BRPI0806365A2 - composto, composição farmacêutica, processo de preparação de um composto, método de controle de vegetação indesejada, método de inibição da atividade de fosfatase vegetal, uso do composto - Google Patents
composto, composição farmacêutica, processo de preparação de um composto, método de controle de vegetação indesejada, método de inibição da atividade de fosfatase vegetal, uso do composto Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0806365A2 BRPI0806365A2 BRPI0806365-6A BRPI0806365A BRPI0806365A2 BR PI0806365 A2 BRPI0806365 A2 BR PI0806365A2 BR PI0806365 A BRPI0806365 A BR PI0806365A BR PI0806365 A2 BRPI0806365 A2 BR PI0806365A2
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- formula
- compound
- substituted
- alkyl
- original document
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/08—Bridged systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
- A01N47/08—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having one or more single bonds to nitrogen atoms
- A01N47/10—Carbamic acid derivatives, i.e. containing the group —O—CO—N<; Thio analogues thereof
- A01N47/16—Carbamic acid derivatives, i.e. containing the group —O—CO—N<; Thio analogues thereof the nitrogen atom being part of a heterocyclic ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
- A61K31/203—Retinoic acids ; Salts thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
COMPOSTO, COMPOSIçAO FARMACêUTICA, PROCESSO DE PREPARAçãO DE UM COMPOSTO, MéTODO DE CONTROLE DE VEGETAçãO INDESEJADA, MéTODO DE INIBIçãO DA ATIVIDADE DE FOSFATASE VEGETAL, USO DO COMPOSTO. A presente invenção fornece compostos que possuem a estrutura que pode ser utilizada para o tratamento de tumores.
Description
COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO, MÉTODO DE CONTROLE DE VEGETAÇÃO INDESEJADA, MÉTODO DE INIBIÇÃO DA ATIVIDADE DE FOSFATASE VEGETAL, MÉTODO DE PREVENÇÃO OU TRATAMENTO DE UMA INFECÇÃO FÚNGICA EM UM PACIENTE E MÉTODO DE TRATAMENTO DE PACIENTES QUE SOFREM DE CÂNCER
Ao longo do presente pedido, são indicadas algumas publicações. As citações completas dessas publicações podem ser encontradas imediatamente antes das reivindicações. Os relatórios descritivos dessas publicações são integralmente incorporados ao presente por meio de referência ao presente pedido, a fim de descrever mais completamente o estado da técnica a que se refere a presente invenção.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Retinóides, metabólitos de vitamina A, foram examinados terapeuticamente contra uma série de tumores, incluindo gliomas (Yung et al (1996)). Co-repressor receptor nuclear (N-CoR) é intimamente associado ao receptor retinóide e liberado mediante união de ligantes ao receptor (Bastien et al (2004)). Evitando-se a ação de proteína fosfatase-1 e proteína fosfatase-2A, as antifosfatases aumentam a forma fosforilada de N-CoR e promovem a sua translocalização citoplasmática subsequente (Hermanson et al (2002)).
0 inibidor de fosfatase, Cantaridina, possui atividade antitumor contra cânceres humanos do fígado (hepatomas) e do trato gastrointestinal superior, mas é tóxico para o trato urinário (Wang, 1989).
A publicação de um relatório dando conta que cantaridina age como um inibidor de fosfatase de proteínas despertou um interesse mais geral em compostos com este tipo de estrutura química (Li e Casida, 1992). Descobriu-se anteriormente que o congênere mais simples e o seu produto de hidrólise (disponível comercialmente como o herbicida Endothal) são hepatotóxicos (Graziani e Casida, 1997). Estudos de união demonstraram que a ação de certos homólogos de cantaridina é direta sobre fosfatase-2A de proteína e indireta sobre fosfatase-1 de proteína (Honkanen et al, 1993; Li et al, 1993).
Dos congêneres conhecidos deste tipo de composto, apenas o original, cantaridina, e seu derivado bis(normetila), norcantaridina, observaram qualquer uso como substância de droga anticancerígena e apenas norcantaridina é utilizada como agente antineoplástico (Tsauer et al, 1997).
Apesar destes sucessos, poucos compostos deste tipo foram selecionados pela atividade antitumorosa ou citotóxica. Atualmente, existe uma necessidade significativa de desenvolvimento de inibidores de fosfatases de proteína que sejam mais ativas, menos tóxicas e apresentem ação mais específica que as substâncias conhecidas mencionadas acima.
RESUMO DA INVENÇÃO Composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 3</formula>
em que:
a união α está presente ou ausente;
R1 e R2 são, independentemente entre si, H, O" ou OR9, em que R9 é H, alquila, alquenila, alquinila ou arila; ou R1 e R2 juntos são =0;
R3 e R4 são diferentes entre si e cada qual é OH, O", OR9, SH, S" OU SR9; <formula>formula see original document page 4</formula>
em que X é O, S, NRi0 ou N+R10R10;
em que cada Ri0 é independentemente alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro quando Ri e R2 forem =0;
<formula>formula see original document page 4</formula>
-CH2CN, -CH2CO2Rii, -CH2COR11, -NHR11 ou -NH+(R11)2, em que R11 é alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais substituído ou não substituído, ou H;
R5 e R6 são, independentemente entre si, Η, OH; ou R5 e R6, tomados em conjunto, são =0; e
R7 e R8 são, independentemente entre si, H, F, Cl, 15 BR7 SO2Ph, CO2CH3 ou SR12, em que R12 é H, arila ou alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído;
ou um sal, enantiômero ou zwitteríon do composto.
Composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 4</formula> a união α está presente ou ausente;
R9 está presente ou ausente e, quando presente, é H, alquila, alquenila, alquinila ou fenila; e
X é O7 NR10 ou NH+R10, em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila ou arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro;
<formula>formula see original document page 5</formula>
-CH2CN, -CH2CO2R12 ou -CH2COR12, em que R12 é H ou alquila;
ou um sal, zwitteríon ou enantiômero do composto. Composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 5</formula>
em que:
A e B são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3, CN, COR14 ou SR14;
em que R14 é H, arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; X é O, NH OU S;
Z é O, S, SR15, NH, NR15, CH2OH ou CH2OR15, em que R15 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; e
YeW são, independentemente entre si, CH2, CHOH, C=O ou C=S;
ou um sal do composto. A presente invenção contempla adicionalmente um método de controle de vegetação indesejada que compreende o contato da vegetação ou seu ambiente com uma quantidade eficaz como herbicida dos compostos conforme a presente invenção.
A presente invenção contempla ainda um método de inibição da atividade de fosfatase de plantas que compreende o contato da planta ou seu ambiente com uma quantidade eficaz como herbicida dos compostos conforme a presente invenção.
A presente invenção contempla ainda um método de prevenção ou tratamento de infecções fúngicas em pacientes, que compreende a administração ao paciente de uma quantidade eficaz dos compostos conforme a presente invenção.
A presente invenção contempla ainda um método de tratamento de câncer em pacientes, que compreende a administração ao paciente de uma quantidade eficaz dos compostos conforme a presente invenção.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
Figura 1: curva logarítmica de linhagem celular de glioma U373 tratada com Endothal (End), tioanidrido Endothal (ET), norcantaridina (nor-Can) ou Composto 100. O aumento das dosagens demonstra maior inibição do crescimento. Barras de erros indicam desvio padrão.
Figura 2: inibição da linhagem de células de glioma U3 73 tratadas com Endothal (End) ou Composto 100 ou cada qual com e sem ácido retinóico totalmente trans (ATRA) por sete dias. O tratamento individual com Endothal e Composto 100 exibe inibição modesta do crescimento. Combinação de End ou Composto 100 com ATRA exibe redução sinérgica do crescimento celular. Barras de erro indicam desvio padrão.
Figura 3: inibição do crescimento de linhagem de células de câncer renal, UMRC por tioanidrido de Endothal (ET), Endothal (End), ácido retinóico totalmente trans (ATRA), Tricostatina A (TSA) e norcantaridina (nor-Can) por sete dias. As barras de erro indicam desvio padrão.
Figura 4: inibição do crescimento de linhagem de células de glioma U3 73 por tioanidrido Endothal (ET), Endothal (End), ácido retinóico totalmente trans (ATRA), tricostatina A (TSA) e norcantaridina (nor-Can) por sete dias. Tratamento individual com tioanidrido Endothal exibiu a maior inibição do crescimento. Barras de erro indicam desvio padrão.
Figura 5: inibição de crescimento de linhagem de células de câncer de mama, MCF-7 por meio de inibição de UMRC por tioanidrido Endothal (ET), Endothal (End), ácido retinóico totalmente trans (ATRA), tricostatina A (TSA) e norcantaridina (nor-Can) por sete dias. Tratamento com doses individuais de Endothal, ATRA e TSA exibiu inibição do crescimento. Barras de erro indicam desvio padrão.
Figura 6: curva logarítmica de linhagem de células de glioma U373 tratada com 1-(3-exocarbõxi-7-oxabiciclo [2.2.1]heptano-2-exocarbonil)-4 -etilpiperazina (Composto 105) após três dias. O aumento das dosagens demonstra uma maior inibição do crescimento.
Figura 7: curva logarítmica de linhagem de células GBM humanas U373 tratada com 1-(3-exocarbõxi-7-oxabiciclo [2.2.1] heptano-2-exocarbonil)-4-etilpiperazina (Composto 105) após sete dias. 0 aumento das dosagens demonstra maior inibição do crescimento.
Figura 8: inibição do crescimento de linhagem de células GBM humanas U373 tratada com Composto 105 por sete dias. 0 gráfico exibe a inibição do crescimento ao longo de sete dias nas dosagens a seguir: 1, 2, 5, 10, 50 e 100 μΜ de composto 105, 10 μΜ de composto 100 e uma dosagem controle. Figura 9: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 105 ao longo de sete dias.
Figura 10: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 102 ao longo de sete dias.
Figura 11: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 101 ao longo de sete dias.
Figura 12: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 103 ao longo de sete dias.
Figura 13: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 104 ao longo de sete dias.
Figura 14: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 106 ao longo de sete dias.
Figura 15: inibição do crescimento da linhagem de células de glioma U373 pelo Composto 100 ao longo de sete dias.
Figura 16: inibição do crescimento da linhagem de células de meduloblastoma DAOY pelo Composto 100 ao longo de sete dias.
Figura 17: efeito do composto 100 sobre o volume de tumor de xenoenxerto U87 ao longo de 26 dias.
Figura 18: efeito do composto 100 e do Composto 102 sobre o volume de tumor de xenoenxerto DAOY ao longo de 23 dias.
Figura 19A: representação gráfica e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células MDA-MB-231 ao Composto 100 e Composto 102 utilizando um teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19B: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células HT-29 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19C: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células NCI-H460 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19D: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células NCI-H522 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19E: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células NCI-H69 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19F: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células GXF-209 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19G: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células HepG2 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19H: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células OVCAR-3 ao composto 100 e ao composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 191: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células PANC-I ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19J: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células DU-145 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias. Figura 19K: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células LNCAP ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média + desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19L: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células HL-60 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19M: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células K-562 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidos em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
Figura 19N: representação gráfica (I) e adequação de curvas com valor IC50 (II) de dados obtidos após a exposição de células MOLT-4 ao Composto 100 e ao Composto 102 utilizando o teste CellTiter-Glo. Os efeitos de 10 μΜ de doxorubicina que foi utilizada como controle positivo também são exibidas em I. Cada ponto representa a média ± desvio padrão de amostras pelo menos em três cópias.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 12</formula>
em que a união α está presente ou ausente; R1 e R2 são, independentemente entre si, H, O" ou OR9, em que R9 é H, alquila, alquenila, alquinila ou arila; ou Ri e R2 juntos são =O; R3 e R4 são diferentes entre si e cada qual é OH, O", OR9, SH, S- , SR9;
<formula>formula see original document page 12</formula>
em que X é O, S, NR10 ou N+R10R10, em que cada R10 é independentemente alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila ou arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro quando Ri e R2 forem =O;
<formula>formula see original document page 12</formula>
-CH2CN, -CH2CO2R11, -CH2COR11, -NHR11 ou -NH+(R11)2, em que cada Rii é independentemente alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais substituído ou não substituído, OU H; R5 e R6 são, independentemente entre si, H, OH ou R5 e R6, tomados em conjunto, são =0; e R7 e R8 são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3, CN, COR12 ou SR12, em que R12 é H, arila ou alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído ou um sal, enantiômero ou zwitteríon do composto.
Uma realização conforme a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 13</formula>
A presente invenção fornece ainda a composição do presente em que R1 e R2 juntos são =0; R3 é 0" ou OR9, em que R9 é H, metila, etila ou fenila; R4 é:
<formula>formula see original document page 13</formula>
em que X é 0, S, NR10 ou N+R10R10;
em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro quando R1 e R2 forem =0; <formula>formula see original document page 14</formula>
-CH2CN, -CH2CO2R11, -CH2COR11, -NHR11, -NH+(R11)2 em que Rn é alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais substituído ou não substituído, ou H;
-R5 e R6, tomados em conjunto, são =0; e R7 e R8 são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3, CN, CORi2 ou SRi2, em que R12 é H ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído.
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R3 é O".
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 14</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 104):
<formula>formula see original document page 14</formula> Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 104E):
<formula>formula see original document page 15</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 106):
<formula>formula see original document page 15</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 106E):
A presente invenção fornece adicionalmente a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 15</formula> em que X é O, NRi0 ou N+R10R10, em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído;
<formula>formula see original document page 16</formula>
A presente invenção fornece adicionalmente a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 16</formula>
em que Ri0 é H, alquila, alquila C2-Ci2 substituído, alquenila, alquenila C4-Ci2 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro quando R1 e R2 forem =0;
<formula>formula see original document page 16</formula>
-CH2CN, -CH2CO2R11, -CH2COR11, -NHR11 ou NH+(R11)2, em que R11 é H ou alquila.
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 16</formula> A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 17</formula>
em que R10 é:
<formula>formula see original document page 17</formula>
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 17</formula>
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 17</formula>
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R4 é:
<formula>formula see original document page 17</formula>
A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R5 e R6 juntos são =O. A presente invenção fornece ainda a composição do presente, em que R7 e R8 são independentemente H.
A presente invenção também fornece um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 18</formula>
em que a união α está presente ou ausente; R9 está presente ou ausente e, quando presente, é H, alquila C1-C10, alquenila C2-C10 ou fenila; e X é O, S, NR10 ou N+R10R10, em que cada R10 é independentemente alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila e arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro;
<formula>formula see original document page 18</formula>
-CH2CO2R11, -CH2COR11, -CH2CN ou -CH2CH2R16, em que R11 é H ou alquila e em que Ri6 é qualquer substituinte que é um precursor de um intermediário aziridinila ou um sal, enantiômero ou zwitteríon do composto.
Em uma realização, a presente invenção fornece a estrutura:
<formula>formula see original document page 18</formula> em que a união α está presente ou ausente; X é O, S, NRio ou N+R10R10/ em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4- C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila e arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro;
<formula>formula see original document page 19</formula>
-CH2CO2R11, -CH2COR11, -CH2CN ou -CH2CH2R16, em que R11 é H ou alquila e em que R16 é qualquer substituinte que é um precursor de um intermediário aziridinila;
ou um sal, enantiômero ou zwitteríon do composto.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que X é O ou NH+R10, em que R10 é H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila ou arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro;
<formula>formula see original document page 19</formula>
A presente invenção fornece ainda uma realização em que X é O.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que X é -CH2CH2R16, em que R16 é qualquer substituinte que é um precursor de um intermediário de aziridinila.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que X é NH+R10, em que R10 é H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro;
-CH2CO2R11, -CH2COR1I, -CH2CN ou -CH2CH2R167 em que R11 é H ou alquila e em que R16 é qualquer substituinte que é um precursor de um intermediário aziridinila.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que R10 é metila.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que R10 é:
A presente invenção fornece ainda uma realização em que R10 é:
A presente invenção fornece ainda uma realização em que R10 é etila.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que R10 é ausente.
Em uma outra realização, a presente invenção fornece a estrutura: em que R9 é presente ou ausente e, quando presente, é H, alquila, alquenila, alquinila ou fenila; e X é O, NRi0 ou N+R10R10, em que cada Ri0 é independentemente alquila, alquila C2-Ci2 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro;
<formula>formula see original document page 21</formula>
-CH2CO2R11, -CH2COR11 ou -CH2CN, em que Rii é H ou alquila;
ou um sal, zwitteríon ou enantiômero do composto.
Em uma outra realização da presente invenção, R10 é ciclopropila.
Em uma outra realização, a presente invenção fornece a estrutura:
<formula>formula see original document page 21</formula>
em que X é 0 ou NH+R10, em que R10 está presente ou ausente e, quando presente, é alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais é substituído ou não substituído;
<formula>formula see original document page 21</formula>
-CH2CO2R11, -CH2COR11 ou -CH2CN, em que R11 é H ou alquila. Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 100):
<formula>formula see original document page 22</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 102):
<formula>formula see original document page 22</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 101): Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 103):
<formula>formula see original document page 23</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 105): <formula>formula see original document page 24</formula>
Em uma outra realização, a presente invenção fornece a estrutura:
<formula>formula see original document page 24</formula>
em que X é O7 NRi0 ou NH+Ri0;
em que R9 é alquila, alquenila, alquinila ou arila;
e
em que Rxo está presente ou ausente e, quando presente, é alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais substituído ou não substituído;
<formula>formula see original document page 24</formula>
-CH2CO2R11, -CH2CORii ou -CH2CN, em que R11 é H ou alquila.
Em uma outra realização da presente invenção, Ri0 é ciclopropila.
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 111):
<formula>formula see original document page 24</formula> Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 104E):
<formula>formula see original document page 25</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 100E):
<formula>formula see original document page 25</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 102E):
<formula>formula see original document page 25</formula> <formula>formula see original document page 26</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 101E):
<formula>formula see original document page 26</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 103E):
<formula>formula see original document page 26</formula> Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 105E):
<formula>formula see original document page 27</formula>
Em uma realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 111E):
<formula>formula see original document page 27</formula>
A presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 106):
<formula>formula see original document page 27</formula>
A presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 106E): <formula>formula see original document page 28</formula>
A presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 108):
<formula>formula see original document page 28</formula>
A presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 107) :
<formula>formula see original document page 28</formula>
A presente invenção fornece um composto que possui a estrutura (Composto 107E):
<formula>formula see original document page 28</formula>
Em uma outra realização, a presente invencao fornece um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 28</formula> em que AeB são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3, COR14, SR14, em que R14 é H ou arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; X é O, NH OU S; Z é O, S, SR15, NH, NRi5, CH2OH; CH2OR15 em que Ri5 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; e Y e W são, independentemente entre si, CHOH CH2, C=S ou C=O, ou um sal do composto.
Em uma realização da presente invenção, YeW são, independentemente entre si, CH2 ou C=S.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que X é 0; ZéS; eYeW são, independentemente, C=S.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que A e B são independentemente F.
A presente invenção fornece ainda uma realização em que A é H; e B é F.
Em uma outra realização, a presente invenção fornece um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 29</formula>
em que A é F ou SR14, em que R14 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; e B é F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3 ou SRi4, em que R14 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído.
Em uma realização adicional, a presente invenção fornece as estruturas: <formula>formula see original document page 30</formula>
A presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende os compostos conforme a presente invenção e um veículo farmaceuticamente aceitável.
A presente invenção também fornece um processo de elaboração de um composto que compreende a reação de um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 30</formula>
com um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 31</formula>
para formar um composto que possui a estrutura a seguir:
<formula>formula see original document page 31</formula>
reação de um composto que possui a estrutura acima com hidrogênio na presença de um catalisador para formar:
<formula>formula see original document page 31</formula>
A presente invenção também fornece um processo de fabricação de um composto que compreende a reação de um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 31</formula>
com um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 32</formula>
para formar um composto que possui a estrutura a seguir:
<formula>formula see original document page 32</formula>
reação de um composto que possui a estrutura acima com hidrogênio na presença de um catalisador para formar:
<formula>formula see original document page 32</formula>
A presente invenção também fornece um processo de fabricação de um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 32</formula>
que compreende:
-dissolução de um composto que possui a estrutura a seguir:
<formula>formula see original document page 32</formula> em benzeno e adição de um composto que possui a
estrutura:
<formula>formula see original document page 33</formula>
à temperatura ambiente para produzir um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 33</formula>
e recristalização do composto produzido a partir de um solvente quente.
A presente invenção também fornece um processo de fabricação de um composto que compreende:
dissolução de um composto que possui a estrutura a seguir:
<formula>formula see original document page 33</formula>
em benzeno e adição de um composto que possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 33</formula>
à temperatura ambiente para produzir um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 34</formula>
recristalização do composto produzido a partir de um solvente quente.
Em uma realização, o solvente é dimetilformamida (DMF) ou etanol.
A presente invenção fornece um método de tratamento de um paciente que sofre de um tumor que sobre-expressa N-CoR que compreende a administração ao paciente de um ou mais dos compostos conforme a presente invenção, isoladamente ou em combinação com um ou mais ligantes receptores retinoides ou um ou mais ligantes de histona desacetilase, ou ambos, em cada caso em uma quantidade eficaz para o tratamento do paciente.
Em uma realização, o composto é selecionado a partir do Composto 100 e do Composto 105.
No método conforme a presente invenção, o ligante histona desacetilase pode ser um inibidor, tal como o inibidor histona desacetilase de HDAC-3 (histona desacetilase-3). O ligante histona desacetilase pode também ser selecionado a partir do grupo que consiste de 2-amino-8- oxo-9,10-epoxidecanoíla, 3-(4-aroil-lH-pirrol-2-il)-N- hidróxi-2-propenamida, Composto APHA 8, apicidina, butirato de arginina, ácido butírico, depsipeptídeo, depudecina, HDAC- 3, bis-hidroxamida de ácido m-carboxicinâmico, N-(2- aminofenil)-4-[N-(piridin-3- ilmetoxicarbonil)aminometil]benzamida, MS 275, oxanfiatin, butirato de fenila, piroxamida, escriptaid, sirtinol, butirato de sódio, ácido subérico bis-hidroxâmico, ácido suberoiIanilido hidroxâmico, tricostatina A, trapoxin A, trapoxin B e ácido valpróico.
Os compostos conforme a presente invenção podem ser utilizados em combinação com compostos que inibem a enzima histona desacetilase (HDAC). Essas enzimas HDAC modificam por meio de pós-tradução histonas (Patente Norte-Americana Publicada n° 2004/0197888, Armour et al). Histonas são grupos de proteínas que se associam com DNA em células eucarióticas para formar estruturas compactadas denominadas cromatina. Esta compactação permite a localização de uma enorme quantidade de DNA no interior do núcleo de uma célula eucariótica, mas a estrutura compacta de cromatina restringe o acesso de fatores de transcrição ao DNA. A acetilação das histonas reduz a compactação da cromatina, o que permite que fatores de transcrição unam-se ao DNA. Desacetilação, catalisada por histona desacetilases (HDACs), aumenta a compactação de cromatina, de forma a reduzir a acessibilidade do fator de transcrição a DNA. Inibidores de histona desacetilases evitam, portanto, a compactação de cromatina, permitindo que fatores de transcrição unam-se a DNA e aumentem a expressão dos genes.
Nos métodos conforme a presente invenção, uma determinação do percentual de células com N-CoR no citoplasma com relação ao percentual de células com N-CoR no núcleo é representativo da razão entre a quantidade de células não diferenciadas e a quantidade de células menos diferenciadas em um dado tecido.
No método conforme a presente invenção, os tumores que sobre-expressam N-CoR podem incluir glioblastoma multiforme, câncer de mama, câncer colo-retal, câncer do pulmão de células pequenas ou câncer do ovário.
A presente invenção também fornece um método de inibição do crescimento de um tumor que sobre-expressa N-CoR em pacientes, que compreende a administração ao paciente de um ou mais dos compostos conforme a presente invenção, isoladamente ou em combinação com um ou mais ligantes receptores de retinóide, um ou mais ligantes de histona desacetilase ou ambos e, em cada caso, em quantidades eficazes para afetar N-CoR, de forma a induzir, com isso, a diferenciação de células do N-CoR que sobre-expressa tumores e inibir o crescimento do tumor no paciente.
Em uma realização, o composto é selecionado a partir do Composto 100 e do Composto 102.
Nos métodos conforme a presente invenção, uma determinação do percentual de células com N-CoR no citoplasma com relação ao percentual de células com N-CoR no núcleo é representativa da razão entre a quantidade de células mais diferenciadas e a razão de células menos diferenciadas em um dado tecido.
No método conforme a presente invenção, tumores que sobre-expressam N-CoR podem incluir glioblastoma multiforme, câncer de mama, câncer colo-retal, câncer do pulmão de células pequenas ou câncer do ovário.
A presente invenção contempla ainda um método de controle de vegetação indesejada que compreende o contato da vegetação ou seu ambiente com uma quantidade eficaz como herbicida dos compostos conforme a presente invenção.
A presente invenção contempla ainda um método de inibição da atividade de fosfatase de plantas que compreende contato da planta ou seu ambiente com uma quantidade eficaz como herbicida dos compostos conforme a presente invenção.
A presente invenção contempla ainda um método de prevenção ou tratamento de infecções fúngicas em um paciente que compreende a administração ao paciente de uma quantidade eficaz dos compostos conforme a presente invenção. A presente invenção contempla ainda um método de tratamento de câncer em pacientes que compreende a administração ao paciente de uma quantidade eficaz dos compostos conforme a presente invenção.
A presente invenção contempla ainda um método de tratamento de pacientes que sofrem de câncer de mama, câncer do cõlon, câncer do pulmão de células grandes, adenocarcinoma do pulmão, câncer do pulmão de células pequenas, câncer do estômago, câncer do fígado, adenocarcinoma do ovário, carcinoma do pâncreas, carcinoma da próstata, leucemia promilocítica, leucemia mielocítica crônica ou leucemia linfocitica aguda que compreende a administração ao paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos conforme a presente invenção, de forma a tratar o paciente.
A presente invenção contempla ainda o uso de pró- drogas que são convertidas in vivo nos compostos conforme a presente invenção (vide, por exemplo, R. B. Silverman, 1992, The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, Academic Press, Capítulo 8, cujo conteúdo integral é incorporado ao presente como referência). Essas pró-drogas podem ser utilizadas para alterar a biodistribuição (tal como para permitir compostos que tipicamente não entrariam em um local reativo) ou a farmacocinética do composto.
Em uma realização da presente invenção, o composto possui a estrutura:
<formula>formula see original document page 37</formula>
Em uma realizacao da presente invencao, o composto possui a estrutura: <formula>formula see original document page 38</formula>
Da forma utilizada no presente, "zwitteríon" indica um composto que é eletricamente neutro, mas conduz cargas positivas e negativas formais sobre átomos diferentes. Zwitteríons são polares, possuem alta solubilidade em água e possuem baixa solubilidade na maior parte dos solventes orgânicos.
Aziridinas são compostos orgânicos que compartilham o grupo funcional aziridina que é um heterociclo com três membros com um grupo amina e dois grupos metileno. Precursores de intermediários aziridinila incluem compostos conhecidos dos técnicos no assunto que fornecem rapidamente intermediários de arizidinila sob condições apropriadas.
Os compostos descritos na presente invenção encontram-se em forma racêmica ou como enantiômeros individuais. Os enantiômeros podem ser separados utilizando métodos conhecidos, tais como os descritos, por exemplo, em Pure and Applied Chemistry 69, 1469-1474 (1997), IUPAC.
Da forma utilizada no presente, "sobre-expressão de N-CoR" indica que o nível de correpressor receptor nuclear (N-CoR) expresso nas células do tecido testado é elevado em comparação com os níveis de N-CoR conforme medido em células saudáveis normais do mesmo tipo de tecido sob condições análogas. O correpressor receptor nuclear (N-CoR) conforme a presente invenção pode ser qualquer molécula que se una ao domínio de união de ligantes do receptor de hormônio da tireóide unido por DNA (T3R) e receptor de ácido retinóico (RAR) (Patente Norte-Americana n° 6.949.624, Liu et al). Exemplos de tumores que sobre-expressam N-CoR podem incluir glioblastoma multiforme, câncer de mama (Myers et al), câncer colo-retal (Giannini e Cavallini), carcinoma do pulmão de células pequenas (Waters et al) ou câncer do ovário (Havrilesky et al).
"Solvente", da forma utilizada no presente, destina-se a incluir compostos tais como hexanos, benzeno, tolueno, dietil éter, clorofórmio, cloreto de metileno, acetato de etila, 1,4-dioxano, água, THF, acetona, acetonitrila, DMF, DMSO, ácido acético, n-butanol, isopropanol, n-propanol, etanol, metanol, ácido fórmico, tetracloreto de carbono, benzenotiol, clorobenzeno, ciclo- hexanotiol, 1-dietilaminoetanol, dicloreto de etileno, etileno glicol, xileno, 1,1,2,2-tetracloroetano, fenol, ácido acético, 1-butanol, 2-butanol, 2-butanona, diglima, dimetil éter, dioxano, éter de petróleo, (NMP) .W-metil-2- pirrolidinona, heptano, glicerina, HMPA (hexametilfósforo triamida), MTBE (metil t-butil éter), nitrometano, piridina, 1-propanol, 2-propanol e trietilamina.
Certas realizações dos compostos descritos podem conter um grupo funcional básico, tal como amino ou alquilamino, e são, portanto, capazes de formar sais farmaceuticamente aceitáveis com ácidos farmaceuticamente aceitáveis ou conter um grupo funcional ácido e são, portanto, capazes de formar sais farmaceuticamente aceitáveis com bases. Os compostos do presente podem apresentar-se, portanto, em uma forma de sal. Da forma utilizada no presente, um "sal" é um sal dos compostos do presente que tenha sido modificado por meio da elaboração de sais de ácidos ou bases dos compostos. O sal pode ser farmaceuticamente aceitável. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas sem limitar-se a sais de ácidos orgânicos ou minerais de resíduos básicos, tais como aminas; sais álcali ou orgânicos de resíduos ácidos, tais como fenóis. Os sais podem ser elaborados utilizando um ácido orgânico ou inorgânico. Esses sais de ácidos são cloretos, brometos, sulfatos, nitratos, fosfatos, sulfonatos, formatos, tartaratos, maleatos, malatos, citratos, benzoatos, salicilatos, ascorbatos e similares. Sais de fenolato são os sais de metais alcalino-terrosos, sódio, potássio ou lítio. A expressão "sal farmaceuticamente aceitável", neste particular, indica os sais de adição de bases ou ácidos orgânicos e inorgânicos relativamente não tóxicos de compostos conforme a presente invenção. Esses sais podem ser preparados in si tu durante o isolamento final e purificação dos compostos conforme a presente invenção, ou por meio de reação separada de um composto purificado conforme a presente invenção na sua forma de ácido livre ou de base livre com uma base ou ácido orgânico ou inorgânico apropriado e isolamento do sal formado desta maneira. Os sais representativos incluem os sais de bromidrato, cloridrato, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, naftilato, mesilato, gluco-heptonato, lactobionato, laurilsulfonato e similares. Para uma descrição de possíveis sais, vide, por exemplo, Berge et al (1977), Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sei. 66: 1-19.
Da forma utilizada no presente, "quantidade terapeuticamente eficaz" designa uma quantidade suficiente para tratar um paciente que sofre com uma doença (tal como tumores que sobre-expressam N-CoR) ou para aliviar um sintoma ou uma complicação associada à doença.
Da forma utilizada no presente, "eficaz como herbicida" indica uma quantidade suficiente para prejudicar o crescimento das plantas, particularmente por meio da inibição da atividade de fosfatase 2A da planta. Da forma utilizada no presente, "tratamento" indica a redução da velocidade, suspensão ou reversão do progresso de uma doença, particularmente tumores que sobre-expressam N- CoR.
Da forma utilizada no presente, "alquila" destina- se a incluir grupos hidrocarbonetos alifáticos saturados de cadeia linear e ramificada que contêm o número especificado de átomos de carbono. Desta forma, C1-Cn como em "alquila C1- Cn" é definido como incluindo grupos que contêm 1, 2,..., n-1 ou η carbonos em uma disposição linear ou ramificada e, especificamente, inclui metila, etila, propila, butila, pentila, hexila e assim por diante. Uma realização pode ser alquila C1-C12. "Alcóxi" representa um grupo alquila conforme descrito acima ligado por meio de uma ponte de oxigênio.
O termo "alquenila" indica um radical hidrocarboneto não aromático, linear ou ramificado, que contém pelo menos uma união dupla carbono-carbono e até o número máximo possível de uniões duplas carbono-carbono não aromáticas pode estar presente. Desta forma, alquenila C2-Cn é definido como incluindo grupos que contêm 1, 2,..., n-1 ou η carbonos. "Alquenila C2-C6", por exemplo, indica um radical alquenila que contém dois, três, quatro, cinco ou seis átomos de carbono e pelo menos uma união dupla carbono-carbono e até, por exemplo, três uniões duplas carbono-carbono no caso de um alquenila C6, respectivamente. Os grupos alquenila incluem etenila, propenila, butenila e ciclo-hexenila. Conforme descrito acima com relação a alquila, a parte linear, ramificada ou cíclica do grupo alquenila pode conter uniões duplas e pode ser substituída caso seja indicado um grupo alquenila substituído. Uma realização pode ser alquenila C2-C12.
O termo "alquinila" indica um radical hidrocarboneto linear ou ramificado, que contém pelo menos uma união tripla carbono-carbono e até a quantidade máxima possível de uniões triplas carbono-carbono não aromáticas pode estar presente. Desta forma, alquinila C2-Cn é definido como incluindo grupos que contêm 1, 2,..., n-1 ou n carbonos. "Alquinila C2-C6", por exemplo, indica um radical alquinila que contém dois ou três átomos de carbono e uma união tripla carbono-carbono, ou que contém quatro ou cinco átomos de carbono e até duas uniões triplas carbono-carbono, ou que contém seis átomos de carbono e até três uniões triplas carbono-carbono. Os grupos alquinila incluem etinila, propinila e butinila. Conforme descrito acima com relação a alquila, a parte linear ou ramificada do grupo alquinila pode conter uniões triplas e pode ser substituída caso seja indicado um grupo alquinila substituído. Uma realização pode ser um alquinila C2-Cn.
Da forma utilizada no presente, "arila" destina-se a indicar qualquer anel de carbono monocíclico ou bicíclico estável com até dez átomos em cada anel, em que pelo menos um anel é aromático. Exemplos desses elementos arila incluem fenila, naftila, tetra-hidronaftila, indanila, bifenila, fenantrila, antrila ou acenaftila. Em casos em que o substituinte arila é bicíclico e um anel é não aromático, compreende-se que a ligação é realizada por meio do anel aromático. Os arilas substituídos incluídos na presente invenção incluem substituição em qualquer posição apropriada com aminas, aminas substituídas, alquilaminas, hidróxis e alquil-hidróxis, em que a porção "alquila" das alquilaminas e alquil-hidróxis é um alquila C2-Cn conforme definido acima. As aminas substituídas podem ser substituídas com grupos alquila, alquenila, alquinila ou arila, conforme definido acima.
Os substituintes alquila, alquenila, alquinila e arila podem ser substituídos ou não substituídos, a menos que definido especificamente em contrário. Alquila (C1-C6) pode ser substituído, por exemplo, com um ou mais substituintes selecionados a partir de OH, oxo, halogênio, alcóxi, dialquilamino ou heterociclila, tal como morfolinila, piperidinila e assim por diante.
Nos compostos conforme a presente invenção, grupos alquila, alquenila e alquinila podem ser adicionalmente substituídos por meio da substituição de um ou mais átomos de hidrogênio por grupos não de hidrogênio descritos no presente até o máximo possível. Estes incluem, mas sem limitações, halo, hidróxi, mercapto, amino, carbóxi, ciano e carbamoíla.
O termo "substituído", da forma utilizada no presente, indica que uma dada estrutura possui um substituinte que pode ser um grupo alquila, alquenila ou arila, conforme definido acima. O termo deve ser considerado como incluindo diversos graus de substituição por um substituinte designado. Quando forem descritas ou reivindicadas diversas porções substituintes, o composto substituído pode ser substituído independentemente por uma ou mais das porções substituintes descritas ou reivindicadas, isoladamente ou em conjunto. Por independentemente substituído, indica-se que os (dois ou mais) substituintes podem ser idênticos ou diferentes.
Da forma utilizada no presente, "administração" de um agente pode ser realizada utilizando qualquer dos diversos métodos ou sistemas de fornecimento bem conhecidos dos técnicos no assunto. A administração pode ser realizada, por exemplo, por via parenteral, intraperitoneal, intravenosa, intra-arterial, transdérmica, sublingual, intramuscular, retal, transbucal, intranasal, lipossômica, inalatória, vaginal, intraocular, por administração local, subcutânea, por via intra-adiposa, intra-articular, intratecal, em um ventrículo cerebral, intraventricular, intratumoral, na parênquima cerebral ou intraparenquimal.
Os sistemas de administração a seguir, que empregam uma série de veículos farmacêuticos utilizados rotineiramente, podem ser utilizados, mas são apenas representativos dos diversos sistemas possíveis idealizados para administração de composições conforme a presente invenção.
Sistemas de fornecimento de drogas injetáveis incluem soluções, suspensões, géis, microesferas e injetáveis poliméricos e podem compreender excipientes tais como agentes de alteração da solubilidade (tais como etanol, propileno glicol e sacarose) e polímeros (tais como policaprilactonas e PLGAs).
Sistemas implantáveis incluem varas e discos e podem conter excipientes tais como PLGA e policaprilactona.
Sistemas de fornecimento oral incluem pastilhas e cápsulas. Estes podem conter excipientes tais como aglutinantes (por exemplo, hidroxipropilmetilcelulose, polivinil pirilodona, outros materiais celulósicos e amido) , diluentes (tais como lactose e outros açúcares, amido, fosfato dicálcico e materiais celulósicos), agentes desintegrantes (tais como polímeros de amido e materiais celulósicos) e agentes lubrificantes (tais como estearatos e talco).
Sistemas de fornecimento transmucosa incluem emplastros, pastilhas, supositórios, pessários, géis e cremes e podem conter excipientes tais como solubilizantes e amplificadores (tais como propileno glicol, sais de bile e aminoácidos) e outros veículos (tais como polietileno glicol, ésteres de ácidos graxos e derivados e polímeros hidrofílicos, tais como hidroxipropilmetilcelulose e ácido hialurônico). Sistemas de fornecimento dérmico incluem, por exemplo, géis aquosos e não aquosos, cremes, emulsões múltiplas, microemulsões, lipossomos, unguentos, soluções aquosas e não aquosas, loções, aerossóis, pós e bases de hidrocarboneto e podem conter excipientes tais como solubilizantes, amplificadores da permeação (tais como ácidos graxos, ésteres de ácidos graxos, álcoois graxos e aminoácidos) e polímeros hidrofílicos (tais como policarbofil e polivinilpirrolidona). Em uma realização, o veículo farmaceuticamente aceitável é um lipossomo ou um amplificador transdérmico.
Soluções, suspensões e pós para sistemas de fornecimento reconstituíveis incluem veículos tais como agentes formadores de suspensão (tais como gomas, zantanas, celuloses e açúcares), umectantes (tais como sorbitol), solubilizantes (tais como etanol, água, PEG e propileno glicol), tensoativos (tais como lauril sulfato de sódio, Spans, Tweens e cetil piridina), conservantes e antioxidantes (tais como parabéns, vitaminas EeCe ácido ascórbico), agentes antiaglomeração, agentes de revestimento e agentes quelantes (tais como EDTA).
Compreende-se que substituintes e padrões de substituição sobre os compostos conforme a presente invenção podem ser selecionados por um técnico comum no assunto para fornecer compostos que sejam quimicamente estáveis e que possam ser facilmente sintetizados por meio de métodos conhecidos na técnica, bem como os métodos descritos abaixo, a partir de materiais de partida facilmente disponíveis. Caso um substituinte seja, por si próprio, substituído por mais de
O um grupo, compreende-se que esses diversos grupos podem estar sobre o mesmo carbono ou sobre carbonos diferentes, desde que resulte uma estrutura estável. Descobrimos que uma proteína que possui maior expressão de glioblastoma multi forme (GBMs) em comparação com cérebro normal é correpressor receptor nuclear (N-CoR), um regulador do conjunto de células haste neurais normais. A expressão de N-CoR em GBM foi confirmada por meio de imuno- histoquímica e Western Blot.
N-CoR é expresso no núcleo de células haste neurais (NSCs) (Hermanson et al (2002) ) . Após a fosforilação dependente de Aktl quinase/fosfatidilinositol-3-OH quinase, N-CoR desloca-se para o citoplasma e gera diferenciação astrocítica de NSCs. A retenção nuclear de N-CoR é, portanto, essencial para a manutenção de NSCs no estado não diferenciado (Hermanson et al). De forma análoga a CD133+ NSC encontrado no interior do cérebro em desenvolvimento, células haste de tumores do cérebro (BTSC) que contêm CD133 foram identificadas em GBM (Uchida et al (2000) ; e Singh et al (2003)). BTSCs são capazes de proliferação, autorrenovação e diferenciação. BTSCs, mas não apenas células de tumores diferenciadas por CD133, são capazes de recapitular tumores mediante transplante de xenoenxerto (Singh et al (2004)).
Retinoides, metabólitos de vitamina A, foram examinados terapeuticamente em uma série de tumores, incluindo gliomas (Yung et al (1996)). N-CoR é intimamente associado ao receptor de retinoide e liberado mediante união de ligantes ao receptor (Bastien et al (2004)). Formulamos a hipótese de que um efeito de retinoides sobre gliomas malignos pode ser a indução de diferenciação por meio da união de retinoides ao receptor de retinoides, seguida por dissociação do complexo de receptor de retinoides e N-CoR e deslocamento de N-CoR para o citoplasma. Esta idéia explicaria a observação anterior de aumento da expressão de GFAP em uma linhagem de células de glioma (U343 MG-A) tratadas com retinoides (Rudka et al (1988)). Para testar isso, direcionamos a dois locais diferentes, individual ou simultaneamente, dentro do processo de N-CoR por meio de tratamento da linhagem de células GBM U343 MG-A com 50 μΜ de ácido retinóico (RA) e/ou 10 nM de ácido ocadaico (OA), um inibidor de fosfatase 1 de proteína e fosfatase 2A de proteína. Evitando-se a ação de fosfatase 1 de proteína e fosfatase 2A de proteína, ácido ocadaico aumenta a forma fosforilada de N-CoR e promove a sua deslocação citoplasmática subsequente (Hermanson et al (2002)).
A linhagem celular U343 MG-A é disponível por meio do Banco de Tecidos do Centro de Pesquisa de Tumores Cerebrais da Universidade da Califórnia em São Francisco (UCSF) (Universidade da Califórnia, São Francisco, Health Sciences West Building, San Francisco, Califórnia 94143- 0520). Além disso, as linhagens de células U343 e U87 são disponíveis comercialmente por meio da EPO GmbH, Robert- Róssle-Str. 10, 13092 Berlin-Buch, Alemanha.
Diversas moléculas que possuem atividade anti-PP2A sinergizam-se com ácidos retinóicos na inibição do crescimento de células de tumores que sobre-expressam N-CoR in vitro. O grupo mais eficaz de inibidores de fosfatase que se sinergizam com ácidos retinóicos e foram avaliados são análogos do antigo agente terapêutico, Mylabris, derivado dos corpos moídos do besouro da bolha, em que o principal agente ativo é cantaridina, conhecido como potente inibidor de PP2A (Wang, 1989; Peng et al, 2002).
Cantaridina possui atividade antitumorosa contra cânceres humanos do fígado (hepatomas) e do trato gastrointestinal superior, mas é tóxico para o trato urinário (Wang, 1989). Norcantaridina, uma cantaridina demetilada, mantém atividade antitumorosa de cantaridina contra hepatomas e cânceres do estômago e esôfago, mas possui pouca ou nenhuma toxicidade do trato urinário. Norcantaridina também estimula a produção de glóbulos brancos do sangue em pacientes e camundongos, um fenômeno não compreendido mecanicamente, mas um efeito farmacológico de beneficio potencial como um agente anticancerigeno (Wang et al, 1986; Wang, 1989).
A publicação de um relatório que cantaridina age como um inibidor da fosfatase de proteínas causou um interesse mais geral em compostos com este tipo de estrutura química (Li e Casida, 1992). Anteriormente, havia sido descoberto que o congênere mais simples e seu produto de hidrólise (disponível comercialmente como o herbicida Endothal) são hepatóxicos (Graziano e Casida, 1997). Os alvos primários no fígado aparentemente são as fosfatases de proteína PP2A e PPl, em que todos os compostos exibem valores ED50 em nível micromolar. Estudos de união demonstraram que a ação de certos homólogos de cantaridina são diretos sobre PP2A e indiretos sobre PPl (Honkanen et al, 1993; Li et al, 1993). Fosfatase PPlB é afetada apenas em níveis milimolares desses compostos, enquanto a enzima PP2C não é influenciada.
No passado, diversos análogos de cantaridina haviam sido sintetizados e avaliados para determinar a atividade antifosfatase e pela sua capacidade de inibir o crescimento de células cancerígenas em cultivo (Sakoff e McClusky, 2004; Hart et al, 2004) . Algumas das moléculas de norcantaridina modificadas e avaliadas anteriormente inibiram o crescimento de diversas linhagens de células de tumores humanos. A atividade de análogos de norcantaridina contra células de tumores que sobre-expressam N-CoR ou a atividade de norcantaridinas combinada com outros potenciais agentes antitumores não foi analisada. Estudos adicionais incluíram dezesseis "norcantaridinas modificadas" avaliadas para determinar a atividade contra quatro linhagens de células de tumores humanos, que incluem ovário, rim, colo-retal e pulmão, bem como uma linhagem de leucemia de camundongo. Nenhuma era tão ativa quanto agentes isolados tais como cantaridina ou norcantaridina e nenhuma foi avaliada para determinar a atividade em combinação com um outro agente antitumor (McCluskey et al, Pedido de Patente Norte-Americano Publicado n° 2006/0030616, 2006).
Uma série diferente de análogos de cantaridina havia sido sintetizada anteriormente e avaliada como pesticidas e para atividade antitumores contra linhagens de células de câncer. Quarenta e três análogos de Endothal e cantaridina foram desenvolvidos e tiveram determinada sua atividade como herbicidas e sua letalidade a camundongos (Matsuzawa et al, 1987). Demonstrou-se que tioanidrido Endothal é um herbicida mais potente que Endothal, mas foi tóxico para o fígado de camundongos (Matsuzawa et al, 1987; Kawamura et al, 1990).
Mais recentemente, descobriu-se que tioanidrido Endothal é um agente ativo contra PP2A e PPl in vivo (Erdodi et al, 1995). Endothal e anidrido Endothal, como cantaridina, inibem a atividade de PP2A e, até certo ponto, a atividade de PPl (Erdodi et al, 1995). No fígado, o alvo principal aparentemente é PPl. Em fibroblastas, apenas tioanidido Endothal causou notáveis alterações morfológicas, ao contrário de cantaridina e Endothal (Erdodi et al, 1995). Acredita-se que a maior atividade de tioanidrido Endothal in vivo esteja relacionada com a sua maior lipofilicidade, o que resulta em aumento da difusão ao longo da plasmalema (Essers et al, 2001). Uma publicação mais recente descreveu a síntese dos análogos mono e difluor de Endothal e também os anidridos correspondentes, mas nenhum dado farmacológico acompanhou esse trabalho sintético (Essers et al, 2001).
Dos congêneres conhecidos deste tipo de composto, apenas o parental, cantaridina e seu derivado bis(normetila), norcantaridina, tiveram qualquer uso como substâncias de drogas anticancerígenas e apenas norcantaridina é utilizada como agente antineoplástico (Tsauer et al, 1997).
Na pesquisa do desenvolvimento de novas substâncias de drogas nesta área, descobrimos que é essencial desenvolver inibidores que possuam maior especificidade, especialmente para as enzimas que exibam alta atividade contra os processos de reprodução de células de câncer. Alta especificidade também sustenta a possibilidade de evitar alvos importantes para a função celular normal. Do ponto de vista das características físicas de qualquer substância de droga recém desenvolvida, ela deve possuir predominantemente boa permeabilidade de membrana (ou seja, possui um valor Iog P de duas a quatro unidades).
Os compostos descritos no presente possuem um efeito antagonista sobre fosfatase 2A e fosfatase 1. Confirmamos que pelo menos os Compostos 100, 105 e 102 são eficazes na inibição do crescimento de células de tumores que sobre-expressam N-CoR. Os Compostos 100 e 105 são vantajosos sobre outros homólogos de cantaridina, pois eles existem na forma de zwitteríons, o que os torna hidrossolúveis e estáveis sob pH ácido, que são características desejáveis para drogas oralmente eficazes. 0 composto 102 é solúvel em lipídios, o que fornece maior capacidade que os Compostos 100 e 105 de cruzar a barreira entre o sangue e o cérebro. Isso é especialmente importante ao tratar-se tumores tais como glioblastoma multiforme.
O Composto 100, norcantaridina (nor-Can), Endothal (End) e tioanidrido Endothal (ET) foram avaliados para determinar a sua capacidade de inibir o crescimento de GBMs de forma dependente de dosagem in vivo conforme exibido na
Figura 1.
A partir de plotagens gráficas da linhagem celular de glioblastoma multiforme GBM U373 (disponível por meio do Instituto Nacional de Disfunções Neurológicas e Unidade de Patogênese Molecular de Apoplexia, Building 10, Room 5 D37, Institutos Nacionais de Saúde, 900 Rockville Pike, Bethesda, Maryland 20892) em função da exposição a diferentes doses da droga por sete dias, foi estimada a concentração de cada composto que inibiu a proliferação de células de tumores do cérebro em 50% (IC50). As IC50s expressas em micromolaridade (μΜ) foram: 2,5, 3,0, 12,0 e 15,0 para tioanidrido Endothal, Composto 100, norcantaridina e Endothal, respectivamente, conforme exibido na Figura 1. Conforme exibido, em base molar, o Composto 100 foi um inibidor potente de GBMs in vitro.
Em combinação com antifosfatases, retinoides inibem sinergicamente a proliferação de glioblastoma multiforme. Afirma-se que a sinergia (potencialização) da atividade inibidora de duas drogas em combinação está presente quando o percentual de sobrevivência na presença de duas drogas é maior que a soma dos percentuais de sobrevivência das duas drogas utilizadas isoladamente nas mesmas doses na combinação.
A atividade inibidora do Composto 10 0 foi adicionalmente avaliada em combinação com retinoides, bem como individualmente. Conforme exibido na Figura 2, a combinação de Composto 100 com ácido retinóico totalmente trans (ATRA) demonstrou uma redução sinérgica do crescimento celular.
O percentual de sobrevivência esperado de células U373 expostas à combinação de Atra e End é de 50% (77% por ATRA x 65% por End = 5 0%), enquanto a sobrevivência observada foi de 32%. O percentual esperado de sobrevivência na presença da combinação de ATRA e Composto 100 é de 60% (77% por ATRA χ 78% por Composto 100 = 60%) , enquanto a sobrevivência observada foi de 53%. Para determinar se existe especificidade de tipo de tumor das propriedades inibidoras de inibidores de PP2A, ácido retinóico e tricostatina A, medimos os seus efeitos inibidores como agentes isolados contra a linhagem GBM U373, uma linhagem de câncer de mama, MCF-7 (obtida por meio de ATCC) e uma linhagem de células de câncer renal, UMRC (UMRC obtida por meio do Dr. Zhuang, NINDS, NIH do Programa de Suporte à Pesquisa Intramural, SAIC, Instituto Nacional do Câncer, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento do Câncer Frederick.
A linhagem de células de câncer dos rins, UMRC (Figura 3) foi menos sensível que a linhagem de tumor do cérebro, U373 (Figura 4), enquanto a linhagem de câncer de mama, MCF-7 (Figura 5) foi tão sensível quanto U373 a ácido retinóico totalmente trans, tioanidrido Endothal, norcantaridina, Endothal e tricostatina A. Existe alguma especificidade de tipo celular dessas drogas para GBMs. A atividade das drogas contra células MF-7 indica que os regimes que estão sendo desenvolvidos para o tratamento de tumores do cérebro provavelmente também são úteis contra câncer de mama e outros tumores que sobre-expressam N-CoR.
Demonstramos que o Composto 100 possuirá efeitos inibidores similares no tratamento de câncer de mama e outros tumores que sobre-expressam N-CoR devido às similaridades estruturais entre o Composto 100 e Endothal, bem como seus efeitos similares no tratamento de glioblastoma multiforme.
Endothal também é conhecido como um desfoliante ativo e potente herbicida de contato utilizado em muitas situações agrícolas. Ele é considerado eficaz como dissecante pré-colheita e como herbicida pré-emergência (Crafts, 1953).
Endothal, norcantaridinas e cantaridina são todos inibidores bem conhecidos de fosfatase de proteína de mamíferos, bem como potentes herbicidas (Matsuzawa et al, 1987). O mecanismo por meio do qual Endothal e outros homólogos exercem a sua potente atividade herbicida não foi estudado extensamente, apesar do uso disseminado de Endothal internacionalmente na agricultura. Dever-se-á observar que Endothal é hidrossolúvel, ao contrário de cantaridina e norcantaridina.
Considerou-se que a atividade de Endothal como herbicida de contato e desfoliante é relacionada à conhecida toxicidade irritante do seu composto parental, norcantaridina. Estudos mais recentes sugerem, entretanto, que a atividade herbicida de Endothal pode ser uma função principalmente da sua atividade anti-proteínas de plantas (PP2A). Li et al (1993) demonstraram que cantaridina e Endothal inibem PP2A e PPl de folha de espinafre e inibem a ativação de nitrato reductase pela luz na folha de espinafre intacta, um processo mediado por PP2A. Smith et al (1994), demonstram que os inibidores de fosfatase de proteína não relacionados estruturalmente ácido ocadaico e caliculina A são potentes inibidores sob concentrações nanomolares do crescimento de certas plantas. A atividade de ácido ocadaico e caliculina A sugere fortemente que a atividade de Endothal como herbicida deve-se à sua atividade antifosfatase.
Baskin e Wilson (1997) exibiram inibidores de proteína serino-treonina fosfatases que incluem cantaridina, que inibe a organização de microtúbulos de plantas. Ayaydin et al (2 000) demonstram que Endothal inibiu a atividade de PP2A, causando alteração da divisão celular em células de alfafa cultivadas. Eles observaram que Endothal era permeável às células.
Como Endothal, os Compostos 100 e 105 são hidrossolúveis. Mas, ao contrário de Endothal, que é um diácido, os Compostos 100 e 105 podem ser zwitteríons. 0 fato de que os compostos descritos no presente tais como o Composto 100 são mais potentes que Endothal contra o crescimento de células de câncer de mamíferos pode dever-se à maior permeabilidade celular dos zwitteríons com relação ao diácido. Os Compostos 100 e 105 são herbicidas mais potentes em base molar devido à melhor penetração celular. Os Compostos 100 e 105, como zwitteríons, também são menos tóxicos para distribuidores e aplicadores do herbicida, bem como para o público exposto inadvertidamente ao agente. Os Compostos 100 e 105 não possuem o caráter ácido de Endothal.
Os compostos do presente, incluindo os Compostos 100 e 105, são, portanto, herbicidas úteis, comercialmente viáveis e mais seguros com relação à exposição humana e ao meio ambiente.
DETALHES EXPERIMENTAIS MÉTODOS E MATERIAIS Preparação de anidrido Endothal
<formula>formula see original document page 54</formula>
Esquema 1
Conforme exibido no Esquema 1, preparamos anidrido Endothal por meio da adição de anidrido acético (0,5 ml) (4) a uma suspensão de Endothal (18 6 mg) (3) em benzeno (3 ml) e a mistura foi agitada em seguida até que o sólido houvesse entrado em solução (duas horas). A solução foi aquecida a vácuo para remover o benzeno e o resíduo foi aquecido em seguida a 8 0 0C por trinta minutos. Adicionou-se em seguida éter de petróleo (5 ml) e o anidrido desejado cristalinizou- se espontaneamente. 0 produto foi removido por meio de filtragem e lavado com um pouco de éter de petróleo para gerar o produto puro (85 mg) que foi utilizado imediatamente nas duas preparações a seguir.
Preparação de Endothal 4-metilpiperazina monoamida (EMPM) (Composto 100):
<formula>formula see original document page 55</formula>
Anidrido Endothal (85 mg) (5), preparado conforme descrito acima, foi dissolvido em benzeno (2 ml) e N- metilpiperazina (60 mg) (6) foi adicionada em uma parcela à temperatura ambiente. Quase imediatamente, surgiu um cristalino branco. A mistura foi mantida à temperatura ambiente por uma noite e o produto foi removido em seguida por meio de filtragem, lavado com um pouco de benzeno e seco em seguida (14 5 mg) . Um espectro de massa de íons negativos exibiu um íon parental a m/z 267 (267 teóricos), que confirma o peso molecular de 268 unidades de massa. 0 produto foi recristalizado a partir de DMF quente para gerar 95 mg da monoamida pura, Composto 100 (1) , ponto de fusão 226-227 °C, com alguma decomposição iniciando-se em 224 °C. 0 espectro de NMR 1H do sal de sódio do Composto 100 confirma a estrutura. Sal de sódio. NMR 1H (D2O): 1,41-1,70 (m, 4H) , 2,18 (s, 3H) , 2,21-2,55 (m, 4H), 2,92 (d, 1H), 3,17 (d, 1H), 3,22-3,40 (m, 2H) , 3,45 (m, 2H) , 4,60 (q, 1H) , 4,78 (q, 1H) . Os dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 100 exibiram picos a 141 m/z, 167 m/z, 254 m/z, 199 m/z e 185 m/z, correspondentes a fragmentos com carga negativa (Tabela 1).
Preparação de Endothal 4-etilpiperazina monoamida (EEPM) (Composto 105): <formula>formula see original document page 56</formula>Anidrido Endothal (1,68 g, 10 mmol) e N- etilpiperazina (3,42 g, 30 mmol) foram adicionados a 10 ml de tolueno e aquecidos sob refluxo por dezoito horas. 0 solvente foi evaporado em seguida sob pressão reduzida e o resíduo foi cristalizado a partir de metil t-butil éter para gerar o produto bruto (1,8 g) . Recristalização a partir do mesmo solvente gerou um total de 1,2 g (rendimento de 42,5%) em duas safras. Ponto de fusão 215-218 0C (com decomposição). 0 NMR 1H do sal de sódio em D2O e o espectro de íons negativos MS confirmam a estrutura e o peso molecular (m/z 282,2 ams) , respectivamente. Sal de sódio. NMR 1H (D2O): 0,95 (t, 3H) , 1,42-1,65 (m, 4H) , 2,20-2,42 (m, 4H) , 2,43-2,55 (m, 2H) , 2,93 (d, 1H) , 3,08 (d, 1H) , 3,20-3,33 (m, 2H) , 3,42-3,58 (m, 2H) , 4,45 (q, 1H) , 4,75 (q, 1H) . 0 espectro de MS indica a presença do dímero de associação em m/ζ 563,3 ams, que poderia ser esperado para um zwitteríon. Além disso, um traço de Endothal (MS m/z 185 ams) está presente, mas não é evidente no espectro de NMR. Um espectro de massa de íons negativos exibiu um íon parental a 282,2 m/z (282,2 teórico), o que confirma o peso molecular como 282,2 unidades de massa.
Preparação de terc-butil éster de ácido 4-(3- carbóxi-7-oxa-biciclo [2.2.1]heptano-2-carbonil)piperazino-1- carboxílico (Composto 102):
<formula>formula see original document page 56</formula>
Anidrido Endothal (1) (500 mg, 3 mmol) e N-BOC piperazina (2) (1,86 g, 10 mol) foram adicionados a tolueno seco (8 ml) e aquecidos a 100-110 °C por oito horas. 0 solvente foi removido em um evaporador giratório e adicionou- se ao resíduo uma mistura de ácido cítrico aquoso a 10% (20 ml) e acetato de etila (20 ml) . 0 sólido separado (Composto 102) (3) foi filtrado, lavado com hexano e seco a vácuo. Rendimento, 500 mg (47%), ponto de fusão 206-208 °C. O espectro de massa e os dados de NMR 1H confirmaram a identidade do Composto 102. Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 102 exibiram picos a 141,1 m/z, 185 m/z e 354 m/z. NMR 1H (DMSO- de) : 1,42 (s, 9H) , 1,45-1,72 (m, 4H) , 3,02-3,15 (d, 1H) , 3,20-3,55 (m, 9H), 4,65-4,70 (m, 2H).
Preparação de ácido 3-{l- [2-(4-metoxifenil)- etil] piperidin-4-ilcarbamoil}-7-oxabiciclo[2.2.1]-heptano-2- carboxílico (Composto 104):
Anidrido Endothal (1) (500 mg, 3 mmol) e amina (4) (2,34 g, 10 mmol) foram adicionados a tolueno seco (8 ml) e aquecidos a 100 0C por vinte horas. 0 solvente foi evaporado em seguida sob pressão reduzida, o resíduo foi absorvido em água e a solução foi acidif içada até pH 5,5 a 6 com HCl diluído. 0 sólido foi filtrado e recristalizado a partir de metanol para gerar (5) puro (Composto 104) . Rendimento, 450 mg (36%). Ponto de fusão: 140-142 °C. 0 espectro de massa e os dados de NMR 1H confirmaram a identidade do Composto 104. Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 104 exibiram picos em 385. NMR 1H (CDCl3): 1,48-1,65 (m, 4H), 1,78-1,95 (m, 2H), 1,98-2,15 (t, 2H) , 2,40-2,60 (m, 4H) , 2,68-2,78 (m, 2H) , 2,80 (s, 2H) , 3,02-3,15 (d, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,82-3,98 (m, 1H), 4,82-4,88 (m, 2H), 6,78-6,82 (d, 2H), 7,09-7,12 (d, 2H).
Preparação de ácido 3 -(4-benzilpiperazino-1- carbonil)-7-oxabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxílico (Composto 103): este composto foi preparado em três etapas a partir de anidrido Endothal (1) conforme exibido abaixo no Esquema 1.
<formula>formula see original document page 58</formula>
Esquema 1
Etapa 1: preparação de monometil éster de ácido 7- oxabiciclo [2.2.1]heptano-2,3-dicarboxílico:
Anidrido Endothal (1) (4 g, 24 mmol) foi aquecido sob refluxo em metanol seco (20 ml) por três horas. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e o sólido separado (6) foi filtrado e cristalizado a partir de metanol. Rendimento: 4,6 g (96%). Ponto de fusão: 114-146 °C.
Etapa 2: preparação de metil éster de ácido 3-(4- benzilpiperazino-l-carbonil)-7-oxabiciclo[2.2.1]heptano-2- carboxílico (8):
À mistura de derivado ácido (6) (2,6 g, 13 mmol) em cloreto de metileno (40 ml), adicionou-se EDC.HC1 (2,75 g, 15 mmol) seguido por HOBt (150 mg). A mistura foi agitada por dez minutos à temperatura ambiente antes da adição de N- benzil piperazina (7) (1,76 g) seguida por DIPEA (3,5 ml, 20 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. Adicionou-se água à mistura de reação, a camada de cloreto de metileno foi separada, lavada uma vez com NaHCO3 aquoso, seca em seguida sobre NaSO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado por meio de cromatografia de coluna utilizando 1 a 2% de metanol em cloreto de metileno como eluente para gerar o material puro necessário (8). Rendimento: 2,7 g (58%).
Etapa 3: preparação de ácido 3 -(4-benzilpiperazino- 1-carbonil)-7-oxabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxílico (Composto 103):
A uma solução de éster (8) (2,50 g, 7 mmol) em metanol (20 ml), adicionou-se NaOH aquoso (360 mg dissolvidos em 5 ml de água) e agitou-se à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado em seguida até secar, adicionou-se água (20 ml) e o pH da solução foi ajustado em seguida até pH 5 utilizando 6 N HCl. Ele foi evaporado até secar em seguida e adicionou-se cloreto de metileno (30 ml). O NaCl sólido residual foi removido por meio de filtragem e o filtrado foi concentrado. O sólido resultante foi triturado com isopropil éter para gerar o ácido puro (9) (Composto 103). Rendimento: 1,8 g (75%). Ponto de fusão > 190 0C (dec) . O espectro de massa e os dados de NMR 1H confirmaram a identidade do Composto 103. NMR 1H (CDCl3): 1,45-1,84 (m, 4H) , 2,45-2,68 (m, 2H), 2,75-2,95 (m, 2H), 3,12-3,35 (m, 2H), 3,38-3,55 (m, 2H) , 3,60-3,80 (m, 2H) , 3,95-4,20 (m, 2H) , 4,75-4,85 (m, 2H) , 7,4 0 (s, 5H) . Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga de composto 103 exibiram picos a 177,2 m/z, 345 m/z e 711 m/z.
Preparação de ácido 3 -(piperazino-l-carbonil)-7- oxabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxílico (Composto 101):
<formula>formula see original document page 59</formula>
O derivado ácido N-benzil protegido (9) (500 mg, 1,45 mmol) em metanol foi hidrogenado utilizando balão de hidrogênio sobre um catalisador Pd/C (5%, 50 mg) à temperatura ambiente por uma noite. A mistura de reação foi filtrada a partir dos catalisadores e concentrada até secar. O resíduo bruto foi cristalizado a partir de 2-proponal para gerar amina (10) (Composto 101) na forma de sólido branco puro. Rendimento: 215 mg (58%) , ponto de fusão > 24 0 0C (dec) . O espectro de massa e os dados de NMR 1H confirmaram a identidade do Composto 101. NMR 1H (CDCl3-CD3OD): 1,42-1,78 (m, 4H) , 2,92-3,15 (m, 8H) , 3,52-3,82 (m, 2H) , 4,58 (q, 1H) , 4,78 (q, 1H) . Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 101 exibiram picos a 177,2 m/z, 255,2 m/z, 277,2 m/z e 318,2 m/z.
Preparação de sal de ácido 3-(piperazino-1- carbonil)-7-oxabiciclo [2.2.1]heptano-2-carbotioico de N-metil piperazina (Composto 108):
<formula>formula see original document page 60</formula>
Tioanidrido Endothal (11) (552 mg, 3 mmol) e N- metil piperazina (12) (1 g, 10 mmol) foram adicionados a tolueno seco (10 ml) e aquecidos sob refluxo por duas horas e meia. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e o sólido que havia se separado foi filtrado e cristalizado a partir de cloreto de metileno e acetato de etila para gerar (13) necessário puro (Composto 108) . Rendimento: 585 mg (51%), ponto de fusão > 180 0C (dec). 0 espectro de massa e os dados de NMR 1H confirmaram a identidade do Composto 108. NMR 1H (CDCl3): 1,52-1,56 (m, 2H) , 1,82-1,85 (m, 2H) , 2,27 (s, 3H) , 2,28-2,42 (m, 11H) , 3,01 (s, 3H), 3,28-3,36 (m, 2H), 3,42-3,49 (m, 4H), 3,60-3,78 (m, 2H), 4,89-4,91 (m, 2H). Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 108 exibiram picos a 217 m/z, 251 m/z e 351 m/z.
Preparação de metil éster de ácido 3-(4- metilpiperazino-l-carbonil)-7-oxabiciclo[2.2.1]2-carboxílico (Composto 107):
<formula>formula see original document page 61</formula>
A uma suspensão de derivado ácido (14) (53 6 mg, 2 mmol) em cloreto de metileno, adicionou-se cloreto de tionila (0,5 ml) seguido por duas gotas de DMF. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. Foi uma suspensão de sal de cloridrato cloreto ácido. Adicionou-se metanol seco (10 ml) , agitou-se por trinta minutos e evaporou-se até secar utilizando evaporador giratório. Ao resíduo, adicionou-se água (20 ml) e extraiu-se com acetato de etila (20 ml) . 0 pH da camada aquosa foi ajustado em 4,5 utilizando NaHCO3 (10%) e evaporado até secar. 0 resíduo foi transformado em azeotropo com acetonitrila. Ele foi novamente dissolvido em acetonitrila e o NaCl separado foi removido por meio de filtragem. 0 filtrado foi evaporado até secar e triturado com acetato de etila para gerar um sólido pegajoso, que foi seco em um forno a vácuo para obter o composto desejado na forma de sólido incolor (15) (Composto 107) . Rendimento: 14 0 mg (25%, ponto de fusão 105-107 °C). Os dados de NMR 1H foram compatíveis com o espectro esperado para o Composto 107. NMR 1H (D2O): 1,49-1,53 (m, 2H) , 1,60-1,64 (m, 2H), 2,8 (s, 3H), 2,96-3,36 (m, 10H), 3,52 (s, 3H), 4,84-4,86 (m, 2H) . Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 10 7 exibiram picos a 123 m/z, 183 m/z, 251 m/z e 283 m/z. Preparação de 1-{Ν-(3-exocarbóxi-7-oxabiciclo [2.2.1] heptano-2-exocarbonil)amino-2-(N, N-dimetil)aminoetano (Composto 106).
Anidrido Endothal (1,68 g, 10 mmol) e unsim-N, N- dimetiletileno diamina (2,64 g, 30 mmol) foram adicionados a tolueno (10 ml) e aquecidos sob refluxo por duas horas. 0 solvente foi removido em seguida por meio de evaporação sob pressão reduzida e o resíduo foi triturado com um pouco de di-isopropil éter para causar cristalização. 0 produto foi recristalizado duas vezes em seguida a partir de hexano por meio de resfriamento a -20 °C. 0 produto puro (1,9 g; rendimento de 74%) fundiu-se a 48-50 °C. 0 espectro de NMR 1H encontra-se em perfeito acordo com a estrutura que é zwitteriônica e sofre uma substituição de dois prótons quando tratado com D2O. 0 espectro de massa também confirmou a identidade do Composto 106. NMR 1H (CDCl3): 1,62-1,75 (m, 2H) , 1,85-1,95 (m, 2H) , 2,2 (s, 6H) , 2,45 (t, 2H) , 2,92 (s, 2H) , 3,60 (t, 2H) , 4,85-4,95. (m, 2H) . Dados de espectrometria de massa que medem a razão entre massa e carga do Composto 106 exibiram picos a 239,2 m/z, 257 m/z e 513 m/ζ.
ESPECTROMETRIA DE MASSA: A Tabela 1 demonstra a correlação entre a razão entre massa e carga dos íons e as estruturas correspondentes. Uma amostra do composto 100 foi ionizada no espectrômetro de massa. íons com massas diferentes foram separados e a sua abundância relativa foi medida.
Tabela 1: Relação Entre Massa e Carga de íons
<table>table see original document page 62</column></row><table> <table>table see original document page 63</column></row><table>
A tabela 2 exibe a correlacao entre a razao entre massa e carga dos íons e estruturas correspondentes. Uma amostra do Composto 105 foi ionizada no espectrômetro de massa. Ions com massas diferentes foram separados e foi medida a sua abundância relativa.
Tabela 2: Relação Entre Massa e Carga de íons
<table>table see original document page 63</column></row><table> <table>table see original document page 64</column></row><table>
EXEMPLO 1: EFEITO DO COMPOSTO 100 E ANÁLOGOS
RELACIONADOS SOBRE CÉLULAS GBM
Para identificar alvos terapêuticos inovadores para o tratamento de glioblastoma multiforme (GBM), análogos de cantaridina foram avaliados para determinar a sua capacidade de inibição do crescimento de células de glioblastoma multiforme. Especificamente, a linhagem de células GBM U3 73 foi utilizada nas avaliações.
Os homólogos de cantaridina que foram avaliados foram norcantaridina (nor-Can), que é uma bis(normetil) cantaridina; Endothal (End), que é um derivado de ácido dicarboxílico de norcantaridinas; tioanidrido Endothal (ET); e Compostos 100 e 105, preparados conforme descrito acima.
As células foram colocadas em placas em três cópias no dia 1 com e sem quantidades diferentes de cada droga dissolvidas em meios (Composto 100, Composto 105 e Endothal) ou em sulfóxido de dimetila (tioanidrido Endothal e norcantaridina). O número total de células é contado nos cultivos em três cópias em cada dose e em controles após sete dias e determina-se o número médio de células e o desvio padrão.
A quantidade de inibição do crescimento de células GMB é expressa como a proporção do número de células nas placas experimentais em comparação com o número de células em placas controle que contêm apenas o veículo da droga e o meio de cultivo. O percentual médio de controle é plotado e inserido entre parênteses por um desvio padrão calculado a partir das medições em três cópias.
RESULTADOS
Cada um dos análogos de norcantaridina inibiu o crescimento de GMBs de forma dependente de dosagem in vivo, conforme exibido na Figura 1.
A partir das plotagens de gráficos da linhagem de células GBM U3 73 em função da exposição a diferentes doses de droga por sete dias, foi estimada a concentração de cada composto que inibiu a proliferação de células de tumor do cérebro em 50% (IC50). As IC50s expressas em micromolaridade (μΜ) foram: 2,5, 3,0, 12,0 e 15,0 para tioanidrido endothal, Composto 100, norcantaridina e endothal, respectivamente, conforme observado na Figura 1.
Além disso, curvas logarítmicas da linhagem de células de glioma U373 tratadas com diferentes doses de Composto 105 por três (Figura 6) e sete dias (Figura 7) indicam que o aumento das dosagens demonstra uma inibição maior do crescimento. Além disso, a Figura 8 é uma curva de reação à dosagem para o Composto 105 contra o cultivo de células de GBM humanas ao longo de sete dias em diversas concentrações do Composto 105. Dever-se-á observar que o Composto 100 foi incluído em uma única concentração de 10 μΜ e que, nessa concentração, os dois compostos possuem valores inibidores idênticos. EXEMPLO 2: EFEITO DO COMPOSTO 100 COMBINADO COM ÁCIDO RETINÓICO
Para identificar o efeito de combinações de antifosfatases PP2A e retinoides que afetam complexos 5 nucleares, concentramo-nos em derivados de cantaridina hidrossolúveis que se demonstrou serem ativos contra GBMs humanos in vitro, Endothal e Composto 100.
Para observar os efeitos do Composto 100 em combinação com ácidos retinóicos, o Composto 100 foi combinado com ácido retinóico totalmente trans.
As células foram colocadas em placas em três cópias no dia 1 com e sem quantidades diferentes de cada droga dissolvidas em meios (Composto 100 e Endothal) . 0 número total de células é contado nos cultivos em três cópias em cada dose e nos controles após sete dias e é determinado o número médio de células e o desvio padrão.
A quantidade de inibição do crescimento de células GBM é expressa na forma de proporção entre o número de células nas placas experimentais em comparação com o número de células em placas controle que contêm apenas o veículo de droga e o meio de cultivo. 0 percentual médio de controle é plotado e inserido entre parênteses por um desvio padrão calculado a partir das medições em três cópias.
RESULTADOS
A Figura 2 demonstra que o Composto 100, bem como Endothal, cada qual em combinação com ATRA, inibiram sinergicamente a proliferação da linhagem de células GBM U373. Afirma-se que a sinergia (potencialização) da atividade inibidora de duas drogas em combinação está presente quando o percentual de sobrevivência na presença de duas drogas for menor que o produto dos percentuais de sobrevivência das duas drogas utilizadas isoladamente nas mesmas doses em combinação. A extensão da sinergia do Composto 100 e Endothal (end) em combinação com ATRA é quantificada abaixo na Tabela 3.
Tabela 3: Endothal e Composto 100 + /- Inibição de ATRA de células U3 73
<table>table see original document page 67</column></row><table>
O percentual esperado de sobrevivência de células
U3 73 expostas à combinação de ATRA e Composto 1 foi de 60% (77% por ATRA χ 78% por Composto 100 = 60%) , enquanto a sobrevivência observada foi de 53%. 0 percentual esperado de sobrevivência na presença da combinação de ATRA e End foi de 50% (77% por ATRA χ 65% por End = 50%), enquanto a sobrevivência esperada foi de 32%.
O Composto 100, quando combinado com Tricostatina A ou quando combinado com ácido 13-eis retinóico, inibiu sinergicamente o crescimento de linhagem de células GBM U373 conforme exibido abaixo na Tabela 4.
Tabela 4: Composto 100 + /- Ácido 13-Cis Retinóico (CIS-RA) e Composto 1 +/- Tricostatina A (TSA) na Inibição de
Linhagem de Células GBM U373
<table>table see original document page 67</column></row><table>
As duas drogas foram sinérgicas na sua inibição do crescimento, de células U373. 0 percentual de sobrevivência das células após a exposição às duas drogas em combinação foi menor que o que seria esperado do percentual de sobrevivência das células quando expostas a cada uma das duas drogas às mesmas dosagens utilizadas na combinação.
EXEMPLO 3 : DETERMINAÇÃO DA ESPECIFICIDADE DE TIPOS DE TUMORES
Para determinar se existe especificidade de tipo de tumores das propriedades inibidoras de análogos de Composto 100, ácido retinóico e Tricostatina A, medimos os seus efeitos inibidores como agentes isolados contra a linha GBM U373, uma linhagem de câncer de mama, MCF-7 (obtida por meio da ATCC) e uma linhagem de células de câncer do fígado, UMRC (UMRC obtida por meio do Dr. Zhuang, NINDS, NIH do Programa de Suporte à Pesquisa Intramural, SAIC, Instituto Nacional do Câncer, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Câncer Frederick).
RESULTADOS
A linhagem de células de câncer renal, UMRC (Figura 3), foi menos sensível que a linhagem de tumor do cérebro, U373 (Figura 4), enquanto a linhagem de câncer de mama, MCF-7 (Figura 5), foi tão sensível quanto U3 73 para ácido retinóico totalmente trans, tioanidrido Endothal, norcantaridina, Endothal e Tricostatina A. Existe alguma especificidade de tipo celular dessas drogas para GBMs. A atividade das drogas contra células MCF-7 indica que os regimes sendo desenvolvidos para o tratamento de tumores do cérebro podem também ser úteis contra câncer de mama, bem como outros tumores que sobre-expressam N-CoR.
EXEMPLO 4
Além das atividades inibidoras sob baixas concentrações micromolares de Composto 100, o Composto 105, como o Composto 100, também é um zwitteríon e é altamente ativo, conforme exibido na Figura 9. 0 composto solúvel em lipídios 102 também é altamente potente na inibição de linhagens de células de glioma, U373 (Figura 10). Outros derivados de nocantaridina, os Compostos 101, 103, 104 e 106 possuem menos atividade (Figuras 11 a 14).
Para todos os experimentos de cultivo celular, as células são mantidas em crescimento na presença ou ausência de diferentes concentrações de droga ou na presença do veículo utilizado para dissolver a droga, PBS para Composto 100 e DMSO para o Composto 102. As contagens de células são realizadas em três cópias no dia 3 e no dia 7 e a inibição de crescimento é expressa na forma de percentual do número de células presentes na cavidade experimental dividido pelo número de células em uma cavidade controle.
Existe inibição dependente de dosagem pelo Composto 100 da linhagem de células GBM U373 (Figura 15) e inibição dependente de dosagem da linhagem de células de meduloblastoma DAOY (Figura 16).
Para experimentos in vivo, células de tumores implantadas por via subcutânea são mantidas em crescimento por sete dias até um tamanho de 5 a 7 mm. No dia 7, a administração da droga inicia-se por via intraperitoneal por vinte dias. Os diâmetros perpendiculares máximos das massas de tumor são medidos a cada dois a cinco dias. No 21° dia após o início do tratamento, os animais são sacrificados e dissecados livres dos tecidos subcutâneos e medidos.
Demonstra-se que o Composto 100 suprime o crescimento da linhagem de. células GBM U87 que cresce de forma subcutânea em camundongos SCID (Figura 17) . Também se demonstra que o Composto 100 e o Composto 200 inibem a proliferação de células DAOY quando implantados por via subcutânea em camundongos SCID (Figura 18).
EXEMPLO 5 : ATIVIDADE DE DROGAS CONTRA LINHAGENS DE CÉLULAS DE CÂNCER HUMANO DIFERENTES DE GLIOBLASTOMAS E MEDULOBLASTOMAS
MATERIAIS E MÉTODOS Linhagens celulares MDA-MB-231, HT-29, NCI-H460, NCI-H522, NCI-H69, GXF-209, HepG2, OVAR-3, PANC-1, DU-145, LNCAP, HL-60, K-562 e MOLT-4 foram obtidas da Coleção Norte- Americana de Cultivos de Tipos (ATCC, Manassas VA) ou do Instituto Nacional de Câncer (NCI, Frederick MD). Meios RPMI- 1640, dipeptídeo L-glutamina (HyQ SG-200) e HEPES foram obtidos por meio da Hyclone (Logan UT).
Soro de feto bovino (FBS) foi obtido por meio da Sigma-Aldrich (St. Louis MO). DMSO foi adquirido da Fisher Chemicals (Fair Lawn NJ) . O reagente do Teste de Viabilidade Celular Luminescente CellTiter-Glo foi obtido por meio da Promega Corporation (Madison WI) . Todos os plásticos de cultivo de tecido foram obtidos por meio da Corning Incorporated (Nova Iorque NY). O Composto 100 e o Composto 102 foram fornecidos pela Lixte Biotechnology Holdings, Inc. (East Setauket NY).
Todas as linhagens celulares foram cultivadas rotineiramente duas vezes por semana em meio RPMI-164 O suplementado com 2 mM de dipeptídeo L-glutamina, 10 mM de HEPES e 10% FBS.
As linhagens celulares aderentes células MDA-MB- 231, HT-29, NCI-H4 60, NCI-H522, GXF-209, HepG2, OVAR-3, PANC- 1, DU-14 5 e LNCAP foram semeadas em duas placas com 96 cavidades a 2500 células por cavidade em um volume total de 50 μl e incubadas em um incubador de cultivo de células de CO2 a 5% umidifiçado a 37 °C por uma noite. As linhagens de células em suspensão NCI-H69, HL-60, K-562 e M0LT-4 foram semeadas em duas placas com 96 cavidades a dez mil células por cavidade em um volume total de 50 μl e incubadas em um incubador de CO2 a 5% umidifiçado a 37 °C por uma noite.
Um estoque de 20 mM de droga hidrossolúvel Composto 100 foi elaborado em água estéril e estoques de 20 mM de Composto 102 foram elaborados em DMSO. Isso foi seguido pela elaboração de 2X estoques das concentrações finais necessárias em meio RPMI-1640. 50 μl das soluções padrão 2X foram adicionados às cavidades apropriadas, que continham 50 μl de células e meio para gerar as concentrações finais descritas no Apêndice. A concentração superior do Composto 100 foi esterilizada por filtragem antes do uso. Foram adicionados 50 μl de meios aos meios e cavidades de controle de células e 50 μl de uma solução padrão 2X DMSO imitação foram adicionados às células de controle de veículos. Ao mesmo tempo em que as drogas eram adicionadas às células, uma das placas de cada linhagem celular foi utilizada para o teste CellTiter-Glo conforme descrito abaixo, para a fim de obter valores de Dia 0 para cada linhagem celular. Após um período de incubação de 72 horas, o teste CellTiter-Glo foi realizado sobre a placa remanescente.
TESTE CELLTITER-GLO 0 teste foi realizado conforme as instruções do fabricante. Resumidamente, placas foram removidas do incubador e colocadas sobre a bancada sob temperaturas ambiente por trinta minutos. As placas não foram empilhadas. Após a incubação por trinta minutos à temperatura ambiente, 100 μl de reagente CellTiter-Glo foram adicionados a cada cavidade sobre a placa e misturados por dois minutos, seguidos por incubação por dez minutos adicionais à temperatura ambiente. A luminescência foi registrada em seguida utilizando o contador de luminescência e cintilação Perkin Elmer Microbeta (Trilux).
RESULTADOS E DISCUSSÃO Estes estudos foram realizados conforme descrito em Materiais e Métodos, com os dados brutos e configuração de placas descritos no Apêndice. Os valores IC50 obtidos para cada droga em cada linhagem celular são descritos na Tabela 5. A representação gráfica do efeito dos compostos em cada linhagem celular, junto com as adequações de curvas associadas, é ilustrada nas Figuras 19A a N.
A maior parte das linhagens celulares testadas foi sensível a todas as drogas na faixa com baixo μΜ (Tabela 5).
O Composto 100 e o Composto 102 possuem atividade significativa (aproximadamente igual para todas as linhagens à droga anticancerígena utilizada clinicamente como comparador positivo, doxorubicina). As drogas foram ativas contra linhagens celulares de: câncer de mama; câncer do cólon; os três tipos principais de câncer do pulmão, células grandes, adenocarcinoma e células pequenas; câncer do estômago; câncer do fígado (hepatoma); adenocarcinoma do ovário; carcinoma do pâncreas, dois tipos de carcinoma da próstata; e três tipos de leucemia, promilocítica, mielocítica crônica e linfocítica aguda (Tabela 5).
Tabela 5: Concentração do Composto 100 e 102 que Resulta em Inibição de 50% da Proliferação (IC50) Obtida das Adequações de Curvas de Quatorze Linhagens de Células de Câncer Humano (Figuras 19A a N)
<table>table see original document page 72</column></row><table> <table>table see original document page 73</column></row><table>
EXEMPLO 6: ATIVIDADE ANTIFUNGICA
A população crescente de pacientes com comprometimento imunológico devido a transplantes, HIV/AIDS e câncer, principalmente leucemia, resultou em um aumento das infecções fúngicas severas. Os fungos mais freqüentemente recuperados de infecções nesses pacientes são Aspergillus spp e Candida spp. Terapias eficazes são disponíveis para o tratamento de Candida spp, mas permanece a preocupação sobre o tratamento de infecções causadas por Aspergillus spp, que são associadas a alta mortalidade no hospedeiro imunocomprometido. Essas infecções são de difícil limpeza neste grupo de pacientes, de forma a aumentar a necessidade de agentes com boa atividade contra esses fungos. Além disso, infecções fúngicas trabalhosas menos sérias, mas crônicas das unhas e da pele dos pés e das mãos, as dermatofitoses, afetam milhões de pessoas em todo o mundo. Como resultado do cenário mutante de infecções fúngicas e da falta de uma cura geral para essas infecções, os Compostos 100 e 102 estão passando por testes para possível desenvolvimento futuro.
MATERIAIS E MÉTODOS
Testes antifúngicos foram completados com um lote comum para os Compostos 100 e 102. Uma porção de 10 mg de cada pó foi pesada e adicionada a 1 ml de água destilada estéril para o Composto 100 e DMSO para o Composto 102. A concentração resultante de 10 μς/πιΐ foi diluída em uma concentração de trabalho de 640 ug/ml para cada composto. Todas as diluições subsequentes foram também realizadas utilizando os diluentes correspondentes. Concentrações de teste finais variaram de 0,125 a 64 yg/ml.
RESULTADOS
Um total de 23 isolados foi testado para incluir 3 Candida albieans, 3 Candida glabrata, 3 Cryptococcus neoformans, 3 Aspergillus fumigatus, 3 Rhizopus oryzae, 3 Fusarium solani, 3 Pseudallescheria boydii e 2 Trichosporon rubrum. Todos os isolados foram isolados clínicos submetidos ao Laboratório de Testes com Fungos para avaliação. Testes de susceptibilidade antifúngica foram realizados conforme os métodos descritos no Comitê Nacional de Padrões de Laboratórios Clínicos, M-27A2, Referenee Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts; Approved Standard, e M3 8-A, Referenee Method for Broth Dilution Antifungal Suseeptibility Testing of Conidium- Forming Filamentous Fungi; Approved Standard. Estes incluem teste em RPMI-164 0 com glutamina e sem bicarbonato, um tamanho de inoculado de 0,5 a 2,5 χ IO3 para leveduras ou 1 a 5 χ IO4 para fungos e incubação a 35 0C por 24 e 48 horas. A concentração inibidora mínima (MIC) foi definida como a concentração mais baixa que resultou em uma redução de 50% da turvação em comparação com um tubo controle livre de drogas para a levedura e 80% de inibição para os moldes.
Embora não se observasse a atividade do Composto 100 nos níveis testados, descobriu-se atividade significativa para o Composto 102 contra T. rubrum (Tabela 6).
CONCLUSÃO Dependendo dos níveis deste composto que podem ser atingidos em pacientes humanos, perfis de segurança e outros fatores pertinentes, este composto pode ser um combatente viável das infecções dermatofíticas causadas por Trichosporon 5 rubrum.
Tabela 6
<table>table see original document page 75</column></row><table>
REFERÊNCIAS
Alder, B. (1938), Ann. Chem., 113, 120.
Ayaydin, F. et al (2000), The Plant Journal, 23:
85-96.
Baskin, T. e Wilson, J. (1997), Plant Physiol. 113:
493-502.
Bastien et al (2004), Gene, Vol. 328, págs. 1-16. Bhongle, Ν. N. et al (1984), Indian J. Chem. Sect. B, 23, 465-468.
Blaheta, A. et al (2002), Current Medicinal Chemistry, Vol. 9, págs. 1417-1433. Crafts, Α. S. (1953), Rev. Plant. Physiol. 4: 253- 282.
Drewinko et al (1967), Câncer Biochem. Biophys., Vol. 1, pãgs. 187-195.
Erdodi, F. et al (1985), Am. J. Physiol., 269 (Cell Physiol. 38) C1176-C1184.
Essers, M. et al (2001), Tetrahedron Lett., 42, 5429-5433.
Fanghaemel, F. et al (1994) , Synthesis, 10, 1067- 1071.
Giannini, R. e Cvallini, A. (2005), Anticancer Research, Vol. 36, N° 6B, págs. 4287-4292.
Gõttlicher, M. et al (2001), Eur. Mol. Bio. Journal, Vol. 20, n° 24, págs. 6969-6978.
Graziano, M. J. e Casida, J. E. (1987), Toxicol. Lett., 37, 143-148.
Hart, M. E. et al (2004) , Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, Vol. 14, págs. 1969-1973.
Havrilesky, L. J. et al (2001) , J. Soe. Gynecology. Investig., Vol. 8, págs. 104-113.
Hermanson et al (2002), Nature, Vol. 419, págs. 934-939.
Honkanan, R. E. et al (1993), FEBS Lett., 330, 283- 286.
Hughes et al (1988), Nature, Vol. 335, págs. 70-73.
Kayser, Μ. M. et al (1989), Can. J. Chem., 67, 1401-1410.
Kayser, Μ. M. et al (1982), Can. J. Chem., 60, 1199-1208.
Kawamuraf N. et al (1990), Chem. Res. Toxicol., Vol. 3, págs. 318-324.
Kovach, J. S. et al (1985), Câncer Treat. Rep., Vol. 69, págs. 97-103. Li, Υ. Μ. et al (1992), Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A., 89, 11867-11870.
Li, Υ. M. et al (1993), Biochem. Pharmacol., 46, 1435-1443.
Matsuzawa, M. et al (1987) , J. Agric. Food Chem. , Col. 35, N0 5.
Momparlet, R. L. (1980), Pharmaeol. Ther., Vol. 8, págs. 21-35.
Myers, E. et al (2005), Clin. Câncer Res., Vol. 11, págs. 2111-2122.
Park, D. M. et al (2007), Cell Cyele, 6 (4): 467-70.
Peng, F. et al (2002), J. Câncer Res. Clin. Oncol., Vol. 128, págs. 223-230.
Ramezanian, M. et al (1989), J. Org. Chem., 54, 2852-2854.
Rutka et al (1988), Int. J. Câncer, Vol. 42, pág. 419-427.
Sanderson, L. et al (2004) , Drug Metabolism and Disposition, Vol. 32, N0 10, págs. 1132-1138.
Sakoff, J. A. (2004) , Current Pharmaceutical Design, Vol. 10, págs. 1139-1159.
Schweizer, H. R. (1989), Helv. Chim. Acta., 2221- 2235 .
Shimi, I. R. et al (1982), European Journal of Câncer and Clinicai Oncology, 18: 785-793.
Singh et al (2003), Câncer Research, Vol. 63, págs. 5821-5828.
Singh et al (2004), Nature, Vol. 432, págs. 396-401.
Smith et al (1994), Planta 194: 516-524.
Stupp et al (2005), N. Engl. J. Med., Vol. 352, págs. 987-996. Trost, L. (1977), J. Am. Chem. Soc., 99, 7079. Tsauer, W. et al (1997), Anticancer Research 17, 2095-2098.
Uchida et al (2000), Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A., Vol. 97, págs. 14720-14725.
Wang, D. S. (1989), Journal of Ethnopharmacology, 26: 147-162.
Yi, S. N. et al (1988), Bulletin of Hunan Medicai University, 13: 327-330.
Patente Norte-Americana n° 6.949.624, Liu et al.
Patente Norte-Americana Publicada n° 2004/0197888, Armour et al.
Patente Norte-Amerieana Publicada n° 2004/0253637, Bueehler et al.
Patente Norte-Americana Publicada n° 2005/0203082,
Hsu et al.
Patente Norte-Americana Publicada n°
2006/0 03 0616A1, depositada em nove de fevereiro de 2006 (McCluskey et al). Valeriote, F. (1975), Câncer Chemother. Rep., Vol.
59, págs. 895-900.
Wang, G. S. (1983), Chin. Pharmac. Bull., Col. 18, págs. 18-19.
Wang, G. S. (1989), J. Ethnopharmacol., Vol. 26, págs. 147-162.
Wang, G. S. et al (1986), Chinese Pharm. Bull., Vol. 21, págs. 90-93.
Wang, G. S. et al (1987), Chinese Pharm. Bull., Vol. 22, págs. 517-519.
Waters, C. E. et al (2004), J. Endocrinol., Vol. 183, págs. 375-383.
Yoshida, M. et al (1990) , Journal of Biological Chem., Vol. 265, N0 28, págs. 17174-17179. Yung et al (1996), Clin. Câncer Res., Vol. 2, págs
1931-1935.
Claims (55)
1. COMPOSTO, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 80</formula> caracterizado pelo fato de que: a união α está presente ou ausente; R1 e R2 são, independentemente entre si, H, O" ou OR9, em que R9 é H, alquila, alquenila, alquinila ou arila; ou R1 e R2 juntos são =0; R3 e R4 são diferentes entre si e cada qual ê 0H, 0" ,OR9, SH, S" OU SR9; <formula>formula see original document page 80</formula> em que X é O, S, NR10 ou N+R10R10/ em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila ou arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro quando R1 e R2 forem =O; <formula>formula see original document page 80</formula> -CH2CN, -CH2CO2R11, -CH2COR11, -NHR11 ou -NH+(R11)2, em que cada R11 é independentemente alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais substituído ou não substituído, ou H; R5 e R6 são, independentemente entre si, H, OH ou R5 e R6, tomados em conjunto, são =0; e R7 e R8 são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3 ou SRx2; em que R12 é H, arila ou alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; ou um sal, enantiômero ou zwitteríon do composto.
2. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto possui a estrutura:
3. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto possui a estrutura: <formula>formula see original document page 81</formula>
4. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto possui a estrutura: <formula>formula see original document page 81</formula>
5. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a união α está presente.
6. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a união α está ausente.
7. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que: R1 e R2 juntos são =O; R3 é O" ou OR9, em que R9 é H, metila, etila ou fenila; R4 é: <formula>formula see original document page 82</formula> em que X é O, S, NR10 ou N+R10Rio; em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 82</formula> -CH2CN, -CH2CO2Rn, -CH2COR11, -NHR11 ou -NH+(R11)2 em que R11 é alquila, alquenila ou alquinila, cada um dos quais substituído ou não substituído, ou H; R5 e R6, tomados em conjunto, são =0; e R7 e R8 são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3 ou SR12; em que R12 é um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído.
8. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R3 é O-.
9. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 83</formula> em que X é O, NRio, N+R10R10; em que cada Ri0 é independentemente H, alquila, alquila C2-Ci2 substituído, alquenila, alquenila C4-Ci2 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro quando R1 e R2 forem =O; <formula>formula see original document page 83</formula> -CH2CN, -CH2CO2R11, -CH2COR11, -NHR11 OU -NH+(R11)2, em que R11 é H ou alquila.
10. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 83</formula> <formula>formula see original document page 84</formula>
11. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 84</formula> em que Ri0 é H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro quando R1 e R2 forem =O; <formula>formula see original document page 84</formula> -CH2CN, -CH2CO2R11, -CH2COR11, -NHR11 ou -NH+(Rn)2, em que R11 é H ou alquila.
12. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 85</formula>
13. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 85</formula> em que R10 é: <formula>formula see original document page 85</formula>
14. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 85</formula> em que R10 é:
15. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 85</formula>
16. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11, caracterizado pelo fato de que R4 é: <formula>formula see original document page 86</formula>
17. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11 a 16, caracterizado pelo fato de que R5 e R6 juntos são =0.
18. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 ou 11 a 17, caracterizado pelo fato de que R7 e R8 são independentemente H.
19. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1: <formula>formula see original document page 86</formula> caracterizado pelo fato de que a união α está presente ou ausente; R9 está presente ou ausente e, quando presente, é H, alquila C1-C10, alquenila C2-C10 ou fenila; e X é O, S, NRi0 ou N+R10R10; em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 86</formula> -CH2CO2R11, -CH2COR11, -CH2CN ou -CH2CH2R16, em que Rl1 é H ou alquila e em que R16 é qualquer substituinte que é um precursor de um intermediário aziridinila; ou um sal, zwitteríon ou enantiômero do composto.
20. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 87</formula> em que: a união α está presente ou ausente; X é O, S, NR10 ou N+R10R10; em que cada Ri0 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila e arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 87</formula> -CH2CO2R11, -CH2COR11, -CH2CN ou -CH2CH2R16, em que R11 é H ou alquila e em que R16 é qualquer substituinte que é um intermediário aziridinila; ou um sal, zwitteríon ou enantiômero de um composto.
21. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que: X é 0 ou NH+R10; em que R10 é H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila ou arila substituído, em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 87</formula>
22. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que X é -CH2CH2Ri6, em que R16 é qualquer substituinte que é um precursor de um intermediário de aziridinila.
23. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20 ou 21, caracterizado pelo fato de que X é O.
24. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20 ou 21, caracterizado pelo fato de que: X é NH+R10; em que R10 é H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 88</formula>
25. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20, 21 ou 24, caracterizado pelo fato de que R10 é metila.
26. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20, 21 ou 24, caracterizado pelo fato de que R10 é:
27. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20, 21 ou 24, caracterizado pelo fato de que R10 é: <formula>formula see original document page 89</formula>
28. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20, 21 ou 24, caracterizado pelo fato de que R10 é etila.
29. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 20, 21 ou 24, caracterizado pelo fato de que R10 é ausente.
30. COMPOSTO, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 89</formula> caracterizado pelo fato de que: a união α está presente ou ausente; R9 está presente ou ausente e, quando presente, é H, alquila, alquenila, alquinila ou fenila; e X é O, NR10 OU N+R10R10, em que cada R10 é independentemente H, alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 89</formula> -CH2CN, -CH2CO2Ri2 ou -CH2CORi2, em que R12 é H ou alquila; ou um sal, zwitteríon ou enantiômero do composto.
31. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 30, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 90</formula> caracterizado pelo fato de que: a união α está presente ou ausente; X é O ou NH+Ri0, em que R10 é H, alquila, alquila C2- C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído em que o substituinte é diferente de cloro; <formula>formula see original document page 90</formula> -CH2N, -CH2CO2R12 ou -CH2COR12, em que R12 é H ou alquila.
32. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que a união α está presente.
33. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que a união α está ausente.
34. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 90</formula>
35. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação terizado pelo fato de que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 92</formula>
36. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 30, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 93</formula> Caracterizado pelo fato de que: a união α está presente ou ausente; X é NH+R10; em que R10 está presente ou ausente e, quando presente, R10 é alquila, alquila C2-C12 substituído, alquenila, alquenila C4-C12 substituído; -CH2N, -CH2CO2Ri2 OU -CH2COR12, em que R12 é H ou alquila.
37. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto possui a estrutura: <formula>formula see original document page 93</formula>
38. COMPOSTO, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 93</formula> caracterizado pelo fato de que: A e B são, independentemente entre si, H, F, Cl, Br, SO2Ph, COR14, CO2CH3, SR14; em que R14 é H ou arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; X é O, NH ou S; Z é O, S, SRi5, NH, NR15, CH2OH, CH2OR15 em que R15 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; e Y e W são, independentemente entre si, CHOH CH2, C=S ou C=O; ou um sal do composto.
39. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 38, caracterizado pelo fato de que: A e B são, independentemente entre si, H ou F; X é O; Z é S; e Y e W são independentemente C=S.
40. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 38 ou 39, caracterizado pelo fato de que AeB são independentemente F.
41. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 8 ou 39, caracterizado pelo fato de que: A é H; e B é F.
42. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 38, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 94</formula> caracterizado pelo fato de que: A é F ou SR14, em que Ri4 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído; e B é F, Cl, Br, SO2Ph, CO2CH3, CORi4 ou SR14, em que R14 é arila ou um alquila, alquenila ou alquinila substituído ou não substituído.
43. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que possui a estrutura:
44. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, caracterizado pelo fato de compreender o composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 3 7 e um veículo farmaceuticamente aceitável.
45. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO, que possui a estrutura conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de compreender: a. reação de um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 96</formula> com um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 96</formula> para formar um composto que possui a estrutura a seguir: b. reação de um composto que possui a estrutura acima com hidrogênio na presença de um catalisador para formar:
46. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO, que possui a estrutura conforme definida na reivindicação 38, caracterizado pelo fato de compreender: a. reação de um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 97</formula> com um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 97</formula> para formar um composto que possui a estrutura a seguir: b. reação de um composto que possui a estrutura acima com hidrogênio na presença de um catalisador para formar: <formula>formula see original document page 97</formula>
47. PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO, que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 97</formula>caracterizado pelo fato de compreender: a dissolução de um composto que possui a estrutura a seguir: <formula>formula see original document page 98</formula> em benzeno e adição de um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 98</formula> para produzir um composto que possui a estrutura: <formula>formula see original document page 98</formula> b. recristalização do composto após a etapa a, para produzir o composto.
48. PROCESSO, conforme descrito em qualquer uma das reivindicações 43 ou 44, caracterizado pelo fato de que o solvente é dimetilformamida.
49. MÉTODO DE CONTROLE DE VEGETAÇÃO INDESEJADA, caracterizado por compreender o contato da vegetação ou seu ambiente com uma quantidade eficaz como herbicida dos compostos conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 37.
50. MÉTODO DE INIBIÇÃO DA ATIVIDADE DE FOSFATASE VEGETAL, caracterizado por compreender o contato da planta ou seu ambiente com uma quantidade eficaz como herbicida dos compostos conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 37.
51. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 49 ou 50, caracterizado pelo fato de que o composto é o Composto 100, 100E, 101, 101E, 102, 102E, 103, -103E, 104, 104E, 105, 105E, 106, 106E, 107, 107E, 108 ou 111.
52. MÉTODO DE PREVENÇÃO OU TRATAMENTO DE UMA INFECÇÃO FÚNGICA EM UM PACIENTE, que compreende a administração ao paciente de uma quantidade eficaz dos compostos conforme definido em qualquer das reivindicações 1 a 37 para tratar a infecção fúngica, de forma a tratar a infecção fúngica.
53. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que o composto é o Composto 100, -100E, 101, 101E, 102, 102E, 103, 103E, 104, 104E, 105, 105E, -106, 106E, 107, 107E, 108 OU 111.
54. MÉTODO DE TRATAMENTO DE PACIENTES QUE SOFREM DE CÂNCER, sendo este câncer de mama, câncer do cólon, câncer do pulmão de células grandes, adenocarcinoma do pulmão, câncer do pulmão de células pequenas, câncer do estômago, câncer do fígado, adenocarcinoma do ovário, carcinoma do pâncreas, carcinoma da próstata, leucemia promilocitica, leucemia mielocítica crônica ou leucemia linfocítica aguda que compreende a administração ao paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos conforme definido em qualquer das reivindicações 1 a 37, de forma a tratar o paciente.
55. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 54, caracterizado pelo fato de que o composto é 100, 100E, 101, -101E, 102, 102E, 103, 103E, 104, 104E, 105, 105E, 106, 106E, -107, 107E, 108 ou 111.
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US89990307P | 2007-02-06 | 2007-02-06 | |
| US60/899,903 | 2007-02-06 | ||
| US96490407P | 2007-08-14 | 2007-08-14 | |
| US60/964,904 | 2007-08-14 | ||
| US1132308P | 2008-01-15 | 2008-01-15 | |
| US61/011,323 | 2008-01-15 | ||
| PCT/US2008/001549 WO2008097561A1 (en) | 2007-02-06 | 2008-02-06 | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0806365A2 true BRPI0806365A2 (pt) | 2011-09-06 |
| BRPI0806365B1 BRPI0806365B1 (pt) | 2020-01-21 |
| BRPI0806365B8 BRPI0806365B8 (pt) | 2021-05-25 |
Family
ID=39682021
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0806365A BRPI0806365B8 (pt) | 2007-02-06 | 2008-02-06 | composto, uso do composto, composição farmacêutica e uso da composição farmacêutica |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (6) | US7998957B2 (pt) |
| EP (1) | EP2124550B1 (pt) |
| JP (1) | JP5693850B2 (pt) |
| CN (2) | CN103788108B (pt) |
| AU (1) | AU2008214299B2 (pt) |
| BR (1) | BRPI0806365B8 (pt) |
| CA (1) | CA2676422C (pt) |
| EA (1) | EA023804B1 (pt) |
| MX (1) | MX2009008347A (pt) |
| WO (1) | WO2008097561A1 (pt) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090018142A9 (en) * | 2006-05-02 | 2009-01-15 | Zhengping Zhuang | Use of phosphatases to treat tumors overexpressing N-CoR |
| CA2676422C (en) | 2007-02-06 | 2018-10-16 | Lixte Biotechnology Holdings, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use |
| US20090035292A1 (en) * | 2007-08-03 | 2009-02-05 | Kovach John S | Use of phosphatases to treat neuroblastomas and medulloblastomas |
| WO2009039407A1 (en) * | 2007-09-19 | 2009-03-26 | University Of Massachusetts | Water-soluble and water-insoluble, ring opening metathesis polymerization products, monomers and related methods |
| EA018618B1 (ru) * | 2007-10-01 | 2013-09-30 | Ликсте Байотекнолоджи, Инк. | Ингибиторы hdac |
| WO2010147612A1 (en) * | 2009-06-18 | 2010-12-23 | Lixte Biotechnology, Inc. | Methods of modulating cell regulation by inhibiting p53 |
| CA2730148C (en) | 2008-08-01 | 2018-04-03 | Lixte Biotechnology, Inc. | Neuroprotective agents for the prevention and treatment of neurodegenerative diseases |
| EP2309853A4 (en) * | 2008-08-01 | 2012-04-25 | Lixte Biotechnology Inc | METHOD FOR CELL MITITULATING BY INHIBITION OF SERIN / THREONINE PHOSPHATASE |
| US8227473B2 (en) * | 2008-08-01 | 2012-07-24 | Lixte Biotechnology, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use |
| JP6262225B2 (ja) | 2012-06-29 | 2018-01-17 | リクスト・バイオテクノロジー，インコーポレイテッド | オキサビシクロヘプタン類、および再灌流障害の治療のためのオキサビシクロヘプタン類 |
| CA2877167A1 (en) | 2012-06-29 | 2014-01-03 | Lixte Biotechnology, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes for the treatment of diabetes |
| EP2983661B1 (en) * | 2013-04-09 | 2024-05-29 | Lixte Biotechnology, Inc. | Formulations of oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes |
| JP2016538281A (ja) * | 2013-11-15 | 2016-12-08 | リクスト・バイオテクノロジー，インコーポレイテッド | 血液脳関門を通過するタンパク質ホスファターゼ阻害剤 |
| CN103664978B (zh) * | 2013-11-29 | 2016-06-22 | 西北农林科技大学 | 一种卤苯基芳香胺取代去甲斑蝥素及其制备方法和应用 |
| DK3143026T3 (da) | 2014-05-13 | 2024-09-30 | Novartis Ag | Forbindelser og sammensætninger til induktion af chondrogenese |
| WO2015196073A1 (en) * | 2014-06-20 | 2015-12-23 | Lixte Biotechnology, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes for the treatment of ovarian cancer |
| US10071094B2 (en) | 2014-07-24 | 2018-09-11 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Protein phosphatase 2A inhibitors for treating myelodysplastic syndromes |
| WO2016040877A1 (en) * | 2014-09-12 | 2016-03-17 | Lixte Biotechnology, Inc. | Human dosing of phosphatase inhibitor |
| WO2016061193A1 (en) * | 2014-10-15 | 2016-04-21 | Lixte Biotechnology, Inc. | Process of synthesizing 3-(4-methylpiperazine-1-carbonyl)-7-oxabicyclo[2.2.1] heptane-2-carboxylic acid |
| WO2016099274A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Avantium Knowledge Centre B.V. | Improved process for the preparation of a benzene compound |
| AU2016219853B2 (en) * | 2015-02-19 | 2019-05-16 | Lixte Biotechnology, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes for the treatment of depressive and stress disorders |
| DK3294287T3 (da) * | 2015-05-15 | 2020-06-08 | Lixte Biotechnology Inc | Oxabicycloheptan-prodrugs |
| EP3407887B1 (en) | 2016-01-27 | 2021-09-01 | Lixte Biotechnology, Inc. | Clinical regimen for treating myelodysplastic syndrome with phosphatase inhibitor |
| CN106083877A (zh) * | 2016-06-21 | 2016-11-09 | 遵义医学院附属医院 | 不饱和去甲斑蝥素甲酯钡盐及其抗肿瘤应用 |
| MX2019006694A (es) | 2016-12-08 | 2019-08-21 | Lixte Biotechnology Inc | Oxabicicloheptanos para la modulacion de la respuesta inmunitaria. |
| EP4281063A4 (en) * | 2021-01-19 | 2024-11-13 | Lixte Biotechnology, Inc. | OXABICYCLOHEPTANE FOR THE TREATMENT OF SMALL CELL LUNG CANCER |
| US12315881B2 (en) | 2021-03-26 | 2025-05-27 | Alliance For Sustainable Energy, Llc | Electrolyte components for charging of lithium-ion batteries |
| WO2024097784A2 (en) * | 2022-11-03 | 2024-05-10 | Lixte Biotechnology, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes for treating refractory cancers |
| CN116531361B (zh) * | 2022-12-01 | 2024-11-15 | 武汉大学 | 氧桥双环-[2.2.1]-庚烯类化合物在制备抗新型冠状病毒药物中的应用 |
Family Cites Families (113)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2957906A (en) | 1955-10-25 | 1960-10-25 | Monsanto Chemicals | Ketones |
| JPS5752354B2 (pt) * | 1973-10-22 | 1982-11-06 | ||
| US3980674A (en) * | 1974-01-28 | 1976-09-14 | Delmar Chemicals Limited | 2,3-Disubstituted 7-oxabicyclo-[2.2.1]-5-heptene |
| JPS5132733A (en) | 1974-09-10 | 1976-03-19 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Josozai |
| US3954913A (en) * | 1975-01-06 | 1976-05-04 | The Standard Oil Company | Stabilized nitrile polymers |
| JPS5188631A (en) * | 1975-01-31 | 1976-08-03 | Hiiryoyosatsukinzai oyobi sonoseizoho | |
| US4143054A (en) * | 1977-11-04 | 1979-03-06 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 7-oxabicycloheptane- and 7-oxabicycloheptene compounds |
| US4218478A (en) * | 1979-01-05 | 1980-08-19 | Ruiko Oiwa | Trichostatin as an antiprotozoal agent |
| US4298752A (en) * | 1980-09-19 | 1981-11-03 | Regents Of The University Of California | Cycloadduct precursors of cantharidin and method |
| US4614825A (en) * | 1982-05-17 | 1986-09-30 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 7-oxabicycloheptane and 7-oxabicycloheptene compounds |
| US4463015A (en) * | 1982-08-18 | 1984-07-31 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Aryl substituted 7-oxabicycloheptane compounds, useful in inhibiting platelet aggregation |
| US4524151A (en) * | 1983-11-14 | 1985-06-18 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 7-Oxabicycloheptane thio ethers useful as cardiovascular agents |
| JPS61176523A (ja) * | 1985-01-30 | 1986-08-08 | Teruhiko Beppu | 制癌剤 |
| US4654355A (en) * | 1985-08-01 | 1987-03-31 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 7-oxabicycloheptane substituted amide-thioamide prostaglandin analogs |
| US4851553A (en) * | 1986-06-04 | 1989-07-25 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 7-oxabicycloheptane amido-carboxylic acids |
| US4816579A (en) | 1986-06-04 | 1989-03-28 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | 7-oxabicycloheptane amino-alcohol intermediates useful in making thromboxane A2 receptor antagonists |
| US4851423A (en) * | 1986-12-10 | 1989-07-25 | Schering Corporation | Pharmaceutically active compounds |
| SU1553533A1 (ru) | 1988-01-28 | 1990-03-30 | Военная Краснознаменная академия химической защиты им.Маршала Советского Союза С.К.Тимошенко | Способ получени 1,4-бисполифторалкил-7-оксбицикло [2.2.1]гептанов |
| JP2789365B2 (ja) * | 1988-12-14 | 1998-08-20 | 塩野義製薬株式会社 | ジカルボン酸モノエステルおよびその製造法 |
| US5763647A (en) | 1990-03-30 | 1998-06-09 | Shionogi & Co., Ltd. | Preparation of optically active 1,4-bridged-cyclohexane carboxylic acid derivatives |
| US5266710A (en) | 1990-12-18 | 1993-11-30 | Patel Ramesh N | (Exo,exo)-7-oxabicyclo[2.2.1]heptane-2,3-dimethanol; monoacyl ester and diacyl ester |
| US5326898A (en) * | 1992-02-11 | 1994-07-05 | Allergan, Inc. | Substituted phenylethenyl compounds having retinoid-like biological activity |
| US6602713B1 (en) | 2001-02-09 | 2003-08-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of protein phosphatase 2 catalytic subunit beta expression |
| US5518993A (en) * | 1994-08-12 | 1996-05-21 | Buckman Laboratories International, Inc. | Pesticidal compositions containing ethoxylated fatty amines for increasing the effectiveness of endothal and salts thereof |
| US5770382A (en) | 1994-12-30 | 1998-06-23 | Ligand Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic retinoids, methods for their production and use |
| US6222055B1 (en) * | 1995-07-06 | 2001-04-24 | Fraunhofer-Gesellschaft Zur Foerderung Der Angwandten Forschung E.V. | Hydrolyzable and polymerizable and/or polyadditive silanes |
| DE19600707B4 (de) | 1996-01-11 | 2004-02-19 | Glüsenkamp, Karl-Heinz, Dr. | Biyclische Anhydrid-Wirkstoff-Verbindungen, Verfahren zur Herstellung und Verwendung derselben |
| US5968965A (en) * | 1996-01-30 | 1999-10-19 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
| US6777217B1 (en) * | 1996-03-26 | 2004-08-17 | President And Fellows Of Harvard College | Histone deacetylases, and uses related thereto |
| US5925651A (en) * | 1996-04-03 | 1999-07-20 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
| US6387673B1 (en) * | 1997-05-01 | 2002-05-14 | The Salk Institute For Biological Studies | Compounds useful for the modulation of processes mediated by nuclear hormone receptors, methods for the identification and use of such compounds |
| US6875451B2 (en) * | 1997-10-15 | 2005-04-05 | Polarx Biopharmaceuticals Inc. | Compositions and methods for the treatment of primary and metastatic neoplastic diseases using arsenic compounds |
| US6632823B1 (en) | 1997-12-22 | 2003-10-14 | Merck & Co., Inc. | Substituted pyridine compounds useful as modulators of acetylcholine receptors |
| ATE413889T1 (de) | 1998-06-05 | 2008-11-15 | Nutrinia Ltd | Insulin angereichertes säuglingsnährpräparat |
| US20040110822A1 (en) * | 1998-07-14 | 2004-06-10 | The University Of Newcastle Research Associates | Anhydride modified cantharidin analogues useful in the treatment of cancer |
| AUPP466598A0 (en) * | 1998-07-14 | 1998-08-06 | University Of Newcastle Research Associates Limited, The | Product and process |
| US6235755B1 (en) * | 1998-08-07 | 2001-05-22 | Applied Research Systems Ars Holding N.A. | FSH mimetics for the treatment of infertility |
| US20020151515A1 (en) | 1999-06-18 | 2002-10-17 | Roberts Bruce L. | Preparation and use of superior vaccines |
| US6949624B1 (en) * | 1999-08-03 | 2005-09-27 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Cloning of the human nuclear receptor co-repressor gene |
| NZ517613A (en) | 1999-09-08 | 2004-01-30 | Sloan Kettering Inst Cancer | Novel class of cytodifferentiating agents and histone deacetylase inhibitors, and methods of use thereof |
| US7605185B2 (en) | 1999-11-23 | 2009-10-20 | Gerhart Graupner | Treatment of arrhythmia by retinoids affecting signal transduction |
| JP4518627B2 (ja) * | 2000-03-14 | 2010-08-04 | 旭化成イーマテリアルズ株式会社 | ヒドロキシポリアミド |
| WO2001070675A2 (en) * | 2000-03-24 | 2001-09-27 | Methylgene, Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
| PE20020354A1 (es) * | 2000-09-01 | 2002-06-12 | Novartis Ag | Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda) |
| US7199137B2 (en) * | 2000-09-21 | 2007-04-03 | Smithkline Beecham Plc | Imidazole derivatives as Raf kinase inhibitors |
| AU2001296558A1 (en) * | 2000-10-03 | 2002-04-15 | Oncopharmaceutical, Inc. | Inhibitors of angiogenesis and tumor growth for local and systemic administration |
| WO2002029018A2 (en) * | 2000-10-06 | 2002-04-11 | Michigan State University | Divinyl ether synthase gene and protein, and uses thereof |
| CN1213050C (zh) | 2000-11-23 | 2005-08-03 | 拜尔公司 | 氧杂双环[2.2.1]庚烷衍生物，其制备方法和作为农药的用途 |
| US20020177692A1 (en) | 2001-04-16 | 2002-11-28 | Myriad Genetics, Incorporated | BCL-XL-interacting protein and use thereof |
| AUPR392301A0 (en) * | 2001-03-23 | 2001-04-26 | University Of Newcastle Research Associates Limited, The | Protein phosphatase inhibitors |
| US20040253637A1 (en) * | 2001-04-13 | 2004-12-16 | Biosite Incorporated | Markers for differential diagnosis and methods of use thereof |
| US6905669B2 (en) * | 2001-04-24 | 2005-06-14 | Supergen, Inc. | Compositions and methods for reestablishing gene transcription through inhibition of DNA methylation and histone deacetylase |
| US20070015144A9 (en) | 2001-05-25 | 2007-01-18 | Genset, S.A. | Human cDNAs and proteins and uses thereof |
| AU2002322721B2 (en) * | 2001-08-03 | 2009-01-08 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Acylthiols and component thiol compositions as anti-HIV and anti-retroviral agents |
| US20040010045A1 (en) * | 2001-09-07 | 2004-01-15 | Taolin Yi | Therapeutic compositions comprised of pentamidine and methods of using same to treat cancer |
| US7179450B2 (en) * | 2001-09-20 | 2007-02-20 | Medi-Physics, Inc. | Methods for in vivo evaluation of pulmonary physiology and/or function using NMR signals of polarized Xe |
| AU2002340253C1 (en) * | 2001-10-16 | 2011-03-31 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Treatment of neurodegenerative diseases and cancer of the brain |
| ATE352319T1 (de) | 2001-11-06 | 2007-02-15 | Novartis Pharma Gmbh | Kombination cyclooxygenase-2 inhibitor/ histone deacetylase inhibitor |
| AU2003211576A1 (en) * | 2002-02-20 | 2003-09-09 | Sueharu Horinouchi | Histone deacetylase inhibitors and process for producing the same |
| US7456219B2 (en) * | 2002-03-04 | 2008-11-25 | Merck Hdac Research, Llc | Polymorphs of suberoylanilide hydroxamic acid |
| US7148257B2 (en) * | 2002-03-04 | 2006-12-12 | Merck Hdac Research, Llc | Methods of treating mesothelioma with suberoylanilide hydroxamic acid |
| EP1484972B1 (de) | 2002-03-08 | 2008-11-19 | Basf Se | Fungizide mischungen auf der basis von prothioconazol mit einem insektizid |
| US6809118B2 (en) * | 2002-07-25 | 2004-10-26 | Yih-Lin Chung | Methods for therapy of radiation cutaneous syndrome |
| AU2003241346A1 (en) | 2002-05-01 | 2003-11-17 | The Cleveland Clinic Foundation | Therapeutic compositions comprised of pentamidine and methods of using same to treat cancer |
| NZ538686A (en) * | 2002-09-23 | 2008-01-31 | Schering Corp | Novel imidazopyrazines as cyclin dependent kinase inhibitors |
| US7154002B1 (en) | 2002-10-08 | 2006-12-26 | Takeda San Diego, Inc. | Histone deacetylase inhibitors |
| AU2003291736A1 (en) * | 2002-11-05 | 2004-06-03 | Cell Signaling Technology, Inc. | Methods and materials for examining pathways associated with glioblastoma progression |
| GB0226855D0 (en) * | 2002-11-18 | 2002-12-24 | Queen Mary & Westfield College | Histone deacetylase inhibitors |
| US20040197888A1 (en) | 2002-12-31 | 2004-10-07 | Armour Christopher D. | Alternatively spliced isoforms of histone deacetylase 3 (HDAC3) |
| WO2004064727A2 (en) * | 2003-01-16 | 2004-08-05 | Georgetown University | Method of cancer treatment using hdac inhibitors |
| US8802116B2 (en) | 2003-02-27 | 2014-08-12 | Novasel Australia Pty. Ltd. | Poloxamer emulsion preparations |
| US20050102708A1 (en) * | 2003-03-12 | 2005-05-12 | Laurent Lecanu | Animal model simulating neurologic disease |
| WO2004087153A2 (en) * | 2003-03-28 | 2004-10-14 | Chiron Corporation | Use of organic compounds for immunopotentiation |
| US7842835B2 (en) * | 2003-07-07 | 2010-11-30 | Georgetown University | Histone deacetylase inhibitors and methods of use thereof |
| WO2005025620A2 (en) * | 2003-08-13 | 2005-03-24 | Pharmacia Corporation | Combination therapy with inhibitors of inducible nitric oxide synthase and alkylating agents |
| AU2004266233A1 (en) * | 2003-08-13 | 2005-03-03 | Amgen, Inc. | Melanin concentrating hormone receptor antagonist |
| US7378409B2 (en) * | 2003-08-21 | 2008-05-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted cycloalkylamine derivatives as modulators of chemokine receptor activity |
| US20070135365A1 (en) * | 2003-08-21 | 2007-06-14 | Katsuyuki Tanizawa | Pharmaceutical composition for preventing or remedying cardiac hypertrophy and cardiovascular disease caused thereby |
| US7094193B2 (en) | 2003-08-28 | 2006-08-22 | Philip Morris Usa Inc. | High speed laser perforation of cigarette tipping paper |
| WO2005034866A2 (en) * | 2003-10-06 | 2005-04-21 | Glaxo Group Limited | Preparation of 1, 6, 7- trisubstituted azabenzimidazoles as kinase inhibitors |
| US20070208166A1 (en) * | 2003-10-24 | 2007-09-06 | Exelixis, Inc. | Tao Kinase Modulators And Method Of Use |
| JP2007511528A (ja) | 2003-11-13 | 2007-05-10 | ボード・オブ・リージエンツ，ザ・ユニバーシテイ・オブ・テキサス・システム | 心肥大および心不全の処置としてのｔｒｐチャネル阻害方法 |
| GB0328157D0 (en) | 2003-12-04 | 2004-01-07 | Imp College Innovations Ltd | Compounds |
| EP1699436A2 (en) | 2003-12-12 | 2006-09-13 | Myogen, Inc. | Enoximone formulations and their use in the treatment of cardiac hypertrophy and heart failure |
| US8652502B2 (en) * | 2003-12-19 | 2014-02-18 | Cordis Corporation | Local vascular delivery of trichostatin A alone or in combination with sirolimus to prevent restenosis following vascular injury |
| US20050282893A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-12-22 | Au Jessie L | Methods and compositions for using suramin, pentosan, polysulfate, telomerase antisense and telomerase inhibitors |
| US20050283841A1 (en) | 2004-02-02 | 2005-12-22 | Mckinsey Timothy A | Inhibition of protein kinase C-related kinase (PRK) as a treatment for cardiac hypertrophy and heart failure |
| US7253204B2 (en) * | 2004-03-26 | 2007-08-07 | Methylgene Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
| FR2872704B1 (fr) | 2004-07-12 | 2007-11-02 | Laurent Schwartz | Pluritherapie contre le cancer |
| CN101106997A (zh) | 2004-08-17 | 2008-01-16 | 约翰·霍普金斯大学 | Pde5抑制剂组合物及治疗心脏病征候的方法 |
| KR100677149B1 (ko) * | 2004-11-12 | 2007-02-02 | 삼성전자주식회사 | 잉크 조성물 |
| US20060264415A1 (en) * | 2005-04-01 | 2006-11-23 | Methylgene Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
| GB0511266D0 (en) | 2005-06-02 | 2005-07-13 | Trust | Chemical compounds |
| WO2007014029A2 (en) | 2005-07-22 | 2007-02-01 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Yin yang 1 as a treatment for cardiac hypertrophy and heart failure |
| JP2009504656A (ja) * | 2005-08-10 | 2009-02-05 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | デアセチラーゼ阻害剤の使用法 |
| EP2275095A3 (en) | 2005-08-26 | 2011-08-17 | Braincells, Inc. | Neurogenesis by muscarinic receptor modulation |
| JP2009521424A (ja) * | 2005-12-19 | 2009-06-04 | メチルジーン インコーポレイテッド | 抗真菌剤の活性を増強するためのヒストンデアセチラーゼ阻害剤 |
| CA2641308A1 (en) * | 2006-02-06 | 2007-08-16 | Lixte Biotechnology Holdings, Inc. | Use of phosphatases to treat tumors overexpressing n-cor |
| CN101466670B (zh) | 2006-04-07 | 2013-04-17 | 梅特希尔基因公司 | 组蛋白脱乙酰酶抑制剂 |
| US20090018142A9 (en) * | 2006-05-02 | 2009-01-15 | Zhengping Zhuang | Use of phosphatases to treat tumors overexpressing N-CoR |
| WO2008030617A2 (en) * | 2006-09-07 | 2008-03-13 | Stemline Therapeutics, Inc. | Cancer therapy with cantharidin and cantharidin analogs |
| JP2010502681A (ja) | 2006-09-08 | 2010-01-28 | アンスティテュ・グスターブ・ルシ | プロテインホスファターゼ１、ｇａｄｄ３４およびプロテインホスファターゼ１／ｇａｄｄ３４複合体の阻害剤、その調製および使用 |
| JP5198755B2 (ja) | 2006-10-31 | 2013-05-15 | 日精株式会社 | 機械式駐車場装置 |
| WO2008058342A1 (en) * | 2006-11-15 | 2008-05-22 | Genetic Technologies Limited | Compounds, compositions and methods for controlling invertebrate pests |
| CA2676422C (en) | 2007-02-06 | 2018-10-16 | Lixte Biotechnology Holdings, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use |
| US20090035292A1 (en) * | 2007-08-03 | 2009-02-05 | Kovach John S | Use of phosphatases to treat neuroblastomas and medulloblastomas |
| EA018618B1 (ru) * | 2007-10-01 | 2013-09-30 | Ликсте Байотекнолоджи, Инк. | Ингибиторы hdac |
| JP5069091B2 (ja) | 2007-12-12 | 2012-11-07 | 三菱電機株式会社 | 監視カメラおよび監視カメラシステム |
| US8227473B2 (en) | 2008-08-01 | 2012-07-24 | Lixte Biotechnology, Inc. | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use |
| WO2010147612A1 (en) | 2009-06-18 | 2010-12-23 | Lixte Biotechnology, Inc. | Methods of modulating cell regulation by inhibiting p53 |
| CA2730148C (en) | 2008-08-01 | 2018-04-03 | Lixte Biotechnology, Inc. | Neuroprotective agents for the prevention and treatment of neurodegenerative diseases |
| EP2309853A4 (en) | 2008-08-01 | 2012-04-25 | Lixte Biotechnology Inc | METHOD FOR CELL MITITULATING BY INHIBITION OF SERIN / THREONINE PHOSPHATASE |
| US20120135522A1 (en) | 2009-06-18 | 2012-05-31 | Kovach John S | Methods of modulating cell regulation by inhibiting p53 |
-
2008
- 2008-02-06 CA CA2676422A patent/CA2676422C/en active Active
- 2008-02-06 EA EA200970737A patent/EA023804B1/ru unknown
- 2008-02-06 US US12/069,147 patent/US7998957B2/en active Active
- 2008-02-06 CN CN201310655668.5A patent/CN103788108B/zh active Active
- 2008-02-06 WO PCT/US2008/001549 patent/WO2008097561A1/en not_active Ceased
- 2008-02-06 CN CN200880004292.9A patent/CN101662939B/zh active Active
- 2008-02-06 BR BRPI0806365A patent/BRPI0806365B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2008-02-06 MX MX2009008347A patent/MX2009008347A/es active IP Right Grant
- 2008-02-06 AU AU2008214299A patent/AU2008214299B2/en active Active
- 2008-02-06 JP JP2009549092A patent/JP5693850B2/ja active Active
- 2008-02-06 EP EP08725214.4A patent/EP2124550B1/en active Active
-
2011
- 2011-06-30 US US13/174,249 patent/US8426444B2/en active Active
-
2013
- 2013-04-19 US US13/866,854 patent/US8822461B2/en active Active
-
2014
- 2014-07-10 US US14/328,384 patent/US9079917B2/en active Active
-
2017
- 2017-02-06 US US15/425,550 patent/US10023587B2/en active Active
-
2018
- 2018-06-26 US US16/018,924 patent/US10399993B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2124550A4 (en) | 2011-04-06 |
| EP2124550B1 (en) | 2017-04-19 |
| CN103788108A (zh) | 2014-05-14 |
| WO2008097561A8 (en) | 2009-10-01 |
| CA2676422C (en) | 2018-10-16 |
| US20120270736A1 (en) | 2012-10-25 |
| AU2008214299B2 (en) | 2014-01-09 |
| US20180370983A1 (en) | 2018-12-27 |
| JP5693850B2 (ja) | 2015-04-01 |
| CA2676422A1 (en) | 2008-08-14 |
| EA023804B1 (ru) | 2016-07-29 |
| MX2009008347A (es) | 2009-10-19 |
| CN103788108B (zh) | 2017-04-12 |
| US7998957B2 (en) | 2011-08-16 |
| AU2008214299A1 (en) | 2008-08-14 |
| US20170369503A1 (en) | 2017-12-28 |
| WO2008097561A1 (en) | 2008-08-14 |
| EA200970737A1 (ru) | 2010-02-26 |
| EP2124550A1 (en) | 2009-12-02 |
| BRPI0806365B1 (pt) | 2020-01-21 |
| US9079917B2 (en) | 2015-07-14 |
| CN101662939B (zh) | 2015-11-25 |
| US20150045373A1 (en) | 2015-02-12 |
| BRPI0806365B8 (pt) | 2021-05-25 |
| US8822461B2 (en) | 2014-09-02 |
| US20090036309A1 (en) | 2009-02-05 |
| US8426444B2 (en) | 2013-04-23 |
| US10023587B2 (en) | 2018-07-17 |
| CN101662939A (zh) | 2010-03-03 |
| US20130302402A1 (en) | 2013-11-14 |
| US10399993B2 (en) | 2019-09-03 |
| JP2010518081A (ja) | 2010-05-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BRPI0806365A2 (pt) | composto, composição farmacêutica, processo de preparação de um composto, método de controle de vegetação indesejada, método de inibição da atividade de fosfatase vegetal, uso do composto | |
| AU2009277031B2 (en) | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use | |
| US20140051678A1 (en) | Inhibitors of the activity of complex iii of the mitochondrial electron transport chain and use thereof for treating diseases | |
| CA3253882A1 (en) | Combination drug for treating triple-negative breast cancer | |
| JP6617702B2 (ja) | Ｆｔｙ７２０のアザサイクリック拘束アナログ | |
| ES2634152T3 (es) | Oxabicicloheptanos y oxabicicloheptenos, su preparación y uso | |
| KR20150014910A (ko) | 허혈-재관류계 질환의 치료 화합물 | |
| HK1140375B (en) | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use | |
| HK1140375A (en) | Oxabicycloheptanes and oxabicycloheptenes, their preparation and use | |
| CN106146612B (zh) | 一类乙二醛酶i不可逆抑制剂及其制备方法和用途 | |
| WO2017177216A1 (en) | Prodigiosin analogs | |
| CN105037490B (zh) | 一类乙二醛酶i不可逆抑制剂及其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B25A | Requested transfer of rights approved |
Owner name: LIXTE BIOTECHNOLOGY, INC. (US) Free format text: TRANSFERIDO DE: LIXTE BIOTECHNOLOGY HOLDINGS, INC. |
|
| B07D | Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette] | ||
| B06F | Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette] | ||
| B07E | Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette] |
Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI |
|
| B07A | Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette] | ||
| B06A | Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette] | ||
| B09A | Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette] | ||
| B16A | Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 21/01/2020, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. |
|
| B16C | Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 06/02/2008 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF |
|
| B21F | Lapse acc. art. 78, item iv - on non-payment of the annual fees in time |
Free format text: REFERENTE A 18A ANUIDADE. |
|
| B24J | Lapse because of non-payment of annual fees (definitively: art 78 iv lpi, resolution 113/2013 art. 12) |
Free format text: EM VIRTUDE DA EXTINCAO PUBLICADA NA RPI 2865 DE 02-12-2025 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDA A EXTINCAO DA PATENTE E SEUS CERTIFICADOS, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013. |