BRPI0915981A2 - método para tratar a degeneração macular atrófica relacionada à idade - Google Patents

Abstract

MÉTODO PARA TRATAR A DEGENERAÇÃO MACULAR ATRÓFICA RELACIONADA Á IDADE. Composições e métodos para tratar a degeneração macular seca relacionada á idade ("DMRI seca") administrando a um local intraocular de um agente antineovascular(como bevacizumab)em um veículo polimérico líquido ou ´solido (ou ambos), como o ácido hiaurônico biodegradável ou PLGA(ou PLA).

Description

: 1/39 Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MÉTODO : PARA TRATAR A DEGENERAÇÃO MACULAR ATRÓFICA RELACIONA- DA À IDADE". - REFERÊNCIA CRUZADA Este pedido reivindica o benefício do pedido de patente provisó- ria US Nº Serial 12/176, 238, depositado em 18 julho de 2008, toda descri- ção da qual é incorporada aqui por esta referência específica.

ANTECEDENTE A presente invenção é direcionada a composições (isto é, siste- mas de entrega de fármacos) e a métodos para tratar condições oculares, e para prevenir a ocorrência de certas condições oculares. Em particular, a presente invenção é dirigida a composições farmacêuticas e métodos para tratar e para prevenir condições oculares posteriores, por exemplo, preve- ' nindo neovascularizações da retina, da coroide e/ou da mácula e/ou para tratar vários tipos de degeneração macular (como degeneração macular re- lacionada à idade), através do uso de um sistema de distribuição de fárma- cos compreendendo um agente antineovascular. No mundo industrializado, a expectativa média de vida é superi- or a 80 anos de idade e está aumentando constantemente. Infelizmente, a qualidade de vida para os idosos está frequentemente drasticamente diminu- ída pela doença ocular conhecida como degeneração macular relacionada à idade ("DMRI" ou "DMI"). A DMRI é a principal causa de cegueira no mundo todo e a Organização Mundial da Saúde estimou que cerca de 14 milhões de pessoas são cegas ou severamente deficientes por causa da DMRI. O so- frimento da DMRI tem um grande impacto na saúde física e mental da popu- lação geriátrica e de suas famílias e apresenta uma responsabilidade signifi- cativa no cuidado de saúde pública. As características seminais da DRMI| é a perda progressiva da visão central atribuível às alterações degenerativas e neovasculares na mácula, uma área especializada no centro da retina. Existem duas formas da DRMI, DRMI atrófica ou seca e DMRI neovascular ou úmida. Normalmente a DRMI começa como a DMRI seca. À DMRI seca é caracterizada pela formação da placa amarela como depósitos,

: 2/39 chamados de drusas na mácula, entre o epitélio pigmentar da retina (EPR) e : a coroide subjacente. Cerca de 15% dos pacientes com DMRI seca desen- volvem DMRI úmida caracterizada pela neovascularização coroidal, que se - dá pela formação de novos vasos sanguíneos na coroide e perda da visão.

Embora não haja cura para a DMRI, há tratamentos conhecidos para a DMRI úmida (a forma menos prevalente da DMRI), tais como o uso de agentes antineovasculares e terapia fotodinâmica (irradiação a laser da mácula). Os agentes antineovasculares para o tratamento da DMRI úmida incluem agentes que bloqueiam a ação do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), retardando, assim, a angiogênese (formação de novos va- sos sanguíneos na retina), que leva a neovascularização coroidal e perda de visão em pacientes com DMRI úmida. Tais agentes "anti-VEGF" aprovados ou em estudo clínico para tratar a DMRI úmida incluem o bevacizumab (A- ' vastin), ranibizumab (Lucentis), e pegaptanib (Macugen). O bevacizumab é um anticorpo anti-VEGF de sequência completa aprovado para uso no cân- Ú cer de cólon metastático. O ranibizumab é um fragmento de anticorpo mono- clonal humanizado anti-VEGF que inibe todos os isotipos de VEGF e o pe- gaptanib é um aptâmero neutralizante do VEGF que inibe especificamente uma isoforma do VEGF (VEGF-165).

Outros agentes anti- VEGF conhecidos incluem pequeno RNA de interferência (siRNAs), corticosteroides, tais como acetato de anacortave, acetonido de triancinolona e acetonido de fluocinolona; inibidores do recep- tor da tirosina quinase (como o vatalanib e ruboxistaurin [diminui a atividade da proteína quinase CJ); lactato de esqualamina; e fatores de crescimento, incluindo o fator derivado de pigmento epitelial. Os siRNAs podem inibir a produção do VEGF e a produção do receptor do VEGF, os corticosteroides podem tratar o aspecto DME da DMRI úmida, os inibidores do receptor da tirosina quinase inibem os efeitos a jusantes do VEGF, e o lactato de esqua- lamina inibe os canais de íons da membrana plasmática com efeitos a jusan- tesdoVEGF.

Uma condição ocular pode incluir uma doença, uma dor, ou uma condição que afeta ou que envolve o olho ou uma das partes ou regiões do

: 3/39 olho.

Genericamente, o olho inclui o globo ocular e os tecidos e fluidos que constituem o globo ocular, os músculos perioculares (como os músculos o- blíquo e reto) e a porção do nervo óptico, que fica no interior ou adjacente ao - globo ocular.

Uma condição ocular frontal ou anterior do olho é uma doença, umadorouuma condição que afeta ou que envolve uma região ou sítio ocu- lar, como um músculo periocular, uma pálpebra, ou um tecido ou líquido do globo ocular que é localizado anterior à parede posterior da cápsula do cris- talino ou dos músculos ciliares.

Assim, uma condição ocular frontal do olho afeta ou envolve principalmente, a conjuntiva, a córnea, a conjuntiva, a câ- mara anterior, a íris, a câmara posterior (atrás da íris, mas em frente da pa- rede posterior da cápsula do cristalino), o cristalino e a cápsula do cristalino, bem como os vasos sanguíneos, vasos linfáticos e nervos que vascularizam, mantenham ou inervam uma região ou sítio ocular anterior. - Uma condição ocular frontal do olho (anterior) pode incluir uma doença, uma dor ou uma condição, como, por exemplo, afacia; pseudofacia, Ú astigmatismo; blefaroespasmo, catarata; doenças da conjuntiva, conjuntivite; doenças da córnea; úlcera de córnea, síndromes do olho seco; doenças das pálpebras; doenças das vias lacrimais; obstrução dos ductos lacrimais; mio- pia, presbiopia; distúrbios da pupila; distúrbios de refração e estrabismo.

O glaucoma pode ser considerado uma condição ocular frontal do olho, porque o objetivo clínico do tratamento do glaucoma pode ser o de reduzir a hiper- tensão do fluido aquoso na câmara anterior do olho (ou seja, reduzir a pres- são intraocular). Uma condição ocular posterior (ou parte posterior do olho) é uma doença, dor ou condição que afeta ou envolve principalmente uma regi- ão ou sítio ocular posterior como coroide ou esclera (em uma posição poste- rior a um plano através da parede posterior da cápsula do cristalino), vítreo, câmara vítrea, retina, nervo óptico (ou seja, o disco óptico) e vasos e nervos sanguíneos que vascularizam ou inervam uma região ou sítio ocular poste- rior Assim, uma condição ocular posterior pode incluir uma doença, uma dor ou uma condição, como por exemplo, a degeneração macular (co-

: 4/39 mo a degeneração macular não-exsudativa relacionada à idade e a degene- ração macular exsudativa relacionada à idade); neovascularização coroidal; neurorretinopatia macular aguda; edema macular (como edema macular cis- - toide e edema macular diabético), doença de Behçet, distúrbios da retina, retinopatia diabética (incluindo retinopatia diabética proliferativa); doença oclusiva arterial da retina; oclusão da veia central da retina; doenças uveítica da retina, descolamento de retina; trauma ocular que afeta um sítio ou local í posterior ocular, uma condição ocular posterior causada ou influenciado por um tratamento ocular a laser; condições oculares posteriores causadas ou influenciadas por uma terapia fotodinâmica; fotocoagulação; retinopatia da radiação, transtornos da membrana epiretinal; oclusão do ramo da veia cen- tral da retina; neuropatia óptica isquêmica anterior, disfunção da retina sem retinopatia diabética, retinite pigmentosa e glaucoma.

O glaucoma também - pode ser considerado uma condição ocular posterior, porque um objetivo terapêutico do tratamento do glaucoma é prevenir a perda ou redução da ocorrência de perda de visão devido a danos ou a perda de células da retina ou células do nervo óptico (ou seja, neuroproteção). Como foi afirmado, a degeneração macular, como a DMRI é uma causa principal de cegueira no mundo e estima-se que treze milhões de americanos têm indício de degeneração macular.

A degeneração macular resultada em uma quebra da mácula, a parte sensível à luz da retina res- ponsável pela visão nítida direta necessária para ler ou dirigir.

A visão cen- tral é especialmente afetada.

A degeneração macular é diagnosticada como seca (atrófica) ou úmida (exsudativa). A forma seca de degeneração macular é mais comum do que a forma úmida da degeneração macular, com cerca de 90% dos pacientes com DMRI sendo diagnosticados com DMRI seca.

À forma úmida da doença geralmente leva a uma perda de visão mais severa.

A degeneração macular pode produzir uma lenta ou súbita perda de visão indolor.

A causa da degeneração macular não é clara.

A forma seca da D- MRI pode resultar do envelhecimento e afinamento dos tecidos da mácula, depósito de pigmento na mácula, ou uma combinação dos dois processos.

Com a DMRI úmida, novos vasos sanguíneos crescem abaixo da retina e

: 5/39 vazam sangue e fluidos. Este vazamento faz com que as células da retina morram e criam pontos cegos na visão central. O edema macular ("EM") pode resultar em uma expansão da - mácula. O edema é causado pelo vazamento de fluido dos vasos sanguí- neos da retina. O sangue vaza para fora das paredes dos vasos fracos em uma área muito pequena da mácula, que é rica em cones, as terminações nervosas que detectam a cor e a partir das quais a visão diurna depende. O embaçamento ocorre então no meio ou apenas ao lado do campo visual central. A perda visual pode progredir durante um período de meses. A obs- trução dos vasos sanguíneos da retina, a inflamação ocular e a degeneração macular relacionada à idade, todos têm sido associados com o edema ma- cular. A mácula também pode ser afetada pelo inchaço após a extração da catarata. Sintomas do EM incluem visão central embaçada, visão distorcida, - visão tingida de rosa e sensibilidade à luz. As causas do EM podem incluir oclusão da veia da retina, degeneração macular, vazamento macular diabé- tico, inflamação ocular, coriorretinopatia serosa central idiopática, uveite an- terior ou posterior, pars planitis, retinite pigmentosa, retinopatia por radiação, descolamento do vítreo posterior, formação da membrana epiretinal, telangi- ectasia retinal justafoveal idiopática, capsulotomia ou iridotomia com Nd: YAG. Alguns pacientes com EM podem ter um histórico de uso de epinefrina tópica ou análogos de prostaglandina para o glaucoma. A primeira linha de tratamento para EM é tipicamente gotas anti-inflamatórias de aplicação tópi- ca. O aumento da permeabilidade capilar da retina e subsequente edema da retina de edema macular pode resultar de uma ruptura da barreira sanguí- neadaretina mediada em parte pelo fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), uma glicoproteína de 45 kD. Sabe-se que o VEGF pode aumentar a permeabilidade vascular, possivelmente por aumentar a fosforilação de pro- teínas de junção apertada, como ocludina e zônula ocluden. Da mesma for- ma, em estados de doença não-ocular humana, tais como ascite, o VEGF tem sido caracterizado como um potente fator de permeabilidade vascular (VPF).

Bioquimicamente, o VEGF é conhecido por ser um dos principais

= 6/39 contribuintes para o aumento no número de capilares em tecidos submetidos à angiogênese. As células endoteliais capilares bovinas irão se proliferar e | mostrar sinais de estruturas tubulares in vitro após estimulação por VEGF. À - regulação positiva do VEGF é um componente importante da resposta fisio- lógica ao exercício e seu papel na angiogênese é suspeito de ser um trata- mento possível em lesões vasculares.

O VEGF provoca uma cascata de sinalização intracelular em cé- lulas endoteliais. O VEGF se ligando ao receptor-2 VEGF (VEGFR- 2) inicia uma cascata de sinalização da tirosina quinase que estimula a produção de fatores que variadamente estimula a permeabilidade do vaso (síntese de óxido nítrico epitelial; (eNOS), proliferação/ sobrevivência (DFGF; fator de crescimento fibroblástico básico), migração (moléculas de adesão intercelu- lar (ICAMs); moléculas de adesão celular vascular (VCAMs); metaloprotea- . ses de matriz (MMP)) e finalmente, diferenciação em vasos sanguíneos ma- duros. Como parte da cascata de sinalização angiogênica, o NO (óxido nítri- à co) é amplamente considerado um dos principais contribuintes para a res- posta angiogênica porque a inibição de NO reduz significativamente os efei- tos dos fatores de crescimento angiogênico.

A retina humana normal contém pouco ou nenhum VEGF; no en- tanto, a hipóxia causa regulação positiva da produção de VEGF. Os estados de doença caracterizados por regulação positiva do VEGF induzida por hi- póxia incluem, sem limitação, CRVO e OVR. Esta regulação positiva induzi- da por hipóxia do VEGF pode ser inibida farmacologicamente. Pe'er J. et al., Vascular Endothelial Growth Factor Upregulation In Human Central Retinal Vein Occlusion, OPHTHALMOLOGY 1998; 105:412-416. Foi demonstrado que os anticorpos anti-VEGF podem inibir o VEGF dirigido a proliferação celular do endotélio capilar. Assim, a atenuação dos efeitos de VEGF introduz uma lógica para o tratamento do edema macular da doença oclusiva venosa.

Além disso, a hiperexpressão do VEGF provoca o aumento da permeabilidade nos vasos sanguíneos, além de estimular a angiogênese. Na degeneração macular "úmida" ou exsudativa, o VEGF causa a proliferação de capilares na retina. Já que o aumento da angiogênese também provoca

: 7139 edema, o sangue e outros fluidos da retina vazam para a retina, causando perda de visão. A invenção inclui um novo tratamento para a degeneração macular sem a neovascularização através do uso de um agente antineovas- - cular, como um aptâmero de inibição do VEGF, ou outro composto inibidor do VEGF, de talmaneira a parar a principal cascata de sinalização para a angiogênese, prevenindo, assim, esses sintomas.

A retinopatia diabética é a principal causa da cegueira entre a- dultos com idade entre 20 e 74 anos. A isquemia macular é uma das princi- pais causas de perda irreversível de acuidade visual e sensibilidade ao con- traste e diminuída em pacientes com retinopatia diabética. A não perfusão capilar e a diminuição do fluxo sanguíneo capilar que é responsável por essa isquemia é vista clinicamente no angiograma com fluoresceína como um aumento na zona foveal avascular (FAZ) ou uma irregularidade do contorno - da FAZ. Estes achados são preditores de outras, talvez bem mais conheci- das,complicações que ameaçam a visão da retinopatia diabética, incluindo o edema macular e a retinopatia proliferativa. Talvez mais importante, a não perfusão capilar extensiva é também um preditor de um prognóstico visual pobre da retinopatia diabética.

Existem tratamentos disponíveis ou em desenvolvimento para edema macular e retinopatia proliferativa, como fotocoagulação a laser, cor- ticoides intravítreo e terapias anti-VEGF. Embora a fotocoagulação a laser tenha sido estudada para a perda de visão diretamente associada a isque- mia macular, não há atualmente nenhum tratamento conhecido para esta indicação.

A superfície exterior do globo ocular normal de mamíferos tem uma camada de tecido conhecida como epitélio conjuntival, abaixo da qual está uma camada de tecido chamada fáscia de Tenon (também chamada estroma conjuntival). A extensão da fáscia de Tenon se estendendo para trás por todo o globo forma uma bainha fascial conhecida como cápsula de Tenon. Sob a fáscia de Tenon está a episclera. Coletivamente, o epitélio conjuntival e a fáscia de Tenon são referidos como a conjuntiva. Como se observa, sob a fáscia de Tenon está a episclera, debaixo da qual se encon-

: 8/39 tra a esclera, seguida pela coroide. A maioria dos vasos linfáticos e seu sis- tema associado de drenagem, que é muito eficiente na remoção de agentes terapêuticos colocados nas suas imediações, está presente na conjuntiva do - olho.

Um agente terapêutico pode ser administrado ao olho para tratar uma condição ocular. Por exemplo, o tecido-alvo para um agente terapêutico anti-hipertensivo para tratar a pressão intraocular elevada característica do glaucoma pode ser o corpo ciliar e/ou a rede trabecular. Infelizmente, a ad- ministração de um farmacêutico anti-hipertensivo tópico ocular na forma de colírio pode resultar em uma lavagem rápida da maioria, se não de todos os agentes terapêuticos antes de chegar ao corpo ciliar e/ou ao tecido-alvo da rede trabecular, exigindo, assim, redosagens frequentes para tratar eficaz- mente uma condição hipertensa. Além disso, os efeitos colaterais para paci- - entes da administração tópica de medicamentos antiglaucomatosos e seus conservantes variam de desconforto ocular para as alterações que ameaçam : a visão da superfície ocular, incluindo hiperemia conjuntival (vermelhidão dos olhos), ardor, dor, diminuição e função da produção de lágrimas, diminu- ição da estabilidade do filme lacrimal, ceratite ponteada superficial, metapla- sia de células escamosas, e as alterações na morfologia da célula. Esses efeitos adversos dos colírios tópicos antiglaucomatosos podem interferir com o tratamento do glaucoma desencorajando a adesão da administração ao paciente, assim como o tratamento prolongado com colírios está associado a um maior fracasso da cirurgia de filtração. Asbell P.A,, et al Effects of topical antiglaucoma medications on the ocular surface, Ocul Surf 2005 Jan; 3(1):2740; Mueller M,, et al. Tear film break up time and Schirmer test after different antiglaucomatous medications, Invest Ophthalmo! Vis Sci 2000 Mar 15; 41(4): S283.

É conhecido a administração de um fármaco de depósito no es- paço sub-tenon posterior (ou seja, próximo da mácula). Ver, por exemplo, coluna4 da patente US 6.413.245. Além disso, é conhecido a administração de um implante polilático no espaço sub-tenon ou em um local supracoroidal. Ver, por exemplo, patentes US 5.264.188 publicada e pedido de patente pu-

mm 9/39 blicado US 20050244463.

Um agente antineovascular pode ser usado para o tratamento de uma condição ocular, como uma condição ocular posterior, que envolve a - angiogênese como a neovascularização da coroide (CNV). A distribuição de uma quantidade terapêutica de um agente antineovascular (um fármaco) nos olhos pode ser difícil, senão impossível, para os fármacos com meia-vida plasmática curta, uma vez que a exposição do fármaco nos tecidos intraocu- lares é limitada. Portanto, uma maneira mais eficaz de distribuir um fármaco para tratar uma condição ocular posterior, como a CNV, é colocar o fármaco diretamente nos olhos, como diretamente no vítreo. Maurice, D.M. (1983) Micropharmaceutics of the eye, Ocular Inflammation Ther. 1:97-102; Lee, V.H.L. et al. (1989), Drug delivery to the posterior segment" Chapter 25 In Retina. T.E. Ogden e A. P. Schachat eds, St. Louis: CV Mosby, vol. 1, p. - 483-98, e Olsen, T.W. et al. (1995), Human scleral permeability: effects of age, cryotherapy, transscleral diode laser, and surgical thinning, Invest. Oph- thalmol. Vis. Sci. 36:1893-1903.

As técnicas como a injeção intravítrea de um fármaco têm mos- trado resultados promissores, mas devido a curta meia-vida intraocular do agente ativo, incluindo agentes antineovasculares, as injeções intravítreas devem ser frequentemente repetidas para manter um nível terapêutico do fármaco. Por sua vez, esse processo repetitivo aumenta o potencial de efei- tos colaterais como infecção, descolamento de retina, endoftalmite e catara- ta.

Sistema de distribuição de fármacos intraocular pode ser feito de um polímero biodegradável, como polímeros poli (lático) (PLA), polímeros poli (lático-co-glicólico) (PLGA), bem como copolímeros de polímeros PLA e PLGA. Os polímeros PLA e PLGA se degradam por hidrólise, e os produtos de degradação, ácido lático e ácido glicólico, são metabolizados em dióxido de carbono e água.

Os sistemas de distribuição de fármacos têm sido formulados com vários agentes ativos. Por exemplo, é conhecido fazer implantes de po- límero 2-metoxiestradiol de poliácido lático (como bastões e obréia) desti-

: 10/39 nados para uso intraocular, por um método de extrusão por derretimento. Ver, por exemplo, pedido de patente publicado US 20050244471. Além dis- so, é conhecido fazer implantes de polímero de poliácido lático brimonidina - e microesferas para uso intraocular. Ver, por exemplo, pedidos de patente publicados US 20050244463 e 20050244506, e pedido de patente US núme- ro de série 11/395 019. Além disso, é conhecido por fazer bimatoprost con- tendo os implantes de polímero de ácido polilático e microesferas para uso intraocular. Ver, por exemplo, pedidos de patente publicados US 2005 0244464 e 2006 0182781, e os pedidos de patentes US número de série 11/303,462;e11/371,118.

EP 488 401 discute implantes intraoculares, feitos de certos áci- dos poliláticos, para ser aplicado ao interior do olho depois de uma operação cirúrgica para distúrbios de corpo vítreo/ retina ou para o glaucoma. EP ] 430539 discute o uso de um implante biodegradável que é inserido na su- —pracoroidal.

O pedido US número de série 11/565, 917 depositado em 1 de dezembro de 2006 mostra a administração intraocular (incluindo sub-tenon) de vários implantes sólidos contendo o fármaco.

Os sistemas de distribuição de fármacos intraocular que são su- turados ou fixados no local são conhecidos. A suturação ou outros meios de fixação requerem tecidos oculares sensíveis para estarem em contato com os aspectos de um sistema de distribuição de fármacos que não são neces- sários para conter um agente terapêutico, dentro ou no sistema de distribui- ção de fármacos, ou para permitir que o agente terapêutico seja lançado in vivo. Como tal sutura ou meios de fixação do olho, um valor meramente peri- férico ou auxiliar e seu uso pode aumentar o tempo de cura, o desconforto do paciente e o risco de infecção ou outras complicações.

Os pedidos de patente US números de série 11/742, 350; 11/859, 310, 11/952, 938, 11/364, 687 discutem o uso de composições intra- oculares compreendendo agente terapêutico anti-VEGF, como o bevacizu- mab. Formulações de macromoléculas para uso intraocular são conhecidas, ver, por exemplo, pedidos com número de série 11/370, 301, 11/364, 687;

: 11/39 60/721, 600, 11/116, 698 e 60/567, 423.

Significativamente, embora a DMRI seca seja a forma mais co- mum de AMD, exceto para o uso de antioxidantes (tais como alta dose de - vitaminas C, E, beta-caroteno e/ou zinco para neutralizar espécies reativas de oxigênio na retina), "não há terapias atuais para a mais comum DMRI 'seca". Gehrs K. et al, Age-related macular degeneration - emerging patho- genetic and therapeutic concepts, Ann Med 2006, 38: 450-471. Assim, "não há tratamento eficaz para a forma mais prevalente atrófica (seca) da DMRI". Petrukhin, K., New therapeutic targets in atrophic age-related macular dege- —neration, Expert Opin. Ther. Metas 92.007) 11 (5): 625-639.

Assim, seria vantajoso ter um sistema de distribuição de fárma- cos de liberação prolongada adequado para uso intraocular para o tratamen- to da DMRI seca. O que é necessário, portanto, é uma composição e um . método para o tratamento da DMRI seca.

SUMÁRIO A presente invenção atende a esta necessidade, fornecendo composições e métodos para o tratamento da DMRI seca. Em particular, a presente invenção fornece uma terapia intraocular eficaz para tratar a DMRI seca pelo uso de um sistema de distribuição de fármaco de liberação pro- longada adequado para o uso intraocular (ou seja, intravítrea). Definições Os termos abaixo são definidos para ter os seguintes significa- dos: "Agente antineovascular" significa um composto que tem um e- feito antiangiogênico, quando administrado a um olho, como pela injeção ou implantação intravítrea.

"Agente anti-VEGF" significa um composto que inibe uma ativi- dade ou um efeito do VEGF, e inclui bevacizumab, ranibizumab, pegaptanib, aptâmeros neutralizantes do VEGF, anticorpos monoclonais anti-VEGF, —siRNAs, corticosteroides, tais como acetato anacortave, acetonido de trian- cinolona e acetonido de fluocinolona; inibidores do receptor da tirosina qui- nase, como vatalanib e ruboxistaurin, lactato de esqualamina e; fatores de

: 12/39 crescimento, incluindo o fator derivado de pigmento epitelial. "Cerca de" significa aproximadamente ou quase, e no contexto | de um valor ou um intervalo numérico estabelecidos aqui significa + 10% do valor intervalo numérico recitado ou reivindicado.

"Agente ativo", "fármaco" e "agente terapêutico" são usados al- ternadamente aqui e se referem a qualquer substância (incluindo biológica ou macromolécula) usada para tratar uma doença ocular.

"Biocompatíveis" no que diz respeito a um sistema de distribui- ção de fármacos significa que sob administração intraocular do sistema de distribuição de fármacos a um olho de mamífero uma significativa reação imunogênica não ocorre.

"Polímero bioerosível/bioerodível" significa um polímero que se degrada in vivo. O polímero pode ser um polímero tipo gel ou hidrogel, polí- : mero PLA ou PLGA ou suas misturas ou seus derivados. As palavras "bioe- rosivel/bioerodível" e "biodegradável" são sinônimas e são usadas alterna- ' damente aqui.

"Sistema de distribuição de fármacos" significa um líquido, um hidrogel, um gel, uma formulação de alta viscosidade, um implante sólido ou microesferas a partir dos quais uma quantidade terapêutica de um agente terapêutico pode ser liberada mediante administração in vivo do sistema de distribuição de fármacos, sem qualquer exigência de que o sistema de distri- buição de fármacos seja suturado ao tecido ocular ou fixado de outra manei- ra por meio de uma ligação.

"A DMRI seca" (também referida como degeneração macular a- tróficarelacionada à idade) significa uma condição humana da retina em que drusas estão presentes na mácula, mas com pouca ou nenhuma neovascu- larização da retina. A DMRI seca inclui categoria 1 DMRI (algumas ou pou- cas drusas pequenas presentes), categoria 2 DMRI (DMRI precoce em que drusas pequenas ou de tamanho moderado estão presente) e categoria 3 DMRI (DRM! intermediária que é quando numerosas drusas médias ou grandes estão presentes). Em contrapartida, "DMRI molhada" significa uma condição humana da retina caracterizada pela presença da neovasculariza-

: 13/39 ção da retina (categoria 4 ou DMRI avançada) ou perda de visão. Pequenas : drusas têm um diâmetro menor que 63 mícrons, drusas de tamanho médio têm um diâmetro entre 63 a 124 mícrons, e drusas grandes têm diâmetro de : 125 mícrons ou mais.

"Intraocular" significa dentro ou abaixo de um tecido ocular. Uma administração intraocular de um sistema de distribuição de fármacos inclui a administração do sistema de distribuição do fármaco a um local sub-tenon, subconjuntival, supracoroidal, intravíitreal e similares. Uma administração intraocular de um sistema de distribuição de fármacos exclui a administração do sistema de distribuição de fármacos a um local tópico, sistêmico, intra- muscular, subcutâneo, intraperitoneal, e similares.

"Condição ocular" significa uma doença, dor, ou condição que afeta ou que envolve o olho ou uma das partes ou regiões do olho, como ' uma doença da retina. O olho inclui o globo ocular e os tecidos e fluidos que constituem o globo ocular, a musculatura periocular (tais como os músculos i oblíquos e retos) e a porção do nervo óptico, que está dentro ou adjacente ao globo ocular.

"Condição ocular posterior" significa uma doença, dor ou condi- ção que afeta ou que envolve uma região ou local ocular posterior, tais como —coroide e esclera (em uma posição posterior a um plano através da parede posterior da cápsula do cristalino), vítrea, câmara vítrea, retina, nervo óptico (ou seja, o disco óptico), e os vasos sanguíneos e nervos que vascularizam ou inervam uma região ou local posterior ocular.

"Substancialmente" signífica entre 51% a 100% do item ou da — quantidade tão qualificado.

"Adequado para inserção (ou implantação) em (ou a) uma região ou um local ocular", no que diz respeito a um sistema de distribuição de fár- macos, significa um sistema de distribuição de fármacos que tem um tama- nho (dimensões) de tal forma que pode ser administrado, injetado, inserido ou implantado sem causar dano tecidual excessivo e sem interferir indevi- damente fisicamente com a visão existente do paciente no qual o implante é implantado ou inserido.

: 14/39 "Prolongado" como em "período prolongado" ou "liberação pro- ' longada" significa por um período de tempo superior a três dias, de prefe- rência pelo menos 20 dias (ou seja, por um período de tempo de 20 dias a ' 365 dias), e mais preferivelmente por pelo menos 30 dias. Uma liberação prolongada pode persistir por entre cerca de dois meses e cerca de quatro meses.

"Níveis terapêuticos" ou "quantidade terapêutica" significa uma quantidade ou concentração de um agente ativo que tenha sido localmente distribuído a uma região ocular, que é apropriada para tratar com segurança uma doença ocular, de modo a reduzir ou prevenir um sintoma de uma do- ença ocular.

"Tratar" significa administrar um tratamento a um paciente hu- mano. Tratar inclui um tratamento que age para reduzir um sintoma clínico ' existente (como a quantidade ou a extensão das drusas presentes) de uma condição ocular presente diagnosticada (tais como a DMRI seca), bem como | a prevenção da deterioração (ou diminuição da taxa de deterioração) da condição ocular presente diagnosticada para outra condição ocular (como a DMRI úmida), que tem sintomas clínicos adicionais ou novos (tais como per- da de visão e/ou neovascularização).

Uma modalidade da invenção é um método para tratar de uma doença da retina, como a degeneração macular, tais como a degeneração macular seca relacionada à idade (DMRI seca). O método pode incluir a eta- pa de administrar um agente antineovascular a um olho de um paciente com DMRI seca, tratando, assim, a DMRI seca. O agente antineovascular pode serum agente do fator de crescimento endotelial antivascular (VEGF) e o agente anti- VEGF exemplar pode ser o bevacizumab, o ranibizumab e o pe- gaptanib, bem como derivados, ésteres, sais e misturas destes agentes anti- VEGF.

Preferencialmente, o agente antineovascular é administrado em um método dentro do escopo da invenção como ou como parte de um sis- tema de distribuição de fármacos biocompatíveis. Assim, o sistema de distri- buição de fármacos biocompatíveis pode incluir o agente antineovascular e a. 15/39 um veículo polimérico associados com o agente antineovascular. O veículo polimérico pode ser selecionado do grupo constituído por um ácido lático polimérico ("PLA"), um ácido glicólico polimérico, um polímero ácido lático- - co-ácido glicólico ("PLGA"), uma hidroxipropilmetilcelulose polimérica, e um ácido hialurônico polimérico e suas misturas.

O agente antineovascular pode ser associado ao veículo polimé- rico ao ser disperso de forma homogênea por todo o veículo polimérico e a etapa da administração do método pode ser realizada ao injetar o agente antineovascular em um local intraocular anterior ou para um local intraocular posterior, como na cavidade vítrea. Uma modalidade adicional da invenção é um método para tratar a DMRI seca, preparando um sistema de distribuição de fármacos biocom- patíveis compreendendo um agente antineovascular (isto é, o bevacizumab - ou um derivado, éster, ou sal do mesmo) e um veículo polimérico associado ao agente antineovascular, e injetando o sistema de distribuição de fármacos ' na cavidade vítrea do olho de um paciente com DMRI seca tratando, assim, a DMRI seca.

De preferência, um sistema de distribuição de fármacos dentro do escopo da invenção pode conter ou compreender de cerca de 5 ug a cer- cade3mgde um agente antineovascular, o bevacizumab. Dito de forma diferente, o sistema de distribuição de fármacos dentro do escopo da inven- ção pode liberar in vivo uma média de entre cerca de 10 ng a cerca de 40 pg de um agente antineovascular (como o bevacizumab) durante um período de 24 horas após a injeção intraocular da implantação do sistema de distribui- ção de fármacos. Preferencialmente, o sistema de distribuição de fármacos libera uma média de cerca de 14 ug a cerca de 28 ug do agente antineovas- cular (isto é, o bevacizumab) durante um período de 24 horas após a injeção intraocular da implantação do sistema de distribuição de fármacos. Mais pre- ferencialmente, o sistema de distribuição de fármacos pode liberar uma mé- diade entre cerca de 7 ug acerca de 14 ug do agente antineovascular (isto é, o bevacizumab) durante um período de 24 horas após a injeção intraocu- lar da implantação do sistema de distribuição de fármacos. Em uma modali-

Í 16/39 dade, o sistema da distribuição de fármacos pode liberar entre 10 ng e cerca de 200 ug de um agente antineovascular (como o bevacizumab) durante um período de 24 horas após a injeção intraocular de implantação do sistema de . distribuição de fármacos.

Um método detalhado no escopo da invenção é um método para tratar a DMRI seca em um paciente com DMRI seca em um olho e DMRI úmida no outro olho, o método compreendendo a etapa de injetar um siste- ma de distribuição de fármacos biocompatíveis compreendendo um agente antineovascular e um veículo polimérico associado ao agente antineovascu- larna cavidade vítrea do olho com DMRI seca do paciente tratando, assim, a DMRI seca, prevenindo ou retardando a progressão da DMRI seca para a DMRI úmida no olho tratado.

Um método mais detalhado no escopo da invenção é um método de baixa dosagem para tratar a DMRI seca, o método compreendendo as etapas de: (a) preparar um sistema de distribuição de fármacos biocompatí- i veis de liberação prolongada compreendendo entre cerca de 5 ug e cerca de ug de bevacizumab e um veículo de ácido hialurônico polimérico associ- ado ao bevacizumab, (b) injetar o sistema de distribuição de fármacos na cavidade vítrea do olho de um paciente com DMRI seca; e (c) liberar do sis- 20 tema de distribuição de fármacos uma média entre cerca de 14 nanogramas a cerca de 120 nanogramas do bevacizumab por um período de 24 horas durante um período de tempo de cerca de um mês ou mais, ou cerca de 2 meses, ou cerca de 3 meses ou mais (de preferência, o sistema de distribui- ção de fármacos pode liberar o agente ativo por entre cerca de 3 meses e cerca de 6 meses), tratando, assim, a DMRI seca com baixas doses do be- vacizumab liberado do sistema de distribuição de fármacos. O outro olho não injetado do paciente pode ter DMRI úmida e a DMRI seca é tratada ao pre- venir ou atrasar o início da neovascularização da retina no olho com DMRI seca injetado.

Sistema de distribuição de fármacos pode ter uma viscosidade entre cerca de 130.000 cps e cerca de 300.000 cps a uma taxa de cisalha- mento de cerca de 0,1/seg a cerca de 25ºC e o sistema de distribuição de

: 17/39 fármacos pode injetar através de uma seringa de calibre 25-30. : A invenção também abrange um método de baixa dosagem para tratar a DMRI seca, o método compreendendo as etapas de: (a) preparar um - sistema de distribuição de fármacos biocompatíveis de liberação prolongada compreendendo entre cerca de 5 ug e cerca de 20 ug de bevacizumab e um veículo de ácido hialurônico polimérico associado ao bevacizumab, (b) u- sando uma seringa de calibre 25 a 30 para injetar o sistema de distribuição de fármacos na cavidade vítrea do olho de um paciente com DMRI seca, onde o outro olho não injetado do paciente tem DMRI úmido, e; (c) liberando dosistema de distribuição de fármacos uma média de cerca de 14 nanogra- mas a cerca de 120 nanogramas de bevacizumab por um período de 24 ho- ras durante um período de tempo entre cerca de 3 meses e cerca de 6 me- ses, tratando, assim, a DMRI seca com baixas doses de bevacizumab libe- ' rado do sistema de distribuição de fármacos ao prevenir ou retardar o início da neovascularização da retina no olho com DMRI seca injetado, onde o sis- i tema de distribuição de fármacos tem uma viscosidade de cerca de 130.000 cps e cerca de 300.000 cps a uma taxa de cisalhamento de cerca de 0,1/seg a cerca 25ºC. . Outro método, no escopo da invenção, é um método para pre- veniro desenvolvimento da neovascularização coroidal, o método compre- endendo as etapas de: (a) preparar um sistema de distribuição de fármacos biocompatí- veis compreendendo um fármaco antineovascular e um ácido hialurônico polimérico associado ao fármaco antineovascular, e; (b) injetar o sistema de distribuição de fármacos em um local intraocular (como um local intraocular sub-tenon, subconjuntival, supracoroidal, intrascleral, intravitreal ou retrobul- bar) prevenindo, assim, o desenvolvimento da neovascularização coroidal. O ácido hialurônico polimérico usado pode ser um ácido hialurônico de ligação cruzada ou um ácido hialurônico de ligação não cruzada ou suas misturas, e de preferência, o ácido hialurônico polimérico tem um peso molecular entre cerca de 1 milhão de Dáltons e cerca de 2 milhões de Dáltons.

Para resumir, a invenção engloba composições e um método pa-

. 18/39 ra tratar uma condição ocular, preparando um sistema de distribuição de fármacos biocompatíveis que compreende um fármaco e um veículo polimé- rico para o fármaco, e injetando ou implantando o sistema de distribuição de : fármacos em um local intraocular. O veículo polimérico pode ser, por exem- plo, um colágeno, um polissacarídeo (como uma hidroxipropilmetilcelulose, um alginato, uma quitosana, um ágar e uma pectina), um ácido hialurônico ou um polímero biodegradável, como um polímero PLGA ou PLA. O local intraocular pode ser um local intraocular anterior ou posterior e a condição ocular pode ser uma condição ocular anterior ou posterior. O local intraocular pode ser um local sub-tenon, subconjuntival, supracoroidal, intrascleral, in- travitreal ou retrobulbar.

DESENHOS A figura 1 é um gráfico que mostra a viabilidade percentual (eixo E Y) in vitro de células epiteliais pigmentares da retina ARPE-19 (100% de via- bilidade no eixo y é a viabilidade das células ARPE-19 no tempo zero) após i 24, 48 e 72 horas de incubação in vitro nas concentrações de polissorbato 80 mostradas no eixo X.

DESCRIÇÃO A invenção é baseada na descoberta de que um agente antineo- vascular pode ser usado para tratar uma condição, como a DMRI seca, mesmo quando nenhuma neovascularização está presente no olho com DMR! seca do paciente a ser tratado. Antes da invenção não se sabia que um agente antineovascular poderia ser usado para tratar uma condição, co- mo a DMRI seca, onde nenhuma neovascularização está presente no olho do paciente a ser tratado. Ver, por exemplo, J. Lin, et al. Vascular Endotheli- al Growth Factor Gene Polymorphisms in Age-related Macular Degeneration, Am J Ophthalmol. 2008, 29 de março (o gene do VEGF não está associado ao DNA do paciente com DMRI seca, e; Cook H,, et al, Age-related macular degeneration: diagnosis and management, Br Med Bull. 2008; 85:127-49 ("..não existe tratamento para a DMRI seca avançada..."). A invenção trata a DMRI seca, prevenindo ou atrasando a progressão da DMRI seca para a DMR! úmida.

y 19/39

Sem querer ser vinculado pela teoria, pode-se postular um me- : canismo para a eficácia da invenção e modalidades do mesmo.

Assim, po- de-se estimar que um paciente com DMRI úmida em um olho tem 10% de ' chance (a cada ano) de desenvolver a neovascularização (DMRI úmida) no outro olho.

Estas percentagens são cumulativas de modo que ao longo de 5 anos o paciente com DMRI úmida em um olho tem 50% de chance de de- senvolver a DMRI úmida no outro olho, possivelmente devido à presença de mutação no gene do fator H do complemento.

Acredita-se que processos mediados geneticamente que levam ao desenvolvimento da DMRI úmida em um olho vão prevalecer ao longo do tempo no outro olho, de modo que es- ses pacientes estão em alto risco para o desenvolvimento da DMRI úmida (neovascular) em ambos os olhos e as medidas preventivas são, portanto, indicadas para reduzir a chance de o paciente desenvolver perda severa da

' visão nos dois olhos.

Assim, postula-se que a terapia antineovascular pode ser eficaz para tratar a DMRI seca, prevenindo, assim, sua progressão para a DMRI úmida, mesmo que o olho com a DMRI seca a ser tratado tenha pouca ou nenhuma neovascularização.

Para reduzir a chance de progredir da DMRI seca para úmida, objetivos relevantes incluem a via do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). O VEGF é uma proteína de sinalização impor- tante envolvida na vasculogênese e na angiogênese.

Em pacientes com DMRI seca, uma hiperexpressão do VEGF tem sido implicada na progressão para a CNV.

O VEGF tem sido validado como um alvo importante, uma vez que os bloqueadores do VEGF, tais como Macugen'" (pegaptanib), um ap- tâmero peguilado que especificamente bloqueia o VEGF165, e mais impor- tante, o Avastin"M (bevacizumab), um anticorpo monocional que é mais pro- míscuo e bloqueia todas as isoformas do VEGF conhecidas VEGF121, VEGF165, VEGF189 e VEGF20. Os bloqueadores do VEGF foram usados extensivamente para CNV associado com DMRI, retinopatia diabética proli- ferativa (RDP), glaucoma neovascular, edema macular diabético (DME) e edema macular secundário à oclusão da veia da retina (RVO). Os resultados com bloqueio anti-VEGF são mais impressionantes para CNV associado

: 20/39 com DMRI.

Embora atualmente não aprovado pelo FDA para tal uso, a inje- ção de 1,25 a 2,5 mg de bevacizumab (isto é, não como um sistema de dis- tribuição de fármacos com liberação prolongada ou estendida) aquoso (ou seja, liberação imediata) na cavidade vítrea foi realizada sem toxicidade in- traocular significativa observada em estudos em animais e seres humanos. A meia-vida do vítreo de um anticorpo monoclonal anti-VEGF, como o beva- cizumab, após a injeção no vítreo a partir de uma formulação de liberação imediata (ou seja, aquosa) é de apenas 5 a 6 dias. As formulações antineo- vascular de libertação imediata, portanto, não pode fornecer qualquer efeito terapêutico prolongado ou em andamento (devido a uma liberação imediata de uma vez) e requerem re-injeção dolorosa frequente para tratar uma con- dição ocular.

' Assim, embora as doses de formulação aquosa intravítrea de bevacizumab tão altas quanto 1,25 a 2,5 mg têm sido administradas para tratar a neovascularização macular (DMRI úmida), acredita-se que é possí- vel que as doses de bevacizumab de menos 1% de dosagens intravítreas conhecidas (ou seja, menos de 12 ug) podem suprimir a neovascularização. Postula-se que uma dose de bevacizumab tão baixa quanto 6,2 ug (ou seja, menos de 0,5% da dose conhecida de 1,25 mg) pode ser usada para tratar ou prevenir a neovascularização intraocular em seres humanos (ou seja, para tratar DMRI seca). Assim, 1,25 mg a 2,5 mg de um agente antineovas- cular, como o bevacizumab, pode ser liberado no vítreo durante um período de 3-6 meses, de um sistema de distribuição de fármacos de liberação pro- longada para fornecer tratamento a longo prazo de uma condição ocular crônica, tal como a DMRI seca.

Um hidrogel é um gel coloidal formado como uma dispersão em água ou outro meio aquoso. Assim, um hidrogel é formado após a formação de um coloide no qual uma fase dispersa (o polímero) foi combinada com uma fase contínua (isto é, água) para produzir um produto viscoso gelatino- so, por exemplo, ácido silícico coagulado. Um hidrogel é uma rede tridimen- sional de cadeias de polímero hidrofílico que são ligadas de forma cruzada,

NES 21/39 quer através de ligação química ou física. Devido à natureza hidrofílica das cadeias poliméricas, os hidrogéis absorvem água e se expandem (exceto se ! eles já absorveram sua quantidade máxima de água). O processo de expan- são é o mesmo da dissolução dos polímeros hidrofílicos sem ligação cruza- da Por definição, a água constitui, pelo menos, 10% do peso total (ou volu- me) de um hidrogel.

Os exemplos de hidrogéis incluem polímeros sintéticos, tais co- mo metacrilato de etila poli-hidróxi, e álcool polivinílico quimicamente ou fisi- camente ligados de forma cruzada, poliacrilamida, poli (N-vinil pirrolidona), óxido de polietileno e poliacrilonitrila hidrolisada. Exemplos de hidrogéis que são polímeros orgânicos incluem hidrogéis à base de polissacarídeo cova- lente ou ionicamente ligados de forma cruzada, tais como os sais metálicos polivalentes de alginato, pectina, carboximetil celulose, heparina, hialuronato E e hidrogéis de quitina, quitosana, pululana, gelana e xantana. Os hidrogéis particulares usados nesse experimento eram um composto de celulose (ou seja, hidroxipropilmetilcelulose [HPMC]) e um ácido hialurônico de alto peso molecular (HA).

Como uma modalidade da invenção, é feita uma formulação de hidrogel para injeção intravítrea usando um ácido hialurônico polimérico e um anticorpo monoclonal anti-VEGF. Este sistema de distribuição de fárma- cos pode fornecer liberação prolongada de uma dose baixa diária do anti- corpo monocional anti-VEGF por um período de 3 a 6 meses e prevenir a conversão da DMRI seca a DMRI úmida. O sistema de distribuição de fár- macos também pode incluir a encapsulação da microesfera do anticorpo an- ti-VEGF no hidrogel. O sistema de distribuição de fármacos de liberação pro- longada pode fornecer o bloqueio anti-VEGF necessário no olho para reduzir a chance da progressão da DMRI seca a neovascular. Além disso, as baixas doses liberadas no olho durante um período de tempo prolongado não for- necem um nível tóxico sistêmico do agente antineovascular.

O sistema de distribuição de fármacos de liberação prolongada também pode ser usado para fornecer bloqueio anti-VEGF de liberação pro- longada em pacientes com oclusão da veia central da retina que estão em

| 22/39 risco de neovascularização e em pacientes com retinopatia diabética não- proliferativa severa que estão em risco de progredir para doença neovascu- lar. - Alternativamente, o sistema de distribuição de fármacos pode serum implante PLGA, anticorpos encapsulados lipossomais opcionalmente aprisionados em um ácido hialurônico de ligação cruzada. Além disso, mi- croesferas, microcápsulas (variando de 0,001 a 100 mícrons) e lipossomas com superfícies modificadas para criar uma interação com o polímero de hidroge! para modificar lançamento.

Outros compostos anti-VEGF podem ser usados no lugar de um anticorpo monocional anti-VEGF (por exemplo, bevacizumab) e estes inclu- em aptâmeros anti-VEGF (por exemplo, pegaptanib), falsos receptores re- combinantes solúveis (por exemplo, o VEGF trap), fragmentos de anticorpo ' (por exemplo, ranibizumab), corticosteroides, expressão decrescente de pe- queno RNA de interferência do ligante VEGFR ou VEGF, pós-bloqueio do VEGFR com inibidores de tirosina quinase, inibidores MMP, IGFBP3, blo- queadores SDF-1, PEDF, gama-secretase, ligante 4 como delta, antagonis- tas de integrina, bloqueio da HIF alfa-1, bloqueio da proteína quinase CK2 e inibidores de células-tronco (ou seja, célula progenitora endotelial) indo para olocalda neovascularização usando caderina endotelial vascular (CD-144) e anticorpos do fator 1derivado do estroma (SDF). Os agentes que têm ativi- dade contra o CNV que não são necessariamente compostos anti-VEGF também podem ser usados e incluem fármacos anti-inflamatórios, rapamici- na, ciclosporina, agentes anti-TNF, agentes anti-complementar.

A invenção também engloba determinadas formulações e méto- dos de sistema de distribuição de fármacos para administrar esses sistemas de distribuição de fármacos para o tratamento de uma condição ocular, co- mo a DMRI seca. A presente invenção abrange sistemas de distribuição de fármacos que são estruturados e configurados exclusivamente para a admi- — nistração intraocular, em oposição à tópica ou à sistêmica. A administração intraocular pode ser por implante ou injeção na cavidade vítrea (câmara pos- terior) do olho. Os sistemas de distribuição de fármacos no escopo da inven-

Á 23/39 ção podem ser implantes biodegradáveis e/ou microesferas.

Os sistemas de distribuição de fármacos podem ser monolíticos, ou seja, o agente ativo é homogeneamente distribuído ou disperso por todo o polímero biodegradável. - O agente terapêutico pode ser liberado dos sistemas de distribuição de fár- macos feito de acordo com a presente invenção por um período de tempo entre cerca de 2 horas a 12 meses ou mais.

Uma característica importante dos sistemas de distribuição de fármacos é que eles não incluem qualquer meio (como uma cobertura, protrusão ou aba de sutura) para fixar o sistema de distribuição de fármacos para o local intraocular ao qual ele é administra- do Uma característica importante de um sistema de distribuição de fármacos no escopo da invenção é que ele pode ser implantado ou injetado em um local intraocular (por exemplo, como um local sub-tenon anterior, ' subconjuntival, intravitreal ou supracoroidal) para fornecer uma liberação prolongada de um agente terapêutico, sem a ocorrência ou a persistência de imunogenicidade significativa em e adjacente ao local da implantação ou injeção intraocular.

Os polímeros polilático (PLA) existem em 2 formas químicas, poli (L-láctico) e poli(D, L-lático). O poli (L-lático) puro é regulador de região e, portanto, também é altamente cristalino, então degrada in vivo a uma taxa muito lenta.

O poli(D, L-lático) é aleatório de região que leva a degradação mais rápida in vivo.

Portanto, um polímero PLA que é uma mistura de polí- mero predominantemente poli(L-lático), o restante sendo um polímero poli(D- lático) degradará in vivo em uma taxa mais lenta que um polímero PLA que é predominantemente um polímero poli(D-lático). Um PLGA é um co-polímero que combina o poli(D, L-lático) com um poli(glicólico) em várias possíveis taxas.

Quanto maior o teor de ácido glicólico em um PLGA mais rápido a degradação do polímero.

Em uma modalidade da invenção, um sistema de distribuição de fármacos para administração intraocular (ou seja, por implante ou injeção intravítrea) compreende configurado, consiste em, ou consiste essencial- mente em pelo menos 75 por cento em peso de um PLA e não mais de cer-

. 24/39 ca de 25 por cento em peso, de um polímero poli(D, L-lático-co-glicólico).

No escopo da invenção estão suspensões de microesferas (in- corporando um agente antineovascular) suspensas em um hidrogel (como - um ácido hialurônico polimérico) que pode ser administrado em um local in- traocular através de uma agulha de seringa. A administração de tal suspen- são exige que a viscosidade da suspensão de microesfera a 25ºC seja me- nos que cerca de 300.000 cP. A viscosidade da água a 25ºC é de cerca de 1 cP (cP ou cps é centiposie, uma medida de viscosidade). A 25ºC, a viscosi- dade do óleo de oliva é de 84 cP, do óleo de mamona de 986 P e do glicerol 1490cP Os sistemas de distribuição de fármacos da invenção podem in- cluir um agente terapêutico misturado ou disperso em um polímero biode- gradável. As composições dos sistemas de distribuição de fármacos podem ' variar de acordo com o perfil de liberação do fármaco preferido, o determi- nado agente ativo usado, a condição ocular a ser tratada, e os antecedentes médicos do paciente. Os agentes terapêuticos que podem ser usados nes- ses sistemas de distribuição de fármacos incluem, mas não estão limitados a (seja sozinho em um sistema de distribuição de fármacos no escopo da pre- sente invenção, ou em combinação com outro agente terapêutico): inibidores daECA, citocinas endógenas, agentes que influenciam a membrana basal, os agentes que influenciam o crescimento de células endoteliais, agonistas ou bloqueadores adrenérgicos, agonistas ou bloqueadores colinérgicos, ini- bidores de aldose redutase, analgésicos, anestésicos, antialérgicos, agentes anti-inflamatórios, anti-hipertensivos, compressores, antibacterianos, antivi- rais, antifúngicos, antiprotozoais, anti-infecciosos, agentes antitumorais, an- timetabólitos, agentes antiangiogênicos, inibidores da tirosina quinase; anti- bióticos, como os aminoglicosídeos, como a gentamicina, canamicina, neo- micina e vancomicina; anfenicóis tais como cloranfenicol, cefalosporinas, como cefazolina HCI; penicilinas, tais como ampicilina, penicilina, carbenicili- na, oxicilina, meticilina; lincosamidas como lincomicina; antibióticos polipep- tídeos como a polimixina e a bacitracina; tetraciclinas tais como a tetracicli- na; quinolonas, como a ciproflaxina, etc; sulfonamidas, tais como a clorami-

. 25/39 na T; e sulfonas, como o ácido sulfanílico como entidade hidrofílica, fárma- : cos anti-viral, por exemplo, aciclovir, ganciclovir, vidarabina, azidotimidina, azatioprina, dideoxiinosina, dideoxicitosina, dexametasona, ciproflaxin, anti- . bióticos solúveis em água, tais como aciclovir, ganciclovir, vidarabina, azido- timidina, dideoxiinosina, dideoxicitosina; epinefrina; isoflurfate; adriamicina; bleomicina; mitomicina, ara-C; actinomicina D; escopolamina; e similares, analgésicos, como codeína, morfina, ceterolaco, naproxeno, etc, um anesté- sico, por exemplo, lidocaína; bloqueador beta-adrenérgico ou agonista beta- adrenérgico, por exemplo, efidrina, epinefrina, etc; inibidor da aldose reduta- se, por exemplo, epalrestat, ponalrestat, sorbinil, tolrestat; antialérgicos, por exemplo, cromolin, beclometasona, dexametasona e flunisolida; colchicina, agentes anti-helmínticos, por exemplo, ivermectina e suramina de sódio; a- gentes antiamébicos, por exemplo, cloroquina e clortetraciclina; e agentes " antifúngicos, por exemplo, anfotericina, etc, compostos antiangiogênese, tais como acetato de anecortave, retinoides, tais como Tazarotene, agentes anti- i glaucoma, tais como brimonidina (Alphagan e Alphagan P), acetozolamida, bimatoprost (Lumigan), timolol, mebefunolol; memantina, latanoprost (Xala- tan); agonistas receptores alfa-2 adrenérgicos; 2-metoxiestradiol; antineoplá- sicos, tais como vimblastina, vincristina, interferons; antimetabólitos alfa, be- taegama,como análogos de ácido fólico, análogos de purinas, e análogos de pirimidina; imunossupressores como azatioprina, ciclosporina e mizoribi- na; agentes miótico como o carbacol, agentes midriáticos como a atropina, inibidores da protease como a aprotinina, camostat, gabexato, vasodilatado- res como a bradicinina, e vários fatores de crescimento, como fator de cres- cimento epidérmico, fator de crescimento do fibroblasto básico, fatores de crescimento do nervo, inibidores da anidrase carbônica, e assim similares.

Em modalidades específicas da invenção, o agente ativo pode ser um composto que bloqueia ou reduz a expressão de receptores VEGF (VEGFR) ou ligante VEGF incluindo, mas não limitado a aptâmeros anti- VEGF (por exemplo, Pegaptanib), falsos receptores recombinantes solúveis (por exemplo, VEGF trap), anticorpos monocionais anti-VEGF (por exemplo, Bevacizamabe) e/ou fragmentos de anticorpos (por exemplo, Ranibizama-

. 26/39 be), expressão decrescente de pequeno RNA de interferência do ligante : VEGFR ou VEGF, pós-bloqueio do VEGFR com inibidores de tirosina quina- se, inibidores MMP, IGFBP3, bloqueadores SDF-1, PEDF, gama-secretase, ligante 4 como delta, antagonistas de integrina, bloqueio da HIF alfa-1, blo- queioda proteína quinase CK2 e inibidores de células-tronco (ou seja, célula progenitora endotelial) indo para o local da neovascularização usando cade- rina endotelial vascular (CD-144) e anticorpos do fator 1 derivado do estroma (SDF).

Em outra modalidade ou variação da invenção, o agente ativo é o metotrexato. Em outra variação, o agente ativo é um ácido retinoico. Em outra variação, o agente ativo é um agente anti-inflamatório como um agente antiinflamatório não hormonal. Os agentes anti-inflamatórios não hormonais que podem ser usados incluem, mas não estão limitados a, aspirina, diclofe- naco, flurbiprofeno, ibuprofeno, cetorolaco, naproxeno, e suprofen. Em outra variação, o agente anti-inflamatório é um agente anti-inflamatório esteroidal, como a dexametasona.

Os agentes anti-inflamatóros esteroidais que podem ser usados nesses sistemas de distribuição de fármacos pode incluir, mas não estão limitados a, 21-acetoxipregnenolona, alclometasona, algestona, amcinonida, beclometasona, betametasona, budesonida, cloroprednisona, clobetasol, clobetasona, clocortolona, cloprednol, corticosterona, cortisona, cortivazol, deflazacort, desonida, desoximetasona, dexametasona, diflorasona, diflucor- tolona, difluprednato, enoxolona, fluazacorte, flucloronida, flumetasona, fluni- solida, acetonido de fluocinolona, fluocinonida, fluocortina butila, fluocortolo- na, fluorometolona, acetato de fluperolona, acetato de fluprednidena, flu- prednisolona, fluorandrenolida, propionato de fluticasona, formocortal, halci- nonida, propionato de halobetasol, halometasona, acetato de halopredona, hidrocortamato, hidrocortisona, etabonato de loteprednol, mazipredona, me- drisona, meprednisone, metilprednisolona, furoato de mometasona, parame- tasona, prednicarbato, prednisolona, acetato de prednisolona 25-dietilamino, fosfato sódico de prednisolona, prednisona, prednival, prednilideno, rimexo- lona, tixocortol, triancinolona, triancinolona acetonida, benetonida de trianci-

. 27/39 nolona, hexacetonido de triancinolona, e qualquer um dos seus derivados. : Em uma modalidade, cortisona, dexametasona, fluocinolona, hi- drocortisona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona e triancinolona, e - seus derivados, são os agentes anti-inflamatórios esteroidais preferidos.

Em outra variação preferida, o agente anti-inflamatório esteroidal é a dexameta- sona.

Em outra variação, o implante biodegradável inclui uma combinação de dois ou mais agentes anti-inflamatórios esteroidais.

O agente ativo, tal como um agente antineovascular, pode com- preendem entre cerca de 1% a cerca de 90% em peso do implante ou do sistema de distribuição de fármacos.

Em uma variação, o agente é de cerca de 5% a cerca de 80% em peso do implante.

Em uma variação preferida, o agente é composto por cerca de 10% a cerca de 60% em peso do implante.

Em uma modalidade mais preferida da presente invenção, o agente pode compreender cerca de 50% em peso do implante.

O agente terapêutico ativo presente nos sistemas de distribuição de fármacos pode ser homogeneamente disperso no polímero biodegradável do sistema de distribuição de fármacos.

A seleção do polímero biodegradá- vel utilizado pode variar com a liberação desejada da cinética, a tolerância do paciente, a natureza da doença a ser tratada e similares.

As característi- cas do polímero que são consideradas incluem, mas não estão limitados a, biocompatibilidade e biodegradabilidade no local de implantação, compatibi- lidade com o agente ativo de interesse e temperaturas de processamento.

À matriz do polímero biodegradável geralmente é composta por pelo menos cerca de 10, pelo menos cerca de 20, pelo menos cerca de 30, pelo menos —cercade 40, pelo menos cerca de 50, pelo menos cerca de 60, pelo menos cerca de 70, pelo menos cerca de 80 ou pelo menos cerca de 90 por cento em peso do implante.

Em uma variação, a matriz de polímero biodegradável compreende cerca de 40% para 50% em peso do sistema de distribuição de fármacos.

Os polímeros biodegradáveis que podem ser usados incluem, mas não estão limitados a, polímeros feitos de monômeros tais como éste- res ou éteres orgânicos, que quando degradados resultam em produtos de

. 28/39 degradação fisiologicamente aceitáveis. Anidridos, amidas, ortoésteres ou similares, isoladamente ou em combinação com outros monômeros, também podem ser usados. Os polímeros são geralmente polímeros de condensa- - ção. Os polímeros podem ser de ligação cruzada ou não.

Pela maior parte, além do carbono e do hidrogênio, os polímeros incluirão o oxigênio e o nitrogênio, em particular o oxigênio. O oxigênio pode estar presente como óxi, por exemplo, hidróxi ou éter, carbonila, por exem- plo, carbonila não óxi, como o éster do ácido carboxílico e similares. O nitro- gênio pode estar presente como amida, ciano e amino. Uma lista com e- xemplos de polímeros biodegradáveis que podem ser usados estão descri- tos em Heller, Biodegradable Polymers in Controlled Drug Delivery, Em: "CRC Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems", vol. 1. CRC Press, Boca Raton, FL (1987).

' Os polímeros de ácidos carboxílicos hidroxialifáticos, homo ou copolímeros, e polissacarídeos são de interesse particular. Entre os poliéste- res de interesse estão incluídos homo ou copolímeros de ácido D-lático, áci- do L-lático, o ácido lático racêmico, ácido glicólico, caprolactona e suas combinações. Os copolímeros de ácido glicólico e lático são de interesse particular, onde a taxa de biodegradação é controlada pela razão de ácido glicólico para o láctico. O percentual de cada monômero no copolímero do ácido poli (lático-co-glicólico) (PLGA) pode ser de 0-100%, cerca de 15-85%, cerca de 25-75%, ou cerca de 35-65%. Em algumas variações, copolímeros 25/75 PLGA e/ou 50/50 PLGA são usados. Em outras variações, os copolí- meros PLGA são usados em conjunto com polímeros poliláticos.

Outros agentes podem ser empregados em uma formulação do sistema de distribuição de fármacos para uma variedade de propósitos. Por exemplo, os agentes tampão e conservantes podem ser empregados. Os conservantes que podem ser usados incluem, mas não estão limitados a, bissulfito de sódio, bissulfato de sódio, tiossulfato de sódio, cloreto de ben- zalcônio, clorobutanol, timerosal, acetato fenilmercúrico, nitrato fenilmercúri- co, metilparabeno, álcool polivinílico, e álcool! feniletílico. Exemplos de agen- tes tampão que podem ser empregados incluem, mas não estão limitados a,

; : 29/39 carbonato de sódio, borato de sódio, fosfato de sódio, acetato de sódio, bi- carbonato de sódio e similares, como aprovados pelo FDA para a via dese- jada de administração. Os tensoativos, que podem ser usados para estabili- zar as partículas em um coloide e/ou eletrólitos, como cloreto de sódio e clo- retode potássio, também podem ser incluídos na formulação. O Sistema de distribuição de fármacos também pode ter ácidos e excipientes básicos para controlar o pH no microambiente, bem como nas interfaces (camada de difu- são estagnada). Os sistemas de distribuição de fármacos biodegradáveis tam- bém podem incluir compostos hidrofílicos ou hidrofóbicos adicionais que aceleram ou retardar a liberação do agente ativo. Adicionalmente, os modu- ladores de liberação, como os descritos na patente US No. 5.869.079 podem ser incluídos nos implantes. A quantidade de modulador de liberação em- pregada será dependente do perfil de liberação desejado, da atividade do modulador, e do perfil de liberação do glicocorticoide na ausência de modu- lador. Quando o agente tampão ou potencializador ou modulador de liberta- ção são hidrofílicos, também podem atuar como um acelerador de liberação. Os aditivos hidrofílicos agem para aumentar as taxas de liberação através da rápida dissolução do material em torno das partículas do fármaco, o que aumentaa área de superfície do fármaco exposto, aumentando assim a taxa de difusão do fármaco. Da mesma forma, um agente tampão ou potenciali- zador ou modulador podem se dissolver mais lentamente, retardando a ex- posição das partículas de fármaco, e diminuindo assim o taxa de difusão do fármaco.

Sistema de distribuição de fármacos no escopo da presente in- venção pode ser formulado com partículas de um agente ativo disperso em um polímero biodegradável. Sem estar vinculada a teoria, acredita-se que a liberação do agente ativo pode ser alcançada através da erosão da matriz de polímero biodegradável e pela difusão do agente de partículas em um fluido ocular, por exemplo, o vítreo, com dissolução subsequente da matriz do po- límero e a liberação do agente ativo. Os fatores que influenciam a cinética de liberação do agente ativo do implante podem incluir características como o

. ' 30/39 tamanho e a forma do implante, o tamanho das partículas do agente ativo, a solubilidade do agente ativo, a proporção do agente ativo para o(s) políme- ro(s), o método de produção, a área da superfície exposta, a densidade do ] implante e a taxa de erosão do(s) polímero(s).

A taxa de liberação do agente ativo pode depender pelo menos, em parte, na taxa de degradação do componente ou dos componentes da estrutura do polímero que compõem a matriz de polímero biodegradável. Por exemplo, os polímeros de condensação podem ser degradados por hidrólise (entre outros mecanismos) e, portanto, qualquer alteração na composição do implante que melhore a absorção de água pelo implante provavelmente au- mentará a taxa de hidrólise, aumentando assim a taxa de degradação e de erosão do polímero, e aumentando assim a taxa de liberação de agente ati- vo. A taxa de liberação do agente ativo também pode ser influenciada pela ' cristalinidade do agente ativo, pelo pH no implante e pelo pH nas interfaces.

A cinética de liberação dos sistemas de distribuição de fármacos À da presente invenção pode ser dependente, em parte, da área de superfície dos sistemas de distribuição de fármacos. Uma maior área de superfície ex- põe mais o polímero e o agente ativo para o fluido ocular, causando a rápida erosão do polímero e dissolução das partículas do agente ativo no fluido.

Os exemplos de condições oculares que podem ser tratados pe- los sistemas de distribuição de fármacos e métodos da invenção incluem, mas não estão limitados a, glaucoma, uveite, edema macular, degeneração macular, descolamento de retina, tumor ocular posterior, infecções fúngicas ou virais, coroidite multifocal, retinopatia diabética, vitreoretinopatia prolifera- tiva (PVR), oftalmia simpática, síndrome de Vogt Koyanagi-Harada (VKH), histoplasmose, difusão uveal e oclusão vascular. Em uma variação, os im- plantes são particularmente úteis no tratamento de tais condições médicas como uveite, edema macular, condições vasculares oclusivas, vitreorretino- patia proliferativa (PVR) e várias outras retinopatias.

Os sistemas de distribuição de fármacos da invenção podem ser injetados em um local intraocular com uma seringa ou podem ser inseridos (implantados) no olho por uma variedade de métodos, incluindo a colocação

; : 31/39 de um fórceps, por trocarte, ou por outros tipos de aplicadores, depois de r fazer uma incisão na esclera. Em alguns casos, um trocarte ou aplicador podem ser usados sem criar uma incisão. Em uma variação preferida, um É aplicador portátil é usado para inserir um ou mais implantes biodegradáveis no olho. O aplicador portátil compreende tipicamente uma agulha de aço inoxidável de 18-30 GA, uma alavanca, um acionador, e um êmbolo. Os dis- positivos apropriados para inserir um implante ou implantes em uma região ou local ocular posterior inclui os descritos em pedido de patente US número de série 10/666.872.

O método de administração geralmente envolve primeiro o aces- so da área-alvo na região ocular com a agulha, o trocarte ou outro dispositi- vo de implantação. Uma vez dentro da área-alvo, por exemplo, da cavidade vítrea, uma alavanca em um dispositivo portátil pode ser pressionada para ' fazer com que um acionador impulsione um êmbolo para frente. Conforme o —êmbolo se move para frente, ele pode empurrar o implante ou implantes pa- ra a área-alvo (ou seja, o vítreo).

Várias técnicas podem ser empregadas para fazer os implantes no escopo da presente invenção. As técnicas úteis incluem métodos de se- paração de fases, métodos interfacial, métodos de extrusão, métodos de compressão, métodos de moldagem, métodos de moldagem por injeção, métodos de impressão por calor e semelhantes.

Os sistemas de distribuição de fármacos descritos aqui podem ser usados para prevenir ou tratar várias doenças ou condições oculares, incluindo as seguintes: maculopatias/ degeneração da retina: degeneração macular, incluindo a idade degeneração macular relacionada à idade (D- MRI), como a degeneração macular relacionada à idade não-exudativa e a degeneração macular relacionada à idade exsudativa, neovascularização coroidal, retinopatia, incluindo a retinopatia diabética, neurorretinopatia ma- cular crônica e aguda, coriorretinopatia serosa central, e edema macular, incluindo edema macular cistoide e edema macular diabético. Uveite/ retini- te/ coroidite: epiteliopatia aguda pigmentar placoide multifocal, doença de Behcet, retinocoroidopatia de birdshot, infecciosas (sífilis, lIyme, tuberculose,

: : 32/39 toxoplasmose), uveite, incluindo uveite intermediária (pars planitis) e uveite 7 anterior, coroidite multifocal, síndrome dos múltiplos pontos brancos evanes- centes (MEWDS), sarcoidose ocular, esclerite posterior, coroidite serpigino- o sa, fibrose sub-retiniana, síndrome de uveite e síndrome de Vogt-Koyanagi- Harada.

Doenças vasculares/ doenças exsudativas: doença oclusiva arterial da retina, oclusão da veia central da retina, coagulopatia intravascular dis- seminada, oclusão do ramo da veia central da retina, alterações fundoscópi- cas hipertensas, síndrome isquêmica ocular, microaneurismas arterial da retina, doença de Coat, telangiectasia parafoveal, oclusão da veia hemirreti- niana, papiloflebite, oclusão da artéria central da retina, oclusão de ramo arterial da retina, doença de artéria carótida (DAC), angitis de ramo congela- do, retinopatia falciforme e outras hemoglobinopatias, estrias angioides, vi- treorretinopatia exsudativa familiar, doença de Eales.

Traumáticas/ cirúrgi- ' cas: oftalmia simpática, doença uveítica da retina, descolamento da retina, trauma, laser, PDT, fotocoagulação, hipoperfusão durante a cirurgia, retino- patia da radiação, retinopatia de transplante de medula óssea.

Distúrbios proliferativos: retinopatia proliferativa vitreal e membranas epiretinais, retino- patia diabética proliferativa.

Doenças infecciosas: histoplasmose ocular, to- xocaríase ocular, síndrome de histoplasmose ocular presumida (POHS), en- doftalmite, toxoplasmose, doenças da retina associada à infecção pelo HIV, doença de coroide associada à infecção pelo HIV, doença uveítica associa- da à infecção pelo HIV, retinite viral, necrose aguda da retina, necrose pro- gressiva da retina externa, doença fungal da retina, sífilis ocular, tuberculose ocular, neurorretinite sub-aguda unilateral difusa e miíase.

Distúrbios genéti- cos: retinose pigmentosa, distúrbios sistêmicos com distrofias de retina as- sociadas, cegueira noturna estacionária congênita, distrofias de cones, do- ença de Stargardt e flavimaculatus do fundo, doença de Bests, distrofia pa- drão do epitélio pigmentado da retina, retinosquise ligada ao X, distrofia do fundo de Sorsby, maculopatia concêntrica benigna, distrofia cristalina de Bi- ettii pseudoxantoma elástico.

Rasgos/buracos da retina: descolamento da retina, buraco macular, rasgo retinal gigante.

Tumores: doenças da retina associado com tumores, hipertrofia congênita do EPR, melanoma uveal pos-

. . 33/39 terior, hemangioma de coroide, osteoma de coroide, metástase de coroide, f hamartoma combinado da retina e do epitélio pigmentado da retina, retino- blastoma, tumores vasoproliferativos do fundo ocular, astrocitoma de retina, E tumores linfoide intraocular. Diversos: coroidopatia interna puntiforme, epite- liopatia pigmentar placoide multifocal posterior aguda, degeneração da retina míope, epitelite pigmentar da retina aguda e similares.

EXEMPLOS Os seguintes exemplos ilustram aspectos e modalidades da in- venção. Exemplo1 Microesferas de PLGA-Bevacizumab intravitreal para tratamento da DMRI seca Um homem de 78 anos tem degeneração macular relacionada à : idade e catarata nos dois olhos. O paciente também pode ter uma história de doença cardiovascular e um infarto do miocárdio da parede inferior 6 meses antes. O paciente pode se queixar de visão embaçada e metamorfopsia no olho direito e o exame pode revelar acuidade visual de 20/400 no olho direi- to, 20/32 no olho esquerdo. O exame da retina pode mostrar neovasculari- zação coroidal subfoveal (CNV) (DMRI úmida no olho direito), aproximada- mente uma área de disco em tamanho, com hemorragia e edema circundan- te no olho direito. O olho esquerdo equivalente pode mostrar características de alto risco para desenvolver DMRI úmida como drusa de aparência amor- fa, mole, que incluiu a fóvea, mas nenhum sinal de neovascularização coroi- dal e pode ser confirmado por angiografia por fluoresceina (DMRI seca no —olhoesquerdo). O paciente pode iniciar com injeções intravítreas mensais de ranibizumab (um agente antineovascular) no olho direito com DMRI úmida com resolução do edema e da hemorragia e um retorno na acuidade visual para 20/125 dentro de 4 meses. No olho esquerdo, o paciente pode receber uma injeção intraví- treade uma formulação de anticorpo monoclional anti-VEGF de liberação prolongada (opcionalmente com um reforçador de penetração) para a profi- laxia contra o desenvolvimento de CNV no olho, já que ele agora está em

Ê . 34/39 alto risco de desenvolver DMRI úmida no olho esquerdo que vê melhor. O . volume injetado pode ser de 50 ul compreendendo o bevacizumab incorpo- rado nas microesferas de PLGA com um peso total de bevacizumab (fárma- o co) de 2,5 mg.

As microesferas de PLGA polissorbato 20 com uma taxa de libe- ração in vitro de 10 ug/dia também podem ser colocadas na formulação para reforçar a permeabilidade da retina. As microesferas de bevacizumab e de polissorbato 20 são colocadas em um ácido hialurônico de ligação cruzada em uma concentração de 1,2% com seringabilidade razoável, usando uma agulhade27G.

O paciente pode receber injeções intravitreal no olho esquerdo de 50ul de microesferas de PLGA-bevacizumab (peso total do fármaco 2,5 mg) da invenção a cada 6 meses e no final de um período de 7 anos de a- n companhamento o paciente pode ter a visão mantida no olho esquerdo em 20/32. Seu risco de ter desenvolvido a DMRI úmida nesse olho esquerdo foi À de mais de 50%, mas o exame repetido pode revelar nenhum sinal de CNV no olho esquerdo. Infelizmente, no final de um período de 7 anos de acom- panhamento, a visão no olho direito pode ter sido deteriorado em 20/400, com uma cicatriz disciforme presente no exame na área central macular.

Dado que ele não perca a visão no olho esquerdo, ele é capaz de manter uma carteira de motorista e um estilo de vida independente durante esse período. Apesar de ter sido exposto a baixa dose terapêutica prolongada de anti-VEGF no olho, a doença cardiovascular do paciente pode permanecer inalterada sem experimentar qualquer evento tromboembólico.

As microesferas usadas terapeuticamente nos Exemplos de 1 a 3 podem ser feitas por um método de evaporação do solvente do cloreto de metileno em um solução de PVA (álcool polivinílico). De 10 a 100 mg/mL de microesferas podem ser suspensas em uma solução tampão de fosfato iso- tônico e de 50 a 200 ul da suspensão de microesferas podem ser adminis- tradasa um local intraocular.

As microesferas do agente antineovascular com o agente anti- neovascular homogeneamente distribuído ou disperso por todo o ácido poli-

: Á 35/39 lático selecionado (PLA) ou resina de PLGA podem ser produzidas usando r uma técnica de emulsão/ evaporação de solvente.

O não-solvente (fase a- quosa contínua) é saturado com o agente antineovascular para evitar a per- E da do agente antineovascular da fase de polímero e aumentar a eficiência de carregamento.

Além disso, o agente antineovascular saturado com metanol pode ser usado para resfriar a emulsão.

O metanol serviu como um dissipa- dor para remover o diclorometano rapidamente, endurecendo as microesfe- ras antes que o agente antineovascular pudesse se difundir para fora delas.

Exemplo 2 F ' Microesferas de Bevacizumab-PLGA intravitreal de baixa dose para o tratamento da DMRI seca Um homem de 74 anos é diagnosticado com a idade DMRI seca , em um olho (direito) e DMRI úmida no outro olho (esquerdo). Ele tem 20/40 ' de visão em seu olho direito.

Ele é tratado por injeção intravitreal no olho com bDMRI seca de um sistema de distribuição de fármacos de liberação pro- | longada.

O sistema de distribuição de fármacos de liberação prolongada compreende um total de cerca de 6 microgramas (dose baixa) do agente ativo bevacizumab em um veículo polimérico.

O veículo polimérico é um áci- do hialurônico de alta viscosidade ou um PLGA ou PLA associados ao agen- te antineovascular bevacizumab para formar uma pluralidade de microesfe- ras ou um implante monolítico único no qual o bevacizumab é homogenea- mente distribuído.

Alternativamente, o sistema de distribuição de fármacos de liberação prolongada pode compreender as microesferas ou implante de bevacizumab no ácido hialurônico (de ligação cruzada ou não), de modo que os veículos poliméricos viscosos (ácido hialurônico) e os sólidos (microesfe- ras ou implante de PLA ou PLGA) estão presentes no mesmo sistema de distribuição de fármacos.

O sistema de distribuição de fármacos pode liberar 6 mg de bevacizumab no vítreo durante um período de 1 a 6 meses, após o qual o olho direito do paciente pode mostrar nenhuma evidência de neovas- cularizaçãoeamesma visão mantida (20/40) em seu olho direito.

Exemplo 3 Microesferas de Ranibizumab-PLGA intravitreal para o tratamen-

, P 36/39 to da DMRI seca

- Uma mulher de 83 pode acordar com a visão embaçada no olho | esquerdo, Ela pode ter um histórico de glaucoma, s/p remoção de catarata á com IOLs (lentes intraocular), e DMRI seca em ambos os olhos e pode estar usando colírio Alphagan P.

O oftalmologista da paciente pode examiná-la e ela pode ser diagnosticada com DMRI úmida no olho esquerdo e mandada imediatamente a um especialista em retina.

A visão pode ser 20/25 no olho direito e 20/200 no olho esquerdo.

O exame da retina pode apresentar alte- rações secas na mácula do olho direito, mas características de alto risco, tais como drusas grandes e numerosas mudanças pigmentar na região sub- foveal.

A mácula do olho esquerdo pode mostrar um CNV subfoveal de a- proximadamente 2 áreas de disco de tamanho com edema macular circun- dante e hemorragias intraretinais.

A angiofluoresceinografia pode confirmar a ' presença de CNV no olho esquerdo MNSR predominantemente clássica na aparência.

O paciente pode ser imediatamente iniciado com injeções intraví- treais mensais de ranibizumab no olho esquerdo com DMRI úmida, com re- solução do edema de retina durante um período de 3 meses, mas ela pode experimentar somente uma melhoria modesta da acuidade visual do olho esquerdo de 20/100. Já que o paciente estava com alto risco de desenvolver CNVem seu olho direito e a visão no olho esquerdo não pode melhorar sen- sivelmente durante o período de 3 meses, ela pode receber uma injeção in- travítrea no olho direito de 50 ul compreendendo 4,8 mg de ranibizumab in- corporado nas microesferas de PLGA, para profilaxia contra o desenvolvi- mento de CNV no olho direito.

As microesferas de PLGA polissorbato 20 comuma taxa de liberação in vitro de 5 ug/dia também podem ser colocadas na formulação para reforçar a permeabilidade da retina.

As microesferas po- dem ser colocadas em um ácido hialurônico (HA) parcialmente de ligação cruzada em uma concentração de 2,1% de HA.

Tal HA de ligação cruzada pode ser obtido de Allergan Medical (Irvine, Califórnia), sob as marcas co-

—merciais Juvederm Ultra Plus, Juvederm 30, Captique e Voluma.

A paciente pode ter injeções intravitreais repetidas no olho direi- to de 50 ul compreendendo 4,8 mg de microesferas de ranibizumab-PLGA a

. . 37/39 cada seis meses durante um período de 4 anos com acuidade visual restan- E te de 20/25 no olho direito e 20/200 para o olho esquerdo. O exame da retina pode mostrar a DMRI seca no olho direito e uma cicatriz disciforme organi- zada no olho esquerdo com fibrose leve subfoveal. Ela pode ser capaz de viver de forma independente em sua própria casa, dada a excelente visão que ela pode manter em seu olho direito.

Exemplo 4 Sistema de distribuição de fármacos antineovascular com um re- forçador de penetração da retina Um experimento foi realizado para analisar a toxicidade de um reforçador de penetração de retina polissorbato para as células epiteliais pigmentadas da retina ("RPE"). Assim, as células ARPE-19 (Ver Dunn, K. et al., ARPE-19, a human retinal pigment epithelial cell line with differentiated " properties, Exp Eye Res. Fev 1996, 62(2):155-69) foram incubadas in vitro em concentrações de polissorbato 80 variando de 0% a 0,10% p/p e um en- l saio de viabilidade celular foi realizado.

O protocolo para este experimento in vitro foi como se segue: as células ARPE-19 (passagem 11 a 23) foram semeadas no dia anterior ao experimento em placas de 24 poços a 125.000 células/poço em meio DMEM:F12 suplementado com FBS a 10%. O curso de tempo e a resposta da dose foram simultaneamente realizados em células ARPE-19. Parâme- tros de soluções de incubação, como pH, osmolaridade foram medidos para cada concentração. Tempos de incubação foram de 24h, 48h, 72h. Um con- trole negativo (sem tratamento) e um controle positivo (SMM H2O>z) foram incluídos. A condição não-tratada foi meio celular de cultura suplementado com soro. SMM de H20> foram preparados a partir de solução estoque de H202 a 3% (875 mM). As concentrações aplicadas às células foram determi- nadas considerando diversos parâmetros, tais como: (a) concentração comumente usada na formulação.

(b) concentração limitante para a solubilidade de compostos.

(c) concentração limitante para a viscosidade aplicável, osmola- ridade e valores de pH.

. ' 38/39 Numa primeira abordagem, as concentrações cobriram um inter- ' valo amplo (Exp.1). Após os resultados preliminares, um segundo conjunto de experimentos (Exp.2 a 4) determinou com mais precisão as concentra- o ções dos compostos levando à inibição de 50% da viabilidade celular, com baseem um ensaio de viabilidade celular e aspecto morfológico. Todo o in- tervalo de concentrações foi obtido com diluição em série da condição mais concentrada em meio de cultura de células (DMEM:F12 suplementado com FBS a 10%). Os resultados do ensaio MTT foram expressos como uma por- centagem de viabilidade celular calculados da seguinte forma: % viabilidade celular= OD teste / OD controle X 100.

Depois que três experimentos foram concluídos de forma inde- pendente nas mesmas condições, um gráfico foi construído a partir de 3 con- juntos de valores, produzindo valores de variação padrão inter-experimental.

' O intervalo da concentração levando a 50% de viabilidade celular foi, portan- to, determinado. A aparência morfológica foi analisada por variação de esco- re semi-quantitativa de 5 a 1, do fenótipo normal para o letal respectivamen- te.

Foi observado que as concentrações de polissorbato 80 mais que cerca de 0,06% (0,6 mg/ml) foram associadas com a diminuição da via- bilidade celular do RPE, e concentrações de polissorbato 80 superiores a cerca de 0,09% (0,9 mg/ml) foram associadas com a viabilidade celulares de menos de 50%, como mostra a figura 1. Assumindo um volume vítreo de 4 ml em um olho humano, o peso máximo total de polissorbato no vítreo de uma vez, portanto, deve não deve exceder 3,6 mg.

Em cada um dos exemplos 1-3 acima, um ou mais reforçadores de penetração da retina pode ser incluído no sistema de distribuição de fár- macos para aumentar a permeabilidade da retina para o agente antineovas- cular usado. Assim, um reforçador de penetração da retina pode ser adicio- nado ao sistema de distribuição de fármacos de liberação prolongada, para liberar concomitantemente com o agente antineovascular (ou seja, um com- posto anti-VEGF). Co-liberando ambos uma dose baixa do composto anti- VEGF e reforçador de penetração por um período de 6 meses pode otimizar

. : 39/39 a eficácia dos compostos anti-VEGF especialmente os maiores, como um F anticorpo monocional, para alcançar o espaço sub-retinal para tratar CNV. Um reforçador de penetração preferenciais da retina é o polissorbato 20 (por o exemplo, Tween 20 e C12-sorbitano-E20) e o polissorbato 80, adicionado ao sistema de distribuição de fármacos como uma solução aquosa com uma concentração do reforçador de penetração da retina na solução aquosa de entre cerca de 0,005% a 0,10% (0,05 mg a 1 mg do reforçador de penetra- ção da retina por m! de água. Os reforçadores de penetração da retina alter- nativos incluem, mas não estão limitados a, laurilsulfato de sódio, cloreto de benzalcônio, e ciclodextranos.

Todos os artigos, referências, patentes, pedidos e publicações estabelecidos acima estão incorporados aqui por referência em suas totali- dades.

' Assim, o espírito e o escopo das seguintes reivindicações não | devem ser limitados às descrições das modalidades preferidas estabelecidas acima.

Claims (25)

1. Y ' 1/5

   REIVINDICAÇÕES - 1. Método para tratar a degeneração macular seca relacionada à À idade ("DMRI seca"), o método compreendendo a etapa de administração de o um agente antineovascular a um olho de um paciente com DMRI seca, tra- tando, assim, a DMRI seca.
2. 2. Método de acordo com a reivindicação 1, em que o agente an- tineovascular é um agente antifator de crescimento endotelial vascular ("anti- VEGF").
3. 3. Método de acordo com a reivindicação 2, em que o agente an- ti-VEGF é selecionado do grupo consistindo em bevacizumab, ranibizumab e pegaptanib e derivados, ésteres, sais e suas misturas.
4. 4. Método de acordo com a reivindicação 1, em que o agente an- tineovascular é administrado como um sistema de distribuição de fármacos q biocompatíveis. '
5. 5. Método de acordo com a reivindicação 4, em que o sistema Í de distribuição de fármacos biocompatíveis inclui o agente antineovascular e um veículo polimérico associado ao agente antineovascular.
6. 6. Método de acordo com a reivindicação 5, em que o veículo polimérico é selecionado do grupo que consiste em um ácido lático poliméri- co, um ácido glicólico polimérico, um polímero ácido lático-co-ácido glicólico ("PLGA"), uma hidroxipropilmetilcelulose polimérica, e um ácido hialurônico polimérico, e suas misturas.
7. 7. Método de acordo com a reivindicação 5, em que o agente an- tineovascular está associado ao veículo polimérico, sendo dispersado de forma homogênea por todo o veículo polimérico.
8. 8. Método de acordo com a reivindicação 1, em que a etapa de administração é realizada ao injetar o agente antineovascular a um local in- traocular anterior.
9. 9. Método de acordo com a reivindicação 1, em que a etapa de administração é realizada ao injetar o agente antineovascular a um local in- traocular posterior.
10. 10. Método de acordo com a reivindicação 9, em que a etapa de
11. . i 2/5 administração é realizada ao injetar o agente antineovascular na cavidade . vítrea. | 11. Método para tratar a DMRI seca, o método compreendendo a as etapas de: (a) preparar um sistema de distribuição de fármacos biocom- patíveis compreendendo um agente antineovascular e um veículo polimérico associado ao agente antineovascularan- tin, e; (b) injetar o sistema de distribuição de fármacos na cavidade vítrea do olho de um paciente com DMRI seca, tratando, assim, a DMR! seca.
12. 12. Método de acordo com a reivindicação 11, em que o agente antineovascular é o bevacizumab ou um derivado, éster, ou sal do mesmo.
13. - 13. Método de acordo com a reivindicação 12, em que o sistema de distribuição de fármacos compreende de cerca de 5 ug a cerca de 3 mg do bevacizumab.
14. 14. Método de acordo com a reivindicação 13, em que o veículo polimérico é selecionado do grupo que consiste em um ácido lático polímero, um ácido glicólico polimérico, um PLGA, uma hidroxipropilmetilcelulose poli- mérica, eum ácido hialurônico polimérico, e suas misturas.
15. 15. Método de acordo com a reivindicação 14, em que o sistema de distribuição de fármacos libera uma média de cerca de 10 ug a cerca de 40 ug do bevacizumab durante um período de 24 horas.
16. 16. Método de acordo com a reivindicação 15, em que o sistema de distribuição de fármacos libera uma média de cerca de 14 ug a cerca de 28 ug do bevacizumab durante um período de 24 horas.
17. 17. Método de acordo com a reivindicação 16, em que o sistema de distribuição de fármacos libera uma média de cerca de 7 ug a cerca de 14 ug do bevacizumab durante um período de 24 horas.
18. 18. Método para tratar a DMRI seca em um paciente com DMRI seca em um olho e DMRI úmida no outro olho, o método compreendendo a etapa de injetar um sistema de distribuição de fármacos biocompatíveis

    À N 3/5 compreendendo um agente antineovascular e um veículo polimérico associ- - ado ao agente antineovascular na cavidade vítrea do olho do paciente com À DMRI seca, tratando, assim, a DMRI seca.
19. 19. Método de acordo com a reivindicação 18, em que a DMRI seca é tratada, ao impedir ou retardar a progressão da DMRI seca para a DMRI úmida no olho tratado.
20. 20. Método de baixa dosagem para tratar a DMRI seca, o méto- do compreendendo as etapas: (a) preparar um sistema de distribuição de fármacos biocom- patíveis de liberação prolongada, compreendendo entre cerca de 5 ug e cerca de 20 ug de bevacizumab e um veí- culo de ácido hialurônico polimérico associado ao bevaci- zumab; t (b) injetar o sistema de distribuição de fármacos na cavidade vítrea do olho de um paciente com DMRI seca, e; Í (c) liberar do sistema de distribuição de fármacos uma média de cerca de 14 nanogramas a cerca de 120 nanogramas de bevacizumab por um período de 24 horas, durante um pe- ríodo de tempo de cerca de 3 meses a cerca de 6 meses, tratando, assim, a DMRI seca com baixas doses de bevaci- zumab liberado do sistema de distribuição de fármacos.
21. 21. Método de acordo com a reivindicação 20, em que o outro olho não injetado do paciente tem DMRI úmida.
22. 22. Método de acordo com a reivindicação 21, em que a DMRI seca é tratada ao prevenir ou retardar o início da neovascularização retinal no olho com DMRI seca injetado.
23. 23. Método de acordo com a reivindicação 21, em que o sistema de distribuição de fármacos tem uma viscosidade entre cerca de 130.000 cps e cerca de 300.000 cps a uma taxa de cisalhamento de cerca de 0,1/seg acercade25ºC.
24. 24. Método de acordo com a reivindicação 21, em que o sistema de distribuição de fármacos é injetado usando uma seringa de calibre 25 a

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25. 25. Método de baixa dosagem para tratar a DMRI seca, o méto- do compreendendo as etapas: sl (a) preparar um sistema de distribuição de fármacos biocom- patíveis de liberação prolongada compreendendo entre cerca de 5 ug e cerca de 20 ug de bevacizumab e um veí- culo de ácido hialurônico polimérico associado ao bevaci- zumab, (b) usando uma seringa de calibre 25 a 30 para injetar o siste- ma de distribuição de fármacos na cavidade vítrea do olho de um paciente com DMRI seca, onde o outro olho não in- jetado do paciente tem DMRI úmido, e; (c) liberando do sistema de distribuição de fármacos uma mé- - dia de cerca de 14 nanogramas a cerca de 120 nanogra- mas de bevacizumab por um período de 24 horas durante um período de tempo entre cerca de 3 meses e cerca de 6 meses, tratando, assim, a DMRI seca com baixas doses de bevacizumab liberado do sistema de distribuição de fárma- cos ao prevenir ou retardar o início da neovascularização retinal no olho com DMRI seca injetado, onde o sistema de distribuição de fármacos tem uma viscosidade de cerca de

    130.000 cps e cerca de 300.000 cps a uma taxa de cisa- lIhamento de cerca de 0,1/seg a cerca 25ºC.

    26. Método para prevenir o desenvolvimento da neovasculariza- ção ocular, o método compreendendo as etapas: (a) preparar um sistema de distribuição de fármacos biocom- patíveis compreendendo um fármaco antineovascular e um ácido hialurônico polimérico associado ao fármaco antineo- vascular, e; (b) injetar o sistema de distribuição de fármacos em um local intraocular do olho de um paciente, prevenindo, assim, o desenvolvimento da neovascularização coroidal.

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    27. Método de acordo com a reivindicação 26, em que o ácido - hialurônico polimérico é um ácido hialurônico de ligação cruzada.

    28. Método de acordo com a reivindicação 26, em que o ácido i hialurônico polimérico é um ácido hialurônico sem ligações cruzadas.

    29. Método de acordo com a reivindicação 26, em que o ácido hialurônico polimérico tem um peso molecular entre cerca de 1 milhão de Dáltons e cerca de 2 milhões de Dáltons.

    30. Método de acordo com a reivindicação 26, em que o local in- traocular é selecionado do grupo de locais intraoculares consistindo em lo- cais intraoculares subtenoniana, subconjuntival, supracoroidal, intrascleral, intravitreal e retrobulbar.

    31. Método de acordo com a reivindicação 26, em que o pacien- te tem uma condição ocular selecionada de condições oculares DMRI seca, - oclusão da veia central retinal sem neovascularização e retinopatia diabética não-proliferativa.

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