CH250524A

CH250524A - Verfahren zur Herstellung von Penicillinsalzen von Alkali- und Erdalkalimetallen.

Info

Publication number: CH250524A
Authority: CH
Inventors: F Hoffmann- Aktiengesellschaft
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1945-07-19
Filing date: 1946-07-18
Publication date: 1947-08-31
Also published as: US2459315A; ES174340A1; GB614581A; FR930821A; BE466916A; NL126624B

Description

Verfahren zur Herstellung von Penicillinsalzen von Alkali- und Erdalkalimetallen. Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Penicil.linsal- zen von Alkali- und Erdalkalimetallen. Nach dem Verfahren gemäss der vorlie genden Erfindung können Penicillinsalze auf einfacherem, bequemerem und wirtschaftli cherem Weg dargestellt werden, als 'dies mit den bisher verwendeten Methoden möglich war.

Das Verfahren eignet sich besonders zur Durehführuhg in grossem Massstabe.

Zur Zeit werden Alkali- und Erdalkali- salze von Penicillin gewöhnlich durch Ex traktion des Penicillins aus seiner Lösung in einem organischen Lösungsmittel mittels einer wässerigen Lösung oder Suspension eines alka lischen Reagens hergestellt, wobei eine wäs serige Lösung des entsprechenden Penicillin salzes gebildet wird. Anschliessend wird diese Lösung durch Gefrieren und hierauf durch Eindampfen und Trocknen im Vakuum in gefrorenem Zustand zu einem trockenen Pul ver verarbeitet.

Dieses Verfahren ist durch den Nachteil charakterisiert, dass ein relativ grosses Volu men der wässerigen Penicillinsalzlösimg aus dem gefrorenen Zustand eingetrocknet wer den muss, insbesondere wenn das Calcium- salz hergestellt werden soll. Die Gefrier- und Trocknungsoperation erfordert ,schwere, teure und komplizierte Gefrier- und Hochvakuum ausrüstungen. Dazu kommt noch, sogar unter den idealsten Bedingungen, eine beträchtliche Zeitspanne zur vollkommenen Entfernung des Wassers aus dem gefrorenen Produkt.

Zur Vermeidung dieser Nachteile wurde zusätzliches dielektrisches Erwärmen vor geschlagen (British medical Journal, Feb. 17, 1945, Seite 218). Bei dieser Arbeitsmethode folgt auf die vorgängige Konzentrierung durch dielektrisches Erwärmen Trocknen der konzentrierten Penicillinlösung in gefrorenem Zustand.

Erfindungsgemäss werden Penicillinsalze der Alkali- und Erdalkalimeta@lle dadurch er halten, dass Penicillin, gelöst in einem orga nischen Lösungsmittel, praktisch in Ab wesenheit von Waeser mit einer organischen Alkali- oder Erdalkalimetallverbindung zur Reaktion gebracht wird.

Dieses neue Verfah ren ist bei zweckmässiger Durchführung cha rakterisiert durch: a) Schnelligkeit, b) Reduktion der Verfahrenskosten, c) Reduktion der Unterhaltskosten für die Apparatur, d) Reduktion des benötigten Raumes, e) Eliminierung von umständlichen, kom plizierten und teuren Apparaten, f) Vermeidung von niederen Temperatu ren und Hochvakuumapparaturen, h) Verwendung von leicht zugänglichen, billigen Standardausrüstungen, i) hohe Totalausbeute an Penicillinsal- zen und j) hinreichende Stärke und Stabilität der Produkte.

Zweckmässig wird die Lösung des freiön Penicillins in einem organischen Lösungsmit tel mit einer Lösung oder einer Suspension ebner alkali- oder erdalkalimetallorganischen Verbindung in einem wasserfreien organi schen Lösungsmittel gemischt oder die me- tallorganische Verbindung in trockener Form zur

Penicillinlösung zugegeben.

Die metallorganische Verbindung reagiert mit dem freien, im organischen Lösungsmit tel gelösten Penicillin unter Bildung des ent sprechenden Penicillinsalzes. Die besten Re sultate werden erzielt, wenn stöchiometrisch äquivalente Mengen der metallorganischen Verbindung und des freien Penicillins mit einander zur Reaktion gebracht werden.

Das entstehende Penicillinsalz kann in der Reaktionsmischung unlöslich sein, in wel chem Fall das Salz abfiltriert, gewaschen und vom Lösungsmittel durch Trocknen im Vakuumschrank befreit werden kann. Ist das Penicillin-salz in der Reaktionsmischung lös lich, so wird vorteilhaft zur Ausfällung des Salzes ein zweites Lösungsmittel von geringe rem Salzlösungsvermögen zugegeben. Ebenso kann das Salz auch durch Konzentrieren oder Trocknen der entstehenden Lösung des Peni- ciIlinsalzes erhalten werden.

Wenn eine Penicillinlösung vorliegt, die nicht praktisch wasserfrei ist, so muss die Lösung zur Erreichung dieses Erfordernisses einem Trocknungsverfahren unterworfen wer den, z. B. durch Behandeln mit einem Trock- nungsmittel, wie mit wasserfreiem Natrium sulfat, oder durch Entfernung des Wassers durch azeotrope Destillation.

Geeignete Lösungsmittel, die als solche oder in Mischung zur Herstellung der Peni- cillinlösung verwendet werden können, sind z. B. Ester, wie Äthylacetat, Butylacetat, Isopropylacetat, Amylacetat, Benzylacetat, Äthylbutyrat, Äthylbenzoat, Diäthylmalo- nat, Furansäureäthylester;

Ketone, wie Ace ton, Cyclohexanon, Cyclopentanon, Äthyl- methylketon, Methyl-isobutylketon, Diäthyl- keton, Acetophenon; halogenierte Kohlen wasserstoffe, wie Chloroform, Tetrachlorkoh- lenstoff, Äthylendichlorid, Chlorbenzol, Athylbromid;

Äther, inklusive cyclische Äther, wie Diäthyläther, Dibutyläther, Di- isopropyläther, Dioxan, Tetrahydrofuran; Alkohole, inklusive verätherte Alkohole, wie Isopr opylalkohol, Amylalkohol, Butylalkohol, Cyclohexanol, Cyclopentanol, Tetrahydrofur- furylalkohol;

Nitrile, wie Aeetonitril, Benzo- nitril, Propionitril; Xohlenwasserstoffe, wie Benzol, Toluol, Xylol, Cyclohexan;

und Ketoester, wie Äthylacetoacetat, Butyl- acetoacetat, 2-Carbäthoxy-cyelohexanon-1, 2- Carboäthoxy-cyclopentanon-1, Lävulinsäure- methylester und Lävulinsäureäthylester.

Beispiele von zur Behandlung der Peni- cillinlösungen geeigneten Lösungen von orga nischen Metallverbindungen sind: Natriumbutylat in Butylalkohol, Na- triumbutylat in Cyclohexanol, Kaliunmisopro- pylat in Isopropylalkohol, Calciumdiäthyl- malonat in Butylacetat, Calciumdiäthylmalo- nat in Amylacetat,

Calciumdiäthylmalonat in Methylisobutylketon, Natriumdiäthylmalo- nat in Butylacetat, Natriumdiäthylmalonat in Isopropylacetat, Natriumdiäthylmalonat in 14fethylisobutylketon, Natriumdiäthylmalo- nat in Cyclohexanol, Xaliumdiäthylmalonat in Amylacetat,

Calciumdiäthylmalonat in Cy- clohexanol, Magnesiumdiäthylmalonat in Bu- ty laoetat, Magnesiumdiäthylmalonat in Me- thylisobutylketon, Magnesiumdiäthylmalonat in Cyclohexanol, Magnesiumdiäthylmalonat in Toluol, Natriumäthylacetoacetat in Athyl- acetoacetat,

Calciumäthylacetoacetat in Ä.hyl- acetoacetat, Calciumäthylacetoacetat in Bu- tylacetat, Natriumäthylacetoaeetat in Butyl- acetat, Natriumäthylacetoacetatin Chlorof orm, Calciumäthylacetoacetat in Chloroform,

Cal- eiumäthylacetoacetat in Äther, Natriumäthyl- acyetoacetat in Äther, Calciumä,thylacetoace- tat in Benzol, Natriumäthylacetoacetat in Benzol, Natriumacetylaceton in Butylacetat, Natriumacetylaceton in Chloroform, Na triumacetylaceton in Acetylaceton, Calcium- acetylaceton in Amylacetat,

Natrium-2-carb- äthoxy-cyclohexanon-1 in l3utylaeetat, 1V a triumphenolat in Butylacetat, Kaliumpheno- lat in Butylalkohol, Natriumisopropylat in Butylacetat, Kalium-2-carbäthoxy-cyclohexa- non-1 in Butylacetat, Kalium-2-carbäthoxy- cyclopentanon-1 in Methylisobutylketon,

Strontiumäthylacetoacetat in Äthylaceto- acetat, Lithiumäthylacetoacetat in Äthyl- acetoaeetat und Lithiumcliäthylmalonat in Butylacetat.

Hieraus ist zu ersehend dass sowohl für die metallorganischen Verbindungen als auch für die Lösungsmittel viele Möglichkeiten vorhanden sind. Praktisch kann für das freie Penicillin jedes organische Lösungsmittel, in welchem dasselbe löslich ist, verwendet wer den.

Ebenso kann praktisch jede mehr oder ,%#eniger lösliche organische Alkali- oder Erd- alkaliverbindung verwendet werden. Solche Verbindungen sind zum Beispiel Salze von organischen, Säuren und Alkoholen, wie Na t?iumisopropylat und Natrium-n-butylat, Na triumbenzylat, Kaliumbenzylat und die ent sprechenden Cyclohexanolderivate oder Phe- nolate, wie Natriumphenolat, Natriumguai- akolat,

Natriumnaphthylat und Alkali- und Ei rdalkalimetallverbindungen von Salicyl- säureestern. Vom praktischen Standpunkt der Löslichkeit, der leichten Zugänglichkeit und der Kosten aus betrachtet, ist es vorteilhaft, Alkali- oder Erdalkalimetallderivate von sol chen organischen Verbindungen;

zu verwen den, die wenigstens ein aktiviertes Wasser stoffatom an einem Kohlenstoff enthalten, wie dies zum Beispiel bei den Verbindungen von der Struktur der Malornester, der ss-K,eto- ester, der 1,3-Cyan-carbalkoxyverbindungen, der 1,3-Cyancarbonyl- oder -der 1,3-Dicarbo- nylverbindungen der Fall ist.

Besonders ge eignet sind die Alkali- und Erdalkalimetall- derivate des Malonsäuremethylesters, des Di- äthyl-, Dibutyl- oder der höheren! Ester; die entsprechenden Ester der monosubstituierten Malonsäure, wie der Methylmalonsäure oder der Äthylmalonsäure;

Ester der Acetoessig- säure, a-Methyl-acetoessigsäure, y-Methyl- acetoessigsäure, a"y-Dimethyl-acetoessigsäure usw.;

Ester der Cyanessigsäure, a-Cyan-pro- Ponsäure und Cyan-bernsteinsäure; 2-Cyan- cyclohexanon-1, 2-Cyan-cyclopentanon-1, a- Cyan-acetophenon und a-Cyan-aceton;

Cyclo- hexan-1,3.-dion, Acetylaceton, a-Methyl-ace- tylaceton, y-Methyl-acetylaceton und Ben- zoylaceton.

Selbstverständlich können auch Mischun gen mehrerer Lösungsmittel und Mischun gen mehrerer metallorganischer Behandlungs mittel verwendet werden.

Wenn in den nachfolgenden Beispielen von Penicillin-"Einheiten" die Rede ist, so sind darunter Oxford-Einheiten zu verstehen. Beispiel 1: Zu 100 cm' einer Lösung von Penicillin in Butylacetat, die z.

B. erhältlich ist durch Ansäuern einer wässerigen Lösung von Peni cillin bis zum pA 3 und Extrahieren mit Bu- tylacetat und die einen ungefähren Gehalt von1300 000 Einheiten besitzt (bestimmt durch Extraktion mit wässerigem Natrium hydroxyd bis zum pa 7,4 und biologischer Prüfung des lyophil getrockneten Extraktes), gibt man unter Rühren bei 15 C 6,5 cm' einer 2,5-n-Lösung von Calcium-diäthylmalo- nat in Diäthylmalonat hinzu.

Dabei entsteht sofort ein Niederschlag. Nach 5 Minuten Rühren wird die Mischung zentrifugiert. Der Rückstand wird mit zwei Portionen von je 10 cm' trockenem Butylacetat und anschlie ssend mit zwei Portionen von je 10 em3 txok.- kenem Benzol gewaschen. Nach Trocknen während 3 Stunden bei 50 C und 20 mm Druck besteht der Rückstand aus einem sehwach gelben Pulver. Es wiegt 2,72 g und enthält 550 Einheiten pro mg. Auf diese Weise erhält man1500. 000 Einheiten oder 15 % mehr als bei der Extraktion mit wäs serigem Alkali.

Es zeigt sich, dass das Peni- cillin-caleium seine gesamte Aktivität behält, auch wenn es während 7 Tagen bei 50 C aufbewahrt wird. Beispiel 2: Zu 100 cm3 einer Lösung von Penicillin in Butylacetat, mit einem ungefähren, Gehalt von 2 300 000 Einheiten Penicillin (bestimmt wie in Beispiel 1) fügt:

man bei 15 C unter Rühren 11,5 om@ einer 2,5-n-Lösung von Natriumdiäthylmalonat in Diäthylmalonat hinzu. Sofort bildet sich ein Niederschlag.

Das Rühren wird noch 5 Minuten fortgesetzt und das Gemisch anschliessend abzentrifu- giert. Der Rückstand wird zweimal mit je 10 cm@ trockenem Butylacetat und anschlie- Bend zweimal mit je 10 eins trockenem Ben zol gewaschen. Der Rückstand besteht nach 3stündigem Trocknen bei 50 C und 20 mm aus einem schwach gelben Pulver und wiegt 4,94 g. Er ist vollkommen löslich in Wasser mit einem pa von 6,5. Er enthält 528 Einhei ten pro mg.

Insgesamt werden 2 600 000 Ein heiten oder 139o5 mehr als bei der wässerigen Extraktion erhalten. Reispiel 3: Bei Verwendung von Kalium-diäthyl- malonat an Stelle der Natriumverbindung wie in Beispiel 2 erhält man trockenes Peni- eillin-kalium.

Beispiel l: Zu 70 cm' einer Lösung von Penicillin in Butylacetat mit einem Gehalt von ungefähr 1000 000 Einheiten (bestimmt wie in Bei spiel 1) fügt man bei 25 C langsam unter Rühren 6,8 cm@ einer 1,5-n-Lösung von ILagnesium-diäthylmalonat in Diäthylmalo- nat. Das Rühren wird noch 5 Minuten fort gesetzt, die Mischung anschliessend zentrifu giert und der Rückstand mit trockenem Bu- tylacetat und nachher mit Benzol gewaschen.

Nach Befreien des Rückstandes vom Lö- sungsmittel bei 50 C und 20 mm während 3 Stunden erhält man 2,54 g eines schwach gelben, Pulvers, mit einem Gehalt von 535 Einheiten pro mg, entsprechend total 1300 000 Einheiten. Beispiel 5:

200 cm7 einer Penicillinlösung in Butyl- acetat, mit einem ungefähren Gehalt von 800-000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1) werden im Vakuum bei 30 mm auf 50 C (Badtemperatur) erhitzt, bis 15 cxri@ abdesstil- liertsind. Der Rückstand wird auf 25 C ab- gekühlt und unter Rühren langsam mit 9,0 cms einer 1,

3-n-Natriumäthylacetoacetat- lösung in Äthylacetoacetat versetzt. Der sich Lildende, feinverteilte Niederschlag wird abfil- triert, mit trockenem Butylacetat und dann mit Benzol gewaschen und endlich durch Trocknen sm Hochvakuum bei Raumtempera tur von Lösungsmittelresten befreit. Es wer den 1,48 g eines sehr schwach gelb gefärbten, fein verteilten Pulvers erhalten, das in Was ser vollkommen; löslich ist und 425 Einheiten pro mg enthält.

Auf diese Weise werden total 610 000 Einheiten erhalten, entspre chend 76 % der Theorie. Weitere 220 000 Einheiten werden beim Waschen des Butyl- acetatfiltrates des Penici@llinnatriumnieder- schlages mit Wasser erhalten. Beispael 6: 200 cm' einer Butylacetatlösung, wie sie in Beispiel 5 beschrieben ist, werden durch Destillation bei 20 mm Vakuum. und 50 C (Badtemperatiir) auf 40 cnis eingeengt.

Zu diesen 40 eins fügt man langsam unter Rüh ren bei 25 C 4,0 cn2 einer 1,3-n-Natrium- äthylacetoacetatlösung in Äthylaeetoacetat. Der Niederschlag wird abfiltriert und genau gleich wie in Beispiel 5 behandelt. Das schwach gelbe Pulver wiegt 1,65 g und ent hält 515 Einheiten pro mg, entsprechend einer Totalausbeute von 8.50 000 Einheiten oder 6 % mehr als die 800 000 Einheiten (be stimmt durch Extraktion mit wässerigem Al kali).

Das Butylacetatfiltrat des Penicillin natriumniedersehlages wird mit Wasser aus geschüttelt. Die wässerige Phase zeigt ein pff von 6,8 und enthält ungefähr 20 000 Einhei ten, entsprechend weiteren 2,5 %.

Beispiel 7: Zu 100 eins einer P'enicilliulösung in Ä thylacetoacetat, mit einem ungefähren Ge halt von 885 000 Einheiten (bestimmt durch Extraktion mit einem wässerigen Puffer und Testen dieser Lösung) fügt man langsam 2,30 cd einer 1,25-n-Lösung von Natrium äthylacetoacetat in Äthylaeetoacetat hinzu.

Sofort bildet sich ein Niederschlag, der nach fünfminutigem Rühren bei Zimmertempera tur abfiltriert und mit zwei Portionen von je 20 cm' trockenem Benzol gewaschen wird. Der Rückstand wird im Hochvakuum bei Zimmertemperatur getrocknet. Man erhält 1,30 g eines schwach gelben Pulvers mit einem Gehalt von 600 Einheiten pro mg, das vollkommen; in Wasser löslich ist. Die Aus beute beträgt 780 000 Einheiten oder 93 der Theorie. Das Filtrat des Natriumpenicil- linniederschlages wird mit 10 cm' Wasser extrahiert.

Dieses enthält weitere 160 000 Einheiten resp. weitere 191'o der Theorie. Beispiel 8: 500 cm' eines Chloroformextraktes von freiem Penicillin, mit einem ungefähren Ge halt von 2 600 000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1) werden durch Kühlen auf -- 60 C und Filtrieren von Wasser befreit. Das trockene Filtrat wird unter 50 mm Va kuum bei 3,5 C auf 100 em@ konzentriert.

Dazu fügt man unter Rühren 10 cm' einer 2,5-n-Lösung von Calciumdiäthylmalonat in Diäthylmalonat. Der Niederschlag wird ab filtriert, mit trockenem, \wasserfreiem Chloro form 'gewaschen und bei 50 C und 20 mm Vakuum während 3 Stunden getrocknet. Das so erhaltene schwach gelbe Pulver wiegt 4,6,8 mg und enthält 640 Einheiten pro mg, entsprechend einem Total von 3 000 000 Ein heiten. Dies ist15% mehr, als durch wäs serige Extraktion erhalten wurde.

Beispiel 9: 250 onia einer Penicillin-Ätlierlö.sung, mit einem ungefähren; Gehalt von 790 000 Ein heiten (bestimmt wie in Beispiel 1) werden auf - 60 C abgekühlt und vom Eis abfil- triert. Das wasserfreie Filtrat wird dann bei 100 mm und 25 C auf 50 Irrig konzentriert.

Zu dem Konzentrat fügt man 1,70 cm' einer 2,5-n-Lösung von Caleium-diäthylmalonat in Diäthylmalonat. Die Mischung wird während 5 Minuten bei Zimmertemperatur gründlich geschüttelt und dann zentrifugiert. Der Rück stand wird mit drei Portionen von je 10 cm' trockenem Äther gewaschen und ansehlie- ssend bei 50 C und 20 mm Vakuum während einer Stunde getrocknet.

Das resultierende Pulver enthält 620 Einheiten pro mg, ent sprechend einem Total von 860 000 Einheiten oder 9 % mehr, als durch wässerige Extrak tion erhalten wird. Beispiel 10: 400 cm' einer Lösung von Penicillin in Butylacetat, mit einem ungefähren Gehalt von 2 500 000 Einheiten (bestimmt nach Bei spiel 1) werden bei 50 C (Badteznperatur) und 20- mm auf ein Volumen von 80 cms kon- zentriert. Zu der Lösung fügt man unter Rühren langsam bei 10 C 8,

7 cm@ einer 1,3-n-Lösung von Natriumacetylaceton in Acetylaceton. E@ bildet sich sofort ein Nie derschlag, der nach 5 Minuten Rühren ab zentrifugiert wird. Der Rückstand wird nach Waschen mit trockenem Butylacetat und trockenem Benzol durch Trocknen im Va kuum (20 mm) bei 50 C von Lösungsmittel resten befreit.

Das resultierende schwach gelbe Pulver wiegt 3,58 g, ist vollkommen löslich in Wasser (pn 7,0) und enthält 880 Einheiten pro mg, entsprechend total 3 000 000 Einheiten oder 20,% mehr als mit tels der wässerigen Kontrollentraktion ge funden wird.

Beispiel 11: 100 cmg einer Penicillin-Butylacetatlösung, mit einem ungefähren Gehalt von 200 0'00 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1), wer den bei 20 mm Vakuum und einer Badtem- peratur von 50 C auf ein Volumen von 20 cni' konzenwriert. Zu diesem Konzentrat fügt; man unter Rühren 4,92- cm' einer 0,8-n-Lösung von Natrium-2-carbäthoxy-cy- elohexanon-1 in Butylacetat hinzu.

Der sich sofort bildende Niederschlag wird.abfiltriert und mit Portionen von je 10 cm@ trockenem Benzol gewaschen und bei Zimmertemperatur im Hochvakuum getrocknet. Das resultie rende, schwach gelbe Pulver wiegt 1,1 g und enthält 183 Einheiten pro mg, entsprechend einem Total von 200 000 Einheiten.

Es ist .in Wasser vollständig ,löslich. Beispiel 12: Zu 20 cms einer Penicillin-Butylacetat- lösung, mit einem ungefähren Gehalt von 100 000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1), fügt man unter Feuchtigkeitsausschluss und unter Rühren 80 cm' einer 0,5 % igen Lösung von Natriumphenolat in trockenem Aceton hinzu. Bei Zimmertemperatur wird nun noch eine Stunde weitergerührt.

Der Nie derschlag wird filtriert, der Rückstand mit wasserfrelem Benzol gewaschen und im Hoch vakuum bei Zimmertemperatur während einer Stunde getrocknet. Man erhält ein leicht gelbbraun gefärbtes Pulver, das 2,2 g wiegt und 440 Einheiten pro mg enthält.

Beispiel 13: Zu 3.00 emg einer Penicillin-Butylacetat- lösung, mit einem ungefähren Gehalt von 360 000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1), fügt man unter Rühren 11,0 cm' einer 0.4-n-Lösung von Natrium-isopropylat in Isopropanol. Die Quantität des.

zu verwen denden Reagens wird durch Titrierung einer aliquoten Butylacetatlösung bis zum pn 7 mit 0,5-n-Natriumhydroxyd bestimmt. Man rührt noch eine Stunde bei 4 C. Der Niederschlag wird filtriert, der Rückstand mit wasserfreiem Benzol gewaschen und während einer .Stunde im Hochvakuum bei 35 C getrocknet. Das auf diese Weise erhal tene Penicillin-natrium wiegt 1,4 g und ent hält 250 Einheiten pro mg.

Beispiel 14: Zu 250 ein' einer wasserfreien Äther lösung von Penicillin, mit einem ungefähren Gehalt von 215 000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1), gibt man 125 ein' wasserfreies Butanol und konzentriert die Lösung im Va kuum bei 2,5 C auf 125 ein'. Zu diesem Kon zentrat fügt man unter Rühren 31,4 cmW' einer 0,1-n-Lösung von Natriuiu-n-butylat in n-Butanol. Die Lösung bleibt klar, und es scheidet sich kein Niederschlag aus.

Nun wird die Lösung bei 20 mm Vakuum und 45 C (Badtemperatur) zur Trockne einge dampft. Die letzten Reste des Lösungsmittels werden im Vakuum von 1 mm entfernt. Der Rückstand, ein dunkelbrauner, spröder, lack ähnlicher Film, wird zu einem gelben Pulver zerstossen und wiegt 0,49g. Dieses ist voll ständig löslich in Wasser. Die wässerige Lö sung hat ein pa von 6,7. Das.

Pulver enthält 500 Einheiten pro mg, entsprechend total 245 000 Einheiten oder 30 000 Einheiten mehr, als durch wässerige Extraktion der ur sprünglichen Ätherlösung erhalten wird. Beispiel 15: Eine mit Beispiel 14 identische Lösung von Penicillin in n-Butanol, neutralisiert mit 31,4 cm' 0,1-n-Natrium-n-butylat, wird mit Petroläther (30 bis 60 C) behandelt, bis kein weiterer Niederschlag mehr ausfällt. Dazu werden 400 crn@ Petroläther gebraucht.

Der Niederschlag wird abfiltriert und durch Trocknen bei 50 C und 20 mm Vakuum wäh rend einer Stunde vom Lösungsmittel befreit. Das resultierende, fein verteilte gelbe Pulver wiegt 0,44 g und ist in ,Wasser vollständig löslich. Die wässerige Lösung hat das p$ 6,9. Es enthält 510 Einheiten pro mg, entspre chend total 22,4 000 Einheiten. -Bei der wäs serigen Extraktion der ursprünglichen, Äther lösung werden nur 215 00'0 Einheiten erhal ten.

Beispiel 16: 200 eins einer Lösung von Penicillin in Alethyl-isobutyl-keton, mit einem ungefäh ren Gehalt von 2 680 000 Einheiten (be stimmt wie in Beispiel 1), werden bei 30 mm Vakuum und einer Badtemperatur von 50 C auf ein Volumen von 100 ein' konzentriert. Zu diesem Konzentrat fügt man unter Rüh ren 5,25 cm' einer 2,9-n-Lösung von Calcium- diäthylmalonat in Diäthylmalonat. Sofort bildet sich ein Niederschlag.

Nach weiteren 5 Minuten Rühren wird die Mischung auf einer Nut-sehe abfiltriert. Der Niederschlag wird mit zwei Portionen von je 20 ein' Ben zol gewaschen und dann in einem Vakuum trockenschrank bei 20 mm und 50 C wäh rend 3 Stunden getrocknet. Das resultierende schwach gelbe Pulver wiegt 4,31 g und ent hält 620 Einheiten pro mg oder total 2 670 000 Einheiten. Zum klaren Filtrat fügt man 400 cm' Petrolätlier (30 bis 60 C).

Ei s bildet sich ein geringer Niederschlag, der abfil- triert, mit 2:0 em' Petroläther gewaschen und im Vakuumtroekenschrank bei 50 C getrock net wird. Das so erhaltene .schwach gelbe Pulver wiegt 0,05 g und enthält 20 000 Ein heiten.

Beispiel 17: 940 cm' einer Lösung von Penicillin in Butylacetat, mit einem ungefähren Gehalt von 1910 000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1), werden bei einem Vakuiun von 20 mm und einer Badtemperatur von 50 C auf ein Volumen von 180 ein' konzentriert. Das Konzentrat wird durch ein steriles Ent- keimungsfilter in eine sterile 250-cni3-Zen- trifuge hinein filtriert.

Zu diesem sterilen Filtrat gibt man unter aseptischen Bedingun gen 7,6 cm' einer 1,8-n-Lösung von Natrium diätIlylmalonat, welche ebenfalls durch Ent- keimungsfiltration sterilisiert wurde. Sofort fällt ein Niederschlag aus. Dieser wird zen trifugiert. Die überstehende Lösung wird un ter aseptischen Bedingungen, entfernt, und der Niederschlag wird unter aseptischen Be dingungen mit 20 cm' Butylacetat (100 % ), welches durch Kochen sterilisiert wurde, ge waschen.

Die Suspension wird zentrifugiert, das Butylacetat unter aseptischen Bedingun gen entfernt und der Niederschlag nochmals mit40 cm' sterilem Benzol, das durch Ko chen sterilisiert wurde, gewaschen. Das Ben zol wird unter aseptischen Bedingungen ent fernt, und der Niederschlag wird dadurch ge trocknet, dass die Zentrifuge mitsamt dem Inhalt während 3 Stunden bei einer Tem peratur von 50 C und einem Vakuum von 20 mm in einem Vakuumtrockenschrank auf bewahrt wird. Dieses Pulver erweist sieh als steril, wenn es. den bekannten bakteriologi schen Prüfverfahren, unterworfen wird.

Beispiel18: Zu 500 cm' einer Lösung von Penicillin in trockenem Äther, mit einem Gehalt von 1600 000 Einheiten (bestimmt wie in Bei spiel 1), gibt man unter Rühren eine Lösung von 2,6 g Calciumoleat in Äther. Nun rührt man weitere 3,0 Minuten, destilliert den gröss ten Teil des Äthers im Vakuum ab und zen trifugiert den Niederschlag. Das Produkt wird verschiedene Male mit trockenem Äther gewaschen, und dann im Vakuum getrocknet. Das resultierende sehwach gelbe Pulver wiegt 2,7 g und enthält 620 Einheiten pro mg oder total1674 000 Einheiten.

Beispiel 19: Zu 100 cm' einer Lösung von Penicillin in Butylacetat, mit einem ungefähren Ge halt von 2 300 000 Einheiten Penicillin (be stimmt wie in Beispiel 1), gibt man unter Rühren 5,23 g trockenes, gepulvertes Natrium- diäthylmalonat. Nach weiteren 20 Minuten Rühreu wird der gebildete Niederschlag ab filtriert und auf dem Filter zweimal mit je 10 cm' trockenem Butylaoetat und zweimal mit je 10 cm' trockenem Benzol gewaschen. Nach Trocknen im Vakuum während 4 Stun den bei 50 C erhält man ein schwach gelbes Pulver, das 4,92 g wiegt.

Es ist vollständig löslich in Wasser und enthält530 Einheiten pro mg, entsprechend einem Total von 2 600 000 Einheiten.

Beispiel 20: Zu 500 cm' einer Penicillinlösung in trok- kenem Äther, mit einem ungefähren Gehalt von1600 000 Einheiten (bestimmt wie in Beispiel 1), gibt man langsam unter Rühren 3 g Barium-linoleat in Äther. Nach weiterem einstündigen Rühren wird der grösste Teil des Äthers im Vakuum abdestilliert und der Niederschlag zentrifugiert. Das Produkt wird verschiedene Male mit trockenem Äther ge- @vaschen und dann im Vakuum getrocknet.

Das resultierende schwach gelbe Pulver wiegt 3 g und enthält 5315 Einheiten pro mg.

Beispiel 14 erläutert einen, Fall, in wel- eliem das gebildete Penicillinsalz im Reak tionsgemisch löslich ist und durch Trocknen im Vakuum gewonnen wird.

Beispiel 15 veranschaulicht einen Fall, in welchem das gebildete Penicillinsalz im Re aktionsgemisch löslich ist und durch Ausfäl lung mittels eines organischen Fällungsmit- tels gewonnen wird. leas erfindungsgemässe Verfahren eignet sich besonders zur Herstellung der Natrium-, Kalium-, Magnesium-, Lithium-, Strontium-, Barium- und Calciumsalze von Penicillin.

Es kann sowohl zur Herstellung steriler als auch nicht steriler Penicillinsalze dienen. Werden, wie, z. B. für die parenterale Zu fuhr, sterile Salze benötigt, so wird das Ver fahren unter aseptischen Bedingungen und mit sterilen Reagenzien durchgeführt. Wenn, wie im Falle der oralen Zufuhr des Penicil lins, das Salz "nicht steril sein muss, so sind solche Vorsichtsmassnahmen unnötig. Beispiel 17 illustriert ein Verfahren zur Herstellung eines sterilen Penieillinsalzes.

Claims

PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Herstellung von Penicillin salzen der Alkali- oder Erdalkalimetalle durch Umsetzung von Penicillin mit einer Alkali- oderEi rdalkaliverbindung, dadurch gekennzeichnet, dass Penicillin, gelöst in einem organischen Lösungsmittel, praktisch in Abwesenheit von Wasser mit einer orga nischen Alkali- oder Erdalkaliverbindung zur Reaktion gebracht wird. UNTERANSPRüCHE.: 1.

Verfahren nach Patentanspruch, da durch gekennzeichnet, dass die Reaktion un ter aseptischen Bedingungen durchgeführt wird. 2. Verfahren nach Patentanspruch und Unteranspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Reaktion mit stöchiömetrischen Men gen der Ausgangsstoffe durchgeführt wird.