CH325667A - Procédé d'élimination des impuretés colorées d'un sel d'héparine - Google Patents

Description

  Procédé     d'élimination    des     impuretés    colorées d'un sel     d'héparine       La présente     invention    se rapporte à un  procédé d'élimination des impuretés colorées  qui accompagnent les sels d'héparine.  



  On suppose que l'héparine est un mélange  d'esters     polysulfuriques    de la     mucoïtine    ; elle  constitue un agent anticoagulant très précieux,  très utilisé en clinique. L'héparine libre est de  nature acide et est généralement isolée sous  forme de sel, par exemple de sel de sodium.  L'héparine est habituellement fournie en mé  decine sous forme de solution du sel de sodium,  qui est de     couleur    jaunâtre ou brune. On a  éprouvé depuis longtemps le besoin d'éliminer  cette coloration et l'on a effectué des recher  ches pour établir un procédé de traitement des  sels d'héparine qui permit d'obtenir un pro  duit donnant une solution incolore.  



  La titulaire a découvert que l'on peut éli  miner rapidement et efficacement les impuretés  colorées des sels d'héparine sans perte sensible  d'activité, en chauffant l'héparine en milieu  aqueux, de préférence à environ     80 C    et à  un<I>pH</I> compris entre 8,0 et 8,5, en présence  d'un sel de l'acide permanganique et en sépa  rant le liquide des composés de manganèse  précipités. Le sel d'acide- permanganique uti  lisé est déterminé en partie par la nature du  cation que l'on désire voir figurer dans le sel  d'héparine finalement obtenu. On prépare nor  malement l'héparine sous forme de son sel de    sodium, de sorte que c'est normalement le per  manganate de sodium auquel on fera appel  dans le procédé ci-dessus.  



  La quantité de permanganate nécessaire  pour effectuer la décoloration varie avec le lot  particulier de sel d'héparine préparé à déco  lorer. On peut déterminer avec précision la  quantité à utiliser en traitant des parties ali  quotes de chaque lot de sel d'héparine au  moyen de quantités croissantes de solution de  permanganate jusqu'à détermination de la  quantité de     permanganate    juste     suffisante    pour  effectuer la décoloration dans les conditions  ci-dessus décrites. La quantité à     utiliser    dans  le cas du permanganate de sodium est d'envi  ron une molécule-gramme pour décolorer 100  millions d'unités de sel d'héparine.  



  La durée pendant laquelle on doit laisser  la réaction se poursuivre varie avec la nature  du lot particulier de sel d'héparine soumis au  traitement mais, ordinairement, la décoloration  de la solution de sel d'héparine est terminée en  15 à 30 minutes après l'addition de la solution       permanganique.    La perte d'activité     d'héparine     éprouvée au cours de ce temps est faible ou  nulle.  



  La gamme de<I>pH</I> dans laquelle on effec  tue la réaction est critique. Si le<I>pH</I> est nette  ment inférieur à 8,0, la décoloration du sel  d'héparine ne se fait que     difficilement    ou ne      se fait pas du tout, et si le<I>pH</I> est nettement  supérieur à 8,5, la décoloration est accompa  gnée d'une perte prononcée d'héparine par  suite de dégradation. Il est donc nécessaire  d'effectuer la réaction dans des conditions tel  les que le<I>pH</I> initial du mélange réactionnel  soit compris entre 8,0 et 8,5.  



  La réaction. doit être effectuée à chaud, si  non le bioxyde de manganèse formé se dépose  rait sous forme de très fines particules extrê  mement     difficiles    à séparer par     filtration    et  tendrait à polluer le sel d'héparine isolé.  



  A chaud, le bioxyde de manganèse se dé  pose sous forme granulaire et est aisément en  levé du produit ; la réaction est effectuée le  plus commodément à une température d'envi  ron 80  C.  



  Quand la décoloration de la solution de sel  d'héparine a été effectuée, le bioxyde de man  ganèse mis en     liberté    peut être isolé par filtra  tion et le sel d'héparine     solide    est recueilli au  sein du filtrat par les moyens connus. C'est  ainsi, par exemple, que le     filtrat    aqueux peut  être versé dans un excès d'alcool, ce qui pro  voque la précipitation du sel     d'héparine    sous  forme d'un solide blanc que l'on peut recueillir  et sécher.  



  La décoloration de l'héparine de la manière  décrite ci-dessus effectue en même temps une  élimination des substances pyrogènes partielle,  mais suffisante pour l'utilisation en médecine.  Pour en assurer l'élimination complète, il est  nécessaire de soumettre la matière à un autre  traitement qui peut être effectué par les pro  cédés connus, tels que le traitement sur char  bon de bois activé ou la filtration sur couche de  cellulose.  



  L'exemple suivant illustre l'invention.  <I>Exemple.</I> - On dissout 300 g d'héparine (à  l'état de sel de sodium) d'une activité de  100     u/mg    dans quatre litres d'eau distillée, et  l'on filtre la solution sur une couche de     kiesel-          guhr,    qu'on lave ensuite à plusieurs reprises au  moyen de faibles portions (100 cc) d'eau distil  lée. On règle le volume du mélange du     filtrat    et  des liqueurs de lavage à 6     litres    par addition  d'eau distillée et l'on chauffe rapidement la so  lution à     801,    C.

   On règle le<I>pH</I> de la solution    chaude à 8,0-8,5 par addition d'une solution  5 N d'hydroxyde de sodium et l'on ajoute en  agitant énergiquement 100 cc d'une solution à       40        %        en        poids/volume        de        permanganate        de     sodium. On laisse la solution réactionnelle re  poser pendant trente minutes en maintenant la  température à 800 C.

   On refroidit le produit à  environ     40(l    C et l'on isole le bioxyde de man  ganèse qui se sépare par filtration sur     lit    de       kieselguhr.    On met en suspension la couche de       kieselguhr    dans 1 litre d'eau distillée et l'on  chauffe à 800 C, le<I>pH</I> étant réglé à 8,0-8,5 si  nécessaire. On refroidit la suspension à 400 C  et l'on filtre, le     lit    filtrant étant lavé au moyen  de deux portions de 250 cc chacune d'eau dis  tillée. On mélange le filtrat avec celui prove  nant de la masse réactionnelle principale et  l'on ajuste la solution<I>à pH</I> 6,5.

   On ajoute à la  solution suffisamment de     chlorure    de sodium       pour        produire        une        concentration        de    1     %        dans     la solution finale. On clarifie la solution ainsi  obtenue par filtration et l'on verse le filtrat en  agitant dans quatre fois son volume d'alcool à  95 0/0. On isole le solide qui se sépare par fil  tration et on le sèche sous vide à     35,)    C. On  obtient ainsi de l'héparine (sous forme de sel  sodique) à l'état de poudre blanche d'une acti  vité d'environ 100     u/mg.  

Claims (1)

1. REVENDICATION Procédé d'élimination des impuretés colo rées d'un sel d'héparine, caractérisé en ce que l'on chauffe l'héparine en milieu aqueux, à un <I>pH</I> compris entre 8,0 et 8,5 et en présence d'un sel de l'acide permanganique, et en ce que l'on sépare le liquide des composés de manganèse précipités. SOUS-REVENDICATION Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que l'on chauffe la solution de sel d'hé parine à une température comprise entre 60 et 90o C, et en ce qu'on l'amène audit<I>pH</I> en pré sence d'une quantité de permanganate de so dium de l'ordre d'une molécule-gramme par 100 millions d'unités d'héparine.