CH294890A - Procédé pour la purification de la pénicilline. - Google Patents

Description

  Procédé     pour    la     purification    de la     pénicilline.       La présente invention se rapporte à un  procédé pour la purification de la pénicilline,  dans le but d'obtenir une pénicilline d'un  haut degré de pureté.  



  Des procédés de préparation de sels de la.  pénicilline sous une forme pure sont bien  connus. Ils comprennent, par exemple,     1e     traitement au charbon du 'couillon de culture  acidifié et. des traitements d'extraction suc  cessifs au     rioyen    d'un solvant organique et  d'eau, des méthodes     chromatographiques,    la  formation de dérivés cristallisables de la péni  cilline, par exemple des sels alcalins ou des sels  aminés, et la purification de ces composés par  cristallisation, la substance pure obtenue étant  finalement transformée, si nécessaire, en un  sel déterminé pour un usage     thérapeutique.     



  Ces procédés présentent cependant le dés  avantage de comprendre un nombre considé  rable d'opérations, ordinairement dix ou plus,  chaque opération entraînant une perte de  pénicilline, ce qui conduit à de très faibles  rendements en pénicilline ou en dérivé  recherché, généralement de l'ordre de 30 %.  



  L'invention a pour but. la production de  pénicilline d'un haut degré de pureté, par un  procédé comprenant un petit nombre d'opé  rations et conduisant à un rendement total  élevé en pénicilline. La pénicilline purifiée  ainsi obtenue peut ensuite être transformée en  un sel pur de pénicilline.  



  Le composé     procaïne-pénicilline    a une  valeur thérapeutique considérable, car il pré-    sente cette propriété     précieuse    d'assurer un  niveau élevé de pénicilline dans le courant  sanguin, pendant un temps considérable après  l'injection. Cette propriété est due à la faible  solubilité du composé dans les milieux liqui  des de l'organisme. Un procédé approprié de  préparation de la     procaïne-pénicilline    consiste  à faire réagir la     procaïne    et la pénicilline  dans un solvant de ces corps dans lequel la       procaïne-pénicilline    est, insoluble, et à récu  pérer de ce solvant le composé qui s'est pré  cipité.  



  On a trouvé maintenant qu'en employant.  la     procaïne-pénicilline    comme produit inter  médiaire dans la purification de la pénicilline  et en utilisant la propriété de la     procaïne-          pénicilline    d'être pratiquement insoluble dans  les solvants usuels, la purification de la péni  cilline peut être effectuée simplement et avec  peu d'opérations, et qu'on peut obtenir des       rendements    supérieurs à ceux obtenus par les  procédés antérieurs.  



  Le procédé selon l'invention pour la puri  fication de la pénicilline     est    caractérisé en ce  qu'on transforme de la pénicilline impure  libre en son sel     procaïne-pénicilline    à l'aide  de     procaïne    ou d'un sel de celle-ci, en opérant  dans un solvant dans lequel la solubilité du  sel     procaïne-pénicilline    est d'au plus     511/o,    en  ce qu'on sépare la     procaïne-pénicilline    ainsi       précipitée,    en ce qu'on suspend cette dernière  dans un mélange d'eau et d'un solvant orga-      nique pratiquement non miscible à l'eau,

   en  ce qu'on décompose la     procaïne-pénicilline    en  traitant cette suspension à l'aide d'un agent  hydrolysant non neutre, en ce qu'on sépare la  phase aqueuse de la phase formée par le sol  vant organique, et en ce qu'on recueille la         p-NH2.        C6H.r    . CO . 0.     CH@CI-12    .     N(C.,H5)@,,    .     HCl       est bien connu comme anesthésique local.

   Par  sels de     procaïne,    on entend ici les sels de cette  base libre, tels que le chlorhydrate, formés par  addition d'un acide à. l'atome d'azote trivalent,  qui se transforme alors en azote     pentavalent.     La     procaïne-pénicilline    est. un sel de ce type,  dans lequel une molécule de pénicilline est fiée  à cet atome d'azote.

   Cependant, dans la présente  description, quand on parle des  sels de     pro-          caïne     en tant que produit de départ, on     exclut     évidemment la     procaine-pénicilline.    Bien que  le sel de     procaïne    utilisé ordinairement dans  la préparation de la     procaïne-pénicillirie    soit  le chlorhydrate, d'autres sels de la     procaïne     peuvent être utilisés, par exemple le phos  phate, le sulfate,     l'ascorbate    de     procaïne,    etc.  



  La     procaïne-pénicilline,    formée     intermé-          diairement,    peut. être obtenue à. partir de  pénicilline impure sous forme acide et, de       procaïne    sous forme de base libre, ou par  double décomposition d'un sel de     procaïne    et  d'un sel de pénicilline préparé d'abord à par  tir de la pénicilline impure libre. Par exem  ple, le chlorhydrate de     procaïne    et le sel de  sodium de pénicilline peuvent réagir pour  donner de la     procaïne-pénicilline    et du chlo  rure de sodium.

   Bien qu'on puisse obtenir la       procaine-pénieilline    par réaction entre     tin    sel  de     procaine    et. la pénicilline sous forme acide,  ou entre la     procaïne    et un sel de pénicilline,  une telle réaction ne se fait pas d'une manière  satisfaisante et n'est pas complète. Le procédé  selon l'invention peut comprendre la forma  tion  in situ  dans le mélange réactionnel de  la     procaïne    sous forme de base libre par addi  tion d'une base.  



  La     procaïne    et la pénicilline peuvent être  présentes, dans le milieu réactionnel, en pro  portions pratiquement équimoléculaires, mais    pénicilline purifiée à. l'état libre de celle des  phases qui la, contient.  



  On entend ici par     procaïne    le     p-amino-          benzoyl-diéthyl-amino-éthanol    sons forme de  base libre, dont le     chlorhydrate,    répondant  à la formule    on utilise, de préférence, un excès de     proeaïne     pour éviter toute perte de pénicilline.  



  La pénicilline peut. être employée directe  ment sous forme acide, constituant la pénicil  line proprement dite, mais elle peut     égalemen,     être d'abord transformée en un sel de pénicil  line, avant. de la faire réagir avec la     procaïne     ou un sel de celle-ci. La pénicilline ou son sel  peut se trouver en solution dans de l'eau ou  dans un solvant organique.  



  La.     procaïne-pénicilline    peut être     préparée     à partir     d'une    pénicilline partiellement puri  fiée. Il faut noter qu'il n'est pas avantageux  d'utiliser un bouillon de culture brut     conte-          Liant    de la pénicilline, pour la préparation de  la     proeaïne-pénieilline,    car un tel bouillon cou.  tient des impuretés très complexes qui peuvent       empêcher    une précipitation satisfaisante de la       proca:ine-pénicilline,    et surtout la pénicilline  est trop diluée dans un bouillon de culture  brut pour permettre la précipitation.

   Il peut  être utile de traiter la solution de pénicilline  ou de ses sels avec une petite quantité,     pal-          exemple    1 à     5%,        de        charbon        activé,        avant        la     réaction avec la     procaïne.    Ce     traitement    au  charbon peut. se faire en agitant la solution  avec le charbon et en séparant ce dernier par  filtration.

   Bien qu'un tel traitement. ne con  duise à     aucune    amélioration notable de la  pureté de la pénicilline, il améliore considé  rablement la couleur du sel     procaïne-pénieil-          line    obtenu     subséquemment.     



  Parmi les solvants dans lesquels la solu  bilité de la.     procaïne-pénicilline    est. d'au plus  5     %        et        qui        peuvent        être        utilisés        dans        le        pro-          cédé    selon l'invention, on peut citer l'eau, les  esters d'acides     carboxyliques    aliphatiques  inférieurs, tels que l'acétate     d'amyle    et l'acé  tate de     butyle,    les alcools aliphatiques, tels que  l'éthanol, le propanol,

   le     butanol    et. l'alcool      amylique, les hydrocarbures aliphatiques  chlorés, tels que le chloroforme, les éthers, tels  que l'éther éthylique, l'éther     méthyl-éthylique     et l'éther     éthyl-isopropylique,    les cétones ali  phatiques inférieures, telles que la     méthyl-          isobut.yl-eétone    et la     méthyl-éthyl-cétone,    les  mélanges de solvants organiques, tels que le  mélange acétone-acétate de butyle ou     butanol.     acétate de butyle, et les mélanges d'eau et de  solvants organiques, tels que l'acétone, la       méthyl-éthyl-cétone,    le     butanol,

          ete.     



  Pour assurer une bonne précipitation de la       procaïne-pénicilline,    il. faut. évidemment que  la concentration en pénicilline du solvant  réactionnel soit supérieure à la concentration  correspondant à la solubilité de- la     procaïne-          pénicilline    dans ce solvant.

   Par exemple, la  solubilité de la     procaïne-pénicilline    dans l'eau       étant        de        0,5        %        en        poids        environ,        ce        qui        cor-          respond    à une solution aqueuse contenant  environ 5000     unités    de pénicilline par milli  litre, la solution devra contenir, si on utilise  de l'eau comme solvant réactionnel, plus de  5000 unités de pénicilline par millilitre, et  avantageusement plus de 25 000 unités par  millilitre.

   Il en est de même avec d'autres sol  vants réactionnels, la concentration     minimum     admissible de la pénicilline dans le mélange  réactionnel dépendant de la     solubilité    de la       proeaïne-pénieilline    dans le solvant utilisé.

   La  solubilité de la     proca:ine-pénieilline    dans le       solvant        ne        doit        pas        dépasser        5%,        et        sera        de          préférence        inférieure    à     2%.     



  La séparation de la     procaïne-pénicilline     précitée peut se faire, par exemple, par filtra  tion, par centrifugation ou par tout autre  moyen, avant d'être convertie en pénicilline.  



  La     procaïne-pénicilline    séparée est ensuite  suspendue dans de l'eau, en présence d'un sol  vant organique pratiquement non miscible  l'eau, et la     procaïne-pénicilline    est décomposée  soit à un pH acide, soit- à     uni    pH alcalin. Pour  la suspension, on utilise, de préférence, un  mélange d'eau et de solvant en volumes égaux.  En milieu acide, la     procaïne-pénicilline    est  décomposée en pénicilline libre qui passe dan,  le solvant organique, et en un sel de     procaïne     (lui reste en solution dans la phase aqueuse.

      Les deux     phases    sont alors séparées, et la péni  cilline libre est isolée à partir de la phase  formée par le solvant, le sel de     proca:ine    pou  vant également être isolé à partir de la phase  aqueuse. En milieu alcalin, il se forme d'abord  un sel de pénicilline et de la     procaïne    sous  forme de base libre. Le sel de pénicilline reste  dans la phase aqueuse et est ensuite trans  formé en pénicilline libre par adjonction d'un  acide. La     procaïne-base    reste dans le solvant  organique et peut en être isolée.  



  Parmi les solvants pratiquement non mis  cibles à l'eau, on peut citer les alcools, tels  que le     butanol    et l'alcool amylique, les esters,  tels que l'acétate de butyle et l'acétate d'amyle,  les cétones, telles que la     méthyl-isobutyl-          cétone,    les hydrocarbures aliphatiques chlorés,  tels que le chloroforme, et les éthers, tels que  l'éther     di-éthylique    et l'éther     di-isopropylique.     



  La     décomposition    de la     proca;ine-pénicil-          line    se fait de préférence en milieu acide et  <B>de</B> préférence à un pH compris entre 1,5 et 2,5.  On peut     suspendre    la     procaïne-pénieilline     dans de l'eau, en présence d'un solvant. orga  nique de la pénicilline pratiquement non  miscible à, l'eau, et acidifier la suspension par  adjonction d'une substance     appropriée,    telle  qu'un acide minéral ou organique.     La,    péni  cilline libérée reste dans le solvant, organique,  d'où elle est isolée, tandis que le sel de pro  caïne formé reste dans la phase aqueuse.

   On  évite évidemment l'emploi d'un acide décom  posant la pénicilline, comme l'acide nitrique.  



  La pénicilline, obtenue sous forme puri  fiée, peut servir à la préparation de diffé  rents sels purs de la. pénicilline.  



  Lorsqu'on a décomposé la     procaïne-pénicil-          fine    en milieu acide, on peut isoler la     pro-          caïne        ù.    partir de la phase aqueuse, en ajus  tant le pH de celle-ci entre 10 et 10,5, par  exemple par addition d'hydroxyde de sodium,  ce qui entraîne la. précipitation de la     pro-          caïne.    Si un solvant organique est présent, la       procaïne    passe dans le solvant et peut être  isolée par évaporation et cristallisation, ou  par addition d'un second solvant dans lequel  la     procaïne    est:

   pratiquement insoluble, par  exemple l'éther de pétrole,      La     procaïne-pénicilline    peut être décom  posée     aussi    en la suspendant dans de l'eau, en  présence d'un solvant organique     pratiquement     non miscible à l'eau, en ajoutant     lui    agent  hydrolysant alcalin à la suspension et à une  température ne dépassant pas la température  ordinaire, de préférence entre 0 et. 5  C, la  pénicilline risquant d'être décomposée à des  températures     supérieures,    lorsque le milieu  est alcalin.

   La pénicilline passe alors dans la  phase aqueuse, sous forme du sel     correspon-          clant    à l'alcali utilisé - par exemple le  sel de sodium si on utilise l'hydroxyde de  sodium -, et la     procaine-base    passe dans la  phase organique. Ensuite, la pénicilline est  libérée de son sel, dans la phase aqueuse, par  adjonction d'un acide.  



  On veillera à ce que l'addition d'alcali ne  conduise, à aucun moment, à un excès d'alcali  dans la suspension de la     procaïne-pénicilline     à. décomposer. On utilise, de préférence,  l'alcali sous forme de     solution    aqueuse diluée,  <U>que</U> l'on ajoute très lentement, en agitant, à  la suspension de la     procaïne-pénicilline.    On a  trouvé qu'en ajoutant à la suspension une  solution de l'alcali d'une normalité d'environ  0,025, goutte à goutte et en agitant, on évite  pratiquement complètement une destruction  de l'activité de la pénicilline.  



  La mise en     oeuvre    du procédé selon l'in  vention est illustrée par les exemples suivants.  Les parties exprimées en poids et les parties  exprimées en volume ont entre elles le même  rapport que si elles étaient     exprimées    en       jrammes    et en millilitres.    <I>Exemple 1:</I>  La pénicilline à purifier est isolée comme  suit  On filtre un bouillon. de culture     contenant     de la pénicilline, on l'acidifie et on l'extrait  avec de l'acétate de butyle. La solution orga  nique est extraite par de l'eau à un pH de 7,  et l'extrait aqueux est acidifié et extrait à       nou-veau    par de l'acétate de butyle.

   On agite  la solution résultante avec     11/o    en poids de  charbon activé, et on sépare ce dernier par  filtration.    On traite 2000     parties    en volume de la  solution résultante, contenant 7200 unités de  pénicilline par millilitre, avec une solution  de 6 parties en poids de     procaïne    dans de  l'acétate de butyle, et on laisse reposer le  mélange pendant une nuit. On sépare par  filtration la     procaïne-pénicilline    cristallisée  qui s'est précipitée, on la. lave avec de l'acé  tone, on filtre à nouveau, on lave le préci  pité avec de l'eau et de l'éther et on le sèche  à 37  C.

   On sépare ainsi 13,70 parties en poids  de     procaine-pénicilline    ayant une activité de  910     unités/mg,    le rendement en pénicilline,  extraite sous forme de     procaïne-pénicilline    de  sa solution dans l'acétate de butyle traitée au  charbon, étant de     871/o.     



  On suspend 8,25 parties en poids de pro  ca:ine-pénicilline dans un mélange d'eau et  d'acétate de butyle, et. l'on acidifie avec de  l'acide chlorhydrique. La. pénicilline libérée       passe    dans la couche formée par l'acétate de  butyle; on sépare cette couche et on en recueille  la pénicilline par évaporation du solvant  dans le vide.  



  <I>Exemple 2:</I>  On suspend 0,98 partie en poids de     pro-          caïne-pénieilline,    préparée comme décrit. dans  l'exemple 1, dans 20 parties en volume d'eau,  on agite vigoureusement avec 30 parties en  volume d'acétate de butyle, et on refroidit le  mélange à une température inférieure à 5  C.  On ajoute goutte à goutte, sur une période  d'une heure, 60 parties en volume d'une solu  tion aqueuse d'hydroxyde de sodium 0,025     N     et, quand l'addition est achevée, on sépare les  phases.

   On trouve, en déterminant     l'activité,     que la phase     aqueulse    contient les     961/o    en  poids de la pénicilline présente dans la     pro-          caïne-pénicilline    utilisée. On acidifie ensuite  la solution aqueuse, et on en extrait la pénicil  line libérée à l'aide d'un solvant organique.

           Exemple   <I>3:</I>  On prépare une partie en poids de     pro-          caïne-pénicilline    par le procédé selon l'exem  ple 1, on la suspend dans 20 parties en  volume d'eau, on agite vigoureusement avec  40 parties en volume d'éther     isopropylique,         et on refroidit le mélange au-dessous de     5"    C.  On ajoute goutte â. goutte, pendant une heure  environ,     1-1,5    parties en volume d'une solu  tion d'hydroxyde de sodium. 0,1 N, et on       sépare    les phases quand cette addition est  achevée.

   On trouve, en déterminant l'activité,  que la phase aqueuse séparée contient les       81%        en        poids        de        la        pénicilline        présente        dans     la     procaïne-pénieilline    utilisée. On acidifie  ensuite la solution     aqueuse    et on en extrait  la pénicilline libérée, à l'état purifié, à l'aide  d'acétate de butyle.

      <I>Exemple</I>  On fait réagir Une solution de pénicilline  dans l'acétate de butyle, obtenue par extrac  tion d'un bouillon de     culture,    avec une pro  portion équimoléculaire de     procaïne-base    en  solution dans de l'acétate de butyle, on sépare  par filtration la     procaïne-pénicilline    précipi  tée et. on la lave avec de l'acétate de butyle,  puis avec de l'eau.  



  On suspend 20 parties en poids de la     pro-          caïne-pénieilline    obtenue dans un mélange     clé     100 parties en volume     d.'eaii    et. de 200 parties  en volume de     chloroforme,    on brasse le  mélange et on l'acidifie à un pli de ' avec       101/o    en poids d'acide sulfurique. On sépare  alois las phases, et on recueille la     pénicilline     purifiée de la phase formée par 1e     chloro-          forme.     



  Si l'on veut préparer un sel de la     péni-          eilline    ainsi purifiée, on dissout 1.5 parties en  poids de cette dernière dans 200 parties en  volume de chloroforme et on extrait la solu  tion avec 100 parties en volume d'une solution  aqueuse clé     Na2C03    à un     pll    de 6,8. On sépare  l'extrait aqueux et le dessèche par congélation  pour obtenir le sel sodique clé     pénicilïine     purifiée.  



  <I>Exemple 5:</I>  On suspend 20 parties en poids de     pro-          caïne-pénicilline    précipitée, préparée     comme     décrit dans l'exemple 4, dans un mélange de  100 parties en volume d'eau et de 200 parties  en volume de     inéthyl-isobutyl-cétone,    on  brasse le mélange et on l'acidifie à un     pfl    de       1,4        avec        10%        en        poids        d'acide        chlorhydrique;

         on sépare alors les phases et on recueille la  pénicilline purifiée de la phase     cétonique    par  évaporation du solvant     dans    le vide.  



       Exemple   <I>6:</I>  On suspend 20 parties en poids de     pro-          caïne-pénicilline,    préparée comme décrit dans  F exemple 4, dans un     mélange    de 100 parties  en volume d'eau et de<B>'</B>00 parties en     volume     d'éther, on brasse le mélange et on l'acidifie  à     un        pi,        de        1,4        avec        1.0        %        en        poids        d'acide     phosphorique;

   on sépare alors les phases, et on       reeüeille    la     pénieillïne    purifiée de la phase       éthérique.     



       Exemple   <I>i:</I>  On filtre 81600 litres d'un bouillon de  culture contenant de la pénicilline, on acidi  fie le filtrat et on     l'extrait    avec de l'acétate  de butyle. On extrait à nouveau l'extrait  butylique avec de     l'eau    à un pH de 7, on acidi  fie l'extrait aqueux et. on l'extrait: avec 1640  litres     d.'aeétate    de butyle. Cet extrait buty  lique (désigné par N dans le tableau     ci-          après)    contient 17 000 millions d'unités de  pénicilline, l'activité des substances solides  qu'il contient étant de 796 unités de     pénicil-          fine    par mg.

   On traite cet extrait avec     36,3    kg  de     procaïne-base    en solution dans 81,7 litres  d'acétone. La     procaine-pénieilline    précipitée  est. séparée par filtration, lavée avec 109  litres d'acétate de butyle et 6,8 litres d'acé  tone, et séparée à nouveau par filtration. La       procaïne-pénieilline    est alors mise en suspen  sion clans 227     litres    d'eau et<B>725</B> litres d'acé  tate de butyle et décomposée par adjonction  de 90,8 litres d'un tampon au phosphate à  un pH de 1,1. La. phase d'acétate de butyle,       désimnée    par Y dans le tableau ci-après, qui  contient, la pénicilline, est. séparée et lavée  avec de l'eau.

   On trouve, en déterminant son       activité,        qu'elle        contient.        les        100%        de        la        péni-          cilline    contenue     dans    la     solution    butylique  originale traitée avec la     procaïne,    l'activité  des substances     solidés    qu'elle contient étant  de 1.612 unités de pénicilline par mg. On  recueille ensuite la pénicilline purifiée libre de  la phase d'acétate de butyle par évaporation  de ce dernier dans le vide.

        Si l'on veut transformer la pénicilline ainsi  purifiée en     procaïne-pénicilline    propre à un  usage thérapeutique, on peut dissoudre la  pénicilline pure dans de l'acétate de butyle,  et traiter la solution avec de la     procaïne,    à.  raison de 130 g de     procaïne-base    pour 100  millions d'unités de pénicilline, la     procaïne       étant utilisée en solution dans de l'acétone.  On peut séparer la     procaïne-pénicilline    for  mée, la laver, la sécher et la mettre finale  ment en emballages.  



  Le procédé ci-dessus (exemple 7) est effec  tué cinq fois, les résultats obtenus étant. don  nés dans le tableau ci-dessous.  
EMI0006.0006     
  
    Extrait <SEP> butylique <SEP> brut <SEP> (X) <SEP> traité <SEP> avec
<tb>  la <SEP> procaïne-base <SEP> Extrait <SEP> butylique <SEP> purifié <SEP> (V)
<tb>  Exemple <SEP> Activité <SEP> des <SEP> Activité <SEP> des
<tb>  Nombre <SEP> Rendement <SEP> en
<tb>  volume <SEP> substances <SEP> solides <SEP> substances <SEP> solides
<tb>  litres <SEP> en <SEP> unités <SEP> de <SEP> péni- <SEP> total <SEP> d'unités <SEP> en <SEP> unités <SEP> de <SEP> péni- <SEP> pénicilline <SEP> à <SEP> partir
<tb>  cilline <SEP> par <SEP> mg <SEP> (en <SEP> millions)

   <SEP> cilline <SEP> par <SEP> mg <SEP> de <SEP> l'extrait <SEP> X <SEP> en
<tb>  8 <SEP> 1640 <SEP> 655 <SEP> 24000 <SEP> 1530 <SEP> 90
<tb>  9 <SEP> 1640 <SEP> 734 <SEP> <B>25370</B> <SEP> 1680 <SEP> 85
<tb>  10 <SEP> 1640 <SEP> 833 <SEP> <B>18000</B> <SEP> 1.612 <SEP> 100
<tb>  11 <SEP> 1640 <SEP> 976 <SEP> <B>30000</B> <SEP> 1670 <SEP> 91
<tb>  12 <SEP> 1640 <SEP> 1073 <SEP> <B>25700</B> <SEP> 1640 <SEP> 91.,.5            Exemple   <I>13:

  </I>  On suspend 20 parties en poids de     pro-          eaïne-pénicilline,    préparée comme décrit dans  l'exemple 4, dans un mélange de 100 parties  en volume d'eau et de 200 parties en volume  d'acétate de butyle, on brasse le mélange et on       l'acidifie    à     un        pH        de        1,5        avec        10%        en        poids     d'acide chlorhydrique; on sépare alors les pha  ses et on recueille la pénicilline purifiée de la  phase d'acétate de butyle.

Claims (1)

1. REVENDICATION: Procédé pour la purification de la péni- eilline, caractérisé en ce qu'on transforme de la. pénicilline impure libre en son sel pro- caïne-pénicilline à l'aide de procaïne ou d'un sel de celle-ci, en opérant dans un solvant dans lequel la solubilité du sel procaïne-péni- cilline est d'au plus 51/o, en ce qu'on sépare la procdïne-pénicilline ainsi précipitée, en ce qu'on suspend cette dernière dans un mélange d'eau et d'un solvant organique pratiquement non miscible à l'eau,

   en ce qu'on décompose la procdïne-pénicilline en traitant cette sus pension à l'aide d'un agent hydrolysant non neutre, en ce qu'on sépare la phase aqueuse de la phase formée par le solvant organique et en ce qu'on recueille la pénicilline purifiée à l'état libre de celle des phases qui la contient. <B>SOUS-REVENDICATIONS:</B> 1. Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on décompose la procaine-péni- cilline en traitant ladite suspension à l'aide d'un agent hydrolysant acide, et en ce qu'on isole la pénicilline libre de la phase organique. 2.

   Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on décompose la procaïne-péni- cilline en traitant ladite suspension à l'aide d'un agent hydrolysant alcalin et. à une tem pérature ne dépassant pas la température ordinaire, en ce qu'on sépare la phase aqueuse contenant un sel de la pénicilline, et en ce qu'on transforme ce sel en pénicilline libre purifiée par adjonction d'un acide. 3. Procédé selon la. revendication, carac térisé en ce qu'on fait réagir la. pénicilline impure avec la procaïne pour effectuer ladite transformation en procaïne-pénicilline. 4.

   Procédé selon la. revendication, caracté risé en ce qu'on transforme d'abord la péni cilline impure en un sel de pénicilline, et en ce qu'on fait réagir ce sel avec un sel de pro- caïne pour obtenir la procaïne-pénicilline. 5. -Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on lave la procaïne-pénicilline avec de l'eau avant de la suspendre dans le mélange d'eau et de solvant organique. 6. Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on lave la procaïne-pénicilline avec un solvant organique avant de la sus pendre dans le mélange d'eau et de solvant organique. 7.

   Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on lave la procdïne-pénicilline avec un mélange d'eau et de solvant organique avant de la suspendre dans le mélange d'eau et de solvant organique. S. Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on suspend la procaïne-pénicil- line dans un mélange d'eau et d'un alcool ali phatique non miscible à l'eau. 9. Procédé selon la revendication, caracté risé en ce qu'on suspend la procaïne-pénicil- line dans un mélange d'eau et d'une cétone non miscible à l'eau. 10.

   Procédé selon la revendication, carac térisé en ce qu'on suspend la procaïne-péni- cilline dans un mélange d'eau et d'un ester d'acide carboxylique non miscible à l'eau. 11. Procédé selon la revendication, carac térisé en ce qu'on suspend la procWïne-pénicil- line dans un mélange d'eau et d'un hydro carbure aliphatique chloré non miscible à l'eau. 12. Procédé selon la revendication et la sous-revendieation 8, caractérisé en ce que le solvant est. l'alcool. butylique. 1û. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 8, caractérisé en ce que le solvant est l'alcool amylique.

   1.4-. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 9, caractérisé en ce que le solvant est la méthy 1-isobutyl-cétone. 15. Procédé selon la revendication et la #-ous-rev endication 10, caractérisé en ce que le solvant est. l'acétate de butyle. 1.6. Procédé selon la revendication et la .#:,)ii5-revendication 10, caractérisé en ce que le solvant est. l'acétate d'amvle. 17. Procédé selon la Vrevendication et la sous-revendication 11, caractérisé en ce que le solvant est le chloroforme. 18.

   Procédé selon la, revendication, caracté risé en ce qu'on suspend la procaïne-pénicil- line dans un mélange d'eau et dudit solvant en volumes égaux. 19. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 1, caractérisé en ce qu'on décompose la procaïne-pénicilline à un pli compris entre 1,5 et 2,5. 20. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 2, caractérisé en ce qu'on décompose la procaïne-pénicilline à l'aide d'une solution aqueuse diluée d'un alcali. 21. Procédé selon la revendication et la sous-revendication 2, caractérisé en ce qu'on effectue la décomposition à une température comprise entre 0 et 5 C.

   22. Procédé selon la revendication et les sous-revendications 2 et 20, caractérisé en ce qu'on décompose la procaïne-pénicilline à l'aide d'hydroxyde de sodium.