CH285195A - Procédé de préparation d'un tissu organique en vue de son examen microscopique. - Google Patents

Procédé de préparation d'un tissu organique en vue de son examen microscopique.

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CH285195A
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    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/30Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis

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Description


  



  Procédé de préparation   d'un    tissu organique en vue de son examen microscopique.



   La préparation d'un tissu organique en vue de son examen   microscopique    comprend une série de traitements avant le découpage du tissu en tranches et la coloration des coupes. Lors de la préparation du tissu, il est nécessaire de l'immerger successivement dans différents liquides, tout d'abord pour fixer le tissu, pour le laver afin d'enlever le fixateur, en second lieu pour déshydrater le tissu, habitellement par immersion dans des alcools ou autres agents de déshydratation, puis de plonger le tissu dans un agent ayant pour but de le clarifier, et ensuite d'imprégner le tissu avee un agent approprié, tel que la paraffine on la   eelloidine.    Après ces traitements, on fait des coupes du tissu ainsi traité, on élimine l'agent d'imprégnation, habituellement à l'aide   d'un    solvant,

   puis on colore les coupes et on les monte sur les lames porte-objets du   micros-    eope.



   Suivant le procédé décrit dans le brevet américain   N"2393580 du 22 janvier 1946,    le tissu est retourné pendant son immersion dans les divers agents liquides, y compris les agents d'imprégnation et de coloration, ce qui abrège ainsi les temps d'immersion nécessaires et permet d'obtenir de meilleures coupes.



   La présente invention se rapporte à un    procédé de préparation d'un tissu organique    en vue   de son examen microseopique, eompor-    tant l'immersion du tissu dans au moins un agent liquide : le procédé selon l'invention est caractérisé en ee qu'on déplace ce tissu alternativement dans des directions opposées pendant son immersion. On attribue l'amélioralion ainsi réalisée au   déplaeement relatif    accru entre le tissu et le liquide dans lequel il est immergé, eet accroissement du déplacement relatif servant à accélérer la pénétration de 1'agent liquide dans le tissu.



   Le   procède suivant l'invention peut tre    mis en oeuvre comme suit :
 On immerge le tissu dans n'importe quel liquide convenable, par exemple dans un des fixateurs suivants : formaline, fixateurs de
Bouin, de   Zenker,    de Halle, de Ferrari (vendu par la firme   amérieaine The Teehnieon    Cy), de   Vande-Grift,    etc. Pendant son immersion dans le liquide de fixation, on maintient le tissu en mouvement, de préférence en faisant tourner lentement le tissu dans ce liquide. On place le tissu de manière qu'il soit complètement immergé et que sa plus grande face se trouve dans une position verticale. Dans cette position verticale, on le fait osciller autour d'un axe vertical.

   Cette opération se fait de préférence à une fréquence d'environ 5   oseil-    lations par minute ; on peut évidemment faire varier cette fréquence, mais elle doit tre suf  fisamment    faible pour éviter un déplacement sensible du liquide pendant le mouvement du tissu. En général, on opère à une fréquence comprise entre   1.    et 10 oscillations par minute et pendant au moins deux minutes.



   Le processus décrit plus haut pour la fixation du tissu est répété à chaque stade ultérieur de sa préparation, c'est-à-dire lors du lavage du tissu après sa fixation si ce lavage est nécessaire, lors de la déshydratation du tissu par son immersion dans des alcools, du   dioxane,    de l'acétone ou d'autres agents   dés-    hydratants, lors de la clarification du tissu par immersion dans le chloroforme, le benzène, le xylol, l'huile de bois de cèdre, l'aniline,   ete.,    et lors de l'imprégnation du tissu déshydraté par immersion dans la   paraffine, la eelloïdine,      ete.,    à l'état liquide.



   On peut faire varier le laps de temps pendant lequel le tissu est immergé dans les divers agents liquides ; en général, lorsqu'on déplace le tissu dans le liquide, le temps d'immersion peut tre réduit de façon importante.



   Ainsi, le temps nécessaire à la fixation, dans le cas où l'on utilise le fixateur de   Zenker    comme indiqué dans le brevet   améri-    eain   ? 2393580, peut tre réduit    d'environ    ,) heures, comme indiqué dans 1'exemple 1 de    ce brevet, à environ 3 heures   ou 3    heures et demie lorsqn'on opère suivant l'invention.



   Après la fixation et la déshydratation du tissu, on l'immerge dans de la paraffine ou un antre agent d'imprégnation liquide, on découpe les tranches, on les monte sur les lames porte-objets, on élimine la paraffine et on les colore. On diminue le temps nécessaire à ehaeune de ces opérations en faisant tourner alternativement le tissu dans des directions opposées, comme indiqué plus haut pour la fixation et la déshydratation, mais étant donné que pour l'élimination de la paraffine et pour la coloration des tranches les périodes d'immersion sont chacune de courte durée, c'est  à-dire    comprises entre 2 et 10 minutes, ce temps d'immersion peut demeurer le mme que dans les procédés antérieurs.



   La mise en oeuvre du procédé, objet de l'invention, est grandement facilitée par   l'uti-    lisation d'un appareil de traitement et d'immersion automatique du tissu, tel que celui décrit dans le brevet américain   N"2341198,    en prévoyant toutefois des organes pour assurer la rotation alternative du porte-tissu ou de la coupelle le renfermant dans des direetions opposées, au lieu de le faire tourner dans la mme direction.


Claims (1)

  1. REVENDICATION : Procédé de préparation d'nn tissu or, a- nique en vue de son examen microscopique, comportant l'immersion du tissu dans au u moins un agent liquide, et caractérisé en ce qu'on déplace ce tissu alternativement dans des directions opposées pendant son immer- sion.
    SOUS-REVENDICATIONS : 1. Procédé selon la revendication, earacté- risé en ce qu'on déplace le tissu transversalement à sa plus grande face dans un liquide de fixation.
    2. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce qu'on place le tissu dans le liquide de manière que sa plus grande face soit vertieale, et qu'on le déplace transversalement à cette face en le maintenant dans cette position verticale.
    3. Procédé selon la sous-revendication 2, caractérisé en ce qu'on déplace le tissu par oscillations autour d'un axe vertical.
    4. Procédé selon la sous-revendication 3. caractérisé en ee qu'on opère à une fréquence comprise entre 1 et 10 oscillations par minute pendant an moins 2 minutes.
    5. Procédé selon la sous-revendication 4. caractérisé en ce que la fréquence est d'environ 5 oscillations par minute.
    6. Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'agent liquide dans lequel le tissu est immergé est un fixateur.
    7. Procédé selon la revendication, earaetérisé en ce que l'agent liquide dans lequel le tissu est immergé est un agent de déshydra- tation.
CH285195D 1949-09-16 1949-09-16 Procédé de préparation d'un tissu organique en vue de son examen microscopique. CH285195A (fr)

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