Procédé de préparation de 7-déhydro-cholestérol. La présente invention a trait :à la prépa ration de 7-déhydro-cholestérol, qui est une provitamine D3.
Le noyau du cholestérol de départ est re présenté par la formule suivante:
EMI0001.0004
où R est un reste d'hydrocarbure saturé à chaîne ouverte.
Ziegler (Annalen, 551, 80-119 [19421) a publié un long article sur l'halogénation dans la position allyle de nombreuses subs tances non saturées et il remarque briève ment que les éthers-sels de cholestéryle peu vent être bromés avec la succinimide bromée sur l'azote, mais il ne décrit pas la nature ou les propriétés du produit résultant.
L'objet de l'invention est un procédé de préparation de 7-déhydro-cholestérol, carac térisé par le fait que l'on fait réagir un éther-sel du cholestérol, avec le groupe acyloxy dans la position 8, avec un composé halogénant azoté ayant un halogène lié à l'azote, et qu'on soumet 1ë produit halogéné résultant à l'action d'un composé apte à lui enlever une molécule d'acide halogéné, et qu'on saponifie le produit résultant,
de ma- nière à obtenir le groupe OH dans la Èosi- tion â.
L'éther-sel du cholestérol que l'on fait réagir est 'de préférence un éther-sel d'un acide carboxylé, dont le reste acyle ne con tient aucun groupement réagissant soit avec l'agent halogénant, soit avec le -stérol halo- géné. On utilise avantageusement l'éther-sel dérivant de l'acide acétique.
Le composé halogénant azoté ayant -un halogène lié à l'azote peut être la bromo- succinimide, la bromo-phtalimide, une amide chlorée ou bromée, d'acides gras n'ayant pas plus de six atomes de carbône dans la Mo lécule et ne présentant pas'd'autres \substi- tuants que l'halogène lié à l'azote, unè bronio ou cbloroacétanilide, ayant l'halogène lié à l'azote,
et portant dans la position. para et, si on" le désire, dans une ou dans les deux positions ortho de l'anneau du benzène, des groupements tels qu'ils empêchent la'migra- tion de l'halogène lié à l'azote en position para et/ou ortho, ces substituants n'étant pas modifiés par les réactifs et par les produits de la réaction contenus dans le mélange réactionnel.
L'agent d'halogénation utilisé" de préfé rence est la N-bromo=succinimidë.' Le composé apte à enlever une molécule d'acide halogéné est avantageusement une amine tertiaire, liqüide à la température or dinaire ou' à là température de la réaction, sans autre groupe fonctionnel que 1e groupe amine tertiaire réagissant avec l'halogène fixé à l'éther-sel du cholestérol. Nous utili sons de préférence la diéthyl-aniline.
La première étape du procédé, celle de l'halogénation, s'effectue de préférence en pré sence d'un solvant qui dissout l'éther-sel du stérol et qui ne réagit ni avec les matières premières ni avec les produits de la réaction. Comme solvant, on peut citer des fractions légères du pétrole, spécialement l'essence, dont la température d'ébullition varie de 60 à 80 , mais d'autres solvants, comme par exemple l'éther, l'acétate d'éthyle, le t6tra- chlorure de carbone, peuvent aussi être uti lisés, de même que le mélange des solvants cités.
Nous avons constaté qu'il est en géné ral recommandable d'utiliser des solvants à point d'ébullition bas, comme ceux mention nés, et d'opérer au point d'ébullition de sol vant, bien que l'on puisse également opérer à des températures plus basses.
Il a été également trouvé avantageux de remuer et d'agiter le mélange pendant la réaction, spécialement si l'on opère au- dessous du point d'ébullition.
Nous avons trouvé par expérience que le rendement de l'opération est amélioré en effectuant la réaction avec un excès de N-bromo-succinimide ou d'un autre agent halogénant et jusqu'à ce que ce dernier soit épuisé en halogène, et dans le cas de la N-bromo-succinimide, qu'un excès de 20 à 30% par rapport à, la quantité stoechiométri- que est souhaitable.
Nous avons également trouvé désirable d'utiliser une N-bromo- suceinimide très pure et très finement divisée.
Nous avons trouvé également que la mé thode la plus efficace de réaliser la première étape du procédé est d'employer de la N-bromo-succinimide avec une fraction légère de pétrole comme solvant et de chauffer le mélange à reflux en le remuant jusqu'à ce que le solidus ne contienne presque plus de brome.
D'autres amides ou imides halogénées sur l'azote peuvent être utilisées en lieu et place de N-bromo-succinimide, mais alors le ren dement de l'opération décroît en général. Pour réaliser la deuxième étape du pro cédé, -c'est-à-dire la déhydrohalogénati:on, on utilise de préférence de la diéthyl-aniline ou de la. diméthyl-aniline.
Nous avons trouvé que dans ce cas il est recommandable d'opérer avec un assez fort excès de la base et de porter la température de réaction à environ 100 C ou un peu moins. A titre d'exemple, il est avantageux d'utiliser une quantité de diéthyl-aniline cor respondant à une fois et demie à deux fois le poids de l'éther-sel original et d'effectuer la réaction au bain-marie à environ 95 C pendant environ trois heures. En opérant à des températures supérieures à 100 C, il a.
été trouvé désirable d'employer des quantités plus grandes de déhydrohalogénant, par exemple environ 10 fois le poids d'éther-sel original si l'on fait usage de diéthyl-aniline à son point d'ébullition.
Comme pour l'agent halogénant, il a été trouvé avantageux, dans le cas du déhydro- halogénant, d'agiter constamment le mélange en réaction et d'employer un réactif aussi pur que possible, car la. présence d'impuretés paraît faire diminuer le rendement de l'opé ration.
Cette seconde étape fournit un mélange de stéroïdes contenant l'éther-sel du 7-déhv- dro-cholestérol, ayant des doubles liaisons dans les positions 5 : 6 et 7<B>:8;</B> le 7-déhydro- cholestérol correspondant est obtenu par hydrolyse du mélange susindiqué, ce 7-déhy- dro-cholestérol étant en général obtenu égale ment en mélange avec d'autres stéroïdes.
<B>Pour</B> transformer ce 7-déhydro-cholestérol en vitamine, il sera en général préférable d'irradier le produit impur obtenu, étant donné que la plupart des substances contami- nantes peuvent, si on le désire, .être ensuite éliminées par des méthodes connues.
La purification peut aussi être effectuée, par des méthodes connues, sur le produit impur non irradié, obtenu après enlèvement d'une molécule d'acide halogéné, par exem ple par séparation chromatographique, ledit produit étant, si cela est nécessaire, traité de manière à former des éthers-sels convenant pour cette séparation. Dans ce but, nous pré férons préparer les 3,5-dinitro-benzoates. Après séparation, le produit purifié est hydrolysé. Nous donnons ci-après quelques exemples de réalisation de l'invention.
Exemple <I>1:</I> 10 g d'acétate de cholestéryle sont dissous dans 30 cm' d'éther; 4 g de N-bromo-succini- mide sont introduits dans la solution et le tout est chauffé à reflux pendant 8 heures. Après refroidissement, la solution éthérée est lavée d'abord avec de l'eau, puis avec une solution à 5 % de carbonate de sodium, et enfin de nouveau avec de l'eau. Le mélange froid peut être filtré pour retenir les parties solides non dissoutes, puis lavé comme décrit ci-dessus.
Après que la solution éthérée lavée a été séchée sur un agent dessiccant approprié comme du sulfate de magnésium anhydre, l'éther est éliminé par distillation et le résidu est dissous dans 100 cm' de diéthyl-aniline. Cette solution est chauffée dans un appareil à reflux pendant 15 minutes, refroidie et versée dans 350 crri@ d'acide chlorhydrique à <B>10%</B> contenant de la glace pilée.
Les éthers- sels des stérols qui se séparent sont extraits avec de l'éther et lavés avec l0: 100 cm7 d'acide chlorhydrique à, <B>10%;</B> 20: 100 cm3 d'eau; 30: 100 cm@ de solution de carbonate de sodium et 40: 100 cm3 d'eau.
La solution éthérée est séchée à nouveau sur du sulfate de magnésium anhydre et con centrée ensuite @à environ 30 cm. On ajoute à ce résidu 35 cms d'une solution d'éthylate de sodium préparée en dissolvant 5 g de so dium dans 200 crri@ d'alcool éthylique sec. Après un repos d'une nuit à la température du local, le mélange est dilué avec de l'éther et la solution est lavée trois fois avec de l'eau.
L'éther est ensuite éliminé par distil lation et le. résidu est recristallisé dans l'al cool éthylique et l'on obtient 4,4 g de ma tière contenant 30/'901 de 7-déhydro-cholesté- rol, représentant un rendement de 15 % de la valeur théorique.
I1 est intéressant de noter que dans une autre expérience, effectuée comme la précé- dente, si ce n'est que la première opération à reflux fut interrompue après 3 heures, le rendement final fut de 4 g de matière contenant seulement<B>18%</B> de 7-déhydro- cholestérol.
Exemple <I>2:</I> 12 g de benzoate de cholestéryle sont dis sous dans 40 cm' de tétrachlorure de carbone; 4 g de N-bromo-succinimide sont ajoutés à la solution et le mélange est chauffé à reflux pendant 30 minutes. Après refroidissement, la solution dans le tétrachlorure de carbone est soumise aux mêmes lavages que la so lution éthérée au stade correspondant de l'exemple 1.
Après distillation sous pression réduite du tétrachlorure de carbone, le résidu est chauffé à reflux pendant 15 minutes avec 100 cm' de diéthyl-aniline. La solution résiduaire est acidifiée et extraite au moyen d'éther, etc.comme dans l'exemple 1, et le résidu de l'extrait éthéré est hydrolysé avec de l'éthylate de sodium .à la température du local, ce que donne 3 g de matière contenant <B>10%</B> de 7-déhydro-cholestérol. Exemple <I>3:
</I> 14 g de 3,5-dinitro-benzoate de cholesté- ryle sont dissous dans 100 em3 de tétrachlo rure de carbone et la solution chauffée à reflux pendant 15 minutes avec 4 g de N-bromo-succinimide. Après refroidissement, la solution dans le tétrachlorure de carbone est lavée comme dans l'exemple 1, et le tétra chlorure de carbone est éliminé par distilla tion sous pression réduite.
Le résidu est soumis au même traitement que le résidu de la solution après bromuratiou dans l'exemple 1, ce que donne finalement' 3,5 g de matière contenant 6 % de 7-déhydro-cholestérol. Exemple 300 g d'acétate de cholestéryle sont dis sous dans 1 litre d'éther et la solution est chauffée à reflux pendant 5 heures avec 120 g de N-bromo-succinimide. La solution éthérée est filtrée, lavée et séchée comme décrit dans l'exemple 1.
Le résidu obtenu après élimination de l'éther par distillation est chauffé à reflux pendant 15 minutes avec 3 litres de diéthyl-aniline. Les deux tiers à peu près de la diéthyl-aniline sont éliminés par distillation sous pression réduite et la so lution restante est versée après refroidisse ment dans 4 litres d'acide chlorhydrique à 10 % refroidi à la glace. Le précipité solide est dissous dans l'éther et la solution est lavée avec 10:1 litre d'acide chlorhydrique à <B>10%;</B> 20: de l'eau; 30: 1 litre de solution à <B>10%</B> de carbonate de sodium et 40: de l'eau.
Après séchage sur du sulfate de magnésium anhydre, la solution dans l'éther est concen trée à environ 1 litre et additionnée d'une solution d'éthylate de sodium préparée en dissolvant 25 g de sodium dans 1 litre d'al cool éthylique. Ce mélange est laissé à la température du local pendant 13 heures et il est ensuite débarrassé de l'acétate de sodium et de l'alcool éthylique par trois lavages à l'eau. La solution éthérée résiduaire est en suite distillée pour enlever le solvant et le résidu est cristallisé dans de l'alcool éthy lique pour donner 145 g de matière contenant 14% du 7-déhydro-cholestérol.
Par irradiation avec de la lumière ultra violette et élimination consécutive de la ma tière inerte, ce mélange donne 25 g d'un pro duit ayant une activité en vitamine D de 5,6 X 106 unités internationales par gramme. Exemple <I>5:</I> 10 g d'acétate de cholestéryle sont dissous dans 25 cm" d'acétate d'éthyle et la solution est chauffée à reflux pendant 15 minutes avec 4 g de N-bromo-succinimide. Après re froidissement, la solution dans l'acétate est lavée avec 10: de l'eau; 20: une solution de carbonate de sodium à<B>10%;</B> 30: de l'eau.
L'acétate d'éthyle est éliminé par distillation sous pression réduite. Le résidu est alors chauffé à reflux avec de la diéthyl-aniline et traité comme dans les exemples précédents. <I>Exemple 6:</I> 10 g d'acétate de eholestéryle sont dissous dans 30 cm' d'éther et la solution est chauf fée à reflux pendant 8 heures avec 4 g de N-bromo-succinimide. Après lavage de la so lution éthérée et distillation du produit comme dans l'exemple 1, le résidu est traité pendant 10 minutes avec 100 cm' de dimé- thyl-aniline bouillante.
Le traitement s'achève de nouveau comme dans l'exemple 1 et l'on obtient 4,3 g de matière contenant 27 % de 7-déhydro-chalestérol.
Exemple <I>7:</I> 10 g d'acétate de cholestéryle sont dissous dans 30 cm" d'éther et la solution est chauf fée à reflux pendant 6 heures avec 5 g de N-bromo-phtalimide. Le traitement consécu tif est exactement identique à celui de l'exemple 1 et fournit \?,6 g de matière conte nant 21% de 7-déhydro-cholestérol.
Ezewple <I>8:</I> 10g d'acétate de cholestéryle sont bromés comme décrit à. l'exemple 6; le résidu restant après distillation du solvant est dissous dans 100 cri" de diéthyl-aniline et chauffé au bain-marie à 95-100 C pendant 30 minutes.
Après refroidissement, la solution est versée dans 300 cm" d'acide chlorhydrique à<B>10%</B> et le produit est extrait avec de l'éther, hydro lysé et cristallisé dans de l'alcool comme dans l'exemple 1, ce que donne 3,2g de ma tière contenant 24% de 7-déhydro-cholestérol. Exemple <I>9:</I> De l'acétate de cholestéry le (56 g) est dissous dans de la, benzine, à point d'ébulli tion 60-806 C (250 cm').
On ajoute de la N-bromo-succinimide (23 g) et le mélange est chauffé à reflux sur un bain-marie en agitant fortement jusqu"a ce que la partie solide ne contienne plus de brome actif. La solution est alors refroidie et filtrée, le filtrat étant versé dans de la diéthyl-aniline (90 cm"). La benzine est éliminée par distil lation sous pression réduite de cette solution et la solution résiduaire est chauffée au bain de vapeur (95-100 C) pendant 3 heures.
Après ce laps de temps la solution est re froidie et diluée avec de l'essence légère (250 cm"), lavée avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 40 %, une solution de carbonate de sodium à 10 %, puis à l'eau, et l'essence est éliminée par distillation sous pression réduite. Le résidu solide est hydro lysé par ébullition pendant 15 minutes avec une solution d'hydroxyde de potassium (10 g) dans de l'alcool éthylique (150 cm@). Cette solution est débarrassée de l'acétate de po tasse par filtration avant qu'elle se refroi disse, on ajoute de l'eau (15 cm') et laisse cristalliser le stérol libre.
Rendement: 30 g, contenant 35 % de 7-déhydro-cholestérol. <I>Exemple 10:</I> De l'acétate de cholestéryle (56 g) est dis sous dans de la benzine, à point d'ébullition 60-80 C (250 cm) et le mélange est chauffé à reflux avec de la N-bromo-succinimide (28 g) jusqu'à consommation du brome actif de cette dernière. Après quoi, le produit est traité exactement comme dans l'exemple 9.
Rendement: 29 g, contenant<B>58%</B> de 7-dé- hydro-cholestérol. Exemple <B><I>il:</I></B> Du n-butyrate de cholestéryle (12,4 g) est dissous dans de la benzine, à point d'ébul lition 60-80 C (50 cm3) et la solution est chauffée @à reflux pendant 15 minutes avec de la N-bromo-succinimide (5,6 g). Après fil tration, le produit est traité comme dans l'exemple 9, en utilisant des quantités pro portionnelles de réactifs.
Production: 5 g, contenant 42 % de 7-déhydro-cholestérol.
<I>Exemple 12:</I> De l'acétate de cholestéryle (10 g) est dissous dans de la. benzine, point d'ébullition 60-80 C (50 cms) et la solution est chauf fée à reflux avec de la N-bromo-succinimide (5 g) jusqu'à ce que le brome actif de cette dernière soit consommé. La solution est filtrée et l'on ajoute de la pipéridine éthyli que, ayant le groupe éthyle lié à l'azote (20 ci3). Après élimination de la benzine par distillation sous pression réduite, cette solution est chauffée pendant 2 heures au bain de vapeur (95---100 C).
Le traitement consécutif est exactement le méme que celui décrit dans l'exemple 9. Rendement:<B>1,71</B> g, contenant 23% de 7-déhydro-cholestérol.
Exemple <I>13:</I> De l'acétate de cholestéryle (11 g) est dissous dans de la benzine, point d'ébullition 60-80 E (55 cm3) et la solution est chauf fée à reflux avec de la N-bromo-succinimide (5,5 g) jusqu'à ce que le brome actif de cette dernière soit consommé. Après filtration, de la diéthyl-cyclohegylamine ayant les deux groupes éthyle liés à l'azote est ajoutée (8 cm@),
la benzine est éliminée par distilla tion sous pression réduite et la solution res tante est chauffée pendant 2 heures au bain de vapeur (95-100 C). Le traitement s'achève comme dans l'exemple 9. Rende ment: 3,6 g, contenant 8 % de 7-déhydro- cholestérol.
<I>Exemple 14:</I> De l'acétate de cholestéryle (11 g) est mis en réaction avec de la N-bromo-succinimide (5,5 g) comme à l'exemple 13, on ajoute de la dipropyl-aniline ayant les groupes propyle liés -à l'azote (10 cm') et après avoir éliminé la benzine par distillation sous pression ré duite, la solution est chauffée 3 heures au bain de vapeur (95-100 C). Le traitement s'achève comme dans l'exemple 9. Rende ment:. 6,2 g, contenant 27 % de 7-déhydro- cholestérol.
<I>Exemple 15:</I> De l'acétate de cholestéryle (10 g) est dissous dans de l'éther diéthylique (30 cm') et la solution est chauffée à reflux 6 heures avec de la N-bromo-acétamide (3,5 g).
La so lution dans l'éther est ensuite lavée à l'eau, puis avec une solution à 10 % de carbonate de soude et de nouveau à l'eau, séchée sur du sulfate de magnésium anhydre et l'éther enlevé par distillation. Le résidu est dissous dans 100 cm' de diéthyl-aniline et cette solu tion est chauffée à reflux pendant 10 mi nutes; traitement consécutif comme dans l'exemple 1.
Rendement: 3,3 g, contenant 34% de 7-déhydro-cholestérol. Exemple <I>1<B>6</B>:</I> De l'acétate de cholestéryle (5 g) est dis sous dans de l'éther diéthylique (15 cm") et chauffé à. reflux pendant 48 heures avec de la trichloro-acétanilide, portant les trois atomes de chlore liés l'un à l'azote, les deux autres dans la position o et p (2,7 g). Le produit est traité comme dans l'exemple 14. Rendement: 0,7 g, contenant 17 % de 7-déhydro-cholestérol.
Process for the preparation of 7-dehydro-cholesterol. The present invention relates to: the preparation of 7-dehydro-cholesterol, which is a provitamin D3.
The core of the starting cholesterol is represented by the following formula:
EMI0001.0004
where R is an open chain saturated hydrocarbon residue.
Ziegler (Annalen, 551, 80-119 [19421) has published a long article on the halogenation in the allyl position of many unsaturated substances and he briefly notices that the cholesteryl ethers salts can be brominated with succinimide. brominated on nitrogen, but it does not describe the nature or properties of the resulting product.
The object of the invention is a process for the preparation of 7-dehydro-cholesterol, charac terized in that an ether-salt of cholesterol is reacted with the acyloxy group in position 8, with a halogenating compound nitrogen having a halogen bound to nitrogen, and the resulting halogenated product is subjected to the action of a compound capable of removing a halogenated acid molecule from it, and the resulting product is saponified,
so as to obtain the OH group in the osition.
The ether-salt of cholesterol which is reacted is preferably an ether-salt of a carboxylated acid, the acyl residue of which does not contain any group which reacts either with the halogenating agent or with the halo-esterol. - uncomfortable. The ether-salt derived from acetic acid is advantageously used.
The nitrogenous halogenating compound having a halogen bonded to nitrogen can be bromosuccinimide, bromophthalimide, a chlorinated or brominated amide, fatty acids having not more than six carbon atoms in the molecule and not having any substitutes other than halogen bound to nitrogen, a bronio or cbloroacetanilide, having halogen bound to nitrogen,
and bearing in position. para and, if desired, in one or both ortho positions of the benzene ring, groups such as to prevent migration of halogen bound to nitrogen in the para position and / or ortho, these substituents not being modified by the reactants and by the reaction products contained in the reaction mixture.
The halogenating agent preferably used is N-bromo = succinimide. The compound capable of removing a halogenated acid molecule is advantageously a tertiary amine, liquid at standard temperature or at the reaction temperature, without any functional group other than the tertiary amine group reacting with the halogen attached to the compound. Cholesterol ether salt We preferably use diethyl aniline.
The first step of the process, that of the halogenation, is preferably carried out in the presence of a solvent which dissolves the ether-salt of the sterol and which reacts neither with the raw materials nor with the products of the reaction. As solvents, mention may be made of light petroleum fractions, especially gasoline, the boiling point of which varies from 60 to 80, but other solvents, such as for example ether, ethyl acetate, Carbon tetrachloride can also be used, as can the mixture of the solvents mentioned.
We have found that it is generally advisable to use low-boiling point solvents, such as those mentioned, and to operate at the boiling point of the solvent, although it is also possible to operate at lower temperatures.
It has also been found advantageous to stir and agitate the mixture during the reaction, especially if one is operating below the boiling point.
We have found by experience that the yield of the operation is improved by carrying out the reaction with an excess of N-bromo-succinimide or other halogenating agent and until the latter is depleted in halogen, and in the In the case of N-bromo-succinimide, a 20 to 30% excess over the stoichiometric amount is desirable.
We have also found it desirable to use a very pure and very finely divided N-bromo-succeinimide.
We have also found that the most efficient method of carrying out the first step of the process is to use N-bromo-succinimide with a light fraction of petroleum as a solvent and to heat the mixture under reflux with stirring until that the solidus hardly contains any more bromine.
Other amides or imides halogenated on nitrogen can be used instead of N-bromo-succinimide, but then the yield of the operation generally decreases. To carry out the second step of the process, -that is to say the dehydrohalogenati: one, is preferably used diethyl-aniline or. dimethyl-aniline.
We have found that in this case it is advisable to operate with a fairly large excess of the base and to bring the reaction temperature to about 100 ° C. or a little lower. By way of example, it is advantageous to use an amount of diethyl-aniline corresponding to one and a half to two times the weight of the original ether-salt and to carry out the reaction in a water bath at about 95%. C for about three hours. By operating at temperatures above 100 C, it has.
It has been found desirable to employ larger amounts of the dehydrohalogen, for example about 10 times the weight of the original ether-salt if diethyl-aniline is used at its boiling point.
As with the halogenating agent, it has been found advantageous in the case of the dehydrohalogenant to stir the reaction mixture constantly and to employ a reagent as pure as possible, since the. presence of impurities appears to reduce the efficiency of the operation.
This second step provides a mixture of steroids containing the ether-salt of 7-dehydro-cholesterol, having double bonds in the 5: 6 and 7-positions <B>: 8; </B> 7-dehydro- The corresponding cholesterol is obtained by hydrolysis of the above-mentioned mixture, this 7-dehydro-cholesterol being generally also obtained in mixture with other steroids.
<B> In order </B> to convert this 7-dehydro-cholesterol into a vitamin, it will generally be preferable to irradiate the impure product obtained, since most contaminants can, if desired, be. then removed by known methods.
The purification can also be carried out, by known methods, on the unirradiated impure product, obtained after removal of a halogenated acid molecule, for example by chromatographic separation, said product being, if necessary, treated in such a manner. in forming ethers-salts suitable for this separation. For this purpose, we prefer to prepare 3,5-dinitro-benzoates. After separation, the purified product is hydrolyzed. We give below some examples of embodiment of the invention.
Example <I> 1: </I> 10 g of cholesteryl acetate are dissolved in 30 cm 3 of ether; 4 g of N-bromo-succinimide are introduced into the solution and the whole is heated under reflux for 8 hours. After cooling, the ethereal solution is washed first with water, then with 5% sodium carbonate solution, and finally again with water. The cold mixture can be filtered to retain the undissolved solid parts, then washed as described above.
After the washed ethereal solution has been dried over a suitable desiccant such as anhydrous magnesium sulfate, the ether is removed by distillation and the residue is dissolved in 100 cc of diethyl-aniline. This solution is heated in a reflux apparatus for 15 minutes, cooled and poured into 350 crri® of <B> 10% </B> hydrochloric acid containing crushed ice.
The ether salts of the sterols which separate are extracted with ether and washed with 10: 100 cm 3 of 10% hydrochloric acid; </B> 20: 100 cm 3 of water; 30: 100 cm3 of sodium carbonate solution and 40: 100 cm3 of water.
The ethereal solution is dried again over anhydrous magnesium sulfate and then concentrated to about 30 cm. To this residue is added 35 cms of a sodium ethoxide solution prepared by dissolving 5 g of sodium in 200 cc of dry ethyl alcohol. After standing overnight at room temperature, the mixture is diluted with ether and the solution is washed three times with water.
The ether is then removed by distillation and the. The residue is recrystallized from ethyl alcohol and 4.4 g of material are obtained containing 30% of 7-dehydro-cholesterol, representing a yield of 15% of the theoretical value.
It is interesting to note that in another experiment, carried out as the preceding one, except that the first reflux operation was stopped after 3 hours, the final yield was 4 g of material containing only <B> 18 % </B> of 7-dehydro-cholesterol.
Example <I> 2: </I> 12 g of cholesteryl benzoate are dissolved in 40 cm 3 of carbon tetrachloride; 4 g of N-bromo-succinimide are added to the solution and the mixture is heated under reflux for 30 minutes. After cooling, the solution in carbon tetrachloride is subjected to the same washes as the ethereal solution in the corresponding stage of Example 1.
After distillation under reduced pressure of carbon tetrachloride, the residue is heated under reflux for 15 minutes with 100 cm 3 of diethyl-aniline. The residual solution is acidified and extracted with ether, etc., as in example 1, and the residue of the ethereal extract is hydrolyzed with sodium ethoxide at room temperature, which gives 3 g of material containing <B> 10% </B> of 7-dehydro-cholesterol. Example <I> 3:
</I> 14 g of cholesteryl 3,5-dinitro-benzoate are dissolved in 100 em3 of carbon tetrachloride and the solution heated to reflux for 15 minutes with 4 g of N-bromo-succinimide. After cooling, the solution in carbon tetrachloride is washed as in Example 1, and the carbon tetrachloride is removed by distillation under reduced pressure.
The residue is subjected to the same treatment as the residue of the solution after bromination in Example 1, which finally gives 3.5 g of material containing 6% of 7-dehydro-cholesterol. Example 300 g of cholesteryl acetate are dissolved in 1 liter of ether and the solution is heated under reflux for 5 hours with 120 g of N-bromo-succinimide. The ethereal solution is filtered, washed and dried as described in Example 1.
The residue obtained after removing the ether by distillation is heated at reflux for 15 minutes with 3 liters of diethyl-aniline. About two thirds of the diethyl aniline is removed by distillation under reduced pressure and the remaining solution after cooling is poured into 4 liters of ice-cold 10% hydrochloric acid. The solid precipitate is dissolved in ether and the solution is washed with 10: 1 liter of <B> 10% hydrochloric acid; </B> 20: water; 30: 1 liter of <B> 10% </B> sodium carbonate solution and 40: water.
After drying over anhydrous magnesium sulfate, the ether solution is concentrated to about 1 liter and added with a sodium ethoxide solution prepared by dissolving 25 g of sodium in 1 liter of ethyl alcohol. This mixture is left at room temperature for 13 hours and it is then freed from sodium acetate and ethyl alcohol by washing three times with water. The residual ethereal solution is then distilled to remove the solvent and the residue is crystallized from ethyl alcohol to give 145 g of material containing 14% of the 7-dehydro-cholesterol.
Upon irradiation with ultraviolet light and subsequent elimination of the inert material, this mixture gives 25 g of a product having a vitamin D activity of 5.6 X 106 international units per gram. Example <I> 5: </I> 10 g of cholesteryl acetate are dissolved in 25 cm 3 of ethyl acetate and the solution is heated under reflux for 15 minutes with 4 g of N-bromo-succinimide. After cooling, the acetate solution is washed with 10: water; 20: a <B> 10% sodium carbonate solution; </B> 30: water.
The ethyl acetate is removed by distillation under reduced pressure. The residue is then heated to reflux with diethyl-aniline and treated as in the preceding examples. <I> Example 6: </I> 10 g of eholesteryl acetate are dissolved in 30 cm 3 of ether and the solution is heated under reflux for 8 hours with 4 g of N-bromo-succinimide. After washing the ethereal solution and distilling the product as in Example 1, the residue is treated for 10 minutes with 100 cc of boiling dimethylaniline.
The treatment is completed again as in Example 1 and 4.3 g of material containing 27% of 7-dehydro-chalesterol are obtained.
Example <I> 7: </I> 10 g of cholesteryl acetate are dissolved in 30 cm 3 of ether and the solution is heated under reflux for 6 hours with 5 g of N-bromo-phthalimide. tif is exactly the same as that of Example 1 and provides 6 g of material containing 21% 7-dehydro-cholesterol.
Ezewple <I> 8: </I> 10g of cholesteryl acetate are brominated as described in. Example 6; the residue remaining after distillation of the solvent is dissolved in 100 µl of diethyl-aniline and heated in a water bath at 95-100 C for 30 minutes.
After cooling, the solution is poured into 300 cm "of <B> 10% </B> hydrochloric acid and the product is extracted with ether, hydrolysed and crystallized from alcohol as in the example. 1, which gives 3.2 g of material containing 24% of 7-dehydro-cholesterol. Example <I> 9: </I> Cholesterol acetate (56 g) is dissolved in benzine, at boiling point 60-806 C (250 cm ').
N-bromo-succinimide (23 g) is added and the mixture is refluxed on a water bath with vigorous stirring until the solid part no longer contains active bromine. The solution is then cooled and filtered. , the filtrate being poured into diethyl-aniline (90 cm "). The benzine is removed by distillation under reduced pressure from this solution and the residual solution is heated in a steam bath (95-100 ° C.) for 3 hours.
After this time the solution is cooled again and diluted with light gasoline (250 cm "), washed with a 40% aqueous hydrochloric acid solution, 10% sodium carbonate solution, then with water. water, and the gasoline is removed by distillation under reduced pressure The solid residue is hydrolysed by boiling for 15 minutes with a solution of potassium hydroxide (10 g) in ethyl alcohol (150 cm 2). This solution is freed from the acetate of the cup by filtration before it cools, water (15 cm 3) is added and the free sterol is allowed to crystallize.
Yield: 30 g, containing 35% of 7-dehydro-cholesterol. <I> Example 10: </I> Cholesteryl acetate (56 g) is dissolved in benzine, at boiling point 60-80 C (250 cm) and the mixture is heated to reflux with N-bromo-succinimide (28 g) until consumption of the active bromine of the latter. After that, the product is processed exactly as in Example 9.
Yield: 29 g, containing <B> 58% </B> of 7-dehydro-cholesterol. Example <B><I>il:</I> </B> Cholesteryl n-butyrate (12.4 g) is dissolved in benzine, boiling point 60-80 C (50 cm3) and the solution is heated @ reflux for 15 minutes with N-bromo-succinimide (5.6 g). After filtration, the product is treated as in Example 9, using proportional amounts of reagents.
Production: 5 g, containing 42% of 7-dehydro-cholesterol.
<I> Example 12: </I> Cholesteryl acetate (10 g) is dissolved in. benzine, boiling point 60-80 C (50 cms) and the solution is heated under reflux with N-bromo-succinimide (5 g) until the active bromine of the latter is consumed. The solution is filtered and ethyl piperidine, having the ethyl group bound to nitrogen (C13) is added. After removing the benzine by distillation under reduced pressure, this solution is heated for 2 hours in a steam bath (95 --- 100 ° C.).
The subsequent treatment is exactly the same as that described in Example 9. Yield: <B> 1.71 </B> g, containing 23% of 7-dehydro-cholesterol.
Example <I> 13: </I> Cholesteryl acetate (11 g) is dissolved in benzine, boiling point 60-80 E (55 cm3) and the solution is heated under reflux with N-bromo-succinimide (5.5 g) until the active bromine of the latter is consumed. After filtration, diethyl-cyclohegylamine having the two ethyl groups bound to nitrogen is added (8 cm @),
the benzine is removed by distillation under reduced pressure and the remaining solution is heated for 2 hours in a steam bath (95-100 C). The treatment is completed as in Example 9. Yield: 3.6 g, containing 8% of 7-dehydrocholesterol.
<I> Example 14: </I> Cholesteryl acetate (11 g) is reacted with N-bromo-succinimide (5.5 g) as in example 13, dipropyl is added -aniline having the propyl groups bonded to nitrogen (10 cm 3) and after having removed the benzine by distillation under reduced pressure, the solution is heated for 3 hours in a steam bath (95-100 C). The processing ends as in Example 9. Rendering :. 6.2 g, containing 27% 7-dehydro-cholesterol.
<I> Example 15: </I> Cholesteryl acetate (10 g) is dissolved in diethyl ether (30 cm ') and the solution is heated at reflux for 6 hours with N-bromo-acetamide (3.5 g).
The ether solution is then washed with water, then with 10% sodium carbonate solution and again with water, dried over anhydrous magnesium sulfate and the ether removed by distillation. The residue is dissolved in 100 cm 3 of diethyl-aniline and this solution is heated under reflux for 10 minutes; subsequent treatment as in Example 1.
Yield: 3.3 g, containing 34% of 7-dehydro-cholesterol. Example <I> 1 <B> 6 </B>: </I> Cholesteryl acetate (5 g) is dissolved in diethyl ether (15 cm ") and heated at reflux for 48 hours. with trichloroacetanilide, carrying the three chlorine atoms one bonded to nitrogen, the other two in the o and p position (2.7 g). The product is treated as in Example 14. Yield : 0.7 g, containing 17% of 7-dehydro-cholesterol.