismos eucarióticos que sinte- tizam PUFA começa com a Δ6-dessaturação tanto de LA quanto de ALA pa- ra gerar ácido γ-linolênico (GLA, 18:3n6) e SDA. Estabelecimento da Composição de Óleos
Em relação à Tabela 1a, é importante fornecer uma base do que constitui faixas "normais" de composição de óleo em comparação com as composições de óleo da presente invenção. Uma fonte significativa de dados usada para estabelecer os critérios básicos de composição para óleos e gorduras comestíveis de maior importância tem sido "Ministry of Agriculture, Fisheries and Food" (MAFF) e a "Federation of Oils, Seeds and Fats Associ- ations" (FOSFA) nas instalações da "Leatherhead Food Research Associati- on" no Reino Unido.
Para estabelecer dados padronizados significativos, é essencial que sejam coletadas amostras suficientes de origens geográficas represen- tativas, e que os óleos sejam puros. No trabalho de MAFF/FOSFA, mais de 600 amostras comerciais autênticas de sementes oleaginosas vegetais de origem e história conhecidas, geralmente de dez origens geográficas diferen- tes, foram estudadas quanto a cada um de 11 óleos vegetais. Os óleos ex- traídos foram analisados para determinar sua composição global de ácido graxo ("FAC"). A FAC na posição 2 da composição de triglicerídeo, esterol e tocoferol, o número de carbonos do triglicerídeo e o valor do iodo, os valores de proteína no óleo, o ponto de fusão e teor gordura sólida, como apropria- do, são determinados.
Antes de 1981, os dados da FAC não eram incluídos nos pa- drões publicados, pois não havia dados disponíveis de qualidade suficiente. Em 1981, foram adotados padrões que incluíam faixas da FAC como crité- * rios mandatários da composição. O trabalho de MAFF/FOSFA forneceu a base para revisões posteriores dessas faixas.
Em geral, à medida que mais dados se tornaram disponíveis, foi possível propor faixas de ácidos graxos bem mais estreitas e, consequente- mente, mais específicas do que aquelas adotadas em 1981. A Tabela 1a dá exemplos de FAC de óleos que foram adotadas pela "Codex Alimentarius Commission" (CAC) em 1981 e faixas para os mesmos óleos propostas pelo encontro do "Codex Committee on Fats and Oils" (CCFO) ocorrido em 1993. TABELA 1a - PADRÕES PARA A COMPOSIÇÃO DE ÁCIDOS GRAXOS DE ÓLEOS
<table>table see original document page 12</column></row><table>
Fontes: "CODEX ALIMENTARIUS COMMISSION", 1983 e 1993.
Considerando o que foi apresentado acima e de acordo com a presente invenção, o óleo rico em SDA produzido em uma planta de semen- te oleaginosa recombinante fornece uma composição de óleo não-disponível previamente para fabricantes de alimentos. Ele permite a incorporação de um óleo Ômega-3 em produtos alimentícios que não estava presente em quantidades apreciáveis em óleos vegetais típicos, antes da presente inven- ção. Além disso, o uso desse óleo Ômega-3 é possível sem as preocupa- ções tradicionais com as qualidades sensoriais do alimento ou com o prazo de validade quando esses óleos são originados tendo peixes ou algas como fontes. Após a liberação do óleo, ele pode ser recolhido e utilizado para a produção de produtos assados, produtos derivados do leite, pastas, marga- rinas, produtos esportivos, barras nutritivas e fórmulas para bebês, rações, aquicultura, usos nutracêuticos e medicinais. Cada um possuindo um teor nutricional aumentado.
Em relação à Tabela 1b, para ilustrar a utilidade da presente in- venção, vários produtos alimentícios foram/estão sendo encolhidos, repre- sentando uma gama ampla de categorias de alimentos, para determinar o impacto do SDA e de outros óleos Ômega-3 sobre o sabor do produto e so- bre o prazo de validade.
A estabilidade oxidativa, como medida por testes sensoriais do prazo de validade aceito, é uma característica importante do PUFA que de- termina a vida útil e as características de sabor de gorduras e óleos. A dete- rioração oxidativa em gorduras e óleos pode ser avaliada por métodos quí- micos úmidos como, por exemplo, o valor de peróxido (PV, que mede peró- xidos resultantes da oxidação primária), e valor de p-anisidina (AV, que me- de principalmente 2-alquenais resultantes da oxidação secundária) ou, em alimentos, pode ser avaliada por testes sensoriais do paladar. Categorias selecionadas de alimentos e produtos são as seguintes: TABELA 1b
<table>table see original document page 14</column></row><table>
De acordo com os estudos atuais, o desenvolvimento de produ-
tos alimentícios que incorporam SDA transgênico forneceu várias formula- ções e processos. O desenvolvimento e pesquisas adicionais foram efetua- dos para otimização do sabor e o aprimoramento das características do pra- zo de validade. Por exemplo, alimentos ou bebidas que podem conter as composições de SDA da presente invenção incluem produtos assados e misturas para assar (por exemplo, bolos, brownies, bolinhos, biscoitos, mas- sas, tortas e massas de tortas), gordura vegetal e produtos de óleo (por e- xemplo, gorduras vegetais, margarinas, óleos para frituras, óleos de cozinha e de saladas, óleos de pipoca, molhos de saladas e maionese), alimentos que são fritos em óleo (por exemplo, batatas fritas, salgadinhos de milho, salgadinhos do tipo tortilha, outros aperitivos farináceos fritos, rosquinhas e galinha frita), produtos derivados do leite e produtos artificiais derivados do leite (por exemplo, manteiga, sorvete e outras sobremesas congeladas que contêm gordura, iogurte e queijos, incluindo queijos naturais, queijos proces- sados, queijo cremoso, queijo cottage, alimentos de queijo e pastas de quei- jo, leite, creme, creme azedo, soro do leite e creme para café), produtos de carne (por exemplo, hambúrgueres, cachorros quentes, salsichas, lingüiças, mortadela e outras carnes para lanche, carnes em lata, incluindo pas- ta/produtos de carne, guisados, pastas para sanduíche e peixe em lata), análogos de carne, tofu, e vários tipos de pastas de proteína, doces e confei- tos (por exemplo, balas, chocolates, confeitos de chocolate, coberturas e glacês, xaropes, recheios de creme e recheios de frutas), pastas de nozes e vários tipos de sopas, patês, molhos e caldos. Cada um dos exemplos acima compreende diferentes modalidades da presente invenção. A presente invenção baseia suas formulações em níveis-alvo de óleos Ôme- ga-3 para cada produto alimentício. Esses níveis foram identificados com base na bioequivalência do produto de SDA. As informações apresentadas na Tabela 2a identificam os níveis-alvo de Omega 3 por porção:
TABELA 2a
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Com base nessas informações, foram desenvolvidas formula- ções preferidas do SDA da presente invenção com o nível apropriado de ácido estearidônico para liberar os níveis visados por porção. A quantidade adicionada variou entre diferentes aplicações em função das diferenças no tamanho da porção.
As Tabelas 2b-d abaixo refletem as faixas das composições de óleo de SDA da presente invenção. TABELA 2b. Óleo de SDA / Variante-1 (produzido pelas plantas transgênicas da invenção) (1a parte)
DADOS ANALÍTICOS DE SEMENTES E ÓLEOS DE SOJA - TRITURADA (250 KG) <table>table see original document page 16</column></row><table> <table>table see original document page 17</column></row><table> DADOS ANALÍTICOS DE SEMENTES E ÓLEOS DE SOJA - TRITURADA (250 KG)
<table>table see original document page 18</column></row><table>
Tabela 2b (2a parte)
DADOS ANALÍTICOS DE SEMENTES E ÓLEOS DE SOJA - TRITURADA (250 KG)
<table>table see original document page 18</column></row><table> <table>table see original document page 19</column></row><table> TABELA 2c. Óleo de SDA / Variante-1 (produzido pelas plantas transgênicas
<table>table see original document page 20</column></row><table> <table>table see original document page 21</column></row><table> <table>table see original document page 22</column></row><table> <table>table see original document page 23</column></row><table> <table>table see original document page 24</column></row><table> TABELA 2d. Óleo de SDA / Variante-1 (produzido pelas plantas transgênicas da invenção)
<table>table see original document page 25</column></row><table> DADOS ANALÍTICOS DE SEMENTES E ÓLEOS DE SOJA-TRITURADA (3 toneladas métricas de sojas de controle; 5 toneladas métricas de sojas SDA) <table>table see original document page 26</column></row><table> <table>table see original document page 27</column></row><table> <table>table see original document page 28</column></row><table> <table>table see original document page 29</column></row><table>
Para a presente invenção, a fonte primária de ácido estearidôni- co foi o óleo extraído de sojas transgênicas que foram projetadas para pro- duzir níveis altos de ácido estearidônico. As sojas foram processadas em uma instalação de processamento de óleo e o óleo foi extraído de forma consistente com os métodos descritos nos Pedidos de Patente U.S. 2006/0111578 e 2006/0111254. Além do óleo, foi feita farinha das sojas transgênicas e sojas de controle típicas das práticas industriais no proces- samento de farinha de soja integral. Um exemplo de uma formulação alimen- tícia que utiliza o SDA da invenção é encontrado nas Tabelas 3a-3c e nas Figuras 2a-2e abaixo. Os atributos gerais dos molhos de estilo italiano de acordo com modalidades preferidas da presente invenção são apresentados nas Tabelas 4a-4c.
TABELA 3a Molho de salada italiano - atributos de prazo de validade (1a par- te}
<table>table see original document page 30</column></row><table> <table>table see original document page 31</column></row><table> <table>table see original document page 32</column></row><table>
Escala = O a 15
TABELA 3a Molho de salada italiano - atributos de prazo de validade (conti- nuação}
<table>table see original document page 32</column></row><table> <table>table see original document page 33</column></row><table> <table>table see original document page 34</column></row><table>
TABELA 3b Molho de salada italiano - atributos de prazo de validade
<table>table see original document page 34</column></row><table> <table>table see original document page 35</column></row><table>
TABELA 3b Molho de salada italiano - atributos de prazo de validade (conti- nuarão)
<table>table see original document page 35</column></row><table> <table>table see original document page 36</column></row><table> <table>table see original document page 37</column></row><table>
TABELA 3c Molho de salada italiano - atributos de prazo de validade
<table>table see original document page 37</column></row><table> <table>table see original document page 38</column></row><table> <table>table see original document page 39</column></row><table>
TABELA 4b: MOLHO DE SALADA DO TIPO ITALIANO
<table>table see original document page 39</column></row><table> <table>table see original document page 40</column></row><table>
Tabela 4c: MOLHO DE SALADA DO TIPO ITALIANO
PRODUÇÃO DO PRAZO DE VALIDADE RESULTADOS MICROANALÍTICOS MOLHO ITALIANO
<table>table see original document page 40</column></row><table> De acordo com os métodos da presente invenção, amostras de vários molhos de saladas foram submetidas a um laboratório de análise de alimentos para estudos confirmatórios e análise de várias modalidades da invenção. A abordagem geral para os testes do prazo de validade é a avalia- ção por 5 analistas de atributos na degustação dos molhos e a obtenção de um consenso em relação aos atributos e intensidade (em uma escala de 15 pontos - 0 sendo ausente, 15 sendo extremo) para cada molho. As listas de atributos identificados pelos analistas estão nos documentos em anexo. Atri- butos adicionais são identificados, se necessário. As características do teste de atributos são fornecidas abaixo, na Tabela 5, juntamente com os dados do teste sensorial em vários pontos no tempo, na Tabela 6.
TABELA 5. DEFINIÇÕES DO MOLHO DE SDA DE ATRIBUTOS SENSORI- AIS
APARÊNCIA
Cor amarela A intensidade da cor amarela na amostra, do amarelo-claro ao escuro.
AROMA/SABOR
Aroma total - A intensidade do aroma total da amostra.
Sabor total - A intensidade do sabor total da amostra, incluindo os gostos
básicos.
Óleo total - A intensidade de aroma/sabor de qualquer tipo de óleo, incluindo óleo oxidado.
Óleo oxidado - A intensidade de aroma/sabor de óleo oxidado, descrita como óleo velho que passou por oxidação, caracterizado como de papelão, pican- te, de tinta ou de peixe.
Aroma/sabor desagradável total - A intensidade de aroma/sabor que supos- tamente não devia haver no produto, inclui óleo oxidado e outras observa- ções desagradáveis. A natureza da observação desagradável deve ser des- crita.
Maionese/laticínios - A intensidade do aroma/sabor associado à maionese ou ao produto derivado do leite.
Vinagre - A intensidade do aroma/sabor de vinagre branco ou ácido acético. Cebola/alho/ervas - A intensidade de aroma/sabor associado à cebola, ao alho e a todas as ervas verdes secas e frescas.
Azedo - Um dos quatro paladares básicos, percebido primariamente nas laterais da língua; comum aos ácidos.
Salgado - Um dos quatro paladares básicos, percebido primariamente nas laterais da língua; comum ao cloreto de sódio (sal de mesa).
FATORES DA SENSAÇÃO
Pungente - A quantidade de queimação ou irritação da cavidade nasal pro- duzida ao cheirar a amostra, por exemplo, com raiz-forte.
TEXTURA
Viscosidade pela boca - O grau de espessura da amostra da forma percebi- da quando manipulada na boca.
Impregnação oleosa na boca - A quantidade de impregnação percebida nos tecidos moles da boca.
PÓS-DEGUSTAÇÃO
Pós-degustação total - A intensidade de pós-degustação total da amostra.
EXEMPLO 1
Molho de salada
As tabelas acima representam os dados desenvolvidos para uma modalida- de preferida da presente invenção. Favor ver também as Figuras 2a-2e para uma representação gráfica dos dados determinados por quatro meses. De acordo com os dados aqui apresentados, as amostras que contêm SDA possuem significativamente menos sabor desagradável do que as formula- ções de Ômega-3 de óleo de peixe e de alga correspondentes, fornecendo o benefício da presença de uma formulação de Ômega-3, sem o prazo de va- lidade substancialmente encurtado e estabilidade limitada. Em função dos sabores pungentes e odores extremamente desagradáveis, os óleos deriva- dos de peixes e algas simplesmente não puderam ser testados e foram re- movidos do período de avaliação acelerada de 3 meses, enquanto a compo- sição de SDA da invenção não foi. No geral, as composições de SDA da in- venção demonstram estabilidade aumentada, degradação reduzida e conse- qüente prazo de validade aumentado para utilização comercial em conjunto com a liberação de Ômegas-3 benéficos na dieta.
Com relação às modalidades específicas de molho de saladas, as composi- ções de SDA da invenção desenvolvidas utilizadas para molhos Ranch a- primorados mantiveram seu perfil de sabor por mais tempo do que os óleos de peixe e de alga após armazenamento por 6 meses em temperatura ambi- ente. Para os molhos italianos, o sistema de sabor mais complexo produz algum mascaramento, mas os molhos que contêm SDA da presente inven- ção possuem novamente menos sabor desagradável do que molhos basea- dos em peixes/algas comparáveis.
Molhos de salada do tipo italiano:
De acordo com a presente invenção, os estudos de prazo de validade, em temperatura ambiente e estudos acelerados, foram completa- dos ao longo de 4 meses. Cada amostra foi avaliada pelo painel treinado de atributos em um laboratório de alimentos em 0, 2 e 4 meses em temperatura ambiente e em 1, 2 e 3 meses em temperatura acelerada (35°C (95°F)). Pa- ra molhos Ranch, as amostras de óleo de peixe e de alga só foram cheira- das por 3 meses em função do sabor e caráter altamente desagradável com dois meses. Todas as outras amostras, incluindo aquelas que contêm o óleo de SDA da invenção, foram avaliadas por 3 meses. Isso é típico para avalia- ções aceleradas de prazo de validade.
De acordo com os métodos da presente invenção, os molhos italianos de- monstraram estabilidade significativa em termos de sabor em relação ao ou- tros produtos de teste que contêm Ômega-3. O teste acelerado foi comple- tado ao longo de quatro meses testando a 35°C (95°F). Nesse ponto, todos os produtos exibiram odores desagradáveis, com os óleos de peixe demons- trando os piores odores. Significativamente, as formulações de SDA da in- venção foram similares à referência de óleo de soja.
De acordo com os métodos da presente invenção, os molhos do tipo Ranch demonstraram melhoras significativas de acordo com parâmetros sensoriais com relação às formulações de óleo de peixe e óleo de alga que contêm outros Ômegas-3. Também de acordo com a invenção, o teste ace- lerado foi completado. Odores desagradáveis de alta intensidade se desen- volveram nas amostras de peixe e alga em dois meses, enquanto o óleo de SDA da invenção e o óleo de soja de referência podem ser avaliados de a- cordo com parâmetros sensoriais em 3 meses. As amostras de referência e de linhaça exibiram mais sabores característicos e menos sabor desagradá- vel do que o óleo de SDA da invenção. O óleo de SDA da invenção exibiu mais sabores característicos e menos odores desagradáveis do que as a- mostras de peixe e alga. Isso demonstra que SDA aumentou o prazo de va- lidade vs. óleos de peixe e de alga. Além disso, o teste em temperatura am- biente foi completado para as formulações de acordo com a presente inven- ção ao longo de 4 meses. Os resultados indicam que as amostras de SDA da invenção indicam que o produto de SDA da invenção possui um perfil significativamente menor para odores desagradáveis em relação às outras fontes de Ômega-3, incluindo óleos de peixe e de alga. Os dados para molhos do tipo italiano e Ranch e gráficos que demonstram as características para a avaliação estão anexados nas Tabelas 1-11 e nas figuras 2 e 3. EXEMPLO 2
MOLHO DE SALADAS DO TIPO RANCH
TABELA 6a - Atributos de prazo de validade do molho de salada do tipo Ranch (1a parte)
<table>table see original document page 44</column></row><table> <table>table see original document page 45</column></row><table>
TABELA 6a - continuação - (1a parte)
<table>table see original document page 45</column></row><table> <table>table see original document page 46</column></row><table>
TABELA 6a - continuação - (2a parte)
<table>table see original document page 46</column></row><table> <table>table see original document page 47</column></row><table> <table>table see original document page 48</column></row><table>
Escala = O a 15
Observação: a cor indica variância em relação ao óleo de soja de referência no ponto no tempo inicial; amarelo = +/- 1,0, laranja = +/- 1,5 a 2,0, vermelho = /<2,5
<table>table see original document page 48</column></row><table> <table>table see original document page 49</column></row><table>
TABELA 6a — continuação - (1 parte) <table>table see original document page 49</column></row><table> <table>table see original document page 50</column></row><table> <table>table see original document page 51</column></row><table>
TABELA 6a -continuação- (2 parte)
<table>table see original document page 51</column></row><table>
Escala = 0 a 15
Observação: a cor indica variância em relação ao óleo de soja de referência no ponto no tempo inicial; laranja = +/- 1,5 a 2,0, vermelho = /<2,5 TABELA 6b - Atributos de prazo de validade do molho de salada do tipo Ranch
Óleo de linhaça
<table>table see original document page 52</column></row><table> TABELA 6b - continuação
<table>table see original document page 53</column></row><table>
Escala = 0 a 15
Observação: a cor indica variância em relação ao óleo de soja de referência no ponto no tempo inicial; amarelo = +/-1,0, ou;
TABELA 7a
<table>table see original document page 54</column></row><table> TABELA Ia -continuação-
<table>table see original document page 55</column></row><table>
TABELA 7b
Processo de produção de molho do tipo Ranch
1. Verificar se o misturador está em boas condições de funcionamento, limpo e livre de poeira e sujeiras, hermeticamente fechado.
2. Ajustaro moinho coloide em 0,45.
3. Ajustar a velocidade do tanque do misturador em 45 hz.
4. Adicionar água no tanque do misturador.
5. Acrescentar conservantes (benzoato, sorbato, EDTA) no tanque do mistu- rador. 6. Fazer uma mistura de goma (goma xantana + 700 g de óleo de soja)
7. Adicionar a mistura ao tanque de Dixie1 deixar misturar por 3 minutos
8. Aumentar a velocidade do tanque para 35 hz.
9. Adicionar os ingredientes secos restantes lentamente ao tanque do mistu- rador.
10. Adicionar gema de ovo e leite em pó cultivado
11. Aumentar a velocidade do tanque para 45 hz.
12. Adicionar lentamente o óleo de soja restante e, se apropriado, o óleo Omega 3.
13. Adicionar lentamente o vinagre e o ácido fosfórico.
14. Misturar tudo até que todos os ingredientes estejam incorporados e mis- turados (aproximadamente 30 segundos)
15. Abrir a válvula do tanque do misturador e ajustar a velocidade da bomba em 30 hz.
TABELA 7c
PRODUÇÃO DO PRAZO DE VALIDADE RESULTADOS MICROANALÍTICOS MOLHO DO TIPO RANCH
<table>table see original document page 56</column></row><table> A abordagem geral para os testes do prazo de validade é que 5 analistas treinados nos atributos degustem os molhos e encontrem um con- senso em relação aos atributos e à intensidade (em uma escala de 15 pon- tos - 0 sendo ausente, 15 sendo extremo) para cada molho. As listas dos atributos identificados pelos analistas estão nos documentos em anexo. Atri- butos adicionais podiam ser identificados, caso necessário.
Para o exemplo atual, as tabelas acima fornecem dados signifi- cativos sobre o sabor e a consistência. No caso do molho do tipo Ranch, por causa de seu sabor mais sensível, as diferenças entre os molhos feitos com SDA e suas contrapartes competitivas são mais óbvias. As tabelas acima representam os dados desenvolvidos para uma modalidade preferida da presente invenção. Favor ver também as Figuras 3a-3h para uma represen- tação gráfica dos dados com molho do tipo Ranch. De acordo com os dados aqui apresentados, as amostras que contêm SDA possuem sabores signifi- cativamente menos desagradáveis do que aquelas que contêm os óleos de peixe e de alga. Em função dos sabores pungentes e do odor extremamente desagradável, os óleos derivados de peixes e algas foram simplesmente removidos do período de avaliação acelerada de 3 meses, enquanto o SDA não foi. Demonstrando estabilidade aumentada, degradação reduzida e con- sequente prazo de validade aumentado. EXEMPLO 3 MAIONESE
De acordo com a presente invenção, uma maionese foi prepara- da e testada com o óleo da invenção que contém Ômega-3; os dados apre- sentados se aplicam a todas as variantes de maioneses e de molhos de sa- ladas, produzidas de diversas formas (moinho coloide, moinho de fritura etc.). TABELA 8a Formulação de SDA - Maionese (1a parte)
<table>table see original document page 58</column></row><table> TABELA 8a -continuação (1a parte)
<table>table see original document page 59</column></row><table>
TABELA 8a - (2a parte)
<table>table see original document page 59</column></row><table> TABELA 8a - continuação-(2a parte)
<table>table see original document page 60</column></row><table> TABELA 8a - continuação-(2a parte)
<table>table see original document page 61</column></row><table> TABELA 8b Composição da invenção - Comparação com maionese baseada em óleo de peixe
<table>table see original document page 61</column></row><table> TABELA 8b -continuação
<table>table see original document page 62</column></row><table> TABELA 8c Composição da invenção - Comparação com maionese baseada em óleo de alga
<table>table see original document page 63</column></row><table> TABELA 8c -cotinuação-
<table>table see original document page 64</column></row><table>
TABELA 8d Composição da invenção - Comparação com maionese baseada em óleo de linhaça
<table>table see original document page 64</column></row><table>2 3 TABELA 8d -continuação-
<table>table see original document page 65</column></row><table> TABELA 9a.
FORMULAÇÕES E PROCESSO DE MAIONESE DE SDA
<table>table see original document page 66</column></row><table>
TABELA 9b
Processo de maionese - Planta piloto
2. Ajustar o moinho coloide em 30.
3. Primeiro adicionar a água, depois misturar no EDTA.
4. Adicionar a gema de ovo, misturar por 3 min.
5. Pré-misturar a farinha de mostarda, o açúcar e o sal. Adicionar a pré- mistura lentamente até dissolvida e dispersa igualmente.
6. Adicionar os óleos e misturar por 3 minutos, ajustar a velocidade do tan- que do misturador de Dixie a 35 hz.
7. Adicionar o vinagre lentamente.
8. Misturar até que todos os ingredientes estejam dispersos. Desligar a agi- tação do misturador de Dixie1 permitir que o ar saia.
9. Iniciar o moinho coloide. Abriro tanque do misturador, a válvu- la, ajustar a velocidade da bomba em 30 hz.
10. Embalar em embalagens individuais.
De acordo com a presente invenção, a abordagem geral para os testes do prazo de validade é que 5 analistas treinados nos atributos degus- tem os molhos e encontrem um consenso em relação aos atributos e à in- tensidade (em uma escala de 15 pontos - 0 sendo ausente, 15 sendo extre- mo) para cada molho. As listas dos atributos identificados pelos analistas estão nos documentos em anexo. Atributos adicionais podiam ser identifica- dos, caso necessário.
TABELA 9c
<table>table see original document page 67</column></row><table> De acordo com a presente invenção os seguintes dados foram desenvolvidos após avaliações iniciais. Similar ao exemplo de molhos de saladas, o sabor inicial da maionese que contém SDA era similar ao contro- le. A amostra de linhaça foi a mais diferente das outras comparadas.
De acordo com os métodos da presente invenção, os estudos de prazo de validade por dois meses em condições de armazenamento em temperatura ambiente e acelerada foram completados. Todas as amostras no estudo de temperatura acelerada tiveram sabor acentuadamente desa- gradável com a amostra de óleo de alga contendo as maiores alterações. SDA teve melhor desempenho do que as outras fontes de óleo que contém Ômega-3. Para o estudo em temperatura ambiente, o óleo de alga exibiu níveis bem maiores de odores desagradáveis do que o óleo de SDA da in- venção. Veja os dados acima nas tabelas 12-14 e nas Figuras 4a-4e. EXEMPLO 4
LEITE DE SOJA
De acordo com a presente invenção, o leite de soja pode ser preparado em duas formas diferentes. Na primeira, sojas enriquecidas em SDA são descascadas, fragmentadas em flocos e depois transformadas em farinha de soja integral. O leite de soja é formulado dissolvendo-se primeiro a farinha de soja em água, misturando-se e processando-se para inativar as enzimas. A base de soja é filtrada para remover os sólidos adicionais e des- gaseificada. Os ingredientes restantes são adicionados, misturados, o produ- to é então homogeneizado em um homogeneizador de dois estágios, e de- pois processado por meio de uma unidade de processamento térmico "Ultra High Temperature" (UHT). O produto resultante é empacotado e refrigerado, com um prazo de validade típico de 12 semanas. A seguir, será apresentada uma formulação da forma fornecida na Tabela 10; veja também a Figura 6 para um diagrama de fluxo do processo.
TABELA 10
<table>table see original document page 68</column></row><table> <table>table see original document page 69</column></row><table>
O exemplo usado também pode ser aplicado a diferentes tipos de unidades de homogeneização e de processamento térmico (vapor direto, vapor indireto etc.). Diferentes sabores de leite de soja, incluindo neutro, chocolate, maçã, laranja, frutas vermelhas etc., podem ser preparados da mesma forma.
Verificou-se que o produto resultante possui sabor aceitável e propriedades bucais agradáveis em comparação com o leite de soja feito de farinha processada da mesma forma, mas sem o aprimoramento de SDA da presente invenção. De acordo com os dados desenvolvidos de acordo com a presente invenção, após um prazo de validade de 9 meses, há apenas ligei- ras diferenças no paladar entre as modalidades da presente invenção apri- moradas com uma composição de SDA transgênico versus uma composição de controle com óleo de soja não-transgênica que não contém ácidos graxos Ômega-3. Isso foi feito tanto para o leite de soja quanto para preparados de frutas. Observa-se que esses são mantidos refrigerados e possuem apenas um prazo de validade de 3 meses na maioria dos estabelecimentos comerci- ais.
A segunda abordagem nesse exemplo é a utilização de proteína de soja isolada, e a adição de óleo de soja enriquecido em SDA para obter- se uma nova composição de produto. A seguir, será apresentada uma for- mulação da forma fornecida na Tabela 11 com um diagrama de fluxo corres- pondente na Figura 7. TABELA 11
<table>table see original document page 70</column></row><table>
De acordo com a presente invenção, o exemplo apresentado acima também pode ser aplicado a diferentes tipos de unidades de homoge- neização e de processamento térmico (vapor direto, vapor indireto etc.)· Di- ferentes sabores de leite de soja, incluindo neutro, chocolate, maçã, laranja, frutas vermelhas etc., podem ser preparados da mesma forma. Verificou-se que o produto resultante possui sabor aceitável e propriedades de sensação bucal agradável em comparação com o leite de soja feito com óleo de soja refinado, branqueado e desodorizado.
TABELA 12 (1a parte)
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TABELA 12 (2a parte)
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Escala = 0 a 15
Observação: a cor indica variância em relação à referência de soja; amarelo = +/-1,0, laranja = +/-1,5 a 2,0, vermelho = /<2,5
EXEMPLO 5
SMOOTHIES DE FRUTAS
De acordo com uma modalidade preferida da presente invenção, foram desenvolvidos smoothies de frutas a partir de leite de soja. Outras fon- tes de óleo de SDA também poderiam ser usadas para o desenvolvimento de smoothies de frutas em modalidades alternativas. Também de acordo com a presente invenção, os processos desenvolvidos para a produção dos smoothies de frutas levam em conta as propriedades únicas do óleo de SDA para a melhora da saúde e da nutrição. Foram desenvolvidos dois produtos do tipo smoothie, e foi determinado que ambos os produtos possuem propri- edades de prazo de validade prolongado. Durante um processo que envolve a utilização de pasteurização ultra elevada, foi obtido um produto que é ar- mazenado refrigerado, com um prazo de validade típico de 12 semanas de outras bebidas refrigeradas. Embora seja aqui descrito um protótipo de fru- tas vermelhas variadas, outros sabores podem ser desenvolvidos, incluindo morango, uva, amora, laranja, limão, maçã, abacaxi, manga, morango- banana, e qualquer outra combinação de sabores de frutas. Na primeira abordagem, o leite de soja é preparado como descri- to na primeira parte do Exemplo 4, utilizando farinha de soja enriquecida com SDA. Ingredientes adicionais, que incluem estabilizantes, flavorizantes e frutas, são adicionados antes da homogeneização. A seguir, será apresen- tada uma formulação usada para o produto:
TABELA 13
SMOOTHIE BASEADO EM SOJA DE FRUTAS VERMELHAS VARIADAS
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A porção da base de soja foi preparada de acordo com o pro- cesso descrito no Exemplo 4. O processamento para o restante do produto é descrito abaixo: TABELA 14
Procedimentos de preparação:
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15. Numerar as garrafas, aplicar os rótulos e refrigerar (refrigerador walk-in PD Warehouse)._
Uma segunda abordagem desenvolvida pela presente invenção é quando um óleo enriquecido com SDA é adicionado a uma formulação que contém proteína de soja isolada. Nessa modalidade, foi desenvolvido um produto de frutas vermelhas variadas, mas pode ser estendido para sabores adicionais, como descrito acima. A seguir, será descrita a formulação básica usada em uma modalidade da presente invenção:
TABELA 15
SMOOTHIE BASEADO EM SOJA DE FRUTAS VERMELHAS VARIADAS
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O produto foi desenvolvido de acordo com os métodos da inven- ção e possui a seguinte formulação:
TABELA 16
Procedimentos de preparação:
1. Pesar previamente todos os ingredientes secos
2. Porção estabilizadora: adicionar água prescrita para a porção estabiliza- dora em um vasilhame de mistura e começar a agitação.
3. Aquecer a água até 43,3 a 48,8°C.
4. Misturar a pectina e o Avicel com uma porção do açúcar seco e adicionar lentamente à água com mistura com cisalhamento elevado. Permitir 5 minu- tos para hidratação. 5. Adicionar o ácido cítrico.
6. Porção de leite de soja: adicionar a água prescrita para a porção de leite de soja em um vasilhame de mistura separado, e começar a agitação.
7. Aquecer a água até 37,7 a 43,33°C.
8. Adicionar a proteína de soja isolada. Misturar bem para dispersar.
9. Adicionar o citrato de potássio, a Iecitina de soja, o sal e o óleo.
10. Combinar a porção estabilizadora e a porção de leite de soja em um va- silhame de mistura maior, com camisa de vapor.
11. Adicionar o purê congelado de morango, a cor e os flavorizantes, e mis- turar até ficarem uniformes.
10. Verificar o pH. pH esperado de 4,2 ± 0,2.
Os produtos resultantes de ambas as abordagens neste exem- plo eram típicos de uma modalidade de smoothie com sabor de fruta da in- venção com um prazo de validade refrigerada de 12 meses, como desenvol- vido pela presente invenção.
Os dados e as técnicas acima demonstram a produção de um smoothie de frutas vermelhas variadas a partir de leite de soja de acordo com os métodos da invenção. De acordo com uma modalidade da invenção, o óleo de SDA da invenção fornece diferenças substanciais em relação a outras amostras que contêm Ômega-3. Os dados são apresentados nas Ta- belas 17-21 e os gráficos que demonstram os resultados estão nas Figuras 6a-6b.
TABELA 17 (1a parte)
SMOOTHIE DE FRUTAS VERMELHAS VARIADAS - RESULTADOS DE ATRIBUTOS
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EXEMPLO 6
PASTAS DO TIPO MARGARINA
TABELA 18
Pasta do tipo margarina com 70% de gordura
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De acordo com uma modalidade preferida da presente invenção, um processo de margarina típico é: a água, o sal, o benzoato de sódio e o sabor de manteiga são misturados em uma fase aquosa. Em relação à Figu- ra 9, um ingrediente de leite como, por exemplo, soro do leite em pó, casei- nato de sódio ou leite em pó, pode ser adicionado à fase aquosa. Os óleos, a Iecitina, os mono e diglicerídeos, as vitaminas e os flavorizantes são mistu- rados e combinados com a fase aquosa e misturados. A emulsão misturada é passada através de uma série de trocadores de calor com a superfície es- covada, misturadores de pino e tubos de repouso (A, B e C unidades respec- tivamente) para obter-se uma temperatura e uma consistência de preenchi- mento desejadas.
EXEMPLO 7
MASSA DE BISCOITO
De acordo com a invenção, o óleo de SDA da invenção também pode ser desenvolvido em produtos alimentícios, incluindo biscoitos. Será fornecida abaixo uma receita para essa utilização.
TABELA 19
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Produção de planta recombinante
Em um método para produzir de forma recombinante uma prote- ína de interesse, um ácido nucleico que codifica uma proteína transgênica pode ser introduzido em uma célula hospedeira. As células hospedeiras re- combinantes podem ser usadas para produzir a proteína transgênica, inclu- indo um ácido graxo desejável como, por exemplo, SDA1 que pode ser se- cretada ou mantida na semente, na vagem ou em outra porção de uma plan- ta-alvo. Um ácido nucleico que codifica uma proteína transgênica pode ser introduzido em uma célula hospedeira, por exemplo, por recombinação ho- móloga. Na maioria dos casos, um ácido nucleico que codifica a proteína transgênica de interesse é incorporado em um vetor de expressão recombi- nante.
Em particular, a presente invenção também dirige-se às plantas transgênicas e células hospedeiras transformadas que compreendem, em uma orientação 5' para 3', um promotor operacionalmente ligado a uma se- qüência de ácidos nucleicos estrutural heteróloga. Seqüências de ácidos nucleicos adicionais também podem ser introduzidas na planta ou na célula hospedeira, juntamente com o promotor e a seqüência de ácidos nucleicos estrutural. Essas seqüências adicionais podem incluir finalizadores da trans- crição 3', sinais de poliadenilação 3', outras seqüências de ácidos nucleicos não traduzidas, seqüências de trânsito ou de direcionamento, marcadores selecionáveis, intensificadores e operadores.
Seqüências de ácidos nucleicos da presente invenção preferi- das, incluindo vetores recombinantes, seqüências de ácidos nucleicos estru- turais, promotores e outros elementos reguladores, estão descritas acima. Os meios para a preparação desses vetores recombinantes são bem- conhecidos na técnica. Por exemplo, métodos para a produção de vetores recombinantes particularmente adequados à transformação de plantas são descritos nas Patentes U.S. Nos 4.940.835 e 4.757.011.
Vetores típicos úteis para a expressão de ácidos nucleicos em células e plantas superiores são bem-conhecidos na técnica e incluem veto- res derivados do plasmídeo indutor de tumor (Ti) de Agrobacterium tumefa- ciens. Outros vetores recombinantes úteis para a transformação de plantas também foram descritos na literatura. A célula hospedeira transformada pode geralmente ser qualquer célula que seja compatível com a presente invenção. A célula hospedeira transformada pode ser uma célula procariótica, mais preferivelmente uma célula bacteriana, ainda mais preferivelmente uma célula de Agrobacterium, Bacillus, Escherichia, Pseudomonas e, mais preferivelmente ainda, é uma célula de Escherichia coli. Alternativamente, a célula hospedeira transforma- da é preferivelmente eucariótica e, mais preferivelmente, uma célula de plan- ta, levedura ou fúngica. A célula de levedura preferivelmente é uma célula de Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe ou Piehia pastoris. A célula de planta preferivelmente é uma célula de alfafa, maçã, banana, cevada, feijão, brócolis, repolho, canola, cenoura, mandioca, aipo, frutas cí- tricas, trevo, coco, café, milho, algodão, pepino, alho, uva, linhaça, melão, aveia, oliva, cebola, palma, ervilha, amendoim, pimenta, batata, rábano, col- za (não canola), arroz, centeio, sorgo, soja, espinafre, morango, beterraba, cana de açúcar, girassol, tabaco, tomate ou trigo. A célula hospedeira trans- formada é mais preferivelmente uma célula de canola, milho ou soja; e, mais preferivelmente ainda, uma célula de soja. A célula de soja é preferivelmente uma linhagem de elite de células de soja. Uma "linhagem de elite" é qual- quer linhagem que resultou de cruzamento e seleção para um desempenho agronômico superior.
A planta transgênica da invenção é preferivelmente uma planta de alfafa, maçã, banana, cevada, feijão, brócolis, repolho, canola, cenoura, mandioca, aipo, frutas cítricas, trevo, coco, café, milho, algodão, pepino, a- Iho, uva, linhaça, melão, aveia, oliva, cebola, palma, ervilha, amendoim, pi- menta, batata, rábano, colza (não canola), arroz, centeio, açafroa, sorgo, soja, espinafre, morango, beterraba, cana de açúcar, girassol, tabaco, toma- te ou trigo. A planta hospedeira transformada é, mais preferivelmente ainda, uma célula de canola, milho ou soja; e, destas, mais preferivelmente ainda, uma planta de soja.
Método para a preparação de plantas transqênicas
A invenção é ainda dirigida a um método para a preparação de plantas transgênicas capazes de produzir uma quantidade substancial de SDA1 que compreendem, em uma direção 5' para 3', um promotor operacio- nalmente ligado a uma seqüência de ácidos nucleicos estrutural heteróloga. A seqüência de ácidos nucleicos compreende a seqüência de SDA1 quando traduzida e transcrita na forma de aminoácido. Outras seqüências de ácidos nucleicos estruturais também podem ser introduzidas na planta, juntamente com o promotor e a seqüência de ácidos nucleicos estrutural. Essas outras seqüências de ácidos nucleicos estruturais podem incluir finalizadores da transcrição 3', sinais de poliadenilação 3', outras seqüências de ácidos nu- cleicos não traduzidas, seqüências de trânsito ou de direcionamento, marca- dores selecionáveis, intensificadores e operadores.
O método geralmente compreende a seleção de uma célula de planta adequada, a transformação da célula de planta com um vetor recom- binante, a obtenção da célula hospedeira transformada e o cultivo da célula hospedeira transformada sob condições eficazes para produzir uma planta.
A planta transgênica da invenção pode geralmente ser qualquer tipo de planta, preferivelmente é uma com valor agronômico, agrícola, orna- mental, econômico ou comercial e, mais preferivelmente, é uma planta de alfafa, maçã, banana, cevada, feijão, brócolis, repolho, canola, cenoura, grão de mamona, aipo, frutas cítricas, trevo, coco, café, milho, algodão, pepino, conífera de Douglas, eucalipto, alho, uva, pinheiro Loblolly, linhaça, melão, aveia, oliva, cebola, palma, pastinaca, ervilha, amendoim, pimenta, álamo, batata, rábano, pinheiro Radiata, colza (não-canola), arroz, centeio, açafroa, sorgo, pinheiro Southern, soja, espinafre, morango, beterraba, cana de açú- car, girassol, Docegum, chá, tabaco, tomate, turfa ou trigo. A planta trans- formada é mais preferivelmente uma célula de canola, milho ou soja; e, mais preferivelmente ainda, uma planta de soja. A planta de soja é preferivelmen- te uma planta de soja de elite. Uma planta de elite é qualquer planta de uma linhagem de elite. Linhagens de elite são descritas acima.
A regeneração, o desenvolvimento e o cultivo de plantas a partir de protoplasto ou explantes de plantas transformadas são plenamente ensi- nados na técnica (Gelvin e outros, "PLANT MOLECULAR BIOLOGY MANU- AL", (1990); e Weissbach e Weissbach, "METHODS FOR PLANT MOLECU- LAR BIOLOGY" (1989)). Nesse método, os transformantes são geralmente cultivados na presença de um meio seletivo que seleciona as células trans- formadas com sucesso e induz a regeneração dos brotos da planta deseja- da. Esses brotos são obtidos tipicamente em até dois a quatro meses.
Os brotos são então transferidos para um meio indutor de raízes adequado que contém o agente seletivo e um antibiótico para evitar o cres- cimento bacteriano. Muitos dos brotos desenvolverão raízes. Essas são en- tão transplantadas para o solo ou para outros meios para permitir a continu- ação do desenvolvimento de raízes. O método, como definido, geralmente irá variar, dependendo da cepa de planta empregada em particular.
De preferência, as plantas transgênicas regeneradas são auto- polinizadas para a geração de plantas transgênicas homozigotas. Alternati- vamente, o pólen obtido das plantas transgênicas regeneradas pode ser cru- zado com plantas não-transgênicas, preferivelmente linhagens endogâmicas de espécies economicamente importantes. Inversamente, o pólen de plantas não-transgênicas pode ser usado para polinizar as plantas transgênicas re- generadas.
A planta transgênica pode passar a seqüência de ácidos nuclei- cos que codifica a proteína de interesse para sua prole. A planta transgênica é preferivelmente homozigota para o ácido nucleico que codifica a proteína de interesse e transmite aquela seqüência para toda a sua prole mediante reprodução sexual. A prole pode ser desenvolvida a partir de sementes pro- duzidas pela planta transgênica. Essas plantas adicionais podem então ser autopolinizadas para gerar uma linhagem de geração verdadeira de plantas.
A prole dessas plantas é avaliada, dentre outras coisas, quanto à expressão gênica. A expressão gênica pode ser detectada por vários mé- todos comuns (por exemplo, western blotting, imonoprecipitação e ELISA).
Seqüências reguladoras incluem aquelas que dirigem a expres- são constitutiva de uma seqüência de nucleotídeos em muitos tipos de célu- las hospedeiras, aquelas que dirigem a expressão da seqüência de nucleotí- deos apenas em certas células hospedeiras (por exemplo, seqüências regu- ladoras tecido-específicas), e aquelas que dirigem a expressão de uma for- ma regulável (por exemplo, apenas na presença um agente de indução). Será observado por aqueles habilitados na técnica que o design do vetor de expressão pode depender de fatores como, por exemplo, a escolha da célula hospedeira a ser transformada, o nível de expressão da proteína transgênica desejada, e semelhantes. Os vetores de expressão de proteína transgênica podem ser introduzidos em células hospedeiras para, desse modo, produzir proteínas transgênicas codificadas por ácidos nucleicos.
Como aqui usados, os termos "transformação" e "transfecção" referem-se a diversas metodologias reconhecidas na técnica para a introdu- ção de ácido nucleico estranho (por exemplo, DNA) em uma célula hospe- deira, incluindo coprecipitação com fosfato de cálcio ou cloreto de cálcio, transfecção mediada por DEAE-dextrana, lipofecção, eletroporação, microin- jeção e transfecção por mediação viral. Métodos adequados para a trans- formação ou transfecção de células hospedeiras podem ser encontrados em Sambrook e outros ("Molecular Cloning: A Laboratory Manual", 2a Edição, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)), e em outros manuais de labo- ratório.
Aqueles versados na técnica podem consultar textos de referên- cia geral para descrições detalhadas de técnicas conhecidas aqui discutidas ou técnicas equivalentes. Esses textos incluem: Ausubel, e outros, "CUR- RENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY" (eds., John Wiley & Sons, N.Y. (1989)); Birren e outros, "GENOME ANALYSIS: A LABORATORY MA- NUAL 1: ANALYZING DNA", (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1997)); Clark, "PLANT MOLECULAR BIOLOGY: A LABORATORY MANUAL", (Clark, Springer-Verlag, Berlin, (1997)); e Maliga e outros, "ME- THODS IN PLANT MOLECULAR BIOLOGY", (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1995)). Esses textos podem, evidentemente, tam- bém ser referidos na produção ou utilização de um aspecto da invenção. Entende-se que qualquer um dos agentes da invenção pode ser substanci- almente purificado e/ou ser biologicamente ativo e/ou recombinante. Redução de ácido linoleico
Sabe-se que ácidos graxos Ômega-3 e Omega-6 são ácidos graxos que são necessários na nutrição humana. Ácidos graxos Omega-6 incluem ácido Iinoleico e seus derivados. Esses óleos são considerados es- senciais à nutrição humana, pois esses ácidos graxos devem ser consumi- dos na dieta, já que os seres humanos não conseguem produzir outras gor- duras dietéticas ou nutrientes, e eles não podem ser armazenados no corpo. Ácidos graxos desse tipo fornecem energia e também são componentes de células nervosas, membranas celulares, e são convertidos em substâncias similares a hormônio conhecidas como prostaglandinas.
Em relação à figura 1, o ácido Iinoleico é um ácido graxo poli- insaturado com 18 carbonos de comprimento que contém duas ligações du- plas. Sua primeira ligação dupla ocorre no sexto carbono a partir da extremi- dade ômega, o que o classifica como um óleo Ômega-6. Como o ácido Iino- Ieico é absorvido e metabolizado no corpo humano, ele é convertido em um ácido graxo derivado, ácido gama-iinoleico (GLA), que é convertido em ácido di-homo-gama-linoleico (DGLA) e ácido araquidônico (AA). O DGLA e o AA são então convertidos em dois tipos de prostaglandinas por adição de duas moléculas de carbono e remoção de moléculas de hidrogênio. Há três famí- lias de prostaglandinas, PGE1, PGE2 e PGE3. DGLA é convertido em PGE1, enquanto AA é convertido em PGE2. PGE3 é feito pela conversão de ácidos graxos Ômega-3.
Nos seres humanos, o consumo excessivo de óleos Ômega-6 em relação ao consumo de óleos Ômega-3 pode levar a uma superprodução de prostaglandinas produtoras de inflamação (PGE2) e a uma escassez de prostaglandinas antiinflamatórias (PGE1 e PGE2). Isso, por sua vez, pode levar a vários outros problemas de saúde. Além disso, o consumo diário de ácidos graxos Ômega-6 por consumidores pode ser excessivo em função da presença de ácidos graxos Ômega-6 nos óleos vegetais de cozinha comuns e nos alimentos processados atualmente no mercado. A proporção de con- sumo de ácido graxo de Ômega-6 em relação ao Ômega-3 pode freqüente- mente atingir 20:1 nas dietas ocidentais. Para se obter uma proporção mais desejável, uma modalidade da presente invenção permite a produção au- mentada de SDA, ao mesmo tempo em que reduz a produção de LA em uma planta transgênica de semente oleaginosa. O óleo resultante contém níveis menores de LA1 ao mesmo tempo em que permite a produção de quantidades significativas de SDA, e pode ser usado em diversos papéis na indústria de alimentos, desde óleos de cozinha até como ingrediente alimen- tício.
Elevação dos níveis de tocoferol
Os tocoferóis são antioxidantes naturais e nutrientes essenciais na dieta encontrados em óleos de plantas. Esses antioxidantes protegem as membranas celulares e outras partes lipossolúveis do corpo como, por e- xemplo, colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL), de danos. Pa- rece que eles também protegem o corpo contra doenças cardiovasculares e certas formas de câncer, e demonstraram efeitos de estimulação imunológi- ca. De acordo com a presente invenção, aumentos na presença de tocofe- róis no óleo de plantas de sementes oleaginosas transgênicas serão benéfi- cos aos consumidores do óleo. Em relação aos objetivos da presente inven- ção, concentrações aumentadas de tocoferóis presentes em várias de suas modalidades serão benéficas como parte de um produto de óleo e também podem reduzir a oxidação do SDA.
Embora a presente invenção tenha sido descrita com algum de- talhe como forma de ilustração e exemplo com o objetivo de facilitar sua compreensão, ficará evidente para aqueles habilitados na técnica que po- dem ser efetuadas algumas alterações e modificações. Portanto, a descrição e os exemplos não devem ser considerados como Iimitantes do escopo da invenção, que é delineada pelas reivindicações em anexo.
Consequentemente, deve-se entender que as modalidades da invenção aqui apresentadas que fornecem uma fonte de SDA aprimorada para utilização em produtos alimentícios não se limitam aos exemplos espe- cíficos. Esses exemplos são ilustrativos da aplicabilidade geral da presente invenção para a ampla gama de itens alimentícios. Com a inclusão de SDA, esses itens também podem ser feitos com qualidades sensoriais iguais ou melhores, aumentando, ao mesmo tempo, significativamente a qualidade nutricional do alimento produzido para consumo humano. Além disso, os exemplos aqui apresentados são meramente ilus- trativos da aplicação dos princípios da invenção. Ficará evidente a partir da descrição apresentada anteriormente que poderiam ser feitas alterações nas formas, nos métodos de uso e nas aplicações dos elementos da planta deri- vada para aplicações não relacionadas diretamente ao consumo humano. Nesse campo, está incluído o uso de SDA derivado de plantas para o de- senvolvimento de rações com características nutricionais aprimoradas para uso nas indústrias de produção animal, geralmente incluindo, sem limitação: produção de carne bovina; produção de aves; produção de carne de porco; e/ou aquicultura. Esses usos variantes podem ser adotados sem se afastar do espírito da invenção ou do escopo das reivindicações em anexo. Literatura citada e incorporada por referência:
Estas referências são especificamente incorporadas por referên- cia relevante aos procedimentos suplementares ou a outros detalhes que possam fornecer.
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Claims (101)

1. Produto alimentício que compreende ácido estearidônico que exibe prazo de validade prolongado contra degradação do sabor em que o referido ácido estearidônico é derivado de uma planta transgênica.
2. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos 5% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
3. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
4. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
5. Produto de acordo com a reivindicação 1, que exibe ainda estabilidade aumentada.
6. Produto de acordo com a reivindicação 1, que compreende ainda tocoferóis.
7. Produto de acordo com a reivindicação 6, que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
8. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
9. Produto de acordo com a reivindicação 2, que compreende ainda proteína de soja.
10. Produto de acordo com a reivindicação 2, em que o referido produto alimentício compreende menos do que cerca de 40% de LA.
11. Produto de acordo com a reivindicação 1, que compreende ainda o fato de que o referido ácido estearidônico é parte de uma fração de óleo de uma planta de semente oleaginosa.
12. Produto de acordo com a reivindicação 3, em que a refe- rida planta de fração de semente oleaginosa é composta por 2% a 50% do referido óleo de planta de semente oleaginosa após a semente e/ou o frag- mento produzido pela planta ser triturado para liberar a referida fração de óleo.
13. Produto de acordo com a reivindicação 3, em que a referida planta de semente oleaginosa é composta por pelo menos 20% do referido óleo de planta de semente oleaginosa após a semente e/ou o fragmento produzido pela planta ser triturado para liberar a referida fração de óleo.
14. Produto de acordo com a reivindicação 1, que ainda com- preende: a) um ingrediente contendo umidade; e b) estabilizador suficiente para formar uma emulsão, de tal forma que o referido produto alimentício seja uma emulsão estável.
15. Produto de acordo com a reivindicação 6, que compreende adicionalmente um agente quelante.
16. Produto de acordo com a reivindicação 7, que compreende adicionalmente um componente lácteo.
17. Produto de acordo com a reivindicação 6, 7 ou 8, em que o referido produto alimentício é uma maionese.
18. Produto de acordo com a reivindicação 6, em que o referido ingrediente contendo umidade é um componente lácteo.
19. Produto de acordo com a reivindicação 10, em que o referido componente lácteo compreende entre 25% - 80% do peso do referido produ- to.
20. Produto de acordo com a reivindicação 11, em que o referido produto alimentício é um iogurte.
21. Produto de acordo com a reivindicação 11, em que o referido produto alimentício é congelado.
22. Produto de acordo com a reivindicação 13, em que o referido produto alimentício é um sorvete.
23. Produto de acordo com a reivindicação 11, em que o referido produto alimentício é uma margarina.
24. Produto de acordo com a reivindicação 6, em que a referida <- emulsão é do tipo óleo-em-água e em que a referida fase aquosa compre- ende 10% a 80% por peso do referido produto alimentício.
25. Produto de acordo com a reivindicação 16, em que a referida fase aquosa compreende água.
26. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 17, em que o referido produto alimentício é um molho de saladas.
27. Produto alimentício de acordo com as reivindicação 12, 14, -15 ou 18, em que o referido produto alimentício é estável quando refrigera- do.
28. Produto de acordo com a reivindicação 1 sem nenhum tra- tamento por aquecimento para a preparação do produto alimentício.
29. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que a referida planta transgênica é uma planta de cultivo.
30. Produto de acordo com a reivindicação 1 em que a referida planta transgênica é uma planta de semente oleaginosa.
31. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que a referida planta transgênica é selecionada do grupo que consiste em: canola, milho, linhaça e soja.
32. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 1, em que o referido produto alimentício é selecionado do grupo que consiste em: pro- dutos assados, produtos derivados do leite, pastas, margarinas, produtos esportivos, barras nutritivas e fórmulas para bebês.
33. Produto alimentício animal contendo ácido estearidônico que exibe validade prolongada do produto, em que o ácido estearidônico é deri- vado de uma planta transgênica e em que o referido produto alimentício po- de ser utilizado como ração animal para animais de criação e/ou aquicultura. -26. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é gado. -27. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é um suíno. -28. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é uma ave de criação. 29. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é uma galinha. 30. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é salmão. 31. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é truta. 32. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é bagre. 33. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é tilápia.
34. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é um crustáceo.
35. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é cavala.
36. Produto de acordo com a reivindicação 33, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos 5% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
37. Produto de acordo com a reivindicação 33, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
38. Produto de acordo com a reivindicação 33, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
39. Produto de acordo com a reivindicação 33 que exibe ainda estabilidade aumentada.
40. Produto de acordo com a reivindicação 33 que compreende ainda tocoferóis.
41. Produto de acordo com a reivindicação 40 que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
42. Produto de acordo com a reivindicação 33, que compreende ainda o fato de que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a -80% do referido produto alimentício.
43. Produto de acordo com a reivindicação 42 que compreende ainda proteína de soja.
44. Produto de acordo com a reivindicação 42 em que o referido produto alimentício compreende menos do que cerca de 40% de LA.
45. Produto contendo ácido estearidônico que exibe estabilidade aumentada e prazo de validade prolongado contra degradação do sabor, em que o ácido estearidônico é derivado de uma planta transgênica e é utilizado como um nutracêutico.
46. Nutracêutico contendo ácido estearidônico que exibe prazo de validade prolongado contra degradação do sabor, em que o ácido estea- ridônico é derivado de uma planta transgênica.
47. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos 5% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
48. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspon- dente de EPA.
49. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspon- dente de EPA.
50. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46 que exibe ainda estabilidade aumentada.
51. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46 que compre- ende ainda tocoferóis.
52. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 51 que compre- ende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
53. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46 que compre- ende ainda o fato de que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimentício.
54. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 53 que compre- ende ainda proteína de soja.
55. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 53, em que o referido produto alimentício compreende menos do que cerca de 40% de LA.
56. Método de produção de um produto selecionado do grupo que consiste em um produto alimentício, um produto alimentício médico, um suplemento dietético, uma fórmula para bebês e uma substância farmacêuti- ca, em que o produto é suplementado com ácido estearidônico.
57. Método de acordo com a reivindicação 56, que compreende ainda a diminuição do nível de ácidos graxos diferentes do ácido estearidô- nico.
58. Método de acordo com a reivindicação 56 que compreende ainda a suplementação com tocoferóis.
59. Método de acordo com a reivindicação 56, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
60. Método de acordo com a reivindicação 59 que compreende ainda proteína de soja.
61. Método de acordo com a reivindicação 56, em que o referido produto exibe prazo de validade prolongado.
62. Método de acordo com a reivindicação 56, em que o referido ácido estearidônico é derivado de uma soja transgênica.
63. Método de acordo com a reivindicação 59, que compreende ainda a suplementação com ácidos graxos selecionados do grupo de ALA, DHA, EPA, ou ácido oleico.
64. Método de suplementação de uma ração animal que com- preende a combinação de ácido estearidônico derivado de uma planta trans- gênica com nutrientes de rações.
65. Método de acordo com a reivindicação 64, em que os nutri- entes de rações são selecionados do grupo que consiste em proteínas, lipí- deos, carboidratos, vitaminas, minerais e ácidos nucleicos.
66. Método de acordo com a reivindicação 64 que compreende ainda a suplementação com tocoferóis.
67. Método de acordo com a reivindicação 64, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
68. Método de acordo com a reivindicação 67 que compreende ainda proteína de soja.
69. Método de acordo com a reivindicação 64, em que o referido produto exibe prazo de validade prolongado.
70. Método de acordo com a reivindicação 64, em que o referido ácido estearidônico é derivado de uma soja transgênica.
71. Método para fornecer a um ser humano ou a um animal um suplemento dietético enriquecido com ácido estearidônico que compreende ácido estearidônico derivado de uma planta transgênica em uma forma con- sumível ou usável por seres humanos ou animais.
72. Produto da reivindicação 71, em que o referido prazo de va- lidade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de -10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
73. Produto de acordo com a reivindicação 71, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
74. Produto de acordo com a reivindicação 71 que exibe ainda estabilidade aumentada.
75. Produto de acordo com a reivindicação 71 que compreende ainda tocoferóis.
76. Produto de acordo com a reivindicação 75 que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
77. Produto de acordo com a reivindicação 71, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido suplemento die- tético.
78. Produto de acordo com a reivindicação 72 que compreende ainda proteína de soja.
79. Ingrediente alimentício que compreende um óleo de soja transgênica, em que o referido óleo de soja transgênica compreende pelo menos cerca de 0,2% de SDA e, no máximo, cerca de 40% de LA com base no peso total de ácidos graxos ou derivados destes na composição, e em que o referido óleo de soja compreende pelo menos cerca de 400 ppm de tocoferóis.
80. Produto de acordo com a reivindicação 79, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
81. Produto de acordo com a reivindicação 79, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
82. Produto de acordo com a reivindicação 79 que exibe ainda estabilidade aumentada.
83. Produto de acordo com a reivindicação 79 que compreende ainda tocoferóis.
84. Produto de acordo com a reivindicação 83 que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
85. Produto de acordo com a reivindicação 79 em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
86. Produto de acordo com a reivindicação 80 que compreende ainda proteína de soja.
87. Ingrediente alimentício de acordo com a reivindicação 86, em que o óleo de soja transgênica compreende pelo menos um agente estabili- zante selecionado do grupo que consiste em ácido cítrico, t-butil- hidroquinona, ascorbil palmitato, propil gaiato, e combinações dos mesmos.
88. Ingrediente alimentício de acordo com a reivindicação 86, em que o óleo de soja transgênica exibe estabilidade aumentada em compara- ção com um segundo óleo de soja transgênica que compreende um nível similar de SDA, em que o segundo óleo de soja transgênica não compreen- de estabilizantes adicionados e compreende menos do que cerca de 400 ppm de tocoferóis.
89. Ingrediente alimentício de acordo com a reivindicação 86, em que o referido óleo de soja transgênica ainda compreende pelo menos 10% de SDA e, no máximo, cerca de 35% de LA com base no peso total de áci- dos graxos ou derivados dos mesmos na composição, e em que o referido óleo de soja compreende pelo menos cerca de 400 ppm de tocoferóis.
90. Ingrediente alimentício de acordo com a reivindicação 86, em que o referido óleo de soja transgênica exibe prazo de validade prolongado em comparação com uma concentração correspondente de DHA.
91. Óleo de planta transgênica em que o referido óleo de planta transgênica compreende pelo menos cerca de 0,2% de SDA e menos do que cerca de 10% de LA com base no peso total de ácidos graxos ou deri- vados dos mesmos na composição, e em que o referido óleo compreende pelo menos cerca de 400 ppm de tocoferóis.
92. Produto de acordo com a reivindicação 91, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
93. Produto de acordo com a reivindicação 91, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
94. Produto de acordo com a reivindicação 91 que exibe ainda estabilidade aumentada.
95. Produto de acordo com a reivindicação 91 que compreende ainda tocoferóis.
96. Produto de acordo com a reivindicação 95 que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
97. Produto de acordo com a reivindicação 92, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
98. Produto de acordo com a reivindicação 92 que compreende ainda proteína de soja.
99. Ingrediente alimentício de acordo com a reivindicação 91, em que o referido óleo de soja transgênica exibe prazo de validade prolongado em comparação com uma concentração correspondente de DHA.
100. Composição de acordo com a reivindicação 1, em que a composição é selecionada do produto alimentício selecionado do grupo que consiste em: a) farelo de soja; b) farinha de soja; c) farinha de soja sem gordura; d) leite de soja; e) leite de soja seco por spray; f) concentrado de proteína de soja; g) concentrado de proteína de soja texturizado; h) proteína de soja hidrolisada; i) isolado de proteína de soja; e, j) tofu seco por spray.
101. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 1, em que o produto alimentício é uma bebida líquida ou uma mistura de bebida em pó que compreende ainda sacarose, carbonato de cálcio, flavorizante, sal, goma e vitamina.
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