CH288980A - Procédé pour séparer, dans une solution, une ptéridine des impuretés qui l'accompagnent. - Google Patents

Description

      w        N..     Procédé pour séparer, dans une solution, une     ptéridine    des impuretés qui     l'àpaent.       Il est décrit     ct    revendiqué, au brevet prin  cipal, un procédé pour séparer, dans une solu-         tion    contenant une     ptéridine    correspondant à  la formule générale:  
EMI0001.0008     
    où R est le reste d'un aminoacide ou d'un  peptide, ladite     ptéridine    des     impuretés    qui  l'accompagnent et notamment de     ptéridines     de formule autre que la formule ci-dessus.

      Il a été découvert maintenant que ce même       processus    peut s'appliquer, avec tous les avan  tages mentionnés au brevet principal, aux       ptéridines    renfermant le groupement:  
EMI0001.0014     
    dans lequel R est le reste d'un aminoacide.

    La présente invention a donc pour objet  un procédé pour séparer, dans une solution    contenant une     ptéridine    présentant le groupe  ment  
EMI0001.0016     
    dans lequel     R        est    le reste d'un aminoacide,  ladite     ptéridine    des impuretés qui l'accom-         pagnent    et notamment des     ptéridines    de for  mule autre que' la formule ci-dessus, ce pro-      cédé étant caractérisé par le fait qu'on ajoute,  à cette solution contenant une     ptéridine    ayant  la formule générale ci-dessus, un sel soluble  de     zinc,

      de préférence un sel acide de zinc à  une solution     alcaline    d'un mélange réactionnel  cru, et règle le pH du liquide à une valeur  comprise entre 10,5 et 11,2 et en ce qu'on  sépare les matières     précipitées;        constituées     essentiellement desdites impuretés sous forme  de combinaisons de zinc, d'avec la solution       qui.    contient la majeure partie de la     ptéridine     désirée sons forme     d'iun    sel de zinc soluble,  et régénère finalement cette     ptéridine.    La pré  cipitation peut avoir lieu aussi bien dans une  solution froide que chaude.  



  Pour la régénération, le pH de la solution  débarrassée des     impuretés    peut ensuite être ré  duit     jusqu'aux    limites comprises entre 6,5 et  7 environ, en ajoutant des quantités supplé  mentaires d'un sel acide de zinc ou par l'addi  tion d'acide. Dans ces conditions, les sels de  zinc des composés désirés ont une solubilité  minimum et précipitent. Ils sont     recueillis    et  transformés en     ptéridines    libres.  



       Etant    donné que la solubilité des sels de  zinc des     ptéridines    désirées n'augmente que  faiblement ou pas du tout lorsqu'on élève la  température, tandis que la solubilité des sels  des autres     ptéridines    tend à augmenter, il est       indiqué    que la précipitation des sels de zinc  des     ptérid'ines    désirées s'effectue à une tempé  rature élevée, de préférence entre 50 et 95  C       environ.     



  Bien que les sels de zinc précipités aient  une pureté sensiblement améliorée, il est ordi  nairement désirable de répéter le processus  jusqu'à     l'élimination        pratiquement    totale     des          impuretés.    A cet effet, on     dissout    par exemple  les sels de     zinc    dans une     solution    aqueuse  d'un alcali (hydrate de sodium, de calcium,  de baryum ou autres) à un     pg    supérieur à  11,5.

   L'hydrate     insoluble    de zinc ainsi que  d'autres substances     insolubles    peuvent être  alors     éliminées    par     filtration,    puis on répète  l'opération qu'on vient de décrire.  



       Lorsqu'on    estime que la purification a été  suffisamment     poussée,    en traitant le sel de  zinc avec     un    acide pour abaisser le pH à une    valeur inférieure à 5 et de préférence à 3,  on obtient la précipitation de. la     ptéridine     libre. Le produit peut être séparé de son       eau-mère    puis séché ou conditionné pour  obtenir des produits pharmaceutiques de diffé  rentes     sortes.     



  L'invention est décrite avec plus de détails  dans les exemples qui suivent.    <I>Exemple 1:</I>    Du produit cru provenant de la réaction  de sulfate de     2,4,5,6-tétraminopyrimidine,    de       dibromopropionaldéhyde    et d'acide     p-amino-          benzoylglutamique    et contenant 2 parties  d'acide N- (4-     [2,4-diaminopyrimido[4,5-b]-          py-ra7-yl    - 6 -     méthylamino    ]     benzoyl)    -glutamique,  appelé également acide     4-amino-ptéroylghit-          amique,    est mélangé avec 4 parties de chaux  et 2000 parties d'eau à 60-70  C pendant  15 minutes.

   On ajoute un auxiliaire de filtra  tion, puis ensuite on filtre le mélange. On  traite le filtrat avec l'auxiliaire de filtration  et une solution à 20% de chlorure de zinc  jusqu'à obtenir     un    pH de<B>10,6.</B> La bouillie est.  ensuite filtrée et on chauffe le filtrat à 80  C.  On ajoute la solution de chlorure de zinc jus  qu'au pH de 6,8 et on filtre le sel de zinc  avec l'auxiliaire de filtration. Le gâteau est  mélangé avec 4 parties de chaux et 1000 par  ties d'eau à 90  C, puis on le filtre. On règle  le filtrat à un pH de 4 avec de l'acide chlor  hydrique dilué, on refroidit et on filtre avec  l'auxiliaire de filtration. On mélange ensuite  le gâteau avec 4 parties de carbonate de  magnésium et 700 parties d'eau à 85-90  C,  on agite avec 1,5 partie de charbon de bois  pendant 5 minutes, puis on filtre.

   On règle le  filtrat à un     pH    de 4, on le refroidit, puis on  filtre. Le produit pèse 1,1 partie et donne à  l'analyse     74,31/0    d'acide     4-aminoptéroylglut-          amique,    ce qui représente une amélioration  considérable de la pureté par rapport à celle  du mélange réactionnel cru.         Exemple   <I>2:</I>  Un mélange de 32,9 parties de sulfate de       2,4,5,6-tétraamino-pyrimidine        dihydraté,    de      29,3     parties    de chlorure de baryum     dihydraté     et de 600 parties d'eau a été chauffé à 60  C  puis refroidi à 40  C.

   On a ajouté 13,3 parties  d'acide     p-aminobenzoylglutamique,    puis on a  réglé le<B>pli</B> à 3. On a ajouté ensuite une solu  tion de 17,5 parties de     butylchloral    dans  25 parties d'acide acétique glacial en l'espace  de 20 minutes à     40-45     C en ajoutant de la  soude caustique pour maintenir un pH de 2,8  à 3,0. On a agité le mélange à la même tempé  rature et au même pH pendant une demi-heure  encore et enfin on l'a refroidi, on l'a filtré et  on l'a séché. Le rendement fut de 45 parties  et l'analyse indique     11,91/o    de substance  active.    De ce produit cru (5 parties de substance  active) est mélangé avec 10 parties de chaux  et 2000 parties d'eau à 80  C, puis filtré et  lavé à l'eau chaude.

   On règle le pH du filtrat  à 10,6 à l'aide d'une solution aqueuse de       chlorure    de zinc, on filtre, on acidifie jusqu'au  pH de 4, on refroidit et enfin on filtre. On  mélange le gâteau avec 2500 parties d'eau à  80  C et de la soude caustique pour atteindre  un pH de 12. On refroidit ensuite lentement  le mélange, on le traite avec du gaz carboni  que jusqu'au pH de 7 à 20  C, on filtre, puis on  acidifie jusqu'au pH de 4, on refroidit et enfin  on filtre. On mélange le gâteau avec 5 parties  de carbonate de magnésium, 2,5 parties de  charbon actif et 1000 parties d'eau à     .80     C,  puis le mélange est filtré, acidifié au pH de 4,  refroidi, filtré et séché.

   Le rendement était  de 1,662 partie et l'analyse chimique a donné       69,3%        d'acide        N-[4-{[1-(2,4-diamino-6-ptéri-          dyl)-éthyl]        amino    }     -benzoyl]glutamique.     



  <I>Exemple 3:</I>  Un mélange de sulfate de     2,4,5,6-tétra-          aminopyrimidine    (6,4 g) et d'acide     p-amino-          benzoylaspartique    (3,3 g) dans 100 cuis d'eau  a été traité avec 3,5     cm3    de     tribromoacétone.     Le mélange, bien agité, a été chauffé à 80  C  pendant 30 minutes en maintenant le pH à 2,0  par l'addition de soude caustique 2,5 N, sui  vant le besoin. Puis on a réglé le pH du mé  lange à 3,9 et on     a,    refroidi et filtré. Le gâteau    filtré a été lavé à l'eau, à l'acétone et à l'éther  puis séché. Le rendement a été de 5,5 g et  l'analyse chimique a donné     28,91/o.     



  La substance     ci-dessus    (5,0 g) est mise en  suspension dans 1400 cuis d'eau chaude, puis  dissoute par l'addition de 14     cuis    de soude  caustique 10 N. La solution filtrée est chauf  fée à 80-85  C et on ajoute ensuite 5 g de  terre d'infusoire et 26     cm3        d'une    solution à       30%        de        chlorure        de        calcium.        Ce        mélange        est     filtré à chaud et on jette le gâteau filtré.

   Le  filtrat, contenant 0,83 g de substance active,  déterminée par analyse chimique, est ré  chauffé à 80  C     puis    traité avec environ  90     cm3    d'une solution de chlorure de zinc à  5 0/u au     pg    de 10,9 puis filtré avec 5 g de terre       d'infusoire.    Le gâteau filtré est jeté.

   Le filtrat,  contenant 0,63 g de substance active, déter  minée par l'analyse chimique, est refroidi à  40  C, puis on règle le<B>pi, *à</B> 6,8 en ajoutant       environ        35        cuis        d'une        solution    à     30%        de        chlo-          rure    de zinc. Le     eel    de zinc précipité est en  suite recueilli et on jette le filtrat.

   Le sel de  zinc ci-dessus est agité pendant 15 minutes  avec 200     cm3    d'eau et 5     ems    de soude     caùs-          tique    10N (pH 11,8),     puis    on filtre. Ensuite,  on acidifie le filtrat au     p,i    de 3,8 avec de  l'acide chlorhydrique, on refroidit .dans un  bain de glace et on recueille enfin le préci  pité sur le     filtre.    Ce précipité est mis en sus  pension dans 200     cm3    d'eau, on règle le pH  à 11,5 et on chauffe la solution à 60  C avant  de régler le pH à 7 en introduisant dans le  mélange des bulles de gaz carbonique. Après  avoir refroidi à 10  C, on filtre le mélange et  jette le gâteau filtré.

   Le filtrat, contenant  0,38 g de matière active, est acidifié jusqu'au  pH de 3,8, bien refroidi et enfin on recueille  le précipité. Ce dernier est mis en suspen  sion dans 50     cm3    d'eau environ, puis agité  avec 0,4 g     d'oxyde    de magnésium jusqu'à  l'alcalinité, puis on chauffe le mélange à 80  à 90  C et enfin on filtre à chaud. On déco  lore le filtrat chaud avec un peu de charbon  actif et on filtre de nouveau.

   Au refroidisse  ment, le filtrat dépose     un    précipité cristallin  et jaune de sel de magnésium d'acide     4-amino-          ptéroylaspartique.    On     recristallise        cette    ma-           tière    à partir de 60     cms    environ d'eau chaude,  on lave à l'eau, à l'acétone et à l'éther, puis  on sèche au-dessus de     pentoxyde    phosphoreux  sous vide à 100  C.

   Le rendement a été de  0,2 g et l'analyse chimique a donné     89,51/o.     Le sel est     dissous    dans l'eau chaude, le PH  réglé à 4 avec de l'acide chlorhydrique et    l'acide libre est isolé comme indiqué dans les  exemples précédents.

Claims (1)

1. REVENDICATION: Procédé pour séparer, dans une solution contenant une ptéridine présentant le groupe ment EMI0004.0008 dans lequel R est le reste d'un aminoacide, ladite ptéridine des impuretés qui l'accompa gnent et notamment des ptéridines de for mule autre que la formule ci-dessus, caracté risé en ce qu'on ajoute à cette solution un sel soluble de zinc et règle le pH du liquide à une valeur comprise entre 10,5 et 11,2 et en ce qu'on sépare les matières précipitées, constituées essentiellement desdites impuretés sous forme de combinaisons de zinc, d'avec la solution,

   qui contient la majeure partie de la ptéridine désirée soies Îorme du sel de zinc, soluble, et régénère finalement cette ptéridine. SOUS-REVENDICATIONS 1. Procédé suivant la revendication, carac térisé en ce qu'on part de la solution aqueuse d'un mélange réactionnel cru, alcalinisée à un pH supérieur à 11,5 et à laquelle on ajoute un sel acide de zinc pour l'amener dans les dites limites de pH. 2. Procédé suivant la revendication, carac térisé en ce qu'on règle le pH de la solution du sel soluble de zinc de la ptéridine désirée entre 6,5 et 7,0, de façon à précipiter ce sel.

   de zinc et on sépare de la solution le sel de zinc précipité. 3. Procédé suivant la sous-revendication \_', caractérisé en ce qu'on chauffe la solution jusqu'à une température comprise entre 50 et 95 C avant d'en régler le pH entre 6,5 et 7,0. 4. Procédé suivant la sous-revendication 2, caractérisé en ce qu'on règle le PH de la solu tion par l'addition d'un sel acide de zinc. 5. Procédé suivant la sous-revendication 3, caractérisé en ce qu'on règle le pH de la solu tion par l'addition d'un sel acide de zinc. 6.

   Procédé suivant la revendication, carac- téris"ë en ce qu'on part de la solution d'un mélange réactionnel cru, que l'on traite d'abord avec un composé de métal alcalino- terreux et en ce qu'on sépare les matières, constituées par des impuretés, qui précipitent à la suite dudit traitement. 7. Procédé suivant la revendication, carac térisé en ce que la ptéridine à séparer a la formule EMI0004.0028